JP2023521663A - 標的化脂質粒子及び組成物ならびにその使用 - Google Patents

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Abstract

本明細書では、内腔またはキャビティを包囲する脂質二重層と、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメイン、例えば、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含有する標的化エンベロープタンパク質とを含有する脂質粒子が提供される。また、本明細書では、結合ドメイン、例えば、ｓｄＡｂ可変ドメインに融合または連結されたＧタンパク質を含有する標的化エンベロープタンパク質、及びそのようなタンパク質をコードするポリヌクレオチドが提供される。また、そのような標的化脂質粒子を含有するプロデューサー細胞及び組成物ならびに標的化脂質粒子を作製及び使用する方法が提供される。【選択図】図４Ａ

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年３月３１日に出願された「Ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｌｉｐｉｄ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｎｄ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題する米国仮出願６３／００３，１６８、及び２０２１年２月２６日に出願された「Ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｌｉｐｉｄ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｎｄ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題する米国仮出願６３／１５４，３４１の利益を主張し、その各々の内容は、すべての目的のためにそれらの全体が参照により組み込まれる。
配列表の参照による組み込み
本出願は、電子形式の配列表とともに出願されている。この配列表は、２０２１年３月２９日に作成された２，０７１，６８３バイトのサイズである１８６１５２００３６４０ＳｅｑＬｉｓｔ．ＴＸＴと題されるファイルとして提供される。配列表の電子形式の情報は、その全体が参照により組み込まれる。
分野
本開示は、内腔またはキャビティを包囲する脂質二重層と、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメイン、例えば、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含有する標的化エンベロープタンパク質とを含有する脂質粒子に関する。本開示はまた、結合ドメイン、例えば、ｓｄＡｂ可変ドメインに融合または連結されたＧタンパク質を含有する標的化エンベロープタンパク質、及びそのようなタンパク質をコードするポリヌクレオチドを提供する。また、そのような標的化脂質粒子を含有するプロデューサー細胞及び組成物ならびに標的化脂質粒子を作製及び使用する方法が開示される。
背景
ウイルス様粒子及びウイルスベクターを含む脂質粒子は、外因性物質の細胞への送達のために一般的に使用される。しかしながら、脂質粒子の所定の標的細胞への送達は、課題がある場合がある。レンチウイルスベクターの場合、宿主範囲は、異種エンベロープタンパク質で偽型化することによって変更され得る。所定の再標的化エンベロープタンパク質は、脂質粒子の表面上で十分に安定ではなく、発現もしない場合がある。所望の細胞を標的とするための、ウイルス様粒子及びウイルスベクターを含む改善された脂質粒子が必要とされている。提供される開示は、この必要性に対処する。
概要
本明細書では、（ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、（ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｃ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子であって、ｓｄＡｂ可変ドメインが、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び標的化エンベロープタンパク質が、脂質二重層に埋め込まれている、標的化脂質粒子が提供される。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、リンカーを介してＧタンパク質に結合されている。いくつかの実施形態では、リンカーは、ペプチドリンカーである。
本明細書では、（ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、（ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｃ）ペプチドリンカーを介してシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインに結合したヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分を含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子であって、シングルドメイン抗体が、標的細胞の細胞表面分子に結合し、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び標的化エンベロープタンパク質が、脂質二重層に埋め込まれている、標的化脂質粒子が提供される。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分のＮ末端は、脂質二重層の外側に露出されている。いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質のＣ末端は、脂質二重層の外側に露出されている。
いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する細胞表面分子と結合する。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である。任意の実施形態のうちの一部では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する抗原またはその一部と結合する。いくつかの実施形態では、抗原は、シングルドメイン抗体によって認識されるエピトープを含有する細胞表面分子または細胞表面分子の一部である。任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物または腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、標的細胞は、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、肝細胞である。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される。
任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、Ｔ細胞である。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＣＤ８またはＣＤ４である。
任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＬＤＬ－Ｒである。
本明細書では、（ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、（ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｃ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子であって、結合ドメインが、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、結合ドメインが、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＡＳＧＲ２からなる群から選択される細胞表面分子と結合し、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び標的化エンベロープタンパク質が、脂質二重層に埋め込まれている、標的化脂質粒子が提供される。
本明細書では、（ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、（ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｃ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子であって、結合ドメインが、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、結合ドメインが、ＣＤ８及びＣＤ４、任意にヒトＣＤ８またはヒトＣＤ４からなる群から選択される細胞表面分子と結合し、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び標的化エンベロープタンパク質が、脂質二重層に埋め込まれている、標的化脂質粒子が提供される。
本明細書では、（ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、（ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｃ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子であって、結合ドメインが、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、結合ドメインが、低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）、任意にヒトＬＤＬ－Ｒである細胞表面分子と結合し、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び標的化エンベロープタンパク質が、脂質二重層に埋め込まれている、標的化脂質粒子が提供される。
任意の実施形態のうちの一部では、脂質粒子は、レンチウイルスベクターである。任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、リンカーを介してＧタンパク質に結合されている。任意の実施形態のうちの一部では、リンカーは、ペプチドリンカーである。
本明細書では、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される細胞表面分子を標的とする結合ドメインを含むレンチウイルスベクターであって、再標的化ウイルス融合タンパク質で偽型化されており、前記再標的化ウイルス融合タンパク質が、（ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｂ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分に結合した結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、レンチウイルスベクターが、提供される。
本明細書では、ＣＤ８及びＣＤ４、任意にヒトＣＤ８及びヒトＣＤ４からなる群から選択される細胞表面分子を標的とする結合ドメインを含むレンチウイルスベクターであって、再標的化ウイルス融合タンパク質で偽型化されており、前記再標的化ウイルス融合タンパク質が、（ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｂ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分に結合した結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、レンチウイルスベクターが、提供される。
本明細書では、低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）を標的とする結合ドメインを含むレンチウイルスベクターであって、任意にＬＤＬ－Ｒは、ヒトＬＤＬ－Ｒであり、レンチウイルスベクターは、（ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｂ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分に結合した結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む再標的化ウイルス融合タンパク質で偽型化されている、レンチウイルスベクターが、提供される。
任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されている。
本明細書では、
（ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、
（ｂ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む、標的化エンベロープタンパク質であって、結合ドメインが、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、結合ドメインが、ＣＤ４と結合する、標的化エンベロープタンパク質と、
（ｃ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸を含むカーゴであって、ＣＡＲが、
（ｉ）細胞外抗原（例えば、ＣＤ１９またはＢＣＭＡ）と結合する細胞外抗原結合ドメイン、ならびに
（ｉｉ）ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン及び、任意に４－１ＢＢまたはＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達領域
を含む、カーゴと
を含む、レンチウイルスベクターが提供される。いくつかの実施形態では、ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖである。
任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターは、ＣＡＲをコードする核酸をＴ細胞に送達することが可能である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、対象においてｉｎ ｖｉｖｏである。
本明細書では、（ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｂ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、レンチウイルスベクターであって、結合ドメインが、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、結合ドメインが、ＡＳＧＲ１と結合し、レンチウイルスベクターが、肝細胞を標的とすることが可能である、レンチウイルスベクターが提供される。任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターは、肝細胞への送達のための外因性物質をさらに含む。
任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターは外因性物質を肝細胞に送達することが可能であり、任意に肝細胞は対象においてｉｎ ｖｉｖｏである。
任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、リンカーを介してＧタンパク質に結合されている。任意の実施形態のうちの一部では、リンカーは、ペプチドリンカーである。任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体である。任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。
任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、最大で６５アミノ酸の長さを含む。任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、最大で５０アミノ酸の長さを含む。任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、約２～６５アミノ酸、２～６０アミノ酸、２～５６アミノ酸、２～５２アミノ酸、２～４８アミノ酸、２～４４アミノ酸、２～４０アミノ酸、２～３６アミノ酸、２～３２アミノ酸、２～２８アミノ酸、２～２４アミノ酸、２～２０アミノ酸、２～１８アミノ酸、２～１４アミノ酸、２～１２アミノ酸、２～１０アミノ酸、２～８アミノ酸、２～６アミノ酸、６～６５アミノ酸、６～６０アミノ酸、６～５６アミノ酸、６～５２アミノ酸、６～４８アミノ酸、６～４４アミノ酸、６～４０アミノ酸、６～３６アミノ酸、６～３２アミノ酸、６～２８アミノ酸、６～２４アミノ酸、６～２０アミノ酸、６～１８アミノ酸、６～１４アミノ酸、６～１２アミノ酸、６～１０アミノ酸、６～８アミノ酸、８～６５アミノ酸、８～６０アミノ酸、８～５６アミノ酸、８～５２アミノ酸、８～４８アミノ酸、８～４４アミノ酸、８～４０アミノ酸、８～３６アミノ酸、８～３２アミノ酸、８～２８アミノ酸、８～２４アミノ酸、８～２０アミノ酸、８～１８アミノ酸、８～１４アミノ酸、８～１２アミノ酸、８～１０アミノ酸、１０～６５アミノ酸、１０～６０アミノ酸、１０～５６アミノ酸、１０～５２アミノ酸、１０～４８アミノ酸、１０～４４アミノ酸、１０～４０アミノ酸、１０～３６アミノ酸、１０～３２アミノ酸、１０～２８アミノ酸、１０～２４アミノ酸、１０～２０アミノ酸、１０～１８アミノ酸、１０～１４アミノ酸、１０～１２アミノ酸、１２～６５アミノ酸、１２～６０アミノ酸、１２～５６アミノ酸、１２～５２アミノ酸、１２～４８アミノ酸、１２～４４アミノ酸、１２～４０アミノ酸、１２～３６アミノ酸、１２～３２アミノ酸、１２～２８アミノ酸、１２～２４アミノ酸、１２～２０アミノ酸、１２～１８アミノ酸、１２～１４アミノ酸、１４～６５アミノ酸、１４～６０アミノ酸、１４～５６アミノ酸、１４～５２アミノ酸、１４～４８アミノ酸、１４～４４アミノ酸、１４～４０アミノ酸、１４～３６アミノ酸、１４～３２アミノ酸、１４～２８アミノ酸、１４～２４アミノ酸、１４～２０アミノ酸、１４～１８アミノ酸、１８～６５アミノ酸、１８～６０アミノ酸、１８～５６アミノ酸、１８～５２アミノ酸、１８～４８アミノ酸、１８～４４アミノ酸、１８～４０アミノ酸、１８～３６アミノ酸、１８～３２アミノ酸、１８～２８アミノ酸、１８～２４アミノ酸、１８～２０アミノ酸、２０～６５アミノ酸、２０～６０アミノ酸、２０～５６アミノ酸、２０～５２アミノ酸、２０～４８アミノ酸、２０～４４アミノ酸、２０～４０アミノ酸、２０～３６アミノ酸、２０～３２アミノ酸、２０～２８アミノ酸、２０～２６アミノ酸、２０～２４アミノ酸、２４～６５アミノ酸、２４～６０アミノ酸、２４～５６アミノ酸、２４～５２アミノ酸、２４～４８アミノ酸、２４～４４アミノ酸、２４～４０アミノ酸、２４～３６アミノ酸、２４～３２アミノ酸、２４～３０アミノ酸、２４～２８アミノ酸、２８～６５アミノ酸、２８～６０アミノ酸、２８～５６アミノ酸、２８～５２アミノ酸、２８～４８アミノ酸、２８～４４アミノ酸、２８～４０アミノ酸、２８～３６アミノ酸、２８～３４アミノ酸、２８～３２アミノ酸、３２～６５アミノ酸、３２～６０アミノ酸、３２～５６アミノ酸、３２～５２アミノ酸、３２～４８アミノ酸、３２～４４アミノ酸、３２～４０アミノ酸、３２～３８アミノ酸、３２～３６アミノ酸、３６～６５アミノ酸、３６～６０アミノ酸、３６～５６アミノ酸、３６～５２アミノ酸、３６～４８アミノ酸、３６～４４アミノ酸、３６～４０アミノ酸、４０～６５アミノ酸、４０～６０アミノ酸、４０～５６アミノ酸、４０～５２アミノ酸、４０～４８アミノ酸、４０～４４アミノ酸、４４～６５アミノ酸、４４～６０アミノ酸、４４～５６アミノ酸、４４～５２アミノ酸、４４～４８アミノ酸、４８～６５アミノ酸、４８～６０アミノ酸、４８～５６アミノ酸、４８～５２アミノ酸、５０～６５アミノ酸、５０～６０アミノ酸、５０～５６アミノ酸、５０～５２アミノ酸、５４～６５アミノ酸、５４～６０アミノ酸、５４～５６アミノ酸、５８～６５アミノ酸、５８～６０アミノ酸、または６０～６５アミノ酸を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、長さが３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９，２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４または６５アミノ酸であるポリペプチドを含む。任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧＳ（配列番号４３）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号４１）またはそれらの組み合わせを含むフレキシブルリンカーである。任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、（ＧＧＳ）ｎ（ｎは１～１０である）を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号４２）（ｎは１～１０である）を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ペプチドリンカーは、（ＧＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２７）（ｎは１～６である）を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質またはヘンドラウイルスＧタンパク質である。任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、切断型でありかつ野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基を欠く生物学的に活性な部分である。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－ＧのＮ末端で切断された生物学的に活性な部分であり、配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０のいずれかに示される配列、または配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの５アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列、または配列番号１０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列、または配列番号３５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４５に示されるアミノ酸配列、または配列番号４５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１０アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３６に示されるアミノ酸配列、または配列番号３６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１１に示されるアミノ酸配列、または配列番号１１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４６に示されるアミノ酸配列、または配列番号４６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１５アミノ酸切断を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１２に示されるアミノ酸配列、または配列番号１２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３７に示されるアミノ酸配列、または配列番号３７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４７に示されるアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１３に示されるアミノ酸配列、または配列番号１３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列、または配列番号３８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４８に示されるアミノ酸配列、または配列番号４８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２５アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１４に示されるアミノ酸配列、または配列番号１４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３９に示されるアミノ酸配列、または配列番号３９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４９に示されるアミノ酸配列、または配列番号４９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３０アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１５に示されるアミノ酸配列、または配列番号１５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４０に示されるアミノ酸配列、または配列番号４０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号２２に示されるアミノ酸配列、または配列番号２２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号５３に示されるアミノ酸配列、または配列番号５３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質、その生物学的に活性な部分は、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合を示す変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である機能的に活性なバリアントである。
任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質には、配列番号２８に示される付番を参照してＥ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択されるアミノ酸置換に対応する１つ以上のアミノ酸置換が含まれる。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質には、配列番号２８に示される付番を参照してアミノ酸置換Ｅ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａが含まれる。
任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１６に示されるアミノ酸配列、または配列番号１６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号５１に示されるアミノ酸配列、または配列番号５１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ニパウイルスＦ（ＮｉＶ－Ｆ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＦタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、配列番号２に示されるアミノ酸配列、または配列番号２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号５に示される配列、または配列番号５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％，少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、ｉ）野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断、及びｉｉ）Ｎ結合型グリコシル化部位における点変異を含むその生物学的に活性な部分である。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号７に示される配列、または配列番号７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％，少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２２アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号８に示される配列、または配列番号８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％，少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチドの配列によってコードされるアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号２３に示される配列、または配列番号２３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％，少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、Ｆ－タンパク質またはその生物学的に活性な部分は、Ｆ１サブユニットまたはその融合部分を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質は、配列番号２３に示される配列を含み、Ｇタンパク質は、配列番号１６に示される配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質は、配列番号２３に示される配列からなり、もしくはそれから本質的になり、及び／またはＧタンパク質は、配列番号１６に示される配列からなり、もしくはそれから本質的になる。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｆ１サブユニットは、Ｆ０前駆体のタンパク質分解的に切断された部分である。任意の実施形態のうちの一部では、Ｆ１サブユニットは、配列番号４に示される配列、または配列番号４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％，少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、脂質二重層は、レトロウイルスまたはレトロウイルス様粒子を生成するために使用される宿主細胞の膜に由来する。任意の実施形態のうちの一部では、宿主細胞は、ＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、ＭＤＣＫ細胞、Ｃ３Ｈ １０Ｔ１／２細胞、ＦＬＹ細胞、Ｐｓｉ－２細胞、ＢＯＳＣ ２３細胞、ＰＡ３１７細胞、ＷＥＨＩ細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＳＣ １細胞、ＢＳＣ ４０細胞、ＢＭＴ １０細胞、ＶＥＲＯ細胞、Ｗ１３８細胞、ＭＲＣ５細胞、Ａ５４９細胞、ＨＴ１０８０細胞、２９３細胞、２９３Ｔ細胞、Ｂ－５０細胞、３Ｔ３細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＨｅｐＧ２細胞、Ｓａｏｓ－２細胞、Ｈｕｈ７細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｗ１６３細胞、２１１細胞、及び２１１Ａ細胞からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、宿主細胞は、２９３Ｔ細胞を含む。任意の実施形態のうちの一部では、脂質二重層は、ウイルスエンベロープであるか、またはそれを含む。任意の実施形態のうちの一部では、レトロウイルス様粒子は、複製欠損性である。
任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子は、Ｆタンパク質分子及びＧタンパク質以外の１つ以上のウイルス成分を含む。任意の実施形態のうちの一部では、１つ以上のウイルス成分は、レトロウイルスからのものである。任意の実施形態のうちの一部では、レトロウイルスは、レンチウイルスである。任意の実施形態のうちの一部では、１つ以上のウイルス成分は、Ｇａｇ、Ｐｏｌ、Ｒｅｖ及びＴａｔのうちの１つ以上から選択されるウイルスパッケージングタンパク質を含む。任意の実施形態のうちの一部では、１つ以上のウイルス成分は、以下の核酸配列：５’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３ドメインを欠く）、プサイパッケージング要素（プサイ）、セントラルポリプリン配列（ｃＰＰＴ）／セントラル終結配列（ＣＴＳ）（例えば、ＤＮＡフラップ）、ポリＡテール配列、転写後制御要素（例えば、ＷＰＲＥ）、Ｒｅｖ反応要素（ＲＲＥ）、及び３’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３を欠く）のうちの１つ以上（例えば、すべて）を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子は、レンチウイルスベクターである。
任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターは、複製欠損性である。
任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターは、外因性物質をさらに含む。任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子は、外因性物質をさらに含む。いくつかの実施形態では、レンチウイルスベクターは、外因性物質をさらに含む。
任意の実施形態のうちの一部では、外因性物質は、内腔に存在する。任意の実施形態のうちの一部では、外因性物質は、タンパク質または核酸である。いくつかの実施形態では、核酸は、ＤＮＡまたはＲＮＡである。
任意の実施形態のうちの一部では、外因性物質は、標的細胞への送達のためのカーゴをコードする核酸である。任意の実施形態のうちの一部では、外因性物質は、治療剤または診断剤をコードする。
任意の実施形態のうちの一部では、外因性物質は、膜タンパク質をコードする。いくつかの実施形態では、タンパク質は、疾患または病態によって発現するまたはそれに関連する細胞を標的とするための抗原受容体である。いくつかの実施形態では、膜タンパク質は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、（ｉ）細胞外抗原（例えば、ＣＤ１９またはＢＣＭＡ）と結合する細胞外抗原結合ドメインであって、任意に細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖである、細胞外抗原結合ドメインと、（ｉｉ）膜貫通ドメインと、（ｉｉｉ）ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン及び、任意に共刺激シグナル伝達ドメイン、例えば、４－１ＢＢまたはＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達領域とを含む。いくつかの実施形態では、標的細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞上の細胞表面分子は、ＣＤ４またはＣＤ８である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＣＤ４（例えば、ヒトＣＤ４）と結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＣＤ４（例えば、ヒトＣＤ４）と結合するシングルドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＣＤ８（例えば、ヒトＣＤ８）と結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＣＤ８（例えば、ヒトＣＤ８）と結合するシングルドメイン抗体である。
任意の実施形態のうちの一部では、外因性物質は、遺伝子欠損、任意に標的細胞における遺伝子欠損を修正するためのペイロード遺伝子を含む核酸である。いくつかの実施形態では、遺伝子欠損は、肝臓細胞または肝細胞に関連する。いくつかの実施形態では、標的細胞は、肝細胞である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される分子である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＡＳＧＲ１（例えば、ヒトＡＳＧＲ１）と結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＡＳＧＲ１（例えば、ヒトＡＳＧＲ１）と結合するシングルドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＡＳＧＲ２（例えば、ヒトＡＳＧＲ２）と結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＡＳＧＲ２（例えば、ヒトＡＳＧＲ２）と結合するシングルドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＴＭ４ＳＦ５（例えば、ヒトＴＭ４ＳＦ５）と結合するｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ＴＭ４ＳＦ５（例えば、ヒトＴＭ４ＳＦ５）と結合するシングルドメイン抗体である。
任意の実施形態のうちの一部では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する細胞表面分子と結合する。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子は、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である。任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物または腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される。
任意の実施形態のうちの一部では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する抗原またはその一部と結合する。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗原またはその一部は、ヒトＡＳＧＲ１である。いくつかの実施形態では、抗原またはその一部は、ヒトＡＳＧＲ２である。いくつかの実施形態では、抗原またはその一部は、ヒトＴＭ４ＳＦ５である。
本明細書では、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分と（ｉｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される細胞表面分子と結合する結合ドメインとをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチドが提供される。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ヒトＡＳＧＲ１である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ヒトＡＳＧＲ２である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ヒトＴＭ４ＳＦ５である。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＣＤ８またはＣＤ４である。
本明細書では、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分と（ｉｉ）ＣＤ４及びＣＤ８からなる群から選択される細胞表面分子と結合する結合ドメインとをコードする、核酸配列が提供される。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ヒトＣＤ４である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ヒトＣＤ８である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子または抗原は、低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子または抗原は、ヒトＬＤＬ－Ｒである。
本明細書では、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分と（ｉｉ）低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）と結合する結合ドメインとをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチドが提供される。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、ヒトＬＤＬ－Ｒと結合する。任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である。任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。
本明細書では、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分と（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインとをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチドであって、ｓｄＡｂ可変ドメインが、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されている、ポリヌクレオチドが提供される。任意の実施形態のうちの一部では、ポリヌクレオチドは、（ｉｉｉ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸配列をさらに含む。
いくつかの実施形態では、核酸配列は、第１の核酸配列であり、ポリヌクレオチドは、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする第２の核酸配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、ＩＲＥＳまたは第１及び第２の核酸配列間の連結ペプチドをコードする配列を含む。いくつかの実施形態では、連結ペプチドは、自己切断性ペプチドまたはリボソームスキッピングを引き起こすペプチド、任意にＴ２Ａペプチドである。
任意の実施形態のうちの一部では、ポリヌクレオチドには、核酸の発現をコントロールするために機能可能に連結された少なくとも１つのプロモーターが含まれる。任意の実施形態のうちの一部では、プロモーターは、第１の核酸配列及び第２の核酸配列の発現をコントロールするように機能可能に連結される。任意の実施形態のうちの一部では、プロモーターは、構成的プロモーターである。任意の実施形態のうちの一部では、プロモーターは、誘導性プロモーターである。
任意の実施形態のうちの一部では、ｓｄＡｂ可変ドメインは、コードされるペプチドリンカーを介してＧタンパク質に結合されている。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、コードされるペプチドリンカーを介してＧタンパク質に結合されている。任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、最大で２５アミノ酸の長さを含む。任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、最大で６５アミノ酸の長さを含む。任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、約２～６５アミノ酸、２～６０アミノ酸、２～５６アミノ酸、２～５２アミノ酸、２～４８アミノ酸、２～４４アミノ酸、２～４０アミノ酸、２～３６アミノ酸、２～３２アミノ酸、２～２８アミノ酸、２～２４アミノ酸、２～２０アミノ酸、２～１８アミノ酸、２～１４アミノ酸、２～１２アミノ酸、２～１０アミノ酸、２～８アミノ酸、２～６アミノ酸、６～６５アミノ酸、６～６０アミノ酸、６～５６アミノ酸、６～５２アミノ酸、６～４８アミノ酸、６～４４アミノ酸、６～４０アミノ酸、６～３６アミノ酸、６～３２アミノ酸、６～２８アミノ酸、６～２４アミノ酸、６～２０アミノ酸、６～１８アミノ酸、６～１４アミノ酸、６～１２アミノ酸、６～１０アミノ酸、６～８アミノ酸、８～６５アミノ酸、８～６０アミノ酸、８～５６アミノ酸、８～５２アミノ酸、８～４８アミノ酸、８～４４アミノ酸、８～４０アミノ酸、８～３６アミノ酸、８～３２アミノ酸、８～２８アミノ酸、８～２４アミノ酸、８～２０アミノ酸、８～１８アミノ酸、８～１４アミノ酸、８～１２アミノ酸、８～１０アミノ酸、１０～６５アミノ酸、１０～６０アミノ酸、１０～５６アミノ酸、１０～５２アミノ酸、１０～４８アミノ酸、１０～４４アミノ酸、１０～４０アミノ酸、１０～３６アミノ酸、１０～３２アミノ酸、１０～２８アミノ酸、１０～２４アミノ酸、１０～２０アミノ酸、１０～１８アミノ酸、１０～１４アミノ酸、１０～１２アミノ酸、１２～６５アミノ酸、１２～６０アミノ酸、１２～５６アミノ酸、１２～５２アミノ酸、１２～４８アミノ酸、１２～４４アミノ酸、１２～４０アミノ酸、１２～３６アミノ酸、１２～３２アミノ酸、１２～２８アミノ酸、１２～２４アミノ酸、１２～２０アミノ酸、１２～１８アミノ酸、１２～１４アミノ酸、１４～６５アミノ酸、１４～６０アミノ酸、１４～５６アミノ酸、１４～５２アミノ酸、１４～４８アミノ酸、１４～４４アミノ酸、１４～４０アミノ酸、１４～３６アミノ酸、１４～３２アミノ酸、１４～２８アミノ酸、１４～２４アミノ酸、１４～２０アミノ酸、１４～１８アミノ酸、１８～６５アミノ酸、１８～６０アミノ酸、１８～５６アミノ酸、１８～５２アミノ酸、１８～４８アミノ酸、１８～４４アミノ酸、１８～４０アミノ酸、１８～３６アミノ酸、１８～３２アミノ酸、１８～２８アミノ酸、１８～２４アミノ酸、１８～２０アミノ酸、２０～６５アミノ酸、２０～６０アミノ酸、２０～５６アミノ酸、２０～５２アミノ酸、２０～４８アミノ酸、２０～４４アミノ酸、２０～４０アミノ酸、２０～３６アミノ酸、２０～３２アミノ酸、２０～２８アミノ酸、２０～２６アミノ酸、２０～２４アミノ酸、２４～６５アミノ酸、２４～６０アミノ酸、２４～５６アミノ酸、２４～５２アミノ酸、２４～４８アミノ酸、２４～４４アミノ酸、２４～４０アミノ酸、２４～３６アミノ酸、２４～３２アミノ酸、２４～３０アミノ酸、２４～２８アミノ酸、２８～６５アミノ酸、２８～６０アミノ酸、２８～５６アミノ酸、２８～５２アミノ酸、２８～４８アミノ酸、２８～４４アミノ酸、２８～４０アミノ酸、２８～３６アミノ酸、２８～３４アミノ酸、２８～３２アミノ酸、３２～６５アミノ酸、３２～６０アミノ酸、３２～５６アミノ酸、３２～５２アミノ酸、３２～４８アミノ酸、３２～４４アミノ酸、３２～４０アミノ酸、３２～３８アミノ酸、３２～３６アミノ酸、３６～６５アミノ酸、３６～６０アミノ酸、３６～５６アミノ酸、３６～５２アミノ酸、３６～４８アミノ酸、３６～４４アミノ酸、３６～４０アミノ酸、４０～６５アミノ酸、４０～６０アミノ酸、４０～５６アミノ酸、４０～５２アミノ酸、４０～４８アミノ酸、４０～４４アミノ酸、４４～６５アミノ酸、４４～６０アミノ酸、４４～５６アミノ酸、４４～５２アミノ酸、４４～４８アミノ酸、４８～６５アミノ酸、４８～６０アミノ酸、４８～５６アミノ酸、４８～５２アミノ酸、５０～６５アミノ酸、５０～６０アミノ酸、５０～５６アミノ酸、５０～５２アミノ酸、５４～６５アミノ酸、５４～６０アミノ酸、５４～５６アミノ酸、５８～６５アミノ酸、５８～６０アミノ酸、または６０～６５アミノ酸を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、長さが３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９，２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４または６５アミノ酸であるポリペプチドを含む。任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧＳ（配列番号４３）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号４１）及びそれらの組み合わせを含む。任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、（ＧＧＳ）ｎ（ｎは１～１０である）を含む。任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号４２）（ｎは１～１０である）を含む。任意の実施形態のうちの一部では、コードされるペプチドリンカーは、（ＧＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２７）（ｎは１～４である）を含む。任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質をコードする配列は、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＧタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、バリアントは、ネイティブ結合パートナーについて減少した結合を示すそのバリアントである。任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質をコードする核酸配列は、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＧタンパク質であるか、またはネイティブ結合パートナーについて減少した結合を示すそのバリアントである。いくつかの実施形態では、コードされるＧタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質をコードする核酸配列は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質である。任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質をコードする核酸配列は、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合を示す変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、配列番号９、配列番号２８もしくは配列番号４４に示されるアミノ酸配列を含み、または配列番号９、配列番号２８もしくは配列番号４４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、切断型でありかつ野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基を欠く生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－ＧのＮ末端で切断された生物学的に活性な部分であり、配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０のいずれかに示される配列、または配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの５アミノ酸切断を含む生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列、または配列番号１０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列、または配列番号３５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４５に示されるアミノ酸配列、または配列番号４５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１０アミノ酸切断を含む生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１１に示されるアミノ酸配列、または配列番号１１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３６に示されるアミノ酸配列、または配列番号３６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４６に示されるアミノ酸配列、または配列番号４６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１５アミノ酸切断を含む生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１２に示されるアミノ酸配列、または配列番号１２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３７に示されるアミノ酸配列、または配列番号３７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４７に示されるアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断を含む生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１３に示されるアミノ酸配列、または配列番号１３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列、または配列番号３８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４８に示されるアミノ酸配列、または配列番号４８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２５アミノ酸切断を含む生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１４に示されるアミノ酸配列、または配列番号１４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号３９に示されるアミノ酸配列、または配列番号３９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４９に示されるアミノ酸配列、または配列番号４９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３０アミノ酸切断を含む生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号１５に示されるアミノ酸配列、または配列番号１５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号４０に示されるアミノ酸配列、または配列番号４０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号５０に示されるアミノ酸配列、または配列番号５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号２２に示されるアミノ酸配列、または配列番号２２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号５３に示されるアミノ酸配列、または配列番号５３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｇタンパク質は、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合を示す変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号２８に示される付番を参照してＥ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択されるアミノ酸置換に対応する１つ以上のアミノ酸置換を含む。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号２８に示される付番を参照してアミノ酸置換Ｅ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａを含む。
任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、ｉ）Ｎ末端におけるまたはその近くの切断、及びｉｉ）Ｅ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択される点変異を含む。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１６に示されるアミノ酸配列、または配列番号１６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号５１に示されるアミノ酸配列、または配列番号５１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ニパウイルスＦ（ＮｉＶ－Ｆ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＦタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、配列番号２示されるアミノ酸配列、または配列番号２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号５に示される配列、または配列番号５と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、ｉ）野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断、及びｉｉ）Ｎ結合型グリコシル化部位における点変異を含むその生物学的に活性な部分である。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号７に示される配列、または配列番号７と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２２アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である。任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質または生物学的に活性な部分は、配列番号８に示される配列、または配列番号８と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチドの配列によってコードされるアミノ酸配列を有する。
任意の実施形態のうちの一部では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号２３に示される配列、または配列番号２３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質は、配列番号２３に示される配列を含み、Ｇタンパク質は、配列番号１６に示される配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、Ｆタンパク質は、配列番号２３に示される配列からなり、またはそれから本質的になり、Ｇタンパク質は、配列番号１６に示される配列からなり、またはそれから本質的になる。
本明細書では、本明細書に記載の実施形態のいずれかのポリヌクレオチドを含むベクターが提供される。任意の実施形態のうちの一部では、ベクターは、哺乳動物ベクター、ウイルスベクターまたは人工染色体であり、任意に人工染色体は、細菌人工染色体（ＢＡＣ）である。
本明細書では、本明細書に記載の実施形態のいずれかのポリヌクレオチドを含むプラスミドが提供される。任意の実施形態のうちの一部では、プラスミドは、レンチウイルス生成のためのタンパク質をコードする１つ以上の核酸をさらに含む。
本明細書では、本明細書に記載の実施形態のいずれかのポリヌクレオチドまたは本明細書に記載の実施形態のいずれかのベクター、または本明細書に記載の実施形態のいずれかのプラスミドを含む細胞が提供される。
本明細書では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、細胞を提供することであって、標的化エンベロープタンパク質は、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む、提供すること、
ｂ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で細胞を培養すること、及び
ｃ）細胞から標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより標的化脂質粒子を作製すること
を含む方法が提供される。
本明細書では、偽型化レンチウイルスベクターを作製する方法であって、
ａ）レンチウイルスウイルス核酸（複数可）と、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞を提供することであって、前記標的化エンベロープタンパク質は、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体を含む、提供すること、
ｂ）レンチウイルスベクターの生成を可能とする条件下で細胞を培養すること、及び
ｃ）細胞からレンチウイルスベクターを分離、濃縮、または精製し、それにより偽型化レンチウイルスベクターを作製すること
を含む方法が提供される。
任意の実施形態のうちの一部では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する細胞表面分子と結合する。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子は、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である。任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物または腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する抗原またはその一部と結合する。
本明細書では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、細胞を提供することであって、標的化エンベロープタンパク質は、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含み、結合ドメインは、（ｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＡＳＧＲ２からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、（ｉｉ）ＣＤ４またはＣＤ８、任意にヒトＣＤ４またはヒトＣＤ８からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、または（ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）、任意にヒトＬＤＬ－Ｒである細胞表面分子と結合する、提供すること、
ｂ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で細胞を培養すること、及び
ｃ）細胞から標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより標的化脂質粒子を作製すること
を含む方法が提供される。
本明細書では、偽型化レンチウイルスベクターを作製する方法であって、ａ）レンチウイルスウイルス核酸（複数可）と、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞を提供することであって、前記標的化エンベロープタンパク質は、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含み、結合ドメインは、（ｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＡＳＧＲ２からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、（ｉｉ）ＣＤ４またはＣＤ８、任意にヒトＣＤ４またはヒトＣＤ８からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、または（ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）、任意にヒトＬＤＬ－Ｒである細胞表面分子と結合する、提供すること、ｂ）レンチウイルスベクターの生成を可能とする条件下でプロデューサー細胞を培養すること、及びｃ）細胞からレンチウイルスベクターを分離、濃縮、または精製し、それにより偽型化レンチウイルスベクターを作製することを含む方法が提供される。
任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体である。任意の実施形態のうちの一部では、結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子は、ＣＤ８またはＣＤ４である。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子は、ＬＤＬ－Ｒである。
本明細書では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
ａ）本明細書で提供される実施形態のいずれかのポリヌクレオチド、本明細書に記載の実施形態のいずれかのベクター、または本明細書に記載の実施形態のいずれかのプラスミドを含む細胞を提供すること、
ｂ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で細胞を培養すること、及び
ｃ）細胞から標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより標的化脂質粒子を作製すること
を含む方法が提供される。
本明細書では、偽型化レンチウイルスベクターを作製する方法であって、
ａ）レンチウイルスウイルス核酸（複数可）と、本明細書で列挙される実施形態のいずれかのポリヌクレオチドまたは本明細書で列挙される実施形態のいずれかのベクターとを含む、プロデューサー細胞を提供すること、
ｂ）レンチウイルスベクターの生成を可能とする条件下で細胞を培養すること、及び
ｃ）細胞からレンチウイルスベクターを分離、濃縮、または精製し、それにより偽型化レンチウイルスベクターを作製すること
を含む方法が提供される。任意の実施形態のうちの一部では、ステップ（ｂ）の前に、方法は、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードするポリヌクレオチドを細胞に提供することをさらに含む。
任意の実施形態のうちの一部では、細胞は、哺乳動物細胞である。
任意の実施形態のうちの一部では、細胞は、ウイルス核酸を含むプロデューサー細胞である。任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸は、レトロウイルス核酸またはレンチウイルス核酸であり、標的化脂質粒子は、ウイルス粒子またはウイルス様粒子である。任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子は、レトロウイルス粒子またはレトロウイルス様粒子である。いくつかの実施形態では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子は、レンチウイルス粒子またはレンチウイルス様粒子である。
任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸（複数可）は、ウイルス複製に関与する１つ以上の遺伝子を欠く。任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸は、Ｇａｇ、Ｐｏｌ、Ｒｅｖ及びＴａｔのうちの１つ以上から選択されるウイルスパッケージングタンパク質をコードする核酸を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸は、以下の核酸配列：５’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３ドメインを欠く）、プサイパッケージング要素（プサイ）、セントラルポリプリン配列（ｃＰＰＴ）／セントラル終結配列（ＣＴＳ）（例えば、ＤＮＡフラップ）、ポリＡテール配列、転写後制御要素（例えば、ＷＰＲＥ）、Ｒｅｖ反応要素（ＲＲＥ）、及び３’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３を欠く）のうちの１つ以上（例えば、すべて）を含む。
本明細書では、本明細書で列挙される実施形態のいずれかのポリヌクレオチドまたは本明細書で列挙される実施形態のいずれかのベクター、または本明細書に記載の実施形態のいずれかのプラスミドを含むプロデューサー細胞が提供される。
任意の実施形態のうちの一部では、プロデューサー細胞は、ヘニパウイルスＦタンパク質またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸をさらに含む。
任意の実施形態のうちの一部では、細胞は、ウイルス核酸をさらに含む。任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸は、レンチウイルス核酸である。本明細書では、（ｉ）ウイルス核酸（複数可）と、（ｉｉ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、（ｉｉｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞であって、任意にウイルス核酸（複数可）が、レンチウイルス核酸である、プロデューサー細胞が提供される。任意の実施形態のうちの一部では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する細胞表面分子と結合する。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子は、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である。
任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物または腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、標的細胞は、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する抗原またはその一部と結合する。
本明細書では、（ｉ）ウイルス核酸（複数可）と、（ｉｉ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、（ｉｉｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞であって、結合ドメインが、（ｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＡＳＧＲ２からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、（ｉｉ）ＣＤ４またはＣＤ８、任意にヒトＣＤ４またはヒトＣＤ８からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、または（ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）、任意にヒトＬＤＬ－Ｒである細胞表面分子と結合する、プロデューサー細胞が提供される。任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸（複数可）は、レンチウイルス核酸である。
任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＣＤ８またはＣＤ４である。任意の実施形態のうちの一部では、細胞表面分子または抗原は、ＬＤＬ－Ｒである。
任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸（複数可）は、ウイルス複製に関与する１つ以上の遺伝子を欠く。任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸は、Ｇａｇ、Ｐｏｌ、Ｒｅｖ及びＴａｔのうちの１つ以上から選択されるウイルスパッケージングタンパク質をコードする核酸を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ウイルス核酸は、以下の核酸配列：５’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３ドメインを欠く）、プサイパッケージング要素（プサイ）、セントラルポリプリン配列（ｃＰＰＴ）／セントラル終結配列（ＣＴＳ）（例えば、ＤＮＡフラップ）、ポリＡテール配列、転写後制御要素（例えば、ＷＰＲＥ）、Ｒｅｖ反応要素（ＲＲＥ）、及び３’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３を欠く）のうちの１つ以上（例えば、すべて）を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号２に示される配列、（ｉｉ）配列番号２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号５に示される配列、（ｉｉ）配列番号５と少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号７に示される配列、（ｉｉ）配列番号７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号８に示される配列をコードするヌクレオチド配列によってコードする配列、（ｉｉ）配列番号８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号２３に示される配列、（ｉｉ）配列番号２３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示される配列、（ｉｉ）配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号１０に示される配列、（ｉｉ）配列番号１０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号３５に示される配列、（ｉｉ）配列番号３５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号４５に示される配列、（ｉｉ）配列番号４５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号１１に示される配列、（ｉｉ）配列番号１１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号３６に示される配列、（ｉｉ）配列番号３６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号４６に示される配列、（ｉｉ）配列番号４６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号１２に示される配列、（ｉｉ）配列番号１２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号３７に示される配列、（ｉｉ）配列番号３７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号４７に示される配列、（ｉｉ）配列番号４７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号１３に示される配列、（ｉｉ）配列番号１３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号３８に示される配列、（ｉｉ）配列番号３８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号４８に示される配列、（ｉｉ）配列番号４８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号１４に示される配列、（ｉｉ）配列番号１４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号３９に示される配列、（ｉｉ）配列番号３９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号４９に示される配列、（ｉｉ）配列番号４９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号１５に示される配列、（ｉｉ）配列番号１５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号４０に示される配列、（ｉｉ）配列番号４０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号５０に示される配列、（ｉｉ）配列番号５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号１６に示される配列、（ｉｉ）配列番号１６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
任意の実施形態のうちの一部では、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、（ｉ）配列番号５１に示される配列、（ｉｉ）配列番号５１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
提供される実施形態のいくつかの態様では、標的化脂質粒子は、同様の脂質二重層に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれが代替的標的化部位に融合されている参照脂質粒子と比較して多い標的化エンベロープタンパク質発現を有し、任意に代替的標的化部位は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。任意の実施形態のうちの一部では、発現は、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する。いくつかの実施形態では、発現は、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて、好ましくは１０倍もしくは約１０倍もしくは約１０倍超またはそれを超えて増加する。任意の実施形態のうちの一部では、形質導入後の標的細胞における力価は、１×１０６形質導入単位（ＴＵ）／ｍＬ以上、２×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、３×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、４×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、５×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、６×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、７×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、８×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、９×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、または１×１０７ＴＵ／ｍＬ以上である。また、本明細書では、脂質粒子の集団の中で、５０％もしくは約５０％超、５５％もしくは約５５％超、６０％もしくは約６０％超、６５％もしくは約６５％超、７０％もしくは約７０％超、または７５％もしくは約７５％超は標的化エンベロープタンパク質について表面陽性である組成物が提供される。任意の実施形態のうちの一部では、標的化エンベロープタンパク質は、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２または０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の密度で標的化脂質粒子の表面上に存在する。
本明細書では、本明細書で提供される実施形態のいずれかのプロデューサー細胞から生成されたウイルスベクター粒子またはウイルス様粒子が提供される。
本明細書では、本明細書で提供される実施形態のいずれかの複数の標的化脂質粒子を含む組成物が提供される。いくつかの実施形態では、組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含む。任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子は、１μｍ未満の平均直径を含む。任意の実施形態のうちの一部では、組成物は、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２または０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の平均密度で標的化脂質粒子の表面上に存在する標的化エンベロープタンパク質をさらに含む。
本明細書では、膜（例えば、細胞膜）に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれが代替的標的化部位に融合されている参照プロデューサー細胞と比較して多い、標的化エンベロープタンパク質の膜（例えば、細胞膜）発現を含有するプロデューサー細胞であって、任意に代替的標的化部位は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、プロデューサー細胞が提供される。いくつかの実施形態では、発現は、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する。いくつかの実施形態では、発現は、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて、好ましくは１０倍もしくは約１０倍もしくは１０倍超またはそれを超えて増加する。いくつかの実施形態では、平方ミクロン当たり少なくとも２０のタンパク質（例えば、少なくとも５０、１００、２００、５００、１０００、２０００、５０００、または１０，０００のタンパク質）である、プロデューサー細胞の膜（例えば、細胞膜）上の標的化エンベロープタンパク質の発現を、プロデューサー細胞は有する。任意の実施形態のうちの一部では、標的化エンベロープタンパク質は、プロデューサー細胞の総膜（例えば、細胞膜）タンパク質の少なくとも０．１％（例えば、少なくとも０．２％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、または１０％）（例えば、総タンパク質重量に対して）を構成する。
本明細書では、細胞に形質導入する方法であって、本明細書に記載のウイルスベクターのいずれかまたは本明細書に記載の組成物のいずれかで細胞に形質導入することを含む、方法が提供される。任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子の標的化エンベロープタンパク質は、ＣＤ４を標的とし、細胞は、ＣＤ４＋細胞である。任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターの標的化エンベロープタンパク質は、ＣＤ８を標的とし、細胞は、ＣＤ８＋細胞である。任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターの標的化エンベロープタンパク質は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２またはＴＭ４ＳＦ５を標的とし、細胞は、肝細胞である。
本明細書では、外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する方法であって、本明細書で提供される実施形態のいずれかの標的化脂質粒子または本明細書で提供される実施形態のいずれかの組成物を対象に投与することを含み、標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターが外因性物質を含む、方法が提供される。
本明細書では、外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれかを対象に投与することを含み、複数の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターが外因性物質を含む、方法が提供される。
本明細書では、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を細胞に送達する方法であって、細胞を本明細書に記載のレンチウイルスベクターのいずれかまたは本明細書に記載の実施形態のいずれかの標的化脂質粒子と接触させることを含み、レンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子が、ＣＡＲをコードする核酸を含む、方法が提供される。
本明細書では、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を細胞に送達する方法であって、細胞を本明細書に記載の組成物のいずれかと接触させることを含み、複数のレンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子が、ＣＡＲをコードする核酸を含む、方法が提供される。
本明細書では、外因性物質を肝細胞に送達する方法であって、細胞を、本明細書に記載のレンチウイルスベクターのいずれか、または本明細書に記載の実施形態のいずれかの標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターと接触させることを含む、方法が提供される。
本明細書では、外因性物質を肝細胞に送達する方法であって、細胞を本明細書に記載の組成物のいずれかと接触させることを含み、複数のレンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子が、肝細胞への送達のための外因性物質を含む、方法が提供される。任意の実施形態のうちの一部では、接触させることは、レンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子で細胞に形質導入する。
本明細書では、対象（例えば、ヒト対象）における疾患または障害を処置する方法であって、本明細書で提供される実施形態のいずれかの標的化脂質粒子または本明細書で提供される実施形態のいずれかの組成物を対象に投与することを含む、方法が提供される。
本明細書では、哺乳動物細胞を標的化脂質粒子に融合させる方法であって、本明細書で提供される実施形態のいずれかの標的化脂質粒子または本明細書で提供される実施形態のいずれかの組成物を対象に投与することを含む、方法が提供される。任意の実施形態のうちの一部では、哺乳動物細胞を標的化脂質粒子に融合させることは、外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する。任意の実施形態のうちの一部では、哺乳動物細胞を標的化脂質粒子に融合させることは、対象（例えば、ヒト対象）における疾患または障害を処置する。任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子の標的化エンベロープタンパク質は、ＣＤ４を標的とし、細胞は、ＣＤ４＋細胞である。任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターの標的化エンベロープタンパク質は、ＣＤ８を標的とし、細胞は、ＣＤ８＋細胞である。任意の実施形態のうちの一部では、レンチウイルスベクターの標的化エンベロープタンパク質は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２またはＴＭ４ＳＦ５を標的とし、細胞は、肝細胞である。
任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子は、同様の脂質二重層に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれが代替的標的化部位に融合されている参照脂質粒子と比較して多い標的化エンベロープタンパク質発現を有する。いくつかの実施形態では、代替的標的化部位は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。任意の実施形態のうちの一部では、発現は、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する。任意の実施形態のうちの一部では、発現は、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて、好ましくは１０倍もしくは約１０倍もしくは１０倍超またはそれを超えて増加する。
任意の実施形態のうちの一部では、形質導入後の標的細胞における力価は、１×１０６形質導入単位（ＴＵ）／ｍＬ以上、２×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、３×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、４×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、５×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、６×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、７×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、８×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、９×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、または１×１０７ＴＵ／ｍＬ以上である。
任意の実施形態のうちの一部では、組成物における脂質粒子またはレンチウイルスベクターの集団の中で、５０％もしくは約５０％超、５５％もしくは約５５％超、６０％もしくは約６０％超、６５％もしくは約６５％超、７０％もしくは約７０％超、または７５％もしくは約７５％超は、標的化エンベロープタンパク質について表面陽性である。任意の実施形態のうちの一部では、標的化エンベロープタンパク質は、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２または０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の密度で標的化脂質粒子の表面上に存在する。
本明細書では、本明細書に記載の実施形態のいずれかの複数の標的化脂質粒子または本明細書に記載の実施形態のいずれかの複数のレンチウイルスベクターを含む組成物であって、標的化エンベロープタンパク質は、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２または０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の平均密度で標的化脂質粒子の表面上に存在する、組成物が提供される。
任意の実施形態のうちの一部では、膜（例えば、細胞膜）に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれが代替的標的化部位に融合されている参照プロデューサー細胞と比較して多い、標的化エンベロープタンパク質の膜（例えば、細胞膜）発現を、プロデューサー細胞は有し、任意に代替的標的化部位は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。任意の実施形態のうちの一部では、発現は、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する。任意の実施形態のうちの一部では、発現は、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて、好ましくは１０倍もしくは約１０倍もしくは１０倍超またはそれを超えて増加する。任意の実施形態のうちの一部では、平方ミクロン当たり少なくとも２０のタンパク質（例えば、少なくとも５０、１００、２００、５００、１０００、２０００、５０００、または１０，０００のタンパク質）である、プロデューサー細胞の膜（例えば、細胞膜）上の標的化エンベロープタンパク質の発現を、プロデューサー細胞は有する。任意の実施形態のうちの一部では、標的化エンベロープタンパク質は、プロデューサー細胞の総膜（例えば、細胞膜）タンパク質の少なくとも０．１％（例えば、少なくとも０．２％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、または１０％）（例えば、総タンパク質重量に対して）を構成する。
詳細な説明
本明細書では、内腔またはキャビティを包囲する脂質二重層と、（１）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（２）結合ドメイン、例えば、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含有する標的化エンベロープタンパク質とを含有する、標的化脂質粒子であって、標的化エンベロープタンパク質が、脂質粒子の脂質二重層に埋め込まれている、標的化脂質粒子が提供される。特定の実施形態では、結合ドメイン、例えば、シングルドメイン抗体は、所望の標的分子に結合する、例えば、特異的に結合する能力を有する抗体である。例示的な結合ドメインは、セクションＩＩ．Ａ．２に記載されている。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子はまた、脂質二重層に埋め込まれたヘニパウイルス融合（Ｆ）タンパク質分子またはその生物学的に活性な部分を含有する。特定の実施形態では、脂質粒子は、ウイルス様粒子、ウイルス、またはウイルスベクター、例えば、レンチウイルスベクターであり得る。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質及びＦタンパク質の一方または両方は、ヘンドラ（ＨｅＶ）もしくはニパ（ＮｉＶ）ウイルスからのものであるか、またはその生物学的に活性な部分であるか、またはそのバリアントもしくは変異体である。特定の実施形態では、Ｇタンパク質及びＦタンパク質の両方は、ヘンドラ（ＨｅＶ）またはニパ（ＮｉＶ）ウイルスからのものである。いくつかの実施形態では、融合及び結合糖タンパク質は、ニパウイルスの細胞侵入を媒介する。
Ｆタンパク質、例えば、ＮｉＶ－Ｆは、疎水性融合ペプチド及び２つのヘプタッドリピート領域を有するエクトドメインなどの、多くのファミリーの融合タンパク質（例えば、ＨＩＶ－１ ｇｐ４１またはインフルエンザウイルス血球凝集素［ＨＡ］）と共通する構造的及び機能的特徴を有するクラスＩ融合タンパク質である（Ｗｈｉｔｅ ＪＭ ｅｔ ａｌ．２００８．Ｃｒｉｔ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ４３：１８９－２１９）。Ｆタンパク質は、不活性な前駆体Ｆ０として合成され、２つのジスルフィド連結サブユニットＦ１及びＦ２へのタンパク質分解的切断によって活性化される（Ｍｏｌｌ Ｍ．ｅｔ ａｌ．２００４．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７８（１８）：９７０５－９７１２）。
Ｇタンパク質は、Ｎ末端細胞質尾部、膜貫通ドメイン、細胞外茎部、及び球状頭部を含有するＩＩ型膜貫通糖タンパク質である、ヘニパウイルス（例えば、ニパウイルスまたはヘンドラウイルス）の結合タンパク質である（Ｌｉｕ，Ｑ．ｅｔ ａｌ．２０１５．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，８９（３）：１８３８－１８５０）。結合タンパク質であるＮｉＶ－Ｇは、受容体エフリンＢ２及びエフリンＢ３を認識する。ＮｉＶ－Ｇに対する受容体の結合は、ＮｉＶ－Ｆの作動を最終的にもたらす一連の構造的変化を誘発し、ＮｉＶ－Ｆの融合ペプチドを露出させ、ウイルス細胞膜融合をもたらす別の一連の構造的変化を可能とする（Ｓｔｏｎｅ Ｊ．Ａ．ｅｔ ａｌ．２０１６．Ｊ Ｖｉｒｏｌ．９０（２３）：１０７６２－１０７７３）。エフリンＢ２は、主要なＮｉＶ受容体として（Ｎｅｇｒｅｔｅ ｅｔ ａｌ．，２００５）、エフリンＢ３は、代替的受容体として（Ｎｅｇｒｅｔｅ ｅｔ ａｌ．，２００６）過去に同定された。実際、ＮｉＶ－Ｇは、ピコモル範囲の親和性結合定数（Ｋｄ）でエフリンＢ２及びＢ３に対する高い親和性を有する（Ｎｅｇｒｅｔｅ ｅｔ ａｌ．，２００６）（細胞表面に発現したエフリンＢ２及びＢ３についてそれぞれＫｄ＝０．０６ｎＭ及び０．５８ｎＭ）。
標的化脂質粒子の形質導入の効率は、ＮｉＶ－Ｆ及びＮｉＶ－Ｇの一方または両方において超融合変異を操作することによって改善され得る。いくつかのそのような変異は、先行記載されている（例えば、Ｌｅｅ ａｔ ａｌ，２０１１，Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙを参照されたい）。これは、例えば、エフリンＢ２及び／またはＢ３に対するＮｉＶ－Ｇの特異性及びピコモル親和性を維持するために有用であり得る。また、エフリンＢ２及びＢ３結合を完全に無効にするが、このＮｉＶ－ＧとＮｉＶ－Ｆとの会合に影響を与えないＮｉＶ－Ｇにおける変異が同定されている。脂質粒子の標的化を改善するための方法は、結合分子とＧタンパク質（例えば、エフリンＢ２及びエフリンＢ３結合を無効にするための変異を有するＮｉｖ－Ｇを含むＮｉｖ－Ｇ）との融合によって達成され得る。これにより、異なる細胞表面分子に対して仕向けられた結合分子の添加を介してエフリンＢ２＋ではない他の所望の細胞タイプの標的化を可能とする改変されたＧタンパク質指向性が可能となり得る。
Ｇタンパク質に融合されたそのような結合分子を組み込んでいる再標的化脂質粒子が生成されたが、いくつかの結合分子は、Ｇタンパク質（例えば、ＮｉＶ－Ｇ）と融合された場合、他のものよりも脂質粒子の表面上で良好に発現することが本明細書で見出された。例えば、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）、例えば、ＶＨＨは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）よりも１０倍良好に発現し得ることが見出されている。理論に縛られることを望むものではないが、発現の増加は、脂質粒子の表面上の再標的化Ｇタンパク質の安定性の増加に起因し得る。このより多い発現は、同じ標的分子に対する代替的結合ドメイン、例えば、ｓｃＦｖを含有する同様の脂質粒子と比較して脂質粒子が標的分子（例えば、細胞表面分子）を標的とする能力を改善し得る。
よって、本明細書では、標的細胞上の細胞表面分子に対して仕向けられた、またはそれに結合することができるｓｄＡｂ可変ドメインに結合したヘニパウイルスのＧタンパク質（例えば、ＨｅｎｄｒａまたはＮｉｐａｈ、例えば、ＮｉＶ－Ｇ）を含有する標的化脂質粒子が提供される。ｓｄＡｂ可変ドメインには、ＶＬまたはＶＨのみのｓｄＡｂ、ナノボディ、ラクダ科動物ＶＨＨドメイン、サメＩｇＮＡＲまたはその断片のものが含まれ得る。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂは、ＶＨＨである。
提供される実施形態の態様では、標的化脂質粒子は、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを発現するように操作され得、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び標的化エンベロープタンパク質は、脂質二重層に埋め込まれる。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂ可変ドメインは、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されている。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂ可変ドメインは、リンカーを介してＧタンパク質に結合されている。
また、対象へのｉｎ ｖｉｖｏ投与後を含む、例えば、診断または治療剤の細胞への送達のための、１つ以上の外因性物質を追加的に含有する標的化脂質粒子が提供される。また、本明細書では、診断及び治療方法における、標的化脂質粒子の方法及び使用が提供される。また、ポリヌクレオチド、標的化脂質非細胞粒子を操作、調製、及び生成するための方法、粒子を含有する組成物、ならびに粒子を使用、生成及び投与することを含む及びそのためのキット及びデバイスが提供される。
本出願で言及される特許文献、科学記事及びデータベースを含むすべての刊行物は、各々の個々の刊行物が参照により個々に開示されているのと同じ程度にすべての目的のためにそれらの全体が参照により組み込まれる。本明細書に示される定義が参照により本明細書に組み込まれる特許、出願、公開された出願及び他の刊行物に示される定義に反している場合または別様に矛盾する場合、本明細書に示される定義は、参照により本明細書に組み込まれる定義より優先する。
本明細書で使用される節の見出しは、構成目的のみのためであり、記載される主題を限定するものと解釈されるべきではない。
図１Ａ～１Ｃは、ｓｃＦｖまたはＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞の特徴づけを示している。図１Ａは、フローサイトメトリーによって分析され、Ｈｉｓ＋細胞の％によって定量された蛍光強度中央値（ＭＦＩ）として示される、ｓｃＦＶまたはＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞の表面発現を示している。空のベクター及びバインダードメインを有しない発現ベクターを陰性対照として使用した。 図１Ａ～１Ｃは、ｓｃＦｖまたはＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞の特徴づけを示している。図１Ｂは、フローサイトメトリーによって分析され、％Ｆｃ＋細胞によって定量された蛍光強度中央値（ＭＦＩ）として示される、ＶＨＨ結合モダリティのｓｃＦＶを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞の可溶性ｈＣＤ４－Ｆｃタンパク質に対する結合を示している。空のベクター及びバインダードメインを有しない発現ベクターを陰性対照として使用した。 図１Ａ～１Ｃは、ｓｃＦｖまたはＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞の特徴づけを示している。図１Ｃは、フローサイトメトリーによって分析され、Ｈｉｓ＋細胞の％によって定量される蛍光強度中央値（ＭＦＩ）として示される、ｓｃＦｖ結合モダリティと比較した、ＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞についての２９３細胞上の標的化結合配列の表面発現を示している。空のベクター及びバインダードメインを有しない発現ベクターを陰性対照として使用した。 Ｔ細胞について濃縮するためにネガティブ選択し、解凍し、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８で活性化した末梢血からのＰａｎＴ細胞に対するｓｃＦＶまたはＶＨＨ結合モダリティを含有する４つの例示的なコンストラクトの形質導入有効性を示している。細胞をフローサイトメトリーによって分析し、力価を、ＧＦＰ＋であったＣＤ４陽性細胞の％によって決定した。 図３Ａ～Ｂは、フローサイトメトリーによって分析される、ＮＯＤ－ｓｃｉｄ－ＩＬ２ｒγｎｕｌｌマウスに腹腔内注入された活性化ＰＢＭＣを使用したｉｎ ｖｉｖｏモデルでのＣＤ８再標的化偽型化レンチウイルスの形質導入効率を示している。ＣＤ８再標的化偽型化レンチウイルスの形質導入効率がＣＤ８＋（図３Ａ）またはＣＤ８－（図３Ｂ）Ｔ細胞について示されており、力価は、ＧＦＰ＋であったＣＤ８陽性または陰性細胞の％によって決定した。 図３Ａの説明を参照のこと。 図４Ａ～Ｂは、ｉｎ ｖｉｔｒｏで白血病細胞の殺傷をもたらすためのキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含有するＣＤ８再標的化偽型化レンチウイルスの能力を示している。図４Ａは、形質導入後４日目でＣＤ８＋細胞上のＣＤ１９＋ＣＡＲ発現を検出するための能力を示している。図４Ｂは、フローサイトメトリーによって分析された、インキュベート後１８時間の時点で評価されたＮａｌｍ６細胞の排除を示している。 図４Ａの説明を参照のこと。
Ｉ．定義
別段定義されない限り、本明細書で使用される当該技術分野のすべての用語、表記ならびに他の技術的及び科学的用語または専門用語は、請求される主題が関連する当該技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有することが意図されている。いくつかの場合では、一般的に理解される意味を有する用語は、明確性のため及び／またはすぐに参照できるようにするために本明細書で定義されており、本明細書におけるそのような定義の包含は、かならずしも、当該技術分野で通常理解されるものとの実質的な差を示すものと解釈されるべきではない。
別段定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語、頭字語、ならびに略語は、本発明が関連する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。別段示されない限り、化学及び生化学名称のための略語及び記号は、ＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ命名法に従う。別段示されない限り、すべての数値範囲は、範囲を定義する値ならびにそれらの間のすべての整数値を含む。
本明細書で使用される場合、冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、冠詞の文法上の目的語の１つまたは複数（すなわち、少なくとも１つの）を指す。例として、「要素（ａｎ ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つの要素または複数の要素を意味する。
本明細書で使用される場合、「約」は、当業者によって理解され、それが使用される文脈である程度異なる。本明細書で使用される場合、「約」は、測定可能な値、例えば、量、時間的継続時間などに言及する場合、指定された値から±２０％または±１０％、より好ましくは±５％、さらにより好ましくは±１％、またより好ましくは±０．１％の変動を包含するが、それは、そのような変動が、開示される方法を実施するために適切であるからである。
本明細書で使用される場合、「脂質粒子」は、内腔またはキャビティを包囲する両親媒性脂質の二重層を含有する任意の生物学的または合成粒子を指す。典型的には脂質粒子は、核を含有しない。脂質粒子の例には、固体粒子、例えば、ナノ粒子、ウイルス由来粒子または細胞由来粒子が含まれる。そのような脂質粒子には、ウイルス粒子（例えば、レンチウイルス粒子）、ウイルス様粒子、ウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）エクソソーム、除核された細胞、様々な小胞、例えば、微小胞、膜小胞、細胞外膜小胞、細胞膜小胞、巨大細胞膜小胞、アポトーシス小体、ミト粒子（ｍｉｔｏｐａｒｔｉｃｌｅ）、ピレノサイト、またはリソソームが含まれるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、脂質粒子は、フソソームであり得る。いくつかの実施形態では、脂質粒子は、血小板ではない。
本明細書で使用される場合、例えば、Ｇタンパク質またはＦタンパク質などのタンパク質に関して、「生物学的に活性な部分」は、タンパク質の全長の活性または特性を示すまたは保持するタンパク質の一部を指す。例えば、Ｆタンパク質の生物学的に活性な部分は、Ｇタンパク質と併せて、各々が脂質二重層に埋め込まれている場合、融合活性を保持する。Ｇタンパク質の生物学的に活性な部分は、Ｆタンパク質と併せて、各々が脂質二重層に埋め込まれている場合に融合活性を保持する。保持される活性には、全長または野生型Ｆタンパク質またはＧタンパク質の活性の１０％～１５０％またはそれ以上が含まれる。Ｆ及びＧタンパク質の生物学的に活性な部分の例には、細胞質ドメインの切断、例えば、最大で１、２、３、４、５、６、７、８ ９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、２０、２５、３０、３５またはそれ以上の連続アミノ酸の切断が含まれ、例えば、Ｋｈｅｔａｗａｔ ａｎｄ Ｂｒｏｄｅｒ ２０１０ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ Ｊｏｕｒｎａｌ ７：３１２、Ｗｉｔｔｉｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１３ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０：９９７－１００５、特許出願番号ＷＯ／２０１３／１４８３２７を参照されたい。
本明細書で使用される場合、「フソソーム」は、内腔またはキャビティを包囲する両親媒性脂質の二重層及び両親媒性脂質二重層と相互作用するフソゲンを含有する粒子を指す。実施形態では、フソソームは、核酸を含む。いくつかの実施形態では、フソソームは、膜包囲調製物である。いくつかの実施形態では、フソソームは、源細胞に由来する。
本明細書で使用される場合、「フソソーム組成物」は、１つ以上のフソソームを含む組成物を指す。
本明細書で使用される場合、「フソゲン」は、２つの膜包囲内腔間で相互作用を作り出す物質または分子を指す。実施形態では、フソゲンは、膜の融合を容易化する。他の実施形態では、フソゲンは、２つの内腔（例えば、レトロウイルスベクターの内腔及び標的細胞の細胞質）間の接続、例えば、孔部を生成する。いくつかの実施形態では、フソゲンは、２つ以上のタンパク質の複合体を含み、例えば、いずれのタンパク質も融合活性を単独で有しない。いくつかの実施形態では、フソゲンは、標的化ドメインを含む。
本明細書で使用される場合、「再標的化フソゲン」は、フソゲンの天然に存在する形態の一部ではない配列を有する標的化部位を含むフソゲンを指す。実施形態では、フソゲンは、フソゲンの天然に存在する形態における標的化部位と比較して異なる標的化部位を含む。実施形態では、フソゲンの天然に存在する形態は、再標的化メインを欠き、再標的化フソゲンは、フソゲンの天然に存在する形態にはない標的化部位を含む。実施形態では、フソゲンは、標的化部位を含むように修飾される。実施形態では、フソゲンは、例えば、膜貫通ドメイン、融合的に活性なドメイン、または細胞質ドメインにおいてフソゲンの天然に存在する形態に対して標的化部位の外側に１つ以上の配列改変を含む。
本明細書で使用される場合、「標的化エンベロープタンパク質」は、分子を所望の細胞タイプに標的化するシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメイン、例えば、ＶＬまたはＶＨのみのｓｄＡｂ、ナノボディ、ラクダ科動物ＶＨＨドメイン、サメＩｇＮＡＲまたはその断片に結合したヘニパウイルスＧタンパク質を含有するポリペプチドを指す。いくつかのそのような実施形態では、結合は、直接的、またはペプチドリンカーなどのリンカーを介して間接的であり得る。
本明細書で使用される場合、「標的化脂質粒子」は、脂質二重層に埋め込まれた標的化エンベロープタンパク質を含有する脂質粒子を指す。
本明細書で使用される場合、「レトロウイルス核酸」は、レトロウイルスまたはレトロウイルスベクターに、単独で、またはヘルパー細胞、ヘルパーウイルス、もしくはヘルパープラスミドと組み合わせてパッケージングするための少なくとも最小配列要件を含有する核酸を指す。いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸は、外因性物質、陽性標的細胞特異的制御要素、非標的細胞特異的制御要素、または陰性ＴＣＳＲＥをさらに含み、またはコードする。いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸は、５’ＬＴＲ（例えば、組み込みを促進するためのもの）、Ｕ３（例えば、ウイルスゲノムＲＮＡ転写を活性化するためのもの）、Ｒ（例えば、Ｔａｔ結合領域）、Ｕ５、３’ＬＴＲ（例えば、組み込みを促進するためのもの）、パッケージング部位（例えば、プサイ（Ψ））、ＲＲＥ（例えば、Ｒｅｖに結合し、核外搬出を促進するためのもの）のうちの１つ以上（例えば、すべて）を含む。レトロウイルス核酸は、ＲＮＡ（例えば、ビリオンの一部である場合）またはＤＮＡ（例えば、源細胞に導入されている場合またはレシピエント細胞における逆転写後）を含み得る。いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸は、ｇａｇ、ｐｏｌ、及びｅｎｖのうちの１つ以上（例えば、すべて）を含むヘルパー細胞、ヘルパーウイルス、またはヘルパープラスミドを使用してパッケージングされる。
本明細書で使用される場合、「標的細胞」は、標的化脂質粒子が外因性物質を送達することが所望であるタイプの細胞を指す。実施形態では、標的細胞は、特定の組織タイプまたはクラスの細胞、例えば、免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞は、罹患細胞、例えば、がん細胞である。いくつかの実施形態では、フソゲン、例えば、再標的化フソゲンは、非標的細胞と比較して標的細胞への外因性物質の優先的送達をもたらす。
本明細書で使用される場合、「非標的細胞」は、標的化脂質粒子が外因性物質を送達することが所望ではない細胞のタイプを指す。いくつかの実施形態では、非標的細胞は、特定の組織タイプまたはクラスの細胞である。いくつかの実施形態では、非標的細胞は、非罹患細胞、例えば、非がん細胞である。いくつかの実施形態では、フソゲン、例えば、再標的化フソゲンは、標的細胞と比較して非標的細胞への外因性物質のより低い送達をもたらす。
本明細書で使用される場合、「シングルドメイン抗体」または「ｓｄＡｂ」は、単一の単量体ドメイン抗原結合／認識ドメインを有する抗体を指す。そのような抗体には、ナノボディ、ラクダ科動物抗体（例えば、ＶＨＨ）、またはサメ抗体（例えば、ＩｇＮＡＲ）が含まれる。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂの可変ドメインは、３つのＣＤＲ及び４つのフレームワーク領域（ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４と指定される）を含む。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂ可変ドメインが抗原結合及び特異性を実質的に維持する限り、ｓｄＡｂ可変ドメインは、部分的ＦＲ１及び／またはＦＲ４のみを含むようにＮ末端またはＣ末端で切断され得、またはそれらのフレームワーク領域の一方もしくは両方を欠く。
「ＣＤＲ」という用語は、当業者に対する少なくとも１つの同定手法によって定義される相補性決定領域を示す。所与のＣＤＲまたはＦＲの正確なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，” ５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（“Ｋａｂａｔ”付番スキーム）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）ＪＭＢ ２７３，９２７－９４８（“Ｃｈｏｔｈｉａ”付番スキーム）、ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６），“Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ａｎｔｉｇｅｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｃｏｎｔａｃｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ｔｏｐｏｇｒａｐｈｙ，” Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２，７３２－７４５．”（“Ｃｏｎｔａｃｔ”付番スキーム）、Ｌｅｆｒａｎｃ ＭＰ ｅｔ ａｌ．，“ＩＭＧＴ ｕｎｉｑｕｅ ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ａｎｄ Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ ａｎｄ Ｉｇ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ Ｖ－ｌｉｋｅ ｄｏｍａｉｎｓ，” Ｄｅｖ Ｃｏｍｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３ Ｊａｎ；２７（１）：５５－７７（“ＩＭＧＴ”付番スキーム）、Ｈｏｎｅｇｇｅｒ Ａ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ Ａ，“Ｙｅｔ ａｎｏｔｈｅｒ ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ ｓｃｈｅｍｅ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ：ａｎ ａｕｔｏｍａｔｉｃ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｏｏｌ，” Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２００１ Ｊｕｎ ８；３０９（３）：６５７－７０，（“Ａｈｏ”付番スキーム）、及びＭａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｌｏｏｐｓ：ａ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ａｌｇｏｒｉｔｈｍ，” ＰＮＡＳ，１９８９，８６（２３）：９２６８－９２７２，（“ＡｂＭ”付番スキーム）に記載されているものを含む、いくつかのよく知られているスキームのいずれかを使用して容易に決定され得る。
所与のＣＤＲまたはＦＲの境界は、同定に使用されるスキームに応じて変わり得る。例えば、Ｋａｂａｔスキームは、構造的アライメントに基づくのに対し、Ｃｈｏｔｈｉａスキームは、構造的情報に基づく。Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａスキームの両方について付番は、挿入文字、例えば、「３０ａ」によって提供される挿入、及びいくつかの抗体で現れる欠失を伴って、最も共通の抗体領域配列長さに基づく。これらの２つのスキームは、異なる位置で所定の挿入及び欠失（「インデル」）を配置し、異なる付番をもたらす。Ｃｏｎｔａｃｔスキームは、複雑な結晶構造の分析に基づいており、Ｃｈｏｔｈｉａ付番スキームと多くの点で類似する。ＡｂＭスキームは、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウエアによって使用されるものに基づくＫａｂａｔ定義とＣｈｏｔｈｉａ定義との間の折衷案である。
いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ付番スキーム、Ｋａｂａｔ付番スキーム、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの組み合わせ、ＡｂＭ定義、及び／またはＣｏｎｔａｃｔ定義のいずれかに従って定義され得る。ｓｄＡｂ可変ドメインは、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と指定された３つのＣＤＲを含む。以下の表１は、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、及びＣｏｎｔａｃｔスキームによってそれぞれ同定されるＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３の例示的な位置境界を列挙している。ＣＤＲ－Ｈ１の場合、残基付番は、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ付番スキームの両方を使用して列挙される。ＦＲは、ＣＤＲ間に位置し、例えば、ＦＲ－Ｈ１は、ＣＤＲ－Ｈ１の前に位置し、ＦＲ－Ｈ２は、ＣＤＲ－Ｈ１とＣＤＲ－Ｈ２との間に位置し、ＦＲ－Ｈ３は、ＣＤＲ－Ｈ２とＣＤＲ－Ｈ３との間に位置するなどである。示されるＫａｂａｔ付番スキームは、Ｈ３５Ａ及びＨ３５Ｂで挿入を配置するので、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲ－Ｈ１ループの端部は、示されるＫａｂａｔ付番規則を使用して付番された場合、ループの長さに応じて、Ｈ３２とＨ３４との間で変わることを留意されたい。
（表１）様々な付番スキームに従うＣＤＲの境界
Figure 2023521663000002
よって、別段特定されない限り、所与の抗体またはその可変領域などのその領域の「ＣＤＲ」もしくは「相補性決定領域」、または個々の特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）は、前述したスキームのいずれかによって定義される、ある（または特定の）相補性決定領域を包含するものと理解されるべきである。例えば、特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）が、所与のｓｄＡｂアミノ酸配列における対応するＣＤＲのアミノ酸配列を含有することが記述される場合、そのようなＣＤＲは、前述したスキームのいずれかによって定義される、ｓｄＡｂ内の対応するＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）の配列を有することが理解される。任意の抗体、例えば、ｓｄＡｂは、ＣＤＲを含み、それは、他の前述した付番スキームまたは当業者に知られている他の付番スキームのいずれかに従って同定され得ることが理解される。
本明細書で使用される場合、抗原などの標的分子に「特異的に結合する」という用語は、結合分子、例えば、シングルドメイン抗体は、代替的分子より頻繁に、より迅速に、より長い継続期間で及び／または特定の標的分子とより高い親和性で反応または会合することを意味する。結合分子、例えば、ｓｄＡｂ可変ドメインは、それが他の分子に結合する場合よりも高い親和性、アビディティで、より容易に、及び／またはより長い継続期間で結合する場合、標的分子に「特異的に結合する」。第１の標的に特異的に結合するｓｄＡｂなどの結合分子は、第２の標的に特異的に結合する場合があり、またはしない場合があることが理解される。このように、「特異的結合」は、かならずしも、排他的結合を必要とするわけではない（が、それを含み得る）。
本明細書で使用される場合、ペプチド、ポリペプチドまたは抗体配列に関して、「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」及び「相同性」は、配列同一性最大パーセントを達成するために、配列を整合させ、必要に応じてギャップを導入した後の、配列同一性の一部としていずれの保存的置換も考慮しない、特定のペプチドもしくはポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基の百分率として定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、当該技術分野における技術の範囲内である種々の方式で、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、またはＭＥＧＡＬＩＧＮＴＭ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア等の、公的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して、達成することができる。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。
アミノ酸置換には、ポリペプチドにおけるあるアミノ酸の別のアミノ酸での置き換えが含まれ得るがこれらに限定されない。例示的な置換が表２に示されている。アミノ酸置換は、対象となる抗体に導入され、産物は、所望の活性、例えば、保持／改善された結合について、スクリーニングされ得る。
（表２）
Figure 2023521663000003
アミノ酸は、共通の側鎖特性に従って分類され得る：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ、
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを別のクラスと交換することを伴うことになる。
タンパク質の位置を参照して「に対応する」という用語、例えば、ヌクレオチドまたはアミノ酸位置が、配列表に示されるものなどの開示される配列におけるヌクレオチドまたはアミノ酸位置「に対応する」という記述は、構造的配列アライメントに基づいてまたはＧＡＰアルゴリズムなどの標準的なアライメントアルゴリズムを使用して開示される配列とのアライメントで同定されるヌクレオチドまたはアミノ酸位置を指す。例えば、同様の配列（例えば、断片または種バリアント）の対応する残基は、構造的アライメント法によって参照配列に対するアライメントによって決定され得る。配列をアライメントすることにより、当業者は、例えば、ガイドとして保存された及び同一のアミノ酸残基を使用して、対応する残基を同定し得る。
「単離された」という用語は、本明細書で使用される場合、天然で典型的に見られるまたは生成される成分の少なくとも一部から分離された分子を指す。例えば、ポリペプチドは、それが生成された細胞の成分の少なくとも一部から分離された場合、「単離された」と称される。ポリペプチドが発現後に細胞によって分泌される場合、生成された細胞からポリペプチドを含有する上清を物理的に分離することは、ポリペプチドを「単離すること」とみなされる。同様に、ポリヌクレオチドは、天然で典型的に見られるより大きなポリヌクレオチド（例えば、ＤＮＡポリヌクレオチドの場合、ゲノムＤＮＡまたはミトコンドリアＤＮＡなど）の一部ではない場合、または例えば、ＲＮＡポリヌクレオチドの場合、それが生成された細胞の成分の少なくとも一部から分離された場合、「単離された」と称される。よって、宿主細胞内部のベクターに含有されるＤＮＡポリヌクレオチドは、「単離された」と称され得る。
「有効量」という用語は、本明細書で使用される場合、処置される症状及び／または病態を有意にかつ良好に改変する（例えば、良好な臨床的反応を提供する）のに十分な薬学的組成物の量を意味する。薬学的組成物において使用するための活性成分の有効量は、処置されている特定の病態、病態の重症度、処置の継続期間、併用療法の特質、用いられる特定の活性成分（複数可）、利用される特定の薬学的に許容可能な賦形剤（複数可）及び／または担体（複数可）、及び同様の要因に応じて担当医の知識及び専門的技術を用いて変わる。
「外因性物質」は、標的化脂質粒子に関して本明細書で使用される場合、対応する野生型源細胞から作製された対応する野生型ウイルスまたはフソゲンに含まれず、コードもされない物質を指す。いくつかの実施形態では、外因性物質は、天然に存在せず、例えば、天然に存在するタンパク質に対して（例えば、挿入、付加、または置換によって）改変された配列を有するタンパク質または核酸である。いくつかの実施形態では、外因性物質は、源細胞に天然に存在しない。いくつかの実施形態では、外因性物質は、源細胞に天然に存在するが、ウイルスに対して外因性である。いくつかの実施形態では、外因性物質は、レシピエント細胞に天然に存在しない。いくつかの実施形態では、外因性物質は、レシピエント細胞に天然に存在するが、所望のレベルでまたは所望の時間で存在しない。いくつかの実施形態では、外因性物質は、ＲＮＡまたはタンパク質を含む。
本明細書で使用される場合、「プロモーター」は、遺伝子コード配列に機能可能に連結された場合、遺伝子の転写を誘導するシス作用性ＤＮＡ配列を指す。プロモーターは、転写因子結合部位を含み得る。いくつかの実施形態では、プロモーターは、遺伝子と遠位の１つ以上のエンハンサーと協働して作用する。
本明細書で使用される場合、組成物は、細胞を含む、２つ以上の生成物、物質、または化合物の任意の混合物を指す。それは、溶液、懸濁液、液体、粉末、ペースト、水性、非水性またはそれらの任意の組み合わせであり得る。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な」という用語は、化合物の生物学的活性または特性を抑止せず、かつ比較的非毒性である担体または希釈剤などの物質を指し、すなわち、物質は、望ましくない生物学的効果を引き起こすことも、それが含有される組成物の成分のいずれとも有害な様態で相互作用することもなく、個体に投与され得る。
本明細書で使用される場合、「薬学的組成物」という用語は、本発明の少なくとも１つの化合物と、他の化学的成分、例えば、担体、安定化剤、希釈剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、及び／または賦形剤との混合物を指す。薬学的組成物は、化合物の生物への投与を容易化する。静脈内、経口、エアロゾル、非経口、眼内、肺、及び局所投与を含むがこれらに限定されない化合物を投与する複数の技術が当該技術分野で存在する。
「疾患」または「障害」は、本明細書で使用される場合、処置が必要とされる及び／または所望である状態を指す。
本明細書で使用される場合、「処置する」、「処置すること」、または「処置」は、疾患または障害を改善すること、例えば、疾患または障害の進行を遅らせることもしくは停止させることもしくは減少させることまたはその臨床的症状の少なくとも１つを減少させることを指す。本開示の目的のため、疾患または障害を改善することは、１つ以上の症状の軽減、疾患の程度の減弱、疾患の拡大（例えば、転移、例えば、肺またはリンパ節への転移）を防止することまたは遅延させること、疾患の再発を防止することまたは遅延させること、疾患進行を遅延させることまたは遅らせること、疾患状態の改善、疾患または疾患の進行を阻害すること、疾患またはその進行の阻害することまたは遅らせること、その進展を停止させること、及び寛解（部分的または全体的にかかわらない）のうちの任意の１つ以上を含むがこれらに限定されない有益なまたは所望の臨床的結果を得ることを含み得る。
「個体」及び「対象」という用語は、動物、例えば哺乳動物を指すために本明細書で互換的に使用される。患者という用語には、ヒト及び獣医学的対象が含まれる。いくつかの実施形態では、ヒト、齧歯類、サル、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、哺乳類実験動物、哺乳類牧場動物、哺乳類スポーツ動物、及び哺乳類ペットを含むがこれらに限定されない哺乳動物を処置する方法が提供される。対象は、男性または女性であり得、幼児、若年、青年、成人、及び老年対象を含む任意の好適な年齢であり得る。いくつかの例では、「個体」または「対象」は、疾患または障害のための処置を必要とする個体または対象を指す。いくつかの実施形態では、処置を受ける対象は、対象が処置に関連する傷害を有する、または障害にかかるのに十分なリスクがあるものとして特定されているという事実を指定する患者であり得る。特定の実施形態では、対象は、ヒト、例えば、ヒト患者である。
ＩＩ．標的化脂質粒子（例えば、レンチウイルスベクター）
本明細書では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子であって、結合ドメインが、Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、（ｉ）及び（ｉｉ）の各々が、標的化脂質粒子の外側表面上に露出されている、標的化脂質粒子が提供される。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、一本鎖可変断片である。特定の実施形態では、提供される脂質粒子は、標的細胞に対する結合を容易化し、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分、ならびに脂質粒子及び標的細胞膜の２つの内腔の統合または融合の容易化に関与するＦ糖タンパク質を含有する標的化エンベロープタンパク質によって媒介される融合活性を示す。
本明細書では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子であって、シングルドメイン抗体が、Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、（ｉ）及び（ｉｉ）の各々が、標的化脂質粒子の外側表面上に露出されている、標的化脂質粒子が提供される。特定の実施形態では、提供される脂質粒子は、標的細胞に対する結合を容易化し、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分、ならびに脂質粒子及び標的細胞膜の２つの内腔の統合または融合の容易化に関与するＦ糖タンパク質を含有する標的化エンベロープタンパク質によって媒介される融合活性を示す。
任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子は、ウイルス粒子またはウイルス様粒子である。いくつかの態様では、そのような標的化脂質粒子は、ウイルス核酸、例えば、レトロウイルス核酸、例えばレンチウイルス核酸を含有する。特定の実施形態では、任意の提供される標的化脂質粒子、例えば、ウイルス粒子またはウイルス様粒子は、複製欠損性である。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、レンチウイルスベクターであり、レンチウイルスベクターは、ヘニパウイルスＦタンパク質及び標的化エンベロープタンパク質で偽型化されている。
例えば、本明細書では、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、偽型化レンチウイルスベクターであって、結合ドメインが、Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、（ｉ）及び（ｉｉ）の各々が、標的化脂質粒子の外側表面上に露出されている、偽型化レンチウイルスベクターが提供される。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、一本鎖可変断片である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される標的化脂質粒子（例えば、標的化レンチウイルスベクター）は、同様のエンベロープタンパク質を組み込んでいるがそれが一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）などのｓｄＡｂ可変ドメイン以外の代替的標的化部位に融合されている参照脂質粒子（例えば、参照レンチウイルスベクター）と比較して増加したまたは多い標的化エンベロープタンパク質発現を有する。いくつかの実施形態では、そのような標的化脂質粒子は、トランスファー、エンベロープ、及びｇａｇ－ｐｏｌプラスミドでのパッケージング細胞のコトランスフェクションの後に脂質粒子（例えば、レンチウイルス粒子）の偽型化によって生成される。
いくつかの実施形態では、発現は、参照脂質粒子（例えば、参照レンチウイルスベクター）、例えば、同様のエンベロープタンパク質を含有するがｓｃＦｖに融合された参照脂質粒子と比較して、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する。いくつかの例では、発現は、参照脂質粒子（例えば、参照レンチウイルスベクター）、例えば、同様のエンベロープタンパク質を含有するがｓｃＦｖに融合された参照脂質粒子と比較して、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて増加する。いくつかの実施形態では、発現は、フローサイトメトリー、例えば、ＦＡＣを使用してｉｎ ｖｉｔｒｏでアッセイされ得る。いくつかの実施形態では、発現は、標的化脂質粒子（例えば、標的化レンチウイルスベクター）の表面上の標的化エンベロープタンパク質の数または密度として示され得る。いくつかの実施形態では、発現は、標的化脂質粒子（例えば、標的化レンチウイルスベクター）の表面上の標的化エンベロープタンパク質の表面発現の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として示され得る。いくつかの実施形態では、発現は、標的化エンベロープタンパク質について表面陽性である集団における脂質粒子（例えば、レンチウイルスベクター）のパーセントとして示され得る。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子（例えば、標的化レンチウイルスベクター）の集団において、脂質粒子の５０％または約５０％超は、標的化エンベロープタンパク質について表面陽性である。例えば、提供される標的化脂質粒子（例えば、標的化レンチウイルスベクター）の集団において、集団における細胞の５５％または約５５％超、６０％または約６０％超、６５％または約６５％超、７０％または約７０％超、７５％または約７５％超が、標的化エンベロープタンパク質について表面陽性である。
いくつかの実施形態では、形質導入（例えば、形質導入細胞）などによる標的細胞への導入後の標的化脂質粒子の力価は、同様のエンベロープタンパク質を組み込んでいるが一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）などのｓｄＡｂ可変ドメイン以外の代替的標的化部位に融合されている参照脂質粒子（例えば、参照レンチウイルスベクター）の同じ標的細胞への力価と比較して増加する。典型的には、代替的標的化部位は、標的化脂質粒子の標的化エンベロープタンパク質のｓｄＡｂ可変ドメインと同じ標的分子を認識し、またはそれと結合する。いくつかの実施形態では、力価は、参照脂質粒子（例えば、参照レンチウイルスベクター）、例えば、同様のエンベロープタンパク質を含有するがｓｃＦｖに融合された参照脂質粒子の力価と比較して、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する。いくつかの例では、力価は、参照脂質粒子（例えば、参照レンチウイルスベクター）、例えば、同様のエンベロープタンパク質を含有するがｓｃＦｖに融合された参照脂質粒子の力価と比較して、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて増加する。いくつかの実施形態では、標的細胞（例えば、形質導入細胞）における標的化脂質粒子の力価は、１×１０６形質導入単位（ＴＵ）／ｍＬまたは約１ｘ１０６形質導入単位（ＴＵ）／ｍＬ超である。例えば、標的細胞（例えば、形質導入細胞）における標的化脂質粒子の力価は、２×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約２×１０６ＴＵ／ｍＬ超、３×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約３×１０６ＴＵ／ｍＬ超、４×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約４×１０６ＴＵ／ｍＬ超、５×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約５×１０６ＴＵ／ｍＬ超、６×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約６×１０６ＴＵ／ｍＬ超、７×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約７×１０６ＴＵ／ｍＬ超、８×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約８×１０６ＴＵ／ｍＬ超、９×１０６ＴＵ／ｍＬもしくは約９×１０６ＴＵ／ｍＬ超、または１×１０７ＴＵ／ｍＬもしくは約１×１０７ＴＵ／ｍＬ超である。
Ａ．標的化エンベロープタンパク質（例えば、ヘニパウイルスと結合ドメイン）
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子（例えば、レンチウイルスベクター）には、標的化脂質粒子（例えば、レンチウイルスベクター）の表面上に露出した標的化エンベロープタンパク質が含まれる。
いくつかの実施形態では、標的化エンベロープタンパク質は、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び標的細胞上の細胞表面分子に結合する結合ドメインを含有する。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。結合ドメインは、Ｇタンパク質に直接的にまたは間接的に連結され得る。特定の実施形態では、結合ドメインは、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端（Ｃ末端アミノ酸）に連結される。連結は、ペプチドリンカー、例えば、フレキシブルペプチドリンカーを介するものであり得る。
１．Ｇタンパク質
いくつかの実施形態では、標的化エンベロープタンパク質は、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインまたはその生物学的に活性な部分を含有する。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂは、標的細胞上の細胞表面分子に結合する。ｓｄＡｂ可変ドメインは、Ｇタンパク質に直接的にまたは間接的に連結され得る。特定の実施形態では、ｓｄＡｂ可変ドメインは、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端（Ｃ末端アミノ酸）に連結される。連結は、ペプチドリンカー、例えば、フレキシブルペプチドリンカーを介するものであり得る。
いくつかの実施形態では、結合ドメイン（例えば、ｓｄＡｂ）は、細胞の細胞表面抗原に結合する。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、１つのタイプの細胞に特徴的である。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、複数のタイプの細胞に特徴的である。
いくつかの実施形態では、結合ドメイン（例えば、ｓｄＡｂ）可変ドメインは、細胞表面分子または抗原に結合する。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＭ４ＳＦ５、ＣＤ８、ＣＤ４、または低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＡＳＧＲ１である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＡＳＧＲ２である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＴＭ４ＳＦ５である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＣＤ８である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＣＤ４である。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＬＤＬ－Ｒである。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、ヘニパウイルスＧタンパク質またはその生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、ヘニパウイルスＧタンパク質は、ヘンドラ（ＨｅＶ）ウイルスＧタンパク質、ニパ（ＮｉＶ）ウイルスＧタンパク質（ＮｉＶ－Ｇ）、セダー（ＣｅｄＰＶ）ウイルスＧタンパク質、ＭｏｊｉａｎｇウイルスＧタンパク質、コウモリパラミクソウイルスＧタンパク質またはその生物学的に活性な部分である。表３は、Ｇタンパク質の非限定的な例を提供する。
結合Ｇタンパク質は、Ｎ末端細胞質尾部（例えば、配列番号９のアミノ酸１～４９に対応する）、膜貫通ドメイン（例えば、配列番号９のアミノ酸５０～７０に対応する）、及び細胞外茎部（例えば、配列番号９のアミノ酸７１～１８７に対応する）を含有する細胞外ドメイン、及び球状頭部（配列番号９のアミノ酸１８８～６０２に対応する）を含むＩＩ型膜貫通糖タンパク質である。Ｎ末端細胞質ドメインは、脂質二重層の内側内腔内にあり、Ｃ末端部分は、脂質二重層の外側で露出した細胞外ドメインである。Ｃ末端領域における茎部の領域（例えば、ＮｉＶ－Ｇのアミノ酸１５９～１６７に対応する）は、Ｆタンパク質との相互作用及びＦタンパク質融合の誘発に関与することが示されている（Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．２０１５ Ｊ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ８９：１８３８）。野生型Ｇタンパク質において、球状頭部は、ヘニパウイルス侵入受容体エフリンＢ２及びエフリンＢ３に対する受容体結合を媒介するが、膜融合にとって不必要である（Ｂｒａｎｄｅｌ－Ｔｒｅｔｈｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２０１９．９３（１３）ｅ００５７７－１９）。本明細書における特定の実施形態では、Ｇタンパク質の指向性は、ｓｄＡｂ可変ドメインに対するＧタンパク質またはその生物学的に活性な断片（例えば、細胞質切断）の連結によって改変される。結合パートナーに対するＧタンパク質の結合は、適合性Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分によって媒介される融合を誘発し得る。本明細書に開示されるＧタンパク質配列は主に、翻訳の開始に必要とされるＮ末端メチオニンを含む発現した配列として開示される。そのようなＮ末端メチオニンは、一般的に、翻訳と共にまたは翻訳後に切断されるので、本明細書に開示されるすべてのＧタンパク質配列についての成熟タンパク質配列はまた、Ｎ末端メチオニンを欠くものとして企図される。
Ｇ糖タンパク質は、ヘニパウイルス種間で高度に保存されている。例えば、ＮｉＶ及びＨｅＶウイルスのＧタンパク質は、７９％のアミノ酸同一性を共有する。研究は、異型融合活性化によって実証されるように、Ｇタンパク質の中で異なる種のＦタンパク質との高い適合度を示した（Ｂｒａｎｄｅｌ－Ｔｒｅｔｈｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２０１９）。以下にさらに記載されるように、再標的化脂質粒子は、異なる種からの異種のＧ及びＦタンパク質を含有し得る。
（表３）ヘニパウイルスタンパク質Ｇ配列クラスター
列１：Ｇｅｎｂａｎｋ ＩＤには、クラスターの重心配列であるウイルスのゲノム配列全体のＧｅｎｂａｎｋ ＩＤが含まれる。
列２：ＣＤＳのヌクレオチドは、ゲノム全体における遺伝子のＣＤＳに対応するヌクレオチドを提供する。
列３：完全遺伝子名であって、Ｇｅｎｂａｎｋ ＩＤ、ウイルス種、株、及びタンパク質名を含む遺伝子の完全な名称を提供する。
列４：配列であって、遺伝子のアミノ酸配列を提供する。
列５：配列数／クラスターであって、この重心配列とクラスター化する配列の数を提供する。
列６：記載される配列についての配列番号を提供する。
Figure 2023521663000004
Figure 2023521663000005
Figure 2023521663000006
Figure 2023521663000007
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、配列番号９、１８、２８、２９、３０、３１、４４、５２、または５４～５６のいずれかに示される配列を有し、または配列番号９、１８、２８、２９、３０、３１、４４、５２、もしくは５４～５６のいずれか１つと少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％同一である配列を有するその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。特定の実施形態では、Ｇタンパク質または機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、ヘニパウイルスＦタンパク質、例えば、セクションＩ．Ｂに示されるＦタンパク質（例えば、ＮｉＶ－ＦまたはＨｅＶ－Ｆ）と併せて融合活性を保持するタンパク質である。融合活性には、２つの膜内腔、例えば、その脂質二重層に埋め込まれたヘニパウイルスＦ及びＧタンパク質を有する標的化脂質粒子の内腔、ならびに標的細胞、例えば、標的化エンベロープタンパク質によって認識されるまたは結合される表面受容体または分子を含有する細胞の細胞質の融合を促進または容易化するためのヘニパウイルスＦタンパク質と併せたＧタンパク質の活性が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質及びＧタンパク質は、同じヘニパウイルス種からのものである（例えば、ＮｉＶ－Ｇ及びＮｉＶ－Ｆ）。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質及びＧタンパク質は、異なるヘニパウイルス種からのものである（例えば、ＮｉＶ－Ｇ及びＨｅＶ－Ｆ）。
特定の実施形態では、Ｇタンパク質は、配列番号９、配列番号２８、配列番号１８、配列番号３０、配列番号３１、配列番号４４、配列番号５２もしくは配列番号５４～５６に示されるアミノ酸の配列を有し、または融合活性を保持するその機能的に活性なバリアントもしくはその生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、機能的に活性なバリアントは、配列番号９、配列番号２８、配列番号１８、配列番号３０、配列番号３１、配列番号４４、配列番号５２または配列番号５４～５６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ヘニパウイルスＦタンパク質（例えば、ＮｉＶ－ＦまたはＨｅＶ－Ｆ）と併せて融合活性を保持する。いくつかの実施形態では、生物学的に活性な部分は、配列番号９、配列番号２８、配列番号１８、配列番号３０配列番号３１、配列番号４４、配列番号５２または配列番号５４～５６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有し、ヘニパウイルスＦタンパク質（例えば、ＮｉＶ－ＦまたはＨｅＶ－Ｆ）と併せて融合活性を保持する。
融合活性を保持することに対する言及には、配列番号９、配列番号２８、配列番号１８、配列番号３０、配列番号３１、配列番号４４、配列番号５２または配列番号５４～５６に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質の結合のレベルまたは程度の１０％もしくは約１０％から１５０％もしくは約１５０％の間またはそれを超え、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約２０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約２５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約３０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約３５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約４０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約４５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約５０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約５５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約６０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約６５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約７０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約７５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９０％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９５％、例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１００％、または例えば、対応する野生型Ｇタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１２０％である（ニパウイルスＦタンパク質と併せた）活性が含まれる。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、１つ以上のアミノ酸変異、例えば、１つ以上のアミノ酸挿入、欠失、置換または切断を含有する機能的に活性なバリアントまたは生物学的に活性な部分である変異体Ｇタンパク質である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、参照Ｇタンパク質配列と比較したアミノ酸のアミノ酸挿入、欠失、置換または切断に関する。いくつかの実施形態では、参照Ｇタンパク質配列は、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分の野生型配列である。いくつかの実施形態では、その機能的に活性なバリアントまたは生物学的に活性な部分は、野生型ヘンドラ（ＨｅＶ）ウイルスＧタンパク質、野生型ニパ（ＮｉＶ）ウイルスＧタンパク質（ＮｉＶ－Ｇ）、野生型セダー（ＣｅｄＰＶ）ウイルスＧタンパク質、野生型ＭｏｊｉａｎｇウイルスＧタンパク質、野生型コウモリパラミクソウイルスＧタンパク質またはその生物学的に活性な部分の変異体である。いくつかの実施形態では、野生型Ｇタンパク質は、配列番号９、１８、２８、２９、３０、３１、配列番号４４、配列番号５２または配列番号５４～５６のいずれか１つに示される配列を有する。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、野生型ヘンドラ（ＨｅＶ）ウイルスＧタンパク質、野生型ニパ（ＮｉＶ）ウイルスＧタンパク質（ＮｉＶ－Ｇ）、野生型セダー（ＣｅｄＰＶ）ウイルスＧタンパク質、野生型ＭｏｊｉａｎｇウイルスＧタンパク質、野生型コウモリパラミクソウイルスＧタンパク質のＮ末端及び／またはＣ末端で切断された断片である生物学的に活性な部分である変異体Ｇタンパク質である。特定の実施形態では、切断は、細胞質ドメインのすべてまたは一部のＮ末端切断である。いくつかの実施形態では、変異体Ｇタンパク質は、切断型でありかつ配列番号９、１８、２８、２９、３０，３１、配列番号４４、配列番号５２または配列番号５４～５６のいずれか１つに示される野生型Ｇタンパク質などの野生型Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４９個の連続アミノ酸残基を欠く生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質は、切断型であり、野生型Ｇタンパク質のＮ末端における最大で４９個の連続アミノ酸、例えば、最大で４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、３０、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１個の連続アミノ酸を欠く。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＧタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示される配列を有するＮｉＶ－Ｇタンパク質であるか、または配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と少なくとも８０％または約８０％、少なくとも８１％または約８１％、少なくとも８２％または約８２％、少なくとも８３％または約８３％、少なくとも８４％または約８４％、少なくとも８５％または約８５％、少なくとも８６％または約８６％、少なくとも８７％または約８７％、少なくとも８８％または約８８％、少なくとも８９％または約８９％、少なくとも９０％または約９０％、少なくとも９１％または約９１％、少なくとも９２％または約９２％、少なくとも９３％または約９３％、少なくとも９４％または約９４％、少なくとも９５％または約９５％、９６％または約９６％、少なくとも９７％または約９７％、少なくとも９８％または約９８％、少なくとも９９％または約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するその機能的バリアントまたは生物学的に活性な部分である。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇの生物学的に活性な部分である変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である。いくつかの実施形態では、生物学的に活性な部分は、Ｎ末端で切断された断片である。いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、切断型であり、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で９個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１０個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１１個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１２個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１３個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１４個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１９個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２０個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２１個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２２個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２３個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２４個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２９個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３０個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３１個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３２個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３３個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３４個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３９個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４１個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４２個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４３個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４４個の連続アミノ酸残基、または野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４５個の連続アミノ酸残基（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）を欠く。
いくつかの実施形態では、ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、細胞質ドメインを含有しない生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、細胞質ドメインを有しないＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３２によってコードされる。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１０～１５、３５～４０、４５～５０、２２、５３または配列番号３２のいずれかに示される配列を含み、または配列番号１０～１５、３５～４０、４５～５０、２２、５３または配列番号３２と少なくとも８０％または８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するその機能的バリアントである。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの５アミノ酸切断、例えば、配列番号１０に示されるものまたは配列番号１０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号３５に示されるものまたは配列番号３５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号４５に示されるものまたは配列番号４５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントを有する。いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１０アミノ酸切断、例えば、配列番号１１に示されるものまたは配列番号１１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号３６に示されるものまたは配列番号３６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号４６に示されるものまたは配列番号４６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントを有する。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１５アミノ酸切断、例えば、配列番号１２に示されるものまたは配列番号１２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号３７に示されるものまたは配列番号３７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号４７に示されるものまたは配列番号４７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントを有する。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断、例えば、配列番号１３に示されるものまたは配列番号１３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号３８に示されるものまたは配列番号３８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号４８に示されるものまたは配列番号４８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントを有する。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２５アミノ酸切断、例えば、配列番号１４に示されるものまたは配列番号１４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号３９に示されるものまたは配列番号３９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号４９に示されるものまたは配列番号４９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントを有する。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３０アミノ酸切断、例えば、配列番号１５に示されるものまたは配列番号１５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号４０に示されるものまたは配列番号４０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号５０に示されるものまたは配列番号５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントを有する。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断、例えば、配列番号２２に示されるものまたは配列番号２２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアント、または例えば、配列番号５３に示されるものまたは配列番号５３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントを有する。
いくつかの実施形態では、変異体ＨｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３２または配列番号３２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントに示されるように、野生型ＨｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端細胞質ドメインを欠く。
いくつかの実施形態では、変異体Ｇタンパク質は、配列番号１８または５２に示される配列を有する変異体ＨｅＶ－Ｇタンパク質であるか、または配列番号１８または５２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するその機能的バリアントまたは生物学的に活性な部分である。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、野生型ＨｅＶ－Ｇの生物学的に活性な部分である変異体ＨｅＶ－Ｇタンパク質である。いくつかの実施形態では、生物学的に活性な部分は、Ｎ末端で切断された断片である。いくつかの実施形態では、変異体ＨｅＶ－Ｇタンパク質は、切断型であり、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で５個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で６個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で７個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で８個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で９個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１０個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１１個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１２個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１３個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１４個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１５個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１６個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１７個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１８個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１９個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２０個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２１個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２２個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２３個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２４個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２５個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２６個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２７個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２８個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２９個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３０個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３１個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３２個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３３個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３４個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３５個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３６個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３７個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３８個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３９個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４１個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４２個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４３個の連続アミノ酸残基、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４４個の連続アミノ酸残基、または野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４５個の連続アミノ酸残基を欠く。いくつかの実施形態では、ＨｅＶ－Ｇタンパク質は、細胞質ドメインを含有しない生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、変異体ＨｅＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３３または配列番号３３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するその機能的バリアントに示されるように、野生型ＨｅＶ－Ｇタンパク質（配列番号１８または５２）のＮ末端細胞質ドメインを欠く。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に結合する。いくつかの態様では、Ｇタンパク質は、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０もしくは配列番号３１のいずれか１つに示されるアミノ酸の配列を有し、またはエフリンＢ２もしくはエフリンＢ３に結合することができるその機能的に活性なバリアントもしくはその生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、機能的に活性なバリアントまたは生物学的に活性な部分は、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分を有し、エフリンＢ２またはＢ３に対する結合を保持する。エフリンＢ２またはＢ３に対する結合を保持することに対する言及には、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約５％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の１０％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の１５％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の２０％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、または機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の２５％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の３０％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の３５％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の４０％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の４５％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の５０％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の５５％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の６０％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の６５％、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の７０％、例えば、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約７５％、例えば、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８０％、例えば、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８５％、例えば、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型Ｇタンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９０％、または例えば、配列番号９、配列番号１８または配列番号２８、配列番号２９、配列番号４４、配列番号３０または配列番号３１に示されるような対応する野生型タンパク質、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分の結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９５％である結合が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、ＮｉＶ－Ｇまたはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分であり、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に結合する。いくつかの態様では、ＮｉＶ－Ｇは、配列番号９、配列番号２８もしくは配列番号４４に示されるアミノ酸の配列を有し、またはエフリンＢ２もしくはエフリンＢ３に結合することができるその機能的に活性なバリアントもしくはその生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、機能的に活性なバリアントまたは生物学的に活性な部分は、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有し、エフリンＢ２またはＢ３に対する結合を保持する。例示的な生物学的に活性な部分には、例えば、配列番号１０～１５、３５～４０、４５～５０及び３２のいずれか１つに示される、細胞質ドメインのすべてまたは一部、例えば、１つ以上、例えば、１～４９個の連続Ｎ末端アミノ酸残基を欠くＮ末端切断バリアントが含まれる。エフリンＢ２またはＢ３に対する結合を保持することに対する言及には、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約５％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の１０％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の１５％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の２０％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の２５％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の３０％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の３５％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の４０％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の４５％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の５０％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の５５％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の６０％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の６５％、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の７０％、例えば、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約７５％、例えば、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮＩＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８０％、例えば、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８５％、例えば、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９０％、または例えば、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示されるような対応する野生型ＮｉＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９５％である結合が含まれる。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、ＨｅＶ－Ｇまたはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分であり、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に結合する。いくつかの態様では、ＨｅＶ－Ｇは、配列番号１８もしくは５２に示されるアミノ酸の配列を有し、またはエフリンＢ２もしくはエフリンＢ３に結合することができるその機能的に活性なバリアントもしくはその生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、機能的に活性なバリアントまたは生物学的に活性な部分は、配列番号１８または５２と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有し、エフリンＢ２またはＢ３に対する結合を保持する。例示的な生物学的に活性な部分には、例えば、配列番号３３のいずれか１つに示される、細胞質ドメインのすべてまたは一部、例えば、１つ以上、例えば、１～４９個の連続Ｎ末端アミノ酸残基を欠くＮ末端切断バリアントが含まれる。エフリンＢ２またはＢ３に対する結合を保持することに対する言及には、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約５％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の１０％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の１５％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の２０％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の２５％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の３０％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の３５％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の４０％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の４５％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の５０％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の５５％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の６０％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の６５％、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の７０％、例えば、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約７５％、例えば、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８０％、例えば、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＮＩＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８５％、例えば、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９０％、または例えば、配列番号１８または５２に示されるような対応する野生型ＨｅＶ－Ｇの結合のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９５％である結合が含まれる。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質またはその生物学的は、野生型Ｇタンパク質のネイティブ結合パートナーについて減少した結合を示す変異体Ｇタンパク質である。いくつかの実施形態では、変異体Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型Ｎｉｖ－Ｇの変異体であり、ネイティブ結合パートナーエフリンＢ２またはエフリンＢ３の一方または両方に対する減少した結合を示す。いくつかの実施形態では、変異体Ｇタンパク質または生物学的に活性な部分、例えば、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、ネイティブ結合パートナーに対する減少した結合を示す。いくつかの実施形態では、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合は、５％もしくは約５％、１０％もしくは約１０％、１５％もしくは約１５％、２０％もしくは約２０％、２５％もしくは約２５％、３０％もしくは約３０％、４０％もしくは約４０％、５０％もしくは約５０％、６０％もしくは約６０％、７０％もしくは約７０％、８０％もしくは約８０％、９０％もしくは約９０％、または１００％もしくは約１００％を超えて減少する。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、形質導入効率を改善し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、エフリンＢ２またはエフリンＢ３ではない他の所望の細胞タイプの特異的標的化を可能とする。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、少なくとも１つの天然受容体との結合を少なくとも部分的に不可能にし、例えば、エフリンＢ２またはエフリンＢ３のうちの少なくとも１つに対する結合を減少させた。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、天然受容体認識と干渉する。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、エフリンＢ２及びエフリンＢ３の一方または両方との相互作用に関与する残基における１つ以上のアミノ酸置換を含有する。いくつかの実施形態では、アミノ酸置換は、配列番号２８に示される付番を参照して変異Ｅ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａに対応する。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、配列番号２８に示される付番を参照してＥ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含有する変異体Ｇタンパク質である。いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質は、配列番号２８を参照してＥ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含有する変異体Ｇタンパク質であり、Ｎ末端切断を含有するその生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、切断型であり、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの９個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１０個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１１個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１２個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１３個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１４個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で１５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの１９個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２０個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２１個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２２個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２３個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２４個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で２５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの２９個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３０個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３１個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの３２個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの３３個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの３４個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの３５個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３６個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３７個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３８個の連続アミノ酸残基、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で３９個の連続アミノ酸残基、または野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号２８）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基を欠く。
いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１６もしくは５１に示されるアミノ酸配列、または配列番号１６もしくは５１と少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。特定の実施形態では、Ｇタンパク質は、配列番号１６または５１に示されるアミノ酸の配列を有する。
いくつかの実施形態では、標的化エンベロープタンパク質は、Ｇタンパク質または機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分及びｓｄＡｂ可変ドメインを含有し、標的化エンベロープタンパク質は、野生型Ｇタンパク質のネイティブ結合パートナーとは異なる別の分子について増加した結合を示す。いくつかの実施形態では、分子は、所望の標的細胞の表面上に発現したタンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、他の分子に対する増加した結合は、２５％もしくは約２５％、３０％もしくは約３０％、４０％もしくは約４０％、５０％もしくは約５０％、６０％もしくは約６０％、７０％もしくは約７０％、８０％もしくは約８０％、９０％もしくは約９０％、または１００％もしくは約１００％を超えて増加する。特定の実施形態では、結合は、野生型Ｇタンパク質の結合と比較して再標的化された結合を付与し、その場合、新たなまたは異なる結合活性が付与される。
２．結合ドメイン
いくつかの実施形態では、結合ドメインは、標的細胞上の細胞表面分子に結合する任意の物質であり得る。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、抗体または抗体部分または断片であり得る。
結合ドメインは、異なる結合強度を有するように調節され得る。例えば、様々な結合強度を有するｓｃＦｖ及び抗体が、多いまたは少ない量の標的抗原を示す細胞に対するキメラ結合タンパク質の融合活性を改変するために使用され得る。例えば、異なる親和性を有するＤＡＲＰｉｎが、多いまたは少ない量の標的抗原を示す細胞に対する融合活性を改変するために使用され得る。結合ドメインはまた、標的リガンド上の異なる領域を標的とするように調節され得、これは、標的を提示する細胞との融合速度に影響を及ぼす。
結合ドメインは、ヒト化抗体分子、インタクトＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＥまたはＩｇＭ抗体；二重または多重特異性抗体（例えば、Ｚｙｂｏｄｉｅｓ（登録商標）など）；抗体断片、例えば、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｄ’断片、Ｆｄ断片、及び単離されたＣＤＲまたはそのセット；一本鎖Ｆｖｓ；ポリペプチド－Ｆｃ融合体；シングルドメイン抗体（例えば、サメシングルドメイン抗体、例えば、ＩｇＮＡＲまたはその断片）；ラクダ様抗体；マスク化抗体（例えば、Ｐｒｏｂｏｄｉｅｓ（登録商標））；小モジュール免疫薬剤（「ＳＭＩＰｓＴＭ」）；一本鎖またはタンデムダイアボディ（ＴａｎｄＡｂ（登録商標））；ＶＨＨ；Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ（登録商標）；Ｎａｎｏｂｏｄｉｅｓ（登録商標）；ミニボディ；ＢｉＴＥ（登録商標）；アンキリンリピートタンパク質またはＤＡＲＰＩＮ（登録商標）；Ａｖｉｍｅｒ（登録商標）；ＤＡＲＴ；ＴＣＲ様抗体；Ａｄｎｅｃｔｉｎ（登録商標）；Ａｆｆｉｌｉｎ（登録商標）；Ｔｒａｎｓ－ｂｏｄｉｅｓ（登録商標）；Ａｆｆｉｂｏｄｉｅｓ（登録商標）；ＴｒｉｍｅｒＸ（登録商標）；ＭｉｃｒｏＰｒｏｔｅｉｎｓ；Ｆｙｎｏｍｅｒｓ（登録商標）、Ｃｅｎｔｙｒｉｎｓ（登録商標）；及びＫＡＬＢＩＴＯＲ（登録商標）を含み得る。標的化部位にはまた、抗体またはその抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ抗体断片、ジスルフィド連結したＦｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、線状抗体、シングルドメイン抗体、例えば、ｓｄＡｂ（ＶＬまたはＶＨのいずれか）、ナノボディ、またはラクダ科動物ＶＨＨドメイン）、抗原結合フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）骨格、例えば、フィブロネクチンポリペプチドミニボディ、リガンド、サイトカイン、ケモカイン、またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）が含まれ得る。
いくつかの実施形態では、結合ドメインは、一本鎖分子である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、結合ドメインは、一本鎖可変断片である。特定の実施形態では、結合ドメインは、ヒトまたはヒト化された抗体可変配列（複数可）を含有する。
いくつかの実施形態では、結合ドメインは、シングルドメイン抗体である。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、ヒトまたはヒト化であり得る。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体またはその部分は、天然に存在する。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体またはその部分は、合成である。
いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、相補性決定領域がシングルドメインポリペプチドの一部である抗体である。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、重鎖のみの抗体可変ドメインである。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、軽鎖を含まない。
いくつかの実施形態では、軽鎖を欠く重鎖抗体は、ＶＨＨと称される。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、１２～１５ｋＤａの分子量を有する。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体には、ラクダ科動物抗体またはサメ抗体が含まれる。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体分子は、ラクダ種、例えば、ラクダ、リャマ、ヒトコブラクダ、アルパカ、ビクーナ及びグアナコにおいて樹立された抗体に由来する。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、免疫グロブリン新抗原受容体（ＩｇＮＡＲ）と称され、軟骨魚類に由来する。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、ヒトまたはマウスＩｇＧの二量体可変ドメインを単量体に分割し、重要な残基をラクダ化することによって生成される。
いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、ファージディスプレイライブラリから生成され得る。いくつかの実施形態では、ファージディスプレイライブラリは、Ａｒｂａｂｉ ｅｔ ａｌ．，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，４１４，５２１－５２６（１９９７）、Ｌａｕｗｅｒｅｙｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１７，３５１２－３５２０（１９９８）、Ｄｅｃａｎｎｉｅｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，７，３６１－３７０（１９９９）に記載されているように、様々な抗原で免疫されたラクダ科動物ＶＨＨレパートリーから生成される。いくつかの実施形態では、ファージディスプレイライブラリは、非免疫ラクダ科動物の抗体断片を含めて生成される。いくつかの実施形態では、ヒトシングルドメイン抗体のシングルドメイン抗体ライブラリは、１つ以上の骨格に多様性を導入することによって合成的に生成される。
いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体のＣ末端は、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されている。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体のＮ末端は、脂質二重層の外部表面上に露出されている。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体のＮ末端は、標的細胞の細胞表面分子に結合する。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する細胞表面分子に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である。
いくつかの実施形態では、標的細胞の細胞表面分子は、抗原またはその一部である。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体またはその一部は、特定の抗原に選択的に結合することができる単一の単量体ドメイン抗原結合／認識ドメインを有する抗体である。いくつかの実施形態では、シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する抗原と結合する。
例示的な細胞には、多形核細胞（ＰＭＮ、ＰＭＬ、ＰＭＮＬ、または顆粒球としても知られている）、幹細胞、胚性幹細胞、神経幹細胞、間葉幹細胞（ＭＳＣ）、造血幹細胞（ＨＳＣ）、ヒト筋原幹細胞、筋肉由来幹細胞（ＭｕＳｔｅｍ）、胚性幹細胞（ＥＳまたはＥＳＣ）、縁上皮幹細胞、心筋原幹細胞、心筋細胞、前駆細胞、免疫エフェクター細胞、リンパ球、マクロファージ、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞、Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、同種異系細胞、常在性心臓細胞、誘導多能性幹細胞（ｉＰＳ）、アジポーズ由来または表現型修飾幹または前駆細胞、ＣＤ１３３＋細胞、アルデヒドデヒドロゲナーゼ陽性細胞（ＡＬＤＨ＋）、臍帯血液（ＵＣＢ）細胞、末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）、ニューロン、神経前駆細胞、膵臓ベータ細胞、グリア細胞、または肝細胞が含まれる。
いくつかの実施形態では、標的細胞は、標的組織の細胞である。標的組織には、肝臓、肺、心臓、脾臓、膵臓、消化管、腎臓、精巣、卵巣、脳、生殖器官、中枢神経系、末梢神経系、骨格筋、内皮、内耳、または眼が含まれ得る。
いくつかの実施形態では、標的細胞は、筋肉細胞（例えば、骨格筋細胞）、腎臓細胞、肝臓細胞（例えば、肝細胞）、または心臓細胞（例えば、心筋細胞）である。いくつかの実施形態では、標的細胞は、心臓細胞、例えば、心筋細胞（例えば、静止心筋細胞）、肝芽細胞（例えば、胆管肝芽細胞）、上皮細胞、Ｔ細胞（例えば、ナイーブＴ細胞）、マクロファージ（例えば、腫瘍浸潤マクロファージ）、または線維芽細胞（例えば、心臓線維芽細胞）である。
いくつかの実施形態では、標的細胞は、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物または腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞は、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞である。
いくつかの実施形態では、標的細胞は、抗原提示細胞、ＭＨＣクラスＩＩ＋細胞、プロフェッショナル抗原提示細胞、非定型抗原提示細胞、マクロファージ、樹状細胞、骨髄樹状細胞、形質細胞様樹状細胞、ＣＤ１１ｃ＋細胞、ＣＤ１１ｂ＋細胞、脾細胞、Ｂ細胞、肝細胞、内皮細胞、または非がん細胞）である。
いくつかの実施形態では、細胞表面分子は、ＣＤ８、ＣＤ４、アシアログリコプロテイン受容体２（ＡＳＧＲ２）、膜貫通４ Ｌ６ファミリーメンバー５（ＴＭ４ＳＦ５）、低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）またはアシアログリコプロテイン１（ＡＳＧＲ１）のいずれか１つである。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、ｓｄＡｂ可変ドメインに直接的に連結される。いくつかの実施形態では、標的化エンベロープタンパク質は、以下の構造：（Ｎ’－シングルドメイン抗体－Ｃ’）－（Ｃ’－Ｇタンパク質－Ｎ’）を有する融合タンパク質である。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、リンカーを介してｓｄＡｂ可変ドメインに間接的に連結される。いくつかの実施形態では、リンカーは、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、リンカーは、化学的リンカーである。
いくつかの実施形態では、リンカーは、ペプチドリンカーであり、標的化エンベロープタンパク質は、ペプチドリンカーを介してｓｄＡｂ可変ドメインに連結されたＧタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分を含有する融合タンパク質である。いくつかの実施形態では、標的化エンベロープタンパク質は、以下の構造：（Ｎ’－シングルドメイン抗体－Ｃ’）－リンカー－（Ｃ’－Ｇタンパク質－Ｎ’）を有する融合タンパク質である。
いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、長さが最大で６５アミノ酸である。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、約２～６５アミノ酸、２～６０アミノ酸、２～５６アミノ酸、２～５２アミノ酸、２～４８アミノ酸、２～４４アミノ酸、２～４０アミノ酸、２～３６アミノ酸、２～３２アミノ酸、２～２８アミノ酸、２～２４アミノ酸、２～２０アミノ酸、２～１８アミノ酸、２～１４アミノ酸、２～１２アミノ酸、２～１０アミノ酸、２～８アミノ酸、２～６アミノ酸、６～６５アミノ酸、６～６０アミノ酸、６～５６アミノ酸、６～５２アミノ酸、６～４８アミノ酸、６～４４アミノ酸、６～４０アミノ酸、６～３６アミノ酸、６～３２アミノ酸、６～２８アミノ酸、６～２４アミノ酸、６～２０アミノ酸、６～１８アミノ酸、６～１４アミノ酸、６～１２アミノ酸、６～１０アミノ酸、６～８アミノ酸、８～６５アミノ酸、８～６０アミノ酸、８～５６アミノ酸、８～５２アミノ酸、８～４８アミノ酸、８～４４アミノ酸、８～４０アミノ酸、８～３６アミノ酸、８～３２アミノ酸、８～２８アミノ酸、８～２４アミノ酸、８～２０アミノ酸、８～１８アミノ酸、８～１４アミノ酸、８～１２アミノ酸、８～１０アミノ酸、１０～６５アミノ酸、１０～６０アミノ酸、１０～５６アミノ酸、１０～５２アミノ酸、１０～４８アミノ酸、１０～４４アミノ酸、１０～４０アミノ酸、１０～３６アミノ酸、１０～３２アミノ酸、１０～２８アミノ酸、１０～２４アミノ酸、１０～２０アミノ酸、１０～１８アミノ酸、１０～１４アミノ酸、１０～１２アミノ酸、１２～６５アミノ酸、１２～６０アミノ酸、１２～５６アミノ酸、１２～５２アミノ酸、１２～４８アミノ酸、１２～４４アミノ酸、１２～４０アミノ酸、１２～３６アミノ酸、１２～３２アミノ酸、１２～２８アミノ酸、１２～２４アミノ酸、１２～２０アミノ酸、１２～１８アミノ酸、１２～１４アミノ酸、１４～６５アミノ酸、１４～６０アミノ酸、１４～５６アミノ酸、１４～５２アミノ酸、１４～４８アミノ酸、１４～４４アミノ酸、１４～４０アミノ酸、１４～３６アミノ酸、１４～３２アミノ酸、１４～２８アミノ酸、１４～２４アミノ酸、１４～２０アミノ酸、１４～１８アミノ酸、１８～６５アミノ酸、１８～６０アミノ酸、１８～５６アミノ酸、１８～５２アミノ酸、１８～４８アミノ酸、１８～４４アミノ酸、１８～４０アミノ酸、１８～３６アミノ酸、１８～３２アミノ酸、１８～２８アミノ酸、１８～２４アミノ酸、１８～２０アミノ酸、２０～６５アミノ酸、２０～６０アミノ酸、２０～５６アミノ酸、２０～５２アミノ酸、２０～４８アミノ酸、２０～４４アミノ酸、２０～４０アミノ酸、２０～３６アミノ酸、２０～３２アミノ酸、２０～２８アミノ酸、２０～２６アミノ酸、２０～２４アミノ酸、２４～６５アミノ酸、２４～６０アミノ酸、２４～５６アミノ酸、２４～５２アミノ酸、２４～４８アミノ酸、２４～４４アミノ酸、２４～４０アミノ酸、２４～３６アミノ酸、２４～３２アミノ酸、２４～３０アミノ酸、２４～２８アミノ酸、２８～６５アミノ酸、２８～６０アミノ酸、２８～５６アミノ酸、２８～５２アミノ酸、２８～４８アミノ酸、２８～４４アミノ酸、２８～４０アミノ酸、２８～３６アミノ酸、２８～３４アミノ酸、２８～３２アミノ酸、３２～６５アミノ酸、３２～６０アミノ酸、３２～５６アミノ酸、３２～５２アミノ酸、３２～４８アミノ酸、３２～４４アミノ酸、３２～４０アミノ酸、３２～３８アミノ酸、３２～３６アミノ酸、３６～６５アミノ酸、３６～６０アミノ酸、３６～５６アミノ酸、３６～５２アミノ酸、３６～４８アミノ酸、３６～４４アミノ酸、３６～４０アミノ酸、４０～６５アミノ酸、４０～６０アミノ酸、４０～５６アミノ酸、４０～５２アミノ酸、４０～４８アミノ酸、４０～４４アミノ酸、４４～６５アミノ酸、４４～６０アミノ酸、４４～５６アミノ酸、４４～５２アミノ酸、４４～４８アミノ酸、４８～６５アミノ酸、４８～６０アミノ酸、４８～５６アミノ酸、４８～５２アミノ酸、５０～６５アミノ酸、５０～６０アミノ酸、５０～５６アミノ酸、５０～５２アミノ酸、５４～６５アミノ酸、５４～６０アミノ酸、５４～５６アミノ酸、５８～６５アミノ酸、５８～６０アミノ酸、または６０～６５アミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、長さが３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、または６５アミノ酸であるポリペプチドである。
特定の実施形態では、リンカーは、フレキシブルペプチドリンカーである。いくつかのそのような実施形態では、リンカーは、１～２０アミノ酸、例えば、主にグリシンから構成される１～２０アミノ酸である。いくつかの実施形態では、リンカーは、１～２０アミノ酸、例えば、主にグリシン及びセリンから構成される１～２０アミノ酸である。いくつかの実施形態では、リンカーは、ＧＳ－リンカーと称される、アミノ酸グリシン及びセリンを含有するフレキシブルペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーには、配列ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧＳ（配列番号４３）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号４１）またはそれらの組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態では、ポリペプチドリンカーは、配列（ＧＧＳ）ｎ（ｎは１～１０である）を有する。いくつかの実施形態では、ポリペプチドリンカーは、配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ、（配列番号４２）（ｎは１～１０である）を有する。いくつかの実施形態では、ポリペプチドリンカーは、配列（ＧＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２７）（ｎは１～６である）を有する。
３．ポリヌクレオチド
本明細書では、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドが提供される。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインまたはその生物学的に活性な部分をコードする核酸配列をさらに含む。ポリヌクレオチドには、上述した標的化エンベロープタンパク質のいずれかをコードするヌクレオチドの配列が含まれ得る。ポリヌクレオチドは、合成核酸であり得る。提供されるポリヌクレオチドのいずれかを含有する発現ベクターも提供される。
任意の実施形態のうちの一部では、天然または合成核酸の発現は、典型的には、対象となる遺伝子をコードする核酸をプロモーターに機能可能に連結し、コンストラクトを発現ベクターに組み込むことによって達成される。いくつかの実施形態では、ベクターは、真核生物における複製及び組み込みに好適であり得る。いくつかの実施形態では、クローニングベクターは、所望の核酸配列の発現に有用な転写及び翻訳ターミネーター、開始配列、及びプロモーターを含有する。任意の実施形態のうちの一部では、プラスミドは、細胞における発現に好適なプロモーターを含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、Ｇタンパク質及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含有する標的化エンベロープタンパク質の発現をコントロールするために機能可能に連結された少なくとも１つのプロモーターを含有する。標的化エンベロープタンパク質の発現のため、各プロモーターにおける少なくとも１つのモジュールが、ＲＮＡ合成のための開始部位を配置するように機能する。この最も知られている例は、ＴＡＴＡボックスであるが、ＴＡＴＡボックスを欠くいくつかのプロモーター、例えば、哺乳動物末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ遺伝子のためのプロモーター及びＳＶ４０遺伝子のためのプロモーターでは、開始部位自体に重なっている別の要素が、開始の箇所を固定させるのに役立つ。
いくつかの実施形態では、追加のプロモーター要素、例えば、エンハンサーが、転写開始の頻度を制御する。いくつかの実施形態では、追加のプロモーター要素は、開始部位の３０～１１０ｂｐ上流の領域に位置するが、いくつかのプロモーターは、開始部位の下流にも同様に機能的要素を含有することが最近示された。いくつかの実施形態では、プロモーター要素間の間隔はしばしばフレキシブルであるため、プロモーター機能は、要素が互いに反転または移動した場合に維持される。いくつかの実施形態では、チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーター、プロモーター要素間の間隔は、活性が低下し始める前に５０ｂｐ間隔まで増加され得る。いくつかの実施形態では、プロモーターに応じて、個々の要素は、協働的にまたは独立してのいずれかで機能して転写を活性化し得る。
プロモーターは、コードセグメント及び／またはエクソンの上流に位置する５′非コード配列を単離することによって得られ得るように、遺伝子またはポリヌクレオチド配列に天然に関連するものであり得る。そのようなプロモーターは、「内因性」と称され得る。同様に、エンハンサーは、その配列の下流または上流のいずれかに位置するポリヌクレオチド配列に天然に関連するものであり得る。代替的には、その天然環境においてポリヌクレオチド配列に通常は関連しないプロモーターを指す、組換えまたは異種プロモーターのコントロール下でコードポリヌクレオチドセグメントを配置することによって所定の利点が得られる。組換えまたは異種エンハンサーはまた、その天然環境におけるポリヌクレオチド配列に通常関連しないエンハンサー指す。そのようなプロモーターまたはエンハンサーには、他の遺伝子のプロモーターまたはエンハンサー、及び任意の他の原核生物、ウイルス、または真核細胞から単離されたプロモーターまたはエンハンサー、及び「天然に存在」しない、すなわち、異なる転写制御領域の異なる要素、及び／または発現を改変する変異を含有するプロモーターまたはエンハンサーが含まれ得る。プロモーター及びエンハンサーの核酸配列を合成的に生成することに加えて、配列は、本明細書に開示される組成物と組み合わせて、組換えクローニング及び／またはＰＣＲを含む核酸増幅技術を使用して生成され得る（米国特許番号４，６８３，２０２及び５，９２８，９０６）。
いくつかの実施形態では、好適なプロモーターは、最初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配列である。いくつかの実施形態では、プロモーター配列は、それに機能可能に連結された任意のポリヌクレオチド配列の高レベルの発現を誘導することが可能な強力な構成的プロモーター配列である。いくつかの実施形態では、好適なプロモーターは、伸長成長因子－ｌａ（ＥＦ－ｌａ）である。いくつかの実施形態では、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳房腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長い末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイルス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ならびにヒト遺伝子プロモーター、例えば、限定されないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、及びクレアチンキナーゼプロモーターを含むがこれらに限定されない他の構成的プロモーター配列も使用され得る。
いくつかの実施形態では、プロモーターは、誘導性プロモーターである。いくつかの実施形態では、誘導性プロモーターは、そのような発現が所望である場合に機能可能に連結されたポリヌクレオチド配列の発現を作動させ、または発現が所望ではない場合に発現を停止することが可能な分子スイッチを提供する。いくつかの実施形態では、誘導性プロモーターは、メタロチオニンプロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、及びテトラサイクリンプロモーターを含む。
いくつかの実施形態では、外因的にコントロールされる誘導性プロモーターは、Ｇタンパク質及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインの発現を制御するために使用され得る。例えば、放射線誘導性プロモーター、熱誘導性プロモーター、及び／または薬物誘導性プロモーターを、例えば、標的とされる領域における導入遺伝子発現を選択的に誘導するために使用することができる。そのような実施形態では、導入遺伝子発現の位置、継続期間、及びレベルは、誘導の外因性源の投与によって制御され得る。
いくつかの実施形態では、Ｇタンパク質及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含有する標的化エンベロープタンパク質の発現は、薬物誘導性プロモーターを使用して制御される。例えば、いくつかの場合では、プロモーター、エンハンサー、またはトランス活性化因子は、Ｌａｃオペレーター配列、テトラサイクリンオペレーター配列、ガラクトースオペレーター配列、ドキシサイクリンオペレーター配列、ラパマイシンオペレーター配列、タモキシフェンオペレーター配列、もしくはホルモン反応性オペレーター配列、またはそれらのアナログを含む。いくつかの例では、誘導性プロモーターは、テトラサイクリン反応要素（ＴＲＥ）を含む。いくつかの実施形態では、誘導性プロモーターは、タモキシフェンの存在下で遺伝子発現を活性化し得るエストロゲン反応要素（ＥＲＥ）を含む。いくつかの例では、薬物誘導性要素、例えば、ＴＲＥは、薬物、例えば、ドキシサイクリンの存在下で転写を向上させるために選択されたプロモーターと組み合わされ得る。いくつかの実施形態では、薬物誘導性プロモーターは、小分子誘導性プロモーターである。
提供されるポリヌクレオチドのいずれも、特定の種、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ヒツジ、ウシなどの種における翻訳のためにＣｐＧモチーフを除去するために及び／またはコドンを最適化するために修飾され得る。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、ヒトコドン使用頻度について最適化される（すなわち、ヒトコドン最適化される）。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、ＣｐＧモチーフを除去するように修飾される。他の実施形態では、提供されるポリヌクレオチドは、ＣｐＧモチーフを除去するように修飾され、コドン最適化、例えば、ヒトコドン最適化される。コドン最適化ならびにＣｐＧモチーフ検出及び修飾の方法は、よく知られている。典型的には、ポリヌクレオチド最適化は、導入遺伝子発現を向上させ、導入遺伝子安定性を増加させ、コードされるポリペプチドのアミノ酸配列を保存する。
標的化エンベロープタンパク質の発現を評価するために、細胞に導入される発現ベクターはまた、発現する粒子、例えば、ウイルス粒子の特定及び選択を容易化するために選択マーカー遺伝子またはレポーター遺伝子のいずれかまたはその両方を含有し得る。他の実施形態では、選択マーカーは、ＤＮＡの分離断片上に搭載され、コトランスフェクション手順において使用され得る。選択マーカー及びレポーター遺伝子の両方は、宿主細胞における発現を可能にするために適切な制御配列に隣接し得る。有用な選択マーカーは、当該技術分野で知られており、例えば、抗生物質耐性遺伝子、例えば、ｎｅｏなどが含まれる。
レポーター遺伝子は、トランスフェクションされた可能性のある細胞を特定するために及び制御配列の機能性を評価するために使用される。容易にアッセイ可能なタンパク質をコードするレポーター遺伝子は、当該技術分野でよく知られている。通常、レポーター遺伝子は、レシピエント生物または組織では存在しないまたは発現せず、かつ発現がいくつかの容易に検出可能な特性、例えば、酵素活性によって示されるタンパク質をコードする遺伝子である。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後の好適な時点でアッセイされる。
好適なレポーター遺伝子には、ルシフェラーゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌アルカリホスファターゼをコードする遺伝子、または緑色蛍光タンパク質遺伝子が含まれ得る（例えば、Ｕｉ－Ｔｅｉ ｅｔ ａｌ．，２０００，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．４７９：７９－８２を参照されたい）。好適な発現システムはよく知られており、よく知られている技術を使用して調製され、または商業的に入手され得る。内部欠失コンストラクトは、独自内部制限部位を使用してまたは非独自制限部位の部分的消化によって生成され得る。次いでコンストラクトは、高レベルの所望のポリヌクレオチド及び／またはポリペプチド発現を示す細胞にトランスフェクションされ得る。通常、レポーター遺伝子の最も高いレベルの発現を示す最小５′フランキング領域を有するコンストラクトは、プロモーターとして識別される。そのようなプロモーター領域は、レポーター遺伝子に連結され、プロモーター誘導転写を調節する能力について薬剤を評価するために使用され得る。
Ｂ．フソゲン（例えば、ヘニパウイルスＦタンパク質）
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、１つ以上のフソゲンを含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、外因性のまたは過剰発現したフソゲンを含有する。いくつかの実施形態では、フソゲンは、脂質二重層に配置される。いくつかの実施形態では、フソゲンは、標的化脂質粒子の膜への融合を容易化する。いくつかの実施形態では、膜は、血漿細胞膜である。
いくつかの実施形態では、フソゲンは、タンパク質ベース、脂質ベース、及び化学ベースのフソゲンを含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、タンパク質フソゲンを含む第１のフソゲン及び脂質フソゲンまたは化学フソゲンを含む第２のフソゲンを含む。いくつかの実施形態では、フソゲンは、標的細胞表面上のフソゲン結合パートナーと結合する。
いくつかの実施形態では、フソゲンは、疎水性融合ペプチドドメインを有するタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、フソゲンは、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分を含む。いくつかの実施形態では、ヘニパウイルスＦタンパク質は、ヘンドラ（Ｈｅｖ）ウイルスＦタンパク質、ニパ（ＮｉＶ）ウイルスＦ－タンパク質、セダー（ＣｅｄＰＶ）ウイルスＦタンパク質、ＭｏｊｉａｎｇウイルスＦタンパク質またはコウモリパラミクソウイルスＦタンパク質またはその生物学的に活性な部分である。
表４は、Ｆタンパク質の非限定的な例を提供する。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分のＮ末端疎水性融合ペプチドドメインは、脂質二重層の外側に露出されている。
ヘニパウイルスのＦタンパク質は、シグナルペプチド（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１～２６に対応する）を含有するＦ０前駆体としてコードされる。シグナルペプチドの切断後、成熟Ｆ０（例えば、配列番号２）は、細胞表面に輸送され、次いで取り込まれ、カテプシンＬによって（配列番号１のアミノ酸１０９～１１０の間で）成熟融合サブユニットＦ１（例えば、配列番号１のアミノ酸１１０～５４６に対応、配列番号４に示される）及びＦ２（例えば、配列番号１のアミノ酸残基２７～１０９に対応、配列番号３に示される）に切断される。Ｆ１及びＦ２サブユニットは、ジスルフィド結合によって会合し、細胞表面に戻されてリサイクルされる。Ｆ１サブユニットは、融合を誘導するために細胞膜に挿入することができる、Ｆ１サブユニットのＮ末端に位置する融合ペプチドドメイン（例えば、配列番号１のアミノ酸１１０～１２９に対応する）を含有する。特定の場合では、Ｇが標的分子と係合し、Ｆからのその解離及び膜融合を媒介するための融合ペプチドの曝露をもたらすまで、融合活性は、Ｆタンパク質とＧタンパク質との会合によってブロックされる。
異なるヘニパウイルス種間で、Ｆタンパク質の配列及び活性は、高度に保存されている。例えば、ＮｉＶ及びＨｅＶウイルスのＦタンパク質は、８９％のアミノ酸配列同一性を共有する。さらに、いくつかの場合では、ヘニパウイルスＦタンパク質は、融合を誘発するための他の種からのＧタンパク質との適合性を示す（Ｂｒａｎｄｅｌ－Ｔｒｅｔｈｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２０１９．９３（１３）：ｅ００５７７－１９）。いくつかの態様または提供される再標的化脂質粒子において、Ｆタンパク質は、Ｇタンパク質に対して異種であり、すなわち、Ｆ及びＧタンパク質または生物学的に活性な部分は、異なるヘニパウイルス種からのものである。例えば、Ｆタンパク質は、ヘンドラウイルスからのものであり、Ｇタンパク質は、ニパウイルスからのものである。他の態様では、Ｆタンパク質は、ヘニパウイルスの異なる種からのＦタンパク質の領域を含有するキメラＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質のアミノ酸残基の領域をヘニパウイルスのある種から別のものに交換すると、アミノ酸挿入を含む種のＧタンパク質への融合をもたらし得る。（Ｂｒａｎｄｅｌ－Ｔｒｅｔｈｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．２０１９）。いくつかの場合では、キメラＦタンパク質は、あるヘニパウイルス種からの細胞外ドメイン及び異なるヘニパウイルス種からの膜貫通及び／または細胞質ドメインを含有する。例えば、Ｆタンパク質は、ヘンドラウイルスの細胞外ドメイン及びニパウイルスの膜貫通／細胞質ドメインを含有する。本明細書に開示されるＦタンパク質配列は主に、Ｎ末端シグナル配列を含む発現した配列として開示される。そのようなＮ末端シグナル配列は、一般的に、翻訳と共にまたは翻訳後に切断されるので、本明細書に開示されるすべてのＦタンパク質配列についての成熟タンパク質配列はまた、Ｎ末端シグナル配列を欠くものとして企図される。
（表４）ヘニパウイルスタンパク質Ｆ配列クラスター
列１：Ｇｅｎｂａｎｋ ＩＤには、クラスターの重心配列であるウイルスのゲノム配列全体のＧｅｎｂａｎｋ ＩＤが含まれる。
列２：ＣＤＳのヌクレオチドは、ゲノム全体における遺伝子のＣＤＳに対応するヌクレオチドを提供する。
列３：完全遺伝子名であって、Ｇｅｎｂａｎｋ ＩＤ、ウイルス種、株、及びタンパク質名を含む遺伝子の完全な名称を提供する。ニパウイルスＦタンパク質は、ヘンドラウイルスのものと８０％超同一であり、同じ配列クラスター内で見られる。
列４：配列であって、遺伝子のアミノ酸配列を提供する。
列５：配列数／クラスターであって、この重心配列とクラスター化する配列の数を提供する。
列６：記載される配列についての配列番号を提供する。
Figure 2023521663000008
Figure 2023521663000009
Figure 2023521663000010
Figure 2023521663000011
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、配列番号１、２、１７、２４、２５、２６または５７～６０のいずれか１つによって示される配列をコードするヌクレオチド配列によってコードされ、または配列番号１、２、１７、２４、２５、２６または５７～６０のいずれか１つと少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％同一である配列を有するその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。特定の実施形態では、Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、ヘニパウイルスＧタンパク質、例えば、セクションＩ．Ａに示されるＧタンパク質（例えば、ＮｉＶ－ＧまたはＨｅＶ－Ｇ）と併せて融合活性を保持する。融合活性には、２つの膜内腔、例えば、その脂質二重層に埋め込まれたヘニパウイルスＦ及びＧタンパク質を有する標的化脂質粒子の内腔、ならびに標的細胞、例えば、標的化エンベロープタンパク質によって認識されるまたはそれが結合する表面受容体または分子を含有する細胞の細胞質の融合を促進または容易化するためのヘニパウイルスＧタンパク質と併せたＦタンパク質の活性が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質及びＧタンパク質は、同じヘニパウイルス種からのものである（例えば、ＮｉＶ－Ｇ及びＮｉＶ－Ｆ）。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質及びＧタンパク質は、異なるヘニパウイルス種からのものである（例えば、ＮｉＶ－Ｇ及びＨｅＶ－Ｆ）。特定の実施形態では、Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、カテプシンＬによって切断される切断部位（例えば、配列番号１のアミノ酸１０９～１１０の間の切断部位に対応する）を保持する。
特定の実施形態では、Ｆタンパク質は、配列番号１、配列番号２、配列番号１７、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号５７、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、もしくは配列番号６０に示されるアミノ酸の配列を有し、または融合活性を保持するその機能的に活性なバリアントもしくはその生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、機能的に活性なバリアントは、配列番号１、配列番号２、配列番号１７、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号５７、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、または配列番号６０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ヘニパウイルスＧタンパク質（例えば、ＮｉＶ－ＧまたはＨｅＶ－Ｇ）と併せて融合活性を保持する。いくつかの実施形態では、生物学的に活性な部分は、配列番号１、配列番号２、配列番号１７、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号５７、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、または配列番号６０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有し、ヘニパウイルスＧタンパク質（例えば、ＮｉＶ－ＧまたはＨｅＶ－Ｇ）と併せて融合活性を保持する。
融合活性を保持することに対する言及には、配列番号１、配列番号２、配列番号１７、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号５７、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、または配列番号６０に示されるような対応する野生型Ｆタンパク質の結合のレベルまたは程度の１０％もしくは約１０％から１５０％もしくは約１５０％の間またはそれを超え、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約２０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約２５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約３０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約３５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約４０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約４５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約５０％、例えば、対応する野生型ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約５５％例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約６０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約６５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約７０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約７５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約８５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９０％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約９５％、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１００％、または例えば、対応する野生型Ｆタンパク質の融合活性のレベルまたは程度の少なくともまたは少なくとも約１２０％である（ヘニパウイルスＧタンパク質と併せた）活性が含まれる。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、１つ以上のアミノ酸変異、例えば、１つ以上のアミノ酸挿入、欠失、置換または切断を含有する機能的に活性な断片または生物学的に活性な部分である変異体Ｆタンパク質である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、参照Ｆタンパク質配列と比較したアミノ酸のアミノ酸挿入、欠失、置換または切断に関する。いくつかの実施形態では、参照Ｆタンパク質配列は、Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分の野生型配列である。いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ヘンドラ（Ｈｅｖ）ウイルスＦタンパク質、ニパ（ＮｉＶ）ウイルスＦ－タンパク質、セダー（ＣｅｄＰＶ）ウイルスＦタンパク質、ＭｏｊｉａｎｇウイルスＦタンパク質またはコウモリパラミクソウイルスＦタンパク質の変異体である。いくつかの実施形態では、野生型Ｆタンパク質は、配列番号１、２、１７、２４、２５，２６、または５７～６０のいずれか１つをコードするヌクレオチドの配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質は、Ｎ末端及び／またはＣ末端で切断された断片である野生型Ｆタンパク質の生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質、またはその野生型Ｆタンパク質の生物学的に活性な部分は、１つ以上のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、形質導入効率を改善し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の変異は、融合能力を増加させ得る。例示的な変異には、記載されている任意のものが含まれ、例えば、Ｋｈｅｔａｗａｔ ａｎｄ Ｂｒｏｄｅｒ ２０１０ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ Ｊｏｕｒｎａｌ ７：３１２、Ｗｉｔｔｉｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１３ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０：９９７－１００５、公開国際、特許出願番号ＷＯ／２０１３／１４８３２７を参照されたい。
いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質は、切断型でありかつ配列番号１、１７、２４、２５または２６のいずれか１つに示されるＦタンパク質をコードするヌクレオチドの配列によってコードされる野生型Ｆタンパク質などの野生型Ｆタンパク質のＣ末端におけるまたはその近くの最大で２０個の連続アミノ酸残基を欠く生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質は、切断型であり、野生型Ｆタンパク質のＣ末端における最大で１９個の連続アミノ酸、例えば、最大で１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１個の連続アミノ酸を欠く。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、Ｆ１サブユニットまたはその融合部分を含む。いくつかの実施形態では、Ｆ１サブユニットは、Ｆ０前駆体のタンパク質分解的に切断された部分である。いくつかの実施形態では、Ｆ０前駆体は、不活性である。いくつかの実施形態では、Ｆ０前駆体の切断は、ジスルフィド連結Ｆ１＋Ｆ２ヘテロ二量体を形成する。いくつかの実施形態では、切断は、融合ペプチドを露出させ、成熟Ｆタンパク質を生成する。いくつかの実施形態では、切断は、単一の塩基性残基でまたはその周りで生じる。いくつかの実施形態では、切断は、ＮｉＶ－Ｆタンパク質のアルギニン１０９で生じる。いくつかの実施形態では、切断は、ヘンドラウイルスＦタンパク質のリジン１０９で生じる。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、野生型ニパウイルスＦ（ＮｉＶ－Ｆ）タンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、Ｆ０前駆体は、配列番号１に示される配列をコードするヌクレオチドの配列によってコードされる。コードする核酸は、配列ＭＶＶＩＬＤＫＲＣＹ ＣＮＬＬＩＬＩＬＭＩ ＳＥＣＳＶＧ（配列番号３４）を有するシグナルペプチド配列をコードし得る。いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、配列番号２に示される配列を有する。いくつかの例では、Ｆタンパク質は、配列番号４に示される配列を含むＦ１サブユニット及び配列番号３に示される配列を含むＦ２サブユニットに切断される。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、配列番号１に示される配列をコードするヌクレオチドの配列によってコードされるＮｉＶ－Ｆタンパク質であるか、または配列番号１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。いくつかの実施形態では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号２に示される配列を有し、または配列番号２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である。特定の実施形態では、Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、カテプシンＬによって切断される切断部位（例えば、配列番号１のアミノ酸１０９～１１０の間の切断部位に対応する）を保持する。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分には、配列番号４に示される配列、または配列番号４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するＦ１サブユニットが含まれる。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分には、配列番号３に示される配列、または配列番号３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するＦ２サブユニットが含まれる。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、切断型でありかつ野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（例えば、配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの最大で２０個の連続アミノ酸残基を欠くその生物学的に活性な部分である変異体ＮｉＶ－Ｆタンパク質である。いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号５と少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列を有する。いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質は、配列番号６に示される配列を有するＦ１タンパク質を含有する。いくつかの実施形態では、変異体Ｆタンパク質は、配列番号６と少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列を有する。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断；及びＮ結合型グリコシル化部位における点変異を有するその生物学的に活性な部分である変異体ＮｉＶ－Ｆタンパク質である。いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、変異体ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号７と少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列を有する。
いくつかの実施形態では、Ｆタンパク質は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２２アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である変異体ＮｉＶ－Ｆタンパク質である。いくつかの実施形態では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号８に示される配列をコードするヌクレオチド配列によってコードされる。いくつかの実施形態では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号８と少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチド配列によってコードされる。特定の実施形態では、バリアントＦタンパク質は、配列番号２３に示されるアミノ酸の配列を有する変異体Ｎｉｖ－Ｆタンパク質である。いくつかの実施形態では、ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号２３と少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列によってコードされる。
Ｃ．脂質二重層
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子には、内腔またはキャビティを包囲する両親媒性脂質の天然に由来する二重層が含まれる。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、最外表面として脂質二重層を含む。いくつかの実施形態では、脂質二重層は、内腔を包囲する。いくつかの実施形態では、内腔は、水性である。いくつかの実施形態では、内腔は、脂質二重層の内部の親水性頭部基と接触している。いくつかの実施形態では、内腔は、サイトゾルである。いくつかの実施形態では、サイトゾルは、源細胞に存在する細胞成分を含有する。いくつかの実施形態では、サイトゾルは、源細胞に存在する成分を含有しない。いくつかの実施形態では、内腔は、キャビティである。いくつかの実施形態では、キャビティは、水性環境を含有する。いくつかの実施形態では、キャビティは、水性環境を含有しない。
いくつかの態様では、脂質二重層は、脂質含有粒子を生成するためのプロセス中に源細胞から誘導される。脂質含有粒子を生成するための例示的な方法は、セクションＩ．Ｅで提供される。いくつかの実施形態では、脂質二重層には、脂質二重層が生成される細胞の膜成分、例えば、リン脂質、膜タンパク質などが含まれる。いくつかの実施形態では、脂質二重層には、微小胞が生成される細胞に見られる成分を含むサイトゾル、例えば、溶質、タンパク質、核酸などが含まれるが、細胞の成分のすべてではなく、例えば、それらは核を欠く。いくつかの実施形態では、脂質二重層は、エクソソーム様とみなされる。脂質二重層は、サイズが様々であり得、いくつかの例では、４０～１００ｎｍを含む、３０から１５０ｎｍなどの３０から３００ｎｍの範囲の直径を有する。
いくつかの実施形態では、脂質二重層は、ウイルスエンベロープである。いくつかの実施形態では、ウイルスエンベロープは、源細胞から得られる。いくつかの実施形態では、ウイルスエンベロープは、源細胞の細胞膜からのウイルスカプシドによって得られる。いくつかの実施形態では、脂質二重層は、宿主細胞の細胞膜以外の膜から得られる。いくつかの実施形態では、ウイルスエンベロープ脂質二重層は、ウイルス糖タンパク質を含むウイルスタンパク質と共に埋め込まれている。
他の態様では、脂質二重層には、合成脂質複合体が含まれる。いくつかの実施形態では、合成脂質複合体は、リポソームである。いくつかの実施形態では、脂質二重層は、リン脂質二重層膜及び内側水性媒体によって特性化される小胞構造である。いくつかの実施形態では、脂質二重層は、水性媒体によって分離された複数の脂質層を有する。いくつかの実施形態では、脂質二重層は、リン脂質が過剰の水溶液に懸濁された場合に自発的に形成する。いくつかの例では、脂質成分は、近接した構造の形成前に自己再構成を受け、脂質二重層間の水及び溶解した溶質を捕捉する。
いくつかの実施形態では、源細胞に対して外因性のまたは過剰発現したものを含む、上述したものなどの標的化エンベロープタンパク質及びフソゲンは、脂質二重層に配置される。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、いくつかの異なるタイプの脂質を含む。いくつかの実施形態では、脂質は、両親媒性脂質である。いくつかの実施形態では、両親媒性脂質は、リン脂質である。いくつかの実施形態では、リン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、及びホスファチジルセリンを含む。いくつかの実施形態では、脂質は、ホスホコリン及びホスホイノシトールなどのリン脂質を含む。いくつかの実施形態では、脂質は、ＤＭＰＣ、ＤＯＰＣ、及びＤＳＰＣを含む。
いくつかの実施形態では、二重層は、同じまたは異なるタイプの１つ以上の脂質で構成され。いくつかの実施形態では、源細胞は、ＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、ＭＤＣＫ細胞、Ｃ３Ｈ １０Ｔ１／２細胞、ＦＬＹ細胞、Ｐｓｉ－２細胞、ＢＯＳＣ ２３細胞、ＰＡ３１７細胞、ＷＥＨＩ細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＳＣ １細胞、ＢＳＣ ４０細胞、ＢＭＴ １０細胞、ＶＥＲＯ細胞、Ｗ１３８細胞、ＭＲＣ５細胞、Ａ５４９細胞、ＨＴ１０８０細胞、２９３細胞、２９３Ｔ細胞、Ｂ－５０細胞、３Ｔ３細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＨｅｐＧ２細胞、Ｓａｏｓ－２細胞、Ｈｕｈ７細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｗ１６３細胞、２１１細胞、及び２１１Ａ細胞から選択される細胞を含む。
Ｄ．外因性物質
実施形態では、レンチウイルスベクターなどの標的化脂質粒子は、源細胞に対して外因性である物質（以下「カーゴ」または「ペイロード」とも呼ばれる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、外因性物質は、タンパク質または核酸（例えば、ＤＮＡ、染色体（例えば、ヒト人工染色体）、ＲＮＡ、例えば、ｍＲＮＡまたはｍｉＲＮＡ）である。いくつかの実施形態では、外因性物質は、タンパク質をコードする核酸である。タンパク質は、標的細胞に対する標的化送達のために所望であるような任意のタンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、タンパク質は、治療剤または診断剤である。いくつかの実施形態では、タンパク質は、疾患または病態によって発現するまたはそれに関連する細胞を標的化するための抗原受容体、例えばキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）である。タンパク質をコードする核酸のコード配列に対する言及はまた、本明細書でペイロード遺伝子と称される。いくつかの実施形態では、外因性物質または外因性物質をコードする核酸は、非細胞粒子の内腔に存在する。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、サイトゾルタンパク質を含みまたはコードする。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、膜タンパク質を含みまたはコードする。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、治療剤を含みまたはコードする。いくつかの実施形態では、治療剤は、タンパク質、例えば、酵素、膜貫通タンパク質、受容体、抗体；核酸、例えば、ＤＮＡ、染色体（例えば、ヒト人工染色体）、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、または小分子のうちの１つ以上から選択される。
実施形態では、外因性物質は、少なくとも１０、２０、５０、１００、２００、５００、１，０００、２，０００、５，０００、１０，０００、２０，０００、５０，０００、１００，０００、２００，０００、５００，０００、１，０００，０００、５，０００，０００、１０，０００，０００、５０，０００，０００、１００，０００，０００、５００，０００，０００、または１，０００，０００，０００コピー、または１０、２０、５０、１００、２００、５００、１，０００、２，０００、５，０００、１０，０００、２０，０００、５０，０００、１００，０００、２００，０００、５００，０００、１，０００，０００、５，０００，０００、１０，０００，０００、５０，０００，０００、１００，０００，０００、５００，０００，０００、または１，０００，０００，０００コピー以下で存在する。実施形態では、標的化脂質粒子は、例えば、ｓｉＲＮＡまたは遺伝子編集酵素での源細胞、例えば、哺乳動物源細胞の処置により、１つ以上の内因性分子、例えば、タンパク質または核酸（例えば、いくつかの実施形態では、源細胞に対して内因性、いくつかの実施形態では、標的細胞に対して内因性）の改変、例えば、増加または低下したレベルを有する。実施形態では、内因性分子は、少なくとも１０、２０、５０、１００、２００、５００、１，０００、２，０００、５，０００、１０，０００、２０，０００、５０，０００、１００，０００、２００，０００、５００，０００、１，０００，０００、５，０００，０００、１０，０００，０００、５０，０００，０００、１００，０００，０００、５００，０００，０００、または１，０００，０００，０００コピー、または１０、２０、５０、１００、２００、５００、１，０００、２，０００、５，０００、１０，０００、２０，０００、５０，０００、１００，０００、２００，０００、５００，０００、１，０００，０００、５，０００，０００、１０，０００，０００、５０，０００，０００、１００，０００，０００、５００，０００，０００、または１，０００，０００，０００コピー以下で存在する。実施形態では、内因性分子（例えば、ＲＮＡまたはタンパク質）は、源細胞におけるその濃度よりも少なくとも１、２、３、４、５、１０、２０、５０、１００、５００、１０３、５．０×１０３、１０４、５．０×１０４、１０５、５．０×１０５、１０６、５．０×１０６、１．０×１０７、５．０×１０７、または１．０×１０８高い濃度で存在する。実施形態では、内因性分子（例えば、ＲＮＡまたはタンパク質）は、源細胞におけるその濃度よりも少なくとも１、２、３、４、５、１０、２０、５０、１００、５００、１０３、５．０×１０３、１０４、５．０×１０４、１０５、５．０×１０５、１０６、５．０×１０６、１．０×１０７、５．０×１０７、または１．０×１０８低い濃度で存在する。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、フソソームに含まれるカーゴ（例えば、治療剤、例えば、外因性治療剤）の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％を標的細胞に送達する。いくつかの実施形態では、標的細胞（複数可）と融合する標的化脂質粒子は、標的細胞（複数可）と融合する脂質粒子に含まれるカーゴ（例えば、治療剤、例えば、外因性治療剤）の平均で少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％を標的細胞に送達する。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子組成物は、標的化脂質粒子組成物に含まれるカーゴ（例えば、治療剤、例えば、外因性治療剤）の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％を標的組織に送達する。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、標的化脂質粒子の由来となった細胞において自然に発現しない。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、標的化脂質粒子の由来となった細胞において自然に発現する。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、脂質粒子の由来となった細胞における発現（例えば、トランスフェクション、形質導入、またはエレクトロポレーションを介して導入されたＤＮＡまたはｍＲＮＡからの発現）を介して標的化脂質粒子に搭載される。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、ゲノムに組み込まれたまたはエピソーム的に維持されたＤＮＡから発現する。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴの発現は、構成的である。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴの発現は、誘導される。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴの発現は、標的化脂質粒子を生成する直前に誘導される。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴの発現は、フソゲンの発現と同時に誘導される。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、脂質粒子自体またはフソソームの由来となった細胞へのエレクトロポレーションを介して脂質粒子に搭載される。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、脂質粒子自体または脂質粒子の由来となった細胞への（例えば、カーゴをコードするＤＮＡまたはｍＲＮＡの）トランスフェクションを介して脂質粒子に搭載される。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴには、１つ以上の核酸配列、１つ以上のポリペプチド、核酸配列及び／またはポリペプチドの組み合わせ、１つ以上の細胞小器官、及びそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴには、１つ以上の細胞成分が含まれ得る。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴには、１つ以上のサイトゾル及び／または核成分が含まれる。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴには、核酸、例えば、ＤＮＡ、ｎＤＮＡ（核ＤＮＡ）、ｍｔＤＮＡ（ミトコンドリアＤＮＡ）、タンパク質コードＤＮＡ、遺伝子、オペロン、染色体、ゲノム、トランスポゾン、レトロトランスポゾン、ウイルスゲノム、イントロン、エクソン、修飾ＤＮＡ、ｍＲＮＡ（メッセンジャーＲＮＡ）、ｔＲＮＡ（トランスファーＲＮＡ）、修飾ＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ（低分子干渉）、ｔｍＲＮＡ（トランスファーメッセンジャーＲＮＡ）、ｒＲＮＡ（リボソームＲＮＡ）、ｍｔＲＮＡ（ミトコンドリアＲＮＡ）、ｓｎＲＮＡ（小核ＲＮＡ）、小核小体ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮＡ）、ＳｍＹ ＲＮＡ（ｍＲＮＡトランス－スプライシングＲＮＡ）、ｇＲＮＡ（ガイドＲＮＡ）、ＴＥＲＣ（テロメラーゼＲＮＡ成分）、ａＲＮＡ（アンチセンスＲＮＡ）、ｃｉｓ－ＮＡＴ（シス－天然アンチセンス転写産物）、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、ＩｎｃＲＮＡ（長鎖ノンコーディングＲＮＡ）、ｐｉＲＮＡ（ｐｉｗｉ相互作用ＲＮＡ）、ｓｈＲＮＡ（短ヘアピンＲＮＡ）、ｔａｓｉＲＮＡ（トランス作用性ｓｉＲＮＡ）、ｅＲＮＡ（エンハンサーＲＮＡ）、サテライトＲＮＡ、ｐｃＲＮＡ（タンパク質コードＲＮＡ）、ｄｓＲＮＡ（二本鎖ＲＮＡ）、ＲＮＡｉ（干渉ＲＮＡ）、ｃｉｒｃＲＮＡ（環状ＲＮＡ）、リプログラミングＲＮＡ、アプタマー、及びそれらの任意の組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態では、核酸は、野生型核酸である。いくつかの実施形態では、タンパク質は、変異体核酸である。いくつかの実施形態では、核酸は、複数の核酸配列の融合体またはキメラである。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴには、核酸が含まれ得る。例えば、外因性物質またはカーゴは、内因性タンパク質の発現を向上させるためのＲＮＡ、または内因性タンパク質のタンパク質発現を阻害するｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含み得る。例えば、内因性タンパク質は、標的細胞において構造または機能を調節し得る。いくつかの実施形態では、カーゴには、標的細胞において構造または機能を調節する操作されたタンパク質をコードする核酸が含まれ得る。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、標的細胞において構造または機能を調節する転写活性化因子を標的とする核酸である。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、ポリペプチド、例えば、酵素、構造ポリペプチド、シグナル伝達ポリペプチド、制御性ポリペプチド、輸送ポリペプチド、感覚ポリペプチド、運動ポリペプチド、防御ポリペプチド、保存ポリペプチド、転写因子、抗体、サイトカイン、ホルモン、異化ポリペプチド、同化ポリペプチド、タンパク質分解ポリペプチド、代謝ポリペプチド、キナーゼ、トランスフェラーゼ、ヒドロラーゼ、リアーゼ、イソメラーゼ、リガーゼ、酵素調節因子ポリペプチド、タンパク質結合ポリペプチド、脂質結合ポリペプチド、膜融合ポリペプチド、細胞分化ポリペプチド、エピジェネティックポリペプチド、細胞死ポリペプチド、核輸送ポリペプチド、核酸融合ポリペプチド、再プログラム化ポリペプチド、ＤＮＡ編集ポリペプチド、ＤＮＡ修復ポリペプチド、ＤＮＡ組換えポリペプチド、トランスポサーゼポリペプチド、ＤＮＡ組み込みポリペプチド、標的化エンドヌクレアーゼ（例えば、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、転写活性化因子様ヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、ｃａｓ９及びそのホモログ）、リコンビナーゼ、及びそれらの任意の組み合わせであるか、またはそれをコードする。いくつかの実施形態では、タンパク質は、分解のための細胞におけるタンパク質を標的とする。いくつかの実施形態では、タンパク質は、タンパク質をプロテアソームに局在化することによって分解のための細胞におけるタンパク質を標的とする。いくつかの実施形態では、タンパク質は、野生型タンパク質である。いくつかの実施形態では、タンパク質は、変異体タンパク質である。いくつかの実施形態ではタンパク質は、融合またはキメラタンパク質である。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、小分子、例えば、イオン（例えば、Ｃａ２＋、Ｃｌ－、Ｆｅ２＋）、炭水化物、脂質、反応性酸素種、反応性窒素種、イソプレノイド、シグナル伝達分子、ヘム、ポリペプチド補因子、電子求引性化合物、電子供与性化合物、代謝産物、リガンド、及びそれらの任意の組み合わせである。いくつかの実施形態では、小分子は、細胞において標的と相互作用する薬剤である。いくつかの実施形態では、小分子は、分解のための細胞におけるタンパク質を標的とする。いくつかの実施形態では、小分子は、タンパク質をプロテアソームに局在化することによって分解のための細胞におけるタンパク質を標的とする。いくつかの実施形態では、その小分子は、タンパク質分解標的化キメラ分子（ＰＲＯＴＡＣ）である。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴには、タンパク質、核酸、または代謝産物の混合物、例えば、複数のポリペプチド、複数の核酸、複数の小分子；核酸、ポリペプチド、及び小分子の組み合わせ；リボヌクレオタンパク質複合体（例えば、Ｃａｓ９－ｇＲＮＡ複合体）；複数の転写因子、複数のエピジェネティック因子、再プログラム化因子（例えば、Ｏｃｔ４、Ｓｏｘ２、ｃＭｙｃ、及びＫｌｆ４）；複数の制御性ＲＮＡ；及びそれらの任意の組み合わせが含まれる。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴには、１つ以上の細胞小器官、例えば、コンドリソーム、ミトコンドリア、リソソーム、核、細胞膜、細胞質、小胞体、リボソーム、液胞、エンドソーム、スプライセオソーム、ポリメラーゼ、カプシド、アクロソーム、オートファゴソーム、中心小体、グリコソーム、グリオキシソーム、ハイドロジェノソーム、メラノソーム、マイトソーム、マイオファイブリル、刺胞（ｃｎｉｄｏｃｙｓｔ）、ペルオキシソーム、プロテアソーム、小胞、ストレス顆粒、細胞小器官のネットワーク、及びそれらの任意の組み合わせが含まれる。
いくつかの実施形態では、外因性物質は、サイトゾルタンパク質、例えば、レシピエント細胞において生成され、レシピエント細胞質に局在化するタンパク質であるか、またはそれをコードする。いくつかの実施形態では、外因性物質は、分泌タンパク質、例えば、レシピエント細胞によって生成され、分泌されるタンパク質であるか、またはそれをコードする。いくつかの実施形態では、外因性物質は、核タンパク質、例えば、レシピエント細胞において生成され、レシピエント細胞の核に搬入されるタンパク質であるか、またはそれをコードする。いくつかの実施形態では、外因性物質は、細胞小器官タンパク質（例えば、ミトコンドリアタンパク質）、例えば、レシピエント細胞において生成され、レシピエント細胞の細胞小器官（例えば、ミトコンドリア）に搬入されるタンパク質であるか、またはそれをコードする。いくつかの実施形態では、タンパク質は、野生型タンパク質または変異体タンパク質である。いくつかの実施形態ではタンパク質は、融合またはキメラタンパク質である。
いくつかの実施形態では、外因性物質は、肝細胞または肝臓細胞に送達されることが可能である。いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、肝細胞または肝臓細胞における疾患または障害を処置するために送達され得る。
いくつかの実施形態では、外因性物質は、ＯＴＣ、ＣＰＳ１、ＮＡＧＳ、ＢＣＫＤＨＡ、ＢＣＫＤＨＢ、ＤＢＴ、ＤＬＤ、ＭＵＴ、ＭＭＡＡ、ＭＭＡＢ、ＭＭＡＣＨＣ、ＭＭＡＤＨＣ、ＭＣＥＥ、ＰＣＣＡ、ＰＣＣＢ、ＵＧＴ１Ａ１、ＡＳＳ１、ＰＡＨ、ＰＡＬ、ＡＴＰ８Ｂ１、ＡＢＣＢ１１、ＡＢＣＢ４、ＴＪＰ２、ＩＶＤ、ＧＣＤＨ、ＥＴＦＡ、ＥＴＦＢ、ＥＴＦＤＨ、ＡＳＬ、Ｄ２ＨＧＤＨ、ＨＭＧＣＬ、ＭＣＣＣ１、ＭＣＣＣ２、ＡＢＣＤ４、ＨＣＦＣ１、ＬＮＢＲＤ１、ＡＲＧ１、ＳＬＣ２５Ａ１５、ＳＬＣ２５Ａ１３、ＡＬＡＤ、ＣＰＯＸ、ＨＭＢＳ、ＰＰＯＸ、ＢＴＤ、ＨＬＣＳ、ＰＣ、ＳＬＣ７Ａ７、ＣＰＴ２、ＡＣＡＤＭ、ＡＣＡＤＳ、ＡＣＡＤＶＬ、ＡＧＬ、Ｇ６ＰＣ、ＧＢＥ１、ＰＨＫＡ１、ＰＨＫＡ２、ＰＨＫＢ、ＰＨＫＧ２、ＳＬＣ３７Ａ４、ＰＭＭ２、ＣＢＳ、ＦＡＨ、ＴＡＴ、ＧＡＬＴ、ＧＡＬＫ１、ＧＡＬＥ、Ｇ６ＰＤ、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ７Ａ９、ＭＴＨＦＲ、ＭＴＲ、ＭＴＲＲ、ＡＴＰ７Ｂ、ＨＰＲＴ１、ＨＪＶ、ＨＡＭＰ、ＪＡＧ１、ＴＴＲ、ＡＧＸＴ、ＬＩＰＡ、ＳＥＲＰＩＮＧ１、ＨＳＤ１７Ｂ４、ＵＲＯＤ、ＨＦＥ、ＬＰＬ，ＧＲＨＰＲ、ＨＯＧＡ１、ＬＤＬＲ、ＡＣＡＤ８、ＡＣＡＤＳＢ、ＡＣＡＴ１、ＡＣＳＦ３、ＡＳＰＡ、ＡＵＨ、ＤＮＡＪＣ１９、ＥＴＨＥ１、ＦＢＰ１、ＦＴＣＤ、ＧＳＳ、ＨＩＢＣＨ、ＩＤＨ２、Ｌ２ＨＧＤＨ、ＭＬＹＣＤ、ＯＰＡ３、ＯＰＬＡＨ、ＯＸＣＴ１、ＰＯＬＧ、ＰＰＭ１Ｋ、ＳＥＲＡＣ１、ＳＬＣ２５Ａ１、ＳＵＣＬＡ２、ＳＵＣＬＧ１、ＴＡＺ、ＡＧＫ、ＣＬＰＢ、ＴＭＥＭ７０、ＡＬＤＨ１８Ａ１、ＯＡＴ、ＣＡ５Ａ、ＧＬＵＤ１、ＧＬＵＬ、ＵＭＰＳ、ＳＬＣ２２Ａ５、ＣＰＴ１Ａ、ＨＡＤＨＡ、ＨＡＤＨ、ＳＬＣ５２Ａ１、ＳＬＣ５２Ａ２、ＳＬＣ５２Ａ３、ＨＡＤＨＢ、ＧＹＳ２、ＰＹＧＬ、ＳＬＣ２Ａ２、ＡＬＧ１、ＡＬＧ２、ＡＬＧ３、ＡＬＧ６、ＡＬＧ８、ＡＬＧ９、ＡＬＧ１１、ＡＬＧ１２、ＡＬＧ１３、ＡＴＰ６Ｖ０Ａ２、Ｂ３ＧＬＣＴ、ＣＨＳＴ１４、ＣＯＧ１、ＣＯＧ２、ＣＯＧ４、ＣＯＧ５、ＣＯＧ６、ＣＯＧ７、ＣＯＧ８、ＤＯＬＫ、ＤＨＤＤＳ、ＤＰＡＧＴ１、ＤＰＭ１、ＤＰＭ２、ＤＰＭ３、Ｇ６ＰＣ３、ＧＦＰＴ１、ＧＭＰＰＡ、ＧＭＰＰＢ、ＭＡＧＴ１、ＭＡＮ１Ｂ１、ＭＧＡＴ２、ＭＯＧＳ、ＭＰＤＵ１、ＭＰＩ、ＮＧＬＹ１、ＰＧＭ１、ＰＧＭ３、ＲＦＴ１、ＳＥＣ２３Ｂ、ＳＬＣ３５Ａ１、ＳＬＣ３５Ａ２、ＳＬＣ３５Ｃ１、ＳＳＲ４、ＳＲＤ５Ａ３、ＴＭＥＭ１６５、ＴＲＩＰ１１、ＴＵＳＣ３、ＡＬＧ１４、Ｂ４ＧＡＬＴ１、ＤＤＯＳＴ、ＮＵＳ１、ＲＰＮ２、ＳＥＣ２３Ａ、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＴ３ＧＡＬ３、ＳＴＴ３Ａ、ＳＴＴ３Ｂ、ＡＧＡ、ＡＲＳＡ、ＡＲＳＢ、ＡＳＡＨ１、ＡＴＰ１３Ａ２、ＣＬＮ３、ＣＬＮ５、ＣＬＮ６、ＣＬＮ８、ＣＴＮＳ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＤ、ＣＴＳＦ、ＣＴＳＫ、ＤＮＡＪＣ５、ＦＵＣＡ１、ＧＡＡ、ＧＡＬＣ、ＧＡＬＮＳ、ＧＬＡ、ＧＬＢ１、ＧＭ２Ａ、ＧＮＰＴＡＢ、ＧＮＰＴＧ、ＧＮＳ、ＧＲＮ、ＧＵＳＢ、ＨＥＸＡ、ＨＥＸＢ、ＨＧＳＮＡＴ、ＨＹＡＬ１、ＩＤＳ、ＩＤＵＡ、ＫＣＴＤ７、ＬＡＭＰ２、ＭＡＮ２Ｂ１、ＭＡＮＢＡ、ＭＣＯＬＮ１、ＭＦＳＤ８、ＮＡＧＡ、ＮＡＧＬＵ、ＮＥＵ１、ＮＰＣ１、ＮＰＣ２、ＳＧＳＨ、ＰＰＴ１、ＰＳＡＰ、ＳＬＣ１７Ａ５、ＳＭＰＤ１、ＳＵＭＦ１、ＴＰＰ１、ＡＨＣＹ、ＧＮＭＴ、ＭＡＴ１Ａ、ＧＣＨ１、ＰＣＢＤ１、ＰＴＳ、ＱＤＰＲ、ＳＰＲ、ＤＮＡＪＣ１２、ＡＬＤＨ４Ａ１、ＰＲＯＤＨ、ＨＰＤ、ＧＢＡ、ＨＧＤ、ＡＭＮ、ＣＤ３２０、ＣＵＢＮ、ＧＩＦ、ＴＣＮ１、ＴＣＮ２、ＰＲＥＰＬ、ＰＨＧＤＨ、ＰＳＡＴ１、ＰＳＰＨ、ＡＭＴ，ＧＣＳＨ、ＧＬＤＣ、ＬＩＡＳ、ＮＦＵ１、ＳＬＣ６Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１、ＡＴＰ７Ａ、ＡＰ１Ｓ１、ＣＰ、ＳＬＣ３３Ａ１、ＰＥＸ７、
ＰＨＹＨ、ＡＧＰＳ、ＧＮＰＡＴ、ＡＢＣＤ１、ＡＣＯＸ１、ＰＥＸ１、ＰＥＸ２、ＰＥＸ３、ＰＥＸ５、ＰＥＸ６、ＰＥＸ１０、ＰＥＸ１２、ＰＥＸ１３、ＰＥＸ１４、ＰＥＸ１６、ＰＥＸ１９、ＰＥＸ２６、ＡＭＡＣＲ、ＡＤＡ、ＡＤＳＬ、ＡＭＰＤ１、ＧＰＨＮ、ＭＯＣＯＳ、ＭＯＣＳ１、ＰＮＰ、ＸＤＨ、ＳＵＯＸ、ＯＧＤＨ、ＳＬＣ２５Ａ１９、ＤＨＴＫＤ１、ＳＬＣ１３Ａ５、ＦＨ、ＤＬＡＴ、ＭＰＣ１、ＰＤＨＡ１、ＰＤＨＢ、ＰＤＨＸ、ＰＤＰ１、ＡＢＣＣ２、ＳＬＣＯ１Ｂ１、ＳＬＣＯ１Ｂ３、ＨＦＥ２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＰＹＧＭ、ＣＯＬ１Ａ２、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＳＣ１、ＴＳＣ２、ＤＨＣＲ７、ＰＧＫ１、ＶＬＤＬＲ、ＫＹＮＵ、Ｆ５、Ｃ３、ＣＯＬ４Ａ１、ＣＦＨ、ＳＬＣ１２Ａ２、ＧＫ、ＳＦＴＰＣ、ＣＲＴＡＰ、Ｐ３Ｈ１、ＣＯＬ７Ａ１、ＰＫＬＲ、ＴＡＬＤＯ１、ＴＦ、ＥＰＣＡＭ、ＶＨＬ、ＧＣ、ＳＥＲＰＩＮＡ１、ＡＢＣＣ６、Ｆ８、Ｆ９、ＡｐｏＢ、ＰＣＳＫ９、ＬＤＬＲＡＰ１，ＡＢＣＧ５、ＡＢＣＧ８、ＬＣＡＴ、ＳＰＩＮＫ５、またはＧＮＥからの遺伝子によってコードされる。
いくつかの実施形態では、外因性物質は、ＯＴＣ、ＣＰＳ１、ＮＡＧＳ、ＢＣＫＤＨＡ、ＢＣＫＤＨＢ、ＤＢＴ、ＤＬＤ、ＭＵＴ、ＭＭＡＡ、ＭＭＡＢ、ＭＭＡＣＨＣ、ＭＭＡＤＨＣ、ＭＣＥＥ、ＰＣＣＡ、ＰＣＣＢ、ＵＧＴ１Ａ１、ＡＳＳ１、ＰＡＬ、ＰＡＨ、ＡＴＰ８Ｂ１、ＡＢＣＢ１１、ＡＢＣＢ４、ＴＪＰ２、ＩＶＤ、ＧＣＤＨ、ＥＴＦＡ、ＥＴＦＢ、ＥＴＦＤＨ、ＡＳＬ、Ｄ２ＨＧＤＨ、ＨＭＧＣＬ、ＭＣＣＣ１、ＭＣＣＣ２、ＡＢＣＤ４、ＨＣＦＣ１、ＬＭＢＲＤ１、ＡＲＧ１、ＳＬＣ２５Ａ１５、ＳＬＣ２５Ａ１３、ＡＬＡＤ、ＣＰＯＸ、ＨＭＢＳ、ＰＰＯＸ、ＢＴＤ、ＨＬＣＳ、ＰＣ、ＳＬＣ７Ａ７、ＣＰＴ２、ＡＣＡＤＭ、ＡＣＡＤＳ、ＡＣＡＤＶＬ、ＡＧＬ、Ｇ６ＰＣ、ＧＢＥ１、ＰＨＫＡ１、ＰＨＫＡ２、ＰＨＫＢ、ＰＨＫＧ２、ＳＬＣ３７Ａ４、ＰＭＭ２、ＣＢＳ、ＦＡＨ、ＴＡＴ、ＧＡＬＴ、ＧＡＬＫ１、ＧＡＬＥ、Ｇ６ＰＤ、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ７Ａ９、ＭＴＨＦＲ、ＭＴＲ、ＭＴＲＲ、ＡＴＰ７Ｂ、ＨＰＲＴ１、ＨＪＶ、ＨＡＭＰ、ＪＡＧ１、ＴＴＲ、ＡＧＸＴ、ＬＩＰＡ、ＳＥＲＰＩＮＧ１、ＨＳＤ１７Ｂ４、ＵＲＯＤ、ＨＦＥ、ＬＰＬ、ＧＲＨＰＲ、ＨＯＧＡ１、またはＬＤＬＲからの遺伝子によってコードされる。いくつかの実施形態では、外因性物質は、酵素フェニルアラニンアンモニアリアーゼ（ＰＡＬ）である。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴは、表５に列挙される疾患または適応症を処置するために送達され得る。いくつかの実施形態では、適応症は、肝臓細胞または肝細胞に特定的である。
いくつかの実施形態では、外因性物質は、以下の表５のタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、外因性物質は、表５のタンパク質のいずれかの野生型ヒト配列、その機能的断片（例えば、その酵素的に活性な断片）、またはその機能的バリアントを含む。いくつかの実施形態では、外因性物質は、表５のアミノ酸配列、例えば、表５の列４のＵｎｉｐｒｏｔタンパク質アクセッション番号配列または表５の列５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、外因性物質をコードするペイロード遺伝子は、表５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するアミノ酸配列をコードする。いくつかの実施形態では、外因性物質をコードするペイロード遺伝子は、表５の核酸配列、例えば、表５の列３のＥｎｓｅｍｂｌｅ遺伝子アクセッション番号と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する核酸配列を有する。
（表５）
第１の列は、本明細書における方法及び使用に従って、第６の列における適応症を処置するために送達され得る外因性物質を列挙している。表５の各Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
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いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターは、Ｔ細胞を標的とすることが可能な外因性物質を含有する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞を標的とすることが可能な外因性物質は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体、インテグリン、イオンチャネル、孔形成タンパク質、トル様受容体、インターロイキン受容体、細胞接着タンパク質、または輸送タンパク質である。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメイン（例えば、１、２または３つのシグナル伝達ドメイン）を含む第一世代ＣＡＲであるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び少なくとも３つのシグナル伝達ドメインを含む第三世代ＣＡＲを含む。いくつかの実施形態では、第四世代ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、３または４つのシグナル伝達ドメイン、及びＣＡＲの成功裏のシグナル伝達時にサイトカイン遺伝子の発現を誘導するドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたはＦａｂであるか、またはそれを含む。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ抗原結合ドメインは、抗体またはその抗原結合部分であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたはＦａｂであるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ抗原結合ドメインは、Ｔ細胞アルファ鎖抗体；Ｔ細胞β鎖抗体；Ｔ細胞γ鎖抗体；Ｔ細胞δ鎖抗体；ＣＣＲ７抗体；ＣＤ３抗体；ＣＤ４抗体；ＣＤ５抗体；ＣＤ７抗体；ＣＤ８抗体；ＣＤ１１ｂ抗体；ＣＤ１１ｃ抗体；ＣＤ１６抗体；ＣＤ１９抗体；ＣＤ２０抗体；ＣＤ２１抗体；ＣＤ２２抗体；ＣＤ２５抗体；ＣＤ２８抗体；ＣＤ３４抗体；ＣＤ３５抗体；ＣＤ４０抗体；ＣＤ４５ＲＡ抗体；ＣＤ４５ＲＯ抗体；ＣＤ５２抗体；ＣＤ５６抗体；ＣＤ６２Ｌ抗体；ＣＤ６８抗体；ＣＤ８０抗体；ＣＤ９５抗体；ＣＤ１１７抗体；ＣＤ１２７抗体；ＣＤ１３３抗体；ＣＤ１３７（４－１ ＢＢ）抗体；ＣＤ１６３抗体；Ｆ４／８０抗体；ＩＬ－４Ｒａ抗体；Ｓｃａ－１抗体；ＣＴＬＡ－４抗体；ＧＩＴＲ抗体ＧＡＲＰ抗体；ＬＡＰ抗体；グランザイムＢ抗体；ＬＦＡ－１抗体；ＭＲ１抗体；ｕＰＡＲ抗体；またはトランスフェリン受容体抗体のｓｃＦｖまたはＦａｂ断片を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ結合ドメインは、細胞の細胞表面抗原に結合する。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、１つのタイプの細胞に特徴的である。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、複数のタイプの細胞に特徴的である。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの抗原結合ドメインは、Ｔ細胞に特徴的な抗原を標的とする。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞に特徴的な抗原は、Ｔ細胞に特徴的な細胞表面受容体、膜輸送タンパク質（例えば、能動的または受動的輸送タンパク質、例えば、イオンチャネルタンパク質、孔形成タンパク質など）、膜貫通受容体、膜酵素、及び／または細胞接着タンパク質から選択される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞に特徴的な抗原は、Ｇタンパク質共役型受容体、受容体チロシンキナーゼ、チロシンキナーゼ関連受容体、受容体様チロシンホスファターゼ、受容体セリン／トレオニンキナーゼ、受容体グアニル酸シクラーゼ、ヒスチジンキナーゼ関連受容体、ＡＫＴ１；ＡＫＴ２；ＡＫＴ３；ＡＴＦ２；ＢＣＬ１０；ＣＡＬＭ１；ＣＤ３Ｄ（ＣＤ３δ）；ＣＤ３Ｅ（ＣＤ３ε）；ＣＤ３Ｇ（ＣＤ３γ）；ＣＤ４；ＣＤ８；ＣＤ２８；ＣＤ４５；ＣＤ８０（Ｂ７－１）；ＣＤ８６（Ｂ７－２）；ＣＤ２４７（ＣＤ３ζ）；ＣＴＬＡ４（ＣＤ１５２）；ＥＬＫ１；ＥＲＫ１（ＭＡＰＫ３）；ＥＲＫ２；ＦＯＳ；ＦＹＮ；ＧＲＡＰ２（ＧＡＤＳ）；ＧＲＢ２；ＨＬＡ－ＤＲＡ；ＨＬＡ－ＤＲＢ１；ＨＬＡ－ＤＲＢ３；ＨＬＡ－ＤＲＢ４；ＨＬＡ－ＤＲＢ５；ＨＲＡＳ；ＩＫＢＫＡ（ＣＨＵＫ）；ＩＫＢＫＢ；ＩＫＢＫＥ；ＩＫＢＫＧ（ＮＥＭＯ）；ＩＬ２；ＩＴＰＲ１；ＩＴＫ；ＪＵＮ；ＫＲＡＳ２；ＬＡＴ；ＬＣＫ；ＭＡＰ２Ｋ１（ＭＥＫ１）；ＭＡＰ２Ｋ２（ＭＥＫ２）；ＭＡＰ２Ｋ３（ＭＫＫ３）；ＭＡＰ２Ｋ４（ＭＫＫ４）；ＭＡＰ２Ｋ６（ＭＫＫ６）；ＭＡＰ２Ｋ７（ＭＫＫ７）；ＭＡＰ３Ｋ１（ＭＥＫＫ１）；ＭＡＰ３Ｋ３；ＭＡＰ３Ｋ４；ＭＡＰ３Ｋ５；ＭＡＰ３Ｋ８；ＭＡＰ３Ｋ１４（ＮＩＫ）；ＭＡＰＫ８（ＪＮＫ１）；ＭＡＰＫ９（ＪＮＫ２）；ＭＡＰＫ１０（ＪＮＫ３）；ＭＡＰＫ１１（ｐ３８β）；ＭＡＰＫ１２（ｐ３８γ）；ＭＡＰＫ１３（ｐ３８δ）；ＭＡＰＫ１４（ｐ３８α）；ＮＣＫ；ＮＦＡＴ１；ＮＦＡＴ２；ＮＦＫＢ１；ＮＦＫＢ２；ＮＦＫＢＩＡ；ＮＲＡＳ；ＰＡＫ１；ＰＡＫ２；ＰＡＫ３；ＰＡＫ４；ＰＩＫ３Ｃ２Ｂ；ＰＩＫ３Ｃ３（ＶＰＳ３４）；ＰＩＫ３ＣＡ；ＰＩＫ３ＣＢ；ＰＩＫ３ＣＤ；ＰＩＫ３Ｒ１；ＰＫＣＡ；ＰＫＣＢ；ＰＫＣＭ；ＰＫＣＱ；ＰＬＣＹ１；ＰＲＦ１（パーフォリン）；ＰＴＥＮ；ＲＡＣ１；ＲＡＦ１；ＲＥＬＡ；ＳＤＦ１；ＳＨＰ２；ＳＬＰ７６；ＳＯＳ；ＳＲＣ；ＴＢＫ１；ＴＣＲＡ；ＴＥＣ；ＴＲＡＦ６；ＶＡＶ１；ＶＡＶ２；またはＺＡＰ７０であり得る。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲの抗原結合ドメインは、障害に特徴的な抗原を標的とする。いくつかの実施形態では、疾患または障害は、ＣＤ４＋ Ｔ細胞に関連する。いくつかの実施形態では、疾患または障害は、ＣＤ８＋ Ｔ細胞に関連する。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４、またはその機能的バリアントのアルファ、ベータまたはゼータ鎖の少なくとも膜貫通領域を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８α、ＣＤ８β、４－１ＢＢ／ＣＤ１３７、ＣＤ２８、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＦｃεＲＩγ、ＣＤ１６、ＯＸ４０／ＣＤ１３４、ＣＤ３ζ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲζ、ＣＤ３２、ＣＤ６４、ＣＤ６４、ＣＤ４５、ＣＤ５、ＣＤ９、ＣＤ２２、ＣＤ３７、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ／ＣＤ１５４、ＶＥＧＦＲ２、ＦＡＳ、及びＦＧＦＲ２Ｂ、またはその機能的バリアントの少なくとも膜貫通領域（複数可）を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、Ｂ７－１／ＣＤ８０；Ｂ７－２／ＣＤ８６；Ｂ７－Ｈ１／ＰＤ－Ｌ１；Ｂ７－Ｈ２；Ｂ７－Ｈ３；Ｂ７－Ｈ４；Ｂ７－Ｈ６；Ｂ７－Ｈ７；ＢＴＬＡ／ＣＤ２７２；ＣＤ２８；ＣＴＬＡ－４；Ｇｉ２４／ＶＩＳＴＡ／Ｂ７－Ｈ５；ＩＣＯＳ／ＣＤ２７８；ＰＤ－１；ＰＤ－Ｌ２／Ｂ７－ＤＣ；ＰＤＣＤ６）；４－１ＢＢ／ＴＮＦＳＦ９／ＣＤ１３７；４－１ＢＢリガンド／ＴＮＦＳＦ９；ＢＡＦＦ／ＢＬｙＳ／ＴＮＦＳＦ１３Ｂ；ＢＡＦＦ Ｒ／ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ；ＣＤ２７／ＴＮＦＲＳＦ７；ＣＤ２７リガンド／ＴＮＦＳＦ７；ＣＤ３０／ＴＮＦＲＳＦ８；ＣＤ３０リガンド／ＴＮＦＳＦ８；ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５；ＣＤ４０／ＴＮＦＳＦ５；ＣＤ４０リガンド／ＴＮＦＳＦ５；ＤＲ３／ＴＮＦＲＳＦ２５；ＧＩＴＲ／ＴＮＦＲＳＦ１８；ＧＩＴＲリガンド／ＴＮＦＳＦ１８；ＨＶＥＭ／ＴＮＦＲＳＦ１４；ＬＩＧＨＴ／ＴＮＦＳＦ１４；リンホトキシン－アルファ／ＴＮＦ－ベータ；ＯＸ４０／ＴＮＦＲＳＦ４；ＯＸ４０リガンド／ＴＮＦＳＦ４；ＲＥＬＴ／ＴＮＦＲＳＦ１９Ｌ；ＴＡＣＩ／ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ；ＴＬ１Ａ／ＴＮＦＳＦ１５；ＴＮＦ－アルファ；ＴＮＦ ＲＩＩ／ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ）；２Ｂ４／ＣＤ２４４／ＳＬＡＭＦ４；ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８；ＣＤ２；ＣＤ２Ｆ－１０／ＳＬＡＭＦ９；ＣＤ４８／ＳＬＡＭＦ２；ＣＤ５８／ＬＦＡ－３；ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５；ＣＤ２２９／ＳＬＡＭＦ３；ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７；ＮＴＢ－Ａ／ＳＬＡＭＦ６；ＳＬＡＭ／ＣＤ１５０）；ＣＤ２；ＣＤ７；ＣＤ５３；ＣＤ８２／Ｋａｉ－１；ＣＤ９０／Ｔｈｙ１；ＣＤ９６；ＣＤ１６０；ＣＤ２００；ＣＤ３００ａ／ＬＭＩＲ１；ＨＬＡ Ｃｌａｓｓ Ｉ；ＨＬＡ－ＤＲ；Ｉｋａｒｏｓ；インテグリンアルファ４／ＣＤ４９ｄ；インテグリンアルファ４ベータ１；インテグリンアルファ４ベータ７／ＬＰＡＭ－１；ＬＡＧ－３；ＴＣＬ１Ａ；ＴＣＬ１Ｂ；ＣＲＴＡＭ；ＤＡＰ１２；デクチン－１／ＣＬＥＣ７Ａ；ＤＰＰＩＶ／ＣＤ２６；ＥｐｈＢ６；ＴＩＭ－１／ＫＩＭ－１／ＨＡＶＣＲ；ＴＩＭ－４；ＴＳＬＰ；ＴＳＬＰ Ｒ；リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）；ＮＫＧ２Ｃ、ＣＤ３ゼータドメイン、免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＣＤ１３４／ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、またはそれらの機能的断片のうちの１つ以上から選択される少なくとも１つのシグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ３ゼータドメインまたは免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、またはその機能的バリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、（ｉ）ＣＤ３ゼータドメイン、または免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、またはその機能的バリアント、及び（ｉｉ）ＣＤ２８ドメイン、または４－１ＢＢドメイン、またはその機能的バリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、（ｉ）ＣＤ３ゼータドメイン、または免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、またはその機能的バリアント、（ｉｉ）ＣＤ２８ドメインまたはその機能的バリアント、及び（ｉｉｉ）４－１ＢＢドメイン、またはＣＤ１３４ドメイン、またはその機能的バリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、（ｉ）ＣＤ３ゼータドメイン、もしくは免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、もしくはその機能的バリアント、（ｉｉ）ＣＤ２８ドメイン、もしくは４－１ＢＢドメイン、もしくはその機能的バリアント、及び／または（ｉｉｉ）４－１ＢＢドメイン、もしくはＣＤ１３４ドメイン、もしくはその機能的バリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、（ｉ）ＣＤ３ゼータドメイン、または免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、またはその機能的バリアント、（ｉｉ）ＣＤ２８ドメインまたはその機能的バリアント、（ｉｉｉ）４－１ＢＢドメイン、またはＣＤ１３４ドメイン、またはその機能的バリアント、及び（ｉｖ）サイトカインまたは共刺激リガンド導入遺伝子を含む。
所定の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３（例えば、ＣＤ３－ゼータ）細胞内ドメインに連結されたＣＤ２８膜貫通及びシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータ細胞内ドメインに連結された、キメラＣＤ２８及びＣＤ１３７（４－１ＢＢ、ＴＮＦＲＳＦ９）共刺激ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、細胞質部分において、１つ以上の、例えば、２つ以上の、共刺激ドメイン及び活性化ドメイン、例えば、一次活性化ドメインを包含する。例示的なＣＡＲには、ＣＤ３－ゼータ、ＣＤ２８、及び４－１ＢＢの細胞内成分が含まれる。
いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインには、４－１ＢＢシグナル伝達ドメイン及びＣＤ３－ゼータシグナル伝達ドメインの細胞内成分が含まれる。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインには、ＣＤ２８シグナル伝達ドメイン及びＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインの細胞内成分が含まれる。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、抗原（例えば、腫瘍抗原）に結合する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、抗体または抗体断片、例えば、ｓｃＦｖ）、スペーサー（例えば、本明細書に記載される任意のものなどのヒンジドメインを含有する）、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される任意のもの）、及び細胞内シグナル伝達ドメイン（例えば、任意の細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば、本明細書に記載される一次シグナル伝達ドメインまたは共刺激シグナル伝達ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次細胞質シグナル伝達ドメインであるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインには、共刺激分子の細胞内シグナル伝達ドメイン（例えば、共刺激ドメイン）が追加的に含まれる。ＣＡＲの例示的な成分の例は、表６に記載されている。提供される態様では、ＣＡＲにおける各成分の配列には、表６に列挙される任意の組み合わせが含まれ得る。
（表６）ＣＡＲ成分及び例示的な配列
Figure 2023521663000056
Figure 2023521663000057
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、１つ以上のスペーサーをさらに含み、例えば、スペーサーは、抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の第１のスペーサーである。いくつかの実施形態では、第１のスペーサーには、免疫グロブリン定常領域もしくはバリアントまたはその修飾されたバージョンの少なくとも一部が含まれる。いくつかの実施形態では、スペーサーは、膜貫通ドメインとシグナル伝達ドメインとの間の第２のスペーサーである。いくつかの実施形態では、第２のスペーサーは、オリゴペプチドであり、例えば、オリゴペプチドは、グリシン－セリンダブレットを含む。
本明細書に記載のＣＡＲに加えて、様々なキメラ抗原受容体及びそれをコードするヌクレオチド配列が知られており、本明細書に記載されるｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏでの標的細胞のフソソーム送達及び再プログラム化に好適であろう。例えば、ＷＯ２０１３０４０５５７、ＷＯ２０１２０７９０００、ＷＯ２０１６０３０４１４、Ｓｍｉｔｈ Ｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．２０１７．（ＤＯＩ：１０．１０３８／ＮＮＡＮＯ．２０１７．５７）（その開示は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲまたはＣＡＲをコードする核酸（例えば、ＤＮＡ、ｇＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＲＮＡ、ｐｒｅ－ＭＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡなど）を含む標的化脂質粒子が標的細胞に送達される。いくつかの実施形態では、標的細胞は、１つ以上のＦｃ受容体を発現し、かつ１つ以上のエフェクター機能を媒介するエフェクター細胞、例えば、免疫系の細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞には、単球、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好酸球、肥満細胞、血小板、大型顆粒リンパ球、ランゲルハンス細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔリンパ球（例えば、Ｔ細胞）、ガンマデルタＴ細胞、Ｂリンパ球（例えば、Ｂ細胞）のうちの１つ以上が含まれ得るがこれらに限定されない場合があり、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、及びサルを含むがこれらに限定されない任意の生物からのものであり得る。
Ｅ．標的化脂質粒子を生成する方法
本明細書では、脂質二重層と、脂質二重層によって囲まれた内腔と、標的化エンベロープタンパク質と、フソゲンとを含む、標的化脂質粒子であって、標的化エンベロープタンパク質及びフソゲンが、脂質二重層に埋め込まれている、標的化脂質粒子が提供される。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、ウイルス粒子、ウイルス様粒子、ナノ粒子、小胞、エクソソーム、デンドリマー、レンチウイルス、ウイルスベクター、除核細胞、微小胞、膜小胞、細胞外膜小胞、細胞膜小胞、巨大細胞膜小胞、アポトーシス小体、ミト粒子、ピレノサイト、リソソーム、別の膜包囲小胞、またはレンチウイルスベクター、ウイルスベースの粒子、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）または細胞由来粒子であり得る。
１．ウイルス様粒子
本明細書では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子などのウイルスに由来する標的化脂質粒子（レトロウイルスまたはレンチウイルスに由来するものを含む）が提供される。いくつかの実施形態では、両親媒性脂質の標的化脂質粒子の二重層は、ウイルスエンベロープであるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、両親媒性脂質の標的化脂質粒子の二重層は、プロデューサー細胞に由来する脂質であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、ウイルスエンベロープは、フソゲン、例えば、ウイルスに対して内因性であるフソゲンまたは偽型化フソゲンを含み得る。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子の内腔またはキャビティは、ウイルス核酸、例えば、レトロウイルス核酸、例えば、レンチウイルス核酸を含む。いくつかの実施形態では、ウイルス核酸は、ウイルスゲノムであり得る。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、１つ以上のウイルス非構造タンパク質を、例えば、そのキャビティまたは内腔にさらに含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、ＶＬＰは、エンベロープを含まない。いくつかの実施形態では、ＶＬＰは、エンベロープを含む。
いくつかの実施形態では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子、例えば、レトロウイルスまたはレトロウイルス様粒子は、ｇａｇポリタンパク質、ポリメラーゼ（例えば、ｐｏｌ）、インテグラーゼ（例えば、非機能性または非機能性バリアント）、プロテアーゼ、及びフソゲンのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、ｒｅｖをさらに含む。いくつかの実施形態では、前述のタンパク質の１つ以上は、レトロウイルスゲノムにコードされ、いくつかの実施形態では、前述のタンパク質の１つ以上は、例えば、ヘルパー細胞、ヘルパーウイルス、またはヘルパープラスミドによってトランスで提供される。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子核酸（例えば、レトロウイルス核酸）は、以下の核酸配列：５’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３ドメインを欠く）、プサイパッケージング要素（プサイ）、ペイロード遺伝子に機能可能に連結されたセントラルポリプリン配列（ｃＰＰＴ）プロモーター、ペイロード遺伝子（任意にオープンリーディングフレームの前のイントロンを含む）、ポリＡテール配列、ＷＰＲＥ、及び３’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３を欠く）のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子核酸は、１つ以上のインシュレーター要素をさらに含む。いくつかの実施形態では、認識部位は、ポリＡテール配列とＷＰＲＥとの間に位置する。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、カプシドへ自己構築するウイルスタンパク質によって形成される超分子複合体を含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、ウイルスカプシドに由来するウイルス粒子またはウイルス様粒子である。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、ウイルスヌクレオカプシドに由来するウイルス粒子またはウイルス様粒子である。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、核酸をパッケージングする特性を保持するヌクレオカプシド由来を含む。いくつかの実施形態では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子は、ウイルス構造糖タンパク質のみを含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、ウイルスゲノムを含有しない。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、発現プロセス中に宿主細胞からの核酸をパッケージングする。いくつかの実施形態では、核酸は、ウイルス複製に関与するいかなる遺伝子もコードしない。特定の実施形態では、標的化脂質粒子は、例えば、複製欠損性であるウイルス様粒子、例えば、レンチウイルス様粒子などのレトロウイルス様粒子である。
いくつかの場合では、標的化脂質粒子は、野生型感染性ウイルスから形態的に区別不可能なウイルス粒子である。いくつかの実施形態では、ウイルス粒子は、ウイルスプロテオーム全体を抗原として提示する。いくつかの実施形態では、ウイルス粒子は、プロテオームの一部のみを抗原として提示する。
いくつかの実施形態では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子は、パラミクソウイルス科内のウイルスからのタンパク質（例えば、エンベロープタンパク質）を利用して生成される。いくつかの実施形態では、パラミクソウイルス科は、ヘニパウイルス属内のメンバーを含む。いくつかの実施形態では、ヘニパウイルスは、ヘンドラ（ＨｅＶ）またはニパ（ＮｉＶ）ウイルスであるか、またはそれを含む。特定の実施形態では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子は、セクションＩ．Ａ．及び１．Ｂ．に記載される標的化エンベロープタンパク質及びフソゲンを組み込む。
いくつかの実施形態では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子は、細菌、哺乳動物細胞株、昆虫細胞株、酵母及び植物細胞を含む複数の細胞培養システムにおいて生成され得る。
いくつかの実施形態では、ウイルス粒子またはウイルス様粒子の構築は、ウイルスゲノム内の独自のカプシド形成配列（例えば、ステムループ構造を有するＵＴＲ）へのコアタンパク質の結合によって開始する。いくつかの実施形態では、コアとカプシド形成配列との相互作用は、オリゴマー化を容易化する。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、配列からウイルスＲＮＡを除去または排除する結果であり得るウイルスＲＮＡがないまたはそれを欠く配列を含むウイルス様粒子である。いくつかの実施形態では、これは、ｇａｇ上の内因性パッケージングシグナル結合部位を使用することによって達成され得る。いくつかの実施形態では、内因性パッケージングシグナル結合部位は、ｐｏｌ上にある。いくつかの実施形態では、送達されるＲＮＡは、同種パッケージングシグナルを含有する。いくつかの実施形態では、送達されるＲＮＡ上に位置する異種結合ドメイン（ｇａｇに対して異種である）、及びｇａｇまたはｐｏｌ上に位置する同種結合部位は、送達されるＲＮＡのパッケージングを確保するために使用され得る。いくつかの実施形態では、異種配列は、非ウイルス性であり得、またはそれは、ウイルス性であり得、その場合、それは異なるウイルスに由来し得る。いくつかの実施形態では、ベクター粒子は、治療ＲＮＡを送達するため使用され得、その場合、機能性インテグラーゼ及び／または逆転写酵素は必要とされない。いくつかの実施形態では、ベクター粒子はまた、対象となる治療遺伝子を送達するため使用され得、その場合、ｐｏｌが典型的に含まれる。
ａ．トランスファーベクター
いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸は、５’プロモーター（例えば、パッケージングされたＲＮＡ全体の発現をコントロールするためのもの）、５’ＬＴＲ（例えば、Ｒ（ポリアデニル化テールシグナルを含む）及び／またはプライマー活性化シグナルを含むＵ５）、プライマー結合部位、プサイパッケージングシグナル、核外搬出のためのＲＲＥ要素、導入遺伝子発現をコントロールするための導入遺伝子の直接的上流のプロモーター、導入遺伝子（または他の外因性物質要素）、ポリプリントラクト、及び３’ＬＴＲ（例えば、変異したＵ３、Ｒ、及びＵ５を含む）のうちの１つ以上（例えば、すべて）を含む。いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸は、ｃＰＰＴ、ＷＰＲＥ、及び／またはインシュレーター要素のうちの１つ以上をさらに含む。
レトロウイルスは、典型的には、そのゲノムＲＮＡの線状二本鎖ＤＮＡコピーへの逆転写によって複製し、その後、そのゲノムＤＮＡを宿主ゲノムに共有結合的に組み込む。特定の実施形態において使用するために好適な例示的なレトロウイルスには、モロニーマウス白血病ウイルス（Ｍ－ＭｕＬＶ）、モロニーマウス肉腫ウイルス（ＭｏＭＳＶ）、ハーベイマウス肉腫ウイルス（ＨａＭｕＳＶ）、マウス乳腫瘍ウイルス（ＭｕＭＴＶ）、テナガザル白血病ウイルス（ＧａＬＶ）、ネコ白血病ウイルス（ＦＬＶ）、スピューマウイルス、フレンドマウス白血病ウイルス、マウス幹細胞ウイルス（ＭＳＣＶ）及びラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）、及びレンチウイルスが含まれるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態ではレトロウイルスは、ガンマレトロウイルスである。いくつかの実施形態ではレトロウイルスは、イプシロンレトロウイルスである。いくつかの実施形態ではレトロウイルスは、アルファレトロウイルスである。いくつかの実施形態ではレトロウイルスは、ベータレトロウイルスである。いくつかの実施形態ではレトロウイルスは、デルタレトロウイルスである。いくつかの実施形態ではレトロウイルスは、レンチウイルスである。いくつかの実施形態では、レトロウイルスは、スプマレトロウイルスである。いくつかの実施形態ではレトロウイルスは、内因性レトロウイルスである。
例示的なレンチウイルスには、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス；ＨＩＶ１型、及びＨＩＶ２型を含む）、ビスナ・マエディウイルス（ＶＭＶ）ウイルス、ヤギ関節炎－脳炎ウイルス（ＣＡＥＶ）、ウマ伝染性貧血ウイルス（ＥＩＡＶ）、ネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）、ウシ免疫不全ウイルス（ＢＩＶ）、及びサル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）が含まれるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＨＩＶベースのベクター骨格（すなわち、ＨＩＶシス作用性配列要素）が使用される。
いくつかの実施形態では、本明細書におけるベクターは、別の核酸分子を移行または輸送することが可能な核酸分子である。移行される核酸は通常、ベクター核酸分子に連結され、例えば、挿入される。ベクターには、細胞において自己複製を誘導する配列が含まれ得、または宿主細胞ＤＮＡへの組み込みを可能とするのに十分な配列が含まれ得る。有用なベクターには、例えば、プラスミド（例えば、ＤＮＡプラスミドまたはＲＮＡプラスミド）、トランスポゾン、コスミド、細菌人工染色体、及びウイルスベクターが含まれる。有用なウイルスベクターには、例えば、複製欠損性レトロウイルス及びレンチウイルスが含まれる。
いくつかの実施形態では、ウイルスベクターは、典型的には核酸分子の移行または細胞のゲノムもしくは核酸移行を媒介するウイルス粒子への組み込みを容易化するウイルス由来核酸要素を含む核酸分子（例えば、トランスファープラスミド）を含む。ウイルス粒子は、典型的には、核酸（複数可）に加えて様々なウイルス成分及び時に宿主細胞成分も含み得る。いくつかの実施形態では、ウイルスベクターは、例えば、核酸を細胞に、または移行した核酸（例えば、むき出しのＤＮＡ）に移行させることが可能なウイルスまたはウイルス粒子を含む。いくつかの実施形態では、ウイルスベクター及びトランスファープラスミドは、主にウイルスに由来する構造的及び／または機能的遺伝子要素を含む。レトロウイルスベクターは、主にレトロウイルスに由来する構造的及び／または機能的遺伝子要素、またはその一部を含有するウイルスベクターまたはプラスミドを含み得る。レンチウイルスベクターは、主にレンチウイルスに由来する、ＬＴＲを含む、構造的及び／または機能的遺伝子要素、またはその一部を含有するウイルスベクターまたはプラスミドを含み得る。
実施形態では、レンチウイルスベクター（例えば、レンチウイルス発現ベクター）は、レンチウイルストランスファープラスミド（例えば、むき出しのＤＮＡとして）または感染性レンチウイルス粒子を含み得る。クローニング部位、プロモーター、制御要素、異種核酸などの要素に関して、これらの要素の配列は、ＲＮＡ形態でレンチウイルス粒子に存在し得、ＤＮＡ形態でＤＮＡプラスミドに存在し得ることが理解されるべきである。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のベクターにおいて、複製に寄与する、または必須である１つ以上のタンパク質コード領域の少なくとも一部は、対応する野生型ウイルスと比較して存在しない場合がある。いくつかの実施形態では、ウイルスベクターは、複製欠損性である。いくつかの実施形態では、ベクターは、標的非分裂宿主細胞の形質導入、及び／またはそのゲノムを宿主ゲノムに組み込むことが可能である。
いくつかの実施形態では、野生型レトロウイルスゲノムの構造は、しばしば、５’長い末端反復（ＬＴＲ）及び３’ＬＴＲを含み、その間またはその中に、ゲノムがパッケージングされることを可能にするためのパッケージングシグナル、プライマー結合部位、宿主細胞ゲノムへの組み込みを可能とするための組み込み部位ならびにウイルス粒子の構築を促進するパッケージング成分をコードするｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖ遺伝子が配置されている。より複雑なレトロウイルスは、追加の特徴、例えば、ＨＩＶにおけるｒｅｖ及びＲＲＥ配列を有し、これは、感染した標的細胞の核から細胞質への組み込まれたプロウイルスのＲＮＡ転写産物の効率的な搬出を可能とする。プロウイルスでは、ウイルス遺伝子は、長い末端反復（ＬＴＲ）と呼ばれる領域によって両端で挟まれている。いくつかの実施形態では、ＬＴＲは、プロウイルスの組み込み及び転写に関与する。いくつかの実施形態では、ＬＴＲは、エンハンサー－プロモーター配列として機能し、ウイルス遺伝子の発現をコントロールし得る。いくつかの実施形態では、レトロウイルスＲＮＡのカプシド形成は、ウイルスゲノムの５’末端に位置するプサイ配列により生じる。
いくつかの実施形態では、ＬＴＲは、Ｕ３、Ｒ及びＵ５と呼ばれる３つの要素に分けられ得る同様の配列である。Ｕ３は、ＲＮＡの３’末端に特有の配列に由来する。Ｒは、ＲＮＡの両端で繰り返される配列に由来し、Ｕ５は、ＲＮＡの５’末端に特有の配列に由来する。３つの要素のサイズは、異なるレトロウイルス間で大幅に変化し得る。
いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムについては、転写開始の部位は、典型的には、一方のＬＴＲにおけるＵ３とＲとの間の境界であり、ポリ（Ａ）付加（終結）の部位は、他方のＬＴＲにおけるＲとＵ５との間の境界である。Ｕ３は、細胞性、及びいくつかの場合では、ウイルス転写活性化因子タンパク質に対して反応性のプロモーター及び複数のエンハンサー配列を含む、プロウイルスの転写コントロール要素のほとんどを含有する。いくつかの実施形態では、レトロウイルスは、遺伝子発現の制御に関与するタンパク質をコードする次の遺伝子：ｔａｔ、ｒｅｖ、ｔａｘ及びｒｅｘのうちの任意の１つ以上を含む。
いくつかの実施形態では、構造遺伝子ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖ、ｇａｇは、ウイルスの内部構造タンパク質をコードする。いくつかの実施形態では、Ｇａｇタンパク質は、成熟タンパク質ＭＡ（マトリックス）、ＣＡ（カプシド）及びＮＣ（ヌクレオカプシド）にタンパク質分解的に処理される。いくつかの実施形態では、ｐｏｌ遺伝子は、逆転写酵素（ＲＴ）をコードし、これは、ゲノムの複製を媒介する、ＤＮＡポリメラーゼ、関連するＲＮａｓｅ Ｈ及びインテグラーゼ（ＩＮ）を含有する。いくつかの実施形態では、ｅｎｖ遺伝子は、細胞受容体タンパク質と特異的に相互作用する複合体を形成する、ビリオンの表面（ＳＵ）糖タンパク質及び膜貫通（ＴＭ）タンパク質をコードする。いくつかの実施形態では、相互作用は、ウイルス膜と細胞膜との融合によって感染症を促進する。
いくつかの実施形態では、複製欠損性レトロウイルスベクターゲノムｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖは、存在しない場合があり、または機能性ではない場合がある。いくつかの実施形態では、ＲＮＡの両末端におけるＲ領域は、典型的には繰り返し配列である。いくつかの実施形態では、Ｕ５及びＵ３は、ＲＮＡゲノムの５’及び３’末端における独自の配列をそれぞれ表す。
いくつかの実施形態では、レトロウイルスはまた、ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖ以外のタンパク質をコードする追加の遺伝子を含有し得る。追加の遺伝子の例には、（ＨＩＶにおける）、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｘ、ｖｐｕ、ｔａｔ、ｒｅｖ及びｎｅｆのうちの１つ以上が含まれる。ＥＩＡＶは、（とりわけ）追加の遺伝子Ｓ２を有する。いくつかの実施形態では、追加の遺伝子によってコードされるタンパク質は、様々な機能を果たし、その一部は、細胞性タンパク質によって提供される機能の重複であり得る。ＥＩＡＶにおいて、例えば、ｔａｔは、ウイルスＬＴＲの転写活性化因子として作用する（Ｄｅｒｓｅ ａｎｄ Ｎｅｗｂｏｌｄ １９９３ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １９４：５３０－６；Ｍａｕｒｙ ｅｔ ａｌ．１９９４ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ２００：６３２－４２）。それは、ＴＡＲと称される安定なステムループＲＮＡ二次構造に結合する。Ｒｅｖは、ｒｅｖ－反応要素（ＲＲＥ）を介してウイルス遺伝子の発現を制御し、調整する（Ｍａｒｔａｒａｎｏ ｅｔ ａｌ．１９９４ Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６８：３１０２－１１）。
いくつかの実施形態では、プロテアーゼ、逆転写酵素及びインテグラーゼに加えて、非霊長類レンチウイルスは、ｄＵＴＰａｓｅをコードする第４のｐｏｌ遺伝子産物を含有する。いくつかの実施形態では、これは、これらのレンチウイルスが、所定の非分裂細胞または徐々に分裂する細胞タイプに感染する能力において役割を果たす。
実施形態では、組換えレンチウイルスベクター（ＲＬＶ）は、ＲＮＡゲノムを、パッケージング成分の存在下で、標的細胞に感染することが可能なウイルス粒子にパッケージングすることが可能となるように十分なレトロウイルス遺伝子情報を有するベクターである。いくつかの実施形態では、標的細胞の感染は、逆転写及び標的細胞ゲノムへの組み込みを含み得る。いくつかの実施形態では、ＲＬＶは、典型的には、ベクターによって標的細胞に送達される非ウイルスコーディング配列を保有する。いくつかの実施形態では、ＲＬＶは、標的細胞内で感染性レトロウイルス粒子を生成するための独立した複製が不可能である。いくつかの実施形態では、ＲＬＶは、機能性ｇａｇ－ｐｏｌ及び／またはｅｎｖ遺伝子及び／または複製に関与する他の遺伝子を欠く。いくつかの実施形態では、ベクターは、例えば、ＰＣＴ特許出願ＷＯ９９／１５６８３（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、スプリット－イントロンベクターとして構成され得る。
いくつかの実施形態では、レンチウイルスベクターは、最小ウイルスゲノムを含み、例えば、ウイルスベクターは、例えば、ＷＯ９８／１７８１５（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、対象となるヌクレオチド配列を標的宿主細胞に感染させ、形質導入し、送達するための必要とされる機能性を提供するために、非必須要素を除去し、必須要素を保持するように操作されている。
いくつかの実施形態では、最小レンチウイルスゲノムは、例えば、（５’）Ｒ－Ｕ５－１つ以上の第１のヌクレオチド配列－Ｕ３－Ｒ（３’）を含み得る。いくつかの実施形態では、源細胞内でレンチウイルスゲノムを生成するために使用されるプラスミドベクターにはまた、源細胞におけるゲノムの転写を誘導するためのレンチウイルスゲノムに機能可能に連結された転写制御コントロール配列が含まれ得る。いくつかの実施形態では、制御配列は、転写されたレトロウイルス配列、例えば、５’Ｕ３領域に関連する天然配列を含み得、またはそれらは、異種プロモーター、例えば、別のウイルスプロモーター、例えばＣＭＶプロモーターを含み得る。いくつかの実施形態では、レンチウイルスゲノムは、効率的なウイルス生成を促進するための追加の配列を含む。いくつかの実施形態では、ＨＩＶの場合、ｒｅｖ及びＲＲＥ配列が含まれ得る。いくつかの実施形態では、代替的にまたは組み合わせて、コドン最適化が使用され得、例えば、外因性物質をコードする遺伝子は、例えば、ＷＯ０１／７９５１８（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、コドン最適化され得る。いくつかの実施形態では、ｒｅｖ／ＲＲＥシステムと類似するまたは同じ機能を発揮する代替的配列も使用され得る。いくつかの実施形態では、ｒｅｖ／ＲＲＥシステムの機能性アナログは、Ｍａｓｏｎ Ｐｆｉｚｅｒサルウイルスに見られる。いくつかの実施形態では、これは、ＣＴＥとして知られており、感染細胞における因子と相互作用すると考えられるゲノムにおけるＲＲＥ型配列を含む。細胞因子は、ｒｅｖアナログと考えられ得る。いくつかの実施形態では、ＣＴＥは、ｒｅｖ／ＲＲＥシステムの代替手段として使用され得る。いくつかの実施形態では、ＨＴＬＶ－ＩのＲｅｘタンパク質は、ＨＩＶ－ＩのＲｅｖタンパク質に機能的に取って代わり得る。Ｒｅｖ及びＲｅｘは、ＩＲＥ－ＢＰに対して類似する効果を有する。
いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸（例えば、レンチウイルス核酸、例えば、霊長類または非霊長類レンチウイルス核酸）は、（１）欠失したｇａｇ遺伝子であって、ｇａｇ遺伝子における欠失が、ｇａｇコード配列の約ヌクレオチド３５０または３５４の下流の１つ以上のヌクレオチドを除去する、欠失したｇａｇ遺伝子を含む、（２）レトロウイルス核酸に存在しない１つ以上のアクセサリー遺伝子を有する、（３）ｔａｔ遺伝子を欠くが、５’ＬＴＲの末端とｇａｇのＡＴＧとの間にリーダー配列を含む、及び（４）（１）、（２）及び（３）の組み合わせである。実施形態では、レンチウイルスベクターは、特徴（１）及び（２）及び（３）のすべてを含む。このストラテジーは、ＷＯ９９／３２６４６（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）においてより詳細に記載されている。
いくつかの実施形態では、霊長類レンチウイルス最小システムは、ベクター生成のためにまたは分裂細胞及び非分裂細胞の形質導入のためにＨＩＶ／ＳＩＶの追加の遺伝子ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｘ、ｖｐｕ、ｔａｔ、ｒｅｖ及びｎｅｆのいずれも必要としない。いくつかの実施形態では、ＥＩＡＶ最小ベクターシステムは、ベクター生成のためにまたは分裂細胞及び非分裂細胞の形質導入のためにＳ２を必要としない。
いくつかの実施形態では、追加の遺伝子の欠失により、レンチウイルス（例えば、ＨＩＶ）感染症における疾患に関連する遺伝子を伴わずにベクターを生成することが可能となり得る。いくつかの実施形態では、ｔａｔは、疾患に関連する。いくつかの実施形態では、追加の遺伝子の欠失により、ベクターは、より多くの異種ＤＮＡをパッケージングすることが可能となる。いくつかの実施形態では、Ｓ２などの機能が不明である遺伝子は、省略され、よって、不要な効果を引き起こすリスクを減少させ得る。最小レンチウイルスベクターの例は、ＷＯ９９／３２６４６及びＷＯ９８／１７８１５に開示されている。
いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸は、少なくともｔａｔ及びＳ２（それがＥＩＡＶベクターシステムである場合）を欠き、場合によってはｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｘ、ｖｐｕ及びｎｅｆも欠く。いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸はまた、ｒｅｖ、ＲＲＥ、またはその両方を欠く。
いくつかの実施形態ではレトロウイルス核酸は、ｖｐｘを含む。Ｖｐｘポリペプチドは、細胞質における遊離ｄＮＴＰを分解するＳＡＭＨＤ１制限因子に結合し、その分解を誘導する。いくつかの実施形態では、細胞質における遊離ｄＮＴＰの濃度は、ＶｐｘがＳＡＭＨＤ１を分解し、逆転写活性が増加するとともに増加し、よって、レトロウイルスゲノムの逆転写及び標的細胞ゲノムへの組み込みを容易化する。
いくつかの実施形態では、異なる細胞は、特定のコドンのそれらの使用頻度が異なる。いくつかの実施形態では、このコドンバイアスは、細胞タイプにおける特定のｔＲＮＡの相対的存在量におけるバイアスに対応する。いくつかの実施形態では、対応するｔＲＮＡの相対的存在量に一致するように調整されるように配列におけるコドンを改変することにより、発現を増加させることが可能である。いくつかの実施形態では、対応するｔＲＮＡが特定の細胞タイプにおいて稀であることが知られているコドンを故意に選択することによって発現を減少させることが可能である。いくつかの実施形態では、追加の程度の翻訳コントロールが可能である。コドン最適化の追加的説明は、例えば、ＷＯ９９／４１３９７（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
いくつかの実施形態では、ＨＩＶ及び他のレンチウイルスを含むウイルスは、多数の稀なコドンを使用し、これらを一般的に使用される哺乳動物コドンに対応するように変化させることによって、哺乳動物プロデューサー細胞におけるパッケージング成分の増加した発現が達成され得る。
いくつかの実施形態では、コドン最適化は、多数の他の利点を有する。いくつかの実施形態では、それらの配列における変化により、パッケージング成分をコードするヌクレオチド配列は、ＲＮＡ不安定性配列（ＩＮＳ）が減少、またはそれから排除され得る。同時に、パッケージング成分のためのアミノ酸配列コード配列は、その配列によってコードされるウイルス成分が、パッケージング成分の機能が損なわれないように同じ、または十分に類似したままとなるように保持される。いくつかの実施形態では、コドン最適化はまた、搬出のためのＲｅｖ／ＲＲＥ要件を克服し、最適化された配列をＲｅｖ非依存とする。いくつかの実施形態では、コドン最適化はまた、ベクターシステム内の異なるコンストラクト間（例えば、ｇａｇ－ｐｏｌ及びｅｎｖオープンリーディングフレームにおける重複の領域間）の相同組換えを減少させる。いくつかの実施形態では、コドン最適化は、ウイルス力価の増加及び／または改善した安全性をもたらす。
いくつかの実施形態では、ＩＮＳに関するコドンのみが、コドン最適化される。他の実施形態では、配列は、ｇａｇ－ｐｏｌのフレームシフト部位を包含する配列を除き、それらの全体がコドン最適化される。
ｇａｇ－ｐｏｌ遺伝子は、ｇａｇ－ｐｏｌタンパク質をコードする２つの重複するリーディングフレームを含む。両方のタンパク質の発現は、翻訳中のフレームシフトに依存する。このフレームシフトは、翻訳中のリボソーム「滑り（ｓｌｉｐｐａｇｅ）」の結果として生じる。この滑りは、少なくとも部分的にリボソーム停止ＲＮＡ二次構造によって引き起こされると考えられる。そのような二次構造は、ｇａｇ－ｐｏｌ遺伝子におけるフレームシフト部位の下流に存在する。ＨＩＶの場合、重複の領域は、ｇａｇの開始の１２２２下流のヌクレオチド（ヌクレオチド１は、ｇａｇ ＡＴＧのＡである）からｇａｇの最後（ｎｔ１５０３）まで伸長する。結果的に、フレームシフト部位及び２つのリーディングフレームの重複領域に及ぶ２８１ｂｐ断片は、好ましくはコドン最適化されない。いくつかの実施形態では、この断片の保持は、ｇａｇ－ｐｏｌタンパク質の発現をより効率的なものとする。ＥＩＡＶの場合、重複の開始は、ｎｔ１２６２（ヌクレオチド１はｇａｇ ＡＴＧのＡである）である。重複の最後は、ｎｔ１４６１である。フレームシフト部位及びｇａｇ－ｐｏｌ重複が保存されることを確保するために、野生型配列は、ｎｔ１１５６から１４６５まで保持され得る。
いくつかの実施形態では、例えば、好都合な制限部位を提供するために、最適なコドン使用頻度からの逸脱がなされ得、保存的アミノ酸変化がｇａｇ－ｐｏｌタンパク質に導入され得る。
いくつかの実施形態では、コドン最適化は、哺乳動物システムにおける不十分なコドン使用頻度を伴うコドンに基づく。３番目ならびに時に２番目及び３番目の塩基が変化され得る。
いくつかの実施形態では、遺伝子コードの縮重特質により、多数のｇａｇ－ｐｏｌ配列が当業者によって達成され得ることが理解される。また、コドン最適化ｇａｇ－ｐｏｌ配列を生成するための足掛かりとして使用され得る記載される多くのレトロウイルスバリアントが存在する。レンチウイルスゲノムは、非常に可変性である。例えば、依然として機能性であるＨＩＶ－Ｉの多くの準種が存在する。これは、ＥＩＡＶについても当てはまる。これらのバリアントは、形質導入プロセスの特定の部分を向上させるために使用され得る。ＨＩＶ－Ｉバリアントの例は、Ｌｏｓ Ａｌａｍｏｓ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙによって維持されているＨＩＶデータベースで見ることができる。ＥＩＡＶクローンの詳細は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈによって維持されているＮＣＢＩデータベースで見ることができる。
いくつかの実施形態では、コドン最適化ｇａｇ－ｐｏｌ配列のためのストラテジーが、任意のレトロウイルス、例えば、ＥＩＡＶ、ＦＩＶ、ＢＩＶ、ＣＡＥＶ、ＶＭＲ、ＳＩＶ、ＨＩＶ－Ｉ及びＨＩＶ－２に関して使用され得る。また、この方法は、ＨＴＬＶ－Ｉ、ＨＴＬＶ－２、ＨＦＶ、ＨＳＲＶ及びヒト内因性レトロウイルス（ＨＥＲＶ）、ＭＬＶ及び他のレトロウイルスからの遺伝子の発現を増加させるために使用され得る。
実施形態では、レトロウイルスベクターは、ｅｎｖ配列を依然として保持するベクターにおけるｇａｇの２５５～３６０ヌクレオチド、またはスプライスドナー変異、ｇａｇ及びｅｎｖ欠失の特定の組み合わせにおけるｇａｇの約４０ヌクレオチド含むパッケージングシグナルを含む。いくつかの実施形態では、レトロウイルスベクターは、１つ以上の欠失を含むｇａｇ配列を含み、例えば、ｇａｇ配列は、Ｎ末端から誘導可能な約３６０ヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態では、レトロウイルスベクター、ヘルパー細胞、ヘルパーウイルス、またはヘルパープラスミドは、レトロウイルス構造及びアクセサリータンパク質、例えばｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ、ｔａｔ、ｒｅｖ、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ、ｖｐｘ、またはｎｅｆタンパク質または他のレトロウイルスタンパク質を含み得る。いくつかの実施形態ではレトロウイルスタンパク質は、同じレトロウイルスに由来する。いくつかの実施形態では、レトロウイルスタンパク質は、複数のレトロウイルス、例えば、２、３、４、またはそれ以上のレトロウイルスに由来する。
いくつかの実施形態では、ｇａｇ及びｐｏｌをコードする配列は通常、ネイティブレンチウイルスにおいてＧａｇ－Ｐｏｌ前駆体として組織化される。ｇａｇ配列は、ｐ５５とも呼ばれる、５５ｋＤのＧａｇ前駆体タンパク質をコードする。ｐ５５は、ＭＡ（マトリックス［ｐ１７］）、ＣＡ（カプシド［ｐ２４］）、ＮＣ（ヌクレオカプシド［ｐ９］）、及びｐ６と指定された４つのより小さなタンパク質への成熟のプロセス中にウイルスにコードされるプロテアーゼ（ｐｏｌ遺伝子の生成物）によって切断される。ｐｏｌ前駆体タンパク質は、ウイルスにコードされるプロテアーゼによってＧａｇから切断され、さらに消化されてプロテアーゼ（ｐ１０）、ＲＴ（ｐ５０）、ＲＮａｓｅ Ｈ（ｐ１５）、及びインテグラーゼ（ｐ３１）活性を分離する。
いくつかの実施形態では、レンチウイルスベクターは、組み込み欠損性である。いくつかの実施形態では、ｐｏｌは、インテグラーゼ遺伝子における変異によりコードすることなどによってインテグラーゼ欠損性となる。例えば、ｐｏｌコード配列は、例えば、触媒活性に関与するアミノ酸の１つ以上の変異、すなわち、アスパラギン６４、アスパラギン酸１１６及び／またはグルタミン酸１５２のうちの１つ以上の変異によって、インテグラーゼにおける不活性化変異を含有し得る。いくつかの実施形態では、インテグラーゼ変異は、Ｄ６４Ｖ変異である。いくつかの実施形態では、インテグラーゼにおける変異は、ウイルスＲＮＡのレンチウイルスへのパッケージングを可能とする。いくつかの実施形態では、インテグラーゼにおける変異は、ウイルスタンパク質のレンチウイルスへのパッケージングを可能とする。いくつかの実施形態では、インテグラーゼにおける変異は、挿入変異生成の可能性を減少させる。いくつかの実施形態では、インテグラーゼにおける変異は、複製能力のあるリコンビナント（ＲＣＲ）を生成する可能性を低下させる（Ｗａｎｉｓｃｈ ｅｔ ａｌ．２００９．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．１７９８）：１３１６－１３３２）。いくつかの実施形態では、ネイティブＧａｇ－Ｐｏｌ配列がヘルパーベクター（例えば、ヘルパープラスミドまたはヘルパーウイルス）において利用され得、または修飾がなされ得る。これらの修飾には、キメラＧａｇ－Ｐｏｌであって、Ｇａｇ及びＰｏｌ配列が、異なるウイルス（例えば、異なる種、亜種、株、分岐群など）から得られ得、及び／または配列が、転写及び／または翻訳を改善するように、及び／または組換えを減少させるように修飾されているものが含まれる。
いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸には、（ｉ）野生型ＩＮＳ１に対してＲＮＡの核外搬出の制限を減少させる変異したＩＮＳ１阻害配列を含む、（ｉｉ）フレームシフト及び未完熟終結をもたらす２つのヌクレオチド挿入を含有する、及び／または（ｉｉｉ）ｇａｇのＩＮＳ２、ＩＮＳ３、及びＩＮＳ４阻害配列を含まないｇａｇタンパク質の１５０～２５０（例えば、１６８）ヌクレオチド部分をコードするポリヌクレオチドが含まれる。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のベクターは、レトロウイルス（例えば、レンチウイルス）配列及び非レンチウイルス性ウイルス配列の両方を含むハイブリッドベクターである。いくつかの実施形態では、ハイブリッドベクターは、逆転写、複製、組み込み及び／またはパッケージングのためのレトロウイルス、例えば、レンチウイルスの配列を含む。
いくつかの実施形態では、ウイルスベクター骨格配列のほとんどまたはすべては、レンチウイルス、例えば、ＨＩＶ－１に由来する。しかしながら、レトロウイルス及び／またはレンチウイルス配列の多くの異なる源が使用または組み合わされ得、所定のレンチウイルス配列における多数の置換及び改変が、トランスファーベクターが本明細書に記載の機能を発揮する能力を損なうことなく提供され得ることが理解されるべきである。多様なレンチウイルスベクターがＮａｌｄｉｎｉ ｅｔ ａｌ．，（１９９６ａ，１９９６ｂ，ａｎｄ １９９８）、Ｚｕｆｆｅｒｅｙ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）、Ｄｕｌｌ ｅｔ ａｌ．，１９９８，米国特許番号６，０１３，５１６、及び５，９９４，１３６に記載されており、その多くは、レトロウイルス核酸を生成するために適応され得る。
いくつかの実施形態では、プロウイルスの各末端には、長い末端反復（ＬＴＲ）が典型的に見られる。ＬＴＲは、典型的には、それらの天然配列状況において、ダイレクトリピートであり、かつＵ３、Ｒ及びＵ５領域を含有するレトロウイルス核酸の末端に位置するドメインを含む。ＬＴＲは通常、レトロウイルス遺伝子の発現（例えば、遺伝子転写産物の促進、開始及びポリアデニル化）及びウイルス複製を促進する。ＬＴＲは、転写コントロール要素、ポリアデニル化シグナルならびにウイルスゲノムの複製及び組み込みのための配列を含む、多数の制御シグナルを含み得る。ウイルスＬＴＲは、典型的には、Ｕ３、Ｒ及びＵ５と呼ばれる３つの領域に分けられるＵ３領域は、典型的には、エンハンサー及びプロモーター要素を含有する。Ｕ５領域は、典型的には、プライマー結合部位とＲ領域との間の配列であり、ポリアデニル化配列を含有し得る。Ｒ（リピート）領域は、Ｕ３及びＵ５領域によって挟まれ得る。ＬＴＲは、典型的には、Ｕ３、Ｒ及びＵ５領域から構成され、ウイルスゲノムの５′及び３′末端の両方に現れ得る。いくつかの実施形態では、５′ＬＴＲには、ゲノムの逆転写のための配列（ｔＲＮＡプライマー結合部位）及びウイルスＲＮＡの粒子への効率的なパッケージングのための配列（プサイ部位）が隣接する。
いくつかの実施形態では、パッケージングシグナルは、ウイルスＲＮＡのウイルスカプシドまたは粒子への挿入を媒介するレトロウイルスゲノム内に配置された配列を含み得、例えば、Ｃｌｅｖｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９５．Ｊ．ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６９，Ｎｏ．４；ｐｐ．２１０１－２１０９を参照されたい。いくつかのレトロウイルスベクターは、ウイルスゲノムのカプシド形成のための最小パッケージングシグナル（プサイ［Ψ］配列）を使用する。
様々な実施形態では、レトロウイルス核酸は、修飾された５′ＬＴＲ及び／または３′ＬＴＲを含む。ＬＴＲのいずれかまたは両方は、１つ以上の欠失、挿入、または置換を含むがこれらに限定されない１つ以上の修飾を含み得る。３′ＬＴＲの修飾は、しばしば、ウイルスを複製欠損性とすることによってレンチウイルスまたはレトロウイルスシステムの安全性を改善するために行われる（例えば、感染性ビリオンが生成されないように完全で有効な複製が不可能なウイルス（例えば、複製欠損性レンチウイルス子孫））。
いくつかの実施形態では、ベクターは、自己不活性化（ＳＩＮ）ベクター、例えば、複製欠損性ベクター、例えば、レトロウイルスまたはレンチウイルスベクターであって、右の（３′）ＬＴＲエンハンサー－プロモーター領域（Ｕ３領域として知られている）が、ウイルス複製の第１ラウンドを超えてウイルス転写を防止するように（例えば、欠失または置換によって）修飾されているものである。これは、右の（３′）ＬＴＲ Ｕ３領域がウイルス複製中に左の（５′）ＬＴＲ Ｕ３領域のためのテンプレートとして使用され得、よって、Ｕ３エンハンサー－プロモーターの非存在がウイルス複製を阻害するからである。実施形態では、３′ＬＴＲは、Ｕ５領域が除去、改変、または例えば、外因性ポリ（Ａ）配列で置き換えられるように修飾される。３′ＬＴＲ、５′ＬＴＲ、または３′及び５′ＬＴＲの両方は、修飾されたＬＴＲであり得る。
いくつかの実施形態では、５′ＬＴＲのＵ３領域は、ウイルス粒子の生成中にウイルスゲノムの転写を誘導するために異種プロモーターに置き換えられる。使用され得る異種プロモーターの例には、例えば、ウイルス性サルウイルス４０（ＳＶ４０）（例えば、初期または後期）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）（例えば、前初期）、モロニ―マウス白血病ウイルス（ＭｏＭＬＶ）、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）、及び単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）（チミジンキナーゼ）プロモーターが含まれる。いくつかの実施形態では、プロモーターは、Ｔａｔ非依存的様式で高レベルの転写を誘導することができる。所定の実施形態では、異種プロモーターは、ウイルスゲノムが転写される様式をコントロールする際に追加の利点を有する。例えば、異種プロモーターは、誘導性であり得、これによりウイルスゲノムのすべてまたは一部の転写が、誘導因子が存在する場合にのみ生じる。誘導因子には、１つ以上の化学的化合物または宿主細胞が培養される温度またはｐＨなどの生理学的条件が含まれるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態では、ウイルスベクターは、例えば、レンチウイルス（例えば、ＨＩＶ）ＬＴＲのＲ領域に位置する、ＴＡＲ（トランス活性化反応）要素を含む。この要素は、レンチウイルストランス活性化因子（ｔａｔ）遺伝子要素と相互作用してウイルス複製を向上させる。しかしながら、この要素は、例えば、５′ＬＴＲのＵ３領域が異種プロモーターによって置き換えられた実施形態では必要とされない。
いくつかの実施形態では、Ｒ領域、例えば、キャッピング基の開始（すなわち、転写の開始）で始まり、ポリＡトラクトの開始の直前に終了するレトロウイルスＬＴＲ内の領域は、Ｕ３及びＵ５領域によって挟まれ得る。Ｒ領域は、ゲノムの一端から他端への発生期ＤＮＡの移行において逆転写中に役割を果たす。
いくつかの実施形態では、レトロウイルス核酸はまた、ＦＬＡＰ要素、例えば、配列がレトロウイルス、例えば、ＨＩＶ－１またはＨＩＶ－２のセントラルポリプリン配列及びセントラル終結配列（ｃＰＰＴ及びＣＴＳ）を含む核酸を含み得る。好適なＦＬＡＰ要素は、米国特許番号６，６８２，９０７及びＺｅｎｎｏｕ，ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｃｅｌｌ，１０１：１７３（それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。ＨＩＶ－１逆転写中に、セントラルポリプリン配列（ｃＰＰＴ）におけるプラス鎖ＤＮＡの中央開始及びセントラル終結配列（ＣＴＳ）における中央終結は、３本鎖ＤＮＡ構造：ＨＩＶ－１セントラルＤＮＡフラップの形成をもたらし得る。いくつかの実施形態では、レトロウイルスまたはレンチウイルスベクター骨格は、外因性物質をコードする遺伝子の上流または下流に１つ以上のＦＬＡＰ要素を含む。例えば、いくつかの実施形態では、トランスファープラスミドには、ＦＬＡＰ要素、例えば、ＨＩＶ－１に由来する、またはそれから単離されたＦＬＡＰ要素が含まれる。
実施形態では、レトロウイルスまたはレンチウイルス核酸は、１つ以上の搬出要素、例えば、細胞の核から細胞質へのＲＮＡ転写産物の輸送を制御するシス作用性転写後制御要素を含む。ＲＮＡ搬出要素の例には、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ｒｅｖ反応要素（ＲＲＥ）（例えば、Ｃｕｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６５：１０５３；及びＣｕｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１．Ｃｅｌｌ ５８：４２３を参照されたい）、及びＢ型肝炎ウイルス転写後制御要素（ＨＰＲＥ）が含まれるがこれらに限定されず、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。通常、ＲＮＡ搬出要素は、遺伝子の３′ＵＴＲ内に配置され、１つまたは複数のコピーとして挿入され得る。
いくつかの実施形態では、ウイルスベクターにおける異種配列の発現は、転写後制御要素、ポリアデニル化部位、及び転写終結シグナルのうちの１つ以上、例えば、すべてをベクターに組み込むことによって増加する。多様な転写後制御要素、例えば、ウッドチャック肝炎ウイルス転写後制御要素（ＷＰＲＥ；Ｚｕｆｆｅｒｅｙ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，７３：２８８６）、Ｂ型肝炎ウイルスに存在する転写後制御要素（ＨＰＲＥ）（Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，５：３８６４）、及び類似物（Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．，９：１７６６）（その各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）がタンパク質での異種核酸の発現を増加させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のレトロウイルス核酸は、転写後制御要素、例えば、ＷＰＲＥまたはＨＰＲＥを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のレトロウイルス核酸は、転写後制御要素、例えば、ＷＰＲＥまたはＨＰＲＥを欠くまたは含まない。
いくつかの実施形態では、異種核酸転写産物の終結及びポリアデニル化を指示する要素が、例えば、外因性物質の発現を増加させるために、含まれ得る。転写終結シグナルは、ポリアデニル化シグナルの下流で見ることができる。いくつかの実施形態では、ベクターは、外因性物質をコードするポリヌクレオチドの３′にポリアデニル化配列を含む。ポリＡ部位は、ＲＮＡポリメラーゼＩＩによって発生期ＲＮＡ転写産物の終結及びポリアデニル化の両方を指示するＤＮＡ配列を含み得る。ポリアデニル化配列は、コード配列の３′末端へのポリＡテールの付加によってｍＲＮＡ安定性を促進し、よって、増加した翻訳効率に寄与し得る。レトロウイルス核酸において使用され得るポリＡシグナルの例示的な例には、ＡＡＴＡＡＡ、ＡＴＴＡＡＡ、ＡＧＴＡＡＡ、ウシ成長ホルモンポリＡ配列（ＢＧＨｐＡ）、ウサギβ－グロビンポリＡ配列（ｒβｇｐＡ）、または別の好適な異種もしくは内因性ポリＡ配列が含まれる。
いくつかの実施形態では、レトロウイルスまたはレンチウイルスベクターは、１つ以上のインシュレーター要素、例えば、本明細書に記載のインシュレーター要素をさらに含む。
様々な実施形態では、ベクターは、外因性物質をコードするポリヌクレオチドに機能可能に連結されたプロモーターを含む。ベクターは、１つ以上のＬＴＲを有し得、いずれかのＬＴＲは、１つ以上の修飾、例えば、１つ以上のヌクレオチド置換、付加、または欠失を含む。ベクターは、形質導入効率（例えば、ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰ）を増加させるためのより多くのアクセサリー要素、ウイルスパッケージング（例えば、プサイ（Ψ）パッケージングシグナル、ＲＲＥ）、及び／または外因性遺伝子発現を増加させる他の要素（例えば、ポリ（Ａ）配列）のうちの１つをさらに含み得、任意にＷＰＲＥまたはＨＰＲＥを含み得る。
いくつかの実施形態では、レンチウイルス核酸は、例えば、５’から３’まで、プロモーター（例えば、ＣＭＶ）、Ｒ配列（例えば、ＴＡＲを含む）、Ｕ５配列（例えば、組み込みのため）、ＰＢＳ配列（例えば、逆転写のため）、ＤＩＳ配列（例えば、ゲノム二量化のため）、プサイパッケージングシグナル、部分的ｇａｇ配列、ＲＲＥ配列（例えば、核外搬出のため）、ｃＰＰＴ配列（例えば、核搬入のため）、外因性物質の発現を誘導するためのプロモーター、外因性物質をコードする遺伝子、ＷＰＲＥ配列（例えば、効率的な導入遺伝子発現のため）、ＰＰＴ配列（例えば、逆転写のため）、Ｒ配列（例えば、ポリアデニル化及び終結のため）、及びＵ５シグナル（例えば、組み込みのため）のうちの１つ以上、例えば、すべてを含む。
ｂ．パッケージングベクター及びプロデューサー細胞
大規模なウイルス粒子生成は、しばしば、所望のウイルス力価を達成するために有用である。ウイルス粒子は、ウイルス構造及び／またはアクセサリー遺伝子、例えば、ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ、ｔａｔ、ｒｅｖ、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ、ｖｐｘ、もしくはｎｅｆ遺伝子または他のレトロウイルス遺伝子を含むパッケージング細胞株にトランスファーベクターをトランスフェクションすることによって生成され得る。
いくつかの実施形態では、パッケージングベクターは、パッケージングシグナルを欠き、かつ１、２、３、４またはそれ以上のウイルス構造及び／またはアクセサリー遺伝子をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターまたはウイルスベクターである。典型的には、パッケージングベクターは、プロデューサー細胞に含まれ、トランスフェクション、形質導入または感染を介して細胞に導入される。レトロウイルス、例えば、レンチウイルストランスファーベクターは、源細胞または細胞株を生成するためにトランスフェクション、形質導入または感染を介してプロデューサー細胞株に導入され得る。パッケージングベクターは、例えば、リン酸カルシウムトランスフェクション、リポフェクションまたはエレクトロポレーションを含む標準的な方法によってヒト細胞または細胞株に導入され得る。いくつかの実施形態では、パッケージングベクターは、顕性選択マーカー、例えば、ネオマイシン、ハイグロマイシン、ピューロマイシン、ブラストサイジン、ゼオシン、チミジンキナーゼ、ＤＨＦＲ、ＧｌｎシンテターゼまたはＡＤＡと共に細胞に導入され、続いて適切な薬物の存在下で選択され、クローンが単離される。選択マーカー遺伝子は、パッケージングベクターによって、例えば、ＩＲＥＳまたは自己切断性ウイルスペプチドによってコードする遺伝子に物理的に連結され得る。
いくつかの実施形態では、プロデューサー細胞株には、パッケージングシグナルを含有しないが、ウイルス粒子をパッケージングし得るウイルス構造タンパク質及び複製酵素（例えば、ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖ）を安定的にまたは一過性で発現する細胞株が含まれる。任意の好適な細胞株、例えば、哺乳動物細胞、例えば、ヒト細胞が採用され得る。使用され得る好適な細胞株には、例えば、ＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、ＭＤＣＫ細胞、Ｃ３Ｈ １０Ｔ１／２細胞、ＦＬＹ細胞、Ｐｓｉ－２細胞、ＢＯＳＣ ２３細胞、ＰＡ３１７細胞、ＷＥＨＩ細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＳＣ １細胞、ＢＳＣ ４０細胞、ＢＭＴ １０細胞、ＶＥＲＯ細胞、Ｗ１３８細胞、ＭＲＣ５細胞、Ａ５４９細胞、ＨＴ１０８０細胞、２９３細胞、２９３Ｔ細胞、Ｂ－５０細胞、３Ｔ３細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＨｅｐＧ２細胞、Ｓａｏｓ－２細胞、Ｈｕｈ７細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｗ１６３細胞、２１１細胞、及び２１１Ａ細胞が含まれる。実施形態では、パッケージング細胞は、２９３細胞、２９３Ｔ細胞、またはＡ５４９細胞である。
いくつかの実施形態では、源細胞株には、プロデューサー細胞株及びパッケージングシグナルを含むトランスファーベクターコンストを含む、組換えレトロウイルス粒子を生成することが可能な細胞株が含まれる。ウイルスストック溶液を調製する方法は、例えば、Ｙ．Ｓｏｎｅｏｋａ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２３：６２８－６３３、及びＮ．Ｒ．Ｌａｎｄａｕ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６６：５１１０－５１１３（参照により本明細書に組み込まれる）によって説明されている。感染性ウイルス粒子は、例えば、細胞溶解または、細胞培養物の上清の収集によって、プロデューサー細胞から収集され得る。任意に、収集されたウイルス粒子は、濃縮または精製され得る。
いくつかの実施形態では、源細胞は、ウイルス粒子をパッケージングし得るウイルス構造タンパク質及び複製酵素（例えば、ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖ）をコードする１つ以上のプラスミドを含む。いくつかの実施形態では、ｇａｇ、ｐｏｌ、及びｅｎｖ前駆体のうちの少なくとも２つをコードする配列は、同じプラスミド上にある。いくつかの実施形態では、ｇａｇ、ｐｏｌ、及びｅｎｖ前駆体をコードする配列は、異なるプラスミド上にある。いくつかの実施形態では、ｇａｇ、ｐｏｌ、及びｅｎｖ前駆体をコードする配列は、同じ発現シグナル、例えば、プロモーターを有する。いくつかの実施形態では、ｇａｇ、ｐｏｌ、及びｅｎｖ前駆体をコードする配列は、異なる発現シグナル、例えば、異なるプロモーターを有する。いくつかの実施形態では、ｇａｇ、ｐｏｌ、及びｅｎｖ前駆体の発現は、誘導性である。いくつかの実施形態では、ウイルス構造タンパク質及び複製酵素をコードするプラスミドは、同時にまたは異なる時間でトランスフェクションされる。いくつかの実施形態では、ウイルス構造タンパク質及び複製酵素をコードするプラスミドは、パッケージングベクターと同時に、または異なる時間にトランスフェクションされる。
いくつかの実施形態では、源細胞株は、１つ以上の安定に組み込まれたウイルス構造遺伝子を含む。いくつかの実施形態では、安定に組み込まれたウイルス構造遺伝子の発現は、誘導性である。
いくつかの実施形態では、ウイルス構造遺伝子の発現は、転写レベルで制御される。いくつかの実施形態では、ウイルス構造遺伝子の発現は、翻訳レベルで制御される。いくつかの実施形態では、ウイルス構造遺伝子の発現は、翻訳後レベルで制御される。
いくつかの実施形態では、ウイルス構造遺伝子の発現は、テトラサイクリン（Ｔｅｔ）依存性システムによって制御され、Ｔｅｔ制御転写リプレッサー（Ｔｅｔ－Ｒ）が、プロモーターに含まれるＤＮＡ配列に結合し、立体障害によって転写を抑制する（Ｙａｏ ｅｔ ａｌ，１９９８、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ，２００５）。ドキシサイクリン（ｄｏｘ）を添加すると、Ｔｅｔ－Ｒが放出され、転写が可能となる。複数の他の好適な転写制御プロモーター、転写因子、及び小分子誘導因子は、ウイルス構造遺伝子の転写を制御するために好適である。
いくつかの実施形態では、Ｔｅｔ制御プロモーターのコントロール下にありかつ抗生物質耐性カセットと結合した第三世代レンチウイルス成分であるヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ）Ｒｅｖ、Ｇａｇ／Ｐｏｌ、及びエンベロープが源細胞ゲノムに別々に組み込まれる。いくつかの実施形態では、源細胞は、ゲノムに組み込まれたＲｅｖ、Ｇａｇ／Ｐｏｌ、及びエンベロープタンパク質の各々の１コピーのみを有する。
いくつかの実施形態では、外因性物質をコードする核酸（例えば、外因性物質をコードするレトロウイルス核酸）もまた、源細胞ゲノムに組み込まれる。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のレトロウイルス核酸は、逆転写を受けることができない。そのような核酸は、実施形態では、外因性物質を一過性に発現することができる。レトロウイルスまたはＶＬＰは、無効化された逆転写酵素タンパク質を含む場合があり、または逆転写酵素タンパク質を含まない場合がある。実施形態では、レトロウイルス核酸は、無効化されたプライマー結合部位（ＰＢＳ）及び／またはａｔｔ部位を含む。実施形態では、ｒｅｖ、ｔａｔ、ｖｉｆ、ｎｅｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ、ｖｐｘ及びＳ２またはその機能的同等物を含む１つ以上のウイルスアクセサリー遺伝子は、機能不全とされており、またはレトロウイルス核酸に存在しない。実施形態では、Ｓ２、ｒｅｖ及びｔａｔから選択される１つ以上のアクセサリー遺伝子は、機能不全とされており、またはレトロウイルス核酸には存在しない。
２．細胞由来粒子
本明細書では、天然由来の膜を含む標的化脂質粒子が提供される。いくつかの実施形態では、天然由来の膜は、細胞または組織から調製された膜小胞を含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、細胞から得ることができる小胞を含む。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、微小胞、エクソソーム、膜包囲体、アポトーシス小体（アポトーシス細胞からのもの）、粒子（例えば、血小板に由来し得る）、エクトソーム（例えば、血清における好中球及び単球に由来し得る）、プロスタトソーム（前立腺癌細胞から得ることができる）、またはカーディオソーム（心臓細胞に由来し得る）を含む。
いくつかの実施形態では、源細胞は、内皮細胞、線維芽細胞、血液細胞（例えば、マクロファージ、好中球、顆粒球、白血球）、幹細胞（例えば、間葉幹細胞、臍帯幹細胞、骨髄幹細胞、造血幹細胞、誘導多能性幹細胞、例えば、対象の細胞に由来する誘導多能性幹細胞）、胚性幹細胞（例えば、胚卵黄嚢、胎盤、臍帯、胎児皮膚、青年皮膚、血液、骨髄、脂肪組織、赤血球生成組織、造血組織からの幹細胞）、筋芽細胞、実質細胞（例えば、肝細胞）、肺胞細胞、ニューロン（例えば、網膜神経細胞）前駆体細胞（例えば、網膜前駆体細胞、骨髄芽球、骨髄前駆体細胞、胸腺細胞、減数分裂細胞、巨核芽球、前巨核芽球、メラノブラスト、リンパ芽球、骨髄前駆体細胞、正赤芽球、または血管芽細胞）、前駆細胞（例えば、心臓前駆細胞、衛星細胞、放射状グリア細胞、骨髄間質細胞、膵臓前駆細胞、内皮前駆細胞、芽細胞）、または不死化細胞（例えば、ＨｅＥａ、ＨＥＫ２９３、ＨＦＦ－１、ＭＲＣ－５、ＷＩ－３８、ＩＭＲ ９０、ＩＭＲ ９１、ＰＥＲ．Ｃ６、ＨＴ－１０８０、またはＢＪ細胞）である。いくつかの実施形態では、源細胞は、２９３細胞、ＨＥＫ細胞、ヒト内皮細胞、またはヒト上皮細胞、単球、マクロファージ、樹状細胞、または幹細胞以外である。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、１未満、１～１．１、１．０５～１．１５、１．１～１．２、１．１５～１．２５、１．２～１．３、１．２５～１．３５、または１．３５超ｇ／ｍｌの密度を有する。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子組成物は、タンパク質質量に基づいて０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、４％、５％、または１０％未満の源細胞または０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、４％、５％、または１０％未満の機能性核を有する細胞を含む。
実施形態では、標的化脂質粒子は、サイズを有し、または標的化脂質粒子の集団は、源細胞のものの約０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％未満である平均サイズを有する。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、細胞外小胞、例えば、内部空間を包囲し、かつその由来となった細胞よりも小さな直径を有する膜を含む細胞由来小胞を含む。実施形態では、細胞外小胞は、２０ｎｍ～１０００ｎｍの直径を有する。実施形態では、標的化脂質粒子は、アポトーシス小体、細胞の断片、直接的または間接的操作によって細胞から誘導された小胞、小胞化細胞小器官、及び生存細胞によって（例えば、直接的細胞膜出芽または後期エンドソームと細胞膜との融合によって）生成される小胞を含む。実施形態では、細胞外小胞は、生存もしくは死生物、移植された組織もしくは器官、または培養された細胞に由来する。
実施形態では、標的化脂質粒子は、ナノ小胞、例えば、内部空間を包囲し、かつ直接的または間接的操作によって前記細胞から生成された膜を含む細胞由来の小さな（例えば、直径が２０～２５０ｎｍ、または直径が３０～１５０ｎｍ）小胞を含む。ナノ小胞の生成は、いくつかの例では、源細胞の破壊をもたらし得る。ナノ小胞は、脂質または脂肪酸及びポリペプチドを含み得る。
実施形態では、標的化脂質粒子は、エクソソームを含む。実施形態では、エクソソームは、内部空間を包囲し、かつ直接的細胞膜出芽によってまたは後期エンドソームと細胞膜との融合によって前記細胞から生成された膜を含む細胞由来の小さな（例えば、直径が２０～３００ｎｍ、または直径が４０～２００ｎｍ）小胞である。実施形態では、エクソソームの生成は、源細胞の破壊をもたらさない。実施形態では、エクソソームは、脂質または脂肪酸及びポリペプチドを含む。例示的なエクソソーム及び他の膜包囲体はまた、ＷＯ／２０１７／１６１０１０、ＷＯ／２０１６／０７７６３９、ＵＳ２０１６０１６８５７２、ＵＳ２０１５０２９０３４３、及びＵＳ２００７０２９８１１８（その各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、免疫調節因子の増加した発現をもたらす遺伝子修飾を有する源細胞に由来する。いくつかの実施形態では、免疫抑制因子は、細胞の外部表面にある。いくつかの実施形態では、免疫抑制因子は、標的化脂質粒子の外部表面に組み込まれる。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、共有結合または非共有結合によって固体粒子の表面に結合した免疫調節因子を含む。
ｃ．ａ．細胞由来粒子の生成
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、エクソソーム、微小胞、膜小胞、細胞外膜小胞、細胞膜小胞、巨大細胞膜小胞、アポトーシス小体、ミト粒子、ピレノサイト、リソソーム、または他の膜包囲小胞の出芽を誘導することによって生成される。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、細胞除核を誘導することによって生成される。除核は、遺伝子的、化学的（例えば、アクチノマイシンＤを使用する、Ｂａｙｏｎａ－Ｂａｆａｌｕｙｅｔ ａｌ．，“Ａ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｅｎｕｃｌｅａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ＤＮＡ ｔｏ ρ° ｃｅｌｌｓ” Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２００３ Ａｕｇ １５；３１（１６）：ｅ９８を参照されたい）、機械的方法（例えば、絞りまたは吸入、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，“Ａ ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ｔｗｏ ｅｎｕｃｌｅａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ ｐｉｇ ｓｏｍａｔｉｃ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｆｅｒ：ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｑｕｅｅｚｉｎｇ ａｎｄ ｔｈｅ ａｓｐｉｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ．” Ａｎｉｍ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００８；１９（２）：７１－９を参照されたい）、またはそれらの組み合わせなどのアッセイを使用して実施され得る。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、細胞断片化を誘導することによって生成される。いくつかの実施形態では、細胞断片化は、以下の方法（化学的方法、機械的方法（例えば、遠心分離（例えば、超遠心分離、または密度遠心分離）、凍結解凍、または超音波処理）、またはそれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない）を使用して実施され得る。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、微小胞である。いくつかの実施形態では微小胞は、約１００ｎｍ～約２０００ｎｍの直径を有する。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、細胞ゴーストを含む。いくつかの実施形態では、小胞は、細胞膜小胞、例えば、巨大細胞膜小胞である。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子を作製するために使用された源細胞は、標的化脂質粒子が作製された後の試験のために利用可能ではない。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子の特徴は、参照細胞に対する比較によって説明される。実施形態では、参照細胞は、源細胞である。実施形態では、参照細胞は、ＨｅＬａ、ＨＥＫ２９３、ＨＦＦ－１、ＭＲＣ－５、ＷＩ－３８、ＩＭＲ９０、ＩＭＲ９１、ＰＥＲ．Ｃ６、ＨＴ－１０８０、またはＢＪ細胞である。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子の集団の特徴は、参照細胞の集団、例えば、源細胞の集団、またはＨｅＬａ、ＨＥＫ２９３、ＨＦＦ－１、ＭＲＣ－５、ＷＩ－３８、ＩＭＲ ９０、ＩＭＲ ９１、ＰＥＲ．Ｃ６、ＨＴ－１０８０、またはＢＪ細胞の集団に対する比較によって記載される。
ＩＩＩ．薬学的組成物
本開示はまた、いくつかの態様では、本明細書に記載の標的化脂質粒子組成物及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物を提供する。薬学的組成物は、記載される標的化脂質粒子のいずれかを含み得る。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、薬学的または適正製造基準（ＧＭＰ）標準を満たす。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、適正製造基準（ＧＭＰ）に従って作製された。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、既定の参照値未満の病原体レベルを有し、例えば、病原体を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、既定の参照値未満の混入物質レベルを有し、例えば、混入物質を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、低い免疫原性を有する。
いくつかの実施形態では、本明細書では、本発明の方法を実施するための本発明の薬学的組成物またはその塩の使用が提供される。そのような薬学的組成物は、対象への投与に好適な形態の本発明の少なくとも１つの化合物もしくはコンジュゲートまたはその塩からなり得、または薬学的組成物は、本発明の少なくとも１つの化合物もしくはコンジュゲートまたはその塩、及び１つ以上の薬学的に許容可能な担体、１つ以上の追加の成分、またはこれらのいくつかの組み合わせを含み得る。いくつかの実施形態では、本発明の化合物またはコンジュゲートは、例えば、当該技術分野でよく知られているように、生理的に許容可能なカチオンまたはアニオンと組み合わせて、生理的に許容可能な塩の形態で薬学的組成物に存在し得る。
いくつかの実施形態では、本発明の方法を実施するのに有用な薬学的組成物は、１ｎｇ／ｋｇ／日～１００ｍｇ／ｋｇ／日の間の用量で送達するために投与され得る。別の実施形態では、本発明を実施するのに有用な薬学的組成物は、１ｎｇ／ｋｇ／日～５００ｍｇ／ｋｇ／日の間の用量で送達するために投与され得る。
いくつかの実施形態では、本発明の薬学的組成物における活性成分、薬学的に許容可能な担体、及び任意の追加の成分の相対量は、処置される対象が何であるか、そのサイズ、及び状態に応じて、さらに組成物が投与される経路に応じて変化する。いくつかの実施形態では、組成物は、０．１％～１００％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
いくつかの実施形態では、本発明の方法において有用である薬学的組成物は、経口、直腸、膣、非経口、局所、肺、鼻腔内、口腔内、眼、または別の投与経路のために好適に開発され得る。いくつかの実施形態では、本発明の方法において有用な組成物は、哺乳動物の皮膚、膣または任意の他の組織に直接的に投与され得る。いくつかの実施形態では、製剤には、リポソーム調製物、活性成分を含有する再封止された赤血球、及び免疫学ベースの製剤が含まれる。いくつかの実施形態では、投与の経路（複数可）は、当業者に容易に明らかとなり、処置されている疾患のタイプ及び重症度、処置されている獣医学的またはヒト対象のタイプ及び年齢などを含む多数の要素に依存する。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤は、薬理学の技術分野で知られている、または後に開発され得る任意の方法によって調製され得る。いくつかの実施形態では、調製方法には、活性成分を担体または１つ以上の他の付随成分と会合させ、次いで、必要に応じてまたは所望により、生成物を所望の単一または複数の用量単位に成形または包装するステップが含まれる。
いくつかの実施形態では、「単位用量」は、既定の量の活性成分を含む薬学的組成物の個別量である。いくつかの実施形態では、活性成分の量は通常、対象に投与されるであろう活性成分の投薬量または例えば、そのような投薬量の２分の１または３分の１などのそのような投薬量の好都合な一部と同等である。いくつかの実施形態では、単位投薬形態は、単回１日用量または複数の１日用量の１つ（例えば、１日当たり約１～４回以上）のためのものであり得る。いくつかの実施形態では、複数の１日用量が使用される場合、単位投薬形態は、各用量について同じまたは異なり得る。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される薬学的組成物の説明は主に、ヒトへの医療用投与に好適な薬学的組成物を対象としているが、そのような組成物は通常、すべての種類の動物への投与に好適であることが当業者によって理解される。いくつかの実施形態では、組成物を様々な動物に対する投与に好適なものとするためのヒトへの投与に好適な薬学的組成物の変更はよく理解されており、通常の熟練された獣医学的薬理学者は、存在する場合でも単なる通常の実験を伴ってそのような修飾を設計及び実施し得る。いくつかの実施形態では、本発明の薬学的組成物の投与が企図される対象には、ヒト及び他の霊長類、商業的に関連する哺乳動物、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、及びイヌを含む哺乳動物が含まれる。
任意の実施形態のうちの一部では、本発明の組成物は、１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤または担体を使用して製剤化される。一実施形態では、本発明の薬学的組成物は、治療的有効量の本発明の化合物またはコンジュゲート及び薬学的に許容可能な担体を含む。いくつかの実施形態では、有用な薬学的に許容可能な担体には、グリセロール、水、生理食塩水、エタノール及び他の薬学的に許容可能な塩溶液、例えば、リン酸塩及び有機酸の塩が含まれるがこれらに限定されない。これらの及び他の薬学的に許容可能な担体の例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９９１，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ）に記載されている。
いくつかの実施形態では、担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、好適なそれらの混合物、及び植物油を含有する溶媒または分散媒体であり得る。いくつかの実施形態では、適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散の場合は必要とされる粒子サイズの維持によって及び界面活性剤の使用によって維持され得る。いくつかの実施形態では、微生物の作用の防止は、様々な抗細菌及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって達成され得る。いくつかの実施形態では、組成物において等張剤、例えば、糖類、塩化ナトリウム、またはポリアルコール、例えば、マンニトール及びソルビトールを含むことが好ましい。いくつかの実施形態では、注射用組成物の長期吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムまたはゼラチンを組成物に含めることによってもたられ得る。一実施形態では、薬学的に許容可能な担体は、ＤＭＳＯ単独ではない。
いくつかの実施形態では、従来の賦形剤、すなわち、当該技術分野で知られている、経口、膣、非経口、鼻、静脈内、皮下、腸内、または任意の他の好適な投与様式に好適な薬学的に許容可能な有機または無機担体物質と併せて用いられ得る。いくつかの実施形態では、薬学的調製物は、滅菌され得、所望の場合、補助剤、例えば、滑沢剤、防腐剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧緩衝液に影響を及ぼすための塩、着色、香味及び／または芳香物質などと混合され得る。いくつかの実施形態では、薬学的調製物はまた、所望の場合、他の活性剤、例えば、他の鎮痛剤と組み合わされ得る。
いくつかの実施形態では、「追加の成分」には、以下のうちの１つ以上が含まれるがこれらに限定されない：賦形剤；表面活性剤；分散剤；不活性希釈剤；顆粒化及び崩壊剤；結合剤；滑沢剤；甘味剤；香味剤；着色剤；防腐剤；生理的分解性組成物、例えば、ゼラチン；水性ビヒクル及び溶媒；油性ビヒクル及び溶媒；懸濁剤；分散または湿潤剤；乳化剤、粘滑剤；緩衝液；塩；増粘剤；充填剤；乳化剤；抗酸化剤；抗生物質；抗真菌剤；安定化剤；及び薬学的に許容可能なポリマー性または疎水性物質。いくつかの実施形態では、本発明の薬学的組成物に含まれ得る「追加の成分」は、当該技術分野で知られており、例えば、Ｇｅｎａｒｏ，ｅｄ．（１９８５，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．）（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、組成物の総重量に基づいて約０．００５％～２．０％の防腐剤を含み得る。いくつかの実施形態では、防腐剤は、環境における混入物質に曝露した場合に損傷を防止するために使用される。いくつかの実施形態では、本発明に従って有用な防腐剤の例には、ベンジルアルコール、ソルビン酸、パラベン、イミドウレア及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるものが含まれるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、特に好ましい防腐剤は、約０．５％～２．０％のベンジルアルコール及び０．０５％～０．５％のソルビン酸の組み合わせである。
いくつかの実施形態では、組成物には、好ましくは、抗酸化剤及び化合物の分解を阻害するキレート剤が含まれる。いくつかの実施形態では、いくつかの化合物のための抗酸化剤は、組成物の総重量に基づいて重量で約０．０１％～０．３％の好ましい範囲のＢＨＴ、ＢＨＡ、アルファ－トコフェロール及びアスコルビン酸、より好ましくは０．０３％～０．１％の範囲のＢＨＴである。いくつかの実施形態では、キレート剤は、組成物の総重量に基づいて重量で０．０１％～０．５％の量で存在する。特に好ましいキレート剤には、組成物の総重量に基づいて重量で約０．０１％～０．２０％の重量範囲及びより好ましくは０．０２％～０．１０％の範囲のエデト酸塩（例えば、エデト酸二ナトリウム）及びクエン酸が含まれる。いくつかの実施形態では、キレート剤は、製剤の保存可能期間に有害であり得る組成物中の金属イオンをキレートするのに有用である。いくつかの実施形態では、他の好適な及び同等の抗酸化剤及びキレート剤は、そのため、当業者に知られているように代用され得る。
いくつかの実施形態では、水性または油性ビヒクルにおける活性成分の懸濁液を達成するために従来の方法を使用して液体懸濁液が調製され得る。いくつかの実施形態では、水性ビヒクルには、例えば、水、及び等張性生理食塩水が含まれる。いくつかの実施形態では、油性ビヒクルには、例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコール、植物油、例えば、ラッカセイ、オリーブ、ゴマ、またはココナッツ油、分画植物油、及び鉱油、例えば、液体パラフィンが含まれる。いくつかの実施形態では、液体懸濁液は、懸濁剤、分散または湿潤剤、乳化剤、粘滑剤、防腐剤、緩衝液、塩、香味剤、着色剤、及び甘味剤を含むがこれらに限定されない１つ以上の追加の成分をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、油性懸濁液は、増粘剤をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、懸濁剤には、ソルビトールシロップ、水素化食用脂肪、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、アカシアガム、及びセルロース誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースが含まれるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、分散または湿潤剤には、天然に存在するホスファチド、例えば、レシチン、アルキレンオキシドと脂肪酸との、長鎖脂肪族アルコールとの、脂肪酸及びヘキシトールに由来する部分エステルとの、または脂肪酸及び無水ヘキシトール（例えば、それぞれ、ステアリン酸ポリオキシエチレン、ヘプタデカエチレンオキシセタノール、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール、及びモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）に由来する部分エステルとの縮合生成物が含まれるがこれらに限定されない。既知の乳化剤には、レシチン、及びアカシアが含まれるがこれらに限定されない。既知の防腐剤には、メチル、エチル、またはｎ－プロピル－パラ－ヒドロキシベンゾエート、アスコルビン酸、及びソルビン酸が含まれるがこれらに限定されない。既知の甘味剤には、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、スクロース、及びサッカリンが含まれる。油性懸濁液のための既知の増粘剤には、例えば、蜜ろう、固形パラフィン、及びセチルアルコールが含まれる。
いくつかの実施形態では、液体懸濁液と実質的に同じ手法（主な違いは、活性成分が溶媒に懸濁されるのではなく溶解されることである）で水性または油性溶媒中の活性成分の液体溶液が調製され得る。本明細書で使用される場合、「油性」液体は、炭素含有液体分子を含み、かつ水よりも低い極性特性を示すものである。いくつかの実施形態では、本発明の薬学的組成物の液体溶液は、液体懸濁液に関して記載される成分の各々を含み得、懸濁剤はかならずしも、溶媒中の活性成分の溶解を補助するわけではないことが理解される。いくつかの実施形態では、水性溶媒には、例えば、水、及び等張性生理食塩水が含まれる。いくつかの実施形態では、油性溶媒には、例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコール、植物油、例えば、ラッカセイ、オリーブ、ゴマ、またはココナッツ油、分画植物油、及び鉱油、例えば、液体パラフィンが含まれる。
いくつかの実施形態では、本発明の薬学的調製物の粉末及び顆粒製剤が既知の方法を使用して調製され得る。いくつかの実施形態では、製剤は、対象に直接的に投与され、例えば、錠剤を形成するため、カプセルを充填するため、または水性もしくは油性ビヒクルをそれに添加することによって水性もしくは油性懸濁液もしくは溶液を調製するために使用される。任意の実施形態のうちの一部では、製剤は、分散または湿潤剤、懸濁剤、及び防腐剤のうちの１つ以上をさらに含み得る。追加の賦形剤、例えば、充填剤及び甘味剤、香味剤、または着色剤もまた、これらの製剤に含まれ得る。
いくつかの実施形態では、本発明の薬学的組成物はまた、水中油エマルションまたは油中水エマルションの形態で調製、包装、または販売され得る。いくつかの実施形態では、油性相は、植物油、例えば、オリーブまたはラッカセイ油、鉱油、例えば、液体パラフィン、またはこれらの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の乳化剤、例えば、天然に存在するガム、例えば、アカシアガムまたはトラガカントガム、天然に存在するホスファチド、例えば、大豆またはレシチンホスファチド、脂肪酸及び無水ヘキシトールの組み合わせに由来するエステルまたは部分エステル、例えば、モノオレイン酸ソルビタン、ならびにそのような部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンをさらに含む。いくつかの実施形態では、エマルションはまた、例えば、甘味剤または香味剤を含む追加の成分を含有し得る。
ＩＶ．処置の方法
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される標的化脂質粒子、または本明細書に記載されるその薬学的組成物は、対象、例えば、哺乳動物、例えば、ヒトに投与され得る。そのような実施形態では、対象は、特定の疾患または病態のリスクがある、その症状を有する、またはその診断がされている、またはそれを有するものとして特定されている場合がある。一実施形態では、対象は、がんを有する。一実施形態では、対象は、感染性疾患を有する。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、対象における疾患または病態を処置するための外因性物質をコードする核酸配列を含有する。例えば、外因性物質は、新生物細胞のタンパク質を標的とし、またはそれに特異的なものであり、標的化脂質粒子は、対象における腫瘍またはがんを処置するために対象に投与される。別の例では、外因性物質は、炎症性メディエーターまたは免疫分子、例えば、サイトカインであり、標的化脂質粒子は、免疫反応を調節する（例えば、増加させる）ことが所望である任意の病態、例えば、がんまたは感染性疾患を処置するために対象に投与される。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、疾患、病態または障害の処置を達成するための有効量または用量で投与される。本明細書では、そのような方法及び処置における、ならびにそのような治療方法を行うための薬品の調製における提供される標的化脂質粒子のいずれかの使用が提供される。いくつかの実施形態では、方法は、標的化脂質粒子またはそれを含む組成物を、疾患または病態または障害を有する、有していた、またはそれが疑われる対象に投与することによって行われる。いくつかの実施形態では、方法は、それにより対象における疾患または病態または障害を処置する。また、本明細書では、外因性物質によって標的とされるまたは提供される特定の遺伝子またはタンパク質に関連する疾患、病態または障害の処置のための、本明細書で提供される薬学的組成物などの組成物のいずれかの使用が提供される。
いくつかの実施形態では、提供される方法または使用は、経口、吸入、経皮または非経口（静脈内、腫瘍内、腹腔内、筋肉内、腔内、及び皮下を含む）投与を含む薬学的組成物の投与を伴う。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、単独で投与され得るか、または薬学的組成物として製剤化され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の標的化脂質粒子または組成物は、対象、例えば、哺乳動物、例えば、ヒトに投与され得る。任意の実施形態のうちの一部では、対象は、特定の疾患または病態（例えば、本明細書に記載の疾患または病態）のリスクがある、その症状を有する、またはその診断がされている、またはそれを有するものとして特定されている場合がある。いくつかの実施形態では、疾患は、疾患または障害である。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、単位用量組成物の形態、例えば、単位用量の経口、非経口、経皮または吸入組成物で投与され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、混和によって調製され、経口、吸入、経皮または非経口投与のために適応され、したがって、錠剤、カプセル、経口液体調製物、粉末、顆粒、ロゼンジ、再構成可能な粉末、注射可能な及び注入可能な溶液または懸濁液または座剤またはエアロゾルの形態であり得る。
いくつかの実施形態では、投与のレジメンは、有効量を構成するものに影響を及ぼし得る。いくつかの実施形態では、治療製剤は、疾患の診断の前または後のいずれかで対象に投与され得る。いくつかの実施形態では、いくつかの分割された投薬量、ならびに調整された投薬量が、毎日または順次に投与され得、または用量は、連続的に注入され得、またはボーラス注射であり得る。いくつかの実施形態では、治療製剤の投薬量は、治療的または予防的状況の要件によって示されるように比例的に増加または減少され得る。
いくつかの実施形態では、対象、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトへの本発明の組成物の投与は、疾患を予防または処置するのに有効な投薬量及び期間で、既知の手順を使用して行われ得る。いくつかの実施形態では、治療効果を達成するために必要な治療化合物の有効量は、用いられる特定の化合物の活性；投与の時間；化合物の排泄の速度；処置の継続期間；化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物または物質；処置されている対象の疾患または障害の状態、年齢、性別、体重、状態、全般的健康状態及び既往歴、ならびに医学の分野でよく知られている同様の要素などの要素に応じて変わり得る。いくつかの実施形態では、投薬レジメンは、最適な治療反応を提供するために調整され得る。いくつかの実施形態では、いくつかの分割用量が毎日投与され得、または用量は、治療的状況の要件によって示されるように比例的に減少され得る。いくつかの実施形態では、本発明の治療化合物のための有効な用量範囲は、１日当たり約１から５，０００ｍｇ／ｋｇ体重である。当業者は、関連性のある要因を研究し、過度の実験を用いることなく治療化合物の有効量に関して決定を下すことができるであろう。
いくつかの実施形態では、化合物は、１日数回もの頻度で対象に投与され得、またはそれは、より頻度が少なく、例えば、１日１回、週１回、２週に１回、月１回、またはさらに頻度が少なく、例えば、数ヶ月毎に１回もしくはさらに１年に１回またはそれ以下で投与され得る。いくつかの実施形態では、１日当たり投薬される化合物の量は、非限定的な例では、１日毎、１日おき、２日毎、３日毎、４日毎、または５日毎に投与され得る。いくつかの実施形態では、１日おきの投与を用いて、１日当たり５ｍｇの用量が月曜日に開始され得、第１の後続の１日当たり５ｍｇの用量が水曜日に投与され、第２の後続の１日当たり５ｍｇの用量が金曜日に投与されるなどである。用量の頻度は、当業者に容易に明らかとなり、例えば、限定されないが、処置されている疾患のタイプ及び重症度、動物のタイプ及び年齢などの多数の要因に依存する。
いくつかの実施形態では、本発明の薬学的組成物における活性成分の投薬量レベルは、対象への毒性を伴うことなく、特定の対象、組成物、及び投与様式のための所望の治療的反応を達成するのに有効な活性成分の量を得るように変更され得る。
当該技術分野における通常の技術を有する医師、例えば、内科医または獣医師は、必要とされる薬学的組成物の有効量を容易に決定し、処方し得る。いくつかの実施形態では、医師または獣医師は、所望の治療効果を達成するために必要とされるものよりも少ないレベルにて薬学的組成物で用いられる本発明の化合物の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで投薬量を徐々に増加させ得る。
いくつかの実施形態では、投与の容易性及び投薬量の均一性のために投薬単位形態で化合物を製剤化することが特に有利である。いくつかの実施形態では、投薬単位形態は、本明細書で使用される場合、処置される対象のための単一の投薬量として適した物理的に別個の単位を指す。各単位は、必要とされる薬学的ビヒクルと関連した所望の治療効果を生成するために計算された既定量の治療化合物を含有する。いくつかの実施形態では、本発明の投薬単位形態は、（ａ）治療化合物及び達成される特定の治療効果の独自の特性、及び（ｂ）対象における疾患の処置のためのそのような治療化合物を調合／製剤化する当該技術分野に固有の制限によって影響を受け、及び／またはそれに直接的に依存する。
いくつかの実施形態では、「容器」という用語には、薬学的組成物を保持するための任意の入れ物が含まれる。いくつかの実施形態では、容器は、薬学的組成物を含有する包装である。他の実施形態では、容器は、薬学的組成物を含有する包装ではなく、すなわち、容器は、包装された薬学的組成物または未包装の薬学的組成物及び薬学的組成物の使用のための説明書を含有するボックスまたはバイアルなどの入れ物である。薬学的組成物の使用のための説明書は、薬学的組成物を含有する包装上に含有され得、このように説明書は、包装された製品に対する増加した機能的関係性を形成することが理解されるべきである。いくつかの実施形態では、説明書は、化合物がその意図された機能、例えば、対象における疾患を処置もしくは予防する、または画像化もしくは診断剤を対象に送達する機能を発揮する能力に関する情報を含有し得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される組成物のいずれの投与経路にも、経口、鼻、直腸、非経口、舌下、経皮、経粘膜（例えば、舌下、舌、（経）口腔内、（経）尿道、膣（例えば、経膣及び膣周囲）、鼻（内）、及び（経）直腸）、膀胱内、肺内、十二指腸内、胃内、髄腔内、皮下、筋肉内、皮内、動脈内、静脈内、気管支内、吸入、及び局所投与が含まれる。
任意の実施形態のうちの一部では、好適な組成物及び投薬形態には、例えば、錠剤、カプセル、カプレット、丸剤、ジェルキャップ、トローチ、分散体、懸濁液、溶液、シロップ、顆粒、ビーズ、経皮膚パッチ、ゲル、粉末、ペレット、マグマ、ロゼンジ、クリーム、ペースト、プラスター、ローション、ディスク、座剤、鼻または経口投与のための液体スプレー、吸入のための乾燥粉末またはエアロゾル化製剤、膀胱内投与のための組成物及び製剤などが含まれる。
いくつかの実施形態では、外因性物質またはカーゴを含む標的化脂質粒子組成物は、そのような外因性物質またはカーゴを細胞組織または対象に送達するために使用され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の標的化脂質粒子組成物の投与によるカーゴの送達は、細胞タンパク質発現レベルを改変し得る。所定の実施形態では、投与される組成物は、ポリペプチドが送達される細胞において実質的に非存在のまたは減少した機能的活性を提供する１つ以上のカーゴ（例えば、ポリペプチドまたはｍＲＮＡ）の上方制御（細胞における発現、細胞における送達、または細胞内の誘導を介する）を誘導する。いくつかの実施形態では、欠落した機能的活性は、酵素的、構造的、または制御的の性質のものであり得る。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、ポリペプチドが上方制御された細胞において存在するが、実質的に欠損している機能的活性を増加させる（例えば、相乗的に）１つ以上のポリペプチドの上方制御を誘導する。任意の実施形態のうちの一部では、投与される組成物は、ポリペプチド、ｓｉＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡが送達される細胞において存在するまたは上方制御された機能的活性を抑制する１つ以上のカーゴ（例えば、ポリペプチド、ｓｉＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡ）の下方制御（細胞における発現、細胞における送達、または細胞内の誘導を介する）を誘導する。任意の実施形態のうちの一部では、上方制御された機能的活性は、事実上、酵素的、構造的、または制御的であり得る。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、ポリペプチドが下方制御された細胞において存在するまたは上方制御された機能的活性を低下させる（例えば、相乗的に）１つ以上のポリペプチドの下方制御を誘導する。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、所定の機能的活性の上方制御及び他の機能的活性の下方制御を誘導する。
任意の実施形態のうちの一部では、標的化脂質粒子組成物（例えば、ミトコンドリアまたはＤＮＡを含むもの）は、標的細胞に対する効果を媒介し、効果は、少なくとも１、２、３、４、５、６、もしくは７日間、２、３、もしくは４週間、または１、２、３、６、もしくは１２ヶ月間持続する。いくつかの実施形態（例えば、標的化脂質粒子組成物が外因性タンパク質を含む）では、効果は、１、２、３、４、５、６、もしくは７日、２、３、もしくは４週、または１、２、３、６、もしくは１２ヶ月未満の間持続する。
任意の実施形態のうちの一部では、本明細書に記載の標的化脂質粒子組成物は、細胞または組織、例えば、ヒト細胞または組織にｅｘ－ｖｉｖｏで送達される。実施形態では、組成物は、細胞または組織の機能をｅｘ－ｖｉｖｏで改善し、例えば、細胞生存性、呼吸、または他の機能（例えば、本明細書に記載の別の機能を改善する。
いくつかの実施形態では、組成物は、傷害状態（例えば、外傷、疾患、低酸素症、虚血または他の損傷からのもの）であるｅｘ ｖｉｖｏ組織に送達される。
いくつかの実施形態では、組成物は、ｅｘ－ｖｉｖｏ移植物（例えば、組織外植片または移植のための組織、例えば、ヒト静脈、筋骨格移植片、例えば、骨もしくは腱、角膜、皮膚、心臓弁、神経；または単離もしくは培養された器官、例えば、ヒトに移植される器官、例えば、ヒト心臓、肝臓、肺、腎臓、膵臓、腸、胸腺、眼）に送達される。いくつかの実施形態では、組成物は、移植の前、間及び／または後に組織に送達される。
いくつかの実施形態では、組成物は、細胞、例えば、細胞調製物と共に送達、投与または接触される。いくつかの実施形態では、細胞調製物は、細胞療法調製物（ヒト対象への投与のために意図された細胞調製物）であり得る。実施形態では、細胞調製物は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する、例えば、組換えＣＡＲを発現する細胞を含む。ＣＡＲを発現する細胞は、例えば、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞であり得る。実施形態では、細胞調製物は、神経幹細胞調製物である。実施形態では、細胞調製物は、間葉幹細胞（ＭＳＣ）調製物である。実施形態では、細胞調製物は、造血幹細胞（ＨＳＣ）調製物である。実施形態では、細胞調製物は、膵島細胞調製物である。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の標的化脂質粒子組成物は、対象、例えば、哺乳動物、例えば、ヒトに投与され得る。そのような実施形態では、対象は、特定の疾患または病態（例えば、本明細書に記載の疾患または病態）のリスクがある、その症状を有する、またはその診断がされている、またはそれを有するものとして特定されている場合がある。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子の源は、標的化脂質粒子組成物が投与されるものと同じ対象からのものである。他の実施形態では、それらは異なる。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子及びレシピエント組織の源は、自己移植（同じ対象からのもの）または異種（異なる対象からのもの）であり得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の標的化脂質粒子組成物のためのドナー組織は、レシピエント組織とは異なる組織タイプであり得る。いくつかの実施形態では、ドナー組織は、筋肉組織であり得、レシピエント組織は、結合組織（例えば、脂肪組織）であり得る。他の実施形態では、ドナー組織及びレシピエント組織は、同じまたは異なるタイプのものであり得るが、異なる器官系からのものであり得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の標的化脂質粒子組成物は、がん、自己免疫疾患、感染性疾患、代謝疾患、神経変性疾患、または遺伝子疾患（例えば、酵素欠損症）を有する対象に投与され得る。いくつかの実施形態では、対象は、再生を必要とする。
いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、膜融合を阻害するタンパク質の阻害剤と共投与される。例えば、サプレッシン（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｙｎ）は、細胞－細胞融合を阻害するヒトタンパク質である（Ｓｕｇｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，“Ａ ｎｏｖｅｌ ｈｕｍａｎ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｃｅｌｌ－ｃｅｌｌ ｆｕｓｉｏｎ”Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ ３：１４６２（ＤＯＩ：１０．１０３８／ｓｒｅｐ０１４６２））。いくつかの実施形態では、標的化脂質粒子は、シプレッシン（ｓｙｐｒｅｓｓｙｎ）の阻害剤、例えば、ｓｉＲＮＡまたは阻害性抗体と共投与される。
Ｖ．例示的な実施形態
提供される実施形態には以下のものがある：
１．標的化脂質粒子であって、
（ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、
（ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、
（ｃ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む、標的化エンベロープタンパク質であって、前記ｓｄＡｂ可変ドメインは、前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されている、前記標的化エンベロープタンパク質と
を含み、前記Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び前記標的化エンベロープタンパク質は、前記脂質二重層に埋め込まれている、前記標的化脂質粒子。
２．前記シングルドメイン抗体は、リンカーを介して前記Ｇタンパク質に結合されている、実施形態１に記載の標的化脂質粒子。
３．前記リンカーは、ペプチドリンカーである、実施形態２に記載の標的化脂質粒子。
４．標的化脂質粒子であって、
（ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、
（ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、
（ｃ）ペプチドリンカーを介してシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインに結合したヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分を含む、標的化エンベロープタンパク質であって、前記シングルドメイン抗体は、標的細胞の細胞表面分子に結合する、前記標的化エンベロープタンパク質と
を含み、前記Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び前記標的化エンベロープタンパク質は、前記脂質二重層に埋め込まれている、前記標的化脂質粒子。
５．前記Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分のＮ末端は、脂質二重層の外側に露出されている、実施形態１～４のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
６．前記Ｇタンパク質のＣ末端は、前記脂質二重層の外側に露出されている、実施形態１～５のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
７．前記シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する細胞表面分子と結合する、実施形態１～６のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
８．前記細胞表面分子は、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である、実施形態７に記載の標的化脂質粒子。
９．前記標的細胞は、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物もしくは腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される、実施形態７に記載の標的化脂質粒子。
１０．前記標的細胞は、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される、実施形態９に記載の標的化脂質粒子。
１１．前記シングルドメイン抗体は、標的細胞上に存在する抗原またはその一部と結合する、先行実施形態のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１２．前記ペプチドリンカーは、最大で６５アミノ酸の長さを含む、実施形態３～１１のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１３．前記ペプチドリンカーは、約２～６５アミノ酸、２～６０アミノ酸、２～５６アミノ酸、２～５２アミノ酸、２～４８アミノ酸、２～４４アミノ酸、２～４０アミノ酸、２～３６アミノ酸、２～３２アミノ酸、２～２８アミノ酸、２～２４アミノ酸、２～２０アミノ酸、２～１８アミノ酸、２～１４アミノ酸、２～１２アミノ酸、２～１０アミノ酸、２～８アミノ酸、２～６アミノ酸、６～６５アミノ酸、６～６０アミノ酸、６～５６アミノ酸、６～５２アミノ酸、６～４８アミノ酸、６～４４アミノ酸、６～４０アミノ酸、６～３６アミノ酸、６～３２アミノ酸、６～２８アミノ酸、６～２４アミノ酸、６～２０アミノ酸、６～１８アミノ酸、６～１４アミノ酸、６～１２アミノ酸、６～１０アミノ酸、６～８アミノ酸、８～６５アミノ酸、８～６０アミノ酸、８～５６アミノ酸、８～５２アミノ酸、８～４８アミノ酸、８～４４アミノ酸、８～４０アミノ酸、８～３６アミノ酸、８～３２アミノ酸、８～２８アミノ酸、８～２４アミノ酸、８～２０アミノ酸、８～１８アミノ酸、８～１４アミノ酸、８～１２アミノ酸、８～１０アミノ酸、１０～６５アミノ酸、１０～６０アミノ酸、１０～５６アミノ酸、１０～５２アミノ酸、１０～４８アミノ酸、１０～４４アミノ酸、１０～４０アミノ酸、１０～３６アミノ酸、１０～３２アミノ酸、１０～２８アミノ酸、１０～２４アミノ酸、１０～２０アミノ酸、１０～１８アミノ酸、１０～１４アミノ酸、１０～１２アミノ酸、１２～６５アミノ酸、１２～６０アミノ酸、１２～５６アミノ酸、１２～５２アミノ酸、１２～４８アミノ酸、１２～４４アミノ酸、１２～４０アミノ酸、１２～３６アミノ酸、１２～３２アミノ酸、１２～２８アミノ酸、１２～２４アミノ酸、１２～２０アミノ酸、１２～１８アミノ酸、１２～１４アミノ酸、１４～６５アミノ酸、１４～６０アミノ酸、１４～５６アミノ酸、１４～５２アミノ酸、１４～４８アミノ酸、１４～４４アミノ酸、１４～４０アミノ酸、１４～３６アミノ酸、１４～３２アミノ酸、１４～２８アミノ酸、１４～２４アミノ酸、１４～２０アミノ酸、１４～１８アミノ酸、１８～６５アミノ酸、１８～６０アミノ酸、１８～５６アミノ酸、１８～５２アミノ酸、１８～４８アミノ酸、１８～４４アミノ酸、１８～４０アミノ酸、１８～３６アミノ酸、１８～３２アミノ酸、１８～２８アミノ酸、１８～２４アミノ酸、１８～２０アミノ酸、２０～６５アミノ酸、２０～６０アミノ酸、２０～５６アミノ酸、２０～５２アミノ酸、２０～４８アミノ酸、２０～４４アミノ酸、２０～４０アミノ酸、２０～３６アミノ酸、２０～３２アミノ酸、２０～２８アミノ酸、２０～２６アミノ酸、２０～２４アミノ酸、２４～６５アミノ酸、２４～６０アミノ酸、２４～５６アミノ酸、２４～５２アミノ酸、２４～４８アミノ酸、２４～４４アミノ酸、２４～４０アミノ酸、２４～３６アミノ酸、２４～３２アミノ酸、２４～３０アミノ酸、２４～２８アミノ酸、２８～６５アミノ酸、２８～６０アミノ酸、２８～５６アミノ酸、２８～５２アミノ酸、２８～４８アミノ酸、２８～４４アミノ酸、２８～４０アミノ酸、２８～３６アミノ酸、２８～３４アミノ酸、２８～３２アミノ酸、３２～６５アミノ酸、３２～６０アミノ酸、３２～５６アミノ酸、３２～５２アミノ酸、３２～４８アミノ酸、３２～４４アミノ酸、３２～４０アミノ酸、３２～３８アミノ酸、３２～３６アミノ酸、３６～６５アミノ酸、３６～６０アミノ酸、３６～５６アミノ酸、３６～５２アミノ酸、３６～４８アミノ酸、３６～４４アミノ酸、３６～４０アミノ酸、４０～６５アミノ酸、４０～６０アミノ酸、４０～５６アミノ酸、４０～５２アミノ酸、４０～４８アミノ酸、４０～４４アミノ酸、４４～６５アミノ酸、４４～６０アミノ酸、４４～５６アミノ酸、４４～５２アミノ酸、４４～４８アミノ酸、４８～６５アミノ酸、４８～６０アミノ酸、４８～５６アミノ酸、４８～５２アミノ酸、５０～６５アミノ酸、５０～６０アミノ酸、５０～５６アミノ酸、５０～５２アミノ酸、５４～６５アミノ酸、５４～６０アミノ酸、５４～５６アミノ酸、５８～６５アミノ酸、５８～６０アミノ酸、または６０～６５アミノ酸を含む、実施形態３～１１のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１４．前記ペプチドリンカーは、長さが３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９，２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４または６５アミノ酸であるポリペプチドを含む、実施形態３～１１のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１５．前記ペプチドリンカーは、ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧＳ（配列番号４３）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号４１）またはそれらの組み合わせを含むフレキシブルリンカーである、実施形態３～１４のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１６．前記ペプチドリンカーは、ｎが１～１０である（ＧＧＳ）ｎを含む、実施形態３～１５のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１７．前記ペプチドリンカーは、ｎが１～１０である（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号４２）を含む、実施形態３～１５のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１８．前記ペプチドリンカーは、ｎが１～６である（ＧＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２７）を含む、実施形態３～１５のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１９．前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質またはヘンドラウイルスＧタンパク質である、実施形態１～１８のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
２０．前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、実施形態１～１９のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
２１．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２０に記載の標的化脂質粒子。
２２．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、
切断型でありかつ前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基を欠く生物学的に活性な部分
である、実施形態２１に記載の標的化脂質粒子。
２３．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、野生型ＮｉＶ－ＧのＮ末端で切断された生物学的に活性な部分であり、配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０のいずれかに示される配列、または配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態１～１８のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
２４．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの５アミノ酸切断を有する、実施形態２１～２３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
２５．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列、または配列番号１０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態２４に記載の標的化脂質粒子。
２６．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列、または配列番号３５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態２４に記載の標的化脂質粒子。
２７．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号４５に示されるアミノ酸配列、または配列番号４５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態２４に記載の標的化脂質粒子。
２８．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１０アミノ酸切断を有する、実施形態２１～２３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
２９．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１１に示されるアミノ酸配列、または配列番号１１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態２８に記載の標的化脂質粒子。
３０．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３６に示されるアミノ酸配列、または配列番号３６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態２８に記載の標的化脂質粒子。
３１．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号４６に示されるアミノ酸配列、または配列番号４６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態２８に記載の標的化脂質粒子。
３２．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１５アミノ酸切断を有する、実施形態２１～２３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
３３．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１２に示されるアミノ酸配列、または配列番号１２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態３２に記載の標的化脂質粒子。
３４．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３７に示されるアミノ酸配列、または配列番号３７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態３２に記載の標的化脂質粒子。
３５．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号４７に示されるアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態３２に記載の標的化脂質粒子。
３６．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断を有する、実施形態２１～２３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
３７．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１３に示されるアミノ酸配列、または配列番号１３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態３６に記載の標的化脂質粒子。
３８．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列、または配列番号３８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態３６に記載の標的化脂質粒子。
３９．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号４８に示されるアミノ酸配列、または配列番号４８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態３６に記載の標的化脂質粒子。
４０．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２５アミノ酸切断を有する、実施形態２１～２３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
４１．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１４に示されるアミノ酸配列、または配列番号１４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４０に記載の標的化脂質粒子。
４２．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号３９に示されるアミノ酸配列、または配列番号３９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４０に記載の標的化脂質粒子。
４３．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号４９に示されるアミノ酸配列、または配列番号４９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４０に記載の標的化脂質粒子。
４４．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３０アミノ酸切断を有する、実施形態２１～２３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
４５．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１５に示されるアミノ酸配列、または配列番号１５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４４に記載の標的化脂質粒子。
４６．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号４０に示されるアミノ酸配列、または配列番号４０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４４に記載の標的化脂質粒子。
４７．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号５０に示されるアミノ酸配列、または配列番号５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４４に記載の標的化脂質粒子。
４８．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断を有する、実施形態２１～２３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
４９．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号２２に示されるアミノ酸配列、または配列番号２２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４８に記載の標的化脂質粒子。
５０．前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号５３に示されるアミノ酸配列、または配列番号５３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態４８に記載の標的化脂質粒子。
５１．前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合を示す変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である、実施形態１～４８のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
５２．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、
配列番号２８に示される付番を参照してＥ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択されるアミノ酸置換に対応する１つ以上のアミノ酸置換
を含む、実施形態５１に記載の標的化脂質粒子。
５３．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号１６に示されるアミノ酸配列、または配列番号１６と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態５１または実施形態５２に記載の標的化脂質粒子。
５４．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質は、配列番号５１に示されるアミノ酸配列、または配列番号５１と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態５１または実施形態５２に記載の標的化脂質粒子。
５５．前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ニパウイルスＦ（ＮｉＶ－Ｆ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＦタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、実施形態１～５４のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
５６．前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分は、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、実施形態１～５５のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
５７．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分は、配列番号２示されるアミノ酸配列、または配列番号２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１～５６のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
５８．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である、実施形態１～５７のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
５９．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号５と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態５８に記載の標的化脂質粒子。
６０．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、
ｉ）前記野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断、及び
ｉｉ）Ｎ結合型グリコシル化部位における点変異
を含むその生物学的に活性な部分である、実施形態１～５７のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
６１．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号７と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態６０に記載の標的化脂質粒子。
６２．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、前記野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２２アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である、実施形態１～５７のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
６３．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号８と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチドの配列によってコードされるアミノ酸配列を有する、実施形態６２に記載の標的化脂質粒子
６４．前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質は、配列番号２３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態６３に記載の標的化脂質粒子。
６５．前記Ｆ－タンパク質またはその生物学的に活性な部分は、Ｆ１サブユニットまたはその融合部分を含む、実施形態１～５７のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
６６．前記Ｆ１サブユニットは、Ｆ０前駆体のタンパク質分解的に切断された部分である、実施形態６５に記載の標的化脂質粒子。
６７．前記Ｆ１サブユニットは、配列番号４に示される配列、または配列番号４と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態６６に記載の標的化脂質粒子。
６８．前記脂質二重層は、レトロウイルスまたはレトロウイルス様粒子を生成するために使用される宿主細胞の膜に由来する、実施形態１～６７のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
６９．前記脂質二重層は、ウイルスエンベロープであるか、またはそれを含む、実施形態１～６０のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
７０．前記レトロウイルス様粒子は、複製欠損性である、実施形態６８に記載の標的化脂質粒子。
７１．前記Ｆタンパク質分子及び前記Ｇタンパク質以外の１つ以上のウイルス成分を含む、実施形態１～７０のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
７２．前記１つ以上のウイルス成分は、レトロウイルスからのものである、実施形態７１に記載の標的化脂質粒子。
７３．前記レトロウイルスは、レンチウイルスである、実施形態７２に記載の標的化脂質粒子。
７４．前記１つ以上のウイルス成分は、Ｇａｇ、Ｐｏｌ、Ｒｅｖ及びＴａｔのうちの１つ以上から選択されるウイルスパッケージングタンパク質を含む、実施形態７１～７３のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
７５．前記１つ以上のウイルス成分は、以下の核酸配列：５’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３ドメインを欠く）、プサイパッケージング要素（プサイ）、セントラルポリプリン配列（ｃＰＰＴ）／セントラル終結配列（ＣＴＳ）（例えば、ＤＮＡフラップ）、ポリＡテール配列、転写後制御要素（例えば、ＷＰＲＥ）、Ｒｅｖ反応要素（ＲＲＥ）、及び３’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３を欠く）のうちの１つ以上（例えば、すべて）を含む、実施形態７１～７４のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
７６．外因性物質をさらに含む、実施形態１～７５のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
７７．前記外因性物質は、内腔に存在する、実施形態７６に記載の標的化脂質粒子。
７８．前記外因性物質は、タンパク質または核酸であり、任意に前記核酸は、ＤＮＡまたはＲＮＡである、実施形態７７に記載の標的化脂質粒子。
７９．前記外因性物質は、治療剤または診断剤をコードする、実施形態７６～７８のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
８０．前記宿主細胞は、ＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、ＭＤＣＫ細胞、Ｃ３Ｈ １０Ｔ１／２細胞、ＦＬＹ細胞、Ｐｓｉ－２細胞、ＢＯＳＣ ２３細胞、ＰＡ３１７細胞、ＷＥＨＩ細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＳＣ １細胞、ＢＳＣ ４０細胞、ＢＭＴ １０細胞、ＶＥＲＯ細胞、Ｗ１３８細胞、ＭＲＣ５細胞、Ａ５４９細胞、ＨＴ１０８０細胞、２９３細胞、２９３Ｔ細胞、Ｂ－５０細胞、３Ｔ３細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＨｅｐＧ２細胞、Ｓａｏｓ－２細胞、Ｈｕｈ７細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｗ１６３細胞、２１１細胞、及び２１１Ａ細胞からなる群から選択される、実施形態６８～７９のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
８１．前記宿主細胞は、２９３Ｔ細胞を含む、実施形態６８～８０のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
８２．（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分と（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインとをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチドであって、前記ｓｄＡｂ可変ドメインは、前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されている、前記ポリヌクレオチド。
８３．（ｉｉｉ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸配列をさらに含む、実施形態８２に記載のポリヌクレオチド。
８４．前記核酸の発現をコントロールするために機能可能に連結された少なくとも１つのプロモーターをさらに含む、実施形態８２または実施形態８３に記載のポリヌクレオチド。
８５．前記プロモーターは、構成的プロモーターである、実施形態８３～８４のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
８６．前記プロモーターは、誘導性プロモーターである、実施形態８３～８５のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
８７．前記ｓｄＡｂ可変ドメインは、コードされるペプチドリンカーを介して前記Ｇタンパク質に結合されている、実施形態８２～８６のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
８８．前記コードされるペプチドリンカーは、最大で６５アミノ酸の長さを含む、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
８９．前記コードされるペプチドリンカーは、約２～６５アミノ酸、２～６０アミノ酸、２～５６アミノ酸、２～５２アミノ酸、２～４８アミノ酸、２～４４アミノ酸、２～４０アミノ酸、２～３６アミノ酸、２～３２アミノ酸、２～２８アミノ酸、２～２４アミノ酸、２～２０アミノ酸、２～１８アミノ酸、２～１４アミノ酸、２～１２アミノ酸、２～１０アミノ酸、２～８アミノ酸、２～６アミノ酸、６～６５アミノ酸、６～６０アミノ酸、６～５６アミノ酸、６～５２アミノ酸、６～４８アミノ酸、６～４４アミノ酸、６～４０アミノ酸、６～３６アミノ酸、６～３２アミノ酸、６～２８アミノ酸、６～２４アミノ酸、６～２０アミノ酸、６～１８アミノ酸、６～１４アミノ酸、６～１２アミノ酸、６～１０アミノ酸、６～８アミノ酸、８～６５アミノ酸、８～６０アミノ酸、８～５６アミノ酸、８～５２アミノ酸、８～４８アミノ酸、８～４４アミノ酸、８～４０アミノ酸、８～３６アミノ酸、８～３２アミノ酸、８～２８アミノ酸、８～２４アミノ酸、８～２０アミノ酸、８～１８アミノ酸、８～１４アミノ酸、８～１２アミノ酸、８～１０アミノ酸、１０～６５アミノ酸、１０～６０アミノ酸、１０～５６アミノ酸、１０～５２アミノ酸、１０～４８アミノ酸、１０～４４アミノ酸、１０～４０アミノ酸、１０～３６アミノ酸、１０～３２アミノ酸、１０～２８アミノ酸、１０～２４アミノ酸、１０～２０アミノ酸、１０～１８アミノ酸、１０～１４アミノ酸、１０～１２アミノ酸、１２～６５アミノ酸、１２～６０アミノ酸、１２～５６アミノ酸、１２～５２アミノ酸、１２～４８アミノ酸、１２～４４アミノ酸、１２～４０アミノ酸、１２～３６アミノ酸、１２～３２アミノ酸、１２～２８アミノ酸、１２～２４アミノ酸、１２～２０アミノ酸、１２～１８アミノ酸、１２～１４アミノ酸、１４～６５アミノ酸、１４～６０アミノ酸、１４～５６アミノ酸、１４～５２アミノ酸、１４～４８アミノ酸、１４～４４アミノ酸、１４～４０アミノ酸、１４～３６アミノ酸、１４～３２アミノ酸、１４～２８アミノ酸、１４～２４アミノ酸、１４～２０アミノ酸、１４～１８アミノ酸、１８～６５アミノ酸、１８～６０アミノ酸、１８～５６アミノ酸、１８～５２アミノ酸、１８～４８アミノ酸、１８～４４アミノ酸、１８～４０アミノ酸、１８～３６アミノ酸、１８～３２アミノ酸、１８～２８アミノ酸、１８～２４アミノ酸、１８～２０アミノ酸、２０～６５アミノ酸、２０～６０アミノ酸、２０～５６アミノ酸、２０～５２アミノ酸、２０～４８アミノ酸、２０～４４アミノ酸、２０～４０アミノ酸、２０～３６アミノ酸、２０～３２アミノ酸、２０～２８アミノ酸、２０～２６アミノ酸、２０～２４アミノ酸、２４～６５アミノ酸、２４～６０アミノ酸、２４～５６アミノ酸、２４～５２アミノ酸、２４～４８アミノ酸、２４～４４アミノ酸、２４～４０アミノ酸、２４～３６アミノ酸、２４～３２アミノ酸、２４～３０アミノ酸、２４～２８アミノ酸、２８～６５アミノ酸、２８～６０アミノ酸、２８～５６アミノ酸、２８～５２アミノ酸、２８～４８アミノ酸、２８～４４アミノ酸、２８～４０アミノ酸、２８～３６アミノ酸、２８～３４アミノ酸、２８～３２アミノ酸、３２～６５アミノ酸、３２～６０アミノ酸、３２～５６アミノ酸、３２～５２アミノ酸、３２～４８アミノ酸、３２～４４アミノ酸、３２～４０アミノ酸、３２～３８アミノ酸、３２～３６アミノ酸、３６～６５アミノ酸、３６～６０アミノ酸、３６～５６アミノ酸、３６～５２アミノ酸、３６～４８アミノ酸、３６～４４アミノ酸、３６～４０アミノ酸、４０～６５アミノ酸、４０～６０アミノ酸、４０～５６アミノ酸、４０～５２アミノ酸、４０～４８アミノ酸、４０～４４アミノ酸、４４～６５アミノ酸、４４～６０アミノ酸、４４～５６アミノ酸、４４～５２アミノ酸、４４～４８アミノ酸、４８～６５アミノ酸、４８～６０アミノ酸、４８～５６アミノ酸、４８～５２アミノ酸、５０～６５アミノ酸、５０～６０アミノ酸、５０～５６アミノ酸、５０～５２アミノ酸、５４～６５アミノ酸、５４～６０アミノ酸、５４～５６アミノ酸、５８～６５アミノ酸、５８～６０アミノ酸、または６０～６５アミノ酸を含む、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９０．前記コードされるペプチドリンカーは、長さが３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９，２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４または６５アミノ酸であるポリペプチドを含む、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９１．前記コードされるペプチドリンカーは、ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧＳ（配列番号４３）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号４１）及びそれらの組み合わせを含む、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９２．前記コードされるペプチドリンカーは、ｎが１～１０である（ＧＧＳ）ｎを含む、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９３．前記コードされるペプチドリンカーは、ｎが１～１０である（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号４２）を含む、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９４．前記コードされるペプチドリンカーは、ｎが１～４である（ＧＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２７）を含む、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９５．前記Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＧタンパク質であるか、またはネイティブ結合パートナーについて減少した結合を示すそのバリアントである、実施形態８６～８７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９６．前記Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質である、実施形態８２～９５のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９７．前記Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合を示す変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である、実施形態８２～９５のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
９８．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態９７に記載のポリヌクレオチド。
９９．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０のいずれかに示される配列、または配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態８２～９５及び９７のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１００．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの５アミノ酸切断を含む、実施形態９７～９９のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１０１．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列、または配列番号１０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１００に記載のポリヌクレオチド。
１０２．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列、または配列番号３５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１００に記載のポリヌクレオチド。
１０３．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号４５に示されるアミノ酸配列、または配列番号４５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１００に記載のポリヌクレオチド。
１０４．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１０アミノ酸切断を含む、実施形態９７～９９のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１０５．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１１に示されるアミノ酸配列、または配列番号１１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１０４に記載のポリヌクレオチド。
１０６．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号３６に示されるアミノ酸配列、または配列番号３６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１０４に記載のポリヌクレオチド。
１０７．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号４６に示されるアミノ酸配列、または配列番号４６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１０４に記載のポリヌクレオチド。
１０８．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの１５アミノ酸切断を含む、実施形態９７～９９のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１０９．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１２に示されるアミノ酸配列、または配列番号１２と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１０８に記載のポリヌクレオチド。
１１０．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号３７に示されるアミノ酸配列、または配列番号３７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１０８に記載のポリヌクレオチド。
１１１．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号４７に示されるアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１０８に記載のポリヌクレオチド。
１１２．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断を含む、実施形態９７～９９のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１１３．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１３に示されるアミノ酸配列、または配列番号１３と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１１２に記載のポリヌクレオチド。
１１４．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列、または配列番号３８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１１２に記載のポリヌクレオチド。
１１５．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号４８に示されるアミノ酸配列、または配列番号４８と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１１２に記載のポリヌクレオチド。
１１６．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの２５アミノ酸切断を含む、実施形態９７～９９のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１１７．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１４に示されるアミノ酸配列、または配列番号１４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１１６に記載のポリヌクレオチド。
１１８．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号３９に示されるアミノ酸配列、または配列番号３９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１１６に記載のポリヌクレオチド。
１１９．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号４９に示されるアミノ酸配列、または配列番号４９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１１６に記載のポリヌクレオチド。
１２０．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３０アミノ酸切断を含む、実施形態９７～９９のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１２１．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１５に示されるアミノ酸配列、または配列番号１５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１２０に記載のポリヌクレオチド。
１２２．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号４０に示されるアミノ酸配列、または配列番号４０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１２０に記載のポリヌクレオチド。
１２３．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号５０に示されるアミノ酸配列、または配列番号５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１２０に記載のポリヌクレオチド。
１２４．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、
ｉ）Ｎ末端におけるまたはその近くの切断、及び
ｉｉ）Ｅ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択される点変異
を含む、実施形態９７～９９のいずれかに記載のポリヌクレオチド。
１２５．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号１６に示されるアミノ酸配列、または配列番号１６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１２４に記載のポリヌクレオチド。
１２６．前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質をコードする前記核酸配列は、配列番号５１に示されるアミノ酸配列、または配列番号５１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１２４に記載のポリヌクレオチド。
１２７．実施形態８２～１２６のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
１２８．前記ベクターは、哺乳動物ベクター、ウイルスベクターまたは人工染色体であり、任意に前記人工染色体は、細菌人工染色体（ＢＡＣ）である、実施形態１２７に記載のベクター。
１２９．実施形態８２～１２６のいずれかに記載のポリヌクレオチドまたは実施形態１２７もしくは実施形態１２８に記載のベクターを含む、細胞。
１３０．ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、細胞を提供すること、
ｂ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で前記細胞を培養すること、及び
ｃ）前記細胞から前記標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより前記標的化脂質粒子を作製すること
を含む、前記方法。
１３１．ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
ａ）実施形態８２～１２６のいずれかに記載のポリヌクレオチドまたは実施形態１２７もしくは実施形態１２８に記載のベクターを含む細胞を提供すること、
ｂ）前記細胞にヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードするポリヌクレオチドを提供すること、
ｃ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で前記細胞を培養すること、及び
ｄ）前記細胞から前記標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより前記標的化脂質粒子を作製すること
を含む、前記方法。
１３２．前記細胞は、哺乳動物細胞である、実施形態１３０または実施形態１３１に記載の方法。
１３３．前記細胞は、プロデューサー細胞であり、前記標的化脂質粒子は、ウイルス粒子またはウイルス様粒子、任意にレトロウイルス粒子またはレトロウイルス様粒子、任意にレンチウイルス粒子またはレンチウイルス様粒子である、実施形態１３０～１３１のいずれかに記載の方法。
１３４．（ｉ）ウイルス核酸（複数可）と、（ｉｉ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、（ｉｉｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞であって、任意に前記ウイルス核酸（複数可）は、レンチウイルス核酸である、前記プロデューサー細胞。
１３５．前記ウイルス核酸（複数可）は、ウイルス複製に関与する１つ以上の遺伝子を欠く、実施形態１３４に記載のプロデューサー細胞。
１３６．前記ウイルス核酸は、Ｇａｇ、Ｐｏｌ、Ｒｅｖ及びＴａｔのうちの１つ以上から選択されるウイルスパッケージングタンパク質をコードする核酸を含む、実施形態１３４または実施形態１３５に記載のプロデューサー細胞。
１３７．前記ウイルス核酸は、
以下の核酸配列：５’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３ドメインを欠く）、プサイパッケージング要素（プサイ）、セントラルポリプリン配列（ｃＰＰＴ）／セントラル終結配列（ＣＴＳ）（例えば、ＤＮＡフラップ）、ポリＡテール配列、転写後制御要素（例えば、ＷＰＲＥ）、Ｒｅｖ反応要素（ＲＲＥ）、及び３’ＬＴＲ（例えば、Ｕ５を含み、機能性Ｕ３を欠く）のうちの１つ以上（例えば、すべて）
を含む、実施形態１３４～１３６のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１３８．前記ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号２に示される配列、
（ｉｉ）配列番号２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１３７のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１３９．前記ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号５に示される配列、
（ｉｉ）配列番号５と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１３７のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４０．前記ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号７に示される配列、
（ｉｉ）配列番号７と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１３７のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４１．前記ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号８に示される配列をコードするヌクレオチド配列によってコードする配列、
（ｉｉ）配列番号８と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１３７のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４２．前記ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号２３に示される配列、
（ｉｉ）配列番号２３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１３７のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４３．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示される配列、
（ｉｉ）配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４４．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号１０に示される配列、
（ｉｉ）配列番号１０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４５．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号３５に示される配列、
（ｉｉ）配列番号３５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４６．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号４５に示される配列、
（ｉｉ）配列番号４５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４７．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号１１に示される配列、
（ｉｉ）配列番号１１と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４８．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号３６に示される配列、
（ｉｉ）配列番号３６と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１４９．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号４６に示される配列、
（ｉｉ）配列番号４６と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５０．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号１２に示される配列、
（ｉｉ）配列番号１２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５１．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号３７に示される配列、
（ｉｉ）配列番号３７と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５２．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号４７に示される配列、
（ｉｉ）配列番号４７と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５３．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号１３に示される配列、
（ｉｉ）配列番号１３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５４．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号３８に示される配列、
（ｉｉ）配列番号３８と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５５．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号４８に示される配列、
（ｉｉ）配列番号４８と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５６．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号１４に示される配列、
（ｉｉ）配列番号１４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５７．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号３９に示される配列、
（ｉｉ）配列番号３９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５８．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号４９に示される配列、
（ｉｉ）配列番号４９と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１５９．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号１５に示される配列、
（ｉｉ）配列番号１５と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１６０．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号４０に示される配列、
（ｉｉ）配列番号４０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１６１．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号５０に示される配列、
（ｉｉ）配列番号５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１６２．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号１６に示される配列、
（ｉｉ）配列番号１６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１６３．前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分は、
（ｉ）配列番号５１に示される配列、
（ｉｉ）配列番号５１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、実施形態１３４～１４２のいずれかに記載のプロデューサー細胞。
１６４．実施形態１３４～１６３のいずれかに記載のプロデューサー細胞から生成された、ウイルスベクター粒子またはウイルス様粒子。
１６５．実施形態１～８１及び１７３～１７６のいずれかに記載の複数の標的化脂質粒子を含む、組成物。
１６６．薬学的に許容可能な担体をさらに含む、実施形態１６５に記載の組成物。
１６７．前記標的化脂質粒子は、１μｍ未満の平均直径を含む、実施形態１６５または実施形態１６６に記載の薬学的組成物。
１６８．外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する方法であって、実施形態１～８１及び１７３～１７６のいずれかに記載の標的化脂質粒子または実施形態１６５～１６７及び１７７のいずれかに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
１６９．対象（例えば、ヒト対象）における疾患または障害を処置する方法であって、実施形態１～８１及び１７３～１７６のいずれかに記載の標的化脂質粒子または実施形態１６５～１６７及び１７７のいずれかに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
１７０．哺乳動物細胞を標的化脂質粒子に融合させる方法であって、実施形態１～８１及び１７３～１７６のいずれかに記載の標的化脂質粒子または実施形態１６５～１６７及び１７７のいずれかに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
１７１．前記哺乳動物細胞を前記標的化脂質粒子に前記融合させることは、外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する、実施形態１７０に記載の方法。
１７２．前記哺乳動物細胞を前記標的化脂質粒子に前記融合させることは、対象（例えば、ヒト対象）における疾患または障害を処置する、実施形態１７０または実施形態１７１に記載の方法。
１７３．前記標的化脂質粒子は、同様の脂質二重層に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれが代替的標的化部位に融合されている参照脂質粒子と比較して多い前記標的化エンベロープタンパク質発現を有し、任意に前記代替的標的化部位は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、実施形態１～８１のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１７４．前記発現は、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する、実施形態１７３に記載の標的化脂質粒子。
１７５．前記発現は、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて、好ましくは１０倍もしくは約１０倍もしくは１０倍超またはそれを超えて増加する、実施形態１７３に記載の標的化脂質粒子。
１７６．形質導入後の標的細胞における力価は、１×１０６形質導入単位（ＴＵ）／ｍＬ以上、２×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、３×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、４×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、５×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、６×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、７×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、８×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、９×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、または１×１０７ＴＵ／ｍＬ以上である、実施形態１～８１及び１７３～１７５のいずれかに記載の標的化脂質粒子または実施形態１６４に記載のウイルスベクター粒子もしくはウイルス様粒子。
１７７．前記組成物における脂質粒子の集団の中で、５０％もしくは約５０％超、５５％もしくは約５５％超、６０％もしくは約６０％超、６５％もしくは約６５％超、７０％もしくは約７０％超、または７５％もしくは約７５％超が、前記標的化エンベロープタンパク質について表面陽性である、実施形態１６５～１６７のいずれかに記載の組成物。
１７８．前記標的化エンベロープタンパク質が、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２または０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の密度で前記標的化脂質粒子の表面上に存在する、実施形態１～８１及び１７３～１７６のいずれかに記載の標的化脂質粒子。
１７９．実施形態１～８１及び１７３～１７６及び１７８のいずれかに記載の複数の標的化脂質粒子を含む組成物であって、前記標的化エンベロープタンパク質が、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２または０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の平均密度で前記標的化脂質粒子の表面上に存在する、前記組成物。
１８０．膜（例えば、細胞膜）に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれが代替的標的化部位に融合されている参照プロデューサー細胞と比較して多い、前記標的化エンベロープタンパク質の膜（例えば、細胞膜）発現を、前記プロデューサー細胞が有し、任意に前記代替的標的化部位は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、実施形態１３４～１６３のいずれか１つに記載のプロデューサー細胞。
１８１．前記発現は、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２５％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％以上またはそれを超えて増加する、実施形態１８０に記載のプロデューサー細胞。
１８２．前記発現は、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍以上またはそれを超えて、好ましくは１０倍もしくは約１０倍もしくは１０倍超またはそれを超えて増加する、実施形態１８０に記載のプロデューサー細胞。
１８３．平方ミクロン当たり少なくとも２０のタンパク質（例えば、少なくとも５０、１００、２００、５００、１０００、２０００、５０００、または１０，０００のタンパク質）である、前記プロデューサー細胞の膜（例えば、細胞膜）上の前記標的化エンベロープタンパク質の発現を、前記プロデューサー細胞が有する、実施形態１３４～１６３及び１８０～１８２のいずれか１つに記載のプロデューサー細胞。
１８４．前記標的化エンベロープタンパク質は、前記プロデューサー細胞の総膜（例えば、細胞膜）タンパク質の少なくとも０．１％（例えば、少なくとも０．２％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、または１０％）（例えば、総タンパク質重量に対して）を構成する、実施形態１３４～１６３及び１８０～１８３のいずれか１つに記載のプロデューサー細胞。
以下の例は、例示の目的のためにのみ含まれ、本発明の範囲を限定することは意図されていない。
実施例１：標的化バインダーを含有するプロデューサー細胞の生成及び特性づけ
この実施例は、ＮｉＶＧがｓｃＦｖまたはＶＨＨ結合モダリティに連結されたＮｉＶＧ標的化結合配列の生成及び評価を記載する。
Ａ．ＣＤ４に仕向けられた結合モダリティ
ヒト細胞受容体ＣＤ４に対するｓｃＦｖまたはＶＨＨ結合モダリティを含有する例示的な再標的化ＮｉｖＧフソゲンコンストラクトを生成した。各結合モダリティについて、独自のＣＤＲ３を含有する４つの異なる配列を評価した。各々の例示的なバインダー配列をコドン最適化し、ＮｉＶＧ（ＧｃΔ３４；Ｂｅｎｄｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１６ ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｌ １２（６）：ｅ１００５６４１）をコードする配列との融合体として発現ベクターにクローニングした。得られたベクターは、ＮｉＶＧ（配列番号１６）を含有するＮｉｖＧ標的化ドメイン、フレキシブルリンカー及び結合ドメインと、それに続く検出用の６ｘＨｉｓタグ（ＮｉｖＧ－リンカー－ｓｃＦｖ－６ｘＨｉｓ）をコードしていた。
サブクローニング後、トランスフェクション試薬を使用して５μｇの各々の例示的なコンストラクトをＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクションした。ｐｃＤＮＡ３．１プラスミド（空のベクター）及びバインダードメインを有しない発現ベクター（ＮｉＶＧ－リンカー－バインダーなし）を陰性対照として使用した。
トランスフェクションから４８時間後、細胞を採取し、１００，０００細胞を、５０ｎＭまたは３００ｎＭのいずれかのヒトＦｃタグを有する可溶性ヒトＣＤ４タンパク質（ｈＣＤ４－Ｆｃ）と４℃で１時間インキュベートした。インキュベート後、細胞を洗浄し、ＮｉｖＧ－バインダーの表面発現を検出するためのＡｌｅｘａ－６４７にコンジュゲートされた抗Ｈｉｓ抗体、及び可溶性ｈＣＤ４－Ｆｃタンパク質に対する結合を検出するためのＡｌｅｘａ－４８８にコンジュゲートされた抗ヒトＦｃ抗体で共染色した。
細胞をフローサイトメトリーによって分析し、Ｈｉｓ（表面発現）及びＦｃ（ＣＤ４タンパク質結合）についてのゲートを陰性対照の空のベクター（ｐｃＤＮＡ３．１）に基づいて設定した。ＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞の蛍光強度中央値（ＭＦＩ）の評価は、ｓｃＦｖ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞よりも、Ｈｉｓ＋細胞の％によって定量されるより高い表面発現（図１Ａ）及びＦｃ＋細胞の％によって定量される可溶性ｈＣＤ４－Ｆｃタンパク質に対するより高い結合（図１Ｂ）を実証した。
Ｂ．複数の細胞受容体に仕向けられた結合モダリティ
全般的に上述したｓｃＦｖ及びＶＨＨ結合モダリティを含有するが、他の細胞受容体ｈＣＤ８、ＣＤ４、ＡＳＧＲ２、ＴＭ４ＳＦ５、ＬＤＬＲまたはＡＳＧＲ１に対して仕向けられた独自の配列を含有する例示的なコンストラクトを生成した。複数の配列（各々が独自のＣＤＲ３を含有する）を、異なる細胞受容体を含有する各結合モダリティについて評価した。上述したようにＮｉｖＧ－リンカー－－６ｘＨｉｓ発現ベクターにサブクローニングした後、５μｇの各々の例示的なコンストラクトを約ＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクションした。ｐｃＤＮＡ３．１プラスミド（空のベクター）及び結合ドメインを有しない発現ベクター（ＮｉＶＧ－リンカー－バインダーなし）を陰性対照として使用した。
トランスフェクションから４８時間後、細胞を採取し、１００，０００細胞を洗浄し、ＮｉｖＧ－バインダーの表面発現を検出するためのＡｌｅｘａ－６４７にコンジュゲートされた抗Ｈｉｓ抗体で染色した。細胞をフローサイトメトリーによって分析し、Ｈｉｓ（表面発現）についてのゲートを陰性対照の空のベクター（ｐｃＤＮＡ３．１）に基づいて設定した。蛍光強度中央値（ＭＦＩ）を、１００に設定されたＮｉｖＧ－バインダーなし対照のものに対して正規化した。ｓｃＦｖ結合モダリティと比較して、ＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞は、Ｈｉｓ＋細胞の％によって定量される２９３細胞に対する標的化結合配列のより高い表面発現を実証した（図１Ｃ）。
実施例２：標的化バインダーで偽型化されたレンチウイルスの生成及び特性づけ
この実施例は、ＮｉｖＧ再標的化フソゲンで偽型化されたレンチウイルスの生成及び初代ヒトＴ細胞の形質導入の評価を記載する。
Ａ．ＮｉｖＧ偽型化レンチウイルスの生成
２９３細胞を１０ｃｍの皿に５．４ｘ１０６で播種し、２４時間放置した。播種の２４時間後、細胞を以下のプラスミドを用いてポリエチレンイミン（ＰＥＩ）を使用してトランスフェクションした：ｓｃＦｖまたはＶＨＨ結合モダリティに連結したｈＣＤ４標的化結合配列を含有するＮｉｖＧ偽型化ベクター（ＮｉｖＧ－リンカー－ｈＣＤ４－結合モダリティ）、ＮｉｖＦ配列ＮｉｖＦｄｅｌ２２をコードするヌクレオチド配列を含有するベクター（配列番号８；またはシグナル配列を有しない配列番号２３；Ｂｅｎｄｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１６ ＰＬｏＳ）、空の骨格、ＨＩＶ－１ ｐｏｌ、ＨＩＶ－１ ｇａｇ、ＨＩＶ－１ Ｒｅｖ、ＨＩＶ－１ Ｔａｔ、ＡｍｐＲプロモーター及びＳＶ４０プロモーターを含有するパッケージングプラスミド、ならびにＳＦＦＶプロモーターのコントロール下で高感度緑色蛍光タンパク質（ｅＧＦＰ）をコードするレンチウイルスレポータープラスミドｐＬｅｎｔｉ－ＳＦＦＶ－ｅＧＦＰ。陽性対照細胞を、４μｇのＶＳＶ－Ｇと共に上述したプラスミドを使用して生成した。
Ｂ．初代ヒトＴ細胞のＮｉｖＧ偽型化レンチウイルス形質導入効率
Ｔ細胞を濃縮するためにネガティブ選択された末梢血からのＰａｎＴ細胞（ＳｔｅｍＣｅｌｌＴｅｃｈ，Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，Ｃａｎａｄａ）を解凍し、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８で２日間活性化した。概して上述したように生成された濃縮したレンチウイルスを０．０５希釈で開始して６倍連続希釈し、合計で４点の希釈系列とした。レンチウイルスを１００，０００個のＰａｎＴ細胞に添加し、１０００ｇにて２５Ｃで９０分間のスピンフェクションによって形質導入した。形質導入したＰａｎＴ細胞を形質導入後２日目及び５日目に分割し、形質導入後７日目に、細胞を採取し、Ａｌｅｘａ－６４７がコンジュゲートされた抗ヒトＣＤ４抗体で染色した。細胞をフローサイトメトリーによって分析し、力価を、ＧＦＰ＋であったＣＤ４陽性細胞の％によって決定した。ＶＨＨ結合モダリティを含有するコンストラクトでトランスフェクションされた細胞は、初代ヒトＴ細胞に対するｓｃＦｖ結合モダリティを含有するコンストラクトよりも１０倍増加した力価を実証した（図２）。
実施例３．ＣＤ８標的化バインダーで偽型化されたレンチウイルスのｉｎ ｖｉｖｏ送達
この実施例は、ＣＤ８ ＮｉｖＧ再標的化フソゲンで偽型化されたレンチウイルスの生成及び初代ヒトＴ細胞の形質導入のｉｎ ｖｉｖｏ評価を記載する。
ＣＤ８再標的化ＮｉｖＧフソゲンを本質的に実施例２に記載されているように生成した。再標的化ＮｉｖＧ偽型化フソゲンは、ＮｉＶＧ（配列番号１６）を含有するＮｉｖＧ標的化ドメイン、フレキシブルリンカー及び例示的なＣＤ８結合ドメインであるＶＨＨまたはｓｃＦｖのいずれかの結合モダリティを含有していた。
ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）からのＴ細胞を抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８で３日間活性化した。３日のインキュベート後、１×１０７細胞をＮＯＤ－ｓｃｉｄ－ＩＬ２ｒγｎｕｌｌマウスに腹腔内に注射した。注射から１日後、マウスに上述したように生成した１×１０７形質導入単位（ＴＵ）のＣＤ８ ＮｉｖＧ偽型化レンチウイルス、またはレインチウイルスベクター（ＬＶＶ）なし対照を、腹腔内注射を介して摂取させた。ＣＤ８ ＮｉｖＧ偽型化レンチウイルス注射から７日後に、腹膜細胞を採取し、フローサイトメトリーによって分析し、ＧＦＰ＋であったＣＤ８陽性または陰性細胞の％によって力価を決定した。ＣＤ８再標的化偽型化レンチウイルスは、ＣＤ８＋ Ｔ細胞の有意なｉｎ ｖｉｖｏ形質導入（図３Ａ）及びＣＤ８ －Ｔ細胞の最小の形質導入（図３Ｂ）を実証した。これらの結果は、ＣＤ８標的化偽型化レンチウイルス媒介送達が、意図される細胞タイプ（例えば、ＣＤ８＋ Ｔ細胞）への導入遺伝子の特異的送達を可能にすることを示している。
実施例４．ＣＤ８標的化バインダーを有する偽型化レンチウイルスを含有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
この実施例は、ＣＤ８再標的化フソゲンで偽型化されたレンチウイルスのｉｎ ｖｉｔｒｏ腫瘍殺傷活性及びＣＤ１９に仕向けられたキメラ抗原受容体（ＣＤ１９ＣＡＲ）の発現を記載する。ｅＧＦＰまたはＣＤ１９ＣＡＲのいずれかをコードするプラスミドを２９３プロデューサー細胞にトランスフェクションしたこと以外は、実質的に実施例３に記載されているようにレンチウイルスを生成した。ＣＤ１９ＣＡＲは、ＣＤ１９に対して仕向けられた抗ｓｃＦｖと、４－１ＢＢ及びＣＤ３－ゼータである細胞内成分を含有する細胞内シグナル伝達ドメインとを含有していた。
ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８試薬で活性化し、ＣＤ１９＋ＣＡＲまたはＧＦＰを発現するＣＤ８再標的化ＮｉｖＧレンチウイルスで様々な濃度範囲（１０～１０，０００形質導入単位／ウェル）で形質導入した。ＲＦＰ＋ Ｎａｌｍ６白血病細胞を３日目に培養物に添加し、Ｎａｌｍ６細胞の排除をフローサイトメトリーによって１８時間の時点で評価した。
図４Ａに示されているように、形質導入から４日後に両方のＣＤ８再標的化フソゲンを有するＣＤ８＋細胞においてＣＤ１９＋ ＣＡＲ発現を特異的に検出した。ＣＤ１９ＣＡＲを発現する形質導入されたＣＤ８＋ Ｔ細胞はまた、ＣＤ１９＋ Ｎａｌｍ６白血病細胞の殺傷において、強力でレンチウイルス用量依存的な増加を媒介し、対照的に、ＧＦＰを発現するように形質導入された細胞は、標的細胞殺傷を示さなかった（図４Ｂ）。
これらの結果は、ＣＤ１９ＣＡＲをコードする導入遺伝子を有するＣＤ８再標的化偽型化レンチウイルスがＣＤ１９ＣＡＲをヒトＣＤ８＋ Ｔ細胞に送達して、ＰＢＭＣの複雑な混合物におけるＣＤ８＋ Ｔ細胞の特異的形質導入を媒介し、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの白血病細胞の殺傷によって用量依存的抗腫瘍反応を示したことを実証している。
本発明は、例えば、本発明の様々な態様を例示するために提供される特定の開示される実施形態に範囲が限定されることは意図されていない。記載される組成物及び方法に対する様々な修飾が、本明細書における説明及び教示から明らかになるであろう。そのような変形は、本開示の真の範囲及び趣旨から逸脱することなく実施され得、本開示の範囲に入ることが意図されている。
配列
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Claims (141)

  1. 標的化脂質粒子であって、
    （ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、
    （ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、
    （ｃ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む、標的化エンベロープタンパク質であって、前記ｓｄＡｂ可変ドメインが、前記Ｇタンパク質もしくはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、及び／または前記ｓｄＡｂが、ペプチドリンカーを介して前記Ｇタンパク質もしくはその生物学的に活性な部分に結合されており、前記ｓｄＡｂが、標的細胞の細胞表面分子に結合する、前記標的化エンベロープタンパク質と
    を含み、前記Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び前記標的化エンベロープタンパク質が、脂質二重層に埋め込まれている、前記標的化脂質粒子。
  2. 前記細胞表面分子が、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である、請求項１に記載の標的化脂質粒子。
  3. 前記標的細胞が、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物または腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される、請求項１または請求項２に記載の標的化脂質粒子。
  4. 前記標的細胞が、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  5. 前記シングルドメイン抗体が、肝細胞上に存在する抗原またはその一部に結合する、請求項１～４のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  6. 前記細胞表面分子または抗原が、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦからなる群から選択される、請求項１～５のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  7. 前記シングルドメイン抗体が、Ｔ細胞上に存在する抗原またはその一部に結合する、請求項１～４のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  8. 前記細胞表面分子または抗原が、ＣＤ８またはＣＤ４である、請求項１～４及び７のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  9. 前記細胞表面分子または抗原が、ＬＤＬ－Ｒである、請求項１～４のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  10. 標的化脂質粒子であって、
    （ａ）内腔を包囲する脂質二重層と、
    （ｂ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、
    （ｃ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む、標的化エンベロープタンパク質であって、前記結合ドメインが、前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、前記結合ドメインが、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＭ４ＳＦ５、ＣＤ８、ＣＤ４及びＬＤＬ－Ｒからなる群から選択される細胞表面分子と結合する、前記標的化エンベロープタンパク質と
    を含み、前記Ｆタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分及び前記標的化エンベロープタンパク質が、前記脂質二重層に埋め込まれている、前記標的化脂質粒子。
  11. 前記結合ドメインが、リンカーを介して前記Ｇタンパク質に結合されている、請求項１０に記載の標的化脂質粒子。
  12. 前記リンカーが、ペプチドリンカーである、請求項１１に記載の標的化脂質粒子。
  13. レンチウイルスベクターである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  14. （ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、
    （ｂ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む、標的化エンベロープタンパク質であって、前記結合ドメインが、前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、前記結合ドメインが、ＣＤ４と結合する、前記標的化エンベロープタンパク質と、
    （ｃ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸を含むカーゴであって、前記ＣＡＲが、
    （ｉ）ＣＤ１９と結合する細胞外抗原結合ドメインであって、任意に前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである、前記細胞外抗原結合ドメイン、
    （ｉｉ）膜貫通ドメイン、及び
    （ｉｉｉ）ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達領域
    を含む、前記カーゴと
    を含む、レンチウイルスベクター。
  15. 前記ＣＡＲの前記細胞内シグナル伝達領域が、４－１ＢＢ共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項１４に記載のレンチウイルスベクター。
  16. 前記レンチウイルスベクターが、前記ＣＡＲをコードする前記核酸をＴ細胞に送達することが可能であり、任意に前記Ｔ細胞が、対象においてｉｎ ｖｉｖｏである、請求項１４または請求項１５に記載のレンチウイルスベクター。
  17. （ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、
    （ｂ）（ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び（ｉｉ）結合ドメインを含む、標的化エンベロープタンパク質であって、前記結合ドメインが、前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されており、前記結合ドメインが、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２及びＴＭ４ＳＦ５からなる群から選択される細胞表面分子と結合する、前記標的化エンベロープタンパク質と
    を含む、レンチウイルスベクター。
  18. 肝細胞を標的とすることが可能である、請求項１７に記載のレンチウイルスベクター。
  19. 肝細胞への送達のための外因性物質をさらに含み、及び／または前記レンチウイルスベクターが前記外因性物質を肝細胞に送達することが可能であり、任意に前記肝細胞が対象においてｉｎ ｖｉｖｏである、請求項１７及び請求項１８のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  20. 前記結合ドメインが、リンカーを介して前記Ｇタンパク質に結合されており、任意に前記リンカーが、ペプチドリンカーである、請求項１４～１９のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  21. 前記結合ドメインが、シングルドメイン抗体であるか、または一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、請求項１０～１３のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～２０のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  22. 前記ペプチドリンカーが、最大で６５アミノ酸の長さ、任意に２～６５アミノ酸の長さを含む、請求項１～９、１２、及び１３のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項２０もしくは請求項２１に記載のレンチウイルスベクター。
  23. 前記ペプチドリンカーが、ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧＳ（配列番号４３）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号４１）もしくはそれらの組み合わせを含むフレキシブルリンカーであるか、または前記ペプチドリンカーが、ｎが１～１０である（ＧＧＳ）ｎ、ｎが１～１０である（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号４２）、もしくはｎが１～６である（ＧＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２７）を含む、請求項１～９、１２、１３及び２２のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項２０～２２のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  24. 前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＧタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項１～１３、２２及び２３のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～２３のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  25. 前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項１～１３及び２２～２４のいずれかに記載の標的化脂質粒子または請求項１４～２４のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  26. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分が、配列番号９、配列番号２８もしくは配列番号４４に示されるアミノ酸配列、または配列番号９、配列番号２８もしくは配列番号４４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項２４または請求項２５に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  27. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、
    切断型でありかつ前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基を欠く生物学的に活性な部分
    である、請求項２４～２６のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルス粒子。
  28. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、野生型ＮｉＶ－ＧのＮ末端で切断された生物学的に活性な部分であり、配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０のいずれかに示される配列、または配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、少なくとも８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、請求項２４～２７のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルス粒子。
  29. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの５アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの１０アミノ酸切断、前記Ｎ末端におけるまたはその近くの１５アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの２５アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの３０アミノ酸切断、または前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断からなる群から選択される前記野生型ＮｉＶ－ＧのＮ末端におけるまたはその近くの切断を有する生物学的に活性な部分であり、任意に前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示される、請求項２４～２８のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  30. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である、請求項２４～２９のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  31. 前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合を示す変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である、請求項１～１３、及び２２～３０のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～３０のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  32. 前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、
    配列番号２８に示される付番を参照してＥ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択されるアミノ酸置換に対応する１つ以上のアミノ酸置換
    を含む、請求項３１に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  33. 前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、
    配列番号２８に示される付番を参照してアミノ酸置換Ｅ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａ
    を含む、請求項３１または請求項３２に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  34. 前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質または前記生物学的に活性な部分が、配列番号１６に示されるアミノ酸配列、または配列番号１６と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、請求項３１～３３のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  35. 前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ニパウイルスＦ（ＮｉＶ－Ｆ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＦタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項１～１３及び２２～３４のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～３４のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  36. 前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項１～１３、及び２２～３５のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～３５のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  37. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分が、配列番号２示されるアミノ酸配列、または配列番号２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１～１３及び２２～３６のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～３６のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  38. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質が、
    ｉ）前記野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるもしくはその近くの２０アミノ酸切断、及び／または
    ｉｉ）Ｎ結合型グリコシル化部位における点変異
    を含むその生物学的に活性な部分である、請求項１～１３、及び２２～３７のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～３７のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  39. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質または前記生物学的に活性な部分が、配列番号５もしくは配列番号７に示される配列、または配列番号５もしくは配列番号７と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、請求項３８に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  40. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質が、前記野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２２アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である、請求項１～１３、及び２２～３７のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～３７のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  41. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質または前記生物学的に活性な部分が、配列番号８もしくは配列番号２３に示される配列、または配列番号８もしくは配列番号２３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチドの配列によってコードされるアミノ酸配列を有する、請求項４０に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  42. 前記Ｆタンパク質が、配列番号２３に示される配列を含み、前記Ｇタンパク質が、配列番号１６に示される配列を含む、請求項１～１３、及び２２～４１のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～４１のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  43. 前記脂質二重層が、レトロウイルスまたはレトロウイルス様粒子を生成するために使用される宿主細胞の膜に由来する、請求項１～１３、及び２２～４２のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  44. 前記宿主細胞が、ＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、ＭＤＣＫ細胞、Ｃ３Ｈ １０Ｔ１／２細胞、ＦＬＹ細胞、Ｐｓｉ－２細胞、ＢＯＳＣ ２３細胞、ＰＡ３１７細胞、ＷＥＨＩ細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＳＣ １細胞、ＢＳＣ ４０細胞、ＢＭＴ １０細胞、ＶＥＲＯ細胞、Ｗ１３８細胞、ＭＲＣ５細胞、Ａ５４９細胞、ＨＴ１０８０細胞、２９３細胞、２９３Ｔ細胞、Ｂ－５０細胞、３Ｔ３細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＨｅｐＧ２細胞、Ｓａｏｓ－２細胞、Ｈｕｈ７細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｗ１６３細胞、２１１細胞、及び２１１Ａ細胞からなる群から選択される、請求項４３に記載の標的化脂質粒子。
  45. 前記脂質二重層が、ウイルスエンベロープであるか、またはそれを含む、請求項１～１３、及び２２～４４のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  46. 前記Ｆタンパク質分子及び前記Ｇタンパク質以外の１つ以上のウイルス成分を含む、請求項１～１３及び２２～４５のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  47. 前記１つ以上のウイルス成分が、レトロウイルスからのものである、請求項４６に記載の標的化脂質粒子。
  48. 前記レトロウイルスが、レンチウイルスまたはレンチウイルス様粒子である、請求項４３～４７のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  49. 外因性物質をさらに含む、請求項１～１３及び２２～４８のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子または請求項１４～４２のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  50. 前記外因性物質が、前記内腔に存在する、請求項４９に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  51. 前記外因性物質がタンパク質または核酸であり、任意に前記核酸が、ＤＮＡまたはＲＮＡである、請求項４９または請求項５０に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  52. 前記外因性物質が、前記標的細胞への送達のためのカーゴをコードする核酸である、請求項４９～５１のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  53. 前記外因性物質が、治療剤または診断剤をコードする、請求項４９～５２のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  54. 前記外因性物質が膜タンパク質をコードし、任意に前記膜タンパク質が、疾患または病態によって発現するまたはそれに関連する細胞を標的とするための抗原受容体である、請求項４９～５３のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  55. 前記膜タンパク質がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、請求項５３に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  56. 前記標的細胞がＴ細胞である、請求項５２～５５のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  57. 前記外因性物質が、遺伝子欠損、任意に前記標的細胞における遺伝子欠損を修正するためのペイロード遺伝子を含む核酸であり、任意に前記遺伝子欠損が、肝臓細胞または肝細胞に関連する、請求項４９～５３のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクター。
  58. （ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分と（ｉｉ）シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインとをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチドであって、前記ｓｄＡｂ可変ドメインが、前記Ｇタンパク質またはその生物学的に活性な部分のＣ末端に結合されている、前記ポリヌクレオチド。
  59. 前記シングルドメイン抗体が、標的細胞上に存在する細胞表面分子と結合する、請求項５８に記載のポリヌクレオチド。
  60. 前記細胞表面分子が、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である、請求項５９に記載のポリヌクレオチド。
  61. 前記標的細胞が、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物もしくは腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される、請求項５９または請求項６０に記載のポリヌクレオチド。
  62. 前記標的細胞が、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される、請求項５９～６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  63. 前記細胞表面分子または抗原が、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＭ４ＳＦ５、ＣＤ８、ＣＤ４、及び低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）からなる群から選択される、請求項５９～６２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  64. （ｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分と（ｉｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＴＭ４ＳＦ５、ＣＤ４、ＣＤ８、及び低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）からなる群から選択される細胞表面分子に結合する結合ドメインとをコードする核酸配列を含む、ポリヌクレオチド。
  65. 前記結合ドメインが、シングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）であるか、または一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、請求項６４に記載のポリヌクレオチド。
  66. 前記核酸配列が、第１の核酸配列であり、前記ポリヌクレオチドが、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする第２の核酸配列をさらに含む、請求項５８～６５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  67. 前記ポリヌクレオチドが、ＩＲＥＳまたは前記第１及び第２の核酸配列間の連結ペプチドをコードする配列を含み、任意に、前記連結ペプチドが、自己切断性ペプチドまたはリボソームスキッピングを引き起こすペプチド、任意にＴ２Ａペプチドである、請求項６６に記載のポリヌクレオチド。
  68. 前記核酸の発現、任意に前記第１の核酸配列及び前記第２の核酸配列の発現をコントロールするために機能可能に連結された少なくとも１つのプロモーターをさらに含む、請求項５８～６７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  69. 前記ｓｄＡｂ可変ドメインまたは前記結合ドメインが、コードされるペプチドリンカーを介して前記Ｇタンパク質に結合されている、請求項５８～６８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  70. 前記コードされるペプチドリンカーが、最大で６５アミノ酸の長さ、任意に２～６５アミノ酸の長さを含む、請求項６９に記載のポリヌクレオチド。
  71. 前記コードされるペプチドリンカーが、ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧＳ（配列番号４３）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号４１）及びそれらの組み合わせを含み、または前記コードされるペプチドリンカーが、ｎが１～１０である（ＧＧＳ）ｎ、ｎが１～１０である（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号４２）、もしくはｎが１～４である（ＧＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２７）を含む、請求項６９または請求項７０に記載のポリヌクレオチド。
  72. 前記コードされるＧタンパク質が、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＧタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分であり、任意に前記バリアントが、ネイティブ結合パートナーについて減少した結合を示すそのバリアントである、請求項５８～７１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  73. 前記コードされるＧタンパク質が、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項５８～７２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  74. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分が、配列番号９、配列番号２８もしくは配列番号４４に示されるアミノ酸配列を含み、または配列番号９、配列番号２８もしくは配列番号４４と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項７２または請求項７３に記載のポリヌクレオチド。
  75. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、
    切断型でありかつ前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの最大で４０個の連続アミノ酸残基を欠く生物学的に活性な部分
    である、請求項７２～７４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  76. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、野生型ＮｉＶ－ＧのＮ末端で切断された生物学的に活性な部分であり、配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０のいずれかに示される配列、または配列番号１０～１５、３５～４０もしくは４５～５０と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項７２～７５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  77. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの５アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの１０アミノ酸切断、前記Ｎ末端におけるまたはその近くの１５アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの２０アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの２５アミノ酸切断、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの３０アミノ酸切断、または前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断からなる群から選択される前記野生型ＮｉＶ－ＧのＮ末端におけるまたはその近くの切断を有する生物学的に活性な部分であり、任意に前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示される、請求項７２～７６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  78. 前記ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、前記野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質（配列番号９、配列番号２８または配列番号４４）のＮ末端におけるまたはその近くの３４アミノ酸切断を有する生物学的に活性な部分である、請求項７２～７７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  79. 前記Ｇタンパク質が、エフリンＢ２またはエフリンＢ３に対する減少した結合を示す変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質である、請求項５８～７８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  80. 前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、配列番号２８に示される付番を参照してＥ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａからなる群から選択されるアミノ酸置換に対応する１つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項７９に記載のポリヌクレオチド。
  81. 前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、配列番号２８に示される付番を参照してアミノ酸置換Ｅ５０１Ａ、Ｗ５０４Ａ、Ｑ５３０Ａ及びＥ５３３Ａを含む、請求項７９または請求項８０に記載のポリヌクレオチド。
  82. 前記変異体ＮｉＶ－Ｇタンパク質が、配列番号１６に示されるアミノ酸配列、または配列番号１６と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項７９～８１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  83. 前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ニパウイルスＦ（ＮｉＶ－Ｆ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＦタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項６６～８２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  84. 前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項６６～８３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  85. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分が、配列番号２に示されるアミノ酸配列、または配列番号２と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項８３または請求項８４に記載のポリヌクレオチド。
  86. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質が、
    ｉ）前記野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるもしくはその近くの２０アミノ酸切断、及び／または
    ｉｉ）Ｎ結合型グリコシル化部位における点変異
    を含むその生物学的に活性な部分である、請求項８５または請求項８５に記載のポリヌクレオチド。
  87. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質または前記生物学的に活性な部分が、配列番号５もしくは配列番号７に示される配列、または配列番号５もしくは配列番号７と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、請求項８６に記載のポリヌクレオチド。
  88. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質が、前記野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質（配列番号２）のＣ末端におけるまたはその近くの２２アミノ酸切断を有するその生物学的に活性な部分である、請求項８５または請求項８６に記載のポリヌクレオチド。
  89. 前記ＮｉＶ－Ｆタンパク質または前記生物学的に活性な部分が、配列番号８もしくは配列番号２３に示される配列、または配列番号８もしくは配列番号２３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有する配列をコードするヌクレオチドの配列によってコードされるアミノ酸配列を有する、請求項８８に記載のポリヌクレオチド。
  90. 前記Ｆタンパク質が、配列番号２３に示される配列を含み、前記Ｇタンパク質が、配列番号１６に示される配列を含む、請求項６６～８９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
  91. 請求項５８～９０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
  92. 前記ベクターが、哺乳動物ベクター、ウイルスベクターまたは人工染色体であり、任意に前記人工染色体が、細菌人工染色体（ＢＡＣ）である、請求項９１に記載のベクター。
  93. 請求項５８～９０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む、プラスミド。
  94. レンチウイルス生成のためのタンパク質をコードする１つ以上の核酸をさらに含む、請求項９３に記載のプラスミド。
  95. 請求項５８～９０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、または請求項９１もしくは請求項９２に記載のベクター、または請求項９３もしくは９４に記載のプラスミドを含む、細胞。
  96. ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
    ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、細胞を提供することであって、前記標的化エンベロープタンパク質が、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む、前記提供すること、
    ｂ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で前記細胞を培養すること、及び
    ｃ）前記細胞から前記標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより前記標的化脂質粒子を作製すること
    を含む、前記方法。
  97. 偽型化レンチウイルスベクターを作製する方法であって、
    ａ）レンチウイルスウイルス核酸（複数可）と、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞を提供することであって、前記標的化エンベロープタンパク質が、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体を含む、前記提供すること、
    ｂ）前記レンチウイルスベクターの生成を可能とする条件下で前記細胞を培養すること、及び
    ｃ）前記細胞から前記レンチウイルスベクターを分離、濃縮、または精製し、それにより前記偽型化レンチウイルスベクターを作製すること
    を含む、前記方法。
  98. ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
    ａ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、細胞を提供することであって、前記標的化エンベロープタンパク質が、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含み、前記結合ドメインが、
    （ｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＡＳＧＲ２からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、
    （ｉｉ）ＣＤ４またはＣＤ８、任意にヒトＣＤ４またはヒトＣＤ８からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、または
    （ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）、任意にヒトＬＤＬ－Ｒである細胞表面分子と結合する、
    前記提供すること、
    ｂ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で前記細胞を培養すること、及び
    ｃ）前記細胞から前記標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより前記標的化脂質粒子を作製すること
    を含む、前記方法。
  99. 偽型化レンチウイルスベクターを作製する方法であって、
    ａ）レンチウイルスウイルス核酸（複数可）と、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞を提供することであって、前記標的化エンベロープタンパク質が、ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含み、前記結合ドメインが、
    （ｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＡＳＧＲ２からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、
    （ｉｉ）ＣＤ４またはＣＤ８、任意にヒトＣＤ４またはヒトＣＤ８からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、または
    （ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）、任意にヒトＬＤＬ－Ｒである細胞表面分子と結合する、
    前記提供すること、
    ｂ）レンチウイルスベクターの生成を可能とする条件下で前記プロデューサー細胞を培養すること、及び
    ｃ）前記細胞から前記レンチウイルスベクターを分離、濃縮、または精製し、それにより前記偽型化レンチウイルスベクターを作製すること
    を含む、前記方法。
  100. 前記結合ドメインが、シングルドメイン抗体であるか、または一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、請求項９８または請求項９９に記載の方法。
  101. ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分と、標的化エンベロープタンパク質とを含む、標的化脂質粒子を作製する方法であって、
    ａ）請求項５８～９０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、または請求項９１もしくは請求項９２に記載のベクター、または請求項９３もしくは請求項９４に記載のプラスミドを含む細胞を提供すること、
    ｂ）標的化脂質粒子の生成を可能とする条件下で前記細胞を培養すること、及び
    ｃ）前記細胞から前記標的化脂質粒子を分離、濃縮、または精製し、それにより前記標的化脂質粒子を作製すること
    を含む、前記方法。
  102. 偽型化レンチウイルスベクターを作製する方法であって、
    ａ）レンチウイルスウイルス核酸（複数可）と、請求項５８～９０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、または請求項９１もしくは請求項９２に記載のベクター、または請求項９３もしくは請求項９４に記載のプラスミドとを含む、プロデューサー細胞を提供すること、
    ｂ）前記レンチウイルスベクターの生成を可能とする条件下で前記細胞を培養すること、及び
    ｃ）前記細胞から前記レンチウイルスベクターを分離、濃縮、または精製し、それにより前記偽型化レンチウイルスベクターを作製すること
    を含む、前記方法。
  103. ステップ（ｂ）の前に、ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードするポリヌクレオチドを前記細胞に提供することをさらに含む、請求項１０１または請求項１０２に記載の方法。
  104. 前記細胞が、哺乳動物細胞である、請求項９６～１０３のいずれか一項に記載の方法。
  105. 前記細胞が、ウイルス核酸、任意にレトロウイルス核酸またはレンチウイルス核酸を含むプロデューサー細胞であり、前記標的化脂質粒子が、ウイルス粒子またはウイルス様粒子、任意にレトロウイルス粒子またはレトロウイルス様粒子、任意にレンチウイルス粒子またはレンチウイルス様粒子である、請求項９６～１０４のいずれか一項に記載の方法。
  106. 請求項５８～９０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、または請求項９１もしくは請求項９２に記載のベクター、または請求項９３もしくは請求項９４に記載のプラスミドを含む、プロデューサー細胞。
  107. ヘニパウイルスＦタンパク質またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸をさらに含む、請求項１０６に記載のプロデューサー細胞。
  108. 前記細胞がウイルス核酸をさらに含み、任意に前記ウイルス核酸が、レンチウイルス核酸である、請求項１０６または請求項１０７に記載のプロデューサー細胞。
  109. （ｉ）ウイルス核酸（複数可）と、（ｉｉ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、（ｉｉｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及びシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）可変ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞であって、任意に前記ウイルス核酸（複数可）が、レンチウイルス核酸である、前記プロデューサー細胞。
  110. 前記シングルドメイン抗体が、標的細胞上に存在する細胞表面分子と結合する、請求項１０９に記載のプロデューサー細胞。
  111. 前記細胞表面分子が、タンパク質、グリカン、脂質または低分子量分子である、請求項１１０に記載のプロデューサー細胞。
  112. 前記標的細胞が、腫瘍浸潤リンパ球、Ｔ細胞、新生物または腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、幹細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、肝臓細胞または完全に分化した細胞からなる群から選択される、請求項１１０または請求項１１１に記載のプロデューサー細胞。
  113. 前記標的細胞が、ＣＤ３＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、肝細胞、造血幹細胞、ＣＤ３４＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 造血幹細胞、ＣＤ１１７＋ 造血幹細胞、ＣＤ１０５＋ 内皮細胞、Ｂ細胞、ＣＤ２０＋ Ｂ細胞、ＣＤ１９＋ Ｂ細胞、がん細胞、ＣＤ１３３＋ がん細胞、ＥｐＣＡＭ＋ がん細胞、ＣＤ１９＋ がん細胞、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ＋ がん細胞、ＧｌｕＡ２＋ ニューロン、ＧｌｕＡ４＋ ニューロン、ＮＫＧ２Ｄ＋ ナチュラルキラー細胞、ＳＬＣ１Ａ３＋ 星状細胞、ＳＬＣ７Ａ１０＋ 脂肪細胞、またはＣＤ３０＋ 肺上皮細胞からなる群から選択される、請求項１１０～１１２のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞。
  114. （ｉ）ウイルス核酸（複数可）と、（ｉｉ）ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分をコードする核酸と、（ｉｉｉ）ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分及び結合ドメインを含む標的化エンベロープタンパク質をコードする核酸とを含む、プロデューサー細胞であって、前記結合ドメインが、
    （ｉ）ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、及びＴＭ４ＳＦ５、任意にヒトＡＳＧＲ１、ヒトＡＳＧＲ２及びヒトＡＳＧＲ２からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、
    （ｉｉ）ＣＤ４またはＣＤ８、任意にヒトＣＤ４またはヒトＣＤ８からなる群から選択される細胞表面分子と結合するか、または
    （ｉｉｉ）低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬ－Ｒ）、任意にヒトＬＤＬ－Ｒである細胞表面分子と結合し、
    任意に前記ウイルス核酸（複数可）が、レンチウイルス核酸である、
    前記プロデューサー細胞。
  115. 前記結合ドメインが、シングルドメイン抗体であるか、または一本鎖可変断片である、請求項１１４に記載のプロデューサー細胞。
  116. 前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ニパウイルスＦ（ＮｉＶ－Ｆ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＦタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項１０９～１１５のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞。
  117. 前記Ｆタンパク質またはその生物学的に活性な部分が、野生型ＮｉＶ－Ｆタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項１０９～１１６のいずれか一項に記載のプロデューサー。
  118. 前記ヘニパウイルスＦタンパク質分子またはその生物学的に活性な部分が、
    （ｉ）配列番号２、配列番号５、配列番号７、配列番号８または配列番号２３に示される配列、
    （ｉｉ）配列番号２、配列番号５、配列番号７、配列番号８または配列番号２３と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
    を含む、請求項１０９～１１７のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞。
  119. 前記コードされるＧタンパク質が、野生型ニパウイルスＧ（ＮｉＶ－Ｇ）タンパク質もしくはヘンドラウイルスＧタンパク質であるか、またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分であり、任意に前記バリアントが、ネイティブ結合パートナーについて減少した結合を示すそのバリアントである、請求項１０９～１１８のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞。
  120. 前記コードされるＧタンパク質が、野生型ＮｉＶ－Ｇタンパク質またはその機能的に活性なバリアントもしくは生物学的に活性な部分である、請求項１０９～１１９のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞。
  121. 前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分が、
    （ｉ）配列番号９、配列番号２８または配列番号４４に示される配列、
    （ｉｉ）配列番号９、配列番号２８または配列番号４４と８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、少なくとも９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
    を含む、請求項１０９～１２０のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞。
  122. 前記ヘニパウイルスエンベロープ結合糖タンパク質Ｇ（Ｇタンパク質）またはその生物学的に活性な部分が、
    （ｉ）配列番号１０～１６、３５～４０または４５～５１に示される配列、
    （ｉｉ）配列番号１０～１６、３５～４０または４５～５１と少なくとも８０％もしくは約８０％、少なくとも８１％もしくは約８１％、少なくとも８２％もしくは約８２％、少なくとも８３％もしくは約８３％、８４％もしくは約８４％、少なくとも８５％もしくは約８５％、少なくとも８６％もしくは約８６％、または少なくとも８７％もしくは約８７％、少なくとも８８％もしくは約８８％、または少なくとも８９％もしくは約８９％、９０％もしくは約９０％、少なくとも９１％もしくは約９１％、少なくとも９２％もしくは約９２％、少なくとも９３％もしくは約９３％、少なくとも９４％もしくは約９４％、少なくとも９５％もしくは約９５％、少なくとも９６％もしくは約９６％、少なくとも９７％もしくは約９７％、少なくとも９８％もしくは約９８％、または少なくとも９９％もしくは約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列
    を含む、請求項１０９～１２１のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞。
  123. 膜（例えば、細胞膜）に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれが代替的標的化部位に融合されている参照プロデューサー細胞と比較して多い、前記標的化エンベロープタンパク質の膜（例えば、細胞膜）発現を、前記プロデューサー細胞が有し、任意に前記代替的標的化部位が、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、ならびに／または
    平方ミクロン当たり少なくとも２０のタンパク質（例えば、少なくとも５０、１００、２００、５００、１０００、２０００、５０００、もしくは１０，０００のタンパク質）である、前記プロデューサー細胞の膜（例えば、細胞膜）上の前記標的化エンベロープタンパク質の発現を、前記プロデューサー細胞が有する、及び／もしくは前記標的化エンベロープタンパク質が、前記プロデューサー細胞の総膜（例えば、細胞膜）タンパク質の少なくとも０．１％（例えば、少なくとも０．２％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、もしくは１０％）（例えば、総タンパク質重量に対して）を構成する、
    請求項１０９～１２２のいずれか１項に記載のプロデューサー細胞。
  124. 請求項９６～１０５のいずれか一項に記載の方法によってまたは請求項１０６～１２２のいずれか一項に記載のプロデューサー細胞から生成された、標的化脂質粒子または偽型化レンチウイルスベクター。
  125. 前記標的化脂質粒子が、同様の脂質二重層に同じエンベロープタンパク質が組み込まれているがそれか代替的標的化部位に融合されている参照脂質粒子と比較して多い前記標的化エンベロープタンパク質発現を有し、任意に前記代替的標的化部位が、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、請求項１～１３、２１～５７及び１２４のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子。
  126. 形質導入後の標的細胞における力価が、１×１０６形質導入単位（ＴＵ）／ｍＬ以上、２×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、３×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、４×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、５×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、６×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、７×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、８×１０６ＴＵ／ｍＬ以上、９ｘ１０６ＴＵ／ｍＬ以上、もしくは１ｘ１０７ＴＵ／ｍＬ以上である、及び／または
    前記標的化エンベロープタンパク質が、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２もしくは０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の密度で前記標的化脂質粒子の表面上に存在する、
    請求項１～１３、２１～５７、１２４及び１２５のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子、請求項１３～４２、４９～５７及び１２４のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター。
  127. 請求項１～５７及び１２４～１２６のいずれか一項に記載の複数の標的化脂質粒子または複数のレンチウイルスベクターを含む、組成物。
  128. 薬学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項１２７に記載の組成物。
  129. 前記組成物における脂質粒子またはレンチウイルスベクターの集団の中で、５０％もしくは約５０％超、５５％もしくは約５５％超、６０％もしくは約６０％超、６５％もしくは約６５％超、７０％もしくは約７０％超、または７５％もしくは約７５％超が、前記標的化エンベロープタンパク質について表面陽性である、及び／または
    前記標的化エンベロープタンパク質が、少なくとも約（０．００１、０．００２、０．００５、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２もしくは０．５）の標的化エンベロープタンパク質／ｎｍ２の平均密度で前記標的化脂質粒子の表面上に存在する、
    請求項１２７または請求項１２８に記載の組成物。
  130. 細胞に形質導入する方法であって、請求項１３～４２、４９～５７及び１２４のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクターまたは請求項１３～４２、４９～５７及び１２４のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクターもしくは複数のレンチウイルスベクターを含む組成物で細胞に形質導入することを含む、前記方法。
  131. 前記レンチウイルスベクターもしくは標的化脂質粒子の前記標的化エンベロープタンパク質が、ＣＤ４を標的とし、前記細胞が、ＣＤ４＋細胞であるか、または
    前記レンチウイルスベクターの前記標的化エンベロープタンパク質が、ＣＤ８を標的とし、前記細胞が、ＣＤ８＋細胞であるか、または
    前記レンチウイルスベクターの前記標的化エンベロープタンパク質が、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２もしくはＴＭ４ＳＦ５を標的とし、前記細胞が、肝細胞である、
    請求項１３０に記載の方法。
  132. 外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する方法であって、請求項４９～５７、１２５及び１２６のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターを前記対象に投与することを含み、標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターが、前記外因性物質を含む、前記方法。
  133. 外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する方法であって、請求項１２７～１２９のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含み、複数の標的化脂質粒子またはレンチウイルスベクターが、前記外因性物質を含む、前記方法。
  134. キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を細胞に送達する方法であって、細胞を、請求項１４～１６及び１９～４２のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクターまたは請求項５５もしくは請求項５６に記載の標的化脂質粒子と接触させることを含み、前記レンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子が、前記ＣＡＲをコードする核酸を含む、前記方法。
  135. キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を細胞に送達する方法であって、細胞を、請求項１２７～１２９のいずれか一項に記載の組成物と接触させることを含み、複数のレンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子が、前記ＣＡＲをコードする核酸を含む、前記方法。
  136. 外因性物質を肝細胞に送達する方法であって、細胞を、請求項１７～４２のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクターまたは請求項５７に記載の標的化脂質粒子もしくはレンチウイルスベクターと接触させることを含む、前記方法。
  137. 外因性物質を肝細胞に送達する方法であって、細胞を、請求項１２７～１２９のいずれか一項に記載の組成物と接触させることを含み、複数のレンチウイルスベクターまたは標的化脂質粒子が、前記肝細胞への送達のための外因性物質を含む、前記方法。
  138. 前記接触させることが、レンチウイルスベクターまたは前記標的化脂質粒子で前記細胞に形質導入することを含み、任意に前記接触させることが、対象においてｉｎ ｖｉｖｏである、請求項１３４～１３７のいずれか一項に記載の方法。
  139. 対象（例えば、ヒト対象）における疾患または障害を処置する方法であって、請求項１～１３、２１～５７、及び１２４～１２６のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子、または請求項１３～４２、４９～５７、１２４及び１２６のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター、または請求項１２７～１２９のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
  140. 哺乳動物細胞を標的化脂質粒子に融合させる方法であって、請求項１～１３、２１～５７、及び１２４～１２６のいずれか一項に記載の標的化脂質粒子、請求項１３～４２、４９～５７、１２４及び１２６のいずれか一項に記載のレンチウイルスベクター、または請求項１２７～１２９のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
  141. 前記哺乳動物細胞を前記標的化脂質粒子に前記融合させることが、外因性物質を対象（例えば、ヒト対象）に送達する、請求項１４０に記載の方法。
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US12351837B2 (en) 2019-01-23 2025-07-08 The Broad Institute, Inc. Supernegatively charged proteins and uses thereof
AU2020232691B2 (en) 2019-03-05 2023-06-29 Nkarta, Inc. CD19-directed chimeric antigen receptors and uses thereof in immunotherapy
WO2020214842A1 (en) 2019-04-17 2020-10-22 The Broad Institute, Inc. Adenine base editors with reduced off-target effects
JP2022536364A (ja) 2019-06-13 2022-08-15 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 操作されたヒト内在性ウイルス様粒子および細胞への送達のためのその使用方法
WO2022020800A2 (en) 2020-07-24 2022-01-27 The General Hospital Corporation Enhanced virus-like particles and methods of use thereof for delivery to cells
CA3216353A1 (en) * 2021-04-08 2022-10-13 Sana Biotechnology, Inc. Cd8-specific antibody constructs and compositions thereof
WO2022261150A2 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Scribe Therapeutics Inc. Particle delivery systems
EP4463135A2 (en) * 2022-01-10 2024-11-20 Sana Biotechnology, Inc. Methods of ex vivo dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses
EP4473097A1 (en) * 2022-02-02 2024-12-11 Sana Biotechnology, Inc. Methods of repeat dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses
WO2024081936A1 (en) * 2022-10-13 2024-04-18 Northwestern University Methods for assembling protein-conjugated nanocarrier vaccines
EP4627096A1 (en) * 2022-12-02 2025-10-08 Sana Biotechnology, Inc. Lipid particles with cofusogens and methods of producing and using the same
US20240293462A1 (en) * 2023-03-03 2024-09-05 Trustees Of Boston University Immune Cell Fusion (ICF) and Uses Thereof
WO2024220560A1 (en) * 2023-04-18 2024-10-24 Sana Biotechnology, Inc. Engineered protein g fusogens and related lipid particles and methods thereof
WO2024220574A1 (en) * 2023-04-18 2024-10-24 Sana Biotechnology, Inc. Universal protein g fusogens and adapter systems thereof and related lipid particles and uses
WO2024254544A2 (en) * 2023-06-07 2024-12-12 Nvelop Therapeutics, Inc. Compositions and methods for promoting payload delivery in cells
WO2025085950A1 (en) * 2023-10-27 2025-05-01 Monash University Compositions and methods for targeting lipid nanoparticles
CN120505421B (zh) * 2025-07-18 2025-09-23 宁波大学附属第一医院 一种用于辅助诊断结直肠癌的eRNA分子标记物及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019086351A1 (en) * 2017-10-30 2019-05-09 Miltenyi Biotec Gmbh Adapter-based retroviral vector system for the selective transduction of target cells
JP2019514373A (ja) * 2016-04-21 2019-06-06 エコール ノルマル シュペリウール ドゥ リヨン 細胞の異なる亜型の活性を選択的にモジュレートするための方法
US20190351047A1 (en) * 2016-12-23 2019-11-21 Curevac Ag Henipavirus vaccine
WO2020014209A1 (en) * 2018-07-09 2020-01-16 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Fusosome compositions and uses thereof

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US6013516A (en) 1995-10-06 2000-01-11 The Salk Institute For Biological Studies Vector and method of use for nucleic acid delivery to non-dividing cells
US5928906A (en) 1996-05-09 1999-07-27 Sequenom, Inc. Process for direct sequencing during template amplification
CZ137399A3 (cs) 1996-10-17 1999-07-14 Oxford Biomedica (Uk) Limited Retrovirový produkční systém pro produkci replikačně defektivních vektorovýh partikulí
GB9720465D0 (en) 1997-09-25 1997-11-26 Oxford Biomedica Ltd Dual-virus vectors
US5994136A (en) 1997-12-12 1999-11-30 Cell Genesys, Inc. Method and means for producing high titer, safe, recombinant lentivirus vectors
JP4578678B2 (ja) 1997-12-22 2010-11-10 オックスフォード バイオメディカ（ユーケー）リミテッド ウマ伝染性貧血ウイルス（ｅｉａｖ）系
GB9803351D0 (en) 1998-02-17 1998-04-15 Oxford Biomedica Ltd Anti-viral vectors
FR2777909B1 (fr) 1998-04-24 2002-08-02 Pasteur Institut Utilisation de sequences d'adn de structure triplex pour le tranfert de sequences de nucleotides dans des cellules, vecteurs recombinants contenant ces sequences triplex
GB0009760D0 (en) 2000-04-19 2000-06-07 Oxford Biomedica Ltd Method
US9085778B2 (en) 2006-05-03 2015-07-21 VL27, Inc. Exosome transfer of nucleic acids to cells
PH12013501201A1 (en) 2010-12-09 2013-07-29 Univ Pennsylvania Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
EA201490636A1 (ru) 2011-09-16 2014-08-29 Дзе Трастиз Оф Дзе Юниверсити Оф Пенсильвания Сконструированные с помощью рнк t-клетки для лечения злокачественных новообразований
EP3971286A3 (en) 2012-03-26 2022-04-20 The Regents of the University of California Nipah virus envelope pseudotyped lentiviruses and methods of use
JP6391582B2 (ja) 2012-11-13 2018-09-19 コディアック バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療剤の送達方法
ES2688035T3 (es) 2014-08-29 2018-10-30 Gemoab Monoclonals Gmbh Receptor de antígeno universal que expresa células inmunes para direccionamiento de antígenos múltiples diversos, procedimiento para fabricación del mismo y utilización del mismo para tratamiento de cáncer, infecciones y enfermedades autoinmunes
WO2016077639A2 (en) 2014-11-12 2016-05-19 VL27, Inc. Nanovesicular therapies
EP3430024A4 (en) 2016-03-15 2019-11-13 Codiak BioSciences, Inc. THERAPEUTIC MEMBRANE VESICLES
BR112019023323A2 (pt) * 2017-05-08 2020-07-21 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. composições para facilitar a fusão de membrana e usos das mesmas
BR112020023015A2 (pt) * 2018-05-15 2021-02-17 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. composições de fusossoma e usos das mesmas
JP2022507453A (ja) * 2018-11-14 2022-01-18 フラッグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ， インコーポレイテッド Ｔ細胞送達のためのフソソーム組成物
CA3120082A1 (en) * 2018-11-14 2020-05-22 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Fusosome compositions for cns delivery

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2019514373A (ja) * 2016-04-21 2019-06-06 エコール ノルマル シュペリウール ドゥ リヨン 細胞の異なる亜型の活性を選択的にモジュレートするための方法
US20190351047A1 (en) * 2016-12-23 2019-11-21 Curevac Ag Henipavirus vaccine
WO2019086351A1 (en) * 2017-10-30 2019-05-09 Miltenyi Biotec Gmbh Adapter-based retroviral vector system for the selective transduction of target cells
WO2020014209A1 (en) * 2018-07-09 2020-01-16 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Fusosome compositions and uses thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CANCER IMMUNOLOGY IMMUNOTHERAPY, vol. 66, JPN6025016083, 2017, pages 475 - 489, ISSN: 0005664294 *

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