JP2023553532A - 癌の処置のための併用療法 - Google Patents

Abstract

【解決手段】本開示は、ＳＨＰ２阻害剤およびＥＧＦＲ阻害剤の併用療法を用いて癌を処置する方法を提供する。【選択図】図１Ａ

Description

相互参照
本出願は、２０２０年１２月１１日に出願された米国仮特許出願第６３／１２４，６６５７号、２０２１年６月２４日に出願された米国仮特許出願６３／２１４，７１８号、２０２１年１０月６日に出願された米国仮特許出願第６３／２５３，０１２号、および、２０２１年１１月９日に出願された米国仮特許出願第６３／２７７，５６１号の利益を主張するものであり、各出願はその全体を参照することによって本明細書に組み込まれる。

Ｓｒｃホモロジー－２ホスファターゼ（ＳＨＰ２）は、様々な組織および細胞型において遍在的に発現される非受容体タンパク質ホスファターゼである（以下の概説を参照：Ｔａｊａｎ Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ Ｊ Ｍｅｄ Ｇｅｎｅｔ ２０１６ ５８（１０）：５０９－２５；Ｇｒｏｓｓｍａｎｎ ＫＳ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１０ １０６：５３－８９）。ＳＨＰ２は、そのＮＨ２末端における２つのＳｒｃ相同性２（Ｎ－ＳＨ２およびＣ－ＳＨ２）ドメイン、触媒ＰＴＰ（プロテインチロシンホスファターゼ）ドメイン、および調節特性を備えたＣ末端テールから構成される。基礎状態では、ＳＨ２ドメインとＰＴＰドメインとの間の分子間相互作用は、触媒ポケットへの基質の接近を妨げ、ＳＨＰ２を閉じた自己阻害立体構造に維持する。刺激に応答して、リン酸化チロシンモチーフを有するＳＨＰ２活性化タンパク質はＳＨ２ドメインに結合し、ＳＨＰ２の活性部位の曝露および酵素的活性化を引き起こす。

本明細書に開示される本実施形態は、一般的に、予想外の程度の相乗作用を提供しながらも、ＥＧＦＲ阻害剤と併せてＳＨＰ２阻害剤を利用する癌を処置するための併用療法に関連する組成物および方法に関する。

ＳＨＰ２は、増殖、分化、細胞周期維持および運動性を含む基本的な細胞機能において重要な役割を果たす。その関連シグナル伝達分子を脱リン酸化することによって、ＳＨＰ２は、広範囲の成長因子、サイトカイン、およびホルモンに応答して複数の細胞内シグナル伝達経路を調節する。ＳＨＰ２が関与する細胞シグナル伝達プロセスには、ＲＡＳ－ＭＡＰＫ（マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ）、ＰＩ３Ｋ（ホスホイノシトール３－キナーゼ）－ＡＫＴ、およびＪＡＫ－ＳＴＡＴ経路が含まれる。

ＳＨＰ２はさらに、この経路上でシグナル増強の役割を果たし、ＲＴＫの下流およびＲＡＳの上流で作用する。ＭＡＰＫシグナル伝達の薬理学的阻害に対する抵抗性の１つの一般的なメカニズムは、ＭＡＰＫシグナル伝達の再活性化を促進するＲＴＫの活性化を含む。ＲＴＫ活性化は、直接結合を介しておよびアダプタータンパク質を介してＳＨＰ２を補充する。これらの相互作用は、閉鎖（不活性）立体構造から開放（活性）立体構造へのＳＨＰ２の変換を引き起こす。ＳＨＰ２は、ＲＡＳシグナル伝達再活性化の重要な促進因子であり、主抵抗性および二次抵抗性の両方において薬理学的阻害を回避する。ＳＨＰ２の阻害は、しばしば発癌性シグナル伝達および適応腫瘍エスケープ（Ｐｒａｈａｌｌａｄ，Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ １２，１９７８～１９８５（２０１５）；Ｃｈｅｎ ＹＮ，Ｎａｔｕｒｅ ５３５，１４８～１５２（２０１６）を参照）を促す上流ＲＴＫシグナル伝達を全体的に減衰させる効果を達成し、これは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するためのすべての方法、化合物、組成物、データなどを含むがこれらに限定されないその教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

ＳＨＰ２に加えて、細胞外タンパク質リガンドの上皮成長因子ファミリーのメンバーの受容体である膜貫通タンパク質である上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）は、さらにＲＡＳ経路の上流で作動する。複数の角度からのシグナル伝達経路を標的とし、ＳＨＰ２およびＥＧＦＲを介してＲａｓの上流のフィードバックループを潜在的に改善する機会は、併用療法を使用する方法を開発するための機会を提供する。本明細書に記載されるのは、ＳＨＰ２およびＥＧＦＲ阻害剤の使用に関連する様々な特定の方法および組成物である。

第１の態様では、本開示は、癌を有する対象を処置する方法を提供し、該方法は、対象に式Ｉ：

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を治療有効量で、ＥＧＦＲ阻害剤と組合せて投与する工程を含む。

いくつかの実施形態では、対象におけるＥＧＦＲは構成的に発現される。

いくつかの実施形態では、癌は、ＥＧＦＲ遺伝子コピー数増加、ＥＧＦＲ遺伝子増幅、染色体７多染色体、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ、ＥＧＦＲエキソン１９欠失／挿入（例えば、Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ、Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌｉｎｓＩ、Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌｉｎｓＩＰ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＡ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＶ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＶ、Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ、Ｌ７４７＿Ｔ７５１ｄｅｌ、およびＬ７４７＿Ｐ７５３ｄｅｌｉｎｓＳ）、ＥＧＦＲ Ｌ８６１Ｑ、ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ｃ、ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ｓ、ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ａ、ＥＧＦＲ Ｖ７６５Ａ、ＥＧＦＲ Ｔ７８３Ａ、ＥＧＦＲエキソン２０挿入（例えば、Ｎ７７１ｄｕｐ、Ｎ７７１＿Ｈ７７３ｄｕｐ、およびＰ７７２＿Ｈ７７３ｄｕｐ）、ＥＧＦＲスプライスバリアント（例えば、Ｖｉｉｉ、Ｖｖｉ、およびＶｉｉ）、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｄ、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｔ、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｖ、ＥＧＦＲＧ５９８Ａ、ＥＧＦＲ Ｇ５９８Ｖ、ＥＧＦＲ Ｔ７９０Ｍ、およびＥＧＦＲ Ｃ７９７Ｓから選択されるＥＧＦＲ変異を含む。

いくつかの実施形態では、癌は肺癌である。

いくつかの実施形態では、癌は腺癌である。

いくつかの実施形態では、癌は膵管腺癌（ＰＤＡＣ）である。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤は、オシメルチニブ、ダコミチニブ、ラゼルチニブ、ナザルチニブ、ネラチニブ、モボセルチニブ、アファチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、リフィラフェニブ、アミバンタマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ネシツムマブ、ミゾタマブクレズトクラックス、ニモツズマブおよびバンデタニブから選択される。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はオシメルチニブである。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はエルロチニブである。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はゲフィチニブである。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はラパチニブである。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はネラチニブである。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はアファチニブである。

いくつかの実施形態では、方法は、第３のＭＡＰＫ経路阻害剤を投与する工程を含む。

いくつかの実施形態では、投与は経口である。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物の投与量は、毎日２０ｍｇ～４００ｍｇの範囲である。

いくつかの実施形態では、式ＩのＥＧＦＲ阻害剤の投与量は、毎日１ｍｇ～１５００ｍｇの範囲である。

第２の態様では、本開示は、対象の肺癌を処置する方法を提供し、該方法は、対象に、治療有効量の式Ｉ：

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、オシメルチニブと組み合わせて投与することを含む。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物は、１日１回または２回投与される。

いくつかの実施形態では、オシメルチニブは、１日１回または２回投与される。

いくつかの実施形態では、対象はヒトである。

いくつかの実施形態では、肺癌は非小細胞肺癌である。

いくつかの実施形態では、肺癌はＥＧＦＲ変異を有する。

第３の態様では、本開示は、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、およびＥＧＦＲ阻害剤を含むキットを提供する。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物およびＥＧＦＲ阻害剤は、別々のパッケージにある。

いくつかの実施形態では、キットは、キットの内容物を癌の処置のために対象に投与させるための説明書をさらに含む。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤は、オシメルチニブ、ダコミチニブ、ラゼルチニブ、ナザルチニブ、ネラチニブ、モボセルチニブ、アファチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、リフィラフェニブ、アミバンタマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ネシツムマブ、ミゾタマブクレズトクラックス、ニモツズマブおよびバンデタニブの１つ以上である。

最終的態様では、本開示は、対象の癌を処置する方法を提供し、該方法は、対象に式Ｉ：

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を治療有効量で、セツキシマブと組み合わせて経口的に投与する工程を含む。

いくつかの実施形態では、セツキシマブは毎週投与される。

いくつかの実施形態では、セツキシマブは隔週投与される

いくつかの実施形態では、癌は扁平細胞頭頚部癌（ＳＣＣＨＮ）である。

いくつかの実施形態では、癌は膵管腺癌（ＰＤＡＣ）である。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物は、１日１回または２回投与される。

いくつかの実施形態では、対象はヒトである。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日に約２０ｍｇ～約２６０ｍｇの間の投与量で投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日に約２０ｍｇ～約６０ｍｇの間の投与量で投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日に約４０ｍｇ、または１日に約６０ｍｇの投与量で投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日２回、約１０ｍｇ～約１００ｍｇの間の投与量で投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日２回、約２０ｍｇ～約８０ｍｇの間の投与量で投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、医薬組成物として製剤化される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、経口組成物として製剤化される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日１回または２回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、２８日サイクルにわたり連続的に投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日１回、約１０ｍｇ～約１４０ｍｇの量で投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む３週間サイクルで１日１回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで１日１回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、６週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週３回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、週の１日目、３日目、および５日目に投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週に４回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む３週間サイクルで投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、週２日に２回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、各週の１日目および２日目に投与される。

いくつかの実施形態では、癌は、肺癌、胃癌、肝臓癌、結腸癌、腎癌、乳癌、膵臓癌、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）、若年性骨髄単球性白血病、神経芽細胞腫、黒色腫、および急性骨髄性白血病から選択される。

細胞株ＨＣＣ８２７における式Ｉの化合物とＥＧＦＲ阻害剤オシメルチニブとの組み合わせのデータを示す。このデータは、式Ｉの化合物とＥＧＦＲ阻害剤オシメルチニブとの組み合わせがインビトロで相乗作用を示すことを示す。 細胞株ＮＣＩ－Ｈ８２０における式Ｉの化合物とＥＧＦＲ阻害剤オシメルチニブとの組み合わせの数値データを示す。このデータは、式Ｉの化合物とＥＧＦＲ阻害剤オシメルチニブとの組み合わせがインビトロで相乗作用を示すことを示す。 式Ｉの化合物単独で（黒丸、線１）、および０．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、１．０μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または２．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＣＡＬ－２７細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ｌｏｇＭ）のプロットを示す。 セツキシマブ処置単独が細胞生存率を約４０％減少させたことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。 式Ｉの化合物単独で、および０．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、１．０μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または２．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＳＣＣ－９細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ログＭ）のプロットを示す。 セツキシマブ処置単独が細胞生存率を約１５％減少させたことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。 式Ｉの化合物単独で、および１．０μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、２．５μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または５．０μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＳＣＣ－１５細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ｌｏｇＭ）のプロットを示す。 セツキシマブ処置単独が細胞生存率を１０％未満のみ減少させたことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。 式Ｉの化合物単独で、および２．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、５．０μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または１０．０μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＳＣＣ－２５細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ログＭ）のプロットを示す。 セツキシマブ処置単独が細胞生存率を減少させなかったことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。 式Ｉの化合物対ＤＭＳＯでのＥＲＫ１／２リン酸化活性の約５０％阻害のイムノブロットを示す。 総ＥＲＫによって正規化された、定量化されたリン酸化ＥＲＫ１／２バンドの棒グラフを示す。定量結果は、式Ｉの化合物単独またはセツキシマブ単独による処置が、ＤＭＳＯ処置の対照細胞と比較してＥＲＫ１／２リン酸化を約５０％減少させたことを示したが、式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせは、ＨＰＶ陰性頭頸部扁平上皮癌細胞株ＣＡＬ２７においてＥＲＫ１／２リン酸化の約８０％阻害を示した。 （エルロチニブ耐性）ＨＣＣ８２７／ＥＲ１細胞株における、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによるＢｌｉｓｓ相乗作用スコアの表を示す。 （エルロチニブ耐性）ＨＣＣ８２７ＥＲ１親細胞株における、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによるＢｌｉｓｓ相乗作用スコアの表を示す。 ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－２１５における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。 ＥＧＦＲ ｄｅｌＥ７４６＿Ｅ７４９／Ｔ７９０Ｍ変異体およびＭＥＴ増幅ＮＳＣＬＣ ＣＤＸモデルＮＣＩ－Ｈ８２０における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。 ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異体およびＥＲＢＢ２高発現ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－１４３－９における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。 ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－２３４における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。 ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－１２８－３３における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。 ＥＧＦＲ^{ｅｘ１９ｄｅｌ}変異体エルロチニブ耐性ＣＤＸモデルＨＣＣ８２７／ＥＲ１（ＭＥＴ^ａｍｐ）［Ｅ４９５７－Ｕ２１０１］における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。 ＲＡＳ／ＲＡＦ野性型ＰＤＸモデルＣＲＣ０４９における、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、および式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。 ＲＡＳ／ＲＡＦ野性型ＨＰＶ－陰性ＨＮＳＣＣ ＣＤＸモデルＦａＤｕにおける、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、および式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。

Ｉ．全般
本実施形態は、癌を有する対象を処置する方法を提供し、該方法は、対象に式Ｉ：

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を治療有効量で、ＥＧＦＲ阻害剤と組合せて投与する工程を含む。以下の実施例は、予想外であった組合せの相乗作用を示す。式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を使用する本明細書に開示される併用療法は、ＥＧＦＲの阻害剤と組み合わせて使用される代替的なＳＨＰ２阻害剤の組み合わせと比較して優れた結果を示すことができる。さらに、式ＩのＳＨＰ２阻害剤とＥＧＦＲの阻害剤との組み合わせは、単独療法において単独で使用されるいずれかの薬剤のより低用量の使用を可能にする方法を提供し、これは、潜在的な副作用の低減に役立ち得る。特に、併用療法は、任意のＥＧＦＲ変異を有するか、またはＥＧＦＲを過剰発現する癌細胞において有効であり得る。したがって、そのような処置は、適切な患者集団選択を支援するためのコンパニオン診断の使用に適合する。これらおよび他の利点は、当業者によって認識されるであろう。

ＩＩ．定義
特に断らない限り、本明細書で使用される全ての技術的用語および科学的用語は、本実施形態が対象とする技術分野における当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。加えて、本明細書に記載される方法または材料と類似または同等の任意の方法または材料を、本明細書の実施形態の実施において使用することができる。本明細書に開示される実施形態の目的ために、以下の用語が定義される。

本明細書で使用される「ａ」、「ａｎ」または「ｔｈｅ」は、１つのメンバーを有する態様を含むだけでなく、複数のメンバーを有する態様も含む。例えば、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上明確に別段の指示がない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「細胞（ａ ｃｅｌｌ）」への言及はその複数の細胞を含み、「薬剤（ｔｈｅ ａｇｅｎｔ）」への言及は当業者に知られている１つ以上の薬剤などへの言及を含んでいる。

「薬学的に許容可能な賦形剤」は、対象への活性薬剤の投与および対象による吸収を支援する物質を指す。本実施形態に有用な医薬賦形剤は、結合剤、充填剤、崩壊剤、潤滑剤、界面活性剤、コーティング、甘味剤、香味剤および着色剤を含むが、これらに限定されない。当業者は、他の医薬賦形剤が本実施形態に有用であることを認識するであろう。

「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、例えば、軽減、寛解、症状の軽減または損傷、病態もしくは状態に対する患者の忍容性の向上、変性速度の緩徐化あるいは減退、変性の最終点に対する衰退、患者の身体的または精神的な健康状態の改善を含む任意の客観的または主観的パラメータ、損傷、病状または状態の処置または改善における成功の任意の徴候を指す。症状の処置または改善は、身体検査、神経精神医学的検査、および／または精神医学的評価の結果を含む客観的または主観的パラメータに基づくことができる。

「投与すること」は、経口投与、坐剤としての投与、局所的接触、非経口、静脈内、腹腔内、筋肉内、病巣内、鼻腔内もしくは皮下投与、髄腔内投与、または対象への徐放性デバイス、例えば、ミニ浸透圧ポンプの移植を指す。本明細書に開示される併用療法の内容では、投与は、別々の時間または同時もしくは実質的に同時であり得る。

本明細書で使用される「同時投与する」または「組み合わせて投与する」は、１つ以上の追加の療法の投与と同時に、その直前に、またはその直後に、本明細書に記載される組成物を投与することを指す。本明細書に提供される化合物は、単独で投与され得るか、または患者に同時投与され得る。同時投与は、化合物の、個々にまたは組み合わせて（１より多くの化合物）の同時または連続投与を含むように意図される。同時投与は、同じ日、同じ週内、および／または同じ処置スケジュール内での化合物の投与を含むように意図される。化合物は、異なる投与スケジュールを有し得るが、それらが同じ処置スケジュール内で投与される場合、依然として同時投与され得る。例えば、パルボシクリブは、４週間の処置スケジュール内で３週間にわたって１日１回投与されてもよく、および式Ｉの化合物は、４週間の処置スケジュール内の任意の時間に投与される場合、パルボシクリブと同時投与される。

「治療有効量」は、それが投与される治療効果をもたらす投与量を指す。正確な用量は、処置の目的に依存し、そして公知の技術（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｓ．１～３，１９９２）；Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；ａｎｄ Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００３，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓを参照）を使用して当業者によって確認可能であり、それらの各々は、本明細書中の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書中に援用される。感作細胞では、治療有効量は、しばしば、非感作細胞に対する従来の治療有効量よりも低くなり得る。

「阻害」、「阻害する」および「阻害剤」特定の作用または機能を部分的もしくは完全に遮断もしくは禁止する化合物、または部分的もしくは完全に遮断もしくは禁止する方法を指す。

「癌」は、限定されることなく、白血病、リンパ腫、癌腫および肉腫を含む、哺乳動物（例えば、ヒト）において見出される全ての種類の癌、新生物または悪性腫瘍を指す。本明細書に提供される化合物または方法を用いて処置され得る例示的な癌は、脳癌、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、前立腺癌、大腸癌、膵臓癌、髄芽腫、黒色腫、子宮頚癌、胃癌、卵巣癌、肺癌、頭部の癌、ホジキン病および非ホジキンリンパ腫を含む。本明細書で提供される化合物または方法により処置され得る例示的な癌は、甲状腺、内分泌系、脳、乳房、子宮頚、結腸、頭頸部、肝臓、腎臓、肺、卵巣、膵臓、直腸、胃、および子宮の癌を含む。さらなる例は、甲状腺癌、胆管癌、膵臓腺癌、皮膚黒色腫、結腸腺癌、直腸腺癌、胃腺癌、食道癌、頭頸部扁平上皮癌、乳房浸潤癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、非小細胞肺癌、中皮腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、多形神経膠芽腫、卵巣癌、横紋筋肉腫、原発性血小板血症、原発性マクログロブリン血症、原発性脳腫瘍、悪性膵臓インスラノーマ、悪性カルチノイド、膀胱癌、前悪性皮膚病変、精巣癌、甲状腺癌、神経芽細胞腫、食道癌、尿生殖路癌、悪性高カルシウム血症、子宮内膜癌、副腎皮質癌、内分泌または外分泌膵臓の新生物、髄様甲状腺癌、甲状腺髄様癌、黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、肝細胞癌、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）または前立腺癌を含む。

「ＥＧＦＲ阻害剤」は、野生型のＥＧＦＲまたはＥＧＦＲ変異体の任意の阻害剤を指す。ＥＧＦＲ変異は、その全体が参照により本明細書に取り込まれている米国特許公報２０１８／０２３５９６８に開示されるものいずかを含むが、これらに限定されない。ＥＧＦＲ変異は、一塩基多型、エキソン挿入と欠失、多染色体性などを含むが、これらに限定されない。変異の具体例には、限定されないが、ＥＧＦＲ遺伝子コピー数増加、ＥＧＦＲ遺伝子増幅、染色体７多染色体、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ、ＥＧＦＲエキソン１９欠失／挿入（例えば、Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ、Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌｉｎｓＩ、Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌｉｎｓＩＰ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＡ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＶ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＶ、Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ、Ｌ７４７＿Ｔ７５１ｄｅｌ、およびＬ７４７＿Ｐ７５３ｄｅｌｉｎｓＳ）、ＥＧＦＲ Ｌ８６１Ｑ、ＥＧＦＲ Ｌ７１８Ｑ、ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ｃ，ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ｓ、ＥＧＦＲ Ｇ７２４Ｓ、ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ａ、ＥＧＦＲ Ｖ７６５Ａ、ＥＧＦＲ Ｔ７８３Ａ、ＥＧＦＲエキソン２０挿入（例えば、Ｎ７７１ｄｕｐ、Ｎ７７１＿Ｈ７７３ｄｕｐ、およびＰ７７２＿Ｈ７７３ｄｕｐ）、ＥＧＦＲスプライスバリアント（例えば、Ｖｉｉｉ、Ｖｖｉ、およびＶｉｉ）、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｄ、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｔ、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｖ、ＥＧＦＲＧ Ｇ５９８Ａ、ＥＧＦＲ Ｇ５９８Ｖ、ＥＧＦＲ Ｓ７６８Ｉ、ＥＧＦＲ Ｔ７９０Ｍ、およびＥＧＦＲ Ｃ７９７Ｓを含む。いくつかの実施形態では、本段落および本明細書の他の場所に詳述される変異のうちの１つ以上は、任意の方法、キット、および組成物等を含むが、それらに限定されない、本明細書に記載される実施形態から特異的にに除外することができる。ＥＧＦＲ阻害剤の非限定的な例としては、オシメルチニブ、ダコミチニブ、ラゼルチニブ、ナザルチニブ、ネラチニブ、モボセルチニブ、アファチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、リフィラフェニブ、アミバンタマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ネシツムマブ、ミゾタマブクレズトクラックス、ニモツズマブおよびバンデタニブを含む。他のＥＧＦＲ阻害剤は、米国特許出願公開第２０２０／０００２２７９号、同第２０１９／０２０２９２０，号および同第２０１９／０１６７６８６号ならびに国際出願ＷＯ２０１２／０６１２９９、ＷＯ２０１９／０６７５４３、およびＷＯ２０２０／１９０７６５に開示されるものを含み、これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、本段落および本明細書の他の場所に詳述される阻害剤の１つ以上、ならびに組み込まれる参考文献中の阻害剤は、限定ではないが、任意の方法、キット、および組成物等を含む、本明細書に記載される実施形態のうちの１つ以上から具体的に除外することができる。

「被験体」とは、本明細書で提供されるような医薬組成物の投与により処置可能な疾患または疾病を患っているか、あるいはそれにかかりやすい生物を指す。限定されない例は、ヒト、他の哺乳動物、ウシ、ラット、マウス、イヌ、サル、ヤギ、ヒツジ、ウシ、シカ、ウマおよび他の非哺乳動物を含む。いくつかの実施形態では、患者はヒトである。

ＩＩＩ．投与方法
いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、医薬組成物として製剤化される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、経口組成物として製剤化される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日１回または２回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、２８日サイクルにわたり連続的に投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日１回、約１０ｍｇ～約１４０ｍｇの量で投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む３週間サイクルで１日１回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで１日１回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、６週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週３回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、週の１日目、３日目、および５日目に投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週４回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む３週間サイクルで投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、週２日で１日２回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、各週の１日目および２日目に投与される。

いくつかの実施形態では、癌は、肺癌、胃癌、肝臓癌、結腸癌、腎癌、乳癌、膵臓癌、膵管腺癌、若年性骨髄単球性白血病、神経芽細胞腫、黒色腫、および急性骨髄性白血病から選択される。いくつかの実施形態では、癌は膵管腺癌（ＰＤＡＣ）である。

ＩＶ．併用療法
いくつかの実施形態では、本明細書には癌を有する対象を処置する方法が提供され、該方法は、対象に式Ｉ：

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を治療有効量で、ＥＧＦＲ阻害剤と組合せて投与する工程を含む。本明細書に開示されるように、有意な相乗作用は、そのような組み合わせについて予想されたものを越えて観察された。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、ＥＧＦＲが役割を果たすあらゆる癌の処置に適している。いくつかの実施形態では、癌は、例えば、大腸癌（例えば、結腸癌、直腸癌など）であり得る。いくつかの実施形態では、癌は、例えば、ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）であり得る。いくつかの実施形態では、癌は、例えば、神経膠芽腫を含む神経膠腫であり得る。いくつかの実施形態では、癌は三種陰性乳癌である。いくつかの実施形態では、癌は甲状腺癌である。いくつかの実施形態では、癌は、例えば、頭頸部扁平上皮癌であり得る。当業者によって理解されるように、腫瘍は、腫瘍の第１のまたは原発性遺伝子座から１つ以上の他の身体組織または部位に転移し得る。特に、中枢神経系への転移（すなわち、二次ＣＮＳ腫瘍）、特に脳への転移（すなわち、脳転移）は、腫瘍および癌、例えば、乳房、肺、黒色腫、腎臓および結腸直腸についてよく文書化されている。したがって、本明細書に開示される方法は、他の器官への転移（すなわち、転移性腫瘍増殖）の処置にも使用することができる。

いくつかの実施形態では、方法は、第３のＭＡＰＫ経路阻害剤を投与する工程を含んでもよい。理論によって制限されることなく、癌細胞におけるＭＡＰＫシグナル伝達の抑制は、ＰＤ－Ｌ１発現の下方調節をもたらし、癌細胞が免疫系によって検出される可能性を増加させることができる。このような第３のＭＡＰＫ経路阻害剤は、ＭＡＰＫ経路におけるタンパク質の他の変異に基づき得る。いくつかの実施形態では、Ｋ－Ｒａｓ、Ｎ－Ｒａｓ、Ｈ－Ｒａｓ、ＰＤＧＦＲＡ、ＰＤＧＦＲＢ、ＭＥＴ、ＦＧＦＲ、ＡＬＫ、ＲＯＳ１、ＴＲＫＡ、ＴＲＫＢ、ＴＲＫＣ、ＥＧＦＲ、ＩＧＦＲ１Ｒ、ＧＲＢ２、ＳＯＳ、ＡＲＡＦ、ＢＲＡＦ、ＲＡＦ１、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ｃ－Ｍｙｃ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、ＣＤＫ２、ＥＲＫ１、およびＥＲＫ２を標的とするものを含む、任意のＭＡＰＫ経路阻害剤を使用することができる。例示的なＭＡＰＫ経路阻害剤は、限定されることなく、アファチニブ、オシメルチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、ダコミチニブ、バンデタニブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ、トラメチニブ、ビニメチニブ、コビメチニブ、セルメチニブ、ウリキセルチニブ、ＬＴＴ４６２、およびＬＹ３２１４９９６を含む。いくつかの実施形態では、限定されないが、任意の方法、キットおよび組成物などを含む、上記の詳述された阻害剤の１つ以上を、本明細書に記載される実施形態から具体的に除外することができる。

本明細書に開示される方法は、他の化学療法剤と組み合わせることができる。そのような抗癌剤の例は、Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ｂｙ Ｖ．Ｔ．Ｄｅｖｉｔａ ａｎｄ Ｓ．Ｈｅｌｌｍａｎ（ｅｄｉｔｏｒｓ），６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１年２月１５日），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓに見出すことができ、これは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、全ての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示の全てについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。当業者は、関与する薬物および疾患の特定の特徴に基づいて、薬剤のどの組合せが有用であるかを識別することができるであろう。

いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも１つの細胞毒性薬剤の同時投与を含み得る。用語「細胞毒性薬剤」は、本明細書で使用されるように、細胞機能を阻害または予防し、および／または細胞死もしくは破壊を引き起こす物質を指す。細胞毒性薬剤は、限定されないが、放射性同位元素（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅｌ８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２およびＬｕの放射性同位元素）、化学療法剤、成長阻害剤、核酸分解酵素などの酵素およびその断片、ならびにその断片および／または変異体を含む、細菌、真菌、植物または動物起源の小分子毒素または酵素的に活性な毒素などの毒素を含む。

細胞毒性薬剤の例は、抗微小管剤、プラチナ配位錯体、アルキル化剤、抗生物質、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモンのアナログ、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ血管形成阻害剤、免疫療法剤、アポトーシス促進剤、ＬＤＨ－Ａの阻害剤；脂肪酸生合成の阻害剤；細胞周期シグナル伝達阻害剤；ＨＤＡＣ阻害剤、プロテアソーム阻害剤；および癌代謝の阻害剤から選択され得る。

化学療法剤は癌の処置に有用な化合物を含む。化学療法剤の例は、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍ．）、ジスルフィラム、没食子酸エピガロカテキン、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、１７－ＡＡＧ（ゲルダナマイシン）、ラジシコール、乳酸脱水素酵素Ａ（ＬＤＨ－Ａ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ／Ｓｕｇｅｎ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、フィナスネート（ｆｉｎａｓｕｎａｔｅ）（ＶＡＴＡＬＡＮＩＢ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５－ＦＵ（５－フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ Ｓｍｉｔｈ Ｋｌｉｎｅ）、ロナファルニブ（ Ｌｏｎａｆａｒｎｉｂ）（ＳＣＨ ６６３３６）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）Ｂａｙｅｒ Ｌａｂｓ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、アルキル化剤、例えば、チオテパおよびシトキサン（登録商標） シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｓｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）；ブスルファン、インプロスルファン、およびピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、およびウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）などのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド（ｔｒｉｅｔｙｌｅｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリエチレンチオホスホルアミド（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈａｏｒａｍｉｄｅ）、およびトリメチロロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含む、エチレンイミンおよびメチラメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）；アセトゲニン（特にブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（トポテカンとイリノテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ １０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、およびビセレシン合成アナログを含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；副腎皮質ステロイド（プレドニゾンとプレドニゾロンを含む）；酢酸シプロテロン；フィナステリドとデュタステリドを含む５－α－レダクターゼ；ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタットドラスチン；アルデスロイキン、タルクデュオカルマイシン（合成アナログ、ｋＷ－２１８９とＣＢ１－ＴＭ１を含む））；エリュテロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）；パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチインＡ（ａ ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンギスタチン；クロラムブチル、クロルナファジン（ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）、クロロホスファミド（ｃｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩（ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ ｏｘｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、メルファラン、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、およびラニムスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）などのニトロソ尿素；エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１Ｉとカリケアマイシンω１Ｉ（Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９４ ３３：１８３－１８６）などの抗生物質；ダイネマイシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）Ａを含むダイネマイシン；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団および関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎｓ）、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン（ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｉｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）（ドキソルビシン）、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン
オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン（ｚｏｒｕｂｉｃｉｎ）；メトトレキサートおよび５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸アナログ；フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリンアナログ；アンシタビン、アザシチジン、６ アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジンアナログ；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤（ａｎｔｉ－ａｄｒｅｎａｌｓ）；フォリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）などの、葉酸補充薬（ｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｒｅｐｌｅｎｉｓｈｅｒ）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジコン；エルフォミチン（ｅｌｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）；マイタンシンとアンサマイトシンなどのマイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダムノール（ｍｏｐｉｄａｍｎｏｌ）；ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫＲ多糖類複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ－２毒素、ベラキュリンＡ、ロリジン（ｒｏｒｉｄｉｎ）Ａ、およびアングイジン（ａｎｇｕｉｄｉｎｅ）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシッド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（パクリタキセル；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、アブラキサン（登録商標）（クレモフォールを含まない）、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，ＩＩＩ．）、およびタキソテール（登録商標）（ドセタキセル、ｄｏｘｅｔａｘｅｌ；Ｓａｎｏｆｉ－Ａｖｅｎｔｉｓ）；クロラムブシル（ｃｈｌｏｒａｎｍｂｕｃｉｌ）；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金アナログ；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤 ＲＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）
レチン酸などのレチノイド；および上記のもののいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、および誘導体を含む。

化学療法剤は、さらに、（ｉ）例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；クエン酸タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、イオドキシフェン、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（クエン酸トレミフェン）を含む、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）などの、腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤；（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）－イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メゲストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Ｐｆｉｚｅｒ）、ホルメスタニー、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）およびＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；（ｉｉｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリド、およびゴセレリンなどの抗アンドロゲン；ブセレリン、トリプテレリン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ジエチルスチルベストロール、プレマリン、フルオキシメステロン、全てのトランスレチン酸、フェンレチニド、ならびにトロキサシタビン（１，３－ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）；（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えば、ＰＫＣ－α、ＲａｌｆおよびＨ－Ｒａｓ；（ｖｉｉ）ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））およびＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；（ｖｉｉｉ）遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、およびＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）、ｒＩＬ－２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）などのトポイソメラーゼ１阻害剤；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標） ｒｍＲＨ；および（ｉｘ）上記のもののいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、および誘導体を含む。

化学療法剤は、アレムツズマブ（キャンパス）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）；パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）などの抗体および抗体薬物複合体、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）をさらに含む。本発明の化合物と組み合わせて薬剤としての治療可能性を有するさらなるヒト化モノクローナル抗体は、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネウズマブ（ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ）、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴル、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペクツズマブ、ペキセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブ・テトラキセタン、タドシツズマブ、タリツマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビツマブ、ウルトキサズマブ（ｕｒｔｏｘａｚｕｍａｂ）、ウステキヌマブ、ビシリズマブ、およびインターロイキン－１２ ｐ４０タンパク質を認識するように遺伝子組換えされた組換え体の排他的にヒト配列の完全長ＩｇＧ１λ抗体である抗－インターロイキン－１２（ＡＢＴ－８７４／Ｊ６９５、Ｗｙｅｔｈ ＲｅｓｅａｒｃｈおよびＡｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を含む。

化学療法剤は、他の「ＥＧＦＲ阻害剤」をさらに含み、これは、ＥＧＦＲまたはその変異体形態に結合するかまたはそうでなければそれと直接相互作用し、そのシグナル伝達活性を防止または低減する化合物を指し、および代替的に「ＥＧＦＲアンタゴニスト」と称される。そのような薬剤の例は、ＥＧＦＲに結合する抗体および小分子を含む。ＥＧＦＲに結合する抗体の例は、ＭＡｂ ５７９（ＡＴＣＣ ＣＲＬ ＨＢ ８５０６）、ＭＡｂ ４５５（ＡＴＣＣ ＣＲＬ ＨＢ８５０７）、ＭＡｂ ２２５（ＡＴＣＣ ＣＲＬ ８５０８）、ＭＡｂ ５２８（ＡＴＣＣ ＣＲＬ ８５０９）（米国特許第４，９４３，５３３号、Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ ｅｔ ａｌ．を参照）およびその変異体、例えば、キメラ化２２５（Ｃ２２５またはセツキシマブ；ＥＲＢＵＴＩＸ）および再成形ヒト２２５（Ｈ２２５）（ＷＯ９６／４０２１０、Ｉｍｃｌｏｎｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．を参照）；完全ヒトＥＧＦＲ標的化抗体であるＩＭＣ－１１Ｆ８（Ｉｍｃｌｏｎｅ）；ＩＩ型変異体ＥＧＦＲに結合する抗体（米国特許第５，２１２，２９０号）；米国特許第５，８９１，９９６号に記載されているようにＥＧＦＲに結合するヒト化およびキメラ抗体は；ＡＢＸ－ＥＧＦまたはパニツムマブなどのＥＧＦＲに結合するヒト抗体（ＷＯ９８／５０４３３、Ａｂｇｅｎｉｘ／Ａｍｇｅｎを参照）；ＥＭＤ ５５９００（Ｓｔｒａｇｌｉｏｔｔｏ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ３２Ａ：６３６－６４０（１９９６））ＥＧＦＲ結合に関してＥＧＦおよびＴＧＦαの両方と競合するＥＧＦＲに対するヒト化ＥＧＦＲ抗体であるＥＭＤ７２００（マツズマブ）（ＥＭＤ／Ｍｅｒｃｋ）；ヒトＥＧＦＲ抗体、ＨｕＭａｘ－ＥＧＦＲ（ＧｅｎＭａｂ）；Ｅ１．１、Ｅ２．４、Ｅ２．５、Ｅ６．２、Ｅ６．４、Ｅ２．１１、Ｅ６．３およびＥ７．６．３ として知られ、かつＵＳ６，２３５，８８３に記載されている完全ヒト抗体；ＭＤＸ－４４７（Ｍｅｄａｒｅｘ Ｉｎｃ）；およびｍＡｂ８０６またはヒト化ｍＡｂ８０６（Ｊｏｈｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９（２９）：３０３７５－３０３８４（２００４））を含む。抗ＥＧＦＲの抗体は、抗ＥＧＦＲ抗体は、細胞毒性薬剤とコンジュゲートされ得、これによって、免疫複合体（例えば、ＥＰ６５９，４３９Ａ２、Ｍｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ ＧｍｂＨを参照）を生成する。ＥＧＦＲアンタゴニストは、米国特許第５，６１６，５８２号、第５，４５７，１０５号、第５，４７５，００１号、第５，６５４，３０７号、第５，６７９，６８３号、第６，０８４，０９５号、第６，２６５，４１０号、第６，４５５，５３４号、第６，５２１，６２０号、第６，５９６，７２６号、第６，７１３，４８４号、第５，７７０，５９９号、第６，１４０，３３２号、第５，８６６，５７２号、第６，３９９，６０２号、第６，３４４，４５９号、第６，６０２，８６３号、第６，３９１，８７４号、第６，３４４，４５５号、第５，７６０，０４１号、第６，００２，００８および第５，７４７，４９８号と、ＷＯ９８／１４４５１、ＷＯ９８／５００３８、ＷＯ９９／０９０１６およびＷＯ９９／２４０３７のＰＣＴ公報と同様に記載されている化合物などの小分子を含む。特定の小分子ＥＧＦＲアンタゴニストは、ＯＳＩ－７７４（ＣＰ－３５８７７４、エルロチニブ、ＴＡＲＣＥＶＡ－Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＰＤ １８３８０５（ＣＩ １０３３、２－プロペンアミド、Ｎ－［４－［（３－クロロ－４－フルオロフェニル）アミノ］－７－［３－（４－モルホリニル）プロポキシ］－６－キナゾリニル］－、二塩酸塩、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）；ＺＤ１８３９、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））４－（３’－クロロ－４’－フルオロアニリノ）－７－メトキシ－６－（３－モルホリノプロポキシ）キナゾリン、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＺＭ １０５１８０（（６－アミノ－４－（３－メチルフェニル－アミノ）－キナゾリン，Ｚｅｎｅｃａ）；ＢＩＢＸ－１８２（Ｎ８－（３－クロロ－４－フルオロ－フェニル）－Ｎ２－（１－メチル－ピペリジン－４－イル）－ピリミド［５，４－ｄ］ピリミジン－２，８－ジアミン，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）；ＰＫＩ－１６６（（Ｒ）－４－［４－［（１－フェニルエチル）アミノ］－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－６－イル］－フェノール）；（Ｒ）－６－（４－ヒドロキシフェニル）－４－［（１－フェニルエチル）アミノ］－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン）；ＣＬ－３８７７８５（Ｎ－［４－［（３－ブロモフェニル）アミノ］－６－キナゾリニル］－２－ブチンアミド）；ＥＫＢ－５６９（Ｎ－［４－［（３－クロロ－４－フルオロフェニル）アミノ］－３－シアノ－７－エトキシ－６－キノリニル］－４－（ジメチルアミノ）－２－ブテンアミド）（Ｗｙｅｔｈ）；ＡＧ１４７８（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＡＧ１５７１（ＳＵ ５２７１；Ｐｆｉｚｅｒ）；デュアルＥＧＦＲ／ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、またはＮ－［３－クロロ－４－［（３ フルオロフェニル）メトキシ］フェニル］－６［５［［［２メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］－２－フラニル］－４－キナゾリンアミン］）を含む。上記の参考文献の各々は、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

化学療法剤はまた、上記の段落で言及されるＥＧＦＲ標的化薬物を含む「チロシンキナーゼ阻害剤」；Ｔａｋｅｄａから入手可能なＴＡＫ１６５などの小分子ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤；ＣＰ－７２４，７１４、ＥｒｂＢ２受容体チロシンキナーゼの経口選択的阻害剤（ＰｆｉｚｅｒおよびＯＳＩ）；ＥＧＦＲに優先的に結合するが、ＨＥＲ２およびＥＧＦＲ過剰発現細胞の両方を阻害するＥＫＢ－５６９（Ｗｙｅｔｈから入手可能）などのデュアル－ＨＥＲ阻害剤；ラパチニブ（ＧＳＫ５７２０１６；Ｇｌａｘｏ－ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）、経口ＨＥＲ２およびＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤；ＰＫＩ－１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓから入手可能）；ｐａｎ－ＨＥＲ阻害剤、例えば、カネルチニブ（ＣＩ－１０３３；Ｐｈａｒｍａｃｉａ）；Ｒａｆ－１シグナル伝達を阻害する、ＩＳＩＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手可能なアンチセンス剤ＩＳＩＳ－５１３２などのＲａｆ－１阻害剤；非ＨＥＲ標的化ＴＫ阻害剤、例えばメシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｇｌａｘｏ ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）；多標的化チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒから入手可能）；バタラニブ（ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４、Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ ＡＧから入手可能）などのＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤；ＭＡＰＫ細胞外調節化キナーゼＩ阻害剤ＣＩ－１０４０（Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能）；キナゾリン、例えば、ＰＤ１５３０３５，４－（３－クロロアニリノ）キナゾリン；ピリドピリミジン；ピリミドピリミジン；ピロロピリミジン、例えば、ＣＧＰ５９３２６、ＣＧＰ６０２６１およびＣＧＰ６２７０６；ピラゾロピリミジン、４－（フェニルアミノ）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン；クルクミン（ジフェルロイルメタン，４，５－ビス（４－フルオロアニリノ）フタルイミド）；ニトロチオフェン部分を含有するチルホスチン；ＰＤ－０１８３８０５（Ｗａｒｎｅｒ－Ｌａｍｂｅｒ）；アンチセンス分子（例えば、ＨＥＲをコードする核酸に結合するもの）；キノキサリン（米国特許第５，８０４，３９６号）；トリホスチン（米国特許第５，８０４，３９６号）；ＺＤ６４７４（Ａｓｔｒａ Ｚｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ－７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／シェリング）；ｐａｎ－ＨＥＲ阻害剤、例えば、ＣＩ－１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；Ａｆｆｉｎｉｔａｃ（ＩＳＩＳ ３５２１；ＩＳＩＳ／Ｌｉｌｌｙ）；メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））；ＰＫＩ１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＧＷ２０１６（Ｇｌａｘｏ ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；ＣＩ－１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＥＫＢ－５６９（Ｗｙｅｔｈ）；セマキシニブ（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＺＤ６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ－７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ ＡＧ）；ＩＮＣ－１Ｃ１１（Ｉｍｃｌｏｎｅ）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標））；または以下の特許公報：米国特許第５，８０４，３９６号；ＷＯ１９９９／０９０１６（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ）；ＷＯ１９９８／４３９６０（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ）；ＷＯ１９９７／３８９８３（Ｗａｒｎｅｒ Ｌａｍｂｅｒｔ）；ＷＯ１９９９／０６３７８（Ｗａｒｎｅｒ Ｌａｍｂｅｒｔ）；ＷＯ１９９９／０６３９６（Ｗａｒｎｅｒ Ｌａｍｂｅｒｔ）；ＷＯ１９９６／３０３４７（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ）； ＷＯ１９９６／３３９７８（Ｚｅｎｅｃａ）；ＷＯ１９９６／３３９７（Ｚｅｎｅｃａ）およびＷＯ１９９６／３３９８０（Ｚｅｎｅｃａ）のいずれかに記載されている通りのものを含む。上記の参考文献の各々は、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

化学療法剤は、デキサメタゾン、インターフェロン、コルヒチン、メトプリン、シクロスポリン、アンホテリシン、メトロニダゾール、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アミホスチン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、ＢＣＧライブ、ベバキュジマブ、ベキサロテン、クラドリビン、クロファラビン、ダルベポエチンアルファ、デニロイキン、デキサゾキサン、エポエチンアルファ、エロチニブ、フィルグラスチム、酢酸ヒストレリン、イブリツモマブ、インターフェロンアルファ－２ａ、インターフェロンアルファ－２ｂ、レナリドミド、レバミソール、メスナ、メトキサレン、ナンドロロン、ネララビン、ノフェツモマブ、オプレルベキン、パリフェルミン、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセドジナトリウム、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、キナクリン、ラスブリカーゼ、サルグラモスチム、テモゾロミド、ＶＭ－２６、６－ＴＧ、トレミフェン、トレチノイン、ＡＴＲＡ、バルルルビシン、ゾレドロネート、およびゾレドロン酸、ならびにそれらの薬学的に許容可能な塩をさらに含む。

化学療法剤は、さらに、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酢酸コルチゾン、ピバル酸チキソコルトール、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、モメタゾン（ｍｏｍｅｔａｓｏｎｅ）、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ベタメタゾン、リン酸ベタメタゾンナトリウム、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン－１７－ブチレート、ヒドロコルチゾン－１７－バレレート、アクロメタゾンジオプロピオネート、ベタメタゾンバレレート、ベータメタゾンジプロピオネート、プレドニカルベート（ｐｒｅｄｎｉｃａｒｂａｔｅ）、クロベタゾン－１７－ブチレート、クロベタゾール－１７－プロピオネート、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロンと酢酸フルプレドニデン；フェニルアラニン－グルタミン-グリシン（ＦＥＧ）およびそのＤ－異性体型（ＦＥＧ）（ＩＭＵＬＡＮ ＢｉｏＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＬＬＣ）などの免疫選択的抗炎症ペプチド（ＩｍＳＡＩＤ）；抗リウマチ薬物、例えば、アザチオプリン、シクロスポリン（シクロスポリンＡ）、Ｄ－ペニシラミン、金塩、ヒドロキシクロロキン、レフルノミドミノサイクリン（ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ）、スルファサラジン、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）遮断薬、例えば、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ）、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、セルトリズマブペゴール（Ｃｉｍｚｉａ）、ゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ）、インターロイキン１（ＩＬ－１）遮断薬、例えば、アナキンラ（Ｋｉｎｅｒｅｔ）、Ｔ細胞同時刺激遮断薬、例えば、アバタセプト（Ｏｒｅｎｃｉａ）、インターロイキン６（ＩＬ－６）遮断薬、例えば、トシリズマブ（ＡＣＴＥＭＥＲＡ（登録商標））；レブリキズマブなどのインターロイキン１３（ＩＬ－１３）遮断薬、；ロンタリズマブなどのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ）遮断薬；ｒｈｕＭＡｂベータ７などのベータ７インテグリン遮断薬；抗Ｍ１プライムなどのＩｇＥ経路遮断薬；抗リンホトキシンα（ＬＴａ）などのホモトリマーＬＴａ３および膜結合ヘテロトリマーＬＴａｌ／ｐ２遮断薬；放射性同位体（例えば、Ａｔ^２１１、Ｉ^１３１、Ｉ^１２５、Ｙ^９０、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８、Ｓｍ^１５３、Ｂｉ^２１２、Ｐ^３２、Ｐｂ^２１２およびＬｕの放射性同位体）；チオプラチン、ＰＳ－３４１、フェニルブチレート、ＥＴ－１８－ＯＣＨ３、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（Ｌ－７３９７４９、Ｌ－７４４８３２）などの他の治験薬；クエルセチン、レスベラトロール、ピセアタンノール、没食子酸エピガロカテキン、テアフラビン、フラバノール、プロシアニジン、ベツリン酸などのポリフェノールおよびそれらの誘導体；クロロキンなどのオートファジー阻害剤；δ－９－テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ（登録商標））；ベータ－ラパコン；ラパコール（ｌａｐａｃｈｏｌ）；コルヒチン；ベツリン酸；アセチルカンプトテシン、スコポレクチン、および９－アミノカンプトテシン）；ポドフィロトキシン；テガフール（ＵＦＴＯＲＡＬ（登録商標））；ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））；クロドロネート（例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ（登録商標）またはＯＳＴＡＣ（登録商標））、エチドロネート（ＤＩＤＲＯＣＡＬ（登録商標））、ＮＥ－５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（登録商標））、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、チルドロネート（ＳＫＥＬＩＤ（登録商標））、またはリセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ（登録商標））などのビスホスホネート；および上皮成長因子受容体（ＥＧＦ－Ｒ）；ＴＨＥＲＡＴＯＰＥ（登録商標）ワクチンなどのワクチン；ペリフォシン、ＣＯＸ－２阻害剤（例えば、セレコキシブまたはエトリコキシブ）、プロテオソーム阻害剤（例えば、ＰＳ３４１）；ＣＣＩ－７７９；チピファルニブ（Ｒ１１５７７）；オラフェニブ、ＡＢＴ５１０；オブリメルセンナトリウム（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標））などのＢｃｌ－２阻害剤；ピキサントロン；ロナファルニブ（ＳＣＨ６６３６、ＳＡＲＡＳＡＲ（商標））などのファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤；および上記のもののいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸または誘導体とともに、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチンおよびプレドニゾロンの併用療法の略語であるＣＨＯＰ；および５－ＦＵとロイコボリンと組み合わせたオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））による処置レジメンの略語であるＦＯＬＦＯＸなどの上記のうちの２つ以上の組合せを含む。

化学療法剤は、鎮痛剤、解熱および抗炎症性の効果を有する非ステロイド性抗炎症性の薬物をさらに含む。ＮＳＡＩＤは、酵素シクロオキシゲナーゼの非選択的阻害剤を含む。ＮＳＡＩＤの具体的な例は、アスピリン、イブプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、オキサプロジンおよびナプロキセンなどのプロピオン酸誘導体、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、ジクロフェナクなどの酢酸誘導体、ピロキシカム、メロキシカム、テノキシカム、ドロキシカム、ロルノキシカムおよびイソキシカムなどのエノール酸誘導体、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フルフェナム酸、トルフェナム酸などのフェナム酸誘導体、ならびにセレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ロフェコキシブおよびバルデコキシブなどのＣＯＸ－２阻害剤を含む。ＮＳＡＩＤは、関節リウマチ、変形性関節症、炎症性関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群、急性痛風、月経困難症、転移性骨痛、頭痛および片頭痛、術後疼痛、炎症および組織損傷による軽度から中程度の疼痛、発熱、イレウス、ならびに大腸炎などの疾病の症状の軽減に適応され得る。

ある実施形態では、化学療法剤は、とりわけ、ドキソルビシン、デキサメタゾン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、フルオロウラシル、トポテカン、インターフェロン、プラチナ誘導体、タキサン（例えば、パクリタキセル、ドセタキセル）、ビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン）、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）、エピポドフィロトキシン（例えば、エトポシド）、シスプラチン、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、ラパマイシン）、メトトレキサート、アクチノマイシンＤ、ドラスタチン１０、コルヒチン、トリメトレキサート、メトプリン、シクロスポリン、ダウノルビシン、テニポシド、アンホテリシン、アルキル化剤（例えば、クロラムブシル）、５－フルオロウラシル、カンプトテシン、シスプラチン、メトロニダゾール、およびメシル酸イマチニブを含むが、これらに限定されない。他の実施形態では、本明細書に開示される化合物は、ベバシズマブまたはパニツムマブなどの生物学的薬剤と組み合わせて投与される。

特定の実施形態では、本明細書に開示される化合物、またはその薬学的に許容可能な組成物は、アバレリクス、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アミホスチン、アナストロゾール、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザシチジン、ＢＣＧライブ、ベバキュジマブ、フルオロウラシル、ベキサロテン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カルステロン、カペシタビン、カンプトテシン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、クロラムブシル、クラドリビン、クロファラビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダクチノマイシン、ダルベポエチンアルファ、ダウノルビシン、デニロイキン、デキサゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン （中性）、ドキソルビシン塩酸塩、ドロモスタノロンプロピオネート、エピルビシン、エポエチンアルファ、エロチニブ、エストラムスチン、エトポシドホスフェート、エトポシド、エキセメスタン、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、フルベストラント、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、酢酸ゴセレリン、酢酸ヒストレリン、ヒドロキシ尿素、イブリツモマブ、イダルビシン、イホスファミド、メシル酸イマチニブ、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、イリノテカン、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、酢酸リュープロリド、レバミソール、ロムスチン、酢酸メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、６－ＭＰ、メスナ、メトトレキサート、メトキサレン、マイトマイシンＣ、ミトタン、ミトキサントロン、ナンドロロン、ネララビン、ノフェツモマブ、オプレルベキン、オキサリプラチン、パクリタキセル、パリフェルミン（ｐａｌｉｆｅｒｍｉｎ）、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド二ナトリウム、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、サルグラモスチム、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、マレイン酸スニチニブ、タルク、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、ＶＭ－２６、テストラクトン、チオグアニン、６－ＴＧ、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ＡＴＲＡ、ウラシルマスタード、バルルルビシン（ｖａｌｒｕｂｉｃｉｎ）、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ゾレドロネート、またはゾレドロン酸のいずれか１つ以上から選択される抗増殖性または化学療法剤と組み合わせて投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物の投与は、癌を処置するための任意の適切な量であり得る。例えば、投与は１ｍｇ体重～５００ｍｇの間の日用量であり得る。さらなる例として、日用量は、約２０ｍｇ～４００ｍｇ（またはその間の端点を含む任意の部分範囲もしくは部分値）の範囲内であり得る。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物の投与の範囲は、１０ｍｇ～３００ｍｇであり得る。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物の投与の範囲は、１０ｍｇ～１００ｍｇであり得る。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物の投与の範囲は、５ｍｇ～５０ｍｇであり得る。１日の投与量は、１日の総投与量を提供するために、単回投与量（例えば、ＱＤ）を投与することによって、または１日の間に複数回投与することによって（例えば、ＢＩＤ、ＴＩＤ、ＱＩＤなど。）達成することができる。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤の投与は、任意の適切な量である。例えば、１日１ｍｇ～５００ｍｇ（またはその間の端点を含む任意の部分範囲もしくは部分値）の範囲の量であり得る。ＥＧＦＲ阻害剤の投与は、任意の所与のＥＧＦＲ阻害剤について承認された投薬と同じかまたはそれ未満であり得、所与の適応症に依存し得る。例えば、ＮＳＣＬＣのためのオシメルチニブは、４０ｍｇおよび８０ｍｇで市販の用量で毎日２０～１００ｍｇ投与されることがある。上記の詳述された範囲のそれぞれは、端点を含む、その中の任意の下位範囲または下位点を含み得ることが理解されるであろう。上記の詳述された範囲のそれぞれは、端点を含む、その中の任意の部分範囲または部分点を含み得ることが理解されるであろう。成人の一般的な用量範囲は、一般に５ｍｇ～２ｇ／日である。別々のユニットで提供される錠剤または他の提示の形態は、そのような投与量で有効である、または多数の同様の量、例えば、通常約１０ｍｇ～２００ｍｇまでである、５ｍｇ～５００ｍｇまでを含むユニットとして有効である１以上の化合物の量を、好都合に含み得る。単一剤形をもたらすために担体物質と組み合わせられ得る活性成分の量は、処置される宿主および投与の特定の様式に応じて変化する。いくつかの実施形態では、投与は経口である。例えば、扁平細胞頭頚部癌（ＳＣＣＨＮ）のためのセツキシマブは、静脈内注入によって５００～１００ｍｇ／ｍ^２で投与され得、１００ｍｇ／５０ｍｌおよび２００ｍｇ／１００ｍｌバイアルにおいて市販の投与量が利用可能である。上記の詳述された範囲のそれぞれは、端点を含む、その中の任意の部分範囲または部分点を含み得ることが理解されるであろう。上記の詳述された範囲のそれぞれは、端点を含む、その中の任意の部分範囲または部分点を含み得ることが理解されるであろう。成人のヒトの一般的な投与量範囲は、一般的に、最初の注入の４００ｍｇ／ｍ^２から２５０ｍｇ／ｍ^２／週の注入までである。部分範囲は、５００ｍｇ／ｍ^２／隔週および５００ｍｇ／ｍ^２／隔週の注入を含む。部分範囲は、２５０ｍｇ／ｍ^２／週、２５０ｍｇ／ｍ^２／隔週およびに２５０ｍｇｍｇ／ｍ^２／３週間ごとの注入を含む。部分範囲は、２００ｍｇ／ｍ^２／週、２００ｍｇ／ｍ^２／隔週およびに２００ｍｇｍｇ／ｍ^２／３週間ごとの注入を含む。部分範囲は、１５０ｍｇ／ｍ^２／週、１５０ｍｇ／ｍ^２／隔週およびに１５０ｍｇｍｇ／ｍ^２／３週間ごとの注入を含む。部分範囲は、１００ｍｇ／ｍ^２／週、１００ｍｇ／ｍ^２／隔週およびに１００ｍｇｍｇ／ｍ^２／３週間ごとの注入を含む。部分範囲は、５００ｍｇ／ｍ^２／１２０分、４００ｍｇ／ｍ^２／１２０分、２５０ｍｇ／ｍ^２／６０分、２５０ｍｇ／ｍ^２／１２０分、２００ｍｇ／ｍ^２／６０分、２００ｍｇ／ｍ^２／１２０分、１５０ｍｇ／ｍ^２／６０分、１５０ｍｇ／ｍ^２／１２０分、１００ｍｇ／ｍ^２／６０分、または１００ｍｇ／ｍ^２／１２０分を含む。いくつかの実施形態では、セツキシマブは最大５４ヶ月間投与されることがある。いくつかの実施形態では、投与は静脈注射である。

いくつかの実施形態では、治療有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、オシメルチニブなどのＥＧＦＲ阻害剤と組み合わせて、対象に経口投与する工程を含む、対象における結腸直腸癌を処置する方法を提供する。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物は、１日１回または２回投与される。いくつかの実施形態では、オシメルチニブは、１日１回または２回投与される。例えば、本明細書に記載されたように薬物は同時投与され得る薬物は、例えば、本明細書に記載されるように同時投与することができる。

いくつかの実施形態では、治療有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、セツキシマブなどのＥＧＦＲ阻害剤と組み合わせて、対象に経口投与する工程を含む、対象における頭頚部癌（ＳＣＣＨＮ）を処置する方法を提供する。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物は、１日１回または２回投与される。いくつかの実施形態では、セツキシマブは、毎週投与される。薬物は、例えば、本明細書に記載されるように同時投与することができる。

いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ変異（ＥＧＦＲ変異を有する癌）を有する患者が選択される。

いくつかの実施形態では、ＮＳＣＬＣを有する患者が選択される。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ変異があるＮＳＣＬＣを有する患者が選択される。いくつかの実施形態では、頭頸部扁平上皮癌を有する患者が選択される。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ変異を有する頭頸部扁平上皮癌を有する患者が選択される。いくつかの実施形態では、頭頸部扁平上皮癌のステージは、段階的に分類される。いくつかの実施形態では、ステージ０は、一般的に、腫瘍が、腫瘍が始まった領域に局在し、癌細胞が、組織のより深い層、近くの構造、リンパ節、または遠隔部位に存在しないことを指す。いくつかの実施形態では、ステージ１は、一般的に、原発性腫瘍が２ｃｍ横切るかまたは小さく、癌細胞が組織のより深い層、近くの構造、リンパ節または遠隔部位に存在しないことを指す。いくつかの実施形態では、ステージ２は、一般的に、腫瘍が２～４ｃｍ横切って測定され、癌細胞が組織のより深い層、近くの構造、リンパ節または遠隔部位に存在しないことを指す。いくつかの実施形態では、ステージ３は、一般的に、腫瘍が以下の基準の１つによって分類される場合を指す：（ｉ）横断して４ｃｍより大きく、癌細胞が組織のより深い層、近くの構造、リンパ節または遠位部位に存在しない、または（ｉｉ）腫瘍はあらゆるサイズであるが、近くの構造または遠位部位に増殖していない；癌細胞は、１つのリンパ節に存在し、これは、原発性腫瘍と同じ頭部または頸部の側に位置し、横断して３ｃｍ未満である。いくつかの実施形態では、頭頸部扁平上皮癌はレベル２である。いくつかの実施形態では、頭頸部扁平上皮癌はレベル２／３である。いくつかの実施形態では、頭頸部扁平上皮癌はレベル３である。いくつかの実施形態では、大腸癌を有する患者が選択される。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ変異を有する大腸癌を有する患者が選択される。

いくつかの実施形態では、癌はヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）陰性である。いくつかの実施形態では、癌にはＫＲＡＳ変異（ｗｔＫＲＡＳ）がない。いくつかの実施形態では、癌にはＮＲＡＳ変異（ｗｔＮＲＡＳ）がない。いくつかの実施形態では、癌にはＢＲＡＦ変異（ｗｔＢＲＡＦ）がない。いくつかの実施形態では、癌はｗｔＫＲＡＳ／ｗｔＮＲＡＳ／ｗｔＢＲＡＦである。いくつかの実施形態では、癌にはＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、またはＢＲＡＦに変異がない。

いくつかの実施形態では、癌には１つ以上の後天性変異がある。いくつかの実施形態では、後天性変異は、第１選択処置から生じる。いくつかの実施形態では、第１選択処置はＥＧＦＲ阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はオシメルチニブである。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はセツキシマブである。いくつかの実施形態では、癌は固形腫瘍癌である。いくつかの実施形態では、癌はＮＳＣＬＣである。

いくつかの実施形態では、後天性変異は後天性ＥＧＦＲ変異である。いくつかの実施形態では、後天性ＥＧＦＲ変異はＣ７９７Ｘである。いくつかの実施形態では、後天性ＥＧＦＲ変異はＬ７１８Ｑである。いくつかの実施形態では、後天性ＥＧＦＲ変異はＥＧＦＲ増幅である。いくつかの実施形態では、後天性ＥＧＦＲ変異はＧ７２４Ｓである。いくつかの実施形態では、後天性変異はＳ７６８Ｉである。

いくつかの実施形態では、後天性変異は、後天性増幅変異である。いくつかの実施形態では、後天性変異はＭＥＴ遺伝子増幅である。いくつかの実施形態では、後天性変異はＨＥＲ２遺伝子増幅である。

いくつかの実施形態では、後天性変異は、後天性発癌性融合である。いくつかの実施形態では、後天性発癌性融合はＳＰＴＢＮ１－ＡＬＫである。いくつかの実施形態では、後天性発癌性融合はＲＥＴ融合である。いくつかの実施形態では、後天性発癌性融合はＢＲＡＦ融合である。

いくつかの実施形態では、後天性変異は後天性ＭＡＰＫ－ＰＩ３Ｋ変異である。いくつかの実施形態では、後天性ＭＡＰＫ－ＰＩ３Ｋ変異はＢＲＡＦ－Ｖ６００Ｅである。いくつかの実施形態では、後天性ＭＡＰＫ－ＰＩ３Ｋ変異はＰＩ３ＫＣＡである。いくつかの実施形態では、後天性ＭＡＰＫ－ＰＩ３Ｋ変異はＫＲＡＳである。いくつかの実施形態では、後天性ＭＡＰＫ－ＰＩ３Ｋ変異はＨＥＲ２である。

いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、霊長類、げっ歯類、イヌ、ネコ、または他の小動物などのヒト以外の哺乳動物である。

組成物
本明細書に開示される式Ｉの化合物は塩として存在し得る。本実施形態は、薬学的に許容可能な塩であり得るそのような塩を含む。適用可能な塩形態の例は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、酒石酸（例えば、（＋）－酒石酸（－）－酒石酸、またはラセミ混合物を含むそれらの混合物、コハク酸塩、安息香酸塩およびグルタミン酸などのアミノ酸との塩を含む。このような塩は、当業者に既知の方法により調製され得る。ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、またはマグネシウム塩、または類似の塩も含まれる。本実施形態の化合物が比較的塩基性の官能性を含む場合、酸付加塩は、きちんとした（ｎｅａｔ）または適切な不活性溶媒において、そのような化合物の中性形態を十分な量の所望の酸に接触させることにより、得られ得る。許容可能な酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、一水素炭酸（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｃａｒｂｏｎｉｃ）、リン酸、一水素リン酸（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ）、二水素リン酸（ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ）、硫酸、一水素硫酸（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｓｕｌｆｕｒｉｃ）、ヨウ化水素酸、または亜リン酸などの無機酸に由来するもの、同様に、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、コルク酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などの有機酸に由来する塩を含む。アルギン酸塩などのアミノ酸の塩、およびグルクロン酸またはガラクツロン酸（ｇａｌａｃｔｕｎｏｒｉｃ ａｃｉｄｓ）などの有機酸の塩はさらに含まれる。本実施形態の特定の特異的な化合物は、化合物が塩基は酸付加塩のいずれかに変換されることを可能にする、塩基性および酸性両方の官能性を含んでいる。

他の塩は、本実施形態の方法において使用される化合物の酸または塩基塩を含む。薬学的に許容可能な塩の例示的な例は、鉱酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸等）塩、有機酸（酢酸、プロピオン酸、グルタミン酸、クエン酸等）塩、および第四級アンモニウム（ヨウ化メチル、ヨウ化エチル等）塩である。薬学的に許容可能な塩は非毒性であることが理解される。適切な薬学的に許容可能な塩に関する追加情報は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５に見出すことができ、これは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための全ての方法、化合物、組成物、データなどを含むがこれらに限定されないその教示の全てについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

薬学的に許容可能な塩は、本明細書に記載される化合物に見出される特定の置換基に依存して、比較的無毒な酸または塩基で調製される活性化合物の塩を含むとされる。本実施形態の化合物が比較的酸性の官能性を含む場合、塩基付加塩は、きちんとした（ｎｅａｔ）または適切な不活性溶媒において、そのような化合物の中性形態を十分な量の所望の塩基に接触させることにより、得られ得る。薬学的に許容可能な塩基付加塩の例は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、またはマグネシウム塩、または同様の塩を含む。本実施形態の化合物が比較的塩基性の官能性を含む場合、酸付加塩は、きちんとした（ｎｅａｔ）または適切な不活性溶媒において、そのような化合物の中性形態を十分な量の所望の酸に接触させることにより、得られ得る。薬学的に許容可能な酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、一水素炭酸（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｃａｒｂｏｎｉｃ）、リン酸、一水素リン酸（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ）、二水素リン酸（ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ）、硫酸、一水素硫酸（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｓｕｌｆｕｒｉｃ）、ヨウ化水素酸、または亜リン酸などの無機酸に由来するもの、同様に、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、コルク酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などの比較的無毒な有機酸に由来する塩を含む。アルギネートなどのアミノ酸の塩、およびグルクロン酸またはガラクツロン酸などの有機酸の塩（例えば、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ，”Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，６６，１－１９を参照）はされに含まれ、これらは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本実施形態の特定の特異的な化合物は、化合物が塩基または酸付加塩の何れかに変換されることを可能にする、塩基性および酸性両方の官能性を含んでいる。

化合物の中性形態は、塩を塩基または酸に接触させ、従来のやり方で親化合物を単離することにより、再生成されることが好ましい。化合物の親形態は、極性溶媒における溶解性などの特定の物理的性質において様々な塩の形態とは異なる。

本実施形態の特定の化合物は、非溶媒和形態に加えて溶媒和形態で存在することができ、これらは水和形態を含む。通常、溶媒和形態は、非溶媒和形態と同等であり、本実施形態の範囲内に包含される。本実施形態の特定の化合物は、複数の結晶または非晶質形態で存在し得る。通常、物理的形態はすべて、本実施形態により企図された用途にあてはまり、本実施形態の範囲内にあるように意図される。

本実施形態の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）または二重結合を有し；エナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、互変異性体、幾何異性体、立体異性体の形態は、絶対立体化学に関して、アミノ酸のための（Ｒ）－または（Ｓ）－、或いは（Ｄ）－または（Ｌ）－として定義され得、個々の異性体は本実施形態の範囲内に包含される。本実施形態の化合物は、当該技術分野においてあまりに不安定なため合成および／分離ができないと知られるものを含まない。本実施形態は、ラセミ形態および光学的に純粋な形態で化合物を含むことを意図される。光学活性の（Ｒ）－および（Ｓ）－、または（Ｄ）－および（Ｌ）－の異性体は、キラルシントンまたはキラル試薬を使用して調製され、或いは従来の技術を使用して分離され得る。

特に明記しない限り、本実施形態の化合物は、そのような化合物を構成する原子の１以上において不自然な比率の原子の同位体を含み得る。例えば、本実施形態の化合物は、放射性同位体または安定同位体、例えば、重水素（^２Ｈ）、トリチウム（^３Ｈ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）、フッ素－１８（^１８Ｆ）、窒素－１５（^１５Ｎ）、酸素－１７（^１７Ｏ）、酸素－１８（^１８Ｏ）、炭素－１３（^１３Ｃ）などで標識することができる。または炭素－１４（^１４Ｃ）。本実施形態の化合物の同位体のバリエーションはすべて、放射性であってもなくても、本実施形態の範囲内に包含される。

塩の形態に加えて、本実施形態は、プロドラッグ形態である化合物を提供する。本明細書に記載される化合物のプロドラッグは、本実施形態の化合物を提供するための生理学条件下で、化学的変化を容易に受けやすい化合物である。加えて、プロドラッグは、エキソビボの環境において化学的または生化学的な方法によって本実施形態の化合物に変換され得る。例えば、プロドラッグは、適切な酵素または化学試薬とともに、経皮パッチリザーバー（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ ｐａｔｃｈ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）に置かれた時、ゆっくり本実施形態の化合物に変換され得る。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物および薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、経口錠剤調製物として構成される。

本実施形態の化合物は、多種多様な経口、非経口および局所剤形で調製および投与することができる。経口調製物は、患者が摂取するのに適した錠剤、丸剤、粉末、ドラジェ、カプセル、液体、ロゼンジ、カシェ剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などを含む。本の実施形態の化合物も注射（それは静脈内で、筋肉内に、皮内で、皮下に、十二指腸内にあるいは腹腔内である）によって投与することができる。注射によって、すなわち、静脈内、筋肉内、皮内、皮下、硬膜内、または腹腔内に投与することもできる。さらに、本明細書に記載される化合物は、吸入によって、例えば、鼻腔内に投与することができる。さらに、本実施形態の化合物は、経皮的に投与することができる。本明細書に開示される式Ｉの化合物はまた、坐剤、吹送、散剤およびエアロゾル製剤（ステロイド吸入剤の例については、Ｒｏｈａｔａｇｉ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３５：１１８７－１１９３，１９９５；Ｔｊｗａ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７５：１０７－１１１，１９９５を参照）を含む眼内、膣内および直腸内経路によって投与され得、これらは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。それに応じて、本実施形態はさらに、１つ以上薬学的に許容可能な担体および／または賦形剤ならびに式Ｉの化合物または式Ｉの化合物の薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を提供する。

本実施形態の化合物から医薬組成物を調製するために、薬学的に許容可能な担体は、固体または液体のいずれかであり得る。固形調製物は、粉末、錠剤、丸剤、カプセル、カシェ剤、坐剤、および分散可能な顆粒剤を含む。固体状担体は、希釈液、香料、界面活性剤、結合剤、防腐剤、錠剤崩壊剤、またはカプセル化材料としても作用し得る１つ以上の物質であり得る。製剤化および投与のための技術に関する詳細は、科学文献および特許文献に詳細に記載されており、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ（「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ」）の最新版を参照されたく、これらは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

散財において、担体は、微粉化された活性成分との混合物である微粉化された固体である。錠剤では、有効成分は、適切な比率で必要な結着性を有している担体および必要に応じて追加の賦形剤と混合され、所望の形状およびサイズに圧縮される。

散剤、カプセル剤および錠剤は、好ましくは５％または１０％～７０％の活性化合物を含有する。適切な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖類、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、ココアバターなどである。「調製」との用語は、カプセルを提供する担体として封入材料を備える活性化合物の製剤を含むように意図され、ここで、他の賦形剤を含むまたは含まない活性成分は担体によって囲まれ、従って担体に付随している。同様に、カシェ剤とトローチ剤が含まれる。錠剤、粉末剤、カプセル、丸剤、カシェ剤、およびトローチ剤は、経口投与に適している固形剤形として使用され得る。

適切な固体賦形剤は、ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖類；トウモロコシ、小麦、米、ジャガイモ、または他の植物のでんぷん；メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル－セルロース、またはカルボキシメチルセルロースナトリウムなどのセルロース；ならびにアラビアゴムおよびトラガカントゴムを含むガム；同様に、ゼラチンおよびコラーゲンなどのタンパク質を含むが、これらに限定されない炭水化物またはタンパク質の充填剤である。必要に応じて、架橋結合ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸、またはアルギン酸ナトリウムなどのアルギン酸の塩などの崩壊剤または可溶化剤が加えられてもよい。

糖衣錠コアには、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カーボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに適切な有機溶媒または溶媒混合物も含有し得る濃縮糖溶液などの好適なコーティングが提供される。製品同定のため、または活性化合物の量（すなわち、投与量）を特徴付けるために、染料またはピグメントを錠剤または糖衣錠コーティングに添加してもよい。本明細書に開示される医薬調製物は、例えば、ゼラチン製の押し出し型（ｐｕｓｈ－ｆｉｔ）カプセル、同様に、ゼラチン製のソフトな密封カプセル、および、グリセロールまたはソルビトールなどのコーティングを使用して、経口使用され得る。押し出し型カプセルは、ラクトースまたはデンプンなどの充填剤または結合剤、タルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、および任意選択で安定剤と混合された式Ｉの化合物を含有することができる。ソフトカプセルにおいて、式Ｉの化合物は、安定剤を伴ってまたは伴わずに、脂肪油、流動パラフィン、または液ポリエチレングリコールなどの、適切な液体中に溶解または懸濁されてもよい。

液体調製物は、溶液、懸濁液、およびエマルジョン、例えば、水、水／プロピレングリコール溶液を含む。非経口注射のために、液体調製物は、ポリエチレングリコール水溶液中の溶液中で製剤化され得る。

経口使用に適切な水溶液は、有効成分を水中に溶解し、必要に応じて適切な着色剤、香料、安定剤、および増粘剤を加えることによって調製され得る。経口使用に適した水性懸濁液は、微粉化された活性成分を、天然または合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアゴムなどの粘性材料、ならびに天然に存在するホスファチド（例えば、レシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンステアレート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノ－オレエート）、またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノ－オレエート）などの分散剤または湿潤剤を用いて水中に分散させることによって作製することができる。水性懸濁液はさらに１つ以上の保存剤、例えば、エチルまたはｐ－ヒドロキシ安息香酸ｎ－プロピル、１つ以上の着色料、１つ以上の香料、およびスクロース、アスパルテーム、またはサッカリンなどの１つ以上の甘味料を含み得る。製剤は容量オスモル濃度に対して調節することができる。

使用直前に経口投与用の液体形態調製物に変換されることが意図される固体形態調製物も含まれる。そのような液体形態は、溶液、懸濁液、およびエマルジョンを含む。これらの調製物は、活性成分に加えて、着色剤、香料、安定剤、緩衝剤、人工および天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含有し得る。

油性懸濁液は、落花生油、オリーブオイル、胡麻油、またはやし油などの植物油、あるいは流動パラフィンなどの鉱油中、あるいはこれらの混合物に式Ｉの化合物を懸濁することによって製剤化され得る。油性懸濁液は、みつろう、固形パラフィン、セチルアルコールなどの増粘剤を含み得る。グリセロール、ソルビトール、またはスクロースなどの甘味剤を添加して、口当たりの良い経口調製物を提供することができる。これらの製剤は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の付加によって保存され得る。注射可能な油性ビヒクルの一例として、Ｍｉｎｔｏ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２８１：９３－１０２，１９９７を参照し、これらは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に開示される医薬組成物は、水中油型エマルジョンの形態でもあり得る。油相は、上記の植物油もしくは鉱油、またはこれらの混合物であり得る。適切な乳化剤は、アラビアゴムおよびトラガカントゴムなどの自然発生のゴム、大豆レシチンなどの自然発生のリン脂肪、モノオレイン酸ソルビタンなどの脂肪酸および無水ヘキシトールに由来するエステルまたは部分的なエステル、およびポリオキシエチレンモノオレイン酸ソルビタンなどの、酸化エチレンを有する部分的なエステルの縮合物を含む。エマルジョンはさらに、シロップ剤およびエリキシル剤の製剤の場合のように、甘味剤および香料を含有し得る。このような製剤は、粘滑剤、防腐剤、または着色剤をさらに含み得る。

本明細書に開示される式Ｉの化合物の医薬製剤は、塩として提供することができ、塩基、すなわち、カチオン性塩、例えば、アルカリおよびアルカリ土類金属塩、例えば、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、ならびにアンモニウム塩、例えば、アンモニウム、トリメチルアンモニウム、ジエチルアンモニウムおよびトリス（ヒドロキシメチル）メチル－アンモニウム塩と形成することができる。

医薬製剤は、好ましくは単位剤形である。このような形態では、調製物は、適切な量の活性成分を含有する単位用量に細分される。単位剤形は、包装された調製物であってもよく、包装は、包装された錠剤、カプセル剤、およびバイアルまたはアンプル中の散剤などの、別個の量の調製物を含有する。さらに、単位剤形は、カプセル剤、錠剤、カシェ剤、もしくはロゼンジ剤自体であってもよく、または包装された形態の適切な数のこれらのいずれかであってもよい。

単位投与量調製物中の活性成分の量は、特定の用途および活性成分の効力に応じて、０．１ｍｇ～１００００ｍｇ、より典型的には１．０ｍｇ～１０００ｍｇ、最も典型的には１０ｍｇ～５００ｍｇで変動または調整され得る。組成物は、所望の場合、他の適合性のある治療剤をさらに含有することができる。

投与レジメンはさらに、当技術分野で周知の薬物動態パラメータ、すなわち、吸収速度、バイオアベイラビリティ、代謝、クリアランスなども考慮に入れる（例えば、Ｈｉｄａｌｇｏ－Ａｒａｇｏｎｅｓ（１９９６）Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．５８：６１１－６１７；Ｇｒｏｎｉｎｇ（１９９６）Ｐｈａｒｍａｚｉｅ ５１：３３７－３４１；Ｆｏｔｈｅｒｂｙ（１９９６） Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ ５４：５９－６９；Ｊｏｈｎｓｏｎ（１９９５）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８４：１１４４－１１４６；Ｒｏｈａｔａｇｉ（１９９５）Ｐｈａｒｍａｚｉｅ ５０：６１０－６１３；Ｂｒｏｐｈｙ（１９８３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２４：１０３－１０８；最新のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ（上記）を参照し、その各々は、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。）。最先端技術は、臨床医が、個々の患者、ＧＲおよび／またはＭＲモジュレーター、ならびに処置される疾患または疾病それぞれに対する投与レジメンを決定することを可能にする。

式Ｉの化合物製剤の単回または複数回投与は、患者によって必要とされ、許容される投与量および頻度に応じて投与することができる。製剤は、疾患状態を効果的に処置するのに充分な量の活性薬剤を提供すべきである。したがって、一実施形態では、式Ｉの化合物の経口投与のための医薬製剤は、終点を含むその中のすべての部分範囲および部分値を含む、約０．５～約３０ｍｇ／ｋｇ体重／日の日量である。代替的な一実施形態では、投与量は、約１ｍｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ体重／患者／日である。特に、経口投与とは対照的に、脳脊髄液（ＣＳＦ）空間などの解剖学的に閉塞した部位に、血流に、体腔に、または器官の管腔に薬物を投与する場合、より低い投与量を使用することができる。局所投与では、実質的により高い投与量を使用することができる。非経口投与のための式Ｉの化合物を含む製剤を調製するための実際の方法は、当業者に公知または明らかであり、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ（上記）などの刊行物により詳細に記載されている。Ｎｉｅｍａｎ，Ｉｎ“Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ａｎｔｉｓｔｅｒｏｉｄ Ａｃｔｉｏｎ”，Ａｇａｒｗａｌ，ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｄｅ Ｇｒｕｙｔｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８７）も参照し、これらは、本明細書の実施形態および開示のいずれかとともに使用するための、限定されないが、すべての方法、化合物、組成物、データなどを含む、その教示のすべてについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの実施形態では、同時投与は、第２の活性薬剤の０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、１６、２０、または２４時間（または２４時間以内の時間の任意の下位範囲もしくは時間の下位値）以内に１つの活性薬剤を投与することを含む。同時投与は、２つの活性薬剤を同時に、ほぼ同時に（例えば、互いの約１、５、１０、１５、２０、または３０分以内（または、例えば、０～３０分の時間の任意の部分範囲もしくは時間の部分値））、または任意の順序で連続的に投与することを含む。いくつかの実施形態では、同時投与は、同時製剤化、すなわち、両方の活性剤を含む単一の医薬組成物を調製することによって達成され得る。いくつかの実施形態では、活性剤は別々に製剤化され得る。いくつかの実施形態では、活性剤および／または補助剤は、互いに連結または抱合され得る。薬物の少なくとも１回の投与用量は、例えば、同時に投与することができる。薬物の少なくとも１回の投与用量は、例えば、互いに数分以内または１時間未満で投与することができる。薬物の少なくとも１回の投与用量は、例えば、異なる時間に、ただし同じ日に、または異なる日に投与することができる。

本明細書に開示される式Ｉの化合物を含む医薬組成物が、１つ以上の許容される担体中で製剤化された後、それは、適切な容器に入れられ、示される状態の処置のために標識され得る。式Ｉの化合物の投与について、このような標識は、例えば、投与の量、頻度および方法に関する指示を含む。

医薬品投与
本明細書の化合物の投与レジメンは、当然ながら、特定の薬剤の薬力学的特徴ならびにその投与様式および投与経路；レシピエントの種、年齢、性別、健康状態、医学的状態、および体重；症状の性質および程度；同時処置の種類；処置頻度；投与経路、患者の腎機能および肝機能、ならびに所望の効果などの公知の因子に応じて変動する。臨床医は、疾患または障害の進行を予防、対抗、または停止するために必要な薬物の有効量を決定および処方することができる。

一般的な指針として、各活性成分の１日の経口投与量は、示された効果のために使用される場合、約０．００１～約１０００ｍｇ／ｋｇ体重の間、好ましくは約０．０１～約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の間、最も好ましくは約０．１～約２０ｍｇ／ｋｇ／日の間の範囲である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、約１０ｍｇ／日～約２００ｍｇ／日の間の投与量で投与されることがある。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、約１０ｍｇ／日、２０ｍｇ／日、３０ｍｇ／日、４０ｍｇ／日、５０ｍｇ／日、６０ｍｇ／日、７０ｍｇ／日、８０ｍｇ／日、９０ｍｇ／日、１００ｍｇ／日、１１０ｍｇ／日、１２０ｍｇ／日、１３０ｍｇ／日、１４０ｍｇ／日、１５０ｍｇ／日、１６０ｍｇ／日、１７０ｍｇ／日、１８０ｍｇ／日、１９０ｍｇ／日、または２００ｍｇ／日で投与されることがある。投与量は、詳述された範囲内の任意の値または部分範囲であり得る。

患者の状態および意図される治療効果に応じて、治療剤の投与頻度は、例えば、１日１回～１日６回に変動し得る。すなわち、投与頻度は、ＱＤ、すなわち１日１回、ＢＩＤ、すなわち１日２回；ＴＩＤ、すなわち１日３回；ＱＩＤ、すなわち１日４回；１日５回または１日６回であってもよい。別の実施形態では、投与頻度は、ＢＩＷ、すなわち週２回、ＴＩＷ、すなわち週３回、またはＱＩＷ、すなわち週４回であってもよい。

患者の状態および意図される治療効果に応じて、処置サイクルは、治療剤が投与されない期間を有ることがある。本明細書で使用されるように、「間隔投与」は、治療剤の投与と、その後の空所の日または空所の週を指す。例えば、処置サイクルは、２週間の治療剤投与と、それに続く治療剤が投与されない１週間とを含む３週間であり得る。いくつかの実施形態では、処置サイクルは、３週間の投与と、それに続く治療剤が投与されない１週間を含む４週間であり得る。

本明細書で使用されるように用語「処置サイクル」は、治療剤を投与するための所定の期間を意味する。典型的には、患者は、治療の効果を評価するために各処置サイクルの終わりに診察される。

１つの実施形態では、処置サイクルの各々は、約３日以上を有する。別の実施形態では、処置サイクルの各々は、約３日～約６０日を有する。別の実施形態では、処置サイクルの各々は、約５日～約５０日を有する。別の実施形態では、処置サイクルの各々は、約７日～約２８日を有する。別の実施形態では、処置サイクルの各々は、２８日を有する。１つの実施形態では、処置サイクルは、約２９日を有する。別の実施形態では、処置サイクルは、約３０日を有する。別の実施形態では、処置サイクルは、約３１日を有する。別の実施形態では、処置サイクルは、約１ヶ月長の処置サイクルを有する。別の実施形態では、処置サイクルは、３週間～８週間の任意の長さの時間である。別の実施形態では、処置サイクルは、３週間～６週間の任意の長さの時間である。さらに別の実施形態では、処置サイクルは３週間である。別の実施形態では、処置サイクルは１ヶ月である。別の実施形態では、処置サイクルは、４週間である。別の実施形態では、処置サイクルは、５週間である。別の実施形態では、処置サイクルは、６週間である。別の実施形態では、処置サイクルは、７週間である。別の実施形態では、処置サイクルは、８週間である。処置サイクルの持続時間は、エンドポイントを含む、詳述された範囲内の任意の値または部分範囲を含むことがある。

本明細書で使用されるように、「同時投与（ｃｏ－ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」または「同時投与（ｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という用語は、（ａ）追加の治療剤および（ｂ）式（Ｉ）の化合物、またはその塩、溶媒和物、エステルおよび／もしくはプロドラッグを、共に協調的に投与することを指す。例えば、同時投与は、同時投与、逐次投与、重複投与、間隔投与、連続投与、またはそれらの組み合わせであり得る。

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与レジメンは、２８日サイクルにわたり連続的に１日１回である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の１日１回の投与レジメンは、２０ｍｇ／日、３０ｍｇ／日、４０ｍｇ／日、５０ｍｇ／日、６０ｍｇ／日であり得るが、これらに限定されない。式（Ｉ）の化合物は、２０ｍｇ～６０ｍｇのいずれかで１日１回投与され得る。投与量は、詳述された範囲内の任意の値または部分範囲であり得る。

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与レジメンは、２８日サイクルにわたり連続的に１日２回である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の１日２回の投与レジメンは、１０ｍｇ／日、２０ｍｇ／日３０ｍｇ／日、４０ｍｇ／日、５０ｍｇ／日、６０ｍｇ／日、７０ｍｇ／日、８０ｍｇ／日、９０ｍｇ／日、１００ｍｇ／日であり得るが、これらに限定されない。式（Ｉ）の化合物は、２０ｍｇ～８０ｍｇのいずれかで１日２回投与され得る。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１０ｍｇ／日～１００ｍｇ／日のいずれかで投与され得る。投与量は、詳述された範囲内の任意の値または部分範囲であり得る。

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与レジメンは、１日１回、２０ｍｇ～６０ｍｇ／日のいずれかで２週間、続いて６週間にわたって１週間の中断（例えば、２週間オン、１週間オフ）であってもよい。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与レジメンは、１日２回、１０ｍｇ～１００ｍｇのいずれかで１日２回で２週間、続いて６週間にわたって１週間の中断（例えば、２週間オン、１週間オフ）であってもよい。

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与レジメンは、１日１回、２０ｍｇ～６０ｍｇ／日のいずれかで３週間、続いて８週間にわたって１週間の中断（例えば、３週間オン、１週間オフ）であってもよい。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与レジメンは、１日３回、１０ｍｇ～１００ｍｇのいずれかで１日２回で３週間、続いて８週間にわたって１週間の中断（例えば、８週間オン、１週間オフ）であってもよい。

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与レジメンは、１日目および２日目に１日２回、毎週８週間であり得る。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与量は、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇであり得るが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む３週間サイクルで１日１回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで１日１回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、６週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週３回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、週の１日目、３日目、および５日目に投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週４回投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む３週間サイクルで投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで投与される。

いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、週２日で、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、各週の１日目および２日目に投与される。

式Ｉの化合物が週に複数回投与される場合、投与量は、週内の任意の日または日の組み合わせで投与され得る。例えば、週３回の投与は、１日目、３日目、および５日目；１日目、２日目、および３日目；１日目、３日目および５日目等々の投与を含み得る。週２日の投与は、１日目および２日目；１日目および３日目；１日目および４日目；１日目および５日目；１日目および６日目；１日目および７日目等々の投与を含み得る。

キットおよび産物
いくつかの実施形態は、式Ｉの化合物および／または少なくとも１つのＥＧＦＲ阻害剤を含むキットおよび産物に関する。例えば、キットまたは産物は、式Ｉの化合物を備えたパッケージまたは容器を含み得る。そのようなキットおよび産物は、式Ｉの化合物を別途提供されるＥＧＦＲ阻害剤とどのように併用するかことを含む、承認された薬剤投与および指示情報を備えた産物添付物またはラベルをさらに含み得る。キットは、本明細書に記載されるような癌を処置する方法において使用することができる。

いくつかの態様では、キットまたは産物は、式Ｉの化合物および少なくとも１つのＥＧＦＲ阻害剤の両方を含むことができる。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤は、例えば、オシメルチニブである。そのようなキットは、１つ以上容器またはパッケージを含むことができ、１つ以上の容器またはパッケージは、単一の容器および／もしくはパッケージ中に、または別々のパッケージ／容器中に一緒に１つまたは両方の併用薬物を含む。いくつかの例では、２つの薬物は別々に包装されるが、単一のパッケージ、容器または箱に含まれる。そのようなキットおよび産物は、式Ｉの化合物を、提供されるＥＧＦＲ阻害剤とどのように併用するかことを含む、承認された薬剤投与および指示情報を産物添付物またはラベルをさらに含み得る。キットは、本明細書に記載される癌を処置する方法において使用することができる。

基本手順
すべての出発物質および溶媒は、商業的供給源から得たか、または文献の引用に従って調製した。

実施例１
組み合わせ細胞増殖アッセイ：細胞（ウェル当たり２０００細胞）を、１００μｌの細胞培養培地中の９６ウェルプレート上に播種した。Ｔｅｃａｎ Ｄ３００ｅ Ｄｉｇｉｔａｌ Ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ組み合わせマトリックス・プロトコルを使用して、０から１０μＭまで変動する濃度で式Ｉの化合物およびオシメルチニブで細胞を処理した。５日目に、５０μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（ＣＴＧ）試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、プレートを穏やかに振盪しながら１０分間インキュベートした。１０分間のインキュベーション後、発光シグナルを提供者の指示（Ｐｒｏｍｅｇａ）に従って決定し、Ｃｏｍｂｅｎｅｆｉｔソフトウェアを使用して標準ＨＳＡモデルによって組み合わせデータを生成した。組み合わせ相乗作用は、結果表において正の数によって表した。負の数は、組み合わせの拮抗作用を表す。

図１Ａおよび図１Ｂは、組み合わせた式Ｉの化合物およびＥＧＦＲ阻害剤オシメルチニブが、ＥＧＦＲ変異細胞株ＨＣＣ８２７、ＥＧＦＲチロシンキナーゼドメインに後天性変異を有する肺腺癌（Ｅ７４６－Ａ７５０欠失）、およびＮＣＩ－Ｈ８２０、ＥＧＦＲチロシンキナーゼドメインに後天性変異を有する肺腺癌細胞株（Ｔ７９０Ｍ）においてインビトロで相乗作用を示すことを表示するデータを示す。図１Ａは、細胞株ＨＣＣ８２７における式Ｉの化合物とＥＧＦＲ阻害剤オシメルチニブについての数値データを示す。図１Ｂは、細胞株ＮＣＩ－Ｈ８２０における式Ｉの化合物とＥＧＦＲ阻害剤オシメルチニブについての数値データを示す。式Ｉの化合物およびＥＧＦＲｉ（オシメルチニブ）の組み合わせは、強い相乗的生存効果を示す。

実施例２
これらの実験からの結果を図３～６に要約し、以下でさらに説明する。

図２Ａおよび図２Ｂは、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、または式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせのいずれかによるＣＡＬ－２７細胞の処置を示す。図２Ａは、式Ｉの化合物単独で（黒丸、線１）、および０．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、１．０μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または２．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＣＡＬ－２７細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ログＭ）のプロットを示す。

図２Ｂは、セツキシマブ処置単独が細胞生存率を約４０％減少させたことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。

図３Ａおよび図３Ｂは、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、または式Ｉの化合物およびセツキシマブの組み合わせのいずれかによるＳＣＣ－９細胞処置を示す。図３Ａは、式Ｉの化合物単独で、および０．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、１．０μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または２．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＳＣＣ－９細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ログＭ）のプロットを示す。図３Ｂは、セツキシマブ処置単独が細胞生存率を約１５％減少させたことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。

図４Ａおよび４Ｂは、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、または式Ｉの化合物およびセツキシマブの組み合わせのいずれかによるＳＣＣ－１５細胞の処置を示す。図４Ａは、式Ｉの化合物単独で、および１．０μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、２．５μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または５．０μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＳＣＣ－１５細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ログＭ）のプロットを示す。図４Ｂは、セツキシマブ処置単独が細胞生存率を１０％未満で減少させたことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。

図４Ａおよび５Ｂは、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、または式Ｉの化合物およびセツキシマブの組み合わせのいずれかによるＳＣＣ－２５細胞の処置を示す。図５Ａは、式Ｉの化合物単独で、および２．５μｇ／ｍｌ（黒四角、線２）、５．０μｇ／ｍｌ（黒丸、線３）、または１０．０μｇ／ｍｌ（黒四角、線４）のセツキシマブとの組み合わせで処置されたＳＣＣ－２５細胞における活性パーセント対阻害剤濃度（ログＭ）のプロットを示す。図５Ｂは、セツキシマブ処置単独が細胞生存率を減少させなかったことを示すＣＴＧ活性パーセントの棒グラフを示す。

図６Ａおよび図６Ｂは、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、または式Ｉの化合物とセツキシマブの組み合わせのいずれかによるＨＰＶ陰性ＣＡＬ２７細胞におけるＥＲＫ１／２リン酸化の阻害を示す。図６Ａは、式Ｉの化合物対ＤＭＳＯでのＥＲＫ１／２リン酸化活性の約５０％阻害のイムノブロットを示す。図６Ｂは、総ＥＲＫによって正規化された、定量化されたリン酸化ＥＲＫ１／２バンドを示す。定量結果は、式Ｉの化合物またはセツキシマブ単独による処置が、ＤＭＳＯ処置の対照細胞と比較してＥＲＫ１／２リン酸化を約５０％減少させたことを示したが、式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせは、ＨＰＶ陰性頭頸部扁平上皮癌細胞株ＣＡＬ２７においてＥＲＫ１／２リン酸化の約８０％阻害を示した。

実施例３：式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせは、ＨＰＶ陰性頭頸部扁平上皮癌細胞におけるＭＡＰＫシグナル伝達および細胞生存率に対する併用効果を示した。 本研究の目的は、式Ｉの化合物によるＳＨＰ２阻害を介した発癌性ＭＡＰＫシグナル伝達およびセツキシマブによるＥＧＦＲ阻害を介したＥＧＦＲシグナル伝達に対する併用効果を決定することである。

本研究で使用した細胞株はＡＴＣＣから入手した（ＣＡＬ２７＃ＣＲＬ－２０９５、ＳＣＣ－１５＃ＣＲＬ－１６２３、ＳＣＣ－２５＃ＣＲＬ－１６２８、ＳＣＣ－４＃ＣＲＬ－１６２４およびＳＣＣ－９＃ＣＲＬ－１６２９）。細胞株ＣＡＬ２７をＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ＃）中で培養した。ＳＣＣ－４、ＳＣＣ－１５、ＳＣＣ－２５、ＳＣＣ－９細胞株を、ＤＭＥＭと、１．２ｇ／Ｌ重炭酸ナトリウム、２．５ｍＭＬ－グルタミン、１５ｍＭＨＥＰＥＳ、および４００ｎｇ／ｍｌのヒドロコルチゾン、９０％を補充した０．５ｍＭピルビン酸ナトリウムを含有するＨａｍ’ｓ Ｆ１２培地との１：１混合物中；ウシ胎仔血清、１０％（Ｈｙｃｌｏｎｅ＃ＳＨ－３００７１．０３）およびペニシリン／ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ＃１５０７０－０６３）中で培養した。細胞を３７℃／５％ＣＯ_２で維持した。細胞を氷冷ＰＢＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＃１００１０－０２３）中で洗浄し、Ｈａｌｔホスファターゼおよびプロテアーゼ阻害剤（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＃７８４４５）を補充したＲＩＰＡ溶解および抽出緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＃８９９００）中で溶解した。細胞膜を、ウシ血清アルブミンＢＳＡ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈ ＃９９９８）によって非特異的タンパク質に対してブロックした。免疫ブロッティングのための抗体は以下の通り：ホスホ－ｐ４４／４２ ＥＲＫ１／２（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈ＃４３７０）、ＥＲＫ２抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ ＃ｓｃ－１６４７）、抗マウスＩｇＧ ＨＲＰ結合抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈ＃７０７６）、および抗ウサギＩｇＧ ＨＲＰ結合抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈ＃７０７４）であった。

細胞増殖アッセイ：細胞（ウェル当たり２０００細胞）を、１００μｌの細胞培養培地中の９６ウェルプレート上に播種した。細胞を、Ｔｅｃａｎ Ｄ３００ｅ Ｄｉｇｉｔａｌ Ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ組み合わせマトリックス・プロトコルを使用して、０から１０ｐＭまで変動する式Ｉの化合物の濃度ならびに０．５、１、２．５、５および１０μｇ／ｍｌの固定セツキシマブ濃度で処理した。５日目に、５０μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（ＣＴＧ）試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、プレートを穏やかに振盪しながら１０分間インキュベートした。１０分間のインキュベーション後、発光シグナルを提供者の指示書（Ｐｒｏｍｅｇａ）に従って決定し、Ｃｏｍｂｅｎｅｆｉｔソフトウェアによって組み合わせデータを生成した。

ウェスタンブロット法：細胞を、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含むＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＲＩＰＡ溶解緩衝液を用いて氷上で１０分間溶解した。細胞を微量遠心機を用いて４°Ｃで１０分間遠心分離した。上清を予め冷却した微量遠心管に移し、溶解物のタンパク質濃度をＢＣＡ法を使用して測定した。等量のタンパク質の細胞溶解物上清を免疫ブロッティングに使用した。

本研究の目的は、式Ｉの化合物によるＳＨＰ２阻害を介した発癌性ＭＡＰＫシグナル伝達およびセツキシマブによるＥＧＦＲ阻害を介したＥＧＦＲシグナル伝達に対する併用効果を決定することである。３つのＨＰＶ陰性頭頸部扁平上皮癌細胞株ＣＡＬ２７、ＳＣＣ－４、ＳＣＣ－９、ＳＣＣ－１５およびＳＣＣ－２５を９６ウェルプレートに分割した。一晩インキュベートした後、式Ｉの化合物およびセツキシマブを、Ｔｅｃａｎ Ｄ３００ｅ Ｄｉｇｉｔａｌ Ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ組み合わせマトリックス・プロトコルを使用して細胞に添加した。５日間のインキュベーション後にＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏアッセイを実施し、セツキシマブの添加によって式Ｉの化合物の活性感受性を増加させることによって併用効果を試験した。組み合わせデータは、セツキシマブがＨＰＶ陰性頭頸部扁平上皮癌細胞株における式Ｉの化合物の感受性を増加させたことを示した。（図２～図５）。

ＣＡＬ２７細胞を式Ｉの化合物単独で処置し、セツキシマブと組み合わせても処置した。式Ｉの化合物は単独で、１１２ｎＭのＩＣ５０でＣＡＬ２７細胞の細胞増殖を阻害した。式Ｉの化合物の感受性は、セツキシマブと組み合わせると増加した。セツキシマブの同時処置は、式Ｉの化合物の活性を投与量依存的に感作し、式Ｉの化合物のＩＣ５０は、２．５μｇ／ｍｌのセツキシマブの同時処置により１１２ｎＭから５７ｎＭに減少した（図２Ａおよび表２）。セツキシマブ単独処置はさらに、細胞生存率を約４０％減少させ（図２Ｂ）、セツキシマブ単独処置がこの細胞株において有効であったことを示唆した。式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせは、細胞生存率のより顕著な阻害を示した。

ＳＣＣ－９細胞を式Ｉの化合物単独で処置し、およびセツキシマブと組み合わせても処置した。式Ｉの化合物では、１６１ｎＭのＩＣ５０でＳＣＣ－９細胞の細胞増殖を阻害した。式Ｉの化合物の感受性は、セツキシマブと組み合わせると増加した。セツキシマブの同時処置は、式Ｉの化合物の活性を投与量依存的に感作し、式Ｉの化合物のＩＣ５０は、２．５μｇ／ｍｌのセツキシマブの同時処置により１６１ｎＭから３６ｎＭに減少した（図３Ａおよび表３）。しかし、最大で２．５μｇ／ｍｌのセツキシマブ単独処置で細胞生存率の顕著な減少は観察されなかった（図３Ｂ）。式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせは、細胞生存率のより顕著な阻害を示した。

ＳＣＣ－１５細胞を式Ｉの化合物単独で処置し、およびセツキシマブと組み合わせても処置した。式Ｉの化合物では、１４０６ｎＭのＩＣ５０でＳＣＣ－１５細胞の細胞増殖を阻害した。式Ｉの化合物の感受性は、セツキシマブと組み合わせると増加した。セツキシマブの同時処置は、式Ｉの化合物の活性を投与量依存的に感作し、式Ｉの化合物のＩＣ５０は、５μｇ／ｍｌのセツキシマブの同時処置により１４０６ｎＭから５５ｎＭに減少した（図４Ａおよび表４）。しかし、最大で５μｇ／ｍｌのセツキシマブ単独処置で細胞生存率の顕著な減少は観察されなかった（図４Ｂ）。式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせは、細胞生存率のより顕著な阻害を示した。

ＳＣＣ－２５細胞を式Ｉの化合物単独で処置し、およびセツキシマブと組み合わせても処置した。式Ｉの化合物では、８０４６ｎＭのＩＣ５０でＳＣＣ－１５細胞の細胞増殖を阻害した。式Ｉの化合物の感受性は、セツキシマブと組み合わせると増加した。セツキシマブの同時処置は、式Ｉの化合物の活性を投与量依存的に感作し、式Ｉの化合物のＩＣ５０は、１０μｇ／ｍｌのセツキシマブの同時処置により１４０６ｎＭから４１８ｎＭに減少した（図５Ａおよび表５）。しかし、最大で５μｇ／ｍｌのセツキシマブ単独処置で細胞生存率の顕著な減少は観察されなかった（図５Ｂ）。式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせは、細胞生存率のより顕著な阻害を示した。

式Ｉとセツキシマブの組み合わせは、ＨＰＶ陰性ＣＡＬ２７細胞におけるＥＲＫ１／２リン酸化の強固な阻害を示した。細胞株ＣＡＬ２７を６ウェルプレートに分け、示されるように式Ｉの化合物単独で、またはセツキシマブ単独で、および組み合わせて別々に処置した（図６Ａ～図６Ｂ）。処置の４時間後、細胞を溶解し、リン酸化ＥＲＫ１／２について免疫ブロットした。免疫ブロットの結果は、式Ｉの化合物がＤＭＳＯ処置対照細胞と比較してＥＲＫ１／２リン酸化を約５０％阻害することを示した。セツキシマブ処置は、約５０％のＥＲＫ１／２リン酸化の阻害を示し、阻害は、式Ｉの化合物と組み合わせた場合に、より顕著（約８０％）になった（図６Ａ）。リン酸化ＥＲＫ１／２バンドを、Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｉｍａｇｅ Ｌａｂソフトウェアを使用することによって定量し、総ＥＲＫによって正規化した。定量結果は、式Ｉの化合物単独またはセツキシマブ単独による処置が、ＤＭＳＯ処置対照細胞と比較してＥＲＫ１／２リン酸化を約５０％減少させたことを示したが、式Ｉの化合物とセツキシマブの組み合わせは、ＨＰＶ陰性頭頸部扁平上皮癌細胞株ＣＡＬ２７におけるＥＲＫ１／２リン酸化の約８０％阻害を示した（図６Ｂ）。

実施例４：進行性または転移性固形腫瘍を有する患者において他の抗癌治療との併用における本開示の化合物の非盲検第１ｂ／２相試験
試験設計
医薬組成物の形態の本開示の化合物（例えば、式Ｉの化合物）は、非盲検多施設臨床試験において特定の分子変化を抱く固形腫瘍を有する対象において他の癌治療との併用で投与される。スクリーニング期間の後、適格な対象を登録し、疾患進行、許容できない毒性、または処置を停止するための別の基準を満たすまで、式Ｉの化合物を含む医薬組成物および別の抗癌治療で処置する。

本研究は、他の癌治療と組み合わせて投与される場合の本開示の化合物（例えば、式Ｉの化合物）の漸増投与量の安全性および忍容性を評価し、他の癌治療と組み合わせて投与された場合の式Ｉの化合物の最大耐量（ＭＴＤ）および／または推奨投与量（ＲＤ）を決定し、他の癌治療と組み合わせて投与された場合の化合物の薬物動態（ＰＫ）プロファイルを特徴付け、および、他の癌治療と組み合わせて投与された場合の抗腫瘍活性を評価する。

評価項目
評価される主要評価項目：（１）用量制限毒性（ＤＬＴ）（観察された毒性に基づく）（２）最大耐量（ＭＴＤ）（観察された毒性に基づく）（３）推奨投与量（ＲＤ）（観察された毒性に基づく）（４）有害事象（ＡＥ）（治療で発現したＡＥおよび重篤なＡＥの発生率および重症度）（時間枠：初回投与の時点から２４ヶ月まで評価した）（５）血漿濃度（Ｃｍａｘ）（時間枠：試験日から最大２９日目まで）（６）Ｃｍａｘに達するまでの時間（Ｔｍａｘ）（時間枠：試験日から最大２９日目まで）（７）曲線下面積（本開示の化合物の血漿濃度－時間曲線下面積）（８）半減期（時間枠：試験１日目から２９日目まで）。

評価される二次的評価項目：（９）客観的奏効率（ＯＲＲ）（ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１によるＸ線画像の評価に基づく）（時間枠：初回投与の時点から２４ヶ月まで評価した）（１０）応答の持続時間（ＤＯＲ）（ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１によるＸ線画像の評価に基づく）（１１）応答の時間（ＴＴＲ）（ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１によるＸ線画像の評価に基づく）（時間枠：初回投与の時点から２４ヶ月まで評価した）。

他の事前に指定された評価項目：（１２）薬力学的評価（ＩＨＣまたは免疫蛍光によるＰＢＭＣまたは腫瘍組織におけるリン酸化ＥＲＫ（ｐＥＲＫ）阻害の評価（時間枠：初回投与から２４ヶ月まで評価した）。

試験対象患者基準：（１）年齢≧１８歳（２）書面によるインフォームドコンセントの意思があり、それを与えることができる（３）組織学的または細胞学的に確認された進行性または転移性固形腫瘍（４）患者の腫瘍組織学および／または分子バイオマーカープロファイルに利用可能な標準的な全身療法がない、または、標準的な療法は、耐えられないか、効果的でないか、またはアクセスできない（５）経口医薬を飲み込むことができる（６）イースタン協調腫瘍学グループパフォーマンスステータス（ＥＣＯＧ ＰＳ）が０または１である（７）十分な心血管機能、血液機能、肝機能、および腎機能を有し、（７）すべてのプロトコルによって必要とされる訪問、評価、および手順に従う意思がある。

除外基準：（１）ＳＨＰ２阻害剤による以前の処置（２）記録されたＰＴＰＮ１１変異（３）別の研究療法を受けるか、または第１の投与量の４週間以内に治験薬の研究に参加した（４）サイクル１、７日以内の１日目に事前の緩和放射線を受けた（５）原発性中枢神経系疾患または既知の活動性ＣＮＳ転移および／または癌性髄膜炎（６）手術前または薬物吸収に影響を及ぼし得る胃腸機能障害を有する（７）臨床的に重要性のある間質性肺疾患または肺炎（８）第１の投与量の前の１２週間以内の血栓塞栓または脳血管事象の病歴（９）網膜静脈閉塞（ＲＶＯまたはＲＶＯの現在のリスク因子）の病歴または現在の証拠（１０）治験責任医師の意見では、プロトコルによる研究投与、またはＡｅｓの評価を損な得る何らかの基礎疾病、精神的疾病、または社会的状況を有する、および（１１）妊娠中もしくは授乳中、または試験期間中に妊娠または父親となる見込みがあること。

ＨＰＶ陰性、頭頸部扁平上皮癌：１日１回の連続的投与（ＱＤ）についての投与量レベルは、式Ｉの化合物について４０ｍｇ、２０～６０ｍｇＱＤ、４０ｍｇＱＤまたは６０ｍｇＱＤである。１日２回の連続的投与（ＢＩＤ）の投与量レベルは、１０～１００ｍｇＢＩＤまたは２０ｍｇ～８０ｍｇＢＩＤである。ＱＤまたはＢＩＤの計画された投与スケジュールは、２週間オン／１週間オフである。セツキシマブの投与は隔週で投与する。

ｗｔＫＲＡＳ／ｗｔＮＲＡＳ／ｗｔＢＲＡＦ、大腸癌：１日１回の連続的投与（ＱＤ）についての投与量レベルは、式Ｉの化合物について４０ｍｇ、２０～６０ｍｇＱＤ、４０ｍｇＱＤまたは６０ｍｇＱＤである。１日２回の連続的投与（ＢＩＤ）の投与量レベルは、１０～１００ｍｇＢＩＤまたは２０ｍｇ～８０ｍｇＢＩＤである。ＱＤまたはＢＩＤの計画された投与スケジュールは、２週間オン／１週間オフである。セツキシマブの投与は隔週で投与する。

実施例５－ＨＣＣ８２７細胞株およびエルロチニブ耐性細胞株ＨＣＣ８２７／ＥＲ１における式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用療法
材料および方法
ヒトＮＳＣＬＣ細胞株、ＨＣＣ８２７はＡＴＣＣから購入した。ＥＧＦＲエキソン１９欠失変異体およびＭＥＴ増幅ＨＣＣ８２７／ＥＲ１細胞株（Ｃｒｏｗｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ＵＫ）は、漸増濃度のエルロチニブの存在下で細胞を培養することによって、Ｃｒｏｗｎ ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅでＨＣＣ８２７（ＡＴＣＣ）から誘導した。ＨＣＣ８２７／ＥＲ１細胞を、ＲＰＭＩ－１６４０に１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および４２ｐＭエルロチニブを含有する培地中で３７°Ｃで、５％ＣＯ_２空気大気下で培養した。培地を慣例的に更新し、腫瘍細胞をトリプシン－ＥＤＴＡによって８０％のコンフルエンスで３～５日毎に継代培養した（Ｍｏｏｒｅ ｅｔ ａｌ．２０１６ｂ）。

細胞増殖アッセイ：対数増殖期間中に細胞を採収し、Ｃｏｕｎｔ－ｓｔａｒを使用して計数した。細胞を９６ウェルプレート上に４×１０^３細胞／ｍＬの最終細胞密度で１００μＬ／ウェルの体積で播種した。一晩インキュベートした後、プレーティングした細胞をＲＴで約３０分間平衡化した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ試薬（５０μＬ）を各ウェルに添加し、オービタルシェーカー上で５分間混合して細胞溶解を誘導した。プレートをＲＴで２０分間インキュベートし、発光シグナルを安定化させた。Ｔ０の発光シグナルを、ＥｎＶｉｓｉｏｎ Ｍｕｌｔｉ Ｌａｂｅｌ Ｒｅａｄｅｒを使用して測定した。併用処置のために、薬物を調製し、各ウェル中の各試験物品の１０００×薬物溶液で同時に分配した。プレートを加湿インキュベーター中で、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２で１２０時間インキュベートし、その後ＣＴＧアッセイにより測定した。プレートを室温で約３０分間平衡化した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（５０μＬ）を各ウェルに加え、プレートをオービタルシェーカー上で５分間インキュベートして細胞溶解を誘導した。プレートを室温で２０分間インキュベートして発光シグナル（Ｔ５）を安定化させ、その後、ＥｎＶｉｓｉｏｎ Ｍｕｌｔｉ Ｌａｂｅｌ Ｒｅａｄｅｒを使用して測定した。

相乗作用算出
Ｒパッケージ「ＳｙｎｅｒｇｙＦｉｎｄｅｒ」を使用して、Ｌｏｅｗｅ相加性モデルまたはＢｌｉｓｓ独立性モデルに基づいて相乗作用スコアを算出した。算出方法の詳細は後述される。

投与量×１の薬物Ａを投与量×２の薬物Ｂと組み合わせる薬物併用実験において、この併用の効果をＥＡＢｏｂｓとして測定する。加えて、投与量ｘ１の薬物Ａの効果はＥＡであり、投与量ｘ２の薬物Ｂの効果はＥＢである。

予想される薬物効果（ＥＡＢ）は、ＢｌｉｓｓモデルまたはＬｏｅｗｅモデルのいずれかに基づいて算出される：

Ｂｌｉｓｓモデル：ＥＡＢ＝ＥＡ＋ＥＢ－ＥＡ＊ＥＢ

Ｌｏｅｗｅモデル：４つのパラメータ対数ロジスティックモデルを使用して、各薬物の用量反応曲線を適合させ、その後、非線形方程式を使用して、対数ロジスティックモデルのパラメータに基づいてＥＡＢを算出した。

図７Ａは、（エルロチニブ耐性）ＨＣＣ８２７／ＥＲ１細胞株における、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによるＢｌｉｓｓ相乗作用スコアの表を示す。

図７Ｂ（エルロチニブ耐性）ＨＣＣ８２７ＥＲ１親細胞株における、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによるＢｌｉｓｓ相乗作用スコアの表を示す。

ＥＡＢｏｂｓとＥＡＢの間の割合差はその組み合わせの相乗作用スコアである。

実施例６－ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－２１５における式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭ酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける１８日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式１の被験物質化合物を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で調製し、周囲条件下で保存した。組み合わせ薬剤オシメルチニブを、０．５％のＨＰＭＣおよび０．１％のＴｗｅｅｎ ８０のビヒクル中で毎週調製し、周囲条件下で保存した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。マウスは、移植時に６～８週齢であった。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたプロトコルおよびガイドラインに従って実施した。動物施設およびプログラムは、実験動物の管理と使用に関する指針（ＮＲＣ，２０１１）の標準の下で操作され、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）によって認定された。具体的には、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎで実行されたこの研究の全ての部分は、ＩＡＣＵＣおよび適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によって検討され承認された研究プロトコルに準拠した。

ＰＤＸモデルの調製
ＬＵＮ２３５５－２１５モデルは、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎ（上海、中国）での前臨床有効性研究のために確立された。このＰＤＸモデルは、４９歳の男性の中国人のＮＳＣＬＣ患者に由来した。ＰＤＸモデルにおけるＥＧＦＲ変異は、全エキソムシーケンシングおよびＰＣＲシーケンシングによって確認した。ＰＤＸモデルから採取した腫瘍断片を雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。マウスをイソフルランで麻酔し、移植手術を通して麻酔を維持した。マウスの皮膚を、右側腹部上で適切な外科用スクラブおよびアルコールで洗浄した。トロカールの鋭利な端部を使用して小さな皮膚切開を行い、１０－１２ｇのトロカール針のスタイレットによる鈍的切開によって、右側胸壁に沿った１．５ｃｍの皮下ポケットを形成した。腫瘍断片（１５～３０ｍｍ^３）をトロカール針に入れ、右側腹部の皮下ポケットに進行させた。トロカール切開を縫合糸または創傷クリップで閉鎖し、これを閉鎖の１週間後に除去した。

腫瘍サイズが体積で１５０～２５０ｍｍ^３に達したとき、腫瘍を有するマウスを無作為に試験群に分け、各群に８匹のマウスを入れた。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化の同日に開始した。処置開始日を処置０日目と表記した。ビヒクル対照溶液、１５ｍｇ／ｋｇＱＤの式Ｉの化合物単独、１５ｍｇ／ｋｇＱＤのオシメルチニブ単独、ならびに１５ｍｇ／ｋｇＱＤの式Ｉの化合物および１５ｍｇ／ｋｇＱＤのオシメルチニブの組み合わせの経口投与によってマウスに投与した。投与容量は、各化合物について５ｍＬ／ｋｇであった。併用群ではオシメルチニブを、式Ｉの化合物ＱＤの投与の１時間後に投与した。この研究は、研究プロトコルに定義されるように処置１８日目に終了した。

結果
図８は、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－２１５における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図８に示されるように、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによって、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－２１５において、式Ｉの化合物単独での処置またはオシメルチニブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

実施例７－オシメルチニブ耐性ＭＥＴ増幅ＮＳＣＬＣ ＣＤＸモデルＮＣＩ－Ｈ８２０における式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭ酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける２８日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式Ｉの化合物の被験物品を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で新たに調製し、周囲条件下で保存した。組み合わせ薬剤オシメルチニブを、０．５％のＨＰＭＣおよび０．１％のＴｗｅｅｎ ８０のビヒクル中で毎週調製し、周囲条件下で保存した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。マウスは、移植時に６～８週齢であった。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、ＷｕＸｉＡｐｐＴｅｃの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたガイドラインに従って実施した。研究中、動物のケアおよび使用は、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）の規制に従って行った。加えて、ＷｕＸｉＡｐｐＴｅｃで実行されたこの研究の全ての部分は、試験責任者および適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によってされ承認された研究プロトコルに準拠した。

異種移植片モデルの調製
ＮＣＩ－Ｈ８２０は、ＥＧＦＲエキソン１９欠失変異、ＥＧＦＲ Ｔ７９０Ｍ変異、およびＭＥＴ増幅を有するヒト肺腺癌細胞株である。ＮＣＩ－Ｈ８２０細胞株は、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ－１８１（商標））から購入した。ＮＣＩ－Ｈ８２０細胞を、ＲＰＭＬ１６４０に１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）および１％抗生物質－抗真菌薬（ＡＡ）を含有する培地中で、３７°Ｃで、空気中５％ＣＯ_２の大気下で培養した。培地を２～３日毎に更新し、腫瘍細胞を、トリプシン－ＥＤＴＡによって８０～９０％のコンフルエンスで日常的に継代培養した。指数増殖期で増殖する細胞を採収し、接種のために計数した。

ＮＣＩ－Ｈ８２０腫瘍細胞を、マウスに皮下移植した。簡潔に言えば、５０％のマトリゲルと混合された１０×１０^６腫瘍細胞を含有する２００μＬの細胞懸濁液を、シリンジを使用して、マウスの右側腹部に皮下移植した。動物の健康および腫瘍増殖を毎日モニタリングした。腫瘍体積は、腫瘍が触診可能かつ測定可能であった場合、カリパスによって週２回測定した。腫瘍体積が平均１７１ｍｍ^３（９６～２５１ｍｍ^３の範囲）に達したとき、腫瘍を有するマウスを、各群に８匹のマウスを有する異なる群に無作為化した。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化後の日に開始した。処置開始日を処置１日目と表記した。ビヒクル対照溶液、３０ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物単独、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブ単独の経口投与によってマウスに投与した。１つの追加の群は、式Ｉの化合物およびオシメルチニブの併用処置、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物の投与、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブを受け入れた。投与容量は、各化合物について５ｍＬ／ｋｇであった。併用群ではオシメルチニブを、式Ｉの化合物ＱＤの投与の１時間後に投与した。この研究は、研究プロトコルに定義されるように処置２８日目に終了した。

結果
図９は、ＥＧＦＲ ｄｅｌＥ７４６＿Ｅ７４９／Ｔ７９０Ｍ変異体およびＭＥＴ増幅ＮＳＣＬＣ ＣＤＸモデルＮＣＩ－Ｈ８２０における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図９に示されるように、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによって、ＥＧＦＲ ｄｅｌＥ７４６＿Ｅ７４９／Ｔ７９０およびＭＥＴ増幅ＮＳＣＬＣ ＣＤＸモデルＮＣＩ－Ｈ８２０において、式Ｉの化合物単独での処置またはオシメルチニブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

実施例８－ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体およびＥＲＢＢ２過剰発現ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－１４３－９における式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭの酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける２８日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式Ｉの化合物の被験物品を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で調製し、周囲条件下で保存した。組み合わせ薬剤オシメルチニブを、０．５％のＨＰＭＣおよび０．１％のＴｗｅｅｎ ８０のビヒクル中で毎週調製し、周囲条件下で保存した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。マウスは、移植時に６～８週齢であった。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたプロトコルおよびガイドラインに従って実施した。動物施設およびプログラムは、実験動物の管理と使用に関する指針（全米研究評議会，２０１１）の標準の下で操作され、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）によって認定された。具体的には、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎで実行されたこの研究の全ての部分は、ＩＡＣＵＣおよび適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によって検討され承認された研究プロトコルに準拠した。

ＰＤＸモデルの調製
ＬＵＮ２００５－１４３－９モデルは、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎ（上海、中国）での前臨床有効性研究のために確立された。親ＰＤＸモデルは、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異を有する腫瘍を有する６０歳男性の中国人のＮＳＣＬＣ患者に由来した。オシメルチニブ耐性腫瘍、ＥＲＢＢ２高発現を有するＬＵＮ２００５－１４３－９は、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブ処置の約８ヶ月後に約６０匹の親腫瘍を有するマウスに由来した。ＰＤＸモデルから採取した腫瘍断片を雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。これを行うために、マウスをイソフルランで麻酔し、移植手術を通して麻酔を維持した。無菌外科手術を使用して、マウスの皮膚を、右側腹部上で適切な外科用スクラブおよびアルコールで洗浄した。トロカールの鋭利な端部を使用して小さな皮膚切開を行い、１０－１２ｇのトロカール針のスタイレットによる鈍的切開によって、右側胸壁に沿った１．５ｃｍの皮下ポケットを形成した。腫瘍断片（１５～３０ｍｍ^３）をトロカール針に入れ、右側腹部の皮下ポケットに進行させた。トロカール切開を縫合糸または創傷クリップで閉鎖し、これを閉鎖の１週間後に除去した。腫瘍サイズが体積で１５０～２５０ｍｍ^３に達したとき、腫瘍を有するマウスを無作為に試験群に分け、各群に８匹のマウスを入れた。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化の同日に開始した。処置開始日を処置０日目と表記した。ビヒクル対照溶液、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブ単独、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物単独の経口投与によってマウスに投与した。１つの追加の群は、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用処置を受け入れ、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物の投与、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブであった。投与容量は、各化合物について５ｍＬ／ｋｇであった。併用群ではオシメルチニブを式Ｉの化合物ＱＤ投与量の投与の１時間後に投与した。この研究は、研究プロトコルに定義されるように処置２８日目に終了した。

結果
図１０は、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異体およびＥＲＢＢ２過剰発現ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－１４３－９における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図１０に示されるように、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによって、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異体およびＥＲＢＢ２過剰発現ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－１４３－９において、式Ｉの化合物単独での処置またはオシメルチニブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

実施例９－ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－２３４における式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭ酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける２４日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式Ｉの化合物の被験物品を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で調製し、周囲条件下で保存した。組み合わせ薬剤オシメルチニブを、０．５％のＨＰＭＣおよび０．１％のＴｗｅｅｎ ８０のビヒクル中で毎週調製し、周囲条件下で保存した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。マウスは、移植時に６～８週齢であった。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたプロトコルおよびガイドラインに従って実施した。動物施設およびプログラムは、実験動物の管理と使用に関する指針（全米研究評議会，２０１１）の標準の下で操作され、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）によって認定された。具体的には、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎで実行されたこの研究の全ての部分は、ＩＡＣＵＣおよび適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によって検討され承認された研究プロトコルに準拠した。

ＰＤＸモデルの調製
ＬＵＮ２００５－２３４モデルは、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎ（上海、中国）での前臨床有効性研究のために確立された。親ＰＤＸモデルは、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異を有する腫瘍を有する６０歳男性の中国人のＮＳＣＬＣ患者に由来した。オシメルチニブ耐性腫瘍、ＬＵＮ２００５－２３４は、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブ処置の約７ヶ月後に約６０匹の親腫瘍を有するマウスに由来した。ＰＤＸモデルから採取した腫瘍断片を雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。これを行うために、マウスをイソフルランで麻酔し、移植手術を通して麻酔を維持した。無菌外科手術を使用して、マウスの皮膚を、右側腹部上で適切な外科用スクラブおよびアルコールで洗浄した。トロカールの鋭利な端部を使用して小さな皮膚切開を行い、１０－１２ｇのトロカール針のスタイレットによる鈍的切開によって、右側胸壁に沿った１．５ｃｍの皮下ポケットを形成した。腫瘍断片（１５～３０ｍｍ^３）をトロカール針に入れ、右側腹部の皮下ポケットに進行させた。トロカール切開を縫合糸または創傷クリップで閉鎖し、これを閉鎖の１週間後に除去した。平均腫瘍体積が２０５ｍｍ^３に達したとき（腫瘍サイズは１５０～２５０ｍｍ^３の範囲であった）、腫瘍を有するマウスを、各群に８匹のマウスを有する試験群に無作為に分けた。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化の同日に開始した。処置開始日を処置０日目と表記した。ビヒクル対照溶液、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブ単独、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物単独の経口投与によってマウスに投与した。１つの追加の群は、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用処置を受け入れ、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式１の化合物の投与、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブの投与であった。投与容量は、各化合物について５ｍＬ／ｋｇであった。併用群ではオシメルチニブを式Ｉの化合物のＱＤ投与量の投与の１時間後に投与した。この研究は、研究プロトコルに定義されるように処置２４日目に終了した。

結果
図１１は、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－２３４における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図１１に示されるように、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによって、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２００５－２３４において、式Ｉの化合物単独での処置またはオシメルチニブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

実施例１０－ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－１２８－３３における式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭの酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける２０日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式Ｉの化合物の被験物品を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で新たに調製し、周囲条件下で保存した。組み合わせ薬剤オシメルチニブを、０．５％のＨＰＭＣおよび０．１％のＴｗｅｅｎ ８０のビヒクル中で毎週調製し、周囲条件下で保存した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。マウスは、移植時に６～８週齢であった。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたプロトコルおよびガイドラインに従って実施した。動物施設およびプログラムは、実験動物の管理と使用に関する指針（ＮＲＣ，２０１１）の標準の下で操作され、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）によって認定された。具体的には、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎで実行されたこの研究の全ての部分は、ＩＡＣＵＣおよび適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によって検討され承認された研究プロトコルに準拠した。

ＰＤＸモデルの調製
ＬＵＮ２３５５－１２８－３３モデルは、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎ（上海、中国）での前臨床有効性研究のために確立された。このＰＤＸモデルは、４９歳の男性の中国人のＮＳＣＬＣ患者に由来した。ＰＤＸモデルにおけるＥＧＦＲ変異は、全エキソムシーケンシングおよびＰＣＲシーケンシングによって確認した。ＰＤＸモデルから採取した腫瘍断片を雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。マウスをイソフルランで麻酔し、移植手術を通して麻酔を維持した。マウスの皮膚を、右側腹部上で適切な外科用スクラブおよびアルコールで洗浄した。無菌の外科手術が使用された。トロカールの鋭利な端部を使用して小さな皮膚切開を行い、１０～１２ｇのトロカール針のスタイレットによる鈍的切開によって、右側胸壁に沿った１．５ｃｍの皮下ポケットを形成した。腫瘍断片（１５～３０ｍｍ^３）をトロカール針に入れ、右側腹部の皮下ポケットに進行させた。トロカール切開を縫合糸または創傷クリップで閉鎖し、これを閉鎖の１週間後に除去した。

腫瘍サイズが体積で１５０～２５０ｍｍ^３に達したとき、腫瘍を有するマウスを無作為に試験群に分け、各群に８匹のマウスを入れた。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化の同日に開始した。処置開始日を処置０日目と表記した。ビヒクル対照溶液、５ｍｇ／ｋｇのＢＩＤの式Ｉの化合物単独、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物単独、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブ単独の経口投与によってマウスに投与した。２つの追加の群は、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用治療を受け、一方の群は、５ｍｇ／ｋｇのＢＩＤでの式Ｉの化合物と１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブとの併用を投与され、他方の群は、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物と１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブとの併用を投与された。投与容量は各化合物について５ｍＬ／ｋｇであり、ＢＩＤレジメンの間隔は８時間であった。オシメルチニブは、式１の化合物ＱＤの投与の１時間後、または併用群におけるＢＩＤレジメンの第１の投与量の後に投与された。

結果
図１２は、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－１２８－３３における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図１２に示されるように、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによって、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異体ＮＳＣＬＣ ＰＤＸモデルＬＵＮ２３５５－１２８－３３において、式Ｉの化合物単独での処置またはオシメルチニブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

実施例１１－ＥＧＦＲｅｘｌ９ｄｅｌ変異体ＣＤＸモデルＨＣＣ８２７／ＥＲ１における式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭの酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける２８日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式Ｉの化合物の被験物品を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で新たに調製し、周囲条件下で保存した。組み合わせ薬剤オシメルチニブを、０．５％のＨＰＭＣおよび０．１％のＴｗｅｅｎ ８０のビヒクル中で毎週調製し、周囲条件下で保存した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、ＳＰＦ（Ｂｅｉｊｉｎｇ）Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ，Ｌｔｄ．から購入した。マウスは、移植時に９～１１週齢であった。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、Ｃｒｏｗｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）の動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたガイドラインに従って実施した。研究中、動物のケアおよび使用は、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）の規制に従って行った。加えて、Ｃｒｏｗｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）で実行されたこの研究の全ての部分は、試験責任者および適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によってされ承認された研究プロトコルに準拠した。

異種移植片モデルの調製
ヒト肺癌ＨＣＣ８２７細胞、ＡＴＣＣから購入した。ＥＧＦＲエキソン１９欠失変異体およびエルロチニブ耐性ＭＥＴ増幅ＨＣＣ８２７／ＥＲ１細胞株（Ｃｒｏｗｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ＵＫ）は、漸増濃度のエルロチニブの存在下で細胞を培養することによって、Ｃｒｏｗｎ ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅのＨＣＣ８２７（ＡＴＣＣ）から誘導した。ＨＣＣ８２７／ＥＲ１細胞を、ＲＰＭＩ－１６４０に１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および４２ｐＭエルロチニブを含有する培地中で３７°Ｃで、空気中５％ＣＯ_２の大気下で培養した。培地を慣例的に更新し、腫瘍細胞をトリプシン－ＥＤＴＡによって８０％のコンフルエンスで３～５日毎に継代培養した。指数増殖期で増殖する細胞を採収し、接種のために計数した。簡潔に言えば、５０％のマトリゲルと混合された５×１０^６のＨＣＣ８２７／ＥＲ１腫瘍細胞を含有する１００μＬの細胞懸濁液を、シリンジを使用して、マウスの右側腹部に皮下的に移植した。動物の健康および腫瘍増殖を移植後に毎日モニタリングした。腫瘍体積は、異種移植腫瘍が触診可能かつ測定可能であった場合、カリパスによって週２回測定した。

腫瘍大きさが平均約１４５ｍｍ^３（１０４～１８９ｍｍ^３の範囲）に達したとき、腫瘍を有するマウスを、各群に８匹のマウスを有する試験群に無作為に分けた。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化の同日に開始した。処置開始日を処置０日目と表記した。ビヒクル対照溶液、３０ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物単独、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブ単独の経口投与によってマウスに投与した。オシメルチニブと組み合わせた場合の式Ｉの化合物の最適投与量を同定する以前に実行された忍容性試験に基づいて、式Ｉの化合物の投与量レベルは、併用療法について３０ｍｇ／ｋｇＱＤから１５ｍｇ／ｋｇＱＤに低下した。１つの追加の群は、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの併用処置を受け入れ、１５ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物の投与、および１５ｍｇ／ｋｇＱＤでのオシメルチニブの投与であった。投与容量は、各化合物について５ｍＬ／ｋｇであった。併用群ではオシメルチニブを式Ｉの化合物ＱＤの投与の１時間後に投与した。この研究は、研究プロトコルに定義されるように処置２８日目に終了した。

結果
図１３は、ＥＧＦＲｅｘ１９ｄｅｌ変異体ＣＤＸモデルＨＣＣ８２７／ＥＲ１における、式Ｉの化合物単独、オシメルチニブ単独、および式Ｉの化合物とオシメルチニブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図１３に示されるように、式Ｉの化合物とオシメルチニブとの組み合わせによって、ＥＧＦＲｅｘ１９ｄｅｌ変異体ＣＤＸモデルＨＣＣ８２７／ＥＲ１において、式Ｉの化合物単独での処置またはオシメルチニブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

実施例１２－ＲＡＳ／ＲＡＦ野生型ＰＤＸ型ＣＲＣ０４９における式Ｉの化合物とセツキシマブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭの酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける２８日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式Ｉの化合物の被験物品を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で新たに調製し、周囲条件下で保存した。併用剤セツキシマブをＰＢＳ中で調製し、２～８°Ｃで保存した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。マウスは、移植時に６～８週齢であった。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたプロトコルおよびガイドラインに従って実施した。動物施設およびプログラムは、実験動物の管理と使用に関する指針（ＮＲＣ，２０１１）の標準の下で操作され、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）によって認定された。具体的には、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎで実行されたこの研究の全ての部分は、ＩＡＣＵＣおよび適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によって検討され承認された研究プロトコルに準拠した。

ＰＤＸモデルの調製
ＣＲＣ０４９ ＰＤＸモデルを、ＧｅｎｅｎＤｅｓｉｇｎでの有効性研究のために確立した。このＰＤＸモデルは、７９歳の男性の中国人のＣＲＣ患者に由来した。ＰＤＸモデルにおけるＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、およびＨＲＡＳ、ＡＲＡＦ、ＢＲＡＦ、およびＲＡＦＩ遺伝子を、全エクソームシーケンシングおよびＰＣＲシーケンシングによって分析した。ＰＤＸマウスモデルから採取した腫瘍断片を雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。マウスをイソフルランで麻酔し、移植手術を通して麻酔を維持した。マウスの皮膚を、右側腹部上で適切な外科用スクラブおよびアルコールで洗浄した。無菌外科的手順を移植に使用した。トロカールの鋭利な端部を使用して小さな皮膚切開を行い、１０－１２ｇのトロカール針のスタイレットによる鈍的切開によって、右側胸壁に沿った１．５ｃｍの皮下ポケットを形成した。腫瘍断片（１５～３０ｍｍ^３）をトロカール針に入れ、右側腹部の皮下ポケットに進行させた。トロカール切開を縫合糸または創傷クリップで閉鎖し、これを閉鎖の１週間後に除去した。腫瘍サイズが体積で１４３～２４９ｍｍ^３に達したとき、腫瘍を有するマウスを無作為に試験群に分け、各群に８匹のマウスを入れた。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化の同日に開始した。処置開始日を処置０日目と表記した。ビヒクル対照溶液、２０ｍｇ／ｋｇＢＩＷでのセツキシマブ単独、および３０ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物単独の経口投与によってマウスに投与した。１つの追加の群は、式Ｉの化合物とセツキシマブとの併用処置を受け入れ、３０ｍｇ／ｋｇＱＤでの式Ｉの化合物の投与、および２０ｍｇ／ｋｇＢＩＷでのセツキシマブの投与であった。投与容量は、各化合物について５ｍＬ／ｋｇであった。併用群ではセツキシマブを式Ｉの化合物を３０ｍｇ／ｋｇＱＤの投与の１時間後に投与した。この研究は、研究プロトコルに定義されるように２８日目に終了した。

結果
図１４は、ＲＡＳ／ＲＡＦ野性型ＰＤＸモデルＣＲＣ０４９における、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、および式Ｉの化合物とセツキシマブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図１４に示されるように、式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせによって、ＲＡＳ／ＲＡＦ野性型ＰＤＸモデルＣＲＣ０４９において、式Ｉの化合物単独での処置またはセツキシマブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

実施例１３－ＲＡＳ／ＲＡＦ野生型ＨＰＶ－陰性ＣＤＸモデルＦａＤｕにおける式Ｉの化合物とセツキシマブとの併用療法
材料
ビヒクル／対照物、脱イオン水中１００ｍＭの酢酸を、ｐＨを４．８～５．０に調節して調製し、マウスにおける２８日間の投与間中、周囲条件下で保存した。

式Ｉの被験物質を、毎週１００ｍＭの酢酸緩衝液のビヒクル中で新たに調製し、周囲条件下で保存した。（５ｍｇ／ｍＬ、２～８°Ｃで保存した）併用剤セツキシマブを各投与前に生理食塩水で３ｍｇ／ｍＬに希釈した。

雌のＢａｌｂ／ｃヌードマウスは、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。マウスは、移植時に６～８週齢であった。マウスを、特別な病原体を含まない（ＳＰＦ）環境の飼育器施設に宿し、任意の実験の開始前に少なくとも３日間、その新しい環境に順応させた。

本研究における動物の取り扱い、ケア、および処置に関連するすべての手順は、ＷｕＸｉＡｐｐＴｅｃの動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたおよびガイドラインに従って実施した。研究中、動物のケアおよび使用は、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）の規制に従って行った。加えて、ＷｕＸｉＡｐｐＴｅｃで実行されたこの研究の全ての部分は、試験責任者および適用可能な標準操作手順（ＳＯＰ）によって承認された研究プロトコルに準拠した。

異種移植片モデルの調製
ＦａＤｕは、ＲＡＳ／ＲＡＦ野生型ヒト頭頸部扁平上皮癌（咽頭癌）細胞株であった。ＦａＤｕ細胞株は、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ－４３（商標））から購入した。ＦａＤｕ細胞を、ＥＭＥＭに１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）および１％抗生物質－抗真菌薬（ＡＡ）を含有する培地中で、３７°Ｃ、空気中５％ＣＯ_２の大気下で培養した。培地を２～３日毎に更新し、腫瘍細胞を、トリプシン－ＥＤＴＡによって８０～９０％のコンフルエンスで日常的に継代培養した。指数増殖期で増殖する細胞を採収し、接種のために計数した。

ＦａＤｕ腫瘍細胞を、マウスに皮下移植した。５×１０^６腫瘍細胞を含有する２００μＬの細胞懸濁液を、シリンジを使用して、マウスの右側腹部に皮下移植した。動物の健康および腫瘍増殖を毎日モニタリングした。腫瘍体積は、腫瘍が触診可能かつ測定可能であった場合、カリパスによって週２回測定した。腫瘍体積が平均１５３ｍｍ^３（７５～２１７ｍｍ^３の範囲）に達したとき、腫瘍を有するマウスを、各群に８匹のマウスを有する異なる群に無作為化した。無作為化日を処置０日目と表記した。

処置
処置は無作為化後の日に開始した。処置開始日を処置１日目と表記した。ビヒクル対照溶液、３０ｍｇ／ｋｇＱ３Ｄでのセツキシマブ単独、および１０ｍｇ／ｋｇＢＩＤでの式Ｉの化合物単独の経口投与によってマウスに投与した。１つの追加の群は、式Ｉの化合物とセツキシマブとの併用処置を受け入れ、１０ｍｇ／ｋｇＢＩＤでの式Ｉの化合物の投与、および３０ｍｇ／ｋｇＱ３Ｄでのセツキシマブの投与であった。投与容量は、式Ｉの化合物については５ｍＬ／ｋｇであり、セツキシマブについては１０ｍＬ／ｋｇであった。式Ｉの化合物用のＢＩＤレジメンの間隔は８時間であった。併用群ではセツキシマブを式Ｉの化合物ＢＩＤ投与量の第１回の投与の１時間後に投与した。この研究は、研究プロトコルに定義されるように２８日目に終了した。

結果
図１５は、ＲＡＳ／ＲＡＦ野性型ＨＰＶ－陰性ＨＮＳＣＣ ＣＤＸモデルＦａＤｕにおける、式Ｉの化合物単独、セツキシマブ単独、および式Ｉの化合物とセツキシマブの組み合わせのレジメンによる処置期間にわたる腫瘍体積のグラフを示す。対照群および処置群において有意な体重変化は観察されなかった。

結論
図１５に示されるように、式Ｉの化合物とセツキシマブとの組み合わせによって、ＲＡＳ／ＲＡＦ野性型ＨＰＶ－陰性ＨＮＳＣＣ ＣＤＸモデルＦａＤｕにおいて、式Ｉの化合物単独での処置またはセツキシマブ単独での処置と比較して優れた腫瘍増殖阻害が示された。

前述の実施形態は、理解を明確にする目的で例証および実施例によってある程度詳細に説明されているが、当業者は、ある変更および修正が添付の特許請求の範囲内で実践され得ることを理解するであろう。さらに、本明細書に提供される各参考文献は、各参考文献が個々に参照により組み込まれるのと同程度に、その全体が参照により組み込まれる。本出願と本明細書で提供される参考文献との間に矛盾が存在する場合、本出願が支配するものとする。

Claims (60)

1. 癌を有する対象を処置する方法であって、前記対象に式Ｉ：
   

   

   の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を治療有効量で、ＥＧＦＲ阻害剤と組み合わせて投与することを含む、方法。
2. 対象におけるＥＧＦＲは構成的に発現される、請求項１に記載の方法。
3. 前記癌は、ＥＧＦＲ遺伝子コピー数増加、ＥＧＦＲ遺伝子増幅、染色体７多染色体、ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ、ＥＧＦＲエキソン１９欠失／挿入（例えば、Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ、Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌｉｎｓＩ、Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌｉｎｓＩＰ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＡ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＶ、Ｅ７４６＿Ｓ７５２ｄｅｌｉｎｓＶ、Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ、Ｌ７４７＿Ｔ７５１ｄｅｌ、およびＬ７４７＿Ｐ７５３ｄｅｌｉｎｓＳ）、ＥＧＦＲ Ｌ８６１Ｑ、 ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ｃ、ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ｓ、ＥＧＦＲ Ｇ７１９Ａ、ＥＧＦＲ Ｖ７６５Ａ、ＥＧＦＲ Ｔ７８３Ａ、ＥＧＦＲエキソン２０挿入（例えば、Ｎ７７１ｄｕｐ、Ｎ７７１＿Ｈ７７３ｄｕｐ、およびＰ７７２＿Ｈ７７３ｄｕｐ）、ＥＧＦＲスプライスバリアント（例えば、Ｖｉｉｉ、Ｖｖｉ、およびＶｉｉ）、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｄ、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｔ、ＥＧＦＲ Ａ２８９Ｖ、ＥＧＦＲＧ５９８Ａ、ＥＧＦＲ Ｇ５９８Ｖ、ＥＧＦＲ Ｔ７９０Ｍ、およびＥＧＦＲ Ｃ７９７Ｓから選択されるＥＧＦＲ変異を含む、請求項１に記載の方法。
4. 前記癌は肺癌である、請求項１または２に記載の方法。
5. 前記癌は腺癌である、請求項１または２に記載の方法。
6. 前記癌は膵管腺癌（ＰＤＡＣ）である、請求項１または２に記載の方法。
7. 前記ＥＧＦＲ阻害剤は、オシメルチニブ、ダコミチニブ、ラゼルチニブ、ナザルチニブ、ネラチニブ、モボセルチニブ、アファチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、リフィラフェニブ、アミバンタマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ネシツムマブ、ミゾタマブクレズトクラックス、ニモツズマブおよびバンデタニブから選択される、請求項１～６のいずれか１つに記載の方法。
8. 前記ＥＧＦＲ阻害剤はオシメルチニブである、請求項１～６のいずれか１つに記載の方法。
9. 前記ＥＧＦＲ阻害剤はエルロチニブである、請求項１～６のいずれか１つに記載の方法。
10. 前記ＥＧＦＲ阻害剤はゲフィチニブである、請求項１～６のいずれか１つに記載の方法。
11. 前記ＥＧＦＲ阻害剤はラパチニブである、請求項１～６のいずれか１つに記載の方法。
12. 前記ＥＧＦＲ阻害剤はネラチニブである、請求項１～６のいずれか１つに記載の方法。
13. 前記ＥＧＦＲ阻害剤はアファチニブである、請求項１～６のいずれか１つに記載の方法。
14. 前記方法は、第３のＭＡＰＫ経路阻害剤を投与する工程を含む、請求項１～１３のいずれか１つに記載の方法。
15. 前記投与は経口である、請求項１～１４のいずれか１つに記載の方法。
16. 前記式Ｉの化合物の投与量は、１日２０ｍｇ～４００ｍｇの範囲である、請求項１～１５のいずれか１つに記載の方法。
17. 前記ＥＧＦＲ阻害剤の投与量は、１日１ｍｇ～１５００ｍｇの範囲である、請求項１～１６のいずれか１つに記載の方法。
18. 対象の肺癌を処置する方法であって、前記対象に式Ｉ：
    

    

    の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を治療有効量で、オシメルチニブと組み合わせて経口投与することを含む、方法。
19. 前記式Ｉの化合物は、１日１回または２回投与される、請求項１８に記載の方法。
20. 前記オシメルチニブは、１日１回または２回投与される、請求項１８または１９に記載の方法。
21. 前記対象はヒトである、請求項１８～２０のいずれか１つに記載の方法。
22. 前記肺癌は、非小細胞肺癌である、請求項１８～２１のいずれか１つに記載の方法。
23. 前記肺癌は、ＥＧＦＲ変異を有する、請求項１８～２２のいずれか１つに記載の方法。
24. 式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩とＥＧＦＲ阻害剤とを含むキット。
25. 前記式Ｉの化合物および前記ＥＧＦＲ阻害剤は、別々のパッケージにある、請求項２４に記載のキット。
26. 前記キットの内容物を癌の処置のために対象に投与するための説明書をさらに含む、請求項２４または２５に記載のキット。
27. 前記ＥＧＦＲ阻害剤は、オシメルチニブ、ダコミチニブ、ラゼルチニブ、ナザルチニブ、ネラチニブ、モボセルチニブ、アファチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、リフィラフェニブ、アミバンタマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ネシツムマブ、ミゾタマブクレズトクラックス、ニモツズマブおよびバンデタニブのうち１つ以上である、請求項２４～２６のいずれか１つに記載のキット。
28. 対象の癌を処置する方法であって、前記対象に式Ｉ：
    

    

    の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を治療有効量で、セツキシマブと組み合わせて経口投与することを含む、方法。
29. セツキシマブは毎週投与される、請求項２８に記載の方法。
30. セツキシマブは隔週で投与される、請求項２８または２９に記載の方法。
31. 前記癌は、扁平細胞頭頚部癌（ＳＣＣＨＮ）である、請求項２８～３０のいずれか１つに記載の方法。
32. 前記癌は、大腸癌または頭頚部扁平細胞癌である、請求項２８～３０のいずれか１つに記載の方法。
33. 前記癌はＨＰＶ陰性である、請求項２８～３０のいずれか１つに記載の方法。
34. 前記癌は、ｗｔＫＲＡＳ／ｗｔＮＲＡＳ／ｗｔＢＲＡＦである、請求項２８～３０のいずれか１つに記載の方法。
35. 前記癌は、ＫＲＡＳ、ＮＲＡｓ、またはＢＲＡＦにおいて変異を有していない、請求項２８～３０のいずれか１つに記載の方法。
36. 前記癌は膵管腺癌（ＰＤＡＣ）である、請求項２８～３０のいずれか１つに記載の方法。
37. 前記対象はヒトである、請求項２８～３６のいずれか１つに記載の方法。
38. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日に約２０ｍｇ～約２６０ｍｇの間の投与量で投与される、請求項１～３７のいずれか１つに記載の方法。
39. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日に約２０ｍｇ～約６０ｍｇの間の投与量で投与される、請求項１～３８のいずれか１つに記載の方法。
40. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日に約４０ｍｇ、または１日に約６０ｍｇの投与量で投与される、請求項１～３９のいずれか１つに記載の方法。
41. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、約１０ｍｇ～約１００ｍｇの投与量で１日２回投与される、請求項１～３７のいずれか１つに記載の方法。
42. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、約２０ｍｇ～約８０ｍｇの間の投与量で１日２回投与される、請求項１～３７のいずれか１つに記載の方法。
43. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、医薬組成物として製剤化される、請求項１～４２のいずれか１つに記載の方法。
44. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、経口組成物として製剤化される、請求項４３に記載の方法。
45. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、１日１回または２回投与される、請求項１～４４のいずれか１つに記載の方法。
46. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２８日サイクルにわたり連続的に投与される、請求項１～４５のいずれか１つに記載の方法。
47. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、約１０ｍｇ～約１４０ｍｇの量で１日１回投与される、請求項１～４６のいずれか１つに記載の方法。
48. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、化合物の２週間の投与とその後の化合物の１週間の非投与を含む３週間のサイクルで１日１回投与される、請求項１～４７のいずれか１つに記載の方法。
49. 式Ｉの前記化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで１日１回投与される、請求項１～４７のいずれか１つに記載の方法。
50. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、６週間の期間にわたって投与される、請求項１～４９のいずれか１つに記載の方法。
51. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される、請求項１～４９のいずれか１つに記載の方法。
52. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週３回投与される、請求項１～５１のいずれか１つに記載の方法。
53. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週の１日目、３日目、および５日目に投与される、請求項５２に記載の方法。
54. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週４回投与される、請求項１～５３のいずれか１つに記載の方法。
55. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、２週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む３週間サイクルで１日１回投与される、請求項５４に記載の方法。
56. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、３週間の化合物投与とその後の１週間の化合物非投与を含む４週間サイクルで投与される、請求項５４に記載の方法。
57. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、週２日で１日２回投与される、請求項１～５６のいずれか１つに記載の方法。
58. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、８週間の期間にわたって投与される、請求項１～５７のいずれか１つに記載の方法。
59. 前記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、各週の１日目および２日目に投与される、請求項５７または５８に記載の方法。
60. 前記癌は、肺癌、胃癌、肝臓癌、結腸癌、腎癌、乳癌、膵臓癌、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）、若年性骨髄単球性白血病、神経芽細胞腫、黒色腫、および急性骨髄性白血病から選択される、請求項１～５９のいずれか１つに記載の方法。