JP2023156353A - 終末糖化産物受容体（ｒａｇｅ）の活性化のスクリーニングアッセイ、モジュレーター及び調節 - Google Patents

終末糖化産物受容体（ｒａｇｅ）の活性化のスクリーニングアッセイ、モジュレーター及び調節 Download PDF

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Abstract

【課題】ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理のための医薬組成物を提供する。【解決手段】特定の配列に示されるアミノ酸配列からなる、ＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達を阻害する単離または精製されたペプチド、前記ペプチドを含む融合ポリペプチド、前記ペプチドまたは融合ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、並びに前記ペプチド、融合ポリペプチドまたは核酸を含む医薬組成物を提供する。前記医薬組成物は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、前記処置、予防又は管理を必要とする患者において行うために使用される。【選択図】なし

Description

本発明は、概して、特定の疾患及び／又は状態に関連する受容体の活性化のモジュレー
ターを同定するためのスクリーニングアッセイ、そのようなモジュレーター、そのような
モジュレーターの投与を含む処置方法に関する。より具体的には、本発明は、Ｓ１００Ａ
８／Ａ９、終末糖化産物（ＡＧＥ）及びＨＭＧＢ１を含むＲＡＧＥリガンドによるＲＡＧ
Ｅの活性化の調節も伴う又は伴わない、活性化１型アンジオテンシン受容体（ＡＴ１Ｒ）
及び活性化ＣＣケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）を含む、特定の共存活性化Ｇタンパク質
共役受容体（ＧＰＣＲ）によるＲＡＧＥリガンド非依存性メカニズム（ＲＡＧＥのＲＡＧ
Ｅリガンド非依存性トランス活性化としても知られる）を介した終末糖化産物受容体（Ｒ
ＡＧＥ）の活性化のモジュレーターに関する。本発明は、そのようなモジュレーターを同
定するためのスクリーニングアッセイ及び前記モジュレーターを使用したＲＡＧＥ関連障
害の処置方法にも関する。
終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）は、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーに属
する多価Ｉ型膜貫通糖タンパク質である（Ｎｅｅｐｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９２）。５
０～５５ｋＤａのグリコシル化ＲＡＧＥタンパク質は、限られた範囲の細胞（例えば、血
管内皮、ＩＩ型肺細胞、白血球）で構成的に発現されるが、ＲＡＧＥ発現は、傷害及び炎
症後の大半の細胞型及び組織で誘導され得る（Ｂａｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０
０５）。ＲＡＧＥ発現は、心血管疾患（ＣＶＤ）、がん、糖尿病、慢性腎疾患（ＣＫＤ）
、虚血性傷害及びアルツハイマー病を含むが、これらに限定されない重要な炎症性及び代
謝性障害で著しく上方制御される（Ｙａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。
ＲＡＧＥをコードするＡＧＥＲ遺伝子の遺伝的欠失は、いくつかのがん（Ｍａｌｉｋ
ｅｔ ａｌ．，２０１５）及びアテローム性動脈硬化症及び糖尿病性合併症を含む炎症性
疾患（Ｃｈｕａｈ ｅｔ ａｌ．，２０１３）を含む、マウスにおける多数の疾患及び疾
患プロセスからの保護をもたらすことが以前に実証されている。例えば、アポリポタンパ
ク質Ｅ（ａｐｏＥ）ノックアウト（ＫＯ）マウスでは、ＲＡＧＥの欠失により、加齢に伴
うプラークの蓄積がより少なくなり、糖尿病によって加速されるアテローム性動脈硬化が
軽減される（Ｓｏｒｏ－Ｐａａｖｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００８）。同様に、ＡＧＥ
Ｒの欠失は、グルコース制御に影響を与えることなく、糖尿病マウスの腎障害を軽減する
ことができる（Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ．，２００５）。
ＡＧＥＲ遺伝子の多型は、関節炎、アテローム性動脈硬化症及び糖尿病性合併症、がん
のリスク、肥満、てんかん並びにアルツハイマー病を含む認知障害を含むが、これらに限
定されない、ヒトにおける多数の疾患及び疾患プロセスに関連付けられてきた。
終末糖化産物（ＡＧＥ）及び非ＡＧＥリガンド（タンパク質のＳ１００カルグラニュリ
ンファミリーのメンバー、ＨＭＧＢ１、アミロイド及びＭａｃ－１を含む）によるＲＡＧ
Ｅの細胞外ドメインへの結合は、核因子カッパＢ（ＮＦκＢ）及びレニン－アンジオテン
シンアルドステロンシステム（ＲＡＡＳ）を含む、炎症、損傷及び機能障害に関与する一
連のシグナル伝達カスケードを活性化する。
実験モデルでは、可溶性デコイ受容体を使用したＲＡＧＥのリガンド媒介性活性化の阻
害は、アテローム形成及び血管損傷を減弱し（Ｓｃｈｍｉｄｔ ｅｔ ａｌ．１９９９）
、これは、ＲＡＧＥの病理学的作用がこのような設定におけるＲＡＧＥのリガンド媒介性
活性化によって部分的に媒介されることを意味する。
ＲＡＧＥが活性化され、全てのその生物学的効果を主張する正確な分子メカニズムは、
十分に理解されておらず、そのため、これらの臨床的に重要なシグナル伝達経路を標的と
する能力は、臨床設定では依然として見出されていない。
レニン－アンジオテンシンアルドステロンシステム（ＲＡＡＳ）は、多くの一般的な疾
患及び疾患プロセスの発生及び進行にも関与している重要な恒常性の経路である。アンジ
オテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤又はアンジオテンシンＩＩ受容体１型（ＡＴ１Ｒ）
ブロッカー（阻害剤）によるレニン－アンジオテンシンアルドステロンシステム（ＲＡＡ
Ｓ）の阻害は、高血圧、心血管疾患（ＣＶＤ）、心不全、慢性腎疾患（ＣＫＤ）及び糖尿
病性合併症を含む多くの疾患及び／又は状態の管理に広く使用されている。ＲＡＡＳ阻害
は、糖尿病の予防（Ｔｉｋｅｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，２００４）、神経保護（Ｔｈｏｅ
ｎｅ－Ｒｅｉｎｅｋｅ ｅｔ ａｌ．，２０１１）、特定のがんの成長の緩和（Ｓｈｅｎ
ｅｔ ａｌ．，２０１６）及びマウスに長い寿命を与えるＡＴ１Ｒの遺伝子欠失によっ
て加齢においても（Ｂｅｎｉｇｎｉ ｅｔ ａｌ．，２００９）利点を有することが示さ
れている。
ＲＡＡＳブロッカーのこれらの作用は、ＲＡＡＳブロッカーによって付与される血圧低
下に付加され、且つそれから独立したものである。これは、他の薬剤と同等の血圧低下は
同じ利点を付与しないためである（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，１９９３）。特に、アンジオ
テンシンＩＩ（Ａｎｇ ＩＩ）によるＡＴ１Ｒの活性化は、血管収縮を引き起こす経路と
異なる経路を介して酸化ストレスの誘導、核因子κＢ（ＮＦκＢ）の活性化及び炎症を引
き起こす。
レニン－アンジオテンシンアルドステロンシステム（ＲＡＡＳ）の活性化は、アテロー
ム性動脈硬化の重要なメディエーターであることが知られている（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．
，１９９３；及びＪａｃｏｂｙ ｅｔ ａｌ．，２００３）。アテローム形成は、アンジ
オテンシン（Ａｎｇ）ＩＩの注入後に増加し、実験モデルでは、その血圧の恒常性への効
果とは独立して、低塩食（Ｔｉｋｅｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，２０１２）、糖尿病（Ｇｏ
ｌｄｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００６；及びＳｏｒｏ－Ｐａａｖｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，
２００８）及びアンジオテンシン変換酵素２（Ａｃｅ２）の遺伝的欠失（Ｔｈｏｍａｓ
ｅｔ ａｌ．，２０１０）を含む生理学的ＲＡＡＳ活性化に関連する。同様に、ＲＡＡＳ
の阻害は、全身血圧の低下に付加され、且つそれから独立した抗アテローム性動脈硬化作
用を有する（Ｃａｎｄｉｄｏ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｃａｎｄｉｄｏ ｅｔ ａｌ．
，２００４；及びＫｎｏｗｌｅｓ ｅｔ ａｌ．，２０００）。Ａｎｇ ＩＩは、酸化ス
トレスの誘導（Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９６）、血管癒着（Ｇｒａ
ｆｅ ｅｔ ａｌ．，１９９７）及び炎症（Ｍａｒｖａｒ ｅｔ ａｌ．，２０１０）を
含む多数の直接的なアテローム性動脈硬化促進効果を有する（Ｄａｕｇｈｅｒｔｙ ｅｔ
ａｌ．，２０００；Ｆｅｒｒａｒｉｏ ｅｔ ａｌ．，２００６；及びＥｋｈｏｌｍ
ｅｔ ａｌ．，２００９）。
これらのアテローム性動脈硬化促進作用は、主に１型アンジオテンシン受容体（ＡＴ１
Ｒ）の活性化及びそれに続く活性酸素種（ＲＯＳ）の誘導並びにＮＦκＢシグナル伝達の
活性化（Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，２００８）によって媒介されると考えられている。しかし
ながら、ＡＴ１Ｒを介した従来の血管収縮シグナル伝達からの相対的な独立性を含む、こ
れらの作用の根底にあるシグナル伝達メカニズムは、十分に理解されていない。
また、アテローム性動脈硬化の病因には特定のケモカインシグナル伝達経路が関与し、
動脈病変へのマクロファージの浸潤がこの異常型炎症性疾患に直接寄与していることも示
されている（Ｂｏｉｓｖｅｒｔ ｅｔ ａｌ．，２００４）。実際、全ての既知のＣＣ及
びＣＸＣケモカイン受容体並びにＣＸ３ＣＲ１及びＸＣＲ１は、炎症に関係付けられてい
る（Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．２０００；Ｚｌｏｔｎｉｋ ａｎｄ Ｙｏｓｈｉｅ ２
０００）。ケモカインリガンド（ＣＣＬ）の主要な生理学的機能は、「定期的な免疫監視
、炎症及び発生中の細胞移動」の調節である。（Ａｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００７）
。ＣＣＬは、炎症促進性サイトカインに応答して放出され、ケモカインに対する生理学的
応答を媒介するＧタンパク質共役受容体の大きいファミリーに選択的に結合する。ケモカ
インは、元来、走化性サイトカインと称されていた。
慢性炎症性疾患の動物モデル研究は、アンタゴニストによる、ＭＣＰ－１（単球走化性
タンパク質１、別名単球化学誘引タンパク質１、単球走化性及び活性化因子（ＭＣＡＦ）
並びにケモカイン（Ｃ－Ｃモチーフ）リガンド２（ＣＣＬ２））とＣＣＲ２（ケモカイン
（Ｃ－Ｃモチーフ）受容体２）との間の結合の阻害が炎症反応を抑制することを実証した
。ＭＣＰ－１とその認識受容体ＣＣＲ２との間の相互作用は、ブドウ膜炎、アテローム性
動脈硬化症、関節リウマチ、多発性硬化症、クローン病、腎炎、臓器移植片拒絶反応、肺
線維症、腎不全、糖尿病及び糖尿病性合併症、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性
網膜炎、糖尿病性微小血管症、結核、サルコイドーシス、侵襲性ブドウ球菌感染症、白内
障手術後の炎症、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、慢性蕁麻疹、アレルギー性喘
息、歯周病、歯周炎、歯肉炎、歯肉疾患、拡張期心筋症、心筋梗塞、心筋炎、慢性心不全
、血管狭窄、再狭窄、再灌流障害、糸球体腎炎、固形腫瘍及びがん、慢性リンパ性白血病
、慢性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、悪性骨髄腫、ホジキン病並びに膀胱、乳房、子宮頸
部、結腸、肺、前立腺又は胃の癌腫などの炎症性疾患の病状に関係付けられている（Ｒｏ
ｌｌｉｎｓ，１９９６；Ｄａｗｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，２００３）。
ＭＣＰ－１及びＣＣＲ２の両方のＫＯマウスは、これらのシグナル伝達経路の非存在下
で炎症性病変への単球浸潤が有意に減少することを実証している。さらに、このようなＫ
Ｏマウスは、実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ、ヒト多発性硬化症のモデル）、ゴキ
ブリアレルゲン誘導性喘息、アテローム性動脈硬化症及びブドウ膜炎の発症に耐性がある
。関節リウマチ及びクローン病患者は、ＭＣＰ－１発現及び浸潤マクロファージ数の減少
と相関する用量レベルでのＴＮＦαアンタゴニスト（例えば、モノクローナル抗体及び可
溶性受容体）による処置中に改善した。
ＭＣＰ－１は、季節性及び慢性アレルギー性鼻炎の病因に関係付けられており、チリダ
ニアレルギーを有する大半の患者の鼻粘膜で発見されている。ＭＣＰ－１は、インビトロ
で好塩基球からのヒスタミン放出を誘導することも見出されている。アレルギー状態中、
アレルゲンとヒスタミンの両方は、アレルギー性鼻炎を有する人の鼻粘膜におけるＭＣＰ
－１及び他のケモカインの発現を引き起こす（すなわち上方制御する）ことが示されてお
り、これは、そのような患者におけるポジティブフィードバックループの存在を示唆して
いる。
腎疾患は、腎マクロファージの蓄積を特徴とする慢性炎症に関連している。糖尿病腎に
よる単球化学誘引タンパク質１（ＭＣＰ－１／ＣＣＬ２）の産生は、糖尿病性腎症から生
じる腎疾患におけるマクロファージ蓄積に影響を与える主要な要因として特定されている
（Ｔｅｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，２００８）。様々な動物モデルにおいて、ＣＣＲ２の阻害
、及び／又は特定のＣＣＲ２経路の阻害、及び／又はＣＣＲ２リガンドＭＣＰ－１の阻害
が腎障害を軽減することが示されている（Ｔｅｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｒａｏ
Ｖ ｅｔ ａ．，２００６；Ｋａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１０；Ｋｉｔａｇａｗａ
ｅｔ ａｌ．，２００４；Ｐａｒｋ Ｊ ｅｔ ａｌ．，２００８）。
Ｔｅｓｃｈ（２００８）は、ＭＣＰ－１の選択的標的化が、糖尿病性腎症を含む腎疾患
の動物モデルの抑制において効果的な処置であると証明されたことに注目している。ＣＣ
Ｒ２の小分子アンタゴニスト（ＩＮＣＢ３３４４、プロパゲルマニウム、ＲＳ－５０４３
９３）を含む処置は、マウスモデルで多発性硬化症、腎虚血再灌流障害、尿管閉塞及び糖
尿病性腎症並びにラットモデルで関節炎の炎症を抑制することが示されている。ＣＣＲ２
の人工生物学的アンタゴニストも効果的であることが証明されている。ＭＣＰ－１の欠損
不活性型を発現するベクターを形質導入した細胞の皮下注入は、ループス腎炎のマウスモ
デルで腎炎症の発症を抑制することが見出されている。同様に、７ＮＤ（ＭＣＰ－１の変
異体）による筋肉形質導入は、腎虚血再灌流障害、ループス腎炎及び糖尿病性腎症のマウ
スモデルにおける腎炎症を軽減する。現在まで、炎症性疾患に対するケモカイン単剤療法
のヒト試験は、薬物の承認に至っていない。Ａｎｄｅｒｓ ＨＪらは、単一のケモカイン
アンタゴニスト処置が疾患の処置に効果的でなかった理由を検討し、単一のケモカインメ
ディエーターの冗長性及びケモカイン受容体の可変発現パターンを含む可能な説明を議論
している（Ａｎｄｅｒｓ ＨＪ ｅｔ ａｌ．２０１０）。したがって、ＣＣＲ２経路の
活性化により引き起こされる疾患の効果的な処置に対する技術的必要性が存在する。
本発明の主題である、活性化された共存ＧＰＣＲを介してＲＡＧＥがＲＡＧＥリガンド
非依存性に活性化され得るという概念は、多数のＧＰＣＲ、特に炎症及び細胞増殖に関連
するＧＰＣＲのために意味を有することに注意することが重要である。
ＡＴ１Ｒ及びＣＣＲ２を含む特定の活性化された共存ＧＰＣＲとＲＡＧＥとの間にＲＡ
ＧＥリガンド非依存性な新規機能的相互作用が説明されるのは、この背景技術に反するも
のである。
ＲＡＧＥシグナル伝達、レニンアンジオテンシンアルドステロンシステム（ＲＡＡＳ）
及び特定のケモカインシグナル伝達経路は、血管合併症の発生及び進行に関与する経路で
機能的に相互作用することが知られている。例えば、ＲＡＧＥリガンドのＲＡＧＥへの結
合は、炎症促進性シグナル伝達を誘導することができ、これは、ＡＴ１Ｒのアンタゴニス
ト（阻害剤）によって減少させることができる（例えば、Ｆｕｋａｍｉ ｅｔ ａｌ．２
００４）。同様に、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒ受容体の活性化は、ＲＡＧＥリガンドの
形成及び放出を増加させ、ＲＡＧＥへのＲＡＧＥリガンド結合の阻害又はＲＡＧＥリガン
ドを減少させる介入は、Ａｎｇ ＩＩ－ＡＴ１Ｒ誘導性損傷を減弱させることができる（
例えば、Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ．２００５）。ＲＡＧＥリガンドによるＲＡＧＥの活
性化後に誘導される下流シグナル伝達経路及びメディエーターの一部、特に炎症を引き起
こすものは、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒの活性化（例えば、ＮＦκＢ活性化）後に誘導
されるシグナル伝達経路及びメディエーターにも類似している。
この先行技術は、ＲＡＧＥと、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２な
どの特定のケモカイン受容体などのＧＰＣＲとの複合体形成に関する証拠を示唆も開示も
していない。また、これにより、Ａｎｇ ＩＩによるアンジオテンシン受容体又はＭＣＰ
－１によるＣＣＲ２など、ＧＰＣＲの認識リガンドによる共存ＧＰＣＲの活性化は、ＲＡ
ＧＥ、特にＲＡＧＥの細胞質側テールの活性化を直接的にもたらすであろうことも、いか
なるＲＡＧＥリガンドも不存在での、又はＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド結合外部ドメイン
の存在を実際に必要としない、ＲＡＧＥを介したその後のシグナル伝達の誘導も予想され
るものではない。したがって、ＲＡＧＥの細胞質側テールのリガンド非依存活性化の調節
に、Ａｎｇ ＩＩのＡＴ１Ｒへの結合又はＭＣＰ－１のＣＣＲ２への結合によるものなど
、特定の共存ＧＰＣＲの活性化後に誘導されるシグナル伝達の調節が関与するであろうこ
とは、予想できなかった。
ＲＡＧＥの顕著な特徴の１つは、阻害を受けやすい単一のリガンド及び単一の結合部位
ではなく、外部ドメイン上の複数部位での複数リガンドによる活性化である。ＲＡＧＥは
、終末糖化産物（ＡＧＥ）及び高移動度群ボックス１（ＨＭＧＢ－１）、Ｓ－１００／カ
ルグラニュリン、ＳＡＡ、Ａβ、Ｃ３ａ、ヒートショックプロテイン７０（ＨＳＰ７０）
、母細胞傷害関連糖タンパク質、酸性且つシステイン豊富な分泌タンパク質（ＳＰＡＲＣ
）、β２－インテグリンＭａｃ－１（ＣＤ１１ｂ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、二
本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、リポ多糖（ＬＰＳ）及びタン
パク質過酸化物を含む他の非ＡＧＥリガンドによって活性化され得る。
ＲＡＧＥリガンドによるＲＡＧＥの細胞外ドメインの活性化は、ＮＦκＢの活性化並び
にその後の炎症、酸化ストレス、線維形成及び細胞増殖につながるＮＦκＢ駆動遺伝子発
現を引き起こす（Ｂｉｅｒｈａｕｓ ｅｔ ａｌ．，２００１）。
ＲＡＧＥリガンド誘導性シグナル伝達は、ＲＡＧＥリガンド－受容体相互作用がＮＦκ
Ｂ活性化を介してＲＡＧＥの発現を増加させるポジティブフィードバックループも引き起
こし、それにより後続のＲＡＧＥ誘導性細胞活性化を増強する。実際、本発明者らがＲＡ
ＧＥ発現を強く下方制御することを知っている唯一の手段は、ＲＡＧＥの活性化を低減す
ることである。この状況は、リガンドのレベルが増加すると受容体の発現が低下する低密
度リポタンパク質（ＬＤＬ）受容体などの他の受容体とは対照的である。
重要なことに、本発明者らは、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒ又はＭＣＰ－１によるＣＣ
Ｒ２など、特定の共存ＧＰＣＲの活性化後、いかなるＲＡＧＥリガンド又はＲＡＧＥの細
胞外ドメインからも独立して、ＲＡＧＥの細胞質側テールが活性化され、炎症、酸化スト
レス、線維形成、細胞増殖及び細胞生存に関与する重要な転写因子であるＮＦκＢの活性
化につながる下流シグナル伝達を開始することを示した。ＲＡＧＥ発現の不存在、具体的
にはＲＡＧＥの細胞質側テールにおける重要なドメインの発現の不存在は、ＲＡＧＥの細
胞外ドメインの発現とは独立して、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒ又はＭＣＰ－１によるＣ
ＣＲ２など、共存ＧＰＣＲの活性化後のＮＦκＢ活性化の誘導を防止する。理論に拘束さ
れることを望むものではないが、本発明者らは、ＡＴ１Ｒ及びＣＣＲ２を含む特定の共存
活性化ＧＰＣＲによるＲＡＧＥの細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド非依存性活性化が、
ＲＡＧＥを活性化する支配的経路であると考える。さらに、再び理論に拘束されることを
望むものではないが、本発明者らは、例えば、損傷、ストレス又は低酸素症に曝された細
胞におけるＲＡＧＥのデノボ発現が、確立されたＧＰＣＲシグナル伝達の活性化を介して
発生する炎症促進性シグナル伝達の導管を提供するものと考える。
本発明者らは、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒ又はＭＣＰ－１によるＣＣＲ２など、特定
の共存ＧＰＣＲの活性化後のＲＡＧＥの細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド非依存性活性
化も、ＲＡＧＥ発現を増加させるシグナル伝達を引き起こすことを示した。
ＲＡＧＥは、腫瘍細胞の増殖、移動及び浸潤を含む、腫瘍生物学の多くの側面に関係付
けられている（Ｍａｌｉｋ ｅｔ ａｌ．，２０１５；Ａｂｅ ｅｔ ａｌ．，２００８
）。多くのがんは、より高いレベルのＲＡＧＥを有する（例として、乳がん、結腸がん、
腎臓がん及び胃がんがある；Ｔａｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０００）。ＲＡＧＥは、
肺機能の正常な部分であり、肺細胞が分化して悪性になると失われるため、ＲＡＧＥ発現
が低下する肺がんは、例外である（Ｍａｒｉｎａｋｉｓ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。Ｃ
６神経膠腫細胞では、ＲＡＧＥが遮断された細胞で構成される腫瘍において腫瘍体積が著
しく減少する。対照的に、ＲＡＧＥを過剰発現する腫瘍は、急速に成長し、周囲の組織に
非常に効率的に浸潤した（Ｔａｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０００）。がん処置として
のＲＡＧＥシグナル伝達を遮断するための治療薬の要求は、多形神経膠腫／髄芽腫（Ｔａ
ｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０００）；膵臓がん（Ｍａｌｉｋ ｅｔ ａｌ．，２０１
５；Ｌｅｃｌｅｒｃ ｅｔ ａｌ．，２０１５）；黒色腫（Ｍａｌｉｋ ｅｔ ａｌ．，
２０１５）；前立腺がん（Ｍａｌｉｋ ｅｔ ａｌ．，２０１５）；乳がん（Ｍａｌｉｋ
ｅｔ ａｌ．，２０１５）；肝臓がん／肝がん（Ｌｏｇｓｄｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０
０７；Ｖｏｌｚ ｅｔ ａｌ．，２０１０）；及び結腸がん（Ｓｐａｒｖｅｒｏ ｅｔ
ａｌ．，２００９）を含むが、これらに限定されない多くの一般的ながんに対してなされ
てきた。
ＲＡＧＥ阻害剤がその処置に有用であり得ることを前臨床及び臨床研究が裏付けている
アルツハイマー病を含むがこれに限定されない広範な脳障害に、ＲＡＧＥは関係付けられ
てきた（Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。ＲＡＧＥシグナル伝達が関係する他の脳の
状態には、筋萎縮性側索硬化症（Ｒａｙ ｅｔ ａｌ ２０１６）；ハンチントン病（Ｒ
ａｙ ｅｔ ａｌ ２０１６）；クロイツフェルト・ヤコブ病（Ｒａｙ ｅｔ ａｌ ２
０１６）；糖尿病性神経障害、家族性アミロイド多発性神経障害、シャルコー神経関節症
及び血管炎性神経障害などの神経変性状態（Ｒａｙ ｅｔ ａｌ ２０１６）；神経障害
性疼痛（Ｗａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１６）；神経膠腫の発生及び進行（Ａｎｇｅｌｏｐ
ｏｕｌｏｕ ｅｔ ａｌ．，２０１６）；並びに虚血性脳損傷／脳卒中（Ｘｉａ ｅｔ
ａｌ ２０１０）が含まれるが、これらに限定されない。
健康な状態では、肺のＲＡＧＥの発現は、全ての組織の中で最高である。しかしながら
、肺におけるＲＡＧＥ発現は、通常、１型肺細胞でのみ見られる。肺の他の細胞及び他の
部位におけるＲＡＧＥシグナル伝達の上方制御は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）／肺気
腫（Ｓｕｋｋａｒ ｅｔ ａｌ．，２０１２）；喘息（Ｓｕｋｋａｒ ｅｔ ａｌ．，２
０１２）；喫煙／汚染による負傷；急性肺損傷／急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）（Ｇｕ
ｏ ｅｔ ａｌ．，２０１２）；及び肺線維症を含むが、これらに限定されない広範な肺
障害に関係付けられてきた。
ＲＡＧＥは、多くの炎症性疾患に決定的に関与し、その結果、その処置の潜在的な治療
標的となる。そのような状態には、炎症性関節炎（Ｓｐａｒｖｅｒｏ ｅｔ ａｌ．，２
００９；Ｃｈｕａｈ ｅｔ ａｌ．，２０１３）；変形性関節炎（Ｘｉｅ ｅｔ ａｌ．
，２０１３）；網膜疾患（Ｂａｒｉｌｅ ｅｔ ａｌ．，２００７）；アテローム性動脈
硬化症（Ｓｏｒｏ－Ｐａａｖｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｓｃｈｍｉｄｔ ｅｔ
ａｌ．，１９９９；Ｐａｒｋ ｅｔ ａｌ．，１９９８；Ｚｈｏｕ ｅｔ ａｌ．，２
００３；Ｙａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１０）；血管石灰化（Ｏｔｔ ｅｔ ａｌ．，２０
１４）；心筋症（Ｖｏｌｚ ｅｔ ａｌ．，２０１０；Ｒｕｓｓｏ ｅｔ ａｌ．，２０
１６）；虚血性心疾患／心臓リモデリング／線維症（Ｙａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１０；
Ｒａｍａｓａｍｙ ｅｔ ａｌ．，２０１２）；心不全（Ｒａｍａｓａｍｙ ｅｔ ａｌ
．，２０１２）；糖尿病性及び非糖尿病性腎疾患（Ｆｕｋａｍｉ ｅｔ ａｌ．，２０１
５；Ｇｕｇｌｉｕｃｃｉ ｅｔ ａｌ．，２０１４）；炎症性腸疾患（Ｏｔｔ ｅｔ ａ
ｌ．，２０１４）；子癇前症（Ｄａｆｆｕ ｅｔ ａｌ．，２０１３）；多嚢胞性卵巣症
候群（Ｇａｒｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５）；肝脂肪症、線維症、虚血性及び非虚血性肝
損傷（Ｙａｍａｇｉｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０１５）；脊髄損傷（Ｙａｍａｇｉｓｈｉ
ｅｔ ａｌ．，２０１５）；皮膚の炎症及び老化（Ｔｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４
）；並びに角膜炎（Ｔｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４）が含まれるが、これらに限定さ
れない。
本発明は、ＲＡＧＥが、ＡＴ１Ｒ及びＣＣＲ２を含む特定の共存ＧＰＣＲと共に細胞膜
内に受容体ヘテロマー複合体を形成するという本発明者らによる判定から部分的に生じる
。
さらに、本発明は、ＡＴ１Ｒの形態のアンジオテンシン受容体（この場合、Ａｎｇ Ｉ
Ｉによる）又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体（この場合、ＭＣＰ－１による）
など、特定の共存ＧＰＣＲの活性化がＲＡＧＥの細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド非依
存性活性化を引き起こすという本発明者らによる認識から部分的に生じる。
本発明者らは、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒ又はＭＣＰ－１によるＣＣＲ２など、特定
の共存ＧＰＣＲの活性化が共通のメカニズムを介してＲＡＧＥの細胞質側テールのドメイ
ンの活性化をもたらすことを示した。トランス活性化のこの経路は、ＲＡＧＥリガンドの
遊離を必要としないか、又はＲＡＧＥの細胞外ドメインへの結合を必要としない（すなわ
ち、これは、ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化である）。
ＲＡＧＥの細胞質側テールがリン酸化されていることを示唆する公開されたデータがあ
るが（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０１１）、本発明者らは、Ａｎｇ ＩＩに
よるＡＴ１Ｒ受容体など、特定の共存ＧＰＣＲの活性化後に誘導されるＲＡＧＥリガンド
非依存性シグナル伝達が、ＲＡＧＥの細胞質側テールがセリン３９１又はＲＡＧＥの細胞
質側テールの他の部位でリン酸化されることを必要としないことを示した。さらに、本発
明者らは、他の哺乳類からのＲＡＧＥホモログやリン酸化を維持できるいかなる残基も有
しないＲＡＧＥ変異体も、ＲＡＧＥのリガンド依存性活性化及びＲＡＧＥリガンド非依存
性活性化に応答して活性化され、シグナル伝達を誘導することができることから、ＲＡＧ
Ｅの細胞外ドメインへのＲＡＧＥリガンド（例えば、Ｓ１００Ａ８／Ａ９など）結合後に
誘導されるＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達が、細胞質側テールがセリン３９１又は
ＲＡＧＥの細胞質側テールの他の部位でリン酸化されることを必ずしも必要とするもので
はないことも示した。さらに、ＲＡＧＥのＮ末端トランケート型構築物（例えば、Ｓ３９
１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４）の阻害機能は、ＲＡＧＥリン酸化のターゲットの非存在
下でも維持され、これにより、本発明者らによって説明されたＲＡＧＥ構築物の調節効果
がＲＡＧＥのリン酸化に依存しないことが確認される。
従来技術は、ＰＫＣζの阻害剤が、ＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド依存性（例えば
、ｓ１００誘導性）シグナル伝達及び他の多くのＰＫＣζ依存性経路を阻害することを実
証している。ヒト及び動物では、ＰＫＣζの遺伝的欠失により重篤な疾患が生じる。研究
者らは、ＰＫＣζの阻害剤が、全長型ＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド非依存性（すな
わちトランス活性化誘導）シグナル伝達も阻害することを示した。しかしながら、ＲＡＧ
ＥのＮ末端トランケート型構築物（例えば、ＲＡＧＥ３６２－４０４）の調節機能は、Ｐ
ＫＣζの阻害に影響されず、このことにより、本発明者らによって説明されたＲＡＧＥ構
築物の調節効果がＰＫＣζに依存しないことが確認される。
ＲＡＧＥ活性化に続いて誘導される共有経路の阻害剤（例えば、ｍｙＤ８８、ＴＩＲＡ
Ｐ、インターロイキン－１受容体関連キナーゼ４（ＩＲＡＫ４）又はＮＦκＢ）は、ＲＡ
ＧＥリガンド依存性（例えば、ｓ１００誘導性）及びＲＡＧＥリガンド非依存性（すなわ
ちトランス活性化誘導性）の両方のＲＡＧＥを介したシグナル伝達を非特異的に遮断する
。他の受容体（例えば、ＴＬＲ）もこれらのシグナル伝達分子／経路を使用するため、こ
れらのメディエーターのいずれかの阻害は、ＲＡＧＥシグナル伝達に特異的ではなく、こ
れらのシグナル伝達メディエーターの他の多くの機能に影響を与え、これは、ヒトの健康
に有害であり得る（例えば、ｍｙＤ８８、ＴＩＲＡＰ、ＩＲＡＫ４又はＮＦκＢの遺伝子
欠失は、ＲＡＧＥ欠失と異なり、ヒト及び動物に有害である）。
本発明者らは、さらに、ＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達の阻害などの選択的調
節が、ＲＡＧＥの細胞質側テールを介したシグナル伝達を選択的に標的化することによっ
て達成できることを示し、本発明者らのアッセイ及びそこから同定されたモジュレーター
が、このトランス活性化（ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化）プロセスに作用
することを示した。
本発明者らは、さらに、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化及びＲＡＧＥシグナ
ル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性トランス活性化の二重阻害も、ＲＡＧＥの細胞質側テ
ールを介して媒介されるシグナル伝達を選択的に標的化することで達成できることを示し
、本発明者らのアッセイ及びそこから同定されたモジュレーターが、共有メディエーター
によるＲＡＧＥ活性化の両方の方式に同時に作用することができることを示した。これは
、可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１、ＲＡＧＥ中和抗体及びＲＡＧＥの細胞外ドメインに選択
的に結合してＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のみを阻害する可能性のある低分
子とは直接区別される。
本発明者らは、さらに、ＲＡＧＥの細胞質側テールを介して媒介されるシグナル伝達を
選択的に標的化することによる、ＲＡＧＥシグナル伝達のＲＡＧＥリガンド依存性シグナ
ル伝達及び／又はＲＡＧＥリガンド非依存性トランス活性化の調節が、従来技術（Ｍａｎ
ｉｇｒａｓｓｏ，Ｍ．Ｂ．，ｅｔ ａｌ ２０１６）が示唆するリガンド依存性ＲＡＧＥ
活性化のモジュレーターである可能性があるＤｉａｐｈａｎｏｕｓ－１（Ｄｉａｐｈ１）
とＲＡＧＥとの相互作用を調節することなく達成することができることを示した。さらに
、ＲＡＧＥのＮ末端トランケート型構築物（例えば、ＲＡＧＥ３６２－４０４）の調節機
能は、Ｄｉａｐｈ１の非存在下で維持され、これにより、本発明者らによって説明された
ＲＡＧＥ構築物の調節効果がＤｉａｐｈ１に依存しないことが確認される。
Ｓａｋａｇｕｃｈｉ及び共同研究者は、細胞がＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ１１、Ｓ
１００Ａ１２、ＨＭＧＢ１又はＡＧＥで処置された場合、一般的な炎症促進性アダプター
タンパク質ＴＩＲＡＰ、ＭｙＤ８８及びＩＲＡＫが、主にＨＥＫ２９３細胞で過剰発現し
たＲＡＧＥと共沈し、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存活性化をもたらすことを見出した
。ＴＩＲＡＰ、ＭｙＤ８８及びＩＲＡＫは、ＮＦκＢの転写を活性化するＴＬＲ－３を除
く全てのｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）のアダプタータンパク質としても機能するため、こ
れらの相互作用は、ＲＡＧＥに特異的ではない。
この研究に続き、同グループは、Ｓ３９１Ｅ－ＲＡＧＥ３８７－３９５（ＲＡＧＥ（Ｅ
）－Ｉ）を、ＲＡＧＥのリン酸化状態を模倣し、アダプタータンパク質ＴＩＲＡＰを隔離
することにより、内因性ＲＡＧＥシグナル伝達を防止することを介した、ＲＡＧＥリガン
ド依存性シグナル伝達の特定の側面（すなわちアポトーシス、細胞移動及び浸潤の阻害）
の阻害剤として提案する研究を発表した（Ｐｕｔｒａｎｔｏ ｅｔ ａｌ．，２０１３）
。しかしながら、本発明者らは、リン酸化がＲＡＧＥ活性化に必要でないことを示した。
さらに、これらの一般的なアダプタータンパク質を隔離することは、ＴＬＲ（例えば、Ｔ
ＬＲ－２及びＴＬＲ－４）を介したシグナル伝達にも影響を及ぼし、その一部は、ＲＡＧ
Ｅリガンド（例えば、ｓ１００タンパク質）によっても活性化される可能性があり、これ
は、Ｐｕｒａｎｔｏらの発見を説明するようである。同じ実験で、Ｐｕｒａｎｔｏらは、
Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３８７－３９５が、ＴＩＲＡＰへの認識できるほどの結合を示さず
、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ｂによって誘導されるアポトーシスを減衰させなかったため
、適切な阻害剤でないことも主張した（Ｐｕｔｒａｎｔｏ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。
Ｐｕｒａｎｔｏらは、細胞内アデノシン三リン酸含有量を決定することにより評価される
ように、Ｕ－８７ＭＧ細胞の成長が有意に影響を受けなかったため、Ｓ３９１Ｅ－ＲＡＧ
Ｅ３８７－３９５が全てのＲＡＧＥリガンド誘導性シグナル伝達経路を阻害しなかったこ
とにも注目した（Ｐｕｔｒａｎｔｏ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。したがって、Ｐｕｔｒ
ａｎｔｏ及び共同研究者によって推定的に阻害されたＲＡＧＥリガンド依存性経路及びＰ
ｕｒａｎｔｏらが利用したＲＡＧＥの細胞質側テールの断片は、本発明の主題である、共
存活性化ＧＰＣＲ及びモジュレーターによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化
と明らかに異なる。実際、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３８７－３９５に関するＰｕｒａｎｔｏ
らの否定的な知見は、本発明から遠ざかることを教示している。Ｐｕｔｒａｎｔｏ ｅｔ
ａｌは、この刊行物のいずれの点においても、共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥの細胞質側
テールのＲＡＧＥリガンド非依存性活性化を企図していない。
欧州特許出願公開第１４１５９９７－Ａ１号明細書は、ＲＡＧＥの細胞質側テールに直
接的又は間接的に結合し、それにより、リガンドのＲＡＧＥへの結合から生じるシグナル
伝達及びその後のＮＦκＢの活性化と、その活性化から生じる下流経路とを阻害又は増強
するポリペプチドの同定及び使用を詳述している。本発明は、多くの点でこの教示と異な
る。第一に、この教示は、ＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達又は
ＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達とＲＡＧＥリガンド非依存性シグ
ナル伝達との二重阻害を企図するものではない。第二に、欧州特許出願公開第１４１５９
９７ Ａ１号明細書の特許請求の範囲は、ＲＡＧＥの細胞質側テールの未同定要素に結合
するためのポリペプチドの使用に関する。対照的に、本発明者らは、ＲＡＧＥの細胞質側
テールをコードするポリペプチド及びその変異型が、ＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド
非依存性シグナル伝達又はＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達及びＲ
ＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達と関連するシグナル伝達分子を選択的に結合するた
めに使用することができ、その後のＮＦκＢの活性化と、その活性化から生じる下流経路
との調節を導くことを実証した。第三に、本発明者らは、ＲＡＧＥの細胞質側テールの重
要な要素を含有する選択的に修飾されたポリペプチドを使用して、ＲＡＧＥを介してＲＡ
ＧＥリガンド非依存性シグナル伝達を調節する能力を実証した。第四に、ＲＡＧＥを介し
たＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達の調節は、欧州特許出願公開第１４１５９９７－
Ａ１号明細書に示されていない。さらに、欧州特許第１４１５９９７－Ａ１号明細書で具
体的に同定されたＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達を調節できる唯一のポリペプチド
は、全長型ＲＡＧＥの周知の結合パートナー及びシグナル伝達メディエーターであるＰＫ
Ｃζである。本発明者らは、ＰＫＣζがそれらのモジュレーターの作用に必要でないこと
を示している。
ＲＡＧＥは、ＣｐＧ－ＤＮＡの結合後、サイトゾル残基Ｋ３７４でＦ－ｂｏｘタンパク
質ＦＢＸＯ１０によってモノユビキチン化され、そのエンドサイトーシス及びリソソーム
媒介分解を引き起こす（Ｅｖａｎｋｏｖｉｃｈ ｅｔ ａｌ．２０１７）。エンドサイト
ーシス及び／又はＲＡＧＥのユビキチン化は、他の炎症促進性ＲＡＧＥリガンドでは観察
されていない。
ＲＡＧＥのユビキチン化は、Ｓ３９１に部分的に依存しており、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ
変異体は、ＦＢＸＯ１０過剰発現後のユビキチン化及びその後の分解に対して部分的に耐
性がある。
これらのデータは、Ｋ３７４Ｒ及びＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異体が特定の状況下でユビ
キチン化に耐性を有し得、それにより野生型ＲＡＧＥよりも高いレベルで蓄積できること
を示唆している。しかしながら、この潜在的に増加した分解に対する安定性／耐性は、以
下に詳述するように、共存ＧＰＣＲの活性化後のＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活
性化の急速な調節及び１０００倍過剰に送達される野生型ＲＡＧＥの存在下でもＳ３９１
Ａ－ＲＡＧＥ変異体によって達成されるＲＡＧＥシグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存
性活性化の阻害を説明することができず、この調節は、Ｋ３７４の存在下及び非存在下で
同様に発生するものでもない。
本発明の以下の説明の普遍性を制限するものではないが、本発明者らは、Ａｎｇ ＩＩ
などによるＡＴ１Ｒ又はＭＣＰ－１などによるＣＣＲ２など、特定の共存ＧＰＣＲの活性
化がＲＡＧＥの共存細胞質側テールの活性化を引き起こすことを実証した。この活性化は
、ＲＡＧＥの細胞外ドメインの非存在下で起こり、したがってＲＡＧＥリガンド又はＲＡ
ＧＥの細胞外ドメインとのそれらの相互作用とは完全に独立している。理論に拘束される
ことを望むものではないが、本発明者らは、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥのこのト
ランス活性化がＲＡＧＥ活性化の主要なメカニズムを表すと考える。この前提と一致して
、本発明者らは、ＲＡＧＥ－リガンド依存性シグナル伝達が完全に不存在のままであって
も、ＡＧＥＲ／ａｐｏＥダブルＫＯ（ＤＫＯ）マウスにおけるＲＡＧＥリガンド非依存性
ＲＡＧＥシグナル伝達の選択的回復が、ＲＡＧＥに富むａｐｏＥ－ＫＯマウスで観察され
たものと有意に異ならないレベルにアテローム形成を回復することを実証した。
ＡＴ１Ｒの活性化によって誘導される有害なシグナル伝達事象の多くは、ＲＡＧＥ発現
が不存在である場合（例えば、遺伝子の欠失若しくはサイレンシング、又はＲＡＧＥを発
現しない健康な細胞内、又は活性化ＡＴ１ＲによるＲＡＧＥのリガンド非依存性活性化が
防止又は阻害される場合）に減衰する。
同時に、ＡＴ１Ｒアンタゴニストによって阻害されるイノシトールリン酸及びカルシウ
ム流入の誘導につながるＡＴ１Ｒ活性化によって誘導されるＧｑシグナル伝達経路などの
ＲＡＧＥ非依存性ＡＴ１Ｒシグナル伝達経路は、ＲＡＧＥ欠失、ＲＡＧＥ発現のサイレン
シング又はＲＡＧＥ機能の阻害の影響を受けない。
そのため、ＡＴ１Ｒ又はＣＣＲ２などの特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧ
Ｅリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の調節、特に阻害は、共存ＧＰＣＲの活性化後にＲ
ＡＧＥを介して誘導される病原性シグナル伝達を標的とした治療的介入に特定の利点を提
供する。例えば、そのようなモジュレーターは、特定の実施形態において、血圧調節を損
なうことなく、又はＲＡＡＳ阻害剤の使用を制限するＡＴ１Ｒ阻害後に起こるものなどの
ＡＴ１Ｒ阻害からのフィードバック「回避」を誘導することなく、ＡＴ１Ｒの有害効果の
積極的な標的化を可能にする。そのようなモジュレーターは、このトランス活性化経路が
構成的に活性化されるか（例えば、白血球、内皮細胞）又は誘導された（例えば、炎症及
び損傷の部位）細胞及び組織にのみ影響し得、ＲＡＧＥも発現しない細胞（例えば、健常
平滑筋細胞）におけるＲＡＡＳ及び他のＧＰＣＲ媒介シグナル伝達を影響されないままと
する。
ＡＴ１Ｒの活性化は、血行動態効果及び非血行動態効果の両方を有する。血行動態効果
とは、血流の変化につながるものであり、血液量、血圧、流量又は速度、抵抗、心拍出量
、乱流及び壁張力の変化が含まれる。ＡＴ１Ｒブロッカー（阻害剤）は、血行動態（例え
ば、血圧を下げる、抵抗力及び心拍出量を変える）及び非血行動態効果（例えば、酸化ス
トレス及び炎症を引き起こす）の両方を示すことができる。ＲＡＡＳが活性化した状態（
例えば、心疾患、腎疾患、高血圧）では、血行動態と非血行動態との両方の経路が活性化
される。
活性化ＡＴ１ＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化は、ＡＴ１Ｒ活性化
の非血行動態（非血流効果）のみのメディエーターである。本発明者らは、ＲＡＧＥの全
体的な遺伝子欠失が直接的な血行動態効果を有さず（例えば、血圧、血管抵抗又は血流、
血液量に影響を及ぼさない）、ＡＴ１Ｒ活性化又は阻害の血行動態効果を変化させないこ
とを観察した。活性化ＡＴ１ＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を標的
とする主な利点は、それにより、有害な血行動態の効果により前記処置が安全でなくなる
前にどの程度血圧低下が可能かを制限する血圧調節の制約に制限されないことである。
さらに、血流の変化は、自動的にフィードバック（恒常性）応答を引き起こし、血流を
一定レベルに維持する。これらのフィードバック応答は、ＡＴ１Ｒ阻害又はアンジオテン
シン変換酵素（ＡＣＥ）の阻害によるＲＡＡＳの阻害の血行動態効果を相殺又は回避する
ように作用する。対照的に、ＡＴ１Ｒなどの活性化アンジオテンシン受容体によるＲＡＧ
Ｅリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害を介して達成されるＲＡＡＳの活性化後に誘
導される非血行動態経路の選択的阻害は、フィードバック／回避応答に関連しない。その
ようなフィードバック応答の欠如は、そのような阻害の耐久性及び有効性を裏付ける。
＜活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュ
レーター＞
一形態において、本発明は、ＲＡＧＥ活性のモジュレーターを含み、そのようなＲＡＧ
Ｅ活性は、特定の活性な共存ＧＰＣＲによって誘導される。
一形態において、本発明は、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド
非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターを含む。
一形態において、本発明は、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによって誘導されるＲＡ
ＧＥ依存性シグナル伝達のモジュレーターであるモジュレーターを含む。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥリガンドの非存在下で作用する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの切断された外部ドメインの存在下で
作用する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、長さが４０アミノ酸以下、２０アミノ酸以下、
１０アミノ酸以下又は５アミノ酸以下である、ＲＡＧＥの切断された外部ドメインの存在
下で作用する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、長さが５アミノ酸超、１０アミノ酸超又は２０
アミノ酸超である、ＲＡＧＥの膜貫通ドメインの類似体、断片又は誘導体にコンジュゲー
トされたＲＡＧＥの細胞外ドメイン全体を含有する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド結合外部ドメイン
の非存在下で作用する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの細胞外ドメインを含有しない。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの細胞外ドメインの類似体、断片又は
誘導体を含有しない。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片を含有する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、長さが４０アミノ酸以下、２０アミノ酸以下、
１０アミノ酸以下又は５アミノ酸以下であるＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片を含有する
。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの細胞外ドメインに結合しない。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、活性化された共存ＧＰＣＲによって誘導される
ＲＡＧＥのＣ末端細胞質側テールを介して発生するシグナル伝達を阻害又は促進する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥのＣ末端細胞質側テールに発生する結
合を阻害する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメインと特定のＧＰＣＲと
の間の相互作用を阻害又は促進する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメインと特定のＧＰＣＲと
の相互作用を阻害する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン及び特定のＧＰＣＲ
の近接性に依存するＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を調節する活性化ＧＰＣＲの能力を阻害
又は促進する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン及び特定のＧＰＣＲ
の近接性に依存するＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を調節する活性化ＧＰＣＲの能力を阻害
する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン及び特定のＧＰＣＲ
の近接性に依存するＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を調節する活性化ＧＰＣＲの能力を阻害
又は促進し、且つ活性化された共存ＧＰＣＲによって誘導されるＲＡＧＥのＣ末端細胞質
側テールを介して発生するシグナル伝達を阻害又は促進する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン及び特定のＧＰＣＲ
の近接性に依存するＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を調節する活性化ＧＰＣＲの能力を阻害
し、且つ活性化された共存ＧＰＣＲによって誘導されるＲＡＧＥのＣ末端細胞質側テール
を介して発生するシグナル伝達を阻害する。
本明細書全体を通して、文脈がそうでないことを要しない限り、共存ＧＰＣＲは、内因
的に又は形質導入の結果として、ＲＡＧＥと同じ細胞で共発現するＧタンパク質共役型受
容体スーパーファミリーのメンバー（ＧＰＣＲ；７回膜貫通ドメイン受容体、７ＴＭ受容
体、ヘプタヘリカル受容体、セルペンチン受容体及びＧタンパク質連結受容体としても知
られる；他のいくつかの７ＴＭタンパク質は、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１３７、ＯＲ５１Ｅ
１、ＴＰＲＡ１、ＧＰＲ１４３及びＧＰＲ１５７を含む、Ｇタンパク質共役型受容体スー
パーファミリーのメンバーとして分類されている）を意味する。このスーパーファミリー
の全てのメンバーがＧタンパク質に共役するわけではなく、これに関連して、ＧＰＣＲと
いう用語には、Ｇタンパク質に共役しないスーパーファミリーのメンバーが含まれること
に注意されたい。同一細胞での共発現は、共免疫沈降、生物発光共鳴エネルギー移動（Ｂ
ＲＥＴ）、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）及び顕微鏡検査を含む、当業者に知られ
ている多くの技術によって実証され得る。共存ＧＰＣＲは、好ましくは、ＧＰＣＲとＲＡ
ＧＥとの間で機能的相互作用が生じるようにＲＡＧＥに十分に近接したＧＰＣＲである。
さらにより好ましくは、共存ＧＰＣＲは、適切な近接アッセイがこの近接を検出できるほ
どＲＡＧＥに十分に近接したＧＰＣＲである。適切な近接アッセイの例は、ＢＲＥＴ、Ｆ
ＲＥＴ、酵素断片補完、スプリットルシフェラーゼ補完、スプリットフルオロフォア補完
、ＴＡＮＧＯアッセイ、ＮａｎｏＬｕｃ Ｂｉｎａｒｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｎａｎ
ｏＢＩＴ）アッセイ、近接性ライゲーションアッセイ（ＰＬＡ）又はこれらのタンパク質
の１つ以上がアッセイの使用を容易にするために標識又はタグ付けされているかどうかに
かかわらず、２つのタンパク質の近接性を検出できる他の任意の近接性アッセイである。
そのような近接性アッセイは、異なる方法で構成でき、受容体－ヘテロマー調査技術（Ｒ
ｅｃｅｐｔｏｒ－ＨＩＴ）の構成及びその派生は、そのような近接性アッセイの好ましい
構成である（国際公開第２００８／０５５３１３号パンフレット；Ｊａｅｇｅｒ ｅｔ
ａｌ．，２０１４）。
本明細書全体を通して、文脈がそうでないことを要しない限り、活性化されたＧＰＣＲ
は、アゴニスト、部分アゴニスト及び／若しくはアロステリックモジュレーターの結合か
ら生じ得、且つ／又はリガンド結合を必要としない構成的活性の結果としての活性状態に
あるＧＰＣＲを意味する。
本明細書全体を通して、文脈がそうでないことを要しない限り、本発明の特定の活性化
された共存ＧＰＣＲは、ＲＡＧＥと同じ細胞で発現され、ＲＡＧＥ活性化の調節及び／又
はＲＡＧＥ依存性シグナル伝達の誘導の調節を示すＲＡＧＥへの影響が、特定の共存ＧＰ
ＣＲの認識リガンドによる活性化時又はＧＰＣＲが構成的に活性である場合に検出される
、ＧＰＣＲである。
一実施形態では、ＲＡＧＥ活性化の調節を示すＲＡＧＥへの影響は、共存ＧＰＣＲの認
識リガンドの付加時に生物発光共鳴エネルギー移動（ＢＲＥＴ）を使用して、ルシフェラ
ーゼコンジュゲートＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８など）の、フルオロフォアで標識さ
れたＲａｂ１、Ｒａｂ４、Ｒａｂ５、Ｒａｂ６、Ｒａｂ７、Ｒａｂ８、Ｒａｂ９及び／又
はＲａｂ１１などのＲａｂ（Ｖｅｎｕｓ－Ｒａｂ１、Ｖｅｎｕｓ－Ｒａｂ４、Ｖｅｎｕｓ
－Ｒａｂ５、Ｖｅｎｕｓ－Ｒａｂ６、Ｖｅｎｕｓ－Ｒａｂ７、Ｖｅｎｕｓ－Ｒａｂ８、Ｖ
ｅｎｕｓ－Ｒａｂ９及び／又はＶｅｎｕｓ－Ｒａｂ１１など）などの細胞内コンパートメ
ントマーカー及び／又はＫ－ｒａｓ（Ｖｅｎｕｓ－Ｋ－ｒａｓなど）のフルオロフォアコ
ンジュゲート断片などの原形質膜マーカーへの近接性の変化によって検出されるものなど
の細胞内輸送の変化である（Ｔｉｕｌｐａｋｏｖ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
別の実施形態では、ＲＡＧＥに対する効果は、ルシフェラーゼコンジュゲートＲＡＧＥ
（ＲＡＧＥ－Ｒｌｕｃ８など）の、ＩＱＧＡＰ－１、プロテインキナーゼＣゼータ（ＰＫ
Ｃζ）、Ｄｏｃｋ７、ＭｙＤ８８、ＴＩＲＡＰ、ＥＲＫ１／２（Ｊｕｌｅｓ ｅｔ ａｌ
．，２０１３；Ｒａｍａｓａｍｙ ｅｔ ａｌ．，２０１６）、嗅覚受容体２Ｔ２、ＡＤ
Ｐ／ＡＴＰトランスロカーゼ２、プロテインホスファターゼ１Ｇ、細胞間接着分子１、タ
ンパク質ＤＪ－１（ＰＡＲＫ７）、カルポニン－３、ドレブリン、フィラミンＢ、Ｒａｓ
関連タンパク質Ｒａｂ－１３、ラディキシン／エズリン／モエシン、プロテオリピドタン
パク質２、コロニン、Ｓ１００ Ａ１１、サクシニル－ＣｏＡリガーゼ［ＧＤＰ形成］サ
ブユニットα、Ｈｓｃ７０相互作用タンパク質、アポトーシス阻害剤５、ニューロピリン
、切断刺激因子、成長因子受容体結合タンパク質２、ｓｅｃ６１βサブユニット又はＮｃ
ｋ１など、ＲＡＧＥの細胞質側テールと相互作用するフルオロフォア標識タンパク質など
のＲＡＧＥ相互作用群への近接性の変化によって検出されるものなど、ＲＡＧＥ依存性シ
グナル伝達の変化である。
別の実施形態において、ＲＡＧＥに対する効果は、以下の１つ以上によって測定される
認識リガンドによる特定の共存ＧＰＣＲの活性化時のＮＦκＢの標準的活性化の変化によ
り検出されるものなど、ＲＡＧＥ依存性シグナル伝達の変化である。
・ＧＳＴ－ＩκＢαなどの基質のインビトロでのリン酸化をモニタリングすることによ
るＩｋＢキナーゼ（ＩＫＫ）の活性；
・ＩκＢ及び／又はＩκＢ－αのリン酸化／ユビキチン化及び／又は分解を含む、Ｉｋ
Ｂ分解動態の検出；
・抗体、ゲルシフト、ＥＭＳＡ及び／又は質量分析の使用などによるｐ６５（Ｒｅｌ－
Ａ）のリン酸化／ユビキチン化の検出；
・ｐ６５／ホスホｐ６５などのＮＦκＢ成分／サブユニットのサイトゾルから核への輸
送／転移の検出；
・ＮＦκＢサブユニットの二量体化／複合体形成の検出；
・電気泳動移動度シフトアッセイ又はゲルシフトアッセイ、ＳＥＬＥＸ、タンパク質結
合マイクロアレイ又は配列に基づくアプローチの使用などによる、ＮＦκＢ応答要素／コ
ンセンサスＮＦκＢ結合モチーフを含む固定化ＤＮＡ配列／オリゴヌクレオチドへの結合
による活性ＮＦκＢ成分／サブユニットの検出；
・特定の遺伝子のプロモーター及びエンハンサーへの、ＤＮＡへのＮＦκＢのインサイ
チュー結合を検出するクロマチン免疫沈降（ＣｈＩＰ）アッセイ；
・ＮＦκＢキナーゼ活性に対するインビトロキナーゼアッセイ；
・プラスミド形質導入、レポーター細胞株、ミニサークル、レトロウイルス又はレンチ
ウイルスなどのアプローチを使用した、ＬａｃＺ Ｆｌｕｃ、ｅＧＦＰ ＳＥＡＰ及びＮ
Ｆ－ｇｌｕｃなどのレポーター構築物の導入遺伝子発現を介したＮＦκＢレポーターアッ
セイを使用したＮＦκＢ転写活性の測定；
・サイトカイン、成長因子、接着分子及びリアルタイムＰＣＲによるミトコンドリア抗
アポトーシス遺伝子、タンパク質又は機能的アッセイなど、ＮＦκＢの下流標的の発現の
変化の測定（ＮＦκＢの多面的性質は、現在およそ５００個の転写標的に反映されている
ことに注意されたい（２０１７年８月２日時点のｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｕ．ｅｄｕ／
ｎｆ－ｋｂ／ｇｅｎｅ－ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ／ｔａｒｇｅｔ－ｇｅｎｅｓ／を参照された
い））；及び
・Ｔ細胞でのＰＯＬＫＡＤＯＴＳ、内皮細胞での接着、白血球での活性化又は腫瘍形成
など、ＮＦκＢ依存性シグナル伝達によって誘導される機能又は構造の変化の測定。
別の実施形態では、ＲＡＧＥに対する効果は、以下の１つ以上を測定することによりＮ
ＦκＢの非標準的な活性化の変化によって検出されるものなど、ＲＡＧＥシグナル伝達の
変化である。
・ＮＩＫ（ＮＦκＢ誘導キナーゼ）の検出；
・ＩＫＫαの活性化／リン酸化の検出；
・キナーゼアッセイを実行することによる、基質を自己リン酸化又はリン酸化する能力
によるＮＩＫキナーゼ活性の検出；
・ｐ５２／ＲｅｌＢなどのｐ５２含有ＮＦκＢダイマーの生成；
・ホスホＮＦκＢ２ｐ１００（Ｓｅｒ８６６／８７０）の検出；
・前駆体ｐ１００のｐ５２への部分的分解（処理と呼ばれる）の検出；
・核へのｐ５２／ＲｅｌＢ転移の検出；
・ＮＦκＢ部位へのｐ５２／ＲｅｌＢ結合の検出；
・プラスミド形質導入、レポーター細胞株、ミニサークル、レトロウイルス又はレンチ
ウイルスなどのアプローチを使用した、ＬａｃＺ Ｆｌｕｃ、ｅＧＦＰ ＳＥＡＰ、ＮＦ
－ｇｌｕｃなどのレポーター構築物の導入遺伝子発現を介したＮＦκＢレポーターアッセ
イを使用したＮＦκＢ転写活性の測定；及び
・リアルタイムＰＣＲ、タンパク質発現又はＣＸＣＬ１２など、機能的アッセイによる
ＮＦκＢの非標準シグナル伝達の下流標的の発現の変化の測定。
＜共存ＧＰＣＲ＞
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＲＡＧＥと同じ細胞で
発現され、且つＲＡＧＥ関連障害に関連付けられるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＲＡＧＥと同じ細胞で
発現され、ＲＡＧＥ関連障害に関連付けられ、且つそれらの除去及び／又は阻害によりＲ
ＡＧＥ関連障害の軽減又は緩和がもたらされるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、炎症に関係付けられる
ＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、炎症に関係付けられ、
且つそれらの除去及び／又は阻害により炎症の軽減又は緩和がもたらされるＧＰＣＲであ
る。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、細胞増殖に関係付けら
れるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、細胞増殖に関係付けら
れ、且つそれらの除去及び／又は阻害により細胞増殖の軽減又は緩和がもたらされるＧＰ
ＣＲである。
実際、多くのＧＰＣＲがある程度炎症に関与している証拠があり、これらのレベルは、
証拠のレベルに応じて区別することができる。
１ － 現在までに証拠が発見されなかった；
２ － 受容体構造又は受容体内のモチーフは、既知の炎症／免疫受容体又は炎症／免
疫プロセスに関与するモチーフと類似している；
３ － 受容体は、炎症／免疫プロセスを媒介するリガンドに結合する；
４ － 受容体は、炎症性疾患／免疫疾患に関連付けられる／関与する；
５ － 炎症／免疫プロセスにおける受容体の直接的な関与について記述した少なくと
も１つの論文；
６ － 受容体は、炎症／免疫細胞で発現する；及び
７ － 炎症／免疫プロセスにおける受容体の関与が十分に特徴付けられている（ｈｔ
ｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｕｉｄｅｔｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ｏｒｇデータベースに記
載されている通り）。
ファミリーＡのＧＰＣＲ（嗅覚、鋤鼻、オプシンを除く）と、その炎症への関与の現在の
証拠レベル（上記キーを参照されたい）：
ファミリーＡ嗅覚ＧＰＣＲと、その炎症への関与の現在の証拠レベル（上記キーを参照さ
れたい）：
ファミリーＡ鋤鼻及びオプシンＧＰＣＲと、その炎症への関与の現在の証拠レベル（上記
キーを参照されたい）：
ファミリーＢのＧＰＣＲと、その炎症への関与の現在の証拠レベル（上記キーを参照され
たい）：
ファミリーＣのＧＰＣＲと、その炎症への関与の現在の証拠レベル（上記キーを参照され
たい）：
ＦｒｉｚｚｌｅｄファミリーＧＰＣＲと、その炎症への関与の現在の証拠レベル（上記キ
ーを参照されたい）：
ＧＰＣＲスーパーファミリーのメンバーとして分類されている他の７ＴＭタンパク質と、
その炎症への関与の現在の証拠レベル（上記キーを参照されたい）：
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：：ＡＤＧＲＡ２、
ＡＤＧＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＦ３、ＡＤＧＲＧ４、ＡＤＧＲＶ１、ＣＥＬＳＲ
１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ３、ＯＸ１受容体、ＯＸ２受容体、ＰＴＨ１受容体、ＰＴ
Ｈ２受容体、ＡＭＹ１受容体、ＡＭＹ２受容体、ＡＭＹ３受容体、ＡＭ１受容体、ＡＭ２
受容体、ＧＰＲ６３、ＧＰＲ７５、ＮＭＵ２受容体、ＯＰＮ５、Ｖ１Ｂ受容体、ｙ６受容
体、５－ＨＴ４受容体、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、Ｇ
ＰＲ１４１、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５０、ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５７
、ＧＰＲ１９、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ３７、ＧＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ５０、ＧＰＲ６２、Ｌ
ＧＲ５、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、ＮＴＳ２受容体、ＯＰＮ４、ＯＰＮ４、ＯＲ１０
Ａ７、ＯＲ１０ＡＧ１、ＯＲ１０Ｑ１、ＯＲ１０Ｗ１、ＯＲ１２Ｄ３、ＯＲ１３Ｃ２、Ｏ
Ｒ１３Ｃ３、ＯＲ１３Ｃ４、ＯＲ１３Ｃ５、ＯＲ１３Ｃ８、ＯＲ１３Ｆ１、ＯＲ１３Ｇ１
、ＯＲ１Ａ２、ＯＲ１Ｌ１、ＯＲ１Ｓ１、ＯＲ１Ｓ２、ＯＲ２ＡＫ２、ＯＲ２Ｄ２、ＯＲ
２Ｄ３、ＯＲ４Ａ１５、ＯＲ４Ｃ１１、ＯＲ４Ｃ１２、ＯＲ４Ｃ１３、ＯＲ４Ｃ１５、Ｏ
Ｒ４Ｃ１６、ＯＲ４Ｋ１３、ＯＲ４Ｋ１４、ＯＲ４Ｋ１５、ＯＲ４Ｋ１７、ＯＲ４Ｎ５、
ＯＲ５ＡＣ２、ＯＲ５ＡＫ２、ＯＲ５ＡＰ２、ＯＲ５ＡＲ１、ＯＲ５ＡＳ１、ＯＲ５Ｂ１
２、ＯＲ５Ｂ１７、ＯＲ５Ｂ２、ＯＲ５Ｂ２１、ＯＲ５Ｂ３、ＯＲ５Ｄ１３、ＯＲ５Ｄ１
４、ＯＲ５Ｄ１６、ＯＲ５Ｄ１８、ＯＲ５Ｆ１、ＯＲ５Ｉ１、ＯＲ５Ｊ２、ＯＲ５Ｋ３、
ＯＲ５Ｌ１、ＯＲ５Ｌ２、ＯＲ５Ｍ１、ＯＲ５Ｍ１０、ＯＲ５Ｍ１１、ＯＲ５Ｍ３、ＯＲ
５Ｍ８、ＯＲ５Ｍ９、ＯＲ５Ｒ１、ＯＲ５Ｔ１、ＯＲ５Ｔ２、ＯＲ５Ｔ３、ＯＲ５Ｗ２、
ＯＲ６Ｃ７４、ＯＲ６Ｋ６、ＯＲ６Ｍ１、ＯＲ６Ｑ１、ＯＲ６Ｘ１、ＯＲ８Ｈ１、ＯＲ８
Ｈ２、ＯＲ８Ｈ３、ＯＲ８Ｊ１、ＯＲ８Ｊ３、ＯＲ８Ｋ１、ＯＲ８Ｋ３、ＯＲ８Ｋ５、Ｏ
Ｒ８Ｕ１、ＯＲ８Ｕ８、ＯＲ９Ａ４、ＯＲ９Ｇ１、ＯＲ９Ｇ４、ＯＲ９Ｇ９、ＯＲ９Ｑ２
、ＴＡＡＲ３、ＴＰＲＡ１、Ｙ４受容体、５－ＨＴ１Ｄ受容体、５－ＨＴ１Ｅ受容体、Ａ
ＤＧＲＢ１、ＡＴ２受容体、ＢＢ１受容体、ＢＢ３受容体、ＣＧＲＰ受容体、ＣＲＦ１受
容体、ＣＲＦ２受容体、ＥＴＡ受容体、ＥＴＢ受容体、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ７、
ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＡＢ受容体、ＧＡＢＡＢ１、ＧＡＢＡＢ２、ＧＡＬ１受容体
、ＧＩＰ受容体、ＧＬＰ－１受容体、ＧＬＰ－２受容体、グルカゴン受容体、ＧｎＲＨ２
受容体、ＧＰＥＲ、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５８、ＧＰＲ
１６１、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４５、ＧＰＲ８８、ＧＰＲＣ
５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、Ｈ３受容体、ＨＣＡ１受容体、ＬＰＡ１受容体、Ｌ
ＰＡ３受容体、ＬＰＡ４受容体、ＭＣ２受容体、ＭＣ４受容体、ｍＧｌｕ２受容体、ｍＧ
ｌｕ３受容体、モチリン受容体、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ３、ＮＫ
２受容体、ＮＰＦＦ１受容体、ＮＰＦＦ２受容体、ＮＰＳ受容体、ＮＴＳ１受容体、ＯＲ
１Ｄ２、ＯＲ２ＡＧ１、ＯＴ受容体、ＰＡＣ１受容体、ＲＸＦＰ１受容体、セクレチン受
容体、ＴＳＨ受容体、ＵＴ受容体、Ｖ１Ａ受容体、Ｖ２受容体、α２Ａ－アドレナリン受
容体、α２Ｂ－アドレナリン受容体、α２Ｃ－アドレナリン受容体、β１－アドレナリン
受容体、β３－アドレナリン受容体、５－ＨＴ１Ｂ受容体、５－ＨＴ１Ｆ受容体、５－Ｈ
Ｔ２Ｂ受容体、５－ＨＴ２Ｃ受容体、５－ＨＴ５Ａ受容体、５－ＨＴ６受容体、５－ＨＴ
７受容体、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ５
、カルシトニン受容体様受容体、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＣＣＫ１受容体、ＣＣＫ
２受容体、ＣＴ受容体、Ｄ１受容体、Ｄ２受容体、Ｄ３受容体、Ｄ４受容体、Ｄ５受容体
、ＦＦＡ１受容体、ＦＦＡ３受容体、ＦＳＨ受容体、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、Ｇ
ＨＲＨ受容体、ＧｎＲＨ１受容体、ＧＰＢＡ受容体、ＧＰＲ１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１
２、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ
１６０、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１７３、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰ
Ｒ１８、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、
ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３
、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６受容体、ＨＣＡ２受
容体、ＨＣＡ３受容体、キスぺプチン受容体、ＬＧＲ４、ＬＧＲ６、ＬＨ受容体、ＬＰＡ
２受容体、ＬＰＡ６受容体、Ｍ１受容体、Ｍ２受容体、Ｍ３受容体、Ｍ４受容体、Ｍ５受
容体、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ３受容体、ＭＣ５受容体、ＭＣＨ２受容体、ｍＧｌｕ４受容体、
ｍＧｌｕ７受容体、ｍＧｌｕ８受容体、ＭＲＧＰＲＧ、ＮＯＰ受容体、ＮＰＢＷ１受容体
、ＮＰＢＷ２受容体、ＯＰＮ３、ＯＲ１１Ｈ１、ＯＲ２Ａ１、ＯＲ２Ａ２、ＯＲ２Ａ４、
ＯＲ２Ａ４２、ＯＲ２Ａ７、ＯＲ２Ｂ１１、ＯＲ２Ｂ６、ＯＲ２Ｃ１、ＯＲ２Ｃ３、ＯＲ
２Ｊ３、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２Ｔ１１、ＯＲ２Ｔ３４、ＯＲ２Ｗ３、ＯＲ３Ａ３、ＯＲ４
Ｄ１０、ＯＲ４Ｍ１、ＯＲ４Ｑ３、ＯＲ５１Ａ２、ＯＲ５１Ａ４、ＯＲ５１Ａ７、ＯＲ５
１Ｂ２、ＯＲ５１Ｂ４、ＯＲ５１Ｂ５、ＯＲ５１Ｂ６、ＯＲ５１Ｄ１、ＯＲ５１Ｅ１、Ｏ
Ｒ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ２、ＯＲ５１Ｆ１、ＯＲ５１Ｆ２、ＯＲ５１Ｇ１、ＯＲ５１Ｇ２
、ＯＲ５１Ｉ１、ＯＲ５１Ｉ２、ＯＲ５１Ｊ１、ＯＲ５１Ｌ１、ＯＲ５１Ｍ１、ＯＲ５１
Ｑ１、ＯＲ５１Ｓ１、ＯＲ５１Ｔ１、ＯＲ５１Ｖ１、ＯＲ５２Ａ１、ＯＲ５２Ａ４、ＯＲ
５２Ａ５、ＯＲ５２Ｂ２、ＯＲ５２Ｂ４、ＯＲ５２Ｂ６、ＯＲ５２Ｄ１、ＯＲ５２Ｅ２、
ＯＲ５２Ｅ４、ＯＲ５２Ｅ５、ＯＲ５２Ｅ６、ＯＲ５２Ｅ８、ＯＲ５２Ｈ１、ＯＲ５２Ｉ
１、ＯＲ５２Ｉ２、ＯＲ５２Ｊ３、ＯＲ５２Ｋ１、ＯＲ５２Ｋ２、ＯＲ５２Ｌ１、ＯＲ５
２Ｍ１、ＯＲ５２Ｎ１、ＯＲ５２Ｎ２、ＯＲ５２Ｎ４、ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ５２Ｒ１、Ｏ
Ｒ５２Ｗ１、ＯＲ５６Ａ１、ＯＲ５６Ａ３、ＯＲ５６Ａ４、ＯＲ５６Ａ５、ＯＲ５６Ｂ１
、ＯＲ５６Ｂ４、ＯＲ６Ｖ１、ＯＲ７Ｄ２、ＯＲ９Ａ２、オキソグルタル酸受容体、Ｐ２
ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ８、Ｐ２Ｙ１２受容体、Ｐ２Ｙ４受容体、ＰｒＲＰ受容体、ＱＲＦＰ
受容体、ＲＸＦＰ２受容体、ＲＸＦＰ４受容体、ｓｓｔ１受容体、ｓｓｔ２受容体、ｓｓ
ｔ３受容体、ｓｓｔ４受容体、ｓｓｔ５受容体、ＴＡ１受容体、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ５
、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、
ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、Ｔ
ＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡ
Ｓ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ
２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２
Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＲＨ１受容体
、Ｙ１受容体、Ｙ２受容体、Ｙ５受容体、α１Ａ－アドレナリン受容体、α１Ｂ－アドレ
ナリン受容体、α１Ｄ－アドレナリン受容体、δ受容体、５－ＨＴ１Ａ受容体、５－ＨＴ
２Ａ受容体、Ａ１受容体、Ａ２Ａ受容体、Ａ２Ｂ受容体、Ａ３受容体、ＡＣＫＲ１、ＡＣ
ＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧ
ＲＥ５、アペリン受容体、ＡＴ１受容体、Ｂ１受容体、Ｂ２受容体、ＢＢ２（ＧＲＰ）受
容体、ＢＬＴ１受容体、ＢＬＴ２受容体、Ｃ３ａ受容体、Ｃ５ａ１受容体、Ｃ５ａ２受容
体、ＣａＳ受容体、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、
ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ケメリン受容体、ＣＸ３ＣＲ１
、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、Ｃｙｓ
ＬＴ１受容体、ＣｙｓＬＴ２受容体、ＤＰ１受容体、ＤＰ２受容体、ＥＰ１受容体、ＥＰ
２受容体、ＥＰ３受容体、ＥＰ４受容体、ＦＦＡ２受容体、ＦＦＡ４受容体、ＦＰ受容体
、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ３、ＦＺＤ６、ＧＡＬ２受容
体、ＧＡＬ３受容体、グレリン受容体、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ
１８３、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ４、ＧＰＲ５５、Ｇ
ＰＲ５５、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、Ｈ１受容体、Ｈ２受容体、Ｈ４受容体、ＩＰ受容体
、ＬＰＡ５受容体、ＭＡＳ１、ＭＣ１受容体、ＭＣＨ１受容体、ｍＧｌｕ１受容体、ｍＧ
ｌｕ５受容体、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＴ１受容体、ＭＴ２受容体、ＮＫ１受容体、ＮＫ３受
容体、ＮＭＵ１受容体、ＯＸＥ受容体、Ｐ２Ｙ１受容体、Ｐ２Ｙ１１受容体、Ｐ２Ｙ１３
受容体、Ｐ２Ｙ１４受容体、Ｐ２Ｙ２受容体、Ｐ２Ｙ６受容体、ＰＡＦ受容体、ＰＡＲ１
、ＰＡＲ２、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＰＫＲ１、ＰＫＲ２、Ｓ１Ｐ１受容体、Ｓ１Ｐ２受容
体、Ｓ１Ｐ３受容体、Ｓ１Ｐ４受容体、Ｓ１Ｐ５受容体、コハク酸受容体、ＴＰ受容体、
ＶＰＡＣ１受容体、ＶＰＡＣ２受容体、ＸＣＲ１、β２－アドレナリン受容体、κ受容体
、μ受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣ
Ｒである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、
ＣＣＲ１０及びＣＸＣＲ３を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００９５］
の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸ
ＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、ニューロ
テンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プ
ロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体
及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における本出願の国際公開
公報における段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ
１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチ
ド受容体１、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグラ
ンジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソ
マトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報にお
ける段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の国際公開公報における
段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の国際公開公
報における段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の国際公開公
報における段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の
国際公開公報における段落［０００９５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グ
ルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、ＯＸ１受
容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ
３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトスタチン
３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００９５］の群から選択され
るＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ３、Ｍ２受容体、ＯＸ１受
容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００９５］の群から選択されるＧ
ＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣ
Ｒ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドー
パミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴ
Ｓ２受容体、ＯＸ１受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、
プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容
体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００９
５］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：：ＯＸ１受容体、
ＯＸ２受容体、ＰＴＨ１受容体、ＰＴＨ２受容体、ＡＭＹ１受容体、ＡＭＹ２受容体、Ａ
ＭＹ３受容体、ＡＭ１受容体、ＡＭ２受容体、ＧＰＲ６３、ＧＰＲ７５、ＮＭＵ２受容体
、ＯＰＮ５、Ｖ１Ｂ受容体、ｙ６受容体、５－ＨＴ４受容体、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１１
９、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５０、ＧＰＲ
１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５７、ＧＰＲ１９、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ３７、ＧＰＲ３
７Ｌ１、ＧＰＲ５０、ＧＰＲ６２、ＬＧＲ５、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、ＮＴＳ２受
容体、ＯＰＮ４、ＯＰＮ４、ＯＲ１０Ａ７、ＯＲ１０ＡＧ１、ＯＲ１０Ｑ１、ＯＲ１０Ｗ
１、ＯＲ１２Ｄ３、ＯＲ１３Ｃ２、ＯＲ１３Ｃ３、ＯＲ１３Ｃ４、ＯＲ１３Ｃ５、ＯＲ１
３Ｃ８、ＯＲ１３Ｆ１、ＯＲ１３Ｇ１、ＯＲ１Ａ２、ＯＲ１Ｌ１、ＯＲ１Ｓ１、ＯＲ１Ｓ
２、ＯＲ２ＡＫ２、ＯＲ２Ｄ２、ＯＲ２Ｄ３、ＯＲ４Ａ１５、ＯＲ４Ｃ１１、ＯＲ４Ｃ１
２、ＯＲ４Ｃ１３、ＯＲ４Ｃ１５、ＯＲ４Ｃ１６、ＯＲ４Ｋ１３、ＯＲ４Ｋ１４、ＯＲ４
Ｋ１５、ＯＲ４Ｋ１７、ＯＲ４Ｎ５、ＯＲ５ＡＣ２、ＯＲ５ＡＫ２、ＯＲ５ＡＰ２、ＯＲ
５ＡＲ１、ＯＲ５ＡＳ１、ＯＲ５Ｂ１２、ＯＲ５Ｂ１７、ＯＲ５Ｂ２、ＯＲ５Ｂ２１、Ｏ
Ｒ５Ｂ３、ＯＲ５Ｄ１３、ＯＲ５Ｄ１４、ＯＲ５Ｄ１６、ＯＲ５Ｄ１８、ＯＲ５Ｆ１、Ｏ
Ｒ５Ｉ１、ＯＲ５Ｊ２、ＯＲ５Ｋ３、ＯＲ５Ｌ１、ＯＲ５Ｌ２、ＯＲ５Ｍ１、ＯＲ５Ｍ１
０、ＯＲ５Ｍ１１、ＯＲ５Ｍ３、ＯＲ５Ｍ８、ＯＲ５Ｍ９、ＯＲ５Ｒ１、ＯＲ５Ｔ１、Ｏ
Ｒ５Ｔ２、ＯＲ５Ｔ３、ＯＲ５Ｗ２、ＯＲ６Ｃ７４、ＯＲ６Ｋ６、ＯＲ６Ｍ１、ＯＲ６Ｑ
１、ＯＲ６Ｘ１、ＯＲ８Ｈ１、ＯＲ８Ｈ２、ＯＲ８Ｈ３、ＯＲ８Ｊ１、ＯＲ８Ｊ３、ＯＲ
８Ｋ１、ＯＲ８Ｋ３、ＯＲ８Ｋ５、ＯＲ８Ｕ１、ＯＲ８Ｕ８、ＯＲ９Ａ４、ＯＲ９Ｇ１、
ＯＲ９Ｇ４、ＯＲ９Ｇ９、ＯＲ９Ｑ２、ＴＡＡＲ３、ＴＰＲＡ１、Ｙ４受容体、５－ＨＴ
１Ｄ受容体、５－ＨＴ１Ｅ受容体、ＡＤＧＲＢ１、ＡＴ２受容体、ＢＢ１受容体、ＢＢ３
受容体、ＣＧＲＰ受容体、ＣＲＦ１受容体、ＣＲＦ２受容体、ＥＴＡ受容体、ＥＴＢ受容
体、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＡＢ受容体、ＧＡＢＡ
Ｂ１、ＧＡＢＡＢ２、ＧＡＬ１受容体、ＧＩＰ受容体、ＧＬＰ－１受容体、ＧＬＰ－２受
容体、グルカゴン受容体、ＧｎＲＨ２受容体、ＧＰＥＲ、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１３９、
ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５８、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ３９
、ＧＰＲ４５、ＧＰＲ８８、ＧＰＲＣ５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、Ｈ３受容体、
ＨＣＡ１受容体、ＬＰＡ１受容体、ＬＰＡ３受容体、ＬＰＡ４受容体、ＭＣ２受容体、Ｍ
Ｃ４受容体、ｍＧｌｕ２受容体、ｍＧｌｕ３受容体、モチリン受容体、ＭＲＧＰＲＤ、Ｍ
ＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ３、ＮＫ２受容体、ＮＰＦＦ１受容体、ＮＰＦＦ２受容体、
ＮＰＳ受容体、ＮＴＳ１受容体、ＯＲ１Ｄ２、ＯＲ２ＡＧ１、ＯＴ受容体、ＰＡＣ１受容
体、ＲＸＦＰ１受容体、セクレチン受容体、ＴＳＨ受容体、ＵＴ受容体、Ｖ１Ａ受容体、
Ｖ２受容体、α２Ａ－アドレナリン受容体、α２Ｂ－アドレナリン受容体、α２Ｃ－アド
レナリン受容体、β１－アドレナリン受容体、β３－アドレナリン受容体、５－ＨＴ１Ｂ
受容体、５－ＨＴ１Ｆ受容体、５－ＨＴ２Ｂ受容体、５－ＨＴ２Ｃ受容体、５－ＨＴ５Ａ
受容体、５－ＨＴ６受容体、５－ＨＴ７受容体、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧ
ＲＧ１、ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ５、カルシトニン受容体様受容体、ＣＢ１受容体、Ｃ
Ｂ２受容体、ＣＣＫ１受容体、ＣＣＫ２受容体、ＣＴ受容体、Ｄ１受容体、Ｄ２受容体、
Ｄ３受容体、Ｄ４受容体、Ｄ５受容体、ＦＦＡ１受容体、ＦＦＡ３受容体、ＦＳＨ受容体
、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＧＨＲＨ受容体、ＧｎＲＨ１受容体、ＧＰＢＡ受容体
、ＧＰＲ１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、
ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１７３
、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２２、
ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、
ＧＰＲ７８、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲＣ
５Ｄ、ＧＰＲＣ６受容体、ＨＣＡ２受容体、ＨＣＡ３受容体、キスぺプチン受容体、ＬＧ
Ｒ４、ＬＧＲ６、ＬＨ受容体、ＬＰＡ２受容体、ＬＰＡ６受容体、Ｍ１受容体、Ｍ２受容
体、Ｍ３受容体、Ｍ４受容体、Ｍ５受容体、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ３受容体、ＭＣ５受容体、
ＭＣＨ２受容体、ｍＧｌｕ４受容体、ｍＧｌｕ７受容体、ｍＧｌｕ８受容体、ＭＲＧＰＲ
Ｇ、ＮＯＰ受容体、ＮＰＢＷ１受容体、ＮＰＢＷ２受容体、ＯＰＮ３、ＯＲ１１Ｈ１、Ｏ
Ｒ２Ａ１、ＯＲ２Ａ２、ＯＲ２Ａ４、ＯＲ２Ａ４２、ＯＲ２Ａ７、ＯＲ２Ｂ１１、ＯＲ２
Ｂ６、ＯＲ２Ｃ１、ＯＲ２Ｃ３、ＯＲ２Ｊ３、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２Ｔ１１、ＯＲ２Ｔ３
４、ＯＲ２Ｗ３、ＯＲ３Ａ３、ＯＲ４Ｄ１０、ＯＲ４Ｍ１、ＯＲ４Ｑ３、ＯＲ５１Ａ２、
ＯＲ５１Ａ４、ＯＲ５１Ａ７、ＯＲ５１Ｂ２、ＯＲ５１Ｂ４、ＯＲ５１Ｂ５、ＯＲ５１Ｂ
６、ＯＲ５１Ｄ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ２、ＯＲ５１Ｆ１、ＯＲ５
１Ｆ２、ＯＲ５１Ｇ１、ＯＲ５１Ｇ２、ＯＲ５１Ｉ１、ＯＲ５１Ｉ２、ＯＲ５１Ｊ１、Ｏ
Ｒ５１Ｌ１、ＯＲ５１Ｍ１、ＯＲ５１Ｑ１、ＯＲ５１Ｓ１、ＯＲ５１Ｔ１、ＯＲ５１Ｖ１
、ＯＲ５２Ａ１、ＯＲ５２Ａ４、ＯＲ５２Ａ５、ＯＲ５２Ｂ２、ＯＲ５２Ｂ４、ＯＲ５２
Ｂ６、ＯＲ５２Ｄ１、ＯＲ５２Ｅ２、ＯＲ５２Ｅ４、ＯＲ５２Ｅ５、ＯＲ５２Ｅ６、ＯＲ
５２Ｅ８、ＯＲ５２Ｈ１、ＯＲ５２Ｉ１、ＯＲ５２Ｉ２、ＯＲ５２Ｊ３、ＯＲ５２Ｋ１、
ＯＲ５２Ｋ２、ＯＲ５２Ｌ１、ＯＲ５２Ｍ１、ＯＲ５２Ｎ１、ＯＲ５２Ｎ２、ＯＲ５２Ｎ
４、ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ５２Ｒ１、ＯＲ５２Ｗ１、ＯＲ５６Ａ１、ＯＲ５６Ａ３、ＯＲ５
６Ａ４、ＯＲ５６Ａ５、ＯＲ５６Ｂ１、ＯＲ５６Ｂ４、ＯＲ６Ｖ１、ＯＲ７Ｄ２、ＯＲ９
Ａ２、オキソグルタル酸受容体、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ８、Ｐ２Ｙ１２受容体、Ｐ２Ｙ
４受容体、ＰｒＲＰ受容体、ＱＲＦＰ受容体、ＲＸＦＰ２受容体、ＲＸＦＰ４受容体、ｓ
ｓｔ１受容体、ｓｓｔ２受容体、ｓｓｔ３受容体、ｓｓｔ４受容体、ｓｓｔ５受容体、Ｔ
Ａ１受容体、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＳ１
Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、
ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、Ｔ
ＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡ
Ｓ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡ
Ｓ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２
Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＲＨ１受容体、Ｙ１受容体、Ｙ２受容体、Ｙ５受容体、α１Ａ－
アドレナリン受容体、α１Ｂ－アドレナリン受容体、α１Ｄ－アドレナリン受容体、δ受
容体、５－ＨＴ１Ａ受容体、５－ＨＴ２Ａ受容体、Ａ１受容体、Ａ２Ａ受容体、Ａ２Ｂ受
容体、Ａ３受容体、ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、ＡＤＧＲＥ１、
ＡＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ５、アペリン受容体、ＡＴ１受容体、Ｂ１受容
体、Ｂ２受容体、ＢＢ２（ＧＲＰ）受容体、ＢＬＴ１受容体、ＢＬＴ２受容体、Ｃ３ａ受
容体、Ｃ５ａ１受容体、Ｃ５ａ２受容体、ＣａＳ受容体、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ
２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ
Ｌ２、ケメリン受容体、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ
４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣｙｓＬＴ１受容体、ＣｙｓＬＴ２受容体、ＤＰ１受容体
、ＤＰ２受容体、ＥＰ１受容体、ＥＰ２受容体、ＥＰ３受容体、ＥＰ４受容体、ＦＦＡ２
受容体、ＦＦＡ４受容体、ＦＰ受容体、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ２／ＡＬＸ
、ＦＰＲ３、ＦＺＤ６、ＧＡＬ２受容体、ＧＡＬ３受容体、グレリン受容体、ＧＰＲ１３
２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、Ｇ
ＰＲ３４、ＧＰＲ４、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、Ｈ１受容体、
Ｈ２受容体、Ｈ４受容体、ＩＰ受容体、ＬＰＡ５受容体、ＭＡＳ１、ＭＣ１受容体、ＭＣ
Ｈ１受容体、ｍＧｌｕ１受容体、ｍＧｌｕ５受容体、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＴ１受容体、Ｍ
Ｔ２受容体、ＮＫ１受容体、ＮＫ３受容体、ＮＭＵ１受容体、ＯＸＥ受容体、Ｐ２Ｙ１受
容体、Ｐ２Ｙ１１受容体、Ｐ２Ｙ１３受容体、Ｐ２Ｙ１４受容体、Ｐ２Ｙ２受容体、Ｐ２
Ｙ６受容体、ＰＡＦ受容体、ＰＡＲ１、ＰＡＲ２、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＰＫＲ１、ＰＫ
Ｒ２、Ｓ１Ｐ１受容体、Ｓ１Ｐ２受容体、Ｓ１Ｐ３受容体、Ｓ１Ｐ４受容体、Ｓ１Ｐ５受
容体、コハク酸受容体、ＴＰ受容体、ＶＰＡＣ１受容体、ＶＰＡＣ２受容体、ＸＣＲ１、
β２－アドレナリン受容体、κ受容体、μ受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、
ＣＣＲ１０及びＣＸＣＲ３を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１０９
］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸ
ＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、ニューロ
テンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プ
ロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体
及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１０
９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ
１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチ
ド受容体１、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグラ
ンジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソ
マトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報にお
ける段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＯＸ１受容体、Ｏ
Ｘ２受容体、ＰＴＨ１受容体、ＰＴＨ２受容体、ＡＭＹ１受容体、ＡＭＹ２受容体、ＡＭ
Ｙ３受容体、ＡＭ１受容体、ＡＭ２受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の国際公開公報における
段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の国際公開公
報における段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の国際公開公
報における段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、Ｍ２受容体及びＯＸ１受容体を除いて、本出願の
国際公開公報における段落［０００１０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グ
ルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、ＯＸ１受
容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ
３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトスタチン
３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１０９］の群から選択さ
れるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ３、Ｍ２受容体及びＯＸ１
受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１０９］の群から選択され
るＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣ
Ｒ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドー
パミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴ
Ｓ２受容体、ＯＸ１受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、
プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容
体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１
０９］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：５－ＨＴ４受容体
、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１
４９、ＧＰＲ１５０、ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５７、ＧＰＲ１９、ＧＰＲ
２５、ＧＰＲ３７、ＧＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ５０、ＧＰＲ６２、ＬＧＲ５、ＭＲＧＰＲＥ
、ＭＲＧＰＲＦ、ＮＴＳ２受容体、ＯＰＮ４、ＯＰＮ４、ＯＲ１０Ａ７、ＯＲ１０ＡＧ１
、ＯＲ１０Ｑ１、ＯＲ１０Ｗ１、ＯＲ１２Ｄ３、ＯＲ１３Ｃ２、ＯＲ１３Ｃ３、ＯＲ１３
Ｃ４、ＯＲ１３Ｃ５、ＯＲ１３Ｃ８、ＯＲ１３Ｆ１、ＯＲ１３Ｇ１、ＯＲ１Ａ２、ＯＲ１
Ｌ１、ＯＲ１Ｓ１、ＯＲ１Ｓ２、ＯＲ２ＡＫ２、ＯＲ２Ｄ２、ＯＲ２Ｄ３、ＯＲ４Ａ１５
、ＯＲ４Ｃ１１、ＯＲ４Ｃ１２、ＯＲ４Ｃ１３、ＯＲ４Ｃ１５、ＯＲ４Ｃ１６、ＯＲ４Ｋ
１３、ＯＲ４Ｋ１４、ＯＲ４Ｋ１５、ＯＲ４Ｋ１７、ＯＲ４Ｎ５、ＯＲ５ＡＣ２、ＯＲ５
ＡＫ２、ＯＲ５ＡＰ２、ＯＲ５ＡＲ１、ＯＲ５ＡＳ１、ＯＲ５Ｂ１２、ＯＲ５Ｂ１７、Ｏ
Ｒ５Ｂ２、ＯＲ５Ｂ２１、ＯＲ５Ｂ３、ＯＲ５Ｄ１３、ＯＲ５Ｄ１４、ＯＲ５Ｄ１６、Ｏ
Ｒ５Ｄ１８、ＯＲ５Ｆ１、ＯＲ５Ｉ１、ＯＲ５Ｊ２、ＯＲ５Ｋ３、ＯＲ５Ｌ１、ＯＲ５Ｌ
２、ＯＲ５Ｍ１、ＯＲ５Ｍ１０、ＯＲ５Ｍ１１、ＯＲ５Ｍ３、ＯＲ５Ｍ８、ＯＲ５Ｍ９、
ＯＲ５Ｒ１、ＯＲ５Ｔ１、ＯＲ５Ｔ２、ＯＲ５Ｔ３、ＯＲ５Ｗ２、ＯＲ６Ｃ７４、ＯＲ６
Ｋ６、ＯＲ６Ｍ１、ＯＲ６Ｑ１、ＯＲ６Ｘ１、ＯＲ８Ｈ１、ＯＲ８Ｈ２、ＯＲ８Ｈ３、Ｏ
Ｒ８Ｊ１、ＯＲ８Ｊ３、ＯＲ８Ｋ１、ＯＲ８Ｋ３、ＯＲ８Ｋ５、ＯＲ８Ｕ１、ＯＲ８Ｕ８
、ＯＲ９Ａ４、ＯＲ９Ｇ１、ＯＲ９Ｇ４、ＯＲ９Ｇ９、ＯＲ９Ｑ２、ＴＡＡＲ３、ＴＰＲ
Ａ１、Ｙ４受容体、５－ＨＴ１Ｄ受容体、５－ＨＴ１Ｅ受容体、ＡＤＧＲＢ１、ＡＴ２受
容体、ＢＢ１受容体、ＢＢ３受容体、ＣＧＲＰ受容体、ＣＲＦ１受容体、ＣＲＦ２受容体
、ＥＴＡ受容体、ＥＴＢ受容体、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、
ＧＡＢＡＢ受容体、ＧＡＢＡＢ１、ＧＡＢＡＢ２、ＧＡＬ１受容体、ＧＩＰ受容体、ＧＬ
Ｐ－１受容体、ＧＬＰ－２受容体、グルカゴン受容体、ＧｎＲＨ２受容体、ＧＰＥＲ、Ｇ
ＰＲ１０７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５８、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１７１
、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４５、ＧＰＲ８８、ＧＰＲＣ５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、
ＧＰＲＣ５Ｃ、Ｈ３受容体、ＨＣＡ１受容体、ＬＰＡ１受容体、ＬＰＡ３受容体、ＬＰＡ
４受容体、ＭＣ２受容体、ＭＣ４受容体、ｍＧｌｕ２受容体、ｍＧｌｕ３受容体、モチリ
ン受容体、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ３、ＮＫ２受容体、ＮＰＦＦ１
受容体、ＮＰＦＦ２受容体、ＮＰＳ受容体、ＮＴＳ１受容体、ＯＲ１Ｄ２、ＯＲ２ＡＧ１
、ＯＴ受容体、ＰＡＣ１受容体、ＲＸＦＰ１受容体、セクレチン受容体、ＴＳＨ受容体、
ＵＴ受容体、Ｖ１Ａ受容体、Ｖ２受容体、α２Ａ－アドレナリン受容体、α２Ｂ－アドレ
ナリン受容体、α２Ｃ－アドレナリン受容体、β１－アドレナリン受容体、β３－アドレ
ナリン受容体、５－ＨＴ１Ｂ受容体、５－ＨＴ１Ｆ受容体、５－ＨＴ２Ｂ受容体、５－Ｈ
Ｔ２Ｃ受容体、５－ＨＴ５Ａ受容体、５－ＨＴ６受容体、５－ＨＴ７受容体、ＡＤＧＲＥ
４Ｐ、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ５、カルシトニン受容体
様受容体、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＣＣＫ１受容体、ＣＣＫ２受容体、ＣＴ受容体
、Ｄ１受容体、Ｄ２受容体、Ｄ３受容体、Ｄ４受容体、Ｄ５受容体、ＦＦＡ１受容体、Ｆ
ＦＡ３受容体、ＦＳＨ受容体、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＧＨＲＨ受容体、ＧｎＲ
Ｈ１受容体、ＧＰＢＡ受容体、ＧＰＲ１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１４２、Ｇ
ＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６２
、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１７３、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８２
、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３
５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ
８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６受容体、ＨＣＡ２受容体、ＨＣＡ３受容体
、キスぺプチン受容体、ＬＧＲ４、ＬＧＲ６、ＬＨ受容体、ＬＰＡ２受容体、ＬＰＡ６受
容体、Ｍ１受容体、Ｍ２受容体、Ｍ３受容体、Ｍ４受容体、Ｍ５受容体、ＭＡＳ１Ｌ、Ｍ
Ｃ３受容体、ＭＣ５受容体、ＭＣＨ２受容体、ｍＧｌｕ４受容体、ｍＧｌｕ７受容体、ｍ
Ｇｌｕ８受容体、ＭＲＧＰＲＧ、ＮＯＰ受容体、ＮＰＢＷ１受容体、ＮＰＢＷ２受容体、
ＯＰＮ３、ＯＲ１１Ｈ１、ＯＲ２Ａ１、ＯＲ２Ａ２、ＯＲ２Ａ４、ＯＲ２Ａ４２、ＯＲ２
Ａ７、ＯＲ２Ｂ１１、ＯＲ２Ｂ６、ＯＲ２Ｃ１、ＯＲ２Ｃ３、ＯＲ２Ｊ３、ＯＲ２Ｌ１３
、ＯＲ２Ｔ１１、ＯＲ２Ｔ３４、ＯＲ２Ｗ３、ＯＲ３Ａ３、ＯＲ４Ｄ１０、ＯＲ４Ｍ１、
ＯＲ４Ｑ３、ＯＲ５１Ａ２、ＯＲ５１Ａ４、ＯＲ５１Ａ７、ＯＲ５１Ｂ２、ＯＲ５１Ｂ４
、ＯＲ５１Ｂ５、ＯＲ５１Ｂ６、ＯＲ５１Ｄ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１
Ｅ２、ＯＲ５１Ｆ１、ＯＲ５１Ｆ２、ＯＲ５１Ｇ１、ＯＲ５１Ｇ２、ＯＲ５１Ｉ１、ＯＲ
５１Ｉ２、ＯＲ５１Ｊ１、ＯＲ５１Ｌ１、ＯＲ５１Ｍ１、ＯＲ５１Ｑ１、ＯＲ５１Ｓ１、
ＯＲ５１Ｔ１、ＯＲ５１Ｖ１、ＯＲ５２Ａ１、ＯＲ５２Ａ４、ＯＲ５２Ａ５、ＯＲ５２Ｂ
２、ＯＲ５２Ｂ４、ＯＲ５２Ｂ６、ＯＲ５２Ｄ１、ＯＲ５２Ｅ２、ＯＲ５２Ｅ４、ＯＲ５
２Ｅ５、ＯＲ５２Ｅ６、ＯＲ５２Ｅ８、ＯＲ５２Ｈ１、ＯＲ５２Ｉ１、ＯＲ５２Ｉ２、Ｏ
Ｒ５２Ｊ３、ＯＲ５２Ｋ１、ＯＲ５２Ｋ２、ＯＲ５２Ｌ１、ＯＲ５２Ｍ１、ＯＲ５２Ｎ１
、ＯＲ５２Ｎ２、ＯＲ５２Ｎ４、ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ５２Ｒ１、ＯＲ５２Ｗ１、ＯＲ５６
Ａ１、ＯＲ５６Ａ３、ＯＲ５６Ａ４、ＯＲ５６Ａ５、ＯＲ５６Ｂ１、ＯＲ５６Ｂ４、ＯＲ
６Ｖ１、ＯＲ７Ｄ２、ＯＲ９Ａ２、オキソグルタル酸受容体、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ８
、Ｐ２Ｙ１２受容体、Ｐ２Ｙ４受容体、ＰｒＲＰ受容体、ＱＲＦＰ受容体、ＲＸＦＰ２受
容体、ＲＸＦＰ４受容体、ｓｓｔ１受容体、ｓｓｔ２受容体、ｓｓｔ３受容体、ｓｓｔ４
受容体、ｓｓｔ５受容体、ＴＡ１受容体、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡ
Ｒ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ
２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ
２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２
Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ
４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６
０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＲＨ１受容体、Ｙ１受容体、Ｙ２受
容体、Ｙ５受容体、α１Ａ－アドレナリン受容体、α１Ｂ－アドレナリン受容体、α１Ｄ
－アドレナリン受容体、δ受容体、５－ＨＴ１Ａ受容体、５－ＨＴ２Ａ受容体、Ａ１受容
体、Ａ２Ａ受容体、Ａ２Ｂ受容体、Ａ３受容体、ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、
ＡＣＫＲ４、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ５、アペリン受容
体、ＡＴ１受容体、Ｂ１受容体、Ｂ２受容体、ＢＢ２（ＧＲＰ）受容体、ＢＬＴ１受容体
、ＢＬＴ２受容体、Ｃ３ａ受容体、Ｃ５ａ１受容体、Ｃ５ａ２受容体、ＣａＳ受容体、Ｃ
ＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、
ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ケメリン受容体、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣ
Ｒ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣｙｓＬＴ１受容体、Ｃｙｓ
ＬＴ２受容体、ＤＰ１受容体、ＤＰ２受容体、ＥＰ１受容体、ＥＰ２受容体、ＥＰ３受容
体、ＥＰ４受容体、ＦＦＡ２受容体、ＦＦＡ４受容体、ＦＰ受容体、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２
／ＡＬＸ、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ３、ＦＺＤ６、ＧＡＬ２受容体、ＧＡＬ３受容体、
グレリン受容体、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲ２１、
ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ４、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６５
、ＧＰＲ６８、Ｈ１受容体、Ｈ２受容体、Ｈ４受容体、ＩＰ受容体、ＬＰＡ５受容体、Ｍ
ＡＳ１、ＭＣ１受容体、ＭＣＨ１受容体、ｍＧｌｕ１受容体、ｍＧｌｕ５受容体、ＭＲＧ
ＰＲＸ２、ＭＴ１受容体、ＭＴ２受容体、ＮＫ１受容体、ＮＫ３受容体、ＮＭＵ１受容体
、ＯＸＥ受容体、Ｐ２Ｙ１受容体、Ｐ２Ｙ１１受容体、Ｐ２Ｙ１３受容体、Ｐ２Ｙ１４受
容体、Ｐ２Ｙ２受容体、Ｐ２Ｙ６受容体、ＰＡＦ受容体、ＰＡＲ１、ＰＡＲ２、ＰＡＲ３
、ＰＡＲ４、ＰＫＲ１、ＰＫＲ２、Ｓ１Ｐ１受容体、Ｓ１Ｐ２受容体、Ｓ１Ｐ３受容体、
Ｓ１Ｐ４受容体、Ｓ１Ｐ５受容体、コハク酸受容体、ＴＰ受容体、ＶＰＡＣ１受容体、Ｖ
ＰＡＣ２受容体、ＸＣＲ１、β２－アドレナリン受容体、κ受容体、μ受容体から選択さ
れるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１２４］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、
ＣＣＲ１０及びＣＸＣＲ３を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１２４
］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸ
ＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、ニューロ
テンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プ
ロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体
及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１２
４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ
１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチ
ド受容体１、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグラ
ンジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソ
マトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報にお
ける段落［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１
２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落
［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落
［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報に
おける段落［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グ
ルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活
性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロ
スタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除い
て、本出願の国際公開公報における段落［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲで
ある。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ３及びＭ２受容体を除いて
、本出願の国際公開公報における段落［０００１２４］の群から選択されるＧＰＣＲであ
る。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣ
Ｒ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドー
パミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴ
Ｓ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグラン
ジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトス
タチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１２４］の群から
選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：５－ＨＴ１Ｄ受容
体、５－ＨＴ１Ｅ受容体、ＡＤＧＲＢ１、ＡＴ２受容体、ＢＢ１受容体、ＢＢ３受容体、
ＣＧＲＰ受容体、ＣＲＦ１受容体、ＣＲＦ２受容体、ＥＴＡ受容体、ＥＴＢ受容体、ＦＺ
Ｄ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＡＢ受容体、ＧＡＢＡＢ１、Ｇ
ＡＢＡＢ２、ＧＡＬ１受容体、ＧＩＰ受容体、ＧＬＰ－１受容体、ＧＬＰ－２受容体、グ
ルカゴン受容体、ＧｎＲＨ２受容体、ＧＰＥＲ、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１
５６、ＧＰＲ１５８、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ
４５、ＧＰＲ８８、ＧＰＲＣ５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、Ｈ３受容体、ＨＣＡ１
受容体、ＬＰＡ１受容体、ＬＰＡ３受容体、ＬＰＡ４受容体、ＭＣ２受容体、ＭＣ４受容
体、ｍＧｌｕ２受容体、ｍＧｌｕ３受容体、モチリン受容体、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲ
Ｘ１、ＭＲＧＰＲＸ３、ＮＫ２受容体、ＮＰＦＦ１受容体、ＮＰＦＦ２受容体、ＮＰＳ受
容体、ＮＴＳ１受容体、ＯＲ１Ｄ２、ＯＲ２ＡＧ１、ＯＴ受容体、ＰＡＣ１受容体、ＲＸ
ＦＰ１受容体、セクレチン受容体、ＴＳＨ受容体、ＵＴ受容体、Ｖ１Ａ受容体、Ｖ２受容
体、α２Ａ－アドレナリン受容体、α２Ｂ－アドレナリン受容体、α２Ｃ－アドレナリン
受容体、β１－アドレナリン受容体、β３－アドレナリン受容体、５－ＨＴ１Ｂ受容体、
５－ＨＴ１Ｆ受容体、５－ＨＴ２Ｂ受容体、５－ＨＴ２Ｃ受容体、５－ＨＴ５Ａ受容体、
５－ＨＴ６受容体、５－ＨＴ７受容体、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＧ１、
ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ５、カルシトニン受容体様受容体、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容
体、ＣＣＫ１受容体、ＣＣＫ２受容体、ＣＴ受容体、Ｄ１受容体、Ｄ２受容体、Ｄ３受容
体、Ｄ４受容体、Ｄ５受容体、ＦＦＡ１受容体、ＦＦＡ３受容体、ＦＳＨ受容体、ＦＺＤ
１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＧＨＲＨ受容体、ＧｎＲＨ１受容体、ＧＰＢＡ受容体、ＧＰＲ
１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１
４８、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１７３、ＧＰＲ
１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２
６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ７
８、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲＣ５Ｄ、Ｇ
ＰＲＣ６受容体、ＨＣＡ２受容体、ＨＣＡ３受容体、キスぺプチン受容体、ＬＧＲ４、Ｌ
ＧＲ６、ＬＨ受容体、ＬＰＡ２受容体、ＬＰＡ６受容体、Ｍ１受容体、Ｍ２受容体、Ｍ３
受容体、Ｍ４受容体、Ｍ５受容体、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ３受容体、ＭＣ５受容体、ＭＣＨ２
受容体、ｍＧｌｕ４受容体、ｍＧｌｕ７受容体、ｍＧｌｕ８受容体、ＭＲＧＰＲＧ、ＮＯ
Ｐ受容体、ＮＰＢＷ１受容体、ＮＰＢＷ２受容体、ＯＰＮ３、ＯＲ１１Ｈ１、ＯＲ２Ａ１
、ＯＲ２Ａ２、ＯＲ２Ａ４、ＯＲ２Ａ４２、ＯＲ２Ａ７、ＯＲ２Ｂ１１、ＯＲ２Ｂ６、Ｏ
Ｒ２Ｃ１、ＯＲ２Ｃ３、ＯＲ２Ｊ３、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２Ｔ１１、ＯＲ２Ｔ３４、ＯＲ
２Ｗ３、ＯＲ３Ａ３、ＯＲ４Ｄ１０、ＯＲ４Ｍ１、ＯＲ４Ｑ３、ＯＲ５１Ａ２、ＯＲ５１
Ａ４、ＯＲ５１Ａ７、ＯＲ５１Ｂ２、ＯＲ５１Ｂ４、ＯＲ５１Ｂ５、ＯＲ５１Ｂ６、ＯＲ
５１Ｄ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ２、ＯＲ５１Ｆ１、ＯＲ５１Ｆ２、
ＯＲ５１Ｇ１、ＯＲ５１Ｇ２、ＯＲ５１Ｉ１、ＯＲ５１Ｉ２、ＯＲ５１Ｊ１、ＯＲ５１Ｌ
１、ＯＲ５１Ｍ１、ＯＲ５１Ｑ１、ＯＲ５１Ｓ１、ＯＲ５１Ｔ１、ＯＲ５１Ｖ１、ＯＲ５
２Ａ１、ＯＲ５２Ａ４、ＯＲ５２Ａ５、ＯＲ５２Ｂ２、ＯＲ５２Ｂ４、ＯＲ５２Ｂ６、Ｏ
Ｒ５２Ｄ１、ＯＲ５２Ｅ２、ＯＲ５２Ｅ４、ＯＲ５２Ｅ５、ＯＲ５２Ｅ６、ＯＲ５２Ｅ８
、ＯＲ５２Ｈ１、ＯＲ５２Ｉ１、ＯＲ５２Ｉ２、ＯＲ５２Ｊ３、ＯＲ５２Ｋ１、ＯＲ５２
Ｋ２、ＯＲ５２Ｌ１、ＯＲ５２Ｍ１、ＯＲ５２Ｎ１、ＯＲ５２Ｎ２、ＯＲ５２Ｎ４、ＯＲ
５２Ｎ５、ＯＲ５２Ｒ１、ＯＲ５２Ｗ１、ＯＲ５６Ａ１、ＯＲ５６Ａ３、ＯＲ５６Ａ４、
ＯＲ５６Ａ５、ＯＲ５６Ｂ１、ＯＲ５６Ｂ４、ＯＲ６Ｖ１、ＯＲ７Ｄ２、ＯＲ９Ａ２、オ
キソグルタル酸受容体、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ８、Ｐ２Ｙ１２受容体、Ｐ２Ｙ４受容体
、ＰｒＲＰ受容体、ＱＲＦＰ受容体、ＲＸＦＰ２受容体、ＲＸＦＰ４受容体、ｓｓｔ１受
容体、ｓｓｔ２受容体、ｓｓｔ３受容体、ｓｓｔ４受容体、ｓｓｔ５受容体、ＴＡ１受容
体、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＳ１Ｒ１、Ｔ
ＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２
Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ
３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４
０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４
６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、Ｔ
ＡＳ２Ｒ９、ＴＲＨ１受容体、Ｙ１受容体、Ｙ２受容体、Ｙ５受容体、α１Ａ－アドレナ
リン受容体、α１Ｂ－アドレナリン受容体、α１Ｄ－アドレナリン受容体、δ受容体、５
－ＨＴ１Ａ受容体、５－ＨＴ２Ａ受容体、Ａ１受容体、Ａ２Ａ受容体、Ａ２Ｂ受容体、Ａ
３受容体、ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲ
Ｅ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ５、アペリン受容体、ＡＴ１受容体、Ｂ１受容体、Ｂ２
受容体、ＢＢ２（ＧＲＰ）受容体、ＢＬＴ１受容体、ＢＬＴ２受容体、Ｃ３ａ受容体、Ｃ
５ａ１受容体、Ｃ５ａ２受容体、ＣａＳ受容体、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣ
Ｒ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ケ
メリン受容体、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸ
ＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣｙｓＬＴ１受容体、ＣｙｓＬＴ２受容体、ＤＰ１受容体、ＤＰ２
受容体、ＥＰ１受容体、ＥＰ２受容体、ＥＰ３受容体、ＥＰ４受容体、ＦＦＡ２受容体、
ＦＦＡ４受容体、ＦＰ受容体、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ
３、ＦＺＤ６、ＧＡＬ２受容体、ＧＡＬ３受容体、グレリン受容体、ＧＰＲ１３２、ＧＰ
Ｒ１５、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３４
、ＧＰＲ４、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、Ｈ１受容体、Ｈ２受容
体、Ｈ４受容体、ＩＰ受容体、ＬＰＡ５受容体、ＭＡＳ１、ＭＣ１受容体、ＭＣＨ１受容
体、ｍＧｌｕ１受容体、ｍＧｌｕ５受容体、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＴ１受容体、ＭＴ２受容
体、ＮＫ１受容体、ＮＫ３受容体、ＮＭＵ１受容体、ＯＸＥ受容体、Ｐ２Ｙ１受容体、Ｐ
２Ｙ１１受容体、Ｐ２Ｙ１３受容体、Ｐ２Ｙ１４受容体、Ｐ２Ｙ２受容体、Ｐ２Ｙ６受容
体、ＰＡＦ受容体、ＰＡＲ１、ＰＡＲ２、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＰＫＲ１、ＰＫＲ２、Ｓ
１Ｐ１受容体、Ｓ１Ｐ２受容体、Ｓ１Ｐ３受容体、Ｓ１Ｐ４受容体、Ｓ１Ｐ５受容体、コ
ハク酸受容体、ＴＰ受容体、ＶＰＡＣ１受容体、ＶＰＡＣ２受容体、ＸＣＲ１、β２－ア
ドレナリン受容体、κ受容体、μ受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、
ＣＣＲ１０及びＣＸＣＲ３を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１３８
］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸ
ＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、血小板活
性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロ
スタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除い
て、本出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲで
ある。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ
１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチ
ド受容体１、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグラン
ジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトス
タチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から
選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１
３８］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落
［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落
［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報に
おける段落［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グ
ルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活
性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロ
スタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除い
て、本出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲで
ある。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ３及びＭ２受容体を除いて
、本出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から選択されるＧＰＣＲであ
る。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣ
Ｒ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドー
パミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴ
Ｓ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグラン
ジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトス
タチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１３８］の群から
選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：５－ＨＴ１Ｂ受容
体、５－ＨＴ１Ｆ受容体、５－ＨＴ２Ｂ受容体、５－ＨＴ２Ｃ受容体、５－ＨＴ５Ａ受容
体、５－ＨＴ６受容体、５－ＨＴ７受容体、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＧ
１、ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ５、カルシトニン受容体様受容体、ＣＢ１受容体、ＣＢ２
受容体、ＣＣＫ１受容体、ＣＣＫ２受容体、ＣＴ受容体、Ｄ１受容体、Ｄ２受容体、Ｄ３
受容体、Ｄ４受容体、Ｄ５受容体、ＦＦＡ１受容体、ＦＦＡ３受容体、ＦＳＨ受容体、Ｆ
ＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＧＨＲＨ受容体、ＧｎＲＨ１受容体、ＧＰＢＡ受容体、Ｇ
ＰＲ１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰ
Ｒ１４８、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１７３、Ｇ
ＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２２、ＧＰ
Ｒ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰ
Ｒ７８、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲＣ５Ｄ
、ＧＰＲＣ６受容体、ＨＣＡ２受容体、ＨＣＡ３受容体、キスぺプチン受容体、ＬＧＲ４
、ＬＧＲ６、ＬＨ受容体、ＬＰＡ２受容体、ＬＰＡ６受容体、Ｍ１受容体、Ｍ２受容体、
Ｍ３受容体、Ｍ４受容体、Ｍ５受容体、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ３受容体、ＭＣ５受容体、ＭＣ
Ｈ２受容体、ｍＧｌｕ４受容体、ｍＧｌｕ７受容体、ｍＧｌｕ８受容体、ＭＲＧＰＲＧ、
ＮＯＰ受容体、ＮＰＢＷ１受容体、ＮＰＢＷ２受容体、ＯＰＮ３、ＯＲ１１Ｈ１、ＯＲ２
Ａ１、ＯＲ２Ａ２、ＯＲ２Ａ４、ＯＲ２Ａ４２、ＯＲ２Ａ７、ＯＲ２Ｂ１１、ＯＲ２Ｂ６
、ＯＲ２Ｃ１、ＯＲ２Ｃ３、ＯＲ２Ｊ３、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２Ｔ１１、ＯＲ２Ｔ３４、
ＯＲ２Ｗ３、ＯＲ３Ａ３、ＯＲ４Ｄ１０、ＯＲ４Ｍ１、ＯＲ４Ｑ３、ＯＲ５１Ａ２、ＯＲ
５１Ａ４、ＯＲ５１Ａ７、ＯＲ５１Ｂ２、ＯＲ５１Ｂ４、ＯＲ５１Ｂ５、ＯＲ５１Ｂ６、
ＯＲ５１Ｄ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ２、ＯＲ５１Ｆ１、ＯＲ５１Ｆ
２、ＯＲ５１Ｇ１、ＯＲ５１Ｇ２、ＯＲ５１Ｉ１、ＯＲ５１Ｉ２、ＯＲ５１Ｊ１、ＯＲ５
１Ｌ１、ＯＲ５１Ｍ１、ＯＲ５１Ｑ１、ＯＲ５１Ｓ１、ＯＲ５１Ｔ１、ＯＲ５１Ｖ１、Ｏ
Ｒ５２Ａ１、ＯＲ５２Ａ４、ＯＲ５２Ａ５、ＯＲ５２Ｂ２、ＯＲ５２Ｂ４、ＯＲ５２Ｂ６
、ＯＲ５２Ｄ１、ＯＲ５２Ｅ２、ＯＲ５２Ｅ４、ＯＲ５２Ｅ５、ＯＲ５２Ｅ６、ＯＲ５２
Ｅ８、ＯＲ５２Ｈ１、ＯＲ５２Ｉ１、ＯＲ５２Ｉ２、ＯＲ５２Ｊ３、ＯＲ５２Ｋ１、ＯＲ
５２Ｋ２、ＯＲ５２Ｌ１、ＯＲ５２Ｍ１、ＯＲ５２Ｎ１、ＯＲ５２Ｎ２、ＯＲ５２Ｎ４、
ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ５２Ｒ１、ＯＲ５２Ｗ１、ＯＲ５６Ａ１、ＯＲ５６Ａ３、ＯＲ５６Ａ
４、ＯＲ５６Ａ５、ＯＲ５６Ｂ１、ＯＲ５６Ｂ４、ＯＲ６Ｖ１、ＯＲ７Ｄ２、ＯＲ９Ａ２
、オキソグルタル酸受容体、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ８、Ｐ２Ｙ１２受容体、Ｐ２Ｙ４受
容体、ＰｒＲＰ受容体、ＱＲＦＰ受容体、ＲＸＦＰ２受容体、ＲＸＦＰ４受容体、ｓｓｔ
１受容体、ｓｓｔ２受容体、ｓｓｔ３受容体、ｓｓｔ４受容体、ｓｓｔ５受容体、ＴＡ１
受容体、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＳ１Ｒ１
、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡ
Ｓ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ
２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２
Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２
Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８
、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＲＨ１受容体、Ｙ１受容体、Ｙ２受容体、Ｙ５受容体、α１Ａ－アド
レナリン受容体、α１Ｂ－アドレナリン受容体、α１Ｄ－アドレナリン受容体、δ受容体
、５－ＨＴ１Ａ受容体、５－ＨＴ２Ａ受容体、Ａ１受容体、Ａ２Ａ受容体、Ａ２Ｂ受容体
、Ａ３受容体、ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤ
ＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ５、アペリン受容体、ＡＴ１受容体、Ｂ１受容体、
Ｂ２受容体、ＢＢ２（ＧＲＰ）受容体、ＢＬＴ１受容体、ＢＬＴ２受容体、Ｃ３ａ受容体
、Ｃ５ａ１受容体、Ｃ５ａ２受容体、ＣａＳ受容体、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、
ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２
、ケメリン受容体、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、
ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣｙｓＬＴ１受容体、ＣｙｓＬＴ２受容体、ＤＰ１受容体、Ｄ
Ｐ２受容体、ＥＰ１受容体、ＥＰ２受容体、ＥＰ３受容体、ＥＰ４受容体、ＦＦＡ２受容
体、ＦＦＡ４受容体、ＦＰ受容体、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、Ｆ
ＰＲ３、ＦＺＤ６、ＧＡＬ２受容体、ＧＡＬ３受容体、グレリン受容体、ＧＰＲ１３２、
ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ
３４、ＧＰＲ４、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、Ｈ１受容体、Ｈ２
受容体、Ｈ４受容体、ＩＰ受容体、ＬＰＡ５受容体、ＭＡＳ１、ＭＣ１受容体、ＭＣＨ１
受容体、ｍＧｌｕ１受容体、ｍＧｌｕ５受容体、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＴ１受容体、ＭＴ２
受容体、ＮＫ１受容体、ＮＫ３受容体、ＮＭＵ１受容体、ＯＸＥ受容体、Ｐ２Ｙ１受容体
、Ｐ２Ｙ１１受容体、Ｐ２Ｙ１３受容体、Ｐ２Ｙ１４受容体、Ｐ２Ｙ２受容体、Ｐ２Ｙ６
受容体、ＰＡＦ受容体、ＰＡＲ１、ＰＡＲ２、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＰＫＲ１、ＰＫＲ２
、Ｓ１Ｐ１受容体、Ｓ１Ｐ２受容体、Ｓ１Ｐ３受容体、Ｓ１Ｐ４受容体、Ｓ１Ｐ５受容体
、コハク酸受容体、ＴＰ受容体、ＶＰＡＣ１受容体、ＶＰＡＣ２受容体、ＸＣＲ１、β２
－アドレナリン受容体、κ受容体、μ受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１５２］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、
ＣＣＲ１０及びＣＸＣＲ３を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１５２
］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンβ２受容体、アペリ
ン受容体、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、
ドーパミンＤ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロ
スタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及
びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１５２
］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンβ２受容体、アペリ
ン受容体、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸ
ＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグラン
ジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマ
トスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報におけ
る段落［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１
５２］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落
［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落
［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５及びＭ２受容体を除いて、本出願の国際公開公報に
おける段落［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グ
ルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活
性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロ
スタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除い
て、本出願の国際公開公報における段落［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲで
ある。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ３及びＭ２受容体を除いて
、本出願の国際公開公報における段落［０００１５２］の群から選択されるＧＰＣＲであ
る。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アド
レナリンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナ
リンβ２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣ
Ｒ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドー
パミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１、Ｍ２受容体、ニューロテンシンＮＴ
Ｓ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグラン
ジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトス
タチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１５２］の群から
選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：５－ＨＴ１Ａ受容
体、５－ＨＴ２Ａ受容体、Ａ１受容体、Ａ２Ａ受容体、Ａ２Ｂ受容体、Ａ３受容体、ＡＣ
ＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲ
Ｅ３、ＡＤＧＲＥ５、アペリン受容体、ＡＴ１受容体、Ｂ１受容体、Ｂ２受容体、ＢＢ２
（ＧＲＰ）受容体、ＢＬＴ１受容体、ＢＬＴ２受容体、Ｃ３ａ受容体、Ｃ５ａ１受容体、
Ｃ５ａ２受容体、ＣａＳ受容体、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４
、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ケメリン受容体、
ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣ
Ｒ６、ＣｙｓＬＴ１受容体、ＣｙｓＬＴ２受容体、ＤＰ１受容体、ＤＰ２受容体、ＥＰ１
受容体、ＥＰ２受容体、ＥＰ３受容体、ＥＰ４受容体、ＦＦＡ２受容体、ＦＦＡ４受容体
、ＦＰ受容体、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ３、ＦＺＤ６、
ＧＡＬ２受容体、ＧＡＬ３受容体、グレリン受容体、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ
１８、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ４、Ｇ
ＰＲ５５、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、Ｈ１受容体、Ｈ２受容体、Ｈ４受容体
、ＩＰ受容体、ＬＰＡ５受容体、ＭＡＳ１、ＭＣ１受容体、ＭＣＨ１受容体、ｍＧｌｕ１
受容体、ｍＧｌｕ５受容体、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＴ１受容体、ＭＴ２受容体、ＮＫ１受容
体、ＮＫ３受容体、ＮＭＵ１受容体、ＯＸＥ受容体、Ｐ２Ｙ１受容体、Ｐ２Ｙ１１受容体
、Ｐ２Ｙ１３受容体、Ｐ２Ｙ１４受容体、Ｐ２Ｙ２受容体、Ｐ２Ｙ６受容体、ＰＡＦ受容
体、ＰＡＲ１、ＰＡＲ２、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＰＫＲ１、ＰＫＲ２、Ｓ１Ｐ１受容体、
Ｓ１Ｐ２受容体、Ｓ１Ｐ３受容体、Ｓ１Ｐ４受容体、Ｓ１Ｐ５受容体、コハク酸受容体、
ＴＰ受容体、ＶＰＡＣ１受容体、ＶＰＡＣ２受容体、ＸＣＲ１、β２－アドレナリン受容
体、κ受容体、μ受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、
ＣＣＲ１０及びＣＸＣＲ３を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１６６
］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンβ２受容体、アペリ
ン受容体、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、
血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容
体及びプロスタグランジンＥ４受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０
００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンβ２受容体、アペリ
ン受容体、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸ
ＣＲ６、ＣＸＣＲ７、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２受容体、プロス
タグランジンＥ３受容体及びプロスタグランジンＥ４受容体を除いて、本出願の国際公開
公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ３を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ３及びＣＣＲ４
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ３及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４及
びＣＣＲ５を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００１６６］の群から選択
されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣ
Ｒ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプチド受容体１
、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジンＥ２
受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマトスタチ
ン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公開公報における段落［
０００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、
ＣＣＲ５、ＣＣＲ１０及びＣＸＣＲ３を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０
００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アデノシンＡ２Ａ受容
体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナリンα２Ａ受容体、アド
レナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリンβ２受容体、アドレナリ
ンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０
、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴ
ン様ペプチド受容体１、ニューロテンシンＮＴＳ２受容体、血小板活性化因子受容体、プ
ロスタグランジンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４
受容体、ソマトスタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体を除いて、本出願の国際公
開公報における段落［０００１６６］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＡＴ１Ｒを含むア
ンジオテンシン受容体並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ２、Ｃ
ＸＣＲ４、ＣＸＣＲ６及びＣＸＣＲ７を含む特定のケモカイン受容体から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＡＴ１Ｒを含むア
ンジオテンシン受容体並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ１、Ｃ
ＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ６及びＣＸＣＲ７を含む特定のケモカイン受容体から選
択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＡＴ１Ｒを含むア
ンジオテンシン受容体並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ１、Ｃ
ＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４及びＣＸＣＲ６を含む特定のケモカイン受容体から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＡＴ１Ｒを含むア
ンジオテンシン受容体並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ２、Ｃ
ＸＣＲ４及びＣＸＣＲ６を含む特定のケモカイン受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＡＴ１Ｒを含むア
ンジオテンシン受容体並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ１、Ｃ
ＸＣＲ２及びＣＸＣＲ６を含む特定のケモカイン受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＡＴ１Ｒを含むア
ンジオテンシン受容体並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ２及び
ＣＸＣＲ６を含む特定のケモカイン受容体から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、バソプレシン受容体２である
。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現されるケ
モカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣ
Ｒ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ
３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選
択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ６、ＣＣ
Ｒ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣ
Ｒ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケ
モカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣ
Ｒ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣ
Ｒ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケ
モカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣ
Ｒ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸ
ＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受
容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣ
Ｒ８、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸ
ＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣ
Ｒ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣ
Ｒ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケ
モカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣ
Ｒ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸ
ＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受
容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣ
Ｒ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸ
ＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受
容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、Ｃ
ＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である
。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ９、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、Ｃ
Ｘ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣ
Ｒ８、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ
３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣ
Ｒ８、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ
３ＣＲ１、ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣ
Ｒ８、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、Ｘ
ＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ９、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、
ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ９、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、
ＸＣＲ１から選択されるケモカイン受容体である。
一実施形態では、特定のケモカイン受容体は、ＲＡＧＥと同じ細胞内で共発現され、炎
症に関係付けられ、且つ群：ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣ
Ｒ９、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＸＣＲ１から
選択されるケモカイン受容体である。
本発明の一形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：アデノシン１
Ａ受容体、アドレナリンα１Ａ受容体、アドレナリンα１Ｂ受容体、アドレナリンα２Ｂ
受容体、アンジオテンシン受容体ＡＴ１Ｒ、ブラジキニン受容体Ｂ２、ＣＣＲ１、ＣＣＲ
２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ２、ＣＸ
ＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ドーパミンＤ１受容体、エンドセリン受容体Ａ型、エンドセリン受
容体Ｂ型、ヒスタミンＨ３受容体、ムスカリンＭ１受容体、ムスカリンＭ２受容体、ムス
カリンＭ３受容体、ニューロペプチドＹ１受容体、ニューロテンシン１受容体、オレキシ
ン受容体１、オレキシン受容体２、プロスタグランジンＥ１受容体、セロトニン５－ＨＴ
１ａ受容体、セロトニン５－ＨＴ２ａ受容体、セロトニン５－ＨＴ２ｂ受容体、セロトニ
ン５－ＨＴ２ｃ受容体、セロトニン５－ＨＴ４ｂ受容体、ソマトスタチン２受容体、スフ
ィンゴシン１－リン酸受容体Ｓ１Ｐ１、スフィンゴシン１－リン酸受容体Ｓ１Ｐ３、サイ
ロトロピン放出ホルモン受容体１、バソプレシン受容体１Ａ、バソプレシン受容体１Ｂ又
はバソプレシン受容体２から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５及
びＣＸＣＲ４を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選
択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、本出願の国際
公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を
除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰＣ
Ｒである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、
本出願の国際公開公報における段落［０００２０４］の群から選択されるＧＰＣＲである
。
本発明の好ましい形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：アドレ
ナリンα１Ａ受容体、アドレナリンα１Ｂ受容体、アンジオテンシン受容体ＡＴ１Ｒ、ブ
ラジキニン受容体Ｂ２、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ６、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ
４、ＣＸＣＲ５、ドーパミンＤ１受容体、エンドセリン受容体Ｂ型、ヒスタミンＨ３受容
体、ムスカリンＭ２受容体、ニューロペプチドＹ１受容体、ニューロテンシン１受容体、
オレキシン受容体１、オレキシン受容体２、プロスタグランジンＥ１受容体、セロトニン
５－ＨＴ２ｂ受容体、セロトニン５－ＨＴ２ｃ受容体、セロトニン５－ＨＴ４ｂ受容体、
ソマトスタチン２受容体、スフィンゴシン１－リン酸受容体Ｓ１Ｐ３、バソプレシン受容
体１Ａ又はバソプレシン受容体１Ｂから選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２１４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＸＣＲ
４を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２１４］の群から選択されるＧ
ＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、本出願の国際
公開公報における段落［０００２１４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２１４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＸＣＲ４、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２１４］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
本発明の特に好ましい形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ア
ドレナリンα１Ａ受容体、アドレナリンα１Ｂ受容体、アンジオテンシン受容体ＡＴ１Ｒ
、ブラジキニン受容体Ｂ２、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、
ドーパミンＤ１受容体、エンドセリン受容体Ｂ型、ヒスタミンＨ３受容体、ムスカリンＭ
２受容体、ニューロペプチドＹ１受容体、オレキシン受容体１、オレキシン受容体２、プ
ロスタグランジンＥ１受容体、セロトニン５－ＨＴ２ｃ受容体、セロトニン５－ＨＴ４ｂ
受容体、ソマトスタチン２受容体、スフィンゴシン１－リン酸受容体Ｓ１Ｐ３、バソプレ
シン受容体１Ａ又はバソプレシン受容体１Ｂから選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＸＣＲ４を除いて、
本出願の国際公開公報における段落［０００２２０］の群から選択されるＧＰＣＲである
。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、本出願の国際
公開公報における段落［０００２２０］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、アドレナリンα１Ａ受
容体、ＣＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ムスカリンＭ２受容体及びオレキシン受容体１を除いて、
本出願の国際公開公報における段落［０００２２０］の群から選択されるＧＰＣＲである
。
本発明の一形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：アデノシンＡ
１受容体（ＡＤＯＲＡ１）、アドレナリンα２Ｂ受容体、アンジオテンシン受容体ＡＴ１
（ＡＴ１Ｒ）、ブラジキニン受容体２（Ｂ２Ｒ）、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣ
Ｒ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ニューロ
ペプチドＹ１受容体（ＮＰＹ１Ｒ）、オレキシン受容体２、スフィンゴシン１リン酸受容
体１（Ｓ１ＰＲ１）、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン受容体１（ＴＲＨＲ１）、バソプ
レシン受容体１Ａ（Ｖ１ａＲ）、バソプレシン受容体１Ｂ（Ｖ１ｂＲ）及びバソプレシン
受容体２（Ｖ２Ｒ）から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２２４］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２２４］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＸＣＲ４を除いて、
本出願の国際公開公報における段落［０００２２４］の群から選択されるＧＰＣＲである
。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５及
びＣＸＣＲ４を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２２４］の群から選
択されるＧＰＣＲである。
本発明の好ましい一形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：アド
レナリンα２Ｂ受容体、アンジオテンシン受容体ＡＴ１（ＡＴ１Ｒ）、ブラジキニン受容
体２（Ｂ２Ｒ）、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ９、ＣＸ
ＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ニューロペプチドＹ１受容体（ＮＰＹ１Ｒ）、オレキシン受容体２
、スフィンゴシン１リン酸受容体１（Ｓ１ＰＲ１）、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン受
容体１（ＴＲＨＲ１）、バソプレシン受容体１Ａ（Ｖ１ａＲ）、バソプレシン受容体１Ｂ
（Ｖ１ｂＲ）及びバソプレシン受容体２（Ｖ２Ｒ）から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２３０］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ５を除いて、本
出願の国際公開公報における段落［０００２３０］の群から選択されるＧＰＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４及びＣＣＲ５
を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２３０］の群から選択されるＧＰ
ＣＲである。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＸＣＲ４を除いて、
本出願の国際公開公報における段落［０００２３０］の群から選択されるＧＰＣＲである
。
一実施形態では、本発明の特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５及
びＣＸＣＲ４を除いて、本出願の国際公開公報における段落［０００２３０］の群から選
択されるＧＰＣＲである。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、アンジオテンシン受
容体である。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＡＴ１Ｒである。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＣＣＲ１、ＣＣ
Ｒ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ６及びＣＸＣＲ７から選
択される特定のケモカイン受容体である。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＣＣＲ１、ＣＣ
Ｒ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２及びＣＸＣＲ６から選択される特定
のケモカイン受容体である。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、群：ＣＣＲ１、ＣＣ
Ｒ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＸＣＲ２及びＣＸＣＲ６から選択される特定のケモカイン
受容体である。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ２及びＣＣＲ
６から選択される特定のケモカイン受容体である。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ２である。
本発明の特定の形態では、本発明の活性化された共存ＧＰＣＲは、ＣＸＣＲ４である。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥリガンドは、ＲＡＧＥの細胞外ドメインと相互作用して
ＲＡＧＥの活性化を調節するリガンドである。したがって、本発明のこの形態では、ＲＡ
ＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化は、ＲＡＧＥの細胞外ドメインと相互作用するリ
ガンドを介して発生しないＲＡＧＥの活性化を意味する。
好ましくは、ＲＡＧＥリガンドは、ＲＡＧＥの細胞外ドメインと相互作用してＲＡＧＥ
の活性化を調節し、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又は細胞質側テール又はその中に含まれる
モチーフと相互作用しないリガンドである。したがって、本発明のこの好ましい形態では
、ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化は、リガンドがＲＡＧＥの膜貫通ドメイン
若しくは細胞質側テール又はそれに含有されるモチーフとも相互作用しない限り、ＲＡＧ
Ｅの細胞外ドメインと相互作用するリガンドを介して発生しないＲＡＧＥの活性化を意味
する。
ＲＡＧＥの細胞外ドメイン（外部ドメインとも呼ばれる）は、３つの免疫グロブリン様
領域：Ｎ末端Ｖ型ドメインと、それに続く２つのＣ型ドメイン（Ｃ及びＣ’又は代わりに
Ｃ１及びＣ２と称される）とを含む。主要なリガンド結合部分は、Ｖドメインであるが、
ＲＡＧＥの活性化は、Ｃドメインへのリガンド結合によっても媒介され得る。リガンドは
、負に帯電する傾向があるため、大半のリガンドは、Ｖドメイン及び／又はＣ１ドメイン
に結合する傾向があるが、Ｃ２ドメインに結合するリガンドの例が少なくとも１つある（
Ｓ１００Ａ６；Ｌｅｃｌｅｒｃ ｅｔ ａｌ．，２００７）。Ｃ１及びＣ２ドメインは、
一般にリガンドに直接結合しないことがあり得るが、それらは、リガンドとの相互作用を
媒介するためにＶドメインを安定化する上で重要な役割を有する可能性がある。ＲＡＧＥ
は、単一の膜貫通ドメイン及び細胞質側テールを有する。ヒトでは、ＲＡＧＥの細胞質側
テールは、４３アミノ酸長（残基３６２～残基４０４）である。この細胞質側テールは、
ＲＡＧＥ依存性細胞活性化に重要なモチーフを含有する。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥリガンドは、ＲＡＧＥの細胞外ドメインの細胞外Ｖ、Ｃ
１及び／又はＣ２ドメインと相互作用してＲＡＧＥを活性化するリガンドである。本発明
のこの形態では、ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化は、ＲＡＧＥの細胞外ドメ
インの細胞外Ｖ、Ｃ１又はＣ２ドメインと相互作用するリガンドを介して発生しないＲＡ
ＧＥの活性化を意味する。
好ましくは、ＲＡＧＥリガンドは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン若しくは細胞質側テール
又はそれに含有されるモチーフと相互作用しない。本発明のこの形態では、ＲＡＧＥリガ
ンド非依存性のＲＡＧＥ活性化は、リガンドがＲＡＧＥの膜貫通ドメイン若しくは細胞質
側テール又はそれに含有されるモチーフとも相互作用しない限り、ＲＡＧＥの細胞外ドメ
インの細胞外Ｖ、Ｃ１又はＣ２ドメインと相互作用するリガンドを介して発生しないＲＡ
ＧＥの活性化を意味する。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどの活性化アンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２など
、活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節す
るモジュレーターは、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化も調節する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明のモジュレーターは、特定の活性化された共存
ＧＰＣＲに関連するＲＡＧＥ非依存性シグナル伝達経路を調節しないか、又は異なって調
節するか、又は異なる程度に調節する。
好ましい実施形態では、本発明のモジュレーターは、１つ以上のＲＡＧＥ非依存性の特
定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路を阻害しないか又はより少ない程度に阻害する。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、Ｇ
ｑシグナル伝達経路である。本発明の一形態では、ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣ
Ｒシグナル伝達経路は、Ｇｉ／ｏシグナル伝達経路である。本発明の一形態では、ＲＡＧ
Ｅ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、Ｇｓシグナル伝達経路である。本
発明の一形態では、ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、カルシ
ウムシグナル伝達経路である。本発明の一形態では、ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰ
ＣＲシグナル伝達経路は、ホスホリパーゼＣシグナル伝達経路である。本発明の別の形態
では、ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、βアレスチン媒介細
胞外調節キナーゼ（ＥＲＫ）シグナル伝達である。
活性化された共存ＧＰＣＲが、活性化されたＡＴ１Ｒである特に好ましい実施形態では
、本発明のモジュレーターは、１つ以上のＲＡＧＥ非依存性ＡＴ１Ｒシグナル伝達経路を
調節しないか又はより少ない程度に調節する。
活性化された共存ＧＰＣＲが、活性化されたＡＴ１Ｒである特に好ましい実施形態では
、本発明のモジュレーターは、１つ以上のＲＡＧＥ非依存性ＡＴ１Ｒシグナル伝達経路を
阻害しないか又はより少ない程度に阻害する。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ非依存性ＡＴ１Ｒシグナル伝達経路は、Ｇｑシグナル伝
達経路である。本発明の別の形態では、ＲＡＧＥ非依存性ＡＴ１Ｒシグナル伝達経路は、
βアレスチン媒介細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫ）シグナル伝達である。
活性化された共存ＧＰＣＲが、活性化されたＣＣＲ２である別の特に好ましい実施形態
では、本発明のモジュレーターは、１つ以上のＲＡＧＥ非依存性ＣＣＲ２シグナル伝達経
路を調節しないか又はより少ない程度に調節する。
活性化された共存ＧＰＣＲが、活性化されたＣＣＲ２である別の特に好ましい実施形態
では、本発明のモジュレーターは、１つ以上のＲＡＧＥ非依存性ＣＣＲ２シグナル伝達経
路を阻害しないか又はより少ない程度に阻害する。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ非依存性ＡＴ１Ｒシグナル伝達経路は、Ｇｉ／ｏシグナ
ル伝達経路である。本発明の別の形態では、ＲＡＧＥ非依存性ＣＣＲ２シグナル伝達経路
は、βアレスチン媒介細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫ）シグナル伝達である。本発明の別の
形態では、ＲＡＧＥ非依存性ＣＣＲ２シグナル伝達経路は、ホスホリパーゼＣシグナル伝
達経路である。
＜モジュレーター＞
本発明の一形態では、本発明のモジュレーターは、活性化剤、阻害剤、アロステリック
モジュレーター又はＲＡＧＥの細胞質側テールの機能的又は非機能的な代替物である。機
能的代替物は、特定の共存ＧＰＣＲの存在下でＲＡＧＥの細胞質側テールに代わるモジュ
レーターであり、それらによって活性化されて、野生型ＲＡＧＥの発現の存在下又は非存
在下で下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を誘導することができる。非機能的代替物は、
特定の共存ＧＰＣＲの存在下でＲＡＧＥの細胞質側テールに代わるモジュレーターであり
、それらによって活性化されることができないか、又は下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝
達を誘導することができず、且つＲＡＧＥの細胞質側テールの活性化及びそれにより生じ
るＲＡＧＥ依存シグナル伝達を通して通常発生するシグナル伝達を阻害する。
本発明の一形態では、本発明のモジュレーターは、活性化剤、阻害剤、アロステリック
モジュレーター又はＲＡＧＥの膜貫通ドメイン若しくはその一部の非機能的代替物である
。
非機能的代替物は、特定の共存ＧＰＣＲの存在下でＲＡＧＥの膜貫通ドメインに代わる
モジュレーターであり、それらによって活性化されることができないか、又は下流のＲＡ
ＧＥ依存性シグナル伝達を誘導することができず、且つＲＡＧＥの細胞質側テールの活性
化及びそれにより生じるＲＡＧＥ依存シグナル伝達を通して通常発生するシグナル伝達を
阻害する。
本発明の一形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部及び
ＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片を含む。
本発明の一形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部及び
ＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む。
本発明の一形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部、及
びＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片、及びＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む。
本発明の一形態では、本発明のモジュレーターは、長さが４０アミノ酸以下、２０アミ
ノ酸以下、１０アミノ酸以下又は５アミノ酸以下であるＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片
を含有する。
モジュレーターの例として、本発明者らは、ＲＡＧＥ３６２－４０４がＲＡＧＥの機能
的代替物であり、ＡＴ１Ｒ及びＣＣＲ２などの特定の共存ＧＰＣＲによって活性化するこ
とができ、野生型ＲＡＧＥの発現の存在下又は非存在下において、ＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化に起因する下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を誘導することを実
証した。さらに、ＲＡＧＥ３６２－４０４が細胞透過性ペプチド（ＴＡＴ）及びマーカー
タンパク質（ｍＣｈｅｒｒｙ）に融合すると、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒの活性化に続
くＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４オリゴペプチドによる処置は、野生
型ＲＡＧＥの発現の非存在下においてＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスのＡｎｇ ＩＩ
依存性炎症及びアテローム形成を回復することができる。
ＲＡＧＥ３６２－４０４の配列は、配列番号１である。
モジュレーターの追加の例として、本発明者らは、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０
４が、特定の共存ＧＰＣＲの存在下でそれらによって活性化されず、ＲＡＧＥ依存性シグ
ナル伝達を阻害するＲＡＧＥの非機能的代替物であることを実証した。Ｓ３９１Ａ－ＲＡ
ＧＥ３６２－４０４の発現は、活性化ＡＴ１Ｒによる野生型ＲＡＧＥリガンド非依存性の
ＲＡＧＥ活性化及びＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９による野生型ＲＡＧＥのＲＡＧ
Ｅリガンド依存性活性化を阻害する。さらに、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４が細
胞透過性ペプチド（ＴＡＴ）及びマーカータンパク質（ｍＣｈｅｒｒｙ）に融合すると、
ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４オリゴペプチドによる処
置は、活性化されたＡＴ１ＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を阻害し
て、アポリポタンパク質ＥノックアウトマウスにおけるＡｎｇ ＩＩ依存性炎症及びアテ
ローム形成を減弱させる。さらなる例を以下に提供する。
Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の配列は、配列番号２である。
モジュレーターの別の例として、本発明者らは、ＲＡＧＥ３３８－３６１が、活性化Ａ
Ｔ１Ｒによる野生型ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を阻害することを実証し
た。この阻害は、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の共発現によって克服される
。
ＲＡＧＥ３３８－３６１の配列は、配列番号３である。
［Ｌ３３８ＧＴＬＡＬＡＬＧＩＬＧＧＬＧＴＡＡＬＬＩＧＶＩ３６１］
一形態において、本発明は、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２など
のケモカイン受容体など、そのような特定の活性化された共存ＧＰＣＲの活性化により引
き起こされるＲＡＧＥの細胞質側テールのトランス活性化を調節する、特定の活性化され
た共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターを含
む。
一形態において、本発明は、プロテインキナーゼＣゼータ（ＰＫＣζ）、Ｄｏｃｋ７、
ＭｙＤ８８、ＴＩＲＡＰ、ＩＲＡＫ４、ＥＲＫ１／２、嗅覚受容体２Ｔ２、ＡＤＰ／ＡＴ
Ｐトランスロカーゼ２、プロテインホスファターゼ１Ｇ、細胞間接着分子１、タンパク質
ＤＪ－１（ＰＡＲＫ７）、カルポニン－３、ドレブリン、フィラミンＢ、Ｒａｓ関連タン
パク質Ｒａｂ－１３、ラディキシン／エズリン／モエシン、プロテオリピドタンパク質２
、コロニン、Ｓ１００ Ａ１１、サクシニル－ＣｏＡリガーゼ［ＧＤＰ形成］サブユニッ
トα、Ｈｓｃ７０相互作用タンパク質、アポトーシス阻害剤５、ニューロピリン、切断刺
激因子、成長因子受容体結合タンパク質２、ｓｅｃ６１βサブユニット若しくはＮｃｋ１
を含む、Ｒａｓ－ＧＴＰａｓｅ活性化様タンパク質（ＩＱＧＡＰ１）若しくは他のＲＡＧ
Ｅ関連タンパク質に結合するか、又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体若しくはＣ
ＣＲ２などのケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥト
ランス活性化を調節するために、これらの要素のＲＡＧＥへの結合を破壊する、特定の活
性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥの細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド非依存性活
性化のモジュレーターを含む。
本発明の一形態では、本発明のモジュレーターは、ＩＱＧＡＰ－１、ＰＫＣζ、Ｄｏｃ
ｋ７、ＭｙＤ８８、ＴＩＲＡＰ、ＩＲＡＫ４、ＥＲＫ１／２、嗅覚受容体２Ｔ２、ＡＤＰ
／ＡＴＰトランスロカーゼ２、プロテインホスファターゼ１Ｇ、細胞間接着分子１、タン
パク質ＤＪ－１（ＰＡＲＫ７）、カルポニン－３、ドレブリン、フィラミンＢ、Ｒａｓ関
連タンパク質Ｒａｂ－１３、ラディキシン／エズリン／モエシン、プロテオリピドタンパ
ク質２、コロニン、Ｓ１００ Ａ１１、サクシニル－ＣｏＡリガーゼ［ＧＤＰ形成］サブ
ユニットα、Ｈｓｃ７０相互作用タンパク質、アポトーシス阻害剤５、ニューロピリン、
切断刺激因子、成長因子受容体結合タンパク質２、ｓｅｃ６１βサブユニット若しくはＮ
ｃｋ１を含む、特定の活性化された共存ＧＰＣＲの細胞質ゾル要素、ＲＡＧＥ及び／又は
いずれかと複合体化した要素に結合して、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体など、
若しくはＣＣＲ２などのケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによる
ＲＡＧＥトランス活性化に必要なこれらのシグナル伝達要素を調節することにより、ＲＡ
ＧＥの細胞質側テールを介したＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達を調節する。
本発明の一形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ＲＡＧＥのサイトゾル要素及び／又はサイトゾ
ルのＲＡＧＥと複合する要素（ＩＱＧＡＰ－１、ＰＫＣζ、Ｄｏｃｋ７、ＭｙＤ８８、Ｉ
ＲＡＫ４、ＴＩＲＡＰ、ＥＲＫ１／２、嗅覚受容体２Ｔ２、ＡＤＰ／ＡＴＰトランスロカ
ーゼ２、プロテインホスファターゼ１Ｇ、細胞間接着分子１、タンパク質ＤＪ－１（ＰＡ
ＲＫ７）、カルポニン－３、ドレブリン、フィラミンＢ、Ｒａｓ関連タンパク質Ｒａｂ－
１３、ラディキシン／エズリン／モエシン、プロテオリピドタンパク質２、コロニン、Ｓ
１００ Ａ１１、サクシニル－ＣｏＡリガーゼ［ＧＤＰ形成］サブユニットα、Ｈｓｃ７
０相互作用タンパク質、アポトーシス阻害剤５、ニューロピリン、切断刺激因子、成長因
子受容体結合タンパク質２、ｓｅｃ６１βサブユニット又はＮｃｋ１など）に結合するこ
とにより、ＲＡＧＥの細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド依存性活性化も調節して、これ
らの要素を介したＲＡＧＥリガンド媒介シグナル伝達を阻害する。
特定の実施形態では、モジュレーターは、配列番号１に記載のアミノ酸配列又はその類
似体、断片若しくは誘導体を含むか、それからなるか又はそれから本質的になる。
いくつかの実施形態では、モジュレーターは、遺伝子送達（エレクトロポレーション、
マイクロインジェクション、遺伝子銃、インペイルフェクション（ｉｍｐａｌｅｆｅｃｔ
ｉｏｎ）、静水圧、持続注入、超音波処理、リポフェクション、リポソーム、ナノバブル
及び高分子遺伝子担体など、ウイルス又は人工の非ウイルス遺伝子送達を使用することに
よるものなど）によって導入され、ペプチドフラグメント、生物学的に活性な類似体又は
誘導体が転写及び翻訳プロセスの結果として細胞によって生成される。
この態様のいくつかの実施形態では、モジュレーターは、ＡＴ１Ｒ又はＣＣＲ２などの
特定の共存ＧＰＣＲ又はそれらと複合する要素と複合体を形成するための改変された能力
を有する。例えば、ＲＡＧＥ類似体又は誘導体は、少なくとも１つのアミノ酸残基の置換
、付加若しくは欠失又は異常若しくは非従来型アミノ酸又は非アミノ酸残基の付加若しく
は置換により、野生型ＲＡＧＥポリペプチド又は断片配列と区別され得る。
いくつかの実施形態では、モジュレーターは、野生型ヒトＲＡＧＥポリペプチドに通常
存在するセリン３９１の修飾を欠くか又はこれを有する。このタイプの例示的な例では、
ＲＡＧＥの細胞質側テールの断片、類似体又は誘導体は、野生型ＲＡＧＥ配列の３９１位
のセリンを欠いている（例えば、ＲＡＧＥ３７０－３９０構築物は、Ｇｌｕ３９０で切断
されている）。適切には、３９１位のセリンは、共存ＧＰＣＲの活性化後にこの部位のセ
リンによって付与されるシグナル伝達を損なうか又は無効にするように欠失されているか
、又は別のアミノ酸残基、類似体又は誘導体で置換されている。一実施形態では、３９１
位のセリンは、欠失しているか、又は群：アラニン、アスパラギン酸、フェニルアラニン
、ヒスチジン、リジン、アルギニン、チロシン、アスパラギン、バリン、グリシン、シス
テイン若しくはグルタミン酸から選択される別のアミノ酸残基で置換されている。
いくつかの実施形態では、モジュレーターは、野生型ヒトＲＡＧＥポリペプチドに通常
存在するセリン３９１を保持しているか、又は３９１位でセリンと同じ機能を保持する別
のアミノ酸若しくはその類似体若しくは誘導体で置換されている。このタイプの例では、
ＲＡＧＥの細胞質側テールの断片は、野生型ＲＡＧＥ配列の３９１位のセリンを保持して
いる（例えば、ＲＡＧＥ３７０－４０４構築物）。適切には、３９１位のセリンは、この
部位にセリンを含有するＲＡＧＥ構築物による共存ＧＰＣＲの活性化後に付与されるシグ
ナル伝達を複製するために、別のアミノ酸残基又はその類似体若しくは誘導体で置換され
ている。一実施形態では、３９１位のセリンは、群：プロリン、グルタミン、スレオニン
、ロイシン、イソロイシン、メチオニン又はトリプトファンから選択される別のアミノ酸
残基で置換されている。
いくつかの実施形態では、モジュレーターは、ヒト野生型ＲＡＧＥと比較してＤｉａｐ
ｈａｎｏｕｓ １（Ｄｉａｐｈ１）に結合する能力を欠くか又は低下した能力を有する。
このタイプの例示的な例では、ペプチド又はその類似体、断片若しくは誘導体は、ＲＡＧ
Ｅ－Ｄｉａｐｈ１結合部位（ＲＡＧＥ３７０－３９０、ＲＡＧＥ３７４－３９０又はＲＡ
ＧＥ３７９－３９０など）を欠くか、又はこの部位を無効にするか又は損なうように変化
されたＤｉａｐｈ１結合部位（３６６Ａ／３６７Ａなど）を有する。適切には、３６６／
３６７の残基は、この部位を損なうか又は無効にするように欠失されているか、又は他の
残基（アラニンなど）で置換されており、そうすることでＤｉａｐｈ１への野生型の結合
によって引き起こされる制約を減らすことにより、他の標的への結合の親和性を改善する
。
本発明の一態様では、本発明のモジュレーターは、式Ｉ：
Ｚ１ Ｍ Ｚ２ （Ｉ）
（式中、
Ｚ１は、存在しないか、又は約１～約５０アミノ酸残基を含むタンパク質性部分の少な
くとも１つから選択され；
Ｍは、配列番号１に記載のアミノ酸配列又はその類似体、断片若しくは誘導体であり；
及び
Ｚ２は、存在しないか、又は約１～約５０アミノ酸残基を含むタンパク質性部分である
）
によって表されるアミノ酸配列を含むか、それからなるか又はそれから本質的になる、単
離又は精製されたペプチドを含む。
上記の本発明のいくつかの実施形態では、モジュレーター（上記及び本明細書の他の箇
所に広く記載されているＲＡＧＥの細胞質側テールの断片、その類似体又は誘導体など）
は、細胞膜を透過することができる。このタイプの非限定的な例では、ＲＡＧＥモジュレ
ーターは、細胞膜透過分子（例えば、以下の配列番号４に記載のＨＩＶ－ＴＡＴモチーフ
）にコンジュゲート、融合又は他の方法で連結されている。
配列番号４：
［ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ］。
本発明のいくつかの形態では、モジュレーターは、特定の活性化された共存ＧＰＣＲに
よるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化に関連する要素に結合及び／又は干渉す
る能力を上記のペプチドモジュレーターと共有する非ペプチド分子である。これらの非ペ
プチドモジュレーターは、ペプチドモジュレーターに含まれる機能的に重要なドメインに
対する構造的類似性を含む場合及び含まない場合があり得る。
好ましい形態において、非ペプチドモジュレーターは、本出願の国際公開公報における
段落［０００３１８］に記載のファーマコフォアによって表されるように、ペプチドモジ
ュレーターに含まれる機能的に重要なドメインと構造的類似性を含む。
本発明の好ましい形態では、モジュレーターは、阻害剤である。
本発明の特定の形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非
依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、モジュレーターは、特定の共存Ｇ
ＰＣＲの阻害剤及び／又は特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の阻害剤である。
本発明の特定の形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非
依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、モジュレーターは、ＲＡＧＥのＲ
ＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害剤、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥの阻害剤、及び
／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤である。
特定の共存ＧＰＣＲがＡＴ１Ｒである本発明の特定の形態では、ＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、モジュレーターは、ＡＴ１Ｒ阻害剤
及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路の阻害剤である。
本発明の特定の形態では、活性化アンジオテンシン受容体、好ましくは活性化ＡＴ１Ｒ
によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、モジュ
レーターは、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害剤、及び／又は構成的活性
型ＲＡＧＥの阻害剤、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤である。
本発明の特定の形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非
依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、モジュレーターは、特定の共存Ｇ
ＰＣＲの阻害剤及び／又は特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の阻害剤であり、ＲＡＧ
ＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害剤、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥの阻害剤
、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤である。
本発明の特定の形態では、活性化アンジオテンシン受容体、好ましくは活性化ＡＴ１Ｒ
によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、モジュ
レーターは、ＡＴ１Ｒ阻害剤及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路の阻害剤であり、ＲＡ
ＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害剤、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥの阻害
剤、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤である。
特定の共存ＧＰＣＲが特定のケモカイン受容体、好ましくはＣＣＲ２である本発明の特
定の形態では、ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて
、モジュレーターは、特定のケモカイン受容体阻害剤、好ましくはＣＣＲ２阻害剤及び／
又は特定のケモカインシグナル伝達経路、好ましくはＣＣＲ２シグナル伝達経路の阻害剤
である。
本発明の特定の形態では、活性化された特定のケモカイン受容体、好ましくは活性化Ｃ
ＣＲ２によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、
モジュレーターは、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害剤、及び／又は構成
的活性型ＲＡＧＥの阻害剤、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤である。
本発明の特定の形態では、活性化ケモカイン受容体、好ましくは活性化ＣＣＲ２による
ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であることに加えて、モジュレータ
ーは、特定のケモカイン受容体阻害剤、好ましくはＣＣＲ２阻害剤及び／又は特定のケモ
カインシグナル伝達経路、好ましくはＣＣＲ２シグナル伝達経路の阻害剤であり、ＲＡＧ
ＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害剤、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥの阻害剤
、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤である。
本発明の特定の形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの細胞質側テール又はその一部
の機能的代替物であり、活性化ＡＴ１Ｒ及び活性化ＣＣＲ２などの特定の共存ＧＰＣＲに
よって活性化することができ、野生型ＲＡＧＥの発現の存在下又は非存在下で下流のＲＡ
ＧＥ依存性シグナル伝達を誘導する。
本発明の特定の形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの細胞質側テール又はその一部
の非機能的代替物であり、非機能的代替物は、共存ＧＰＣＲによって活性化されることが
できないか、又は下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を促進できず、且つＲＡＧＥの細胞
質側テール及びＲＡＧＥ依存シグナル伝達を通して発生するシグナル伝達を阻害する。
本発明の特定の形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部
の非機能的代替物であり、非機能的代替物は、共存ＧＰＣＲによって活性化されることが
できないか、又は下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を促進できず、且つＲＡＧＥの細胞
質側テール及びＲＡＧＥ依存シグナル伝達を通して発生するシグナル伝達を阻害する。
本発明の特定の形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部
及びＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片を含む。本発明の特定の形態では、モジュレーター
は、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部及びＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む
。
本発明の特定の形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部
、及びＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片、及びＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む。
本発明の特定の形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非
依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、長さが４０アミノ酸以下、２０アミノ酸以
下、１０アミノ酸以下又は５アミノ酸以下であるヒト野生型ＲＡＧＥのリガンド結合外部
ドメインの断片を含有する。
本発明者らは、ＲＡＧＥの細胞質側テールの残基３７０～３９０を含むペプチド（配列
番号５を参照されたい）が、野生型ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化とＲＡＧ
Ｅリガンド依存性活性化との両方を阻害する阻害ペプチドであることをさらに発見した。
配列番号５：
［Ｇ３７０ＥＥＲＫＡＰＥＮＱＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＱ３９０］。
ＲＡＧＥ３６３－４０４について、溶液ＮＭＲ構造物が存在し（Ｒａｉ Ｖ ｅｔ ａ
ｌ．，２０１２）、このペプチドのＮ末端（残基３６３～３７６）が秩序化されているこ
とが示されている。ＲＡＧＥ－３６２－４０４（モデル４）のＲｏｓｅｔｔａ由来モデル
が存在し、ＮＭＲ構造と一致し（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｒｃｓｂ．ｏｒｇ／ｐｄｂ／ｅ
ｘｐｌｏｒｅ／ｅｘｐｌｏｒｅ．ｄｏ？ｓｔｒｕｃｔｕｒｅＩｄ＝２ＬＭＢ、２０１６年
８月２５日アクセス））、ペプチドの残りの部分がαヘリックスを形成することも示唆し
ている。
ＲＡＧＥ３７０－３９０の初期モデルは、モデル４（モデル４＿３７０－３９０）を切
断することによって構築された。モデル４は、Ｉ－Ｔａｓｓｅｒ Ｗｅｂサーバー（ｈｔ
ｔｐ：／／ｚｈａｎｇｌａｂ．ｃｃｍｂ．ｍｅｄ．ｕｍｉｃｈ．ｅｄｕ／Ｉ－ＴＡＳＳＥ
Ｒ／）に配列を入力することによって生成されるＲＡＧＥの細胞質側テールの理論モデル
である。Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ（２０１５）、Ｒｏｙ ｅｔ ａｌ（２０１０）及びＹ
Ｚｈａｎｇ（２００８）も参照されたい。Ｉ－Ｔａｓｓｅｒサーバーによって提示された
５つのモデルは、全て領域３７０－３９０がヘリックスを形成すると予測した。モデルと
ＮＭＲ構造は、ペプチド配列の骨格のＣα炭素によってアラインされた。モデル４のＤｉ
ａｐｈａｎｏｕｓ １結合部位に対応する領域の予測構造は、この領域について記録され
たＮＭＲ構造に最も近いため、モデル４が優先モデルとして選択された。
ＧＲＯＭＡＣＳを使用して、水中のモデル４の２０ｎｓの分子動態シミュレーションを
実行した（Ｈｅｓｓ ｅｔ ａｌ．，２００８）。分子動態シミュレーションは、モデル
４＿３７０－３９０のαヘリックス領域が安定していることを示唆している。多数の荷電
側鎖間に強い相互作用が観察され、これにより、これらの相互作用が折り畳み構造を安定
化し、これらの残基の任意の保存がペプチド構造の安定化における役割に起因し得ること
が示唆される。
Ｂｌａｓｔ検索を使用して、ＲＡＧＥ３７０－３９０の相同配列を同定した。配列は次
のようにアラインされた。
ＣＬＵＳＴＡＬ ２．０．１０多重配列アライメント
この分析により、以下のようにマークされた、ＲＡＧＥ３７０－３９０における多数の
強力に保存された残基が特定された。＊（アスタリスク）は、単一の完全に保存された残
基を有する位置を示す。：（コロン）は、強く類似した特性を有する基間の保存を示す（
Ｇｏｎｎｅｔ ＰＡＭ ２５０マトリックスにおけるスコア＞０．５）。．（ピリオド）
は、弱く類似した特性を有する基間の保存を示す（Ｇｏｎｎｅｔ ＰＡＭ ２５０マトリ
ックスにおけるスコア＝＜０．５）。
高度に保存された残基は、構造的な役割を果たす可能性がある。下線が引かれた残基は
、ヘリックスの一面に位置し、結合ファーマコフォアを表す可能性がある。
モデル４＿ＲＡＧＥ３７０－３９０の構造及び分子動態シミュレーションの結果を検討
すると、構造内に多数の塩橋が存在していることがわかる。分子動態シミュレーションは
、これらの相互作用が重要な構造的特徴であることを示す。構造的機能は、これらのアミ
ノ酸の保存された性質について可能性のある理由である。
多くの強固に保存されたアミノ酸は、塩橋形成に関与していない。これらは、ＲＡＧＥ
３７０－３９０ヘリックスの片面に存在し、結合インターフェースを表す可能性がある。
これらは、Ｇｌｕ３８０、Ｇｌｕ３８４、Ｇｌｕ３８７及びＬｅｕ３８８である。別の高
度に保存された残基であるＧｌｕ３７７も、ペプチドのこの面に存在し、Ｌｙｓ３７４へ
のαヘリックス安定化塩橋の形成に加えて、結合にも関与し得る。
主要な疎水性残基Ｌ３８８のアラニン（例えば、Ｌ３８８Ａ－ＲＡＧＥ３７０－３９０
）での置換は、野生型ＲＡＧＥに作用する場合、ＲＡＧＥ３７０－３９０によって達成さ
れる阻害の損失をもたらす。３８０及び３８４の両方を排除するＲＡＧＥのＮ末端トラン
ケート（例えば、ＲＡＧＥ３８５－３９０及びＲＡＧＥ３８５－４０４）は、これらのＲ
ＡＧＥ構築物の調節作用の損失をもたらす。対照的に、３７４及び３７７の両方を排除す
るＲＡＧＥのＮ末端トランケートは、阻害剤（ＲＡＧＥ３７９－３９０）として又は野生
型ＲＡＧＥの機能的代替物（例えば、ＲＡＧＥ３７９－４０４）としてのＲＡＧＥペプチ
ドの機能の損失をもたらさず、これは、これらの保存された残基（３７４及び３７７）が
、ＲＡＧＥの細胞質側テールのαヘリカル三次構造を安定化する役割を果たし得る場合で
も調節活性に必須でないことを示している。
本発明者らは、結合面を表すこれら４つのアミノ酸の保存された性質と一致して、ＲＡ
ＧＥの細胞質側テールの残基３７９～３９０のみを含むペプチド（すなわちＲＡＧＥ３７
９－３９０）が、野生型ＲＡＧＥのリガンド非依存性活性化とリガンド依存性活性化との
両方を阻害する阻害ペプチドであること及びＲＡＧＥ３７９－４０４がＣＨＯ細胞中の特
定の共存ＧＰＣＲによって活性化できることをさらに発見した。
本発明の好ましい形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２など
の特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガン
ド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号６に記載のＥペプチドＱ３７
９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＱ３９０又はその誘導体である。
配列番号６：
［Ｑ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＱ３９０］
構造モデル４＿ＲＡＧＥ３７０－３９０に由来するＲＡＧＥ３７９－３９０ペプチドの
ファーマコフォアを以下に示す。
Ｈ４は、疎水性残基であり、Ｐ１～Ｐ３は、極性残基であり、距離は、オングストロー
ムで示される。部位点間の距離のマトリックスは、次の通りであり、ここで、Ｐは、極性
部位点（水素結合又は荷電）を表し、Ｈは、疎水性部位点を表す。距離は、オングストロ
ームである。各ポイントの位置に許容差が適用されるべきである。
分子動態シミュレーションは、ＲＡＧＥ３７９－３９０の相互作用基が可動性であり、
部位間の距離の大きさが正の場合、各基の位置に最大±１０Åの許容差が適用されるべき
であることを示している。
当業者に理解されるように、上記のサブセットを取ることにより、追加のより小さいフ
ァーマコフォアを生成することができ、本発明は、そのようなファーマコフォア、化合物
を同定するためのそのような使用方法及びそのように同定された化合物を包含する。
一形態において、本発明は、群：第１の荷電又は水素結合性基（Ａ）、第２の荷電又は
水素結合性基（Ｂ）、第３の荷電又は水素結合性基（Ｃ）及び疎水基（Ｄ）から選択され
る２つ以上の特徴を含む、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターをさらに含み、特徴の部位点間の距離は、部位点
間の距離の大きさが正である場合、最大±１０Å以内の許容差内において、以下の通りで
ある。
本発明の好ましい形態では、部位点間の距離の大きさが正である場合、許容差は、最大
±５Åである。本発明の好ましい形態では、部位点間の距離の大きさが正である場合、許
容差は、最大±２Åである。本発明の好ましい形態では、部位点間の距離の大きさが正で
ある場合、許容差は、最大±１Åである。
本発明の好ましい形態では、モジュレーターは、上記で特定された群から選択される３
つ以上の特徴を含む。
本発明の好ましい形態では、モジュレーターは、上記で特定された群からの４つの特徴
を含む。
本発明の一形態では、次の組み合わせ：ＡＢ、ＡＣ、ＡＤ、ＢＣ、ＢＤ及びＣＤの１つ
から選択される少なくとも２つの特徴を含むことを特徴とするモジュレーターが提供され
る。
本発明の一形態では、次の組み合わせ：ＡＢＣ、ＡＢＤ、ＡＣＤ及びＢＣＤの１つから
選択される少なくとも３つの特徴を含むことを特徴とするモジュレーターが提供される。
本発明の一形態では、次の組み合わせ：ＡＢＣＤの１つから選択される少なくとも４つ
の特徴を含むことを特徴とするモジュレーターが提供される。
本発明の一形態では、モジュレーターは、ＲＡＧＥ３７０－３９０のＥ３７７の保存さ
れた安定化作用と一致する追加の荷電又は水素結合性基（Ｐ１）を含み、したがって、群
：第１の荷電又は水素結合性基（Ａ）、第２の荷電又は水素結合性基（Ｂ）、第３の荷電
又は水素結合性基（Ｃ）、第４の荷電又は水素基（Ｄ）及び疎水基（Ｅ）から選択される
２つ以上の特徴を含むことを特徴とするモジュレーターが提供され、特徴の部位点間の距
離は、±１０Å以内の許容差内において、以下の通りである。
ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ペプチド又は非ペプ
チジル化合物であり得る。
本発明の一形態では、疎水性基は、群：Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔ
ｒｐ、Ｔｙｒから選択されるアミノ酸残基である。
本発明の一形態では、疎水性基は、群：Ｃ１～８アルキル、Ｃ１～８アルケニル、Ｃ３
～６シクロアルキル、アリール、置換アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、ア
ルキルヘテロアリールから選択される化学部分である。
「アルキル」は、脂肪族炭化水素基を意味し、直鎖又は分岐鎖であり得、鎖に約１個～
約２０個の炭素原子を含む。好ましいアルキル基は、鎖に約１個～約１２個の炭素原子を
含む。好ましいアルキル基は、鎖に約１個～約６個の炭素原子を含む。分岐鎖は、メチル
、エチル又はプロピルなどの１つ以上の低級アルキル基が直鎖アルキル鎖に結合している
ことを意味する。
「低級アルキル」は、直鎖又は分岐鎖であり得る、鎖に約１個～約６個の炭素原子を有
する基を意味する。アルキル基は、任意選択により同一であるか又は異なり得る１つ以上
の置換基で置換され得、各置換基は、ハロ、アルキル、アリール、シクロアルキル、シア
ノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、アミノ、－ＮＨ（アルキル）、－ＮＨ（シ
クロアルキル）、－Ｎ（アルキル）２、カルボキシ及び－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキルからなる
群から独立して選択される。適切なアルキル基の非限定的な例には、メチル、エチル、ｎ
－プロピル、イソプロピル及びｔ－ブチルが含まれる。
「アルケニル」は、直鎖又は分岐鎖であり得、鎖に約２個～約１５個の炭素原子を含む
、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を含む脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいア
ルケニル基は、鎖に約２個～約１２個の炭素原子、より好ましくは、鎖に約２個～約４個
の炭素原子を有する。分岐鎖は、メチル、エチル又はプロピルなどの１つ以上の低級アル
キル基が直鎖アルケニル鎖に結合していることを意味する。
「低級アルケニル」は、直鎖又は分岐鎖であり得る、鎖中の約２個～約６個の炭素原子
を意味する。適切なアルケニル基の非限定的な例には、エテニル、プロペニル、２－ブテ
ニル及び３－メチルブテニルが含まれる。「置換アルケニル」という用語は、アルケニル
基が同一であるか又は異なり得る１つ以上の置換基で置換され得ることを意味し、各置換
基は、アルキル、アリール及びシクロアルキルからなる群から独立して選択される。
「アルキニル」は、直鎖又は分岐鎖であり得、鎖に約２個～約１５個の炭素原子を含む
、少なくとも１つの炭素－炭素三重結合を含む脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいア
ルキニル基は、鎖に約２個～約１２個の炭素原子、より好ましくは鎖に約２個～約４個の
炭素原子を有する。分岐鎖は、メチル、エチル又はプロピルなどの１つ以上の低級アルキ
ル基が直鎖アルキニル鎖に結合していることを意味する。
「低級アルキニル」は、直鎖又は分岐鎖であり得る、鎖中の約２個～約６個の炭素原子
を意味する。適切なアルキニル基の非限定的な例には、エチニル、プロピニル、２－ブチ
ニル及び３－メチルブチニルが含まれる。「置換アルキニル」という用語は、アルキニル
基が同一であるか又は異なり得る１つ以上の置換基で置換され得ることを意味し、各置換
基は、アルキル、アリール及びシクロアルキルからなる群から独立して選択される。
「脂肪族」は、パラフィン、オレフィン又はアセチレン炭素原子の直鎖又は分岐鎖を意
味し、これらを含む。脂肪族基は、任意選択により同一であるか又は異なり得る１つ以上
の置換基で置換することができ、各置換基は、Ｈ、ハロ、ハロゲン、アルキル、アリール
、シクロアルキル、シクロアルキルアミノ、アルケニル、複素環、アルキニル、シクロア
ルキルアミノカルボニル、ヒドロキシル、チオ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アル
キルチオ、アミノ、－ＮＨ（アルキル）、－ＮＨ（シクロアルキル）、－Ｎ（アルキル）
２）カルボキシル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、ヘテロアリール、アラルキル、アルキルア
リール、アラルケニル、ヘテロアラルキル、アルキルヘテロアリール、ヘテロアラルケニ
ル、ヘテロアルキル、カルボニル、ヒドロキシアルキル、アリールオキシ、アラルコキシ
、アシル、アロイル、ニトロ、アミノ、アミド、エステル、カルボン酸アリールオキシカ
ルボニル、アラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロ
アリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、ヘテロアリールス
ルフィニル、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アラルキルチオ、ヘテ
ロアラルキルチオ、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクレニル、カルバメー
ト、尿素、ケトン、アルデヒド、シアノ、スルホンアミド、スルホキシド、スルホン、ス
ルホニル尿素、スルホニル、ヒドラジド、ヒドロキサメート、Ｓ（アルキル）Ｙ１Ｙ２Ｎ
－アルキル－、Ｙ１Ｙ２Ｎ－アルキル－、Ｙ１Ｙ２ＮＣ（Ｏ）－及びＹ１Ｙ２ＮＳＯ２－
からなる群から独立して選択され、ここで、Ｙ１及びＹ２は、同じであるか又は異なり得
、水素、アルキル、アリール及びアラルキルからなる群から独立して選択される。
「ヘテロ脂肪族」は、少なくとも１つのヘテロ原子（酸素、窒素、硫黄など）を含有し
、それ以外の点では脂肪族基であるものを意味する。ヘテロ脂肪族という用語には、置換
ヘテロ脂肪族が含まれる。
「アリール」は、約６個～約１４個の炭素原子、好ましくは約６個～約１０個の炭素原
子を含む芳香族単環式又は多環式環系を意味する。アリール基は、同一であるか又は異な
り得、本明細書で定義された通りである１つ以上の「環系置換基」で任意選択により置換
することができる。適切なアリール基の非限定的な例には、フェニル及びナフチルが含ま
れる。
「ヘテロアルキル」は、１つ以上の水素原子がＮ、Ｓ又はＯから選択されるヘテロ原子
で置換された、上記で定義されるアルキルを意味する。
「ヘテロアリール」は、約５個～約１４個の環原子、好ましくは約５～約１０個の環原
子を含む芳香族単環式又は多環式環系を意味し、ここで、１つ以上の環原子は、炭素以外
の元素、例えば窒素、酸素又は硫黄の単独又は組み合わせである。好ましいヘテロアリー
ルは、約５個～約６個の環原子を含む。「ヘテロアリール」は、同一であるか又は異なり
得、本明細書で定義された通りである１つ以上の「環系置換基」で任意選択により置換す
ることができる。ヘテロアリールのルート名の前の接頭辞のアザ、オキサ又はチアは、そ
れぞれ少なくとも窒素、酸素又は硫黄原子が環原子として存在することを意味する。ヘテ
ロアリールの窒素原子は、任意選択により、対応するＮ－オキシドに酸化することができ
る。適切なヘテロアリールの非限定的な例には、ピリジル、ピラジニル、フラニル、チエ
ニル、ピリミジニル、ピリドン（Ｎ－置換ピリドンを含む）、イソオキサゾリル、イソチ
アゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、フラザニル、ピロリル、ピラゾリル
、トリアゾリル、１，２，４－チアジアゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、キノキサリ
ニル、フタラジニル、オキシインドリル、イミダゾ［１，２－ａ］ピリジニル、イミダゾ
［２，１－ｂ］チアゾリル、ベンゾフラザニル、インドリル、アザインドリル、ベンズイ
ミダゾリル、ベンゾチエニル、キノリニル、イミダゾリル、チエノピリジル、キナゾリニ
ル、チエノピリミジル、ピロロピリジル、イミダゾピリジル、イソキノリニル、ベンゾア
ザインドリル、１，２，４－トリアジニル、ベンゾチアゾリルなどが含まれる。「ヘテロ
アリール」という用語は、例えば、テトラヒドロイソキノリル、テトラヒドロキノリルな
どの部分飽和ヘテロアリール部分も指す。
「アラルキル」又は「アリールアルキル」は、アリール及びアルキルが前述の通りであ
るアリール－アルキル－基を意味する。好ましいアラルキルは、低級アルキル基を含む。
適切なアラルキル基の非限定的な例には、ベンジル、２－フェネチル及びナフタレニルメ
チルが含まれる。親部分への結合は、アルキルを介する。
「アルキルアリール」は、アルキル及びアリールが前述の通りであるアルキル－アリー
ル－基を意味する。好ましいアルキルアリールは、低級アルキル基を含む。適切なアルキ
ルアリール基の非限定的な例は、トリルである。親部分への結合は、アリールを介する。
「シクロアルキル」は、約３個～約１０個の炭素原子、好ましくは約５個～約１０個の
炭素原子を含む非芳香族単環式又は多環式環系を意味する。好ましいシクロアルキル環は
、約５個～約７個の環原子を含む。シクロアルキルは、同一であるか又は異なり得、上記
で定義された通りである１つ以上の「環系置換基」で任意選択により置換することができ
る。適切な単環式シクロアルキルの非限定的な例には、シクロプロピル、シクロペンチル
、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが含まれる。適切な多環式シクロアルキルの非限
定的な例には、１－デカリニル、ノルボルニル、アダマンチルなど、及び例えばインダニ
ル、テトラヒドロナフチルなどの部分飽和種が含まれる。「ハロゲン」は、フッ素、塩素
、臭素又はヨウ素を意味する。フッ素、塩素及び臭素が好ましい。
「環系置換基」は、例えば、環系上の利用可能な水素を置き換える、芳香族又は非芳香
族環系に結合した置換基を意味する。環系置換基は、同一であるか又は異なり得、それぞ
れアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、アルキ
ルアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールアルキニル
、アルキルヘテロアリール、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アリールオ
キシ、アラルコキシ、アシル、アロイル、ハロ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、アルコキ
シカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アルキルスルホニ
ル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキルチオ、アリールチオ、ヘ
テロアリールチオ、アラルキルチオ、ヘテロアラルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロシ
クリル、－Ｃ（＝Ｎ－ＣＮ）－ＮＨ２、－Ｃ（＝ＮＨ）－ＮＨ２、－Ｃ（＝ＮＨ）－ＮＨ
（アルキル）、Ｙ１Ｙ２Ｎ－、Ｙ１Ｙ２Ｎ－アルキル－、Ｙ１Ｙ２ＮＣ（Ｏ）－、Ｙ１Ｙ
２ＮＳＯ２－及び－ＳＯ２ＮＹ１Ｙ２からなる群から独立して選択され、ここで、Ｙ１及
びＹ２は、同一であるか又は異なり得、水素、アルキル、アリール、シクロアルキル及び
アラルキルからなる群から独立して選択される。「環系置換基」は、環系における２つの
隣接する炭素原子上の２つの利用可能な水素（各炭素上の１つのＨ）を同時に置き換える
単一の部分も意味し得る。そのような部分の例は、例えば、以下のような部分を形成する
メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、－Ｃ（ＣＨ３）２－などである。
本発明のヘテロ原子含有環系では、Ｎ、Ｏ又はＳ１に隣接する炭素原子上にヒドロキシ
ル基がなく、また別のヘテロ原子に隣接する炭素上にＮ又はＳ基がないことに留意された
い。したがって、例えば、環において、
２及び５と標識された炭素に直接結合する－ＯＨはない。
例えば、化学部分：
などの互変異性形態も、本発明の特定の実施形態では均等物であると考えられることに留
意されたい。
「アルキニルアルキル」は、アルキニル及びアルキルが前述の通りであるアルキニル－
アルキル－基を意味する。好ましいアルキニルアルキルは、低級アルキニル及び低級アル
キル基を含む。親部分への結合は、アルキルを介する。適切なアルキニルアルキル基の非
限定的な例には、プロパルギルメチルが含まれる。
「ヘテロアラルキル」は、ヘテロアリール及びアルキルが前述の通りであるヘテロアリ
ール－アルキル－基を意味する。好ましいヘテロアラルキルは、低級アルキル基を含む。
適切なアラルキル基の非限定的な例には、ピリジルメチル及びキノリン－３－イルメチル
が含まれる。親部分への結合は、アルキルを介する。
「ヒドロキシアルキル」は、アルキルが先に定義された通りであるＨＯ－アルキル－基
を意味する。好ましいヒドロキシアルキルは、低級アルキルを含む。適切なヒドロキシア
ルキル基の非限定的な例には、ヒドロキシメチル及び２－ヒドロキシエチルが含まれる。
「アシル」は、Ｈ－Ｃ（Ｏ）－、アルキル－Ｃ（Ｏ）－又はシクロアルキル－Ｃ（Ｏ）
－基を意味し、様々な基は、前述の通りである。親部分への結合は、カルボニルを介する
。好ましいアシルは、低級アルキルを含む。適切なアシル基の非限定的な例には、ホルミ
ル、アセチル及びプロパノイルが含まれる。
「アロイル」は、アリール基が前述の通りであるアリール－Ｃ（Ｏ）－基を意味する。
親部分への結合は、カルボニルを介する。適切な基の非限定的な例には、ベンゾイル及び
１－ナフトイルが含まれる。
「アルコキシ」は、アルキル基が前述の通りであるアルキル－Ｏ－基を意味する。適切
なアルコキシ基の非限定的な例には、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポ
キシ及びｎ－ブトキシが含まれる。親部分への結合は、エーテル酸素を介する。
「アリールオキシ」は、アリール基が前述の通りであるアリール－Ｏ－基を意味する。
適切なアリールオキシ基の非限定的な例には、フェノキシ及びナフトキシが含まれる。親
部分への結合は、エーテル酸素を介する。
「アルキルチオ」は、アルキル基が前述の通りであるアルキル－Ｓ－基を意味する。適
切なアルキルチオ基の非限定的な例には、メチルチオ及びエチルチオが含まれる。親部分
への結合は、硫黄を介する。
「アリールチオ」は、アリール基が前述の通りであるアリール－Ｓ－基を意味する。適
切なアリールチオ基の非限定的な例には、フェニルチオ及びナフチルチオが含まれる。親
部分への結合は、硫黄を介する。
「アラルキルチオ」は、アラルキル基が前述の通りであるアラルキル－Ｓ－基を意味す
る。適切なアラルキルチオ基の非限定的な例は、ベンジルチオである。親部分への結合は
、硫黄を介する。
「アルコキシカルボニル」は、アルキル－Ｏ－ＣＯ－基を意味する。適切なアルコキシ
カルボニル基の非限定的な例には、メトキシカルボニル及びエトキシカルボニルが含まれ
る。親部分への結合は、カルボニルを介する。
「アラルコキシカルボニル」は、アラルキル－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－基を意味する。適切なア
ラルコキシカルボニル基の非限定的な例は、ベンジルオキシカルボニルである。親部分へ
の結合は、カルボニルを介する。
「アルキルスルホニル」は、アルキル－Ｓ（Ｏ２）－基を意味する。好ましい基は、ア
ルキル基が低級アルキルであるものである。親部分への結合は、スルホニルを介する。
「アリールスルホニル」は、アリール－Ｓ（Ｏ２）－基を意味する。親部分への結合は
、スルホニルを介する。
「置換」という用語は、指定された原子の現況での通常の原子価を超えず、置換が安定
な化合物をもたらす場合、指定された原子上の１つ以上の水素が指定された基からの選択
で置き換えられることを意味する。置換基及び／又は変数の組み合わせは、そのような組
み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。
「安定な化合物」又は「安定な構造」は、反応混合物からの有用な純度への単離及び有
効な治療剤への製剤に耐えるのに十分に強い化合物を意味する。
「任意選択により置換された」という用語は、特定の基、ラジカル又は部分での任意選
択による置換を意味する。
化合物における官能基が「保護された」と称される場合、これは、化合物が反応に供さ
れたとき、保護された部位での望ましくない副反応を防ぐために基が修飾された形態にあ
ることを意味する。適切な保護基は、当業者によって認識され、また例えばＧｒｅｅｎｅ
ｅｔ ａｌ（１９９１）などの標準的なテキストを参照することによって認識されるで
あろう。
任意の構成要素又は本発明において、任意の変数（例えば、アリール、複素環、Ｒ２）
が複数回出現する場合、各出現におけるその定義は、他の全ての出現におけるその定義と
は独立したものである。
本発明の一形態では、荷電又は水素結合基のそれぞれは、群：Ａｓｐ、Ｇｌｕから独立
して選択されるアミノ酸残基である。
本発明の一形態では、荷電又は水素結合基のそれぞれは、カルボン酸部分を有するアミ
ノ酸残基である。
本発明の一形態では、荷電又は水素結合基のそれぞれは、群：カルボン酸、ヒドロキシ
酸、ホスホン酸及びホスフィン酸、スルホン酸及びスルフィン酸、スルホンアミド、アシ
ルスルホンアミド及びスルホニル尿素、２，２，２－トリフルオロエタン－１－オール及
びトリフルオロメチルケトン、テトラゾール、５－オキソ－１，２，４－オキサジアゾー
ル及び５－オキソ－１，２，４－チアジアゾール、チアゾリジンジオン、オキサゾリジン
ジオン及びオキサジアゾリジン－ジオン、３－ヒドロキシイソキサゾール及び３－ヒドロ
キシイソチアゾール、置換フェノール、スクアリン酸、３－及び４－ヒドロキシキノリン
－２－オン、テトラン酸及びテトラミン酸、シクロペンタン－１，３－ジオン及びボロン
酸、メルカプトアゾール、スルホニミダミドを含む（Ｂａｌｌａｔｏｒｅ ｅｔ ａｌ．
，２０１３）他の環状及び非環状構造から独立して選択される化学部分である。
一形態では、本発明は、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特
定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非
依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターを同定するための方法を提供し、前記方法は、
（１）化合物の三次元構造を、群：第１の荷電又は水素結合性基（Ａ）、第２の荷電又は
水素結合性基（Ｂ）、第３の荷電又は水素結合性基（Ｃ）及び疎水基（Ｄ）から選択され
る２つ以上の特徴を含むファーマコフォアと比較するステップであって、特徴間の距離は
、±１０Å以内の許容差内において、以下の通りである、ステップと、
（２）そのように配置された疎水性及び／又は荷電若しくは水素結合性化学部分を有する
化合物を選択するステップとを含む。
ファーマコフォアとの比較を含む上述の方法によって同定されたＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、ペプチド又は非ペプチジル化合物であり得る
。
本発明の好ましい形態では、部位点間の距離の大きさが正である場合、許容差は、最大
±５Åである。本発明の好ましい形態では、部位点間の距離の大きさが正である場合、許
容差は、最大±２Åである。本発明の好ましい形態では、部位点間の距離の大きさが正で
ある場合、許容差は、最大±１Åである。
本発明の好ましい形態では、モジュレーターは、上記で特定された群から選択される３
つ以上の特徴を含む。
本発明の好ましい形態では、モジュレーターは、上記で特定された群からの４つの特徴
を含む。
本発明の一形態では、化合物の三次元構造とファーマコフォアとの比較は、化合物の最
小エネルギー構造とファーマコフォアとの比較を伴う。
潜在的に多数の化合物から化合物を選択する効率的な手段は、化合物の三次元化学構造
の１つ以上のコンピューター化されたデータベースをスクリーニングするために、コンピ
ュータープログラム、例えばＣａｔａｌｙｓｔ（ＭＳｌ）を使用して、本発明のファーマ
コフォアと化合物を比較することを含む。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号１に記載のアミノ酸配列を有するペ
プチド又は少なくとも残基３７９～３９０を含有するその類似体、断片若しくは誘導体で
ある。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号１の式のペプチド又はその類似体若
しくは誘導体である。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号２の式のペプチド又はその類似体若
しくは誘導体である。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号５の式のペプチド又はその類似体若
しくは誘導体である。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号６の式のペプチド又はその類似体若
しくは誘導体である。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号７に記載のＳ３９１Ａ－Ｅ３９２Ｘ
－ＲＡＧＥペプチド又はその類似体若しくは誘導体である。
配列番号７：
［Ｌ３６２ＷＱＲＲＱＲＲＧＥＥＲＫＡＰＥＮＱＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＱＡ３９１］
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、配列番号８に記載のＳ３９１Ｘ－ＲＡＧＥペ
プチド又はその類似体若しくは誘導体である。
配列番号８：
［Ｌ３６２ＷＱＲＲＱＲＲＧＥＥＲＫＡＰＥＮＱＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＱ３９０］
好ましい特定の誘導体は、以下の配列番号９に記載のＱ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＲ
３９０、配列番号１０に記載のＱ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＫ３９０、配列番号１１に
記載のＫ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＱ３９０、配列番号１２に記載のＫ３７９ＥＥＥＥ
ＲＡＥＬＮＫ３９０及び配列番号１３に記載のＫ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＲ３９０を
含む。
配列番号９：［Ｑ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＲ３９０］
配列番号１０：［Ｑ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＫ３９０］
配列番号１１：［Ｋ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＱ３９０］
配列番号１２：［Ｋ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＫ３９０］
配列番号１３：［Ｋ３７９ＥＥＥＥＥＲＡＥＬＮＲ３９０］
配列番号１、２、５～１３などの本発明のモジュレーターに関連して本明細書で使用さ
れる「誘導体」という用語は、その一次構造がＲＡＧＥのＣ末端細胞質側テール又はその
断片から取得されたか又はそれに由来するが、アミノ酸の付加、置換、切断、化学的及び
／又は生化学的修飾（アセチル化、カルボキシル化、リン酸化、グリコシル化、ユビキチ
ン化、側鎖メチル化）、放射性ヌクレオチド又はハロゲンでの標識、異常又は人工アミノ
酸（Ｄ－アミノ酸、Ｎ－メチル化アミノ酸、四置換、β－ペプチド、ピログルタミン酸；
２－アミノアジピン酸；３－アミノアジピン酸；β－アラニン；β－アミノプロピオン酸
；２－アミノ酪酸；４－アミノ酪酸；ピペリジン酸；６－アミノカプロン酸；２－アミノ
ヘプタン酸；２－アミノイソ酪酸；３－アミノイソ酪酸；２－アミノピメリン酸；２，４
－ジアミノ酪酸；デスモシン；２，２’’－ジアミノピメリン酸；２，３－ジアミノプロ
ピオン酸；Ｎ－エチルグリシン；Ｎ－エチルアスパラギン；ヒドロキシリジン；アロ－ヒ
ドロキシリジン；３－ヒドロキシプロリン；４－ヒドロキシプロリン；イソデスモシン；
アロ－イソロイシン；Ｎ－メチルグリシン；サルコシン；Ｎ－メチルイソロイシン；Ｎ－
メチルバリン；ノルバリン；ノルロイシン；オルニチン；スタチンなど）、レトロ逆位配
列、環状ペプチド、ペプトイド又は非ペプチド薬物、非ペプチド標識、非ペプチド担体若
しくは非ペプチド樹脂への連結を含むことを特徴とするモジュレーターを指す。
本発明者らは、野生型ＲＡＧＥの残基３４３～３６１を含むペプチド（配列番号１４）
が、ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化とＲＡＧＥリガンド依存性活性化との両
方を阻害する阻害ペプチドであることをさらに発見した。
置換は、アミノ酸が異なる天然又は非従来のアミノ酸残基で置換されるアミノ酸変化を
包含する。そのような置換は、「保存的」として分類することができ、この場合、ポリペ
プチドに含まれるアミノ酸残基は、極性、側鎖官能性又はサイズのいずれかに関して類似
した性質の別の天然アミノ酸で置換され、例えばＳｅｒ⇔Ｔｈｒ⇔Ｐｒｏ⇔Ｈｙｐ⇔Ｇｌ
ｙ⇔Ａｌａ、Ｖａｌ⇔Ｉｌｅ⇔Ｌｅｕ、Ｈｉｓ⇔Ｌｙｓ⇔Ａｒｇ、Ａｓｎ⇔Ｇｌｎ⇔Ａｓ
ｐ⇔Ｇｌｕ又はＰｈｅ⇔Ｔｒｐ⇔Ｔｙｒである。いくつかの非従来型アミノ酸も、天然に
存在するアミノ酸の適切な代替物となり得ることを理解されたい。例えば、オルニチン、
ホモアルギニン及びジメチルリジンは、Ｈｉｓ、Ａｒｇ及びＬｙｓに関連している。
本発明に包含される置換は、「非保存的」であり得、ポリペプチドに存在するアミノ酸
残基が、異なる群からの天然に存在するアミノ酸などの異なる特性を有するアミノ酸で置
換されているか（例えば、荷電又は疎水性アミノ酸をアラニンで置換する）、又は代わり
に天然に存在するアミノ酸が非従来型のアミノ酸で置換される。
アミノ酸置換は、典型的には、単一の残基の置換であるが、クラスター化又は分散した
複数の残基の置換であり得る。好ましくは、アミノ酸置換は、保存的である。
付加は、１つ以上の天然又は非従来型アミノ酸残基の付加を包含する。欠失は、１つ以
上のアミノ酸残基の欠失を包含する。
上記のように、本発明は、１つ以上のアミノ酸が側鎖修飾を受けたペプチドを含む。本
発明によって企図される側鎖修飾の例には、アルデヒドとの反応及びそれに続くＮａＢＨ
４での還元による還元的アルキル化；メチルアセトイミデートによるアミジン化；無水酢
酸によるアシル化；シアネートによるアミノ基のカルバモイル化；２，４，６－トリニト
ロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）によるアミノ基のトリニトロベンジル化；無水コハク
酸及び無水テトラヒドロフタル酸によるアミノ基のアシル化；及びピリドキサール－５－
リン酸によるリジンのピリドキシル化とそれに続くＮａＢＨ４による還元などによるアミ
ノ基の修飾が含まれる。
アルギニン残基のグアニジン基は、２，３－ブタンジオン、フェニルグリオキサール及
びグリオキサールなどの試薬との複素環縮合生成物の形成により修飾され得る。
カルボキシル基は、Ｏ－アシルイソウレア形成を介したカルボジイミド活性化及びそれ
に続く誘導体化、例えば対応するアミドへの誘導体化により修飾され得る。スルフヒドリ
ル基は、ヨード酢酸又はヨードアセトアミドによるカルボキシメチル化；過ギ酸のシステ
イン酸への酸化；他のチオール化合物との混合ジスルフィドの形成；マレイミド、無水マ
レイン酸又は他の置換マレイミドとの反応；４－クロロ水銀安息香酸、４－クロロ水銀フ
ェニルスルホン酸、塩化フェニル水銀、２－クロロ水銀－４－ニトロフェノール及び他の
水銀剤を使用した水銀誘導体の形成；アルカリ性ｐＨでのシアネートによるカルバモイル
化などの方法により修飾され得る。本発明の好ましい形態では、システイン残基のいかな
る修飾も、必要なジスルフィド結合を形成するペプチドの能力に影響してはならない。シ
ステインのスルフヒドリル基をセレン等価物で置き換えて、ペプチドが１つ以上のジスル
フィド結合の代わりにジセレン結合を形成することも可能である。
トリプトファン残基は、例えば、Ｎ－ブロモスクシンイミドによる酸化又は２－ヒドロ
キシ－５－ニトロベンジルブロミド若しくはスルフェニルハライドによるインドール環の
アルキル化により修飾され得る。他方では、チロシン残基は、テトラニトロメタンによる
ニトロ化によって変化して、３－ニトロチロシン誘導体を形成し得る。
ヒスチジン残基のイミダゾール環の修飾は、ヨード酢酸誘導体によるアルキル化又はジ
エチルピロカルボネートによるＮ－カルボエトキシル化によって達成され得る。プロリン
残基は、例えば、４位のヒドロキシル化により修飾され得る。
修飾された側鎖を有するいくつかのアミノ酸及び他の非天然アミノ酸のリストを次の表
に示す。
これらの種類の修飾は、個人に投与される場合又は診断試薬として使用される場合、ペ
プチドを安定化するために重要であり得る。
本明細書で使用される保存的アミノ酸置換は、群のメンバー間の置換が分子の生物学的
活性を保存する（例えば、Ｇｒａｎｔｈａｍ，Ｒ．，１９７４を参照されたい）ように、
十分に類似した物理化学的特性を有する群内のアミノ酸残基を含み得る。特に、保存的ア
ミノ酸置換は、アミノ酸が同じクラスのアミノ酸（例えば、塩基性アミノ酸、酸性アミノ
酸、極性アミノ酸、脂肪族側鎖を有するアミノ酸、正又は負に荷電した側鎖を有するアミ
ノ酸、側鎖に芳香族基を有するアミノ酸、水素架橋に入ることができる側鎖、例えばヒド
ロキシル官能基を有する側鎖を有するアミノ酸）に由来する置換であることが好ましい。
保存的置換は、本件の場合、例えば、塩基性アミノ酸残基（Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ）を
別の塩基性アミノ酸残基（Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ）に置換すること、脂肪族アミノ酸残
基（Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ｌｉｅ）を別の脂肪族アミノ酸残基に置換するこ
と、芳香族アミノ酸残基（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）を別の芳香族アミノ酸残基に置換す
ること、トレオニンをセリンに又はロイシンをイソロイシンに置換することである。さら
なる保存的アミノ酸交換が当業者に知られているであろう。異性体形態は、好ましくは、
維持されるべきであり、例えば、Ｋは、好ましくは、Ｒ又はＨを置換し、ｋは、好ましく
は、ｒ及びｈを置換する。
アミノ酸の置換を検討する場合、本発明の好ましい置換は、Ｇｒａｎｔｈａｍ，Ｒ．（
１９７４）に１００未満のＤを有すると記載されているものであり、その内容は、参照に
より組み込まれる。最も好ましい代替物は、５０未満のＤを有すると説明されているもの
である。
本発明のペプチドモジュレーターは、配列番号１、２、５、６、７、８、９、１０、１
１、１２又は１３のレトロインベルソ異性体又は改変若しくは置換されたバリアント又は
付加若しくは欠失によって形成されるペプチドを含む（Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，２０１０）
。
＜ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理方法＞
別の関連する態様では、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのよ
うな処置を必要とする患者において行う方法を提供し、方法は、本発明の特定の活性化さ
れた共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターの
有効量の投与を含む。
別の態様では、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのような処置
を必要とする患者において行うための薬剤の製造のための、特定の活性化された共存ＧＰ
ＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターの使用を含む。
別の態様では、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのような処置
を必要とする患者において行うための、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥ
リガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターの使用を含む。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、アンジオテンシン受容体である。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、ＡＴ１Ｒである。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、特定のケモカイン受容体である。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ２である。
さらに、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのような処置を必要
とする患者において行う方法を提供し、方法は、有効量の、本発明の特定の活性化された
共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、特
定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター及び／又は特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路のモ
ジュレーターとの組み合わせの投与を含む。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、アンジオテンシン受容体である。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、ＡＴ１Ｒである。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、特定のケモカイン受容体である。
本発明の好ましい形態では、特定の共存ＧＰＣＲは、ＣＣＲ２である。
方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド
非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、特定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター及
び／又は特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み合わせの投与を
含み得、ここで、特定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター及び／又は特定の共存ＧＰＣＲシ
グナル伝達経路のモジュレーターは、特定の共存ＧＰＣＲに関する障害の処置のために通
常投与されるよりも低い用量で投与される。
方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド
非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、特定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター及
び／又は特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み合わせの投与を
含み得、ここで、特定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター及び／又は特定の共存ＧＰＣＲシ
グナル伝達経路のモジュレーターは、ＲＡＧＥに関する障害の処置のために通常投与され
るよりも低い用量で投与される。
本発明の特に好ましい形態では、方法は、有効量の、本発明の活性化アンジオテンシン
受容体によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、ＡＴ１Ｒ
のモジュレーター及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み合わせ
の投与を含み、ここで、ＡＴ１Ｒのモジュレーター及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路
のモジュレーターは、ＡＴ１Ｒ関連障害の処置のために通常投与されるよりも低い用量で
投与される。
本発明の別の特に好ましい形態では、方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の
ケモカイン受容体によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと
、ＣＣＲ２のモジュレーター及び／又はＣＣＲ２シグナル伝達経路のモジュレーターとの
組み合わせの投与を含み、ここで、ＣＣＲ２のモジュレーター及び／又はＣＣＲ２シグナ
ル伝達経路のモジュレーターは、ＣＣＲ２関連障害の処置のために通常投与されるよりも
低い用量で投与される。
さらに、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのような処置を必要
とする患者において行う方法を提供し、方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の
共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、Ｒ
ＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及び／又は構成的活性型ＲＡ
ＧＥのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み
合わせの投与を含む。
本発明の特に好ましい形態では、方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の共存
ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、ＲＡＧ
ＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥ
のモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み合わ
せの投与を含み、ここで、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、
及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経
路のモジュレーターは、ＲＡＧＥ関連障害の処置のために通常投与されるよりも低い用量
で投与される。
さらに、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのような処置を必要
とする患者において行う方法を提供し、方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の
共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、特
定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター及び／又は特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路のモ
ジュレーターとの組み合わせの投与を含む。
例えば、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのような処置を必要
とする患者において行う方法を提供し、方法は、有効量の、本発明の活性化アンジオテン
シン受容体によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、ＲＡ
ＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及び／又は構成的活性型ＲＡＧ
Ｅのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュレーター並びにＡＴ
１Ｒのモジュレーター及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み合
わせの投与を含む。
例えば、本発明は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、そのような処置を必要
とする患者において行う方法を提供し、方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の
ケモカイン受容体によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと
、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及び／又は構成的活性型
ＲＡＧＥのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュレーター並び
にＣＣＲ２のモジュレーター及び／又はＣＣＲ２シグナル伝達経路のモジュレーターとの
組み合わせの投与を含む。
本発明の特に好ましい形態では、方法は、有効量の、本発明の活性化された特定の共存
ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、特定の
共存ＧＰＣＲのモジュレーター及び／又は特定の共存ＧＰＣＲのシグナル伝達経路のモジ
ュレーター並びにＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及び／又
は構成的活性型ＲＡＧＥのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジ
ュレーターとの組み合わせの投与を含み、ここで、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活
性化のモジュレーター、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥのモジュレーター、及び／又は
ＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュレーターは、ＲＡＧＥ関連障害の処置のために通常投
与されるよりも低い用量で投与され、且つ／又は特定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター及
び／又は特定の共存ＧＰＣＲのシグナル伝達経路のモジュレーターは、ＧＰＣＲに関する
障害の処置のために通常投与されるよりも低い用量で投与される。
本発明の特に好ましい形態では、方法は、有効量の、本発明の活性化アンジオテンシン
受容体によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、ＡＴ１Ｒ
のモジュレーター及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路のモジュレーター並びにＲＡＧＥ
のＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥの
モジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み合わせ
の投与を含み、ここで、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及
び／又は構成的活性型ＲＡＧＥのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路
のモジュレーターは、ＲＡＧＥ関連障害の処置のために通常投与されるよりも低い用量で
投与され、且つ／又はＡＴ１Ｒのモジュレーター及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路の
モジュレーターは、ＡＴ１Ｒ関連障害の処置のために通常投与されるよりも低い用量で投
与される。
本発明の特に好ましい形態では、方法は、有効量の、本発明の活性化された特定のケモ
カイン受容体によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターと、Ｃ
ＣＲ２のモジュレーター及び／又はＣＣＲ２シグナル伝達経路のモジュレーター並びにＲ
ＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレーター、及び／又は構成的活性型ＲＡ
ＧＥのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュレーターとの組み
合わせの投与を含み、ここで、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化のモジュレータ
ー、及び／又は構成的活性型ＲＡＧＥのモジュレーター、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝
達経路のモジュレーターは、ＲＡＧＥ関連障害の処置のために通常投与されるよりも低い
用量で投与され、且つ／又はＣＣＲ２のモジュレーター及び／又はＣＣＲ２シグナル伝達
経路のモジュレーターは、ＣＣＲ２関連障害の処置のために通常投与されるよりも低い用
量で投与される。
ＲＡＧＥ関連障害は、ＲＡＧＥの発現に依存する障害として定義される。これは、ＲＡ
ＧＥの発現にも依存しているＡＴ１Ｒ関連障害又はＣＣＲ２関連障害など、特定の共存Ｇ
ＰＣＲに関連する障害を除外するものではない。実際、障害は、ＲＡＧＥ関連である場合
と、ＡＴ１Ｒ関連又はＣＣＲ２関連を含む特定の共存ＧＰＣＲに関連している場合との両
方があり得る。
特定の共存ＧＰＣＲに関連する障害は、特定の共存ＧＰＣＲの発現に依存する障害とし
て定義される。これは、特定の共存ＧＰＣＲの発現にも依存しているＲＡＧＥ関連障害を
除外するものではない。実際、障害は、ＲＡＧＥ関連である場合と、ＡＴ１Ｒ関連又はＣ
ＣＲ２関連を含む特定の共存ＧＰＣＲに関連している場合との両方があり得る。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、群：心血管障害；消化器疾患；がん；神経
障害、呼吸器障害、結合組織障害、腎臓障害、生殖器障害、皮膚障害、眼障害、内分泌障
害から選択される障害である。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、群：アテローム性動脈硬化症、虚血性心疾
患、心筋炎、心内膜炎、心筋症、急性リウマチ熱、慢性リウマチ性心疾患、脳血管疾患／
脳卒中、心不全、血管石灰化、末梢血管疾患、リンパ管炎から選択される心血管障害であ
る。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、群：歯周炎、食道炎、胃炎、胃十二指腸潰
瘍、クローン病、潰瘍性大腸炎、虚血性大腸炎、腸炎及び小腸結腸炎、腹膜炎、アルコー
ル性肝疾患、肝炎、中毒性肝疾患、胆汁性肝硬変、肝線維症／肝硬変、非アルコール性脂
肪肝／非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨ）、肝外傷及び肝障害、外傷又
は手術からの回復から選択される消化器系障害である。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、群：唇、口腔及び咽頭の悪性新生物、消化
器の悪性新生物、呼吸器及び胸腔内器官の悪性新生物、骨及び関節軟骨の悪性新生物、黒
色腫及び皮膚の他の悪性新生物、中皮及び軟組織の悪性新生物、乳房の悪性新生物、女性
生殖器の悪性新生物、男性生殖器の悪性新生物、尿路の悪性新生物、眼、脳及び中枢神経
系の他の部分の悪性新生物、甲状腺及び他の内分泌腺の悪性新生物、リンパ系、造血系及
び関連する組織の悪性新生物、不明確な、二次及び／又は特定されていない部位の悪性新
生物から選択されるがんである。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、神経障害であり、且つ群：中枢神経系の炎
症性疾患、主に中枢神経系に影響を与える全身性萎縮、錐体外路及び運動障害、パーキン
ソン病、中枢神経系の脱髄性疾患、アルツハイマー病、限局性脳萎縮、レビー小体病、て
んかん、片頭痛、神経障害性疼痛、糖尿病性神経障害、多発性神経障害、神経膠腫の発生
及び進行、脊髄外傷、虚血性脳損傷／脳卒中、脳外傷及び脳損傷、外傷又は手術からの回
復から選択される。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、精神障害であり、且つ群：認知症、アルツ
ハイマー病、血管性認知症、嗜癖、統合失調症、主要な情動障害、抑うつ、躁病、双極性
障害、不安障害から選択される。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、呼吸器（肺）障害であり、且つ群：急性上
気道感染症、鼻炎、鼻咽頭炎、副鼻腔炎、喉頭炎、インフルエンザ及び肺炎、急性気管支
炎、急性細気管支炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、肺気腫、外
因による慢性肺疾患、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、肺好酸球増加症及び胸膜炎、肺
外傷並びに肺損傷、外傷又は手術からの回復から選択される。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、結合組織障害であり、且つ群：変形性関節
炎、感染性関節炎、関節リウマチ、乾癬性及び腸疾患性関節症、若年性関節炎、痛風及び
他の結晶性関節症、糖尿病性関節症、結節性多発性動脈炎、チャーグ・ストラウス、粘膜
皮膚リンパ節症候群［川崎］、過敏性血管炎、グッドパスチャー症候群、血栓性微小血管
症、ウェゲナー肉芽腫症、大動脈弓症候群［高安］、巨細胞性動脈炎、リウマチ性多発筋
痛、顕微鏡的多発性血管炎、低補血性血管炎、全身性エリテマトーデス、皮膚多発性筋炎
、多発性筋炎、全身性硬化症、ＣＲ（Ｅ）ＳＴ症候群、乾燥症候群［シェーグレン］、混
合性結合組織病、ベーチェット病、外傷性筋損傷、捻挫、筋挫傷及び骨折から選択される
。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、腎障害であり、且つ群：糸球体腎炎、腎炎
、糖尿病性腎疾患、間質性腎炎、閉塞性及び逆流性腎症、急性腎不全及び慢性腎疾患から
選択される。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、生殖器障害であり、且つ群：前立腺炎、前
立腺肥大、前立腺異形成、卵管炎、卵巣炎、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、多嚢胞性卵巣
症候群、子宮頸管炎、子宮頸部異形成、膣炎、外陰炎から選択される。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、群：皮膚炎、湿疹、天疱瘡／類天疱瘡、乾
癬、ばら色粃糠疹、扁平苔癬、蕁麻疹、多形性紅斑、結節性紅斑、日焼け、角化症、光老
化性皮膚潰瘍、表在性皮膚損傷及び開放創から選択される皮膚障害である。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、群：角膜炎、結膜炎、網膜炎、緑内障、強
膜炎、上強膜炎、脈絡網膜炎症、糖尿病性網膜症、黄斑浮腫、未熟児網膜症及び視神経炎
、眼の外傷並びに眼の損傷、外傷又は手術からの回復から選択される眼障害である。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥ関連障害は、群：糖尿病、インスリン抵抗性、耐糖能障
害及び甲状腺炎から選択される内分泌障害である。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒを阻害するか、又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路を阻害す
る阻害剤は、群：エプロサルタン（商品名Ｔｅｖｅｔｅｎ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ＵＳＡ）、ロサルタン（商品名Ｃｏｚａａｒ（登録商標）、
Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ）、バルサルタン（商品名Ｄｉｏｖａｎ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉ
ｓ）、テルミサルタン（商品名Ｍｉｃａｒｄｉｓ（登録商標）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、イルベサルタン（商品名Ａｖａｐｒｏ（登録商標）、Ｓａｎｏｆ
ｉＡｖｅｎｔｉｓ）、オルメサルタン（商品名Ｂｅｎｉｃａｒ（登録商標）、Ｄａｉｉｃ
ｈｉ Ｓａｎｋｙｏ Ｉｎｃ）、アジルサルタン（商品名Ｅｄａｒｂｉ、Ｔａｋｅｄａ）
、カンデサルタン（商品名Ａｔａｃａｎｄ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ｚ
Ｄ－７１１５、サララシン（（Ｓａｒ１－Ａｌａ８）Ａｎｇ ＩＩ）、サルスラン（（Ｓ
ａｒ１－Ｔｈｒ８）Ａｎｇ ＩＩ）及びＤｕＰ７５３から選択される。このリストには、
これらの阻害剤のプロドラッグも含まれ、これは、カンデサルタン（カンデサルタンシレ
キセチル）、アジルサルタン（アジルサルタンメドキソミル）及びオルメサルタン（オル
メサルタンメドキソミル）を含み、それらが投与される形態及び活性代謝産物（ロサルタ
ンの活性代謝産物であるＥＸＰ－３１７４など）であり得る。部分アゴニストは、アゴニ
ズムを示しても最大の効果をもたらさないため、部分アゴニストは内因性Ａｎｇ ＩＩを
阻害するように作用することができ、したがって治療的に阻害剤として作用し得ることに
留意されたい。
本発明の一形態では、特定のケモカイン受容体を阻害するか、又は特定のケモカインシ
グナル伝達経路を阻害する阻害剤は、群：プロパゲルマニウム（３－［（２－カルボキシ
エチル－オキソゲルミル）オキシ－オキソゲルミル］プロパン酸としても知られる、プロ
キシゲルマニウム、Ｇｅ－１３２、ビス（２－カルボキシエチルゲルマニウム）セスキオ
キシド（ＣＥＧＳ）、２－カルボキシエチルゲルマセスキオキサン、ＳＫ－８１８、有機
ゲルマニウム、ゲルマニウムセスキオキシド、３，３’－（１，３－ジオキソ－１，３－
ジゲルマノキサンジイル）ビスプロピオン酸、３－オキシゲルミルプロピオン酸ポリマー
、ポリ－トランス－（２－カルボキシエチル）ゲルマセスキオキサン、プロキシゲルマニ
ウム、レパゲルマニウム及びセロシオン；ＣＣＲ２）、ＢＭＳ ＣＣＲ２ ２２（ＣＣＲ
２）、レスベラトロール（ＣＣＲ２）、ＲＳ５０４３９３（ＣＣＲ２）、ＲＳ１０２８９
５（ＣＣＲ２）、ＭＬＮ－１２０２（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ
ａｌｓ；ＣＣＲ２）、ＩＮＣＢ８６９６（Ｉｎｃｙｔｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
ｓ；ＣＣＲ２）、ＭＫ－０８１２（Ｍｅｒｃｋ；ＣＣＲ２）、ＣＣＸ１４０（Ｃｈｅｍｏ
Ｃｅｎｔｒｙｘ；ＣＣＲ２）、ＰＦ－４１３６３０９（Ｐｆｉｚｅｒ；ＣＣＲ２）、ＢＭ
Ｓ－７４１６７２（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ；ＣＣＲ２）；レペルタ
キシン（ＣＸＣＲ２）、ＴＡＫ－７７９（ＣＣＲ５）、ＴＡＫ－２２０（ＣＣＲ５）、Ｔ
ＡＫ－６５２（ＣＣＲ５）、ＡＫ６９２（ＣＣＲ５）、ＣＭＰＤ１６７（ＣＣＲ５）、Ｂ
Ｘ－４７１（ＣＣＲ１）、ＡＭＤ３１００（ＣＸＣＲ４）、ＡＭＤ１１０７０（ＣＸＣＲ
４）、ＦＣ１３１（ＣＸＣＲ４）、ＭＬＮ３８９７（ＣＣＲ１）、ＣＰ－４８１７１５（
ＣＣＲ１）、ＧＷ－８７３１４０（ＣＣＲ５）、ＳＢ ２２５００２（ＣＸＣＲ２）及び
ＳＢ ２６５６１０（ＣＸＣＲ２）から選択される。
本発明の一形態では、ＣＣＲ２を阻害するか、又はＣＣＲ２シグナル伝達経路を阻害す
る阻害剤は、群：プロパゲルマニウム（３－［（２－カルボキシエチル－オキソゲルミル
）オキシ－オキソゲルミル］プロパン酸としても知られる、プロキシゲルマニウム、Ｇｅ
－１３２、ビス（２－カルボキシエチルゲルマニウム）セスキオキシド（ＣＥＧＳ）、２
－カルボキシエチルゲルマセスキオキサン、ＳＫ－８１８、有機ゲルマニウム、三酸化ゲ
ルマニウム、３，３’－（１，３－ジオキソ－１，３－ジゲルマノキサンジイル）ビスプ
ロピオン酸、３－オキシゲルミルプロピオン酸ポリマー、ポリ－トランス－（２－カルボ
キシエチル）ゲルマセスキオキサン、プロキシゲルマニウム、レパゲルマニウム及びセロ
シオン）、ＢＭＳ ＣＣＲ２ ２２（ＣＣＲ２）、レスベラトロール（ＣＣＲ２）、ＲＳ
５０４３９３、ＲＳ１０２８９５、ＭＬＮ－１２０２（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒ
ｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＩＮＣＢ８６９６（Ｉｎｃｙｔｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉ
ｃａｌｓ）、ＭＫ－０８１２（Ｍｅｒｃｋ）、ＣＣＸ１４０（ＣｈｅｍｏＣｅｎｔｒｙｘ
）、ＰＦ－４１３６３０９（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＢＭＳ－７４１６７２（ブリストル・マイ
ヤーズスクイブ）から選択される。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害剤、及び／又は
構成的活性型ＲＡＧＥの阻害剤、及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤は、群：
アゼリラゴン（ＴＴＰ４８８／ＰＦ－０４４９４７００）（Ｖドメインを標的とするＲＡ
ＧＥ－リガンド相互作用の経口低分子阻害剤）；ＴＴＰ４０００（米国特許第７９８１４
２３号明細書に記載のヒトＩｇ Ｆｃドメインに連結されたＲＡＧＥのリガンド結合外部
ドメインを使用した、ＲＡＧＥの可溶性融合タンパク質阻害剤）；国際公開第２００７１
０９７４７号パンフレットに記載のＲＡＧＥ及びそのＲＡＧＥ結合フラグメントに特異的
に結合する抗体；ＦＰＳ－ＺＭ１２７（高親和性でＡβ／ＲＡＧＥ相互作用を遮断する三
級アミド）；米国特許出願公開第２０１００２４９０３８号明細書に記載のＲＡＧＥリガ
ンド誘導性シグナル伝達に拮抗するペプチド；国際公開第２０１２１０９５６９号パンフ
レットに記載のリゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）アンタゴニスト；Ｈａｎ ｅｔ ａｌ（
２０１２）に記載の２－アミノピリミジン；Ｈａｎ ｅｔ ａｌ（２０１４）に記載のピ
ラゾール－５－カルボキサミド；Ｈａｎ ｅｔ ａｌ（２０１５）に記載の４，６－ビス
フェニル－２－（３－アルコキシアニリノ）ピリミジン；Ｍａｎｉｇｒａｓｓｏ ｅｔ
ａｌ（２０１６）に記載のリガンド刺激ＲＡＧＥ－ＤＩＡＰＨ１シグナル伝達の小分子阻
害剤；米国特許出願公開第２００９０２２０４８４号明細書に記載の、ＲＡＧＥの細胞質
側テールの全て若しくは一部から本質的になるか、又はＲＡＧＥの細胞質側テールに結合
するＤｉａｐｈａｎｏｕｓ－１の一部から本質的になるポリペプチドから選択される。
特定の実施形態では、モジュレーターは、本明細書で広範に記載されるスクリーニング
方法又はモジュレーターを同定するための方法を使用して、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテン
シン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、活性化された特定の共存Ｇ
ＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターとして同定さ
れることに基づいて対象に投与される。
ＡＴ１Ｒ関連障害は、ＡＴ１Ｒの発現に依存する障害として定義される。これは、ＡＴ
１Ｒの発現にも依存しているＲＡＧＥ関連障害を除外するものではない。実際、障害は、
ＲＡＧＥ関連及びＡＴ１Ｒ関連の両方であり得る。
特定のケモカイン受容体関連障害は、特定のケモカイン受容体の発現に依存する障害と
して定義される。これは、特定のケモカイン受容体の発現にも依存しているＲＡＧＥ関連
障害を除外するものではない。実際、障害は、ＲＡＧＥ関連及び特定のケモカイン受容体
関連の両方であり得る。
ＣＣＲ２関連障害は、ＣＣＲ２の発現に依存する障害として定義される。これは、ＣＣ
Ｒ２の発現にも依存しているＲＡＧＥ関連障害を除外するものではない。実際、障害は、
ＲＡＧＥ関連及びＣＣＲ２関連の両方であり得る。
組み合わせ薬剤について、以下の用量が「通常」投与される。
＜候補薬剤のスクリーニング方法＞
一形態では、本発明は、候補薬剤を、活性な共存ＧＰＣＲによって誘導されるＲＡＧＥ
活性を調節するその能力についてスクリーニングする方法を含み、方法は、候補薬剤の存
在下でＲＡＧＥポリペプチドをＧＰＣＲポリペプチドと接触させるステップと、ここで、
ＧＰＣＲポリペプチドは、構成的に活性であり、且つ／又はそのＧＰＣＲのアゴニスト、
部分アゴニスト若しくはアロステリックモジュレーターの添加によって活性化され；候補
薬剤の存在によるＲＡＧＥ活性化の調節を示す効果を検出することにより、且つ／又は候
補薬剤の存在によって調節されるＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を検出することにより、候
補薬剤が、活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化
のモジュレーターであるかどうかを検出するステップとを含む。
一形態では、本発明は、候補薬剤を、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣ
Ｒ２などの特定のケモカイン受容体など、活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧ
Ｅリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化（ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド非依存性トランス活
性化としても知られる）を調節（すなわち活性化、阻害又はアロステリック調節）するそ
の能力についてスクリーニングする方法を含む。これらの方法は、一般に、
ａ．候補薬剤の存在下でＲＡＧＥポリペプチドをＧＰＣＲポリペプチドと接触させるこ
と、ここで、ＧＰＣＲポリペプチドは、構成的に活性であり、且つ／又はそのＧＰＣＲの
アゴニスト、部分アゴニスト若しくはアロステリックモジュレーターの添加によって活性
化される；及び
ｂ．候補薬剤の存在によるＲＡＧＥ活性化の調節を示す効果を検出することにより、且
つ／又は候補薬剤の存在によって調節されるＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を検出すること
により、候補薬剤が、活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡ
ＧＥ活性化のモジュレーターであるかどうかを検出すること
を含むか、それからなるか又はそれから本質的になる。
いくつかの実施形態では、スクリーニング方法は、ＲＡＧＥの存在下又は非存在下にお
いて、候補薬剤が、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体若しくはＣＣＲ２などの特定
のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲのモジュレーター（活性化剤、阻害剤、ア
ロステリックモジュレーターなど）又はＡＴ１Ｒシグナル伝達経路などのアンジオテンシ
ン受容体シグナル伝達経路など、若しくはＣＣＲ２シグナル伝達経路などの特定のケモカ
イン受容体シグナル伝達経路など、特定の共存ＧＰＣＲのシグナル伝達経路のモジュレー
ター（活性化剤、阻害剤、アロステリックモジュレーターなど）であるかどうかを検出す
ることをさらに含む。いくつかの実施形態では、ＲＡＧＥポリペプチドが存在する場合、
それが存在しない場合と比較してより大きいシグナルの調節をもたらす候補薬剤は、共存
ＧＰＣＲの活性化に起因するＲＡＧＥ非依存性シグナル伝達よりも、活性化された共存Ｇ
ＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の調節について選択的である。
一形態では、本発明は、前記方法によってモジュレーターとして同定されたペプチドを
含む。一形態では、本発明は、前記方法によってモジュレーターとして同定された化合物
を含む。
いくつかの実施形態では、スクリーニング方法は、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受
容体など、又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲの存在
下又は非存在下において、候補薬剤が、ＲＡＧＥ又はＲＡＧＥシグナル伝達経路のモジュ
レーター（活性化剤、阻害剤、アロステリックモジュレーター又は機能的代替物など）で
あるかどうかを検出することをさらに含む。いくつかの実施形態では、ＧＰＣＲポリペプ
チドが存在する場合、それが存在しない場合と比較してＲＡＧＥ依存性シグナルのより大
きい調節をもたらす候補薬剤は、活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化の調節について選択的である。
いくつかの実施形態では、スクリーニング方法は、候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチド
又はＲＡＧＥシグナル伝達経路及びＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体若しくはＣＣ
Ｒ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲ又はＡＴ１Ｒシグナル伝達
経路などのアンジオテンシン受容体シグナル伝達経路など、若しくはＣＣＲ２シグナル伝
達経路などの特定のケモカイン受容体シグナル伝達経路など、特定の共存ＧＰＣＲのシグ
ナル伝達経路のモジュレーター（活性化剤、阻害剤、アロステリックモジュレーター又は
機能的代替物など）であるかどうかを検出することをさらに含む。
いくつかの実施形態では、スクリーニング方法は、ＲＡＧＥの細胞外ドメインに結合し
、したがってＲＡＧＥリガンド依存的な方式でＲＡＧＥの活性化を阻害するＲＡＧＥリガ
ンドの阻害剤を使用することをさらに含む。
いくつかの実施形態において、スクリーニング方法は、ＲＡＧＥポリペプチドであって
、それがＲＡＧＥリガンドをその外部ドメインに結合させることができず、且つしたがっ
てＲＡＧＥリガンド依存的な方式で活性化されることができないように変異及び／又は切
断されているＲＡＧＥポリペプチドの使用をさらに含む。
いくつかの実施形態では、ＲＡＧＥへのＲＡＧＥリガンドの結合を調節するモジュレー
ターに細胞を曝露することにより、ＲＡＧＥの細胞外ドメインへのＲＡＧＥリガンドの結
合が損なわれる。
いくつかの実施形態において、それがＲＡＧＥリガンドを結合させることができず、且
つしたがってＲＡＧＥリガンド依存的な方式で活性化されることができないように変異及
び／又は切断されたＲＡＧＥポリペプチドの使用は、ＲＡＧＥリガンドに結合できるＲＡ
ＧＥポリペプチドが関与するスクリーニング前、後又はそれに並行して発生する。
適切には、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイ
ン受容体など、活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡ
ＧＥ活性化を調節し、適切にはＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体若しくはＣＣＲ２
などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲ及び／又はＡＴ１Ｒシグナル伝
達経路などのアンジオテンシン受容体シグナル伝達経路など、若しくはＣＣＲ２シグナル
伝達経路などの特定のケモカイン受容体シグナル伝達経路など、特定の共存ＧＰＣＲのシ
グナル伝達経路を調節し、且つ／又はＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化を阻害し
、且つ／又は構成的活性型ＲＡＧＥ及び／又はＲＡＧＥシグナル伝達経路を阻害する候補
薬剤又は候補薬剤の誘導体は、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理に特に有用である
。
本発明のスクリーニング方法の特定の実施形態では、候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチ
ドがＧＰＣＲポリペプチドと接触されるときに検出されるＲＡＧＥ依存性シグナルを調節
する場合、方法は、ＧＰＣＲポリペプチドが存在する場合にＲＡＧＥ依存性シグナルのよ
り大きい調節をもたらす候補薬剤が、活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド
非依存性のＲＡＧＥ活性化の調節について選択的であるように、ＧＰＣＲポリペプチドの
非存在下で候補薬剤がＲＡＧＥ依存性シグナルを調節するかどうか及び／又はその程度を
決定することをさらに含む。
本発明のスクリーニング方法の特定の実施形態では、候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチ
ドがＧＰＣＲポリペプチドと接触されるときに検出されるシグナルを調節する場合、方法
は、シグナルがＲＡＧＥポリペプチドの非存在下で生成されるかどうか及び／又はその程
度を決定し、且つシグナルがＲＡＧＥポリペプチドの非存在下で生成される場合、ＲＡＧ
Ｅポリペプチドが存在する場合にシグナルのより大きい調節をもたらす候補薬剤が、共存
ＧＰＣＲの活性化に起因するＲＡＧＥ非依存性シグナル伝達よりも、活性化された共存Ｇ
ＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の調節について選択的であるよ
うに、ＲＡＧＥポリペプチドの非存在下で候補薬剤がシグナルを調節するかどうか及び／
又はその程度を決定することをさらに含む。
特定の実施形態では、スクリーニング方法は、近接（ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ）スクリーニ
ングアッセイを使用して、ＲＡＧＥポリペプチドの、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受
容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲとの近接性を
評価する。このタイプの例示的な例では、ＲＡＧＥポリペプチドは、第１のレポーター成
分にカップリング（例えば、コンジュゲート又は他の方法で連結）し、ＡＴ１Ｒなどのア
ンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰ
ＣＲは、第２のレポーター成分にカップリング（例えば、コンジュゲート又は他の方法で
連結）する。第１及び第２のレポーター成分の近接により、検出器による検出が可能なシ
グナルが生成される。第１及び第２のレポーター成分は、本発明の機能に明らかな影響を
与えることなく、第１のレポーター成分が第２のレポーター成分と交換され得るという意
味で相補的な対を構成する。第１及び第２のレポーター成分は、同じであるか又は異なり
得る。
一実施形態では、近接スクリーニングアッセイは、Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｈｅｔｅｒｏｍ
ｅｒ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ又はＲｅｃｅｐｔｏｒ－ＨＩ
Ｔ（Ｊａｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１４）としても知られる、国際公開第２００８０
５５３１３号パンフレット（Ｄｉｍｅｒｉｘ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｔｙ Ｌｔｄ；
また米国特許第８２８３１２７号明細書、米国特許第８５６８９９７号明細書、欧州特許
第２０８００１２号明細書、カナダ特許第２６６９０８８号明細書、中国特許第１０１６
５７７１５号明細書）に記載のものである。この方法では、ＲＡＧＥは第１のレポーター
成分にカップリングされ、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特
定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲは、近接スクリーニングアッセイに関し
て標識されず、ＧＰＣＲ相互作用基は、相補的な第２のレポーター成分に連結され、複合
体とのその相互作用は、非標識ＧＰＣＲ又は特にヘテロマー複合体に選択的なリガンドに
結合したときに調節される。ＧＰＣＲ相互作用基の好ましい例は、アレスチン、Ｇタンパ
ク質及びリガンドである。代わりに、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ
２などの特定のケモカイン受容体などの特定の共存ＧＰＣＲは、第１のレポーター成分に
カップリングされ、ＲＡＧＥは、近接スクリーニングアッセイに関して標識されず、ＲＡ
ＧＥ相互作用基は、相補的な第２のレポーター成分に連結され、複合体とのその相互作用
は、非標識ＲＡＧＥ又は特にヘテロマー複合体に選択的なリガンドに結合したときに調節
される。ＲＡＧＥ相互作用基の好ましい例は、ＩＱＧＡＰ－１、Ｄｉａｐｈａｎｏｕｓ
１、Ｄｏｃｋ７、ＭｙＤ８８、ＴＩＲＡＰ、ＩＲＡＫ４、ＥＲＫ１／２及びＰＫＣζなど
のＲＡＧＥの細胞質側テールと相互作用するタンパク質である（Ｊｕｌｅｓ ｅｔ ａｌ
．，２０１３；Ｒａｍａｓａｍｙ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
レポーター成分は、酵素、発光又は生物発光分子、蛍光分子及び酵素切断部位を組み込
んだリンカーによりＲＡＧＥ、特定の共存ＧＰＣＲ又は相互作用基にカップリングした転
写因子又は他の分子を含み得る。要するに、それらの空間的近接の結果として検出可能な
シグナルを発することができる、有機又は無機のタンパク質性若しくは非タンパク質性又
はそれらの複合体の既知の分子である。
好ましくは、レポーター成分開始剤の存在下で第１及び第２のレポーター成分の近接に
よって生成されるシグナルは、発光、蛍光及び比色変化からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、発光は、ルシフェラーゼ、ガラクトシダーゼ、ラクタマーゼ
、ペルオキシダーゼ又は適切な基質の存在下で発光可能な任意のタンパク質からなる群か
ら選択される生物発光タンパク質によって産生される。
第１及び第２のレポーター成分の好ましい組み合わせには、米国特許第８，２８３，１
２７号明細書に詳述されているものが含まれるが、第１及び第２のレポーター成分の有用
な組み合わせは、決してこれらに限定されるものではない。
いくつかの実施形態では、スクリーニング方法は、第１及び第２のレポーター成分の相
互の近接を検出して、それにより、候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチドとＡＴ１Ｒなどの
アンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存Ｇ
ＰＣＲとの間の相互作用を調節するかどうかを判断することをさらに含む。一般的に、こ
れは、第１及び第２のレポーター成分の近接が、ＲＡＧＥポリペプチドと、ＡＴ１Ｒなど
のアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存
ＧＰＣＲとの間の近接の候補薬剤による調節によって変化された近接シグナルを生成した
ときに達成される。
ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などのケモカイン受容体など、Ｒ
ＡＧＥ及び特定の共存ＧＰＣＲの一方又は両方は、可溶性形態であるか、又は細胞表面に
発現し得る。
いくつかの実施形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの
特定のケモカイン受容体など、ＲＡＧＥ及び特定の共存ＧＰＣＲは、単一の膜中に位置す
るか、又は部分的にその中に位置するか、又はその上に位置し、例えば両方とも宿主細胞
の表面で発現される。
本発明の別の実施形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２など
の特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲは、細胞膜で事前に形成された複合
体において事前にＲＡＧＥと共に組み立てられる。
本発明の別の実施形態では、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２など
の特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲの、ＡＴ１ＲについてＡｎｇ ＩＩ
又はＣＣＲ２についてＭＣＰ－１などの認識リガンドの会合による活性化後、ＲＡＧＥの
細胞質側テールに関与するシグナル伝達が引き起こされる。
本発明の一実施形態では、ＲＡＧＥの細胞質側テールの活性化は、その構造的立体構造
及び／又は結合パートナーに対する親和性の変化に関連している。
本発明の一実施形態では、ＲＡＧＥの構造的立体構造及び／又は結合パートナーに対す
る親和性のモニタリングは、ＲＡＧＥリガンド又は特定の活性化された共存ＧＰＣＲによ
るＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化によって活性化され得なくなるように、Ｒ
ＡＧＥの細胞質側テールが変異及び／又は切断されたときに発生する。
本発明の一実施形態では、構造的立体構造及び／又は結合パートナーに対する親和性の
モニタリングは、ＲＡＧＥリガンド又は特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥ
リガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化による、ＲＡＧＥの結合及び／又は活性化を阻害する
薬剤の存在下で発生する。
本発明の一実施形態では、結合パートナーの動員のモニタリングは、ＲＡＧＥリガンド
又は特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化
によるＲＡＧＥの活性化前に発生する。
本発明の一実施形態では、シグナル伝達メディエーター及び／又はＲＡＧＥの細胞質側
テールへの結合パートナーの動員及び活性化のモニタリングは、ＲＡＧＥリガンド又は特
定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化による
ＲＡＧＥの活性化後に発生する。
本発明の一実施形態では、ＲＡＧＥリガンド又は特定の活性化された共存ＧＰＣＲによ
るＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化によるＲＡＧＥの活性化後の結合パートナ
ーの動員のモニタリングは、ＲＡＧＥリガンドによるＲＡＧＥの結合及び／又は活性化を
阻害する薬剤の存在下で発生する。
本発明のさらなる実施形態は、候補薬剤を、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又
はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガ
ンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節（活性化、阻害又は他の方法での調節など）するそ
の能力について、ＲＡＧＥに媒介されるシグナル伝達の調節を検出することによってスク
リーニングする方法を含む。そのような方法は、以下の１つ以上を測定することにより、
ＮＦκＢの標準的な活性化を測定するステップが含まれ得る。
・ＧＳＴ－ＩκＢαなどの基質のインビトロでのリン酸化をモニタリングすることによ
るＩｋＢキナーゼ（ＩＫＫ）の活性；
・ＩκＢ及び／又はＩκＢ－αのリン酸化／ユビキチン化及び／又は分解を含む、Ｉｋ
Ｂ分解動態の検出；
・抗体、ゲルシフト、ＥＭＳＡ又は質量分析の使用などによるｐ６５（Ｒｅｌ－Ａ）の
リン酸化／ユビキチン化の検出；
・ｐ６５／ホスホｐ６５などのＮＦκＢ成分／サブユニットの細胞質から核への輸送／
転移の検出；
・ＮＦκＢサブユニットの二量体化／複合体形成の検出；
・電気泳動移動度シフトアッセイ又はゲルシフトアッセイ、ＳＥＬＥＸ、タンパク質結
合マイクロアレイ又は配列に基づくアプローチの使用などによる、ＮＦκＢ応答要素／コ
ンセンサスＮＦκＢ結合を含む固定化ＤＮＡ配列／オリゴヌクレオチドへの結合による活
性ＮＦκＢ成分／サブユニットの検出；
・特定の遺伝子のプロモーター及びエンハンサーへの、ＤＮＡへのＮＦκＢのインサイ
チュー結合を検出するクロマチン免疫沈降（ＣｈＩＰ）アッセイ；
・ＮＦκＢキナーゼ活性に対するインビトロキナーゼアッセイ；
・プラスミド形質導入、レポーター細胞株、ミニサークル、レトロウイルス、レンチウ
イルスなどのアプローチを使用した、ＬａｃＺ Ｆｌｕｃ、ｅＧＦＰ ＳＥＡＰ、ＮＦ－
ｇｌｕｃなどのレポーター構築物の導入遺伝子発現を介したＮＦκＢレポーターアッセイ
を使用したＮＦκＢ転写活性の測定；
・ＮＦκＢの下流標的の発現の変化の測定（サイトカイン、成長因子、接着分子及びリ
アルタイムＰＣＲによるミトコンドリア抗アポトーシス遺伝子、タンパク質又は機能的ア
ッセイなど）（ＮＦκＢの多面的性質は、現在５００を超える数のその転写標的に反映さ
れていることに注意されたい（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｕ．ｅｄｕ／ｎｆ－ｋｂ／ｇｅ
ｎｅ－ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ／ｔａｒｇｅｔ－ｇｅｎｅｓ／、２０１７年８月２日アクセス
を参照されたい））；及び
・Ｔ細胞でのＰＯＬＫＡＤＯＴＳ、内皮細胞での接着、白血球での活性化又は腫瘍形成
など、ＮＦκＢ依存性シグナル伝達によって誘導される機能又は構造の変化の測定。
追加又は代替として、このような方法は、以下の１つ以上を測定することにより、ＮＦ
－κＢの非標準的作用から生じるシグナルを測定することを含み得る。
・ＮＩＫ（ＮＦκＢ誘導キナーゼ）の検出；
・ＩＫＫαの活性化／リン酸化の検出；
・キナーゼアッセイを実行することによる、基質を自己リン酸化又はリン酸化する能力
によるＮＩＫキナーゼ活性の検出；
・ｐ５２／ＲｅｌＢなどのｐ５２含有ＮＦκＢダイマーの生成；
・ホスホＮＦκＢ２ｐ１００（Ｓｅｒ８６６／８７０）の検出；
・前駆体ｐ１００のｐ５２への部分的分解（処理と呼ばれる）の検出；
・核へのｐ５２／ＲｅｌＢ転移の検出；
・κＢ部位へのｐ５２／ＲｅｌＢ結合の検出；
・プラスミド形質導入、レポーター細胞株、ミニサークル、レトロウイルス又はレンチ
ウイルスなどのアプローチを使用した、ＬａｃＺ Ｆｌｕｃ、ｅＧＦＰ ＳＥＡＰ、ＮＦ
－ｇｌｕｃなどのレポーター構築物の導入遺伝子発現を介したＮＦκＢレポーターアッセ
イを使用したＮＦκＢ転写活性の測定；
・リアルタイムＰＣＲ、タンパク質発現又は機能的アッセイによるＮＦκＢの非標準シ
グナル伝達の下流標的（ＣＸＣＬ１２など）の発現の変化の測定。
別の態様では、本発明は、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒ又はＭＣＰ－１によるＣＣＲ２
などの認識リガンドによる特定の共存ＧＰＣＲの活性化後又は特定の共存ＧＰＣＲが構成
的に活性である場合、ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節（すなわち活性
化、阻害又は他の方法で調節）し、適切にはＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又は
ＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲを調節し、且つ／又は
ＲＡＧＥポリペプチド又はＲＡＧＥシグナル伝達経路を調節するモジュレーター（活性化
剤、阻害剤、アロステリックモジュレーター又は機能的代替物など）を同定する方法を提
供する。本発明の好ましい形態では、そのようなモジュレーターは、ＡＴ１Ｒなどのアン
ジオテンシン受容体若しくはＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、ＲＡＧＥ若し
くは特定の共存ＧＰＣＲの一方又は両方の阻害剤又はＲＡＧＥシグナル伝達経路の阻害剤
である。本発明の特に好ましい形態では、ＲＡＧＥシグナル伝達経路の調節は、Ｇｑシグ
ナル伝達経路などのＡＴ１Ｒシグナル伝達経路又はＧｉシグナル伝達経路などのＣＣＲ２
シグナル伝達経路などの古典的な特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の調節と異なり、
且つ／又は有意に異なる程度で発生する。本発明の特に好ましい形態では、ＲＡＧＥシグ
ナル伝達経路の阻害は、Ｇｑシグナル伝達経路などのＡＴ１Ｒシグナル伝達経路又はＧｉ
シグナル伝達経路などのＣＣＲ２シグナル伝達経路などの古典的な特定の共存ＧＰＣＲシ
グナル伝達経路の阻害と異なり、且つ／又はそれより大きい。
＜構築物＞
関連する態様では、本発明は、ＲＡＧＥと、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又
はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲとの間の近接性のモ
ジュレーターを同定するための構築物系を提供する。
いくつかの実施形態では、これらの構築物系は、第１のコード配列に作動可能に接続さ
れた調節配列を含む第１の構築物であって、第１のコーディング配列は、ＲＡＧＥポリペ
プチドに対応するポリペプチドをコードする核酸配列及び近接シグナル又はエネルギー供
与体分子をコードする核酸配列を含む、第１の構築物；並びに第２のコード配列に作動可
能に接続された調節配列を含む第２の構築物であって、第２のコーディング配列は、ＡＴ
１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体などの特
定の共存ＧＰＣＲに対応するポリペプチドをコードする核酸配列及び近接シグナル又はエ
ネルギー受容体分子をコードする核酸配列を含む、第２の構築物を含む。特定の実施形態
では、エネルギー供与体分子は、生物発光又は蛍光分子であり、エネルギー受容体分子は
、蛍光受容体分子である。
他の実施形態では、本発明の構築物系は、第１のコード配列に作動可能に接続された調
節配列を含む第１の構築物であって、第１のコーディング配列は、ＡＴ１Ｒなどのアンジ
オテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体などの特定の共存ＧＰＣＲ
に対応するポリペプチドをコードする核酸配列及び近接シグナル又はエネルギー供与体分
子をコードする核酸配列を含む、第１の構築物；並びに第２のコード配列に作動可能に接
続された調節配列を含む第２の構築物であって、第２のコーディング配列は、ＲＡＧＥポ
リペプチドに対応するポリペプチドをコードする核酸配列及び近接シグナル又はエネルギ
ー受容体分子をコードする核酸配列を含む、第２の構築物を含む。特定の実施形態では、
エネルギー供与体分子は、生物発光又は蛍光分子であり、エネルギー受容体分子は、蛍光
受容体分子である。
他の実施形態では、本発明の構築物系は、第１のコード配列に作動可能に接続された調
節配列を含む第１の構築物であって、第１のコーディング配列は、ＡＴ１Ｒなどのアンジ
オテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体などの特定の共存ＧＰＣＲ
に対応するポリペプチドをコードする核酸配列を含む、第１の構築物；並びに第２のコー
ド配列に作動可能に接続された調節配列を含む第２の構築物であって、第２のコーディン
グ配列は、ＲＡＧＥポリペプチドに対応するポリペプチドをコードする核酸配列を含み、
これにより、ＲＡＧＥポリペプチドが天然配列の外部ドメインの１つ以上を欠失させた、
第２の構築物を含む。
＜ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の調節方法＞
関連する態様では、本発明は、動物又は動物起源（ヒト又はヒト起源であってもなくて
もよい）の細胞又は組織において、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２
などの特定のケモカイン受容体など、活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリ
ガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節する方法を提供する。
＜ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の特異的調節方法＞
別の関連する態様では、本発明は、特に、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又は
ＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲ
ＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化及びその後の細胞内の下流シグナル伝達経路を
調節する方法を提供する。これらの方法は、ＲＡＧＥリガンドがその外部ドメインに結合
できないように、又は細胞をＲＡＧＥリガンドのＲＡＧＥへの結合を調節するモジュレー
ターに曝露することによりＲＡＧＥリガンドのその外部ドメインへの結合が損なわれるよ
うにＲＡＧＥを切断するか又は変異させることを含む。
本発明の好ましい形態では、ＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達経路の調節は、Ｒ
ＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達経路の調節と異なり、且つ／又はそれより有意に大き
い。
本発明の特に好ましい形態では、ＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達経路の阻害は
、ＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達経路の阻害と異なり、且つ／又はそれより有意に
大きい。
＜ＲＡＧＥリガンド依存性及びＲＡＧＥリガンド非依存性の両方のＲＡＧＥ活性化の調節
方法＞
別の関連する態様では、本発明は、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリ
ガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節することに加え、ＲＡＧＥリガンドによるＲＡＧ
ＥのＲＡＧＥリガンド依存活性化（ＡＧＥ修飾タンパク質、脂質又はＤＮＡ、タンパク質
のＳ１００カルグラニュリンファミリーのメンバー、ＨＭＧＢ１、アミロイド及びＭａｃ
－１を含む）及び細胞、組織又は動物におけるその後の下流シグナル伝達経路を阻害する
方法を提供する。
本発明の一態様では、これらの方法は、結合相互作用において、ＲＡＧＥの細胞質側テ
ールの代わりに、ＲＡＧＥの細胞質側テールの断片、類似体又は誘導体を含む、本明細書
に記載のモジュレーターを使用して、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによる、ＲＡＧＥ
のＲＡＧＥリガンド依存性活性化とＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化との両方
の活性化を防止することを含む。本発明の一態様では、細胞を、ＲＡＧＥの細胞質側テー
ルへのシグナル伝達要素の結合を阻害する阻害剤に曝露することにより、ＲＡＧＥ依存性
シグナル伝達が損なわれ、ＲＡＧＥリガンドが媒介するＲＡＧＥの活性化と、特定の活性
化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化との両方の阻害
をもたらす。
本発明の一態様では、これらの方法は、ＲＡＧＥの膜貫通ドメインの代わりに、ＲＡＧ
Ｅの膜貫通ドメインの断片、類似体又は誘導体を含む、本明細書に記載のモジュレーター
を使用して、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによる、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存
性活性化とＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化との両方の活性化を防止すること
を含む。本発明の一態様では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一
部及びＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片を含む。本発明の一態様では、モジュレーターは
、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部及びＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む。
本発明の一態様では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部、及び
ＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片、及びＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む。
本発明の一態様では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターは、長さが４０アミノ酸以下、２０アミノ酸以下、
１０アミノ酸以下又は５アミノ酸以下であるＲＡＧＥのリガンド結合外部ドメインの断片
を含有する。
一態様では、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化の阻害は、特定の活性化された
共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害と同時に発生する
。
一態様では、これらの方法は、ＲＡＧＥ又はその類似体、フラグメント若しくは誘導体
が野生型ＲＡＧＥの細胞質側テール又はその一部の非機能的代替物となるようなＲＡＧＥ
のサイレンシング、切断、修飾又は変異を含み、これは、ＲＡＧＥリガンド依存性又はＲ
ＡＧＥリガンド非依存性経路（Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異など）のいずれによっても活性
化されないか、又は下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を促進できず、したがってＲＡＧ
Ｅの細胞質側テール及びＲＡＧＥ依存シグナル伝達を通して発生するシグナル伝達を阻害
する。
一態様では、これらの方法は、ＲＡＧＥ又はその類似体、フラグメント若しくは誘導体
が野生型ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部の非機能的代替物となるようなＲＡＧＥ
のサイレンシング、切断、修飾又は変異を含み、これは、ＲＡＧＥリガンド依存性又はＲ
ＡＧＥリガンド非依存性経路のいずれによっても活性化されないか、又は下流のＲＡＧＥ
依存性シグナル伝達を促進できず、したがってＲＡＧＥの細胞質側テール及びＲＡＧＥ依
存シグナル伝達を通して発生するシグナル伝達を阻害する。本発明の一態様では、モジュ
レーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部及びＲＡＧＥの細胞外ドメインの断
片を含む。本発明の一態様では、モジュレーターは、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその
一部及びＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む。本発明の一態様では、モジュレーター
は、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部、及びＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片、及
びＲＡＧＥの細胞質側テールの断片を含む。
一態様では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡ
ＧＥ活性化のモジュレーターは、長さが４０アミノ酸以下、２０アミノ酸以下、１０アミ
ノ酸以下又は５アミノ酸以下であるＲＡＧＥのリガンド結合外部ドメインの断片を含有す
る。
一態様では、これらの方法は、ＲＡＧＥ又はその類似体、フラグメント若しくは誘導体
がＲＡＧＥの細胞質側テールによって媒介されるシグナル伝達に関与する一般的な要素（
ＰＫＣζ、Ｄｉａｐｈ１、ＭｙＤ８８、ＴＩＲＡＰ、ＮＦκＢなど）を調節するようなＲ
ＡＧＥのサイレンシング、切断、修飾又は変異を含む。ＲＡＧＥリガンド依存性又はＲＡ
ＧＥリガンド非依存性活性化経路のいずれかによるＲＡＧＥの活性化との関連である。
一態様では、これらの方法は、ＲＡＧＥのＲＡＧＥリガンド依存性活性化（ＲＡＧＥの
細胞外ドメインへのＲＡＧＥリガンドの結合を調節するモジュレーターによるものなど）
を調節するモジュレーターに加えて、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ
２などの特定のケモカイン受容体など、活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥ
リガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節するモジュレーターの使用を含む。
＜特定の共存ＧＰＣＲを介してＲＡＧＥ非依存性シグナル伝達も調節しつつ、特定の活性
化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節する方法
＞
一態様では、本発明は、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化を調節するだけでなく、認識リガンドによる活性化後に誘導される
ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路をも調節する方法を提供する。
一形態では、本発明は、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依
存性のＲＡＧＥ活性化を調節するのと同時に、認識リガンドによる活性化後に誘導される
ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路を調節する方法を提供する。
一形態では、認識リガンドによる活性化後に誘導されるＲＡＧＥ非依存性の特定の共存
ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、Ａｎｇ ＩＩにより活性化されるＡＴ１ＲなどのＧｑシグ
ナル伝達経路である。別の形態では、ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝
達経路は、ＭＣＰ－１により活性化されるＣＣＲ２などのＧｉシグナル伝達経路である。
別の形態では、ＲＡＧＥ非依存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、βアレスチ
ン媒介細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫ）シグナル伝達である。別の形態では、ＲＡＧＥ非依
存性の特定の共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、細胞内シグナル伝達媒介物（イノシトー
ルリン酸又はカルシウムなど）の変化である。
雄性ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥダブルノックアウト（ＤＫＯ）マウスにおける４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後のＳｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合として表される定量プラーク面積。 ４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスからの大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。 （ｉ）酸化的ＤＮＡ損傷のマーカーであるプラズマ８－ヒドロキシデオキシグアノシン（８－ＯＨ－ｄＧ）、並びに（ｉｉ）大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより推定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈におけるＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニット、ＮＯＸ－１及びＮＯＸ－４の遺伝子発現の誘導によって推定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後の酸化ストレスのマーカー。 （ｉ）市販のＥＬＩＳＡによって測定される、Ｓ１００Ａ８／Ａ９の循環血漿レベル、（ｉｉ）自社のＥＬＩＳＡによって測定される、血漿ＡＧＥレベル、（ｉｉｉ）Ａｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクルの４週間注入後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＨＰＬＣによって測定される、ＡＧＥ前駆体であるメチルグリオキサールの循環レベルを含む、ＲＡＧＥリガンドの発現。 ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後の、テールカフプレチスモグラフィーによって測定される収縮期血圧。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、対照ａｐｏＥ－ＫＯマウスに対して、＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＳｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合として表される定量プラーク面積。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。 （ｉ）酸化的ＤＮＡ損傷のマーカーであるプラズマ８－ヒドロキシデオキシグアノシン（８－ＯＨ－ｄＧ）、並びに（ｉｉ）大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより推定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈におけるＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニット、ＮＯＸ－１及びＮＯＸ－４の遺伝子発現の誘導によって推定される、６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでの酸化ストレスのマーカー。 ６週間にわたり０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料に曝露されたａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＥＬＩＳＡによって測定される、可溶性ＭＣＰ－１及びＩＣＡＭ－１の循環レベル。 動的フローアッセイによって測定される、低ナトリウム食又は通常飼料への１週間前の曝露後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈表面にエクスビボで付着する標識白血球の数。 （ｉ）市販のＥＬＩＳＡによって測定される、Ｓ１００Ａ８／Ａ９の循環血漿レベル、（ｉｉ）自社のＥＬＩＳＡによって測定される、血漿ＡＧＥレベル、及び（ｉｉｉ）６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＨＰＬＣによって測定される、ＡＧＥ前駆体であるメチルグリオキサールの循環レベルを含む、ＲＡＧＥリガンドの発現。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのテールカフプレチスモグラフィーによって測定される、収縮期血圧。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのラジオイムノアッセイによって測定される、（ｉ）ナトリウム排泄の減少、（ｉｉ）血漿レニン活性の増加、（ｉｉｉ）血漿アルドステロンレベルの増加を含む、ＲＡＡＳの活性化のマーカー。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、通常飼料のａｐｏＥ－ＫＯマウスに対して、ｐ＜０．０５。＃は、ａｐｏＥ－ＫＯマウス＋低ナトリウムに対するものである。 ラジオイムノアッセイによって測定される、遺伝的Ａｃｅ２欠損を有するか又は有しない、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける血中Ａｎｇ ＩＩ濃度。 遺伝的Ａｃｅ２欠損を有するか又は有しない、１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける、テールカフプレチスモグラフィーによって測定される収縮期血圧。 遺伝的Ａｃｅ２欠損を有するか又は有しない、１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける、Ｓｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合として表される定量プラーク面積。 Ａｃｅ２及び／又はＲＡＧＥの存在下又は非存在下における、ａｐｏＥ－ＫＯマウスからの大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの大動脈発現。 酸化的ＤＮＡ損傷のマーカーであるプラズマ８－ヒドロキシデオキシグアノシン（８－ＯＨ－ｄＧ）によって推定される、１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス、ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯ及びＡｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥトリプルＫＯ（ＴＫＯ）マウスの酸化ストレス。 （ｉ）市販のＥＬＩＳＡによって測定される、Ｓ１００Ａ８／Ａ９の循環血漿レベル、（ｉｉ）１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス、ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯ及びＡｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ ＴＫＯマウスにおいて、自社のＥＬＩＳＡによって測定される、血漿ＡＧＥレベルを含む、ＲＡＧＥリガンドの発現。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスに対するものである。 Ａｎｇ ＩＩ又はビヒクルにエクスビボで曝露した後の大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより測定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯにおける、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの大動脈発現。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、未処置ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩに対して；ｐ＜０．０５。 動的フローアッセイによって測定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）又はビヒクル対照への４時間のエクスビボ曝露後の内皮活性化のマーカーとしての、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯの大動脈表面に付着する標識白血球の数。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、未処置ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩに対するＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩである；ｐ＜０．０５。 Ａｎｇ ＩＩによる前処理（１μＭで２時間）の存在下又は非存在下における、Ｃ５７ｂｌ６又はＡＧＥＲ－ＫＯマウスからの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）の単層に付着した標識ＴＨＰ－１単球の数。 Ｃ５７ｂｌ６からの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）及びＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）又はビヒクル対照への曝露後のＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのＰＭＡＥＣでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより測定される、ＡＧＥＲ自体、重要な接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα及びＭＣＰ－１）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。 （ｉ）フローチャンバーアッセイにおけるＤＣＦＨ蛍光の誘導、及び（ｉｉ）ＧＴＰ活性化ＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニット、Ｒａｃ－１のレベル、及び（ｉｉｉ）酸化型グルタチオンのレベルによって推定される、ｃ５７ｂｌ６マウス及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのＰＭＡＥＣにおけるＡｎｇ ＩＩ又はビヒクル対照への曝露後の酸化ストレスのマーカー。 Ａｎｇ ＩＩへの曝露後のＣ５７ｂｌ６及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）の単層における、ＶＣＡＭ－１及びＮＦκＢ（それぞれＣＸＣＬ１２及びＣＸＣＬ２）を介した非標準及び標準シグナル伝達のマーカーの遺伝子発現。リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＰＭＡＥＣ。ＴＮＦαは、標準的な特定の対照として示される。ＶＣＡＭ－１は、図４Ｄでデータを複製する標的特異的対照として示される。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）で処置されたＣ５７ｂｌ６及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）における、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）及び炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα及びＭＣＰ－１）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、記号は、＊が未処置野生型ＰＭＡＥＣに対して；＃がＳ１００Ａ８／Ａ９で処置された野生型ＰＭＡＥＣに対するものを意味する、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって推定される、ＲＡＧＥ若しくはＮＦκＢサブユニットｐ６５の発現がｓｉＲＮＡを用いて選択的にサイレンシングされたか、又は変化させず（スクランブルＲＮＡ対照）、続いてＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）若しくはＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）に曝露された、ＰＭＡＥＣの単層における重要な接着タンパク質であるＶＣＡＭ－１の遺伝子発現。 （ｉ）ＩＰ－１によって推定されるイノシトールリン酸合成の誘導、及び（ｉｉ）初期増殖応答遺伝子（ＥＧＲ１）の下流誘導を含む、ｃ５７ｂｌ６マウス及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）によるＡＴ１Ｒの活性化後に誘導されるＧｑ媒介シグナル伝達のマーカー。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、特に明記しない限り、＊は、未処置野生型対照ＰＭＡＥＣに対して、＃は、Ａｎｇ ＩＩ処置野生型対照に対して、ｐ＜０．０５。 全長型ヒトＲＡＧＥの追加的な発現を伴い又は伴わず、ヒトＡＴ１Ｒの発現の存在下又は非存在下において、ＣＨＯ細胞のＩＰ－１レベルによって推定される、外因性Ａｎｇ ＩＩに対する古典的な反応性のマーカーである、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）に反応したイノシトールリン酸合成の誘導。 全長型ヒトＲＡＧＥの追加的な発現を伴い又は伴わず、ヒトＡＴ１Ｒの発現の存在下又は非存在下において、ＣＨＯ細胞におけるＥＧＲ１遺伝子の下流誘導によって推定される、外因性Ａｎｇ ＩＩに対する反応性のマーカーである、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）に反応したＥＧＲ１発現の誘導。 （ｉ）化学発光ＳＥＡＰレポーター遺伝子アッセイ、及び（ｉｉ）全長型ヒトＲＡＧＥの追加的な発現を伴い又は伴わない、ヒトＡＴ１ＲのＣＨＯ細胞における発現の存在下又は非存在下におけるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導、及び（ｉｉｉ）ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥシグナル伝達の完全性の対照としてのＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）への曝露後によって測定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＮ末端トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導及びＮＦκＢ活性の化学発光ＳＥＡＰレポーター遺伝子アッセイによって測定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＣ欠損型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導及びＮＦκＢ活性の化学発光ＳＥＡＰレポーター遺伝子アッセイによって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＮ末端トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＣ欠損型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 ｍＣｈｅｒｒｙと融合していないＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、特に明記しない限り、未処置ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥの細胞外ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有するデコイ受容体（可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とするＲＡＧＥ中和抗体は、ＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＮＦκＢサブユニットｐ６５の発現によって推定されるように、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞においては、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によるが、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）によらず、炎症促進性シグナル伝達の誘導を阻害する。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６、＊は、ビヒクル単体に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥの細胞外ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有するデコイ受容体（可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１；ｓＲＡＧＥ）を標的とするＲＡＧＥ中和抗体は、主要な接着遺伝子であるＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１並びに炎症性ケモカイン遺伝子（ＭＣＰ－１）の誘導によって推定されるように、野生型マウスからのＰＭＡＥＣにおいては、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）により炎症促進性シグナル伝達の誘導を阻害しない。ＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのデータがネガティブコントロールとして示されている。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６、＊は、ビヒクル単体で処置された対照細胞に対して（白のバー）、＃は、Ａｎｇ ＩＩ単体で処置された対照細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥの細胞外ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有するデコイ受容体（可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とするＲＡＧＥ中和抗体は、主要な接着遺伝子であるＩＣＡＭ－１の誘導によって推定されるように、野生型マウスからのＰＭＡＥＣにおいては、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９により炎症促進性シグナル伝達の誘導を阻害する。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６、＊は、ビヒクル単体で処置された対照細胞に対して（白のバー）、＃は、Ｓ１００Ａ８／Ａ９単体で処置された対照細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、全長野生型ＲＡＧＥ２２－４０４又は選択されたＳ３９１－ＲＡＧＥ２２－４０４変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍｌ；灰色のバー）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ；黒のバー）による炎症性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、全長ＲＡＧＥを発現するビヒクル処置ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ｓ３９１（キメラＲＡＧＥ；ｃＲＡＧＥ）以外の細胞質側テールにリン酸化可能なモチーフを欠くキメラＲＡＧＥ及び細胞質側テールにいかなるリン酸化可能なモチーフも完全に欠くＳ３９１－ｃＲＡＧＥ変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍｌ）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症促進性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、全長キメラＲＡＧＥを発現するビヒクル処置ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に対して；ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、全長又はＮ末端トランケート型Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症促進性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ベクター形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ｓ３９１－ＲＡＧＥ３６２－４０４変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞における野生型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下でのＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症促進性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍｌ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド依存性誘導の誘導に対するｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＭｙＤ８８発現の選択的抑制の効果。ｓｉＲＮＡを使用したＲＡＧＥシグナル伝達の別の下流メディエーターである、ｐ６５発現の選択的抑制は、ポジティブコントロールとして示されている。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＭｙＤ８８発現の選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＭｙＤ８８発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によるＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達の誘導に対する、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるＰＫＣζ（ｉＰＫＣｚ）の偽基質又はＰＫＣζ（ｓｉＰＫＣｚ）若しくはＲＡＧＥ（ｓｉＲＡＧＥ）若しくはスクランブル対照の発現を標的とするｓｉＲＮＡを使用したＰＫＣζの選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の遺伝子発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層における、ＰＫＣζ（ｉＰＫＣζ）の偽基質又はＰＫＣζ（ｓｉＰＫＣζ）を標的とするｓｉＲＮＡを使用した、ＰＫＣζ発現の選択的抑制の効果。列１及び２には、スクランブルｓｉＲＮＡ対照が含まれる。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＲｅｌＡ／ｐ６５及びＰＣＮＡの遺伝子発現によって推定される、Ｓ３９１（ｃＲＡＧＥ）以外の細胞質側テールにリン酸化可能なモチーフを欠くキメラＲＡＧＥ及びＳ３９１Ｑ－ＲＡＧＥ変異（Ｓ３１９Ｑ－ｃＲＡＧＥ）も含有し、それにより細胞質側テールの全てのリン酸化部位を除去するｃＲＡＧＥを発現するＣＨＯ細胞における、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）によるｐ６５及びＰＣＮＡのＲＡＧＥリガンド非依存性誘導に対するＰＫＣζ（ＰＫＣζｉ）の偽基質を使用したＰＫＣζ発現の選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＰＫＣζ発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によるＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達の誘導に対する、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡを使用したＤｉａｐｈ１発現の選択的抑制の効果。ｓｉＲＡＧＥのデータは、対照として含まれている。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞における、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によって誘導されるシグナル伝達及びＡｎｇ ＩＩによって誘導されるＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達に対する、荷電パッチであって、それを介してＤｉａｐｈ１とＲＡＧＥが推定的に相互作用するものを選択的に破壊するＲ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡＧＥ変異の特異的効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）によって誘導されるＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達の誘導に対する、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡを使用したＤｉａｐｈ１発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５。 Ａｎｇ ＩＩへの暴露後の内皮単層への白血球接着の誘導に対する、ＳＶＥＣの単層における、スクランブル制御とは対照的に、ｓｉＲＮＡを使用した、Ｄｉａｐｈ１又はＡＧＥＲ発現の選択的抑制。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ａｎｇ ＩＩによって誘導されるシグナル伝達に対する、荷電パッチであって、それを介してＤｉａｐｈ１とＲＡＧＥが推定的に相互作用するものが破壊又は欠失されるＲ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＤｉａｐｈ１発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブルｓｉＲＮＡで処置したビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ａｎｇ ＩＩによって誘導されるシグナル伝達に対する、阻害性ペプチドＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４で前処理されたＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞における、全長型ＲＡＧＥ、トランケート型ＲＡＧＥ又はＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５。特に明記しない限り、データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層における、スクランブル対照と対比した、ＩＱＧＡＰ－１を標的とするｓｉＲＮＡを使用したＩＱＧＡＰ－１発現の選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド依存性誘導の誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層における、スクランブル対照と対比した、ｓｉＲＮＡを使用したＩＱＧＡＰ－１発現の選択的抑制の効果。 変異体ＲＡＧＥの細胞質側テール（Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４）でコーティングされたカラムを使用して他のサイトゾル成分からＩＱＧＡＰ－１として同定されるタンパク質並びにＩＱＧＡＰ－１関連タンパク質、エズリン／ラディキシン／モエシン及びＧＰＣＲ嗅覚受容体２Ｔ２のプルダウン。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＩＱＧＡＰ－１発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５、＃は、スクランブル＋リガンド（Ａｎｇ ＩＩ又は適切な場合にはｓ１００Ａ８／Ａ９）に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＴ－ＰＣＲによって測定される、対照としてのベクター単体（ｐｃ－Ｎｅｏ）と比較した、Ａｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１の誘導に対するマウスＳＶＥＣのＲＡＧＥ又はＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して；＃は、ｎｅｏ＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 阻害活性を有する最小の断片を同定するための、マウスＳＶＥＣにおけるＡｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１の誘導に対するトランケート型ＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 ｍＣｈｅｒｒｙと融合していない変異体及びＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化の阻害。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 マウスＳＶＥＣのＡｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１の誘導に対するＲＡＧＥ３７０－３９０の単一部位特異的アラニン又はリジン変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥ３７９－３９０とストレプトマイセスの抗炎症タンパク質及び他の微生物からのタンパク質との配列相同性。 ＴＡＴ－Ｃｈｅｒｒｙ単体（８μｇ）と比較した場合の、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ；黒のバー）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導に対する、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異を伴わない又は伴うＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４（０．４ｎｇ／ｍｌ）の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドによって達成されるシグナル伝達の阻害は、野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドでの前処置によって逆転しない。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して；ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドによって達成されるシグナル伝達の阻害は、千倍過剰の野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドでの後処置にかかわらず観察される。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 リン酸化に利用可能な標的のない全長型Ｓ３９１Ｑ－ｃＲＡＧＥで形質導入したＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩに応答したｐ６５及びＰＣＮＡ遺伝子発現の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの阻害効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、Ａｎｇ ＩＩに対して、＃は、全長野生型ＲＡＧＥに対して；ｐ＜０．０５。 Ａｎｇ ＩＩに応答したＲＡＧＥ欠損ＰＭＡＥＣの炎症促進性遺伝子発現の誘導に対する野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチド（０．４ｎｇ／ｍｌ）の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 対照としてのＴＮＦαへの応答と、Ａｎｇ ＩＩに応答するＰＭＡＥＣにおける炎症促進性ＶＣＡＭ－１、ＣＸＣＬ２及びＣＸＣＬ１２遺伝子発現の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル及び処置対照（ＴＡＴ）に対して、＃は、Ａｎｇ ＩＩ及び処置対照（ＴＡＴ）に対して；ｐ＜０．０５。 ＨＡＥＣのＡｎｇ ＩＩに応答した炎症促進性遺伝子発現の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチド及びＡＴ１Ｒブロッカー、イルベサルタンの効果。 （ｉ）対照として示された不活性な全長型Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異体を発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞と、全長型ＲＡＧＥも発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９に応答した炎症促進性遺伝子発現（ｐ６５）の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの阻害効果。（ｉｉ）ＲＡＧＥ中、内因的に十分に存在するＰＭＡＥＣ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ又はＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９に応答した炎症促進性遺伝子発現（ＶＣＡＭ－１）の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの阻害効果。特に明記しない限り、データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５、＃は、対照＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 ａｐｏＥ－ＫＯマウスからの大動脈全体をＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）にエクスビボで曝露した後の炎症促進性マーカーのＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋ビヒクル＋ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５、＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ対照＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスからの大動脈全体をＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）にエクスビボで曝露した後の炎症促進性マーカーのＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対する野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋ビヒクル＋ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５。 ａｐｏＥ－ＫＯ及びＡｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥトリプルＫＯマウスにおける大動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対する、ｍＣｈｅｒｒｙ蛍光タンパク質で標識されたＲＡＧＥのＣ末端の４２アミノ酸及び細胞透過を促進するＨＩＶ－ＴＡＴモチーフを含むＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４のアテローム性動脈硬化誘発効果。これは、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける大動脈アテローム性動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の抗アテローム性動脈硬化効果と比較される。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８；＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯ対照に対して；ｐ＜０．０５。 糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯ及び糖尿病ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける大動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対する、ｍＣｈｅｒｒｙ蛍光タンパク質で標識されたＲＡＧＥのＣ末端の４２アミノ酸及び細胞透過を促進するＨＩＶ－ＴＡＴモチーフを含むＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドのアテローム性動脈硬化誘発効果。これは、糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける大動脈アテローム性動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の抗アテローム性動脈硬化効果と比較される。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８；＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して、＃は、糖尿病ａｐｏＥ ＤＫＯ対照に対して；ｐ＜０．０５。 示される通り、ＡＧＥＲ発現を伴う又は伴わない、マウス及び糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯマウスの収縮期血圧に対する、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－ ４０４及びＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の効果の欠如。 ＡＴ１／Ｒｌｕｃ８及びＲＡＧＥ／ＶｅｎｕｓによるＢＲＥＴ飽和曲線は、可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１（ｓＲＡＧＥ）を伴う又は伴わないＡｎｇ ＩＩ又はビヒクル添加の６０分後に生成された。データは、３つの独立した実験から結合される。 対照としてのＡＴ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＡｎｇ ＩＩ誘導性動員及びＣＣＲ４／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２２誘導性動員。 Ａｎｇ ＩＩへの曝露後のＡＴ１受容体の存在下であり、ＣＣＬ２２への曝露後のＣＣＲ４の存在下ではない、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／ＶｅｎｕｓのＡｎｇ ＩＩ誘導性動員。 Ｇαｉ／Ｎｌｕｃ及びＧγ２／Ｖｅｎｕｓが非標識ＣＣＲ４の存在下で共発現されると、ＣＣＬ２２誘導ＢＲＥＴシグナルが観察される。 ＡＴ１受容体の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のＡｎｇ ＩＩ誘導性動員。ＡＴ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＡｎｇ ＩＩ誘導性動員は、対照として含まれている。 ＴＲＨ受容体１（ＴＲＨＲ１）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のサイロトロピン放出ホルモン（ＴＲＨ）誘導性の弱い動員。ＴＲＨＲ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＴＲＨ誘導性動員は、対照として含まれている。挿入図は、ｙ軸スケールを拡大した同一のデータを示す。 オレキシン受容体１（ＯｘＲ１）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のオレキシンＡ（ＯｘＡ）誘導性動員。ＯｘＲ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＯｘＡ誘導性動員は、対照として含まれている。 ＢＤＫ受容体２（ＢＤＫＲ）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のブラジキニン（ＢＤＫ）誘導性の弱い動員。ＢＤＫＲ／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＢＤＫ誘導性動員は、対照として含まれている。挿入図は、ｙ軸スケールを拡大した同一のデータを示す。 バソプレシン受容体２（Ｖ２Ｒ）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のアルギニンバソプレシン（ＡＶＰ）誘導性動員。Ｖ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＡＶＰ誘導性動員は、対照として含まれている。 ＣＣＲ２の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のＣＣＬ２（ＭＣＰ１）誘導性動員。ＣＣＲ２／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＭＣＰ－１誘導性動員は、対照として含まれている。 特にＣＣＲ５の非存在下での対照と比較した、ＭＩＰ１βへの曝露後のＣＣＲ５の存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）の、ＣＣＬ４（ＭＩＰ１β）誘導性の特に弱い動員。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＭＩＰ１β誘導性動員は、さらなる対照として含まれている。挿入図は、ｙ軸スケールを拡大した同一のデータを示す。全てのデータは、３回の独立した実験の平均±ＳＥＭである。 ＣＣＲ１の存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ３誘導性動員。 ＣＣＲ２の存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２誘導性動員。 ＣＣＲ４の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２２誘導性動員の欠如。 ＣＣＲ５の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ４誘導性動員の欠如。 ＣＣＲ６の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２０誘導性動員。 ＣＣＲ７の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ１９誘導性動員。 ＣＣＲ１０の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２７誘導性動員の欠如。 ＣＸＣＲ１の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ８誘導性動員。 ＣＸＣＲ２の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ８誘導性動員。 ＣＸＣＲ３の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ１１誘導性動員の欠如。 ＣＸＣＲ４の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８へのβ－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓの近接性のＣＸＣＬ１２誘導性減少。 ＣＸＣＲ６の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ１６誘導性動員。全てのデータは、３回の独立した実験の平均±ＳＥＭである。 時間ゼロで、示された濃度で、示されたリガンドによって活性化された、示された非ＢＲＥＴ標識ＧＰＣＲの存在下における、Ｖｅｎｕｓ標識された示された細胞内コンパートメントマーカーへのＲｌｕｃ８標識ＲＡＧＥの近接。 ＲＡＧＥ共発現の存在下又は非存在下でＣＣＲ２を発現するＣＨＯ細胞におけるＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ共発現の存在下又は非存在下でＣＸＣＲ２を発現するＣＨＯ細胞におけるＣＸＣＬ２（ＩＬ－８）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ活性化のペプチド阻害剤、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４の存在下又は非存在下で骨髄由来初代マクロファージにおけるＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ活性化のペプチド阻害剤、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４の存在下又は非存在下でＨＭＥＣにおけるＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）によるＭＣＰ－１の遺伝子発現の自己誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ活性化のペプチド阻害剤、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４の存在下又は非存在下でＣＸＣＲ２を発現するＨＭＥＣにおけるＩＬ－８によるＭＣＰ－１の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１とＮｌｕｃ／ＡＴ１間のＢＲＥＴは、Ａｎｇ ＩＩで増加する。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～５である。 示されるように、細胞が２００ｎｇ又は４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡによっても形質導入された場合のＡＴ１／Ｒｌｕｃ８及びＲＡＧＥ／ＶｅｎｕｓによるＢＲＥＴ飽和曲線は、ビヒクル又はＡｎｇ ＩＩの添加の６０分後に生成された。データは、３つの独立した実験から結合される。 示されるように、細胞が０、５０、１００、２００、３００又は４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡ又はｐｃＤＮＡ３制御プラスミドによっても形質導入された場合のＡＴ１／Ｒｌｕｃ８とＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓとの間のＢＲＥＴシグナルのＡｎｇ ＩＩ誘導性調節。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～４である。フィルター：Ｖｅｎｕｓ ５５０ｎｍ／Ｒｌｕｃ８ ４５０ｎｍ。 示されるように、細胞が５０ｎｇのＡＴ１／Ｒｌｕｃ８ ｃＤＮＡ、３００ｎｇのＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓ ｃＤＮＡ及び０、５０、１００、２００、３００又は４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡ又はｐｃＤＮＡ３制御プラスミドによって形質導入された場合のＡＴ１／Ｒｌｕｃ８とｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１との間のＡｎｇ ＩＩ誘導性ＢＲＥＴシグナルの欠如。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～４である。フィルター：ｍＣｈｅｒｒｙ ６５０ｎｍ／Ｒｌｕｃ８ ４５０ ｎｍ。 図２１Ｃ及び２１Ｄに示す実験におけるＡＴ１／Ｒｌｕｃ８からの発光、ＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓからの蛍光、ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１からの蛍光。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～４である。 示されるように、細胞がｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡ又はｐｃＤＮＡ３制御プラスミドによっても形質導入された場合のＧＰＣＲ／Ｒｌｕｃ８とＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓとの間のＢＲＥＴシグナルのリガンド誘導性調節。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝２～４である。フィルター：Ｖｅｎｕｓ ５５０ｎｍ／Ｒｌｕｃ８ ４５０ｎｍ。形質導入されたｃＤＮＡの量：５０ｎｇ ＧＰＣＲ／Ｒｌｕｃ８＋３００ｎｇ ＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓ＋４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３ ３８－３６１又はｐｃＤＮＡ３。示された濃度、時間ゼロで、示されたリガンドによって活性化された示されたＲｌｕｃ８標識ＧＰＣＲ。 ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１によって阻害されたＨＭＥＣ１におけるＡｎｇ ＩＩ媒介炎症促進性シグナル伝達（ＩＣＡＭ－１発現）は、ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３６２－４０４によってレスキューされる。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲを使用して測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって表されるように、ＨＭＥＣ細胞におけるＡｎｇ ＩＩによる炎症誘発性シグナル伝達の誘導は、発現をモニターするためのＮ末端ｍＣｈｅｒｒｙ融合を有する又は有しないＲＡＧＥ膜貫通ドメインＲＡＧＥ３４３－３６１の過剰発現により阻害される。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲを使用して測定されるｐ６５の発現によって表されるように、ＲＡＧＥ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９による炎症誘発性シグナル伝達の誘導は、ＲＡＧＥ膜貫通ドメインＲＡＧＥ３４３－３６１単独又はＲＡＧＥ３７０－３９０の過剰発現により阻害される。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって表されるように、ＨＭＥＣ細胞におけるＡｎｇ ＩＩによる炎症誘発性シグナル伝達の誘導は、Ｄｉａｐｈ１又はＰＫＣｚを標的とするｓｉＲＮＡによって阻害される。この阻害は、ＲＡＧＥ３６２－４０４によってレスキューされるが、ＲＡＧＥ３４３－４０４によってレスキューされない。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。
［配列の簡単な説明］
［発明の詳細な説明］
＜１．定義＞
別に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明
が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に
記載のものと類似の又は均等な任意の方法及び材料を本発明の実施又は試験に使用するこ
とができるが、好ましい方法及び材料が記載される。本発明の目的のために、次に以下の
用語を定義する。
「受容体ヘテロマー」は、「個々の成分の生化学的特性と明らかに異なる生化学的特性
を備えた少なくとも２つの（機能的）受容体ユニットで構成される高分子複合体。」と定
義される（Ｆｅｒｒｅ ｅｔ ａｌ．，２００９）。
冠詞「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」は、本明細書では、冠詞の文法的対象の
１つ又は２つ以上（すなわち少なくとも１つ）を指すために使用される。例として、「要
素」は、１つの要素又は複数の要素を意味する。
「約」とは、基準測定値、量、レベル、値、数、頻度、割合、寸法、サイズ、量、重量
又は長さに対して、１０、９、８、７、６、５、４、３、２又は１％異なる測定値、数量
、レベル、値、数、頻度、割合、寸法、サイズ、量、重量又は長さを意味する。
本明細書で使用される「及び／又は」は、関連する列挙された項目の１つ以上のあらゆ
る組み合わせ及び代替（又は）で解釈される場合の組み合わせの欠如を指し、包含する。
「薬剤」、「候補薬剤」、「調節剤」、「モジュレーター」、「代替物」、「機能的代
替物」、「非機能的代替物」又は「阻害剤」という用語は、所望の薬理学的及び／又は生
理学的効果を誘導する、化合物、化合物の混合物、生体高分子、生物学的材料からの抽出
物、生物学的有機体若しくはその一部又は他の材料を含む。これらの用語は、塩、エステ
ル、アミド、プロドラッグ、活性代謝物、類似体なども含むが、これらに限定されない、
本明細書で具体的に言及される化合物の薬学的に許容される薬理学的活性成分も包含する
。上記の用語が使用される場合、これには、活性薬剤それ自体並びに薬学的に許容される
薬理学的に活性な塩、エステル、アミド、プロドラッグ、代謝産物及び類似体が含まれる
ことを理解されたい。「薬剤」、「調節剤」、「代替物」又は「阻害剤」という用語は、
狭く解釈されるべきではなく、小分子、ペプチド、ポリペプチド及びタンパク質などのタ
ンパク性分子、並びにそれらを含む組成物、並びにＲＮＡ、ＤＮＡ及びその模倣物及び化
学的類似体などの遺伝的分子、並びに細胞剤まで及ぶ。「薬剤」、「モジュレーター」、
「代替物」又は「阻害剤」という用語は、本明細書で言及されるポリペプチド及びそのポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを産生及び分泌するこ
とができる細胞を含む。したがって、「薬剤」、「モジュレーター」、「代替物」又は「
阻害剤」という用語は、細胞の範囲での発現及び分泌のための、ウイルス又は非ウイルス
ベクターなどのベクター、発現ベクター及びプラスミドを含む核酸構築物まで及ぶ。
「阻害剤」という用語は、その最も広い意味で使用され、別の分子の活性、活性化又は
機能の少なくとも１つの側面を減少させる、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、抗体
、抗体断片、高分子又は低分子（１０ｋＤａ未満）を含む任意の化合物を含む。例えば、
阻害剤は、ＲＡＧＥ及び／又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２など
の特定のケモカイン受容体などの特定の共存ＧＰＣＲの活性、活性化又は機能及び／又は
適切にはＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受
容体など、活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ
活性化を減少させ得る。したがって、「特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥ
リガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤」とは、特定の活性化された共存ＧＰＣＲに
よるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を実質的に低減、阻害、拮抗、遮断、負
の調節及び／又は軽減できる薬剤を指す。阻害剤による特定の活性化された共存ＧＰＣＲ
によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害は、細胞による炎症促進性サイ
トカインを含む炎症促進性メディエーターの産生又はＲＡＧＥ疾患の症状の異常なＲＡＧ
Ｅリガンド非依存性活性化に関連する他の細胞要素の調節を含む、その生物学的効果を適
切に低減又は阻害する。部分アゴニストは、アゴニズムを示しても最大の効果をもたらさ
ないため、阻害剤として作用することができることに留意されたい。したがって、内因性
アゴニストなどのより効果的なアゴニストのアゴニスト活性に競合又は調整することによ
り、それが存在しない場合と比較してシグナル伝達出力を減少させるため、それは、受容
体ポリペプチド及び／又はそのシグナル伝達経路の阻害剤として効果的に作用し得る。そ
の結果、部分アゴニストは、治療設定において阻害剤として作用し得る。阻害剤は、別の
分子の活性、活性化又は機能の全ての側面を必ずしも阻害するわけではなく、実際、いく
つかの側面を阻害する一方、他の側面を活性化し、且つ／又はさらなる側面を調節しない
可能性がある。したがって、阻害剤は、リガンドバイアスを示し得る。
「リガンドバイアス」という用語は、同じ受容体に対して、異なるシグナル伝達経路の
活性化を選択的に促進又は阻害する別個のリガンド安定化受容体状態が存在できる現象を
指す（Ｍｕｓｔａｆａ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。この現象には、リガンドバイアスシ
グナル伝達、リガンド誘導バイアスシグナル伝達、受容体シグナルのアゴニスト輸送、細
胞ベースの機能的選択性、受容体活性状態ベースの選択性、刺激輸送、バイアスアゴニズ
ム、副次的有効性及びリガンド誘導性選択的シグナル伝達（Ｍｕｓｔａｆａ ｅｔ ａｌ
．，２０１０）を含むが、これらに限定されない複数の名称が付けられている。例として
、これは、全てのアゴニストが、多くの場合に内因性アゴニストである参照アゴニストに
よって通常活性化される全てのシグナル伝達経路を活性化するわけではないという概念を
含む。アゴニストは、参照と比較して、いくつかの経路を活性化するが、他の経路は活性
化しない可能性があり、それによってバイアスを示す。さらに、アンタゴニスト又は逆ア
ゴニスト又は阻害剤は、一部の経路のみを阻害し、他の経路は阻害しない可能性があり、
オルソステリックリガンド結合部位及び／又はアロステリック結合部位で作用する可能性
がある。オルソステリック及びアロステリック結合部位は、当技術分野で一般的に知られ
ているように定義されており、アロステリズムは、ある受容体へのリガンドの結合が同じ
高分子複合体の別の受容体のアロステリック調節を引き起こし得るように、ある受容体か
ら別の受容体に複合体を越えて起こり得る。アロステリックモジュレーターもリガンドバ
イアスを示し得、いくつかのシグナル伝達経路を調節できるが、他のものを調節すること
はできない。リガンドは、例えば、あるシグナル伝達経路のアゴニストとして作用する一
方、別のシグナル伝達経路の阻害剤として作用し、且つ／又は第３のシグナル伝達経路に
影響を与えない可能性があることも当技術分野で知られている。実際、シグナル伝達調節
効果の複数のバリエーションと組み合わせが発生し得る。リガンドバイアスは、例えば、
リガンドが１つの経路を介してシグナル伝達を完全に阻害することなく低下させ、且つ／
又は別のシグナル伝達経路を不完全に活性化し得るという点でも絶対的ではない。経路は
、異なる程度に調節することができ、これは、複数のパラメーターによって測定できる。
これには、シグナル伝達の効力、及び／若しくは有効性、及び／若しくは時間的側面並び
に／又はシグナル伝達の空間的側面の違いが含まれるが、これらに限定されない。
「機能的代替物」という用語は、その最も広い意味で使用され、別の分子の活性、活性
化又は機能の少なくとも１つの側面をその分子の代わりに模倣するか又は増加できる、タ
ンパク質、ポリペプチド、ペプチド、抗体、抗体断片、高分子又は低分子（１０ｋＤａ未
満）を含む任意の化合物を含む。例えば、ＲＡＧＥの機能的代替物は、そうでなければＲ
ＡＧＥ発現を欠くシステムにおいて、ＲＡＧＥ及び／又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシ
ン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体などの特定の共存ＧＰＣＲの活性、
活性化又は機能及び／又は適切にはＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２
などの特定のケモカイン受容体など、活性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリ
ガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を再現し得る。したがって、特定の活性化された共存Ｇ
ＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の「機能的代替物」とは、特定
の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を実質的
に増加、増強、アゴナイズ及び／又は正に調節できる薬剤を指す。機能的代替物による特
定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のシグ
ナル伝達能力の回復は、細胞による炎症促進性サイトカインを含む炎症促進性メディエー
ターの産生又はＲＡＧＥ疾患の症状のＲＡＧＥリガンド非依存性活性化に関連する他の細
胞要素の調節を含む、その生物学的効果を適切に回復又は増強する。機能的代替物は、別
の分子の活性、活性化又は機能の全ての側面を必ずしも模倣するわけではなく、実際、い
くつかの側面を阻害する一方、他の側面を活性化し、且つ／又はさらなる側面を調節しな
い可能性がある。したがって、機能的代替物もリガンドバイアスを示し得る。
「非機能的代替物」という用語は、その最も広い意味で使用され、別の分子の活性、活
性化又は機能の少なくとも１つの側面をその分子の代わりに阻害、アンタゴナイズ又は減
少できる、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、抗体、抗体断片、高分子又は低分子（
１０ｋＤａ未満）を含む任意の化合物を含む。例えば、ＲＡＧＥの非機能的代替物は、Ｒ
ＡＧＥ及び／又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモ
カイン受容体などの特定の共存ＧＰＣＲの活性、活性化又は機能及び／又は適切にはＡＴ
１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、活
性化された特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を阻害
し得る。したがって、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性
のＲＡＧＥ活性化の「非機能的代替物」とは、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲ
ＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を実質的に低減、阻害、拮抗及び／又は負に調
節できる薬剤を指す。非機能的代替物による特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡ
ＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のシグナル伝達能力の低減は、細胞による炎症促
進性サイトカインを含む炎症促進性メディエーターの産生又はＲＡＧＥ疾患の症状のＲＡ
ＧＥリガンド非依存性活性化に関連する他の細胞要素の調節を含む、その生物学的効果を
適切に低減又は阻害する。部分アゴニストは、アゴニズムを示しても最大の効果をもたら
さないため、阻害剤として作用することもできることに留意されたい。したがって、内因
性アゴニストなどのより効果的なアゴニストのアゴニスト活性に競合又は調整することに
より、それが存在しない場合と比較してシグナル伝達出力を減少させるため、それは、受
容体ポリペプチド及び／又はそのシグナル伝達経路の阻害剤として効果的に作用し得る。
その結果、部分アゴニストは、治療設定において阻害剤として作用し得る。非機能的代替
物は、別の分子の活性、活性化又は機能の全ての側面を必ずしも低減するわけではなく、
実際、いくつかの側面を阻害する一方、他の側面を促進し、且つ／又はさらなる側面を調
節しない可能性がある。したがって、非機能的代替物もリガンドバイアスを示し得る。
「結合」という用語及びその文法的均等物は、例えば、生理学的条件下での共有、静電
、疎水性及びイオン及び／又は水素結合相互作用による、分子間の物理的会合を指し、塩
橋及び水橋などの相互作用並びに他の従来のあらゆる結合手段を含む。結合は、直接又は
１つ以上の他の中間分子との相互作用を介して発生し得る。
本明細書全体を通して、文脈がそうでないことを要しない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「含んでいる」という語は、述べられたステップ若しくは要素又はステップ若しくは要素の群の包含を意味するが、他のいかなるステップ若しくは要素又はステップ若しくは要素の群の除外でもないことが理解されるであろう。したがって、「含んでいる」などの用語の使用は、列挙された要素が必要又は必須であるが、他の要素が、任意選択により、存在する場合と存在しない場合とがあることを示す。「からなる」とは、「からなる」という語句に係るものを含み、かつ、それに限定されることを意味する。したがって、「からなる」という語句は、列挙された要素が必要又は必須であり、他の要素が存在してはならないことを示す。「から本質的になる」とは、語句の後に列挙された任意の要素を含み、列挙された要素の開示において指定された活動又は行動に干渉又は貢献しない他の要素に限定されることを意味する。したがって、「から本質的になる」という語句は、列挙された要素が必要又は必須であるが、列挙された要素の活動又は行動に影響するかどうかに依存して、他の要素が、任意選択により、存在する場合と存在しない場合とがあることを示す。
「構築物」という用語は、異なる供給源からの１つ以上の単離された核酸配列を含む組
換え遺伝子分子を指す。したがって、構築物は、異なる起源の２つ以上の核酸配列が単一
の核酸分子に組み立てられ、（１）天然には一緒に見られない調節及びコード配列を含む
核酸配列（すなわち、ヌクレオチド配列の少なくとも１つは、他のヌクレオチド配列の少
なくとも１つに関して異種である）、又は（２）天然には隣接していない機能的ＲＮＡ分
子又はタンパク質の一部をコードする配列、又は（３）天然には隣接していないプロモー
ターの部分を含有する任意の構築物を含む、キメラ分子である。代表的な構築物には、任
意の供給源に由来し、ゲノム統合又は自己複製が可能であり、１つ以上の核酸分子が作動
可能に連結されている核酸分子を含む、プラスミド、コスミド、ウイルス、自己複製ポリ
ヌクレオチド分子、ファージ又は線状若しくは環状の一本鎖若しくは二本鎖のＤＮＡ若し
くはＲＮＡ核酸分子などの任意の組換え核酸分子が含まれる。本発明の構築物は、一般に
、例えば標的核酸配列又はモジュレーター核酸配列など、構築物にも含まれる目的の核酸
配列の発現を指示するために必要な要素を含む。そのような要素は、目的の核酸配列に（
その転写を指示するように）作動可能に連結されたプロモーターなどの制御要素を含み得
、多くの場合、ポリアデニル化配列も含む。本発明の特定の実施形態において、構築物は
、ベクター内に含有され得る。構築物の成分に加えて、ベクターは、例えば、１つ以上の
選択可能なマーカー、原核生物及び真核生物の起点などの１つ以上の複製起点、少なくと
も１つの多回クローニングサイト及び／又は宿主細胞のゲノムへの構築物の安定した組み
込みを容易にする要素を含み得る。２つ以上の構築物は、単一のベクターなどの単一の核
酸分子内に含有され得るか、又は２つ以上の別個のベクターなどの２つ以上の別個の核酸
分子内に含まれ得る。「発現構築物」は、一般に、少なくとも目的のヌクレオチド配列に
作動可能に連結された制御配列を含む。このようにして、例えば、発現されるべきヌクレ
オチド配列と作動可能に連結されたプロモーターは、生物体又は宿主細胞を含むその一部
における発現のための発現構築物で提供される。本発明の実施のための、構築物及び宿主
細胞を調製及び使用するための従来の組成物及び方法は、当業者に周知である。例えば、
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，３ｒ
ｄ ｅｄｉｔｉｏｎ Ｖｏｌｕｍｅｓ １，２ ａｎｄ ３．Ｊ．Ｆ．Ｓａｍｂｒｏｏｋ
，Ｄ．Ｗ．Ｒｕｓｓｅｌｌ ａｎｄ Ｎ．Ｉｒｗｉｎ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒ
ｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００を参照されたい。
「対応する」又は「対応している」とは、参照核酸配列に対して実質的な配列同一性（
例えば、参照核酸配列の全体又は一部に対して少なくとも約５０、５１、５２、５３、５
４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７
、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、
８１、８２、８３、８４、８５、８６、９７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９
４、９５、９６、９７、９８、９９％又は１００％までの配列同一性）を示す核酸配列又
は参照アミノ酸配列に対して実質的な配列類似性若しくは同一性（例えば、参照アミノ酸
配列の全体又は一部に対して少なくとも５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５
７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０
、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、
８４、８５、８６、９７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９
７、９８、９９％又は１００％までの配列類似性又は同一性）を示すアミノ酸配列を意味
する。
「有効量」とは、状態を処置又は予防することに関連して、そのような処置又は予防を
必要とする個体への、阻害剤などの薬剤若しくはモジュレーター又は組成物の量の、症状
の発生の防止、そのような症状の抑制及び／又はその状態の既存の症状の処置に効果的で
ある単回用量又は一連の用量の一部のいずれかでの投与を意味する。有効量は、処置され
る個体の健康及び身体的状態、処置される個体の分類群、組成物の処方、医学的状況の評
価及び他の関連要因に応じて異なる。その量は、定期的な試験を通じて決定できる比較的
広い範囲に収まると予想される。
本明細書で使用される「コードする」、「コードしている」などの用語は、別の核酸又
はポリペプチドを提供する核酸の能力を指す。例えば、核酸配列は、転写及び／若しくは
翻訳されてポリペプチドを生成できる場合又は転写及び／若しくは翻訳されてポリペプチ
ドを生成できる形態に処理できる場合、ポリペプチドを「コードする」と言われる。その
ような核酸配列は、コード配列又はコード配列と非コード配列との両方を含み得る。した
がって、「コードする」、「コードしている」などの用語は、ＤＮＡ分子の転写から生じ
るＲＮＡ産物、ＲＮＡ分子の翻訳から生じるタンパク質、ＤＮＡ分子がＲＮＡ産物を形成
するための転写及びその後のＲＮＡ産物の翻訳から生じるタンパク質又はＲＮＡ産物を提
供するためのＤＮＡ分子の転写、処理されたＲＮＡ産物（例えば、ｍＲＮＡ）を提供する
ためのＲＮＡ産物の処理及びその後の処理されたＲＮＡ産物の翻訳から生じるタンパク質
を含む。
遺伝子配列に関する「発現」という用語は、ＲＮＡ転写物（例えば、ｍＲＮＡ、アンチ
センスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）を産生する遺伝子の転写及び必要
に応じて得られたｍＲＮＡ転写物のタンパク質への翻訳を指す。したがって、文脈から明
らかとなるように、コーディング配列の発現は、コーディング配列の転写及び翻訳から生
じる。逆に、非コーディング配列の発現は、非コーディング配列の転写から生じる。「発
現」は、細胞コンパートメント又は構造を含む細胞内、細胞上又は細胞外の遺伝子産物の
位置も指し、その例示的な例には、細胞質、核、リボソーム、リソソーム及び細胞膜又は
表面が含まれる。
「発現ベクター」とは、ベクター内に含有されるポリヌクレオチドの転写及び適切には
ポリヌクレオチドによってコードされるペプチド又はポリペプチドの合成を指示すること
ができる任意の遺伝要素を意味する。そのような発現ベクターは、当業者に知られている
。
本明細書で使用される「機能」という用語は、生物学的、酵素的又は治療的機能を指す
。
本明細書で使用される「遺伝子」という用語は、ｍＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、ｓｉ
ＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡなどを産生するために使用することができる核酸分子を
指す。遺伝子は、機能性タンパク質の産生に使用できる場合とできない場合とがあり得る
。遺伝子は、コーディング領域と非コーディング領域との両方を含み得る（例えば、イン
トロン、調節エレメント、プロモーター、エンハンサー、終止配列並びに５’及び３’非
翻訳領域など）。
「宿主細胞」という用語は、ポリヌクレオチド又は核酸構築物が導入される細胞を指す
。本発明の宿主細胞には、細菌、酵母及び動物（本明細書で定義される「対象」という用
語の範囲内に含まれる脊椎動物を含む）のものが含まれるが、これらに限定される必要は
ない。宿主細胞は、単細胞であり得るか、又は液体培養、単層などとしての組織培養で増
殖し得る。宿主細胞は、組織に直接又は間接的に由来し得るか、又は動物（本明細書で定
義される「対象」という用語の範囲内にある脊椎動物を含む）を含む生物体内に存在し得
る。
「相互作用」という用語は、２つの分子間の分子間力に基づく効果を指し、その例は、
イオン間相互作用、水素結合による相互作用、双極子間相互作用、疎水性相互作用及びそ
れらの組み合わせを含み、分子間の結合を含む。相互作用は、直接又は１つ以上の他の中
間分子を介して発生し得る。
「機能的相互作用」という用語は、１つの分子が別の分子の機能に影響を与えることを
指し、２つの分子が互いに物理的に相互作用していることを必ずしも意味しない。
「ルシフェラーゼ」という用語は、ルシフェラーゼタンパク質に対応するポリペプチド
を意味し、その基質が酸化されると発光する。例示的なルシフェラーゼタンパク質は、セ
レンテラジンを酸化するウミシイタケルシフェラーゼ又はその誘導体である。別のルシフ
ェラーゼタンパク質の例は、ＮａｎｏＬｕｃである。
「類似体」という用語は、内因性ペプチドとの構造的類似性により、類似するペプチド
の少なくとも１つの生物学的機能を模倣することができる小分子を指す。「ペプチド類似
体」とは、ペプチド結合を含み、アミノ酸又はそれらの誘導体で構成されるモジュラー構
造を含有する天然のペプチドである類似体である。「非ペプチド類似体」とは、ペプチド
結合を含まず、構成要素としてアミノ酸又はそれらの誘導体で構成されるモジュラー構造
を含有しない、天然のペプチドではない類似体である。
例として、ＲＡＧＥ類似体は、ＡＴ１Ｒとヘテロマー複合体を形成するＲＡＧＥの能力
を模倣し得るが、ＡＴ１Ｒを介して作用するＡＴ１ＲリガンドによるＲＡＧＥのトランス
活性化を適切に阻害する。
「誘導体」という用語は、その一次構造がＲＡＧＥの細胞質側テール又はその断片から
取得されたか、それに由来するが、アミノ酸の付加、置換、切断、化学的及び／又は生化
学的修飾、レトロ逆位配列、環状ペプチド、ペプトイド、β－ペプチド又は非ペプチド薬
物、非ペプチド標識、非ペプチド担体若しくは非ペプチド樹脂への連結を含む分子を指す
。
本明細書で使用される場合、用語「調節する」、「制御する」及びそれらの文法的均等
物は、生物学的活性又は効果を変更する効果を指す（例えば、サイトカイン産生、細胞接
着、ＧＰＣＲシグナル伝達、ＲＡＧＥシグナル伝達）。例えば、特定の生体分子のアゴニ
スト、アンタゴニスト、逆アゴニスト又はアロステリックモジュレーターは、受容体など
の生体分子の活性又は効果（例えば、サイトカイン産生、細胞接着、受容体シグナル伝達
）を、増加／刺激（例えば、アゴニスト、活性化剤、正のアロステリックモジュレーター
）又は減少／阻害（例えば、アンタゴニスト、阻害剤、逆アゴニスト、負のアロステリッ
クモジュレーター）することにより、その生体分子、例えば受容体の活性を調節する。
本明細書で使用される「動作可能に接続された」又は「動作可能に連結された」という
用語は、そのように説明された成分が意図した方法で機能できる関係にある並置を指す。
例えば、コード配列に「作動可能に連結された」調節配列は、調節配列に適合した条件下
でのコード配列の発現を可能にするための、コード配列に対する調節配列の位置決め及び
／又は配向を指す。
「薬学的に許容される担体」とは、生物学的に又は他の点で望ましくないものではない
物質から構成される医薬用ビヒクルを意味し、すなわち、物質は、選択された活性剤又は
モジュレーター、例えば阻害剤と共に、有害反応を全く又は実質的に引き起こすことなく
対象に投与され得る。担体は、賦形剤及び希釈剤、洗剤、着色剤、湿潤剤又は乳化剤、ｐ
Ｈ緩衝剤、防腐剤、形質導入剤などの他の添加物を含み得る。
同様に、本明細書で提供される化合物の「薬理学的に許容される」塩、エステル、アミ
ド、プロドラッグ又は誘導体は、生物学的に又は他の点で望ましくないものではない塩、
エステル、アミド、プロドラッグ又は誘導体である。
「ポリヌクレオチド」、「核酸」及び「ヌクレオチド配列」という用語には、ＲＮＡ、
ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、合成形態及び混合ポリマー、センス鎖及びアンチセンス鎖の両
方が含まれ、当業者に容易に理解されるように、化学的又は生化学的に修飾され得、非天
然又は誘導体化ヌクレオチド塩基を含み得る。
「ポリペプチド」、「タンパク質性分子」、「ペプチド」及び「タンパク質」という用
語は、本明細書において互換的に使用されて、アミノ酸残基のポリマー並びにそのバリア
ント及び合成類似体を指す。したがって、これらの用語は、１つ以上のアミノ酸残基が対
応する天然アミノ酸の化学的類似体などの合成非天然アミノ酸であるアミノ酸ポリマー並
びに天然に存在するアミノ酸ポリマーに適用される。これらの用語は、修飾、例えばグリ
コシル化、アセチル化、リン酸化などを除外するものではない。主題のタンパク質性分子
の可溶性形態が特に有用である。定義には、例えば、非天然アミノ酸又は置換された連結
を有するポリペプチドを含む、アミノ酸の１つ以上の類似体を含むポリペプチドが含まれ
る。
「ポリペプチドバリアント」という用語は、１つ以上のアミノ酸が異なるアミノ酸で置
換されているポリペプチドを指す。以下に記載するように、ポリペプチドの活性の性質を
変えることなく、いくつかのアミノ酸を広く類似した特性を有する他のものに変え得るこ
と（保存的置換）は、当技術分野で十分に理解されるであろう。これらの用語は、１つ以
上のアミノ酸が付加若しくは欠失した又は異なるアミノ酸で置換されたポリペプチドも包
含する。
本明細書で使用する「予防する」、「予防される」又は「予防している」という用語は
、疾患又は状態の発症に対する対象の抵抗性を増加させるか、又は換言すれば、対象が疾
患又は状態を発症する可能性を減少させる予防的処置及び疾患又は状態が始まった後、そ
れを軽減するか、又は全て排除するか、又は悪化を防ぐための処置を指す。これらの用語
は、その範囲内に、疾患又は状態の素因があり得るが、依然としてそれを有すると診断さ
れていない対象に疾患又は状態が発生するのを予防することも含む。
本明細書における「プロモーター」への言及は、その最も広い文脈でとられるべきであ
り、発達及び／又は環境刺激に応じて、又は組織特異的又は細胞型特異的な方法で遺伝子
発現を変化させるＣＣＡＡＴボックス配列及び追加の調節要素（すなわち上流の活性化配
列、エンハンサー及びサイレンサー）を伴い又は伴わず、正確な転写開始に必要なＴＡＴ
Ａボックスを含む、古典的なゲノム遺伝子の転写調節配列を含む。プロモーターは、必ず
しもではないが、通常、発現を調節する構造遺伝子の上流又は５’に位置している。さら
に、プロモーターを含む調節要素は、通常、遺伝子の転写開始部位から２ｋｂ以内に位置
している。本発明による好ましいプロモーターは、細胞における発現をさらに増強し、且
つ／又は作動可能に接続される構造遺伝子の発現のタイミングを変更するための１つ以上
の特定の調節エレメントの追加のコピーを含み得る。
「近接性」とは、２つの完全体（一般にポリペプチド）間の距離を指す。例えば、ＲＡ
ＧＥポリペプチドとＧＰＣＲポリペプチドとの近接性は、２つのポリペプチド間の相対的
距離を意味する。２つのポリペプチドが直接相互作用する場合、それらは、空間的に互い
に近いと見なされるか、又は近接近（ｃｌｏｓｅ ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ）にあると説明さ
れる。２つのポリペプチドが同一のヘテロマー及び／又は高分子複合体の一部であるが、
直接相互作用していない場合も、それらは、近接近にあると見なされる。より具体的には
、本発明の目的のために、約３０ｎｍ以下、１０ｎｍ以下又は５ｎｍ以下の距離は近接近
にあると見なされる。
「近接スクリーニングアッセイ」とは、検出可能な近接性シグナルを生成するために第
１及び第２のレポーター成分を近接させることを含むアッセイ、システム又は実験的アプ
ローチを意味する。第１及び第２のレポーター成分の近接により、検出器による検出が可
能な近接シグナルが生成される。第１及び第２のレポーター成分は、本発明の機能に明ら
かな影響を与えることなく、第１のレポーター成分が第２のレポーター成分と交換され得
る（すなわちＲＡＧＥポリペプチドにカップリングされた第１のレポーター成分及びＧＰ
ＣＲポリペプチドにカップリングされた第２のレポーター成分又はＧＰＣＲポリペプチド
にカップリングされた第１のレポーター成分及びＲＡＧＥポリペプチドにカップリングさ
れた第２のレポーター成分）という意味で相補的な対を構成する。ＲＡＧＥポリペプチド
とＧＰＣＲポリペプチドとの間又はレポーター成分間の直接の物理的接触は、必要でなく
、１つ以上の連結分子によって媒介され得る。好ましくは、レポーター成分開始剤の存在
下で第１及び第２のレポーター成分の近接により生成される近接シグナルは、発光、蛍光
及び比色変化からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、発光は、ルシフェラ
ーゼ、ガラクトシダーゼ、ラクタマーゼ、ペルオキシダーゼ又は適切な基質の存在下で発
光可能な任意のタンパク質からなる群から選択される生物発光タンパク質によって産生さ
れる。
「レポーター成分」という用語は、別のレポーター成分に近接すると検出可能な近接シ
グナルの放出を生じることができる、有機又は無機、タンパク質性又は非タンパク質性又
はその複合体の任意の既知の化合物であり得る。いくつかの実施形態では、レポーター成
分は、ＲＡＧＥポリペプチド及び／又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣ
Ｒ２などの特定のケモカイン受容体などの特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドとカップリン
グした酵素、発光分子又はその一部、蛍光分子又はその一部及び転写因子又は他の分子を
含むか、それからなるか又はそれから本質的になる群から選択される。いくつかの実施形
態では、レポーター成分は、酵素、発光又は生物発光分子、蛍光分子及び酵素切断部位を
組み込んだリンカーにより、ＲＡＧＥポリペプチド及び／又は特定の共存ＧＰＣＲポリペ
プチドにカップリングした転写因子又は他の分子を含み得る。
本発明のいくつかの態様では、近接レポーターシステムは、ドナー及び／又はアクセプ
ター分子となることができるレポーター成分の対の組み合わせを含む。したがって、本発
明に従って使用することができるレポーター成分は、その物理的特性に基づいて選択する
ことができ、共鳴エネルギー移動（ＲＥＴ）の技術分野で知られているように、２つは、
それらが一緒にＲＥＴペアのドナー分子及びアクセプター分子を構成するように選択され
る。ＲＥＴペア内のレポーター成分の１つが生物発光タンパク質である場合、ＲＥＴは、
生物発光ＲＥＴ（ＢＲＥＴ）として知られている。ＲＥＴペアを形成する両方のレポータ
ー成分がフルオロフォアである場合、得られるＲＥＴは、蛍光ＲＥＴ（ＦＲＥＴ）として
知られている。既知の適切なドナーとアクセプターの対の例は、ウミシイタケルシフェラ
ーゼ（又はそのバリアント）及び黄色蛍光タンパク質；ウミシイタケルシフェラーゼ（又
はそのバリアント）及び緑色蛍光タンパク質（又はそのバリアント）；ＮａｎｏＬｕｃ及
び黄色蛍光タンパク質；ＮａｎｏＬｕｃ及びｍＣｈｅｒｒｙ蛍光タンパク質；ＮａｎｏＬ
ｕｃ及びＨａｌｏＴａｇ（適切なＨａｌｏＴａｇリガンドを伴う）；シアン蛍光タンパク
質及び黄色蛍光タンパク質；フルオレセイン及びテトラメチルローダミン；５－（２’－
アミノエチル）アミノナフタレン－１－スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）及びフルオレセインを
含む（一般的に、Ｒ．Ｈａｕｇｌａｎｄ、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅ
ｎｔ Ｐｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｓｉｘｔｈ Ｅ
ｄ．１９９５を参照されたい）。フルオロフォアの一方又は両方は、緑色蛍光タンパク質
などの蛍光タンパク質であり得、ＲＡＧＥポリペプチド又は特定の共存ＧＰＣＲポリペプ
チドと蛍光タンパク質との融合タンパク質を調製することにより、フルオロフォアとして
蛍光タンパク質を使用することが特に有利である。
第１及び第２のレポーター成分の好ましい組み合わせには、蛍光レポーター成分を伴う
発光レポーター成分、非蛍光消光剤を伴う発光レポーター成分、非蛍光消光剤を伴う蛍光
レポーター成分、共鳴エネルギー移動が可能な第１及び第２の蛍光レポーター成分が含ま
れる。しかしながら、第１及び第２のレポーター成分の有用な組み合わせは、決してこれ
らに限定されるものではない。本発明によって利用され得る第１及び第２のレポーター成
分の代替の組み合わせには、米国特許第６８９３８２７号明細書（Ａｐｐｌｅｒａ Ｃｏ
ｒｐｏｒａｔｉｏｎ）；米国特許第６８００４４５号明細書（Ａｐｐｌｅｒａ Ｃｏｒｐ
ｏｒａｔｉｏｎ）；米国特許第７０４９０７６号明細書（Ｓｅｎｔｉｇｅｎ Ｂｉｏｓｃ
ｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．及びＴｈｅ Ｔｒｕｓｔｅｅｓ ｏｆ Ｃｏｌｕｍｂｉａ Ｕｎ
ｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｉｔｙ ｏｆ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）；米国特許第６
１１０６９３号明細書（Ｄｕｋｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）；米国特許第５８９１６４６
号明細書（Ｄｕｋｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）；国際公開第２００５／０３１３０９号パ
ンフレット（ＯＤＹＳＳＥＹ ＴＨＥＲＡ ＩＮＣ．）；及び米国特許第８１０１３７３
号明細書（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に例示されるものが含まれる
。
本明細書で使用される「カップリング」、「直接的にカップリング」及び「間接的にカ
ップリング」という用語は、レポーター構成要素が、ＲＡＧＥポリペプチド及び／又は特
定の共存ＧＰＣＲポリペプチドに付着又は会合して、分析又は検出されることができる実
体を形成することを意味する。レポーター成分のＲＡＧＥポリペプチド及び／又は特定の
共存ＧＰＣＲポリペプチドへの直接的又は間接的カップリングは、化学架橋、タンパク質
の化学修飾、アミノ酸の化学修飾、核酸の化学修飾、炭水化物の化学修飾、脂質の化学修
飾、他の有機又は無機分子の化学修飾、ビオチン－アビジン相互作用、抗原抗体相互作用
及び核酸ハイブリダイゼーションを含む、２つの分子をカップリングする任意の既知の共
有又は非共有手段によるものであり得る。本発明の一形態では、レポーター成分は、リン
カーによってＲＡＧＥポリペプチド及び／又は特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドに間接的
にカップリングされる。いくつかの実施形態では、リンカーは、酵素切断部位を含む。Ｒ
ＡＧＥポリペプチド及び／又は特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドと、タンパク質性レポー
ター成分とを結合する直接的方法の例は、遺伝子融合であり、ＲＡＧＥポリペプチド及び
／又は特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドをコードする遺伝子と、生物発光又は蛍光タンパ
ク質とが融合して単一のポリペプチド鎖を生成する。直接的カップリング法の別の例は、
コンジュゲートであり、ＲＡＧＥポリペプチド及び／又は特定の共存ＧＰＣＲポリペプチ
ドとレポーター成分とのカップリングは、リガーゼ、ヒドロラーゼ、特にホスファターゼ
、エステラーゼ及びグリコシダーゼ又はオキシドレダクターゼ、特にペルオキシダーゼな
どの酵素を使用する。
本発明の好ましい実施形態では、ＲＡＧＥポリペプチドは、レポーター成分と共に単一
のポリペプチド鎖を形成し、且つ／又は特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドはレポーター成
分と共に単一のポリペプチド鎖を形成する。本発明の特に好ましい形態では、レポーター
成分は、異なる。追加の機能性は、同じポリペプチド鎖の一部を形成し得る。例えば、単
一のポリペプチド鎖は、融合構築物のアフィニティー精製に使用されるペプチド配列をコ
ードする配列；及び／又は融合構築物を真核細胞の細胞内コンパートメントに導くペプチ
ド配列をコードする配列；及び／又は真核細胞膜の透過を促進するペプチド配列をコード
する配列；及び／又は抗体の使用又は他の方法によって発現レベルを評価することを可能
にする配列をさらに含む。
「調節配列」とは、特定の宿主細胞において作動可能に連結されたヌクレオチド配列（
例えば、コード配列）を発現させる核酸配列（例えば、ＤＮＡ）を意味する。原核細胞に
適した調節配列には、例えば、プロモーターが含まれ、任意選択により、オペレーター配
列及びリボソーム結合部位などのシス作用性配列が含まれる。真核細胞に適した制御配列
には、ｍＲＮＡの安定性を調節するプロモーター、ポリアデニル化シグナル、転写エンハ
ンサー、翻訳エンハンサー、リーダー又はトレーリング配列及び転写されたポリヌクレオ
チドによってコードされる産物を細胞における細胞内コンパートメント又は細胞外環境に
標的化する標的化配列が含まれる。
「塩」、「誘導体」及び「プロドラッグ」という用語には、レシピエントへの投与時に
本発明の化合物又はその活性代謝物若しくは残基を（直接的又は間接的に）提供すること
ができる任意の薬学的に許容される塩、エステル、水和物又は他の化合物が含まれる。適
切な薬学的に許容される塩には、塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミ
ン酸及び臭化水素酸などの薬学的に許容される無機酸の塩又は酢酸、プロピオン酸、酪酸
、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、クエン酸、乳酸、ムチン酸、
グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トルエ
ンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、サリチル酸、スルファニル酸、アスパラギン酸、グ
ルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パント
テン酸、タンニン酸、アスコルビン酸及び吉草酸などの薬学的に許容される有機酸の塩が
含まれる。塩基塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、
アンモニウム及びアルキルアンモニウムなどの薬学的に許容される陽イオンで形成される
ものが含まれるが、これらに限定されない。また、塩基性窒素含有基は、メチル、エチル
、プロピル及びブチル塩化物、臭化物及びヨウ化物などの低級アルキルハロゲン化物；硫
酸ジメチル及びジエチルのような硫酸ジアルキル；他の薬剤で四級化され得る。しかしな
がら、薬学的に許容されない塩も薬学的に許容される塩の調製に有用であり得るため、本
発明の範囲に含まれることが理解されるであろう。塩及びプロドラッグ及び誘導体の調製
は、当技術分野で公知の方法により実施することができる。例えば、金属塩は、本発明の
化合物と金属水酸化物との反応により調製することができる。酸塩は、適切な酸を本発明
の化合物と反応させることにより調製することができる。
「選択的」という用語は、ＲＡＧＥポリペプチド又は特定の共存ＧＰＣＲポリペプチド
の別の生物学的相互作用を実質的に調節することなく、ＲＡＧＥポリペプチドと特定の共
存ＧＰＣＲポリペプチドとの間の相互作用、適切には物理的相互作用（例えば、結合）を
調節する化合物を指す。したがって、直接のＲＡＧＥ－特定の共存ＧＰＣＲ相互作用に対
して選択的である化合物は、ＲＡＧＥの別の結合活性又は別の基質若しくは結合パートナ
ーへの特定の共存ＧＰＣＲの別の結合活性の調節に関して約２倍、５倍、１０倍、２０倍
、５０倍超又は約１００超の選択性を示す。
本明細書で使用される「配列同一性」という用語は、比較ウィンドウにわたってヌクレ
オチドごとに又はアミノ酸ごとに配列が同一である程度を指す。したがって、「配列同一
性の割合」は、比較ウィンドウにわたって２つの最適にアラインされた配列を比較するこ
と、同一の核酸塩基（例えば、Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ、Ｉ）又は同一のアミノ酸残基（例えば、
Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、
Ｔｒｐ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ及びＭｅｔ
）が両方の配列で発生する位置の数を決定して、一致する位置の数を得ること、一致する
位置の数を比較ウィンドウ内の位置の総数（すなわちウィンドウサイズ）で除すこと及び
結果に１００を掛けて配列同一性の割合を求めることによって計算される。本発明の目的
のために、「配列同一性」は、適切な方法によって計算された「一致割合」を意味すると
理解されるであろう。例えば、配列同一性解析は、ソフトウェアに付属の参照マニュアル
で使用されている標準のデフォルトを使用して、ＤＮＡＳＩＳコンピュータープログラム
（Ｗｉｎｄｏｗｓ用バージョン２．５、Ｈｉｔａｃｈｉ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｅｎｇｉｎ
ｅｅｒｉｎｇ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉ
ｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡから入手可能）を使用して実行され得る。
「類似性」とは、以下で定義されるように、同一であるか又は保存的置換を構成するア
ミノ酸のパーセンテージを指す。
類似性は、ＧＡＰ（Ｄｅｖｅｒａｕｘ ｅｔ ａｌ．１９８４，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃ
ｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １２，３８７－３９５）などの配列比較プログラムを使用し
て決定され得る。この方法では、本明細書で引用したものと類似又は実質的に異なる長さ
の配列は、アライメントにギャップを挿入することにより比較され得、そのようなギャッ
プは、例えばＧＡＰにより使用される比較アルゴリズムにより決定される。
２つ以上のポリヌクレオチド又はポリペプチド間の配列関係を説明するために使用され
る用語には、「参照配列」、「比較ウィンドウ」、「配列同一性」、「配列同一性の割合
」及び「実質的同一性」が含まれる。「参照配列」は、その長さが、ヌクレオチド及びア
ミノ酸残基を含む、少なくとも１２モノマー単位であるが、多くの場合に１５～１８モノ
マー単位であり、多くの場合少なくとも２５モノマー単位である。２つのポリヌクレオチ
ドは、それぞれ（１）２つのポリヌクレオチド間で類似している配列（すなわち、完全な
ポリヌクレオチド配列の一部のみ）、及び（２）２つのポリヌクレオチド間で異なってい
る配列を含み得、２つ（又はそれ以上）のポリヌクレオチド間の配列比較は、典型的には
、「比較ウィンドウ」にわたって２つのポリヌクレオチドの配列を比較して、配列類似性
の局所領域を同定及び比較することにより行われる。「比較ウィンドウ」とは、少なくと
も６つの連続した位置、一般的には約５０～約１００、より一般的には約１００～約１５
０の概念的なセグメントを指し、２つの配列が最適にアラインされた後、配列は、同じ数
の連続した位置の参照配列と比較される。比較ウィンドウは、２つの配列の最適なアライ
メントのために、参照配列（付加又は欠失を含まない）と比較して約２０％以下の付加又
は欠失（すなわちギャップ）を含み得る。比較ウィンドウをアラインするための配列の最
適なアライメントは、アルゴリズムのコンピューター化された実装（ＧＡＰ、ＢＥＳＴＦ
ＩＴ、ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｏｆｔ
ｗａｒｅ Ｐａｃｋａｇｅ Ｒｅｌｅａｓｅ ７．０，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔ
ｅｒ Ｇｒｏｕｐ，５７５ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒｉｖｅ Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳ
Ａ）又は検査及び選択された様々な方法のいずれかによって生成された最良のアラインメ
ント（すなわち比較ウィンドウにわたって最高の相同性割合をもたらす）によって行われ
得る。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒ
ｅｓ．２５：３３８９に開示されるように、ＢＬＡＳＴファミリーのプログラムを参照し
得る。配列分析の詳細な議論は、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐ
ｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，” Ｊｏｈｎ Ｗｉｌ
ｅｙ＆Ｓｏｎｓ Ｉｎｃ，１９９４－１９９８，Ｃｈａｐｔｅｒ １５のＵｎｉｔ １９
．３に見ることができる。
本明細書で使用される「小分子」とは、３キロダルトン（ｋＤａ）未満、典型的には１
．５キロダルトン未満、より好ましくは約１キロダルトン未満の分子量を有する組成物を
指す。小分子は、核酸、ペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣物、炭水化物、脂質又は
他の有機（炭素含有）又は無機分子であり得る。当業者に理解されるように、本説明に基
づいて、多くの場合、真菌、細菌又は藻類の抽出物である、化学的及び／又は生物学的混
合物の広範なライブラリを本発明のアッセイのいずれかでスクリーニングして、生物活性
を調節する化合物を同定し得る。「小有機分子」とは、３ｋＤａ未満、１．５ｋＤａ未満
又はさらに約１ｋＤａ未満の分子量を有する有機化合物（又は無機化合物（金属など）と
複合した有機化合物）である。
本明細書で使用される「ストリンジェンシー」とは、ハイブリダイゼーション及び洗浄
手順中の温度及びイオン強度条件並びに特定の有機溶媒の有無を指す。ストリンジェンシ
ーが高いほど、固定化された標的ヌクレオチド配列と洗浄後に標的にハイブリダイズした
ままであるプローブヌクレオチド配列との間の相補性の程度が高くなる。ストリンジェン
シー条件には、低、中、高及び非常に高いストリンジェンシー条件が含まれ、ハイブリダ
イゼーション及び洗浄の特定の条件を表す。ハイブリダイゼーション反応を行うためのガ
イダンスは、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，（１９９８、上掲），セクション６．３．
１～６．３．６に見出すことができる。その参照文献には、水性及び非水性の方法が記載
されており、どちらも使用することができる。本明細書における低ストリンジェンシー条
件への言及は、４２℃でのハイブリダイゼーションについて少なくとも約１％ｖ／ｖ～少
なくとも約１５％ｖ／ｖのホルムアミド及び少なくとも約１Ｍ～少なくとも約２Ｍの塩並
びに４２℃での洗浄について少なくとも約１Ｍ～少なくとも約２Ｍの塩を含み、包含する
。低ストリンジェンシー条件は、６５℃でのハイブリダイゼーションについて１％ウシ血
清アルブミン（ＢＳＡ）、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．５Ｍ ＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、
７％ＳＤＳ及び室温での洗浄について、（ｉ）２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ；又は（ｉｉ
）０．５％ＢＳＡ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、４０ｍＭ ＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、５％Ｓ
ＤＳも含み得る。低ストリンジェンシー条件の一実施形態は、約４５°Ｃの６×塩化ナト
リウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）中でのハイブリダイゼーション、その後、少なく
とも５０°Ｃの０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ中での２回洗浄（洗浄液の温度は、低ス
トリンジェンシー条件について５５℃に上げることができる）を含む。中ストリンジェン
シー条件は、４２℃でのハイブリダイゼーションについて少なくとも約１６％ｖ／ｖ～少
なくとも約３０％ｖ／ｖのホルムアミド及び少なくとも約０．５Ｍ～少なくとも約０．９
Ｍの塩並びに５５℃での洗浄について少なくとも約０．１Ｍ～少なくとも約０．２Ｍの塩
を含み、包含する。中ストリンジェンシー条件は、６５℃でのハイブリダイゼーションに
ついて１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．５Ｍ ＮａＨＰＯ４
（ｐＨ７．２）、７％ＳＤＳ及び６０～６５℃での洗浄について、（ｉ）２××ＳＳＣ、
０．１％ＳＤＳ；又は（ｉｉ）０．５％ＢＳＡ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、４０ｍＭ ＮａＨＰ
Ｏ４（ｐＨ７．２）、５％ＳＤＳも含み得る。中ストリンジェンシー条件の一実施形態は
、約４５℃の６××ＳＳＣ中でのハイブリダイダイゼーション、その後、６０°Ｃの０．
２××ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ中での１回以上の洗浄を含む。高ストリンジェンシー条件
は、４２℃でのハイブリダイゼーションについて少なくとも約３１％ｖ／ｖ～少なくとも
約５０％ｖ／ｖのホルムアミド及び約０．０１Ｍ～約０．１５Ｍの塩並びに５５℃での洗
浄について約０．０１Ｍ～約０．０２Ｍの塩を含み、包含する。高ストリンジェンシー条
件は、６５℃でのハイブリダイゼーションについて１％ＢＳＡ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．
５Ｍ ＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、７％ＳＤＳ及び６５℃を超える温度での洗浄につい
て、（ｉ）０．２××ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ；又は（ｉｉ）０．５％ＢＳＡ、１ｍＭ
ＥＤＴＡ、４０ｍＭ ＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、１％ＳＤＳも含み得る。高ストリン
ジェンシー条件の一実施形態は、約４５℃の６××ＳＳＣ中でのハイブリダイダイゼーシ
ョン、その後、６５°Ｃの０．２××ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ中での１回以上の洗浄を含
む。特定の実施形態では、ペプチド又はポリペプチドは、非常に高いストリンジェンシー
条件下で参照ヌクレオチド配列にハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードさ
れる。非常に高いストリンジェンシー条件の一実施形態は、約６５℃の０．５Ｍリン酸ナ
トリウム、７％ＳＤＳのハイブリダイダイゼーション、その後、６５°Ｃの０．２×ＳＳ
Ｃ、１％ＳＤＳでの１回以上の洗浄を含む。他のストリンジェンシー条件は、当技術分野
で周知であり、当業者は、ハイブリダイゼーションの特異性を最適化するために様々な因
子を操作できることを認識するであろう。最終洗浄のストリンジェンシーの最適化は、高
度なハイブリダイゼーションを保証するのに役立ち得る。詳細な例については、Ａｕｓｕ
ｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，上掲、２．１０．１～２．１０．１６ページ及びＳａｍｂｒｏｏ
ｋ ｅｔ ａｌ．（１９８９、上掲），セクション１．１０１～１．１０４を参照された
い。ストリンジェントな洗浄は、典型的には約４２℃～６８℃の温度で実施されるが、当
業者は、他の温度がストリンジェントな条件に適し得ることを理解するであろう。ＤＮＡ
－ＤＮＡハイブリッドの形成では、典型的には、最大ハイブリダイゼーション速度はＴｍ
の約２０℃～２５℃下で発生する。Ｔｍが融解温度又は２つの相補的ポリヌクレオチド配
列が解離する温度であることは、当技術分野で周知である。Ｔｍを推定する方法は、当技
術分野で周知である（上掲のＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，２．１０．８ページを参照
されたい）。一般に、完全に一致したＤＮＡの二重鎖のＴｍは、次式により近似値として
予測され得る。
Ｔｍ＝８１．５＋１６．６（ｌｏｇ１０Ｍ）＋０．４１（％Ｇ＋Ｃ）－０．６３（％ホ
ルムアミド）－（６００／長さ）
式中、Ｍは、Ｎａ＋の濃度であり、好ましくは０．０１モル～０．４モルの範囲であり；
％Ｇ＋Ｃは、塩基の総数の割合としてのグアノシン塩基とシトシン塩基の合計であり、３
０％～７５％Ｇ＋Ｃの範囲内であり；％ホルムアミドは、体積によるパーセントホルムア
ミド濃度であり；長さは、ＤＮＡ二重鎖における塩基対の数である。二重鎖ＤＮＡのＴｍ
は、無作為にミスマッチした塩基対の数が１％増加するごとにおよそ１℃減少する。洗浄
は、通常、高ストリンジェンシーの場合にはＴｍ－１５℃で、中ストリンジェンシーの場
合にはＴｍ－３０°℃で実行される。ハイブリダイゼーション手順の一例では、固定化Ｄ
ＮＡを含有する膜（例えば、ニトロセルロース膜又はナイロン膜）は、標識プローブを含
有するハイブリダイゼーション緩衝液（５０％脱イオン化ホルムアミド、５×ＳＳＣ、５
×デンハート溶液（０．１％フィコール、０．１％ポリビニルピロリドン及び０．１％ウ
シ血清アルブミン）、０．１％ＳＤＳ及び２００ｍｇ／ｍＬ変性サケ精子ＤＮＡ）中、４
２°℃で一晩ハイブリダイズされる。次いで、膜を２回連続して中程度のストリンジェン
シー洗浄（すなわち４５℃で１５分間、２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、その後、５０℃で
１５分間、２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ）に供し、その後、２回連続して、より高いスト
リンジェンシー洗浄（すなわち５５℃で１２分間、０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、そ
の後、６５～６８℃で１２分間、０．２×ＳＳＣ及び０．１％ＳＤＳ溶液に供する。
本明細書で互換的に使用される「対象」、「宿主」、「個体」又は「患者」という用語
は、治療又は予防が望まれる任意の対象、特に脊椎動物対象、さらにより具体的には哺乳
類対象を指す。本発明の範囲に含まれる適切な脊椎動物には、霊長類（例えば、ヒト、サ
ル及び類人猿並びにマカク属（例えば、Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓなどの
カニクイザル及び／又はアカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）など）及びヒヒ（
Ｐａｐｉｏ ｕｒｓｉｎｕｓ）並びにマーモセット（Ｃａｌｌｉｔｈｒｉｘ属の種）、リ
スザル（Ｓａｉｍｉｒｉ属の種）及びタマリン（Ｓａｇｕｉｎｕｓ属の種）並びにチンパ
ンジー（Ｐａｎ ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ）などの類人猿の種などのサルの種を含む）、
げっ歯類（例えば、マウス、ラット、モルモット）、ウサギ類（例えば、ウサギ、ノウサ
ギ）、ウシ（ｂｏｖｉｎｅ）（例えば、ウシ（ｃａｔｔｌｅ））、ヒツジ（ｏｖｉｎｅ）
（例えば、ヒツジ（ｓｈｅｅｐ））、ヤギ（ｃａｐｒｉｎｅ）（例えば、ヤギ（ｇｏａｔ
））、ブタ（ｐｏｒｃｉｎｅ）（例えば、ブタ（ｐｉｇ））、ウマ（ｅｑｕｉｎｅ）（例
えば、ウマ（ｈｏｒｓｅ））、イヌ（ｃａｒｉｎｅ）（例えば、イヌ（ｄｏｇ））、ネコ
（ｆｅｌｉｎｅ）（例えば、ネコ（ｃａｔ））、鳥類（例えば、ニワトリ、シチメンチョ
ウ、アヒル、ガチョウ及びカナリア、セキセイインコなどのコンパニオンバード）、海洋
哺乳類（例えば、イルカ、クジラ）、爬虫類（例えば、ヘビ、カエル、トカゲ）及び魚を
含む、脊索動物門の任意のメンバーが含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形
態では、対象は、ヒトなどの霊長類である。ただし、「患者」、「対象」、「宿主」又は
「個人」という用語は、症状が存在することを意味するものではないことを理解されたい
。
本明細書で使用される「処置」、「処置している」などの用語は、所望の薬理学的及び
／又は生理学的効果を得ることを指す。その効果は、疾患又は状態（例えば、血液悪性腫
瘍）及び／又は疾患又は状態に起因する有害効果の部分的又は完全な治癒の点で治療的で
あり得る。これらの用語は、哺乳動物、特にヒトの状態又は疾患の任意の処置にも適用さ
れ、（ａ）疾患又は状態を阻害すること、すなわちその発症を阻止すること；又は（ｂ）
疾患又は状態を緩和すること、すなわち疾患又は状態の退行を引き起こすことを含む。
「バリアント」という用語は、参照野生型タンパク質と何らかの形で異なるタンパク質
を指すために広く使用されており、タンパク質は、参照野生型タンパク質の生物学的特性
を保持し得るか、又は参照野生型タンパク質と異なる生物学的特性を有し得る。主題のタ
ンパク質の「生物学的特性」という用語には、最大発光、量子収量、明るさなどのスペク
トル特性；インビボ及び／又はインビトロでの安定性（例えば、半減期）などが含まれる
が、これらに限定されない。バリアントは、単一アミノ酸の変化（置換）、１つ以上のア
ミノ酸の欠失（点欠失）、Ｎ末端切断、Ｃ末端切断、挿入などを含み得る。ポリペプチド
バリアントは、分子生物学で周知の標準的な手法を使用して生成できる。
「ベクター」とは、核酸分子、好ましくは例えばプラスミド、バクテリオファージ又は
植物ウイルスに由来するＤＮＡ分子を意味し、その中に核酸配列が挿入又はクローニング
され得る。ベクターは、好ましくは、１つ以上の固有の制限部位を含有し、標的細胞若し
くは組織又は前駆細胞若しくはその組織を含む定義された宿主細胞で自己複製可能であり
得るか、又はクローン化された配列が複製可能であるように、定義された宿主のゲノムと
統合可能であり得る。したがって、ベクターは、自律的に複製するベクター、すなわち染
色体外実体として存在するベクターであり、その複製は、染色体複製とは独立したもの、
例えば線形又は閉環状プラスミド、染色体外要素、ミニ染色体又は人工染色体である。ベ
クターは、自己複製を保証するための任意の手段を含有し得る。代わりに、ベクターは、
宿主細胞に導入されたときにゲノムに組み込まれ、組み込まれた染色体と共に複製される
ものであり得る。ベクターシステムは、単一のベクター又はプラスミド又は２つ以上のベ
クター又はプラスミドを含み得、これらは、一緒になって宿主細胞のゲノムに導入される
全ＤＮＡ又はトランスポゾンを含む。ベクターの選択は、典型的には、ベクターが導入さ
れる宿主細胞とのベクターの互換性に依存するであろう。ベクターは、適切な形質転換体
の選択に使用できる抗生物質耐性遺伝子などの選択マーカーを含み得る。そのような耐性
遺伝子の例は、当業者に周知である。
文脈がそうでないことを要しない限り、「ＲＡＧＥ」又は「ＲＡＧＥポリペプチド」は
、ＡＧＥＲヌクレオチド若しくはＡＧＥＲポリヌクレオチド又はＲＡＧＥヌクレオチド若
しくはＲＡＧＥポリヌクレオチドとしても知られるＡＧＥＲ遺伝子の転写及び翻訳及び／
又は選択的スプライシングから生成される１つ又は複数のタンパク質産物を示すものとす
る。
文脈がそうでないことを要しない限り、「ＡＴ１Ｒ」、又は「ＡＴ１Ｒポリペプチド」
、又は「ＡＴ１受容体」、又は「ＡＴ１Ｒ」は、ＡＴ１Ｒヌクレオチド又はＡＴ１Ｒポリ
ヌクレオチドとしても知られるＡＧＴＲ１、Ａｇｔｒ１ａ又はＡｇｔｒ１ｂ遺伝子の転写
及び翻訳及び／又は選択的スプライシングから生成される１つ又は複数のタンパク質産物
を示すものとする。例えば、ヒトでは、１つの遺伝子が染色体３ｑ２１～ｑ２５に位置す
るＡＴ１Ｒをコードしている（ＩＵＰＨＡＲデータベース、ｗｗｗ．ｇｕｉｄｅｔｏｐｈ
ａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ｏｒｇ）。マウスでは、２つの遺伝子、染色体１３ １６．０
ｃＭに位置するＡｇｔｒ１ａ及び染色体３ ７．６ ｃＭに位置するＡｇｔｒ１ｂがＡＴ
１Ｒをコードする（ＩＵＰＨＡＲデータベース、ｗｗｗ．ｇｕｉｄｅｔｏｐｈａｒｍａｃ
ｏｌｏｇｙ．ｏｒｇ）。ラットでは、２つの遺伝子、染色体１７ｑ１２に位置するＡｇｔ
ｒ１ａ及び染色体２ｑ２４に位置するＡｇｔｒ１ｂがＡＴ１Ｒをコードする（ＩＵＰＨＡ
Ｒデータベース、ｗｗｗ．ｇｕｉｄｅｔｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ｏｒｇ）。
いくつかの場合、Ａｇｔｒ１ａ遺伝子の１つ又は複数のタンパク質産物は、ＡＴ１ａＲ
と称される場合があり、Ａｇｔｒ１ｂ遺伝子の１つ又は複数のタンパク質産物は、ＡＴ１
ｂＲと称される場合があるが、Ａｇｔｒ１ａ及びＡｇｔｒ１ｂ遺伝子の１つ又は複数のタ
ンパク質産物は、両方ともＡＴ１Ｒと称され得る。
本明細書に記載の各実施形態は、特に明記しない限り、必要な変更を加えて各実施形態
に適用されるものとする。
＜２．略語＞
次の略語は、本出願全体で使用される。
ａａ＝アミノ酸；
ｄ＝日；
ｈ＝時間；
ｋｂ＝キロ塩基又はキロ塩基対；
ｋＤａ＝キロダルトン；
ｎｍ＝ナノメートル；
ｎｔ＝ヌクレオチド；
ｎｔｓ＝ヌクレオチド（複数）；
ｓ＝秒
＜３．受容体ポリペプチド並びにポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列
＞
一部の実施形態では、受容体ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、生物発光
又は蛍光ドナー分子又は蛍光アクセプター分子又は近接スクリーニングアッセイの他の適
切なレポーター成分をコードする核酸配列に作動可能に接続される。所望のポリペプチド
のコード配列が単離又は合成されると、それらは、発現（例えば、一時的発現又は安定発
現）に適した任意の構築物にクローン化することができる。クローニング及び発現ベクタ
ーを含む多数の構築物が当業者に知られており、適切な構築物の選択は、当業者の技術の
範囲内である。
いくつかの実施形態では、ＤＮＡ合成、ＰＣＲ突然変異誘発及び制限エンドヌクレアー
ゼ消化とその後のＰＣＲ連結を含む通常の技術及び分子生物学的方法を使用して、受容体
ポリヌクレオチドコード配列が適切な構築物内の位置に挿入される。コアタンパク質の任
意のコード配列は、本発明のキメラポリペプチドをコードする核酸配列を調製するのに適
している。
クローニング、突然変異などの本発明に適用可能な分子生物学的手法を説明する一般的
なテキストには、Ｂｅｒｇｅｒ ａｎｄ Ｋｉｍｍｅｌ，Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍ
ｏｌｏｇｙ ｖｏｌｕｍｅ １５２ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ
Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．（Ｂｅｒｇｅｒ）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏ
ｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ-Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（３ｒｄ
Ｅｄ．），Ｖｏｌ．１－３，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏ
ｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，２０００（“Ｓａｍｂｒｏｏ
ｋ”）及びＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌ
ｏｇｙ，Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔ
ｏｃｏｌｓ，ａ ｊｏｉｎｔ ｖｅｎｔｕｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂ
ｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．及びＪｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ
，Ｉｎｃ．，（“Ａｕｓｕｂｅｌ”）が含まれる。これらのテキストは、突然変異誘発、
ベクターの使用、プロモーター及び例えばキメラコアタンパク質のクローニング及び発現
に関連する他の多くの関連トピックを説明している。
＜３．１ 終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）ポリペプチド＞
ＲＡＧＥの重要な役割は、メイラード反応によりアミノ基が非酵素的に修飾された糖化
タンパク質を含む終末糖化産物（ＡＧＥ）に結合することである。ＲＡＧＥは、一般的な
モチーフを介してリガンドのクラスを検出するその能力のため、多くの場合にパターン認
識受容体と称される。
本発明の特定の実施形態では、ＲＡＧＥポリペプチドは、ＲＡＧＥタンパク質配列を含
むか、又はＲＡＧＥタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。いくつかの実施形態では、ＲＡＧＥタンパク質配列は、哺乳動物Ｒ
ＡＧＥタンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＲＡＧＥタンパク質配列は
、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ１５１０９）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｑ６２１５１）ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２８１７３）、ラット（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６３４９５）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ７Ｐ２Ｑ
８）及びイヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２０ＪＶ７）からなる群から選択される哺
乳動物に由来する。好ましい実施形態では、ＲＡＧＥタンパク質配列は、ヒト野生型ＲＡ
ＧＥタンパク質配列（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ１５１０９）又はこの配列
の機能的断片に対応する。ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ１５１０９で定義されるヒト全
長野生型タンパク質配列は、以下の通りである。
野生型ＲＡＧＥは、５つの異なるドメインを含む。ＲＡＧＥの細胞外ドメインは、３つ
の免疫グロブリン様（Ｉｇ）ドメイン、Ｖ、Ｃ１及びＣ２ドメイン（配列番号１４の残基
２３～３４２）を保有する。これらのＩｇドメインは、それぞれＶ型、Ｃ型及びＳ型に属
する。第４のドメインは、単一の膜貫通（ＴＭ）ヘリックス（配列番号１４の残基３４３
～３６１）及び最後にキナーゼ活性を欠き、構造化されていないと推定される（Ｎｅｅｐ
ｅｒｓ，１９９２を参照されたい）細胞質側テール（配列番号１４の残基３６２～４０４
、配列番号１に記載）を含む。さらに、ヒト野生型ＲＡＧＥタンパク質配列は、２２アミ
ノ酸のＮ末端シグナルペプチドを含み、これは、ＲＡＧＥタンパク質の原形質膜への輸送
における役割を果たすことが以前に示されている。
本明細書全体を通して、文脈がそうでないことを要しない限り、ＲＡＧＥの細胞外ドメ
インへの言及は、野生型ＲＡＧＥ（配列番号１４）のアミノ酸残基２３～３４２への言及
を意味する。
本明細書全体を通して、文脈がそうでないことを要しない限り、ＲＡＧＥの膜貫通ドメ
インへ（又はＴＭ）の言及は、野生型ＲＡＧＥ（配列番号１４）のアミノ酸残基３４３～
３６１への言及を意味する。
本明細書全体を通して、文脈がそうでないことを要しない限り、ＲＡＧＥの細胞質側テ
ールへの言及は、野生型ＲＡＧＥ（配列番号１４）のアミノ酸残基３６２～４０４への言
及を意味する。
本発明の一形態では、ＲＡＧＥポリペプチドは、哺乳動物野生型ＲＡＧＥタンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＲＡＧＥポリペプチド配列は、ＲＡＧＥリガンド誘
導性シグナル伝達を損なうようにＲＡＧＥの細胞外ドメインの１つ以上のリガンド結合領
域（Ｖ、Ｃ又はＳ型Ｉｇドメイン）が変異又は欠失したヒト野生型ＲＡＧＥタンパク質配
列を含み得る。非限定的な例として、本発明での使用に適したＲＡＧＥポリペプチドは、
配列番号１に記載のヒト野生型ＲＡＧＥタンパク質配列のアミノ酸残基３６２～４０４を
含んでいた。
ＲＡＧＥの細胞質側テール（配列番号１の残基３６２～４０４）は、シグナル伝達の原
因である。いくつかの実施形態では、本発明のＲＡＧＥポリペプチドは、ＲＡＧＥの細胞
質側テール又はその断片又は変異、切断（トランケート）若しくは融合断片を含むか、そ
れからなるか又はそれから本質的になる。例えば、ＲＡＧＥポリペプチドは、配列番号１
に記載のヒト野生型ＲＡＧＥの残基３６２～４０４を含むか、それからなるか又はそれか
ら本質的になり得る。
＜３．２ ＲＡＧＥポリペプチドをコードするベクター及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＲＡＧＥポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
Ｌ３３４１２．１、ＥＵ５７０２４７．１、ＥＵ５７０２４６．１、ＥＵ５７０２４５．
１、ＥＵ５７０２４４．１、ＥＵ５７０２４２．１、ＥＵ５７０２４１．１、ＥＵ５７０
２４０．１に記載の、マウスＡＧＥＲヌクレオチド配列に対応する配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
Ｍ９１２１２．１又はＮＭ＿１７３９８２．３に記載の、ウシＡＧＥＲヌクレオチド配列
に対応する配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
Ｌ３３４１３．１、ＮＭ＿０５３３３６．２に記載の、ラットＡＧＥＲヌクレオチド配列
に対応する配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＣＭ００１２７９．１、ＮＭ＿００１２０５１１７．１、ＧＵ１３９４０８．１、ＧＵ１
３９４０９．１、ＧＵ１３９４１０．１、ＧＵ１３９４１１．１、ＧＵ１３９４１２．１
、ＧＵ１３９４１３．１、ＧＵ１３９４１４．１、ＧＵ１３９４１５．１、ＧＵ１３９４
１６．１、ＧＵ１３９４１７．１、ＧＵ１３９４１８．１、ＧＵ１３９４１９．１、ＧＵ
１３９４２０．１、ＧＵ１３９４２１．１、ＧＵ１３９４２２．１に記載の、マカクＡＧ
ＥＲヌクレオチド配列に対応する配列を含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＤＱ１２５９３６．１、ＤＱ１２５９３７．１、ＤＱ１２５９３８．１、ＤＱ１２５９４
０．１又はＤＱ１２５９３９に記載の、イヌＡＧＥＲヌクレオチド配列に対応する配列を
含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＦ００１０９５．１、ＡＢ０６１６６８．１、ＡＪ０１２７５３．１、Ｙ１８０６０．
１、ＥＵ８２６６２０．１、ＥＵ８２６６１８．１、ＥＵ８２６６１７．１、ＥＵ８２６
６１６．１、ＡＦ０６５２１３．１、ＡＦ０６５２１２．１、ＡＦ０６５２１０．１、Ｃ
Ｕ６９０９７７．１、ＣＵ６９０９７６．１、ＡＪ２３８８９６．１、Ｙ１８７６２．１
に記載の、ヒトＡＧＥＲヌクレオチド配列に対応する配列を含む。このタイプのいくつか
の実施形態では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、
７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８
４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７
、９８又は９９％の配列同一性を共有するＡＧＥＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＡＧＥＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＲＡ
ＧＥタンパク質と少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％
、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポリ
ペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では、
ＡＧＥＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｒ
ＡＧＥタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配
列又はその断片を含む。
＜３．３ １型アンジオテンシンＩＩ受容体（ＡＴ１Ｒ）ポリペプチド＞
ＡＴ１ＲによるＧタンパク質依存性シグナル伝達は、正常な心血管ホメオスタシスに不
可欠であるが、慢性機能障害には有害であり、これは、細胞死及び組織線維症に関連し、
心肥大及び心不全を引き起こす（Ｍａ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。
その高い医学的関連性及び数十年の研究にもかかわらず、ＡＴ１Ｒの構造及び十分に確
立されたＡＴ１Ｒブロッカー（ＡＲＢ）の結合モードは、最近解明されたに過ぎない（Ｚ
ｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５）。この構造は、ＡＴ１Ｒの細胞外部分がヘリックス
ＩＩ及びＩＩＩを連結するＮ末端セグメントＥＣＬ１（ヒトＡＴ１ＲのＧｌｕ９１～Ｐｈ
ｅ９６）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＡＴ１ＲのＨｉｓ１６６～Ｉ
ｌｅ１９１）並びにヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＡＴ１ＲのＩｌｅ
２７０～Ｃｙｓ２７４）からなることを示していた。２つのジスルフィド結合は、Ｎ末端
とＥＣＬ３を接続するＣｙｓ１８～Ｃｙｓ２７４及びヘリックスＩＩＩとＥＣＬ２（ＡＴ
１Ｒと約３６％の配列同一性を共有するケモカイン受容体ＣＸＣＲ４に類似）を接続する
Ｃｙｓ１０１～Ｃｙｓ１８０によるＡＴ１Ｒの細胞外側の形成を促進する。
本発明の特定の実施形態では、ＡＴ１Ｒポリペプチドは、ＡＴ１Ｒタンパク質配列を含
むか、又はＡＴ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＡＴ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物ＡＴ１Ｒタンパク質配
列に対応する。適当なＡＴ１Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
３０５５６）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ７７５９０）、ウシ（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５１０４）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３４９７６）
、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＷＶ２６）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｐ３０５５５）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＧＬＮ９）、
スナネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ３５２１０、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ２９０８９）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２９７５４）、ネコ（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＶＶＡ２）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｇ３Ｗ０Ｍ６）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ｄ１Ｎ０）及びパンダ（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｄ２ＨＷＤ９）を含む群から選択される哺乳動物からのもので
あり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＡＴ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＡＴ１Ｒタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＡＴ１Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＡＴ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０５５６）又は
野生型ＡＴ１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＡＴ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型ＡＴ１Ｒタンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＡＴ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＡＴ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３２０～３５９は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＡＴ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＡＴ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＡＴ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基７～１６は、切断され得る）。非限定的な例として、
本発明での使用に適したＡＴ１Ｒポリペプチドは、配列番号１６に記載のヒト野生型ＡＴ
１Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～６及び１７～３１９を含んでいた。
＜３．４ ＡＴ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＡＴ１Ｒポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＫＲ７１１４２４．１、ＫＲ７１１４２３．１、ＫＲ７１１４２２．１、ＫＲ７１１４２
１．１、ＫＪ８９６３９９．１、ＫＪ８９６３９８．１、ＮＭ＿０３２０４９．３、ＮＭ
＿０３１８５０．３、ＮＭ＿００４８３５．４、ＮＭ＿０００６８５．４、ＮＭ＿００９
５８５．３、ＤＱ８９５６０１．２、ＢＣ０６８４９４．１、ＢＣ０２２４４７．１、Ｄ
Ｑ８９２３８８．２及びＡＫ２９１５４１．１に記載の、ヒトＡＴ１Ｒヌクレオチドに対
応する（すなわちＡＧＴＲ１遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例で
は、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９
９％の配列同一性を共有するＡＴ１Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＡＴ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＡＴ
１Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＡＴ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＡＴ１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．５ アデノシン１受容体（Ａ１Ｒ）ポリペプチド＞
Ａ１Ｒは、心血管系の重要なレギュレーターであり、神経、代謝及び骨格プロセスにお
けるものなどの様々な他の役割も有する（Ｆｒｅｄｈｏｌｍ ｅｔ ａｌ．，２０１１）
。
現在まで、Ａ１Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能及
びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチを
通じて推測しなければならない。Ａ１Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＡ１Ｒ
のＭｅｔ１～Ｓｅｒ４）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＡ１Ｒの
Ｐｒｏ７３～Ｔｈｒ７５）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＡ１ＲのＴ
ｒｐ１４６～Ｉｌｅ１７５）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＡ１
ＲのＰｒｏ２６１～Ｌｙｓ２６５）からなる。４つのジスルフィド結合がＡ１Ｒの細胞外
側に形成され得（Ａ２Ａの結晶構造で見られるように）、これがリガンド結合溝の安定化
を促進すると考えられている（Ｐｉｉｒａｉｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，２０１１）。
本発明の特定の実施形態では、Ａ１Ｒポリペプチドは、Ａ１Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＡ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ａ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ａ１Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＡ１Ｒ配列は、適切には、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｈ２Ｑ０Ｘ８）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２８１９０）、イヌ（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｐ１１６１６）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４７７４
５）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＲＡＮ５）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ３０５４２）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６０６１２）、パンダ（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｍ０Ｗ２）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｉ３Ｌ
ＥＮ５）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号。Ｐ３４９７０）、ラット（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｏ０８７６６）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５０９９）
、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＮＳＹ０）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＷＶＡ４）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る
。
いくつかの好ましい実施形態では、Ａ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＡ１Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ａ１Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ａ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０５４２）又は野生型Ａ
１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ａ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ａ１Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ａ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ａ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３１５～３２６は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ａ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ａ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ａ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１５４～１６１は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＡ１Ｒポリペプチドは、配列番号１７に記載のヒト野生型Ａ１Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１５３及び１６２～３１４を含んでいた。
＜３．６ Ａ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ａ１Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＣＲ５４１７４９．１、ＮＭ＿０００６７４．２、ＮＭ＿００１０４８２３０．１、ＮＧ
＿０５２９１７．１、ＫＣ８８４７４４．１、ＫＣ８８１１０８．１、Ｌ２２２１４．１
、ＡＹ１３６７４６．１及びＢＣ０２６３４０．１に記載の、ヒトＡ１Ｒヌクレオチドに
対応する（すなわちＡＤＯＲＡ１遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な
例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７
２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５
、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又
は９９％の配列同一性を共有するＡ１Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ａ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ａ１Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ａ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ａ
１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．７ アドレナリン作動性α１Ａ受容体（α１Ａ－ＡＲ）ポリペプチド＞
α１Ａ－ＡＲは、心血管系の調節に関与し、特に血圧及び心収縮性の増加を媒介するよ
うである（Ｃｈｅｎ＆Ｍｉｎｎｅｍａｎ，２００５）。
現在まで、α１Ａ－ＡＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的
機能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロ
ーチを通じて推測しなければならない。α１Ａ－ＡＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント
（ヒトα１Ａ－ＡＲのＭｅｔ１～Ａｓｎ２２）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥ
ＣＬ１（ヒトα１Ａ－ＡＲのＧｌｙ９０～Ｐｈｅ９４）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結す
るＥＣＬ２（ヒトα１Ａ－ＡＲのＴｒｐ１６５～Ｇｌｕ１８０）及びヘリックスＶＩをＶ
ＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトα１Ａ－ＡＲのＰｒｏ２９９～Ｐｒｏ３０３）からなる。
大半のＧＰＣＲのように、α１Ａ－ＡＲは、ＥＣＬ１とＥＣＬ２とを接続するジスルフィ
ド結合を含有する可能性がある（Ｆｉｎｃｈ ｅｔ ａｌ．，２００６）。
本発明の特定の実施形態では、α１Ａ－ＡＲポリペプチドは、α１Ａ－ＡＲタンパク質
配列を含むか、又はα１Ａ－ＡＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、
７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８
７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の
配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、α１Ａ－ＡＲタンパク質配列は、哺乳動物α１Ａ－ＡＲタン
パク質配列に対応する。適当なα１Ａ－ＡＲ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｍ３ＷＲＵ５）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｒ０Ｔ２）
、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＹＩ６）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ａ０Ａ０Ａ０ＭＰＢ９）、スナネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ０ＡＥ５５）、
ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＱＥ１７）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｑ９ＷＵ２５）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＵＴＱ３）、ヒト（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ７ＥＷ１６）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ８Ｂ
ＵＥ５）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＴＭ０７）、ラット（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｐ７０６４８）、アカゲザル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＤＬＫ７
）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＪ３４）を含む群から選択される哺乳動
物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、α１Ａ－ＡＲタンパク質配列は、ヒトα１Ａ－ＡＲ
タンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、α１Ａ－ＡＲポリペプチドは、以
下に記載のヒト全長野生型α１Ａ－ＡＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ
７ＥＷ１６）又は野生型α１Ａ－ＡＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、α１Ａ－ＡＲポリペプチドは、哺乳動物野生型α１Ａ－ＡＲタン
パク質配列のトランケート型を含む。例えば、α１Ａ－ＡＲポリペプチド配列は、Ｃ末端
切断を有するヒト野生型α１Ａ－ＡＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基
３４２～４１３は、切断され得る）。代わりに又はさらに、α１Ａ－ＡＲポリペプチド配
列は、Ｎ末端切断を有する野生型α１Ａ－ＡＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ
末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型α１Ａ－ＡＲタンパク質配列の内部セク
ションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７４～１８５は、切
断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適したα１Ａ－ＡＲポリペプチド
は、配列番号１８に記載のヒト野生型α１Ａ－ＡＲタンパク質配列のアミノ酸残基２～１
７３及び１８６～３４１を含んでいた。
＜３．８ α１Ａ－ＡＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、α１Ａ－ＡＲポ
リペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリ
ヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ３８９５０５．１、ＮＧ＿０２９３９５．１、ＮＭ＿００１３２２５０４．１、ＮＭ
＿００１３２２５０２．１、ＮＭ＿０３３３０４．３、ＮＭ＿０３３３０３．４、ＮＭ＿
０３３３０２．３、ＮＲ＿１３６３４３．１、ＮＭ＿０００６８０．３、ＮＭ＿００１３
２２５０３．１、ＡＹ４９１７８１．１、ＡＹ４９１７８０．１、ＡＹ４９１７７９．１
、ＡＹ４９１７７８．１、ＡＹ４９１７７７．１及びＡＹ４９１７７６．１に記載の、ヒ
トα１Ａ－ＡＲヌクレオチドに対応する（すなわちＡＤＲＡ１Ａ遺伝子に対応する）配列
を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１
つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、
８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９
４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するα１Ａ－ＡＲヌクレオチ
ド配列を含む。
いくつかの実施形態では、α１Ａ－ＡＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類
α１Ａ－ＡＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、
７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一
性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの
実施形態では、α１Ａ－ＡＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件
下で野生型哺乳類α１Ａ－ＡＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダ
イズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．９ アドレナリン作動性α１Ｂ受容体（α１Ｂ－ＡＲ）ポリペプチド＞
α１Ｂ－ＡＲは、心血管系の調節、自発運動及びグルコース代謝に関与する（Ｃｈｅｎ
＆Ｍｉｎｎｅｍａｎ，２００５）。
現在まで、α１Ｂ－ＡＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的
機能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロ
ーチを通じて推測しなければならない。α１Ｂ－ＡＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント
（ヒトα１Ｂ－ＡＲのＭｅｔ１～Ｔｈｒ３６）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥ
ＣＬ１（ヒトα１Ｂ－ＡＲのＧｌｙ１０９～Ｌｅｕ１１３）、ヘリックスＩＶ及びＶを連
結するＥＣＬ２（ヒトα１Ｂ－ＡＲのＬｙｓ１８５～Ｇｌｕ１９９）及びヘリックスＶＩ
をＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトα１Ｂ－ＡＲのＳｅｒ３２１～Ｐｒｏ３２５）からな
る。大半のＧＰＣＲのように、α１Ｂ－ＡＲはＥＣＬ１とＥＣＬ２を接続するジスルフィ
ド結合を含有する可能性がある（Ｆｉｎｃｈ ｅｔ ａｌ．，２００６）。
本発明の特定の実施形態では、α１Ｂ－ＡＲポリペプチドは、α１Ｂ－ＡＲタンパク質
配列を含むか、又はα１Ｂ－ＡＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、
７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８
７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の
配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列は、哺乳動物α１Ｂ－ＡＲタン
パク質配列に対応する。適当なα１Ｂ－ＡＲ配列は、適切には、チンパンジー（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＲＸ４）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＧＡ６）
、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＰＫ７１）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｇ３Ｓ９７７）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０ＷＢＱ９）、ハムス
ター（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１８８４１）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｆ７ＡＴＭ９）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３５３６８）、マーモセット（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｕ３ＤＲ８６）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ９７
７１７）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＲＲ３６）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｕ３ＫＭ５９）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１５８２３）、タ
スマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＷＸ９）を含む群から選択される哺
乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列は、ヒトα１Ｂ－ＡＲ
タンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、α１Ｂ－ＡＲポリペプチドは、以
下に記載のヒト全長野生型α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
３５３６８）又は野生型α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、α１Ｂ－ＡＲポリペプチドは、哺乳動物野生型α１Ｂ－ＡＲタン
パク質配列のトランケート型を含む。例えば、α１Ｂ－ＡＲポリペプチド配列は、Ｃ末端
切断を有するヒト野生型α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基
３６５～５２０は、切断され得る）。代わりに又はさらに、α１Ｂ－ＡＲポリペプチド配
列は、Ｎ末端切断を有する野生型α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ
末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列の内部セク
ションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８６～１９６は、切
断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適したα１Ｂ－ＡＲポリペプチド
は、配列番号１９に記載のヒト野生型α１Ｂ－ＡＲタンパク質配列のアミノ酸残基２～１
８５及び１９７～３６４を含んでいた。
＜３．１０ α１Ｂ－ＡＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、α１Ｂ－ＡＲポ
リペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリ
ヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００６７９．３、ＡＹ５３０１９１．１、ＥＵ３３２８３１．１、ＢＣ１３６５
６９．１及びＢＣ１３６５６８．１に記載の、ヒトα１Ｂ－ＡＲヌクレオチドに対応する
（すなわちＡＤＲＡ１Ｂ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、
ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３
、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、
８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％
の配列同一性を共有するα１Ｂ－ＡＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、α１Ｂ－ＡＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類
α１Ｂ－ＡＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、
７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一
性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの
実施形態では、α１Ｂ－ＡＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件
下で野生型哺乳類α１Ｂ－ＡＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダ
イズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．１１ アドレナリン作動性α２Ｂ受容体（α２Ｂ－ＡＲ）ポリペプチド＞
α２Ｂ－ＡＲは、十分に特徴付けられていないＧＰＣＲであるが、血圧調節に関与し、
発達過程における役割も有しているようである（Ｋａｂｌｅ ｅｔ ａｌ．，２０００）
。
現在まで、α２Ｂ－ＡＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的
機能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロ
ーチを通じて推測しなければならない。α２Ｂ－ＡＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント
（ヒトα２Ｂ－ＡＲのＭｅｔ１～Ｓｅｒ８）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣ
Ｌ１（ヒトα２Ｂ－ＡＲのＧｌｙ７６～Ｐｈｅ８０）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結する
ＥＣＬ２（ヒトα２Ｂ－ＡＲのＬｙｓ１５１～Ｇｌｎ１６８）及びヘリックスＶＩをＶＩ
Ｉに連結するＥＣＬ３（ヒトα２Ｂ－ＡＲのＰｒｏ３９５～Ｖａｌ４００）からなる。
本発明の特定の実施形態では、α２Ｂ－ＡＲポリペプチドは、α２Ｂ－ＡＲタンパク質
配列を含むか、又はα２Ｂ－ＡＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、
７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８
７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の
配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列は、哺乳動物α２Ｂ－ＡＲタン
パク質配列に対応する。適当なα２Ｂ－ＡＲ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｍ３Ｘ１Ｆ７）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＲＨＺ６）
、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３Ｘ６Ｓ２）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ１Ｑ１Ｑ４）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＲＭＷ６）、モルモット（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６０４７５）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ｂ
Ｗ５４）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１８０８９）、マーモセット（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＩＰＲ３）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０５４５
）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ３８ＰＴ０）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｇ１ＴＱＬ５）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１９３２８）、タスマニ
アデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＷＺ４）を含む群から選択される哺乳動物
からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列は、ヒトα２Ｂ－ＡＲ
タンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、α２Ｂ－ＡＲポリペプチドは、以
下に記載のヒト全長野生型α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
１８０８９）又は野生型α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、α２Ｂ－ＡＲポリペプチドは、哺乳動物野生型α２Ｂ－ＡＲタン
パク質配列のトランケート型を含む。例えば、α２Ｂ－ＡＲポリペプチド配列は、Ｃ末端
切断を有するヒト野生型α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基
４４０～４４７は、切断され得る）。代わりに又はさらに、α２Ｂ－ＡＲポリペプチド配
列は、Ｎ末端切断を有する野生型α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ
末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列の内部セク
ションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１５３～１６１は、切
断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適したα２Ｂ－ＡＲポリペプチド
は、配列番号２０に記載のヒト野生型α２Ｂ－ＡＲタンパク質配列のアミノ酸残基２～１
５２及び１６２～４３９を含んでいた。
＜３．１２ α２Ｂ－ＡＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、α２Ｂ－ＡＲポ
リペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリ
ヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００６８２．６、ＨＦ５８３４９４．１、ＥＵ３３２８４７．１、ＮＧ＿０３２
９５０．１、ＡＦ３１６８９５．１、ＤＱ０５７０７６．１、ＢＣ１３６５３７．１、Ｂ
Ｃ１３３０２１．１及びＡＹ５４８１６７．１に記載の、ヒトα２Ｂ－ＡＲヌクレオチド
に対応する（すなわちＡＤＲＡ２Ｂ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的
な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、
７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８
５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８
又は９９％の配列同一性を共有するα２Ｂ－ＡＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、α２Ｂ－ＡＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類
α２Ｂ－ＡＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、
７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一
性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの
実施形態では、α２Ｂ－ＡＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件
下で野生型哺乳類α２Ｂ－ＡＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダ
イズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．１３ ブラジキニン受容体Ｂ２（Ｂ２Ｒ）ポリペプチド＞
Ｂ２Ｒは、血管拡張並びに水分及び塩分減少の媒介を通じて血圧降下作用を有すること
と最も一般的に関連付けられるが、炎症、増殖、アポトーシス、血管新生にも関与する（
Ｂｌａｅｓ＆Ｇｉｒｏｌａｍｉ，２０１３）。
現在まで、Ｂ２Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能及
びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチを
通じて推測しなければならない。Ｂ２Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＢ２Ｒ
のＭｅｔ１～Ｇｌｙ５４）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＢ２Ｒ
のＡｓｎ１２０～Ｐｈｅ１２５）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＢ２
ＲのＴｈｒ１９７～Ｉｌｅ２１９）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒ
トＢ２ＲのＩｌｅ３００～Ｓｅｒ３０２）からなる。大半のＧＰＣＲのように、Ｂ２Ｒは
、ＥＣＬ１とＥＣＬ２を接続するジスルフィド結合を含有する可能性がある（Ｌｅｅｂ－
Ｌｕｎｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，２００５）。
本発明の特定の実施形態では、Ｂ２Ｒポリペプチドは、Ｂ２Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＢ２Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｂ２Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｂ２Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＢ２Ｒ配列は、適切には、コウモリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１
Ｑ１５８）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＷＲ０５）、チンパンジー（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｑ８Ｗ１）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＷＫ０
）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＢＤＱ４）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｏ７０５２６）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０４１１）、マーモ
セット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｕ３ＣＶＳ９）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｐ３２２９９）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＬＡＺ３）、ブタ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＧＬＸ８）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２８６
４２）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５０２３）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｗ５Ｑ３８２）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｂ２Ｒタンパク質配列は、ヒトＢ２Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｂ２Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｂ２Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０４１１）又は野生型Ｂ
２Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｂ２Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｂ２Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｂ２Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｂ２Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３５１～３９１は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｂ２Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｂ２Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｂ２Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１９９～２０８は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＢ２Ｒポリペプチドは、配列番号２１に記載のヒト野生型Ｂ２Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１９８及び２０９～３５０を含んでいた。
＜３．１４ Ｂ２Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｂ２Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＨＦ５８３４３０．１、ＡＹ２７５４６５．１、ＮＭ＿０００６２３．３、ＫＪ９５０６
２８．１、ＡＦ３７８５４２．２、ＢＣ０７４８９４．２及びＢＣ０７４８９５．２に記
載の、ヒトＢ２Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＢＤＫＲＢ２遺伝子に対応する）配
列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか
１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０
、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、
９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＢ２Ｒヌクレオチド配
列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｂ２Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｂ２Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｂ２Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｂ
２Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．１５ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ１（ＣＣＲ１）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ１は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、Ｔ細胞、単球、好酸球及び好塩基球に見られ、関節リウマチ及び多発性硬化症に関連
付けられる（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
現在まで、ＣＣＲ１の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＣＣＲ１の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣ
ＣＲ１のＭｅｔ１～Ａｓｎ２８）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＣＣＲ１のＡｓｐ９７～Ｐｈｅ１０１）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒ
トＣＣＲ１のＬｙｓ１７３～Ｓｅｒ１９１）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣ
Ｌ３（ヒトＣＣＲ１のＴｈｒ２７０～Ｈｉｓ２７１）からなる。全てのケモカイン受容体
と同様に、Ｎ末端は、リガンド結合及び受容体活性化に重要であるようである（Ｋｕｆａ
ｒｅｖａ ｅｔ ａｌ．，２０１５）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ１ポリペプチドは、ＣＣＲ１タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ１タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ１タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ１タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ１配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｂ
６ＤＸＦ４）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＭＧ４）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０ＪＮ７２）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２Ｖ０Ｑ
７）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＲＬ２９）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｆ６Ｕ０Ｄ１）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３２２４６）、マーモセ
ット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＭＹＪ８）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｐ５１６７５）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６ＹＳＴ０）、ウサギ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＭＹＪ９）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＪＬＹ
８）、アカゲザル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＱＪＲ２）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＸＸ５）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ１タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ１タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ１ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ１タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３２２４６）又は
野生型ＣＣＲ１タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ１ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ１タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ１ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ１タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３１８～３５５は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ１ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ１タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ１タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７４～１８２は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ１ポリペプチドは、配列番号２２に記載のヒト野生
型ＣＣＲ１タンパク質配列のアミノ酸残基２～１７３及び１８３～３１７を含んでいた。
＜３．１６ ＣＣＲ１ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ１ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１２９５．２、ＡＦ０５１３０５．１、ＢＣ０６４９９１．１及びＢＣ０５１
３０６．１に記載の、ヒトＣＣＲ１ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＣＲ１遺伝子に
対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配
列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８
、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、
９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＣＣＲ１
ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ１ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ１ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ１ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ１タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．１７ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ２（ＣＣＲ２）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ２は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、単球、樹状細胞及び記憶Ｔ細胞に見られ、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、
多発性硬化症、細胞内病原体への耐性、２型糖尿病に関連付けられる（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａ
ｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
ＣＣＲ２の結晶構造が最近公開され（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）、そのリ
ガンド結合モード及び活性化プロセスに対する見識を提供している。ＣＣＲ２の細胞外部
分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣＣＲ２のＭｅｔ１～Ｄ３６）、ヘリックスＩＩ及びＩＩ
Ｉを連結するＥＣＬ１（ヒトＣＣＲ２のＧｌｕ１０５～Ｐｈｅ１０８）、ヘリックスＩＶ
及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＣＣＲ２のＬｙｓ１８０～Ｐｈｅ１９４）及びヘリック
スＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＣＣＲ２のＬｅｕ２７４～Ｓｅｒ２７５）から
なる。全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ２は、その外部ドメインに２つの保存さ
れたジスルフィド結合を有することが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６
）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ２ポリペプチドは、ＣＣＲ２タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ２タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ２タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ２タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ２配列は、適切には、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｈ２ＱＭＧ５）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｄ９ＺＤＤ９）、ゴリラ（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３Ｓ６Ｔ３）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ
０ＶＩＩ５）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｂ３ＳＰＸ１）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｐ４１５９７）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＤＴ７
０）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８３）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｇ１ＭＭＦ１）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６ＹＴ４２）、ウサギ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＫ５７）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ
５５１９３）、アカゲザル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ１８７９３）、ヒツジ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＸＵ４）を含む群から選択される哺乳動物からのものであ
り得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ２タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ２タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ２ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ２タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４１５９７）又は
野生型ＣＣＲ２タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ２ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ２タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ２ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ２タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３２２～３７４は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ２ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ２タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ２タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８２～１９９は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ２ポリペプチドは、配列番号２３に記載のヒト野生
型ＣＣＲ２タンパク質配列のアミノ酸残基２～１８１及び２００～３２１を含んでいた。
＜３．１８ ＣＣＲ２ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ２ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１１２３３９６．１、ＮＭ＿００１１２３０４１．２、ＮＧ＿０２１４２８．
１、ＫＣ２４８０７９．１、ＫＣ２４８０７８．１、ＫＣ２４８０７７．１、ＫＣ２４８
０７６．１、ＫＣ２４８０７５．１、ＫＣ２４８０７４．１、ＫＣ２４８０７３．１、Ｋ
Ｃ２４８０７２．１、ＫＣ２４８０７１．１、ＫＣ２４８０７０．１、ＡＦ５４５４８０
．１、ＢＣ１２６４５２．１及びＢＣ０９５５４０．１に記載の、ヒトＣＣＲ２ヌクレオ
チドに対応する（すなわちＣＣＲ２遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的
な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、
７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８
５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８
又は９９％の配列同一性を共有するＣＣＲ２ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ２ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ２ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ２ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ２タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．１９ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ３（ＣＣＲ３）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ３は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、好酸球、好塩基球、マスト細胞、Ｔｈ２細胞及び血小板に見られ、アレルギー性喘息
及び鼻炎に関連付けられる（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
現在まで、ＣＣＲ３の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＣＣＲ３の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣ
ＣＲ３のＭｅｔ１～Ａｓｐ２８）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＣＣＲ３のＨｉｓ９７～Ｐｈｅ１０１）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒ
トＣＣＲ３のＧｌｕ１７３～Ｔｈｒ１９１）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣ
Ｌ３（ヒトＣＣＲ３のＧｌｙ２７０～Ａｓｎ２７１）からなる。全てのケモカイン受容体
と同様に、ＣＣＲ３は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフィド結合を有する
ことが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ３ポリペプチドは、ＣＣＲ３タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ３タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ３タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ３タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ３配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３ＷＺ２７）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｒ０Ｚ４）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＰ１６）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６４Ｈ３
４）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｚ２Ｉ３）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｆ６ＵＨ１２）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６７７）、マー
モセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＤＴＡ４）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｑ８ＢＨＢ８）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＭＭＣ８）、ブタ（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ７５ＺＨ４）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｂ５Ｓ
Ｕ３９）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ５４８１４）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＸＷ１）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ３タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ３タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ３ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ３タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６７７）又は
野生型ＣＣＲ３タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ３ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ３タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ３ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ３タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３１８～３５５は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ３ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ３タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ３タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７５～１８７は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ３ポリペプチドは、配列番号２４に記載のヒト野生
型ＣＣＲ３タンパク質配列のアミノ酸残基２～１７４及び１８８～３１７を含んでいた。
＜３．２０ ＣＣＲ３ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ３ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿１７８３２９．２、ＮＭ＿００１８３７．３、ＮＭ＿００１１６４６８０．１、Ｎ
Ｍ＿１７８３２８．１、ＡＨ００９８６７．２、ＡＦ２４７３６１．１、ＡＦ２６２３０
３．１、ＡＦ２６２３０２．１、ＡＦ２６２３０１．１、ＡＦ２６２３００．１、ＡＦ２
６２２９９．１、ＡＨ０１０６９１．２、ＡＦ２２４４９５．１、ＡＦ２４７３６０．１
、ＡＦ２４７３５９．１及びＡＦ０２６５３５．１に記載の、ヒトＣＣＲ３ヌクレオチド
に対応する（すなわちＣＣＲ３遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例
では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２
、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、
８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は
９９％の配列同一性を共有するＣＣＲ３ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ３ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ３ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ３ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ３タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．２１ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ４（ＣＣＲ４）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ４は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、Ｔ細胞（Ｔｈ２）、樹状細胞（成熟）、好塩基球、マクロファージ及び血小板に見ら
れ、寄生虫感染、移植片拒絶及びＴ細胞の皮膚へのホーミングに関連付けられる（Ｃｈａ
ｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
現在まで、ＣＣＲ４の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＣＣＲ４の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣ
ＣＲ４のＭｅｔ１～Ｇｌｙ３３）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＣＣＲ４のＧｌｎ１０２～Ｐｈｅ１０５）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（
ヒトＣＣＲ４のＴｈｒ１７７～Ａｓｎ１９４）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥ
ＣＬ３（ヒトＣＣＲ４のＬｅｕ２７３～Ｇｌｎ２７４）からなる。全てのケモカイン受容
体と同様に、ＣＣＲ４は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフィド結合を有す
ることが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ４ポリペプチドは、ＣＣＲ４タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ４タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ４タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ４タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ４配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３ＶＺＥ０）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＭ９１）、牛（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ６ＱＬＡ５）、犬（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ８ＭＪＷ８）
、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＲＣ１７）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｈ０Ｖ３Ａ３）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＲＪＴ２）、ヒト（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６７９）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ７Ｆ２Ｂ０）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８０）、ブタ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｉ３Ｌ５５２）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＴＸＶ
０）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９１ＺＨ４）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｗ５Ｑ１Ａ７）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ４タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ４タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ４ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ４タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６７９）又は
野生型ＣＣＲ４タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ４ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ４タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ４ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ４タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３２１～３６０は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ４ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ４タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ４タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７９～１８９は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ４ポリペプチドは、配列番号２５に記載のヒト野生
型ＣＣＲ４タンパク質配列のアミノ酸残基２～１７８及び１９０～３２０を含んでいた。
＜３．２２ ＣＣＲ４ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ４ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ３２２５３９．１、ＮＣ＿０００００５．１０、ＮＭ＿００５５０８．４、ＥＦ０６
４７５９．１、ＢＣ０７４９３５．２、ＢＣ０７１７５１．１及びＢＣ０６９１３９．１
に記載の、ヒトＣＣＲ４ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＣＲ４遺伝子に対応する）
配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれ
か１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８
０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３
、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＣＣＲ４ヌクレオチ
ド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ４ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ４ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ４ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ４タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．２３ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ５（ＣＣＲ５）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ５は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、Ｔ細胞及び単球に見られ、ＨＩＶ－１感染及び移植拒絶に関連付けられる（Ｃｈａｒ
ｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
ＣＣＲ５の結晶構造が解明されており（Ｔａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３）、そのリガ
ンド結合モード及び活性化プロセスに対する見識を提供している。ＣＣＲ５の細胞外部分
は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣＣＲ５のＭｅｔ１～Ａｓｎ２４）、ヘリックスＩＩ及びＩ
ＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＣＣＲ５のＧｌｎ９３～Ｐｈｅ９６）、ヘリックスＩＶ及
びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＣＣＲ５のＡｒｇ１６８～Ｇｌｎ１８６）及びヘリックス
ＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＣＣＲ５のＬｅｕ２６６～Ａｓｎ２６７）からな
る。全てのケモカイン受容体で予想されるように、ＣＣＲ５は、その外部ドメインに２つ
の保存されたジスルフィド結合を有する（Ｔａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ５ポリペプチドは、ＣＣＲ５タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ５タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ５タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ５タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ５配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ
４ＺＹ８３）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５６４４０）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２ＨＪ１７）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５ＥＣＲ
９）、ヤギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ５Ｂ６Ｌ８）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｐ５６４３９）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ４ＺＺ５４）、ヒト（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８１）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｑ６ＷＮ９８）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８２）、ブタ（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６ＹＴ４１）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ１ＺＹ２２
）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ０８５５６）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｂ７Ｔ９０３）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ５タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ５タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ５ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ５タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８１）又は
野生型ＣＣＲ５タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ５ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ５タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ５ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ５タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３１４～３５２は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ５ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ５タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ５タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７１～１８１は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ５ポリペプチドは、配列番号２６に記載のヒト野生
型ＣＣＲ５タンパク質配列のアミノ酸残基２～１７０及び１８２～３１３を含んでいた。
＜３．２４ ＣＣＲ５ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ５ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ４６３２１５．１、ＧＱ１２１０３５．１、ＡＨ００５７８６．２、ＮＭ＿０００５
７９．３、ＮＭ＿００１１００１６８．１、ＡＦ０５６０１９．１、ＡＢ１８２９９０．
１、ＡＢ１８２９８４．１、ＡＢ１８２９８６．１、ＡＦ０１１５３７．１、ＡＦ０１１
５３２．１、ＡＦ０１１５２５．１、ＡＦ０１１５２１．１、ＪＱ２９１２３２．１、Ｅ
Ｆ２０２０８９．１、ＡＦ０５２５３９．１に記載の、ヒトＣＣＲ５ヌクレオチドに対応
する（すなわちＣＣＲ５遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、
ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３
、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、
８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％
の配列同一性を共有するＣＣＲ５ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ５ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ５ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ５ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ５タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．２５ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ６（ＣＣＲ６）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ６は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、Ｔ細胞（Ｔ調節及び記憶）、Ｂ細胞及び樹状細胞に見られ、粘膜液性免疫、アレルギ
ー性喘息、腸Ｔ細胞ホーミングに関連付けられる（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２
００６）。
現在まで、ＣＣＲ４の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＣＣＲ６の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣ
ＣＲ６のＭｅｔ１～Ｇｌｕ４０）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＣＣＲ６のＧｌｙ１０９～Ｐｈｅ１１３）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（
ヒトＣＣＲ６のＧｌｎ１８７～Ｇｌｕ２０６）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥ
ＣＬ３（ヒトＣＣＲ６のＡｓｎ２８５～Ａｒｇ２８６）からなる。全てのケモカイン受容
体と同様に、ＣＣＲ６は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフィド結合を有す
ることが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ６ポリペプチドは、ＣＣＲ６タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ６タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ６タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ６タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ６配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３ＷＰＪ２）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＵ１３）、牛（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＴ５６）、犬（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｊ９Ｐ４Ｚ８）
、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３Ｒ６Ｓ８）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｈ０ＷＢＴ８）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＰＰ７７）、ヒト（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８４）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ６ＰＭＺ８）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ５４６８９）、ブタ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｉ３ＬＢＩ５）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｕ０４
１）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５ＢＫ５８）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｗ５Ｐ４Ｄ１）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ６タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ６タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ６ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ６タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８４）又は
野生型ＣＣＲ６タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ６ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ６タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ６ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ６タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３３３～３７４は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ６ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ６タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ６タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１９１～２０２は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ６ポリペプチドは、配列番号２７に記載のヒト野生
型ＣＣＲ６タンパク質配列のアミノ酸残基２～１９０及び２０３～３３２を含んでいた。
＜３．２６ ＣＣＲ６ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ６ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００４３６７．５、ＮＭ＿０３１４０９．３、ＡＹ２４２１２６．１、ＢＣ０３７
９６０．１及びＵ４５９８４．１に記載の、ヒトＣＣＲ６ヌクレオチドに対応する（すな
わちＣＣＲ６遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレ
オチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７
５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８
、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一
性を共有するＣＣＲ６ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ６ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ６ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ６ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ６タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．２７ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ７（ＣＣＲ７）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ７は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、Ｔ細胞及び成熟樹状細胞に見られ、Ｔ細胞及び樹状細胞のリンパ節への輸送、抗原提
示並びに細胞性免疫に関連付けられる（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
現在まで、ＣＣＲ７の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＣＣＲ７の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣ
ＣＲ７のＭｅｔ１～Ａｓｐ５２）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＣＣＲ７のＳｅｒ１２１～Ｐｈｅ１２４）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（
ヒトＣＣＲ７のＡｓｐ１９８～Ｖａｌ２１７）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥ
ＣＬ３（ヒトＣＣＲ７のＴｈｒ２９４～Ｓｅｒ２９６）からなる。全てのケモカイン受容
体と同様に、ＣＣＲ７は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフィド結合を有す
ることが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ７ポリペプチドは、ＣＣＲ７タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ７タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ７タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ７タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ７配列は、適切には、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｐ４７７７４）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３２２４８）、ラット（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６Ｕ２Ｄ６）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ８６１Ｓ１）
、牛（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０ＪＮＡ６）、犬（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｊ
９Ｐ８９３）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＴＫＪ１）、マーモセット（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６Ｒ３Ａ６）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｈ２Ｒ９Ｐ０）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＷＡＦ３）、ヒツ
ジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＺＧ４）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｈ０ＶＬ６５）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＷＢＵ１）、ウマ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＳＰＨ５）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり
得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ７タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ７タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ７ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ７タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３２２４８）又は
野生型ＣＣＲ７タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ７ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ７タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ７ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ７タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３５８～３７８は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ７ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ７タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ７タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基２０１～２０９は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ７ポリペプチドは、配列番号２８に記載のヒト野生
型ＣＣＲ７タンパク質配列のアミノ酸残基２～２００及び２１０～３５７を含んでいた。
＜３．２８ ＣＣＲ７ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ７ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１３０１７１８．１、ＮＭ＿００１３０１７１７．１、ＮＭ＿００１３０１７
１６．１、ＮＭ＿００１３０１７１４．１、ＮＭ＿００１８３８．３、ＥＦ０６４７５８
．１、ＮＣ＿００００１７．１１、ＮＣ＿０１８９２８．２、ＣＭ０００２６８．１、Ｂ
Ｃ０３５３４３．１に記載の、ヒトＣＣＲ７ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＣＲ７
遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、こ
れらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７
７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０
、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有する
ＣＣＲ７ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ７ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ７ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ７ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ７タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．２９ ＣＣケモカイン受容体ＣＣＲ９（ＣＣＲ９）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＣＲ９は、炎症プロセスの媒介に関与する。これ
は、Ｔ細胞及びＩｇＡ＋プラズマ細胞に見られ、Ｔ細胞及びＩｇＡ＋プラズマ細胞の腸及
び炎症性腸疾患へのホーミングに関連付けられる（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２
００６）。
現在まで、ＣＣＲ９の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＣＣＲ９の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＣ
ＣＲ９のＭｅｔ１～Ａｓｎ４２）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＣＣＲ９のＧｌｎ１１１～Ｐｈｅ１１４）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（
ヒトＣＣＲ９のＧｌｎ１８８～Ｇｌｕ２０６）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥ
ＣＬ３（ヒトＣＣＲ９のＰｈｅ２８５～Ｓｅｒ２８７）からなる。全てのケモカイン受容
体と同様に、ＣＣＲ９は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフィド結合を有す
ることが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＣＲ９ポリペプチドは、ＣＣＲ９タンパク質配列を含
むか、又はＣＣＲ９タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ９タンパク質配列は、哺乳動物ＣＣＲ９タンパク質配
列に対応する。適当なＣＣＲ９配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３Ｗ６Ｋ０）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＭＧ２）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＲＭＫ７）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ２ＲＱ２
１）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＱＱ１８）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｈ０ＶＷＰ５）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６Ｘ７Ｎ４）、ヒ
ト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８６）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｆ７Ｆ０２３）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＷＵＴ７）、パンタ（
ｐａｎｔａ）（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｍ０Ｔ５）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｑ６ＹＴ４７）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＵＱ１）、ヒツジ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ１ＷＬＰ９）を含む群から選択される哺乳動物からのも
のであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＣＲ９タンパク質配列は、ヒトＣＣＲ９タンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＣＲ９ポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＣＣＲ９タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５１６８６）又は
野生型ＣＣＲ９タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＣＲ９ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＣＲ９タンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＣＣＲ９ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＣＣＲ９タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３３４～３６９は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＣＲ９ポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＣＣＲ９タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＣＣＲ９タンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１９０～２０４は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＣＣＲ９ポリペプチドは、配列番号２９に記載のヒト野生
型ＣＣＲ９タンパク質配列のアミノ酸残基２～１８９及び２０５～３３３を含んでいた。
＜３．３０ ＣＣＲ９ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＣＲ９ポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ２４２１２７．１、ＮＭ＿００１２５６３６９．１、ＮＭ＿０３１２００．２、ＮＭ
＿００６６４１．３、ＡＦ１４５２０７．１、ＮＧ＿０２９４７２．１、ＡＦ１４５４４
０．１、ＡＦ１４５４３９．１、ＢＣ０９５５１６．１、ＢＣ０６９６７８．１及びＡＪ
１３２３３７．１に記載の、ヒトＣＣＲ９ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＣＲ９遺
伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これ
らの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７
、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、
９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＣ
ＣＲ９ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＣＲ９ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＣＣ
Ｒ９ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＣＲ９ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＣＣＲ９タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．３１ ＣＸＣケモカイン受容体ＣＸＣＲ２（ＣＸＣＲ２）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＸＣＲ２は、炎症プロセスの媒介に関与する。こ
れは、好中球、単球、微小血管内皮細胞に見られ、炎症性肺疾患、ＣＯＰＤに関連付けら
れ、腫瘍成長の血管新生を示す（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ、２００６）。
現在まで、ＣＸＣＲ２の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機
能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロー
チを通じて推測しなければならない。ＣＸＣＲ２の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒ
トＣＸＣＲ２のＭｅｔ１～Ｇｌｕ４２）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１
（ヒトＣＸＣＲ２のＧｌｙ１１１～Ｐｈｅ１１４）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥ
ＣＬ２（ヒトＣＸＣＲ２のＡｒｇ１８５～Ａｌａ２０５）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに
連結するＥＣＬ３（ヒトＣＸＣＲ２のＶａｌ２８１～Ｇｌｕ２８４）からなる。全てのケ
モカイン受容体と同様に、ＣＸＣＲ２は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフ
ィド結合を有することが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＸＣＲ２ポリペプチドは、ＣＸＣＲ２タンパク質配列
を含むか、又はＣＸＣＲ２タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２タンパク質配列は、哺乳動物ＣＸＣＲ２タンパク
質配列に対応する。適当なＣＸＣＲ２配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｐ２５０２５）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３５３４３）、ラット（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３５４０７）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３５
３４４）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ９７５７１）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｑ２８００３）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２８８０７）
、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２８４２２）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｆ６ＹＩ１８）、コウモリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｐ３Ｆ４）、
ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＸＦＨ４）モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｑ８１０Ｔ４）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＳＳ０５）、ヒツジ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＱＤＸ４）を含む群から選択される哺乳動物からのものであ
り得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＸＣＲ２タンパク質配列は、ヒトＣＸＣＲ２タン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２ポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＣＸＣＲ２タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５０２
５）又は野生型ＣＸＣＲ２タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＸＣＲ２ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＸＣＲ２タンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＣＸＣＲ２ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＣＸＣＲ２タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３４６～
３６０は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＸＣＲ２ポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＣＸＣＲ２タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＣＸＣＲ２タンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８７～２０２は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＣＸＣＲ２ポリペプチドは、配列番号３０
に記載のヒト野生型ＣＸＣＲ２タンパク質配列のアミノ酸残基２～１８６及び２０３～３
４５を含んでいた。
＜３．３２ ＣＸＣＲ２ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＸＣＲ２ポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１１６８２９８．１、ＮＭ＿００１５５７．３、ＡＢ０３２７３４．１、ＡＢ
０３２７３３．１、ＮＧ＿０５２９７５．１、ＸＭ＿０１７００３９９２．１、ＸＭ＿０
１７００３９９１．１、ＸＭ＿０１７００３９９０．１、ＸＭ＿００５２４６５３０．３
に記載の、ヒトＣＸＣＲ２ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＸＣＲ２遺伝子に対応す
る）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のい
ずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９
、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、
９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＣＸＣＲ２ヌク
レオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｃ
ＸＣＲ２ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＣＸＣＲ２ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＣＸＣＲ２タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．３３ ＣＸＣケモカイン受容体ＣＸＣＲ４（ＣＸＣＲ４）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＸＣＲ４は、炎症プロセスの媒介に関与する。こ
れは、免疫系全体に広く発現し、ＨＩＶ感染、腫瘍転移及び造血に関連付けられる（Ｃｈ
ａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
現在まで、２つの研究でＣＸＣＲ４の結晶構造の解明が報告されており、そのリガンド
へどのように結合するかについて見識を提供している（Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０；
Ｑｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１５）。ＣＸＣＲ４の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒ
トＣＸＣＲ４のＭｅｔ１～Ｐｈｅ２９）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１
（ヒトＣＸＣＲ４のＡｓｎ１０１～Ｐｈｅ１０４）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥ
ＣＬ２（ヒトＣＸＣＲ４のＡｓｎ１７６～Ａｓｎ１９２）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに
連結するＥＣＬ３（ヒトＣＸＣＲ４のＩｌｅ２６９～Ｇｌｎ２７２）からなる。大半のケ
モカイン受容体で予想されるように、ＣＸＣＲ４は、その外部ドメインに２つの保存され
たジスルフィド結合を有する（Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＸＣＲ４ポリペプチドは、ＣＸＣＲ４タンパク質配列
を含むか、又はＣＸＣＲ４タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ４タンパク質配列は、哺乳動物ＣＸＣＲ４タンパク
質配列に対応する。適当なＣＸＣＲ４配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｐ５６４９８）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ６１０７２）、ウシ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５９３０）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ３
ＬＳＬ６）、ハリネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ２ＺＶ５２）、ウマ（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６Ｙ９Ｍ７）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ６１
０７３）、ライオン（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｂ５ＬＶＸ６）、マーモセット（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ８ＨＺＵ１）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託Ａ０Ａ０Ｒ４
Ｊ０Ｎ８）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ７６４Ｍ９）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＧＦ１）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ０Ｇ２Ｋ９
Ｕ１）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＬＡ４）を含む群から選択される哺
乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＸＣＲ４タンパク質配列は、ヒトＣＸＣＲ４タン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ４ポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＣＸＣＲ４タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ６１０７
３）又は野生型ＣＸＣＲ４タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＸＣＲ４ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＸＣＲ４タンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＣＸＣＲ４ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＣＸＣＲ４タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３１９～
３５２は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＸＣＲ４ポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＣＸＣＲ４タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＣＸＣＲ４タンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７９～１８８は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＣＸＣＲ４ポリペプチドは、配列番号３１
に記載のヒト野生型ＣＸＣＲ４タンパク質配列のアミノ酸残基２～１７８及び１８９～３
１８を含んでいた。
＜３．３４ ＣＸＣＲ４ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＸＣＲ４ポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ２４２１２９．１、ＡＪ２２４８６９．１、ＮＭ＿００３４６７．２、ＮＭ＿００１
００８５４０．２、ＮＭ＿００１３４８０５６．１、ＮＭ＿００１３４８０６０．１、Ｎ
Ｍ＿００１３４８０５９．１、ＡＦ１４７２０４．２、ＡＹ８２６７７３．１、ＫＵ２４
５６４７．１、ＫＵ２４５６４６．１、Ｙ１４７３９．１、ＡＦ０２５３７５．１、ＡＦ
０５２５７２．１、ＡＦ３４８４９１．１及びＵ８１００３．１に記載の、ヒトＣＸＣＲ
４ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＸＣＲ４遺伝子に対応する）配列を含む。このタ
イプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも
７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８
３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６
、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＣＸＣＲ４ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ４ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｃ
ＸＣＲ４ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＣＸＣＲ４ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＣＸＣＲ４タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．３５ ＣＸＣケモカイン受容体ＣＸＣＲ５（ＣＸＣＲ５）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＸＣＲ５は、炎症プロセスの媒介に関与する。こ
れは、Ｂ細胞及び濾胞性ヘルパーＴ細胞で発現し、Ｂ細胞濾胞の形成に関与する（Ｃｈａ
ｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，２００６）。
現在まで、ＣＣＲ９の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＣＸＣＲ５の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒト
ＣＸＣＲ５のＭｅｔ１～Ｇｌｕ４２）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（
ヒトＣＸＣＲ５のＧｌｙ１１４～Ｌｅｕ１１７）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣ
Ｌ２（ヒトＣＸＣＲ５のＬｙｓ１８９～Ｇｌｕ２１１）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連
結するＥＣＬ３（ヒトＣＸＣＲ５のＡｌａ２８９～Ａｓｎ２９２）からなる。全てのケモ
カイン受容体と同様に、ＣＣＲ９は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフィド
結合を有することが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＸＣＲ５ポリペプチドは、ＣＸＣＲ５タンパク質配列
を含むか、又はＣＸＣＲ５タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ５タンパク質配列は、哺乳動物ＣＸＣＲ５タンパク
質配列に対応する。適当なＣＸＣＲ５配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｍ３ＸＡＳ４）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｑ４Ｗ８）、ウシ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３Ｎ３Ｕ０）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ２
ＲＲ０３）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＲＤＷ５）、モルモット（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０Ｗ６Ｉ１）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３２３０２
）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ａ１Ｓ１）、マウス（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｑ０４６８３）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＫＺＫ８）、
ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＳＡＪ４）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｇ１ＴＮＧ１）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３４９９７）、ヒツジ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＰＷ１）を含む群から選択される哺乳動物からのものであ
り得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＸＣＲ５タンパク質配列は、ヒトＣＸＣＲ５タン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ５ポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＣＸＣＲ５タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３２３０
２）又は野生型ＣＸＣＲ５タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＸＣＲ５ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＸＣＲ５タンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＣＸＣＲ５ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＣＸＣＲ５タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３３９～
３７２は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＸＣＲ５ポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＣＸＣＲ５タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＣＸＣＲ５タンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１９３～２０８は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＣＸＣＲ５ポリペプチドは、配列番号３２
に記載のヒト野生型ＣＸＣＲ５タンパク質配列のアミノ酸残基２～１９２及び２０９～３
３８を含んでいた。
＜３．３６ ＣＸＣＲ５ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＸＣＲ５ポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１７１６．４、ＮＭ＿０３２９６６．２及びＢＣ１１０３５２．１に記載の、
ヒトＣＸＣＲ５ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＸＣＲ５遺伝子に対応する）配列を
含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つ
と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８
１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４
、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＣＸＣＲ５ヌクレオチド配
列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ５ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｃ
ＸＣＲ５ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＣＸＣＲ５ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＣＸＣＲ５タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．３７ ＣＸＣケモカイン受容体ＣＸＣＲ６（ＣＸＣＲ６）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＸＣＲ６は、炎症プロセスの媒介に関与する。こ
れは、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞及び記憶ＣＤ４＋Ｔ細胞に見られ、炎症性
肝疾患及びアテローム性動脈硬化症に関連付けられる（Ｃｈａｒｏ＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ
，２００６）。
現在まで、ＣＸＣＲ６の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機
能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロー
チを通じて推測しなければならない。ＣＸＣＲ６の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒ
トＣＸＣＲ６のＭｅｔ１～Ａｓｐ２５）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１
（ヒトＣＸＣＲ６のＧｌｕ９４～Ｐｈｅ９７）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ
２（ヒトＣＸＣＲ６のＡｓｎ１７１～Ｇｌｕ１８５）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結
するＥＣＬ３（ヒトＣＸＣＲ６のＴｒｐ２５８～Ａｌａ２６２）からなる。全てのケモカ
イン受容体と同様に、ＣＸＣＲ６は、その外部ドメインに２つの保存されたジスルフィド
結合を有することが予想される（Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＸＣＲ６ポリペプチドは、ＣＸＣＲ６タンパク質配列
を含むか、又はＣＸＣＲ６タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６タンパク質配列は、哺乳動物ＣＸＣＲ６タンパク
質配列に対応する。適当なＣＸＣＲ６配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｏ００５７４）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＴＶ１６）、マウ
ス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＥＱ１６）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ａ７ＩＳＤ５）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６ＹＴ４４）、ウシ（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｑ５ＥＡ９４）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＰＭＵ３）、
タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３Ｗ５Ｚ９）、マーモセット（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＤＴＲ０）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３Ｗ６Ｋ１
）、コウモリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｐ８Ｃ６）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｇ１ＳＬＪ０）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０Ｗ８２３）、
ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＸＱ８８）を含む群から選択される哺乳動物から
のものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＸＣＲ６タンパク質配列は、ヒトＣＸＣＲ６タン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６ポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＣＸＣＲ６タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ００５７
４）又は野生型ＣＸＣＲ６タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＸＣＲ６ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＸＣＲ６タンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＣＸＣＲ６ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＣＸＣＲ６タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３１８～
３４２は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＸＣＲ６ポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＣＸＣＲ６タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＣＸＣＲ６タンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７２～１８０は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＣＸＣＲ６ポリペプチドは、配列番号３３
に記載のヒト野生型ＣＸＣＲ６タンパク質配列のアミノ酸残基２～１７１及び１８１～３
１７を含んでいた。
＜３．３８ ＣＸＣＲ６ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＸＣＲ６ポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００６５６４．１、ＸＭ＿００５２６４８０９．２、ＸＭ＿０１１５３３２９１．
２、ＸＭ＿０１１５３３２９０．２、ＥＵ０７６９７４．１、ＥＦ０６４７４１．１、Ａ
Ｋ３１３７５４．１に記載の、ヒトＣＸＣＲ６ヌクレオチドに対応する（すなわちＣＸＣ
Ｒ６遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは
、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６
、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、
９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有
するＣＸＣＲ６ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｃ
ＸＣＲ６ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＣＸＣＲ６ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＣＸＣＲ６タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．３９ ＣＸＣケモカイン受容体ＣＸＣＲ７（非定型ケモカイン受容体３；ＡＣＫＲ
３としても知られる）ポリペプチド＞
全てのケモカイン受容体と同様に、ＣＸＣＲ７は、炎症プロセスの媒介に関与する。こ
れは、網状赤血球、毛細血管細静脈、腎臓及び肺の上皮細胞並びに小脳ニューロンに見ら
れる。ＣＸＣＲ７は、様々な自己免疫疾患、移植合併症、ＨＩＶ感染、子癇前症及び悪性
腫瘍に関連付けられている（Ｈｏｒｎｅ＆Ｗｏｏｌｌｅｙ、２００９）。
現在まで、ＣＸＣＲ７の結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機
能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロー
チを通じて推測しなければならない。ＣＸＣＲ７の細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒ
トＣＸＣＲ７のＭｅｔ１～Ｓｅｒ４１）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１
（ヒトＣＸＣＲ７のＨｉｓ１０７～Ｍｅｔ１１２）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥ
ＣＬ２（ヒトＣＸＣＲ７のＬｙｓ１８４～Ｇｌｕ２０７）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに
連結するＥＣＬ３（ヒトＣＸＣＲ７のＴｙｒ２８２～Ｐｈｅ２８５）からなる。細胞外ア
ミノ末端ドメインは、残基１６、２７及び３３に３つの潜在的なＮグリコシル化部位を保
有する（Ｃｚｅｒｗｉｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，２００７）。
本発明の特定の実施形態では、ＣＸＣＲ７ポリペプチドは、ＣＸＣＲ７タンパク質配列
を含むか、又はＣＸＣＲ７タンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ７タンパク質配列は、哺乳動物ＣＸＣＲ７タンパク
質配列に対応する。適当なＣＸＣＲ７配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｐ２５１０６）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ８９０３９）、マウス（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５６４８５）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１１６
１３）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ４ＩＦ７７）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｆ７ＧＴＬ４）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＨＺＸ１）
、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＪＰ１）、ミンク（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｕ６ＤＥ１９）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＣＸＣＲ７タンパク質配列は、ヒトＣＸＣＲ７タン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ７ポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＣＸＣＲ７タンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５１０
６）又は野生型ＣＸＣＲ７タンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＣＸＣＲ７ポリペプチドは、哺乳動物野生型ＣＸＣＲ７タンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＣＸＣＲ７ポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＣＸＣＲ７タンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３３９～
３６２は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＣＸＣＲ７ポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＣＸＣＲ７タンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＣＸＣＲ７タンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８７～２０４は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＣＸＣＲ７ポリペプチドは、配列番号３４
に記載のヒト野生型ＣＸＣＲ７タンパク質配列のアミノ酸残基２～１８６及び２０５～３
３８を含んでいた。
＜３．４０ ＣＸＣＲ７ポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＣＸＣＲ７ポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０２０３１１．２、ＸＭ＿０１７００４５１６．１、ＸＭ＿００５２４６０９８．
３、ＸＭ＿００５２４６０９７．２、ＢＣ０３６６６１．２に記載の、ヒトＣＸＣＲ７ヌ
クレオチドに対応する（すなわちＡＣＫＲ３遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプ
の代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０
、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、
８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９
７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＣＸＣＲ７ヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ７ポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｃ
ＸＣＲ７ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＣＸＣＲ７ポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＣＸＣＲ７タンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．４１ ドーパミンＤ１受容体（Ｄ１Ｒ）ポリペプチド＞
中枢神経系（ＣＮＳ）において、Ｄ１Ｒは、自発運動の刺激、報酬及び強化メカニズム
への関与並びに学習、記憶及び他の認知機能における役割を含む、多数の機能を有する。
ＣＮＳ以外では、Ｄ１Ｒは、レニン分泌及び腎機能の維持を調節する（Ｂｅａｕｌｉｅｕ
＆Ｇａｉｎｅｔｄｉｎｏｖ，２０１１）。
現在まで、Ｄ１Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能及
びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチを
通じて推測しなければならない。Ｄ１Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＤ１Ｒ
のＭｅｔ１～Ｌｅｕ１４）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＤ１Ｒ
のＡｌａ８７～Ｐｈｅ９２）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＤ１Ｒの
Ｔｒｐ１６３～Ｌｅｕ１９０）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＤ
１ＲのＧｌｙ２９９～Ｐｒｏ３０５）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｄ１Ｒポリペプチドは、Ｄ１Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＤ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｄ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｄ１Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＤ１Ｒ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＶＶ
Ｄ１）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＳ１８）、ウシ（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｑ９５１３６）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＰＩ２１）、
ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＲＸＥ８）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｈ０ＶＥＳ０）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２１７２８）、マウス（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６１６１６）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１
ＬＫ０７）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５０１３０）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＭＬ２）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１８９０１）、
ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＰＫ６）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＤＤ８）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｄ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＤ１Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｄ１Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｄ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２１７２８）又は野生型Ｄ
１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｄ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｄ１Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｄ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｄ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３４８～４４６は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｄ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｄ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｄ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１６６～１８６は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＤ１Ｒポリペプチドは、配列番号３５に記載のヒト野生型Ｄ１Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１６５及び１８７～３４７を含んでいた。
＜３．４２ Ｄ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｄ１Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＣＲ５４１９２２．１、ＥＵ２４９２９７．１、ＫＲ７１２１３３．１、ＫＲ７１２１３
２．１、ＫＲ７１２１３１．１、ＫＲ７１２１３０．１、ＫＪ８９６７２６．１、ＮＭ＿
０００７９４．３及びＮＧ＿０１１８０２．１に記載の、ヒトＤ１Ｒヌクレオチドに対応
する（すなわちＤＲＤ１遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、
ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３
、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、
８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％
の配列同一性を共有するＤ１Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｄ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｄ１Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｄ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｄ
１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．４３ エンドセリン受容体Ａ型（ＥＴＡＲ）ポリペプチド＞
ＥＴＡＲは、血管収縮、心血管リモデリング、細胞増殖、細胞分化、細胞外マトリック
ス産生並びに水及びナトリウム分泌の制御を含む、多くの機能を媒介する。これは、肺高
血圧、アテローム性動脈硬化、糖尿病及び心筋虚血後の心臓リモデリングなどの様々な疾
患の発症にも関係付けられる（Ｈｏｒｉｎｏｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。
現在まで、ＥＴＡＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＥＴＡＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＥ
ＴＡＲのＭｅｔ１～Ｃｙｓ６９）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＥＴＡＲのＧｌｙ１４４～Ｐｈｅ１４８）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（
ヒトＥＴＡＲのＶａｌ２２５～Ｓｅｒ２４５）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥ
ＣＬ３（ヒトＥＴＡＲのＡｓｎ３３４～Ａｓｎ３３９）からなる。
本発明の特定の実施形態では、ＥＴＡＲポリペプチドは、ＥＴＡＲタンパク質配列を含
むか、又はＥＴＡＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＥＴＡＲタンパク質配列は、哺乳動物ＥＴＡＲタンパク質配
列に対応する。適当なＥＴＡＲ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３ＷＭＪ５）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＱ９４）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２１４５０）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５ＫＳＵ
９）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＣＨＦ１）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ２５１０１）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＹＮ６８）、マ
ウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６１６１４）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｇ１Ｌ５Ｆ１）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２９０１０）、ウサギ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ５Ａ８Ｋ３）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２６６８
４）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９５Ｌ５５）、タスマニアデビル（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＸＫ８）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり
得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＥＴＡＲタンパク質配列は、ヒトＥＴＡＲタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＥＴＡＲポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＥＴＡＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５１０１）又は
野生型ＥＴＡＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＥＴＡＲポリペプチドは、哺乳動物野生型ＥＴＡＲタンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＥＴＡＲポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＥＴＡＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３８７～４２７は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＥＴＡＲポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＥＴＡＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＥＴＡＲタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基２２８～２４２は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＥＴＡＲポリペプチドは、配列番号３６に記載のヒト野生
型ＥＴＡＲタンパク質配列のアミノ酸残基２～２２７及び２４３～３８６を含んでいた。
＜３．４４ ＥＴＡＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＥＴＡＲポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１９５７．３、ＮＧ＿０１３３４３．１、ＮＲ＿０４５９５８．１、ＮＭ＿０
０１２５６２８３．１、ＮＭ＿００１１６６０５５．１、ＡＹ２７５４６２．１、Ｌ０６
６２２．１及びＡＹ４２２９８９．１に記載の、ヒトＥＴＡＲヌクレオチドに対応する（
すなわちＥＤＮＲＡ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリ
ヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７
４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７
、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配
列同一性を共有するＥＴＡＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＥＴＡＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＥＴ
ＡＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＥＴＡＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＥＴＡＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．４５ エンドセリン受容体Ｂ型（ＥＴＢＲ）ポリペプチド＞
ＥＴＢＲは、一酸化窒素及びプロスタサイクリンの内皮産生を通して血管拡張を媒介す
ると考えられている。さらに、内在性リガンドのレベルを枯渇させることにより、ＥＴＡ
Ｒの多くの病理学的作用を減弱させると考えられている（Ｈｏｒｉｎｏｕｃｈｉ ｅｔ
ａｌ．，２０１３）。
ＥＴＢＲの結晶構造が最近解明され、そのリガンド結合モード及び活性化プロセスに対
する見識を提供している（Ｓｈｉｈｏｙａ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。ＥＴＢＲの細胞
外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＥＴＢＲのＭｅｔ１～Ｃｙｓ９０）、ヘリックスＩＩ
及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＥＴＢＲのＧｌｕ１６５～Ｐｈｅ１６９）、ヘリッ
クスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＥＴＢＲのＡｓｐ２４１～Ｔｈｒ２６３）及び
ヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＥＴＢＲのＡｓｎ３５１～Ａｓｎ３５
６）からなる。ＥＴＢＲは、その外部ドメインに２つのジスルフィド結合を含有する（Ｓ
ｈｉｈｏｙａ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、ＥＴＢＲポリペプチドは、ＥＴＢＲタンパク質配列を含
むか、又はＥＴＢＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＥＴＢＲタンパク質配列は、哺乳動物ＥＴＢＲタンパク質配
列に対応する。適当なＥＴＢＲ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３ＷＲＰ２）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｋ７ＤＥＡ２）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２８０８８）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５６４９
７）、キツネ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｉ６ＵＧ９７）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｇ３ＲＥＳ６）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ６２７０９）、ヒト（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２４５３０）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４
８３０２）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＬＧＣ８）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｐ３５４６３）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｎ０Ｗ７）、
ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２１４５１）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｗ５ＮＰＰ６）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＥＴＢＲタンパク質配列は、ヒトＥＴＢＲタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＥＴＢＲポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＥＴＢＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２４５３０）又は
野生型ＥＴＢＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＥＴＢＲポリペプチドは、哺乳動物野生型ＥＴＢＲタンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＥＴＢＲポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＥＴＢＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基４０４～４４２は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＥＴＢＲポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＥＴＢＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＥＴＢＲタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基２４５～２６０は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＥＴＢＲポリペプチドは、配列番号３７に記載のヒト野生
型ＥＴＢＲタンパク質配列のアミノ酸残基２～２４４及び２６１～４０３を含んでいた。
＜３．４６ ＥＴＢＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＥＴＢＲポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ２７５４６３．１、ＮＭ＿０００１１５．４、ＮＭ＿００１１２２６５９．２、ＮＭ
＿００３９９１．３、ＮＭ＿００１２０１３９７．１、Ｌ０６６２３．１、ＮＧ＿０１１
６３０．２、ＡＹ５４７３１２．１、ＡＹ２７５４６３．１、ＡＢ２０９１９８．１及び
ＢＣ０１４４７２．１に記載の、ヒトＥＴＢＲヌクレオチドに対応する（すなわちＥＤＮ
ＲＢ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは
、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６
、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、
９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有
するＥＴＢＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＥＴＢＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＥＴ
ＢＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＥＴＢＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＥＴＢＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．４７ ヒスタミンＨ３受容体（Ｈ３Ｒ）ポリペプチド＞
Ｈ３Ｒは、セロトニン作動性、ノルアドレナリン作動性、コリン作動性及びドーパミン
作動性の神経伝達物質放出を調節し、自発運動、哺乳動物の冬眠及び胃酸分泌に関与する
。これは、免疫応答及び多発性硬化症においても役割を有し得る（Ｐａｎｕｌａ ｅｔ
ａｌ．，２０１５）。
現在まで、Ｈ３Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能及
びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチを
通じて推測しなければならない。Ｈ３Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＨ３Ｒ
のＭｅｔ１～Ｓｅｒ３０）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＨ３Ｒ
のＧｌｙ９８～Ｐｈｅ１０２）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＨ３Ｒ
のＴｒｐ１７４～Ｔｙｒ１９４）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒト
Ｈ３ＲのＨｉｓ３８５～Ｖａｌ３８９）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｈ３Ｒポリペプチドは、Ｈ３Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＨ３Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｈ３Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｈ３Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＨ３Ｒ配列は、適切には、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｈ２Ｒ２Ｎ９）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＭＬ８）、イヌ（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＰＳＪ０）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＳＪＮ４）
、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＪＩ３５）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｆ６ＵＭＹ９）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｙ５Ｎ１）、マーモセ
ット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｕ３ＥＰＴ７）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｐ５８４０６）、オランウータン（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｐ２Ｉ０）、カモ
ノハシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＶＡ７２）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｑ９ＱＹＮ８）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＹ０９）、タスマニア
デビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＷＱＶ４）を含む群から選択される哺乳動物か
らのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｈ３Ｒタンパク質配列は、ヒトＨ３Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｈ３Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｈ３Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｙ５Ｎ１）又は野生型Ｈ
３Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｈ３Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｈ３Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｈ３Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｈ３Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基４２９～４４５は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｈ３Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｈ３Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｈ３Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１７７～１９２は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＨ３Ｒポリペプチドは、配列番号３８に記載のヒト野生型Ｈ３Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１７６及び１９３～４２８を含んでいた。
＜３．４８ Ｈ３Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｈ３Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００７２３２．２、ＡＦ３４６９０４．１、ＡＦ３４６９０３．１、ＡＦ３２１９
１３．１、ＡＦ３２１９１２．１、ＡＦ３２１９１１．１、ＡＦ３２１９１０．１、ＡＦ
３６３７９１．１、ＢＣ０９６８４０．１、ＡＪ２９６６５２．１及びＡＪ２７８２５０
．１に記載の、ヒトＨ３Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＨＲＨ３遺伝子に対応する
）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいず
れか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、
８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９
３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＨ３Ｒヌクレオチ
ド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｈ３Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｈ３Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｈ３Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｈ
３Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．４９ ムスカリンＭ１受容体（Ｍ１Ｒ）ポリペプチド＞
Ｍ１Ｒは、学習、記憶及び認知において重要な役割を果たす。これは、アルツハイマー
病、統合失調症及び薬物嗜癖など、様々なＣＮＳ障害の有望な標的と見られる（Ｔｈａｌ
ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
Ｍ１Ｒの結晶構造が最近解明され、そのリガンド結合モード及び活性化プロセスに対す
る見識を提供している（Ｔｈａｌ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。Ｍ１Ｒの細胞外部分は、
Ｎ末端セグメント（ヒトＭ１ＲのＭｅｔ１～Ｇｌｙ２１）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを
連結するＥＣＬ１（ヒトＭ１ＲのＧｌｙ８９～Ｌｅｕ９３）、ヘリックスＩＶ及びＶを連
結するＥＣＬ２（ヒトＭ１ＲのＧｌｕ１７０～Ｓｅｒ１８４）及びヘリックスＶＩをＶＩ
Ｉに連結するＥＣＬ３（ヒトＭ１ＲのＬｙｓ３９２～Ｖａｌ３９５）からなる。これは、
外部ドメインにジスルフィド架橋を含有する（Ｔｈａｌ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
本発明の特定の実施形態では、Ｍ１Ｒポリペプチドは、Ｍ１Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＭ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｍ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｍ１Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＭ１Ｒ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＶＵ
Ｋ２）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｑ３Ｘ５）、ウシ（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｆ１Ｎ５Ｃ５）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＰＴ２３）、
ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＲＪＰ５）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｈ０Ｗ４Ｒ２）、ハリネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ３ＷＦＭ
０）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＳＬＧ５）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ１１２２９）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＩＰＹ９）、マ
ウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１２６５７）ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
０４７６１）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＲ５５）、ラット（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ０８４８２）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得
る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｍ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＭ１Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｍ１Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｍ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１１２２９）又は野生型Ｍ
１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｍ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｍ１Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｍ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｍ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基４３５～４６０は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｍ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｍ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｍ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１７１～１８２は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＭ１Ｒポリペプチドは、配列番号３９に記載のヒト野生型Ｍ１Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１７０及び１８３～４３４を含んでいた。
＜３．５０ Ｍ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｍ１Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００７３８．２、ＢＣ００７７４０．２、ＢＣ０２２９８４．１、ＢＴ００７１
６６．１及びＡＦ３８５５８７．１に記載の、ヒトＭ１Ｒヌクレオチドに対応する（すな
わちＣＨＲＭ１遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌク
レオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性を共有するＭ１Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｍ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｍ１Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｍ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｍ
１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．５１ ムスカリンＭ２受容体（Ｍ２Ｒ）ポリペプチド＞
Ｍ２Ｒは、心機能の調節において重要な役割を果たし、認知及び疼痛知覚を含む、多く
のＣＮＳプロセスにも関与する（Ｋｒｕｓｅ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。
現在まで、Ｍ２Ｒの２つの結晶構造が公開されており（Ｈａｇａ ｅｔ ａｌ．，２０
１２；Ｋｒｕｓｅ ｅｔ ａｌ．，２０１３）、受容体のリガンド結合及び活性化メカニ
ズムに対する見識を提供している。Ｍ２Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＭ２
ＲのＭｅｔ１～Ｔｙｒ１８）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＭ２
ＲのＧｌｙ８７～Ｌｅｕ９１）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＭ２Ｒ
のＶａｌ１６８～Ｓｅｒ１８２）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒト
Ｍ２ＲのＡｌａ４１４～Ｉｌｅ４１７）からなる。これは、外部ドメインに２つのジスル
フィド架橋を含有する（Ｈａｇａ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。
本発明の特定の実施形態では、Ｍ２Ｒポリペプチドは、Ｍ２Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＭ２Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｍ２Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｍ２Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＭ２Ｒ配列は、適切には、コウモリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１
ＰＷＺ４）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＷＳＧ４）、チンパンジー（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＲＡＰ９）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４１９８５
）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＰＷＲ７）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｇ３ＱＫＢ８）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ０８１７２）、マーモセッ
ト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＡＰＥ０）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｑ９ＥＲＺ４）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ０６１９９）、ウサギ（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＴＢＸ１）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１０９８０
）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＮＳＷ２）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＸ７５）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得
る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｍ２Ｒタンパク質配列は、ヒトＭ２Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｍ２Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｍ２Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ０８１７２）又は野生型Ｍ
２Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｍ２Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｍ２Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｍ２Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｍ２Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基４５７～４６６は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｍ２Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｍ２Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｍ２Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１７２～１７７は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＭ２Ｒポリペプチドは、配列番号４０に記載のヒト野生型Ｍ２Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１７１及び１７８～４５６を含んでいた。
＜３．５２ Ｍ２Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｍ２Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＦ４９８９１６．１、ＮＭ＿００１００６６３２．１、ＮＭ＿００１００６６３１．１
、ＮＭ＿００１００６６３０．１、ＮＭ＿００１００６６２９．１、ＮＭ＿００１００６
６２８．１、ＮＭ＿００１００６６２７．１、ＮＭ＿００１００６６２６．１、ＮＭ＿０
００７３９．２、ＮＧ＿０１１８４６．２及びＭ１６４０４．１に記載の、ヒトＭ２Ｒヌ
クレオチドに対応する（すなわちＣＨＲＭ２遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプ
の代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０
、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、
８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９
７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＭ２Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｍ２Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｍ２Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｍ２Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｍ
２Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．５３ ムスカリンＭ３受容体（Ｍ３Ｒ）ポリペプチド＞
Ｍ３Ｒは、ＣＮＳ及び末梢組織の両方に広く分布している。これは、シェーグレン症候
群、２型糖尿病、肥満、消化性潰瘍疾患、過活動膀胱、慢性閉塞性肺疾患、過敏性腸症候
群及び胃腸痙攣を含む、いくつかの疾患の潜在的な治療標的である（Ｗｅｓｓ ｅｔ ａ
ｌ．，２００７）。
現在まで、Ｍ３Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能及
びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチを
通じて推測しなければならない。Ｍ３Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＭ３Ｒ
のＭｅｔ１～Ｔｈｒ６４）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＭ３Ｒ
のＡｓｎ１３２～Ｌｅｕ１３６）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＭ３
ＲのＬｙｓ２１３～Ｓｅｒ２２７）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒ
トＭ３ＲのＡｓｐ５１８～Ｉｌｅ５２１）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｍ３Ｒポリペプチドは、Ｍ３Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＭ３Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｍ３Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｍ３Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＭ３Ｒ配列は、適切には、コウモリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１
Ｑ９Ｚ８）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３Ｘ７Ａ６）、チンパンジー（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｎ２Ａ４）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４１９８４
）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＰＧＺ２）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｑ９Ｎ２Ａ３）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２０３０９）、マーモセッ
ト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｕ３Ｄ４１７）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｑ９ＥＲＺ３）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＭＰ５６）、ブタ（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１１４８３）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｕ３０８
）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ０８４８３）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｗ５Ｑ８Ｒ１）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｍ３Ｒタンパク質配列は、ヒトＭ３Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｍ３Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｍ３Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２０３０９）又は野生型Ｍ
３Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｍ３Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｍ３Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｍ３Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｍ３Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基５６０～５９０は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｍ３Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｍ３Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｍ３Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基２１６～２２１は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＭ３Ｒポリペプチドは、配列番号４１に記載のヒト野生型Ｍ３Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～２１５及び２２２～５５９を含んでいた。
＜３．５４ Ｍ３Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｍ３Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＦ４９８９１７．１、ＮＧ＿０３２０４６．２、ＮＭ＿００１３４７７１６．１、ＮＭ
＿０００７４０．３、ＡＨ０１１６７２．２、ＡＦ３８５５８９．１、Ｕ２９５８９．１
、ＡＢ０４１３９５．１、ＢＣ０９６８４４．１及びＢＣ１２１０２６．２に記載の、ヒ
トＭ３Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＣＨＲＭ３遺伝子に対応する）配列を含む。
このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少な
くとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８
２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５
、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＭ３Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｍ３Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｍ３Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｍ３Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｍ
３Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．５５ ニューロペプチドＹ１受容体（Ｙ１Ｒ）ポリペプチド＞
Ｙ１Ｒは、脳、心臓、腎臓及び胃腸管を含む、様々な組織で発現し、初期の研究では、
血管収縮及び抗不安作用を媒介することが示された（Ｍｉｃｈｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９
９８）。これは、肥満、不安及び抑うつ、アルコール依存、骨代謝、疼痛、がん、心血管
疾患、腸疾患、概日性障害、アルツハイマー病などの様々な疾患に関係付けられている（
Ｂｒｏｔｈｅｒｓ＆Ｗａｈｌｅｓｔｅｄｔ，２０１０）。
現在まで、Ｙ１Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能及
びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチを
通じて推測しなければならない。Ｙ１Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＹ１Ｒ
のＭｅｔ１～Ａ３８）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＹ１ＲのＧ
ｌｕ１０４～Ｐｈｅ１０８）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＹ１Ｒの
Ｖａｌ１７８～Ｓｅｒ２０４）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＹ
１ＲのＨｉｓ２９０～Ａｌａ２９４）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｙ１Ｒポリペプチドは、Ｙ１Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＹ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｙ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｙ１Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＹ１Ｒ配列は、適切には、コウモリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１
Ｐ０４７）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３Ｗ４Ｘ９）、チンパンジー（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＱＤ５）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ１ＲＭＵ８
）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ０２８１３）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｇ３ＱＰ８９）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＷＶＤ０）、ヒト
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５９２９）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｆ７Ｉ８Ａ１）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ０４５７３）、ブタ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ０２８３５）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｂ６ＶＲ
Ｓ４）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２１５５５）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｗ５ＰＷ２５）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｙ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＹ１Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｙ１Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｙ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２５９２９）又は野生型Ｙ
１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｙ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｙ１Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｙ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｙ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３３６～３８４は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｙ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｙ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｙ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１８３～１９５は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＹ１Ｒポリペプチドは、配列番号４２に記載のヒト野生型Ｙ１Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１８２及び１９６～３３５を含んでいた。
＜３．５６ Ｙ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｙ１Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ５４８１６８．１、ＮＭ＿０００９０９．５、ＢＣ０７１７２０．１、ＢＣ０３６６
５７．２及びＡＫ３１２５７８．１に記載の、ヒトＹ１Ｒヌクレオチドに対応する（すな
わちＮＰＹ１Ｒ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌク
レオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性を共有するＹ１Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｙ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｙ１Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｙ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｙ
１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜３．５７ ニューロテンシン１受容体（ＮＴＳ１Ｒ）ポリペプチド＞
ＮＴＳ１Ｒは、ドーパミン神経伝達の調節、低体温、抗侵害受容及びがん細胞の成長促
進など、ニューロテンシンの既知の効果の大半を媒介する。これは、パーキンソン病及び
統合失調症発病にも関係付けられている（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。
現在まで、ＮＴＳ１Ｒの結晶構造が公開されており（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，２０
１２）、受容体のリガンド結合及び活性化メカニズムに対する見識を提供している。ＮＴ
Ｓ１Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＮＴＳ１ＲのＭｅｔ１～Ａｓｐ５９）、
ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＮＴＳ１ＲのＨｉｓ１３１～Ｐｈｅ
１３６）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＮＴＳ１ＲのＧｌｙ２０８～
Ｈｉｓ２２９）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＮＴＳ１ＲのＳｅ
ｒ３３０～Ｔｒｐ３３４）からなる。これは、ヘリックスＥＣＬ２及びＩＩＩを連結する
ジスルフィド結合を有する（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。
本発明の特定の実施形態では、ＮＴＳ１Ｒポリペプチドは、ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列
を含むか、又はＮＴＳ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物ＮＴＳ１Ｒタンパク
質配列に対応する。適当なＮＴＳ１Ｒ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｍ３Ｘ９Ｊ３）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＫＲ３）、ウシ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＷＧ２）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ２
ＲＮ６３）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＲＬＦ９）、モルモット（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０Ｗ４Ｐ３）、ハリネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ
１Ｓ２ＺＪＴ３）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＢＳＲ０）、ヒト（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０９８９）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｕ３Ｄ
２Ｇ１）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ８８３１９）、ラット（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｐ２０７８９）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＰＳＭ７）、
タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＥ６９）を含む群から選択される
哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＮＴＳ１Ｒタン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＮＴＳ１Ｒポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０９８
９）又は野生型ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＮＴＳ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型ＮＴＳ１Ｒタンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＮＴＳ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３８０～
４１８は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＮＴＳ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基２１３～２２３は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＮＴＳ１Ｒポリペプチドは、配列番号４３
に記載のヒト野生型ＮＴＳ１Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～２１２及び２２４～３
７９を含んでいた。
＜３．５８ ＮＴＳ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＮＴＳ１Ｒポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ４２９１０６．１及びＮＭ＿００２５３１．２に記載の、ヒトＮＴＳ１Ｒヌクレオチ
ドに対応する（すなわちＮＴＳ１Ｒ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的
な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、
７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８
５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８
又は９９％の配列同一性を共有するＮＴＳ１Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＮＴＳ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｎ
ＴＳ１Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＮＴＳ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＮＴＳ１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．５９ オレキシン受容体１（ＯＸ１Ｒ）ポリペプチド＞
ＯＸ１Ｒは、摂食、報酬、侵害受容及びストレスの調節において重要な役割を有する。
ＯＸ１Ｒの拮抗作用は、睡眠障害、肥満、疼痛及び嗜癖の処置において有益であり得ると
考えられている（Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。
現在まで、ＯＸ１Ｒの結晶構造が公開されており（Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１６）
、受容体のリガンド結合及び活性化メカニズムに対する見識を提供している。ＯＸ１Ｒの
細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＯＸ１ＲのＭｅｔ１～Ｔｙｒ４５）、ヘリックス
ＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＯＸ１ＲのＧｌｕ１１０～Ｐｈｅ１１４）、ヘ
リックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＯＸ１ＲのＧｌｕ１８４～Ａｓｐ２０８）
及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＯＸ１ＲのＧｌｙ３２５～Ａｓｐ
３３２）からなる。
本発明の特定の実施形態では、ＯＸ１Ｒポリペプチドは、ＯＸ１Ｒタンパク質配列を含
むか、又はＯＸ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＯＸ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物ＯＸ１Ｒタンパク質配
列に対応する。適当なＯＸ１Ｒ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３ＷＮ１３）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＰＹＪ１）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ０ＧＢＺ５）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ２Ｒ２Ａ
３）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０Ｖ９Ｆ２）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｆ６Ｙ１Ｕ３）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ４３６１３）、マー
モセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ｈ２Ｍ７）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ５８３０７）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＳＶＡ１）、ブタ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ９７６６１）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＰ
Ｊ３）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５６７１８）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｗ５ＮＴＥ０）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＯＸ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＯＸ１Ｒタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＯＸ１Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＯＸ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ４３６１３）又は
野生型ＯＸ１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＯＸ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型ＯＸ１Ｒタンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＯＸ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＯＸ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３７４～４２５は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＯＸ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＯＸ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＯＸ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８９～１９６は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＯＸ１Ｒポリペプチドは、配列番号４４に記載のヒト野生
型ＯＸ１Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１８８及び１９７～３７３を含んでいた。
＜３．６０ ＯＸ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＯＸ１Ｒポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＦ０４１２４３．１、ＮＭ＿００１５２５．２及びＢＣ０７４７９６．２に記載の、ヒ
トＯＸ１Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＨＣＲＴＲ１遺伝子に対応する）配列を含
む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと
少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、
９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＯＸ１Ｒヌクレオチド配列を
含む。
いくつかの実施形態では、ＯＸ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＯＸ
１Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＯＸ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＯＸ１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．６１ オレキシン受容体２（ＯＸ２Ｒ）ポリペプチド＞
ＯＸ１Ｒのように、ＯＸ２Ｒは、睡眠障害、肥満、疼痛及び嗜癖の処置において有益で
あり得ると考えられている。しかし、ＯＸ２Ｒは、オレキシンペプチドの覚醒促進効果を
優勢に媒介するため、ＯＸ１Ｒと異なる生理学的機能を有する（Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，
２０１６）。
現在まで、ＯＸ２Ｒの結晶構造が公開されており（Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１５）
、受容体のリガンド結合及び活性化メカニズムに対する見識を提供している。ＯＸ２Ｒの
細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＯＸ２ＲのＭｅｔ１～Ｇｕ５２）、ヘリックスＩ
Ｉ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＯＸ２ＲのＧｌｕ１１８～Ｐｈｅ１２２）、ヘリ
ックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＯＸ２ＲのＧｌｕ１９２～Ｇｌｙ２１６）及
びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＯＸ２ＲのＧｌｙ３３１～Ａｓｐ３
３８）からなる。
本発明の特定の実施形態では、ＯＸ２Ｒポリペプチドは、ＯＸ２Ｒタンパク質配列を含
むか、又はＯＸ２Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＯＸ２Ｒタンパク質配列は、哺乳動物ＯＸ２Ｒタンパク質配
列に対応する。適当なＯＸ２Ｒ配列は、適切には、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ
３Ｘ９６１）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＱＴ８２）、ウシ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＧ２３）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＴＵＰ
７）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＳＩＩ０）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｆ６ＸＳ１３）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ４３６１４）、マーモセ
ット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ｄ３Ｘ８）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｐ５８３０８）、パンダ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＭＧＦ７）、ブタ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ６２８０９）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＴＱ
８）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ５６７１９）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｗ５Ｐ９Ｄ８）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＯＸ２Ｒタンパク質配列は、ヒトＯＸ２Ｒタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＯＸ２Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＯＸ２Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ４３６１４）又は
野生型ＯＸ２Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＯＸ２Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型ＯＸ２Ｒタンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＯＸ２Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＯＸ２Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３８０～４４４は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＯＸ２Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＯＸ２Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＯＸ２Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１９５～２０４は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＯＸ２Ｒポリペプチドは、配列番号４５に記載のヒト野生
型ＯＸ２Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１９４及び２０５～３７９を含んでいた。
＜３．６２ ＯＸ２Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＯＸ２Ｒポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＦ０４１２４５．２、ＮＭ＿００１５２６．４、ＫＣ８１２５００．１、ＫＣ８１２４
９９．１、ＮＧ＿０１２４４７．２及びＡＦ２８３７６０．１に記載の、ヒトＯＸ２Ｒヌ
クレオチドに対応する（すなわちＨＣＲＴＲ２遺伝子に対応する）配列を含む。このタイ
プの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７
０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３
、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、
９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＯＸ２Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＯＸ２Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＯＸ
２Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＯＸ２Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＯＸ２Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．６３ プロスタグランジンＥ１受容体（ＥＰ１Ｒ）ポリペプチド＞
ＥＰ１Ｒは、ストレス反応（ＡＣＴＨ分泌及びストレス行動）を媒介し、化学発がんを
促進し、炎症性熱性痛覚過敏を媒介する（Ｓｕｇｉｍｏｔｏ＆Ｎａｒｕｍｉｙａ，２００
７）。
現在まで、ＥＰ１Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。ＥＰ１Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＥ
Ｐ１ＲのＭｅｔ１～Ｓｅｒ２７）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
ＥＰ１ＲのＡｌａ１０１～Ａｌａ１０６）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（
ヒトＥＰ１ＲのＶａｌ１７６～Ａｒｇ１９９）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥ
ＣＬ３（ヒトＥＰ１ＲのＴｒｐ３２４～Ｓｅｒ３２８）からなる。
本発明の特定の実施形態では、ＥＰ１Ｒポリペプチドは、ＥＰ１Ｒタンパク質配列を含
むか、又はＥＰ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＥＰ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物ＥＰ１Ｒタンパク質配
列に対応する。適当なＥＰ１Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
３４９９５）、コウモリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＰＢＢ３）、ウシ（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＵＹ４）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＢＧＬ８）
、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ｃ７Ｎ３）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｇ３Ｓ６Ｍ０）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５６４Ｈ５）、マーモセ
ット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＨＴＨ９）、サル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ａ０Ａ０Ｄ９Ｒ１Ｙ９）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３５３７５）、パンダ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｍ４Ｃ２）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
７０５９７）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＰＳ１）を含む群
から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＥＰ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＥＰ１Ｒタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＥＰ１Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型ＥＰ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３４９９５）又は
野生型ＥＰ１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＥＰ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型ＥＰ１Ｒタンパク質配
列のトランケート型を含む。例えば、ＥＰ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有する
ヒト野生型ＥＰ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３７８～４０２は
、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＥＰ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有
する野生型ＥＰ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又は
それに加えて、野生型ＥＰ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が
行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８５～１８９は、切断され得る）。非限定的な例と
して、本発明での使用に適したＥＰ１Ｒポリペプチドは、配列番号４６に記載のヒト野生
型ＥＰ１Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１８４及び１９０～３７７を含んでいた。
＜３．６４ ＥＰ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＥＰ１Ｒポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＡＹ２７５４７０．１、ＮＭ＿０００９５５．２及びＢＣ０２９７６８．１に記載の、ヒ
トＥＰ１Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＰＴＧＥＲ１遺伝子に対応する）配列を含
む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと
少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、
９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＥＰ１Ｒヌクレオチド配列を
含む。
いくつかの実施形態では、ＥＰ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類ＥＰ
１Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、ＥＰ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類ＥＰ１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．６５ セロトニン５－ＨＴ１ａ受容体（５－ＨＴ１ａＲ）ポリペプチド＞
５－ＨＴ１ａＲは、不安、ストレス反応、抑うつ、統合失調症及び嗜癖の媒介に関与す
る。これは、虚血性脳損傷に対する神経保護作用を有するとも考えられている（Ｎｉｃｈ
ｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
現在まで、５－ＨＴ１ａＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造
的機能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプ
ローチを通じて推測しなければならない。５－ＨＴ１ａＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメ
ント（ヒト５－ＨＴ１ａＲのＭｅｔ１～Ｔｈｒ３２）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結
するＥＣＬ１（ヒト５－ＨＴ１ａＲのＡｓｎ１００～Ｌｅｕ１０４）、ヘリックスＩＶ及
びＶを連結するＥＣＬ２（ヒト５－ＨＴ１ａＲのＴｒｐ１７５～Ｌｙｓ１９１）及びヘリ
ックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒト５－ＨＴ１ａＲのＣｙｓ３７１～Ｍｅｔ３
７７）からなる。ヘリックスＩＩＩとＥＣＬ２との間にジスルフィド架橋を形成すると考
えられている（Ｎｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
本発明の特定の実施形態では、５－ＨＴ１ａＲポリペプチドは、５－ＨＴ１ａＲタンパ
ク質配列を含むか、又は５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９
９％の配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列は、哺乳動物５－ＨＴ１ａＲ
タンパク質配列に対応する。適当な５－ＨＴ１ａＲ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｐ０８９０８）、ワニ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１５１ＭＸ
Ｅ８）、ニワトリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｄ２Ｋ８Ｐ９）、チンパンジー（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｎ２９８）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６ＸＸＸ９
）、キツネ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６ＸＸＹ０）、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｑ９８９９８）、ゴリラ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｎ２９７）、ウマ（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ０ＥＡＢ６）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６
４２６４）、オランウータン（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｎ２９６）、ラット（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１９３２７）を含む群から選択される哺乳動物からのもので
あり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列は、ヒト５－ＨＴ１
ａＲタンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、５－ＨＴ１ａＲポリペプチド
は、以下に記載のヒト全長野生型５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ０８９０８）又は野生型５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、５－ＨＴ１ａＲポリペプチドは、哺乳動物野生型５－ＨＴ１ａＲ
タンパク質配列のトランケート型を含む。例えば、５－ＨＴ１ａＲポリペプチド配列は、
Ｃ末端切断を有するヒト野生型５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミ
ノ酸残基４１６～２は、切断され得る）。代わりに又はさらに、５－ＨＴ１ａＲポリペプ
チド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末
端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列
の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８１～１
８７は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適した５－ＨＴ１ａＲ
ポリペプチドは、配列番号４７に記載のヒト野生型５－ＨＴ１ａＲタンパク質配列のアミ
ノ酸残基２～１８０及び１８８～４１５を含んでいた。
＜３．６６ ５－ＨＴ１ａＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、５－ＨＴ１ａＲ
ポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポ
リヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００５２４．３、ＡＦ４９８９７８．１、ＮＧ＿０３２８１６．１、ＡＢ０４１
４０３．１、ＢＣ１３６２６３．１及びＢＣ０６９１５９．１に記載の、ヒト５－ＨＴ１
ａＲヌクレオチドに対応する（すなわちＨＴＲ１Ａ遺伝子に対応する）配列を含む。この
タイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくと
も７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、
８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９
６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有する５－ＨＴ１ａＲヌクレオチド配列を含
む。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ１ａＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳
類５－ＨＴ１ａＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０
％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列
同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつ
かの実施形態では、５－ＨＴ１ａＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシ
ー条件下で野生型哺乳類５－ＨＴ１ａＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハ
イブリダイズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．６７ セロトニン５－ＨＴ２ａ受容体（５－ＨＴ２ａＲ）ポリペプチド＞
ＣＮＳにおいて、５－ＨＴ２ａＲは、幻覚作用の重要部位の１つである。末梢では、５
－ＨＴ２ａＲは、動脈線維芽細胞の増殖、大動脈平滑筋細胞の遊走、動脈血管収縮及び鎮
痛を含む、様々な他の機能を有する（Ｎｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
現在まで、５－ＨＴ２ａＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造
的機能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプ
ローチを通じて推測しなければならない。５－ＨＴ２ａＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメ
ント（ヒト５－ＨＴ２ａＲのＭｅｔ１～Ｇｌｕ７３）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結
するＥＣＬ１（ヒト５－ＨＴ２ａＲのＧｌｙ１３８～Ｌｅｕ１４３）、ヘリックスＩＶ及
びＶを連結するＥＣＬ２（ヒト５－ＨＴ２ａＲのＬｅｕ２１５～Ａｌａ２３０）及びヘリ
ックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒト５－ＨＴ２ａＲのＬｙｓ３５０～Ａｓｎ３
５４）からなる。ヘリックスＩＩＩとＥＣＬ２との間にジスルフィド架橋を形成すると考
えられている（Ｎｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
本発明の特定の実施形態では、５－ＨＴ２ａＲポリペプチドは、５－ＨＴ２ａＲタンパ
ク質配列を含むか、又は５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９
９％の配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列は、哺乳動物５－ＨＴ２ａＲ
タンパク質配列に対応する。適当な５－ＨＴ２ａＲ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｐ２８２２３）、ニワトリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ１ＢＶＩ５
）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ７５Ｚ８９）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｏ４６６３５）、ハムスター（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１８５９９）、ハリネ
ズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ２ＺＬＭ４）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｐ５０１２８）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３５３６３）、オラ
ンウータン（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５Ｒ４Ｑ６）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ５０１２９）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ１４８４２）を含む群か
ら選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列は、ヒト５－ＨＴ２
ａＲタンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ａＲポリペプチド
は、以下に記載のヒト全長野生型５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ２８２２３）又は野生型５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、５－ＨＴ２ａＲポリペプチドは、哺乳動物野生型５－ＨＴ２ａＲ
タンパク質配列のトランケート型を含む。例えば、５－ＨＴ２ａＲポリペプチド配列は、
Ｃ末端切断を有するヒト野生型５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミ
ノ酸残基３９６～４７１は、切断され得る）。代わりに又はさらに、５－ＨＴ２ａＲポリ
ペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列を含み得る。
Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型５－ＨＴ２ａＲタンパク質
配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基２１９
～２２４は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適した５－ＨＴ２
ａＲポリペプチドは、配列番号４８に記載のヒト野生型５－ＨＴ２ａＲタンパク質配列の
アミノ酸残基２～２１８及び２２５～３９７を含んでいた。
＜３．６８ ５－ＨＴ２ａＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、５－ＨＴ２ａＲ
ポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポ
リヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００６２１．４、ＮＭ＿００１１６５９４７．２、ＮＧ＿０１３０１１．１、Ａ
Ｆ４９８９８２．１、ＥＵ７９６４２４．１、ＥＵ７９６４２９．１、ＥＵ７９６４３４
．１、ＫＣ６０３６１３．１、ＢＣ０７４８４９．２、ＢＣ０７４８４８．２、ＢＣ０６
９５７６．１及びＢＣ０６９３５６．１に記載の、ヒト５－ＨＴ２ａＲヌクレオチドに対
応する（すなわちＨＴＲ２Ａ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例で
は、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９
９％の配列同一性を共有する５－ＨＴ２ａＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ａＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳
類５－ＨＴ２ａＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０
％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列
同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつ
かの実施形態では、５－ＨＴ２ａＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシ
ー条件下で野生型哺乳類５－ＨＴ２ａＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハ
イブリダイズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．６９ セロトニン５－ＨＴ２ｂ受容体（５－ＨＴ２ｂＲ）ポリペプチド＞
ＣＮＳにおいて、５－ＨＴ２ｂＲは、聴覚系における役割を有するようであり、薬物乱
用に対する脆弱性と関連付けられる。しかし、これは、発達中に重要な末梢において、よ
り高度に発現され、心臓及び脳の適切な形成を調整する（Ｎｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌ
ｓ，２００８）。
現在まで、２つの研究でＣＸＣＲ４の結晶構造の解明が報告されており、そのリガンド
へどのように結合するかについて見識を提供している（Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，２０１３
；Ｗａｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。５－ＨＴ２ｂＲの細胞外部分は、Ｎ末端セ
グメント（ヒト５－ＨＴ２ｂＲのＭｅｔ１～Ｌｙｓ５３）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを
連結するＥＣＬ１（ヒト５－ＨＴ２ｂＲのＧｌｕ１１８～Ｌｅｕ１２３）、ヘリックスＩ
Ｖ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒト５－ＨＴ２ｂＲのＩｌｅ１９５～Ａｒｇ２１３）及び
ヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒト５－ＨＴ２ｂＲのＡｓｐ３５１～Ａｓ
ｎ３５４）からなる。ヘリックスＩＩＩとＥＣＬ２との間にジスルフィド架橋を形成する
と考えられている（Ｎｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
本発明の特定の実施形態では、５－ＨＴ２ｂＲポリペプチドは、５－ＨＴ２ｂＲタンパ
ク質配列を含むか、又は５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９
９％の配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列は、哺乳動物５－ＨＴ２ｂＲ
タンパク質配列に対応する。適当な５－ＨＴ２ｂＲ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｐ４１５９５）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＷＲＨ８）、
ナマズ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＵＡＨ８）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｈ２ＱＪＬ０）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＱＩ７８）、カエル
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＷＧＪ８）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ａ３ＲＬ３４）、ハリネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ２ＺＨＫ９）、
ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６Ｖ７１４）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ７ＨＱＦ４）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ０２１５２）、ラット（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０９９４）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＱＨ
Ｎ７）、ゼブラフィッシュ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ０ＧＨ７４）を含む群から選
択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列は、ヒト５－ＨＴ２
ｂＲタンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ｂＲポリペプチド
は、以下に記載のヒト全長野生型５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ４１５９５）又は野生型５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、５－ＨＴ２ｂＲポリペプチドは、哺乳動物野生型５－ＨＴ２ｂＲ
タンパク質配列のトランケート型を含む。例えば、５－ＨＴ２ｂＲポリペプチド配列は、
Ｃ末端切断を有するヒト野生型５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミ
ノ酸残基３９６～４８１は、切断され得る）。代わりに又はさらに、５－ＨＴ２ｂＲポリ
ペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列を含み得る。
Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型５－ＨＴ２ｂＲタンパク質
配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基２００
～２０８は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適した５－ＨＴ２
ｂＲポリペプチドは、配列番号４９に記載のヒト野生型５－ＨＴ２ｂＲタンパク質配列の
アミノ酸残基２～１９９及び２０９～３９５を含んでいた。
＜３．７０ ５－ＨＴ２ｂＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、５－ＨＴ２ｂＲ
ポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポ
リヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１３２０７５８．１、ＮＭ＿０００８６７．４、ＥＵ７９６４３９．１、ＥＵ
７９６４４４．１、ＡＹ１１４１０３．１、ＡＨ００７８１９．３、ＡＹ１３６７５１．
１及びＢＣ０６３１２３．１に記載の、ヒト５－ＨＴ２ｂＲヌクレオチドに対応する（す
なわちＨＴＲ２Ｂ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌ
クレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４
、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、
８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列
同一性を共有する５－ＨＴ２ＢＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ｂＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳
類５－ＨＴ２ｂＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０
％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列
同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつ
かの実施形態では、５－ＨＴ２ｂＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシ
ー条件下で野生型哺乳類５－ＨＴ２ｂＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハ
イブリダイズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．７１ セロトニン５－ＨＴ２ｃ受容体（５－ＨＴ２ｃＲ）ポリペプチド＞
５－ＨＴ２ｃＲは中脳辺縁系ドーパミン作動性機能を調節することが示されている。さ
らに、これらは、不安、体重調節及び精神刺激薬乱用の媒介において役割を果たすと考え
られている（Ｎｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
現在まで、５－ＨＴ２ｃＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造
的機能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプ
ローチを通じて推測しなければならない。５－ＨＴ２ｃＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメ
ント（ヒト５－ＨＴ２ｃＲのＭｅｔ１～Ｖａｌ５２）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結
するＥＣＬ１（ヒト５－ＨＴ２ｃＲのＡｓｐ１１７～Ｌｅｕ１２２）、ヘリックスＩＶ及
びＶを連結するＥＣＬ２（ヒト５－ＨＴ２ｃＲのＬｅｕ１９４～Ａｓｎ２１０）及びヘリ
ックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒト５－ＨＴ２ｃＲのＧｌｕ３３８～Ａｓｎ３
４２）からなる。ヘリックスＩＩＩとＥＣＬ２との間にジスルフィド架橋を形成すると考
えられている（Ｎｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
本発明の特定の実施形態では、５－ＨＴ２ｃＲポリペプチドは、５－ＨＴ２ｃＲタンパ
ク質配列を含むか、又は５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９
９％の配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列は、哺乳動物５－ＨＴ２ｃＲ
タンパク質配列に対応する。適当な５－ＨＴ２ｃＲ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｐ２８３３５）、ワニ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１５１Ｎ７
Ｄ９）、ヒヒ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ０９６ＭＰＨ１、ネコ（ＵｎｉＰｒｏ
ｔＫＢ受託番号Ｍ３Ｘ５Ｍ０）、ニワトリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１Ｎ９８９）
、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５ＩＳ６６）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｑ６０Ｆ９７）、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＡＺＳ９）、ハリ
ネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ３ＡＤＣ２）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｆ６ＰＳＵ６）、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２８３３５）、マカク
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ａ５７８）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
３４９６８）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ８ＹＹ０３）、ラット（ＵｎｉＰｒ
ｏｔＫＢ受託番号Ｐ０８９０９）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る
。
いくつかの好ましい実施形態では、５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列は、ヒト５－ＨＴ２
ｃＲタンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ｃＲポリペプチド
は、以下に記載のヒト全長野生型５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｐ２８３３５）又は野生型５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、５－ＨＴ２ｃＲポリペプチドは、哺乳動物野生型５－ＨＴ２ｃＲ
タンパク質配列のトランケート型を含む。例えば、５－ＨＴ２ｃＲポリペプチド配列は、
Ｃ末端切断を有するヒト野生型５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミ
ノ酸残基３８４～４５８は、切断され得る）。代わりに又はさらに、５－ＨＴ２ｃＲポリ
ペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列を含み得る。
Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型５－ＨＴ２ｃＲタンパク質
配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１９８
～２０５は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適した５－ＨＴ２
ｃＲポリペプチドは、配列番号５０に記載のヒト野生型５－ＨＴ２ｃＲタンパク質配列の
アミノ酸残基２～１９７及び２０６～３８３を含んでいた。
＜３．７２ ５－ＨＴ２ｃＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、５－ＨＴ２ｃＲ
ポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポ
リヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１２５６７６０．２、ＮＭ＿０００８６８．３、ＮＭ＿００１２５６７６１．
２、ＮＧ＿０１２０８２．２、ＥＵ７９６４５４．１、ＡＦ４９８９８３．１及びＢＣ０
９５５４３．１に記載の、ヒト５－ＨＴ２ｃＲヌクレオチドに対応する（すなわちＨＴＲ
２Ｃ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは
、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６
、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、
９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有
する５－ＨＴ２ＣＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ２ｃＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳
類５－ＨＴ２ｃＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０
％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列
同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつ
かの実施形態では、５－ＨＴ２ｃＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシ
ー条件下で野生型哺乳類５－ＨＴ２ｃＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハ
イブリダイズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．７３ セロトニン５－ＨＴ４受容体（５－ＨＴ４Ｒ）ポリペプチド＞
ＣＮＳにおいて、５－ＨＴ４Ｒは、学習及び記憶並びに自発運動の媒介に関与すると考
えられている。末梢では、これらは胃腸及び心血管機能において役割を果たす（Ｎｉｃｈ
ｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
現在まで、５－ＨＴ４Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的
機能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロ
ーチを通じて推測しなければならない。５－ＨＴ４Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント
（ヒト５－ＨＴ４ＲのＭｅｔ１～Ｓｅｒ１０）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥ
ＣＬ１（ヒト５－ＨＴ４ＲのＧｌｕ８４～Ｔｙｒ８８）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結す
るＥＣＬ２（ヒト５－ＨＴ４ＲのＴｒｐ１６１～Ｖａｌ１８８）及びヘリックスＶＩをＶ
ＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒト５－ＨＴ４ＲのＧｌｕ２８６～Ｖａｌ２８９）からなる。
ヘリックスＩＩＩとＥＣＬ２との間にジスルフィド架橋を形成すると考えられている（Ｎ
ｉｃｈｏｌｓ＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，２００８）。
本発明の特定の実施形態では、５－ＨＴ４Ｒポリペプチドは、５－ＨＴ４Ｒタンパク質
配列を含むか、又は５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、
７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８
７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の
配列同一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列は、哺乳動物５－ＨＴ４Ｒタン
パク質配列に対応する。適当な５－ＨＴ４Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｑ１３６３９）、ワニ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１５１Ｍ６Ｌ１）
、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５Ｅ９Ｑ５）、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｆ７ＢＩＡ５）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ７０５２８）、ハリネ
ズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ２ＺＡＫ９）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｄ２Ｙ０Ｚ２）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＦＥ４３）、
マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ９７２８８）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ１ＲＬＢ０）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６２７５８）を含む群から選
択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列は、ヒト５－ＨＴ４Ｒ
タンパク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、５－ＨＴ４Ｒポリペプチドは、以
下に記載のヒト全長野生型５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ
１３６３９）又は野生型５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、５－ＨＴ４Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型５－ＨＴ４Ｒタン
パク質配列のトランケート型を含む。例えば、５－ＨＴ４Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端
切断を有するヒト野生型５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基
３２９～３８８は、切断され得る）。代わりに又はさらに、５－ＨＴ４Ｒポリペプチド配
列は、Ｎ末端切断を有する野生型５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ
末端切断の代替として又はそれに加えて、野生型５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列の内部セク
ションを除去するために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１６６～１８３は、切
断され得る）。非限定的な例として、本発明での使用に適した５－ＨＴ４Ｒポリペプチド
は、配列番号５１に記載のヒト野生型５－ＨＴ４Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１
６５及び１８４～３２８を含んでいた。
＜３．７４ ５－ＨＴ４Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、５－ＨＴ４Ｒポ
リペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリ
ヌクレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００８７０．６、ＮＭ＿００１２８６４１０．１、ＮＭ＿００１０４０１７３．
２、ＮＭ＿００１０４０１７２．２、ＮＭ＿００１０４０１６９．２、ＮＭ＿１９９４５
３．３、ＮＲ＿１０４４４５．１、ＮＧ＿０２９０５２．１、ＡＭ７１２９１２．１、Ａ
Ｊ６３３６４５．１、ＡＪ２７８９８２．１、ＡＪ２７８９８１．１、ＡＪ２７８９８０
．１、ＡＪ２７８９７９．１、ＡＢ０７０６２０．２及びＡＢ０７０６２１．１に記載の
、ヒト５－ＨＴ４Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＨＴＲ４遺伝子に対応する）配列
を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１
つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、
８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９
４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有する５－ＨＴ４Ｒヌクレオチ
ド配列を含む。
いくつかの実施形態では、５－ＨＴ４Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類
５－ＨＴ４Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、
７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一
性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの
実施形態では、５－ＨＴ４Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件
下で野生型哺乳類５－ＨＴ４Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダ
イズするヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．７５ ソマトスタチン２受容体（ＳＳＴ２Ｒ）ポリペプチド＞
ＳＳＴ２Ｒは、脳、肺、心臓、胃、腎臓、肝臓及び多くのタイプの免疫細胞を含む、体
全体に広く発現する（Ｄｅ Ｍａｒｔｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。これは、細胞
周期調節、アポトーシス及び転写調節を媒介するとも考えられている（Ｔｈｅｏｄｏｒｏ
ｐｏｕｌｏｕ＆Ｓｔａｌｌａ，２０１３）。
現在まで、ＳＳＴ２Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機
能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロー
チを通じて推測しなければならない。ＳＳＴ２Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒ
トＳＳＴ２ＲのＭｅｔ１～Ｇｌｕ３９）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１
（ヒトＳＳＴ２ＲのＶａｌ１０６～Ｐｈｅ１１０）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥ
ＣＬ２（ヒトＳＳＴ２ＲのＧｌｙ１８２～Ｇｌｕ２００）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに
連結するＥＣＬ３（ヒトＳＳＴ２ＲのＡｌａ２８３～Ｐｒｏ２８６）からなる。ヘリック
スＩＩＩとＥＣＬ２との間にジスルフィド架橋を形成すると考えられている（Ｐａｔｅｌ
，１９９９）。
本発明の特定の実施形態では、ＳＳＴ２Ｒポリペプチドは、ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列
を含むか、又はＳＳＴ２Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列は、哺乳動物ＳＳＴ２Ｒタンパク
質配列に対応する。適当なＳＳＴ２Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｐ３０８７４）、ワニ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１５１Ｎ２６０）、コイ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｂ２Ｄ１Ｔ６）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３
Ｗ２Ｑ８）、ニワトリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５８Ｇ８４）、チンパンジー（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ２ＨＦＨ４）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３４９
９３）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ４９ＬＸ６）、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｆ６Ｔ８８８）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ７ＮＪＤ６）、マウ
ス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０８７５）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
３４９９４）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＸ１３）、ラット（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０６８０）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＮＰＴ８
）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列は、ヒトＳＳＴ２Ｒタン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＳＳＴ２Ｒポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０８７
４）又は野生型ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＳＳＴ２Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型ＳＳＴ２Ｒタンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＳＳＴ２Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３２９～
３６９は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＳＳＴ２Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８３～１９３は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＳＳＴ２Ｒポリペプチドは、配列番号５２
に記載のヒト野生型ＳＳＴ２Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１８２及び１９４～３
２８を含んでいた。
＜３．７６ ＳＳＴ２Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＳＳＴ２Ｒポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１０５０．２、ＮＧ＿０２９３７１．１、Ｌ３４６８９．１、ＡＹ２３６５４
２．１、Ｍ８１８３０．１、ＡＦ１８４１７４．１、Ｌ１３０３３．１、ＢＣ０９５４９
５．１及びＢＣ０１９６１０．１に記載の、ヒトＳＳＴ２Ｒヌクレオチドに対応する（す
なわちＳＳＴＲ２遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌ
クレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４
、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、
８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列
同一性を共有するＳＳＴ２Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＳＳＴ２Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｓ
ＳＴ２Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＳＳＴ２Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＳＳＴ２Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．７７ スフィンゴシン１－リン酸受容体１（Ｓ１Ｐ１Ｒ）ポリペプチド＞
Ｓ１Ｐ１Ｒは、星状細胞の遊走、Ｂ細胞の走化性及び放出阻害、Ｔ細胞の走化性及び放
出阻害、心筋細胞の陽性変力作用の増加、血管系の早期発達並びに神経幹細胞の遊走を含
む、様々な生理学的機能を媒介する（Ｒｏｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００９）。
現在まで、Ｓ１Ｐ１Ｒの結晶構造が公開されており（Ｈａｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，２
０１２）、受容体のリガンド結合及び活性化メカニズムに対する見識を提供している。Ｓ
１Ｐ１Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＳ１Ｐ１ＲのＭｅｔ１～Ｌｙｓ４１）
、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＳ１Ｐ１ＲのＳｅｒ１０５～Ｌｅ
ｕ１１２）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＳ１Ｐ１ＲのＴｒｐ１８２
～Ｔｙｒ１９８）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒトＳ１Ｐ１ＲのＬ
ｙｓ２８３～Ｃｙｓ２８７）からなる。２つのジスルフィド結合は、Ｓ１Ｐ１Ｒの細胞外
側の形成を促進する（Ｈａｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。
本発明の特定の実施形態では、Ｓ１Ｐ１Ｒポリペプチドは、Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列
を含むか、又はＳ１Ｐ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク
質配列に対応する。適当なＳ１Ｐ１Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｐ２１４５３）、ワニ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１５１Ｍ４Ｓ４）、ネコ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３Ｗ６Ｒ４）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｈ２ＰＺＩ１）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ５Ｅ９Ｐ３）、イヌ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｗ５ＶＮＦ７）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０Ｖ
７Ｇ９）、ハリネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ３Ａ３９９）、マカク（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ９ＥＵＷ９）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ７ＨＢＩ１）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ０８５３０）、ウサギ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｔ９Ｒ２）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４８３
０３）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＷＦＦ９）、カメ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｋ７Ｆ１５０）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり
得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＳ１Ｐ１Ｒタン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｓ１Ｐ１Ｒポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２１４５
３）又は野生型Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｓ１Ｐ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、Ｓ１Ｐ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３２８～
３８２は、切断され得る）。代わりに又はさらに、Ｓ１Ｐ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８７～１９３は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＳ１Ｐ１Ｒポリペプチドは、配列番号５３
に記載のヒト野生型Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１８６及び１９４～３
２７を含んでいた。
＜３．７８ Ｓ１Ｐ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｓ１Ｐ１Ｒポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００１３２０７３０．１、ＮＭ＿００１４００．４、ＮＧ＿０１６１８１．１及び
ＢＣ０１８６５０．１に記載の、ヒトＳ１Ｐ１Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＳ１
ＰＲ１遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチド
は、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７
６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９
、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共
有するＳ１Ｐ１Ｒヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｓ１Ｐ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｓ
１Ｐ１Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、Ｓ１Ｐ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類Ｓ１Ｐ１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．７９ スフィンゴシン１－リン酸受容体３（Ｓ１Ｐ３Ｒ）ポリペプチド＞
Ｓ１Ｐ３Ｒは、脳、心臓、脾臓、肝臓、肺、胸腺、腎臓、精巣及び骨格筋に見られる。
これは、虚血再灌流及び樹状細胞の致死／炎症／凝固後の心筋細胞の生存を含む、様々な
生理学的機能を媒介する（Ｒｏｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００９）。
現在まで、Ｓ１Ｐ３Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機
能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロー
チを通じて推測しなければならない。Ｓ１Ｐ３Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒ
トＳ１Ｐ３ＲのＭｅｔ１～Ａｌａ３５）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１
（ヒトＳ１Ｐ３ＲのＳｅｒ９９～Ｌｅｕ１０６）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣ
Ｌ２（ヒトＳ１Ｐ３ＲのＴｒｐ１７６～Ｔｙｒ１９２）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連
結するＥＣＬ３（ヒトＳ１Ｐ３ＲのＡｒｇ２７０～Ｃｙｓ２７４）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｓ１Ｐ３Ｒポリペプチドは、Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列
を含むか、又はＳ１Ｐ３Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク
質配列に対応する。適当なＳ１Ｐ３Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｑ９９５００）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＲＢＬ８）、ウシ
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ６ＱＲ１７）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ２
ＲＦ７４）、モルモット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０ＷＤＨ２）、ハリネズミ（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ３ＡＳＩ７）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｇ７ＮＥＭ６）、マーモセット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７Ｆ４Ｈ４）、マウス
（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９Ｚ０Ｕ９）、オランウータン（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受
託番号Ｋ７ＥＶＱ８）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１Ｔ９Ａ８）、ラット（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１Ｍ９Ｄ３）、サーモン（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ
０Ａ１Ｓ３ＬＵ５２）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＶＰＤ８）
を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列は、ヒトＳ１Ｐ３Ｒタン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｓ１Ｐ３Ｒポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９９５０
０）又は野生型Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｓ１Ｐ３Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、Ｓ１Ｐ３Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３１５～
３７８は、切断され得る）。代わりに又はさらに、Ｓ１Ｐ３Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１８１～１８８は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＳ１Ｐ３Ｒポリペプチドは、配列番号５４
に記載のヒト野生型Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１８０及び１８９～３
１４を含んでいた。
＜３．８０ Ｓ１Ｐ３Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｓ１Ｐ３Ｒポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌ
クレオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００５２２６．３、ＢＣ０６０８２７．１及びＢＣ０６９５７９．１に記載の、ヒ
トＳ１Ｐ３Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＳ１ＰＲ３遺伝子に対応する）配列を含
む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと
少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、
９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＳ１Ｐ３Ｒヌクレオチド配列
を含む。
いくつかの実施形態では、Ｓ１Ｐ３Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｓ
１Ｐ３Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、Ｓ１Ｐ３Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類Ｓ１Ｐ３Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．８１ サイロトロピン放出ホルモン受容体１（ＴＲＨ１Ｒ）ポリペプチド＞
ＴＲＨ１Ｒは、プロラクチン及び甲状腺刺激ホルモンの放出を刺激し（Ｐｅｒｒｅｔ
ｅｔ ａｌ．，１９８８）、ＴＲＨ１Ｒに対するＴＲＨの作用は、甲状腺軸の正常な機能
に不可欠である（Ｈｏｌｌｅｎｂｅｒｇ，２００８）。
現在まで、ＴＲＨ１Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機
能及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプロー
チを通じて推測しなければならない。ＴＲＨ１Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒ
トＴＲＨ１ＲのＭｅｔ１～Ａｌａ２１）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１
（ヒトＴＲＨ１ＲのＴｙｒ８８～Ｔｙｒ９３）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ
２（ヒトＴＲＨ１ＲのＡｓｐ１６５～Ｉｌｅ１８３）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結
するＥＣＬ３（ヒトＴＲＨ１ＲのＳｅｒ２９３～Ｇｌｎ２９７）からなる。
本発明の特定の実施形態では、ＴＲＨ１Ｒポリペプチドは、ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列
を含むか、又はＴＲＨ１Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、
７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８
８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同
一性又は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列は、哺乳動物ＴＲＨ１Ｒタンパク
質配列に対応する。適当なＴＲＨ１Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｐ３４９８１）、ワニ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１５１Ｐ２Ｂ９）、ニワ
トリ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ９３６０３）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号
Ｏ４６６３９）、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６Ｘ１１５）、ハリネズミ（Ｕ
ｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｓ２ＺＴＦ７）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ７ＤＷＭ０）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ２１７６１）、ブタ（Ｕｎｉ
ＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｄ５ＦＵＨ１）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ０１７１
７）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ２８５９６）を含む群から選択される哺乳
動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列は、ヒトＴＲＨ１Ｒタン
パク質配列に対応する。いくつかの実施形態では、ＴＲＨ１Ｒポリペプチドは、以下に記
載のヒト全長野生型ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３４９８
１）又は野生型ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、ＴＲＨ１Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型ＴＲＨ１Ｒタンパク
質配列のトランケート型を含む。例えば、ＴＲＨ１Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を
有するヒト野生型ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３３７～
３９８は、切断され得る）。代わりに又はさらに、ＴＲＨ１Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末
端切断を有する野生型ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代
替として又はそれに加えて、野生型ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去す
るために切断が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１６７～１７５は、切断され得る）。
非限定的な例として、本発明での使用に適したＴＲＨ１Ｒポリペプチドは、配列番号５５
に記載のヒト野生型ＴＲＨ１Ｒタンパク質配列のアミノ酸残基２～１６６及び１７６～３
３６を含んでいた。
＜３．８２ ＴＲＨ１Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、ＴＲＨＲポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００３３０１．５、ＮＧ＿０１７１６１．１、ＡＪ０１１７０１．１、ＢＣ１１３
３６０．１、ＢＣ１０５０４５．１及びＡＹ４９３３７３．１に記載の、ヒトＴＲＨＲヌ
クレオチドに対応する（すなわちＴＲＨＲ遺伝子に対応する）配列を含む。このタイプの
代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと少なくとも７０、
７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８
４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７
、９８又は９９％の配列同一性を共有するＴＲＨＲヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態では、ＴＲＨ１Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｔ
ＲＨ１Ｒポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５
％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を
有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施
形態では、ＴＲＨ１Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野
生型哺乳類ＴＲＨ１Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズする
ヌクレオチド配列又はその断片を含む。
＜３．８３ バソプレシン受容体１Ａ（Ｖ１ＡＲ）ポリペプチド＞
Ｖ１ＡＲは、肝臓、血管平滑筋細胞及び脳を含む、多くの組織で発現する。血管系では
、受容体は、血管収縮を仲介し、脳では不安及び攻撃を引き起こす反応を媒介する（Ｍａ
ｎｎｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００８）。
現在まで、Ｖ１ＡＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。Ｖ１ＡＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＶ
１ＡＲのＭｅｔ１～Ａｓｎ４７）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
Ｖ１ＡＲのＴｈｒ１１４～Ｐｈｅ１１７）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（
ヒトＶ１ＡＲのＳｅｒ１９０～Ｉｌｅ２０８）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥ
ＣＬ３（ヒトＶ１ＡＲのＰｒｏ３１８～Ｔｒｐ３２２）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｖ１ＡＲポリペプチドは、Ｖ１ＡＲタンパク質配列を含
むか、又はＶ１ＡＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｖ１ＡＲタンパク質配列は、哺乳動物Ｖ１ＡＲタンパク質配
列に対応する。適当なＶ１ＡＲ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
３７２８８）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＷＫＫ５）、チンパンジー（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｑ６Ｄ６）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ２ＶＤＳ
９）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｅ２Ｒ８Ｄ３）、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ
受託番号Ｆ７Ｂ８３６）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＱＬＰ１）、マカク（
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＺＸＱ６）、マウス（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ６
２４６３）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ａ０Ａ１Ｄ５ＮＸＳ１）、ウサギ（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＴＬＭ４）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０５
６０）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４８０４３）、カメ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｋ７ＦＳＳ７）、ハタネズミ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＷＴＶ８）を
含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｖ１ＡＲタンパク質配列は、ヒトＶ１ＡＲタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｖ１ＡＲポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型Ｖ１ＡＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３７２８８）又は
野生型Ｖ１ＡＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｖ１ＡＲポリペプチドは、哺乳動物野生型ＴＶ１ＡＲタンパク質
配列のトランケート型を含む。例えば、Ｖ１ＡＲポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有す
るヒト野生型Ｖ１ＡＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３６５～４１８
は、切断され得る）。代わりに又はさらに、Ｖ１ＡＲポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を
有する野生型Ｖ１ＡＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又
はそれに加えて、野生型Ｖ１ＡＲタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断
が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１９２～２０５は、切断され得る）。非限定的な例
として、本発明での使用に適したＶ１ＡＲポリペプチドは、配列番号５６に記載のヒト野
生型Ｖ１ＡＲタンパク質配列のアミノ酸残基２～１９１及び２０６～３６４を含んでいた
。
＜３．８４ Ｖ１ＡＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｖ１ＡＲポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００７０６．４、ＫＪ５３４７８０．１、ＫＪ５３４７７９．１、ＢＣ０７４８
０３．２、ＢＣ０７４８０４．２、ＡＦ２０８５４１．１及びＡＹ３２２５５０．１に記
載の、ヒトＶ１ＡＲヌクレオチドに対応する（すなわちＡＶＰＲ１Ａ遺伝子に対応する）
配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれ
か１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８
０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３
、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＶ１ＡＲヌクレオチ
ド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｖ１ＡＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｖ１
ＡＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、Ｖ１ＡＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類Ｖ１ＡＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．８５ バソプレシン受容体１Ｂ（Ｖ１ＢＲ）ポリペプチド＞
Ｖ１ＢＲは、脳、腎臓及び副腎髄質を含む多くの組織で発現する。下垂体前葉では、こ
れは、副腎皮質刺激ホルモンの放出を刺激し、不安及びストレス反応を媒介すると考えら
れている（Ｍａｎｎｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００８）。
現在まで、Ｖ１ＢＲの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能
及びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチ
を通じて推測しなければならない。Ｖ１ＢＲの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＶ
１ＢＲのＭｅｔ１～Ｇｌｕ３０）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒト
Ｖ１ＢＲのＴｈｒ９７～Ｐｈｅ１００）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒ
トＶ１ＢＲのＳｅｒ１７３～Ｇｌｙ１９１）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣ
Ｌ３（ヒトＶ１ＢＲのＬｙｓ３０８～Ｇｌｕ３１２）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｖ１ＢＲポリペプチドは、Ｖ１ＢＲタンパク質配列を含
むか、又はＶ１ＢＲタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、
７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８
９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又
は類似性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｖ１ＢＲタンパク質配列は、哺乳動物Ｖ１ＢＲタンパク質配
列に対応する。適当なＶ１ＢＲ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ
４７９０１）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３Ｗ６Ｅ７）、ニワトリ（ＵｎｉＰ
ｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＮＶＷ１）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２Ｒ
１Ｑ０）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＭＥ８５）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｆ１Ｐ９Ｄ６）、カエル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＥＨＹ９）、モル
モット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ０Ｖ８Ｍ７）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番
号Ｆ７ＢＮＵ０）、マカク（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ７ＢＡＵ２）、マウス（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ９ＷＵ０２）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ１ＳＦ０
６）、ウサギ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＳＳＶ５）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｐ４８９７４）、タスマニアデビル（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ３ＷＸ９
５）を含む群から選択される哺乳動物からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｖ１ＢＲタンパク質配列は、ヒトＶ１ＢＲタンパク
質配列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｖ１ＢＲポリペプチドは、以下に記載のヒ
ト全長野生型Ｖ１ＢＲタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４７９０１）又は
野生型Ｖ１ＢＲタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｖ１ＢＲポリペプチドは、哺乳動物野生型ＴＶ１ＢＲタンパク質
配列のトランケート型を含む。例えば、Ｖ１ＢＲポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有す
るヒト野生型Ｖ１ＢＲタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３５５～４２４
は、切断され得る）。代わりに又はさらに、Ｖ１ＢＲポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を
有する野生型Ｖ１ＢＲタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又
はそれに加えて、野生型Ｖ１ＢＲタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断
が行われ得る（例えば、アミノ酸残基１７５～１８３は、切断され得る）。非限定的な例
として、本発明での使用に適したＶ１ＢＲポリペプチドは、配列番号５７に記載のヒト野
生型Ｖ１ＢＲタンパク質配列のアミノ酸残基２～１７４及び１８４～３５４を含んでいた
。
＜３．８６ Ｖ１ＢＲポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｖ１ＢＲポリペ
プチドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌク
レオチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿０００７０７．３、ＤＱ１９４８１６．１及びＥＵ４３２１１１．１に記載の、ヒ
トＶ１ＢＲヌクレオチドに対応する（すなわちＡＶＰＲ１Ｂ遺伝子に対応する）配列を含
む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のいずれか１つと
少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、
９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＶ１ＢＲヌクレオチド配列を
含む。
いくつかの実施形態では、Ｖ１ＢＲポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｖ１
ＢＲポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、
８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態
では、Ｖ１ＢＲポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺
乳類Ｖ１ＢＲタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオ
チド配列又はその断片を含む。
＜３．８７ バソプレシン受容体２（Ｖ２Ｒ）ポリペプチド＞
Ｖ２Ｒは、腎臓の集合管に存在する受容体を介して抗利尿を媒介する。さらに、これは
、バソプレシンによって誘導される疼痛反応を媒介するようである（Ｍａｎｎｉｎｇ ｅ
ｔ ａｌ．，２００８）。
現在まで、Ｖ２Ｒの結晶構造は、依然として公開されておらず、受容体の構造的機能及
びリガンド結合機能は、突然変異誘発及び相同性モデリングなどの間接的なアプローチを
通じて推測しなければならない。Ｖ２Ｒの細胞外部分は、Ｎ末端セグメント（ヒトＶ２Ｒ
のＭｅｔ１～Ｇｌｕ３３）、ヘリックスＩＩ及びＩＩＩを連結するＥＣＬ１（ヒトＶ２Ｒ
のＴｈｒ１０２～Ｐｈｅ１０５）、ヘリックスＩＶ及びＶを連結するＥＣＬ２（ヒトＶ２
ＲのＡｌａ１７９～Ａｌａ１９７）及びヘリックスＶＩをＶＩＩに連結するＥＣＬ３（ヒ
トＶ２ＲのＰｒｏ２９８～Ｌｅｕ３０２）からなる。
本発明の特定の実施形態では、Ｖ２Ｒポリペプチドは、Ｖ２Ｒタンパク質配列を含むか
、又はＶ２Ｒタンパク質配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、
７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９
０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似
性を共有する。
いくつかの実施形態では、Ｖ２Ｒタンパク質配列は、哺乳動物Ｖ２Ｒタンパク質配列に
対応する。適当なＶ２Ｒ配列は、適切には、ヒト（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０５
１８）、ネコ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｍ３ＷＦ０７）、ニワトリ（ＵｎｉＰｒｏｔ
ＫＢ受託番号Ｆ１ＮＶ７４）、チンパンジー（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｈ２ＲＣＣ１
）、ウシ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ４８０４４）、イヌ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託
番号Ｏ７７８０８）、ウマ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｆ６ＵＸ０８）、マウス（Ｕｎ
ｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｏ８８７２１）、ブタ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３２３０
７）、ラット（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｑ００７８８）、ヒツジ（ＵｎｉＰｒｏｔＫ
Ｂ受託番号Ｗ５ＮＴＬ０）、シチメンチョウ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｇ１ＮＡＩ７
）、カメ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｋ７ＦＪ４５）を含む群から選択される哺乳動物
からのものであり得る。
いくつかの好ましい実施形態では、Ｖ２Ｒタンパク質配列は、ヒトＶ２Ｒタンパク質配
列に対応する。いくつかの実施形態では、Ｖ２Ｒポリペプチドは、以下に記載のヒト全長
野生型Ｖ２Ｒタンパク質配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ受託番号Ｐ３０５１８）又は野生型Ｖ
２Ｒタンパク質配列の機能的断片を含む。
本発明の一形態では、Ｖ２Ｒポリペプチドは、哺乳動物野生型Ｖ２Ｒタンパク質配列の
トランケート型を含む。例えば、Ｖ２Ｒポリペプチド配列は、Ｃ末端切断を有するヒト野
生型Ｖ２Ｒタンパク質配列を含み得る（例えば、アミノ酸残基３４２～３７１は、切断さ
れ得る）。代わりに又はさらに、Ｖ２Ｒポリペプチド配列は、Ｎ末端切断を有する野生型
Ｖ２Ｒタンパク質配列を含み得る。Ｃ末端又はＮ末端切断の代替として又はそれに加えて
、野生型Ｖ２Ｒタンパク質配列の内部セクションを除去するために切断が行われ得る（例
えば、アミノ酸残基１８７～１９１は、切断され得る）。非限定的な例として、本発明で
の使用に適したＶ２Ｒポリペプチドは、配列番号５８に記載のヒト野生型Ｖ２Ｒタンパク
質配列のアミノ酸残基２～１８６及び１９２～３４１を含んでいた。
＜３．８８ Ｖ２Ｒポリペプチドをコードする構築物及びヌクレオチド配列＞
本発明は、上記及び本明細書の他の箇所に広く記載されているように、Ｖ２Ｒポリペプ
チドをコードする単離ポリヌクレオチド配列及び構築物も包含する。これらのポリヌクレ
オチド配列又は構築物を含む宿主細胞も企図される。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号
ＮＭ＿００００５４．４、ＮＭ＿００１１４６１５１．１、ＮＲ＿０２７４１９．１、Ｕ
０４３５７．１、ＮＧ＿００８６８７．１、ＢＣ１１２１８１．１及びＢＣ１０１４８４
．１に記載の、ヒトＶ２Ｒヌクレオチドに対応する（すなわちＡＶＰＲ２遺伝子に対応す
る）配列を含む。このタイプの代表的な例では、ポリヌクレオチドは、これらの配列のい
ずれか１つと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９
、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、
９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性を共有するＶ２Ｒヌクレオ
チド配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｖ２Ｒポリヌクレオチドコード配列は、野生型哺乳類Ｖ２Ｒ
ポリヌクレオチドと少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０
％、８５％、９０％、９２％、９５％、９９％若しくは１００％の配列同一性を有するポ
リペプチドをコードするヌクレオチド配列又はその断片を含む。いくつかの実施形態では
、Ｖ２Ｒポリヌクレオチドは、低、中又は高ストリンジェンシー条件下で野生型哺乳類Ｖ
２Ｒタンパク質のオープンリーディングフレームにハイブリダイズするヌクレオチド配列
又はその断片を含む。
＜４．特定の共存ＧＰＣＲ及び／又はＲＡＧＥを発現する細胞＞
ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体な
ど、特定の共存ＧＰＣＲ及び／又はＲＡＧＥをコードする核酸分子（好ましくはベクター
を含む構築物の形態）は、宿主細胞、適切には安定な細胞株を含む任意の細胞株に、一時
的又は安定的に形質導入又は同時形質導入することができる。好ましい実施形態では、細
胞株は哺乳動物由来の細胞株である。好ましい細胞株は、ＲＡＧＥ及び特定の共存ＧＰＣ
Ｒが由来するものと同じ生物体に由来するものである。したがって、使用する細胞株は、
それぞれ特定の目的ごとに最適化することができ、例えば、前記細胞で発現されるポリヌ
クレオチドがヒトタンパク質（又はヒトタンパク質に由来するポリペプチド）をコードす
る場合、ヒト細胞に由来する細胞株が最も適している可能性が高い。しかしながら、これ
は、異なる生物体に由来するポリペプチド及び細胞の使用を除外するものではない。一例
は、ラット又はマウス由来のポリペプチドをヒト由来細胞の表面に発現させることである
。別の例は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞などのハムスター由来細胞の表
面にラット又はヒト由来のポリペプチドを発現させることである。
本発明を実施するのに適したヒト由来細胞株の一例は、ＨＥＫ２９３細胞株（例えば、
ＨＥＫ２９３細胞株又はＨＥＫ２９３ＦＴ細胞株）である。適切な細胞株の他の例には、
ＣＯＳ－１細胞株、又はＣＯＳ－７細胞株、又はＣＨＯ細胞株、又はＨｅＬａ細胞株が含
まれるが、これらに限定されない。
したがって、本発明の細胞は、ＲＡＧＥと、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又
はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲとを発現する。
＜５．候補薬剤＞
特定の態様では、本発明は、ＡＴ１Ｒ及びＣＣＲ２を含む特定の共存活性化ＧＰＣＲに
よるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化に起因する細胞におけるシグナル伝達を
調節する薬剤をスクリーニングする方法を提供する。薬剤は、それが特定の共存活性化Ｇ
ＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を調節する（例えば、阻害又は
シグナル伝達する）場合、特定の共存活性化ＧＰＣＲ及びＲＡＧＥの一方又は両方及び／
又はいずれかと複合体を形成したタンパク質に結合できる。代表的な薬剤は、特定の共存
活性化ＧＰＣＲ及びＲＡＧＥの任意のドメイン又はＲＡＧＥと複合体を形成する他のタン
パク質及び／又はＲＡＧＥの細胞外ドメイン以外の特定の共存活性化ＧＰＣＲに結合でき
る。いかなる理論又は作動形態にも拘束されることを望むものではないが、本発明者らは
、特定の共存活性化ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化を媒介す
る部位は、膜の細胞質（サイトゾル）側に存在すると仮定する。そのようなものとして、
いくつかの実施形態では、スクリーニングされる候補薬剤は、細胞透過性である（すなわ
ち原形質膜を介して輸送できる）と決定されるか、細胞透過性となるように修飾される。
一実施形態では、本発明の細胞は、外部ドメイン及び特定の共存活性化ＧＰＣＲを欠くＲ
ＡＧＥポリペプチドを発現する。別の実施形態において、本発明の細胞は、ＲＡＧＥの細
胞質側テール又はその断片及び特定の共存活性化ＧＰＣＲを発現する。別の実施形態では
、本発明の細胞は、特定の共存活性化ＧＰＣＲを発現するが、内因性ＲＡＧＥを発現しな
い。
任意の既知のタイプのスクリーニングアッセイは、特定の共存活性化ＧＰＣＲによるＲ
ＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターであるものとしての候補薬剤
を同定するのに適していることが企図される。一実施形態では、近接スクリーニングアッ
セイが使用される。実行する近接スクリーニングアッセイの一例は、特定の共存活性化Ｇ
ＰＣＲとＲＡＧＥと間の近接性の変化を調査するための生物発光共鳴エネルギー移動（Ｂ
ＲＥＴ）アッセイである。いくつかの実施形態では、可溶性組換えポリペプチドを使用し
、インビトロで実施されるスクリーニングアッセイが想定される。そのようなスクリーニ
ングアッセイの例は、従来のツーハイブリッド、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）又は補完
システムである。別の実施形態では、例えば、特定の共存活性化ＧＰＣＲ及び／又はＲＡ
ＧＥに結合する蛍光標識ペプチド又は他の薬剤を使用する、結合アッセイが利用される。
これは、ＢＲＥＴを利用するために、特定の共存活性化ＧＰＣＲ又はＲＡＧＥにコンジュ
ゲートしたＮａｎｏＬｕｃと共に使用される場合とされない場合があり得る（Ｓｔｏｄｄ
ａｒｔ ｅｔ ａｌ．，２０１５）。特定の共存活性化ＧＰＣＲ又はＲＡＧＥへのＮａｎ
ｏＬｕｃの融合は、特定の共存活性化ＧＰＣＲ又はＲＡＧＥポリペプチド内のＮ末端、Ｃ
末端又は別の適切な部位で発生し得る。
イムノアッセイは、特定の結合を分析するためにも使用でき、ほんの数例を挙げれば、
ウエスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）
、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、沈降反応、ゲル拡散沈降反応、
免疫拡散アッセイ、凝集アッセイ、補体固定アッセイ、免疫放射分析アッセイ、蛍光イム
ノアッセイ、プロテインＡイムノアッセイなどの技術を使用した競合及び非競合アッセイ
システムが含まれるが、これらに限定されない。そのようなアッセイは、日常的なもので
あり、当技術分野で周知である（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる
、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃ
ｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅ
ｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい）。いくつかの実施形態では
、ＲＡＧＥポリペプチドは、ＥＬＩＳＡを使用して、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受
容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の共存ＧＰＣＲへの結合につ
いてアッセイされる。このタイプの例示的な例では、組換えＲＡＧＥポリペプチド又は特
定の組換え共存ＧＰＣＲポリペプチドのいずれかを候補薬剤と共に、その底面が他の結合
パートナー、例えば標的の制限量でコーティングされた、マイクロタイタープレートに接
触させる。プレートを緩衝液で洗浄して、非特異的に結合したポリペプチドと過剰な候補
薬剤とを除去する。次いで、プレート上の標的に結合するＲＡＧＥポリペプチド又は特定
の共存ＧＰＣＲポリペプチドの量は、ＲＡＧＥポリペプチド又は特定の共存ＧＰＣＲポリ
ペプチド、例えば、ポリペプチドの標識又は定常部分を認識することができる抗体でプレ
ートをプローブすることによって決定される。抗体は、検出システム（例えば、適切な基
質が提供された場合に比色産物を生成するアルカリホスファターゼ又はホースラディッシ
ュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）などの酵素）に連結されている。
他の実施形態では、候補薬剤が特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドへのＲＡＧＥポリペプ
チドの結合を調節する能力は、均質アッセイを使用して分析され、すなわちアッセイの全
ての成分が追加された後、追加の流体操作は不要である。例えば、蛍光共鳴エネルギー移
動（ＦＲＥＴ）を均質アッセイとして使用することができる（例えば、米国特許第５，６
３１，１６９号明細書；及び米国特許第４，８６８，１０３号明細書を参照されたい）。
ＲＡＧＥポリペプチドが特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドに近接している場合、共鳴エネ
ルギーが第２の分子（例えば、特定の共存ＧＰＣＲポリペプチド）上の蛍光アクセプター
によって吸収され得るように、第１の分子（例えば、ＲＡＧＥポリペプチド）上のフルオ
ロフォア標識が選択される。特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドの蛍光アクセプターは、移
動されたエネルギーを吸収すると蛍光を発する。標識間のエネルギー移動の効率は分子を
隔てる距離に関連しているため、分子間の空間的な関係を評価できる。ポリペプチドが近
接した状況では、アッセイにおける蛍光アクセプターの蛍光発光が検出可能であるべきで
ある。ＦＲＥＴは、標準的な蛍光検出手段、例えば蛍光計を使用して、便利に測定できる
。
他の実施形態では、ＲＡＧＥポリペプチドと特定の共存ＧＰＣＲポリペプチドとの間の
相互作用は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して分析される。ＳＰＲ又は生体分子
相互作用分析（ＢＩＡ）は、いかなる相互作用物質も標識せずに、リアルタイムで生体特
異的相互作用を検出する。ＢＩＡチップの結合表面での質量の変化（結合イベントを示す
）は、表面近くの光の屈折率が変化をもたらす（表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）の光学現
象）。屈折率の変化は、検出可能なシグナルを生成し、これは、生体分子間のリアルタイ
ム反応の指標として測定される。ＳＰＲを使用するための方法は、例えば、米国特許第５
，６４１，６４０号明細書；Ｒａｅｔｈｅｒ，１９８８；Ｓｊｏｌａｎｄｅｒ ａｎｄ
Ｕｒｂａｎｉｃｚｋｙ（１９９１），Ｓｚａｂｏ ｅｔ ａｌ．（１９９５）及びＢＩＡ
ｃｏｒｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＡＢ（Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）によっ
て提供されるオンラインリソースに記載されている。
候補薬剤のＲＡＧＥポリペプチドとＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体など、特定
の共存活性化ＧＰＣＲ又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体ととの間の相互作用を
調節する能力が特定されると、候補薬剤の毒性及び／又は有効性は、例えばＬＤ５０（集
団の５０％に致命的な用量）及びＥＤ５０（集団の５０％で治療上有効な用量）を決定す
るために、細胞培養又は実験動物における標準的な製薬手順によって決定することができ
る。毒性効果と治療効果との用量比は、治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表
すことができる。大きい治療指数を示す治療が好ましい。有毒な副作用を示す治療法も使
用され得るが、感染していない細胞への潜在的な損傷を最小限に抑え、それにより副作用
を減らすために、影響を受ける組織の部位にそのような薬剤を標的とする送達システムを
設計するように注意すべきである。
細胞培養アッセイ及び動物研究から得られたデータは、ヒトを含む哺乳動物で使用する
ための予防薬及び／又は治療薬の投与量の範囲を処方する際に使用できる。そのような薬
剤の投与量は、適切には、毒性がほとんど又は全くないＥＤ５０を含む血中濃度の範囲内
にある。投与量は、使用される剤形及び利用される投与経路に依存してこの範囲内で変動
し得る。本発明の方法で使用される任意の治療について、治療有効用量は、最初に細胞培
養アッセイから推定することができる。細胞培養で決定されるＩＣ５０（すなわち症状の
最大阻害の半分を達成する試験化合物の濃度）を含む血中血漿濃度範囲を達成するために
、動物モデルで用量を処方し得る。このような情報は、ヒトにおける有用な用量をより正
確に決定するために使用できる。血漿中のレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィ
ーによって測定され得る。
候補薬剤は、多数の化学クラスを包含するが、典型的には、それらは、有機分子であり
、好ましくは分子量が５０ダルトンより大きく約２，５００ダルトンより小さい、小さい
有機化合物である。候補薬剤は、タンパク質との構造的相互作用、特に水素結合に必要な
官能基を含み、典型的には、少なくともアミン、カルボニル、ヒドロキシル又はカルボキ
シル基、望ましくは少なくとも２つの官能化学基を含む。候補薬剤は、多くの場合、上記
の官能基の１つ以上で置換された環状炭素若しくは複素環構造又は芳香族若しくは多芳香
族構造を含む。候補薬剤は、ペプチド、糖類、脂肪酸、ステロイド、プリン、ピリミジン
、誘導体、構造類似体又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない生体分子
中にも見られる。
小（非ペプチド）分子モジュレーターは、特に有利である。この点に関して、小分子は
、経口投与後により容易に吸収されるか、潜在的な抗原決定基がより少ないか、より大き
いタンパク質ベースの医薬品よりも細胞膜を通過する可能性が高いため、望ましい。また
、小さい有機分子は、適切な細胞への侵入を獲得し、遺伝子の発現に影響を与え得るか（
例えば、遺伝子発現に関与する調節領域又は転写因子と相互作用することによる）；又は
アクセサリー分子の結合を阻害又は強化することにより、遺伝子の活性に影響を与え得る
。
代わりに、細菌、真菌、植物及び動物の抽出物の形態での天然化合物のライブラリが入
手可能であるか、容易に生成される。さらに、天然又は合成で産生されたライブラリ及び
化合物は、従来の化学的、物理的及び生化学的手段により容易に変更され、コンビナトリ
アルライブラリーを産生するために使用され得る。既知の薬剤は、アシル化、アルキル化
、エステル化又はアミド化などの指向的又は無作為な化学修飾に供され、構造的類似体を
生成し得る。
スクリーニングは、既知の薬理学的に活性な化合物及びその化学的類似体も対象とし得
る。
動物モデルで化合物をさらに試験して、最も強力なインビボ効果を有する化合物を特定
し得る。これらの分子は、例えば、化合物を逐次修飾、分子モデリング及び合理的な薬物
設計で使用される他の日常的な手順に供することにより、医薬品のさらなる開発のための
「リード化合物」として役立ち得る。
＜５．１ ＲＡＧＥポリペプチドの断片、類似体及び誘導体＞
いくつかの実施形態では、候補薬剤は、ＲＡＧＥの細胞質側テールの断片であり、候補
薬剤は、ＲＡＧＥポリペプチドの断片又は遺伝子送達後に続いて断片が生成されるＲＡＧ
ＥポリペプチドをコードするＤＮＡを含む。適切には、候補薬剤は、ＲＡＧＥポリペプチ
ド配列の細胞質側テールの断片と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６
、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、
９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類
似性を共有するか、又はそれと１、２、３、５又は１０、１５若しくは２０アミノ酸残基
以下が異なる、ペプチドである。上記のように、本発明のいくつかの実施形態では、ＲＡ
ＧＥ断片アミノ酸配列は、野生型ＲＡＧＥポリペプチドの細胞質側テールに対応する（例
えば、野生型ＲＡＧＥタンパク質のアミノ酸残基３６２～４０４（配列番号１又はその断
片）。
いくつかの好ましい例では、断片は、野生型ＲＡＧＥタンパク質のＣ末端細胞質側テー
ルに対応する（すなわち配列番号１に記載のアミノ酸配列のアミノ酸残基３６２～４０４
）。ペプチド類似体は、そのＮ末端又はＣ末端に追加のアミノ酸残基又はその誘導体を含
み得る。同様に、類似体は、野生型ＲＡＧＥタンパク質又はその誘導体のＣ末端細胞質側
テールの任意の８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９
、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、
３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１又は４２アミノ酸断片を含み得
る。
そのようなものとして、ペプチドは、以下のアミノ酸配列：［配列番号１］を含み得る
。
代わりに、類似体は、配列番号１に記載の配列と少なくとも７０、７１、７２、７３、
７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８
７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は９９％の
配列同一性又は類似性を共有し得るか、又はそれと１、２、３、５又は１０アミノ酸残基
以下が異なる。
いくつかの実施形態では、候補薬剤は、活性化剤、阻害剤、アロステリックモジュレー
ター又はＲＡＧＥの膜貫通ドメイン若しくはその一部の非機能的代替物であり、候補薬剤
は、ＲＡＧＥポリペプチドの断片又は遺伝子送達後に続いて断片が生成されるＲＡＧＥポ
リペプチドをコードするＤＮＡを含む。適切には、候補薬剤は、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイ
ン又はその断片を含む、ＲＡＧＥポリペプチド配列の断片と少なくとも７０、７１、７２
、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、
８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８又は
９９％の配列同一性又は類似性を共有するか、又はそれと１、２、３、５又は１０、１５
若しくは２０アミノ酸残基以下が異なるペプチドである。非機能的代替物は、特定の共存
ＧＰＣＲの存在下でＲＡＧＥの膜貫通ドメインに代わる候補物質であり、それらによって
活性化できないか、又は下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を誘導できず、且つＲＡＧＥ
の細胞質側テールの活性化及びそれにより生じるＲＡＧＥ依存シグナル伝達を介して通常
発生するシグナル伝達を阻害する。いくつかの実施形態では、候補薬剤は、ＲＡＧＥの膜
貫通ドメイン又はその一部及びＲＡＧＥの細胞外ドメインの断片を含む。いくつかの実施
形態では、候補薬剤は、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン又はその一部及びＲＡＧＥの細胞質側
テールの断片を含む。いくつかの実施形態では、候補薬剤は、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン
又はその一部並びにＲＡＧＥの細胞外ドメイン及び／又はＲＡＧＥの細胞質側テールの断
片を含む。
いくつかの実施形態では、類似体アミノ酸配列は、少なくとも１つの（例えば、少なく
とも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０）アミノ酸残基の置換、付加又は欠失に
よって野生型ＲＡＧＥポリペプチド配列と区別され、これは、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテ
ンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存
ＧＰＣＲによる細胞質側テールの活性化の調節をもたらす。
いくつかの実施形態では、ペプチド、類似体、断片又はその誘導体は、特定の共存ＧＰ
ＣＲを活性化する認識リガンドから生じるシグナル伝達を適切に阻害する。
したがって、いくつかの実施形態では、ペプチド、類似体、断片又はその誘導体は、特
定の活性化された共存ＧＰＣＲ結合部位が損なわれたＲＡＧＥポリペプチド配列に対応す
る。少なくとも１つのアミノ酸の置換、付加又は欠失は、ＲＡＧＥと、ＡＴ１Ｒなどのア
ンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化さ
れた共存ＧＰＣＲとの間の相互作用において重要な残基に対応する任意の位置に適切に配
置される。このタイプの例では、ペプチド類似体アミノ酸配列は、別のアミノ酸残基によ
る野生型ＲＡＧＥタンパク質の細胞質側テールのアミノ酸残基位置Ｓ３９１（配列番号１
に記載）での置換、付加又は欠失により、野生型ＲＡＧＥポリペプチド配列と区別される
。
いくつかの実施形態では、ペプチド、類似体、断片又はその誘導体は、特定の活性化さ
れた共存ＧＰＣＲがその機能的相互作用を発揮する部位が損なわれたＲＡＧＥポリペプチ
ド配列に対応する。少なくとも１つのアミノ酸の置換付加又は欠失は、ＲＡＧＥと、ＡＴ
１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特
定の活性化された共存ＧＰＣＲとの間の機能的相互作用において重要な残基に対応する任
意の位置に適切に配置される。
アミノ酸位置３９１の残基は、ＡＴ１Ｒ及びＣＣＲ２などの特定の活性化された共存Ｇ
ＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化において重要であると本発明者
らが判定した部位である。適切には、これらの実施形態では、セリン３９１は、ＲＡＧＥ
の細胞質側テールの活性化を阻害するために、除去されているか、又は別のアミノ酸（ア
ラニン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、ヒスチジン、リジン、アルギニン、チロシ
ン、アスパラギン、バリン、グリシン、システイン若しくはグルタミン酸など）で置換さ
れている。他の実施形態では、セリン３９１は、特定の共存ＧＰＣＲの活性化後に活性化
されるように、別のアミノ酸（プロリン、グルタミン、ロイシン、イソロイシンメチオニ
ン、スレオニン又はトリプトファンなど）を保持するか、又はそれで置換され、これによ
り、野生型ＲＡＧＥの発現を必要として又は必要とせずに、ＲＡＧＥ依存性シグナル伝達
を誘導する。理論に拘束されることを望むものではないが、本発明者らは、Ｓ３９１の置
換又は欠失が、この残基（すなわちＲＡＧＥ３７９－３９０）に近接するαヘリカルコイ
ル（例えば、ＲＡＧＥ３７９－３９０）の立体構造及び／又は結合パートナーに対する親
和性に影響すると考えている。
このタイプの他の例では、ペプチド、類似体、断片又はその誘導体は、Ｓ３９１部位に
近接したαヘリックスの立体構造にとって重要な任意のアミノ酸（例えば、アミノ酸位置
Ｓ３９１に直接隣接するアミノ酸）の置換、付加又は欠失によって野生型ＲＡＧＥポリペ
プチド配列と区別される。例えば、野生型ＲＡＧＥタンパク質配列のアミノ酸位置３９０
のグルタミン残基は、極性アミノ酸（例えば、アルギニン又はリジン）で置換された場合
、そのＣ末端でのαヘリックスのキャッピングを強化し得る［例えば、配列番号９及び１
０］。そのような置換により、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２など
の特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガン
ド非依存性のＲＡＧＥ活性化の阻害剤であるペプチドが生じる。
代わりに、ペプチド、類似体、断片又はその誘導体は、配列番号５に記載の配列と少な
くとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８
２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５
、９６、９７、９８又は９９％の配列同一性又は類似性を共有するか、又はそれと１、２
、３、５又は１０アミノ酸残基以下が異なる。上記のペプチド、その類似体、断片又は誘
導体の、Ｃ末端又はＮ末端のいずれか又は両方での任意の切断も企図される。したがって
、配列番号５に記載の配列からの８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、
１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３
０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１又は４２アミ
ノ酸を含む断片は、それらが細胞質側テールの野生型ＲＡＧＥアミノ酸配列の位置Ｓｅｒ
３９１（配列番号１に記載の通り）に対応する置換又は欠失を含む場合、ペプチド、類似
体、断片又はその誘導体として適切である。
いくつかの実施形態において、本発明のＲＡＧＥペプチド模倣物は、天然又は合成タン
パク質形質導入ドメイン又は模倣物にコンジュゲート、融合又は他の方法で連結されるか
、非共有結合担体系（例えば、リポソーム、ＰＥＰ－１）に配置され、これは、ＲＡＧＥ
ペプチドを細胞の細胞内成分に適切に標的化し、当技術分野で周知である。そのような分
子の非限定的な例には、ＨＩＶ－ＴＡＴモチーフ（配列番号４：ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ
、Ｓｃｈｗａｒｚｅ ｅｔ ａｌ．，２０００でレビューされている）を含む、天然の細
胞膜透過性ペプチド並びに例えば米国特許出願番号第２０１４／０２１３７７５号明細書
、同第２０１４／０１４１４５２号明細書及び同第２０１３／０１３６７４２号明細書に
記載のものなどの天然及び／又は合成の細胞膜透過性ペプチドとの融合が含まれ、これら
の文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
＜６．近接スクリーニングアッセイ＞
特定の実施形態では、スクリーニング方法は、ＲＡＧＥポリペプチドのＡＴ１Ｒ特定の
活性化された共存ＧＰＣＲへの近接性の変化を評価することにより、候補薬剤が、ＲＡＧ
ＥポリペプチドとＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体など、特定の活性化された共存
ＧＰＣＲ又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体との間の相互作用を調節できるかど
うかを評価する。このタイプの例示的な例では、ＲＡＧＥポリペプチドは、第１のレポー
ター成分にカップリング（例えば、コンジュゲート、融合、そうでなければ連結）し、特
定の活性化された共存ＧＰＣＲは第２のレポーター成分にカップリング（例えば、コンジ
ュゲート、そうでなければ連結）する。第１及び第２のレポーター成分は、同じであるか
又は異なり得る。例えば、一方のレポーター成分は、近接シグナル又はエネルギー供与体
であり得、他方は、近接シグナル又はエネルギー受容体であり得る。第１及び第２のレポ
ーター成分は、近接近にある場合に検出可能なシグナルを発することができる任意の既知
の分子（例えば、有機分子、無機分子、タンパク質性分子、非タンパク質性分子又はそれ
らの組み合わせ）であり得る。
相互作用するポリペプチドの近接性を評価するのに適したスクリーニングアッセイは、
当技術分野で十分に確立されており、そのようなアッセイの任意の形式は、上記及び本明
細書の他の箇所に記載の本発明の方法に適している。例えば、米国特許第８，２８３，１
２７号明細書は、分子会合の検出のためのそのような適切なシステムの１つを記載してお
り、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
一般的な例として、候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチドとＡＴ１Ｒなどのアンジオテン
シン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存Ｇ
ＰＣＲとの間の相互作用を調節できるかどうかを判断するために、３つの成分（すなわち
（ｉ）第１のレポーター成分にカップリングしたＲＡＧＥポリペプチド、（ｉｉ）第２の
レポーター成分にカップリングした特定の活性化された共存ＧＰＣＲ、及び（ｉｉｉ）候
補薬剤）のそれぞれがアッセイシステムに提供される。第１及び第２のレポーター成分か
らの近接シグナルが観測され、候補薬剤の非存在下において、相互作用するＲＡＧＥと特
定の活性化された共存ＧＰＣＲとから放出される参照近接シグナル（すなわちＲＡＧＥポ
リペプチドと、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカ
イン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲとが自由に相互作用できる場合の第１
及び第２のレポーター成分が発する近接シグナル）と比較される。候補薬剤がＲＡＧＥポ
リペプチドと特定の活性化された共存ＧＰＣＲとの間の相互作用を調節しない場合、参照
近接シグナルへの変化は観察されない。しかしながら、候補薬剤がＲＡＧＥポリペプチド
と特定の活性化された共存ＧＰＣＲとの間の相互作用を調節できる場合、第１及び第２の
レポーター成分から発せられた近接シグナルの変化は、アッセイシステムへの候補薬剤の
存在時に観察される。典型的には、参照近接シグナルと比較した場合の近接シグナルの減
少は、候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチドとＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又は
ＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲとの間の
相互作用に拮抗することを示すか、そうでなければ阻害することを示す。逆に、参照近接
シグナルと比較した場合の近接シグナルの増加は、候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチドと
特定の活性化された共存ＧＰＣＲとの間の相互作用を作動することを一般的に示すか、そ
うでなければ刺激することを示す。代表的なレポーター成分は、適切には、生物発光ドナ
ー分子及び蛍光アクセプター分子から選択される。いくつかの例示的な実施形態では、生
物発光ドナー分子及び蛍光アクセプター分子は、タンパク質である。
ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体な
ど、特定の活性化された共存ＧＰＣＲ及び／又はＲＡＧＥポリペプチドの、レポーター成
分へのカップリングは、直接的又は間接的なカップリングによるものであり得、２つの分
子をカップリングする任意の既知の共有又は非共有手段によるものであり得る。カップリ
ング方法の例には、化学架橋、タンパク質の化学修飾、アミノ酸の化学修飾、核酸の化学
修飾、炭水化物の化学修飾、脂質の化学修飾、他の有機又は無機分子の化学修飾、ビオチ
ン－アビジン相互作用、抗原抗体相互作用及び核酸ハイブリダイゼーションが含まれる。
本発明のいくつかの形態では、第１及び／又は第２のレポーター成分は、リンカーにより
、ＲＡＧＥ及び／又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定の
ケモカイン受容体などの特定の活性化された共存ＧＰＣＲに間接的にカップリングされる
。いくつかの実施形態では、リンカーは、酵素切断部位を含む。
代わりに、ＲＡＧＥポリペプチド及び／又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又
はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲは、タ
ンパク質性レポーター成分に直接的にカップリングされ得る。タンパク質性分子を直接的
にコンジュゲートするためのアプローチは、例えば、遺伝子融合により、十分に確立され
ており、ＲＡＧＥポリペプチドをコードする核酸及び／又は特定の活性化された共存ＧＰ
ＣＲ並びに第１及び／又は第２のレポーター成分は融合して、単一のポリペプチドをコー
ドする核酸を生成する。
本発明の特に好ましい実施形態では、ＲＡＧＥポリペプチド及び／又はＡＴ１Ｒなどの
アンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化
された共存ＧＰＣＲ及び第１及び／又は第２のレポーター成分は、それぞれ単一のポリペ
プチドの一部を形成する。追加の機能性は、同じポリペプチドの一部を形成し得る。例え
ば、ＲＡＧＥ及び／又は特定の活性化された共存ＧＰＣＲ並びに第１及び／又は第２のレ
ポーター成分は、それぞれ親和性精製のためのアミノ酸配列；ポリペプチドを真核細胞の
細胞内コンパートメントに指向させるアミノ酸配列；真核細胞膜の透過を促進するアミノ
酸配列；及び抗体の使用又は他の方法によって発現レベルを評価することを可能にするア
ミノ酸配列のいずれか１つ以上をさらに含む単一のポリペプチドの一部を形成する。
一部の実施形態では、スクリーニングアッセイは、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受
容体又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲ
と、ＲＡＧＥポリペプチドとの間の相互作用を評価するためにエネルギー供与体及びエネ
ルギー受容体分子を使用する。２つの分子間のエネルギー移動の原理は、互いの近接性及
び配向性の相対的変化に関する情報を提供する手段として活用できる。共鳴エネルギー移
動（ＲＥＴ）は、励起状態のエネルギーのドナー分子からアクセプター分子への移動であ
る。フェルスター又は蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）は、２つの色素分子の電子励
起状態間の距離依存性相互作用であり、光子の放出を伴わずドナー分子からアクセプター
分子に励起が移動する。これは、アクセプター分子の吸収スペクトルがドナーの発光スペ
クトルと重複する場合にのみ発生できる。フェルスターは、エネルギードナー及びエネル
ギーアクセプター間の共鳴エネルギー移動の程度は、２つの分子間の距離の６乗に反比例
すると判定した。ＦＲＥＴの場合、特定の波長の外部光源を使用して、ドナー分子を励起
する。
生物発光共鳴エネルギー移動（ＢＲＥＴ）は、Ｐｆｌｅｇｅｒ ａｎｄ Ｅｉｄｎｅ（
２００６）、米国特許第８，２８３，１２７号明細書、Ｊａｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，２
０１４及びＳｔｏｄｄａｒｔ ｅｔ ａｌ．２０１５に記載される。ＢＲＥＴで使用され
ているルシフェラーゼには、ホタル、ウミシイタケ（Ｒｅｎｉｌｌａ ｒｅｎｉｆｏｒｍ
ｉｓ）、ガウシア・プリンケプス（Ｇａｕｓｓｉａ ｐｒｉｎｃｅｐｓ）及びＮａｎｏＬ
ｕｃルシフェラーゼ（Ｐｒｏｍｅｇａ）からのものが含まれる。
特定の実施形態では、スクリーニングアッセイは、ＢＲＥＴ技術又はアッセイを使用す
る。ＢＲＥＴスクリーニングを実行するには、生物発光ドナー、モジュレーター及び蛍光
アクセプターの３つの成分が必要である。蛍光アクセプターは、これらの成分が適切な特
別な関係にあり、適切な基質（生物発光開始化合物）が存在する場合、生物発光ドナーか
らエネルギーを受容でき、発光を生成する。モジュレーターは、生物発光ドナー及び蛍光
アクセプターの近接性及び／又は配向性に影響を与え、それにより、成分間のエネルギー
移動を調節することができるか、又は生物発光ドナーによって生成された発光と蛍光アク
セプターとの間のエネルギー移動に影響を与えることにおいて異なる役割を果たすことが
できる。
ＢＲＥＴ技術の利点の１つは、生細胞におけるタンパク質－タンパク質相互作用をリガ
ンドによる活性化後にリアルタイムでモニター及び／又は決定できることである。
いくつかの実施形態では、特定の活性化された共存ＧＰＣＲ（ＡＴ１Ｒなどのアンジオ
テンシン受容体又はＣＣＲ２などのケモカイン受容体など）又はＲＡＧＥポリペプチドは
、生物発光ドナーに融合されるか、そうでなければ連結される。いくつかの実施形態では
、特定の活性化された共存ＧＰＣＲ又はＲＡＧＥポリペプチドは、蛍光アクセプターに融
合されるか、そうでなければ連結される。例えば、一実施形態では、特定の活性化された
共存ＧＰＣＲは、生物発光ドナーに融合されるか、そうでなければ連結され、ＲＡＧＥポ
リペプチドは、蛍光アクセプターに融合されるか、そうでなければ連結される。
＜６．１ 生物発光ドナー＞
上記のように、生物発光ドナーは、第１の標的タンパク質（ＲＡＧＥポリペプチド又は
ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体若しくはＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体
など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲ）及び生物発光ドナー分子を含むが、これらに限
定されない。生物発光ドナー分子は、ウミシイタケルシフェラーゼ及びその断片；ウミシ
イタケルシフェラーゼのポリペプチドバリアント；などを含み得るが、これらに限定され
ない。特に、生物発光ドナー分子は、以下のウミシイタケルシフェラーゼタンパク質配列
のいずれかを含み得るが、これらに限定されない。
野生型ウミシイタケルシフェラーゼ：
Ｃｙｓ１２４Ａｌａ／Ｍｅｔ１８５Ｖａｌバリアントウミシイタケルシフェラーゼ：
ＲＬｕｃ８バリアントウミシイタケルシフェラーゼ：
他の適切な生物発光ドナー分子は、ＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ（Ｐｒｏｍｅｇａ）
、甲虫ルシフェラーゼ、ホタル（Ｐｈｏｔｉｎｕｓ ｐｙｒａｌｉｓ）ルシフェラーゼ（
ｆＬｕｃ）、ガウシアルシフェラーゼ、ヒカリキノコバエ属（Ａｒａｃｈｎｏｃａｍｐａ
ｓｐ）ルシフェラーゼ、コメツキムシ赤色ルシフェラーゼ及びエクオリン発光タンパク
質など、他のルシフェラーゼ又は発光タンパク質を含み得るが、これらに限定されない。
本発明で使用できる代替の非ルシフェラーゼ生物発光ドナー分子は、適切な基質に作用し
て発光シグナルを生成することができる任意の酵素である。そのような酵素の特定の例は
、β－ガラクトシダーゼ、ラクタマーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリ性ホス
ファターゼ、β－グルクロニダーゼ及びβ－グルコシダーゼである。これらの酵素の合成
発光基質は、当技術分野で周知であり、Ｔｒｏｐｉｘ Ｉｎｃ．（Ｂｅｄｆｏｒｄ，Ｍａ
ｓｓ．，ＵＳＡ）などの企業から市販されている。
好ましい実施形態では、低分子量の生物発光ドナー分子を使用して、立体障害による相
互作用の阻害を防止又は最小化する。生物発光ドナーは、好ましくは、単一のポリペプチ
ド鎖からなる。また、生物発光タンパク質は、好ましくは、オリゴマー又は凝集体を形成
しない。生物発光ドナー分子であるウミシイタケルシフェラーゼ、ガウシアルシフェラー
ゼ、ホタルルシフェラーゼ及びＮａｎｏＬｕｃは、これらの基準の全て又は大部分を満た
す。いくつかの好ましい実施形態では、生物発光ドナーは、上記で広く定義されるような
、特定の活性化された共存ＧＰＣＲ（ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ
２などの特定のケモカイン受容体など）を含む。
いくつかの実施形態では、生物発光ドナーは、ルシフェラーゼバリアントを含む。ルシ
フェラーゼバリアントは、ルシフェラーゼ活性を保持する（すなわち分子酸素の存在下で
セレンテラジン基質の発光産物への変換を触媒する）。ルシフェラーゼバリアントは、対
応する参照野生型タンパク質と比較して、以下の特性：強化された光出力；調節された発
光波長の最大値；調節された基質利用の少なくとも１つを有し得る。特定の実施形態では
、本発明に適したルシフェラーゼバリアントは、上記特性の２つ以上（例えば、調節され
た安定性及び強化された輝度、強化された光出力及び調節された発光の最大値、調節され
た安定性及び調節された発光の最大値など）を含むか、又は上記特性の３つ以上（例えば
、調節された安定性、強化された光出力及び調節された発光の最大値）を含む。
上記のように、特に企図されるそのようなバリアントウミシイタケルシフェラーゼタン
パク質の１つには、野生型アミノ酸配列（配列番号６１）と比較して８個のアミノ酸置換
が含まれるが、これらに限定されない。これらのアミノ酸置換には、Ａｌａ５５Ｔｈｒ、
Ｃｙｓ１２４Ａｌａ、Ｓｅｒ１３０Ａｌａ、Ｌｙｓ１３６Ａｒｇ、Ａｌａ１４３Ｍｅｔ、
Ｍｅｔ１８５Ｖａｌ、Ｍｅｔ２５３Ｌｅｕ及びＳｅｒ２８７Ｌｅｕが含まれる。さらに、
バリアントウミシイタケルシフェラーゼタンパク質は、保存的に修飾されたバリアントが
変異ウミシイタケルシフェラーゼタンパク質の特性を保持している限り、１つ以上の追加
の保存的置換を含み得る。
＜６．２ 生物発光ドナーエンコーディングベクター＞
いくつかの実施形態では、生物発光ドナーをコードするベクターは、生物発光ドナーを
コードするポリヌクレオチド（例えば、ＲＬｕｃ８に融合されているか、そうでなければ
連結されている、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２などの特定のケモ
カイン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰＣＲ）を含み得るが、これに限定されな
い。ベクター（例えば、ウイルス及び非ウイルス）及びポリヌクレオチドを産生する方法
は、当技術分野で周知である。生物発光ドナーは、他の発現システムを使用して発現させ
ることができ、生物発光ドナーベクターは、単なる例示的な実施形態であることに留意さ
れたい。
＜６．３ 蛍光アクセプター＞
上記のように、蛍光アクセプターは、限定されないが、第２の標的タンパク質を含み、
ここで、第２の標的タンパク質は、ＲＡＧＥポリペプチド又はＡＴ１Ｒなどのアンジオテ
ンシン受容体若しくはＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体など、特定の活性化された
共存ＧＰＣＲのいずれかと、蛍光アクセプター分子とからなる。一般に、フルオロフォア
は、ある波長で電磁エネルギー及び／又は共鳴エネルギーを吸収し、第２の波長で電磁エ
ネルギーを放出する。いくつかの好ましい実施形態では、蛍光アクセプターは、上記及び
本明細書の他の箇所で広く定義されるＲＡＧＥポリペプチドを含む。
代表的な蛍光アクセプター分子（すなわちフルオロフォア）には、ｓｇＧＦＰ、ｓｇＢ
ＦＰ、ブルーシフトＧＦＰ（Ｙ６６Ｈ）、青色蛍光タンパク質（ＢＦＰ）、シアン蛍光タ
ンパク質（ＣＦＰ）、シアンＧＦＰ、ＤｓＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ２、単量体ＲＦＰ、強化Ｂ
ＦＰ（ＥＢＦＰ）、強化ＣＦＰ（ＥＣＦＰ）、強化ＧＦＰ（ＥＧＦＰ）、不安定化ＥＧＦ
Ｐ、不安定化ＥＣＦＰ、不安定化ＥＹＦＰ、ＧＦＰ（Ｓ６５Ｔ）、レッドシフトＧＦＰ（
ｒｓＧＦＰ）、野生型ＧＦＰ（ＧＦＰ）、ＧＦＰｕｖ、ＨｃＲｅｄ、ｔ－ＨｃＲｅｄ、ｒ
ｓＧＦＰ、Ｓａｐｐｈｉｒｅ ＧＦＰ、ｓｇＢＦＰ（商標）、ｓｇＢＦＰ（商標）（スー
パーグローＢＦＰ）、ｓｇＧＦＰ（商標）、ｓｇＧＦＰ（商標）（スーパーグローＧＦＰ
）、野生型ＧＦＰ、黄色バリアントＧＦＰ、ＹＦＰ、Ｖｅｎｕｓ、Ｅｍｅｒａｌｄ、Ｔｏ
ｐａｚ、Ｃｉｔｒｉｎｅ、ＹＰｅｔ、ｔ－ｄｉｍｅｒ２、ｔ ｄｉｍｅｒ２（１２）、ｍ
ＲＦＰ１、ポシロポリン、ウミシイタケＧＦＰ、モンスターＧＦＰ、ｐａＧＦＰ及びカエ
デタンパク質が含まれるが、これらに限定されない。好ましくは、Ｖｅｎｕｓは、ＹＦＰ
配列と比較してアミノ酸置換を含有し、これは、成熟の律速段階である３７℃での発色団
の酸化を加速する。また、Ｖｅｎｕｓは、フルオロフォアが十分に折り畳まれることを許
容し、アシドーシス及びＣｌ－に対するタンパク質の耐性を改善する他の置換（例えば、
Ｆ６３Ｌ、Ｍ１５３Ｔ、Ｖ１６３Ａ及びＳ１７５Ｇ）を有する。
他の代表的な蛍光アクセプター分子（すなわちフルオロフォア）には、Ａｌｅｘａ Ｆ
ｌｕｏｒ誘導体、ＢＯＤＩＰＹ誘導体及び米国特許第８，２８３，１２７号明細書で参照
されているもの、１，５ ＩＡＥＤＡＮＳ；１，８－ＡＮＳ；４－メチルウンベリフェロ
ン；５－カルボキシ－２，７－ジクロロフルオレセイン；５－カルボキシフルオレセイン
（５－ＦＡＭ）；５－カルボキシナフトフルオレセイン；５－カルボキシテトラメチルロ
ーダミン（５－ＴＡＭＲＡ）；５－ＦＡＭ（５－カルボキシフルオレセイン）；５－ＨＡ
Ｔ（ヒドロキシトリプタミン）；５－ヒドロキシトリプタミン（ＨＡＴ）；５－ＲＯＸ（
カルボキシ－Ｘ－ローダミン）；５－ＴＡＭＲＡ（５－カルボキシテトラメチルローダミ
ン）；６－カルボキシローダミン６Ｇ；６－ＣＲ ６Ｇ；６－ＪＯＥ；７－アミノ－４－
メチルクマリン；７－アミノアクチノマイシンＤ（７－ＡＡＤ）；７－ヒドロキシ－４－
メチルクマリン；９－アミノ－６－クロロ－２－メトキシアクリジン；ＡＢＱ；酸フクシ
ン；ＡＣＭＡ（９－アミノ－６－クロロ－２－メトキシアクリジン）；アクリジンオレン
ジ；アクリジンレッド；アクリジンイエロー；アクリフラビン；アクリフラビンフォイル
ゲンＳＩＴＳＡ；エクオリン（発光タンパク質）；ＡＦＰ－自己蛍光タンパク質－（Ｑｕ
ａｎｔｕｍ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ３５０（商
標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ４３０（商標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ４８８（商
標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ５３２（商標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ５４６（商
標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ５６８（商標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ５９４（商
標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ６３３（商標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ６４７（商
標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ６６０（商標）；ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ ６８０（商
標）；アリザリンコンプレクソン；アリザリンレッド；アロフィコシアニン（ＡＰＣ）；
ＡＭＣ、ＡＭＣＡ－Ｓ；ＡＭＣＡ（アミノメチルクマリン）；ＡＭＣＡ－Ｘ；アミノアク
チノマイシンＤ；アミノクマリン；アミノメチルクマリン（ＡＭＣＡ）；アニリンブルー
；ステアリン酸アントロシル；ＡＰＣ（アロフィコシアニン）；ＡＰＣ－Ｃｙ７；ＡＰＴ
ＲＡ－ＢＴＣ；ＡＰＴＳ；アストラゾンブリリアントレッド４Ｇ；アストラゾンオレンジ
Ｒ；アストラゾンレッド６Ｂ；アストラゾンイエロー７ ＧＬＬ；アタブリン；ＡＴＴＯ
－ＴＡＧ（商標）ＣＢＱＣＡ；ＡＴＴＯ－ＴＡＧ（商標）ＦＱ；オーラミン；オーロホス
フィンＧ；オーロホスフィン；ＢＡＯ ９（ビスアミノフェニルオキサジアゾール）；Ｂ
ＣＥＣＦ（高ｐＨ）；ＢＣＥＣＦ（低ｐＨ）；ベルベリン硫酸；βラクタマーゼ；ビマン
；ビスベンズアミド；ビスベンズイミド（Ｈｏｅｃｈｓｔ）；ｂｉｓ－ＢＴＣ；Ｂｌａｎ
ｃｏｐｈｏｒ ＦＦＧ；ＢｌａｎｃｏｐｈｏｒＳＶ；ＢＯＢＯ（商標）－１；ＢＯＢＯ（
商標）－３；Ｂｏｄｉｐｙ４９２／５１５；Ｂｏｄｉｐｙ４９３／５０３；Ｂｏｄｉｐｙ
５００／５１０；Ｂｏｄｉｐｙ５０５／５１５；Ｂｏｄｉｐｙ５３０／５５０；Ｂｏｄｉ
ｐｙ５４２／５６３；Ｂｏｄｉｐｙ５５８／５６８；Ｂｏｄｉｐｙ５６４／５７０；Ｂｏ
ｄｉｐｙ５７６／５８９；Ｂｏｄｉｐｙ５８１／５９１；Ｂｏｄｉｐｙ６３０／６５０－
Ｘ；Ｂｏｄｉｐｙ６５０／６６５－Ｘ；Ｂｏｄｉｐｙ６６５／６７６；Ｂｏｄｉｐｙ Ｆ
ｌ；Ｂｏｄｉｐｙ ＦＬ ＡＴＰ；Ｂｏｄｉｐｙ Ｆｌ－セラミド；Ｂｏｄｉｐｙ Ｒ６
Ｇ ＳＥ；Ｂｏｄｉｐｙ ＴＭＲ；Ｂｏｄｉｐｙ ＴＭＲ－Ｘコンジュゲート；Ｂｏｄｉ
ｐｙ ＴＭＲ－Ｘ、ＳＥ；Ｂｏｄｉｐｙ ＴＲ；Ｂｏｄｉｐｙ ＴＲ ＡＴＰ；Ｂｏｄｉ
ｐｙ ＴＲ－Ｘ ＳＥ；ＢＯ－ＰＲＯ（商標）－１；ＢＯ－ＰＲＯ（商標）－３；ブリリ
アントスルホフラビンＦＦ；ＢＴＣ；ＢＴＣ－５Ｎ；カルセイン；カルセインブルー；Ｃ
ＡＬＣＩＵＭ ＣＲＩＭＳＯＮ（商標）；カルシウムグリーン；カルシウムグリーン－１
Ｃａ２＋染料；カルシウムグリーン－２ Ｃａ２＋；カルシウムグリーン－５Ｎ Ｃａ
２＋；カルシウムグリーン－Ｃ１８ Ｃａ２＋；カルシウムオレンジ；Ｃａｌｃｏｆｌｕ
ｏｒ Ｗｈｉｔｅ；カルボキシ－Ｘ－ローダミン（５－ＲＯＸ）；カスケードブルー（商
標）；カスケードイエロー；カテコールアミン；ＣＣＦ２（ＧｅｎｅＢｌａｚｅｒ）；Ｃ
ＦＤＡ；クロロフィル；クロモマイシンＡ；クロモマイシンＡ；ＣＬ－ＮＥＲＦ；ＣＭＦ
ＤＡ；クマリンファロイジン；Ｃ－フィコシアニン；ＣＰＭメチルクマリン；ＣＴＣ；Ｃ
ＴＣホルマザン；Ｃｙ２（商標）；Ｃｙ３．１８；Ｃｙ３．５（商標）；Ｃｙ３（商標）
；Ｃｙ５．１８；Ｃｙ５．５（商標）；Ｃｙ５（商標）；Ｃｙ７（商標）；サイクリック
ＡＭＰフルオロセンサー（ＦｉＣＲｈＲ）；ダブシル；ダンシル；ダンシルアミン；ダン
シルカダベリン；塩化ダンシル；ダンシルＤＨＰＥ；フッ化ダンシル；ＤＡＰＩ；ダポキ
シル；ダポキシル２；Ｄａｐｏｘｙｌ ３’ＤＣＦＤＡ；ＤＣＦＨ（ジクロロジヒドロフ
ルオレセイン二酢酸）；ＤＤＡＯ；ＤＨＲ（ジヒドロローダミン１２３）；Ｄｉ－４－Ａ
ＮＥＰＰＳ；Ｄｉ－８－ＡＮＥＰＰＳ（非比率）；ＤｉＡ（４－Ｄｉ－１６－ＡＳＰ）；
ジクロロジヒドロフルオレセインジアセテート（ＤＣＦＨ）；ＤｉＤ親油性トレーサー；
ＤｉＤ（ＤｉｌＣ１８（５））；ＤＩＤＳ；ジヒドロローダミン１２３（ＤＨＲ）；Ｄｉ
ｌ（ＤｉｌＣ１８（３））；ジニトロフェノール；ＤｉＯ（ＤｉＯＣ１８（３））；Ｄｉ
Ｒ；ＤｉＲ（ＤｉｌＣ１８（７））；ＤＭ－ＮＥＲＦ（高ｐＨ）；ＤＮＰ；ドーパミン；
ＤＴＡＦ；ＤＹ－６３０－ＮＨＳ；ＤＹ－６３５－ＮＨＳ；ＥＬＦ ９７；エオシン；エ
リスロシン；エリスロシンＩＴＣ；臭化エチジウム；エチジウムホモダイマー－１（Ｅｔ
ｈＤ－１）；Ｅｕｃｈｒｙｓｉｎ；ＥｕｋｏＬｉｇｈｔ；塩化ユーロピウム（ＩＩＩ）；
ＥＹＦＰ；ファストブルー；ＦＤＡ；フォイルゲン（パラロサニリン）；ＦＩＦ（ホルム
アルデヒド誘起蛍光）；ＦＩＴＣ；フラゾオレンジ；Ｆｌｕｏ－３；Ｆｌｕｏ－４；フル
オレセイン（ＦＩＴＣ）；フルオレセインジアセテート；フルオロエメラルド；フルオロ
ゴールド（ヒドロキシスチルバミジン）；フルオロルビー；ＦｌｕｏｒＸ；ＦＭ １－４
３（商標）；ＦＭ ４－４６；Ｆｕｒａ Ｒｅｄ（商標）（高ｐＨ）；Ｆｕｒａ Ｒｅｄ
（商標）／Ｆｌｕｏ－３；Ｆｕｒａ－２；Ｆｕｒａ－２／ＢＣＥＣＦ；ジェンアクリルブ
リリアントレッドＢ；ジェンアクリルブリリアントイエロー１０ＧＦ；ジェンアクリルピ
ンク３Ｇ；ジェンアクリルイエロー５ＧＦ；ＧｅｎｅＢｌａｚｅｒ（ＣＣＦ２）；グロキ
サリン酸；グラニュラーブルー；ヘマトポルフィリン；Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８；Ｈ
ｏｅｃｈｓｔ ３３３４２；Ｈｏｅｃｈｓｔ ３４５８０；ＨＰＴＳ；ヒドロキシクマリ
ン；ヒドロキシスチルバミジン（フルオロゴールド）；ヒドロキシトリプタミン；Ｉｎｄ
ｏ－１、高カルシウム；Ｉｎｄｏ－１、低カルシウム；インドジカルボシアニン（ＤｉＤ
）；インドトリカルボシアニン（ＤｉＲ）；イントラホワイトＣｆ；ＪＣ－１；ＪＯ－Ｊ
Ｏ－１；ＪＯ－ＰＲＯ－１；ＬａｓｅｒＰｒｏ；Ｌａｕｒｏｄａｎ；ＬＤＳ ７５１（Ｄ
ＮＡ）；ＬＤＳ ７５１（ＲＮＡ）；Ｌｅｕｃｏｐｈｏｒ ＰＡＦ；Ｌｅｕｃｏｐｈｏｒ
ＳＦ；Ｌｅｕｃｏｐｈｏｒ ＷＳ；リサミンローダミン；リサミンローダミンＢ；カル
セイン／エチジウムホモダイマー；ＬＯＬＯ－１；ＬＯ－ＰＲＯ－１；ルシファーイエロ
ー；リゾトラッカーブルー；リゾトラッカーブルーホワイト；リゾトラッカーグリーン；
リゾトラッカーレッド；リゾトラッカーイエロー；リゾセンサーブルー；リゾセンサーグ
リーン；リゾセンサーイエロー／ブルー；マググリーン；マグダラレッド（フロキシンＢ
）；Ｍａｇ－Ｆｕｒａ Ｒｅｄ；Ｍａｇ－Ｆｕｒａ－２；Ｍａｇ－Ｆｕｒａ－５；Ｍａｇ
－Ｉｎｄｏ－１；マグネシウムグリーン；マグネシウムオレンジ；マラカイトグリーン；
マリーナブルー；マキシロンブリリアントフラビン１０ ＧＦＦ；マキシロンブリリアン
トフラビン８ ＧＦＦ；メロシアニン；メトキシクマリン；ミトトラッカーグリーンＦＭ
；ミトトラッカーオレンジ；ミトトラッカーレッド；ミトラマイシン；モノブロモビマン
；モノブロモビマン（ｍＢＢｒ－ＧＳＨ）；モノクロロビマン；ＭＰＳ（メチルグリーン
ピロニンスチルベン）；ＮＢＤ；ＮＢＤアミン；ナイルレッド；ニトロベンゾオキサジド
ール；ノルアドレナリン；ニュークリアファストレッド；ニュークリアイエロー；ナイロ
サンブリリアントラビンＥ８Ｇ；オレゴングリーン；オレゴングリーン４８８－Ｘ；Ｏｒ
ｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ（商標）；Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ（商標）４８８；Ｏｒｅｇｏ
ｎ Ｇｒｅｅｎ（商標）５００；Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ（商標）５１４；パシフィッ
クブルー；パラロサニリン（フォイルゲン）；ＰＢＦＩ；ＰＥ－Ｃｙ５；ＰＥ－Ｃｙ７；
ＰｅｒＣＰ；ＰｅｒＣＰ－Ｃｙ５．５；ＰＥ－テキサスレッド［赤色６１３］；フロキシ
ンＢ（マグダラレッド）；Ｐｈｏｒｗｉｔｅ ＡＲ；Ｐｈｏｒｗｉｔｅ ＢＫＬ；Ｐｈｏ
ｒｗｉｔｅ Ｒｅｖ；Ｐｈｏｒｗｉｔｅ ＲＰＡ；ホスフィン３Ｒ；フォトレジスト；フ
ィコエリスリンＢ［ＰＥ］；フィコエリスリンＲ［ＰＥ］；ＰＫＨ２６（Ｓｉｇｍａ）；
ＰＫＨ６７；ＰＭＩＡ；ポントクロームブルーブラック；ＰＯＰＯ－１；ＰＯＰＯ－３；
ＰＯ－ＰＲＯ－１；ＰＯ－ＰＲＯ－３；プリムリン；プロシオンイエロー；プロピジウム
ロジッド（ＰＩ）；ＰｙＭＰＯ；ピレン；ピロニン；ピロニンＢ；Ｐｙｒｏｚａｌブリリ
アントフラビン７ＧＦ；ＱＳＹ ７；キナクリンマスタード；赤色６１３［ＰＥ－テキサ
スレッド］；レゾルフィン；ＲＨ４１４；Ｒｈｏｄ－２；ローダミン；ローダミン１１０
；ローダミン１２３；ローダミン５ ＧＬＤ；ローダミン６Ｇ；ローダミンＢ；ローダミ
ンＢ ２００；ローダミンＢエキストラ；ローダミンＢＢ；ローダミンＢＧ；ローダミン
グリーン；ローダミンファリシジン；ローダミンファロイジン；ローダミンレッド；ロー
ダミンＷＴ；ローズベンガル；Ｒ－フィコシアニン；Ｒ－フィコエリスリン（ＰＥ）；Ｓ
６５Ａ；Ｓ６５Ｃ；Ｓ６５Ｌ；Ｓ６５Ｔ；ＳＢＦＩ；セロトニン；セブロンブリリアント
レッド２Ｂ；セブロンブリリアントレッド４Ｇ；セブロンブリリアントレッドＢ；セブロ
ンオレンジ；セブロンイエローＬ；ＳＩＴＳ；ＳＩＴＳ（プリムリン）；ＳＩＴＳ（スチ
ルベンイソチオスルホン酸）；ＳＮＡＦＬカルセイン；ＳＮＡＦＬ－１；ＳＮＡＦＬ－２
；ＳＮＡＲＦカルセイン；ＳＮＡＲＦ１；ナトリウムグリーン；スペクトラムアクア；ス
ペクトラムグリーン；スペクトラムオレンジ；スペクトラムレッド；ＳＰＱ（６－メトキ
シ－Ｎ－（３－スルホプロピル）キノリニウム）；スチルベン；スルホローダミンＢ ｃ
ａｎ Ｃ；スルホローダミンエキストラ；ＳＹＴＯ １１；ＳＹＴＯ １２；ＳＹＴＯ
１３；ＳＹＴＯ １４；ＳＹＴＯ １５；ＳＹＴＯ １６；ＳＹＴＯ １７；ＳＹＴＯ
１８；ＳＹＴＯ ２０；ＳＹＴＯ ２１；ＳＹＴＯ ２２；ＳＹＴＯ ２３；ＳＹＴＯ
２４；ＳＹＴＯ ２５；ＳＹＴＯ ４０；ＳＹＴＯ ４１；ＳＹＴＯ ４２；ＳＹＴＯ
４３；ＳＹＴＯ ４４；ＳＹＴＯ ４５；ＳＹＴＯ ５９；ＳＹＴＯ ６０；ＳＹＴＯ
６１；ＳＹＴＯ ６２；ＳＹＴＯ ６３；ＳＹＴＯ ６４；ＳＹＴＯ ８０；ＳＹＴＯ
８１；ＳＹＴＯ ８２；ＳＹＴＯ ８３；ＳＹＴＯ ８４；ＳＹＴＯ ８５；ＳＹＴＯＸ
ブルー；ＳＹＴＯＸグリーン；ＳＹＴＯＸオレンジ；テトラサイクリン；テトラメチルロ
ーダミン（ＴＲＩＴＣ）；ＴＥＸＡＳ ＲＥＤ（商標）；ＴＥＸＡＳ ＲＥＤ－Ｘ（商標
）コンジュゲート；チアジカルボシアニン（ＤｉＳＣ３）；チアジンレッドＲ；チアゾー
ルオレンジ；チオフラビン５；チオフラビンＳ；チオフラビンＴＣＮ；チオライト；チオ
ゾールオレンジ；チノポールＣＢＳ（Ｃａｌｃｏｆｌｕｏｒ Ｗｈｉｔｅ）；ＴＭＲ；Ｔ
Ｏ－ＰＲＯ－１；ＴＯ－ＰＲＯ－３；ＴＯ－ＰＲＯ－５；ＴＯＴＯ－１；ＴＯＴＯ－３；
ＴｒｉＣｏｌｏｒ（ＰＥ－Ｃｙ５）；ＴＲＩＴＣ ＴｅｔｒａｍｅｔｈｙｌＲｏｄａｍｉ
ｎ
ｅｌｓｏＴｈｉｏＣｙａｎａｔｅ；トゥルーブルー；トゥルーレッド；ウルトラライト；
ウラニンＢ；Ｕｖｉｔｅｘ ＳＦＣ；ＷＷ ７８１；Ｘ－ローダミン；ＸＲＩＴＣ；キシ
レンオレンジ；Ｙ６６Ｆ；Ｙ６６Ｈ；Ｙ６６Ｗ；ＹＯ－ＰＲＯ－１；ＹＯ－ＰＲＯ－３；
ＹＯＹＯ－１；ＹＯＹＯ－３、Ｓｙｂｒグリーン、チアゾールオレンジ（インターキレー
ト色素）又はこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
蛍光アクセプター分子は、別の分子の付着を可能にする分子にコンジュゲートしたフル
オロフォアであり得る。別の分子への結合を可能にする分子の例は、ＨａｌｏＴａｇであ
る。ＨａｌｏＴａｇに付着して使用される場合又は使用されない場合があり、結果として
ＨａｌｏＴａｇリガンドとして説明される場合又は説明されない場合があるフルオロフォ
アの例は、オレゴングリーン、テトラメチルローダミン（ＴＭＲ）及び非クロロＴＯＭ（
ＮＣＴ）である。
＜６．４ 蛍光アクセプターベクター＞
蛍光アクセプターベクターは、蛍光アクセプター融合タンパク質（例えば、ＲＡＧＥポ
リペプチド及び緑色蛍光タンパク質バリアント、Ｖｅｎｕｓ）及びその縮重ヌクレオチド
配列をコードするポリヌクレオチドを含み得るが、これらに限定されない。ポリヌクレオ
チド及びベクター（例えば、ウイルス性及び非ウイルス性）を産生する方法は、当技術分
野で周知である。蛍光融合タンパク質は、他の発現システムを使用して発現させることが
でき、蛍光ベクターは、単なる例示的な実施形態であることに留意されたい。
＜６．５ 生物発光開始化合物＞
生物発光開始化合物の選択は、生物発光ドナーによって生成される光の波長及び強度に
影響を与え得る。
ＢＲＥＴ技術に適していることが知られている例示的な生物発光開始化合物は、セレン
テラジンである。セレンテラジンは、刺胞動物、カイアシ類、毛顎類、有櫛動物、十脚類
のエビ、アミ類のエビ、放散虫及びいくつかの魚の分類群で発生する（Ｇｒｅｅｒ ａｎ
ｄ Ｓｚａｌａｙ，２００２）。ウミシイタケルシフェラーゼ及びウミシイタケルシフェ
ラーゼのバリアントについて、４１８～５１２ｎｍの発光をもたらすセレンテラジン類似
体及びその機能的誘導体が利用できる（Ｉｎｏｕｙｅ ｅｔ ａｌ．，１９９７）。いく
つかのセレンテラジン類似体及びその機能的誘導体は、４１８ｎｍ未満の波長で発光し得
る。ビスデオキシセレンテラジン（ＤｅｅｐＢｌｕｅＣとしても知られ、コレレンテラジ
ン４００ａとしても知られている）及びその誘導体は、４１８ｎｍ未満の発光及び４１８
ｎｍを超える発光を含む発光スペクトルを有する基質の例である。
生物発光開始化合物には、セレンテラジン及び類似体並びにその機能的誘導体が含まれ
得るが、これらに限定されない。セレンテラジンの例示的な誘導体には、セレンテラジン
４００ａ、セレンテラジンｃｐ、セレンテラジンｆ、セレンテラジンｆｃｐ、セレンテラ
ジンｈ、セレンテラジンｈｃｐ；セレンテラジンｉｐ、セレンテラジンｎ、セレンテラジ
ンＯ、セレンテラジンｃ、セレンテラジンｃ、セレンテラジンｉ、セレンテラジンｉｃｐ
、セレンテラジン２－メチル、ベンジルセレンテラジンビスデオキシセレンテラジン、Ｅ
ｎｄｕＲｅｎ、ＶｉｖｉＲｅｎ、ディープブルーセレンテラジン（ＤＢＣ；ＤｅｅｐＢｌ
ｕｅＣ）（米国特許第６，０２０，１９２号明細書、同第５，９６８，７５０号明細書及
び同第５，８７４，３０４号明細書においてより詳細に説明される）、フリマジン及びそ
のバリアントが含まれるが、これらに限定されない。
一般に、セレンテラジンは、多様な生物発光タンパク質、特にルシフェラーゼの作用を
受けると発光することが知られている。有用であるが、非限定的なセレンテラジンは、米
国特許出願公開第１０／０５３，４８２号明細書に開示され、その開示は、その全体が参
照により本明細書に組み込まれる。セレンテラジンは、Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐｏｒａ
ｔｉｏｎ（Ｕ．Ｓ．Ａ．）及びＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｕ．Ｓ．
Ａ．）から入手できる。セレンテラジンは、例えば、Ｓｈｉｍｏｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．
，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２６１：９１３－２０，１９８９；Ｉｎｏｕｙｅ ｅｔ ａｌ．
，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２３３：３４９－５３，１９９
７；及びＴｅｒａｎｉｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２４９：３７
－４３，１９９７に記載のように合成され得る。
＜６．６ ＢＲＥＴアッセイの実施方法＞
上記のように、本発明は、ＢＲＥＴシステムを使用して、ＲＡＧＥポリペプチドと、生
細胞、組織若しくは器官又は生物体内のＡＴ１Ｒポリペプチドとの間の近接性を決定する
（すなわち検出、局在化又は定量化する）方法を含む。例えば、ＢＲＥＴシステムを使用
して、ＲＡＧＥポリペプチドとＡＴ１Ｒポリペプチドとの近接性及びその近接度を測定す
ることにより、生きている動物を画像化することができる。このアプローチは、基本的な
細胞生物学を理解するためのタンパク質間相互作用の研究を促進し、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ
複合体のモジュレーターであると特定された候補薬剤のインビボ試験を可能にする。
例えば、ＢＲＥＴシステムを使用して、生細胞内のＲＡＧＥとＡＴ１Ｒとの近接性を測
定及び定量し、投与された候補薬剤が近接性を調整（すなわち増加又は減少）する能力を
判断できる。さらに、ＢＲＥＴシステムを使用して、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ複合体を標的と
する候補薬剤の効果を測定できる。
いくつかの実施形態では、ＲＡＧＥポリペプチド及びＡＴ１Ｒポリペプチドのコード領
域を利用して開発された上記及び本明細書の他の箇所に記載のベクター構築物で形質導入
された細胞株は、その後、適切なマイクロプレートリーダーでの測定又は光学イメージン
グにより、候補薬剤の存在下及び非存在下でのＲＡＧＥとＡＴ１Ｒとの間の近接性を定量
して、前記候補薬剤がＲＡＧＥとＡＴ１Ｒとの間の近接性を調節する（すなわち刺激又は
阻害する）かどうかを判定する。当業者に理解されるように、この技術は、インビボでの
試験を可能にすることにより、候補薬剤の検証を有意に加速するであろう。
当業者に理解されるように、そのようなスクリーニングは、細胞培養で行われ得る。好
ましくは、スクリーニングされた化合物は、哺乳動物への投与に適している。さらにより
好ましくは、スクリーニングされた化合物は、ヒトへの投与に適している。
＜６．７ ＢＲＥＴキット＞
本発明は、以下：生物発光ドナー（これは、例えば、生物発光ドナー分子ＲＬｕｃ８に
融合又は他の方法で連結されたＡＴ１Ｒポリペプチドを含む）；生物発光ドナーを含むベ
クター；蛍光アクセプター（これは、例えば、蛍光アクセプター分子Ｖｅｎｕｓに融合又
は他の方法で連結されたＲＡＧＥポリペプチドを含む）；蛍光アクセプターを含むベクタ
ー；生物発光開始化合物；候補薬剤；及び説明書（使用のために書かれた取扱説明書）の
２つ以上、３つ以上、４つ以上又は全てを含み得るキットを包含する。したがって、いく
つかの実施形態では、生物発光ドナーは、ＡＴ１Ｒポリペプチドを含み、蛍光アクセプタ
ーは、ＲＡＧＥポリペプチドを含むであろう。キットは、上記で列挙した成分の様々な組
み合わせを宿主細胞又は宿主生物に投与するための、当技術分野で知られている適切な緩
衝液及び試薬も含み得る。
特定の例示的な例として、キットは、生物発光ドナー分子Ｒｌｕｃ８に融合又は他の方
法で連結されたＡＴ１Ｒポリペプチドを含む生物発光ドナー；及び蛍光アクセプター分子
Ｖｅｎｕｓに融合又は他の方法で連結されたＲＡＧＥポリペプチドを含む蛍光アクセプタ
ーを含み得る。
特定の例示的な例として、ＢＲＥＴアッセイを実施するために、生物発光ドナー及び蛍
光アクセプターは、上記で広く説明されているように細胞内で共発現される。強力で飽和
可能なＢＲＥＴシグナルの生成は、ＡＴ１ＲポリペプチドとＲＡＧＥポリペプチドとの間
の近接性（例えば、１０ｎｍ未満）を示し、ドナーによる細胞透過性セレンテラジン基質
の酸化から生じるエネルギーがアクセプターに移動することを可能にし、これは、より長
い特性波長で蛍光を発する。したがって、ＡＴ１ＲポリペプチドとＲＡＧＥポリペプチド
との近接性のモジュレーターとしての候補薬剤の同定は、細胞が候補薬剤に曝露された結
果としての、標識されたＡＴ１Ｒポリペプチド及び標識されたＲＡＧＥポリペプチドを共
発現する細胞によって生成されるＢＲＥＴシグナルの変化（例えば、増加又は減少）に基
づいて行われる。具体的には、候補薬剤への曝露に応答して細胞によって生成されるＢＲ
ＥＴシグナルの減少により、薬剤がＲＡＧＥとＡＴ１Ｒとの間の近接の阻害剤であること
が特定される。反対に、候補薬剤への曝露に応答して細胞によって生成されるＢＲＥＴシ
グナルの増加により、薬剤がＲＡＧＥとＡＴ１Ｒとの間の近接の誘導剤であることが特定
される。
＜７．システムの構築＞
本発明によれば、ＲＡＧＥポリペプチドとＡＴ１Ｒポリペプチドとの間の近接性のモジ
ュレーターを同定するための構築物系が提供される。１つの広範な形態では、システムは
、ＲＡＧＥポリペプチド及びエネルギードナー分子（例えば、生物発光ドナー分子）をコ
ードする第１の合成構築物；及びＡＴ１Ｒポリペプチド及びエネルギーアクセプター分子
（例えば、蛍光アクセプター分子）をコードする第２の合成構築物を含む。別の広範な形
態では、システムは、ＡＴ１Ｒポリペプチド及びエネルギードナー分子（例えば、生物発
光ドナー分子）をコードする第１の合成構築物；及びＲＡＧＥポリペプチド及びエネルギ
ーアクセプター分子（例えば、蛍光アクセプター分子）をコードする第２の合成構築物を
含む。
本発明の合成構築物は、それぞれ生物発光ドナーコード配列又は蛍光アクセプターコー
ド配列に作動可能に接続された調節配列を含む。調節配列は、適切には、転写及び／又は
翻訳制御配列を含み、これらは、目的の細胞又は生物体での発現に適合する。典型的には
、転写及び翻訳調節制御配列は、プロモーター配列、５’非コード領域、転写調節タンパ
ク質又は翻訳調節タンパク質の機能的結合部位などのシス調節領域、上流のオープンリー
ディングフレーム、リボソーム結合配列、転写開始部位、翻訳開始部位及び／又はリーダ
ー配列、終止コドン、翻訳停止部位及び３’非翻訳領域をコードするヌクレオチド配列を
含むが、これらに限定されない。当技術分野で知られている構成的又は誘導性プロモータ
ーは、本発明により企図される。プロモーターは、天然に存在するプロモーター又は２つ
以上のプロモーターの要素を組み合わせたハイブリッドプロモーターのいずれかであり得
る。本発明によって企図されるプロモーター配列は、目的の生物体に固有のものであるか
、又は選択された生物体において領域が機能的である代替源に由来し得る。プロモーター
の選択は、目的の宿主によって異なる。例えば、植物での発現に使用できるプロモーター
には、ＣａＭＶ３５Ｓ植物プロモーター、ＣａＭＶ１９Ｓ植物プロモーター、ＦＭＶ３４
Ｓ植物プロモーター、サトウキビ桿菌バドナウイルス植物プロモーター、ＣｓＶＭＶ植物
プロモーター、シロイヌナズナＡＣＴ２／ＡＣＴ８アクチン植物プロモーター、シロイヌ
ナズナユビキチンＵＢＱ１植物プロモーター、オオムギ葉チオニンＢＴＨ６植物プロモー
ター及びコメアクチン植物プロモーターをその例に含む構成的植物プロモーター；マメフ
ァゼオリン貯蔵タンパク質植物プロモーター、ＤＬＥＣ植物プロモーター、ＰＨＳβ植物
プロモーター、ゼイン貯蔵タンパク質植物プロモーター、ダイズからのコングルチンγ植
物プロモーター、ＡＴ２Ｓ１遺伝子植物プロモーター、シロイヌナズナからのＡＣＴ１１
アクチン植物プロモーター、セイヨウアブラナからのｎａｐＡ植物プロモーター及びジャ
ガイモパタチン遺伝子植物プロモーターをその例に含む、組織特異的植物プロモーター；
並びにエンドウマメｒｂｃＳ遺伝子に由来する光誘導性植物プロモーター、アルファルフ
ァｒｂｃＳ遺伝子からの植物プロモーター、干ばつにおいて活発なＤＲＥ、ＭＹＣ及びＭ
ＹＢ植物プロモーターをその例に含む誘導性植物プロモーター；高塩分及び浸透圧ストレ
スにおいて活性なＩＮＴ、ＩＮＰＳ、ｐｒｘＥａ、Ｈａ ｈｓｐ１７．７Ｇ４及びＲＤ２
１植物プロモーター並びに病原性ストレスにおいて活性なｈｓｒ２０３Ｊ及びｓｔｒ２４
６Ｃ植物プロモーターなどの植物プロモーターが含まれる。代わりに、哺乳動物での発現
に使用できるプロモーターには、カドミウムなどの重金属に反応して誘導されるメタロチ
オネインプロモーター、β－アクチンプロモーター及びＳＶ４０ラージＴ抗原プロモータ
ー、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）即時型（ＩＥ）プロモーター、ラウス肉腫ウイ
ルスＬＴＲプロモーター、アデノウイルスプロモーター又はＨＰＶプロモーターなどのウ
イルスプロモーターが含まれ、特にＨＰＶ上流調節領域（ＵＲＲ）も使用され得る。これ
らのプロモーターは、全て十分に記載されており、当技術分野で容易に入手可能である。
本発明の合成構築物は、３’非翻訳配列も含み得る。３’非翻訳配列は、ポリアデニル
化シグナル及びｍＲＮＡプロセシング又は遺伝子発現をもたらすことができる他の任意の
調節シグナルを含有する、ＤＮＡセグメントを含む遺伝子の部分を指す。ポリアデニル化
シグナルは、ｍＲＮＡ前駆体の３’末端にポリアデニル酸領域を付加することを特徴とす
る。ポリアデニル化シグナルは、一般的に、標準形態５’ＡＡＴＡＡＡ－３’との相同性
の存在によって認識されるが、変異型は、異常でない。３’非翻訳調節ＤＮＡ配列は、好
ましくは、約５０～１，０００ヌクレオチド塩基対を含み、ポリアデニル化シグナル及び
ｍＲＮＡプロセシング又は遺伝子発現をもたらすことができる他の任意の調節シグナルに
加えて、転写及び翻訳終結配列を含み得る。
特定の実施形態では、合成構築物は、合成構築物を含有する生物体又はその前駆体の選
択を可能にする選択可能マーカー遺伝子をさらに含む。選択遺伝子は、当技術分野で周知
であり、目的の細胞若しくは生物又はその前駆細胞若しくは前駆体での発現に適合する。
いくつかの実施形態では、本発明の合成構築物は、染色体外要素として複製する能力を
有する、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）又はウシパピローマウイルス（ＢＰＶ）など
のウイルスベクターの形態である（Ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ Ｖｉｒａｌ Ｖｅｃｔｏｒｓ
，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｇｌｕｚｍａｎ ｅ
ｄ．，１９８２；Ｓａｒｖｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８１，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ
．１：４８６）。ウイルスベクターは、ポリヌクレオチド又は導入遺伝子の発現を細胞に
導入及び誘導するために改変された、レトロウイルス（レンチウイルス）、アデノ随伴ウ
イルス（例えば、Ｏｋａｄａ，１９９６，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．３：９５７－９６４；Ｍ
ｕｚｙｃｚｋａ，１９９４，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｓｔ．９４：１３５１；ＡＡＶベクタ
ーについて記載する米国特許第６，１５６，３０３号明細書、同第６，１４３，５４８号
明細書、同第５，９５２，２２１号明細書を参照されたい；また米国特許第６，００４，
７９９号明細書、同第５，８３３，９９３号明細書も参照されたい）、アデノウイルス（
例えば、米国特許第６，１４０，０８７号明細書、同第６，１３６，５９４号明細書、同
第６，１３３，０２８号明細書、同第６，１２０，７６４号明細書を参照されたい）、レ
オウイルス、ヘルペスウイルス又はロタウイルスゲノムを含む。レトロウイルスベクター
は、マウス白血病ウイルス（例えば、米国特許第６，１３２，７３１号明細書を参照され
たい）、テナガザル白血病ウイルス（例えば、米国特許第６，０３３，９０５号明細書を
参照されたい）、サル免疫不全ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（例えば、米国特許第５
，９８５，６４１号明細書を参照されたい）及びそれらの組み合わせに基づくものを含み
得る。
ベクターは、インビボで動物細胞（例えば、幹細胞）に遺伝子を効率的に送達するもの
も含む（例えば、米国特許第５，８２１，２３５号明細書及び同第５，７８６，３４０号
明細書；Ｃｒｏｙｌｅ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．５：６４５；Ｃ
ｒｏｙｌｅ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１５：１３４８；Ｃｒｏｙ
ｌｅ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．９：５６１；Ｆｏｒｅｍ
ａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．９：１３１３；Ｗｉｒｔ
ｚ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｇｕｔ ４４：８００を参照されたい）。インビボ送達に
適したアデノウイルス及びアデノ随伴ウイルスベクターは、例えば、米国特許第５，７０
０，４７０号明細書、同第５，７３１，１７２号明細書及び同第５，６０４，０９０号明
細書に記載される。インビボ送達に適した追加のベクターは、単純ヘルペスウイルスベク
ター（例えば、米国特許第５，５０１，９７９号明細書を参照されたい）、レトロウイル
スベクター（例えば、米国特許第５，６２４，８２０号明細書、同第５，６９３，５０８
号明細書及び同第５，６７４，７０３号明細書；並びに国際公開第９２／０５２６６号パ
ンフレット及び国際公開第９２／１４８２９号パンフレットを参照されたい）、ウシパピ
ローマウイルス（ＢＰＶ）ベクター（例えば、米国特許第５，７１９，０５４号明細書を
参照されたい）、ＣＭＶベースのベクター（例えば、米国特許第５，５６１，０６３号明
細書を参照されたい）及びパルボウイルス、ロタウイルス及びノーウォークウイルスベク
ターを含む。レンチウイルスベクターは、分裂細胞及び非分裂細胞を感染させるのに有用
である（例えば、米国特許第６，０１３，５１６号明細書を参照されたい）。
昆虫細胞発現のためのベクターは、一般的に、バキュロウイルス及び他の核多角体ウイ
ルスの組換えバリエーション、例えばＢｏｍｂｙｘ ｍｏｒｉ核多角体ウイルスベクター
を使用する（例えば、Ｃｈｏｉ，２０００，Ａｒｃｈ．Ｖｉｒｏｌ．１４５：１７１－１
７７を参照されたい）。例えば、鱗翅目及び鞘翅目細胞は、バキュロウイルスを複製する
ために使用されて、バキュロウイルスによって運ばれる外来遺伝子の発現を促進し、例え
ば、スポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞
は、異種の、例えばヒトの、コード配列を運ぶ組換えオートグラファ・カリフォルニカ（
Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）核多角体病ウイルス（ＡｃＮＰＶ）に
感染している（例えば、Ｌｅｅ，２０００，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７４：１１８７３－１１８
８０；Ｗｕ，２０００，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８０：７５－８３を参照されたい）
。例えば、鱗翅目及び鞘翅目昆虫細胞株のゲノムに核酸を安定して統合するための、寄生
性スズメバチＧｌｙｐｔａｐａｎｔｅｌｅｓ ｉｎｄｉｅｎｓｉｓのポリドナウイルスの
使用を説明する米国特許第６，１４３，５６５号明細書を参照されたい。米国特許第６，
１３０，０７４号明細書；同第５，８５８，３５３号明細書；同第５，００４，６８７号
明細書も参照されたい。
本発明は、本発明の合成構築物を含有する細胞をさらに企図する。これに関して、本発
明の構築物系は、原核生物及び真核生物の宿主細胞に適用可能であり、例えば単細胞生物
並びに限定されないが、酵母、植物及び哺乳類、爬虫類、魚類及び鳥類などの脊椎動物及
び後生動物、海綿、蠕虫、軟体動物、線虫、甲殻類及び棘皮動物などの無脊椎動物を含む
動物などの多細胞生物に由来する細胞を含むことが理解されるであろう。特定の実施形態
では、構築物系を使用して、植物細胞又は動物細胞における異なる同義コドンの翻訳効率
を決定するか、又はＲＡＧＥポリペプチドとＡＴ１Ｒポリペプチドとの間の近接性を調節
する候補薬剤の能力を決定する。
真核生物の例示的な例は、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、トリコデルマ
（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）及びニューロスポラ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）の種を含む、
酵母及び糸状菌などの真菌；例示的な例として魚類（例えば、サーモン、マス、ティラピ
ア、マグロ、コイ、カレイ、オヒョウ、メカジキ、タラ及びゼブラフィッシュ）、鳥類（
例えば、ニワトリ、アヒル、ウズラ、キジ及びシチメンチョウ並びに他の野鳥又は狩猟鳥
）及び哺乳動物（例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、水牛、シカ、ヒツジ、ウサギ並びに
マウス、ラット、ハムスター及びモルモットなどのげっ歯類、ヤギ、ブタ、霊長類、イル
カ及びクジラなどの海洋哺乳類並びに任意の組織又は幹細胞タイプのヒト又は他の哺乳動
物細胞株（例えば、ＣＯＳ、ＮＩＨ ３Ｔ３ ＣＨＯ、ＢＨＫ、ＨＥＫ２９３又はＨｅＬ
ａ細胞）などの細胞株、並びに多能性及び非多能性及び胚性幹細胞を含む幹細胞、並びに
非ヒト受精卵）、並びに例示的な例として線虫（代表的な属には、限定されないが、鉤虫
属（Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ）、鶏回虫属（Ａｓｃａｒｉｄｉａ）、回虫属（Ａｓｃａｒ
ｉｓ）、ブノストムム属（Ｂｕｎｏｓｔｏｍｕｍ）、線虫属（Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔ
ｉｓ）、毛細線虫属（Ｃａｐｉｌｌａｒｉａ）、シャベルティア属（Ｃｈａｂｅｒｔｉａ
）、クーペリア属（Ｃｏｏｐｅｒｉａ）、ディクチオカウルス属（Ｄｉｃｔｙｏｃａｕｌ
ｕｓ）、捻転胃虫属（Ｈａｅｒｎｏｎｃｈｕｓ）、ヘテラキス属（Ｈｅｔｅｒａｋｉｓ）
、ネマトジルス属（Ｎｅｍａｔｏｄｉｒｕｓ）、腸結節虫属（Ｏｅｓｏｐｈａｇｏｓｔｏ
ｍｕｍ）、オステルタギア属（Ｏｓｔｅｒｔａｇｉａ）、蟯虫属（Ｏｘｙｕｒｉｓ）、パ
ラスカリス属（Ｐａｒａｓｃａｒｉｓ）、円虫属（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ）、トキサスカ
リス属（Ｔｏｘａｓｃａｒｉｓ）、鞭虫属（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ）、毛様線虫属（Ｔｒｉ
ｃｈｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ）、トフリコネマ属（Ｔｆｌｉｃｈｏｎｅｍａ）、トキソカ
ラ属（Ｔｏｘｏｃａｒａ）、ウンシナリア属（Ｕｎｃｉｎａｒｉａ）など、動物に感染す
るもの、並びに限定されないが、ブルサファレンクス属（Ｂｕｒｓａｐｈａｌｅｎｃｈｕ
ｓ）、クリコネリエラ属（Ｃｒｉｃｏｎｅｒｒｉｅｌｌａ）、ジイレンクス属（Ｄｉｉｙ
ｌｅｎｃｈｕｓ）、クキセンチュウ属（Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ）、シストセンチュウ属
（Ｇｌｏｂｏｄｅｒａ）、ラセンセンチュウ属（Ｈｅｌｉｃｏｔｙｌｅｎｃｈｕｓ）、ヘ
テロデラ属（Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ）、ロンジドルス属（Ｌｏｎｇｉｄｏｒｕｓ）、メロ
ドイジン属（Ｍｅｌｏｄｏｉｇｙｎｅ）、ナコブス属（Ｎａｃｏｂｂｕｓ）、ピンセンチ
ュウ属（Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ）、ネグサレセンチュウ属（Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈ
ｕｓ）、ネモグリセンチュウ属（Ｒａｄｏｐｈｏｌｕｓ）、ロテリンクス属（Ｒｏｔｅｌ
ｙｎｃｈｕｓ）、ハリセンチュウ属（Ｔｙｌｅｎｃｈｕｓ）及びキシフィネルナ属（Ｘｉ
ｐｈｉｎｅｒｎａ）などの植物に感染するものが含まれる）を含む無脊椎動物並びに他の
蠕虫、ショウジョウバエ及び他の昆虫（ミツバチ科（Ａｐｉｄａｅ）、ゾウムシ科（Ｃｕ
ｒｃｕｌｉｏｎｉｄａｅ）、コガネムシ科（Ｓｃａｒａｂａｅｉｄａｅ）、ミバエ科（Ｔ
ｅｐｈｒｉｔｉｄａｅ）、ハマキガ科（Ｔｏｒｔｒｉｃｉｄａｅ）からものなど、その代
表的な目は、甲虫目（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ）、双翅目（Ｄｉｐｔｅｒａ）、鱗翅目（Ｌ
ｅｐｉｄｏｐｔｅｒａ）及び単翅目（Ｈｏｍｏｐｔｅｒａ）が含まれる）を含む、脊椎動
物を含む動物宿主を含むが、これらに限定されない。
本発明の合成構築物は、エクスビボで直接又は細胞培養で目的の細胞に導入され得る。
本発明の合成構築物は、任意の適切な方法を使用して目的の細胞に導入され得、使用され
る方法の種類は、目的の企図される細胞タイプに応じて異なる。例えば、核酸分子を細胞
に送達するための方法について、４つの一般的なクラス：（１）リン酸カルシウム沈殿、
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）媒介沈殿及びリポフェクションなどの化学的方法；（
２）マイクロインジェクション、エレクトロポレーション、加速法、真空浸透などの物理
的方法；（３）細菌及びウイルスベクター媒介形質転換などのベクターベースの方法；及
び（４）受容体媒介が説明されている。これらのクラス及び他のクラスに含まれる形質転
換技術は、当業者に周知であり、新しい技術が継続的に知られている。形質転換技術の特
定の選択は、特定の宿主種を形質転換する効率及び特定の選択方法論により本発明を実施
する人の経験及び選好によって決定される。本発明の合成構築物を細胞に導入する形質転
換システムの特定の選択は、許容されるレベルの核酸導入を達成する限り、本発明にとっ
て必須又は制限とはならないことは、当業者に明らかであろう。したがって、合成構築物
は、ウイルス感染、ファージ感染、マイクロインジェクション、エレクトロポレーション
又は小胞の融合、リポフェクション、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）又はアグロバクテリウム・リゾゲネス（
Ａ．ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）による感染又はプロトプラスト融合を含む任意の数の経路に
よって組織又は宿主細胞に導入される。ジェット注射も筋肉内投与に使用され得る（例え
ば、Ｆｕｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２０５：３６５
－３６８に記載される通り）。合成構築物を微小発射体上にコーティングし、粒子衝撃装
置又は「遺伝子銃」により宿主細胞又は組織に送達することができる（例えば、Ｔａｎｇ
ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｎａｔｕｒｅ ３５６：１５２－１５４を参照されたい）。
代わりに、合成構築物は、宿主生物に直接供給するか若しくは注入することができるか、
又は細胞に（すなわち細胞内に）導入され得るか、又は細胞外で空洞、間質空間、生物体
の循環中に導入され得るか、又は経口的に導入され得る。経口導入の方法には、合成構築
物と生物体の食物との直接混合が含まれる。特定の実施形態では、流体力学的核酸投与プ
ロトコルが使用される（例えば、Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ
．７５：３４６９－３４７３；Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．
６：１２５８－１２６６；Ｗｏｌｆｆ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４
７：１４６５－１４６８；Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ Ｔ
ｈｅｒ．１０：１７３５－１７３７；及びＺｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｇｅｎ
ｅ Ｔｈｅｒ．７：１３４４－１３４９を参照されたい）。核酸送達の他の方法には、リ
ポソーム媒介転移、ネイキッドＤＮＡ送達（直接注射）及び受容体媒介転移（リガンド－
ＤＮＡ複合体）が含まれるが、これらに限定されない。
＜８．ＲＡＧＥの活性化により媒介される下流シグナル伝達を検出するアッセイ＞
ＲＡＧＥの活性化は、特定の細胞タイプ、その状態及び刺激の持続時間に応じて、細胞
機能の特定の側面に関与する多くの細胞内シグナル伝達経路を引き起こすことが知られて
いる。これらのシグナル伝達経路は、ＮＡＤＰＨオキシダーゼを介したＲＯＳの生成及び
細胞外シグナル調節キナーゼ１／２（ＥＲＫ１／２）、ストレス活性化タンパク質キナー
ゼ（ＳＡＰＫ）／ｃ－Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）、タンパク質キナーゼＣ（ＰＫ
Ｃ）、ｐ３８－ＭＡＰキナーゼ；Ｒｈｏキナーゼ（Ｒｈｏ）、ＡＭＰキナーゼ（ＡＭＰＫ
）、ホスホイノシチド３キナーゼ／Ａｋｔ（ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ）；ヤヌス活性化キナーゼ
（ＪＡＫ）／シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）；グリコーゲンシンターゼキナーゼ３
β（ＧＳＫ３β）（Ｂａｔｋｕｌｗａｒ ＫＢ ｅｔ ａｌ ２０１５）など、マイトジ
ェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）を含む様々なキナーゼの活性化によって活性
化される。これらのキナーゼは、下流のシグナル伝達分子をリン酸化し、転写因子核因子
カッパＢ（ＮＦ－κＢ）、ｅｇｒ１及び特異性タンパク質１（ＳＰ１）の活性化を介して
特定の細胞応答を引き起こし、それにより、炎症、細胞運動、接着及び構造を含む特定の
細胞プロセスを調節する。
ＲＡＧＥの活性化後のＲＯＳの生成は、ＲＯＳ自体を検出するアッセイ（ＲＯＳによる
プローブの修飾及びその付加物の検出）、内因性又は合成基質上でＲＯＳによって誘導さ
れる修飾の測定又はそれらに起因するシグナル伝達経路の誘導によって測定することがで
きる。
ＲＡＧＥの活性化後のこれらの特定の下流シグナルは、これらのキナーゼの活性化を検
出するアッセイ（すなわちキナーゼ活性アッセイ）、キナーゼ活性の合成又は内因性標的
のリン酸化又は転写因子の下流誘導（例えば、ＮＦκＢ、ＡＰ－１、ＥＧＲ－１）、遺伝
子発現、タンパク質発現の変化又はそれらに起因する細胞機能／表現型の変化によって測
定することができる。
＜９．医薬組成物＞
一般的に、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体など、特定の活性化された共存ＧＰ
ＣＲ又はＣＣＲ２などの特定のケモカイン受容体によるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡ
ＧＥ活性化のモジュレーターとして、したがって、治療可能性を有するものとして選択さ
れた候補薬剤を同定するにあたり、薬剤は、薬学的に許容される担体、賦形剤及び／又は
安定剤を任意選択により含む医薬組成物の形態で製造される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏ
ｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））。これらの組成物は、一般に、凍結乾燥製剤又は水性溶液
の形態である。抗体結晶も企図される（米国特許出願公開第２００２／０１３６７１９号
明細書を参照されたい）。許容される担体、賦形剤又は安定剤は、使用される投与量及び
濃度でレシピエントに無害であり、リン酸、クエン酸、他の有機酸などの緩衝剤；アスコ
ルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルア
ンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェ
ノール、ブチル又はベンジルアルコール、メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパ
ラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール及びｍ－
クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチ
ン、免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グ
リシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、リジンなどのアミノ酸；
単糖類、二糖類及びグルコース、マンノース又はデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤ
ＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトールなど
の糖；ナトリウムなどの塩を形成する対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯
体）；及び／又はＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）、ポリエチレングリ
コール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含む。凍結乾燥された抗体製剤は、国際
公開第９７／０４８０１号パンフレットに記載されている。
医薬組成物は、処置される特定の適応症に必要な活性化合物、望ましくは互いに悪影響
を及ぼさない相補的活性を有するものを含む。そのような分子は、適切には、意図する目
的に有効な量で組み合わされて存在する。
活性成分はまた、例えば、コアセルベーション技術又は界面重合により調製されたマイ
クロカプセル、例えばそれぞれコロイド状薬物送達システム（例えば、リポソーム、アル
ブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）中又はマク
ロエマルジョン中のヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン－マイクロカプセル及びポ
リ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセルに封入され得る。そのような技術は、Ｒ
ｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ
ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
徐放性製剤が調製され得る。徐放性調製物の適切な例には、抗体を含有する固体疎水性
ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、そのマトリックスは、成形品、例えばフィルム
又はマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例には、ポリエステル、ハイ
ドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート）又はポリ（ビニルア
ルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号明細書）、Ｌ－グルタミ
ン酸とγ－エチル－Ｌ－グルタミン酸のコポリマー、非分解性エチレン－酢酸ビニル、分
解性乳酸－グリコール酸共重合体、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸－グリコー
ル酸共重合体及び酢酸ロイプロリドで構成される注射用ミクロスフェア）、ポリ－Ｄ－（
－）－３－ヒドロキシ酪酸が含まれる。
いくつかの実施形態では、意図する投与方式に応じて、組成物は、一般に、約０．００
０００１重量％～９０重量％、約０．０００１重量％～５０重量％又は約０．０１重量％
～約２５重量％のモジュレーターを含有し、残りは、適切な薬学的担体、希釈剤又は賦形
剤である。モジュレーターの投与量は、投与方法、影響を受ける対象の種、年齢、性別、
体重及び一般的な健康状態などの様々な要因に依存し得、当業者は、標準的なプロトコル
を使用して容易に決定することができる。投与量は、モジュレーターのその結合パートナ
ー（すなわちＡＴ１Ｒ及び／又はＲＡＧＥなどの共存ＧＰＣＲ）への結合親和性、そのバ
イオアベイラビリティ及びそのインビボ及び薬物動態特性も考慮する。これに関し、投与
のための薬剤の正確な量は、施術者の判断にも依存し得る。心血管代謝性疾患及び／又は
状態の処置又は予防において投与される薬剤の有効量を決定する際、医師又は獣医は、経
時的な疾患又は状態の進行を評価し得る。いずれの事象においても、当業者は、過度の実
験を行うことなく、本発明の薬剤の適切な投与量を容易に決定し得る。患者に投与される
活性物質の投与量は、患者の経時的な有益な反応並びに／又は心代謝性疾患及び／若しく
は状態の処置及び／若しくは予防をもたらすのに十分であるべきである。用量は、心臓代
謝性疾患及び／又は状態の症状を改善するために適切な間隔で投与され得る。そのような
間隔は、当業者に知られている日常的な手順を使用して確認することができ、使用される
活性薬剤のタイプ及びその製剤に応じて変化し得る。例えば、間隔は、毎日、隔日、毎週
、隔週、毎月、隔月、四半期ごと、半年ごと又は毎年である。
本発明の方法を用いて同定された任意のモジュレーターについて、治療有効用量は、最
初に細胞培養アッセイから推定することができる。例えば、細胞培養で決定されるＩＣ５
０を含む血中濃度範囲（例えば、ＡＴ１Ｒなどのアンジオテンシン受容体又はＣＣＲ２な
どの特定のケモカイン受容体など、活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非
依存性のＲＡＧＥ活性化の最大阻害の半分を達成するモジュレーターの濃度）を達成する
ために、動物モデルで用量を処方し得る。このような情報は、ヒトを含む哺乳動物におけ
る有用な用量をより正確に決定するために使用できる。
投与量及び間隔は、治療効果を維持するのに十分な活性剤の血漿レベルを提供するため
に個別に調整され得る。全身投与のための通常の患者の投与量は、１～２０００ｍｇ／日
、一般的には１～２５０ｍｇ／日及び典型的には１０～１５０ｍｇ／日である。患者の体
重の観点から、通常の投与量は、０．０２～２５ｍｇ／ｋｇ／日、一般的には０．０２～
３ｍｇ／ｋｇ／日、典型的には．２～１．５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。患者の体表面
積の観点からは、通常の投与量は、０．５～１２００ｍｇ／ｍ２／日、一般的には０．５
～１５０ｍｇ／ｍ２／日、典型的には５～１００ｍｇ／ｍ２／日の範囲である。
モジュレーターは、対象の心代謝性疾患及び／又は状態の症状を処置若しくは改善する
か、又はその発生若しくは進行を逆転又は阻害する少なくとも１つの補助療法と同時に投
与され得る。モジュレーターは、補助療法後に治療的に使用され得、療法が投与される前
に又は療法と共に使用され得る。したがって、本発明は、モジュレーター及び補助療法（
例えば、医学的処置）の同時投与を使用する併用療法を企図し、その非限定的な例には、
利尿剤、βブロッカー、α阻害剤、ＡＣＥ阻害剤及びアンジオテンシン受容体ブロッカー
が含まれる。
本発明を容易に理解し、実際の効果をもたらすために、特定の好ましい実施形態を以下
の非限定的な例により説明する。
以下の実施例１～２１のそれぞれでは、独立して、文脈がそうでないことを要しない限
り、以下の一般的な材料及び方法が適用される。
＜動物モデル＞
Ｃ５７ｂｌ６マウス、ＡＧＥＲノックアウト（ＫＯ）マウス、ａｐｏＥ－ＫＯマウス、
ＡＧＥＲ／ａｐｏＥダブルノックアウト（ＤＫＯ）、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯ及びＡ
ＧＥＲ／Ａｃｅ２／ａｐｏＥトリプルノックアウト（ＴＫＯ）マウスは、ＡＭＰＲＥＰア
ニマルハウスにおいて、社内で調達及び生成した。全てのマウスはＣ５７ｂｌ６バックグ
ラウンドで飼育された。実験研究では、６～８週齢で体重２０～２５ｇの雄性マウスを使
用し、インビボ研究では１群あたり少なくとも８匹、エクスビボ研究ではｎ＝６／群であ
った。研究を通して、動物はマウス飼料及び水への自由なアクセスが与えられていた。全
ての実験は、Ａｌｆｒｅｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｅｃｉｎｃｔの動
物倫理委員会によって承認され、米国国立衛生研究所によって公開された実験動物の管理
と使用に関するガイド（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ）（ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．
８５－２３、１９９６年改訂版）に従って実施された。
＜大動脈プラーク面積定量方法＞
マウスから大動脈弓を取り除き、過剰な脂肪を取り、１０％中性緩衝ホルマリンに入れ
、続いてＳｕｄａｎ ＩＶ－ハークスハイマー溶液（０．５％ｗ／ｖｏｌ；Ｇｕｒｒ、Ｂ
ＤＨ Ｌｉｍｉｔｅｄ、Ｐｏｏｌｅ、ＵＫ）で染色した。その後、大動脈を縦方向に切開
し、ワックスパッドにピンで平らに固定した。大動脈弓を横切るプラーク蓄積を、赤く染
色された面積の割合として定量化した。
＜定量的リアルタイムＰＣＲによる炎症促進性メディエーターの大動脈発現＞
各研究期間の終わりに、胸部及び腹部大動脈をＴＲＩＺＯＬに入れ、急速凍結し、－８
０℃で保存した。ＲＮＡ抽出及びｃＤＮＡ合成は、トリゾール法を使用して大動脈ホモジ
ネートで行われた。接着分子、サイトカイン、炎症性、酸化ストレス及びマクロファージ
マーカーを含む、アテローム形成促進メディエーターの遺伝子発現は、大動脈ホモジネー
トにおいて、蓄積性蛍光のリアルタイム検出に基づいたＴａｑＭａｎシステムを使用して
実行された定量的リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって推定された（ＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ
７７００、Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ Ｉｎｃ、ＰＥ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔ
ｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ、ＵＳＡ）。遺伝子発現は１８Ｓ ｍＲＮＡに正規化され、未処置
対照マウス／細胞の発現レベル（１の任意値とした）と比較した倍率変化として報告され
た。
＜酸化ストレスの誘導＞
各動物モデルにおける酸化ストレスの誘導は、ＯｘｉＳｅｌｅｃｔ Ｏｘｉｄａｔｉｖ
ｅ ＤＮＡ Ｄａｍａｇｅ ＥＬＩＳＡキット（８－ＯＨｄＧ定量；Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ
ａｂｓ，Ｉｎｃ）を使用して、８－ヒドロキシデオキシグアノシンの血漿レベルを測定す
ることにより推定され、製造元の指示に従って実施された。さらに、スーパーオキシド産
生ＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニット、ＮＯＸ－１及びＮＯＸ－４の遺伝子発現は、上
記のようにリアルタイムＲＴ－ＰＣＲを使用してマウスの大動脈で定量された。
＜ＲＡＧＥリガンドの血中濃度＞
ＲＡＧＥリガンドの循環レベルにおける変化を動物モデルで評価した。Ｓ１００Ａ８／
Ａ９レベルは、製造元の取扱説明書に従って実行したＥＬＩＳＡ（Ｉｍｍｕｎｄｉａｇｎ
ｏｓｔｉｋ、ドイツ）によって推定された。血漿ＡＧＥは自社のＥＬＩＳＡによって測定
された。ＡＧＥの反応性前駆体である血漿メチルグリオキサールをＨＰＬＣで測定した。
＜収縮期血圧測定＞
収縮期血圧は、コンピューター化された非侵襲性のテールカフシステム（Ｋｅｎｔ Ｓ
ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＵＳＡ）を使用して、事前に温めた意識のあるマウスのテールカフ
プレチスモグラフィーで測定した。正確な測定を保証するために、圧力を測定する前に動
物を装置に慣れさせた。
＜インビトロ研究＞
＜細胞培養＞
一次大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）は、（野生型）Ｃ５７ｂｌ６マウス及びＡＧＥＲ－
ＫＯマウスの大動脈から分離され、ダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ）／Ｆ１２内
皮細胞増殖サプリメント（ＥＣＧＳ）補充培地で培養された。チャイニーズハムスター卵
巣（ＣＨＯ）細胞を、Ｆ１２培地（２ｍＭグルタミンを含む１０％ＦＣＳ）を使用して培
養した。ヒト微小血管内皮細胞（ＨＭＥＣ）をＭＣＤＢ１３１培地（１０ｍＭグルタミン
、ＥＧＦ及びヒドロコルチゾンを含む１０％ＦＣＳ）で培養した。
＜トランスジェニックチャイニーズハムスター卵巣細胞の生成＞
Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｔｈｅｒｍｏ）を使用して、１００ｎｇのＡＴ
１Ｒ－Ｒｌｕｃ８構築物をＣＨＯ細胞に形質導入した。Ｇ４１８を使用して安定トランス
フェクタントを選択した。次いで、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯは、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２
０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、ＲＡＧＥ構築物を一時的に形質導入し、１
６時間インキュベートした。ヒト（Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ）ＡＧＥＲ転写バリアント
１コード配列（ＮＭ＿００１１３６）を合成し、ｐＣＩｎｅｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）のＮｈ
ｅＩ及びＸｂａＩ部位間でクローニングして、ベクターｐＣＩｎｅｏ－ＲＡＧＥを生成し
た。次いで、このプラスミドを使用して、変異体ＡＧＥＲクローンのライブラリ（ＮＰ＿
００１１２７）を生成した。プライマー１－ＲＡＧＥ－ＳＰ－５’及びｍＣｈｅｒｒｙ－
ＸｈｏＩ－ＮｏｔＩ－３’を使用して、ベクターｐｍＣｈｅｒｒｙ－Ｃ１からｍＣｈｅｒ
ｒｙのコード配列を増幅した。次いで、得られたＰＣＲ産物を、プライマー２－ＲＡＧＥ
－ＳＰ－５’及びｍＣｈｅｒｒｙ－ＸｈｏＩ－ＮｏｔＩ－３’を使用した第２のＰＣＲの
テンプレートとして使用した。生成したＰＣＲ産物はＮｈｅＩ及びＮｏｔＩで消化され、
ｐＣＩｎｅｏのＮｈｅＩ及びＮｏｔＩ部位間に挿入されて、ｐＣＩｎｅｏ－ＳＰ－ｍＣｈ
ｅｒｒｙを生成した。挿入物の配列は、ＤＮＡ配列決定（Ｍｉｃｒｏｍｏｎ、Ｍｏｎａｓ
ｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）により確認された。トランケート型ＲＡＧＥ構築物について
、プライマー１－ＲＡＧＥ－ＳＰ－５’及びｍＣｈｅｒｒｙ－ＸｈｏＩ－ＮｏｔＩ－３’
を使用して、ベクターｐｍＣｈｅｒｒｙ－Ｃ１からｍＣｈｅｒｒｙのコード配列を増幅し
た。次いで、得られたＰＣＲ産物を、プライマー２－ＲＡＧＥ－ＳＰ－５’及びｍＣｈｅ
ｒｒｙ－ＸｈｏＩ－ＮｏｔＩ－３’を使用した第２のＰＣＲのテンプレートとして使用し
た。生成したＰＣＲ産物はＮｈｅＩ及びＮｏｔＩで消化され、ｐＣＩｎｅｏのＮｈｅＩ及
びＮｏｔＩ部位間に挿入されて、ｐＣＩｎｅｏ－ＳＰ－ｍＣｈｅｒｒｙを生成した。挿入
物の配列は、ＤＮＡ配列決定（Ｍｉｃｒｏｍｏｎ、Ｍｏｎａｓｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
）により確認された。
＜定量的リアルタイムＰＣＲによる炎症促進性マーカー及びメディエーターの細胞発現＞
Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）又はＲＡＧＥリガンドへの２時間の曝露後、Ｓ１００Ａ８／Ａ
９（５ｎｇ／ｍＬ）細胞をＴｒｉｚｏｌに入れ、ｍＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡを合成した
。ＮＦκＢサブユニットｐ６５（ＲｅｌＡ）又はＮＦκＢ活性化標的遺伝子（例えば、Ｉ
ＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）の遺伝子発現の変化は、蓄積性蛍光のリアルタイム検出に基
づいたＴａｑＭａｎシステムを使用して実行された定量的リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによ
って推定された（ＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ ７７００、Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ Ｉｎｃ、
ＰＥ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ、ＵＳＡ）。遺伝子発現は
１８ ＳｍＲＮＡに正規化され、未処置対照マウス／細胞の発現レベル（１の任意値とし
た）と比較した倍率変化として報告された。
＜ｓｉＲＮＡを使用した遺伝子発現の選択的サイレンシング＞
Ｃ５７ｂｌ６マウスのＰＭＡＥＣも、製造元の取扱説明書に従ってＬｉｐｏｆｅｃｔａ
ｍｉｎｅ ＲＮＡｉＭＡＸ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、ｓｉＲＮＡで、ＲＡＧ
Ｅ（２ｎＭ）Ａｍｂｉｏｎ、ＩＤ：ｓ６２１１９）、ｐ６５（ＲｅｌＡ）（１０ｎＭ；Ａ
ｍｂｉｏｎ、ＩＤ：ｓ７２８５７）、ＭｙＤ８８（１０ｎＭ；Ａｍｂｉｏｎ、ＩＤ：ｓ２
０１７１９）、ＰＫＣζ（１０ｎＭ；Ａｍｂｉｏｎ、ＩＤ：ｓ７１７１６）、ＩＱＧＡＰ
－１ 、Ａｍｂｉｏｎ、ＩＤ：ｓ７８１１９）、Ｄｉａｐｈ１（１０ｎＭ；センス５’－
ＵＡＣＡＧＡＧＧＡＡＧＣＵＧＡＵＡＵＵＧＡＡＧＣＣ、アンチセンス３’－ＧＧＣＵＵ
ＣＡＡＵＡＵＣＡＧＣＵＵＣＣＵＣＵＧＵＡ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）又はスクランブル
対照＃１（２ｎＭ又は１０ｎＭ；Ａｍｂｉｏｎ）に形質導入した。シグナル伝達対照とし
て、１μＭ Ａｎｇ ＩＩ又は５ｎｇ／ｍｌのＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９で
処置する前に、１０％ＦＢＳを含有する培地で細胞を１６時間回復させた。
＜ペプチドの生成＞
オリゴペプチド（Ｃｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ（対照）、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ－ＲＡＧＥ
３６２－４０４及びｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＴＡＴ－ＲＡＧＥ３６２－４０４は、
大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）株ＣｌｅａｒＣｏｌｉ ＢＬ２１（ＤＥ３
；Ｌｕｃｉｇｅｎ）の形質転換によって生成された。単一の形質転換コロニーを、１００
μｇ／ｍｌアンピシリンを含む５０ｍｌ ２ＹＴ培地に接種し、培養物を２５０ｒｅｖ／
分で振盪しながら３７℃で一晩増殖させた。１０ｍｌの一晩培養液を使用して、１００μ
ｇ／ｍｌアンピシリンを含む１リットルの２ＹＴ培地に接種し、培養液を２５０ｒｅｖ／
ｍｉｎで振盪しながら３７℃で増殖させた。培養物のＯＤ６００が０．８に達すると、温
度を１５℃に３０分間シフトし、その後、１ｍＭイソプロピルβ－Ｄ－１－チオガラクト
ピラノシド（ＩＰＴＧ）の添加によりタンパク質発現を誘導した。ＩＰＴＧの添加に続い
て、培養物を２５０回転／分で振盪しながら１５℃で約１６時間増殖させた。遠心分離（
３５００ｇ、４°Ｃ、２０分）により細胞を回収し、氷冷溶解緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉ
ｓ ｐＨ７．４、３００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ ｍＭイミダゾール、５ｍＭβメルカプト
エタノール）に再懸濁した。再懸濁した細胞を超音波処理し、不溶性物質を遠心分離（１
３０００ｇ、４℃、３０分）でペレット化した。上清をろ過（０．２μｍ）し、溶解緩衝
液で事前に平衡化した１ｍｌのＮｉ－ＮＴＡアガロース樹脂総容積（Ｑｉａｇｅｎ）を備
えた重力流カラムに供した。上清を樹脂に通した後、カラムを１００ｍｌの洗浄緩衝液（
２０ｍＭイミダゾール、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．４、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍ
Ｍ β－メルカプトエタノール）で洗浄した。Ｈｉｓ標識ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ及びＴ
ＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥペプチドは、溶出緩衝液（２５０ｍＭイミダゾール、５
０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．４、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ β－メルカプトエタノ
ール）を使用して樹脂から溶出した。精製タンパク質の純度は、ＳＤＳ－ＰＡＧＥで評価
した。典型的には、培養液１リットルあたり１０ｍｇのタンパク質が生成された。タンパ
ク質を含有する溶出画分をプールし、Ｎａｎｏｄｒｏｐ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅ
ｔｒｙ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）及びＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａ
ｙ（Ｐｉｅｒｃｅ）で定量した。
＜生物発光共鳴エネルギー移動（ＢＲＥＴ）＞
ＢＲＥＴは、特にＧＰＣＲを含む、生細胞におけるタンパク質－タンパク質近接性を研
究するための確立された技術である（Ｐｆｌｅｇｅｒ ａｎｄ Ｅｉｄｎｅ，２００６）
。目的の１つのタンパク質は、生物発光ドナー酵素であるＲｌｕｃ８、ウミシイタケルシ
フェラーゼのバリアントに連結され、第２のタンパク質は、アクセプターフルオロフォア
であるＶｅｎｕｓ、緑色蛍光タンパク質のバリアントに連結された。近接近にある場合（
＜１０ｎｍ）、ドナーによる細胞透過性セレンテラジン基質の急速な酸化から生じるエネ
ルギーがアクセプターに移動でき、これは、より長い特性波長で蛍光を発する。
プラスミドは、ヒト胚性腎臓（ＨＥＫ）２９３ＦＴ細胞で一時的に共発現され、ＢＲＥ
Ｔ測定は、ＰＯＬＡＲｓｔａｒ Ｏｍｅｇａ又はＬＵＭＩｓｔａｒプレートリーダー（Ｂ
ＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、Ｍｏｒｎｉｎｇｔｏｎ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、オーストラリア）を
使用して、４６０～４９０ｎｍ（「ドナー放出」）及び５２０～５５０ｎｍ（「アクセプ
ター放出」）フィルターで、又はＶＩＣＴＯＲ Ｌｉｇｈｔプレートリーダー（Ｐｅｒｋ
ｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｇｌｅｎ Ｗａｖｅｒｌｅｙ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、オーストラリア）
を使用して、４００～４７５ｎｍ（「ドナー放出」）及び５２０～５４０ｎｍ（「アクセ
プター放出」）フィルターで、又はＣＬＡＲＩＯｓｔａｒプレートリーダー（ＢＭＧ Ｌ
ａｂｔｅｃｈ、Ｍｏｒｎｉｎｇｔｏｎ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、オーストラリア）を使用して
、４２０～４８０ｎｍ（「ドナー放出」）及び５２０～６２０ｎｍ（「アクセプター放出
」）フィルターで、３７°Ｃで行われた。
ＢＲＥＴ比は、Ｒｌｕｃ８及びＶｅｎｕｓ標識タンパク質の両方を発現する細胞サンプ
ルと同じ比率から、Ｒｌｕｃ８標識タンパク質のみを発現する細胞サンプルの「ドナー放
出」に対する「アクセプター放出」の比率を引くことにより計算された。代わりに、リガ
ンド誘導ＢＲＥＴシグナルは、アゴニストで処置した同じ細胞の第２のアリコートと同じ
比率から、ビヒクルで処置した細胞サンプルの「ドナー放出」に対する「アクセプター放
出」の比率を引くことにより計算された。
ＢＲＥＴ動態アッセイの場合、最終的な処置前の読み取り値は、ゼロ時点（リガンド／
ビヒクルの添加時点）で表示される。飽和アッセイでは、４８５／１４励起フィルター、
５３５／２５発光フィルター及びＤ５０５ミラーを使用して、ＥｎＶｉｓｉｏｎ ２１０
２マルチラベルプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｇｌｅｎ Ｗａｖｅｒｌｅ
ｙ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、オーストラリア）で光励起後の蛍光を測定した。蛍光／発光比率
は、任意単位の蛍光値（ＥｎＶｉｓｉｏｎで取得）を任意単位の発光値（ＢＲＥＴアッセ
イの一部として取得）で除算することによって生成された。
ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８及びβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓを用いたＲｅｃｅｐｔｏｒ－
ＨＩＴアッセイでは、ＢＲＥＴシステムに関して非標識のＧＰＣＲがＨＥＫ２９３ＦＴ細
胞で共発現した。次いで、これらの細胞を、共発現ＧＰＣＲに選択的な適切な認識アゴニ
ストで処置して、そのＧＰＣＲへのβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓの動員を促進した。リ
ガンド誘導ＢＲＥＴシグナルは、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖ
ｅｎｕｓの動員を示し、それによりＲＡＧＥと活性化ＧＰＣＲとが近接近にあることを示
した。
図２１Ｂ、Ｃ、ＤのＢＲＥＴ測定は、３７℃で、ＣＬＡＲＩＯｓｔａｒプレートリーダ
ー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、Ｍｏｒｎｉｎｇｔｏｎ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、オーストラリ
ア）を使用して、４２０～４８０ｎｍ（「ドナー放出」）及び５２０～５８０ｎｍ（「ア
クセプター放出」）フィルターで行われた。図２１Ｅの発光測定値は、ＢＲＥＴ測定値（
「ドナー放出」）の一部として取得された。図２１Ｅの蛍光測定は、ＣＬＡＲＩＯｓｔａ
ｒプレートリーダーを使用して、Ｖｅｎｕｓについて４９７／１５ｎｍ励起フィルター、
５４０／２０ｎｍ発光フィルター及び５１７．２ｎｍダイクロイックミラーで、ｍＣｈｅ
ｒｒｙについて５８０／８ｎｍ励起フィルター、６１５／１０ｎｍ発光フィルター及び５
９７ｎｍダイクロイックミラーで行われた。
＜統計＞
連続データは平均±ＳＥＭとして表される。群間の平均差は、両側ＡＮＯＶＡを使用し
て比較された。群間の有意差を検出するために、Ｓｔｕｄｅｎｔ－Ｎｅｗｍａｎ－Ｋｅｕ
ｌｓ事後分析によりペアごとの多重比較が行われた。Ｐ＜０．０５は統計的に有意と見な
された。
［実施例１ ＡＮＧ ＩＩの注入に伴うアテローム発生は、ＡＧＥＲ／ＡＰＯＥ－ＤＫＯ
マウスで減少する］
この実施例は、ＲＡＧＥの発現が、アテローム性動脈硬化感受性ａｐｏＥ－ＫＯマウス
のアテローム発生を増加させるために、アンジオテンシンＩＩ（Ａｎｇ ＩＩ）の注入に
必要であることを示している。
４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）の注入は、アテローム硬化性プラーク
の存在を表すＳｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合の増加によって示される
ように、未処置のａｐｏＥ－ＫＯマウスと比較して、アテローム性動脈硬化感受性ａｐｏ
Ｅ－ＫＯマウスのアテローム形成を増加させる（図１Ａ）。
４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）の注入は、アテローム形成促進メディ
エーター（図１Ｂ）及び酸化ストレスのマーカー（図１Ｃ）をコードする遺伝子の大動脈
発現も増加する。
ａｐｏＥ－ＫＯマウスでは、４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）の注入は
、Ｓ１００Ａ８／Ａ９、ＡＧＥ及びそれらの反応性ジカルボニル前駆体（図１Ｄ）を含む
ＲＡＧＥリガンドの循環レベルも増加し、Ａｎｇ ＩＩ処置マウスの大動脈におけるＲＡ
ＧＥリガンドＭａｃ１／ＣＤ１１ｂの遺伝子発現も増加する。（図１Ｂ）。
ＲＡＧＥの遺伝子欠失は、ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスへのＡｎｇ ＩＩ（１μ
ｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）の４週間注入後に観察されるアテローム形成の増加を防ぎ（図１Ａ）
、アテローム形成促進メディエーターのＡｎｇ ＩＩ誘導大動脈発現（図１Ｂ）、Ａｎｇ
ＩＩ誘導酸化ストレス（図１Ｃ）及びＡｎｇ ＩＩ注入後のａｐｏＥ－ＫＯマウスで観
察されるＲＡＧＥリガンドのＡｎｇ ＩＩ誘導循環レベル（図１Ｄ）も防ぐ。
収縮期血圧レベルは、ａｐｏＥ－ＫＯ及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス（図１Ｅ
）の両方にＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）を４週間注入した後、同程度に増加し
、ＲＡＧＥ欠乏がＡＴ１Ｒを介してＡｎｇ ＩＩによって誘導される血行動態シグナル伝
達に影響を与えないことを示す。
＜追加の材料と方法＞
＜アンジオテンシン注入モデル＞
６～８週齢の雄のａｐｏＥ－ＫＯ及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス（ｎ＝８／グ
ループ）を無作為化して、Ａｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒ
ｉｃｈ、Ｃａｓｔｌｅ Ｈｉｌ、オーストラリア）又はケタミン（１５０ｍｇ／ｋｇ）及
びキシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により、全身麻酔下で各マウスの背側正中
線に沿った皮下腔に配置した浸透圧ミニポンプ（Ｍｏｄｅｌ ２００４、ＡＬＺＥＴ、Ｂ
ｉｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｇｙｍｅａ、オーストラリア）を使用し４週間の皮下注入を
介した溶媒を摂取した。各モデルの各研究期間の最後に、ＣＯ２窒息とそれに続く心臓穿
刺による放血を使用してマウスを人道的に殺処分した。
［実施例２ ＲＡＡＳを活性化する低ナトリウム食に関連するアテローム形成は、ＡＧＥ
Ｒ／ＡＰＯＥ－ＤＫＯマウスで減少する］
この実施例は、アテローム性動脈硬化感受性ａｐｏＥ－ＫＯマウスでアテローム形成を
誘導するために、低ナトリウム食に関連するＲＡＡＳ活性化にＲＡＧＥの発現が必要であ
ることを示している。
低ナトリウム食は、生理的レニン－アンジオテンシン－アルドステロン系（ＲＡＡＳ）
活性化の一般に認められている実験モデルであり、ホメオスタシス機能の一部として適切
に塩を保持するＲＡＡＳの能力のテストである。
０．０５％（低）ナトリウム食の６週間の曝露は、アテローム硬化性プラークの存在を
表すＳｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合の増加によって示されるように、
ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおけるＲＡＡＳ依存性プラーク蓄積の増加をもたらす（図２Ａ）
。
０．０５％（低）ナトリウム食への６週間の曝露は、アテローム形成促進メディエータ
ーの大動脈発現の増加（図２Ｂ）、酸化ストレスのマーカーの増加（図２Ｃ）及び可溶性
ＭＣＰ－１及びＩＣＡＭ－１の血中濃度の増加（図２Ｄ）ももたらす。
通常食を与えたａｐｏＥ－ＫＯマウスの大動脈と比較して、低ナトリウム食の１週間の
曝露後、ａｐｏＥ－ＫＯマウスから採取した大動脈により多くの白血球が接着する（図２
Ｅ）。
ａｐｏＥ－ＫＯマウスでは、低塩食は、Ｓ１００Ａ８／Ａ９、ＡＧＥ及びその反応性ジ
カルボニル前駆体（図２Ｆ）を含むＲＡＧＥリガンドの循環レベルを増加させ、大動脈に
おけるＲＡＧＥリガンドＭａｃ１／ＣＤ１１ｂの遺伝子発現も増加させる（図２Ｂ）。
ＲＡＧＥの遺伝子欠失は、同じ食餌を与えたａｐｏＥ－ＫＯマウスと比較した場合、低
ナトリウム食の４週間後のＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおけるアテローム形成の
誘導を防ぎ（図２Ａ）、また、血管炎症のマーカーの大動脈発現の増加、酸化ストレスの
マーカーの増加又は循環炎症マーカーの増加（図２Ｂ、２Ｃ及び２Ｄ）も防ぐ。
低ナトリウム食を１週間与えたＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯから採取した大動脈は、同
じ食餌を与えたａｐｏＥ－ＫＯマウスと比較して、エクスビボで大動脈内皮への標識され
た白血球の接着性の増加を示さない（図２Ｅ）。
ａｐｏＥ－ＫＯマウスで見られる低ナトリウム食の摂取に応じたＲＡＧＥリガンド、Ｓ
１００Ａ８／Ａ９及びＡＧＥの循環レベルの増加は、同じ低ナトリウム食で４週間処置し
たＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスでは観察されない（図２Ｆ）。
血圧レベルは、ａｐｏＥ－ＫＯ又はＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスのいずれにおい
ても低ナトリウム食によって変更されない（図２Ｇ）。
ＲＡＡＳ活性化のマーカーの生理学的誘導（例えば、血漿アルドステロン、血漿レニン
）及び低ナトリウム食に関連するナトリウム保持は、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ
／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス間で有意差はない（図２Ｈ）。
＜追加の材料と方法＞
＜マウスの０．０５％（低）ナトリウム食への曝露＞
低ナトリウム食（０．０５％ナトリウム）への曝露は、生理学的ＲＡＡＳ活性化の認め
られた実験モデルである（Ｔｉｋｅｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．２０１２）。この研究では、
ａｐｏＥ－ＫＯ及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス（ｎ＝８／グループ）を無作為化
して、共に６％の脂肪を含む（Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｆｅｅｄｓ、パース、オーストラリ
ア）低塩分（０．０５％ナトリウム）又は通常の塩分（０．３％ナトリウム）を含む等カ
ロリー食を１週間又は６週間、摂取した。
＜血漿レニン及びアルドステロン＞
ＲＡＡＳの活性化は、アルドステロン及び（プロ）レニンの循環レベルの増加と関連し
ている。これらのＲＡＡＳ成分は、グループごとに市販のラジオイムノアッセイ（Ｐｒｏ
Ｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｍａｌｖｅｒｎ、オーストラリア）によっ
て推定された。
＜可溶性ＭＣＰ－１及びＩＣＡＭ－１の循環＞
可溶性ＭＣＰ－１及びＩＣＡＭ－１の循環は、製造元の取扱説明書に従ってそれぞれ実
施されたＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）によって推定された。
＜尿中ナトリウム排泄＞
６週間の通常又は低ナトリウム食後、マウスを個々の代謝ケージ（Ｉｆｆａ Ｃｒｅｄ
ｏ、Ｌ’Ａｒｂｒｅｓｅｌｅ、フランス）に２４時間入れ、体重、水及び食物（ナトリウ
ム）の摂取量と尿排泄量を記録した。（ＣＯＢＡＳ ＩＮＴＥＧＲＡ ４００オートアナ
ライザー；（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＵＳＡ
）により、イオン感受性電極を使用して希釈尿中のナトリウム濃度を測定し、総ナトリウ
ム排泄量（μｍｏｌ／日）を総尿排泄量に乗じて推定した。
＜標識白血球の大動脈への接着＞
低ナトリウム又は通常ナトリウム食の１週間後、ａｐｏＥ－ＫＯ及びＡＧＥＲ／ａｐｏ
Ｅ－ＤＫＯ動物は人道的に殺処分された。大動脈を摘出し、脂肪が取り除かれ、クレブス
緩衝液で満たされた血管チャンバーに標本として入れ、前述のとおり、３７℃の緩衝液を
通過し、カルボゲンガス（９５％Ｏ２、５％ＣＯ２）を注入することにより生理学的ｐＨ
に維持された。次に、ＤｉｌＣ１８（１：１０００）で標識した全血を、０．１２ｍｌ／
ｍｉｎで大動脈に灌流した。ポジティブコントロールとして、血管（ｎ＝６／グループ）
をＴＮＦα（４ｎｇ／ｍｌ）で４時間、３７°Ｃ又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）で前処置し
た。血管壁細胞の相互作用の画像とビデオを、蛍光顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ Ｄｉｓｃｏｖｅ
ｒｙ．Ｖ２０）を使用して取得し、デジタルカメラ（ＨＡＭＡＭＡＴＳＵ ＯＲＣＡ－Ｅ
Ｒ）と組み合わせて、ＡｘｉｏＶｉｓｏｎソフトウェアで分析した。各時点で２～３フレ
ームを撮影し、１フレームあたりの接着細胞の数を記録した。
［実施例３ ＡＣＥ２／ＡＰＯＥダブルＫＯマウスのアテローム形成は、ＡＣＥ２／ＡＧ
ＥＲ／ＡＰＯＥトリプルＫＯマウスで減少する］
この実施例は、ＲＡＧＥの発現がアテローム性動脈硬化感受性Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－Ｄ
ＫＯマウスのアテローム形成の増加を誘導するために遺伝的Ａｃｅ２欠損に必要であるこ
とを示している。
ＡＣＥ２は、ＲＡＡＳの主要なエフェクターであるＡｎｇ ＩＩを代謝する酵素である
。Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおけるＡｃｅ２の遺伝的欠損は、Ａｎｇ ＩＩの
循環レベルの増加（図３Ａ）、収縮期血圧の増加（図３Ｂ）及びＡｃｅ２を構成的に十分
にあるａｐｏＥ－ＫＯマウスと比較した場合の大動脈弓におけるプラーク蓄積の増大に関
連するＲＡＡＳの構成的活性化（図３Ｃ）をもたらす。
Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈も、ａｐｏＥ－ＫＯマウスと比較して、ア
テローム形成促進メディエーターの発現の増加を示している（図３Ｄ）。
Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＫＯマウスは、ａｐｏＥ－ＫＯマウス（図３Ｆ）と比較して、酸
化ストレスの循環マーカーを増加させ（図３Ｅ）、Ｓ１００Ａ８／Ａ９及びＡＧＥを含む
ＲＡＧＥリガンドの循環レベルを上昇させた。
Ａｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ ＴＫＯマウスのＲＡＧＥをコードするＡＧＥＲ遺伝子
の遺伝子欠失は、アテローム形成の増加（図３Ｃ）及びＡｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウ
スで観察される炎症促進性マーカー（図３Ｄ）、酸化ストレスのマーカー（図３Ｅ）及び
ＲＡＧＥリガンドの誘導（図３Ｆ）を防ぎ、これらのマーカーはａｐｏＥ－ＫＯマウスで
観察されたものと同様のレベルに回復した。
Ａｎｇ ＩＩの血圧レベル及び血中濃度は、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯ又はＡｃｅ２
／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ ＴＫＯ間で有意差はない（図３Ａ及び３Ｂ）。
＜追加の材料と方法＞
＜ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおけるＡｃｅ２の遺伝子欠損＞
Ａｃｅ２は、血管系でＡｎｇ ＩＩを代謝する主要な酵素である。アテローム性動脈硬
化感受性ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおけるＡｃｅ２の遺伝子欠損は、野生型ａｐｏＥ－ＫＯ
マウスと比較した場合、Ａｎｇ ＩＩの循環レベルの増加及びプラーク蓄積の増加をもた
らす（Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ ２０１２）。これらの研究では、雄のＡｃｅ２／ａｐ
ｏＥ－ＤＫＯ及びＡＧＥＲ／Ａｃｅ２／ａｐｏＥ ＴＫＯマウスを１６～１８週齢まで追
跡した。これは、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおけるプラーク蓄積の増加に関連
する時点である。
＜血漿アンジオテンシンＩＩ＞
血漿アンジオテンシンＩＩレベルは、市販のラジオイムノアッセイ（ＰｒｏＳｅａｒｃ
ｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｍａｌｖｅｒｎ、オーストラリア）によって推定され
た。
［実施例４ アンジオテンシンＩＩへの曝露による大動脈及び内皮における炎症促進性シ
グナル伝達の誘導は、ＲＡＧＥ発現に依存している］
この実施例は、ＲＡＧＥの発現がＡｎｇ ＩＩへの曝露に必要であり、大動脈及びそれ
らから採取された大動脈内皮細胞の炎症促進性シグナル伝達を誘導することを示している
。
ａｐｏＥ－ＫＯマウスから摘出された大動脈をＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）にエクスビボで
曝露すると、アテローム形成促進メディエーターの発現が増加し（図４Ａ）、未処置の大
動脈と比較した場合、接着白血球数が増加する（図４Ｂ）。
ＡＧＥＲ／ｐｏＥ ＤＫＯマウスでのＲＡＧＥの遺伝子欠失は、ａｐｏＥ－ＫＯマウス
からの大動脈と比較した場合、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後、これらのアテローム
生成メディエーターの誘導（図４Ａ）又はプライミング白血球の大動脈への内皮接着性の
増加（図４Ｂ）を防ぐ。
Ｃ５７ｂｌ６マウスの大動脈から摘出された一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）
では、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露により、炎症促進性シグナル伝達も誘導される。
これは、標識ＴＨＰ－１（単球型）細胞のＡｎｇ ＩＩ処置ＰＭＡＥＣの単層への接着の
増加（図４Ｃ）及び主要な炎症促進性遺伝子の発現の増加（図４Ｄ）並びにＲＯＳ及び酸
化ストレスの他のマーカーの産生、ｒａｃ－１及び酸化グルタチオンの活性化において急
速な増加に関連している（図４Ｅ）。
Ｃ５７ｂｌ６マウスの大動脈から摘出されたＰＭＡＥＣでは、古典的なマーカーＣＸＣ
Ｌ２及びＣＸＣＬ１２の誘導によって実証されるように、Ａｎｇ ＩＩへの曝露は、ＮＦ
κＢの下流の標準的及び非標準的なシグナル伝達の誘導ももたらす（図４Ｆ）。ＴＮＦα
は、ＮＦκＢ活性化の下流への標準シグナル伝達を選択的に誘導する能力のポジティブコ
ントロールとして示されている。ＶＣＡＭ－１の発現は、図４Ｄのデータを複製する追加
の標的応答遺伝子として示されている。
Ｃ５７ｂｌ６マウスの大動脈から摘出されたＰＭＡＥＣでは、ＲＡＧＥリガンド、Ｓ１
００Ａ８／Ａ９への曝露により、ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１、ＴＮＦα及びＭＣＰー１
などの標的ＮＦκＢ依存性炎症促進性遺伝子も誘導される（図４Ｇ）。
ＡＧＥＲ－ＫＯマウスから摘出されたＰＭＡＥＣでは、Ａｎｇ ＩＩによる処置は、主
要な炎症促進性遺伝子（図４Ｄ）、ＮＦκＢの標準的又は非標準的活性化のマーカー（図
４Ｆ）、ＲＯＳ生産及び酸化ストレス（図４Ｅ）の増加又は内皮接着性の機能的増加（図
４Ｃ）の誘導を引き起こさない。
ＡＧＥＲ－ＫＯマウスから摘出されたＰＭＡＥＣでは、ＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ
８／Ａ９で処置は、ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１及びＭＣＰ－１などの炎症促進性遺伝子
の誘導を引き起こさない（図４Ｇ）。
ｓｉＲＮＡを使用したＰＭＡＥＣでのＡＧＥＲ発現のサイレンシングは、遺伝的ＲＡＧ
Ｅ欠失と同様の表現型を実現し、Ａｎｇ ＩＩ又はＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ
９によるＶＣＡＭ－１遺伝子発現のＮＦκＢ依存性誘導を防ぐ（図４Ｈ）。ｐ６５発現の
サイレンシングは、このシグナル伝達経路のＮＦκＢ依存性のポジティブコントロールと
して示されている。
これらを総合すると、ＡＧＥＲ－ＫＯマウスの内皮細胞及びＲＡＧＥ発現がｓｉＲＮＡ
により抑制されたＰＭＡＥＣにおける発見は、どちらもこれらの細胞におけるＳ１００Ａ
８／Ａ９の作用がＲＡＧＥを介して特異的に媒介されること、及びＳ１００Ａ８／Ａ９が
ＮＦκＢを活性化する可能性のある他の受容体及び他の細胞系（例えば、白血球及びグリ
ア細胞など）に存在する下流のシグナル伝達経路（例えば、Ｔｏｌｌ様受容体など）は、
ＰＭＡＥＣにおけるこの現象には重要な役割を果たさない。
ＲＡＧＥ欠損ＰＭＡＥＣのＡｎｇ ＩＩへの曝露はイノシトールリン酸合成の同様の増
加をもたらすため、ＡＧＥＲ－ＫＯマウス由来のＰＭＡＥＣにおけるＡｎｇ ＩＩの効果
の観察された減衰は、ＲＡＧＥ非存在下でのＲＡＡＳシグナル伝達の喪失によるものでは
ないＩＰ－１の増加及び初期増殖応答遺伝子（ＥＧＲ１）の下流誘導により推定されるよ
うに、両方とも適格性があるＡｎｇ ＩＩを介したシグナル伝達のマーカーであると考え
られる（図４Ｉ）。
＜追加の材料と方法＞
＜摘出大動脈のエクスビボ研究＞
大動脈はａｐｏＥ－ＫＯ及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスから摘出され、分割さ
れてクレブス緩衝液に入れられた。そして、３７°Ｃの緩衝液を通してカルボゲンガス（
９５％Ｏ２；５％ＣＯ２）を注入することにより生理的ｐＨに維持された。次に、血管（
ｎ＝６／グループ）をＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）で４時間処置した。その後、ＤｉｌＣ１８
（１：１０００）で標識された全血を大動脈に０．１２ｍｌ／ｍｉｎで灌流した。血管壁
細胞の相互作用の画像とビデオを、蛍光顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．Ｖ２
０）を使用して観察し、デジタルカメラ（ＨＡＭＡＭＡＴＳＵ ＯＲＣＡ－ＥＲ）と組み
合わせて、ＡｘｉｏＶｉｓｏｎソフトウェアで分析した。
＜静的接着アッセイ＞
Ａｎｇ ＩＩに対する機能的応答性は、ＰＭＡＥＣで静的接着アッセイを使用して決定
した。このアッセイでは、ＰＭＡＥＣを１ウェルあたり５０，０００細胞で６ウェルプレ
ートに播種し、１μＭ Ａｎｇ ＩＩで２４時間処置する前に７０％コンフルエントに成
長させた。血管内の単球及びマクロファージを模倣するヒトＴＨＰ－１細胞は、製造元の
取扱説明書に従ってＣｅｌｌＶｕｅ Ｂｕｒｇｕｎｄｙ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｃｅ
ｌｌラベリングキット（ＬＩＣＯＲ）を使用して染色し、その後、１ウェルあたり３×１
０５の生存細胞で内皮細胞単層に播種し、２０分間３７℃でインキュベートした。内皮細
胞単層に接着していなかった細胞を取り除き、ウェルをＰＢＳで洗浄した後、ＰＢＳ中の
４％ホルマリンで３０分間固定した。次に、ＯＤＹＳＳＥＹ赤外線イメージャー（Ｌｉｃ
ｏｒ）を使用して、細胞の接着を定量化した。さらに、光学顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ Ｃ
ＫＸ４１）を使用して、接着細胞を２０倍で撮影した。
＜スーパーオキシドの生成及び酸化ストレスの追加マーカー＞
Ａｎｇ ＩＩによって誘導されるスーパーオキシド産生を定量化するために、ＡＧＥＲ
－ＫＯ及びＣ５７Ｂｌ６大動脈からのＰＭＡＥＣでリアルタイムに総細胞質及びミトコン
ドリアスーパーオキシド産生を測定するために、血管チャンバーアッセイが使用された。
ＰＭＡＥＣは、コラーゲンでコーティングされたカバースリップ上で成長し、８０％コン
フルエントになったときに密閉されたガラスチャンバーに取り付けられた。チャンバーを
クレブス緩衝液で１時間灌流し、１０分ごとに蛍光測定値を取得してベースライン測定値
を確立した。その後、細胞に１μＭ Ａｎｇ ＩＩを６０分間灌流し、さらに１０分間１
分ごとに蛍光測定を行った。蛍光測定値は、ベースラインからの蛍光任意単位の変化（Δ
）として表された。製造元の取扱説明書に従って、Ｒａｃ－１ Ｇ－ＬＩＳＡ活性化アッ
セイ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ）を使用して、Ａｎｇ ＩＩに曝露した後の細胞溶解物
の活性化ＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニットのレベル、Ｒａｃ－１活性化も測定した。
製造元の取扱説明書に従って実施される酸化型グルタチオンのレベルを含む酸化ストレス
の追加マーカー（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、ＵＳ）も分析され
た。
＜ＡＴ１Ｒを介したシグナル伝達の整合性＞
ＡＴ１Ｒシグナル伝達カスケードがＡＧＥＲ－ＫＯからのＰＭＡＥＣで機能することを
確認するために、製造元の取扱説明書及びＥＧＲ１の遺伝子発現の変化を使用したＩＰ－
ｏｎｅ ＨＴＲＦアッセイ（ＣｉｓＢｉｏ ｂｉｏａｓｓａｙｓ，Ｂａｇｎｏｌｓ－ｓｕ
ｒ－Ｃｅｚｅ Ｃｅｄｅｘ，フランス）を使用し、Ｇｑ受容体活性化後に細胞内に蓄積す
るイノシトールリン酸（ＩＰ３）の安定した下流代謝物であるミオ－イノシトールリン酸
（ＩＰ１）を測定した。その後、リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって評価された１μＭ
Ａｎｇ ＩＩへの曝露の２時間後にＡＴ１Ｒは決定された。
［実施例５ ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞での炎症促進性シグナル伝達に対する全長型及び切断
されたヒトＲＡＧＥ構造の調節効果］
この実施例は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞で主要な炎症促進性転写因
子ｐ６５－ＮＦκＢの発現を誘導し、ＮＦκＢ活性を増加させるためのＡｎｇ ＩＩへの
曝露には、ＡＴ１ＲとＲＡＧＥの両方の発現も必要であることを示している。
ＣＨＯ細胞は細胞表面受容体をほとんど発現せず、特に表面に内因性ＡＴ１Ｒ又はＲＡ
ＧＥを発現しないため、ＡＴ１Ｒ－ＲＡＧＥ相互作用の役割を探求する理想的なシステム
である。さらに、ＣＨＯ細胞は、ＲＡＧＥリガンドに結合し、それらによって活性化され
る能力を潜在的に有するＴＬＲを発現せず、ＮＦκＢの活性化をもたらす。
ヒトＡＴ１Ｒ遺伝子によるＣＨＯ細胞の安定した形質導入により、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細
胞が生成され、イノシトールリン酸合成の誘導（図５Ａ）及び初期増殖応答遺伝子、ＥＧ
Ｒ１（図５Ｂ）の誘導によって実証されるように、外因性Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）に対す
る古典的な応答性が付与される。
対照的に、外因性のＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）は、主要な炎症促進性転写因子であるｐ６
５－ＮＦκＢの発現を誘導することも、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＮＦκＢ活性化を
高めることもできない（図５Ｃ）。
外因性Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）は、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に全長型のヒトＲＡＧＥポリ
ペプチドを形質導入し、発現させた場合にのみ、主要な炎症促進性転写因子ｐ６５－ＮＦ
κＢの活性化を誘導できる（図５Ｃ）。ＲＡＧＥリガンドであるＳ１００Ａ８／Ａ９（５
ｎｇ／ｍＬ）は、細胞がＲＡＧＥポリペプチドも発現している場合にのみ、主要な炎症促
進性転写因子ｐ６５－ＮＦκＢの活性化を誘導することができる（図５Ｃ）。これは、Ｒ
ＡＧＥのトランスジェニック発現及び形質導入されたＣＨＯ細胞におけるそのシグナル伝
達経路の完全性のポジティブコントロールとしての役割を果たす。
（ｉ）ＲＡＧＥの細胞外ドメインを欠く（すなわちｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３４２－
４０４）、（ｉｉ）ＲＡＧＥの細胞外ドメイン及び膜貫通ドメインを欠く（すなわちｍＣ
ｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４）、又は（ｉｉｉ）ＲＡＧＥの細胞外ドメイン、膜
貫通ドメイン及びＤｉａｐｈａｎｏｕｓ－１結合ドメイン（３６６－３６７）を欠く（す
なわちｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３７０－４０４）Ｎ末端トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ
－ＲＡＧＥ構築物によるＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞の形質導入は、Ｑ３７９が保持される条件
で、空プラスミド（ベクター）のみと比較した場合、Ａｎｇ ＩＩ応答性の炎症促進性シ
グナル伝達を媒介する全長型ＲＡＧＥ２２－４０４の能力を保持する（図５Ｄ）。Ｑ３７
９を超えるＮ切断（例えば、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３８０－４０４）は、Ａｎｇ Ｉ
Ｉ応答性の炎症促進性シグナル伝達を媒介することのできない不活性な変異ＲＡＧＥペプ
チドをもたらす。
Ａｎｇ ＩＩ応答性のＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞へのＣ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物
の形質導入は、野生型ＲＡＧＥのＣ末端の少なくともＳｅｒ３９１が無傷のままであると
いう条件で、炎症促進性シグナル伝達を媒介する能力を保持する（すなわちＲＡＧＥ２２
－３９１；図５Ｅ）。
ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞でＡｎｇ ＩＩ応答性の炎症促進性シグナル伝達を媒介する能力
を保持している最小の構築物は、１３－ｍｅｒの構築物ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３７９
－３９１である（図５Ｅ）。
ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９（図５Ｆ）応答性のＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に形質
導入した場合、ＲＡＧＥリガンド結合外部ドメインを欠くＮ末端トランケート型ｍＣｈｅ
ｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物は、シグナル伝達を促進できない。これは、ＲＡＧＥリガンド依
存性ＲＡＧＥ活性化は、リガンドに結合するためこのリガンド結合外部ドメインを必要と
しているためである。ＲＡＧＥの他の部分に加えて、その後、そのシグナル伝達を転送し
、細胞内シグナル伝達カスケードを動員し活性化する。
Ｃ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物は、Ｓ１００Ａ８／Ａ９応答性のＡＴ１Ｒ－ＣＨ
Ｏ細胞に形質導入され、野生型ＲＡＧＥのＣ末端の少なくともＳｅｒ３９１が無傷のまま
である場合に、炎症促進性シグナル伝達を媒介する能力を保持できる（すなわちＲＡＧＥ
２２－３９１；図５Ｇ）。
追加のｍＣｈｅｒｒｙタンパク質は、細胞モデルでの導入遺伝子構築物の発現を確実に
する実用的な手段を提供する。ただし、（ｉ）ｍＣｈｅｒｒｙの発現自体はシグナル伝達
経路に影響を及ぼさない（すなわち図５ＦのｍＣｈｅｒｒｙ対照）、且つ（ｉｉ）ｍＣｈ
ｅｒｒｙタンパク質が取り除かれたＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物（図５Ｈ）は、
Ａｎｇ ＩＩに応答して、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ融合タンパク質を発現するものと同
じレベルのシグナル伝達機能を達成する（図５Ｄ、５Ｆ）ため、Ｎ末端トランケート型Ｒ
ＡＧＥの炎症促進性シグナル伝達作用に関与しない。同様に、Ｑ３７９を超えるＮ切断に
よりαヘリックスが不安定になり、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ融合の有無にかかわらず、
構造物のシグナル伝達機能が失われる（それぞれ図５Ｆ及び５Ｈ）。
＜追加の材料と方法＞
＜古典的なＧＰＣＲシグナル伝達＞
製造元の取扱説明書に従い使用したＩＰ－ｏｎｅ ＨＴＲＦアッセイ（ＣｉｓＢｉｏ
ｂｉｏａｓｓａｙｓ、Ｂａｇｎｏｌｓ－ｓｕｒ－Ｃｅｚｅ Ｃｅｄｅｘ、フランス）を使
用し、Ｇｑ受容体活性化後に細胞内に蓄積するＩＰ３の安定した下流代謝物であるミオイ
ノシトールリン酸（ＩＰ１）の誘導により、１μＭ Ａｎｇ ＩＩで処置した細胞内で古
典的ＧＰＣＲシグナル伝達が確認された。
＜ＮＦκＢ活性アッセイ＞
１μＭ Ａｎｇ ＩＩ又はシグナル伝達コントロールとして５ｎｇ／ｍｌのＲＡＧＥリ
ガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によるＮＦκＢ活性の誘導を測定するために、製造元の取扱説
明書に従い使用したＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使
用してＮＦκＢ－ＳＥＡＰ又はβ－ガラクトシダーゼ（β－Ｇａｌ）をコードする０．４
μｇプラスミドでＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞を形質導入した。２４時間後、各プラスミドの組
み合わせで形質導入した細胞をＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）で処置するか又は未処置のまま４
時間インキュベートしてから、細胞上清と細胞溶解物を回収した。化学発光ＳＥＡＰレポ
ーター遺伝子アッセイ（Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して細胞
上清を分析し、処置後のＳＥＡＰ産生を検出した。形質導入効率を制御するために、市販
のキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、細胞溶解物でβ－Ｇａｌを分析した。
［実施例６ ＡＮＧ ＩＩによるＡＴ１Ｒの活性化後の、ＲＡＧＥリガンド非依存ＲＡＧ
Ｅ活性化］
この実施例は、Ａｎｇ ＩＩのＡＴ１Ｒへの結合後に続くＲＡＧＥの活性化が、ＲＡＧ
Ｅリガンドの遊離を介してでなく、ＲＡＧＥリガンド非依存性経路を介して起こることを
示している。
ＡＴ１Ｒの活性化は、膜テザーリガンドのプロテアーゼ媒介細胞外「シェディング」に
つながる経路の活性化によりチロシン－キナーゼ受容体の活性化を引き起こすことが知ら
れており、これらは、その後、これらのチロシン－キナーゼ受容体に自由に結合して活性
化することができる。
ＲＡＧＥのリガンド結合外部ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有す
る可溶性ＲＡＧＥデコイ（ｓＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とする中和抗体による前処置
は、両方とも全長型ＲＡＧＥ及びＡＴ１Ｒの両方を発現するＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ
細胞のＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９による炎症促進性シグナル伝達のＲＡＧＥリ
ガンド依存性誘導をブロックする（図６Ａ）。
ＲＡＧＥのリガンド結合外部ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有す
る可溶性ＲＡＧＥデコイ（ｓＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とする中和抗体による前処置
は、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯのＡｎｇ ＩＩによる炎症促進性シグナル伝達のＲＡＧ
Ｅリガンド非依存性誘導に影響しない（図６Ａ）。
ＲＡＧＥのリガンド結合外部ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有す
る可溶性ＲＡＧＥデコイ（ｓＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とする中和抗体による前処置
も、ＡＴ１Ｒ及びＲＡＧＥの両方を内因的に十分にあるＰＭＡＥＣでの炎症促進性シグナ
ル伝達のＡｎｇ ＩＩ－ＡＴ１Ｒ依存性誘導を減衰しない（図６Ｂ）。ＡＧＥＲ－ＫＯマ
ウスからのＰＭＡＥＣがネガティブコントロールとして示されている。
対照的に、ＲＡＧＥのリガンド結合外部ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親
和性を有する可溶性ＲＡＧＥデコイ（ｓＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とする中和抗体に
よる前処置は、ＡＴ１Ｒ及びＲＡＧＥの両方を内因的に十分にあるＰＭＡＥＣでのＲＡＧ
ＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９への曝露後に誘導される炎症促進性シグナル伝達を減衰さ
せることができる（図６Ｃ）。
実施例５で詳述するＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物を使用した発見と併せて、こ
れらのデータは、Ａｎｇ ＩＩへの曝露後のＲＡＧＥ受容体の活性化が、そのような遊離
リガンドによるＲＡＧＥリガンドの遊離又はＲＡＧＥの細胞外ドメインの活性化に依存し
ないことを確認する。
＜追加の材料と方法＞
１μＭ Ａｎｇ ＩＩ又は５ｎｇ／ｍｌのＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９に曝
露する前に、ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥａｂ；Ｒ＆Ｄシステム；１μｇ／ｍＬ）又は可溶性ＲＡ
ＧＥ２２－３３１（ｓＲＡＧＥ；１μｇ／ｍＬ）に対する中和抗体での１時間の前処置の
有無で追加実験を実施した。
［実施例７ 共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化は、炎症促進
性シグナル伝達を誘導するために細胞質側テールのリン酸化反応を必要としない］
この実施例は、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化は
、炎症促進性シグナル伝達を誘導するためにＲＡＧＥのリン酸化反応を必要としないこと
を示している。
Ｓｅｒ３９１のリン酸化反応は、ＲＡＧＥを介したリガンド依存性シグナル伝達に重要
であると以前考えられていた。おそらく、ＲＡＧＥの細胞質側テールへのタンパク質アダ
プターの動員を促進することにより、炎症促進性シグナル伝達を変換する。
しかし、他の多くの哺乳動物は、ＲＡＧＥの３９１位にリン酸化できないセリン以外の
別のアミノ酸を有する。例えば、ラクダは３９１にグルタミンを有し、プロリンは牛、羊
、山羊、豚、鹿、他の哺乳類の同じ位置に生まれながらに見られる。これらの残基はリン
酸化反応を維持できないが、これらの動物には無傷のＲＡＧＥシグナル伝達経路がある。
Ｓ３９１がグルタミン（Ｓ３９１Ｑ－ＲＡＧＥ）又はプロリン（Ｓ３９１Ｐ－ＲＡＧＥ
）に変異した全長型ＲＡＧＥ構築物によるＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞の形質導入により、この
部位での潜在的なリン酸化反応をブロックし、ｐ６５－ＮＦκＢ遺伝子発現のＡｎｇ Ｉ
Ｉ依存性誘導を媒介し続ける。Ｓ３９１の推定リン酸化部位がグルタミン（Ｓ３９１Ｑ－
ＲＡＧＥ）又はプロリン（Ｓ３９１Ｐ－－ＲＡＧＥ）に変異した全長型ＲＡＧＥ構築物で
の形質導入も、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＮＦκＢ発現のＳ１００Ａ８／Ａ９依存性
誘導を媒介し続ける（図７Ａ）。
ＲＡＧＥの３９４～４０４の最後の１１個のＣ末端残基を、生まれながらに潜在的リン
酸化反応部位を含まないマウスＲＡＧＥの細胞質側テールに確認されるそれらの残基に置
き換えることにより、ヒトＲＡＧＥの細胞質側テール上（Ｓ３９９、Ｓ４００及びＴ４０
１）の他の全ての潜在的リン酸化反応部位を遮断した（すなわちｈＲＡＧＥ３９４－４０
４；Ｐ３９４ＥＡＧＥＳＳＴＧＧＰは、ｍＲＡＧＥ３９２－４０４；Ａ３９４ＥＭＰＥＮ
ＧＡＧＧＰに置き換えられ、リン酸化反応のための潜在的部位を含まないキメラＲＡＧＲ
（ｃＲＡＧＥ）を生成する（Ｓ３９１Ｑ－ｃＲＡＧＥ）。特に、この構築物は、Ａｎｇ
ＩＩ応答性のＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞における野生型ＲＡＧＥ（図７Ｂ）と同様のシグナル
伝達が可能であった。ＲＡＧＥを介したリガンド非依存性炎症促進性シグナル伝達にはＲ
ＡＧＥのシグナル伝達誘導性リン酸化反応は不要であり、他の部位はＳ３９１が変異した
場合のＲＡＧＥリン酸化反応のための冗長性を伝達しない。
Ｓ３９１Ｑ－ｃＲＡＧＥは、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞でＳ１００Ａ８／Ａ９誘導性シグナ
ル伝達を媒介することも示された（図７Ｂ）。これらのデータは、ＲＡＧＥのシグナル伝
達誘導性リン酸化反応も、ＲＡＧＥを介したリガンド依存性炎症促進性シグナル伝達に必
要ではないこと、又はＳ３９１が変異した場合に細胞質側テールの他のリン酸化反応部位
がＲＡＧＥリン酸化反応の冗長性を伝達できることを確認する。
Ｓ３９１を欠失したＲＡＧＥ構築物（例えば、ＲＡＧＥ２２－３９０）は、ＡＴ１Ｒ－
ＣＨＯ細胞においてＮＦκＢ活性化又はｐ６５発現のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導を媒介する
能力を有さない（実施例５、図５Ｇを参照されたい）。
Ｓ３９１のみがアラニンに変異した全長型のＲＡＧＥ構築物（Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ）
は、ヒトＲＡＧＥのＳ３９９、Ｓ４００及びＴ４０１に他の潜在的なリン酸化反応部位が
存在するにもかかわらず、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢ発現又は活性（ｐ６
５発現により決定される）のＡｎｇ ＩＩ依存性又はＳ１００Ａ８／Ａ９依存性誘導を媒
介する能力を有さない（図７Ａ）。
Ｓ３９１のみが選択的にアラニンに変異した全長型及びＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ
構築物（Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ）は、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢ発現又は
活性（ｐ６５発現により決定される）のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導を媒介する能力も有さな
い（図７Ｃ）。
Ｓ３９１のみがシステインに変異したＲＡＧＥ構築物（Ｓ３９１－ＣＲＡＧＥ）は、Ａ
Ｔ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢ発現又は活性（ｐ６５発現により決定される）の
Ａｎｇ ＩＩ依存性又はＳ１００Ａ８／Ａ９依存性誘導を媒介する能力も有さない（図７
Ａ）。
Ｓ３９１がロイシンに変異した全長型ＲＡＧＥ構築物（Ｓ３９１Ｌ－ＲＡＧＥ）は、Ａ
Ｔ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢ発現のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導を媒介する能力を
保持するが、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によって誘導されるシグナル伝達を失
う（図７Ａ）。
対照的に、Ｓ３９１がグルタミン酸に変異した全長型ＲＡＧＥ構築物（Ｓ３９１Ｅ－Ｒ
ＡＧＥ）は、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢ発現のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導を
媒介する能力を失う（図７Ａ）が、ＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９への曝露後に
シグナル伝達の能力を保持する（図７Ａ）。
Ｓ３９１がイソロイシン、メチオニン、スレオニン又はトリプトファンに変異したＮ末
端トランケートｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４構築物によるＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ
細胞の形質導入は、ＮＦκＢ発現（ｐ６５発現により決定される）のＡｎｇ ＩＩ依存性
誘導を媒介する野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４の形質導入能力を保持する（図７Ｄ）。対
照的に、Ｓ３９１がアラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、グリ
シン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン、アルギニン、バリン又はチロシンに変異した
Ｎ末端トランケート型ＲＡＧＥ３６２－４０４構築物での形質導入では、野生型ＲＡＧＥ
と比較した場合、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢ発現又は活性（ｐ６５発現に
より決定される）のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導の回復ができない（図７Ｄ）。
［実施例８ 共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化及びＲＡＧＥ
リガンド依存性ＲＡＧＥ活性化におけるＭＹＤ８８の共通の役割］
この実施例では、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化
及びＲＡＧＥリガンド依存性ＲＡＧＥ活性化におけるミエロイド系分化因子８８（ｍｙＤ
８８）の共通の役割について説明する。
共通アダプタータンパク質ｍｙＤ８８は、ＲＡＧＥ及びＴＬＲ－３を除く全てのＴｏｌ
ｌ様受容体（ＴＬＲ）を含む他の多くの受容体だけではなくＲＡＧＥ活性化後の下流の炎
症促進性シグナル伝達に重要であることが以前に示されている。リガンド依存性ＲＡＧＥ
活性化は、ＭｙＤ８８及びＲＡＧＥの細胞質側テールへのアダプタータンパク質（ＴＩＲ
ＡＰ）を含むトルインターロイキン－１受容体ドメインを含む他の一般的なアダプタータ
ンパク質の動員を促進すると考えられており、ＩＲＡＫ４を通じて動員及びシグナル伝達
を変換し、最終的には、ＮＦκＢの活性化につながる。
ｓｉＲＮＡを使用したｍｙＤ８８発現のサイレンシングは、ＰＭＡＥＣのＲＡＧＥリガ
ンドＳ１００Ａ８／Ａ９によって誘導される、主要な接着分子であるＩＣＡＭ－１のＮＦ
κＢ依存性誘導を阻害する（図８Ａ）。この効果は、この下流標的であるｐ６５のサイレ
ンシングに匹敵する。
ｓｉＲＮＡを使用したＭｙＤ８８発現のサイレンシングは、主要な接着分子であるＩＣ
ＡＭ－１の遺伝子発現のＮＦκＢ依存性活性化を含む、ＰＭＡＥＣのＡｎｇ ＩＩによる
ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化によって誘導されるシグナル伝達も阻害する（
図８Ｂ）。
ｓｉＲＮＡを使用したＭｙＤ８８発現のサイレンシングは、主要な接着分子の遺伝子発
現のＮＦκＢ依存性活性化、ＨＭＥＣのＡｎｇ ＩＩによるＲＡＧＥリガンド非依存性Ｒ
ＡＧＥ活性化によって誘導されるＭＣＰ－１も阻害する（図８Ｃ）。この阻害はＲＡＧＥ
３６２－４０４によってレスキューされ（図８Ｃ）、本発明者らによって同定されたＲＡ
ＧＥの機能的代替物は、ＭｙＤ８８が無関係に機能していることを確認している。
［実施例９ 共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化及びＲＡＧＥ
リガンド依存性ＲＡＧＥ活性化におけるＰＫＣ－ＺＥＴＡの共通の役割］
この実施例では、特定の共存ＧＰＣＲ及びＲＡＧＥリガンド依存性ＲＡＧＥ活性化によ
るＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化におけるＰＫＣζの共通の役割について説明
する。
非定型ＰＫＣであるＰＫＣζは、ＲＡＧＥリガンド依存性ＲＡＧＥ活性化及びその後の
下流経路の活性化に重要であることが以前に示されている。ＰＫＣζは、ＲＡＧＥの細胞
質側テール及び別のＲＡＧＥ結合パートナーであるＤｉａｐｈ１に結合することが示され
ている。
ＰＫＣζは、ＭＡＰキナーゼシグナル伝達、ＮＦκＢ活性化、細胞極性、インスリン媒
介グルコース取り込み及び長期記憶増強などを含む多くのシグナル伝達経路に関与する多
面性キナーゼである。ＰＫＣζは、炎症促進性シグナル伝達のＴＬＲ２／４依存性誘導を
含む他の多くのシグナル伝達経路にも関与している。ＰＫＣζは、受容体の下流のシグナ
ル伝達及び機能における主要なイベントである活性化ＧＰＣＲのリン酸化状態も調節する
。
ｓｉＲＮＡを使用したＰＫＣζ発現のサイレンシング又は偽基質（ｉＰＫＣζ）による
ＰＫＣζの阻害は、ＲＡＧＥ発現のサイレンシングと同等の効果で、ＰＭＡＥＣのＲＡＧ
ＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によって誘導されるシグナル伝達を阻害する（図９Ａ）。
これは、ＰＫＣζのサイレンシング又は阻害が、ＴＬＲ２／４を介してＳ１００Ａ８／Ａ
９のシグナル伝達をサイレンシングすることで作用するのではなく、むしろ具体的には全
長型ＲＡＧＥを通じて、特にシグナル伝達を変更することによって作用することをさらに
確認しする。
ｓｉＲＮＡを使用したＰＫＣζ発現のサイレンシング又は偽基質（ｉＰＫＣζ）による
ＰＫＣζの阻害は、主要接着分子であるＩＣＡＭ－１のＮＦκＢ依存性活性化を含む、Ａ
ｎｇ ＩＩによる全長型ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化によって誘導されるシ
グナル伝達も阻害する（図９Ｂ）。
ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞でのＡｎｇ ＩＩへの曝露後のｐ６５及びＰＣＮＡのＮＦκＢ依
存性活性化により評価されるように（図９Ｃ）、偽基質（ＰＫＣζｉ）によるＰＫＣζの
阻害は、全長型Ｓ３９１Ｑ－ｃＲＡＧＥ２２－４０４（リン酸化可能な細胞質側テールに
セリン又はスレオニンを含まない）のＲＡＧＥリガンド非依存性活性化によって誘導され
るシグナル伝達も阻害し、ＲＡＧＥのリン酸化反応を誘導することによるＲＡＧＥシグナ
ル伝達経路にＰＫＣζが作用していないことを確認する。
対照的に、ｓｉＲＮＡを使用したＰＫＣζ発現のサイレンシングは、主要な接着分子の
遺伝子発現のＮＦκＢ依存性活性化、ＨＭＥＣにおけるＡｎｇ ＩＩによるＲＡＧＥ３６
２－４０４のリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化によって誘導されるＭＣＰ－１を阻害せず
（図９Ｄ）、本発明者らによって同定されたＲＡＧＥの機能的代替物は、ＰＫＣζが無関
係に機能していることを確認する。
＜追加の材料と方法＞
ＰＫＣζ（ｉＰＫＣζ、５μＭ、Ｔｏｃｒｉｓ）の偽基質による１時間の前処置の有無
で追加実験を実施した。
［実施例１０ ＲＡＧＥリガンド依存性ＲＡＧＥ活性化と比較した共存ＧＰＣＲによるＲ
ＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化におけるＤＩＡＰＨＡＮＯＵＳ－１の異なる役割
］
この実施例では、ＲＡＧＥリガンド依存性ＲＡＧＥ活性化と比較した特定の共存ＧＰＣ
ＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化におけるＤｉａｐｈａｎｏｕｓ―１（
Ｄｉａｐｈ１）の異なる役割について述べる。具体的には、ＲＡＧＥの荷電パッチ（Ｒ３
６６～Ｑ３６７）及びＤｉａｐｈ１と複合することが知られている安定化するαターンへ
の依存性を述べ、ＲＡＧＥリガンド依存性及びＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド非依存
性（トランス活性化）誘導性シグナル伝達の主要な違いを示している。
フォルミン型タンパク質、Ｄｉａｐｈａｎｏｕｓ－１（Ｄｉａｐｈ１）は、ＲＡＧＥリ
ガンドによって誘導される炎症促進性シグナル伝達の主要な要素と見なされている。
Ｄｉａｐｈ１発現のサイレンシングは、ネガティブコントロールとして作用するＲＡＧ
Ｅのサイレンシングと同等の効果で、ＰＭＡＥＣのＲＡＧＥリガンドであるＳ１００Ａ８
／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）によって誘導された全長型ＲＡＧＥを介したリガンド依存性シグ
ナル伝達を減衰させる（図１０Ａ）。
ＲＡＧＥの帯電したパッチ（Ｒ３６６～Ｑ３６７）は、Ｄｉａｐｈ１との複合体を安定
化させるαターンを形成すると考えられている（Ｒａｉ，ｅｔ ａｌ．２０１６）。Ｄｉ
ａｐｈ１とＲＡＧＥが相互作用すると考えられる帯電したパッチを選択的に破壊するＲ３
６６～Ｑ３６７の突然変異は、全長型Ｒ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡＧＥを発現するＡＴ
１Ｒ ＣＨＯ細胞でのＳ１００Ａ８／Ａ９誘導性シグナル伝達を防ぐことができる（図１
０Ｂ）。
Ｄｉａｐｈ１発現のサイレンシングは、ＰＭＡＥＣでのＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１
発現の誘導（図１０Ｃ）を含む、Ａｎｇ ＩＩによって誘導された全長型ＲＡＧＥを介し
たリガンド非依存性ＲＡＧＥシグナル伝達も減衰し、Ａｎｇ ＩＩへの曝露後、内皮単層
への白血球接着の機能的誘導を阻害する（図１０Ｄ）。
対照的に、変異した全長型Ｒ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡＧＥ２２－４０４及びＮ末端
トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｒ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４では
、Ｄｉａｐｈ１及びＲＡＧＥが相互作用すると考えられる帯電したパッチが破壊され、Ａ
Ｔ１Ｒ－ＣＨＯ細胞でのＡｎｇ ＩＩによって誘導されるＲＡＧＥリガンド非依存性シグ
ナル伝達を媒介する（図１０Ｂ）。
さらに、Ｄｉａｐｈ１及びＲＡＧＥが相互作用すると考えられる帯電したパッチを欠失
しても（例えば、ＲＡＧＥ３７０－４０４）、ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化
及びＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞のＡｎｇ ＩＩによって誘導される炎症促進性シグナル伝達を
防ぐことをしない（図１０Ｅ）。
さらに、ｓｉＲＮＡを使用したＤｉａｐｈ１発現のサイレンシングは、ＨＭＥＣにおけ
るＡｎｇ ＩＩによるＲＡＧＥ３６２－４０４のリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化によっ
て誘導されるＭＣＰ－１遺伝子発現のＮＦκＢ依存性活性化を阻害せず（図１０Ｆ）、本
発明者らによって同定されたＲＡＧＥの機能的代替物は、Ｄｉａｐｈ１が無関係に機能し
ていることを確認する。
これらを総合すると、これらのデータは、ＲＡＧＥの帯電したパッチ及びＤｉａｐｈ１
間の相互作用を破壊する方法が、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリ
ガンド非依存性シグナル伝達に直接影響しないことを意味する。
理論に拘束されることを望むものではないが、本発明者らは、Ｄｉａｐｈ１及び全長型
ＲＡＧＥが相互作用すると考えられている帯電したパッチの突然変異及び欠失が、この相
互作用を通じて生じる結合制限の緩和に作用すると考えられている。つまり、この結合ド
メインのないＮ末端トランケート型ＲＡＧＥペプチド（例えば、ＲＡＧＥ３７０－４０４
）又はこのドメインが変更された変異ペプチド（例えば、Ｒ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡ
ＧＥ３６２－４０４）は、帯電したパッチが存在している構築物であるｍＣｈｅｒｒｙ－
Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４（０．４ｎｇ／ｍｌ）による前処置により与えられ
るトランス活性化の阻害を克服することができる（図１０Ｇ）。
［実施例１１ 共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化及びＲＡＧ
Ｅリガンド依存性ＲＡＧＥ活性化におけるＩＱＧＡＰ－１の共通の役割］
この実施例では、ＲＡＧＥの活性化におけるＩＱＧＡＰ－１の役割について説明する。
ＩＱＧＡＰ－１は、アクチン細胞骨格の組織、転写及び細胞接着から細胞周期の調節に
至るまで、種々の細胞プロセスの調節に関与する足場タンパク質である。ＩＱＧＡＰ－１
は、Ｃｄｃ４２、Ｒａｃ－１、カルモジュリン－１及びＥＲＫ１／２の活性型を含むＲＡ
ＧＥエフェクター分子に結合することが知られている。
ＩＱＧＡＰ－１発現のサイレンシングは、ＰＭＡＥＣのＡｎｇ ＩＩによって誘導され
るＲＡＧＥを介したＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達（図１１Ａ）及びＰＭＡＥｃ
のＳ１００Ａ８／Ａ９によって誘導されるＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達（図１１
Ｂ）を減衰させる。
ＲＡＧＥの細胞質側テールの変異型であるＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４は、Ｓ
３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４でコーティングされたカラムを使用して他のサイトゾ
ル成分から特異的に精製される能力によって示されるように、ＩＱＧＡＰ－１と優先的に
結合する（図１１Ｃ）。この戦略は、ＩＱＧＡＰ－１に関連するタンパク質、エズリン／
ラディキシン／モエシンも破壊した。
ｓｉＲＮＡを使用したＩＱＧＡＰ－１発現のサイレンシングは、ＨＭＥＣのＡｎｇ Ｉ
ＩによるＲＡＧＥ３６２－４０４のＲＡＧＥリガンド非依存性活性化によって誘導される
ＭＣＰ－１遺伝子発現のＮＦκＢ依存性活性化も阻害し（図１１Ｄ）、本発明者らによっ
て同定されたＲＡＧＥの機能的代替物は、ＩＱＧＡＰ－１に機能的に依存することを確認
する。
＜追加の材料と方法＞
＜プルダウン実験の方法＞
ＴＡＴ－Ｃｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチド及びＴＡＴ－ｍ
Ｃｈｅｒｒｙ対照ペプチドを重力流ＮｉＮＴＡカラムに結合し、溶解緩衝液（５０ｍＭ
Ｔｒｉｓ ｐＨ７．５、３００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ β－メルカプトエタノール、１
０ｍＭイミダゾールを使用して平衡化した。Ｈｓ－ＡＴ１Ｒで安定的に形質導入された５
×１０７のＣＨＯ細胞をＲＩＰＡ緩衝液（１％ＮＰ－４０、０．５％Ｎａ－デオキシコー
ル酸、プロテアーゼ及びホスファターゼ阻害剤を添加した１×ＰＢＳ）で溶解し、溶解緩
衝液で５０ｍｌに希釈し、重力流によりＮｉ－ＮＴＡカラムに２回通した。１ｍｌカラム
を徹底的に洗浄した（２００ｍｌの洗浄緩衝液：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．４、３０
０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ β－メルカプトエタノール、２０ｍＭイミダゾール）。洗浄
後、２ｍｌの溶出緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．４、３００ｍＭ ＮａＣｌ、５
ｍＭ β－メルカプトエタノール、２５０ｍＭイミダゾール）をカラムに充填し、Ａペプ
チド又はＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ対照ペプチドのいずれかに結合したタンパク質の溶出に
使用した。質量分析法によるプロテオーム解析のために、サンプル１ｍｌが提供された。
Ｖｅｎｎｙ２．１．０を使用して、２つのタンパク質に特異的に結合したタンパク質のリ
ストを生成した。
［実施例１２ マウスＳＶＥＣにおける共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性Ｒ
ＡＧＥ活性化の阻害］
この実施例では、ＲＡＧＥの細胞質側テールの特定の成分を使用して、Ａｎｇ ＩＩへ
の曝露後のマウスＳＶＥＣでＲＡＧＥを介して誘導されるＲＡＧＥリガンド非依存性シグ
ナル伝達を阻害する方法について説明する。
全長型Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ２２－４０４及びＮ末端トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ－
Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４によるマウスＳＶＥＣの形質導入は、ＲＡＧＥ発現
を内因的に十分にあるマウスＳＶＥＣのＡｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１遺伝子発現の誘
導を防ぐことができる（図１２Ａ）。
全長型（ＲＡＧＥ２２－４０４）及び野生型コンフォメーション（Ｓ３９１）を保持す
るＮ末端トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物によるマウスＳＶＥＣの形質導
入は、Ａｎｇ ＩＩへの曝露後のＩＣＡＭ－１遺伝子発現の誘導に影響しない（図１２Ａ
）。
Ｃ末端トランケート型Ｓ３９１Ｘ－ＲＡＧＥ変異体（すなわちＲＡＧＥ２２－３９０及
びｍ－Ｃｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３７０－３９０）によるマウスＳＶＥＣの形質導入は、Ｒ
ＡＧＥ発現を内因的に十分にあるマウスＳＶＥＣのＡｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１の誘
導も防止する（図１２Ａ）。
ＳＶＥＣでＲＡＧＥシグナル伝達を阻害することが実証されている最小の配列は、ｍＣ
ｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３７９－３９０である（図１２Ｂ）。さらにＮ末端又はＣ末端の欠
損（例えば、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３８０－３９０）又は細胞質側テールの他の成分
を含むがＲＡＧＥ３７９－３９０ドデカペプチドを含まないペプチドは、ＲＡＧＥ活性化
を介したＡｎｇ ＩＩの炎症促進性作用に対する阻害効果を示さない。
追加のｍＣｈｅｒｒｙタンパク質は、細胞モデルでの導入遺伝子構築物の発現を確実に
する実用的な手段を提供する。ただし、（ｉ）ｍＣｈｅｒｒｙ（対照）の発現自体はシグ
ナル伝達経路に阻害効果を有さず（図１２Ｂ）、且つ（ｉｉ）ｍＣｈｅｒｒｙタンパク質
が取り除かれたＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物は、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ融合
タンパク質を発現する構築物として、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞でのＡｎｇ ＩＩ
依存性シグナル伝達の同様の阻害を達成した（図１２Ｃ）ため、上記で詳述した（図１２
Ｂ）ように、Ｎ末端トランケート型ＲＡＧＥの機能的阻害作用には関与しない。
このＲＡＧＥ配列から生じるペプチドは、αヘリックスであると予測される。αヘリッ
クスは、キャッピングアミノ酸への変化によって安定化又は破壊される可能性があるため
、追加の選択的変異が行われた。特に、アラニン置換によるグルタミン３７９又はグルタ
ミン３９０のいずれかの損失は、ヘリックスを不安定にし、阻害の損失をもたらした。そ
の上、グルタミンからリジンへの変異体Ｑ３９０Ｋ－ＲＡＧＥ３７０－３９０及びＱ３７
９Ｋ－ＲＡＧＥ３７０―３９０は最大の阻害効果を保持するように見えたが、末端のリジ
ン又はアルギニンが、αヘリックス立体構造のドデカペプチドの安定化においてより大き
い効果を有するという既知の技術と一致する（図１２Ｄ）。
ドデカペプチドＲＡＧＥ３７９－３９０のこの配列は、ストレプトマイセスを含む共生
生物由来の免疫調節性細菌タンパク質の配列と相同性がある（図１２Ｅ）。哺乳類のみが
ＲＡＧＥの遺伝子を保有するが、病原体におけるＲＡＧＥ阻害配列の存在は、炎症を含む
哺乳類の宿主防御を回避／減衰する生存メカニズムと一致している。
ＳＶＥＣ細胞におけるＡｎｇ ＩＩを用いたＡＴ１Ｒの活性化後のＩＣＡＭ－１発現の
誘導を阻害するＲＡＧＥ３７０－３９０の能力は、以下のグルタミンからアラニンへの突
然変異：Ｑ３９０Ａ－ＲＡＧＥ３７０－３９０又はＱ３７９Ａ－ＲＡＧＥ３７０－３９０
（図１２Ｄ）、Ｌ３８８Ａ－ＲＡＧＥ３７０－３９０、Ｅ３８４Ａ－ＲＡＧＥ３７０－３
９０、Ｅ３８２Ａ－ＲＡＧＥ３７０－３９０及びＥ３８０Ａ－ＲＡＧＥ３７０－３９０に
より失われるが、ＳＶＥＣ細胞のシグナル伝達を野生型ＲＡＧＥ３７０－３９０として抑
制し続ける。
＜追加の材料と方法＞
内因性ＲＡＧＥのトランス活性化を阻害するＲＡＧＥ構築物の可能性を調べるため、２
５ｍＭグルコースを含む１０％ＦＢＳ／ＤＭＥＭで培養した不死化マウス内皮細胞（Ｓｖ
ｅｃ４－１０、ＡＴＣＣ）で追加実験を行った。ＳＶＥＣには、製造元の取扱説明書に従
ってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、切断さ
れたＲＡＧＥ構築物を形質導入するか、又はＲＡＧＥオリゴペプチド（２８０ｐＭ）で処
置した。１μＭ Ａｎｇ ＩＩで処置する前に、細胞を、１０％ＦＢＳを含む培地で１６
時間回復させた。
［実施例１３ インビトロでの共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存ＲＡＧＥ活性
化の標的化］
この実施例では、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存ＲＡＧＥ活性化の
細胞膜透過性ペプチドモジュレーターによる細胞の処置が、細胞培養内で、ＲＡＧＥリガ
ンド非依存性ＲＡＧＥ活性化を介して炎症促進性シグナル伝達の誘導を調節できることを
実証する。
ＲＡＧＥの細胞質側テールの活性化を介してＡＴ１Ｒ依存性シグナル伝達を標的化する
治療可能性を検証するため、ｍＣｈｅｒｒｙ蛍光タンパク質（発現と伝達を定量化するた
め）及びＨＩＶ－ＴＡＴモチーフ（細胞透過を促進するため）で標識されたＲＡＧＥのＣ
末端４３アミノ酸を構成するオリゴペプチドは、代替品として機能するために生成された
。１つのバージョンでは、３９１のセリン残基は、内因性ＲＡＧＥの活性化を阻害する能
力をシグナル化及び強化する能力を中和するために、アラニンに変更された（Ｓ３９１Ａ
－ＲＡＧＥ３６２－４０４；配列番号１）。
活性化する野生型構築物からの１つのアミノ酸残基のみが異なるＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒ
ｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質０．４ｎｇ／ｍｌ）によるＡＴ
１Ｒ－ＣＨＯ細胞（ＲＡＧＥを発現しない）の処置は、Ａｎｇ ＩＩによるｐ６５－ＮＦ
κＢの発現の誘導を促進しない（図１３Ａ）。
野生型ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合ペプチド（１ｎｇ／ｍｌ
）で前処置され、その後、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０
４融合タンパク質（１ｎｇ／ｍｌ）で処置されたＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞では、野生型ペプ
チドによるＡｎｇ ＩＩ誘導性の炎症促進性シグナル伝達の回復を防ぐことができる（図
１３Ｂ）。
ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質（１ｎ
ｇ／ｍｌ）で処置したＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞では、１０００倍過剰であっても、野生型Ｔ
ＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合ペプチドの後続処置によっては、未
処置の細胞と比較した場合、ｐ６５のＡｎｇ ＩＩ誘導性発現に対する応答性を回復する
ことはできない（図１３Ｃ）。
Ｓ３９１Ｑ－ｃＲＡＧＥ２２－４０４（すなわちリン酸化可能な要素を含まない構築物
）を発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞では、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧ
Ｅ３６２－４０４融合タンパク質（０．４ｎｇ／ｍｌ）での後続処置により、ｐ６５－Ｎ
ＦκＢ及び増殖マーカーＰＣＮＡのＡｎｇ ＩＩ誘導導入を防止でき、ＲＡＧＥのリン酸
化反応とは無関係に調節が達成されることを確認した（図１３Ｄ）。
野生型ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合ペプチド（０．４ｎｇ／
ｍｌ）によるＡＧＥＲ－ＫＯマウス（ＲＡＧＥ欠損）のＰＭＡＥＣの処置は、ｐ６５－Ｎ
ＦκＢ及びＮＦκＢ依存性炎症促進性遺伝子、ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１及びＭＣＰ－
１の発現のＡｎｇ ＩＩを介した誘導を回復することができる。（図１３Ｅ）。
ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質（０．
４ｎｇ／ｍｌ）によるｃ５７ｂｌ６マウスから得られたＲＡＧＥに富んだＰＭＡＥＣの処
置は、ＮＦκＢ活性化の標準的及び非標準的経路の活性化（それぞれＣＸＣＬ１２及びＣ
ＸＣＬ２の発現の誘導により検出される）及びＶＣＡＭ－１遺伝子発現の下流のＮＦκＢ
依存性誘導（図１３Ｆ）につながる下流シグナル伝達のＡｎｇ ＩＩ誘導導入をブロック
する。ＴＮＦαは、標準ＮＦκＢシグナル伝達のポジティブコントロールとして示されて
おり、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質の
影響を受けない。
ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質（０．
４ｎｇ／ｍｌ）によるＲＡＧＥに富んだヒトＡＥＣの処置は、炎症促進性遺伝子、ＩＣＡ
Ｍ－１、ＶＣＡＭ－１、ＭＣＰ－１、ＴＮＦα及びＩＬ－６のＮＦκＢ依存性誘導につな
がるＡｎｇ ＩＩ誘導性の下流シグナル伝達もブロックする（図１３Ｇ）。阻害効果は、
ＡＴ１ＲブロッカーであるＨＡＥＣのイルベサルタンで達成される効果に匹敵する。
ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質（０．
４ｎｇ／ｍｌ）での処置は、（ｉ）ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、且つ（ｉ
ｉ）ＲＡＧＥに富んだＰＭＡＥＣにおいて、ＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９によ
る炎症促進性遺伝子発現のその後の誘導も阻害する（図１３Ｈ）。
＜追加の材料と方法＞
ヒト組織への抑制戦略の適用性を確認するために、ヒト由来の一次大動脈内皮細胞（Ｌ
ｏｎｚａ）で追加実験が行われた。ＨＡＥＣはＥＧＭ－２培地で成長した。Ａｎｇ ＩＩ
（１μＭ）又はＳ１００Ａ８／Ａ９（２μｇ／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）のいずれ
かで２時間前処置し、いずれの場合も、０．４ｎｇ／ｍｌの用量でｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡ
Ｔ（対照）、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４（野生型）又はＴＡＴ－
ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４で３０分間処置した。さらなる対
照として、ＡＴ１Ｒブロッカーイルベサルタンの阻害効果（１μＭ；Ａｎｇ ＩＩ投与の
３０分前）もＨＡＥＣで調査した。
［実施例１４ エクスビボの大動脈での共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存ＲＡ
ＧＥ活性化の標的化］
この実施例では、ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の細胞膜透過性ペプチド阻
害剤（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質、
８ｎｇ／ｍｌ）による大動脈の処置がエクスビボでのＲＡＡＳ媒介炎症の誘導を防ぐこと
ができることを実証する。
実施例４でも詳述するように、Ａｎｇ ＩＩへのエクスビボ曝露は、ａｐｏＥ－ＫＯマ
ウスから摘出された大動脈におけるアテローム形成促進メディエーターの発現を増加させ
る（図１４Ａ）。対照的に、Ａｎｇ ＩＩによるＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスから
採取した大動脈のエクスビボでの処置は、これらのアテローム生成メディエーターの誘導
を引き起こさない（図１４Ｂ）。
ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の細胞膜透過性ペプチド阻害剤（ＴＡＴ－ｍ
Ｃｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質、８ｎｇ／ｍｌ）に
よるａｐｏＥ－ＫＯマウス由来の大動脈の前処置は、Ａｎｇ ＩＩ依存性の接着分子の誘
導を防ぎ、リアルタイムＲＴ－ＰＣＲで測定された遺伝子発現で検出される（図１４Ａ）
。
ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス由来の大動脈を細胞膜透過性野生型ＲＡＧＥペプチ
ド（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質、８μｇ／ｍｌ）
で前処置は、Ａｎｇ ＩＩ依存性の接着分子及び炎症マーカーの誘導が回復し、リアルタ
イムＲＴ－ＰＣＲで測定した遺伝子発現で検出された（図１４Ｂ）。
＜追加の材料と方法＞
大動脈はａｐｏＥ－ＫＯ及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスから摘出され、分割さ
れてクレブス緩衝液に入れられた。そして、３７°Ｃの緩衝液を通してカルボゲンガス（
９５％Ｏ２；５％ＣＯ２）を注入することにより生理的ｐＨに維持された。大動脈を無作
為化して、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ（対照）、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ－ＲＡＧＥ３６２
－４０４（野生型）又はｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４
オリゴペプチド（全て８ｎｇ／ｍＬ）で前処置を行った。３０分後、大動脈はＡｎｇ Ｉ
Ｉ（１μＭ）に４時間曝露された。インキュベーションの最後に、大動脈をトリゾールに
入れ、ｍＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡを合成した。次に、上記で詳述したように、アテロー
ム形成促進メディエーターの遺伝子発現を定量的リアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより推定し
た。
［実施例１５ ライブマウスでの共存ＧＰＣＲ（トランス活性化）によるＲＡＧＥリガン
ド非依存性ＲＡＧＥ活性化の標的化］
この実施例では、ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の細胞膜透過性ペプチド阻
害剤による処置が、ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおけるＲＡＡＳ媒介アテローム性動脈硬化の
誘発を防ぐことができることを実証する。
実施例３に詳述するように、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおけるＡｃｅ２の遺
伝的欠損は、Ａｃｅ２が十分にあるａｐｏＥ－ＫＯマウスと比較した場合、１６週齢での
プラーク蓄積の増加をもたらす。Ａｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥトリプルＫＯマウスは、
遺伝的Ａｃｅ２欠損に関連するアテローム性動脈硬化のこの増加に対して保護されている
（図１５Ａ）。
Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスのＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の細胞
膜透過性ペプチド阻害剤による処置（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３
６２－４０４融合タンパク質（Ｓ３９１Ａ）；１０週間隔日ごとに１０μｇ／ｋｇ／ＩＰ
）は、このモデルでＡｎｇ ＩＩ依存性アテローム性動脈硬化を減衰させる（図１５Ａ）
。
Ａｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥトリプルＫＯマウスのＲＡＧＥリガンド非依存活性化Ｒ
ＡＧＥの細胞膜透過性ペプチドトランスデューサー（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ
３６２－４０４融合タンパク質（ＷＴ）；１０μｇ／ｋｇ／ＩＰの１０週間隔日）による
処置は、シグナル伝達可能なＲＡＧＥの細胞質側テールのみを復元し、全長型ＲＡＧＥ及
びその関連リガンド結合ドメインの継続的な不在にもかかわらず、ＲＡＧＥに富んだＡｃ
ｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスで観察されるアテローム性動脈硬化を復元する（図１５Ａ
）。
Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスのＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の細胞
膜透過性ペプチド阻害剤（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０
４融合タンパク質；１０週間隔日１０μｇ／ｋｇ／ＩＰ）による処置は血圧レベルに影響
しない（図１５Ｃ）。
また、ストレプトゾトシン誘導糖尿病は、ＲＡＡＳの活性化及びアテローム性動脈硬化
の増加に関連するモデルであり、血圧を低下させたり、グルコース制御を変更したりする
ことなく、ＲＡＡＳ阻害によって予防される（Ｃａｎｄｉｄｏ ｅｔ ａｌ．，２００２
）。
ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスは、糖尿病の誘発後のアテローム性動脈硬化症の増
加に対して保護されている（Ｓｏｒｏ－Ｐａａｖｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００８）。
糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯマウスのＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の細胞透過性
ペプチド阻害剤（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タ
ンパク質（Ｓ３９１Ａ）；１０μｇ／ｋｇ／ＩＰで１０週間隔日）による処置は、血圧レ
ベルに影響を与えず（図１５Ｂ）、このモデルのアテローム性動脈硬化を減衰させる（図
１５Ｃ）。
糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯマウスのＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の細胞透過性
ペプチドトランスデューサー（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タ
ンパク質；１０μｇ／ｋｇ／ＩＰで１０週間隔日）による処置は、シグナル伝達可能なＲ
ＡＧＥの細胞質側テールのみを復元し、全長型ＲＡＧＥ及びその関連リガンド結合ドメイ
ンの継続的な不在にもかかわらず、糖尿病単独で見られる以上にアテローム性動脈硬化が
増加する（図１５Ｂ）。
糖尿病ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスをＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化
の細胞透過性ペプチドトランスデューサー（ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－
４０４融合タンパク質、１０μｇ／ｋｇ／ＩＰで１０週間隔日）による処置は、シグナル
伝達可能なＲＡＧＥの細胞質側テールのみを復元し、全長型ＲＡＧＥ及びその関連するリ
ガンド結合ドメインの継続的な不在にもかかわらず、遺伝的ＲＡＧＥ欠失により与えられ
た保護を覆し、ＲＡＧＥに富んだマウスで観察されるレベルまでアテローム性動脈硬化が
増加する（図１５Ｂ）。
＜追加の材料と方法＞
雄性ａｐｏＥ－ＫＯマウス、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス及びＡｃｅ２／ＡＧＥ
Ｒ／ａｐｏＥ ＴＫＯマウスを無作為化して、ＴＡＴ－Ｃｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡ
ＧＥ３６２－４０４（阻害剤）ペプチド（１０μｇ／ｋｇ／ＩＰ隔日）、ＴＡＴ－Ｃｈｅ
ｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４（野生型；１０μｇ／ｋｇ／ＩＰ隔日）オリゴペプチド
又はｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ（対照；１０μｇ／ｋｇ／ＩＰ隔日）１０週間投与し、その
時点でそれらは人道的に殺処分された。
Ａｎｇ ＩＩ依存性アテローム性動脈硬化の２番目のモデルでは、ａｐｏＥ－ＫＯマウ
ス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯを無作為に割り当てて、ストレプトゾトシン（５５ｍ
ｇ／ｋｇ、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）又
は緩衝液（クエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ４．５）を１日５回連日投与で腹腔内投与した
（Ｓｏｒｏ－Ｐａｖｉｎｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．２００８）。このレジメンは、高血糖症
（血中グルコース約３０ｍＭ）に関連する糖尿病のインスリン欠乏型を誘導するが、ケト
ーシスを防止するか、又はインスリンの補充を必要とするのに十分なβ細胞機能を備えて
いる。糖尿病の存在は、ストレプトゾトシンの初回投与１週間後、空腹時血糖値が１５ｍ
Ｍを超えることで確認された。糖尿病マウスは、全て１０週間後にＨｂＡ１ｃ＞８％（中
央値１１．２％）を達成した。糖尿病の１週間後、マウスをさらに無作為化して、ｍＣｈ
ｅｒｒｙ－ＴＡＴ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４（阻害剤）ペプチド（１００μ
ｇ／ｋｇ／ＩＰ隔日）、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ－ＲＡＧＥ３６２－４０４（野生型、１
００μｇ／ｋｇ／ＩＰ隔日）オリゴペプチド又はｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＡＴ（対照；１００
μｇ／ｋｇ／ＩＰ隔日）１０週間投与し、その時点でそれらは人道的に殺処分された。
［実施例１６ ＢＲＥＴは、生細胞で共発現したときのＡＴ１Ｒ及びＲＡＧＥの近接近を
示す］
この実施例では、ＨＥＫ２９３ＦＴ細胞でのＲｌｕｃ８標識ＡＴ１Ｒ（ＡＴ１Ｒ／Ｒｌ
ｕｃ８）及びヴィーナス（Ｖｅｎｕｓ）標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓ）の共発現
により、その近接性と一致する強力且つ飽和可能なＢＲＥＴシグナルの生成をもたらし、
Ａｎｇ ＩＩで処置すると減少することを示す（図１６Ａ）。可溶性ＲＡＧＥ２２－３３
１（ｓＲＡＧＥ）の存在は、これらの結果を変えない（図１６Ａ）。
ＡＴ１Ｒ／Ｒｌｕｃ８及びβ－アレスチン２／ヴィーナスをＡｎｇ ＩＩで共発現する
細胞の処置は、ＡＴ１Ｒへのβ－アレスチン２の動員と一致する頑強で安定したリガンド
誘導ＢＲＥＴシグナルの誘導をもたらす（図１６Ｂ）。ケモカイン（Ｃ－Ｃ Ｍｏｔｉｆ
）受容体４（ＣＣＲ４）／Ｒｌｕｃ８及びβ－アレスチン２／ヴィーナスをその認識リガ
ンドＣＣＬ２２で共発現する細胞の処置はまた、ＣＣＲ４へのβ－アレスチン２の動員と
一致する頑強なリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの誘導をもたらす（図１６Ｂ）。
ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８及びβ－アレスチン２／ヴィーナスをＡｎｇ ＩＩで共発現する
細胞の処置は、非標識ＡＴ１Ｒの存在下でＢＲＥＴシグナルを誘導し、ＲＡＧＥ及びＡＴ
１Ｒが近接近にあることを示す（図１６Ｃ）。
対照として、これは、認識リガンドＣＣＬ２２で処置した場合、非標識ＣＣＲ４の存在
下では観察されない（図１６Ｃ）。
非標識ＣＣＲ４の発現／機能を実証するための追加の対照として、Ｇαｉ／Ｎｌｕｃ及
びＧγ２／ヴィーナスを共発現させると、ＣＣＬ２２誘導ＢＲＥＴシグナルが観察される
（図１６Ｄ）。
＜追加の材料と方法＞
Ｒｌｕｃ８の代替ＢＲＥＴドナーはＮａｎｏｌｕｃ（Ｎｌｕｃ）であり、これは、Ｔｉ
ｕｌｐａｋｏｖ ｅｔ ａｌ．，２０１６に記載されているように、これをヴィーナスと
フリマジン基質との組み合わせで使用することができる。このアプローチは、ＣＣＲ４の
機能を評価するためにＧαｉ／Ｎｌｕｃ及びＧγ２／ヴィーナスの近接をモニタリングす
るときに使用された。
［実施例１７ ＢＲＥＴは、生細胞で共発現した場合、ＡＴ１Ｒに加えて特定の活性化Ｇ
ＰＣＲに対するＲＡＧＥの近接近を示す］
この実施例では、上記の実施例１６で説明した生細胞におけるＲＡＧＥ及びＡＴ１Ｒ間
の近接近が、ＲＡＧＥ及び特定の他の活性化された共存ＧＰＣＲ間でも観察されることを
実証する。
Ｒｌｕｃ８標識ＧＰＣＲ及びβ－アレスチン２／ヴィーナスをそのＧＰＣＲに適切な認
識アゴニストと共発現する細胞の処置は、活性化Ｒｌｕｃ８標識ＧＰＣＲへのβ－アレス
チン２の動員と一致する頑強なリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの誘導をもたらした。これ
は、Ａｎｇ ＩＩを含むＡＴ１Ｒ（図１７Ａ）、ＴＲＨを含むＴＲＨＲ１（図１７Ｂ）、
ＯｘＡを含むＯｘＲ１（図１７Ｃ）、ブラジキニンを含むブラジキニン受容体２（ＢＤＫ
Ｒ）（図１７Ｄ）、ＡＶＰを含むＶ２Ｒ（図１７Ｅ）、ＭＣＰ１を含むＣＣＲ２（図１７
Ｆ）及びＭＩＰ１βを含むＣＣＲ５で観察された（図１７Ｇ）。
受容体－ＨＩＴ：ＡＴ１Ｒ（図１７Ａ）、ＯｘＲ１（図１７Ｃ）、Ｖ２Ｒ（図１７Ｅ）
又はＣＣＲ２（図１７Ｆ）の存在下で、そのＧＰＣＲに適切な認識アゴニストでＲｌｕｃ
８標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８）及びβ－アレスチン２／ヴィーナスを共発現す
る細胞の処置は、そのＧＰＣＲに対するβ－アレスチン２の動員と一致する明確なリガン
ド誘導ＢＲＥＴシグナルの誘導をもたらした。このことは、活性化されたＧＰＣＲに対し
ＲＡＧＥ近接も示す。共発現ＧＰＣＲの非存在下では、リガンド誘導ＢＲＥＴシグナルは
観察されなかった。
ＴＲＨＲ１（図１７Ｂ）又はブラジキニン受容体２（ＢＤＫＲ；図１７Ｄ）の存在下で
、そのＧＰＣＲに適切な認識アゴニストでＲｌｕｃ８標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ
８）及びβ－アレスチン２／ヴィーナスを共発現する細胞の処置は、共発現ＧＰＣＲの非
存在下で観察され、ＧＰＣＲに対するβ－アレスチン２の動員と一致する共発現ＧＰＣＲ
の存在下でリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの不足から識別可能な弱いリガンド誘導ＢＲＥ
Ｔシグナルの誘導をもたらした。このことは、活性化されたＧＰＣＲに対しＲＡＧＥ近接
も示し得るが、ＡＴ１Ｒ、ＯｘＲ１、Ｖ２Ｒ又はＣＣＲ２で観察されるほど明確ではない
。
ＣＣＲ５の存在下でＲｌｕｃ８標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８）及びβ－アレス
チン２／ヴィーナスをＭＩＰ１βで共発現する細胞の処置（図１７Ｇ）は、共発現された
ＧＰＣＲの非存在下で観察されるものから識別しにくい弱いリガンド誘導ＢＲＥＴシグナ
ルの誘導をもたらした。
［実施例１８ ＢＲＥＴは、生細胞で共発現したときに特定の活性化されたケモカイン受
容体へのＲＡＧＥの近接近を示す］
この実施例では、Ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ＨＩＴアッセイ立体構造を使用して、ＲＡＧＥ及
び特定のケモカイン受容体の近接近が生細胞で観察されることを実証する。
ＣＣＲ１（図１８Ａ）、ＣＣＲ２（図１８Ｂ）、ＣＣＲ６（図１８Ｅ）、ＣＣＲ７（図
１８Ｆ）、ＣＸＣＲ２（図１８Ｉ）又はＣＸＣＲ６（図１７Ｆ）の存在下で、そのＧＰＣ
Ｒの適切な認識アゴニスト（標識）でＲｌｕｃ８標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８）
及びβ－アレスチン２／ヴィーナスを共発現する細胞の処理は、ＧＰＣＲに対するβ－ア
レスチン２の動員と一致するＢＲＥＴシグナルの明確なリガンド誘導性増加の誘導をもた
らした。このことは、活性化されたＧＰＣＲに対しＲＡＧＥ近接も示す。
ＣＸＣＲ１（図１８Ｈ）の存在下で、ＣＸＣＬ８のＲｌｕｃ８標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ
／Ｒｌｕｃ８）及びβ－アレスチン２／ヴィーナスの共発現する細胞の処置は、ＧＰＣＲ
に対するβ－アレスチン２の動員と一致するＢＲＥＴシグナルの識別可能なリガンド誘導
性増加の誘導をもたらした。このことは、活性化されたＧＰＣＲに対しＲＡＧＥ近接を示
しているが、前述の受容体ほど明確でもない。
ＣＸＣＲ４の存在下で、ＣＸＣＬ１２とＲｌｕｃ８標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ
８）及びβ－アレスチン２／ヴィーナスを共発現する細胞の処置（図１８Ｋ）は、β―ア
レスチン２及びＲＡＧＥ間の近接の減少に一致するＢＲＥＴシグナルの明確なリガンド誘
導性減少又はＲｌｕｃ８及びヴィーナス間の少ない共鳴エネルギー移動がもたらすコンフ
ォメーション変化がもたらされた。このことは、β－アレスチン２／ヴィーナスが動員さ
れる活性化されたＧＰＣＲに対するＲＡＧＥの近接の変化も示す。
ＣＣＲ４（図１８Ｃ）、ＣＣＲ５（図１８Ｄ）、ＣＣＲ１０（図１８Ｇ）又はＣＸＣＲ
３（図１７Ｊ）の存在下で、そのＧＰＣＲの適切な認識アゴニスト（標識）でＲｌｕｃ８
標識ＲＡＧＥ（ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８）及びβ―アレスチン２／ヴィーナスを共発現する
細胞の処置は、ＢＲＥＴシグナルの識別可能なリガンド誘導性変化の誘導をもたらさなか
った。これは、ＣＣＲ４／Ｒｌｕｃ８に対するβ―アレスチン２／ヴィーナスへのＣＣＬ
２２誘導動員（図１６Ｂ）及びＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８に対するβ―アレスチン２／ヴィー
ナスへのＣＣＬ４誘導動員に観察される非常に強力なリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルにあ
るにもかかわらずである（ｎ＝３；データは示さず）。より弱いが、それでも依然として
明確なリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルは、ＣＣＲ１０／Ｒｌｕｃ８に対するβ―アレスチ
ン２／ヴィーナスへのＣＣＬ２７誘導動員及びＣＸＣＲ３／Ｒｌｕｃ８に対するβ―アレ
スチン２／ヴィーナスのＣＸＣＬ１１誘導動員でも観察された（ｎ＝３；データは示さず
）。
［実施例１９ ＢＲＥＴは、共存ＧＰＣＲ活性化が生細胞におけるＲＡＧＥ細胞内局在の
変化をもたらすことを示す］
この実施例では、特定の共存するＧＰＣＲの活性化によりＲＡＧＥ及び細胞内コンパー
トメントマーカー間の近接が変化することを示しており、多数のＧＰＣＲのＲＡＧＥ機能
に対するＧＰＣＲ活性化の効果を示すことを示す。
使用されたヴィーナス標識細胞内コンパートメントマーカーは、原形質膜マーカーＫＲ
ＡＳ及びＲａｂＧＴＰアーゼＲａｂ１（シスゴルジへの小胞体輸送）、Ｒａｂ４（初期エ
ンドソームリサイクル）、Ｒａｂ５（初期エンドソーム）、Ｒａｂ７（後期エンドソーム
／リソソーム）、Ｒａｂ８（原形質膜へのトランスゴルジネットワーク）、Ｒａｂ９（ト
ランスゴルジネットワークへの後期エンドソーム輸送）及びＲａｂ１１（リサイクルエン
ドソーム）であった。Ｒｌｕｃ８標識ＲＡＧＥのヴィーナス標識細胞内コンパートメント
マーカーへの近接は、ＧＰＣＲの適切な認識アゴニストを時間０及び指定濃度で添加する
前後にリアルタイムで評価された。
アドレナリンα１Ａ受容体、アドレナリンα１Ｂ受容体、アンジオテンシン受容体ＡＴ
１Ｒ、ブラジキニン受容体Ｂ２、ＣＣＲ２、ＣＣＲ６、ＣＣＲ９、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ
５、ドーパミンＤ１受容体、エンドセリン受容体Ｂ型、ヒスタミンＨ３受容体、ムスカリ
ンＭ２受容体、ニューロペプチドＹ１受容体、オレキシン受容体１、オレキシン受容体２
、プロスタグランジンＥ１受容体、セロトニン５－ＨＴ２ｃ受容体、セロトニン５－ＨＴ
４ｂ受容体、ソマトスタチン２受容体、スフィンゴシン１－リン酸受容体Ｓ１Ｐ３、バソ
プレシン受容体１Ａ及びバソプレシン受容体１Ｂでは、少なくとも１つの細胞内コンパー
トメントマーカーへの近接の変化の兆候を示す特にリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの明確
な変化は、リガンド添加の結果として観察された。
ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ニューロテンシン１受容体及びセロトニン５－ＨＴ２ｂ受容体で
は、少なくとも１つの細胞内コンパートメントマーカーへの近接の変化兆候を示すリガン
ド誘導ＢＲＥＴシグナルの明確な変化は、リガンド添加の結果として観察された。
アデノシンＡ１受容体、アドレナリンα２Ｂ受容体、ＣＣＲ１、ＣＣＲ５、ＣＣＲ７、
ＣＸＣＲ２、エンドセリン受容体Ａ型、ムスカリンＭ１受容体、ムスカリンＭ３受容体、
セロトニン５－ＨＴ１ａ受容体、セロトニン５－ＨＴ２ａ受容体、スフィンゴシン１－リ
ン酸受容体Ｓ１Ｐ１、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン受容体１及びバソプレッシン受容
体２では、少なくとも１つの細胞内コンパートメントマーカーへの近接の変化の兆候を示
すリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの小さいながらも識別可能な変化が、リガンド添加の結
果として観察された。
アデノシンＡ２Ａ受容体、アデノシンＡ２Ｂ受容体、アデノシンＡ３受容体、アドレナ
リンα２Ａ受容体、アドレナリンα２Ｃ受容体、アドレナリンβ１受容体、アドレナリン
β２受容体、アドレナリンβ３受容体、アペリン受容体、ＣＣＲ８、ＣＣＲ１０、ＣＸＣ
Ｒ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ドーパミンＤ２受容体、グルカゴン様ペプ
チド受容体１、ニューロテンシン２受容体、血小板活性化因子受容体、プロスタグランジ
ンＥ２受容体、プロスタグランジンＥ３受容体、プロスタグランジンＥ４受容体、ソマト
スタチン１受容体及びソマトスタチン３受容体では、細胞内コンパートメントマーカーの
いずれかに対するリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの識別可能な変化は、リガンドの添加の
結果としてほとんど観察されなかった（データは示さず）。
［実施例２０ ＡＴ１受容体以外の特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥのリ
ガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化］
この実施例では、主要な炎症促進性転写因子であるｐ６５－ＮＦκＢの発現を誘導する
認識リガンド（それぞれＭＣＰ―１及びＣＸＣＬ８）による特定のケモカイン受容体（Ｃ
ＣＲ２及びＣＸＣＲ２）の活性化は、ＲＡＧＥの共発現も必要であることを実証する。
ＣＣＲ２をコードし、その表面にＣＣＲ２を発現するプラスミドで安定的に形質導入し
たＣＨＯ細胞（ＣＣＲ２－ＣＨＯ細胞）は、ＲＡＧＥでの形質導入及びＣＣＲ２の認識リ
ガンドであるＭＣＰ－１（１０－７）への曝露により、ＮＦκＢの活性化及びｐ６５の発
現の誘導をもたらす（図２０Ａ）。ＲＡＧＥ共発現の非存在下で、ＭＣＰ－１はＮＦκＢ
の活性化を誘導せず、ＣＣＲ２－ＣＨＯ細胞におけるｐ６５の発現を誘導しない。
ＣＸＣＲ２をコードし、その表面にＣＸＣＲ２を発現するプラスミドで安定に形質導入
されたＣＨＯ細胞（ＣＸＣＲ２－ＣＨＯ細胞）は、ＲＡＧＥでの形質導入と認識リガンド
ＩＬ－８（ＣＸＣＬ８）への曝露により、共発現したＲＡＧＥの存在下で、ｐ６５の発現
の増加をもたらす（図２０Ｂ）。ＲＡＧＥの非存在下では、ＩＬ－８はＮＦκＢの活性化
を誘導せず、ＣＸＣＲ２－ＣＨＯ細胞でｐ６５の発現を誘導しない。
骨髄由来の一次マウスマクロファージでは、ＣＣＲ２の認識リガンドであるＭＣＰ－１
（１０－７Ｍ）に曝露すると、ＮＦκＢが活性化され、ｐ６５の発現の誘導をもたらす（
図２０Ｃ）。一次マクロファージにおけるＭＣＰ－１によるｐ６５－ＮＦκＢの発現の誘
導は、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４融合タンパク質（
０．４ｎｇ／ｍｌ）での前処置によりブロックされる。
ＭＣＰ－１（１０－７Ｍ）へのＨＭＥＣ曝露では、ＣＣＲ２の認識リガンドは、ＮＦκ
Ｂの活性化及びＭＣＰ－１の発現の自動誘導をもたらす（図２０Ｄ）。ＨＭＥＣのＭＣＰ
－１発現の自動誘導は、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４
融合タンパク質（０．４ｎｇ／ｍｌ）による前処置によりブロックされる。これらを総合
すると、これらのデータは、ＭＣＰ－１／ＣＣＲ２シグナル伝達プロセスにおける共存内
因性ＲＡＧＥの役割が確認される。
ＩＬ－８（１０－７Ｍ）へのＣＸＣＲ２発現ＨＭＥＣの曝露では、ＣＸＣＲ２の認識リ
ガンドは、ＮＦκＢの活性化及びＭＣＰ－１の発現の誘導をもたらす（図２０Ｅ）。ＨＭ
ＥＣのＭＣＰ－１発現の誘導は、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２
－４０４融合タンパク質（０．４ｎｇ／ｍｌ）による前処置によってブロックされる。こ
れらのデータを総合すると、ＩＬ―８／ＣＸＣＲ２シグナル伝達プロセスにおける共存内
在性ＲＡＧＥの役割が確認される。
＜追加の材料と方法＞
＜トランスジェニックチャイニーズハムスター卵巣細胞の生成＞
Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｔｈｅｒｍｏ）を使用して、１００ｎｇのＣＣ
Ｒ２－Ｒｌｕｃ８構築物又はＣＸＣＲ２－Ｒｌｕｃ８をＣＨＯ細胞に形質導入した。Ｇ４
１８を使用して安定トランスフェクタントを選択した。次いで、ＣＣＲ２－ＣＨＯ及びＣ
ＸＣＲ２－ＣＨＯ細胞は、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
）を使用して、全長型のＲＡＧＥ構築物を一時的に形質導入し、１６時間インキュベート
した。次に、ＣＣＲ２－ＣＨＯ細胞をＣＣＲ２の認識リガンドであるＭＣＰ－１（１０－
７）に２時間曝露した。ＣＸＣＲ２－ＣＨＯ細胞を認識リガンドＩＬ－８（ＣＸＣＬ８）
に２時間暴露した。次に、細胞をトリゾールに入れ、ｍＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡを合成
した。ＮＦκＢサブユニットｐ６５（ＲｅｌＡ）の遺伝子発現の変化は、一般的な方法に
詳述されているように、蓄積性蛍光のリアルタイム検出に基づいたＴａｑＭａｎシステム
を使用して実行された定量的リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって決定された（ＡＢＩ Ｐ
ｒｉｓｍ ７７００、Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ Ｉｎｃ、ＰＥ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ
，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ、ＵＳＡ）。
＜一次骨髄由来マクロファージ＞
一次骨髄由来マクロファージを、ＲＡＧＥ３６２－４０４、変異体ＲＡＧＥペプチド、
Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４又はＴＡＴ－ｃｈｅｒｒｙ対照で１時間前処置した
。次いで、細胞を、ＣＣＲ２の認識リガンドであるＭＣＰ－１（１０－７Ｍ）に２時間曝
露した。次に、細胞をトリゾールに入れ、ｍＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡを合成した。ＮＦ
κＢサブユニットｐ６５（ＲｅｌＡ）の遺伝子発現の変化は、一般的な方法に詳述されて
いるように、蓄積性蛍光のリアルタイム検出に基づいたＴａｑＭａｎシステムを使用して
実行された定量的リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって決定された（ＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ
７７００、Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ Ｉｎｃ、ＰＥ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔ
ｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ、ＵＳＡ）。
［実施例２１ 特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存ＲＡＧＥ活性化は、Ｒ
ＡＧＥの膜貫通ドメインを標的にすることにより阻害される］
この実施例は、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化及
びＲＡＧＥリガンドによるＲＡＧＥ活性化が、ＲＡＧＥの膜貫通ドメイン（ＴＭＤ）の調
節後に阻害されることを示している。
ＲＡＧＥは、単一の膜貫通ヘリックス（配列番号１４の残基３４３－３６１）を含む１
型膜貫通タンパク質である。ＲＡＧＥ－ＴＭＤは、全ての哺乳類種で高度に保存されてい
る。
ＲＡＧＥ－ＴＭＤは、この疎水性ドメインを欠損するＲＡＧＥアイソフォーム（例えば
、可溶性ＲＡＧＥ；ｓＲＡＧＥ）が分泌され、原形質膜に保持されないため、膜の標的化
とアンカリングに重要である。
細胞表面のＲＡＧＥのホモ二量体化は、ＲＡＧＥ媒介のシグナル伝達に不可欠である。
ＲＡＧＥの細胞外部分のＶ、Ｃ１及びＣ２ドメインには、ＲＡＧＥの二量体化を促進する
要素が含まれており（例えば、ＲＡＧＥ２２－３３１はホモ二量体化できる）、ＲＡＧＥ
の二量体化はｓＲＡＧＥの過剰発現によって阻害され得る。ＲＡＧＥのＴＭＤも潜在的に
オリゴマー化において積極的役割を果たし、ＴＭＤはＲＡＧＥ細胞外部ドメインとは無関
係にホモ二量体化することが以前に示されている（Ｓｕ ｅｔ ａｌ．２０１３）。
ＲＡＧＥ－ＴＭＤは、外部ドメインからサイトゾルドメインのシグナル伝達要素へのＲ
ＡＧＥリガンド誘導シグナルの伝達にも必要である。理論に拘束されることを望むもので
はないが、本発明者らは、リガンド結合後の立体構造変化（Ｃ末端間の距離を１００Åに
増加させるハサミ様運動など）の伝達により、これが起こると考えている（Ｘｕｅ ｅｔ
ａｌ．２０１７）。
ＲＡＧＥリガンド結合は、セクレターゼＡＤＡＭ１０／１７及びＭＭＰ９によるＲＡＧ
Ｅ２２－３３１の外部ドメインシェディングを誘導することが知られており、その後、Ｒ
ＡＧＥの残りの膜結合Ｃ末端断片は、膜内切断プロテアーゼであるγ－セクレターゼによ
って処理される。γ－セクレターゼの阻害により、ＲＡＧＥリガンド結合後の膜における
ＲＡＧＥのＣ末端断片の保持が増加し、及びＲＡＧＥリガンド誘導性シグナル伝達の阻害
がもたらされ、ＲＡＧＥ膜貫通ドメインの膜内タンパク質分解がＲＡＧＥリガンド依存性
シグナル伝達の重要なステップであることを示唆している（Ｂｒａｌｅｙ ｅｔ ａｌ．
２０１６）。
これらを総合すると、これらのデータは、特定の共存ＧＰＣＲの活性化に続くＲＡＧＥ
リガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化を調節する手段として、ＲＡＧＥ－ＴＭＤを標的とする
根拠を提供する。
Ｎ末端タグｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３３８－３６１（ｍＣｈｅｒｒｙに連結された細
胞外膜近傍断片を有するＲＡＧＥ－ＴＭＤ）及び細胞外ルシフェラーゼ標識ＡＴ１受容体
（Ｎｌｕｃ－ＡＴ１；図２１Ａ）間でＢＲＥＴシグナルが観察されることを実証し、ＴＭ
ＤがＲＡＧＥ及び特定のＧＰＣＲ間の相互作用にも関与していることを確認する。
ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３３８－３６１の過剰発現は、用量依存的に全長型ＲＡＧＥ
及びＡＴ１間のＢＲＥＴを調節し、ＢＲＥＴ飽和アッセイ（図２１Ｂ）及び動態アッセイ
（図２１Ｃ）で実証され、全長型ＲＡＧＥ及びＡＴ１間のＢＲＥＴは、外部ドメインの膜
近傍部を有するＲＡＧＥ－ＴＭＤの非機能的代替物により阻害されることを確認した。特
に、ｓＲＡＧＥ（すなわちＲＡＧＥの細胞外リガンド結合性Ｖ－Ｃ１－Ｃ２ドメイン；Ｒ
ＡＧＥ２２－３３１）は、ＡＴ１Ｒ及びＲＡＧＥ間のＢＲＥＴを阻害しない（図１６Ａ）
。
対照実験を図２１Ｄに示し、適切なフィルターセットを使用しても、ＡＴ１／Ｒｌｕｃ
８及びｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１間にリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルがな
いことを示している。図２１Ｅに示すように、外部光源による励起後にｍＣｈｅｒｒｙタ
グを使用し、ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１融合タンパク質の相対発現レベル
を個別に評価する。図２１Ｅにも示されているように、ルシフェラーゼからの同様の相対
発光により、種々の形質導入にわたるＡＴ１／Ｒｌｕｃ８の同様の発現レベルが実証され
る。さらに、種々の形質導入にわたるＲＡＧＥ／ヴィーナスの同様の発現レベルは、外部
光源による励起後のヴィーナスの発光波長での同様の相対蛍光発光によって示される。
アドレナリンα２Ｂ受容体、アンジオテンシン受容体ＡＴ１（ＡＴ１Ｒ）、ブラジキニ
ン受容体２（Ｂ２Ｒ）、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ９
、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ニューロペプチドＹ１受容体（ＮＰＹ１Ｒ）、オレキシン受
容体２、スフィンゴシン１リン酸受容体１（Ｓ１ＰＲ１）、甲状腺刺激ホルモン放出ホル
モン受容体１（ＴＲＨＲ１）、バソプレシン受容体１Ａ（Ｖ１ａＲ）、バソプレシン受容
体１Ｂ（Ｖ１ｂＲ）及びバソプレシン受容体２（Ｖ２Ｒ）では、Ｒｌｕｃ８標識ＧＰＣＲ
及びＲＡＧＥ／ヴィーナス間のリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルでの変化の特に明確な阻害
は、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３３８－３６１を共発現させたときに観察され（図２１Ｆ
）、全長型ＲＡＧＥ及びこれらのＧＰＣＲ間のＢＲＥＴが、外部ドメインの膜近傍部を有
するＲＡＧＥ－ＴＭＤのＲの非機能的代替物によって阻害されることを確認した。
アデノシンＡ１受容体（ＡＤＯＲＡ１）、ＣＣＲ７及びＣＸＣＲ５では、ｍＣｈｅｒｒ
ｙ－ＲＡＧＥ３３８－３６１を共発現させた場合、Ｒｌｕｃ８標識ＧＰＣＲ及びＲＡＧＥ
／ヴィーナス間のリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの変化の小さいながらも識別可能な阻害
が観察され（図２１Ｆ）、全長型ＲＡＧＥ及びこれらのＧＰＣＲ間のＢＲＥＴが、外部ド
メインの膜近傍部を有するＲＡＧＥ－ＴＭＤの非機能的代替物によって阻害されることを
確認する。
アドレナリンα１Ａ受容体、ＣＣＲ３、ムスカリン性アセチルコリン受容体２（ＣＨＲ
Ｍ２）及びオレキシン受容体１では、Ｒｌｕｃ８標識ＧＰＣＲ及びＲＡＧＥ／ヴィーナス
間でリガンド誘導ＢＲＥＴシグナルの識別可能な変化はほとんど認められず、ｍＣｈｅｒ
ｒｙ－ＲＡＧＥ３３８－３６１の共発現の効果は決定できなかった（図２１Ｆ）。
上記で詳述したように、ＲＡＧＥのトランス活性化にはサイトゾルドメイン（ＲＡＧＥ
３７９―３９１）の発現が必要であるため、それに続くＲＡＧＥ３３８－３６１は活性化
できない。しかし、ヒト微小血管内皮細胞（ＨＭＥＣ）の全長型ＲＡＧＥのトランス活性
化後に誘導されるＩＣＡＭ－１遺伝子発現によって示されるように、Ａｎｇ ＩＩを媒介
した炎症促進性シグナル伝達は、ＲＡＧＥ３３８－３６１の形質導入によって阻害される
。この阻害は、ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の追加の発現（すなわちＲＡＧ
Ｅのサイトゾルドメイン；図２１Ｇ）によってレスキューされる。これは、ＴＭＤ及びサ
イトゾルドメインが独立して機能することができるが、全長型ＲＡＧＥ構築物では相互依
存を示唆している。特に、ｓＲＡＧＥ（すなわちＲＡＧＥの細胞外ドメイン）は、特定の
共存ＧＰＣＲの活性化に続くＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化を阻害しない。
ＲＡＧＥのＴＭＤのみが、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧ
Ｅ活性化の阻害剤として作用するという仮説を検証するために、ＨＭＥＣにＲＡＧＥのＴ
ＭＤ（ＲＡＧＥ３４３－３６１）又はｍＣｈｅｒｒｙ－ＴＭＤ融合のみを形質導入した。
いずれかの構築物の発現は、ＲＡＧＥ発現が内因的に十分にあるＨＭＥＣのＡｎｇ ＩＩ
によるＭＣＰ１及びＩＣＡＭ１遺伝子発現の両方の誘導を防ぐことができた（図２１Ｈ）
。
ＲＡＧＥのＴＭＤのみがＲＡＧＥリガンド依存性ＲＡＧＥの活性化の阻害剤としても作
用するという仮説を検証するために、全長型ヒトＲＡＧＥを発現するＣＨＯ細胞を、ＲＡ
ＧＥのＴＭＤのみを発現する構築物の形質導入の有無でＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／
Ａ９で処理した（ＲＡＧＥ３４３－３６１）。この構築物の発現は、ＲＡＧＥ３７０－３
９０と同様に、Ｓ１００Ａ８／Ａ９によるｐ６５遺伝子発現の誘導を防ぐことができた（
図２１Ｉ）。
ＲＡＧＥトランス活性化におけるｍＤｉａｐｈ１及びＰＫＣζの作用は、ＲＡＧＥ－Ｔ
ＭＤでのそれらの作用により媒介され、ｓｉＲＮＡを使用したｍＤｉａｐｈ１及びＰＫＣ
ζのサイレンシングは、ＲＡＧＥ３６２－４０４ではなくＲＡＧＥ３４３－４０４によっ
て誘導されるシグナル伝達を阻害するためである（図２１Ｊ）。
これらのデータを総合すると、ＲＡＧＥ－ＴＭＤの特定の調節が、特定の共存ＧＰＣＲ
によるＲＡＧＥのトランス活性化と、ＲＡＧＥの細胞外ドメインの活性化に続くＲＡＧＥ
リガンド依存性シグナル伝達とを阻害できることが確認される。
［実施例２２ ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の潜在的阻害剤に対するスクリ
ーニングの仮想実施例］
以下のアッセイは、特定の共存ＧＰＣＲの活性化を介してＲＡＧＥリガンド非依存性Ｒ
ＡＧＥシグナル伝達の潜在的な阻害剤を特定するために、本明細書に記載の本発明を論理
的に適用する方法の仮想実施例である（例えば、ＡＴ１Ｒ誘導又はＲＡＧＥのＣＣＲ２媒
介トランス活性化）。
アッセイ１：ＲＡＧＥの細胞質側テール（全長型又は欠損型、野生型又は阻害性変異体
）及びＩＱＧＡＰ－１又はその断片との間の結合の阻害を測定する競合アッセイ。
方法：サンドイッチアッセイでは、ＩＱＧＡＰ又はＲＡＧＥの細胞質側テールがプレー
ト又はカラムに結合している（全長型又は欠損型）。試験化合物／モジュレーターの段階
希釈の存在下で結合パートナー（すなわちＲＡＧＥのＩＱＧＡＰ又は細胞質側テール）を
追加する。固有標識（蛍光標識、酵素融合）又は検出プローブ（例えば、結合パートナー
に対して標識をもたらす抗体）によって測定された結合パートナーの存在。結合パートナ
ーの不在は、追加された試験化合物がサイトゾルＲＡＧＥ及びＩＱＧＡＰ－１又はその断
片間の結合の競合的阻害剤であることを示す。
アッセイ２：ＲＡＧＥ及びＩＱＧＡＰ－１の細胞質側テール間の結合を測定するために
使用される酵母２ハイブリッド。
方法：酵母２ハイブリッドアッセイは、ＩＱＧＡＰ－１及びサイトゾルＲＡＧＥ（全長
型又は欠損型、野生型又は阻害性変異体）を発現する。固有標識（例えば、蛍光標識、酵
素融合、レポーターシステム（例えば、ＫＩＳＳ））によって測定された結合パートナー
の存在。結合パートナーの不在は、追加された試験化合物がＲＡＧＥの細胞質側テール及
びＩＱＧＡＰ－１又はその断片間の結合の競合的阻害剤であることを示す。
アッセイ３：ＲＡＧＥの細胞質側テール（全長型又は欠損型、野生型又は阻害性変異体
）及びＩＱＧＡＰ－１間の結合を測定するために使用されるＢＲＥＴ。
方法：ＢＲＥＴアッセイは、標識ＩＱＧＡＰ及びサイトゾルＲＡＧＥを発現し、それら
の間の共鳴エネルギーの移動を測定し、それらの近接性を示す。試験化合物／モジュレー
ターの添加によるＢＲＥＴシグナルの阻害は、試験化合物／モジュレーターがサイトゾル
ＲＡＧＥ及びＩＱＧＡＰ又はその断片間の相互作用の競合的阻害剤であることを示す。
アッセイ４：ＲＡＧＥを介した下流シグナル伝達の誘導を検出することにより、特定の
活性化された共存ＧＰＣＲ（例えば、ＡＴ１Ｒ誘導）によるＲＡＧＥリガンド非依存性Ｒ
ＡＧＥ活性化の阻害。
ＲＡＧＥリガンド非依存性（例えば、ＡＴ１Ｒ誘導トランス活性化）ＲＡＧＥシグナル
伝達の阻害剤は、Ａｎｇ ＩＩ（又はその認識リガンドに曝露された別のＧＰＣＲ）に曝
露されたＡＴ１Ｒ及びＲＡＧＥの両方を発現するＣＨＯ細胞でＲＡＧＥ依存性の下流ＮＦ
κＢ活性化を減少される試験化合物により示されるが、Ｓ１００Ａ８／Ａ９又はＳ１００
Ａ８／Ａ９によって誘導される下流ＮＦκＢ活性化又は他のＲＡＧＥリガンドによって誘
導されるＲＡＧＥシグナル伝達ではないか、又はＡｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒの活性化後
に誘導されるＲＡＧＥ非依存性Ｇｑシグナル伝達を示す（例えば、カルシウム流入、イノ
シトールリン酸レベル、ＥＧＲなどの発現マーカー）。
アッセイ５：ＲＡＧＥ３７９－３９０の結合パートナー。
方法：ＲＡＧＥ３７９－３９０がＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の調節に重
要なシグナル伝達要素であることを実証した後、ＲＡＧＥ３７９－３９０への高親和性特
異的結合パートナーの同定は、インシリコ（ｉｎ ｓｉｌｉｃｏ）又はインビトロでペプ
チド及び非ペプチドライブラリーのスクリーニング（すなわち化学物質）又は構造に基づ
く薬物設計が行われる。
［結論］
ＭＣＰ－１によるＡｎｇ ＩＩ及びＣＣＲ２のＡＴ１Ｒの活性化など、認識リガンドに
よる特定の共存ＧＰＣＲの活性化は、例えばカルシウム流入、イノシトールリン酸合成及
びＰＫＡの活性化を誘導するＧＰＣＲを介した古典的な標準シグナル伝達と異なる経路を
通じて炎症を引き起こす。ここで、本発明者らは、特定の共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥの
細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化が、この分裂の主要な決定因
子であることを示している。本発明者らは、多くのＧＰＣＲの炎症促進性シグナル伝達下
流に重要であるＮＦκＢの活性化が、共存ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化に
よって媒介されることを実証する。その結果、例えば、Ａｎｇ ＩＩ－ＡＴ１Ｒの活性化
によって誘導される血管の有害な変化の多くは、ＲＡＧＥが欠失したとき又はＲＡＧＥの
活性化が阻害されたときに減衰する。対照的に、古典的なＧｑ経路を介したＡＴ１Ｒ依存
性シグナル伝達は、ＲＡＧＥ発現の影響を受けず、ＲＡＧＥ欠失は、Ａｎｇ ＩＩの塩欠
乏又は血圧反応性において血管恒常性に有害な影響を及ぼさない。
本発明者らは、ＡＴ１Ｒ又はＣＣＲ２を含むＲＡＧＥ及びＧＰＣＲがヘテロ複合体を形
成し、明確な受容体－ＨＩＴ ＢＲＥＴシグナルの生成を伴うという特定の証拠を本明細
書に提供する。これは、ヘテロ複合体の形成及びトランス活性化が、外部ドメインの追加
の膜近傍断片の有無にかかわらず、ＲＡＧＥの膜貫通ドメインの非機能的置換の発現によ
って阻害されるという本発明者らによって本明細書に提供された特定の証拠によりさらに
裏付けられている。ＧＰＣＲの不活性状態での事前組み立ては、シグナル伝達成分を含む
一時的な複合体を形成し、急速で拡張した応答性が可能であると考えられている。理論に
拘束されることを望むものではないが、本発明者らは、特定の共存ＧＰＣＲとＲＡＧＥと
の事前組み立てが同様の役割を果たし、ＧＰＣＲの活性化後にＲＡＧＥの細胞質側テール
の迅速なＲＡＧＥリガンド非依存性活性化及び下流の炎症促進性シグナル伝達を可能にす
ると考えている。
本発明者らは、１つのアミノ酸（セリン３９１）のみが異なる野生型ＲＡＧＥと異なり
、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒなど、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ及び３９０Ｘ－ＲＡＧＥ変異
体が、特定の共存ＧＰＣＲの活性化後に炎症促進性シグナル伝達を誘導しないことから、
ＲＡＧＥの残基３９１の立体構造がＧＰＣＲ依存性炎症促進性シグナル伝達にとって重要
であることも示す。これは、以前に示唆されたように、ＲＡＧＥ活性化後にＳｅｒ３９１
がリン酸化されるためではなく、この位置に異なるアミノ酸を含むＲＡＧＥ、すなわちＱ
３９１及びＰ３９１（それぞれラクダ及びウシに生まれながらに見られる）もＲＡＧＥリ
ガンド及び特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性活性化によ
って活性化され得るからである。（実施例７を参照されたい）。ＰＫＣζ阻害は、全長型
ＲＡＧＥの活性化を防ぐことができるが、ＲＡＧＥのリン酸化を防ぐことにより作用する
のではなく、リン酸化を持続できるアミノ酸を含まない全長型Ｓ３９１ＱキメラＲＡＧＥ
変異体を介したシグナル伝達も阻害する。（すなわちセリン、スレオニン又はチロシンで
はない）。
ＲＡＧＥの細胞質側テールとＤｉａｐｈ１との相互作用は、炎症促進シグナル伝達に重
要であることが知られており、おそらくＤｉａｐｈ１も結合するＰＫＣζの動員と活性化
、及びその後、膜貫通ドメインとの相互作用を介したＲＡＧＥ媒介構造の「ハサミ様」変
化を促進するためである。本発明者らの実験では、Ｄｉａｐｈ１又はＰＫＣζのサイレン
シングは、全長型ＲＡＧＥ及びＲＡＧＥ－ＴＭＤを保持するＮ末端トランケート型ＲＡＧ
Ｅ構築物によって媒介されるＡｎｇ ＩＩとのシグナル伝達を介してＡｎｇ ＩＩ及びｓ
１００誘導炎症促進性シグナル伝達の両方を阻害する。ただし、ＲＡＧＥ－ＴＭＤが欠落
しているＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物は、Ｄｉａｐｈ１又はＰＫＣζのサイレン
シング後に続くＡｎｇ ＩＩにより依然として活性化され得る。Ｄｉａｐｈ１は、小さい
帯電したパッチを介してサイトゾルのＲＡＧＥと相互作用すると考えられている。この帯
電したパッチのアラニン置換（Ｒ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ）は、ＲＡＧＥリガンドであるｓ
１００Ａ８／Ａ９によって媒介されるシグナル伝達を防ぐ。ただし、この帯電したパッチ
の突然変異又はそれが安定化するαループの欠失（例えば、ＲＡＧＥ３７０－４０４）は
、Ａｎｇ ＩＩによるＡＴ１Ｒなどの特定の共存ＧＰＣＲの活性化後のＲＡＧＥの細胞質
側テールのＲＡＧＥリガンド非依存性活性化に影響しない。その結果、小分子又は他の阻
害剤を使用してＤｉａｐｈ－１のＲＡＧＥへの結合を破壊する提案された方法（Ｒａｍａ
ｓａｍｙ ｅｔ ａｌ．２０１６）は、特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥ
リガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化に影響しない。さらに、Ｎ末端トランケート型ＲＡＧＥ
３６２－４０４の特定の共存ＧＰＣＲ、例えばＡＴ１Ｒなどによって活性化される能力は
、ｓｉＲＮＡを使用したＰＫＣζ又はＤｉａｐｈ－１の阻害によって阻害されず、このド
メインの作用機序はこれら両方のＲＡＧＥ結合パートナーと無関係であることが確認され
ている。
ＲＡＧＥの細胞外ドメインは歴史的にその機能に不可欠であると考えられてきたが、理
論に拘束されることを望むものではないが、本発明者らは、特定の活性化された共存ＧＰ
ＣＲによるＲＡＧＥの細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド非依存性活性化が下流のエフェ
クターの活性化及びシグナル伝達を誘導する主要なメカニズムであるようだと考えている
。この仮説と一致して、野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４オリゴペプチドによる処置は、糖
尿病のＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスのアテローム形成を回復し、ＡＧＥＲ－ＫＯマ
ウスで観察される相対的な血管保護は、このＲＡＧＥリガンド非依存性トランス活性化経
路の阻害を介して媒介されることを示唆し、その病態生理学的重要性及び特定の活性化さ
れた共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥの細胞質側テールのＲＡＧＥリガンド非依存性活性化の
阻害に対する理論的根拠をさらに強調する。
一部の細胞（例えば、内皮細胞、白血球）のみが通常条件下でＲＡＧＥを発現する。こ
れは、本発明者らが説明する特定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非
依存性ＲＡＧＥ活性化は、通常条件下でこれらの細胞タイプに限定されることを意味する
。他のほとんどの細胞型は、通常条件下ではＲＡＧＥを発現しない。ＲＡＧＥ発現はＡＴ
１Ｒ活性化後に誘導される古典的なＧｑシグナル伝達に影響を及ぼさないという発見に加
えて、発現のこの限られた分布は、ＲＡＧＥの欠失／阻害が血圧、ナトリウム利尿又は全
身性ＲＡＡＳの他の恒常性機能に影響を与えない理由を部分的に説明し得る。しかし、損
傷、炎症、ストレス又は低酸素症後、ＲＡＧＥの新生（ｄｅ ｎｏｖｏ）又は強化された
発現は、局所ＧＰＣＲ活性化の炎症促進性効果の導管を提供し得る。
現在、ＧＰＣＲ媒介シグナル伝達の全身性拮抗薬（例えば、ＡＴ１Ｒ拮抗薬、ＣＣＲ２
拮抗薬）が存在するが、この戦略によって達成される阻害は、それぞれのブロックされた
ＧＰＣＲから生じる全てのシグナル伝達を取り除く。これは、阻害からのフィードバック
エスケープを誘導するか、生理学的シグナル伝達阻害から生じる望ましくない効果をもた
らし得るため、状況によっては最適ではない可能性がある。例えば、ＡＴ１Ｒの阻害は、
血圧の低下をもたらすが、これは、一部の設定（例えば、下記の心筋梗塞、脳卒中又は重
度の心不全など）で望ましくない場合があり、及びＲＡＡＳのフィードバック「エスケー
プ」活性化を引き起こす。ＲＡＧＥのこのＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化が作
動している主要の細胞のみを標的とし、ＧＰＣＲ活性化から生じる炎症促進性シグナルの
みを標的とする潜在的な利点は、全身阻害の制限が適用されないことである。
原理の証明として、本発明者らは、内皮細胞においてＲＡＧＥ及びＡＴ１Ｒの両方が十
分にあり、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥの過剰発現又はＴＡＴ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－
４０４オリゴペプチドでの処置が、ＡＴ１Ｒブロッカーと同じくらい効果的であるが、標
準的なＩＰ－１依存シグナル伝達を変更することなく、Ａｎｇ ＩＩ－ＡＴ１Ｒ依存性炎
症促進性シグナル伝達を阻害することができることを示す。エクスビボで大動脈に適用さ
れた同じオリゴペプチドは、Ａｎｇ ＩＩへの曝露後の炎症促進性分子の誘導を遮断する
こともできる。さらに、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス又は糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯマ
ウスに１０週間投与した場合、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドは、血圧レ
ベルに影響を与えることなくＲＡＡＳ依存性アテローム性動脈硬化を減衰させることがで
きた。さらに、本発明者らは、ＲＡＧＥ３３８－３６１又はＲＡＧＥ３４３－３６１が、
ＲＡＧＥ及びＡＴ１Ｒの両方を豊富に含む内皮細胞におけるＡｎｇ ＩＩ－ＡＴ１Ｒ依存
性炎症促進性シグナル伝達も阻害できることを示した。これらのデータは、この新規炎症
促進性シグナル伝達経路を特異的に標的とする治療の可能性を強調している。
Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４オリゴペプチドで達成された阻害は、過剰な野生
型ＲＡＧＥ３６２－４０４によって克服されないが、低濃度のＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６
２－４０４オリゴペプチドは既存の野生型ＲＡＧＥを克服し、その作用は単純な競合では
ないことを示唆している。さらに、ドデカペプチドＲＡＧＥ３７９－３９０を使用して同
等の阻害を達成できることは、αヘリックスの小さい領域、特にこの領域の主要な残基の
変化が、ＩＱＧＡＰ－１を含むシグナル伝達メディエーターに対するそのようなＲＡＧＥ
変異体の親和性を変えることを示しており、その後、野生型ＲＡＧＥにより内因性シグナ
ル伝達がブロックされる。
特に、共存ＧＰＣＲ（例えば、ＭＣＰ－１によるＣＣＲ２）の活性化後に誘導される炎
症促進性シグナル伝達の阻害におけるＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の有効性及び
認識リガンドによるＧＰＣＲの活性化後のＮＦκＢの活性化の媒介によるＲＡＧＥの作用
（例えば、ＭＣＰによるＣＣＲ２－ＣＨＯ細胞又はＩＬ－８によるＣＸＣＲ２－ＣＨＯ細
胞の活性化）は、ＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化をもたらす活性化された共存
ＧＰＣＲの効果がＡＴ１Ｒに限定されず、特定の他の共存ＧＰＣＲの活性化に続いて誘導
される炎症促進性シグナル伝達が一般化可能であることを確認する。理論に拘束されるこ
とを望むものではないが、本発明者らは、本明細書で同定された主要なＲＡＧＥファーマ
コフォアは、炎症促進効果を伴う多くのＧＰＣＲに共通のシグナル伝達要素と相互作用す
るか又は野生型ＲＡＧＥとの相互作用によると考えている。
本発明者らは、ＲＡＧＥ－ＧＰＣＲヘテロマーの機構的理解が、生理学的シグナル伝達
を損なうことなく、又はそれらの阻害からフィードバック「エスケープ」誘導なしで、特
定の活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性ＲＡＧＥ活性化の有害作
用を特異的に標的とすることができる新規治療法の開発に直接つながると予想する。これ
らのデータは、アテローム性動脈硬化症、神経変性疾患、悪性腫瘍、糖尿病合併症並びに
他の重要な炎症性及び増殖性の状態を含む、ＲＡＧＥ媒介のシグナル伝達が関係する広範
囲の状態に適用し得る。
本明細書に引用される全ての特許、特許出願及び刊行物の開示は、その全体が参照によ
り本明細書に組み込まれる。
本明細書における任意の参考文献の引用は、そのような参考文献が本出願の「先行技術
」として利用可能であることの承認として解釈されるべきではない。
本明細書を通して、目的は、本発明をいずれか１つの実施形態又は特定の特徴の集合に
限定することなく、本発明の好ましい実施形態を説明することであった。したがって、当
業者は、本開示に照らして、本発明の範囲から逸脱することなく、例示された特定の実施
形態に対する様々な修正形態及び変更形態がなされ得ることを理解するであろう。そのよ
うな修正形態及び変更形態は、全て添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されて
いる。
本明細書で使用する「単離された」とは、本発明のペプチドモジュレーターを説明する
場合、自然状態ではない本明細書に記載のペプチドを意味する（例えば、より大きいタン
パク質分子又はそれが自然に発生するか又は通常関連する細胞組織片から解離している）
か、又は天然タンパク質の非天然の断片である（例えば、ペプチドは、天然タンパク質の
２５％未満、好ましくは１０％未満、最も好ましくは５％未満を含包する）。単離は、ペ
プチドのアミノ酸配列が自然に発生しないことも意味し得る。例えば、配列は天然に存在
する配列から修正されるためであり（例えば、アルギニン、トリプトファン又はリジンな
どの塩基性（すなわちカチオン性）アミノ酸を含む特定のアミノ酸の変更により）又は配
列に自然界に存在する隣接するアミノ酸が含まれていないためである。「単離された」と
いう用語は、ペプチド又はアミノ酸配列が人工の配列又はポリペプチドであり、非天然で
あることを意味する場合がある。
同様に、ペプチドをコードする核酸に関連して使用される「単離された」は、前述の全
てを包含し、例えば、単離された核酸は、それらが自然に結び付いている隣接ヌクレオチ
ドから分離されており、生物学的抽出物からの精製などにより、組換え的、合成的に生産
することができる。単離された核酸は、前述のペプチドの１つをコードする部分と、別の
ペプチド又はタンパク質をコードする別の部分を含むことができる。単離された核酸は標
識することもできる。核酸には、動物、細菌、植物又は真菌の使用に好ましいコドンが含
まれる。特定の実施形態では、単離された核酸は、発現ベクターなどのベクターであり、
前述の単離されたペプチドの１つをコードする核酸を含む。所望のＤＮＡ配列の構築物の
ための一般的な方法が提供され、例えば、前出のＢｒｏｗｎ Ｊ．ｅｔ ａｌ．（１９７
９），Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，６８：１０９；Ｓａｍｂｒｏｏｋ
Ｊ，Ｍａｎｉａｔｉｓ Ｔ（１９８９）である。
本明細書で使用される「アミノ酸」又は「残基」という用語は、２０の天然アミノ酸の
いずれか、天然アミノ酸のいずれか１つのＤ型、非天然アミノ酸及び誘導体、その類似体
及び模倣物を含む。天然に存在するアミノ酸を含む任意のアミノ酸は、商業的に購入する
か、又は当技術分野で知られている方法により合成することができる。非天然アミノ酸の
例には、ノルロイシン（「Ｎｌｅ」）、ノルバリン（「Ｎｖａ」）、β－アラニン、Ｌ－
又はＤ－ナフタラニン、オルニチン（「Ｏｒｎ」）、ホモアルギニン（ホモＡｒｇ）など
が含まれ、Ｍ．Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ
Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”第１及び第２改訂版，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９８４ ａｎｄ １９９３及びＳｔｅｗａｒｔ ａｎｄ Ｙｏ
ｕｎｇ，“Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”第２版，
Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ．，１９８４など
にこれらが記載されていることを含む当ペプチド技術などでよく知られており、両方とも
参照により本明細書に組み込まれる。
一般的なアミノ酸は、フルネーム、標準の１文字表記（ＩＵＰＡＣ）又は標準の３文字
表記で称され得る。例えば、Ａ、Ａｌａ、アラニン；Ｃ、Ｃｙｓ、システイン；Ｄ、Ａｓ
ｐ、アスパラギン酸（アスパラギン酸塩）；Ｅ、Ｇｌｕ、グルタミン酸（グルタミン酸塩
）；Ｆ、Ｐｈｅ、フェニルアラニン；Ｇ、Ｇｌｙ、グリシン；Ｈ、Ｈｉｓ、ヒスチジン；
Ｉ、Ｉｌｅ、イソロイシン；Ｋ、Ｌｙｓ、リジン；Ｌ、Ｌｅｕ、ロイシン；Ｍ、Ｍｅｔ、
メチオニン；Ｎ、Ａｓｎ、アスパラギン；Ｐ、Ｐｒｏ、プロリン；Ｑ、Ｇｌｎ、グルタミ
ン；Ｒ、Ａｒｇ、アルギニン；Ｓ、Ｓｅｒ、セリン；Ｔ、Ｔｈｒ、スレオニン；Ｖ、Ｖａ
ｌ、バリン；Ｗ、Ｔｒｐ、トリプトファン；Ｘ、Ｈｙｐ、ヒドロキシプロリン；Ｙ、Ｔｙ
ｒ、チロシン。本明細書の組成物中のあらゆるアミノ酸は、天然、合成及びその誘導体又
はその模倣物であり得る。
ペプチドの非ペプチド類似体、例えば、安定化構造又は生分解の軽減を提供するものも
考えられる。ペプチド模倣類似体は、非ペプチド部分による１つ以上の残基の置換により
、選択されたペプチドに基づいて調製することができる。好ましくは、非ペプチド部分は
、ペプチドがその天然の立体構造を保持するか、又は好ましい立体構造、例えば、生物活
性などを安定化させることを可能にする。ペプチドからの非ペプチド模倣類似体の調製方
法の一例は、Ｎａｃｈｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｇｕｌ．Ｐｅｐｔ．５７：３５９－３
７０（１９９５）に記載されている。本明細書で使用される「ペプチド」という用語は、
前述の全てを包含する。
上記のように、本発明のペプチドは、天然アミノ酸、すなわちＬ－アミノ酸又はＤ－ア
ミノ酸、すなわち天然配列と比較してレトロ－インベルソ（ｒｅｔｒｏ－ｉｎｖｅｒｓｏ
）順でＤ－アミノ酸を含むアミノ酸配列のいずれかで構成され得る。「レトロ－インベル
ソ（ｒｅｔｒｏ－ｉｎｖｅｒｓｏ）」という用語は、配列の方向が逆で、各アミノ酸残基
のキラリティが反転している直鎖ペプチドの異性体を指す。したがって、Ｌ型で存在する
本明細書の任意の配列も、Ｄ－エナンチオマー（レトロ－インベルソ）ペプチド配列とし
て本明細書で本質的に開示される。本発明によればＤ－エナンチオマー（レトロ－インベ
ルソ）ペプチド配列は、例えば、対応する天然Ｌ－アミノ酸配列のアミノ酸配列の逆を合
成することにより、構築することができる。Ｄ－レトロ－インベルソエナンチオマーペプ
チド、例えば単離されたペプチドの成分である各単一アミド結合のカルボニル基とアミノ
基の位置は交換され、各α炭素の側鎖基の位置は保存される。
上記で定義されたＤ－エナンチオマーアミノ酸を有する本発明の実施形態の単離ペプチ
ドモジュレーターの成分調製は、対応する天然に存在するＬ型アミノ酸配列の逆アミノ酸
配列を化学的に合成することにより、又は当業者に知られている任意の他の適切な方法に
より達成することができる。代わりに、ペプチド又はその成分のＤ－レトロ－インベルソ
（Ｄ－ｒｅｔｒｏ－ｉｎｖｅｒｓｏ）エナンチオマー型は、Ｄ－レトロ－インベルソ－エ
ナンチオマー型の化学合成のためのマトリックスとして、Ｌ型ペプチド又はその成分を利
用し、上記に開示の化学合成を使用して調整し得る。
本発明の実施形態のペプチドモジュレーターが機能する方法に影響を与えないか、又は
本発明の実施形態のペプチドモジュレーターが機能する方法に有利に影響する様々な側基
の追加を含む様々な変更を行うことができる。そのような変化には、電荷基の追加又は削
除、アミノ酸の置換、結合には影響しないが、血液脳関門を通過する輸送を促進する本発
明の実施形態のペプチドモジュレーターの全体的な電荷特性に影響を与える親油性部分の
追加などが含まれ得る。そのような各変化について、分子が本発明に従って機能するかど
うかを試験するために、日常的な実験のみが必要とされる。単に所望の変更を行うか、所
望のペプチドを選択して、実施例で詳細に説明された方法で適用する。
本発明の一形態では、本明細書で定義される「配列同一性」という用語は、配列が以下
のように比較されることを意味する。２つのアミノ酸配列のパーセント同一性を決定する
ために、最適な比較目的のために配列をアライメントすることができる（例えば、最初の
アミノ酸配列の配列にギャップを導入できる）。次に、対応するアミノ酸位置のアミノ酸
を比較できる。最初の配列の位置が、２番目の配列の対応する位置と同じアミノ酸で占め
られている場合、分子はその位置で同一である。２つの配列間の同一性パーセントは、配
列が共有する同一位置の数の関数である。例えば、特定のペプチドが定義された長さの参
照ポリペプチドに対して特定のパーセント同一性を有すると言われる場合、パーセント同
一性は参照ペプチドに対するものである。したがって、１００アミノ酸長の参照ポリペプ
チドと５０％同一のペプチドは、参照ポリペプチドの５０アミノ酸長の部分と完全に同一
である５０アミノ酸ポリペプチドであり得る。また、その全長が参照ポリペプチドと５０
％同一である１００アミノ酸長のポリペプチドであり得た。このような２つの配列のパー
セント同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成できる。
２つの配列の比較に利用される数学的アルゴリズムの好ましい非限定的な例は、ａｌｇ
ｏｒｉｔｈｍ ｏｆ Ｋａｒｌｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９３），ＰＮＡＳ ＵＳＡ，９
０：５８７３－５８７７である。そのようなアルゴリズムは、本発明のアミノ酸配列に対
して所望の同一性を有する配列を識別するために使用し得るＮＢＬＡＳＴプログラムに組
み込まれている。比較の目的でギャップのあるアラインメントを取得するには、Ａｌｔｓ
ｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，（１９９７），Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ，２５：
３３８９－３４０２に記載されているように、ギャップありＢＬＡＳＴ（Ｇａｐｐｅｄ
ＢＬＡＳＴ）を利用することができる。ＢＬＡＳＴ及びギャップありＢＬＡＳＴプログラ
ムを利用する場合、それぞれのプログラムのデフォルトパラメータ（例えば、ＮＢＬＡＳ
Ｔ）を使用することができる。さらに配列は、Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ Ｇ
ｒｏｕｐ’ｓ ＧＡＰ（グローバルアラインメントプログラム）のバージョン９を用い、
デフォルト（ＢＬＯＳＵＭ６２）マトリックス（値－４から＋１１）、ギャップオープン
ペナルティ―１２（最初のｎｕｌｌギャップに関して）及び－４のギャップ延長ペナルテ
ィ（ギャップ内の連続するヌルが追加されるごと）を使用しアライメントすることができ
る。アラインメント後、要求された配列内のアミノ酸の数の割合として一致した数を表す
ことにより、同一性の割合が計算される。２つのアミノ酸配列のパーセント同一性を決定
する記載された方法は、核酸配列に対応して適用することができる。
一実施形態において、本発明の実施形態のペプチドモジュレーターは、直接的又はリン
カーを介して連結され得る。これに関連して、「リンカー」は、通常、ペプチド、オリゴ
ペプチド又はポリペプチドであり、複数のペプチドを互いに連結するために使用され得る
。互いに連結されるように選択された本発明のペプチドは、同一の配列であるか、又は本
発明のペプチドのいずれかから選択される。リンカーは、１―１０アミノ酸の長さ、より
好ましくは１―５アミノ酸の長さ及び最も好ましくは１―３アミノ酸の長さを有すること
ができる。特定の実施形態では、リンカーは、二次構造形成特性を有する必要はない、す
なわちα―ヘリックス又はβ―シート構造形成傾向を必要としない。例えば、リンカーが
グリシン残基の少なくとも３５％で構成されている場合である。前述のように、リンカー
は、通常の細胞過程によって細胞内で切断できるＭＭＰペプチドなどの切断可能なペプチ
ドであり、毒性と見なさないほどに細胞外用量を十分低く保ちながら、以前に連結された
ペプチドの細胞内用量を効果的に上昇させることができる。リンカーとして細胞内／内因
的に切断可能なペプチド、オリゴペプチド又はポリペプチド配列の使用により、標的細胞
への伝達後にペプチドを互いに分離することができる。これに関連して、切断可能なオリ
ゴ又はポリペプチド配列には、プロテアーゼ切断可能なオリゴ又はポリペプチド配列も含
まれ、プロテアーゼ切断部位は、通常、処理細胞により内因的に発現されるプロテアーゼ
に応じて選択される。上記で定義されたリンカーは、オリゴ又はポリペプチド配列として
存在する場合、Ｄ―アミノ酸又は天然アミノ酸、すなわちＬ―アミノ酸のいずれかで構成
され得る。上記の代替として、ペプチドのカップリング又は融合は、カップリング剤又は
コンジュゲート剤、例えば架橋試薬を介して達成され得る。
利用できるいくつかの分子間架橋試薬があり、例えば、Ｍｅａｎｓ ａｎｄ Ｆｅｅｎ
ｅｙ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｈｏｌ
ｄｅｎ－Ｄａｙ，１９７４，ｐｐ．３９－４３を参照されたい。これらの試薬には、例え
ば、Ｎ－スクシンイミジル３―（２―ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）又は
Ｎ、Ｎ’―（１，３―フェニレン）ビスマレイミドがあり、Ｎ、Ｎ’―エチレン―ビス―
（ヨードアセトアミド）又は６―１１個の炭素メチレン架橋を有する他のそのような試薬
及び１，５―ジフルオロ―２，４―ジニトロベンゼンなどがある。この目的に有用な他の
架橋試薬には、ｐ、ｐ’―ジフルオロ―ｍ、ｍ’―ジニトロジフェニルスルホン；アジピ
ン酸ジメチル；フェノール―１，４―ジスルホニルクロリド；ヘキサメチレンジイソシア
ネート又はジイソチオシアネート又はアゾフェニル―ｐ―ジイソシアネート；グルタルア
ルデヒド及びジジアゾベンジジンなどが含まれる。架橋試薬は、ホモ二官能性、すなわち
同じ反応を受ける２つの官能基を有し得る。好ましいホモ二官能性架橋結合試薬は、ビス
マレイミドヘキサン（ＢＭＨ）である。ＢＭＨには２つのマレイミド官能基が含まれてお
り、穏やかな条件下（ｐＨ ６．５―７．７）でスルフヒドリル含有化合物と特異的に反
応する。２つのマレイミド基は炭化水素鎖で接続されている。したがって、ＢＭＨは、シ
ステイン残基を含むタンパク質（又はポリペプチド）の不可逆的な架橋に有用である。架
橋試薬はヘテロ二官能性でもあり得る。ヘテロ二官能性架橋試薬は、２つの異なる官能基
、例えば、遊離アミンとチオールをそれぞれ有する２つのタンパク質を架橋するアミン反
応性基及びチオール反応性基を有する。ヘテロ二官能性架橋試薬の例は、スクシンイミジ
ル４―（Ｎ―マレイミドメチル）シクロヘキサン―１―カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、
ｍ―マレイミドベンゾイル―Ｎ―ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）及びＭＢ
Ｓの伸びきり鎖アナログであるスクシンイミド４―（ｐ―マレイミドフェニル）ブチレー
ト（ＳＭＰＢ）などである。これらの架橋試薬のスクシンイミジル基と第一級アミン及び
チオール反応性マレイミドは、システイン残基のチオールと共有結合を形成する。架橋試
薬は、多くの場合に水溶性が低いため、スルホン酸基などの親水性部分を架橋試薬に加え
得、その水溶性を改善する。スルホＭＢＳ及びスルホＳＭＣＣは、水溶性に修飾された架
橋試薬の例である。多くの架橋試薬は、細胞条件下で基本的に切断不可能なコンジュゲー
トを生じる。したがって、架橋試薬は、細胞条件下で切断可能なジスルフィドなどの共有
結合を含んでいるものもある。例えば、トラウト試薬（Ｔｒａｕｔ’ｓ ｒｅａｇｅｎｔ
）、ジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート）（ＤＳＰ）及びＮ－スクシンイミジ
ル３―（２―ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）は、周知の切断可能な架橋剤
である。切断可能な架橋試薬の使用により、必要があれば、細胞が架橋試薬の特定の配列
を切断できる場合、標的細胞への伝達後にペプチドを分離することができる。この目的の
ために、直接的なジスルフィド結合も有用であり得る。化学的架橋には、スペーサーアー
ムの使用も含まれる可能性がある。スペーサーアームは、分子内の柔軟性を提供するか、
又は共役部分間の分子内距離を調整し、それによって生物学的活性を維持するのに役立ち
可能性がある。スペーサーアームは、例えば、プロリンなどのスペーサーアミノ酸を含む
タンパク質（又はポリペプチド）部分の形態であり得る。代わりに、スペーサーアームは
、「長鎖ＳＰＤＰ」のような架橋試薬の一部であり得る（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ
．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ．，ｃａｔ．Ｎｏ．２１６５１Ｈ）。上記のものを含む多
くの架橋試薬が市販されている。それらの使用に関する詳細な使用説明書は、商業供給者
から容易に入手できる。架橋タンパク質及びコンジュゲートの調製に関する一般的なリフ
ァレンスは；Ｗｏｎｇ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｏｎｊｕｇａｔ
ｉｏｎ ａｎｄ Ｃｒｏｓｓ－Ｌｉｎｋｉｎｇ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ（１９９１）である
。
一実施形態では、ペプチドモジュレーターは、「誘導体」、「バリアント」又は「機能
的断片」を含み得る。すなわち、アミノ酸配列の１つ以上の部位で１つ以上のアミノ酸の
置換、天然配列の任意の部位での１つ以上のアミノ酸の欠失及び／又は天然ペプチド配列
の１つ以上の部位での１つ以上のアミノ酸の挿入により、上記で定義したように、本発明
の天然に存在するペプチド（Ｌ－アミノ酸）の配列に由来する。「誘導体」は、本発明の
ペプチドとして使用される場合、それらの生物学的活性を保持するものとする。本発明に
関連して、誘導体は、上記で定義されたそれらのＬ―又はＤ―アミノ酸配列又はその両方
の形で存在し得る。
本発明のペプチドの誘導体の調製のためにアミノ酸の置換が行われる場合、同類（アミ
ノ酸）置換が好ましい。同類（アミノ酸）置換には、通常、次のグループ内の置換が含ま
れる。グリシン及びアラニン；バリン、イソロイシン及びロイシン；アスパラギン酸（ア
スパラギン酸塩）及びグルタミン酸（グルタミン酸塩）；アスパラギン及びグルタミン；
セリン及びスレオニン；リジン及びアルギニン；フェニルアラニン及びチロシンなどであ
る。したがって、好ましい同類置換基は、アスパラギン酸塩―グルタミン酸塩；アスパラ
ギン－グルタミン；バリン－ロイシン－イソロイシン；アラニン－バリン；及びフェニル
アラニン－チロシンである。そのような突然変異により、例えばペプチドの安定性及び／
又は有効性が強化し得る。ペプチドに突然変異が導入された場合、ペプチドは（機能的に
）相同のままである。例えば、順番、機能及び抗原特性又は他の機能が相同のままである
。ペプチドのそのような変異成分は、特定の用途（例えば、ｐＨ最適化の増加、温度安定
性の増加など）のために、本発明のペプチドの変更されていない配列よりも有利であり得
る変更された特性を有することが可能である。
一実施形態では、本発明のペプチドの誘導体は、本発明のペプチドの非修飾配列と実質
的な同一性を有すると定義される。天然に存在する類似体に対して、特に好ましいのは、
少なくとも３０％の配列同一性、好ましくは少なくとも５０％の配列同一性、さらに好ま
しくは少なくとも６０％の配列同一性、さらに好ましくは少なくとも７５％の配列同一性
、さらにより好ましくは少なくとも８０％のアミノ酸配列、さらになおも好ましくは９０
％の配列同一性及び最も好ましくは少なくとも９５％又はさらに９９％の配列同一性を有
するアミノ酸配列である。本発明のペプチドの機能的誘導体の合成又は単離並びに２つの
アミノ酸配列のパーセント同一性の決定のための適切な方法は上記されている。さらに、
上記に開示のペプチドの誘導体の製造方法は周知であり、当業者に周知の標準的な方法に
従って実施することができる（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ Ｊ，Ｍａｎｉａｔｉｓ Ｔ（
１９８９）を参照されたい）。
さらなる実施形態として、本発明は、本明細書で定義されるモジュレーターを含む医薬
組成物又は薬物を提供する。特定の実施形態では、そのような医薬組成物又は医薬品は、
本明細書で定義されるように、モジュレーター及び任意選択によるリンカーを含む。
さらに、そのような医薬組成物又は医薬は、医薬的に許容される担体、アジュバント又
はビヒクルを含むことができる。本発明による「薬学的に許容される担体、アジュバント
又はビヒクル」とは、製剤化されるモジュレーターの薬理学的活性又は生理学的標的を破
壊しない非毒性の担体、アジュバント又はビヒクルを指す。本発明の医薬組成物に使用で
きる薬学的に許容される担体、アジュバント又はビヒクルには、頭蓋又は頭蓋内に適用で
きるもの又は血液脳関門（ＢＢＢ）を通過できるものが含まれるが、これらに限定されな
い。それにもかかわらず、本発明の医薬組成物は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン
酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸などの緩
衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分的グリセリ
ド混合物、水、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩
、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウムなどの塩又は電解質、ポリビニルピロリドン、
セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、
ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレンブロックポリマー、
ポリエチレングリコール及びラノリン（ｗｏｏｌ ｆａｔ）などを含むことができる。
本発明の医薬組成物は、経口的に、吸入スプレー、局所的、直腸、経鼻的、頬側的、経
膣的、脳又は埋め込みリザーバを介することによる非経口的に投与され得る。
ＲＡＧＥの任意のドメインに関して又は任意の他のポリペプチド配列に関して、本明細
書で使用される「断片」という用語は、ＲＡＧＥのドメイン又はそれが参照する他の任意
のポリペプチド配列よりも少ない１つ以上のアミノ酸残基を意味すると理解されるべきで
ある。
本明細書で使用する非経口という用語には、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液嚢内
、胸骨内、くも膜下腔内、肝内、病巣内及び頭蓋内注射又は注入技術が含まれる。医薬組
成物は、経口、腹腔内又は静脈内投与される。本発明の医薬組成物の無菌注射可能形態は
、水性又は油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁
剤を使用して、当技術分野で周知の技術に従って製剤され得る。無菌注射製剤は、例えば
１，３－ブタンジオール溶液など、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒中の無
菌注射溶液又は懸濁液であり得る。使用可能な許容されるビヒクル及び溶媒の中には、水
、リンゲル液及び等張性塩化ナトリウム溶液がある。加えて、無菌の固定油が、溶媒又は
懸濁化剤として従来から使用されている。
そのようなものとして、合成モノ又はジグリセリドを含む任意の刺激の少ない固定油を
使用することができる。オレイン酸及びそのグリセリド誘導体などの脂肪酸は、特にそれ
らのポリオキシエチル化バージョンのオリーブ油又はヒマシ油などの天然の薬学的に許容
される油と同様に、注射剤の調製に有用である。これらの油剤又は懸濁液は、カルボキシ
メチルセルロースなどの長鎖アルコール希釈剤又は分散剤又は乳濁液及び懸濁液を含む薬
学的に許容される剤形の製剤に一般的に使用される類似の分散剤も含み得る。薬学的に許
容される固体、液体又は他の剤形の製造に一般的に使用される、Ｔｗｅｅｎｓ、Ｓｐａｎ
ｓ及び他の乳化剤又はバイオアベイラビリティ増強剤などの他の一般的に使用される界面
活性剤も製剤の目的に使用され得る。
本明細書の薬学的に許容される組成物は、カプセル、錠剤、水性懸濁液又は溶液を含む
任意の経口的に許容される剤形で経口投与することができるが、これらに限定されるもの
ではない。経口使用のための錠剤の場合、一般的に使用される担体には、乳糖とコーンス
ターチが含まれる。通常、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤も添加される。カプセ
ル剤での経口投与の場合、有用な希釈剤には、乳糖及び乾燥コーンスターチが含まれる。
経口使用に水性懸濁液が必要な場合、有効成分を乳化剤及び懸濁剤と組み合わせる。必要
に応じて、特定の甘味料、香料、着色料を追加し得る。
代わりに、本明細書で定義される医薬組成物は、直腸投与用の坐剤の剤形で投与し得る
。そのような坐剤は、室温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸で
溶けて薬物を放出する適切な非刺激性賦形剤と薬剤を混合することにより調製することが
できる。そのような材料には、カカオバター、蜜蝋、ポリエチレングリコールが含まれる
。
本明細書で定義される医薬組成物は、特に処置の標的が、脳、他の頭蓋内組織、目又は
皮膚の疾患を含む局所適用により容易にアクセス可能な領域又は器官を含む場合、局所投
与することもでき得る。適切な製剤は、これらの領域又は臓器のそれぞれに対して迅速に
調製される。
局所適用のために、本明細書で定義される医薬組成物は、本明細書で特定されるモジュ
レーターを含む適切な軟膏に製剤化され、１つ以上の担体に懸濁又は溶解され得る。ペプ
チドの局所投与のための担体には、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリ
コール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス及び水が含ま
れるが、これらに限定されるものではない。代わりに、本明細書で定義される医薬組成物
は、１つ以上の薬学的に許容される担体に懸濁又は溶解したペプチドを含む適切なローシ
ョン又はクリームに製剤化することができる。適切な担体には、鉱油、モノステアリン酸
ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２
－オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水が含まれるが、これらに限定される
ものではない。
本明細書で定義される医薬組成物は、経鼻エアロゾル又は吸入によって投与することも
できる。そのような組成物は、医薬製剤の技術分野で周知の技術に従って調製することが
でき、ベンジルアルコール又は他の適切な防腐剤、バイオアベイラビリティ―を増強する
吸収促進剤、フルオロカーボン及び／又は他の従来の可溶化剤又は分散剤を使用する生理
食塩水中の溶液として調整し得る。本明細書の薬学的に許容される組成物又は薬剤は、経
口又は非経口投与用、例えば、注射による投与に製剤化される。
処置目的のために、非毒性の有効量のモジュレーターを上記で定義された医薬組成物の
調製に使用し得る。したがって、モジュレーターのある量を担体材料と組み合わせて、上
記で定義された組成物を生成することができる。
医薬組成物は、典型的には、単一の（又は複数の）剤形で調製され、これは、処置され
る宿主及び特定の投与方式に応じて異なる。通常、医薬組成物は、０．０００１から１０
０ｍｇ／ｋｇ体重／日のペプチドの用量あたりの投与量範囲が医薬組成物を投与されてい
る患者に投与できるように製剤化される。用量範囲あたりの好ましい投与範囲は、０．０
１ｍｇ／ｋｇ体重／日から５０ｍｇ／ｋｇ体重／日まで変化し、さらに好ましい用量範囲
あたりの投与量範囲は、０．１ｍｇ／ｋｇ体重／日から１０ｍｇ／ｋｇ体重／日である。
ただし、上記の投与量範囲及び処置計画は、使用する特定のモジュレーターの活性、年
齢、体重、健康状態、性別、食習慣、投与時間、排泄率、併用薬、処置する医師の判断及
び処置されている特定の疾患の重症度などを含む、種々の要因に応じて任意の特定の患者
に適切に適合して得る。これに関連して、投与は初期投与量範囲で行われ得、例えば、上
記のとおり、その範囲内で初期用量範囲を増減することにより、処置期間中にわたって変
化し得る。代わりに、投与は、特定の投与量範囲を投与することにより連続的な方法で実
施され、それにより、処置の全時間にわたって初期投与量範囲を維持することができる。
さらに、両方の投与形態を組み合わせ得、例えば、処置の種々の期間で投与量範囲を調整
（増加又は減少）するが、単一の期間内で一定に保ち、それにより、種々の期間の投与量
範囲が互いに異なる場合である。
治療的に使用される場合、本発明のモジュレーターは治療有効量で投与される。一般に
、治療有効量とは、処置される特定の状態の発症を遅らせるか、進行を阻害するか、又は
完全に停止するのに必要な量を意味する。一般に、治療有効量は、対象の年齢及び状態並
びに対象の疾患の性質及び程度によって異なり、これらは、全て当業者によって決定され
ることができる。特に合併症が発生した場合、個々の医師が投与量を調整することができ
る。
上記のように、本発明の一側面は、ストリンジェントな条件下で単離されたペプチドモ
ジュレーター又はそのバリアントをコードする核酸配列及びそれらの誘導体並びに上記の
ヌクレオチド配列からなる核酸分子にハイブリダイズする他の核酸配列に関連している。
本明細書で使用される「ストリンジェントな条件」という用語は、当業者が精通している
パラメーターを指す。核酸ハイブリダイゼーションのパラメーターは、そのような方法を
蓄積した参考文献にあり得る。例えばＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂ
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ｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ。より具体的には、本明細書で使用されるストリンジェントな条
件は、ハイブリダイゼーション緩衝液（３．５×ＳＳＣ、０．０２％フィコール、０．０
２％ポリビニルピロリドン、０．０２％ウシ血清アルブミン、２５ ｍＭＮａＨ２ＰＯ４
（ｐＨ７）、０．５％ＳＤＳ、２ｍＭ ＥＤＴＡ）における６５℃でのハイブリダイゼー
ションを指す。ＳＳＣは０．１５Ｍ塩化ナトリウム／０．１５ Ｍクエン酸ナトリウム、
ｐＨ７であり、ＳＤＳはドデシル硫酸ナトリウム並びにＥＤＴＡはエチレンジアミン四酢
酸である。ハイブリダイゼーション後、ＤＮＡが転写された膜を室温で２×ＳＳＣで洗浄
し、次に６５℃で、０．１×ＳＳＣ／０．１×ＳＤＳで洗浄する。
本発明は、上記製剤の少なくとも１つの上記医薬組成物（１つ以上の容器内）及び医薬
組成物の適用に関する指示及び／又は情報に関する取扱説明書又は情報パンフレットを含
むキットをさらに提供する。
本発明の分野の当業者は、本明細書に記載された本発明が、具体的に記載されたもの以
外の変形形態及び修正形態が可能であることを理解するであろう。本発明は、そのような
機能的変形形態及び修正形態を全て含むことを理解されたい。本発明は、本明細書におい
て個々に又は集合的に参照又は示される全てのステップ、特徴、組成物及び化合物並びに
前記ステップ又は特徴のあらゆる組み合わせ又は任意の２つ以上も含む。本発明は、例示
のみを目的とする本明細書に記載の特定の実施形態によって範囲が限定されるものではな
い。本明細書に記載されているように、機能的に均等な製品、組成物及び方法は、明らか
に本発明の範囲内である。さらに、本発明は、特に明記しない限り、分子生物学、微生物
学、神経生物学、ウイルス学、組換えＤＮＡ技術、溶液中のペプチド合成、固相ペプチド
合成及び免疫学の従来の技術又は本明細書で引用した技術を使用して、過度な実験を行う
ことなく実行される。
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１．
４０．Ｂｒａｌｅｙ Ａ．，Ｋｗａｋ Ｔ．，Ｊｕｌｅｓ Ｊ．，Ｈａｒｊａ Ｅ．，Ｌ
ａｎｄｇｒａｆ Ｒ．，Ｈｕｄｓｏｎ Ｂ．Ｉ．（２０１６）Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏ
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Ｒｏｌｅ ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２９１，１２
０５７－７３．
４１．Ｂｒａｅｕｎｅｒ－Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｈ．，Ｊｅｎｓｅｎ，Ａ．Ａ．，Ｓｈｅｐｐ
ａｒｄ，Ｐ．Ｏ．，Ｂｒｏｄｉｎ，Ｂ．，Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ－Ｌａｒｓｅｎ，Ｐ．＆
Ｏ’Ｈａｒａ，Ｐ．（２００１）Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔ
ｉｏｎ ｏｆ ａ ｈｕｍａｎ ｏｒｐｈａｎ ｆａｍｉｌｙ Ｃ Ｇ－ｐｒｏｔｅｉｎ
ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＧＰＲＣ５Ｄ．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂ
ｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ（ＢＢＡ）－Ｇｅｎｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，１５１８，２３７－２４８．
４２．Ｂｒｅｙｅｒ，Ｒ．Ｍ．，Ｃ．Ｋ．Ｂａｇｄａｓｓａｒｉａｎ，Ｓ．Ａ．Ｍｙｅｒ
ｓ，ａｎｄ Ｍ．Ｄ．Ｂｒｅｙｅｒ．Ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｓｕ
ｂｔｙｐｅｓ ａｎｄ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
Ｔｏｘｉｃｏｌ，２００１，４１：６６１－９０．
４３．Ｂｒｅｚｉｌｌｏｎ，Ｓ．，Ｌａｎｎｏｙ，Ｖ．，Ｆｒａｎｓｓｅｎ，Ｊ．－Ｄ．
，Ｌｅ Ｐｏｕｌ，Ｅ．，Ｄｕｐｒｉｅｚ，Ｖ．，Ｌｕｃｃｈｅｔｔｉ，Ｊ．，Ｄｅｔｈ
ｅｕｘ，Ｍ．＆Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒ，Ｍ．（２００３）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ ｌｉｇａｎｄｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｏｒｐｈａｎ Ｇ ｐｒｏ
ｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ＧＰＲ７ ａｎｄ ＧＰＲ８．Ｊｏｕ
ｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７８，７７６－７８３
．
４４．Ｂｒｉｓｃｏｅ，Ｃ．Ｐ．，Ｔａｄａｙｙｏｎ，Ｍ．，Ａｎｄｒｅｗｓ，Ｊ．Ｌ．
，Ｂｅｎｓｏｎ，Ｗ．Ｇ．，Ｃｈａｍｂｅｒｓ，Ｊ．Ｋ．，Ｅｉｌｅｒｔ，Ｍ．Ｍ．，Ｅ
ｌｌｉｓ，Ｃ．，Ｅｌｓｈｏｕｒｂａｇｙ，Ｎ．Ａ．，Ｇｏｅｔｚ，Ａ．Ｓ．＆Ｍｉｎｎ
ｉｃｋ，Ｄ．Ｔ．（２００３）Ｔｈｅ ｏｒｐｈａｎ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌ
ｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＧＰＲ４０ ｉｓ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｂｙ ｍｅｄｉｕｍ
ａｎｄ ｌｏｎｇ ｃｈａｉｎ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂ
ｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７８，１１３０３－１１３１１．
４５．Ｂｒｏｔｈｅｒｓ，Ｓ．Ｐ．＆Ｗａｈｌｅｓｔｅｄｔ，Ｃ．（２０１０）Ｔｈｅｒ
ａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ Ｙ（ＮＰＹ）
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｌｉｇａｎｄｓ．ＥＭＢＯ Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２，４２９－４３９．
４６．Ｂｒｏｗｎ，Ａ．Ｊ．，Ｇｏｌｄｓｗｏｒｔｈｙ，Ｓ．Ｍ．，Ｂａｒｎｅｓ，Ａ．
Ａ．，Ｅｉｌｅｒｔ，Ｍ．Ｍ．，Ｔｃｈｅａｎｇ，Ｌ．，Ｄａｎｉｅｌｓ，Ｄ．，Ｍｕｉ
ｒ，Ａ．Ｉ．，Ｗｉｇｇｌｅｓｗｏｒｔｈ，Ｍ．Ｊ．，Ｋｉｎｇｈｏｒｎ，Ｉ．＆Ｆｒａ
ｓｅｒ，Ｎ．Ｊ．（２００３）Ｔｈｅ Ｏｒｐｈａｎ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌ
ｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ＧＰＲ４１ ａｎｄ ＧＰＲ４３ ａｒｅ ａｃｔｉｖａｔ
ｅｄ ｂｙ ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｓｈｏｒｔ ｃｈａｉｎ ｃ
ａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ，２７８，１１３１２－１１３１９．
４７．Ｂｕｃｈｅｒ，Ｍ．，Ｈｏｂｂｈａｈｎ，Ｊ．，Ｔａｅｇｅｒ，Ｋ．＆Ｋｕｒｔｚ
，Ａ．（２００２）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏ
ｎ ｏｆ ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ Ｖ１Ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｄｕｒｉｎｇ ａｃ
ｕｔｅ ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ ｉｎ ｒａｔｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ－Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ，Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ ａｎ
ｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２８２，Ｒ９７９－Ｒ９８４．
４８．Ｂｕｌｅｒ，Ｍ．，Ａａｔｓｉｎｋｉ，Ｓ．－Ｍ．，Ｓｋｏｕｍａｌ，Ｒ．，Ｋｏ
ｍｋａ，Ｚ．，Ｔｏｔｈ，Ｍ．，Ｋｅｒｋｅｌａｅ，Ｒ．，Ｇｅｏｒｇｉａｄｉ，Ａ．，
Ｋｅｒｓｔｅｎ，Ｓ．＆Ｈａｋｋｏｌａ，Ｊ．（２０１２）Ｅｎｅｒｇｙ－ｓｅｎｓｉｎ
ｇ Ｆａｃｔｏｒｓ Ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ Ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ Ｐｒｏｌｉｆｅ
ｒａｔｏｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ γ Ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ １
－α（ＰＧＣ－１α）ａｎｄ ＡＭＰ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａ
ｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｍｅ
ｄｉａｔｏｒｓ ｉｎ Ｌｉｖｅｒ ＩＮＤＵＣＴＩＯＮ ＯＦ ＩＮＴＥＲＬＥＵＫＩ
Ｎ １ ＲＥＣＥＰＴＯＲ ＡＮＴＡＧＯＮＩＳＴ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏ
ｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８７，１８４７－１８６０．
４９．Ｂｕｒｇｅｓｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｍ．Ｎ．Ｐｅｒｋｉｎｓ，Ｈ．Ｐ．Ｒａｎｇ，Ｅ．Ａ
．Ｃａｍｐｂｅｌｌ，Ｍ．Ｃ．Ｂｒｏｗｎ，ａｎｄ Ｐ．ＭｃＩｎｔｙｒｅ．Ｂｒａｄｙ
ｚｉｄｅ，ａ ｐｏｔｅｎｔ ｎｏｎ－ｐｅｐｔｉｄｅ Ｂ（２）ｂｒａｄｙｋｉｎｉｎ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ｗｉｔｈ ｌｏｎｇ－ｌａｓｔｉｎｇ ｏ
ｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍ
ａｔｏｒｙ ｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａ．Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０００，１
２９：７７－８６．
５０．Ｃａｉ，Ｚ．，ｅｔ ａｌ．Ｒｏｌｅ ｏｆ ＲＡＧＥ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅ
ｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｎｅｕｒｏ
ｂｉｏｌｏｇｙ，２０１６，３６：４８３－４９５．
５１．Ｃａｌｄｅｒｏｎ－Ｇａｒｃｉｄｕｅｎａｓ，Ｌ．，Ｋａｖａｎａｕｇｈ，Ｍ．，
Ｂｌｏｃｋ，Ｍ．，Ｄ’Ａｎｇｉｕｌｌｉ，Ａ．，Ｄｅｌｇａｄｏ－Ｃｈａｖｅｚ，Ｒ．
，Ｔｏｒｒｅｓ－Ｊａｒｄｏｎ，Ｒ．，Ｇｏｎｚａｌｅｚ－Ｍａｃｉｅｌ，Ａ．，Ｒｅｙ
ｎｏｓｏ－Ｒｏｂｌｅｓ，Ｒ．，Ｏｓｎａｙａ，Ｎ．＆Ｖｉｌｌａｒｒｅａｌ－Ｃａｌｄ
ｅｒｏｎ，Ｒ．（２０１２）Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ｈｙｐｅｒｐｈｏｓ
ｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ ｔａｕ，ｄｉｆｆｕｓｅ ａｍｙｌｏｉｄ ｐｌａｑｕｅｓ，ａ
ｎｄ ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｐｒｉｏｎ
ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ａｉｒ ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ ｅｘｐｏｓｅｄ ｃｈｉｌｄｒ
ｅｎ ａｎｄ ｙｏｕｎｇ ａｄｕｌｔｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ
’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，２８，９３－１０７．
５２．Ｃａｌｏｎｇｅ，Ｍ．，ｄｅ Ｓａｌａｍａｎｃａ，Ａ．Ｅ．，Ｓｉｅｍａｓｋｏ
，Ｋ．Ｆ．，Ｄｉｅｂｏｌｄ，Ｙ．，Ｇａｏ，Ｊ．，Ｊｕａｒｅｚ－Ｃａｍｐｏ，Ｍ．＆
Ｓｔｅｒｎ，Ｍ．Ｅ．（２００５）Ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ
ｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｍａｒｋｅｒｓ ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｒｅｃ
ｅｐｔｏｒｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖａｌ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ
Ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ Ｏｃｕｌａｒ Ｓｕｒｆａｃｅ，３，Ｓ－１４５－Ｓ－１４８．
５３．Ｃａｍｉｎｓｃｈｉ，Ｉ．，Ｖａｎｄｅｎａｂｅｅｌｅ，Ｓ．，Ｓｏｆｉ，Ｍ．，
Ｍｃｋｎｉｇｈｔ，Ａ．Ｊ．，Ｗａｒｄ，Ｎ．，Ｂｒｏｄｎｉｃｋｉ，Ｔ．Ｃ．，Ｔｏｙ
，Ｔ．，Ｌａｈｏｕｄ，Ｍ．，Ｍａｒａｓｋｏｖｓｋｙ，Ｅ．＆Ｓｈｏｒｔｍａｎ，Ｋ．
（２００６）Ｇｅｎｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ａｎａｌ
ｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ ＥＧＦ－ＴＭ７ ｍｏｌｅ
ｃｕｌｅ，ＦＩＲＥ：Ｆｕｌｌ Ｌｅｎｇｔｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐａｐｅｒ．ＤＮＡ
Ｓｅｑｕｅｎｃｅ，１７，８－１４．
５４．Ｃａｎｄｉｄｏ，Ｒ．，ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ
ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｂｙ ａｎｇｉｏｔｅｎｓ
ｉｎ－ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ｄｉａｂｅ
ｔｉｃ ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｅ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ．Ｃｉｒｃ
ｕｌａｔｉｏｎ，１０６：２４６－２５３．
５５．Ｃａｎｄｉｄｏ，Ｒ．，ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｉｒｂｅｓａｒｔａｎ ｂｕｔ
ｎｏｔ ａｍｌｏｄｉｐｉｎｅ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｄｉａｂｅｔｅｓ－ａｓｓｏ
ｃｉａｔｅｄ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１０９：１
５３６－１５４２．
５６．Ｃａｎｉ，Ｐ．Ｄ．，Ｐｏｓｓｅｍｉｅｒｓ，Ｓ．，Ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｅｌｅ，
Ｔ．，Ｇｕｉｏｔ，Ｙ．，Ｅｖｅｒａｒｄ，Ａ．，Ｒｏｔｔｉｅｒ，Ｏ．，Ｇｅｕｒｔｓ
，Ｌ．，Ｎａｓｌａｉｎ，Ｄ．，Ｎｅｙｒｉｎｃｋ，Ａ．＆Ｌａｍｂｅｒｔ，Ｄ．Ｍ．（
２００９）Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｇｕｔ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｃｏｎｔｒｏｌ ｉ
ｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｏｂｅｓｅ ｍｉｃｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ａ ｍｅｃｈ
ａｎｉｓｍ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ＧＬＰ－２－ｄｒｉｖｅｎ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ
ｏｆ ｇｕｔ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ．Ｇｕｔ，５８，１０９１－１１０３．
５７．Ｃａｎｔａｇｒｅｌ，Ｖ．，Ｌｏｓｓｉ，Ａ．，Ｂｏｕｌａｎｇｅｒ，Ｓ．，Ｄｅ
ｐｅｔｒｉｓ，Ｄ．，Ｍａｔｔｅｉ，Ｍ．，Ｇｅｃｚ，Ｊ．，Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｃ．，
Ｖａｎ Ｍａｌｄｅｒｇｅｍ，Ｌ．＆Ｖｉｌｌａｒｄ，Ｌ．（２００４）Ｄｉｓｒｕｐｔ
ｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ Ｘ ｌｉｎｋｅｄ ｇｅｎｅ ｈｉｇｈｌｙ ｅｘｐｒｅｓ
ｓｅｄ ｉｎ ｂｒａｉｎ ｉｎ ａ ｆａｍｉｌｙ ｗｉｔｈ ｔｗｏ ｍｅｎｔａｌ
ｌｙ ｒｅｔａｒｄｅｄ ｍａｌｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃａｌ ｇｅｎ
ｅｔｉｃｓ，４１，７３６－７４２．
５８．Ｃａｎｔａｒｅｌｌａ，Ｇ．，Ｓｃｏｌｌｏ，Ｍ．，Ｌｅｍｐｅｒｅｕｒ，Ｌ．，
Ｓａｃｃａｎｉ－Ｊｏｔｔｉ，Ｇ．，Ｂａｓｉｌｅ，Ｆ．＆Ｂｅｒｎａｒｄｉｎｉ，Ｒ．
（２０１１）Ｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｒｅｌｅａｓｅ ｏ
ｆ ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｂｙ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ－ａｃ
ｔｉｖａｔｅｄ ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｈａｒｍａｃｏｌ
ｏｇｙ，８２，３８０－３８８．
５９．Ｃａｐｒａ，Ｖ．，Ｒａｖａｓｉ，Ｓ．，Ａｃｃｏｍａｚｚｏ，Ｍ．Ｒ．，Ｃｉｔ
ｒｏ，Ｓ．，Ｇｒｉｍｏｌｄｉ，Ｍ．，Ａｂｂｒａｃｃｈｉｏ，Ｍ．Ｐ．＆Ｒｏｖａｔｉ
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ｏｒ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｅｔｅ
ｒｏｌｏｇｏｕｓ ｄｅｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ：ａ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｆｅｅｄ
ｂａｃｋ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１１８，５６２５－５６３６．
６０．Ｃａｒｏｎｔｉ，Ｂ．，Ｃａｌｄｅｒａｒｏ，Ｃ．，Ｐａｓｓａｒｅｌｌｉ，Ｆ．
，Ｐａｌｌａｄｉｎｉ，Ｇ．＆Ｐｏｎｔｉｅｒｉ，Ｆ．Ｅ．（１９９８）Ｄｏｐａｍｉｎ
ｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｍＲＮＡｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．
Ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅｓ，６２，１９１９－１９２５．
６１．Ｃａｒｒｉｌｌｏ－Ｖｉｃｏ，Ａ．，ＧＡＲＣＩＡ，Ｓ．，Ｃａｌｖｏ，Ｊ．Ｒ．
＆Ｇｕｅｒｒｅｒｏ，Ｊ．Ｍ．（２００３）Ｍｅｌａｔｏｎｉｎ ｃｏｕｎｔｅｒａｃｔ
ｓ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＰＧＥ２ ｏｎ ＩＬ－２
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｖｉａ ｉｔｓ
ｍｔ１ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｔｈｅ ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ，
１７，７５５－７５７．
６２．Ｃａｒｕｓｏ，Ｃ．，Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．，Ｓｃｈｉｏｔｈ，Ｈ．Ｂ．，Ｒｅｙ，
Ｒ．，Ｓｅｉｌｉｃｏｖｉｃｈ，Ａ．＆Ｌａｓａｇａ，Ｍ．（２００７）Ａｃｔｉｖａｔ
ｉｏｎ ｏｆ ｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ ４ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｒｅｄｕｃｅｓ
ｔｈｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ａ
ｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａ
ｎｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍｍａ ｉｎ ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ．Ｅｎｄｏｃｒ
ｉｎｏｌｏｇｙ，１４８，４９１８－４９２６．
６３．Ｃｈａｒｏ，Ｉ．Ｆ．＆Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，Ｒ．Ｍ．（２００６）Ｔｈｅ ｍａ
ｎｙ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ，３５４，
６１０－６２１．
６４．Ｃｈｅｎ，Ａ．，Ｄｏｎｇ，Ｌ．，Ｌｅｆｆｌｅｒ，Ｎ．Ｒ．，Ａｓｃｈ，Ａ．Ｓ
．，Ｗｉｔｔｅ，Ｏ．Ｎ．＆Ｙａｎｇ，Ｌ．Ｖ．（２０１１）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏ
ｆ ＧＰＲ４ ｂｙ ａｃｉｄｏｓｉｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ
ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｃＡＭＰ／Ｅｐａｃ ｐａｔ
ｈｗａｙ．ＰｌｏＳ ｏｎｅ，６，ｅ２７５８６．
６５．Ｃｈｅｎ，Ｈ．Ｆ．，Ｊｅｕｎｇ，Ｅ．Ｂ．，Ｓｔｅｐｈｅｎｓｏｎ，Ｍ．＆Ｌｅ
ｕｎｇ，Ｐ．Ｃ．（１９９９）Ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎ
ｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ－ｒｅｌｅ
ａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＧｎＲＨ），ＧｎＲＨ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ａｎｄ ｉｎ
ｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｇａｍｍａ－ｃｈａｉｎ ｍｅｓｓｅｎｇ
ｅｒ ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄｓ ｔｈａｔ ａｒｅ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ
ｂｙ ＧｎＲＨ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，８４，７４３－７５０
．
６６．Ｃｈｅｎ，Ｈ．Ｆ．，Ｊｅｕｎｇ，Ｅ．Ｂ．，Ｓｔｅｐｈｅｎｓｏｎ，Ｍ．＆Ｌｅ
ｕｎｇ，Ｐ．Ｃ．（１９９９）Ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎ
ｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ－ｒｅｌｅ
ａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＧｎＲＨ），ＧｎＲＨ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ａｎｄ ｉｎ
ｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｇａｍｍａ－ｃｈａｉｎ ｍｅｓｓｅｎｇ
ｅｒ ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄｓ ｔｈａｔ ａｒｅ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ
ｂｙ ＧｎＲＨ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，８４，７４３－７５０
．
６７．Ｃｈｅｎ，Ｔ．－Ｙ．，Ｈｗａｎｇ，Ｔ．－Ｌ．，Ｌｉｎ，Ｃ．－Ｙ．，Ｌｉｎ，
Ｔ．－Ｎ．，Ｌａｉ，Ｈ．－Ｙ．，Ｔｓａｉ，Ｗ．－Ｐ．＆Ｌｉｎ，Ｈ．－Ｈ．（２０１
１）ＥＭＲ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｌｉｇａｔｉｏｎ ｍｏｄｕｌａｔｅｓ ｃｙｔｏｋ
ｉｎｅ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ
ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｔｒｅａｔｅｄ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉ
ｌｓ．Ｃｈａｎｇ Ｇｕｎｇ Ｍｅｄ Ｊ，３４，４６８－４７７．
６８．Ｃｈｅｎ，Ｙ．，Ｃｏｒｒｉｄｅｎ，Ｒ．，Ｉｎｏｕｅ，Ｙ．，Ｙｉｐ，Ｌ．，Ｈ
ａｓｈｉｇｕｃｈｉ，Ｎ．，Ｚｉｎｋｅｒｎａｇｅｌ，Ａ．，Ｎｉｚｅｔ，Ｖ．，Ｉｎｓ
ｅｌ，Ｐ．Ａ．＆Ｊｕｎｇｅｒ，Ｗ．Ｇ．（２００６）ＡＴＰ ｒｅｌｅａｓｅ ｇｕｉ
ｄｅｓ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍｏｔａｘｉｓ ｖｉａ Ｐ２Ｙ２ ａｎｄ Ａ
３ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３１４，１７９２－１７９５．
６９．Ｃｈｅｎ，Ｚ．Ｊ．＆Ｍｉｎｎｅｍａｎ，Ｋ．Ｐ．（２００５）Ｒｅｃｅｎｔ ｐ
ｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ ａｌｐｈａ１－ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ．Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｉｎ，２６，１２８１－１２８７．
７０．Ｃｈｈａｊｌａｎｉ，Ｖ．（１９９６）Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｃＤＮ
Ａ ｆｏｒ ｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｂｔｙｐｅｓ ｉｎ
ｈｕｍａｎ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ｂｉｏｌｏｇｙ ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，３８，７３－８０．
７１．Ｃｈｈｕｏｎ，Ｃ．，Ｐｒａｎｋｅ，Ｉ．，Ｂｏｒｏｔ，Ｆ．，Ｔｏｎｄｅｌｉｅ
ｒ，Ｄ．，Ｌｉｐｅｃｋａ，Ｊ．，Ｆｒｉｔｓｃｈ，Ｊ．，Ｃｈａｎｓｏｎ，Ｍ．，Ｅｄ
ｅｌｍａｎ，Ａ．，Ｏｌｌｅｒｏ，Ｍ．＆Ｇｕｅｒｒｅｒａ，Ｉ．（２０１６）Ｃｈａｎ
ｇｅｓ ｉｎ ｌｉｐｉｄ ｒａｆｔ ｐｒｏｔｅｏｍｅ ｕｐｏｎ ＴＮＦ－α ｓｔ
ｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｃｅｌｌｓ．Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，１４５，２４６－２５３．
７２．Ｃｈｕａｈ，Ｙ．Ｋ．，Ｂａｓｉｒ，Ｒ．，Ｔａｌｉｂ，Ｈ．，Ｔｉｅ，Ｔ．Ｈ．
＆Ｎｏｒｄｉｎ，Ｎ．Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏ
ｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｉｎ ｉｎ
ｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａ
ｌ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，２０１３，２０１３：４０３４６０．
７３．Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ，Ｉ．Ｇ．ｏ．Ａ．Ｓ．（２０１３）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｒｉｓｋ ｖａｒｉａｎｔｓ ｆｏｒ ａｎｋｙｌ
ｏｓｉｎｇ ｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｈｉｇｈ－ｄｅｎｓｉｔｙ ｇ
ｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｌｏｃｉ．Ｎａｔｕｒｅ
ｇｅｎｅｔｉｃｓ，４５，７３０－７３８．
７４．Ｃｏｏｋ，Ｉ．Ｈ．，Ｅｖａｎｓ，Ｊ．，Ｍａｌｄｏｎａｄｏ－Ｐｅｒｅｚ，Ｄ．
，Ｃｒｉｔｃｈｌｅｙ，Ｈ．Ｏ．，Ｓａｌｅｓ，Ｋ．Ｊ．＆Ｊａｂｂｏｕｒ，Ｈ．Ｎ．（
２０１０）Ｐｒｏｋｉｎｅｔｉｃｉｎ（ＰＲＯＫ１）ｍｏｄｕｌａｔｅｓ ｉｎｔｅｒｌ
ｅｕｋｉｎ（ＩＬ）－１１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｖｉａ ｐｒｏｋｉｎｅｔｉｃｉｎ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ １（ＰＲＯＫＲ１）ａｎｄ ｔｈｅ ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ／Ｎ
ＦＡＴ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｈｕｍａｎ ｒ
ｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，１６，１５８－１６９．
７５．Ｃｏｓｔａ，Ａ．，Ｔｏｓｃｈｉ，Ａ．，Ｍｕｒｆｕｎｉ，Ｉ．，ｅｔ ａｌ．Ｌ
ｏｃａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｖ１ａ－Ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ Ｒ
ｅｃｅｐｔｏｒ Ｅｎｈａｎｃｅｓ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ Ｔｕｍｏｒ Ｎ
ｅｃｒｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｍｕｓｃｌｅ Ａｔｒｏｐｈｙ．Ｂｉ
ｏＭｅｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２０１４，Ａｒｔｉｃｌｅ
ＩＤ ２３５４２６，ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１４／２３５４２６．
７６．Ｃｕｄｄｉｈｙ，Ｒ．Ｍ．，Ｄｕｔｔｏｎ，Ｃ．Ｍ．＆Ｂａｈｎ，Ｒ．Ｓ．（１９
９５）Ａ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄ
ｏｍａｉｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｙｒｏｔｒｏｐｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｓ ｈｉｇ
ｈｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｔｈｙｒｏｉｄ ｄ
ｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｆｅｍａｌｅｓ．Ｔｈｙｒｏｉｄ，５，８９－９５．
７７．Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ，Ｍ．Ａ．，Ｅ．Ｒｏｎｄｅａｕ，Ｘ．Ｃｈｅｎ，Ｓ．Ｒ．
Ｃｏｕｇｈｌｉｎ，Ｓ．Ｒ．Ｈｏｌｄｓｗｏｒｔｈ，ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｔｉｐｐｉｎｇ．
Ｐｒｏｔｅａｓｅ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｔ
ｈｒｏｍｂｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ，ｃｅｌｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｒｅｎａｌ ｉｎ
ｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｒｅｓｃｅｎｔｉｃ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉ
ｔｉｓ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ，２０００，１９１：４５５－６２．
７８．Ｃｚｅｐｉｅｌｅｗｓｋｉ，Ｒ．Ｓ．，Ｐｏｒｔｏ，Ｂ．Ｎ．，Ｒｉｚｚｏ，Ｌ．
Ｂ．，Ｒｏｅｓｌｅｒ，Ｒ．，Ａｂｕｊａｍｒａ，Ａ．Ｌ．，Ｐｉｎｔｏ，Ｌ．Ｇ．，Ｓ
ｃｈｗａｒｔｓｍａｎｎ，Ｇ．，ｄｅ Ｑｕｅｉｒｏｚ Ｃｕｎｈａ，Ｆ．＆Ｂｏｎｏｒ
ｉｎｏ，Ｃ．（２０１２）Ｇａｓｔｒｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ（ＧＲＰＲ）ｍｅｄｉａｔｅｓ ｃｈｅｍｏｔａｘｉｓ ｉｎ ｎｅｕｔｒ
ｏｐｈｉｌｓ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅ
ｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１０９，５４７－５５２．
７９．Ｃｚｅｒｗｉｎｓｋｉ，Ｍ．，Ｋｅｒｎ，Ｊ．，Ｇｒｏｄｅｃｋａ，Ｍ．，Ｐａｐ
ｒｏｃｋａ，Ｍ．，Ｋｒｏｐ－Ｗａｔｏｒｅｋ，Ａ．＆Ｗａｓｎｉｏｗｓｋａ，Ｋ．（２
００７）Ｍｕｔａｔｉｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎ－ｇｌｙｃｏｓｙ
ｌａｔｉｏｎ ｓｉｔｅｓ ｏｆ Ｄｕｆｆｙ ａｎｔｉｇｅｎ／ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆ
ｏｒ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ
，３５６，８１６－８２１．
８０．Ｄ’Ａｎｄｒｅａ，Ｇ．，Ｔｅｒｒａｚｚｉｎｏ，Ｓ．，Ｆｏｒｔｉｎ，Ｄ．，Ｆ
ａｒｒｕｇｇｉｏ，Ａ．，Ｒｉｎａｌｄｉ，Ｌ．＆Ｌｅｏｎ，Ａ．（２００３）ＨＰＬＣ
ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｃｅ ａｍｉｎ
ｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ ａｎｄ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ａｎｄ ｅｘｐ
ｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍＲＮＡ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｏｆ ｔｒａｃｅ ａｍｉ
ｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ．Ｎ
ｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ｌｅｔｔｅｒｓ，３４６，８９－９２．
８１．Ｄ’Ａｍａｔｏ，Ｍ．，Ｂｒｕｃｅ，Ｓ．，Ｂｒｅｓｓｏ，Ｆ．，Ｚｕｃｃｈｅｌ
ｌｉ，Ｍ．，Ｅｚｅｒ，Ｓ．，Ｐｕｌｋｋｉｎｅｎ，Ｖ．，Ｌｉｎｄｇｒｅｎ，Ｃ．，Ａ
ｓｔｅｇｉａｎｏ，Ｍ．，Ｒｉｚｚｅｔｔｏ，Ｍ．＆Ｇｉｏｎｃｈｅｔｔｉ，Ｐ．（２０
０７）Ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ ｓ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏ
ｒｐｈｉｓｍ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ
ｔｏ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔ
ｅｒｏｌｏｇｙ，１３３，８０８－８１７．
８２．Ｄ’Ａｎｄｒｅａ，Ｇ．，Ｄ’Ａｒｒｉｇｏ，Ａ．，Ｆａｃｃｈｉｎｅｔｔｉ，Ｆ
．，Ｄｅｌ Ｇｉｕｄｉｃｅ，Ｅ．，Ｃｏｌａｖｉｔｏ，Ｄ．，Ｂｅｒｎａｒｄｉｎｉ，
Ｄ．＆Ｌｅｏｎ，Ａ．（２０１２）Ｏｃｔｏｐａｍｉｎｅ，ｕｎｌｉｋｅ ｏｔｈｅｒ
ｔｒａｃｅ ａｍｉｎｅｓ，ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｏｆ ａｓｔｒｏ
ｇｌｉａ－ｅｎｒｉｃｈｅｄ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｔｏ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａ
ｒｉｄｅ ｖｉａ ａ β－ａｄｒｅｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｍｅｃ
ｈａｎｉｓｍ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ｌｅｔｔｅｒｓ，５１７，３６－４０．
８３．ｄａ Ｓｉｌｖｅｉｒａ，Ｋ．Ｄ．，Ｃｏｅｌｈｏ，Ｆ．Ｍ．，Ｖｉｅｉｒａ，Ａ
．Ｔ．，Ｓａｃｈｓ，Ｄ．，Ｂａｒｒｏｓｏ，Ｌ．Ｃ．，Ｃｏｓｔａ，Ｖ．Ｖ．，Ｂｒｅ
ｔａｓ，Ｔ．Ｌ．Ｂ．，Ｂａｄｅｒ，Ｍ．，ｄｅ Ｓｏｕｓａ，Ｌ．Ｐ．＆ｄａ Ｓｉｌ
ｖａ，Ｔ．Ａ．（２０１０）Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏ
ｆ ｔｈｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ－（１－７
）ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＭＡＳ，ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ
ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１８５，
５５６９－５５７６．
８４．Ｄａｆｆｕ，Ｇ．，ｅｔ ａｌ．Ｒａｄｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｆｏｒ ＲＡＧＥ
ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ
ｉｎ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ ｂｅｙｏｎｄ．Ｉ
ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｃｉｅｎｃ
ｅｓ，２０１３，１４：１９８９１－１９９１０．
８５．Ｄａｕｇｈｅｒｔｙ，Ａ．，Ｍａｎｎｉｎｇ，Ｍ．Ｗ．＆Ｃａｓｓｉｓ，Ｌ．Ａ．
（２０００）Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅ
ｒｏｔｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ ａｎｄ ａｎｅｕｒｙｓｍｓ ｉｎ ａｐｏｌｉｐｏｐｒ
ｏｔｅｉｎ Ｅ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ，１０５
：１６０５－１６１２．
８６．Ｄａｖｉｄｓｏｎ，Ｃ．，Ａｓａｄｕｚｚａｍａｎ，Ｍ．，Ａｒｉｚｍｅｎｄｉ，
Ｎ．，Ｐｏｌｌｅｙ，Ｄ．，Ｗｕ，Ｙ．，Ｇｏｒｄｏｎ，Ｊ．，Ｈｏｌｌｅｎｂｅｒｇ，
Ｍ．，Ｃａｍｅｒｏｎ，Ｌ．＆Ｖｌｉａｇｏｆｔｉｓ，Ｈ．（２０１３）Ｐｒｏｔｅｉｎ
ａｓｅ‐ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ‐２ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｐａｒｔ
ｉｃｉｐａｔｅｓ ｉｎ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｔｏ ｈｏ
ｕｓｅ ｄｕｓｔ ｍｉｔｅ ａｌｌｅｒｇｅｎｓ ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｍｏｄｅ
ｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ＆Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｌｌｅｒｇｙ，４３，１２７４－
１２８５．
８７．Ｄａｗｓｏｎ，Ｊ．，Ｍｉｌｔｚ，Ｗ．，Ｍｉｒ，Ａ．Ｋ．，＆Ｗｉｅｓｓｎｅｒ
，Ｃ．（２００３）Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔ
ａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ－１ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｉｎ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｅｘｐｅ
ｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｔａｒｇｅｔｓ，７：３５－４８．
８８．Ｄｅ Ｍａｒｔｉｎｏ，Ｍ．Ｃ．，Ｈｏｆｌａｎｄ，Ｌ．Ｊ．＆Ｌａｍｂｅｒｔｓ
，Ｓ．Ｗ．（２０１０）Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ ａｎｄ ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ
ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｆｒｏｍ ｂａｓｉｃ ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃ
ａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｐｒｏｇ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ，１８２，２５５－２
８０．
８９．Ｄｅｎｇ，Ｊ．，Ｆｕｊｉｍｏｔｏ，Ｊ．，Ｙｅ，Ｘ．－Ｆ．，Ｍｅｎ，Ｔ．－Ｙ
．，Ｖａｎ Ｐｅｌｔ，Ｃ．Ｓ．，Ｃｈｅｎ，Ｙ．－Ｌ．，Ｌｉｎ，Ｘ．－Ｆ．，Ｋａｄ
ａｒａ，Ｈ．，Ｔａｏ，Ｑ．＆Ｌｏｔａｎ，Ｄ．（２０１０）Ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｏｆ
ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｇｅｎｅ Ｇｐｒｃ５ａ ｉｎ ｍｉｃｅ
ｌｅａｄｓ ｔｏ ＮＦ－κＢ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ａｉｒｗａｙ ｅｐｉ
ｔｈｅｌｉｕｍ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｌｕｎｇ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａ
ｎｄ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ．Ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｒｅｓｅａ
ｒｃｈ，３，４２４－４３７．
９０．Ｄｉｊｋｓｔｅｒｈｕｉｓ，Ｊ．，Ｐｅｔｅｒｓｅｎ，Ｊ．＆Ｓｃｈｕｌｔｅ，Ｇ
．（２０１４）ＷＮＴ／Ｆｒｉｚｚｌｅｄ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ：ｒｅｃｅｐｔｏｒ－
ｌｉｇａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｗｉｔｈ ｆｏｃｕｓ ｏｎ ＦＺＤ‐Ｇ ｐ
ｒｏｔｅｉｎ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ
ｒｅｌｅｖａｎｃｅ：ＩＵＰＨＡＲ Ｒｅｖｉｅｗ ３．Ｂｒｉｔｉｓｈ ｊｏｕｒｎａ
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Ｓ．Ｒ．，Ｊａｖｉｔｃｈ，Ｊ．Ａ．，Ｌｏｈｓｅ，Ｍ．Ｊ．，Ｍａｃｋｉｅ，Ｋ．，Ｍ
ｉｌｌｉｇａｎ，Ｇ．，Ｐｆｌｅｇｅｒ，Ｋ．Ｄ．Ｇ．，Ｐｉｎ，Ｊ．Ｐ．，Ｖｏｌｋｏ
ｗ，Ｎ．，Ｗａｌｄｈｏｅｒ，Ｍ．，Ｗｏｏｄｓ，Ａ．Ｓ．ａｎｄ Ｆｒａｎｃｏ Ｒ．
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１１１．Ｆｅｒｒｉｅｒ Ｌ，Ｓｅｒｒａｄｅｉｌ－Ｌｅ Ｇａｌ Ｃ，Ｓｃｈｕｌｔｅ
ＡＭ，Ｖａｓｉｎａ Ｖ，Ｇａｕｌｔｉｅｒ Ｅ，Ｓｃｈｒｏｅｄｅｌ Ｓ，Ｕｒｓｉ
ｎｏ ＭＧ，Ｃｈａｕｍａｚ Ｇ，Ｐａｓｃａｌ Ｍ，Ｄｅ Ｐｏｎｔｉ Ｆ，Ｂｕｅｎ
ｏ Ｌ．Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｏｌｅ ｏｆ ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ
ｔｈｒｏｕｇｈ Ｖ１ｂ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｈａｐｔｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ
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ｉｏｎ ｉｎ ＩＢＤ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ Ｌｉｖ
ｅｒ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２０１０，２９９：Ｇ１２９８－３０７．
１１２．Ｆｉｎｃｈ，Ａ．Ｍ．，Ｓａｒｒａｍｅｇｎａ，Ｖ．＆Ｇｒａｈａｍ，Ｒ．Ｍ．
（２００６）Ｌｉｇａｎｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ，Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，ａｎｄ Ａｇｏｎ
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ｅｎｅｒｇｉｃ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：Ｉｎ ｔｈｅ ２１ｓｔ Ｃｅｎｔｕｒｙ．Ｈｕ
ｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，ｐｐ．２５－８５．
１１３．Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ａ．，Ｓｃｈｍｉｄ，Ｂ．，Ｅｌｌｉｎｇｈａｕｓ，Ｄ．，Ｎ
ｏｔｈｎａｇｅｌ，Ｍ．，Ｇａｅｄｅ，Ｋ．Ｉ．，Ｓｃｈｕｅｒｍａｎｎ，Ｍ．，Ｌｉｐ
ｉｎｓｋｉ，Ｓ．，Ｒｏｓｅｎｓｔｉｅｌ，Ｐ．，Ｚｉｓｓｅｌ，Ｇ．＆Ｈｏｅｈｎｅ，
Ｋ．（２０１２）Ａ ｎｏｖｅｌ ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ ｒｉｓｋ ｌｏｃｕｓ ｆ
ｏｒ Ｅｕｒｏｐｅａｎｓ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ １１ｑ１３．１．Ａｍｅｒｉ
ｃａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ａｎｄ ｃｒｉｔｉｃａｌ
ｃａｒｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１８６，８７７－８８５．
１１４．Ｆｌｅｇｅｌ，Ｃ．，Ｍａｎｔｅｎｉｏｔｉｓ，Ｓ．，Ｏｓｔｈｏｌｄ，Ｓ．，
Ｈａｔｔ，Ｈ．＆Ｇｉｓｓｅｌｍａｎｎ，Ｇ．（２０１３）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｐｒ
ｏｆｉｌｅ ｏｆ Ｅｃｔｏｐｉｃ Ｏｌｆａｃｔｏｒｙ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ Ｄｅｔ
ｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ Ｄｅｅｐ Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ，８，ｅ５
５３６８．
１１５．Ｆｌｅｉｓｃｈｍａｎｎ，Ａ．，Ｌａｅｄｅｒａｃｈ，Ｕ．，Ｆｒｉｅｓｓ，Ｈ
．，Ｂｕｅｃｈｌｅｒ，Ｍ．Ｗ．＆Ｒｅｕｂｉ，Ｊ．Ｃ．（２０００）Ｂｏｍｂｅｓｉｎ
ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｔｉｓｓｕｅ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎ
ｔｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｌａｂｏｒａｔｏ
ｒｙ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，８０，１８０７－１８１７．
１１６．Ｆｏｒｎａｒｉ，Ｔ．Ａ．，Ｄｏｎａｔｅ，Ｐ．Ｂ．，Ｍａｃｅｄｏ，Ｃ．，Ｓ
ａｋａｍｏｔｏ－Ｈｏｊｏ，Ｅ．Ｔ．，Ｄｏｎａｄｉ，Ｅ．Ａ．＆Ｐａｓｓｏｓ，Ｇ．Ａ
．（２０１１）Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅ
ｌｌｉｔｕｓ ｉｎ ｎｏｎｏｂｅｓｅ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｍｉｃｅ ｆｏｌｌｏｗｓ
ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ ａｎｄ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ Ｔ ｌ
ｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｃｌｉｎｉ
ｃａｌ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１１．
１１７．Ｆｏｓｔｅｒ，Ｈ．Ｒ．，Ｆｕｅｒｓｔ，Ｅ．，Ｂｒａｎｃｈｅｔｔ，Ｗ．，Ｌ
ｅｅ，Ｔ．Ｈ．，Ｃｏｕｓｉｎｓ，Ｄ．Ｊ．＆Ｗｏｓｚｃｚｅｋ，Ｇ．（２０１６）Ｌｅ
ｕｋｏｔｒｉｅｎｅ Ｅ４ ｉｓ ａ ｆｕｌｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｇｏｎｉｓ
ｔ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｃｙｓｔｅｉｎｙｌ ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ ｔｙｐｅ １
ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｓｃｉｅ
ｎｔｉｆｉｃ ｒｅｐｏｒｔｓ，６．
１１８．Ｆｒａｓｃｈ，Ｓ．Ｃ．，Ｂｅｒｒｙ，Ｋ．Ｚ．，Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ－Ｂｏｙ
ａｎａｐａｌｌｉ，Ｒ．，Ｊｉｎ，Ｈ．－Ｓ．，Ｌｅｓｌｉｅ，Ｃ．，Ｈｅｎｓｏｎ，Ｐ
．Ｍ．，Ｍｕｒｐｈｙ，Ｒ．Ｃ．＆Ｂｒａｔｔｏｎ，Ｄ．Ｌ．（２００８）ＮＡＤＰＨ
ｏｘｉｄａｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｓｏｐｈｏｓ
ｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ａｃｔ
ｉｖａｔｅｄ ａｎｄ ｄｙｉｎｇ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ ｖｉａ Ｇ２Ａ．Ｊｏｕ
ｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８３，３３７３６－３
３７４９．
１１９．Ｆｒｅｄｈｏｌｍ，Ｂ．Ｂ．，ＡＰ，Ｉ．Ｊ．，Ｊａｃｏｂｓｏｎ，Ｋ．Ａ．，
Ｌｉｎｄｅｎ，Ｊ．＆Ｍｕｌｌｅｒ，Ｃ．Ｅ．（２０１１）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇ
ｙ．ＬＸＸＸＩ．Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ａｎｄ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ－－ａｎ ｕｐｄａｔｅ．Ｐｈａｒｍａ
ｃｏｌ Ｒｅｖ，６３，１－３４．
１２０．Ｆｒｅｉｒｅ‐Ｇａｒａｂａｌ，Ｍ．，Ｎｕｎｅｚ，Ｍ．，Ｂａｌｂｏａ，Ｊ．
，Ｌｏｐｅｚ‐Ｄｅｌｇａｄｏ，Ｐ．，Ｇａｌｌｅｇｏ，Ｒ．，Ｇａｒｃｉａ‐Ｃａｂａ
ｌｌｅｒｏ，Ｔ．，Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ‐Ｒｏｅｌ，Ｍ．，Ｂｒｅｎｌｌａ，Ｊ．＆Ｒｅ
ｙ‐Ｍｅｎｄｅｚ，Ｍ．（２００３）Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔ
ｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ５‐ＨＴ
１Ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｂｒｉｔｉｓｈ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏ
ｌｏｇｙ，１３９，４５７－４６３．
１２１．Ｆｕｊｉｔａ，Ｔ．，Ｍａｔｓｕｏｋａ，Ｔ．，Ｈｏｎｄａ，Ｔ．，Ｋａｂａｓ
ｈｉｍａ，Ｋ．，Ｈｉｒａｔａ，Ｔ．＆Ｎａｒｕｍｉｙａ，Ｓ．（２０１１）Ａ ＧＰＲ
４０ ａｇｏｎｉｓｔ ＧＷ９５０８ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＣＣＬ５，ＣＣＬ１７，
ａｎｄ ＣＸＣＬ１０ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ ａｎ
ｄ ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｉｍｍｕｎｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉ
ｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，
１３１，１６６０－１６６７．
１２２．Ｆｕｊｉｔａ，Ｔ．，Ｔｏｚａｋｉ‐Ｓａｉｔｏｈ，Ｈ．＆Ｉｎｏｕｅ，Ｋ．（
２００９）Ｐ２Ｙ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｎ
ｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｏｘｉ
ｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｖｉａ ＩＬ‐６ ｒｅｌｅａｓｅ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃ
ａｍｐａｌ ｃｕｌｔｕｒｅｓ．Ｇｌｉａ，５７，２４４－２５７．
１２３．Ｆｕｋａｍｉ Ｋ，Ｕｅｄａ Ｓ，Ｙａｍａｇｉｓｈｉ Ｓ，Ｋａｔｏ Ｓ，Ｉ
ｎａｇａｋｉ Ｙ，Ｔａｋｅｕｃｈｉ Ｍ，Ｍｏｔｏｍｉｙａ Ｙ，Ｂｕｃａｌａ Ｒ，
Ｉｉｄａ Ｓ，Ｔａｍａｋｉ Ｋ，Ｉｍａｉｚｕｍｉ Ｔ，Ｃｏｏｐｅｒ ＭＥ，Ｏｋｕ
ｄａ Ｓ．（２００４）ＡＧＥｓ ａｃｔｉｖａｔｅ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ＴＧＦ－β
－Ｓｍａｄ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｖｉａ ａｎ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｔ
ｙｐｅ Ｉ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ，６６
：２１３７－２１４７．
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ｓ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｌｅａｓｅ，ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉ
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ｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉ
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１４０．Ｇｒａｎａｄｏｓ－Ｓｏｔｏ，Ｖ．，Ａｒｇｕｅｅｌｌｅｓ，Ｃ．Ｆ．，Ｒｏｃ
ｈａ－Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｈ．Ｉ．，Ｇｏｄｉｎｅｚ－Ｃｈａｐａｒｒｏ，Ｂ．，Ｆｌｏ
ｒｅｓ－Ｍｕｒｒｉｅｔａ，Ｆ．Ｊ．＆Ｖｉｌｌａｌｏｎ，Ｃ．Ｍ．（２０１０）Ｔｈｅ
ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ５－ＨＴ１Ａ，５－ＨＴ１Ｂ，５－ＨＴ１Ｄ
，５－ＨＴ１Ｅ ａｎｄ ５－ＨＴ１Ｆ ｓｅｒｏｔｏｎｅｒｇｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔ
ｓ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１６５，５６１－５６８．
１４１．Ｇｒａｎｔｈａｍ，Ｒ．（１９７４）Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎ
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１４２．Ｇｒａｅｓｓｅｌ，Ｓ．，Ｏｐｏｌｋａ，Ａ．，Ａｎｄｅｒｓ，Ｓ．，Ｓｔｒａ
ｕｂ，Ｒ．Ｈ．，Ｇｒｉｆｋａ，Ｊ．，Ｌｕｇｅｒ，Ｔ．Ａ．＆Ｂｏｅｈｍ，Ｍ．（２０
０９）Ｔｈｅ ｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ａｒｔｉｃｕｌａｒ
ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓ：Ｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ｐｒｏ－
ｏｐｉｏｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ，ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ ｐｒｏｔｅａｓｅｓ，ａｎｄ
ａ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ α－ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ－ｓｔｉ
ｍｕｌａｔｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ ｏｎ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏ
ｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ
ｓ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ＆Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，６０，３０１７－３０２７．
１４３．Ｇｒｅｅｎｅ Ｔ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｇｒｏｕｐｓ ｉ
ｎ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９１，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ．
１４４．Ｇｒｅｇｏｒｙ，Ｍ．Ａ．，Ｐｈａｎｇ，Ｔ．Ｌ．，Ｎｅｖｉａｎｉ，Ｐ．，Ａ
ｌｖａｒｅｚ－Ｃａｌｄｅｒｏｎ，Ｆ．，Ｅｉｄｅ，Ｃ．Ａ．，Ｏ’Ｈａｒｅ，Ｔ．，Ｚ
ａｂｅｒｅｚｈｎｙｙ，Ｖ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｒ．Ｔ．，Ｄｒｕｋｅｒ，Ｂ．Ｊ．＆
Ｐｅｒｒｏｔｔｉ，Ｄ．（２０１０）Ｗｎｔ／Ｃａ ２＋／ＮＦＡＴ ｓｉｇｎａｌｌｉ
ｎｇ ｍａｉｎｔａｉｎｓ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ Ｐｈ＋ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅ
ｌｌｓ ｕｐｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｃｒ－Ａｂｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｃｅ
ｌｌ，１８，７４－８７．
１４５．Ｇｕｅｎａｒｄ，Ｆ．，Ｌａｍｏｎｔａｇｎｅ，Ｍ．，Ｂｏｓｓｅ，Ｙ．，Ｄｅ
ｓｈａｉｅｓ，Ｙ．，Ｃｉａｎｆｌｏｎｅ，Ｋ．，Ｋｒａｌ，Ｊ．Ｇ．，Ｍａｒｃｅａｕ
，Ｐ．＆Ｖｏｈｌ，Ｍ．－Ｃ．（２０１５）Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｇｅｓｔａｔ
ｉｏｎａｌ Ｏｂｅｓｉｔｙ ｏｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｇｅ
ｎｏｔｙｐｅｓ ａｎｄ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ Ｏｆ
ｆｓｐｒｉｎｇ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ Ｍａｔｅｒｎａｌ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉ
ｎａｌ Ｂｙｐａｓｓ Ｓｕｒｇｅｒｙ ｆｏｒ Ｏｂｅｓｉｔｙ．ＰｌｏＳ ｏｎｅ，
１０，ｅ０１１７０１１．
１４６．Ｇｕｇｌｉｕｃｃｉ，Ａ．＆Ｍｅｎｉｎｉ，Ｔ．Ｔｈｅ ａｘｉｓ ＡＧＥ－Ｒ
ＡＧＥ－ｓｏｌｕｂｌｅ ＲＡＧＥ ａｎｄ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｉｎ
ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ．Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｅｘｐｅ
ｒｉｍｅｎｔａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｙ，２０１４，８２４：１
９１－２０８．
１４７．Ｇｕｏ，Ｗ．Ａ．，Ｋｎｉｇｈｔ，Ｐ．Ｒ．＆Ｒａｇｈａｖｅｎｄｒａｎ，Ｋ．
Ｔｈｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ
ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｎｄ ａｃｕｔｅ ｌｕｎｇ ｉｎｊｕｒｙ／ａｃｕｔｅ ｒｅｓ
ｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ ｃａｒ
ｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１２，３８：１５８８－１５９８．
１４８．Ｈａｇａ，Ｋ．，Ｋｒｕｓｅ，Ａ．Ｃ．，Ａｓａｄａ，Ｈ．，Ｙｕｒｕｇｉ－Ｋ
ｏｂａｙａｓｈｉ，Ｔ．，Ｓｈｉｒｏｉｓｈｉ，Ｍ．，Ｚｈａｎｇ，Ｃ．，Ｗｅｉｓ，Ｗ
．Ｉ．，Ｏｋａｄａ，Ｔ．，Ｋｏｂｉｌｋａ，Ｂ．Ｋ．，Ｈａｇａ，Ｔ．＆Ｋｏｂａｙａ
ｓｈｉ，Ｔ．（２０１２）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ Ｍ２ ｍｕ
ｓｃａｒｉｎｉｃ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｂｏｕｎｄ ｔｏ
ａｎ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ．Ｎａｔｕｒｅ，４８２，５４７－５５１．
１４９．Ｈａｇｎｅｒ，Ｓ．，Ｓｔａｈｌ，Ｕ．，Ｋｎｏｂｌａｕｃｈ，Ｂ．，ＭｃＧｒ
ｅｇｏｒ，Ｇ．＆Ｌａｎｇ，Ｒ．（２００２）Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
－ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｓｔｒｉ
ｂｕｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｃｅｌｌ
ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ，３１０，４１－５０．
１５０．Ｈａｎ，Ｙ．Ｔ．，ｅｔ ａｌ．Ｆｉｎｅ ｔｕｎｉｎｇ ｏｆ ４，６－ｂｉ
ｓｐｈｅｎｙｌ－２－（３－ａｌｋｏｘｙａｎｉｌｉｎｏ）ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ ｆｏ
ｃｕｓｉｎｇ ｏｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｍｉｎｏａｌ
ｋｏｘｙ ｍｏｉｅｔｙ ｆｏｒ ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ ｕｓｅｆｕｌ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃ
ａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＲＡＧＥ）．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆ｍｅｄｉ
ｃｉｎａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１５，２３：５７９－５８７．
１５１．Ｈａｎ，Ｙ．Ｔ．，ｅｔ ａｌ．Ｌｉｇａｎｄ－ｂａｓｅｄ ｄｅｓｉｇｎ，ｓ
ｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ２－
ａｍｉｎｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅｓ，ａ ｎｏｖｅｌ ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｒｅｃｅｐ
ｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ（
ＲＡＧＥ）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ，２０１２，５５：９１２０－９１３５．
１５２．Ｈａｎ，Ｙ．Ｔ．，ｅｔ ａｌ．Ｐｙｒａｚｏｌｅ－５－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄ
ｅｓ，ｎｏｖｅｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａ
ｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＲＡＧＥ）．Ｅｕｒｏｐｅ
ａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１４，７
９：１２８－１４２．
１５３．Ｈａｎｄｌｅｙ，Ｄ．Ａ．，Ｃ．Ｍ．Ａｒｂｅｅｎｙ，Ｍ．Ｌ．Ｌｅｅ，Ｒ．Ｇ
．Ｖａｎ Ｖａｌｅｎ，ａｎｄ Ｒ．Ｎ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｌ
ａｔｅｌｅｔ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ｏｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ
ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｐｌａｓｍａ ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９８４，８：１３７－４２．
１５４．Ｈａｎｓｅｎ，Ｗ．，Ｗｅｓｔｅｎｄｏｒｆ，Ａ．，Ｔｏｅｐｆｅｒ，Ｔ．，Ｍ
ａｕｅｌ，Ｓ．，Ｇｅｆｆｅｒｓ，Ｒ．，Ｇｒｕｂｅｒ，Ａ．＆Ｂｕｅｒ，Ｊ．（２０１
０）Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｖｏ ｉｓ ｍｏｄｕｌａｔｅｄ ｂｙ Ｇ
ＰＲ８３ ｉｓｏｆｏｒｍ－４ ｂｕｔ ｎｏｔ ＧＰＲ８３ ｉｓｏｆｏｒｍ－１ ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｇｅｎｅｓ ａｎ
ｄ ｉｍｍｕｎｉｔｙ，１１，３５７－３６１．
１５５．Ｈａｎｓｏｎ，Ｍ．Ａ．，Ｒｏｔｈ，Ｃ．Ｂ．，Ｊｏ，Ｅ．，Ｇｒｉｆｆｉｔｈ
，Ｍ．Ｔ．，Ｓｃｏｔｔ，Ｆ．Ｌ．，Ｒｅｉｎｈａｒｔ，Ｇ．，Ｄｅｓａｌｅ，Ｈ．，Ｃ
ｌｅｍｏｎｓ，Ｂ．，Ｃａｈａｌａｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｓｃｈｕｅｒｅｒ，Ｓ．Ｃ．，Ｓａｎ
ｎａ，Ｍ．Ｇ．，Ｈａｎ，Ｇ．Ｗ．，Ｋｕｈｎ，Ｐ．，Ｒｏｓｅｎ，Ｈ．＆Ｓｔｅｖｅｎ
ｓ，Ｒ．Ｃ．（２０１２）Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ａ ｌｉｐｉｄ
Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３３５，
８５１－８５５．
１５６．Ｈａｒｔｍａｎｎ，Ｋ．，Ｈｅｎｚ，Ｂ．Ｍ．，Ｋｒｕｅｇｅｒ－Ｋｒａｓａｇ
ａｋｅｓ，Ｓ．，Ｋｏｅｈｌ，Ｊ．，Ｂｕｒｇｅｒ，Ｒ．，Ｇｕｈｌ，Ｓ．，Ｈａａｓｅ
，Ｉ．，Ｌｉｐｐｅｒｔ，Ｕ．＆Ｚｕｂｅｒｂｉｅｒ，Ｔ．（１９９７）Ｃ３ａ ａｎｄ
Ｃ５ａ ｓｔｉｍｕｌａｔｅ ｃｈｅｍｏｔａｘｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍａｓｔ
ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ，８９，２８６３－２８７０．
１５７．Ｈａｒｔｍｅｙｅｒ，Ｍ．，Ｓｃｈｏｌｚｅｎ，Ｔ．，Ｂｅｃｈｅｒ，Ｅ．，Ｂ
ｈａｒｄｗａｊ，Ｒ．，Ｓｃｈｗａｒｚ，Ｔ．＆Ｌｕｇｅｒ，Ｔ．（１９９７）Ｈｕｍａ
ｎ ｄｅｒｍａｌ ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ
ｅｘｐｒｅｓｓ ｔｈｅ ｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｙｐｅ
１ ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＩＬ－８ ｕ
ｐｏｎ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａｌｐｈａ－ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ－ｓｔ
ｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ，１５９，１９３０－１９３７．
１５８．Ｈａｒｖｅｙ，Ｒ．Ｃ．，Ｍｕｌｌｉｇｈａｎ，Ｃ．Ｇ．，Ｗａｎｇ，Ｘ．，Ｄ
ｏｂｂｉｎ，Ｋ．Ｋ．，Ｄａｖｉｄｓｏｎ，Ｇ．Ｓ．，Ｂｅｄｒｉｃｋ，Ｅ．Ｊ．，Ｃｈ
ｅｎ，Ｉ．－Ｍ．，Ａｔｌａｓ，Ｓ．Ｒ．，Ｋａｎｇ，Ｈ．＆Ａｒ，Ｋ．（２０１０）Ｉ
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ｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｗｉｔｈ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉ
ｏｎ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ：ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｇｅｎｏｍｅ－ｗｉｄ
ｅ ＤＮＡ ｃｏｐｙ ｎｕｍｂｅｒ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ，ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃ
ｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ａｎｄ ｏｕｔｃｏｍｅ．Ｂｌｏｏｄ，１１６，４８７
４－４８８４．
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ｒｗａｙ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ，１８６，６１２９－６１３５．
１６１．Ｈｅｓｓ Ｂ，Ｋｕｔｚｎｅｒ Ｃ，Ｖａｎ Ｄｅｒ Ｓｐｏｅｌ Ｄ，Ｌｉｎ
ｄａｈｌ Ｅ．ＧＲＯＭＡＣＳ ４：Ａｌｇｏｒｉｔｈｍｓ ｆｏｒ ｈｉｇｈｌｙ ｅ
ｆｆｉｃｉｅｎｔ，ｌｏａｄ－ｂａｌａｎｃｅｄ，ａｎｄ ｓｃａｌａｂｌｅ ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ．Ｊ Ｃｈｅｍ Ｔｈｅｏｒｙ Ｃｏｍｐｕｔ，２０
０８，４：４３５．
１６２．Ｈｅｕｂｌｅｉｎ，Ｓ．，Ｌｅｎｈａｒｄ，Ｍ．，Ｖｒｅｋｏｕｓｓｉｓ，Ｔ．
，Ｓｃｈｏｅｐｆｅｒ，Ｊ．，Ｋｕｈｎ，Ｃ．，Ｆｒｉｅｓｅ，Ｋ．，Ｍａｋｒｉｇｉａ
ｎｎａｋｉｓ，Ａ．，Ｍａｙｒ，Ｄ．＆Ｊｅｓｃｈｋｅ，Ｕ．（２０１２）Ｔｈｅ Ｇ－
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ｉｓ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ ｏｖａｒｉａｎ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ
ａｎｄ ｐｅｌｖｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎｖｏｌｖｉｎ
ｇ ｔｈｅ ｏｖａｒｙ．Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９，１１９
７－１２０４．
１６３．Ｈｉｌｌ，Ｊ．，Ｄｕｃｋｗｏｒｔｈ，Ｍ．，Ｍｕｒｄｏｃｋ，Ｐ．，Ｒｅｎｎ
ｉｅ，Ｇ．，Ｓａｂｉｄｏ－Ｄａｖｉｄ，Ｃ．，Ａｍｅｓ，Ｒ．Ｓ．，Ｓｚｅｋｅｒｅｓ
，Ｐ．，Ｗｉｌｓｏｎ，Ｓ．，Ｂｅｒｇｓｍａ，Ｄ．Ｊ．＆Ｇｌｏｇｅｒ，Ｉ．Ｓ．（２
００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃｈａ
ｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＣＨ２，ａ ｎｏｖｅｌ ｈｕｍａｎ ＭＣＨ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
，２７６，２０１２５－２０１２９．
１６４．Ｈｏｈｅｎｈａｕｓ，Ｄ．Ｍ．，Ｓｃｈａａｌｅ，Ｋ．，Ｌｅ Ｃａｏ，Ｋ．－
Ａ．，Ｓｅｏｗ，Ｖ．，Ｉｙｅｒ，Ａ．，Ｆａｉｒｌｉｅ，Ｄ．Ｐ．＆Ｓｗｅｅｔ，Ｍ．
Ｊ．（２０１３）Ａｎ ｍＲＮＡ ａｔｌａｓ ｏｆ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌ
ｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｐｒｉｍａｒｙ ｈｕ
ｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ／ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｃｔｉｖａｔｉ
ｏｎ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ ｔａｒｇｅｔａｂｌｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｒｅｇｕｌ
ａｔｏｒｓ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ，２１８，
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ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ：ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｙａｎｇｐｙｅｏｎｇ ｈ
ｅａｌｔｈ ｃｏｈｏｒｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｅ ｒｉｏｄ
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１６７．Ｈｏｑｕｅ，Ｒ．，Ｆａｒｏｏｑ，Ａ．，Ｇｈａｎｉ，Ａ．，Ｇｏｒｅｌｉｃｋ
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ｅｐｔｏｒ－ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａ
ｔｉｏｎ ｖｉａ ＧＰＲ８１－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｉ
ｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，１４６，１７６３
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ｉｏｎ，ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ．Ｉｎｆｌａｍｍ Ｒｅｓ
，５８，４３１－４３５．１６７．Ｈｏｒｔｏｎ，Ｊ．，Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｓ．＆Ｂｒ
ｙａｎｔ－Ｇｒｅｅｎｗｏｏｄ，Ｇ．（２０１２）Ｒｅｌａｘｉｎ ａｕｇｍｅｎｔｓ
ｔｈｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ＩＬ６ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｈｏ
ｒｉｏｄｅｃｉｄｕａ．Ｐｌａｃｅｎｔａ，３３，３９９－４０７．
１７０．Ｈｓｕ，Ｓ．Ｙ．，Ｎａｋａｂａｙａｓｈｉ，Ｋ．，Ｎｉｓｈｉ，Ｓ．，Ｋｕｍ
ａｇａｉ，Ｊ．，Ｋｕｄｏ，Ｍ．，Ｓｈｅｒｗｏｏｄ，Ｏ．Ｄ．＆Ｈｓｕｅｈ，Ａ．Ｊ．
（２００２）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｒｐｈａｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｂｙ
ｔｈｅ ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｌａｘｉｎ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９５，６７１－６７４．
１７１．Ｉｃｈｉｍｏｎｊｉ，Ｉ．，Ｔｏｍｕｒａ，Ｈ．，Ｍｏｇｉ，Ｃ．，Ｓａｔｏ，
Ｋ．，Ａｏｋｉ，Ｈ．，Ｈｉｓａｄａ，Ｔ．，Ｄｏｂａｓｈｉ，Ｋ．，Ｉｓｈｉｚｕｋａ
，Ｔ．，Ｍｏｒｉ，Ｍ．＆Ｏｋａｊｉｍａ，Ｆ．（２０１０）Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａ
ｒ ａｃｉｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ＩＬ－６ ｐｒｏｄｕｃｔｉ
ｏｎ ａｎｄ Ｃａ２＋ ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｐｒｏｔｏｎ－
ｓｅｎｓｉｎｇ ＯＧＲ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ａｉｒｗａｙ ｓ
ｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐ
ｈｙｓｉｏｌｏｇｙ－Ｌｕｎｇ Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｈ
ｙｓｉｏｌｏｇｙ，２９９，Ｌ５６７－Ｌ５７７．
１７２．Ｉｇｎａｔｏｖ，Ａ．，Ｒｏｂｅｒｔ，Ｊ．，Ｇｒｅｇｏｒｙ‐Ｅｖａｎｓ，Ｃ
．＆Ｓｃｈａｌｌｅｒ，Ｈ．（２００６）ＲＡＮＴＥＳ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ Ｃａ２
＋ ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｏｓｉｔｏｌ ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔ
ｅ（ＩＰ３）ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｅｌｌｓ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔ
ｈ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ‐ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ７５．Ｂｒｉｔｉｓｈ
ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１４９，４９０－４９７．
１７３．Ｉｍｐｒｏｔａ，Ｇ．，Ｃａｒｐｉｎｏ，Ｆ．，Ｐｅｔｒｏｚｚａ，Ｖ．，Ｇｕ
ｇｌｉｅｔｔａ，Ａ．，Ｔａｂａｃｃｏ，Ａ．＆Ｂｒｏｃｃａｒｄｏ，Ｍ．（２００３）
Ｃｅｎｔｒａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ＮＫ １ ａｎｄ ＮＫ
３ ｔａｃｈｙｋｉｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｇｏｎｉｓｔｓ ｏｎ ｔｗｏ ｍ
ｏｄｅｌｓ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｌｙ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｏｌｉｔｉｓ
ｉｎ ｒａｔｓ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，２４，９０３－９１１．
１７４．Ｉｎｂｅ，Ｈ．，Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｓ．，Ｍｉｙａｗａｋｉ，Ｍ．，Ｔａｎａ
ｂｅ，Ｅ．＆Ｅｎｃｉｎａｓ，Ｊ．Ａ．（２００４）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａ
ｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｃｅｌｌ－ｓｕｒｆａｃｅ ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ，Ｐ２Ｙ１５，ｆｏｒ ＡＭＰ ａｎｄ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ．Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７９，１９７９０－１９７
９９．
１７５．Ｉｒｕｋａｙａｍａ－Ｔｏｍｏｂｅ，Ｙ．，Ｔａｎａｋａ，Ｈ．，Ｙｏｋｏｍｉ
ｚｏ，Ｔ．，Ｈａｓｈｉｄａｔｅ－Ｙｏｓｈｉｄａ，Ｔ．，Ｙａｎａｇｉｓａｗａ，Ｍ．
＆Ｓａｋｕｒａｉ，Ｔ．（２００９）Ａｒｏｍａｔｉｃ Ｄ－ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ
ａｃｔ ａｓ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ
ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ａ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧＰＲ１０９Ｂ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉ
ｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１０６，３９３０－３９３４．
１７６．Ｉｓｅｒｉ，Ｓ．Ｏｅ．，Ｓｅｎｅｒ，Ｇ．，Ｓａｇｌａｍ，Ｂ．，Ｇｅｄｉｋ
，Ｎ．，Ｅｒｃａｎ，Ｆ．＆Ｙｅｇｅｎ，Ｂ．Ｃ．（２００５）Ｏｘｙｔｏｃｉｎ ａｍ
ｅｌｉｏｒａｔｅｓ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｃｏｌｏｎｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ
ｂｙ ａ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｐｅｐ
ｔｉｄｅｓ，２６，４８３－４９１．
１７７．Ｉｓｈｉｈａｒａ，Ｈ．，Ｃｏｎｎｏｌｌｙ，Ａ．Ｊ．，Ｚｅｎｇ，Ｄ．，Ｋａ
ｈｎ，Ｍ．Ｌ．，Ｚｈｅｎｇ，Ｙ．Ｗ．，Ｔｉｍｍｏｎｓ，Ｃ．，Ｔｒａｍ，Ｔ．＆Ｃｏ
ｕｇｈｌｉｎ，Ｓ．Ｒ．（１９９７）Ｐｒｏｔｅａｓｅ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅ
ｐｔｏｒ ３ ｉｓ ａ ｓｅｃｏｎｄ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ
ｈｕｍａｎｓ．
１７８．Ｉｔｏ，Ｙ．，Ｂａｎｎｏ，Ｒ．，Ｓｈｉｂａｔａ，Ｍ．，Ａｄａｃｈｉ，Ｋ．
，Ｈａｇｉｍｏｔｏ，Ｓ．，Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｄ．，Ｏｚａｗａ，Ｙ．，Ｇｏｔｏ，Ｍ
．，Ｓｕｇａ，Ｈ．＆Ｓｕｇｉｍｕｒａ，Ｙ．（２０１３）ＧＡＢＡ ｔｙｐｅ Ｂ ｒ
ｅｃｅｐｔｏｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｉｎ ｐｒｏｏｐｉｏｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉ
ｎ ｎｅｕｒｏｎｓ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｏｂｅｓｉｔｙ，ｉｎｓｕｌ
ｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ａｎｄ ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｉｏｎ ｉｎ ｍａｌｅ ｍｉｃｅ ｏｎ ａ ｈｉｇｈ－ｆａｔ ｄｉｅｔ．Ｔｈｅ
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，３３，１７１６６－１７１７３．
１７９．Ｉｗａｓａ，Ｔ．，Ｍａｔｓｕｚａｋｉ，Ｔ．，Ｔｕｎｇａｌａｇｓｕｖｄ，Ａ
．，Ｍｕｎｋｈｚａｙａ，Ｍ．，Ｋａｗａｍｉ，Ｔ．，Ｎｉｋｉ，Ｈ．，Ｋａｔｏ，Ｔ．
，Ｋｕｗａｈａｒａ，Ａ．，Ｕｅｍｕｒａ，Ｈ．，Ｙａｓｕｉ，Ｔ．＆Ｉｒａｈａｒａ，
Ｍ．（２０１４）Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ Ｋｉｓｓ１ ａｎｄ ＲＦＲＰ ｇｅｎｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ａｒｅ ｃｈａｎｇｅｄ ｂｙ ａ ｈｉｇｈ ｄｏｓｅ
ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｉｎ ｆｅｍａｌｅ ｒａｔｓ．Ｈｏｒ
ｍｏｎｅｓ ａｎｄ Ｂｅｈａｖｉｏｒ，６６，３０９－３１６．
１８０．Ｉｚｅｂｏｕｄ，Ｃ．Ａ．，Ｖｅｒｍｅｕｌｅｎ，Ｒ．Ｍ．，Ｚｗａｒｔ，Ａ．
，Ｖｏｓｓ，Ｈ．－Ｐ．，ｖａｎ Ｍｉｅｒｔ，Ａ．Ｓ．Ｊ．Ｐ．Ａ．Ｍ．＆Ｗｉｔｋａ
ｍｐ，Ｒ．Ｆ．（２０００）Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ａｔ ｔｈｅ β２
－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ ｏｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｓ ａ ｍａｊｏｒ
ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆ
ｅｃｔｓ ｏｆ β２－ａｇｏｎｉｓｔｓ．Ｎａｕｎｙｎ－Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇ’
ｓ Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３６２，１８４－１８９．
１８１．Ｊａｃｏｂｙ，Ｄ．Ｓ．，ａｎｄ Ｒａｄｅｒ，Ｄ．Ｊ．（２００３）Ｒｅｎｉ
ｎ－ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ａｔｈｅｒｏｔｈｒｏｍｂｏｔｉ
ｃ ｄｉｓｅａｓｅ：ｆｒｏｍ ｇｅｎｅｓ ｔｏ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ａｒｃｈ Ｉ
ｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ，１６３：１１５５－６４．
１８２．Ｊａｅｇｅｒ，Ｗ．Ｃ．，Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ｓ．Ｐ．，Ｈｉｌｌ，Ｓ．Ｊ．
ａｎｄ Ｐｆｌｅｇｅｒ，Ｋ．Ｄ．Ｇ．，Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ｏｆ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｂｉａｓ ｉｎ ＧＰＣＲ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．
Ｆｒｏｎｔ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２０１４，５：２６．
１８３．Ｊａｆｆｒｅ，Ｆ．，Ｂｏｎｎｉｎ，Ｐ．，Ｃａｌｌｅｂｅｒｔ，Ｊ．，Ｄｅｂ
ｂａｂｉ，Ｈ．，Ｓｅｔｏｌａ，Ｖ．，Ｄｏｌｙ，Ｓ．，Ｍｏｎａｓｓｉｅｒ，Ｌ．，Ｍ
ｅｔｔａｕｅｒ，Ｂ．，Ｂｌａｘａｌｌ，Ｂ．Ｃ．＆Ｌａｕｎａｙ，Ｊ．－Ｍ．（２００
９）Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ ａｎｄ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ
ｃａｒｄｉａｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ｃｏｒｅｇｕｌａｔｅ ａｄｒｅｎｅｒｇ
ｉｃ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｃａｒｄｉａｃ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ．Ｃｉｒｃｕｌａ
ｔｉｏｎ ｒｅｓｅａｒｃｈ，１０４，１１３－１２３．
１８４．Ｊａｈｎｓｅｎ，Ｊ．，Ｆａｌｃｈ，Ｊ．，Ｍｏｗｉｎｃｋｅｌ，Ｐ．＆Ａａｄ
ｌａｎｄ，Ｅ．（２００２）Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ ｓｔａｔｕｓ，ｐａｒａｔｈｙｒｏｉ
ｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍｉｎｅｒａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ｉｎ ｐａ
ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｓ
ｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，
３７，１９２－１９９．
１８５．Ｊｅｎｎｅ，Ｃ．Ｎ．，Ｅｎｄｅｒｓ，Ａ．，Ｒｉｖｅｒａ，Ｒ．，Ｗａｔｓｏ
ｎ，Ｓ．Ｒ．，Ｂａｎｋｏｖｉｃｈ，Ａ．Ｊ．，Ｐｅｒｅｉｒａ，Ｊ．Ｐ．，Ｘｕ，Ｙ．
，Ｒｏｏｔｓ，Ｃ．Ｍ．，Ｂｅｉｌｋｅ，Ｊ．Ｎ．＆Ｂａｎｅｒｊｅｅ，Ａ．（２００９
）Ｔ－ｂｅｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｓ１Ｐ５ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ＮＫ ｃ
ｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｅｇｒｅｓｓ ｆｒｏｍ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ａｎ
ｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａ
ｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０６，２４６９－２４８１．
１８６．Ｊｉａ，Ｒ．－Ｚ．，Ｚｈａｎｇ，Ｘ．，Ｈｕ，Ｐ．，Ｌｉｕ，Ｘ．－Ｍ．，Ｈ
ｕａ，Ｘ．－Ｄ．，Ｗａｎｇ，Ｘ．＆Ｄｉｎｇ，Ｈ．－Ｊ．（２０１２）Ｓｃｒｅｅｎｉ
ｎｇ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｓｔａｔｕｓ ｉ
ｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｃｅｎｔａ ｉｎ ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ ｕｓｉｎｇ ａ
ＣｐＧ ｉｓｌａｎｄ ｐｌｕｓ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ．Ｉｎｔ
ｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｄｉｃｉｎｅ
，３０，１３３．
１８７．Ｊｉｍｅｎｅｚ－Ａｎｄｒａｄｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｚｈｏｕ，Ｓ．，Ｄｕ，Ｊ．，Ｙ
ａｍａｎｉ，Ａ．，Ｇｒａｄｙ，Ｊ．Ｊ．，Ｃａｓｔａｎｅｄａ－Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ，
Ｇ．＆Ｃａｒｌｔｏｎ，Ｓ．Ｍ．（２００４）Ｐｒｏ－ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ ｒｏｌ
ｅ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｇａｌａｎｉｎ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ
ｐａｉｎ．Ｐａｉｎ，１１０，１０－２１．
１８８．Ｊｏｈｎｓ，Ｄ．Ｇ．，Ａｏ，Ｚ．，Ｎａｓｅｌｓｋｙ，Ｄ．，Ｈｅｒｏｌｄ，
Ｃ．Ｌ．，Ｍａｎｉｓｃａｌｃｏ，Ｋ．，Ｓａｒｏｖ－Ｂｌａｔ，Ｌ．，Ｓｔｅｐｌｅｗ
ｓｋｉ，Ｋ．，Ａｉｙａｒ，Ｎ．＆Ｄｏｕｇｌａｓ，Ｓ．Ａ．（２００４）Ｕｒｏｔｅｎ
ｓｉｎ－ＩＩ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈ
ｙ：ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ａｎｄ ｒｏｌｅ
ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ．Ｎａｕｎｙｎ－Ｓｃｈｍｉｅ
ｄｅｂｅｒｇ’ｓ ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３７０，２３
８－２５０．
１８９．Ｊｏｓｓａｒｔ，Ｃ．，Ｍｕｌｕｍｂａ，Ｍ．，Ｇｒａｎａｔａ，Ｒ．，Ｇａｌ
ｌｏ，Ｄ．，Ｇｈｉｇｏ，Ｅ．，Ｍａｒｌｅａｕ，Ｓ．，Ｓｅｒｖａｎｔ，Ｍ．Ｊ．＆Ｏ
ｎｇ，Ｈ．（２０１３）Ｐｙｒｏｇｌｕｔａｍｙｌａｔｅｄ ＲＦ－ａｍｉｄｅ ｐｅｐ
ｔｉｄｅ（ＱＲＦＰ）ｇｅｎｅ ｉｓ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ
ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２８，
６５－７９．
１９０．Ｊｕｌｅｓ Ｊ，Ｍａｉｇｕｅｌ Ｄ，Ｈｕｄｓｏｎ ＢＩ，Ａｌｔｅｒｎａｔ
ｉｖｅ Ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ＲＡＧＥ Ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ Ｄｏｍ
ａｉｎ Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉ
ｏｎ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ，２０１３，８：ｅ７８２６７．
１９１．Ｊｕｒｉｓｉｃ，Ｇ．，Ｓｕｎｄｂｅｒｇ，Ｊ．，Ｂｌｅｉｃｈ，Ａ．，Ｌｅｉ
ｔｅｒ，Ｅ．，Ｂｒｏｍａｎ，Ｋ．，Ｂｕｅｃｈｌｅｒ，Ｇ．，Ａｌｌｅｙ，Ｌ．，Ｖｅ
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２０８．Ｋｏｎｏｎｉｋｈｉｎ，Ａ．，Ｆｅｄｏｒｃｈｅｎｋｏ，Ｋ．Ｙ．，Ｒｙａｂｏ
ｋｏｎ，Ａ．，Ｓｔａｒｏｄｕｂｔｓｅｖａ，Ｎ．，Ｐｏｐｏｖ，Ｉ．，Ｚａｖｉａｌｏ
ｖａ，Ｍ．，Ａｎａｅｖ，Ｅ．，Ｃｈｕｃｈａｌｉｎ，Ａ．，Ｖａｒｆｏｌｏｍｅｅｖ，
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ｅｍｉｓｔｒｙ（Ｍｏｓｃｏｗ）Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ Ｓｅｒｉｅｓ Ｂ：Ｂｉｏｍｅ
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２０９．Ｋｏｔｔｙａｎ，Ｌ．Ｃ．，Ｃｏｌｌｉｅｒ，Ａ．Ｒ．，Ｃａｏ，Ｋ．Ｈ．，Ｎ
ｉｅｓｅ，Ｋ．Ａ．，Ｈｅｄｇｅｂｅｔｈ，Ｍ．，Ｒａｄｕ，Ｃ．Ｇ．，Ｗｉｔｔｅ，Ｏ
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ｒｍａｎｎ，Ｎ．（２００９）Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｉｓ ｉｎ
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２１０．Ｋｒｉｓｈｎａｍｏｏｒｔｈｙ，Ｓ．，Ｒｅｃｃｈｉｕｔｉ，Ａ．，Ｃｈｉａｎ
ｇ，Ｎ．，Ｆｒｅｄｍａｎ，Ｇ．＆Ｓｅｒｈａｎ，Ｃ．Ｎ．（２０１２）Ｒｅｓｏｌｖｉ
ｎ Ｄ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｒｅｇｕ
ｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｒｅｓｏｌｖｉｎｇ
ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ．Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐａｔｈｏｌ
ｏｇｙ，１８０，２０１８－２０２７．
２１１．Ｋｒｉｓｈｎａｍｏｏｒｔｈｙ，Ｓ．，Ｒｅｃｃｈｉｕｔｉ，Ａ．，Ｃｈｉａｎ
ｇ，Ｎ．，Ｙａｃｏｕｂｉａｎ，Ｓ．，Ｌｅｅ，Ｃ．－Ｈ．，Ｙａｎｇ，Ｒ．，Ｐｅｔａ
ｓｉｓ，Ｎ．Ａ．＆Ｓｅｒｈａｎ，Ｃ．Ｎ．（２０１０）Ｒｅｓｏｌｖｉｎ Ｄ１ ｂｉ
ｎｄｓ ｈｕｍａｎ ｐｈａｇｏｃｙｔｅｓ ｗｉｔｈ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｐ
ｒｏｒｅｓｏｌｖｉｎｇ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ
Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１０７，１６６０－１
６６５．
２１２．Ｋｒｕｓｅ，Ａ．Ｃ．，Ｒｉｎｇ，Ａ．Ｍ．，Ｍａｎｇｌｉｋ，Ａ．，Ｈｕ，Ｊ
．，Ｈｕ，Ｋ．，Ｅｉｔｅｌ，Ｋ．，Ｈｕｂｎｅｒ，Ｈ．，Ｐａｒｄｏｎ，Ｅ．，Ｖａｌ
ａｎｔ，Ｃ．，Ｓｅｘｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｏｕｌｏｓ，Ａ．，Ｆｅｌｄ
ｅｒ，Ｃ．Ｃ．，Ｇｍｅｉｎｅｒ，Ｐ．，Ｓｔｅｙａｅｒｔ，Ｊ．，Ｗｅｉｓ，Ｗ．Ｉ．
，Ｇａｒｃｉａ，Ｋ．Ｃ．，Ｗｅｓｓ，Ｊ．＆Ｋｏｂｉｌｋａ，Ｂ．Ｋ．（２０１３）Ａ
ｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｌｌｏｓｔｅｒｉｃ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａ
ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｎａｔｕｒ
ｅ，５０４，１０１－１０６．
２１３．Ｋｕｄｕｋ，Ｓ．Ｄ．，ａｎｄ Ｍ．Ｇ．Ｂｏｃｋ．Ｂｒａｄｙｋｉｎｉｎ Ｂ
１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ａｓ ｎｏｖｅｌ ａｎａｌｇｅｓｉ
ｃｓ：ａ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｏｆ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ．Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｅｄ Ｃｈｅ
ｍ，２００８，８：１４２０－３０．
２１４．Ｋｕｆａｒｅｖａ，Ｉ．，Ｓａｌａｎｇａ，Ｃ．Ｌ．＆Ｈａｎｄｅｌ，Ｔ．Ｍ．
（２０１５）Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓ
ｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆ
ｏｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂ
ｉｏｌ，９３，３７２－３８３．
２１５．Ｋｕｎｉｋａｔａ，Ｔ．，Ｙａｍａｎｅ，Ｈ．，Ｓｅｇｉ，Ｅ．，Ｍａｔｓｕｏ
ｋａ，Ｔ．，Ｓｕｇｉｍｏｔｏ，Ｙ．，Ｔａｎａｋａ，Ｓ．，Ｔａｎａｋａ，Ｈ．，Ｎａ
ｇａｉ，Ｈ．，Ｉｃｈｉｋａｗａ，Ａ．＆Ｎａｒｕｍｉｙａ，Ｓ．（２００５）Ｓｕｐｐ
ｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｔｈｅ
ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｂｔｙｐｅ ＥＰ３．Ｎａｔ
ｕｒｅ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６，５２４－５３１．
２１６．Ｋｕｐｐ，Ｌ．Ｉ．，Ｋｏｓｃｏ，Ｍ．Ｈ．，Ｓｃｈｅｎｋｅｉｎ，Ｈ．Ａ．＆
Ｔｅｗ，Ｊ．Ｇ．（１９９１）Ｃｈｅｍｏｔａｘｉｓ ｏｆ ｇｅｒｍｉｎａｌ ｃｅｎ
ｔｅｒｓ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ Ｃ５ａ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ
ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２１，２６９７－２７０１．
２１７．Ｋｗｏｎ，Ｊ．Ｙ．，Ｐａｒｋ，Ｍ．Ｋ．，Ｓｅｏ，Ｙ．Ｒ．＆Ｓｏｎｇ，Ｊ．
－Ｊ．（２０１４）Ｇｅｎｏｍｉｃ－ｂａｓｅｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
ｎｏｖｅｌ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａ
ｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｎｅｔｗｏｒｋｓ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｄｉｅ
ｓｅｌ ｅｘｈａｕｓｔ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍｉｄｄｌｅ ｅａ
ｒ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ＆Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｔｏ
ｘｉｃｏｌｏｇｙ，１０，９５－１０５．
２１８．Ｌａｆｒａｎｃｅ，Ｍ．，Ｒｏｕｓｓｙ，Ｇ．，Ｂｅｌｌｅｖｉｌｌｅ，Ｋ．，
Ｍａｅｎｏ，Ｈ．，Ｂｅａｕｄｅｔ，Ｎ．，Ｗａｄａ，Ｋ．＆Ｓａｒｒｅｔ，Ｐ．（２０
１０）Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ＮＴＳ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｓｔｒｅ
ｓｓ－ｉｎｄｕｃｅｄ ａｎａｌｇｅｓｉａ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１６６，６３
９－６５２．
２１９．Ｌａｉｒｄ，Ｊ．Ｍ．，Ｏｌｉｖａｒ，Ｔ．，Ｌｏｐｅｚ－Ｇａｒｃｉａ，Ｊ．
Ａ．，Ｍａｇｇｉ，Ｃ．Ａ．＆Ｃｅｒｖｅｒｏ，Ｆ．（２００１）Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ
ｏｆ ｒａｔ ｓｐｉｎａｌ ｎｅｕｒｏｎｓ ｔｏ ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ ｏｆ ｉ
ｎｆｌａｍｅｄ ｃｏｌｏｎ：ｒｏｌｅ ｏｆ ｔａｃｈｙｋｉｎｉｎ ＮＫ２ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒｓ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，４０，６９６－７０１．
２２０．Ｌａｍａｓ，Ｏ．，Ｍａｒｔｉｎｅｚ，Ｊ．Ａ．＆Ｍａｒｔｉ，Ａ．（２００３
）Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａ β３－ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ ａｇｏｎｉｓｔ ｏｎ ｔ
ｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｄｉｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄ（ｃａｆｅｔ
ｅｒｉａ）ｏｂｅｓｅ ａｎｉｍａｌｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ
ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５９，１８３－１９１．
２２１．Ｌａｔｔｉｎ，Ｊ．Ｅ．，Ｓｃｈｒｏｄｅｒ，Ｋ．，Ｓｕ，Ａ．Ｉ．，Ｗａｌｋ
ｅｒ，Ｊ．Ｒ．，Ｚｈａｎｇ，Ｊ．，Ｗｉｌｔｓｈｉｒｅ，Ｔ．，Ｓａｉｊｏ，Ｋ．，Ｇ
ｌａｓｓ，Ｃ．Ｋ．，Ｈｕｍｅ，Ｄ．Ａ．＆Ｋｅｌｌｉｅ，Ｓ．（２００８）Ｅｘｐｒｅ
ｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ｃｏｕｐｌｅｄ Ｒｅｃｅ
ｐｔｏｒｓ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｍｅ ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ，４，１．
２２２．Ｌａｕｋｏｖａ，Ｍ．，Ｖａｒｇｏｖｉｃ，Ｐ．，Ｋｒｉｚａｎｏｖａ，Ｏ．＆
Ｋｖｅｔｎａｎｓｋｙ，Ｒ．（２０１０）Ｒｅｐｅａｔｅｄ Ｓｔｒｅｓｓ Ｄｏｗｎ－
Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ β２－ ａｎｄ α２Ｃ－Ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ Ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒｓ ａｎｄ Ｕｐ－Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｉ
Ｌ－６ ｉｎ ｔｈｅ Ｒａｔ Ｓｐｌｅｅｎ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，３０，１０７７－１０８７．
２２３．Ｌａｚｅｎｎｅｃ，Ｇ．＆Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，Ａ．（２０１０）Ｃｈｅｍｏｋｉ
ｎｅｓ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｎｅｗ ｉｎｓｉｇｈｔｓ
ｉｎｔｏ ｃａｎｃｅｒ－ｒｅｌａｔｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｔｒｅｎｄｓ
ｉｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１６，１３３－１４４．
２２４．Ｌｅｅｂ－Ｌｕｎｄｂｅｒｇ，Ｌ．Ｍ．，Ｍａｒｃｅａｕ，Ｆ．，Ｍｕｌｌｅｒ
－Ｅｓｔｅｒｌ，Ｗ．，Ｐｅｔｔｉｂｏｎｅ，Ｄ．Ｊ．＆Ｚｕｒａｗ，Ｂ．Ｌ．（２００
５）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｕｎｉｏｎ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ＸＬ
Ｖ．Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｋｉｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆ
ａｍｉｌｙ：ｆｒｏｍ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｔｏ ｐａｔｈｏ
ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ
，５７，２７－７７．
２２５．Ｌｅ Ｐｏｕｌ，Ｅ．，Ｌｏｉｓｏｎ，Ｃ．，Ｓｔｒｕｙｆ，Ｓ．，Ｓｐｒｉｎ
ｇａｅｌ，Ｊ．－Ｙ．，Ｌａｎｎｏｙ，Ｖ．，Ｄｅｃｏｂｅｃｑ，Ｍ．－Ｅ．，Ｂｒｅｚ
ｉｌｌｏｎ，Ｓ．，Ｄｕｐｒｉｅｚ，Ｖ．，Ｖａｓｓａｒｔ，Ｇ．＆Ｖａｎ Ｄａｍｍｅ
，Ｊ．（２００３）Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ
ｈｕｍａｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｆｏｒ ｓｈｏｒｔ ｃｈａｉｎ ｆａｔｔｙ ａｃ
ｉｄｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ
ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ，２７８，２５４８１－２５４８９．
２２６．Ｌｅ，Ｙ．，Ｇｏｎｇ，Ｗ．，Ｌｉ，Ｂ．，Ｄｕｎｌｏｐ，Ｎ．Ｍ．，Ｓｈｅｎ
，Ｗ．，Ｓｕ，Ｓ．Ｂ．，Ｒｉｃｈａｒｄ，Ｄ．Ｙ．＆Ｗａｎｇ，Ｊ．Ｍ．（１９９９）
Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ｓｅｖｅｎ－ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ，Ｇ
ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ｆｏｒｍｙｌ ｐｅｐｔｉｄ
ｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｌｉｋｅ １ ａｎｄ ｆｏｒｍｙｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒ，ｂｙ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｈｅｘａｐｅｐｔｉｄｅ ＷＫＹＭＶ
ｍ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｐｈａｇｏｃｙｔｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ Ｊｏｕ
ｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１６３，６７７７－６７８４．
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ｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｗｉｔｈ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ＲＡＧＥ（ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏ
ｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ）ｉｍｍｕｎｏ
ｇｌｏｂｕｌｉｎ ｄｏｍａｉｎｓ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２８２：３１３１７－３
１３３１．
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ｎｕｍｂｅｒ ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｕｌｍｏ
ｎａｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｍｅａｓｕｒｅｓ ｉｎ Ｋｏｒｅａ Ａｓｓｏｃｉａｔ
ｅｄ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ（ＫＡＲＥ）ｃｏｈｏｒｔｓ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，９７，１０１
－１０５．
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ＥＢＶ‐ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｏｉｄ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ
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２３３．Ｌｅｅｂ－Ｌｕｎｄｂｅｒｇ，Ｌ．Ｍ．，Ｆ．Ｍａｒｃｅａｕ，Ｗ．Ｍｕｌｌｅ
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ＬＶ．Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｋｉｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｆａｍｉｌｙ：ｆｒｏｍ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｔｏ ｐａｔｈ
ｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅ
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ａｃｔｉｖａｔｅｓ β１ ｉｎｔｅｇｒｉｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ
ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，３１，３５０４－３５１２．
２３５．Ｌｉ Ｃ．，Ｐａｚｇｉｅｒ Ｍ．，Ｌｉ Ｊ．，Ｌｉ Ｃ．，Ｌｉｕ Ｍ．，
Ｚｏｕ Ｇ．，Ｌｉ Ｚ．，Ｃｈｅｎ Ｊ．，Ｔａｒａｓｏｖ Ｓ．Ｇ．，Ｌｕ Ｗ．Ｙ
．，Ｌｕ Ｗ．Ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｔｒｏ－ｉｎｖｅ
ｒｓｏ ｉｓｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｉｍｉｃｒｙ．Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２０１０，２８５：１９５７２－１９５８１．
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ｎ ＩＩ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ａｎｄ ｒｅｎａｌ ｉｎ
ｊｕｒｙ．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｈ
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ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ ｐｒ
ｏｔｅｉｎ－１（ＭＣＰ－１）／ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ（Ｃ－Ｃ ｍｏｔｉｆ）ｌｉｇａｎ
ｄ ２（ＣＣＬ２）ａｎｄ ｒｅｃｒｕｉｔｓ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｔｏ ｐｒｏ
ｍｏｔｅ ｉｎｖａｓｉｏｎ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．ＰＬｏＳ
Ｏｎｅ，８，ｅ５４０７３．
２３８．Ｌｉａｎｇ，Ｍ．，Ｎｉｕ，Ｊ．，Ｚｈａｎｇ，Ｌ．，Ｄｅｎｇ，Ｈ．，Ｍａ，
Ｊ．，Ｚｈｏｕ，Ｗ．，Ｄｕａｎ，Ｄ．，Ｚｈｏｕ，Ｙ．，Ｘｕ，Ｈ．＆Ｃｈｅｎ，Ｌ．
（２０１６）Ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎ Ｇ－ｐｒｏｔｅｉ
ｎ ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ ｂ
ｅｔｗｅｅｎ ｅａｒｌｙ－ａｎｄ ｌａｔｅ－ｏｎｓｅｔ ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ
．Ｐｌａｃｅｎｔａ，４０，５２－５９．
２３９．Ｌｉｎ，Ｃ．－Ｉ．，Ｃｈｅｎ，Ｃ．－Ｎ．，Ｌｉｎ，Ｐ．－Ｗ．，Ｃｈａｎｇ
，Ｋ．－Ｊ．，Ｈｓｉｅｈ，Ｆ．－Ｊ．＆Ｌｅｅ，Ｈ．（２００７）Ｌｙｓｏｐｈｏｓｐ
ｈａｔｉｄｉｃ ａｃｉｄ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ－ｒｅｌａ
ｔｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒ
ｏｕｇｈ ＬＰＡ １ ａｎｄ ＬＰＡ ３．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏ
ｐｈｙｓｉｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３６３，１００
１－１００８．
２４０．Ｌｉｎ，Ｅ．－Ｊ．Ｄ．，Ｓａｉｎｓｂｕｒｙ，Ａ．，Ｌｅｅ，Ｎ．Ｊ．，Ｂｏ
ｅｙ，Ｄ．，Ｃｏｕｚｅｎｓ，Ｍ．，Ｅｎｒｉｑｕｅｚ，Ｒ．，Ｓｌａｃｋ，Ｋ．，Ｂｌ
ａｎｄ，Ｒ．，Ｄｕｒｉｎｇ，Ｍ．Ｊ．＆Ｈｅｒｚｏｇ，Ｈ．（２００６）Ｃｏｍｂｉｎ
ｅｄ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆ Ｙ１，Ｙ２，ａｎｄ Ｙ４ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｐｒ
ｅｖｅｎｔｓ ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ Ｙ ｏｖｅｒｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎｅｍｉａ ｄｅｓｐｉ
ｔｅ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ｏｆ ｈｙｐｅｒｐｈａｇｉａ ａｎｄ ｏｂｅｓｉｔ
ｙ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１４７，５０９４－５１０１．
２４１．Ｌｉｎ，Ｈ．Ｈ．，Ｆａｕｎｃｅ，Ｄ．Ｅ．，Ｓｔａｃｅｙ，Ｍ．，Ｔｅｒａｊ
ｅｗｉｃｚ，Ａ．，Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｔ．，Ｚｈａｎｇ－Ｈｏｏｖｅｒ，Ｊ．，Ｋｅｒ
ｌｅｙ，Ｍ．，Ｍｕｃｅｎｓｋｉ，Ｍ．Ｌ．，Ｇｏｒｄｏｎ，Ｓ．＆Ｓｔｅｉｎ－Ｓｔｒ
ｅｉｌｅｉｎ，Ｊ．（２００５）Ｔｈｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ Ｆ４／８０ ｒｅｃｅ
ｐｔｏｒ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎ
ｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｅｆｆｅｒｅｎｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌ
ｌｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ，２０１
，１６１５－１６２５．
２４２．Ｌｉｎｇ，Ｐ．，Ｎｇｏ，Ｋ．，Ｎｇｕｙｅｎ，Ｓ．，Ｔｈｕｒｍｏｎｄ，Ｒ．
Ｌ．，Ｅｄｗａｒｄｓ，Ｊ．Ｐ．，Ｋａｒｌｓｓｏｎ，Ｌ．＆Ｆｕｎｇ‐Ｌｅｕｎｇ，Ｗ
．Ｐ．（２００４）ＨｉｓｔａｍｉｎｅＨ４ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｅ
ｏｓｉｎｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍｏｔａｘｉｓ ｗｉｔｈ ｃｅｌｌ ｓｈａｐｅ ｃｈａ
ｎｇｅ ａｎｄ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ．Ｂ
ｒｉｔｉｓｈ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１４２，１６１－１
７１．
２４３．Ｌｉｕ，Ｃ．，Ｋｕｅｉ，Ｃ．，Ｓｕｔｔｏｎ，Ｓ．，Ｃｈｅｎ，Ｊ．，Ｂｏｎ
ａｖｅｎｔｕｒｅ，Ｐ．，Ｗｕ，Ｊ．，Ｎｅｐｏｍｕｃｅｎｏ，Ｄ．，Ｋａｍｍｅ，Ｆ．
，Ｔｒａｎ，Ｄ．－Ｔ．＆Ｚｈｕ，Ｊ．（２００５）ＩＮＳＬ５ ｉｓ ａ ｈｉｇｈ
ａｆｆｉｎｉｔｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｇｏｎｉｓｔ ｆｏｒ ＧＰＣＲ１４２（ＧＰ
Ｒ１００）．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８
０，２９２－３００．
２４４．Ｌｉｕ，Ｊ．，Ｅｓｃｈｅｒ，Ａ．，Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ａｓｓａｙ ｓｅｎｓ
ｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｎ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｓｅｃｒｅｔｅｄ Ｒｅｎｉｌｌ
ａ ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ，Ｇｅｎｅ，１９９９，２３７（１）：１５３－９．
２４５．Ｌｉｕ，Ｓ．，Ｑｉａｎ，Ｙ．，Ｌｉ，Ｌ．，Ｗｅｉ，Ｇ．，Ｇｕａｎ，Ｙ．，
Ｐａｎ，Ｈ．，Ｇｕａｎ，Ｘ．，Ｚｈａｎｇ，Ｌ．，Ｌｕ，Ｘ．＆Ｚｈａｏ，Ｙ．（２０
１３）Ｌｇｒ４ ｇｅｎｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｓｕｓｃｅｐ
ｔｉｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｏｆ ｄｅｘｔｒａｎ ｓｏｄｉｕｍ
ｓｕｌｆａｔｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａ
ｓｅ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ，２８８，８７９４－８８０３．
２４６．Ｌｉｕ，Ｗ．，Ｗａｃｋｅｒ，Ｄ．，Ｇａｔｉ，Ｃ．，Ｈａｎ，Ｇ．Ｗ．，Ｊａ
ｍｅｓ，Ｄ．，Ｗａｎｇ，Ｄ．，Ｎｅｌｓｏｎ，Ｇ．，Ｗｅｉｅｒｓｔａｌｌ，Ｕ．，Ｋ
ａｔｒｉｔｃｈ，Ｖ．，Ｂａｒｔｙ，Ａ．，Ｚａｔｓｅｐｉｎ，Ｎ．Ａ．，Ｌｉ，Ｄ．，
Ｍｅｓｓｅｒｓｃｈｍｉｄｔ，Ｍ．，Ｂｏｕｔｅｔ，Ｓ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｇ．Ｊ．
，Ｋｏｇｌｉｎ，Ｊ．Ｅ．，Ｓｅｉｂｅｒｔ，Ｍ．Ｍ．，Ｗａｎｇ，Ｃ．，Ｓｈａｈ，Ｓ
．Ｔ．，Ｂａｓｕ，Ｓ．，Ｆｒｏｍｍｅ，Ｒ．，Ｋｕｐｉｔｚ，Ｃ．，Ｒｅｎｄｅｋ，Ｋ
．Ｎ．，Ｇｒｏｔｊｏｈａｎｎ，Ｉ．，Ｆｒｏｍｍｅ，Ｐ．，Ｋｉｒｉａｎ，Ｒ．Ａ．，
Ｂｅｙｅｒｌｅｉｎ，Ｋ．Ｒ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｔ．Ａ．，Ｃｈａｐｍａｎ，Ｈ．Ｎ．，Ｃ
ａｆｆｒｅｙ，Ｍ．，Ｓｐｅｎｃｅ，Ｊ．Ｃ．，Ｓｔｅｖｅｎｓ，Ｒ．Ｃ．＆Ｃｈｅｒｅ
ｚｏｖ，Ｖ．（２０１３）Ｓｅｒｉａｌ ｆｅｍｔｏｓｅｃｏｎｄ ｃｒｙｓｔａｌｌｏ
ｇｒａｐｈｙ ｏｆ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ，３４２，１５２１－１５２４．
２４７．Ｌｏｇｓｄｏｎ，Ｃ．Ｄ．，Ｆｕｅｎｔｅｓ，Ｍ．Ｋ．，Ｈｕａｎｇ，Ｅ．Ｈ．
＆Ａｒｕｍｕｇａｍ，Ｔ．（２００７）ＲＡＧＥ ａｎｄ ＲＡＧＥ ｌｉｇａｎｄｓ
ｉｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，７：７
７７－７８９．
２４８．Ｌｕ，Ｄ．，Ｚｈａｏ，Ｙ．，Ｔａｗａｔａｏ，Ｒ．，Ｃｏｔｔａｍ，Ｈ．Ｂ．
，Ｓｅｎ，Ｍ．，Ｌｅｏｎｉ，Ｌ．Ｍ．，Ｋｉｐｐｓ，Ｔ．Ｊ．，Ｃｏｒｒ，Ｍ．＆Ｃａ
ｒｓｏｎ，Ｄ．Ａ．（２００４）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｗｎｔ ｓｉｇ
ｎａｌｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌ
ｅｕｋｅｍｉａ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄ
ｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ
Ａｍｅｒｉｃａ，１０１，３１１８－３１２３．
２４９．Ｌｕ，Ｍ．Ｃ．，Ｌａｉ，Ｎ．Ｓ．，Ｙｕ，Ｈ．Ｃ．，Ｈｕａｎｇ，Ｈ．Ｂ．，
Ｈｓｉｅｈ，Ｓ．Ｃ．＆Ｙｕ，Ｃ．Ｌ．（２０１０）Ａｎｔｉ－ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔ
ｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｂｉｎｄ ｓｕｒｆａｃｅ‐ｅｘｐｒｅ
ｓｓｅｄ ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ Ｇｒｐ７８ ｏｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ／ｍａｃ
ｒｏｐｈａｇｅｓ ａｎｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｅ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａ
ｃｔｏｒ α ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ＆Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，６
２，１２１３－１２２３．
２５０．Ｌｕｎｄｅｑｕｉｓｔ，Ａ．＆Ｂｏｙｃｅ，Ｊ．Ａ．（２０１１）ＬＰＡ５ ｉ
ｓ ａｂｕｎｄａｎｔｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｍａｓｔ ｃｅｌ
ｌｓ ａｎｄ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆｏｒ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ ａｃ
ｉｄ ｉｎｄｕｃｅｄ ＭＩＰ－１β ｒｅｌｅａｓｅ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，６，ｅ１８
１９２．
２５１．Ｍａ，Ｔ．Ｋ．，Ｋａｍ，Ｋ．Ｋ．，Ｙａｎ，Ｂ．Ｐ．，Ｌａｍ，Ｙ．Ｙ．，Ｒ
ｅｎｉｎ－ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ－ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｂｌｏｃ
ｋａｄｅ ｆｏｒ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ
ｓｔａｔｕｓ，Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１０，１６０：１２７３－１２９
２．
２５２．Ｍａｅｋａｗａ，Ａ．，Ｂａｌｅｓｔｒｉｅｒｉ，Ｂ．，Ａｕｓｔｅｎ，Ｋ．Ｆ
．＆Ｋａｎａｏｋａ，Ｙ．（２００９）ＧＰＲ１７ ｉｓ ａ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｒｅ
ｇｕｌａｔｏｒ ｏｆ ｔｈｅ ｃｙｓｔｅｉｎｙｌ ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ １ ｒ
ｅｃｅｐｔｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ Ｄ４．Ｐｒｏｃｅ
ｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃ
ｅｓ，１０６，１１６８５－１１６９０．
２５３．Ｍａｌｉｋ，Ｐ．，Ｃｈａｕｄｈｒｙ，Ｎ．，Ｍｉｔｔａｌ，Ｒ．＆Ｍｕｋｈｅ
ｒｊｅｅ，Ｔ．Ｋ．（２０１５）Ｒｏｌｅ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａ
ｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｍｐｌ
ｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｔｙｐｅｓ
ｏｆ ｃａｎｃｅｒｓ．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ ａｃｔ
ａ，１８５０：１８９８－１９０４．
２５４．Ｍａｌｋｉ，Ａ．，Ｆｉｅｄｌｅｒ，Ｊ．，Ｆｒｉｃｋｅ，Ｋ．，Ｂａｌｌｗｅ
ｇ，Ｉ．，Ｐｆａｆｆｌ，Ｍ．Ｗ．＆Ｋｒａｕｔｗｕｒｓｔ，Ｄ．（２０１５）Ｃｌａｓ
ｓ Ｉ ｏｄｏｒａｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＴＡＳ１Ｒ ａｎｄ ＴＡＳ２Ｒ ｔａ
ｓｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ａｒｅ ｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔ
ｉｏｎｓ ｏｆ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｂｉｏｌｏｇｙ，９７，５３３－５４５．
２５５．Ｍａｌｋｉ，Ａ．，Ｆｉｅｄｌｅｒ，Ｊ．，Ｆｒｉｃｋｅ，Ｋ．，Ｂａｌｌｗｅ
ｇ，Ｉ．，Ｐｆａｆｆｌ，Ｍ．Ｗ．＆Ｋｒａｕｔｗｕｒｓｔ，Ｄ．（２０１５）Ｃｌａｓ
ｓ Ｉ ｏｄｏｒａｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＴＡＳ１Ｒ ａｎｄ ＴＡＳ２Ｒ ｔａ
ｓｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ａｒｅ ｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔ
ｉｏｎｓ ｏｆ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｂｉｏｌｏｇｙ，９７，５３３－５４５．
２５６．Ｍａｌｋｉ，Ａ．，Ｆｉｅｄｌｅｒ，Ｊ．，Ｆｒｉｃｋｅ，Ｋ．，Ｂａｌｌｗｅ
ｇ，Ｉ．，Ｐｆａｆｆｌ，Ｍ．Ｗ．＆Ｋｒａｕｔｗｕｒｓｔ，Ｄ．（２０１５）Ｃｌａｓ
ｓ Ｉ ｏｄｏｒａｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＴＡＳ１Ｒ ａｎｄ ＴＡＳ２Ｒ ｔａ
ｓｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ａｒｅ ｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔ
ｉｏｎｓ ｏｆ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｂｉｏｌｏｇｙ，９７，５３３－５４５．
２５７．Ｍａｎｉｇｒａｓｓｏ，Ｍ．Ｂ．，ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｓｍａｌｌ Ｍｏ
ｌｅｃｕｌｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｇａｎｄ－Ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ Ｒ
ＡＧＥ－ＤＩＡＰＨ１ Ｓｉｇｎａｌ Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ．Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉ
ｃ ｒｅｐｏｒｔｓ，６：２２４５０．
２５８．Ｍａｎｎｉｎｇ，Ｍ．，Ｓｔｏｅｖ，Ｓ．，Ｃｈｉｎｉ，Ｂ．，Ｄｕｒｒｏｕｘ
，Ｔ．，Ｍｏｕｉｌｌａｃ，Ｂ．＆Ｇｕｉｌｌｏｎ，Ｇ．（２００８）Ｐｅｐｔｉｄｅ
ａｎｄ ｎｏｎ－ｐｅｐｔｉｄｅ ａｇｏｎｉｓｔｓ ａｎｄ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ
ｆｏｒ ｔｈｅ ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ ａｎｄ ｏｘｙｔｏｃｉｎ Ｖ１ａ，Ｖ１
ｂ，Ｖ２ ａｎｄ ＯＴ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｒｅｓｅａｒｃｈ ｔｏｏｌｓ ａｎｄ
ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ．Ｐｒｏｇ Ｂｒａｉｎ
Ｒｅｓ，１７０，４７３－５１２．
２５９．Ｍａｏ，Ｙ．，Ｚｈａｎｇ，Ｍ．，Ｔｕｍａ，Ｒ．Ｆ．＆Ｋｕｎａｐｕｌｉ，Ｓ
．Ｐ．（２０１０）Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ＰＡＲ４ ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ ｃ
ｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｍ
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ｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａ
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ｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ：ｎｅｗ ｍｏｌｅｃ
ｕｌｅｓ ａｎｄ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｔｈｅ
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ｃｅｄ ｂｙ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉ
ｏｎ．Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ，１０７：２６３－２７０．
２６５．Ｍａｓ，Ｖ．，Ｍａｌｕｆ，Ｄ．，Ａｒｃｈｅｒ，Ｋ．Ｊ．，Ｐｏｔｔｅｒ，Ａ
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ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｌｉｖｅｒ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａ
ｔｉｏｎ，１７，８２４－８３５．
２６６．Ｍａｓｌｏｗｓｋｉ，Ｋ．Ｍ．，Ｖｉｅｉｒａ，Ａ．Ｔ．，Ｎｇ，Ａ．，Ｋｒａ
ｎｉｃｈ，Ｊ．，Ｓｉｅｒｒｏ，Ｆ．，Ｙｕ，Ｄ．，Ｓｃｈｉｌｔｅｒ，Ｈ．Ｃ．，Ｒｏ
ｌｐｈ，Ｍ．Ｓ．，Ｍａｃｋａｙ，Ｆ．＆Ａｒｔｉｓ，Ｄ．（２００９）Ｒｅｇｕｌａｔ
ｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｂｙ ｇｕｔ ｍｉｃ
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４３．Ｎａｔｕｒｅ，４６１，１２８２－１２８６．
２６７．Ｍａｓｔｅｒｓ，Ｓ．Ｌ．，Ｄｕｎｎｅ，Ａ．，Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ，Ｓ．
Ｌ．，Ｈｕｌｌ，Ｒ．Ｌ．，Ｔａｎｎａｈｉｌｌ，Ｇ．Ｍ．，Ｓｈａｒｐ，Ｆ．Ａ．，Ｂ
ｅｃｋｅｒ，Ｃ．，Ｆｒａｎｃｈｉ，Ｌ．，Ｙｏｓｈｉｈａｒａ，Ｅ．＆Ｃｈｅｎ，Ｚ．
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ｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｎａｔｕｒｅ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１１，８９７－
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２６８．Ｍａｔａｖｅｌｌｉ，Ｌ．Ｃ．，Ｈｕａｎｇ，Ｊ．＆Ｓｉｒａｇｙ，Ｈ．Ｍ．（
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ｅｎｏｖａｓｃｕｌａｒ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，５７
，３０８－３１３．
２６９．Ｍａｔｌｏｕｂｉａｎ，Ｍ．，Ｌｏ，Ｃ．Ｇ．，Ｃｉｎａｍｏｎ，Ｇ．，Ｌｅｓ
ｎｅｓｋｉ，Ｍ．Ｊ．，Ｘｕ，Ｙ．，Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ，Ｖ．，Ａｌｌｅｎｄｅ，Ｍ．
Ｌ．，Ｐｒｏｉａ，Ｒ．Ｌ．＆Ｃｙｓｔｅｒ，Ｊ．Ｇ．（２００４）Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔ
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１．Ｎａｔｕｒｅ，４２７，３５５－３６０．
２７０．Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ，Ｍ．，Ｓａｉｔｏ，Ｔ．，Ｔａｋａｓａｋｉ，Ｊ．，Ｋａ
ｍｏｈａｒａ，Ｍ．，Ｓｕｇｉｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｍ．，Ｔａｄｏｋ
ｏｒｏ，Ｍ．，Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ，Ｓ．－ｉ．，Ｏｈｉｓｈｉ，Ｔ．＆Ｆｕｒｕｉｃｈ
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ｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ．Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎ
ｉｃａｔｉｏｎｓ，２７２，５７６－５８２．
２７１．Ｍａｔｓｕｍｕｒａ，Ｔ．，Ｏｙａｍａ，Ｍ．，Ｋｏｚｕｋａ－Ｈａｔａ，Ｈ．
，Ｉｓｈｉｋａｗａ，Ｋ．，Ｉｎｏｕｅ，Ｔ．，Ｍｕｔａ，Ｔ．，Ｓｅｍｂａ，Ｋ．＆Ｉ
ｎｏｕｅ，Ｊ．－ｉ．（２０１０）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＢＣＡＰ－Ｌ
ａｓ ａ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｏｆ ｔｈｅ ＴＬＲ ｓｉｇｎ
ａｌｌｉｎｇ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＩＬ－６ ａｎｄ ＩＬ
－１０ ｉｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｂｙ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈｏｐｒ
ｏｔｅｏｍｉｃｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓ
ｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，４００，２６５－２７０．
２７２．Ｍａｔｓｕｏｋａ，Ｔ．，Ｍ．Ｈｉｒａｔａ，Ｈ．Ｔａｎａｋａ，Ｙ．Ｔａｋａ
ｈａｓｈｉ，Ｔ．Ｍｕｒａｔａ，ａｎｄ Ｋ．Ｋａｂａｓｈｉｍａ．Ｐｒｏｓｔａｇｌａ
ｎｄｉｎ Ｄ２ ａｓ ａ ｍｅｄｉａｔｏｒ ｏｆ ａｌｌｅｒｇｉｃ ａｓｔｈｍａ
．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０００，２８７：２０１３－７．
２７３．Ｍａｔｔｅｕｃｃｉ，Ｃ．，Ｍｉｎｕｔｏｌｏ，Ａ．，Ｓｉｎｉｂａｌｄｉ‐Ｖ
ａｌｌｅｂｏｎａ，Ｐ．，Ｐａｌａｍａｒａ，Ａ．Ｔ．，Ｒａｓｉ，Ｇ．，Ｍａｓｔｉｎ
ｏ，Ａ．＆Ｇａｒａｃｉ，Ｅ．（２０１０）Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌ
ｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｉｎ ｖｉｔｒ
ｏ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｔｈｙｍｏｓｉｎ ａｌｐｈａ‐１．Ａｎｎａｌｓ
ｏｆ ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１１９
４，６－１９．
２７４．ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ，Ｊ．Ａ．，Ｂａｒｒｉｎｇｈａｕｓ，Ｋ．Ｇ．，Ｂｉｓｈ
ｏｐ，Ｇ．Ｇ．，Ｓａｎｄｅｒｓ，Ｊ．Ｍ．，Ｒｉｅｇｅｒ，Ｊ．Ｍ．，Ｈｅｓｓｅｌｂ
ａｃｈｅｒ，Ｓ．Ｅ．，Ｇｉｍｐｌｅ，Ｌ．Ｗ．，Ｐｏｗｅｒｓ，Ｅ．Ｒ．，Ｍａｃｄｏ
ｎａｌｄ，Ｔ．＆Ｓｕｌｌｉｖａｎ，Ｇ．（２００１）Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ａ２Ａ ｒ
ｅｃｅｐｔｏｒ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｒｅｄｕｃｅｓ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ
ａｎｄ ｎｅｏｉｎｔｉｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｃａｒｏｔ
ｉｄ ｌｉｇａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ．Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｔｈｒｏｍ
ｂｏｓｉｓ，ａｎｄ Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２１，７９１－７９６．
２７５．ＭｃＱｕｉｓｔｏｎ，Ｔ．，Ｌｕｂｅｒｔｏ，Ｃ．＆Ｄｅｌ Ｐｏｅｔａ，Ｍ．
（２０１１）Ｒｏｌｅ ｏｆ ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ－１－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（Ｓ１
Ｐ）ａｎｄ Ｓ１Ｐ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ｉｎ ｔｈｅ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ
ｏｆ Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ ｂｙ ａｌｖｅｏｌａｒ
ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１５７，１４１６－１４２７．
２７６．ＭｃＶｅｒｒｙ，Ｂ．Ｊ．，Ｘ．Ｐｅｎｇ，Ｐ．Ｍ．Ｈａｓｓｏｕｎ，Ｓ．Ｓａ
ｍｍａｎｉ，Ｂ．Ａ．Ｓｉｍｏｎ，ａｎｄ Ｊ．Ｇ．Ｇａｒｃｉａ．Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉ
ｎｅ １－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｒｅｄｕｃｅｓ ｖａｓｃｕｌａｒ ｌｅａｋ ｉｎ
ｍｕｒｉｎｅ ａｎｄ ｃａｎｉｎｅ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｌｕｎｇ ｉ
ｎｊｕｒｙ．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ，２００４，１７０
：９８７－９３．
２７７．Ｍｅｈｔａ，Ｄ．，Ｍ．Ｋｏｎｓｔａｎｔｏｕｌａｋｉ，Ｇ．Ｕ．Ａｈｍｍｅｄ
，ａｎｄ Ａ．Ｂ．Ｍａｌｉｋ．Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ １－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｉ
ｎｄｕｃｅｄ ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｃａ２
＋ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｒａｃ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｄｈｅｒｅｎｓ ｊ
ｕｎｃｔｉｏｎ ａｓｓｅｍｂｌｙ ｉｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２００５，２８０：１７３２０－８．
２７８．Ｍｅｌｌａｄｏ，Ｍ．，Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ－Ａｇｕｌｌｏ，Ｔ．，Ｒｏｄｒｉ
ｇｕｅｚ－Ｆｒａｄｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｇａｒｃｉａ Ｓａｎ Ｆｒｕｔｏｓ，Ｍ．，ｄｅ
ｌａ Ｐｅｎａ，Ｐ．，Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ａ，Ｃ．＆Ｍｏｎｔｏｙａ，Ｅ．（１９９９
）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｙｒｏｔｒｏｐｉｎ－
ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＴＲＨＲ）ｉｎ ｔｈｅ ｉ
ｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｕｓｉｎｇ ａｇｏｎｉｓｔ ａｎｔｉ－ＴＲＨＲ ｍｏｎ
ｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，４５１，３０８－
３１４．
２７９．Ｍｉｃｈｅｌ，Ｍ．Ｃ．，Ｂｅｃｋ－Ｓｉｃｋｉｎｇｅｒ，Ａ．，Ｃｏｘ，Ｈ．
，Ｄｏｏｄｓ，Ｈ．Ｎ．，Ｈｅｒｚｏｇ，Ｈ．，Ｌａｒｈａｍｍａｒ，Ｄ．，Ｑｕｉｒｉ
ｏｎ，Ｒ．，Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｔ．＆Ｗｅｓｔｆａｌｌ，Ｔ．（１９９８）ＸＶＩ．Ｉ
ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｒｅｃｏｍ
ｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｏｆ ｎｅｕｒｏ
ｐｅｐｔｉｄｅ Ｙ，ｐｅｐｔｉｄｅ ＹＹ，ａｎｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｐｏｌｙ
ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ，５０，１４３－１
５０．
２８０．Ｍｉｎａｍｉ，Ｔ．，Ｈ．Ｎａｋａｎｏ，Ｔ．Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｙ．Ｓｕｇ
ｉｍｏｔｏ，Ｆ．Ｕｓｈｉｋｕｂｉ，ａｎｄ Ａ．Ｉｃｈｉｋａｗａ．Ｃｈａｒａｃｔｅ
ｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ＥＰ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｂｔｙｐｅｓ ｒｅｓｐｏｎｓ
ｉｂｌｅ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２－ｉｎｄｕｃｅｄ ｐａｉｎ ｒ
ｅｓｐｏｎｓｅｓ ｂｙ ｕｓｅ ｏｆ ＥＰ１ ａｎｄ ＥＰ３ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｉｃｅ．Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００１，１３３：４３
８－４４．
２８１．Ｍｉｔｉｃ，Ｋ．，Ｓｔａｎｏｊｅｖｉｃ，Ｓ．，Ｋｕｓｔｒｉｍｏｖｉｃ，Ｎ
．，Ｖｕｊｉｃ，Ｖ．＆Ｄｉｍｉｔｒｉｊｅｖｉｃ，Ｍ．（２０１１）Ｎｅｕｒｏｐｅｐ
ｔｉｄｅ Ｙ ｍｏｄｕｌａｔｅｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏ
ｒｙ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ：Ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｒｏｌｅ ｆｏｒ Ｙ１
，Ｙ２ ａｎｄ Ｙ５ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，３２，１６２６－１６
３３．
２８２．Ｍｉｔｓｕｈａｓｈｉ，Ｍ．，Ｍｉｔｓｕｈａｓｈｉ，Ｔ．＆Ｐａｙａｎ，Ｄ．
（１９８９）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ ｏｆ ｈｉ
ｓｔａｍｉｎｅＨ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎ
Ｈ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｃａ２＋ ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ
ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｈｕｍａｎ ＨＬ－６０ ｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ ｌｅ
ｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ，２６４，１８３５６－１８３６２．
２８３．Ｍｏ，Ｊ．，Ｙａｎｇ，Ａ．，Ｃｈｅｎ，Ｚ．，Ｓｈａｏ，Ｔ．，Ｚｈａｎｇ，
Ｙ．＆Ｃｈｅｎ，Ｑ．（２０１３）Ｎｅｕｒｏｎｏｓｔａｔｉｎ ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ
ｓ ｓｏｄｉｕｍ ｔａｕｒｏｃｈｏｌａｔｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ａｃｕｔｅ ｐａｎｃ
ｒｅａｔｉｔｉｓ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ
ｓｃｉｅｎｃｅｓ，５８，２９０３－２９０７．
２８４．Ｍｏｏｒｅ，Ｄ．Ｊ．，Ｃｈａｍｂｅｒｓ，Ｊ．Ｋ．，Ｗａｈｌｉｎ，Ｊ．－Ｐ
．，Ｔａｎ，Ｋ．Ｂ．，Ｍｏｏｒｅ，Ｇ．Ｂ．，Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｏ．，Ｅｍｓｏｎ，Ｐ
．Ｃ．＆Ｍｕｒｄｏｃｋ，Ｐ．Ｒ．（２００１）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎ
ｏｆ ｈｕｍａｎ Ｐ２Ｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｂｔｙｐｅｓ：ａ ｑｕａｎｔｉ
ｔａｔｉｖｅ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ
ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｓｔｕｄｙ．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈ
ｙｓｉｃａ Ａｃｔａ（ＢＢＡ）－Ｇｅｎｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅ
ｓｓｉｏｎ，１５２１，１０７－１１９．
２８５．Ｍｏｒｉｙａｍａ，Ｍ．，Ｓａｔｏ，Ｔ．，Ｉｎｏｕｅ，Ｈ．，Ｆｕｋｕｙａｍ
ａ，Ｓ．，Ｔｅｒａｎｉｓｈｉ，Ｈ．，Ｋａｎｇａｗａ，Ｋ．，Ｋａｎｏ，Ｔ．，Ｙｏｓ
ｈｉｍｕｒａ，Ａ．＆Ｋｏｊｉｍａ，Ｍ．（２００５）Ｔｈｅ ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄ
ｅ ｎｅｕｒｏｍｅｄｉｎ Ｕ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｂｙ
ｄｉｒｅｃｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒ
ｎａｌ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０２，２１７－２２４
．
２８６．Ｍｏｒｏｏｋａ Ｈ，Ｉｗａｎａｇａ Ｙ，Ｔａｍａｋｉ Ｙ，Ｔａｋａｓｅ
Ｔ，Ａｋａｈｏｓｈｉ Ｙ，Ｎａｋａｎｏ Ｙ，Ｆｕｊｉｋｉ Ｈ，Ｍｉｙａｚａｋｉ
Ｓ．Ｃｈｒｏｎｉｃ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｒａｌ ｖａｓｏｐｒｅ
ｓｓｉｎ ｔｙｐｅ ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ｔｏｌｖａｐｔａ
ｎ ｅｘｅｒｔｓ ｂｏｔｈ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ａｎｄ ｒｅｎａｌ ｐｒｏｔｅ
ｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ
ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ．Ｃｉｒｃ Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌ，２０１２，５：４８４
－９２．
２８７．Ｍｕｉｒ，Ａ．Ｉ．，Ｃｈａｍｂｅｒｌａｉｎ，Ｌ．，Ｅｌｓｈｏｕｒｂａｇｙ
，Ｎ．Ａ．，Ｍｉｃｈａｌｏｖｉｃｈ，Ｄ．，Ｍｏｏｒｅ，Ｄ．Ｊ．，Ｃａｌａｍａｒｉ
，Ａ．，Ｓｚｅｋｅｒｅｓ，Ｐ．Ｇ．，Ｓａｒａｕ，Ｈ．Ｍ．，Ｃｈａｍｂｅｒｓ，Ｊ．
Ｋ．＆Ｍｕｒｄｏｃｋ，Ｐ．（２００１）ＡＸＯＲ１２，ａ ｎｏｖｅｌ ｈｕｍａｎ
Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｂｙ
ｔｈｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ＫｉＳＳ－１．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７６，２８９６９－２８９７５．
２８８．Ｍｕｒａｔａ，Ｔ．，Ｆ．Ｕｓｈｉｋｕｂｉ，Ｔ．Ｍａｔｓｕｏｋａ，Ｍ．Ｈｉ
ｒａｔａ，Ａ．Ｙａｍａｓａｋｉ，ａｎｄ Ｙ．Ｓｕｇｉｍｏｔｏ．Ａｌｔｅｒｅｄ ｐ
ａｉｎ ｐｅｒｃｅｐｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｉｎ ｍｉｃｅ ｌａｃｋｉｎｇ ｐｒｏｓｔａｃｙｃｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｎ
ａｔｕｒｅ，１９９７，３８８：６７８－８２．
２８９．Ｍｕｒｐｈｙ，Ｐ．Ｍ．，Ｍ．Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ，Ｉ．Ｆ．Ｃｈａｒｏ，Ｃ
．Ａ．Ｈｅｂｅｒｔ，Ｒ．Ｈｏｒｕｋ，ａｎｄ Ｋ．Ｍａｔｓｕｓｈｉｍａ．（２０００
）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ＸＸＩ
Ｉ．Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｆｏｒ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｐ
ｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ，５２：１４５－７６．
２９０．Ｍｕｓｔａｆａ，Ｓ．，Ａｙｏｕｂ，Ｍ．Ａ．ａｎｄ Ｐｆｌｅｇｅｒ，Ｋ．Ｄ
．Ｇ．，（２０１０）Ｕｎｃｏｖｅｒｉｎｇ ＧＰＣＲ ｈｅｔｅｒｏｍｅｒ－ｂｉａｓ
ｅｄ ｌｉｇａｎｄｓ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ Ｔｅｃｈｎｏｌ，７：ｅ
７７－ｅ８５．
２９１．Ｍｕｓｔａｆａ，Ｓ．，Ｓｅｅ，Ｈ．Ｂ．，Ｓｅｅｂｅｒ，Ｒ．Ｍ．，Ａｒｍｓ
ｔｒｏｎｇ，Ｓ．Ｐ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｃ．Ｗ．，Ｖｅｎｔｕｒａ，Ｓ．，Ａｙｏｕｂ，Ｍ
．Ａ．，ａｎｄ Ｐｆｌｅｇｅｒ，Ｋ．Ｄ．，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ
ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ａｌｐｈａ１Ａ－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ－
ＣＸＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ｈｅｔｅｒｏｍｅｒ，Ｊ Ｂｉｏｌ
Ｃｈｅｍ，２０１２，２８７：１２９５２－６５．
２９２．Ｎａｇａｍａｃｈｉ，Ｍ．，Ｓａｋａｔａ，Ｄ．，Ｋａｂａｓｈｉｍａ，Ｋ．，
Ｆｕｒｕｙａｓｈｉｋｉ，Ｔ．，Ｍｕｒａｔａ，Ｔ．，Ｓｅｇｉ－Ｎｉｓｈｉｄａ，Ｅ．
，Ｓｏｏｎｔｒａｐａ，Ｋ．，Ｍａｔｓｕｏｋａ，Ｔ．，Ｍｉｙａｃｈｉ，Ｙ．＆Ｎａｒ
ｕｍｉｙａ，Ｓ．（２００７）Ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｈ１－ｍｅｄｉａｔ
ｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｂｙ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ ＥＰ１．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍ
ｅｄｉｃｉｎｅ，２０４，２８６５－２８７４．
２９３．Ｎｅｅｐｅｒ，Ｍ．，Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ａ．Ｍ．，Ｂｒｅｔｔ，Ｊ．，Ｙａｎ，
Ｓ．Ｄ．，Ｗａｎｇ，Ｆ．，Ｐａｎ，Ｙ．Ｃ．，Ｅｌｌｉｓｔｏｎ，Ｋ．，Ｓｔｅｒｎ，
Ｄ．，Ｓｈａｗ，Ａ．，Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｃ
ｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃｏｓ
ｙｌａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｊ Ｂｉｏｌ
Ｃｈｅｍ，１９９２，２６８：２１，１４９９８－５００４．
２９４．Ｎｅｍｅｔｈ，Ｚ．Ｈ．，Ｌｕｔｚ，Ｃ．Ｓ．，Ｃｓｏｋａ，Ｂ．，Ｄｅｉｔｃ
ｈ，Ｅ．Ａ．，Ｌｅｉｂｏｖｉｃｈ，Ｓ．Ｊ．，Ｇａｕｓｅ，Ｗ．Ｃ．，Ｔｏｎｅ，Ｍ．
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ｈａｇｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ａｎ Ａ２Ｂ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｐ
ｏｓｔｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７５，８２６０－８２７０．
２９５．Ｎｅｕｍａｎｎ，Ｊ．，Ｓｃｈａａｌｅ，Ｋ．，Ｆａｒｈａｔ，Ｋ．，Ｅｎｄｅ
ｒｍａｎｎ，Ｔ．，Ｕｌｍｅｒ，Ａ．Ｊ．，Ｅｈｌｅｒｓ，Ｓ．＆Ｒｅｉｌｉｎｇ，Ｎ．
（２０１０）Ｆｒｉｚｚｌｅｄ１ ｉｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，ａｎｄ ｉｔｓ ｌｉｇａｎｄ Ｗｎｔ３ａ ｉｓ
ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．Ｔｈｅ ＦＡ
ＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ，２４，４５９９－４６１２．
２９６．Ｎｉｃｈｏｌｓ，Ｄ．Ｅ．＆Ｎｉｃｈｏｌｓ，Ｃ．Ｄ．（２００８）Ｓｅｒｏｔ
ｏｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｃｈｅｍ Ｒｅｖ，１０８，１６１４－１６４１．
２９７．Ｎｉｅ，Ｙ．，Ｍａ，Ｒ．Ｃ．，Ｃｈａｎ，Ｊ．Ｃ．，Ｘｕ，Ｈ．＆Ｘｕ，Ｇ．
（２０１２）Ｇｌｕｃｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｓｕｌｉｎｏｔｒｏｐｉｃ ｐ
ｅｐｔｉｄｅ ｉｍｐａｉｒｓ ｉｎｓｕｌｉｎ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｖｉａ ｉｎ
ｄｕｃｉｎｇ ａｄｉｐｏｃｙｔｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｇｌｕｃｏｓｅ
－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｓｕｌｉｎｏｔｒｏｐｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔ
ｏｒ－ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ．Ｔｈｅ ＦＡＳＥＢ Ｊ
ｏｕｒｎａｌ，２６，２３８３－２３９３．
２９８．Ｎｉｅｄｅｒｎｂｅｒｇ，Ａ．，Ｔｕｎａｒｕ，Ｓ．，Ｂｌａｕｋａｔ，Ａ．，
Ａｒｄａｔｉ，Ａ．＆Ｋｏｓｔｅｎｉｓ，Ｅ．（２００３）Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ １
－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｎｄ ｄｉｏｌｅｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ ａｃｉｄ
ａｒｅ ｌｏｗ ａｆｆｉｎｉｔｙ ａｇｏｎｉｓｔｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｏｒｐｈａ
ｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＧＰＲ６３．Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ，１５，
４３５－４４６．
２９９．Ｎｉｊｍｅｉｊｅｒ，Ｓ．，Ｖｉｓｃｈｅｒ，Ｈ．Ｆ．＆Ｌｅｕｒｓ，Ｒ．（２
０１６）Ａｄｈｅｓｉｏｎ ＧＰＣＲｓ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｃａｌ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．
３００．Ｎｉｓｈｉｏ，Ｒ．，Ｍａｔｓｕｍｏｒｉ，Ａ．，Ｓｈｉｏｉ，Ｔ．，Ｗａｎｇ
，Ｗ．，Ｙａｍａｄａ，Ｔ．，Ｏｎｏ，Ｋ．＆Ｓａｓａｙａｍａ，Ｓ．（１９９８）Ｄｅ
ｎｏｐａｍｉｎｅ，ａ β１－ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ ａｇｏｎｉｓｔ，ｐｒｏｌｏｎｇ
ｓ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｏｎｇｅｓｔｉ
ｖｅ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｖｉｒａｌ ｍｙｏｃａｒ
ｄｉｔｉｓ：ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔ
ｏｒ－α ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｈｅａｒｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ，３２，８０
８－８１５．
３０１．Ｏｂｉｎａｔａ，Ｈ．ａｎｄ Ｈｌａ，Ｔ．，Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ １－ｐ
ｈｏｓｐｈａｔｅ ｉｎ ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ
，Ｓｅｍｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ，２０１２，３４：７３－９１．
３０２．Ｏｈｓｈｉｍａ，Ｓ．，Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｎ．，Ｎｉｓｈｉｏｋａ，Ｋ．，
Ｍｉｍａ，Ｔ．，Ｉｓｈｉｉ，Ｔ．，Ｕｍｅｓｈｉｔａ－Ｓａｓａｉ，Ｍ．，Ｋｏｂａｙ
ａｓｈｉ，Ｈ．，Ｓｈｉｍｉｚｕ，Ｍ．，Ｋａｔａｄａ，Ｙ．＆Ｗａｋｉｔａｎｉ，Ｓ．
（２００２）Ｅｎｈａｎｃｅｄ ｌｏｃａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｏｓｔｅｏ
ｐｏｎｔｉｎ ｉｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ｊｏｉｎｔｓ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，２９，２０６１－２０６７．
３０３．Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｋ．，Ｉｍｂｅ，Ｈ．，Ｍｏｒｉｋａｗａ，Ｙ．，Ｉｔｏｈ，
Ｍ．，Ｓｅｋｉｍｏｔｏ，Ｍ．，Ｎｅｍｏｔｏ，Ｋ．＆Ｓｅｎｂａ，Ｅ．（２００２）５
－ＨＴ２Ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｂｔｙｐｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ
ｂｒａｎｃｈ ｏｆ ｓｅｎｓｏｒｙ ｆｉｂｅｒｓ ｉｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ
ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐａｉｎ ｉ
ｎ ｒａｔｓ．Ｐａｉｎ，９９，１３３－１４３．
３０４．Ｏｓｂｏｒｎ，Ｏ．，ＭｃＮｅｌｉｓ，Ｊ．，Ｓａｎｃｈｅｚ－Ａｌａｖｅｚ，
Ｍ．，Ｔａｌｕｋｄａｒ，Ｓ．，Ｌｕ，Ｍ．，Ｌｉ，Ｐ．，Ｔｈｉｅｄｅ，Ｌ．，Ｍｏｒ
ｉｎａｇａ，Ｈ．，Ｋｉｍ，Ｊ．Ｊ．＆Ｈｅｉｎｒｉｃｈｓｄｏｒｆｆ，Ｊ．（２０１２
）Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２１ ｄｅｌｅｔｉｏｎ
ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｉｎｓｕｌｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｄｉｅｔ－ｉｎｄ
ｕｃｅｄ ｏｂｅｓｅ ｍｉｃｅ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，１２２，２４４４－２４５３．
３０５．Ｏｔｈｍａｎ，Ｍ．Ａ．，Ｇｒｙｇａｌｅｗｉｃｚ，Ｂ．，Ｐｉｅｎｋｏｗｓｋ
ａ－Ｇｒｅｌａ，Ｂ．，Ｒｉｎｃｉｃ，Ｍ．，Ｒｉｔｔｓｃｈｅｒ，Ｋ．，Ｍｅｌｏ，Ｊ
．Ｂ．，Ｃａｒｒｅｉｒａ，Ｉ．Ｍ．，Ｍｅｙｅｒ，Ｂ．，Ｍａｒｚｅｎａ，Ｗ．＆Ｌｉ
ｅｈｒ，Ｔ．（２０１５）Ｎｏｖｅｌ Ｃｒｙｐｔｉｃ Ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｓ
ｉｎ Ａｄｕｌｔ Ｂ－Ｃｅｌｌ Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ Ａｃｕｔｅ Ｌｙｍｐｈｏｂ
ｌａｓｔｉｃ Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅ ＭＬＬ Ｇｅｎｅ．Ｊ
ｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，０
０２２１５５４１５５７６２０１．
３０６．Ｏｔｔ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．Ｒｏｌｅ ｏｆ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔ
ｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｉｎ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ．
Ｒｅｄｏｘ ｂｉｏｌｏｇｙ，２０１４，２：４１１－４２９．
３０７．Ｐａａｖｏｎｅｎ，Ａ．，Ｗａｔｓｏｎ，Ａ．Ｍ．，Ｌｉ Ｊ．，Ｐａａｖｏｎ
ｅｎ，Ｋ．，Ｋｏｉｔｋａ，Ａ．，Ｃａｌｋｉｎ，Ａ．Ｃ．，Ｂａｒｉｔ，Ｄ．，Ｃｏｕ
ｇｈｌａｎ，Ｍ．Ｔ．，Ｄｒｅｗ，Ｂ．Ｇ．，Ｌａｎｃａｓｔｅｒ，Ｇ．Ｉ．，Ｔｈｏｍ
ａｓ，Ｍ．，Ｆｏｒｂｅｓ，Ｊ．Ｍ．，Ｎａｗｒｏｔｈ，Ｐ．Ｐ．，Ｂｉｅｒｈａｕｓ
Ａ．，Ｃｏｏｐｅｒ Ｍ．Ｅ．，ａｎｄ Ｊａｎｄｅｌｅｉｔ－Ｄａｈｍ Ｋ．Ａ．Ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃ
ｔｓ（ＲＡＧＥ）ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏ
ｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ ｄｉａｂｅｔｅｓ，Ｄｉａ
ｂｅｔｅｓ．２００８，５７：２４６１－９．
３０８．Ｐａｎｕｌａ，Ｐ．，Ｃｈａｚｏｔ，Ｐ．Ｌ．，Ｃｏｗａｒｔ，Ｍ．，Ｇｕｔｚ
ｍｅｒ，Ｒ．，Ｌｅｕｒｓ，Ｒ．，Ｌｉｕ，Ｗ．Ｌ．，Ｓｔａｒｋ，Ｈ．，Ｔｈｕｒｍｏ
ｎｄ，Ｒ．Ｌ．＆Ｈａａｓ，Ｈ．Ｌ．（２０１５）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉ
ｏｎ ｏｆ Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．ＸＣ
ＶＩＩＩ．Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ，６
７，６０１－６５５．
３０９．Ｐａｒｋ Ｊ ｅｔ ａｌ．（２００８）ＭＣＰ－１／ＣＣＲ２ ｓｙｓｔｅｍ
ｉｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｈｉｇｈ ｇｌｕｃｏｓｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｉｂ
ｒｏｎｅｃｔｉｎ ａｎｄ ｔｙｐｅ ＩＶ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ｃｅｌｌｓ，Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏ
ｌ Ｒｅｎａｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２９５：Ｆ７４９－Ｆ７５７．
３１０．Ｐａｒｋ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ
ｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｂｙ ｔ
ｈｅ ｓｏｌｕｂｌｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉ
ｏｎ ｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｎａｔｕｒｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，４：１０２５－１０
３１．
３１１．Ｐａｒｋｅｒ，Ｈ．，Ｈａｂｉｂ，Ａ．，Ｒｏｇｅｒｓ，Ｇ．，Ｇｒｉｂｂｌｅ
，Ｆ．＆Ｒｅｉｍａｎｎ，Ｆ．（２００９）Ｎｕｔｒｉｅｎｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓ
ｅｃｒｅｔｉｏｎ ｏｆ ｇｌｕｃｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｓｕｌｉｎｏｔｒ
ｏｐｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｆｒｏｍ ｐｒｉｍａｒｙ ｍｕｒｉｎｅ Ｋ ｃ
ｅｌｌｓ．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，５２，２８９－２９８．
３１２．Ｐａｓｔｅｒｎａｃｋ，Ｓ．Ｍ．，ｖｏｎ Ｋｕｅｇｅｌｇｅｎ，Ｉ．，Ａｌ
Ａｂｏｕｄ，Ｋ．，Ｌｅｅ，Ｙ．－Ａ．，Ｒｕｅｓｃｈｅｎｄｏｒｆ，Ｆ．，Ｖｏｓｓ，
Ｋ．，Ｈｉｌｌｍｅｒ，Ａ．Ｍ．，Ｍｏｌｄｅｒｉｎｇｓ，Ｇ．Ｊ．，Ｆｒａｎｚ，Ｔ．
＆Ｒａｍｉｒｅｚ，Ａ．（２００８）Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐ
ｔｏｒ Ｐ２Ｙ５ ａｎｄ ｉｔｓ ｌｉｇａｎｄ ＬＰＡ ａｒｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ
ｉｎ ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｈａｉｒ ｇｒｏｗｔｈ．Ｎａｔ
ｕｒｅ ｇｅｎｅｔｉｃｓ，４０，３２９－３３４．
３１３．Ｐａｔｅｌ，Ｙ．Ｃ．（１９９９）Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆａｍｉｌｙ．Ｆｒｏｎｔ Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２
０，１５７－１９８．
３１４．Ｐｅｌｕｓｏ，Ｊ．，ＬａＦｏｒｇｅ，Ｋ．Ｓ．，Ｍａｔｔｈｅｓ，Ｈ．Ｗ．，
Ｋｒｅｅｋ，Ｍ．Ｊ．，Ｋｉｅｆｆｅｒ，Ｂ．Ｌ．＆Ｇａｖｅｒｉａｕｘ－Ｒｕｆｆ，Ｃ
．（１９９８）Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ／ｏｒｐｈａｎ
ｉｎ ＦＱ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｅｎｔｒ
ａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌｓ．Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８１，１８４－１９２．
３１５．Ｐｅｎｇ，Ｙ．－Ｍ．，ｖａｎ ｄｅ Ｇａｒｄｅ，Ｍ．Ｄ．，Ｃｈｅｎｇ，Ｋ
．－Ｆ．，Ｂａａｒｓ，Ｐ．Ａ．，Ｒｅｍｍｅｒｓｗａａｌ，Ｅ．Ｂ．，ｖａｎ Ｌｉｅ
ｒ，Ｒ．Ａ．，Ｍａｃｋａｙ，Ｃ．Ｒ．，Ｌｉｎ，Ｈ．－Ｈ．＆Ｈａｍａｎｎ，Ｊ．（２
０１１）Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＧＰＲ５６ ｂｙ ｈｕｍａ
ｎ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｌｅｕｋｏ
ｃｙｔｅ ｂｉｏｌｏｇｙ，９０，７３５－７４０．
３１６．Ｐｅｒｒｅｔ，Ｇ．，Ｖａｌｅｎｓｉ，Ｐ．，Ｈｕｇｕｅｓ，Ｊ．Ｎ．，Ｖａｓ
ｓｙ，Ｒ．＆Ｕｚｚａｎ，Ｂ．（１９８８）Ｕｓｅ ｏｆ ａ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎ
ｅｔｉｃ ｍｏｄｅｌ ｔｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ ｔｈｅ ｔｈｙｒｏｔｒｏｐ
ｉｎ（ＴＳＨ）ａｎｄ ｐｒｏｌａｃｔｉｎ（ＰＲＬ）ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｔｈｙ
ｒｏｔｒｏｐｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＴＨＲ）ｉｎ ｍａｎ．Ｍｅ
ｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ ｃ
ｌｉｎｉｃａｌ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１０，３８７－３９１．
３１７．Ｐｅｔｅｒｓｅｎ，Ｈ．＆Ｍｙｒｅｎ，Ｊ．（１９７４）Ｓｅｃｒｅｔｉｎ ｄ
ｏｓｅ－ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ
ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，１０，８５１－８６１．
３１８．Ｐｆｌｅｇｅｒ，Ｋ．Ｄ．＆Ｅｉｄｎｅ，Ｋ．Ａ．（２００６）Ｉｌｌｕｍｉｎ
ａｔｉｎｇ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｔｅ
ｒａｃｔｉｏｎｓ ｕｓｉｎｇ ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ
ｅｎｅｒｇｙ ｔｒａｎｓｆｅｒ（ＢＲＥＴ）．Ｎａｔ Ｍｅｔｈｏｄｓ ３，１６５
－１７４．
３１９．Ｐｉｉｒａｉｎｅｎ，Ｈ．，Ａｓｈｏｋ，Ｙ．，Ｎａｎｅｋａｒ，Ｒ．Ｔ．＆Ｊ
ａａｋｏｌａ，Ｖ．Ｐ．（２０１１）Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ
ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｆｒｏｍ ｃｒｙｓｔａｌ ｔｏ ｆｕｎｃ
ｔｉｏｎ．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ，１８０８，１２３３－１２４４
．
３２０．Ｐｉｌｌａｉ，Ｓ．Ｇ．，Ｃｏｕｓｅｎｓ，Ｄ．Ｊ．，Ｂａｒｎｅｓ，Ａ．Ａ．
，Ｂｕｃｋｌｅｙ，Ｐ．Ｔ．，Ｃｈｉａｎｏ，Ｍ．Ｎ．，Ｈｏｓｋｉｎｇ，Ｌ．Ｋ．，Ｃ
ａｍｅｒｏｎ，Ｌ．－Ａ．，Ｆｌｉｎｇ，Ｍ．Ｅ．，Ｆｏｌｅｙ，Ｊ．Ｊ．＆Ｇｒｅｅｎ
，Ａ．（２００４）Ａ ｃｏｄｉｎｇ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｔｈｅ ＣＹ
ＳＬＴ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｗｉｔｈ ｒｅｄｕｃｅｄ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｔｏ Ｌ
ＴＤ４ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｓｔｈｍａ．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅ
ｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，１４，６２７－６３３．
３２１．Ｐｉｏｍｅｌｌｉ，Ｄ．，Ａ．Ｇｉｕｆｆｒｉｄａ，Ａ．Ｃａｌｉｇｎａｎｏ，
ａｎｄ Ｆ．Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ ｄｅ Ｆｏｎｓｅｃａ．Ｔｈｅ ｅｎｄｏｃａｎｎａ
ｂｉｎｏｉｄ ｓｙｓｔｅｍ ａｓ ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉ
ｃ ｄｒｕｇｓ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ，２０００，２１：２１８
－２４．
３２２．Ｐｏｌｏｓｏ，Ｎ．Ｊ．，Ｕｒｑｕｈａｒｔ，Ｐ．，Ｎｉｃｏｌａｏｕ，Ａ．，
Ｗａｎｇ，Ｊ．＆Ｗｏｏｄｗａｒｄ，Ｄ．Ｆ．（２０１３）ＰＧＥ ２ ｄｉｆｆｅｒｅ
ｎｔｉａｌｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｍｏｎｏｃｙｔｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｄｅｎｄｒ
ｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｄｅｐｅｎｄｉｎｇ ｏ
ｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｕｓａｇｅ（ＥＰ ２／ＥＰ ４）．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｍ
ｍｕｎｏｌｏｇｙ，５４，２８４－２９５．
３２３．Ｐｏｗｅｌｌ，Ｗ．Ｓ．＆Ｒｏｋａｃｈ，Ｊ．（２０１３）Ｔｈｅ ｅｏｓｉｎ
ｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ ５－ｏｘｏ－ＥＴＥ ａｎｄ ｔｈｅ
ＯＸＥ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ ｌｉｐｉｄ ｒｅｓｅａｒｃｈ，
５２，６５１－６６５．
３２４．Ｐｕｔｒａｎｔｏ ＥＷ，Ｍｕｒａｔａ Ｈ，Ｙａｍａｍｏｔｏ Ｋ，Ｋａｔａ
ｏｋａ Ｋ，Ｙａｍａｄａ Ｈ，Ｆｕｔａｍｉ Ｊ，Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｍ，Ｈｕｈ
ＮＨ（２０１３）Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＲＡＧＥ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｔｈ
ｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｉｎｈｉ
ｂｉｔｏｒ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｂｙ ＰＥＩ ｃａｔｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｎｔ
Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ．，３２，９３８－９４４．
３２５．Ｑｉｎ，Ｌ．，Ｋｕｆａｒｅｖａ，Ｉ．，Ｈｏｌｄｅｎ，Ｌ．Ｇ．，Ｗａｎｇ，
Ｃ．，Ｚｈｅｎｇ，Ｙ．，Ｚｈａｏ，Ｃ．，Ｆｅｎａｌｔｉ，Ｇ．，Ｗｕ，Ｈ．，Ｈａｎ
，Ｇ．Ｗ．，Ｃｈｅｒｅｚｏｖ，Ｖ．，Ａｂａｇｙａｎ，Ｒ．，Ｓｔｅｖｅｎｓ，Ｒ．Ｃ
．＆Ｈａｎｄｅｌ，Ｔ．Ｍ．（２０１５）Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｂｉｏｌｏｇｙ．Ｃｒ
ｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒ ＣＸＣＲ４ ｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ａ ｖｉｒａｌ ｃｈｅｍｏｋｉｎ
ｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３４７，１１１７－１１２２．
３２６．Ｑｕ，Ｌ．，Ｆａｎ，Ｎ．，Ｍａ，Ｃ．，Ｗａｎｇ，Ｔ．，Ｈａｎ，Ｌ．，Ｆｕ
，Ｋ．，Ｗａｎｇ，Ｙ．，Ｓｈｉｍａｄａ，Ｓ．Ｇ．，Ｄｏｎｇ，Ｘ．＆ＬａＭｏｔｔｅ
，Ｒ．Ｈ．（２０１４）Ｅｎｈａｎｃｅｄ ｅｘｃｉｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＭＲＧＰ
ＲＡ３－ａｎｄ ＭＲＧＰＲＤ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｎｏｃｉｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ａ
ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｉｔｃｈ ａｎｄ ｐａｉｎ．Ｂｒａ
ｉｎ，１３７，１０３９－１０５０．
３２７．Ｑｕｉｇｌｅｙ，Ｄ．Ａ．，Ｔｏ，Ｍ．Ｄ．，Ｐｅｒｅｚ－Ｌｏｓａｄａ，Ｊ．
，Ｐｅｌｏｒｏｓｓｏ，Ｆ．Ｇ．，Ｍａｏ，Ｊ．－Ｈ．，Ｎａｇａｓｅ，Ｈ．，Ｇｉｎｚ
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ＮＡＤＨ／ＮＡＤＰＨ ｏｘｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔ
ｉｏｎ ｔｏ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｖａｓｏｍｏｔｏｒ ｔｏｎｅ，Ｊ Ｃ
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ｆ Ｐ２Ｙ１０，ａ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ Ｈｅｐｔａｈｅｌｉｃ
ａｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓ
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３３５．Ｒａｙ，Ｒ．，Ｊｕｒａｎｅｋ，Ｊ．Ｋ．＆Ｒａｉ，Ｖ．ＲＡＧＥ ａｘｉｓ
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ｎｄ ｉｔｓ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ
ｏｆ ａｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ ｌａｔｅｒａｌ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．Ｎｅｕｒｏｓ
ｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｂｉｏｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ｒｅｖｉｅｗｓ，２０１６，６２
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ｉｍｉｇｒａｉｎｅ ｄｒｕｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏ
ｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，９１，３６
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３３７．Ｒｅｅｓ，Ｓ．，ｄｅｎ Ｄａａｓ，Ｉ．，Ｆｏｏｒｄ，Ｓ．，Ｇｏｏｄｓｏｎ
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５‐ＨＴ５Ａ ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．ＦＥＢＳ ｌｅｔｔｅｒｓ，３
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３３８．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｌ．Ｊ．，Ｔｏｕｒｋｏｖａ，Ｉ．，Ｗａｎｇ，Ｙ．，Ｓｈ
ａｒｒｏｗ，Ａ．Ｃ．，Ｌａｎｄａｕ，Ｍ．Ｓ．，Ｙａｒｏｓｌａｖｓｋｉｙ，Ｂ．Ｂ．
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ｃｌａｓｔｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｒｅｓｅａ
ｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３９４，１２－１７．
３３９．Ｒｏｌｌｉｎｓ，Ｂ．Ｊ．（１９９６）Ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒ
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ｉｓｅａｓｅ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．Ｔｏｄａｙ，２：１９８－２０４．
３４０．Ｒｏｍｐｌｅｒ，Ｈ．，Ｓｃｈｕｌｚ，Ａ．，Ｐｉｔｒａ，Ｃ．，Ｃｏｏｐ，Ｇ
．，Ｐｒｚｅｗｏｒｓｋｉ，Ｍ．，Ｐａａｂｏ，Ｓ．＆Ｓｃｈｏｎｅｂｅｒｇ，Ｔ．（２
００５）Ｔｈｅ ｒｉｓｅ ａｎｄ ｆａｌｌ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃ
ｔａｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＧＰＲ３３．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａ
ｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．
３４１．Ｒｏｓｅｎ，Ｈ．，Ｇｏｎｚａｌｅｚ－Ｃａｂｒｅｒａ，Ｐ．Ｊ．，Ｓａｎｎａ
，Ｍ．Ｇ．＆Ｂｒｏｗｎ，Ｓ．（２００９）Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ １－ｐｈｏｓｐｈ
ａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ
，７８，７４３－７６８．
３４２．Ｒｏｓｓｉ，Ｌ．，Ｌｅｍｏｌｉ，Ｒ．Ｍ．＆Ｇｏｏｄｅｌｌ，Ｍ．Ａ．（２０
１３）Ｇｐｒ１７１，ａ ｐｕｔａｔｉｖｅ Ｐ２Ｙ－ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｎ
ｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｍｙｅｌｏｉｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔ
ｉｏｎ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ．
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，４１，１０２－１１２．
３４３．Ｒｏｙ Ａ，Ｋｕｃｕｋｕｒａｌ Ａ，Ｚｈａｎｇ Ｙ．Ｉ－ＴＡＳＳＥＲ：ａ
ｕｎｉｆｉｅｄ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ
Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，２０１０，５：７２５－７３８．
３４４．Ｒｕｂｉｃ，Ｔ．，Ｌａｍｅｔｓｃｈｗａｎｄｔｎｅｒ，Ｇ．，Ｊｏｓｔ，Ｓ．
，Ｈｉｎｔｅｒｅｇｇｅｒ，Ｓ．，Ｋｕｎｄ，Ｊ．，Ｃａｒｂａｌｌｉｄｏ－Ｐｅｒｒｉ
ｇ，Ｎ．，Ｓｃｈｗａｅｒｚｌｅｒ，Ｃ．，Ｊｕｎｔ，Ｔ．，Ｖｏｓｈｏｌ，Ｈ．＆Ｍｅ
ｉｎｇａｓｓｎｅｒ，Ｊ．Ｇ．（２００８）Ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇ ｔｈｅ ｓｕｃｃｉ
ｎａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＧＰＲ９１ ｏｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｅ
ｎｈａｎｃｅｓ ｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｎａｔｕｒｅ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，９，１２６
１－１２６９．
３４５．Ｒｕｓｓｏ，Ｉ．＆Ｆｒａｎｇｏｇｉａｎｎｉｓ，Ｎ．Ｇ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ－
ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｃａｒｄｉａｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ：Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｅｆｆ
ｅｃｔｏｒｓ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕ
ｔｉｃ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａ
ｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ，２０１６，９０：８４－９３．
３４６．Ｓａｂａｎ，Ｒ．，Ｓａｂａｎ，Ｍ．Ｒ．，Ｎｇｕｙｅｎ，Ｎ．－Ｂ．，Ｌｕ，
Ｂ．，Ｇｅｒａｒｄ，Ｃ．，Ｇｅｒａｒｄ，Ｎ．Ｐ．＆Ｈａｍｍｏｎｄ，Ｔ．Ｇ．（２０
００）Ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎ－１（ＮＫ－１）ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅ
ｄ ｉｎ ａｎｔｉｇｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｙｓｔｉｔｉｓ．Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃ
ａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１５６，７７５－７８０．
３４７．Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｍ，Ｍｕｒａｔａ Ｈ，Ｙａｍａｍｏｔｏ Ｋ，Ｏｎｏ
Ｔ，Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｙ，Ｍｏｔｏｙａｍａ Ａ，Ｈｉｂｉｎｏ Ｔ，Ｋａｔａｏｋ
ａ Ｋ，Ｈｕｈ ＮＨ．（２０１１）ＴＩＲＡＰ，ａｎ ａｄａｐｔｏｒ ｐｒｏｔｅｉ
ｎ ｆｏｒ ＴＬＲ２／４，ｔｒａｎｓｄｕｃｅｓ ａ ｓｉｇｎａｌ ｆｒｏｍ ＲＡ
ＧＥ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ ｕｐｏｎ ｌｉｇａｎｄ ｂｉｎｄｉｎｇ．ＰＬ
ｏＳ Ｏｎｅ，６：ｅ２３１３２．
３４８．Ｓａｋａｍｏｔｏ，Ｙ．，Ｉｎｏｕｅ，Ｈ．，Ｋａｗａｋａｍｉ，Ｓ．，Ｍｉｙ
ａｗａｋｉ，Ｋ．，Ｍｉｙａｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｍｉｚｕｔａ，Ｋ．＆Ｉｔａｋｕｒａ，Ｍ
．（２００６）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｐ
ｒ１１９ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｉｓｌｅｔｓ ｏｆ ｍｉｃｅ ａｎ
ｄ ｒａｔｓ：ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ＰＰ－ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎ
ｉｃａｔｉｏｎｓ，３５１，４７４－４８０．
３４９．Ｓａｌｍｏｎ，Ａ．－Ｍ．，Ｄａｍａｊ，Ｍ．Ｉ．，Ｍａｒｕｂｉｏ，Ｌ．Ｍ．
，Ｅｐｐｉｎｇ－Ｊｏｒｄａｎ，Ｍ．Ｐ．，Ｍｅｒｌｏ－Ｐｉｃｈ，Ｅ．＆Ｃｈａｎｇｅ
ｕｘ，Ｊ．－Ｐ．（２００１）Ａｌｔｅｒｅｄ ｎｅｕｒｏａｄａｐｔａｔｉｏｎ ｉｎ
ｏｐｉａｔｅ ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ ａｎｄ ｎｅｕｒｏｇｅｎｉｃ ｉｎｆｌａｍ
ｍａｔｏｒｙ ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ ｉｎ αＣＧＲＰ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉ
ｃｅ．Ｎａｔｕｒｅ ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，４，３５７－３５８．
３５０．Ｓａｍｐａｉｏ，Ａ．Ｌ．，Ｒａｅ，Ｇ．Ａ．＆Ｍａｒｉａ ｄａｓ Ｇｒａｃ
ａｓ，Ｍ．（２００４）Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ＥＴＡ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｏｎ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ａｎｄ ｌｙｍｐ
ｈｏｃｙｔｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ＬＰＳ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｆｌａ
ｍｍａｔｉｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｂｉｏｌｏｇｙ，７６，
２１０－２１６．
３５１．Ｓａｒｋａｒ，Ｃ．，Ｄａｓ，Ｓ．，Ｃｈａｋｒｏｂｏｒｔｙ，Ｄ．，Ｃｈｏｗ
ｄｈｕｒｙ，Ｕ．Ｒ．，Ｂａｓｕ，Ｂ．，Ｄａｓｇｕｐｔａ，Ｐ．Ｓ．＆Ｂａｓｕ，Ｓ．
（２００６）Ｃｕｔｔｉｎｇ ｅｄｇｅ：ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｏｐａｍｉ
ｎｅ Ｄ４ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎｄｕｃｅ Ｔ ｃｅｌｌ ｑｕｉｅｓｃｅｎｃｅ
ｂｙ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｋｒｕｅｐｐｅｌ－ｌｉｋｅ ｆａｃｔｏｒ－２
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＥＲＫ１／Ｅ
ＲＫ２ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ，１７７，７５２５－７５２９．
３５２．Ｓａｓａｋｉ，Ｙ．，Ｈｏｓｈｉ，Ｍ．，Ａｋａｚａｗａ，Ｃ．，Ｎａｋａｍｕ
ｒａ，Ｙ．，Ｔｓｕｚｕｋｉ，Ｈ．，Ｉｎｏｕｅ，Ｋ．＆Ｋｏｈｓａｋａ，Ｓ．（２００
３）Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｇｉ／ｏ‐ｃｏｕｐｌｅｄ Ａ
ＴＰ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｐ２Ｙ１２ ｉｎ ｍｉｃｒｏｇｌｉａ ｉｎ ｒａｔ ｂｒ
ａｉｎ．Ｇｌｉａ，４４，２４２－２５０．
３５３．Ｓａｔｏ，Ｋ．Ｚ．，Ｆｕｊｉｉ，Ｔ．，Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｙ．，Ｙａｍａｄ
ａ，Ｓ．，Ａｎｄｏ，Ｔ．，Ｋａｚｕｋｏ，Ｆ．＆Ｋａｗａｓｈｉｍａ，Ｋ．（１９９９
）Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｒ ｍｕｓｃａｒ
ｉｎｉｃ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｂｔｙｐｅｓ ａｎｄ
ｎｅｕｒｏｎａｌ ｎｉｃｏｔｉｎｉｃ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔ
ｏｒ ｓｕｂｕｎｉｔｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｌｅｕｋｏｃｙ
ｔｅｓ ａｎｄ ｌｅｕｋｅｍｉｃ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ
ｌｅｔｔｅｒｓ，２６６，１７－２０．
３５４．Ｓａｔｏｈ，Ａ．，Ｓｈｉｍｏｓｅｇａｗａ，Ｔ．，Ｓａｔｏｈ，Ｋ．，Ｉｔｏ
，Ｈ．，Ｋｏｈｎｏ，Ｙ．，Ｍａｓａｍｕｎｅ，Ａ．，Ｆｕｊｉｔａ，Ｍ．＆Ｔｏｙｏｔ
ａ，Ｔ．（２０００）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ａ１－ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｄｕｃｅｓ ｅｄｅｍａ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｎ
ｔｈｅ ｐａｎｃｒｅａｓ ｏｆ ｒａｔｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，１
１９，８２９－８３６．
３５５．Ｓｃｈａｕｂ，Ａ．，Ｆｕｔｔｅｒｅｒ，Ａ．＆Ｐｆｅｆｆｅｒ，Ｋ．（２００
１）ＰＵＭＡ－Ｇ，ａｎ ＩＦＮ－ｇａｍｍａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｇｅｎｅ ｉｎ
ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｍｅｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｖ
ｅｎ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｓｐａｎｎｉｎｇ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｐｅｒ
ｆａｍｉｌｙ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３１，３７１４－３７２５．
３５６．Ｓｃｈｉｆｆｍａｎｎ，Ｅ．，Ｃｏｒｃｏｒａｎ，Ｂ．Ａ．＆Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ
．（１９７５）Ｎ－ｆｏｒｍｙｌｍｅｔｈｉｏｎｙｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｓ ｃｈｅ
ｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔｓ ｆｏｒ ｌｅｕｃｏｃｙｔｅｓ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ
ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，７２，
１０５９－１０６２．
３５７．Ｓｃｈｍｉｄｈｕｂｅｒ，Ｓ．Ｍ．，Ｒａｕｃｈ，Ｉ．，Ｋｏｆｌｅｒ，Ｂ．＆
Ｂｒａｉｎ，Ｓ．Ｄ．（２００９）Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｏｄｕｌａ
ｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇａｌａｎｉｎ ｏｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅ
ｄｅｍａ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｇａｌａｎｉ
ｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ３ ｉｎ ｔｈｅ ｍｕｒｉｎｅ ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｔ
ｕｒｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ：ＭＮ
，３７，１７７－１８１．
３５８．Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ａ．Ｍ．，Ｙａｎ，Ｓ．Ｄ．，Ｗａｕｔｉｅｒ，Ｊ．Ｌ．＆Ｓ
ｔｅｒｎ，Ｄ．（１９９９）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ
ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ：ａ ｍｅｃｈａｎ
ｉｓｍ ｆｏｒ ｃｈｒｏｎｉｃ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ
ｄｉａｂｅｔｉｃ ｖａｓｃｕｌｏｐａｔｈｙ ａｎｄ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉ
ｓ．Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ，８４：４８９－４９７．
３５９．Ｓｃｈｍｉｔｚ，Ｆ．，Ｓｃｈｒａｄｅｒ，Ｈ．，Ｏｔｔｅ，Ｊ．－Ｍ．，Ｓｃ
ｈｍｉｔｚ，Ｈ．，Ｓｔｕｅｂｅｒ，Ｅ．，Ｈｅｒｚｉｇ，Ｋ．－Ｈ．＆Ｓｃｈｍｉｄｔ
，Ｗ．Ｅ．（２００１）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＣＫ－Ｂ／ｇａｓｔｒ
ｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｐｌｉｃｅ ｖａｒｉａｎｔｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｅｒ
ｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｇｕｌａｔｏ
ｒｙ ｐｅｐｔｉｄｅｓ，１０１，２５－３３．
３６０．Ｓｃｈｕｅｌｅｒｔ，Ｎ．＆ＭｃＤｏｕｇａｌｌ，Ｊ．Ｊ．（２０１１）Ｔｈｅ
ａｂｎｏｒｍａｌ ｃａｎｎａｂｉｄｉｏｌ ａｎａｌｏｇｕｅ Ｏ－１６０２ ｒｅ
ｄｕｃｅｓ ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａｃｕｔ
ｅ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｖｉａ ｔｈｅ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＧＰＲ５５．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ｌｅｔｔｅｒｓ，５００
，７２－７６．
３６１．Ｓｃｈｗａｒｚｅ，Ｓ．Ｒ．，Ｈｒｕｓｋａ，Ｋ．Ａ．，Ｄｏｗｄｙ，Ｓ．Ｆ．
（２０００）Ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ：ｕｎｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ
ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｉｎｔｏ ａｌｌ ｃｅｌｌｓ？Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ
，１０：２９０－２９５．
３６２．Ｓｈｅｎ，Ｚ．－Ｊ．，Ｈｕ，Ｊ．，Ｅｓｎａｕｌｔ，Ｓ．，Ｄｏｚｍｏｒｏｖ
，Ｉ．＆Ｍａｌｔｅｒ，Ｊ．Ｓ．（２０１５）ＲＮＡ Ｓｅｑ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｒ
ｅｖｅａｌｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ ＴＧＦ
－β ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｌｏｏｄ ｅｏｓｉｎｏｐｈｉ
ｌｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ｌｅｔｔｅｒｓ，１６７，１－１０．
３６３．Ｓｈｅｎ．Ｊ．，Ｈｕａｎｇ．Ｙ．Ｍ．，Ｗａｎｇ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．（２０
１６）Ｒｅｎｉｎ－ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ｂｌｏｃｋａｄｅ ｆｏｒ
ｔｈｅ ｒｉｓｋ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｄｅａｔｈ．Ｊ Ｒｅｎｉｎ Ａｎ
ｇｉｏｔｅｎｓｉｎ Ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ Ｓｙｓｔ．８，１７（３）．
３６４．Ｓｈｉｈｏｙａ，Ｗ．，Ｎｉｓｈｉｚａｗａ，Ｔ．，Ｏｋｕｔａ，Ａ．，Ｔａｎ
ｉ，Ｋ．，Ｄｏｈｍａｅ，Ｎ．，Ｆｕｊｉｙｏｓｈｉ，Ｙ．，Ｎｕｒｅｋｉ，Ｏ．＆Ｄｏ
ｉ，Ｔ．（２０１６）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈ
ｅｌｉｎ ＥＴＢ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｂｙ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１．Ｎａｔｕｒｅ
，５３７，３６３－３６８．
３６５．Ｓｉｍａ，Ｃ．，Ｃｈｅｎｇ，Ｑ．，Ｒａｕｔａｖａ，Ｊ．，Ｌｅｖｅｓｑｕｅ
，Ｃ．，Ｓｈｅｒｍａｎ，Ｐ．＆Ｇｌｏｇａｕｅｒ，Ｍ．（２０１５）Ｉｄｅｎｔｉｆｉ
ｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｔｒａｉｔ ｌｏｃｉ ｉｎｆｌｕｅ
ｎｃｉｎｇ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ‐ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｌｖｅｏｌａｒ ｂｏｎ
ｅ ｌｏｓｓ：ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｐｏｌｙｇｅｎｉｃ ｉｎｈｅｒｉｔａｎ
ｃｅ ｏｆ ｈｏｓｔ－ｂｉｏｆｉｌｍ ｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｉａ ｉｎ ｐｅｒｉ
ｏｄｏｎｔｉｔｉｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｒｅｓｅａｒｃ
ｈ．
３６６．Ｓｊｏｌａｎｄｅｒ Ｓ ａｎｄ Ｕｒｂａｎｉｃｚｋｙ Ｃ．Ｉｎｔｅｇｒａ
ｔｅｄ ｆｌｕｉｄ ｈａｎｄｌｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９１，
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３６７．Ｓｏｈｎ，Ｓ．－Ｈ．，Ｃｈｕｎｇ，Ｈ．－Ｓ．，Ｋｏ，Ｅ．，Ｊｅｏｎｇ，Ｈ
．－ｊ．，Ｋｉｍ，Ｓ．－Ｈ．，Ｊｅｏｎｇ，Ｊ．－Ｈ．，Ｋｉｍ，Ｙ．，Ｓｈｉｎ，Ｍ
．，Ｈｏｎｇ，Ｍ．＆Ｂａｅ，Ｈ．（２００９）Ｔｈｅ ｇｅｎｏｍｅ－ｗｉｄｅ ｅｘ
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅ ｏｆ Ｎｅｌｕｍｂｉｎｉｓ ｓｅｍｅｎ ｏｎ
ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ＢＶ－２ ｍｉｃｒｏ
ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ
ｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，３２，１０１２－１０２０．
３６８．Ｓｏｌｉｎｓｋｉ，Ｈ．Ｊ．，Ｐｅｔｅｒｍａｎｎ，Ｆ．，Ｒｏｔｈｅ，Ｋ．，
Ｂｏｅｋｈｏｆｆ，Ｉ．，Ｇｕｄｅｒｍａｎｎ，Ｔ．＆Ｂｒｅｉｔ，Ａ．（２０１３）Ｈ
ｕｍａｎ Ｍａｓ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ｃｏｕｐｌｅｄ Ｒｅｃｅｐ
ｔｏｒｓ－Ｘ１ Ｉｎｄｕｃｅ Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ Ｅｘｐｒ
ｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｒａｔ Ｄｏｒｓａｌ Ｒｏｏｔ Ｇａｎｇｌｉａ Ｎｅｕｒｏｎ
ｓ ａｎｄ Ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ Ｌｉｇａｎｄ ２ ｆｒｏｍ
ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ＬＡＤ－２ Ｍａｓｔ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ
，８，ｅ５８７５６．
３６９．Ｓｏｎｏｂｅ，Ｙ．，Ｎａｋａｎｅ，Ｈ．，Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｔ．＆Ｎａｋａ
ｎｏ，Ｋ．（２００４）Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｎ Ａ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ
ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ＣＤ４＋ ａｎｄ ＣＤ８＋
Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｂｙ ａｕｔｏｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｓｔａｍ
ｉｎｅ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５３，８７－９２．
３７０．Ｓｏｎｏｄａ，Ｎ．，Ｋａｔａｂｕｃｈｉ，Ｈ．，Ｔａｓｈｉｒｏ，Ｈ．，Ｏｈ
ｂａ，Ｔ．，Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｒ．，Ｍｉｎｅｇｉｓｈｉ，Ｔ．＆Ｏｋａｍｕｒａ，
Ｈ．（２００５）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｖａｒｉａｎｔ ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎ
ｇ ｈｏｒｍｏｎｅ／ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒｓ ａｎｄ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｇｏｎａｄｏｔｒ
ｏｐｉｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｖｉｌｌｏｕｓ ｍａｃｒｏｐｈａ
ｇｅｓ．Ｐｌａｃｅｎｔａ，２６，２９８－３０７．
３７１．Ｓｏｒｏ－Ｐａａｖｏｎｅｎ，Ａ．，Ｗａｔｓｏｎ，ＡＭ．，Ｔｈｏｍａｓ，Ｍ
．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌ
ｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＲＡＧＥ）ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｔｔ
ｅｎｕａｔｅｓ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓ
ｉｓ ｉｎ ｄｉａｂｅｔｅｓ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５７：２４６１－２４６９．
３７２．Ｓｏｕｚａ，Ｄ．Ｇ．，Ｌｏｍｅｚ，Ｅ．Ｓ．Ｌ．，Ｐｉｎｈｏ，Ｖ．，Ｐｅｓ
ｑｕｅｒｏ，Ｊ．Ｂ．，Ｂａｄｅｒ，Ｍ．，Ｐｅｓｑｕｅｒｏ，Ｊ．Ｌ．＆Ｔｅｉｘｅｉ
ｒａ，Ｍ．Ｍ．（２００４）Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｂｒａｄｙｋｉｎｉｎ Ｂ２ ａｎｄ Ｂ
１ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｌｏｃａｌ，Ｒｅｍｏｔｅ，ａｎｄ Ｓｙｓｔ
ｅｍｉｃ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ Ｔｈａｔ Ｆｏｌｌｏｗ
Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｉｓｃｈｅｍｉａ ａｎｄ Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ Ｉｎｊｕ
ｒｙ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７２，２５４２－２５
４８．
３７３．Ｓｐａｒｖｅｒｏ，Ｌ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ．（２００９）ＲＡＧＥ（Ｒｅｃｅｐ
ｔｏｒ ｆｏｒ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ），
ＲＡＧＥ ｌｉｇａｎｄｓ，ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ａｎ
ｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ
ｍｅｄｉｃｉｎｅ，７：１７．
３７４．Ｓｔａｃｅｙ，Ｍ．，Ｌｉｎ，Ｈ．－Ｈ．，Ｈｉｌｙａｒｄ，Ｋ．Ｌ．，Ｇｏｒ
ｄｏｎ，Ｓ．＆ＭｃＫｎｉｇｈｔ，Ａ．Ｊ．（２００１）Ｈｕｍａｎ ｅｐｉｄｅｒｍａ
ｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（ＥＧＦ）ｍｏｄｕｌｅ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｍｕ
ｃｉｎ－ｌｉｋｅ ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ３ ｉｓ ａ ｎｅｗ ｍｅｍ
ｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ＥＧＦ－ＴＭ７ ｆａｍｉｌｙ ｔｈａｔ ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ
ｓ ａ ｌｉｇａｎｄ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ａｎｄ ａｃｔｉ
ｖａｔｅｄ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７６，１８８６３－１８８７０．
３７５．Ｓｔｅｆｕｌｊ，Ｊ．，Ｊｅｒｎｅｊ，Ｂ．，Ｃｉｃｉｎ－Ｓａｉｎ，Ｌ．，Ｒ
ｉｎｎｅｒ，Ｉ．＆Ｓｃｈａｕｅｎｓｔｅｉｎ，Ｋ．（２０００）ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅ
ｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｃｅｌｌｓ ｏｆ
ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔ．Ｂｒａｉｎ，ｂｅｈ
ａｖｉｏｒ，ａｎｄ ｉｍｍｕｎｉｔｙ，１４，２１９－２２４．
３７６．Ｓｔｏｃｋｈａｍｍｅｒ，Ｏ．Ｗ．，Ｒａｕｗｅｒｄａ，Ｈ．，Ｗｉｔｔｉｎｋ
，Ｆ．Ｒ．，Ｂｒｅｉｔ，Ｔ．Ｍ．，Ｍｅｉｊｅｒ，Ａ．Ｈ．＆Ｓｐａｉｎｋ，Ｈ．Ｐ．
（２０１０）Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｔｒａｆ６ ｆｕ
ｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｏｆ
ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｅｍｂｒｙｏｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４
８，１７９－１９０．
３７７．Ｓｔｏｄｄａｒｔ ＬＡ，Ｊｏｈｎｓｔｏｎｅ ＥＫＭ，Ｗｈｅａｌ ＡＪ，Ｇ
ｏｕｌｄｉｎｇ Ｊ，Ｒｏｂｅｒｓ ＭＢ，Ｍａｃｈｌｅｉｄｔ Ｔ，Ｗｏｏｄ ＫＶ，
Ｈｉｌｌ ＳＪ ａｎｄ Ｐｆｌｅｇｅｒ ＫＤＧ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂ
ＲＥＴ ｔｏ ｍｏｎｉｔｏｒ ｌｉｇａｎｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｔｏ ＧＰＣＲｓ．Ｎ
ａｔ Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０１５，１２：６６１－６６３．
３７８．Ｓｕ Ｐ．Ｃ．，Ｂｅｒｇｅｒ Ｂ．Ｗ．（２０１３）Ａ ｎｏｖｅｌ ａｓｓ
ａｙ ｆｏｒ ａｓｓｅｓｓｉｎｇ ｊｕｘｔａｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｄ ｔｒａｎｓ
ｍｅｍｂｒａｎｅ ｄｏｍａｉｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆ
ｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏ
ｌ．４２５，４６５２－４６５８．
３７９．Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ，Ｈ．，Ｇｕｐｔａ，Ｋ．，Ｇｕｏ，Ｑ．，Ｐｒｉｃｅ
，Ｒ．＆Ａｌｉ，Ｈ．（２０１１）Ｍａｓ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｇｅｎｅ Ｘ２（ＭｒｇＸ
２）Ｉｓ ａ Ｎｏｖｅｌ Ｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｆｏｒ ｔｈｅ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｐｅｐｔｉｄｅ ＬＬ－３７ ｉｎ Ｈ
ｕｍａｎ Ｍａｓｔ Ｃｅｌｌｓ ＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥ ＴＯ ＲＥＣＥＰＴＯＲ Ｐ
ＨＯＳＰＨＯＲＹＬＡＴＩＯＮ，ＤＥＳＥＮＳＩＴＩＺＡＴＩＯＮ，ＡＮＤ ＩＮＴＥＲ
ＮＡＬＩＺＡＴＩＯＮ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ，２８６，４４７３９－４４７４９．
３８０．Ｓｕｇｉｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｓａｉｔｏ，Ｍ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ，Ｓ．，Ｗａ
ｔａｎａｂｅ，Ｙ．，Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ，Ｓ．＆Ｋａｗａｓｈｉｍａ，Ｈ．（１９９４
）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｅｘｐｒｅｓ
ｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｃＤＮＡ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ Ｖ１ｂ ｖａ
ｓｏｐｒｅｓｓｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２６９，２７０８８－２７０９２．
３８１．Ｓｕｇｉｍｏｔｏ，Ｙ．＆Ｎａｒｕｍｉｙａ，Ｓ．（２００７）Ｐｒｏｓｔａｇ
ｌａｎｄｉｎ Ｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２８２，１１６１３
－１１６１７．
３８２．Ｓｕｇｏ，Ｔ．，Ｔａｃｈｉｍｏｔｏ，Ｈ．，Ｃｈｉｋａｔｓｕ，Ｔ．，Ｍｕｒ
ａｋａｍｉ，Ｙ．，Ｋｉｋｕｋａｗａ，Ｙ．，Ｓａｔｏ，Ｓ．，Ｋｉｋｕｃｈｉ，Ｋ．，
Ｎａｇｉ，Ｔ．，Ｈａｒａｄａ，Ｍ．＆Ｏｇｉ，Ｋ．（２００６）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒ ｏｎ ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｐｈｙｓｉ
ｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３４１，１０７８－１０８
７．
３８３．Ｓｕｋｋａｒ，Ｍ．Ｂ．，ｅｔ ａｌ．ＲＡＧＥ：ａ ｎｅｗ ｆｒｏｎｔｉｅ
ｒ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ａｉｒｗａｙｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕ
ｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１２，１６７：１１６１－１１７６．
３８４．Ｓｕｎｕｗａｒ，Ｌ．，Ｍｅｄｉｎｉ，Ｍ．，Ｃｏｈｅｎ，Ｌ．，Ｓｅｋｌｅｒ
，Ｉ．＆Ｈｅｒｓｈｆｉｎｋｅｌ，Ｍ．（２０１６）Ｔｈｅ ｚｉｎｃ ｓｅｎｓｉｎｇ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＺｎＲ／ＧＰＲ３９，ｔｒｉｇｇｅｒｓ ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉ
ｃ ｃａｌｃｉｕｍ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｉｎ ｃｏｌｏｎｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ
ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｏｃｃｌｕｄｉｎ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎ
ｔａｌ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｐｈｉｌ．Ｔｒａｎｓ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｂ，３７１，２０１５０
４２０．
３８５．Ｓｕｚｕｋｉ，Ｔ．，Ｗｏｎ，Ｋ．－Ｊ．，Ｈｏｒｉｇｕｃｈｉ，Ｋ．，Ｋｉｎ
ｏｓｈｉｔａ，Ｋ．，Ｈｏｒｉ，Ｍ．，Ｔｏｒｉｈａｓｈｉ，Ｓ．，Ｍｏｍｏｔａｎｉ，
Ｅ．，Ｉｔｏｈ，Ｋ．，Ｈｉｒａｙａｍａ，Ｋ．＆Ｗａｒｄ，Ｓ．Ｍ．（２００４）Ｍｕ
ｓｃｕｌａｒｉｓ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｏｓｓ ｏｆ ｉｎ
ｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｏｆ Ｃａｊａｌ ｉｎ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅ
ｌｉｎ ＥＴＢ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｎｕｌｌ ｒａｔ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ－Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｄ Ｌｉ
ｖｅｒ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２８７，Ｇ６３８－Ｇ６４６．
３８６．Ｓｗａｎ，Ｃ．，Ｄｕｒｏｕｄｉｅｒ，Ｎ．Ｐ．，Ｃａｍｐｂｅｌｌ，Ｅ．，Ｚ
ａｉｔｏｕｎ，Ａ．，Ｈａｓｔｉｎｇｓ，Ｍ．，Ｄｕｋｅｓ，Ｇ．Ｅ．，Ｃｏｘ，Ｊ．，
Ｋｅｌｌｙ，Ｆ．Ｍ．，Ｗｉｌｄｅ，Ｊ．＆Ｌｅｎｎｏｎ，Ｍ．Ｇ．（２０１３）Ｉｄｅ
ｎｔｉｆｙｉｎｇ ａｎｄ ｔｅｓｔｉｎｇ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｐ
ｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｒｒｉｔａｂｌｅ ｂｏｗｅｌ ｓｙｎｄ
ｒｏｍｅ（ＩＢＳ）：ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＴＮＦＳＦ１５ ａｎｄ Ｔ
ＮＦα．Ｇｕｔ，６２，９８５－９９４．
３８７．Ｓｗａｎｅｙ，Ｊ．，Ｃｈａｐｍａｎ，Ｃ．，Ｃｏｒｒｅａ，Ｌ．，Ｓｔｅｂｂ
ｉｎｓ，Ｋ．，Ｂｕｎｄｅｙ，Ｒ．，Ｐｒｏｄａｎｏｖｉｃｈ，Ｐ．，Ｆａｇａｎ，Ｐ．
，Ｂａｃｃｅｉ，Ｃ．，Ｓａｎｔｉｎｉ，Ａ．＆Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎ，Ｊ．（２０１０
）Ａ ｎｏｖｅｌ，ｏｒａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ＬＰＡ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔ
ａｇｏｎｉｓｔ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｌｕｎｇ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏ
ｕｓｅ ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ ｍｏｄｅｌ．Ｂｒｉｔｉｓｈ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐ
ｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１６０，１６９９－１７１３．
３８８．Ｓｚａｂｏ，Ａ．，Ｓｔｏｌｚ，Ｌ．ａｎｄ Ｇｒａｎｚｏｗ，Ｒ．Ｓｕｒｆａ
ｃｅ ｐｌａｓｍｏｎ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｕｓｅ ｉｎ ｂｉｏｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ（ＢＩＡ）．Ｃｕｒｒ
Ｏｐｉｎ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ，１９９５，５：６９９－７０５．
３８９．Ｔａｇｕｃｈｉ，Ａ．，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｂｌｏｃｋａｄｅ ｏｆ Ｒ
ＡＧＥ－ａｍｐｈｏｔｅｒｉｎ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｔｕｍ
ｏｕｒ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．Ｎａｔｕｒｅ，４０５：３５４
－３６０．
３９０．Ｔａｋａｙａｍａ，Ｋ．，Ｙｕｈｋｉ，Ｋ．，Ｏｎｏ，Ｋ．，Ｆｕｊｉｎｏ，Ｔ
．，Ｈａｒａ，Ａ．，Ｙａｍａｄａ，Ｔ．，Ｋｕｒｉｙａｍａ，Ｓ．，Ｋａｒｉｂｅ，Ｈ
．，Ｏｋａｄａ，Ｙ．，Ｔａｋａｈａｔａ，Ｏ．，Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ，Ｔ．，Ｉｉｊｉ
ｍａ，Ｔ．，Ｉｗａｓａｋｉ，Ｈ．，Ｎａｒｕｍｉｙａ，Ｓ．＆Ｕｓｈｉｋｕｂｉ，Ｆ．
（２００５）Ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ Ａ２ ａｎｄ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｆ
２ａｌｐｈａ ｍｅｄｉａｔｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ．
Ｎａｔ Ｍｅｄ，１１，５６２－５６６．
３９１．Ｔａｋｅｎｏｕｃｈｉ，Ｒ．，Ｉｎｏｕｅ，Ｋ．，Ｋａｍｂｅ，Ｙ．＆Ｍｉｙａ
ｔａ，Ａ．（２０１２）Ｎ－ａｒａｃｈｉｄｏｎｏｙｌ ｇｌｙｃｉｎｅ ｉｎｄｕｃｅ
ｓ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｖｉａ ＧＰＲ１８．Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔ
ｉｏｎｓ，４１８，３６６－３７１．
３９２．Ｔａｎ，Ｑ．，Ｚｈｕ，Ｙ．，Ｌｉ，Ｊ．，Ｃｈｅｎ，Ｚ．，Ｈａｎ，Ｇ．Ｗ．
，Ｋｕｆａｒｅｖａ，Ｉ．，Ｌｉ，Ｔ．，Ｍａ，Ｌ．，Ｆｅｎａｌｔｉ，Ｇ．，Ｌｉ，Ｊ
．，Ｚｈａｎｇ，Ｗ．，Ｘｉｅ，Ｘ．，Ｙａｎｇ，Ｈ．，Ｊｉａｎｇ，Ｈ．，Ｃｈｅｒｅ
ｚｏｖ，Ｖ．，Ｌｉｕ，Ｈ．，Ｓｔｅｖｅｎｓ，Ｒ．Ｃ．，Ｚｈａｏ，Ｑ．＆Ｗｕ，Ｂ．
（２０１３）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ＣＣＲ５ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ－ＨＩＶ ｅｎｔｒｙ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｍａｒａｖｉｒｏｃ ｃｏｍ
ｐｌｅｘ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３４１，１３８７－１３９０．
３９３．Ｔａｎｉｙａｍａ，Ｙ．，Ｓｕｚｕｋｉ，Ｔ．，Ｍｉｋａｍｉ，Ｙ．，Ｍｏｒｉ
ｙａ，Ｔ．，Ｓａｔｏｍｉ，Ｓ．＆Ｓａｓａｎｏ，Ｈ．（２００５）Ｓｙｓｔｅｍｉｃ
ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕ
ｂｔｙｐｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ：ａｎ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｓ
ｔｕｄｙ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｊｏｕｒｎａｌ，５２，６０５－６１１．
３９４．Ｔａｑｕｅｔ，Ｎ．，Ｐｈｉｌｉｐｐｅ，Ｃ．，Ｒｅｉｍｕｎｄ，Ｊ．－Ｍ．＆
Ｍｕｌｌｅｒ，Ｃ．Ｄ．（２０１２）Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｂｏｗｅｌ Ｄｉｓｅ
ａｓｅ Ｇ－Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｏｕｐｌｅｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ（ＧＰＣＲｓ）Ｅｘ
ｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｗｉｔｈ Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ Ｃａｒ
ｄｓ．
３９５．Ｔａｕｂ，Ｄ．Ｄ．，Ｅｉｓｅｎｓｔｅｉｎ，Ｔ．Ｋ．，Ｇｅｌｌｅｒ，Ｅ．Ｂ
．，Ａｄｌｅｒ，Ｍ．Ｗ．＆Ｒｏｇｅｒｓ，Ｔ．Ｊ．（１９９１）Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕ
ｌａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｍｕ－ａｎｄ ｋａｐｐａ－ｓｅｌｅｃｔｉｖ
ｅ ｏｐｉｏｉｄ ａｇｏｎｉｓｔｓ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔ
ｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，８８，３６０－３６４．
３９６．Ｔａｙｅｂａｔｉ，Ｓ．，Ｂｒｏｎｚｅｔｔｉ，Ｅ．，Ｍｏｒｒａ Ｄｉ Ｃｅ
ｌｌａ，Ｓ．，Ｍｕｌａｔｅｒｏ，Ｐ．，Ｒｉｃｃｉ，Ａ．，Ｒｏｓｓｏｄｉｖｉｔａ，
Ｉ．，Ｓｃｈｅｎａ，Ｍ．，Ｓｃｈｉａｖｏｎｅ，Ｄ．，Ｖｅｇｌｉｏ，Ｆ．＆Ａｍｅｎ
ｔａ，Ｆ．（２０００）Ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍ
ｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ａｌｐｈａ１‐ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒｓ
ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｊ
ｏｕｒｎａｌ ｏｆ ａｕｔｏｎｏｍｉｃ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０，３０５－
３１２．
３９７．Ｔｅｒ Ｂｅｅｋ，Ｗ．Ｐ．，Ｍｕｌｌｅｒ，Ｅ．Ｓ．，Ｖａｎ Ｄｅｎ Ｂｅ
ｒｇ，Ｍ．，Ｍｅｉｊｅｒ，Ｍ．Ｊ．，Ｂｉｅｍｏｎｄ，Ｉ．＆Ｌａｍｅｒｓ，Ｃ．Ｂ．
（２００８）Ｍｏｔｉｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｓｍｏ
ｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ，ｍｙｅｎｔｅｒｉｃ ｐｌｅｘｕｓ，ａｎｄ ｍｕｃｏｓａ ｏ
ｆ ｈｕｍａｎ ｉｎｆｌａｍｅｄ ａｎｄ ｎｏｎｉｎｆｌａｍｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉ
ｎｅ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ，１４，６１２－６１
９．
３９８．Ｔｅｓｃｈ，Ｇ．Ｈ．（２００８）ＭＣＰ－１／ＣＣＬ２：ａ ｎｅｗ ｄｉａ
ｇｎｏｓｔｉｃ ｍａｒｋｅｒ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｆｏ
ｒ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｒｅｎａｌ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｎ
ｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｒｅｎａｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２９
４：６９７－７０１．
３９９．Ｔｅｕｓｃｈｅｒ，Ｃ．，Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ，Ｍ．，Ｎｏｕｂａｄｅ，Ｒ
．，Ｇａｏ，Ｊ．Ｆ．，Ｏｆｆｎｅｒ，Ｈ．，Ｚａｃｈａｒｙ，Ｊ．Ｆ．＆Ｂｌａｎｋｅ
ｎｈｏｒｎ，Ｅ．Ｐ．（２００７）Ｃｅｎｔｒａｌ ｈｉｓｔａｍｉｎｅ Ｈ３ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｓｕ
ｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ
ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ＣＮＳ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａ
ｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１０４，１０１４６－１０１
５１．
４００．Ｔｈａｌ，Ｄ．Ｍ．，Ｓｕｎ，Ｂ．，Ｆｅｎｇ，Ｄ．，Ｎａｗａｒａｔｎｅ，Ｖ
．，Ｌｅａｃｈ，Ｋ．，Ｆｅｌｄｅｒ，Ｃ．Ｃ．，Ｂｕｒｅｓ，Ｍ．Ｇ．，Ｅｖａｎｓ，
Ｄ．Ａ．，Ｗｅｉｓ，Ｗ．Ｉ．，Ｂａｃｈｈａｗａｔ，Ｐ．，Ｋｏｂｉｌｋａ，Ｔ．Ｓ．
，Ｓｅｘｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．，Ｋｏｂｉｌｋａ，Ｂ．Ｋ．＆Ｃｈｒｉｓｔｏｐｏｕｌｏｓ，
Ａ．（２０１６）Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｍ１ ａｎｄ
Ｍ４ ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｎ
ａｔｕｒｅ，５３１，３３５－３４０．
４０１．Ｔｈｅｏｄｏｒｏｐｏｕｌｏｕ，Ｍ．＆Ｓｔａｌｌａ，Ｇ．Ｋ．（２０１３）Ｓ
ｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｆｒｏｍ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｔｏ
ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ．Ｆｒｏｎｔ Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ
，３４，２２８－２５２．
４０２．Ｔｈｏｅｎｅ－Ｒｅｉｎｅｋｅ，Ｃ．，Ｒｕｍｓｃｈｕｓｓｅｌ，Ｋ．，Ｓｃｈ
ｍｅｒｂａｃｈ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｖｅｎ
ｔｉｏｎ ｓｔｕｄｉｅｓ ｗｉｔｈ ｔｅｌｍｉｓａｒｔａｎ，ｒａｍｉｐｒｉｌ ａ
ｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒａｔ ｓｔ
ｒｏｋｅ ｍｏｄｅｌｓ．ＰｌｏＳ Ｏｎｅ，２０１１，６：ｅ２３６４６．
４０３．Ｔｈｏｍａｓ，Ｍ．Ｃ．，Ｐｉｃｋｅｒｉｎｇ，Ｒ．Ｊ．，Ｔｓｏｒｏｔｅｓ，
Ｄ．，Ｋｏｉｔｋａ，Ａ．，Ｓｈｅｅｈｙ，Ｋ．，Ｂｅｒｎａｒｄｉ，Ｓ．，Ｔｏｆｆｏ
ｌｉ Ｂ．，Ｎｇｕｙｅｎ－Ｈｕｕ，Ｔ．Ｐ．，Ｈｅａｄ，Ｇ．Ａ．，Ｆｕ，Ｙ．，Ｃｈ
ｉｎ－Ｄｕｓｔｉｎｇ，Ｊ．，Ｃｏｏｐｅｒ，Ｍ．Ｅ．，Ｔｉｋｅｌｌｉｓ Ｃ．（２０
１０）Ｇｅｎｅｔｉｃ Ａｃｅ２ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｃｃｅｎｔｕａｔｅｓ ｖ
ａｓｃｕｌａｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ
ｉｎ ｔｈｅ ＡｐｏＥ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｏｕｓｅ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１０７：８８８－９７．
４０４．Ｔｈｏｍａｓ，Ｍ．Ｃ．，Ｔｉｋｅｌｌｉｓ，Ｃ．，Ｂｕｒｎｓ，Ｗ．Ｍ．，ｅ
ｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｒｅｎｉｎ ａｎｇｉｏｔｅ
ｎｓｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈ
ｅ ｋｉｄｎｅｙ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ
ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ，２００５，１６：２９７６－２９８４．
４０５．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｓ．Ｗ．，Ａ．Ｄｒａｙ，ａｎｄ Ｌ．Ｕｒｂａｎ．Ｉｎｊ
ｕｒｙ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ ｏｆ ｓｐｉｎａｌ ｒｅｆｌｅｘ
ａｃｔｉｖｉｔｙ：ＮＫ１ ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖａｔ
ｉｏｎ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｄ Ａ－ ａｎｄ Ｃ－ｆｉｂｅｒ ｍｅｄｉａｔｅｄ
ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｖｉｔ
ｒｏ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１９９４，１４：３６７２－８７．
４０６．Ｔｉｃｈｅｌａａｒ，Ｊ．Ｗ．，Ｗｅｓｓｅｌｋａｍｐｅｒ，Ｓ．Ｃ．，Ｃｈｏ
ｗｄｈｕｒｙ，Ｓ．，Ｙｉｎ，Ｈ．，Ｂｅｒｃｌａｚ，Ｐ．－Ｙ．，Ｓａｒｔｏｒ，Ｍ．
Ａ．，Ｌｅｉｋａｕｆ，Ｇ．Ｄ．＆Ｗｈｉｔｓｅｔｔ，Ｊ．Ａ．（２００７）Ｄｕｒａｔ
ｉｏｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｖｅｒｓｕｓ ｉｎｆｌ
ａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｌｕｎｇ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｆｉｂｒ
ｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－７ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｅｘｐｅｒｉ
ｍｅｎｔａｌ ｌｕｎｇ ｒｅｓｅａｒｃｈ，３３，３８５－４１７．
４０７．Ｔｉｋｅｌｌｉｓ，Ｃ，Ｗｏｏｋｅｙ，Ｐ．Ｊ．，Ｃａｎｄｉｄｏ，Ｒ．，Ｔｈ
ｏｍａｓ，Ｍ．Ｃ．（２００４）Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｉｓｌｅｔ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ
ａｆｔｅｒ ｂｌｏｃｋａｄｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｎｉｎ－ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ
ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ＺＤＦ ｒａｔ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５３：９８９－９
９７．
４０８．Ｔｉｋｅｌｌｉｓ，Ｃ．，Ｐｉｃｋｅｒｉｎｇ，Ｒ．Ｊ．，Ｔｓｏｒｏｔｅｓ，
Ｄ．，Ｈｕｅｔ，Ｏ．，Ｃｈｉｎ－Ｄｕｓｔｉｎｇ，Ｊ．，Ｃｏｏｐｅｒ，Ｍ．Ｅ．，ａ
ｎｄ Ｔｈｏｍａｓ，Ｍ．Ｃ．（２０１２）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｅ
ｎｉｎ－Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｔｈｅ ｅｆｆｅ
ｃｔｓ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｓａｌｔ ｉｎｔａｋｅ ｏｎ ａｔｈｅｒｏｇｅｎｅ
ｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｅ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｏｕ
ｓｅ，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，６０：９８－１０５．
４０９．Ｔｉｒｕｐｐａｔｈｉ，Ｃ．，Ｒ．Ｄ．Ｍｉｎｓｈａｌｌ，Ｂ．Ｃ．Ｐａｒｉａ
，Ｓ．Ｍ．Ｖｏｇｅｌ，ａｎｄ Ａ．Ｂ．Ｍａｌｉｋ．Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｃａ２＋ｓｉｇ
ｎａｌｌｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ
ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ．Ｖａｓｃｕｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００２，３９：１
７３－８５．
４１０．Ｔｉｕｌｐａｋｏｖ Ａ，Ｗｈｉｔｅ ＣＷ，Ａｂｈａｙａｗａｒｄａｎａ Ｒ
Ｓ，Ｓｅｅ ＨＢ，Ｃｈａｎ ＡＳ，Ｓｅｅｂｅｒ ＲＭ，Ｈｅｎｇ ＪＩ，Ｄｅｄｏｖ
Ｉ，Ｐａｖｌｏｓ ＮＪ，Ｐｆｌｅｇｅｒ ＫＤＧ，Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｖａ
ｓｏｐｒｅｓｓｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｎｏｖｅｌ Ｌ３１
２Ｓ ｈａｖｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｒａｆｆｉｃｋ
ｉｎｇ，Ｍｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２０１６，３０：８８９－９０４．
４１１．Ｔｏｎｇ，Ｌ．，Ｌａｎ，Ｗ．，Ｌｉｍ，Ｒ．Ｒ．＆Ｃｈａｕｒａｓｉａ，Ｓ．
Ｓ．Ｓ１００Ａ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｓ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔａｒｇｅｔｓ ｉｎ
ｔｈｅ ｏｃｕｌａｒ ｓｕｒｆａｃｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ
ｓ．Ｔｈｅ ｏｃｕｌａｒ ｓｕｒｆａｃｅ，２０１４，１２：２３－３１．
４１２．Ｔｏｒｒｅｓ，Ｒ．，Ｓ．Ｄ．Ｃｒｏｌｌ，Ｊ．Ｖｅｒｃｏｌｌｏｎｅ，Ｊ．Ｒ
ｅｉｎｈａｒｄｔ，Ｊ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，ａｎｄ Ｓ．Ｚａｂｓｋｉ．Ｍｉｃｅ ｇ
ｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｉｎ ｎｅｕｒｏｍｅｄｉｎ Ｕ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒ ２，ｂｕｔ ｎｏｔ ｎｅｕｒｏｍｅｄｉｎ Ｕ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １，
ｈａｖｅ ｉｍｐａｉｒｅｄ ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｐａｉｎ
，２００７，１３０：２６７－７８．
４１３．Ｔｓａｔｓａｎｉｓ，Ｃ．，Ａｎｄｒｏｕｌｉｄａｋｉ，Ａ．，Ｄｅｒｍｉｔｚ
ａｋｉ，Ｅ．，Ｇｒａｖａｎｉｓ，Ａ．＆Ｍａｒｇｉｏｒｉｓ，Ａ．Ｎ．（２００７）Ｃ
ｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎ ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １
（ＣＲＦ１）ａｎｄ ＣＲＦ２ ａｇｏｎｉｓｔｓ ｅｘｅｒｔ ａｎ ａｎｔｉ‐ｉｎ
ｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ ｐｈａｓｅ
ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ ＬＰＳ‐ｉｎｄｕｃｅｄ
ＴＮＦα ｒｅｌｅａｓｅ ｆｒｏｍ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｖｉａ ｉｎｄｕｃ
ｔｉｏｎ ｏｆ ＣＯＸ‐２ ａｎｄ ＰＧＥ２．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｅｌｌｕｌ
ａｒ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２１０，７７４－７８３．
４１４．Ｕｈｌｅｎ，Ｍ．，ＦＡＧＥＲｂｅｒｇ，Ｌ．，Ｈａｌｌｓｔｒｏｅｍ，Ｂ．Ｍ
．，Ｌｉｎｄｓｋｏｇ，Ｃ．，Ｏｋｓｖｏｌｄ，Ｐ．，Ｍａｒｄｉｎｏｇｌｕ，Ａ．，Ｓ
ｉｖｅｒｔｓｓｏｎ，Ａ．，Ｋａｍｐｆ，Ｃ．，Ｓｊｏｅｓｔｅｄｔ，Ｅ．＆Ａｓｐｌｕ
ｎｄ，Ａ．（２０１５）Ｔｉｓｓｕｅ－ｂａｓｅｄ ｍａｐ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ
ｐｒｏｔｅｏｍｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３４７，１２６０４１９．
４１５．Ｕｈｌｅｎ，Ｍ．，ＦＡＧＥＲｂｅｒｇ，Ｌ．，Ｈａｌｌｓｔｒｏｅｍ，Ｂ．Ｍ
．，Ｌｉｎｄｓｋｏｇ，Ｃ．，Ｏｋｓｖｏｌｄ，Ｐ．，Ｍａｒｄｉｎｏｇｌｕ，Ａ．，Ｓ
ｉｖｅｒｔｓｓｏｎ，Ａ．，Ｋａｍｐｆ，Ｃ．，Ｓｊｏｅｓｔｅｄｔ，Ｅ．＆Ａｓｐｌｕ
ｎｄ，Ａ．（２０１５）Ｔｉｓｓｕｅ－ｂａｓｅｄ ｍａｐ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ
ｐｒｏｔｅｏｍｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３４７，１２６０４１９．
４１６．Ｖａｕｇｈａｎ，Ｋ．Ｒ．，Ｓｔｏｋｅｓ，Ｌ．，Ｐｒｉｎｃｅ，Ｌ．Ｒ．，Ｍ
ａｒｒｉｏｔｔ，Ｈ．Ｍ．，Ｍｅｉｓ，Ｓ．，Ｋａｓｓａｃｋ，Ｍ．Ｕ．，Ｂｉｎｇｌｅ
，Ｃ．Ｄ．，Ｓａｂｒｏｅ，Ｉ．，Ｓｕｒｐｒｅｎａｎｔ，Ａ．＆Ｗｈｙｔｅ，Ｍ．Ｋ．
（２００７）Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
ｂｙ ＡＴＰ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｐ２Ｙ１１ ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７９，８５４４－８５５
３．
４１７．Ｖｅｎｋａｔａｒａｍａｎ，Ｃ．＆Ｋｕｏ，Ｆ．（２００５）Ｔｈｅ Ｇ－ｐｒ
ｏｔｅｉｎ ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧＰＲ８４ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ Ｉ
Ｌ－４ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｒｅｓｐｏ
ｎｓｅ ｔｏ ＣＤ３ ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ｌｅｔｔｅ
ｒｓ，１０１，１４４－１５３．
４１８．Ｖｏｉｃｅ，Ｊ．Ｋ．，Ｇｒｉｎｎｉｎｇｅｒ，Ｃ．，Ｋｏｎｇ，Ｙ．，Ｂａｎ
ｇａｌｅ，Ｙ．，Ｐａｕｌ，Ｓ．＆Ｇｏｅｔｚｌ，Ｅ．Ｊ．（２００３）Ｒｏｌｅｓ ｏ
ｆ ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ（ＶＩＰ）ｉｎ ｔ
ｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｉｍｍｕｎｅ ｐｈｅｎｏｔ
ｙｐｅｓ ｂｙ ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ ｍｉｃｅ ａｎｄ Ｔ ｃｅｌｌ－ｔａｒｇｅｔ
ｅｄ ｔｙｐｅ ＩＩ ＶＩＰ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ．
Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７０，３０８－３１４．
４１９．Ｖｏｌｐｉ，Ｃ．，Ｆａｚｉｏ，Ｆ．＆Ｆａｌｌａｒｉｎｏ，Ｆ．（２０１２）
Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒｓ ｉｎ ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｅ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈａ
ｒｍａｃｏｌｏｇｙ，６３，５０１－５０６．
４２０．Ｖｏｌｚ，Ｈ．Ｃ．，Ｋａｙａ，Ｚ．，Ｋａｔｕｓ，Ｈ．Ａ．＆Ａｎｄｒａｓｓ
ｙ，Ｍ．（２０１０）Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ＨＭＧＢ１／ＲＡＧＥ ｉｎ ｉｎｆｌ
ａｍｍａｔｏｒｙ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ．Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ ｔｈｒｏ
ｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ，３６：１８５－１９４．
４２１．Ｖｕ，Ｔ．Ｋ．，Ｄ．Ｔ．Ｈｕｎｇ，Ｖ．Ｉ．Ｗｈｅａｔｏｎ，ａｎｄ Ｓ．Ｒ
．Ｃｏｕｇｈｌｉｎ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ａ ｆｕｎｃｔｉｏ
ｎａｌ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｒｅｖｅａｌｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｐｒ
ｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖａｔｉ
ｏｎ．Ｃｅｌｌ，１９９１，６４：１０５７－６８．
４２２．Ｗａｃｋｅｒ，Ｄ．，Ｗａｎｇ，Ｃ．，Ｋａｔｒｉｔｃｈ，Ｖ．，Ｈａｎ，Ｇ．
Ｗ．，Ｈｕａｎｇ，Ｘ．Ｐ．，Ｖａｒｄｙ，Ｅ．，ＭｃＣｏｒｖｙ，Ｊ．Ｄ．，Ｊｉａｎ
ｇ，Ｙ．，Ｃｈｕ，Ｍ．，Ｓｉｕ，Ｆ．Ｙ．，Ｌｉｕ，Ｗ．，Ｘｕ，Ｈ．Ｅ．，Ｃｈｅｒ
ｅｚｏｖ，Ｖ．，Ｒｏｔｈ，Ｂ．Ｌ．＆Ｓｔｅｖｅｎｓ，Ｒ．Ｃ．（２０１３）Ｓｔｒｕ
ｃｔｕｒａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉ
ｔｙ ａｔ ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３４０，６１
５－６１９．
４２３．Ｗａｄａ，Ｎ．，Ｈａｓｈｉｎａｇａ，Ｔ．，Ｏｔａｂｅ，Ｓ．，Ｙｕａｎ，Ｘ
．，Ｋｕｒｉｔａ，Ｙ．，Ｋａｋｉｎｏ，Ｓ．，Ｏｈｏｋｉ，Ｔ．，Ｎａｋａｙａｍａ，
Ｈ．，Ｆｕｋｕｔａｎｉ，Ｔ．＆Ｔａｊｉｒｉ，Ｙ．（２０１３）Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ
ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｗｎｔ ｌｉｇａｎｄｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｅｃｅ
ｐｔｏｒｓ ｉｎ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ ｂｙ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｙｐｅｒ
ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎｅｍｉａ．ＰｌｏＳ ｏｎｅ，８，ｅ６７７１２．
４２４．Ｗａｎ，Ｗ．，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｒｏｌｅ ｏｆ ＨＭ
ＧＢ１ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ Ｐａｉｎ：Ａ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｔｈｅｒ
ａｐｅｕｔｉｃ Ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｊｏｕ
ｒｎａｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１６，２０１６：６４
３０４２３．
４２５．Ｗａｎｇ，Ｄ．Ｂ．，Ｄａｙｔｏｎ，Ｒ．Ｄ．，Ｚｗｅｉｇ，Ｒ．Ｍ．＆Ｋｌｅ
ｉｎ，Ｒ．Ｌ．（２０１０）Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａ
ｔａｕ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｉｎ ｒａｔｓ ｉｍｐｌｉｃ
ａｔｅｓ ａｎ ｅａｒｌｙ ｐｒｏ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ．
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，２２４，１９７－２０６．
４２６．Ｗａｎｇ，Ｊ．，Ｓｉｍｏｎａｖｉｃｉｕｓ，Ｎ．，Ｗｕ，Ｘ．，Ｓｗａｍｉｎ
ａｔｈ，Ｇ．，Ｒｅａｇａｎ，Ｊ．，Ｔｉａｎ，Ｈ．＆Ｌｉｎｇ，Ｌ．（２００６）Ｋｙ
ｎｕｒｅｎｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ａ ｌｉｇａｎｄ ｆｏｒ ｏｒｐｈａｎ Ｇ ｐｒ
ｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＧＰＲ３５．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８１，２２０２１－２２０２８．
４２７．Ｗａｒｎｙ，Ｍ．，Ａｂｏｕｄｏｌａ，Ｓ．，Ｒｏｂｓｏｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｓｅｖ
ｉｇｎｙ，Ｊ．，Ｃｏｍｍｕｎｉ，Ｄ．，Ｓｏｌｔｏｆｆ，Ｓ．Ｐ．＆Ｋｅｌｌｙ，Ｃ．
Ｐ．（２００１）Ｐ２Ｙ６ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｍｅｄｉａｔｅ
ｓ ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－８ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｒ
ｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ＵＤＰ ｏｒ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｊｏｕ
ｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７６，２６０５１－２
６０５６．
４２８．Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｔ．，Ｔｏｍｉｏｋａ，Ｎ．Ｈ．，Ｄｏｓｈｉ，Ｍ．，Ｗａ
ｔａｎａｂｅ，Ｓ．，Ｔｓｕｃｈｉｙａ，Ｍ．＆Ｈｏｓｏｙａｍａｄａ，Ｍ．（２０１３
）Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｆａｃｔｏｒ
ｉｓ ａ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏ
ｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ ｉｎ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｄｂ／ｄｂ
ｍｉｃｅ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅ
ｔｉｎ，３６，７４１－７４７．
４２９．Ｗａｔｅｒｓ，Ｋ．Ｍ．，Ｔａｎ，Ｒ．，Ｇｅｎｅｔｏｓ，Ｄ．Ｃ．，Ｖｅｒｍ
ａ，Ｓ．，Ｙｅｌｌｏｗｌｅｙ，Ｃ．Ｅ．＆Ｋａｒｉｎ，Ｎ．Ｊ．（２００７）ＤＮＡ
ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｖｅａｌｓ ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｌ
ｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏ
ｆ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１ ｃｅ
ｌｌｓ．Ｂｏｎｅ，４１，８３３－８４１．
４３０．Ｗｅｌｌｅｎｄｏｒｐｈ，Ｐ．＆Ｂｒａｅｕｎｅｒ－Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｈ．（２
００４）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ ｓｅｑ
ｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＧＰＲＣ６Ａ，ａ ｎｏｖｅｌ ｆａｍｉｌｙ
Ｃ Ｇ－ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｇｅｎｅ，３３５，３７
－４６．
４３１．Ｗｅｎｓｍａｎ，Ｈ．，Ｋａｍｇａｒｉ，Ｎ．，Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ，Ａ．，Ｇ
ｒｕｊｉｃ，Ｍ．，Ｃａｌｏｕｎｏｖａ，Ｇ．，Ｌｕｎｄｅｑｕｉｓｔ，Ａ．，Ｒｏｅｎ
ｎｂｅｒｇ，Ｅ．＆Ｐｅｊｌｅｒ，Ｇ．（２０１２）Ｔｕｍｏｒ－ｍａｓｔ ｃｅｌｌ
ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏ－ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉ
ｃ ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃ ４－１ＢＢ ｉｎ ＭＣ
ｓ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ Ｌｅｗｉｓ Ｌｕｎｇ Ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｍｏ
ｌｅｃｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，５０，２１０－２１９．
４３２．Ｗｅｓｓ，Ｊ．，Ｅｇｌｅｎ，Ｒ．Ｍ．＆Ｇａｕｔａｍ，Ｄ．（２００７）Ｍｕ
ｓｃａｒｉｎｉｃ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｍｕｔａｎｔ
ｍｉｃｅ ｐｒｏｖｉｄｅ ｎｅｗ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｆｏｒ ｄｒｕｇ ｄｅｖｅｌ
ｏｐｍｅｎｔ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ，６，７２１－７３３．
４３３．Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｆ．，Ｎｏｉｎａｊ，Ｎ．，Ｓｈｉｂａｔａ，Ｙ．，Ｌｏｖｅ
，Ｊ．，Ｋｌｏｓｓ，Ｂ．，Ｘｕ，Ｆ．，Ｇｖｏｚｄｅｎｏｖｉｃ－Ｊｅｒｅｍｉｃ，Ｊ
．，Ｓｈａｈ，Ｐ．，Ｓｈｉｌｏａｃｈ，Ｊ．，Ｔａｔｅ，Ｃ．Ｇ．＆Ｇｒｉｓｓｈａｍ
ｍｅｒ，Ｒ．（２０１２）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ａｇｏｎｉｓｔ－ｂｏｕ
ｎｄ ｎｅｕｒｏｔｅｎｓｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｎａｔｕｒｅ，４９０，５０８－５
１３．
４３４．Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｈ．，Ｃｈｉａｎｏ，Ｍ．，Ｗｉｇｇｌｅｓｗｏｒｔｈ，Ｍ．
，Ｇｅｓｋｅ，Ｒ．，Ｒｉｌｅｙ，Ｊ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｎ．，Ｈａｌｌ，Ｓ．，Ｚｈｕ，
Ｇ．，Ｍａｕｒｉｏ，Ｆ．＆Ｓａｖａｇｅ，Ｔ．（２００８）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉ
ｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ａｓｔｈｍａ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｇｅｎｅ
ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ １ｑｔｅｒ ａｎｄ ｉｔｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ
ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ．Ｈｕｍａｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１７，１
８９０－１９０３．
４３５．Ｗｒｉｇｈｔ，Ｄ．Ｈ．，Ｆｏｒｄ‐Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎ，Ａ．Ｗ．，Ｃｈａ
ｄｅｅ，Ｋ．＆Ｍｅｔｔｅｒｓ，Ｋ．Ｍ．（２０００）Ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｐｒｏｓｔ
ａｎｏｉｄ ＤＰ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｍｕｃｉｎ ｓｅｃｒｅ
ｔｉｏｎ ｉｎ ＬＳ１７４Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｂｒｉｔｉｓｈ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１３１，１５３７－１５４５．
４３６．Ｗｕ，Ｂ．，Ｃｈｉｅｎ，Ｅ．Ｙ．，Ｍｏｌ，Ｃ．Ｄ．，Ｆｅｎａｌｔｉ，Ｇ．
，Ｌｉｕ，Ｗ．，Ｋａｔｒｉｔｃｈ，Ｖ．，Ａｂａｇｙａｎ，Ｒ．，Ｂｒｏｏｕｎ，Ａ．
，Ｗｅｌｌｓ，Ｐ．，Ｂｉ，Ｆ．Ｃ．，Ｈａｍｅｌ，Ｄ．Ｊ．，Ｋｕｈｎ，Ｐ．，Ｈａｎ
ｄｅｌ，Ｔ．Ｍ．，Ｃｈｅｒｅｚｏｖ，Ｖ．＆Ｓｔｅｖｅｎｓ，Ｒ．Ｃ．（２０１０）Ｓ
ｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ＣＸＣＲ４ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ＧＰＣＲ ｗｉ
ｔｈ ｓｍａｌｌ－ｍｏｌｅｃｕｌｅ ａｎｄ ｃｙｃｌｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔ
ａｇｏｎｉｓｔｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３３０，１０６６－１０７１．
４３７．Ｗｕ，Ｑ．－Ｌ．，Ｚｉｅｒｏｌｄ，Ｃ．＆Ｒａｎｈｅｉｍ，Ｅ．Ａ．（２００
９）Ｄｙｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｒｉｚｚｌｅｄ ６ ｉｓ ａ ｃｒｉｔｉ
ｃａｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｏｆ Ｂ－ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉ
ｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌ
ｅｕｋｅｍｉａ．Ｂｌｏｏｄ，１１３，３０３１－３０３９．
４３８．Ｘｉａ，Ｗ．，Ｈａｎ，Ｊ．，Ｈｕａｎｇ，Ｇ．＆Ｙｉｎｇ，Ｗ．Ｉｎｆｌａｍ
ｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｉｓｃｈａｅｍｉｃ ｂｒａｉｎ ｉｎｊｕｒｙ：ｃｕｒｒｅｎｔ
ａｄｖａｎｃｅｓ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．Ｃｌｉｎｉｃ
ａｌ ａｎｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ＆ｐｈｙｓｉｏｌ
ｏｇｙ，２０１０，３７：２５３－２５８．
４３９．Ｘｉｅ，Ｊ．，Ｍｅｎｄｅｚ，Ｊ．Ｄ．，Ｍｅｎｄｅｚ－Ｖａｌｅｎｚｕｅｌａ
，Ｖ．＆Ａｇｕｉｌａｒ－Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ，Ｍ．Ｍ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａ
ｌｌｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａ
ｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＲＡＧＥ）．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌｌ
ｉｎｇ，２０１３，２５：２１８５－２１９７．
４４０．Ｘｉｏｎｇ，Ｘ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｒ．Ｅ．，Ｘｕ，Ｌ．，Ｙａｎｇ，Ｌ．，Ｓｕ
ｎ，Ｘ．，Ｚｏｕ，Ｂ．，Ｐａｓｃｕａｌ，Ｃ．，Ｓａｋｕｒａｉ，Ｔ．，Ｇｉｆｆａｒ
ｄ，Ｒ．Ｇ．＆Ｘｉｅ，Ｘ．Ｓ．（２０１３）Ｍｉｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎ
ｅ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｂｙ ｔｈｅ ｈｙｐｏｃｒｅ
ｔｉｎ／ｏｒｅｘｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｒｅｄ
ｕｃｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｓｔｒｏｋｅ，４４，７６４－７７０．
４４１．Ｘｕｅ Ｊ．，Ｍａｎｉｇｒａｓｓｏ Ｍ．，Ｓｃａｌａｂｒｉｎ Ｍ．，Ｒａ
ｉ Ｖ．，Ｒｅｖｅｒｄａｔｔｏ Ｓ．，Ｂｕｒｚ Ｄ．Ｓ．，Ｆａｂｒｉｓ Ｄ．，Ｓ
ｃｈｍｉｄｔ Ａ．Ｍ．，Ｓｈｅｋｈｔｍａｎ Ａ．（２０１６）Ｃｈａｎｇｅ ｉｎ
ｔｈｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ ｏｆ ａ ＲＡＧＥ－Ｌｉｇａｎｄ
Ｃｏｍｐｌｅｘ Ｔｒｉｇｇｅｒｓ ＲＡＧＥ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ．Ｓｔｒｕｃｔｕ
ｒｅ．２４，１５０９－２２．
４４２．Ｙａｄａｖ，Ｍ．，Ｈｕａｎｇ，Ｍ．－Ｃ．＆Ｇｏｅｔｚｌ，Ｅ．Ｊ．（２０１
１）ＶＰＡＣ１（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ（ＶＩ
Ｐ）ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｙｐｅ １）Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅ
ｐｔｏｒ ｍｅｄｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＶＩＰ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍｕｒ
ｉｎｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｏ
ｌｏｇｙ，２６７，１２４－１３２．
４４３．Ｙａｍａｇｉｓｈｉ，Ｓ．＆Ｍａｔｓｕｉ，Ｔ．Ｒｏｌｅ ｏｆ ｒｅｃｅｐｔ
ｏｒ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｒ
ＡＧＥ）ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ｍｅｄｉｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１５，２０：１５．
４４４．Ｙａｎ，Ｓ．Ｆ．，Ｒａｍａｓａｍｙ，Ｒ．，Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ａ．Ｍ．，Ｔｈ
ｅ ＲＡＧＥ ａｘｉｓ：Ａ ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｓｉｇｎ
ａｌｌｉｎｇ ｄａｎｇｅｒ ｔｏ ｔｈｅ ｖｕｌｎｅｒａｂｌｅ ｖａｓｃｕｌａｔ
ｕｒｅ．Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ，２０１０，１０６：８４２－８５３．
４４５．Ｙａｎｇ Ｊ，Ｙａｎ Ｒ，Ｒｏｙ Ａ，Ｘｕ Ｄ，Ｐｏｉｓｓｏｎ Ｊ，Ｚｈ
ａｎｇ Ｙ．Ｔｈｅ Ｉ－ＴＡＳＳＥＲ Ｓｕｉｔｅ：Ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔｒｕｃｔｕ
ｒｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ，２０１５，１２：７－８．
４４６．Ｙａｎｇ，Ｄ．，Ｃｈｅｎ，Ｑ．，Ｇｅｒｔｚ，Ｂ．，Ｈｅ，Ｒ．，Ｐｈｕｌｓ
ｕｋｓｏｍｂａｔｉ，Ｍ．，Ｙｅ，Ｒ．Ｄ．＆Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍ，Ｊ．Ｊ．（２００２
）Ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎａ
ｌ ｆｏｒｍｙｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｌｉｋｅ－２（ＦＰＲＬ２）ｔ
ｈｒｏｕｇｈｏｕｔ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ．Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ，７２，５９
８－６０７．
４４７．Ｙａｎｇ，Ｈ．－Ｙ．＆Ｉａｄａｒｏｌａ，Ｍ．（２００３）Ａｃｔｉｖａｔｉ
ｏｎ ｏｆ ｓｐｉｎａｌ ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ ＦＦ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｅｕ
ｒｏｐｅｐｔｉｄｅ ＦＦ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ｄｕｒｉｎｇ ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ ｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１１
８，１７９－１８７．
４４８．Ｙｅ，Ｒ．Ｄ．，Ｆ．Ｂｏｕｌａｙ，Ｊ．Ｍ．Ｗａｎｇ，Ｃ．Ｄａｈｌｇｒｅｎ
，Ｃ．Ｇｅｒａｒｄ，ａｎｄ Ｍ．Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇ
ｙ．ＬＸＸＩＩＩ．Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｏｒｍｙｌ ｐｅｐ
ｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＦＰＲ）ｆａｍｉｌｙ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ，２
００９，６１：１１９－６１．
４４９．Ｙｉ，Ｔ．，Ｌｅｅ，Ｄ．－Ｓ．，Ｊｅｏｎ，Ｍ．－Ｓ．，Ｋｗｏｎ，Ｓ．Ｗ．
＆Ｓｏｎｇ，Ｓ．Ｕ．（２０１２）Ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅ
ｒｅｖｅａｌｓ ｔｈａｔ ＳＴＡＴ２ ｉｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍ
ｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍ
ａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｇｅｎ
ｅ，４９７，１３１－１３９．
４５０．Ｙｉｎ，Ｊ．，Ｂａｂａｏｇｌｕ，Ｋ．，Ｂｒａｕｔｉｇａｍ，Ｃ．Ａ．，Ｃｌ
ａｒｋ，Ｌ．，Ｓｈａｏ，Ｚ．，Ｓｃｈｅｕｅｒｍａｎｎ，Ｔ．Ｈ．，Ｈａｒｒｅｌｌ，
Ｃ．Ｍ．，Ｇｏｔｔｅｒ，Ａ．Ｌ．，Ｒｏｅｃｋｅｒ，Ａ．Ｊ．，Ｗｉｎｒｏｗ，Ｃ．Ｊ
．，Ｒｅｎｇｅｒ，Ｊ．Ｊ．，Ｃｏｌｅｍａｎ，Ｐ．Ｊ．＆Ｒｏｓｅｎｂａｕｍ，Ｄ．Ｍ
．（２０１６）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｌｉｇａｎｄ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｍｅｃｈ
ａｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ＯＸ１ ａｎｄ ＯＸ２ ｏｒｅｘｉｎ ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒｓ．Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２３，２９３－２９９．
４５１．Ｙｉｎ，Ｊ．，Ｍｏｂａｒｅｃ，Ｊ．Ｃ．，Ｋｏｌｂ，Ｐ．＆Ｒｏｓｅｎｂａｕ
ｍ，Ｄ．Ｍ．（２０１５）Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍ
ａｎ ＯＸ２ ｏｒｅｘｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｂｏｕｎｄ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｓｏ
ｍｎｉａ ｄｒｕｇ ｓｕｖｏｒｅｘａｎｔ．Ｎａｔｕｒｅ，５１９，２４７－２５０．
４５２．Ｙｉｎ，Ｘ．，Ｃｈｅｎｇ，Ｈ．，Ｌｉｎ，Ｙ．，Ｆａｎ，Ｘ．，Ｃｕｉ，Ｙ．
，Ｚｈｏｕ，Ｆ．，Ｓｈｅｎ，Ｃ．，Ｚｕｏ，Ｘ．，Ｚｈｅｎｇ，Ｘ．＆Ｚｈａｎｇ，Ｗ
．（２０１４）Ｆｉｖｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｇｅｎｅｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ
ｍａｔｃｈｉｎｇ ｓｉｇｎａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｅＱＴＬ ａｎｄ ＧＷＡＳ ｉｎ
ｐｓｏｒｉａｓｉｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｃｉ
ｅｎｃｅ，７６，１３９－１４２．
４５３．Ｙｏｋｏｍｉｚｏ，Ｔ．，Ｋａｔｏ，Ｋ．，Ｔｅｒａｗａｋｉ，Ｋ．，Ｉｚｕｍ
ｉ，Ｔ．＆Ｓｈｉｍｉｚｕ，Ｔ．（２０００）Ａ Ｓｅｃｏｎｄ Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎ
ｅ Ｂ４ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，Ｂｌｔ２ Ａ Ｎｅｗ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｔａｒ
ｇｅｔ ｉｎ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｄｉ
ｓｏｒｄｅｒｓ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍｅｄｉ
ｃｉｎｅ，１９２，４２１－４３２．
４５４．Ｙｏｓｔ，Ｃ．Ｃ．，Ａ．Ｓ．Ｗｅｙｒｉｃｈ，ａｎｄ Ｇ．Ａ．Ｚｉｍｍｅｒ
ｍａｎ．Ｔｈｅ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ（ＰＡＦ）ｓ
ｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｃａｓｃａｄｅ ｉｎ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏ
ｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，２０１０，９２：６９２－７．
４５５．Ｙｏｕ，Ｊ．，Ｎｇｕｙｅｎ，Ａ．Ｖ．，Ａｌｂｅｒｓ，Ｃ．Ｇ．，Ｌｉｎ，Ｆ
．＆Ｈｏｌｃｏｍｂｅ，Ｒ．Ｆ．（２００８）Ｗｎｔ ｐａｔｈｗａｙ－ｒｅｌａｔｅｄ
ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄ
ｉｓｅａｓｅ．Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ ｓｃｉｅｎｃｅｓ，５
３，１０１３－１０１９．
４５６．Ｚａｍｍａｔａｒｏ，Ｍ．，Ｃｈｉｅｃｈｉｏ，Ｓ．，Ｍｏｎｔａｎａ，Ｍ．Ｃ
．，Ｔｒａｆｉｃａｎｔｅ，Ａ．，Ｃｏｐａｎｉ，Ａ．，Ｎｉｃｏｌｅｔｔｉ，Ｆ．＆Ｇ
ｅｒｅａｕ，Ｒ．Ｗ．（２０１１）ｍＧｌｕ２ ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ ｇｌｕｔａ
ｍａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｒｅｓｔｒａｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐａｉ
ｎ ａｎｄ ｍｅｄｉａｔｅ ｔｈｅ ａｎａｌｇｅｓｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ
ｄｕａｌ ｍＧｌｕ２／ｍＧｌｕ３ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｇｏｎｉｓｔｓ．Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ ｐａｉｎ，７，１．
４５７．Ｚｅｎｇ，Ｈ．，Ａ．ＧｒＡＧＥＲｏｖ，Ｊ．Ｇ．Ｈｏｈｍａｎｎ，Ｍ．Ｎ．Ｐ
ａｖｌｏｖａ，Ｂ．Ａ．Ｓｃｈｉｍｐｆ，ａｎｄ Ｈ．Ｘｕ．Ｎｅｕｒｏｍｅｄｉｎ Ｕ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ ｄｉｓｐｌａｙ ｄｉｆｆｅ
ｒｅｎｔｉａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｓｅｎｓｏｒｙ ｐｅｒｃｅｐｔｉｏｎ，
ｓｔｒｅｓｓ，ａｎｄ ｆｅｅｄｉｎｇ．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ，２００６，２６
：９３５２－６３．
４５８．Ｚｈａｎｇ Ｙ．Ｉ－ＴＡＳＳＥＲ ｓｅｒｖｅｒ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ
３Ｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ．ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉ
ｃｓ，２００８，９：４０．
４５９．Ｚｈａｎｇ，Ｆ．，Ｗｕ，Ｒ．，Ｑｉａｎｇ，Ｘ．，Ｚｈｏｕ，Ｍ．＆Ｗａｎｇ
，Ｐ．（２０１０ａ）Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｏｆ α２Ａ－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ
：ａ ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｉｎｈｉｂｉｔ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒ
ｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｓｅｐｓｉｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，８８，２８９－２９６．
４６０．Ｚｈａｎｇ，Ｈ．，Ｕｎａｌ，Ｈ．，Ｇａｔｉ，Ｃ．，Ｗｏｎ Ｈａｎ，Ｇ．，
Ｌｉｕ，Ｗ．，Ｚａｔｓｅｐｉｎ，Ｎ．Ａ．，Ｊａｍｅｓ，Ｄ．，Ｗａｎｔ，Ｄ．，Ｎｅ
ｌｓｏｎ，Ｇ．，Ｗｅｉｅｒｓｔａｌｌ，Ｕ．，Ｓａｗａｙａ，Ｍ．Ｒ．，Ｘｕ，Ｑ．，
Ｍｅｓｓｅｒｓｃｈｍｉｄｔ，Ｍ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｇ．Ｊ．，Ｂｏｕｔｅｔ，Ｓ．
，Ｙｅｆａｎｏｖ，Ｏ．Ｍ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｔ．，Ａ．，Ｗａｎｇ，Ｃ．，Ｉｓｈｃｈｅ
ｎｋｏ，Ａ．，Ｔｉｒｕｐｕｌａ，Ｋ．Ｃ．，Ｄｅｓｎｏｙｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｔｒ
ｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｒｅｖｅａ
ｌｅｄ ｂｙ Ｓｅｒｉａｌ Ｆｅｍｔｏｓｅｃｏｎｄ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈ
ｙ，Ｃｅｌｌ，２０１５，１６１：４，８３３－８４４．
４６１．Ｚｈａｎｇ，Ｘ．，Ｓｃｈｍｕｄｄｅ，Ｉ．，Ｌａｕｍｏｎｎｉｅｒ，Ｙ．，Ｐ
ａｎｄｅｙ，Ｍ．，Ｃｌａｒｋ，Ｊ．，Ｋｏｅｎｉｇ，Ｐ．，Ｇｅｒａｒｄ，Ｎ．，Ｇｅ
ｒａｒｄ，Ｃ．，Ｗｉｌｌｓ－Ｋａｒｐ，Ｍ．＆Ｋｏｅｈｌ，Ｊ．（２０１０ｂ）Ａ ｃ
ｒｉｔｉｃａｌ ｒｏｌｅ ｆｏｒ Ｃ５Ｌ２ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉ
ｓ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｌｌｅｒｇｉｃ ａｓｔｈｍａ．Ｊｏｕｒｎａ
ｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．：１９５０），１８５，
６７４１．
４６２．Ｚｈａｏ，Ｗ．，Ｈｏ，Ｌ．，Ｖａｒｇｈｅｓｅ，Ｍ．，Ｙｅｍｕｌ，Ｓ．，Ｄ
ａｍｓ－Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ，Ｋ．，Ｇｏｒｄｏｎ，Ｗ．，Ｋｎａｂｌｅ，Ｌ．，Ｆｒｅｉ
ｒｅ，Ｄ．，Ｈａｒｏｕｔｕｎｉａｎ，Ｖ．＆Ｐａｓｉｎｅｔｔｉ，Ｇ．Ｍ．（２０１３
）Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｏｌｆａｃｔｏｒｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ
ｉｎ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｔｒａｕｍａｔｉｃ ｂｒａｉｎ
ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔ
ａｕｏｐａｔｈｙ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，
３４，４１７－４２９．
４６３．Ｚｈａｏ，Ｚ．，Ｌｅｅ，Ｃ．Ｃ．，Ｂａｌｄｉｎｉ，Ａ．＆Ｃａｓｋｅｙ，Ｃ
．Ｔ．（１９９５）Ａ Ｈｕｍａｎ Ｈｏｍｏｌｏｇｕｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｄｒｏｓｏｐ
ｈｉｌａ Ｐｏｌａｒｉｔｙ Ｇｅｎｅ ｆｒｉｚｚｌｅｄ Ｈａｓ Ｂｅｅｎ Ｉｄｅ
ｎｔｉｆｉｅｄ ａｎｄ Ｍａｐｐｅｄ ｔｏ １７ｑ２１．１．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２
７，３７０－３７３．
４６４．Ｚｈｅｎｇ，Ｙ．，Ｑｉｎ，Ｌ．，Ｚａｃａｒｉａｓ，Ｎ．Ｖ．，ｄｅ Ｖｒｉ
ｅｓ，Ｈ．，Ｈａｎ，Ｇ．Ｗ．，Ｇｕｓｔａｖｓｓｏｎ，Ｍ．，Ｄａｂｒｏｓ，Ｍ．，Ｚ
ｈａｏ，Ｃ．，Ｃｈｅｒｎｅｙ，Ｒ．Ｊ．，Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．，Ｓｔａｍｏｓ，Ｄ．，
Ａｂａｇｙａｎ，Ｒ．，Ｃｈｅｒｅｚｏｖ，Ｖ．，Ｓｔｅｖｅｎｓ，Ｒ．Ｃ．，ＡＰ，Ｉ
．Ｊ．，Ｈｅｉｔｍａｎ，Ｌ．Ｈ．，Ｔｅｂｂｅｎ，Ａ．，Ｋｕｆａｒｅｖａ，Ｉ．＆Ｈ
ａｎｄｅｌ，Ｔ．Ｍ．（２０１６）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎ
ｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ｗｉｔｈ ｏｒｔｈｏｓｔｅｒｉｃ ａｎｄ ａｌｌｏｓｔ
ｅｒｉｃ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ．Ｎａｔｕｒｅ，５４０，４５８－４６１．
４６５．Ｚｈｏｎｇ，Ｈ．，Ｓｈｌｙｋｏｖ，Ｓ．Ｇ．，Ｍｏｌｉｎａ，Ｊ．Ｇ．，Ｓａ
ｎｂｏｒｎ，Ｂ．Ｍ．，Ｊａｃｏｂｓｏｎ，Ｍ．Ａ．，Ｔｉｌｌｅｙ，Ｓ．Ｌ．＆Ｂｌａ
ｃｋｂｕｒｎ，Ｍ．Ｒ．（２００３）Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ ｌｕ
ｎｇ ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｔｈｅ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ａ３ ｒｅｃｅｐｔ
ｏｒ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７１，３３８－３４５
．
４６６．Ｚｈｏｕ，Ｎ．，Ｆａｎ，Ｘ．，Ｍｕｋｈｔａｒ，Ｍ．，Ｆａｎｇ，Ｊ．，Ｐａ
ｔｅｌ，Ｃ．Ａ．，ＤｕＢｏｉｓ，Ｇ．Ｃ．＆Ｐｏｍｅｒａｎｔｚ，Ｒ．Ｊ．（２００３
）Ｃｅｌｌ－ｃｅｌｌ ｆｕｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ
ｔｈｅ ＣＮＳ－ｂａｓｅｄ，ＨＩＶ－１ ｃｏ－ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＡＰＪ．Ｖｉｒ
ｏｌｏｇｙ，３０７，２２－３６．
４６７．Ｚｈｏｕ，Ｚ．，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ＡＧＥ（ＲＡＧＥ）
ｍｅｄｉａｔｅｓ ｎｅｏｉｎｔｉｍａｌ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓ
ｅ ｔｏ ａｒｔｅｒｉａｌ ｉｎｊｕｒｙ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００３，１０
７：２２３８－２２４３．
４６８．Ｚｈｕ，Ｐ．，Ｓｕｎ，Ｗ．，Ｚｈａｎｇ，Ｃ．，Ｓｏｎｇ，Ｚ．＆Ｌｉｎ，Ｓ
．（２０１６）Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ Ｙ ｉｎ ｔｈｅ
ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ ｃａｒｄ
ｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ，２２０，２３５－２４１．
４６９．Ｚｉｏｇａｓ，Ｄ．Ｃ．，Ｇｒａｓ－Ｍｉｒａｌｌｅｓ，Ｂ．，Ｍｕｓｔａｆａ
，Ｓ．，Ｇｅｉｇｅｒ，Ｂ．Ｍ．，Ｎａｊａｒｉａｎ，Ｒ．Ｍ．，Ｎａｇｅｌ，Ｊ．Ｍ．
，Ｆｌｉｅｒ，Ｓ．Ｎ．，Ｐｏｐｏｖ，Ｙ．，Ｔｓｅｎｇ，Ｙ．－Ｈ．＆Ｋｏｋｋｏｔｏ
ｕ，Ｅ．（２０１３）Ａｎｔｉ－ｍｅｌａｎｉｎ－ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｎｇ ｈｏｒ
ｍｏｎｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ ｃｈｒｏｎｉｃ ｅｘｐｅｒｉ
ｍｅｎｔａｌ ｃｏｌｉｔｉｓ ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕ
ｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ－Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｄ
Ｌｉｖｅｒ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，３０４，Ｇ８７６－Ｇ８８４．
４７０．Ｚｌｏｔｎｉｋ，Ａ．，ａｎｄ Ｏ．Ｙｏｓｈｉｅ．（２０００）Ｃｈｅｍｏｋ
ｉｎｅｓ：ａ ｎｅｗ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｔｈｅ
ｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，１２：１２１－７．
雄性ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥダブルノックアウト（ＤＫＯ）マウスにおける４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後のＳｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合として表される定量プラーク面積。 ４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスからの大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。 （ｉ）酸化的ＤＮＡ損傷のマーカーであるプラズマ８－ヒドロキシデオキシグアノシン（８－ＯＨ－ｄＧ）、並びに（ｉｉ）大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより推定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈におけるＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニット、ＮＯＸ－１及びＮＯＸ－４の遺伝子発現の誘導によって推定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後の酸化ストレスのマーカー。 （ｉ）市販のＥＬＩＳＡによって測定される、Ｓ１００Ａ８／Ａ９の循環血漿レベル、（ｉｉ）自社のＥＬＩＳＡによって測定される、血漿ＡＧＥレベル、（ｉｉｉ）Ａｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクルの４週間注入後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＨＰＬＣによって測定される、ＡＧＥ前駆体であるメチルグリオキサールの循環レベルを含む、ＲＡＧＥリガンドの発現。 ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける４週間のＡｎｇ ＩＩ（１μｇ／ｋｇ／ｍｉｎ）又はビヒクル対照注入後の、テールカフプレチスモグラフィーによって測定される収縮期血圧。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、対照ａｐｏＥ－ＫＯマウスに対して、＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＳｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合として表される定量プラーク面積。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。 （ｉ）酸化的ＤＮＡ損傷のマーカーであるプラズマ８－ヒドロキシデオキシグアノシン（８－ＯＨ－ｄＧ）、並びに（ｉｉ）大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより推定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈におけるＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニット、ＮＯＸ－１及びＮＯＸ－４の遺伝子発現の誘導によって推定される、６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでの酸化ストレスのマーカー。 ６週間にわたり０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料に曝露されたａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＥＬＩＳＡによって測定される、可溶性ＭＣＰ－１及びＩＣＡＭ－１の循環レベル。 動的フローアッセイによって測定される、低ナトリウム食又は通常飼料への１週間前の曝露後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスの大動脈表面にエクスビボで付着する標識白血球の数。 （ｉ）市販のＥＬＩＳＡによって測定される、Ｓ１００Ａ８／Ａ９の循環血漿レベル、（ｉｉ）自社のＥＬＩＳＡによって測定される、血漿ＡＧＥレベル、及び（ｉｉｉ）６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのＨＰＬＣによって測定される、ＡＧＥ前駆体であるメチルグリオキサールの循環レベルを含む、ＲＡＧＥリガンドの発現。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのテールカフプレチスモグラフィーによって測定される、収縮期血圧。 ６週間の０．０５％（低）ナトリウム食又は通常飼料後のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスでのラジオイムノアッセイによって測定される、（ｉ）ナトリウム排泄の減少、（ｉｉ）血漿レニン活性の増加、（ｉｉｉ）血漿アルドステロンレベルの増加を含む、ＲＡＡＳの活性化のマーカー。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、通常飼料のａｐｏＥ－ＫＯマウスに対して、ｐ＜０．０５。＃は、ａｐｏＥ－ＫＯマウス＋低ナトリウムに対するものである。 ラジオイムノアッセイによって測定される、遺伝的Ａｃｅ２欠損を有するか又は有しない、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける血中Ａｎｇ ＩＩ濃度。 遺伝的Ａｃｅ２欠損を有するか又は有しない、１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける、テールカフプレチスモグラフィーによって測定される収縮期血圧。 遺伝的Ａｃｅ２欠損を有するか又は有しない、１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける、Ｓｕｄａｎ ＩＶ染色陽性の大動脈弓表面積の割合として表される定量プラーク面積。 Ａｃｅ２及び／又はＲＡＧＥの存在下又は非存在下における、ａｐｏＥ－ＫＯマウスからの大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの大動脈発現。 酸化的ＤＮＡ損傷のマーカーであるプラズマ８－ヒドロキシデオキシグアノシン（８－ＯＨ－ｄＧ）によって推定される、１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス、ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯ及びＡｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥトリプルＫＯ（ＴＫＯ）マウスの酸化ストレス。 （ｉ）市販のＥＬＩＳＡによって測定される、Ｓ１００Ａ８／Ａ９の循環血漿レベル、（ｉｉ）１８週齢のａｐｏＥ－ＫＯマウス、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウス、ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯ及びＡｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ ＴＫＯマウスにおいて、自社のＥＬＩＳＡによって測定される、血漿ＡＧＥレベルを含む、ＲＡＧＥリガンドの発現。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスに対するものである。 Ａｎｇ ＩＩ又はビヒクルにエクスビボで曝露した後の大動脈ホモジネートでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより測定される、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯにおける、ＡＧＥＲ自体、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα、ＭＣＰ－１及びＩＬ－６）並びにマクロファージマーカー（Ｍａｃ－１／Ｃｄ１１ｂ）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの大動脈発現。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、未処置ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩに対して；ｐ＜０．０５。 動的フローアッセイによって測定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）又はビヒクル対照への４時間のエクスビボ曝露後の内皮活性化のマーカーとしての、ａｐｏＥ－ＫＯマウス及びＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯの大動脈表面に付着する標識白血球の数。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、未処置ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩに対するＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯ＋Ａｎｇ ＩＩである；ｐ＜０．０５。 Ａｎｇ ＩＩによる前処理（１μＭで２時間）の存在下又は非存在下における、Ｃ５７ｂｌ６又はＡＧＥＲ－ＫＯマウスからの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）の単層に付着した標識ＴＨＰ－１単球の数。 Ｃ５７ｂｌ６からの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）及びＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）又はビヒクル対照への曝露後のＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのＰＭＡＥＣでのリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより測定される、ＡＧＥＲ自体、重要な接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）、炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα及びＭＣＰ－１）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。 （ｉ）フローチャンバーアッセイにおけるＤＣＦＨ蛍光の誘導、及び（ｉｉ）ＧＴＰ活性化ＮＡＤＰＨオキシダーゼサブユニット、Ｒａｃ－１のレベル、及び（ｉｉｉ）酸化型グルタチオンのレベルによって推定される、ｃ５７ｂｌ６マウス及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのＰＭＡＥＣにおけるＡｎｇ ＩＩ又はビヒクル対照への曝露後の酸化ストレスのマーカー。 Ａｎｇ ＩＩへの曝露後のＣ５７ｂｌ６及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）の単層における、ＶＣＡＭ－１及びＮＦκＢ（それぞれＣＸＣＬ１２及びＣＸＣＬ２）を介した非標準及び標準シグナル伝達のマーカーの遺伝子発現。リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＰＭＡＥＣ。ＴＮＦαは、標準的な特定の対照として示される。ＶＣＡＭ－１は、図４Ｄでデータを複製する標的特異的対照として示される。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定される、ＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）で処置されたＣ５７ｂｌ６及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからの一次マウス大動脈内皮細胞（ＰＭＡＥＣ）における、接着分子（ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１）及び炎症性サイトカイン及びケモカイン（ＴＮＦα及びＭＣＰ－１）を含む、アテローム性動脈硬化誘発メディエーターの発現。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、記号は、＊が未処置野生型ＰＭＡＥＣに対して；＃がＳ１００Ａ８／Ａ９で処置された野生型ＰＭＡＥＣに対するものを意味する、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって推定される、ＲＡＧＥ若しくはＮＦκＢサブユニットｐ６５の発現がｓｉＲＮＡを用いて選択的にサイレンシングされたか、又は変化させず（スクランブルＲＮＡ対照）、続いてＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）若しくはＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）に曝露された、ＰＭＡＥＣの単層における重要な接着タンパク質であるＶＣＡＭ－１の遺伝子発現。 （ｉ）ＩＰ－１によって推定されるイノシトールリン酸合成の誘導、及び（ｉｉ）初期増殖応答遺伝子（ＥＧＲ１）の下流誘導を含む、ｃ５７ｂｌ６マウス及びＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）によるＡＴ１Ｒの活性化後に誘導されるＧｑ媒介シグナル伝達のマーカー。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、特に明記しない限り、＊は、未処置野生型対照ＰＭＡＥＣに対して、＃は、Ａｎｇ ＩＩ処置野生型対照に対して、ｐ＜０．０５。 全長型ヒトＲＡＧＥの追加的な発現を伴い又は伴わず、ヒトＡＴ１Ｒの発現の存在下又は非存在下において、ＣＨＯ細胞のＩＰ－１レベルによって推定される、外因性Ａｎｇ ＩＩに対する古典的な反応性のマーカーである、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）に反応したイノシトールリン酸合成の誘導。 全長型ヒトＲＡＧＥの追加的な発現を伴い又は伴わず、ヒトＡＴ１Ｒの発現の存在下又は非存在下において、ＣＨＯ細胞におけるＥＧＲ１遺伝子の下流誘導によって推定される、外因性Ａｎｇ ＩＩに対する反応性のマーカーである、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）に反応したＥＧＲ１発現の誘導。 （ｉ）化学発光ＳＥＡＰレポーター遺伝子アッセイ、及び（ｉｉ）全長型ヒトＲＡＧＥの追加的な発現を伴い又は伴わない、ヒトＡＴ１ＲのＣＨＯ細胞における発現の存在下又は非存在下におけるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導、及び（ｉｉｉ）ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥシグナル伝達の完全性の対照としてのＲＡＧＥリガンド、Ｓ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）への曝露後によって測定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＮ末端トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導及びＮＦκＢ活性の化学発光ＳＥＡＰレポーター遺伝子アッセイによって測定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＣ欠損型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導及びＮＦκＢ活性の化学発光ＳＥＡＰレポーター遺伝子アッセイによって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＮ末端トランケート型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 全長ヒトＲＡＧＥ及びＣ欠損型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下又は非存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍＬ）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ、１群あたりｎ＝６、＊は、ベクター（ｎｅｏ）－形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 ｍＣｈｅｒｒｙと融合していないＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、特に明記しない限り、未処置ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯに対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥの細胞外ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有するデコイ受容体（可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とするＲＡＧＥ中和抗体は、ＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＮＦκＢサブユニットｐ６５の発現によって推定されるように、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞においては、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によるが、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）によらず、炎症促進性シグナル伝達の誘導を阻害する。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６、＊は、ビヒクル単体に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥの細胞外ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有するデコイ受容体（可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１；ｓＲＡＧＥ）を標的とするＲＡＧＥ中和抗体は、主要な接着遺伝子であるＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１並びに炎症性ケモカイン遺伝子（ＭＣＰ－１）の誘導によって推定されるように、野生型マウスからのＰＭＡＥＣにおいては、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）により炎症促進性シグナル伝達の誘導を阻害しない。ＡＧＥＲ－ＫＯマウスからのデータがネガティブコントロールとして示されている。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６、＊は、ビヒクル単体で処置された対照細胞に対して（白のバー）、＃は、Ａｎｇ ＩＩ単体で処置された対照細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥの細胞外ドメイン（ＲＡＧＥａｂ）又はリガンド結合親和性を有するデコイ受容体（可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１）を標的とするＲＡＧＥ中和抗体は、主要な接着遺伝子であるＩＣＡＭ－１の誘導によって推定されるように、野生型マウスからのＰＭＡＥＣにおいては、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９により炎症促進性シグナル伝達の誘導を阻害する。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６、＊は、ビヒクル単体で処置された対照細胞に対して（白のバー）、＃は、Ｓ１００Ａ８／Ａ９単体で処置された対照細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、全長野生型ＲＡＧＥ２２－４０４又は選択されたＳ３９１－ＲＡＧＥ２２－４０４変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍｌ；灰色のバー）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ；黒のバー）による炎症性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、全長ＲＡＧＥを発現するビヒクル処置ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ｓ３９１（キメラＲＡＧＥ；ｃＲＡＧＥ）以外の細胞質側テールにリン酸化可能なモチーフを欠くキメラＲＡＧＥ及び細胞質側テールにいかなるリン酸化可能なモチーフも完全に欠くＳ３９１－ｃＲＡＧＥ変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍｌ）又はＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症促進性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、全長キメラＲＡＧＥを発現するビヒクル処置ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に対して；ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、全長又はＮ末端トランケート型Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症促進性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ベクター形質導入ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞に対して、ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ｓ３９１－ＲＡＧＥ３６２－４０４変異体も発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞における野生型ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下でのＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症促進性シグナル伝達の誘導。データは、平均±ＳＥＭを示す；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９（５ｎｇ／ｍｌ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド依存性誘導の誘導に対するｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＭｙＤ８８発現の選択的抑制の効果。ｓｉＲＮＡを使用したＲＡＧＥシグナル伝達の別の下流メディエーターである、ｐ６５発現の選択的抑制は、ポジティブコントロールとして示されている。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＭｙＤ８８発現の選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＭｙＤ８８発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によるＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達の誘導に対する、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるＰＫＣζ（ｉＰＫＣｚ）の偽基質又はＰＫＣζ（ｓｉＰＫＣｚ）若しくはＲＡＧＥ（ｓｉＲＡＧＥ）若しくはスクランブル対照の発現を標的とするｓｉＲＮＡを使用したＰＫＣζの選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の遺伝子発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層における、ＰＫＣζ（ｉＰＫＣζ）の偽基質又はＰＫＣζ（ｓｉＰＫＣζ）を標的とするｓｉＲＮＡを使用した、ＰＫＣζ発現の選択的抑制の効果。列１及び２には、スクランブルｓｉＲＮＡ対照が含まれる。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＲｅｌＡ／ｐ６５及びＰＣＮＡの遺伝子発現によって推定される、Ｓ３９１（ｃＲＡＧＥ）以外の細胞質側テールにリン酸化可能なモチーフを欠くキメラＲＡＧＥ及びＳ３９１Ｑ－ＲＡＧＥ変異（Ｓ３１９Ｑ－ｃＲＡＧＥ）も含有し、それにより細胞質側テールの全てのリン酸化部位を除去するｃＲＡＧＥを発現するＣＨＯ細胞における、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）によるｐ６５及びＰＣＮＡのＲＡＧＥリガンド非依存性誘導に対するＰＫＣζ（ＰＫＣζｉ）の偽基質を使用したＰＫＣζ発現の選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＰＫＣζ発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によるＲＡＧＥリガンド依存性シグナル伝達の誘導に対する、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡを使用したＤｉａｐｈ１発現の選択的抑制の効果。ｓｉＲＡＧＥのデータは、対照として含まれている。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞における、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９によって誘導されるシグナル伝達及びＡｎｇ ＩＩによって誘導されるＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達に対する、荷電パッチであって、それを介してＤｉａｐｈ１とＲＡＧＥが推定的に相互作用するものを選択的に破壊するＲ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡＧＥ変異の特異的効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）によって誘導されるＲＡＧＥリガンド非依存性シグナル伝達の誘導に対する、Ｃ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡを使用したＤｉａｐｈ１発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５。 Ａｎｇ ＩＩへの暴露後の内皮単層への白血球接着の誘導に対する、ＳＶＥＣの単層における、スクランブル制御とは対照的に、ｓｉＲＮＡを使用した、Ｄｉａｐｈ１又はＡＧＥＲ発現の選択的抑制。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ａｎｇ ＩＩによって誘導されるシグナル伝達に対する、荷電パッチであって、それを介してＤｉａｐｈ１とＲＡＧＥが推定的に相互作用するものが破壊又は欠失されるＲ３６６Ａ－Ｑ３６７Ａ－ＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＤｉａｐｈ１発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブルｓｉＲＮＡで処置したビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって測定される、Ａｎｇ ＩＩによって誘導されるシグナル伝達に対する、阻害性ペプチドＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４で前処理されたＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞における、全長型ＲＡＧＥ、トランケート型ＲＡＧＥ又はＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５。特に明記しない限り、データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって推定される、Ａｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層における、スクランブル対照と対比した、ＩＱＧＡＰ－１を標的とするｓｉＲＮＡを使用したＩＱＧＡＰ－１発現の選択的抑制の効果。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド依存性誘導の誘導に対するＣ５７ｂｌ６マウスからのＰＭＡＥＣの単層における、スクランブル対照と対比した、ｓｉＲＮＡを使用したＩＱＧＡＰ－１発現の選択的抑制の効果。 変異体ＲＡＧＥの細胞質側テール（Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４）でコーティングされたカラムを使用して他のサイトゾル成分からＩＱＧＡＰ－１として同定されるタンパク質並びにＩＱＧＡＰ－１関連タンパク質、エズリン／ラディキシン／モエシン及びＧＰＣＲ嗅覚受容体２Ｔ２のプルダウン。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＭＣＰ－１の発現によって推定される、ＲＡＧＥ３６２－４０４の存在下及び非存在下におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）による炎症性シグナル伝達のＲＡＧＥリガンド非依存性誘導の誘導に対するＨＭＥＣの単層におけるｓｉＲＮＡ又はスクランブル対照を使用したＩＱＧＡＰ－１発現の選択的抑制の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、スクランブル対照に対して、ｐ＜０．０５、＃は、スクランブル＋リガンド（Ａｎｇ ＩＩ又は適切な場合にはｓ１００Ａ８／Ａ９）に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＴ－ＰＣＲによって測定される、対照としてのベクター単体（ｐｃ－Ｎｅｏ）と比較した、Ａｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１の誘導に対するマウスＳＶＥＣのＲＡＧＥ又はＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して；＃は、ｎｅｏ＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 阻害活性を有する最小の断片を同定するための、マウスＳＶＥＣにおけるＡｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１の誘導に対するトランケート型ＲＡＧＥ変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 ｍＣｈｅｒｒｙと融合していない変異体及びＮ末端トランケート型ＲＡＧＥ構築物の発現の存在下において、ＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導によって推定される、ＲＡＧＥ－ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯにおけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）への曝露後のＮＦκＢ活性化の阻害。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 マウスＳＶＥＣのＡｎｇ ＩＩによるＩＣＡＭ－１の誘導に対するＲＡＧＥ３７０－３９０の単一部位特異的アラニン又はリジン変異体による形質導入の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＲＡＧＥ３７９－３９０とストレプトマイセスの抗炎症タンパク質及び他の微生物からのタンパク質との配列相同性。 ＴＡＴ－Ｃｈｅｒｒｙ単体（８μｇ）と比較した場合の、ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ（１μＭ；黒のバー）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導に対する、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異を伴わない又は伴うＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４（０．４ｎｇ／ｍｌ）の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドによって達成されるシグナル伝達の阻害は、野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドでの前処置によって逆転しない。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して；ｐ＜０．０５。 ＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドによって達成されるシグナル伝達の阻害は、千倍過剰の野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドでの後処置にかかわらず観察される。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 リン酸化に利用可能な標的のない全長型Ｓ３９１Ｑ－ｃＲＡＧＥで形質導入したＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＡｎｇ ＩＩに応答したｐ６５及びＰＣＮＡ遺伝子発現の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの阻害効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、Ａｎｇ ＩＩに対して、＃は、全長野生型ＲＡＧＥに対して；ｐ＜０．０５。 Ａｎｇ ＩＩに応答したＲＡＧＥ欠損ＰＭＡＥＣの炎症促進性遺伝子発現の誘導に対する野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチド（０．４ｎｇ／ｍｌ）の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、未処置対照に対して、ｐ＜０．０５。 対照としてのＴＮＦαへの応答と、Ａｎｇ ＩＩに応答するＰＭＡＥＣにおける炎症促進性ＶＣＡＭ－１、ＣＸＣＬ２及びＣＸＣＬ１２遺伝子発現の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル及び処置対照（ＴＡＴ）に対して、＃は、Ａｎｇ ＩＩ及び処置対照（ＴＡＴ）に対して；ｐ＜０．０５。 ＨＡＥＣのＡｎｇ ＩＩに応答した炎症促進性遺伝子発現の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチド及びＡＴ１Ｒブロッカー、イルベサルタンの効果。 （ｉ）対照として示された不活性な全長型Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ変異体を発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞と、全長型ＲＡＧＥも発現するＡＴ１Ｒ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９に応答した炎症促進性遺伝子発現（ｐ６５）の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの阻害効果。（ｉｉ）ＲＡＧＥ中、内因的に十分に存在するＰＭＡＥＣ細胞におけるＡｎｇ ＩＩ又はＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９に応答した炎症促進性遺伝子発現（ＶＣＡＭ－１）の誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドの阻害効果。特に明記しない限り、データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６～８、＊は、ビヒクル対照に対して、ｐ＜０．０５、＃は、対照＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 ａｐｏＥ－ＫＯマウスからの大動脈全体をＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）にエクスビボで曝露した後の炎症促進性マーカーのＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＳ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝６、＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋ビヒクル＋ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５、＃は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ対照＋Ａｎｇ ＩＩに対して、ｐ＜０．０５。 ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＫＯマウスからの大動脈全体をＡｎｇ ＩＩ（１μＭ）にエクスビボで曝露した後の炎症促進性マーカーのＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対する野生型ＲＡＧＥ３６２－４０４の効果。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８、＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ＋ビヒクル＋ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ対照に対して、ｐ＜０．０５。 ａｐｏＥ－ＫＯ及びＡｃｅ２／ＡＧＥＲ／ａｐｏＥトリプルＫＯマウスにおける大動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対する、ｍＣｈｅｒｒｙ蛍光タンパク質で標識されたＲＡＧＥのＣ末端の４２アミノ酸及び細胞透過を促進するＨＩＶ－ＴＡＴモチーフを含むＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４のアテローム性動脈硬化誘発効果。これは、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける大動脈アテローム性動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の抗アテローム性動脈硬化効果と比較される。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８；＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して；＃は、Ａｃｅ２／ａｐｏＥ－ＤＫＯ対照に対して；ｐ＜０．０５。 糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯ及び糖尿病ＡＧＥＲ／ａｐｏＥ－ＤＫＯマウスにおける大動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対する、ｍＣｈｅｒｒｙ蛍光タンパク質で標識されたＲＡＧＥのＣ末端の４２アミノ酸及び細胞透過を促進するＨＩＶ－ＴＡＴモチーフを含むＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４ペプチドのアテローム性動脈硬化誘発効果。これは、糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯマウスにおける大動脈アテローム性動脈硬化のＡｎｇ ＩＩ依存性誘導に対するＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の抗アテローム性動脈硬化効果と比較される。データは、平均±ＳＥＭ；１群あたりｎ＝８；＊は、ａｐｏＥ－ＫＯ対照に対して、＃は、糖尿病ａｐｏＥ ＤＫＯ対照に対して；ｐ＜０．０５。 示される通り、ＡＧＥＲ発現を伴う又は伴わない、マウス及び糖尿病ａｐｏＥ－ＫＯマウスの収縮期血圧に対する、ＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－ＲＡＧＥ３６２－４０４及びＴＡＴ－ｍＣｈｅｒｒｙ－Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０４の効果の欠如。 ＡＴ１／Ｒｌｕｃ８及びＲＡＧＥ／ＶｅｎｕｓによるＢＲＥＴ飽和曲線は、可溶性ＲＡＧＥ２２－３３１（ｓＲＡＧＥ）を伴う又は伴わないＡｎｇ ＩＩ又はビヒクル添加の６０分後に生成された。データは、３つの独立した実験から結合される。 対照としてのＡＴ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＡｎｇ ＩＩ誘導性動員及びＣＣＲ４／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２２誘導性動員。 Ａｎｇ ＩＩへの曝露後のＡＴ１受容体の存在下であり、ＣＣＬ２２への曝露後のＣＣＲ４の存在下ではない、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／ＶｅｎｕｓのＡｎｇ ＩＩ誘導性動員。 Ｇαｉ／Ｎｌｕｃ及びＧγ２／Ｖｅｎｕｓが非標識ＣＣＲ４の存在下で共発現されると、ＣＣＬ２２誘導ＢＲＥＴシグナルが観察される。 ＡＴ１受容体の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のＡｎｇ ＩＩ誘導性動員。ＡＴ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＡｎｇ ＩＩ誘導性動員は、対照として含まれている。 ＴＲＨ受容体１（ＴＲＨＲ１）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のサイロトロピン放出ホルモン（ＴＲＨ）誘導性の弱い動員。ＴＲＨＲ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＴＲＨ誘導性動員は、対照として含まれている。挿入図は、ｙ軸スケールを拡大した同一のデータを示す。 オレキシン受容体１（ＯｘＲ１）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のオレキシンＡ（ＯｘＡ）誘導性動員。ＯｘＲ１／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＯｘＡ誘導性動員は、対照として含まれている。 ＢＤＫ受容体２（ＢＤＫＲ）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のブラジキニン（ＢＤＫ）誘導性の弱い動員。ＢＤＫＲ／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＢＤＫ誘導性動員は、対照として含まれている。挿入図は、ｙ軸スケールを拡大した同一のデータを示す。 バソプレシン受容体２（Ｖ２Ｒ）の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のアルギニンバソプレシン（ＡＶＰ）誘導性動員。Ｖ２Ｒ／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＡＶＰ誘導性動員は、対照として含まれている。 ＣＣＲ２の非存在下ではなく存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）のＣＣＬ２（ＭＣＰ１）誘導性動員。ＣＣＲ２／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＭＣＰ－１誘導性動員は、対照として含まれている。 特にＣＣＲ５の非存在下での対照と比較した、ＭＩＰ１βへの曝露後のＣＣＲ５の存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－アレスチン２／Ｖｅｎｕｓ（β－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓ）の、ＣＣＬ４（ＭＩＰ１β）誘導性の特に弱い動員。ＣＣＲ５／Ｒｌｕｃ８へのβａｒｒｅｓｔｉｎ２／ＶｅｎｕｓのＭＩＰ１β誘導性動員は、さらなる対照として含まれている。挿入図は、ｙ軸スケールを拡大した同一のデータを示す。全てのデータは、３回の独立した実験の平均±ＳＥＭである。 ＣＣＲ１の存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ３誘導性動員。 ＣＣＲ２の存在下でのＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２誘導性動員。 ＣＣＲ４の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２２誘導性動員の欠如。 ＣＣＲ５の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ４誘導性動員の欠如。 ＣＣＲ６の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２０誘導性動員。 ＣＣＲ７の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ１９誘導性動員。 ＣＣＲ１０の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＣＬ２７誘導性動員の欠如。 ＣＸＣＲ１の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ８誘導性動員。 ＣＸＣＲ２の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ８誘導性動員。 ＣＸＣＲ３の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ１１誘導性動員の欠如。 ＣＸＣＲ４の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８へのβ－ａｒｒ２／Ｖｅｎｕｓの近接性のＣＸＣＬ１２誘導性減少。 ＣＸＣＲ６の存在下での、ＲＡＧＥ／Ｒｌｕｃ８に近接したβ－ａｒｒ２／ＶｅｎｕｓのＣＸＣＬ１６誘導性動員。全てのデータは、３回の独立した実験の平均±ＳＥＭである。 時間ゼロで、示された濃度で、示されたリガンドによって活性化された、示された非ＢＲＥＴ標識ＧＰＣＲの存在下における、Ｖｅｎｕｓ標識された示された細胞内コンパートメントマーカーへのＲｌｕｃ８標識ＲＡＧＥの近接。 ＲＡＧＥ共発現の存在下又は非存在下でＣＣＲ２を発現するＣＨＯ細胞におけるＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ共発現の存在下又は非存在下でＣＸＣＲ２を発現するＣＨＯ細胞におけるＣＸＣＬ２（ＩＬ－８）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ活性化のペプチド阻害剤、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４の存在下又は非存在下で骨髄由来初代マクロファージにおけるＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）によるＮＦκＢサブユニットｐ６５の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ活性化のペプチド阻害剤、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４の存在下又は非存在下でＨＭＥＣにおけるＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）によるＭＣＰ－１の遺伝子発現の自己誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ＲＡＧＥ活性化のペプチド阻害剤、Ｓ３９１Ａ－ＲＡＧＥ３６２－４０ ４の存在下又は非存在下でＣＸＣＲ２を発現するＨＭＥＣにおけるＩＬ－８によるＭＣＰ－１の遺伝子発現の誘導により測定されるＮＦκＢの活性化。 ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１とＮｌｕｃ／ＡＴ１間のＢＲＥＴは、Ａｎｇ ＩＩで増加する。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～５である。 示されるように、細胞が２００ｎｇ又は４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡによっても形質導入された場合のＡＴ１／Ｒｌｕｃ８及びＲＡＧＥ／ＶｅｎｕｓによるＢＲＥＴ飽和曲線は、ビヒクル又はＡｎｇ ＩＩの添加の６０分後に生成された。データは、３つの独立した実験から結合される。 示されるように、細胞が０、５０、１００、２００、３００又は４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡ又はｐｃＤＮＡ３制御プラスミドによっても形質導入された場合のＡＴ１／Ｒｌｕｃ８とＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓとの間のＢＲＥＴシグナルのＡｎｇ ＩＩ誘導性調節。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～４である。フィルター：Ｖｅｎｕｓ ５５０ｎｍ／Ｒｌｕｃ８ ４５０ｎｍ。 示されるように、細胞が５０ｎｇのＡＴ１／Ｒｌｕｃ８ ｃＤＮＡ、３００ｎｇのＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓ ｃＤＮＡ及び０、５０、１００、２００、３００又は４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡ又はｐｃＤＮＡ３制御プラスミドによって形質導入された場合のＡＴ１／Ｒｌｕｃ８とｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１との間のＡｎｇ ＩＩ誘導性ＢＲＥＴシグナルの欠如。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～４である。フィルター：ｍＣｈｅｒｒｙ ６５０ｎｍ／Ｒｌｕｃ８ ４５０ ｎｍ。 図２１Ｃ及び２１Ｄに示す実験におけるＡＴ１／Ｒｌｕｃ８からの発光、ＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓからの蛍光、ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１からの蛍光。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝３～４である。 示されるように、細胞がｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１ｃＤＮＡ又はｐｃＤＮＡ３制御プラスミドによっても形質導入された場合のＧＰＣＲ／Ｒｌｕｃ８とＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓとの間のＢＲＥＴシグナルのリガンド誘導性調節。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝２～４である。フィルター：Ｖｅｎｕｓ ５５０ｎｍ／Ｒｌｕｃ８ ４５０ｎｍ。形質導入されたｃＤＮＡの量：５０ｎｇ ＧＰＣＲ／Ｒｌｕｃ８＋３００ｎｇ ＲＡＧＥ／Ｖｅｎｕｓ＋４００ｎｇのｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１又はｐｃＤＮＡ３。示された濃度、時間ゼロで、示されたリガンドによって活性化された示されたＲｌｕｃ８標識ＧＰＣＲ。 ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３３８－３６１によって阻害されたＨＭＥＣ１におけるＡｎｇ ＩＩ媒介炎症促進性シグナル伝達（ＩＣＡＭ－１発現）は、ｍＣｈｅｒｒｙ／ＲＡＧＥ３６２－４０４によってレスキューされる。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲを使用して測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって表されるように、ＨＭＥＣ細胞におけるＡｎｇ ＩＩによる炎症誘発性シグナル伝達の誘導は、発現をモニターするためのＮ末端ｍＣｈｅｒｒｙ融合を有する又は有しないＲＡＧＥ膜貫通ドメインＲＡＧＥ３４３－３６１の過剰発現により阻害される。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲを使用して測定されるｐ６５の発現によって表されるように、ＲＡＧＥ－ＣＨＯ細胞におけるＲＡＧＥリガンドＳ１００Ａ８／Ａ９による炎症誘発性シグナル伝達の誘導は、ＲＡＧＥ膜貫通ドメインＲＡＧＥ３４３－３６１単独又はＲＡＧＥ３７０－３９０の過剰発現により阻害される。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。 リアルタイムＲＴ－ＰＣＲによって測定されるＩＣＡＭ－１の発現によって表されるように、ＨＭＥＣ細胞におけるＡｎｇ ＩＩによる炎症誘発性シグナル伝達の誘導は、Ｄｉａｐｈ１又はＰＫＣｚを標的とするｓｉＲＮＡによって阻害される。この阻害は、ＲＡＧＥ３６２－４０４によってレスキューされるが、ＲＡＧＥ３４３－４０４によってレスキューされない。データは、平均値±ＳＥＭとして表され、ｎ＝６～８である。

Claims (91)

  1. ＲＡＧＥ活性のモジュレーターであって、前記ＲＡＧＥ活性が活性な共存ＧＰＣＲによ
    って誘導される、モジュレーター。
  2. 活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化のモジュ
    レーターである、請求項１に記載のモジュレーター。
  3. 活性化された共存ＧＰＣＲによって誘導されるＲＡＧＥ依存性シグナル伝達のモジュレ
    ーターである、請求項１に記載のモジュレーター。
  4. 前記共存ＧＰＣＲは、炎症に関係付けられることを特徴とする、請求項１～３のいずれ
    か一項に記載のモジュレーター。
  5. 前記共存ＧＰＣＲは、細胞増殖に関係付けられることを特徴とする、請求項１～４のい
    ずれか一項に記載のモジュレーター。
  6. 前記共存ＧＰＣＲは、群：ＡＤＧＲＡ２、ＡＤＧＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＦ３
    、ＡＤＧＲＧ４、ＡＤＧＲＶ１、ＣＥＬＳＲ１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ３、ＯＸ１受
    容体、ＯＸ２受容体、ＰＴＨ１受容体、ＰＴＨ２受容体、ＡＭＹ１受容体、ＡＭＹ２受容
    体、ＡＭＹ３受容体、ＡＭ１受容体、ＡＭ２受容体、ＧＰＲ６３、ＧＰＲ７５、ＮＭＵ２
    受容体、ＯＰＮ５、Ｖ１Ｂ受容体、ｙ６受容体、５－ＨＴ４受容体、ＧＰＲ１０１、ＧＰ
    Ｒ１１９、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５０、
    ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５７、ＧＰＲ１９、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ３７、Ｇ
    ＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ５０、ＧＰＲ６２、ＬＧＲ５、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、ＮＴ
    Ｓ２受容体、ＯＰＮ４、ＯＰＮ４、ＯＲ１０Ａ７、ＯＲ１０ＡＧ１、ＯＲ１０Ｑ１、ＯＲ
    １０Ｗ１、ＯＲ１２Ｄ３、ＯＲ１３Ｃ２、ＯＲ１３Ｃ３、ＯＲ１３Ｃ４、ＯＲ１３Ｃ５、
    ＯＲ１３Ｃ８、ＯＲ１３Ｆ１、ＯＲ１３Ｇ１、ＯＲ１Ａ２、ＯＲ１Ｌ１、ＯＲ１Ｓ１、Ｏ
    Ｒ１Ｓ２、ＯＲ２ＡＫ２、ＯＲ２Ｄ２、ＯＲ２Ｄ３、ＯＲ４Ａ１５、ＯＲ４Ｃ１１、ＯＲ
    ４Ｃ１２、ＯＲ４Ｃ１３、ＯＲ４Ｃ１５、ＯＲ４Ｃ１６、ＯＲ４Ｋ１３、ＯＲ４Ｋ１４、
    ＯＲ４Ｋ１５、ＯＲ４Ｋ１７、ＯＲ４Ｎ５、ＯＲ５ＡＣ２、ＯＲ５ＡＫ２、ＯＲ５ＡＰ２
    、ＯＲ５ＡＲ１、ＯＲ５ＡＳ１、ＯＲ５Ｂ１２、ＯＲ５Ｂ１７、ＯＲ５Ｂ２、ＯＲ５Ｂ２
    １、ＯＲ５Ｂ３、ＯＲ５Ｄ１３、ＯＲ５Ｄ１４、ＯＲ５Ｄ１６、ＯＲ５Ｄ１８、ＯＲ５Ｆ
    １、ＯＲ５Ｉ１、ＯＲ５Ｊ２、ＯＲ５Ｋ３、ＯＲ５Ｌ１、ＯＲ５Ｌ２、ＯＲ５Ｍ１、ＯＲ
    ５Ｍ１０、ＯＲ５Ｍ１１、ＯＲ５Ｍ３、ＯＲ５Ｍ８、ＯＲ５Ｍ９、ＯＲ５Ｒ１、ＯＲ５Ｔ
    １、ＯＲ５Ｔ２、ＯＲ５Ｔ３、ＯＲ５Ｗ２、ＯＲ６Ｃ７４、ＯＲ６Ｋ６、ＯＲ６Ｍ１、Ｏ
    Ｒ６Ｑ１、ＯＲ６Ｘ１、ＯＲ８Ｈ１、ＯＲ８Ｈ２、ＯＲ８Ｈ３、ＯＲ８Ｊ１、ＯＲ８Ｊ３
    、ＯＲ８Ｋ１、ＯＲ８Ｋ３、ＯＲ８Ｋ５、ＯＲ８Ｕ１、ＯＲ８Ｕ８、ＯＲ９Ａ４、ＯＲ９
    Ｇ１、ＯＲ９Ｇ４、ＯＲ９Ｇ９、ＯＲ９Ｑ２、ＴＡＡＲ３、ＴＰＲＡ１、Ｙ４受容体、５
    －ＨＴ１Ｄ受容体、５－ＨＴ１Ｅ受容体、ＡＤＧＲＢ１、ＡＴ２受容体、ＢＢ１受容体、
    ＢＢ３受容体、ＣＧＲＰ受容体、ＣＲＦ１受容体、ＣＲＦ２受容体、ＥＴＡ受容体、ＥＴ
    Ｂ受容体、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＡＢ受容体、Ｇ
    ＡＢＡＢ１、ＧＡＢＡＢ２、ＧＡＬ１受容体、ＧＩＰ受容体、ＧＬＰ－１受容体、ＧＬＰ
    －２受容体、グルカゴン受容体、ＧｎＲＨ２受容体、ＧＰＥＲ、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１
    ３９、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５８、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７９、ＧＰ
    Ｒ３９、ＧＰＲ４５、ＧＰＲ８８、ＧＰＲＣ５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、Ｈ３受
    容体、ＨＣＡ１受容体、ＬＰＡ１受容体、ＬＰＡ３受容体、ＬＰＡ４受容体、ＭＣ２受容
    体、ＭＣ４受容体、ｍＧｌｕ２受容体、ｍＧｌｕ３受容体、モチリン受容体、ＭＲＧＰＲ
    Ｄ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ３、ＮＫ２受容体、ＮＰＦＦ１受容体、ＮＰＦＦ２受
    容体、ＮＰＳ受容体、ＮＴＳ１受容体、ＯＲ１Ｄ２、ＯＲ２ＡＧ１、ＯＴ受容体、ＰＡＣ
    １受容体、ＲＸＦＰ１受容体、セクレチン受容体、ＴＳＨ受容体、ＵＴ受容体、Ｖ１Ａ受
    容体、Ｖ２受容体、α２Ａ－アドレナリン受容体、α２Ｂ－アドレナリン受容体、α２Ｃ
    －アドレナリン受容体、β１－アドレナリン受容体、β３－アドレナリン受容体、５－Ｈ
    Ｔ１Ｂ受容体、５－ＨＴ１Ｆ受容体、５－ＨＴ２Ｂ受容体、５－ＨＴ２Ｃ受容体、５－Ｈ
    Ｔ５Ａ受容体、５－ＨＴ６受容体、５－ＨＴ７受容体、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＦ１、
    ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ５、カルシトニン受容体様受容体、ＣＢ１受容
    体、ＣＢ２受容体、ＣＣＫ１受容体、ＣＣＫ２受容体、ＣＴ受容体、Ｄ１受容体、Ｄ２受
    容体、Ｄ３受容体、Ｄ４受容体、Ｄ５受容体、ＦＦＡ１受容体、ＦＦＡ３受容体、ＦＳＨ
    受容体、ＦＺＤ１、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＧＨＲＨ受容体、ＧｎＲＨ１受容体、ＧＰＢＡ
    受容体、ＧＰＲ１、ＧＰＲ１１９、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１
    ４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ
    １７３、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ
    ２２、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ
    ６１、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、Ｇ
    ＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６受容体、ＨＣＡ２受容体、ＨＣＡ３受容体、キスぺプチン受容体
    、ＬＧＲ４、ＬＧＲ６、ＬＨ受容体、ＬＰＡ２受容体、ＬＰＡ６受容体、Ｍ１受容体、Ｍ
    ２受容体、Ｍ３受容体、Ｍ４受容体、Ｍ５受容体、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ３受容体、ＭＣ５受
    容体、ＭＣＨ２受容体、ｍＧｌｕ４受容体、ｍＧｌｕ７受容体、ｍＧｌｕ８受容体、ＭＲ
    ＧＰＲＧ、ＮＯＰ受容体、ＮＰＢＷ１受容体、ＮＰＢＷ２受容体、ＯＰＮ３、ＯＲ１１Ｈ
    １、ＯＲ２Ａ１、ＯＲ２Ａ２、ＯＲ２Ａ４、ＯＲ２Ａ４２、ＯＲ２Ａ７、ＯＲ２Ｂ１１、
    ＯＲ２Ｂ６、ＯＲ２Ｃ１、ＯＲ２Ｃ３、ＯＲ２Ｊ３、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２Ｔ１１、ＯＲ
    ２Ｔ３４、ＯＲ２Ｗ３、ＯＲ３Ａ３、ＯＲ４Ｄ１０、ＯＲ４Ｍ１、ＯＲ４Ｑ３、ＯＲ５１
    Ａ２、ＯＲ５１Ａ４、ＯＲ５１Ａ７、ＯＲ５１Ｂ２、ＯＲ５１Ｂ４、ＯＲ５１Ｂ５、ＯＲ
    ５１Ｂ６、ＯＲ５１Ｄ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＲ５１Ｅ２、ＯＲ５１Ｆ１、
    ＯＲ５１Ｆ２、ＯＲ５１Ｇ１、ＯＲ５１Ｇ２、ＯＲ５１Ｉ１、ＯＲ５１Ｉ２、ＯＲ５１Ｊ
    １、ＯＲ５１Ｌ１、ＯＲ５１Ｍ１、ＯＲ５１Ｑ１、ＯＲ５１Ｓ１、ＯＲ５１Ｔ１、ＯＲ５
    １Ｖ１、ＯＲ５２Ａ１、ＯＲ５２Ａ４、ＯＲ５２Ａ５、ＯＲ５２Ｂ２、ＯＲ５２Ｂ４、Ｏ
    Ｒ５２Ｂ６、ＯＲ５２Ｄ１、ＯＲ５２Ｅ２、ＯＲ５２Ｅ４、ＯＲ５２Ｅ５、ＯＲ５２Ｅ６
    、ＯＲ５２Ｅ８、ＯＲ５２Ｈ１、ＯＲ５２Ｉ１、ＯＲ５２Ｉ２、ＯＲ５２Ｊ３、ＯＲ５２
    Ｋ１、ＯＲ５２Ｋ２、ＯＲ５２Ｌ１、ＯＲ５２Ｍ１、ＯＲ５２Ｎ１、ＯＲ５２Ｎ２、ＯＲ
    ５２Ｎ４、ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ５２Ｒ１、ＯＲ５２Ｗ１、ＯＲ５６Ａ１、ＯＲ５６Ａ３、
    ＯＲ５６Ａ４、ＯＲ５６Ａ５、ＯＲ５６Ｂ１、ＯＲ５６Ｂ４、ＯＲ６Ｖ１、ＯＲ７Ｄ２、
    ＯＲ９Ａ２、オキソグルタル酸受容体、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ８、Ｐ２Ｙ１２受容体、
    Ｐ２Ｙ４受容体、ＰｒＲＰ受容体、ＱＲＦＰ受容体、ＲＸＦＰ２受容体、ＲＸＦＰ４受容
    体、ｓｓｔ１受容体、ｓｓｔ２受容体、ｓｓｔ３受容体、ｓｓｔ４受容体、ｓｓｔ５受容
    体、ＴＡ１受容体、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、Ｔ
    ＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ
    １３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ
    ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４
    、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５
    、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、Ｔ
    ＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＲＨ１受容体、Ｙ１受容体、Ｙ２受容体、Ｙ５受容体、α
    １Ａ－アドレナリン受容体、α１Ｂ－アドレナリン受容体、α１Ｄ－アドレナリン受容体
    、δ受容体、５－ＨＴ１Ａ受容体、５－ＨＴ２Ａ受容体、Ａ１受容体、Ａ２Ａ受容体、Ａ
    ２Ｂ受容体、Ａ３受容体、ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、ＡＤＧＲ
    Ｅ１、ＡＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ５、アペリン受容体、ＡＴ１受容体、Ｂ
    １受容体、Ｂ２受容体、ＢＢ２（ＧＲＰ）受容体、ＢＬＴ１受容体、ＢＬＴ２受容体、Ｃ
    ３ａ受容体、Ｃ５ａ１受容体、Ｃ５ａ２受容体、ＣａＳ受容体、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、
    ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、
    ＣＣＲＬ２、ケメリン受容体、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、Ｃ
    ＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣｙｓＬＴ１受容体、ＣｙｓＬＴ２受容体、ＤＰ１
    受容体、ＤＰ２受容体、ＥＰ１受容体、ＥＰ２受容体、ＥＰ３受容体、ＥＰ４受容体、Ｆ
    ＦＡ２受容体、ＦＦＡ４受容体、ＦＰ受容体、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２／ＡＬＸ、ＦＰＲ２／
    ＡＬＸ、ＦＰＲ３、ＦＺＤ６、ＧＡＬ２受容体、ＧＡＬ３受容体、グレリン受容体、ＧＰ
    Ｒ１３２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３
    ２、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ４、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、Ｈ１受
    容体、Ｈ２受容体、Ｈ４受容体、ＩＰ受容体、ＬＰＡ５受容体、ＭＡＳ１、ＭＣ１受容体
    、ＭＣＨ１受容体、ｍＧｌｕ１受容体、ｍＧｌｕ５受容体、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＴ１受容
    体、ＭＴ２受容体、ＮＫ１受容体、ＮＫ３受容体、ＮＭＵ１受容体、ＯＸＥ受容体、Ｐ２
    Ｙ１受容体、Ｐ２Ｙ１１受容体、Ｐ２Ｙ１３受容体、Ｐ２Ｙ１４受容体、Ｐ２Ｙ２受容体
    、Ｐ２Ｙ６受容体、ＰＡＦ受容体、ＰＡＲ１、ＰＡＲ２、ＰＡＲ３、ＰＡＲ４、ＰＫＲ１
    、ＰＫＲ２、Ｓ１Ｐ１受容体、Ｓ１Ｐ２受容体、Ｓ１Ｐ３受容体、Ｓ１Ｐ４受容体、Ｓ１
    Ｐ５受容体、コハク酸受容体、ＴＰ受容体、ＶＰＡＣ１受容体、ＶＰＡＣ２受容体、ＸＣ
    Ｒ１、β２－アドレナリン受容体、κ受容体、μ受容体から選択されることを特徴とする
    、請求項１～５のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  7. ＲＡＧＥの細胞外ドメインを含有しないことを特徴とする、請求項１～６のいずれか一
    項に記載のモジュレーター。
  8. ＲＡＧＥの細胞外ドメインの類似体又は誘導体を含有しないことを特徴とする、請求項
    １～７のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  9. ＲＡＧＥのリガンド結合性Ｖ－Ｃ１－Ｃ２ドメインに結合しないことを特徴とする、請
    求項１～８のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  10. 活性化された共存ＧＰＣＲによって誘導されるＲＡＧＥのＣ末端細胞質側テールを介し
    て発生するシグナル伝達を阻害又は促進することを特徴とする、請求項１～９のいずれか
    一項に記載のモジュレーター。
  11. ＲＡＧＥのＣ末端細胞質側テールに対して生じる結合を阻害することを特徴とする、請
    求項１～１０のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  12. ＲＡＧＥの細胞質側テール又はその一部の機能的代替物であり、且つ共存ＧＰＣＲの活
    性化時、野生型ＲＡＧＥの発現の存在下又は非存在下で下流のＲＡＧＥ依存性シグナル伝
    達を誘導することができることを特徴とする、請求項１～１１のいずれか一項に記載のモ
    ジュレーター。
  13. ＲＡＧＥの細胞質側テール又はその一部の非機能的代替物であり、前記非機能的代替物
    は、共存ＧＰＣＲによって活性化されることができないか、又は下流のＲＡＧＥ依存性シ
    グナル伝達を促進することができず、且つＲＡＧＥの細胞質側テール及びＲＡＧＥ依存シ
    グナル伝達を介して発生するシグナル伝達を阻害することを特徴とする、請求項１～１１
    のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  14. ＲＡＧＥの細胞質側テールを含有しないことを特徴とする、請求項１～１１のいずれか
    一項に記載のモジュレーター。
  15. ＲＡＧＥの細胞質側テールの類似体、断片又は誘導体を含有しないことを特徴とする、
    請求項１～１１のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  16. ＲＡＧＥの膜貫通ドメインの類似体、断片又は誘導体を含有し、且つＲＡＧＥの細胞質
    側テール又はその断片を含有しないことを特徴とする、請求項１～１１のいずれか一項に
    記載のモジュレーター。
  17. ＲＡＧＥの膜貫通ドメインの類似体、断片又は誘導体にコンジュゲートされたＲＡＧＥ
    の細胞外ドメイン全体を含有し、且つＲＡＧＥの細胞質側テール又はその断片を含有しな
    いことを特徴とする、請求項１～１１のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  18. 長さが２０アミノ酸超、１０アミノ酸超又は５アミノ酸超であるＲＡＧＥの膜貫通ドメ
    インの類似体、断片又は誘導体にコンジュゲートされたＲＡＧＥの細胞外ドメイン全体を
    含有し、且つＲＡＧＥの細胞質側テール又はその断片を含有しないことを特徴とする、請
    求項１～１１のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  19. ＲＡＧＥのトランケート型外部ドメインを含有することを特徴とする、請求項１～１１
    のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  20. 長さが４０アミノ酸以下、２０アミノ酸以下、１０アミノ酸以下又は５アミノ酸以下で
    あるＲＡＧＥのトランケート型外部ドメインを含有することを特徴とする、請求項１～１
    １のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  21. ＲＡＧＥのトランケート型外部ドメインの存在下で作用することを特徴とする、請求項
    １～２０のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  22. 長さが４０アミノ酸以下、２０アミノ酸以下、１０アミノ酸以下又は５アミノ酸以下で
    あるＲＡＧＥのトランケート型外部ドメインの存在下で作用することを特徴とする、請求
    項１～２１のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  23. 式Ｉ：
    Ｚ１ Ｍ Ｚ２ （Ｉ）
    （式中、
    ｉ．Ｚ１は、存在しないか、又は約１～約５０アミノ酸残基を含むタンパク質性部分の
    少なくとも１つから選択され；
    ｉｉ．Ｍは、配列番号１に記載のアミノ酸配列又はその類似体、断片若しくは誘導体で
    あり；及び
    ｉｉｉ．Ｚ２は、存在しないか、又は約１～約５０アミノ酸残基を含むタンパク質性部
    分である）
    によって表されるアミノ酸配列を含むか、それからなるか又はそれから本質的になる、単
    離又は精製されたペプチドを含むことを特徴とする、請求項１～２２のいずれか一項に記
    載のモジュレーター。
  24. Ｍは、ＲＡＧＥポリペプチド配列の野生型ヒトＣ末端細胞質側テールと少なくとも７０
    、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、
    ８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９
    ７、９８若しくは９９％の配列同一性若しくは類似性を共有するか、又は、ＲＡＧＥポリ
    ペプチド配列の野生型ヒトＣ末端細胞質側テールと１、２、３、５、１０、１５若しくは
    ２０アミノ酸残基以下だけ異なる、配列番号１に記載のＲＡＧＥポリペプチドの野生型ヒ
    トＣ末端細胞質側テールの類似体であることを特徴とする、請求項２３に記載のモジュレ
    ーター。
  25. 前記Ｍは、野生型ＲＡＧＥポリペプチドのＣ末端細胞質側テールの任意の８、９、１０
    、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、
    ２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３
    ７、３８、３９、４０、４１又は４２アミノ酸断片を含むことを特徴とする、請求項２３
    に記載のモジュレーター。
  26. 前記Ｍは、前記断片と少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、
    ７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９
    １、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８若しくは９９％の配列同一性若しくは類
    似性を共有するか、又はそれと１、２、３、５、１０、１５若しくは２０アミノ酸残基以
    下だけ異なる前記断片の類似体であることを特徴とする、請求項２３に記載のモジュレー
    ター。
  27. ヒト野生型ＲＡＧＥポリペプチドのＣ末端細胞質側テールのセリン３９１を欠くことを
    特徴とする、請求項２３～２６のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  28. ヒト野生型ＲＡＧＥポリペプチドのＣ末端細胞質側テールのセリン３９１において修飾
    されていることを特徴とする、請求項２３～２６のいずれか一項に記載のモジュレーター
    。
  29. ヒト野生型ＲＡＧＥポリペプチドのＣ末端細胞質側テールのセリン３９１は、群：グル
    タミン、プロリン、スレオニン、ロイシン、アラニン、システイン、アルギニン、リジン
    、アスパラギン酸、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、メチオニン、フェニルアラニ
    ン、バリン、アスパラギン、イソロイシン、トリプトファン又はチロシンから選択される
    アミノ酸残基で置換されていることを特徴とする、請求項２３～２６又は２８のいずれか
    一項に記載のモジュレーター。
  30. ヒト野生型ＲＡＧＥポリペプチドのＣ末端細胞質側テールのセリン３９１は、群：アラ
    ニン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、ヒスチジン、リジン、アルギニン、チロシン
    、アスパラギン、バリン、グリシン、システイン又はグルタミン酸から選択されるアミノ
    酸残基で置換されていることを特徴とする、請求項２８に記載のモジュレーター。
  31. ヒト野生型ＲＡＧＥポリペプチドのＣ末端細胞質側テールのセリン３９１は、群：プロ
    リン、ロイシン、イソロイシン、グルタミン、メチオニン、スレオニン又はトリプトファ
    ンから選択されるアミノ酸残基で置換されていることを特徴とする、請求項２８に記載の
    モジュレーター。
  32. ＲＡＧＥとＤｉａｐｈａｎｏｕｓ－１との相互作用を調節しないことを特徴とする、請
    求項１～３１のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  33. ヒト野生型ＲＡＧＥと比較してＤｉａｐｈａｎｏｕｓ－１に結合する能力を欠くか、又
    は低下した能力を有することを特徴とする、請求項１～３２のいずれか一項に記載のモジ
    ュレーター。
  34. ＲＡＧＥ－Ｄｉａｐｈａｎｏｕｓ－１結合部位Ｒ３６６～Ｑ３６７を欠くことを特徴と
    するペプチドであることを特徴とする、請求項３２又は３３に記載のモジュレーター。
  35. 変化されたＲＡＧＥ－Ｄｉａｐｈａｎｏｕｓ－１結合部位Ｒ３６６～Ｑ３６７を有する
    ペプチドであることを特徴とする、請求項３２又は３３に記載のモジュレーター。
  36. Ｒ３６６／Ｑ３６７の残基は、前記部位を損なうか又は無効にするように欠失又は他の
    残基で置換されていることを特徴とする、請求項３５に記載のモジュレーター。
  37. Ｒａｓ－ＧＴＰａｓｅ活性化様タンパク質（ＩＱＧＡＰ１）、ラディキシン、エズリン
    又はモエシン、ＩＲＡＫ４及びＴＩＲＡＰの１つ以上への野生型ＲＡＧＥのＣ末端細胞質
    側テールの結合を阻害することを特徴とする、請求項１～３６のいずれか一項に記載のモ
    ジュレーター。
  38. 嗅覚受容体２Ｔ２、ＡＤＰ／ＡＴＰトランスロカーゼ２、プロテインホスファターゼ１
    Ｇ、細胞間接着分子１、タンパク質ＤＪ－１（ＰＡＲＫ７）、カルポニン－３、ドレブリ
    ン、フィラミンＢ、Ｒａｓ関連タンパク質Ｒａｂ－１３、プロテオリピドタンパク質２、
    コロニン、Ｓ１００ Ａ１１、サクシニル－ＣｏＡリガーゼ［ＧＤＰ形成］サブユニット
    α、Ｈｓｃ７０相互作用タンパク質、アポトーシス阻害剤５、ニューロピリン、切断刺激
    因子、成長因子受容体結合タンパク質２、ｓｅｃ６１βサブユニット、Ｄｏｃｋ７又はＮ
    ｃｋ１の１つ以上への野生型ＲＡＧＥのＣ末端細胞質側テールの結合を阻害することを特
    徴とする、請求項１～３７のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  39. Ｍは、少なくとも残基３７９～３９０を含有する、配列番号１に記載のアミノ酸配列又
    はその類似体、断片若しくは誘導体であることを特徴とする、請求項２３に記載のモジュ
    レーター。
  40. Ｍは、配列番号１の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴とす
    る、請求項２３に記載のモジュレーター。
  41. Ｍは、配列番号２の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴とす
    る、請求項２３に記載のモジュレーター。
  42. Ｍは、配列番号５の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴とす
    る、請求項２３に記載のモジュレーター。
  43. Ｍは、配列番号６の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴とす
    る、請求項２３に記載のモジュレーター。
  44. Ｍは、配列番号７の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴とす
    る、請求項２３に記載のモジュレーター。
  45. Ｍは、配列番号８の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴とす
    る、請求項２３に記載のモジュレーター。
  46. Ｍは、配列番号９の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴とす
    る、請求項２３に記載のモジュレーター。
  47. Ｍは、配列番号１０の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴と
    する、請求項２３に記載のモジュレーター。
  48. Ｍは、配列番号１１の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴と
    する、請求項２３に記載のモジュレーター。
  49. Ｍは、配列番号１２の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴と
    する、請求項２３に記載のモジュレーター。
  50. Ｍは、配列番号１３の式のペプチド又はその類似体若しくは誘導体であることを特徴と
    する、請求項２１３に記載のモジュレーター。
  51. 前記ペプチドと少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、
    ７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９
    ２、９３、９４、９５、９６、９７、９８若しくは９９％の配列同一性若しくは類似性を
    共有するか、又は前記ペプチドと１、２、３、５若しくはさらに１０アミノ酸残基以下だ
    け異なる前記ペプチドの類似体であることを特徴とする、請求項４０～５０のいずれか一
    項に記載のモジュレーター。
  52. Ｚ１基は、細胞透過性ペプチド又はＲＡＧＥの細胞質側テールの断片であることを特徴
    とする、請求項２３～５１のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  53. Ｚ２は、細胞透過性ペプチド又はＲＡＧＥの細胞質側テールの断片であることを特徴と
    する、請求項２３～５２のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  54. 群：第１の荷電又は水素結合性基（Ａ）、第２の荷電又は水素結合性基（Ｂ）、第３の
    荷電又は水素結合性基（Ｃ）及び疎水基（Ｄ）から選択される２つ以上の特徴を含み、前
    記特徴の部位点間の距離は、前記特徴間の距離の大きさが正である場合、最大±１０Å、
    ±５Å、±２Å又は±１Åの許容差内において、以下の通りである、請求項１～５３のい
    ずれか一項に記載のモジュレーター。
  55. 非ペプチジルである、請求項５４に記載のモジュレーター。
  56. ＲＡＧＥ活性の阻害剤であり、前記ＲＡＧＥ活性は、活性な共存ＧＰＣＲによって誘導
    される、請求項１～５５のいずれか一項に記載のモジュレーター。
  57. ＲＡＧＥ活性を調節する方法であって、前記ＲＡＧＥ活性は、請求項１～５６のいずれ
    か一項に記載のモジュレーターを使用して活性な共存ＧＰＣＲによって誘導される、方法
    。
  58. 候補薬剤を、ＲＡＧＥ活性を調節するその能力についてスクリーニングする方法であっ
    て、前記ＲＡＧＥ活性は、活性な共存ＧＰＣＲによって誘導され、前記方法は、
    候補薬剤の存在下でＲＡＧＥポリペプチドをＧＰＣＲポリペプチドと接触させるステッ
    プと、ここで、前記ＧＰＣＲポリペプチドは、構成的に活性であり、且つ／又は前記ＧＰ
    ＣＲのアゴニスト、部分アゴニスト若しくはアロステリックモジュレーターの添加によっ
    て活性化され；
    前記候補薬剤の存在によるＲＡＧＥ活性化の調節を示す効果を検出することにより、且
    つ／又は前記候補薬剤の存在によって調節されるＲＡＧＥ依存性シグナル伝達を検出する
    ことにより、前記候補薬剤が、活性化された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存
    性のＲＡＧＥ活性化のモジュレーターであるかどうかを検出するステップと
    を含む方法。
  59. ＲＡＧＥの細胞外ドメインに結合し、その結果としてＲＡＧＥリガンド依存的な方式で
    ＲＡＧＥの活性化を阻害するＲＡＧＥリガンドの阻害剤を使用するステップを含む、請求
    項５８に記載の方法。
  60. ＲＡＧＥポリペプチドであって、それがＲＡＧＥリガンドをその外部ドメインに結合さ
    せることができず、且つその結果としてＲＡＧＥリガンド依存的な方式で活性化されるこ
    とができないように変異及び／又は切断されているＲＡＧＥポリペプチドを使用するステ
    ップを含む、請求項５８に記載の方法。
  61. 前記候補薬剤が、ＲＡＧＥポリペプチドがＧＰＣＲポリペプチドと接触されるときに検
    出されるＲＡＧＥ依存性シグナルを調節する場合、前記ＧＰＣＲポリペプチドが存在する
    ときに前記ＲＡＧＥ依存性シグナルのより大きい調節をもたらす前記候補薬剤が、活性化
    された共存ＧＰＣＲによるＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の調節について選
    択的であるように、前記ＧＰＣＲポリペプチドの非存在下で前記候補薬剤が前記ＲＡＧＥ
    依存性シグナルを調節するかどうか及び／又はその程度を決定することをさらに含む、請
    求項５８～６０のいずれか一項に記載の方法。
  62. 前記候補薬剤が、前記ＲＡＧＥポリペプチドがＧＰＣＲポリペプチドと接触されるとき
    に検出される前記シグナルを調節する場合、前記シグナルが前記ＲＡＧＥポリペプチドの
    非存在下で生成されるかどうか及び／又はその程度を決定し、且つ前記シグナルが前記Ｒ
    ＡＧＥポリペプチドの非存在下で生成される場合、前記ＲＡＧＥポリペプチドが存在する
    ときに前記シグナルのより大きい調節をもたらす前記候補薬剤が、共存ＧＰＣＲの活性化
    に起因するＲＡＧＥ非依存性シグナル伝達よりも、前記活性化された共存ＧＰＣＲによる
    ＲＡＧＥリガンド非依存性のＲＡＧＥ活性化の調節について選択的であるように、前記Ｒ
    ＡＧＥポリペプチドの非存在下で前記候補薬剤が前記シグナルを調節するかどうか及び／
    又はその程度を決定することをさらに含む、請求項５８～６１のいずれか一項に記載の方
    法。
  63. 前記ＲＡＧＥポリペプチドの共存ＧＰＣＲへの近接性を評価するか、又はそれを評価す
    るステップをさらに含むことを特徴とする、請求項５８～６２のいずれか一項に記載の方
    法。
  64. ＲＡＧＥ活性のモジュレーターであって、前記ＲＡＧＥ活性は、活性な共存ＧＰＣＲに
    よって誘導される、モジュレーターを同定する方法であって、（１）候補の３次元構造を
    、群：第１の荷電又は水素結合性基（Ａ）、第２の荷電又は水素結合性基（Ｂ）、第３の
    荷電又は水素結合性基（Ｃ）及び疎水基（Ｄ）から選択される２つ以上の特徴を含むＲＡ
    ＧＥのＣ末端細胞質側テールのファーマコフォアモデルであって、前記特徴間の距離の大
    きさが正である場合、前記特徴間の前記距離は、最大±１０Å、±５Å、±２Å又は±１
    Åの許容差内において、以下の通りである、ファーマコフォアモデルと比較するステップ
    と；
    （２）疎水性及び／又は荷電若しくは水素結合性化学部分がそのように配置される場合に
    モジュレーターとしての候補を選択するステップとを含む方法。
  65. ぺプチジル又は非ペプチジルである、請求項５８～６４のいずれか一項に記載の方法の
    いずれか１つによって同定されるモジュレーター。
  66. ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、前記処置を必要とする患者において行う方
    法であって、有効量の、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載のモジュレーター
    の投与を含む方法。
  67. ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、前記処置を必要とする患者において行うた
    めの、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載のモジュレーターの使用。
  68. ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、前記処置を必要とする患者において行うた
    めの薬剤の製造のための、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載のモジュレータ
    ーの使用。
  69. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、群：心血管障害；消化器疾患；がん；神経障害；呼吸器障害
    ；結合組織障害；腎臓障害；生殖器障害；皮膚障害；眼障害；及び内分泌障害から選択さ
    れる障害であることを特徴とする、請求項６６～６８のいずれか一項に記載の方法又は使
    用。
  70. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、群：アテローム性動脈硬化症、虚血性心疾患、心筋炎、心内
    膜炎、心筋症、急性リウマチ熱、慢性リウマチ性心疾患、脳血管疾患／脳卒中、心不全、
    血管石灰化、末梢血管疾患及びリンパ管炎から選択される心血管障害であることを特徴と
    する、請求項６９に記載の方法又は使用。
  71. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、群：歯周炎、食道炎、胃炎、胃十二指腸潰瘍、クローン病、
    潰瘍性大腸炎、虚血性大腸炎、腸炎及び小腸結腸炎、腹膜炎、アルコール性肝疾患、肝炎
    、中毒性肝疾患、胆汁性肝硬変、肝線維症／肝硬変、非アルコール性脂肪肝／非アルコー
    ル性脂肪性肝炎（ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨ）、肝外傷並びに肝障害、外傷又は手術からの回
    復から選択される消化器系障害であることを特徴とする、請求項６９に記載の方法又は使
    用。
  72. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、群：唇、口腔及び咽頭の悪性新生物、消化器の悪性新生物、
    呼吸器及び胸腔内器官の悪性新生物、骨及び関節軟骨の悪性新生物、黒色腫及び皮膚の他
    の悪性新生物、中皮及び軟組織の悪性新生物、乳房の悪性新生物、女性生殖器の悪性新生
    物、男性生殖器の悪性新生物、尿路の悪性新生物、眼、脳及び中枢神経系の他の部分の悪
    性新生物、甲状腺及び他の内分泌腺の悪性新生物、リンパ系、造血系及び関連する組織の
    悪性新生物、不明確な、二次及び／又は特定されていない部位の悪性新生物から選択され
    るがんであることを特徴とする、請求項６９に記載の方法又は使用。
  73. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、神経障害であり、且つ群：中枢神経系の炎症性疾患、主に中
    枢神経系に影響を与える全身性萎縮、錐体外路及び運動障害、パーキンソン病、中枢神経
    系の脱髄性疾患、アルツハイマー病、限局性脳萎縮、レビー小体病、てんかん、片頭痛、
    神経障害性疼痛、糖尿病性神経障害、多発性神経障害、神経膠腫の発生及び進行、脊髄外
    傷及び虚血性脳損傷／脳卒中、脳外傷並びに脳損傷、外傷又は手術からの回復から選択さ
    れることを特徴とする、請求項６９に記載の方法又は使用。
  74. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、精神障害であり、且つ群：認知症、アルツハイマー病、血管
    性認知症、嗜癖、統合失調症、主要な情動障害、抑うつ、躁病、双極性障害及び不安障害
    から選択されることを特徴とする、請求項６９に記載の方法又は使用。
  75. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、呼吸器（肺）障害であり、且つ群：急性上気道感染症、鼻炎
    、鼻咽頭炎、副鼻腔炎、喉頭炎、インフルエンザ及び肺炎、急性気管支炎、急性細気管支
    炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、肺気腫、外因による慢性肺疾
    患、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、肺好酸球増加症及び胸膜炎、肺外傷並びに肺損傷
    、外傷又は手術からの回復から選択されることを特徴とする、請求項６９に記載の方法又
    は使用。
  76. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、結合組織障害であり、且つ群：変形性関節炎、感染性関節炎
    、関節リウマチ、乾癬性及び腸疾患性関節症、若年性関節炎、痛風及び他の結晶性関節症
    、糖尿病性関節症、結節性多発性動脈炎、チャーグ・ストラウス、粘膜皮膚リンパ節症候
    群［川崎］、過敏性血管炎、グッドパスチャー症候群、血栓性微小血管症、ウェゲナー肉
    芽腫症、大動脈弓症候群［高安］、巨細胞性動脈炎、リウマチ性多発筋痛、顕微鏡的多発
    性血管炎、低補血性血管炎、全身性エリテマトーデス、皮膚多発性筋炎、多発性筋炎、全
    身性硬化症、ＣＲ（Ｅ）ＳＴ症候群、乾燥症候群［シェーグレン］、混合性結合組織病、
    ベーチェット病、外傷性筋損傷、捻挫、筋挫傷並びに骨折から選択されることを特徴とす
    る、請求項６９に記載の方法又は使用。
  77. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、腎障害であり、且つ群：糸球体腎炎、腎炎、糖尿病性腎疾患
    、間質性腎炎、閉塞性及び逆流性腎症、急性腎不全並びに慢性腎疾患から選択されること
    を特徴とする、請求項６９に記載の方法又は使用。
  78. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、生殖器障害であり、且つ群：前立腺炎、前立腺肥大、前立腺
    異形成、卵管炎、卵巣炎、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、多嚢胞性卵巣症候群、子宮頸管
    炎、子宮頸部異形成、膣炎、外陰炎から選択されることを特徴とする、請求項６９に記載
    の方法又は使用。
  79. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、群：皮膚炎、湿疹、天疱瘡／類天疱瘡、乾癬、ばら色粃糠疹
    、扁平苔癬、蕁麻疹、多形性紅斑、結節性紅斑、日焼け、角化症、光老化性皮膚潰瘍、表
    在性皮膚損傷及び開放創から選択される皮膚障害であることを特徴とする、請求項６９に
    記載の方法又は使用。
  80. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、群：角膜炎、結膜炎、網膜炎、緑内障、強膜炎、上強膜炎、
    脈絡網膜炎症、糖尿病性網膜症、黄斑浮腫、未熟児網膜症及び視神経炎、眼の外傷並びに
    眼の損傷、外傷又は手術からの回復から選択される眼障害であることを特徴とする、請求
    項６９に記載の方法又は使用。
  81. 前記ＲＡＧＥ関連障害は、群：糖尿病、インスリン抵抗性、耐糖能障害及び甲状腺炎か
    ら選択される内分泌障害であることを特徴とする、請求項６９に記載の方法又は使用。
  82. ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、前記処置を必要とする患者において行う方
    法であって、有効量の、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載の阻害剤と、共存
    ＧＰＣＲの阻害剤及び／又は共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の阻害剤との組み合わせの投
    与を含む方法。
  83. 有効量の、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載の阻害剤と、前記共存ＧＰＣ
    Ｒの阻害剤及び／又は前記共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の阻害剤との組み合わせの投与
    を含み、前記共存ＧＰＣＲの前記阻害剤及び／又は前記共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の
    前記阻害剤が、前記共存ＧＰＣＲに関連する障害の処置のために通常投与されるよりも低
    い用量で投与されることを特徴とする、請求項８２に記載の方法。
  84. 有効量の、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載の阻害剤と、前記共存ＧＰＣ
    Ｒの阻害剤及び／又は前記共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の阻害剤との組み合わせの投与
    を含み、前記共存ＧＰＣＲの前記阻害剤及び／又は前記共存ＧＰＣＲシグナル伝達経路の
    前記阻害剤が、ＲＡＧＥに関連する障害の処置のために通常投与されるよりも低い用量で
    投与されることを特徴とする、請求項８２に記載の方法。
  85. ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、前記処置を必要とする患者において行う方
    法であって、有効量の、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載の阻害剤と、ＲＡ
    ＧＥリガンド依存性シグナル伝達経路の阻害剤との組み合わせの投与を含む方法。
  86. 有効量の、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載の阻害剤と、ＲＡＧＥリガン
    ド依存性シグナル伝達経路の阻害剤との組み合わせの投与を含み、前記ＲＡＧＥリガンド
    依存性シグナル伝達経路の前記阻害剤が、ＲＡＧＥに関連する障害の処置のために通常投
    与されるよりも低い用量で投与されることを特徴とする、請求項８５に記載の方法。
  87. 請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載のペプチドモジュレーターをコードする
    核酸配列であって、それから、前記ペプチドモジュレーターは、遺伝子送達後に続いて生
    成される、核酸配列。
  88. 請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載のペプチドモジュレーターの誘導体であ
    って、１つ以上アミノ酸置換、切断、化学的及び／若しくは生化学的修飾（アセチル化、
    カルボキシル化、リン酸化、グリコシル化、ユビキチン化）、放射性ヌクレオチド若しく
    はハロゲンでの標識、Ｄ－アミノ酸、非従来型アミノ酸、グリコシル化アミノ酸；ピログ
    ルタミン酸；２－アミノアジピン酸；３－アミノアジピン酸；β－アラニン；β－アミノ
    プロピオン酸；２－アミノ酪酸；４－アミノ酪酸；ピペリジン酸；６－アミノカプロン酸
    ；２－アミノヘプタン酸；２－アミノイソ酪酸；３－アミノイソ酪酸；２－アミノピメリ
    ン酸；２，４－ジアミノ酪酸；デスモシン；２，２’’－ジアミノピメリン酸；２，３－
    ジアミノプロピオン酸；Ｎ－エチルグリシン；Ｎ－エチルアスパラギン；ヒドロキシリジ
    ン；アロ－ヒドロキシリジン；３－ヒドロキシプロリン；４－ヒドロキシプロリン；イソ
    デスモシン；アロ－イソロイシン；Ｎ－メチルグリシン；サルコシン；Ｎ－メチルイソロ
    イシン；Ｎ－メチルバリン；ノルバリン；ノルロイシン；オルニチン；スタチン；ハロゲ
    ン化アミノ酸；硫黄部分を有するアミノ酸、レトロ逆位配列、環状ペプチド、ペプトイド
    、β－ペプチド又は非ペプチド薬物、非ペプチド標識、非ペプチド担体若しくは非ペプチ
    ド樹脂への連結を含む誘導体。
  89. 治療有効量の、請求項１～５６又は６５のいずれか一項に記載のモジュレーターを含む
    医薬組成物。
  90. １つ以上の賦形剤を含むことを特徴とする、請求項８９に記載の医薬組成物。
  91. 請求項８９又は９０に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、請求項６６又は６
    ９～８６のいずれか一項に記載の、ＲＡＧＥ関連障害の処置、予防又は管理を、前記処置
    を必要とする患者において行う方法。
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