JP2023041027A - 細胞を分離するための磁気分離器を組み込んだシステムおよび方法 - Google Patents

Abstract

【課題】磁気セレクタの操作方法および磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法を提供する。
【解決手段】磁気セレクタ１００は、床表面を有する床１０８を含むハウジング１０２と、前記床表面の反対側に配置され、上に配置される少なくとも１つの磁石を有する磁石キャリア１０４と含み、磁石キャリアは、磁石キャリアが床に隣接している第１の状態と磁石キャリアが床から離間している第２の状態との間で床に対して移動可能である。この方法は、容器１０６を床表面上に配置することと、容器内の流体に磁場を印加するために磁石キャリアを第１の状態に移動させることと、容器から磁場を解除するために磁石キャリアを第１の状態から第２の状態に移動させることと、容器を取り外すことを含む。
【選択図】図３

Description

本開示は、一般的に、磁場を使用する装置および方法を対象とする。より具体的には、本開示は、細胞を含む流体に磁場を印加するためのシステムおよび方法、ならびに細胞を分離するための磁気セレクタを組み込んだ方法を対象とする。

血液または血液成分などの体液の処理は、典型的には、再利用可能な処理装置（「ハードウェア」）および再利用可能な装置に取り付けるかまたは他の方法で関連付けるために適合された使い捨て流体回路を使用することを伴う。流体回路は、典型的には、プラスチックバッグなどの容器および関連付けられた回路を通る流路を画定するチューブを含む。使い捨て流体回路はまた、生物学的流体／細胞を２つ以上の成分に分離、洗浄、または他の方法で処理することができる１つ以上の分離装置を含んでもよい。分離装置は、遠心分離および／または後述の膜分離に基づいて生物学的流体を分離することができる。他の分離装置は、例えば、標的細胞を選択および／または分離するために磁場を使用することができる。米国特許出願公開第２０１７／０３１５１２１号および第２０１８／０１７２６８５号に記載されているように、特定のシステムは、これらの分離装置の組み合わせを使用することができる。本開示は、細胞を分離するための磁気セレクタを組み込んだ方法を提供する。

異種細胞出発材料または供給源材料からの標的免疫表現型細胞サブセットの免疫磁気選択の調製、ならびに下流洗浄および再懸濁のためのシステムおよび方法が開示される。係合可能な磁気配列を有する磁気セレクタを利用し、自動化することができる流体処理システムが提供される。このシステムは、自動洗浄インキュベーションによる免疫磁気選択のためのアフェレーシス収集（または他の異種細胞集団）材料、および細胞材料の容量／濃度調整を準備することができる。このシステムは、標的／非標的細胞分画の除去と、その後の下流での使用に必要な細胞濃度での標的／非標的分画の洗浄／再懸濁も容易にする。この方法は、使用者がカスタム値と処理パラメータを定義して、さまざまな細胞開始材料、さまざまな細胞標的／非標的細胞集団、純度／回収プロファイル、磁性試薬など、多数のアプリケーションと手順に対応できるように高度に構成可能である。

第１の態様では、磁気セレクタを操作する方法が提供される。磁気セレクタは、床表面を有する床と、床表面とは床の反対側に配置され、その上に配置された少なくとも１つの磁石を有する磁石キャリアとを含むハウジングを含み、磁石キャリアは、磁石キャリアが床に隣接している第１の状態と、磁石キャリアが床から離れている第２の状態の位置の間で床に対して移動可能である。この方法は、容器を床表面に配置すること、磁石キャリアを第１の状態に移動させて容器内の流体に磁場を印加すること、磁石キャリアを第１の状態から第２の状態に移動させて磁場を容器内の流体から解放することと、容器を取り外すことを含む。

第２の態様では、磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体処理システムを操作する方法が提供される。生物学的流体処理システムは、床表面を有する床を含むハウジングを有する磁気セレクタと、セレクタの床表面とは床の反対側に配置され、その上に配置された少なくとも１つの磁石を有する磁石キャリアとを含む。磁石キャリアは磁石キャリアが床に隣接している第１の状態と、磁石キャリアが床から離れている第２の状態との間で、床に対して移動可能である。この方法は、容器を床表面に配置すること、容器内の流体に磁性粒子を有する流体を添加して流体中の標的細胞との複合体を形成すること、磁石キャリアを第１の状態に移動させて容器内の流体に磁場を印加すること、磁石キャリアを第１の状態から第２の状態に移動させて容器から磁場を解放すること、および、容器を取り外すことを含む。

第３の態様では、流体処理システムを操作する方法が提供される。流体処理システムは、生物学的流体が充填された供給源容器に接続可能であり、供給源容器からの生物学的流体を少なくとも２つの体積の材料に分離するように構成された使い捨て流体回路上で動作する流体処理部と、流体経路に沿って流体処理部に接続される容器と、容器と磁石キャリアを受け入れるように構成されたハウジングを備える磁気セレクタとを備え、ハウジングは、容器が配置される床表面を有する床を含み、磁石キャリアは、床表面とは反対側の空間に配置される。この方法には、前処理、処理、および後処理の状態が含まれる。前処理状態は、手順プロトコルの選択、手順の設定、流体処理部への使い捨て流体回路の設置、および流体処理部への供給源容器および少なくとも１つの溶液容器の取り付けをさらに含む。処理状態はさらに、供給源容器内の生体液の使い捨て流体回路への導入、生体液の洗浄、採取および希釈、ネガティブセレクションインキュベーションを行うための磁性粒子とのインキュベーション、床に隣接して容器を磁場にさらす第１の状態と磁場を除去するために床から離れた第２の状態の間での磁石キャリアの移動、および容器内の懸濁液中に残っている結合していない細胞を含むネガティブ分画の除去を含む。後処理状態は、容器を密封し、最終製品を取り出し、使い捨て流体回路を取り出すことをさらに含む。

閉鎖状態または位置にあるドアを有する磁気セレクタの一実施形態の斜視図である。

ドアが開放状態または位置にある、図１の磁気セレクタの斜視図である。

図１の磁気セレクタの部分断面図であり、ドアが開放状態にあり、磁石キャリアが磁気セレクタの床から離れている。

図１の磁気セレクタの部分断面図であり、ドアは閉鎖状態にあり、磁石キャリアは磁気セレクタの床から離れている。

図１の磁気セレクタの部分断面図であり、ドアは閉鎖状態にあり、磁石キャリアは磁気セレクタの床に隣接している。

流体回路が取り外され、磁気セレクタのドアが開放状態または位置にある、図１の磁気セレクタを組み込んだ流体処理システムの斜視図である。

流体回路が取り付けられ、磁気セレクタのドアが閉鎖状態または位置にある、図６の流体処理システムの斜視図である。

図６のシステムの他の要素と共に使用される制御部のブロック図である。

図６のシステムおよびそこに組み込まれた磁気セレクタを操作する方法の詳細なステップを示すフローチャートである。 図６のシステムおよびそこに組み込まれた磁気セレクタを操作する方法の詳細なステップを示すフローチャートである。 図６のシステムおよびそこに組み込まれた磁気セレクタを操作する方法の詳細なステップを示すフローチャートである。

本明細書に記載の磁気セレクタを利用する操作方法に関するより一般的なステップを示すフローチャートである。

本開示による装置と装置を使用する方法のより詳細な説明を以下に記載する。特定の装置および方法に関する以下の説明は、例示を意図したものであり、すべての可能な変型または用途を網羅するものではないことを理解されたい。したがって、本開示の範囲は、限定を意図するものではなく、当業者が想起するであろう変型または実施形態を包含すると理解されるべきである。

最初に図１を参照すると、図示の実施形態による磁気セレクタ１００は、ハウジング１０２（例えば、図１および図２を参照）および磁石キャリア１０４（例えば、図２～５を参照）を含む。磁気セレクタ１００はまた、磁石キャリア１０４に結合され（例えば、配線で接続され）、磁石キャリア１０４および磁気セレクタ１００の他の態様を操作するように構成された制御部を含み得る。代替的に、磁気セレクタ１００は、例えば、図６～図８を参照して以下に論じられるように、流体処理システムと共に使用されるか、流体処理システムに組み込まれてもよい。この流体処理システムは、磁石キャリア１０４および磁気セレクタ１００の他の態様を操作するように構成された制御部を含み得る。

磁気セレクタ１００のハウジング１０２は、容器１０６（図３～５）を受け入れるように構成されており、容器１０６は、可撓性または剛性の壁を有することができる。図示のように、ハウジング１０２は床１０８を含み、その上に容器１０６が配置される。ハウジングは、床１０８に対して移動可能なドア１１０を含むことができる。ドア１１０は、開放状態（図２および図３）と閉鎖状態（図１、図４、および図５）との間で移動可能（例えば旋回可能）である。容器１０６は、床表面１１４と対面ドア表面１１６との間の空間１１２（例えば、図４および図５を参照）に配置されてもよく、これらは一定の距離を隔てている。このように、容器１０６が可撓性である場合、あたかも容器が固定された、または剛性形状の容器であるかのように、表面１１４、１１６によって決定される形状をとる。あるいは、容器は、床表面１１４に適合するように選択された形状を有する剛性壁の容器であってもよく、そうでなければドア表面１１６によって課される形状を維持してもよい。

本例では、磁石キャリア１０４は、容器１０６とは反対側の床１０８の側１１８に配置される。図２～図５を参照せよ。磁石キャリア１０４は、その上に配置された少なくとも１つの磁石１２０を有する。本明細書に示されるように、少なくとも１つの磁石１２０は、磁石キャリア１０４の表面１２２上に二次元または三次元配列で配置された複数の磁石（例えば、永久磁石）を含み得る。磁石キャリア１０４は、磁石キャリア１０４が床１０８に隣接（近接）している第１の状態（図５）と、磁石が床１０８から離れている第２の状態（図３および図４）との間で、床１０８に対して移動可能である。

磁気セレクタ１００は、多くの免疫磁気手順で使用することができる。一般的に言えば、これらの手順は、容器を床１０８上に配置することを含む（図３）。容器が剛性の構造の場合、ドアは必要ない。この手順は、磁石キャリア１０４を第１の状態に移動させて容器内の流体に磁場を印加すること（図５）と、磁石キャリア１０２を第１の状態から第２の状態に移動させて容器から磁場の係合を解除し（図４）、容器を取り外す（図３）ことを必要とし得る。

磁気セレクタ１００はまた、より詳細に図に示されるように、同様の手順のために可撓性の容器１０６と共に使用されてもよい。したがって、手順は、可撓性の容器１０６を床１０８上に配置すること（図３）、ドア１１０を開放状態から閉鎖状態に移動させ、可撓性の容器１０６を床表面１１４と対面ドア表面１１６との間に移動させること（図４）、磁石キャリア１０４を第１の状態に移動させて容器１０６内の流体に磁場を印加すること（図５）、磁石キャリア１０２を第１の状態から第２の状態に移動させて容器１０６から磁場を解除すること（図４）、ドア１０４を開放状態に動かすこと、および、可撓性の容器１０６を取り外すこと（図３）を含み得る。

これらの手順は、剛性または可撓性の容器を使用するかどうかに関わらず、図９Ａ～９Ｃと図１０のフローチャートに示されるように、より大きな手順のサブセットとして表すことができる。手順はまた、手順の特定のステップで容器内の流体を撹拌することを含んでもよい。例えば、手順は、容器１０６を磁気セレクタ１００内の床１０８に配置することを含んでもよい。ドア１１０は、磁石キャリア１０４を第２の状態に移動させた後、床１０８上の容器と共に容器１０６内の流体を撹拌する閉鎖状態に移動されることができる。手順はまた、続けて、容器１０６内の流体を撹拌した後、磁石キャリア１０４を第１の状態に移動させて容器１０６内の流体に磁場を印加することと、磁石キャリア１０４を第１の状態から第２の状態に移動させて、容器１０６から磁場を解放すること、磁石キャリア１０４を第２の状態に移動させた後、希釈剤を容器１０６に追加することを含み得る。手順はまた、容器１０６に希釈剤を加えた後、磁石キャリア１０４を第１の状態に移動させて、容器１０６内の流体に磁場を印加すること、およびその後、容器１０６から流体および希釈剤の一部を除去することを含み得る。次いで、これらの動作に続いて、容器１０６から流体および希釈剤の一部を除去した後、希釈剤を容器１０６に追加することができる。

手順はまた、予備動作として、磁気キャリア１０４を第１の状態に移動させて流体に磁場を印加する前に、容器１０６内の流体に磁性粒子または磁性粒子を含む流体を加えることを含むことができる。磁性粒子は、流体中の標的細胞と複合体を形成する。実際、この予備動作は、容器１０６が床１０８上に配置される前に実行されてもよいが、他の実施形態によれば、容器１０６が床１０８上に配置されている間に磁性粒子が追加されてもよい。さらに、磁性粒子を中間体に付着させ、中間体を標的細胞に付着させて複合体を形成することができ、または磁性粒子および中間体を流体に添加し、次いで磁性粒子を中間体に付着させて、中間体が標的細胞に結合して複合体を形成することができる。

磁気セレクタ１００の利点は、以下の１つまたは複数を含むことができる。容器１０６は可撓性の容器であってもよいが、床１０８とドア１１０（または床１０８とドア１１０の表面）との間の選択された間隔でハウジング１０４内に容器１０６を配置することによって、容器１０６は剛性の形状をとる。これにより、容器１０６内でより均一な流体－気体（例えば、空気）界面を形成することができる（例えば、図４および図５を参照）。このより均一な界面は、ここでのように、磁石からの流体の距離が、流体、特に流体内の細胞への磁場の適用に影響を与える可能性がある場合に役立つ。容器が剛性壁の容器である場合にも同様の利点が得られる。さらに、可動な磁石キャリア１０４を備えることによって、磁場の印加および除去を含む複雑な手順を自動化することができ、たとえば容器間で流体を移動させるのとは対照的に、手順を単一の容器内で実行することが可能になるが、容器間の流体の移動も可能である。さらに、容器１０６とは反対側に可動な磁石キャリア１０４を設けることによって、磁石キャリア１０４の構造および動作は、容器１０６のハウジング１０２への導入およびハウジング１０２からの取出しにも対応しなければならないものとは対照的に、単純化され得る（例えば、図３を参照）。

このように磁気セレクタ１００をその構造および動作に関して概略的に説明したが、次に磁気セレクタ１００の構造および操作を以下に詳細に説明する。さらに、磁気セレクタ１００の構造および操作は、流体処理システム、特に細胞処理システムに組み込まれるものとして説明されている。

まず図１および２を参照すると、図示された実施形態の磁気セレクタ１００は、トレイ１３０を含むハウジング１０２を有する。トレイ１３０は、床１０８を画定する底壁１３２と、底壁１３２／床１０８から上方に延びる側壁１３４、１３６とを有する。図示のように、トレイ１３０は、いずれかの端１３８、１４０に壁を実質的に欠いている（例えば、容器１０６および容器１０６に取り付けられた構造の導入および除去を容易にするため）が、トレイ１３０は、容器１０６をハウジング１０２内に固定するために、いずれかの端１３８、１４０に機器を備えることができる。例えば、クリップ１４２は、端部１３８で床１０８に取り付けられることができ、このクリップ１４２は、容器１０６の端部をハウジング１０２に固定するために、間に容器１０６の端部を受け入れる１つまたは複数のばね負荷ジョーを含むことができる。トレイ１３０の他端１４０では、バー１４４が床１０８に取り付けられ得、その下を容器１０６の反対側の端を通過させることができ、容器１０６のその端は他の構造（例えば、サンプリング用または流体回路へのアクセス用に構成することができるポート）を配置することができる。他の実施形態によれば、トレイ１３０はまた、端部１３８、１４０に端壁を有してもよい。

図３～５に示されるように、側壁１３４、１３６は、容器１０６が側壁１３４、１３６の一方または両方に接触することなくそれらの間に受容されるように、互いに離間され得る。側壁１３４、１３６のこの間隔により、容器１０６を床１０８とドア１１０との間に配置して、より均一な形状にすることができる（図３を図４および図５と比較されたい）。可撓性の容器１０６の形状の変化の量は、図３～５に示されるものよりも小さくてもよい。容器１０６内の様々な点の間の距離、特に容器１０６内の流体－気体（例えば空気）界面に沿った距離は、ドア１１０が閉鎖状態に移動すると、より均一になることが分かるであろう（例えば、図４および図５）。上述のように、容器は代替的に剛性壁の容器であってもよく、その場合、ドア１１０は任意であり得る。なぜなら、容器をトレイ１３０とドア１１０に適合させることは、容器の剛性壁構造によって達成することができるからである。

ドア１１０は、一方の縁１５０に沿って第１の側壁（例えば、側壁１３４）に旋回可能に取り付けられ、閉鎖状態で第１の側壁（１３４）の反対側の第２の側壁（例えば、側壁１３６）に隣接する対向縁１５２を有する（図１、図４および図５を参照）。図１および図２に最もよく見られるように、ハウジング１０２は、第１の端部１５８、１６０で側壁１３４に取り付けられ、第２の端部１６２、１６４でドア１１０に取り付けられた１つまたは複数のヒンジ１５４、１５６を含むことができる。これにより、ドア１１０は、開放状態（例えば、図２）と閉鎖状態（図１）との間で枢動または回転することができる。ドア１１０はまた、縁１５２に沿って配置されたラッチ１６６を含むことができ、ラッチ１６６は側壁１３６と協働してドア１１０を閉鎖状態に維持することができる。

床表面１１４と対向するドア表面１１６との間には、第１および第２の側壁１３４、１３６の高さによって少なくとも部分的に決定される距離がある。図面、特に図３～５に示されるように、容器１０６に隣接する表面１１４、１１６の部分は、側壁１３４から側壁１３６まで、および端部１３８から端部１４０までのこれらの表面１３４、１３６間の固定された距離が均一であるように、平坦かつ平行である。この構成は、側壁１３４から側壁１３６まで、および端１３８から端１４０まで均一である、床表面１１４から定められた距離である容器１０６内の流体－気体界面を提供する。表面１１４、１１６の変化は一定の距離を提供することができるが、側壁１３４から側壁１３６まで、および端部１３８から端部１４０までのこれらの表面１１４、１１６の間で均一ではない距離を提供することができることが認識されるであろう。したがって、可撓性の容器１０６は依然として剛性容器のような形状に強制されるが、床表面１１４に対して異なる距離を有し、例えば、本明細書に示されるものとは異なる配置の磁石が望ましい場合がある。

図にも示されているように、ドア１１０は、ドア１１０が閉鎖状態で床表面１１４に面するドア１１０の表面１７０上に配置されたスペーサ１６８を含むことができる（例えば、図４を参照）。スペーサ１６８は、ドア１１０が閉鎖状態で床表面１１４に面するスペーサ表面１７２を有し、対面ドア表面１１６はスペーサ表面１７２を含む。図に示されるように、スペーサ表面１７２は、対面ドア表面１１６と同延である。他の実施形態によれば、スペーサ１６８が含まれなくてもよく、その場合、表面１７０は、対面ドア表面１１６と同延であってもよいことが認識されるであろう。

スペーサ１６８は、例えば、異なるサイズの容器１０６を収容するために、スペーサ１６８が含まれていても含まれていなくてもよいように、取り外し可能であってもよい。スペーサ１６８はまた、床表面１１４とドア表面１１６との間の固定距離が変更され得るように調節可能であり得る。例えば、図示のように、スペーサ１６８は、スペーサ１６８の角に位置する４つの締結具１７４を使用して、ドア１１０の表面１７０に取り付けられる。例えば図２に見られるように、スペーサ１６８は表面１７０に隣接していないが（他の実施形態によれば可能であるが）、ポスト１７６がスペーサ１６８の角と表面１７０との間に配置されている。ポスト１７６の高さは、表面１１４、１１６間の距離を部分的に（例えば、スペーサ１６８の厚さとともに）決定する。第１の高さのポストを取り外し、それを第２の高さのポストと交換することによって、表面１１４、１１６の間の距離を変更することができる。この調整により、異なるサイズの容器１０６を収容することもできる。

距離１１４、１１６を変化させるためのスペーサ１６８の調節は、例えばスペーサ１６８の各隅にある調節ネジなどの他の機構によって提供されてもよいことがさらに認識される。調整は、磁石キャリア１０４に関して以下で説明するリニアアクチュエータの方法と同様の方法で、調整可能なネジまたは複数のネジを操作するためにモータが使用される特定の実施形態に従って自動化されてもよい。

図３～５を参照すると、磁石キャリア１０４は、少なくとも１つの磁石１２０が配置されるプレート１８０を含むことができる。プレート１８０は、床１０８に並進可能に取り付けられ、第１の状態（図５）と第２の状態（図３および４）との間で並進する。前述のように、磁石キャリア１０４は、手順（例えば、制御部にプログラムされた手順）に従ってプレート１８０を第１の状態と第２の状態との間で自動的に変換する制御部に結合することができる。

図示のように、磁石キャリア１０４は、複数のリニアベアリング１８２、１８４およびリニアアクチュエータ１８６を含む。リニアベアリング１８２、１８４は、一端１８８、１９０で床１０８に取り付けられ、プレート１８０はリニアベアリング１８２、１８４に取り付けられる。図３～５に示されるように、ベアリング１８２、１８４の他端１９２、１９４は、複数の支柱１９８によって床１０８に固定された支持板１９６に取り付けられる。リニアアクチュエータ１８６は符号２００でプレート１８０に取り付けられ、リニアアクチュエータ１８６はプレート１８０をリニアベアリング１８２、１８４に沿って第１の状態と第２の状態との間で移動させるように構成される。図３～５に示されるように、リニアアクチュエータ１８６は、支持プレート１９６に取り付けられ、プレート１８０に固定されたナット２０６に受け入れられる親ネジ２０４を回転させるモータ２０２を含むことができ、親ネジ２０４の回転と、ナット２０６との協働により、プレート１８０が第１の状態または第２の状態または位置の間で移動する。

上述したように、少なくとも１つの磁石１２０は、図２～５に示すように、複数の磁石を含むことができる。配列１２０は、プレート１８０の表面２０８が平坦である場合は二次元であってもよいし、プレート１８０の表面２０８が平坦でない場合、または例えば個々の磁石が様々な高さのポストに取り付けられている場合は三次元であってもよい。図示の実施形態によれば、少なくとも１つの磁石１２０は永久磁石であってもよいが、他の実施形態によれば、磁石１２０は代わりに電磁石であってもよい。

操作中、使用者とも呼ばれる操作者は、最初にラッチ１６６を開き、ドア１１０をそのヒンジ１５４、１５６を中心に回転させることにより、ドア１１０を開くことができる。次に、使用者は、可撓性の容器１０６を床１０８に配置し（図３）、クリップ１４２とバー１４４を使用して容器１０６を所定の位置に固定することができる。次に、使用者はドア１１０を開放状態から閉鎖状態に動かし、可撓性の容器１０６を床表面１１４と対面ドア表面１１６との間に移動させることができる（例えば、図４）。このとき、磁石キャリア１０４は、図示のように第２の状態にあってもよい。

次に、磁石キャリア１０４は、容器１０６内の流体に磁場を印加するために、例えば電子制御部によって自動的に第１の状態に移動され得る（図５）。これは、モータ２０２に親ネジ２０４を第１の方向に回転させることによって実行することができる。磁石キャリア１０４は、ある期間、第１の状態にとどまることができる。次に、磁石キャリア１０４を移動させて、第１の状態から第２の状態に戻して、容器１０６から磁場を解放することができ（図４）、その後、使用者はドア１１０を開放状態に移動させ、可撓性の容器１０６を除去することができる（図３）。

他のステップが前の２つの段落で言及されたものに先行し得ることが理解されるであろう。さらに、説明したこれらの状態の間で他のステップを実行することができる。最後に、上記の状態の後に他のステップが発生する場合がある。

磁気セレクタを独立して使用することは可能であるが、セレクタを細胞処理システムなどの流体処理システムと組み合わせて、または流体処理システムに組み込んで使用することも可能である。例えば、図６および図７は、全体が参照として本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０２１／００４６４２６号に開示された処理システムなどの流体処理システムに組み込まれたセレクタ１００を示している。磁気分離器１００は、米国特許出願公開第２０１７／０３１５１２１号および第２０１８／０１７２６８５号に記載されているような他の処理システムと共に他の磁気分離器またはセレクタと組み合わせて使用することも可能である。

そのような実施形態によれば、図７に見られるように、流体処理システム２２０は、生物学的流体が充填された供給源容器２２４に接続可能であり、生物学的流体を供給源容器２２４から少なくとも２つの材料の流れに分離するように構成された流体処理部２２２を含む。「生物学的流体」には血液および血液成分が含まれるが、これらに限定されない。「細胞」または「生体細胞」には、赤血球、白血球、および血小板などの血球が含まれるがこれらに限定されない。処理部２２２は、流体経路２２６に沿って磁気セレクタ１００内に配置された容器１０６に接続される。

処理部２２２は、再利用可能な処理機械またはハードウェア２３２と組み合わせて使用される使い捨て流体回路（セットまたはキットとも呼ばれる）２３０を含む。回路２３０は、システムの内部、例えば、流路、容器等が外部環境に対して露出または「開放」されていない「閉鎖」システムまたは回路であってもよい。 回路２３０は、例えば処置前または処置中に追加の容器が回路２３０に取り付けられている場合でも、閉じていると見なすことができる。制御ユニット（または制御部）２３４（図８を参照）は、回路２３０およびハードウェア２３２を含む処理部２２２に結合される。制御部２３４は、処理部２３０およびハードウェア２３２を手順または処理に従って動作させて、セレクタ１００と組み合わせて製品を生産または生成するように構成される。例えば、磁気セレクタ１００は、処理部２３０、２３２によって生物学的流体から最初に分離された対象細胞または標的細胞の追加の選択を提供するために、システム２２０の一部として含まれてもよい。

図６および図７を参照すると、使い捨て流体回路２３０は、流体、特に生物学的流体の供給源容器２２４に接続可能である。使い捨て流体回路２３０は、原料容器２２４から受け取った流体を処理するために使用される回転膜分離器２４０を含む。供給源容器２２４から回転膜分離器２４０を通り、容器１０６などの１つまたは複数の容器への流体の流れは、供給源容器２２４、回転膜分離器（または略して回転膜）２４０、および容器１０６と流体連通状態にある第１および第２のシリンジ２４２、２４４を使用することによって達成される。シリンジ２４２、２４４はまた、いくつかの他の容器２４６、２４８、２５０と流体連通することができる。

容器２２４、１０６、２４６、２４８、２５０、回転膜２４０、およびシリンジ２４２、２４４の間の流体の流れは、流れ制御カセット２６０を使用して制御され、このカセット２６０は、チューブまたはラインによって上記のそれぞれに接続され得る。さらに、カセット２６０は、複数の別個のチャネルまたは通路によって部分的に画定される内部流路を含んでもよく、これらは、カセット２６０の構造（例えば、ハウジング）内に収容されてもよく、それによって画定されてもよい。チャネルは、１つのチャネルから別のチャネルへの流体の流れを制御することができる複数の選択可能な接合部で接続することができる。これらの選択可能な接合部は、図示のように、選択可能な接合部がチャネル間の制御されたアクセスを提供するため、弁、弁ステーション、またはクランプと呼ばれることもある。カセット２６０はまた、圧力などの流れの特性を決定するためにカセット２６０内の流路にセンサを関連付けることができるセンサステーションを含むことができる。好ましくは、ラインおよびチャネルのそれぞれの長さは、流体回路２３０の内部容積をさらに最小化するために、可能な限り短く保たれる。

図７に示されるように、回転膜２４０およびシリンジ２４２、２４４は、キット２３０に関連するチューブの容積をさらに減らすために、カセット２６０の一部として（すなわち、一体物として）一体的に形成されてもよい。他の実施形態によれば、回転膜２４０および／またはシリンジ２４２、２４４は、容器２２４、１０６、２４６、２４８、２５０のうちの１つまたは複数を有する場合のように、使用時に流体回路２３０の残りの部分に取り付けることができる。再び、図７に示されるように、容器２４６および容器１０６は、カセット２６０と一体的に形成され得る。

図６～８を参照すると、再利用可能なハードウェア構成要素（または略して再利用可能なハードウェア）２３２は、回転膜分離器２４０用の駆動部２７０、それぞれのシリンジ２４２、２４４用のシリンジポンプ２７２、２７４、および流体回路２３０がハードウェア２３２上に配置されるとき（例えば、ハードウェア２３２上に取り付けられるとき）、流れ制御カセット２６０と共に関連付けられた制御カセットインターフェース２７６を含む。カセットインターフェース２７６は、流量制御カセット２６０のクランプおよびセンサステーションに関連付けられたアクチュエータおよびセンサを含み、それぞれクランプを操作するかまたは流体の特性を感知するように構成される。

再利用可能なハードウェア２３２は、例えば図９A～９Cのフローチャートに関連して以下に説明されるような操作方法を使用して、システム２２０の動作を制御するように構成された制御部２３４に結合される。図８に示されるように、制御部２３４は、マイクロプロセッサ２８０を含むことができる（実際には、複数の物理および／または仮想プロセッサを含むことができる）。他の実施形態によれば、制御部２３４は、本明細書に記載の動作を実行するように設計された１つまたは複数の電気回路を含むことができる。実際、制御部２３４は、マイクロプロセッサ２８０および他の回路または回路構成を含むことができる。さらに、制御部２３４は、少なくとも１つのメモリ２８２を含み得る。マイクロプロセッサ２８０をプログラムする命令は、マイクロプロセッサ２８０に関連付けられた少なくとも１つのメモリ２８２に格納することができ、少なくとも１つのメモリ２８２は、コンピュータ実行可能命令を格納した、１つまたは複数の有形の非一時的なコンピュータ可読メモリを含むことができる。これは、マイクロプロセッサ２８０によって実行されると、マイクロプロセッサ２８０に、本明細書で説明する１つまたは複数の動作を実行させることができる。

上述のように、制御部２３４は、回転膜駆動部２７０、第１のシリンジポンプ２７２、第２のシリンジポンプ２７４およびカセットインターフェース２７６などの再利用可能なハードウェア２３２の機器に結合（すなわち、直接的または間接的に接続）することができる。制御部２３４は、これらの装置のそれぞれを操作し、それぞれが他の装置または機器のアセンブリであってもよく、ハードウェア２３２に関連付けられた流体回路２３０を通って流体を流れさせ、例えば流体を供給源容器２２４から、回転膜２４０を通り、最終的に容器１０６に入るように流れさせてもよい。

例えば、制御部２３４は、供給源容器２２４内の流体に含まれる特定の細胞を、それらが容器１０６に向けられる前に洗浄するなど、プロトコルに従って処理または手順を実行するようにプログラムされ得る。制御部２３４は、流体回路２３０をテストする、流体回路２３０をプライミングする、洗浄が実行された後に回路２３０の部分をすすぐ、他の構成要素をその流体が容器１０６に分配される前の細胞含有流体に追加するなどの他の動作を同様に実行するようにプログラムすることができる。

図８にも示されているように、制御部２３４は、例えば、これらの構造から（例えば、信号の形で）情報を受信するため、または、構造の動作を制御するために（例えば、信号の形で）コマンドを送信するため、上記の構造の１つ以上に結合され得る。図示のように、制御部２３４は、少なくとも１つの入力装置２８４に結合してその装置から情報を受け取り、少なくとも１つの出力装置２８６に結合して、その装置に情報を提供することができる。少なくとも１つの入力装置２８４は、本明細書に記載の実施形態による多数の異なる装置を含むことができる。例えば、入力装置２８４は、使用者が制御部２３４に情報および／または命令を提供することができるキーボードまたはキーパッドを含んでもよい。

あるいは、入力装置２８４は、ビデオディスプレイの形態の出力装置２８６と併せて使用され得るようなタッチスクリーンであってもよい。例えば、図６および図７に示した実施形態は、システム２２０のハウジング２９２の前面パネル２９０に取り付けられたそのようなタッチ感応ディスプレイスクリーン２８８を含む。入力装置はまた、バーコードリーダまたはスキャナ、またはＲＦＩＤリーダなどのリーダまたはスキャナを含んでもよい。さらに他の実施形態によれば、入力装置は、制御部２３４を含む細胞処理システムが、ローカルネットワークを介して他の処理システムと（有線、ケーブルなどを介して、または無線で）、または、ローカルネットワーク、広域ネットワーク、またはインターネットを介して、他の細胞処理システムまたは他のコンピュータ機器（サーバーなど）と通信することを可能にするコンピュータ機器の形態であってもよい。そのような実施形態によれば、入力は、内部送信機／受信機装置を含むことができる。

制御部２３４はまた、磁気セレクタ１００、特に磁石キャリア１０４に結合されてもよい。制御部２３４は、磁石キャリア１０４が床１０８に隣接している第１の状態と、磁石キャリア１０４が床１０８から離れている第２の状態との間で磁石キャリア１０４を移動させるように構成され得る。特に、制御部２３４は、リニアアクチュエータ１８６のモータ２０２に結合され得、モータ２０２を作動させてプレート１８０を２つの状態または位置の間で駆動し得る。

システム２２０を操作し、システム２２０に組み込まれた磁気セレクタ１００を操作する自動化された方法の一実施形態によれば、磁気セレクタ１００は、磁場を使用して標的細胞を選択するために使用される。「自動化された」または「自動的に」とは、システム（および特に制御部２３４）が、実質的な操作者／使用者の関与なしに処理方法の処理ステップを実行するようにプログラムできることを意味する。もちろん、本開示の自動システムにおいてさえ、使い捨て流体回路の装填および処理パラメータの入力を含む、使用者の活動が関与し得ることが理解されるであろう。追加の手動手順も必要になる場合があり、処理内の特定の手順を再構成する機会がある場合がある。しかし、再利用可能な装置は、実質的な使用者の介入なしに、以下に説明する使い捨て回路を通して生物学的流体を処理することができる。

システムの動作方法の詳細な説明は、概略的には、前処理３００、処理４００、および後処理５００の段階または状態内の複数のステップを含む方法から始まる。図９Ａの前処理３００、図９Ｂの処理４００、図９Ｃの後処理５００など、これらの状態のステップのいくつかの代替を表すフローチャートを図で見ることができる。

使用者は、最初にハードウェア２３２を起動（たとえば、スイッチオン）することができる。制御部２３４を備えたハードウェア２３２は、ポンプ２７２、２７４、および他の構成要素のチェックを含む自己較ポジティブチェックを行うことができる。使用者がセレクタ１００を起動するとき、または使用者がハードウェア２３２を起動するときに、セレクタ１００に対して同様の自己較ポジティブチェックを実行することができる。

図９Ａに示すように、前処理３００は、ブロック３０２でプロトコル選択から始まる。このステップでは、流体処理システム２２０は、細胞処理手順を実行するために選択するプロトコルのリストを表示する。このステップの関連するプロトコルパラメータには、それぞれのプロトコルＩＤとプロトコルの説明が含まれる場合がある。次に、ブロック３０４で、方法は手順セットアップを含む。選択されたプロトコルの手順セットアップ中、システム制御部２３４は、例えば、実行される特定の選択された手順に関連し、入力装置２８４を介して入力され得る、識別、消耗品、および供給源組成を含み得る情報を入力するように使用者を促す。このステップ３０４では、関連プロトコルパラメータは、必要な手順ＩＤ、使用者ＩＤ、および供給源ＩＤを含む、例えば、標的細胞、細胞成分、成分保持フラグ（二次洗浄および後処理用）、一次セット参照番号、一次セット確認参照設定、溶液１名称、溶液１参照番号、溶液２名称、溶液２参照番号、溶液３名称、溶液３参照番号、溶液４名称、溶液４参照番号、および、最終製品袋最大充填体積（ｍＬ）を識別する、適切な情報をより具体的に含むことができる。また、ハードウェア２３２は、例示であって限定ではなく、入力装置２８４を使用して、処理される細胞懸濁液の量、行われるサイクルの数などを含む処理パラメータを入力または変更するように使用者に促すことができる。

次に、前処理３００は、ブロック３０６で、セットを取り付けるするステップを含む。これは、流体処理システム２２０の制御部２３４が、使い捨て流体回路２３０（使い捨てキット、キット、またはカセットとも呼ばれる）を流体処理システム２２０のハードウェア２３２に取り付けるように使用者を促すことを伴う。このステップの間、流体処理システム２２０は、流体回路２３０を所定の位置に装填し、封止する。キットが取り付けられると、ブロック３０８で取り付け確認が実行される。このステップにおいて、システムは、使い捨てキット２３０の様々な部品が正しく取り付けられているかチェックし、キットの完全性を確認する。

前処理３００は、ブロック３１０の溶液１取り付けに続き、システム２２０は、使用者に、溶液１を使い捨てキット２３０に取り付けるように促す。溶液１は、容器２４８などの容器によって保持され得る分離緩衝液であり得、このステップの関連するプロトコルパラメータは、溶液１の接続体積を含み得る。溶液を接続する場合、チューブを容器に接続するなどの接続は、スパイクコネクタ、無菌接続、または他の適切な接続手段を介して行うことができる。

これに、ブロック３１２で、溶液２取り付けステップが続き、ここで、システム２２０は、溶液２を使い捨てキット２３０に取り付けるように使用者を促す。溶液２は、例えば、容器２５０などの容器によって保持され得る生理食塩水などの放出緩衝液または洗浄媒体であり得る。このステップの関連するプロトコルパラメータには、溶液２の接続体積が含まれる場合がある。

図９Ａに示される次のステップは、溶液３の取り付けステップを伴うブロック３１４である。このステップでは、システム２２０は、溶液３を使い捨てキット２３０に取り付けるように使用者を促す。溶液３は、容器２４６などの容器によって保持され得る、磁性粒子を含有する磁性試薬または磁性流体（ＦＦ）であり得る。このステップの関連するプロトコルパラメータには、溶液３の接続ポイントと溶液３の接続体積が含まれる場合がある。システム２２０はまた、手順の途中で行われる溶液３の添加の直前に溶液３を取り付けるように別の方法で構成することもできる。ブロック３１６の任意のステップには、溶液４の取り付けが含まれる。該当する場合、システム２２０は、溶液４を使い捨てキット２３０に取り付けるように使用者を促す。溶液４は、別の容器に保持された新しい媒体である場合があり、このステップの関連するプロトコルパラメータには、溶液４の接続ポイントと溶液４の接続体積が含まれる場合がある。システム２２０は、手順の途中で行われる溶液４の添加の直前に溶液４を取り付けるように、別の方法で構成することもできる。

使用者が適切な溶液を接続すると、前処理３００は、ブロック３１８で溶液プライミングを続行する。流体処理システム２２０の制御部２３４は、流体回路または使い捨てキット２３０の様々な部品をプライミングして、（１）チューブラインの正しい設置をチェックし、（２）チューブラインおよび回転膜分離器２４０から空気を除去する。例示的な実施形態では、流体回路２３０は生理食塩水でプライミングされてもよいが、他の生体適合性水溶液が使用されてもよい。

ブロック３２０における次のステップは、供給源の取り付けであり、システム２２０の制御部２３４は、供給源製品をキット２３０に取り付けるように使用者を促す。供給源製品は、アフェレーシス（または白血球アフェレーシス）によって最近得られた、一晩冷蔵された、または以前に凍結保存された材料などである可能性がある生物学的流体／細胞であり得、例えば供給源容器２２４によって保持され得る。ブロック３２２で供給源プライミングが続き、ここで、システムは、供給源製品につながるチューブラインをプライミングして、チューブラインから空気を除去する。必要に応じて、この状態を使用して供給源製品を事前に希釈することもできる。このステップの関連するプロトコルパラメータには、供給源プライミング体積（ｍＬ）と供給源プライミング流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。この段階で、方法は、供給源プライミング一時停止のためのブロック３２４を含むことができ、システム２２０は、供給源プライミングのステップ３２２の完了時に一時停止して、次の状態に移行する前に供給源製品容器を撹拌または混合するように構成することができる。そのため、このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定されたプライミング後一時停止とプライミング後一時停止テキストが含まれる場合がある。

前処理３００を完了すると、次に、方法は、図９Ｂに見られるように、処理４００の状態に入る。図９Ｂは、図９Ｃに示されるキーに対応する、円で囲まれた番号付きのノート１から８を含む。処理４００は、（一次洗浄サイクルのための）供給源ローディングを伴うブロック４０２で開始する。このステップでは、供給源製品は、供給源製品容器２２４のポートなどを介して、チューブおよびシリンジポンプ２７２に関連付けられた第１のシリンジ２４２の使用を介して、回転膜分離器２４０に引き込まれる。したがって、生物学的流体／細胞は、１つまたは複数のシリンジポンプ２７２、２７４の操作を介して、供給源容器２２４からキット２３０を介してその回転膜分離器２４０に移送される。同様に、洗浄媒体は、その容器２５０から流体回路２３０を通って回転膜分離器２４０に送達されてもよい。

一次洗浄中、供給源生成物内の細胞は、（１）供給源容器が空になるまで（図９Ｂの円キー２：供給源容器が空である、によって識別される）、または、（２）回転膜分離器２４０内の細胞の数が、事前に設定された容量に達する（図９Ｂの円キー１：最大環状ＰＣＶ％に到達、によって識別される）まで、回転膜分離器２４０の環状空間内に蓄積する。細胞が回転膜分離器２４０に装填されると、上清（濾液）が膜を横切り、第１のシリンジ２４２に引き込まれる。生物細胞は、上清が分離されて廃棄物容器２４６に除去される間、処理中の容器に収集され得ることが理解されるであろう。

このステップの関連プロトコルパラメータには、回転膜分離器のローディング回転速度（ＲＰＭ）、供給源入口流量（ｍＬ／分）、および最大環状充填細胞容積（ＰＣＶ）（％）が含まれ得る。

ブロック４０４における次の処理ステップは、供給源すすぎ４０４（一次洗浄用）である。供給源容器２２４が空になると、溶液１が容器２４８から供給源容器２２４に移されて、容器およびチューブラインに残った残留細胞が回収される。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された供給源すすぎ、および供給源すすぎ体積（ｍＬ）が含まれる場合がある。以下で説明する状態のそれぞれについて、各ステップに使用される溶液は、エンドユーザによって設定可能であり、アプリケーションおよび使用者の処理ニーズに依存することを理解されたい。

これに続いて、ブロック４０６で、供給源すすぎ一時停止（一次洗浄用）が続く。次いで、システム２２０は、ブロック４０８で供給源ローディング状態に戻り、残留細胞を含むすすぎ溶液を処理する。しかしながら、システム２２０は、ブロック４０６において、溶液１が供給源容器２２４に移送された後に供給源すすぎ一時停止を含むように設定され、使用者が供給源容器２２４内のすすぎ溶液を混合して、供給源容器２２４内に捕捉された残留細胞を捕捉することを可能にすることができる。画面２８８に表示されるテキストは、このステップを追加できるように設定可能である。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された供給源すすぎ一時停止、および、供給源すすぎ一時停止テキストが含まれる場合がある。供給源すすぎ一時停止が利用される場合、システム２２０は供給源ローディングのブロック４０８ステップに戻り、残留細胞を含むすすぎ溶液を処理する。

処理４００は、洗浄４１０（一次洗浄用）に続き、細胞が回転膜分離器２４０の環状空間内に懸濁された状態で、溶液１が、第１のシリンジ２４２を使用して分離器２４０の回転子内に引き込まれる。残りの上清および洗浄緩衝液は、回転膜２４０を横切り、第１のシリンジ２４２に引き込まれる。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された一次回転子洗浄、一次洗浄溶液、一次洗浄回転子洗浄体積（ｍＬ）、および一次洗浄回転子洗浄流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。この工程は追加の洗浄溶液で繰り返され得ることが理解されるであろう。たとえば、選択のために新鮮なアフェレーシス材料を処理する場合、血小板は洗浄液２で活性化される。その場合、懸濁液を最初に溶液１で洗浄して血小板を濾液に除去し、その後すぐに溶液２で洗浄して、その後の処理ステップに必要な媒体に細胞を再懸濁する。

これにブロック４１２で採取（一次洗浄用）が続き、ここで回転膜分離器２４０の回転子の環状空間内の細胞は、第２のシリンジ２４４を使用して溶液１と共に回転子から引き出され、例示されている容器１０６などの選択容器、または別の選択容器へ移送される。供給源容器２２４が空でない場合、システム２２０は、供給源ローディング（一次洗浄用）状態に戻る（図９Ｂの円キー３：供給源容器が空でない、によって識別されるように）。供給源容器２２４が空である場合、システム２２０は、ブロック４１４で、希釈１の状態またはステップに移行する。この採取（一次洗浄用）ステップの関連プロトコルパラメータには、採取量（ｍＬ）と採取流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。ブロック４１４の希釈１のステップにおいて、システム２２０は、溶液１を用いて回転膜分離器２４０から細胞を採取した直後に、選択容器内の細胞懸濁液を希釈する。この希釈１のステップの関連するプロトコルパラメータには、希釈１体積（ｍＬ）および希釈１流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。

ブロック４１４で、システムは、２２４で、ネガティブ分画保持容器を使い捨てキット２３０に取り付けるか、または予め接続されたネガティブ分画保持容器への流体経路を開くように使用者を促すことができる。ブロック４１４での希釈１に続いて、手順は希釈６のステップのためにブロック４５２に進み（図９Ｂの円キー７：結合前磁性試薬、によって識別されるように）、ポジティブセレクション（以下で論じる）を受けるか、または（円キー８：磁性試薬の共通の捕捉、によって識別されるように、処理は次のブロック４１６のステップである希釈１一時停止に進むことができる。ブロック４１６の希釈１一時停止では、システム２２０は、希釈１の状態の完了時に一時停止するように設定され得る。これは、使用者が選択容器に抗体を直接手動で追加できる手順のポイントである。例えば、使用者は標的細胞を含む溶液にモノクローナル抗体（ｍＡｂ）溶液を手動で注入することができ、例えば、導入容器（図示せず）を処理前または処理中に無菌的に容器に取り付けることができ、ｍＡｂ溶液は、導入容器から容器に注入され得る。他の実施形態によれば、モノクローナル抗体は、容器に自動的に導入され得る。この希釈１一時停止に関連するプロトコルパラメータには、設定された希釈１一次停止、希釈１一次停止テキスト、希釈１サンプル体積（ｍＬ）、および、抗体体積（ｍＬ）が含まれる場合がある。

次に、これに続いて、ブロック４１８でインキュベーションを行うことができる。インキュベーションは、選択容器１０６内の細胞懸濁液が添加された抗体と共にインキュベートされる抗体インキュベーションである。インキュベーションおよび撹拌の持続時間は、少なくとも１つの入力装置２８４を介して使用者によって設定可能である。この状態で、磁気セレクタ１００の磁石キャリア１０４は、床１０８から離れた第２の状態になることによって係合解除され、関連するプロトコルパラメータは、インキュベーション時間、インキュベーション撹拌可能、インキュベーション撹拌速度、およびインキュベーション撹拌角度を含み得る。

ブロック４２０の希釈２において、システムは、細胞懸濁液を溶液１でさらに希釈して、二次洗浄のための特定の細胞濃度または体積を目標とすることができる。これにブロック４２２で、供給源袋への移送が続き、ここで、細胞懸濁液は、選択容器から元の供給源容器（または新たに接続された容器）に、第２のシリンジ２４４を使用して移送される。ブロック４２４の回転子再プライミングでは、システムは、供給源容器２２４と第２シリンジ２４４との間の使い捨てキット２３０のセグメントを再プライミングして、空気を除去する。この状態での関連するプロトコルパラメータには、抗体後回転子再プライミング溶液、抗体後供給源プライミング体積（ｍＬ）、および抗体後供給源プライミング流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。これに任意で、回転子再プライミング一時停止が続き、システム２２０は、次の状態に移行する前に、供給源容器２２４内の細胞懸濁液を混合するために、回転子再プライミングの完了時に一時停止するように設定され得る。回転子再プライミング一次停止を利用するように再設定する場合、関連するプロトコルパラメータには、設定された抗体後供給源プライミング一次停止、および、抗体後供給源プライミング一次停止テキストが含まれる場合がある。

図９Ｂの例に示されるように、ブロック４２８での処理４００は、（二次洗浄サイクルのための）さらなる供給源ローディングを含むことができる。したがって、ブロック４２８で、細胞懸濁液は、第１のシリンジ２４２を使用して供給源製品容器２２４のポートを通して回転膜分離器２４０の回転子に引き込まれる。一次洗浄と同様に、（１）供給源容器が空になるまで（図９Ｂの円キー２：供給源容器が空である）、または（２）回転子内の細胞数が事前に設定された体積に達する（図９Ｂの円キー１：最大環状ＰＣＶ％に到達）まで、細胞は回転子の環状空間内に蓄積される。細胞が回転子に装填されると、上清（過剰な抗体を含む）が回転する膜分離器２４０の膜を横切り、第１のシリンジ２４２に引き込まれる。関連するプロトコルパラメータには、回転子ローディング回転速度（ＲＰＭ）、供給源入口流量（ｍＬ／分）、および、最大環状ＰＣＶ（％）が含まれる場合がある。

ブロック４３０における次の処理ステップは、供給源すすぎ４０４（二次洗浄用）である。供給源容器２２４が空になると、溶液２が容器２５０から供給源容器２２４に移されて、容器およびチューブラインに残った残留細胞が回収される。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された供給源すすぎ、および供給源すすぎ体積（ｍＬ）が含まれる場合がある。

次に、システム２２０は、ブロック４３４で供給源ローディング状態に戻り、残留細胞を含むすすぎ溶液を処理する。しかしながら、システム２２０は、ブロック４３２で供給源すすぎ一時停止を含むように設定することができる。したがって、溶液２が供給源容器２２４に移された後、システム２２０は一時停止して、使用者が供給源容器２２４内のすすぎ溶液を混合して、容器内に捕捉された残留細胞を捕捉できるように設定することができる。画面２８８に表示されるテキストは、このステップを追加できるように設定可能である。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された供給源すすぎ一時停止および供給源すすぎ一時停止テキストが含まれる場合がある。ブロック４３２で供給源すすぎ一時停止が利用される場合、システム２２０は供給源ローディングのブロック４３４ステップに戻り、残留細胞を含むすすぎ溶液を処理する。

処理４００は、ブロック４３６で洗浄（二次洗浄のため）に続き、ここで細胞が回転膜分離器２４０の回転子の環状空間内に懸濁された状態で、溶液２が分離器２４０の回転子内に、第１のシリンジ２４２を使用して引き込まれる。残りの上清および洗浄緩衝液は、回転膜２４０を横切り、第１のシリンジ２４２に引き込まれる。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された二次回転子洗浄、二次洗浄の回転子洗浄量（ｍＬ）、および二次洗浄の回転子洗浄流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。

ブロック４３８で採取（二次洗浄用）が続き、ここで、回転膜分離器２４０の回転子の環状空間内の細胞が、第２のシリンジ２４４を使用して溶液２と共に回転子から引き出され、例示されている容器１０６などの選択容器、または別の選択容器へ移送される。供給源容器２２４が空でない場合、システム２２０は供給源ローディング（二次洗浄用）状態に戻る（図９Ｂの円キー３：供給源容器が空でない、によって識別されるように）。採取（二次洗浄用）ステップの関連するプロトコルパラメータには、採取体積（ｍＬ）および採取流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。供給源容器２２４が空である場合、システム２２０は、ブロック４３９で空気量管理状態に移行する。ブロック４３９では、容器１０６または代替の選択容器などの選択容器は、磁気セレクタ１００を揺動させることによって別の方法で撹拌を与えるために、本明細書で論じられるハードウェアを使用して、傾斜した位置に移動される。容器の入口が容器の大部分よりも高くなるように持ち上げると、選択容器に閉じ込められた空気が容器の入口で利用できるようになる。次いで、空気は、第２のシリンジポンプ２７４によって容器から引き出され、カセットフィルタ通気孔を介してカセット２６０を通して排出される。この処理は、第２のシリンジポンプ２７４でカセットセンサステーションの１つによって空気が検出され、空気の除去が示されるまで繰り返される。この時点で、既知の体積の空気（例えば、５０～３００ｍＬ）が、カセットのフィルタ付き通気孔を介してシリンジポンプ７２４に再導入される。次いで、シリンジポンプ２７４は、既知の体積の空気を選択容器１０６に向ける。この体積の空気は、磁気的に標識された細胞の回収を最適化するために使用される。選択容器内の空気が多すぎると、選択容器に一緒に収容できる流体の量が制限され、それによって選択の細胞の体積が制限される。選択容器内の空気が少なすぎると、排水操作中に可撓性の容器の壁が互いに崩壊する可能性があり、磁気的に捕捉された細胞がネガティブ分画に失われる可能性がある。空気量管理状態の関連するプロトコルパラメータには、選択容器空気体積（ｍＬ）が含まれる。

次いで、システム２２０は、ブロック４４０で希釈３状態に移行する。ブロック４４０の希釈３ステップにおいて、システム２２０は、溶液２で回転膜分離器２４０の回転子から細胞を回収し、空気量管理ステップを終了した後に、選択容器内の細胞懸濁液を希釈する。この希釈３のステップの関連するプロトコルパラメータには、希釈３体積（ｍＬ）、希釈３溶液、および希釈３流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。システム２２０は任意で、手順の途中で溶液３を取り付けるように設定されている場合、システムは、溶液３を流体回路または使い捨てキット２３０に取り付けるように使用者を促す。

処理４００はブロック４４２で希釈４に続き、ここでシステム２２０は、磁性粒子を含む溶液３を容器１０６などの選択容器に自動的に追加するように設定されてもよい。逆に、磁性粒子は、使用者が選択容器に手動で追加することもできる。磁性粒子は、一次洗浄後にブロック４１６で添加された抗体に結合する。この希釈４のステップの関連するプロトコルパラメータには、希釈４の設定（自動化／手動）、希釈４体積（ｍＬ）、および希釈４流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。

これに続いて、ブロック４４４でインキュベーション（磁石オフ）が行われる。選択容器内の細胞懸濁液は、磁性粒子とともにインキュベートされる。インキュベーションおよび撹拌の持続時間は、少なくとも１つの入力装置２８４を介して使用者によって設定可能である。この状態では、磁気セレクタ１００の磁石キャリア１０４は、床１０８から離れた第２の状態になることによって係合解除され、関連するプロトコルパラメータは、インキュベーション時間、可能なインキュベーション撹拌、インキュベーション撹拌速度、およびインキュベーション撹拌角度を含み得る。

ブロック４４６における次のステップは、インキュベーション（磁石オン）であり、磁石を係合させたネガティブセレクションインキュベーションと呼ばれることもある。磁石キャリア１０４は係合され、磁石が床１０８に隣接した第１のキャリア状態に移動され、磁気的に結合された細胞が磁石に向かって引っ張られる。選択と撹拌の持続時間は、使用者が設定できる。関連するプロトコルパラメータには、インキュベーション時間、可能なインキュベーション撹拌、インキュベーション撹拌速度、およびインキュベーション撹拌角度が含まれる場合がある。

処理４００は、ブロック４４８で、ネガティブ分画をネガティブ分画容器に移送するステップに続く。このステップでは、磁石は依然として係合されており、懸濁液中に残っている結合していない細胞は、第２のシリンジ２４４を使用して分離容器から除去される。次に、除去された細胞は、供給源容器２２４の代わりに、ネガティブ分画保持容器に移される。ネガティブ分画保持容器は図７には示されていないが、容器２２４に取って代わるか、または容器２２４とのＹサイト接続を介して事前に接続された容器であってもよい。ネガティブセレクションの数は、使用者が設定できる。追加のネガティブセレクションが設定されていない場合がある（図９Ｂの円キー５：追加の選択なし、で識別されるように）。あるいは、追加のネガティブセレクションが設定されている場合、システム２２０は、選択容器１０６に残っている細胞を再度希釈して溶液２で再懸濁し、再インキュベートし、ネガティブ分画をネガティブ分画保持容器に移すことを繰り返す。最終的なネガティブセレクションが完了した後、システムは、第２のシリンジ２４４からネガティブ分画保持容器までの流体経路を追跡して、残留細胞を除去する。

ネガティブ分画を供給源袋に移送するステップのブロック４４８で、ポジティブセレクションが手順の一部として実行されるように設定されている場合、システムは次に希釈５状態のブロック４５０に移行する（図９Ｂの円キー４：追加選択、によって識別されるように）。ポジティブセレクションが設定されていない場合（図９Ｂの円キー６：ネガティブセレクションのみ、によって識別されるように）、システム２２０は完了しており、選択容器１０６内の製品を密封して取り出すように使用者に促すか、選択後洗浄設定に応じて、ブロック４６０と４６２との間で発生するポジティブ分画サンプリング一時停止状態に移行する。ブロック４４８における関連するプロトコルパラメータは、ネガティブセレクションの数、ネガティブ分画回転子すすぎ容量（ｍＬ）、ネガティブ分画エアチェイス体積（ｍＬ）、ポジティブセレクション設定、および選択後洗浄設定を含み得る。

前述のように、ブロック４５０で希釈５が提供される。磁気セレクタ１００の床１０８から間隔を空けることによって磁石キャリア１０４が第２の状態で係合解除された状態で、ポジティブセレクションされた細胞が再懸濁され、溶液１で希釈される。溶液１の内容物が磁性試薬に作用し、それによって細胞が磁性粒子または磁性ビーズから解放される。関連するプロトコルパラメータには、希釈５流量（ｍＬ／分）、希釈５溶液、および希釈５体積（ｍＬ）が含まれる場合がある。

ブロック４５２の希釈６からブロック４５４のインキュベーションまでの代替ステップが存在する。ブロック４５２でのインキュベーションは、選択容器１０６内の細胞懸濁液が溶液１と共にインキュベートされる洗浄緩衝液インキュベーションを提供する。インキュベーションおよび撹拌の持続時間は、少なくとも１つの入力装置２８４を介して使用者によって設定可能である。この状態で、磁石キャリア１０４は、磁気セレクタ１００の床１０８から離れた第２の状態に移動することによって解放される。関連するプロトコルパラメータには、インキュベーション時間、可能なインキュベーション撹拌、インキュベーション撹拌速度、およびインキュベーション撹拌角度が含まれる場合がある。磁性試薬またはＦＦに関連する放出時間に応じて、このようなインキュベーション状態の使用が望ましい場合がある。

これに、ブロック４５６で、さらなるインキュベーション（磁石オン）が続く。このさらなるインキュベーションは、磁気結合によるポジティブセレクションインキュベーションを提供する。磁石キャリア１０４は、磁気セレクタ１００の床１０８に隣接する第１の状態に移動されることによって係合される。遊離した磁気ビーズは、磁石キャリア１０４上の磁石１２０に向かって引っ張られる。このインキュベーション中の選択および撹拌の持続時間は、少なくとも１つの入力装置２８４を介して使用者によって設定可能である。関連するプロトコルパラメータには、インキュベーション時間、可能なインキュベーション撹拌、インキュベーション撹拌速度、およびインキュベーション撹拌角度が含まれる場合がある。

処理４００は、ポジティブ分画袋への移送のステップのためにブロック４５８に続く。このステップでは、磁石は依然として係合されており、浮遊状態のままである解放された細胞は、第２のシリンジ２４４を使用して分離容器から除去される。選択後洗浄が手順で実行されるように設定されている場合、除去された細胞は、供給源容器２２４の代わりにポジティブ分画保持容器に移される。
ポジティブ分画保持容器は図７には示されていないが、容器２２４を置換するか、または容器２２４とのＹサイト接続を介して事前に接続された容器であってもよい。選択後洗浄が手順に対して設定されていない場合、除去された細胞は最終製品袋に移され、手順は完了し、システム２２０は後処理５００に進み、最終製品を密封して除去するように使用者を促す。ポジティブセレクションの数は、使用者が設定できる。

追加のポジティブセレクションが設定される場合、システム２２０は、選択容器１０６に残っている細胞を溶液１で希釈および再懸濁し、再インキュベートし、ポジティブ分画の保持容器への移動を繰り返す。最終的なポジティブセレクションが完了した後（図９Ｂの円キー５：追加の選択なし、によって識別されるように）、システム２２０は、第２のシリンジ２４４からポジティブ分画保持容器（または、選択後洗浄設定に応じて最終製品容器）を使用して、ポジティブセレクションされた残りの細胞をすべて除去する。最終のポジティブセレクションの後、選択後洗浄が設定される場合、システム２２０は、選択されたすべての細胞をポジティブ分画保持容器に移した後、ブロック４５８内で標的分画サンプリング一時停止に移行する。使用者には、細胞濃度をサンプリングして更新する選択肢がある。標的分画サンプリング一時停止状態の関連するプロトコルパラメータには、設定された標的細胞一次停止、標的細胞一次停止テキスト、標的細胞サンプリング体積（ｍＬ）、および実際の標的細胞濃度が含まれる場合がある。

選択後洗浄が設定される場合、システムは、溶液４を使い捨てキット２３０に取り付けるように使用者を促す。次に、システム２２０は、回転子再プライミングのためにブロック４６０に進む。このステップでは、システム２２０は、ポジティブ分画保持容器と第２のシリンジ２４４との間の流体回路または使い捨てキット２３０のセグメントを溶液４で再プライミングして空気を除去する。溶液４を接続するための関連プロトコルパラメータには、溶液４接続体積が含まれる場合があり、回転子再プライミングの関連プロトコルパラメータには、選択後プライミング体積（ｍＬ）および選択後供給源プライミング流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。ブロック４６０はまた、選択後供給源プライミング一時停止を含むように設定することができ、システム２２０は、回転子再プライミングの完了時に一時停止して、次の状態に移行する前にポジティブ分画保持容器内の細胞懸濁液を混合することができる。このような選択後供給源プライミング一時停止に関連するプロトコルパラメータには、設定された選択後プライミング一時停止、および選択後プライミングテキストが含まれる場合がある。

最終洗浄が選択後に設定される場合、次の状態はブロック４６２の供給源ローディングである。細胞懸濁液は、第１のシリンジ２４２を使用して供給源ポートを通して回転膜分離器２４０の回転子に引き込まれる。細胞は、（１）ポジティブ分画を保持する容器（図示せず）が空になるまで（図９Ｂの円キー２：供給源容器が空である、によって識別される）、この場合、次のステップはブロック４７０の洗浄（以下で説明）、または（２）回転子内の細胞数が事前に設定された体積に達する（図９Ｂの円キー１：最大環状ＰＣＶ％到達によって識別される）まで、回転子の環状空間内に蓄積される。細胞が回転膜分離器２４０の回転子に装填されると、上清（濾液）が膜を横切り、第１のシリンジ２４２に引き込まれる。このような選択後供給源ローディングに関連するプロトコルパラメータには、選択後回転子ローディング回転速度（ＲＰＭ）、選択後供給源入口流量（ｍＬ／分）、および選択後最大環状ＰＣＶ（５％）が含まれる場合がある。

ポジティブ分画保持容器（図示せず）が空である場合（図９Ｂの円キー２：供給源容器が空である、によって識別される）、方法は供給源すすぎのためのブロック４６４に進む。これは選択後供給源すすぎであり、ポジティブ分画保持容器が空になると、溶液４（プロトコルに応じて位置２４８または２５０で溶液１または溶液２を置き換える）がブロック４６０で残留細胞を回収するためにポジティブ分画保持に移される。システムは選択後供給源ローディング状態に戻り、残留細胞を含むすすぎ液を処理する。この供給源すすぎステップの関連プロトコルパラメータには、設定された選択後供給源すすぎ、および選択後供給源すすぎ体積（ｍＬ）が含まれる場合がある。

ブロック４６６で、システム２２０は供給源すすぎ一時停止に達する。これは選択後供給源すすぎ一時停止であり、溶液４がポジティブ分画保持容器（図示せず）に移された後、システム２２０を一時停止して、使用者が容器内のすすぎ溶液を混合して容器に閉じ込められた残留物を捕捉できるように設定することができる。表示画面２８８に表示されるテキストは設定可能である。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された選択後供給源すすぎ一時停止および選択後供給源すすぎ一時停止テキストが含まれる場合がある。これは、ブロック４６８の供給源ローディングに続き、さらなる洗浄に備える。

次のステップは、ブロック４７０の洗浄（新しい媒体）であり、回転子内の細胞の数が予め設定された容量に達したためにブロック４６２から進んだ（図９Ｂの円キー１：最大環状ＰＣＶ％到達、によって識別されるように）か、またはブロック４６８でのさらなるすすぎステップおよび供給源ローディングから進んだかに関わらない。回転膜分離器２４０の回転子の環状空間内に細胞が懸濁された状態で、第１のシリンジ２４２を使用して、溶液４が回転子に引き込まれる。残りの上清と洗浄緩衝液は膜を通過し、第１のシリンジ２４２に引き込まれる。このステップの関連するプロトコルパラメータには、設定された選択後回転子洗浄、選択後洗浄体積（ｍＬ）、および選択後洗浄流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。

処理４００は、採取（最終容器への）のためにブロック４７２に続く。この採取ステップでは、回転膜分離器２４０の回転子の環状空間内の細胞は、第２のシリンジ２４４を使用して溶液４と共に回転子から引き出され、最終生成物容器（図示せず）に移され、それは使用者が接続した、流体経路２２６に接続された接続容器（袋、インキュベート容器、または他の容器のいずれか）であろう。ポジティブの分画保持容器（図示せず）が空でない場合（図９Ｂの円キー３：供給源容器が空ではない、によって識別されるように）、システム２２０は、ブロック４６２の供給源ローディング（選択後）ステップに戻る。ポジティブ分画保持容器が空の場合、システム２２０は、ブロック４７４で最終希釈（新しい媒体）状態に移行する。このステップの関連するプロトコルパラメータには、採取量（ｍＬ）と採取流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。

さらなるブロック４７４の最終希釈（新しい媒体）ステップでは、システムは、溶液４を用いて回転子から細胞を採取した直後に、流体経路２２６に接続された最終生成物容器（図示せず）内の細胞懸濁液を希釈して、目標最終製品体積または目標最終濃度を達成する。このステップの関連するプロトコルパラメータには、最終希釈流量（ｍＬ／分）、最終希釈エントリ方法、最終希釈濃度、最終希釈体積（ｍＬ）、および最終希釈エアチェイス容量（ｍＬ）が含まれる場合がある。

最終希釈（新しい媒体）ステップの後、処理４００は、システム２２０が残留すすぎを含むように設定されてもよい。そのように設定されている場合、システム２２０は溶液を選択容器１０６に戻して、遊離した磁性ビーズおよび残留細胞を再懸濁する。残留すすぎステップを含む場合、関連するプロトコルパラメータには、残留すすぎ設定、残留すすぎ溶液、残留すすぎ体積（ｍＬ）、および残留すすぎ流量（ｍＬ／分）が含まれる場合がある。

次に、システム２２０は、ブロック５０２での最終製品の密封／取り外しを含む後処理５００に移行する。このステップで、システム２２０は、流体経路２２６に取り付けられた最終製品容器（図示せず）を密封して取り外すように促す。これに続いて、ブロック５０４で手順要約ステップが行われ、システムは画面表示部２８８などに手順の概要を表示する。最後に、ブロック５０６のセットの取り外しで、システム２２０は、使い捨ての流体回路またはキット２３０を流体処理ハードウェア２３２から取り外すように使用者を促す。

上記の説明によれば、本開示の一部は、磁気セレクタ１００の使用に焦点を当ててより一般的に議論され得る。例えば、磁気セレクタ１００は、独立して使用されるか、システム２２０の一部として使用されるかに関わらず、選択のための標的細胞を準備するために他の溶液と組み合わされた流体と共に使用され得る。

例えば、標的細胞を含む溶液にモノクローナル抗体溶液を導入し、一定時間インキュベートして、溶液中のモノクローナル抗体と標的細胞（例えばＣＤ３４＋末梢血幹細胞、ＣＤ３＋／ＣＤ２８＋Ｔ細胞リンパ球、およびＣＤ８＋形質Ｂ細胞などの特定の表現型の白血球であり得、これらの細胞は標的細胞とも呼ばれる）との間の相互作用を可能にすることができる。回転膜分離器２４０を使用して、細胞を混合し、次いで細胞を洗浄して、結合していないモノクローナル抗体を除去することができる。

この時点で、非特異的磁性粒子溶液（例えば磁性ビーズ溶液または磁性流体（ＦＦ）などの磁性試薬）が懸濁液に導入され得る。例えば、導入容器（図示せず）は、処置前または処置中に無菌的に容器に取り付けることができ、磁性流体は導入容器から容器に注入される。他の実施形態によれば、磁性流体は容器内に自動的に導入され得る。容器の内容物は、磁性流体とモノクローナル抗体の非特異的末端との間の相互作用を可能にするために一定期間インキュベートされ、混合され、（任意に）結合していない磁性流体を除去するために洗浄され得る。

あるいは、モノクローナル抗体と磁性粒子は、容器１０６に導入する前に組み合わせることができる。この場合、モノクローナル抗体と磁性粒子の組み合わせを細胞とインキュベートして、上記で概説した２つの関連する一連のステップとは対照的に、単一の一連のステップで複合体を形成することができる。

複合体が形成されると、流体は容器１０６内に移動され得る。磁性粒子、特に標的細胞に関連する磁性粒子を容器１０６の特定の部分（例えば、床１０８に隣接する容器の下部）に引き付けるために、磁石キャリア１０４を作動させ、および／または容器１０６に隣接して配置することができる。次いで、容器１０６を撹拌し、ネガティブ分画を除去することができる。次いで、所望の最終容積を達成するために追加の流体を容器に加えることができ、キャリア１０４と床１０８とが離間するように磁石キャリア１０４を床１０８に対して移動させることができる。処理が完了すると、制御部２３４は、容器１０６をサンプリングし、密封し、取り出すように使用者を促すことができる。

１つの例示的な動作方法の詳細な説明において上述したように、セレクタ１００は撹拌を利用することができる。容器１０６内の流体を撹拌できるようにするために、セレクタ１００は、ハウジング２９２から垂下するシャフト２９４に取り付けることができる。シャフト２９４は、ハウジング２９２に取り付けられたモータに取り付けられ、このモータは、シャフトをシャフトの軸の周りで反対方向に回転させることができる。結果として、容器１０６内の流体は、振動様式で撹拌され得る。

セレクタ１００をシャフト２９４に取り付けることにより、容器が水平と同じ高さになるように容器を配置する代わりに、容器１０６を水平に対して斜めに配置することもできる。例えば、セレクタ１００は、セレクタ１００が水平に対して３０度で配置されるように、水平に対して配向されてもよい。もちろん、これは、セレクタ１００（または床表面１１４）を水平（または垂直）に対して様々な方向に向けることができる機構（ピボットなど）、または、セレクタ１００が水平（または垂直）に対して特定の角度の配向になることを可能にする機構（傾斜面など）を提供することによって、セレクタ１００のスタンドアロンバージョンでも達成することができる。

操作方法６００を示す図１０のフローチャートを参照することによって支援され得る、磁気セレクタ１００の操作の簡単な説明を提供することも有用であろう。標的細胞の磁気分離または選択を開始するために、ブロック６０２は、セレクタに容器を配置する第１のステップを提供する。このステップでは、容器１０６は、磁気セレクタ１００の床１０８上に配置される。容器が剛性壁の容器である場合、セレクタ１００のドア１１０は任意とすることができる。容器１０６が可撓性であると仮定すると、ブロック６０４の次のステップはドアを閉じることである。したがって、ドア１１０は、床表面１１４と対面ドア表面１１６との間に可撓性容器１０６を有する状態で、ブロック６０４で開放状態から閉鎖状態に移動される。処理中の容器の内容物は、ステップ６０２、６０４の前または後に容器１０６に移されてもよい。

方法６００は、ブロック６０６のキャリアの第１の状態のステップに進む。このステップでは、磁石キャリア１０４が床１０８に隣接する第１の状態に移動され、容器１０６内の流体に磁場が適用される。磁場の印加により、磁性粒子に関連付けられた標的細胞および結合していない磁性粒子が、容器１０６の一部、特に床１０８に隣接する容器１０６の一部に移動する。

方法の次のステップは、ブロック６０８のインキュベーションである。このステップでは、容器１０６の内容物は、磁石キャリア１０４が第１の状態にある期間、容器１０６内に留まることができる。この方法は、撹拌ステップのためにブロック６１０に続き、容器１０６の内容物が撹拌され、これは、磁石キャリア１０４が第２の状態にあり、磁気セレクタ１００の床１０８から離れた状態で起こり得る。例えば、シャフト２９４は、トレイ１３０が、第１の端部１３８が第２の端部１４０よりも高い位置と第２の端部１４０が第１の端部１３８よりも高い位置との間で交互に前後に傾斜するように回転することができる。ブロック６０６～６１０の動作は、より長い期間（例えば、数分）にわたって複数のサイクルとして繰り返すことができる。方法６００のこの部分が完了すると、次のステップはブロック６１２のキャリア第２の状態である。このステップでは、磁石キャリア１０４は、セレクタ１００の床１０８から離れた第２の状態に移動される。

ブロック６１４で、希釈剤添加ステップが実行される。流体（希釈剤）は、洗浄容器２４８、２５０のうちの１つから容器１０６に添加され得る。容器１０６内で所望の体積が達成されると、本方法はキャリア第１の状態のブロック６１６に進む。このステップでは、磁石キャリア１０４は、セレクタ１００の床１０８に隣接する第１の状態に移動され得る。次いで、この方法は、ブロック６１８のインキュベートステップを経て、容器１０６の内容物が一定期間インキュベートされる。次のブロック６２０のステップは、磁石キャリア１０４に引き付けられず、したがってセレクタ１００の床１０８に最も隣接する容器１０６の部分にない、流体、希釈剤、およびその他の物質を含み得るネガティブ分画を除去するための、分画の除去である。ネガティブ分画の除去は、それぞれのシリンジポンプ２７２、２７４で作動するシリンジ２４２、２４４の１つを介して起こり得る。容器１０６の位置決めも、例えば、端部１３８よりも低い高さに配置された端部１４０でトレイ１３０を配置するように調整することができる。

ブロック６２０の分画の除去ステップの後、方法６００は、ブロック６２２のすすぎステップに進むことができる。容器１０６は、磁性粒子に関連付けられた標的細胞ではない任意の細胞を除去するために流体を受け取る。少なくとも１つのポンプ２７２、２７４を操作して、それぞれの容器２４８、２５０から容器１０６に希釈剤（例えば、洗浄溶液）を加えることができる。同時に、またはその直後に、磁石キャリア１０４は、セレクタ１００の床１０８から離れた第２の状態に移動し、容器１０６を撹拌することができる。磁石キャリア１０４は、第１の状態に移動され、容器の内容物がインキュベートされる。その後、希釈剤を容器１０６から除去することができる。ブロック６２２での動作は、必要に応じて複数のサイクルにわたって繰り返すことができる。

所望の数のサイクルが完了すると、方法６００はキャリア第２の状態のブロック６２４に進む。このステップでは、磁石キャリア１０４は、分離器１００の床１０８から離れた第２の状態に移動される。希釈剤の追加は次のステップであり、ブロック６２６であり、シリンジポンプ２７２、２７４を操作して、１つまたは複数の容器２４８、２５０から容器１０６に流体を移送することによって、容器１０６の体積を最終量にする。容器１０６は、流体が容器１０６に移送されると同時に、またはその直後に、容器１０６の傾きを変化させることによって、ブロック６２８の撹拌でさらに撹拌されてもよい。

次に、セレクタ１００のドア１１０を開放状態に移動させることができ、容器１０６を密閉して、磁気セレクタ１００から取り外すことができる。特定の実施形態によれば、磁気的に選択され、容器１０６内に保持されるポジティブ分画は、所望の製品であり得る。他の実施形態によれば、容器１０６内のポジティブ分画は、容器１０６から１つまたは複数の追加の容器に移されてもよく、その容器は患者への投与または送達に適切な容積を含み得、容器はシリンジのような送達容器であってもよい。

したがって、細胞を含む流体が配置された容器に磁場を印加するための改良されたシステムおよび方法が本明細書で論じられ、磁気セレクタは、独立して利用されてもよいし、生物学的流体を処理するためのシステムおよび方法に組み込まれてもよい。上記で提供される説明、および以下で提供される他の態様は、例示を目的として意図されており、本開示の範囲を、本明細書で説明される特定の方法、システム、装置、または装置に限定することを意図するものではない。

他の態様
態様１．
磁気セレクタの操作方法であって、磁気セレクタは、床表面を有する床を含むハウジングと、床表面とは床の反対側に配置され、少なくとも１つの磁石が配置される磁石キャリアとを備え、磁石キャリアは、磁石キャリアが床に隣接している第１の状態と磁石キャリアが床から離間している第２の状態の間で床に対して移動可能であり、方法は、床表面上に容器を配置することと、容器内の流体に磁場を印加するために磁石キャリアを第１の状態に移動させることと、磁場を容器から解除するために磁石キャリアを第２の状態に移動させることと、容器を取り外すことを含む、磁気セレクタの操作方法。

態様２．
さらに、容器が床表面上に配置されている間、容器内の流体を撹拌することを含む、態様１に記載の磁気セレクタの操作方法。

態様３．
さらに、磁石キャリアを第２の状態に移動させた後、容器内の流体を撹拌することを含む、態様１または態様２に記載の磁気セレクタの操作方法。

態様４．
さらに、容器内の流体の撹拌後に容器内の流体に磁場を印加するために磁石キャリアを第１の状態に移動させることと、磁場を容器から解除するために磁石キャリアを第１の状態から第２の状態に移動させることと、磁石キャリアを第２の状態に移動させた熱尾で容器に希釈剤を加えることとを含む、態様１または態様２に記載の磁気セレクタの操作方法。

態様５．
さらに、容器に希釈剤を加えた後に容器内の流体に磁場を印加するために磁石キャリアを第１の状態に移動させることと、容器から流体と希釈剤の一部を除去することとを含む、態様１から態様３までのいずれか１つに記載の磁気セレクタの操作方法。

態様６．
さらに、容器から流体と希釈剤の一部を除去した後に、容器に希釈剤を加えることを含む、態様１から態様５までのいずれか１つに記載の磁気セレクタの操作方法。

態様７．
さらに、容器内の流体に磁場を印加するために磁石キャリアを第１の位置に移動させることに先立って、容器内の流体に磁性粒子を加えることを含み、磁性粒子は流体中の標的細胞と複合体を形成する、態様１から態様６までのいずれか１つに記載の磁気セレクタの操作方法。

態様８．
磁気セレクタのハウジングは、さらに、床に対して開放状態と閉鎖状態の間で移動可能なドアを備え、ドアは、閉鎖状態において固定された距離で床表面から離間して間に空間を規定する対面ドア表面を有し、方法はさらに、容器を床表面上に配置した後にドアを開放状態から閉鎖状態に移動させることと、容器から磁場を解除するために磁石キャリアを第１の状態から第２の状態に移動させた後にドアを開放状態に移動させて容器を取り外すことを含む、態様１から態様７までのいずれか１つに記載の磁気セレクタの操作方法。

態様９．
容器は可撓性または剛性の壁の容器である、態様１から態様８までのいずれか１つに記載の磁気セレクタの操作方法。

態様１０．
容器は可撓性であり、ドアが閉鎖状態にあるとき、床表面と対面ドア表面との間の空間に適合する、態様８に記載の磁気セレクタの操作方法。

態様１１．
磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法であって、システムは、床表面を有する床を有するハウジングを備える磁気セレクタと、セレクタの床表面とは床の反対側に配置され、少なくとも１つの磁石を有する磁石キャリアとを有し、磁石キャリアは床に対して磁石キャリアが床に隣接する第１の状態と磁石キャリアが床から離間している第２の状態との間で移動可能であり、方法は、床表面上に容器を配置することと、流体内で標的細胞が複合体を形成するように容器内の流体に磁性粒子を有する流体を加えることと、容器内の流体に磁場を印加するために第１の状態に磁石キャリアを移動させることと、容器から磁場を解除するために第１の状態から第２の状態に磁石キャリアを移動させることと、容器を取り外すこととを含む、磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１２．
さらに、磁性粒子を含む流体を加えて磁石キャリアを第１の状態に移動させた後に流体を容器内でインキュベートすることを含む、態様１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１３．
さらに、容器が床表面上に配置されている間、容器内の流体を撹拌することを含む、態様１１または態様１２に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１４．
さらに、磁石キャリアを第２の状態に移動させた後に容器内の流体を撹拌することを含む、態様１１から態様１３までのいずれか１つに記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１５．
さらに、磁石キャリアを第２の状態に移動させた後に容器に希釈剤を加えることを含む、態様１１から態様１４までのいずれか１つに記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１６．
さらに、希釈剤を容器内に加えた後に容器中の流体に磁場を印加するために磁石キャリアを第１の状態に移動させることと、結合していない細胞のネガティブ分画を容器から取り除くことを含む、態様１１から態様１４までのいずれか１つに記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１７．
さらに、選択された体積を達成するために、結合していない細胞のネガティブ分画を容器から取り除いた後に磁石キャリアを第２の状態に移動させることを含む、態様１６に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１８．
磁気セレクタのハウジングはさらに、開放状態と閉鎖状態の間で床に対して移動可能なドアを備え、ドアは閉鎖状態において床表面から定められた距離、離間し、その間に空間を規定する対面ドア表面を有し、方法はさらに、容器を床表面上に配置した後、ドアを開放状態から閉鎖状態に移動させることと、容器から磁場を解除するために磁石キャリアを第１の状態から第２の状態に移動させた後にドアを開放状態に移動させて容器を取り外すことを含む、態様１１から態様１７までのいずれか１つに記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様１９．
容器は可撓性であり、ドアが閉鎖状態であるとき、床表面と対面ドア表面との間の空間に適合する、態様１１から態様１８までのいずれか１つに記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様２０．
システムはさらに、容器内外に移送するように構成された流体処理部上の少なくとも１つのポンプと、流体処理部と磁気セレクタと少なくとも１つのポンプに接続される少なくとも１つの制御部とを備える、態様１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。

態様２１．
流体処理システムの操作方法であって、
システムは、生物学的流体が充填された供給源容器に接続可能な使い捨て流体回路上で動作し、生物学的流体を少なくとも２つの体積の材料に分離するように構成されている流体処理部と、流体経路に沿って流体処理部に接続されている容器と、容器を受け入れるように構成されているハウジングと磁石キャリアとを備える磁気セレクタとを備え、ハウジングは上に容器が配置される床表面を有する床を含み、磁石キャリアは床表面とは床の反対側に配置されており、方法は、
前処理状態と、処理状態と、後処理状態とを含み、
前処理状態はさらに、手順プロトコルの選択と、手順のセットアップと、流体処理部への使い捨て流体回路の取り付けと、流体処理部への供給源容器と少なくとも１つの溶液容器との取り付けとを含み、
処理状態はさらに、供給源容器内の生物学的流体の使い捨て流体回路への導入と、洗浄と、採取と、生物学的流体の希釈と、ネガティブセレクションインキュベーションを実行するための磁性粒子とのインキュベーションと、容器を磁場にさらすために床に隣接した第１の状態と磁場を除去するために床から離間した第２の状態との間で磁石キャリアを移動させることと、容器内の懸濁液内に残留している結合していない細胞を含むネガティブ分画を除去することとを含み、
後処理状態はさらに、容器を密封し、最終製品を取り外し、使い捨て流体回路を取り外すことを含む、流体処理システムの操作方法。

態様２２．
処理状態はさらに、ポジティブセレクションインキュベーションを実行することと、磁石キャリアが第１の状態にある間に懸濁液中に残留する解放された細胞を含むポジティブ分画を除去することを含む、態様２１に記載の流体処理システムの操作方法。

態様２３．
流体処理部はさらに、ハードウェアと、ハードウェアを操作するように構成された制御部とを備え、使い捨て流体回路はハードウェア上に取り付けられ、供給源容器と磁気セレクタの床上に配置された容器に接続されている、態様２１に記載の流体処理システムの操作方法。

Claims (23)

1. 磁気セレクタの操作方法であって、
   磁気セレクタは、床表面を有する床を含むハウジングと、前記床表面とは床の反対側に配置され、少なくとも１つの磁石が配置される磁石キャリアとを備え、前記磁石キャリアは、前記磁石キャリアが前記床に隣接している第１の状態と前記磁石キャリアが前記床から離間している第２の状態の間で床に対して移動可能であり、前記方法は、
   前記床表面上に容器を配置することと、
   前記容器内の流体に磁場を印加するために前記磁石キャリアを前記第１の状態に移動させることと、
   前記磁場を前記容器から解除するために前記磁石キャリアを前記第２の状態に移動させることと、
   前記容器を取り外すことを含む、磁気セレクタの操作方法。
2. さらに、前記容器が前記床表面上に配置されている間、前記容器内の流体を撹拌することを含む、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
3. さらに、前記磁石キャリアを前記第２の状態に移動させた後、前記容器内の前記流体を撹拌することを含む、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
4. さらに、前記容器内の前記流体の撹拌後に前記容器内の前記流体に磁場を印加するために前記磁石キャリアを前記第１の状態に移動させることと、前記磁場を前記容器から解除するために前記磁石キャリアを前記第１の状態から前記第２の状態に移動させることと、前記磁石キャリアを前記第２の状態に移動させた熱尾で前記容器に希釈剤を加えることとを含む、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
5. さらに、前記容器に前記希釈剤を加えた後に前記容器内の前記流体に磁場を印加するために前記磁石キャリアを前記第１の状態に移動させることと、前記容器から前記流体と前記希釈剤の一部を除去することとを含む、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
6. さらに、前記容器から前記流体と前記希釈剤の一部を除去した後に、前記容器に希釈剤を加えることを含む、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
7. さらに、前記容器内の前記流体に磁場を印加するために前記磁石キャリアを前記第１の位置に移動させることに先立って、前記容器内の前記流体に磁性粒子を加えることを含み、前記磁性粒子は前記流体中の標的細胞と複合体を形成する、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
8. 前記磁気セレクタのハウジングは、さらに、前記床に対して開放状態と閉鎖状態の間で移動可能なドアを備え、前記ドアは、前記閉鎖状態において固定された距離で前記床表面から離間して間に空間を規定する対面ドア表面を有し、方法はさらに、前記容器を前記床表面上に配置した後に前記ドアを前記開放状態から前記閉鎖状態に移動させることと、前記容器から磁場を解除するために前記磁石キャリアを前記第１の状態から前記第２の状態に移動させた後に前記ドアを前記開放状態に移動させて前記容器を取り外すことを含む、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
9. 前記容器は可撓性または剛性の壁の容器である、請求項１に記載の磁気セレクタの操作方法。
10. 前記容器は可撓性であり、前記ドアが前記閉鎖状態にあるとき、前記床表面と前記対面ドア表面との間の空間に適合する、請求項８に記載の磁気セレクタの操作方法。
11. 磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法であって、前記システムは、床表面を有する床を有するハウジングを備える磁気セレクタと、前記セレクタの前記床表面とは前記床の反対側に配置され、少なくとも１つの磁石を有する磁石キャリアとを有し、前記磁石キャリアは前記床に対して前記磁石キャリアが前記床に隣接する第１の状態と前記磁石キャリアが前記床から離間している第２の状態との間で移動可能であり、前記方法は、
    前記床表面上に容器を配置することと、
    流体内で標的細胞が複合体を形成するように前記容器内の流体に磁性粒子を有する流体を加えることと、
    前記容器内の前記流体に磁場を印加するために前記第１の状態に前記磁石キャリアを移動させることと、
    前記容器から前記磁場を解除するために前記第１の状態から前記第２の状態に前記磁石キャリアを移動させることと、
    前記容器を取り外すこととを含む、磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
12. さらに、磁性粒子を含む前記流体を加えて前記磁石キャリアを前記第１の状態に移動させた後に前記流体を前記容器内でインキュベートすることを含む、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
13. さらに、前記容器が前記床表面上に配置されている間、前記容器内の前記流体を撹拌することを含む、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
14. さらに、前記磁石キャリアを前記第２の状態に移動させた後に前記容器内の前記流体を撹拌することを含む、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
15. さらに、前記磁石キャリアを前記第２の状態に移動させた後に前記容器に希釈剤を加えることを含む、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
16. さらに、前記希釈剤を前記容器内に加えた後に前記容器中の前記流体に磁場を印加するために前記磁石キャリアを前記第１の状態に移動させることと、結合していない細胞のネガティブ分画を前記容器から取り除くことを含む、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
17. さらに、選択された体積を達成するために、前記結合していない細胞のネガティブ分画を前記容器から取り除いた後に前記磁石キャリアを前記第２の状態に移動させることを含む、請求項１６に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
18. 前記磁気セレクタの前記ハウジングはさらに、開放状態と閉鎖状態の間で床に対して移動可能なドアを備え、前記ドアは前記閉鎖状態において前記床表面から定められた距離、離間し、その間に空間を規定する対面ドア表面を有し、前記方法はさらに、前記容器を前記床表面上に配置した後、前記ドアを前記開放状態から前記閉鎖状態に移動させることと、前記容器から前記磁場を解除するために前記磁石キャリアを前記第１の状態から前記第２の状態に移動させた後に前記ドアを開放状態に移動させて前記容器を取り外すことを含む、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
19. 前記容器は可撓性であり、前記ドアが前記閉鎖状態であるとき、前記床表面と前記対面ドア表面との間の前記空間に適合する、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
20. 前記システムはさらに、前記容器内外に移送するように構成された流体処理部上の少なくとも１つのポンプと、前記流体処理部と磁気セレクタと前記少なくとも１つのポンプに接続される少なくとも１つの制御部とを備える、請求項１１に記載の磁気セレクタを組み込んだ生物学的流体分離システムの操作方法。
21. 流体処理システムの操作方法であって、
    前記システムは、生物学的流体が充填された供給源容器に接続可能な使い捨て流体回路上で動作し、前記生物学的流体を少なくとも２つの体積の材料に分離するように構成されている流体処理部と、流体経路に沿って前記流体処理部に接続されている容器と、前記容器を受け入れるように構成されているハウジングと磁石キャリアとを備える磁気セレクタとを備え、前記ハウジングは上に前記容器が配置される床表面を有する床を含み、前記磁石キャリアは前記床表面とは床の反対側に配置されており、前記方法は、
    前処理状態と、処理状態と、後処理状態とを含み、
    前記前処理状態はさらに、手順プロトコルの選択と、手順のセットアップと、前記流体処理部への前記使い捨て流体回路の取り付けと、前記流体処理部への前記供給源容器と少なくとも１つの溶液容器との取り付けとを含み、
    前記処理状態はさらに、前記供給源容器内の生物学的流体の前記使い捨て流体回路への導入と、洗浄と、採取と、前記生物学的流体の希釈と、ネガティブセレクションインキュベーションを実行するための磁性粒子とのインキュベーションと、前記容器を磁場にさらすために前記床に隣接した第１の状態と前記磁場を除去するために前記床から離間した第２の状態との間で前記磁石キャリアを移動させることと、前記容器内の懸濁液内に残留している結合していない細胞を含むネガティブ分画を除去することとを含み、
    前記後処理状態はさらに、前記容器を密封し、前記最終製品を取り外し、前記使い捨て流体回路を取り外すことを含む、流体処理システムの操作方法。
22. 前記処理状態はさらに、ポジティブセレクションインキュベーションを実行することと、前記磁石キャリアが前記第１の状態にある間に懸濁液中に残留する解放された細胞を含むポジティブ分画を除去することを含む、請求項２１に記載の流体処理システムの操作方法。
23. 前記流体処理部はさらに、ハードウェアと、前記ハードウェアを操作するように構成された制御部とを備え、前記使い捨て流体回路は前記ハードウェア上に取り付けられ、前記供給源容器と前記磁気セレクタの前記床上に配置された前記容器に接続されている、請求項２１に記載の流体処理システムの操作方法。
    
    

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