JP2023177177A - がん治療のための併用療法 - Google Patents

Abstract

【課題】ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤によるがんの併用療法ならびにその使用および医薬組成物を提供する。【解決手段】ＢＲＡＦ阻害剤が、式（Ｉ）：TIFF2023177177000050.tif52170の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せを提供する。【選択図】なし

Description

本発明は、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ、ならびにその使用および医薬組成物に関する。

本発明は、特に、がんの治療に使用するための、ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤を提供し、ここで、ＢＲＡＦ阻害剤は、式（Ｉ）：

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である。

変異ＢＲＡＦは標的化可能な発がん性ドライバーであり、これまでに３つのＢＲＡＦ阻害剤（ＢＲＡＦｉ）（ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エンコラフェニブ）が市場に届き、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ陽性黒色腫での有効性を示している。しかしながら、薬物耐性の迅速な獲得がほぼ普遍的に観察されており、標的療法に関する治療上の利益の持続期間は依然として限られている。

さらに、開発された第一世代のＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｅ}駆動性腫瘍においてＭＡＰＫシグナル伝達を抑制する予想外の「逆説的」能力を明らかにしたが、同じ阻害剤は、ＢＲＡＦ野生型（ＷＴ）モデルにおいてＭＡＰＫ刺激活性を示した（Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１２；３６６：２７１－２７３；およびＢｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ第１１１巻、６４０－６４５頁（２０１４））。

次いで、ＲＡＦパラドックスに関する機構的研究により、発がん性ＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｅ}がその単量体サイトゾル形態でＭＥＫ１／２をリン酸化する一方で、ＷＴ ＢＲＡＦおよびＲＡＦ１の活性化は、細胞膜移行、ならびに活性化ＲＡＳ（ＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、ＨＲＡＳ）によって促進されるホモおよび／またはヘテロ二量体化を含む事象の複雑な工程を必要とすることが明らかになった（Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ第１４巻、４５５－４６７頁（２０１４））。

ベムラフェニブ、ダブラフェニブおよびエンコラフェニブのような第一世代のＢＲＡＦ阻害剤の、ＷＴ ＢＲＡＦまたはＲＡＦ１プロトマーへの結合は、ＲＡＦホモおよび／またはヘテロ二量体化、ならびに新たに形成されたＲＡＦ二量体の膜会合を迅速に誘導する。二量体型の立体配座では、１つのＲＡＦプロトマーが第２のＲＡＦプロトマーの立体配座変化をアロステリックに誘導してキナーゼ活性状態をもたらし、重要なことに、阻害剤の結合にとって好ましくない立体配座をもたらす。薬物治療によって誘導された二量体は、結果として、経路の過活性化による未結合プロトマーによって動作される触媒作用によりＭＥＫリン酸化を促進する。

腫瘍はＢＲＡＦｉ治療からほとんど逃れられず、大部分の事例における機構は、ＲＡＦ二量体化を誘発する獲得された能力に関係する。この効果は、ＭＥＫ阻害剤（ＭＥＫｉ）併用治療によって打ち消すことができる。しかしながら、これらの薬剤は、ヒトにおいてＭＥＫｉの達成可能な用量を制限する非常に不十分な治療指数を示す。結果として、第一世代のＢＲＡＦｉとＭＥＫｉとの併用療法に対する耐性は、依然としてＲＡＦ逆説的活性化によって媒介される。したがって、これらの併用療法の臨床的利益は依然として限られている。

本発明は、がん、特に黒色腫の治療に使用するための式（Ｉ）のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との新しい組合せに関する。式（Ｉ）の化合物はＢＲＡＦ阻害剤であり、上市されている第一世代のＢＲＡＦ阻害剤：エンコラフェニブ、ダブラフェニブおよびベムラフェニブ（パラドックスインデューサ）と比較した場合、ＭＡＰＫシグナル伝達経路の無視できる逆説的活性化（パラドックスブレーカ）示す。この特性に加えて、式（Ｉ）の化合物はまた、非常に強力な脳浸透特性を有し、したがって、脳内に転移したがんの治療のために緊急に必要とされる代替療法を提供する。本発明は、第一世代のＢＲＡＦ阻害剤で治療された患者で頻繁に観察される急速に獲得される治療耐性を克服する可能性を有する、ＢＲＡＦ関連腫瘍に対して強力な併用活性を伴う、がん治療に使用するための新しい組合せを開示する。がんの治療に使用するための本発明に開示される組合せは、ＭＥＫｉおよびＢＲＡＦｉ単剤療法の相加効果をはるかに超える予想外の組合せ活性を示す。

第一世代のＢＲＡＦ阻害剤エンコラフェニブと比較した場合の、細胞株Ａ３７５ ＢＲＡＦ／ＮＲＡＳにおける、ＭＥＫ阻害剤コビメチニブと組み合わせた（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミド（本明細書では化合物Ｉａと呼ぶ）によるＰ－ＥＲＫ阻害を開示している。 第一世代のＢＲＡＦ阻害剤エンコラフェニブと比較した場合の、細胞株Ａ３７５ ＢＲＡＦ／ＮＲＡＳにおける、ＭＥＫ阻害剤コビメチニブと組み合わせた化合物Ｉａによる増殖阻害を開示している。 化合物Ｉａとコビメチニブとの組合せが、単剤療法と比較した場合に、細胞株Ａ３７５ ＮＲＡＳを移植したマウスの腫瘍体積を劇的かつ相乗的に減少させることを開示している。 ビニメチニブと組み合わせた第一世代のＢＲＡＦ阻害剤エンコラフェニブと比較した場合の、細胞株Ａ３７５ ＮＲＡＳを移植したマウスの腫瘍体積に対する、ビニメチニブと組み合わせた化合物Ｉａの明確な相乗効果を開示している。 単剤療法と比較した場合の、細胞株Ａ３７５ ＮＲＡＳを移植したマウスの腫瘍体積に対する、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドナトリウム塩（本明細書では化合物ＩＩａと呼ぶ）と組み合わせた化合物Ｉａの明確な用量依存的相乗効果を開示している。 細胞株Ａ３７５における増殖阻害に対する、化合物ＩＩａと組み合わせたエンコラフェニブの明確な相乗効果を開示している。

「阻害剤」という用語は、特定のリガンドの特定の受容体への結合と競合する、結合を減少させる、もしくは結合を妨げる化合物、または特定のタンパク質の機能を減少させるもしくは妨げる化合物を表す。特に、その中で使用される阻害剤は、ＢＲＡＦおよびＭＥＫから選択されるそれぞれの標的の活性を標的化する、活性を低下させる、または活性を阻害する化合物を指し、特定の阻害剤は、１μＭ未満、５００ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２５ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、２ｎＭ未満または１ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。本発明のいくつかの実施形態では、「ＢＲＡＦ阻害剤」という用語は、ＢＲＡＦキナーゼ活性を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％低下させる化合物を指す。本発明のいくつかの実施形態では、「ＭＥＫ阻害剤」という用語は、ＭＥＫキナーゼ活性を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％低下させる化合物を指す。

「ＩＣ５０」という用語は、特定の測定された活性の５０％を阻害するために必要な特定の化合物の濃度を指す。

「薬学的に許容され得る塩」という用語は、生物学的にまたはその他望ましくないものではない、遊離塩基または遊離酸の生物学的有効性および特性を保持する、式（Ｉ）の化合物またはＭＥＫ阻害剤の塩を指す。これらの塩は、例えば、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等、特に塩酸、および有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、サリチル酸、Ｎ－アセチルシステイン等で形成することができる。加えて、これらの塩は、無機塩基または有機塩基を遊離酸に添加することによって調製され得る。無機塩基に由来する塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウムおよびマグネシウム塩等が含まれるがこれらに限定されない。有機塩基に由来する塩には、第一級、第二級、および第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、リジン、アルギニン、Ｎ－エチルピペリジン、ピペリジン、ポリイミン樹脂等の塩が含まれるがこれらに限定されない。式（Ｉ）の化合物の特定の薬学的に許容され得る塩は、塩酸塩、メタンスルホン酸塩、およびクエン酸塩である。［３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）フェニル］－［３－ヒドロキシ－３－［（２Ｓ）－ピペリジン－２－イル］アゼチジン－１－イル］メタノンの特定の薬学的に許容され得る塩は、フマル酸塩およびコハク酸塩、特にヘミフマル酸塩およびヘミコハク酸塩である。式（ＩＩ）の化合物の特定の薬学的に許容され得る塩は、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、セシウム塩およびルビジウム塩などのアルカリ金属塩であり、ナトリウム塩およびカリウム塩が好ましい。

「溶媒和物」という用語は、溶媒と溶質との非共有結合性の化学量論的または非化学量論的組合せを指す。「水和物」という用語は、水と溶質との非共有結合性の化学量論的または非化学量論的組合せを指す。例えば、式（Ｉ）の化合物およびその薬学的に許容され得る塩は、非溶媒和形態、およびアニソール、ジクロロメタン、トルエン、１，４－ジオキサン、水等の薬学的に許容され得る溶媒との溶媒和形態で存在し得る。

式（Ｉ）の化合物は、１つの不斉中心を含み、光学的に純粋な鏡像異性体または鏡像異性体の混合物、例えばラセミ体などの形態で存在し得る。

Ｃａｈｎ－Ｉｎｇｏｌｄ－Ｐｒｅｌｏｇ則によれば、不斉炭素原子は、「Ｒ」または「Ｓ」立体配置のものであり得る。

一態様では、本発明は、がんの治療に使用するためのＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤を提供し、ここで、ＢＲＡＦ阻害剤は、式（Ｉ）：

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である。

本発明のいくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（Ｉａ）に記載の化合物である：

本発明のいくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（Ｉｂ）に記載の化合物である：

本発明に従って使用するためのＭＥＫ阻害剤の非限定的な例には、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、ビニメチニブ、トラメチニブ、セルメチニブ、ピマセルチブ、レファメチニブ、Ｎ－［２（Ｒ），３－ジヒドロキシプロポキシ］－３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）ベンズアミド（ＰＤ－３２５９０１）、２－（２－クロロ－４－ヨードフェニルアミノ）－Ｎ－（シクロプロピルメトキシ）－３，４－ジフルオロベンズアミド（Ｃｌ－１０４０）および３－［２（Ｒ），３－ジヒドロキシプロピル］－６－フルオロ－５－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）－８－メチルピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－４，７（３Ｈ，８Ｈ）－ジオン（ＴＡＫ－７３３）が含まれる。

本発明のいくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は式（ＩＩ）：

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である。

式（ＩＩ）の化合物は、強力なＭＥＫ阻害活性および高いＲＡＦ／ＭＥＫ複合体安定化活性を有する経口的に利用可能なＭＥＫ阻害剤である。式（ＩＩ）の化学名は、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物は、以下の式（ＩＩａ）に記載のナトリウム塩である：

本発明のいくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤はコビメチニブである。コビメチニブは、ＲＡＳ／ＲＡＦ経路の中心構成要素である、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２の経口的に利用可能な強力かつ高度に選択的な阻害剤である。コビメチニブは、化学名［３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）フェニル］－［３－ヒドロキシ－３－［（２Ｓ）－ピペリジン－２－イル］アゼチジン－１－イル］メタノンを有し、以下の構造を有する：

コビメチニブは、国際公開第２００７／０４４５１５号に記載されている方法に従って調製され得る。コビメチニブは市販されており、以下のＣＡＳ登録番号：９３４６６０－９３－２を有する。

本発明のいくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤はビニメチニブである。ビニメチニブは、ＲＡＳ／ＲＡＦ経路の中心構成要素である、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２の経口的に利用可能な強力かつ高度に選択的な阻害剤である。ビニメチニブは、化学名５－［（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）アミノ］－４－フルオロ－Ｎ－（２－ヒドロキシエトキシ）－１－メチル－１Ｈ－ベンズイミダゾール－６－カルボキサミドを有し、以下の構造を有する：

ビニメチニブは、国際公開第２００３／０７７９１４号に記載されている方法に従って調製され得る。ビニメチニブは市販されており、以下のＣＡＳ登録番号：６０６１４３－８９－９を有する。

一態様では、本発明は、がんの治療に使用するためのＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤を提供し、ここで、ＭＥＫ阻害剤は、式（ＩI）：

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である。

本発明のいくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ阻害剤はエンコラフェニブである。エンコラフェニブは、化学名メチルＮ－［（２Ｓ）－１－［［４－［３－［５－クロロ－２－フルオロ－３－（メタンスルホンアミド）フェニル］－１－プロパン－２－イルピラゾール－４－イル］ピリミジン－２－イル］アミノ］プロパン－２－イル］カルバメートを有し、以下の構造を有する：

エンコラフェニブは、国際公開第２０１１／０２５９２７号に記載されている方法に従って調製され得る。エンコラフェニブは市販されており、以下のＣＡＳ登録番号：１２６９４４０－１７－６を有する。

アッセイ手順
材料
Ｌ－グルタミンを補充したＤＭＥＭフェノールレッド不含培地を（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）から購入した。ウシ胎児血清（ＦＢＳ）をＶＷＲから購入した。高機能ＥＲＫホスホ－Ｔ２０２／Ｙ２０４キット－１０，０００試験を、Ｃｉｓｂｉｏカタログ番号６４ＡＥＲＰＥＨから購入した。Ａ３７５を、元々ＡＴＣＣから入手し、Ｒｏｃｈｅリポジトリによって保管した。３８４ウェルマイクロプレートは３８４ウェル（蓋付き、ＨｉＢａｓｅ、小容量カタログ７８４－０８０）でありＧｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅから購入した。

Ａ３７５細胞におけるＰ－ＥＲＫ決定のためのＨＴＲＦアッセイ
Ａ３７５は、Ｖ６００Ｅ変異のＢＲＡＦを発現する細胞がんモデルである。ＥＲＫ１，２リン酸化（ＭＡＰＫ経路のリン酸化カスケードの末端メンバー）は、ＭＡＰＫ経路の活性化状態の主な読出しとして以後報告されている。アッセイの前に、Ａ３７５細胞株を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を補充したＤＭＥＭフェノールレッド不含培地中で維持する。化合物処置の後、Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４位でリン酸化された場合、ＥＲＫタンパク質に対して、言及されたキット（Ｃｉｓｂｉｏカタログ番号６４ＡＥＲＰＥＨ）において提供される２つの抗体の選択的結合によって誘導されるＦＲＥＴ蛍光シグナルを測定することによって、Ｐ－ＥＲＫレベルを決定する。簡潔に言えば、１２μｌ培地／ウェル中の８０００細胞／ウェルを３８４ウェルプレートに播種し、インキュベータ内に一晩放置し（５％ＣＯ２加湿雰囲気下、３７℃で）、翌日、プレートを以下の最終薬物濃度で試験化合物、ダブラフェニブおよびＰＬＸ８３９４（後者の２つは対照として）を用いて二連で処置する：１０μＭ－３μＭ－１μＭ－０．３μＭ－０．１μＭ－０．０３μＭ－０．０１μＭ－０．００３μＭ－０．００１μＭ、すべてのウェルをＤＭＳＯ正規化に供し、薬物インキュベーションを１時間行う。次いで、キットと共に供給された４×溶解緩衝液４μｌをウェルに添加し、次いで、プレートを３０秒間遠心分離（３００ｒｃｆ）し、プレートシェーカー上で室温にて１時間インキュベートする。

インキュベーションの最後に、４μＬ／ウェルの高機能Ｐ－ＥＲＫ抗体溶液（製造業者の指示に従って調製）、続いて４μＬ／ウェルのクリプテートＰ－ＥＲＫ抗体溶液（製造業者の指示に従って調製）（Ｃｉｓｂｉｏカタログ番号６４ＡＥＲＰＥＨ）を試験ウェルに添加する。
適切なデータ正規化を可能にするために、報告される薬物処置なしの対照ウェルは、常に各プレートに含まれる（製造業者の指示に従って）：
対照および実験のｐ－ＥＲＫ ＨＴＲＦウェル含有量（μｌ）：

次いで、プレートを３００ｒｃｆで３０秒間遠心分離し、蒸発を防ぐために密封し、室温の暗所で一晩インキュベートする。

次いで、プレートを分析し、蛍光発光値をＰｈｅｒａｓｔａｓｔ ＦＳＸ（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ）装置によって６６５および６２０ｎＭで収集する。

得られた蛍光値を式：比＝シグナル（６２０ｎｍ）／シグナル（６２５ｎｍ）＊１００００に従って処理し、次いでブランクの比の平均をすべての値に対して差し引く。

ＤＭＳＯのみで処置した細胞によって導かれた比（ブランクを差し引いたもの）の平均を１００％とみなし、１０μＭダブラフェニブで処置した細胞によって導かれた比（ブランクを差し引いたもの）の平均を０％とみなして、データを正規化する。正規化された点の平均をシグモイド曲線でフィッティングし、ＩＣ５０を決定する。結果を表１に要約する。生化学的アッセイにより、式（Ｉａ）および（Ｉｂ）の化合物のＢＲＡＦおよびＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｅ}に対する高い親和性を確認した。Ｋｄは、生化学実験における解離定数である。

表１：化合物（Ｉａ）および（Ｉｂ）は、ＢＲＡＦおよびＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｅ}に対して高い親和性ならびにＣ末端Ｓｒｃキナーゼ（ＣＳＫ）およびリンパ球特異的チロシンタンパク質キナーゼ（ＬＣＫ）よりも高い選択性を有する。Ｋｄは、生化学実験における解離定数である。ＩＣ５０を、上記のようにＡ３７５細胞株において測定した。

本発明の式（Ｉ）の化合物の調製は、逐次的または収束的な合成経路で行うことができる。本発明の合成は、以下の一般的なスキームで示される。反応および得られた生成物の精製を行うために必要な技能は、当業者に公知である。

より詳細には、式（Ｉ）の化合物は、以下に示される方法、実施例に示される方法、または類似の方法によって製造することができる。個々の反応工程のための適切な反応条件は、当業者に公知である。反応の順序は、スキーム１に表示されているものに限定されないが、出発材料およびそれぞれの反応性に応じて、反応工程の順序を自由に変更することができる。出発材料は、市販されているか、または以下に示される方法に類似する方法、本明細書もしくは実験手順に引用された参考文献に記載されている方法、または当技術分野で公知の方法によって調製することができる。

本発明における式（Ｉ）の化合物を官能基にて誘導体化して、ｉｎ ｖｉｖｏで親化合物に変換し戻すことができる誘導体を提供してもよいことが、理解されるであろう。

実験手順
（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミド（式（Ｉａ）の化合物）および（３Ｓ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミド（式（Ｉｂ）の化合物）
６－ヒドロキシ－３－メチル－キナゾリン－４－オン

２－アミノ－５－ヒドロキシ安息香酸（１０ｇ、６５．３ｍｍｏｌ、当量：１．０）およびＮ－メチルホルムアミド（３０ｇ、２９．９ｍＬ、５０３ｍｍｏｌ、当量：７．７）を１４５℃で２１時間４５分間加熱し、次いで室温に冷却した。反応混合物を５０ｍＬのＨ_２Ｏで希釈し、室温で２０分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過によって回収した。淡褐色固体を２０ｍＬの水で３回洗浄した。固体をトルエンに溶解し、蒸発乾固させた（３回）。固体を高真空下、４０℃の真空中で一晩乾燥させて、表題化合物を淡褐色固体（１０．３ｇ、収率８９％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１７７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

３，６－ジフルオロ－２－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－ベンゾニトリル

炭酸セシウム（３．２２ｇ、９．７９ｍｍｏｌ、当量：１．１５）を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３５ｍＬ）中の６－ヒドロキシ－３－メチルキナゾリン－４－オン（１５００ｍｇ、８．５１ｍｍｏｌ、当量：１．０）の溶液に室温で添加した。混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで２，３，６－トリフルオロベンゾニトリル（１．４７ｇ、１．０８ｍｌ、９．３７ｍｍｏｌ、当量：１．１）を添加した。１時間後、反応物を氷上で冷却し、水（１２０ｍＬ）で希釈した。得られた固体を濾過によって回収し、氷水（１００ｍＬ）およびヘプタン（１００ｍＬ）で洗浄し、吸引乾燥させた。固体をトルエンに溶解し、蒸発乾固させ（３回）、次いで真空中で一晩乾燥させて、表題化合物を淡褐色固体（２．５８ｇ、収率９７％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１４．１［Ｍ＋Ｈ］＋．

（３Ｒ）－３－フルオロピロリジン－１－スルホンアミド

（Ｒ）－３－フルオロピロリジン塩酸塩（１．８ｇ、１４．３ｍｍｏｌ、当量：１．２）を、ジオキサン（１０ｍＬ）中の硫酸ジアミド（１．１４８ｇ、１１．９ｍｍｏｌ、当量：１．０）およびトリエチルアミン（２．４２ｇ、３．３３ｍＬ、２３．９ｍｍｏｌ、当量：２）の溶液に添加した。反応物を密閉管中１１５℃で１５．５時間撹拌し、次いで室温に冷却し、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭで希釈し、シリカゲルで蒸発乾固させ、カラムに移した。フラッシュクロマトグラフィー（４０ｇのシリカ、８０％ＥｔＯＡｃ）による精製によって表題化合物を白色結晶性固体（１．８２ｇ、収率９１％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１６９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

（３Ｓ）－３－フルオロピロリジン－１－スルホンアミド

トリエチルアミン（３０４ｍｇ、４１９μｌ、３．０１ｍｍｏｌ、当量：２．０）を、ジオキサン（１．３ｍｌ）中の硫酸ジアミド（１４６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ、当量：１．０）および（Ｓ）－３－フルオロピロリジン塩酸塩（２３４ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ、当量：１．２）の懸濁液に添加した。反応物を密閉管中１１５℃で１６時間３５分間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残渣をＭｅＯＨで希釈し、シリカゲルで蒸発乾固させ、カラムに移した。フラッシュクロマトグラフィー（４０ｇのシリカ、０～８％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）による精製によって表題化合物を淡黄色固体（１９３ｍｇ、収率７５％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１６９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミド（式（Ｉａ）の化合物）

（Ｒ）－３－フルオロピロリジン－１－スルホンアミド（１．２６ｇ、７．５１ｍｍｏｌ、当量：２．１）および炭酸セシウム（２．５６ｇ、７．８７ｍｍｏｌ、当量：２．２）を、アルゴン雰囲気下、乾燥ＤＭＦ（１０．２ｍｌ）に懸濁した。反応物を５０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＤＭＦ（２５．５ｍｌ）中の３，６－ジフルオロ－２－（（３－メチル－４－オキソ－３，４－ジヒドロキナゾリン－６－イル）オキシ）ベンゾニトリル（１．１２ｇ、３．５８ｍｍｏｌ、当量：１．０）の溶液を添加した。反応混合物を１００℃で１５時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残渣を飽和ＮＨ_４Ｃｌ（１００ｍＬ）水溶液およびＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に溶解した。相を分離し、水層を２×１００ｍＬのＥｔＯＡｃでさらに抽出した。合わせた有機層を水（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、フィルタにかけ、真空中で濃縮した。水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、フィルタにかけ、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭおよびＭｅＯＨで希釈し、シリカで濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（１２０ｇ、０．５～２％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）による精製によってオフホワイトの固体が得られ、これを超音波処理により１：１ヘプタン／ＤＣＭ（２０ｍＬ）でトリチュエートし、次いで真空中で乾燥させて、表題化合物を無色固体（１．０８７ｇ、収率６６％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．キラルＳＦＣ：ＲＴ＝４．５９４分［Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣカラム、４．６×２５０ｍｍ、粒径５μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）；８分間にわたり０．２％ＮＨＥｔ_２を含有する２０～４０％ＭｅＯＨの勾配；流量：２．５ｍＬ／分；１４０バールの背圧］。

（３Ｓ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミド（式（Ｉｂ）の化合物）

（Ｓ）－３－フルオロピロリジン－１－スルホンアミド（１８１ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、当量：２．１）をＤＭＦ（１．６ｍｌ）に溶解した。室温で、炭酸セシウム（３６８ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、当量：２．２）を添加し、反応混合物を５０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＤＭＦ（４ｍｌ）中の３，６－ジフルオロ－２－（（３－メチル－４－オキソ－３，４－ジヒドロキナゾリン－６－イル）オキシ）ベンゾニトリル（１６０．８ｍｇ、５１３μｍｏｌ、当量：１．０）の溶液を添加した。反応混合物を１０５℃で２時間５０分間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭに溶解し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で洗浄した。水層をＤＣＭで２回逆抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、フィルタにかけ、蒸発させた。残渣（褐色油状物）をＤＣＭで希釈し、カラムに移した。フラッシュクロマトグラフィー（８０ｇ、ＤＣＭ中０～１００％ＥｔＯＡｃ）による精製によって固体が得られ、これをＳＦＣによってさらに精製して、表題化合物を淡黄色固体（１１９ｍｇ、収率５０％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．キラルＳＦＣ：ＲＴ＝４．４１１分［Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣカラム、４．６×２５０ｍｍ、粒径５μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）；８分間にわたり０．２％ＮＨＥｔ_２を含有する２０～４０％ＭｅＯＨの勾配；流量：２．５ｍＬ／分；１４０バールの背圧］。

２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド（式（ＩＩ）の化合物）
式（ＩＩ）の化合物は、以下に示される方法、実施例に示される方法または類似の方法によって製造することができる。

ＮＭＲ分析は、Ｂｒｕｋｅｒ Ｃｏ．のＡＶＡＮＣＥ ＩＩＩ ＨＤ４００（４００ＭＨｚ）を使用して行った。ＮＭＲデータはｐｐｍ（百万分率）（δ）で示され、試料溶媒からの重水素ロックシグナルを基準として使用した。

マススペクトルデータは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｃｏｒｐ．の超高速液体クロマトグラフィー（Ｎｅｘｅｒａ ＵＣ）を備えたシングル四重極質量分析計（ＬＣＭＳ－２０２０）またはＷａｔｅｒｓ Ｃｏ．のＡｃｑｕｉｔｙ超高速液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣまたはＵＰＬＣ Ｉ－Ｃｌａｓｓ）を備えたシングル四重極質量分析計（ＳＱＤまたはＳＱＤ２）を使用して得た。

高速液体クロマトグラフィーは、以下の表２に列挙される分析条件Ａ～Ｃのうち１つを使用して行った。表２では、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸、「ＦＡ」はギ酸を表す。

市販の試薬をさらに精製することなく直接使用した。

すべての非水性反応を無水溶媒中で行った。

ロータリーエバポレータを使用して減圧下の濃縮および溶媒蒸留を行った。

本明細書で使用される場合、「室温」は、約２０℃～約２５℃の温度を意味する。

メチル３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）－５－ホルミルベンゾエート（化合物ａ１）

トルエン（４４ｍＬ）とＭｅＯＨ（１１ｍＬ）中の３，４－ジフルオロ－２－（（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ）－５－ホルミル安息香酸（５．５０ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）の混合懸濁液を０℃に冷却し、１０％ジアゾメチルトリメチルシランヘキサン溶液（２１．８ｍＬ、１３．１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で６４時間撹拌した。酢酸（０．７４８ｍＬ）を反応混合物に添加し、次いで減圧下で濃縮した。得られた残渣をトリチュエーション（ヘキサン／酢酸エチル）によって精製して、表題化合物（５．０１ｇ、８８％）を無色固体として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：４３６［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：１．００分（分析条件Ｂ）

メチル３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）－５－［（Ｅ）－［（４－メチルフェニル）スルホニルヒドラジニリデン］メチル］ベンゾエート（化合物ａ２）

４－メチルベンゼンスルホニルヒドラジド（２．１４ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）を、ＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中のメチル３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）－５－ホルミルベンゾエート（化合物ａ１、５．００ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いでヘキサン（１５０ｍＬ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、フィルタにかけ、次いでヘキサン（３０ｍＬ）で洗浄して、表題化合物（７．０５ｇ、定量的）を固体として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：６０４［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：１．０６分（分析条件Ｂ）

Ｎ－（２，４－ジメトキシベンジル）－３－フルオロ－４－ヨードピリジン－２－アミン（化合物ａ３）

トリエチルアミン（３．６３ｍＬ、２６．０ｍｍｏｌ）および１－（２，４－ジメトキシフェニル）メタンアミン（３．２６ｍＬ、２１．７ｍｍｏｌ）を、ＮＭＰ（３２ｍＬ）中の２，３－ジフルオロ－４－ヨードピリジン（２．０９ｇ、８．６７ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を１００℃で１．５時間撹拌した。水を反応混合物に添加し、酢酸エチルで抽出を行った。有機層を１３％ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥剤を濾別した後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）によって精製して、表題化合物（３．２０ｇ、９５％）をオイル状物として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：３８９［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：０．９４分（分析条件Ｃ）

［２－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－フルオロピリジン－４－イル］ボロン酸（化合物ａ４）

Ｎ－（２，４－ジメトキシベンジル）－３－フルオロ－４－ヨードピリジン－２－アミン（化合物ａ３、２．７０ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）、［１，１－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン付加物（５６８ｍｇ、０．６９６ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（２．０５ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）およびビス（ピナコラト）ジボロン（２．６５ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン溶液（２７ｍＬ）を、窒素雰囲気下、９０℃で５時間、次いで１１０℃で１９時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィー（０．１％ギ酸水溶液／０．１％ギ酸アセトニトリル溶液）によって精製して、表題化合物（２．０７ｇ、９７％）をオイル状物として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：３０７［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：０．４４分（分析条件Ｃ）

メチル５－［［２－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－フルオロピリジン－４－イル］メチル］－３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）ベンゾエート（化合物ａ５）

メチル３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）－５－［（Ｅ）－［（４－メチルフェニル）スルホニルヒドラジニリデン］メチル］ベンゾエート（化合物ａ２、１．３０ｇ、２．１６ｍｍｏｌ）、［２－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－フルオロピリジン－４－イル］ボロン酸（化合物ａ４、１．９８ｇ、６．４６ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（３５７ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン懸濁液（５９ｍＬ）を、窒素雰囲気下、１００℃で２．５時間、次いで１１０℃で３時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に添加し、次いで水および１３％ブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥剤を濾別した後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）によって精製して、表題化合物（５２４ｍｇ、３６％）を泡状物として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：６８２［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：１．０３分（分析条件Ｂ）

メチル５－［（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル］－３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）ベンゾエート（化合物ａ６）

メチル５－［［２－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－フルオロピリジン－４－イル］メチル］－３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）ベンゾエート（化合物ａ５、５２３ｍｇ、０．７６８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（１６ｍＬ）を０℃に冷却し、トリフルオロ酢酸（１５．７ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィー（０．０５％トリフルオロ酢酸水溶液／０．０５％トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液）によって精製して、表題化合物（３２１ｍｇ、７９％）をオイル状物として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：５３２［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：０．５５分（分析条件Ｂ）

５－（（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル）－３，４－ジフルオロ－２－（（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ）安息香酸塩酸塩（化合物ａ７）

ＴＨＦ（６４ｍＬ）と（３２ｍＬ）中のメチル５－［（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル］－３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）ベンゾエート（化合物ａ６、４．００ｇ、７．５３ｍｍｏｌ）の混合溶液を０℃に冷却し、水酸化リチウム一水和物（９４８ｍｇ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３．５時間撹拌した。０℃に冷却した後、５Ｍ塩酸（１５．１ｍＬ）を反応混合物に添加し、次いで減圧下で濃縮した。得られた残渣を水およびＴＢＭＥで洗浄して、表題化合物（４．２０ｇ、定量的）を紫色化合物として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：５１８［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：０．６８分（分析条件Ｃ）

５－（（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル）－３，４－ジフルオロ－２－（（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ）ベンズアミド（化合物ａ８）

５－（（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル）－３，４－ジフルオロ－２－（（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ）安息香酸塩酸塩（化合物ａ７、２００ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ溶液（３．６ｍＬ）を０℃に冷却し、ＨＯＯＢｔ（６７．８ｍｇ、０．４１５ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（８０．０ｍｇ、０．４１５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１．５時間撹拌した。ＨＯＯＢｔ（８．８ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（１０．４ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）をさらに添加し、室温で１時間撹拌した後、７ＭアンモニアＭｅＯＨ溶液（０．１０３ｍＬ、０．７２２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１８９ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。水と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を１：１で反応混合物に添加し、抽出を酢酸エチルで行った。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥剤を濾別した後、減圧下で濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（１ｍＬ）に溶解し、ヘキサン（１０ｍＬ）を添加した。得られた固体をフィルタにかけ、ヘキサンで洗浄して、表題化合物（１６２ｍｇ、８７％）を無色固体として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：５１７［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：０．６４分（分析条件Ｃ）

５－（（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル）－２－（（４－シクロプロピル－２－フルオロフェニル）アミノ）－３，４－ジフルオロベンズアミド（化合物ａ９）

テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１１．２ｍｇ、９．６８μｍｏｌ）および０．５Ｍシクロプロピル亜鉛ブロミド（１．９４ｍＬ、０．９６９ｍｍｏｌ）を、５－（（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル）－３，４－ジフルオロ－２－（（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ）ベンズアミド（化合物ａ８、１００ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液（１．９ｍＬ）に添加し、混合物を、窒素雰囲気下、室温で２．５時間撹拌した。酢酸エチル（５ｍＬ）を反応混合物に添加し、次いでセライトでフィルタにかけ、酢酸エチル（３ｍＬ）で洗浄した。濾液を水および飽和ブラインで洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥剤を濾別した後、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／ヘキサン（１／１０、１１ｍＬ）を得られた残渣に添加し、固体を濾別し、ヘキサン（３ｍＬ）で洗浄して、表題化合物ａ９（６３．４ｍｇ、７６％）を無色固体として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：４３１［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：０．６１分（分析条件Ｃ）

４－ニトロフェニルメチルスルファメート（化合物ｒ１）

４－ニトロフェノール（５．００ｇ、３５．９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１．３ｍＬ、８１．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（６０ｍＬ）を－７８℃に冷却し、メチルスルファモイルクロリド（５．８２ｇ、４４．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１５ｍＬ）を添加し、混合物を－７８℃で１．５時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）および逆相カラムクロマトグラフィー（０．１％ギ酸水溶液／０．１％ギ酸アセトニトリル溶液）によって精製して、表題化合物（５．５１ｇ、６６％）を無色固体として得た。ＨＰＬＣ保持時間：０．６３分（分析条件Ｃ）^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：８．３１（２Ｈ，ｍ），７．４６（２Ｈ，ｍ），４．６８（１Ｈ，ｍ），３．００（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）．

２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド（式（ＩＩ）の化合物）

５－（（２－アミノ－３－フルオロピリジン－４－イル）メチル）－２－（（４－シクロプロピル－２－フルオロフェニル）アミノ）－３，４－ジフルオロベンズアミド（化合物ａ９、２．４７ｇ、５．７４ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（２８．７ｍＬ）に溶解した後、ピリジン（２．７８ｍＬ、３４．４ｍｍｏｌ）および４－ニトロフェニルメチルスルファメート（化合物ｒ１、４．００ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４０℃で２．５時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、水（２４．７ｍＬ）を添加した。アセトニトリル（３ｍＬ）および水（１９．８ｍＬ）をさらに添加し、１０分間撹拌した後、固体を濾別した。得られた固体を水／アセトニトリル（１／１、４９．４ｍＬ）で洗浄して、表題化合物（２．５６ｇ、８５％）を無色固体として得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ：５２４［Ｍ＋Ｈ］^＋．ＨＰＬＣ保持時間：１．１３分（分析条件Ａ）

２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドナトリウム塩（化合物ＩＩａ）

（１）化合物ＩＩａ（形態Ｉ）の調製
アセトン（１０．６ｍＬ）およびＤＭＳＯ（１．５１ｍＬ）を２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド（式（ＩＩ）の化合物、３．０３ｇ）に添加し、室温で溶解した。２０％ナトリウムエトキシドエタノール溶液（３．０３ｍＬ）および化合物ＩＩのナトリウム塩のシード結晶（後述の試料ＩＩｂ）を溶液に添加し、混合物を室温で１時間撹拌した後、エタノール（１５．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、エタノール（１５．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で４時間撹拌して、化合物ＩＩのナトリウム塩（２．７４ｇ）を粉末状結晶（試料ＩＩａ（形態Ｉ））として得た。

（２）試料ＩＩｂの調製
２０％ナトリウムエトキシドエタノール溶液（０．０５４ｍＬ）およびメチルイソブチルケトン（０．１６１ｍＬ）を式（ＩＩ）の化合物（５３．６ｍｇ）に添加し、混合物を室温で３０分撹拌し、次いでメチルイソブチルケトン（０．１６１ｍＬ）を添加し、６０℃で４日間撹拌を継続した。次いで、ＤＭＳＯ（０．０５４ｍＬ）を添加し、混合物を６０℃で５時間撹拌して、化合物ＩＩのナトリウム塩（２５．６ｍｇ）を粉末状結晶（試料ＩＩｂ）として得た。

化合物ＩＩのＭＥＫ１阻害活性
化合物ＩＩのＭＥＫ１阻害活性を下記のように蛍光偏光法によって評価した。

試験化合物、ＣＲＡＦ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．）、ＭＥＫ１（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．）およびＥＲＫ２（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）をＡＴＰ含有緩衝液中で混合し、３０℃で６０分間反応させた。次いで、ＦＡＭ標識ＥＲＫｔｉｄｅ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｃｏｒｐ．）を添加し、反応を３０℃で４５分間継続した。ＩＭＡＰ（登録商標）Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｃｏｒｐ．）をさらに添加し、室温で１５分間反応を継続した。反応後、蛍光プレートリーダを用いて蛍光偏光を測定し、試験化合物を含まない対照に対する阻害パーセントに基づいて、５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を計算した。試験化合物が化合物ＩＩである場合、ＭＥＫ１活性について１７ｎＭのＩＣ５０が測定された。

本発明は、特に、以下のものに関する：
ＢＲＡＦ阻害剤が式（Ｉ）：

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
式（Ｉ）の化合物が、（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドである、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、トラメチニブおよびビニメチニブ、またはそれらの薬学的に許容され得る塩から選択される、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、またはその薬学的に許容され得る塩である、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＭＥＫ阻害剤が２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドナトリウム塩である、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩である、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＭＥＫ阻害剤が［３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）フェニル］－［３－ヒドロキシ－３－［（２Ｓ）－ピペリジン－２－イル］アゼチジン－１－イル］メタノンヘミフマル酸塩である、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＭＥＫ阻害剤が［３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードアニリノ）フェニル］－［３－ヒドロキシ－３－［（２Ｓ）－ピペリジン－２－イル］アゼチジン－１－イル］メタノンヘミコハク酸塩である、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
医薬として使用するための、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
がんの治療または予防のための医薬を調製するための、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せの使用；
がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療または予防のための方法であって、有効量の、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せを、それを必要とする患者に投与することを含む、方法；
本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ、および１種以上の薬学的に許容され得る添加物を含む医薬組成物；
ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤が両方とも経口投与される、本明細書に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物；
ＢＲＡＦ阻害剤がＭＥＫ阻害剤と同時に投与される、本明細書に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物；
ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤が共製剤化されている、本発明に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物；
ＢＲＡＦ阻害剤がＭＥＫ阻害剤と逐次的に投与される、本発明に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物；
がんが、甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんである、本発明に記載の使用のためのＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
がんがＢＲＡＦ^Ｖ６００変異に関連する、本発明に記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
がんがＢＲＡＦ^Ｖ６００変異陽性の切除不能なまたは転移性のがんである、本発明に記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＢＲＡＦ^Ｖ６００変異が、（ａ）患者の腫瘍組織および／または体液の試料から抽出された核酸（例えばＤＮＡ）に対してＰＣＲまたは配列決定を行うこと；および（ｂ）試料中のＢＲＡＦ^Ｖ６００の発現を決定することを含む方法を使用して決定される、本明細書に記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＭＥＫ分解剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＥＧＦＲ分解剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の阻害剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の分解剤、ＳＨＰ２阻害剤、ＳＨＰ２分解剤、Ａｘｌ阻害剤、Ａｘｌ分解剤、ＡＬＫ阻害剤、ＡＬＫ分解剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ分解剤、ＳＯＳ１阻害剤、ＳＯＳ１分解剤、シグナル伝達経路阻害剤、チェックポイント阻害剤、アポトーシス経路の調節剤、細胞傷害性化学療法剤、血管新生標的治療薬、免疫標的剤、ならびに抗体－薬物コンジュゲートから選択される１種以上のさらなる抗がん剤を含む、本発明に記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＢＲＡＦ阻害剤が、（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、がんの治療または予防のための医薬を調製するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せの使用；
ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、トラメチニブおよびビニメチニブから、またはその薬学的に許容され得る塩から選択される、本発明に記載の医薬を調製するための、本発明に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ；
ＢＲＡＦ阻害剤が、（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、がんの治療または予防のための方法であって、有効量の、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤とを、それを必要とする患者に投与することを含む、方法；
がんが、甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんおよび非小細胞肺がんから選択される、本発明に記載のがんの治療または予防のための方法；
ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、トラメチニブおよびビニメチニブから、またはその薬学的に許容され得る塩から選択される、本発明に記載のがんの治療または予防のための方法；
ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、ビニメチニブ、トラメチニブ、セルメチニブ、ピマセルチブ、レファメチニブ、Ｎ－［２（Ｒ），３－ジヒドロキシプロポキシ］－３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）ベンズアミド（ＰＤ－３２５９０１）、２－（２－クロロ－４－ヨードフェニルアミノ）－Ｎ－（シクロプロピルメトキシ）－３，４－ジフルオロベンズアミド（Ｃｌ－１０４０）および３－［２（Ｒ），３－ジヒドロキシプロピル］－６－フルオロ－５－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）－８－メチルピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－４，７（３Ｈ，８Ｈ）－ジオン（ＴＡＫ－７３３）から選択される、本明細書に記載の医薬組成物；
ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、トラメチニブおよびビニメチニブから、またはその薬学的に許容され得る塩から選択される、本明細書に記載の医薬組成物；
ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、本明細書に記載の医薬組成物；
ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩である、本明細書に記載の医薬組成物；
式（Ｉ）の化合物が（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドである、本明細書に記載の医薬組成物；
式（Ｉ）の化合物が（３Ｓ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドである、本明細書に記載の医薬組成物；
がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤が経口投与される、がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
第１の組成物が第２の組成物と同時に投与される、がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
第１および第２の組成物が共製剤化されている、がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
第１の組成物が第２の組成物と逐次的に投与される、がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
がんがＢＲＡＦ変異に関連する、がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
がんが、ＢＲＡＦ^Ｖ６００変異陽性の切除不能または転移性のがん、特にＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｅ}またはＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｋ}変異陽性の切除不能なまたは転移性のがんである、がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
ＢＲＡＦ^Ｖ６００変異が、（ａ）患者の腫瘍組織および／または体液の試料から抽出された核酸（例えばＤＮＡ）に対してＰＣＲまたは配列決定を行うこと；および（ｂ）試料中のＢＲＡＦ^Ｖ６００の発現を決定することを含む方法を使用して決定される、がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物；
がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防における本明細書に記載の医薬組成物の使用；ならびに
がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防のための医薬を調製するための、本明細書に記載の医薬組成物の使用。

本発明のさらなる実施形態は以下の通りである：
［１］ＭＥＫ阻害剤と組み合わせてがんの治療または予防に使用するための化合物であって、式（Ｉ）：

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、化合物。

［２］ＭＥＫ阻害剤と組み合わせたがんの治療または予防のための、［１］に記載の化合物および１種以上の薬学的に許容され得る添加物を含む医薬組成物。

［３］ＭＥＫ阻害剤と組み合わせてがんの治療または予防に使用するための医薬の製造における［１］に記載の化合物の使用。

［４］がんの治療または予防のための方法であって、有効量の、ＭＥＫ阻害剤と［１］に記載の化合物との組合せを、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。

［５］式（Ｉ）の化合物が（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドである、［１］から［４］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［６］ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、トラメチニブおよびビニメチニブ、またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物から選択される、［１］から［５］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［７］ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、［１］から［６］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［７．１］ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、［１］から［７］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［７．２］ＭＥＫ阻害剤が２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドナトリウム塩である、［１］から［７．１］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［８］ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、［１］から［６］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［９］式（Ｉ）の化合物およびＭＥＫ阻害剤が両方とも経口投与される、［１］から［８］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［１０］式（Ｉ）の化合物がＭＥＫ阻害剤と同時に投与される、［１］から［９］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［１１］式（Ｉ）の化合物がＭＥＫ阻害剤と逐次的に投与される、［１］から［１０］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［１２］ＢＲＡＦ阻害剤と組み合わせてがんの治療または予防に使用するための化合物であって、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、化合物。

［１３］ＢＲＡＦ阻害剤と組み合わせたがんの治療または予防のための、［１２］に記載の化合物および１種以上の薬学的に許容され得る添加物を含む医薬組成物。

［１４］ＢＲＡＦ阻害剤と組み合わせてがんの治療または予防に使用するための医薬の製造における、［１２］に記載の化合物の使用。

［１５］がんの治療または予防のための方法であって、有効量の、ＢＲＡＦ阻害剤と［１２］に記載の化合物との組合せを、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。

［１６］ＢＲＡＦ阻害剤が式（Ｉ）：

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、［１２］から［１５］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［１７］式（Ｉ）の化合物が（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドである、［１６］に記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［１８］［１２］に記載の化合物およびＢＲＡＦ阻害剤が両方とも経口投与される、［１２］から［１７］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［１９］［１２］に記載の化合物がＢＲＡＦ阻害剤と同時に投与される、［１２］から［１８］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２０］［１２］に記載の化合物がＢＲＡＦ阻害剤と逐次的に投与される、［１２］から［１９］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２１］［１２］に記載の化合物が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、［１２］から［２０］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２２］［１２］に記載の化合物が２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドナトリウム塩である、［１２］から［２１］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２３］がんが、甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんである、［１］から［２２］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２４］がんがＢＲＡＦＶ６００変異に関連する、［１］から［２３］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２５］がんがＢＲＡＦＶ６００変異陽性の切除不能なまたは転移性のがんである、［１］から［２４］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２６］ＢＲＡＦＶ６００変異が、（ａ）患者の腫瘍組織および／または体液の試料から抽出された核酸（例えばＤＮＡ）に対してＰＣＲまたは配列決定を行うこと；および（ｂ）試料中のＢＲＡＦＶ６００の発現を決定することを含む方法を使用して決定される、［１］から［２５］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［２７］ＭＥＫ分解剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＥＧＦＲ分解剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の阻害剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の分解剤、ＳＨＰ２阻害剤、ＳＨＰ２分解剤、Ａｘｌ阻害剤、Ａｘｌ分解剤、ＡＬＫ阻害剤、ＡＬＫ分解剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ分解剤、ＳＯＳ１阻害剤、ＳＯＳ１分解剤、シグナル伝達経路阻害剤、チェックポイント阻害剤、アポトーシス経路の調節剤、細胞傷害性化学療法剤、血管新生標的治療薬、免疫標的剤、ならびに抗体－薬物コンジュゲートから選択される１種以上のさらなる抗がん剤を含む、［１］から［２６］のいずれか１つに記載の化合物、医薬組成物、使用または方法。

［１０１］ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せであって、ＭＥＫ阻害剤が、式（ＩＩ）

の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、組合せ。

［１０２］式（ＩＩ）の化合物が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドである、［１０１］に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１０３］ＢＲＡＦ阻害剤が、（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミド、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、およびエンコラフェニブ、またはその薬学的に許容され得る塩から選択される、［１０１］または［１０２］に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１０４］ＢＲＡＦ阻害剤が、（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、［１０１］から［１０３］のいずれか１つに記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１０５］ＢＲＡＦ阻害剤が、エンコラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩である、［１０１］から［１０３］のいずれか１つに記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１０６］医薬として使用するための、［１０１］から［１０５］のいずれか１つに記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１０７］がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、［１０１］から［１０５］のいずれか１つに記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１０８］がんの治療または予防のための医薬を調製するための、［１０１］から［１０５］のいずれか１つに記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せの使用。

［１０９］がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療または予防のための方法であって、有効量の、［１０１］から［１０５］のいずれか１つに記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せを、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。

［１１０］［１０１］から［１０５］のいずれか１つに記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ、および１種以上の薬学的に許容され得る添加物を含む医薬組成物。

［１１１］前記ＢＲＡＦ阻害剤および前記ＭＥＫ阻害剤が両方とも経口投与される、［１０６］から［１１０］のいずれか１つに記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。

［１１２］前記ＢＲＡＦ阻害剤が前記ＭＥＫ阻害剤と同時に投与される、［１０６］から［１１１］のいずれか１つに記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。

［１１３］前記ＢＲＡＦ阻害剤および前記ＭＥＫ阻害剤が共製剤化されている、［１０６］から［１１２］のいずれか１つに記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。

［１１４］前記ＢＲＡＦ阻害剤が前記ＭＥＫ阻害剤と逐次的に投与される、［１０６］から［１１１］のいずれか１つに記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。

［１１５］前記がんが、甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんである、［１０６］から［１０８］のいずれか１つに記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１１６］前記がんがＢＲＡＦ^Ｖ６００変異に関連する、［１０６］から［１０９］のいずれか１つに記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１１７］前記がんがＢＲＡＦ^Ｖ６００変異陽性の切除不能なまたは転移性のがんである、［１０６］から［１０９］のいずれか１つに記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１１８］ＢＲＡＦ^Ｖ６００変異が、（ａ）患者の腫瘍組織および／または体液の試料から抽出された核酸（例えばＤＮＡ）に対してＰＣＲまたは配列決定を行うこと；および（ｂ）前記試料中のＢＲＡＦ^Ｖ６００の発現を決定することを含む方法を使用して決定される、［１０６］から［１０９］のいずれか１つに記載の使用のためのＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１１９］ＭＥＫ分解剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＥＧＦＲ分解剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の阻害剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の分解剤、ＳＨＰ２阻害剤、ＳＨＰ２分解剤、Ａｘｌ阻害剤、Ａｘｌ分解剤、ＡＬＫ阻害剤、ＡＬＫ分解剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ分解剤、ＳＯＳ１阻害剤、ＳＯＳ１分解剤、シグナル伝達経路阻害剤、チェックポイント阻害剤、アポトーシス経路の調節剤、細胞傷害性化学療法剤、血管新生標的治療薬、免疫標的剤、ならびに抗体－薬物コンジュゲートから選択される１種以上のさらなる抗がん剤を含む、［１０６］から［１０９］のいずれか１つに記載の使用のためのＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。

［１２０］前記ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、［１０１］から［１１９］のいずれか１つに記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。

［１２１］前記ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドである、［１０１］から［１２０］のいずれか１つに記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。

［１２２］前記ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドナトリウム塩である、［１０１］から［１２０］のいずれか１つに記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。

本発明のある特定の実施形態は、がん、特に甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんの治療または予防のための方法であって、有効量の、本明細書に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法に関する；
本発明のある特定の実施形態は、脳転移の治療および／または予防のための医薬としての使用のための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、原発性腫瘍が黒色腫または非小細胞肺がんである、脳転移の治療および／または予防のための医薬としての使用のための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者が標的療法に関して治療経験がない、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療および／または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者が標的療法に関して治療経験がなく、チェックポイント阻害剤の治療経験がある、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療および／または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者が標的療法に関して治療経験があり、チェックポイント阻害剤の治療経験がある、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療および／または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、がんが以前に手術によって治療されている、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療および／または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者がＢＲＡＦ阻害剤治療に関して治療経験がない、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療および／または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、ＢＲＡＦ阻害剤治療抵抗性腫瘍の治療および／または治療のための医薬として使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者がＭＥＫ阻害剤処置に関して治療経験がない、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療および／または予防に使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；ならびに
本発明のある特定の実施形態は、ＭＥＫ阻害剤治療抵抗性腫瘍の治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する。

本発明のある特定の実施形態は、エンコラフェニブ、ダブラフェニブおよびエンコラフェニブから選択されるＢＲＡＦ阻害剤、ならびに／またはビニメチニブ、トラメチニブおよびコビメチニブから選択されるＭＥＫ阻害剤で以前に治療された対象におけるがんの治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、エンコラフェニブおよびビニメチニブで以前に治療された対象における治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、ダブラフェニブおよびトラメチニブで以前に治療された対象における治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、ベムラフェニブおよびコビメチニブで以前に治療された対象における治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、チェックポイント阻害剤で以前に治療された対象におけるがん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載の医薬組成物に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者が標的療法に関して治療経験がない、癌がん、特に黒色腫または非小細胞肺癌がんの治療および／または予防に使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者が標的療法に関して治療経験がなく、チェックポイント阻害剤の治療経験がある、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者が標的療法に関して治療経験があり、チェックポイント阻害剤の治療経験がある、がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者がＢＲＡＦ阻害剤治療に関して治療経験がない、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、ＢＲＡＦ阻害剤治療抵抗性腫瘍の治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、患者がＭＥＫ阻害剤処置に関して治療経験がない、がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、ＭＥＫ阻害剤治療抵抗性腫瘍の治療的および／または予防的処置に使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、エンコラフェニブ、ダブラフェニブおよびエンコラフェニブから選択されるＢＲＡＦ阻害剤、ならびに／またはビニメチニブ、トラメチニブおよびコビメチニブから選択されるＭＥＫ阻害剤で以前に治療された対象におけるがんの治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、エンコラフェニブおよびビニメチニブで以前に治療された対象における治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、ダブラフェニブおよびトラメチニブで以前に治療された対象における治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、ベムラフェニブおよびコビメチニブで以前に治療された対象における治療および／または予防のための医薬として使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
本発明のある特定の実施形態は、チェックポイント阻害剤で以前に治療された対象におけるがん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤に関する；
一実施形態では、本発明は、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤、「リーフレット」としても公知な処方情報、ブリスターパッケージまたはボトル（ＨＤＰＥまたはガラス）および容器を含むキットを提供する。処方情報は、好ましくは、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せの投与に関する患者へのアドバイスを含む；
一実施形態では、治療された対象は、本明細書に記載の前記以前の治療に対して難治性になった；および
一実施形態では、治療された対象は、本明細書に記載の前記以前の治療の間に脳転移を発症した。

本発明のある特定の実施形態は、少なくとも１つの置換基が少なくとも１つの放射性同位体を含む、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物を含む医薬組成物に関する。放射性同位体の具体的な例は、^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃおよび^１８Ｆである。

さらに、本発明は、適用可能な場合、式（Ｉ）の化合物のすべての光学異性体、すなわち、ジアステレオ異性体、ジアステレオ異性体混合物、ラセミ混合物、それらのすべての対応する鏡像異性体および／または互変異性体、ならびにそれらの溶媒和物を含む。

さらに、本発明は、適用可能な場合、ＭＥＫ阻害剤のすべての光学異性体、すなわち、ジアステレオ異性体、ジアステレオ異性体混合物、ラセミ混合物、それらのすべての対応する鏡像異性体および／または互変異性体、ならびにそれらの溶媒和物を含む。

所望であれば、本発明の化合物のラセミ混合物を分離して、個々の鏡像異性体を単離することができる。分離は、化合物のラセミ混合物を鏡像異性的に純粋な化合物にカップリングさせてジアステレオ異性体混合物を形成し、続いて、分別結晶またはクロマトグラフィーなどの標準的方法によって個々のジアステレオマーを分離するような、当技術分野で周知の方法によって行うことができる。

実施形態では、光学的に純粋な鏡像異性体が提供される場合、光学的に純粋な鏡像異性体とは、化合物が所望の異性体を９０重量％超、特に所望の異性体を９５重量％超、またはより詳しくは所望の異性体を９９重量％超含むことを意味し、前記重量パーセントは、化合物の異性体の全重量に基づく。キラル的に純粋なまたはキラル的に濃縮された化合物は、キラル選択的合成によって、または鏡像異性体の分離によって調製することができる。鏡像異性体の分離は、最終生成物に対して、または代替的に好適な中間体に対して行うことができる。

一実施形態では、１種以上のさらなる抗がん剤は本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組み合わせで使用され、ここで、さらなる抗がん剤は、ＭＥＫ分解剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＥＧＦＲ分解剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の阻害剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の分解剤、ＳＨＰ２阻害剤、ＳＨＰ２分解剤、Ａｘｌ阻害剤、Ａｘｌ分解剤、ＡＬＫ阻害剤、ＡＬＫ分解剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ分解剤、ＳＯＳ１阻害剤、ＳＯＳ１分解剤、シグナル伝達経路阻害剤、チェックポイント阻害剤、アポトーシス経路の調節剤、細胞傷害性化学療法剤、血管新生標的治療薬、免疫標的剤、ならびに抗体－薬物コンジュゲートから選択される。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つはＥＧＦＲ阻害剤である。ＥＧＦＲ阻害剤の非限定的な例としては、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））、オシメルチニブ（メレレクチニブ（ｍｅｒｅｌｅｃｔｉｎｉｂ）、Ｔａｇｒｉｓｓｏ（登録商標））、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、ゲフィチニブ（ｌｒｅｓｓａ（登録商標））、ネシツムマブ（Ｐｏｒｔｒａｚｚａ（商標））、ネラチニブ（Ｎｅｒｌｙｎｘ（登録商標））、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標））、バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ（登録商標））およびブリガチニブ（Ａｌｕｎｂｒｉｇ（登録商標）が挙げられる。ＥＧＦＲ阻害剤のさらなる例は、当技術分野で公知である。いくつかの実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤はアロステリックＥＧＦＲ阻害剤である。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つはＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の阻害剤である。ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３阻害剤の非限定的な例としては、ラパチニブ、カネルチニブ、（Ｅ）－２－メトキシ－Ｎ－（３－（４－（３－メチル－４－（６－メチルピリジン－３－イルオキシ）フェニルアミノ）キナゾリン－６－イル）アリル）アセトアミド（ＧＰ－７２４７１４）、サピチニブ、７－［［４－［（３－エチニルフェニル）アミノ］－７－メトキシ－６－キナゾリニル］オキシ］－Ｎ－ヒドロキシ－ヘプタンアミド（ＣＵＤＣ－１０１）、ムブリチニブ、６－［４－［（４－エチルピペラジン－１－イル）メチル］フェニル］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－フェニルエチル］－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－アミン（ＡＥＥ７８８）、イルビニチニブ（ツカチニブ）、ポジオチニブ、Ｎ－［４－［１－［４－アセチル－１－ピペラジニル）シクロへキシル］－４－アミノ－３－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジニル－２－メトキシフェニル］－１－メチル－２－インドールカルボキサミド（ＫＩＮ００１－１１１）、７－シクロペンチル－５－（４－フェノキシフェニル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イルアミン（ＫＩＮ００１－０５１）、６，７－ジメトキシ－Ｎ－（４－フェノキシフェニル）キナゾリン－４－アミン（ＫＩＮ００１－３０）、ダサチニブおよびボスチニブが挙げられる。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つはＳＨＰ２の阻害剤である。ＳＨＰ２阻害剤の非限定的な例としては、６－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－３－（２，３－ジクロロフェニル）ピラジン－２－アミン（ＳＨＰ０９９）、［３－［（３Ｓ，４Ｓ）－４アミノ－３－メチル－２－オキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル］－６－（２，３－ジクロロフェニル）－５－メチルピラジン－２－イル］メタノール（ＲＭＣ－４５５０）、ＲＭＣ－４６３０、ＴＮＯ１５５、ならびに国際公開第２０１５／１０７４９３号パンフレット、国際公開第２０１５／１０７４９４号パンフレット、国際公開第２０１５／１０７４９５号パンフレット、国際公開第２０１９／０７５２６５号パンフレット、ＰＣＴ／Ｕ８２０１９／０５６７８６号パンフレットおよびＰＣＴ／ｌ８２０２０／０５３０１９号パンフレットに開示されている化合物が挙げられる。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つは、ＰＩ３Ｋ阻害剤である。非限定的な例としては、ブパルリシブ（ＢＫＭ１２０）、アルペリシブ（ＢＹＬ７１９）、サモトリシブ（ＬＹ３０２３４１４）、８－［（１Ｒ）－１－［（３，５－ジフルオロフェニル）アミノ］エチル］－Ｎ，Ｎ－ジメチル－２－（モルホリン－４－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－６－カルボキサミド（ＡＺＤ８１８６）、テナリシブ（ＲＰ６５３０）、ボキタリシブ塩酸塩（ｖｏｘｔａｌｉｓｉｂ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（ＳＡＲ－２４５４０９）、ゲダトリシブ（ＰＦ－０５２１２３８４）、パヌリシブ（Ｐ－７１７０）、タセリシブ（ＧＤＣ－００３２）、トランス－２－アミノ－８－［４－（２－ヒドロキシエトキシ）シクロヘキシル］－６－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－メチルピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－７（８Ｈ）－オン（ＰＦ－０４６９１５０２）、デュベリシブ（ＡＢＢＶ－９５４）、Ｎ２－［４－オキソ－４－［４－（４－オキソ－８－フェニル－４Ｈ－１－ベンゾピラン－２－イル）モルホリン－４－イウム－４－イルメトキシ］ブチリル］－Ｌ－アルギニル－グリシル－Ｌ－アスパルチル－Ｌ－セリンアセテート（ＳＦ－１１２６）、ピクチリシブ（ＧＤＣ－０９４１）、２－メチル－１－［２－メチル－３－（トリフルオロメチル）ベンジル］－６－（モルホリン－４－イル）－１Ｈ－ベンズイミダゾール－４－カルボン酸（ＧＳＫ２６３６７７１）、イデラリシブ（ＧＳ－１１０１）、ウンブラリシブトシレート（ＴＧＲ－１２０２）、ピクチリシブ（ＧＤＣ－０９４１）、コパンリシブ塩酸塩（ＢＡＹ８４－１２３６）、ダクトリシブ（ＢＥＺ－２３５）、１－（４－［５－［５－アミノ－６－（５－ｔｅｒｔ－ブチル－１，３，４－オキサジアゾール－２－イル）ピラジン－２－イル］－１－エチル－１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－３－イル］ピペリジン－１－イル）－３－ヒドロキシプロパン－１－オン（ＡＺＤ－８８３５）、５－［６，６－ジメチル－４－（モルホリン－４－イル）－８，９－ジヒドロ－６Ｈ－［１，４］オキサジノ［４，３－ｅ］プリン－２－イル］ピリミジン－２－アミン（ＧＤＣ－００８４）、エベロリムス、ラパマイシン、ペリホシン、シロリムスおよびテムシロリムスが挙げられる。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つはＡＬＫ阻害剤である。非限定的な例としては、クリゾチニブ（ＰＦ－０２３４１０６６）、セリチニブ（ＬＤＫ３７８）、アレクチニブ（アレセンサ）、ブリガチニブ（ＡＰ２６１１３）、ロルラチニブ（ＰＦ－６４６３９２２）、エンサルチニブ（Ｘ－３９６）、エントレクチニブ（ＲＸＤＸ－１０１）、レポトレクチニブ（ｒｅｐｒｏｔｅｃｔｉｎｉｂ）（ＴＰＸ－０００５）、ベリザチニブ（ＴＳＲ－０１１）、アルコチニブ（ＺＧ－０４１８）、フォリチニブ（ｆｏｒｉｔｉｎｉｂ）（ＳＡＦ－１８９）、ＣＥＰ－３７４４０、ＴＱ－Ｂ３１３９、ＰＬＢ１００３およびＴＰＸ－０１３１が挙げられる。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つはチェックポイント阻害剤である。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＰＤ－１阻害剤またはＰＤ－Ｌ１阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＴＬＡ－４阻害剤はイピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標））またはトレメリムマブ（ＧＰ－６７５，２０６）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１阻害剤はペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標））およびＲＮ８８８である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標））、アベルマブ（Ｂａｖｅｎｃｉｏ（登録商標））またはデュルバルマブ（Ｉｍｆｉｎｚｉ^（商標））である。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つは抗体－薬物コンジュゲートである。抗体－薬物コンジュゲートの非限定的な例としては、ゲムツズマブオゾガマイシン（Ｍｙｌｏｔａｒｇ（商標））、イノツズマブオゾガマイシン（Ｂｅｓｐｏｎｓａ（登録商標））、ブレンツキシマブベドチン（Ａｄｃｅｔｒｉｓ（登録商標））、ａｄｏ－トラスツズマブエムタンシン（ＴＤＭ－ｆ；Ｋａｄｃｙｌａ（登録商標））、ミルベツキシマブソラブタンシン（ＩＭＧＮ８５３）およびアネツマブラブタンシンが挙げられる。

いくつかの実施形態では、さらなる抗がん剤の１つは、ベバシズマブ（Ｍｖａｓｔｉ（商標）、Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））、アベルマブ（Ｂａｖｅｎｃｉｏ（登録商標））、リツキシマブ（ＭａｂＴｈｅｒａ（商標）、Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））、エドレコロマブ（Ｐａｎｏｒｅｘ）、ダラツムマブ（Ｄａｒｚａｌｅｘ（登録商標））、オララツマブ（Ｌａｒｔｒｕｖｏ（商標））、オファツムマブ（Ａｒｚｅｒｒａ（登録商標））、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標））、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、オレゴボマブ、ペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））、ジヌツキシマブ（Ｕｎｉｔｕｘｉｎ（登録商標））、オビヌツズマブ（Ｇａｚｙｖａ（登録商標））、トレメリムマブ（ＧＰ－６７５，２０６）、ラムシルマブ（Ｃｙｒａｍｚａ（登録商標））、ウブリツキシマブ（ＴＧ－１１０１）、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））、エロツズマブ（ＥｍｐｌｉｃｉｔｉＴ’Ｖ’）、ネシツムマブ（ＰｏｒｔｒａｚｚａＴ’Ｖ’）、シルムツズマブ（ＵＣ－９６１）、イブリツモマブ（Ｚｅｖａｌｉｎ（登録商標））、イサツキシマブ（ＳＡＲ６５０９８４）、ニモツズマブ、フレソリムマブ（ＧＣ１００８）、リリルマブ（ＩＮＮ）、モガムリズマブ（Ｐｏｔｅｌｉｇｅｏ（登録商標））、フィクラツズマブ（ＡＶ－２９９）、デノスマブ（Ｘｇｅｖａ（登録商標））、ガニツマブ、ウレルマブ、ピジリズマブ、アマツキシマブ、ブリナツモマブ（ＡＭＧ１０３；Ｂｌｉｎｃｙｔｏ（登録商標））またはミドスタウリン（Ｒｙｄａｐｔ）などの抗体である。

本発明の別の実施形態は、１つ以上の組成物を含有する医薬組成物であって、各組成物が、本発明に従って使用するための１つ以上の化合物および１つ以上の治療的に不活性な担体、希釈剤または添加物を含有する、医薬組成物、ならびにそのような医薬組成物を調製する方法を提供する。一例では、式（Ｉ）の化合物は、生理学的に許容され得る担体、すなわち、ガレノスの投与形態に用いられる用量および濃度でレシピエントに対して毒性でない担体と、適切なｐＨおよび所望の純度で、周囲温度で混合することによって製剤化されてもよい。製剤のｐＨは、特定の用途および化合物の濃度に主に依存するが、好ましくは約３～約８の範囲である。一例では、式（Ｉ）の化合物は、ｐＨ５の酢酸緩衝剤にて製剤化される。別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は無菌である。化合物は、例えば、固体もしくは非晶質組成物として、凍結乾燥製剤として、または水溶液として保管され得る。一例では、ＭＥＫ阻害剤は、生理学的に許容され得る担体、すなわち、ガレノスの投与形態に用いられる用量および濃度でレシピエントに対して毒性でない担体と、適切なｐＨおよび所望の純度で、周囲温度で混合することによって製剤化されてもよい。製剤のｐＨは、特定の用途および化合物の濃度に主に依存するが、好ましくは約３～約８の範囲である。一例では、ＭＥＫ阻害剤は、ｐＨ５の酢酸緩衝剤にて製剤化される。別の実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は無菌である。ＭＥＫ阻害剤は、例えば、固体もしくは非晶質組成物として、凍結乾燥製剤として、または水溶液として保管され得る。

組成物は、良好な医療行為と一致した様式で製剤化、投薬、および投与される。この文脈で考慮すべき要因としては、治療される特定の障害、治療される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床的症状、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール、および医療従事者に公知である他の要因が挙げられる。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容され得る担体」または「薬学的に許容され得る添加物」は、溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌薬および抗真菌薬、等張剤および吸収遅延剤、ならびに医薬品の投与と適合可能な他の材料および化合物を含む、医薬品の投与と適合可能なありとあらゆる物質を含むことが意図される。いずれかの従来の媒体または薬剤が活性のある化合物と不適合である場合を除いて、本発明の組成物においてその使用が企図される。補助的な活性のある化合物を、組成物中に組み込むこともできる。

医薬組成物は、本明細書に記載のＢＲＡＦ阻害剤および／またはＭＥＫ阻害剤を薬学的に許容され得る無機もしくは有機の担体または添加物で処理することによって得ることができる。ラクトース、コーンスターチもしくはその誘導体、タルク、ステアリン酸もしくはその塩等は、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、および硬質ゼラチンカプセル剤の担体として使用することができる。軟質ゼラチンカプセルに適した担体は、例えば、植物油、ワックス、油脂、半固形および液状ポリオール等である。しかし、活性物質の性質に応じて、軟質ゼラチンカプセル剤の場合、通常、担体は必要とされない。液剤およびシロップ剤の生産に適した担体は、例えば、水、ポリオール、グリセロール、植物油等である。坐剤に適した担体は、例えば、天然または硬化油、ワックス、油脂、半液体または液状ポリオール等である。

さらに、医薬組成物は、防腐剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、着香剤、浸透圧を変化させるための塩、緩衝液、マスキング剤または抗酸化剤を含有することができる。また、さらに他の治療上有用な物質を含有することもできる。

ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤の医薬組成物は、単独でまたは組み合わせで、所望の程度の純度を有する有効成分を任意の薬学的に許容され得る担体、添加物または安定剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．（編）（１９８０））と混合することによって、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で貯蔵のために調製することができる。許容され得る担体、添加物または安定剤には、用いられる用量および濃度でレシピエントに対して非毒性であり、リン酸、クエン酸および他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムクロリド、ベンゼトニウムクロリド；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；メチルまたはプロピルバラベンなどのアルキルパラべン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；およびｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンもしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンもしくはリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、およびグルコース、マンノースもしくはデキストリンを含むその他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトールなどの糖；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属錯体（例えばＺｎ－タンパク質錯体）；ならびに／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が含まれる。

ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤の医薬組成物には、経口、経鼻、局所（頬側および舌下を含む）、直腸、膣および／または非経口投与に適したものが含まれる。組成物は、都合良く、単位剤形で提示されてもよく、薬学分野で周知のいずれかの方法によって調製され得る。単一剤形を生産するために担体材料と組み合わせることができる有効成分の量は、治療される宿主および特定の投与様式に依存して変化する。単一剤形を生産するために担体材料と組み合せることができる有効成分の量は、一般に、治療効果を生じるＢＲＡＦ阻害剤またはＭＥＫ阻害剤の量である。一般に、１００パーセントのうち、この量は、有効成分の約１パーセント～約９０パーセント、好ましくは約５パーセント～約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント～約３０パーセントの範囲である。これらの組成物を調製する方法は、ＢＲＡＦ阻害剤またはＭＥＫ阻害剤を担体および任意に１つ以上の補助成分と会合させる工程を含む。一般に、医薬組成物は、ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤を、液体担体、または細かく分けた固体担体、またはその両方と均一かつ密接に会合させ、次いで、必要に応じて、生成物を成形することによって調製することができる。経口投与に適した医薬組成物は、カプセル剤、カシェ剤、サシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤（フレーバーベース、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカントを使用）、散剤、顆粒剤の形態で、または水性もしくは非水性液体中の液剤もしくは懸濁剤として、または水中油型もしくは油中水型液体乳剤として、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、またはトローチ剤（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤を使用）として、および／または洗口剤等としてであってもよく、それぞれが有効成分として所定量のＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤を含有する。ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤は、ボーラス、舐剤またはペースト剤として投与されてもよい。

本発明のさらなる実施形態では、ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤は、１つまたは２つの別個の医薬組成物に製剤化される。

有効成分はまた、例えばコアセルベーション技法または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えばそれぞれヒドロキシメチルセルロースもしくはゼラチン－マイクロカプセルおよびポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）中に、またはマクロエマルション中に取り込まれてもよい。そのような技法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．（編）（１９８０）に開示されている。

ｉｎ ｖｉｖｏ投与のために使用される製剤は、無菌でなければならない。これは、滅菌濾過膜による濾過によって容易に達成される。

投与量は、広範囲内で変化させることができ、当然、それぞれの具体的な事例において個々の要件に対して調整されなければならない。経口投与の場合、成人の投与量は、一般式（Ｉ）の化合物または対応する量のその薬学的に許容され得る溶媒和物で、１日あたり約０．０１ｍｇ～約１０００ｍｇで変化させることができる。１日投与量を、単回用量または分割用量として投与することができ、加えて、必要であると判明した場合、上限を超えることもできる。

以下の実施例は、本発明を限定することなく説明するが、単にその代表としての役割を果たすに過ぎない。医薬組成物は、好都合には約１～５００ｍｇ、特に１～１００ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含有する。医薬組成物は、好都合には約１～５００ｍｇ、特に１～１００ｍｇの式（ＩＩ）の化合物を含有する。ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物は、さらに約１～５００ｍｇ、特に１～１００ｍｇのＭＥＫ阻害剤を固定用量配合剤に含有する。

本発明による組成物の非限定的な例は以下の通りである：
実施例Ａ
以下の組成の錠剤は、通常の方法で製造される。

製造手順
１．成分１、２、３および４を混合し、精製水で顆粒化する。
２．顆粒を５０℃で乾燥させる。
３．顆粒を適切な粉砕装置に通す。
４．成分５を添加し、３分間混合し、適切なプレス機で圧縮する。

実施例Ｂ－１
以下の組成のカプセル剤を製造する：

製造手順
１．成分１、２および３を適切なミキサーで３０分間混合する。
２．成分４および５を添加し、３分間混合する。
３．適切なカプセルに充填する。

式（Ｉ）の化合物、ラクトースおよびコーンスターチを、先ずミキサー中、次いで粉砕機中で混合する。混合物をミキサーに戻し、そこにタルクを添加し、充分に混合する。混合物は、機械によって適切なカプセル、例えば硬質ゼラチンカプセルに充填される。

実施例Ｂ－２
以下の組成の軟質ゼラチンカプセル剤を製造する：

製造手順
式（Ｉ）の化合物を他の成分の温かい融解物に溶解し、混合物を適切なサイズの軟質ゼラチンカプセルに充填する。充填した軟質ゼラチンカプセルを、通常の手順に従って処理する。

実施例Ｃ
以下の組成の坐剤を製造する：

製造手順
坐薬練剤（ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ ｍａｓｓ）をガラスまたはスチールベッセル中で融解し、充分に混合し、４５℃に冷却する。次いで、これに微粉末化した式（Ｉ）の化合物を添加し、完全に分散するまで撹拌する。混合物を適したサイズの坐剤型に注ぎ、冷えるまで放置し、次いで坐剤を型から取り出し、ワックスペーパーまたは金属箔で個々に包装する。

実施例Ｄ
以下の組成の注射液を製造する：

製造手順
式（Ｉ）の化合物を、ポリエチレングリコール４００と注射用の水（一部）との混合物に溶解する。ｐＨを酢酸により５．０に調整する。残りの量の水を添加することにより、体積を１．０ｍｌに調整する。溶液をフィルタにかけ、適切な過量を使用してバイアルに充填し、滅菌する。

実施例Ｅ
次の組成のサシェ剤（ｓａｃｈｅｔ）を製造する：

製造手順
式（Ｉ）の化合物を、ラクトース、微結晶セルロースおよびカルボキシルメチルセルロースナトリウムと混合し、水中のポリビニルピロリドンの混合物で顆粒化する。顆粒をステアリン酸マグネシウムおよび香味添加剤と混合し、サシェに充填する。

略語
ＣＡＳ＝ケミカル・アブストラクト・サービス；ＤＣＭ＝ジクロロメタン；ＤＩＰＥＡ＝Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；ＤＮＡ＝デオキシリボ核酸；ＥＤＣ・ＨＣｌ＝１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩；ＥＳＩ＝エレクトロスプレーイオン化；ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル；ＨＯＯＢｔ＝３，４－ジヒドロ－３－ヒドロキシ－４－オキソ－１，２，３－ベンゾトリアジン；ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ＝液体クロマトグラフィー－ＭＳ／ＭＳ；ＭｅＯＨ＝メタノール；ＭＳ＝質量分析；ＮＭＰ＝Ｎ－メチル－２－ピロリドン；ＰＣＲ＝ポリメラーゼ連鎖反応；ｒｔ＝室温；ＳＦＣ＝超臨界流体クロマトグラフィー；ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン．

試験薬剤
（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミド（本明細書では化合物Ｉａと呼ぶ）は、粉末としてＲｏｃｈｅ、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから提供され、使用前に再懸濁した。２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドナトリウム塩（本明細書では化合物ＩＩａと呼ぶ）は、粉末としてＣｈｕｇａｉ、Ｔｏｋｙｏ、Ｊａｐａｎから提供された。コビメチニブ（カタログ番号ＨＹ－１３０６４Ａ）、エンコラフェニブ（カタログ番号ＨＹ－１５６０５）およびビニメチニブ（カタログ番号ＨＹ－１５２０２）は、ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓから購入した。

細胞株および培養条件
細胞株をＡＴＣＣから入手し、標準的な条件で５％ＣＯ２の加湿インキュベータ内で維持し、週に２回継代した。培養条件を以下の表に報告する：

動物：
ｉｎ ｖｉｖｏ研究では、７～９週齢（実験開始時）の雌マウスをＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。実験に利用した系統はＣＢ．１７ ＳＣＩＤであった。

異種移植確立のために、細胞を５０％Ｍａｔｒｉｇｅｌおよび５０％ハンクス平衡塩溶液からなる培地に懸濁し、右脇腹に皮下注射した。腫瘍体積が約１００ｍｍ^３に達したら、処置前にマウスを無作為化した。

実施例
以下の実施例および図は、本発明を説明するために提供され、限定的な特徴を有しない。

実施例１
ＢＲＡＦ Ｖ６００ＥおよびＲＡＦ二量体誘導変異ＮＲＡＳ Ｑ６１Ｋを呈するＡ３７５細胞株を利用して、ＢＲＡＦｉおよびＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉの組合せに対する耐性機構をモデル化した。Ａ３７５ ＮＲＡＳ Ｑ６１Ｋ細胞を、化合物Ｉａ、エンコラフェニブ単独、または１０ｎＭのＭＥＫｉコビメチニブとの組合せのいずれかで１時間処置し、次いでＰ－ＥＲＫとも呼ばれるリン酸化ＥＲＫのウエスタンブロット分析に利用した（図１）。同様に、Ａ３７５ ＮＲＡＳ Ｑ６１Ｋ細胞を５００細胞／ウェルで播種し、化合物Ｉａ、エンコラフェニブ単独またはＭＥＫｉコビメチニブとの組合せのいずれかで処置し、１２日間インキュベートした。生成されたコロニーを固定し、クリスタルバイオレット／メタノールの溶液で染色した（図２）。そのパラドックスブレーカ特性によれば、化合物Ｉａはエンコラフェニブと比較して、優れたＰ－ＥＲＫ阻害を駆動し、それに対応して化合物Ｉａとコビメチニブとの組合せは、エンコラフェニブ／コビメチニブの組合せによって引き起こされるものと比較して、優れたＰ－ＥＲＫ抑制をもたらす。

実施例２
免疫不全マウスに、第一世代のＢＲＡＦｉおよびＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉに対する耐性のモデルとして、ＢＲＡＦ Ｖ６００ＥおよびＲＡＦ二量体誘導変異ＮＲＡＳ Ｑ６１Ｋを呈する細胞株Ａ３７５ ＮＲＡＳを移植した。腫瘍が確立したら（１００ｍｍ３）、マウスを無作為化し、化合物Ｉａ（２０ｍｇ／ｋｇ）、ＭＥＫｉコビメチニブとのその組合せ（５ｍｇ／ｋｇ、ＱＤ ＰＯ）またはコビメチニブ単独のいずれかを１日１回（ＱＤ）経口投与（ＰＯ）した（図３）。同じマウスモデルを、異なるＭＥＫ阻害剤ビニメチニブ（１０ｍｇ／ｋｇ、ＢＩＤ ＰＯ）と組み合わせた化合物Ｉａ（２０ｍｇ／ｋｇ）でも１日１回処置した（図４）。比較のために、実験アームの１つの動物を、転移性黒色腫の処置のためにＦＤＡ承認された組合せであるビニメチニブとの組合せで、パラドックスを誘発するＢＲＡＦｉエンコラフェニブ（３６ｍｇ／ｋｇ、ＱＤ ＰＯ）で処置した。同じマウスモデルを、異なるＭＥＫ阻害剤化合物ＩＩａ（１つのコホートは０．０６２５ｍｇ／ｋｇ、第２のコホートは１．０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ）と組み合わせた化合物Ｉａ（２０ｍｇ／ｋｇ）でも１日１回処置した（図５）。

実施例３
Ａ３７５細胞株をＡＴＣＣから入手し、標準条件で５％ＣＯ２の加湿インキュベータ内で維持した。細胞を、３８４ウェルプレート（Ｕ底）で７日間、示された濃度でのエンコラフェニブおよび化合物ＩＩａで処置した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ ２．０（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ９２４３）およびＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）によって細胞生存率を測定した。化合物による細胞増殖阻害は、式（１－（Ｔ－Ｖ０）／（Ｖ－Ｖ０））×１００（％）によって計算し、式中、Ｔは化合物を含むウェルの測定値を表し、Ｖは化合物を含まないウェルの測定値を表し、Ｖ０は細胞を含まないウェルの測定値を表す。８０％阻害濃度（ＩＣ８０）の値を計算し、ＩＣ８０のアイソボログラムをプロットした。ＸおよびＹ軸は、それぞれ化合物ＩＩａおよびエンコラフェニブの濃度を表す。アイソボールは双曲性であり、相加線（破線）の下に位置し、エンコラフェニブと化合物ＩＩａとの間の相乗効果を示している（図６）。

Claims (22)

1. ＢＲＡＦ阻害剤が、式（Ｉ）：
   

   

   の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
2. 前記式（Ｉ）の化合物が（３Ｒ）－Ｎ－［２－シアノ－４－フルオロ－３－（３－メチル－４－オキソ－キナゾリン－６－イル）オキシ－フェニル］－３－フルオロ－ピロリジン－１－スルホンアミドである、請求項１に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
3. 前記ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミド、コビメチニブ、トラメチニブおよびビニメチニブ、またはそれらの薬学的に許容され得る塩から選択される、請求項１または２に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
4. 前記ＭＥＫ阻害剤が、２－（４－シクロプロピル－２－フルオロアニリノ）－３，４－ジフルオロ－５－［［３－フルオロ－２－（メチルスルファモイルアミノ）ピリジン－４－イル］メチル］ベンズアミドまたはその薬学的に許容され得る塩である、請求項１から３のいずれか一項に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
5. 前記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩である、請求項１から３のいずれか一項に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
6. 医薬として使用するための、請求項１から５のいずれか一項に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
7. がんの治療的および／または予防的処置に使用するための、請求項１から５のいずれか一項に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
8. がんの治療または予防のための医薬を調製するための、請求項１から５のいずれか一項に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せの使用。
9. がん、特に黒色腫または非小細胞肺がんの治療または予防のための方法であって、有効量の、請求項１から５のいずれか一項に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せを、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。
10. 請求項１から５のいずれか一項に記載のＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ、および１種以上の薬学的に許容され得る添加物を含む医薬組成物。
11. 前記ＢＲＡＦ阻害剤および前記ＭＥＫ阻害剤が両方とも経口投与される、請求項６から１０のいずれか一項に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。
12. 前記ＢＲＡＦ阻害剤が前記ＭＥＫ阻害剤と同時に投与される、請求項６から１１のいずれか一項に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。
13. 前記ＢＲＡＦ阻害剤および前記ＭＥＫ阻害剤が共製剤化されている、請求項６から１２のいずれか一項に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。
14. 前記ＢＲＡＦ阻害剤が前記ＭＥＫ阻害剤と逐次的に投与される、請求項６から１１のいずれか一項に記載の組合せ、使用、方法または医薬組成物。
15. 前記がんが、甲状腺がん、結腸直腸がん、黒色腫、脳のがんまたは非小細胞肺がんである、請求項６から８のいずれか一項に記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
16. 前記がんがＢＲＡＦ^Ｖ６００変異に関連する、請求項６から９のいずれか一項に記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
17. 前記がんがＢＲＡＦ^Ｖ６００変異陽性の切除不能なまたは転移性のがんである、請求項６から９のいずれか一項に記載の使用のための、ＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
18. ＢＲＡＦ^Ｖ６００変異が、（ａ）患者の腫瘍組織および／または体液の試料から抽出された核酸（例えばＤＮＡ）に対してＰＣＲまたは配列決定を行うこと；および（ｂ）前記試料中のＢＲＡＦ^Ｖ６００の発現を決定することを含む方法を使用して決定される、請求項６から９のいずれか一項に記載の使用のためのＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
19. ＭＥＫ分解剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＥＧＦＲ分解剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の阻害剤、ＨＥＲ２および／またはＨＥＲ３の分解剤、ＳＨＰ２阻害剤、ＳＨＰ２分解剤、Ａｘｌ阻害剤、Ａｘｌ分解剤、ＡＬＫ阻害剤、ＡＬＫ分解剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ分解剤、ＳＯＳ１阻害剤、ＳＯＳ１分解剤、シグナル伝達経路阻害剤、チェックポイント阻害剤、アポトーシス経路の調節剤、細胞傷害性化学療法剤、血管新生標的治療薬、免疫標的剤、ならびに抗体－薬物コンジュゲートから選択される１種以上のさらなる抗がん剤を含む、請求項６から９のいずれか一項に記載の使用のためのＢＲＡＦ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との組合せ。
20. ＭＥＫ阻害剤と組み合わせたがんの治療または予防のための、式（Ｉ）：
    

    

    の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物、および１種以上の薬学的に許容され得る添加物を含む医薬組成物。
21. ＢＲＡＦ阻害剤と組み合わせたがんの治療または予防のための、式（ＩＩ）：
    

    

    の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物、および１種以上の薬学的に許容され得る添加物を含む医薬組成物。
22. 本明細書で上述した発明。

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