JP2023064524A - 口腔用組成物 - Google Patents
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Abstract
【課題】歯表面におけるプラークの形成やプラークの成熟化を抑制すること。【解決手段】塩化ドデシルピリジニウム、及びグリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を含有する組成物。【選択図】なし
Description
本開示は、プラーク（歯垢）形成抑制用組成物等に関する。なお、本明細書に記載される全ての文献の内容は参照により本明細書に組み込まれる。
プラーク（歯垢）は、口腔内微生物が凝集したバイオフィルムであり、う蝕や歯周病の原因となり得ると考えられている。このため、プラークコントロール、特にプラーク形成の抑制は重要である。
大まかに言えば、次のようにしてプラークは形成される。すなわち、まず歯の表面に「ペリクル」という唾液や生理的歯肉溝浸出液由来のタンパクの薄い膜が形成され、当該ペリクルを介して連鎖球菌などの通性嫌気性菌（初期付着菌）が歯面に付着する。この初期付着菌に様々な口腔細菌と共凝集するフゾバクテリウム等の媒介細菌が付着し、さらに当該媒介細菌を介して嫌気性菌であるポルフィロモナス・ジンジバリスやトレポネーマ・デンティコーラ等の後期付着菌が付着・凝集し、プラークは成熟する。特に、後期付着菌は歯周病の原因となり、歯周組織の破壊に直接的、間接的に関係することが知られている。
J Dent Res 90(11):1271-1278, 2011
上記のことから、歯表面におけるプラークの形成を抑制すること、特に後期付着菌が付着・凝集しプラークが成熟化するのを抑制することは、歯周病を予防する上で重要である。
本発明者らは、媒介細菌であるフゾバクテリウムに着目して、検討を行った。様々な細菌と共凝集が可能な媒介細菌であるフゾバクテリウムの働きを抑制することができれば、後期付着菌が歯表面に付着・凝集することを抑制でき、ひいてはプラーク形成の成熟化を抑制することが可能となると考えられるからである。
そこで、フゾバクテリウムを殺菌する手法について検討を進めた。しかし、通常口腔用組成物に用いられる各種殺菌剤を検討してみても、フゾバクテリウムを効率よく殺菌できる殺菌剤は見いだすことができなかった。
通常口腔用組成物に用いられる殺菌剤の一例である、塩化セチルピリジニウムについても例外ではなく、フゾバクテリウムに対する効率的な殺菌効果は認められなかった。しかし、本発明者らはさらに検討を進め、塩化セチルピリジニウムは塩化Ｃ１６アルキルピリジニウムであるところ、このアルキル基の長さがフゾバクテリウムへの殺菌効果に影響している可能性を見いだし、さらに改良を重ねた。その結果、塩化Ｃ１２アルキルピリジニウムである塩化ドデシルピリジニウムが、フゾバクテリウムに対する優れた殺菌効果を示すことを見いだした。
そこで、塩化ドデシルピリジニウムを用いて実際に口腔内のフゾバクテリウムを殺菌すべく、さらに検討を進めたところ、塩化ドデシルピリジニウムは、塩化セチルピリジニウムに比べて、歯面滞留性が悪いことがわかった。このため、塩化ドデシルピリジニウムの歯面滞留性を向上させるべく、さらに検討を重ねた。
本開示は例えば以下の項に記載の主題を包含する。
項１．
塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有する口腔用組成物。
項２．
塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有するプラーク形成抑制用組成物。
項３．
塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有するフゾバクテリウム殺菌用組成物。
項４．
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種が、
グリチルリチン酸ジカリウムである、
項１～３のいずれかに記載の組成物。
項５．
塩化ドデシルピリジニウム１質量部に対して、
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を０．１～２０質量部
含有する項１～４のいずれかに記載の組成物。
項６．
塩化ドデシルピリジニウムを０．０１～０．５質量％含有する、項１～５のいずれかに記載の組成物。
項７．
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を０．０１～１質量％含有する、項１～６のいずれかに記載の組成物。
項８．
さらに、クエン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を含有する、項１～７のいずれかに記載の組成物。
項１．
塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有する口腔用組成物。
項２．
塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有するプラーク形成抑制用組成物。
項３．
塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有するフゾバクテリウム殺菌用組成物。
項４．
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種が、
グリチルリチン酸ジカリウムである、
項１～３のいずれかに記載の組成物。
項５．
塩化ドデシルピリジニウム１質量部に対して、
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を０．１～２０質量部
含有する項１～４のいずれかに記載の組成物。
項６．
塩化ドデシルピリジニウムを０．０１～０．５質量％含有する、項１～５のいずれかに記載の組成物。
項７．
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を０．０１～１質量％含有する、項１～６のいずれかに記載の組成物。
項８．
さらに、クエン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を含有する、項１～７のいずれかに記載の組成物。
効率よく、プラーク形成における媒介細菌であるフゾバクテリウムを殺菌する手法が提供され、さらには、その殺菌有効成分（塩化ドデシルピリジニウム）が効率よく歯面に滞留可能な手法が提供される。これにより、プラーク形成を効率よく抑制することも可能となる。
以下、本開示に包含される各実施形態について、さらに詳細に説明する。本開示は、塩化Ｃ１２直鎖アルキルピリジニウム（つまり塩化ドデシルピリジニウム）及びグリチルリチン酸又はその塩を含有する組成物、並びに当該組成物の用途を包含する。当該組成物は、例えば口腔用組成物、フゾバクテリウム殺菌用組成物、及びプラーク形成抑制用組成物等として好ましく用いることができ、本開示はこれらの用途も好ましく包含する。ただし、これらに限定されるわけではなく、本開示は本明細書に開示され当業者が認識できる全てを包含する。
本開示に包含される、塩化ドデシルピリジニウム及びグリチルリチン酸又はその塩を含有する組成物を、「本開示の組成物」ということがある。
なお、ここでのフゾバクテリウムとは、プラーク形成において初期付着菌と後期付着菌との媒介細菌であるフゾバクテリウム属の菌であれば特に限定はされないが、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ（フゾバクテリウム ヌクレアタム）が好ましく例示される。
本開示の組成物は、上記の通り、塩化ドデシルピリジニウムを含有する。塩化ドデシルピリジニウムの含有量としては、効果が奏される範囲であれば特に制限はされないが、例えば０．０１～０．５質量％程度が挙げられる。なお、当該範囲の上限又は下限は、例えば０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．１１、０．１２、０．１３、０．１４、０．１５、０．１６、０．１７、０．１８、０．１９、０．２０、０．２１、０．２２、０．２３、０．２４、０．２５、０．２６、０．２７、０．２８、０．２９、０．３、０．３１、３２、０．３３、０．３４、０．３５、０．３６、０．３７、０．３８、０．３９、０．４、０．４１、０．４２、０．４３、０．４４、０．４５、０．４６、０．４７、０．４８、０．４９質量％であってもよい。例えば当該範囲は０．０２～０．３質量％程度であってもよい。
本開示の組成物は、また、上記の通り、グリチルリチン酸又はその塩を含有する。塩としては、アルカリ金属塩が好ましく、ジナトリウム塩またはジカリウム塩がより好ましい。グリチルリチン酸ジカリウムが特に好ましい。グリチルリチン酸又はその塩は、１種単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。つまり、本開示の組成物には、グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を用いることができる。本開示の組成物におけるグリチルリチン酸又はその塩の含有量としては、効果が奏される範囲であれば特に制限はされないが、例えば０．０１～１質量％程度が挙げられる。なお、当該範囲の上限又は下限は、例えば０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、又は０．９５質量％であってもよい。例えば当該範囲は０．０２～２質量％程度であってもよい。また、グリチルリチン酸又はその塩が２種以上組み合わせて用いられる場合は、その合計量が前記範囲であることが好ましい。
本開示の組成物において、塩化ドデシルピリジニウムとグリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種との含有量比は、効果が奏される範囲であれば特に制限はされない。例えば、前者１質量部に対して後者０．１～２０質量部程度が挙げられる。当該範囲（０．１～２０質量部）の上限又は下限は例えば０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、又は１９質量部であってもよい。例えば当該範囲は０．２～１０質量部であってもよい。また、前者１質量部に対して後者１質量部以上である場合に、特に優れた塩化ドデシルピリジニウムの歯面滞留性向上効果が奏されるため、特に好ましい。
本開示の組成物は、フゾバクテリウム殺菌用として有用な塩化ドデシルピリジニウムを含有し、さらに、塩化ドデシルピリジニウムの歯面滞留性を向上させることができるグリチルリチン酸又はその塩を含有することから、フゾバクテリウム殺菌用として好ましく用いることができる。また、上記の通り、フゾバクテリウムを殺菌することにより歯表面におけるプラークの形成を抑制することができるといえることから、本開示の組成物は、プラーク形成抑制用組成物としても好ましく用いることができる。そして、このような事情から、本開示の組成物は、口腔用組成物としても好ましく用いることができる。当該口腔用組成物は、プラーク形成抑制用、フゾバクテリウム殺菌用等として、好ましく用いることができる。
本開示の組成物は、固形組成物、液体組成物でありえる。当該組成物は、例えば医薬品、医薬部外品として用いることができる。また、本開示の組成物の形態は、特に限定するものではないが、常法に従って例えば軟膏剤、ペースト剤、パスタ剤、ジェル剤、液剤、スプレー剤、洗口液剤、液体歯磨剤、練歯磨剤、ガム剤等の形態（剤形）にすることができる。なかでも、洗口液剤、液体歯磨剤、練歯磨剤、軟膏剤、ペースト剤、液剤、ジェル剤であることが好ましい。
本開示の組成物は、効果を損なわない範囲で、例えば口腔用組成物に配合し得る任意成分を単独で又は２種以上さらに含有してもよい。
例えば、界面活性剤として、ノニオン界面活性剤、アニオン界面活性剤または両性界面活性剤を配合することができる。具体的には、例えば、ノニオン界面活性剤としてはショ糖脂肪酸エステル、マルトース脂肪酸エステル、ラクトース脂肪酸エステル等の糖脂肪酸エステル；脂肪酸アルカノールアミド類；グリセリン脂肪酸エステル；ソルビタン脂肪酸エステル；脂肪酸モノグリセライド；ポリオキシエチレン付加係数が８～１０、アルキル基の炭素数が１３～１５であるポリオキシエチレンアルキルエーテル；ポリオキシエチレン付加係数が１０～１８、アルキル基の炭素数が９であるポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル；セバシン酸ジエチル；ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油；脂肪酸ポリオキシエチレンソルビタン等が挙げられる。アニオン界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム等の硫酸エステル塩；ラウリルスルホコハク酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテルスルホコハク酸ナトリウム等のスルホコハク酸塩；ココイルサルコシンナトリウム、ラウロイルメチルアラニンナトリウム等のアシルアミノ酸塩；ココイルメチルタウリンナトリウム等が挙げられる。両性イオン界面活性剤としては、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン、ヤシ油脂肪酸アミドプロピルジメチルアミノ酢酸ベタイン等の酢酸ベタイン型活性剤；Ｎ－ココイル－Ｎ－カルボキシメチル－Ｎ－ヒドロキシエチルエチレンジアミンナトリウム等のイミダゾリン型活性剤；Ｎ－ラウリルジアミノエチルグリシン等のアミノ酸型活性剤等が挙げられる。これらの界面活性剤は、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。その配合量は、通常、組成物全量に対して０．１～５質量％である。
また、香味剤として、例えば、メントール、カルボン酸、アネトール、オイゲノール、サリチル酸メチル、リモネン、オシメン、ｎ－デシルアルコール、シトロネール、α－テルピネオール、メチルアセタート、シトロネニルアセタート、メチルオイゲノール、シネオール、リナロール、エチルリナロール、チモール、スペアミント油、ペパーミント油、レモン油、オレンジ油、セージ油、ローズマリー油、珪皮油、シソ油、冬緑油、丁子油、ユーカリ油、ピメント油、ｄ－カンフル、ｄ－ボルネオール、ウイキョウ油、ケイヒ油、シンナムアルデヒド、ハッカ油、バニリン等の香料を用いることができる。これらは、単独または２種以上を組み合わせて組成物全量に対して例えば０.００１～１．５質量％配合することができる。
また、甘味剤として、例えば、サッカリンナトリウム、アセスルファームカリウム、ステビオサイド、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、ペリラルチン、タウマチン、アスパラチルフェニルアラニルメチルエステル、ｐ－メトキシシンナミックアルデヒド等を用いることができる。これらは、組成物全量に対して例えば０.０１～１質量％配合することができる。
さらに、湿潤剤として、ソルビット、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、１，３－ブチレングリコール、ポリプロピレングリコール、キシリット、マルチット、ラクチット、ポリオキシエチレングリコール等を単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。
防腐剤として、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン等のパラベン類、安息香酸ナトリウム、フェノキシエタノール、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン等を配合することができる。
着色剤として、青色１号、黄色４号、赤色２０２号、緑３号等の法定色素、群青、強化群青、紺青等の鉱物系色素、酸化チタン等を配合してもよい。
ｐＨ調整剤として、クエン酸、リン酸、リンゴ酸、ピロリン酸、乳酸、酒石酸、グリセロリン酸、酢酸、硝酸、またはこれらの化学的に可能な塩や水酸化ナトリウム等を配合してもよい。これらは、組成物のｐＨが４～８、好ましくは５～７の範囲となるよう、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。ｐＨ調整剤の配合量は例えば０．０１～２重量％であってよい。
本開示の組成物においてｐＨ調整剤を用いる場合には、特にクエン酸又はその塩が好ましい。塩としては、アルカリ金属塩が好ましく、ナトリウム塩またはカリウム塩がより好ましい。クエン酸又はその塩は、１種単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。つまり、本開示の組成物には、クエン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を用いることができる。本開示の組成物におけるクエン酸又はその塩の含有量としては、効果が奏される範囲であれば特に制限はされないが、例えば０．０１～２質量％程度が挙げられる。なお、当該範囲の上限又は下限は、例えば０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、又は２．９質量％であってもよい。例えば当該範囲は０．０２～２質量％程度であってもよい。また、クエン酸又はその塩が２種以上組み合わせて用いられる場合は、その合計量が前記範囲であることが好ましい。また、クエン酸とクエン酸塩とが組み合わせて用いられる場合、特に限定はされないが、その比率は、クエン酸１質量部に対してクエン酸塩１～１５質量部程度であることが好ましい。当該範囲（１～１５質量部）の上限又は下限は例えば２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、又は１４質量部であってもよい。例えば当該範囲は２～１０質量部であってもよい。
本開示の組成物において、塩化ドデシルピリジニウムとクエン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種との含有量比は、効果が奏される範囲であれば特に制限はされない。例えば、前者１質量部に対して後者０．５～２０質量部程度が挙げられる。当該範囲（０．５～２０質量部）の上限又は下限は例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、又は１９質量部であってもよい。例えば当該範囲は１～１５質量部であってもよい。
本開示の組成物には、塩化ドデシルピリジニウムのみならず、さらに、薬効成分として酢酸ｄｌ－α－トコフェロール、コハク酸トコフェロール、またはニコチン酸トコフェロール等のビタミンＥ類、ドデシルジアミノエチルグリシン等の両性殺菌剤、トリクロサン、イソプロピルメチルフェノール、ヒノキチオール等の非イオン性殺菌剤、ラウロイルサルコシンナトリウム等のアニオン系殺菌剤、塩化セチルピリジニウム、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等のカチオン系殺菌剤、デキストラナーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、ムタナーゼ、リゾチーム、溶菌酵素（リテックエンザイム）等の酵素、モノフルオロリン酸ナトリウム、モノフルオロリン酸カリウム等のアルカリ金属モノフルオロフォスフェート、フッ化ナトリウム、フッ化第一錫等のフッ化物、トラネキサム酸やイプシロンアミノカプロン酸、アルミニウムクロルヒドロキシルアラントイン、ジヒドロコレステロール、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸、銅クロロフィリンナトリウム、グリセロフォスフェート、クロロフィル、塩化ナトリウム、カロペプタイド、アラントイン、カルバゾクロム、ヒノキチオール、硝酸カリウム、パラチニット等を、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。
特に限定される訳ではないが、本開示の組成物は塩化セチルピリジニウムをさらに含有することが中でも好ましい。塩化セチルピリジニウムをさらに含有する場合、その含有量は例えば０．０１～０．５質量％程度が挙げられる。なお、当該範囲の上限又は下限は、例えば０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．１１、０．１２、０．１３、０．１４、０．１５、０．１６、０．１７、０．１８、０．１９、０．２０、０．２１、０．２２、０．２３、０．２４、０．２５、０．２６、０．２７、０．２８、０．２９、０．３、０．３１、３２、０．３３、０．３４、０．３５、０．３６、０．３７、０．３８、０．３９、０．４、０．４１、０．４２、０．４３、０．４４、０．４５、０．４６、０．４７、０．４８、０．４９質量％であってもよい。例えば当該範囲は０．０２～０．３質量％程度であってもよい。
また、基剤として、アルコール類、シリコン、アパタイト、白色ワセリン、パラフィン、流動パラフィン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン、プラスチベース等を添加することも可能である。
また、本開示の組成物は、公知の方法または公知の方法から容易に想到する方法により調製することができる。例えば、塩化ドデシルピリジニウム及びグリチルリチン酸又はその塩並びに必要に応じてその他の成分等を適宜混合することによって調製することができる。
本開示の組成物を適用する対象は、特に限定はされず、ヒト及び非ヒト哺乳類が好ましく挙げられる。非ヒト哺乳類としては、家畜やペットなどが好ましく、より具体的には例えばイヌ、ネコ、マウス、ラット、ウマ、ウシ、ヒツジ、サル等が挙げられる。また、本開示の組成物は、特に限定はされないが、上記の通り、塩化ドデシルピリジニウムが媒介細菌たるフゾバクテリウムを効率よく殺菌できることから、特にプラークが形成されていないか、形成途中（後期付着菌が付着していない）の対象の口腔に適用するために、特に適しているということができる。
なお、上述した本開示の組成物に関する記載は、例えば口腔用組成物として用いられないプラーク形成抑制用組成物や上記フゾバクテリウム殺菌剤含有組成物（例えば義歯洗浄用として使用される場合が挙げられる）についても、そのまま当てはまり得る。
本明細書において「含む」とは、「本質的にからなる」と、「からなる」をも包含する（The term "comprising" includes "consisting essentially of” and "consisting of."）。また、本開示は、本明細書に説明した構成要件を任意の組み合わせを全て包含する。
また、上述した本開示の各実施形態について説明した各種特性（性質、構造、機能等）は、本開示に包含される主題を特定するにあたり、どのように組み合わせられてもよい。すなわち、本開示には、本明細書に記載される組み合わせ可能な各特性のあらゆる組み合わせからなる主題が全て包含される。
以下、例を示して本開示の実施形態をより具体的に説明するが、本開示の実施形態は下記の例に限定されるものではない。
フゾバクテリウムに対する塩化アルキルピリジニウムの殺菌効果の検討
以下の３種類の塩化アルキルピリジニウムを水に各種濃度（０．０３％、０．０５％、又は０．１０％）になるよう溶解させ、殺菌剤液として用いた。なお、当該殺菌剤液の塩化アルキルピリジニウム濃度（％）はｗ／ｖ％であるが、溶媒が水であること、及び濃度が比較的低いことから、質量％（ｗ／ｗ％）とほとんど数値としては変わらず、近似することができる。以下のいずれの検討においても同様である。
塩化オクチルピリジニウム（ＯＰＣ）：下記式でＲ＝（ＣＨ２）７ＣＨ３
塩化ドデシルピリジニウム（ＤＰＣ）：下記式でＲ＝（ＣＨ２）１１ＣＨ３
塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）：下記式でＲ＝（ＣＨ２）１５ＣＨ３
以下の３種類の塩化アルキルピリジニウムを水に各種濃度（０．０３％、０．０５％、又は０．１０％）になるよう溶解させ、殺菌剤液として用いた。なお、当該殺菌剤液の塩化アルキルピリジニウム濃度（％）はｗ／ｖ％であるが、溶媒が水であること、及び濃度が比較的低いことから、質量％（ｗ／ｗ％）とほとんど数値としては変わらず、近似することができる。以下のいずれの検討においても同様である。
塩化オクチルピリジニウム（ＯＰＣ）：下記式でＲ＝（ＣＨ２）７ＣＨ３
塩化ドデシルピリジニウム（ＤＰＣ）：下記式でＲ＝（ＣＨ２）１１ＣＨ３
塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）：下記式でＲ＝（ＣＨ２）１５ＣＨ３
また、供試菌として、以下のフゾバクテリウムの２つの亜種を用いた。
菌１：Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum ATCC23726
菌２：Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum ATCC25586
菌１：Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum ATCC23726
菌２：Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum ATCC25586
供試菌をＧＡＭブイヨン培地（日水製薬株式会社）１０ｍｌにそれぞれ植菌し、３７℃で２日間嫌気培養した。当該培養液を供試菌液として用いた。
濃度の異なる殺菌剤液２００μｌに供試菌液２００μｌを混合した。混合から３０秒後に当該混合液１００μｌを採取し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に大豆レシチン、Tween 80をそれぞれ終濃度０．０７％、０．５％になるように添加した薬剤不活化ＰＢＳ９００μｌを加え（混合液を１０倍希釈）、殺菌剤の殺菌作用を不活化した。また、薬剤不活化ＰＢＳにより混合液を段階希釈し、前記混合液を１０１～１０７倍まで希釈した（段階混合液希釈液）。
ＣＤＣ嫌気性菌用ヒツジ血液寒天培地（日本ベクトン・ディッキンソン株式会社）に、調製した段階混合液希釈液をそれぞれ１００μlずつ塗抹し、３７℃で３日間嫌気培養し、生菌数をカウントした。
結果を図１及び図２に示す。なお、これらの図は、Ｌｏｇ（生菌数）ＣＦＵ／ｍｌを縦軸としたグラフである。また、これらの図におけるＣＰＣ、ＤＰＣ、ＯＰＣの濃度は、殺菌剤液として調製した当該成分の濃度を示す。ＣＰＣ及びＯＰＣはフゾバクテリウムに対して殺菌効果を示さない一方で、ＤＰＣは比較的低濃度であってもフゾバクテリウムに対して殺菌効果を示すことが分かった。
次に、ＤＰＣの歯面滞留性を、以下のようにして検討した。
［唾液の採取］
唾液の採取はクリーンルームにおいて実施した。被験者からの唾液採取は、自然に分泌される唾液を約３ｍｌに達するまで行った。採取した唾液は、スイングローター式遠心分離機を用いて、５℃、１１，０００ｒｐｍ、１０分の条件で処理し、上清画分を採取した。採取した上清画分は氷冷の下、約１時間紫外線を照射し、試験に供するまで冷蔵した。
唾液の採取はクリーンルームにおいて実施した。被験者からの唾液採取は、自然に分泌される唾液を約３ｍｌに達するまで行った。採取した唾液は、スイングローター式遠心分離機を用いて、５℃、１１，０００ｒｐｍ、１０分の条件で処理し、上清画分を採取した。採取した上清画分は氷冷の下、約１時間紫外線を照射し、試験に供するまで冷蔵した。
［ＨＡＰ（ヒドロキシアパタイト）担体の調製］
歯牙表面と同様の挙動を示すＨＡＰ担体（ヒドロキシアパタイト粉末唾液処理物）を以下の手順に従って、調製した。
歯牙表面と同様の挙動を示すＨＡＰ担体（ヒドロキシアパタイト粉末唾液処理物）を以下の手順に従って、調製した。
ヒドロキシアパタイト粉末（Ｂｉｏ－ＧｅｌＨＴＰ Ｇｅｌ；ＢＩＯ－ＲＡＤ Ｌａｂ．社製）５０ｍｇをＰＰチューブ（Ｆａｌｃｏｎ２０５９）に秤取し、蒸留水を２ｍｌ添加し、１時間振とう処理を行った。処理後、室温、３０００ｒｐｍ、５分の条件で遠心分離処理を行い、上清を除去した。次いで、前記で得られた唾液を２ｍｌ添加し、タッチミキサーで均一にしたのちに、３７℃に設定した恒温層内で約１５時間振とう処理を行った。その後、再び室温、３０００ｒｐｍ、５分の条件で遠心分離処理を行い、上清を除去し、「ＨＡＰ担体」を得た。
［吸着試験］
上記で得られたＨＡＰ担体（約５０ｍｇ）に各被検体２ｍｌを添加し、タッチミキサーで均一にしたのちに、３７℃に設定した恒温層内で１５分間振とう処理を行い、室温、３０００ｒｐｍ、５分の条件で遠心分離処理を行って上清を除去した。得られた残渣に、蒸留水２ｍｌを添加し、タッチミキサーを用いて均一にした後に、室温、３０００ｒｐｍ、５分の条件で遠心分離処理を行って上清を除去した。得られた残渣に対して、前記と同じ条件で蒸留水洗浄処理を行ない、残渣として吸着処理後のＨＡＰ担体を得た。
上記で得られたＨＡＰ担体（約５０ｍｇ）に各被検体２ｍｌを添加し、タッチミキサーで均一にしたのちに、３７℃に設定した恒温層内で１５分間振とう処理を行い、室温、３０００ｒｐｍ、５分の条件で遠心分離処理を行って上清を除去した。得られた残渣に、蒸留水２ｍｌを添加し、タッチミキサーを用いて均一にした後に、室温、３０００ｒｐｍ、５分の条件で遠心分離処理を行って上清を除去した。得られた残渣に対して、前記と同じ条件で蒸留水洗浄処理を行ない、残渣として吸着処理後のＨＡＰ担体を得た。
［吸着量の測定］
クエン酸（４．２ｇ）、クエン酸２水素１ナトリウム（４．６４ｇ）を溶解した１０００ｍｌの蒸留水のｐＨを３．０に調整した。次いで、ラウリル硫酸ナトリウム（２．８８ｇ）を加え、アセトニトリル３０００ｍｌを添加し均一にしたのちに脱泡処理を行い、抽出溶媒とした。上記で得られた吸着処理後のＨＡＰ担体に、抽出溶媒５ｍｌを加え、タッチミキサーで均一にしたのちに、１０分間振とう処理を行った。処理後、室温、３０００ｒｐｍ、５分の遠心分離処理を行った後に、得られた上清を２０ｍｌメスフラスコに分取した。さらにもう一度前記の抽出処理を行い、得られた上清を前記メスフラスコに秤取した。その後、２０ｍｌに定容し、得られた溶液中の塩化アルキルピリジニウム（ＤＰＣ、ＣＰＣ）の含有量を、ＨＰＬＣを用いて測定した。具体的には、ＤＰＣ及びＣＰＣの濃度既知標準溶液を調製し、滞留性試験サンプルとのピーク面積比較により吸着量を算出した。ＨＰＬＣ分析条件は次の通りとした。
＜分析条件＞
カラム：C18カラム（逆相）
移動相：過塩素酸溶液/アセトニトリル混液
温度：50℃
検出器：PDA（250～260nm付近）
クエン酸（４．２ｇ）、クエン酸２水素１ナトリウム（４．６４ｇ）を溶解した１０００ｍｌの蒸留水のｐＨを３．０に調整した。次いで、ラウリル硫酸ナトリウム（２．８８ｇ）を加え、アセトニトリル３０００ｍｌを添加し均一にしたのちに脱泡処理を行い、抽出溶媒とした。上記で得られた吸着処理後のＨＡＰ担体に、抽出溶媒５ｍｌを加え、タッチミキサーで均一にしたのちに、１０分間振とう処理を行った。処理後、室温、３０００ｒｐｍ、５分の遠心分離処理を行った後に、得られた上清を２０ｍｌメスフラスコに分取した。さらにもう一度前記の抽出処理を行い、得られた上清を前記メスフラスコに秤取した。その後、２０ｍｌに定容し、得られた溶液中の塩化アルキルピリジニウム（ＤＰＣ、ＣＰＣ）の含有量を、ＨＰＬＣを用いて測定した。具体的には、ＤＰＣ及びＣＰＣの濃度既知標準溶液を調製し、滞留性試験サンプルとのピーク面積比較により吸着量を算出した。ＨＰＬＣ分析条件は次の通りとした。
＜分析条件＞
カラム：C18カラム（逆相）
移動相：過塩素酸溶液/アセトニトリル混液
温度：50℃
検出器：PDA（250～260nm付近）
結果は、ＨＡＰ担体５０ｍｇに対する塩化ドデシルピリジニウム吸着量（μｇ）及び塩化セチルピリジニウム吸着量（μｇ）として計算することにより得た。
［具体的な検討内容及び結果］
まず、ＤＰＣ０．０５％水溶液、ＣＰＣ０．０５％水溶液、並びに、ＤＰＣ０．０５％及びＣＰＣ０．０５％水溶液、の３種類の水溶液を、被検体として吸着試験に供した。結果を表１に示す。
まず、ＤＰＣ０．０５％水溶液、ＣＰＣ０．０５％水溶液、並びに、ＤＰＣ０．０５％及びＣＰＣ０．０５％水溶液、の３種類の水溶液を、被検体として吸着試験に供した。結果を表１に示す。
当該結果から、塩化ドデシルピリジニウム（ＤＰＣ）は、歯面滞留性が悪いことがわかった。
そこで、ＤＰＣの歯面滞留性を向上させる素材を見いだすべく、各種成分及びＤＰＣを含む水溶液を調製したところ、グリチルリチン酸又はその塩がＤＰＣの歯面滞留性を向上させることを見いだした。このことを示すデータを以下に記載する。すなわち、表２に示す組成に従って各組成物（実施例１ａ～１ｄ及び比較例Ａ）を調製し、被検体として吸着試験に供した。結果を表２にあわせて示す。また、当該結果をグラフ化して図３に示す。
さらに、グリチルリチン酸ジカリウム量を振って、ＤＰＣの歯面滞留性が変化するかも検討した。すなわち、表３に示す組成に従って各組成物（実施例２ａ～２ｄ及び比較例Ａ）を調製し、被検体として吸着試験に供した。結果を表３にあわせて示す。また、当該結果をグラフ化して図４に示す。
当該結果から、グリチルリチン酸又はその塩の含有量が、ＤＰＣ含有量より多い場合に、特に優れたＤＰＣの歯面滞留性が奏されることが分かった。
なお、さらに、ＤＰＣの歯面滞留性を向上させる素材について探索を行ったところ、クエン酸又はその塩もＤＰＣの歯面滞留性を向上させることを見いだした。このことを示すデータを以下に記載する。すなわち、表４に示す組成に従って各組成物を調製し、被検体として吸着試験に供した。結果を表４にあわせて示す。
当該結果から、クエン酸又はその塩により、ＤＰＣの歯面滞留性を向上させることができることがわかった。
そこで、さらに、クエン酸又はその塩の含有量を変化させてＤＰＣの歯面滞留性を検討した。また、クエン酸又はその塩以外のｐＨ調整剤を用いても、ＤＰＣの歯面滞留性を向上させることができるかを検討した。具体的には、表５に示す組成に従って各組成物（実施例１～１１及び比較例１～３）を調製し、被検体として吸着試験に供した。結果を表３にあわせて示す。また、各組成物のｐＨを、２５℃においてｐＨメーターを用いて測定した。当該結果も表３にあわせて示す。
当該結果から、ｐＨ調製剤の中でも、クエン酸またはその塩を使用することで、ＤＰＣの歯面滞留性を向上させることができることがわかった。
Claims (8)
- 塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有する口腔用組成物。 - 塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有するプラーク形成抑制用組成物。 - 塩化ドデシルピリジニウム、及び
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種
を含有するフゾバクテリウム殺菌用組成物。 - グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種が、
グリチルリチン酸ジカリウムである、
請求項１～３のいずれかに記載の組成物。 - 塩化ドデシルピリジニウム１質量部に対して、
グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を０．１～２０質量部
含有する請求項１～４のいずれかに記載の組成物。 - 塩化ドデシルピリジニウムを０．０１～０．５質量％含有する、請求項１～５のいずれかに記載の組成物。
- グリチルリチン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を０．０１～１質量％含有する、請求項１～６のいずれかに記載の組成物。
- さらに、クエン酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種を含有する、請求項１～７のいずれかに記載の組成物。
Priority Applications (2)
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|---|---|---|---|
| JP2021174856A JP2023064524A (ja) | 2021-10-26 | 2021-10-26 | 口腔用組成物 |
| PCT/JP2022/039702 WO2023074675A1 (ja) | 2021-10-26 | 2022-10-25 | 口腔用組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021174856A JP2023064524A (ja) | 2021-10-26 | 2021-10-26 | 口腔用組成物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023064524A true JP2023064524A (ja) | 2023-05-11 |
Family
ID=86271417
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021174856A Pending JP2023064524A (ja) | 2021-10-26 | 2021-10-26 | 口腔用組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2023064524A (ja) |
-
2021
- 2021-10-26 JP JP2021174856A patent/JP2023064524A/ja active Pending
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