JP2023534460A - コンジュゲーション部位を有するｔ細胞調節性ポリペプチド及びその使用方法 - Google Patents

Abstract

本開示は、化学的コンジュゲーション部位及び少なくとも１つの免疫調節性ポリペプチド配列を含むＴ細胞調節ポリペプチド（Ｔ細胞－ＭＰ）であって、少なくとも１つの免疫調節性ポリペプチド配列は、そのコグネイト共免疫調節性ポリペプチドに対する減少した結合親和性を示すように選択され得る、Ｔ細胞調節ポリペプチド（Ｔ細胞－ＭＰ）を提供する。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、エピトープを提示する分子にコンジュゲートされてＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを形成し得る。Ｔ細胞－エピトープコンジュゲートは、コンジュゲートエピトープに特異的なＴ細胞の活性を調節する（例えば、増殖または細胞傷害活性を増加させる）のに有用であり、したがって、治療剤としての使用のために有用である。【選択図】図１

Description

配列表の組み込み
本出願は、紙コピー及びコンピュータ可読形式（ＣＲＦ）の両方として機能する、ＥＦＳ－ｗｅｂを介して電子的に提出された配列表を含有し、「１２３６４０－８０２１ＵＳ０２＿ｓｅｑｌｉｓｔ．ｔｘｔ」という名前のファイルからなり、これは２０２１年７月１３日に作成され、サイズが６４１，５１６バイトであり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

序論
適応免疫反応を誘導する能力は、Ｔ細胞の表面上に配置されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面上に提示される主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ；ヒトではヒト白血球抗原（ＨＬＡ）複合体とも称される）によって提示される小ペプチドまたは非ペプチド分子（例えば、ポリペプチド等の分子のエピトープ）との係合を伴う。この係合は、免疫系の標的化メカニズムを表し、Ｔ細胞調節（活性化または阻害）及びエフェクター機能のための不可欠な分子相互作用である。エピトープ特異的細胞標的化の後、標的とされたＴ細胞の反応は、Ｔ細胞上の対応受容体の係合を介して作用する免疫調節性分子（その一部はＡＰＣの表面上に見られる）の存在によって指示される。両方のシグナル（エピトープ／ＴＣＲ結合及び免疫調節性分子とＴ細胞上のそれらの対応受容体との係合）は、標的Ｔ細胞機能の活性化または阻害を誘導するために必要とされる。ＴＣＲは、所与のエピトープに特異的である；しかしながら、免疫調節性分子のための対応受容体は、エピトープ特異的ではなく、代わりに、すべてのＴ細胞または大型のＴ細胞サブセットに広く発現する。

本開示は、とりわけ、哺乳動物（例えば、ヒト）の様々な疾患（例えば、がん、ウイルス感染症及び自己免疫障害）及び他の障害のｉｎ ｖｉｖｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、及びｉｎ ｖｉｔｒｏ処置の方法及びそのような処置のための薬品の調製に利用されるＴ細胞調節性ポリペプチド（「Ｔ細胞－ＭＰ」または多重「Ｔ細胞－ＭＰ」）を提供する。一態様では、本明細書に記載のＴ細胞－ＭＰは、クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチドの一部、β２Ｍポリペプチド、エピトープ提示分子に共有結合させるための化学的コンジュゲーション部位、及び少なくとも１つの免疫調節性ポリペプチド（本明細書で「ＭＯＤポリペプチド」または、単に、「ＭＯＤ」とも称される）を含む。Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＯＤの任意の１つ以上は、Ｃｏ－ＭＯＤと称される野生型（「ｗｔ．」）、またはその細胞結合パートナー／受容体（例えば、Ｔ細胞表面）に対する変化した結合親和性を示すバリアントであり得る。

Ｔ細胞－ＭＰは、コンジュゲートされていない場合があり、その場合、それらは、少なくとも１つの化学的コンジュゲーション部位を含み、そこで標的抗原決定基を含む分子（例えば、ペプチド、糖ペプチド、または非ペプチド、例えば、エピトープを提示する炭水化物）が共有結合されて、Ｔ細胞受容体を保有する細胞への提示のためのＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを形成し得る。エピトープを連結させるための化学的コンジュゲーション部位を含むコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、提示されるエピトープに特異的なＴ細胞の活性を調節し得るＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを迅速に調製するため、及び、したがって、個体におけるそれらのＴ細胞を伴う免疫反応を調節するために有用である。

本明細書に記載のＴ細胞－ＭＰは、細胞ベースの発現システムにおける生成に好適であり、その場合、発現したコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチド／タンパク質のほとんど、または実質的にすべて（例えば、７５％、８５％または９０％超）またはすべては、３７℃において組織培養における生成及び少なくともその温度までの使用のために好適に安定した可溶性非凝集状態である。Ｔ細胞－ＭＰは、有利には、単一のベクターに含有される核酸配列によってコードされる単一のポリペプチドとして生成され得る。Ｔ細胞－ＭＰは、高次構造、例えば、二重体（例えば、図１を参照されたい）を形成し得、これは、図９のようなホモ二量体、または、例えば、図１０及び１１に示されるように２つのＴ細胞－ＭＰから形成される場合はヘテロ二量体であり得る。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、例えば、２５、４０、６０、または８０ｍｇ／リットル超（例えば、ＣＨＯ細胞において約２５～約４０、約４０～約６０、または約６０～約８０ｍｇ／ｌ）の高収率で発現し得る。特にジスルフィド結合がＭＨＣ－Ｈ鎖α_１ヘリックスのカルボキシル末端とＭＨＣ－Ｈ鎖α_２－１ヘリックスとの間に存在し（例えば、Ｙ８４ＣからＡ１３９Ｃへのジスルフィド結合）、ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列とβ２Ｍポリペプチドとの間のリンカーが十分な長さのものである（例えば、約１０～約５０ａａ長）場合に収率が高い場合がある。ジスルフィド結合がα_１及びα_２ヘリックスの間に存在する場合、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ発現レベルは、８０ｍｇ／ｌを超え得る（例えば、約８０～約１００、約１００～約１２０、約１２０～約１４０、約１４０～約１６０、約１６０～約１８０、または約１８０～約２００ｍｇ／ｌ）。

精製されると、発現したコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰタンパク質のほとんど、実質的にすべて（例えば、Ｔ細胞－ＭＰの８５％または９０％超）、またはすべては、エピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）へのコンジュゲーション後であっても可溶性非凝集状態で残存し、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰと比較して同様に安定である。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及びそれらのエピトープコンジュゲートは、Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートを特定の細胞または組織（例えば、腫瘍）に仕向け得る標的化配列を追加的に含み得る。特定の標的エピトープとの共送達のためのペイロード（例えば、生物活性物質または標識）、例えば、治療剤（例えば、化学療法剤）もまた、架橋剤等によってＴ細胞－ＭＰに共有結合され得る。したがって、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、標的化配列を用いてエピトープ特異的手法でＴ細胞にＭＯＤ（例えば、ＩＬ－２、４－１ＢＢＬ、ＦａｓＬ、ＴＧＦ－β、ＣＤ７０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、またはそのバリアント）及び／またはペイロード（例えば、化学療法剤）を送達する手段とみなされ得る。

Ｔ細胞－ＭＰは、関連するエピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）の非存在下であっても細胞内輸送中の及び／または多量体ポリペプチドを発現する細胞による分泌後のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの安定化を補助する修飾を含み得る。１つのそのような修飾は、ＭＨＣクラスＩのα_１ヘリックスのカルボキシル末端におけるアミノ酸位置８４（またはその隣接アミノ酸配列ａａｃ１及びａａｃ２）と、ＭＨＣ－クラスＩのα_２－１ヘリックスのアミノ末端におけるアミノ酸位置１３９（またはその隣接アミノ酸配列ａａｃ３及びａａｃ４）との間に形成される結合（例えば、ジスルフィド結合）である。例えば、ＭＨＣ－Ｈのアミノ酸８４（Ｙ８４Ｃ置換）及び１３９（Ａ１３９Ｃ置換）または同等の位置（例えば、図３Ｉを参照されたい）におけるシステイン残基の挿入は、Ｔ細胞－ＭＰの安定化を補助するジスルフィド結合を形成し得る。例えば、Ｚ．Ｈｅｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１４），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ １２７：２８８５－２８９７を参照されたい。

本明細書に記載のＴ細胞－ＭＰ分子の１つの態様は、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰであって、ポリペプチドは、（例えば、Ｎ末端からＣ末端まで）
（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
（ｉｉ）１つ以上の任意のＭＯＤポリペプチド配列をβ２Ｍポリペプチド配列に接続させる任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；
（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；
（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
を含み、コンジュゲートされていないＴ細胞調節性ポリペプチドは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）及び／または（ｉｘ）のＭＯＤ（複数可））を含み；
を含み、β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位（例えば、タンパク質操作、例えば、システイン置換によって提供される）を含む、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを広く対象とする。

そのようなコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、共有結合したエピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）を含まないことが理解される；しかしながら、本開示は、共有結合したエピトープをさらに含むＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートを含み、それを提供する。共有結合したエピトープは、ＭＨＣ－Ｈ／β２Ｍポリペプチド配列の結合割れ目内に位置し、ＴＣＲに提示され得、それによりその分子を臨床検査及び診断のための薬剤として、及び治療剤として使用することが可能となる。本明細書に記載のＴ細胞－ＭＰ及びそれらのエピトープコンジュゲートは、存在するＭＯＤ（複数可）に応じて臨床的に有効なレベルの抗原特異的Ｔ細胞調節（例えば、阻害または活性化）を可能にする拡縮可能な抗原提示細胞非依存性（ＡＰＣ非依存性）免疫治療剤を表す。その上、免疫グロブリンＦｃドメインであり得るＴ細胞ＭＰの骨格部分は、それらの活性化のために十分なコグネイトＴ細胞に対するＭＨＣ－エピトープコンジュゲート及びＭＯＤ部位の多価提示を可能にする。

β２Ｍポリペプチドに対するエピトープの間接的（リンカーを介する）共有結合を有し、かつｗｔ．及び／またはバリアントＭＯＤ（例えば、それらの受容体（Ｃｏ－ＭＯＤ）に対する減少した親和性を有する）であり得るＭＯＤを保有する二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの実施形態によるＴ細胞の優先的活性化を示している。第１のエピトープ特異的Ｔ細胞は、ＴＣＲ及びＣｏ－ＭＯＤの両方の生産的係合により活性化される。対照的に、第２のエピトープ非特異的Ｔ細胞は、エピトープがＴＣＲに係合することができないので活性化されず、よって、ＭＯＤは、それら自体で生産的係合をもたらさない。リンカー及び任意のリンカーの箇所は、Ｔ細胞－ＭＰの要素を接続する黒色の線によって表される。

免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。 免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。 免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。 免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。 免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。 免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。 免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。 免疫グロブリン重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（配列番号１～１３を含む）を提供する。

ヒト免疫グロブリンＪ－鎖の配列（配列番号１４）を提供する。

Ｉｇ ＣＨ１ドメイン配列の配列（配列番号１５）を提供する。

Ｉｇκ及びＩｇλ鎖の配列（配列番号１６～１７）を提供する。

主要組織適合遺伝子複合体クラスＩ重鎖（ＭＨＣ－Ｈ；ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖としても知られている）ポリペプチドのアミノ酸配列を提供する。シグナル配列ａａ１～２４は、太字で下線が引かれている。図３Ａエントリ：３Ａ．１は、ＨＬＡ－Ａ重鎖（ＨＬＡ－Ａ＊０１：０１：０１：０１またはＡ＊０１０１）（ＮＣＢＩアクセッションＮＰ＿００１２２９６８７．１）、配列番号１８であり；エントリ３Ａ．２は、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、配列番号１９であり；エントリ３Ａ．３は、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、配列番号２０であり、エントリ３Ａ．４は、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、配列番号２１である。 主要組織適合遺伝子複合体クラスＩ重鎖（ＭＨＣ－Ｈ；ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖としても知られている）ポリペプチドのアミノ酸配列を提供する。シグナル配列ａａ１～２４は、太字で下線が引かれている。図３Ｂは、ＨＬＡ－Ｂ＊０７：０２：０１（ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２）（ＮＣＢＩ ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＮＰ＿００５５０５．２）の配列である配列番号２２を提供する。 主要組織適合遺伝子複合体クラスＩ重鎖（ＭＨＣ－Ｈ；ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖としても知られている）ポリペプチドのアミノ酸配列を提供する。シグナル配列ａａ１～２４は、太字で下線が引かれている。図３Ｃは、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１（ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＮＰ＿００１２２９９７１．１）（ＨＬＡ－Ｃ＊０７：０１：０１：０１またはＨＬＡ－Ｃｗ＊０７０１０１）、（ＨＬＡ－Ｃｗ＊０７）（ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＣＡＯ７８１９４．１を参照されたい）、配列番号２３の配列を提供する。

１１種の成熟ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列（それらのリーダー、膜貫通及び細胞内ドメイン領域のすべて、または実質的にすべてを有しない）のα１、α２、及びα３ドメインのすべて、または実質的にすべてのアライメントを提供する。アライメントされた配列には、ヒトＨＬＡ－Ａ＊０１０１、配列番号２４（配列番号１８も参照されたい）；ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、配列番号２５；ＨＬＡ－Ｃ、配列番号２６；ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、配列番号２７；マウスＨ２Ｋタンパク質配列、配列番号２８；ＨＬＡ－Ａの３つのバリアント（ｖａｒ．２、ｖａｒ．２Ｃ［Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を有する］、及びｖａｒ．２ＣＰ）、配列番号２９～３１；３つのヒトＨＬＡ－Ａ分子（ＨＬＡ－Ａ＊１１０１（ＨＬＡ－Ａ１１）、配列番号３２；ＨＬＡ－Ａ＊２４０２（ＨＬＡ－Ａ２４）、配列番号３３；及びＨＬＡ－Ａ＊３３０３（ＨＬＡ－Ａ３３）、配列番号３４）が含まれる。ＨＬＡ－Ａ＊０２０１は、ＨＬＡ－Ａのバリアントである。ＨＬＡ－ＡのＹ８４Ａ及びＡ２３６Ｃバリアントは、ＨＬＡ－Ａ（ｖａｒ．２）として表記されている。ＨＬＡ－Ａ（ｖａｒ．２Ｃ）として表記されている７番目のＨＬＡ－Ａ配列は、位置８４、１３９及び２３６でＣ残基で置換されたＨＬＡ－Ａを示しており、８番目の配列は、１つの追加のプロリンを先行の配列のＣ末端に付加している。９～１１番目の配列は、それぞれ、ＨＬＡ－Ａ１１（ＨＬＡ－Ａ＊１１０１）；ＨＬＡ－Ａ２４（ＨＬＡ－Ａ＊２４０２）；及びＨＬＡ－Ａ３３（ＨＬＡ－Ａ＊３３０３）からのものであり、これらは、所定のアジア人集団において多く存在する。アライメントでは、結合するペプチドエピトープの非存在下でＭＨＣ－Ｈ－β２Ｍ複合体を安定化するためのジスルフィド結合の形成のためのその位置におけるａａに代わってシステイン残基が挿入され得る箇所（成熟タンパク質の８４及び１３９）が示されている。また、アライメントでは、β２Ｍと（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１のＡ２３６Ｃからβ２ＭのＲ１２Ｃへのジスルフィド結合を形成する成熟ポリペプチドのａａ１２で）鎖間ジスルフィド結合を形成し得るシステイン残基によって置き換えられ得る位置２３６（成熟ポリペプチドのもの）が示されている。矢印がそれらの箇所の各々の上に現れており、残基は太字である。残基８４、１３９及び２３６を挟むボックスは、（ｉ）任意の天然に存在するａａまたは（ｉｉ）プロリンまたはグリシンを除く任意の天然に存在するａａから独立して選択される１～５ａａによって置き換えられ得るクラスター１、２、３、４、５、及び６（それぞれ、ａａｃ１～ａａｃ６として図に示されている）として表記されている、それらの５残基の６セットの各々の側の５ａａの群を示している。

いくつかの成熟ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、及び－ＣクラスＩ重鎖のα１、α２、及びα３ドメインのすべて、または実質的にすべてのａａ配列のアライメントをそれぞれを提供する。配列は、成熟タンパク質（それらのリーダー配列、膜貫通ドメインまたは細胞内ドメインのすべて、または実質的にすべてを有しない）の一部を提供する。図３Ｄに記載されるように、ａａ残基８４、１３９、及び２３６の位置ならびに（ｉ）任意の天然に存在するａａまたは（ｉｉ）プロリンまたはグリシンを除く任意の天然に存在するａａから独立して選択される１～５ａａによって置き換えられ得るそれらの隣接残基（ａａｃ１～ａａｃ６）も示されている。コンセンサス配列もまた、図に提供されるＨＬＡアレルの各群について提供されており、その図は、連続付番された「Ｘ」残基としての可変ａａ位置及び二重下線が引かれたａａ８４、１３９及び２３６の箇所を示している。 いくつかの成熟ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、及び－ＣクラスＩ重鎖のα１、α２、及びα３ドメインのすべて、または実質的にすべてのａａ配列のアライメントをそれぞれを提供する。配列は、成熟タンパク質（それらのリーダー配列、膜貫通ドメインまたは細胞内ドメインのすべて、または実質的にすべてを有しない）の一部を提供する。図３Ｄに記載されるように、ａａ残基８４、１３９、及び２３６の位置ならびに（ｉ）任意の天然に存在するａａまたは（ｉｉ）プロリンまたはグリシンを除く任意の天然に存在するａａから独立して選択される１～５ａａによって置き換えられ得るそれらの隣接残基（ａａｃ１～ａａｃ６）も示されている。コンセンサス配列もまた、図に提供されるＨＬＡアレルの各群について提供されており、その図は、連続付番された「Ｘ」残基としての可変ａａ位置及び二重下線が引かれたａａ８４、１３９及び２３６の箇所を示している。 いくつかの成熟ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、及び－ＣクラスＩ重鎖のα１、α２、及びα３ドメインのすべて、または実質的にすべてのａａ配列のアライメントをそれぞれを提供する。配列は、成熟タンパク質（それらのリーダー配列、膜貫通ドメインまたは細胞内ドメインのすべて、または実質的にすべてを有しない）の一部を提供する。図３Ｄに記載されるように、ａａ残基８４、１３９、及び２３６の位置ならびに（ｉ）任意の天然に存在するａａまたは（ｉｉ）プロリンまたはグリシンを除く任意の天然に存在するａａから独立して選択される１～５ａａによって置き換えられ得るそれらの隣接残基（ａａｃ１～ａａｃ６）も示されている。コンセンサス配列もまた、図に提供されるＨＬＡアレルの各群について提供されており、その図は、連続付番された「Ｘ」残基としての可変ａａ位置及び二重下線が引かれたａａ８４、１３９及び２３６の箇所を示している。

ＨＬＡ－Ｅ、－Ｆ、及び－Ｇポリペプチドの各々のα１、α２、及びα３ドメインのすべて、または実質的にすべてについてのコンセンサス配列を、連続付番された「Ｘ」残基として示された可変ａａ位置及び二重下線が引かれたａａ８４、１３９及び２３６の箇所と共に提供する。

図３Ｅ～３Ｈに提供されるＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃ、－Ｅ、－Ｆ、及び－Ｇ（配列番号３９、４７、及び５７～６０）のコンセンサスａａ配列のアライメントを提供する。アライメントは、異なる配列間のａａの一致を示している。各配列における可変残基は、連続付番が除かれた「Ｘ」として列挙されている。各可変残基における容認可能なａａは、図３Ｅ～３Ｈへの参照によって決定され得る。図３Ｄに示されているように、ａａ８４、１３９及び２３６の箇所と共に、（ｉ）任意の天然に存在するａａまたは（ｉｉ）プロリンまたはグリシンを除く任意の天然に存在するａａから独立して選択される１～５ａａによって置き換えられ得るそれらの隣接する５ａａクラスターも示されている。

Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ（ＮＰ＿００４０３９．１；配列番号６１）、Ｐａｎ ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ（ＮＰ＿００１００９０６６．１；配列番号６２）、Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ（ＮＰ＿００１０４０６０２．１；配列番号６３）、Ｂｏｓ Ｔａｕｒｕｓ（ＮＰ＿７７６３１８．１；配列番号６４）及びＭｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓ（ＮＰ＿０３３８６５．２；配列番号６５）からのβ２Ｍ前駆体（すなわち、リーダー配列を含む）の多重ａａ配列アライメントを提供する。下線が引かれたａａ１～２０は、シグナルペプチド（時にリーダー配列と称される）である。成熟β２Ｍ配列は、ａａ２１で開始する。

ＡからＦとして表記された６つのコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの実施形態（構造）を提供する。各場合において、Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列；Ｎ末端からＣ末端方向の要素：β２Ｍポリペプチド配列、ＭＨＣ－Ｈのα１、α２、及びα３ドメイン配列を含むクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列を含むコア構造；ならびに骨格ポリペプチド配列（例えば、Ｉｇ Ｆｃポリペプチド配列）を含む。示される実施形態では、α１及びα２ポリペプチド配列は、例えば、Ｔｙｒ８４及びＡｌａ１３９で置換されたシステイン（Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換）間のペプチド内結合によって連結されている。１つ以上のＭＯＤは、コア構造のアミノ及び／またはカルボキシル側に配置されている。Ｌ１～Ｌ６として表記されている独立して選択される任意のリンカーポリペプチドは、線セグメントによって示されている。任意のリンカーポリペプチドは、Ｔ細胞－ＭＰポリペプチドの末端または示されたポリペプチド配列の接続において現れ得る。エピトープをカップリングさせるための化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞－ＭＰ上の任意の箇所に配置され得るが、化学的コンジュゲーション部位のためのβ２Ｍポリペプチド配列及びＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列における潜在的箇所は、アスタリスクによって示されている。示されていないが、化学的コンジュゲーション部位はまた、β２Ｍポリペプチド配列及びＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列を接続させるＬ３リンカーにおいて配置され得る。

図５における実施形態に類似するＡ～Ｆとして表記されているコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの６つの実施形態を提供する。示される実施形態では、化学的コンジュゲーション部位は、β２Ｍポリペプチド配列（例えば、Ｅ４４Ｃ置換を含む）に存在するものとして示されており、骨格は、種間であり得る免疫グロブリンＦｃ領域であり、それにより、２つの異なるコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰが特異的に組み合わさってヘテロ二重体を形成することが可能となる。

異なるＭＯＤ置換（例えば、構造ＡにおけるタンデムＩＬ－２ ＭＯＤ）を有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの例を提供する。化学的コンジュゲーション部位は、β２Ｍポリペプチド配列（例えば、Ｅ４４Ｃ置換）に存在するものとして示されている；しかしながら、それらは、ＭＨＣ－Ｈポリペプチド（α１、α２、及びα３配列）、またはβ２Ｍ及びＭＨＣポリペプチドを接続させるリンカーにあり得る。Ｆｃ骨格は、その対応配列とヘテロ二量体を形成し得る種間Ｆｃポリペプチド配列等の任意の他の骨格配列によって置き換えられ得、列挙された特定のリンカーは、例示にすぎず、他のリンカーポリペプチド配列によって置き換えられ得る。

エピトープコンジュゲートを形成するためにＴ細胞－ＭＰに存在する遊離求核剤（例えば、システイン）へのコンジュゲーションのために付加されたマレイミド基を有するエピトープのいくつかの概略図を示している。「ａ」では、マレイミド基は、任意のリンカー（例えば、ペプチドリンカー配列）によってエピトープに結合される。「ｂ」～「ｅ」では、リンカーは、ｎ回繰り返されたグリシンセリンポリペプチドＧＧＧＧＳ（配列番号１３９）であり、ｎは、存在する場合、１～５であり、リンカーが存在しない場合はｎは０である。「ｃ」～「ｅ」では、マレイミド基の結合は、（ＧＧＧＧＳ）ｎリンカーの末端のリジン（Ｋ）を介し、例えば、リジンのイプシロンアミノ基を介する。「ｄ」及び「ｅ」では、マレイミド基は、リジン（Ｋ）残基のイプシロンアミノ基と形成されたアルキルアミドを介してペプチドに連結されており、ｍは、１～７である。

（Ａ）で示される骨格（この場合Ｉｇ Ｆｃ骨格）を有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰからのコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰホモ二重体の形成を示している。（Ａ）からのコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰポリペプチドは、骨格配列間の相互作用を介して（Ｂ）に示されているようにホモ二重体を形成する。コンジュゲートされていないホモ二重体は、Ｔ細胞－ＭＰタンパク質を安定にまたは一過性に発現する細胞から単離され得る。通常は精製された形態のコンジュゲートされていないホモ二重体は、エピトープをコンジュゲーション部位にカップリングすることによって化学的コンジュゲーションに供され、これは、（Ｃ）に示されるＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを生成するための、β２Ｍポリペプチド配列（例えば、Ｅ４４Ｃ置換を含む）におけるシステインとマレイミド標識ペプチドとの間の反応によって例示される。過剰の反応性ペプチドは除去され得、または（コンジュゲーション部位の量に対して）準化学量論量の反応性エピトープは、コンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰホモ二重体を生成するために利用され得る。コンストラクトは、用いられ得るリンカーの例示である、示されるリンカー配列に限定されない。

（Ａ）で示されるヘテロ二重体を選択的に形成する骨格（この場合、種間ノブ・イン・ホールＩｇ Ｆｃ骨格）を有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰからのコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰヘテロ二重体の形成を示している。コンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰポリペプチドは、種間骨格配列間の相互作用を介して（Ｂ）に示されているようにヘテロ二重体を形成する。コンジュゲートされていないヘテロ二重体は、そのタンパク質を安定にまたは一過性に発現する細胞から単離され得る。通常は精製された形態のコンジュゲートされていないヘテロ二重体は、エピトープをコンジュゲーション部位にカップリングすることによって化学的コンジュゲーションに供され、これは、（Ｃ）に示されるＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを生成するための、β２Ｍポリペプチド配列（例えば、Ｅ４４Ｃ置換）におけるシステインとマレイミド標識ペプチドとの間の反応によって例示される。過剰の反応性ペプチドは除去され得、または（コンジュゲーション部位の量に対して）準化学量論量の反応性エピトープは、コンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰヘテロ二重体（示されるようにＴ細胞－ＭＰポリペプチドの各々に異なるＭＯＤを含み得る）を生成するために利用され得る。コンストラクトは、用いられ得るリンカーの例示である、示されるリンカー配列に限定されない。

３つのヘテロ二量体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート二重体を示している。各々は、種間Ｉｇ Ｆｃポリペプチド対を含む骨格を有する；しかしながら、骨格ポリペプチドは、任意の他の種間ポリペプチド対によって置き換えられ得る。コンストラクトは、用いられ得るリンカーの例示である、示されるリンカー配列に限定されない。

Ｌ３リンカー内及び他の箇所における様々な置換を有する分子（コンストラクト）を用いた、実施例１に記載される培養されたＣＨＯ細胞におけるＴ細胞－ＭＰを含む一連の分子の発現についての比較結果を示している。分子の構造全体がＡ、Ｂ、及びＣで提供される。分子の力価（タンパク質の量）及び凝集していない分子（例えば、可溶性二重体として存在している）の画分は、それぞれ、ヒストグラムＤ及びＥにおいて提供される。

数日にわたって３２及び２８°の両方で１ｍｌ当たり２、４、及び６百万細胞でのコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ（３回繰り返されたＧｌｙ_４ＳｅｒからなるＬ３リンカーを有するコンストラクト３８６１）の培養における生成及び安定性を示している（Ａ及びＢ）。クロマトグラムは、サイズ排除クロマトグラフィーによるさらなる精製の前（Ｃ）及び後（Ｄ）の培養物からのプロテインＡ精製された物質を示している。クマシーブルーゲル（Ｅ）は、物質が、還元された場合（Ｒ）の１０３１２８ダルトン及び非還元サンプルの場合の２０６２１３ダルトンにおける分子量標準（Ｍｗ）に対して移動することを示している。詳細については実施例２を参照されたい。

Ａにおいて、コンジュゲートされたエピトープに特異的なＴ細胞に対するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの特異性を実証する。Ｂにおいて、図１４は、エピトープコンジュゲートの非還元及び還元サンプルの電気泳動ゲルを示している。詳細については実施例３を参照されたい。

実施例４に記載されるＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲート及び対照処置に対する、ＣＭＶ及びＭＡＲＴ－１反応ドナーからのＬｅｕｋｏｐａｋサンプルに存在するＣＤ８＋Ｔ細胞の反応を示している。 実施例４に記載されるＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲート及び対照処置に対する、ＣＭＶ及びＭＡＲＴ－１反応ドナーからのＬｅｕｋｏｐａｋサンプルに存在するＣＤ８＋Ｔ細胞の反応を示している。

２つのシリーズのコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのＣＨＯ細胞発現に対するＬ３リンカーの長さの効果を示しており、ＡにおけるＯｃｔｅｔ分析による培地中の力価、及びプロテインＡ磁性ビーズでの精製後のＢにおけるサンプルに存在する非凝集（二重体）分子の画分を提供する。

Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞）を標的細胞（例えば、示されるようながん細胞）に仕向け、Ｔ細胞の反応を標的細胞に仕向ける方法を示している。

本開示において論述される所定のコンストラクトのアミノ酸配列を提供する。リンカー配列（例えば、ＡＡＡＧＧ及びＧＧＧＧＳ）は、それらの同定を可能にするために太字でイタリック体で下線が引かれている場合がある。ＭＨＣクラスＩ重鎖における示された単一のアミノ酸置換は、下線を伴って太字で示されている。ヒトＩＬ２配列は、ｈＩＬ２によって示され、ベータ－２－ミクログロブリン配列は、β２Ｍによって示され、及びＨＬＡ－Ａ０２配列は、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１によって示され、各々は、示されたａａ置換を保有する。

定義
Ｔ細胞－ＭＰという用語は、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及びＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの両方について包括的であり、それらを含む。用語「コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ（または複数の場合は「ＭＰ（ＭＰｓ）」）は、エピトープ及び／またはペイロード（例えば、非エピトープ分子、例えば、標識）にコンジュゲート（共有結合）されておらず、そのため、少なくとも１つの化学的コンジュゲーション部位を含むＴ細胞－ＭＰを指す。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドはまた、β２Ｍポリペプチド配列と併せてＭＨＣ－Ｈ結合割れ目内に位置し、かつＴＣＲに提示され得る融合したペプチドエピトープを含まない。用語「Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート」（または複数の場合は「コンジュゲート（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ）」）は、共有結合したエピトープが、ＭＨＣの結合割れ目に存在し、かつＴ細胞（エピトープ特異的Ｔ細胞）上に発現したそのエピトープに対する特異性を有するＴＣＲに提示されることを可能にする、化学的コンジュゲーション部位でエピトープにコンジュゲート（共有結合）されたＴ細胞－ＭＰを指す。「Ｔ細胞－ＭＰ－ペイロードコンジュゲート」及び「Ｔ細胞－ＭＰ－ペイロードコンジュゲート」は、１つ以上の独立して選択されるペイロードにコンジュゲート（共有結合）されたＴ細胞－ＭＰを指す。用語「Ｔ細胞－ＭＰ」にはまた、１つ以上の独立して選択されるＭＯＤを含む、またはＭＯＤがないコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及びＴ細胞ＭＰ－エピトープコンジュゲートが含まれる。本開示が特に、ＭＯＤを含有しないＴ細胞－ＭＰを指すそれらの例では、「ＭＯＤがないＴ細胞－ＭＰ」または「ＭＯＤを有しないＴ細胞－ＭＰ」等の用語が用いられる。用語「Ｔ細胞－ＭＰ」にはまた、１つ以上の独立して選択される標的化配列（以下に論述される）を含むコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及びＴ細胞ＭＰ－エピトープコンジュゲートが含まれる。

本明細書で互換的に使用される用語「ポリヌクレオチド」及び「核酸」は、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドのいずれかの任意の長さのヌクレオチドのポリマー形態を指す。よって、これらの用語には、一本鎖、二本鎖、もしくは多本鎖ＤＮＡもしくはＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＤＮＡ－ＲＮＡハイブリッド、またはプリン及びピリミジン塩基もしくは他の天然の、化学的もしくは生化学的に修飾された、非天然の、または誘導体化されたヌクレオチド塩基を含むポリマーが含まれるがこれらに限定されない。

本明細書で互換的に使用される用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、別途記述されない限り、哺乳動物細胞における翻訳中にタンパク質に生合成的に組み込まれる天然に存在するタンパク質構成Ｌ－アミノ酸であるアミノ酸のポリマー形態を指す。

核酸またはポリペプチドは、別の核酸またはポリペプチドに対する所定の「配列同一性」率を有し、アライメントされた場合、２つの配列を比較した場合に塩基またはアミノ酸のパーセンテージが同じであり、同じ相対的位置にあることを意味する。配列同一性は、多数の異なる方法で決定され得る。配列同一性を決定するために、配列は、ＢＬＡＳＴ＋２．１０．０のためのｂｌａｓｔ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｂｌａｓｔ．ｃｇｉ、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｔｃｏｆｆｅｅ／、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｍｕｓｃｌｅ／、及びｍａｆｆｔ．ｃｂｒｃ．ｊｐ／ａｌｉｇｎｍｅｎｔ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／を含むサイトでワールドワイドウェブで利用可能な様々な好都合な方法及びコンピュータプログラム（例えば、ＢＬＡＳＴ、Ｔ－ＣＯＦＦＥＥ、ＭＵＳＣＬＥ、ＭＡＦＦＴ等）を使用してアライメントされ得る。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．（１９９０），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－１０を参照されたい。

本明細書で使用される場合、アミノ酸（「ａａ」単数または「ａａ（ａａｓ）」複数）は、哺乳動物細胞の翻訳においてポリペプチド及びタンパク質に組み込まれた天然に存在するタンパク質構成アミノ酸を意味する。別途記述されない限り、これらは、Ｌ（Ｌｅｕ、ロイシン）、Ａ（Ａｌａ、アラニン）、Ｇ（Ｇｌｙ、グリシン）、Ｓ（Ｓｅｒ、セリン）、Ｖ（Ｖａｌ、バリン）、Ｆ（Ｐｈｅ、フェニルアラニン）、Ｙ（Ｔｙｒ、チロシン）、Ｈ（Ｈｉｓ、ヒスチジン）、Ｒ（Ａｒｇ、アルギニン）、Ｎ（Ａｓｎ、アスパラギン）、Ｅ（Ｇｌｕ、グルタミン酸）、Ｄ（Ａｓｐ、アスパラギン酸）、Ｃ（Ｃｙｓ、システイン）、Ｑ（Ｇｌｎ、グルタミン）、Ｉ（Ｉｌｅ、イソロイシン）、Ｍ（Ｍｅｔ、メチオニン）、Ｐ（Ｐｒｏ、プロリン）、Ｔ（Ｔｈｒ、トレオニン）、Ｋ（Ｌｙｓ、リジン）、及びＷ（Ｔｒｐ、トリプトファン）である。アミノ酸にはまた、哺乳動物細胞に見られるいくつかのタンパク質に現れるアミノ酸であるヒドロキシプロリン及びセレノシステインが含まれる；しかしながら、それらの存在が明示的に示されない限り、それらは含まれると理解されない。

用語「保存的アミノ酸置換」は、同様の側鎖を有するａａ残基のタンパク質における互換性を指す。例えば、脂肪族側鎖を有するａａの群は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシンからなり；脂肪族－ヒドロキシル側鎖を有するａａの群は、セリン及びトレオニンからなり；アミド含有側鎖を有するａａの群は、アスパラギン及びグルタミンからなり；芳香族側鎖を有するａａの群は、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンからなり；塩基性側鎖を有するａａの群は、リジン、アルギニン、及びヒスチジンからなり；酸性側鎖を有するａａの群は、グルタミン酸及びアスパラギン酸からなり；硫黄を含有する側鎖を有するａａの群は、システイン及びメチオニンからなる。例示的な保存的ａａ置換基は、バリン－ロイシン－イソロイシン、フェニルアラニン－チロシン、リジン－アルギニン、アラニン－バリン－グリシン、及びアスパラギン－グルタミンである。

用語「結合」（または「結合した」）は、通常、例えば、塩橋及び水架橋等の相互作用を含む、共有結合性、静電気性、疎水性、イオン性及び／または水素結合相互作用による、分子及び／または原子間の直接的会合を指す。

用語「結合」（または「結合した」）は、ポリペプチド（例えば、Ｔ細胞上のＴ細胞受容体）に対するＴ細胞－ＭＰ結合に関して使用される場合、２つの分子間の非共有結合性相互作用を指す。非共有結合性相互作用は、例えば、塩橋及び水架橋等の相互作用を含む、静電気性、疎水性、イオン性及び／または水素結合相互作用による、２つの分子間の直接的会合を指す。非共有結合性相互作用は、通常、１０^－６Ｍ未満、１０^－７Ｍ未満、１０^－８Ｍ未満、１０^－９Ｍ未満、１０^－１０Ｍ未満、１０^－１１Ｍ未満、１０^－１２Ｍ未満、１０^－１３Ｍ未満、１０^－１４Ｍ未満、または１０^－１５Ｍ未満の解離定数（Ｋ_Ｄ）によって特性化される。「共有結合（ｃｏｖａｌｅｎｔ ｂｏｎｄｉｎｇ）」または「共有結合（ｃｏｖａｌｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ）」は、本明細書で使用される場合、２つの異なる分子間の１つ以上の共有結合性化学的結合の形成を指す。

「親和性」は、本明細書で使用される場合、通常、非共有結合の強度を指し、増加した結合親和性は、より低いＫ_Ｄと相関する。本明細書で使用される場合、用語「親和性」は、２つの物質（例えば、抗体及び抗原）の可逆的結合についての解離定数（Ｋ_Ｄ）によって記載され得る。親和性は、非関連ａａ配列（例えば、リガンド）に対する抗体または受容体の親和性よりも少なくとも１倍～少なくとも１，０００倍高い（例えば、少なくとも２倍～少なくとも５倍高い、少なくとも３倍～少なくとも６倍高い、少なくとも４倍～少なくとも８倍高い、少なくとも５倍～少なくとも１０倍高い、少なくとも６倍～少なくとも１５倍高い、少なくとも７倍～少なくとも２０倍高い、少なくとも８倍～少なくとも３０倍高い、少なくとも９倍～少なくとも３５倍高い、少なくとも１０倍～少なくとも４０倍高い、少なくとも２０倍～少なくとも６０倍高い、少なくとも４０倍～少なくとも８０倍高い、少なくとも６０倍～少なくとも１８０倍高い、少なくとも８０倍～少なくとも２４０倍高い、少なくとも１００倍～少なくとも１，０００倍高い、または少なくとも１，０００倍高い）場合がある。標的タンパク質に対する抗体の親和性は、例えば、約１００ナノモル濃度（ｎＭ）～約０．１ｎＭ、約１００ｎＭ～約１ピコモル濃度（ｐＭ）、または約１００ｎＭ～約１フェムトモル濃度（ｆＭ）またはそれ以上であり得る。本明細書で使用される場合、用語「アビディティ」は、２つ以上の物質の複合体が希釈後に解離することに対する抵抗性を指す。

用語「免疫学的シナプス」または「免疫シナプス」は、本明細書で使用される場合、通常、例えば、抗原提示細胞（ＡＰＣ）または標的細胞とエフェクター細胞、例えば、リンパ球、エフェクターＴ細胞、ナチュラルキラー細胞等との間の界面を含む、適応免疫反応の２つの相互作用する免疫細胞間の自然界面を指す。ＡＰＣとＴ細胞との間の免疫学的シナプスは、通常、例えば、Ｂｒｏｍｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１；１９：３７５－９６（その開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、Ｔ細胞抗原受容体及びＭＨＣ分子の相互作用によって開始する。

「Ｔ細胞」には、Ｔ－ヘルパー細胞（ＣＤ４^＋細胞）、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＤ８^＋細胞）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、及びＮＫ－Ｔ細胞を含む、ＣＤ３を発現する免疫細胞のすべてのタイプが含まれる。

用語「免疫調節性ポリペプチド」（「共刺激ポリペプチド」または、上記したように、「ＭＯＤ」とも称される）には、本明細書で使用される場合、ＡＰＣ（例えば、樹状細胞、Ｂ細胞等）上の、またはそうでなければＴ細胞と相互作用するために利用可能であるポリペプチドまたはその一部（例えば、エクトドメイン）であって、Ｔ細胞上に存在するコグネイト共免疫調節性ポリペプチド（「Ｃｏ－ＭＯＤ」）に特異的に結合し、それによりシグナルを提供するものが含まれる。ＭＯＤがそのＣｏ－ＭＯＤに係合することによって提供されるシグナルは、例えば、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体とペプチドエピトープが搭載されたＭＨＣポリペプチドとの結合によって提供される主要シグナルに加えて、Ｔ細胞反応を媒介する（例えば、誘導する）。反応には、増殖、活性化、分化等が含まれるがこれらに限定されない。ＭＯＤには、ＣＤ７、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、誘導性共刺激リガンド（ＩＣＯＳ－Ｌ）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ－Ｇ、リンホトキシンベータ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、ＨＶＥＭ、トル様受容体（ＴＬＲ）に結合するアゴニストまたは抗体、及びＢ７－Ｈ３と特異的に結合するリガンドが含まれ得るがこれらに限定されない。ＭＯＤはまた、とりわけ、Ｔ細胞上に存在するＣｏ－ＭＯＤ分子と特異的に結合し、それを活性化する抗体または抗体断片、例えば、限定されないが、ＩＬ－２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＬＩＧＨＴ（腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４（ＴＮＦＳＦ１４）としても知られている）、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－ＤＣ、Ｂ７－Ｈ２、Ｂ７－Ｈ３、及びＣＤ８３のいずれかの受容体に対する抗体を包含する。

「組換え」は、本明細書で使用される場合、特定の核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）が、天然系に見られる内因性核酸とは区別可能な構造的コードまたは非コード配列を有するコンストラクトをもたらすクローニング、制限、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）及び／またはライゲーション工程の様々な組み合わせの産物であることを意味する。ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列は、細胞または無細胞転写及び翻訳システムに含有される組換え転写単位から発現することが可能な合成核酸を提供するために、ｃＤＮＡ断片からまたは一連の合成オリゴヌクレオチドから構築され得る。

本明細書で互換的に使用される用語「組換え発現ベクター」または「ＤＮＡコンストラクト」は、ベクター及び少なくとも１つのインサートを含むＤＮＡ分子を指す。組換え発現ベクターは、通常、インサート（複数可）を発現及び／または増殖させる目的のため、または他の組換えヌクレオチド配列の構築のために生成される。インサート（複数可）は、プロモーター配列に機能可能に連結される場合があり、またはそうでない場合があり、ＤＮＡ制御配列に機能可能に連結される場合があり、またはそうでない場合がある。

用語「処置」、「処置すること」等は、通常、所望の薬理学的及び／または生理学的効果を得ることを意味するために本明細書で使用される。効果は、疾患またはその症状を完全にまたは部分的に予防する観点から予防的であり得、及び／または疾患及び／または疾患に起因する有害作用のための部分的または完全な治癒の観点から治療的であり得る。「処置」は、本明細書で使用される場合、哺乳動物における疾患または症状の任意の処置を包含し、（ａ）疾患または症状にかかりやすい可能性があるが、それを有するものとしてまだ診断されていない対象において疾患または症状が生じることを防止すること；（ｂ）疾患または症状を阻害すること、すなわち、その進行を阻止すること；及び／または（ｃ）疾患を緩和すること、すなわち、疾患の退行を引き起こすことを含む。治療剤は、疾患または傷害の発症の前、間または後に投与され得る。進行中の疾患の処置は、処置が患者の望ましくない臨床症状を安定化または減少させる場合、特に興味深い。そのような処置は、望ましくは、罹患した組織における機能の完全な喪失の前に実施される。本治療は、望ましくは、疾患の症候段階中に、及び、いくつかの場合では、疾患の症候段階の後に投与される。

用語「個体」、「対象」、「宿主」、及び「患者」は、本明細書で互換的に使用され、診断、処置、または治療が望まれる任意の哺乳動物対象を指す。哺乳動物には、ヒト及び非ヒト霊長類が含まれ、また、齧歯類（例えば、ラット；マウス）、ウサギ目動物（例えば、ウサギ）、有蹄動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、ヤギ等）、ネコ、イヌ等が含まれる。

本発明をさらに説明する前に、本発明は、記載される特定の実施形態に限定されず、したがって、当然ながら、変化し得ることを理解されたい。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としており、本発明の範囲を限定することは意図されていないことも理解されたい。

値の範囲が提供される場合、その範囲の上限と下限との間の各介在値から範囲の下限の１０分の１までが、範囲内の任意の他の記述された値または介在値と共に本開示に包含されることが理解される。上限及び下限は、独立して、より小さな範囲に含まれ得、それはまた、記述された範囲における任意の特に除外される限度次第で本開示に包含される。記述された範囲が値（例えば、上限または下限）を有する場合、それらの値を除く範囲もまた本発明に含まれる。

別途定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、本発明が属する技術分野における当業者によって理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと同様または同等の任意の方法及び物質も本発明の実施または試験において使用され得るが、好ましい方法及び物質がこれより記載される。本明細書で挙げられるすべての刊行物は、刊行物が引用された関連する方法及び／または物質を開示及び記載するために参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書で使用される場合、及び添付の特許請求の範囲において、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には、文脈が別途明らかに示さない限り、複数の指示対象が含まれることが留意されなければならない。よって、例えば、「ａ Ｔｒｅｇ」に対する言及には、複数のそのようなＴｒｅｇが含まれ、「ｔｈｅ ＭＨＣクラスＩ重鎖」に対する言及には、１つ以上のＭＨＣクラスＩ重鎖及び当業者に知られているその均等物に対する言及等が含まれる。特許請求の範囲は、いかなる任意の要素も除外するように作成され得ることがさらに留意される。このように、この記述は、特許請求の範囲の要素の記述に関連して「単独で」、「のみ」等としてのそのような排他的な用語の使用、または「否定的」な限定の使用のための先行的基礎として機能することが意図されている。

明確性のため、別々の実施形態の文脈で記載される本発明の所定の特徴はまた、単一の実施形態において組み合わせて提供され得ることが理解される。逆に、簡潔にするために単一の実施形態の文脈で記載される本発明の様々な特徴はまた、別々にまたは任意の好適な副次的組み合わせで提供され得る。本発明に関連する実施形態のすべての組み合わせは、本発明によって具体的に包含され、ありとあらゆる組み合わせが個々にかつ明示的に開示されているかのように本明細書に開示される。また、様々な実施形態及びそれらの要素のすべての副次的組み合わせも本発明によって具体的に包含され、ありとあらゆるそのような副次的組み合わせが個々にかつ明示的に本明細書に開示されているかのように本明細書に開示される。

本明細書で論述される刊行物は、本出願の出願日前のそれらの開示のためにのみ提供される。本明細書において、本発明が先行発明によりそのような刊行物に先行する資格がないことを認めるものと解釈されるものはない。さらに、提供される刊行物の日付は、実際の公開日とは異なる場合があり、独立して確認する必要があり得る。

Ｉ．エピトープ結合のための化学的コンジュゲーション部位を有するＴ細胞調節性ポリペプチド（Ｔ細胞－ＭＰ）
本開示は、Ｔ細胞－ＭＰ（エピトープを結合させるのに好適な化学的コンジュゲーション部位を有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及びエピトープがコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの両方）を含み、それを提供する。そのようなＴ細胞－ＭＰは、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで免疫反応を調節し、それにより治療的処置を達成するためにＴ細胞の活性を調節するのに有用である。本開示は特に、Ｔ細胞ＭＰ－エピトープコンジュゲートの調製及びヒトまたは非ヒト試験対象または患者であり得る個体においてｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで免疫反応を調節する際の使用の方法を提供する。ヒトまたは非ヒト試験対象または患者は、１つ以上の腫瘍、１つ以上のがん、及び／または１つ以上の感染症（例えば、細菌及びウイルス感染症）に罹患している場合がある。存在する他の要素に加えて、Ｔ細胞－ＭＰは、それらのＣｏ－ＭＯＤに対する減少した結合親和性を示す１つ以上の独立して選択されるｗｔ．及び／またはバリアントＭＯＤポリペプチド及び１つ以上のペイロードを含み得る。

本開示には、同一の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドを含む、ホモ二量体であるＴ細胞－ＭＰが含まれる。本開示にはまた、第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドを含む、ヘテロ二量体であるＴ細胞－ＭＰであって、それらのポリペプチドのうちの少なくとも１つは、エピトープの結合のための化学的コンジュゲーション部位を含む、Ｔ細胞－ＭＰが含まれる。任意に、ヘテロ二量体のうちの少なくとも１つは、ペイロード、例えば、化学療法剤及び／または標的化配列を含み得る。本開示には、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを形成するためにエピトープに化学的にコンジュゲートされており、かつ標的化配列及び／またはペイロードを任意に含むＴ細胞－ＭＰが含まれる。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＭＯＤ（複数可）のタイプに応じて、Ｔ細胞－ＭＰに存在するエピトープに特異的なＴＣＲを保有するＴ細胞は、例えば、クローン増殖を含む活性化を受けることによって反応し得る（例えば、Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれたＩＬ－２、４－１ＢＢＬ及び／またはＣＤ８０のｗｔ．及び／またはバリアント等の活性化性ＭＯＤの場合）。代替的には、Ｔ細胞は、ＦＡＳＬ及び／またはＰＤ－Ｌ１のｗｔ．及び／またはバリアント等のＭＯＤがＴ細胞－ＭＰに組み込まれた場合、Ｔ細胞活性を下方制御する阻害を受け得る。ＩＬ－２及びＣＤ８０またはＩＬ２及びＰＤ－Ｌ１のｗｔ．及び／またはバリアント等のＭＯＤの組み合わせのＴ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）への組み込みは、相乗効果をもたらし得、その場合、Ｔ細胞反応は、ＭＯＤの１つを欠くこと以外は同一のＴ細胞－ＭＰに対するＴ細胞の反応の合計を超える。ＭＯＤは、いかなるエピトープにも特異的ではないので、Ｔ細胞の活性化または阻害は、Ｔ細胞に対するＴ細胞－ＭＰの結合がＭＨＣ－エピトープ－ＴＣＲ相互作用によって強力に影響を受けるように、または支配さえされるように、それらのＣｏ－ＭＯＤに対する減少した親和性を有するバリアントＭＯＤをＴ細胞－ＭＰに組み込むことによってエピトープ特異的相互作用に偏る場合がある。

ＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、代理ＡＰＣとして機能し、Ｔ細胞と相互作用することによって、適応免疫反応においてエピトープの提示を模倣すると考えられ得る。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、共有結合したエピトープ（例えば、エピトープを提示するペプチド）をＴ細胞の表面上に存在するＴＣＲと係合させ、それに提示することによってそれを行う。この係合は、エピトープ特異的細胞標的化を達成する能力を有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを提供する。本明細書に記載の実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートはまた、Ｔ細胞上の対応共刺激タンパク質（Ｃｏ－ＭＯＤ）に係合する少なくとも１つのＭＯＤを保有する。両方のシグナル（ＴＣＲに対するエピトープ／ＭＨＣ結合及びＣｏ－ＭＯＤに対するＭＯＤ結合）は次いで、所望のＴ細胞特異性及び阻害／アポトーシスまたは活性化／増殖のいずれかの両方を誘導する。

化学的コンジュゲーション部位を有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、治療、診断及び研究用途のための物質を調製するために、異なるエピトープが単独でまたはＴ細胞－ＭＰに付加される１つ以上の追加のペイロードと組み合わせて導入され得るプラットフォームとして利用される。ホモ二量体を含む二重体、及び高次ホモマー複合体を含むＴ細胞－ＭＰは、単一のポリペプチド配列のみを必要とするため、それらは、有利には、単一の発現カセットを有する単一のベクターを使用して細胞に導入され、発現され得る。同様に、ヘテロ二量体二重体Ｔ細胞－ＭＰは、２つの別々の発現カセットまたはバイシストロン性発現カセットを有する単一のベクターを使用して（例えば、タンパク質は、２Ａタンパク質配列または内部リボソーム進入配列（ＩＲＥＳ）によって分離される）、または１つのヘテロ二量体サブユニットをコードするカセットをそれぞれ保有する２つのベクターを使用することによって細胞に導入され得る。二重体または高次Ｔ細胞－ＭＰが種間骨格配列を含有する場合、異なるＴ細胞－ＭＰは、二重または高次構造が異なるＭＯＤを含有することを可能とする異なるＭＯＤを保有し、またはヘテロ二量体の各ポリペプチド上の異なる箇所でＭＯＤを保有し得る。Ｔ細胞－ＭＰのモジュール型特質は、後にエピトープに特異的なＴＣＲを保有するＴ細胞の活性化または阻害について試験され得る調製されたＴ細胞－ＭＰポリペプチドにエピトープ含有分子（例えば、ペプチド）をカップリングすることによって診断及び治療候補の迅速調製及び試験を可能にする。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ、及び特に異なるＭＯＤを有するヘテロ二量体Ｔ細胞－ＭＰ二重体を構築する能力は、ＭＯＤと疾患状態または病態に関連する１つ以上のエピトープとの異なる組み合わせの迅速構築及び評価を可能にする。前述のものに加えて、様々なペイロード、例えば、抗ウイルス剤、化学療法剤、及び／または標的化配列の有効性をＴ細胞－ＭＰに迅速に付与し、利用可能にする能力は、スクリーニングのための及び治療剤としてのＴ細胞－ＭＰの調製を容易化する。

１つ以上の活性化性ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列がＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートに組み込まれた場合、そのエピトープに特異的なＴＣＲを有するＴ細胞を、少なくとも１つの濃度のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと接触させることは、Ｔ細胞活性化をもたらし得る。Ｔ細胞活性化は、以下のうちの１つ以上をもたらし得る：ＺＡＰ－７０プロテインキナーゼ活性の活性増加、Ｔ細胞（複数可）の増殖の誘導、顆粒依存性エフェクター作用（例えば、細胞傷害性Ｔ細胞からのグランザイム、パーフォリン、及び／またはグラニュリシンの放出）、及び／またはＴ細胞サイトカイン（例えば、ＣＤ８＋細胞からのインターフェロンγ）の放出。ＭＯＤポリペプチド配列（複数可）がＴ細胞増殖を誘導する場合、Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートは、エピトープに特異的なＴＣＲを有しない、同じ濃度のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと接触したＴ細胞（図１を参照されたい）と比較して、エピトープに特異的なＴＣＲを有するＴ細胞の活性化において少なくとも２倍（例えば、少なくとも２、３、４、５、１０、２０、３０、５０、７５、または１００倍）の差を誘導し得る。Ｔ細胞の活性化は、例えば、ＺＡＰ－７０活性またはＴ細胞増殖（例えば、Ｗａｎｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ ｉｎ ｂｉｏｌｏｇｙ ２．５（２０１０）：ａ００２２７９を参照されたい）、またはサイトカイン放出によって測定され得る。Ｔ細胞活性化を阻害する１つ以上のｗｔ．またはバリアントＭＯＤポリペプチド配列がＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに組み込まれた場合、エピトープに特異的なＴＣＲを有するＴ細胞を、少なくとも１つの濃度のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと接触させることは、以下のうちの１つ以上をもたらし得る：Ｔ細胞の活性化の予防または阻害、活性化したＴ細胞の反応の減少、及び／またはエピトープ特異的Ｔ細胞の下方制御。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在する阻害性ＭＯＤは、エピトープに特異的なＴＣＲを有するＴ細胞（複数可）のアポトーシスをもたらし得る。阻害性ＭＯＤ配列の効果は、Ｔ細胞増殖、ＺＡＰ－７０活性、顆粒依存性エフェクター作用の減少、及び／または細胞死に対するそれらの効果のうちの１つ以上によって測定され得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの特異性は、結合に対するエピトープ及びそのＭＯＤの相対的寄与に依存する。Ｃｏ－ＭＯＤ（複数可）に対するＭＯＤ（複数可）の親和性が相対的に高いことにより、ＭＯＤ（複数可）が結合相互作用においてＴ細胞－ＭＰを支配する場合、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの特異性は、エピトープが全体の結合エネルギーに対してＭＯＤよりも大きく寄与することによって結合相互作用を支配するＴ細胞－ＭＰ複合体と比べて減少する。エピトープとエピトープに特異的なＴＣＲとの間の結合エネルギーの寄与が大きいほど、そのタイプのＴＣＲを保有するＴ細胞に対するＴ細胞－ＭＰの特異性が大きくなる。エピトープＭＨＣ複合体がそのＴＣＲに対して強い親和性を有する場合、比較的低い親和性を有するｗｔ．ＭＯＤ及び／またはそれらのＣｏ－ＭＯＤに対する減少した親和性を有するバリアントＭＯＤの使用は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと特定のＴ細胞とのエピトープ選択的相互作用を優先し、また、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートにコンジュゲートされ得る任意のペイロードのＴ細胞及び／またはＴ細胞が配置される箇所への選択的送達を容易化する。

本開示は、エピトープ特異的様式でＴ細胞の活性を調節するため、及び、したがって、個体におけるそれらの疾患状態に対する免疫反応を調節するために有用であるがん及び／または感染性物質（例えば、ウイルス、細菌）のエピトープを提示するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを提供する。Ｔ細胞－ＭＰは、ｗｔ．であり、及び／またはＣｏ－ＭＯＤに対する減少した結合親和性を示す１つ以上のＭＯＤを含む。

Ａ．コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及びＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート
１ コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及びＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート成分の構造及び組成
本明細書に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、エピトープを直接的に、またはリンカーを介して間接的にカップリングするための化学的コンジュゲーション部位を含む。化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞－ＭＰ上の任意の箇所に配置され得る。本開示の１つの態様は、骨格（例えば、Ｉｇ Ｆｃ）、β２Ｍ、もしくはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列内、またはβ２Ｍ及びＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列を接続させるリンカー（Ｌ３）内のペプチドエピトープの結合のための化学的コンジュゲーション部位を含むＴ細胞－ＭＰ、及びそれらのＴ細胞－ＭＰの高次複合体を対象とする。本開示の別の態様は、β２Ｍ、もしくはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列内、またはβ２Ｍ及びＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列を接続させるリンカー（Ｌ３）内のペプチドエピトープの結合のための化学的コンジュゲーション部位を含むＴ細胞－ＭＰ、及びそれらのＴ細胞－ＭＰの高次複合体を対象とする。エピトープを直接的に、またはリンカーを介して間接的にカップリングするための化学的コンジュゲーション部位は、β２Ｍポリペプチド配列に配置され得る。エピトープを直接的に、またはリンカーを介して間接的にカップリングするための化学的コンジュゲーション部位は、ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列に配置され得る。エピトープを直接的に、またはリンカーを介して間接的にカップリングするための化学的コンジュゲーション部位は、β２Ｍポリペプチド配列及びＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列を接続させるリンカー（Ｌ３）に配置され得る。エピトープを直接的に、またはリンカーを介して間接的にカップリングするための化学的コンジュゲーション部位は、骨格（例えば、Ｉｇ Ｆｃ）内に配置され得る。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰにエピトープをカップリングさせるための化学的コンジュゲーション部位が骨格（例えば、Ｉｇ Ｆｃ）、β２Ｍ、またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列において現れる場合、化学的コンジュゲーション部位は、それらの配列のいずれかに天然には現れないアミノ酸またはアミノ酸の配列に限定され得、それらの配列のうちの１つに導入された１つ以上のアミノ酸（例えば、１つ以上のａａが天然に存在する配列には現れないａａ配列位置に導入された１つ以上のａａ）を伴い得る。また、エピトープ結合のための化学的コンジュゲーション部位としてＴ細胞－ＭＰポリペプチドのＮ末端アミノ基またはＣ末端カルボキシル基を利用することが可能であるが、それらの部位は、本明細書に記載のＴ細胞－ＭＰまたはそれらの高次複合体のいずれかからコンジュゲーション部位として除外され得る。実際に、Ｔ細胞－ＭＰの化学的コンジュゲーション部位は、Ｎ末端の１０または２０ａａ及び／またはＣ末端の１０または２０ａａから除外され得る。

Ｔ細胞－ＭＰは、高次複合体（例えば、二重体、三重体等）であり得る。高次複合体は、ホモマー（例えば、ホモ二量体またはホモ二重体）またはヘテロマー（例えば、ヘテロ二量体またはヘテロ二重体）であり得る。種間配列の対が骨格配列として用いられ得、その場合、複合体は、２つの異なるＴ細胞－ＭＰが特定のヘテロ二重体を形成することを可能にするのでヘテロ二量体となることが意図されており、これは、種間結合配列の対を有しない２つのＴ細胞－ＭＰが混合された場合に形成し得るホモ二重体及びヘテロ二重体の混合物とは対照的である。

本明細書に記載のＴ細胞－ＭＰ分子の第１の群は、それらの骨格配列において相互作用を介して会合する二重体を形成し得るＴ細胞－ＭＰを広く対象とする。そのようなＴ細胞－ＭＰは、少なくとも第１のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列（例えば、ホモ二量体として二重体化される）、または非同一の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列（例えば、ヘテロ二量体として二重体化される）を有し得、Ｔ細胞－ＭＰの一方または両方は、（例えば、Ｎ末端からＣ末端まで）
（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
（ｉｉ）１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列をβ２Ｍポリペプチド配列に接続させる任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；
（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；
（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
を含み、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）及び／または（ｉｘ）のＭＯＤ（複数可））を含み；
β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、少なくとも１つの化学的コンジュゲーション部位を含む。

本明細書に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの第２の群は、それらの骨格配列において相互作用を介して会合する第１のＴ細胞－ＭＰと第２のＴ細胞－ＭＰとの間の二重体を形成し得る。そのようなコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰは、ホモ二量体として二重体化された同一の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列、またはヘテロ二量体として二重体化された非同一の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列を有し得、Ｔ細胞－ＭＰの一方または両方は、Ｎ末端からＣ末端まで、
（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
（ｉｉ）１つ以上の任意のＭＯＤポリペプチド配列をβ２Ｍポリペプチド配列に接続させる任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；
（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；
（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
を含み、コンジュゲートされていないＴ細胞調節性ポリペプチドは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）及び／または（ｉｘ）のＭＯＤ（複数可））を含み；
β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、例えば、エピトープコンジュゲーション及び／またはペイロードコンジュゲーションのための、少なくとも１つの化学的コンジュゲーション部位を含む。

本明細書に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの第３の群は、それらの骨格配列において相互作用を介して会合する第１のＴ細胞－ＭＰと第２のＴ細胞－ＭＰとの間の二重体として現れる。そのようなコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰは、ホモ二量体として二重体化された同一の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列、またはヘテロ二量体として二重体化された非同一の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列を有し得、Ｔ細胞－ＭＰの一方または両方は、Ｎ末端からＣ末端まで、
（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
（ｉｉ）１つ以上の任意のＭＯＤポリペプチド配列をβ２Ｍポリペプチド配列に接続させる任意のＬ２ポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）１０～５０アミノ酸を含むＬ３リンカーポリペプチド配列；
（ｖ）位置８４及び１３９で置換されたシステインを含み（図３Ｅ～３Ｈ、例えば、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を参照されたい）、かつジスルフィド結合を形成するクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）Ｌ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）種間または非種間免疫グロブリンＦｃ骨格配列；
（ｖｉｉｉ）Ｌ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
を含み、β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、例えば、エピトープコンジュゲーション及び／またはペイロードコンジュゲーションのための、少なくとも１つの化学的コンジュゲーション部位を含み；β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、ｗｔ．配列に現れない化学的コンジュゲーション部位を含み；
第１及び第２のＴ細胞－ＭＰは、それらのＩｇ Ｆｃ骨格配列の間の少なくとも１つのジスルフィド結合を介して任意に共有結合されている。化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞－ＭＰとＴＣＲとの相互作用を妨害せず、好ましくは溶媒露出性であることでエピトープに対するそのコンジュゲーションを可能にするという点で、エピトープコンジュゲーションに好適であるべきである。

コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの上記第１、第２、及び第３の群のものを含むＴ細胞－ＭＰに対するエピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞－ＭＰへのエピトープ提示分子（例えば、ペプチドエピトープ）の共有結合を可能にし、これによりそれは、ＭＨＣ－Ｈポリペプチドによって結合され（結合割れ目に配置され）、ＴＣＲに提示され得る。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの化学的コンジュゲーション部位は、ｗｔ．配列に現れないものであり得る（例えば、それらは、生化学及び／または分子生物学に基づいてタンパク質操作の技術を使用して生成される）。化学的コンジュゲーション部位はまた、Ｔ細胞－ＭＰとＴＣＲとの相互作用を妨害せず、好ましくは溶媒露出性であることでエピトープに対するそのコンジュゲーションを可能にするという点で、エピトープコンジュゲーションに好適であるべきである。

コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、ＭＨＣ－Ｈ／β２Ｍポリペプチド配列の結合割れ目に配置され、かつＴＣＲに提示され得る（Ｔ細胞－ＭＰポリペプチドに共有結合した、またはそれとの融合体としての）ペプチドエピトープを含まないことが理解される。しかしながら、本開示は、化学的コンジュゲーション部位でＴ細胞－ＭＰに直接的にまたは間接的に（例えば、ペプチドまたは非ペプチドリンカーを介して）共有結合したエピトープを提示する分子をさらに含むＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートであって、エピトープはまた、Ｔ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列の結合割れ目に関連付けられ（そこに配置され、または位置し）、そのエピトープに特異的なＴＣＲを保有するＴ細胞に機能的に提示され、Ｔ細胞のＴＣＲ媒介活性化または阻害をもたらし得る、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを含み、それを提供する。

本開示はまた、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するエピトープが、少なくとも１００マイクロモル濃度（μＭ）（例えば、少なくとも１０μＭ、少なくとも１μＭ、少なくとも１００ｎＭ、少なくとも１０ｎＭ、または少なくとも１ｎＭ）の親和性でＴＣＲ（例えば、Ｔ細胞上のもの）に結合し得るＴ細胞－ＭＰを提供する。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが第２のＴ細胞に結合する親和性よりも高い親和性で第１のＴ細胞に結合し得；第１のＴ細胞は、その表面上にＣｏ－ＭＯＤ及びエピトープに結合するＴＣＲを発現し、第２のＴ細胞は、その表面上に第１のＴ細胞に存在するものと同じＣｏ－ＭＯＤを発現するが、その表面上にそのエピトープに結合するＴＣＲを発現しない（例えば、仮にそれが結合するとしても第１の細胞のＴＣＲと同じくらいの緊密性である）。図１を参照されたい。増加した親和性は、結合アッセイにおいて測定され、または第２のＴ細胞と比較して第１のＴ細胞を刺激するために必要とされるＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートの濃度から推測され得る。エピトープ特異的Ｔ細胞に対する増加した親和性は、臨床試験、診断のための薬剤としての、及びエピトープ特異的Ｔ細胞作用を誘導することが可能な治療剤としてのエピトープコンジュゲートの使用を可能にする。

Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＯＤは、独立して選択されるｗｔ．ＭＯＤ及び／またはバリアントＭＯＤである。Ｔ細胞－ＭＰがヘテロマー複合体を、例えば、種間骨格ポリペプチド配列の使用を介して形成する場合、ヘテロマーのＴ細胞－ＭＰの少なくとも１つで提供されるＭＯＤは、ヘテロマー複合体の他のＴ細胞－ＭＰとは独立して選択され得る。したがって、ヘテロ二量体性二重体Ｔ細胞－ＭＰは、二重体の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰにおいて異なる独立して選択されるＭＯＤを有し得る。一態様におけるＭＯＤは、エピトープ特異的Ｔ細胞活性化／増殖を刺激することが可能な１つ以上の活性化性ｗｔ．ＭＯＤ及び／またはバリアントＭＯＤ（例えば、ｗｔ．及び／またはバリアントＩＬ－２、４－１ＢＢＬ及び／またはＣＤ８０）となるように選択される。別の実施形態では、ＭＯＤは、Ｔ細胞活性化／増殖を阻害することが可能な１つ以上の阻害性ｗｔ．ＭＯＤ及び／またはバリアントＭＯＤ（例えば、ＦＡＳ－Ｌ及び／またはＰＤ－Ｌ１）である。好適なエピトープを保有するＴ細胞－ＭＰと併せて使用される場合、特にＭＯＤがバリアントＭＯＤであり、ＭＨＣ－エピトープ－ＴＣＲ相互作用がＴ細胞－ＭＰとＴ細胞との相互作用を支配するのに十分に強力である場合、そのような活性化性または阻害性ＭＯＤは、エピトープ特異的Ｔ細胞作用が可能である。

２ コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの化学的コンジュゲーション部位
用語「化学的コンジュゲーション部位」は、Ｔ細胞－ＭＰとエピトープまたはペイロード含有分子との間の直接的または間接的（介在リンカーまたはスペーサーを介する）共有結合の選択的形成を可能にするＴ細胞－ＭＰの任意の好適な部位を意味する。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの化学的コンジュゲーション部位は、（ｉ）活性、すなわち、化学的コンジュゲーション部位（例えば、溶媒露出性システインスルフヒドリル）の追加の化学的反応または変換を伴わずにＴ細胞－ＭＰとエピトープまたはペイロードとの間の直接的または間接的（介在リンカーまたはスペーサーを介する）共有結合を形成することが可能であり得る、または（ｉｉ）発生段階、すなわち、活性化学的コンジュゲーション部位となるように化学的コンジュゲーション部位のさらなる化学的反応または酵素変換を必要とし得る（例えば、ｆＧｌｙ酵素によってまだ活性化されていないスルファターゼ配列）。

用語「選択的形成」は、エピトープまたはペイロード含有分子が、Ｔ細胞－ＭＰの活性化学的コンジュゲーション部位と反応性である部位を保有する場合、エピトープまたはペイロード含有分子が、Ｔ細胞－ＭＰにおける任意の他の部位よりも多い量でその化学的コンジュゲーション部位に共有結合されることを意味する。

化学的コンジュゲーション部位は、所望のａａ配列を有するＴ細胞－ＭＰを達成するためにタンパク質操作技術を使用して（例えば、適切な核酸配列の使用によって）Ｔ細胞－ＭＰに導入され得る。化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞－ＭＰのタンパク質またはポリペプチド配列における個々のａａ（例えば、システインまたはリジン）またはａａ配列（例えば、スルファターゼ、ソルターゼまたはトランスグルタミナーゼ配列）であり得る。

Ｔ細胞－ＭＰのタンパク質またはポリペプチド配列が、天然に存在するタンパク質（例えば、Ｂ２Ｍ、ＭＨＣ－ＨまたはＩｇＧ骨格）に由来する場合、化学的コンジュゲーション部位は、天然に存在する配列に現れない部位、例えば、アミノ酸置換（例えば、システイン置換）、挿入、及びまたは欠失に起因する部位であり得る。化学的コンジュゲーション部位はまた、天然に存在するタンパク質に由来しない配列、または配列の一部、例えば、リンカー配列（例えば、Ｔ細胞－ＭＰのβ２Ｍ及びＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列を接続させるＴ細胞－ＭＰのＬ３リンカー）であり得る。

いくつかの実施形態では、エピトープがＭＨＣポリペプチドの結合割れ目に配置され、ＴＣＲに提示され得るように共有結合されることを可能にする各々のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドにおける１つのみの化学的コンジュゲーション部位（例えば、タンパク質操作によって付加された１つの化学的コンジュゲーション部位）が存在する。各々の個々のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、同じまたは異なるタイプの化学的コンジュゲーション部位となるように選択される複数の化学的コンジュゲーション部位を含み得、それにより同じまたは異なる分子（例えば、エピトープ及び１つ以上のペイロード）が、化学的コンジュゲーション部位の各々に選択的にコンジュゲートされることを可能にする。したがって、各々の個々のまたは二重体化されたコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、同じまたは異なるタイプの化学的コンジュゲーション部位となるように選択された１つ以上の化学的コンジュゲーション部位を含み得、それにより同じまたは異なる分子が化学的コンジュゲーション部位の各々に選択的にコンジュゲートされることを可能にする。化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は通常、単一の反応を使用して、例えば、二重体のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰにおける所望の部位のすべてにエピトープ提示分子が共有結合され得るように同じ（例えば、同じタイプのもの）である。Ｔ細胞－ＭＰは、エピトープへのコンジュゲーションのためのものに加えて、例えば、標的化配列及び／またはペイロード、例えば、標識の組み込みのためのコンジュゲーション部位を含む、化学的コンジュゲーション部位を含有し得る。

エピトープ提示分子以外の分子を組み込むために使用される化学的コンジュゲーション部位は、ほとんどの例において、異なるタイプのものであり（例えば、異なる化学的反応を利用する）、また、エピトープを組み込むために使用される部位とは異なる箇所におけるものであり、それにより異なる分子がポリペプチドの各々に選択的にコンジュゲートされることを可能にする。Ｔ細胞－ＭＰが標的化配列及び／または１つ以上のペイロード分子を含むべき場合、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、標的化配列及び／またはペイロードの複数の分子への結合を可能にするために化学的コンジュゲーション部位（例えば、タンパク質操作によって付加される化学的コンジュゲーション部位）の複数のコピーを含み得る。

コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドに組み込まれ得る化学的コンジュゲーション部位には、
ａ）酵素修飾配列として作用するペプチド配列（例えば、スルファターゼ、ソルターゼ、及び／またはトランスグルタミナーゼ配列）；
ｂ）非天然ａａ及び／またはセレノシステイン；
ｃ）個体アミノ酸を含む化学的コンジュゲーション部位；
ｄ）炭水化物またはオリゴ糖部位；及び
ｅ）ＩｇＧヌクレオチド結合部位
が含まれるがこれらに限定されない。

ａ．スルファターゼモチーフ
酵素修飾が化学的コンジュゲーションの手段として選択されるそれらの実施形態では、化学的コンジュゲーション部位（複数可）は、スルファターゼモチーフを含み得る。スルファターゼモチーフは、通常、長さが５または６ａａであり、例えば、米国特許第９，５４０，４３８号及び米国特許公開第２０１７／０１６６６３９Ａｌ号（参照により組み込まれる）に記載されている。モチーフの挿入は、アルデヒドタグ化またはアルデヒドタグを有すると時に称されるタンパク質またはポリペプチドの形成をもたらす。モチーフは、選択的（例えば、部位特異的）化学的コンジュゲーション反応のために利用され得る、時にオキソアラニンと称されるアルデヒド含有ａａであるホルミルグリシン残基（「ｆＧｌｙ」であるが、時に「ＦＧｌｙ」と表記される）にモチーフにおけるシステインまたはセリンを変換するためのホルミルグリシン生成酵素（複数可）（「ＦＧＥ」または「ＦＧＥ（ＦＧＥｓ）」）によって作用され得る。したがって、本明細書で使用される場合、「アルデヒドタグ」または「アルデヒドタグ化」ポリペプチドは、変換されていないスルファターゼモチーフを含むａａ配列、ならびにモチーフのシステインまたはセリン残基がＦＧＥの作用によってｆＧｌｙに変換されたスルファターゼモチーフを含むａａ配列を指す。スルファターゼモチーフという用語がａａ配列との関連で利用される場合、発生段階の化学的コンジュゲーション配列（例えば、変換されていないモチーフを含有するポリペプチド）ならびに活性化学的コンジュゲーション部位対応物を含有するそのｆＧｌｙの両方が開示される。ｆＧｌｙ残基は、ポリペプチド（例えば、Ｔ細胞－ＭＰのもの）に存在すると、チオセミカルバジド、アミノオキシ、ヒドラジド、及びヒドラジノ基を含むがこれらに限定されない多様な反応性基を含む分子（例えば、介在リンカーを有するまたは有しないペプチドエピトープ）と反応して、ｆＧｌｙ残基を介してペプチドと分子との間に共有結合を有するコンジュゲート（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）を形成し得る。スルファターゼモチーフは、エピトープ（例えば、エピトープ提示ペプチド）だけでなく、（例えば、薬物及び診断分子とのコンジュゲートの形成において）標的化配列及び／またはペイロードも組み込むために使用され得る。

実施形態では、スルファターゼモチーフは、少なくとも５または６ａａ残基であるが、例えば、長さが５～１６（例えば、６～１６、５～１４、６～１４、５～１２、６～１２、５～１０、６～１０、５～８、または６～８）ａａであり得る。スルファターゼモチーフは、１６、１４、１２、１０、または８ａａ残基未満の長さに限定され得る。

実施形態では、スルファターゼモチーフは、式（Ｉ）の配列を含む：Ｘ１Ｚ１Ｘ２Ｚ２Ｘ３Ｚ３（配列番号６６）（式中、
Ｚ１は、システインまたはセリンであり；
Ｚ２は、プロリンまたはアラニンのいずれかの残基であり（「Ｐ／Ａ」によっても表され得る）；
Ｚ３は、塩基性ａａ（アルギニン、リジン、またはヒスチジン、通常はリジン）、または脂肪族ａａ（アラニン、グリシン、ロイシン、バリン、イソロイシン、またはプロリン、通常はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩ）であり；
Ｘ１は、存在または非存在であり、存在する場合、任意のａａであり得るが、通常は脂肪族ａａ、硫黄含有ａａ、または極性非荷電ａａ（例えば、芳香族アミノ酸または荷電アミノ酸以外）、通常はＬ、Ｍ、Ｖ、ＳまたはＴ、より通常はＬ、Ｍ、ＳまたはＶであり得、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１は、存在し；
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のａａであり得るが、通常は脂肪族ａａ、極性非荷電ａａ、または硫黄含有ａａ（例えば、芳香族ａａまたは荷電ａａ以外）、通常はＳ、Ｔ、Ａ、Ｖ、ＧまたはＣ、より通常はＳ、Ｔ、Ａ、ＶまたはＧであり得る）。

上で示されているように、アルデヒドタグのスルファターゼモチーフは、長さが少なくとも５または６ａａ残基であるが、例えば、５～１６ａａであり得る。モチーフは、アルデヒドタグがスルファターゼモチーフ及び「補助モチーフ」の両方を含むように、Ｎ及びＣ末端の一方または両方で追加の残基を含有し得る。実施形態では、スルファターゼモチーフには、Ｃ末端補助モチーフが含まれる（すなわち、モチーフのＺ３位置に続く）。

スルファターゼモチーフにおけるシステインまたはセリンのｆＧｌｙへの変換（酸化）のために多様なＦＧＥが用いられ得る。本明細書で使用される場合、ホルミルグリシン生成酵素、またはＦＧＥという用語は、スルファターゼモチーフのシステインまたはセリンのｆＧｌｙへの変換を触媒するｆＧｌｙ生成酵素を指す。米国特許第９，５４０，４３８号において論述されるように、その文献は、しばしば、モチーフのシステインをｆＧｌｙに変換するそれらの酵素についてホルミルグリシン生成酵素という用語を使用する一方で、スルファターゼモチーフにおけるセリンをｆＧｌｙに変換する酵素は、Ａｔｓ－Ｂ様と称される。

原核生物のＦＧＥによる変換に適した式（Ｉ）のスルファターゼモチーフはしばしば、「ＳＵＭＰ Ｉ型」ＦＧＥまたは「Ａｔｓ－Ｂ様」ＦＧＥによってそれぞれ修飾され得るＺ１におけるシステインまたはセリン及びＺ２におけるプロリンを含有する。用いられ得る原核生物のＦＧＥ酵素には、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ（システイン型酵素）、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（セリン型酵素）またはＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓのＦＧＥからの酵素が含まれる。スルファターゼモチーフを含有するペプチドが、真核生物のＦＧＥによって、例えば、真核生物のＦＧＥを使用する真核細胞または無細胞システムにおけるペプチドの発現及び変換によって、ｆＧｌｙ含有ペプチドへの変換のために調製されている場合、真核生物のＦＧＥによる変換に適するスルファターゼモチーフが有利に用いられ得る。

変換されていないスルファターゼモチーフを有するポリペプチドの生成のための、または細胞がｆＧｌｙ含有ポリペプチド配列を変換するための好適なＦＧＥを発現する宿主細胞には、原核生物及び真核生物のものが含まれる。非限定的な例には、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ株、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．（例えば、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ等）、酵母または真菌（例えば、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｐｉｃｈｉａ ｓｐｐ．等）が含まれる。昆虫及び脊椎動物、特に哺乳動物等の高等生物に由来するものを含む他の宿主細胞の例には、ＨｅＬａ細胞（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）番号ＣＣＬ－２）、ＣＨＯ細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ９６１８及びＣＲＬ９０９６）、ＣＨＯ ＤＧ４４細胞、ＣＨＯ－Ｋｌ細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－６１）、２９３細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１５７３）、Ｖｅｒｏ細胞、ＮＩＨ ３Ｔ３細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１６５８）、Ｈｎｈ－７細胞、ＢＨＫ細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＣＬｌＯ）、ＰＣ１２細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１７２１）、ＣＯＳ細胞、ＣＯＳ－７細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１６５１）、ＲＡＴ１細胞、マウスＬ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬＩ．３）、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１５７３）、ＨＬＨｅｐＧ２細胞等が含まれるがこれらに限定されない。

スルファターゼモチーフは、Ｔ細胞－ＭＰの任意の所望の箇所に組み込まれ得る。実施形態では、それらは、アミノまたはカルボキシル末端の１０または２０アミノ酸から除外され得る。実施形態では、スルファターゼモチーフは、ＭＨＣ－Ｈもしくはβ２Ｍポリペプチド配列またはそれらを接続させる任意のリンカー配列（Ｌ３リンカー）を含む、任意のＴ細胞－ＭＰ要素に（例えば、その末端にまたは末端の近くに）付加され得る。スルファターゼモチーフはまた、骨格ポリペプチド（例えば、Ｉｇ Ｆｃ）またはＴ細胞－ＭＰに存在するリンカー（例えば、Ｌ１～Ｌ６）のいずれかに付加され得る。

スルファターゼモチーフは、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド配列（例えば、ａａ２１で開始し、それらのＣ末端で終了する図４に示される配列）の少なくとも５０個（例えば、少なくとも６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する配列を有するＴ細胞－ＭＰにおけるβ２Ｍポリペプチドに組み込まれ、または結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。図４における成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド配列は、スルファターゼモチーフの組み込みのために選択され得る。β２Ｍポリペプチドとの配列同一性は、付加されるスルファターゼモチーフまたは存在する任意のリンカーもしくは他の配列を考慮せずに図４におけるβ２Ｍポリペプチドの対応する部分と比べて決定される。

実施形態では、スルファターゼモチーフは、図４に示される配列（図４に示される配列全体、またはａａ２１で開始し、そのＣ末端で終了する成熟ポリペプチドの配列のいずれか）と比較して１～１５（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５）ａａの欠失、挿入及び／または変化を有するβ２Ｍポリペプチド配列に組み込まれ得る。変化は、スルファターゼモチーフ及び存在する任意のリンカー配列のａａを考慮せずに評価される。１つのそのような実施形態では、スルファターゼモチーフは、成熟β２Ｍ配列、例えば、図４に示されるもののａａ１～１５、１５～３５、３５～５５、４０～５０、または５０～７０内に配置及び／または挿入され得る。一実施形態では、スルファターゼモチーフは、図４のヒト成熟β２Ｍポリペプチド配列のａａ３５～５５の間（例えば、ａａ４０～５０の間）に配置され得、図４に示される配列（図４に示される配列全体、またはａａ２１で開始し、そのＣ末端で終了する成熟ポリペプチドの配列のいずれか）と比較して０～１５ａａの置換を有し得る。

スルファターゼモチーフは、スルファターゼモチーフの付加の前に図３Ａ～３Ｉに示されるＭＨＣ－Ｈ配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチド配列に組み込まれ、または結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。

実施形態では、付加されるスルファターゼモチーフは、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に付加され、または、存在する場合、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に配置されたリンカーにまたはその中に結合される。

米国特許第９，５４０，４３８号は、Ｆｃ領域ポリペプチドを含む様々な免疫グロブリン配列へのスルファターゼモチーフの組み込みについて論述しており、スルファターゼモチーフならびにＦｃポリペプチド及び他のポリペプチドの修飾に対するその教示のために参照により本明細書に組み込まれる。その特許はまた、ＦＧＥ酵素、及びｆＧｌｙ残基を形成する際のそれらの使用、ならびに分子、例えば、エピトープ及びペイロードのｆＧｌｙ残基へのカップリングに関連する化学に関するそのガイダンスについて参照により組み込まれる。

スルファターゼモチーフの組み込みは、Ｔ細胞－ＭＰをコードする核酸における所望の箇所でモチーフをコードする核酸配列を組み込むことによって達成され得る。以下に論述されるように、核酸配列は、転写制御配列（複数可）（プロモーター）のコントロール下に配置され、その発現を誘導する制御要素が備えられ得る。発現したタンパク質は、発現及び部分的または完全な精製の後に１つ以上のＦＧＥで処置され得る。代替的には、スルファターゼモチーフを認識するＦＧＥを発現する細胞における核酸の発現は、モチーフのシステインまたはセリンのｆＧｌｙへの変換をもたらす。

前述の観点では、本開示は、上で論述されるＴ細胞－ＭＰポリペプチド鎖に組み込まれた１つ以上のｆＧｌｙ残基を含むＴ細胞－ＭＰを提供する。ｆＧｌｙ残基は、例えば、配列Ｘ１（ｆＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２Ｘ３Ｚ３（式中、ｆＧｌｙは、ホルミルグリシン残基であり；Ｚ２、Ｚ３、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、上の式（Ｉ）で定義されるとおりである）の関連であり得る。エピトープ及び／またはペイロードは、ペプチドまたは化学的リンカーを介してスルファターゼモチーフの反応性ホルミルグリシンに直接的にまたは間接的にコンジュゲートされ得る。化学的コンジュゲーションの後、Ｔ細胞－ＭＰは、配列Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２Ｘ３Ｚ３（式中、ｆＧｌｙ’残基は、化学的反応を受け、共有結合したエピトープまたはペイロードを有することになったホルミルグリシンである）の関連で組み込まれた１つ以上のｆＧｌｙ’残基を含む。

ｆＧｌｙ含有化学的コンジュゲーション部位でカップリングされる分子のチオセミカルバジド、アミノオキシ、ヒドラジド、またはヒドラジノ誘導体の使用を含むがこれらに限定されない多数の化学及び市販の試薬が、分子（例えば、エピトープまたはペイロード）をｆＧｌｙ残基にコンジュゲートするために利用され得る。例えば、（例えば、直接的にペプチドのａａにまたはＰＥＧ等のリンカーを介して結合される）チオセミカルバジド、アミノオキシ、ヒドラジド、ヒドラジノまたはヒドラジニル官能基を保有するエピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）及び／またはペイロードは、共有結合したエピトープを形成するためにｆＧｌｙ含有Ｔ細胞－ＭＰポリペプチドと反応させられ得る。同様に、標的化配列及び／またはペイロード、例えば、薬物及び治療剤は、例えば、ビオチンヒドラジドを連結剤として使用して組み込まれ得る。

本開示は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及び／またはＴ細胞－ＭＰ－ペイロードコンジュゲートを含むコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰを調製する方法であって、
ａ）コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸にセリンまたはシステインを含むスルファターゼモチーフ（例えば、式（Ｉ）または（ＩＩ）のスルファターゼモチーフ、例えば、上で論述されたＸ１ＣＸ２ＰＸ３Ｚ３（配列番号６７）；ＣＸ１ＰＸ２Ｚ３（配列番号６８））をコードするヌクレオチド配列を組み込むこと；
ｂ）スルファターゼモチーフを含有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドを、
ｉ）ＦＧＥを発現し、かつスルファターゼモチーフのセリンまたはシステインをｆＧｌｙに変換する細胞において発現させ、ｆＧｌｙを含有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを部分的または完全に精製すること、または
ｉｉ）スルファターゼモチーフのセリンまたはシステインをｆＧｌｙに変換するＦＧＥを発現しない細胞において発現させ、スルファターゼモチーフを含有するＴ細胞－ＭＰを精製しまたは部分的に精製し、精製されたまたは部分的に精製されたＴ細胞－ＭＰをスルファターゼモチーフのセリンまたはシステインをｆＧｌｙ残基に変換するＦＧＥと接触させること；及び
ｃ）ｆＧｌｙを含有するポリペプチドを、ｆＧｌｙのアルデヒドとエピトープ及び／またはペイロードとの間で共有結合を形成する基で官能化されたエピトープ及び／またはペイロードと接触させること；
を含み、それによりＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及び／またはＴ細胞－ＭＰペイロードコンジュゲートを形成する、方法を提供する。
そのような方法では、エピトープ（エピトープ含有分子）及び／またはペイロードは、アルデヒド基と選択的に反応する任意の好適な官能基によって官能化され得る。そのような基は、例えば、チオセミカルバジド、アミノオキシ、ヒドラジド、及びヒドラジノからなる群から選択され得る。実施形態では、スルファターゼモチーフは、図４に示されるβ２Ｍ配列（例えば、スルファターゼモチーフ配列の付加を含まずにまたは付加の前に計算された同一性を有する成熟β２Ｍポリペプチド）の少なくとも６０、７０、８０または９０個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）の配列同一性を有するβ２Ｍのａａ配列を含む第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドに組み込まれる。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及び／またはＴ細胞－ＭＰペイロードコンジュゲートを調製する方法の実施形態では、スルファターゼモチーフは、図３Ａ～３Ｉに示される配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する配列を含むポリペプチドに組み込まれ、配列同一性は、スルファターゼモチーフ配列の付加を含めずに計算される）。

ｂ．ソルターゼＡ酵素部位
エピトープ（例えば、エピトープの配列を含むペプチド）及びペイロードは、Ｔ細胞－ＭＰのＮ及び／またはＣ末端で、ソルターゼＡコンジュゲーションのための部位をそれらの箇所で組み込むことによって結合され得る。

ソルターゼＡは、Ｃ末端ペンタペプチド配列ＬＰ（Ｘ５）ＴＧ／Ａ（配列番号６９（Ｘ５は、任意の単一のアミノ酸であり、Ｇ／Ａは、グリシンまたはアラニンである）を認識し、配列内のトレオニンとコンジュゲーションパートナーのＮ末端におけるグリシンまたはアラニンとの間でアミド結合を生成する。

Ｔ細胞－ＭＰポリペプチドのＣ末端部分へのエピトープまたはペイロードの結合のため、ＬＰ（Ｘ５）ＴＧ／Ａは、露出したＬ５リンカーにおけるもの等の所望のポリペプチド（複数可）のカルボキシ末端部分において提供される（図５の構造Ａを参照されたい）。グリシンまたはアラニンの露出伸長部（例えば、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓからのソルターゼＡを使用する場合は（Ｇ）_３－５（配列番号７０及び７１）またはＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓからのソルターゼＡを使用する場合はアラニン（Ａ）_３－５（配列番号７２及び７３））は、エピトープを含むペプチド（例えば、エピトープに結合したリンカーにおけるもの）、ペプチドペイロード（またはそれに結合したリンカー）、または非ペプチドエピトープもしくはペイロードに共有結合したペプチドのＮ末端で提供される。

Ｔ細胞－ＭＰポリペプチドのアミノ末端へのエピトープまたはペイロードの結合のため、グリシン（例えば、（Ｇ）_{２、３、４、または５}）またはアラニン（例えば、（Ａ）_{２、３、４、または５}）の露出伸長部を含むａａ配列がＮ末端で提供され、エピトープを含むペプチド（またはそれに結合したリンカー）、ペプチドペイロード（またはそれに結合したリンカー）、または非ペプチドエピトープもしくはペイロードに共有結合したペプチドのカルボキシ末端部分においてＬＰ（Ｘ５）ＴＧ／Ａが提供される。

ソルターゼＡを上述したアミノ及びカルボキシ修飾ペプチドと組み合わせることは、ＬＰ（Ｘ５）ＴＧ／Ａ配列におけるＴｈｒとＧｌｙ／Ａｌａ残基との間の切断、及び形態：カルボキシ修飾ポリペプチド－ＬＰ（Ｘ５）Ｔ＊Ｇ／Ａ－アミノ修飾ポリペプチド（式中、「＊」は、ＬＰ（Ｘ５）ＴＧ／ＡモチーフのトレオニンとＮ末端修飾ペプチドのグリシンまたはアラニンとの間に形成された結合を表す）の共有結合した複合体の形成をもたらす。

ＬＰ（Ｘ５）ＴＧ／Ａの代わりに、ＬＰＥＴＧＧ（配列番号７４）ペプチドがＳ．ａｕｒｅｕｓソルターゼＡカップリングのために使用され得、またはＬＰＥＴＡＡ（配列番号７５）ペプチドがＳ．ｐｙｏｇｅｎｅｓソルターゼＡカップリングのために使用され得る。コンジュゲーション反応は、依然として、トレオニンとアミノ末端オリゴグリシンまたはオリゴアラニンペプチドとの間で生じて、カルボキシ修飾ポリペプチド－ＬＰ（Ｘ５）Ｔ＊Ｇ／Ａ－アミノ修飾ポリペプチド（式中、「＊」は、トレオニンとＮ末端修飾ペプチドのグリシンまたはアラニンとの間に形成された結合を表す）を生成する。

ｃ．トランスグルタミナーゼ酵素部位
トランスグルタミナーゼ（ｍＴＧ）は、グルタミン残基の側鎖上のアミド基と第１級アミンドナー（例えば、第１級アルキルアミン、例えば、ポリペプチドにおけるリジン残基の側鎖に見られるもの）との間で共有結合の形成を触媒する。トランスグルタミナーゼは、遊離アミンを介して直接的に、または遊離アミンを含むリンカーを介して間接的に、エピトープ及びペイロードをＴ細胞－ＭＰにコンジュゲートするために用いられ得る。このように、トランスグルタミナーゼ部位との関連でＴ細胞－ＭＰに付加されるグルタミン残基は、それらがＳｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｍｏｂａｒａｅｎｓｅトランスグルタミナーゼ等の酵素によって近接され得る場合、化学的コンジュゲーション部位としてみなされ得る。その酵素（ＥＣ ２．３．２．１３）は、リジンのε－アミノ基へのグルタミンのγ－アシル移行を触媒する安定なカルシウム非依存性酵素である。しかしながら、配列において現れるグルタミン残基は、酵素修飾のために常に近接可能であるわけではない。制限された近接可能性は、修飾が生じ得る箇所の数を制限するので有利であり得る。例えば、細菌のｍＴＧは通常、ネイティブＩｇＧ１におけるグルタミン残基を修飾することはできない；しかしながら、Ｓｃｈｉｂｌｉ及び同僚（Ｊｅｇｅｒ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ（Ｉｎｔ Ｅｎｇｌ）．２０１０；４９：９９９５７及びＤｅｎｎｌｅｒ Ｐ，ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ Ｃｈｅｍ．２０１４；２５（３）：５６９－７８）は、Ｎ２９７におけるＩｇＧ１の脱グリコシル化がグルタミン残基Ｑ２９５を近接可能とし、酵素ライゲーションを可能として抗体薬物コンジュゲートを生成することを見出した。さらに、Ｎ２９７からＱ２９７へのＩｇＧ１変異体を生成することによって、彼らは、トランスグルタミナーゼによる酵素標識のための２つの部位を導入した。Ｎ２９７における修飾はまた、補体Ｃ１ｑタンパク質とのＩｇＧ Ｆｃ反応の相互作用を減少させるための潜在性を提供する。

Ｔ細胞－ＭＰが化学的コンジュゲーション部位として用いられ得るグルタミンを含有しない場合（例えば、それがトランスグルタミナーゼに近接可能ではなく、所望の箇所に配置もされない場合）、グルタミン残基が配列に付加されてトランスグルタミナーゼ部位が形成され得、またはトランスグルタミナーゼ近接可能グルタミン（時に「グルタミンタグ」または「Ｑ－タグ」と称される）を含む配列がタンパク質操作を介してポリペプチドに組み込まれ得る。付加されたグルタミンまたはＱ－タグは、エピトープまたはペイロードのための化学的コンジュゲーション部位として作用し得る。米国特許公開第２０１７／００４３０３３Ａ１号は、グルタミン残基及びＱ－タグの組み込みならびにポリペプチドを修飾するためのトランスグルタミナーゼの使用を記載しており、それらの教示のために本明細書に組み込まれる。

グルタミン残基及びＱ－タグの組み込みは、ペプチドが合成される場合は化学的に、またはポリペプチドをコードする核酸を修飾し、細胞または無細胞システムにおいて修飾された核酸を発現させることによって達成され得る。実施形態では、グルタミン含有Ｑ－タグは、ＬＱＧ、ＬＬＱＧＧ（配列番号７６）、ＬＬＱＧ（配列番号７７）、ＬＳＬＳＱＧ（配列番号７８）、及びＬＬＱＬＱＧ（配列番号７９）からなる群から選択されるａａ配列を含む（多数の他のものが利用可能である）。

グルタミン残基及びＱ－タグは、Ｔ細胞－ＭＰの任意の所望の箇所に組み込まれ得る。実施形態では、グルタミン残基またはＱ－タグは、ＭＨＣ－Ｈもしくはβ２Ｍポリペプチド配列またはそれらを接続させる任意のリンカー配列（Ｌ３リンカー）を含む、任意のＴ細胞－ＭＰ要素に（例えば、その末端にまたは末端の近くに）付加され得る。グルタミン残基及びＱ－タグはまた、骨格ポリペプチド（例えば、Ｉｇ Ｆｃ）またはＴ細胞－ＭＰに存在するリンカー（例えば、Ｌ１～Ｌ６）のいずれかに付加され得る。

グルタミン残基またはＱ－タグは、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド配列（例えば、ａａ２１で開始し、それらのＣ末端で終了する図４に示される配列）の少なくとも５０個（例えば、少なくとも６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する配列を有するＴ細胞－ＭＰにおけるβ２Ｍポリペプチドに組み込まれ、または結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。図４における成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド配列が、グルタミン残基またはＱ－タグの組み込みのために選択され得る。β２Ｍポリペプチドとの配列同一性は、付加されるグルタミン残基、Ｑ－タグ、または存在する任意のリンカーもしくは他の配列を考慮せずに図４におけるβ２Ｍポリペプチドの対応する部分と比べて決定される。

実施形態では、グルタミン残基またはＱ－タグは、図４に示される配列（図４に示される配列全体、またはａａ２１で開始し、そのＣ末端で終了する成熟ポリペプチドの配列のいずれか）と比較して１～１５（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５）ａａの欠失、挿入及び／または変化を有するβ２Ｍポリペプチド配列に組み込まれ得る。変化は、グルタミン残基、Ｑ－タグ及び存在する任意のリンカー配列のａａを考慮せずに評価される。１つのそのような実施形態では、グルタミン残基またはＱ－タグは、成熟β２Ｍ配列、例えば、図４に示されるもののａａ１～１５、１５～３５、３５～５５、４０～５０、または５０～７０内に配置及び／または挿入され得る。一実施形態では、グルタミン残基またはＱ－タグは、図４のヒト成熟β２Ｍポリペプチド配列のａａ３５～５５の間（例えば、４０～５０）に配置され得、０～１５ａａの置換を有し得る。

グルタミン残基またはＱ－タグは、グルタミン残基またはＱ－タグの付加の前に図３Ａ～３Ｉに示されるＭＨＣ－Ｈ配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチド配列に組み込まれ、または結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。

実施形態では、付加されるグルタミン残基またはＱ－タグは、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に付加され、または、存在する場合、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に配置されたリンカーにまたはその中に結合される。

第１級アミン基を含有する、または含有するように修飾されたペイロード及びエピトープは、グルタミン残基（例えば、Ｑ－タグにおけるグルタミン残基）とエピトープまたはペイロードとの間に共有結合を形成するトランスグルタミナーゼ触媒反応においてアミンドナーとして使用され得る。

エピトープまたはペイロードが、アミンドナーとして作用することを可能にする好適な第１級アミンを含まない場合、エピトープまたはペイロードは、アミン基を組み込むように化学的に修飾され得る（例えば、リジン、アミノカプロン酸、カダベリン等への結合によって第１級アミンを組み込むように修飾される）。エピトープまたはペイロードがペプチドを含み、アミンドナーとして作用するための第１級アミンを必要とする場合、トランスグルタミナーゼが作用し得るリジンまたは別の第１級アミンがペプチドに組み込まれ得る。第１級アミン基を提供し得、アルファアミノ酸鎖に、またはその末端に組み込まれ得る他のアミン含有化合物には、ホモリジン、２，７－ジアミノヘプタン酸、及びアミノヘプタン酸が含まれるがこれらに限定されない。代替的には、エピトープまたはペイロードは、好適なアミン基を含むペプチドまたは非ペプチドリンカーに結合され得る。好適な非ペプチドリンカーの例には、アルキルリンカー及びＰＥＧ（ポリエチレングリコール）リンカーが含まれる。

トランスグルタミナーゼは、哺乳動物の肝臓（例えば、モルモットの肝臓）；真菌（例えば、Ｏｏｍｙｃｅｔｅｓ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｍｏｎａｓｃｕｓ、またはＲｈｉｚｏｐｕｓのトランスグルタミナーゼ）；変形菌（例えば、Ｐｈｙｓａｒｕｍ ｐｏｌｙｃｅｐｈａｌｕｍのトランスグルタミナーゼ）；及び／または多様なＳｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ、Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ ｓｐ．、Ｂａｃｉｌｌｕｓを含む細菌等からの酵素を含む、多様な源から得られ得る。

Ｑ－タグは、グルタミンを挿入することによってまたはＴ細胞－ＭＰに現れるＩｇ Ｆｃ、β２Ｍ、及び／またはＭＨＣ－Ｈ鎖配列に現れるグルタミン残基の周りのａａ配列を修飾することによって生成され、エピトープまたはペイロードの付加のための化学的コンジュゲーション部位として使用され得る。同様に、Ｑ－タグは、直接的にまたは第１級アミンを保有するペプチドまたは化学的リンカーを介して間接的に、例えば、エピトープ及び／またはペイロードのコンジュゲーションのために使用され得る化学的コンジュゲーション部位としてＩｇ Ｆｃ領域に組み込まれ得る。

ｄ．化学的コンジュゲーション部位としてのセレノシステイン及び非天然アミノ酸
部位特異的化学的コンジュゲーション部位をＴ細胞－ＭＰポリペプチドに提供するための１つのストラテジーは、ポリペプチドに存在する天然に存在するタンパク質構成Ｌ－アミノ酸とは異なる反応性を有するａａの挿入を用いる。そのようなａａには、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、及び非天然ａａ：アセチルフェニルアラニン（ｐ－アセチル－Ｌ－フェニルアラニン、ｐＡｃＰｈｅ）；パラジドフェニルアラニン；及びプロピニル－チロシンが含まれるがこれらに限定されない。米国特許公開第２０１４００５１８３６Ａ１号におけるＴｈａｎｏｓらは、Ｏ－メチル－Ｌ－チロシン、Ｏ－４－アリル－Ｌ－チロシン、トリ－Ｏ－アセチル－ＧｌｃＮＡｃβ－セリン、イソプロピル－Ｌ－フェニルアラニン、ｐ－ベンゾイル－Ｌ－フェニルアラニン、Ｌ－ホスホセリン、及びｐ－プロパルギルオキシ－フェニルアラニンを含むいくつかの他の非天然ａａについて論述している。他の非天然ａａには、例えば、アミノ、カルボキシ、アセチル、ヒドラジノ、ヒドラジド、セミカルバジド、スルファニル、アジド及びアルキニル等の反応性基が含まれる。例えば、米国特許公開第２０１４００４６０３０Ａ１号を参照されたい。

実験室でポリペプチドを直接的に合成することに加えて、転写－翻訳システムを利用してタンパク質及びポリペプチドに非天然ａａを組み込むための終止コドンを利用する２つの方法が開発されている。１つ目は、オパール終止コドンであるＵＧＡをＳｅｃ挿入配列と対合させることによってセレノシステイン（Ｓｅｃ）を組み込む。２つ目は、通常はアンバー、オーカー、またはオパール終止コドンの使用を介して非天然ａａをポリペプチドに組み込む。独自コドン、稀なコドン、非天然コドン、５塩基コドン、及び４塩基コドン等の他のタイプのコドンの使用、ならびにナンセンス及びフレームシフト抑制の使用もまた報告されている。例えば、米国特許公開第２０１４００４６０３０Ａ１号及びＲｏｄｒｉｇｕｅｚ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ １０３（２３）８６５０－８６５５（２００６）を参照されたい。例として、非天然アミノ酸アセチルフェニルアラニンは、ｉｎ ｖｉｖｏまたは無細胞転写－翻訳システムにおいてｔＲＮＡ／アミノアシルｔＲＮＡ合成酵素対を使用してアンバーコドンで組み込まれ得る。

セレノシステイン及び非天然ａａの両方の組み込みは、所望の箇所（複数可）でＴ細胞ＭＰポリペプチドの核酸コード配列への必要な終止コドン（複数可）を操作することを必要とし、その後、コード配列は、ｉｎ ｖｉｖｏまたは無細胞転写－翻訳システムにおいてＴ細胞－ＭＰを発現させるために使用される。

ｉｎ ｖｉｖｏシステムは通常、ポリペプチド及びタンパク質への生体直交化学的コンジュゲーション部位として作用する非天然ａａを組み込むための操作された細胞株に依存する。例えば、「Ｉｎ ｖｉｖｏ ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｕｎｎａｔｕｒａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ」という題目の国際公開された出願第２００２／０８５９２３号を参照されたい。ｉｎ ｖｉｖｏでの非天然ａａの組み込みは、宿主細胞における内因性ｔＲＮＡ及び合成酵素のすべて直交するｔＲＮＡ及びアミノアシルｔＲＮＡ合成酵素対に依存する。選抜された非天然ａａは、細胞浸透性及び安定性を重要な考慮事項として、細胞培養または発酵中に培地に補充される。

補充されたｔＲＮＡを備える様々な無細胞合成システムもまた、非天然ａａを組み込むために利用され得る。そのようなシステムには、米国特許公開第２０１６０１１５４８７Ａ１号；Ｇｕｂｅｎｓ ｅｔ ａｌ．，ＲＮＡ．２０１０ Ａｕｇ；１６（８）：１６６０－１６７２；Ｋｉｍ，Ｄ．Ｍ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．６６：１８０－８（１９９９）；Ｋｉｍ，Ｄ．Ｍ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．１６：３８５－９０（２０００）；Ｋｉｍ，Ｄ．Ｍ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．７４：３０９－１６（２００１）；Ｓｗａｒｔｚ ｅｔ ａｌ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６７：１６９－８２（２００４）；Ｋｉｍ，Ｄ．Ｍ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．８５：１２２－２９（２００４）；Ｊｅｗｅｔｔ，Ｍ．Ｃ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．８６：１９－２６（２００４）；Ｙｉｎ，Ｇ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．８６：１８８－９５（２００４）；Ｊｅｗｅｔｔ，Ｍ．Ｃ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：４６５－７２（２００４）；Ｖｏｌｏｓｈｉｎ，Ａ．Ｍ．ａｎｄ Ｓｗａｒｔｚ，Ｊ．Ｒ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．９１：５１６－２１（２００５）に記載されているものが含まれる。

Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれると、組み込まれたセレノシステインまたは非天然ａａと反応性の基を保有するエピトープ及び／またはペイロードは、共有結合を形成するために好適な条件下でＴ細胞－ＭＰと接触させられる。例として、ｐＡｃＰｈｅのケト基は、アルコキシアミンに対して反応性であり、オキシムカップリングを介して、アルコキシアミン含有エピトープ及び／またはペイロードに直接的に、またはアルコキシアミン含有リンカーを介してエピトープ及びペイロードに間接的にコンジュゲートされ得る。セレノシステインは、例えば、第１級アルキルヨウ化物（例えば、リンカーとして使用され得るヨードアセトアミド）、マレイミド、及びメチルスルホンフェニルオキサジアゾール基と反応する。したがって、それらの基を保有するまたはそれらの基を保有するリンカーに結合したエピトープ及び／またはペイロードは、セレノシステインを保有するポリペプチド鎖に共有結合され得る。

他の化学的コンジュゲーション部位について上で論述されるように、セレノシステイン及び／または非天然ａａは、Ｔ細胞－ＭＰにおける任意の所望の箇所に組み込まれ得る。実施形態では、セレノシステイン及び／または非天然ａａは、ＭＨＣ－Ｈもしくはβ２Ｍポリペプチド配列またはそれらを接続させる任意のリンカー配列（Ｌ３リンカー）を含む、任意のＴ細胞－ＭＰ要素に（例えば、その末端にまたは末端の近くに）付加され得る。セレノシステイン及び／または非天然ａａはまた、骨格ポリペプチド（例えば、Ｉｇ Ｆｃ）またはＴ細胞－ＭＰに存在するリンカー（例えば、Ｌ１～Ｌ６）のいずれかに付加され得る。

セレノシステイン及び非天然ａａは、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド配列（例えば、ａａ２１で開始し、それらのＣ末端で終了する図４に示される配列）の少なくとも５０個（例えば、少なくとも６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する配列を有するＴ細胞－ＭＰにおけるβ２Ｍポリペプチドに組み込まれ、または結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。図４における成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド配列は、セレノシステイン及び非天然ａａの組み込みのために選択され得る。β２Ｍポリペプチドとの配列同一性は、付加されるセレノシステイン、非天然ａａ、または存在する任意のリンカーもしくは他の配列を考慮せずに図４におけるβ２Ｍポリペプチドの対応する部分と比べて決定される。

実施形態では、セレノシステイン（複数可）または非天然ａａ（複数可）は、図４に示される配列（図４に示される配列全体、またはａａ２１で開始し、そのＣ末端で終了する成熟ポリペプチドの配列のいずれか）と比較して１～１５（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５）ａａの欠失、挿入及び／または変化を有するβ２Ｍポリペプチド配列に組み込まれ得る。変化は、セレノシステイン（複数可）、非天然ａａ（複数可）、及び存在する任意のリンカー配列を考慮せずに評価される。１つのそのような実施形態では、セレノシステインまたは非天然ａａは、成熟β２Ｍ配列、例えば、図４に示されるもののａａ１～１５、１５～３５、３５～５５、４０～５０、または５０～７０内に配置及び／または挿入され得る。一実施形態では、セレノシステインまたは非天然ａａは、図４のヒト成熟β２Ｍポリペプチド配列のａａ３５～５５の間（例えば、４０～５０）に配置され得、０～１５ａａの置換を有し得る。

セレノシステインまたは非天然ａａは、セレノシステインまたは非天然ａａの付加の前に図３Ａ～３Ｉに示されるＭＨＣ－Ｈ配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチド配列に組み込まれ、または結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。

実施形態では、付加されるセレノシステイン（複数可）または非天然ａａ（複数可）は、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に結合され、または、存在する場合、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に配置されたリンカーにまたはその中に結合される。１つのそのような実施形態では、それらは、直接的にまたはペプチドまたは化学的リンカーを介して間接的にＴ細胞－ＭＰにコンジュゲートされる、例えば、エピトープ、標的化配列、及び／またはペイロードのコンジュゲーションのための部位として利用され得る。

ｅ．アミノ酸化学的コンジュゲーション部位
天然に存在するアミノ酸の側鎖、またはポリペプチドの末端に存在する多様な官能基（例えば、－ＳＨ、－ＮＨ_３、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ等）のいずれは、化学的コンジュゲーション部位として使用され得る。これには、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド及びマレイミド官能基をそれぞれ含む試薬によって容易に修飾可能なリジン及びシステインの側鎖が含まれる。そのようなアミノ酸残基を利用する主要な欠点は、産物の潜在的変動性及び不均一性である。例えば、ＩｇＧは、８０を超えるリジンを有し、溶媒露出部位で２０を超えるリジンを有する。例えば、ＭｃＣｏｍｂ ａｎｄ Ｏｗｅｎ，ＡＡＰＳ Ｊ．１１７（２）：３３９－３５１を参照されたい。システインは、あまり広く分布しない傾向があり；それらは、ジスルフィド結合において係合される傾向があり、近接不可能であり得（例えば、溶媒によってまたはシステインを修飾するために使用される分子に近接可能ではなく）、化学的コンジュゲーション部位を配置することが望ましい場所に位置していない場合がある。しかしながら、化学的コンジュゲーション部位の配置のための所望の箇所で天然に存在するアミノ酸及び、上に論述されるように、天然に存在しないアミノ酸を提供するためにＴ細胞－ＭＰポリペプチドを選択的に修飾することが可能である。修飾は、ポリペプチドの直接的な化学的合成（例えば、適切にブロックされたアミノ酸をカップリングすることによる）及び／または細胞または無細胞システムにおける発現後のポリペプチドをコードする核酸の配列を修飾することによる形態を取り得る。したがって、本開示は、エピトープまたはペイロードコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位として使用される非天然ａａまたは天然ａａ（セレノシステインを含む）を組み込むことが可能な転写／翻訳システムによるＴ細胞－ＭＰポリペプチドの調製を含み、それを提供する。

本開示は、転写／翻訳システムによるＴ細胞－ＭＰの一部の調製及び、そのＣまたはＮ末端に、例えば、化学的合成によって調製された非天然ａａまたは天然ａａ（セレノシステインを含む）を保有するポリペプチドを接続させることを含み、それを提供する。リンカーを含み得るポリペプチドは、ペプチドエピトープのための上述したソルターゼの使用を含む任意の好適な方法によって接続され得る。実施形態では、そのポリペプチドは、ソルターゼコンジュゲーションのために及び／またはリンカー配列の一部として機能し得る２、３、４、または５個のアラニンまたはグリシンの配列を含み得る。

化学的コンジュゲーション部位として使用される天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、Ｔ細胞－ＭＰの任意の所望の箇所で提供され得る。実施形態では、天然に存在するａａは、ＭＨＣ－Ｈもしくはβ２Ｍポリペプチド配列またはそれらを接続させる任意のリンカー配列（Ｌ３リンカー）を含む、任意のＴ細胞－ＭＰ要素に（例えば、その末端にまたは末端の近くに）提供され得る。天然に存在するａａ（複数可）はまた、骨格ポリペプチド（例えば、Ｉｇ Ｆｃ）またはＴ細胞－ＭＰに存在するリンカー（例えば、Ｌ１～Ｌ６）のいずれかに提供され得る。

天然に存在するａａ（例えば、システイン）はまた、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド配列（例えば、ａａ２１で開始し、それらのＣ末端で終了する図４に示される配列）の少なくとも５０個（例えば、少なくとも６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する配列を有するＴ細胞－ＭＰにおけるβ２Ｍポリペプチドに提供され（例えば、タンパク質操作を介して）、または結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。図４における成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド配列は、天然に存在するａａの組み込みのために選択され得る。β２Ｍポリペプチドとの配列同一性は、付加される天然に存在するａａ、任意のリンカー、または存在する任意の他の配列を考慮せずに図４におけるβ２Ｍポリペプチドの対応する部分と比べて決定される。

実施形態では、天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、図４に示される配列（図４に示される配列全体、またはａａ２１で開始し、そのＣ末端で終了する成熟ポリペプチドの配列のいずれか）と比較して１～１５（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５）ａａの欠失、挿入及び／または変化を有するβ２Ｍポリペプチド配列に、例えば、タンパク質操作を介して提供され得る。変化は、天然に存在するａａ、任意のリンカー、または存在する他の配列のａａを考慮せずに評価される。１つのそのような実施形態では、天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、成熟β２Ｍ配列、例えば、図４に示されるもののａａ１～１５、１５～３５、３５～５５、４０～５０、または５０～７０内で（例えば、分子生物学の技術を使用して）修飾され得る。一実施形態では、天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、図４のヒト成熟β２Ｍポリペプチド配列のａａ３５～５５の間で（例えば、４０と５０との間で、４２と４８との間で、４３と４５との間で、またはａａ４４で）提供され得、０～１５ａａの置換を有し得る。

天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、天然に存在するａａの付加の前に図３Ａ～３Ｉに示されるＭＨＣ－Ｈ配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチド配列において提供され、またはそれに結合され得る（例えば、ペプチドリンカーを介して）。

実施形態では、天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に結合され、または、存在する場合、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に配置されたリンカーにまたはその中に結合され得る。

一実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰは、図４に示されるβ２Ｍ配列、図２Ａ～Ｇのいずれかに示されるＩｇ Ｆｃ配列、または図３Ａ～３Ｉに示されるＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドにおいて、例えば、タンパク質操作を介して、提供される化学的コンジュゲーション部位として使用される少なくとも１つの天然に存在するａａ（例えば、システイン）を含有する。実施形態では、化学的コンジュゲーション部位として使用される少なくとも１つの天然に存在するａａは、図４に示される成熟β２Ｍ配列の少なくとも５０個（例えば、少なくとも６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性、図２に示されるＩｇ Ｆｃ配列、または図３Ａ～３Ｉのいずれかに示されるＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドの少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドにおいて提供される。少なくとも１つの天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、図４に示される成熟β２Ｍ配列の少なくともアミノ末端の１０、２０、３０、４０、５０、６０または７０ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９３％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＴ細胞－ＭＰのβ２Ｍのａａ配列において化学的コンジュゲーション部位として提供され得る。少なくとも１つの天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、Ｔ細胞－ＭＰのＩｇ Ｆｃ配列（例えば、図２Ａ～２Ｇのいずれかに示される）において化学的コンジュゲーション部位として提供され得る。少なくとも１つの天然に存在するａａ（例えば、システイン）は、図３Ａ～３Ｉのいずれかに提供されるＭＨＣ Ｈポリペプチド配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＴ細胞－ＭＰのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチド配列において化学的コンジュゲーション部位として提供され得る。別の実施形態では、化学的コンジュゲーション部位として使用される少なくとも１つの天然に存在するａａは、図３Ａ～３Ｉのいずれかに示されるＭＨＣクラスＩ重鎖配列または図４に示される成熟β２Ｍ配列と１００％のａａ配列同一性を有する少なくとも３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００個の連続ａａを含むＴ細胞－ＭＰポリペプチドにおいて提供される。

天然に存在するａａが、例えば、タンパク質操作を介して、ポリペプチドに提供される上記の実施形態のいずれかでは、ａａは、アルギニン、リジン、システイン、セリン、トレオニン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、及びアスパラギンからなる群から選択され得る。代替的には、コンジュゲーション部位として提供されるａａは、リジン、システイン、セリン、トレオニン、及びグルタミンからなる群から選択される。コンジュゲーション部位として提供されるａａはまた、リジン、グルタミン、及びシステインからなる群から選択され得る。１つの例では、提供されるａａは、システインである。別の例では、提供されるａａは、リジンである。また別の例では、提供されるａａは、グルタミンである。

コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰにおいて提供されるアミノ酸にペイロードまたはエピトープをカップリングするために当該技術分野で知られている任意の方法が使用され得る。例として、マレイミドは、スルフヒドリルにカップリングするために利用され得、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドは、アミン基にカップリングするために利用され得、酸無水物または塩化物は、アルコールまたはアミンにカップリングするために使用され得、脱水剤は、アルコールまたはアミンをカルボン酸基にカップリングするために使用され得る。したがって、そのような化学を使用して、エピトープまたはペイロードは、直接的に、またはリンカー（例えば、ホモまたはヘテロ２官能性架橋剤）を介して間接的に、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチド上の箇所にカップリングされ得る。本明細書で以下に記載されるＴ細胞－ＭＰにペイロードを連結するために記載されているものを含むがこれらに限定されない多数の２官能性架橋剤が利用され得る。例えば、ホモまたはヘテロ２官能性リンカーを用いて結合されたマレイミド基（例えば、図９を参照されたい）またはマレイミドアミノ酸を含むペプチドエピトープ（またはペプチド含有ペイロード）は、天然に存在するまたはＴ細胞－ＭＰにおいて提供される化学的コンジュゲーション部位（例えば、システイン残基）のスルフヒドリルにコンジュゲートされ得る。

マレイミドアミノ酸は、固相ペプチド合成の一部としてディールス・アルダー／レトロ・ディールス・アルダー保護スキームを使用してペプチド（例えば、ペプチドエピトープ）に直接的に組み込まれ得る。例えば、Ｋｏｅｈｌｅｒ，Ｋｅｎｎｅｔｈ Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ（２０１２），“Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｉｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｌｉｃｋａｂｌｅ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ，” Ｃｈｅｍｉｃａｌ ＆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｇｒａｄｕａｔｅ Ｔｈｅｓｅｓ ＆ Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｓ，３１，ｈｔｔｐｓ：／／ｓｃｈｏｌａｒ．ｃｏｌｏｒａｄｏ．ｅｄｕ／ ｃｈｂｅ＿ｇｒａｄｅｔｄｓ／３１を参照されたい。

マレイミド基はまた、マレイミドを直接的に（または例えば、エピトープに結合した追加のａａを含み得る介在リンカーを介して間接的に）エピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）に結合させるホモまたはヘテロ２官能性リンカー（時に架橋剤と称される）を使用してエピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）に付加され得る。例えば、ヘテロ２官能性Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド－マレイミド架橋剤は、マレイミドをペプチドリジンのアミン基に結合させ得る。いくつかの特定の架橋剤には、マレイミド官能基及びマレイミドをアミン（例えば、リジンのイプシロンアミノ基）に結合させ得るＮ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）またはＮ－スクシンイミジル基のいずれかを有する分子が含まれる。そのような架橋剤の例には、ＮＨＳ－ＰＥＧ４－マレイミド、γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）；ε－マレイミドカプロン酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）；ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）；及びＮ－（α－マレイミドアセトキシ）－スクシンイミドエステル（ＡＭＡＳ）が含まれるがこれらに限定されず、これらは、ペプチド固定化のための異なる長さ及び特性を提供する。マレイミド基を組み込む他のアミン反応性架橋剤には、Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）が含まれる。追加の架橋剤（２官能性薬剤）が以下に記述される。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰにカップリングされるエピトープは、例えば、リジンのイプシロンアミノ基を用いて形成されたアミドによってカップリングされた、任意のリンカー（例えば、図９を参照されたい）によってペプチドにカップリングされたマレイミドアルキルカルボン酸を有する。マレイミドカルボン酸は、例えば、マレイミドエタン酸、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、またはオクタン酸であり得る。

ペプチドエピトープは、例えば、マレイミドを含む２官能性リンカーまたはペプチドに組み込まれたマレイミドアミノ酸を介してＴ細胞－ＭＰの結合ポケットに存在するまたは提供された（例えば、その中に操作された）天然に存在するシステインにカップリングされ、それによりＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートを形成し得る。ペプチドエピトープは、ＭＨＣ－Ｈ結合ポケット内のまたはそれに隣接する任意の１つ以上の箇所でシステイン残基を有するＭＨＣ重鎖にコンジュゲートされ得る（例えば、１または２つのマレイミドアミノ酸または少なくとも１つのマレイミド含有２官能性リンカーによって）。例として、マレイミドアミノ酸を含むまたはペプチドに結合した架橋剤の一部としてのマレイミド基を保有するペプチドエピトープは、図３Ｄ～３Ｉのように付番されるＭＨＣ－Ｈの位置２、５、７、５９、８４、１１６、１３９、１６７、１６８、１７０、及び／または１７１で１または２ａａ（例えば、システイン）に共有結合され得る（例えば、Ｙ７Ｃ、Ｙ５９Ｃ、Ｙ１１６Ｃ、Ａ１３９Ｃ、Ｗ１６７Ｃ、Ｌ１６８Ｃ、Ｒ１７０Ｃ、及びＹ１７１Ｃ置換）。ペプチドエピトープはまた、図３Ｄ～３Ｈのように付番される位置７及び／または１１６から選択される任意の１つ以上（例えば、１または２つ）のａａ位置でシステイン残基（例えば、Ｙ７Ｃ及びＹ１１６Ｃ置換）を有するＭＨＣ重鎖にコンジュゲートされ得る（例えば、１または２つのマレイミドアミノ酸または少なくとも１つのマレイミド含有２官能性リンカーによって）。図３Ｄ～３Ｈのように付番される位置１１６におけるシステイン置換（例えば、Ｙ１１６Ｃ）及び／または位置１６７におけるシステイン置換（例えば、Ｗ１６７Ｃ）は、（例えば、エピトープ含有ペプチドの末端の一方または両方で）マレイミド基を介して形成される１または２つの結合を用いてエピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）を固定するために別々にまたは組み合わせて使用され得る。

ペプチドエピトープはまた、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド配列の少なくとも６０個の連続するアミノ酸（例えば、少なくとも７０、８０、９０個またはすべての連続ａａ）と少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９７％または１００％）の配列同一性を有するβ２Ｍポリペプチド配列に存在するまたは提供された（例えば、その中に操作された）天然に存在するシステインにカップリングされ得る。化学的コンジュゲーション部位を生成するためにシステインによって置換され得る成熟β２Ｍポリペプチドのいくつかの溶媒露出性位置には、ＮＰ＿００４０３９．１からの成熟ペプチドの２、１４、１６、３４、３６、４４、４５、４７、４８、５０、５８、７４、７７、８５、８８、８９、９１、９４、及び９８（Ｇｌｎ２、Ｐｒｏ１４、Ｇｌｕ１６、Ａｓｐ３４、Ｇｌｕ３６、Ｇｌｕ４４、Ａｒｇ４５、Ｇｌｕ４７、Ａｒｇ４８、Ｇｌｕ５０、Ｌｙｓ５８、Ｇｌｕ７４、Ｇｌｕ７７、Ｖａｌ８５、Ｓｅｒ８８、Ｇｌｎ８９、Ｌｙｓ９１、Ｌｙｓ９４、及びＡｓｐ９８）、または他のβ２Ｍ配列におけるそれらの対応するアミノ酸が含まれる（図４における配列アライメントを参照されたい）。例えば、エピトープは、成熟β２Ｍポリペプチドの位置２、４４、５０、７７、８５、８８、９１、または９８（図４に示される成熟β２Ｍ配列のａａ２２、６４、７０、９７、１０５、１０８、１１１、または１１８）でシステインにコンジュゲートされ得る。したがって、Ｔ細胞－ＭＰのβ２Ｍ配列は、Ｑ２Ｃ、Ｅ４４Ｃ、Ｅ５０Ｃ、Ｅ７７Ｃ、Ｖ８５Ｖ、Ｓ８８Ｃ、Ｋ９１Ｃ、及びＤ９８Ｃから選択される、成熟β２Ｍ配列において（例えば、タンパク質操作によって）提供されるシステイン化学的コンジュゲーション部位を含有し得る。β２Ｍ配列におけるシステイン化学的コンジュゲーション部位はまた、ＭＨＣ－Ｈ配列間に鎖内ジスルフィド結合を形成することによってＭＨＣを安定化するためになされるＭＨＣ－ＨのＹ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換と組み合わされ得る。１つの例では、成熟β２Ｍにおいて提供されるシステイン化学的コンジュゲーション部位は、Ｅ４４に位置する（Ｅ４４Ｃ置換）。別の例では、成熟β２Ｍにおいて提供されるシステイン化学的コンジュゲーション部位は、Ｅ４４に位置し（Ｅ４４Ｃ置換）、β２Ｍ配列はまた、鎖内ジスルフィド結合を形成するＭＨＣ－ＨのＹ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含む。

エピトープ、標的化配列及び／またはペイロードのコンジュゲーションが、（例えば、マレイミド修飾エピトープまたはペイロードを使用して）コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰに存在するシステイン化学的コンジュゲーション部位を介して行われる場合、多様なプロセス条件が、コンジュゲーション反応に起因するコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰのコンジュゲーション効率及び質（例えば、反応に起因する非凝集二重体Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートの量／画分）に影響を及ぼし得る。個々に最適化され得るコンジュゲーションプロセス条件には、（ｉ）コンジュゲーション前のシステインスルフヒドリルの非ブロック化（例えば、潜在的ブロック基が存在し、除去され得る）、（ｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰのエピトープまたはペイロードに対する比、（ｉｉｉ）反応ｐＨ、（ｉｖ）用いられる緩衝液、（ｖ）反応に存在する添加剤、（ｖｉ）反応温度、及び（ｖｉｉ）反応時間が含まれるがこれらに限定されない。

コンジュゲーションの前に、Ｔ細胞－ＭＰは、ブロックされている場合があるシステインスルフヒドリルを減少させ、遊離させるためにジスルフィド還元剤、例えば、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、メルカプトエタノール、またはトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）で処置され得る。処置は、例えば、システインコンジュゲーション部位当たり約０．５～２．０還元当量の比較的少ない量の還元剤を使用して、比較的短い期間行われ得、コンジュゲートされていないＴ細胞ＭＰのシステイン化学的コンジュゲーション部位は、約１０分～約１時間、または約１時間～５時間、コンジュゲーションのための反応性求核剤として利用可能であり得る。

コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのコンジュゲートされるエピトープまたはペイロードに対する比は、約１：２～約１：１００、例えば、約１：２～約１：３、約１：３～約１：１０、約１：１０～約１：２０、約１：２０～約１：４０、または約１：４０～約１：１００で変更され得る。反応性エピトープまたはペイロードの逐次付加の使用は、カップリング反応を完了するまで誘導するために行われ得る（例えば、マレイミドまたはＮ－ヒドロキシスクシンイミド修飾エピトープの複数の用量がＴ細胞－ＭＰと反応させるために添加され得る）。

先に示されているように、コンジュゲーション反応は、緩衝液、そのｐＨ、及び存在し得る添加剤によって影響を受け得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在する反応性システインに対するマレイミドカップリングのため、反応は、典型的には、約ｐＨ６．５～約ｐＨ８．５（例えば、約ｐＨ６．５～約ｐＨ７．０、約ｐＨ７．０～約ｐＨ７．５、約ｐＨ７．５～約ｐＨ８．０、または約ｐＨ８．０～約ｐＨ８．５）で行われる。活性求核剤（例えば、反応性チオール）を含有せず、好ましくはスルフヒドリルの再酸化を避けるために脱気された任意の好適な緩衝液が反応のために用いられ得る。いくつかの好適な従来の緩衝液には、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、トリス－ＨＣｌ、及び（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸）ＨＥＰＥＳが含まれる。従来の緩衝液に対する代替手段として、マレイミドコンジュゲーション反応は、アルギニン、グリシン、リジン、またはヒスチジン等のアミノ酸を含む緩衝液／反応混合物中で行われ得る。高い濃度のアミノ酸、例えば、約０．１Ｍ（モル濃度）～約１．５Ｍ（例えば、約０．１～約０．２５、約０．２５～約０．５、約０．３～約０．６、約０．４～約０．７、約０．５～約０．７５、約０．７５～約１．０、約１．０～約１．２５Ｍ、または約１．２５～約１．５Ｍ）の使用は、コンジュゲートされた及び／またはコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを安定化し得る。

マレイミド及び他のコンジュゲーション反応に有用な添加剤には、プロテアーゼ阻害剤；不要な副反応を妨害し、金属依存性プロテアーゼが存在する場合にそれを阻害する金属キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）；洗浄剤（例えば、ＴＷＥＥＮ８０（登録商標）として販売されているポリソルベート８０、またはＮＰ４０及びＴｅｒｇｉｔｏｌ（商標）ＮＰの名称で販売されているノニルフェノキシポリエトキシエタノール）；及びタンパク質に安定性を加え得るスクロースまたはグリセロール等のポリオールが含まれるがこれらに限定されない。

Ｔ細胞－ＭＰ中のエピトープ、標的化配列及び／またはペイロードとのコンジュゲーション、及び特にマレイミド化学を使用するシステインにおけるコンジュゲーションは、所定範囲の温度、例えば、０℃～４０℃にわたって行われ得る。例えば、システイン－マレイミド反応を含むコンジュゲーション反応は、約０℃～約１０℃、約１０℃～約２０℃、約２０℃～約３０℃、約２５℃～約３７℃、または約３０℃～約４０℃（例えば、約２０℃、約３０℃または約３７℃）で行われ得る。

スルフヒドリル基の対が存在する場合、それらは、Ｔ細胞－ＭＰへの化学的コンジュゲーションのために同時に用いられ得る。そのような実施形態では、ジスルフィド結合を有する、または互いに近接する箇所で提供される２つのシステイン（またはセレノシステイン）を有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、ビス－チオールリンカーの組み込みによって化学的コンジュゲーション部位として利用され得る。Ｇｏｄｗｉｎ及び同僚によって記載されるビス－チオールリンカーは、その場所において架橋基を形成することによってジスルフィド結合を減少させることに関連する不安定性を回避し、同時にエピトープまたはペイロードであり得る別の分子の組み込みを可能にする。例えば、親水性リンカー（例えば、ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）リンカー）を組み込むビス－スルホン試薬の使用を記載しているＢａｄｅｓｃｕ Ｇ，ｅｔ ａｌ．，（２０１４），Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ Ｃｈｅｍ．，２５（６）：１１２４－３６，ｅｎｔｉｔｌｅｄ Ｂｒｉｄｇｉｎｇ ｄｉｓｕｌｆｉｄｅｓ ｆｏｒ ｓｔａｂｌｅ ａｎｄ ｄｅｆｉｎｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓを参照されたい。

通常、ジスルフィド結合を減少させ、ビス－チオールリンカーをシステイン及び／またはセレノシステイン残基の両方と反応させるためにジチオール還元剤（例えば、ジチオスレイトール）の化学量論量またはほぼ化学量論量が用いられる。複数のジスルフィド結合が存在する場合、還元剤の化学量論量またはほぼ化学量論量の使用が、１つの部位における選択的修飾を可能にし得る。例えば、Ｂｒｏｃｃｈｉｎｉ，ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．（２００８）６０：３－１２を参照されたい。Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰがシステイン及び／またはセレノシステイン（例えば、セレノシステイン及びシステイン）の対を含まない場合、それらは、ビス－チオールリンカーと相互作用し得る残基の対を提供するためにポリペプチドにおいて（システインまたはセレノシステインの一方または両方を導入することによって）提供され得る。システイン及び／またはセレノシステインは、ビス－チオールリンカーが（例えば、２つのシステインがジスルフィド結合を形成し得る箇所で）それらを架橋させ得るように配置され得る。システイン及びセレノシステインの任意の組み合わせが用いられ得る（すなわち、２つのシステイン、２つのセレノシステイン、またはセレノシステイン及びシステイン）。システイン及び／またはセレノシステインはいずれとも、Ｔ細胞－ＭＰ上に存在し得る。代替的には、二重体Ｔ細胞－ＭＰにおいて、第１のシステイン及び／またはセレノシステインは、二重体の第１のＴ細胞－ＭＰに存在し、第２のシステイン及び／またはセレノシステインは、二重体の第２のＴ細胞－ＭＰに存在し、ビス－チオールリンカーは、二重体化Ｔ細胞－ＭＰの間で共有結合性架橋として作用する。

実施形態では、システイン及び／またはセレノシステイン残基の対は、システイン及び／またはセレノシステインの対の、及び／またはそれらの配列のうちの１つに結合したＬ２またはＬ３ペプチドリンカーへの付加の前に、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド配列の少なくとも５０個（例えば、少なくとも６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＴ細胞－ＭＰのβ２Ｍ配列に組み込まれる。１つのそのような実施形態では、システイン及び／またはセレノシステインの対は、ビス－チオール基に結合したペプチドまたは化学的リンカーを介するエピトープ及び／またはペイロードのコンジュゲーションのためのビス－チオールリンカーカップリング部位として利用され得る。

別の実施形態では、システイン及び／またはセレノシステインの対は、化学的コンジュゲーション部位としてＴ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列に組み込まれる。実施形態では、システイン及び／またはセレノシステインの対は、システインまたはセレノシステインの、またはそれらの配列のうちの１つに結合したペプチドリンカーへの付加の前に、図３Ａ～３Ｉのいずれかに示されるＭＨＣ－Ｈ配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する配列を含むポリペプチドに組み込まれる。１つのそのような実施形態では、システイン及び／またはセレノシステインの対は、ビス－チオールリンカーに結合したペプチドまたは化学的リンカーを介するエピトープ及び／またはペイロードのコンジュゲーションのためのビス－チオールリンカーカップリング部位として利用され得る。ＭＨＣ－Ｈ配列にＹ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換が含まれる場合、ビス－チオールリンカーは、エピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）の共有結合性カップリングのためのそれらの部位間の共有結合性架橋を形成するために使用され得る。

別の実施形態では、システイン及び／またはセレノシステインの対は、化学的コンジュゲーション部位を提供するためにＴ細胞－ＭＰのＩｇ Ｆｃ配列に組み込まれる。実施形態では、システイン及び／またはセレノシステインの対は、システインまたはセレノシステインの対の付加の前に、図２Ａ～２ＧのＦｃ配列のいずれかに示される配列と少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するＩｇ Ｆｃ配列を含むポリペプチドに組み込まれる。１つのそのような実施形態では、システイン及び／またはセレノシステインの対は、ビス－チオール基に結合したペプチドまたは化学的リンカーを介するエピトープ及び／またはペイロードのコンジュゲーションのためのビス－チオールリンカーカップリング部位として利用される。ビス－チオールリンカーは、二重体Ｔ細胞－ＭＰの骨格ポリペプチド間で共有結合性架橋を形成するために使用され得る。そのような場合、鎖間ジスルフィド結合を形成する下側ヒンジ領域のシステインは、Ｉｇ Ｆｃ骨格ポリペプチド配列に存在する場合、ビス－チオールリンカーを挿入するために使用され得る。

ｆ．他の化学的コンジュゲーション部位
（ｉ）炭水化物化学的コンジュゲーション部位
細胞発現によって調製される多くのタンパク質は、付加された炭水化物（例えば、哺乳動物細胞において発現した抗体に付加されたタイプのオリゴ糖）を含有する。したがって、Ｔ細胞－ＭＰが細胞発現によって調製される場合、炭水化物が存在し得、特にＴ細胞－ＭＰがＩｇ Ｆｃ骨格を含む場合、例えば、グリコール－コンジュゲーション反応において、選択的化学的コンジュゲーション部位として利用可能であり得る。ＭｃＣｏｍｂｓ ａｎｄ Ｏｗｅｎ，ＡＡＰＳ Ｊｏｕｒｎａｌ，（２０１５）１７（２）：３３９－３５１、及びその中で引用された参考文献は、抗体に対する分子のグリコール－コンジュゲーションのための炭水化物残基の使用を記載している。

炭水化物残基の付加または修飾はまた、ｅｘ ｖｉｖｏで、炭水化物を変化させる化学物質（例えば、アルデヒド基を導入する過ヨード酸塩）の使用を介して、または化学的コンジュゲーション部位として使用するための化学的に反応性の炭水化物または炭水化物アナログを組み込み得る酵素（例えば、フコシルトランスフェラーゼ）の作用によって行われ得る。実施形態では、既知のグリコシル化部位を有するＩｇ Ｆｃ骨格の組み込みは、部位特異的化学的コンジュゲーション部位を導入するために使用され得る。

本開示は、化学的コンジュゲーション（例えば、グリコール－コンジュゲーション）部位として炭水化物を有するＴ細胞－ＭＰを含み、それを提供する。

本開示はまた、エピトープならびに他の分子、例えば、標的化配列、薬物、及び診断剤ペイロードとのコンジュゲートを形成する際のそのような分子の使用を含み、それを提供する。

（ｉｉ）ヌクレオチド結合部位
ヌクレオチド結合部位は、結合部位に共有結合し得るＵＶ反応性部位の使用を介して部位特異的官能化を提供する。Ｂｉｌｇｉｃｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ Ｃｈｅｍ．（２０１４）２５（７）：１１９８－２０２は、ヌクレオチド結合部位でＩｇＧに共有結合され得るインドール－３－酪酸（ＩＢＡ）部位の使用を報告した。ヌクレオチド結合部位を形成するために必要とされる配列の組み込みにより、Ｔ細胞－ＭＰと、反応性ヌクレオチドを保有する好適に修飾されたエピトープ及び／または他の分子（例えば、ペイロード薬物または診断剤）との化学的コンジュゲートは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを調製するために用いられ得る。エピトープまたはペイロードは、直接的にまたは介在リンカーを介して間接的に、反応性実体（例えば、ＩＢＡ部位）を介してヌクレオチド結合部位にカップリングされ得る。

本開示は、化学的コンジュゲーション部位としてヌクレオチド結合部位を有するＴ細胞－ＭＰを含み、それを提供する。本開示はまた、エピトープならびに他の分子、例えば、薬物及び診断剤とのコンジュゲートを形成する際のそのような分子の使用、ならびに処置及び診断の方法におけるそれらの分子の使用を含み、それを提供する。

３ Ｔ細胞－ＭＰのＭＨＣポリペプチド
上記したように、Ｔ細胞－ＭＰには、ＭＨＣポリペプチドが含まれる。本開示の目的のため、用語「主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド」は、ヒトＭＨＣ（ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）とも称される）ポリペプチド、げっ歯類（例えば、マウス、ラット等）ＭＨＣポリペプチド、及び他の哺乳動物種（例えば、ウサギ目動物、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、有蹄動物（例えば、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ等）のＭＨＣポリペプチド等を含む、様々な種のＭＨＣクラスＩポリペプチドを含むことを意味する。用語「ＭＨＣポリペプチド」は、クラスＩ ＭＨＣポリペプチド（例えば、β－２ミクログロブリン及びＭＨＣクラスＩ重鎖及び／またはその一部）を含むことを意味する。Ｔ細胞－ＭＰにおけるβ２Ｍ及びＭＨＣ－Ｈ鎖配列の両方は、ヒト起源のものであり得る。別途明示的に記述されない限り、本明細書に記載のＴ細胞－ＭＰ及びＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＭＨＣ－Ｈ鎖の膜固定化ドメイン（膜貫通領域）、またはＴ細胞－ＭＰ、もしくはそのペプチドを、それが発現する細胞（例えば、真核細胞、例えば、哺乳動物細胞）に固定するのに十分なその分子の一部を含むことは意図されていない。また、Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＨＣ－Ｈ鎖は、ネイティブＭＨＣクラスＩ重鎖に関連するシグナルペプチド、膜貫通ドメイン、または細胞内ドメイン（細胞質尾部）を含まない。よって、例えば、いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＨＣ－Ｈ鎖には、ＭＨＣクラスＩ重鎖のα１、α２、及びα３ドメインのみが含まれる。Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＨＣクラスＩ重鎖は、約２７０アミノ酸（ａａ）～約２９０ａａの長さを有し得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＨＣクラスＩ重鎖は、２７０ａａ、２７１ａａ、２７２ａａ、２７３ａａ、２７４ａａ、２７５ａａ、２７６ａａ、２７７ａａ、２７８ａａ、２７９ａａ、２８０ａａ、２８１ａａ、２８２ａａ、２８３ａａ、２８４ａａ、２８５ａａ、２８６ａａ、２８７ａａ、２８８ａａ、２８９ａａ、または２９０ａａの長さを有し得る。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈ及び／またはβ２Ｍポリペプチドは、ヒト化またはヒトＭＨＣポリペプチド（ヒトＭＨＣポリペプチドは、「ヒト白血球抗原」（「ＨＬＡ」）ポリペプチドとも称される）、より具体的には、クラスＩ ＨＬＡポリペプチド、例えば、β２Ｍポリペプチド、またはクラスＩ ＨＬＡ重鎖ポリペプチドである。Ｔ細胞－ＭＰに含まれ得るクラスＩ ＨＬＡ重鎖ポリペプチドには、ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃ、－Ｅ、－Ｆ、及び／または－Ｇ重鎖ポリペプチドが含まれる。Ｔ細胞－ＭＰのクラスＩ ＨＬＡ重鎖ポリペプチドは、図３Ａ～３Ｉに示されるヒトＨＬＡ重鎖ポリペプチド（例えば、α１、α２、及びα３ドメインを包含する配列）のいずれかのａａ配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列を含み得る。例えば、それらは、１～３０、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る（図３Ｅ～３Ｉの重鎖コンセンサス配列において可変であるものとして示されているそれらの箇所に加えて）。

例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ａ、３Ｂ及び／または３Ｃに示されるヒトＨＬＡ－Ａ重鎖ポリペプチドのａａ２５～３００（リーダー、膜貫通及び細胞質配列のすべて、または実質的にすべてを欠く）または２５～３６５（リーダーを欠く）と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。

ａ．ＭＨＣクラスＩ重鎖
クラスＩヒトＭＨＣポリペプチドは、古典的ＨＬＡアレル（ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、及びＣ）、または非古典的ＨＬＡアレル（例えば、ＨＬＡ－Ｅ、Ｆ及びＧ）に由来し得る。以下は、Ｔ細胞－ＭＰ及びそれらのエピトープコンジュゲートに組み込まれ得るＭＨＣ－Ｈアレル及びそれらのアレルのバリアントの非限定的な例である。

（ｉ）ＨＬＡ－Ａ重鎖
Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得るＨＬＡ－Ａ重鎖ペプチド配列、またはその一部には、アレル：Ａ＊０１０１、Ａ＊０２０１、Ａ＊０３０１、Ａ＊１１０１、Ａ＊２３０１、Ａ＊２４０２、Ａ＊２４０７、Ａ＊３３０３、及びＡ＊３４０１が含まれるがこれらに限定されず、これらは、図３Ｅにおいてリーダー、膜貫通及び細胞質配列のすべて、または実質的にすべてを伴わずにアライメントされている。それらのアレルのいずれかは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９（図３Ｅに示される）における１つ以上における置換をさらに含み得る。また、それらのＨＬＡ－Ａアレルの配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％）のａａ配列同一性を有するＨＬＡ－Ａ配列もまた、Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得る（例えば、それは、１～３０、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ａ）ＨＬＡ－Ａ＊０１０１（ＨＬＡ－Ａ＊０１：０１：０１：０１）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊０１：０１：０１：０１（図３Ｄ（配列番号２４）及び図３Ｅ）においてＨＬＡ－Ａとして列挙されるＨＬＡ－Ａ＊０１０１、またはＨＬＡ－Ａ＊０１：０１）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％）のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～３０、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ重鎖ポリペプチドが図３ＤにおいてＨＬＡ－Ａと表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊０１０１重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｂ）ＨＬＡ－Ａ＊０２０１（ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ｄまたは図３Ｅに提供されるＨＬＡ－Ａ＊０２０１（配列番号２７）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％）のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～３０、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊０２０１重鎖ポリペプチドが図３Ｄまたは３ＥにおいてＨＬＡ－Ａ＊０２０１と表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊０２０１重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｃ）ＨＬＡ－Ａ＊１１０１（ＨＬＡ－Ａ＊１１：０１）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ｄまたは３Ｅに提供されるＨＬＡ－Ａ＊１１０１（配列番号３２）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％）のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～３０、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。ＨＬＡ－Ａ＊１１０１重鎖アレルは、アジア系の個体の集団を含む、アジア人の集団において突出して多い場合がある。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊１１０１重鎖ポリペプチドが図３Ｄまたは３ＥにおいてＨＬＡ－Ａ＊１１０１と表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊１１０１重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｄ）はＨＬＡ－Ａ＊２４０２（ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ｄまたは３Ｅに提供されるＨＬＡ－Ａ＊２４０２（配列番号３３）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％）のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～３０、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。ＨＬＡ－Ａ＊２４０２重鎖アレルは、アジア系の個体の集団を含む、アジア人の集団において突出して多い場合がある。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊２４０２重鎖ポリペプチドが図３Ｄまたは３ＥにおいてＨＬＡ－Ａ＊２４０２と表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／またはの１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊２４０２重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｅ）ＨＬＡ－Ａ＊３３０３（ＨＬＡ－Ａ＊３３：０３）またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１（ＨＬＡ－Ａ＊３４：０１）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ｄまたは３Ｅに提供されるＨＬＡ－Ａ＊３３０３（配列番号３４）またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１（配列番号３８）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。ＨＬＡ－Ａ＊３３０３重鎖アレルは、アジア系の個体の集団を含む、アジア人の集団において突出して多い場合がある。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊３３０３またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１重鎖ポリペプチドが図３ＤにおいてＨＬＡ－Ａ＊３３０３と表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ａ＊３３０３またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｉｉ）ＨＬＡ－Ｂ重鎖。
Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得るＨＬＡ－Ｂ重鎖ペプチド配列、またはその一部には、アレル：Ｂ＊０７０２、Ｂ＊０８０１、Ｂ＊１５０２、Ｂ＊３８０２、Ｂ＊４００１、Ｂ＊４６０１、及びＢ＊５３０１が含まれるがこれらに限定されず、これらは、図３Ｆにおいてリーダー、膜貫通及び細胞質配列のすべて、または実質的にすべてを伴わずにアライメントされている。それらのアレルのいずれかは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９（図３Ｆに示される）のうちの１つ以上における置換を含み得る。また、それらのＨＬＡ－Ｂアレルの配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有するＨＬＡ－Ｂ配列もまた、Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得る（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｂ重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ａ）ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２（ＨＬＡ－Ｂ＊０７：０２）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３ＤにおけるＨＬＡ－Ｂ＊０７０２（配列番号２５）（図３ＤにおいてＨＬＡ－Ｂと表示されている）、ＨＬＡ－Ｂ＊０３５０１、ＨＬＡ－Ｂ＊４４０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４４０３、ＨＬＡ－Ｂ＊５８０１のａａ配列またはそれらの配列のいずれかのすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｂ重鎖ポリペプチドが図３ＤにおいてＨＬＡ－Ｂと表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｂ＊０７０２重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｂ）ＨＬＡ－Ｂ＊３５０１（ＨＬＡ－Ｂ＊３５：０１）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ－Ｂ＊３５０１：ＧＳＨＳＭＲＹＦＹＴＡＭＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＡＳＰＲＴＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＲＮＴＱＩＦＫＴＮＴＱＴＹＲＥＳＬＲＮＬＲＧＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＩＩＱＲＭＹＧＣＤＬＧＰＤＧＲＬＬＲＧＨＤＱＳＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＮＥＤＬＳＳＷＴＡＡＤＴＡＡＱＩＴＱＲＫＷＥＡＡＲＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＬＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＡＤＰＰＫＴＨＶＴＨＨＰＶＳＤＨＥＡＴＬＲＣＷＡＬＧＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＲＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＥＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（そのシグナル配列及び膜貫通／細胞内領域配列番号８０を欠いて示されている）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、その配列は、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｂ＊３５０１重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｃ）ＨＬＡ－Ｂ＊４４０２（ＨＬＡ－Ｂ＊４４：０２）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ－Ｂ＊４４０２：ＧＳＨＳＭＲＹＦＹＴＡＭＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＴＶＧＹＶＤＤＴＬＦＶＲＦＤＳＤＡＴＳＰＲＫＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＲＥＴＱＩＳＫＴＮＴＱＴＹＲＥＮＬＲＴＡＬＲＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＩＩＱＲＭＹＧＣＤＶＧＰＤＧＲＬＬＲＧＹＤＱＤＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＮＥＤＬＳＳＷＴＡＡＤＴＡＡＱＩＴＱＲＫＷＥＡＡＲＶＡＥＱＤＲＡＹＬＥＧＬＣＶＥＳＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＡＤＰＰＫＴＨＶＴＨＨＰＩＳＤＨＥＶＴＬＲＣＷＡＬＧＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＲＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＥＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（そのシグナル配列及び膜貫通／細胞内領域配列番号８１を欠いて示されている）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、その配列は、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｂ＊４４０２重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｄ）ＨＬＡ－Ｂ＊４４０３（ＨＬＡ－Ｂ＊４４：０３）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ－Ｂ＊４４０３：ＧＳＨＳＭＲＹＦＹＴＡＭＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＴＶＧＹＶＤＤＴＬＦＶＲＦＤＳＤＡＴＳＰＲＫＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＲＥＴＱＩＳＫＴＮＴＱＴＹＲＥＮＬＲＴＡＬＲＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＩＩＱＲＭＹＧＣＤＶＧＰＤＧＲＬＬＲＧＹＤＱＤＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＮＥＤＬＳＳＷＴＡＡＤＴＡＡＱＩＴＱＲＫＷＥＡＡＲＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＬＣＶＥＳＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＡＤＰＰＫＴＨＶＴＨＨＰＩＳＤＨＥＶＴＬＲＣＷＡＬＧＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＲＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＥＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（そのシグナル配列及び膜貫通／細胞内領域配列番号８２を欠いて示されている）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、その配列は、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｂ＊４４０３重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｅ）ＨＬＡ－Ｂ＊５８０１（ＨＬＡ－Ｂ＊５８：０１）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ－Ｂ＊５８：０１：ＧＳＨＳＭＲＹＦＹＴＡＭＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＡＳＰＲＴＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＧＥＴＲＮＭＫＡＳＡＱＴＹＲＥＮＬＲＩＡＬＲＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＩＩＱＲＭＹＧＣＤＬＧＰＤＧＲＬＬＲＧＨＤＱＳＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＮＥＤＬＳＳＷＴＡＡＤＴＡＡＱＩＴＱＲＫＷＥＡＡＲＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＬＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＡＤＰＰＫＴＨＶＴＨＨＰＶＳＤＨＥＡＴＬＲＣＷＡＬＧＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＲＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＥＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（そのシグナル配列及び膜貫通／細胞内領域配列番号８３を欠いて示されている）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、その配列は、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｂ＊５９０１重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｉｉｉ）ＨＬＡ－Ｃ重鎖
Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得るＨＬＡ－Ｃ重鎖ペプチド配列、またはその一部には、アレル：Ｃ＊０１０２、Ｃ＊０３０３、Ｃ＊０３０４、Ｃ＊０４０１、Ｃ＊０６０２、Ｃ＊０７０１、Ｃ＊０７０２、Ｃ＊０８０１、及びＣ＊１５０２が含まれるがこれらに限定されず、これらは、図３Ｇにおいてリーダー、膜貫通及び細胞質配列のすべて、または実質的にすべてを伴わずにアライメントされている。それらのアレルのいずれかは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４、１３９及び／または２３６（図３Ｇに示される）のうちの１つ以上における置換を含み得る。また、それらのＨＬＡ－Ｃアレルの配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有するＨＬＡ－Ｃ配列もまた、Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得る（例えば、それは、１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｃ重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ａ）ＨＬＡ－Ｃ＊７０１（ＨＬＡ－Ｃ＊０７：０１）及びＨＬＡ－Ｃ＊７０２（ＨＬＡ－Ｃ＊０７：０２）
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３ＧにおけるＨＬＡ－Ｃ＊７０１（配列番号２３）またはＨＬＡ－Ｃ＊７０２（配列番号５４）（図３ＤにおいてＨＬＡ－Ｃと表示されている）のａａ配列、またはそれらの配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、それらの配列と比べて１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｃ重鎖ポリペプチドが図３ＤにおいてＨＬＡ－Ｃと表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｃ＊７０１またはＨＬＡ－Ｃ＊０７０２重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｉｖ）非古典的ＨＬＡ－Ｅ、Ｆ及びＧ重鎖
Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得る非古典的ＨＬＡ重鎖ペプチド配列、またはその一部には、ＨＬＡ－Ｅ、Ｆ、及び／またはＧアレルのものが含まれるがこれらに限定されない。それらのアレル、（ならびにＨＬＡ－Ａ、Ｂ及びＣアレル）の配列は、ワールドワイドウェブで、例えば、ｈｌａ．ａｌｌｅｌｅｓ．ｏｒｇ／ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（ＥＭＢＬ）の部門であるＥｕｒｏｐｅａｎ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ）、及びＮａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）で見ることができる。

いくつかの好適なＨＬＡ－Ｅアレルには、ＨＬＡ－Ｅ＊０１０１（ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０１：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０３（ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０３：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０４、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０５、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０６、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０７、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０９、及びＨＬＡ－Ｅ＊０１：１０が含まれるがこれらに限定されない。いくつかの好適なＨＬＡ－Ｆアレルには、ＨＬＡ－Ｆ＊０１０１（ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０１：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０２、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０３（ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０３：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０４、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０５、及びＨＬＡ－Ｆ＊０１：０６が含まれるがこれらに限定されない。いくつかの好適なＨＬＡ－Ｇアレルには、ＨＬＡ－Ｇ＊０１０１（ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０１：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０２、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０３（ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０３：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０４（ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０４：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０６、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０７、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０８、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０９：ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１０、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１１、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１２、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１４、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１５、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１６、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１７、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１８：ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１９、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：２０、及びＨＬＡ－Ｇ＊０１：２２が含まれるがこれらに限定されない。リーダー、膜貫通及び細胞質配列のすべて、または実質的にすべてを有しないそれらのＨＬＡ－Ｅ、－Ｆ、及び－Ｇアレルについてのコンセンサス配列は、図３Ｈに提供されており、図３Ｅ～３Ｇ及び図３Ｉに提供される上記ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、及び－Ｃアレルのコンセンサス配列とアライメントされている。

上記ＨＬＡ－Ｅ、Ｆ及び／またはＧアレルのいずれかは、コンセンサス配列について図３Ｉに示されるように位置８４及び／または１３９のうちの１つ以上で置換を含み得る。実施形態では、置換は、位置８４のチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）またはシステイン（Ｙ８４Ｃ）、またはＨＬＡ－Ｆの場合はＲ８４ＡまたはＲ８４Ｃ置換；及び／または位置１３９のアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）、またはＨＬＡ－Ｆの場合はＶ１３９Ｃ置換から選択され得る。また、図３Ｉに示されるコンセンサス配列のいずれかのすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）または１００％のａａ配列同一性を有するＨＬＡ－Ｅ、－Ｆ、及び／または－Ｇ配列もまた用いられ得る（例えば、その配列は、そこで挙げられた可変残基における変化に加えて１～２５、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）。Ｔ細胞－ＭＰのＨＬＡ－Ｅ、Ｆ、またはＧ重鎖ポリペプチド配列は、位置８４及び１３９の両方でシステインを含み得る。

（ｖ）マウスＨ２Ｋ
Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、マウスＨ２Ｋ（配列番号２８）（図３ＤにおけるマウスＨ２Ｋ）のａａ配列、またはその配列のすべてまたは一部（例えば、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、または２６０個の連続ａａ）と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のａａ配列同一性を有する配列（例えば、それは、１～３０、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、または２５～３０ａａの挿入、欠失、及び／または置換を含み得る）を含み得る。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰのマウスＨ２Ｋ重鎖ポリペプチドが図３ＤにおいてマウスＨ２Ｋと表示された配列と１００％未満の同一性を有する場合、それは、位置８４におけるチロシンからアラニン（Ｙ８４Ａ）；位置８４におけるチロシンからシステイン（Ｙ８４Ｃ）；及び位置１３９におけるアラニンからシステイン（Ａ１３９Ｃ）から選択される位置８４及び／または１３９の１つ以上における置換を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰのマウスＨ２Ｋ重鎖ポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を含み得る。

（ｖｉ）Ｔ細胞－ＭＰ上のＭＨＣポリペプチドにおけるアミノ酸置換の効果
（ａ）位置８４及び１３９における置換
ＭＨＣ Ｈ鎖の位置８４（図３を参照されたい）（特にそれがチロシン残基である場合）の小さなアミノ酸、例えば、アラニンでの置換（Ｙ８４Ａ）は、ＭＨＣ結合ポケットの一方の端部を開く傾向にあり、（例えば、ペプチドエピトープに結合した）リンカーが、ポケットの端部を介して「通り抜ける」ことを可能にし、したがって、ＭＨＣポケットに適合し、かつＴ細胞－ＭＰによって提示され得るエピトープのサイズのより大きなバリエーション（例えば、エピトープ配列を保有するより長いペプチド）を許容する。代替的には、Ｔ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈ（例えば、ＨＬＡ－重鎖）は、α１ヘリックスのカルボキシル末端部分内に置換されたシステインとα２－１ヘリックスのアミノ末端部分におけるシステイン（例えば、アミノ酸８４及び１３９）との間の鎖内ジスルフィド結合を形成するためにシステインで置換され得る。そのようなジスルフィド結合は、Ｔ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列を安定化し、結合されるペプチドエピトープ（またはヌルペプチド）の非存在下でのその翻訳、細胞処理、及び真核細胞からの排出を可能にする。残基８４及び１３０における以下に提供される表で提供される置換の任意の組み合わせは、位置１１６及び１６７で記載されるものなどの、エピトープ結合割れ目における置換の任意の組み合わせと組み合わされ得る。

（ｂ）位置１１６及び１６７における置換
任意のＭＨＣクラスＩ重鎖配列（ＨＬＡ－Ａ＊０１０１；ＨＬＡ－Ａ＊０２０１；ＨＬＡ－Ａ＊１１０１；ＨＬＡ－Ａ＊２４０２；ＨＬＡ－Ａ＊３３０３；ＨＬＡ－Ｂ；ＨＬＡ－Ｃ；マウスＨ２Ｋについて上で開示されているもの、または本明細書に開示される他のＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、及び／またはＧ配列のいずれか）は、位置１１６におけるシステイン置換（例えば、Ｙ１１６Ｃ）または位置１６７におけるシステイン置換をさらに含み得る。

ＭＨＣ－Ｈ結合ポケットの一方の端部を開くａａ位置８４の置換（例えば、Ｙ８４Ａまたはその同等物）のように、位置１６７におけるアラニンまたはグリシンの置換（例えば、Ｗ１６７Ａ置換またはその同等物）は、ＭＨＣ結合ポケットの他方の端部を開き、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートによって提示され得るペプチドエピトープのより大きなバリエーション（例えば、より長い長さ）を許容する溝を生成する。位置８４及び／または１６７における置換、またはそれらの同等物（例えば、Ｗ１６７ＡまたはＷ１６７Ｇと組み合わせたＹ８４Ａ）は、ＭＨＣ－Ｈ鎖の結合ポケットを修飾するために組み合わせて使用され得る。位置１１６におけるシステイン置換（例えば、Ｙ１１６Ｃ）及び／または１６７におけるシステイン置換（例えば、Ｗ１６７Ｃ）は、１つまたは２つの箇所（例えば、エピトープ含有ペプチドの末端）においてエピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）を固定するために別々にまたは組み合わせて使用され得る。位置１１６及び／または１６７における置換は、上述した位置８４及び／または１３９におけるものを含む置換と組み合わされ得る。

以下の表は、Ｔ細胞－ＭＰに組み込まれ得るいくつかのＭＨＣ重鎖配列修飾を列挙する。

ｂ．ＭＨＣクラスＩ β２－ミクログロブリン及びＭＨＣ－Ｈポリペプチドとの組み合わせ
Ｔ細胞－ＭＰのβ２Ｍのポリペプチドは、ヒトβ２Ｍポリペプチド、非ヒト霊長類β２Ｍポリペプチド、マウスβ２Ｍポリペプチド等であり得る。いくつかの例では、β２Ｍポリペプチドは、図４に示されるβ２Ｍのａａ配列（例えば、成熟β２Ｍ配列）と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む。Ｔ細胞－ＭＰのβ２Ｍのポリペプチドは、図４に示されるβ２Ｍのａａ配列のａａ２１～１１９と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得、同一性が１００％未満である場合、エピトープ結合のための化学的コンジュゲーション部位としてシステインまたは他のａａ置換または挿入（例えば、及びＥ４４Ｃ置換）を含み得る。化学的コンジュゲーション部位は、例えば、β２Ｍポリペプチド配列における溶媒露出箇所に配置され得る。

Ｔ細胞－ＭＰのβ２Ｍポリペプチド配列は、成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド（例えば、図４に提供されるＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿００４０３９．１のａａ２１～１１９）の少なくとも７０個（例えば、少なくとも８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有し得る。例として、Ｔ細胞－ＭＰのβ２Ｍポリペプチド配列は、成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド（例えば、図４に提供されるＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿００４０３９．１のａａ２１～１１９）の少なくとも７０個（例えば、少なくとも８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａのａａセグメント内で最大で６（例えば、１、２、３、４、５、または６）ａａの置換を有し得、エピトープの結合のための化学的コンジュゲーション部位（例えば、成熟ペプチドにおけるＥ４４Ｃ置換）を含み得る。上記したように、そのようなβ２Ｍポリペプチド配列において、エピトープの化学的コンジュゲーション部位は、溶媒露出性ａａ位置を含む多様な箇所に配置され得る。例えば、溶媒露出性アミノ酸位置におけるシステインまたは他のアミノ酸置換または挿入は、エピトープの直接的または間接的（例えば、ペプチドリンカーを介する）結合のための化学的コンジュゲーション部位を提供し得る。

成熟β２Ｍポリペプチド（それらのリーダー配列を欠く）のいくつかの溶媒露出性位置には、ＮＰ＿００４０３９．１からの成熟ペプチドのａａ位置２、１４、１６、３４、３６、４４、４５、４７、４８、５０、５８、７４、７７、８５、８８、８９、９１、９４、及び９８（Ｇｌｎ２、Ｐｒｏ１４、Ｇｌｕ１６、Ａｓｐ３４、Ｇｌｕ３６、Ｇｌｕ４４、Ａｒｇ４５、Ｇｌｕ４７、Ａｒｇ４８、Ｇｌｕ５０、Ｌｙｓ５８、Ｇｌｕ７４、Ｇｌｕ７７、Ｖａｌ８５、Ｓｅｒ８８、Ｇｌｎ８９、Ｌｙｓ９１、Ｌｙｓ９４、及びＡｓｐ９８）、または他のβ２Ｍ配列におけるそれらの対応するアミノ酸（図４における配列アライメントを参照されたい）が含まれる。化学的コンジュゲーション部位（例えば、システインまたは別の反応性ａａ置換）のための溶媒露出性箇所は、ＮＰ＿００４０３９．１等の成熟β２Ｍポリペプチド配列の位置２、４４、５０、７７、８５、８８、９１、もしくは９８、または他のβ２Ｍ配列、例えば、図４におけるものにおける対応するａａ位置から選択され得る。化学的コンジュゲーション部位（例えば、システインまたは別の反応性ａａ置換）のための溶媒露出性箇所はまた、ＮＰ＿００４０３９．１等の成熟β２Ｍポリペプチド配列の位置２、４４、５０、もしくは９８、または他のβ２Ｍ配列、例えば、図４におけるものにおける対応するａａ位置から選択され得る。化学的コンジュゲーション部位（例えば、システインまたは別の反応性ａａ置換）のための溶媒露出性箇所は、ＮＰ＿００４０３９．１等の成熟β２Ｍポリペプチド配列の位置２または４４（Ｇｌｕ２またはＧｌｕ４４）、または他のβ２Ｍ配列、例えば、図４におけるものにおける対応するａａ位置から選択され得る。

β２Ｍポリペプチド配列は、ｗｔ．β２Ｍポリペプチド（例えば、図４におけるβ２Ｍ配列）内に置換された単一のシステインを含み得る。そのようなシステイン残基は、Ｔ細胞－ＭＰポリペプチドに存在する場合、エピトープの共有結合（直接的またはリンカーを介して間接的）のための化学的コンジュゲーション部位として作用し得る。共有結合は、エピトープにおけるまたはエピトープに結合した反応性基、例えば、エピトープまたはペプチドエピトープに結合したリンカーに組み込まれたマレイミド基に対して作られた結合の形態、またはジスルフィド結合の形態の形態であり得る。例えば、いくつかの場合では、そのシグナル配列を欠く成熟β２Ｍのアミノ酸４３、４４、または４５（図４におけるそれらのシグナル配列と共に示される処理されていないタンパク質の残基６３、６４、及び６５）のうちの１つは、システイン残基で置換され得る。システインで置換されるａａ位置は、位置４４であり得る（例えば、成熟ヒトタンパク質ＮＰ＿００４０３９．１のＥ４４Ｃ置換または図４におけるもの等のβ２Ｍ配列における対応するａａ置換）。代替的には、システインで置換されるａａ位置は、位置２であり得る（例えば、成熟ヒトタンパク質ＮＰ＿００４０３９．１のＱ４４Ｃ置換または図４におけるもの等のβ２Ｍ配列における対応するａａ置換）。

ｃ．ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列における置換のいくつかの組み合わせ
エピトープまたはペイロードのための化学的コンジュゲーション部位として機能し得るＴ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈまたはβ２Ｍポリペプチド配列に挿入される任意のシステイン残基（例えば、エピトープのための化学的コンジュゲーション部位を提供するβ２Ｍポリペプチド配列におけるＥ４４Ｃ置換）とは別に、またはそれに加えて、Ｔ細胞－ＭＰは、α１ヘリックスのカルボキシル末端部分内に置換されたシステインとα２－１ヘリックスのアミノ末端部分におけるシステイン（例えば、ａａ位置８４及び１３９におけるアミノ酸、例えば、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ）との間の鎖内ジスルフィド結合を含み得る。α１ヘリックスのカルボキシル末端部分は、約ａａ位置７９～約ａａ位置８９であり、α２－１ヘリックスのアミノ末端部分は、ＭＨＣ－Ｈ鎖の約ａａ位置１３４～約ａａ位置１４４である（ａａ位置は、それらのリーダー配列を有しない重鎖の配列に基づいて決定される（例えば、図３Ｄ～３Ｈを参照されたい）。したがって、ジスルフィド結合は、ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列の位置８３、８４、または８５に位置するシステインと、位置１３８、１３９または１４０のいずれかに位置するシステインとの間におけるものであり得る。例えば、Ｔ細胞－ＭＰにおいて、ジスルフィド結合は、ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列の位置８４に挿入されたシステインと位置１３８、１３９または１４０のいずれかに挿入されたシステインとの間に形成され得る。一態様では、ＭＨＣ－Ｈ鎖内ジスルフィド結合は、図３Ｄ～３Ｈに示される重鎖配列のいずれかの位置８４及び１３９で挿入されたシステイン間のものである。
Ｔ細胞－ＭＰは、（ｉ）エピトープのための化学的コンジュゲーション部位としてＥ４４Ｃ（または別のシステイン置換）を有するＮＰ＿００４０３９．１のａａ２１～１１９の少なくとも７０個（例えば、少なくとも８０、９０、９６、９７、９８個またはすべて）と少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％または９８％）の配列同一性を有する成熟β２Ｍポリペプチド配列；及び（ｉｉ）ＧＳＨＳＭＲＹＦＦＴＳＶＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＡＳＱＲＭＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＧＥＴＲＫＶＫＡＨＳＱＴＨＲＶＤＬ（ａａクラスター１）｛Ｃ｝（ａａクラスター２）ＡＧＳＨＴＶＱＲＭＹＧＣＤＶＧＳＤＷＲＦＬＲＧＹＨＱＹＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＫＥＤＬＲＳＷ（ａａクラスター３）｛Ｃ｝（ａａクラスター４）（２ｘｈＩＬ２（Ｆ４２Ａ，Ｈ１６Ａ）－（Ｇ４Ｓ）－ＧＭＧＧＳＧＧＧＧＳ－（Ｇ４Ｓ）－β２Ｍ（Ｅ４４Ｃ）－（Ｇ４Ｓ）３－ＨＬＡ－Ａ０２（Ｙ８４Ｃ，Ａ１３９Ｃ）－ＡＡＡＧＧ－ｈＩｇＧ１（Ｌ２３４Ａ，Ｌ２３５Ａ）ＨＫＷＥＡＡＨＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＴＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＴＤＡＰＫＴＨＭＴＨＨＡＶＳＤＨＥＡＴＬＲＣＷＡＬＳＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＧＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＱＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（配列番号８４）
（式中、｛Ｃ｝として示されるシステイン残基は、α１及びα２－１ヘリックスの間でジスルフィド結合を形成する）と可変ａａクラスター１～４を除いて少なくとも９０％の配列同一性（例えば、少なくとも９５％、９８％、または１００％の配列同一性）を有するＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチド配列の組み合わせを含み得る。

ａａクラスター１、ａａクラスター２、ａａクラスター３、ａａクラスター４、ａａクラスター５、及びａａクラスター６の各存在は、１～５ａａ残基となるように独立して選択され、ａａ残基は、ｉ）任意の天然に存在する（タンパク質構成）ａａまたはｉｉ）プロリンまたはグリシンを除く任意の天然に存在するａａからそれぞれ独立して選択される。ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ａ鎖であって、
ａａクラスター１は、アミノ酸配列ＧＴＬＲＧ（配列番号８５）または１つもしくは２つのａａが欠失したまたは他の天然に存在するａａで置換された（例えば、ＬがＩ、Ｖ、ＡまたはＦによって置換された）その配列であり得；
ａａクラスター２は、アミノ酸配列ＹＮＱＳＥ（配列番号８６）または１つもしくは２つのａａが欠失したまたは他の天然に存在するａａで置換された（例えば、ＮがＱによって置換され、ＱがＮによって置換され、及び／またはＥがＤによって置換された）その配列であり得；
ａａクラスター３は、アミノ酸配列ＴＡＡＤＭ（配列番号８７）または１つもしくは２つのａａが欠失したまたは他の天然に存在するａａで置換された（例えば、ＴがＳによって置換され、ＡがＧによって置換され、ＤがＥによって置換され、及び／またはＭがＬ、Ｖ、またはＩによって置換された）その配列であり得；及び／またはａａクラスター４は、アミノ酸配列ＡＱＴＴＫ（配列番号８８）または１つもしくは２つのａａが欠失したまたは他の天然に存在するａａで置換された（例えば、ＡがＧによって置換され、ＱがＮによって置換され、またはＴがＳによって置換され、及びまたはＫがＲまたはＱによって置換された）その配列であり得る、
ＨＬＡ－Ａ鎖であり得る。

上記のように、８４及び１３９におけるシステイン間のジスルフィド結合（Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃジスルフィド）を含むＭＨＣ－Ｈ鎖内ジスルフィド結合のいずれかは、Ｔ細胞－ＭＰへのペプチドエピトープの組み込みを可能にする置換と組み合わされ得る。したがって、本開示は、鎖内Ｙ８４Ｃ Ａ１３９Ｃジスルフィド結合を有するＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列及びβ２Ｍポリペプチド配列におけるＥ４４Ｃ置換を有する１つ以上のＴ細胞－ＭＰポリペプチドを含むＴ細胞－ＭＰ及びそれらの高次複合体（例えば、二重体）を含み、それを提供する。Ｔ細胞－ＭＰ及びそれらの高次複合体（例えば、二重体）は、（ｉ）ＮＰ＿００４０３９．１、ＮＰ＿００１００９０６６．１、ＮＰ＿００１０４０６０２．１、ＮＰ＿７７６３１８．１、またはＮＰ＿０３３８６５．２（配列番号６１～６５、図４を参照されたい）のいずれか１つのａａ２１～１１９の少なくとも７０個（例えば、少なくとも８０、９０、９６、９７、９８個またはすべて）と少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％または９８％）の配列同一性を有するＥ４４Ｃ置換を有する成熟β２Ｍポリペプチド配列；及び（ｉｉ）図３Ｄ～３ＨにおけるＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃ、－Ｅ、－Ｆ、または－Ｇ配列のα１、α２、及びα３ドメインの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有し得る、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換（ジスルフィド結合を形成する）を有するＭＨＣ－Ｈ配列を含み得る。ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を有するＨＬＡ－Ａ＊０１０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１ポリペプチド配列であり得る（図３Ｅを参照されたい）。ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を有するＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５０２、Ｂ２７（サブタイプＨＬＡ－Ｂ＊２７０１－２７５９）、ＨＬＡ－Ｂ＊３８０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４００１、ＨＬＡ－Ｂ＊４６０１、またはＨＬＡ－Ｂ＊５３０１ポリペプチド配列であり得る（例えば、図３Ｆを参照されたい）。ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を有するＨＬＡ－Ｃ＊０１０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０３、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０４、ＨＬＡ－Ｃ＊０４０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０６０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０８０１、またはＨＬＡ－Ｃ＊１５０２ポリペプチド配列であり得る（例えば、図３Ｇを参照されたい）。

４ 骨格ポリペプチド
Ｔ細胞－ＭＰ及びＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、免疫グロブリン重鎖定常領域（「Ｉｇ Ｆｃ」または「Ｆｃ」）ポリペプチドを含み得、または別の好適な骨格ポリペプチドを含み得る。骨格ポリペプチド配列が同一であり、対合または多量体化する場合（例えば、いくつかのＩｇ Ｆｃ配列またはロイシンジッパー配列）、それらは、対称対または多量体（例えば、ホモ二量体（例えば、Ｆｃ骨格を用いた図９を参照されたい））を形成し得る。対照的に、２つのＴ細胞－ＭＰ分子間で非対称対合が所望である場合（例えば、各々が１つ以上の異なるＭＯＤを保有する二重体Ｔ細胞－ＭＰを生成するため）、Ｔ細胞－ＭＰに存在する骨格ポリペプチドは、種間結合配列を含み得る。種間結合配列は、それらの特定の相補的対応配列と選択的に相互作用して非対称対（ヘテロ二量体、例えば、種間Ｆｃ骨格を有する図１０を参照されたい）を形成する非同一のポリペプチド配列である。種間結合配列は、いくつかの例では、いくらかの量のホモ二量体を形成し得るが、それらの対応種間結合配列とより強力に結合することによって優先的に二量体化し得る。したがって、特定のヘテロ二量体は、種間二量体化配列及びその対応種間結合配列がポリペプチドの対に組み込まれた場合に形成される傾向がある。例として、種間二量体化配列及びその対応物がポリペプチドの対に組み込まれた場合、それらは、そのポリペプチドの等モル混合物が組み合わされた場合に７０％、８０％、９０％、９５％、９８％または９９％を超えるヘテロ二量体を選択的に形成し得る。ポリペプチドの残りは、モノマーまたはホモ二量体として存在し、これはヘテロ二量体から分離され得る。その上、種間配列は、それらの対応配列について選択的であるため、それらは、特に種間配列が天然に存在せず、または天然に存在するタンパク質配列のバリアントである場合、細胞（例えば、培養中または対象におけるもの）によって発現した他のタンパク質との相互作用を制限し得る。

骨格ポリペプチド配列は、通常、３００ａａ未満（例えば、約１００～約３００ａａ）であり得る。骨格ポリペプチド配列は、２５０ａａ未満（例えば、約７５～約２５０ａａ）であり得る。骨格ポリペプチド配列は、２００ａａ未満（例えば、約６０～約２００ａａ）であり得る。骨格ポリペプチド配列は、１５０ａａ未満（例えば、約５０～約１５０ａａ）であり得る。

骨格ポリペプチド配列には、種間及び非種間Ｉｇ Ｆｃポリペプチド配列が含まれるがこれらに限定されず、しかしながら、Ｉｇ Ｆｃポリペプチド配列以外のポリペプチド配列（非免疫グロブリン配列）が骨格として使用され得る。

ａ．非免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチド
非免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチドには、アルブミン、ＸＴＥＮ（伸長組換え体）；トランスフェリン；Ｆｃ受容体、エラスチン様；アルブミン結合；シルク様（例えば、Ｖａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｐｈｉｌｏｓ Ｔｒａｎｓ Ｒ Ｓｏｃ Ｌｏｎｄ Ｂ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ．３５７：１６５を参照されたい）；シルク－エラスチン様（ＳＥＬＰ；例えば、Ｍｅｇｅｅｄ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ．５４：１０７５）を参照されたい）ポリペプチド等が含まれるがこれらに限定されない。好適なＸＴＥＮポリペプチドには、例えば、ＷＯ２００９／０２３２７０、ＷＯ２０１０／０９１１２２、ＷＯ２００７／１０３５１５、ＵＳ２０１０／０１８９６８２、及びＵＳ２００９／００９２５８２に開示されているものが含まれる；Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２７：１１８６も参照されたい）。好適なアルブミンポリペプチドには、例えば、ヒト血清アルブミンが含まれる。好適なエラスチン様ポリペプチドは、例えば、Ｈａｓｓｏｕｎｅｈ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．５０２：２１５に記載されている。

他の非免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチド配列には、コラーゲンリピートＧｌｙ－Ｘａａ－Ｙａａ及び／またはＧｌｙ－Ｘａａ－Ｐｒｏ（これは１０～４０回繰り返され得る）からなるコラーゲンドメインを含有するコレクチンファミリーのポリペプチド（例えば、ＡＣＲＰ３０またはＡＣＲＰ３０様タンパク質）；コイルドコイルドメイン；ロイシン－ジッパードメイン；Ｆｏｓ／Ｊｕｎ結合対；Ｉｇ ＣＨ１及び軽鎖定常領域Ｃ_Ｌ配列（Ｉｇ ＣＨ１／Ｃ_Ｌ対、例えば、Ｉｇ Ｃ_ＬκまたはＣ_Ｌλ軽鎖定常領域配列と対合したＩｇ ＣＨ１配列）が含まれるがこれらに限定されない。

非免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチドは、事実上、種間または非種間であり得る。例えば、Ｆｏｓ／Ｊｕｎ結合対ならびにＩｇ ＣＨ１ポリペプチド配列及び軽鎖定常領域Ｃ_Ｌ配列の両方は、種間結合対を形成する。ロイシンジッパー配列を含むコイルドコイル配列は、種間ロイシンジッパーまたは非種間ロイシンジッパー配列のいずれかであり得る。例えば、Ｚｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）９４：３６７３－３６７８；及びＬｉ ｅｔ ａｌ．，（２０１２），Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｓ．３：６６２を参照されたい。

二重体Ｔ細胞－ＭＰの骨格ポリペプチドはそれぞれ、ロイシンジッパーポリペプチド配列を含み得る。ロイシンジッパーポリペプチドは、互いに結合して二量体を形成する。ロイシン－ジッパーポリペプチドの非限定的な例には、以下のａａ配列のうちのいずれか１つを含むペプチドが含まれる：ＲＭＫＱＩＥＤＫＩＥＥＩＬＳＫＩＹＨＩＥＮＥＩＡＲＩＫＫＬＩＧＥＲ（配列番号８９）；ＬＳＳＩＥＫＫＱＥＥＱＴＳＷＬＩＷＩＳＮＥＬＴＬＩＲＮＥＬＡＱＳ（配列番号９０）；ＬＳＳＩＥＫＫＬＥＥＩＴＳＱＬＩＱＩＳＮＥＬＴＬＩＲＮＥＬＡＱ（配列番号９１；ＬＳＳＩＥＫＫＬＥＥＩＴＳＱＬＩＱＩＲＮＥＬＴＬＩＲＮＥＬＡＱ（配列番号９２）；ＬＳＳＩＥＫＫＬＥＥＩＴＳＱＬＱＱＩＲＮＥＬＴＬＩＲＮＥＬＡＱ（配列番号９３）；ＬＳＳＬＥＫＫＬＥＥＬＴＳＱＬＩＱＬＲＮＥＬＴＬＬＲＮＥＬＡＱ（配列番号９４）；ＩＳＳＬＥＫＫＩＥＥＬＴＳＱＩＱＱＬＲＮＥＩＴＬＬＲＮＥＩＡＱ（配列番号９５）。いくつかの場合では、ロイシンジッパーポリペプチドは、以下のａａ配列：ＬＥＩＥＡＡＦＬＥＲＥＮＴＡＬＥＴＲＶＡＥＬＲＱＲＶＱＲＬＲＮＲＶＳＱＹＲＴＲＹＧＰＬＧＧＧＫ（配列番号９６）を含む。さらなるロイシン－ジッパーポリペプチドは、当該技術分野で知られており、その多数は、骨格ポリペプチド配列として使用するのに好適である。

Ｔ細胞－ＭＰの骨格ポリペプチドは、二量体を形成するコイルドコイルポリペプチド配列を含み得る。コイルドコイルポリペプチドの非限定的な例には、以下のａａ配列：ＬＫＳＶＥＮＲＬＡＶＶＥＮＱＬＫＴＶＩＥＥＬＫＴＶＫＤＬＬＳＮ（配列番号９７）；ＬＡＲＩＥＥＫＬＫＴＩＫＡＱＬＳＥＩＡＳＴＬＮＭＩＲＥＱＬＡＱ（配列番号９８）；ＶＳＲＬＥＥＫＶＫＴＬＫＳＱＶＴＥＬＡＳＴＶＳＬＬＲＥＱＶＡＱ（配列番号９９）；ＩＱＳＥＫＫＩＥＤＩＳＳＬＩＧＱＩＱＳＥＩＴＬＩＲＮＥＩＡＱ（配列番号１００）；及びＬＭＳＬＥＫＫＬＥＥＬＴＱＴＬＭＱＬＱＮＥＬＳＭＬＫＮＥＬＡＱ（配列番号１０１）のいずれか１つのペプチドが含まれる。

Ｔ細胞ＭＰ二重体のＴ細胞－ＭＰは、ジスルフィド結合を形成し得る少なくとも１つのシステイン残基をそれぞれ含む骨格ポリペプチド配列の対を含み得、そのジスルフィド結合は、システイン残基間の鎖間ジスルフィド結合によって安定化されるそれらのポリペプチドのホモ二量体化またはヘテロ二量体化を可能にする。そのようなａａ配列の例には、ＶＤＬＥＧＳＴＳＮＧＲＱＣＡＧＩＲＬ（配列番号１０２）；ＥＤＤＶＴＴＴＥＥＬＡＰＡＬＶＰＰＰＫＧＴＣＡＧＷＭＡ（配列番号１０３）；及びＧＨＤＱＥＴＴＴＱＧＰＧＶＬＬＰＬＰＫＧＡＣＴＧＱＭＡ（配列番号１０４）が含まれる。

いくつかの骨格ポリペプチド配列は、二重体よりも高次のＴ細胞－ＭＰ複合体、例えば、三重体、四重体、五重体または六重体の形成を可能にする。そのようなａａ配列には、ＩｇＭ定常領域（以下に論述される）が含まれるがこれらに限定されない。三量体を形成するコラーゲンドメインも用いられ得る。コラーゲンドメインは、３ａａの配列Ｇｌｙ－Ｘａａ－Ｘａａ及び／またはＧｌｙＸａａＹａａ（式中、Ｘａａ及びＹａａは、独立して、任意のａａである）を含み得、その配列は、複数回（例えば、１０～４０回）現れ、または繰り返される。Ｇｌｙ－Ｘａａ－Ｙａａ配列では、Ｘａａ及びＹａａは、高い頻度でプロリン及びヒドロキシプロリンであり、それぞれＧｌｙ－Ｘａａ－Ｙａａの存在、またはＧｌｙ－Ｘａａ－Ｙａａの存在の各々において２５％、５０％、７５％、８０％、９０％または９５％を超える。いくつかの場合では、コラーゲンドメインは、１０～４０回繰り返された配列Ｇｌｙ－Ｘａａ－Ｐｒｏを含む。コラーゲンオリゴマー化ペプチドは、以下のａａ配列：ＶＴＡＦＳＮＭＤＤＭＬＱＫＡＨＬＶＩＥＧＴＦＩＹＬＲＤＳＴＥＦＦＩＲＶＲＤＧＷＫＫＬＱＬＧＥＬＩＰＩＰＡＤＳＰＰＰＰＡＬＳＳＮＰ（配列番号１０５）を含み得る。

ｂ．免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチド
（ｉ）非種間免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチド
Ｔ細胞－ＭＰまたはその対応するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの骨格ポリペプチド配列は、Ｆｃポリペプチドを含み得る。Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＦｃポリペプチドは、例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、またはＩｇＭからのものであり得、そのいずれかは、ヒトポリペプチド配列、ヒト化ポリペプチド配列、合成重鎖定常領域のＦｃ領域ポリペプチド、またはコンセンサス重鎖定常領域であり得る。実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ、ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ、ヒトＩｇＧ３ Ｆｃ、ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ、ヒトＩｇＡ Ｆｃ、ヒトＩｇＤ Ｆｃ、ヒトＩｇＥ Ｆｃ、ヒトＩｇＭ Ｆｃ等からのものであり得る。いくつかの場合では、Ｆｃポリペプチドは、図２Ａ～２Ｈに示されるＦｃ領域のａａ配列の少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む。そのような免疫グロブリン配列は、相互作用し、Ｔ細胞－ＭＰ分子から二重体または高次構造を形成し得る。いくつかの例では、Ｆｃ骨格ポリペプチド配列には、２つのＴ細胞－ＭＰポリペプチドを互いに共有結合させる鎖間ジスルフィド結合を形成することが可能な天然に存在するシステイン残基（またはタンパク質操作によって提供される天然に存在しないシステイン残基）が含まれる。別途記述されない限り、Ｔ細胞－ＭＰ及びそれらのエピトープコンジュゲートにおいて使用されるＦｃポリペプチドは、Ｔ細胞－ＭＰを細胞膜に固定させるのに十分な膜貫通固定化ドメインまたはその一部を含む。

ほとんどの免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチド、特にｗｔ．配列のみまたは主にｗｔ．配列を含むものは、ジスルフィド結合を介して互いに自発的に連結して、二重体Ｔ細胞－ＭＰをもたらすホモ二量体を形成し得る。ＩｇＭ重鎖定常領域の場合、Ｊ－鎖の存在下では、高次複合体が形成され得る。骨格ポリペプチドは、図２Ｄに示されるｗｔ．ヒトＩｇＧ１ Ｆｃポリペプチドと１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。骨格ポリペプチドは、図２Ｄに示されるｗｔ．ヒトＩｇＧ１ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％）または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。そのような骨格配列には、アスパラギン以外のａａでのＮ２９７（図２Ｄ、配列番号４において付番されるＮ７７）の置換が含まれ得る。１つの場合では、Ｎ２９７は、アラニンによって置換される（Ｎ２９７Ａ）。Ｎ２９７における置換は、炭水化物修飾の除去をもたらし、ｗｔ．タンパク質と比較して減少した補体成分１ｑ（「Ｃ１ｑ」）結合を有する抗体配列、したがって、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の減少をもたらす。Ｋ３２２（例えば、Ｋ３２２Ａ）置換は、Ｃ１ｑ結合及びＣＤＣ機能が実質的にまたは完全に排除されると共に、ＦｃγＲ結合親和性及びＡＤＣＣの実質的減少を示す。Ｈｅｚａｒｅｈ ｅｔ ａｌ．，（２００１）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７５：１２１６１－１６８。

ＩｇＧのアミノ酸Ｌ２３４及び下側ヒンジ領域における他のａａ（例えば、配列番号８のａａ１４～１９に相当するａａ２３４～２３９、例えば、Ｌ２３５、Ｇ２３６、Ｇ２３７、Ｐ２３８、Ｓ２３９）は、Ｆｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）への結合に関与し、したがって、その箇所における変異は、（ｗｔ．タンパク質と比べて）受容体への結合を減少させ、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）の減少をもたらす。Ｈｅｚａｒｅｈ ｅｔ ａｌ．，（２００１）は、二重変異体（Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ）が、ＦｃγＲまたはＣ１ｑのいずれにも有効に結合せず、ＡＤＣＣ及びＣＤＣ機能の両方が実質的にまたは完全に無効化されたことを実証した。下側ヒンジ領域における置換を有する骨格ポリペプチドは、ロイシン以外のａａでのＬ２３４（図２Ｄに示されるａａ配列のＬ１４）の置換を含む、図２Ｄに示されるｗｔ．ヒトＩｇＧ１ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。

下側ヒンジ領域における置換を有する骨格ポリペプチドは、ロイシン以外のａａでのＬ２３５（図２２Ｄに示されるａａ配列のＬ１５）の置換を含む、図２Ｄに示されるｗｔ．ヒトＩｇＧ１ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。いくつかの場合では、下側ヒンジ領域における置換を有するＴ細胞－ＭＰに存在する骨格ポリペプチドには、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ（「ＬＡＬＡ」）置換（図２Ｄに示されるｗｔ．ａａ配列の位置１４及び１５に対応する位置；例えば、配列番号８を参照されたい）が含まれる。

下側ヒンジ領域における置換を有する骨格ポリペプチドは、プロリン以外のａａでのＰ３３１（図２Ｄに示されるａａ配列のＰ１１１）の置換を含む、図２Ｄに示されるｗｔ．ヒトＩｇＧ１ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。Ｐ３３１における置換は、Ｎ２９７におけるもののように、ｗｔ．タンパク質と比べてＣ１ｑへの減少した結合をもたらし、よって、補体依存性細胞傷害の減少をもたらす。一実施形態では、置換は、Ｐ３３１Ｓ置換である。別の実施形態では、置換は、Ｐ３３１Ａ置換である。

骨格ポリペプチドは、図２Ｄに示されるｗｔ．ヒトＩｇＧ１ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得、ｗｔ．タンパク質と比べてＣ１ｑタンパク質への結合を減少させるＤ２７０、Ｋ３２２、及び／またはＰ３２９（図２Ｄにおける配列番号４のＤ５０、Ｋ１０２、及びＰ１０９に対応する）の置換を含む。

骨格ポリペプチドは、Ｌ２３４及び／またはＬ２３５（図２Ｄに示されるａａ配列のＬ１４及び／またはＬ１５）におけるロイシン以外のａａでの置換（例えば、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ置換）、及びＰ３３１Ｓ等のプロリン以外のａａでのＰ３３１（図２Ｄに示されるａａ配列のＰ１１１）の置換を含む、図２Ｄに示されるｗｔ．ヒトＩｇＧ１ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。１つの例では、Ｔ細胞－ＭＰに存在する骨格ポリペプチドは、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ置換（図２Ｄに示されるａａ配列のａａ位置１４、１５、及び１１１に対応する）を有する図２Ｄに示される「三重変異体」ａａ配列（配列番号６）（ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ）を含む。

Ｔ細胞－ＭＰの骨格Ｆｃポリペプチドは、図２Ｅに示されるヒトＩｇＧ２ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰの骨格Ｆｃポリペプチドは、図２Ｆに示されるヒトＩｇＧ３ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰの骨格Ｆｃポリペプチドは、図２Ｇに示されるヒトＩｇＧ４ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）、またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。Ｔ細胞－ＭＰの骨格Ｆｃポリペプチドは、図２Ｇに示されるＧｅｎＢａｎｋ Ｐ０１８６１ヒトＩｇＧ４ Ｆｃポリペプチドの少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ、例えば、ａａ９９～３２７または１１１～３２７）、またはすべてと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。

Ｔ細胞－ＭＰの骨格Ｆｃポリペプチドは、六量体、または五量体を形成する（特に図２Ｉに提供されるもの等のシグナル配列を欠く成熟ｊ－鎖ペプチドと組み合わされた場合）ＩｇＭ重鎖定常領域（例えば、図２Ｈを参照されたい）を含み得る。

（ｉｉ）種間免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチド
２つのＴ細胞－ＭＰ分子の間の非対称対合が所望である場合（例えば、異なるＭＯＤを有する二重体Ｔ細胞－ＭＰを生成するため）、Ｔ細胞－ＭＰに存在する骨格ポリペプチドは、種間Ｉｇ Ｆｃポリペプチド）配列バリアントを含み、それから本質的になり、またはそれからなり得る。そのような種間ポリペプチド配列には、安定化ジスルフィド結合を有しない（ＫｉＨ）または有する（ＫｉＨｓ－ｓ）ノブ・イン・ホール、ＨＡ－ＴＦ、ＺＷ－１、７．８．６０、ＤＤ－ＫＫ、ＥＷ－ＲＶＴ、ＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓ、及びＡ１０７配列が含まれるがこれらに限定されない。１つの種間結合対は、ＩｇＧ１のＣＨ３ドメイン界面におけるＴ３６６Ｙ及びＹ４０７Ｔ変異体対、または他の免疫グロブリンの対応する残基を含む。Ｒｉｄｇｗａｙ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ９：７，６１７－６２１（１９９６）を参照されたい。第２の種間結合対は、Ｔ３６６Ｗ置換によるノブ、及び相補的Ｉｇ Ｆｃ配列上の三重置換Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖによるホールの形成を伴う。Ｘｕ ｅｔ ａｌ．ｍＡｂｓ ７：１，２３１－２４２（２０１５）を参照されたい。別の種間結合対は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ置換を有する第１のＩｇ ＦｃポリペプチドならびにＳ３５４Ｃ、及びＴ３６６Ｗ置換を有する第２のＩｇ Ｆｃポリペプチドを有する（ジスルフィド結合がＹ３４９ＣとＳ３５４Ｃとの間で形成し得る）。例えば、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ ａｎｄ Ｋｏｎｔｈｅｒｍａｎｎ，ｍＡｂｓ ９：２，１８２－２１２（２０１５）を参照されたい。ノブ・イン・ホール修飾を有するまたは有しないＩｇ Ｆｃポリペプチド配列は、Ｉｇ Ｆｃポリペプチド間のジスルフィド結合（例えば、ヒンジ領域ジスルフィド結合）の形成によって安定化され得る。免疫グロブリン配列に基づくいくつかの種間結合配列は、ａａ位置の付番に対する相互参照を伴って（それらは、括弧「｛ ｝」内に示される図２Ｄに示されるｗｔ．ＩｇＧ１配列（配列番号４）に現れる）以下の表にまとめられている。

表１における配列の種間対に加えて、骨格ポリペプチドには、種間配列のＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインにおけるＩｇＡに由来する４５残基、及びその対応種間配列におけるＩｇＡ ＣＨ３におけるＩｇＧ１に由来する５７残基を有する種間「ＳＥＥＤ」配列が含まれ得る。Ｈａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：１－１６（２０１６）を参照されたい。

種間免疫グロブリン配列には、ＦｃγＲまたはＣ１ｑのいずれかまたは両方への結合を阻害し、ＡＤＣＣ及びＣＤＣ機能を減少または無効化する非種間免疫グロブリン配列について上述した置換が含まれ得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰに見られる骨格ポリペプチドは、ノブ・イン・ホール（ＫｉＨ）；安定化ジスルフィドを有するノブ・イン・ホール（ＫｉＨｓ－ｓ）；ＨＡ－ＴＦ；ＺＷ－１；７．８．６０；ＤＤ－ＫＫ；ＥＷ－ＲＶＴ；ＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓ；Ａ１０７；またはＳＥＥＤ配列からなる群から選択される種間結合配列またはその対応種間結合配列を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰは、Ｔ１４６Ｗ ＫｉＨ配列置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１４６Ｗ、Ｌ１４８Ａ、及びＹ１８７Ｖ ＫｉＨ配列置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含む。骨格ポリペプチドは、Ｌ２３４及びＬ２３５（例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ「ＬＡＬＡ」またはＬ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ）；Ｎ２９７（例えば、Ｎ２９７Ａ）；Ｐ３３１（例えば、Ｐ３３１Ｓ）；Ｌ３５１（例えば、Ｌ３５１Ｋ）；Ｔ３６６（例えば、Ｔ３６６Ｓ）；Ｐ３９５（例えば、Ｐ３９５Ｖ）；Ｆ４０５（例えば、Ｆ４０５Ｒ）；Ｙ４０７（例えば、Ｙ４０７Ａ）；及びＫ４０９（例えば、Ｋ４０９Ｙ）のうちの１つ以上で置換を任意に含む。それらの置換は、図２Ｄの野生型ＩｇＧ１配列におけるＬ１４及びＬ１５（例えば、Ｌ１４Ａ／Ｌ１５Ａ「ＬＡＬＡ」またはＬ１４Ｆ／Ｌ１５Ｅ）；Ｎ７７（例えば、Ｎ７７Ａ）；Ｐ１１１（例えば、Ｐ１１１Ｓ）Ｌ１３１（例えば、Ｌ１３１Ｋ）；Ｔ１４６（例えば、Ｔ１４６Ｓ）；Ｐ１７５（例えば、Ｐ１７５Ｖ）；Ｆ１８５（例えば、Ｆ１８５Ｒ）；Ｙ１８７（例えば、Ｙ１８７Ａ）；及びＫ１８９（例えば、Ｋ１８９Ｙ）で現れる。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｔ１４６Ｗ ＫｉＨ配列置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１４６Ｓ、Ｌ１４８Ａ、及びＹ１８７Ｖ ＫｉＨ配列置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｔ１４６Ｗ及びＳ１３４Ｃ ＫｉＨｓ－ｓ置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１４６Ｓ、Ｌ１４８Ａ、Ｙ１８７Ｖ及びＹ１２９Ｃ ＫｉＨｓ－ｓ置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）配列は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰは、Ｓ１４４Ｈ及びＦ１８５Ａ ＨＡ－ＴＦ置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｙ１２９Ｔ及びＴ１７４Ｆ ＨＡ－ＴＦ置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｔ１３０Ｖ、Ｌ１３１Ｙ、Ｆ１８５Ａ、及びＹ１８７Ｖ ＺＷ１置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１３０Ｖ、Ｔ１４６Ｌ、Ｋ１７２Ｌ、及びＴ１７４Ｗ ＺＷ１置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｋ１４０Ｄ、Ｄ１７９Ｍ、及びＹ１８７Ａ ７．８．６０置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１３０Ｖ Ｅ１２５Ｒ、Ｑ１２７Ｒ、Ｔ１４６Ｖ、及びＫ１８９Ｖ ７．８．６０置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｋ１８９Ｄ、及びＫ１７２Ｄ ＤＤ－ＫＫ置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１３０Ｖ Ｄ１７９Ｋ及びＥ１３６Ｋ ＤＤ－ＫＫ置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｋ１４０Ｅ及びＫ１８９Ｗ ＥＷ－ＲＶＴ置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１３０Ｖ Ｑ１２７Ｒ、Ｄ１７９Ｖ、及びＦ１８５Ｔ ＥＷ－ＲＶＴ置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｋ１４０Ｅ、Ｋ１８９Ｗ、及びＹ１２９Ｃ ＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓ置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１３０Ｖ Ｑ１２７Ｒ、Ｄ１７９Ｖ、Ｆ１８５Ｔ、及びＳ１３４Ｃ ＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓ置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、Ｋ１５０Ｅ及びＫ１８９Ｗ Ａ１０７置換を有するＩｇＧ１配列を含む骨格ポリペプチドを含み、その対応種間結合パートナーポリペプチドは、Ｔ１３０Ｖ Ｅ１３７Ｎ、Ｄ１７９Ｖ、及びＦ１８５Ｔ Ａ１０７置換を有するＩｇＧ１配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｄのｗｔ．ＩｇＧ１の少なくとも１００個（例えば、少なくとも１２５、１５０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０個、または２２７個すべて）の連続ａａと少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の配列同一性を有する配列を含み；一方または両方（二重体Ｔ細胞－ＭＰの場合）の骨格ポリペプチド配列（複数可）は、追加の置換、例えば、Ｌ１４及び／またはＬ１５置換（例えば、「ＬＡＬＡ」置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）、及び／またはＮ７７（Ｎ２９７、例えば、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇ）を含み得る。

骨格配列としての免疫グロブリンＣＨ２及びＣＨ３重鎖定常領域の使用に対する代替手段として、免疫グロブリン軽鎖定常領域（図２Ｋを参照されたい）が、種間骨格配列としてＩｇ ＣＨ１配列（例えば、図２Ｊを参照されたい）と対合され得る。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰ骨格ポリペプチドは、Ｉｇ ＣＨ１ドメイン（例えば、図２Ｊのポリペプチド）を含み、それが複合体を形成する配列（その対応結合パートナー）は、Ｉｇκ鎖定常領域配列を含み、その骨格ポリペプチドは、配列番号１６及び／または１７それぞれの少なくとも７０、少なくとも８０、少なくとも９０、少なくとも１００、または少なくとも１１０個の連続ａａと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する配列を含む。図２Ｋを参照されたい。Ｉｇ ＣＨ１及びＩｇκ配列は、それらの互いに対する親和性を増加させ、したがって、それらを利用して形成される任意のヘテロ二量体の安定性を増加させるために修飾され得る。ＣＨ１－Ｉｇκヘテロ二量体の安定性を増加させる置換には、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．， ＭＡｂｓ，８（４）：７６１－７７４（２０１６）においてＭＤ１３組み合わせとして同定されたものがある。ＭＤ１３組み合わせにおいて、２つの置換がＩｇＣＨ１及びＩｇκ配列の各々に導入される。Ｉｇ ＣＨ１配列は、Ｓ６４Ｅ及びＳ６６Ｖ置換（図２Ｊに示される配列のＳ７０Ｅ及びＳ７２Ｖ）を含有するように修飾される。Ｉｇκ配列は、Ｓ６９Ｌ及びＴ７１Ｓ置換（図２Ｋに示される配列のＳ６８Ｌ及びＴ７０Ｓ）を含有するように修飾される。

別の実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰの骨格ポリペプチドは、Ｉｇ ＣＨ１ドメイン（例えば、図２Ｊの配列番号１５のポリペプチド）を含み、その対応配列は、図２Ｋ（配列番号１７）に示されるようなＩｇλ鎖定常領域配列を含み、骨格ポリペプチドは、図２Ｋに示される配列の少なくとも７０（例えば、少なくとも８０、少なくとも９０、または少なくとも１００）個の連続ａａと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する配列を含む。

ｃ．安定性及び半減期に対する効果
好適な骨格ポリペプチド（例えば、Ｉｇ Ｆｃ骨格配列を有するもの）は、いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰポリペプチド及びそれらの高次複合体の半減期を延長させる。いくつかの場合では、好適な骨格ポリペプチドは、その骨格ポリペプチドを欠くまたは対照骨格ポリペプチドを含む対照Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰと比較して、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰのｉｎ ｖｉｖｏ半減期（例えば、血清半減期）を増加させる。例えば、いくつかの場合では、骨格ポリペプチドは、コンジュゲートされたまたはコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰのｉｎ ｖｉｖｏ半減期（例えば、血清半減期）を、その骨格ポリペプチドを欠く、または対照骨格ポリペプチドを有する他の同一の対照と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約５０％、少なくとも約２倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、または１００倍超増加させる。

５ 免疫調節性ポリペプチド（「ＭＯＤ」）
本開示のＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適なＭＯＤには、以下の免疫調節性ポリペプチドＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８０、（Ｂ７－１）、ＣＤ８３、ＣＤ８６（Ｂ７－２）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＬＴ３（免疫グロブリン様転写産物３）、ＩＬＴ４（免疫グロブリン様転写産物４）、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＩＣＡＭ（細胞間接着分子）、ＩＣＯＳ－Ｌ（誘導性共刺激リガンド）、ＪＡＧ１（ＣＤ３３９）、リンホトキシンベータ受容体、３／ＴＲ６、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、ＴＧＦ－β３、４－１ＢＢＬ、及びそれらのコグネイト受容体を介して係合及びシグナル伝達が可能なそれらのいずれかの断片、例えば、エクトドメイン断片のｗｔ．及びバリアントが含まれるがこれらに限定されない。別途記述されない限り、本開示のＴ細胞－ＭＰにおいて用いられるＭＯＤは、ｗｔ．免疫調節性ポリペプチドのｗｔ．及び／またはバリアント、例えば、特定のＣｏ－ＭＯＤに選択的に結合し、及び／または特定のＣｏ－ＭＯＤに対する減少した親和性を有するバリアントであり得ることが理解される。本開示のＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適ないくつかのＭＯＤポリペプチド及びそれらの１つのＣｏ－ＭＯＤまたは複数のＣｏ－ＭＯＤ（「共免疫調節性ポリペプチド」またはコグネイト共刺激受容体）には、以下の表に記述されるタンパク質対からのＴ細胞調節活性を有するポリペプチド配列が含まれる：

いくつかの場合では、ＭＯＤは、ＩＬ－２ポリペプチド、４－１ＢＢＬポリペプチド、Ｂ７－１ポリペプチド；Ｂ７－２ポリペプチド、ＩＣＯＳ－Ｌポリペプチド、ＯＸ－４０Ｌポリペプチド、ＣＤ８０ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＰＤ－Ｌ１ポリペプチド、ＦａｓＬポリペプチド、ＴＧＦβポリペプチド、及びＰＤ－Ｌ２ポリペプチドのｗｔ．またはバリアントから選択される。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、２つの異なるＭＯＤ、例えば、ＩＬ－２ ＭＯＤまたはＩＬ－２バリアントＭＯＤポリペプチド及びＣＤ８０またはＣＤ８６ ＭＯＤポリペプチドのｗｔ．またはバリアントのいずれかを含む。別の例では、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、ＩＬ－２ ＭＯＤまたはＩＬ－２バリアントＭＯＤポリペプチド及びＰＤ－Ｌ１ ＭＯＤポリペプチドのｗｔ．またはバリアントを含む。いくつかの場合では、同じまたは異なり得るＭＯＤは、タンデムでＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰに存在する。ＭＯＤがタンデムで提供される場合、それらの配列は、いかなる介在配列も伴うことなくまたはリンカーポリペプチドのみによって隔てられて（例えば、ＭＨＣ配列またはエピトープ配列の介在は存在せず）、単一のポリペプチド上で互いにすぐ隣接する。ＭＯＤポリペプチドは、全長ＭＯＤの細胞外部分のすべてまたは一部を含み得る。よって、例えば、ＭＯＤは、いくつかの場合では、天然に存在するＭＯＤに通常見られるシグナルペプチド、膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインのうちの１つ以上を除外し得る。別途記述されない限り、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＯＤは、シグナルペプチド、細胞内ドメイン、または実質的な量（例えば、５％または１０％超）のＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰを哺乳動物細胞膜に固定するのに十分な部分の膜貫通ドメインを含まない。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適なＭＯＤは、天然に存在するＭＯＤのａａ配列のすべてまたは一部（例えば、細胞外部分）を含む。他の例では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適なＭＯＤは、天然に存在するＭＯＤのａａ配列と比較して少なくとも１つのａａ置換を含むバリアントＭＯＤである。いくつかの例では、バリアントＭＯＤは、Ｃｏ－ＭＯＤに対する対応する天然に存在するＭＯＤ（例えば、バリアントに存在するａａ置換（複数可）を含まないＭＯＤ）の親和性よりも低いＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を示す。親和性を変化させるＭＯＤポリペプチド配列における好適なバリエーションは、ペプチドの長さにわたってスキャンし（ａａ置換、例えば、アラニン置換の生成または「アラニンスキャニング」または荷電残基変化）、その親和性を試験することによって同定され得る。親和性を変化させる重要なａａ位置が同定されると、それらの位置は、アラニン以外の１つ以上のａａ置換の効果が試験される垂直走査に供され得る。親和性は、以下に記載されるＢＬＩによって決定され得る。

ａ．減少した親和性を有するＭＯＤ及びバリアントＭＯＤ
共免疫調節性ドメインに対する減少した親和性を示す好適な免疫調節性ドメインは、ｗｔ．免疫調節性ドメインから１ａａ～２０ａａの相違を有し得る。例えば、いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、ａａ配列において、対応するｗｔ．ＭＯＤとは１ａａ～１０ａａ、または１１ａａ～２０ａａ異なる。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して単一のａａ置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して２ａａの置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して３ａａの置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して４ａａの置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して５ａａの置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して６ａａまたは７ａａの置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して８ａａ、９ａａまたは１０ａａの置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して１１、１２、１３、１４、または１５ａａの置換が含まれ得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤには、対応する参照（例えば、ｗｔ．）ＭＯＤと比較して１６、１７、１８、１９、または２０ａａの置換が含まれ得る。

上で論述されるように、本開示のＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適なバリアントＭＯＤは、コグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する対応するｗｔ．ＭＯＤの親和性と比較して、コグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する減少した親和性を示し得る。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、１００ｎＭ～１００μＭであるコグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有する。例えば、いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、約１００ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約３００ｎＭ、約３００ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約５００ｎＭ、約５００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約７００ｎＭ、約７００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約９００ｎＭ、約９００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約３０μＭ、約３０μＭ～約５０μＭ、約５０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭであるコグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有する。

代替的に、または減少した親和性結合に加えて、ＭＯＤは、Ｃｏ－ＭＯＤに対する選択的結合を示すバリアントであり得る。一態様では、ＭＯＤが複数のＣｏ－ＭＯＤに結合し得る場合、少なくとも１つのＣｏ－ＭＯＤに選択的に結合し得るバリアントが選択され得る。例えば、ｗｔ．ＰＤ－Ｌ１は、ＰＤ－１及びＣＤ８０（Ｂ７－１としても知られている）の両方に結合する。そのような場合では、ＰＤ－１またはＣＤ８０のいずれかに選択的に（優先的に）結合するバリアントＰＤ－Ｌ１ ＭＯＤが選択され得る。同様に、ｗｔ．ＭＯＤがＣｏ－ＭＯＤ内の複数のポリペプチドに結合し得る場合、バリアントは、Ｃｏ－ＭＯＤと所望のポリペプチドにのみ選択的に結合するように選択され得る。例えば、ＩＬ－２は、ＩＬ－２Ｒのアルファ、ベータ及びガンマ鎖に結合する。減少した親和性で結合するか、またはポリペプチドの１つ、例えば、ＩＬ－２Ｒのアルファ鎖、またはさらに鎖の２つに結合しないＩＬ－２のバリアントが選択され得る。

（ｉ）結合親和性の決定
ＭＯＤとそのコグネイトＣｏ－ＭＯＤとの間の結合親和性は、精製されたＭＯＤ及び精製されたコグネイトＣｏ－ＭＯＤを使用してバイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）によって決定され得る。Ｔ細胞－ＭＰとそのコグネイトＣｏ－ＭＯＤとの間の結合親和性はまた、精製されたＴ細胞－ＭＰ及びコグネイトＣｏ－ＭＯＤを使用してＢＬＩによって決定され得る。ＢＬＩ法は、当業者によく知られている。例えば、Ｌａｄ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｊ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｓｃｒｅｅｎ．２０（４）：４９８－５０７；及びＳｈａｈ ａｎｄ Ｄｕｎｃａｎ（２０１４）Ｊ．Ｖｉｓ．Ｅｘｐ．１８：ｅ５１３８３を参照されたい。ＭＯＤとそのコグネイトＣｏ－ＭＯＤとの間、またはＭＯＤを有するＴ細胞－ＭＰとそのコグネイトＣｏ－ＭＯＤとの間の本開示に記載される特異的及び相対的結合親和性は、以下の手順を使用して決定され得る。

Ｔ細胞－ＭＰとそのコグネイトＣｏ－ＭＯＤとの間の結合親和性を決定するために、Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ ９６（Ｐａｌ ＦｏｒｔｅＢｉｏ）装置、または同様の装置を使用して以下のようにＢＬＩアッセイが行われ得る。Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、ｗｔ．ＭＯＤを含む対照Ｔ細胞－ＭＰ）は、不溶性支持体（「バイオセンサー」）に固定化される。固定化されたＴ細胞－ＭＰは、「標的」である。固定化は、捕捉抗体がＴ細胞－ＭＰを固定化する不溶性支持体上に捕捉抗体を固定化することによって達成され得る。例えば、固定化は、抗Ｆｃ（例えば、抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ）抗体を不溶性支持体上に固定化することによって達成され得、不溶性支持体上で固定化された抗Ｆｃ抗体は、Ｔ細胞－ＭＰ（Ｔ細胞－ＭＰはＩｇ Ｆｃポリペプチドを含む）に結合し、それを固定化する。Ｃｏ－ＭＯＤは、いくつかの異なる濃度で、固定化されたＴ細胞－ＭＰに施され、装置の反応が記録される。アッセイは、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．８）、５％のポリ（エチレングリコール）６０００、５０ｍＭのＫＣｌ、０．１％のウシ血清アルブミン、及び０．０２％のＴｗｅｅｎ ２０非イオン性洗浄剤を含む液体媒体中で行われる。固定化されたＴ細胞－ＭＰに対するＣｏ－ＭＯＤの結合は、３０℃で行われる。結合親和性についての陽性対照として、Ｔ細胞－ＭＰにおけるＭＨＣポリペプチドのクラスに応じて抗ＭＨＣクラスＩモノクローナル抗体が使用され得る。例えば、７ｎＭのＫＤを有する抗ＨＬＡクラスＩモノクローナル抗体（ｍＡｂ）Ｗ６／３２（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ番号ＨＢ－９５；Ｐａｒｈａｍ ｅｔ ａｌ．（１９７９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２３：３４２）、または抗ＨＬＤ－ＤＲ３モノクローナル抗体、例えば、１６－２３抗体（Ｓｉｇｍａ；「１６．２３」とも称される；例えば、Ｐｉｏｕｓ ｅｔ ａｌ．（１９８５）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６２：１１９３；Ｍｅｌｌｉｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７４：１６０７；ＥＣＡＣＣハイブリドーマコレクション１６－２３，ＥＣＡＣＣ ９９０４３００１を参照されたい）が結合親和性についての陽性対照として使用され得る。抗ＭＨＣクラスＩモノクローナル抗体の段階希釈物を使用して標準曲線が生成され得る。Ｃｏ－ＭＯＤ、または抗ＭＨＣ ｍＡｂは、「分析物」である。ＢＬＩは、２つの表面：ｉ）固定化されたポリペプチド（「標的」）；及びｉｉ）内部参照層から反射した白色光の干渉パターンを分析する。バイオセンサーチップに結合した分子（「分析物」；例えば、Ｃｏ－ＭＯＤ；抗ＨＬＡ抗体）の数の変化は、干渉パターンのシフトを引き起こす；この干渉パターンのシフトはリアルタイムで測定され得る。標的／分析物相互作用の親和性を表す２つの動態的用語は、結合定数（ｋ_ａ）及び解離定数（ｋ_ｄ）である。これらの２つの用語の比（ｋ_ｄ／ｋ_ａ）は、親和性定数Ｋ_Ｄを生じさせる。

上記のとおり、ＭＯＤ（例えば、ＩＬ－２またはＩＬ－２バリアント）とそのコグネイトＣｏ－ＭＯＤ（例えば、ＩＬ－２Ｒ）との間の結合親和性の決定はまた、ＢＬＩによって決定され得る。そのアッセイは、Ｔ細胞－ＭＰについて上述したものと同様である。ＢＬＩアッセイは、Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ ９６（Ｐａｌ ＦｏｒｔｅＢｉｏ）装置、または同様の装置を使用して以下のように行われ得る。Ｔ細胞－ＭＰの成分ＭＯＤ（例えば、本開示のバリアントＩＬ－２ポリペプチド）；及び対照ＭＯＤ（対照ＭＯＤは、ｗｔ．ＭＯＤ、例えば、ｗｔ．ＩＬ－２を含む）を不溶性支持体に固定化する（それぞれ「バイオセンサー」）。ＭＯＤは、「標的」である。固定化は、捕捉抗体がＭＯＤを固定化する不溶性支持体上に捕捉抗体を固定化することによって達成され得る。例えば、標的がイムノアフィニティータグ（例えば、ＦＬＡＧ、ヒトＩｇＧ Ｆｃ）に融合された場合、固定化は、イムノアフィニティータグに対する適切な抗体（例えば、抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ）を用いて不溶性支持体上に固定化することによって達成され得、不溶性支持体上で固定化された抗体は、ＭＯＤ（ＭＯＤはＩｇ Ｆｃポリペプチドを含む）に結合し、それを固定化する。Ｃｏ－ＭＯＤ（またはポリペプチド）は、いくつかの異なる濃度で、固定化されたＭＯＤに施され、装置の反応が記録される。代替的には、Ｃｏ－ＭＯＤ（またはポリペプチド）が、バイオセンサーに固定化され（例えば、単量体サブユニット、ヘテロ二量体サブ複合体、または完全なヘテロ三量体としてＩＬ－２受容体ヘテロ三量体のために）、ＭＯＤは、いくつかの異なる濃度で、固定化されたＣｏ－ＭＯＤ（複数可）に施され、装置の反応が記録される。アッセイは、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．８）、５％のポリ（エチレングリコール）６０００、５０ｍＭのＫＣｌ、０．１％のウシ血清アルブミン、及び０．０２％のＴｗｅｅｎ ２０非イオン性洗浄剤を含む液体媒体中で行われる。固定化されたＭＯＤに対するＣｏ－ＭＯＤの結合は、３０℃で行われる。ＢＬＩは、２つの表面：ｉ）固定化されたポリペプチド（「標的」）；及びｉｉ）内部参照層から反射した白色光の干渉パターンを分析する。バイオセンサーチップに結合した分子（「分析物」；例えば、Ｃｏ－ＭＯＤ）の数の変化は、干渉パターンのシフトを引き起こす；この干渉パターンのシフトはリアルタイムで測定され得る。標的／分析物相互作用の親和性を表す２つの動態的用語は、結合定数（ｋ_ａ）及び解離定数（ｋ_ｄ）である。これらの２つの用語の比（ｋ_ｄ／_ａ）は、親和性定数Ｋ_Ｄを生じさせる。よって、その受容体（例えば、ＩＬ－２Ｒ）に対するｗｔ．ＭＯＤ（例えば、ＩＬ－２）及びそのコグネイトＣｏ－ＭＯＤ（例えば、その受容体；（例えば、ＩＬ－２Ｒ））に対するバリアントＭＯＤ（例えば、本明細書に開示されるＩＬ－２バリアント）の結合親和性の決定は、コグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する、ｗｔ．Ｃｏ－ＭＯＤと比較したバリアントＣｏ－ＭＯＤの相対的結合親和性を決定することを可能にする。すなわち、その受容体（そのコグネイトＣｏ－ＭＯＤ）に対するバリアントＭＯＤの結合親和性が、同じコグネイトＣｏ－ＭＯＤに対するｗｔ．ＭＯＤの結合親和性と比較して減少するかどうか、及び、減少する場合、ｗｔ．Ｃｏ－ＭＯＤの結合親和性からの減少率はどのくらいかを決定することができる。

ＢＬＩアッセイは、マルチウェルプレートで行われ得る。アッセイを実行するために、Ｏｃｔｅｔ Ｄａｔａ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎソフトウェアにおいてプレートレイアウトが規定され、アッセイ工程が規定され、バイオセンサーが割り当てられる。バイオセンサーアセンブリは、水和されている。水和バイオセンサーアセンブリ及びアッセイプレートは、Ｏｃｔｅｔ装置で１０分間平衡化される。データが取得されると、取得されたデータは、Ｏｃｔｅｔ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアにロードされる。データは、参照減算、ｙ軸アライメント、工程間補正、及びＳａｖｉｔｚｋｙ－Ｇｏｌａｙフィルタリングのための方法を特定することによって処理ウィンドウにおいて処理される。データは、分析するための工程を特定し（結合及び解離）、カーブフィッティングモデル（１：１）、フィッティング法（大域）、及び対象となるウィンドウ（秒）を選択することによって分析ウィンドウにおいて分析される。フィッティングの質が評価される。３倍の範囲内である場合、各データトレース（分析物濃度）についてのＫ_Ｄ値が平均化され得る。Ｋ_Ｄ誤差値は、親和性定数値の１桁以内となるべきであり；Ｒ^２値は、０．９５を超えるべきである。例えば、Ａｂｄｉｃｈｅ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊ．Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３７７：２０９を参照されたい。

別途本明細書で記述されない限り、Ｃｏ－ＭＯＤに対する本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの親和性、またはＣｏ－ＭＯＤに対する対照Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（対照Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートはｗｔ．ＭＯＤを含む）の親和性は、上述したように、ＢＬＩを使用して決定される。同様に、ＭＯＤ及びそのＣｏ－ＭＯＤポリペプチドの親和性は、上述したＢＬＩを使用して決定され得る。

本開示のＴ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、Ｃｏ－ＭＯＤに対する対応するｗｔ．ＭＯＤの親和性よりも少なくとも１０％低い、少なくとも１５％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも２５％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも３５％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも４５％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％超低い親和性でそのＣｏ－ＭＯＤに結合し得る。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、１ｎＭ～１００ｎＭ、または１００ｎＭ～１００μＭであるＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有する。例えば、いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、約１ｎＭ～約５ｎＭ、約５ｎＭ～約１０ｎＭ、約１０ｎＭ～約５０ｎＭ、約５０ｎＭ～約１００ｎＭ、約１００ｎＭ～約１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ～約３００ｎＭ、約３００ｎＭ～約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約５００ｎＭ、約５００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約７００ｎＭ、約７００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約９００ｎＭ、約９００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約１５μＭ、約１５μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約２５μＭ、約２５μＭ～約５０μＭ、約５０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭであるＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有する。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、約１ｎＭ～約５ｎＭ、約５ｎＭ～約１０ｎＭ、約１０ｎＭ～約５０ｎＭ、または約５０ｎＭ～約１００ｎＭであるＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有する。

標的Ｔ細胞に対する本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの結合親和性は、以下の手法で測定され得る：Ａ）本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを、ｉ）親ｗｔ．ＭＯＤに結合するＣｏ－ＭＯＤ；及びｉｉ）エピトープに結合するＴＣＲをその表面上に発現する標的Ｔ細胞と、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが標的Ｔ細胞に結合するように接触させることであって、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、エピトープタグまたは蛍光標識（例えば、Ｔ細胞－ＭＰの一部として、緑色蛍光タンパク質等の蛍光ペイロードまたは蛍光タンパク質標識）を含む、接触させること；Ｂ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが標識されていない場合、標的Ｔ細胞が結合したＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを、エピトープタグに結合する蛍光標識された結合剤（例えば、蛍光標識された抗体）と接触させ、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート／標的Ｔ細胞／結合剤複合体を生成すること；及びＣ）フローサイトメトリーを使用してＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート／標的Ｔ細胞／結合剤複合体の平均蛍光強度（ＭＦＩ）を測定すること。エピトープタグは、例えば、ＦＬＡＧタグ、血球凝集素タグ、ｃ－ｍｙｃタグ、ポリ（ヒスチジン）タグ等であり得る。所定範囲の濃度のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（ライブラリメンバー）にわたって測定されたＭＦＩは、親和性の指標を提供する。所定範囲の濃度のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（ライブラリメンバー）にわたって測定されたＭＦＩは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの半数効果濃度（ＥＣ_５０）を提供する。いくつかの場合では、標的Ｔ細胞についての本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＥＣ_５０は、ｎＭ範囲の範囲であり；対照Ｔ細胞（対照Ｔ細胞は、その表面上にｉ）親ｗｔ．ＭＯＤに結合するＣｏ－ＭＯＤ；及びｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するエピトープに結合しないＴ細胞受容体を発現する）についてのＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＥＣ_５０は、μＭの範囲である。対照Ｔ細胞についての本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＥＣ_５０の、標的Ｔ細胞についてのＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＥＣ_５０に対する比は、少なくとも１．５：１、少なくとも２：１、少なくとも５：１、少なくとも１０：１、少なくとも１５：１、少なくとも２０：１、少なくとも２５：１、少なくとも５０：１、少なくとも１００：１、少なくとも５００：１、少なくとも１０^２：１、少なくとも５×１０^２：１、少なくとも１０^３：１、少なくとも５×１０^３：１、少なくとも１０^４：１、少なくとも１０^５：１、または少なくとも１０^６：１であり得る。対照Ｔ細胞についての本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＥＣ_５０の、標的Ｔ細胞についてのＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＥＣ_５０に対する比は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの選択性の表現である。

いくつかの場合では、先行段落において記載されるように測定される場合、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ｉ）親ｗｔ．ＭＯＤに結合するＣｏ－ＭＯＤ；及びｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（ライブラリメンバー）に存在するエピトープ以外のエピトープに結合するＴＣＲを含む対照Ｔ細胞に対するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（ライブラリメンバー）の結合と比較して、標的Ｔ細胞に対する選択的結合を示す。

ｉ）コグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する対照Ｔ細胞－ＭＰ（対照Ｔ細胞－ＭＰは、ｗｔ．ＭＯＤを含む）の結合親和性のｉｉ）コグネイトＣｏ－ＭＯＤに対するｗｔ．ＭＯＤのバリアントを含むＴ細胞－ＭＰの結合親和性に対する比は、ＢＬＩ（上述される）によって測定された場合、少なくとも１．５：１、少なくとも２：１、少なくとも５：１、少なくとも１０：１、少なくとも１５：１、少なくとも２０：１、少なくとも２５：１、少なくとも５０：１、少なくとも１００：１、少なくとも５００：１、少なくとも１０^２：１、少なくとも５×１０^２：１、少なくとも１０^３：１、少なくとも５×１０^３：１、少なくとも１０^４：１、少なくとも１０^５：１、または少なくとも１０^６：１であり得る。ｉ）コグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する対照Ｔ細胞－ＭＰ（対照Ｔ細胞－ＭＰは、ｗｔ．ＭＯＤを含む）の結合親和性のｉｉ）コグネイトＣｏ－ＭＯＤに対するｗｔ．ＭＯＤのバリアントを含むＴ細胞－ＭＰの結合親和性に対する比は、１．５：１～１０^６：１、例えば、１．５：１～１０：１、１０：１～５０：１、５０：１～１０^２：１、１０^２：１～１０^３：１、１０^３：１～１０^４：１、１０^４：１～１０^５：１、または１０^５：１～１０^６：１の範囲であり得る。

例として、対照Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートがｗｔ．ＩＬ－２ポリペプチドを含む場合、及び本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートがＭＯＤとしてバリアントＩＬ－２ポリペプチド（ｗｔ．ＩＬ－２ポリペプチドのａａ配列と比べて１～１０ａａの置換を含む）を含む場合、ｉ）ＩＬ－２受容体（Ｃｏ－ＭＯＤ）に対する対照Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの結合親和性のｉｉ）ＩＬ－２受容体（Ｃｏ－ＭＯＤ）に対する本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの結合親和性に対する比は、ＢＬＩによって測定される場合、少なくとも１．５：１、少なくとも２：１、少なくとも５：１、少なくとも１０：１、少なくとも１５：１、少なくとも２０：１、少なくとも２５：１、少なくとも５０：１、少なくとも１００：１、少なくとも５００：１、少なくとも１０^２：１、少なくとも５×１０^２：１、少なくとも１０^３：１、少なくとも５×１０^３：１、少なくとも１０^４：１、少なくとも１０^５：１、または少なくとも１０^６：１である。対照Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートがｗｔ．ＩＬ－２ポリペプチドを含む場合、及び本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートがＭＯＤとしてバリアントＩＬ－２ポリペプチド（ｗｔ．ＩＬ－２ポリペプチドのａａ配列と比べて１～１０ａａの置換を含む）を含む場合、ｉ）ＩＬ－２受容体（Ｃｏ－ＭＯＤ）に対する対照Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの結合親和性のｉｉ）ＩＬ－２受容体に対する本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの結合親和性に対する比は、ＢＬＩによって測定される場合、１．５：１～１０^６：１、例えば、１．５：１～１０：１、１０：１～５０：１、５０：１～１０^２：１、１０^２：１～１０^３：１、１０^３：１～１０^４：１、１０^４：１～１０^５：１、または１０^５：１～１０^６：１の範囲であり得る。同じ比の結合親和性を有し得る他の例には、ｗｔ．ＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰ及びバリアントＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰであって、ｗｔ．及びバリアントＭＯＤが、ｗｔ．ＣＤ８０及びバリアントＣＤ８０；ｗｔ．ＣＤ８６及びバリアントＣＤ８６；ｗｔ．ＰＤ－Ｌ１及びバリアントＰＤ－Ｌ１；ｗｔ．ＣＴＬＡ４及びバリアントＣＴＬＡ４；またはｗｔ．４－１ＢＢＬ及びバリアント４－１ＢＢＬから選択されるものが含まれる。

本開示のＴ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、１ｎＭ～１００ｎＭ、または１００ｎＭ～２５０μＭであるコグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有し得る。例えば、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、約１ｎＭ～約１０ｎＭ、約１０ｎＭ～約１００ｎＭ、約１００ｎＭ～約５００ｎＭ、約５００ｎＭ～約７５０ｎＭ、約７５０ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２５μＭ、約２５μＭ～約５０μＭ、約５０μＭ～約１００μＭ、または約１００μＭ～約２５０μＭであるコグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有し得る。Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、約１ｎＭ～約５ｎＭ、約５ｎＭ～約１０ｎＭ、約１０ｎＭ～約５０ｎＭ、または約５０ｎＭ～約１００ｎＭであるコグネイトＣｏ－ＭＯＤに対する結合親和性を有し得る。

ＭＯＤのそのＣｏ－ＭＯＤに対する減少した親和性及びＴＣＲに対するエピトープの親和性の組み合わせは、ＭＯＤの活性を依然として可能にしつつ、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの向上した選択性を提供する。よって、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ｉ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するエピトープ以外のエピトープに特異的なＴＣＲ；及びｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＭＯＤに結合するＣｏ－ＭＯＤを提示する第２のＴ細胞に対する結合と比較して、ｉ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するエピトープに特異的なＴＣＲ；及びｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＭＯＤに結合するＣｏ－ＭＯＤの両方を提示する第１のＴ細胞に選択的に結合し得る。例えば、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、第２のＴ細胞に結合する親和性よりも少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも２００％（２倍）、少なくとも２５０％（２．５倍）、少なくとも５００％（５倍）、少なくとも１，０００％（１０倍）、少なくとも１，５００％（１５倍）、少なくとも２，０００％（２０倍）、少なくとも２，５００％（２５倍）、少なくとも５，０００％（５０倍）、少なくとも１０，０００％（１００倍）、または１００倍超高い親和性で第１のＴ細胞に結合し得る。例えば、図１を参照されたい。

ｂ．ＩＬ－２及びそのバリアント
１つの非限定的な例として、Ｔ細胞－ＭＰに存在するｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤは、ＩＬ－２またはバリアントＩＬ－２ポリペプチドである。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、バリアントＩＬ－２ポリペプチドである。野生型ＩＬ－２は、ＩＬ－２受容体（ＩＬ－２Ｒ）に結合する。ｗｔ．ＩＬ－２のａａ配列は、以下のとおりであり得る：

野生型ＩＬ２は、細胞の表面上のＩＬ２受容体（ＩＬ２Ｒ）に結合する。ＩＬ２受容体は、いくつかの場合では、アルファ鎖（ＩＬ－２Ｒα；ＣＤ２５とも称される）、ベータ鎖（ＩＬ－２Ｒβ；ＣＤ１２２とも称される）及びガンマ鎖（ＩＬ－２Ｒγ；ＣＤ１３２とも称される）を含むヘテロ三量体ポリペプチドである。ヒトＩＬ－２Ｒα、ＩＬ２Ｒβ、及びＩＬ－２Ｒγのアミノ酸配列は、以下のとおりであり得る。

ヒトＩＬ－２Ｒα：ＥＬＣＤＤＤＰＰＥ ＩＰＨＡＴＦＫＡＭＡ ＹＫＥＧＴＭＬＮＣＥ ＣＫＲＧＦＲＲＩＫＳ ＧＳＬＹＭＬＣＴＧＮ ＳＳＨＳＳＷＤＮＱＣ ＱＣＴＳＳＡＴＲＮＴ ＴＫＱＶＴＰＱＰＥＥ ＱＫＥＲＫＴＴＥＭＱ ＳＰＭＱＰＶＤＱＡＳ ＬＰＧＨＣＲＥＰＰＰ ＷＥＮＥＡＴＥＲＩＹ ＨＦＶＶＧＱＭＶＹＹ ＱＣＶＱＧＹＲＡＬＨ ＲＧＰＡＥＳＶＣＫＭ ＴＨＧＫＴＲＷＴＱＰ ＱＬＩＣＴＧＥＭＥＴ ＳＱＦＰＧＥＥＫＰＱ ＡＳＰＥＧＲＰＥＳＥ ＴＳＣＬＶＴＴＴＤＦ ＱＩＱＴＥＭＡＡＴＭ ＥＴＳＩＦＴＴＥＹＱ ＶＡＶＡＧＣＶＦＬＬ ＩＳＶＬＬＬＳＧＬＴ ＷＱＲＲＱＲＫＳＲＲ ＴＩ（配列番号１０７）。

ヒトＩＬ－２Ｒβ：ＶＮＧ ＴＳＱＦＴＣＦＹＮＳ ＲＡＮＩＳＣＶＷＳＱ ＤＧＡＬＱＤＴＳＣＱ ＶＨＡＷＰＤＲＲＲＷ ＮＱＴＣＥＬＬＰＶＳ ＱＡＳＷＡＣＮＬＩＬ ＧＡＰＤＳＱＫＬＴＴ ＶＤＩＶＴＬＲＶＬＣ ＲＥＧＶＲＷＲＶＭＡ ＩＱＤＦＫＰＦＥＮＬ ＲＬＭＡＰＩＳＬＱＶ ＶＨＶＥＴＨＲＣＮＩ ＳＷＥＩＳＱＡＳＨＹ ＦＥＲＨＬＥＦＥＡＲ ＴＬＳＰＧＨＴＷＥＥ ＡＰＬＬＴＬＫＱＫＱ ＥＷＩＣＬＥＴＬＴＰ ＤＴＱＹＥＦＱＶＲＶ ＫＰＬＱＧＥＦＴＴＷ ＳＰＷＳＱＰＬＡＦＲ ＴＫＰＡＡＬＧＫＤＴ ＩＰＷＬＧＨＬＬＶＧ ＬＳＧＡＦＧＦＩＩＬ ＶＹＬＬＩＮＣＲＮＴ ＧＰＷＬＫＫＶＬＫＣ ＮＴＰＤＰＳＫＦＦＳ ＱＬＳＳＥＨＧＧＤＶ ＱＫＷＬＳＳＰＦＰＳ ＳＳＦＳＰＧＧＬＡＰ ＥＩＳＰＬＥＶＬＥＲ ＤＫＶＴＱＬＬＬＱＱ ＤＫＶＰＥＰＡＳＬＳ ＳＮＨＳＬＴＳＣＦＴ ＮＱＧＹＦＦＦＨＬＰ ＤＡＬＥＩＥＡＣＱＶ ＹＦＴＹＤＰＹＳＥＥ ＤＰＤＥＧＶＡＧＡＰ ＴＧＳＳＰＱＰＬＱＰ ＬＳＧＥＤＤＡＹＣＴ ＦＰＳＲＤＤＬＬＬＦ ＳＰＳＬＬＧＧＰＳＰ ＰＳＴＡＰＧＧＳＧＡ ＧＥＥＲＭＰＰＳＬＱ ＥＲＶＰＲＤＷＤＰＱ ＰＬＧＰＰＴＰＧＶＰ ＤＬＶＤＦＱＰＰＰＥ ＬＶＬＲＥＡＧＥＥＶ ＰＤＡＧＰＲＥＧＶＳ ＦＰＷＳＲＰＰＧＱＧ ＥＦＲＡＬＮＡＲＬＰ ＬＮＴＤＡＹＬＳＬＱ ＥＬＱＧＱＤＰＴＨＬ Ｖ（配列番号１０８）。
ヒトＩＬ－２Ｒγ：ＬＮＴＴＩＬＴＰ ＮＧＮＥＤＴＴＡＤＦ ＦＬＴＴＭＰＴＤＳＬ ＳＶＳＴＬＰＬＰＥＶ ＱＣＦＶＦＮＶＥＹＭ ＮＣＴＷＮＳＳＳＥＰ ＱＰＴＮＬＴＬＨＹＷ ＹＫＮＳＤＮＤＫＶＱ ＫＣＳＨＹＬＦＳＥＥ ＩＴＳＧＣＱＬＱＫＫ ＥＩＨＬＹＱＴＦＶＶ ＱＬＱＤＰＲＥＰＲＲ ＱＡＴＱＭＬＫＬＱＮ ＬＶＩＰＷＡＰＥＮＬ ＴＬＨＫＬＳＥＳＱＬ ＥＬＮＷＮＮＲＦＬＮ ＨＣＬＥＨＬＶＱＹＲ ＴＤＷＤＨＳＷＴＥＱ ＳＶＤＹＲＨＫＦＳＬ ＰＳＶＤＧＱＫＲＹＴ ＦＲＶＲＳＲＦＮＰＬ ＣＧＳＡＱＨＷＳＥＷ ＳＨＰＩＨＷＧＳＮＴ ＳＫＥＮＰＦＬＦＡＬ ＥＡＶＶＩＳＶＧＳＭ ＧＬＩＩＳＬＬＣＶＹ ＦＷＬＥＲＴＭＰＲＩ ＰＴＬＫＮＬＥＤＬＶ ＴＥＹＨＧＮＦＳＡＷ ＳＧＶＳＫＧＬＡＥＳ ＬＱＰＤＹＳＥＲＬＣ ＬＶＳＥＩＰＰＫＧＧ ＡＬＧＥＧＰＧＡＳＰ ＣＮＱＨＳＰＹＷＡＰ ＰＣＹＴＬＫＰＥＴ（配列番号１０９）。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰがバリアントＩＬ－２ポリペプチドを含む場合、コグネイトＣｏ－ＭＯＤは、配列番号１０７、配列番号１０８、及び配列番号１０９のいずれか１つのａａ配列を含むポリペプチドを含むＩＬ－２Ｒである。

いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるａａ配列を含むＩＬ－２ポリペプチドの結合親和性と比較して、ＩＬ－２Ｒに対する減少した結合親和性を示す。例えば、いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、ＩＬ－２Ｒ（例えば、配列番号１０７～１０９に示されるａａ配列を含むポリペプチドを含むＩＬ－２Ｒ）に対する配列番号１０６に示されるａａ配列を含むＩＬ－２ポリペプチドの結合親和性よりも少なくとも１０％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％超低い結合親和性でＩＬ－２Ｒに結合する。

いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチド（例えば、配列番号１０６のバリアント）は、１００ｎＭ～１００μＭであるＩＬ－２Ｒ（例えば、配列番号１０７～１０９のもの）に対する結合親和性を有する。別の例として、いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチド（例えば、配列番号１０６のバリアント）は、約１００ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約４０μＭ、約４０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭであるＩＬ－２Ｒ（例えば、配列番号１０７～１０９に示されるａａ配列を含むポリペプチドを含むＩＬ－２Ｒ）に対する結合親和性を有する。

いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して単一のａａ置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して２～１０ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して２ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して３ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して４ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して５ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して６または７ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＩＬ－２ポリペプチドは、配列番号１０６に示されるＩＬ－２のａａ配列と比較して８、９、または１０ａａの置換を有する。

好適なバリアントＩＬ－２ポリペプチド配列には、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、９０、１００、１１０、１２０、１３０または１３３）個の連続ａａと少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むポリペプチド配列が含まれる。
ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１５におけるａａは、Ｅ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｈ１６Ａ）。１つの場合では、Ｅ１５の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｅ１５Ａ）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１６におけるａａは、Ｈ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｍｅｔ、Ｖａｌ、またはＴｒｐによって置換される。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、Ａｌａによって置換される。別の場合では、Ｈ１６の位置は、Ｔｈｒによって置換される。
ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置２０におけるａａは、Ｄ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｄ２０の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置４２におけるａａは、Ｆ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｆ４２の位置は、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、またはＨｉｓによって置換される。１つの場合では、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換される。
ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置４５におけるａａは、Ｙ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｙ４５の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置８８におけるａａは、Ｎ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｎ８８の位置は、Ａｌａによって置換される。別の場合では、Ｎ８８の位置は、Ａｒｇによって置換される。
ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１２６におけるａａは、Ｑ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｑ１２６の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｑ１２６Ａ）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１６におけるａａは、Ｈ以外のａａであり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、ＡｌａまたはＴｈｒによって置換され、Ｆ４２の位置は、ＡｌａまたはＴｈｒによって置換される。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｈ１６Ａ及びＦ４２Ａバリアント）。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、Ｔｈｒによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｈ１６Ｔ及びＦ４２Ａバリアント）。

ＩＬ－２バリアントは、配列：

と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得、位置１６及び４２は、以下のように置換される：Ｘ_１は、Ｈｉｓ以外の任意のａａであり；Ｘ_２は、Ｐｈｅ以外の任意のａａである。第２のＩＬ－２バリアントは、Ｘ_１がＡｌａであり、Ｘ_２がＡｌａである置換を含む（Ｈ１６Ａ及びＦ４２Ａバリアント）。第３のＩＬ－２バリアントは、Ｘ_１がＴｈｒであり、Ｘ_２がＡｌａである置換を含む（Ｈ１６Ｔ及びＦ４２Ａバリアント）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置２０におけるａａは、Ｄ以外のａａであり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｄ２０の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｄ２０Ａ及びＦ４２Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１５におけるａａは、Ｅ以外であり、位置２０におけるａａは、Ｄ以外のａａであり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｅ１５の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｄ２０の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｅ１５Ａ、Ｄ２０Ａ、及びＦ４２Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１６におけるａａは、Ｈ以外であり、位置２０におけるａａは、Ｄ以外のａａであり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｄ２０の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｈ１６Ａ、Ｄ２０Ａ、及びＦ４２Ａ置換）。別の場合では、位置Ｈ１６は、Ｔｈｒによって置換され、Ｄ２０の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｈ１６Ｔ、Ｄ２０Ａ、及びＦ４２Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１６におけるａａは、Ｈ以外であり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外であり、位置８８におけるａａは、Ｒ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、ＡｌａまたはＴｈｒによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｎ８８の位置は、Ａｒｇによって置換される（Ｈ１６Ａ、Ｆ４２Ａ、及びＮ８８Ｒ置換またはＨ１６Ｔ、Ｆ４２Ａ、及びＮ８８Ｒ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１６におけるａａは、Ｈ以外であり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外であり、位置１２６におけるａａは、Ｑ以外である、ポリペプチドが含まれる。そのようなＩＬ－２バリアントには、Ｈ１６の位置が、ＡｌａまたはＴｈｒによって置換されており、Ｆ４２の位置が、Ａｌａによって置換されており、Ｑ１２６の位置が、Ａｌａによって置換されているものが含まれる（Ｈ１６Ａ、Ｆ４２Ａ、及びＱ１２６Ａ置換またはＨ１６Ｔ、Ｆ４２Ａ、及びＱ１２６Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置２０におけるａａは、Ｄ以外であり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外であり、位置１２６におけるａａは、Ｑ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、位置Ｄ２０は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｑ１２６の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｄ２０Ａ、Ｆ４２Ａ、及びＱ１２６Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置２０におけるａａは、Ｄ以外であり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外であり、位置４５におけるａａは、Ｙ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、位置Ｄ２０は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｙ４５の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｄ２０Ａ、Ｆ４２Ａ、及びＹ４５Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１６におけるａａは、Ｈ以外であり、位置２０におけるａａは、Ｄ以外であり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外であり、位置４５におけるａａは、Ｙ以外である、ポリペプチドが含まれる。そのようなＩＬ－２バリアントには、Ｈ１６の位置が、ＡｌａまたはＴｈｒによって置換されており、位置Ｄ２０が、Ａｌａによって置換されており、Ｆ４２の位置が、Ａｌａによって置換されており、Ｙ４５の位置が、Ａｌａによって置換されているものが含まれる（Ｈ１６Ａ、Ｄ２０Ａ、Ｆ４２Ａ、及びＹ４５Ａ置換、またはＨ１６Ｔ、Ｄ２０Ａ、Ｆ４２Ａ、及びＹ４５Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置２０におけるａａは、Ｄ以外であり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外であり、位置４５におけるａａは、Ｙ以外であり、位置１２６におけるａａは、Ｑ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、位置Ｄ２０は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｙ４５の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｑ１２６の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｄ２０Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｑ１２６Ａ置換）。

ＩＬ－２バリアントには、配列番号１０６の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１６におけるａａは、Ｈ以外であり、位置２０におけるａａは、Ｄ以外であり、位置４２におけるａａは、Ｆ以外であり、位置４５におけるａａは、Ｙ以外であり、位置１２６におけるａａは、Ｑ以外である、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｈ１６の位置は、ＡｌａまたはＴｈｒによって置換され、位置Ｄ２０は、Ａｌａによって置換され、Ｆ４２の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｙ４５の位置は、Ａｌａによって置換され、Ｑ１２６の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｈ１６Ａ、Ｄ２０Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、及びＱ１２６Ａ置換またはＨ１６Ｔ、Ｄ２０Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、及びＱ１２６Ａ置換）。

ｃ．Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）及びそのバリアント
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するＭＯＤは、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）である。ＦａｓＬは、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ファミリーにおけるホモマーＩＩ型膜貫通タンパク質である。ＦａｓＬは、標的細胞におけるＦａｓ受容体の三量体化によってシグナルを伝達し、これは、標的細胞のアポトーシスをもたらす死誘導複合体を形成する。可溶性ＦａｓＬは、保存部位における膜結合型ＦａｓＬのマトリックスメタロプロテイナーゼ－７（ＭＭＰ－７）切断に起因する。

実施形態では、ｗｔ．Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ ＦａｓＬタンパク質は、配列
ＭＱＱＰＦＮＹＰＹＰ ＱＩＹＷＶＤＳＳＡＳ ＳＰＷＡＰＰＧＴＶＬ ＰＣＰＴＳＶＰＲＲＰ ＧＱＲＲＰＰＰＰＰＰ ＰＰＰＬＰＰＰＰＰＰ ＰＰＬＰＰＬＰＬＰＰ ＬＫＫＲＧＮＨＳＴＧ ＬＣＬＬＶＭＦＦＭＶ ＬＶＡＬＶＧＬＧＬＧ ＭＦＱＬＦＨＬＱＫＥ ＬＡＥＬＲＥＳＴＳＱ ＭＨＴＡＳＳＬＥＫＱ ＩＧＨＰＳＰＰＰＥＫ ＫＥＬＲＫＶＡＨＬＴ ＧＫＳＮＳＲＳＭＰＬ ＥＷＥＤＴＹＧＩＶＬ ＬＳＧＶＫＹＫＫＧＧ ＬＶＩＮＥＴＧＬＹＦ ＶＹＳＫＶＹＦＲＧＱ ＳＣＮＮＬＰＬＳＨＫ ＶＹＭＲＮＳＫＹＰＱ ＤＬＶＭＭＥＧＫＭＭ ＳＹＣＴＴＧＱＭＷＡ ＲＳＳＹＬＧＡＶＦＮ ＬＴＳＡＤＨＬＹＶＮ ＶＳＥＬＳＬＶＮＦＥ ＥＳＱＴＦＦＧＬＹＫ Ｌ、（配列番号１１１）、ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿０００６３０．１、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ－Ｐ４８０２３（残基１～８０は、細胞質性であり、８１０１０２は、膜貫通ドメインであり、ａａ１０３～２８１は、細胞外（エクトドメイン）である）を有する。

好適なＦａｓＬポリペプチドは、ＦａｓＬのエクトドメイン：ＱＬＦＨＬＱＫＥ ＬＡＥＬＲＥＳＴＳＱ ＭＨＴＡＳＳＬＥＫＱ ＩＧＨＰＳＰＰＰＥＫ ＫＥＬＲＫＶＡＨＬＴ ＧＫＳＮＳＲＳＭＰＬ ＥＷＥＤＴＹＧＩＶＬ ＬＳＧＶＫＹＫＫＧＧ ＬＶＩＮＥＴＧＬＹＦ ＶＹＳＫＶＹＦＲＧＱ ＳＣＮＮＬＰＬＳＨＫ ＶＹＭＲＮＳＫＹＰＱ ＤＬＶＭＭＥＧＫＭＭ ＳＹＣＴＴＧＱＭＷＡ ＲＳＳＹＬＧＡＶＦＮ ＬＴＳＡＤＨＬＹＶＮ ＶＳＥＬＳＬＶＮＦＥ ＥＳＱＴＦＦＧＬＹＫ Ｌ（配列番号１１２）のすべてまたは一部を含む。

Ｆａｓ受容体は、配列
ＭＬＧＩＷＴＬＬＰＬ ＶＬＴＳＶＡＲＬＳＳ ＫＳＶＮＡＱＶＴＤＩ ＮＳＫＧＬＥＬＲＫＴ ＶＴＴＶＥＴＱＮＬＥ ＧＬＨＨＤＧＱＦＣＨ ＫＰＣＰＰＧＥＲＫＡ ＲＤＣＴＶＮＧＤＥＰ ＤＣＶＰＣＱＥＧＫＥ ＹＴＤＫＡＨＦＳＳＫ ＣＲＲＣＲＬＣＤＥＧ ＨＧＬＥＶＥＩＮＣＴ ＲＴＱＮＴＫＣＲＣＫ ＰＮＦＦＣＮＳＴＶＣ ＥＨＣＤＰＣＴＫＣＥ ＨＧＩＩＫＥＣＴＬＴ ＳＮＴＫＣＫＥＥＧＳ ＲＳＮＬＧＷＬＣＬＬ ＬＬＰＩＰＬＩＶＷＶ ＫＲＫＥＶＱＫＴＣＲ ＫＨＲＫＥＮＱＧＳＨ ＥＳＰＴＬＮＰＥＴＶ ＡＩＮＬＳＤＶＤＬＳ ＫＹＩＴＴＩＡＧＶＭ ＴＬＳＱＶＫＧＦＶＲ ＫＮＧＶＮＥＡＫＩＤ ＥＩＫＮＤＮＶＱＤＴ ＡＥＱＫＶＱＬＬＲＮ ＷＨＱＬＨＧＫＫＥＡ ＹＤＴＬＩＫＤＬＫＫ ＡＮＬＣＴＬＡＥＫＩ ＱＴＩＩＬＫＤＩＴＳ ＤＳＥＮＳＮＦＲＮＥ ＩＱＳＬＶ（配列番号１１３）ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００００３４．１、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ－Ｐ２５４４５（ａａ２６～１７３は、エクトドメイン（細胞外ドメイン）を形成し、ａａ１７４～１９０は、膜貫通ドメインを形成し、１９１～３３５は、細胞質ドメインを形成する）を有し得る。エクトドメインは、ＦａｓＬとの結合親和性を決定するために使用され得る。

いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチド（例えば、配列番号１１２のバリアントを含む）は、配列番号１１２に示されるａａ配列を含むＦａｓＬポリペプチドの結合親和性と比較して、成熟Ｆａｓ受容体配列（例えば、配列番号１１３に示されるポリペプチドのすべてまたは一部、例えば、そのエクトドメインを含むＦａｓＬ受容体）に対する減少した結合親和性を示す。例えば、いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチド（例えば、配列番号１１２のバリアントを含む）は、配列番号１１１または１１２に示されるａａ配列を含むＦａｓＬポリペプチドの結合親和性よりも少なくとも１０％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％超低い結合親和性でＦａｓ受容体（例えば、配列番号１０２に示されるポリペプチドのすべてまたは一部、例えば、そのエクトドメインを含む）に結合する。

いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチド（例えば、配列番号１１２のバリアントを含む）は、１ｎＭ～１ｍＭ（例えば、１ｎＭ～１０ｎＭ、１０ｎＭ～１００ｎＭ、１００ｎＭ～１μＭ、１μＭ～１０μＭ、１０μＭ～１００μＭ、または１００μＭ～１ｍＭ）であるＦａｓ受容体（例えば、そのエクトドメイン等の配列番号１１３に示されるポリペプチドのすべてまたは一部を含む）に対する結合親和性を有する。別の例として、いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチド（例えば、配列番号１０１のバリアントを含む）は、約１００ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約４０μＭ、約４０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭである成熟Ｆａｓ受容体（例えば、そのエクトドメイン等の配列番号１１３に示されるポリペプチドのすべてまたは一部を含む）に対する結合親和性を有する。

いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチド（例えば、配列番号１１２のバリアントを含む）は、配列番号１１２に示されるＦａｓＬポリペプチド配列と比較して単一のａａ置換を有する）。いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチド（例えば、配列番号１１２のバリアントを含む）は、配列番号１１２に示されるＦａｓＬポリペプチド配列と比較して２ａａ～１０ａａの置換を有する）。いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチドは、配列番号１１２に示されるＦａｓＬポリペプチド配列と比較して２ａａの置換を有する）。いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチドは、配列番号１１２に示されるＦａｓＬポリペプチド配列と比較して３ａａまたは４ａａの置換を有する）。いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチドは、配列番号１１２に示されるＦａｓＬポリペプチド配列と比較して５ａａの置換を有する）。いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチドは、配列番号１１２に示されるＦａｓＬポリペプチド配列と比較して６ａａまたは７ａａの置換を有する）。いくつかの場合では、バリアントＦａｓＬポリペプチドは、配列番号１１２に示されるＦａｓＬポリペプチド配列と比較して８ａａ、９ａａ、または１０ａａの置換を有する）。

好適なバリアントＦａｓＬポリペプチド配列には、配列番号１１２の少なくとも１４０個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１６０、少なくとも１７０、または少なくとも１７５個の連続ａａ）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列が含まれる（例えば、少なくとも１つのａａ置換、欠失または挿入を有する）。
ＦａｓＬバリアントは、配列番号１１２の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドを含み、ａａ１からａａ５０までで１つ以上のａａ置換を保有する。そのようなＦａｓＬバリアントは、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つのａａのＡｌａまたはＧｌｙでの置換を含み得る。

ＦａｓＬバリアントは、配列番号１１２の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドを含み、ａａ５１から１００までで１つ以上のａａ置換を保有する。そのようなＦａｓＬバリアントは、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つのａａのＡｌａまたはＧｌｙでの置換を含み得る。

ＦａｓＬバリアントは、配列番号１１２の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドを含み、ａａ１０１から１５０までで１つ以上のａａ置換を保有する。そのようなＦａｓＬバリアントは、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つのａａのＡｌａまたはＧｌｙでの置換を含み得る。

ＦａｓＬバリアントは、配列番号１１２の少なくとも８０（例えば、少なくとも１００、１１０、１２０、または１３０）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドを含み、ａａ１５１から１７０までで１つ以上のａａ置換を保有する。そのようなＦａｓＬバリアントは、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つのａａのＡｌａまたはＧｌｙでの置換を含み得る。
任意のＡｌａまたはＧｌｙ置換とは独立して、またはそれに加えて、上記のＦａｓＬバリアントのいずれかは、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つの正に荷電したａａのＡｓｐ（Ｄ）またはＧｌｕ（Ｅ）での置換、及び／または少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つの負に帯電したａａのＡｒｇ（Ｒ）またはＬｙｓ（Ｋ）残基での置換を含み得る。

ｄ．ＰＤ－Ｌ１及びそのバリアント
１つの非限定的な例として、Ｔ細胞－ＭＰに存在するｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤは、ＰＤ－Ｌ１またはバリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドである。野生型ＰＤ－Ｌ１は、ＰＤ１及びＣＤ８０（Ｂ７－１としても知られている）に結合する。ｗｔ．ヒトＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、以下のａａ配列：ＭＲＩＦＡＶＦＩＦＭ ＴＹＷＨＬＬＮＡＦＴ ＶＴＶＰＫＤＬＹＶＶ ＥＹＧＳＮＭＴＩＥＣ ＫＦＰＶＥＫＱＬＤＬ ＡＡＬＩＶＹＷＥＭＥ ＤＫＮＩＩＱＦＶＨＧ ＥＥＤＬＫＶＱＨＳＳ ＹＲＱＲＡＲＬＬＫＤ ＱＬＳＬＧＮＡＡＬＱ ＩＴＤＶＫＬＱＤＡＧ ＶＹＲＣＭＩＳＹＧＧ ＡＤＹＫＲＩＴＶＫＶ ＮＡＰＹＮＫＩＮＱＲ ＩＬＶＶＤＰＶＴＳＥ ＨＥＬＴＣＱＡＥＧＹ ＰＫＡＥＶＩＷＴＳＳ ＤＨＱＶＬＳＧＫＴＴ ＴＴＮＳＫＲＥＥＫＬ ＦＮＶＴＳＴＬＲＩＮ ＴＴＴＮＥＩＦＹＣＴ ＦＲＲＬＤＰＥＥＮＨ ＴＡＥＬＶＩＰＧＮＩ ＬＮＶＳＩＫＩＣＬＴ ＬＳＰＳＴ（配列番号１１４）（ａａ１～１８は、シグナル配列を形成し、ａａ１９～１２７は、Ｉｇ様Ｖ型またはＩｇＶドメインを形成し、１３３～２２５は、Ｉｇ様Ｃ２型ドメインを形成する）を含み得る。

ｗｔ．ヒトＰＤ－Ｌ１エクトドメインは、以下のａａ配列：ＦＴ ＶＴＶＰＫＤＬＹＶＶ ＥＹＧＳＮＭＴＩＥＣ ＫＦＰＶＥＫＱＬＤＬ ＡＡＬＩＶＹＷＥＭＥ ＤＫＮＩＩＱＦＶＨＧ ＥＥＤＬＫＶＱＨＳＳ ＹＲＱＲＡＲＬＬＫＤ ＱＬＳＬＧＮＡＡＬＱ ＩＴＤＶＫＬＱＤＡＧ ＶＹＲＣＭＩＳＹＧＧ ＡＤＹＫＲＩＴＶＫＶ ＮＡＰＹＮＫＩＮＱＲ ＩＬＶＶＤＰＶＴＳＥ ＨＥＬＴＣＱＡＥＧＹ ＰＫＡＥＶＩＷＴＳＳ ＤＨＱＶＬＳＧＫＴＴ ＴＴＮＳＫＲＥＥＫＬ ＦＮＶＴＳＴＬＲＩＮ ＴＴＴＮＥＩＦＹＣＴ ＦＲＲＬＤＰＥＥＮＨ ＴＡＥＬＶＩＰＧＮＩ ＬＮＶＳＩＫＩ（配列番号１１５）（ａａ１～１０９は、Ｉｇ様Ｖ型または「ＩｇＶ」ドメインを形成し、ａａ１１５～２０７は、Ｉｇ様Ｃ２型ドメインを形成する）を含み得る。

ＭＯＤとして使用するのに好適なｗｔ．ＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインは、配列番号１１４のａａ１８～１２７またはａａ１９～１２７、及びカルボキシル末端安定化配列、例えば、配列：

の最後の７ａａ（太字かつイタリック体）を含み得る。カルボキシル安定化配列が約ａａ１２２でヒスチジン（例えば、配列番号１１６のａａ１１７として現れるＴｙｒ（Ｙ）のおよそ５残基Ｃ末端側のヒスチジン）を含む場合、ヒスチジンは、ａａ８２及び８３（配列番号１１６における太字かつイタリック体（配列番号１１４のＱ１０７及びＬ１０６））で骨格アミドと安定化静電気的結合を形成し得る。代替手段として、安定化ジスルフィド結合は、ａａ８２または８３（配列番号１１４のＱ１０７及びＬ１０６）のうちの１つ及びａａ残基１２１、１２２、または１２３（配列番号１１４のａａ位置１３９～１４１と同等）のうちの１つを置換することによって形成され得る。

ｗｔ．ＰＤ－１ポリペプチドは、以下のａａ配列：ＰＧＷＦＬＤＳＰＤＲ ＰＷＮＰＰＴＦＳＰＡ ＬＬＶＶＴＥＧＤＮＡ ＴＦＴＣＳＦＳＮＴＳ ＥＳＦＶＬＮＷＹＲＭ ＳＰＳＮＱＴＤＫＬＡ ＡＦＰＥＤＲＳＱＰＧ ＱＤＣＲＦＲＶＴＱＬ ＰＮＧＲＤＦＨＭＳＶ ＶＲＡＲＲＮＤＳＧＴ ＹＬＣＧＡＩＳＬＡＰ ＫＡＱＩＫＥＳＬＲＡ ＥＬＲＶＴＥＲＲＡＥ ＶＰＴＡＨＰＳＰＳＰ ＲＰＡＧＱＦＱＴＬＶ ＶＧＶＶＧＧＬＬＧＳ ＬＶＬＬＶＷＶＬＡＶ ＩＣＳＲＡＡＲＧＴＩ ＧＡＲＲＴＧＱＰＬＫ ＥＤＰＳＡＶＰＶＦＳ ＶＤＹＧＥＬＤＦＱＷ ＲＥＫＴＰＥＰＰＶＰ ＣＶＰＥＱＴＥＹＡＴ ＩＶＦＰＳＧＭＧＴＳ ＳＰＡＲＲＧＳＡＤＧ ＰＲＳＡＱＰＬＲＰＥ ＤＧＨＣＳＷＰＬ（配列番号１１７）を含み得る。

いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド（例えば、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインのバリアント）は、配列番号１１４または配列番号１１５に示されるａａ配列を含むＰＤ－Ｌ１ポリペプチドの結合親和性と比較して、ＰＤ－１（例えば、配列番号１１７に示されるａａ配列を含むＰＤ－１ポリペプチド）に対する減少した結合親和性を示す。例えば、いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４または配列番号１１５に示されるａａ配列を含むＰＤ－Ｌ１ポリペプチドの結合親和性よりも少なくとも１０％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％超低い結合親和性でＰＤ－１（例えば、配列番号１１７に示されるａａ配列を含むＰＤ－１ポリペプチド）に結合する。

いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド（例えば、配列番号１１５またはそのＩｇＶドメインのバリアント）は、１ｎＭ～１ｍＭ（例えば、１ｎＭ～１０ｎＭ、１０ｎＭ～１００ｎＭ、１００ｎＭ～１μＭ、１μＭ～１０μＭ、１０μＭ～１００μＭ、または１００μＭ～１ｍＭ）であるＰＤ－１（例えば、配列番号１１７のもの）に対する結合親和性を有する。別の例として、いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド（例えば、配列番号１１５のバリアント）は、約１００ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約４０μＭ、約４０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭであるＰＤ１（例えば、配列番号１１７に示されるａａ配列を含むＰＤ１ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。

配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１４のａａ１９～１２７（ＩｇＶドメイン）、及び配列番号１１６のうちのいずれか１つの少なくとも８５個の連続ａａ（例えば、少なくとも９０、少なくとも９５、少なくとも１００、または少なくとも１０５個の連続ａａ）と９０％超（９５％、９８％または９９％）の配列同一性を有する配列に対する置換を含めて、ＭＯＤとして使用されるＰＤ－Ｌ１エクトドメイン配列において多数のａａ置換が生成され得る。置換には、ジスルフィド結合置換対Ｄ１０３Ｃ及びＧ３３Ｃ、または対Ｖ１０４及びＳ３４Ｃ（配列番号１１４に基づく）が含まれ得る。置換にはまた、塩橋形成置換対Ｑ１０７Ｄ及びＫ６２Ｒまたは対Ｑ１０７Ｄ及びＳ８０Ｒ（配列番号１１４に基づく）が含まれる。また、置換には、パイスタッキング置換Ｍ３６ＹまたはＭ３６Ｆ（配列番号１１４に基づく）が含まれる。ＰＤ－Ｌ１ ＭＯＤ配列は、配列番号１１５の少なくとも８５個の連続ａａ（例えば、少なくとも９０、少なくとも９５、少なくとも１００、または少なくとも１０５個の連続ａａ）を有する配列、及び少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つまたは少なくとも３つ）のジスルフィド、塩橋、及び／またはパイスタッキング置換を含み得る。ＰＤ－Ｌ１ ＭＯＤ配列は、配列番号１１４のａａ１９～１２７（ＩｇＶドメイン）の少なくとも８５個の連続ａａ（例えば、少なくとも９０、少なくとも９５、少なくとも１００、または少なくとも１０５個の連続ａａ）を有する配列、及び少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つまたは少なくとも３つ）のジスルフィド、塩橋、及び／またはパイスタッキング置換を含み得る。ＰＤ－Ｌ１ ＭＯＤ配列は、ａａ配列番号１１６の少なくとも８５個の連続ａａ（例えば、少なくとも９０、少なくとも９５、少なくとも１００、または少なくとも１０５個の連続ａａ）を有する配列、及び少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つまたは少なくとも３つ）のジスルフィド、塩橋、及び／またはパイスタッキング置換を含み得る。

いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインに示されるＰＤ－Ｌ１のａａ配列と比較して単一のａａ置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインに示されるＰＤ－Ｌ１のａａ配列と比較して２ａａ～１０ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインに示されるＰＤ－Ｌ１のａａ配列と比較して２ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインに示されるＰＤ－Ｌ１のａａ配列と比較して３ａａまたは４ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインに示されるＰＤ－Ｌ１のａａ配列と比較して５ａａまたは６ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインに示されるＰＤ－Ｌ１のａａ配列と比較して７ａａまたは８ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチドは、配列番号１１４、配列番号１１５またはＰＤ－Ｌ１のＩｇＶドメインに示されるＰＤ－Ｌ１のａａ配列と比較して９ａａまたは１０ａａの置換を有する。

好適なバリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド配列には、配列番号１１５の少なくとも１７０個の連続ａａ（例えば、少なくとも１８０、１９０または２００個の連続ａａ）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列（例えば、少なくとも１つのａａ挿入、欠失または置換を有する）が含まれる。好適なバリアントＰＤ－Ｌ１のＩｇＶポリペプチド配列には、配列番号１１５のａａ１～１０９の少なくとも７０個の連続ａａ（例えば、少なくとも８０、９０、１００または１０５個の連続ａａ）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列（例えば、少なくとも１つのａａ挿入、欠失または置換を有する）が含まれる。

バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド配列には、ａａ８におけるＡｓｐ、ａａ３６におけるＩｌｅ、及び／またはａａ５４におけるＧｌｕのうちの１つ以上（２つ以上、または３つすべて）の置換を含む、配列番号１１５の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１１０、１２０、１５０、１８０、１９０、２００、２１０、または２１９）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列が含まれる。

バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド配列には、配列番号１１５の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１１０、１２０、１５０、１８０、１９０、２００、２１０、または２１９）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列であって、位置８におけるａａは、Ｄ以外のａａである、ポリペプチド配列が含まれる。１つの場合では、Ｄ８の位置は、Ａｌａによって置換される。別のそのような実施形態では、Ｄ８の位置は、Ａｒｇによって置換される。

バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド配列には、配列番号１１５の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１１０、１２０、１５０、１８０、１９０、２００、２１０、または２１９）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列であって、位置３６におけるａａは、Ｉ以外のａａである、ポリペプチド配列が含まれる。１つの場合では、Ｉ３６の位置は、Ａｌａによって置換される。別のそのような実施形態では、Ｉ３６の位置は、Ａｓｐによって置換される。
バリアントＰＤ－Ｌ１ポリペプチド配列にはまた、配列番号１１５の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１１０、１２０、１５０、１８０、１９０、２００、２１０、または２１９）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチド配列であって、位置５４におけるａａは、Ｅ以外のａａである、ポリペプチド配列が含まれる。１つの場合では、Ｅ５４の位置は、Ａｌａによって置換される。別のそのような実施形態では、Ｅ５４は、Ａｒｇによって置換される。

ｅ．ＣＤ８０及びそのバリアント
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、バリアントＣＤ８０ポリペプチドである。野生型ＣＤ８０は、ＣＤ２８に結合する。
ヒトＣＤ８０のエクトドメインのｗｔ．ａａ配列は、以下のとおりであり得る：ＶＩＨＶＴＫ ＥＶＫＥＶＡＴＬＳＣ ＧＨＮＶＳＶＥＥＬＡ ＱＴＲＩＹＷＱＫＥＫ ＫＭＶＬＴＭＭＳＧＤ ＭＮＩＷＰＥＹＫＮＲ ＴＩＦＤＩＴＮＮＬＳ ＩＶＩＬＡＬＲＰＳＤ ＥＧＴＹＥＣＶＶＬＫ ＹＥＫＤＡＦＫＲＥＨ ＬＡＥＶＴＬＳＶＫＡ ＤＦＰＴＰＳＩＳＤＦ ＥＩＰＴＳＮＩＲＲＩ ＩＣＳＴＳＧＧＦＰＥ ＰＨＬＳＷＬＥＮＧＥ ＥＬＮＡＩＮＴＴＶＳ ＱＤＰＥＴＥＬＹＡＶ ＳＳＫＬＤＦＮＭＴＴ ＮＨＳＦＭＣＬＩＫＹ ＧＨＬＲＶＮＱＴＦＮ ＷＮＴＴＫＱＥＨＦＰ ＤＮ（配列番号１１８）。ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００５１８２．１を参照されたい。ｗｔ．ヒトＣＤ８０のＩｇＶドメインのａａ配列は、以下のとおりであり得る：ＶＩＨＶＴＫ ＥＶＫＥＶＡＴＬＳＣ ＧＨＮＶＳＶＥＥＬＡ ＱＴＲＩＹＷＱＫＥＫ ＫＭＶＬＴＭＭＳＧＤ ＭＮＩＷＰＥＹＫＮＲ ＴＩＦＤＩＴＮＮＬＳ ＩＶＩＬＡＬＲＰＳＤ ＥＧＴＹＥＣＶＶＬＫ ＹＥＫＤＡＦＫＲＥＨ ＬＡＥＶＴＬＳＶ（配列番号１１９）（配列番号１１８のａａ１～１０４である）。

ｗｔ．ＣＤ２８のａａ配列は、以下のとおりであり得る：ＭＬＲＬＬＬＡＬＮＬ ＦＰＳＩＱＶＴＧＮＫ ＩＬＶＫＱＳＰＭＬＶ ＡＹＤＮＡＶＮＬＳＣ ＫＹＳＹＮＬＦＳＲＥ ＦＲＡＳＬＨＫＧＬＤ ＳＡＶＥＶＣＶＶＹＧ ＮＹＳＱＱＬＱＶＹＳ ＫＴＧＦＮＣＤＧＫＬ ＧＮＥＳＶＴＦＹＬＱ ＮＬＹＶＮＱＴＤＩＹ ＦＣＫＩＥＶＭＹＰＰ ＰＹＬＤＮＥＫＳＮＧ ＴＩＩＨＶＫＧＫＨＬ ＣＰＳＰＬＦＰＧＰＳ ＫＰＦＷＶＬＶＶＶＧ ＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶ ＴＶＡＦＩＩＦＷＶＲ ＳＫＲＳＲＬＬＨＳＤ ＹＭＮＭＴＰＲＲＰＧ ＰＴＲＫＨＹＱＰＹＡ ＰＰＲＤＦＡＡＹＲＳ（配列番号１２０）。

ｗｔ．ＣＤ２８のａａ配列は、以下のとおりであり得る：ＭＬＲＬＬＬＡＬＮＬ ＦＰＳＩＱＶＴＧＮＫ ＩＬＶＫＱＳＰＭＬＶ ＡＹＤＮＡＶＮＬＳＷ ＫＨＬＣＰＳＰＬＦＰ ＧＰＳＫＰＦＷＶＬＶ ＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳ ＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦ ＷＶＲＳＫＲＳＲＬＬ ＨＳＤＹＭＮＭＴＰＲ ＲＰＧＰＴＲＫＨＹＱ ＰＹＡＰＰＲＤＦＡＡ ＹＲＳ（配列番号１２１）

ｗｔ．ＣＤ２８のａａ配列は、以下のとおりであり得る：ＭＬＲＬＬＬＡＬＮＬ ＦＰＳＩＱＶＴＧＫＨ ＬＣＰＳＰＬＦＰＧＰ ＳＫＰＦＷＶＬＶＶＶ ＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬ ＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ ＲＳＫＲＳＲＬＬＨＳ ＤＹＭＮＭＴＰＲＲＰ ＧＰＴＲＫＨＹＱＰＹ ＡＰＰＲＤＦＡＡＹＲ Ｓ（配列番号１２２）。

いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、ＣＤ２８に対する、配列番号１１８、またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９に示されるａａ配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの結合親和性と比較して、ＣＤ２８に対する減少した結合親和性を示す。例えば、いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、ＣＤ２８（例えば、配列番号１２０、配列番号１２１、または配列番号１２２のうちの１つに示されるａａ配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する配列番号１１８に示されるａａ配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの結合親和性よりも少なくとも１０％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％超低い結合親和性でＣＤ２８に結合する。

いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、１００ｎＭ～１００μＭであるＣＤ２８に対する結合親和性を有する。別の例として、いくつかの場合では、本開示のバリアントＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約４０μＭ、約４０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭであるＣＤ２８（例えば、配列番号１２０、配列番号１２１、または配列番号１２２に示されるａａ配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。

いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して単一のａａ置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して１～１０ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して１ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して２ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して３ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して４ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して５ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して６または７ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１１８または１１９に示されるＣＤ８０のａａ配列と比較して８、９、または１０ａａの置換を有する。

少なくとも１つのａａ置換を有するいくつかのＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有するものが含まれる。

いくつかの好適なＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、かつ以下のものを含む約残基１９から約残基６７までのその配列における少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１９におけるａａは、Ｎ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｎ１９の位置は、Ａｌａによって置換される。別のそのような実施形態では、Ｎ１９は、Ａｒｇによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置２５におけるａａは、Ｌ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｌ２５の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置３１におけるａａは、Ｙ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｙ３１の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置３３におけるａａは、Ｑ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｑ３３の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置３８におけるａａは、Ｍ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つのそのような実施形態では、Ｍ３８の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置３９におけるａａは、Ｖ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｖ３９の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置４９におけるａａは、Ｉ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｉ４９の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置５３におけるａａは、Ｙ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｙ５３の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置６０におけるａａは、Ｄ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｄ６０の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置６３におけるａａは、Ｎ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｎ６３の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置６７におけるａａは、Ｉ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｉ６７の位置は、Ａｌａによって置換される。

いくつかの好適なＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、かつ以下のものを含む約残基８６から約残基１１８までのその配列における少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置８６におけるａａは、Ｋ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｋ８６の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１１９におけるａａは、Ｆ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｆ１１９の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１１８におけるａａは、Ｐ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｐ１１８の位置は、Ａｌａによって置換される。

いくつかの好適なＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、かつ以下のものを含む、約残基１５６から約残基１５８までのその配列における少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１５６におけるａａは、Ｓ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、ａａ１５６の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１５７におけるａａは、Ｑ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、ａａ１５７の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０エクトドメインバリアントには、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０４、１２０、１５０、１８０、２００、または２０８）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１５８におけるａａは、Ｄ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、ａａ１５８の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８０バリアントは、配列番号１１８またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１１９の少なくとも８０（例えば、９０、１００、１１０、１２０、１３０または１３３）個の連続ａａと少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むポリペプチドを含み、ＣＤ８０バリアントＭＯＤの表に示されるＣＤ８０配列バリエーションのうちの少なくとも１つを含む。

ｆ．ＣＤ８６及びそのバリアント
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、バリアントＣＤ８６ポリペプチドである。野生型ＣＤ８６は、ＣＤ２８に結合する。

ｗｔ．ヒトＣＤ８６の全エクトドメインのａａ配列は、以下のとおりであり得る：

ｗｔ．ヒトＣＤ８６のＩｇＶドメインのａａ配列は、以下のとおりであり得る：

いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、ＣＤ２８についての配列番号１２３または配列番号１２４に示されるａａ配列を含むＣＤ８６ポリペプチドの結合親和性と比較して、ＣＤ２８に対する減少した結合親和性を示す。例えば、いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、ＣＤ２８（例えば、配列番号１２０、配列番号１２１、または配列番号１２２のうちの１つに示されるａａ配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する配列番号１２３または配列番号１２４に示されるａａ配列を含むＣＤ８６ポリペプチドの結合親和性よりも少なくとも１０％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％超低い結合親和性でＣＤ２８に結合する。

いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、１００ｎＭ～１００μＭであるＣＤ２８に対する結合親和性を有する。別の例として、いくつかの場合では、本開示のバリアントＣＤ８６ポリペプチドは、約１００ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約４０μＭ、約４０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭであるＣＤ２８（例えば、配列番号１２０、配列番号１２１、または配列番号１２２のうちの１つに示されるａａ配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。

いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３または１２４に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して単一のａａ置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して２～１０ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３または１２４に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して２ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３または１２４に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して３ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３または１２４に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して４ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３または１２４に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して５ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３または１２４に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して６または７ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアントＣＤ８６ポリペプチドは、配列番号１２３または１２４に示されるＣＤ８６のａａ配列と比較して８、９、または１０ａａの置換を有する。

少なくとも１つのａａ置換を有するいくつかのＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３またはＩｇＶドメイン配列の配列番号１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有するものが含まれる。好適なＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号８１２３または１２４と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、かつ以下のものを含む、約残基３３から約残基１１０までのその配列における少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。

ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置３３におけるａａは、Ｆ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｆ３３の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置３５におけるａａは、Ｑ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｑ３５の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置４１におけるａａは、Ｖ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｖ４１の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置５９におけるａａは、Ｙ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｙ５９の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置６１におけるａａは、Ｎ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｎ６１の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置６６におけるａａは、Ｄ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｄ６６の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置７０におけるａａは、Ｗ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｗ７０の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置７２におけるａａは、Ｌ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｌ７２の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置９１におけるａａは、Ｈ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｈ９１の位置は、Ａｌａによって置換される。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１１０におけるａａは、Ｌ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｌ１１０の位置は、Ａｌａによって置換される。

ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、Ｎ６１は、Ａｓｎ以外のａａであり、Ｈ９１は、Ｈｉｓ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。実施形態では、Ａｓｎ６１及びＨｉｓ９１の両方の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｎ６１Ａ、及びＨ９１Ａ置換）。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、Ｄ６６は、Ａｓｐ以外のａａであり、Ｈ９１は、Ｈｉｓ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。実施形態では、Ａｓｐ６６及びＨｉｓ９１の両方の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｄ６６Ａ及びＨ９１Ａ置換）。ＣＤ８６エクトドメインバリアントには、配列番号１２３または１２４の少なくとも８０（例えば、少なくとも９０、１００、または１０９、１２０、１５０、１８０、２００、または２２４）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、Ｎ６１は、Ａｓｎ以外のａａであり、Ｄ６６は、Ａｓｐ以外のａａであり、Ｈ９１は、Ｈｉｓ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ａｓｎ６１、Ａｓｐ６６及びＨｉｓ９１の位置は、Ａｌａによって置換される（Ｎ６１Ａ、Ｄ６６Ａ及びＨ９１Ａ置換）。

ｇ．４－１ＢＢＬ及びそのバリアント
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドである。野生型４－１ＢＢＬは、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）に結合する。

ｗｔ．４－１ＢＢＬのａａ配列は、以下のとおりであり得る：ＭＥＹＡＳＤＡＳＬＤ ＰＥＡＰＷＰＰＡＰＲ ＡＲＡＣＲＶＬＰＷＡ ＬＶＡＧＬＬＬＬＬＬ ＬＡＡＡＣＡＶＦＬＡ ＣＰＷＡＶＳＧＡＲＡ ＳＰＧＳＡＡＳＰＲＬ ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤ ＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧ ＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶ ＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹ ＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬ ＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴ ＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶ ＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲ ＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳ ＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬ ＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡ ＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳ ＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱ ＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱ ＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡ ＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱ ＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶ ＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳ ＰＲＳＥ（配列番号１２５）。ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００３８０２．１（ａａ２９～４９は、膜貫通領域である）。

いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、ヒト４－１ＢＢＬの腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）相同性ドメイン（ＴＨＤ）のバリアントである。ヒト４－１ＢＢＬのＴＨＤのｗｔ．ａａ配列は、例えば、以下のように、配列番号１２６～１２８のうちの１つを含み得る：
ＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧ ＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶ ＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹ ＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬ ＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴ ＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶ ＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲ ＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳ ＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬ ＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡ ＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳ ＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱ ＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱ ＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡ ＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱ ＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶ ＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳ ＰＲＳＥ（配列番号１２６）；
Ｄ ＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧ ＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶ ＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹ ＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬ ＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴ ＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶ ＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲ ＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳ ＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬ ＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡ ＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳ ＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱ ＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱ ＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡ ＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱ ＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶ ＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳ ＰＲＳＥ（配列番号１２７）；及び
Ｄ ＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧ ＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶ ＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹ ＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬ ＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴ ＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶ ＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲ ＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳ ＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬ ＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡ ＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳ ＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱ ＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱ ＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡ ＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱ ＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶ ＴＰＥＩＰＡ（配列番号１２８）。
ｗｔ．４－１ＢＢのａａ配列は、以下のとおりであり得る：ＭＧＮＳＣＹＮＩＶＡ ＴＬＬＬＶＬＮＦＥＲ ＴＲＳＬＱＤＰＣＳＮ ＣＰＡＧＴＦＣＤＮＮ ＲＮＱＩＣＳＰＣＰＰ ＮＳＦＳＳＡＧＧＱＲ ＴＣＤＩＣＲＱＣＫＧ ＶＦＲＴＲＫＥＣＳＳ ＴＳＮＡＥＣＤＣＴＰ ＧＦＨＣＬＧＡＧＣＳ ＭＣＥＱＤＣＫＱＧＱ ＥＬＴＫＫＧＣＫＤＣ ＣＦＧＴＦＮＤＱＫＲ ＧＩＣＲＰＷＴＮＣＳ ＬＤＧＫＳＶＬＶＮＧ ＴＫＥＲＤＶＶＣＧＰ ＳＰＡＤＬＳＰＧＡＳ ＳＶＴＰＰＡＰＡＲＥ ＰＧＨＳＰＱＩＩＳＦ ＦＬＡＬＴＳＴＡＬＬ ＦＬＬＦＦＬＴＬＲＦ ＳＶＶＫＲＧＲＫＫＬ ＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲ ＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧ ＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥ ＧＧＣＥＬ（配列番号１２９）。

いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２６～１２８のうちの１つに示されるａａ配列を含む４－１ＢＢＬポリペプチドの結合親和性と比較して、４－１ＢＢに対する減少した結合親和性を示す。例えば、いくつかの場合では、本開示のバリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、４－１ＢＢポリペプチド（例えば、配列番号１２９に示されるａａ配列を含む４－１ＢＢポリペプチド）に対する配列番号１２５～１２８のうちの１つに示されるａａ配列を含む４－１ＢＢＬポリペプチドの結合親和性よりも少なくとも１０％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％超低い結合親和性で４－１ＢＢに結合する。

いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、１００ｎＭ～１００μＭである４－１ＢＢに対する結合親和性を有する。別の例として、いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、約１００ｎＭ～約２００ｎＭ、約２００ｎＭ～約４００ｎＭ、約４００ｎＭ～約６００ｎＭ、約６００ｎＭ～約８００ｎＭ、約８００ｎＭ～約１μＭ、約１μＭ～約５μＭ、約５μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２０μＭ、約２０μＭ～約４０μＭ、約４０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭである４－１ＢＢ（例えば、配列番号１２９に示されるａａ配列を含む４－１ＢＢポリペプチド）に対する結合親和性を有する。

いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２６～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して単一のａａ置換を有する。いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２６～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して２～１０ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２５～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して２ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２６～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して３ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２６～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して４ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２６～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して５ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２５～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して６または７ａａの置換を有する。いくつかの場合では、バリアント４－１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号１２６～１２８のうちの１つに示される４－１ＢＢＬのａａ配列と比較して７、８または９ａａの置換を有する。

少なくとも１つのａａ置換を有するいくつかの４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有するものが含まれる。

好適な４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、残基１１から残基３０までのその配列における少なくとも１つのａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。残基１１から残基３０までで置換を有するいくつかの４－１ＢＢｌバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１１におけるａａは、Ｍ以外のａａであり、位置１２におけるａａは、Ｆ以外のａａであり、位置１４におけるａａは、Ｑ以外のａａであり、位置１５におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置１６におけるａａは、Ｖ以外のａａであり、位置１８におけるａａは、Ｑ以外のａａであり、位置１９におけるａａは、Ｎ以外のａａであり、位置２０におけるａａは、Ｖ以外のａａであり、位置２１におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置２２におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置２３におけるａａは、Ｉ以外のａａであり、位置２４におけるａａは、Ｄ以外のａａであり、位置２５におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置２６におけるａａは、Ｐ以外のａａであり、位置２７におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置２８におけるａａは、Ｓ以外のａａであり、位置２９におけるａａは、Ｗ以外のａａであり、または位置３０におけるａａは、Ｙ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、ａａ１１、１２、１４、１５、１６、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のうちの１つは、Ａｌａによって置換されている、ポリペプチドが含まれる。

好適な４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、残基３１から残基５０までのその配列における少なくとも１つのａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。残基３１から残基５０までで置換を有するいくつかの４－１ＢＢｌバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置３１におけるａａは、Ｓ以外のａａであり、位置３２におけるａａは、Ｄ以外のａａであり、位置３３におけるａａは、Ｐ以外のａａであり、位置３４におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置３５におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置３７におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置３８におけるａａは、Ｖ以外のａａであり、位置３９におけるａａは、Ｓ以外のａａであり、位置４０におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置４１におけるａａは、Ｔ以外のａａであり、位置４２におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置４３におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置４４におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置４５におけるａａは、Ｓ以外のａａであり、位置４６におけるａａは、Ｙ以外のａａであり、位置４７におけるａａは、Ｋ以外のａａであり、位置４８におけるａａは、Ｅ以外のａａであり、位置４９におけるａａは、Ｄ以外のａａであり、または位置５０におけるａａは、Ｔ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。

好適な４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、残基５１から残基７８までのその配列における少なくとも１つのａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。残基５１から残基７８までで置換を有するいくつかの４－１ＢＢｌバリアントには、以下のものが含まれる。４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、ａａ３１、３２、３３、３４、３５、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０のうちの１つは、Ａｌａによって置換されている、ポリペプチドが含まれる。

好適な４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、残基５１から残基１００までのその配列における少なくとも１つのａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。残基５１から残基１００までで置換を有するいくつかの４－１ＢＢｌバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置５１におけるａａは、Ｋ以外のａａであり、位置５２におけるａａは、Ｅ以外のａａであり、位置６５におけるａａは、Ｆ以外のａａであり、位置６６におけるａａは、Ｑ以外のａａであり、位置６７におけるａａは、以外のａａであり、位置６８におけるａａは、Ｅ以外のａａであり、位置６９におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置７０におけるａａは、Ｒ以外のａａであり、位置７１におけるａａは、Ｒ以外のａａであり、位置７２におけるａａは、Ｖ以外のａａであり、位置７３におけるａａは、Ｖ以外のａａであり、位置７５におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置７６におけるａａは、Ｅ以外のａａであり、位置７７におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、または位置７８におけるａａは、Ｓ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、ａａ５１、５２、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７６、７７、または７８のうちの１つは、Ａｌａによって置換されている、ポリペプチドが含まれる。

好適な４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、残基１０３から残基１１７までのその配列における少なくとも１つのａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。残基１０３から残基１１７までで置換を有するいくつかの４－１ＢＢｌバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１０３におけるａａは、Ｖ以外のａａであり、位置１０４におけるａａは、Ｄ以外のａａであり、位置１０５におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置１０６におけるａａは、Ｐ以外のａａであり、位置１０９におけるａａは、Ｓ以外のａａであり、位置１１０におけるａａは、Ｓ以外のａａであり、位置１１１におけるａａは、Ｅ以外のａａであり、位置１１３におけるａａは、Ｒ以外のａａであり、位置１２５におけるａａは、Ｎ以外のａａであり、または位置１１５におけるａａは、Ｓ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。１つの場合では、Ｓ１１５の位置は、Ａｌａによって置換されており、または位置１１７におけるａａは、Ｆ以外のａａである。

４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、ａａ１０３、１０４、１０５、１０６、１０９、１１０、１１１、１１３、１１４、１１５、または１１７のうちの１つは、Ａｌａによって置換されている、ポリペプチドが含まれる。

好適な４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のａａ配列同一性を有し、残基１３０から残基１５４までのその配列における少なくとも１つのａａ置換を有するポリペプチドが含まれる。残基１３０から残基１５４までで置換を有するいくつかの４－１ＢＢｌバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、位置１３０におけるａａは、Ｑ以外のａａであり、位置１３１におけるａａは、Ｒ以外のａａであり、位置１３２におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置１３３におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置１３４におけるａａは、Ｖ以外のａａであり、位置１３５におけるａａは、Ｈ以外のａａであり、位置１３６におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置１３７におけるａａは、Ｈ以外のａａであり、位置１３８におけるａａは、Ｔ以外のａａであり、位置１３９におけるａａは、Ｅ以外のａａであり、位置１４１におけるａａは、Ｒ以外のａａであり、位置１４３におけるａａは、Ｒ以外のａａであり、位置１４４におけるａａは、Ｈ以外のａａであり、位置１４６におけるａａは、Ｗ以外のａａであり、位置１４７におけるａａは、Ｑ以外のａａであり、位置１４８におけるａａは、Ｌ以外のａａであり、位置１４９におけるａａは、Ｔ以外のａａであり、位置１５０におけるａａは、Ｑ以外のａａであり、位置１５１におけるａａは、Ｇ以外のａａであり、位置１５３におけるａａは、Ｔ以外のａａであり、または位置１５４におけるａａは、Ｖ以外のａａである、ポリペプチドが含まれる。４－１ＢＢＬバリアントには、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドであって、ａａ１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４１、１４３、１４４、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５３、または１５４のうちの１つは、Ａｌａによって置換されている、ポリペプチドが含まれる。

４－１ＢＢＬバリアントは、配列番号１２６の少なくとも１４０（例えば、少なくとも１６０、１７５、１８０、または１８１）個の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）のａａ配列同一性を有するポリペプチドを含み、Ｌｙｓ以外のａａでのＫ４７（配列番号１２５のＫ１２７）の置換を含む。実施形態では、Ｋ４７は、Ｋ４７Ａ置換（配列番号１２６におけるＫ１２７Ａ置換）を形成するためにＡｌａで置換される。実施形態では、Ａｓｐ６６及びＨｉｓ９１の両方の位置は、Ａｌａによって置換される（例えば、配列番号１２６におけるＤ６６Ａ及びＨ９１Ａ置換）。

ｈ．抗ＣＤ２８
いくつかの場合では、ＣＤ２８に対して仕向けられた抗体または抗体配列（例えば、抗ＣＤ２８抗体、ＣＤ２８に結合する抗体断片、またはＣＤ２８に結合するｓｃＦｖ、ナノボディ、もしくはダイアボディ）がＴ細胞－ＭＰにおけるＭＯＤとして用いられ得る。抗ＣＤ２８抗体がＣＤ２８活性のスーパーアゴニスト、アゴニスト、またはアンタゴニストとして作用する能力が記載されている。例えば、Ｐｏｉｒｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，（２０１２）Ａｍｅｒ．Ｊ．ｏｆ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，“ＣＤ２８－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｗｈａｔ Ｃａｎ Ｂｅ Ｌｅａｒｎｅｄ Ｆｒｏｍ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｏｄｅｌｓ？”１２：１６８２－１６９０を参照されたい。アゴニストまたはスーパーアゴニストとして作用する抗ＣＤ２８抗体が特に興味深い。

抗ＣＤ２８抗体または抗ＣＤ２８配列は、任意の他のＭＯＤ配列の非存在下でＴ細胞－ＭＰに含まれ得る。代替的には、ＣＤ２８に対して仕向けられた抗体または抗体配列は、１つ以上の追加のＭＯＤ、またはバリアントＭＯＤと共にＴ細胞－ＭＰに組み込まれ得る。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰは、１つ以上（例えば、２つ）の４－１ＢＢＬ ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ、例えば、上述したものと共に１つ以上（例えば、２つ）の抗ＣＤ２８抗体または抗ＣＤ２８配列を含む。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰは、１つ以上（例えば、２つ）のＩＬ－２ ＭＯＤまたはバリアントＩＬ－２ ＭＯＤ、例えば、上述したものと共に１つ以上（例えば、２つ）の抗ＣＤ２８抗体または抗ＣＤ２８配列を含む。例えば、バリアントＩＬ－２ ＭＯＤにおける置換には、Ｆ４２ＡまたはＦ４２Ｔ置換と共にＨ１６ＡまたはＨ１６Ｔが含まれ得る。例として、Ｔ細胞－ＭＰは、Ｈ１６Ａ及び／またはＦ４２Ａ置換を含む１つ以上のバリアントＩＬ－２ ＭＯＤと共に１つ以上（例えば、２つ）の抗ＣＤ２８抗体または抗ＣＤ２８配列（例えば、抗ＣＤ２８ ｓｃＦｖ）を含み得る。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＣＤ２８抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＦＡＡＳＮＶＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＮＦＳＬＮＩＨＰＶＤＥＤＤＶＡ ＭＹＦＣＱＱＳＲＫＶＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号５５９）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＫＬＱＱＳＧＰＧＬＶＴＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＤＹＧＶＨＷＶＲＱＳＰＧＱＧＬＥＷＬＧＶＩＷＡＧＧＧＴＮＹＮＳＡＬＭＳＲＫＳＩＳＫＤＮＳＫＳＱＶＦＬＫＭＮＳＬＱＡＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＫＧＹＳＹＹＹＳＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５６０）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、Ｖ_Ｈ及びＶ_ＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＫａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、Ｖ_Ｈ及びＶ_ＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表、及びＣｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ ＣＤＲは、ＤＹＧＶＨ（ＶＨ ＣＤＲ１）（配列番号５６１）；ＶＩＷＡＧＧＧＴ ＮＹＮＳＡＬＭＳ（ＶＨ ＣＤＲ２）（配列番号５６２）；及びＤＫＧＹＳＹＹＹＳＭＤＹ（ＶＨ ＣＤＲ３）（配列番号５６３）である。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＣＤ２８抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＦ ＡＡＳＮＶＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＮＦＳＬＮＩＨＰＶＤＥＤＤＶＡＭＹＦＣＱＱＳＲＫＶＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号５５９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＫＬＱＱＳＧＰＧＬＶＴＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＤＹＧＶＨＷＶＲＱＳＰＧＱＧＬＥＷＬＧＶＩＷＡＧＧＧＴＮＹＮＳＡＬＭＳＲＫＳＩＳＫＤＮＳＫＳＱＶＦＬＫＭＮＳＬＱＡＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＫＧＹＳＹＹＹＳＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５６０）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＣＤ２８抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＦＡＡＳＮＶＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＮＦＳＬＮＩＨＰＶ ＤＥＤＤＶＡＭＹＦＣＱＱＳＲＫＶＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号５５９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＫＬＱＱＳＧＰＧＬＶＴＰＳＱ ＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＤＹＧＶＨＷＶＲＱＳＰＧＱＧＬＥＷＬＧＶＩＷＡＧＧＧＴＮＹＮＳＡＬＭＳＲＫＳＩＳＫＤＮＳＫＳＱＶＦＬＫＭＮＳＬＱＡＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＫＧＹＳＹＹＹＳＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５６０）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＣＤ２８抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＫＬＱＱＳＧＰＧＬＶＴＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＤＹＧＶＨＷＶＲＱＳＰＧＱＧ ＬＥＷＬＧＶＩＷＡＧＧＧＴＮＹＮＳＡＬＭＳＲＫＳＩＳＫＤＮＳＫＳＱＶＦＬＫＭＮＳＬＱＡＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＫＧＹＳＹＹＹＳＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５６０）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＦＡＡＳＮＶＥＳＧＶＰＡＲＦ ＳＧＳＧＳＧＴＮＦＳＬＮＩＨＰＶＤＥＤＤＶＡＭＹＦＣＱＱＳＲＫＶＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号５５９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

６ リンカー
Ｔ－細胞－ＭＰ（及びそれらのＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、例えば、
ｉ）β２Ｍポリペプチド配列のＮ末端側に配置された２つのＭＯＤポリペプチド（Ｌ１リンカーまたは位置と称される）；
（ｉｉ）ＭＯＤとβ２Ｍポリペプチド配列との間（Ｌ２リンカーまたは位置と称される）；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列とＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列との間（Ｌ３リンカーまたは位置と称される）；
（ｉｖ）ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列と骨格ポリペプチド配列との間（Ｌ４リンカーまたは位置と称される）；
（ｉｖ）骨格のカルボキシル末端または骨格ポリペプチド配列とそのカルボキシ末端に配置されたＭＯＤポリペプチド配列との間（Ｌ５リンカーまたは位置と称される）；または
（ｖｉ）骨格のカルボキシ側に配置された２つのＭＯＤポリペプチド配列の間（Ｌ６リンカーまたは位置と称される）
のうちの任意の１つ以上の間に介在する１つ以上の独立して選択されるリンカーポリペプチド配列を含み得る。
例えば、図５を参照されたい。

エピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）をカップリングするための化学的コンジュゲーション部位は、ＭＨＣ－Ｈとβ２Ｍポリペプチド配列との間のＬ３を含むリンカー（例えば、Ｌ１～Ｌ６リンカー）に組み込まれ得る。したがって、スルファターゼ、ソルターゼ、トランスグルタミナーゼ、セレノシステイン、非天然アミノ酸、及び天然に存在するタンパク質構成アミノ酸（例えば、システイン残基）等を含むがこれらに限定されない化学的コンジュゲーション部位は、Ｌ３リンカーを含むリンカーに組み込まれ得る。ＮまたはＣ末端のいずれかに配置されるポリペプチドリンカーは、追加のポリペプチド（例えば、ヒスチジンタグ）、ペイロード等をカップリングするための、及びエキソプロテアーゼからポリペプチドを保護するための箇所を提供する。

リンカーはまた、ペプチドエピトープと、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの化学的コンジュゲーション部位にペプチドエピトープをカップリングするために使用される任意の反応性化学的部位（基）との間で利用され得る（例えば、図１０を参照されたい）。エピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）と反応性化学的部位との間で利用されるリンカーは、ペプチド／ポリペプチドリンカー、及び／または他の化学的リンカー（例えば、スペーサーとしてアルキル基を含むホモまたはヘテロ２官能性リンカーの形態の非ペプチドリンカー、例えば、図１０のエントリｄ及びｅを参照されたい）であり得る。

好適なポリペプチドリンカー（「スペーサー」とも称される）は、容易に選択され得、多数の好適な長さ、例えば、１ａａ～５０ａａ、１ａａ～５ａａ、１ａａ～１５ａａ、２ａａ～１５ａａ、２ａａ～２５ａａ、３ａａ～１２ａａ、４ａａ～１０ａａ、４ａａ～３５ａａ、５ａａ～３５ａａ、５ａａ～１０ａａ、５ａａ～２０ａａ、６ａａ～２５ａａ、７ａａ～３５ａａ、８ａａ～４０ａａ、９ａａ～４５ａａ、１０～１５ａａ、１０ａａ～５０ａａ、１５～２０ａａ、２０～４０ａａ、または４０～５０ａａのいずれかのものであり得る。長さが１０～５０ａａの範囲の好適なポリペプチドリンカーは、１０～２０、１０～２５、１５～２５、２０～３０、２５～３５、２５～５０、３０～３５、３５～４５、または４０～５０であり得る）。実施形態では、好適なリンカーは、長さが１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０ａａであり得る。ポリペプチドリンカーは、長さが１５ａａ～５０ａａ、例えば、２０～３５、２５～３０、２５～４５、３０～３５、３５～４０、４０～４５、または４５～５０ａａの長さを有し得る。

Ｔ細胞－ＭＰにおけるポリペプチドリンカーには、例えば、ｉ）Ｇｌｙ及び／またはＳｅｒ；ｉｉ）Ａｌａ及びＳｅｒ；ｉｉｉ）Ｇｌｙ、Ａｌａ、及びＳｅｒ；ｉｖ）Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、及びＣｙｓ（例えば、単一のＣｙｓ残基）；ｖ）Ａｌａ、Ｓｅｒ、及びＣｙｓ（例えば、単一のＣｙｓ残基）；及びｖｉ）Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、及びＣｙｓ（例えば、単一のＣｙｓ残基）を含む、それから本質的になる、またはそれからなるポリペプチドが含まれ得る。例示的なリンカーは、グリシンポリマー、グリシン－セリンポリマー、グリシン－アラニンポリマー；アラニン－セリンポリマー（例えば、配列ＧＡ、ＡＧ、ＡＳ、ＳＡ、ＧＳ、ＧＳＧＧＳ（配列番号１３０）またはＧＧＧＳ（配列番号１３１）を含むポリマーを含む）（そのいずれかは、１～１０回繰り返され得る（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回繰り返される））；及び当該技術分野で知られている他のフレキシブルリンカーを含み得る。Ｇｌｙ及びＳｅｒの両方は、比較的非構造化され、そのため、成分間の中性繋ぎ部として機能し得るので、グリシン及びグリシン－セリンポリマーがいずれとも使用され得る。グリシンポリマーは、アラニンポリマーよりもさらに有意に多くのファイ－プサイ空間に近接し、より長い側鎖を有する残基よりもはるかに制限が少ない（Ｓｃｈｅｒａｇａ，Ｒｅｖ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｃｈｅｍ．１１１７３－１４２（１９９２）を参照されたい）。例示的なリンカーはまた、限定されないが、ＧＧＳＧ（配列番号１３２）、ＧＧＳＧＧ（配列番号１３３）、ＧＳＧＳＧ（配列番号１３４）、ＧＳＧＧＧ（配列番号１３５）、ＧＧＧＳＧ（配列番号１３６）、ＧＳＳＳＧ（配列番号１３７）（そのいずれかは、１～１５回繰り返され得る（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５回繰り返される））、またはそれらの組み合わせ等を含むａａ配列を含み得る。リンカーはまた、配列Ｇｌｙ（Ｓｅｒ）_４（配列番号１３８）または（Ｇｌｙ）_４Ｓｅｒ（配列番号１３９）を含み得、そのいずれかは、１～１０回（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回）繰り返され得る。実施形態では、リンカーは、Ｘ１－Ｘ２－Ｘ３－Ｘ４－Ｘ５（式中、Ｘ１～Ｘ５は、グリシン及びセリンから選択され、そのうち１つは、ロイシン、システイン、メチオニンまたはアラニンであり得る）（配列番号１４０）を含む。一実施形態では、リンカーは、１～１０回繰り返され得るａａ配列ＡＡＡＧＧ（配列番号５３２）を含む。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するリンカーポリペプチドには、別のＴ細胞－ＭＰに存在するシステイン残基とジスルフィド結合を形成し、またはエピトープのカップリング（例えば、マレイミドとの反応を介する）のための化学的コンジュゲーション部位として作用し得るシステイン残基が含まれる。いくつかの場合では、例えば、リンカーは、例えば、ａａ配列

（式中、Ｇ_４Ｓ単位は、１～１０回繰り返され得る（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回繰り返される））、

におけるＧｌｙ、Ｓｅｒ及び単一のＣｙｓを含む。

リンカーは、１～１０回繰り返され得る（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回繰り返される）ａａ配列（ＧＧＧＧＳ）（配列番号１３９、Ｇｌｙ_４ＳｅｒまたはＧ_４Ｓとしても表され得る）を含み得る。いくつかの実施形態では、Ｇ_４Ｓリピートを含むリンカーは、１つのグリシンまたはセリン残基がロイシンまたはメチオニンによって置き換えられる。システイン残基を含むＧｌｙ_４Ｓｅｒ含有リンカーポリペプチドを含む第１のＴ細胞－ＭＰは、第２のＴ細胞－ＭＰと二重体化された場合、二重体Ｔ細胞－ＭＰの第２のＴ細胞－ＭＰに存在するシステイン残基とジスルフィド結合を形成し得る。リンカー（特にＬ３リンカー）に存在するそのようなシステイン残基また、例えば、エピトープの一部である、またはエピトープにリンカーによって間接的に接続されたマレイミド官能基との反応によって、エピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）の結合のための化学的コンジュゲーション部位として利用され得る。いくつかの場合では、例えば、リンカーは、ａａ配列ＧＣＧＧＳ（Ｇ_４Ｓ）（配列番号１４１）（式中、Ｇ_４Ｓ単位は、１～１０回繰り返され得る（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回繰り返される））、

を含む。エピトープ、標的化配列及び／またはペイロード（例えば、薬物または標識剤）をＴ細胞－ＭＰ（そのペプチドリンカーを含む）に共有結合させるために使用され得る非ペプチドリンカーは、アルキル、ポリ（エチレングリコール）、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸に不安定な基、光に不安定な基、ペプチダーゼに不安定な基、及びエステラーゼに不安定な基を含むがこれらに限定されない多様な形態を取り得る。非ペプチドリンカー（または「架橋剤」）はまた、例えば、反応性末端基、例えば、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル、マレイミド、ヨード酢酸エステル等を含むホモ２官能性またはヘテロ２官能性リンカーであり得る。好適な架橋剤の例には、Ｎ－スクシンイミジル－［（Ｎ－マレイミドプロピオンアミド）－テトラエチレングリコール］エステル（ＮＨＳ－ＰＥＧ４－マレイミド）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）２－スルホブタノエート（スルホ－ＳＰＤＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）；Ｎ－スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシ－（６－アミドカプロエート）（ＬＣ－ＳＭＣＣ）；κ－マレイミドウンデカン酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＫＭＵＡ）；γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）；ε－マレイミドカプロン酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）；ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）；Ｎ－（α－マレイミドアセトキシ）－スクシンイミドエステル（ＡＭＡＳ）；スクシンイミジル－６－（β－マレイミドプロピオンアミド）ヘキサノエート（ＳＭＰＨ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（ｐ－マレイミドフェニル）ブチレート（ＳＭＰＢ）；Ｎ－（ｐ－マレイミドフェニル）イソシアネート（ＰＭＰＩ）；Ｎ－スクシンイミジル４（２－ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）；Ｎ－スクシンイミジル（４－ヨード－アセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）；６－マレイミドカプロイル（ＭＣ）；マレイミドプロパノイル（ＭＰ）；ｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）；Ｎ－スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシ－（６－アミドカプロエート）、ＳＭＣＣ（ＬＣ－ＳＭＣＣ）の「長鎖」アナログ；３－マレイミドプロパン酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＢＭＰＳ）；Ｎ－スクシンイミジルヨードアセテート（ＳＩＡ）；Ｎ－スクシンイミジルブロモアセテート（ＳＢＡ）；及びＮ－スクシンイミジル３－（ブロモアセタミド）プロピオネート（ＳＢＡＰ）が含まれる。

７ 追加のポリペプチド配列
Ｔ細胞－ＭＰのポリペプチド鎖には、上述したものに加えて１つ以上のポリペプチドが含まれ得る。好適な追加のポリペプチドには、エピトープタグ、親和性ドメイン、及び蛍光タンパク質配列（例えば、緑色蛍光タンパク質）が含まれる。１つ以上の追加のポリペプチド（複数可）は、多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖のＮ末端で、多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖のＣ末端で、または多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖内で内部に、細胞または無細胞システムによって翻訳されたポリペプチドの一部として含まれ得る。

ａ．エピトープタグ及び親和性ドメイン
好適なエピトープタグには、血球凝集素（ＨＡ；例えば、ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ（配列番号１４５））；ｃ－ｍｙｃ（例えば、ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ；配列番号１４６））等が含まれるがこれらに限定されない。

親和性ドメインには、例えば、同定または精製に有用な、固体支持体に固定化されたもの等の、結合パートナーと相互作用し得るペプチド配列が含まれる。複数の連続した単一アミノ酸、例えば、ヒスチジンをコードするＤＮＡ配列は、発現したタンパク質に融合された場合、樹脂カラム、例えば、ニッケルＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）への高い親和性結合によって組換えタンパク質の１工程精製のために使用され得る。例示的な親和性ドメインには、Ｈｉｓ５（ＨＨＨＨＨ）（配列番号１４７）、ＨｉｓＸ６（ＨＨＨＨＨＨ）（配列番号１４８）、Ｃ－ｍｙｃ（ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ）（配列番号１４６）、Ｆｌａｇ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ）（配列番号１４９、ＳｔｒｅｐＴａｇ（ＷＳＨＰＱＦＥＫ）（配列番号１５０）、血球凝集素（例えば、ＨＡタグ（ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ）（配列番号１４５））、グルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、セルロース結合ドメイン、ＲＹＩＲＳ（配列番号１５１）、Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｈｉｓ－Ｔｈｒ（配列番号１５２）、キチン結合ドメイン、Ｓ－ペプチド、Ｔ７ペプチド、ＳＨ２ドメイン、Ｃ末端ＲＮＡタグ、ＷＥＡＡＡＲＥＡＣＣＲＥＣＣＡＲＡ（配列番号１５３）、金属結合ドメイン（例えば、亜鉛結合ドメインまたはカルシウム結合ドメイン、例えば、カルシウム結合タンパク質、例えば、カルモジュリン、トロポニンＣ、カルシニューリンＢ、ミオシン軽鎖、リカバリン、Ｓ－モジュリン、ビシニン、ＶＩＬＩＰ、ニューロカルシン、ヒポカルシン、フリクエニン、カルトラクチン、カルパイン大サブユニット、Ｓ１００タンパク質、パルブアルブミン、カルビンジンＤ９Ｋ、カルビンジンＤ２８Ｋ、及びカルレチニンからのもの）、インテイン、ビオチン、ストレプトアビジン、ＭｙｏＤ、Ｉｄ、ロイシンジッパー配列、及びマルトース結合タンパク質が含まれる。

ｂ．標的化配列
本開示のＴ細胞－ＭＰには、１つ以上の標的化ポリペプチド配列（複数可）または「標的化配列（複数可）」が含まれ得る。標的化配列は、Ｔ細胞－ＭＰポリペプチド内のいずれかの箇所に、例えば、骨格ペプチドのカルボキシル末端内に、カルボキシル末端に、またはカルボキシル末端の近くに配置され得る（例えば、図５もしくは６におけるＣ末端ＭＯＤの代わりに骨格と共に翻訳されるまたはＬ５リンカーに結合される）。代替的には、標的化配列、例えば、抗体抗原結合断片（Ｆａｂ）は、Ｔ細胞－ＭＰに共有結合または非共有結合され得る。標的化配列の共有結合は、標的化配列が有効にＴ細胞－ＭＰに結合したペイロード様分子となる化学的コンジュゲーション部位（例えば、骨格ポリペプチドにおける化学的コンジュゲーション部位）で行われ得る。標的化配列はまた、Ｔ細胞－ＭＰに非共有結合され得る（例えば、ビオチン標識骨格を有するＴ細胞－ＭＰは、がん抗原に仕向けられたアビジン標識標的化抗体またはＦａｂに非共有結合され得る）。Ｔ細胞－ＭＰの一部（例えば、骨格）に仕向けられた第１の抗原結合部位を有する二重特異的抗体（例えば、二重特異的ＩｇＧまたはヒト化抗体）もまた、標的（例えば、がん抗原）に仕向けられた標的化配列（第２の二重特異的抗体結合部位）にＴ細胞－ＭＰを非共有結合させるために用いられ得る。標的化配列は、Ｔ細胞－ＭＰを、標的化配列が結合するタンパク質（または他の分子）を提示する細胞及び／または組織に結合させるまたは「局在化」させる役割を果たす。標的化配列は、抗体またはその抗原結合断片であり得る。標的化配列はまた、一本鎖Ｔ細胞受容体（ｓｃＴＣＲ）であり得る。

（ｉ）標的
本開示のＴ細胞－ＭＰに存在する標的化配列は、感染性生物及び／または感染した細胞の抗原を標的とし得る。１つの例では、標的化配列は、抗体または抗体の抗原結合断片を包含するポリペプチドであり得る。標的化配列は、例えば、細胞表面上に発現した感染性物質のそれらのタンパク質／エピトープを含む、感染性物質、例えば、ウイルス、細菌、真菌、原生動物、及び寄生蠕虫のタンパク質／エピトープに仕向けられ得る。例として、ＨＰＶに感染した細胞は、標的化配列が仕向けられ得るＥ６またはＥ７タンパク質またはその一部を発現し得る。標的化配列はまた、がん関連抗原（「ＣＡＡ」）、例えば、非固形がん（例えば、白血病）に関連する抗原及び／または固形腫瘍関連抗原に特異的ながん標的化ポリペプチド、または「ＣＴＰ」であり得る。１つの例では、標的化配列は、がん細胞の表面上のがん関連ペプチド／ＨＬＡ（ｐＨＬＡ）複合体に特異的であり、そのペプチドは、がん関連ペプチド（例えば、がん関連抗原のペプチド断片）であり得る。本開示のＴ細胞－ＭＰは、がん細胞上に存在するまたはＨＬＡタンパク質との関連でペプチドとして提示されるＣＡＡに結合する標的化配列を使用してがん細胞に標的化され得る。

（ａ）がん関連抗原（ＣＡＡ）
本開示のＴ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体、例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰに存在するＣＴＰで標的化され得るＣＡＡには、例えば、ＮＹ－ＥＳＯ（ニューヨーク食道扁平上皮癌１）、ＭＡＲＴ－１（Ｔ細胞１によって認識される黒色腫抗原、メラン－Ａとしても知られている）、ＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）Ｅ６、ＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤ１７１、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＥＡ（がん胎児性抗原）、ＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）、ＥＧＦＲｖＩＩＩ（上皮成長因子受容体バリアントＩＩＩ）、ＥｐＣＡＭ（上皮細胞接着分子）、ＥｐｈＡ２（エフリンＡ型受容体２）、ジシアロガングリオシドＧＤ２、ＧＰＣ３（グリピカン－３）、ＨＥＲ２、ＩＬ１３Ｒアルファ２（インターロイキン１３受容体サブユニットアルファ－２）、ＬｅＹ（ジフコシル化２型血液型関連抗原）、黒色腫関連抗原（黒色腫関連抗原遺伝子産物またはＭＡＧＥとしても知られている）Ａ３（ＭＡＧＥ Ａ３）、黒色腫糖タンパク質、メソテリン、ＭＵＣ１（ムチン１）、ＭＵＣ１６（ムチン１６）、ミエリン、ＮＫＧ２Ｄ（ナチュラルキラー群２Ｄ）リガンド、ＰＳＭＡ（前立腺特異的膜抗原）、及びＲＯＲ１（Ｉ型受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体）が含まれる。

Ｔ細胞－ＭＰに存在するＣＴＰで標的化され得るＣＡＡにはまた、１７－１Ａ－抗原、アルファ－フェトプロテイン（ＡＦＰ）、アルファ－アクチニン－４、Ａ３、Ａ３３抗体に特異的な抗原、ＡＲＴ－４、Ｂ７、Ｂａ７３３、ＢＡＧＥ、ｂｃｌ－２、ｂｃｌ－６、ＢＣＭＡ、ＢｒＥ３－抗原、ＣＡ１２５、ＣＡＭＥＬ、ＣＡＰ－１、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）、ＣＡＳＰ－８／ｍ、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２１、ＣＤ１、ＣＤ１ａ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ１１Ａ、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ５２、ＣＤ５４、ＣＤ５５、ＣＤ５９、ＣＤ６４、ＣＤ６６ａ－ｅ、ＣＤ６７、ＣＤ７０、ＣＤ７０Ｌ、ＣＤ７４、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８３、ＣＤ９５、ＣＤ１２３、ＣＤ１２６、ＣＤ１３２、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ＣＤ１４７、ＣＤ１５４、ＣＤ１７１、ＣＤＣ２７、ＣＤＫ－４／ｍ、ＣＤＫＮ２Ａ、ＣＥＡ、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＥＡＣＡＭ６、クローディン（例えば、クローディン－１、クローディン－１０、クローディン－１８（例えば、クローディン－１８、アイソフォーム２））、補体因子（例えば、Ｃ３、Ｃ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ及びＣ５）、結腸特異的抗原－ｐ（ＣＳＡｐ）、ｃ－Ｍｅｔ、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ７、ＣＸＣＬ１２、ＤＡＭ、Ｄｉｃｋｋｏｐｆ関連タンパク質（ＤＫＫ）、ＥＤ－Ｂフィブロネクチン、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＧＰ－１（ＴＲＯＰ－２）、ＥＧＰ－２、ＥＬＦ２－Ｍ、Ｅｐ－ＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、Ｆｌｔ－１、Ｆｌｔ－３、葉酸結合タンパク質、葉酸受容体、Ｇ２５０抗原、ガングリオシド（例えば、ＧＣ２、ＧＤ３及びＧＭ２）、ＧＡＧＥ、ＧＤ２、ｇｐ１００、ＧＰＣ３、ＧＲＯ－１３、ＨＬＡ－ＤＲ、ＨＭ１．２４、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）及びそのサブユニット、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＭＧＢ－１、低酸素誘導性因子（ＨＩＦ－１）、ＨＩＦ－１ａ、ＨＳＰ７０－２Ｍ、ＨＳＴ－２、Ｉａ、ＩＦＮ－ガンマ、ＩＦＮ－アルファ、ＩＦＮ－ベータ、ＩＦＮ－Ｘ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－１３Ｒ、ＩＬ１３Ｒアルファ２、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－１７Ｒ、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２３、ＩＬ－２５、ＩＬＧＦ、ＩＬＧＦ－１Ｒ、インスリン様成長因子－１（ＩＧＦ－１）、ＩＧＦ－１Ｒ、インテグリンαＶβ３、インテグリンα５β１、ＫＣ４－抗原、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）、Ｋｒａｓ、ＫＳ－１－抗原、ＫＳ１－４、ＬＤＲ／ＦＵＴ、レガンマ（Ｌｅｇａｍｍａ）、マクロファージ遊走阻害因子（ＭＩＦ）、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ－３、ＭＡＲＴ－１、ＭＡＲＴ－２、ｍＣＲＰ、ＭＣＰ－１、黒色腫糖タンパク質、メソテリン、ＭＩＰ－１Ａ、ＭＩＰ－１Ｂ、ＭＩＦ、ムチン（例えば、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＣ３、ＭＵＣ４、ＭＵＣ５ａｃ、ＭＵＣ１３、ＭＵＣ１６、ＭＵＭ－１／２及びＭＵＭ－３）、ＮＣＡ６６、ＮＣＡ９５、ＮＣＡ９０、ネクチン－４、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＡＭ４抗原、膵臓癌ムチン、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１受容体、胎盤成長因子、ｐ５３、ＰＬＡＧＬ２、前立腺酸ホスファターゼ（ＰＡＰ）、ＰＳＡ、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＭＡ、Ｐ１ＧＦ、ＲＳＳ、ＲＡＮＴＥＳ、ＳＡＧＥ、５１００、スルビビン、スルビビン－２Ｂ、Ｔ１０１、ＴＡＣ、ＴＡＧ－７２、テネイシン、トムソン・フリーデンレイチ抗原、Ｔｎ抗原、ＴＮＦ－アルファ、腫瘍壊死抗原、ＴＲＡＧ－３、ＴＲＡＩＬ受容体、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、ＶＥＧＦ受容体（ＶＥＧＦＲ）及びＷＴ－１が含まれるがこれらに限定されない。

Ｔ細胞－ＭＰのＣＴＰで標的化されるＣＡＡは、血液癌に関連する抗原であり得る。そのような抗原の例には、ＢＣＭＡ、Ｃ５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ６６、ＣＤ７４、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ１３８、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ４、ＤＫＫ、ＥｐｈＡ３、ＧＭ２、ＨＬＡ－ＤＲベータ、インテグリンαＶβ３、ＩＧＦ－Ｒ１、ＩＬ６、ＫＩＲ、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、トランスフェリン受容体、及びＶＥＧＦが含まれるがこれらに限定されない。いくつかの場合では、ＣＡＡは、悪性Ｂ細胞によって発現する抗原、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ７４、ＣＤ８０、ＣＴＬＡ－４、ＩＧＦ－Ｒ１、ＩＬ６、ＰＤ－１、ＴＲＡＩＬＲ２、またはＶＥＧＦである。

Ｔ細胞－ＭＰのＣＴＰで標的化されるＣＡＡは、固形腫瘍に関連し得る。そのような抗原の例には、ＣＡＩＸ、カドヘリン、ＣＥＡ、ｃ－ＭＥＴ、ＣＴＬＡ－４、ＥＧＦＲファミリーメンバー、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＡ３、ＦＡＰ、葉酸結合タンパク質、ＦＲ－アルファ、ガングリオシド（例えば、ＧＣ２、ＧＤ３及びＧＭ２）、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＩＧＦ－１Ｒ、インテグリンαＶβ３、インテグリンα５β１、レガンマ、Ｌｉｖ１、メソテリン、ムチン、ＮａＰｉ２ｂ、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１受容体、ｐｇＡ３３、ＰＳＭＡ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＲ１、ＴＡＧ－７２、テネイシン、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、及び上に列挙される他のものが含まれるがこれらに限定されない。

（ｂ）ペプチド／ＨＬＡ複合体
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体、例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰのＣＴＰは、がん細胞の表面上のペプチド／ＨＬＡ（ｐＨＬＡ）複合体を標的とし、そのペプチドは、がん関連ペプチド（例えば、がん関連抗原のペプチド断片）である。がん関連ペプチド抗原は、当該技術分野で知られている。いくつかの場合では、がん関連ペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合する。

いくつかの場合では、がん細胞の表面上のｐＨＬＡに存在するＣＡＡペプチドエピトープは、ＨＬＡ重鎖、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、Ａ＊０２０１、Ａ＊０３０１、Ａ＊１１０１、Ａ＊２３０１、Ａ＊２４０２、Ａ＊２４０７、Ａ＊３３０３、及び／またはＡ＊３４０１を含むＨＬＡ複合体に結合する。いくつかの場合では、がん細胞の表面上のｐＨＬＡに存在するペプチドエピトープは、ＨＬＡ重鎖、例えば、ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、Ｂ＊０８０１、Ｂ＊１５０２、Ｂ＊３８０２、Ｂ＊４００１、Ｂ＊４６０１、及び／またはＢ＊５３０１を含むＨＬＡ複合体に結合する。いくつかの場合では、がん細胞の表面上のｐＨＬＡに存在するペプチドエピトープは、ＨＬＡ重鎖、例えば、Ｃ＊０１０２、Ｃ＊０３０３、Ｃ＊０３０４、Ｃ＊０４０１、Ｃ＊０６０２、Ｃ＊０７０１、Ｃ＊７０２、Ｃ＊０８０１、及び／またはＣ＊１５０２を含むＨＬＡ複合体に結合する。

いくつかの場合では、ＣＡＡペプチドは、以下のがん関連抗原：ＣＤ２８ポリペプチド、ＭＵＣ１ポリペプチド、ＬＭＰ２ポリペプチド、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）ｖＩＩＩポリペプチド、ＨＥＲ－２／ｎｅｕポリペプチド、黒色腫抗原ファミリーＡ、３（ＭＡＧＥ Ａ３）ポリペプチド、ｐ５３ポリペプチド、変異体ｐ５３ポリペプチド、ＮＹ－ＥＳＯ－１ポリペプチド、葉酸ヒドロラーゼ（前立腺特異的膜抗原；ＰＳＭＡ）ポリペプチド、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）ポリペプチド、クローディンポリペプチド（例えば、クローディン－１、クローディン－１０、クローディン－１８（例えば、クローディン－１８、アイソフォーム２））、ネクチン－４ポリペプチド、Ｔ細胞によって認識される黒色腫抗原（メランＡ／ＭＡＲＴ１）ポリペプチド、Ｒａｓポリペプチド、ｇｐ１００ポリペプチド、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）ポリペプチド、ｂｃｒ－ａｂｌポリペプチド、チロシナーゼポリペプチド、スルビビンポリペプチド、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）ポリペプチド、ｈＴＥＲＴポリペプチド、肉腫転座切断点ポリペプチド、滑膜肉腫Ｘ（ＳＳＸ）切断点ポリペプチド、ＥｐｈＡ２ポリペプチド、酸ホスファターゼ、前立腺（ＰＡＰ）ポリペプチド、アポトーシスの黒色腫阻害因子（ＭＬ－ＩＡＰ）ポリペプチド、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）ポリペプチド、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ ＥＴＳ融合）ポリペプチド、ＮＡ１７ポリペプチド、対合ボックス３（ＰＡＸ３）ポリペプチド、未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）ポリペプチド、アンドロゲン受容体ポリペプチド、サイクリンＢ１ポリペプチド、Ｎ－ｍｙｃがん原遺伝子（ＭＹＣＮ）ポリペプチド、Ｒａｓホモログ遺伝子ファミリーメンバーＣ（ＲｈｏＣ）ポリペプチド、チロシナーゼ関連タンパク質－２（ＴＲＰ－２）ポリペプチド、メソテリンポリペプチド、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）ポリペプチド、黒色腫関連抗原－１（ＭＡＧＥ Ａ１）ポリペプチド、シトクロムＰ４５０ １Ｂ１（ＣＹＰ１Ｂ１）ポリペプチド、胎盤特異的タンパク質１（ＰＬＡＣ１）ポリペプチド、ＢＯＲＩＳポリペプチド（ＣＣＣＴＣ結合因子またはＣＴＣＦとしても知られている）、ＥＴＶ６－ＡＭＬポリペプチド、乳癌抗原ＮＹ－ＢＲ－１ポリペプチド（アンキリンリピートドメイン含有タンパク質３０Ａとも称される）、Ｇ－タンパク質シグナル伝達の制御因子（ＲＧＳ５）ポリペプチド、Ｔ細胞によって認識される扁平上皮癌抗原（ＳＡＲＴ３）ポリペプチド、炭酸脱水酵素ＩＸポリペプチド、対合ボックス５（ＰＡＸ５）ポリペプチド、ＯＹ－ＴＥＳ１（精巣抗原；アクロシン結合タンパク質としても知られている）ポリペプチド、精子タンパク質１７ポリペプチド、リンパ球細胞特異的タンパク質－チロシンキナーゼ（ＬＣＫ）ポリペプチド、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、Ａ－キナーゼ固定タンパク質－４（ＡＫＡＰ－４）、滑膜肉腫Ｘ切断点２（ＳＳＸ２）ポリペプチド、Ｘ抗原ファミリーメンバー１（ＸＡＧＥ１）ポリペプチド、Ｂ７ホモログ３（Ｂ７Ｈ３；ＣＤ２７６としても知られている）ポリペプチド、レグマインポリペプチド（ＬＧＭＮ１；アスパラギニルエンドペプチダーゼとしても知られている）、Ｉｇ及びＥＧＦ相同性ドメインを有するチロシンキナーゼ－２（Ｔｉｅ－２；アンジオポイエチン－１受容体としても知られている）ポリペプチド、Ｐ抗原ファミリーメンバー４（ＰＡＧＥ４）ポリペプチド、血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦ２）ポリペプチド、ＭＡＤ－ＣＴ－１ポリペプチド、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）ポリペプチド、血小板由来成長因子受容体ベータ（ＰＤＧＦβ）ポリペプチド、黒色腫がん精巣抗原－２（ＭＡＤ－ＣＴ－２）ポリペプチド、Ｆｏｓ関連抗原－１（ＦＯＳＬ）ポリペプチド；ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）抗原；アルファ－フェトプロテイン（ＡＦＰ）抗原；及びウィルムス腫瘍－１（ＷＴ１）抗原のいずれか１つの長さが約４ａａ～約２０ａａ（例えば、４ａａ～５ａａ、６ａａ～８ａａ、９ａａ～１１ａａ、１２ａａ～１６ａａ、または１６ａａ～２０ａａ）のペプチドである。

例えば、Ｔ細胞－ＭＰに存在するＣＴＰは、ａ）ＨＬＡ重鎖（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１重鎖またはＨＬＡ－Ａ＊２４０２重鎖）及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合したＷＴ－１ペプチド；ｂ）クラスＩ ＨＬＡ重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合したＨＰＶペプチド；ｃ）クラスＩ ＨＬＡ重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合したメソテリンペプチド；ｄ）クラスＩ ＨＬＡ重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合したＨｅｒ２ペプチド；またはｅ）クラスＩ ＨＬＡ重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合したＢＣＭＡペプチドに結合し得る。

ＣＡＡペプチドは、以下のメソテリンａａ配列：ＬＡＧＥ ＴＧＱＥＡＡＰＬＤＧ ＶＬＡＮＰＰＮＩＳＳ ＬＳＰＲＱＬＬＧＦＰ ＣＡＥＶＳＧＬＳＴＥ ＲＶＲＥＬＡＶＡＬＡ ＱＫＮＶＫＬＳＴＥＱ ＬＲＣＬＡＨＲＬＳＥ ＰＰＥＤＬＤＡＬＰＬ ＤＬＬＬＦＬＮＰＤＡ ＦＳＧＰＱＡＣＴＲＦ ＦＳＲＩＴＫＡＮＶＤ ＬＬＰＲＧＡＰＥＲＱ ＲＬＬＰＡＡＬＡＣＷ ＧＶＲＧＳＬＬＳＥＡ ＤＶＲＡＬＧＧＬＡＣ ＤＬＰＧＲＦＶＡＥＳ ＡＥＶＬＬＰＲＬＶＳ ＣＰＧＰＬＤＱＤＱＱ ＥＡＡＲＡＡＬＱＧＧ ＧＰＰＹＧＰＰＳＴＷ ＳＶＳＴＭＤＡＬＲＧ ＬＬＰＶＬＧＱＰＩＩ ＲＳＩＰＱＧＩＶＡＡ ＷＲＱＲＳＳＲＤＰＳ ＷＲＱＰＥＲＴＩＬＲ ＰＲＦＲＲＥＶＥＫＴ ＡＣＰＳＧＫＫＡＲＥ ＩＤＥＳＬＩＦＹＫＫ ＷＥＬＥＡＣＶＤＡＡ ＬＬＡＴＱＭＤＲＶＮ ＡＩＰＦＴＹＥＱＬＤ ＶＬＫＨＫＬＤＥＬＹ ＰＱＧＹＰＥＳＶＩＱ ＨＬＧＹＬＦＬＫＭＳ ＰＥＤＩＲＫＷＮＶＴ ＳＬＥＴＬＫＡＬＬＥ ＶＮＫＧＨＥＭＳＰＱ ＶＡＴＬＩＤＲＦＶＫ ＧＲＧＱＬＤＫＤＴＬ ＤＴＬＴＡＦＹＰＧＹ ＬＣＳＬＳＰＥＥＬＳ ＳＶＰＰＳＳＩＷＡＶ ＲＰＱＤＬＤＴＣＤＰ ＲＱＬＤＶＬＹＰＫＡ ＲＬＡＦＱＮＭＮＧＳ ＥＹＦＶＫＩＱＳＦＬ ＧＧＡＰＴＥＤＬＫＡ ＬＳＱＱＮＶＳＭＤＬ ＡＴＦＭＫＬＲＴＤＡ ＶＬＰＬＴＶＡＥＶＱ ＫＬＬＧＰＨＶＥＧＬ ＫＡＥＥＲＨＲＰＶＲ ＤＷＩＬＲＱＲＱＤＤ ＬＤＴＬＧＬＧＬＱＧ ＧＩＰＮＧＹＬＶＬＤ ＬＳＭＱＥＡＬＳＧＴ ＰＣＬＬＧＰＧＰＶＬ ＴＶＬＡＬＬＬＡＳＴ ＬＡ（配列番号１５４）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するメソテリンポリペプチドの長さが約４ａａ～約２０ａａ（例えば、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、または２０ａａ）を含み得る。例えば、ｐＨＬＡ複合体に存在するメソテリンペプチドは、ｉ）ＫＬＬＧＰＨＶＥＧＬ（配列番号１５５）；ｉｉ）ＨＬＡ－Ａ＊２４０２／β２Ｍに結合し得るＡＦＹＰＧＹＬＣＳＬ（配列番号１５６）；ｉｉｉ）ＶＬＰＬＴＶＡＥＶ（配列番号１５７）；ｉｖ）ＥＬＡＶＡＬＡＱＫ（配列番号１５８）；ｖ）ＡＬＱＧＧＧＰＰＹ（配列番号１５９）；ｖｉ）ＦＹＰＧＹＬＣＳＬ（配列番号１６０）；ｖｉｉ）ＬＹＰＫＡＲＬＡＦ（配列番号１６１）；ｖｉｉｉ）ＬＬＦＬＬＦＳＬＧＷＶＧＰＳＲ（配列番号１６２）；ｉｘ）ＶＮＫＧＨＥＭＳＰＱＡＰＲＲＰ（配列番号１６３）；ｘ）ＦＭＫＬＲＴＤＡＶＬＰＬＴＶＡ（配列番号１６４）；またはｘｉ）ＤＡＡＬＬＡＴＱＭＤ（配列番号１６５）であり得る。

ＣＡＡペプチドは、以下のＨｅｒ２（受容体チロシン－プロテインキナーゼｅｒｂＢ２）のａａ配列：ＭＥＬＡＡＬＣＲＷＧ ＬＬＬＡＬＬＰＰＧＡ ＡＳＴＱＶＣＴＧＴＤ ＭＫＬＲＬＰＡＳＰＥ ＴＨＬＤＭＬＲＨＬＹ ＱＧＣＱＶＶＱＧＮＬ ＥＬＴＹＬＰＴＮＡＳ ＬＳＦＬＱＤＩＱＥＶ ＱＧＹＶＬＩＡＨＮＱ ＶＲＱＶＰＬＱＲＬＲ ＩＶＲＧＴＱＬＦＥＤ ＮＹＡＬＡＶＬＤＮＧ ＤＰＬＮＮＴＴＰＶＴ ＧＡＳＰＧＧＬＲＥＬ ＱＬＲＳＬＴＥＩＬＫ ＧＧＶＬＩＱＲＮＰＱ ＬＣＹＱＤＴＩＬＷＫ ＤＩＦＨＫＮＮＱＬＡ ＬＴＬＩＤＴＮＲＳＲ ＡＣＨＰＣＳＰＭＣＫ ＧＳＲＣＷＧＥＳＳＥ ＤＣＱＳＬＴＲＴＶＣ ＡＧＧＣＡＲＣＫＧＰ ＬＰＴＤＣＣＨＥＱＣ ＡＡＧＣＴＧＰＫＨＳ ＤＣＬＡＣＬＨＦＮＨ ＳＧＩＣＥＬＨＣＰＡ ＬＶＴＹＮＴＤＴＦＥ ＳＭＰＮＰＥＧＲＹＴ ＦＧＡＳＣＶＴＡＣＰ ＹＮＹＬＳＴＤＶＧＳ ＣＴＬＶＣＰＬＨＮＱ ＥＶＴＡＥＤＧＴＱＲ ＣＥＫＣＳＫＰＣＡＲ ＶＣＹＧＬＧＭＥＨＬ ＲＥＶＲＡＶＴＳＡＮ ＩＱＥＦＡＧＣＫＫＩ ＦＧＳＬＡＦＬＰＥＳ ＦＤＧＤＰＡＳＮＴＡ ＰＬＱＰＥＱＬＱＶＦ ＥＴＬＥＥＩＴＧＹＬ ＹＩＳＡＷＰＤＳＬＰ ＤＬＳＶＦＱＮＬＱＶ ＩＲＧＲＩＬＨＮＧＡ ＹＳＬＴＬＱＧＬＧＩ ＳＷＬＧＬＲＳＬＲＥ ＬＧＳＧＬＡＬＩＨＨ ＮＴＨＬＣＦＶＨＴＶ ＰＷＤＱＬＦＲＮＰＨ ＱＡＬＬＨＴＡＮＲＰ ＥＤＥＣＶＧＥＧＬＡ ＣＨＱＬＣＡＲＧＨＣ ＷＧＰＧＰＴＱＣＶＮ ＣＳＱＦＬＲＧＱＥＣ ＶＥＥＣＲＶＬＱＧＬ ＰＲＥＹＶＮＡＲＨＣ ＬＰＣＨＰＥＣＱＰＱ ＮＧＳＶＴＣＦＧＰＥ ＡＤＱＣＶＡＣＡＨＹ ＫＤＰＰＦＣＶＡＲＣ ＰＳＧＶＫＰＤＬＳＹ ＭＰＩＷＫＦＰＤＥＥ ＧＡＣＱＰＣＰＩＮＣ ＴＨＳＣＶＤＬＤＤＫ ＧＣＰＡＥＱＲＡＳＰ ＬＴＳＩＩＳＡＶＶＧ ＩＬＬＶＶＶＬＧＶＶ ＦＧＩＬＩＫＲＲＱＱ ＫＩＲＫＹＴＭＲＲＬ ＬＱＥＴＥＬＶＥＰＬ ＴＰＳＧＡＭＰＮＱＡ ＱＭＲＩＬＫＥＴＥＬ ＲＫＶＫＶＬＧＳＧＡ ＦＧＴＶＹＫＧＩＷＩ ＰＤＧＥＮＶＫＩＰＶ ＡＩＫＶＬＲＥＮＴＳ ＰＫＡＮＫＥＩＬＤＥ ＡＹＶＭＡＧＶＧＳＰ ＹＶＳＲＬＬＧＩＣＬ ＴＳＴＶＱＬＶＴＱＬ ＭＰＹＧＣＬＬＤＨＶ ＲＥＮＲＧＲＬＧＳＱ ＤＬＬＮＷＣＭＱＩＡ ＫＧＭＳＹＬＥＤＶＲ ＬＶＨＲＤＬＡＡＲＮ ＶＬＶＫＳＰＮＨＶＫ ＩＴＤＦＧＬＡＲＬＬ ＤＩＤＥＴＥＹＨＡＤ ＧＧＫＶＰＩＫＷＭＡ ＬＥＳＩＬＲＲＲＦＴ ＨＱＳＤＶＷＳＹＧＶ ＴＶＷＥＬＭＴＦＧＡ ＫＰＹＤＧＩＰＡＲＥ ＩＰＤＬＬＥＫＧＥＲ ＬＰＱＰＰＩＣＴＩＤ ＶＹＭＩＭＶＫＣＷＭ ＩＤＳＥＣＲＰＲＦＲ ＥＬＶＳＥＦＳＲＭＡ ＲＤＰＱＲＦＶＶＩＱ ＮＥＤＬＧＰＡＳＰＬ ＤＳＴＦＹＲＳＬＬＥ ＤＤＤＭＧＤＬＶＤＡ ＥＥＹＬＶＰＱＱＧＦ ＦＣＰＤＰＡＰＧＡＧ ＧＭＶＨＨＲＨＲＳＳ ＳＴＲＮＭ（配列番号１６６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するメソテリンポリペプチドの長さが約４ａａ～約２０ａａ（例えば、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、または２０ａａ）を含み得る。

ＣＡＡペプチドは、以下のＢＣＭＡのａａ配列：ＭＬＱＭＡＧＱＣＳＱ ＮＥＹＦＤＳＬＬＨＡ ＣＩＰＣＱＬＲＣＳＳ ＮＴＰＰＬＴＣＱＲＹ ＣＮＡＳＶＴＮＳＶＫ ＧＴＮＡＩＬＷＴＣＬ ＧＬＳＬＩＩＳＬＡＶ ＦＶＬＭＦＬＬＲＫＩ ＳＳＥＰＬＫＤＥＦＫ ＮＴＧＳＧＬＬＧＭＡ ＮＩＤＬＥＫＳＲＴＧ ＤＥＩＩＬＰＲＧＬＥ ＹＴＶＥＥＣＴＣＥＤ ＣＩＫＳＫＰＫＶＤＳ ＤＨＣＦＰＬＰＡＭＥ ＥＧＡＴＩＬＶＴＴＫ ＴＮＤＹＣＫＳＬＰＡ ＡＬＳＡＴＥＩＥＫＳ ＩＳＡＲ（配列番号１６７）の一部と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するＢ細胞成熟タンパク質（ＢＣＭＰ）ポリペプチドの長さが約４ａａ～約２０ａａ（例えば、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、または２０ａａ）のペプチドを含み得る。

ＣＡＡペプチドは、以下のＷＴ－１のａａ配列：ＭＤＦＬＬＬＱＤＰＡ ＳＴＣＶＰＥＰＡＳＱ ＨＴＬＲＳＧＰＧＣＬ ＱＱＰＥＱＱＧＶＲＤ ＰＧＧＩＷＡＫＬＧＡ ＡＥＡＳＡＥＲＬＱＧ ＲＲＳＲＧＡＳＧＳＥ ＰＱＱＭＧＳＤＶＲＤ ＬＮＡＬＬＰＡＶＰＳ ＬＧＧＧＧＧＣＡＬＰ ＶＳＧＡＡＱＷＡＰＶ ＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡ ＹＧＳＬＧＧＰＡＰＰ ＰＡＰＰＰＰＰＰＰＰ ＰＨＳＦＩＫＱＥＰＳ ＷＧＧＡＥＰＨＥＥＱ ＣＬＳＡＦＴＶＨＦＳ ＧＱＦＴＧＴＡＧＡＣ ＲＹＧＰＦＧＰＰＰＰ ＳＱＡＳＳＧＱＡＲＭ ＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣ ＬＥＳＱＰＡＩＲＮＱ ＧＹＳＴＶＴＦＤＧＴ ＰＳＹＧＨＴＰＳＨＨ ＡＡＱＦＰＮＨＳＦＫ ＨＥＤＰＭＧＱＱＧＳ ＬＧＥＱＱＹＳＶＰＰ ＰＶＹＧＣＨＴＰＴＤ ＳＣＴＧＳＱＡＬＬＬ ＲＴＰＹＳＳＤＮＬＹ ＱＭＴＳＱＬＥＣＭＴ ＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬ ＫＧＨＳＴＧＹＥＳＤ ＮＨＴＴＰＩＬＣＧＡ ＱＹＲＩＨＴＨＧＶＦ ＲＧＩＱＤＶＲＲＶＰ ＧＶＡＰＴＬＶＲＳＡ ＳＥＴＳＥＫＲＰＦＭ ＣＡＹＰＧＣＮＫＲＹ ＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳ ＲＫＨＴＧＥＫＰＹＱ ＣＤＦＫＤＣＥＲＲＦ ＳＲＳＤＱＬＫＲＨＱ ＲＲＨＴＧＶＫＰＦＱ ＣＫＴＣＱＲＫＦＳＲ ＳＤＨＬＫＴＨＴＲＴ ＨＴＧＥＫＰＦＳＣＲ ＷＰＳＣＱＫＫＦＡＲ ＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭ ＨＱＲＮＭＴＫＬＱＬ ＡＬ（配列番号１６８）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するメソテリンポリペプチドの長さが約４ａａ～約２０ａａ（例えば、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、または２０ａａ）のペプチドを含み得る。

ＷＴ－１ペプチドの非限定的な例には、ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号３９７）、ＣＭＴＷＮＱＭＮ（配列番号４０３）、ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４００）、ＣＭＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧ（配列番号３６１）、ＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡＡ（配列番号３６２）、ＣＭＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧ（配列番号３６３）、ＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡＡ（配列番号３６４）、ＭＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶ（配列番号５３４）、ＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３６６）、ＣＭＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧ（配列番号３６７）、ＭＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶ（配列番号３６８）、ＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３６９）、ＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡＡ（配列番号３７０）、ＭＮＬＧＡＴＬＫ（配列番号３７１）、ＭＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶ（配列番号３７２）、ＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７３）、ＣＭＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７４）、ＣＭＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７５）、ＣＭＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７６）、ＧＹＬＲＮＰＴＡＣ（配列番号３７７）、ＧＡＬＲＮＰＴＡＬ（配列番号３７８）、ＹＡＬＲＮＰＴＡＣ（配列番号３７９）、ＧＬＬＲＮＰＴＡＣ（配列番号３８０）、ＲＹＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８１）、ＹＱＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８２）、ＲＬＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８３）、ＲＩＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８４）、ＱＦＰＮＨＳＦＫＨＥＤＰＭＧＱ（配列番号３８５）、ＨＳＦＫＨＥＤＰＹ（配列番号３８６）、ＱＦＰＮＨＳＦＫＨＥＤＰＭ（配列番号３８７）、ＱＦＰＮＨＳＦＫＨＥＤＰＹ（配列番号３８８）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＮＫ（配列番号３８９）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＹＫ（配列番号３９０）、ＦＭＣＡＹＰＧＣＹ（配列番号３９１）、ＦＭＣＡＹＰＧＣＫ（配列番号３９２）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＮＫＲＹ（配列番号３９３）、ＳＥＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＮＫ（配列番号３９４）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＹＫＲＹ（配列番号３９５）、ＮＬＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号３５９）、ＮＹＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号３６０）、及びセクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉ．（ｂ）に記述されるそれらのＷＴ－１ペプチドが含まれる。

いくつかの場合では、ＣＡＡペプチドは、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）ペプチドと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するＨＰＶポリペプチドの長さが約４ａａ～約２０ａａ（例えば、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、または２０ａａ）のペプチドである。ＨＰＶペプチドは、ＨＰＶ Ｅ６ポリペプチドまたはＨＰＶ Ｅ７ポリペプチドのペプチドであり得る。ＨＰＶエピトープは、例えば、ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８、ＨＰＶ３１、ＨＰＶ３３、ＨＰＶ３５、ＨＰＶ３９、ＨＰＶ４５、ＨＰＶ５１、ＨＰＶ５２、ＨＰＶ５６、ＨＰＶ５８、ＨＰＶ５９、ＨＰＶ６８、ＨＰＶ７３、またはＨＰＶ８２を含む、多様な遺伝子型のいずれかのＨＰＶのエピトープであり得る。ＨＰＶペプチドの非限定的な例には、Ｅ６ １８～２６（ＫＬＰＱＬＣＴＥＬ；配列番号２７４）；Ｅ６ ２６～３４（ＬＱＴＴＩＨＤＩＩ；配列番号４０４）；Ｅ６ ４９～５７（ＶＹＤＦＡＦＲＤＬ；配列番号４０５）；Ｅ６ ５２～６０（ＦＡＦＲＤＬＣＩＶ；配列番号４０６）；Ｅ６ ７５～８３（ＫＦＹＳＫＩＳＥＹ；配列番号４０７）；Ｅ６ ８０～８８（ＩＳＥＹＲＨＹＣＹ；配列番号４０８）；Ｅ７ ７～１５（ＴＬＨＥＹＭＬＤＬ；配列番号４０９）；Ｅ７ １１～１９（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴ；配列番号２７６）；Ｅ７ ４４～５２（ＱＡＥＰＤＲＡＨＹ；配列番号４１０）；Ｅ７ ４９～５７（ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号４１１）；Ｅ７ ６１～６９（ＣＤＳＴＬＲＬＣＶ；配列番号４１２）；及びＥ７ ６７～７６（ＬＣＶＱＳＴＨＶＤＩ；配列番号４１３）；Ｅ７ ８２～９０（ＬＬＭＧＴＬＧＩＶ；配列番号４１４）；Ｅ７ ８６～９３（ＴＬＧＩＶＣＰＩ；配列番号２７７）；Ｅ７ ９２～９３（ＬＬＭＧＴＬＧＩＶＣＰＩ；配列番号４１５）；ならびにセクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉ．（ｃ）におけるそれらのＨＰＶペプチドが含まれる。

いくつかの場合では、ＣＡＡペプチドは、以下のクローディン－１８（アイソフォーム２）（ＣＬＤＮ１８．２）アミノ酸配列：ＭＡＶＴＡＣＱＧＬＧ ＦＶＶＳＬＩＧＩＡＧ ＩＩＡＡＴＣＭＤＱＷ ＳＴＱＤＬＹＮＮＰＶ ＴＡＶＦＮＹＱＧＬＷ ＲＳＣＶＲＥＳＳＧＦ ＴＥＣＲＧＹＦＴＬＬ ＧＬＰＡＭＬＱＡＶＲ ＡＬＭＩＶＧＩＶＬＧ ＡＩＧＬＬＶＳＩＦＡ ＬＫＣＩＲＩＧＳＭＥ ＤＳＡＫＡＮＭＴＬＴ ＳＧＩＭＦＩＶＳＧＬ ＣＡＩＡＧＶＳＶＦＡ ＮＭＬＶＴＮＦＷＭＳ ＴＡＮＭＹＴＧＭＧＧ ＭＶＱＴＶＱＴＲＹＴ ＦＧＡＡＬＦＶＧＷＶ ＡＧＧＬＴＬＩＧＧＶＭＭＣＩＡＣＲＧＬＡ ＰＥＥＴＮＹＫＡＶＳ ＹＨＡＳＧＨＳＶＡＹ ＫＰＧＧＦＫＡＳＴＧ ＦＧＳＮＴＫＮＫＫＩ ＹＤＧＧＡＲＴＥＤＥ ＶＱＳＹＰＳＫＨＤＹ Ｖ（配列番号１６９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するクローディンポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、がん関連ペプチドは、アミノ酸配列ＴＥＤＥＶＱＳＹＰＳＫＨＤＹＶ（配列番号１７０）（約１５アミノ酸の長さを有する）またはＥＶＱＳＹＰＳＫＨＤＹＶ（配列番号１７１）（約１２アミノ酸の長さを有する）を有するクローディンポリペプチドのペプチドである。

いくつかの場合では、ＣＡＡペプチドは、トロホブラスト細胞表面抗原－２（Ｔｒｏｐ－２）ポリペプチドのペプチドである。Ｔｒｏｐ－２（上皮糖タンパク質－１、胃腸腫瘍関連抗原ＧＡ７３３－１、膜成分染色体１表面マーカー－１、及び腫瘍関連カルシウムシグナル伝達物質－２としても知られている）は、多数のがんタイプにおいて制御されず、ＴＡＣＳＴＤ２遺伝子のタンパク質産物である膜貫通糖タンパク質である。いくつかの場合では、がん関連ペプチドは、以下のＴＲＯＰ－２アミノ酸配列：ＱＤＮＣＴＣＰＴＮＫ ＭＴＶＣＳＰＤＧＰＧ ＧＲＣＱＣＲＡＬＧＳ ＧＭＡＶＤＣＳＴＬＴ ＳＫＣＬＬＬＫＡＲＭ ＳＡＰＫＮＡＲＴＬＶ ＲＰＳＥＨＡＬＶＤＮ ＤＧＬＹＤＰＤＣＤＰ ＥＧＲＦＫＡＲＱＣＮ ＱＴＳＶＣＷＣＶＮＳ ＶＧＶＲＲＴＤＫＧＤ ＬＳＬＲＣＤＥＬＶＲ ＴＨＨＩＬＩＤＬＲＨ ＲＰＴＡＧＡＦＮＨＳ ＤＬＤＡＥＬＲＲＬＦ ＲＥＲＹＲＬＨＰＫＦ ＶＡＡＶＨＹＥＱＰＴ ＩＱＩＥＬＲＱＮＴＳ ＱＫＡＡＧＤＶＤＩＧ ＤＡＡＹＹＦＥＲＤＩ ＫＧＥＳＬＦＱＧＲＧ ＧＬＤＬＲＶＲＧＥＰ ＬＱＶＥＲＴＬＩＹＹ ＬＤＥＩＰＰＫＦＳＭ ＫＲＬＴＡＧＬＩＡＶ ＩＶＶＶＶＶＡＬＶＡ ＧＭＡＶＬＶＩＴＮＲ ＲＫＳＧＫＹＫＫＶＥ ＩＫＥＬＧＥＬＲＫＥ ＰＳＬ（配列番号５３５）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するＴＲＯＰ－２ポリペプチドのペプチドである。

（ｉｉ）抗体
上記したように、いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体、例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰに存在するＣＴＰは、抗体またはその抗原結合断片である。いくつかの場合では、ＣＴＰは、ＣＡＡに特異的な抗体である。いくつかの場合では、ＣＴＰは、感染した細胞（例えば、ウイルス、細菌、またはマイコプラズマ）の表面上のペプチドに特異的な抗体である。いくつかの場合では、ＣＴＰは、がん細胞の表面上のペプチド／ＨＬＡ複合体に特異的な抗体であり、そのペプチドは、がん関連ペプチド（例えば、がん関連抗原のペプチド断片）であり得る。

免疫グロブリン５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのクラスの一部は、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、及びＩｇＡ２にさらに分けられ得る。サブクラスは、タイプ、例えば、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂにさらに分けられ得る。

用語「ヒト化免疫グロブリン」は、本明細書で使用される場合、異なる起源の免疫グロブリンの部分を含む免疫グロブリンであって、少なくとも一部は、ヒト起源のアミノ酸配列を含む、免疫グロブリンを指す。キメラまたはＣＤＲグラフト化一本鎖抗体もヒト化免疫グロブリンという用語に包含される。

用語「抗体」及び「免疫グロブリン」には、任意のアイソタイプの抗体または免疫グロブリン、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、及びＦｄ断片を含むがこれらに限定されない抗原に対する特異的結合を保持する抗体の断片、キメラ抗体、ヒト化抗体、一本鎖抗体（ｓｃＡｂ）、シングルドメイン抗体（ｄＡｂ）、シングルドメイン重鎖抗体、シングルドメイン軽鎖抗体、ナノボディ、二重特異的抗体、多重特異的抗体、ならびに抗体及び非抗体タンパク質の抗原－結合（本明細書で抗原結合とも称される）部分を含む融合タンパク質が含まれる。

用語「ナノボディ」（Ｎｂ）は、本明細書で使用される場合、天然に存在する重鎖抗体に由来する最小の抗原結合断片または単一可変ドメイン（Ｖ_ＨＨ）を指し、当業者に知られている。それらは、ラクダ科動物に見られる重鎖のみの抗体に由来する（Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６；Ｄｅｓｍｙｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ｂｉｏｌ．３：８０３；及びＤｅｓｍｙｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３２：１）。

「Ｆｖ」は、完全な抗原認識及び抗原結合部位を含有する最小の抗体断片である。この領域は、非共有結合性会合で緊密となった１つの重鎖可変領域ドメイン及び１つの軽鎖可変領域ドメインの二量体からなる。

「一本鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌドメインであって、これらのドメインが単一のポリペプチド鎖に存在するものを含む。いくつかの実施形態では、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、これにより、ｓＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成することが可能となる。ｓＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたい。

用語「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片であって、その断片が、同じポリペプチド鎖（Ｖ_Ｈ－Ｖ_Ｌ）において軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含むものを指す。同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには過度に短いリンカーを使用することにより、ドメインは、別の鎖の相補性ドメインと対合し、２つの抗原結合部位を形成せざるを得なくなる。ダイアボディは、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ９３／１１１６１；及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－６４４８においてより十分に記載されている。

本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」は、重鎖及び軽鎖の両方のポリペプチドの可変領域内に見られる非連続的抗原結合部位を意味することが意図されている。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ（１９７７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９；Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）（本明細書でＫａｂａｔ １９９１とも称される）によって；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１（本明細書でＣｈｏｔｈｉａ １９８７とも称される）によって；及びＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２によって記載されており、その定義には、互いに比較された場合にアミノ酸残基の重複またはサブセットが含まれる。それにもかかわらず、抗体もしくはグラフト抗体またはそのバリアントのＣＤＲを指すためのいずれの定義の適用も、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であることが意図されている。上で引用された引用文献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基が比較として以下のＣＤＲ表に示されている。

本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｌ１」、「ＣＤＲ－Ｌ２」、及び「ＣＤＲ－Ｌ３」は、それぞれ、軽鎖可変領域における第１、第２、及び第３のＣＤＲを指す。用語「ＣＤＲ－Ｌ１」、「ＣＤＲ－Ｌ２」、及び「ＣＤＲ－Ｌ３」は、「ＶＬ ＣＤＲ１」、「ＶＬ ＣＤＲ２」、及び「ＶＬ ＣＤＲ３」とそれぞれ互換的に使用され得る。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｈ１」、「ＣＤＲ－Ｈ２」、及び「ＣＤＲ－Ｈ３」は、それぞれ、重鎖可変領域における第１、第２、及び第３のＣＤＲを指す。用語「ＣＤＲ－Ｈ１」、「ＣＤＲ－Ｈ２」、及び「ＣＤＲ－Ｈ３」は、「ＶＨ ＣＤＲ１」、「ＶＨ ＣＤＲ２」、及び「ＶＨ ＣＤＲ３」とそれぞれ互換的に使用され得る。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－１」、「ＣＤＲ－２」、及び「ＣＤＲ－３」は、それぞれ、いずれかの鎖の可変領域の第１、第２及び第３のＣＤＲを指す。

Ｔ細胞－ＭＰに含まれ得るＣＡＡ標的化抗体（またはその抗原結合断片）の非限定的な例には、アビツズマブ（抗ＣＤ５１）、ＬＬ１（抗ＣＤ７４）、ＬＬ２またはＲＦＢ４（抗ＣＤ２２）、ベルツズマブ（ｈＡ２０、抗ＣＤ２０）、リツクスマブ（抗ＣＤ２０）、オビヌツズマブ（ＧＡ１０１、抗ＣＤ２０）、ダラツムマブ（抗ＣＤ３８）、ラムブロリズマブ（抗ＰＤ－１受容体）、ニボルマブ（抗ＰＤ－１受容体）、イピリムマブ（抗ＣＴＬＡ－４）、ＲＳ７（抗ＴＲＯＰ－２）、ＰＡＭ４またはＫＣ４（いずれも抗ムチン）、ＭＮ－１４（抗ＣＥＡ）、ＭＮ－１５またはＭＮ－３（抗ＣＥＡＣＡＭ６）、Ｍｕ－９（抗結腸特異的抗原－ｐ）、Ｉｍｍｕ３１（抗アルファ－フェトプロテイン）、Ｒ１（抗ＩＧＦ－１Ｒ）、Ａ１９（抗ＣＤ１９）、ＴＡＧ－７２（例えば、ＣＣ４９）、Ｔｎ、Ｊ５９１またはＨｕＪ５９１（抗ＰＳＭＡ）、ＡＢ－ＰＧ１－ＸＧ１－０２６（抗ＰＳＭＡ二量体）、Ｄ２／Ｂ（抗ＰＳＭＡ）、Ｇ２５０（抗炭酸脱水酵素ＩＸ）、Ｌ２４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ）アレムツズマブ（抗ＣＤ５２）、オポルツズマブ（抗ＥｐＣＡＭ）、ベバシズマブ（抗ＶＥＧＦ）、セツキシマブ（抗ＥＧＦＲ）、ゲムツズマブ（抗ＣＤ３３）、イブリツモマブチウキセタン（抗ＣＤ２０）；パニツムマブ（抗ＥＧＦＲ）；トシツモマブ（抗ＣＤ２０）；ＰＡＭ４（クリバツズマブ；抗ムチンとしても知られている）、トラスツズマブ（抗ＨＥＲ２）、ペルツズマブ（抗ＨＥＲ２）、ポラツズマブ（抗ＣＤ７９ｂ）、及びアネツマブ（抗メソテリン）が含まれるがこれらに限定されない。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含まれ得るＣＡＡ標的化抗体（またはその抗原結合断片）は、一本鎖抗体である。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含まれ得るＣＡＡ標的化抗体（またはその抗原結合断片）は、ｓｃＦｖである。いくつかの場合では、腫瘍標的化ポリペプチドは、ナノボディ（シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）とも称される）である。いくつかの場合では、腫瘍標的化ポリペプチドは、重鎖ナノボディである。いくつかの場合では、腫瘍標的化ポリペプチドは、軽鎖ナノボディである。

様々な腫瘍抗原結合抗体のＶＨ及びＶＬのａａ配列は、そのような抗体の軽鎖及び重鎖ＣＤＲと同様に、当該技術分野で知られている。例えば、Ｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４６９；ＷＯ２００５／０１２４９３；ＵＳ２０１９／０１１９３７５；ＵＳ２０１３／００６６０５５を参照されたい。以下は、腫瘍抗原結合抗体の非限定的な例である。

（ａ）抗Ｈｅｒ２
ＣＴＰとして有用な抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、ａ）以下のａａ配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１７２）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む軽鎖；及びｂ）以下のａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１７３）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む重鎖を含み得る。

抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在する軽鎖可変領域（ＶＬ）；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在する重鎖可変領域（ＶＨ）を含み得る。例えば、抗Ｈｅｒ２抗体は、ａ）ａａ配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮ ＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳ ＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳ ＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ ＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱ ＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１７４）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＬ；及びｂ）ａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲ ＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩ ＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱ ＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡ ＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲ ＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴ ＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡ ＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥ ＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷ ＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹ ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ Ｓ（配列番号１７５）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＨを含み得る。抗Ｈｅｒ２抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）ａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫ ＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲ ＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹ ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩ ＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ ＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧ ＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷ ＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１７６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＨ；ｂ）リンカー；及びｃ）ａａ配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮ ＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳ ＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳ ＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ ＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱ ＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１７７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＬを含み得る。本明細書における他の個所に記載されている好適なリンカー配列には、例えば、１～１０回（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回）繰り返され得る（ＧＧＧＧＳ）（配列番号１３９）が含まれる。

いくつかの場合では、抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）；Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）（本明細書でＫａｂａｔ １９９１とも称される）によって定義されるとおりである。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）（本明細書でＣｈｏｔｈｉａ １９８７とも称される）によって定義されるとおりである。例えば、抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、ａａ配列ＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡ（配列番号１７９）を有するＶＬ ＣＤＲ１；ａａ配列ＳＡＳＦＬＹ（配列番号１８０）を有するＶＬ ＣＤＲ２；ａａ配列ＱＱＨＹＴＴＰＰ（配列番号１８１）を有するＶＬ ＣＤＲ３；ａａ配列ＧＦＮＩＫＤＴＹ（配列番号１８２）を有するＶＨ ＣＤＲ１；ａａ配列ＩＹＰＴＮＧＹＴ（配列番号１８３）を有するＶＨ ＣＤＲ２；及びａａ配列ＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹ（配列番号１８４）を有するＶＨ ＣＤＲ３を含み得る。

いくつかの場合では、抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、ｓｃＦｖ抗体である。例えば、抗Ｈｅｒ２ ｓｃＦｖは、以下のａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１８５）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。

別の例として、いくつかの場合では、抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、ａ）以下のａａ配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＩＧＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＩＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１８６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；及びｂ）以下のａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＤＹＴＭＤＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＤＶＮＰＮＳＧＧＳＩＹＮＱＲＦＫＧＲＦＴＬＳＶＤＲＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＬＧＰＳＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１８７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。

いくつかの場合では、ＣＴＰとして有用な抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在するＶＬ；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在するＶＨを含み得る。例えば、抗Ｈｅｒ２抗体は、ａ）ａａ配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＩＧＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＩＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１８８）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＬ；及びｂ）ａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＤＹＴＭＤＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＤＶＮＰＮＳＧＧＳＩＹＮＱＲＦＫＧＲＦＴＬＳＶＤＲＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＬＧＰＳＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１８９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＨを含み得る。

いくつかの場合では、ＣＴＰとして使用される抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、Ｋａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。例えば、抗ＨＥＲ２抗体は、ａａ配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＧＶＡ（配列番号１９０）を有するＶＬ ＣＤＲ１；ａａ配列ＳＡＳＹＲＹ（配列番号１９１）を有するＶＬ ＣＤＲ２；ａａ配列ＱＱＹＹＩＹＰＹ（配列番号１９２）を有するＶＬ ＣＤＲ３；ａａ配列ＧＦＴＦＴＤＹＴＭＤ（配列番号１９３）を有するＶＨ ＣＤＲ１；ａａ配列ＡＤＶＮＰＮＳＧＧＳＩＹＮＱＲＦＫＧ（配列番号１９４）を有するＶＨ ＣＤＲ２；及びａａ配列ＡＲＮＬＧＰＳＦＹＦＤＹ（配列番号１９５）を有するＶＨ ＣＤＲ３を含み得る。

いくつかの場合では、抗Ｈｅｒ２抗体（またはその抗原結合断片）は、ｓｃＦｖである。例えば、いくつかの場合では、抗Ｈｅｒ２ ｓｃＦｖは、以下のａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１９６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む。

（ｂ）抗ＣＤ１９
ＣＴＰとして有用な抗ＣＤ１９抗体（及びその抗原結合断片）は、当該技術分野で知られており；任意の抗ＣＤ１９抗体のＶＨ及びＶＬ、またはＶＨ及びＶＬ ＣＤＲがＴ細胞－ＭＰにおいて使用され得る。例えば、ＷＯ２００５／０１２４９３を参照されたい。

抗ＣＤ１９抗体（またはその抗原結合断片）には、ａａ配列ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＤＳＹＬＮ（配列番号１９７）を含むＶＬ ＣＤＲ１；ａａ配列ＤＡＳＮＬＶＳ（配列番号１９８）を含むＶＬ ＣＤＲ２；及びａａ配列ＱＱＳＴＥＤＰＷＴ（配列番号１９９）を含むＶＬ ＣＤＲ３が含まれ得る。抗ＣＤ１９抗体（またはその抗原結合断片）には、ａａ配列ＳＹＷＭＮ（配列番号２００）を含むＶＨ ＣＤＲ１；ａａ配列ＱＩＷＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧ（配列番号２０１）を含むＶＨ ＣＤＲ２；及びａａ配列ＲＥＴＴＴＶＧＲＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号２０２）を含むＶＨ ＣＤＲ３が含まれ得る。抗ＣＤ１９抗体には、ａａ配列ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＤＳＹＬＮ（配列番号１９７）を含むＶＬ ＣＤＲ１；ａａ配列ＤＡＳＮＬＶＳ（配列番号１９８）を含むＶＬ ＣＤＲ２；ａａ配列ＱＱＳＴＥＤＰＷＴ（配列番号１９９）を含むＶＬ ＣＤＲ３；ａａ配列ＳＹＷＭＮ（配列番号２００）を含むＶＨ ＣＤＲ１；ａａ配列ＱＩＷＰＧＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦＫＧ（配列番号２０１）を含むＶＨ ＣＤＲ２；及びａａ配列ＲＥＴＴＴＶＧＲＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号２０２）を含むＶＨ ＣＤＲ３が含まれ得る。

抗ＣＤ１９抗体（またはその抗原結合断片）は、ｓｃＦｖであり得る。例えば、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、以下のａａ配列：ＤＩＱＬＴＱＳＰＡＳ ＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴ ＩＳＣＫＡＳＱＳＶＤ ＹＤＧＤＳＹＬＮＷＹ ＱＱＩＰＧＱＰＰＫＬ ＬＩＹＤＡＳＮＬＶＳ ＧＩＰＰＲＦＳＧＳＧ ＳＧＴＤＦＴＬＮＩＨ ＰＶＥＫＶＤＡＡＴＹ ＨＣＱＱＳＴＥＤＰＷ ＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩ ＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧ ＳＧＧＧＧＳＱＶＱＬ ＱＱＳＧＡＥＬＶＲＰ ＧＳＳＶＫＩＳＣＫＡ ＳＧＹＡＦＳＳＹＷＭ ＮＷＶＫＱＲＰＧＱＧ ＬＥＷＩＧＱＩＷＰＧ ＤＧＤＴＮＹＮＧＫＦ ＫＧＫＡＴＬＴＡＤＥ ＳＳＳＴＡＹＭＱＬＳ ＳＬＡＳＥＤＳＡＶＹ ＦＣＡＲＲＥＴＴＴＶ ＧＲＹＹＹＡＭＤＹＷ ＧＱＧＴＴＶＴＶＳ（配列番号２０３）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含み得る。

（ｃ）抗メソテリン
ＣＴＰとして有用な抗メソテリン抗体（またはその抗原結合断片）は、当該技術分野で知られており；任意の抗メソテリン抗体のＶＨ及びＶＬ、またはＶＨ及びＶＬ ＣＤＲが標的化配列としてＴ細胞－ＭＰおいて使用され得る。例えば、Ｕ．Ｓ．２０１９／００００９４４；ＷＯ２００９／０４５９５７；ＷＯ２０１４／０３１４７６；ＵＳＰＮ８，４６０，６６０；ＵＳ２０１３／００６６０５５；及びＷＯ２００９／０６８２０４を参照されたい。

抗メソテリン抗体（またはその抗原結合断片）は、ａ）以下のａａ配列：ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶ ＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩ ＳＣＴＧＴＳＳＤＩＧ ＧＹＮＳＶＳＷＹＱＱ ＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩ ＹＧＶＮＮＲＰＳＧＶ ＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧ ＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬ ＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣ ＳＳＹＤＩＥＳＡＴＰ ＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶ ＬＧＱＰＫＡＡＰＳＶ ＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬ ＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬ ＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴ ＶＡＷＫＧＤＳＳＰＶ ＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳ ＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳ ＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷ ＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴ ＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶ ＡＰＴＥＳＳ（配列番号２０４）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む軽鎖；及びｂ）以下のａａ配列：ＱＶＥＬＶＱＳＧＡＥ ＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩ ＳＣＫＧＳＧＹＳＦＴ ＳＹＷＩＧＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＭＧＩ ＩＤＰＧＤＳＲＴＲＹ ＳＰＳＦＱＧＱＶＴＩ ＳＡＤＫＳＩＳＴＡＹ ＬＱＷＳＳＬＫＡＳＤ ＴＡＭＹＹＣＡＲＧＱ ＬＹＧＧＴＹＭＤＧＷ ＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰ ＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧ ＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫ ＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳ ＷＮＳＧＡＬＴＳＧ ＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳ ＳＧＬＹＳＬＳＳＶ ＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴ ＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫ ＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶ ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴ ＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬ ＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰ ＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲ ＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤ ＶＳＨＥＤＰＥＶＫ ＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶ ＨＮＡＫＴＫＰＲＥ ＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶ ＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷ ＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶ ＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥ ＫＴＩＳＫＡＫＧＱ ＰＲＥＰＱＶＹＴＬ ＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮ ＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧ ＦＹＰＳＤＩＡＶＥ ＷＥＳＮＧＱＰＥＮ ＮＹＫＴＴＰＰＶＬ ＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳ ＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱ ＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨ ＥＡＬＨＮＨＹＴＱ ＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２０５）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む重鎖を含み得る。

抗メソテリン抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在するＶＬ；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在するＶＨを含み得る。例えば、抗メソテリン抗体は、ａ）ａａ配列：ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＩＧＧＹＮＳＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＧＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＤＩＥＳＡＴＰＶＦＧＧＧＴＫ（配列番号２０６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＬ；及びｂ）ａａ配列：ＱＶＥＬＶＱＳＧＡＥ ＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩ ＳＣＫＧＳＧＹＳＦＴ ＳＹＷＩＧＷＶＲＱ ＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧ ＩＩＤＰＧＤＳＲＴＲ ＹＳＰＳＦＱＧＱＶ ＴＩＳＡＤＫＳＩＳＴ ＡＹＬＱＷＳＳＬＫ ＡＳＤＴＡＭＹＹＣＡ ＲＧＱＬＹＧＧＴＹＭ ＤＧＷＧＱＧＴＬＶ ＴＶＳＳ（配列番号２０７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＨを含み得る。

抗メソテリン抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含み得る。ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりであり得る（例えば、Ｋａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。例えば、抗メソテリン抗体（またはその抗原結合断片）は、ａａ配列ＴＧＴＳＳＤＩＧＧＹＮＳＶＳ（配列番号２０８）を有するＶＬ ＣＤＲ１；ａａ配列ＬＭＩＹＧＶＮＮＲＰＳ（配列番号２０９）を有するＶＬ ＣＤＲ２；ａａ配列ＳＳＹＤＩＥＳＡＴＰ（配列番号２１０）を有するＶＬ ＣＤＲ３；ａａ配列ＧＹＳＦＴＳＹＷＩＧ（配列番号２１１）を有するＶＨ ＣＤＲ１；ａａ配列ＷＭＧＩＩＤＰＧＤＳＲＴＲＹＳＰ（配列番号２１２）を有するＶＨ ＣＤＲ２；及びａａ配列ＧＱＬＹＧＧＴＹＭＤＧ（配列番号２１３）を有するＶＨ ＣＤＲ３を含み得る。抗メソテリン抗体は、ｓｃＦｖであり得る。１つの非限定的な例として、抗メソテリンｓｃＦｖは、以下のａａ配列：

（ＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、下線が引かれており；ＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、太字であり下線が引かれている）を含み得る。

１つの非限定的な例として、抗メソテリンｓｃＦｖは、以下のａａ配列：

（ＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、下線が引かれており；ＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、太字であり下線が引かれている）を含み得る。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷ ＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＩＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号５３６）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＭＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＴＡＳＧ ＦＴＦＳＮＮＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＦＤＧＭＮＫＦＹＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＥＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＲＥＧＤＧＳＧＩＹＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５３７）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＫａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＣｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＩＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号５３６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＭＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＴＡＳＧＦＴＦＳＮＮＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＦＤＧＭＮＫＦＹＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＥＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＲＥＧＤＧＳＧＩＹＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５３７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＭＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＴＡＳＧＦＴＦＳＮＮＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＦＤＧＭＮＫＦＹＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＥＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＲＥＧＤＧＳＧＩＹＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５３７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＩＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号５３６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＩＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号５３６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＭＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＴＡＳＧＦＴＦＳＮＮＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＦＤＧＭＮＫＦＹＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＥＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＲＥＧＤＧＳＧＩＹＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５３７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＥＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＴＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＧＲＦＳＧＳＧＳＧＮＳＹＳＬＴＩＳＳＶＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５３９）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＥＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＳＴＡＹＭＤＬＬＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＦＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＳＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号５４０）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＫａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＣｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＥＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＴＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＧＲＦＳＧＳＧＳＧＮＳＹＳＬＴＩＳＳＶＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５３９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＥＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＳＴＡＹＭＤＬＬＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＦＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＳＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号５４０）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＥＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＴＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＧＲＦＳＧＳＧＳＧＮＳＹＳＬＴＩＳＳＶＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５３９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＥＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＳＴＡＹＭＤＬＬＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＦＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＳＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号５４０）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＥＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＳＴＡＹＭＤＬＬＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＦＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＳＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号５４０）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＥＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＴＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＧＲＦＳＧＳＧＳＧＮＳＹＳＬＴＩＳＳＶＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５３９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＩＧＧＹＮＳＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＧＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＤＩＥＳＡＴＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ（配列番号５４１）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＥＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩＳＣＫＧＳＧＹＳＦＴＳＹＷＩＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＩＩＤＰＧＤＳＲＴＲＹＳＰＳＦＱＧＱＶＴＩＳＡＤＫＳＩＳＴＡＹＬＱＷＳＳＬＫＡＳＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＱＬＹＧＧＴＹＭＤＧＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４２）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表、及びＫａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表、及びＣｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。

いくつかの場合では、標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＩＧＧＹＮＳＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＧＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＤＩＥＳＡＴＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ（配列番号５４１）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＥＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩＳＣＫＧＳＧＹＳＦＴＳＹＷＩＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＩＩＤＰＧＤＳＲＴＲＹＳＰＳＦＱＧＱＶＴＩＳＡＤＫＳＩＳＴＡＹＬＱＷＳＳＬＫＡＳＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＱＬＹＧＧＴＹＭＤＧＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４２）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。

標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＩＧＧＹＮＳＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＧＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＤＩＥＳＡＴＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ（配列番号５４１）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＥＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩＳＣＫＧＳＧＹＳＦＴＳＹＷＩＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＩＩＤＰＧＤＳＲＴＲＹＳＰＳＦＱＧＱＶＴＩＳＡＤＫＳＩＳＴＡＹＬＱＷＳＳＬＫＡＳＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＱＬＹＧＧＴＹＭＤＧＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４２）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含み得るｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

標的化配列としてＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＥＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩＳＣＫＧＳＧＹＳＦＴＳＹＷＩＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＩＩＤＰＧＤＳＲＴＲＹＳＰＳＦＱＧＱＶＴＩＳＡＤＫＳＩＳＴＡＹＬＱＷＳＳＬＫＡＳＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＱＬＹＧＧＴＹＭＤＧＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４２）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＩＧＧＹＮＳＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＧＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＤＩＥＳＡＴＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ（配列番号５４１）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含み得るｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５４３）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＭＴＶＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４４）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＫａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＣｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５４３）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＭＴＶＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４４）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５４３）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＭＴＶＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４４）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗メソテリン抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＴＰＹＮＧＡＳＳＹＮＱＫＦＲＧＫＡＴＭＴＶＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＹＤＧＲＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５４４）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＷＳＫＨＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５４３）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

（ｄ）抗－ＴＲＯＰ－２
トロホブラスト細胞表面抗原２（Ｔｒｏｐ－２）（上皮糖タンパク質－１、胃腸腫瘍関連抗原ＧＡ７３３－１、膜成分染色体１表面マーカー－１、及び腫瘍関連カルシウムシグナル伝達物質－２としても知られている）は、多数のがんタイプにおいて上方制御される膜貫通糖タンパク質であり、ＴＡＣＳＴＤ２遺伝子のタンパク質産物である。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰのＣＴＰは、図２３Ａ～２３Ｄに示されるアミノ酸配列のいずれか１つに存在するＶＨ及びＶＬ ＣＤＲを含む抗ＴＲＯＰ－２ ｓｃＦｖまたは抗ＴＲＯＰ－２ナノボディである。いくつかの場合では、ＴＴＰは、図２３Ａ～２３Ｄのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む抗ＴＲＯＰ－２ ｓｃＦｖである。

抗ＴＲＯＰ－２抗体は、当該技術分野で知られており；任意の抗ＴＲＯＰ－２抗体のＶＨ及びＶＬ、またはＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、標的化配列として本開示のＴ細胞－ＭＰにおいて使用され得る。例えば、米国特許第７，２３８，７８５号を参照されたい）。いくつかの場合では、抗ＴＲＯＰ－２抗体は、ｉ）軽鎖ＣＤＲ配列ＣＤＲ１（ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ；配列番号５４５）；ＣＤＲ２（ＳＡＳＹＲＹＴ；配列番号５４６）；及びＣＤＲ３（ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ；配列番号５４７）；及びｉｉ）重鎖ＣＤＲ配列ＣＤＲ１（ＮＹＧＭＮ；配列番号５４８）；ＣＤＲ２（ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ；配列番号５４９）；及びＣＤＲ３（ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ；配列番号５５０）を含む。

いくつかの場合では、抗ＴＲＯＰ－２抗体は、ｉ）重鎖ＣＤＲ配列ＣＤＲ１（ＴＡＧＭＱ；配列番号５５１）；ＣＤＲ２（ＷＩＮＴＨＳＧＶＰＫＹＡＥＤＦＫＧ（配列番号５５２）；及びＣＤＲ３（ＳＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ；配列番号５５３）；及びｉｉ）軽鎖ＣＤＲ配列ＣＤＲ１（ＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ；配列番号５５４）；ＣＤＲ２（ＳＡＳＹＲＹＴ；配列番号５４６）；及びＣＤＲ３（ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ；配列番号５４７）を含む。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ２抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＳＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＡＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５５）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧＲＦＡＦＳＬＤＴＳＶＳＴＡＹＬＱＩＳＳＬＫＡＤＤＴＡＶＹＦＣＡＲＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＳＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５６）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、Ｖ_Ｈ及びＶ_ＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＫａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、Ｖ_Ｈ及びＶ_ＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＣｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ－２抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＳＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＡＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５５）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧＲＦＡＦＳＬＤＴＳＶＳＴＡＹＬＱＩＳＳＬＫＡＤＤＴＡＶＹＦＣＡＲＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＳＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ－２抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＳＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＡＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５５）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧＲＦＡＦＳＬＤＴＳＶＳＴＡＹＬＱＩＳＳＬＫＡＤＤＴＡＶＹＦＣＡＲＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＳＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ－２抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＱＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧＲＦＡＦＳＬＤＴＳＶＳＴＡＹＬＱＩＳＳＬＫＡＤＤＴＡＶＹＦＣＡＲＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＳＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＳＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＡＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５５）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ２抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５５７）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＴＡＧＭＱＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＴＨＳＧＶＰＫＹＡＥＤＦＫＧＲＶＴＩＳＡＤＴＳＴＳＴＡＹＬＱＬＳＳＬＫＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５８）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、Ｖ_Ｈ及びＶ_ＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＫａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、Ｖ_Ｈ及びＶ_ＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、上のＣＤＲ表；及びＣｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ－２抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５５７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；及びｂ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＴＡＧＭＱＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＴＨＳＧＶＰＫＹＡＥＤＦＫＧＲＶＴＩＳＡＤＴＳＴＳＴＡＹＬＱＬＳＳＬＫＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５８）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ－２抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５５７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＴＡＧＭＱＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＴＨＳＧＶＰＫＹＡＥＤＦＫＧＲＶＴＩＳＡＤＴＳＴＳＴＡＹＬＱＬＳＳＬＫＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５８）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに含めるのに好適な抗ＴＲＯＰ－２抗体は、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ａ）以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＴＡＧＭＱＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＴＨＳＧＶＰＫＹＡＥＤＦＫＧＲＶＴＩＳＡＤＴＳＴＳＴＡＹＬＱＬＳＳＬＫＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５５８）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域；ｂ）ペプチドリンカー；及びｃ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＲＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＨＹＩＴＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号５５７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含むｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎは、１～１０の整数である（例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である））を含む。いくつかの場合では、ペプチドリンカーは、アミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号５３８）を含み、１５アミノ酸の長さを有する。

（ｅ）抗ＢＣＭＡ
抗ＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）抗体（またはその抗原結合断片）は、当該技術分野で知られており；任意の抗ＢＣＭＡ抗体のＶＨ及びＶＬ、またはＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、Ｔ細胞－ＭＰの標的化において使用され得る。例えば、ＷＯ２０１４／０８９３３５；及びＵＳ２０１９／０１５３０６１を参照されたい。

抗ＢＣＭＡ抗体（またはその抗原結合断片）は、ａ）以下のａａ配列：ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡ ＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩ ＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬ ＰＧＴＡＰＫＬＬＩＦ ＮＹＨＱＲＰＳＧＶＰ ＤＲＦＳＧＳＫＳＧＳ ＳＡＳＬＡＩＳＧＬＱ ＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡ ＡＷＤＤＳＬＮＧＷＶ ＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ ＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴ ＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱ ＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩ ＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶ ＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫ ＡＧＶＥＴＴＴＰＤＳ ＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳ ＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷ ＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶ ＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴ ＶＡＰＴＥＣＳ（配列番号２１６）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む軽鎖；及びｂ）以下のａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＦＴＦＧ ＤＹＡＬＳＷＦＲＱ ＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧ ＶＳＲＳＫＡＹＧＧ ＴＴＤＹＡＡＳＶＫＧ ＲＦＴＩＳＲＤＤＳ ＫＳＴＡＹＬＱＭＮＳ ＬＫＴＥＤＴＡＶＹ ＹＣＡＳＳＧＹＳＳＧ ＷＴＰＦＤＹＷＧＱＧ ＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴ ＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰ ＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡ ＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦ ＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳ ＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦ ＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹ ＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳ ＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣ ＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫ ＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣ ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰ ＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶ ＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴ ＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴ ＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤ ＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤ ＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫ ＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹ ＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨ ＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫ ＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡ ＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫ ＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴ ＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫ ＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫ ＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥ ＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮ ＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳ ＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬ ＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧ ＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥ ＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳ ＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２１７）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む重鎖を含み得る。

抗ＢＣＭＡ抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在するＶＬ；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在するＶＨを含み得る。例えば、抗ＢＣＭＡ抗体は、ａ）ａａ配列：ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡ ＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩ ＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧ ＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬ ＰＧＴＡＰＫＬＬＩＦ ＮＹＨＱＲＰＳＧＶＰ ＤＲＦＳＧＳＫＳＧＳ ＳＡＳＬＡＩＳＧＬＱ ＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡ ＡＷＤＤＳＬＮＧＷＶ ＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ Ｇ（配列番号２１８）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＬ；及びｂ）ａａ配列：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＫＰＧＧＳＬＲ ＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦ ＧＤＹＡＬＳＷＦＲＱ ＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧ ＶＳＲＳＫＡＹＧＧＴ ＴＤＹＡＡＳＶＫＧＲ ＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＴ ＡＹＬＱＭＮＳＬＫＴ ＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ ＳＧＹＳＳＧＷＴＰＦ ＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴ ＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶ（配列番号２１９）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＶＨを含み得る。

いくつかの場合では、抗ＢＣＭＡ抗体（またはその抗原結合断片）は、上で提供される軽鎖ａａ配列に存在するＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬ ＣＤＲ３；及び上で提供される重鎖ａａ配列に存在するＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるとおりである（例えば、Ｋａｂａｔ １９９１を参照されたい）。いくつかの場合では、ＶＨ及びＶＬのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されるとおりである（例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７を参照されたい）。

例えば、抗ＢＣＭＡ抗体（またはその抗原結合断片）は、ａａ配列ＳＳＮＩＧＳＮＴ（配列番号２２０）を有するＶＬ ＣＤＲ１、ａａ配列ＮＹＨを有するＶＬ ＣＤＲ２、ａａ配列ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＷＶ（配列番号２２１））を有するＶＬ ＣＤＲ３、ａａ配列ＧＦＴＦＧＤＹＡ（配列番号２２２）を有するＶＨ ＣＤＲ１、ａａ配列ＳＲＳＫＡＹＧＧＴＴ（配列番号２２３）を有するＶＨ ＣＤＲ２、及びａａ配列ＡＳＳＧＹＳＳＧＷＴＰＦＤＹ（配列番号２２４）を有するＶＨ ＣＤＲ３を含み得る。

抗ＢＣＭＡ抗体は、ｓｃＦｖであり得る。１つの非限定的な例として、抗ＢＣＭＡ ｓｃＦｖは、以下のａａ配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥ ＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶ ＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳ ＮＹＷＭＨＷＶＲＱＡ ＰＧＱＧＬＥＷＭＧＡ ＴＹＲＧＨＳＤＴＹＹ ＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩ ＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹ ＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤ ＴＡＶＹＹＣＡＲＧＡ ＩＹＮＧＹＤＶＬＤＮ ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ ＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧ ＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳ ＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹ ＴＳＮＬＨＳＧＶＰＳ ＲＦＳＧＳＧＳＧＴ ＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ ＹＲＫＬＰＷＴＦＧＱＧ ＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２２５）、または配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＮＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＡＴＹＲＧＨＳＤＴＹＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＡＩＹＮＧＹＤＶＬＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＮＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＲＫＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号５６４）を含み得る。

別の例として、抗ＢＣＭＡ ｓｃＦｖは、以下のａａ配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳ ＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴ ＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳ ＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰ ＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹ ＴＳＮＬＨＳＧＶＰＳ ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰ ＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱ ＹＲＫＬＰＷＴＦＧＱ ＧＴＫＬＥＩＫＲＧＧ ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧ ＧＧＳＧＧＧＧＳＱＶ ＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫ ＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣ ＫＡＳＧＧＴＦＳＮＹ ＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧ ＱＧＬＥＷＭＧＡ ＴＹＲＧＨＳＤＴＹＹ ＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩ ＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹ ＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤ ＴＡＶＹＹＣＡＲＧＡ ＩＹＮＧＹＤＶＬＤＮ ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ Ｓ（配列番号２２６）を含み得る。

いくつかの場合では、抗ＢＣＭＡ抗体は、アミノ酸配列ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号５６５）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＹＴＳＮＬＨＳ（配列番号５６６）を有するＶＬ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＱＱＹＲＫＬＰＷＴ（配列番号５６７）を有するＶＬ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＮＹＷＭＨ（配列番号５６８）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＡＴＹＲＧＨＳＤＴＹＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５６９）を有するＶＨ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＧＡＩＹＮＧＹＤＶＬＤＮ（配列番号５７０）を有するＶＨ ＣＤＲ３を含み得る。

いくつかの場合では、抗ＢＣＭＡ抗体は、ａ）以下のアミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＮＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＲＫＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号５７１）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの場合では、抗ＢＣＭＡ抗体は、以下のアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＮＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＡＴＹＲＧＨＳＤＴＹＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＡＩＹＤＧＹＤＶＬＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５７２）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖を含む。

いくつかの場合では、抗ＢＣＭＡ抗体（例えば、文献においてべランタマブと称される抗体）は、アミノ酸配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＮＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＲＫＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号５７１）を含む軽鎖；及びアミノ酸配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＮＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＡＴＹＲＧＨＳＤＴＹＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＡＩＹＤＧＹＤＶＬＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５７２）を含む重鎖を含む。

いくつかの場合では、抗ＢＣＭＡ抗体は、抗体に連結されたがん化学療法剤である。例えば、いくつかの場合では、抗ＢＣＭＡ抗体は、モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）がマレイミドカプロイルリンカーを介して抗ＢＣＭＡ抗体べランタマブに連結されたＧＳＫ２８５７９１６（べランタマブ－マホドチン）である。

（ｆ）抗ＭＵＣ１
いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに存在する標的化配列は、ＭＵＣ１に特異的な抗体である。例えば、標的化配列は、がん細胞上に存在するＭＵＣ１ポリペプチドに特異的であり得る。いくつかの場合では、標的化配列は、ＭＵＣ１の切断形態に特異的である；例えば、Ｆｅｓｓｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．１１８：１１３を参照されたい。いくつかの場合では、標的化配列は、グリコシル化ＭＵＣ１ペプチドに特異的な抗体である；例えば、Ｎａｉｔｏ ｅｔ ａｌ．（２０１７）ＡＣＳ Ｏｍｅｇａ ２：７４９３；及びＵＳ１０，０１７，５８０を参照されたい。

１つの非限定的な例として、標的化配列は、ＭＵＣ１に特異的な一本鎖Ｆｖであり得る。例えば、Ｓｉｎｇｈ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．６：５６２；Ｔｈｉｅ ｅｔ ａｌ．（２０１１）ＰＬｏＳＯｎｅ ６：ｅ１５９２１；Ｉｍａｉ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｌｅｕｋｅｍｉａ １８：６７６；Ｐｏｓｅｙ ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ４４：１４４４；ＥＰ３１３０６０７；ＥＰ３１６４４１８；ＷＯ２００２／０４４２１７；及びＵＳ２０１８／０１１２００７を参照されたい。いくつかの場合では、標的化配列は、ＭＵＣ１ペプチドＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧ（配列番号２２７）に特異的なｓｃＦｖである。いくつかの場合では、標的化配列は、ＭＵＣ１ペプチド：ＳＮＩＫＦＲＰＧＳＶＶＶＱＬＴＬＡＦＲＥＧＴＩＮＶＨＤＶＥＴＱＦＮＱＹＫＴＥＡＡＳＲＹ（配列番号２２８）に特異的なｓｃＦｖである。いくつかの場合では、標的化配列は、ＭＵＣ１ペプチドＳＶＶＶＱＬＴＬＡＦＲＥＧＴＩＮＶＨＤＶＥＴＱＦＮＱＹＫＴＥＡＡＳＲＹ（配列番号２２９）に特異的なｓｃＦｖである。いくつかの場合では、標的化配列は、ＭＵＣ１ペプチドＬＡＦＲＥＧＴＩＮＶＨＤＶＥＴＱＦＮＱＹ（配列番号２３０）に特異的なｓｃＦｖである。いくつかの場合では、標的化配列は、ＭＵＣ１ペプチドＳＮＩＫＦＲＰＧＳＶＶＶＱＬＴＬＡＡＦＲＥＧＴＩＮ（配列番号２３１）に特異的なｓｃＦｖである。

例として、抗ＭＵＣ１抗体は、アミノ酸配列ＲＹＧＭＳ（配列番号２３２）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＴＹＩＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２３３）を有するＶＨ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＤＮＹＧＲＮＹＤＹＧＭＤＹ（配列番号２３４）を有するＶＨ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＳＡＴＳＳＶＳＹＩＨ（配列番号２３５）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号２３６）を有するＶＬ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＱＱＲＳＳＳＰＦＴ（配列番号２３７）を有するＶＬ ＣＤＲ３を含み得る。例えば、ＵＳ２０１８／０１１２００７を参照されたい。

別の例として、抗ＭＵＣ１抗体は、アミノ酸配列ＧＹＡＭＳ（配列番号２３８）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＩＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２３９）を有するＶＨ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＬＧＧＤＮＹＹＥＹＦＤＶ（配列番号２４０）を有するＶＨ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＲＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＨ（配列番号２４１）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＬＡＳＮＬＥＳ（配列番号２４２）を有するＶＬ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＱＨＳＲＥＬＰＦＴ（配列番号２４３）を有するＶＬ ＣＤＲ３を含み得る。例えば、ＵＳ２０１８／０１１２００７を参照されたい。

別の例として、抗ＭＵＣ１抗体は、アミノ酸配列ＤＹＡＭＮ（配列番号２４４）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＶＩＳＴＦＳＧＮＩＮＦＮＱＫＦＫＧ（配列番号２４５）を有するＶＨ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＳＤＹＹＧＰＹＦＤＹ（配列番号２４６）を有するＶＨ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＲＳＳＱＴＩＶＨＳＮＧＮＴＹＬＥ（配列番号２４７）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号２４８）を有するＶＬ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＦＱＧＳＨＶＰＦＴ（配列番号２４９）を有するＶＬ ＣＤＲ３を含み得る。例えば、ＵＳ２０１８／０１１２００７を参照されたい。

別の例として、抗ＭＵＣ１抗体は、アミノ酸配列ＧＹＡＭＳ（配列番号２３８）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＩＹＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２３９）を有するＶＨ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＬＧＧＤＮＹＹＥＹ（配列番号２５０）を有するＶＨ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＴＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＨ（配列番号２５１）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＬＶＳＮＬＥＳ（配列番号２５２）を有するＶＬ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＱＨＩＲＥＬＴＲＳＥ（配列番号２５３）を有するＶＬ ＣＤＲ３を含み得る。例えば、ＵＳ２０１８／０１１２００７を参照されたい。

（ｇ）抗ＭＵＣ１６
いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに存在する標的化配列は、ＭＵＣ１６（ＣＡ１２５としても知られている）に特異的な抗体である。例えば、Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ９８：７３７を参照されたい。例えば、標的化配列は、がん細胞上に存在するＭＵＣ１６ポリペプチドに特異的であり得る。例えば、ＵＳ２０１８／０１１８８４８；及びＵＳ２０１８／０１１２００８を参照されたい。いくつかの場合では、ＭＵＣ１６特異的標的化配列は、ｓｃＦｖである。いくつかの場合では、ＭＵＣ１６特異的標的化配列は、ナノボディである。

１つの例として、抗ＭＵＣ１６抗体は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＮＹＹ（配列番号２５４）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＩＳＧＲＧＳＴＩ（配列番号２５５）を有するＶＨ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＶＫＤＲＧＧＹＳＰＹ（配列番号２５６）を有するＶＨ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＱＳＩＳＴＹ（配列番号２５７）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＴＡＳを有するＶＬ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＱＱＳＹＳＴＰＰＩＴ（配列番号２５８）を有するＶＬ ＣＤＲ３を含み得る。例えば、ＵＳ２０１８／０１１８８４８を参照されたい。

（ｈ）抗クローディン－１８．２
いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに存在する標的化配列は、クローディン－１８アイソフォーム２（「クローディン－１８．２」）に特異的な抗体である。例えば、ＷＯ２０１３／１６７２５９を参照されたい。いくつかの場合では、クローディン－１８．２特異的標的化配列は、ｓｃＦｖである。いくつかの場合では、クローディン－１８．２特異的標的化配列は、ナノボディである。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに存在するＣＴＰは、ＴＥＤＥＶＱＳＹＰＳＫＨＤＹＶ（配列番号１７０）またはＥＶＱＳＹＰＳＫＨＤＹＶ（配列番号１７１）に特異的な抗体である。

１つの例として、抗クローディン－１８．２抗体は、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＳ（配列番号２５９）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＩＮＴＥＴＧＶＰ（配列番号２６０）を有するＶＨ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＡＲＲＴＧＦＤＹ（配列番号２６１）を有するＶＨ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＫＮＬＬＨＳＤＧＩＴＹ（配列番号２６２）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＲＶＳを有するＶＬ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＶＱＶＬＥＬＰＦＴ（配列番号２６３）を有するＶＬ ＣＤＲ３を含み得る。

別の例として、抗クローディン－ｓ抗体は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＡ（配列番号２６４）を有するＶＨ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＩＳＤＧＧＳＹＳ（配列番号２６５）を有するＶＨ ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＡＲＤＳＹＹＤＮＳＹＶＲＤＹ（配列番号２６６）を有するＶＨ ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＱＤＩＮＴＦ（配列番号２６７）を有するＶＬ ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＲＴＮを有するＶＬ ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号２６８）を有するＶＬ ＣＤＲ３を含み得る。

（ｉｉｉ）一本鎖Ｔ細胞受容体
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するＣＴＰは、ｓｃＴＣＲである。ＣＴＰは、がん細胞の表面上のペプチド／ＨＬＡ複合体に特異的なｓｃＴＣＲであり得、そのペプチドは、がん関連ペプチド（例えば、がん関連抗原のペプチド断片）であり得る。ＨＬＡ複合体に結合したがん関連ペプチドに特異的なｓｃＴＣＲのアミノ酸配列は、当該技術分野で知られている。例えば、ＵＳ２０１９／０１３５９１４；ＵＳ２０１９／００６２３９８；及びＵＳ２０１８／０３７１０４９を参照されたい。

ｓｃＴＣＲには、好適なペプチドリンカー配列を介して共有結合したアルファ鎖可変領域（Ｖα）及びベータ鎖可変領域（Ｖβ）が含まれる。例えば、Ｖαは、ＶαのＣ末端及びＶβのＮ末端に融合した好適なペプチドリンカー（Ｌ）配列を介してＶβに共有結合され得る。ｓｃＴＣＲは、構造Ｖα－Ｌ－Ｖβを有し得る。ｓｃＴＣＲは、構造Ｖβ－Ｌ－Ｖαを有し得る。ｓｃＴＣＲはまた、定常ドメイン（定常領域とも称される）を含み得る。いくつかの場合では、ｓｃＴＣＲは、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ｉ）ＴＣＲα鎖可変ドメインポリペプチド；ｉｉ）ペプチドリンカー；ｉｉｉ）ＴＣＲβ鎖可変ドメインポリペプチド；及びｉｖ）ＴＣＲβ鎖定常領域細胞外ドメインポリペプチドを含む。いくつかの場合では、ｓｃＴＣＲは、Ｎ末端からＣ末端までの順序で、ｉ）ＴＣＲβ鎖可変ドメインポリペプチド；ｉｉ）ペプチドリンカー；ｉｉｉ）ＴＣＲα鎖可変ドメインポリペプチド；及びｉｖ）ＴＣＲα鎖定常領域細胞外ドメインポリペプチドを含む。

ペプチドががん関連ペプチドであるペプチド／ＨＬＡ複合体に特異的なｓｃＴＣＲのアミノ酸配列は、当該技術分野で知られている。例えば、ＵＳ２０１９／０１３５９１４；ＵＳ２０１９／００６２３９８；ＵＳ２０１８／０３７１０４９；ＵＳ２０１９／０１４４５６３；及びＵＳ２０１９／０１１９３５０を参照されたい。例えば、ｓｃＴＣＲは、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合したＳＬＬＭＷＩＴＱＣ（配列番号１７８）ペプチド等のＮＹ－ＥＳＯエピトープに特異的であり得る。例として、そのようなｓｃＴＣＲは、ｉ）ａａ配列：ＭＱＥＶＴＱＩＰＡＡ ＬＳＶＰＥＧＥＮＬＶ ＬＮＣＳＦＴＤＳＡ ＩＹＮＬＱＷＦＲＱＤ ＰＧＫＧＬＴＳＬＬＬ ＩＱＳＳＱＲＥＱＴＳ ＧＲＬＮＡＳＬＤＫＳ ＳＧＲＳＴＬＹＩＡＡ ＳＱＰＧＤＳＡＴＹＬ ＣＡＶＲＰＴＳＧＧＳ ＹＩＰＴＦＧＲＧＴＳ ＬＩＶＨＰＹ（配列番号２６９）（ａａ２０はＶまたはＡであり得；ａａ５１はＱ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、またはＭであり得；ａａ５２はＳ、Ｐ、Ｆ、またはＧであり得、ａａ５３はＳ、Ｗ、Ｈ、またはＴであり得；ａａ９４はＰ、Ｈ、またはＡであり得；ａａ９５はＴ、Ｌ、Ｍ、Ａ、Ｑ、Ｙ、Ｅ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｎ、Ｇ、Ｓ、Ｄ、またはＲであり得；ａａ９６はＳ、Ｌ、Ｔ、Ｙ、Ｉ、Ｑ、Ｖ、Ｅ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｇ、Ｈ、Ｄ、またはＫであり得；ａａ９７はＧ、Ｄ、Ｎ、Ｖ、Ｓ、Ｔ、またはＡであり得；ａａ９８はＧ、Ｐ、Ｈ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、またはＡであり得；ａａ９９はＳ、Ｔ、Ｙ、Ｄ、Ｈ、Ｖ、Ｎ、Ｅ、Ｇ、Ｑ、Ｋ、Ａ、Ｉ、またはＲであり得；ａａ１００はＹ、Ｆ、Ｍ、またはＤであり得；ａａ１０１はＩ、Ｐ、Ｔ、またはＭであり得；ａａ１０３はＴまたはＡであり得る）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＴＣＲα鎖可変領域；及びｉｉ）ａａ配列：ＭＧＶＴＱＴＰＫＦＱＶＬＫＴＧＱＳＭＴＬＱＣＡＱＤＭＮＨＥＹＭＳＷＹＲＱＤＰＧＭＧＬＲＬＩＨＹＳＶＧＡＧＩＴＤＱＧＥＶＰＮＧＹＮＶＳＲＳＴＴＥＤＦＰＬＲＬＬＳＡＡＰＳＱＴＳＶＹＦＣＡＳＳＹＶＧＮＴＧＥＬＦＦＧＥＧＳＲＬＴＶＬ（配列番号２７０）（ａａ１８はＭまたはＶであり得；ａａ５０はＧ、Ｖ、またはＩであり得；ａａ５２はＧまたはＱであり得；ａａ５３はＩ、Ｔ、またはＭであり得；ａａ５５はＤまたはＲであり得；ａａ５６はＱまたはＲであり得；ａａ７０はＴまたはＩであり得；ａａ９４はＹ、Ｎ、またはＦであり得；ａａ９５はＶまたはＬであり得；ａａ９７はＮ、Ｇ、またはＤであり得る）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＴＣＲβ鎖可変領域を含み得る。例えば、いくつかの場合では、ｓｃＴＣＲは、ｉ）ａａ配列：ＭＱＥＶＴＱＩＰＡＡ ＬＳＶＰＥＧＥＮＬ ＶＬＮＣＳＦＴＤＳ ＡＩＹＮＬＱＷＦＲＱ ＤＰＧＫＧＬＴＳＬ ＬＬＩＭＳＨＱＲＥＱ ＴＳＧＲＬＮＡＳＬＤ ＫＳＳＧＲＳＴＬＹＩ ＡＡＳＱＰＧＤＳＡＴ ＹＬＣＡＶＲＰＴＳＧ ＧＳＹＩＰＴＦＧＲＧ ＴＳＬＩＶＨＰＹ（配列番号２７１）を含むＴＣＲα鎖可変領域；及びａａ配列：ＭＧＶＴＱＴＰＫＦＱＶＬＫＴＧＱＳＭＴＬＱＣＡＱＤＭＮＨＥＹＭＳＷＹＲＱＤＰＧＭＧＬＲＬＩＨＹＳＶＳＡＧＩＴＤＱＧＥＶＰＮＧＹＮＶＳＲＳＴＴＥＤＦＰＬＲＬＬＳＡＡＰＳＱＴＳＶＹＦＣＡＳＳＹＶＧＮＴＧＥＬＦＦＧＥＧＳＲＬＴＶＬ（配列番号２７２）を含むＴＣＲβ鎖可変領域を含み得る。

別の例として、ｓｃＴＣＲは、ＨＬ重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含むＨＬＡ複合体に結合したＨＰＶペプチドエピトープ（例えば、ａａ配列ＹＩＩＦＶＹＩＰＬ（ＨＰＶ １６ Ｅ５６３－７１；配列番号２７３）、ＫＬＰＱＬＣＴＥＬ（ＨＰＶ １６ Ｅ６１１－１９；配列番号２７４）、ＴＩＨＥＩＩＬＥＣＶ（ＨＰＶ １６ Ｅ６；配列番号２７５）、ＹＭＬＤＬＱＰＥＴ（ＨＰＶ １６ Ｅ７１１－１９；配列番号２７６）、ＴＬＧＩＶＣＰＩ（ＨＰＶ １６ Ｅ７８６－９３；配列番号２７７）、ＫＣＩＤＦＹＳＲＩ（ＨＰＶ １８ Ｅ６６７－７５；配列番号２７８）、またはＦＱＱＬＦＬＮＴＬ（ＨＰＶ １８ Ｅ７８６－９４；配列番号２７９）のＨＰＶペプチド）に特異的であり得る。例として、そのようなｓｃＴＣＲは、ｉ）ａａ配列：ＭＥＴＬＬＧＬＬＩＬＱ ＬＱＬＱＷＶＳＳＫＱ ＥＶＴＱＩＰＡＡＬＳ ＶＰＥＧＥＮＬＶＬＮ ＣＳＦＴＤＳＡＩＹＮ ＬＱＷＦＲＱＤＰＧ ＫＧＬＴＳＬＬＬＩＱ ＳＳＱＲＥＱＴＳＧＲ ＬＮＡＳＬＤＫＳＳＧ ＲＳＴＬＹＩＡＡＳＱ ＰＧＤＳＡＴＹＬＣＡ ＶＲＥＴＳＧＳＲＬＴ ＦＧＥＧＴＱＬＴＶＮ ＰＤ（配列番号２８０）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＴＣＲα鎖可変領域；及びｉｉ）ａａ配列：ＭＧＩＲＬＬＣＲＶＡ ＦＣＦＬＡＶＧＬＶＤ ＶＫＶＴＱＳＳＲＹＬ ＶＫＲＴＧＥＫＶＦＬ ＥＣＶＱＤＭＤＨＥＮ ＭＦＷＹＲＱＤＰＧＬ ＧＬＲＬＩＹＦＳＹＤ ＶＫＭＫＥＫＧＤＩＰ ＥＧＹＳＶＳＲＥＫＫ ＥＲＦＳＬＩＬＥＳＡ ＳＴＮＱＴＳＭＹＬＣ ＡＳＳＦＷＧＲＳＴＤ ＴＱＹＦＧＰＧＴＲＬ ＴＶＬ（配列番号２８１）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むＴＣＲβ鎖可変領域を含み得る。

８ エピトープ及びそれらの評価
本開示のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、抗原決定基を提示する多様な分子に化学的コンジュゲーション部位でコンジュゲートされてＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが形成され得る。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰにコンジュゲートされ得るエピトープを提示する分子には、非ペプチドエピトープ（例えば、炭水化物エピトープ）、及びペプチドエピトープ、ホスホペプチドエピトープ、グリコシル化ペプチド（糖ペプチド）エピトープ、炭水化物、及びリポペプチドエピトープ（例えば、脂肪酸、イソプレノイド、ステロール、リン脂質、またはグリコシルホスファチジルイノシトールで修飾されたペプチド）を提示するものが含まれ；まとめて「エピトープ（ｅｐｉｔｏｐｅ）」または「エピトープ（ｅｐｉｔｏｐｅｓ）」と称される。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するペプチド、ホスホ－ペプチド、リポペプチド、または糖ペプチドのエピトープ提示配列は、４～２５個の連続ａａ（例えば、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、２０ａａ、２１ａａ、２２ａａ、２３ａａ、２４ａａ、もしくは２５ａａ、または７ａａ～２５ａａ、７ａａ～１２ａａ、７ａａ～２５ａａ、１０ａａ～１５ａａ、１５ａａ～２０ａａ、もしくは２０ａａ～２５ａａ）のペプチドであり得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのエピトープは、ｍＲＮＡから翻訳されるＴ細胞－ＭＰの一部ではなく、上で示されるとおり、化学的コンジュゲーション部位でＴ細胞－ＭＰに付加される。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートによるＴＣＲへの有効な提示のための候補ＭＨＣアレル及びペプチド（例えば、ホスホペプチド、リポペプチドまたは糖ペプチド）エピトープの組み合わせの選択は、遊離ペプチドが、エピトープコンジュゲートの一部として提示されるＴ細胞－ＭＰを構築するために使用される特定のＨＬＡアレルに対する親和性を有するかどうかを決定するために多数のよく知られている方法のいずれかを使用して達成され得る。

特定の重鎖アレル及びβ２Ｍと組み合わせたペプチドが、所望の様式（例えば、増殖、アネルギー、またはアポトーシスの誘導）でＴ細胞に影響を及ぼし得るかどうかを決定することが可能である。適用可能な方法には、Ｔ細胞－ＭＰと上で論述されるｗｔ．及びバリアントＭＯＤとの結合親和性を評価するために利用されるＢＬＩアッセイを含む、結合アッセイ及びＴ細胞活性化アッセイが含まれる。本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを調製するために使用されるエピトープ（例えば、ペプチドエピトープ）は、少なくとも１００μＭ（例えば、少なくとも１０μＭ、少なくとも１μＭ、少なくとも１００ｎＭ、少なくとも１０ｎＭ、または少なくとも１ｎＭ）の親和性でＴ細胞上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）に結合し得る。いくつかの場合では、エピトープは、約１０^－４Ｍ～約１０^－５Ｍ、約１０^－５Ｍ～約１０^－６Ｍ、約１０^－６Ｍ～約１０^－７Ｍ、約１０^－７Ｍ～約１０^－８Ｍ、または約１０^－８Ｍ～約１０^－９Ｍの親和性でＴ細胞上のＴＣＲに結合する。別の言い方をすれば、いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するエピトープは、約１ｎＭ～約１０ｎＭ、約１０ｎＭ～約１００ｎＭ、約０．１μＭ～約１μＭ、約１μＭ～約１０μＭ、約１０μＭ～約２５μＭ、約２５μＭ～約５０μＭ、約５０μＭ～約７５μＭ、または約７５μＭ～約１００μＭの親和性でＴ細胞上のＴＣＲに結合する。

ａ．細胞ベースの結合アッセイ
１つの例として、細胞ベースのペプチド誘導安定化アッセイは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートにおいて使用するために意図されるＨＬＡクラスＩアレルに候補ペプチドが結合するかどうかを決定するために使用され得る。その結合アッセイは、意図されるアレルを使用してＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートへの組み込みのためのペプチドを選択するために使用され得る。このアッセイでは、対象となるペプチドをＴＡＰ欠損性細胞、すなわち、欠損性の抗原処理に関連するトランスポーター（ＴＡＰ）機構を有し、結果的に、表面クラスＩ分子がほとんどない細胞に結合させる。そのような細胞には、例えば、ヒトＴ２細胞株（Ｔ２（１７４ ｘ ＣＥＭ．Ｔ２；Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）番号ＣＲＬ－１９９２））が含まれる。Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５５：１２６４。小胞体への細胞質ペプチドの効率的なＴＡＰ媒介輸送を伴わないと、構築されたクラスＩ複合体は、構造的に不安定であり、一時的にしか細胞表面で保持されない。しかしながら、Ｔ２細胞がクラスＩに結合することが可能な外因性ペプチドとインキュベートされた場合、表面ペプチド－ＨＬＡクラスＩ複合体は安定化され、例えば、汎抗クラスＩモノクローナル抗体でフローサイトメトリーによって、またはペプチドが蛍光標識されている場合に間接的に検出され得る。ペプチドの付加による細胞表面上のペプチド－ＨＬＡ複合体の安定化及び結果として生じる寿命の延長は、それらの同一性を確認する。したがって、様々なクラスＩ ＨＬＡ重鎖アレルによる提示のための候補ペプチドの結合は、対象となるＨＬＡ Ｈアレルを発現するようにＴ２または同様のＴＡＰ欠損性細胞を遺伝子修飾することによって試験され得る。

ＨＬＡ Ａ＊０２０１に結合するペプチドを評価するためのＴ２アッセイの使用の非限定的な例では、Ｔ２細胞を細胞培地で洗浄し、１０^６細胞／ｍｌで懸濁する。対象となるペプチドを細胞培地において調製し、連続希釈して２００μＭ、１００μＭ、２０μＭ及び２μＭの濃度を提供する。細胞を各ペプチド希釈物と１：１で混合して、２００μＬの最終体積ならびに１００μＭ、５０μＭ、１０μＭ及び１μＭの最終ペプチド濃度を得る。ＨＬＡ Ａ＊０２０１結合ペプチドであるＧＩＬＧＦＶＦＴＬ（配列番号２８２）、及び非ＨＬＡ Ａ＊０２０１限定ペプチドであるＨＰＶＧＥＡＤＹＦ（ＨＬＡ－Ｂ＊３５０１；配列番号２８３）をそれぞれ陽性及び陰性対照として含める。細胞／ペプチド混合物を３７℃で５％ＣＯ_２中で１０分間維持し；次いで室温で一晩インキュベートする。細胞を次いで、３７℃で２時間インキュベートし、蛍光標識された抗ヒトＨＬＡ抗体で染色する。細胞をリン酸緩衝生理食塩水で２回洗浄し、フローサイトメトリーを使用して分析する。抗ＨＬＡ抗体染色の平均的な平均蛍光強度（ＭＦＩ）を使用して結合の強度を測定する。

ＭＯＤがないＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート、特に高次複合体（例えば、二重体、四量体または五量体）の形態のものを含む標識された（例えば、放射性または蛍光標識されたペイロード）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートとＴ細胞との間のエピトープ特異的結合を確立するためにｉｎ ｖｉｔｒｏで使用され得る。しかしながら、Ｔ－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及び／またはＭＯＤがないＴ細胞－エピトープコンジュゲートによるＴ細胞結合は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ用途に制限されない。特にＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの高次複合体による結合は、例えば、エピトープ特異的Ｔ細胞の移動及び局在化を追跡するために、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで行われ得る。ＭＯＤがない分子の使用は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート上のＭＯＤと、対象とならない細胞上のＣｏ－ＭＯＤとの間の相互作用による潜在的干渉を制限するので有利である。そのようなｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏ結合評価において、ＭＯＤがない場合がある標識された（例えば、蛍光または放射性標識された）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートをｉｎ ｖｉｖｏで対象に投与し、またはｅｘ ｖｉｖｏで組織と接触させる。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが対象または組織におけるＴ細胞と結合すると、それは、標識の局在化によって証明されるように循環し、または局在化され得るＴ細胞を有効に標識する。したがって、そのような標識されたＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（それらのＭＯＤがないバリアントを含む）は、研究において及びコンパニオン診断としての両方で利用される。標識は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと標的Ｔ細胞との間のエピトープ特異的結合の評価及びそれらの運命を決定するためのエピトープ特異的Ｔ細胞の追跡を可能にする。標識はまた、ｉｎ ｖｉｖｏ及び／またはｅｘ ｖｉｖｏでＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの局在化の決定を可能にし、これは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが、医療処置が所望である組織（例えば、腫瘍組織）を含む組織に局在化されるかどうかを決定するために使用され得る。

ｂ．生化学的結合アッセイ
Ｔ細胞－ＭＰの構築における使用が意図された特定のアレルのＨＬＡ重鎖ポリペプチドと複合体化されたβ２Ｍポリペプチドを含むＭＨＣクラスＩ複合体は、無細胞ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイシステムにおいて対象となるペプチドに対する結合について試験され得る。例えば、標識された参照ペプチド（例えば、蛍光標識）をＭＨＣ－クラスＩ複合体に結合させてＭＨＣ－参照ペプチド複合体を形成する。対象となる試験ペプチドが、複合体からの標識参照ペプチドを移動させる能力が試験される。結合した参照ペプチドを移動させるのに必要とされる試験ペプチドの量として相対的結合親和性が計算される。例えば、ｖａｎ ｄｅｒ Ｂｕｒｇ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．４４：１８９を参照されたい。

別の例として、対象となるペプチドは、ＭＨＣクラスＩ複合体（ＨＬＡ重鎖ペプチド及びβ２Ｍを含有する）とインキュベートされ得、結合したペプチドによるＭＨＣ複合体の安定化がイムノアッセイ形式で測定され得る。対象となるペプチドがＭＨＣ複合体を安定化する能力は、既知のＴ細胞エピトープを提示する対照ペプチドのものと比較される。安定化の検出は、抗ＨＬＡ抗体を使用して、ペプチドに結合したＭＨＣ複合体のネイティブコンフォメーションの存在または非存在に基づく。例えば、Ｗｅｓｔｒｏｐ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３４１：７６；Ｓｔｅｉｎｉｔｚ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｂｌｏｏｄ １１９：４０７３；及び米国特許第９，２０５，１４４号を参照されたい。

ｃ．Ｔ細胞活性化アッセイ
所与のペプチドがＭＨＣクラスＩ複合体（ＨＬＡ重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含む）に結合するかどうか、及び、ＨＬＡ複合体に結合した場合、ＴＣＲにエピトープを有効に提示し得るかどうかは、ペプチド－ＨＬＡ複合体に対するＴ細胞反応を評価することによって決定され得る。測定され得るＴ細胞反応には、例えば、インターフェロン－ガンマ（ＩＦＮγ）生成、細胞傷害活性等が含まれる。

（ｉ）ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ
好適なＴ細胞活性化アッセイには、例えば、酵素結合イムノスポット（ＥＬＩＳＰＯＴ）アッセイが含まれ、その場合、標的細胞による産物の生成（例えば、標的ＣＤ８＋ＴによるＩＦＮγ生成）が、標的と、クラスＩ ＭＨＣ（例えば、ＨＬＡ）と複合体化された対象となるペプチドを提示する抗原提示細胞（ＡＰＣ）との接触の後に測定される。標的細胞が生成する因子（例えば、ＩＦＮγ）に対する抗体を、マルチウェルプレートのウェルに固定化する。ＡＰＣをウェルに添加し、プレートを、ペプチドがＡＰＣの表面上のＨＬＡクラスＩに結合するように、対象となるペプチドと所定期間インキュベートする。ペプチドに特異的なＣＤ８＋Ｔ細胞をウェルに添加し、プレートを約２４時間インキュベートする。次いでウェルを洗浄し、固定化された抗体に結合した任意の放出された因子（例えば、ＩＦＮγ）を、検出可能に標識された抗体を使用して検出する。比色分析アッセイが使用され得る。例えば、ＩＦＮγ放出が測定される場合、検出可能に標識された抗ＩＦＮγ抗体は、ビオチン標識された抗ＩＦＮγ抗体であり得、これは、アッセイを展開するために添加されるＢＣＩＰ／ＮＢＴ（５－ブロモ－４－クロロ－３－インドリルホスフェート／ニトロブルーテトラゾリウム）溶液を用いて、例えば、アルカリホスファターゼにコンジュゲートされたストレプトアビジンを使用して検出され得る。ＩＦＮγ分泌Ｔ細胞の存在は、着色したスポットによって同定される。陰性対照には、ペプチドと接触していないＡＰＣが含まれる。対象となるペプチドが特定のＨＬＡ Ｈ鎖を含むＨＬＡクラスＩ分子に有効に結合するかどうかを決定するために様々なＨＬＡ重鎖アレルを発現するＡＰＣが使用され得る。

（ｉｉ）細胞傷害アッセイ
所与のエピトープ（例えば、ペプチド）がβ２Ｍと複合体化された特定のＭＨＣクラスＩ重鎖アレルに結合するかどうか、及び、結合した場合、エピトープをＴＣＲに有効に提示し得るかどうかはまた、細胞傷害アッセイを使用して決定され得る。細胞傷害アッセイは、標的細胞と細胞傷害性ＣＤ８^＋Ｔ細胞とのインキュベートを伴う。標的細胞は、その表面上に、試験されるβ２Ｍ、及びエピトープ及びＭＨＣ重鎖アレルの組み合わせを含むＭＨＣクラスＩ複合体を提示する。標的細胞は、例えば、^５１Ｃｒで放射性標識され得る。標的細胞がエピトープを細胞傷害性ＣＤ８^＋Ｔ細胞上のＴＣＲに有効に提示する場合、それは、標的細胞に対してＣＤ８^＋Ｔ細胞による細胞傷害活性を誘導し、これは、溶解した標的細胞からの^５１の放出を測定することによって決定される。特定の細胞傷害性は、ペプチドの存在下での細胞傷害活性の量からペプチドの非存在下での細胞傷害活性の量を減算したものとして計算され得る。

（ｉｉｉ）ペプチド－ＨＬＡ四量体での抗原特異的Ｔ細胞の検出
別の例として、ペプチド－ＭＨＣ複合体の多量体（例えば、二量体、四量体、または五量体）は、標識またはタグ（例えば、蛍光または重金属タグ）を用いて生成される。多量体は次いで、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）またはマスサイトメトリー（ＣｙＴＯＦ）を介して特定のＴ細胞を同定及び定量するために使用され得る。エピトープ特異的Ｔ細胞の検出は、ペプチド結合ＨＬＡ分子が抗原特異的Ｔ細胞のサブセット上の特定のＴＣＲに結合することが可能であるという直接的証拠を提供する。例えば、Ｋｌｅｎｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２：２６３を参照されたい。

ｄ．エピトープ
Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するエピトープは、エピトープ特異的様式でＴ細胞によって結合され得る（すなわち、エピトープは、ＴＣＲがペプチドを認識するエピトープ特異的Ｔ細胞によって特異的に結合される）。エピトープ特異的Ｔ細胞は、特定のＭＨＣ－Ｈアレルポリペプチド／β２Ｍ複合体との関連で参照ａａ配列を有するエピトープに結合するが、同じ状況で提示される参照ａａ配列とは異なるエピトープには実質的に結合しない。例えば、エピトープ特異的Ｔ細胞は、参照ａａ配列を有する特定のＭＨＣ－Ｈアレルポリペプチド／β２Ｍ複合体との関連でエピトープに結合し得、同じ状況で存在する参照ａａ配列とは異なるエピトープには、仮にあったとしても、１０^－６Ｍ未満、１０^－５Ｍ未満、または１０^－４Ｍ未満の親和性で結合し得る。エピトープ特異的Ｔ細胞は、少なくとも１０^－７Ｍ、少なくとも１０^－８Ｍ、少なくとも１０^－９Ｍ、または少なくとも１０^－１０Ｍの親和性で特異的であるエピトープ（例えば、対象となるエピトープを提示するペプチド）に結合し得る。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するエピトープペプチドは、ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃ、－Ｅ、－Ｆまたは－Ｇアレルに特異的なエピトープを提示する。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するペプチドエピトープは、ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、Ａ＊０２０１、Ａ＊０３０１、Ａ＊１１０１、Ａ＊２３０１、Ａ＊２４０２、Ａ＊２４０７、Ａ＊３３０３、及び／またはＡ＊３４０１に限定されたエピトープを提示する。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するペプチドエピトープは、ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、Ｂ＊０８０１、Ｂ＊１５０２、Ｂ＊３８０２、Ｂ＊４００１、Ｂ＊４６０１、及び／またはＢ＊５３０１に限定されたエピトープを提示する。実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰに存在するペプチドエピトープは、Ｃ＊０１０２、Ｃ＊０３０３、Ｃ＊０３０４、Ｃ＊０４０１、Ｃ＊０６０２、Ｃ＊０７０１、Ｃ＊７０２、Ｃ＊０８０１、及び／またはＣ＊１５０２に限定されたエピトープを提示する。

クラスＩ ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を有するＴ細胞－ＭＰによってＴＣＲに結合及び提示され得るエピトープには、がん抗原、及び感染性物質（例えば、ウイルスまたは細菌物質）からの抗原がある。アレルゲンに対する過剰反応をもたらすＴ細胞異常調節（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞異常調節）の場合、提示され得るエピトープには、自己抗原（自己エピトープ）及びアレルゲンのエピトープが含まれる。例えば、アレルゲンは、ナッツ（例えば、木及び／またはピーナッツ）、グルテン、花粉、卵（例えば、ニワトリ、Ｇａｌｌｕｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓの卵）、甲殻類、大豆、魚、及び昆虫毒（例えば、ハチ及び／またはカリバチ毒抗原）のタンパク質または非タンパク質成分から選択され得る。同様に、ＣＤ８＋Ｔｒｅｇ細胞及び自己反応性ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の異常調節が自己免疫疾患をもたらす場合、提示されるエピトープは、例えば、多発性硬化症、ラスムッセン脳炎、腫瘍随伴症候群、セリアック病、全身性硬化症（ＳＳｃ）、１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）、グレーブス病（ＧＤ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、再生不良性貧血（ＡＡ）、または白斑に関連するタンパク質からのものであり得る。

（ｉ）がんに存在するエピトープ－がん関連抗原（「ＣＡＡ」）
Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの高次複合体に含めるのに好適なエピトープには、がん関連抗原に存在するエピトープが含まれるがこれらに限定されない。がん関連抗原は、当該技術分野で知られている；例えば、Ｃｈｅｅｖｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１５：５３２３を参照されたい。がん関連抗原には、α－葉酸受容体；炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）；ＣＤ１９；ＣＤ２０；ＣＤ２２；ＣＤ３０；ＣＤ３３；ＣＤ４４ｖ７／８；がん胎児性抗原（ＣＥＡ）；上皮糖タンパク質－２（ＥＧＰ－２）；上皮糖タンパク質－４０（ＥＧＰ－４０）；葉酸結合タンパク質（ＦＢＰ）；胎児アセチルコリン受容体；ガングリオシド抗原ＧＤ２；Ｈｅｒ２／ｎｅｕ；ＩＬ－１３Ｒ－ａ２；カッパ軽鎖；ＬｅＹ；Ｌ１細胞接着分子；黒色腫関連抗原（ＭＡＧＥ）；ＭＡＧＥ－Ａ１；メソテリン；ＭＵＣ１；ＮＫＧ２Ｄリガンド；がん胎児性抗原（ｈ５Ｔ４）；前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）；前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）；腫瘍関連糖タンパク質－７２（ＴＡＧ－７２）；血管内皮成長因子受容体－２（ＶＥＧＦ－Ｒ２）（例えば、Ｖｉｇｎｅｒｏｎ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：１５；及びＶｉｇｎｅｒｏｎ（２０１５）ＢｉｏＭｅｄ Ｒｅｓ．Ｉｎｔ’ｌ Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ ９４８５０１を参照されたい）；及び上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）ｖＩＩＩポリペプチド（例えば、Ｗｏｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：２９６５；及びＭｉａｏ ｅｔ ａｌ．（２０１４）ＰＬｏＳＯｎｅ ９：ｅ９４２８１を参照されたい）が含まれるがこれらに限定されない。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートへの組み込みのための好適なペプチドエピトープは、ＭＵＣ１ポリペプチド、ＬＭＰ２ポリペプチド、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）ｖＩＩＩポリペプチド、ＨＥＲ－２／ｎｅｕポリペプチド、黒色腫抗原（例えば、ＭＡＧＥ Ａ３）ポリペプチド、ｐ５３ポリペプチド、変異体ｐ５３ポリペプチド、ＮＹ－ＥＳＯ－１ポリペプチド、葉酸ヒドロラーゼ（前立腺特異的膜抗原；ＰＳＭＡ）ポリペプチド、ＣＥＡポリペプチド、Ｔ細胞によって認識される黒色腫抗原（メランＡ／ＭＡＲＴ１）ポリペプチド、Ｒａｓポリペプチド（ＫＲＡＳポリペプチドを含む）、ｇｐ１００ポリペプチド、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）ポリペプチド、ｂｃｒ－ａｂｌポリペプチド、チロシナーゼポリペプチド、スルビビンポリペプチド、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）ポリペプチド、ｈＴＥＲＴポリペプチド、肉腫転座切断点ポリペプチド、滑膜肉腫Ｘ（ＳＳＸ）切断点ポリペプチド、ＥｐｈＡ２ポリペプチド、酸ホスファターゼ、前立腺（ＰＡＰ）ポリペプチド、アポトーシスの黒色腫阻害因子（ＭＬ－ＩＡＰ）ポリペプチド、アルファ－フェトプロテイン（ＡＦＰ）ポリペプチド、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）ポリペプチド、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ ＥＴＳ融合）ポリペプチド、ＮＡ１７ポリペプチド、対合ボックス３（ＰＡＸ３）ポリペプチド、未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）ポリペプチド、アンドロゲン受容体ポリペプチド、サイクリンＢ１ポリペプチド、Ｎ－ｍｙｃがん原遺伝子（ＭＹＣＮ）ポリペプチド、Ｒａｓホモログ遺伝子ファミリーメンバーＣ（ＲｈｏＣ）ポリペプチド、チロシナーゼ関連タンパク質－２（ＴＲＰ－２）ポリペプチド、メソテリンポリペプチド、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）ポリペプチド、黒色腫関連抗原－１（ＭＡＧＥ Ａ１）ポリペプチド、シトクロムＰ４５０ １Ｂ１（ＣＹＰ１Ｂ１）ポリペプチド、胎盤特異的タンパク質１（ＰＬＡＣ１）ポリペプチド、ＢＯＲＩＳポリペプチド（ＣＣＣＴＣ結合因子またはＣＴＣＦとしても知られている）、ＥＴＶ６－ＡＭＬポリペプチド、乳癌抗原ＮＹ－ＢＲ－１ポリペプチド（アンキリンリピートドメイン含有タンパク質３０Ａとも称される）、Ｇ－タンパク質シグナル伝達の制御因子（ＲＧＳ５）ポリペプチド、Ｔ細胞によって認識される扁平上皮癌抗原（ＳＡＲＴ３）ポリペプチド、炭酸脱水酵素ＩＸポリペプチド、対合ボックス５（ＰＡＸ５）ポリペプチド、ＯＹ－ＴＥＳ１（精巣抗原；アクロシン結合タンパク質としても知られている）ポリペプチド、精子タンパク質１７ポリペプチド、リンパ球細胞特異的タンパク質－チロシンキナーゼ（ＬＣＫ）ポリペプチド、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、Ａ－キナーゼ固定タンパク質－４（ＡＫＡＰ－４）、滑膜肉腫Ｘ切断点２（ＳＳＸ２）ポリペプチド、Ｘ抗原ファミリーメンバー１（ＸＡＧＥ１）ポリペプチド、Ｂ７ホモログ３（Ｂ７Ｈ３；ＣＤ２７６としても知られている）ポリペプチド、レグマインポリペプチド（ＬＧＭＮ１；アスパラギニルエンドペプチダーゼとしても知られている）、Ｉｇ及びＥＧＦ相同性ドメインを有するチロシンキナーゼ－２（Ｔｉｅ－２；アンジオポイエチン－１受容体としても知られている）ポリペプチド、Ｐ抗原ファミリーメンバー４（ＰＡＧＥ４）ポリペプチド、血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦ２）ポリペプチド、ＭＡＤ－ＣＴ－１ポリペプチド、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）ポリペプチド、血小板由来成長因子受容体ベータ（ＰＤＧＦβ）ポリペプチド、ＭＡＤ－ＣＴ－２ポリペプチド、Ｆｏｓ関連抗原－１（ＦＯＳＬ）ポリペプチドまたはクローディン（例えば、クローディン１８．２）ポリペプチドの長さが約４ａａ～約２０ａａ（例えば、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、または２０ａａ）のペプチド断片である。いくつかの場合では、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）抗原が特に除外される。いくつかの場合では、アルファ－フェトプロテイン（ＡＦＰ）抗原が特に除外される。いくつかの場合では、ウィルムス腫瘍－１（ＷＴ１）抗原が特に除外される。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに組み込まれ得るがん関連抗原のアミノ酸配列は、当該技術分野で知られている；例えば、ＭＵＣ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＡ５６７３４）；ＬＭＰ２（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＡ４７０２４）；ＥＧＦＲｖＩＩＩ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１３３３８７０）；ＨＥＲ－２／ｎｅｕ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＩ６７１４７）；ＭＡＧＥ－Ａ３（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＨ１１７４４）；ｐ５３（ＧｅｎＢａｎｋ ＢＡＣ１６７９９）；ＮＹ－ＥＳＯ－１（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＡ０５９０８）；ＰＳＭＡ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＨ２５６７２）；ＣＥＡ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＡ５１９６７）；メラン／ＭＡＲＴ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００５５０２）；Ｒａｓ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１１２３９１４）；ｇｐ１００（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＣ６０６３４）；ｂｃｒ－ａｂｌ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＢ６０３８８）；チロシナーゼ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＢ６０３１９）；スルビビン（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＣ５１６６０）；ＰＳＡ（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＤ５４６１７）；ｈＴＥＲＴ（ＧｅｎＢａｎｋ ＢＡＣ１１０１０）；ＳＳＸ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１２６５６２０）；Ｅｐｈ２Ａ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００４４２２）；ＰＡＰ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＨ１６３４４）；ＭＬ－ＩＡＰ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＨ１４４７５）；ＥｐＣＡＭ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００２３４５）；ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ ＥＴＳ融合）（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＣＡ８１３８５）；ＰＡＸ３（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＩ０１３０１）；ＡＬＫ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００４２９５）；アンドロゲン受容体（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００００３５）；サイクリンＢ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＯ９９２７３）；ＭＹＣＮ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１２８０１５７）；ＲｈｏＣ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＨ５２８０８）；ＴＲＰ－２（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＣ６０６２７）；メソテリン（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＨ０９２７２）；ＰＳＣＡ（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＨ６５１８３）；ＭＡＧＥ Ａ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００４９７９）；ＣＹＰ１Ｂ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＭ５０５１２）；ＰＬＡＣ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＧ２２５９６）；ＢＯＲＩＳ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１２５５９６９）；ＥＴＶ６（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１９７８）；ＮＹ－ＢＲ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿４４３７２３）；ＳＡＲＴ３（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿０５５５２１）；炭酸脱水酵素ＩＸ（ＧｅｎＢａｎｋ ＥＡＷ５８３５９）；ＰＡＸ５（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿０５７９５３）；ＯＹ－ＴＥＳ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿１１５８７８）；精子タンパク質１７（ＧｅｎＢａｎｋ ＡＡＫ２０８７８）；ＬＣＫ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１０３６２３６）；ＨＭＷ－ＭＡＡ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１８８８）；ＡＫＡＰ－４（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００３８７７）；ＳＳＸ２（ＧｅｎＢａｎｋ ＣＡＡ６０１１１）；ＸＡＧＥ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１０９１０７３；ＸＰ＿００１１２５８３４；ＸＰ＿００１１２５８５６；及びＸＰ＿００１１２５８７２）；Ｂ７Ｈ３（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１０１９９０７；ＸＰ＿９４７３６８；ＸＰ＿９５０９５８；ＸＰ＿９５０９６０；ＸＰ＿９５０９６２；ＸＰ＿９５０９６３；ＸＰ＿９５０９６５；及びＸＰ＿９５０９６７）；ＬＧＭＮ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１００８５３０）；ＴＩＥ－２（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿０００４５０）；ＰＡＧＥ４（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１３０５８０６）；ＶＥＧＦＲ２（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００２２４４）；ＭＡＤ－ＣＴ－１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００５８９３ ＮＰ＿０５６２１５）；ＦＡＰ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００４４５１）；ＰＤＧＦβ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００２６００）；ＭＡＤ－ＣＴ－２（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００１１３８５７４）；及びＦＯＳＬ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿００５４２９）を参照されたい。これらのポリペプチドはまた、例えば、Ｃｈｅｅｖｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１５：５３２３、及びその中で引用されている参考文献；Ｗａｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１６：１６５３；Ｍａｔｓｕｉ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ５：２４９；Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ ３８３：１６８で論述されている。

（ａ）アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）
Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート、またはそれらの高次複合体（例えば、二重体）は、肝細胞癌、膵臓癌、胃癌、大腸癌、肝芽腫、及び卵巣卵黄嚢腫瘍に関連しているアルファ－フェトプロテイン（ＡＦＰ）のエピトープを提示するペプチドを含み得る。ＡＦＰエピトープは、ａ）ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、ＨＬＡ－Ａ＊２３０１、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、ＨＬＡ－Ａ＊２４０７、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１と少なくとも９５％のａａ（例えば、少なくとも９７％、９８％、または９９％）配列同一性を有するａａ配列；ｂ）ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ－Ｂ＊３８０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４００１、ＨＬＡ－Ｂ＊４６０１、またはＨＬＡ－Ｂ＊５３０１と少なくとも９５％のａａ（例えば、少なくとも９７％、９８％、または９９％）配列同一性を有するａａ配列；またはｃ）図３Ａ～３Ｇに示されるＨＬＡ－Ｃ＊０１０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０３、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０４、ＨＬＡ－Ｃ＊０４０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０６０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０８０１、またはＨＬＡ－Ｃ＊１５０２と少なくとも９５％のａａ（例えば、少なくとも９７％、９８％、または９９％）配列同一性を有するａａ配列を有し得るクラスＩ ＭＨＣポリペプチド配列との関連で提示され得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに含まれ得るＡＦＰペプチドには、ＡＩＴＲＫＭＡＡＴ（配列番号２８４）；ＡＹＴＫＫＡＰＱＬ（配列番号２８５）；ＬＬＮＱＨＡＣＡＶ（配列番号２８６）；ＫＬＶＬＤＶＡＨＶ（配列番号２８７）；ＦＭＮＫＦＩＹＥＩ（配列番号２８８）；ＳＩＰＬＦＱＶＰＥ（配列番号２８９）；ＬＬＮＦＴＥＳＲＴ（配列番号２９０）；ＦＶＱＥＡＴＹＫＦ（配列番号２９１）；ＡＴＹＫＥＶＳＫＭ（配列番号２９２）；ＫＥＶＳＫＭＶＫＤ（配列番号２９３）；ＲＨＮＣＦＬＡＨＫ（配列番号２９４）；ＡＴＡＡＴＣＣＱＬ（配列番号２９５）；ＹＩＱＥＳＱＡＬＡ（配列番号２９６）；ＱＬＴＳＳＥＬＭＡＩ（配列番号２９７）；ＫＬＳＱＫＦＴＫＶ（配列番号２９８）；ＫＥＬＲＥＳＳＬＬ（配列番号２９９）；ＳＬＶＶＤＥＴＹＶ（配列番号３００）；ＩＬＬＷＡＡＲＹＤ（配列番号３０１）；ＫＩＩＰＳＣＣＫＡ（配列番号３０２）；ＣＲＧＤＶＬＤＣＬ（配列番号３０３）；ＱＱＤＴＬＳＮＫＩ（配列番号３０４）；ＴＭＫＱＥＦＬＩＮＬ（配列番号３０５）；ＮＬＶＫＱＫＰＱＩ（配列番号３０６）；ＡＶＩＡＤＦＳＧＬ（配列番号３０７）；ＬＬＡＣＧＥＧＡＡ（配列番号３０８）；ＬＡＣＧＥＧＡＡＤ（配列番号３０９）；ＫＡＰＱＬＴＳＳＥＬ（配列番号３１０）；ＹＩＣＳＱＱＤＴＬ（配列番号３１１）；ＴＥＣＣＫＬＴＴＬ（配列番号３１２）；ＣＴＡＥＩＳＬＡＤＬ（配列番号３１３）；ＶＴＫＥＬＲＥＳＳＬ（配列番号３１４）；ＩＭＳＹＩＣＳＱＱＤ（配列番号３１５）；ＴＲＴＦＱＡＩＴＶ（配列番号３１６）；ＦＱＫＬＧＥＹＹＬ（配列番号３１７）；ＲＶＡＫＧＹＱＥＬ（配列番号３１８）；ＳＹＱＣＴＡＥＩＳＬ（配列番号３１９）；ＫＱＥＦＬＩＮＬＶ（配列番号３２０）；ＭＫＷＶＥＳＩＦＬ（配列番号３２１）；ＰＶＮＰＧＶＧＱＣ（配列番号３２２）；ＡＡＤＩＩＩＧＨＬ（配列番号３２３）；ＱＶＰＥＰＶＴＳＣ（配列番号３２４）；ＴＴＬＥＲＧＱＣＩＩ（配列番号３２５）；ＫＭＡＡＴＡＡＴＣ（配列番号３２６）；ＱＡＱＧＶＡＬＱＴＭ（配列番号３２７）；ＦＱＡＩＴＶＴＫＬ（配列番号３２８）；ＬＬＥＫＣＦＱＴＥ（配列番号３２９）；ＶＡＹＴＫＫＡＰＱ（配列番号３３０）；ＫＹＩＱＥＳＱＡＬ（配列番号３３１）；ＧＶＡＬＱＴＭＫＱ（配列番号３３２）；ＧＱＥＱＥＶＣＦＡ（配列番号３３３）；ＳＥＥＧＲＨＮＣＦＬ（配列番号３３４）；ＲＨＰＦＬＹＡＰＴＩ（配列番号３３５）；ＴＥＩＱＫＬＶＬＤＶ（配列番号３３６）；ＲＲＨＰＱＬＡＶＳＶ（配列番号３３７）；ＧＥＹＹＬＱＮＡＦＬ（配列番号３３８）；ＮＲＲＰＣＦＳＳＬＶ（配列番号３３９）；ＬＱＴＭＫＱＥＦＬＩ（配列番号３４０）；ＩＡＤＦＳＧＬＬＥＫ（配列番号３４１）；ＧＬＬＥＫＣＣＱＧＱ（配列番号３４２）；ＴＬＳＮＫＩＴＥＣ（配列番号３４３）；ＬＱＤＧＥＫＩＭＳＹ（配列番号３４４）；ＧＬＦＱＫＬＧＢＹ（配列番号３４５）；ＮＥＹＧＩＡＳＩＬＤ（配列番号３４６）；ＫＭＶＫＤＡＬＴＡＩ（配列番号３４７）；ＦＬＡＳＦＶＨＥＹ（配列番号３４８）；ＡＱＦＶＱＥＡＴＹ（配列番号３４９）；ＥＹＳＲＲＨＰＱＬ（配列番号３５０）；ＡＹＥＥＤＲＥＴＦ（配列番号３５１；ＳＹＡＮＲＲＰＣＦ（配列番号３５２）；ＣＦＡＥＥＧＱＫＬ（配列番号３５３）；ＲＳＣＧＬＦＱＫＬ（配列番号３５４）；ＩＦＬＩＦＬＬＮＦ（配列番号３５５）；ＫＰＥＧＬＳＰＮＬ（配列番号３５６）；及びＧＬＳＰＮＬＮＲＦＬ（配列番号３５７）が含まれるがこれらに限定されない。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＡＦＰペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２に限定されたエピトープを提示する。ＨＬＡ－Ａ＊２４０２に限定されたエピトープを提示するＡＦＰペプチドの非限定的な例には、ＫＹＩＱＥＳＱＡＬ（配列番号３３１）；ＥＹＹＬＱＮＡＦＬ（配列番号３５８）；ＡＹＴＫＫＡＰＱＬ（配列番号２８５）；ＥＹＳＲＲＨＰＱＬ（配列番号３５０）；ＲＳＣＧＬＦＱＫＬ（配列番号３５４）及びＡＹＥＥＤＲＥＴＦ（配列番号３５１）が含まれる。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＡＦＰペプチドは、ＫＹＩＱＥＳＱＡＬ（配列番号３３１）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＡＦＰペプチドは、ＥＹＹＬＱＮＡＦＬ（配列番号３５８）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＡＦＰペプチドは、ＡＹＴＫＫＡＰＱＬ（配列番号２８５）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＡＦＰペプチドは、ＥＹＳＲＲＨＰＱＬ（配列番号３５０）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＡＦＰペプチドは、ＲＳＣＧＬＦＱＫＬ（配列番号３５４）である。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに存在するＡＦＰペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１に限定されたエピトープを提示する。ＨＬＡ－Ａ＊０２０１に限定されたエピトープを提示するＡＦＰペプチドの非限定的な例は、ＦＭＮＫＦＩＹＥＩ（配列番号２８８）；及びＧＬＳＰＮＬＮＲＦＬ（配列番号３５７）である。

（ｂ）ウィルムス腫瘍抗原（ＷＴ－１）
Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及びそれらの高次複合体（例えば、二重体）は、骨髄性白血病、骨髄腫、卵巣癌、膵臓癌、非小細胞肺癌、大腸癌、乳癌、ウィルムス腫瘍、中皮腫、軟部組織肉腫、神経芽細胞腫、及び腎芽細胞腫に関連しているウィルムス腫瘍－１タンパク質のエピトープを提示するペプチドを含み得る。ＷＴ－１エピトープは、クラスＩ ＭＨＣ提示配列との関連で提示され得る。ＷＴ－１エピトープは、ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、ＨＬＡ－Ａ＊２３０１、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、ＨＬＡ－Ａ＊２４０７、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１と少なくとも９５％（例えば、少なくとも９７％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性；ｂ）ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ－Ｂ＊３８０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４００１、ＨＬＡ－Ｂ＊４６０１、またはＨＬＡ－Ｂ＊５３０１と少なくとも９５％のａａ配列同一性を有するａａ配列；またはｃ）図３Ａ～３Ｇに示されるＨＬＡ－Ｃ＊０１０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０３、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０４、ＨＬＡ－Ｃ＊０４０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０６０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０８０１、またはＨＬＡ－Ｃ＊１５０２と少なくとも９５％のａａ配列同一性を有するａａ配列を有するクラスＩ ＭＨＣ提示複合体との関連で提示され得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに含まれ得るＷＴ－１ペプチドには、ＮＬＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号３５９）、ＮＹＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号３６０）、ＣＭＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧ（配列番号３６１）、ＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡＡ（配列番号３６２）、ＣＭＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧ（配列番号３６３）、ＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡＡ（配列番号３６４）、ＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶ（配列番号３６５）、ＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３６６）、ＣＭＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧ（配列番号３６７）、ＭＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶ（配列番号３６８）、ＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３６９）、ＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡＡ（配列番号３７０）、ＭＮＬＧＡＴＬＫ（配列番号３７１）、ＭＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶ配列番号３７２）、ＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７３）、ＣＭＴＷＮＱＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７４）、ＣＭＴＷＮＬＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７５）、ＣＭＴＷＮＹＭＮＬＧＡＴＬＫＧＶＡ（配列番号３７６）、ＧＹＬＲＮＰＴＡＣ（配列番号３７７）、ＧＡＬＲＮＰＴＡＬ（配列番号３７８）、ＹＡＬＲＮＰＴＡＣ（配列番号３７９）、ＧＬＬＲＮＰＴＡＣ（配列番号３８０）、ＲＹＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８１）、ＹＱＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８２）、ＲＬＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８３）、ＲＩＲＰＨＰＧＡＬ（配列番号３８４）、ＱＦＰＮＨＳＦＫＨＥＤＰＭＧＱ（配列番号３８５）、ＨＳＦＫＨＥＤＰＹ（配列番号３８６）、ＱＦＰＮＨＳＦＫＨＥＤＰＭ（配列番号３８７）、ＱＦＰＮＨＳＦＫＨＥＤＰＹ（配列番号３８８）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＮＫ（配列番号３８９）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＹＫ（配列番号３９０）、ＦＭＣＡＹＰＧＣＹ（配列番号３９１）、ＦＭＣＡＹＰＧＣＫ（配列番号３９２）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＮＫＲＹ（配列番号３９３）、ＳＥＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＮＫ（配列番号３９４）、ＫＲＰＦＭＣＡＹＰＧＣＹＫＲＹ（配列番号３９５）、ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ（配列番号３９６）；ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号３９７）；ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号３９８）；ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ（配列番号３９９）；ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４００）；ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４０１）；及びＮＱＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号４０２）が含まれるがこれらに限定されない。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＷＴ－１ペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２に限定されたエピトープを提示する。ＨＬＡ－Ａ＊２４０２に限定されたエピトープを提示するＷＴ－１ペプチドには、例えば、ＣＭＴＷＮＱＭＮ（配列番号４０３）；ＮＹＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号３６０）（ＷＴ－１ ２３９～２４７；Ｑ２４０Ｙ）；ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４００）（ＷＴ－１ ２３５～２４３）；ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４０１）（ＷＴ－１ ２３５～２４３）；ＮＱＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号４０２）（ＷＴ－１ ２３９～２４７）；及びＮＬＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号３５９）（ＷＴ－１ ２３９～２４７；Ｑ２４０Ｌ）が含まれる。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＷＴ－１ペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１に限定されたエピトープを提示する。ＨＬＡ－Ａ＊０２０１に限定されたエピトープを提示するＷＴ－１ペプチドには、例えば、ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ（配列番号３９６）（ＷＴ－１ ３７～４５）；ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号３９７）（ＷＴ－１ １２６～１３４）；ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号３９８）（ＷＴ－１ １２６～１３４；Ｒ１２６Ｙ）；ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ（配列番号３９９）（ＷＴ－１ １８７～１９５）；及びＮＬＭＮＬＧＡＴＬ（配列番号３５９）（ＷＴ－１ ２３９～２４７；Ｑ２４０Ｌ）が含まれる。

（ｃ）ヒトパピローマウイルスＩ（ＨＰＶ）
Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及びそれらの高次複合体（例えば、二重体）は、子宮頸癌、前立腺癌、または卵巣癌に関連しているヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）のエピトープを提示するペプチドを含み得る。ＨＰＶエピトープは、クラスＩ ＭＨＣ提示配列との関連で提示され得る。ＨＰＶエピトープは、ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、ＨＬＡ－Ａ＊２３０１、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、ＨＬＡ－Ａ＊２４０７、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１と少なくとも９５％のａａ配列同一性；ｂ）ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ－Ｂ＊３８０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４００１、ＨＬＡ－Ｂ＊４６０１、またはＨＬＡ－Ｂ＊５３０１と少なくとも９５％（例えば、少なくとも９７％、９８％、または９９％）のａａ配列同一性を有するａａ配列；またはｃ）図３Ａ～３Ｇに示されるＨＬＡ－Ｃ＊０１０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０３、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０４、ＨＬＡ－Ｃ＊０４０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０６０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０８０１、またはＨＬＡ－Ｃ＊１５０２と少なくとも９５％のａａ配列同一性を有するａａ配列を有するクラスＩ ＭＨＣ提示複合体との関連で提示され得る。ＨＰＶはまた、感染性物質であり、そのエピトープは、感染症の予防または処置のためにＨＰＶに対する免疫反応を変化させるために用いられ得る。

ＨＰＶペプチドエピトープには、Ｅ６及びＥ７遺伝子産物：Ｅ６ １８－２６（ＫＬＰＱＬＣＴＥＬ；配列番号２７４）；Ｅ６ ２６～３４（ＬＱＴＴＩＨＤＩＩ；配列番号４０４）；Ｅ６ ４９～５７（ＶＹＤＦＡＦＲＤＬ；配列番号４０５）；Ｅ６ ５２～６０（ＦＡＦＲＤＬＣＩＶ；配列番号４０６）；Ｅ６ ７５～８３（ＫＦＹＳＫＩＳＥＹ；配列番号４０７）；Ｅ６ ８０～８８（ＩＳＥＹＲＨＹＣＹ；配列番号４０８）；Ｅ７ ７～１５（ＴＬＨＥＹＭＬＤＬ；配列番号４０９）；Ｅ７ １１～１９（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴ；配列番号２７６）；Ｅ７ ４４～５２（ＱＡＥＰＤＲＡＨＹ；配列番号４１０）；Ｅ７ ４９～５７（ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号４１１）；Ｅ７ ６１～６９（ＣＤＳＴＬＲＬＣＶ；配列番号４１２）；Ｅ７ ６７～７６（ＬＣＶＱＳＴＨＶＤＩ；配列番号４１３）；Ｅ７ ８２～９０（ＬＬＭＧＴＬＧＩＶ；配列番号４１４）；Ｅ７ ８６～９３（ＴＬＧＩＶＣＰＩ；配列番号２７７）；またはＥ７ ９２～９３（ＬＬＭＧＴＬＧＩＶＣＰＩ；配列番号４１５）からのものが含まれるがこれらに限定されない。

いくつかの場合では、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／８２～９０（ＬＬＭＧＴＬＧＩＶ；配列番号４１４）である。いくつかの場合では、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／８６～９３（ＴＬＧＩＶＣＰＩ；配列番号２７７）である。いくつかの場合では、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／１１～２０（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ；配列番号４１６）である。いくつかの場合では、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／１１～１９（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴ；配列番号２７６）である。追加の好適なＨＰＶエピトープについては、例えば、Ｒｅｓｓｉｎｇ ｅｔ ａｌ．（（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５９３４）を参照されたい。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに含めるのに好適なＨＰＶペプチドには、ＨＬＡ－Ａ２４に結合するＨＰＶ Ｅ６ペプチドが含まれる（例えば、ＨＬＡ－Ａ２４０１に限定されたエピトープである）。そのようなペプチドの非限定的な例には、ＶＹＤＦＡＦＲＤＬ（配列番号４０５）；ＣＹＳＬＹＧＴＴＬ（配列番号４１７）；ＥＹＲＨＹＣＹＳＬ（配列番号４１８）；ＫＬＰＱＬＣＴＥＬ（配列番号２７４）；ＤＰＱＥＲＰＲＫＬ（配列番号４１９）；ＨＹＣＹＳＬＹＧＴ（配列番号４２０）；ＤＦＡＦＲＤＬＣＩ（配列番号４２１）；ＬＹＧＴＴＬＥＱＱＹ（配列番号４２２）；ＨＹＣＹＳＬＹＧＴＴ（配列番号４２３）；ＥＶＹＤＦＡＦＲＤＬ（配列番号４２４）；ＥＹＲＨＹＣＹＳＬＹ（配列番号４２５）；ＶＹＤＦＡＦＲＤＬＣ（配列番号４２６）；ＹＣＹＳＩＹＧＴＴＬ（配列番号４２７）；ＶＹＣＫＴＶＬＥＬ（配列番号４２８）；ＶＹＧＤＴＬＥＫＬ（配列番号４２９）；及びＬＴＮＴＧＬＹＮＬＬ（配列番号４３０）が含まれる。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに含めるのに好適なＨＰＶペプチドは、ＤＬＱＰＥＴＴＤＬ（配列番号４３１）；ＴＬＨＥＹＭＬＤＬ（配列番号４０９）；ＴＰＴＬＨＥＹＭＬ（配列番号４３２）；ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号４１１）；ＧＴＬＧＩＶＣＰＩ（配列番号４３３）；ＥＰＤＲＡＨＹＮＩ（配列番号４３４）；ＱＬＦＬＮＴＬＳＦ（配列番号４３５）；ＦＱＱＬＦＬＮＴＬ（配列番号２７９）；及びＡＦＱＱＬＦＬＮＴＬ（配列番号４３６）からなる群から選択される。

いくつかの場合では、好適なＨＰＶペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊２４０１に限定されたエピトープを提示する。ＨＬＡ－Ａ＊２４０１に限定されたエピトープを提示するＨＰＶペプチドの非限定的な例は、ＶＹＤＦＡＦＲＤＬ（配列番号４０５）；ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号４１１）；ＣＤＳＴＬＲＬＣＶ（配列番号４１２）；及びＬＣＶＱＳＴＨＶＤＩ（配列番号４１３）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適なＨＰＶペプチドは、ＶＹＤＦＡＦＲＤＬ（配列番号４０５）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに含めるのに好適なＨＰＶペプチドは、ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号４１１）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適なＨＰＶペプチドは、ＣＤＳＴＬＲＬＣＶ（配列番号４１２）である。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰに含めるのに好適なＨＰＶペプチドは、ＬＣＶＱＳＴＨＶＤＩ（配列番号４１３）である。

（ｄ）Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）
Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及びそれらの高次複合体（例えば、二重体）は、肝細胞癌に関連しているＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）のエピトープを提示するペプチドを含み得る。ＨＢＶエピトープは、クラスＩ ＭＨＣ提示複合体との関連で提示され得る。クラスＩ ＭＨＣは、ａ）ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、ＨＬＡ－Ａ＊２３０１、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、ＨＬＡ－Ａ＊２４０７、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１と少なくとも９５％の配列同一性を有するａａ配列；ｂ）ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５０２、ＨＬＡ－Ｂ＊３８０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４００１、ＨＬＡ－Ｂ＊４６０１、またはＨＬＡ－Ｂ＊５３０１と少なくとも９５％のａａ配列同一性を有するａａ配列；またはｃ）図３Ａ～３Ｇに示されるＨＬＡ－Ｃ＊０１０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０３、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０４、ＨＬＡ－Ｃ＊０４０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０６０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０８０１、またはＨＬＡ－Ｃ＊１５０２と少なくとも９５％のａａ配列同一性を有するａａ配列であり得る。ＨＢＶはまた、感染性物質であり、そのエピトープは、感染症の予防または処置のためにＨＢＶに対する免疫反応を変化させるために用いられ得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに含めるのに好適なＨＢＶペプチドには、ＦＬＰＳＤＦＦＰＳＶ（配列番号４３７）、ＧＬＳＲＹＶＡＲＬＧ（配列番号４３８）、ＫＬＨＬＹＳＨＰＩ（配列番号４３９）、ＦＬＬＳＬＧＩＨＬ（配列番号４４０）、ＡＬＭＰＬＹＡＣＩ（配列番号４４１）、ＳＬＹＡＤＳＰＳＶ（配列番号４４２）、ＳＴＬＰＥＴＴＶＶ（配列番号４４３）、ＬＩＭＰＡＲＦＹＰＫ（配列番号４４４）、ＡＩＭＰＡＲＦＹＰＫ（配列番号４４５）、ＹＶＮＶＮＭＧＬＫ（配列番号４４６）、ＭＱＷＮＳＴＡＬＨＱＡＬＱＤＰ（配列番号４４７）、ＬＬＤＰＲＶＲＧＬ（配列番号４４８）、ＳＩＬＳＫＴＧＤＰＶ（配列番号４４９）、ＶＬＱＡＧＦＦＬＬ（配列番号４５０）、ＦＬＬＴＲＩＬＴＩ（配列番号４５１）、ＦＬＧＧＴＰＶＣＬ（配列番号４５２）、ＬＬＣＬＩＦＬＬＶ（配列番号４５３）、ＬＶＬＬＤＹＱＧＭＬ（配列番号４５４）、ＬＬＤＹＱＧＭＬＰＶ（配列番号４５５）、ＩＰＩＰＳＳＷＡＦ（配列番号４５６）、ＷＬＳＬＬＶＰＦＶ（配列番号４５７）、ＧＬＳＰＴＶＷＬＳＶ（配列番号４５８）、ＳＩＶＳＰＦＩＰＬＬ（配列番号４５９）、ＩＬＳＰＦＬＰＬＬ（配列番号４６０）、ＡＴＶＥＬＬＳＦＬＰＳＤＦＦＰＳＶ（配列番号４６１）、ＬＰＳＤＦＦＰＳＶ（配列番号４６２）、ＣＬＴＦＧＲＥＴＶ（配列番号４６３）、ＶＬＥＹＬＶＳＦＧＶ（配列番号４６４）、ＥＹＬＶＳＦＧＶＷ（配列番号４６５）、ＩＬＳＴＬＰＥＴＴＶ（配列番号４６６）、ＳＴＬＰＥＴＴＶＶＲＲ（配列番号４６７）、ＮＶＳＩＰＷＴＨＫ（配列番号４６８）、ＫＶＧＮＦＴＧＬＹ（配列番号４６９）、ＧＬＹＳＳＴＶＰＶ（配列番号４７０）、ＴＬＷＫＡＧＩＬＹＫ（配列番号４７１）、ＴＰＡＲＶＴＧＧＶＦ（配列番号４７２）、ＬＶＶＤＦＳＱＦＳＲ（配列番号４７３）、ＧＬＳＲＹＶＡＲＬ（配列番号４７４）、ＳＩＡＣＳＶＶＲＲ（配列番号４７５）、ＹＭＤＤＶＶＬＧＡ（配列番号４７６）、ＰＬＧＦＦＰＤＨ（配列番号４７７）、ＱＡＦＴＦＳＰＴＹＫ（配列番号４７８）、ＫＹＴＳＦＰＷＬＬ（配列番号４７９）、ＩＬＲＧＴＳＦＶＹＶ（配列番号４８０）、ＨＬＳＬＲＧＬＦＶ（配列番号４８１）、ＶＬＨＫＲＴＬＧＬ（配列番号４８２）、ＧＬＳＡＭＳＴＴＤＬ（配列番号４８３）、ＣＬＦＫＤＷＥＥＬ（配列番号４８４）、及びＶＬＧＧＣＲＨＫＬ（配列番号４８５）が含まれるがこれらに限定されない。

（ｉｉ）感染性物質
Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）Ｔ細胞－ＭＰに含まれ得る感染性物質からの好適なエピトープには、感染性ウイルス、細菌、真菌、原生動物、または寄生蠕虫疾患を引き起こす物質に存在するエピトープ、例えば、ウイルスがコードするポリペプチドによって提示されるエピトープが含まれるがこれらに限定されない。

ウイルス感染病物質の例には、例えば、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、アルファウイルス（トガウイルス）、東部ウマ脳炎ウイルス、東部ウマ脳脊髄炎ウイルス、ベネズエラウマ脳脊髄炎ワクチン株ＴＣ－８３、西部ウマ脳脊髄炎ウイルス、アレナウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（非神経向性株）、タカリベウイルス複合体、ブニヤウイルス、ブニヤムウェラウイルス、リフトバレー熱ウイルスワクチン株ＭＰ－１２、チクングンヤウイルス、カルシウイルス、コロナウイルス、ウシポックスウイルス、フラビウイルス（トガウイルス）－群Ｂアルボウイルス、デングウイルス血清型１、２、３、及び４、黄熱病ウイルスワクチン株１７Ｄ、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、及びＥ型肝炎ウイルス、サイトメガロウイルス、エプスタインバーウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、単純ヘルペス１及び２型、帯状疱疹、ヒトヘルペスウイルス６及び７型、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＶＣ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、インフルエンザウイルスＡ、Ｂ、及びＣ型、パポバウイルス、ニューカッスル病ウイルス、麻疹ウイルス、おたふく風邪ウイルス、パラインフルエンザウイルス１、２、３、及び４型、ポリオーマウイルス（ＪＣウイルス、ＢＫウイルス）、呼吸器合胞体ウイルス、ヒトパルボウイルス（Ｂ１９）、コクサッキーウイルスＡ及びＢ型、エコーウイルス、ポリオウイルス、ライノウイルス、小痘瘡（天然痘マイナーウイルス）、天然痘（天然痘メジャーウイルス）、ホワイトポックスレオウイルス、コルチウイルス、ヒトロタウイルス、及びオルビウイルス（コロラドダニ熱ウイルス）、狂犬病ウイルス、水胞性口炎ウイルス、ルビウイルス（風疹）、セムリキフォレストウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス、アレナウイルス（南米出血熱ウイルスとしても知られている）、フレキサール（Ｆｌｅｘａｌ）、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭ）（神経向性株）、ハンターンウイルスを含むハンタウイルス、リフトバレー熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス、サル痘ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）１及び２型、ヒトＴ細胞リンパ向性ウイルス（ＨＴＬＶ）１及び２型、サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）、水胞性口炎ウイルス、グアナリトウイルス、ラッサ熱ウイルス、フニンウイルス、マチュポウイルス、サビア、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、中欧ダニ媒介性脳炎、極東ダニ媒介性脳炎、ハンザロバ、ヒプル（Ｈｙｐｒ）、クムリンゲ、キャサヌールフォレスト病、オムスク出血熱、及びロシア春夏脳炎ウイルスを含むダニ媒介性脳炎ウイルス複合体（フラビ）、サルヘルペスウイルス（ヘルペスＢまたはサルＢウイルス）、セルコピテシンヘルペスウイルス１（ヘルペスＢウイルス）、ウマモルビリウイルス（ヘンドラ及びヘンドラ様ウイルス）、ニパウイルス、天然痘メジャーウイルス（スモールポックスウイルス）、天然痘マイナーウイルス（小痘瘡）、アフリカ豚熱ウイルス、アフリカウマ病ウイルス、アカバネウイルス、トリインフルエンザウイルス（高病原性）、ブルータングウイルス、ラクダポックスウイルス、古典的ブタ熱ウイルス、Ｃｏｗｄｒｉａ ｒｕｍｉｎａｎｔｉｕｍ（心水病）、口蹄疫ウイルス、ヤギポックスウイルス、日本脳炎ウイルス、ランピースキン病ウイルス、悪性カタル熱ウイルス、メナングルウイルス、ニューカッスル病ウイルス（ＶＶＮＤ）、水胞性口炎ウイルス（外来）、及びジカウイルスが含まれる。そのようなウイルスによってコードされる抗原は、当該技術分野で知られている；本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートにおいて使用するのに好適なペプチドエピトープには、任意の既知のウイルス抗原からのペプチドが含まれ得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを既定の標的細胞または組織（例えば、がん性細胞または組織）に仕向ける標的化配列（例えば、がん関連ポリペプチドに対して仕向けられた標的化配列）を含む実施形態では、エピトープは、有利には、例えば、外来物質、例えば、ウイルスまたは細菌に対する曝露、またはワクチン接種に起因する患者に既に存在するＴ細胞に結合するものである。例えば、エピトープは、ヒト集団の大部分に感染するウイルス、例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、ヒトパピローマウイルス、アデノウイルス等、またはヒト集団の大部分がワクチン接種を介して免疫を有するウイルス、例えば、破傷風、または患者が特に、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートでの処置の前に、例えば、ＣＭＶ、破傷風またはＨＰＶワクチンでワクチン接種されたウイルスによってコードされるウイルス抗原に存在するエピトープであり得る。結果は、患者に存在するＴ細胞が、エピトープを提示する細胞に対する作用から、標的化配列によって認識される標的細胞または組織に対する作用まで有効に再指向されることである。例えば、図１８を参照されたい。

（ａ）ＣＭＶペプチドエピトープ
上記のように、いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＣＭＶペプチドエピトープ、すなわち、ＭＨＣ／ペプチド複合体（例えば、ＨＬＡ／ペプチド複合体）において、ＣＭＶエピトープ（すなわち、ＣＭＶ抗原に存在するエピトープ）をＴ細胞に提示するペプチドを含む。本開示の他のペプチドエピトープと同様に、ＣＭＶペプチドエピトープは、少なくとも４アミノ酸、例えば、４アミノ酸～約２５アミノ酸（例えば、４アミノ酸（ａａ）、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、２０ａａ、２１ａａ、２２ａａ、２３ａａ、２４ａａ、または２５ａａ（長さが４～２０ａａ、６～１８ａａ、８～１５ａａ、８～１２ａａ、５～１０ａａ、１０～１５ａａ、１５～２０ａａ、１０～２０ａａ、または１５～２５ａａの範囲内を含む））の長さを有する。

所与のＣＭＶエピトープ特異的Ｔ細胞は、所与のＣＭＶエピトープの参照アミノ酸配列を有するエピトープに結合するが、参照アミノ酸配列とは異なるエピトープには実質的に結合しない。例えば、所与のＣＭＶエピトープ特異的Ｔ細胞は、参照アミノ酸配列を有するＣＭＶエピトープに結合し、参照アミノ酸配列とは異なるエピトープに、仮にあったとしても、１０－６Ｍ未満、１０－５Ｍ未満、または１０－４Ｍ未満の親和性で結合する。所与のＣＭＶエピトープ特異的Ｔ細胞は、少なくとも１０－７Ｍ、少なくとも１０－８Ｍ、少なくとも１０－９Ｍ、または少なくとも１０－１０Ｍの親和性で特異的であるエピトープに結合し得る。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｐｐ６５からのペプチドである。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｇＢ（糖タンパク質Ｂ）からのペプチドである。

例えば、いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶペプチドエピトープは、少なくとも４アミノ酸、例えば、４アミノ酸～約２５アミノ酸（例えば、４アミノ酸（ａａ）、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、２０ａａ、２１ａａ、２２ａａ、２３ａａ、２４ａａ、または２５ａａ（長さが４～２０ａａ、６～１８ａａ、８～１５ａａ、８～１２ａａ、５～１０ａａ、１０～１５ａａ、１５～２０ａａ、１０～２０ａａ、または１５～２５ａａの範囲を含む））の長さを有し、かつ以下のＣＭＶ ｐｐ６５アミノ酸配列：

ＭＥＳＲＧＲＲＣＰＥ ＭＩＳＶＬＧＰＩＳＧ ＨＶＬＫＡＶＦＳＲＧ ＤＴＰＶＬＰＨＥＴＲ ＬＬＱＴＧＩＨＶＲＶ ＳＱＰＳＬＩＬＶＳＱ ＹＴＰＤＳＴＰＣＨＲ ＧＤＮＱＬＱＶＱＨＴ ＹＦＴＧＳＥＶＥＮＶ ＳＶＮＶＨＮＰＴＧＲ ＳＩＣＰＳＱＥＰＭＳ ＩＹＶＹＡＬＰＬＫＭ ＬＮＩＰＳＩＮＶＨＨ ＹＰＳＡＡＥＲＫＨＲ ＨＬＰＶＡＤＡＶＩＨ ＡＳＧＫＱＭＷＱＡＲ ＬＴＶＳＧＬＡＷＴＲ ＱＱＮＱＷＫＥＰＤＶ ＹＹＴＳＡＦＶＦＰＴ ＫＤＶＡＬＲＨＶＶＣ ＡＨＥＬＶＣＳＭＥＮ ＴＲＡＴＫＭＱＶＩＧ ＤＱＹＶＫＶＹＬＥＳ ＦＣＥＤＶＰＳＧＫＬ ＦＭＨＶＴＬＧＳＤＶ ＥＥＤＬＴＭＴＲＮＰ ＱＰＦＭＲＰＨＥＲＮ ＧＦＴＶＬＣＰＫＮＭ ＩＩＫＰＧＫＩＳＨＩ ＭＬＤＶＡＦＴＳＨＥ ＨＦＧＬＬＣＰＫＳＩ ＰＧＬＳＩＳＧＮＬＬ ＭＮＧＱＱＩＦＬＥＶ ＱＡＩＲＥＴＶＥＬＲ ＱＹＤＰＶＡＡＬＦＦ ＦＤＩＤＬＬＬＱＲＧ ＰＱＹＳＥＨＰＴＦＴ ＳＱＹＲＩＱＧＫＬＥ ＹＲＨＴＷＤＲＨＤＥ ＧＡＡＱＧＤＤＤＶＷ ＴＳＧＳＤＳＤＥＥＬ ＶＴＴＥＲＫＴＰＲＶ ＴＧＧＧＡＭＡＧＡＳ ＴＳＡＧＲＫＲＫＳＡ ＳＳＡＴＡＣＴＳＧＶ ＭＴＲＧＲＬＫＡＥＳ ＴＶＡＰＥＥＤＴＤＥ ＤＳＤＮＥＩＨＮＰＡ ＶＦＴＷＰＰＷＱＡＧ ＩＬＡＲＮＬＶＰＭＶ ＡＴＶＱＧＱＮＬＫＹ ＱＥＦＦＷＤＡＮＤＩ ＹＲＩＦＡＥＬＥＧＶ ＷＱＰＡＡＱＰＫＲＲ ＲＨＲＱＤＡＬＰＧＰ ＣＩＡＳＴＰＫＫＨＲ Ｇ（配列番号４８６）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＭＶポリペプチドのペプチドである。

１つの非限定的な例として、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶペプチドエピトープは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶペプチドエピトープは、以下のＣＭＶ ｇＢアミノ酸配列：

ＭＥＳＲＩＷＣＬＶＶＣＶＮＬＣＩＶＣＬＧＡＡＶＳＳＳＳＴＳＨＡＴＳＳＴＨＮＧＳＨＴＳＲＴＴＳＡＱＴＲＳＶＹＳＱＨＶＴＳＳＥＡＶＳＨＲＡＮＥＴＩＹＮＴＴＬＫＹＧＤＶＶＧＶＮＴＴＫＹＰＹＲＶＣＳＭＡＱＧＴＤＬＩＲＦＥＲＮＩＩＣＴＳＭＫＰＩＮＥＤＬＤＥＧＩＭＶＶＹＫＲＮＩＶＡＨＴＦＫＶＲＶＹＱＫＶＬＴＦＲＲＳＹＡＹＩＹＴＴＹＬＬＧＳＮＴＥＹＶＡＰＰＭＷＥＩＨＨＩＮＫＦＡＱＣＹＳＳＹＳＲＶＩＧＧＴＶＦＶＡＹＨＲＤＳＹＥＮＫＴＭＱＬＩＰＤＤＹＳＮＴＨＳＴＲＹＶＴＶＫＤＱＷＨＳＲＧＳＴＷＬＹＲＥＴＣＮＬＮＣＭＬＴＩＴＴＡＲＳＫＹＰＹＨＦＦＡＴＳＴＧＤＶＶＹＩＳＰＦＹＮＧＴＮＲＮＡＳＹＦＧＥＮＡＤＫＦＦＩＦＰＮＹＴＩＶＳＤＦＧＲＰＮＡＡＰＥＴＨＲＬＶＡＦＬＥＲＡＤＳＶＩＳＷＤＩＱＤＥＫＮＶＴＣＱＬＴＦＷＥＡＳＥＲＴＩＲＳＥＡＥＤＳＹＨＦＳＳＡＫＭＴＡＴＦＬＳＫＫＱＥＶＮＭＳＤＳＡＬＤＣＶＲＤＥＡＩＮＫＬＱＱＩＦＮＴＳＹＮＱＴＹＥＫＹＧＮＶＳＶＦＥＴＳＧＧＬＶＶＦＷＱＧＩＫＱＫＳＬＶＥＬＥＲＬＡＮＲＳＳＬＮＩＴＨＲＴＲＲＳＴＳＤＮＮＴＴＨＬＳＳＭＥＳＶＨＮＬＶＹＡＱＬＱＦＴＹＤＴＬＲＧＹＩＮＲＡＬＡＱＩＡＥＡＷＣＶＤＱＲＲＴＬＥＶＦＫＥＬＳＫＩＮＰＳＡＩＬＳＡＩＹＮＫＰＩＡＡＲＦＭＧＤＶＬＧＬＡＳＣＶＴＩＮＱＴＳＶＫＶＬＲＤＭＮＶＫＥＳＰＧＲＣＹＳＲＰＶＶＩＦＮＦＡＮＳＳＹＶＱＹＧＱＬＧＥＤＮＥＩＬＬＧＮＨＲＴＥＥＣＱＬＰＳＬＫＩＦＩＡＧＮＳＡＹＥＹＶＤＹＬＦＫＲＭＩＤＬＳＳＩＳＴＶＤＳＭＩＡＬＤＩＤＰＬＥＮＴＤＦＲＶＬＥＬＹＳＱＫＥＬＲＳＳＮＶＦＤＬＥＥＩＭＲＥＦＮＳＹＫＱＲＶＫＹＶＥＤＫＶＶＤＰＬＰＰＹＬＫＧＬＤＤＬＭＳＧＬＧＡＡＧＫＡＶＧＶＡＩＧＡＶＧＧＡＶＡＳＶＶＥＧＶＡＴＦＬＫＮＰＦＧＡＦＴＩＩＬＶＡＩＡＶＶＩＩＴＹＬＩＹＴＲＱＲＲＬＣＴＱＰＬＱＮＬＦＰＹＬＶＳＡＤＧＴＴＶＴＳＧＳＴＫＤＴＳＬＱＡＰＰＳＹＥＥＳＶＹＮＳＧＲＫＧＰＧＰＰＳＳＤＡＳＴＡＡＰＰＹＴＮＥＱＡＹＱＭＬＬＡＬＡＲＬＤＡＥＱＲＡＱＱＮＧＴＤＳＬＤＧＱＴＧＴＱＤＫＧＱＫＰＮＬＬＤＲＬＲＨＲＫＮＧＹＲＨＬＫＤＳＤＥＥＥＮＶ（配列番号４８８）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＭＶポリペプチドの少なくとも４アミノ酸、例えば、４アミノ酸～約２５アミノ酸（例えば、４アミノ酸（ａａ）、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、２０ａａ、２１ａａ、２２ａａ、２３ａａ、２４ａａ、または２５ａａ（長さが４～２０ａａ、６～１８ａａ、８～１５ａａ、８～１２ａａ、５～１０ａａ、１０～１５ａａ、１５～２０ａａ、１０～２０ａａ、または１５～２５ａａの範囲を含む））の長さを有するペプチドである。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶエピトープは、ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃ、－Ｅ、－Ｆ、または－Ｇアレルに特異的なエピトープを提示する。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するペプチドエピトープは、ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、Ａ＊０２０１、Ａ＊０３０１、Ａ＊１１０１、Ａ＊２３０１、Ａ＊２４０２、Ａ＊２４０７、Ａ＊３３０３、及び／またはＡ＊３４０１に限定されるエピトープを提示する。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶエピトープは、ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、Ｂ＊０８０１、Ｂ＊１５０２、Ｂ＊３８０２、Ｂ＊４００１、Ｂ＊４６０１、及び／またはＢ＊５３０１に限定されるエピトープを提示する。いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＣＭＶエピトープは、Ｃ＊０１０２、Ｃ＊０３０３、Ｃ＊０３０４、Ｃ＊０４０１、Ｃ＊０６０２、Ｃ＊０７０１、Ｃ＊７０２、Ｃ＊０８０１、及び／またはＣ＊１５０２に限定されるエピトープを提示する。１つの例として、いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ａ）アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有するＣＭＶペプチドエピトープ；ｂ）ＨＬＡ－Ａ＊０２０１クラスＩ重鎖ポリペプチド；及びｃ）β２Ｍポリペプチドを含む。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、がん標的化ポリペプチド（ＣＴＰ）として、がん細胞の表面上に存在するＨｅｒ２ポリペプチドに特異的なｓｃＦｖまたはナノボディを含み；エピトープとしてＣＭＶペプチドエピトープを含む。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドは、ＣＭＶ ｐｐ６５ポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｇＢポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＣＴＰとして、がん細胞の表面上に存在するＭＵＣ１ポリペプチドに特異的なｓｃＦｖまたはナノボディを含み；エピトープとしてＣＭＶペプチドエピトープを含む。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｐｐ６５ポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドは、ＣＭＶ ｇＢポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＣＴＰとして、がん細胞の表面上に存在するＷＴ１ポリペプチドに特異的なｓｃＦｖまたはナノボディを含み；エピトープとしてＣＭＶペプチドエピトープを含む。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｐｐ６５ポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｇＢポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＣＴＰとして、がん細胞の表面上に存在するメソテリンポリペプチドに特異的なｓｃＦｖまたはナノボディを含み；エピトープとしてＣＭＶペプチドエピトープを含む。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｐｐ６５ポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｇＢポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＣＴＰとして、がん細胞の表面上に存在するＣＤ１９ポリペプチドに特異的なｓｃＦｖまたはナノボディを含み；エピトープとしてＣＭＶペプチドエピトープを含む。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｐｐ６５ポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｇＢポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＣＴＰとして、がん細胞の表面上に存在するＢＣＭＡポリペプチドに特異的なｓｃＦｖまたはナノボディを含み；エピトープとしてＣＭＶペプチドエピトープを含む。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｐｐ６５ポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｇＢポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

いくつかの場合では、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、ＣＴＰとして、がん細胞の表面上に存在するＭＵＣ１６ポリペプチドに特異的なｓｃＦｖまたはナノボディを含み；エピトープとしてＣＭＶペプチドエピトープを含む。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｐｐ６５ポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、ＣＭＶ ｇＢポリペプチドのペプチドである。いくつかの場合では、ＣＭＶペプチドエピトープは、アミノ酸配列ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（配列番号４８７）を有し、９アミノ酸の長さを有する。

９ ペイロード－－薬物及び他のコンジュゲート
Ｔ細胞－ＭＰのポリペプチド鎖は、化学的コンジュゲーション部位でポリペプチド鎖に連結された（例えば、共有結合した）治療剤（例えば、小分子薬物または治療剤）、標識（例えば、蛍光標識または放射性標識）、または他の生物学的活性剤等の結合したペイロードを含み得る。例えば、Ｔ細胞－ＭＰがＦｃポリペプチドを含む場合、Ｆｃポリペプチドは、がん、感染性疾患、または自己免疫疾患を処置する、またはそのような疾患の症状を軽減する薬剤である共有結合したペイロードを含み得る。

ペイロードは、本開示のＴ細胞－ＭＰのポリペプチド鎖の一部である化学的コンジュゲーション部位に（例えば、Ｉｇ Ｆｃポリペプチド等の骨格に）直接的にまたは間接的に連結され得る。直接連結は、ａａ側鎖に対する直接的な連結を伴い得る。間接連結は、２官能性架橋リンカー等の架橋リンカーを介して連結され得る。ペイロードは、架橋剤との反応によって形成されるチオエーテル結合、アミド結合、カルバメート結合、ジスルフィド結合、またはエーテル結合を含むがこれらに限定されない任意の許容可能な化学的連結によってＴ細胞－ＭＰに連結され得る。

架橋剤（架橋物質）には、ペイロード及び／または標的化配列をＴ細胞－ＭＰポリペプチドに連結させるために使用され得る切断可能な架橋剤及び切断可能ではない架橋剤が含まれる。架橋剤は、反応性ＮＨＳ、マレイミド、ヨード酢酸、ブロモ酢酸及び／またはカルボキシル基を含み得る。いくつかの場合では、架橋リンカーは、プロテアーゼ切断性架橋リンカーである。好適な架橋剤には、例えば、ペプチド（例えば、長さが２～１０；例えば、長さが２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ａａ）、アルキル鎖、ポリ（エチレングリコール）、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸に不安定な基、光に不安定な基、ペプチダーゼに不安定な基、及びエステラーゼに不安定な基が含まれ得る。好適な架橋剤の非限定的な例は、Ｎ－スクシンイミジル－［（Ｎ－マレイミドプロピオンアミド）－テトラエチレングリコール］エステル（ＮＨＳ－ＰＥＧ４－マレイミド）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）２－スルホブタノエート（スルホ－ＳＰＤＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（２－ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）；Ｎ－スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシ－（６－アミドカプロエート）（ＬＣ－ＳＭＣＣ）；κ－マレイミドウンデカン酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＫＭＵＡ）；γ－マレイミド酪酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＧＭＢＳ）；ε－マレイミドカプロン酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）；ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）；Ｎ－（α－マレイミドアセトキシ）－スクシンイミドエステル（ＡＭＡＳ）；スクシンイミジル－６－（β－マレイミドプロピオンアミド）ヘキサノエート（ＳＭＰＨ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（ｐ－マレイミドフェニル）ブチレート（ＳＭＰＢ）；Ｎ－（ｐ－マレイミドフェニル）イソシアネート（ＰＭＰＩ）；Ｎ－スクシンイミジル４（２－ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）；Ｎ－スクシンイミジル（４－ヨード－アセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）；６－マレイミドカプロイル（ＭＣ）；マレイミドプロパノイル（ＭＰ）；ｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢ）；Ｎ－スクシンイミジル４－（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）；Ｎ－スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－１－カルボキシ－（６－アミドカプロエート）、ＳＭＣＣ（ＬＣ－ＳＭＣＣ）の「長鎖」アナログ；３－マレイミドプロパン酸Ｎ－スクシンイミジルエステル（ＢＭＰＳ）；Ｎ－スクシンイミジルヨードアセテート（ＳＩＡ）；Ｎ－スクシンイミジルブロモアセテート（ＳＢＡ）；及びＮ－スクシンイミジル３－（ブロモアセタミド）プロピオネート（ＳＢＡＰ）である。

Ｔ細胞－ＭＰ－ペイロードコンジュゲートは、１～１０個の反応性基を導入するためにＴ細胞－ＭＰポリペプチド（例えば、Ｔ細胞－ＭＰのＩｇ Ｆｃポリペプチド）と架橋試薬との反応によって形成され得る。ポリペプチドは次いで、Ｔ細胞－ＭＰ－ペイロードコンジュゲートを生成するために、コンジュゲートされる分子（例えば、チオール含有ペイロード薬物、標識または薬剤）と反応させられる。例えば、本開示のＴ細胞－ＭＰがＩｇ Ｆｃポリペプチドを含む場合、コンジュゲートは、（Ａ）－（Ｌ）－（Ｃ）のものであり得、（Ａ）は、Ｉｇ Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチド鎖であり；（Ｌ）は、存在する場合、架橋リンカーであり；（Ｃ）は、ペイロードである。（Ｌ）は、存在する場合、（Ａ）を（Ｃ）に連結させる。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰには、１つ以上（例えば、２、３、４、５、または５超）の分子のペイロードを含むＩｇ Ｆｃポリペプチド配列が含まれる。過剰の架橋剤を使用してＴ細胞－ＭＰにペイロードを導入することは、複数の分子のペイロードがＴ細胞－ＭＰに導入されることをもたらし得る。

好適なペイロード（例えば、薬物）には、米国食品医薬品局によって承認された及び／または２０２０米国薬局方または国内医薬品集（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ）に列挙された事実上任意の小分子（例えば、分子量が２，０００ダルトン未満）が含まれる。実施形態では、それらの薬物は、１，０００未満の分子量である。好適な薬物には、抗生物質、化学療法剤（抗新生物剤）、抗真菌剤、または抗寄生蠕虫剤等（例えば、スルファサラジン、アザチオプリン、シクロホスファミド、レフルノミド；メトトレキサート、抗マラリア剤、Ｄ－ペニシラミン、シクロスポリン）が含まれる。好適な化学療法剤は、アルキル化剤、細胞骨格破壊剤（タキサン）、エポチロン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ヌクレオチドアナログまたは前駆体アナログ、ペプチド抗新生物性抗生物質（例えば、ブレオマイシンまたはアクチノマイシン）、白金系剤、レチノイド、またはビンカアルカロイドであり得る。好適な薬物にはまた、非ステロイド性抗炎症薬及びグルココルチコイド等が含まれる。好適な化学療法剤にはまた、アルキル化剤、細胞骨格破壊剤（タキサン）、エポチロン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ヌクレオチドアナログまたは前駆体アナログ、ペプチド抗新生物性抗生物質（例えば、ブレオマイシンまたはアクチノマイシン）、白金系剤、レチノイド、またはビンカアルカロイドが含まれる。

実施形態では、ペイロードは、生物学的活性剤または薬物、診断剤または標識、ヌクレオチドまたはヌクレオシドアナログ、核酸または合成核酸（例えば、アンチセンス核酸、低分子干渉ＲＮＡ、二本鎖（ｄｓ）ＤＮＡ、一本鎖（ｓｓ）ＤＮＡ、ｓｓＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ）、毒素、リポソーム（例えば、５－フルオロデオキシウリジン等の化学療法剤を組み込む）、ナノ粒子（例えば、核酸または他の分子を保有する金または他の金属保有、脂質、核酸または他の分子を保有する粒子）、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。

実施形態では、ペイロードは、治療剤（例えば、薬物またはプロドラッグ）、化学療法剤、細胞傷害剤、抗生物質、抗ウイルス剤（例えば、レムデシビル）、細胞周期同期化剤、細胞表面受容体（複数可）に対するリガンド、免疫調節剤（例えば、免疫抑制剤、例えば、シクロスポリン）、アポトーシス促進剤、抗血管形成剤、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、タンパク質またはポリペプチド、抗体またはその抗原結合断片、酵素、プロ酵素、ホルモン及びそれらの組み合わせからなる群から独立して選択される生物学的活性剤または薬物から選択される。

実施形態では、ペイロードは、光検出可能な標識（例えば、色素、蛍光標識、リン光性標識、及び発光標識）、造影剤（例えば、ヨウ素またはバリウムを含有する物質）、放射性標識、画像化剤、常磁性標識／画像化剤（ガドリニウムを含有する磁気共鳴画像化標識）、超音波標識及びそれらの組み合わせからなる群から独立して選択される標識である。いくつかの実施形態では、ペイロードは、放射性同位体である、またはそれを含む標識である。放射性同位体または他の標識の例には、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、^３２Ｐ、^３３Ｐ、^６４Ｃｕ、^６８Ｇａ、^８９Ｚｒ、^９０Ｙ、^９９Ｔｃ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^１１１Ｉｎ、^１３１Ｉｎ、^１５３Ｓｍ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^２１１Ａｔ、^２１２Ｂｉ、及び^１５３Ｐｂが含まれるがこれらに限定されない。

ＩＩ．核酸
本開示は、Ｔ細胞－ＭＰまたは複数のＴ細胞－ＭＰ（例えば、種間ヘテロ二量体を形成するＴ細胞－ＭＰの対）をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。ヘテロマー（例えば、ヘテロ二重体を形成する種間対）の個々のＴ細胞－ＭＰは、別々の核酸でコードされ得る。代替的には、ヘテロマーＴ細胞－ＭＰ（例えば、種間対）のＴ細胞－ＭＰはまた、単一の核酸にコードされ得る。そのような核酸には、Ｔ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈ、β２Ｍまたは骨格ポリペプチド配列において、またはそれらのポリペプチド配列を接続させる任意のリンカー（例えば、Ｌ３リンカー）に提供される化学的コンジュゲーション部位（例えば、システイン残基）を有するＴ細胞－ＭＰをコードするヌクレオチド配列を含むものが含まれる。

Ａ．コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸
本開示は、高次複合体（例えば、二重体）を形成し得るコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードするヌクレオチド配列は、転写コントロール要素、例えば、プロモーター、例えば、真核細胞において機能的なプロモーターに機能可能に連結され得、プロモーターは、構成的プロモーターまたは誘導性プロモーターであり得る。上記したように、いくつかの場合では、個々のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、ヘテロマー複合体（例えば、種間骨格対を含むヘテロ二重体Ｔ細胞－ＭＰ）を形成する。ヘテロマーのコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、単一のポリシストロン性核酸配列においてコードされ得る。代替的には、ヘテロマーＴ細胞－ＭＰは、別々の転写コントロール要素によって誘導される発現を伴う別々のモノシストロン性核酸配列においてコードされ得る。別々のモノシストロン性配列が利用される場合、それらは、単一のベクターまたは別々のベクターに存在し得る。

本開示は、（例えば、Ｎ末端からＣ末端まで）（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；（ｉｉ）１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列をβ２Ｍポリペプチド配列に接続させる任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）を含むコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドであって、コンジュゲートされていないＴ細胞調節性ポリペプチドは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）及び／または（ｉｘ）のＭＯＤ（複数可））を含み；β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドをコードする核酸配列を含み、提供する。

本開示は、ＮからＣ末端まで、（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；（ｉｉ）任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）を含むコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドであって、コンジュゲートされていないＴ細胞調節性ポリペプチドは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）及び／または（ｉｘ）のＭＯＤ（複数可））を含み；β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドをコードする核酸配列を含み、提供する。

本開示は、ＮからＣ末端まで、（ｉ）１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；（ｉｉ）任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）を含むコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドであって、コンジュゲートされていないＴ細胞調節性ポリペプチドは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）及び／または（ｉｘ）のＭＯＤ（複数可））を含み；β２Ｍポリペプチド配列、Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／またはＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰポリペプチドをコードする核酸配列を含み、提供する。

好適なＭＨＣ－Ｈ、β２－ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチド、及び骨格ポリペプチドは、上述されている。ＭＨＣ－Ｈポリペプチドは、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、またはＨＬＡ－Ｇ重鎖であり得る。いくつかの場合では、ＭＨＣ－Ｈポリペプチドは、図３Ａ～３Ｈのいずれか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のａａ配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。そのような実施形態では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、膜貫通固定化ドメイン及び細胞内ドメインを含まない場合がある（例えば、図３ＤにおけるＭＨＣ－Ｈポリペプチドを参照されたい）。いくつかの場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、β２－ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドを含み；第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドを含む。いくつかの場合では、β２Ｍポリペプチドは、図４に示されるβ２Ｍアミノ酸配列と少なくとも約８５％（例えば、少なくとも約９０％、９５％、９８％、９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

Ｂ．組換え発現ベクター
本開示は、本開示のＴ細胞－ＭＰをコードする核酸配列を含む組換え発現ベクターを提供する。いくつかの場合では、組換え発現ベクターは、非ウイルスベクターである。いくつかの実施形態では、組換え発現ベクターは、ウイルスコンストラクト、例えば、組換えアデノ随伴ウイルスコンストラクト（例えば、米国特許第７，０７８，３８７号を参照されたい）、組換えアデノウイルスコンストラクト、組換えレンチウイルスコンストラクト、組換えレトロウイルスコンストラクト、非組み込みウイルスベクター等である。

好適な発現ベクターには、ウイルスベクター（例えば、ワクシニアウイルス；ポリオウイルス；アデノウイルス（例えば、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ ３５：２５４３ ２５４９，１９９４；Ｂｏｒｒａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ６：５１５ ５２４，１９９９；Ｌｉ ａｎｄ Ｄａｖｉｄｓｏｎ，ＰＮＡＳ ９２：７７００ ７７０４，１９９５；Ｓａｋａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ５：１０８８ １０９７，１９９９；ＷＯ９４／１２６４９、ＷＯ９３／０３７６９；ＷＯ９３／１９１９１；ＷＯ９４／２８９３８；ＷＯ９５／１１９８４及びＷＯ９５／００６５５を参照されたい）；アデノ随伴ウイルス（例えば、Ａｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ９：８１ ８６，１９９８，Ｆｌａｎｎｅｒｙ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ９４：６９１６ ６９２１，１９９７；Ｂｅｎｎｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ ３８：２８５７ ２８６３，１９９７；Ｊｏｍａｒｙ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ４：６８３ ６９０，１９９７，Ｒｏｌｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １０：６４１ ６４８，１９９９；Ａｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍ Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ ５：５９１ ５９４，１９９６；Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ ｉｎ ＷＯ９３／０９２３９，Ｓａｍｕｌｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．（１９８９）６３：３８２２－３８２８；Ｍｅｎｄｅｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｖｉｒｏｌ．（１９８８）１６６：１５４－１６５；及びＦｌｏｔｔｅ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ（１９９３）９０：１０６１３－１０６１７）；ＳＶ４０；単純ヘルペスウイルス；ヒト免疫不全ウイルス（例えば、Ｍｉｙｏｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ９４：１０３１９ ２３，１９９７；Ｔａｋａｈａｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ７３：７８１２ ７８１６，１９９９を参照されたい）をベースとするウイルスベクター；レトロウイルスベクター（例えば、マウス白血病ウイルス、脾臓壊死ウイルス、及びレトロウイルス、例えば、ラウス肉腫ウイルス、ハーベイ肉腫ウイルス、トリ白血病ウイルス、レンチウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、骨髄増殖性肉腫ウイルス、及び乳房腫瘍ウイルスに由来するベクター）等が含まれるがこれらに限定されない。

多数の好適な発現ベクターが当業者に知られており、多くが市販されている。以下のベクターは、真核宿主細胞のための例として提供される：ｐＸＴ１、ｐＳＧ５（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ（登録商標））、ｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧ、及びｐＳＶＬＳＶ４０（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）。しかしながら、宿主細胞と適合性である限り、任意の他のベクターが使用され得る。

利用される宿主／ベクターシステムに応じて、構成的及び誘導性プロモーター、転写エンハンサー要素、転写ターミネーター等を含む多数の好適な転写及び翻訳コントロール要素のいずれが発現ベクターにおいて使用され得る（例えば、Ｂｉｔｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９８７），Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１５３：５１６－５４４を参照されたい）。

好適な真核生物プロモーター（真核細胞において機能的なプロモーター）の非限定的な例には、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）最初期、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）チミジンキナーゼ、初期及び後期ＳＶ４０、レトロウイルスからの長い末端反復（ＬＴＲ）、及びマウスメタロチオネイン－Ｉからのものが含まれる。適切なベクター及びプロモーターの選択は、当該技術分野の通常の知識のレベルの範囲内である。発現ベクターはまた、翻訳開始のためのリボソーム結合部位及び転写ターミネーターを含有し得る。発現ベクターにはまた、発現を増幅させるための適切な配列が含まれ得る。

ＩＩＩ．Ｔ細胞－ＭＰを生成及び選択する方法
本開示は、Ｃｏ－ＭＯＤに対する対応するｗｔ．ＭＯＤポリペプチド配列の親和性と比較して、Ｃｏ－ＭＯＤに対するより低い親和性を示す１つ以上のｗｔ．ＭＯＤポリペプチド配列及び／または１つ以上のバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含み得る、二重体及び他の高次凝集体のものを含むＴ細胞－ＭＰ（コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び／またはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの両方）を得る方法であって、方法は、
Ａ）コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはヘテロマー（例えば、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのヘテロ二量体二重体）を構成するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの各々をコードする１つ以上の核酸を細胞または無細胞システムに導入することによってＴ細胞－ＭＰ（または高次複合体、例えば、二重体）を生成すること；
を含み、Ｔ細胞－ＭＰは、１つ以上の発生段階の化学的コンジュゲーション部位を含み、発生段階の化学的コンジュゲーション部位は、化学的コンジュゲーション部位を有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを生成するように活性化され得る（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ核酸を翻訳する細胞がホルミルグリシン生成酵素を発現しない場合、スルファターゼモチーフをＦＧＥと反応させてＣｙｓ残基をｆＧｌｙ残基に変換する）、方法を提供する。
Ｔ細胞－ＭＰを生成する上記の方法は、組換え発現ベクターに存在し得る及び／または転写コントロール要素、例えば、真核細胞において機能的であるものに機能可能に連結され得る、本開示に具体的に記載されるものを含む、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする１つ以上の核酸を提供することをさらに含み得る。方法は、この時点で停止され得、未精製のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ（例えば、コンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ）（細胞ライセート及び未精製培地を含む）が得られ得る。代替的には、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、精製によって得られ得るサンプルに存在するタンパク質の総重量を基準として、粗製（６０重量％未満）、最初に純化された（少なくとも６０重量％）、部分的に純化された（少なくとも８０重量％）、実質的に純化された（少なくとも９５重量％）、部分的に純粋なまたは部分的に精製された（少なくとも９８重量％）、実質的に純粋なまたは実質的に精製された（少なくとも９９重量％）、本質的に純粋なまたは本質的に精製された（少なくとも９９．５重量％）または精製された（少なくとも９９．８％）または高度に精製された（少なくとも９９．９重量％）コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを生成するように、例えば、塩析出（例えば、硫酸アンモニウム）、アフィニティークロマトグラフィー、及び／またはサイズ排除クロマトグラフィーのうちの１つ以上を使用して精製され得る。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが所望である場合、方法は、粗製調製物から高度に精製された調製物までのいずれかでＴ細胞－ＭＰを工程Ｂのようにエピトープ提示分子と反応させることによって行われ得る：
Ｂ）工程ＡのコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰに存在する化学的コンジュゲーション部位とのコンジュゲーションに好適なエピトープ（例えば、エピトープ提示ペプチド）（例えば、スルファターゼモチーフのホルミルグリシンとの反応のためのヒドラジニルもしくはヒドラジニルインドール修飾ペプチドまたはシステイン残基との反応のためのマレイミド含有ペプチド）を提供し、エピトープをＴ細胞－ＭＰと（例えば、好適な反応条件下で）接触させてＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを生成すること。
反応に投入されるコンジュゲートされていない物質がどのくらい精製される必要があるかの選択は、コンジュゲーション反応及び条件、副反応の潜在性、ならびに最終エピトープコンジュゲートが精製される必要がある程度を含む多数の要因に依存する。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（例えば、二重体または高次複合体として）は、サンプルに存在するタンパク質の総重量を基準として、少なくとも部分的に純化された（サンプルに存在するタンパク質の少なくとも８０重量％）、実質的に純化された（少なくとも９５重量％）、部分的に純粋なまたは部分的に精製された（少なくとも９８重量％）、実質的に純粋なまたは実質的に精製された（少なくとも９９重量％）、本質的に純粋なまたは本質的に精製された（少なくとも９９．５重量％）、精製された（少なくとも９９．８％）、または高度に精製された（少なくとも９９．９重量％）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートとなるように、例えば、塩析出、サイズ分離、及び／またはアフィニティークロマトグラフィーによって精製され得る。

Ｔ細胞－ＭＰまたは高次複合体がペイロードを含有することが所望である場合、ペイロードは、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと反応させられ得る。異なるコンジュゲーション部位についてのエピトープ及びペイロードの選択性は、直交化学及び／またはコンジュゲーション反応における化学量論のコントロールの使用を介してコントロールされ得る。実施形態では、リンカー（例えば、ポリペプチドまたは他の２官能性化学的リンカー）が、エピトープ及び／またはペイロードをそれらのコンジュゲーション部位に結合させるために使用され得る。ペイロードは、例えば、メイタンシノイド、ベンゾジアゼピン、タキソイド、ＣＣ－１０６５、デュオカルマイシン、デュオカルマイシンアナログ、カリケアミシン、ドラスタチン、ドラスタチンアナログ、アウリスタチン、トマイマイシン、及びレプトマイシン、または前述のいずれか１つのプロドラッグから選択される細胞傷害剤であり得る。ペイロードは、レチノイドであり得る。可能な場合、エピトープのコンジュゲーション及びペイロードの結合から存在する試薬及び他の物質を除去する単一精製スキームが、タンパク質の損失を最小化するために用いられる。

多様な細胞及び無細胞システムが、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの調製のために使用され得る。「遺伝子修飾された宿主細胞」という名前のセクションにおいて論述されるように、細胞は、真核生物起源、より具体的には哺乳動物、霊長類またはさらにヒト起源のものであり得る。

本開示は、Ｃｏ－ＭＯＤに対する対応する親ｗｔ．ＭＯＤの親和性と比較してＣｏ－ＭＯＤに対する減少した親和性を示す１つ以上のｗｔ．ＭＯＤ及び／またはバリアントＭＯＤを含むコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（またはそれらの高次複合体、例えば、二重体）を得る方法を提供する。減少した親和性を有するバリアントＭＯＤが所望である場合、方法は、バリアントＭＯＤポリペプチド（例えば、少なくとも１つの挿入、欠失または置換を有する）のライブラリを調製すること及び（例えば、上述したＢＬＩによって）それらのＣｏ－ＭＯＤに対する減少した親和性を示す複数のメンバーをＭＯＤポリペプチドのライブラリから選択することを含み得る。バリアントＭＯＤが選択されると、バリアントＭＯＤを含むコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸が調製及び発現される。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰが発現した後、それは精製され、所望の場合、エピトープにコンジュゲートされて、選択されたＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートが生成され得る。プロセスは、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはそれらのエピトープコンジュゲートのライブラリを調製するために繰り返され得る。

本開示は、Ｔ細胞に対する選択的結合を示すＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体、例えば、二重体）を得る方法であって、方法は、
Ａ）複数のメンバーを含むＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（またはそれらの高次複合体）のライブラリを生成することであって、各メンバーは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート上に異なるバリアントＭＯＤを含み、バリアントＭＯＤは、アミノ酸配列がその親ｗｔ．ＭＯＤとは異なり（例えば、１ａａ～１０ａａ）、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートライブラリメンバーは、エピトープタグまたは蛍光標識をさらに含む、生成すること、及び
Ｂ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートライブラリメンバーを、標的Ｔ細胞であって、その表面上にｉ）親ｗｔ．ＭＯＤに結合するＣｏ－ＭＯＤ；及びｉｉ）エピトープに結合するＴＣＲを発現する、標的Ｔ細胞と接触させること；
Ｃ）ｉ）親ｗｔ．ＭＯＤに結合するＣｏ－ＭＯＤ；及びｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰライブラリメンバーに存在するエピトープ以外のエピトープに結合するＴＣＲを含む対照Ｔ細胞と同じ条件下でのその結合と比べて、標的Ｔ細胞に選択的に結合するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートライブラリメンバーを選択すること（例えば、上述したＢＬＩ等によって対照Ｔ細胞よりも高い標的Ｔ細胞に対するアビディティまたは親和性を有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを選択すること）
を含む、方法を提供する。標的Ｔ細胞に選択的に結合するものとして同定されたＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートライブラリメンバーは、ライブラリから単離され得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートがエピトープタグまたは標識を含む場合、標的Ｔ細胞に選択的なＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを同定することは、例えば、フローサイトメトリーを使用することによって、標的及び対照Ｔ細胞に関連するエピトープタグまたは標識を検出することを含み得る。標識されたＴ細胞－ＭＰ（例えば、蛍光標識されているもの）は、検出されるのに修飾を必要としないが、エピトープタグ化分子は、エピトープタグを可視化する薬剤（例えば、エピトープタグに結合する蛍光剤）と接触させることを必要とし得る。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの親和性／アビディティは、所定範囲の濃度にわたって（例えば、フローサイトメトリーを使用して平均蛍光強度を測定することによって）標的及び対照Ｔ細胞に関連する薬剤または標識を測定することによって決定され得る。対照Ｔ細胞と比べて標的Ｔ細胞に対する最も高い親和性またはアビディティで結合するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、標的Ｔ細胞に選択的に結合すると理解される。

Ｔ細胞－ＭＰを得る方法及びＴ細胞に対する選択的結合を示すＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを得る方法において利用されるｗｔ．及びバリアントＭＯＤ及びＣｏ－ＭＯＤ対を含むＭＯＤ及びＣｏ－ＭＯＤ対は、ＩＬ－２及びＩＬ－２受容体；４－１ＢＢＬ及び４－１ＢＢ；ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－１；ＦａｓＬ及びＦａｓ；ＴＧＦ－β及びＴＧＦ－β受容体；ＣＤ８０及びＣＤ２８；ＣＤ８６及びＣＤ２８；ＯＸ４０Ｌ及びＯＸ４０；ＩＣＯＳ－Ｌ及びＩＣＯＳ；ＩＣＡＭ及びＬＦＡ－１；ＪＡＧ１及びＮｏｔｃｈ；ＪＡＧ１及びＣＤ４６；ＣＤ７０及びＣＤ２７；ＣＤ８０及びＣＴＬＡ４；ならびにＣＤ８６及びＣＴＬＡ４から選択され得る。代替的には、それらは、ＩＬ－２及びＩＬ－２受容体；４－１ＢＢＬ及び４－１ＢＢ；ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－１；ＦａｓＬ及びＦａｓ；ＣＤ８０及びＣＤ２８；ＣＤ８６及びＣＤ２８；ＣＤ８０及びＣＴＬＡ４；ならびにＣＤ８６及びＣＴＬＡ４から選択され得る。いくつかの場合では、独立して選択されるＴ細胞－ＭＰに存在するバリアントＭＯＤは、対応する親ｗｔ．ＭＯＤと比較して１～２０ａａの独立して選択される配列バリエーション（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ａａの置換、欠失、または挿入）を含む。

Ｔ細胞－ＭＰ（コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、２つ以上のｗｔ．及び／またはバリアントＭＯＤを含み得る。２つ以上のＭＯＤは、同じまたは異なるアミノ酸配列を含み得る。２つ以上のＭＯＤは、Ｔ細胞－ＭＰ－二重体の同じＴ細胞－ＭＰ上に（例えば、タンデムで）あり得る。２つ以上のＭＯＤの１つ目は、Ｔ細胞－ＭＰ二重体の第１のＴ細胞－ＭＰ上にあり得、２つのバリアントＭＯＤの２つ目は、二重体の第２のＴ細胞－ＭＰ上にあり得る。

ＩＶ．遺伝子修飾された宿主細胞
本開示は、遺伝子修飾された宿主細胞であって、宿主細胞は、本開示の核酸（例えば、プロモーターに機能可能に連結され得るコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸）で遺伝子修飾されている、宿主細胞を提供する。そのような細胞がＴ細胞－ＭＰを発現する場合、それらは、先行のセクションにおいて論述されるＴ細胞－ＭＰを生成及び選択する方法において利用され得る。

好適な宿主細胞には、真核細胞、例えば、酵母細胞、昆虫細胞、及び哺乳動物細胞が含まれる。いくつかの場合では、宿主細胞は、哺乳動物細胞株の細胞である。好適な哺乳動物細胞株には、ヒト細胞株、非ヒト霊長類細胞株、げっ歯類（例えば、マウス、ラット）細胞株等が含まれる。好適な哺乳動物細胞株には、ＨｅＬａ細胞（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）番号ＣＣＬ－２（商標））、ＣＨＯ細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－９６１８（商標）、ＣＣＬ－６１（商標）、ＣＲＬ９０９６）、２９３細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１５７３（商標））、Ｖｅｒｏ細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１６５８）、Ｈｕｈ－７細胞、ＢＨＫ細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ－１０（商標））、ＰＣ１２細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１７２１（商標））、ＣＯＳ細胞、ＣＯＳ－７細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１６５１）、ＲＡＴ１細胞、マウスＬ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬＩ．３）、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１５７３）、ＨＬＨｅｐＧ２細胞等が含まれるがこれらに限定されない。

いくつかの場合では、宿主細胞は、内因性β２Ｍを合成しないように、及び／または内因性ＭＨＣクラスＩ重鎖（ＭＨＣ－Ｈ）を合成しないように遺伝子修飾された哺乳動物細胞である。前述のものに加えて、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）活性を発現する宿主細胞は、スルファターゼモチーフを含むＴ細胞－ＭＰと使用するために上で論述されており、そのような細胞は、有利には、内因性ＭＨＣ β２Ｍ及びＭＨＣ－Ｈタンパク質の少なくとも１つ（両方ではない場合）を発現しないように修飾され得る。

Ｖ．組成物及び製剤
本開示は、薬学的組成物及び製剤を含む組成物及び製剤を提供する。組成物は、ａ）Ｔ細胞－ＭＰ及びｂ）賦形剤を含み得る。組成物または製剤に存在する賦形剤（複数可）が薬学的に許容可能な賦形剤である場合、組成物は、薬学的組成物または製剤であり得る。薬学的組成物または製剤はまた、無菌及び／または発熱物質非含有であり得る。いくつかの薬学的に許容可能な賦形剤が以下に提供される。本開示はまた、核酸または組換え発現ベクターを含む薬学的組成物を含む組成物及び製剤であって、核酸または発現核酸は、Ｔ細胞－ＭＰまたはその高次複合体（例えば、ヘテロ二量体Ｔ細胞－ＭＰ二重体の１つのＴ細胞－ＭＰ）のすべてまたは一部をコードする、組成物及び製剤を提供する。

Ａ．Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを含む組成物
本開示の組成物は、Ｔ細胞－ＭＰに加えて、塩、例えば、ＮａＣｌ、ＭｇＣｌ_２、ＣａＣｌ_２、ＫＣｌ、ＭｇＳＯ_４、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム塩等；緩衝剤、（例えば、トリス緩衝液、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－Ｎ’－（２－エタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ）、２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸ナトリウム塩（ＭＥＳ）、３－（Ｎ－モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ－トリス［ヒドロキシメチル］メチル－３－アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳ）等）；可溶化剤；洗浄剤（界面活性剤）、例えば、非イオン性洗浄剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ－２０等；プロテアーゼ阻害剤；グリセロール等（そのいずれかまたはすべては、溶媒和物（例えば、水及び／または有機溶媒との混合イオン塩）、水和物等の形態であり得る）のうちの１つ以上を含み得る。

Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートを含む薬学的に許容可能な組成物は、Ｔ細胞－ＭＰに加えて、薬学的に許容可能な賦形剤を含み得、その様々なものが当該技術分野で知られており、本明細書で詳細に論述する必要はない。薬学的に許容可能な組成物（例えば、注射用製剤）は、無菌であり、及び／または発熱物質及び患者または対象への投与に有害な他の物質（例えば、リポ多糖類）を含まない場合がある。薬学的に許容可能な賦形剤は、例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ”，１９^ｔｈ Ｅｄ．（１９９５），または最新版，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ；Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，” ２０ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ ７^ｔｈ ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ；及びＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，３^ｒｄ ｅｄ．Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃを含む多様な刊行物に十分に記載されている。

本薬学的組成物は、対象への投与に好適であり得、例えば、通常は無菌である。例えば、いくつかの実施形態では、本薬学的組成物は、ヒト対象への投与に好適であり、例えば、組成物は、無菌であり、検出可能な発熱物質及び／または他の毒素を含まない。薬学的組成物は、ｅｘ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏ（細胞のｅｘ ｖｉｖｏ処置）での使用に好適であり得、例えば、それは、細胞と接触させられ、次いでその後、対象への細胞の投与の前に除去され得る。

薬学的組成物を含むＴ細胞－ＭＰ組成物はまた、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、滑石、セルロース、グルコース、スクロース、グリセロール、マグネシウム、カルボネート等の成分を含み得、そのいずれかまたはすべては、薬学的グレードであり得る。

組成物は、水溶液または他の溶液、粉末、顆粒、錠剤、丸剤、座剤、カプセル、懸濁液、スプレー等の形態であり得る。組成物は、以下に記載される様々な投与経路に従って製剤化され得る。

本開示のＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートが注射剤として組織に直接的に（例えば、皮下、腹腔内、筋肉内、及び／または静脈内に）投与される場合、製剤は、すぐに使用可能な投薬形態、非水性形態（例えば、再構成可能な保存安定粉末）または水性形態、例えば、薬学的に許容可能な担体及び賦形剤から構成される液体として提供され得る。Ｔ細胞－ＭＰ製剤はまた、投与後の本タンパク質の血清半減期を延長させるように提供され得る。例えば、Ｔ細胞－ＭＰは、コロイドとして調製されたリポソーム製剤で、または血清半減期を延長させるための他の従来の技術で提供され得る。例えば、Ｓｚｏｋａ ｅｔ ａｌ．１９８０ Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．９：４６７、米国特許第４，２３５，８７１号、第４，５０１，７２８号及び第４，８３７，０２８号に記載されているように、多様な方法がリポソームを調製するために利用可能である。調製物はまた、制御放出または遅延放出形態で提供され得る。

非経口投与に好適な製剤の他の例には、滅菌注射溶液、塩、抗酸化剤、静菌剤、及び／または製剤を意図されたレシピエントの血液と等張にする溶質を含むものが含まれる。そのような非経口製剤にはまた、１つ以上の独立して選択される懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、及び防腐剤が含まれ得る。

Ｔ細胞－ＭＰを含む製剤または薬学的組成物は、容器、例えば、滅菌容器、例えば、シリンジに存在し得る。製剤はまた、単位用量または複数用量密閉容器、例えば、アンプル及びバイアルで提供され得、そのいずれかは、滅菌されていてもよい。製剤または薬学的組成物は、使用直前に滅菌液体賦形剤、例えば、注射用水の添加のみを必要とする滅菌冷凍乾燥（凍結乾燥）状態で保存され得る。即席注射溶液及び懸濁液は、Ｔ細胞－ＭＰを含む滅菌溶液、粉末、顆粒、及び／または錠剤から調製され得る。

製剤におけるＴ細胞－ＭＰの濃度は、広く様々であり得（例えば、重量で約０．１％未満、通常は約２％または少なくとも約２％から２０％～５０％またはそれ以上まで）、通常、選択された特定の投与様式及び患者のニーズに従って主に流体体積、粘度、及び患者ベースの要因に基づいて選択される。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰは、液体組成物に存在する。よって、本開示は、本開示のＴ細胞－ＭＰを含む組成物（例えば、薬学的組成物を含む液体組成物）を提供する。本開示はまた、ａ）本開示のＴ細胞－ＭＰ；及びｂ）生理食塩水（例えば、０．９％または約０．９％のＮａＣｌ）を含む組成物を提供する。いくつかの場合では、組成物は、無菌である。組成物は、ヒト対象への投与に好適であり得、例えば、組成物は、無菌であり、検出可能な発熱物質及び／または他の毒素を含まない。よって、本開示は、ａ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート；及びｂ）生理食塩水（例えば、０．９％または約０．９％ＮａＣｌ）を含む組成物であって、組成物は、無菌であり、検出可能な発熱物質及び／または他の毒素を含まない、組成物を提供する。

Ｂ．核酸または組換え発現ベクターを含む組成物
本開示は、任意の１つ以上のＴ細胞－ＭＰポリペプチド（またはヘテロ二量体等の二重体Ｔ細胞－ＭＰ多量体のポリペプチドの各々）をコードする１つ以上の核酸配列を含む本開示の核酸または組換え発現ベクター（例えば、上掲を参照されたい）を含む組成物（例えば、薬学的組成物）を提供する。薬学的に許容可能な賦形剤は、当該技術分野で知られており、例えば、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２０ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ ７^ｔｈ ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ；及びＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，３^ｒｄ ｅｄ．Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃを含む多様な刊行物に十分に記載されている。

本開示の組成物には、ａ）本開示のＴ細胞－ＭＰポリペプチド（またはＴ細胞－ＭＰのすべてのポリペプチド）をコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸または１つ以上の組換え発現ベクター；及びｂ）塩、緩衝液、界面活性剤、抗酸化剤、親水性ポリマー、デキストリン、キレート剤、懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、静菌剤、及び防腐剤のうちの１つ以上が含まれ得る。好適な緩衝液には、（例えば、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、ビス（２－ヒドロキシエチル）アミノ－トリス（ヒドロキシメチル）メタン（ＢＩＳ－トリス）、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－Ｎ’３－プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳまたはＨＥＰＰＳ）、グリシルグリシン、Ｎ－２－ヒドロキシエチルピペラジン－Ｎ’－２－エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、３－（Ｎ－モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、ピペラジン－Ｎ，Ｎ’－ビス（２－エタン－スルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、重炭酸ナトリウム、３－（Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）－メチル－アミノ）－２－ヒドロキシ－プロパンスルホン酸）ＴＡＰＳＯ、（Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチル－２－アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチル－グリシン（トリシン）、トリス（ヒドロキシメチル）－アミノメタン（トリス）等）が含まれるがこれらに限定されない。好適な塩には、例えば、ＮａＣｌ、ＭｇＣｌ_２、ＫＣｌ、ＭｇＳＯ_４等が含まれる。

本開示の薬学的製剤には、約０．００１％～約９０％（ｗ／ｗ）の量で本開示の核酸または組換え発現ベクターが含まれ得る。以下の製剤の説明において、「本核酸または組換え発現ベクター」には、本開示の核酸または組換え発現ベクターが含まれることが理解されるだろう。例えば、製剤は、本開示の本核酸または本組換え発現ベクターを含み得る。

本核酸または組換え発現ベクターは、他の化合物または化合物の混合物と混合され、それに封入され、それとコンジュゲートされまたはそうでなければそれと関連付けられ得る；そのような化合物には、例えば、リポソームまたは受容体標的化分子が含まれ得る。本核酸または組換え発現ベクターは、取り込み、分布及び／または吸収を補助する１つ以上の成分と製剤において組み合わされ得る。

本核酸または組換え発現ベクター組成物は、限定されないが、錠剤、カプセル、ゲルカプセル、液体シロップ、軟質ゲル、座剤、及び浣腸等の多くの可能性のある投薬形態のいずれかへと製剤化され得る。本核酸または組換え発現ベクター組成物はまた、水性、非水性または混合媒体中の溶液または懸濁液として製剤化され得る。

本核酸または組換え発現ベクターを含む製剤は、リポソーム製剤であり得る。本明細書で使用される場合、用語「リポソーム」には、送達される組成物（例えば、本核酸）を含有し得る水性内部を有する単層または多層ベシクルが含まれる。カチオン性リポソームは、安定な複合体を形成するために負に荷電したＤＮＡ分子と相互作用し得る正に荷電した脂質を含む。ｐＨ感受性であるまたは負に荷電したリポソームは、それを有する複合体よりもＤＮＡを捕捉すると考えられる。リポソームを形成し得るカチオン性及び非カチオン性脂質の両方は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで本核酸または組換え発現ベクターを送達するため使用され得る。

リポソームにはまた、「立体的に安定化した」リポソームが含まれ、その用語は、本明細書で使用される場合、１つ以上の特殊な脂質であって、リポソームに組み込まれた場合に、そのような特殊な脂質を欠くリポソームと比べて延長した循環寿命をもたらす、１つ以上の特殊な脂質を含むリポソームを指す。立体的に安定化したリポソームの例には、１つ以上の糖脂質を含むもの及び１つ以上の親水性ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部位）で誘導体化された脂質を含むものが含まれる。リポソーム及びそれらの使用は、例えば、米国特許第６，２８７，８６０号にさらに記載されている。

本核酸または発現ベクターを含む組成物には、それらの効率的な核酸の送達を達成するために浸透向上剤が含まれ得る。細胞膜を介する核酸等の非脂溶性薬物の拡散を補助することに加えて、浸透向上剤はまた、脂溶性薬物、例えば、本核酸と共投与され得るものの浸透性を向上させる。浸透向上剤は、５つの広いカテゴリー、すなわち、界面活性剤、脂肪酸、胆汁塩、キレート剤、及び非キレート性非界面活性剤のうちの１つに属するものとして分類され得る。浸透向上剤及びそれらの使用は、例えば、米国特許第６，２８７，８６０号にさらに記載されている。

経口投与のための組成物及び製剤には、粉末または顆粒、微粒子、ナノ粒子、水または非水性媒体中の懸濁液または溶液、カプセル、ゲルカプセル、サシェ、錠剤、またはミニ錠剤が含まれる。増粘剤、香味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤または結合剤が所望であり得る。好適な経口製剤には、本核酸が１つ以上の浸透向上剤、界面活性剤及びキレート剤と併せて投与されるものが含まれる。好適な界面活性剤には、脂肪酸及び／またはエステルまたはその塩、胆汁酸及び／またはその塩が含まれるがこれらに限定されない。好適な胆汁酸／塩及び脂肪酸ならびにそれらの使用は、米国特許第６，２８７，８６０号にさらに記載されている。浸透向上剤、例えば、脂肪酸／塩を胆汁酸／塩と組み合わせた組み合わせも好適である。例示的な好適な組み合わせは、ラウリン酸、カプリン酸、及びＵＤＣＡのナトリウム塩である。さらなる浸透向上剤には、ポリオキシエチレン－９－ラウリルエーテル、及びポリオキシエチレン－２０－セチルエーテルが含まれるがこれらに限定されない。好適な浸透向上剤にはまた、プロピレングリコール、ジメチルスルホキシド、トリエタノールアミン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、２－ピロリドン及びその誘導体、テトラヒドロフルフリルアルコール、ならびにＡＺＯＮＥ（商標）が含まれる。

ＶＩ．免疫反応を調節する方法ならびに疾患及び障害を処置する方法
本開示のＴ細胞－ＭＰ及び高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体（例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰ）は、Ｔ細胞の活性を調節し、免疫系の他の細胞の活性を直接的にまたは間接的に調節するのに有用である。本開示は、エピトープに選択的なＴ細胞（例えば、「エピトープ特異的Ｔ細胞」または「エピトープ選択的Ｔ細胞」）の活性を調節する方法であって、方法は、通常、標的Ｔ細胞を本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの高次複合体（例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）と接触させることを伴う、方法を提供する。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体は、がん、新生物、または病原体特異的抗原（例えば、腫瘍、ウイルスまたは細菌抗原）を認識するエピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する１つ以上の独立して選択されるＭＯＤを含み得る。いくつかの場合では、活性化Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８^＋細胞）である。したがって、本開示は、がん、新生物（例えば、非悪性であるが手術不可能な腫瘍）、または感染症を処置する方法であって、方法は、がん、新生物、または病原体（例えば、ウイルスまたは細菌）抗原に特異的なエピトープを認識するエピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する１つ以上の独立して選択されるＭＯＤを含むＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の有効量をそれを必要とする個体に投与することを含む、方法を含み、それを提供する。そのようなＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の有効量は、コンジュゲートされたエピトープに特異的なＣＤ８^＋Ｔ細胞を活性化する（例えば、ＣＤ８^＋Ｔ細胞の増殖を増加させる及び／または増殖関連細胞シグナル伝達を増加させる、細胞傷害因子、例えば、グランザイムの放出を増加させる、及び／またはそれらのサイトカイン、例えば、インターフェロンγの放出を誘導または増強する）量であり得る。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体はまた、エピトープ特異的Ｔ細胞を阻害する１つ以上の独立して選択されるＭＯＤを含み得る。そのようなＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、対象が、様々な腫瘍において生じ得るように、例えば、ＣＤ８＋Ｔｒｅｇ細胞抑制により、十分な免疫反応を作り出すことができない疾患及び障害に処置に有用である。

前述のものに加えて、本開示は、ＭＯＤポリペプチドの送達のためのＴ細胞－ＭＰの使用を企図し、それを提供する。ＭＯＤの送達は、Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートを使用してエピトープ選択的様式で達成され得、また、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを使用して非特異的様式で達成され得る。ＭＯＤを送達する方法は、疾患または障害に罹患している哺乳動物対象（例えば、処置を必要とするヒト患者）の処置において利用され得る。

Ａ．Ｔ細胞活性を調節する方法
本開示は、Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法であって、方法は、対象にＴ細胞－ＭＰまたはその高次複合体（いくつかの例ではペイロードを有する）を接触させることまたは投与することを含む、方法を提供する。接触または投与は、分子が動物（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト、ラット、マウス、イヌ、ネコ、ブタ、ウマ、または霊長類）に投与されるｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで行われ得る；それは、以下にさらに論述されるように疾患または障害を処置する方法のすべてまたは一部を構成し得る。調節に供されるＴ細胞は、例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＮＫ－Ｔ細胞、及び／またはＴｒｅｇ細胞であり得る。いくつかの場合では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞である。

本開示は、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法を提供する。方法は、Ｔ細胞を、エピトープ特異的Ｔ細胞によって認識されるエピトープを保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（例えば、二重体形態）と接触させることを含む。接触は、エピトープによって誘導される選択性を有するエピトープ特異的Ｔ細胞の活性、及びＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートのＭＯＤポリペプチド配列によって少なくとも部分的に誘導される結果的に生じる活性化を選択的に誘導することをもたらす。Ｔ細胞とＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート、または高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体（例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）との接触は、顆粒依存性及び非依存性反応の誘導または抑制を含む、コンジュゲートされたエピトープに特異的なＴＣＲを発現するＴ細胞（エピトープ特異的Ｔ細胞）の活性化または抑制をもたらし得る。顆粒非依存性反応には、エピトープ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞（例えば、血液、リンパ系、及び／または標的組織等の細胞の集団におけるもの）の数または割合の変化、Ｆａｓリガンド（カスパーゼの活性化及びアポトーシスを介する標的細胞死をもたらし得るＦａｓ－Ｌ）の発現の変化、及びサイトカイン／ケモカイン生成（例えば、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）の生成及び放出）が含まれるがこれらに限定されない。顆粒依存性エフェクター作用には、グランザイム、パーフォリン、及び／またはグラニュリシンの放出が含まれる。エピトープ特異的ＣＤ８^＋細胞傷害性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８^＋細胞傷害性エフェクターＴ細胞）の活性化は、顆粒依存性及び／または非依存性反応を介してＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（またはその高次複合体（例えば、二重体）によって提示されるエピトープを認識するエピトープ特異的Ｔ細胞によって、例えば、がん細胞及び／または感染細胞の標的化殺傷をもたらし得る。

活性化性ＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）（Ｔ細胞－ＭＰは、標的Ｔ細胞（エピトープ特異的Ｔ細胞）のＴＣＲによって認識されるエピトープにコンジュゲートされている）の接触は、ｉ）エピトープ特異的Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞）の増殖；ｉｉ）エピトープ特異的誘導細胞傷害活性；ｉｉｉ）エピトープ特異的細胞傷害性（例えば、ＣＤ８＋）Ｔ細胞による１つ以上の細胞傷害性分子（例えば、パーフォリン；グランザイム；グラニュリシン）の放出のうちの１つ以上をもたらし得る。対照的に、阻害性ＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）（Ｔ細胞－ＭＰは、標的Ｔ細胞（エピトープ特異的Ｔ細胞）のＴＣＲによって認識されるエピトープにコンジュゲートされている）の接触は、ｉ）エピトープ特異的Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞）の増殖の抑制及び／または数の減少；ｉｉ）細胞傷害活性のエピトープ特異的抑制；ｉｉｉ）エピトープ特異的細胞傷害性（例えば、ＣＤ８＋）Ｔ細胞による１つ以上の細胞傷害性分子（例えば、パーフォリン；グランザイム；グラニュリシン）の生成及び／または放出の抑制のうちの１つ以上をもたらし得る。Ｔ細胞（エピトープ特異的Ｔ細胞）のＴＣＲによって認識されるエピトープにコンジュゲートされており、かつ阻害性ＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の接触はまた、ｉ）自己反応性Ｔ細胞のエピトープ特異的阻害；またはｉｉ）エピトープ特異的ＣＤ８＋Ｔ制御性細胞の誘導等のうちの１つ以上をもたらし得る。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（またはその高次複合体（例えば、二重体））は、がんエピトープを含み、それは、ＣＤ８^＋Ｔ細胞反応（例えば、がん細胞に対する細胞傷害性ＣＤ８^＋Ｔ細胞反応）を誘導する。いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（またはその高次複合体（例えば、二重体））は、感染性物質のエピトープを含み、それは、感染性物質／病原体の抗原を発現する細胞に対するＣＤ８^＋Ｔ細胞反応（例えば、細胞傷害性ＣＤ８^＋Ｔ細胞反応）を活性化する。

本開示は、ＩＬ－２等の活性化性ＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）によって提示されるエピトープに特異的な動物または組織におけるＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の増殖（例えば、増殖率）及び／または総数を増加させる方法を提供する。Ｔ細胞の増殖または数を増加させる方法は、Ｔ細胞をＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体と（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで）接触させることを含む。接触は、例えば、１つ以上の用量でＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）を対象に投与することによって行われ得る。接触または投与は、組織に存在するＴ細胞（例えば、血液、リンパ系、及び／または標的組織、例えば、腫瘍等の細胞の集団におけるもの）の数（例えば、総数または割合）と比べて、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するエピトープに結合することが可能なＴＣＲを有するＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数を増加させ得る。例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）によって提示されるエピトープに特異的なＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の絶対または相対数は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の用量または投与との１回以上の接触の後に、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも１００％、少なくとも２倍、少なくとも２．５倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、または１０倍超増加し得る。増加は、接触または投与の前のＣＤ８＋Ｔ細胞数と比べて、またはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは高次複合体と接触されていないサンプル（例えば、血液または組織のサンプル）に存在するＴ細胞の集団と比べて計算され得る。

本開示は、エピトープ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の顆粒依存性及び／または顆粒非依存性反応を増加させる方法であって、Ｔ細胞をＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、ＣＤ８０、及び／またはＣＤ８６ ＭＯＤを有する）と（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで）接触させることまたはそれを投与することを含む、方法を提供する。接触または投与は、例えば、増加したＦａｓリガンド発現の発現、サイトカイン／ケモカイン（例えば、ＩＬ－２、ＩＬ－４、及び／またはＩＬ－５）、インターフェロン（例えば、ＩＦＮ－γ）の放出、グランザイムの放出、パーフォリンの放出、及び／またはグラニュリシンの放出をもたらし得る。例えば、ＣＤ８＋エフェクター細胞を、エフェクター細胞に特異的なエピトープを提示するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその複合体（例えば、二重体）と接触させることは、Ｆａｓリガンド発現、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）放出、グランザイム放出、パーフォリン放出、及び／またはグラニュリシン放出のうちの１つ以上を少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも１００％、少なくとも２倍、少なくとも２．５倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、または１０倍超増加させ得る。増加は、接触または投与の前の発現または放出のレベルと比べて、またはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその複合体と接触されていないサンプル（例えば、血液または組織のサンプル）に存在するＴ細胞の集団と比べて計算され得る。

ＣＤ８^＋Ｔｒｅｇ細胞及び自己反応性ＣＤ８^＋エフェクターＴ細胞の異常調節はいずれとも、多発性硬化症、ラスムッセン脳炎、腫瘍随伴症候群、全身性硬化症（ＳＳｃ）、グレーブス病（ＧＤ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、再生不良性貧血（ＡＡ）、及び白斑を含むがこれらに限定されない自己免疫疾患の発病に関連している（例えば、Ｐｉｌｌｉ ｅｔ ａｌ，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ａｒｔｉｃｌｅ ６５２，ｖｏｌ．８，Ｊｕｎｅ ２０１７；Ｃｏｐｐｉｅｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｖｏｌ．２０９ Ｎｏ．１ ５１－６０（２０１２）；Ｈａｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ（ＵＳＡ），１１０（３２）：１３０７４－１３０７８（２０１３）及びＰｅｌｌｅｇｒｉｎｏ ｅｔ ａｌ．ＰＬＯＳ ＯＮＥ，ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０２１０８３９ Ｊａｎｕａｒｙ １６，（２０１９）を参照されたい）。Ｄｅｎｇらは、自己免疫疾患におけるＣＤ８＋Ｔ細胞のエピジェネティックな役割をレビューした（Ｄｅｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ａｒｔｉｃｌｅ ８５６，ｖｏｌ．１０，Ａｐｒｉｌ ２０１９を参照されたい）。ＣＤ８＋エフェクターはまた、炎症性サイトカインの分泌の異常調節、歪められた分化プロファイル、不適切なアポトーシス、または標的細胞に対して仕向けられたエフェクターＴ細胞の機能の誘導を介して自己免疫疾患を促進し得る。いくつかの場合では、自己エピトープ（例えば、自己抗原の抗原決定基）を提示するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）は、細胞との直接的相互作用によって自己反応性ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の活性を減少させ得る。自己抗原及び１つ以上の独立して選択される阻害性ＭＯＤ（例えば、ＰＤＬ１及び／またはＦａｓＬ）を提示するそのようなＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを自己反応性ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞と接触させることは、そのようなＴ細胞による炎症促進性分子の放出を制御する（減少させる）ことによって及び／または自己反応性細胞を排除することによって自己免疫疾患を阻止するための手段として用いられ得る。

エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を減少させることが所望である場合（例えば、それらが自己抗原に対して仕向けられている場合）、それらは、エピトープを提示し、かつそれらのエピトープ特異的反応を調節するＭＯＤを保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその複合体（例えば、二重体）と接触させられ得る。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート及びそれらの高次複合体による細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞の調節は、限定されないが、ｉ）Ｔ細胞によるＦａｓＬ発現の抑制；ｉｉ）ケモカイン及び／またはサイトカイン放出（例えば、ＩＦＮ－γ）の抑制；及び／またはｉｉｉ）細胞毒素（例えば、パーフォリン；グランザイム；グラニュリシン）合成または放出の抑制のうちの１つ以上をもたらし得る。本開示は、例えば、Ｔ細胞が自己抗原に仕向けられている場合、エピトープ特異的様式でエフェクターＴ細胞活性を（例えば、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで）減少させるための方法を含み、それを提供する。例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）によって提示されるエピトープに特異的なＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の絶対または相対数は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の用量または投与との１回以上の接触の後に、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、または少なくとも７５％減少し得る。方法は、（例えば、対象に投与することによって）エピトープ特異的Ｔ細胞を、エピトープを提示し、かつＭＯＤ（例えば、ＴＧＦ－β）を保有する１つ以上の用量のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体と接触させることを含む。接触または投与は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも１００％、少なくとも２倍、少なくとも２．５倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、または１０倍超の（ｉ）Ｔ細胞によるＦａｓＬ発現；ｉｉ）ケモカイン及び／またはサイトカイン放出（例えば、ＩＦＮ－γ）の抑制；及びｉｉｉ）細胞毒素（例えば、パーフォリン；グランザイム；グラニュリシン）合成または放出の抑制のうちの１つ以上の減少をもたらす。変化は、接触または投与の前の発現または放出のレベルと比べて、またはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体と接触されていないサンプル（例えば、血液または組織のサンプル）に存在するＴ細胞の集団と比べて計算され得る。

他の例では、抗原（例えば、自己抗原のエピトープ）を提示するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート（特に１つ以上のＩＬ－６ ＭＯＤを提示する場合）またはその高次複合体は、エピトープに特異的なＣＤ８＋制御性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋ＦＯＸＰ３＋またはＣＤ８＋ＦＯＸＰ３＋ＣＤ２５＋として特性化されるＣＤ８＋Ｔｒｅｇ）と相互作用し、その数または活性を増加させ得る。様々なＣＤ８^＋Ｔｒｅｇサブセットは、例えば、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－β、ＩＬ－１６、ＩＦＮ－γ及びケモカイン（Ｃ－Ｃモチーフ）リガンド４（ＣＣＬ４）を含むサイトカイン及びケモカインを分泌することによって機能し、それにより、例えば、それらのサイトカインのいずれかの作用によって、エフェクターＴ細胞の活性及び潜在的にＣＤ４＋Ｔ細胞の活性を抑制する。ＣＤ８^＋Ｔｒｅｇはまた、表面タンパク質、例えば、ＴＧＦ－β及び細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ－４）がＴエフェクター細胞に作用する細胞対細胞の接触を介してＴ細胞機能を阻害し得る。例えば、Ｙｕ ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｌ．Ｌｅｔｔ １５（６）：８１８７－８１９４（２０１８）を参照されたい。

本開示は、自己抗原に仕向けられたエピトープ特異的ＣＤ８＋Ｔｒｅｇの数（増殖）及び／またはＩＬ－１０、ＴＧＦ－β、ＩＬ－１６、ＩＦＮ－γ及びＣＣＬ４のうちの１つ以上の放出を増加させ、それにより免疫／自己免疫反応を抑制する方法を提供する。（例えば、対象における）自己抗原特異的ＣＤ８＋Ｔｒｅｇの数を増加させる１つの方法は、エピトープ特異的Ｔ細胞を、自己エピトープを提示し、かつＣＤ８＋Ｔｒｅｇ増殖に対して刺激性のＭＯＤ（例えば、ＩＬ－６、例えば、ａｋａｇａｗａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．２，ｐｐ．１２９－１３９，（２００９）を参照されたい）を保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の１つ以上の用量と（ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで、例えば、対象に投与することによって）接触させることを含み、接触させることは、Ｔ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ複合体と接触されていないサンプル（例えば、血液または組織のサンプル）に存在するＣＤ８＋Ｔｒｅｇの数と比べて少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも１００％、少なくとも２倍、少なくとも２．５倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、または１０倍超増加する。

本開示はまた、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－β、ＩＬ－１６、ＩＦＮ－γ及びＣＣＬ４のうちの１つ以上を増加させ、それにより免疫／自己免疫反応を抑制する方法を提供する。方法は、（ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで、例えば、対象に投与することによって）エピトープ特異的Ｔ細胞を、抗原を提示しかつＣＤ８＋Ｔｒｅｇ細胞に対して刺激性のＭＯＤを保有する１つ以上の用量のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）と接触させることを含む。接触は、接触の前の量と比べてまたはＴ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ複合体と接触されていないサンプル（例えば、血液または組織のサンプル）に存在するＴ細胞の集団と比べてＩＬ－１０、ＴＧＦ－β、ＩＬ－１６、ＩＦＮ－γ及びＣＣＬ４のうちの少なくとも１つの放出を少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも１００％、少なくとも２倍、少なくとも２．５倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、または１０倍超増加させる。

エピトープ特異的ＣＤ８＋エフェクターを排除することが所望である場合（例えば、それらが、自己抗原に対して仕向けられている場合）、それらは、そのエピトープを提示するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）と接触させられ得る。Ｔ細胞－ＭＰは、アポトーシスをもたらす１つ以上のＭＯＤを含み得、及び／またはＭＯＤポリペプチド配列の非存在下であっても抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）及び／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を容易化するＩｇ Ｆｃ領域を含み得る（例えば、ｗｔ．Ｉｇ Ｆｃ骨格を有するＭＯＤがないＴ細胞－ＭＰ）。アポトーシスは、例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）が、エピトープ（例えば、自己抗原）及びＭＯＤ、例えば、ＦＡＳ媒介アポトーシスを誘導するＦａｓＬの両方を含む場合に生じ得る。エピトープ特異的Ｔ細胞の排除はまた、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）がエピトープを提示し、ｗｔ．または向上したＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣ機能性を有する免疫グロブリンＦｃポリペプチドを含む場合に抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）及び／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の結果として生じ得る。したがって、本開示は、例えば、Ｔ細胞が自己抗原に仕向けられている場合、エピトープ特異的様式でエフェクターＴ細胞を（例えば、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで）排除する方法を含み、それを提供する。方法は、エピトープ特異的Ｔ細胞を、エピトープを提示し、かつＴ細胞アポトーシスを誘導し得るＭＯＤ、例えば、ＴＮＦまたはＦａｓ－Ｌ（Ｆａｓ受容体（ＣＤ９５）媒介細胞死をもたらす）、及び／またはＡＤＣＣまたはＣＤＣ活性を有するＩｇ Ｆｃ領域を保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の１つ以上の用量と（例えば、ｉｎ ｖｉｖｏで対象に、またはｉｎ ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ ｖｉｖｏで細胞に投与することによって）接触させることを含む。接触または投与は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）によって提示されるエピトープに特異的なＣＤ８＋細胞の少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％の排除をもたらす。変化は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の接触（投与）前のサンプル（例えば、血液または組織のサンプル）、またはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）と接触されていないサンプルに存在するＴ細胞の数と比べて計算され得る。

Ｔ細胞のエピトープ制限調節に加えて、本開示はまた、特定のエピトープによって制限されない様式で免疫調節性ポリペプチドを提供することによってＴ細胞（及び免疫系の他の細胞）の活性を調節する方法を提供する。方法は、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはその高次複合体（例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰ）（Ｔ細胞－ＭＰは、１つ以上のＭＯＤを保有する）、またはそのようなコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸を対象に投与することまたはそうでなければ免疫系の細胞と接触させることを含む。例えば、ＩＬ－２及び／またはＣＤ８０ ＭＯＤを保有するコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、エピトープ非依存的様式でそれらのサイトカインをそれを必要とする対象または患者に有効に提供するために利用され得る。

Ｂ．ＭＯＤ（共刺激ポリペプチド）を選択的に送達する方法
本開示は、ＭＯＤ（共刺激ポリペプチド）、例えば、ＩＬ－２、４－１ＢＢＬ、ＣＤ－８０、ＣＤ－８６、Ｆａｓ－Ｌ、ＰＤ－Ｌ１、またはそれらのいずれかの親和性が減少したバリアント（例えば、本明細書に開示されるＰＤ－Ｌ１及び／またはＩＬ－２バリアント）を、所与のエピトープに特異的なＴＣＲを有する選択されたＴ細胞または選択されたＴ細胞集団に送達する方法を提供する。方法は、Ｔ細胞の集団を、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）と接触させること（例えば、対象への投与による）を含む。Ｔ細胞の集団は、ｉ）標的エピトープに特異的なＴＣＲを有する標的Ｔ細胞；及びｉｉ）標的エピトープに特異的ではない非標的Ｔ細胞（例えば、エピトープ特異的Ｔ細胞が結合するエピトープ以外のエピトープ（複数可）に特異的なＴ細胞）を含む混合集団であり得る。エピトープ特異的Ｔ細胞は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体に存在し、それによって提示されるエピトープに特異的であり、Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートによって提供されるペプチドＭＨＣ複合体に結合し、それによりＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するＭＯＤを標的Ｔ細胞（複数可）に選択的に送達する。接触または投与は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで行われ得、処置方法のすべてまたは一部を構成し得る。よって、例えば、本開示は、共刺激ポリペプチド、例えば、ＰＤ－Ｌ１、または天然に存在する共刺激ポリペプチドの親和性が減少したバリアント、例えば、本明細書に開示されるＰＤ－Ｌ１バリアント、またはその両方の組み合わせを標的Ｔ細胞に選択的に送達する方法であって、疾患または障害の処置を一部を形成する、方法を提供する。

例として、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）は、ｉ）エピトープコンジュゲートに存在するエピトープに特異的な標的Ｔ細胞（複数可）；及びｉｉ）エピトープコンジュゲートに存在するエピトープではない第２のエピトープ（複数可）に特異的な非標的Ｔ細胞（複数可）を含むＴ細胞の集団と接触させられる。集団を接触させることは、ＭＯＤ（複数可）または親和性が減少したバリアントＭＯＤ（複数可）の標的Ｔ細胞への選択的送達をもたらす。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰ）の５０％未満、４０％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満、または４％、３％、２％もしくは１％未満は、非標的Ｔ細胞に結合し得、結果として、ＭＯＤ（複数可）は、標的Ｔ細胞に選択的に送達される（したがって、非標的Ｔ細胞には実質的に送達されない）。

いくつかの場合では、ＭＯＤ（複数可）及び／またはバリアントＭＯＤ（複数可）が送達されるＴ細胞の集団は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで存在し、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）に対する標的Ｔ細胞集団の生物学的反応（例えば、Ｔ細胞活性化、増殖、及び／または表現型分化）は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏ環境の状況下で誘発される。例えば、Ｔ細胞の混合集団が個体から得られ得、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏでＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）と接触させられ得る。そのような接触は、規定の用量（複数可）に対するＴ細胞の集団の単一または複数の曝露及び／または曝露スケジュール（複数可）を含み得る。いくつかの場合では、前記接触は、Ｔ細胞の集団内の標的Ｔ細胞の選択的な結合／活性化、及び／または増殖をもたらし、活性化及び／または増殖した標的Ｔ細胞の集団の生成をもたらす。例として、Ｔ細胞の混合集団は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）であり得る。例えば、患者からのＰＢＭＣは、標準的なリンパ球培養条件下で０．１～１０００ｎＭのＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）に曝露される前に標準的な採血及びＰＢＭＣ濃縮技術によって得られ得る。規定の用量及びスケジュールでの混合Ｔ細胞集団の曝露の前、間、及び後の時点で、ｉｎ ｖｉｔｒｏ培養下の標的Ｔ細胞の存在量が、特定のペプチド－ＭＨＣ多量体、表現型マーカー、及び／または機能的活性（例えば、サイトカインＥＬＩＳｐｏｔアッセイ）によってモニタリングされ得る。いくつかの場合では、ｉｎ ｖｉｔｒｏで抗原特異的細胞の最適な存在量及び／または表現型を達成すると、活性化及び／または増殖した標的Ｔ細胞の集団のすべてまたは一部は、個体（例えば、Ｔ細胞の混合集団が障害の疾患のための処置として得られた個体）に投与される。

例えば、Ｔ細胞の混合集団は、個体から得られ、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）と接触させられる。ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞培養の状況下での規定の用量（複数可）及び／または曝露スケジュール（複数可）に対するＴ細胞の単一または複数の曝露を含み得るそのような接触は、Ｔ細胞の混合集団がＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは高次複合体によって提示されるエピトープに特異的なＴ細胞を含むかどうかを決定するために使用され得る。Ｔ細胞－ＭＰまたは高次複合体のエピトープに特異的なＴ細胞の存在は、Ｔ細胞の混合集団を含むサンプルをアッセイすることよって決定され得、そのＴ細胞の集団は、エピトープに特異的ではないＴ細胞（非標的Ｔ細胞）を含み、エピトープに特異的なＴ細胞（標的Ｔ細胞）を含み得る。既知のアッセイは、標的Ｔ細胞の活性化及び／または増殖を検出するために使用され得、それにより、特定のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体が個体に存在するＴ細胞に結合するエピトープを保有するかどうか、及び、したがって、エピトープコンジュゲートがその個体のための治療的組成物としての潜在的使用を有するかどうかを決定し得るｅｘ ｖｉｖｏアッセイを提供する。標的Ｔ細胞の活性化及び／または増殖の検出のための好適な既知のアッセイには、例えば、Ｔ細胞表現型及び／または抗原特異性及び／または増殖のフローサイトメトリー特性化が含まれる。エピトープ特異的Ｔ細胞の存在を検出するためのそのようなアッセイ、例えば、コンパニオン診断は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）が標的Ｔ細胞に選択的に結合し、それを調節（活性化または阻害）し、及び／または増殖させるかどうかを決定するために追加のアッセイ（例えば、エフェクターサイトカインＥＬＩＳｐｏｔアッセイ）及び／または適切な対照（例えば、抗原特異的及び抗原非特異的多量体ペプチド－ＨＬＡ染色試薬）をさらに含み得る。よって、例えば、本開示は、個体から得られたＴ細胞の混合集団において、対象となるエピトープに結合する標的Ｔ細胞の存在を検出する方法であって、方法は、ａ）Ｔ細胞の混合集団をＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）とｉｎ ｖｉｔｒｏで接触させること；及びｂ）前記接触に反応したＴ細胞の調節（活性化または阻害）及び／または増殖を検出することであって、Ｔ細胞の調節及び／または増殖は、標的Ｔ細胞の存在を示す、検出することを含む、方法を提供する。代替的に、または追加的に、所望のＴ細胞集団の活性化及び／または増加（増殖）がＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）を使用して得られた場合、次いで活性化／増加したＴ細胞を含むＴ細胞の集団のすべてまたは一部は、治療として個体に投与されて戻され得る。

いくつかの例では、Ｔ細胞の集団は、個体におけるｉｎ ｖｉｖｏのものである。そのような例では、１つ以上の共刺激ポリペプチド（例えば、ＩＬ－２またはＰＤ－Ｌ１または親和性が減少したＩＬ－２またはＰＤ－Ｌ１）をエピトープ特異的Ｔ細胞に選択的に送達するための本開示の方法は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）を個体に投与することを含む。
いくつかの例では、１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、ＩＬ－２またはＰＤ－Ｌ１の野生型または親和性が減少したバリアント）が選択的に送達されているエピトープ特異的Ｔ細胞は、標的Ｔ細胞である。

Ｃ．処置方法
本開示は、多様な疾患及び障害のための処置方法を提供する。処置され得る疾患及び／または障害には、新生物（例えば、非悪性新生物）、がん、感染症、アレルギー、移植（移植片）拒絶反応、移植片対宿主病、及び自己免疫疾患または障害が含まれる。処置方法は、（ｉ）少なくとも１つのＴ細胞－ＭＰ（コンジュゲートされていないまたはエピトープコンジュゲートとしてのいずれか）またはその高次複合体（例えば、二重体）；または（ｉｉ）コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ（高次複合体へと構築し得る）をコードする１つ以上の核酸または発現ベクターの所定量を個体に投与することを含み得る。個体におけるエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節し、それにより疾患または病態を処置する方法を行うことが所望である場合、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）が個体に投与され得る。処置方法において利用されるコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、１つ以上（例えば、２つ以上）の独立して選択されるＭＯＤ及び／またはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含み得る。

標的エピトープ特異的標的細胞集団に限定されない免疫調節性ポリペプチドでの処置が所望である場合、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸が患者または対象に投与され得る。本開示の１つの処置方法は、高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体へと構築し得るコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸（例えば、組換え発現ベクター）をそれを必要とする個体に投与することを含む。本開示の別の処置方法は、本開示のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のｍＲＮＡ分子をそれを必要とする個体に投与することを含む。コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰで処置され得る疾患及び／または障害には、ＭＯＤ（複数可）の免疫調節作用が、コグネイトｃｏ－ＭＯＤを保有する細胞の反応を増強または抑制し、それにより疾患症状を軽減するまたは基礎疾患または障害を治癒する免疫反応をもたらすものが含まれる。

本開示は、個体におけるエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節し、それにより処置を行う方法であって、方法は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量を個体に投与することを含み、投与された分子は、個体におけるエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節し、それにより個体における疾患または障害を処置する、方法を提供する。よって、本開示は、処置を行うのに十分なＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の有効量をそれを必要とする個体に投与することを含む処置方法を提供する。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを投与することは、エピトープ特異的Ｔ細胞反応を誘導し、また、エピトープ非特異的Ｔ細胞反応を誘導し得、エピトープ特異的Ｔ細胞反応のエピトープ非特異的Ｔ細胞反応の比は、少なくとも２：１である。いくつかの場合では、エピトープ非特異的Ｔ細胞反応に対するエピトープ特異的Ｔ細胞反応の比は、少なくとも５：１である。いくつかの場合では、エピトープ非特異的Ｔ細胞反応に対するエピトープ特異的Ｔ細胞反応の比は、少なくとも１０：１である。いくつかの場合では、エピトープ非特異的Ｔ細胞反応に対するエピトープ特異的Ｔ細胞反応の比は、少なくとも２５：１である。いくつかの場合では、エピトープ非特異的Ｔ細胞反応に対するエピトープ特異的Ｔ細胞反応の比は、少なくとも５０：１である。いくつかの場合では、エピトープ非特異的Ｔ細胞反応に対するエピトープ特異的Ｔ細胞反応の比は、少なくとも１００：１である。いくつかの場合では、個体は、ヒトである。いくつかの場合では、調節は、がんまたは感染細胞、例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートに存在するペプチドエピトープによって提示される同じエピトープを提示するウイルスまたはがん抗原を発現する細胞に対する細胞傷害性Ｔ細胞反応を増加させる。以下に論述されるように、いくつかの場合では、投与は、静脈内、皮下、筋肉内、全身性、リンパ管内、処置部位の遠位、局所、または処置部位もしくはその近くであり、投与される分子の有効量を投与するために必要とされる用量が本明細書で以下に論述される。

本開示はまた、特定のエピトープ（例えば、ＣＭＶタンパク質の特定のエピトープ）に仕向けられたＴ細胞（例えば、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞）を選択された細胞または組織に向けて再指向させる方法を含み、それを提供する。患者が特定のエピトープに仕向けられた十分なＴ細胞を有しない（または有しない可能性がある）場合、方法は、特定のエピトープに特異的なＴ細胞を誘導する抗原（例えば、サイトメガロウイルス「ＣＭＶ」タンパク質）で、処置される患者を免疫する開始工程を含む（図１８の上部セクションを参照されたい）。エピトープに特異的な十分なＴ細胞を有する患者は、１つ以上（例えば、２つ以上）の標的化配列及び１つ以上のＭＯＤをさらに含む特定のエピトープにコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰで処置される。図１８の中央部分「Ｔ細胞－ＭＰでの処置」を参照されたい。例として、特定のエピトープにコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰは、標的化配列として、がん標的化ペプチドＣＴＰ１及び／またはＣＴＰ２及びＭＯＤ（例えば、ｗｔ．またはバリアントＩＬ－２等、細胞傷害性Ｔ細胞に対して刺激性である）を含み得る。標的化配列を保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、標的細胞または組織上に局在化される（例えば、図１８に示されるがん細胞であるが、特定の表面抗原を有する任意の細胞または組織が標的化され得る）。特定のエピトープにコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰの局在化は、特定のエピトープに特異的なＴ細胞の局在化を引き起こす一方で、Ｔ細胞－ＭＰによって提示される特定のエピトープによって係合されたＴＣＲからのシグナルと組み合わされたＭＯＤからのシグナルは、Ｔ細胞反応（例えば、図１８の下側セクションに示されているような標的細胞の細胞傷害攻撃）を誘導する。全体のプロセスは、Ｔ細胞の作用を、特定のエピトープを発現する細胞または組織から、標的化配列（複数可）が認識する抗原を発現する細胞または組織に再指向させることを可能にする。標的ががん性細胞または組織である場合、標的抗原の喪失または変異による処置からのがんの逃避を防止するために、がん細胞または組織の異なる抗原に対して仕向けられた複数の標的化配列（例えば、図１８におけるＣＴＰ１及びＣＴＰ２）を有するヘテロマーＴ細胞－ＭＰ（例えば、ヘテロ二量体）を使用することが有利であり得る。

（ｉ）コンジュゲートされていないＴ細胞またはその高次複合体（例えば、二重体）；（ｉｉ）コンジュゲートされていないＴ細胞ＭＰまたはその高次複合体（例えば、ホモ二重体またはヘテロ二重体）をコードする１つ以上の核酸；または（ｉｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、ホモ二重体またはヘテロ二重体）のいずれかは、単独でまたは１つ以上の追加の治療剤または薬物と共に投与され得る。治療剤（例えば、チェックポイント阻害因子に対する抗体、例えば、抗ＰＤ－１、例えば、ニボルマブ、セミプリマブ、及びペムブロリズマブ；抗ＰＤＬ－１、例えば、アテゾリズマブ、アベルマブ、またはデュルバルマブ；または抗ＣＴＬＡ－４、例えば、イピリムマブ（これらは、他のものと共に、以下にさらに記載される））は、１つ以上のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ分子をコードする核酸の投与の前、間、または後に投与され得る。追加の治療剤または薬物が、Ｔ細胞－ＭＰまたはその高次複合体（例えば、二重体）、またはコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸を含む組成物または製剤と共に投与される場合、治療剤または薬物は、それらの分子のいずれかと同時に投与され得る。代替的には、治療剤は、単一の製剤または組成物（例えば、薬学的組成物）の一部としてＴ細胞－ＭＰまたは核酸と共投与され得る。

エピトープがアレルゲンに関連する場合、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、アレルギー反応を処置する方法において利用され得る。エピトープが感染性物質（例えば、ウイルス、細菌、真菌、原生動物、または寄生蠕虫）に関連する場合、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、病原体による感染症の処置または予防の方法において利用され得る。エピトープが新生物またはがん性細胞または組織（例えば、がん関連抗原、新抗原、または所定のＨＰＶ及びＨＢＶ抗原等の特定のがんに関連することが知られているウイルスの抗原のエピトープ）に関連する場合、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、様々な新生物またはがんを処置する方法において利用され得る。

１ 新生物及びがん
本開示の方法で処置され得るがん（例えば、悪性新生物）及び新生物（例えば、良性新生物または良性腫瘍）には、図１８に関して上述したようにＴ細胞作用の再指向によるものを含めて、標的化配列で標的化され得る任意の新生物またはがんが含まれる。本開示の方法で処置され得るがんには、癌腫、肉腫、黒色腫、白血病、及びリンパ腫が含まれる。本開示の方法で処置され得るがん及び新生物には、固形腫瘍が含まれる。本開示の方法で処置され得るがんには、転移がんが含まれる。

いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）は、（ｉ）がん特異的エピトープ（例えば、がん関連抗原）、及び（ｉｉ）エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する（例えば、エフェクター機能及び／または増殖を活性化する）１つ以上の独立して選択される活性化性ＭＯＤポリペプチド配列を含む。ＣＤ８＋Ｔ細胞を１または２つのＩＬ－２ ＭＯＤ（例えば、二重体においてＨ１６及び／またはＦ４２置換、例えば、Ｈ１６Ａ及び／またはＦ４２Ａ置換を保有する２または４つのＩＬ－２ ＭＯＤ）を保有するＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと接触させることは、提示されたエピトープに特異的なＴＣＲを有するＴ細胞の増殖をもたらし得る。Ｔ細胞が細胞傷害性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋細胞）である場合、そのようなＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体は、エピトープを発現するがん細胞または病原体感染細胞に特異的なＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数及び／または活性を増加させ得る。ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加した増殖及び／またはＣＤ８＋Ｔ細胞によるケモカイン及び／またはサイトカインの放出の誘導または増強をもたらし得る。したがって、本開示は、がんまたは感染症を処置する方法であって、（ｉ）がんエピトープ（例えば、がん関連抗原のエピトープ）；及び（ｉｉ）コンジュゲートされたエピトープに特異的なＴ細胞を活性化する１つ以上の独立して選択される活性化性ＭＯＤポリペプチド配列を含むＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量をそれを必要とする個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの例では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量は、ＣＤ８＋エフェクター細胞の数または活性を増加させる量である。

ＣＤ８＋Ｔ制御性細胞（Ｔｒｅｇ）は、抗腫瘍免疫を抑制することが示されている（例えば、Ｗａｎｇ，Ｒ－Ｆ．Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，６９（１１）：８１１－８１４（２００８）を参照されたい）。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体が阻害性ＭＯＤ（例えば、ＰＤ－Ｌ１、ＦａｓＬ等）及びがんまたは新生物に対して反応性のＴ細胞に特異的なエピトープを含む場合、それは、Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートによって提示されるエピトープに特異的なＣＤ８^＋Ｔｒｅｇ（例えば、ＦｏｘＰ３^＋、ＣＤ８^＋Ｔ細胞）の増殖及び／または活性を減少させるために処置（治療方法）において利用され得る。抗腫瘍免疫を増強するそのような処置は、単独でまたはがん及び新生物の処置のための他の治療と組み合わせて利用され得る。したがって、本開示は、がんまたは新生物を有する個体を処置する方法であって、個体は、ＣＤ８＋Ｔ－ｒｅｇ細胞による反応の抑制に少なくとも部分的に起因して十分な抗腫瘍免疫反応をもたらさない、方法を提供する。過剰なＣＤ８＋Ｔｒｅｇ活性を伴う疾患または障害を処置する方法には、（ｉ）新生物またはがんに特異的なエピトープ（例えば、がん関連抗原の抗原決定基）；及び（ｉｉ）Ｔ細胞－ＭＰにコンジュゲートされたエピトープに対して特異性を有するＣＤ８＋Ｔｒｅｇを阻害する１つ以上の独立して選択される阻害性ＭＯＤポリペプチド配列を含むＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量をそれを必要とする個体に投与することが含まれる。そのようなＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の有効量はまた、１つ以上の用量で投与される場合、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートによって提示される新生物またはがんエピトープに対する特異性を有するＣＤ８＋Ｔｒｅｇの増殖、絶対数、及び／または活性（例えば、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－β、ＩＬ－１６、ＩＦＮ－γ、またはＣＣＬ４のうちの１つ以上の放出）の減少を引き起こす量であり得る。新生物またはがんエピトープに対する特異性を有するＣＤ８＋Ｔｒｅｇの減少は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の投与前のそれらの細胞の数と比較して、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％であり得る。

処置を行うために有効量のＴ細胞－ＭＰを提供するために必要とされる用量及び投与経路は、以下に論述される。

本明細書に開示される方法によって処置され得るがんには、食道癌、肝細胞癌、基底細胞癌（皮膚癌の形態）、扁平上皮癌（様々な組織）、移行細胞癌（膀胱の悪性新生物）を含む膀胱癌、気管支癌、結腸癌、大腸癌、胃癌、肺の小細胞癌及び非小細胞癌を含む肺癌、副腎皮質癌、甲状腺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、腎細胞癌、非浸潤性乳管癌または胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胚性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、精巣癌、骨原性癌、上皮癌、及び鼻咽腔癌が含まれるがこれらに限定されない。

本明細書に開示される方法によって処置され得る肉腫には、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、脊索腫、骨原性肉腫、骨肉腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、及び他の軟部組織肉腫が含まれるがこれらに限定されない。

本明細書に開示される方法によって処置され得る他の固形腫瘍には、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、及び網膜芽細胞腫が含まれるがこれらに限定されない。

本明細書に開示される方法による治療に適している場合がある白血病には、ａ）慢性骨髄増殖性症候群（多能性造血幹細胞の腫瘍性障害）；ｂ）急性骨髄性白血病（制限された系統潜在性の多能性造血幹細胞または造血細胞の腫瘍性形質転換；ｃ）Ｂ細胞ＣＬＬ、Ｔ細胞ＣＬＬ前リンパ球性白血病、及び有毛細胞白血病を含む慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ；免疫学的に未熟な及び機能的に無能な小リンパ球のクローン増殖）；及びｄ）急性リンパ芽球性白血病（リンパ芽球の蓄積によって特性化される）が含まれるがこれらに限定されない。本方法を使用して処置され得るリンパ腫には、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫）；ホジキンリンパ腫；非ホジキンリンパ腫等が含まれるがこれらに限定されない。

本明細書に開示される方法に従って処置され得る他のがんには、非定型髄膜腫、膵島細胞癌、甲状腺の髄様癌、間葉腫、肝細胞癌、肝芽腫、腎臓の明細胞癌、及び縦隔神経線維腫が含まれる。

上記したように、いくつかの場合では、本処置方法を行う際、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）は、それを必要とする個体に、ポリペプチド自体として投与される。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの投与に加えて、がんまたは新生物を処置する方法は、例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞機能（例えば、エフェクター機能）を増強する、及び／またはそうでなければがんまたは新生物を処置するまたはその症状を軽減する１つ以上の治療剤を投与することをさらに含み得る。したがって、抗ＴＧＦ－β抗体、例えば、ＴＧＦ－β１に対して仕向けられたメテリムマブ（ＣＡＴ１９２）ならびにＴＧＦ－β１及びＴＧＦ－β２に対して仕向けられたフレソリムブ、またはＴＧＦ－β捕捉剤は、がんまたは新生物の処置のためにＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと併せて投与され得る。但し、抗ＴＧＦ－β抗体での処置は、Ｔ細胞－ＭＰが、抗体またはＴＧＦ－βが結合するａａ配列を含まないことを条件とし得る）。

がんまたは新生物の処置のためにＴ細胞－ＭＰまたはその高次複合体（例えば、二重体）と併せて投与され得るＣＤ８＋機能を増強する他の治療剤には、チェックポイント阻害剤（以下に論述される）、以下のものに対して仕向けられた抗体が含まれるがこれらに限定されない：Ｂリンパ球抗原（例えば、イブリツモマブチウキセタン、オビヌツズマブ、オファツムマブ、ＣＤ２０に対するリツキシマブ、ＣＤ３０に対して仕向けられたブレンツキシマブベドチン、及びＣＤ５２に対するアレムツズマブ）；ＥＧＦＲ（例えば、セツキシマブ、パニツムマブ、及びネシツムマブ）；ＶＥＧＦ（例えば、ベバシズマブ）；ＶＥＧＦＲ２（例えば、ラムシルマブ）；ＨＥＲ２（例えば、ペルツズマブ、トラスツズマブ、及びアド－トラスツズマブ）；ＰＤ－１（例えば、チェックポイント阻害を標的とするニボルマブ及びペムブロリズマブ）；ＲＡＮＫＬ（例えば、デノスマブ）；ＣＴＬＡ－４（例えば、チェックポイント阻害を標的とするイピリムマブ）；ＩＬ－６（例えば、シルツキシマブ）；ジシアロガングリオシド（ＧＤ２）、（例えば、ジヌツキシマブ）ジシアロガングリオシド（ＧＤ２）；ＣＤ３８（例えば、ダラツムマブ）；ＳＬＡＭＦ７（エロツズマブ）；ＥｐＣＡＭ及びＣＤ３の両方（例えば、カツマキソマブ）；またはＣＤ１９及びＣＤ３の両方（例えば、ブリナツモマブ）（任意に、但し、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、抗体が結合するａａ配列を含まないことを条件とする）。

がん及び新生物の処置のためにＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと併せて投与され得る化学療法剤には、アルキル化剤、細胞骨格破壊剤（例えば、タキサン）、エポチロン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ヌクレオチドアナログまたは前駆体アナログ、ペプチド抗新生物性抗生物質（例えば、ブレオマイシンまたはアクチノマイシン）、白金系剤、レチノイド、またはビンカアルカロイド及びそれらの誘導体が含まれるがこれらに限定されない。化学療法剤は、アクチノマイシンオールトランスレチノイン酸、アザシチジン、アザチオプリン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カペシタビン、シスプラチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、シタラビン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、エピルビシン、エポチロン、エトポシド、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イマチニブ、イリノテカン、メクロレタミン、メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、テニポシド、チオグアニン、トポテカン、バルルビシン、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、及びビンデシンからなる群から選択され得る。

２ 免疫チェックポイント阻害剤
上記したように、がんまたは新生物の処置のためにＴ細胞－ＭＰまたはその高次複合体（例えば、二重体）と併せて投与され得る治療剤の１つのタイプは、免疫チェックポイント阻害剤である。例示的な免疫チェックポイント阻害剤には、免疫チェックポイントポリペプチド、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ１２２、ＣＤ９６、ＣＤ７３、ＣＤ４７、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＳＦ１Ｒ、ＪＡＫ、ＰＩ３Ｋデルタ、ＰＩ３Ｋガンマ、ＴＡＭ、アルギナーゼ、ＣＤ１３７（４－１ＢＢとしても知られている）、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ９６、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１２２、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２を標的とする阻害剤が含まれる。いくつかの場合では、免疫チェックポイントポリペプチドは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１２２及びＣＤ１３７から選択される刺激性チェックポイント分子である。いくつかの場合では、免疫チェックポイントポリペプチドは、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＤ９６、ＴＩＧＩＴ及びＶＩＳＴＡから選択される阻害性チェックポイント分子である。

いくつかの場合では、免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイントに特異的な抗体、例えば、モノクローナル抗体である。抗免疫チェックポイント抗体は、抗体がヒトにおいて免疫反応を実質的に誘発しないように、完全ヒト、ヒト化、または非免疫化であり得る。いくつかの場合では、抗免疫チェックポイント抗体は、免疫チェックポイントポリペプチドのリガンドに対する免疫チェックポイントポリペプチドの結合を阻害する。いくつかの場合では、抗免疫チェックポイント抗体は、免疫チェックポイントポリペプチドの受容体に対する免疫チェックポイントポリペプチドの結合を阻害する。

免疫チェックポイントに特異的であり、かつ免疫チェックポイント阻害剤として機能する抗体、例えば、モノクローナル抗体は、当該技術分野で知られている。例えば、Ｗｕｒｚ ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｔｈｅｒ．Ａｄｖ．Ｍｅｄ．Ｏｎｃｏｌ．８：４；及びＮａｉｄｏｏ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．２６：２３７５を参照されたい。好適な抗免疫チェックポイント抗体には、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ペムブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ－２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ－１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒ Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ－４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ、（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ、Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ－９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｅｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｅｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ－０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ－６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ－８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌＩＤｅｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ－５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ１２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ ａｎｄ Ｐｉｅｒｒｅ Ｆａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ－９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）及びそれらの組み合わせが含まれるがこれらに限定されない。好適な抗ＬＡＧ３抗体には、例えば、ＢＭＳ－９８６０１６及びＬＡＧ５２５が含まれる。好適な抗ＧＩＴＲ抗体には、例えば、ＴＲＸ５１８、ＭＫ－４１６６、ＩＮＣＡＧＮ０１８７６、及びＭＫ－１２４８が含まれる。好適な抗ＯＸ４０抗体には、例えば、ＭＥＤＩ０５６２、ＩＮＣＡＧＮ０１９４９、ＧＳＫ２８３１７８１、ＧＳＫ－３１７４９９８、ＭＯＸＲ－０９１６、ＰＦ－０４５１８６００、及びＬＡＧ５２５が含まれる。好適な抗ＶＩＳＴＡ抗体は、例えば、ＷＯ２０１５／０９７５３６に提供されている。

抗免疫チェックポイント抗体の好適な投薬量は、１日当たり約１ｍｇ／ｋｇ～約２４００ｍｇ／ｋｇ、例えば、１日当たり約１ｍｇ／ｋｇ～約１２００ｍｇ／ｋｇ（１日当たり約５０ｍｇ／ｋｇ～約１２００ｍｇ／ｋｇを含む）である。そのような薬剤の他の代表的な投薬量には、１日当たり約５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、７００ｍｇ／ｋｇ、８００ｍｇ／ｋｇ、９００ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、１１００ｍｇ／ｋｇ、１２００ｍｇ／ｋｇ、１３００ｍｇ／ｋｇ、１４００ｍｇ／ｋｇ、１５００ｍｇ／ｋｇ、１６００ｍｇ／ｋｇ、１７００ｍｇ／ｋｇ、１８００ｍｇ／ｋｇ、１９００ｍｇ／ｋｇ、２０００ｍｇ／ｋｇ、２１００ｍｇ／ｋｇ、２２００ｍｇ／ｋｇ、及び２３００ｍｇ／ｋｇが含まれる。抗体の有効用量は、１日全体にわたって適切な間隔で別々に投与される、２、３、４、５、６回またはそれ以上の副次的用量として投与され得る。

いくつかの場合では、免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体である。好適な抗ＰＤ－１抗体には、例えば、ニボルマブ、ペムブロリズマブ（ＭＫ－３４７５としても知られている）、ピジリズマブ、ＳＨＲ－１２１０、ＰＤＲ００１、及びＡＭＰ－２２４が含まれる。いくつかの場合では、抗ＰＤ－１モノクローナル抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブまたはＰＤＲ００１である。好適な抗ＰＤ１抗体は、米国特許公開第２０１７／００４４２５９号に記載されている。ピジリズマブについては、例えば、Ｒｏｓｅｎｂｌａｔｔ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３４：４０９－１８を参照されたい。

いくつかの場合では、抗ＰＤ１抗体は、ペムブロリズマブである。いくつかの場合では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ（ＭＤＸ－１１０６またはＢＭＳ－９３６５５８としても知られている；例えば、Ｔｏｐａｌｉａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６６：２４４３－２４５４；及び米国特許第８，００８，４４９号を参照されたい）である。いくつかの場合では、抗ＣＴＬＡ－４抗体は、イピリムマブまたはトレメリムマブである。トレメリムマブについては、例えば、Ｒｉｂａｓ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３１：６１６－２２を参照されたい。

いくつかの場合では、免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体である。いくつかの場合では、抗ＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体は、ＢＭＳ－９３５５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＲＧ７４４６としても知られている）、またはＭＳＢ００１０７１８Ｃである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体は、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）またはＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）である。デュルバルマブについては、例えば、ＷＯ２０１１／０６６３８９を参照されたい。アテゾリズマブについては、例えば、米国特許第８，２１７，１４９号を参照されたい。

いくつかの場合では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。

３ 自己免疫及びアレルギー反応
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）は、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を阻害する（例えば、顆粒依存性及び／または顆粒非依存性反応を含むエフェクター機能及び／または増殖を阻害する）１つ以上の独立して選択される阻害性ＭＯＤポリペプチド配列を含む。

したがって、本開示は、抑制することが必要な抗原決定基（特定のエピトープ）に対する活性Ｔ細胞反応（例えば、アレルギー反応または自己免疫障害）を伴う個体における疾患または障害を処置する方法であって、方法は、特定のエピトープにコンジュゲートされており、かつ１つ以上の独立して選択されるＭＯＤ（例えば、野生型及び／またはバリアント阻害性ＭＯＤ）を含むＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量を個体に投与することを含む、方法を提供する。エピトープが自己抗原の決定基である場合、そのようなＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体は、自己反応性Ｔ細胞の活性を選択的に阻害し得る。したがって、本開示は、個体における自己免疫疾患または障害を処置する方法であって、方法は、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量を個体に投与することを含み、コンジュゲートされたエピトープは、自己エピトープ（自己抗原のエピトープ）であり、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）は、１つ以上の独立して選択されるＭＯＤ（例えば、野生型及び／またはバリアント阻害性ＭＯＤ及び／またはバリアントＭＯＤ）を含む、方法を提供する。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の「有効量」はまた、１つ以上の用量でそれを必要とする個体に投与された場合、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体の投与の前、または投与の非存在下での個体における自己反応性Ｔ細胞の数と比較して、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、コンジュゲートされたエピトープ（例えば、自己抗原またはアレルゲンのエピトープ）に特異的なＴ細胞の数を減少させる量であり得る。アレルゲンのエピトープに特異的な反応（例えば、アレルギー反応）または自己抗原のエピトープに特異的な反応（例えば、自己免疫反応）を伴う疾患または障害を処置するための「有効量」は、１つ以上の用量でそれを必要とする個体に投与された場合、個体におけるＴｈ２サイトカインの生成を減少させる量であり得る。いくつかの場合では、抗原に対する不要な免疫反応（例えば、アレルギー反応または自己免疫反応）を処置するためのＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の「有効量」は、１つ以上の用量でそれを必要とする個体に投与された場合、不要な免疫反応に関連する１つ以上の症状を改善する量である。Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量は、ＣＤ８＋自己反応性Ｔ細胞の数を減少させる量であり得る。いくつかの例では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量は、ＣＤ８＋Ｔｒｅｇの数を増加させ、ひいてはＣＤ８＋自己反応性Ｔエフェクター細胞及び／または活性化ＣＤ８＋エフェクター細胞によって放出されるサイトカインまたは細胞傷害性成分（例えば、パーフォリン；グランザイム；グラニュリシン）の数を減少させる量である。処置を行うためにＴ細胞－ＭＰの有効量を提供するために必要とされる用量及び投与経路は、以下に論述される。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの投与に加えて、自己免疫疾患またはアレルギーを処置する方法は、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、例えば、ＮＳＡＩＤｓ（例えば、Ｃｏｘ－１及び／またはＣｏｘ－２阻害剤、例えば、セレコキシブ、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、及びナプロキセン）；コルチコステロイド（例えば、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、エタメタソネブ、フルドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、プレドニゾロン及びトリアムシノロン）；腫瘍壊死因子アルファの１つ以上の作用を遮断する薬剤（例えば、抗ＴＮＦアルファ、例えば、ゴリムマブ、インフリキシマブ、セルトリズマブ、アダリムマブまたはＴＮＦアルファデコイ受容体、例えば、エタネルセプト）；ＩＬ－１と競合的にＩＬ－１受容体に結合する薬剤（例えば、アナキンラ）；ＩＬ－６受容体に結合し、受容体を介するシグナル伝達からＩＬ－６を阻害する薬剤（例えば、トシリズマブ）を含むがこれらに限定されない、炎症及び／または免疫反応を抑制する１つ以上の治療剤を投与することをさらに含み得る。但し、そのような薬剤の使用は、それらが抗体である場合、Ｔ細胞－ＭＰが、抗体が結合する及び／または薬剤が結合するａａ配列（例えば、ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ）を含まないことを条件とする）。

４ 病原性物質による感染症
いくつかの場合では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）は、（ｉ）病原体特異的エピトープ（例えば、ウイルスまたは細菌抗原のエピトープ）、及び（ｉｉ）エピトープに特異的な標的Ｔ細胞を活性化する（例えば、活性化性顆粒依存性または顆粒非依存性エフェクター機能を活性化する）１つ以上の独立して選択される活性化性ＭＯＤポリペプチド配列を含む。標的Ｔ細胞が細胞傷害性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋細胞）である場合、そのようなＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体は、病原体感染細胞または組織によって発現したエピトープに特異的なＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数及び／または活性を増加させ得る。ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を増加させ、及び／またはＣＤ８＋Ｔ細胞によるケモカイン及び／またはサイトカインの放出を誘導または増強し得る。いくつかの例では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ペプチド、ホスホペプチド、または糖ペプチドエピトープ（例えば、ウイルス、細菌、または他の病原体のスパイク糖タンパク質、核タンパク質、膜タンパク質、レプリカーゼタンパク質、または非構造タンパク質からのもの）に特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞をＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと接触させることは、病原体感染細胞または組織に対する標的Ｔ細胞の細胞傷害活性を増加させる。

エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルスエピトープに特異的なＴ細胞であり得、エピトープ特異的Ｔ細胞を、ウイルスエピトープにコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰと接触させることは、それらのエピトープ特異的Ｔ細胞の数及び／またはウイルスで感染した細胞に対するそれらの細胞傷害活性を増加させる。

したがって、本開示は、病原体による感染症を有する個体を処置する方法であって、（ｉ）病原体特異的エピトープ（例えば、ウイルスまたは細菌抗原のエピトープ）；及び（ｉｉ）病原体特異的エピトープに特異的なＴ細胞を活性化する１つ以上の独立して選択される活性化性ＭＯＤポリペプチド配列を含むＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量をそれを必要とする個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの例では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたはその高次複合体（例えば、二重体）の有効量は、病原体特異的エピトープに対して仕向けられたＣＤ８＋エフェクター細胞の数または活性を増加させる量である。

Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートの投与に加えて、感染症（例えば、病原性感染症）を処置する方法は、１つ以上の抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、及び／または抗寄生蠕虫剤等の１つ以上の治療剤を別々に（例えば、順次に、例えば、Ｔ細胞－ＭＰの投与の直前もしくは直後にまたはＴ細胞－ＭＰ投与と１日おきもしくは１週おきに）または同時に（同じ時間にまたは混合して）投与することをさらに含み得る。

５ 移植拒絶反応及び移植片対宿主病
移植片対宿主または移植拒絶反応について処置されている患者／対象は、それらの免疫反応を抑制する目的のためにＴ細胞－ＭＰの投与に加えて治療剤を摂取し得る。そのような治療剤には、限定されないが、コルチコステロイド（例えば、プレドニゾン）、抗増殖剤（例えば、ミコフェノレート）及び／またはカルシニューリン阻害剤（例えば、シクロスポリンまたはタクロリムス）が含まれる。治療剤は、Ｔ細胞－ＭＰと同時に（同じ時間にまたは混合して）または別々に（例えば、順次に、例えば、Ｔ細胞－ＭＰの投与の直前もしくは直後にまたはＴ細胞－ＭＰ投与と１日おきもしくは１週おきに）投与され得る。

６ 処置方法において使用するための追加の治療剤
Ｔ細胞－ＭＰもしくは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体、またはコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸と共に投与され得る好適な治療剤または薬物には、事実上任意の治療剤が含まれる。好適な治療剤または薬物には、米国食品医薬品局によって承認された及び／または２０２０米国薬局方または国内医薬品集に列挙された小分子治療剤（例えば、分子量が２，０００ダルトン未満）が含まれるがこれらに限定されない。実施形態では、それらの治療剤または薬物は、１，０００未満の分子量である。好適な薬物には、抗生物質、化学療法剤（抗新生物剤）、抗真菌剤、または抗寄生蠕虫剤等（例えば、スルファサラジン、アザチオプリン、シクロホスファミド、レフルノミド；メトトレキサート、抗マラリア剤、Ｄ－ペニシラミン、シクロスポリン）が含まれるがこれらに限定されない。好適な化学療法剤は、アルキル化剤、細胞骨格破壊剤（タキサン）、エポチロン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ヌクレオチドアナログまたは前駆体アナログ、ペプチド抗新生物性抗生物質（例えば、ブレオマイシンまたはアクチノマイシン）、白金系剤、レチノイド、またはビンカアルカロイドであり得る。好適な薬物にはまた、非ステロイド性抗炎症薬及びグルココルチコイド等が含まれる。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート、またはその高次複合体と共に投与され得る好適な治療剤は、抗ＴＧＦ－β抗体、例えば、ＴＧＦ－β１に対して仕向けられたメテリムマブ（ＣＡＴ１９２）及び／またはＴＧＦ－β１及びＴＧＦ－β２に対して仕向けられたフレソリムブ、またはＴＧＦ－β捕捉剤（例えば、Ｃａｂｌｉｖｉ（登録商標）カプラシズマブ－ｙｈｄｐ）を含む。そのような抗体は、一般論として、ＴＧＦ－β１またはＴＧＦ－β２ ＭＯＤ等の、抗体が結合する配列を含むＴ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体と併せて投与されないであろう。

実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体と共に投与され得る好適な治療剤は、次のものに対して仕向けられた１つ以上の抗体を含む：Ｂリンパ球抗原（例えば、イブリツモマブチウキセタン、オビヌツズマブ、オファツムマブ、ＣＤ２０に対するリツキシマブ、ＣＤ３０に対して仕向けられたブレンツキシマブベドチン、及びＣＤ５２に対するアレムツズマブ）；ＥＧＦＲ（例えば、セツキシマブ、パニツムマブ、及びネシツムマブ）；ＶＥＧＦ（例えば、ベバシズマブ）；ＶＥＧＦＲ２（例えば、ラムシルマブ）；ＨＥＲ２（例えば、ペルツズマブ、トラスツズマブ、及びアド－トラスツズマブ）；ＰＤ－１（例えば、チェックポイント阻害を標的とするニボルマブ及びペムブロリズマブ）；ＲＡＮＫＬ（例えば、デノスマブ）；ＣＴＬＡ－４（例えば、チェックポイント阻害を標的とするイピリムマブ）；ＩＬ－６（例えば、シルツキシマブ）；ジシアロガングリオシド（ＧＤ２）、（例えば、ジヌツキシマブ）ジシアロガングリオシド（ＧＤ２）；ＣＤ３８（例えば、ダラツムマブ）；ＳＬＡＭＦ７（エロツズマブ）；ＥｐＣＡＭ及びＣＤ３の両方（例えば、カツマキソマブ）；またはＣＤ１９及びＣＤ３の両方（ブリナツモマブ）。そのような抗体は、一般論として、投与される抗体のいずれかが結合する配列を含むＴ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体（例えば、二重体化Ｔ細胞－ＭＰ）と併せて投与されないであろう。

特にがんまたは新生物の処置のために、Ｔ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体と共に投与され得る好適な治療剤は、１つ以上の化学療法剤を含み得る。そのような化学療法剤は、アルキル化剤、細胞骨格破壊剤（例えば、タキサン）、エポチロン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ヌクレオチドアナログまたは前駆体アナログ、ペプチド抗新生物性抗生物質（例えば、ブレオマイシンまたはアクチノマイシン）、白金系剤、レチノイド、またはビンカアルカロイド及びそれらの誘導体から選択され得る。実施形態では、化学療法剤は、アクチノマイシンオールトランスレチノイン酸、アザシチジン、アザチオプリン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カペシタビン、シスプラチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、シタラビン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、エピルビシン、エポチロン、エトポシド、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イマチニブ、イリノテカン、メクロレタミン、メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、テニポシド、チオグアニン、トポテカン、バルルビシン、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、及びビンデシンから選択される。

細菌、真菌、及び／または寄生蠕虫感染症を処置するために投与される場合、Ｔ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体と共に投与され得る好適な治療剤は、抗生物質、抗真菌剤、及び／または抗寄生蠕虫剤を含み得る。
自己免疫疾患または障害を処置するために投与される場合、Ｔ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ複合体と共に投与され得る好適な治療剤には、ＮＳＡＩＤ、コルチコステロイド（例えば、プレドニゾン）、抗増殖剤（例えば、ミコフェノレート）及び／またはカルシニューリン阻害剤（例えば、シクロスポリンまたはタクロリムス）が含まれるがこれらに限定されない。

ＶＩＩ．処置に好適な対象
例えば、ＭＯＤをＴ細胞に選択的に送達することによるまたはそれらのＴ細胞活性を調節することによる処置に好適な対象には、がん、感染疾患（例えば、ウイルス、細菌、及び／またはマイコプラズマ原因物質を有する者を含む）、移植片対宿主病、移植拒絶反応、アレルギー反応、及び／または自己免疫疾患を有する者が含まれる。

がんを有する処置に好適な対象には、がんのための他の処置が提供されたが、処置に反応しなかった個体が含まれるがこれらに限定されない。本開示の方法で処置され得るがん及び新生物には、ＡＦＰ、ＷＴ－１、ＨＰＶ及びＨＢＶエピトープを含むがこれらに限定されない本明細書に記述されるがんエピトープのいずれかを提示するもの（例えば、セクションＩで記述されたエピトープを参照されたい）、ならびに本明細書に記載の処置方法において記述されるそれらのがん及び新生物（例えば、セクションＶＩを参照されたい）が含まれるがこれらに限定されない。

アレルギーを有する処置に好適な対象には、アレルギーのための他の処置が提供されたが、処置に反応しなかった個体が含まれるがこれらに限定されない。本開示の方法で処置され得るアレルギー病態には、ナッツ（例えば、木及び／またはピーナッツ）、花粉、及び昆虫毒（例えば、ハチ及び／またはカリバチ毒抗原）への曝露に起因するものが含まれるがこれらに限定されない。

自己免疫疾患を有する処置に好適な対象には、自己免疫疾患のための他の処置が提供されたが、処置に反応しなかった個体が含まれるがこれらに限定されない。本開示の方法で処置され得る自己免疫疾患には、アジソン病、円形脱毛症、強直性脊椎炎、自己免疫性脳脊髄炎、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫関連不妊症、自己免疫血小板減少性紫斑病、水疱性類天疱瘡、セリアック病、クローン病、グッドパスチャー症候群、糸球体腎炎（例えば、半月体形成性糸球体腎炎、増殖性糸球体腎炎）、グレーブス病、橋本甲状腺炎、混合性結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症（ＭＧ）、天疱瘡（例えば、尋常性天疱瘡）、悪性貧血、多発性筋炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、強皮症、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、１型糖尿病、血管炎、及び白斑が含まれるがこれらに限定されない。

処置に好適な対象には、感染性物質（例えば、病原体、例えば、ウイルス、細菌、真菌、原生動物、または寄生蠕虫）に曝露され得る者、曝露が疑われる者、及び活動的感染症を有する者が含まれる。そのような対象には、感染性疾患のための他の処置が提供されたが、処置に反応しなかった個体が含まれるがこれらに限定されない。本開示の方法で処置され得る感染性疾患には、本明細書に記述される感染性物質（例えば、ウイルス、例えば、ＨＰＶ、ＨＢＶ等）を有する者が含まれるがこれらに限定されない（例えば、セクションＩにおける感染性物質を参照されたい）。

処置に好適な対象には、移植を受け、かつ移植片対宿主病または移植拒絶反応の形態の移植された組織に対する免疫反応を有する、またはそのリスクを有する個体が含まれる。対象には、他の処置が提供されたが、処置に反応しなかった個体が含まれるがこれらに限定されない。対象は、コルチコステロイド（例えば、プレドニゾン）、抗増殖剤（例えば、ミコフェノレート）及び／またはカルシニューリン阻害剤（例えば、シクロスポリンまたはタクロリムス）を含むがこれらに限定されない、移植された組織に対する免疫反応を抑制する目的のためのＴ細胞－ＭＰの投与と同時の他の処置を受け得る。

ＶＩＩＩ．投薬量及び投与経路
Ａ．投薬量
Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）の好適な投薬量は、様々な臨床的要因に基づいて、担当医、または他の資格のある医療従事者によって決定され得る。医学の技術分野でよく知られているように、任意の１人の患者についての投薬量は、患者のサイズ、身体表面積、年齢、投与される特定のＴ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）、患者の性別、時間、投与経路、全般的健康状態、及び同時に投与されている他の薬物を含む、多くの要因に依存する。当業者はまた、用量レベルが、投与されている特定のＴ細胞－ＭＰ、症状の重症度及び副作用に対する対象の感受性に応じて変わり得ることを理解する。所与の化合物についての好ましい投薬量は、多様な手段によって当業者によって容易に決定可能である。

Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、用量当たり１ｎｇ／ｋｇ体重～１００ｍｇ／ｋｇ体重の間、例えば、体重１ｋｇ当たり０．０１μｇ～１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり０．１μｇ～１０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１μｇ～５０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１０μｇ～２０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１００μｇ～１５ｍｇ、体重１ｋｇ当たり５００μｇ～１０ｍｇ（例えば、体重１ｋｇ当たり０．１～０．５ｍｇ、体重１ｋｇ当たり０．５～１．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１．０～５．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり５．０～１０．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１．０～３．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり２．０～４．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり３．０～５．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり４．０～６．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり５．０～７．０ｍｇ、１ｋｇ当たり６．０～８．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり７．０～９．０ｍｇ、及び体重１ｋｇ当たり８．０～１０．０ｍｇ）、または０．５ｍｇ／ｋｇ体重～５ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得る；しかしながら、特に前述した要因を考慮して、これらの例示的な範囲を下回るまたは上回る用量が想定される。レジメンが連続的注入である場合、上記の用量が利用され得、または用量は、例えば、１分当たり体重１キログラム当たり１μｇ～１０ｍｇの範囲であり得る。Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）はまた、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重～５０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重～約５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重～約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重～約３０ｍｇ／ｋｇ体重、約３０ｍｇ／ｋｇ体重～約４０ｍｇ／ｋｇ体重、または約４０ｍｇ／ｋｇ体重～約５０ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得る。当業者は、体液または組織中の投与された薬剤の測定された滞留時間及び濃度に基づいて投薬のための繰り返し率を容易に推定し得る。

成功裏の処置の後、疾患状態の再発を予防するために維持療法を患者に受けさせることが所望であり得、その場合、Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、例えば、体重１ｋｇ当たり０．０１μｇ～１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり０．１μｇ～１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１μｇ～５０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１０μｇ～２０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１００μｇ～１５ｍｇ、または体重１ｋｇ当たり５００μｇ～１０ｍｇ（例えば、１ｋｇ当たり０．１～０．５ｍｇ、１ｋｇ当たり０．５～１．０ｍｇ、１ｋｇ当たり１．０～３．０ｍｇ、１ｋｇ当たり２．０～４．０ｍｇ、１ｋｇ当たり３．０～５．０ｍｇ、１ｋｇ当たり４．０～６．０ｍｇ、１ｋｇ当たり５．０～７．０ｍｇ、１ｋｇ当たり６．０～８．０ｍｇ、１ｋｇ当たり７．０～９．０ｍｇ、及び１ｋｇ当たり８．０～１０．０ｍｇ）の範囲の維持用量投与される。

Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）の投与の頻度は、多様な要因のいずれか、例えば、症状の重症度等に応じて変化し得る。例えば、いくつかの実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰは、２ヶ月毎に１回、１ヶ月に１回、１ヶ月に２回、２週毎に１回、１ヶ月に３回、３週毎に１回、１週おき（ｑｏｗ）、１週毎に１回、１週に１回（ｑｗ）、１週に２回（ｂｉｗ）、１週に３回（ｔｉｗ）、１週に４回、１週に５回、１週に６回、１日おき（ｑｏｄ）、毎日（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）で投与される。

本開示のＴ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）の投与の継続期間（例えば、Ｔ細胞－ＭＰが１つ以上の用量で投与される期間）は、患者反応等を含む多様な要因のいずれかに応じて変化し得る。例えば、本開示のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、約１日～約１週、約２週～約４週、約１ヶ月～約２ヶ月、約２ヶ月～約４ヶ月、約４ヶ月～約６ヶ月、約６ヶ月～約８ヶ月、約８ヶ月～約１年、約１年～約２年、または約２年～約４年、またはそれ以上の範囲の期間にわたって投与され得る。

Ｂ．投与経路
Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、本開示のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）またはコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのすべてまたは一部をコードする核酸は、ｉｎ ｖｉｖｏ及びｅｘ ｖｉｖｏ方法を含む送達に好適な任意の利用可能な方法及び経路、ならびに全身及び局所投与経路を使用して個体に投与され得る。

本開示のＴ細胞－ＭＰは、全身または局所経路を含む、従来の薬物の送達に好適な任意の利用可能な方法及び経路を使用して宿主に投与され得る。通常、本開示の方法において使用するために企図される投与経路には、腸内、非経口、及び吸入経路が含まれるが、かならずしもこれらに限定されるわけではない。いくつかの許容可能な投与経路には、腫瘍内、腫瘍周辺、筋肉内、リンパ管内、気管内、頭蓋内、皮下、皮内、局所、静脈内、動脈内、直腸、鼻、経口、ならびに他の腸内及び非経口投与経路が含まれる。投与経路は、投与されるＴ細胞－ＭＰ及び／または所望の効果に応じて、所望の場合に組み合わされ、または調節され得る。Ｔ細胞－ＭＰは、単回用量または複数用量で投与され得る。

Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、静脈内に投与され得る。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞－ＭＰは、筋肉内に投与される。Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、リンパ管内に投与され得る。Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、局所に投与され得る（例えば、噴霧または他のエアロゾル形態等の肺投与）。Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、頭蓋内に投与され得る。Ｔ細胞－ＭＰ（例えば、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート）は、皮下に投与され得る。

吸入投与以外の非経口投与経路には、局所、経皮、皮下、筋肉内、眼窩内、嚢内、髄腔内、胸骨内、腫瘍内、リンパ管内、腫瘍周辺、及び静脈内経路、すなわち、消化管を介するもの以外の任意の投与経路が含まれるが、かならずしもこれらに限定されるわけではない。非経口投与は、Ｔ細胞－ＭＰの全身または局所送達を行うために行われ得る。全身送達が所望である場合、投与は、典型的には、薬学的調製物の侵襲的または全身的に吸収される局所または粘膜投与を伴う。

ＩＸ．所定の態様
本発明は、その特定の実施形態を参照して説明されているが、様々な変更が行われ得、本発明の真の主旨及び範囲から逸脱することなく均等物が置換され得ることが当業者によって理解されるはずである。また、特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、及び／または１つまたは複数のプロセス工程を、本発明の目的、主旨、及び範囲に適応させるために多くの改変が行われ得る。すべてのそのような改変は、本明細書に添付された特許請求の範囲の範囲内であることが意図される。
１．コンジュゲートされていないＴ細胞調節性ポリペプチド（Ｔ細胞－ＭＰ）であって、前記ポリペプチドは、
（例えば、Ｎ末端からＣ末端まで）
（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
（ｉｉ）前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列をβ２Ｍポリペプチド配列に接続させる任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）前記β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；
（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；
（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
を含み、前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）または（ｉｘ）の前記ＭＯＤ（複数可））を含み；
前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための１つ以上の化学的コンジュゲーション部位を含む、前記コンジュゲートされていないＴ細胞調節ポリペプチド（Ｔ細胞－ＭＰ）。
２．前記ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、
（ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
（ｉｉ）任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）任意のＬ３リンカーポリペプチド配列（例えば、長さが１０～５０ａａ）；
（ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリンＦｃ配列）；
（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの）であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列）；
を含み、前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列（例えば、要素（ｉ）または（ｉｘ）の前記ＭＯＤ（複数可））を含み；
前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための１つ以上の化学的コンジュゲーション部位を含む、態様１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
態様１及び２に記載のエピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位は、ＭＨＣ－Ｈポリペプチドによって結合され、ＴＣＲに提示され得るように、Ｔ細胞－ＭＰに対するエピトープ提示分子（例えば、ペプチドエピトープ）の共有結合を可能にする。態様１及び２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、ＭＨＣ－Ｈ／β２Ｍポリペプチド配列の結合割れ目に配置され、かつＴＣＲに提示され得る（Ｔ細胞－ＭＰポリペプチドに共有結合した、またはそれとの融合物としての）ペプチドエピトープを含まないことが理解される。
３．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、図３Ａ～３Ｈのいずれかに提供されるＭＨＣ－Ｈポリペプチドの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有するＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、及びＨＬＡ－Ｇ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列から選択されるヒトクラスＩ ＭＨＣ－Ｈ鎖ポリペプチド配列を含む、態様１または態様２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
４．前記ＭＨＣ－Ｈ配列は、細胞膜において前記Ｔ細胞－ＭＰを固定するＭＨＣ－Ｈ膜貫通ドメイン、またはその一部を含まない、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
５．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ａアレルのα１、α２、及びα３ドメインの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
６．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、図３Ｅに提供されるＨＬＡ－Ａ＊０１０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、ＨＬＡ－Ａ＊０３０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、ＨＬＡ－Ａ＊２３０１、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、ＨＬＡ－Ａ＊２４０７、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１ポリペプチド配列の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～５のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
７．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ａ＊０１０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３、またはＨＬＡ－Ａ＊３４０１ポリペプチド配列（例えば、図３Ｅに提供される）の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～６のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
８．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｂアレルのα１、α２、及びα３ドメインの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
９．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５０２、Ｂ２７（サブタイプＨＬＡ－Ｂ＊２７０１－２７５９）、ＨＬＡ－Ｂ＊３８０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４００１、ＨＬＡ－Ｂ＊４６０１、またはＨＬＡ－Ｂ＊５３０１ポリペプチド配列（例えば、図３Ｆに提供される）の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１０．前記ＭＨＣ－Ｈ配列は、ＨＬＡ－Ｂ＊０７０２の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１１．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｃアレルのα１、α２、及びα３ドメインの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１２．前記ＭＨＣ－Ｈ配列は、ＨＬＡ－Ｃ＊０１０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０３、ＨＬＡ－Ｃ＊０３０４、ＨＬＡ－Ｃ＊０４０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０６０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０２、ＨＬＡ－Ｃ＊０８０１、またはＨＬＡ－Ｃ＊１５０２ポリペプチド配列（例えば、図３Ｇに提供される）の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または１１のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１３．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｃ＊０７０１の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または１１のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１４．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｅアレルのα１、α２、及びα３ドメインの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１５．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｅ＊０１０１、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０３、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０４、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０５、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０６、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０７、ＨＬＡ－Ｅ＊０１：０９、またはＨＬＡ－Ｅ＊０１：１０ポリペプチド配列（例えば、図３Ｈに提供される）の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または１４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１６．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｅアレルコンセンサス配列：

（式中、Ｘ１＝ＫまたはＥ、Ｘ２＝ＲまたはＧ、Ｘ３＝ＲまたはＧ、Ｘ４＝ＡまたはＶ、Ｘ５＝ＱまたはＰ、及びＸ６＝ＰまたはＳ）（配列番号５８）
の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または１４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１７．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｆアレルのα１、α２、及びα３ドメインの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１８．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｆ＊０１０１（ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０１：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０２、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０３（ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０３：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０４、ＨＬＡ－Ｆ＊０１：０５、またはＨＬＡ－Ｆ＊０１：０６．ポリペプチド配列（例えば、図３Ｈに提供される）の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または１７のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
１９．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｆアレルコンセンサス配列：

（式中、Ｘ１＝ＹまたはＦ；Ｘ２＝ＰまたはＱ；Ｘ３＝ＳまたはＰ；及びＸ４＝ＰまたはＬ）（配列番号５９）
の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または１７のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２０．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｇアレルのα１、α２、及びα３ドメインの少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２１．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０４（ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０４：０１：０１）、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０６、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０７、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０８、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：０９：ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１０、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１１、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１２、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１４、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１５、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１６、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１７、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１８：ＨＬＡ－Ｇ＊０１：１９、ＨＬＡ－Ｇ＊０１：２０、またはＨＬＡ－Ｇ＊０１：２２ポリペプチド配列（例えば、図３Ｈに提供される）の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または２０のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２２．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ｇアレルコンセンサス配列：

（式中、Ｘ１＝ＳまたはＦ、Ｘ２＝ＹまたはＨ、Ｘ３＝Ｔ、Ｓ、またはＭ、Ｘ４＝ＬまたはＶ；Ｘ５＝ＱまたはＲ、Ｘ６＝ＰまたはＬ、Ｘ７＝ＧまたはＤ、Ｘ８＝ＧまたはＶ、Ｘ９＝ＳまたはＣ、Ｘ１０＝ＬまたはＩ、Ｘ１１＝ＹまたはＨ、Ｘ１２＝ＨまたはＲ、Ｘ１３＝ＹまたはＨ、Ｘ１４＝ＭまたはＴ、Ｘ１５＝ＰまたはＡ、Ｘ１６＝Ｒ、Ｗ、またはＱ、Ｘ１７＝ＴまたはＭ、Ｘ１８＝ＫまたはＥ）（配列番号６０）
の少なくとも２００（例えば、少なくとも２２５、少なくとも２５０、少なくとも２６０、または少なくとも２７５）個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、態様１～４または２０のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２３．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、位置８４におけるアラニン（例えば、ＨＬＡ－Ｆの場合はＹ８４ＡまたはＲ８４Ａ）、位置８４におけるシステイン（例えば、ＨＬＡ－Ｆの場合はＹ８４ＣまたはＲ８４Ｃ）、位置１３９におけるシステイン（例えば、ＨＬＡ－Ｆの場合はＡ１３９ＣまたはＶ１３９Ｃ）、及び位置２３６におけるシステイン（例えば、Ａ２３６Ｃ）からなる群から選択される少なくとも１つの変異（例えば、２つ、または３つの変異）を含む、態様１～２２のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。それらのａａ位置の箇所について図３Ｉを参照されたい。
２４．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、Ｙ８４Ａ及びＡ１３９Ｃ；Ｙ８４Ａ及びＡ２３６Ｃ；Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ；Ｙ８４Ｃ及びＡ２３６Ｃ；ならびにＹ８４Ｃ、Ａ１３９Ｃ及びＡ２３６Ｃからなる群から選択される変異の組み合わせを含む、態様１～２３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２５．前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、位置８４におけるシステイン（例えば、ＨＬＡ－Ｆの場合はＹ８４ＣまたはＲ８４Ｃ）、位置１３９におけるシステイン（例えば、ＨＬＡ－Ｆの場合はＡ１３９ＣまたはＶ１３９Ｃ）、及び任意に位置２３６におけるシステイン（例えば、Ａ２３６Ｃ）を含む、態様１～２３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。それらのａａ位置の箇所について図３Ｉを参照されたい。
２６．前記β２Ｍ配列は、成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド（例えば、図４に提供されるＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿００４０３９．１のａａ２１～１１９）の少なくとも５０個（例えば、６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも９０％（例えば、少なくとも９５％または９８％）または１００％の配列同一性を有する、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２７．前記β２Ｍ配列は、成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド（例えば、図４に提供されるＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿００４０３９．１のａａ２１～１１９）の少なくとも７０個（例えば、少なくとも８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａのａａセグメント内で最大で６（例えば、１、２、３、４、または５）ａａの置換を有する、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２８．前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、ｉ）Ｇｌｙ及び／またはＳｅｒ；ｉｉ）Ａｌａ及びＳｅｒ；ｉｉｉ）Ｇｌｙ、Ａｌａ、及びＳｅｒ；ｉｖ）Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、及びＣｙｓ（例えば、単一のＣｙｓ残基）；ｖ）Ａｌａ、Ｓｅｒ、及びＣｙｓ（例えば、単一のＣｙｓ残基）；またはｖｉ）Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、及びＣｙｓ（例えば、単一のＣｙｓ残基）を含む、それから本質的になる、または、それからなる少なくとも１つのリンカー配列を含む、態様１～２７のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
２９．前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、ポリＧ（例えば、１～１０個のＧｌｙ残基を含むポリグリシン）、ＧＡ、ＡＧ、ＡＳ、ＳＡ、ＧＳ、ＧＳＧＧＳ（配列番号１３０）、ＧＧＧＳ（配列番号１３１）、ＧＧＳＧ（配列番号１３２）、ＧＧＳＧＧ（配列番号１３３）、ＧＳＧＳＧ（配列番号１３４）、ＧＳＧＧＧ（配列番号１３５）、ＧＧＧＳＧ（配列番号１３６）、ＧＳＳＳＧ（配列番号１３７）、ＧＧＧＧＳ（配列番号１３９）、またはＡＡＡＧＧ（配列番号５３２）（そのいずれかは、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回繰り返され得る）から選択される１つ以上の配列を含む少なくとも１つのリンカー（例えば、リンカーＬ１～Ｌ６のいずれか）を含む、態様１～２７のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
３０．前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、１～１０回繰り返され得る（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回繰り返される）Ｇ_４ＳまたはＡＡＡＧＧ配列を含む少なくとも１つのリンカーを含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
３１．前記骨格ポリペプチド配列は、非種間配列または種間配列から独立して選択される、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
３２．前記種間及び非種間配列は、免疫グロブリン重鎖定常領域（Ｉｇ Ｆｃ、例えば、ＣＨ２－ＣＨ３）；コレクチンポリペプチド、コイルドコイルドメイン、ロイシン－ジッパードメイン；Ｆｏｓポリペプチド；Ｊｕｎポリペプチド；Ｉｇ ＣＨ１；Ｉｇ Ｃ_Ｌκ；Ｉｇ Ｃ_Ｌ λ；ジスルフィドを有しないノブ・イン・ホール（ＫｉＨ）；安定化ジスルフィド結合を有するノブ・インホール（ＫｉＨｓ－ｓ）；ＨＡ－ＴＦ；ＺＷ－１；７．８．６０；ＤＤ－ＫＫ；ＥＷ－ＲＶＴ；ＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓ；及びＡ１０７配列からなる群から選択される、態様３１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
３３．少なくとも態様１～３２のいずれかに記載の第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを含む二重体Ｔ細胞－ＭＰまたは高次Ｔ細胞－ＭＰを形成するように複合体化された、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰであって、
（ｉ）前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、第１のβ２Ｍポリペプチド配列；第１のクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；及び第１の骨格ポリペプチドを含み；
（ｉｉ）前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、第２のβ２Ｍポリペプチド配列；第２のクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；及び第２の骨格ポリペプチドを含み；
前記第１及び第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、１つ以上の鎖間共有結合（例えば、１または２つのジスルフィド結合）を任意に含む前記第１及び第２の骨格ポリペプチドの間の結合相互作用によって会合する、前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。例えば、図８及び９における二重体を参照されたい。
３４．前記骨格は、非免疫グロブリンポリペプチド配列を含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
３５．前記非免疫グロブリンポリペプチド配列は、非種間ポリペプチド配列（例えば、非種間コイルドコイルまたはロイシンジッパー配列）である、態様３４に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
３６．前記非免疫グロブリンポリペプチド配列は、種間ポリペプチド配列（例えば、種間コイルドコイルまたはロイシンジッパー配列；Ｊｕｎタンパク質配列と対合するＦｏｓポリペプチド；またはＦｏｓタンパク質配列と対合するＪｕｎポリペプチド）である、態様３４に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
３７．前記骨格は、免疫グロブリンポリペプチド配列を含む、態様１～３３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
３８．前記免疫グロブリンポリペプチド配列は、前記免疫グロブリンポリペプチド配列が非置換であるＴ細胞－ＭＰと比べてＩｇ Ｆｃ受容体及び／または補体Ｃ１ｑタンパク質との結合を減少させる１つ以上の置換を含む、態様３７に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
３９．前記骨格は、非種間免疫グロブリンポリペプチド配列を含む、態様３７または３８に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４０．前記非種間免疫グロブリンポリペプチド配列は、ヒトＩｇＡ Ｆｃ、ＩｇＤ Ｆｃ、またはＩｇＥ Ｆｃ（例えば、図２Ａ～２Ｃに示されるＩｇ Ｆｃ領域のａａ配列の少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む）を含む、態様３９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４１．前記非種間免疫グロブリンポリペプチド配列は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ、ＩｇＧ２ Ｆｃ ＩｇＧ３ ＦｃまたはＩｇＧ４ Ｆｃ（例えば、図２Ｄ～２Ｇに示されるＩｇ Ｆｃ領域のａａ配列の少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む）を含む、態様３９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。例えば、非種間免疫グロブリンポリペプチド配列は、図２Ｄ～２Ｇに示されるＩｇ Ｆｃ領域の少なくとも１５０または２００個の連続ａａと少なくとも約９０％または少なくとも約９５％のａａ配列同一性を有するヒトＩｇＧ１ Ｆｃ、ＩｇＧ２ Ｆｃ ＩｇＧ３ ＦｃまたはＩｇＧ４ Ｆｃのａａ配列を含み得る。
４２．前記非種間免疫グロブリンポリペプチド配列は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ（例えば、図２Ｄに示される野生型（ｗｔ．）Ｉｇ Ｆｃ配列のａａ配列の少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）またはすべてのａａと少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％）または１００％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む）を含む、態様３９または４１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。例えば、非種間免疫グロブリンポリペプチド配列は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ（例えば、図２Ｄ（配列番号４）に示される野生型（ｗｔ．）Ｉｇ Ｆｃ配列の少なくとも１５０または少なくとも２００個の連続ａａと少なくとも約９０％または少なくとも約９５％のａａ配列同一性を有するａａ配列を含む）を含み得る。
４３．前記非種間免疫グロブリンポリペプチドは、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｇ２３６、Ｇ２３７、Ｐ２３８、Ｓ２３９、Ｄ２７０、Ｎ２９７、Ｋ３２２、Ｐ３２９、及び／またはＰ３３１（それぞれ、図２Ｄにおけるｗｔ．ＩｇＧ１のａａ配列のａａＬ１４、Ｌ１５、Ｇ１６、Ｇ１７、Ｐ１８、Ｓ１９、Ｄ５０、Ｎ７７、Ｋ１０２、Ｐ１０９、及びＰ１１１）における少なくとも１つの置換または前記置換を有しない同じ配列と比べてＦｃλ受容体及び／またはＣ１ｑタンパク質に対する結合を減少させる別の置換（例えば、対応する置換）を含む、態様４２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４４．（ｉ）Ｎ２９７の置換（例えば、Ｎ２９７Ａ）；（ｉｉ）ａａ２３４～２３９のいずれかの置換；（ｉｉｉ）Ｌ２３４における置換；（ｉｖ）Ｌ２３５における置換；（ｖ）Ｌ２３４及びＬ２３５における置換（例えば、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａまたは「ＬＡＬＡ」置換）；（ｖｉ）Ｐ３３１の置換；または（ｖｉｉ）Ｄ２７０、Ｋ３２２、及び／またはＰ３２９の置換；Ｌ２３４及び／またはＬ２３５における置換、ならびにＰ３３１における置換（例えば、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ置換）を含む、態様４２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４５．前記骨格配列は、ＩｇＭ重鎖定常領域を含む、態様３９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４６．前記骨格は、種間免疫グロブリンポリペプチド配列を含む、態様１～３３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４７．前記種間免疫グロブリン配列は、免疫グロブリン重鎖定常領域（Ｉｇ Ｆｃ ＣＨ２－ＣＨ３）；Ｉｇ ＣＨ１；Ｉｇ Ｃ_Ｌκ；Ｉｇ Ｃ_Ｌλ；ジスルフィドを有しないノブ・イン・ホール（ＫｉＨ）、安定化ジスルフィド結合を有するノブ・インホール（ＫｉＨｓ－ｓ）、ＨＡ－ＴＦ、ＺＷ－１、７．８．６０、ＤＤ－ＫＫ、ＥＷ－ＲＶＴ、ＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓ、及びＡ１０７配列からなる群から選択される、態様４６に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４８．前記種間免疫グロブリン配列は、ＫＩＨまたはＫＩＨｓ－ｓポリペプチド配列を含む、態様４６に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
４９．前記種間免疫グロブリンは、ＥＷ－ＲＶＴまたはＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓポリペプチド配列を含む、態様４６に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５０．前記種間免疫グロブリン配列は、ＨＡ－ＴＦ、ＺＷ－１、７．８．６０、ＤＤ－ＫＫ、またはＡ１０７ポリペプチド配列を含む、態様４６に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５１．前記置換を有しない同じ配列と比べてＦｃλ受容体及び／またはＣ１ｑタンパク質に対する結合を減少させる１つ以上の置換（例えば、ＩｇＧ１のａａＬ２３４及び／またはＬ２３５、またはＫ３２２における置換）をさらに含む、態様４６～５０のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５２．前記置換を有しない同じ配列と比べて補体活性化を制限する（例えば、ＩｇＧのＤ２７０、Ｎ２９７、Ｋ３２２、Ｐ３２９、及び／またはＰ３３１における置換によって補体Ｃ１ｑタンパク質に対する結合を減少させる）１つ以上の置換をさらに含む、態様４６～５０のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５３．前記種間免疫グロブリンポリペプチド配列は、図２Ｄにおけるｗｔ．Ｉｇ Ｇｇ１のＦｃ配列の少なくとも１２５個の連続ａａ（例えば、少なくとも１５０、少なくとも１７５、少なくとも２００、または少なくとも２１０個の連続ａａ）と少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％）のａａ配列同一性を有するａａ配列を含むヒトＩｇＧ１ Ｆｃを含む、態様４６～５２のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５４．前記種間免疫グロブリンポリペプチド配列は、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｇ２３６、Ｇ２３７、Ｐ２３８、Ｓ２３９、Ｄ２７０、Ｎ２９７、Ｋ３２２、Ｐ３２９、及び／またはＰ３３１（それぞれ、図２Ｄにおけるｗｔ．ＩｇＧ１のａａ配列のａａＬ１４、Ｌ１５、Ｇ１６、Ｇ１７、Ｐ１８、Ｓ１９、Ｄ５０、Ｎ７７、Ｋ１０２、Ｐ１０９、及びＰ１１１）における少なくとも１つの置換または前記置換を有しない同じ配列と比べてＦｃλ受容体及び／またはＣ１ｑタンパク質に対する結合を減少させる別の置換（例えば、対応する置換）を含む、態様５３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５５．（ｉ）Ｎ２９７の置換（例えば、Ｎ２９７Ａ）；（ｉｉ）ａａ２３４～２３９のいずれかの置換；（ｉｉｉ）Ｌ２３４における置換；（ｉｖ）Ｌ２３５における置換；（ｖ）Ｌ２３４及びＬ２３５における置換（例えば、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａまたは「ＬＡＬＡ」置換）；（ｖｉ）Ｐ３３１の置換；または（ｖｉｉ）Ｄ２７０、Ｋ３２２、及び／またはＰ３２９の置換；Ｌ２３４及び／またはＬ２３５における置換、ならびにＰ３３１における置換（例えば、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ置換）を含む、態様５３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５６．ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８０、（Ｂ７－１）、ＣＤ８３、ＣＤ８６（Ｂ７－２）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＬＴ３（免疫グロブリン様転写産物３）、ＩＬＴ４（免疫グロブリン様転写産物４）、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＩＣＡＭ（細胞間接着分子）、ＩＣＯＳ－Ｌ（誘導性共刺激リガンド）、ＪＡＧ１（ＣＤ３３９）、リンホトキシンベータ受容体、３／ＴＲ６、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、ＴＧＦ－β３、４－１ＢＢＬ及び抗ＣＤ２８ポリペプチド配列からなる群から独立して選択される少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様１～５５のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５７．４－１ＢＢＬ、抗ＣＤ２８、ＰＤ－Ｌ１、ＩＬ－２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＩＣＯＳ－Ｌ、ＩＣＡＭ、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ８３、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＪＡＧ１（ＣＤ３３９）、ＣＤ７０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、及びＴＧＦ－β３ポリペプチド配列からなる群から独立して選択される少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
５８．４－１ＢＢＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＩＬ－２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＦａｓＬのｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列及び抗ＣＤ２８からなる群から独立して選択される少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。例えば、コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのｗｔ．ＭＯＤ及び／またはバリアントＩＬ－２ ＭＯＤポリペプチド配列、及び少なくとも１つのｗｔ．ＣＤ８０、ｗｔ．ＣＤ８６、バリアントＣＤ８０またはバリアントＣＤ８６ポリペプチド配列を含み得る。
５９．少なくとも１つのｗｔ．ＩＬ－２またはバリアントＩＬ－２ ＭＯＤ（例えば、Ｈ１６ＡまたはＴ置換及びＦ４２Ａ置換を含む）ポリペプチド配列、またはタンデムのｗｔ．ＩＬ－２ ＭＯＤまたはバリアントＩＬ－２ ＭＯＤポリペプチド配列の少なくとも１つの対を含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６０．（ｉ）ｗｔ．またはバリアントＣＤ８０またはＣＤ８６ ＭＯＤポリペプチド配列；（ｉｉ）ｗｔ．またはバリアントＰＤ－Ｌ１ ＭＯＤポリペプチド配列；及び／または（ｉｉｉ）ｗｔ．またはバリアントＦａｓＬ ＭＯＤポリペプチド配列のうちの少なくとも１つをさらに含む、態様５９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６１．α１ヘリックスのカルボキシル末端部分内に置換されたシステインと前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のα２－１ヘリックスのアミノ末端部分におけるシステインとの間の鎖内ジスルフィド結合をさらに含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６２．位置８４でα１ヘリックスのカルボキシル末端部分内に置換されたシステインと前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列の位置１３９におけるα２－１ヘリックスのアミノ末端部分におけるシステインとの間の鎖内ジスルフィド結合を含み；
位置８４に対してアミノ及びカルボキシルの５残基クラスター（それぞれａａｃ１及びａａｃ２と表記される）及び、位置１３９に対してアミノ及びカルボキシルの５残基クラスター（それぞれａａｃ３及びａａｃ４と表記される）は、１～５個の独立して選択される天然に存在するａａでそれぞれ置換されていてもよく、位置２３６に対してアミノ及びカルボキシルの５残基クラスター（それぞれａａｃ５及びａａｃ６と表記される）は、１～５個の独立して選択される天然に存在するａａでそれぞれ置換されていてもよい、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６３．ａａｃ１～ａａｃ６はそれぞれ、プロリン以外の１～５個の独立して選択される天然に存在するａａで置換されていてもよい、態様６２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６４．前記α１ヘリックスの前記カルボキシル末端部分は、第１の配列ＣＹＮＱＳＥを含み、前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列の前記α２－１ヘリックスの前記アミノ末端部分は、第２の配列Ｄ（Ｍ／Ｔ）ＣＡＱを含み、前記鎖内ジスルフィド結合は、前記第１及び第２の配列における前記システイン間で形成される、態様６２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。図３Ｉのａａｃ１～ａａｃ４を参照されたい。
６５．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、ジスルフィド結合によって連結されていない、態様３３～６４のいずれかに記載の二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６６．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、少なくとも１つ（例えば、２つ）のジスルフィド結合（複数可）によって共有結合されている、態様３３～６４のいずれかに記載の二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６７．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、前記第１のＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のＴ細胞－ＭＰの前記骨格ポリペプチド配列間の少なくとも１つ（例えば、２つ）のジスルフィド結合（複数可）によって共有結合されている、態様６６に記載の二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６８．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの少なくとも１つ（例えば、両方）の配列は、Ｉｇ ＣＨ１ドメインポリペプチド配列を含まない、態様３３～６６のいずれかに記載の二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
６９．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、同一であり、前記コンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰは、ホモ二量体である、態様３３～３５及び３７～４５のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。例えば、図６の構造Ａ及びＢを参照されたい。
７０．ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８０、（Ｂ７－１）、ＣＤ８３、ＣＤ８６（Ｂ７－２）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＬＴ３（免疫グロブリン様転写産物３）、ＩＬＴ４（免疫グロブリン様転写産物４）、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＩＣＡＭ（細胞間接着分子）、ＩＣＯＳ－Ｌ（誘導性共刺激リガンド）、ＪＡＧ１（ＣＤ３３９）、リンホトキシンベータ受容体、３／ＴＲ６、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、ＴＧＦ－β３、４－１ＢＢＬポリペプチド配列及び抗ＣＤ２８からなる群から独立して選択される少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様６９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
７１．４－１ＢＢＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＩＬ－２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＦａｓＬのｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列、及び抗ＣＤ２８からなる群から独立して選択される少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、または少なくとも３つ）のｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様６９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。例えば、前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列、及び少なくとも１つのＣＤ８０、ＣＤ８６、バリアントＣＤ８０またはバリアントＣＤ８６ポリペプチド配列を含み得る。
７２．少なくとも１つのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ（例えば、Ｈ１６ＡまたはＴ置換及びＦ４２Ａ置換を含む）ポリペプチド配列、またはタンデムのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列の少なくとも１つの対を含む、態様６９に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
７３．（ｉ）ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列；（ｉｉ）少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列；及び／または（ｉｉｉ）少なくとも１つのＦａｓＬ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列
のうちの少なくとも１つをさらに含む、態様６９に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
７４．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの前記骨格ポリペプチドは、種間ポリペプチド配列の対であり、前記コンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰは、ヘテロ二量体である、態様３３～３４、３６～３８及び４６～６８に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
７５．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのうちの少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ）は、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８０（Ｂ７－１）、ＣＤ８３、ＣＤ８６（Ｂ７－２）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＬＴ３（免疫グロブリン様転写産物３）、ＩＬＴ４（免疫グロブリン様転写産物４）、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＩＣＡＭ（細胞間接着分子）、ＩＣＯＳ－Ｌ（誘導性共刺激リガンド）、ＪＡＧ１（ＣＤ３３９）、リンホトキシンベータ受容体、３／ＴＲ６、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、ＴＧＦ－β３、抗ＣＤ２８、及び４－１ＢＢＬポリペプチド配列からなる群から独立して選択される少なくとも１つのｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様７４に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
７６．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのうちの少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ）は、４－１ＢＢＬ、抗ＣＤ２８、ＰＤ－Ｌ１、ＩＬ－２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、及びＦａｓＬのｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列からなる群から独立して選択される少なくとも１つのｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様７４に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。例えば、コンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列、及び少なくとも１つの抗ＣＤ２８、ＣＤ８０、ＣＤ８６、バリアントＣＤ８０またはバリアントＣＤ８６ポリペプチド配列を含み得る。
７７．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのうちの少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ）は、少なくとも１つのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列の少なくとも１つの対を含む、態様７４に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
７８．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのうちの少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ）は、（ｉ）ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列；（ｉｉ）少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列；及び／または（ｉｉｉ）少なくとも１つのＦａｓＬ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列のうちの少なくとも１つを含む、態様７４に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
７９．前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰのうちの少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ）は、少なくとも１つのＣＤ８０及び／またはＣＤ８６ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様７４に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８０．前記第１のＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のＴ細胞－ＭＰのうちの少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ）は、少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様７４に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８１．（ｉ）前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、同じＭＯＤを含まない；（ｉｉ）前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、同じ数のＭＯＤを含まない；または（ｉｉｉ）前記ＭＯＤは、前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの異なる箇所に配置されている、態様７４～８０のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８２．３つのヘテロ二量体の三重体Ｔ細胞－ＭＰ、４つのヘテロ二量体の四重体Ｔ細胞－ＭＰ、５つのヘテロ二量体の五重体Ｔ細胞－ＭＰ、または６つの二量体の六重体Ｔ細胞－ＭＰを形成するように複合体化された、態様１～６４のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰ。
８３．各化学的コンジュゲーション部位は、ａ）アミノ酸化学的コンジュゲーション部位；ｂ）非天然アミノ酸及び／またはセレノシステイン；ｃ）酵素修飾配列として作用するペプチド配列（例えば、スルファターゼモチーフ）；ｄ）炭水化物またはオリゴ糖部位；及び／またはｅ）ＩｇＧヌクレオチド結合部位から一緒にまたは独立して選択される、態様１～８２のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８４．少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、酵素修飾配列を含む、態様１～８３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８５．少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、スルファターゼモチーフを含む、態様１～８４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８６．前記スルファターゼモチーフは、配列Ｘ１Ｚ１Ｘ２Ｚ２Ｘ３Ｚ３（式中、
Ｚ１は、システインまたはセリンであり；Ｚ２は、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり；Ｚ３は、塩基性アミノ酸（アルギニン、リジン、またはヒスチジン、通常はリジン）、または脂肪族アミノ酸（アラニン、グリシン、ロイシン、バリン、イソロイシン、またはプロリン、通常はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩ）であり；
Ｘ１は、存在または非存在であり、存在する場合、任意のアミノ酸であり得るが、通常は脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電アミノ酸以外）、通常はＬ、Ｍ、Ｖ、ＳまたはＴ、より通常はＬ、Ｍ、ＳまたはＶであり得、但し、前記スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１は、存在し；
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸であり得るが、通常は脂肪族アミノ酸、極性非荷電アミノ酸、または硫黄含有アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電アミノ酸以外）、通常はＳ、Ｔ、Ａ、Ｖ、ＧまたはＣ、より通常はＳ、Ｔ、Ａ、ＶまたはＧであり得る）
を含む、態様８５に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８７．少なくとも１つのＺ１残基がｆＧｌｙアミノ酸残基に変換されている、態様８６に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８８．前記化学的コンジュゲーション部位の少なくとも１つ（例えば、２つ以上）は、少なくとも１つ（例えば、両方）のＴ細胞－ＭＰポリペプチドのＣ末端に位置するソルターゼＡ酵素部位（例えば、アミノ酸配列ＬＰ（Ｘ５）ＴＧ、ＬＰ（Ｘ５）ＴＡ、またはＬＰＥＴＧＧを含む）を含み；または
前記化学的コンジュゲーション部位の少なくとも１つは、前記第１のまたは第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドの少なくとも一方または両方のアミノ末端でオリゴグリシン（例えば、（Ｇ）_{２、３、４、または５}）またはオリゴアラニン（例えば、（Ａ）_{２、３、４、または５}）を含むソルターゼＡ酵素部位である、
態様１～８４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
８９．少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、トランスグルタミナーゼ部位（例えば、ＬＱＧ、ＬＬＱＧＧ、ＬＬＱＧ、ＬＳＬＳＱＧ、及びＬＬＱＬＱＧからなる群から選択される）を含む、態様１～８４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９０．少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、セレノシステイン、または１つ以上の独立して選択される非天然アミノ酸を含有するアミノ酸配列を含む、態様１～８４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９１．前記１つ以上の非天然アミノ酸のうちの少なくとも１つ（例えば、２つ以上）は、パラ－アセチルフェニルアラニン、パラ－アジドフェニルアラニン及びプロピニル－チロシンからなる群から選択される、態様９０に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９２．少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、炭水化物、単糖、二糖及び／またはオリゴ糖を含む、態様１～８４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９３．少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、１つ以上のＩｇＧヌクレオチド結合部位を含む、態様１～８４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９４．少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、アミノ酸コンジュゲーション部位（例えば、その配列のタンパク質操作によってＴ細胞－ＭＰに提供されるシステイン）を含む、態様１～８４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９５．前記少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞ＭＰポリペプチド配列に提供される（例えば、そのポリペプチド配列のタンパク質操作によってＴ細胞－ＭＰに提供される）リジンのイプシロンアミノ基を含む、態様９４に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９６．前記少なくとも１つ（例えば、２つ以上）の化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞ＭＰポリペプチド配列において提供される（例えば、そのポリペプチド配列のタンパク質操作によってＴ細胞－ＭＰに提供される）セレノシステインのセレノール基及び／またはシステインのスルフヒドリル基を含む、態様９４に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９７．前記少なくとも１つの化学的コンジュゲーション部位は、Ｔ細胞ＭＰポリペプチド配列において、または二重体Ｔ細胞－ＭＰの前記第１のＴ細胞－ＭＰ及び第２のＴ細胞－ＭＰの各々のポリペプチド配列において提供される（例えば、前記ポリペプチド配列（複数可）のタンパク質操作によってＴ細胞－ＭＰにおいて提供される）システインのスルフヒドリル基を含む、態様９４に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９８．前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体化Ｔ細胞－ＭＰに存在する各化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は、同じとなるように選択される（例えば、いずれとも、前記ポリペプチド配列のタンパク質操作によって前記Ｔ細胞－ＭＰポリペプチド配列において提供されるシステインのスルフヒドリルである）、態様１～９７のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
９９．化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は、Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に配置され、または、存在する場合、前記Ｔ細胞－ＭＰのＮまたはＣ末端に位置するリンカーにまたはその中に結合される、態様１～９８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１００．化学的コンジュゲーション部位は、前記Ｔ細胞－ＭＰのリンカー（例えば、Ｌ１～Ｌ６リンカー）に配置されている、態様１～９８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０１．前記１つ以上の化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は、前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列、前記β２Ｍポリペプチド配列、または前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させるリンカー配列（前記Ｌ３リンカー）に配置されている、態様１～９８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０２．前記１つ以上の化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は、前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させるリンカー配列（前記Ｌ３リンカー）に位置する、態様１～９８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０３．前記１つ以上の化学的コンジュゲーション部位は、前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させる前記リンカー配列に存在するシステインのスルフヒドリルである、態様１０２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０４．前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させる前記リンカー配列は、グリシン、グリシン及びセリン、アラニン、アラニン及びセリン、またはアラニン、グリシン及びセリンを含有するポリペプチド配列をさらに含む、態様１０３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０５．前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させる前記リンカー配列は、ポリペプチド配列ＧＧＧＳまたはＧＧＧＧＳを含む、態様１０３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０６．前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させる前記リンカー配列は、ＧＣＧＧＳ（Ｇ４Ｓ）（配列番号１４１）（式中、Ｇ４Ｓ単位は、１～１０回繰り返され得る（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回繰り返される））、ＧＣＧＡＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１４２）、ＧＣＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１４３）及びＧＣＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ配列番号１４４）からなる群から選択されるポリペプチド配列を含む、態様１０３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０７．前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させる前記リンカー配列（前記Ｌ３リンカー）は、１５～５０アミノ酸を含む、態様１０１～１０６のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０８．前記ＭＨＣ－Ｈ及びβ２Ｍポリペプチド配列を接続させる前記リンカー配列（前記Ｌ３リンカー）は、１０～５０アミノ酸を含む、態様１０１～１０６のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１０９．前記１つ以上の化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は、図３Ａ～３Ｉに示されるＭＨＣ－Ｈ配列の少なくとも１５０、１７５、２００、または２２５個の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する、前記Ｔ細胞－ＭＰのＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列に配置されている、態様１～９８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１０．前記１つ以上の化学的コンジュゲーション部位は、システインまたはセレノシステインを含む、態様１０９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１１．少なくとも１つのシステインまたはセレノシステイン化学的コンジュゲーション部位は、図３Ｄ～３Ｉのように付番されたＭＨＣ－Ｈポリペプチドの位置２、５、７、５９、８４、１１６、１３９、１６７、１６８、１７０、または１７１に配置されている、態様１１０に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１２．化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド配列（例えば、ａａ２１で開始し、それらのＣ末端で終了する図４に示される配列）の少なくとも５０個（例えば、少なくとも６０、７０、８０、９０、９６、９７、もしくは９８個またはすべて）の連続ａａと少なくとも８５％（例えば、少なくとも９０％、９５％、９８％もしくは９９％、またはさらに１００％）のａａ配列同一性を有する前記β２Ｍポリペプチド配列に配置されている、態様１～９８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１３．前記１つ以上の化学的コンジュゲーション部位は、図４の成熟ヒトβ２Ｍポリペプチド配列の３５～５５（例えば、４０～５０）の間に配置され、０～１５ａａの置換を有する、態様１１２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１４．少なくとも１つのシステインまたはセレノシステイン化学的コンジュゲーション部位は、前記成熟β２Ｍポリペプチドの位置２、４４、５０、７７、８５、８８、９１、または９８（図４に示されるβ２Ｍ配列のａａ２２、６４、７０、９７、１０５、１０８、１１１、または１１８）に配置されている、態様１１２に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１５．化学的コンジュゲーション部位（例えば、エピトープのコンジュゲーションのためのもの）は、図４に示される成熟β２Ｍポリペプチド（ａａ２１で開始し、そのＣ末端で終了する）と比較して１～１５（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５）ａａの欠失、挿入及び／または変化を有する、前記β２Ｍポリペプチド配列に配置されている、態様１～９８のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１６．前記化学的コンジュゲーション部位は、システインである、態様１１２～１１５のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１７．前記β２Ｍポリペプチド配列は、図４の成熟ヒトβ２Ｍ配列である、態様１１２～１１５のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１８．少なくとも前記第１のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列、及び任意に前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列は、Ｎ末端からＣ末端まで、
（ｉ）Ｌ１リンカーによって任意に接続された１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
（ｉｉ）Ｌ２リンカーポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）１０～５０（例えば、１０～２０、１０～２５、１５～２５、２０～３０、２５～３５、２５～５０、３０～３５、３５～４５、または４０～５０）アミノ酸を含むＬ３リンカーポリペプチド配列；
（ｖ）位置８４及び１３９で置換されたシステインを含み（図３Ｅ～３Ｈ、例えば、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を参照されたい）、かつジスルフィド結合を形成するクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）Ｌ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）種間または非種間免疫グロブリンＦｃ骨格配列；
（ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、任意にＬ６リンカーによって接続された２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列（例えば、タンデムのもの））；
を含み、前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープ（例えば、ペプチド、ホスホペプチド、糖ペプチド、リポペプチドまたは炭水化物エピトープ）の直接的または間接的（例えば、リンカーを介する）共有結合のための化学的コンジュゲーション部位（例えば、タンパク質操作によって付加される）を含み；
前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰは、それらのＩｇ Ｆｃ骨格配列間の少なくとも１つのジスルフィド結合を介して共有結合されている、態様３３～１１７のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１１９．少なくとも前記第１のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列、及び任意に前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列は、
（ｉ）任意に、Ｌ１リンカーによって任意に接続された１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
（ｉｉ）任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
（ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
（ｉｖ）１０～５０アミノ酸を含むＬ３リンカーポリペプチド配列；
（ｖ）位置８４及び１３９で置換されたシステインを含み（図３Ｅ～３Ｈ、例えば、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換を参照されたい）、かつジスルフィド結合を形成するクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
（ｖｉ）Ｌ４リンカーポリペプチド配列；
（ｖｉｉ）種間または非種間免疫グロブリンＦｃ骨格配列；
（ｖｉｉｉ）Ｌ５リンカーポリペプチド配列；及び
（ｉｘ）Ｌ６リンカーポリペプチドによって接続された１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
を含み、前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープ（例えば、ペプチド、ホスホペプチド、糖ペプチド、リポペプチドまたは炭水化物エピトープ）の直接的または間接的（例えば、リンカーを介する）共有結合のための化学的コンジュゲーション部位（例えば、タンパク質操作によって付加される）を含み；
前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰは、それらのＩｇ Ｆｃ骨格配列間の少なくとも１つのジスルフィド結合を介して共有結合されている、態様３３～１１７のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２０．前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドの前記化学的コンジュゲーション部位（複数可）は、Ｌ３リンカー内にある、態様１１８または１１９に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２１．前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドの前記化学的コンジュゲーション部位（複数可）は、グリシン、セリン及び／またはアラニン残基を含む、それから本質的に（主に）なる、またはそうでなければそれからなる前記Ｌ３リンカーに存在するシステインのスルフヒドリルである、態様１２０に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２２．前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドの前記化学的コンジュゲーション部位（複数可）は、前記β２Ｍポリペプチド配列内（例えば、図４に提供される成熟β２Ｍポリペプチド配列におけるＥ４４Ｃ置換）にある、態様１１８または１１９に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２３．前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドの前記化学的コンジュゲーション部位（複数可）は、前記β２Ｍポリペプチド配列で提供されるシステインのスルフヒドリルである、態様１２２に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２４．前記第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドの前記化学的コンジュゲーション部位（複数可）は、図４に提供される成熟β２Ｍポリペプチド配列の位置４４において前記β２Ｍポリペプチドで提供されるシステインのスルフヒドリルである、態様１２３に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２５．前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列は、少なくとも１つ（例えば、２つ以上）のｗｔ ＩＬ－２またはバリアントＩＬ－２配列（例えば、Ｈ１６ＡまたはＴ置換及びＦ４２Ａ置換を含む）を含む、態様１１８～１２４のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２６．前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列は、少なくとも１つのｗｔ．またはバリアントＣＤ８０またはＣＤ８６配列を含む、態様１１８～１２５のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２７．前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列は、少なくとも１つのｗｔ．またはバリアントＰＤ－Ｌ１配列を含む、態様１１８～１２６のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２８．前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列は、少なくとも１つのｗｔ．またはバリアント４－１ＢＢＬまたはＰＤ－Ｌ１配列を含む、態様１１８～１２７のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１２９．（ｉ）前記免疫グロブリンＦｃ骨格は、非種間骨格ポリペプチドであり、前記二重体は、同一の第１及び第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチドを含むホモ二量体であり；または
（ｉｉ）前記第１及び第２の骨格ポリペプチドは、免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチドの種間対（例えば、ＫＩＨまたはＫＩＨ－ｓｓ対）であり、前記二重体は、ヘテロ二量体である、
態様１１８～１２８のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３０．前記第１及び第２の骨格ポリペプチドは、免疫グロブリンＦｃ骨格ポリペプチドの種間対であり、前記第１のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列は、前記第２のＴ細胞－ＭＰポリペプチド配列に存在しない少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様１２９に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３１．Ｔ細胞－ＭＰに共有結合した追加のペプチド及び／またはペイロードをさらに含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３２．前記追加のペプチドは、エピトープタグまたは親和性ドメインである、態様１３１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３３．前記追加のペプチドは、標的化配列である、態様１３１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３４．前記標的化配列は、抗体もしくはその抗原結合断片、または一本鎖Ｔ細胞受容体である、態様１３３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３５．前記標的化配列は、感染性物質のタンパク質または非タンパク質エピトープに仕向けられている、態様１３２～１３３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３６．前記感染性物質は、ウイルス、細菌、真菌、原虫、または寄生蠕虫である、態様１３５に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３７．前記標的化配列は、自己抗原またはアレルゲンに仕向けられている、態様１３２～１３３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３８．前記標的化配列は、がん関連抗原（「ＣＡＡ」）に仕向けられている、態様１３２～１３３のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１３９．前記がん関連抗原は、セクションＩ．Ａ．７．ｂ．ｉ．（ａ）「がん関連抗原「ＣＡＡ」において記述されているものから選択される、態様１３８に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１４０．前記標的化配列は、抗ＣＤ５１、抗ＣＤ７４、抗ＣＤ２２、抗ＣＤ２０、抗ＣＤ２０、抗ＣＤ２２、抗ＣＤ３８、抗ＰＤ－１受容体、抗ＣＴＬＡ－４、抗ＴＲＯＰ－２、抗ムチン、抗ＣＥＡ、抗ＣＥＡＣＡＭ６、抗結腸特異的抗原－ｐ、抗アルファ－フェトプロテイン、抗ＩＧＦ－１Ｒ、抗ＣＤ１９、抗ＰＳＭＡ、抗ＰＳＭＡ二量体、抗炭酸脱水酵素ＩＸ、抗ＨＬＡ－ＤＲ、抗ＣＤ５２、抗ＥｐＣＡＭ、抗ＶＥＧＦ、抗ＥＧＦＲ、抗ＣＤ３３、抗ＨＥＲ２、抗ＣＤ７９ｂ、抗ＢＣＭＡ、及び抗メソテリン抗体またはそれらの抗原結合断片からなる群から選択される、態様１３８に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１４１．前記ＣＡＡは、ペプチド／ＨＬＡ複合体としてＨＬＡによって提示されるペプチドである、態様１３８に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。セクションＩ．Ａ．７．ｂ．ｉ．（ｂ）「ペプチド／ＨＬＡ複合体」を参照されたい。
１４２．前記標的化配列は、抗ＨＥＲ２、抗ＣＤ１９、抗メソテリン、抗ＴＲＯＰ２、抗ＢＣＭＡ、抗ＭＵＣ－１、抗ＭＵＣ１６、もしくは抗クローディン抗体またはそれらの抗原結合断片から選択される、態様１３８に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。セクションＩ．Ａ．７．ｂ．ｉｉ（ａ）～（ｈ）を参照されたい。
１４３．Ｔ細胞－ＭＰに共有結合したペイロードをさらに含む、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１４４．前記ペイロードは、治療剤、化学療法剤、診断剤、または標識である、態様１４３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１４５．少なくとも１つのＴ細胞－ＭＰは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは高次Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート複合体、例えば、二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを形成するために、前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３ポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列における前記化学的コンジュゲーション部位で非ペプチドまたはペプチドエピトープにコンジュゲートされる、任意の先行態様に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
１４６．前記エピトープは、がんエピトープ、感染性物質エピトープ、自己エピトープ（自己抗原）、またはアレルゲンエピトープである、態様１４５に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１４７．前記エピトープは、約４ａａ～約２５ａａ（例えば、前記エピトープは、４ａａ～約１０ａａ、約６ａａ～約１２ａａ、約１０ａａ～約１５ａａ、約１５ａａ～約２０ａａ、または約２０ａａ～約２５ａａの長さを有し得る）を含むペプチド、糖ペプチド、ホスホペプチド、またはリポペプチドである、態様１４５～１４６のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１４８．前記ペプチドエピトープは、約６ａａ～約１２ａａである、態様１４７に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１４９．前記エピトープは、がんエピトープである、態様１４５～１４８のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５０．前記がんエピトープは、セクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉ「がんに存在するエピトープ－がん関連抗原（「ＣＡＡ」）」に示される、態様１４９に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５１．前記がんエピトープは、セクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉ（ａ）「アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）」に示されるアルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）エピトープである、態様１５０に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５２．前記がんエピトープは、セクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉ（ｂ）「ウィルムス腫瘍抗原（ＷＴ－１）」に示されるウィルムス腫瘍抗原（ＷＴ－１）タンパク質のエピトープである、態様１５０に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５３．前記がんエピトープは、セクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉ（ｃ）「ヒトパピローマウイルスＩ（ＨＰＶ）」に示されるヒトパピローマウイルスＩ（ＨＰＶ）エピトープである、態様１５０に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５４．前記がんエピトープは、セクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉ（ｄ）「Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）」に示されるＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）エピトープである、態様１５０に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５５．前記エピトープは、自己エピトープである、態様１４５～１４８のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５６．前記エピトープは、アレルゲン（例えば、アレルギー性タンパク質）のエピトープである、態様１４５～１４８のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５７．前記アレルゲンは、ナッツ（例えば、木及び／またはピーナッツ）、グルテン、花粉、卵（例えば、ニワトリ、Ｇａｌｌｕｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ）、甲殻類、大豆、魚、及び昆虫毒（例えば、ハチ及び／またはカリバチ毒抗原）のタンパク質または非タンパク質成分から選択される、態様１５６に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５８．前記エピトープは、感染性物質によって提示されるエピトープである、態様１４５～１４８のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１５９．前記感染性物質は、ウイルス、細菌、真菌、原生動物、または寄生蠕虫である、態様１５８に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１６０．前記感染性物質は、ウイルスであり、前記エピトープは、ウイルス感染性疾患物質（例えば、セクションＩ．Ａ．８．ｄ．ｉｉ「感染性物質」）に示されるウイルス）によって提示されるエピトープである、態様１４５～１５９のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
１６１．疾患（例えば、がんまたは感染症）または病態（例えば、アレルギー）の処置または予防の方法であって、
（ｉ）有効量の態様１～１４４のいずれかに記載の１つ以上のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰを患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；
（ｉｉ）有効量の態様１４５～１６０のいずれかに記載の１つ以上のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；
（ｉｉｉ）有効量の態様１～１４４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰをコードする１つ以上の核酸を患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；
（ｉｖ）細胞または組織をｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで態様１～１４４のいずれかに記載の１つ以上のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰと接触させること、及び前記細胞、組織、またはその子孫を患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；
（ｖ）細胞または組織をｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで態様１４５～１６０のいずれかに記載の１つ以上のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと接触させること、及び前記細胞、組織、またはその子孫を患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；
または
（ｖｉ）細胞または組織をｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで態様１～１３３のいずれかに記載のＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰをコードする１つ以上の核酸と接触させること及び前記細胞、組織、またはその子孫を患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること
を含む、前記方法。
１６２．疾患（例えば、がんまたは感染症）または病態（例えば、アレルギー）の処置または予防の方法であって、
（ｉ）有効量の態様１４５～１６０のいずれかに記載の１つ以上のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；または
（ｉｉ）細胞または組織をｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、またはｅｘ ｖｉｖｏで態様１４５～１６０のいずれかに記載の１つ以上のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートと接触させること、及び前記細胞、組織、またはその子孫を患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること
を含む、前記方法。
１６３．前記１つ以上のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを形成するために、エピトープ（例えば、ペプチド、リポペプチド、ホスホペプチド、炭水化物または糖ペプチドエピトープ）にコンジュゲートされた態様１１８～１３０のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを含む、態様１６２に記載の方法。
１６４．前記Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、少なくとも１つの標的化配列（例えば、細胞または組織に特異的な標的化配列）をさらに含む、態様１６１～１６３のいずれかに記載の方法。
１６５．前記投与は、哺乳動物患者または対象へのものである、態様１３１～１６４のいずれかに記載の方法。
１６６．前記患者または対象は、ヒトである、態様１６５に記載の方法。
１６７．前記患者または対象は、非ヒト（例えば、げっ歯類、ウサギ目動物、ウシ、イヌ、ネコ、げっ歯類、マウス、ヤギ、サル、ヒツジ、ウマ、ウサギ（ｌａｐｐｉｎｅ）、ブタ等）である、態様１６５に記載の方法。
１６８．前記疾患または病態は、がんであり、標的化配列が存在する場合、それは、ＣＴＰ（例えば、抗ＨＥＲ２、抗ＣＤ１９、抗メソテリン、抗ＴＲＯＰ２、抗ＢＣＭＡ、抗ＭＵＣ－１、抗ＭＵＣ１６）である、態様１６１～１６７のいずれかに記載の方法。
１６９．前記エピトープは、がんエピトープである、態様１６１～１６８のいずれかに記載の方法。
１７０．前記疾患または病態は、感染症である、態様１６１～１６７のいずれかに記載の方法。
１７１．前記疾患は、ウイルス感染症である、態様１６１～１６７のいずれかに記載の方法。
１７２．前記疾患は、細菌、真菌または原生動物感染症である、態様１６１～１６７のいずれかに記載の方法。
１７３．ＣＤ８＋Ｔ細胞機能（例えば、エフェクター機能）を増強する及び／または疾患または病態を処置する１つ以上の治療剤を投与することをさらに含む、態様１６１～１７２のいずれかに記載の方法。
１７４．ＣＤ８＋機能を増強する及び／または前記疾患または病態を処置する前記治療剤は、抗ＴＧＦ－β抗体、例えば、ＴＧＦ－β１に対して仕向けられたメテリムマブ（ＣＡＴ１９２）ならびにＴＧＦ－β１及びＴＧＦ－β２に対して仕向けられたフレソリムブ、またはＴＧＦ－β捕捉剤を含む（任意に、但し、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、前記抗体またはＴＧＦ－β捕捉剤が結合するａａ配列、例えば、ＴＧＦ－β１またはＴＧＦ－β２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤのａａ配列を含まないことを条件とする）、態様１７３に記載の方法。
１７５．ＣＤ８＋機能を増強する及び／または前記疾患または病態を処置する前記治療剤は、以下のものに対して仕向けられた１つ以上の抗体を含む、態様１７３～１７４のいずれかに記載の方法：Ｂリンパ球抗原（例えば、イブリツモマブチウキセタン、オビヌツズマブ、オファツムマブ、ＣＤ２０に対するリツキシマブ、ＣＤ３０に対して仕向けられたブレンツキシマブベドチン、及びＣＤ５２に対するアレムツズマブ）；ＥＧＦＲ（例えば、セツキシマブ、パニツムマブ、及びネシツムマブ）；ＶＥＧＦ（例えば、ベバシズマブ）；ＶＥＧＦＲ２（例えば、ラムシルマブ）；ＨＥＲ２（例えば、ペルツズマブ、トラスツズマブ、及びアド－トラスツズマブ）；ＰＤ－１（例えば、チェックポイント阻害を標的とするニボルマブ及びペムブロリズマブ）；ＲＡＮＫＬ（例えば、デノスマブ）；ＣＴＬＡ－４（例えば、チェックポイント阻害を標的とするイピリムマブ）；ＩＬ－６（例えば、シルツキシマブ）；ジシアロガングリオシド（ＧＤ２）（例えば、ジヌツキシマブ）；ＣＤ３８（例えば、ダラツムマブ）；ＳＬＡＭＦ７（エロツズマブ）；ＥｐＣＡＭ及びＣＤ３の両方（例えば、カツマキソマブ）；またはＣＤ１９及びＣＤ３の両方（ブリナツモマブ）（任意に、但し、Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、抗体が結合するａａ配列を含まないことを条件とする）。
１７６．１つ以上の追加の治療剤（例えば、化学療法剤、抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、及び／または抗寄生蠕虫剤）を投与することをさらに含む、態様１６１～１７５のいずれかに記載の方法。
１７７．前記疾患は、がんであり、前記方法は、１つ以上の化学療法剤を投与することをさらに含む、態様１７６に記載の方法。
１７８．前記１つ以上の化学療法剤は、アルキル化剤、細胞骨格破壊剤（タキサン）、エポチロン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ヌクレオチドアナログまたは前駆体アナログ、ペプチド抗新生物性抗生物質（例えば、ブレオマイシンまたはアクチノマイシン）、白金系剤、レチノイド、ビンカアルカロイド及びそれらの誘導体からなる群から選択される、態様１７７に記載の方法。
１７９．前記１つ以上の化学療法剤は、アクチノマイシンオールトランスレチノイン酸、アザシチジン、アザチオプリン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カペシタビン、シスプラチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、シタラビン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、エピルビシン、エポチロン、エトポシド、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イマチニブ、イリノテカン、メクロレタミン、メルカプトプリン、メトトレキサート、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、テニポシド、チオグアニン、トポテカン、バルルビシン、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、及びビンデシンからなる群から選択される、態様１７６に記載の方法。
１８０．ＣＤ８＋Ｔ細胞機能を抑制する（例えば、エフェクター機能を抑制する）、免疫反応を抑制する、及び／または前記疾患または病態を処置する１つ以上の治療剤を投与することをさらに含む、態様１６１～１６７のいずれかに記載の方法。
１８１．前記疾患または病態は、自己免疫疾患であり、前記エピトープは、自己抗原（自己エピトープ）である、態様１８０に記載の方法。
１８２．前記疾患または病態は、アレルギーであり、前記エピトープは、アレルゲンである、態様１８０に記載の方法。
１８３．ＮＳＡＩＤ（例えば、Ｃｏｘ－１及び／またはＣｏｘ－２阻害剤、例えば、セレコキシブ、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、及びナプロキセン）を投与することをさらに含む、態様１８０～１８２のいずれかに記載の方法。
１８４．コルチコステロイド（例えば、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、エタメタソネブ、フルドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、プレドニゾロン及びトリアムシノロン）を投与することをさらに含む、態様１８０～１８３のいずれかに記載の方法。
１８５．腫瘍壊死因子アルファの１つ以上の作用を遮断する薬剤（例えば、抗ＴＮＦアルファ、例えば、ゴリムマブ、インフリキシマブ、セルトリズマブ、アダリムマブまたはＴＮＦアルファデコイ受容体、例えば、エタネルセプト）を投与することをさらに含む（任意に、但し、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、腫瘍壊死因子アルファｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ及び／またはＴＮＦアルファの１つ以上の作用を遮断する薬剤が結合するａａ配列を含まないことを条件とする）、態様１８０～１８４のいずれかに記載の方法。
１８６．ＩＬ－１と競合してＩＬ－１受容体に結合する１つ以上の薬剤（例えば、アナキンラ）を投与することをさらに含む（任意に、但し、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、ＩＬ－１ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ及び／または前記薬剤が結合するａａ配列を含まないことを条件とする）、態様１８０～１８５のいずれかに記載の方法。
１８７．ＩＬ－６受容体に結合し、かつ前記受容体を介するシグナル伝達からＩＬ－６を阻害する１つ以上の薬剤（例えば、トシリズマブ）を投与することをさらに含む（任意に、但し、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、ＩＬ－６ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ及び／または前記薬剤が結合するａａ配列を含まないことを条件とする）、態様１８０～１８６のいずれかに記載の方法。
１８８．ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６受容体に結合し、かつＴ細胞増殖及び／またはＢ細胞免疫反応を阻害する１つ以上の薬剤（例えば、アバタセプト）を投与することをさらに含む（任意に、但し、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ及び／または前記薬剤が結合するａａ配列を含まないことを条件とする）、態様１８０～１８７のいずれかに記載の方法。
１８９．ＣＤ２０に結合し、Ｂ細胞死をもたらす１つ以上の薬剤（例えば、リツキシマブ）を投与することをさらに含む（但し、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体化Ｔ細胞－ＭＰは、ＣＤ２０ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤ、及び／または前記薬剤が結合するａａ配列を含まないことを条件とする）、態様１８０～１８８のいずれかに記載の方法。
１９０．前記Ｔ細胞－ＭＰもしくは二重体Ｔ細胞－ＭＰ、または前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰをコードする核酸は、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ及び少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤を含む組成物で投与される、態様１８０～１８９のいずれかに記載の方法。
１９１．追加のポリペプチドを任意に含む態様１～１４４のいずれかに記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰをコードする核酸配列。
１９２．プロモーターに機能可能に連結されている、態様１９１に記載の核酸配列。
１９３．態様１～１４４のいずれかに記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰをコードする核酸配列を含む１つ以上の核酸であって、二重体化分子の少なくとも１つは、追加のポリペプチドを任意に含む、前記１つ以上の核酸。
１９４．前記コンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰをコードする前記核酸配列は、プロモーターに機能可能に連結されている、態様１９３に記載の１つ以上の核酸。
１９５．Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰを発現する細胞を生成する方法であって、前記方法は、態様１９１～１９４のいずれかに記載の１つ以上の核酸をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで前記細胞に導入すること；前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰを生成する細胞を選び出すこと；及び任意に、少なくとも１つの細胞染色体に組み込まれていないまたは組み込まれた前記１つ以上の核酸のすべてまたは一部を含む細胞を選び出すことを含む、前記方法。
１９６．前記細胞は、ＨｅＬａ細胞、ＣＨＯ細胞、２９３細胞（ＨＥＫ－２９３細胞）、Ｖｅｒｏ細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、Ｈｕｈ－７細胞、ＢＨＫ細胞、ＰＣ１２、ＣＯＳ細胞、ＣＯＳ－７細胞、ＲＡＴ１細胞、マウスＬ細胞、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞、及びＨＬＨｅｐＧ２細胞から選択される哺乳動物細胞株の細胞である、態様１９５に記載の方法。
１９７．態様１９５または１９６に記載の方法によって調製されるＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰを一過性にまたは安定に発現する１つ以上の細胞。
１９８．前記細胞は、約２０～約２００（例えば、２０～４０、４０～８０、８０～１００、１００～１２０、１２０～１４０、１４０～１６０、１６０～１８０または１８０～２００）ｍｇ／リットル以上の前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを発現する、態様１９７に記載の細胞。
１９９．前記細胞は、前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰを発現しないこと以外は同一の細胞と比べて細胞生存性の実質的減少（５％、１０％、または１５％未満の減少）を伴わずに約２０～約２００ｍｇ／リットル以上の前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを発現する、態様１９８に記載の細胞。
２００．１つ以上（例えば、２つ以上）のｗｔ．ＭＯＤポリペプチド及び／またはバリアントＭＯＤポリペプチドを、患者または対象の１つ以上の細胞または組織に選択的に送達する方法であって、前記方法は、
（ｉ）有効量の態様１～１６０のいずれかに記載の１つ以上のＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰを患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；
を含み、前記１つ以上のＴ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰの少なくとも１つ以上のＴ細胞－ＭＰは、前記１つ以上の細胞または組織に特異的な標的化配列を含み；
前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、１つ以上（例えば、２つ以上）のｗｔ．ＭＯＤ及び／またはバリアントＭＯＤを含む、前記方法。
２０１．１つ以上（例えば、２つ以上）のｗｔ．ＭＯＤポリペプチド及び／またはバリアントＭＯＤポリペプチドを、患者または対象の１つ以上のＴ細胞または組織に選択的に送達する方法であって、前記方法は、
（ｉ）有効量の態様１４５～１６０のいずれかに記載の１つ以上のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを患者／対象（例えば、それを必要とする患者）に投与すること；
を含み、前記１つ以上のＴ細胞、または組織に存在する少なくとも１つのＴ細胞は、前記Ｔ細胞－ＭＰにコンジュゲートされた前記エピトープに選択的（例えば、特異的）であり；
前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、１つ以上のｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤを含む、前記方法。
２０２．前記１つ以上のｗｔ．ＭＯＤポリペプチド及び／またはバリアントＭＯＤポリペプチドは、４－１ＢＢＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＩＬ－２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＩＣＯＳ－Ｌ、ＩＣＡＭ、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ８３、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＪＡＧ１（ＣＤ３３９）、ＣＤ７０、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、及びＴＧＦ－β３ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列からなる群から独立して選択される、態様２００または２０１に記載の方法。
２０３．前記１つ以上のｗｔ．ＭＯＤポリペプチド及び／またはバリアントＭＯＤポリペプチドは、４－１ＢＢＬ、ＰＤ－Ｌ１ ＩＬ－２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、及びＦａｓＬのｗｔ．ＭＯＤならびにそれらのいずれかのバリアントＭＯＤポリペプチド配列からなる群から独立して選択される、態様２００または２０１に記載の方法。
２０４．前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列、及び少なくとも１つのＣＤ８０、ＣＤ８６、バリアントＣＤ８０またはバリアントＣＤ８６ポリペプチド配列を含む、態様２００～２０２のいずれかに記載の方法。
２０５．前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムのＩＬ－２ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列の少なくとも１つの対を含む、態様２００～２０２のいずれかに記載の方法。
２０６．前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＣＤ８０及び／またはＣＤ８６ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様２００～２０２のいずれかに記載の方法。
２０７．前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様２００～２０２のいずれかに記載の方法。
２０８．前記Ｔ細胞－ＭＰまたは二重体Ｔ細胞－ＭＰは、少なくとも１つのＦａｓＬ ｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含む、態様２００～２０２のいずれかに記載の方法。

Ｘ．実施例
実施例１
図１２のＡ、Ｂ及びＣにおいて二重体として示される分割鎖または一本鎖コンストラクトのコア要素として、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１（ＨＬＡ－Ａ０２）クラスＩ重鎖ポリペプチド配列、ヒトβ２Ｍポリペプチド配列、及びＩｇＧ骨格配列を含む一連のコンストラクトをコードする核酸を調製した。

分割鎖コンストラクト（構造ＡまたはＢ）の各々は、Ｎ末端からＣ末端まで、Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ置換を有するタンデムヒトＩＬ－２ポリペプチド配列（２ｘｈＩＬ２）、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１（Ａ０２）α１、α２、及びα３ドメイン、ならびにＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ置換を有するヒトＩｇＧ１骨格を含む第１のポリペプチド配列を有する。分割鎖コンストラクトのほとんどにおいて現れる１６９４第１ポリペプチドは、Ａ２３６Ｃ、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃ置換２ｘｈＩＬ２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）－（Ｇ_４Ｓ）_４－ＨＬＡ－Ａ０２（Ａ２３６Ｃ、Ｙ８４Ｃ、Ａ１３９Ｃ）－ＡＡＡＧＧ－ＩｇＧ１（Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ）：

を含む。

２つの分割鎖コンストラクトにおいて現れる４００８ポリペプチドは、１６９４コンストラクトと似ているが、ＨＬＡ－Ａ０２配列におけるＡ２３６Ｃ、Ｙ８５Ｃ、及びＤ１３７Ｃ置換－２ｘｈＩＬ２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）－（Ｇ_４Ｓ）_４－ＨＬＡ－Ａ０２（Ａ２３６Ｃ、Ｙ８５Ｃ、Ｄ１３７Ｃ）－ＡＡＡＧＧ－ＩｇＧ１（Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ）：

を含む。

図１２における分割鎖コンストラクト（構造Ａ及びＢ）の各々は、Ｒ１２Ｃ及びＥ４４Ｃ置換を有するβ２Ｍポリペプチド配列：ＩＱＲＴＰＫＩＱＶＹＳＣＨＰＡＥＮＧＫＳＮＦＬＮＣＹＶＳＧＦＨＰＳＤＩＥＶＤＬＬＫＮＧＣＲＩＥＫＶＥＨＳＤＬＳＦＳＫＤＷＳＦＹＬＬＹＹＴＥＦＴＰＴＥＫＤＥＹＡＣＲＶＮＨＶＴＬＳＱＰＫＩＶＫＷＤＲＤＭ（配列番号４９５）を含む第２のポリペプチドを含み、示されたリンカー、またはＣＭＶペプチドエピトープＮＬＶＰＭＶＡＴＶ及びリンカーのいずれかが、以下に提供される表に示されるようにそれらのＮ末端で付加される。

図１２に列挙されるコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰコンジュゲートはそれぞれ、単一のポリペプチド鎖として、Ｎ末端からＣ末端まで、ＩＬ－２、β２Ｍ、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１（Ａ０２）α１、α２、及びα３ドメイン、ならびにヒトＩｇＧ１ポリペプチド配列を含む。３８６１コンストラクトのａａ配列は、以下に提供されており、一本鎖Ｔ細胞－ＭＰコンストラクトの残りは、３８６１コンストラクトのバリエーションとみなされ得、これは、Ｆ４２Ａ及びＨ１６Ａ置換を有するタンデム２ｘＩＬ－２配列－（Ｇ_４Ｓ）_４リンカー－β２Ｍ（Ｅ４４Ｃ）－（Ｇ_４Ｓ）_３リンカー－Ｙ８４Ｃ、Ａ１３９Ｃを有するＨＬＡ－Ａ０２－ＡＡＡＧＧリンカー－ならびにＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ置換を有するＩｇＧ１：

を有する。

タンデムＩＬ－２配列がこの例のコンストラクトに存在する場合、それらは、（Ｇ_４Ｓ）_４リンカーによって隔てられている。３８６１以外の配列の各々は、示されるようにＩＬ－２とβ２Ｍとの間、及び／またはβ２ＭとＨＬＡ－Ａ０２配列との間に存在するリンカー（Ｌ３リンカー）においてバリエーションを有する。また、コンストラクト３９８４は、単一のＩＬ－２配列のみを有し、３９９９～４００２の各々は、以下の表に示されるようにＨＬＡ－Ａ０２ポリペプチド配列における追加のａａ置換を有する。

タンパク質コンストラクトをコードする核酸を培地中においてＣＨＯ細胞にトランスフェクションし、それによって可溶性タンパク質として発現させた。７日後に培地において発現したタンパク質のレベルを、発現したタンパク質を捕捉するためのプロテインＡを使用してＢＬＩアッセイによって決定した（図１２Ｄ）。非凝集二重形態で現れるタンパク質の画分を、磁性プロテインＡビーズを使用して培地からタンパク質を単離することによって評価する。洗浄後、結合したタンパク質を、ｐＨを低下させることによってビーズから溶出させ、次いでＡＧＩＬＥＮＴ（登録商標）クロマトグラフィーシステムでＵＶ検出を使用して分析サイズ排除クロマトグラフィーに供する。１２Ｅで報告される非凝集タンパク質の画分は、クロマトグラフィーされたタンパク質の総面積に対する二重体の分子量に対応するピークの面積に基づく。

結果は、コンジュゲートされていない一本鎖Ｔ細胞－ＭＰコンストラクトが、それらのコンジュゲートされていない分割鎖コンストラクト対応物よりも高いレベルでより均一に発現するようであることを示している。

実施例２
コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰに対する培養中の時間、細胞培養密度、及び培養温度の効果を、２８及び３２℃でＣＨＯ細胞においてコンストラクト３８６１（実施例１を参照されたい）を一過性に発現させることによって試験した。トランスフェクションは、ポリペプチドをコードするカセットがクローニングされた組換えｐＴＴ５ベクターを使用してｅｘｐｉＣＨＯ（登録商標）トランスフェクションキット（Ｇｉｂｃｏ（商標）／ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｓｋｏｋｉｅ，ＩＬ）を用いて達成した。トランスフェクションされた細胞を１ミリリットル当たり２、４または６百万細胞まで希釈し、Ｔ細胞－ＭＰ３８６１発現レベル及び二重体形態の非凝集タンパク質の画分を、培養物の一部を除去することによって示されるように２、４、７、及び／または９日目に決定した。分析は、実施例１のように行われ、図１３（Ａ及びＢ）に示されており、各ヒストグラムセットの下に細胞の数及び培養温度が示されている（例えば、３２℃で６００万細胞は６Ｍ／３２Ｃと表記される）。また、図１３には、プロテインＡを使用して培養物から収穫された及びサイズ排除クロマトグラフィーによるさらなる精製の後のコンジュゲートされていない３８６１Ｔ細胞－ＭＰのサイズ除外クロマトグラム（Ｃ及びＤ）が示されている（それぞれ上側及び下側クロマトグラム）。クマシーブルー染色したＳＤＳ ＰＡＧＥ分析（Ｅ）は、精製された物質の純度及び均一性を確認する（このサンプルは、還元形態（Ｒ）及び非還元形態（ＮＲ）でゲルに施された）。

実施例３
Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲート及び対照コンストラクトとエピトープ特異的Ｔ細胞との特定の相互作用を、その分子を、ＣＭＶペプチドＮＬＶＰＭＶＡＴＶ（黒色棒）またはメラン－Ａ及びムチン関連ペプチド（ＭＡＲＴ－１）ＥＬＡＧＩＧＩＬＴＶ（白色棒）のいずれかに対して反応性であるＴ細胞とインキュベートすることによって図１４Ａに提供されるＥｌｉｓｐｏｔデータのヒストグラムにおいて評価した。コンジュゲートされていない３８６１Ｔ細胞－ＭＰ二重体（一般的構造については図１２Ｃを参照されたい）群１、ならびにポリペプチド１６９４及び２６８６を含むコンジュゲートされていない分割鎖コンストラクト（図１２Ｂのように二重体化されている）群２の対照サンプルを試験サンプルを用いて並行に実行した。マレイミド基によって（Ｇ_４Ｓ）_３リンカーを介してβ２ＭのＥ４４Ｃ位置にコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰ及び分割鎖コンストラクトが群３及び４に示されている。融合タンパク質の一部としてＣＭＶまたはＭＡＲＴ－１ポリペプチドを有する対照コンストラクト分割鎖融合タンパク質（図１２構造Ａ）の効果が群５及び６にそれぞれに示されている。ＣＭＶ及びＭＡＲＴ－１ペプチドによる対照刺激が群７及び８にそれぞれに示されている。ヒストグラムは、処置によるＴ細胞の活性化を示す捕捉されたインターフェロンガンマによるスポットの数を示している。

図１４Ｂに示されるＳＤＳ－ＰＡＧＥゲルは、エピトープコンジュゲート及び融合タンパク質の還元及び非還元サンプルの分析を提供し、それらの純度及び均一性を示している。

実施例４
ＣＭＶ反応性ドナー（ドナー８、１０、３８、及び３９）及びＭＡＲＴ－１反応性ドナー（ドナー１７及び１８）からの白血球のＦｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ（登録商標）で精製されたサンプルを調製し、使用して、Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートがＣＭＶまたはＭＡＲＴ－１特異的エピトープに特異的なＴ細胞を増殖させる能力を実証した。ＭＡＲＴ－１反応性ドナー１８はまた、ＣＭＶペプチドに対するいくらかの反応性を示す。陽性及び陰性対照処置は、ＣＭＶ及びＭＡＲＴ－１ペプチドにコンジュゲートされた分割鎖コンストラクトでの処置；培地中のＣＭＶまたはＭＡＲＴ－１ペプチドでの処置；及び培地のみの対照処置を含んでいた。実験のため、白血球を、示された量の対照またはＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートまたは対照処置を含有するＩｍｍｕｎｏＣｕｌｔ（商標）培地（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｃｏｌｕｍｂｉａ）に１ｍｌ当たり２．５×１０^６個の細胞で懸濁した。培養下で１０日後、ＣＭＶまたはＭＡＲＴ－１に反応性の細胞の数を、ＭＢＬ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｒｐから購入したＣＭＶまたはＭＡＲＴ－１四量体を使用してフローサイトメトリーによって評価した。結果は、ＣＭＶペプチド、及びより少ない程度のＣＭＶペプチドにコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰ及び分割鎖コンストラクトの両方が、ＣＭＶ反応性ドナーからのＣＭＶ特異的Ｔ細胞の増殖を濃度依存的に刺激することを示している。ＭＡＲＴ－１ペプチド、及びより少ない程度のＭＡＲＴ－１ペプチドにコンジュゲートされたＴ細胞－ＭＰ及び分割鎖コンストラクトが、ＭＡＲＴ－１反応性ドナーからのＭＡＲＴ－１特異的Ｔ細胞の増殖を濃度依存的に刺激する。各例において、ＣＭＶペプチドコンジュゲートは、ＣＭＶ反応性ドナーからのＴ細胞を選択的に刺激したが、ＭＡＲＴ－１反応性ドナーからのＴ細胞ではそうではなく、その逆も同様であった。ＩＬ－２の非存在下で遊離ペプチドは、Ｔ細胞－ＭＰエピトープコンジュゲートで観察された効果と同等の効果をもたらさなかった。結果は、図１５に提供される。

アッセイに用いられたＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、β２Ｍポリペプチド配列におけるシステイン（Ｅ４４Ｃ）でＣＭＶ（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）またはＭＡＲＴ－１（ＥＬＡＧＩＧＩＬＴＶ）（配列番号５３３）ペプチドのいずれかに、マレイミド基を保有する（Ｇ_４Ｓ）_３リンカー（例えば、ＣＭＶペプチドＮＬＶＰＭＶＡＴＶ－（Ｇ_４Ｓ）_３－リジン－イプシロンアミノ－マレイミドの場合）を介してコンジュゲートされた３１８６ポリペプチドの二重体であった（コンジュゲートされていない二重体の一般的形態については実施例１及び図１２構造Ｃを参照されたい）。分割鎖エピトープコンジュゲートは、β２Ｍポリペプチド配列におけるシステイン（Ｅ４４Ｃ）でＣＭＶ（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）またはＭＡＲＴ－１（ＥＬＡＧＩＧＩＬＴＶ）ペプチドのいずれかに、マレイミド基を保有する（Ｇ_４Ｓ）_３リンカーを介してコンジュゲートされたａ１６９４及び２６８６ポリペプチドをそれぞれ含む２つの分割鎖コンストラクトの二重体であった（コンジュゲートされていない二重体の一般的形態については実施例１及び図１２構造Ｂを参照されたい）。システインコンジュゲーション部位から任意のキャッピングを除去するための還元の後、マレイミド基を保有するペプチドの少なくとも２つの付加を使用して、マレイミドカップリング反応について記載されているようにコンジュゲーションを行った。

追加の試験において、（Ｇ_４Ｓ）_７Ｌ３リンカー（β２ＭとＨＬＡ－Ａ０２配列との間のリンカー）を保有すること以外は３８６１と同一であるコンストラクトの効果を、３８６１ポリペプチド二重体と比較した（すなわち、コンストラクト４１２５ ２ｘＩＬ２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）－（Ｇ_４Ｓ）_７－β２Ｍ（Ｅ４４Ｃ）－（Ｇ_４Ｓ）_３－ＨＬＡ－Ａ０２（Ｙ８４Ｃ、Ａ１３９Ｃ）－ＡＡＡＧＧ－ＩｇＧ１（Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ））。３８６１及び４１２５コンストラクトの両方の二重体を、マレイミド末端（Ｇ_４Ｓ）_３リンカーによってＣＭＶまたはＭＡＲＴ－１ペプチドにコンジュゲートし、エピトープ特異的様式でＴ細胞を増殖させる能力について並行して試験した。アッセイを、培地単独のみの対照を行ったこと以外は３８６１エピトープコンジュゲートについて上述したように行った。結果が図１６に示されており、リンカー長さの延長が、３８６１エピトープコンジュゲートで見られたＴ細胞の増殖を実質的に変化させなかったことを示している。

実施例５
細胞発現のレベル及びＴ細胞－ＭＰタンパク質の質（非凝集画分）に対するＬ３リンカーの長さの効果を試験するために、増加する長さのＬ３リンカーを有すること以外はコンストラクト３８６１に関連するコンストラクト４１２５～４１２８をコードする一連の核酸を調製し、発現ベクター（ｐＴＴ５）に挿入した。β２Ｍポリペプチドにおける追加のＲ１２Ｃ置換（Ｒ１２Ｃ、Ｅ４４Ｃ）及び鎖間ジスルフィド結合を形成し得るＨＬＡ－Ａ０２ペプチドにおけるＡ２３６Ｃ置換を保有する第２のセットのコンストラクト（４１２９～４１３３）も調製した。ベクターをｅｘｐｉＣＨＯ（登録商標）トランスフェクションキットを用いてＣＨＯ細胞にトランスフェクションし、培地において発現したタンパク質の量及び磁性ビーズを使用した精製後の非凝集タンパク質の画分の両方を、示されているように４、６、８、及び／または１１日目に評価した。特定のコンストラクトは、以下の表に記述されるものを含んでいた。

発現したコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰコンストラクトの量を、実施例１に記載の方法を使用してＢｉｏＦｏｒｔｅ装置で捕捉のためのプロテインＡを使用してＢＬＩアッセイによって決定した。結果は、図１７のヒストグラムＡで提供される。

磁性プロテインＡビーズでの精製後の（二重体形態で存在する）凝集していないコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰの画分をサイズ排除クロマトグラフィーによって決定した。実施例１に記載されているようにクロマトグラム下の面積に対する二重体の分子量に対応するクロマトグラフィーピークの面積を使用して画分を決定した。結果は、図１７のヒストグラムＢに示されている。

追加の最適化は、高い収率が可能であることを示している。単離前にＣＨＯ培養細胞培地中でコンストラクト４１２５は２００ｍｇ／ｍｌに達したことが観察され、コンストラクト４１２７は１７０ｍｇ／ｍｌに達したことが観察された。

Claims (25)

1. コンジュゲートされていないＴ細胞調節性ポリペプチド（Ｔ細胞－ＭＰ）であって、前記ポリペプチドは、
   （ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   （ｉｉ）前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列をβ２Ｍポリペプチド配列に接続させる任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
   （ｉｉｉ）前記β２Ｍポリペプチド配列；
   （ｉｖ）長さが１０～５０ａａのＬ３リンカーポリペプチド配列；
   （ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列であって、前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチドは、鎖内ジスルフィド結合を形成する位置８４及び１３９におけるシステイン置換を含む、前記クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
   （ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
   （ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列；
   （ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
   （ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、前記任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   を含み、前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、要素（ｉ）または（ｉｘ）の一部として少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列を含み；
   前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、前記コンジュゲートされていないＴ細胞調節ポリペプチド（Ｔ細胞－ＭＰ）。
2. 前記ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、
   （ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、前記任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   （ｉｉ）任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
   （ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
   （ｉｖ）長さが１０～５０ａａのＬ３リンカーポリペプチド配列；
   （ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列であって、前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチドは、鎖内ジスルフィド結合を形成する位置８４及び１３９におけるシステイン置換を含む、前記クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
   （ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
   （ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列；
   （ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
   （ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、または２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、例えば、タンデムのものであって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、前記任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、または２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   を含み、前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、要素（ｉ）または（ｉｘ）の一部として少なくとも１つのＭＯＤポリペプチド配列を含み；
   前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、請求項１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
3. 前記ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、
   （ｉ）１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   （ｉｉ）任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
   （ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
   （ｉｖ）長さが１０～５０ａａのＬ３リンカーポリペプチド配列；
   （ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列であって、前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチドは、鎖内ジスルフィドを形成する位置８４及び１３９におけるシステイン置換を含む、前記クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
   （ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
   （ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列；
   （ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
   （ｉｘ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、前記任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   を含み、前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、請求項１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
4. 前記ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、
   （ｉ）任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ１リンカーによって互いに任意に接続されている、前記任意に１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   （ｉｉ）任意のＬ２リンカーポリペプチド配列；
   （ｉｉｉ）β２Ｍポリペプチド配列；
   （ｉｖ）長さが１０～５０ａａのＬ３リンカーポリペプチド配列；
   （ｖ）クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列であって、前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチドは、鎖内ジスルフィドを形成する位置８４及び１３９におけるシステイン置換を含む、前記クラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列；
   （ｖｉ）任意のＬ４リンカーポリペプチド配列；
   （ｖｉｉ）骨格ポリペプチド配列；
   （ｖｉｉｉ）任意のＬ５リンカーポリペプチド配列；及び
   （ｉｘ）１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列であって、２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列が存在する場合、それらは、独立して選択されるＬ６リンカーによって互いに任意に接続されている、前記１つ以上のＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムの２つ以上のＭＯＤポリペプチド配列；
   を含み、前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列のうちの少なくとも１つは、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、請求項１に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
5. 前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３リンカーポリペプチド配列、または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、エピトープコンジュゲーションのための化学的コンジュゲーション部位を含む、いずれかの先行請求項に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
6. 前記β２Ｍポリペプチド配列は、図４に提供される成熟ヒトβ２ＭポリペプチドＮＰ＿００４０３９．１、配列番号６１の少なくとも７０または少なくとも９０個の連続ａａと少なくとも９０％または少なくとも９５％の配列同一性を有する、請求項５に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
7. 前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、図３Ａ～３Ｈのいずれかに提供されるＭＨＣ－Ｈポリペプチドの少なくとも２００個の連続ａａと少なくとも８５％の配列同一性を有するＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、及びＨＬＡ－Ｇ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列から選択されるヒトクラスＩ ＭＨＣ－Ｈ鎖ポリペプチド配列を含む、請求項６に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
8. 前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、位置８４と位置１３９との間にジスルフィド結合を含む、請求項７に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
9. 前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列は、ＨＬＡ－Ａ＊０１０１（配列番号２４）、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１（配列番号２７）、ＨＬＡ－Ａ＊０３０１（配列番号３５）、ＨＬＡ－Ａ＊１１０１（配列番号３２）、ＨＬＡ－Ａ＊２３０１（配列番号３６）、ＨＬＡ－Ａ＊２４０２（配列番号３３）、ＨＬＡ－Ａ＊２４０７（配列番号３７）、ＨＬＡ－Ａ＊３３０３（配列番号３４）、ＨＬＡ－Ａ＊３４０１（配列番号３８）、ＨＬＡ－Ｅ（配列番号５８）、ＨＬＡ－Ｆ（配列番号５９）、またはＨＬＡ－Ｇ（配列番号６０）の少なくとも２００個の連続ａａと少なくとも９０％または少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項８に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
10. 少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つのｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列を含み、各ＭＯＤは、抗ＣＤ２８、４－１ＢＢＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＩＬ－２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、及びＦａｓＬのｗｔ．ＭＯＤまたはバリアントＭＯＤポリペプチド配列からなる群から独立して選択される、請求項９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
11. 少なくとも１つのｗｔ．またはバリアントＩＬ－２ ＭＯＤポリペプチド配列、またはタンデムのｗｔ．またはバリアントＩＬ－２ ＭＯＤポリペプチド配列の少なくとも１つの対を含む、請求項１０に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
12. 前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、単一のバリアントＩＬ－２ ＭＯＤまたはタンデムのバリアントＩＬ－２ ＭＯＤポリペプチド配列の対を含み、前記バリアントＩＬ－２ ＭＯＤポリペプチド配列は、Ｆ４２Ａ及びＨ１６ＡまたはＴ置換を含む、請求項１０に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
13. 前記骨格ポリペプチド配列は、免疫グロブリン重鎖定常領域；コレクチンポリペプチド、コイルドコイルドメイン、ロイシン－ジッパードメイン；Ｆｏｓポリペプチド；Ｊｕｎポリペプチド；Ｉｇ ＣＨ１ポリペプチド；Ｉｇ ＣＬκポリペプチド；Ｉｇ ＣＬλポリペプチド；ジスルフィドを有しないノブ・イン・ホール（ＫｉＨ）ポリペプチド；安定化ジスルフィド結合を有するノブ・インホール（ＫｉＨｓ－ｓ）ポリペプチド；ＨＡ－ＴＦポリペプチド；ＺＷ－１ポリペプチド；７．８．６０ポリペプチド；ＤＤ－ＫＫポリペプチド；ＥＷ－ＲＶＴポリペプチド；ＥＷ－ＲＶＴｓ－ｓポリペプチド；及びＡ１０７ポリペプチド配列からなる群から選択される種間または非種間ポリペプチド配列である、請求項１０に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
14. 二重体または高次Ｔ細胞－ＭＰを形成するように複合体化された請求項１３に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰであって、
    少なくとも請求項１３に記載の第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ及び第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰを含み、
    （ｉ）前記第１のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、第１のβ２Ｍポリペプチド配列、第１のクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列、及び第１の骨格ポリペプチド配列を含み；
    （ｉｉ）前記第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、第１のβ２Ｍポリペプチド配列、第２のクラスＩ ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列、及び第２の骨格ポリペプチド配列を含み；
    前記第１及び第２のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰは、前記第１及び第２の骨格ポリペプチド配列の間の１つ以上の鎖間共有結合を任意に含むそれらの間の結合相互作用によって会合し、
    前記二重体または高次Ｔ細胞－ＭＰは、ホモマーまたはヘテロマーである、前記コンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰ。
15. Ｆｃλ受容体及び／またはＣ１ｑタンパク質に対する結合を減少させる１つ以上の置換をさらに含む、請求項１４に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
16. 各化学的コンジュゲーション部位は、ａ）アミノ酸化学的コンジュゲーション部位；ｂ）非天然アミノ酸及び／またはセレノシステイン；ｃ）酵素修飾配列として作用するペプチド配列；ｄ）炭水化物またはオリゴ糖部位；及び／またはｅ）ＩｇＧヌクレオチド結合部位から一緒にまたは独立して選択される、請求項１４に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
17. エピトープコンジュゲーションのための各化学的コンジュゲーション部位は、タンパク質操作によって導入されたシステインである、請求項１６に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
18. 前記タンパク質操作によって導入されたシステインは、前記β２Ｍポリペプチド配列内にある、請求項１７に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
19. 前記β２Ｍポリペプチド配列内の前記タンパク質操作によって導入されたシステインは、前記β２Ｍポリペプチドの位置４４にある、請求項１８に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
20. １つ以上の標的化配列をさらに含む、請求項１９に記載のコンジュゲートされていないＴ細胞－ＭＰまたはコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
21. 二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートを形成するように前記β２Ｍポリペプチド配列、前記Ｌ３ポリペプチド配列、及び／または前記ＭＨＣ－Ｈポリペプチド配列における前記化学的コンジュゲーション部位で非ペプチドまたはペプチドエピトープにコンジュゲートされた請求項１４に記載のコンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰであって、前記二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートは、標的化配列を任意に含む、前記コンジュゲートされていない二重体Ｔ細胞－ＭＰ。
22. 前記エピトープは、前記β２Ｍポリペプチド配列におけるシステインに、前記システインと前記エピトープに結合したマレイミド基との間に形成された結合を介して直接的にまたは間接的にコンジュゲートされている、請求項２１に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
23. 前記エピトープは、がんエピトープ（がん細胞によって提示されるエピトープ）、感染性物質エピトープ（感染性物質の抗原のエピトープ）、自己エピトープ（自己抗原のエピトープ）、またはアレルゲンエピトープ（アレルゲンのエピトープ）である、請求項２２に記載の二重体Ｔ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲート。
24. 疾患を処置する方法であって、有効量の請求項２２に記載のＴ細胞－ＭＰ－エピトープコンジュゲートをそれを必要とする対象に投与することを含む、前記方法。
25. 前記エピトープは、がんエピトープであり、前記対象は、がんに罹患している、請求項２４に記載の方法。

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