JP2023543360A - Ｄｌｘ２ベクター - Google Patents
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Abstract
本開示は、ＡＡＶベクターにおけるＤｌｘ２コード配列の使用によるグリア細胞のニューロンへの変換に関連するＡＡＶベクター、組成物、及び方法に関する。【選択図】図１Ａ
Description
関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年９月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／０８４，９２７号及び２０２１年９月２３日に出願された米国仮特許出願第６３／２４７，４１７号の優先権を主張し、それらの内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２０年９月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／０８４，９２７号及び２０２１年９月２３日に出願された米国仮特許出願第６３／２４７，４１７号の優先権を主張し、それらの内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
配列表の援用
１９，８５９バイト（ＭＳ－Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）で測定）であり、２０２１年９月２７日に作成されたＰ３４８３６ＷＯ００＿ＳＬ．ｔｘｔという名前のファイルに含まれる配列表は、本明細書と共に電子的に提出され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
１９，８５９バイト（ＭＳ－Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）で測定）であり、２０２１年９月２７日に作成されたＰ３４８３６ＷＯ００＿ＳＬ．ｔｘｔという名前のファイルに含まれる配列表は、本明細書と共に電子的に提出され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本開示は、グリア細胞をニューロンに変換させるヒトＤｌｘ２をコードする核酸配列を含むＡＡＶベクターを使用する方法及び組成物を含む。
ニューロンは、神経学的状態を有する対象において、又は中枢神経系（ＣＮＳ）若しくは末梢神経系（ＰＮＳ）への傷害後、しばしば死滅するか又は損傷され、再生することができない。
グリア細胞は、脳傷害又は神経学的状態などのＣＮＳ又はＰＮＳへの傷害の後に反応する。
現在、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を使用して、神経学的状態を有するヒト対象において機能的な新しいニューロンを再生するための利用可能な方法はない。
一態様では、本開示は、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、かつそれを含み、ｈＤｌｘ２配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、又は配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、かつそれを含み、コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）タンパク質をコードするＤｌｘ２核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、かつそれを含み、コード配列が、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）ポリアデニル化シグナル配列と、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含み、コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、治療を必要とする対象の治療のためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）ポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含む。
一態様では、本開示は、生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、グリア細胞をニューロンに変換することを必要とする対象において、それを行う方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に送達することを含み、ＡＡＶが、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）ポリアデニル化シグナル配列と、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、ベクターが、それを必要とする対象において、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる。
一態様では、本開示は、神経学的状態の治療を必要とする対象において、それを行う方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を対象に送達することを含み、ＡＡＶが、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）それを必要とする対象へのポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含む。
一態様では、本開示は、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、かつそれを含み、ｈＤｌｘ２配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、かつそれを含み、当該コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、当該ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、当該配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、当該ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸配列を含むｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含み、当該コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される。
配列の簡単な説明
表１に、核酸配列及びアミノ酸配列のリストを提供する。
表１に、核酸配列及びアミノ酸配列のリストを提供する。
別途定義されない限り、使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野における当業者によって一般に理解されるものと同一の意味を有する。用語が単数形で記載される場合、本発明者らはまた、その用語の複数形によって説明される本開示の態様も企図する。参照によって組み込まれる参考文献で使用される用語及び定義に矛盾がある場合、本出願で使用される用語は、本明細書で与えられる定義を有するものとする。使用される他の専門用語は、当該技術分野専門の様々な辞書、例えば、“Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｈｅｒｉｔａｇｅ（登録商標）Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ”（Ｅｄｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｈｅｒｉｔａｇｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｉｅｓ，２０１１，Ｈｏｕｇｈｔｏｎ Ｍｉｆｆｌｉｎ Ｈａｒｃｏｕｒｔ，Ｂｏｓｔｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）、“ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｔｅｒｍｓ”（６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，２００２，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）、又は“Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ”（６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，２００８，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）によって例示されているような、それらが使用される技術分野における通常の意味を有する。
例えば、全ての特許、公開された特許出願、及び非特許文献を含む、本明細書で引用される任意の参考文献は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
選択肢の群化が提示される場合、その選択肢の群化を構成するメンバーの任意の組み合わせ及び全ての組み合わせが具体的に想定される。例えば、項目が、Ａ、Ｂ、Ｃ、及びＤからなる群から選択される場合、発明者らは、各代替例を個別に（例えば、Ａ単独、Ｂ単独など）、並びにＡ、Ｂ、及びＤ、Ａ及びＣ、Ｂ及びＣなどの組み合わせを具体的に想定する。「及び／又は」という用語は、２つ以上の項目のリストにおいて使用される場合、それ自体で、又は他の列挙された項目のうちのいずれか１つ以上と組み合わせて、列挙された項目のうちのいずれか１つを意味する。例えば、「Ａ及び／又はＢ」という表現は、Ａ及びＢのいずれか又は両方、すなわち、Ａ単独、Ｂ単独、又はＡ及びＢの組み合わせを意味することを意図している。「Ａ、Ｂ、及び／又はＣ」という表現は、Ａ単独、Ｂ単独、Ｃ単独、Ａ及びＢの組み合わせ、Ａ及びＣの組み合わせ、Ｂ及びＣの組み合わせ、又はＡ、Ｂ、及びＣの組み合わせを意味することを意図している。
数値の範囲が本明細書で提供される場合、範囲は、範囲の端及び定義された範囲の端の間の任意の数字を含むと理解される。例えば、「１～１０」は、１～１０の任意の数字、並びに数字１及び数字１０を含む。
数値に関して「約（ａｂｏｕｔ）」という用語が使用される場合、プラス又はマイナス１０％を意味すると理解される。例えば、「約１００」には、９０～１１０が含まれる。
本明細書に提供される任意の組成物又はベクターは、本明細書に提供される任意の方法で使用するために具体的に想定される。
一態様では、本明細書に提供される方法及び組成物は、ベクターを含む。本明細書で使用される場合、「ベクター」という用語は、染色体ＤＮＡから物理的に分離された環状の二本鎖ＤＮＡ分子を指す。「ベクター」という用語は、「プラスミド」という用語と互換的に使用され得ることに留意されたい。
一態様では、本明細書に提供されるベクターは、組換えベクターである。本明細書で使用される場合、「組換えベクター」という用語は、組換え核酸を含むベクターを指す。本明細書で使用される場合、「組換え核酸」は、限定されないが、分子クローニングなどの遺伝子組換えの実験室法によって形成される核酸分子を指す。組換えベクターは、限定されないが、分子クローニングなどの遺伝子組換えの実験室法によって形成され得る。また、限定されないが、当業者は、個々のヌクレオチドによってプラスミドを合成することによって、又は異なる既存のベクターからの核酸分子を一緒にスプライシングすることによって、組換えベクターを新規に作製することができる。
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、ヒト及び追加の霊長類種に感染する複製欠陥非エンベロープ型ディペンドパルボウイルスである。ＡＡＶは、いかなる種においても疾患を引き起こすことは知られていないが、軽度の免疫応答を引き起こす可能性がある。ＡＡＶは、分裂細胞及び静止細胞に感染することができる。ＡＡＶは、ＡＡＶＳ１遺伝子座（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＣ０１０３２７．８のヌクレオチド７７７４～１１４２９）と呼ばれる染色体１９の特定の部位でヒトゲノムに安定して組み込まれるが、ヒトゲノムの他の遺伝子座でのランダムな組み込みも可能である。
ＡＡＶは、約４７００ヌクレオチド長の一本鎖ＤＮＡを有する直鎖ゲノムを含む。ＡＡＶのゲノムはまた、ゲノムの各末端に１４５ヌクレオチド長の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む。ＩＴＲは、２つのウイルス遺伝子であるｒｅｐ（複製のために非構造タンパク質をコードする）及びｃａｐ（カプシドのために構造タンパク質をコードする）に隣接する。ＩＴＲには、ＡＡＶのゲノムレスキュー、複製、及びパッケージングに必要な全てのシス作用エレメントが含まれている。
遺伝子療法アプローチで使用される場合、ＡＡＶゲノム配列のｒｅｐ及びｃａｐ遺伝子は除去され、２つのＡＡＶ ＩＴＲの間に配置される目的のＤＮＡで置き換えられる。本明細書で使用される場合、「ＡＡＶベクター構築物」は、２つのＡＡＶ ＩＴＲ配列間に挿入される所望の配列を含むＤＮＡ分子を指す。本明細書で使用される場合、「ＡＡＶベクター」は、ＤＮＡベクター構築物と共にパッケージングされたＡＡＶを指す。
本明細書で使用される場合、「ＡＡＶベクター血清型」という用語は、主に、ＡＡＶベクターのカプシドタンパク質内のバリエーションを指す。
本明細書で使用される場合、「ｖｇ」は、ＡＡＶ力価の決定の文脈におけるウイルスゲノムを指す。
一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶベクター血清型１、ＡＡＶベクター血清型２、ＡＡＶベクター血清型３、ＡＡＶベクター血清型４、ＡＡＶベクター血清型５、ＡＡＶベクター血清型６、ＡＡＶベクター血清型７、ＡＡＶベクター血清型８、ＡＡＶベクター血清型９、ＡＡＶベクター血清型１０、ＡＡＶベクター血清型１１、及びＡＡＶベクター血清型１２からなる群から選択される。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型２、ＡＡＶ血清型５、及びＡＡＶ血清型９からなる群から選択される。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型１である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型２である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型３である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型４である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型５である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型６である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型７である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型８である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型９である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型１０である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型１１である。一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶ血清型１２である。
一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型１のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型２のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型３のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型４のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型５のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型６のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型７のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型８のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型９のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型１０のＩＴＲ、ＡＡＶ血清型１１のＩＴＲ、及びＡＡＶ血清型１２のＩＴＲからなる群から選択される。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型１のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型２のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型３のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型４のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型５のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型６のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型７のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型８のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型９のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型１０のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型１１のＩＴＲである。一態様では、ＡＡＶベクターのＩＴＲは、ＡＡＶ血清型１２のＩＴＲである。
一態様では、少なくとも１つのＡＡＶベクターのＩＴＲの核酸配列は、配列番号１及び９からなる群から選択される。一態様では、少なくとも１つのＡＡＶベクターのＩＴＲの核酸配列は、配列番号１である。一態様では、少なくとも１つのＡＡＶベクターのＩＴＲの核酸配列は、配列番号９である。
一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１、又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号１又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＡＡＶ ＩＴＲの核酸配列は、配列番号９又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
２つ以上のヌクレオチド又はアミノ酸配列に関して本明細書で使用される「パーセント同一性」又は「パーセント同一」という用語は、（ｉ）比較のウィンドウ（「整列可能な」領域）にわたって２つの最適に整列された配列（ヌクレオチド又はアミノ酸）を比較し、（ｉｉ）両方の配列で同一の核酸塩基（ヌクレオチド配列の場合）又はアミノ酸残基（タンパク質及びポリペプチドの場合）が生じる位置の数を決定して、一致した位置の数を得、（ｉｉｉ）一致した位置の数を比較ウィンドウの位置の総数で割り、次いで、（ｉｖ）この商に１００％を掛けて、パーセント同一性を得ることによって計算される。「パーセント同一性」が特定の比較ウィンドウを指定せずに参照配列に関連して計算されている場合、パーセント同一性は、整列領域にわたる一致した位置の数を参照配列の全長で割ることによって決定される。したがって、本出願の目的のために、２つの配列（クエリ及び対象）が最適に整列されている場合（それらの整列のギャップを考慮して）、クエリ配列の「パーセント同一性」は、２つの配列間の同一の位置の数をその長さ（又は比較ウィンドウ）にわたってクエリ配列の位置の総数で割って、それに１００％を掛けたものと等しい。
配列同一性のパーセンテージがアミノ酸に関して使用される場合、同一ではない残基位置は、保存的アミノ酸置換（アミノ酸残基が、同様の化学的特性（例えば、電荷又は疎水性）を有し、したがって、分子の機能的特性を変化させない他のアミノ酸残基で置換されている）によってしばしば異なることが認識される。配列が保存的置換で異なる場合、パーセント配列同一性を、置換の保存的性質について補正するために上向きに調整することができる。そのような保存的置換によって異なる配列は、「配列類似性」又は「類似性」を有すると言われる。
パーセント同一性を計算するための配列の最適な整列のために、２つ以上のヌクレオチド又はアミノ酸配列間の配列同一性又は類似性を比較するために使用することができるＣｌｕｓｔａｌＷ又はＢａｓｉｃ Ｌｏｃａｌ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ Ｓｅａｒｃｈ Ｔｏｏｌ（登録商標）（ＢＬＡＳＴ（商標））などの様々なペアワイズ又は多重配列整列アルゴリズム及びプログラムが当該技術分野で既知である。他の整列及び比較方法が、当該技術分野で既知であるが、２つの配列間の整列及びパーセント同一性（上記のパーセント同一性の範囲を含む）は、ＣｌｕｓｔａｌＷアルゴリズムによって決定され得る。例えば、Ｃｈｅｎｎａ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｃｌｕｓｔａｌ ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｓ，”Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ３１：３４９７－３５００（２００３）、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｌｕｓｔａｌ Ｗ：Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｗｅｉｇｈｔｉｎｇ，ｐｏｓｉｔｉｏｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｇａｐ ｐｅｎａｌｔｉｅｓ ａｎｄ ｗｅｉｇｈｔ ｍａｔｒｉｘ ｃｈｏｉｃｅ，”Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２２：４６７３－４６８０（１９９４）、Ｌａｒｋｉｎ ＭＡ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｌｕｓｔａｌ Ｗ ａｎｄ Ｃｌｕｓｔａｌ Ｘ ｖｅｒｓｉｏｎ ２．０，”Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２３：２９４７－４８（２００７）、及びＡｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．“Ｂａｓｉｃ ｌｏｃａｌ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｓｅａｒｃｈ ｔｏｏｌ．”Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０（１９９０）を参照されたい（それらの内容及び開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる）。
２つのヌクレオチド配列に関して本明細書で使用される「パーセント相補性」又は「パーセント相補」という用語は、パーセント同一性の概念に類似しているが、クエリ及び対象配列が直線的に配置され、ループ、ステム、又はヘアピンなどの二次フォールディング構造なしで最適に塩基対形成された場合、対象配列をヌクレオチドに最適に塩基対形成又はハイブリダイズするクエリ配列のヌクレオチドのパーセントを指す。かかるパーセント相補性は、２つのＤＮＡ鎖、２つのＲＮＡ鎖、又はＤＮＡ鎖とＲＮＡ鎖との間であり得る。「パーセント相補性」は、（ｉ）比較のウィンドウにわたって直線的にかつ完全に伸長した配置で２つのヌクレオチド配列を最適に塩基対形成又はハイブリダイズさせ（すなわち、フォールディング又は二次構造なしで）、（ｉｉ）比較のウィンドウにわたって２つの配列間の塩基対の位置の数を決定して、相補的な位置の数を得、（ｉｉｉ）相補的な位置の数を比較ウィンドウの位置の総数で割り、（ｉｖ）この商に１００％を掛けて、２つの配列のパーセント相補性を得ることによって計算することができる。２つの配列の最適な塩基対形成は、水素結合を介して、Ｇ－Ｃ、Ａ－Ｔ、及びＡ－Ｕなどのヌクレオチド塩基の既知の対形成に基づいて決定することができる。「パーセント相補性」が、特定の比較ウィンドウを指定せずに参照配列に関連して計算される場合、パーセント同一性は、２つの直線的な配列間の相補的な位置の数を参照配列の全長で割ることによって決定される。したがって、本出願の目的のために、２つの配列（クエリ及び対象）が最適に塩基形成された場合（ミスマッチ又は非塩基対形成ヌクレオチドを許容する場合）、クエリ配列の「パーセント相補性」は、２つの配列間の塩基対形成の位置の数をその長さにわたるクエリ配列の位置の総数で割って、これに１００％を掛けたものと等しくなる。
「ポリヌクレオチド」、「核酸配列」、又は「核酸分子」という用語の使用は、本開示を、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）を含むポリヌクレオチドに限定することを意図するものではない。例えば、リボ核酸（ＲＮＡ）分子も想定される。当業者であれば、ポリヌクレオチド及び核酸分子が、リボヌクレオチド並びにリボヌクレオチド及びデオキシリボヌクレオチドの組み合わせを含むことができることを認識するであろう。かかるデオキシリボヌクレオチド及びリボヌクレオチドは、天然に存在する分子及び合成類似体の両方を含む。本開示のポリヌクレオチドはまた、一本鎖形態、二本鎖形態、ヘアピン、ステム及びループ構造などを含むが、これらに限定されない配列の全ての形態を包含する。一態様では、本明細書に提供される核酸分子は、ＤＮＡ分子である。一態様では、本明細書に提供される核酸分子は、ＲＮＡ分子である。一態様では、本明細書に提供される核酸分子は、一本鎖である。一態様では、本明細書に提供される核酸分子は、二本鎖である。核酸分子は、ポリペプチド又は低分子ＲＮＡをコードすることができる。
本明細書で使用される場合、「ポリペプチド」という用語は、少なくとも２つの共有結合したアミノ酸の鎖を指す。ポリペプチドは、本明細書に提供されるポリヌクレオチドによってコードされ得る。本明細書に提供されるタンパク質は、本明細書に提供される核酸分子によってコードされ得る。タンパク質は、本明細書に提供されるポリペプチドを含むことができる。本明細書で使用される場合、「タンパク質」は、細胞に構造又は酵素活性を提供することができるアミノ酸残基の鎖を指す。本明細書で使用される場合、「コード配列」は、タンパク質をコードする核酸配列を指す。
本明細書で使用される場合、「ＣｐＧ部位」又は「ＣＧ部位」という用語は、シトシン及びグアニンが１つのリン酸基によってのみ分離されているＤＮＡ配列の領域を指す。
本明細書で使用される場合、「ＣＧ島」の「ＣｐＧ島」という用語は、高頻度で発生するＣｐＧ部位を指す。
本明細書で使用される場合、「コドン」という用語は、３つのヌクレオチドの配列を指す。
本明細書で使用される場合、「コドン最適化」という用語は、元のアミノ酸配列を維持しながら、配列の少なくとも１つのコドンを、宿主細胞の遺伝子においてより頻繁に又は最も頻繁に使用されるコドンで置き換えることによって、目的の宿主細胞における発現の増強のために改変されるコードを指す。
本明細書で使用される場合、「エンハンサー」という用語は、少なくとも特定の組織、発生段階、及び／又は状態において、関連する転写可能なＤＮＡ配列又はコード配列の転写及び発現を開始、支援、影響、起因、及び／又は促進するように作動するＤＮＡ配列の領域を指す。一態様では、エンハンサーは、シスエンハンサーである。一態様では、エンハンサーは、トランスエンハンサーである。
本明細書で使用される場合、「ＣＥ」は、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターエンハンサー配列を指す。
本明細書で使用される場合、「ＥＥ」は、Ｅｆ１αプロモーターエンハンサー配列を指す。
エンハンサー配列は、当該技術分野で既知のゲノム技術を利用することによって同定することができる。非限定的な例としては、レポーター遺伝子及び次世代配列決定方法、例えば、クロマチン免疫沈降配列決定（ＣｈＩＰ－ｓｅｑ）、ＤＮａｓｅＩ過感受性配列決定（ＤＮａｓｅ－ｓｅｑ）、小球菌ヌクレアーゼ配列決定（ＭＮａｓｅ－ｓｅｑ）、調節エレメントのホルムアルデヒド支援単離配列決定（ＦＡＩＲＥ－ｓｅｑ）、及びトランスポザーゼアクセス可能クロマチン配列決定のためのアッセイ（ＡＴＡＣ－ｓｅｑ）の使用が挙げられる。
本明細書で使用される場合、「作動可能に連結された」という用語は、プロモーター又は他の調節エレメントと、関連する転写可能なＤＮＡ配列又は遺伝子（又は導入遺伝子）のコード配列との間の機能的連結を指し、そのため、プロモーターなどが、少なくとも特定の組織、発生段階、及び／又は状態において、関連する転写可能なＤＮＡ配列又はコード配列の転写及び発現を開始、支援、影響、起因、及び／又は促進するように作動する。本明細書で使用される場合、「調節エレメント」は、作動可能に連結された配列の発現を正又は負に調節する任意の配列エレメントを指す。「調節エレメント」には、細胞において遺伝子又は転写可能なＤＮＡ配列の発現を調節又は可能にするのに好適、必要、又は好ましい、プロモーター、エンハンサー、リーダー、転写開始部位（ＴＳＳ）、リンカー、５’及び３’非翻訳領域（ＵＴＲ）、イントロン、ポリアデニル化シグナル、及び終止領域又は配列などが含まれるが、これらに限定されない。このような追加の調節エレメントは任意選択的であり、遺伝子又は転写可能なＤＮＡ配列の発現を増強又は最適化するために使用することができる。
本明細書で使用される場合、「ｐ２Ａ」又は「Ｐ２Ａ」は、ブタテッショウウイルス－１からの２Ａ自己切断ペプチド配列を指す。一態様では、リンカーは、Ｐ２Ａ配列を含んでもよい。
本明細書で使用される場合、「プロモーター」という用語は、ＲＮＡポリメラーゼ結合部位、転写開始部位、及び／又はＴＡＴＡボックスを含み、かつ会合した転写可能なポリヌクレオチド配列及び／又は遺伝子（又は導入遺伝子）の転写及び発現を支援又は促進するＤＮＡ配列を指す。プロモーターは、既知の又は天然に存在するプロモーター配列若しくは他のプロモーター配列から、合成的に産生、変化、又は誘導され得る。プロモーターは、２つ以上の異種配列の組み合わせを含むキメラプロモーターも含むことができる。したがって、本出願のプロモーターは、プロモーター配列のバリアントを含むことができ、それらは、既知の又は本明細書に提供される他のプロモーター配列と組成が類似しているが、同一ではない。
本明細書で使用される場合、「イントロン」は、ｍＲＮＡ前駆体からメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）が成熟するとＲＮＡスプライシングによって除去される、ヌクレオチド配列を指す。
本明細書で使用される場合、「ｍＲＮＡ」又は「メッセンジャーＲＮＡ」は、遺伝子の遺伝子配列に対応する一本鎖ＲＮＡを指す。
ｍＲＮＡの発現は、当該技術分野で既知の任意の好適な方法を使用して測定され得る。ｍＲＮＡ発現を測定する非限定的な例としては、定量的逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＲＴ－ＰＣＲ）、ＲＮＡブロット（例えば、ノーザンブロット）、及びＲＮＡ配列決定が挙げられる。発現の違いは、絶対定量化又は相対定量化として説明され得る。例えば、Ｌｉｖａｋ ａｎｄ Ｓｃｈｍｉｔｔｇｅｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ，２５：４０２－４０８（２００１）を参照されたい。
本明細書で使用される場合、「ゲノム編集」又は「遺伝子編集」は、標的化編集技術を使用して、ゲノム内の目的のヌクレオチド配列の標的化された変異誘発、挿入、欠失、逆位、置換、又は転座を指す。目的のヌクレオチド配列は、任意の長さ、例えば、少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも３５、少なくとも４０、少なくとも４５、少なくとも５０、少なくとも７５、少なくとも１００、少なくとも２５０、少なくとも５００、少なくとも１０００、少なくとも２５００、少なくとも５０００、少なくとも１０，０００、又は少なくとも２５，０００ヌクレオチドであり得る。遺伝子編集技術の非限定的な例は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）技術、低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）技術、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）技術、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）技術、又はＣＲＩＳＰＲ／ＣＡＳ技術である。
本明細書で使用される場合、「ＡＳＯ」又は「アンチセンスオリゴヌクレオチド」は、細胞内の標的ＲＮＡ配列に結合し、遺伝子をサイレンシングさせる低分子の一本鎖核酸である。
本明細書で使用される場合、「コード領域」、「遺伝子領域」、又は「遺伝子」は、機能ユニットを生成することができるポリヌクレオチドを指す。非限定的な例としては、タンパク質又は非コードＲＮＡ分子が挙げられる。「コード領域」、「遺伝子」、又は「遺伝子領域」は、プロモーター、エンハンサー配列、リーダー配列、転写開始部位、転写終止部位、ポリアデニル化部位、１つ以上のエキソン、１つ以上のイントロン、５’－ＵＴＲ、３’－ＵＴＲ、又はそれらの任意の組み合わせを含むことができる。
一態様では、遺伝子編集は、変異体ハンチンチン（Ｈｔｔ）凝集体を標的とする。一態様では、遺伝子編集は、非コードＲＮＡ分子によるものである。非コードＲＮＡ分子の非限定的な例としては、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ｍｉＲＮＡ前駆体（ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子ＲＮＡ（１８～２６ヌクレオチド長）及びそれをコードする前駆体、ヘテロクロマチンｓｉＲＮＡ（ｈｃ－ｓｉＲＮＡ）、Ｐｉｗｉ相互作用ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）、ヘアピン二本鎖ＲＮＡ（ヘアピンｄｓＲＮＡ）、トランス作用性ｓｉＲＮＡ（ｔａ－ｓｉＲＮＡ）、天然に存在するアンチセンスｓｉＲＮＡ（ｎａｔ－ｓｉＲＮＡ）、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、トレーサーＲＮＡ（ｔｒａｃＲＮＡ）、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）、シングルガイドＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）が挙げられる。一態様では、ｓｈＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｓｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ＡＳＯは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｍｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｇＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、低分子ＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｈｃ－ｓｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｐｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ヘアピンｄｓＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｔａ－ｓｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｎａｔ－ｓｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｃｒＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｔｒａｃｒＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｓｇＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的とする。一態様では、ｓｈＲＮＡは、配列番号１５～１７からなる群から選択される核酸配列を含む。一態様では、ｓｈＲＮＡは、配列番号１５の核酸配列を含む。一態様では、ｓｈＲＮＡは、配列番号１６の核酸配列を含む。一態様では、ｓｈＲＮＡは、配列番号１７の核酸配列を含む。
本明細書で使用される場合、「ドナー分子」又は「ドナー配列」は、ゲノムへの部位特異的標的化挿入のために選択されている核酸配列として定義される。一態様では、ドナー分子は、「ドナー配列」を含む。一態様では、本明細書に提供される標的編集技術は、１つ以上、２つ以上、３つ以上、４つ以上、又は５つ以上のドナー分子又はドナー配列の使用を含む。本明細書に提供されるドナー分子又はドナー配列は、任意の長さのものであり得る。例えば、本明細書に提供されるドナー分子又はドナー配列は、２～５０，０００、２～１０，０００、２～５０００、２～１０００、２～５００、２～２５０、２～１００、２～５０、２～３０、１５～５０、１５～１００、１５～５００、１５～１０００、１５～５０００、１８～３０、１８～２６、２０～２６、２０～５０、２０～１００、２０～２５０、２０～５００、２０～１０００、２０～５０００、又は２０～１０，０００ヌクレオチド長である。
本明細書で使用される場合、「ＨＴＴ」は、Ｈｔｔ特異的ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）及び／又はドナー配列を指す。
本明細書に提供される部位特異的ヌクレアーゼは、標的化編集技術の一部として使用され得る。部位特異的ヌクレアーゼの非限定的な例としては、メガヌクレアーゼ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、ＲＮＡガイドヌクレアーゼ（例えば、Ｃａｓ９及びＣｐｆ１）、リコンビナーゼ（限定されないが、例えば、ＤＮＡ認識モチーフに結合したセリンリコンビナーゼ、ＤＮＡ認識モチーフに結合したチロシンリコンビナーゼ）、トランスポザーゼ（限定されないが、例えば、ＤＮＡ結合ドメインに結合したＤＮＡトランスポザーゼ）、又はそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
部位特異的ヌクレアーゼ、例えば、メガヌクレアーゼ、ＺＦＮ、ＴＡＬＥＮ、アルゴノートタンパク質（アルゴノートタンパク質の非限定的な例としては、Ｔｈｅｒｍｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓアルゴノート（ＴｔＡｇｏ）、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓアルゴノート（ＰｆＡｇｏ）、Ｎａｔｒｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｒｅｇｏｒｙｉアルゴノート（ＮｇＡｇｏ）、それらのホモログ、又はそれらの改変バージョンが挙げられる）、Ｃａｓ９ヌクレアーゼ（ＲＮＡガイドヌクレアーゼの非限定的な例としては、Ｃａｓ１、Ｃａｓ１Ｂ、Ｃａｓ２、Ｃａｓ３、Ｃａｓ４、Ｃａｓ５、Ｃａｓ６、Ｃａｓ７、Ｃａｓ８、Ｃａｓ９（Ｃｓｎ１及びＣｓｘ１２としても知られている）、Ｃａｓ１０、Ｃｓｙ１、Ｃｓｙ２、Ｃｓｙ３、Ｃｓｅ１、Ｃｓｅ２、Ｃｓｃ１、Ｃｓｃ２、Ｃｓａ５、Ｃｓｎ２、Ｃｓｍ２、Ｃｓｍ３、Ｃｓｍ４、Ｃｓｍ５、Ｃｓｍ６、Ｃｍｒ１、Ｃｍｒ３、Ｃｍｒ４、Ｃｍｒ５、Ｃｍｒ６、Ｃｓｂ１、Ｃｓｂ２、Ｃｓｂ３、Ｃｓｘ１７、Ｃｓｘ１４、Ｃｓｘ１０、Ｃｓｘ１６、ＣｓａＸ、Ｃｓｘ３、Ｃｓｘ１、Ｃｓｘ１５、Ｃｓｆ１、Ｃｓｆ２、Ｃｓｆ３、Ｃｓｆ４、Ｃｐｆ１、ＣａｓＸ、ＣａｓＹ、それらのホモログ、又はそれらの改変バージョンが挙げられる）は、ゲノム配列の標的部位で二本鎖ＤＮＡ切断を誘導し、その後、自然なプロセスによって修復される。次いで、配列の改変は、切断部位で生じ、これは、遺伝子破壊又は核酸配列の組み込みをもたらす逆位、欠失、又は挿入を含み得る。一態様では、本明細書に提供されるＲＮＡガイドヌクレアーゼは、Ｃａｓ１、Ｃａｓ１Ｂ、Ｃａｓ２、Ｃａｓ３、Ｃａｓ４、Ｃａｓ５、Ｃａｓ６、Ｃａｓ７、Ｃａｓ８、Ｃａｓ９（Ｃｓｎ１及びＣｓｘ１２としても知られている）、Ｃａｓ１０、Ｃｓｙ１、Ｃｓｙ２、Ｃｓｙ３、Ｃｓｅ１、Ｃｓｅ２、Ｃｓｃ１、Ｃｓｃ２、Ｃｓａ５、Ｃｓｎ２、Ｃｓｍ２、Ｃｓｍ３、Ｃｓｍ４、Ｃｓｍ５、Ｃｓｍ６、Ｃｍｒ１、Ｃｍｒ３、Ｃｍｒ４、Ｃｍｒ５、Ｃｍｒ６、Ｃｓｂ１、Ｃｓｂ２、Ｃｓｂ３、Ｃｓｘ１７、Ｃｓｘ１４、Ｃｓｘ１０、Ｃｓｘ１６、ＣｓａＸ、Ｃｓｘ３、Ｃｓｘ１、Ｃｓｘ１５、Ｃｓｆ１、Ｃｓｆ２、Ｃｓｆ３、Ｃｓｆ４、Ｃｐｆ１、ＣａｓＸ、ＣａｓＹ、それらのホモログ、又はそれらの改変バージョンからなる群から選択される。
一態様では、本明細書に記載の標的化編集技術は、ＲＮＡガイドヌクレアーゼの使用を含む。
特定の科学理論によって限定されるものではないが、ＣＲＩＳＰＲ／ＣＡＳヌクレアーゼは、細菌及び古細菌の適応免疫系の一部であり、配列依存的な様式で標的ＤＮＡを切断することによってウイルスなどの侵入核酸からそれらを保護する。免疫は、侵入ＤＮＡの短い断片（スペーサーとして知られる）を、ＣＲＩＳＰＲ遺伝子座（ＣＲＩＳＰＲアレイ）の近位端の約２０ヌクレオチド長のＣＲＩＳＰＲ反復の間に組み込むことによって獲得される。よく記載されているＣａｓタンパク質は、Ｃａｓ９ヌクレアーゼ（Ｃｓｎ１としても知られている）であり、これは、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓのクラス２、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムの一部である。Ｍａｋａｒｏｖａ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ（２０１５）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｍｉｃｒｏ３５６９を参照されたい。Ｃａｓ９は、そのアミノ末端にＲｕｖＣ様ヌクレアーゼドメインと、タンパク質の中央に位置するＨＮＨ様ヌクレアーゼドメインと、を含む。Ｃａｓ９タンパク質はまた、ＰＡＭ相互作用（ＰＩ）ドメイン、認識ローブ（ＲＥＣ）、及びＢＨドメインも含む。別のＩＩ型系であるＣｐｆ１ヌクレアーゼは、Ｃａｓ９と同様の様式で作用するが、Ｃｐｆ１は、ｔｒａｃｒＲＮＡを必要としない。Ｃｏｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ（２０１３）３３９：８１９－８２３；Ｚｅｔｓｃｈｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ（２０１５）ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｅｌｌ．２０１５．０９．０３８、米国特許公開第２０１４／００６８７９７号、米国特許公開第２０１４／０２７３２３５号、米国特許公開第２０１５／００６７９２２号、米国特許第８，６９７，３５９号、米国特許第８，７７１，９４５号、米国特許第８，７９５，９６５号、米国特許第８，８６５，４０６号、米国特許第８，８７１，４４５号、米国特許第８，８８９，３５６号、米国特許第８，８８９，４１８号、米国特許第８，８９５，３０８号、及び米国特許第８，９０６，６１６号を参照されたい（それらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
一態様では、本開示は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、Ｃａｓ９ヌクレアーゼ遺伝子、Ｈｔｔ特異的ｇＲＮＡ、及びドナー配列を含む。一態様では、本開示は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、Ｃａｓ９ヌクレアーゼ遺伝子、Ｈｔｔ特異的ｇＲＮＡ、ドナー配列、及びＤｌｘ２遺伝子配列を含む。一態様では、本開示は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、Ｃａｓ９ヌクレアーゼ遺伝子、Ｈｔｔ特異的ｓｈＲＮＡ、及びドナー配列を含む。一態様では、本開示は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、Ｃａｓ９ヌクレアーゼ遺伝子、Ｈｔｔ特異的ｓｈＲＮＡ、ドナー配列、及びＤｌｘ２遺伝子配列を含む。
本明細書で使用される場合、「グリア」又は「グリア細胞」という用語は、ＣＮＳ又はＰＮＳ内の非神経細胞を指す。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞は、少なくとも１つのオリゴデンドロサイト、少なくとも１つのアストロサイト、少なくとも１つのＮＧ２細胞、少なくとも１つの上衣細胞、及び少なくとも１つのミクログリアからなる群から選択される。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞は、少なくとも１つのオリゴデンドロサイトである。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞は、少なくとも１つのＮＧ２細胞である。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞は、少なくとも１つの上衣細胞である。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞は、少なくとも１つのミクログリアである。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞は、少なくとも１つの反応性アストロサイトである。一態様では、少なくとも１つのアストロサイトは、少なくとも１つの反応性アストロサイトである。
本明細書で使用される場合、「アストロサイト」という用語は、脳の重要な構成要素であるグリア細胞を指す。アストロサイトは、シナプス形成及び可塑性、カリウム緩衝、栄養供給、神経又はグリア伝達物質の分泌及び吸収、並びに血液脳関門の維持などの神経機能のサポートに関与する。本明細書で使用される場合、「反応性アストロサイト」という用語は、傷害又は疾患後のアストロサイトの異常な状態を指す。
本明細書で使用される場合、「ＮＧ２細胞」又は「ポリデンドロサイト」という用語は、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（ＣＳＰＧ４）及び血小板由来増殖因子のα受容体（ＰＤＧＦＲＡ）を発現するグリア細胞を指す。
本明細書で使用される場合、「ニューロン」又は「神経細胞」という用語は、シナプスを介して他のニューロンと通信する電気的に励起の細胞を指す。一態様では、ニューロンは、単極ニューロン、双極ニューロン、擬単極ニューロン、及び多極ニューロンからなる群から選択される。一態様では、ニューロンは、単極ニューロンである。一態様では、ニューロンは、双極ニューロンである。一態様では、ニューロンは、擬単極ニューロンである。一態様では、ニューロンは、双極ニューロンである。一態様では、ニューロンは、感覚ニューロン、運動ニューロン、及び介在ニューロンからなる群から選択される。一態様では、ニューロンは、感覚ニューロンである。一態様では、ニューロンは、運動ニューロンである。一態様では、ニューロンは、介在ニューロンである。
本明細書で使用される場合、「機能的なニューロン」という用語は、生物学的プロセスを実行することができるニューロンを指す。限定されないが、生物学的プロセスの例としては、化学シナプス及び電気シナプスを介した情報及び通信の処理及び伝達が挙げられる。
本明細書で使用される場合、「グルタミン酸作動性ニューロン」という用語は、グルタミン酸を産生し、興奮性シナプスを確立するニューロンのサブクラスを指す。本明細書で使用される場合、「興奮性シナプス」という用語は、シナプス前ニューロンにおける活動電位が、シナプス後細胞で発生する活動電位の確率を増加させるシナプスを指す。本明細書で使用される場合、「活動電位」又は「神経インパルス」という用語は、軸索の膜を横切る電気インパルスを指す。本明細書で使用される場合、「軸索」又は「神経線維」という用語は、活動電位を伝導するニューロンを指す。本明細書で使用される場合、「ＧＡＢＡ作動性ニューロン」という用語は、ＧＡＢＡを生成し、抑制性シナプスを確立するニューロンのサブセットを指す。本明細書で使用される場合、「ＧＡＢＡ」又は「γアミノ酪酸」という用語は、イオンチャネルを開いて、負に帯電した塩化物イオンを細胞に流入させるか、又は正に帯電したカリウムイオンを細胞から流出させることを可能にする化合物を指す。本明細書で使用される場合、「抑制性シナプス」という用語は、シナプス後ニューロンの膜電位を、活動電位を生成するための閾値から遠ざけるシナプスを指す。本明細書で使用される場合、「ドーパミン作動性ニューロン」という用語は、ドーパミンを産生するニューロンのサブセットを指す。本明細書で使用される場合、「ドーパミン」という用語は、神経伝達物質の一種を指す。本明細書で使用される場合、「神経伝達物質」という用語は、神経伝達を活性化する内因性化学物質のクラスを指す。本明細書で使用される場合、「神経伝達」という用語は、ニューロンの軸索末端によって神経伝達物質が放出されるプロセスを指す。本明細書で使用される場合、「アセチルコリン作動性ニューロン」又は「コリン作動性ニューロン」という用語は、アセチルコリンを分泌するニューロンのサブセットを指す。本明細書で使用される場合、「アセチルコリン」という用語は、神経伝達物質の一種を指す。本明細書で使用される場合、「セロトニン作動性（ｓｅｒａｔｏｎｅｒｇｉｃ）ニューロン」という用語は、セロトニンを合成するニューロンのサブセットを指す。本明細書で使用される場合、「セロトニン」という用語は、神経伝達物質の一種を指す。本明細書で使用される場合、「エピネフリン作動性（ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅｒｇｉｃ）ニューロン」は、神経伝達物質としてエピネフリンを放出するニューロンを指す。本明細書で使用される場合、「運動ニューロン」という用語は、細胞体が運動皮質、脳幹、又は脊髄に位置し、軸索が脊髄又は脊髄の外側に投射し、筋肉及び腺を直接的又は間接的に制御する、ニューロンのサブセットを指す。本明細書で使用される場合、ペプチド作動性ニューロンという用語は、小さなペプチド分子を神経伝達物質として利用するニューロンのサブセットを指す。
一態様では、ニューロンは、機能的なニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される。一態様では、機能的なニューロンは、グルタミン酸作動性ニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、ＧＡＢＡ作動性ニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、ドーパミン作動性ニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、コリン作動性ニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、セロトニン作動性ニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、エピネフリン作動性ニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、運動ニューロンである。一態様では、機能的なニューロンは、ペプチド作動性ニューロンである。
本明細書で使用される場合、「変換」又は「変換された」という用語は、その物理的形態及び／又は生物学的機能を異なる物理的形態及び／又は異なる生物学的機能に変化させる細胞型を指す。一態様では、本開示は、少なくとも１つのグリア細胞を少なくとも１つのニューロンに変換することを提供する。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞の少なくとも１つのニューロンへの変換は、ＣＮＳ又はＰＮＳにおいて生じる。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞の少なくとも１つのニューロンへの変換は、ＣＮＳにおいて生じる。一態様では、少なくとも１つのグリア細胞の少なくとも１つのニューロンへの変換は、ＰＮＳにおいて生じる。
一態様では、本開示は、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、かつそれを含み、ｈＤｌｘ２配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル配列、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、配列番号１０の場合、アミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）タンパク質をコードするＤｌｘ２核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを提供し、かつそれを含み、コード配列が、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）ポリアデニル化シグナル配列と、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、又は配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含み、コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、治療を必要とする対象の治療のためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物を提供し、かつそれを含み、ＡＡＶベクターが、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）ポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含む。
一態様では、ＡＡＶベクターは、ＡＡＶタンパク質をコードする核酸配列を含む。一態様では、ＡＡＶベクターは、ウイルスタンパク質をコードする核酸配列を含む。ＡＡＶタンパク質及びウイルスタンパク質の非限定的な例としては、ｒｅｐ及びｃａｐタンパク質が挙げられる。
Ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２、ＴＥＳ１とも称される）は、Ｄｌｘ遺伝子ファミリーのメンバーであり、前脳及び頭蓋顔面の発生に役割を果たすホメオボックス含有遺伝子である。
一態様では、Ｄｌｘ２配列は、ヒトＤｌｘ２（ｈＤｌｘ２）配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、チンパンジーＤｌｘ２配列、ボノボＤｌｘ２配列、オランウータンＤｌｘ２配列、ゴリラＤｌｘ２配列、マカクＤｌｘ２配列、マーモセットＤｌｘ２配列、オマキザルＤｌｘ２配列、ヒヒＤｌｘ２配列、テナガザルＤｌｘ２配列、及びキツネザルＮｅｕｒｏＤ１配列からなる群から選択される。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、チンパンジーＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、ボノボＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、オランウータンＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、ゴリラＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、マカクＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、マーモセットＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、オマキザルＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、ヒヒＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、テナガザルＤｌｘ２配列である。一態様では、Ｄｌｘ２配列は、キツネザルＤｌｘ２配列である。
一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、Ｄｌｘ２核酸配列は、配列番号６又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも７０％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも７５％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも８０％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも８５％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９０％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９１％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９２％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９３％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９４％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９５％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９６％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９７％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９８％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９９％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９９．５％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９９．８％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と少なくとも９９．９％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。一態様では、核酸コード配列は、配列番号１０と１００％同一又は類似のアミノ酸配列を含むＤｌｘ２タンパク質をコードする。
グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）（グリア線維性酸性タンパク質とも称される）は、タンパク質のＩＩＩ型中間径フィラメントファミリーのメンバーであり、中枢神経系で発現され、細胞コミュニケーション及び血液脳関門の機能において役割を果たす。
一態様では、プロモーターは、ＧＦＡＰプロモーター、Ｓｏｘ９プロモーター、Ｓ１００ｂプロモーター、Ａ１ｄｈ１ｌ１プロモーター、リポカリン２（Ｌｃｎ２）プロモーター、グルタミンシンテターゼプロモーター、アクアポリン－４（ＡＱＰ４）プロモーター、オリゴデンドロサイト転写因子（Ｏｌｉｇ２）プロモーター、及びシナプシンプロモーター、ＮＧ２プロモーター、イオン化カルシウム結合アダプター分子１（Ｉｂａ１）プロモーター、表面抗原分類８６（ＣＤ８６）プロモーター、血小板由来増殖因子受容体α（ＰＤＧＦＲＡ）プロモーター、血小板由来増殖因子受容体β（ＰＤＧＦＲＢ）プロモーター、伸長因子１－α（ＥＦ１ａ）プロモーター、ＣＡＧプロモーター、サイゴメウイル（ＣＭＶ）プロモーター、ユビキチンプロモーターからなる群から選択される。一態様では、プロモーターは、ＧＦＡＰプロモーターである。一態様では、プロモーターは、Ｓｏｘ９プロモーターである。一態様では、プロモーターは、Ｌｃｎ２プロモーターである。一態様では、プロモーターは、グルタミンシンテターゼプロモーターである。一態様では、プロモーターは、ＡＱＰ４プロモーターである。一態様では、プロモーターは、Ｏｌｉｇ２プロモーターである。一態様では、プロモーターは、シナプシンプロモーターである。一態様では、プロモーターは、Ｉｂａ１プロモーターである。一態様では、プロモーターは、ＣＤ８６プロモーターである。一態様では、プロモーターは、ＰＤＧＦＲＡプロモーターである。一態様では、プロモーターは、ＰＤＧＦＲＢプロモーターである。一態様では、プロモーターは、ＥＦ１ａプロモーターである。一態様では、プロモーターは、ＣＡＧプロモーターである。一態様では、プロモーターは、ＣＭＶプロモーターである。一態様では、プロモーターは、ユビキチンプロモーターである。一態様では、ユビキチンプロモーターは、Ｕ６、Ｈ１、７ＳＫ、及びＵ１からなる群から選択される。一態様では、ユビキチンプロモーターは、Ｕ６である。一態様では、ユビキチンプロモーターは、Ｈ１である。一態様では、ユビキチンプロモーターは、Ｈ１である。一態様では、ユビキチンプロモーターは、７ＳＫである。一態様では、ユビキチンプロモーターは、Ｕ１である。一態様では、Ｕ６は、配列番号１７の核酸配列を含む。
一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、細胞におけるグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）と呼ばれるタンパク質のアストロサイト特異的発現を指示するプロモーターである。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、ヒトＧＦＡＰ（ｈＧＦＡＰ）プロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、Ｇｆａ６８１、Ｇｆａ１．６、及びｈＧＦＡ２．２からなる群から選択される。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、Ｇｆａ６８１である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、Ｇｆａ１．６である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、ｈＧＦＡ２．２である。一態様では、ＧＦＡＰ Ｇｆａ６８１は、配列番号３である。一態様では、ＧＦＡＰ Ｇｆａ１．６は、配列番号４である。一態様では、ｈＧＦａ２．２は、配列番号１２である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、配列番号３である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、配列番号４である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、配列番号１２である。
本明細書で使用される場合、「ｐＧｆａ６８１」は、６８１ｂｐサイズのヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーター切断型配列を指す。「ｐＧｆａ６８１」及び「Ｇｆａ６８１」は、本明細書では互換的に使用される。
一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター配列、ボノボＧＦＡＰプロモーター配列、オランウータンＧＦＡＰプロモーター配列、ゴリラＧＦＡＰプロモーター配列、マカクＧＦＡＰプロモーター配列、マーモセットＧＦＡＰプロモーター配列、オマキザルＧＦＡＰプロモーター配列、ヒヒＧＦＡＰプロモーター配列、テナガザルＧＦＡＰプロモーター配列、及びキツネザルＧＦＡＰプロモーター配列からなる群から選択される。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、ボノボＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、オランウータンＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、ゴリラＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、マカクＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、マーモセットＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、オマキザルＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、ヒヒＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、テナガザルＧＦＡＰプロモーター配列である。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、キツネザルＧＦＡＰプロモーター配列である。
一態様では、ＧＦＡＰプロモーター配列は、少なくとも１００ヌクレオチドを含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、少なくとも５００ヌクレオチドを含む。更なる態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、少なくとも１０００ヌクレオチドを含む。更に別の態様では、ＧＦＡＰプロモーターは、少なくとも１５００ヌクレオチドを含む。
当該技術分野では、プロモーター配列の断片は、作動可能に連結された核酸分子の転写を駆動するように機能し得ることが理解される。例えば、限定されないが、１０００ヌクレオチドのプロモーターが５００ヌクレオチドに切断され、５００ヌクレオチド断片が転写を駆動することができる場合、５００ヌクレオチド断片は、「機能性断片」と称される。
一態様では、プロモーターは少なくとも１０ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも５０ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも１００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも１５０ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも２００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも２５０ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも３００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも３５０ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも４００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも４５０ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、少なくとも５００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、５０ヌクレオチド～７５００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、５０ヌクレオチド～５０００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、５０ヌクレオチド～２５００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、５０ヌクレオチド～１０００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、５０ヌクレオチド～５００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、１０ヌクレオチド～７５００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、１０ヌクレオチド～５０００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、１０ヌクレオチド～２５００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、１０ヌクレオチド～１０００ヌクレオチドを含む。一態様では、プロモーターは、１０ヌクレオチド～５００ヌクレオチドを含む。
一態様では、ＧＦＡＰプロモーターの核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＧＦＡＰプロモーター核酸配列は、配列番号３、４、１２、及びその機能的断片からなる群から選択される配列と１００％同一の配列を含む。
一態様では、本明細書に提供される核酸配列は、コドン最適化される。
一態様では、本明細書に提供される核酸配列は、ＣｐＧ部位が枯渇している。
本明細書で使用される場合、「脳」という用語は、神経系の中枢として機能する臓器を指す。一態様では、脳は、大脳、大脳皮質、小脳、及び／又は脳幹を含む。
本明細書で使用される場合、「大脳皮質」という用語は、大脳の神経組織の外層を指す。
本明細書で使用される場合、「線条体（ｓｔｒｉａｔｕｍ）」又は「線条体（ｃｏｒｐｕｓ ｓｔｒｉａｔｕｍ）」という用語は、前脳の皮質下基底核のニューロンのクラスターを指し、腹側線条体及び背側線条体を含む。
本明細書で使用される場合、「黒質」という用語は、中脳の皮質下基底核のニューロンのクラスターを指し、緻密部及び網様部を含む。
本明細書で使用される場合、「前脳」という用語は、脳の最も前方の部分を指す。
本明細書で使用される場合、「被殻」という用語は、前脳の基底の丸い構造を指し、背部線条体の構成要素である。
本明細書で使用される場合、「尾状核」という用語は、前脳の基底の構造を指し、背部線条体の構成要素である。
本明細書で使用される場合、「皮質下基底核」という用語は、脳の深部大脳半球におけるニューロンのクラスターを指す。
本明細書で使用される場合、「脊髄」という用語は、運動皮質から身体への神経シグナルの伝達において機能する構造を指す。
本明細書で使用される場合、「運動皮質」という用語は、任意の運動の計画、制御、及び実行に関与する大脳皮質の前頭葉の領域を指す。
一態様では、本明細書に提供される方法は、脳において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。一態様では、本明細書に提供される方法は、脳の大脳皮質において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。一態様では、本明細書に提供される方法は、脳の線条体において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。一態様では、本明細書に提供される方法は、脳の背側線条体において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。一態様では、本明細書に提供される方法は、脳の脊髄において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。一態様では、本明細書に提供される方法は、脳の被殻において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。一態様では、本明細書に提供される方法は、脳の尾状核において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。一態様では、本明細書に提供される方法は、脳の黒質において反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する。
伸長因子１α（ＥＦ－１α；ｅＥＦ１ａ１とも称される）は、伸長因子１複合体のαサブユニットのアイソフォームである。複合体は、アミノアシルｔＲＮＡのリボソームへの酵素的送達に関与する。ＥＦ－１αのアイソフォームは、脳、胎盤、肺、肝臓、腎臓、及び膵臓で発現する。
一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのヒトエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのチンパンジーエンハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのボノボエンハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのオランウータンエンハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのゴリラエンハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのマカクエンハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのマーモセットエンハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのオマキザルハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのヒヒエンハンサー配列、ＥＦ－１αプロモーターからのテナガザルエンハンサー配列、及びＥＦ－１αプロモーターからのキツネザルエンハンサー配列からなる群から選択される。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのチンパンジーエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのボノボエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのオランウータンエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのゴリラエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのマカクエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのマーモセットエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのオマキザルエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのヒヒエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのテナガザルエンハンサー配列である。一態様では、ＥＦ－１αプロモーターからのエンハンサー配列は、ＥＦ－１αプロモーターからのキツネザルエンハンサー配列である。
一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＥＦ－１αプロモーター核酸配列からのエンハンサーは、配列番号２又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）は、ヘルペスウイルス目のウイルスの属である。
一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのヒトエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのチンパンジーエンハンサー配列、ＣＭＶからのボノボエンハンサー配列、ＣＭＶからのオランウータンエンハンサー配列、ＣＭＶからのゴリラエンハンサー配列、ＣＭＶからのマカクエンハンサー配列、ＣＭＶからのマーモセットエンハンサー配列、ＣＭＶからのオマキザルエンハンサー配列、ＣＭＶからのヒヒエンハンサー配列、ＣＭＶからのテナガザルエンハンサー配列、及びＣＭＶからのキツネザルエンハンサー配列からなる群から選択される。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのチンパンジー、エンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのボノボエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのオランウータンエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのゴリラエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのマカクエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのマーモセットエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのオマキザルエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのヒヒエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのテナガザルエンハンサー配列である。一態様では、ＣＭＶからのエンハンサー配列は、ＣＭＶからのキツネザルエンハンサー配列である。
一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＣＭＶ核酸配列からのエンハンサーは、配列番号１１又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
一態様では、エンハンサーは、ＥＦ１－αプロモーター及びＣＭＶエンハンサーからのエンハンサーからなる群から選択される。一態様では、エンハンサーは、ＥＦ１－αプロモーターからのものである。一態様では、エンハンサーは、ＣＭＶエンハンサーである。
イントロンは、スプライソソームイントロン、トランスファーＲＮＡイントロン、グループＩイントロン、グループＩＩイントロン、及びグループＩＩＩイントロンを含む、少なくとも５つのクラスに分類することができる。イントロンは、既知の若しくは天然に存在するイントロン配列又は他のイントロン配列から、合成的に産生、変化、又は誘導することができる。イントロンは、２つ以上の異種配列の組み合わせを含むキメライントロンも含むことができる。したがって、本出願のイントロンは、イントロン配列のバリアントを含むことができ、既知の又は本明細書に提供される他のイントロン配列と組成が類似しているが、同一ではない。一態様では、イントロンは、少なくとも１０ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも５０ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも１００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも１５０ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも２００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも２５０ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも３００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも３５０ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも４００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも４５０ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、少なくとも５００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、５０ヌクレオチド～７５００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、５０ヌクレオチド～５０００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、５０ヌクレオチド～２５００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、５０ヌクレオチド～１０００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、５０ヌクレオチド～５００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、１０ヌクレオチド～７５００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、１０ヌクレオチド～５０００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、１０ヌクレオチド～２５００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、１０ヌクレオチド～１０００ヌクレオチドを含む。一態様では、イントロンは、１０ヌクレオチド～５００ヌクレオチドを含む。
本明細書で使用される場合、「ＣＩ」は、ヒトβグロビン遺伝子の第１イントロンからの５’ドナー部位と免疫グロブリン遺伝子重鎖可変領域のイントロンからの分岐及び３’アクセプター部位とからなるキメライントロンを指す。
本明細書で使用される場合、「ＣＲＧＩ」は、ＣＡＧプロモーターにおけるものと同様のウサギβグロビン（ｇｌｏｂｉｎｇ）及びニワトリβアクチンのキメライントロンを指す。
一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５及び１９からなる群から選択される。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５である。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９である。
一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号５又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
一態様では、キメライントロンは、ＣＡＧプロモーターにおけるものと同様のウサギβグロビン及びニワトリβアクチンのキメライントロン（ＣＲＧＩ）である。一態様では、ＣＲＧＩ配列は、配列番号１９を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、キメライントロンの核酸配列は、配列番号１９又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）は、ウイルスベクターで送達される遺伝子の発現を増強する三次構造を作成するＤＮＡ配列である。
本明細書で使用される場合、「ＷＰＲＥ」は、ウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＶ）転写後調節因子を指す。
本明細書で使用される場合、「ｏＰＲＥ」は、ＷＰＲＥの最適化バージョンを指す。
一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７及び１８からなる群から選択される。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７である。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８である。
一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号７又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＷＰＲＥの核酸配列は、配列番号１８又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル配列（ＳＶ４０ポリＡ、サルウイルス４０ポリＡ、及びポリＡとも称する）は、ＤＮＡ配列であり、転写を終結させ、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の３’末端にポリＡテールを付加することができる。
ｈＧＨポリアデニル化シグナル配列（ｈＧＨポリＡとも称する）は、転写を終結させ、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の３’末端にポリＡテールを付加することができるＤＮＡ配列である。
本明細書で使用される場合、「ＳＶ４０ｐＡ」は、ＳＶ４０ウイルスのポリＡシグナルを指す。
本明細書で使用される場合、「ｂＧＨｐＡ」は、ウシ成長ホルモンのポリＡシグナルを指す。
本明細書で使用される場合、「ポリＡテール」は、核酸塩基アデニンのみを含む一続きのＲＮＡを指す。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター構築物から転写されるＲＮＡ分子は、ポリＡテールを含む。一態様では、ポリＡテールは、少なくとも２つのアデニンを含む。一態様では、ポリＡテールは、少なくとも１０個のアデニンを含む。一態様では、ポリＡテールは、少なくとも５０個のアデニンを含む。一態様では、ポリＡテールは、少なくとも１００個のアデニンを含む。一態様では、ポリＡテールは、少なくとも１５０個のアデニンを含む。一態様では、ポリＡテールは、少なくとも２００個のアデニンを含む。一態様では、ポリＡテールは、少なくとも２５０個のアデニンを含む。一態様では、ポリＡテールは、５０個のアデニン～３００個のアデニンを含む。
一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９９．８％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号８又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも１３０％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも１３５％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９９．１３％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ｈＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号１３又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも７０％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも７５％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８０％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８５％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９０％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９１％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９２％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９３％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９４％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９５％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９６％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９７％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９８％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９９％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９９．５％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９９．１３％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と少なくとも９９．９％同一の配列を含む。一態様では、ｂＧＨポリアデニル化シグナルの核酸配列は、配列番号２０又はその相補体と１００％同一の配列を含む。
本明細書で使用される場合、「中枢神経系」又は「ＣＮＳ」という用語は、左右対称の動物の脳及び脊髄を指す。ＣＮＳはまた、網膜、視神経、嗅神経、及び嗅上皮を含む。
本明細書で使用される場合、「末梢神経系」又は「ＰＮＳ」という用語は、網膜、視神経、嗅神経、及び嗅上皮を除く、脳及び脊髄以外の神経及び神経節を指す。一態様では、末梢神経系は、体性神経系と自律神経系とに分けられる。
本明細書で使用される場合、「体性神経系」という用語は、身体運動の随意制御と関連するＰＮＳの部分を指す。
本明細書で使用される場合、「自律神経系」という用語は、内臓の機能を調節するＰＮＳの部分を指す。
本明細書で使用される場合、「ＧＦＡＰ陽性」という用語は、当該技術分野で標準的な技術を使用して、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）の検出可能なタンパク質蓄積又はＧＦＡＰ ｍＲＮＡ発現の検出可能な蓄積を有する細胞を指す。一態様では、グリア細胞は、ＧＦＡＰ陽性である。
本明細書で使用される場合、「検出可能な」という用語は、同定可能なタンパク質又はｍＲＮＡの蓄積を指す。
タンパク質の蓄積は、抗体を使用して同定することができる。タンパク質蓄積を測定する非限定的な例としては、ウエスタンブロット、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、免疫沈降、及び免疫蛍光が挙げられる。本明細書に提供される抗体は、ポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体であり得る。本明細書に提供されるタンパク質に対する特異的結合親和性を有する抗体は、当該技術分野で既知の方法を使用して作製され得る。当該技術分野で既知の方法を使用して、本明細書に提供される抗体をマイクロタイタープレートなどの固体支持体に付着させることができる。
本明細書で使用される場合、「感染多重度（ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）」及び「ＭＯＩ」という用語は、感染中に添加される細胞当たりのビリオンの数を指す。
本明細書で使用される場合、「ビリオン」という用語は、宿主細胞の外側のウイルスの感染形態を指す。
本明細書で使用される場合、「神経学的状態」という用語は、中枢神経系又は末梢神経系における障害、疾病、病気、傷害、又は疾患を指す。神経学的状態の非限定的な例は、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ：ｃｏｕｒｓｅ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００２）（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．）ａｎｄ Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ Ｇｏｅｔｚ，Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００７）（Ｓａｕｎｄｅｒｓ）に見出され得る。
本明細書で使用される場合、「傷害」という用語は、中枢神経系又は末梢神経系への損傷を指す。
一態様では、神経学的状態は、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される。一態様では、神経学的状態は、アルツハイマー病である。一態様では、神経学的状態は、パーキンソン病である。一態様では、神経学的状態は、ＡＬＳである。一態様では、神経学的状態は、ハンチントン病である。一態様では、神経学的状態は、てんかんである。一態様では、神経学的状態は、身体的傷害である。一態様では、神経学的状態は、脳卒中である。一態様では、神経学的状態は、虚血性脳卒中である。一態様では、神経学的状態は、出血性脳卒中である。一態様では、神経学的状態は、脳動脈瘤である。一態様では、神経学的状態は、外傷性脳傷害である。一態様では、神経学的状態は、脳振盪である。一態様では、神経学的状態は、腫瘍である。一態様では、神経学的状態は、炎症である。一態様では、神経学的状態は、感染である。一態様では、神経学的状態は、運動失調症である。一態様では、神経学的状態は、脳萎縮である。一態様では、神経学的状態は、脊髄萎縮である。一態様では、神経学的状態は、多発性硬化症である。一態様では、神経学的状態は、外傷性脊髄傷害である。一態様では、神経学的状態は、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）である。一態様では、神経学的状態は、全虚血である。一態様では、神経学的状態は、低酸素性虚血性脳症である。一態様では、神経学的状態は、塞栓症である。一態様では、神経学的状態は、線維軟骨塞栓症脊髄症である。一態様では、神経学的状態は、血栓症である。一態様では、神経学的状態は、腎症である。一態様では、神経学的状態は、慢性炎症性疾患である。一態様では、神経学的状態は、髄膜炎である。一態様では、神経学的状態は、脳静脈洞血栓症である。
一態様では、神経学的状態は、ＣＮＳ又はＰＮＳへの傷害を含む。一態様では、神経学的状態は、ＣＮＳに対する傷害を含む。一態様では、神経学的状態は、ＰＮＳへの傷害を含む。
一態様では、本開示は、生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル配列、配列番号１３のその核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化配列、又は配列番号２０のその核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化配列と、を含む調節エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法を提供し、かつそれを含み、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、コード配列が、（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル配列、配列番号１３のその核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化配列、又は配列番号２０のその核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化配列と、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される。
一態様では、本開示は、グリア細胞をニューロンに変換することを必要とする対象において、それを行う方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に送達することを含み、ＡＡＶが、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）ポリアデニル化シグナル配列と、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、ベクターが、それを必要とする対象において、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる。
一態様では、本開示は、神経学的状態の治療を必要とする対象において、それを行う方法を提供し、かつそれを含み、本方法は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を対象に送達することを含み、ＡＡＶが、（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、（ｂ）エンハンサーと、（ｃ）キメライントロンと、（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、（ｅ）それを必要とする対象へのポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含む。
一態様では、本明細書に提供される方法は、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる。一態様では、本明細書に提供される方法は、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換する。
神経原性分化１（ＮｅｕｒｏＤ１；β２とも称される）は、他のｂＨＬＨタンパク質とヘテロ二量体を形成して、Ｅボックスとして知られているＤＮＡ配列を含む遺伝子の転写を活性化する塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（ｂＨＬＨ）転写因子である。
Ａｃｈａｅｔｅ－ｓｃｕｔｅファミリーＢＨＬＨ転写因子１（Ａｓｃｌ１、ＡＳＨ１、ＨＡＳＨ１、ＭＡＳＨ－１、及びｂＨＬＨａ４６とも称される）は、転写因子の塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックスファミリーのメンバーをコードし、神経コミットメント及び分化に役割を果たす遺伝子である。
インスリン遺伝子エンハンサータンパク質（ＩＳＬ１；ＩＳＬ ＬＩＭホメオボックス－１及びＩＳＬＥＴ１としても知られている）は、２つのＮ末端ＬＩＭドメイン及び１つのＣ末端ホメオドメインを含む転写因子をコードする遺伝子である。コードされたタンパク質は、膵臓ランゲルハンス島の胚発生に役割を果たす。
ＬＩＭホメオボックス３（ＬＨＸ３；ＬＩＭ３及びＣＰＨＤ３としても知られている）遺伝子は、独自のシステインリッチ亜鉛結合ドメイン（ＬＩＭドメイン）を有するタンパク質のファミリーからのタンパク質をコードする。
ハンチンチン（Ｈｔｔ；ハンチントン病遺伝子としても知られている）遺伝子は、ハンチンチンタンパク質をコードする。野生型には６～３５個のグルタミン残基が含まれ、変異型Ｈｔｔには３６個超のグルタミン残基が含まれる。
一態様では、本明細書に提供される方法は、本開示によるＤｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、第２の転写因子コード配列を含む第２のＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列及び第２の転写因子コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、第２の転写因子は、ＮｅｕｒｏＤ１、Ａｓｃｌ１、ＩＳＬ１、及びＬＨＸ３からなる群から選択される。一態様では、第２の転写因子は、ＮｅｕｒｏＤ１である。一態様では、第２の転写因子は、Ａｓｃｌ１である。一態様では、第２の転写因子は、ＩＳＬ１である。一態様では、第２の転写因子は、ＬＨＸ３である。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列及び第２のＤｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列を含む第２のＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。
一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｓｈＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｓｈＲＮＡ配列及びＨｔｔを標的とする第２のｓｈＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｓｈＲＮＡ配列、Ｈｔｔを標的とする第２のｓｈＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第３のｓｈＲＮＡを含むＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列及びＨｔｔを標的とするｓｈＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列、Ｈｔｔを標的とするｓｈＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第２のｓｈＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列、及びＨｔｔを標的とするｓｈＲＮＡ配列、Ｈｔｔを標的とする第２のｓｈＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第３のｓｈＲＮＡを含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｓｈＲＮＡ配列、Ｈｔｔを標的とする第２のｓｈＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第３のｓｈＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターを使用する。
一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするＡＳＯ配列と組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするＡＳＯ配列及びＨｔｔを標的とする第２のＡＳＯ配列と組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするＡＳＯ配列、Ｈｔｔを標的とする第２のＡＳＯ配列、及びＨｔｔを標的とする第３のＡＳＯと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。
一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｓｉＲＮＡと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｓｉＲＮＡ及びＨｔｔを標的とする第２のｓｉＲＮＡと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｓｉＲＮＡ配列、Ｈｔｔを標的とする第２のｓｉＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第３のｓｉＲＮＡと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。
一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｍｉＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｍｉＲＮＡ配列及びＨｔｔを標的とする第２のｍｉＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｍｉＲＮＡ配列、Ｈｔｔを標的とする第２のｍｉＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第３のｍｉＲＮＡを含むＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列及びＨｔｔを標的とするｍｉＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列、Ｈｔｔを標的とするｍｉＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第２のｍｉＲＮＡ配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列、及びＨｔｔを標的とするｍｉＲＮＡ配列、Ｈｔｔを標的とする第２のｍｉＲＮＡ配列、及びＨｔｔを標的とする第３のｍｉＲＮＡを含むＡＡＶベクターを使用する。
一態様では、本明細書で提供される方法は、Ｈｔｔを標的とするｇＲＮＡ配列及びＣＡＳヌクレアーゼを含むＡＡＶベクターと組み合わせて、Ｄｌｘ２コード配列を含むＡＡＶベクターを使用する。一態様では、本明細書に提供される方法は、Ｄｌｘ２コード配列、及びＨｔｔを標的とするｇＲＮＡ配列、及びＣＡＳヌクレアーゼを含むＡＡＶベクターを使用する。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクターは、機能性について、ＮｅｕＮ、ダブルコルチン（ＤＣＸ）、β３チューブリン、（ニューロフィラメント２００）ＮＦ－２００、（微小管関連タンパク質２）ＭＡＰ２、イオン化カルシウム結合アダプター分子（Ｉｂａ１）の転写レベル及びタンパク質レベルを評価することによって測定される。
本明細書で使用される場合、「ＮｅｕＮ」又は「Ｆｏｘ－３」又は「Ｒｂｆｏｘ２」又は「ヘキサリボヌクレオチド結合タンパク質－３」という用語は、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓにおける性決定遺伝子のタンパク質産物のホモログであり、ニューロン核抗原であるタンパク質を指す。
本明細書で使用される場合、「ＤＣＸ」又は「ダブリング」又は「リッセンセファリン－Ｘ」という用語は、胚及び成体の皮質構造の神経前駆細胞及び未熟ニューロンによって発現される微小管関連タンパク質を指す。
本明細書で使用される場合、「β３－チューブリン」又は「クラスＩＩＩβ－チューブリン」又は「β－チューブリンＩＩＩ」という用語は、ニューロンに見られるチューブリンファミリーの微小管要素を指す。
本明細書で使用される場合、「ＮＦ－２００」という用語は、ニューロンの細胞質に見出されるＩＶ型中間径フィラメントであるタンパク質のクラスを指す。
本明細書で使用される場合、「ＭＡＰ２」という用語は、微小管関連タンパク質ファミリーに属し、ニューロン発生中にニューロン形態を決定及び安定化する役割を果たすタンパク質を指す。
本明細書で使用される場合、「Ｉｂａ１」という用語は、ミクログリアマクロファージ特異的カルシウム結合タンパク質を指す。
一態様では、本明細書に提供される方法は、遺伝子編集技術と組み合わせて、グリア細胞をニューロンに変換する。一態様では、遺伝子編集技術は、変異型Ｈｔｔを標的とする。一態様では、遺伝子編集技術は、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＡＳＯ、及びＣＲＩＳＰＲ／ＣＡＳからなる群から選択される。一態様では、遺伝子編集技術は、ｓｉＲＮＡである。一態様では、遺伝子編集技術は、ｍｉＲＮＡである。一態様では、遺伝子編集技術は、ＡＳＯである。一態様では、遺伝子編集技術は、ＣＲＩＳＰＲ／ＣＡＳである。一態様では、本明細書に提供される組成物は、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる。一態様では、本明細書に提供される組成物は、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換する。
本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、哺乳綱に分類される任意の種を指す。
本明細書で使用される場合、「ヒト」という用語は、Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓを指す。一態様では、ヒトは、神経学的障害を有する。
本明細書で使用される場合、「生きているヒト」という用語は、心臓、呼吸、及び脳活動を有するヒトを指す。
本明細書で使用される場合、「非ヒト霊長類」という用語は、Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓではない霊長目に分類される任意の種又は亜種を指す。非ヒト霊長類の非限定的な例としては、チンパンジー、ボノボ、オランウータン、ゴリラ、マカク、マーモセット、オマキザル、ヒヒ、テナガザル、及びキツネザルが挙げられる。
本明細書で使用される場合、「送達すること」又は「送達」という用語は、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物で哺乳動物を処置することを指す。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、それを必要とする対象に送達される。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、それを必要とする対象に送達されるように製剤化される。一態様では、送達は、局所送達を含む。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、局所送達用に製剤化される。一態様では、送達は、全身送達を含む。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、全身送達用に製剤化される。一態様では、送達は、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物を、それを必要とする対象に注入することを含む。一態様では、送達は、腹腔内、筋肉内、静脈内、髄腔内、脳内、頭蓋内、側脳室内（ｉｎｔｒａ ｌａｔｅｒａｌ ｖｅｎｔｒｉｃｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ）、大槽内、硝子体内、網膜下内（ｉｎｔｒａ－ｓｕｂｒｅｔｉｎａ）、実質内、鼻腔内、又は経口投与からなる群から選択される。一態様では、送達は、腹腔内送達を含む。一態様では、送達は、筋肉内送達を含む。一態様では、送達は、静脈内送達を含む。一態様では、送達は、髄腔内送達を含む。一態様では、送達は、脳内送達を含む。一態様では、送達は、頭蓋内送達を含む。一態様では、送達は、側脳室内送達を含む。一態様では、送達は、大槽内送達を含む。一態様では、送達は、硝子体内送達を含む。一態様では、送達は、網膜下内送達を含む。一態様では、送達は、実質内送達を含む。一態様では、送達は、鼻腔内送達を含む。一態様では、送達は、経口投与を含む。
本明細書で使用される場合、「注入する」という用語は、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物を、圧力下及び力を用いて送達することを指す。非限定的な例として、注入は、シリンジ及び針の使用を含むことができる。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、対象の脳に注入される。一態様では、ＡＡＶベクター又は組成物は、対象の大脳皮質に注入される。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、対象の脊髄に注入される。一態様では、ＡＡＶベクター又は組成物は、対象の線条体に注入される。一態様では、ＡＡＶベクター又は組成物は、対象の背側線条体に注入される。一態様では、ＡＡＶベクター又は組成物は、対象の被殻に注入される。一態様では、ＡＡＶベクター又は組成物は、対象の尾状核に注入される。一態様では、ＡＡＶベクター又は組成物は、対象の黒質に注入される。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、脳の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、脳の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、大脳皮質の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、大脳皮質の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、脊髄の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、脊髄の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、線条体の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、線条体の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、背側線条体の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、背側線条体の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、被殻の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、被殻の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、尾状核の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、尾状核の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、注入部位から約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、注入部位から約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、黒質の約１％～約１００％に広がっている。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクター又は組成物は、被殻の約１％～約１０％、１％～約２０％、１％～約３０％、１０％～約２０％、１０％～約３０％、約１０％～約４０％、約２０％～約３０％、約２０％～約４０％、約２０％～約５０％、約３０％～約４０％、約３０％～約５０％、約３０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約６０％、約４０％～約７０％、約５０％～約６０％、約５０％～約７０％、約５０％～約８０％、約６０％～約７０％、約６０％～約８０％、約６０％～約９０％、約７０％～約８０％、約７０％～約９０％、約７０％～約１００％、約８０％～約９０％、約８０％～約１００％、又は約９０％～約１００％に広がっている。
本明細書で使用される場合、「ＡＡＶ粒子」という用語は、その核酸ゲノムを細胞に伝達するＡＡＶウイルスのパッケージングされたキャプシド形態を指す。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクターによってコードされるＡＡＶ粒子を含む組成物は、１０１０ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１４ＡＡＶ粒子／ｍＬの濃度で注入される。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクターによってコードされるＡＡＶ粒子を含む組成物は、１０１０ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１１ＡＡＶ粒子／ｍＬ、１０１０ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１２ＡＡＶ粒子／ｍＬ、１０１０ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１３ＡＡＶ粒子／ｍＬ、１０１１ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１２ＡＡＶ粒子／ｍＬ、１０１１ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１３ＡＡＶ粒子／ｍＬ、１０１１ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１４ＡＡＶ粒子／ｍＬ、１０１２ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１３ＡＡＶ粒子／ｍＬ、１０１２ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１４ＡＡＶ粒子／ｍＬ、又は１０１３ＡＡＶ粒子／ｍＬ～１０１４ＡＡＶ粒子／ｍＬの濃度で注入される。
一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクターによってコードされるＡＡＶ粒子を含む組成物は、１０μＬ～１０００μＬの体積で注入される。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶベクターによってコードされるＡＡＶ粒子を含む組成物は、１０μＬ～１００μＬ、１０μＬ～２００μＬ、１０μＬ～３００μＬ、１００μＬ～２００μＬ、１００μＬ～３００μＬ、１００μＬ～４００μＬ、２００μＬ～３００μＬ、２００μＬ～４００μＬ、２００μＬ～５００μＬ、３００μＬ～４００μＬ、３００μＬ～５００μＬ、３００μＬ～６００μＬ、４００μＬ～５００μＬ、４００μＬ～６００μＬ、４００μＬ～７００μＬ、５００μＬ～６００μＬ、５００μＬ～７００μＬ、５００μＬ～８００μＬ、６００μＬ～７００μＬ、６００μＬ～８００μＬ、６００μＬ～９００μＬ、７００μＬ～８００μＬ、７００μＬ～９００μＬ、７００μＬ～１０００μＬ、８００μＬ～９００μＬ、８００μＬ～１０００μＬ、又は９００μＬ～１０００μＬの体積で注入される。
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、任意の動物対象を指す。動物対象の非限定的な例としては、ヒト、実験動物（例えば、霊長類、ラット、マウス）、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、シチメンチョウ、ニワトリ）、及び家庭用ペット（例えば、イヌ、ネコ、げっ歯類など）が挙げられる。
本明細書で使用される場合、「それを必要とする対象」は、神経学的状態を有する対象を指す。一態様では、それを必要とする対象は、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される神経疾患を有する。一態様では、それを必要とする対象は、アルツハイマー病を有する。一態様では、それを必要とする対象は、パーキンソン病を有する。一態様では、それを必要とする対象は、ＡＬＳを有する。一態様では、それを必要とする対象は、ハンチントン病を有する。一態様では、それを必要とする対象は、てんかんを有する。一態様では、それを必要とする対象は、身体的傷害を有する。一態様では、それを必要とする対象は、脳卒中を有する。一態様では、それを必要とする対象は、虚血性脳卒中を有する。一態様では、それを必要とする対象は、出血性脳卒中を有する。一態様では、それを必要とする対象は、脳動脈瘤を有する。一態様では、それを必要とする対象は、外傷性脳傷害を有する。一態様では、それを必要とする対象は、脳震盪を有する。一態様では、それを必要とする対象は、腫瘍を有する。一態様では、それを必要とする対象は、炎症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、感染を有する。一態様では、それを必要とする対象は、運動失調症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、脳萎縮を有する。一態様では、それを必要とする対象は、脊髄萎縮を有する。一態様では、それを必要とする対象は、多発性硬化症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、外傷性脊髄傷害を有する。一態様では、それを必要とする対象は、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）を有する。一態様では、それを必要とする対象は、全虚血を有する。一態様では、それを必要とする対象は、低酸素性虚血性脳症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、塞栓症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、線維軟骨塞栓症脊髄症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、血栓症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、腎症を有する。一態様では、それを必要とする対象は、慢性炎症性疾患を有する。一態様では、それを必要とする対象は、髄膜炎を有する。一態様では、それを必要とする対象は、脳静脈洞血栓症を有する。
一態様では、それを必要とする対象は、哺乳動物である。一態様では、それを必要とする対象は、ヒトである。一態様では、それを必要とする対象は、非ヒト霊長類である。一態様では、それを必要とする対象は、チンパンジー、ボノボ、オランウータン、ゴリラ、マカク、マーモセット、オマキザル、ヒヒ、テナガザル、及びキツネザルからなる群から選択される。一態様では、それを必要とする対象は、チンパンジーである。一態様では、それを必要とする対象は、ボノボである。一態様では、それを必要とする対象は、オランウータンである。一態様では、それを必要とする対象は、ゴリラである。一態様では、それを必要とする対象は、マカクである。一態様では、それを必要とする対象は、マーモセットである。一態様では、それを必要とする対象は、オマキザルである。一態様では、それを必要とする対象は、ヒヒである。一態様では、それを必要とする対象は、テナガザルである。一態様では、それを必要とする対象は、キツネザルである。
一態様では、それを必要とする対象は、雄である。一態様では、それを必要とする対象は、雌である。一態様では、それを必要とする対象は、ジェンダーニュートラルである。一態様では、それを必要とする対象は、未熟児（ｐｒｅｍａｔｕｒｅ ｎｅｗｂｏｒｎ）である。一態様では、未熟児は、妊娠３６週以前に生まれる。一態様では、それを必要とする対象は、新生児である。一態様では、新生児（ｎｅｗｂｏｒｎ）という用語は、約２ヶ月齢未満である。一態様では、それを必要とする対象は、新生児（ｎｅｏｎａｔｅ）である。一態様では、新生児は、約１ヶ月齢未満である。一態様では、それを必要とする対象は、乳児である。一態様では、乳児は、２ヶ月～２４ヶ月齢である。一態様では、乳児は、２ヶ月～３ヶ月、２ヶ月～４ヶ月、２ヶ月～５ヶ月、３ヶ月～４ヶ月、３ヶ月～５ヶ月、３ヶ月～６ヶ月、４ヶ月～５ヶ月、４ヶ月～６ヶ月、４ヶ月～７ヶ月、５ヶ月～６ヶ月、５ヶ月～７ヶ月、５ヶ月～８ヶ月、６ヶ月～７ヶ月、６ヶ月～８ヶ月、６ヶ月～９ヶ月、７ヶ月～８ヶ月、７ヶ月～９ヶ月、７ヶ月～１０ヶ月、８ヶ月～９ヶ月、８ヶ月～１０ヶ月、８ヶ月～１１ヶ月、９ヶ月～１０ヶ月、９ヶ月～１１ヶ月、９ヶ月～１２ヶ月、１０ヶ月～１１ヶ月、１０ヶ月～１２ヶ月、１０ヶ月～１３ヶ月、１１ヶ月～１２ヶ月、１１ヶ月～１３ヶ月、１１ヶ月～１４ヶ月、１２ヶ月～１３ヶ月、１２ヶ月～１４ヶ月、１２ヶ月～１５ヶ月、１３ヶ月～１４ヶ月、１３ヶ月～１５ヶ月、１３ヶ月～１６ヶ月、１４ヶ月～１５ヶ月、１４ヶ月～１６ヶ月、１４ヶ月～１７ヶ月、１５ヶ月～１６ヶ月、１５ヶ月～１７ヶ月、１５ヶ月～１８ヶ月、１６ヶ月～１７ヶ月、１６ヶ月～１８ヶ月、１６ヶ月～１９ヶ月、１７ヶ月～１８ヶ月、１７ヶ月～１９ヶ月、１７ヶ月～２０ヶ月、１８ヶ月～１９ヶ月、１８ヶ月～２０ヶ月、１８ヶ月～２１ヶ月、１９ヶ月～２０ヶ月、１９ヶ月～２１ヶ月、１９ヶ月～２２ヶ月、２０ヶ月～２１ヶ月、２０ヶ月～２２ヶ月、２０ヶ月～２３ヶ月、２１ヶ月～２２ヶ月、２１ヶ月～２３ヶ月、２１ヶ月～２４ヶ月、２２ヶ月～２３ヶ月、２２ヶ月～２４ヶ月、及び２３ヶ月～２４ヶ月齢である。一態様では、それを必要とする対象は、幼児である。一態様では、幼児は、１歳～４歳齢である。一態様では、幼児は、１歳～２歳、１歳～３歳、１歳～４歳、２歳～３歳、２歳～４歳、及び３歳～４歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、小児である。一態様では、小児は２歳～５歳齢である。一態様では、小児は、２歳～３歳、２歳～４歳、２歳～５歳、３歳～４歳、３歳～５歳、４歳～５歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、子供である。一態様では、子供は、６歳～１２歳齢である。一態様では、子供は、６歳～７歳、６歳～８歳、６歳～９歳、７歳～８歳、７歳～９歳、７歳～１０歳、８歳～９歳、８歳～１０歳、８歳～１１歳、９歳～１０歳、９歳～１１歳、９歳～１２歳、１０歳～１１歳、１０歳～１２歳、及び１１歳～１２歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、青年である。一態様では、青年は、１３歳～１９歳齢である。一態様では、青年は、１３歳～１４歳、１３歳～１５歳、１３歳～１６歳、１４歳～１５歳、１４歳～１６歳、１４歳～１７歳、１５歳～１６歳、１５歳～１７歳、１５歳～１８歳、１６歳～１７歳、１６歳～１８歳、１６歳～１９歳、１７歳～１８歳、１７歳～１９歳、及び１８歳～１９歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、小児対象である。一態様では、１日～１８歳齢の小児対象である。一態様では、小児対象は、１日～１歳、１日～２歳、１日～３歳、１歳～２歳、１歳～３歳、１歳～４歳、２歳～３歳、２歳～４歳、２歳～５歳、３歳～４歳、３歳～５歳、３歳～６歳、４歳～５歳、４歳～６歳、４歳～７歳、５歳～６歳、５歳～７歳、５歳～８歳、６歳～７歳、６歳～８歳、６歳～９歳、７歳～８歳、７歳～９歳、７歳～１０歳、８歳～９歳、８歳～１０歳、８歳～１１歳、９歳～１０歳、９歳～１１歳、９歳～１２歳、１０歳～１１歳、１０歳～１２歳、１０歳～１３歳、１１歳～１２歳、１１歳～１３歳、１１歳～１４歳、１２歳～１３歳、１２歳～１４歳、１２歳～１５歳、１３歳～１４歳、１３歳～１５歳、１３歳～１６歳、１４歳～１５歳、１４歳～１６歳、１４歳～１７歳、１５歳～１６歳、１５歳～１７歳、１５歳～１８歳、１６歳～１７歳、１６歳～１８歳、及び１７歳～１８歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、高齢者対象である。一態様では、高齢者対象は、６５歳～９５歳以上齢である。一態様では、高齢者対象は、６５歳～７０歳、６５歳～７５歳、６５歳～８０歳、７０歳～７５歳、７０歳～８０歳、７０歳～８５歳、７５歳～８０歳、７５歳～８５歳、７５歳～９０歳、８０歳～８５歳、８０歳～９０歳、８０歳～９５歳、８５歳～９０歳、及び８５歳～９５歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、成人である。一態様では、成人対象は、２０歳～９５歳以上齢である。一態様では、成人対象は、２０歳～２５歳、２０歳～３０歳、２０歳～３５歳、２５歳～３０歳、２５歳～３５歳、２５歳～４０歳、３０歳～３５歳、３０歳～４０歳、３０歳～４５歳、３５歳～４０歳、３５歳～４５歳、３５歳～５０歳、４０歳～４５歳、４０歳～５０歳、４０歳～５５歳、４５歳～５０歳、４５歳～５５歳、４５歳～６０歳、５０歳～５５歳、５０歳～６０歳、５０歳～６５歳、５５歳～６０歳、５５歳～６５歳、５５歳～７０歳、６０歳～６５歳、６０歳～７０歳、６０歳～７５歳、６５歳～７０歳、６５歳～７５歳、６５歳～８０歳、７０歳～７５歳、７０歳～８０歳、７０歳～８５歳、７５歳～８０歳、７５歳～８５歳、７５歳～９０歳、８０歳～８５歳、８０歳～９０歳、８０歳～９５歳、８５歳～９０歳、及び８５歳～９５歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、１歳～５歳、２歳～１０歳、３歳～１８歳、２１歳～５０歳、２１歳～４０歳、２１歳～３０歳、５０歳～９０歳、６０歳～９０歳、７０歳～９０歳、６０歳～８０歳、又は６５歳～７５歳齢である。一態様では、それを必要とする対象は、前期高齢者（ｙｏｕｎｇ ｏｌｄ）対象（６５～７４歳齢）である。一態様では、それを必要とする対象は、中期高齢者（ｍｉｄｄｌｅ ｏｌｄ）対象（７５～８４歳齢）である。一態様では、それを必要とする対象は、後期高齢者（ｏｌｄ）対象（＞８５歳齢）である。
本明細書で使用される場合、「流量」という用語は、ＡＡＶベクター又は組成物の送達速度を指す。一態様では、流量は、０．１μＬ／分～５．０μＬ／分である。一態様では、流量は、０．１μＬ／分～０．２μＬ／分、０．１μＬ／分～０．３μＬ／分、０．１μＬ／分～０．４μＬ／分、０．２μＬ／分～０．３μＬ／分、０．２μＬ／分～０．４μＬ／分、０．２μＬ／分～０．５μＬ／分、０．３μＬ／分～０．４μＬ／分、０．３μＬ／分～０．５μＬ／分、０．３μＬ／分～０．６μＬ／分、０．４μＬ／分～０．５μＬ／分、０．４μＬ／分～０．６μＬ／分、０．４μＬ／分～０．７μＬ／分、０．５μＬ／分～０．６μＬ／分、０．５μＬ／分～０．７μＬ／分、０．５μＬ／分～０．８μＬ／分、０．６μＬ／分～０．７μＬ／分、０．６μＬ／分～０．８μＬ／分、０．６μＬ／分～０．９μＬ／分、０．７μＬ／分～０．８μＬ／分、０．７μＬ／分～０．９μＬ／分、０．７μＬ／分～１．０μＬ／分、０．８μＬ／分～０．９μＬ／分、０．８μＬ／分～１．０μＬ／分、０．８μＬ／分～１．１μＬ／分、０．９μＬ／分～１．０μＬ／分、０．９μＬ／分～１．１μＬ／分、０．９μＬ／分～１．２μＬ／分、１．０μＬ／分～１．１μＬ／分、１．０μＬ／分～１．２μＬ／分、１．０μＬ／分～１．３μＬ／分、１．１μＬ／分～１．２μＬ／分、１．１μＬ／分～１．３μＬ／分、１．１μＬ／分～１．４μＬ／分、１．２μＬ／分～１．３μＬ／分、１．２μＬ／分～１．４μＬ／分、１．２μＬ／分～１．５μＬ／分、１．３μＬ／分～１．４μＬ／分、１．３μＬ／分～１．５μＬ／分、１．３μＬ／分～１．６μＬ／分、１．４μＬ／分～１．５μＬ／分、１．４μＬ／分～１．６μＬ／分、１．４μＬ／分～１．７μＬ／分、１．５μＬ／分～１．６μＬ／分、１．５μＬ／分～１．７μＬ／分、１．５μＬ／分～１．８μＬ／分、１．６μＬ／分～１．７μＬ／分、１．６μＬ／分～１．８μＬ／分、１．６μＬ／分～１．９μＬ／分、１．７μＬ／分～１．８μＬ／分、１．７μＬ／分～１．９μＬ／分、１．７μＬ／分～２．０μＬ／分、１．８μＬ／分～１．９μＬ／分、１．８μＬ／分～２．０μＬ／分、１．８μＬ／分～２．１μＬ／分、１．９μＬ／分～２．０μＬ／分、１．９μＬ／分～２．１μＬ／分、１．９μＬ／分～２．２μＬ／分、２．０μＬ／分～２．１μＬ／分、２．０μＬ／分～２．２μＬ／分、２．０μＬ／分～２．３μＬ／分、２．１μＬ／分～２．２μＬ／分、２．１μＬ／分～２．３μＬ／分、２．１μＬ／分～２．４μＬ／分、２．２μＬ／分～２．３μＬ／分、２．２μＬ／分～２．４μＬ／分、２．２μＬ／分～２．５μＬ／分、２．３μＬ／分～２．４μＬ／分、２．３μＬ／分～２．５μＬ／分、２．３μＬ／分～２．６μＬ／分、２．４μＬ／分～２．５μＬ／分、２．４μＬ／分～２．６μＬ／分、２．４μＬ／分～２．７μＬ／分、２．５μＬ／分～２．６μＬ／分、２．５μＬ／分～２．７μＬ／分、２．５μＬ／分～２．８μＬ／分、２．６μＬ／分～２．７μＬ／分、２．６μＬ／分～２．８μＬ／分、２．６μＬ／分～２．９μＬ／分、２．７μＬ／分～２．８μＬ／分、２．７μＬ／分～２．９μＬ／分、２．７μＬ／分～３．０μＬ／分、２．８μＬ／分～２．９μＬ／分、２．８μＬ／分～３．０μＬ／分、２．８μＬ／分～３．１μＬ／分、２．９μＬ／分～３．０μＬ／分、２．９μＬ／分～３．１μＬ／分、２．９μＬ／分～３．２μＬ／分、３．０μＬ／分～３．１μＬ／分、３．０μＬ／分～３．２μＬ／分、３．０μＬ／分～３．３μＬ／分、３．１μＬ／分～３．２μＬ／分、３．１μＬ／分～３．３μＬ／分、３．１μＬ／分～３．４μＬ／分、３．２μＬ／分～３．３μＬ／分、３．２μＬ／分～３．４μＬ／分、３．２μＬ／分～３．５μＬ／分、３．３μＬ／分～３．４μＬ／分、３．３μＬ／分～３．５μＬ／分、３．３μＬ／分～３．６μＬ／分、３．４μＬ／分～３．５μＬ／分、３．４μＬ／分～３．６μＬ／分、３．４μＬ／分～３．７μＬ／分、３．５μＬ／分～３．６μＬ／分、３．５μＬ／分～３．７μＬ／分、３．５μＬ／分～３．８μＬ／分、３．６μＬ／分～３．７μＬ／分、３．６μＬ／分～３．８μＬ／分、３．６μＬ／分～３．９μＬ／分、３．７μＬ／分～３．８μＬ／分、３．７μＬ／分～３．９μＬ／分、３．７μＬ／分～４．０μＬ／分、３．８μＬ／分～３．９μＬ／分、３．８μＬ／分～４．０μＬ／分、３．８μＬ／分～４．１μＬ／分、３．９μＬ／分～４．０μＬ／分、３．９μＬ／分～４．１μＬ／分、３．９μＬ／分～４．２μＬ／分、４．０μＬ／分～４．１μＬ／分、４．０μＬ／分～４．２μＬ／分、４．０μＬ／分～４．３μＬ／分、４．１μＬ／分～４．２μＬ／分、４．１μＬ／分～４．３μＬ／分、４．１μＬ／分～４．４μＬ／分、４．２μＬ／分～４．３μＬ／分、４．２μＬ／分～４．４μＬ／分、４．２μＬ／分～４．５μＬ／分、４．３μＬ／分～４．４μＬ／分、４．３μＬ／分～４．５μＬ／分、４．３μＬ／分～４．６μＬ／分、４．４μＬ／分～４．５μＬ／分、４．４μＬ／分～４．６μＬ／分、４．４μＬ／分～４．７μＬ／分、４．５μＬ／分～４．６μＬ／分、４．５μＬ／分～４．７μＬ／分、４．５μＬ／分～４．８μＬ／分、４．６μＬ／分～４．７μＬ／分、４．６μＬ／分～４．８μＬ／分、４．６μＬ／分～４．９μＬ／分、４．７μＬ／分～４．８μＬ／分、４．７μＬ／分～４．９μＬ／分、４．７μＬ／分～５．０μＬ／分，４．８μＬ／分～４．９μＬ／分、４．８μＬ／分～５．０μＬ／分、又は４．９μＬ／分～５．０μＬ／分である。
本明細書で使用される場合、「治療有効用量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｄｏｓｅ）」又は「薬学的活性用量（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｄｏｓｅ）」という用語は、神経学的状態の治療に有効である本明細書に提供されるＡＡＶ粒子又は組成物の量を指す。一態様では、本明細書に提供されるＡＡＶ粒子又は組成物は、薬学的に許容される担体と一緒に提供され得る。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、本明細書に提供されるＡＡＶ粒子又は組成物と混合される非毒性の溶媒、分散剤、賦形剤、アジュバント、又は他の材料を指す。
薬学的に許容される担体の非限定的な例としては、液体（例えば、生理食塩水）、ゲル、ナノ粒子、エクソソーム、脂質小胞、又は希釈剤、アジュバント、賦形剤、又は耐酸性カプセル化成分の固体形態が挙げられる。好適な希釈剤及び賦形剤の非限定的な例としては、医薬品グレードの生理食塩水、デキストロース、グリセロール、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなど、及びそれらの組み合わせが挙げられる。一態様では、治療有効用量は、補助物質、例えば、湿潤剤又は乳化剤、安定剤又はｐＨ緩衝剤を含む。一態様では、治療有効用量の本明細書に提供されるＡＡＶ粒子又は組成物が、対象に注入される。一態様では、治療有効用量の本明細書に提供されるＡＡＶ粒子又は組成物が、対象に送達される。一態様では、治療有効用量は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体と共に投与される。一態様では、治療有効用量は、本明細書に提供されるＡＡＶ粒子又は組成物の約１％～約５％、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３０％～約３５％、約４０～約４５％、約５０％～約５５％、約１％～約９５％、約２％～約９５％、約５％～約９５％、約１０％～約９５％、約１５％～約９５％、約２０％～約９５％、約２５％～約９５％、約３０％～約９５％、約３５％～約９５％、約４０％～約９５％、約４５％～約９５％、約５０％～約９５％、約５５％～約９５％、約６０％～約９５％、約６５％～約９５％、約７０％～約９５％、約４５％～約９５％、約８０％～約９５％、又は約８５％～約９５％を含む。
一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、少なくとも２日間又は数週間連続して、少なくとも１日１回又は少なくとも１週間に１回投与される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、若しくは１５日間又は数週間連続して、少なくとも１日１回又は少なくとも１週間に１回送達される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、若しくは１２週間連続して、少なくとも１日１回又は少なくとも１週間に１回送達される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、最大で４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、若しくは２０日間又は数週間連続して、少なくとも１日１回又は少なくとも１週間に１回送達される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、最大で１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、若しくは１２週間又は数ヶ月間連続して、少なくとも１日１回又は少なくとも１週間に１回送達される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、若しくは１２ヶ月間又は数年間連続して、慢性的に、対象の全生涯、又は無期限に、少なくとも１回投与される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、２年間連続して、３年間連続して、又は５年間連続して、年に１回送達される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、２年間連続して、年に１回送達される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、３年間連続して、年に１回送達される。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象に、５年間連続して、年に１回送達される。
本明細書で使用される場合、「寛解」、「治癒」、又は「奏効率」という用語は、それを必要とする対象の、治療有効用量に応答して治癒される割合又は神経学的状態の寛解若しくは完全な解消が得られる割合を指す。
本明細書で使用される場合、「奏効率」という用語は、それを必要とする対象の、治療有効用量に肯定的に応答する（例えば、１つ以上の症状の重症度又は頻度が低下した）割合を指す。
一態様では、治療有効用量は、少なくとも約５０％の神経学的状態の寛解、治癒、奏効率、又は解消率を達成する。一態様では、治療有効用量は、１つ以上の神経学的状態の症状を排除、低減、減速、又は遅延させる。神経学的状態の症状の非限定的な例としては、振戦、動きの鈍化（運動緩慢）、筋肉の硬直、姿勢及び平衡の障害、自動運動の喪失、発話の変化、しびれ、及び書字の変化が挙げられる。一態様では、神経学的状態の症状は、運動症状である。運動症状の非限定的な例としては、不随意運動の障害又は随意運動の障害が挙げられる。一態様では、神経学的状態の症状は、認知症状である。認知症状の非限定的な例としては、微細運動能力、振戦、発作、舞踏病、ジストニア、ジスキネジア、遅い又は異常な眼球運動、歩行障害、姿勢障害、平衡障害、発話困難、嚥下困難、整理困難、優先順位付け困難、課題に集中することの困難、柔軟性の欠如、衝動制御の欠如、爆発、自分自身の行動及び／又は能力の認識の欠如、思考の処理の遅さ、新しい情報を学習することの困難が挙げられる。
一態様では、神経学的状態の症状は、精神医学的症状である。精神医学的症状の非限定的な例としては、うつ病、過敏性、悲しみ又は無感情、ひきこもり、不眠症、疲労、エネルギーの欠如、強迫性障害、躁病、双極性障害、及び体重減少が挙げられる。一態様では、神経学的状態の症状は、少なくとも１つの損傷した血管である。一態様では、神経学的状態の症状は、損傷した血液脳関門（ＢＢＢ）である。一態様では、神経学的状態の症状は、損傷した血流である。神経学的状態の症状の除去、低減、減速、又は遅延を評価するための試験の非限定的な例としては、ハンチントン病統一評価尺度（ＵＨＤＲＳ）スコア、ＵＨＤＲＳ総機能容量（ＴＦＣ）、ＵＨＤＲＳ機能評価、ＵＨＤＲＳ歩行スコア、ＵＨＤＲＳ総運動スコア（ＴＭＳ）、ハミルトンうつ病尺度（ＨＡＭ－Ｄ）、コロンビア自殺重症度評価尺度（Ｃ－ＳＳＲＳ）、モントリオール認知評価（ＭｏＣＡ）、改訂ランキン尺度（ｍＲＳ）、国立衛生研究所脳卒中尺度（ＮＩＨＳＳ）、及びバーセル指数（ＢＩ）、タイムアップ・アンド・ゴー検査（Ｔｉｍｅｄ Ｕｐ ａｎｄ Ｇｏ Ｔｅｓｔ）（ＴＵＧ）、チェドック上肢機能調査（Ｃｈｅｄｏｋｅ Ａｒｍ ａｎｄ Ｈａｎｄ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ）（ＣＡＨＡＩ）、記号数字モダリティー検査、制御口頭語連想課題（Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｏｒａｌ Ｗｏｒｄ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｔａｓｋｓ）、共鳴画像診断（ＭＲＩ）、磁気共鳴画像診断（ｆＭＲＩ）、並びに陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）が挙げられる。
一態様では、治療有効用量は、約１０％～約９９％以上の神経学的状態の寛解、治癒、奏効率、又は解消率を達成する。一態様では、治療有効用量は、１０％～１００％、例えば、１０％～１５％、１０％～２０％、１０％～２５％、１５％～２０％、１５％～２５％、１５％～３０％、２０％～２５％、２０％～３０％、２０％～３５％、２５％～３０％、２５％～３５％、２５％～４０％、３０％～３５％、３０％～４０％、３５％～４５％、３５％～５０％、４０％～４５％、４０％～５０％、４０％～５５％、４５％～５０％、４５％～５５％、４５％～６０％、５０％～５５％、５０％～６０％、５０％～６５％、５５％～６０％、５５％～６５％、５５％～７０％、６０％～６５％、６０％～７０％、６０％～７５％、６５％～７０％、６５％～７５％、６５％～８０％、７０％～７５％、７０％～８０％、７０％～８５％、７５％～８０％、７５％～８５％、７５％～９０％、８０％～８５％、８０％～９０％、８０％～９５％、８５％～９０％、８５％～９５％、８５％～１００％、９０％～９５％、９０％～１００％、又は９５％～１００％の神経学的状態の寛解、治癒、奏効率、又は解消率を達成する。
一態様では、治療有効用量は、１つ以上の神経学的状態の症状を１０％～１００％、例えば、１０％～約１５％、１０％～２０％、１０％～２５％、１５％～２０％、１５％～２５％、１５％～３０％、２０％～２５％、２０％～３０％、２０％～３５％、２５～３０％、２５％～３５％、２５％～４０％、３０％～３５％、３０％～４０％、３５％～４５％、３５％～５０％、４０％～４５％、４０％～５０％、４０％～５５％、４５％～５０％、４５％～５５％、４５％～６０％、５０％～５５％、５０％～６０％、５０％～６５％、５５％～６０％、５５％～６５％、５５％～７０％、６０％～６５％、６０％～７０％、６０％～７５％、６５％～７０％、６５％～７５％、６５％～８０％、７０％～７５％、７０％～８０％、７０％～８５％、７５％～８０％、７５％～８５％、７５％～９０％、８０％～８５％、８０％～９０％、８０％～９５％、８５％～９０％、８５％～９５％、８５％～１００％、９０％～９５％、９０％～１００％、又は９５％～１００％除去、低減、減速、又は遅延させる。
一態様では、神経学的状態の症状は、処置当日、処置後１日、処置後３ヶ月、処置後６ヶ月、処置後１年、及びその後は毎年評価される。
一態様では、神経学的状態の症状は、処置後１日～処置後７日に評価される。一態様では、症状は、処置後１日～処置後２日、処置後１日～処置後３日、処置後１日～処置後４日、処置後２日～処置後３日、処置後２日～処置後４日、処置後２日～処置後５日、処置後３日～処置後４日、処置後３日～処置後５日、処置後３日～処置後６日、処置後４日～処置後５日、処置後４日～処置後６日、処置後４日～処置後７日、処置後５日～処置後６日、処置後５日～処置後７日、又は処置後６日～処置後７日に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１週～処置後４週に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１週～処置後２週、処置後１週～処置後３週、処置後１週～処置後４週、処置後２週～処置後３週、処置後２週～処置後４週、又は処置後３週～処置後４週に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１ヶ月～処置後１２ヶ月に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１ヶ月～処置後２ヶ月、処置後１ヶ月～処置後３ヶ月、処置後１ヶ月～処置後４ヶ月、処置後２ヶ月～処置後３ヶ月、処置後２ヶ月～処置後４ヶ月、処置後２ヶ月～処置後５ヶ月、処置後３ヶ月～処置後４ヶ月、処置後３ヶ月～処置後５ヶ月、処置後３ヶ月～処置後６ヶ月、処置後４ヶ月～処置後５ヶ月、処置後４ヶ月～処置後６ヶ月、処置後４ヶ月～処置後７ヶ月、処置後５ヶ月～処置後６ヶ月、処置後５ヶ月～処置後７ヶ月、処置後５ヶ月～処置後８ヶ月、処置後６ヶ月～処置後７ヶ月、処置後６ヶ月～処置後８ヶ月、処置後６ヶ月～処置後９ヶ月、処置後７ヶ月～処置後８ヶ月、処置後７ヶ月～処置後９ヶ月、処置後７ヶ月～処置後１０ヶ月、処置後８ヶ月～処置後９ヶ月、処置後８ヶ月～処置後１０ヶ月、処置後８ヶ月～処置後１１ヶ月、処置後９ヶ月～処置後１０ヶ月、処置後９ヶ月～処置後１１ヶ月、処置後９ヶ月～処置後１２ヶ月、処置後１０ヶ月～処置後１１ヶ月、処置後１０ヶ月～処置後１２ヶ月、又は処置後１１ヶ月～処置後１２ヶ月に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１年～処置後約２０年に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１年～処置後５年、処置後１年～処置後１０年、処置後１年～処置後１５年、処置後５年～処置後１０年、処置後５年～処置後１５年、処置後５年～処置後２０年、処置後１０年～処置後１５年、処置後１０年～処置後２０年、又は処置後１５年～処置後２０年に評価され得る。
本明細書で使用される場合、「生存率」という用語は、神経学的状態の診断後の所与の期間後にまだ生きている処置群の対象のコホートを指す。
一態様では、治療有効用量は、約１０％～９９％以上の生存率の増加を達成する。一態様では、治療有効用量は、１０％～１００％、例えば、１０％～１５％、１０％～２０％、１０％～２５％、１５％～２０％、１５％～２５％、１５％～３０％、２０％～２５％、２０％～３０％、２０％～３５％、２５％～３０％、２５％～３５％、２５％～４０％、３０％～３５％、３０％～４０％、３５％～４５％、３５％～５０％、４０％～４５％、４０％～５０％、４０％～５５％、４５％～５０％、４５％～５５％、４５％～６０％、５０％～５５％、５０％～６０％、５０％～６５％、５５％～６０％、５５％～６５％、５５％～７０％、６０％～６５％、６０％～７０％、６０％～７５％、６５％～７０％、６５％～７５％、６５％～８０％、７０％～７５％、７０％～８０％、７０％～８５％、７５％～８０％、７５％～８５％、７５％～９０％、８０％～８５％、８０％～９０％、８０％～９５％、８５％～９０％、８５％～９５％、８５％～１００％、９０％～９５％、９０％～１００％、又は９５％～１００％の生存率の増加を達成する。
本明細書で使用される場合、「平均余命」という用語は、対象が生存すると予想される期間を指す。
一態様では、治療有効用量は、平均余命を約１０％～９９％以上増加させる。一態様では、治療有効用量は、平均余命を１０％～１００％、例えば、１０％～１５％、１０％～２０％、１０％～２５％、１５％～２０％、１５％～２５％、１５％～３０％、２０％～２５％、２０％～３０％、２０％～３５％、２５％～３０％、２５％～３５％、２５％～４０％、３０％～３５％、３０％～４０％、３５％～４５％、３５％～５０％、４０％～４５％、４０％～５０％、４０％～５５％、４５％～５０％、４５％～５５％、４５％～６０％、５０％～５５％、５０％～６０％、５０％～６５％、５５％～６０％、５５％～６５％、５５％～７０％、６０％～６５％、６０％～７０％、６０％～７５％、６５％～７０％、６５％～７５％、６５％～８０％、７０％～７５％、７０％～８０％、７０％～８５％、７５％～８０％、７５％～８５％、７５％～９０％、８０％～８５％、８０％～９０％、８０％～９５％、８５％～９０％、８５％～９５％、８５％～１００％、９０％～９５％、９０％～１００％、又は９５％～１００％増加させる。
一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象の脳内の萎縮の量を約１０％～９９％以上減少させる。一態様では、治療有効用量は、それを必要とする対象の脳内の萎縮の量を１０％～１００％、例えば、１０％～１５％、１０％～２０％、１０％～２５％、１５％～２０％、１５％～２５％、１５％～３０％、２０％～２５％、２０％～３０％、２０％～３５％、２５％～３０％、２５％～３５％、２５％～４０％、３０％～３５％、３０％～４０％、３５％～４５％、３５％～５０％、４０％～４５％、４０％～５０％、４０％～５５％、４５％～５０％、４５％～５５％、４５％～６０％、５０％～５５％、５０％～６０％、５０％～６５％、５５％～６０％、５５％～６５％、５５％～７０％、６０％～６５％、６０％～７０％、６０％～７５％、６５％～７０％、６５％～７５％、６５％～８０％、７０％～７５％、７０％～８０％、７０％～８５％、７５％～８０％、７５％～８５％、７５％～９０％、８０％～８５％、８０％～９０％、８０％～９５％、８５％～９０％、８５％～９５％、８５％～１００％、９０％～９５％、９０％～１００％、又は９５％～１００％減少させる。
一態様では、治療を必要とする対象の脳内の萎縮の量は、処置当日、処置後１日、処置後３ヶ月、処置後６ヶ月、処置後１年、及びその後は毎年評価される。
一態様では、それを必要とする対象の脳内の萎縮の量は、処置後１日～処置後７日に評価される。一態様では、症状は、処置後１日～処置後２日、処置後１日～処置後３日、処置後１日～処置後４日、処置後２日～処置後３日、処置後２日～処置後４日、処置後２日～処置後５日、処置後３日～処置後４日、処置後３日～処置後５日、処置後３日～処置後６日、処置後４日～処置後５日、処置後４日～処置後６日、処置後４日～処置後７日、処置後５日～処置後６日、処置後５日～処置後７日、又は処置後６日～処置後７日に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１週～処置後４週に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１週～処置後２週、処置後１週～処置後３週、処置後１週～処置後４週、処置後２週～処置後３週、処置後２週～処置後４週、又は処置後３週～処置後４週に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１ヶ月～処置後１２ヶ月に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１ヶ月～処置後２ヶ月、処置後１ヶ月～処置後３ヶ月、処置後１ヶ月～処置後４ヶ月、処置後２ヶ月～処置後３ヶ月、処置後２ヶ月～処置後４ヶ月、処置後２ヶ月～処置後５ヶ月、処置後３ヶ月～処置後４ヶ月、処置後３ヶ月～処置後５ヶ月、処置後３ヶ月～処置後６ヶ月、処置後４ヶ月～処置後５ヶ月、処置後４ヶ月～処置後６ヶ月、処置後４ヶ月～処置後７ヶ月、処置後５ヶ月～処置後６ヶ月、処置後５ヶ月～処置後７ヶ月、処置後５ヶ月～処置後８ヶ月、処置後６ヶ月～処置後７ヶ月、処置後６ヶ月～処置後８ヶ月、処置後６ヶ月～処置後９ヶ月、処置後７ヶ月～処置後８ヶ月、処置後７ヶ月～処置後９ヶ月、処置後７ヶ月～処置後１０ヶ月、処置後８ヶ月～処置後９ヶ月、処置後８ヶ月～処置後１０ヶ月、処置後８ヶ月～処置後１１ヶ月、処置後９ヶ月～処置後１０ヶ月、処置後９ヶ月～処置後１１ヶ月、処置後９ヶ月～処置後１２ヶ月、処置後１０ヶ月～処置後１１ヶ月、処置後１０ヶ月～処置後１２ヶ月、又は処置後１１ヶ月～処置後１２ヶ月に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１年～処置後約２０年に評価され得る。一態様では、症状は、処置後１年～処置後５年、処置後１年～処置後１０年、処置後１年～処置後１５年、処置後５年～処置後１０年、処置後５年～処置後１５年、処置後５年～処置後２０年、処置後１０年～処置後１５年、処置後１０年～処置後２０年、又は処置後１５年～処置後２０年に評価され得る。
それを必要とする対象の脳内の萎縮の量を評価するための検査の非限定的な例としては、Ｎｉｓｓｌｅ染色、ＭＲＩ、ｆＭＲＩ、及びＰＥＴスキャンが挙げられる。
本開示は、好ましい実施形態を参照して説明されているが、本開示の範囲から逸脱することなく特定の状況に適応するように、様々な変更が行われ得、均等物がその要素に置き換えられ得ることが当業者によって理解されるであろう。したがって、本開示は、本開示を実施するために企図される最良の形態として開示される特定の実施形態に限定されるものではなく、本開示は、添付の特許請求の範囲の範囲及び趣旨内にある全ての実施形態を含むであろうことが意図される。
本明細書に示される実施例は、本開示のいくつかの実施形態を例示するが、いかなる様式でも本開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
実施例１．ＡＡＶベクター構築物
１２のＡＡＶベクター構築物
ＥＦ－１α：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（Ｐ４４）（図１Ｂ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図２Ｂ）、
ＥＦ－１α：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図３Ｂ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図１Ｄ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図２Ｄ）、
ＥＦ－１α：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧｈ（図４Ｄ）、
ＣＥ：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（Ｐ７５）（図１Ａ）、
ＣＥ：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図２Ａ）、
ＣＥ：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図３Ａ）、
ＣＥ：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図１Ｃ）、
ＣＥ：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図２Ｃ）、
ＣＥ：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図３Ｄ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（Ｐ６０）が構築される。
１２のＡＡＶベクター構築物
ＥＦ－１α：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（Ｐ４４）（図１Ｂ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図２Ｂ）、
ＥＦ－１α：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図３Ｂ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図１Ｄ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図２Ｄ）、
ＥＦ－１α：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧｈ（図４Ｄ）、
ＣＥ：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（Ｐ７５）（図１Ａ）、
ＣＥ：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図２Ａ）、
ＣＥ：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（図３Ａ）、
ＣＥ：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図１Ｃ）、
ＣＥ：Ｇｆａ１．６：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図２Ｃ）、
ＣＥ：ＧＦＡ２．２：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ｈＧＨ（図３Ｄ）、
ＥＦ－１α：Ｇｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０（Ｐ６０）が構築される。
１２のベクター構築物は全て、ｐＨＳＧ－２９９（Ｔａｋａｒａ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）を利用し、これは、骨格として、複製起点、カナマイシン耐性遺伝子、及びｌａｃＺ遺伝子と共に多重クローニング部位（ＭＳＣ）を含むｐＵＣベースのベクター構築物である。
発現カセットの５’末端は、ヒト伸長因子－１αプロモーターからのエンハンサー（ＥＦ－１αエンハンサー、配列番号２）又はサイトメガロウイルスエンハンサー（ＣＭＶエンハンサー、配列番号１１）であり、７５８ヌクレオチドのＧＦＡＰプロモーター（Ｇｆａ６８１；配列番号３）、１６６７ヌクレオチドのＧＦＡＰプロモーター（Ｇｆａ１．６；配列番号４）、又は２２１４ヌクレオチドのＧＦＡＰプロモーター（ＧＦＡ２．２配列番号１２）のいずれかの５’に配置される。
エンハンサー／ＧＦＡＰプロモーターに続いて（例えば、３’に）、５’から３’方向へ、いくつかの追加の配列が発現カセットに導入され、これには、キメライントロン（配列番号５又は配列番号１９）、ヒトＤｌｘ２コード配列（ｈＤｌｘ２；配列番号６）、及びウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ；配列番号７又は配列番号１８）が含まれる。これらの配列は全て、ＳＶ４０ポリ（Ａ）シグナル（配列番号８）又はｈＧＨポリ（Ａ）シグナル（配列番号１３）に作動可能に連結される。エンハンサー、ＧＦＡＰプロモーター、キメライントロン、ｈＤｌｘ２コード配列、ＷＰＲＥ、及びポリ（Ａ）シグナルは、２つのＡＡＶ ＩＴＲ配列に隣接している。
実施例２．ＡＡＶウイルス産生
１２のプラスミドの各々を、ポリエチレンイミンを使用して、Ｒｅｐ－Ｃａｐプラスミド（ＡＡＶのｒｅｐ及びｃａｐ遺伝子の発現を駆動するプロモーターを含むプラスミド）及びヘルパープラスミド（アデノウイルスのＥ２Ａ、Ｅ４、及びＶＡ ＲＮＡの発現を駆動するプロモーターを含むプラスミド）と共に、２９３ＡＡＶ細胞に共トランスフェクトして、組換えＡＡＶウイルス粒子を産生する。（Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｉｎｃ．）
１２のプラスミドの各々を、ポリエチレンイミンを使用して、Ｒｅｐ－Ｃａｐプラスミド（ＡＡＶのｒｅｐ及びｃａｐ遺伝子の発現を駆動するプロモーターを含むプラスミド）及びヘルパープラスミド（アデノウイルスのＥ２Ａ、Ｅ４、及びＶＡ ＲＮＡの発現を駆動するプロモーターを含むプラスミド）と共に、２９３ＡＡＶ細胞に共トランスフェクトして、組換えＡＡＶウイルス粒子を産生する。（Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｉｎｃ．）
トランスフェクションの７２時間後、トランスフェクトされた細胞を掻き取り、遠心分離する。細胞ペレットを、凍結し、解凍し、ドライアイス／エタノール混合物に入れ、続いて、３７℃の水浴に入れる。凍結／融解サイクルを更に３回繰り返す。ＡＡＶ溶解物を、不連続イオジキサノール勾配で、３５０，０００ｇで１時間超遠心分離することによって精製する（例えば、細胞破片を除去する）。ウイルス含有層を回収し、次いで、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ａｍｉｃｏｎウルトラ遠心式フィルターを使用して濃縮する。次いで、ＩＴＲ領域又は遺伝子／発現カセット特異的配列を増幅するプライマーを使用するｑＰＣＲによって、ウイルス力価を決定する。
実施例３．アストロサイト細胞培養物
ヒト皮質アストロサイト（ＨＡ１８００；ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）は、それらが９０％超コンフルエントである場合、継代培養する。継代培養の場合、細胞を、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｓｅｌｅｃｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を使用してトリプシン処理し、２００×ｇで５分間遠心分離し、次いで、再懸濁し、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｇｉｂｃｏ）、１０％のウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ）、３．５ｍＭのグルコース（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、Ｂ２７（Ｇｉｂｃｏ）、１０ｎｇ／ｍＬの上皮増殖因子（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、及び１０ｎｇ／ｍＬの線維芽細胞増殖因子２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む培地にプレーティングする。アストロサイトを、２４ウェルプレート（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中、ポリ－Ｄ－リジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）でコーティングされたカバースリップ（１２ｍｍ）上で、カバースリップ当たり約２０，０００細胞の密度で培養する。
ヒト皮質アストロサイト（ＨＡ１８００；ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）は、それらが９０％超コンフルエントである場合、継代培養する。継代培養の場合、細胞を、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｓｅｌｅｃｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を使用してトリプシン処理し、２００×ｇで５分間遠心分離し、次いで、再懸濁し、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｇｉｂｃｏ）、１０％のウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ）、３．５ｍＭのグルコース（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、Ｂ２７（Ｇｉｂｃｏ）、１０ｎｇ／ｍＬの上皮増殖因子（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、及び１０ｎｇ／ｍＬの線維芽細胞増殖因子２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む培地にプレーティングする。アストロサイトを、２４ウェルプレート（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中、ポリ－Ｄ－リジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）でコーティングされたカバースリップ（１２ｍｍ）上で、カバースリップ当たり約２０，０００細胞の密度で培養する。
（Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットの皮質又は線条体から単離された）ラット初代アストロサイトは、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｇｉｂｃｏ）、１０％のウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ）、３．５ｍＭのグルコース（Ｇｉｂｃｏ）を含む培地中で培養される。
全ての細胞は、５％の二酸化炭素を含む加湿空気中、３７℃で維持される。
実施例４．アストロサイト細胞培養物中でのＡＡＶベクターの試験（インビトロ）
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを使用して、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で、実施例３からのヒト皮質アストロサイト及びラット初代アストロサイトを感染させる。細胞の感染の２４時間後、培地を、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｇｉｂｃｏ）、Ｎ２サプリメント（Ｇｉｂｃｏ）、及び２０ｎｇ／ｍＬの脳由来神経栄養因子（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む分化培地で置き換える。４日ごとに、分化培地を細胞培養物に添加する。Ｓｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，４１７：３９－４４（２００２）を参照されたい。
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを使用して、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で、実施例３からのヒト皮質アストロサイト及びラット初代アストロサイトを感染させる。細胞の感染の２４時間後、培地を、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｇｉｂｃｏ）、Ｎ２サプリメント（Ｇｉｂｃｏ）、及び２０ｎｇ／ｍＬの脳由来神経栄養因子（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む分化培地で置き換える。４日ごとに、分化培地を細胞培養物に添加する。Ｓｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，４１７：３９－４４（２００２）を参照されたい。
細胞培養物中の空きスペースは、追加のヒトアストロサイトで満たされ、アストロサイト又はラット初代アストロサイトがニューロンに変換された場合、変換されたニューロンの機能的発生をサポートする。
実施例５．ＡＡＶベクター効力の試験
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを使用して、継代数４～７の実施例３のヒト皮質アストロサイト及びラット初代アストロサイト（又は他の脳領域又は脊髄からのアストロサイト）を、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で感染させる。ｑＰＣＲ、酵素結合免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）、及びウエスタンブロットを実施して、Ｄｌｘ２転写物の発現及びタンパク質レベルを決定する。
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを使用して、継代数４～７の実施例３のヒト皮質アストロサイト及びラット初代アストロサイト（又は他の脳領域又は脊髄からのアストロサイト）を、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で感染させる。ｑＰＣＲ、酵素結合免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）、及びウエスタンブロットを実施して、Ｄｌｘ２転写物の発現及びタンパク質レベルを決定する。
ＮｅｕＮ、ダブルコルチン（ＤＣＸ）、β３－チューブリン、ＮＦ－２００、及びＭＡＰ２の発現を、ｑＰＣＲ、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、及び免疫染色によって評価して、組換えＡＡＶの機能的出力を決定する。
実施例６．ＡＡＶベクターの滴定及び感染率の試験
精製したＡＡＶベクターをＤＮａｓｅＩで処理して、残留プラスミドの混入を排除する。一連のＡＡＶベクターの希釈を、１００倍、５００倍、２５００倍、及び１２５００倍で実施する。ＡＡＶプラスミド骨格を希釈して、段階希釈によって標準曲線を生成する。プラスミドを１０４、１０５、１０６、１０７、及び１０８分子／μＬに希釈する。ｑＰＣＲを、希釈したＡＡＶベクター及び希釈したＡＡＶプラスミドに対して実施する。使用するプライマーは、ＩＴＲ領域（フォワードＩＴＲプライマー、５’－ＧＧＡＡＣＣＣＣＴＡＧＴＧＡＴＧＧＡＧＴＴ、リバースＩＴＲプライマー、５’－ＣＧＧＣＣＴＣＡＧＴＧＡＧＣＧＡ）に対するものである。ｑＰＣＲミックスは、１０μＬのユニバーサルＳＹＢＲマスターミックス２Ｘ、２μＬの５μＭフォワードＩＴＲプライマー、２μＬの５μＭリバースＩＴＲプライマー、５μＬの試験試料又は希釈した標準物質、及び１μＬのＨ２Ｏを含む。ｑＰＣＲのプログラムは、９５℃で１０分間、続いて、９５℃で１５秒間、６０℃で３０秒間を４０サイクル、続いて、溶融曲線である。ｑＰＣＲサイクラーのソフトウェアを使用して、データを分析する。ＡＡＶ試料（ウイルスゲノム（ｖｇ）／ｍｌ）の物理的力価は、標準曲線に基づいて計算される。
精製したＡＡＶベクターをＤＮａｓｅＩで処理して、残留プラスミドの混入を排除する。一連のＡＡＶベクターの希釈を、１００倍、５００倍、２５００倍、及び１２５００倍で実施する。ＡＡＶプラスミド骨格を希釈して、段階希釈によって標準曲線を生成する。プラスミドを１０４、１０５、１０６、１０７、及び１０８分子／μＬに希釈する。ｑＰＣＲを、希釈したＡＡＶベクター及び希釈したＡＡＶプラスミドに対して実施する。使用するプライマーは、ＩＴＲ領域（フォワードＩＴＲプライマー、５’－ＧＧＡＡＣＣＣＣＴＡＧＴＧＡＴＧＧＡＧＴＴ、リバースＩＴＲプライマー、５’－ＣＧＧＣＣＴＣＡＧＴＧＡＧＣＧＡ）に対するものである。ｑＰＣＲミックスは、１０μＬのユニバーサルＳＹＢＲマスターミックス２Ｘ、２μＬの５μＭフォワードＩＴＲプライマー、２μＬの５μＭリバースＩＴＲプライマー、５μＬの試験試料又は希釈した標準物質、及び１μＬのＨ２Ｏを含む。ｑＰＣＲのプログラムは、９５℃で１０分間、続いて、９５℃で１５秒間、６０℃で３０秒間を４０サイクル、続いて、溶融曲線である。ｑＰＣＲサイクラーのソフトウェアを使用して、データを分析する。ＡＡＶ試料（ウイルスゲノム（ｖｇ）／ｍｌ）の物理的力価は、標準曲線に基づいて計算される。
ＡＡＶベクターの感染率は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ；Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）からの標準的なプロトコルを使用して実施される５０％組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイを使用して試験する。
実施例７．ＡＡＶ用量範囲の試験（インビボ）
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを、運動皮質への両側頭蓋内注入により、Ｃ５７／ＢＬ６マウスに注入する。各ＡＡＶは、１μＬの体積で、１×１０１１、３×１０１１、１×１０１２、３×１０１２、１×１０１２、３×１０１２、１×１０１３ウイルスゲノム／ｍＬの投与量で注入される。各投与量を、注入後４日、２０日、及び６０日で評価して、細胞及び組織レベルでの最適有効用量（ＯＥＤ）、最大耐容用量（ＭＴＤ）、及び最小有効用量（ＭＥＤ）を決定する。時点ごとに３匹のマウスが存在する。ＯＥＤ、ＭＴＤ、及びＭＥＤは、Ｄｌｘ２、ＧＦＡＰ、ＮｅｕＮ、及びＩｂａ１の免疫染色を介して、アストロサイトからニューロンへの変換効率及び潜在的な毒性の評価によって決定される。第１の用量範囲が、ＯＥＤ、ＭＴＤ、及びＭＥＤを決定するのに十分でない場合、第２の用量範囲は、１μＬの体積で、１×１０１０ウイルスゲノム／ｍＬ～１×１０１４ＧＣ／ｍＬで行われる。
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを、運動皮質への両側頭蓋内注入により、Ｃ５７／ＢＬ６マウスに注入する。各ＡＡＶは、１μＬの体積で、１×１０１１、３×１０１１、１×１０１２、３×１０１２、１×１０１２、３×１０１２、１×１０１３ウイルスゲノム／ｍＬの投与量で注入される。各投与量を、注入後４日、２０日、及び６０日で評価して、細胞及び組織レベルでの最適有効用量（ＯＥＤ）、最大耐容用量（ＭＴＤ）、及び最小有効用量（ＭＥＤ）を決定する。時点ごとに３匹のマウスが存在する。ＯＥＤ、ＭＴＤ、及びＭＥＤは、Ｄｌｘ２、ＧＦＡＰ、ＮｅｕＮ、及びＩｂａ１の免疫染色を介して、アストロサイトからニューロンへの変換効率及び潜在的な毒性の評価によって決定される。第１の用量範囲が、ＯＥＤ、ＭＴＤ、及びＭＥＤを決定するのに十分でない場合、第２の用量範囲は、１μＬの体積で、１×１０１０ウイルスゲノム／ｍＬ～１×１０１４ＧＣ／ｍＬで行われる。
実施例８．ヒト対象におけるＡＡＶベクターの試験（インビボ）
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを使用して、インビボでヒトの脳又は脊髄のアストロサイトに感染させる。組換えＡＡＶは、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で、１０μＬ～１０００μＬの範囲の体積で、神経学的状態を有するヒト対象の脳又は脊髄に注入される。ヒト対象の神経学的状態の症状、ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む脳の画像診断、並びに行動メトリックが、注入前、注入中、及び注入後に観察される。注入後の観察は、注入後最初の月まで、週に１回行われる。注入後の最初の月の後、観察は、次の１１ヶ月間、月に１回行われ、ウイルス注入後、２年まで延長され得る。
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを使用して、インビボでヒトの脳又は脊髄のアストロサイトに感染させる。組換えＡＡＶは、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で、１０μＬ～１０００μＬの範囲の体積で、神経学的状態を有するヒト対象の脳又は脊髄に注入される。ヒト対象の神経学的状態の症状、ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む脳の画像診断、並びに行動メトリックが、注入前、注入中、及び注入後に観察される。注入後の観察は、注入後最初の月まで、週に１回行われる。注入後の最初の月の後、観察は、次の１１ヶ月間、月に１回行われ、ウイルス注入後、２年まで延長され得る。
実施例９．非ヒト霊長類における用量スケールアッセイ
実施例７からのＤｌｘ２を発現する脳組織の体積を、ベクターゲノム（ｍｍ３／ベクターゲノム）の数で割る。非ヒト霊長類において処置される特定の脳領域の体積（ｍｍ３）を計算し、ベクターゲノムの用量範囲を、実施例７で得られた感染率に従ってスケーリングする。用量範囲試験は、実施例７のように実施され、ＯＥＤ、ＭＴＤ、及びＭＥＤは、Ｄｌｘ２、ＧＦＡＰ、ＮｅｕＮ、及びＩｂａ１の免疫染色を介して、アストロサイトから神経細胞への変換効率及び潜在的な毒性の評価によって決定される。
実施例７からのＤｌｘ２を発現する脳組織の体積を、ベクターゲノム（ｍｍ３／ベクターゲノム）の数で割る。非ヒト霊長類において処置される特定の脳領域の体積（ｍｍ３）を計算し、ベクターゲノムの用量範囲を、実施例７で得られた感染率に従ってスケーリングする。用量範囲試験は、実施例７のように実施され、ＯＥＤ、ＭＴＤ、及びＭＥＤは、Ｄｌｘ２、ＧＦＡＰ、ＮｅｕＮ、及びＩｂａ１の免疫染色を介して、アストロサイトから神経細胞への変換効率及び潜在的な毒性の評価によって決定される。
実施例１０．ハンチントン病を有するそれを必要とする対象の治療（インビボ）
ハンチントン病を有する対象を、実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶで処置する。対象の神経学的症状には、舞踏運動などの不随意運動、制御不能な姿勢、気分の変化、睡眠障害、発話の変化、嚥下困難、並びに学習及び記憶の障害などの認知機能が含まれる。組換えＡＡＶは、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で、１０μＬ～１０００μＬの範囲の体積で、神経学的状態を有するヒト対象の線条体（被殻及び尾状核）に注入される。ヒト対象の神経学的状態の症状、ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む脳の画像診断、並びに行動メトリックが、注入前、注入中、及び注入後に観察される。注入後の観察は、注入後最初の月まで、週に１回行われる。注入後の最初の月の後、観察は、次の１１ヶ月間、月に１回行われ、ウイルス注入後、２年まで延長され得る。
ハンチントン病を有する対象を、実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶで処置する。対象の神経学的症状には、舞踏運動などの不随意運動、制御不能な姿勢、気分の変化、睡眠障害、発話の変化、嚥下困難、並びに学習及び記憶の障害などの認知機能が含まれる。組換えＡＡＶは、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度範囲で、１０μＬ～１０００μＬの範囲の体積で、神経学的状態を有するヒト対象の線条体（被殻及び尾状核）に注入される。ヒト対象の神経学的状態の症状、ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む脳の画像診断、並びに行動メトリックが、注入前、注入中、及び注入後に観察される。注入後の観察は、注入後最初の月まで、週に１回行われる。注入後の最初の月の後、観察は、次の１１ヶ月間、月に１回行われ、ウイルス注入後、２年まで延長され得る。
実施例１１．Ｈｔｔ遺伝子発現のノックダウンのためのｓｈＲＮＡと共役して、グリア細胞をニューロンに直接変換するための組み合わせアプローチ
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ｓｈＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的化するように設計される。Ｄｌｘ２及び標的ｓｈＲＮＡは、ＡＡＶベクター構築物（ｈＵ６：：Ｈｔｔ ｓｈＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）（図５Ａ～図６Ｆ）にパッケージングされ、実施例２に記載されるように、組換えＡＡＶが産生される。組換えＡＡＶは、変異型Ｈｔｔ遺伝子を有するマウスの線条体に注入される。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）組換えＡＡＶ（ｈＵ６：：Ｈｔｔ ｓｈＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）を受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する（図５Ａ～図６Ｆ）。
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ｓｈＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子を標的化するように設計される。Ｄｌｘ２及び標的ｓｈＲＮＡは、ＡＡＶベクター構築物（ｈＵ６：：Ｈｔｔ ｓｈＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）（図５Ａ～図６Ｆ）にパッケージングされ、実施例２に記載されるように、組換えＡＡＶが産生される。組換えＡＡＶは、変異型Ｈｔｔ遺伝子を有するマウスの線条体に注入される。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）組換えＡＡＶ（ｈＵ６：：Ｈｔｔ ｓｈＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）を受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する（図５Ａ～図６Ｆ）。
代替的に、標的ｓｈＲＮＡは、ＡＡＶベクター構築物（ｈＵ６：：ｈＨｔｔ ｓｈＲＮＡ）にパッケージングされ、実施例２に記載されるように、別の組換えＡＡＶが産生される。２つの組換えＡＡＶは、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入される。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２から単独での組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶと組み合わせて組換えＡＡＶ（ｈＵ６：：ｈＨｔｔ ｓｈＲＮＡ）を受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
実施例１２．Ｈｔｔ遺伝子のＣＲＩＳＰＲ／ＣＡＳ遺伝子編集と共役して、グリア細胞をニューロンに直接変換するための組み合わせアプローチ
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）配列は、Ｈｔｔ遺伝子を標的化するように設計される。ドナー配列は、Ｈｔｔ遺伝子のＣＡＧリピートの数を３６未満に改変するように設計される。Ｃａｓ９ヌクレアーゼ、Ｈｔｔ特異的ｇＲＮＡ、及びドナー配列は、ＡＡＶベクター構築物（ＡＡＶ－Ｃａｓ９－ＨＴＴ）にパッケージングされる。組換えＡＡＶは、実施例２に記載されるように産生される。
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）配列は、Ｈｔｔ遺伝子を標的化するように設計される。ドナー配列は、Ｈｔｔ遺伝子のＣＡＧリピートの数を３６未満に改変するように設計される。Ｃａｓ９ヌクレアーゼ、Ｈｔｔ特異的ｇＲＮＡ、及びドナー配列は、ＡＡＶベクター構築物（ＡＡＶ－Ｃａｓ９－ＨＴＴ）にパッケージングされる。組換えＡＡＶは、実施例２に記載されるように産生される。
組換えＡＡＶ（ＡＡＶ－Ｃａｓ９－Ｈｔｔ）を、実施例２からの組換えＡＡＶと同時に、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入する。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶと共に組換えＡＡＶ－Ｃａｓ９－ＨＴＴを受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較して、変異型Ｈｔｔの遺伝子編集とグリアからニューロンへの変換との間の相乗効果を特定する。組換えＡＡＶ－Ｃａｓ９－ＨＴＴ及び実施例２からの組換えＡＡＶは、同時に又は異なる時間に注入することができる。
代替的に、Ｄｌｘ２、リンカー（Ｐ２Ａ）、Ｃａｓ９ヌクレアーゼ、Ｈｔｔ特異的ｇＲＮＡ、及びドナー配列は、ＡＡＶベクター構築物（ＡＡＶ－ｈＤｌｘ２－Ｐ２Ａ－Ｃａｓ９－ＨＴＴ）にパッケージングされる。組換えＡＡＶは、実施例２に記載されるように産生される。組換えＡＡＶ（ＡＡＶ－ｈＤｌｘ２－Ｐ２Ａ－Ｃａｓ９－ＨＴＴ）は、実施例２からの組換えＡＡＶと同時に、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入される。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶと共に組換えＡＡＶ－ｈＤｌｘ２－Ｐ２Ａ－Ｃａｓ９－ＨＴＴを受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較して、変異型Ｈｔｔの遺伝子編集とグリアからニューロンへの変換との間の相乗効果を特定する。
実施例１３．Ｈｔｔ遺伝子発現をノックダウンするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）と共役して、グリア細胞をニューロンに直接変換するための組み合わせアプローチ
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ＡＳＯは、Ｈｔｔ遺伝子発現をノックダウンするように設計及び合成される。実施例２からの組換えＡＡＶを、Ｈｔｔ ＡＳＯと一緒に、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入する。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）Ｈｔｔ ＡＳＯと一緒に、実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ＡＳＯは、Ｈｔｔ遺伝子発現をノックダウンするように設計及び合成される。実施例２からの組換えＡＡＶを、Ｈｔｔ ＡＳＯと一緒に、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入する。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）Ｈｔｔ ＡＳＯと一緒に、実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
実施例１４．Ｈｔｔ遺伝子発現をノックダウンするｓｉＲＮＡと共役して、グリア細胞をニューロンに直接変換するための組み合わせアプローチ
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ｓｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子の発現をノックダウンするように設計及び合成される。実施例２からの組換えＡＡＶを、Ｈｔｔ ｓｉＲＮＡと一緒に、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入する。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）Ｈｔｔ ｓｉＲＮＡと一緒に、実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
Ｈｔｔ遺伝子に相補的である標的配列が同定される。ｓｉＲＮＡは、Ｈｔｔ遺伝子の発現をノックダウンするように設計及び合成される。実施例２からの組換えＡＡＶを、Ｈｔｔ ｓｉＲＮＡと一緒に、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入する。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）Ｈｔｔ ｓｉＲＮＡと一緒に、実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
実施例１５．Ｈｔｔ遺伝子発現をノックダウンするｍｉＲＮＡと共役して、グリア細胞をニューロンに直接変換するための組み合わせアプローチ
Ｈｔｔ遺伝子の発現を調節しているｍｉＲＮＡが同定される。ＮｅｕｒｏＤ１、Ｄｌｘ２、及びｍｉＲＮＡは、ＡＡＶベクター（ＣＡＧ：：Ｈｔｔ ｍｉＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）にパッケージングされ、実施例２に記載されるように、組換えＡＡＶが産生される。組換えＡＡＶは、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入される。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）組換えＡＡＶ（ＣＡＧ：：Ｈｔｔ ｍｉＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）を受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
Ｈｔｔ遺伝子の発現を調節しているｍｉＲＮＡが同定される。ＮｅｕｒｏＤ１、Ｄｌｘ２、及びｍｉＲＮＡは、ＡＡＶベクター（ＣＡＧ：：Ｈｔｔ ｍｉＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）にパッケージングされ、実施例２に記載されるように、組換えＡＡＶが産生される。組換えＡＡＶは、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入される。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶを受ける群、及び（ｉｉｉ）組換えＡＡＶ（ＣＡＧ：：Ｈｔｔ ｍｉＲＮＡ－ｈＧＦＡＰ：：ｈＤｌｘ２）を受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
代替的に、標的ｍｉＲＮＡは、ＡＡＶベクター（ＣＡＧ：：ｈＨｔｔ ｍｉＲＮＡ）にパッケージングされ、実施例２に記載されるように、組換えＡＡＶが産生される。組換えＡＡＶは、変異型Ｈｔｔを有するマウスの線条体に注入される。処置を受けるマウスを、キャットウォーク、オープンフィールド試験、クラスピング、マウス体重、及び握力、並びに脳画像診断（ＭＲＩ、ＰＥＴスキャン、又はＭＲＩ及びＰＥＴの組み合わせを含む）などの行動メトリックについて試験する。（ｉ）処置を受けない群、（ｉｉ）実施例２から組換えＡＡＶのみを受ける群、及び（ｉｉｉ）実施例２からの組換えＡＡＶと組み合わせて組換えＡＡＶ（ＣＡＧ：：：ｈＨｔｔ ｍｉＲＮＡ）を受ける群間で、行動試験結果及び脳イメージングを比較する。
実施例１６．ラットアストロサイト初代培養の樹立の成功
皮質及び線条体の組織を、生後３日のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットの脳から単離する。組織を、パパインで処理して、単一細胞懸濁液を生成し、ポリ－Ｄ－リジンでコーティングされたフラスコに播種する。細胞を、ＧＦＡＰ抗体及びＳＯＸ９抗体で免疫染色する。細胞を、ＤＡＰＩ抗体で対比染色する。ＧＦＡＰ及びＳＯＸ９染色によって同定された（継代６の）細胞の９５％超がアストロサイトである（図７）。左端のパネルは、ＧＦＡＰ染色細胞の画像を提示する。左中央のパネルは、ＳＯＸ９染色細胞の画像を提示する。左中央のパネルは、ＤＡＰＩ染色細胞の画像を提示する。右端のパネルは、ＧＦＡＰ、ＳＯＸ９、及びＤＡＰＩ染色細胞の重ね合わせ画像を提示する。
皮質及び線条体の組織を、生後３日のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットの脳から単離する。組織を、パパインで処理して、単一細胞懸濁液を生成し、ポリ－Ｄ－リジンでコーティングされたフラスコに播種する。細胞を、ＧＦＡＰ抗体及びＳＯＸ９抗体で免疫染色する。細胞を、ＤＡＰＩ抗体で対比染色する。ＧＦＡＰ及びＳＯＸ９染色によって同定された（継代６の）細胞の９５％超がアストロサイトである（図７）。左端のパネルは、ＧＦＡＰ染色細胞の画像を提示する。左中央のパネルは、ＳＯＸ９染色細胞の画像を提示する。左中央のパネルは、ＤＡＰＩ染色細胞の画像を提示する。右端のパネルは、ＧＦＡＰ、ＳＯＸ９、及びＤＡＰＩ染色細胞の重ね合わせ画像を提示する。
実施例１７．プラスミドでトランスフェクトされたアストロサイトにおけるＤｌｘ２の発現
初代ラットアストロサイトを播種し、実施例２に記載されるように、発現ベクターであるＰ４４（ＥＥ：ｐＧｆａ６８１：ＣＩ：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０）、Ｐ６０（ＥＥ：ｐＧｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０）、Ｐ７５（ＣＥ：ｐＧｆａ６８１：ＣＩ：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０）でトランスフェクトする。Ｄｌｘ２タンパク質の発現は、抗Ｄｌｘ２抗体、続いて蛍光色素コンジュゲート二次抗体による免疫染色、及び蛍光顕微鏡を使用してキャプチャされた画像によって視覚化される。（図８；上のパネルは、細胞のＤｌｘ２染色を示し、下のパネルは、細胞のＤｌｘ２染色及びＤＡＰＩ染色の重ね合わせを示す）。
初代ラットアストロサイトを播種し、実施例２に記載されるように、発現ベクターであるＰ４４（ＥＥ：ｐＧｆａ６８１：ＣＩ：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０）、Ｐ６０（ＥＥ：ｐＧｆａ６８１：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０）、Ｐ７５（ＣＥ：ｐＧｆａ６８１：ＣＩ：Ｄｌｘ２：ＷＰＲＥ：ＳＶ４０）でトランスフェクトする。Ｄｌｘ２タンパク質の発現は、抗Ｄｌｘ２抗体、続いて蛍光色素コンジュゲート二次抗体による免疫染色、及び蛍光顕微鏡を使用してキャプチャされた画像によって視覚化される。（図８；上のパネルは、細胞のＤｌｘ２染色を示し、下のパネルは、細胞のＤｌｘ２染色及びＤＡＰＩ染色の重ね合わせを示す）。
実施例１８．初代ラットアストロサイトへのＡＡＶウイルス粒子の形質導入の定量分析
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを、２４ウェルプレート又は９６ウェルプレートに播種した初代ラットアストロサイトに、ウイルス粒子ＡＡＶ９－Ｐ１２（ｐＧｆａ６８１：ＧＦＰ）及びＡＡＶ５－Ｐ７（ｐＥＦ－１α：ＧＦＰ）で形質導入する。感染の７日後、細胞をトリプシン処理によって回収する。細胞を、固定し、洗浄し、ＰＢＳに懸濁する。全ての細胞と比較して、ＧＦＰ陽性細胞をカウントするために、フローサイトメトリーを使用してウイルス形質導入率を分析する（図９Ａ～９Ｂ）。図９Ａは、５×１０５ｖｇ／細胞、２×１０５ｖｇ／細胞、及び５×１０４ｖｇ／細胞のＭＯＩでのＡＡＶ９－Ｐ１２（ｐＧｆａ６８１：ＧＦＰ）及びＡＡＶ５－Ｐ７（ｐＥＦ－１α：ＧＦＰ）の形質導入率（％）を示す。図９Ｂは、２×１０４細胞／ウェル、１．５×１０４細胞／ウェル、１×１０４細胞／ウェル、及び５×１０３細胞／ウェルの一連の密度で９６ウェルプレートに播種され、１００μＬの培地中、一連の量のウイルス（２μＬ、１μＬ、０．５μＬ、０．２５μＬ、０．１２５μＬの１×１０１３ｖｇ／ｍｌのウイルス）に感染した細胞におけるＡＡＶウイルス粒子の形質導入率を示す。
実施例２の方法から得られた組換えＡＡＶを、２４ウェルプレート又は９６ウェルプレートに播種した初代ラットアストロサイトに、ウイルス粒子ＡＡＶ９－Ｐ１２（ｐＧｆａ６８１：ＧＦＰ）及びＡＡＶ５－Ｐ７（ｐＥＦ－１α：ＧＦＰ）で形質導入する。感染の７日後、細胞をトリプシン処理によって回収する。細胞を、固定し、洗浄し、ＰＢＳに懸濁する。全ての細胞と比較して、ＧＦＰ陽性細胞をカウントするために、フローサイトメトリーを使用してウイルス形質導入率を分析する（図９Ａ～９Ｂ）。図９Ａは、５×１０５ｖｇ／細胞、２×１０５ｖｇ／細胞、及び５×１０４ｖｇ／細胞のＭＯＩでのＡＡＶ９－Ｐ１２（ｐＧｆａ６８１：ＧＦＰ）及びＡＡＶ５－Ｐ７（ｐＥＦ－１α：ＧＦＰ）の形質導入率（％）を示す。図９Ｂは、２×１０４細胞／ウェル、１．５×１０４細胞／ウェル、１×１０４細胞／ウェル、及び５×１０３細胞／ウェルの一連の密度で９６ウェルプレートに播種され、１００μＬの培地中、一連の量のウイルス（２μＬ、１μＬ、０．５μＬ、０．２５μＬ、０．１２５μＬの１×１０１３ｖｇ／ｍｌのウイルス）に感染した細胞におけるＡＡＶウイルス粒子の形質導入率を示す。
実施例１９．インビトロでのＤｌｘ２の導入遺伝子発現
ベクター：ベクターは、ラット皮質アストロサイト（ＲＡＣ）のトランスフェクションを介して試験される。加えて、ＡＡＶは、選択されたベクターで生成され、形質導入を介してインビトロで試験される：ＮＸＬ－Ｐ４４：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ＷＰＲＥ－ＳＶ４０ｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ６０：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－Ｄｌｘ２－ＷＰＲＥ－ＳＶ４０ｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ７５：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ＷＰＲＥ－ＳＶ４０ｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１０４：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＧＲＩ－Ｄｌｘ２－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１０５：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１３１：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１３３：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＧＲＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１３７：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＧＲＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
ベクター：ベクターは、ラット皮質アストロサイト（ＲＡＣ）のトランスフェクションを介して試験される。加えて、ＡＡＶは、選択されたベクターで生成され、形質導入を介してインビトロで試験される：ＮＸＬ－Ｐ４４：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ＷＰＲＥ－ＳＶ４０ｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ６０：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－Ｄｌｘ２－ＷＰＲＥ－ＳＶ４０ｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ７５：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ＷＰＲＥ－ＳＶ４０ｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１０４：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＧＲＩ－Ｄｌｘ２－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１０５：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１３１：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１３３：ＣＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＧＲＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
●ＮＸＬ－Ｐ１３７：ＥＥ－ｐＧｆａ６８１－ＣＧＲＩ－Ｄｌｘ２－ｏＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ
ＮＸＬ－Ｐ１０４及びＮＸＬ－Ｐ１０５構築物は、これらの細胞における陽性Ｄｌｘ２染色によって実証されるように、培養ＲＡＣのトランスフェクションの２４時間後、Ｄｌｘ２の発現を駆動するのに有効である（図１０）。ＮＸＬ－Ｐ１３３、ＮＸＬ－Ｐ１３７、及びＮＸＬ－Ｐ１３１構築物は、これらの細胞における陽性Ｄｌｘ２染色によって実証されるように、培養ＲＡＣのトランスフェクションの２４時間後、Ｄｌｘ２の発現を駆動するのに有効である（図１１）。ＡＡＶ９－Ｐ１３３（ＮＬＸ－Ｐ１３３で産生されるＡＡＶ）は、これらの細胞における陽性Ｄｌｘ２染色によって実証されるように、培養ＲＡＣをこのウイルスで形質導入した後、Ｄｌｘ２の発現を駆動するのに有効である（図１２）。
本開示の組成物及び方法に対する様々な更なる修正及び改善は、当業者には明らかであろう。以下の非限定的な実施形態が想定される。
１．配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、ｈＤｌｘ２配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
２．配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
３．ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）タンパク質をコードするＤｌｘ２核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、当該コード配列が、
（ａ）グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）ポリアデニル化シグナル配列と、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
４．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
５．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
６．治療を必要とする対象の治療のためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、
（ａ）グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）ポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含む、組成物。
７．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２、ＡＡＶ血清型５、及びＡＡＶ血清型９からなる群から選択される、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
８．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２である、実施形態７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
９．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型５である、実施形態７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１０．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型９である、実施形態７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１１．当該グリア細胞が、反応性アストロサイトである、実施形態４又は５に記載の組成物。
１２．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態４又は５に記載の組成物。
１３．当該ヒトが、神経学的状態を有する、実施形態４又は５に記載の組成物。
１４．当該Ｄｌｘ２が、ヒトＤｌｘ２（ｈＤｌｘ２）である、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
１５．当該Ｄｌｘ２が、チンパンジーＤｌｘ２、ボノボＤｌｘ２、オランウータンＤｌｘ２、ゴリラＤｌｘ２、マカクＤｌｘ２、マーモセットＤｌｘ２、オマキザルＤｌｘ２、ヒヒＤｌｘ２、テナガザルＤｌｘ２、及びキツネザルＤｌｘ２からなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
１６．当該ｈＤｌｘ２が、配列番号１０と少なくとも８０％同一又は類似のアミノ酸配列をコードする核酸コード配列を含む、実施形態１４に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１７．当該ｈＤｌｘ２コード配列が、配列番号６又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１４に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１８．当該ＧＦＡＰプロモーターが、ヒトＧＦＡＰ（ｈＧＦＡＰ）プロモーターである、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
１９．当該ＧＦＡＰプロモーターが、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター、ボノボＧＦＡＰプロモーター、オランウータンＧＦＡＰプロモーター、ゴリラＧＦＡＰプロモーター、マカクＧＦＡＰプロモーター、マーモセットＧＦＡＰプロモーター、オマキザルＧＦＡＰプロモーター、ヒヒＧＦＡＰプロモーター、テナガザルＧＦＡＰプロモーター、及びキツネザルＧＦＡＰプロモーターからなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２０．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２１．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号４又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２２．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号１２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２３．当該エンハンサーが、ヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーからなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２４．当該ＥＦ１－αが、配列番号２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２３に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２５．当該ＣＭＶエンハンサーが、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２３に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２６．当該キメライントロンが、配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２７．当該ＷＰＲＥが、配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２８．当該ポリアデニル化シグナルが、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、ｈＧＨポリアデニル化シグナル、及びｂＧＨポリアデニル化シグナルからなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２９．当該ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルが、配列番号８又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
３０．当該ｈＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号１３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
３１．当該ｂＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
３２．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶタンパク質配列をコードする核酸配列を更に含む、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
３３．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３４．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型５の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３５．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型９の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３６．当該ＡＡＶベクターが、配列番号１と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３７．当該ＡＡＶベクターが、配列番号９と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３８．組成物を必要とする当該対象が、哺乳動物である、実施形態６に記載の組成物。
３９．当該哺乳動物が、ヒトである、実施形態３８に記載の組成物。
４０．当該哺乳動物が、非ヒト霊長類である、実施形態３８に記載の組成物。
４１．組成物を必要とする当該対象が、神経学的状態を有する、実施形態６に記載の組成物。
４２．当該神経学的状態が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系への傷害を含む、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４３．当該神経学的状態が、ＣＮＳへの傷害を含む、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４４．当該神経学的状態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４５．当該神経学的状態が、アルツハイマー病である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４６．当該神経学的状態が、パーキンソン病である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４７．当該神経学的状態が、ＡＬＳである、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４８．当該神経学的状態が、ハンチントン病である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４９．当該神経学的状態が、脳卒中である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
５０．当該脳卒中が、虚血性脳卒中である、実施形態４９に記載の組成物。
５１．当該脳卒中が、出血性脳卒中である、実施形態４９に記載の組成物。
５２．当該組成物が、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、実施形態４１に記載の組成物。
５３．当該グリア細胞が、アストロサイト及びＮＧ２細胞からなる群から選択される、実施形態５２に記載の組成物。
５４．当該グリア細胞が、アストロサイトである、実施形態５２に記載の組成物。
５５．当該アストロサイトが、反応性アストロサイトである、実施形態５４に記載の組成物。
５６．当該グリア細胞が、ＧＦＡＰ陽性である、実施形態５２に記載の組成物。
５７．当該ニューロンが、機能的なニューロンである、実施形態５２に記載の組成物。
５８．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態５２に記載の組成物。
５９．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロンである、実施形態５８に記載の組成物。
６０．当該組成物が、それを必要とする対象に送達されるように製剤化される、実施形態６に記載の組成物。
６１．当該組成物が、局所送達用に製剤化される、実施形態６０に記載の組成物。
６２．当該組成物が、全身送達用に製剤化される、実施形態６１に記載の組成物。
６３．当該組成物が、腹腔内、筋肉内、静脈内、髄腔内、脳内、頭蓋内、側脳室内、大槽内、硝子体内、網膜下内、実質内、鼻腔内、又は経口投与を介した送達用に製剤化される、実施形態６０～６２のいずれか１つに記載の組成物。
６４．実施形態６に記載の組成物を、それを必要とする当該対象に送達することを含む、方法。
６５．当該組成物が、それを必要とする対象に送達されるように製剤化される、実施形態６４に記載の方法。
６６．当該送達が、局所投与を含む、実施形態６４に記載の方法。
６７．当該送達が、全身投与を含む、実施形態６４に記載の方法。
６８．当該送達が、腹腔内、筋肉内、静脈内、髄腔内、脳内、頭蓋内、側脳室内、大槽内、硝子体内、網膜下内、実質内、鼻腔内、又は経口投与を含む、実施形態６４～６７のいずれか１つに記載の方法。
６９．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、方法。
７０．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される、方法。
７１．グリア細胞をニューロンに変換することを必要とする対象において、それを行う方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする当該対象に送達することを含み、当該ＡＡＶが、
（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）及びポリアデニル化シグナル配列と、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、
当該ベクターが、それを必要とする当該対象において、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、方法。
７２．神経学的状態の治療を必要とする対象において、それを行う方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を当該対象に送達することを含み、当該ＡＡＶが、
（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）それを必要とする当該対象へのポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含む、方法。
７３．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型２、ＡＡＶ血清型５、及びＡＡＶ血清型９からなる群から選択される、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
７４．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型２である、実施形態７３に記載の方法。
７５．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型５である、実施形態７３に記載の方法。
７６．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型９である、実施形態７３に記載の方法。
７７．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンである、実施形態６９又は７０に記載の方法。
７８．当該Ｄｌｘ２が、ヒトＤｌｘ２（ｈＤｌｘ２）である、実施形態７１又は７２に記載の方法。
７９．当該Ｄｌｘ２が、チンパンジーＤｌｘ２、ボノボＤｌｘ２、オランウータンＤｌｘ２、ゴリラＤｌｘ２、マカクＤｌｘ２、マーモセットＤｌｘ２、オマキザルＤｌｘ２、ヒヒＤｌｘ２、テナガザルＤｌｘ２、及びキツネザルＤｌｘ２からなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８０．当該ｈＤｌｘ２が、配列番号１０と少なくとも８０％同一又は類似のアミノ酸配列をコードするアミノ酸配列を含む、実施形態７８に記載の方法。
８１．当該ｈＤｌｘ２配列が、配列番号６又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７８に記載の方法。
８２．当該ＧＦＡＰプロモーターが、ヒトＧＦＡＰ（ｈＧＦＡＰ）プロモーターである、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８３．当該ＧＦＡＰプロモーターが、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター、ボノボＧＦＡＰプロモーター、オランウータンＧＦＡＰプロモーター、ゴリラＧＦＡＰプロモーター、マカクＧＦＡＰプロモーター、マーモセットＧＦＡＰプロモーター、オマキザルＧＦＡＰプロモーター、ヒヒＧＦＡＰプロモーター、テナガザルＧＦＡＰプロモーター、及びキツネザルＧＦＡＰプロモーターからなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８４．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８２に記載の方法。
８５．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号４又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８３に記載の方法。
８６．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号１２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８２に記載の方法。
８７．当該エンハンサーが、ヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーからなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８８．当該ＥＦ１－αが、配列番号２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８７に記載の方法。
８９．当該ＣＭＶエンハンサーが、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８７に記載の方法。
９０．当該キメライントロンが、配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９１．当該ＷＰＲＥが、配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９２．当該ポリアデニル化シグナルが、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル及びｈＧＨポリアデニル化シグナルからなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９３．当該ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルが、配列番号８又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９４．当該ｈＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号１３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９５．当該ｂＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９６．当該ベクターが、ＡＡＶタンパク質配列をコードする核酸配列を更に含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９７．当該ベクターが、ＡＡＶ血清型２の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
９８．当該ベクターが、ＡＡＶ血清型５の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
９９．当該ベクターが、ＡＡＶ血清型９の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
１００．当該ベクターが、配列番号１と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
１０１．当該ベクターが、配列番号９と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
１０２．当該変換が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系において生じる、実施形態６９に記載の方法。
１０３．当該変換が、ＣＮＳにおいて生じる、実施形態７１に記載の方法。
１０４．方法を必要とする当該対象が、哺乳動物である、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１０５．当該哺乳動物が、ヒトである、実施形態１０４に記載の方法。
１０６．当該哺乳動物が、非ヒト霊長類である、実施形態１０４に記載の方法。
１０７．当該送達が、局所投与を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１０８．当該送達が、全身投与を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１０９．当該送達が、腹腔内投与、筋肉内投与、静脈内投与、髄腔内投与、脳内投与、頭蓋内投与、側脳室内投与、大槽内投与、硝子体内投与、網膜下内投与、実質内投与、鼻腔内投与、及び経口投与からなる群から選択される投与を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１１０．当該注入が、腹腔内注入、筋肉内注入、静脈内注入、髄腔内注入、脳内注入、頭蓋内注入、側脳室内注入、大槽内注入、硝子体内注入、網膜下内注入、実質内注入、鼻腔内注入、及び経口注入からなる群から選択される注入を含む、実施形態６９又は７０に記載の方法。
１１１．当該送達が、注入を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１１２．当該注入が、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度で行われる、実施形態６９、７０、又は１１１のいずれか１つに記載の方法。
１１３．当該注入が、０．１μＬ／分～５．０μＬ／分の流量を更に含む、実施形態１１２に記載の方法。
１１４．当該少なくとも１つのグリア細胞が、少なくとも１つのアストロサイト及び少なくとも１つのＮＧ２細胞からなる群から選択される、実施形態７１に記載の方法。
１１５．当該少なくとも１つのグリア細胞が、少なくとも１つのアストロサイトである、実施形態６９に記載の方法。
１１６．当該少なくとも１つのアストロサイトが、反応性アストロサイトである、実施形態１１４又は１１５に記載の方法。
１１７．当該ニューロンが、機能的なニューロンである、実施形態１に記載の方法。
１１８．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態６９、７０、及び１１７のいずれか１つに記載の方法。
１１９．当該対象が、当該送達前の当該対象と比較して、少なくとも１つの神経学的状態の症状の改善を示す、実施形態７１に記載の方法。
１２０．当該改善が、当該送達の１年以内に測定される、実施形態１１９に記載の方法。
１２１．当該方法が、当該ＡＡＶベクターを当該対象の脳に直接注入することを含む、実施形態６９、７０、又は１１１のいずれか１つに記載の方法。
１２２．当該変換が、当該脳の大脳皮質におけるものである、実施形態６９又は７０に記載の方法。
１２３．当該方法が、当該ＡＡＶベクターを当該対象の脊髄に直接注入することを含む、実施形態６９、又は７０、又は１１１のいずれか１つに記載の方法。
１２４．当該神経学的状態が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系への傷害を含む、実施形態７２に記載の方法。
１２５．当該神経学的状態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される、実施形態７２に記載の方法。
１２６．当該神経学的状態が、アルツハイマー病である、実施形態７２に記載の方法。
１２７．当該神経学的状態が、パーキンソン病である、実施形態７２に記載の方法。
１２８．当該神経学的状態が、ＡＬＳである、実施形態７２に記載の方法。
１２９．当該神経学的状態が、ハンチントン病である、実施形態７２に記載の方法。
１３０．当該神経学的状態が、脳卒中である、実施形態７２に記載の方法。
１３１．当該脳卒中が、虚血性脳卒中である、実施形態１３０に記載の方法。
１３２．当該脳卒中が、出血性脳卒中である、実施形態１３０に記載の方法。
１３３．当該方法が、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、実施形態７２に記載の方法。
１３４．当該グリア細胞が、アストロサイト及びＮＧ２細胞からなる群から選択される、実施形態１３３に記載の方法。
１３５．当該グリア細胞が、アストロサイトである、実施形態１３２に記載の方法。
１３６．当該アストロサイトが、反応性アストロサイトである、実施形態１３５に記載の方法。
１３７．当該グリア細胞が、ＧＦＡＰ陽性である、実施形態１３３に記載の方法。
１３８．当該ニューロンが、機能的なニューロンである、実施形態１３３に記載の方法。
１３９．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態１３８に記載の方法。
１４０．治療有効用量の当該ＡＡＶが、当該対象に注入される、実施形態６９又は７０に記載の方法。
１４１．治療有効用量の当該ＡＡＶが、当該対象に送達される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１４２．当該治療有効用量が、薬学的に許容される担体と共に投与される、実施形態１４０又は１４１に記載の方法。
１４３．配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、ｈＤｌｘ２配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
１４４．配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
１４５．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
１４６．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
１４７．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、方法。
１４８．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される、方法。
１．配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、ｈＤｌｘ２配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
２．配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
３．ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）タンパク質をコードするＤｌｘ２核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、当該コード配列が、
（ａ）グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）ポリアデニル化シグナル配列と、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
４．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
５．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
６．治療を必要とする対象の治療のためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、
（ａ）グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）ポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含む、組成物。
７．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２、ＡＡＶ血清型５、及びＡＡＶ血清型９からなる群から選択される、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
８．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２である、実施形態７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
９．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型５である、実施形態７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１０．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型９である、実施形態７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１１．当該グリア細胞が、反応性アストロサイトである、実施形態４又は５に記載の組成物。
１２．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態４又は５に記載の組成物。
１３．当該ヒトが、神経学的状態を有する、実施形態４又は５に記載の組成物。
１４．当該Ｄｌｘ２が、ヒトＤｌｘ２（ｈＤｌｘ２）である、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
１５．当該Ｄｌｘ２が、チンパンジーＤｌｘ２、ボノボＤｌｘ２、オランウータンＤｌｘ２、ゴリラＤｌｘ２、マカクＤｌｘ２、マーモセットＤｌｘ２、オマキザルＤｌｘ２、ヒヒＤｌｘ２、テナガザルＤｌｘ２、及びキツネザルＤｌｘ２からなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
１６．当該ｈＤｌｘ２が、配列番号１０と少なくとも８０％同一又は類似のアミノ酸配列をコードする核酸コード配列を含む、実施形態１４に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１７．当該ｈＤｌｘ２コード配列が、配列番号６又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１４に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
１８．当該ＧＦＡＰプロモーターが、ヒトＧＦＡＰ（ｈＧＦＡＰ）プロモーターである、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
１９．当該ＧＦＡＰプロモーターが、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター、ボノボＧＦＡＰプロモーター、オランウータンＧＦＡＰプロモーター、ゴリラＧＦＡＰプロモーター、マカクＧＦＡＰプロモーター、マーモセットＧＦＡＰプロモーター、オマキザルＧＦＡＰプロモーター、ヒヒＧＦＡＰプロモーター、テナガザルＧＦＡＰプロモーター、及びキツネザルＧＦＡＰプロモーターからなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２０．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２１．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号４又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２２．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号１２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２３．当該エンハンサーが、ヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーからなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２４．当該ＥＦ１－αが、配列番号２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２３に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２５．当該ＣＭＶエンハンサーが、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２３に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
２６．当該キメライントロンが、配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２７．当該ＷＰＲＥが、配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２８．当該ポリアデニル化シグナルが、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、ｈＧＨポリアデニル化シグナル、及びｂＧＨポリアデニル化シグナルからなる群から選択される、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
２９．当該ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルが、配列番号８又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
３０．当該ｈＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号１３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
３１．当該ｂＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
３２．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶタンパク質配列をコードする核酸配列を更に含む、実施形態３に記載のＡＡＶベクター、又は実施形態６に記載の組成物。
３３．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３４．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型５の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３５．当該ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型９の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３６．当該ＡＡＶベクターが、配列番号１と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３７．当該ＡＡＶベクターが、配列番号９と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態１～３のいずれか１つに記載のＡＡＶベクター、又は実施形態４～６のいずれか１つに記載の組成物。
３８．組成物を必要とする当該対象が、哺乳動物である、実施形態６に記載の組成物。
３９．当該哺乳動物が、ヒトである、実施形態３８に記載の組成物。
４０．当該哺乳動物が、非ヒト霊長類である、実施形態３８に記載の組成物。
４１．組成物を必要とする当該対象が、神経学的状態を有する、実施形態６に記載の組成物。
４２．当該神経学的状態が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系への傷害を含む、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４３．当該神経学的状態が、ＣＮＳへの傷害を含む、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４４．当該神経学的状態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４５．当該神経学的状態が、アルツハイマー病である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４６．当該神経学的状態が、パーキンソン病である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４７．当該神経学的状態が、ＡＬＳである、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４８．当該神経学的状態が、ハンチントン病である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
４９．当該神経学的状態が、脳卒中である、実施形態１３又は４１に記載の組成物。
５０．当該脳卒中が、虚血性脳卒中である、実施形態４９に記載の組成物。
５１．当該脳卒中が、出血性脳卒中である、実施形態４９に記載の組成物。
５２．当該組成物が、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、実施形態４１に記載の組成物。
５３．当該グリア細胞が、アストロサイト及びＮＧ２細胞からなる群から選択される、実施形態５２に記載の組成物。
５４．当該グリア細胞が、アストロサイトである、実施形態５２に記載の組成物。
５５．当該アストロサイトが、反応性アストロサイトである、実施形態５４に記載の組成物。
５６．当該グリア細胞が、ＧＦＡＰ陽性である、実施形態５２に記載の組成物。
５７．当該ニューロンが、機能的なニューロンである、実施形態５２に記載の組成物。
５８．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態５２に記載の組成物。
５９．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロンである、実施形態５８に記載の組成物。
６０．当該組成物が、それを必要とする対象に送達されるように製剤化される、実施形態６に記載の組成物。
６１．当該組成物が、局所送達用に製剤化される、実施形態６０に記載の組成物。
６２．当該組成物が、全身送達用に製剤化される、実施形態６１に記載の組成物。
６３．当該組成物が、腹腔内、筋肉内、静脈内、髄腔内、脳内、頭蓋内、側脳室内、大槽内、硝子体内、網膜下内、実質内、鼻腔内、又は経口投与を介した送達用に製剤化される、実施形態６０～６２のいずれか１つに記載の組成物。
６４．実施形態６に記載の組成物を、それを必要とする当該対象に送達することを含む、方法。
６５．当該組成物が、それを必要とする対象に送達されるように製剤化される、実施形態６４に記載の方法。
６６．当該送達が、局所投与を含む、実施形態６４に記載の方法。
６７．当該送達が、全身投与を含む、実施形態６４に記載の方法。
６８．当該送達が、腹腔内、筋肉内、静脈内、髄腔内、脳内、頭蓋内、側脳室内、大槽内、硝子体内、網膜下内、実質内、鼻腔内、又は経口投与を含む、実施形態６４～６７のいずれか１つに記載の方法。
６９．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、方法。
７０．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される、方法。
７１．グリア細胞をニューロンに変換することを必要とする対象において、それを行う方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする当該対象に送達することを含み、当該ＡＡＶが、
（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）及びポリアデニル化シグナル配列と、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、
当該ベクターが、それを必要とする当該対象において、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、方法。
７２．神経学的状態の治療を必要とする対象において、それを行う方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を当該対象に送達することを含み、当該ＡＡＶが、
（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）それを必要とする当該対象へのポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含む、方法。
７３．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型２、ＡＡＶ血清型５、及びＡＡＶ血清型９からなる群から選択される、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
７４．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型２である、実施形態７３に記載の方法。
７５．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型５である、実施形態７３に記載の方法。
７６．当該ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型９である、実施形態７３に記載の方法。
７７．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンである、実施形態６９又は７０に記載の方法。
７８．当該Ｄｌｘ２が、ヒトＤｌｘ２（ｈＤｌｘ２）である、実施形態７１又は７２に記載の方法。
７９．当該Ｄｌｘ２が、チンパンジーＤｌｘ２、ボノボＤｌｘ２、オランウータンＤｌｘ２、ゴリラＤｌｘ２、マカクＤｌｘ２、マーモセットＤｌｘ２、オマキザルＤｌｘ２、ヒヒＤｌｘ２、テナガザルＤｌｘ２、及びキツネザルＤｌｘ２からなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８０．当該ｈＤｌｘ２が、配列番号１０と少なくとも８０％同一又は類似のアミノ酸配列をコードするアミノ酸配列を含む、実施形態７８に記載の方法。
８１．当該ｈＤｌｘ２配列が、配列番号６又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７８に記載の方法。
８２．当該ＧＦＡＰプロモーターが、ヒトＧＦＡＰ（ｈＧＦＡＰ）プロモーターである、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８３．当該ＧＦＡＰプロモーターが、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター、ボノボＧＦＡＰプロモーター、オランウータンＧＦＡＰプロモーター、ゴリラＧＦＡＰプロモーター、マカクＧＦＡＰプロモーター、マーモセットＧＦＡＰプロモーター、オマキザルＧＦＡＰプロモーター、ヒヒＧＦＡＰプロモーター、テナガザルＧＦＡＰプロモーター、及びキツネザルＧＦＡＰプロモーターからなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８４．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８２に記載の方法。
８５．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号４又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８３に記載の方法。
８６．当該ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号１２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８２に記載の方法。
８７．当該エンハンサーが、ヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーからなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
８８．当該ＥＦ１－αが、配列番号２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８７に記載の方法。
８９．当該ＣＭＶエンハンサーが、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態８７に記載の方法。
９０．当該キメライントロンが、配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９１．当該ＷＰＲＥが、配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９２．当該ポリアデニル化シグナルが、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル及びｈＧＨポリアデニル化シグナルからなる群から選択される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９３．当該ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルが、配列番号８又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９４．当該ｈＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号１３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９５．当該ｂＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９６．当該ベクターが、ＡＡＶタンパク質配列をコードする核酸配列を更に含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
９７．当該ベクターが、ＡＡＶ血清型２の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
９８．当該ベクターが、ＡＡＶ血清型５の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
９９．当該ベクターが、ＡＡＶ血清型９の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
１００．当該ベクターが、配列番号１と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
１０１．当該ベクターが、配列番号９と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、実施形態６９～７２のいずれか１つに記載の方法。
１０２．当該変換が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系において生じる、実施形態６９に記載の方法。
１０３．当該変換が、ＣＮＳにおいて生じる、実施形態７１に記載の方法。
１０４．方法を必要とする当該対象が、哺乳動物である、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１０５．当該哺乳動物が、ヒトである、実施形態１０４に記載の方法。
１０６．当該哺乳動物が、非ヒト霊長類である、実施形態１０４に記載の方法。
１０７．当該送達が、局所投与を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１０８．当該送達が、全身投与を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１０９．当該送達が、腹腔内投与、筋肉内投与、静脈内投与、髄腔内投与、脳内投与、頭蓋内投与、側脳室内投与、大槽内投与、硝子体内投与、網膜下内投与、実質内投与、鼻腔内投与、及び経口投与からなる群から選択される投与を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１１０．当該注入が、腹腔内注入、筋肉内注入、静脈内注入、髄腔内注入、脳内注入、頭蓋内注入、側脳室内注入、大槽内注入、硝子体内注入、網膜下内注入、実質内注入、鼻腔内注入、及び経口注入からなる群から選択される注入を含む、実施形態６９又は７０に記載の方法。
１１１．当該送達が、注入を含む、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１１２．当該注入が、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度で行われる、実施形態６９、７０、又は１１１のいずれか１つに記載の方法。
１１３．当該注入が、０．１μＬ／分～５．０μＬ／分の流量を更に含む、実施形態１１２に記載の方法。
１１４．当該少なくとも１つのグリア細胞が、少なくとも１つのアストロサイト及び少なくとも１つのＮＧ２細胞からなる群から選択される、実施形態７１に記載の方法。
１１５．当該少なくとも１つのグリア細胞が、少なくとも１つのアストロサイトである、実施形態６９に記載の方法。
１１６．当該少なくとも１つのアストロサイトが、反応性アストロサイトである、実施形態１１４又は１１５に記載の方法。
１１７．当該ニューロンが、機能的なニューロンである、実施形態１に記載の方法。
１１８．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態６９、７０、及び１１７のいずれか１つに記載の方法。
１１９．当該対象が、当該送達前の当該対象と比較して、少なくとも１つの神経学的状態の症状の改善を示す、実施形態７１に記載の方法。
１２０．当該改善が、当該送達の１年以内に測定される、実施形態１１９に記載の方法。
１２１．当該方法が、当該ＡＡＶベクターを当該対象の脳に直接注入することを含む、実施形態６９、７０、又は１１１のいずれか１つに記載の方法。
１２２．当該変換が、当該脳の大脳皮質におけるものである、実施形態６９又は７０に記載の方法。
１２３．当該方法が、当該ＡＡＶベクターを当該対象の脊髄に直接注入することを含む、実施形態６９、又は７０、又は１１１のいずれか１つに記載の方法。
１２４．当該神経学的状態が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系への傷害を含む、実施形態７２に記載の方法。
１２５．当該神経学的状態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される、実施形態７２に記載の方法。
１２６．当該神経学的状態が、アルツハイマー病である、実施形態７２に記載の方法。
１２７．当該神経学的状態が、パーキンソン病である、実施形態７２に記載の方法。
１２８．当該神経学的状態が、ＡＬＳである、実施形態７２に記載の方法。
１２９．当該神経学的状態が、ハンチントン病である、実施形態７２に記載の方法。
１３０．当該神経学的状態が、脳卒中である、実施形態７２に記載の方法。
１３１．当該脳卒中が、虚血性脳卒中である、実施形態１３０に記載の方法。
１３２．当該脳卒中が、出血性脳卒中である、実施形態１３０に記載の方法。
１３３．当該方法が、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、実施形態７２に記載の方法。
１３４．当該グリア細胞が、アストロサイト及びＮＧ２細胞からなる群から選択される、実施形態１３３に記載の方法。
１３５．当該グリア細胞が、アストロサイトである、実施形態１３２に記載の方法。
１３６．当該アストロサイトが、反応性アストロサイトである、実施形態１３５に記載の方法。
１３７．当該グリア細胞が、ＧＦＡＰ陽性である、実施形態１３３に記載の方法。
１３８．当該ニューロンが、機能的なニューロンである、実施形態１３３に記載の方法。
１３９．当該機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、実施形態１３８に記載の方法。
１４０．治療有効用量の当該ＡＡＶが、当該対象に注入される、実施形態６９又は７０に記載の方法。
１４１．治療有効用量の当該ＡＡＶが、当該対象に送達される、実施形態７１又は７２に記載の方法。
１４２．当該治療有効用量が、薬学的に許容される担体と共に投与される、実施形態１４０又は１４１に記載の方法。
１４３．配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、ｈＤｌｘ２配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
１４４．配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
１４５．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
１４６．ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、当該ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。
１４７．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、方法。
１４８．生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、当該ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、当該コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される、方法。
Claims (148)
- 配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、前記ｈＤｌｘ２配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。 - 配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、前記コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。 - ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）タンパク質をコードするＤｌｘ２核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、前記コード配列が、
（ａ）グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）ポリアデニル化シグナル配列と、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。 - ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、前記ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、前記配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。 - ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、前記ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含み、前記コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。 - 治療を必要とする対象の治療のためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、前記ＡＡＶベクターが、
（ａ）グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）ポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含む、組成物。 - 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２、ＡＡＶ血清型５、及びＡＡＶ血清型９からなる群から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載のＡＡＶベクター、又は請求項４～６のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２である、請求項７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型５である、請求項７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型９である、請求項７に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記グリア細胞が、反応性アストロサイトである、請求項４又は５に記載の組成物。
- 前記機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性（ｓｅｒａｔｏｎｅｒｇｉｃ）ニューロン、エピネフリン作動性（ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅｒｇｉｃ）ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、請求項４又は５に記載の組成物。
- 前記ヒトが、神経学的状態を有する、請求項４又は５に記載の組成物。
- 前記Ｄｌｘ２が、ヒトＤｌｘ２（ｈＤｌｘ２）である、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記Ｄｌｘ２が、チンパンジーＤｌｘ２、ボノボＤｌｘ２、オランウータンＤｌｘ２、ゴリラＤｌｘ２、マカクＤｌｘ２、マーモセットＤｌｘ２、オマキザルＤｌｘ２、ヒヒＤｌｘ２、テナガザルＤｌｘ２、及びキツネザルＤｌｘ２からなる群から選択される、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ｈＤｌｘ２が、配列番号１０と少なくとも８０％同一又は類似のアミノ酸配列をコードする核酸コード配列を含む、請求項１４に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ｈＤｌｘ２コード配列が、配列番号６又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項１４に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ＧＦＡＰプロモーターが、ヒトＧＦＡＰ（ｈＧＦＡＰ）プロモーターである、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ＧＦＡＰプロモーターが、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター、ボノボＧＦＡＰプロモーター、オランウータンＧＦＡＰプロモーター、ゴリラＧＦＡＰプロモーター、マカクＧＦＡＰプロモーター、マーモセットＧＦＡＰプロモーター、オマキザルＧＦＡＰプロモーター、ヒヒＧＦＡＰプロモーター、テナガザルＧＦＡＰプロモーター、及びキツネザルＧＦＡＰプロモーターからなる群から選択される、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号４又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号１２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項１８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記エンハンサーが、ヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーからなる群から選択される、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ＥＦ１－αが、配列番号２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項２３に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ＣＭＶエンハンサーが、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項２３に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記キメライントロンが、配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ＷＰＲＥが、配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ポリアデニル化シグナルが、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、ｈＧＨポリアデニル化シグナル、及びｂＧＨポリアデニル化シグナルからなる群から選択される、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルが、配列番号８又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ｈＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号１３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ｂＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項２８に記載のＡＡＶベクター又は組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶタンパク質配列をコードする核酸配列を更に含む、請求項３に記載のＡＡＶベクター、又は請求項６に記載の組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型２の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のＡＡＶベクター、又は請求項４～６のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型５の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のＡＡＶベクター、又は請求項４～６のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ血清型９の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のＡＡＶベクター、又は請求項４～６のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、配列番号１と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のＡＡＶベクター、又は請求項４～６のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記ＡＡＶベクターが、配列番号９と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のＡＡＶベクター、又は請求項４～６のいずれか一項に記載の組成物。
- 組成物を必要とする前記対象が、哺乳動物である、請求項６に記載の組成物。
- 前記哺乳動物が、ヒトである、請求項３８に記載の組成物。
- 前記哺乳動物が、非ヒト霊長類である、請求項３８に記載の組成物。
- 組成物を必要とする前記対象が、神経学的状態を有する、請求項６に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系への傷害を含む、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、ＣＮＳへの傷害を含む、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、アルツハイマー病である、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、パーキンソン病である、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、ＡＬＳである、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、ハンチントン病である、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記神経学的状態が、脳卒中である、請求項１３又は４１に記載の組成物。
- 前記脳卒中が、虚血性脳卒中である、請求項４９に記載の組成物。
- 前記脳卒中が、出血性脳卒中である、請求項４９に記載の組成物。
- 前記組成物が、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、請求項４１に記載の組成物。
- 前記グリア細胞が、アストロサイト及びＮＧ２細胞からなる群から選択される、請求項５２に記載の組成物。
- 前記グリア細胞が、アストロサイトである、請求項５２に記載の組成物。
- 前記アストロサイトが、反応性アストロサイトである、請求項５４に記載の組成物。
- 前記グリア細胞が、ＧＦＡＰ陽性である、請求項５２に記載の組成物。
- 前記ニューロンが、機能的なニューロンである、請求項５２に記載の組成物。
- 前記機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、請求項５２に記載の組成物。
- 前記機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロンである、請求項５８に記載の組成物。
- 前記組成物が、それを必要とする対象に送達されるように製剤化される、請求項６に記載の組成物。
- 前記組成物が、局所送達用に製剤化される、請求項６０に記載の組成物。
- 前記組成物が、全身送達用に製剤化される、請求項６１に記載の組成物。
- 前記組成物が、腹腔内、筋肉内、静脈内、髄腔内、脳内、頭蓋内、側脳室内、大槽内、硝子体内、網膜下内、実質内、鼻腔内、又は経口投与を介した送達用に製剤化される、請求項６０～６２のいずれか一項に記載の組成物。
- 請求項６に記載の組成物を、それを必要とする前記対象に送達することを含む、方法。
- 前記組成物が、それを必要とする対象に送達されるように製剤化される、請求項６４に記載の方法。
- 前記送達が、局所投与を含む、請求項６４に記載の方法。
- 前記送達が、全身投与を含む、請求項６４に記載の方法。
- 前記送達が、腹腔内、筋肉内、静脈内、髄腔内、脳内、頭蓋内、側脳室内、大槽内、硝子体内、網膜下内、実質内、鼻腔内、又は経口投与を含む、請求項６４～６７のいずれか一項に記載の方法。
- 生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、前記ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、前記配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、方法。 - 生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、前記ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、前記コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列を含むキメライントロンと、
（ｄ）配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列を含むウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される、方法。 - グリア細胞をニューロンに変換することを必要とする対象において、それを行う方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする前記対象に送達することを含み、前記ＡＡＶが、
（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）及びポリアデニル化シグナル配列と、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、
前記ベクターが、それを必要とする前記対象において、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、方法。 - 神経学的状態の治療を必要とする対象において、それを行う方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を前記対象に送達することを含み、前記ＡＡＶが、
（ａ）グリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）エンハンサーと、
（ｃ）キメライントロンと、
（ｄ）ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）と、
（ｅ）それを必要とする前記対象へのポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結されたｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（Ｄｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含む、方法。 - 前記ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型２、ＡＡＶ血清型５、及びＡＡＶ血清型９からなる群から選択される、請求項６９～７２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型２である、請求項７３に記載の方法。
- 前記ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型５である、請求項７３に記載の方法。
- 前記ＡＡＶが、ＡＡＶ血清型９である、請求項７３に記載の方法。
- 前記機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンである、請求項６９又は７０に記載の方法。
- 前記Ｄｌｘ２が、ヒトＤｌｘ２（ｈＤｌｘ２）である、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記Ｄｌｘ２が、チンパンジーＤｌｘ２、ボノボＤｌｘ２、オランウータンＤｌｘ２、ゴリラＤｌｘ２、マカクＤｌｘ２、マーモセットＤｌｘ２、オマキザルＤｌｘ２、ヒヒＤｌｘ２、テナガザルＤｌｘ２、及びキツネザルＤｌｘ２からなる群から選択される、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ｈＤｌｘ２が、配列番号１０と少なくとも８０％同一又は類似のアミノ酸配列をコードするアミノ酸配列を含む、請求項７８に記載の方法。
- 前記ｈＤｌｘ２配列が、配列番号６又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項７８に記載の方法。
- 前記ＧＦＡＰプロモーターが、ヒトＧＦＡＰ（ｈＧＦＡＰ）プロモーターである、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ＧＦＡＰプロモーターが、チンパンジーＧＦＡＰプロモーター、ボノボＧＦＡＰプロモーター、オランウータンＧＦＡＰプロモーター、ゴリラＧＦＡＰプロモーター、マカクＧＦＡＰプロモーター、マーモセットＧＦＡＰプロモーター、オマキザルＧＦＡＰプロモーター、ヒヒＧＦＡＰプロモーター、テナガザルＧＦＡＰプロモーター、及びキツネザルＧＦＡＰプロモーターからなる群から選択される、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項８２に記載の方法。
- 前記ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号４又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項８３に記載の方法。
- 前記ｈＧＦＡＰプロモーターが、配列番号１２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項８２に記載の方法。
- 前記エンハンサーが、ヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーからなる群から選択される、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ＥＦ１－αが、配列番号２又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項８７に記載の方法。
- 前記ＣＭＶエンハンサーが、配列番号１１又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項８７に記載の方法。
- 前記キメライントロンが、配列番号５及び１９からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ＷＰＲＥが、配列番号７及び１８からなる群から選択される核酸配列又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ポリアデニル化シグナルが、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル及びｈＧＨポリアデニル化シグナルからなる群から選択される、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルが、配列番号８又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ｈＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号１３又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ｂＧＨポリアデニル化シグナルが、配列番号２０又はその相補体と少なくとも８０％同一の核酸配列を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ベクターが、ＡＡＶタンパク質配列をコードする核酸配列を更に含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記ベクターが、ＡＡＶ血清型２の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、請求項６９～７２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ベクターが、ＡＡＶ血清型５の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、請求項６９～７２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ベクターが、ＡＡＶ血清型９の逆位末端反復（ＩＴＲ）を含む、請求項６９～７２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ベクターが、配列番号１と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、請求項６９～７２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ベクターが、配列番号９と少なくとも８０％同一の少なくとも１つのＩＴＲ核酸配列を含む、請求項６９～７２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記変換が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系において生じる、請求項６９に記載の方法。
- 前記変換が、前記ＣＮＳにおいて生じる、請求項７１に記載の方法。
- 方法を必要とする前記対象が、哺乳動物である、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記哺乳動物が、ヒトである、請求項１０４に記載の方法。
- 前記哺乳動物が、非ヒト霊長類である、請求項１０４に記載の方法。
- 前記送達が、局所投与を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記送達が、全身投与を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記送達が、腹腔内投与、筋肉内投与、静脈内投与、髄腔内投与、脳内投与、頭蓋内投与、側脳室内投与、大槽内投与、硝子体内投与、網膜下内投与、実質内投与、鼻腔内投与、及び経口投与からなる群から選択される投与を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記注入が、腹腔内注入、筋肉内注入、静脈内注入、髄腔内注入、脳内注入、頭蓋内注入、側脳室内注入、大槽内注入、硝子体内注入、網膜下内注入、実質内注入、鼻腔内注入、及び経口注入からなる群から選択される注入を含む、請求項６９又は７０に記載の方法。
- 前記送達が、注入を含む、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記注入が、１０１０粒子／ｍＬ～１０１４粒子／ｍＬの濃度で行われる、請求項６９、７０、又は１１１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記注入が、０．１μＬ／分～５．０μＬ／分の流量を更に含む、請求項１１２に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのグリア細胞が、少なくとも１つのアストロサイト及び少なくとも１つのＮＧ２細胞からなる群から選択される、請求項７１に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのグリア細胞が、少なくとも１つのアストロサイトである、請求項６９に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのアストロサイトが、反応性アストロサイトである、請求項１１４又は１１５に記載の方法。
- 前記ニューロンが、機能的なニューロンである、請求項１に記載の方法。
- 前記機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、請求項６９、７０、及び１１７のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が、前記送達前の前記対象と比較して、少なくとも１つの神経学的状態の症状の改善を示す、請求項７１に記載の方法。
- 前記改善が、前記送達の１年以内に測定される、請求項１１９に記載の方法。
- 前記方法が、前記ＡＡＶベクターを前記対象の前記脳に直接注入することを含む、請求項６９、７０、又は１１１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記変換が、前記脳の大脳皮質におけるものである、請求項６９又は７０に記載の方法。
- 前記方法が、前記ＡＡＶベクターを前記対象の脊髄に直接注入することを含む、請求項６９、又は７０、又は１１１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記神経学的状態が、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系への傷害を含む、請求項７２に記載の方法。
- 前記神経学的状態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、てんかん、身体的傷害、脳卒中、脳動脈瘤、外傷性脳傷害、脳振盪、腫瘍、炎症、感染、運動失調症、脳萎縮、脊髄萎縮、多発性硬化症、外傷性脊髄傷害、虚血性又は出血性脊髄症（脊髄症）、全虚血、低酸素性虚血性脳症、塞栓症、線維軟骨塞栓症脊髄症、血栓症、腎症、慢性炎症性疾患、髄膜炎、及び脳静脈洞血栓症からなる群から選択される、請求項７２に記載の方法。
- 前記神経学的状態が、アルツハイマー病である、請求項７２に記載の方法。
- 前記神経学的状態が、パーキンソン病である、請求項７２に記載の方法。
- 前記神経学的状態が、ＡＬＳである、請求項７２に記載の方法。
- 前記神経学的状態が、ハンチントン病である、請求項７２に記載の方法。
- 前記神経学的状態が、脳卒中である、請求項７２に記載の方法。
- 前記脳卒中が、虚血性脳卒中である、請求項１３０に記載の方法。
- 前記脳卒中が、出血性脳卒中である、請求項１３０に記載の方法。
- 前記方法が、少なくとも１つのグリア細胞をニューロンに変換することができる、請求項７２に記載の方法。
- 前記グリア細胞が、アストロサイト及びＮＧ２細胞からなる群から選択される、請求項１３３に記載の方法。
- 前記グリア細胞が、アストロサイトである、請求項１３２に記載の方法。
- 前記アストロサイトが、反応性アストロサイトである、請求項１３５に記載の方法。
- 前記グリア細胞が、ＧＦＡＰ陽性である、請求項１３３に記載の方法。
- 前記ニューロンが、機能的なニューロンである、請求項１３３に記載の方法。
- 前記機能的なニューロンが、グルタミン酸作動性ニューロン、ＧＡＢＡ作動性ニューロン、ドーパミン作動性ニューロン、コリン作動性ニューロン、セロトニン作動性ニューロン、エピネフリン作動性ニューロン、運動ニューロン、及びペプチド作動性ニューロンからなる群から選択される、請求項１３８に記載の方法。
- 治療有効用量の前記ＡＡＶが、前記対象に注入される、請求項６９又は７０に記載の方法。
- 治療有効用量の前記ＡＡＶが、前記対象に送達される、請求項７１又は７２に記載の方法。
- 前記治療有効用量が、薬学的に許容される担体と共に投与される、請求項１４０又は１４１に記載の方法。
- 配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、前記ｈＤｌｘ２配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。 - 配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸コード配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターであって、前記コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ１－α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を有するＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。 - ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、前記ＡＡＶベクターが、配列番号６の核酸配列を有するヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含み、前記配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含むヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。 - ヒトにおいて、グリア細胞を機能的なニューロンに変換するためのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む組成物であって、前記ＡＡＶベクターが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含み、前記コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、組成物。 - 生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、前記ＡＡＶが、配列番号６の核酸配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、前記配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む調節エレメントに作動可能に連結される、方法。 - 生きているヒトの脳において、反応性アストロサイトを機能的なニューロンに変換する方法であって、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を、それを必要とする対象に注入することを含み、前記ＡＡＶが、配列番号１０のアミノ酸コード配列を含むヒトｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓホメオボックス２（ｈＤｌｘ２）タンパク質をコードする核酸配列を含むＤＮＡベクター構築物を含み、前記コード配列が、
（ａ）配列番号３、４、及び１２からなる群から選択される核酸配列を含む、ヒトグリア線維性酸タンパク質（ＧＦＡＰ）プロモーターと、
（ｂ）配列番号２の核酸配列を含むヒト伸長因子－１α（ＥＦ－１α）プロモーターからのエンハンサー又は配列番号１１の核酸配列を含むサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーと、
（ｃ）配列番号８の核酸配列を含むＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、配列番号１３の核酸配列を含むｈＧＨポリアデニル化シグナル、又は配列番号２０の核酸配列を含むｂＧＨポリアデニル化シグナルと、を含む発現制御エレメントに作動可能に連結される、方法。
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