JP2023011887A - 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用 - Google Patents

顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用 Download PDF

Info

Publication number
JP2023011887A
JP2023011887A JP2022178427A JP2022178427A JP2023011887A JP 2023011887 A JP2023011887 A JP 2023011887A JP 2022178427 A JP2022178427 A JP 2022178427A JP 2022178427 A JP2022178427 A JP 2022178427A JP 2023011887 A JP2023011887 A JP 2023011887A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
amino acid
acid sequence
sequence seq
seq
csfrα
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2022178427A
Other languages
English (en)
Inventor
ピンシア ジュー
Pingxia Zhu
ラン ウー
Ran Wu
チンシュアン チャン
Qingshuang Zhang
チュン ファン
Qun Huang
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Staidson Beijing Biopharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Staidson Beijing Biopharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Staidson Beijing Biopharmaceutical Co Ltd filed Critical Staidson Beijing Biopharmaceutical Co Ltd
Publication of JP2023011887A publication Critical patent/JP2023011887A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1034—Isolating an individual clone by screening libraries
    • C12N15/1037—Screening libraries presented on the surface of microorganisms, e.g. phage display, E. coli display
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)

Abstract

【課題】顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体（ＧＭ－ＣＳＦＲα）を特異的に認識する抗体または抗原結合フラグメント、その調製方法および使用方法を提供する。【解決手段】ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、エピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのアミノ酸残基Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３及びＩｌｅ２８４を含む、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。【選択図】図７

Description

ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。コンピュータ可読形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７１０２６２０００１４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、記録日：２０１８年１１月７日、サイズ：２４８ＫＢ）
本発明は、顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体α（ＧＭ－ＣＳＦＲα）を特異的に認識する抗体、その調製方法及び使用に関するものであり、それを用いて自己免疫疾患、炎症及びがんを治療する方法を含む。
顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）は、コロニー刺激因子２（ＣＳＦ２）ともいう。ＧＭ－ＣＳＦは、Ｉ型炎症性サイトカインであり、炎症、呼吸及び自己免疫疾患を悪化させる役割を果たす。ＧＭ－ＣＳＦ受容体は、ヘマトポエチン受容体スーパーファミリーのメンバーの一つである。ＧＭ－ＣＳＦ受容体は、α及びβサブユニットからなるヘテロ二量体である。ＧＭ－ＣＳＦは、比較的に低い親和性でαサブユニットと単独で結合（Ｋｄ １－５ｎＭ）できるが、βサブユニットとは全然単独で結合しない。しかしながら、αとβサブユニットが同時に存在すると、親和性の高いリガンド－受容体複合体（Ｋｄ≒１００ｐＭ）が生成する。従って、ＧＭ－ＣＳＦとＧＭ－ＣＳＦＲαの結合に対する中和効果は、ＧＭ－ＣＳＦＲαが介在する疾患及び病症の治療方法となる。特許出願ＷＯ２００７１１０６３１において、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに対する抗体Ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂ（Ｍａｂ，本願の実施例の部分で、対照抗体とする。）が記載されている。
本明細書で言及された全ての刊行物、特許、特許出願及び公開された特許出願に記載された内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本発明の一態様では、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合することができる単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該エピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３及びＩｌｅ２８４からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ又は６つのアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、当該エピトープは、さらに、（ｉ）Ｖａｌ５１、Ｔｈｒ６３及びＩｌｅ１９６；（ｉｉ）Ｌｅｕ１９１及びＩｌｅ１９６；又は（ｉｉｉ）Ａｒｇ４９、Ｖａｌ５１、Ａｓｎ５７及びＳｅｒ６１、のようなアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに結合するＫｄ値が０．１ｐＭ～１ｎＭである。
いくつかの実施例において、上述されたいずれかの単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体について、前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
前記のＶＨは、Ｘ１がＥ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣであり、Ｘ２がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ３がＩ又はＭである配列Ｘ１ＬＸ２Ｘ３Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６）を含む一つの重鎖相補性決定領域（ＨＣ－ＣＤＲ）１と、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦである配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡである配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；
前記のＶＬは、Ｘ１がＳ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣであり、Ｘ２がＱ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣであり、Ｘ３がＳ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱであり、Ｘ４がＳ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣであり、Ｘ５がＳ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧであり、Ｘ６がＹ、Ｌ又はＦである配列ＲＡＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＸ４Ｘ５Ｘ６ＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＧ又はＴであり、Ｘ２がＡ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ又はＦであり、Ｘ３がＳ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮである配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ、又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３と、を含有する。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、
前記のＶＨは、Ｘ１がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ２がＩ又はＭである配列ＥＬＸ１Ｘ２Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦである配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡである配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；
前記のＶＬは、配列ＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、配列ＧＡＳＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つのアミノ酸置換を含む、一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つのアミノ酸置換を含む、一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つのアミノ酸置換を含む、一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；
前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つのアミノ酸置換を含む、一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つのアミノ酸置換を含む、一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つのアミノ酸置換を含む、一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１のいずれか１つのアミノ酸配列を有するＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；
前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４のいずれか１つのアミノ酸配列を有するＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。
いくつかの実施例において、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体は、
（ｉ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは、ＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは、ＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｉｉ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは、全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは、全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｉｉｉ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは、全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは、全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｉｖ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｖ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｖｉ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｖｉｉ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つの ＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｖｉｉｉ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；
（ｉｘ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは全てのＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記のいずれかの単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体について、前記の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、（ｉ）ＶＨの３１位にアミノ酸残基Ｅ、Ｈ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣ；及び／又は（ｉｉ）ＶＬの２６位にアミノ酸残基Ｓ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣ；及び／又は（ｉｉｉ）ＶＬの２７位にアミノ酸残基Ｑ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣ；及び／又は（ｉｖ）ＶＬの２８位にアミノ酸残基Ｓ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱ；及び／又は（ｖ）ＶＬの３０位にアミノ酸残基Ｓ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣ；及び／又は（ｖｉ）ＶＬの３１位にアミノ酸残基Ｓ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧ；及び／又は（ｖｉｉ）ＶＬの３２位にアミノ酸残基Ｙ、Ｌ又はＦ；及び／又は（ｖｉｉｉ）ＶＬの５０位にアミノ酸残基Ｇ又はＴ；及び／又は（ｉｘ）ＶＬの５１位にアミノ酸残基Ａ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｆ、Ｎ又はＶ；及び／又は（ｘ）ＶＬの５２位にアミノ酸残基Ｓ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮ；及び／又は（ｘｉ）ＶＬの９２位にアミノ酸残基Ｄ、Ａ、Ｑ又はＷ；及び／又は（ｘｉｉ）ＶＬの９３位にアミノ酸残基Ｎ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬ；及び／又は（ｘｉｉｉ）ＶＨの２８位にアミノ酸残基Ｔ、Ｈ、Ｖ、Ｅ、Ｐ、Ｌ、Ｍ、Ｓ、Ｗ、Ｃ、Ａ、Ｇ、Ｎ又はＫ；及び／又は（ｘｉｖ）ＶＨの３０位にアミノ酸残基Ｔ、Ｐ、Ｄ、Ｅ、Ｙ、Ｗ、Ｖ、Ｍ、Ｎ、Ｌ、Ｑ、Ｇ、Ｓ、Ａ、Ｋ又はＲを含み、ここで、その番号はＥＵ Ｋａｂａｔ番号により定義される。
いくつかの実施例において、前記のいずれかの単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体について、前記の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、（ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬ；（ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を含むＶＬ；（ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬ；（ｉｖ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬ；（ｖ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を含むＶＬ；（ｖｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬ；（ｖｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬ；（ｖｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬ；（ｉｘ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬ；（ｘ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４１を含むＶＬ；（ｘｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３を含むＶＬ；（ｘｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８を含むＶＬ；（ｘｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３を含むＶＬ；（ｘｉｖ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８を含むＶＬ；（ｘｖ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８を含むＶＬ；（ｘｖｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３６を含むＶＬ；或いは、（ｘｖｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含むＶＨ及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８を含むＶＬ；を含有する。
いくつかの実施例において、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体が前記のいずれかの単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体とＧＭ－ＣＳＦＲαを競合的に結合する。いくつかの実施例において、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体が前記のいずれかの単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と同じエピトープを特異的に結合する。
いくつかの実施例において、前記のいずれかの単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体について、前記の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、Ｆｃフラグメントを含む。いくつかの実施例において、前記の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、全長のＩｇＧ抗体である。いくつかの実施例において、前記の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、全長のＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施例において、前記の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体又はヒト化抗体である。いくつかの実施例において、前記の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’２、Ｆａｂ’－ＳＨ、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆｖフラグメント、ｄＡｂ、Ｆｄ、ナノボディ、ダイアボディ及び線状抗体からなる群から選択される抗原結合性フラグメントである。
いくつかの実施例において、単離された核酸分子に関し、前記の核酸分子は、前記のいずれかの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする。いくつかの実施例において、ベクターに関し、前記のベクターには前記のいずれかの核酸分子を含む。いくつかの実施例において、宿主細胞に関し、前記の宿主細胞には、前記のいずれかの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、前記のいずれかの核酸分子又は前記のいずれかのベクターを含む。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を調製する方法に関し、当該方法は、ａ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を有効に発現する前記のいずれかの宿主細胞を培養すること、そして、ｂ）前記の宿主細胞から発現された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を得ることを含む。
いくつかの実施例において、治療しようとする個体疾患又は病症を治療する方法に関し、当該方法は、前記の個体に対して、有効量の前記のいずれかの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を投与することを含む。いくつかの実施例において、前記の疾患又は病症は、炎症性、呼吸或いは自己免疫疾患又は病症である。いくつかの実施例において、前記の疾患又は病症は、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー反応、多発性硬化症、骨髄性白血病、及びアテローム性動脈硬化症からなる群から選択される。
本願は、同時に前記のいずれかの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む医薬組成物、試薬キット及び製品に関する。
図１Ａ～１Ｃは、ＥＬＩＳＡ分析による例示的な抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がヒトＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合親和性を概略的に示す。
図１Ａは、Ｔ１１９、Ｅ９、Ｅ１６、Ｅ２７、Ｅ２９、Ｅ３０、Ｅ３５、Ｅ３６、Ｅ５４及びＥ３４がヒトＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合曲線を示す。 図１Ｂは、Ｔ１１９、Ｅ１０８、Ｅ１０５、Ｅ１１３、Ｅ８７、Ｅ８５、Ｅ３９、Ｅ４０、ＥＩＩ５５、Ｅ２００ａ及びＥＩＩ８１がヒトＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合曲線を示す。 図１Ｃは、Ｔ１１９、Ｅ６１、Ｅ８３、Ｅ８８、Ｅ９０、Ｅ８４、Ｅ１７２、Ｅ１６４、Ｅ１及びＥ３１がヒトＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合曲線を示す。 図２は、ＥＬＩＳＡ分析による、Ｅ３５、Ｅ２００ａ、Ｔ１１９、Ｅ８７及びＥ１０８がカニクイザルのＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合親和性を示す。 図３は、Ｅ３５、Ｅ８７及びＥ１０８が、それぞれＩＬ３ＲＡ、ＩＬ５ＲＡ、ＧＭ－ＣＳＦＲ及びＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合親和性の比較を示す。 図４は、ＦＡＣＳ分析による、Ｅ３５－ＩｇＧ４が、ＧＭ－ＣＳＦＲαを発現するＷＩＬ２Ｓ細胞との結合親和性、及びＧＭ－ＣＳＦＲαを発現しないコントロールＷＩＬ２Ｓ細胞との結合親和性の比較を示す。 図５Ａ～５Ｄは、競合性ＥＬＩＳＡを採用してリード抗体（ｐａｒｅｎｔａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ）Ｔ１１９及びリード最適化抗体（ｌｅａｄ－ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）がＧＭ－ＣＳＦとＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合を阻害する能力を測定する、競合性結合実験の結果を示す。 図５Ａは、Ｔ１１９、Ｅ０１、Ｅ０９、Ｅ１９４、Ｅ２７、Ｅ２９、Ｅ３４、Ｅ３５、Ｅ４０及びＥ３０の競合性結合実験の結果を示す。 図５Ｂは、Ｔ１１９、Ｅ８３、Ｅ８７、ＥＩＩ８１、Ｅ８５、Ｅ５４、ＥＩＩ５５、Ｅ３１、Ｅ１０５及びＥ８４の競合性結合実験の結果を示す。 図５Ｃは、Ｔ１１９、Ｅ１６４、Ｅ１７２、Ｅ１０８、Ｅ１６、Ｅ３６、Ｅ６１、Ｅ８８及びＥ３９の競合性結合実験の結果を示す。 図５Ｄは、Ｔ１１９、Ｅ９０、ＥＩＩ３３、Ｅ２００ａ、Ｅ９４、Ｅ１１３及びＥＩＩ５２の競合性結合実験の結果を示す。 図６Ａ及び６Ｂは、ＵＮｃｌｅ分析による抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であるＭａｂ－ＩｇＧ１、Ｔ１１９－ＩｇＧ１、Ｅ３５－ＩｇＧ１及びＥ３５ｂ－ＩｇＧ１の熔解温度曲線及び凝集温度曲線を示す。 図６Ａは、抗体の熔解温度曲線を示す。 図６Ｂは、抗体の凝集温度曲線を示す。 図７は、リード抗体Ｔ１１９及びリード最適化抗体のＴＦ－１細胞増殖実験の結果を示す。 図８は、Ｅ３５、Ｅ１０８及びＥ８７ｂ抗体のヒト顆粒球変形実験の結果を示す。 図９は、Ｅ３５抗体のカニクイザル顆粒球変形実験の結果を示す。 図１０は、Ｅ３５、Ｅ１０８及びＥ８７ｂ抗体の顆粒球生存実験の結果を示す。 図１１は、Ｅ３５、Ｅ８７ｂが対照抗体であるＭａｂと比較するＣＤ１１ｂ発現実験の結果を示す。 図１２Ａ及び１２Ｂは、Ｅ３５、Ｅ８７ｂがＭａｂと比較するＴＮＦα放出実験の結果を示す。 図１２Ａは、Ｈｕｍａｎ Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ／Ｍｉｃｒｏｇｌｉａ Ｐａｎｅｌにより計測されたＥ３５、Ｅ８７ｂがＭａｂと比較するＴＮＦα放出実験の結果を示す。 図１２Ｂは、ＥＬＩＳＡにより計測されたＥ３５、Ｅ８７ｂがＭａｂと比較するＴＮＦα放出実験の結果を示す。 図１３は、Ｅ３５、Ｅ８７ｂがＭａｂと比較するＩＬ－１β放出実験の結果を示す。 図１４Ａ及び１４Ｂは、ＥＬＩＳＡにより計測されたＭａｂ及びＥ３５がラットの体内における薬物動態分析の結果を示す。 図１４Ａは、Ｍａｂ又はＥ３５をそれぞれ２ｍｇ／ｋｇで静脈注射する抗体血清濃度を示す。 図１４Ｂは、Ｍａｂ又はＥ３５をそれぞれ２０ｍｇ／ｋｇで静脈注射する薬物動態の結果を示す。 図１５は、ＥＬＩＳＡにより計測されたＭａｂ及びＥ３５がカニクイザルの体内における薬物動態分析の結果を示す。 図１６Ａ～１６Ｄは、カニクイザルにＭａｂ－ＩｇＧ４又はＥ３５－ＩｇＧ４を投与した後の体内顆粒球変形分析のＦＡＣＳ図を示す。 図１６Ａは、抗体投与前の顆粒球のＦＡＣＳ図を示す。 図１６Ｂは、抗体投与後１４日の顆粒球変形分析のＦＡＣＳ図を示す。 図１６Ｃは、抗体投与後２１日の顆粒球変形分析のＦＡＣＳ図を示す。 図１６Ｄは、抗体投与前から抗体投与後２１日までの体内顆粒球の変形傾向に対する分析の結果を示す。 図１７Ａ～１７Ｇは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された炎症性細胞増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害効果の結果を示す。 図１７Ａは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された白血球増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害効果の結果を示す。 図１７Ｂは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された好中球増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害効果の結果を示す。 図１７Ｃは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発されたリンパ球増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害効果の結果を示す。 図１７Ｄは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された好塩基球増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害の結果を示す。 図１７Ｅは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された好酸球増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害効果の結果を示す。 図１７Ｆは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された単球細胞増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害効果の結果を示す。 図１７Ｇは、ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された赤血球増殖に対するＥ３５－ＩｇＧ４の阻害効果の結果を示す。 図１８Ａ～１８Ｃは、ＥＬＩＳＡにより計測された、Ｅ３５－ＩｇＧ４、Ｅ８７ｂ－ＩｇＧ４及びＴ１１９－ＩｇＧ４が野生型ＧＭＲαｈ、及び例示的なアミノ酸残基の突然変異を含むＧＭＲαｈとの結合親和性を示す。 図１８Ａは、Ｅ３５－ＩｇＧ４が野生型ＧＭＲαｈ及び突然変異されたＧＭＲαｈとの結合親和性を示す。 図１８Ｂは、Ｅ８７ｂ－ＩｇＧ４が野生型ＧＭＲαｈ及び突然変異されたＧＭＲαｈとの結合親和性を示す。 図１８Ｃは、Ｔ１１９－ＩｇＧ４が野生型ＧＭＲαｈ及び突然変異されたＧＭＲαｈとの結合親和性を示す。 図１９Ａ～１９Ｂは、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の可変領域配列の配列比較図を示し、中では、相補性決定領域が既に示される。 図１９Ａは、重鎖可変領域の配列比較図を示す。 図１９Ａは、軽鎖可変領域の配列比較図を示す。 図２０は、ＧＭ－ＣＳＦＲαにおけるアミノ酸残基１６－２９６の番号を示す。
本発明の一態様では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体分子に関する。天然ｓｃＦｖファージライブラリーでのスクリーニング、親和性成熟及び適切にデザインされた生化学と生物学実験の組合せにより、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに結合できる抗体分子であって、且つ、ヒトＧＭ－ＣＳＦがその受容体に対する作用を阻害する効率的な抗体分子を同定してきた。本明細書に提供された結果から、既知の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体Ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂと比較すると、本願の抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαの異なる領域又はエピトープに結合し、そして驚いたことに、様々な生物学実験において、本願の抗体がＭａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂよりも更に効果的であることが明らかになった。
本発明に係わる抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα一本鎖抗体（ｓｃＦｖｓ）、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα Ｆｃ融合タンパク質、多重特異性（例えば、二重特異性）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα免疫抱合体及びこのようなものを含む。
本発明の一態様では、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲα上のエピトープと特異的に結合できる抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、そのエピトープは、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのアミノ酸残基Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３及びＩｌｅ２８４を含む。
本発明の他の態様では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、中では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
前記のＶＨは、Ｘ１がＥ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣであり、Ｘ２がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ３がＩ又はＭである配列Ｘ１ＬＸ２Ｘ３Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦである配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡである配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；
前記のＶＬは、Ｘ１がＳ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣであり、Ｘ２がＱ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣであり、Ｘ３がＳ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱであり、Ｘ４がＳ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣであり、Ｘ５がＳ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧであり、Ｘ６がＹ、Ｌ又はＦである配列ＲＡＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＸ４Ｘ５Ｘ６ＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＧ又はＴであり、Ｘ２がＡ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ又はＦであり、Ｘ３がＳ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮである配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ、又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
本発明は、また、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする核酸、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物、及び抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の調製及び使用方法に関する。
定義
本明細書に記載されるように、「処理」又は「治療」は、有効的又は所望的な、臨床結果を含む結果を得る方法である。本願の目的に鑑みて、前記の有効的又は所望的な臨床結果は、疾患による一種又は多種の症状を緩和すること、疾患の程度を軽減すること、疾患を安定すること（例えば、疾患の悪化を予防又は遅延）、疾患の悪化を予防又は遅延すること（例えば、転移）、疾患の再発を予防又は遅延すること、疾患の進みを遅延又は低減すること、疾患の状態を改善すること、疾患（一部又は全部）を緩和すること、疾患の治療に必要する一種又は多種の他の薬物の量を減少すること、疾患の進みを遅延すること、生存質量を改善又は向上すること、体重を増加すること、及び／又は生存期間を延長すること、から選ばれる一種又は多種を含むが、これらに限定されない。同時に、「治療」は、また、疾患の病理結果の軽減（例えば、がんの場合は、腫瘍体積）を含む。本願の方法は、これらの治療のいずれかの一面又は多面を考慮する。
専門語「抗体」は、全長抗体及びその抗原結合フラグメントを含む。全長抗体は、重鎖二本及び軽鎖二本を含む。重鎖及び軽鎖可変領域は、抗原との結合を担当する。二本の鎖における可変領域は、一般的に３つの高度可変ループを含む。そのループは、相補性決定領域（ＣＤＲｓ）と称する（軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲｓは、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含み、重鎖（ＨＣ）ＣＤＲｓは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む。）。本願に記載された抗体又は抗原結合フラグメントのＣＤＲ境界は、Ｋａｂａｔ、 Ｃｈｏｔｈｉａ又はＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉの慣例により定義又は認識される（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １９９７；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８９；Ｋａｂａｔ １９８７；Ｋａｂａｔ １９９１）。重鎖又は軽鎖における３つのＣＤＲ領域は、フレームワーク領域（ＦＲｓ）と称される隣接領域の間に挿入され、前記のフレームワーク領域（ＦＲｓ）はＣＤＲ領域よりさらに高い保存性を持ち、高度可変ループのフレームを形成する。重鎖及び軽鎖の定常領域は、抗原結合に参加しないが、多種の効果機能を示す。抗体は、それらの重鎖の定常領域のアミノ酸配列に基づいて分類される。抗体の５つの主な種類又はアイソタイプは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭであり、それらの特徴は、それぞれα、δ、ε、γ及びμ型重鎖を有する。いくつの主な種類は、ＩｇＧ１（γ１重鎖）、ＩｇＧ２（γ２重鎖）、ＩｇＧ３（γ３重鎖）、ＩｇＧ４（γ４重鎖）、ＩｇＡ１（α１重鎖ｎ）又はＩｇＡ２（α２重鎖）のような亜種に分類される。
本明細書に記載されたように、専門語「抗原結合フラグメント」とは、抗体フラグメントであり、例えば、ダイアボディ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖフラグメント、ジスルフィド安定化Ｆｖフラグメント（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化ダイアボディ（ｄｓダイアボディ）、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖダイマー（二価ダイアボディ）、一つ以上のＣＤＲｓを含む抗体フラグメントからなる多重特異性抗体、単一ドメイン抗体、ナノボディ、ドメイン抗体、二価ドメイン抗体、又は抗原に結合できるが、完全な抗体構造を含まない他のいずれの抗体フラグメントを含む。抗原結合フラグメントは、親抗体又は親抗体フラグメント（例えば、親ｓｃＦｖ）と、同じ抗原に結合できる。いくつかの実施例において、抗原結合フラグメントは、特定のヒト抗体由来の一つ以上のＣＤＲｓを一つ以上の異なるヒト抗体のフレームワーク領域に移植してなるものを含みうる
本明細書に記載されたように、専門語「エピトープ」とは、抗体又は抗体の一部に結合された抗原における特定の原子又はアミノ酸のグループである。両種類の抗体又は抗体の一部がある抗原に競合性結合を示すなら、それらが抗原における同じエピトープに結合しうる。
本明細書に記載されたように、第一抗体は、同じモル濃度で第二抗体とＧＭ－ＣＳＦＲα標的との結合の少なくとも５０％（例えば、少なくとも５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％）を阻害すると、第一抗体は、第二抗体とＧＭ－ＣＳＦＲα標的を「競合」結合する。その逆もまた然りである。ＰＣＴ刊行物であるＷＯ ０３／４８７３１に、交差競合に基づくハイスループット抗体の「エピトープ分類」の方法を説明する。
本明細書に記載されたように、専門語「特異的に結合」、「特異的に認識」又は「…にとって特異的である」とは、測定可能及び再現可能の相互作用であり、例えば、抗体と標的の結合から、生物分子を含む異質分子グループにおいて当該標的が存在することが確認できる。例えば、抗体がある標的（エピトープであっても良い）を特異的に認識できるとは、他の標的に結合することより、当該抗体が当該標的との結合がより親和性があり、その結合がより容易で持続である。いくつかの実施例において、抗原を特異的に認識する抗体は、抗原の一つ以上の抗原決定基と反応し、その結合親和性は、当該抗体が他の標的との結合親和性の少なくとも１０倍である。
本明細書に記載されたように、「単離された」抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体とは、一種の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であり、当該抗体は、（１）天然に存在するタンパク質とは無関係であり、（２）他の同じソースのタンパク質が含まなく、（３）異種の細胞に発現され、又は（４）自然界に存在されていない。
本明細書に記載されたように、専門語「単離された核酸」とは、ゲノム、ｃＤＮＡ又は合成由来の核酸、或いはある組合である。その起源により、前記の「単離された核酸」は、（１）自然界に発見された「単離された核酸」における全部又は一部のポリヌクレオチドとは無関係であり、（２）自然下で連結しないポリヌクレオチドと操作的に連結でき、又は（３）自然界で比較的に長い配列の一部として存在しない。
本明細書に記載されたように、専門語「ＣＤＲ」又は「相補性決定領域」とは、重鎖及び軽鎖ポリペプチドの可変領域に発見された非隣接の抗原結合部位である。文献Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２５２：６６０９－６６１６（１９７７）； Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．， Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐｔ． ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ， 「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ」（１９９１）、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６：９０１－９１７（１９８７）、 Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ Ｂ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．， ２７３： ９２７－９４８（１９９７）、 ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２６２：７３２－７４５（１９９６）、 Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ， Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ４５： ３８３２－３８３９（２００８）、 Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．Ｐ． ｅｔ ａｌ．， Ｄｅｖ． Ｃｏｍｐ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ２７： ５５－７７（２００３）、 及び Ｈｏｎｅｇｇｅｒ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．， ３０９：６５７－６７０（２００１）には、既にこれらの特定の領域を説明する。中では、お互いに比較すると、これらの定義は、アミノ酸残基の重複（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ）又はサブセットを含む。しかしながら、本願に言及された抗体又は移植抗体又はその変異体のＣＤＲに対するあらゆる定義方式は、全て本明細書に定義及び使用された専門語の範囲にある。前記の引用された参照文献に定義されたＣＤＲを含むアミノ酸残基は表１に示されて比較する。ＣＤＲ予測アルゴリズムおよびインターフェースは、本分野では既知であり、例えば、Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ， Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ４５： ３８３２－３８３９（２００８）； Ｅｈｒｅｎｍａｎｎ Ｆ． ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．， ３８： Ｄ３０１－Ｄ３０７（２０１０）； 及びＡｄｏｌｆ－Ｂｒｙｆｏｇｌｅ Ｊ． ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．， ４３： Ｄ４３２－Ｄ４３８（２０１５）を含む文献には、全て説明がある。本段落に引用された参考文献の内容は、本出願で使用するため、および本明細書の１つまたは複数の特許請求の範囲に含めることができるように、全体として本明細書に組み込まる。
Figure 2023011887000002
専門語「キメラ抗体」とは、本願における生物学的な活性を有すればよく、次のような抗体又はこのような抗体のフラグメントである。当該抗体は、重鎖及び／又は軽鎖の一部が、特定種属に由来する、或いは特定の抗体種類又はサブタイプに属する抗体の対応する配列とは、一致、又は同一性を有し、そして、こ（れら）の鎖の残りの部分は、他の種属に由来する、或いは他の抗体種類又はサブタイプに属する抗体に対応する配列とは、一致、又は同一性を有する（Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．４，８１６，５６７； ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４）を参照）。
「Ｆｖ」は、完全の抗原認識及び結合部位を含む最小の抗体フラグメントである。当該フラグメントは、一つの重鎖可変領域及び一つの軽鎖可変領域が緊密な非共有結合で連結されたダイマーである。この二つの領域のフォールディングによって６つの高度可変ループ（軽鎖及び重鎖にはそれぞれ３つの環）が生じられ、前記の高度可変ループは、抗原結合に関するアミノ酸残基を与えて、抗体が抗原に結合する特異性を寄与する。しかしながら、一つの可変領域（又は３つのＣＤＲｓのみを含み、抗原に対する特異性がある、Ｆｖフラグメントの半分）であっても、その親和性が完全の結合部位より低いにも関わらず、抗原を認識及び結合する能力がある。
「一本鎖Ｆｖ」は、単に「ｓＦｖ」又は「ｓｃＦｖ」に記載されても良く、単一のポリペプチド鎖として連結されたＶＨ及びＶＬ抗体領域を含む抗体フラグメントである。いくつかの実施例において、ｓｃＦｖポリペプチドは、さらにｓｃＦｖが抗原結合の理想的な構造を形成させるための、ＶＨ及びＶＬ領域の間の連結ポリペプチドを含む。ｓｃＦｖの概要について、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ， ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照する。
専門語「ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）」とは、短いリンカー（例えば、５～１０つの残基）を用いてＶＨ及びＶＬの領域の間にｓｃＦｖフラグメント（前記の段落を参照）を構築することによって調製された小さな抗体フラグメントである。これによって、可変領域が鎖内ではなく、鎖間でペアリングさせ、２価のフラグメント、つまり二つの抗原結合部位を持つフラグメントを生成する。二重特異性のダイアボディは、二つの「クロスオーバー」ｓｃＦｖフラグメントのヘテロダイマーであり、中では、二つの抗体のＶＨ及びＶＬの領域は、異なるポリペプチド鎖に位置する。ＥＰ ４０４，０９７； ＷＯ ９３／１１１６１； Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４－６４４８（１９９３）において、既にダイアボディに対して全面的に説明した。
非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体からの最少の配列を含むキメラ抗体である。多くの状況において、ヒト化抗体はヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）であり、中では、レシピエント抗体の超可変領域（ＨＶＲ）残基は、マウス、ラット、ウサギ又は非ヒト哺乳類動物の非ヒト種に由来する、理想的な抗体特異性、親和性及び性能を有する、超可変領域で置換される（ドナー抗体）。ある状況において、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域における残基は、対応する非ヒト残基に置換される。なお、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見つけない残基を含んでも良い。これらの修飾により、抗体の性能をさらに改善させることができる。通常、ヒト化抗体は、実質的に全て、少なくとも１つ、一般的には２つの可変領域を含み、中では全て又は実質的に全ての高度可変ループは、全て非ヒト免疫グロブリンの高度可変ループに対応し、全て又は実質的に全てのフレームワーク領域はヒト免疫グロブリン配列である。ヒト抗体は、また免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、通常はヒト免疫グロブリンの定常領域を含む。詳しい内容は、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）； Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照すれば良い。
本明細書に同定されたポリペプチド及び抗体配列の「アミノ酸配列同一性百分率（％）」又は「同一性」は、候補配列及び比較しようとするポリペプチド配列における同じアミノ酸残基の占める百分率として定義される。そして、配列を比較した後、配列同一性の一部としてアミノ酸残基のいずれかの保存的置換を考慮する。アミノ酸配列同一性の百分率は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）、又はＭＵＳＣＬＥソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピューター ソフトウェアを使用して、本分野の技術的範囲内のさまざまな比較方法によって決定することができる。当業者は、比較された配列の全長にわたって最大の比較を達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、測定や比較のための適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、本願の目的のために、アミノ酸配列同一性百分率の値は、配列比較コンピュータプログラムＭＵＳＣＬＥ（Ｅｄｇａｒ， Ｒ．Ｃ．， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ３２（５）：１７９２－１７９７， ２００４； Ｅｄｇａｒ， Ｒ．Ｃ．， ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ５（１）：１１３， ２００４）を使用して生成されたものである。
専門語である「Ｆｃ受容体」又は「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を説明するために用いられる。いくつかの実施例において、本願に記載されたＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（γ受容体の一種）に結合する、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩサブタイプの受容体を含むＦｃＲであり、これらの受容体の対立遺伝子変異体及び選択的スプライシング形態を含む。ＦｃγＲＩＩ受容体は、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）を含み、これらは類似のアミノ酸配列を有し、主には、細胞質ドメインが異なる。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含む。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシン阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）（Ｍ．ｉｎ Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３－２３４（１９９７）を参照）を含む。前記の専門語は、また例えばＦｃγＲＩＩＩＡアロタイプ：ＦｃγＲＩＩＩＡ－Ｐｈｅ１５８、ＦｃγＲＩＩＩＡ－Ｖａｌ１５８、ＦｃγＲＩＩＡ－Ｒ１３１及び／又はＦｃγＲＩＩＡ－Ｈ１３１のようなアロタイプを含む。Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ ９：４５７－９２（１９９１）及びＣａｐｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２５－３４（１９９４）；及び ｄｅ Ｈａａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ． Ｃｌｉｎ． Ｍｅｄ． １２６：３３０－４１（１９９５）において、ＦｃＲｓに対して説明した。本願における専門語ＦｃＲは、将来特定されるＦｃＲｓを含む他のタイプのＦｃＲｓを含有する。専門語ＦｃＲは、同時に母体ＩｇＧｓの新生児への移行を担当する新生児受容体ＦｃＲｎを含む（Ｇｕｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）ａｎｄ Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））。
専門語「ＦｃＲｎ」とは、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）である。ＦｃＲｎは、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）と構造上で類似し、α鎖がβ２ミクログロブリンに非共有結合して構成される。新生児Ｆｃ受容体ＦｃＲｎの複数の機能は、Ｇｈｅｔｉｅ ａｎｄ Ｗａｒｄ（２０００）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８，７３９－７６６．において説明されている。ＦｃＲｎは、母親から新生児への免疫グロブリンＩｇＧｓの受動輸送及び血清ＩｇＧレベルの調節において重要な役割を果たす。ＦｃＲｎは、レスキュー受容体として、細胞内及び細胞間で完全な形で結合し、エンドサイトーシスされたＩｇＧを輸送し、デフォルトの分解経路からそれらをレスキューする。
ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域の「ＣＨ１ドメイン」とは、通常、１１８位のアミノ酸から２１５位のアミノ酸までの延長である（ＥＵ番号付けシステム）ことを指す。
「ヒンジ領域」は、通常、ヒトＩｇＧ１の２１６位Ｇｌｕから２３０位Ｐｒｏ（Ｂｕｒｔｏｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：１６１－２０６（１９８５））まで延長する範囲である。重鎖間のジスルフィド結合を形成する最初と最後のシステイン残基をＩｇＧ１と同じ位置に配置することにより、他のＩｇＧのアイソタイプのヒンジ領域をＩｇＧ１配列と比較させることができる。
ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域の「ＣＨ２ドメイン」は、通常、２３１位のアミノ酸から３４０位のアミノ酸まで延長する。ＣＨ２ドメインの独自性は、別の領域と密接に対合しないことである。その代わりに、２つのＮ末端で連結された分岐糖鎖は、完全な形態の天然ＩｇＧ分子の２つのＣＨ２ドメインの間に挿入する。糖は、ドメインとドメインとの対合の置換物を提供でき、ＣＨ２ドメインの安定性に寄与すること、と推測される。Ｂｕｒｔｏｎ， Ｍｏｌｅｃ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２２：１６１－２０６（１９８５）。
「ＣＨ３」ドメインは、Ｆｃ領域内でＣ末端残基からＣＨ２ドメイン（３４１位のアミノ酸から抗体配列のＣ末端まで、通常はＩｇＧの４４６又は４４７位目のアミノ酸残基）まで延長する部分を含む。
「機能性Ｆｃフラグメント」は、天然のＦｃ領域の配列が有する「エフェクター機能」を備える。例えば、代表的な「エフェクター機能」は、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞障害作用（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体のダウンレギュレーション（例えば：Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）等を含む。このようなエフェクター機能について、通常、Ｆｃ領域の結合ドメイン（例えば、抗体可変領域）への結合が必要であり、本分野で公知の数種の実験方法を利用して評価することができる。
「変化した」ＦｃＲ結合親和性又はＡＤＣＣ活性を有するＩｇＧ Ｆｃ変異体の抗体は、親ポリペプチド、又は天然のＦｃ配列を含むポリペプチドと比較して、そのＦｃＲ結合活性及び／又はＡＤＣＣ活性が増加又は低減した。ＦｃＲへの「結合が増強」を示すＦｃ変異体は、親ポリペプチド、又は天然のＩｇＧ Ｆｃ配列を含むポリペプチドより、少なくとも一種のＦｃＲに対してより高い親和性（例えば、より低い見かけのＫｄ又はＩＣ５０値）を有する。いくつかの実施例において、結合能力は、親ポリペプチドより、約３倍を増加し、例えば、５、１０、２５、５０、６０、１００、１５０、２００倍、５００倍まで高い、又は結合能力が２５％～１０００％のいずれを向上した。ＦｃＲへの「結合が低減」を示すＦｃ変異体は、親ポリペプチドより、少なくとも一種のＦｃＲに対してより高い親和性（例えば、より高い見かけのＫｄ又はＩＣ５０値）を有する。親ポリペプチドより、その結合能力が４０％又はその以上を低減した。
「抗体依存性細胞障害作用」又は「ＡＤＣＣ」は、細胞毒性の一形態であり、分泌されたＩｇが、ある細胞毒性細胞（例えば、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ）、好中球及びマクロファージ）に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲｓ）に結合し、これらの細胞毒性エフェクター細胞を抗原を運ぶ標的細胞に特異的に結合させてから、細胞毒素を利用して標的細胞を殺すことを指す。抗体は細胞毒性細胞を「武装」させるのは、その毒性に必要である。ＡＤＣＣを介在する主な細胞型において、ＮＫ細胞はＦｃγＲＩＩＩのみを発現し、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ， Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ ９：４５７－９２（１９９１）ページ４６４目のＴａｂｌｅ ３において、造血細胞でのＦｃＲ発現をまとめる。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、イン・ビトロのＡＤＣＣ実験を行うことができ、これは米国特許Ｎｏ．５，５００，３６２又は５，８２１，３３７において説明されている。このような実験に適したエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー細胞（ＮＫ）が含まれる。選択的に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、イン・ビボで評価してもよく、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）９５：６５２－６５６（１９９８）に開示された動物モデルにおいて説明されている。
野生型ＩｇＧ Ｆｃを含むポリペプチド又は親ポリペプチドより、変異Ｆｃ領域を含むポリペプチドは、ヒトエフェクター細胞の存在下で、「増強されたＡＤＣＣ活性」を示すか、ＡＤＣＣ効果をより効果的に介在でき、前記の変異Ｆｃ領域を含むポリペプチドは、実験時、野生型ＩｇＧ Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチド（又は親ポリペプチド）との量が実質的に同じである場合、イン・ビトロ又はイン・ビトロのいずれの状況でもＡＤＣＣをより効果的に介在できる。通常、このような変異体は、本分野で既知のいずれのイン・ビトロのＡＤＣＣ実験方法で同定し、例えば、ＡＤＣＣの活性を同定する、例えば動物モデル等を使用する実験と方法に用いられる。いくつかの実施例において、このような変異体は、野生型Ｆｃ（又は親ポリペプチド）と比較すると、ＡＤＣＣをより効果的に介在でき、約５～１００倍を向上でき、例えば約２５～約５０倍を向上する。
「補体依存性細胞傷害」又は「ＣＤＣ」とは、補体の存在下で標的細胞を溶解する。代表的な補体経路の活性化は、補体システムの第一成分（Ｃ１ｑ）と、同族抗原に結合する抗体（適切な構造を持つサブタイプ）との結合によって開始される。補体の活性化を評価するために、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０２：１６３（１９９６）に説明されるＣＤＣ実験を行っても良い。米国特許Ｎｏ．６，１９４，５５１Ｂ１及びＷＯ９９／５１６４２において、改良されたＦｃ領域アミノ酸配列、並びに、増加又は低減されたＣ１ｑ結合能を有するポリペプチド変異体が説明された。これらの特許刊行物の内容は、引用により、明確に本明細書に組み込まれる。また、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １６４： ４１７８－４１８４（２０００）を参照する。
別に限定されない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、縮重バージョン（ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅ ｖｅｒｓｉｏｎｓ）、且つ同じアミノ酸配列をコードするすべてのヌクレオチド配列を含む。タンパク質又はＲＮＡをコードするヌクレオチド配列は、また、イントロンを含んでもよく、例えば、タンパク質をコードするヌクレオチド配列は、いくつかの形態においてイントロンを含む。
専門語「作動可能に連結」とは、調節配列と異種ヌクレオチド配列との機能的連結であり、これにより、後者を発現させる。例えば、第１のヌクレオチド配列と第２のヌクレオチド配列が機能的な関係である場合、第１のヌクレオチド配列と第２のヌクレオチド配列は作動可能に連結される。例えば、プロモーターがコード配列の転写又は発現に影響を与える場合、当該プロモーターとコード配列は作動可能に連結される。通常、作動可能に連結されたＤＮＡ配列は連続的であり、必要に応じて、２つのタンパク質コード領域を同じオープンリーディングフレームにおいて連結できる。
「同族」とは、２つのポリペプチド間又は２つの核酸分子間の配列類似性又は配列同一性である。２つの比較配列の同じ位置が同じ塩基又はアミノ酸単量体サブユニットである場合、例えば、２つのＤＮＡ分子の同じ位置がいずれもアデニンである場合、２つのＤＮＡ分子はその位置で同族である。２つの配列間の同族百分率とは、２つの配列において、位置の総数に対する、共有される一致又は相同位置の数の比に１００を掛ける関数である。例えば、２つの配列において、１０つの位置のうち６つが一致又は相同である場合、２つの配列の同一性は６０％である。例えば、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣとＴＡＴＴＧＣの同一性は５０％である。通常、２つの配列を比較する時、最大の同一性を得るために比較を行う。
本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体又は組成物の「有効量」とは、特定の目的を達成するのに十分な量である。「有効量」は、経験、及び前記の目的に関連する既知の方法によって決定することができる。
専門語「治療有効量」とは、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体又はその組成物が個体の疾患又は症状を効果的に治療できる、使用量である。例えば、がんの場合、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体又はその組成物の治療有効量とは、がん細胞の数を減らし、腫瘍のサイズ又は重量を減らし、腫瘍細胞の周囲臓器への浸潤を阻害（即ち、ある程度で緩和又は好ましくは停止）し、腫瘍転移を阻害（即ち、ある程度で緩和又は好ましくは停止）し、ある程度で腫瘍の成長を阻害し、及び／又はがんに関連する１つ以上の症状を緩和できる量である。本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体又はその組成物は、既存の腫瘍細胞をある程度阻害及び／又は殺すことができ、細胞増殖抑制性又は細胞毒性があるものであり得る。いくつかの実施例において、治療有効量とは、患者の生存期間を延長することができる使用量である。いくつかの実施例において、治療有効量は、患者の無増悪生存期間を改善することができる使用量である。
本明細書で使用されるように、「薬学的に許容される」又は「薬理学的に許容される」とは、生物学的活性がなく、又は他の望ましくない特性を有しない材料であり、例えば、当該材料は、不良な生物効果を引き起こさないように、又は有害な方式で組成物に含まれる他の任意の成分と相互作用しないように、患者に投与される医薬組成物に添加することができる。薬学的に許容される担体又は賦形剤は、好ましくは、毒物学又は製造試験に必要な基準を満たし、及び／又は米国食品医薬品局によって編集された不活性成分ガイドに含まれている。
本明細書に記載された出願の実施例は、「…からなる」及び／又は「実質的に…からなる」の実施例を含むと理解されるべきである。
本明細書に言及される「約」は、数値又はパラメータであり、当該数値又はパラメータ自体の変体も含む（及び説明する）。例えば、「約Ｘ」に関する説明は、「Ｘ」に対する説明を含む。
本明細書に使用されるように、ある数値又はパラメータでは「ない」に関する説明は、通常、当該数値又はパラメータ「以外」を意味して説明する。例えば、当該方法はＸ型がんの治療には使用できないとは、当該方法が通常、Ｘ型がん以外の種類の治療に使用されると意味する。
別段で明確に説明しない限り、本明細書及び前記の請求の範囲に使用される単数形「一つ」、「一個」及び「当該」は、複数の対象を含む。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体
本発明の一態様では、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関する。前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体、マウス抗体、ヒト抗体、及び本明細書に記載された重鎖及び／又は軽鎖ＣＤＲｓを含有する抗体分子を含むが、これらに限定されない。本発明の一態様では、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する単離された抗体に関する。予想の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば全長ＩｇＧ１又はＩｇＧ４）、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα一本鎖抗体、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα Ｆｃ融合タンパク質、多重特異性（例えば、二重特異性）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα免疫抱合体などを含む。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する、全長抗体（例えば全長ＩｇＧ１又はＩｇＧ４）又はその抗原結合フラグメントである。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’２、Ｆａｂ’－ＳＨ、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆｖフラグメント、ｄＡｂ、Ｆｄ、ナノボディ、ダイアボディ及び線状抗体である。いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する抗体とは、ＧＭ－ＣＳＦＲαに対する抗体の結合親和性が、非標的への結合の結合親和性より少なくとも１０倍以上（例えば、１０、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、又は１０７倍を含む）である。いくつかの実施例において、非標的とは、ＧＭ－ＣＳＦＲαの抗原ではないものである。結合親和性は、例えば、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）分析、又は放射性免疫沈降分析（ＲＩＡ）などの本分野で既知の方法によって測定することができる。Ｋｄ値は、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術又はバイオレイヤー干渉技術（ＢＬＩ）などの本分野で既知の方法によって測定することができる。
本明細書では、ヒト配列を含む抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、ヒトＣＤＲ配列を含むヒト重鎖及び軽鎖可変領域）について詳しく説明しているが、同時に非ヒト抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体も熟慮されている。いくつかの実施例において、非ヒト抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のヒトＣＤＲ配列及び非ヒトフレームワーク領域配列を含む。いくつかの実施例において、非ヒトフレームワーク領域配列は、本明細書に記載された一種以上のヒトＣＤＲ配列を利用して合成重鎖及び／又は軽鎖可変領域を形成するために使用され得る配列を含み、その非ヒトフレームワーク領域配列は、例えば、マウス、ラット、ウサギ、ブタ、ウシ（例えば、ウシ、オウシ、スイギュウ）、シカ、ヒツジ、ヤギ、ニワトリ、ネコ、イヌ、フェレット、霊長類（例えば、コザル、マカク）などの哺乳類動物の配列を含む。いくつかの実施例において、非ヒト抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、本明細書に記載された一種以上のヒトＣＤＲ配列を非ヒトフレームワーク領域（例えば、マウス又はニワトリのフレームワーク領域配列）に移植することによって産生される抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む。
例示的なヒトＧＭ－ＣＳＦＲαの完全のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４８で示すアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４８で示すアミノ酸配列からなる。
Figure 2023011887000003
例示的なヒトＧＭ－ＣＳＦＲα細胞外領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４９で示すアミノ酸配列を含み、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４９で示すアミノ酸配列からなる。
Figure 2023011887000004
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲα内のエピトープに特異的に認識する。いくつかの実施例において、前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒト以外の種のＧＭ－ＣＳＦＲαと交差反応する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに対して完全に特異的であり、他の非ヒト種又はタイプに対して交差反応性を示さない。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲα内の線状エピトープに特異的に結合する。いくつかの実施例において、本明細書に記載された前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲα内の非線状エピトープに特異的に結合する。いくつかの実施例において、本明細書に記載された前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３及びＩｌｅ２８４からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ又は６つのアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３及びＩｌｅ２８４を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ｖａｌ５１、Ｔｈｒ６３及びＩｌｅ１９６からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ又は９つのアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、アミノ酸残基Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ｖａｌ５１、Ｔｈｒ６３及びＩｌｅ１９６を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ｌｅｕ１９１及びＩｌｅ１９６からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ又は８つのアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合でき、前記のエピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ｌｅｕ１９１及びＩｌｅ１９６のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ａｒｇ４９、Ｖａｌ５１、Ａｓｎ５７及びＳｅｒ６１からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ又は１０つのアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記エピトープが、アミノ酸残基である、Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ａｒｇ４９、Ｖａｌ５１、Ａｓｎ５７及びＳｅｒ６１を含む。
いくつかの実施例において、前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質（又はそのフラグメント）の少なくとも一種の対立遺伝子変異体と交差反応する。いくつかの実施例において、対立遺伝子変異体は、天然に存在するＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質（又はそのフラグメント）と比較して、多くとも約３０個（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５又は３０のうちのいずれか１個）のアミノ酸置換（例えば、保存置換）を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質（又はそのフラグメント）のいずれかの対立遺伝子変異体と交差反応しない。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質のいずれかの種間変異体と交差反応する。いくつかの実施例において、例えば、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質（又はそのフラグメント）は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαであり、そして、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質（又はそのフラグメント）の種間変異体は、カニクイザルにおける変異体である。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質のいずれかの種間変異体と交差反応しない。
いくつかの実施例において、本明細書に記載されたいずれかの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体について、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、重鎖定常領域及び軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１型重鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ２型重鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ３型重鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ４型重鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含む（「…を含む」は、「…からなる」又は「実質的に…からなる」を含む）。いくつかの実施例において、前記の重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含む（「…を含む」は、「…からなる」又は「実質的に…からなる」を含む）。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、λ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、κ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含む（「…を含む」は、「…からなる」又は「実質的に…からなる」を含む）。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、抗体重鎖可変領域及び抗体軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、
前記のＶＨは、Ｘ１がＥ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣであり、Ｘ２がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ３がＩ又はＭである配列Ｘ１ＬＸ２Ｘ３Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦである配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡである配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；
前記のＶＬは、Ｘ１がＳ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣであり、Ｘ２がＱ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣであり、Ｘ３がＳ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱであり、Ｘ４がＳ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣであり、Ｘ５がＳ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧであり、Ｘ６がＹ、Ｌ又はＦである配列ＲＡＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＸ４Ｘ５Ｘ６ＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＧ又はＴであり、Ｘ２がＡ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ又はＦであり、Ｘ３がＳ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮである配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ、又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、
前記のＶＨは、Ｘ１がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ２がＩ又はＭである配列ＥＬＸ１Ｘ２Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦである配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡである配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；
前記のＶＬは、配列ＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、配列ＧＡＳＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む、一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む、一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又はその変異体を含み、前記の変異体は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれかか）のアミノ酸置換を含む、一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＬを含み、前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む、１つのＬＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれ）のアミノ酸置換を含む変異体を含む、一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む、一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＬを含み、前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２又は多くとも約３つ（例えば、約１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに合計で多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに合計で多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに合計で多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに合計で多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに合計でくとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに合計で多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～５０又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１～７５又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～５０を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１～７５を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、５及び１７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５４又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、５及び１７を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５４を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、８及び２２又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５６又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、８及び２２を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５６を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び２３又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び２３を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、６及び２７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、６及び２７を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び３５又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５３又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び３５を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５３を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び３７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び３７を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：３、６及び３９又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５４又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：３、６及び３９を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５４を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び３５又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び３５を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び５０又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７又は多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１、７及び５０を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５１、５２及び５７を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を有し；前記のＶＬは、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１を有する、１つ、２つ又は３つのＨＣ－ＣＤＲｓを含む。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＬを含み、前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を有する、１つ、２つ又は３つのＬＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を有する、１つ、２つ又は３つのＬＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＬを含み、前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を有する、１つ、２つ又は３つのＬＣ－ＣＤＲｓを含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＬを含み、前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を有する、１つ、２つ又は３つのＬＣ－ＣＤＲｓを含む。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１を有する、ＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を有する、ＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１又は少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６又は少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、機能性エピトープは、組合わせアラニンスキャニング法で解析できる。このプロセスでは、組合わせアラニンスキャニング技術は、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質における、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と相互作用するために必要するアミノ酸の同定に用いられる。いくつかの実施例において、当該エピトープは、コンフォメーションであり、それとともに、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質に結合した抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の晶体構造でエピトープを同定できる。
いくつかの実施例において、本願は、本明細書に記載されたいずれか一種の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と競合的に結合するＧＭ－ＣＳＦＲαの抗体に関する。いくつかの実施例において、本明細書に記載されたいずれか一種の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体とＧＭ－ＣＳＦＲα上のエピトープに競合的に結合できる抗体に関する。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、その抗体は、ＶＨ及びＶＬを含む抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体分子と同じエピトープに結合し、ここで、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、その抗体は、ＶＨ及びＶＬを含む抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体分子とＧＭ－ＣＳＦＲαに競合的に結合し、ここで、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施例において、競合実験は、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と、ＧＭ－ＣＳＦＲαに競合的に結合するモノクローナル抗体を同定することに用いられる。競合実験は、同じエピトープ又は空間上で重なるエピトープを認識するか、１つの抗体による抗原への別の抗体の結合を競合的に阻害することにより、２つの抗体が同じエピトープに結合するかどうかを判断できる。ある実施例において、このような競合的な抗体は、本明細書に記載された抗体と同じエピトープに結合する。いくつかの競合実験は、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ｃｈ．１４（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， Ｎ．Ｙ．）に記載された一般的な実験を含むが、これに限定されない。抗体が結合するエピトープを解析するための詳細な例示的な方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）“Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，” ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｖｏｌ． ６６（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ， Ｔｏｔｏｗａ， Ｎ．Ｊ．）に記載された通りである。いくつかの実施例において、各抗体は、他の抗体の結合の５０％以上を遮断する場合、同じエピトープに結合すると称する。いくつかの実施例では、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と競合する抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体、又はヒト抗体である。
例示的な抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体配列は、表２、表３及び表１８、ならびに図１９Ａ及び図１９Ｂに示す。当業者は、ＣＤＲの位置を予測し、抗体の軽鎖及び重鎖可変領域を定義するための様々な既知のアルゴリズム（ｋａｂａｔ定義方法）があることを認識した。本明細書に記載された抗体のＣＤＲｓ、ＶＨ及び／又はＶＬ配列を含むが、以下の表に示す抗体ではなく、予測アルゴリズムに基づく抗体も本発明の範囲内である。
Figure 2023011887000005
Figure 2023011887000006
Figure 2023011887000007
Figure 2023011887000008
Figure 2023011887000009
Figure 2023011887000010
Figure 2023011887000011
Figure 2023011887000012
Figure 2023011887000013
Figure 2023011887000014
 ＧＭ－ＣＳＦ：顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子
顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）は、コロニー刺激因子２ともいい、マクロファージ、Ｔ細胞、肥満細胞、ナチュラルキラー細胞、内皮細胞、又は線維芽細胞によって産生される。ＧＭ－ＣＳＦは、Ｉ型炎症誘発性サイトカインであり、好中球、好酸球、単球、マクロファージを含む様々な造血細胞類の生存、増殖、及び／又は分化を促進し、例えば、骨髄細胞の分化、単球由来樹状細胞の動員と分化、好中球の開始と活性化などを促進する。それと共に、血管の形成や腫瘍細胞の成長の促進にも関与する。臨床的には、ＧＭ－ＣＳＦは、通常、放射線療後の骨髄の回復を促進するために使用される。
ＧＭ－ＣＳＦは、炎症部位に存在する最初の炎症誘発性サイトカインの１つであり、炎症過程の調節にとって極めて重要である。例えば、造血細胞の、好中球、好酸球、単球及びマクロファージへの分化を促進することができる（Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ ２０１５； ７（１１）：４１５－４３０）。ＧＭ－ＣＳＦは、血管内皮細胞を活性化することにより、単球とマクロファージの動員を促進する。ＧＭ－ＣＳＦは、また、単球及び例えば、慢性関節リウマチ患者の滑膜マクロファージのようなマクロファージの増殖を促進すると共に、マクロファージのサイトカイン放出も促進し、そのサイトカインは、ＧＭ－ＣＳＦ及びＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－１及びケモカインなどの炎症性サイトカインを含む。ＧＭ－ＣＳＦは、さらに炎症組織の抗原提示細胞の調節に関与すると共に、マクロファージ及び樹状細胞によるＩＬ－２３の産生を促進し、ＩＬ－６及びＩＬ－１とともにＴ細胞の分化を調節することができる。内因性ＧＭ－ＣＳＦは、痛みのシグナルに依存し、及び痛みに対する感受性を促進することにより、感覚ニューロンを調節する。ＧＭ－ＣＳＦノックアウトマウスでは、骨髄細胞の発達が影響を受けないことから、骨髄細胞の発達を促進する上でのＧＭ－ＣＳＦの役割が限られていることを示す（Ｓｔａｎｌｅｙ ｅｔ ａｌ． ＰＮＡＳ １９９４； ９１（１２）： ５５９２－５５９４）。しかしながら、適切な炎症反応がないため、ＧＭ－ＣＳＦノックアウトマウスはより感染し易くなる（Ｔｒａｐｎｅｌｌ ｅｔ ａｌ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００３； ３４９：２５２７－２５３９； Ｄｒａｎｏｆｆ ｅｔ ａｌ． Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９４； ２６４：７１３－７１６）。ＧＭ－ＣＳＦの欠如は、関節リウマチ、脳脊髄炎、及び自己免疫性心筋炎等の発生率を低下させることは、ＧＭ－ＣＳＦが主に炎症過程に関与していることを示す（Ｌａｗｌｏｒ ｅｔ ａｌ． Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ＆ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ ２００５；（５２）３７４９－３７５４； ＭｃＱｕａｌｔｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２００１； １９４（７）： ８７３－８８２； Ｓｏｎｄｅｒｅｇｇｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２００８； ２０５（１０）： ２２８１－２２９４）。
ＧＭ－ＣＳＦＲ：顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体
ＧＭ－ＣＳＦ受容体は、ヘマトポエチン受容体スーパーファミリーのメンバーの一つである。ＧＭ－ＣＳＦ受容体は、ヘテロ二量体であり、α及びβサブユニットからなるものである。ここで、αサブユニットはＧＭ－ＣＳＦに非常に特異的であり、βサブユニットはＩＬ－３やＩＬ－５などの他のサイトカイン受容体と共有されている。これは、β受容体サブユニットのより広い組織内の分布に反映されている。αサブユニットであるＧＭ－ＣＳＦＲαは、主に骨髄細胞と、好中球、マクロファージ、好酸球、樹状細胞、内皮細胞、呼吸器上皮細胞などの非造血細胞に発現する。全長のヒトＧＭ－ＣＳＦＲαは、Ｉ型サイトカイン受容体ファミリーに属する、４００個のアミノ酸のＩ型膜糖タンパク質であり、２２個のアミノ酸のシグナルペプチド（１－２２位）、２９８個のアミノ酸の細胞外ドメイン（２３－３２０位）、膜貫通ドメイン（３２１－３４５位）及び５５個のアミノ酸の短い細胞内ドメインで構成される。シグナルペプチドが切断されて、３７８個のアミノ酸のＧＭ－ＣＳＦＲαの成熟タンパク質形態が得られる。ヒトとマウスのＧＭ－ＣＳＦＲαのｃＤＮＡクローンが利用可能であり、且つタンパク質レベルで、その受容体サブユニットは３６％の同一性を持つ。ＧＭ－ＣＳＦは、比較的低い親和性（Ｋｄ １－５ｎＭ）でαサブユニットに単独で結合できるが、βサブユニットには全く結合しない。しかしながら、αサブユニットとβサブユニットが同時に存在する場合、高親和性のリガンド－受容体複合体（Ｋｄ≒１００ｐＭ）が形成される。ＧＭ－ＣＳＦシグナル伝達は、それがＧＭ－ＣＳＦＲα鎖との最初の結合によって起こり、次に比較的に大きなサブユニットと共通のβ鎖を架橋し、ＪＡＫ－ＳＴＡＴ経路をリン酸化する高親和性相互作用を生成する。ＧＭ－ＣＳＦＲとＧＭ－ＣＳＦとの結合は、Ｈａｍａｎ ｅｔ ａｌ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９９９； ２７４（４８）において概略的に説明される。このような相互作用は、また、チロシンリン酸化とＭＡＰＫ経路の活性化を介してシグナルを伝達できる。病理学的には、ＧＭ－ＣＳＦは炎症、呼吸器疾患、自己免疫疾患を悪化させる役割を果たすことが証明されている。従って、ＧＭ－ＣＳＦとＧＭ－ＣＳＦＲαの結合に対する中和は、ＧＭ－ＣＳＦＲαが介在する疾患及び病症の治療方法となる。
全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ又はＩｇＭである。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ定常領域を含み、例えば、いずれかのＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４又はその変異体の定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、λ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、κ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、全長のヒト抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、マウス免疫グロブリンＦｃ配列を含む。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、既に変化された又は他の方式で変化されたＦｃ序列を含むことで、増強された抗体依存性細胞障害作用（ＡＤＣＣ）及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）のエフェクター機能を有する。
従って、例えば、いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記アミノ酸配列からなって、且つ、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ２定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ２は、ヒトＩｇＧ２である。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ３定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ３は、ヒトＩｇＧ３である。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記アミノ酸配列からなって、且つ、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記アミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１又は多くとも約３つ（例えば、約１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ２定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ２は、ヒトＩｇＧ２である。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ３定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ３は、ヒトＩｇＧ３である。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、約１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、約１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、約１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列又は多くとも約３つ（例えば、１つ、２つ又は３つのいずれか）のアミノ酸置換を含む変異体を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域及びｂ）軽鎖可変領域を含み、前記の重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域ＶＨ及びｂ）軽鎖可変領域ＶＬを含み、前記の重鎖可変領域ＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ２定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域ＶＨ及びｂ）軽鎖可変領域ＶＬを含み、前記の重鎖可変領域ＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ２は、ヒトＩｇＧ２である。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ３定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域ＶＨ及びｂ）軽鎖可変領域ＶＬを含み、前記の重鎖可変領域ＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ３は、ヒトＩｇＧ３である。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ａ）重鎖可変領域ＶＨ及びｂ）軽鎖可変領域ＶＬを含み、前記の重鎖可変領域ＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列をを含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ１定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関して、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含む軽鎖可変領域とを含有する。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなって、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
結合親和性
結合親和性は、Ｋｄ、Ｋｏｆｆ、Ｋｏｎ、又はＫａで表すことができる。本明細書に記載されたように、専門語「Ｋｏｆｆ」とは、抗原／抗体複合物からの抗体の解離速度定数であり、キネティックセレクション装置（ｋｉｎｅｔｉｃ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｓｅｔ ｕｐ）によって測定される。専門語「Ｋｏｎ」とは、抗体が抗原に結合して抗原／抗体複合物を形成する場合の結合速度定数である。本明細書に用いられた専門語「Ｋｄ」とは、特定の抗体が抗原と相互作用する場合の解離定数を指し、平衡状態にある抗体分子の溶液中に存在するすべての抗体結合ドメインの半分を占めるのに必要な抗原の濃度を指し、Ｋｏｆｆ／Ｋｏｎに等しい。Ｋｄの測定は、全ての結合分子が溶液にあることを前提として行う。抗体が細胞壁と連結する場合、例えば酵母発現系では、対応する解離速度定数は、ＥＣ５０で表し、Ｋｄの適切な近似値を与える。親和結合定数Ｋａは、解離定数Ｋｄの逆数である。
平衡解離定数（Ｋｄ）は、抗体部分と抗原との親和性を示す指標として使用される。例えば、様々なマーカー剤でマークされた抗体を使用するＳｃａｔｃｈａｒｄ方法及びＢｉａｃｏｒｅ機器（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製）によって簡単に分析することができ、ユーザーマニュアル又は添付の試薬キットで表面プラズモン共鳴によって、生体分子間の相互作用を分析する。これらの方法で得られたＫｄ値は、単位Ｍで表す。標的と特異的に結合する抗体は、例えば、≦１０－７Ｍ、≦１０－８Ｍ、≦１０－９Ｍ、≦１０－１０Ｍ、≦１０－１１Ｍ、≦１０－１２Ｍ又は≦１０－１３ＭのＫｄ値を有しうる。
抗体の結合特異性は、本分野での既知の方法によって測定することができる。これらの方法は、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｓ、ＥＬＩＳＡ－、ＲＩＡ－、ＥＣＬ－、ＩＲＭＡ－、ＥＩＡ－、ＢＩＡｃｏｒｅテスト及びペプチドスキャン等を含むが、これらに限定されない。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦα標的と特異的に結合し、そのＫｄ値は、１０－７Ｍ～１０－１３Ｍ（例えば、１０－７Ｍ～１０－１３Ｍ、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ又は１０－１０Ｍ～１０－１２Ｍ）である。このように、いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体とＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合のＫｄ値は、１０－７Ｍ～１０－１３Ｍ、１×１０－７Ｍ～５×１０－１３Ｍ、１０－７Ｍ～１０－１２Ｍ、１０－７Ｍ～１０－１１Ｍ、１０－７Ｍ～１０－１０Ｍ、１０－７Ｍ～１０－９Ｍ、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、１×１０－８Ｍ～５×１０－１３Ｍ、１０－８Ｍ～１０－１２Ｍ、１０－８Ｍ～１０－１１Ｍ、１０－８Ｍ～１０－１０Ｍ、１０－８Ｍ～１０－９Ｍ、５×１０－９Ｍ～１×１０－１３Ｍ、５×１０－９Ｍ～１×１０－１２Ｍ、５×１０－９Ｍ～１×１０－１１Ｍ、５×１０－９Ｍ～１×１０－１０Ｍ、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ、１０－９Ｍ～１０－１２Ｍ、１０－９Ｍ～１０－１１Ｍ、１０－９Ｍ～１０－１０Ｍ、５×１０－１０Ｍ～１×１０－１３Ｍ、５×１０－１０Ｍ～１×１０－１２Ｍ、５×１０－１０Ｍ～１×１０－１１Ｍ、１０－１０Ｍ～１０－１３Ｍ、１×１０－１０Ｍ～５×１０－１３Ｍ、１×１０－１０Ｍ～１×１０－１２Ｍ、１×１０－１０Ｍ～５×１０－１２Ｍ、１×１０－１０Ｍ～１×１０－１１Ｍ、１０－１１Ｍ～１０－１３Ｍ、１×１０－１１Ｍ～５×１０－１３Ｍ、１０－１１Ｍ～１０－１２Ｍ、１０－１２Ｍ～１０－１３Ｍである。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合のＫｄ値が１０－７Ｍ～１０－１３Ｍである。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と非標的との結合のＫｄ値は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体とＧＭ－ＣＳＦＲα標的とのＫｄ値より高くて、本明細書に引用されたいくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と標的（例えば、ＧＭ－ＣＳＦＲα）との結合親和性は、ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と非標的との結合親和性より高い。いくつかの実施例において、非標的とは、非ＧＭ－ＣＳＦＲα抗原である。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（ＧＭ－ＣＳＦＲαに対して）と非ＧＭ－ＣＳＦＲα標的との結合のＫｄ値は、少なくとも１０倍の差があり、例えば、１０－１００倍、１００－１０００倍、１０３－１０４倍、１０４－１０５倍、１０５－１０６倍、１０６－１０７倍、１０７－１０８倍、１０８－１０９倍、１０９－１０１０倍、１０１０－１０１１倍、１０１１－１０１２倍である。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と非標的との結合のＫｄ値は、１０－１Ｍ～１０－６Ｍ（例えば、１０－１Ｍ～１０－６Ｍ、１０－１Ｍ～１０－５Ｍ、１０－２Ｍ～１０－４Ｍ）である。いくつかの実施例において、前記の非標的とは、非ＧＭ－ＣＳＦＲα抗原である。従って、いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と非ＧＭ－ＣＳＦＲα標的との結合のＫｄ値は、１０－１Ｍ～１０－６Ｍ、１×１０－１Ｍ～５×１０－６Ｍ、１０－１Ｍ～１０－５Ｍ、１×１０－１Ｍ～５×１０－５Ｍ、１０－１Ｍ～１０－４Ｍ、１×１０－１Ｍ～５×１０－４Ｍ、１０－１Ｍ～１０－３Ｍ、１×１０－１Ｍ～５×１０－３Ｍ、１０－１Ｍ～１０－２Ｍ、１０－２Ｍ～１０－６Ｍ、１×１０－２Ｍ～５×１０－６Ｍ、１０－２Ｍ～１０－５Ｍ、１×１０－２Ｍ～５×１０－５Ｍ、１０－２Ｍ～１０－４Ｍ、１×１０－２Ｍ～５×１０－４Ｍ、１０－２Ｍ～１０－３Ｍ、１０－３Ｍ～１０－６Ｍ、１×１０－３Ｍ～５×１０－６Ｍ、１０－３Ｍ～１０－５Ｍ、１×１０－３Ｍ～５×１０－５Ｍ、１０－３Ｍ～１０－４Ｍ、１０－４Ｍ～１０－６Ｍ、１×１０－４Ｍ～５×１０－６Ｍ、１０－４Ｍ～１０－５Ｍ、１０－５Ｍ～１０－６Ｍである。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が高い結合親和性でＧＭ－ＣＳＦＲα標的に特異的に認識し、且つ低い結合親和性で非標的に結合することを言及すると、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＧＭ－ＣＳＦＲα標的との結合のＫｄ値が、１０－７Ｍ～１０－１３Ｍ（例えば、１０－７Ｍ～１０－１３Ｍ、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ、１０－１０Ｍ～１０－１２Ｍ）であり、そして非標的との結合のＫｄ値が、１０－１Ｍ～１０－６Ｍ（例えば、１０－１Ｍ～１０－６Ｍ、１０－１Ｍ～１０－５Ｍ、１０－２Ｍ～１０－４Ｍ）である。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、ＧＭ－ＣＳＦＲαを特異的に認識することを言及すると、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の結合親和性と対照抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、Ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂ）の結合親和性とを比較する。いくつかの実施例において、対照抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がＧＭ－ＣＳＦＲαに結合するＫｄ値は、本願の前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がＧＭ－ＣＳＦＲαに結合するＫｄ値の少なくとも２倍、例えば２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１０－１００倍、１００－１０００倍、１０３－１０４倍である。
核酸
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする核酸分子も含まれる。いくつかの実施例において、本明細書に記載されている全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のいずれかを含む、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする核酸（又は核酸の組）が提供される。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の核酸（又は核酸の組）は、またペプチドタグ（タンパク質精製タグ、Ｈｉｓタグ、ＨＡタグなど）をコードする核酸配列も含む。
同時に、本明細書は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む単離された宿主細胞、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のポリペプチド成分をコードする単離された核酸、又は本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のポリペプチド成分をコードする核酸を含むベクターも含まれる。
本願は、これらの核酸配列の変異体も含む。例えば、変異体は、少なくとも中程度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、本願の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする核酸配列とハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む。
本願は、また、本願の核酸が挿入されたベクターを提供する。
簡単に言えば、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする天然又は合成核酸を適切な発現ベクターに挿入し、核酸が、例えば、プロモーター（例えば、リンパ球特異的プロモーター）及び３‘非翻訳領域（ＵＴＲ）を含む５’及び３‘末端調節エレメントに作動可能に連結されることで、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を発現することできる。前記のベクターは、真核生物の宿主細胞での複製と組み込みに適している可能性がある。典型的なクローニング及び発現ベクターには、目的の核酸配列の発現を調節するための転写及び翻訳ターミネーター、開始配列、及びプロモーターが含まれる。
本願に記載された核酸は、標準的な遺伝子送達プロトコルを使用することにより、核酸免疫化及び遺伝子治療にも使用できる。核酸送達ための方法は、本分野で公知である。例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏｓ．５，３９９，３４６、５，５８０，８５９、５，５８９，４６６を参照し、その全体の内容を引用することにより本明細書に組み込まれる。いくつかの実施例において、本願は、また、遺伝子治療ベクターを提供する。
核酸は、多くのタイプのベクターにクローニングしうる。例えば、核酸は、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス及びコスミドを含むベクターにクローニングしうるが、これらに限定されない。特に対象となるベクターは、発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター及び配列決定ベクターを含む。
また、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に供することができる。ウイルスベクター技術は、本分野で周知であり、例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ（２０１３， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）、及び他のウイルス学又は分子生物学のハンドブックに記載されている。ベクターとして用いられるウイルスは、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルスを含むが、これらに限定されない。通常、適切なベクターには、少なくとも一種の生物で機能する複製起点、プロモーター配列、便利な制限酵素認識部位、及び一つ以上の選択マーカーが含まれる（例えば、ＷＯ ０１／９６５８４；ＷＯ ０１／２９０５８；及びＵ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．６，３２６，１９３参照）。
多くのウイルスベースのシステムが既に開発されていて、それを利用して遺伝子を哺乳類動物細胞に導入する。例えば、逆転写ウイルスは、遺伝子送達システムに便利なプラットフォームを提供する。本分野で既知の技術を適用し、選択される遺伝子をベクターに挿入して、逆転写ウイルス粒子に包装される。次いで、組換えウイルスを単離し、イン・ビトロ又はイン・ビボで受験者の細胞へ送達する。多くの逆転写ウイルスシステムが本分野において既知である。いくつかの実施例において、アデノウイルスベクターを使用する。多くのアデノウイルスベクターが本分野において既知である。いくつかの実施例において、レンチウイルスベクターを使用する。逆転写ウイルスから誘導されたベクターであって、例えば、レンチウイルスは、長期的な遺伝子導入を達成するための適切な手段であり、導入された遺伝子が長期で安定的に整合及びサブセルにおける繁殖を可能にするからである。レンチウイルスベクターは、マウス白血病ウイルスなどの腫瘍から誘導されたレトロウイルスよりさらなる利点を有し、これは、レンチウイルスベクターが非分裂細胞、例えば肝細胞に導入することができるからである。それとともに、レンチウイルスベクターは、低免疫原性とのさらなる利点がある。
エンハンサーなどの他のプロモーターエレメントは、転写初期頻度を調節する。通常、それらは、開始部位の３０－１１０ｂｐ上流の領域に位置するが、最近、多くのプロモーターが開始部位の下流にも機能要素を含むことが発見された。プロモーター要素間の間隔は通常、フレキシブルであるため、要素同士の位置交換又は移動する時にプロモーターの機能が維持される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、活性が低下し始める前に、プロモーターエレメント間の間隔を５０ｂｐ離すことができる。
適切なプロモーターの一例は前初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配列である。このプロモーター配列は、それに作動可能に連結された任意のポリヌクレオチド配列を高レベルで発現発現することができる強力な構成的プロモーター配列である。適切なプロモーターの他の例は、伸長成長因子１α（ＥＦ－１α）プロモーターである。しかしながら、他の構成的プロモーターも使用しても良く、それは、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ロングターミナルリピート（ＬＴＲ）プロモーター、、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、家禽白血病ウイルスプロモーター、Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒウイルス前初期プロモーター、ルース肉腫ウイルスプロモーター、及びヒト遺伝子プロモーターを含むが、これらに限定されなく、当該ヒト遺伝子プロモーターは、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター及びクレアチンキナーゼプロモーターを含むが、これらに限定されない。また、本願を、構成的プロモーターの適用に限定されるべきではない。誘導性プロモーターも本願の一部である。誘導性プロモーターの使用は、ポリヌクレオチド配列の発現を開始できる分子スイッチを提供し、その発現が望まれるときに、誘導性プロモーターがポリヌクレオチド配列と作動可能に連結されているか、又はその発現が望まれないときに、発現をオフにする。誘導性プロモーターは、メタロチオネインプロモーター、糖質コルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター及びテトラサイクリンプロモーターを含むが、これらに限定されない。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の発現は、誘導可能である。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする核酸配列は、本明細書に記載の任意の誘導性プロモーターを含む誘導性プロモーターに作動可能に連結される。
誘導性プロモーター
誘導性プロモーターの使用は、ポリヌクレオチド配列の発現を開始できる分子スイッチを提供し、その発現が望まれるときに、誘導性プロモーターがポリヌクレオチド配列と作動可能に連結されているか、又はその発現が望まれないときに、発現をオフにする。真核細胞に適用する例示的な誘導性プロモーターは、ホルモン調節エレメント（例えば、Ｍａｄｅｒ，Ｓ．ａｎｄ Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｈ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５６０３－５６０７を参照）、合成リガンド調節エレメント（（Ｓｐｅｎｃｅｒ， Ｄ． Ｍ． ｅｔ ａｌ（１９９３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６２： １０１９－１０２４を参照）及び電離放射線調節エレメント（Ｍａｎｏｍｅ， Ｙ．ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２：１０６０７－１０６１３； Ｄａｔｔａ，Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：１０１４－１０１５３を参照）を含むが、これらに限定されない。イン・ビボ又はイン・ビトロ哺乳類動物システムに適用する他の例示的な誘導性プロモーターは、Ｇｉｎｇｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２１：３７７－４０５を参照する。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を発現する誘導性プロモーターシステムは、Ｔｅｔシステムである。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を発現する誘導性プロモーターシステムは、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のｌａｃリプレッサーシステムである。
本願に使用された例示的な誘導性プロモーターシステムは、Ｔｅｔシステムである。当該システムは、Ｇｏｓｓｅｎ等（１９９３）によって説明されたＴｅｔシステムに基づいている。例示的な一例において、目的のポリヌクレオチドは、一つ以上のＴｅｔオペレーター（ＴｅｔＯ）部位を含むプロモーターによって制御される。非活性化状態では、Ｔｅｔリプレッサー（ＴｅｔＲ）がＴｅｔＯ部位に結合し、プロモーターの転写を阻害する。活性化状態では、例えば、テトラサイクリン（Ｔｃ）、無水テトラサイクリン、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）又はその活性類似体などの誘導剤の存在下で、誘導剤は、ＴｅｔＯからのＴｅｔＲの放出を引き起こし、それによって、転写を可能にする。ドキシサイクリンはテトラサイクリン抗生物質ファミリーのメンバーの一つであり、その化学名は１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロキシ－１１－メチル－４，６－ジオキシ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２ａ－ヘキサヒドロテトラエン－３－カルボキサミドである。
一の実施例において、ＴｅｔＲは、例えばマウス又はヒト細胞などの哺乳類動物細胞での発現に適用するためにコドン最適化されている。ほとんどのアミノ酸は、遺伝暗号の縮重のために複数のコドンによってコードされており、核酸によってコードされるアミノ酸配列を変更することなく、所与の核酸のヌクレオチド配列の実質的な変化を可能にする。しかしながら、多くの生物体では、コドンを使用する点で異なりがあり、これは「コドンバイアス」（即ち、特定のアミノ酸に対する特定のコドンの使用に対するバイアス）とも呼ばれる。コドンバイアスは、通常、特定のコドンのｔＲＮＡの優勢な種の存在と相関することが多く、これによりｍＲＮＡ翻訳の効率が向上する。従いまして、特定の生物（例えば、原核生物）に由来するコード配列は、コドン最適化を通じて、異なる生物（例えば、真核生物）における改善された発現のために調整され得る。
Ｔｅｔシステムの他の具体的なバリエーションには、次の「Ｔｅｔ－Ｏｆｆ」及び「Ｔｅｔ－Ｏｎ」システムが含まれる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆシステムにおいて、転写はＴｃ又はＤｏｘの存在下で、非活性化である。そのシステムでは、単純ヘルペスウイルス由来のＶＰ１６の強力なトランス活性化ドメインに融合したＴｅｔＲで構成されるテトラサイクリン制御トランス活性化タンパク質（ｔＴＡ）は、テトラサイクリン応答性プロモーターエレメント（ＴＲＥ）の転写制御下に標的核酸の発現を調節する。ＴＲＥは、プロモーター（通常、ヒトサイトメガロウイルスの前初期プロモーターに由来する最小のプロモーター配列）に融合したＴｅｔＯ配列コンカテマーで構成される。Ｔｃ又はＤｏｘが存在しない場合、ｔＴＡはＴＲＥに結合し、標的遺伝子の転写を活性化する。Ｔｃ又はＤｏｘが存在する場合、ｔＴＡはＴＲＥに結合できず、標的遺伝子が発現できない。
逆に、Ｔｅｔ－Ｏｎシステムにおいて、転写は、Ｔｃ又はＤｏｘの存在下で活性化される状態になる。Ｔｅｔ－Ｏｎシステムは、逆テトラサイクリン調節トランス活性化因子ｒｔＴＡに基づいている。ｔＴＡと同様に、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサーとＶＰ１６トランス活性化ドメインで構成された融合タンパク質である。しかしながら、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合領域における４個のアミノ酸の変化により、ｒｔＴＡの結合特性を変えて、そのｒｔＴＡは、Ｄｏｘが存在する場合、ターゲット導入遺伝子ＴＲＥ内のｔｅｔＯ配列のみを認識できる。従いまして、Ｔｅｔ－Ｏｎシステムでは、ＴＲＥによって調節される標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下でのみｒｔＴＡによって活性化することができる。
別の誘導性プロモーターシステムは、大腸菌由来のｌａｃリプレッサーシステムである（Ｂｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ４９：６０３－６１２（１９８７）を参照）。Ｌａｃリプレッサーシステムは、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプロモーターに作動可能に連結された目的のポリヌクレオチドの転写を調節することによって機能する。Ｌａｃリプレッサー（ｌａｃＲ）はＬａｃＯに結合し、それによって目的のポリヌクレオチドの転写を防ぐ。目的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えば、イソプロピル－β－Ｄチオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって誘導される。
ポリペプチド又はその一部の発現を評価するために、細胞に導入しようとする発現ベクターは、また、ウイルスベクターによってトランスフェクト又は感染した細胞集団からの発現細胞の同定及び選択を容易にするために、選択マーカー遺伝子又はレポーター遺伝子、或いはその両方を含み得る。他の一方では、選択マーカーは、単独のＤＮＡフラグメント上に運ばれ、そしてコトランスフェクション実験において使用され得る。選択マーカー遺伝子又はレポーター遺伝子のいずれも、宿主細胞で発現できるように、適切な調節配列に隣接することができる。有用な選択マーカーは、例えば、ｎｅｏ及び類似の遺伝子のような抗生物質耐性遺伝子を含む。
レポーター遺伝子は、潜在的にトランスフェクトされた細胞の同定、及び調節配列の機能評価に用いられる。通常、レポーター遺伝子は、受容体の生物体又は組織に存在しないか、又は受容体の生物体又は組織が発現しない遺伝子であり、そして、レポーター遺伝子は、例えば、酵素活性のような検出しやすい特性を発現するポリペプチドをコードする。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡが受容体細胞に導入された後の適切な時期に検出される。適切なレポーター遺伝子は、ルシフェラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型アルカリホスファターゼ、又は緑色蛍光タンパク質をコードする遺伝子を含みうる（例えば、Ｕｉ－Ｔｅｌ ｅｔ ａｌ．， ２０００ ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９： ７９－８２）。適切な発現システムは公知であり、既知の技術によって調製するか、又は商業的に入手することができる。通常、レポーター遺伝子の最高の発現レベルを示す最小の５‘フランキング領域を持つ構築体は、プロモーターとして同定される。このようなプロモーター領域は、レポーター遺伝子に連結され、プロモーター駆動性転写を調節するいくつの物質の能力を評価するために使用できる。
いくつかの実施例において、本明細書に記載されたいずれか一種の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の核酸に関する。いくつかの実施例において、前記の核酸は、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の重鎖及び軽鎖をコードする一つ以上の核酸配列を含む。いくつかの実施例において、前記の一つ以上の核酸配列の各核酸配列は単独のベクターに含まれる。いくつかの実施例において、少なくともいくつかの核酸配列は同じベクターに含まれる。いくつかの実施例において、全ての核酸配列は同じベクターに含まれる。ベクターは、例えば、哺乳類動物発現ベクター及びウイルスベクター（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、及びレンチウイルスに由来する）から選択することができる。
遺伝子を細胞に導入し、それらを発現させる方法は、本分野では、既知である。発現ベクターの文脈において、ベクターは、本分野の任意の方法によって、哺乳類動物細胞、細菌、酵母、又は昆虫細胞などの宿主細胞に容易に導入することができる。例えば、発現ベクターは、物理的、化学的又は生物学的方法によって宿主細胞に導入することができる。
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入する物理的方法には、リン酸カルシウム沈殿、リポフェクション、遺伝子衝撃、マイクロインジェクション、エレクトロポレーションなどが含まれる。ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞を調製する方法は、本分野で周知である。例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ（２０１３，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照する。いくつかの実施例において、ポリヌクレオチドは、リン酸カルシウムトランスフェクション法によって宿主細胞に導入される。
目的のポリヌクレオチドを宿主細胞に導入する生物学的方法は、ＤＮＡ及びＲＮＡベクターの使用を含む。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクターは、ヒト細胞などの哺乳類動物細胞に遺伝子を挿入するために最も広く使用されている方法になる。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、アデノウイルス、及びアデノ随伴ウイルスに由来しうる。例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏｓ．５，３５０，６７４及び５，５８５，３６２を参照する。
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための化学的方法には、高分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフェア、磁気ビーズ、及び水中油型エマルジョン、ミセル、混合ゲルクラスターとリポソームを含む脂質ベースのシステムなどのコロイド分散システム、が含まれる。イン・ビボ及びイン・ビトロで送達ベクターとして使用される例示的なコロイドシステムは、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。
非ウイルス送達システムを使用する場合、例示的な送達ベクターはリポソームである。脂質製剤を使用して核酸を宿主細胞に導入することを考えた（イン・ビトロ、エクス・ビボ、又はイン・ビボ）。他の一方では、前記の核酸は、脂質に結合することができる。脂質に結合された核酸は、リポソームの水性内部に包まれ、リポソームの脂質二重層に分散され、リポソームとオリゴヌクレオチドに結合する連結分子を介してリポソームに接続され、リポソームに埋め込まれ、リポソームと複合体を形成し、脂質を含む溶液に分散して、脂質と混合し、脂質に結合し、脂質に懸濁し、ミセルに含まれ、又はミセルと混合し、或いは他の方法で脂質に結合し得る。脂質、脂質／ＤＮＡ又は脂質／発現ベクターに関連する組成物は、溶液中で特定の構造に限定されない。例えば、それらは、二重層構造、ミセル、又は「崩壊した」構造で存在し得る。それらはまた、単純に溶液中に分散させることができ、不均一なサイズ又は形状の凝集体を形成する可能性がある。脂質は、脂肪物質であり、天然存在又は合成された脂質でありうる。例えば、脂質は、細胞質に自然に存在する脂肪滴と、脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコール、アルデヒドなどの長鎖脂肪族炭化水素及びその誘導体とを含む一種類の化合物を含有する。
外因性核酸を宿主細胞に導入するための方法であれ、又は細胞を他の方法で本出願の阻害剤に曝露するための方法であれ、組換えＤＮＡ配列が宿主細胞に存在することを確認するために、様々な実験を行うことができる。このような実験は、例えば、当業者に周知の「分子生物学」実験を含む。例えば、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及びＮｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲ；「生化学」実験、例えば、ある特定のポリペプチドの存在又は不在による検出、免疫学的方法（ＥＬＩＳＡ及びＷｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｓ）又は本明細書に記載された実験による同定は、全て本願の範囲に含まれる。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の調製
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、モノクローナル抗体又はモノクローナル抗体由来のものである。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、モノクローナル抗体由来のＶＨ及びＶＬ、又はその変異体を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、さらに、モノクローナル抗体由来のＣＨ１及びＣＬ領域、又はその変異体を含む。モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法、ファージディスプレイ法を含む本分野で既知の方法、又は組換えＤＮＡ法を使用して調製することができる。また、例示的なファージディスプレイ法は、本明細書及び以下の実施例において説明されている。
ハイブリドーマ法では、通常、ハムスター、マウス、又は他の適切な宿主動物を免疫剤で免疫して、免疫剤に特異的に結合する抗体を産生するか、又は産生できるリンパ球を誘導する。また、イン・ビトロでリンパ球を免疫化することができる。免疫剤は、目的のタンパク質のポリペプチド又は融合タンパク質を含み得る。通常、ヒト由来細胞が必要である場合、末梢血リンパ球（ＰＢＬ）が適用され、非ヒト哺乳類動物由来細胞が必要である場合、脾臓細胞又はリンパ節細胞が適用される。リンパ球は、適切な融合剤、例えば、ポリエチレングリコールを使用して不死化細胞株と融合され、ハイブリドーマ細胞を形成する。不死化細胞株は通常、形質転換された哺乳類動物細胞であり、特にげっ歯類、ウシ科、及びヒトの骨髄腫細胞である。通常、ラット又はマウスの骨髄腫細胞株が適用される。ハイブリドーマ細胞は、適切な培地で培養することができ、前記の培養基には、未融合の不死化細胞の増殖又は生存を阻害する一種以上の物質が含まれることが好ましい。例えば、親細胞には、ヒポキサンチン－グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ「又は」ＨＰＲＴ）を欠いている場合、ハイブリドーマ細胞培養培地には通常、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジン（ＨＡＴ培地）が含まれ、当該培養培地は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を防ぐことができる。
いくつかの実施例において、不死化細胞株は、効率的に融合し、選択される抗体産生細胞によって抗体の安定した高レベルの発現をサポートし、そしてこの細胞は、いくつの培地、例えば、ＨＡＴ培地に感受性がある。いくつかの実施例において、不死化細胞株は、マウス骨髄腫細胞株であり、当該細胞は、例えば、カリフォルニア州サンディエゴのソーク細胞コレクション及びバージニア州マナッサスのアメリカンタイプカルチャーコレクションから得られる。また、ヒト骨髄腫及びマウス－ヒトハイブリッド骨髄腫細胞株の、ヒトモノクローナル抗体の調製のための使用についても説明されている。
そして、ハイブリドーマ細胞を培養する培地中にポリペプチドに対するモノクローナル抗体が存在するかどうかを測定することができる。ハイブリドーマ細胞によって産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、ラジオイムノアッセイ法（ＲＩＡ）又は酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）のような免疫沈降法又はイン・ビトロ結合実験によって決定することができる。このような技術又は分析方法は本分野で既知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ ａｎｄ Ｐｏｌｌａｒｄ， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）に記載されたＳｃａｔｃｈａｒｄ 解析によって決定することができる。
所望のハイブリドーマ細胞が同定された後、標的クローンを限界希釈法によってサブクローン化し、標準的な方法によって培養することができる。この目的に基づく適切な培地は、例えば、改良されたＥａｇｌｅ培地（ＤＭＥＭ）及びＲＰＭＩ－１６４０を含む。又は、ハイブリドーマ細胞は、哺乳類動物の体内で腹水の形で増殖することができる。
サブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体は、例えば、プロテインＡ－セファロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析又はアフィニティークロマトグラフィーのような従来の免疫グロブリン精製法によって、培地又は腹水から分離又は精製することができる。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体によれば、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、抗体ライブラリー（例えば、ｓｃＦｖ又はＦａｂフラグメントを表示するファージライブラリー）から選択されるクローン化配列を含む。前記のクローンは、所望の活性を有する抗体フラグメントをスクリーニングし、ライブラリーと組み合わせる方法で同定することができる。例えば、本分野において、ファージディスプレイライブラリーを生成し、これらのライブラリーをスクリーニングして、所望の結合特性を有する抗体を得るための様々な方法が知られている。このような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ‘Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．， ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．， ２００１）において説明されている。そして、更に例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４；Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５２： ６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｍａｒｋｓ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ， Ｎ．Ｊ．， ２００３）； Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３３８（２）： ２９９－３１０（２００４）； Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）； Ｆｅｌｌｏｕｓｅ， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）： １２４６７－１２４７２（２００４）； ａｎｄ Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）において説明されている。
一部のファージディスプレイ法では、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によってＶＨ及びＶＬ遺伝子レパートリーを別々にクローンし、ファージライブラリーでランダムに再結合されてから、抗原に結合できるファージをスクリーニングされる。これは、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２： ４３３－４５５（１９９４）に記載されている。ファージは通常、ｓｃＦｖフラグメント又はＦａｂフラグメントとして抗体フラグメントを表示する。免疫由来のライブラリーファージは、ハイブリドーマ細胞を構築する必要なしに、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。或いは、ナイーブレパートリー（例えば、ヒト由来）をクローンして、何の免疫化せずに複数の非自己抗原及び自己抗原に対する抗体の単一の供給源を提供することができる。これは、例えば、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ， １２： ７２５－７３４（１９９３）に記載されている。最後に、ナイーブライブラリーは、さらに、幹細胞からの再配列されていないＶ－ｇｅｎｅフラグメントをクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用してＣＤＲ３高度可変領域をコードし、イン・ビトロで再配列する方法で調製しうる。これは、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１－３８８（１９９２）に記載されている。ヒト抗体ファージライブラリーを説明した特許刊行物は、例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．５，７５０，３７３、及びＵＳ Ｐａｔｅｎｔ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏｓ． ２００５／００７９５７４、２００５／０１１９４５５、２００５／０２６６０００、２００７／０１１７１２６、２００７／０１６０５９８、 ２００７／０２３７７６４、２００７／０２９２９３６及び２００９／０００２３６０を含む。
前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ファージディスプレイを適用して、ライブラリーにおける標的ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合できる抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の部分をスクリーニングして調製することができる。当該ライブラリーは、ヒトｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーであり得、少なくとも１×１０９種（例えば、少なくとも約１×１０９、２．５×１０９、５×１０９、７．５×１０９、１×１０１０、２．５×１０１０、５×１０１０、７．５×１０１０又は１×１０１１のいずれか）の多様性を有する特定のヒト抗体フラグメントである。いくつかの実施例において、前記のライブラリーは、健康な受験者のヒトＰＭＢＣｓ及び脾臓から抽出されたＤＮＡで構築されたヒト天然ライブラリーであり、全てのヒト重鎖及び軽鎖サブファミリーを含む。いくつかの実施例において、前記のライブラリーは、様々な疾患の患者、例えば、自己免疫疾患の患者、がんの患者、及び感染性疾患の患者から単離されたＰＭＢＣｓから抽出されたＤＮＡで構築されたヒト天然ライブラリーである。いくつかの実施例において、前記のライブラリーは、半合成のヒトライブラリーであり、ここで、重鎖ＣＤＲ３が完全にランダムであり、全てのアミノ酸（システインを除く）が同じ確率で任意の所定の位置に存在する（例えば、Ｈｏｅｔ，Ｒ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３（３）：３４４－３４８，２００５を参照）。いくつかの実施例において、半合成のヒトライブラリーの重鎖ＣＤＲ３の長さは、約５から約２４個（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３又は２４のいずれか）のアミノ酸の長さである。いくつかの実施例において、前記のライブラリーは、全合成のファージディスプレイライブラリーである。いくつかの実施例において、前記のライブラリーは、非ヒトファージディスプレイライブラリーである。
標的ＧＭ－ＣＳＦＲαに対して高い親和性を有するファージクローンは、標的ＧＭ－ＣＳＦＲαへのファージの反復結合によってスクリーニングすることができ、前記の標的ＧＭ－ＣＳＦＲαは、固体支持体（例えば、溶液パニング（Ｐａｎｎｉｎｇ）に用いるビーズ又は細胞パニングに用いる哺乳類動物細胞）に結合し、そして結合されていないファージを除去し、特異的に結合されたファージを溶出する。続いて、結合されたファージクローンを溶出し、適切な宿主細胞、例えばＥ．ｃｏｌｉ ＸＬ１－Ｂｌｕｅに対する感染に用いられ、発現及び精製をする。特異的にＧＭ－ＣＳＦＲαに結合するファージクローンを濃縮するように、溶液パニング、細胞パニング、又は両方の組み合わせなどの複数ラウンドのパニング（例えば、約２、３、４、５、６又はそれ以上の任意のラウンド）を行っても良い。濃縮されたファージクローンの、標的ＧＭ－ＣＳＦＲαへの特異的結合は、例えば、ＥＬＩＳＡ及びＦＡＣＳを含む、本分野で既知の任意の方法によって検出することができる。
モノクローナル抗体は、例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．４，８１６，５６７に記載された組換えＤＮＡ法によっても調製できる。本願に記載されたモノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の方法（例えば、マウス抗体の軽鎖及び重鎖をコードする遺伝子に特異的に結合するオリゴヌクレオチドプローブ）によって容易に単離及び配列決定することができる。前記のようなハイブリドーマ細胞又は本願のＧＭ－ＣＳＦＲα特異的ファージクローンは、このＤＮＡの供給源とすることができる。単離後、ＤＮＡを発現ベクターに入れ、そして、当該ベクターを、例えば、シミアン（Ｓｉｍｉａｎ）ＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣がん（ＣＨＯ）細胞、又は免疫グロブリンを産生しない骨髄腫細胞のような宿主細胞にトランスフェクトして、組換え宿主細胞内で合成されたモノクローナル抗体を得る。前記のＤＮＡは、修飾されてもよく、例えば、コード配列でヒト重鎖及び軽鎖定常領域を置換し、及び／又はフレームワーク領域で相同な非ヒト配列を置換し（Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．４，８１６，５６７；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，ｓｕｐｒａ）、又は、共有結合で免疫グロブリンのコード配列における非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列の全部又は一部を連結する。この非免疫グロブリンポリペプチドは、本願の抗体の定常領域を置換することができ、又は本願の抗体の可変領域内の抗原結合部位を置換し、キメラ二価抗体を形成することができる。
前記の抗体は一価抗体であり得る。一価抗体を調製する方法は当分野で既知である。例えば、免疫グロブリン軽鎖及び修飾された重鎖の組換に関する発現法である。通常、重鎖が互いに架橋するのを防ぐために、重鎖がＦｃ領域の任意の位置で短く切られる。また、架橋を防ぐために、関連するシステイン残基が他のアミノ酸残基に置換又は削除される。
インビトロ法は、一価抗体の調製にも適用される。抗体を消化して抗体フラグメント、特にＦａｂフラグメントを生成するのは、本分野で知られている任意の方法で達成することができる。
所望の結合特異性（抗体－抗原結合部位）を有する抗体可変領域は、免疫グロブリン定常領域と融合できる。融合物は、好ましくは、ヒンジ、ＣＨ２及びＣＨ３領域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖定常領域と融合される。いくつかの実施例において、軽鎖結合に必要な部位を含む第１の重鎖定常領域（ＣＨ１）は、少なくとも一種の融合物中に現れる。免疫グロブリン重鎖融合体をコードするＤＮＡｓ、及び必要に応じて免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡｓも含み、単独の発現ベクターに挿入し、適切な宿主生物にコトランスフェクトすることができる。
完全ヒト抗体及びヒト化抗体
前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）は、ヒト化抗体又は完全ヒト抗体であり得る。非ヒト（マウスなど）抗体部分のヒト化形態は、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はそれらのフラグメント（例えばＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ又は抗体のその他の抗原結合サブ配列）であり、これは通常、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含む。ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はそのフラグメント（レシピエント抗体）を含み、ここで、受容体ＣＤＲからの残基が、例えば、マウス、ラット、又はウサギのＣＤＲなどの非ヒト（ドナー抗体）のＣＤＲ残基によって置換され、当該ヒト化抗体は、所望な特異性、親和性及び性能を持つ。いくつかの実施例において、ヒト免疫グロブリンＦｖフレームワーク領域の残基は、対応する非ヒト残基に置換される。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体にも、導入されたＣＤＲ又はフレームワーク領域の配列にも存在しないアミノ酸残基を含み得る。通常、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、通常は２つの可変領域を含み、可変領域において、全て又は実質的に全てのＣＤＲ領域が非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲ領域に対応し、全て又は実質的に全てのフレームワーク領域がヒト免疫グロブリンコンセンサス配列である。
通常、ヒト化抗体は、非ヒトから導入された１つ以上のアミノ酸残基を含む。これらの非ヒトアミノ酸残基は、通常、「インポート」残基と呼ばれ、通常、「インポート」可変領域に由来する。いくつかの実施例によって、ヒト化は、実質的にＷｉｎｔｅｒと彼の同僚の以下の方法（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２３９：１５３４－１５３６（１９８８））に従って実行し、げっ歯類動物のＣＤＲｓ又はＣＤＲ配列を対応するヒト抗体の配列を置換する。従って、この「ヒト化」抗体部分（Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．４，８１６，５６７）は、実質的に完全のヒト抗体より不完全であって、その可変領域は、既に非ヒト化に由来する対応する配列に置換された。実際には、ヒト化抗体部分は、典型的には、いくつかのＣＤＲ残基及び可能のいくつかのフレームワーク領域の残基が、げっ歯類抗体の類似部位からの残基によって置換されるヒト抗体部分である。
完全ヒト抗体は、ヒト化の代替形の一つである。例えば、現在、通常遺伝子改変動物（例えば、マウス）を作製し、免疫化後、内因性免疫グロブリンを産生せずに、完全な完全ヒト抗体ライブラリーを生成する。例えば、キメラマウス及び生殖細胞突然変異マウスにおいて、抗体重鎖結合領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合体の欠失は、完全に、内因性抗体の産生を阻害することが報告されている。この生殖細胞突然変異マウスに、ヒト生殖細胞株免疫グロブリン遺伝子アレイを移して、抗原刺激下で完全ヒト抗体を産生することができる。例えば、ａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ， ９０：２５５１（１９９３）； Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５－２５８（１９９３）； Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．， Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ７：３３（１９９３）； Ｕ．Ｓ． Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏｓ． ５，５４５，８０６， ５，５６９，８２５， ５，５９１，６６９； ５，５４５，８０７；及びＷＯ ９７／１７８５２を参照する。又は、完全ヒト抗体は、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を遺伝子改変動物に導入することによって、例えば、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的又は完全にサイレンシングされたマウスによって調製することができる。刺激されると、完全ヒト抗体の産生は、遺伝子の再配列、組み立て、抗体ライブラリーを含むあらゆる面で、ヒトでの産生と非常に類似することが分かる。この方法は、例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏｓ．５，５４５，８０７； ５，５４５，８０６； ５，５６９，８２５； ５，６２５，１２６； ５，６３３，４２５； ａｎｄ ５，６６１，０１６， ａｎｄ Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， １０： ７７９－７８３（１９９２）； Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ， ３６８： ８５６－８５９（１９９４）； Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ， ３６８： ８１２－８１３（１９９４）； Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， １４： ８４５－８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， １４： ８２６（１９９６）； Ｌｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ， Ｉｎｔｅｒｎ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １３： ６５－９３（１９９５）において説明されている。
完全ヒト抗体は、更に、イン・ビトロでＢ細胞を活性化することによって（Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔｓ ５，５６７，６１０及び５，２２９，２７５を参照）、又はファージディスプレイライブラリーを含む本分野で既知の様々な技術を使用することによって生成される。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．， ２２７：３８１（１９９１）； Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．， ２２２：５８１（１９９１）． Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．等の技術も、完全ヒトモノクローナル抗体の調製に用いられる。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ， Ａｌａｎ Ｒ． Ｌｉｓｓ， ｐ． ７７（１９８５）ａｎｄ Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １４７（１）： ８６－９５（１９９１）を参照する。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体変異体
いくつかの実施例において、本明細書に係わる抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）のアミノ酸配列の変異体も含まれる。例えば、抗体の結合親和性及び／又は他の生物学的活性を改善することが必要な場合がある。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードするヌクレオチド配列に適切な修飾を導入することによって、又はペプチド合成によって調製することができる。そのような修飾は、例えば、抗体のアミノ酸配列中の残基の欠失及び／又は挿入及び／又は置換を含む。最終的な構築は、抗原結合性などの所望の特性を有させるように、アミノ酸残基の欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせによって完了することができる。
いくつかの実施例において、１つ以上の、アミノ酸が置換された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体変異体に関する。置換された変異の目的の部位は、高可変領域（ＨＶＲｓ）及びフレームワーク領域（ＦＲｓ）を含む。標的抗体にアミノ酸置換を導入し、目的の活性（例えば、改善された生物活性、保持／改善された抗原結合能、低減された免疫原性、又は改善されたＡＤＣＣ又はＣＤＣ）がある製品をスクリーニングし得る。
保存的置換は、以下の表に示す。
Figure 2023011887000015
側鎖の性質により、アミノ酸を異なる種類に分ける。
ａ、疎水性アミノ酸：ノルロイシンノルロイシンＮｏｒｌｅｕｃｉｎｅ、メチオニンＭｅｔ、アラニンＡｌａ、バリンＶａｌ、ロイシンＬｅｕ、イソロイシンＩｌｅ；
ｂ、中性親水性アミノ酸：システインＣｙｓ、セリンＳｅｒ、スレオニンＴｈｒ、アスパラギンＡｓｎ、グルタミンＧｌｎ；
ｃ、酸性アミノ酸：アスパラギン酸Ａｓｐ、グルタミン酸Ｇｌｕ；
ｄ、塩基性アミノ酸：ヒスチジンＨｉｓ、リジンＬｙｓ、アルギニンＡｒｇ；
ｅ、鎖の方向に影響を与えるアミノ酸：グリシンＧｌｙ、プロリン Ｐｒｏ；
ｆ、芳香族アミノ酸：トリプトファンＴｒｐ、チロシンＴｙｒ、フェニルアラニンＰｈｅ。
非保存的アミノ酸の置換には、前記の一種類から別の種類への置換が含まれる。
例示的な置換変異体は、例えば、ファージディスプレイに基づく親和性成熟技術によって産生される、産生しやすい親和性成熟抗体である。要するに、１つ以上のＣＤＲ残基を突然変異させ、変異体抗体がファージ上に部分的にディスプレイされ、特定の生物学的活性（例えば、ＴＦ－１細胞増殖実験に基づく生物学的活性又は結合親和性）を有する変異体をスクリーニングする。ＴＦ－１細胞増殖実験に基づく改善された生物活性又は抗体親和性を得るように、ＨＶＲｓ領域に変更（例えば、置換）を行うことができる。このような変更は、ＨＶＲの「ホットスポット領域」、つまり体細胞の成熟中に高頻度の突然変異が起こったコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ， Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２０７：１７９－１９６（２００８）を参照）、及び／又は特異性決定残基（ＳＤＲｓ）で行われ、得られた変異体ＶＨ及びＶＬの結合親和性をテストする。二次ライブラリーの構築及び再選択による親和性成熟は、いくつかの文献に記載されている。例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ． ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ‘Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．， ｅｄ．， Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ， Ｔｏｔｏｗａ， ＮＪ，（２００１））。
いくつかの親和性成熟の実施例において、様々な方法（例えば、Ｅｒｒｏｒ Ｐｒｏｎｅ ＰＣＲ、チェーンシャッフリング（ｃｈａｉｎ ｓｈｕｆｆｌｉｎｇ）又はオリゴヌクレオチド特異的変異誘発）のいずれかによって、多様性を選択される、親和性成熟に用いられる可変遺伝子に導入する。そして、二次ライブラリーを作成する。当該ライブラリーに対してスクリーニングして、所望の親和性を有する抗体変異体を同定する。もう一つの方法は、ＨＶＲが介在する多様性の導入の方法であり、ここでは、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一回に４～６つの残基）がランダム化される。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、特異的に同定され、例えば、アラニンスキャニングによって変異誘発又はモデリングする。通常、ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３領域は特に重要な標的である。
いくつかの実施例において、置換、挿入、又は欠失は、１つ以上のＨＶＲ内で起こる可能性があり、このような変化が抗体の抗原に結合する能力を実質的に低下させなければよい。例えば、結合親和性を実質的に低下させない保存的変化（例えば、本明細書で言及される保存的置換）は、ＨＶＲｓにおいて生成される。これらの変化は、ＨＶＲの「ホットスポット領域」又はＳＤＲ領域以外で発生する可能性がある。いくつかの実施例において、上述された変異体ＶＨ及びＶＬについて、各ＨＶＲは変化しないか、又は１つ、２つもしくは３つ以下のアミノ酸置換を含む。
Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２４４：１０８１－１０８５に記載されているように、抗体から、標的突然変異されうるアミノ酸残基又は領域を同定できる有用な方法は、「アラニンスキャニング突然変異」と呼ばれる。当該方法では、標的残基における１つ又は１つのグループ（例えば、アルギニン、アスパラギン酸、ヒスチジン、リジン及びグルタミン酸などの荷電残基）は、中性、又は負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニン又はアスパラギン酸、グルタミン酸）より置換されて、抗体と抗原の間の相互作用が影響を受けるかどうかを決定する。アミノ酸の位置にさらなる置換を導入して、その位置が最初の置換に対して機能的感受性があることを証明することができる。あるいは／さらに、抗原－抗体複合体の結晶構造によって、抗体と抗原との間の接触部位を同定することができる。これらの接触部位に位置する残基及び隣接する残基は、置換候補体として標的化又は削除することができる。変異体をスクリーニングして、所望の性質を持っているかどうかを判定できる。
アミノ酸配列の挿入は、アミノ末端及び／又はカルボキシル末端に、長さが１個の残基から１００個以上の残基を含むポリペプチドを融合することを含み、さらに、配列に１個以上の残基を挿入することも含む。末端挿入の例として、Ｎ末端にメチオニル残基を有する抗体を含む。他の抗体分子の挿入変異体は、抗体分子のＮ末端又はＣ末端に酵素（例えば、ＡＤＥＰＴ）、又は抗体の血清半減期を増加させるポリペプチドを融合することを含む。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３、又はＶＨに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＶＬに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、ここで、ＶＨの３１位は、Ｅ、Ｈ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣから選択されるアミノ酸残基を含む。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体は、ＶＨを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１を含有し、ここで、ＶＨの２８位は、Ｔ、Ｈ、Ｖ、Ｅ、Ｐ、Ｌ、Ｍ、Ｓ、Ｗ、Ｃ、Ａ、Ｇ、Ｎ又はＫから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は３０位は、Ｔ、Ｐ、Ｄ、Ｅ、Ｙ、Ｗ、Ｖ、Ｍ、Ｎ、Ｌ、Ｑ、Ｇ、Ｓ、Ａ、Ｋ又はＲから選択されるアミノ酸残基を含む。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体はＶＬを含み、前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、ここで、ＶＬの２６位は、Ｓ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は２７位は、Ｑ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は２８位は、Ｓ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は３０位は、Ｓ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は３１位は、Ｓ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は３２位は、Ｙ、Ｌ又はＦから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は５０位は、Ｇ又はＴから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は５１位は、Ａ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｆ、Ｎ又はＶから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は５２位は、Ｓ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は９２位は、Ｄ、Ａ、Ｑ又はＷから選択されるアミノ酸残基を含み、及び／又は９３位は、Ｎ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬから選択されるアミノ酸残基を含む。
いくつかの実施例において、表１５に示すいずれのアミノ酸の置換又はそれらの組合せは全て本願の範囲内である。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４１又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４１と少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４１を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３６又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３６と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３６を含むＶＬを含有する。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８と少なくとも約９０％（例えば、少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％のいずれか）の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８を含むＶＬを含有する。
Ｆｃ領域変異体
いくつかの実施例において、１つ以上のアミノ酸修飾は、本明細書に記載された抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体又は抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体融合タンパク質）のＦｃ領域に導入され、それにより、Ｆｃ領域変異体が生成される。いくつかの実施例において、Ｆｃ領域変異体は、増強されたＡＤＣＣエフェクター機能を有し、これは、通常、Ｆｃに結合する受容体（ＦｃＲｓ）に関連する。いくつかの実施例において、Ｆｃ領域変異体は、低減されたＡＤＣＣエフェクター機能を有する。Ｆｃ配列の変化又は突然変異によってそのエフェクター機能に影響を与える例がたくさんあり、例えば、ＷＯ ００／４２０７２及びＳｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ９（２）： ６５９１－６６０４（２００１）において、ＦｃＲｓとの結合を増強又は低減することに関連する抗体変異体を記載された。この刊行物の内容は、引用により本明細書に組み込まれる。
抗体依存性細胞障害作用（ＡＤＣＣ）は、腫瘍細胞に対する治療用抗体の作用メカニズムである。ＡＤＣＣは、細胞が介在する免疫防御であり、標的細胞膜の表面の抗原が特定の抗体（例えば、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）によって結合されると、免疫システムのエフェクター細胞が自発に標的細胞を溶解する（例えば、がん細胞）。通常、ＡＤＣＣ効果は、抗体によって活性化されたＮＫ細胞に関わる。ＮＫ細胞は、Ｆｃ受容体ＣＤ１６を発現する。当該受容体は、標的細胞の表面に結合する抗体分子のＦｃ部分を認識して結合する。ＮＫ細胞の表面で最も一般的なＦｃ受容体は、ＣＤ１６又はＦｃγＲＩＩＩである。Ｆｃ受容体と抗体Ｆｃ領域との結合は、ＮＫ細胞の活性化を引き起こし、細胞溶解粒子が放出させ、続いて標的細胞がアポトーシスする。腫瘍細胞に対するＡＤＣＣの殺傷効果は、高親和性ＦｃＲがトランスフェクトされたＮＫ－９２細胞の特異性実験によって測定することができる。その結果を、ＦｃＲを発現しない野生型ＮＫ－９２と比較する。
いくつかの実施例において、本願は、また、全部ではなく一部のエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体変異体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体変異体）に関し、これにより、体内で延長された半減期を有するが、特定のエフェクター機能（例えば、ＣＤＣ又はＡＤＣＣ）は必須でなく、又は有害であるから、本願では、このような抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が理想的な候補である。イン・ビトロ及び／又はイン・ビボで細胞毒性試験を実施することにより、ＣＤＣ及び／又はＡＤＣＣ活性の低下／消耗を確認する。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合試験によって、抗体のＦｃγＲ結合能力が欠如する（これによって、ＡＤＣＣ活性が欠如する可能性がある）が、ＦｃＲｎ結合能力を依然として保持していることを確認する。ＡＤＣＣを介在する主な細胞において、ＮＫ細胞はＦｃγＲＩＩＩのみを発現し、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ， Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ ９：４５７－４９２（１９９１）ページ４６４目のＴａｂｌｅ ３において、造血細胞でのＦｃＲ発現をまとめる。イン・ビトロで標的分子のＡＤＣＣ活性を評価する非限定的な実例は、Ｕ．Ｓ． Ｐａｔ． Ｎｏ． ５，５００，３６２において説明されている（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ， Ｉ． ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ‘ｌ Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８３：７０５９－７０６３（１９８６））及び Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ， Ｉ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８２：１４９９－１５０２（１９８５）； Ｕ．Ｓ． Ｐａｔ． Ｎｏ． ５，８２１，３３７（ｓｅｅ Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ， Ｍ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｅｘｐ． Ｍｅｄ． １６６：１３５１－１３６１（１９８７）を参照）。また、非放射性検出法を使用しても良い（例えば、ＡＣＴＩ（商標）フローサイトメトリー非放射性細胞毒性試験（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｉｎｃ． Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ， Ｃａｌｉｆ．）及びＣＹＴＯＴＯＸ ９６（商標）非放射性細胞毒性試験（Ｐｒｏｍｅｇａ， Ｍａｄｉｓｏｎ， Ｗｉｓ．）を参照）。このような実験に使用された効果細胞は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー細胞（ＮＫ）を含む。また、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ‘ｌ Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９５：６５２－６５６（１９９８）に記載されたように、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、体内、例えば動物モデルで試験される。同時に、Ｃ１ｑ結合試験を実行することによって、抗体がＣ１ｑに結合できず、ＣＤＣ活性が欠如ことを確認できる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照する。補体活性化の状況を評価するために、ＣＤＣ測定を行う（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０２：１６３（１９９６）； Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．， Ｂｌｏｏｄ １０１：１０４５－１０５２（２００３）；及びＣｒａｇｇ， Ｍ． Ｓ． ａｎｄ Ｍ． Ｊ． Ｇｌｅｎｎｉｅ， Ｂｌｏｏｄ １０３：２７３８－２７４３（２００４）を参照）。本分野で既知の方法を使用して、ＦｃＲｎ結合及びイン・ビボでのクリアランス／半減期を測定する（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ， Ｓ． Ｂ． ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ’ｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １８（１２）：１７５９－１７６９（２００６）を参照）。
低減されたエフェクター機能を有する抗体は、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７及び３２９位で１つ以上の残基が置換されるものを含む（Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．６，７３７，０５６）。これらのＦｃ変異体は、２６５、２６９、２７０、２９７及び３２７位で２つ以上の残基が置換されたＦｃ変異体を含み、２６５及び２９７位残基がアラニンに置換された「ＤＡＮＡ」と呼ばれるＦｃ変異体を含む（Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．７，３３２，５８１）。
このような、ＦｃＲｓとの結合能力の向上又は低減に関連する抗体変異体は既に記載されている（例えば、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．６，７３７，０５６；ＷＯ ２００４／０５６３１２及びＳｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照）。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体に関し、それは、ＡＤＣＣ効果を増強することができる１つ以上の、アミノ酸が置換されたＦｃ領域変異体を含む。いくつかの実施例において、Ｆｃ領域変異体は、ＡＤＣＣ効果を増強することができる１つ以上のアミノ置換が含み、これらの置換は、Ｆｃ領域の２９８、３３３及び／又は３３４位にある（ＥＵ残基番号）。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体は、Ｆｃ領域のＳ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ及びＫ３３４Ａ位にあるアミノ酸置換を含む。
いくつかの実施例において、Ｆｃ領域の変化は、Ｃ１ｑ結合及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の変化を招来し（即ち、増強又は低減）、Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．６，１９４，５５１，ＷＯ ９９／５１６４２及びＩｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １６４： ４１７８－４１８４（２０００）に記載されたことを参照する。
いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体に関し、それは、１個以上のアミノ酸置換を有するＦｃ領域変異体を含み、半減期を延長でき、Ｆｃ受体（ＦｃＲｎ）との結合を増強できる。半減期を延長でき、又はＦｃＲｎ結合を改善できる抗体は、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎ等）において記載されている。これらの抗体Ｆｃ領域は、１個以上のアミノ酸が置換され、Ｆｃ領域とＦｃＲｎとの結合を増強する。これらのＦｃ変異体は、Ｆｃ領域において、２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４又は４３４位の残基が１個以上置換されたもの、例えば、Ｆｃ領域の４３４位残基が置換されたもの（Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．７，３７１，８２６）を含む。
同時に、Ｄｕｎｃａｎ ＆ Ｗｉｎｔｅｒ， Ｎａｔｕｒｅ ３２２：７３８－４０（１９８８）； Ｕ．Ｓ． Ｐａｔ． Ｎｏ． ５，６４８，２６０； Ｕ．Ｓ． Ｐａｔ． Ｎｏ． ５，６２４，８２１及びＷＯ ９４／２９３５１に関する他の変異Ｆｃ領域の例を参照する。
本願は、本明細書に記載されたいずれのＦｃ変異体又はその組み合わせを含む抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を考慮した。
グリコシル化変異体
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のグリコシル化の程度を増加または減少させるように、変更される。抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体上のグリコシル化部位を添加又は削除するために、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体又はそのポリペプチド部分のアミノ酸配列を変更することによって１つ以上のグリコシル化部位を添加又は除去して便利に達成する。
ここで、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がＦｃ領域を含む場合、それに接続されている炭水化物を変化させることができる。哺乳類動物細胞によって産生される天然抗体は、通常、分岐した二分岐オリゴ糖を含み、当該オリゴ糖は通常、Ｎ－結合を通じてＦｃ領域のＣＨ２ドメインにおけるＡｓｎ２９７に結合し、例えば、Ｗｒｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．， ＴＩＢＴＥＣＨ １５：２６－３２（１９９７）を参照する。前記のオリゴ糖は、例えば、マンノース、Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース及びシアル酸、並びに二分岐オリゴ糖構造の「ステム」部分のＧｌｃＮＡｃに連結するトレハロースのような様々な糖を含み得る。いくつかの実施例において、本願の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体にオリゴ糖修飾されて、特定の改善された特性を有する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体変異体を生成することができる。
Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインに連結されたＮ－グリカンは、異質的である。ＣＨＯ細胞で産生された抗体又はＦｃ融合タンパク質は、フコシルトランスフェラーゼ活性によってフコシル化されて、Ｓｈｏｊｉ－Ｈｏｓａｋａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． ２００６， １４０：７７７－ ８３を参照する。通常、ヒト血清で、ごく一部の天然に存在するフコシル化されていないＩｇＧｓが検出される。Ｆｃ領域のＮ－グリコシル化は、Ｆｃ領域のＦｃＲへの結合にとって重要であるが、フコシル化されていないＮ－グリカンは、ＦｃとＦｃＲＩＩＩａとの結合能力を増強される。ＦｃＲＩＩＩａとの結合能力の増強は、ＡＤＣＣ効果を増強し、これは、細胞毒性を必要とする特定の抗体治療適用で有利である。
いくつかの実施例において、Ｆｃが介在する細胞毒性が必要ない場合、増強されたエフェクター機能は有害でありうる。いくつかの実施例において、Ｆｃフラグメント又はＣＨ２ドメインは非グリコシル化されている。いくつかの実施例において、ＣＨ２ドメインにおけるＮ－グリコシル化部位を突然変異させて、そのグリコシル化を防ぐ。
いくつかの実施例において、Ｆｃ領域を含む抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体に関し、ここで、Ｆｃ領域に連結された炭水化物構造には、フコースが減少しているか、又はフコースが欠如し、これは、ＡＤＣＣの機能を増強する可能性がある。具体的には、本明細書は、ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に関し、当該抗体は、野生型ＣＨＯ細胞が産生された同じ抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と比較して、減少されたフコースがある。つまり、それらは、天然のＣＨＯ細胞（例えば、天然のグリコシル化形態を産生するＣＨＯ細胞、天然のＦＵＴ８遺伝子を含むＣＨＯ細胞）によって産生される抗体と比較して、より少ない量のフコースがあることを特徴とする。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のＮ－結合型グリカンは、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％又は５％より少ない量のフコースを有する。例えば、当該抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のフコースの含有量は、１％－８０％、１％－６５％、５％－６５％又は２０％－４０％でありうる。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のＮ－結合型グリカンは、フコースを含まなく、即ち、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、完全にフコースを含まなく、又はフコースを有しない、又は脱フコシル化されたものである。フコースの含有量は、ＷＯ ２００８／０７７５４６に記載されたように、ＭＡＲＤＩ－ＴＯＦ質量分析によって測定された、Ａｓｎ２９７に連結された全ての糖構造（例えば、複合体、ハイブリッド、又はマンノース構造）の合計量に対する、Ａｓｎ２９７に連結された糖鎖内のフコースの平均含有量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域の２９７位のアスパラギン残基（ＥＵ Ｆｃ領域残基番号付けシステム）である。しかしながら、抗体配列のわずかな変化によって、Ａｓｎ２９７は、また２９７位の上流又は下流の約±３アミノ酸、即ち、２９４及び３００位の間に位置しても良い。これらのフコシル化変異体は、増強されたＡＤＣＣ機能を持つ可能性がある。例えば、ＵＳ Ｐａｔｅｎｔ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏｓ． ＵＳ ２００３／０１５７１０８（Ｐｒｅｓｔａ， Ｌ．），ＵＳ ２００４／００９３６２１（Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｏｇｙｏ Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照する。「脱フコース基化」又は「フコース欠損」の抗体変異体に関連する刊行物の実例として、ＵＳ ２００３／０１５７１０８；ＷＯ ２０００／６１７３９；ＷＯ ２００１／２９２４６；ＵＳ ２００３／０１１５６１４；ＵＳ ２００２／０１６４３２８；ＵＳ ２００４／００９３６２１； ＵＳ ２００４／０１３２１４０；ＵＳ ２００４／０１１０７０４；ＵＳ ２００４／０１１０２８２；ＵＳ ２００４／０１０９８６５；ＷＯ ２００３／０８５１１９； ＷＯ ２００３／０８４５７０；ＷＯ ２００５／０３５５８６；ＷＯ ２００５／０３５７７８；ＷＯ２００５／０５３７４２；ＷＯ２００２／０３１１４０；Ｏｋａｚａｋｉ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３３６：１２３９－１２４９（２００４）；Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ． Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｅｎｇ． ８７： ６１４（２００４）を含む。脱フコシル化された抗体を産生できる細胞株は、タンパク質フコシル化機能が欠如するＬｅｃ１３ ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ ｅｔ ａｌ． Ａｒｃｈ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． ２４９：５３３－５４５（１９８６）；ＵＳ Ｐａｔ Ａｐｐｌ Ｎｏ ＵＳ ２００３／０１５７１０８ Ａ１， Ｐｒｅｓｔａ， Ｌ；及びＷＯ ２００４／０５６３１２ Ａ１， Ａｄａｍｓ ｅｔ ａｌ．，特に実施例１１）、及び、例えば、α－１，６－フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８遺伝子がノックアウトされたＣＨＯ細胞のようなノックアウト細胞株 （Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ． Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｅｎｇ． ８７： ６１４（２００４）；Ｋａｎｄａ， Ｙ． ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０－６８８（２００６）；及びＷＯ２００３／０８５１０７）を含む。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体は、さらに、二分オリゴ糖に関し、例えば、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のＦｃ領域に連結された二分岐オリゴ糖は、ＧｌｃＮＡｃによって均等に分割される。この抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体は、減少されたフコシル化及び／又は増強されたＡＤＣＣ機能を持つ可能性がある。このような抗体の実例は、ＷＯ ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ－Ｍａｉｒｅｔ ｅｔ ａｌ．）；Ｕ．Ｓ． Ｐａｔ． Ｎｏ． ６，６０２，６８４（Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．）；ＵＳ ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．），及びＦｅｒｒａｒａ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ９３（５）： ８５１－８６１（２００６）に説明されている。本願は、また、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体に関し、当該抗体は、Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖に少なくとも１つのガラクトース残基を持つ。このような抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体変異体は、増強されたＣＤＣ機能を持つ可能性がある。このような変異体は、例えば、ＷＯ １９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌ ｅｔ ａｌ．）； ＷＯ １９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ， Ｓ．）；及びＷＯ １９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ， Ｓ．）に説明されている。
いくつかの実施例において、Ｆｃ領域を含む前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体は、ＦｃγＲＩＩＩに結合できる。いくつかの実施例において、Ｆｃ領域を含む前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）変異体は、ヒトエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）の存在下で、ＡＤＣＣ活性を示し、又は、ヒト野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する他の同じ抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）と比較して、ヒトエフェクター細胞の存在下で、増強されたＡＤＣＣ活性を有する。
システイン操作変異体（Ｃｙｓｔｅｉｎｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｖａｒｉａｎｔｓ）
いくつかの実施例において、システインが操作された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）の調製が必要とし、当該抗体において、１つ以上のアミノ酸残基がシステイン残基に置換される。いくつかの実施例において、置換された残基は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のアクセス可能な部位（ａｃｃｅｓｓｉｂｌｅ ｓｉｔｅ）に現れる。これらの残基をシステインで置換することにより、活性があるスルフヒドリル基は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のアクセス可能な部位に位置し、当該抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と他の部分とのカップリング、例えば、薬物部分又はリンカー－薬物部分のカップリングに用いられて、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα免疫カップリング体を調製する。システインが操作された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）は、例えば、Ｕ．Ｓ． Ｐａｔ． Ｎｏ． ７，５２１，５４１に記載されたように調製できる。
誘導体
いくつかの実施例において、本明細書に記載の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）は、本分野で知られており、容易に入手可能な他の非タンパク質部分を含むように、さらに修飾され得る。抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の一部を誘導体化するのに適している部分は、水溶性重合体を含むが、この限りではない。水溶性ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコール共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸（単独重合体又はランダム共重合体）、デキストラン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコール単独重合体、プロピレンオキシド／エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセリン）、ポリビニルアルコール及びそれらの混合物を含むが、この限りではない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中で安定しているため、製造において利点がある。重合体は任意の分子量であり得、分岐又は非分岐であり得る。抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に結合する重合体の数は変わってもよく、そして複数の重合体が結合されている場合、それらは同じ分子でも異なる分子でもよい。通常、誘導体化に用いられる重合体の量及び／又はタイプは、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の改善しようとする特性又は機能、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体誘導体が特定の条件下での治療に用いるかどうかなどを含む因子を考慮して決定するが、この限りではない。
医薬組成物
本明細書は、また、いずれか一種の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）、抗体をコードする核酸、抗体をコードする核酸を含むベクター、又は本明細書に記載された核酸又はベクターを含む宿主細胞の組成物（例えば、医薬組成物、ここでは、製剤ともいう。）を含有する。いくつかの実施例において、医薬組成物に関し、その医薬組成物は、本明細書に記載されたいずれか一種の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、及び薬学的に許容される担体を含む。
必要な純度の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を、任意の製薬上許容される担体、賦形剤、又は安定剤と混合することによって（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｏｓｏｌ， Ａ． Ｅｄ．（１９８０））、適切な抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体製剤を得て、凍結乾燥製剤又は液体製剤の形に調製する。許容される担体、賦形剤又は安定剤は、使用された量及び濃度で受験者に対して無毒であり、これらは、リン酸塩、クエン酸及び他の有機酸のような緩衝液；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム；ヘキサメチル塩化アンモニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール；ブタノール又はベンジルアルコール； ｐ－ヒドロキシ安息香酸メチル又はｐ－ヒドロキシ安息香酸プロピルのようなｐ－ヒドロキシ安息香酸アルキルエステル；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール及びｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；例えば、血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性重合体；例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジンのようなアミノ酸；単糖、二糖及びグルコース、マンノース又はデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトールのような糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属複合体（例えば亜鉛－タンパク質複合体）；及び／又はＴＷＥＥＮ（商標），ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような非イオン性界面活性剤）；例示的な製剤はＷＯ９８／５６４１８に記載されており、それらの内容は引用により本明細書に明示的に組み込まれる。皮下投与に適した凍結乾燥製剤は、ＷＯ９７／０４８０１に記載されている。このような凍結乾燥製剤は、適切な希釈剤を用いて高タンパク質濃度の調製物に再構成することができ、そして再構成された製剤は、皮下投与によって本明細書に記載された治療しようとする個体に投与することができる。カチオン性リポソーム又はリポソームは、本願における抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を細胞に送達することに用いられる。
本明細書に記載された製剤は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）に加えて、特定の病症の治療に必要な一種以上の他の活性物質を含み得、この活性物質は、好ましくは相補的活性があり、かつ副作用のない物質である。例えば、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体に加えて、抗腫瘍剤、成長阻害剤、細胞毒性剤又は化学療法剤をさらに含めることが必要な場合がある。これらの分子は、予期された目的に有効な量で組み合わせて存在する。他の物質の有効量は、製剤中の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の含有量、疾患又は病症或いは治療の種類、及び前記の他の要因に依存する。これらの薬物は通常、本明細書に記載される投与量と同じ投与量及び投与経路で使用され、又は現在適用されている投与量の約１％から９９％で使用される。
前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）はまた、凝集技術及び界面重合によって調製されたマイクロカプセルに封入されることができ、例えば、コロイド状薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）又は粗いエマルジョン中のヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン－マイクロカプセル及びポリ（メチルメタクリレート）マイクロカプセルに封入される。これで、徐放性製剤を調製できる。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）の徐放性製剤を調製できる。徐放性製剤の適切な実例は、抗体（又はそのフラグメント）を含有する固体疎水性重合体の半透性マトリックスを含み、これらのマトリックスは、成形品、例えば、フィルム又はマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの実例として、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチルメタクリレート）又はポリ（ビニルアルコール））、ポリ乳酸（Ｕ．Ｓ． Ｐａｔ． Ｎｏ． ３，７７３，９１９）、Ｌ－グルタミン酸及びＬ－グルタミン酸エチル共重合体、非分解性エチレン－酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴＴＭ（乳酸－グリコール酸共重合体と酢酸ロイプロリドからなる注射可能なミクロスフェア）のような分解性乳酸－グリコール酸共重合体及びポリ－Ｄ（－）－ ３－ヒドロキシ酪酸を含む。エチレン－酢酸ビニルや乳酸－グリコール酸のような重合体分子は１００日以上放出できるが、一部のヒドロゲルはより短い時間でタンパク質を放出できる。封入された抗体が体内に長期間留まると、３７℃の高湿環境に曝されるために変性又は凝集し、生物活性が失われたり、免疫原性が変化したりする可能性がある。対応するメカニズムによって、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を安定化するための合理的な対策を設計することができる。例えば、凝集メカニズムは、チオジスルフィド交換によって分子間Ｓ－Ｓ結合を形成する場合、スルフヒドリル残基の修飾、酸性溶液中での凍結乾燥、含水量の制御、適切な添加剤の使用、及び特定の重合体マトリックス組成物の開発によって安定化を達成できる。
いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）は、クエン酸塩、塩化ナトリウム、酢酸塩、コハク酸塩、グリシン、ポリソルベート８０（ツイン８０）又はそれらの任意の組み合わせの緩衝液において調製される。
イン・ビボ投与のための製剤は無菌でなければならない。これは、例えば、滅菌フィルター膜を適用した濾過によって容易に達成することができる。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を使用する治療方法
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）及び／又は本願に記載された組成物は、個体（例えば、ヒトのような哺乳類動物）に投与して、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病などの、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがんのようなＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現に関する疾患及び／又は病症並びに、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの不均衡による疾患及び／又は病症を治療できる。従って、本願は、いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を治療する方法を提供し、個体に対して有効量の、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を含む組成物（例えば、医薬組成物）、例えば、本明細書に記載されたいずれの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を投与することを含む。
いくつかの実施例において、前記の疾患又は病症は、例えば、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー反応、多発性硬化症、骨髄性白血病、又はアテローム性動脈硬化症から選択される。いくつかの実施例において、前記の個体はヒトである。
例えば、いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記のエピトープは、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３及びＩｌｅ２８４位のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ｖａｌ５１、Ｔｈｒ６３及びＩｌｅ１９６位のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ｌｅｕ１９１及びＩｌｅ１９６位のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記のエピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのＶａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３、Ｉｌｅ２８４、Ａｒｇ４９、Ｖａｌ５１、Ａｓｎ５７及びＳｅｒ６１位のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施例において、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、全長抗体である。いくつかの実施例において、前記の全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施例において、前記の疾患又は病症は、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー反応、多発性硬化症、骨髄性白血病、及びアテローム性動脈硬化症から選択される。いくつかの実施例において、前記の個体はヒトである。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、Ｘ１がＥ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣであり、Ｘ２がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ３がＩ又はＭである配列Ｘ１ＬＸ２Ｘ３Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦである配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡである配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し；前記のＶＬは、Ｘ１がＳ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣであり、Ｘ２がＱ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣであり、Ｘ３がＳ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱであり、Ｘ４がＳ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣであり、Ｘ５がＳ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧであり、Ｘ６がＹ、Ｌ又はＦである配列ＲＡＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＸ４Ｘ５Ｘ６ＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、Ｘ１がＧ又はＴであり、Ｘ２がＡ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ又はＦであり、Ｘ３がＳ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮである配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ、又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＨ変異体を含有し；前記のＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有するＶＬ変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含む。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、ここに記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、ここに記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、ここに記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、ここに記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、ここに記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記方法は、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、ここに記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）を有する個体を治療する方法に関し、前記の個体に対して、有効量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与することを含み、ここで、前記の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、前記のＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し；前記のＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３を含有し、或いは多くとも５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する。
いくつかの実施例において、本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１を含むＶＨ、及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有する。いくつかの実施例において、ここに記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４定常領域を含む全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ１は、ヒトＩｇＧ１である。いくつかの実施例において、前記のＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ４である。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、重鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。いくつかの実施例において、軽鎖定常領域は、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７を含むか、又は前記のアミノ酸配列からなる。
いくつかの実施例において、前記の個体は、哺乳類（ヒト、ヒト以外の霊長類、ラット、マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ等）である。いくつかの実施例において、前記の個体はヒトである。いくつかの実施例において、前記の個体は、臨床患者、臨床試験ボランティア、実験動物などである。いくつかの実施例において、前記の個体の年齢は、約６０歳未満（例えば、約５０、４０、３０、２５、２０、１５、又は１０歳未満を含む）である。いくつかの実施例において、前記の個体の年齢は、約６０歳超（例えば、約７０、８０、９０又は１００歳超を含む）である。いくつかの実施例において、前記の個体は、本明細書に記載された一種以上の疾患又は病状（例えば、慢性関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー反応、多重硬化、骨髄白血病又はアテローム性動脈硬化症）をかかると診断された、又は遺伝的にかかりされやすい個体である。いくつかの実施例において、前記の個体は、本明細書に記載された一種以上の疾患又は病症に関連する一種以上の危険因子を有する。
いくつかの実施例において、本願は、個体に対して、その表面にＧＭ－ＣＳＦＲαを発現する細胞に抗ＧＭ－ＣＳＦＲ抗体（例えば、本明細書に記載されたいずれの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、例えば単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を送達する方法に関し、この方法は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を個体に投与することを含む。
ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの異常発現を示す、いずれかの他の疾患又はがんに対する多くの診断方法、及びこれらの疾患の臨床的説明が本分野では既知である。このような方法は、例えば、免疫組織化学、ＰＣＲ、及び蛍光 ｉｎ ｓｉｔｕ ハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）を含むが、これらに限定されない。
いくつかの実施例において、本願に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）及び／又は組成物は、第二、第三又は第四薬剤（例えば、抗腫瘍剤、増殖阻害剤、細胞毒素剤又は化学療法剤）と併用することにより、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの異常発現に関連する疾患及び病状を治療する。
がん治療は、例えば、腫瘍退縮、腫瘍重量又はサイズの低減、進行時間、生存期間、無増悪生存期間、全応答率、応答持続期間、生存質量、タンパク質発現レベル及び／又は活性を利用して評価する。治療効果を決定する方法を利用してもよく、例えば、放射線画像法によって応答するかどうかを検出することを含む。
いくつかの実施例において、治療効果は、腫瘍増殖阻害百分率（％ＴＧＩ）によって評価し、式１００－（Ｔ／Ｃ×１００）を使用して計算し、ここで、Ｔは、治療済の腫瘍の相対平均腫瘍体積であり、Ｃは、未治療の腫瘍の相対平均腫瘍体積である。いくつかの実施例において、％ＴＧＩは、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％又は９５％超である。いくつかの実施例において、治療効果は、顆粒球の形態変化及び／又は顆粒球の生存数の増加によって評価する。いくつかの実施例において、治療効果は、単球分泌サイトカインの増加によって評価する。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の投与量及び方法
個体（例えば、ヒト）に投与される抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）組成物の剤量は、特定の組成物、投与方式、及び治療される疾患の種類によって異なる可能性がある。いくつかの実施例において、組成物（例えば、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物）の量は、がん治療において、客観的応答を効果的に生成することができる（例えば、部分応答又は完全応答）。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物の量は、個体において完全応答を産生するのに十分である。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物の量は、個体において部分応答を産生するのに十分である。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物の投与量（例えば、単独投与時）は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物を使用して治療する個体群において、約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６４％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％又は９０％のいずれより高い全応答率を産生するのに十分である。個体が本明細書に記載された治療方法に対する応答は、例えば、ＲＥＣＩＳＴのレベルによって決定できる。
いくつかの実施例において、組成物（例えば、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物）の量は、個体の無増悪生存期間を延長するのに十分である。いくつかの実施例において、組成物の量は、個体の全生存期間を延長するのに十分である。いくつかの実施例において、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物を使用して治療する個体群において、組成物の量（例えば、単独投与時）は、約５０％、６０％、７０％又は７７％より高い臨床利点を産生するのに十分である。
いくつかの実施例において、組成物（例えば、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物）の量は、単独使用又は第二、第三、及び／又は第四薬剤と併用する時、同じ受験者の治療前の対応する腫瘍サイズ、がん細胞の数又は腫瘍増殖速度と比較して、腫瘍サイズ、がん細胞の数又は腫瘍増殖速度を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％又は１００％まで十分に低減する。標準的な方法、例えば、精製酵素のイン・ビトロ検出、細胞による検出、動物モデル、又はヒト試験で治療効果を測定できる。
いくつかの実施例において、組成物中の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）の量は、毒性効果（即ち、臨床的に許容されるレベルよりも高い効果）を引き起こすレベルより低く、又は組成物が個体に投与される場合、潜在的な副作用が制御又は許容されるレベルにある。
いくつかの実施例において、同じ投与計画に従って、組成物の量は、組成物の最大耐量（ＭＴＤ）に近い。いくつかの実施例において、組成物の量は、ＭＴＤの８０％、９０％、９５％又は９８％より高い。
いくつかの実施例において、組成物における抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）の含有量は０．００１μｇ～１０００μｇの範囲内である。
上述されたいずれの実施例において、組成物における抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）の有効量は、体重によって計算すれば、０．１μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの範囲内である。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物は、例えば、静脈内注射、動脈内投与、腹腔注射、肺内投与、経口投与、吸入投与、血管内投与、筋肉注射、気管内投与、皮下注射、眼内投与、髄腔内投与、粘膜投与又は経皮投与を含む様々な経路を通じて、個体（例えば、ヒト）に投与することができる。いくつの実施例において、組成物の徐放性製剤を使用する。いくつの実施例において、組成物は静脈内投与される。いくつの実施例において、組成物は動脈内投与される。いくつの実施例において、組成物は腹腔内投与される。いくつの実施例において、組成物は肝内投与される。いくつの実施例において、組成物は肝動脈注入によって投与される。いくつの実施例において、組成物は、第１の病変部位から離れた部位に投与される。
製品及び試薬キット
本願のいくつかの実施例において、ある物質を含む製品に関し、前記の物質は、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症又はがん（例えば、関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）の治療に用いられ、又は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）が表面でＧＭ－ＣＳＦＲαを発現している細胞に送達することに用いられる。前記の製品は、容器と、当該容器に付随する容器上のラベル又はパッケージ説明書を含みうる。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、注射器などを含む。容器は、例えば、ガラスやプラスチックのようなさまざまな材料で制作できる。通常、当該容器内は、本明細書に記載された疾患又は病症を効果的に治療することができる組成物を含み、そして、無菌ポートを有する（例えば、当該容器は、静脈輸液バッグ又は皮下注射針によって突き刺すことができるキャップ付きのバイアルであり得る。）ものである。組成物には、少なくとも１つの活性物質として、本願に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む。ラベル又は外装説明書には、当該組成物を使用して治療できる特定の病症を示している。ラベル又は外装説明書には、さらに、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物を患者に投与するための説明書が含まれている。併用療法を含む製品及び試薬キットのいずれも、本明細書の範囲内にある。
外装説明書とは、通常治療用製品の市販パッケージ内の説明書であり、これらの治療用製品の使用に関する適応症、使用法、投与量、投与、禁忌症及び／又は警告情報を含む。いくつかの実施例において、外装説明書は、当該組成物が自己免疫疾患及び／又は炎症病症（例えば、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー反応、多発性硬化症、骨髄性白血病又はアテローム性動脈硬化症など）の治療に用いられることを示している。いくつかの実施例において、外装説明書には、当該組成物ががん（例えば、骨髄性白血病）の治療に用いられ得ることを示している。
さらに、前記の製品は、また、第２の容器を含み得て、その容器が、例えば注射用静菌性水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝液、グリーン溶液、又はグルコース溶液などの薬学的に許容される緩衝液を含む。また、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、注射針、注射器などの商業的及びユーザーの観点から必要な他の材料も含みうる。
また、さまざまな目的に用いる試薬キットに関し、例えば、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）の治療に用いられ、又は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）が表面でＧＭ－ＣＳＦＲαを発現している細胞に送達することに用いられるの任意の製品である。本願の試薬キットは、一つ以上の容器を含み、当該容器は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物（又は単回剤形及び／又は製品）を含み、いくつかの実施例において、さらに他の薬剤（例えば、本明細書に記載されている薬剤）及び／又は本明細書に記載されているいずれの方法と一致する取扱説明書を含む。当該試薬キットは、さらに、適切な治療個体を選択することに対する説明を含み得る。本願の試薬キット付きの取扱説明書は、通常、ラベル又は外装説明書（試薬キットに含まれている紙）に書かれた説明であり、機械読取可能な説明（例えば、磁気又は光学ストレージディスクにおける説明）も許容される。
例えば、いくつかの実施例において、試薬キットは、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を含む組成物を含有する。いくつかの実施例において、試薬キットは、ａ）本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のいずれか一種の組成物、及びｂ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の効果を増強することができる少なくとも一種の有効量の他の薬剤（例えば治療効果、検出効果）を含む。いくつかの実施例において、試薬キットは、ａ）本明細書に記載されたのいずれか一種の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物、及びｂ）個体に抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物を投与し、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）の治療に用いられる取扱説明書を含む。いくつかの実施例において、試薬キットは、ａ）本明細書に記載されたのいずれか一種の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物、ｂ）、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の効果（例えば治療効果、検出効果）を増強することができる少なくとも一種の有効量の他の薬剤、及びｃ）個体に抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物及び他の物質を投与し、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）の治療に用いられる取扱説明書を含む。抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体及び他の物質は、別々の容器又は同じ容器に存在することができる。例えば、当該試薬キットは、一種の特定の組成物又は二種以上の組成物を含み得、中では、一種の組成物が、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含み、他の一種の組成物が他の薬剤を含む。
いくつかの実施例において、試薬キットは、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）をコードする核酸（又は核酸セット）を含む。いくつかの実施例において、試薬キットは、ａ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体など）をコードする核酸（又は核酸のセット）、及びｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現する宿主細胞を含む。いくつかの実施例において、試薬キットは、ａ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体など）をコードする核酸（又は核酸のセット）、及びｂ）：ｉ）宿主細胞に抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を発現すること、ｉｉ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を調製すること、及びｉｉｉ）個体に抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与し、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）の治療に用いられること；に適している使用説明書を含む。いくつかの実施例において、試薬キットは、ａ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体など）をコードする核酸（又は核酸のセット）、ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現する宿主細胞、及びｃ）：ｉ）宿主細胞に抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を発現すること、ｉｉ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を調製すること、及びｉｉｉ）個体に抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を含む組成物を投与し、ＧＭ－ＣＳＦ及び／又はＧＭ－ＣＳＦＲαの高発現及び／又はＧＭ－ＣＳＦ ／ＧＭ－ＣＳＦＲαの機能異常を特徴とする自己免疫疾患及び／又は炎症病症又はがん（例えば関節リウマチ、喘息又は骨髄性白血病）の治療に用いられること；に適している使用説明書を含む。
本願に記載された試薬キットは、適切な形式でパッケージされる。適切なパッケージとして、バイアル、ボトル、ジャー、柔軟な包装（例えば、密封されたポリエステルフィルム又はビニール袋）などが含まれるが、これらに限定されない。試薬キットは、例えば、緩衝液及び説明情報のような他の成分を任意的に提供しうる。従って、本願は、またバイアル、ボトル、ジャー、柔軟なパッケージ（密封されたポリエステルフィルムやビニール袋）などを含む製品を提供する。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体組成物の取扱説明書に関して、通常、投与量、投与期間及び投与経路のような情報を含む。容器は、単位用量、バルク（例えば、複数用量包装）又はサブ単位用量であり得る。例えば、十分な用量の本明細書に記載された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（例えば、全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体）を含む試薬キットを提供し、個体に対して長期間（例えば、１週間、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月又はその以上）で効果的な治療をおこなう。試薬キットは、また複数単位用量の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、医薬組成物、及び取扱説明書を含み得て、十分な量でパッケージし、病院薬局や調剤薬局などの薬局での保管及び使用することに用いる。
当業者は、本願の範囲及び趣旨における若干の実施例を認識できる。次に、以下の非限定的な実施例を参照することにより、本出願をより詳細に説明する。以下の実施例は、本願をさらに説明するものであり、本願の範囲に対するいずれかの方式で制限するものとして解釈されるべきではない。
以下に記載された実施例において、以下の略語が適用される：ＧＭＦ（ｈｕｍａｎ ＧＭ－ＣＳＦ）；ＧＭＲα（ｈｕｍａｎ ＧＭ－ＣＳＦＲα）； ＧＭＲｂ（ｈｕｍａｎ ＧＭ－ＣＳＦＲβ）； Ｍａｂ（Ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂ）； ＧＭＲαｈ（ｈｕｍａｎ ＧＭ－ＣＳＦＲα－６Ｈｉｓ）； ＢＧＭＲα（Ｂｉｏｔｉｎ－Ａｖｉ－ＧＭ－ＣＳＦＲα）； ｍＧＭＲα（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ ｍｏｎｋｅｙ ＧＭ－ＣＳＦＲα）； ｍＧＭＲαｈ（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ ｍｏｎｋｅｙ ＧＭ－ＣＳＦＲα－６Ｈｉｓ）。
実施例１：組換えヒトＧＭ－ＣＳＦＲαの調製、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）のスクリーニング
組換えＧＭ－ＣＳＦＲα抗原の調製
制限酵素認識部位ＨｉｎｄＩＩＩ及びＸｈｏＩを使用することにより、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲα（ここで、単にＧＭＲαと称する）をコードする全長配列を、ベクターｐＳＣ－ＧＭ－ＣＳＦＲα（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｇｅｎｅｒａｙ ＢｉｏｔｅｃｈＣｏ．，Ｌｔｄ）から発現ベクターｐＴＴ５にサブクローニングした。ＧＭＲα上に、Ｈｉｓタグ又は当業者によって一般的に使用される他のタグを付けた。それぞれ、発現ベクターｐＴＴ５－ＧＭＲα－６ｈｉｓ（ＥＣＤ）、ｐＴＴ５－Ａｖｉ－１０Ｈｉｓ－ＧＭＲα（ＥＣＤ）、及びｐＴＴ５－ＧＭＲα（４００ａａ）を構築した。ここで、「ＥＣＤ」は細胞外ドメインを表し、「ｈｉｓ又はＨｉｓ」はＨｉｓタグを表し、「Ａｖｉ」は、アビジンタグを表した。
なお、組換えカニクイザルＧＭ－ＣＳＦＲα構築体もクローン化された。プライマーは、ＮＣＢＩデータベースのカニクイザルＧＭ－ＣＳＦＲαの配列（ＸＭ＿０２４７９１６６６．１）に基づいて設計され、カニクイザル末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）からＲＮＡを抽出し、逆転写してＧＭ－ＣＳＦＲα ｃＤＮＡを得た。ＥＣＤをコードする配列をＧＭ－ＣＳＦＲαｃＤＮＡから増幅し、真核生物の発現ベクターｐＴＴ５にクローニングして、ｐＴＴ５－ｍＧＭＲα－６ｈｉｓ（ＥＣＤ）ベクターの構築を完了した。
ＧＭＲα－６ｈｉｓ（ＥＣＤ）、Ａｖｉ－１０Ｈｉｓ－ＧＭＲα（ＥＣＤ）及びｍＧＭＲα－６ｈｉｓ（ＥＣＤ）を含む組換えヒトＧＭ－ＣＳＦＲαの発現と精製は、製造元のプロトコルに従って実行された。要するに、発現ベクターを２９３Ｆ細胞にトランスフェクトし、前記の細胞を３７℃、８％ＣＯ２、１２０ｒｐｍの条件で５日間培養した。細胞培養液を収集し、Ｈｉｓタグを発現するタンパク質をメーカーのプロトコルに従ってＮｉ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ精製を使用して精製した。具体的な操作は以下のとおりであった。ＱＩＡＧＥＮ社のＮｉ－ＮＴＡ Ｓｕｐｅｒｆｌｏｗカートリッジを固定化金属アフィニティークロマトグラフィー（ＩＭＡＣ）分析に使用した。まず、カートリッジは、緩衝液Ａ１（５０ｍＭ Ｎａ３ＰＯ４、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、ｐＨ ７．２）を使用して、流速１５０ｃｍ／ｈで平衡化された。培養上清液のｐＨを７．２に調整し、室温で１５０ｃｍ／ｈでカートリッジに流した。続いて、カートリッジの容積の６倍の緩衝液Ａ１を使用して、１５０ｃｍ／ｈの流速でカートリッジを再平衡化した。最後に、カートリッジの容積の１０倍のＰＢ溶液５０ｍＭ（０．１５Ｍ ＮａＣｌ及び０．２Ｍ イミダゾールを含み、ｐＨ ７．２）を使用してカートリッジを洗浄し、溶出液を収集した。
ビオチンで標識されたＧＭ－ＣＳＦＲα抗原の調製
ビオチンリガーゼＢ０１０１Ａ（ＧｅｎｅＣｏｐｏｅｉａ）を使用してＡｖｉ－１０Ｈｉｓ－ＧＭＲＡのビオチン化を製造元のプロトコルに従って行った。つまり、Ａｖｉ－１０Ｈｉｓ－ＧＭＲα抗原に、対応するＢｕｆｆｅｒＡ／Ｂ及びＢｉｒＡリガーゼを添加して、３０℃で２時間インキュベートした。ビオチン化ＧＭＲαはＢａｖｉｈ－ＧＭＲαと呼ばれた。ビオチン化の効率はＥＬＩＳＡ法により測定された。要するに、Ｂａｖｉｈ－ＧＭＲαの初期濃度を５００ｎｇ／ｍｌに設定し、１：２の比率で段階希釈した後、ＥＬＩＳＡプレートでコーティングされた。ＳＡ－ＨＲＰで検出し、ビオチン化標準品をコントロールとして使用した。Ｂａｖｉｈ－ＧＭＲαのビオチン化効率は７０％であった。Ｂａｖｉｈ－ＧＭＲαの生物学的活性は、ＴＦ－１細胞増殖実験により確認された。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）のスクリーニング
ｓｃＦｖ抗体酵母ディスプレイライブラリーの構築：２０００のヒト血液サンプルからＲＮＡを抽出し、逆転写によってｃＤＮＡを得て、ＶＨ及びＶＫ特異的プライマーを使用してＶＨ及びＶＫフラグメントを増幅した。ゲル抽出及び精製した後、ＶＨ及びＶＫを連結してｓｃＦｖを構築し、それを酵母ディスプレイプラスミドＰＹＤ１にクローニングして、当該プラスミドを酵母にエレクトロポレーションして、ｓｃＦｖ抗体酵母ディスプレイライブラリーを得た。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）のスクリーニング：酵母ディスプレイライブラリーからＧＭ－ＣＳＦＲαを認識するｓｃＦｖを単離された。要するに、磁気活性化細胞選別（ｍａｇｎｅｔｉｃ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｉｎｇ，ＭＡＣＳ）で、抗ＧＭ－ＣＳＦＲαｓｃＦＶ抗体を発現する細胞を濃縮した。酵母細胞１０００ ＯＤを２５００ｇで５分間遠心分離した。得られた細胞ペレットを、ＯＤ６００＝１の初期濃度にし、ＳＧＣＡＡ培地１Ｌで再懸濁させた。２０℃、２５０ｒｐｍの培養条件で４０～４８時間発現を誘導した。細胞培養液を遠心分離し、ＰＢＳＭ溶液で洗浄した後、細胞ペレットを１μＭ Ｂａｖｉｈ－ＧＭＲαを含む５～１０倍容積量のＰＢＳＭ溶液で再懸濁し、４℃で１時間インキュベートした。遠心分離とＰＢＳＭでの洗浄後、結合していない抗原をＰＢＳＭ溶液で洗い流した。磁気ビーズを加えた後、十分に混合して均一化し、４℃の懸濁装置で３０分間インキュベートした。２５００ｇで５分間遠心分離し、上清を捨て、ペレットを５～１０倍容積量のＰＢＳＭ溶液で再懸濁した。全ての細胞懸濁液がカラムを通過するまで細胞懸濁液を７ｍずつ取ってカラムに加えた。カラムに結合した細胞を収集し、さらに培養および遠心分離すると、プラスミドの単離に供された。
ファージディスプレイライブラリーの調製及びｓｃＦｖ抗体のスクリーニング：ｓｃＦｖ－Ｆ及びｓｃＦｖ－Ｒプライマーを使用して酵母ライブラリーから得られたプラスミドに対してＰＣＲ増幅した。得られたｓｃＦｖｓ抗体フラグメントをＳｆｉＩによってファージディスプレイベクターｐＤＡＮ５にクローニングし、ライゲーション時に、ベクターを使用してＴＧ１ファージディスプレイエレクトロポレーションコンピテントセルを形質導入し、ｓｃＦｖ抗体ファージディスプレイライブラリーが得られた。一連のスクリーニングステップを繰り返した後、ファージディスプレイライブラリーからＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合するｓｃＦｖ抗体を単離した。要するに、２ｘ１０１１ ＰＦＵファージｓｃＦｖライブラリーをビオチン化されたＧＭ－ＣＳＦＲαに加え、３７℃で２時間インキュベートした。ＧＭ－ＣＳＦＲαに結合したファージは、ストレプトアビジンでコーティングされた磁気ビーズによって捕捉され、結合していないファージは洗い流された。ＴＢＳＴ溶液で８～１５回洗浄した（スクリーニングラウンド数の増加に伴い、洗浄の回数も増加）後、Ｇｌｙｃｉｎｅ－ＨＣｌ 溶液（ｐＨ２．２）を使用して、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合するファージを溶出する。これらのファージを使用して、指数増殖期にあるＴＧ１細胞を感染して、アンピシリンを加えて１時間培養した。その後、ヘルパーファージ（Ｈｅｌｐｅｒ Ｐｈａｇｅ）を加えて、シェーカー上で２８℃、２００ｒｐｍで一晩インキュベートした。翌日、培養液を回収して、遠心分離し後、上清を得て、陽性ｓｃＦｖ抗体ライブラリーが得られるまでに、次のスクリーニングに供した。
リガンド結合実験を行い、ｓｃＦｖモノクローナル抗体をスクリーニングした。一番目の実験は、ｓｃＦｖ抗体がヒトＧＭ－ＣＳＦＲα及び／又はカニクイザルＧＭ－ＣＳＦＲαに結合できることを確認するために設計された。要するに、ＧＭＲαｈ（ヒトＧＭ－ＣＳＦＲα）又はｍＧＭＲαｈ（カニクイザルＧＭ－ＣＳＦＲα）抗原をＰＢＳ溶液に溶解し、０．２μｇ／ウェルで９６ウェルプレートをコーティングし４℃で一晩放置した。ｓｃＦｖ抗体を加える前に、ＴＢＳＴ溶液で９６ウェルプレートを洗浄し、５％ミルクを使用して３７℃で１～２時間ブロックしてから、ＴＢＳＴ溶液で再度洗浄した。まず、各ｓｃＦｖサンプルを４０μｇ／ｍＬに希釈し、１５０μＬを取って第１列のウェルに加えた。次に、４０μｇ／ｍＬのｓｃＦｖサンプルを１：３の比率で段階希釈した後、残りのウェルに加えた。３７℃で１時間インキュベートした後、ＴＢＳＴ溶液で６回洗浄した。１００μＬの一次及び二次抗体の混合物（マウス抗－ｆｌａｇ（１：２５００）及び抗マウスＦＣ－ＡＰ（１：２０００））を各ウェルに加えた。３７℃で１時間インキュベートし、ＴＢＳＴで３回洗浄した。次に、各ウェルにＰＮＰ５０μＬを加え、３７℃で１０～２０分間インキュベートした。３Ｍ ＮａＯＨを使用して反応を停止させた。ＥＬＩＳＡの結果（ＯＤ４１０）を分析し、ＰＲＩＳＭを通じて結合曲線を作成した。
２番目の実験は、ＥＬＩＳＡ競合実験を通じて、ｓｃＦｖ抗体がＧＭ－ＣＳＦとＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合を阻害できることを確認するために設計された。要するに、０．５μｇ／ウェルのＧＭ－ＣＳＦと５％ミルクで９６ウェルプレートをコーティングし、３７℃で１～２時間インキュベートし、ＴＢＳＴ溶液で洗浄した。まず、各ｓｃＦｖ抗体サンプルを４０μｇ／ｍＬに希釈し、第１列のウェルに１００μＬを加えた。次に、４０μｇ／ｍＬのｓｃＦｖ抗体サンプルを１：２の比率で段階希釈した後、残りのウェルに加えた。２．５μｇ／ｍＬのＢａｖｉｈ－ＧＭＲａを含むＰＢＳ溶液５０μＬを各ウェルに加えた。３７℃で１時間インキュベートした後、ウェルをＴＢＳＴ溶液で６回洗浄した。ＳＡ－ＨＲＰ（１：２００００）１００μＬを各ウェルに加え、３７℃で１時間インキュベートした。ウェルをＴＢＳＴ溶液で６回洗浄した後、各ウェルにＴＭＢ５０μＬを加え、３７℃で５～１０分間インキュベートした。２Ｍ Ｈ２ＳＯ４を加えて反応を停止した。ＥＬＩＳＡ結果（ＯＤ４５０）を分析し、ＰＲＩＳＭを通じて競合阻害曲線を作成した。
ＴＦ－１細胞増殖実験：ＴＦ－１細胞増殖実験において、ＧＭ－ＣＳＦで刺激されたＴＦ－１細胞増殖に対するｓｃＦｖ抗体の阻害効果をテストして、ｓｃＦｖ抗体の、ＧＭ－ＣＳＦとＧＭ－との結合を阻害する生物学的活性を評価した。ＴＦ－１細胞は、赤白血病の患者から樹立されたヒト前骨髄性細胞株であった。当該細胞株の生存と増殖は因子依存性であり、通常、その増殖を維持するにはヒトＧＭ－ＣＳＦが必要である。要するに、ＴＦ－１細胞をＲＰＭＩ１６４０、１０％ＦＢＳ、１０ｎｇ／ｍＬ ＧＭ－ＣＳＦ培地で培養し、週に２回継代した。ＧＭ－ＣＳＦを含まない培養液（ＲＰＭＩ１６４０、１０％ＦＢＳ）で細胞を３回洗浄し、同じ培養液に再懸濁させた。９６ウェルプレートの各ウェルに約１０，０００個の細胞を加え、一晩培養した。２日目に、ｓｃＦｖ抗体を１：１０の比率で段階希釈（１０μｇ／ｍＬ～０．０００１μｇ／ｍＬ）した後、９６ウェルプレートに加えた。３７℃で１時間インキュベートし、ＧＭ－ＣＳＦ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）を最終濃度が２００ｐｇ／ｍＬになるように加えた。翌日、Ｃｅｌｔｉｔｅｒ－ｇｌｏ検出試薬キット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して細胞の生存率を検出した。ＰＲＩＳＭでＩＣ５０を計算した。
実施例２：全長のヒトＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の調製及び特性評価
全長の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の調製
最も潜在力があるｓｃＦｖ抗体を、ヒトＩｇＧ１又はＩｇＧ４の重鎖定常領域及びヒトｋａｐｐａ軽鎖の定常領域を持つヒトＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体分子に構築した。原核生物発現ベクターからＶＬ和ＶＨを増幅して、それぞれ、真核生物発現ベクターｐＴＴ５－Ｌ（ｋａｐｐａ定常領域を含む）、及びｐＴＴ５－Ｈ１（ＩｇＧ１重鎖定常領域を含む）又はｐＴＴ５－Ｈ４（ＩｇＧ４重鎖定常領域を含む）に構築した。軽鎖及び重鎖を発現するプラスミドを抽出し、２９３Ｆ細胞にトランスフェクトした。細胞を３７℃、８％ＣＯ２、１２０ｒｐｍで５日間培養し、培養液をｐｒｏｔｅｉｎ Ａ アフィニティークロマトグラフィーカラムで精製した。要するに、まず、０．１５Ｍ ＮａＣｌ及び５０ｍＭ ＰＢＳを含む６倍カラム容積のＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）を使用して、１５０ｃｍ／時の流速でプロテインＡカラムを平衡化した。培養上清をｐＨ７．２に調整し、１５０ｃｍ／ｈの流速でカラムに通した。当該カラムを更に平衡化し、、最後にクエン酸ナトリウム緩衝液 ５０ｍＭ（ｐＨ３．５）で溶出し、溶出液を回収した。構築された全長抗体から、主要な親抗体としてＴ１１９が選択された。Ｔ１１９のｓｃＦｖを使用して、ＣＤＲ領域に変異を含むｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーを調製した。ＴＦ－１細胞増殖実験において、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに高い親和性と低い解離速度で結合できる抗体変異体の生物活性を評価した。Ｔ１１９のｓｃＦｖと比較して、生物学的活性が向上されたｓｃＦｖ抗体を選択して、全長抗体を構築した。ＴＦ－１細胞増殖実験を使用して、新しいラウンドの全長抗体スクリーニングを実施し、スクリーニングから得られたリード最適化抗体に対してさらに生化学的及び生物学的分析を実施した。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の親和性
ＥＬＩＳＡ実験によって、親抗体Ｔ１１９及びリード最適化抗体（ヒトＩｇＧ１の形で再構築）とヒトＧＭ－ＣＳＦＲαとの親和性を評価した。図１Ａ－１Ｃに示すように、Ｔ１１９と比較して、リード最適化抗体は全て改善された結合親和性を示した。次に、ＥＬＩＳＡ実験によって、カニクイザルＧＭ－ＣＳＦＲα（ｍＧＭＲαｈ）に対する親抗体Ｔ１１９及びリード最適化抗体Ｅ３５、Ｅ２００ａ、Ｅ８７及びＥ１０８（ヒトＩｇＧ４の形で再構築）の親和性を評価した。図２に示すように、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はカニクイザルＧＭ－ＣＳＦＲαと交差反応した。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の特異性
相同タンパク質との交差反応性：ＥＬＳＩＡ実験によって、Ｅ３５、Ｅ８７、及びＥ１０８（ヒトＩｇＧ４の形で再構築）とＧＭ－ＣＳＦＲαの相同タンパク質ＩＬ３ＲＡ、ＩＬ５ＲＡ及びＧ－ＣＳＦＲとの交差反応をテストした。図３に示すように、テストされた他の相同タンパク質と比較して、抗体はＧＭＲαｈに特異的に結合するから分かるため、調製した抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的である。
ＧＭ－ＣＳＦＲαを発現するＷＩＬ２Ｓ細胞への結合特異性：ＧＭ－ＣＳＦＲαを発現するＷＩＬ２Ｓ細胞への抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体Ｅ３５－ＩｇＧ４の結合の特異性をさらに評価した。説明書の操作手順に従って、ＧＬＹ－６５０（Ｄｙｌｉｇｈｔ Ａｍｉｎｅ－Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｄｙｅｓ，Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体Ｅ３５－ＩｇＧ４に対して蛍光標識を実行した。ＧＭ－ＣＳＦＲαを発現するＷＩＬ２Ｓ細胞は、全長ＧＭ－ＣＳＦＲαを含む発現ベクターを用いたエレクトロポレーションによって生成され、未処理のＷＩＬ２Ｓをコントロールとして使用した。エレクトロポレーションの４８時間後、トランスフェクトされた細胞とトランスフェクトされていない細胞を１５ ｍＬの遠心分離管に回収し、１，０００ ｒｐｍで５分間遠心分離し、ＤＰＢＳ溶液に再懸濁した。次に、１ｘ１０６個の細胞をとって、各Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆチューブに加え、１０００ｇで５分間遠心分離した。１５μｇ／ｍＬ Ｅ３５－ＩｇＧ４を含む１％ＢＳＡ溶液１００μＬを使用してＧＭ－ＣＳＦＲα発現ＷＩＬ２Ｓ細胞（ＧＭＲα－Ｅ３５）を処理し、１％ＢＳＡ溶液（ＣＫ）１００μＬ、５μｇ／ｍＬＥ３５－ＩｇＧ４を含む１％ＢＳＡ溶液１００μＬをそれぞれ使用して対照ＷＩＬ２Ｓ細胞を処理した。３つのグループの細胞を３７℃で４０分間インキュベートし、１ｍＬのＰＢＳ溶液で細胞を２回洗浄した後、ＰＢＳ溶液０．２ｍＬで再懸濁させ、そして、ＦＡＣＳ分析を実行した。図４に示すように、Ｅ３５－ＩｇＧ４は、対照ＷＩＬ２Ｓ細胞に結合しないが、ＧＭ－ＣＳＦＲαを発現するＷＩＬ２Ｓ細胞に強く結合した。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の結合親和性と解離定数（Ｋｄ）の特性評価
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００（ＧＥ）を使用して、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体Ｅ３５及びＥ８７ｂ（ヒトＩｇＧ４の形で再構築）の結合親和性をテストした。センサーチップＣＭ５に、Ｅ３５とＥ８７ｂを固定した。異なる濃度の抗体とＧＭＲαｈの親和性をテストした。濃度の範囲は、１０、５、２．５、１．２５、０．６２５、０．３１２５、０．１５６２５、０．０７８、０．０３９、０．０１９５及び０ｎＭをふくむが、ここで、０．６２５及び０ｎＭでは、それぞれもう一回繰り返した。ＳＰＲテクノロジーを使用して、抗体の結合及び解離速度を測定して結合親和性を決定した。表５に、Ｅ３５及びＥ８７ｂ抗体のｋｏｎ、ｋｏｆｆ、以及Ｋｄ値を示した。
Figure 2023011887000016
 ＧＭ－ＣＳＦＲαへの抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体とＧＭ－ＣＳＦとの競合的結合
競合ＥＬＩＳＡ実験（実施例１に記載されたように）によって、ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がＧＭ－ＣＳＦＲαリガンド結合部位を認識し、ＧＭ－ＣＳＦと競合的にＧＭ－ＣＳＦＲαに結合する能力を評価した。図５Ａ－５Ｄに示すように、親抗体Ｔ１１９とリード最適化抗体（ヒトＩｇＧ４の形で再構築）は、ＧＭ－ＣＳＦとヒトＧＭ－ＣＳＦＲαとの結合を阻害でき、抗体とＧＭ－ＣＳＦが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに競合的に結合することを明らかにした。
抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の安定性実験
熱安定性分析：ＵＮｃｌｅプラットフォームを使用して、Ｔ１１９－ＩｇＧ１、Ｅ３５－ＩｇＧ１、Ｅ３５ｂ－ＩｇＧ１及びＭａｂ－ＩｇＧ１の熱安定性を分析した。各抗体の融解温度（Ｔｍ）及び凝集温度（Ｔａｇｇ）をそれぞれ測定した。Ｔｍ値は、加熱プロセス中に抗体がアンフォールディング温度を表し、Ｔａｇｇ値は、加熱プロセス中に抗体が凝集する温度を表す。表６及び図６Ａ－６Ｂに示すように、対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ１と比較して、Ｔ１１９－ＩｇＧ１、Ｅ３５－ＩｇＧ１及びＥ３５ｂ－ＩｇＧ１は、比較的に高いＴｍ値及びＴａｇｇ値があり、同時に、Ｅ３５－ＩｇＧ１及びＥ３５ｂ－ＩｇＧ１は、リード抗体Ｔ１１９－ＩｇＧ１より、さらに高いＴｍ値及びＴａｇｇ値がある。これらの結果から分かるように、親の抗体Ｔ１１９－ＩｇＧ１及び対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ１と比較して、Ｅ３５－ＩｇＧ１及びＥ３５ｂ－ＩｇＧ１は、より優れた熱安定性を示す。
Figure 2023011887000017
 ＴＦ－１細胞増殖実験
ＴＦ－１細胞増殖実験（例えば、実施例１に記載された方法）によって、親抗体Ｔ１１９及びリード最適化抗体（ヒトＩｇＧ４の形で再構築）のＴＦ－１細胞増殖を阻害する能力をテストする。結果は、図７に示すように、親抗体Ｔ１１９と比較して、リード最適化抗体は、相当又はより優れた細胞増殖を阻害する能力を有する。
顆粒球変形試験
ヒト顆粒球変形試験によって、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をさらに評価する。要するに、１０ｍＬのヒト末梢血を採取し、Ｆｉｃｏｌｌ密度勾配遠心分離によってＰＢＭＣｓを除去した。ＰＢＭＣｓとＦｉｃｏｌｌバッファーを除去した後、細胞溶解液で赤血球を溶解した。ＰＢＳ溶液と細胞培養液で残りの細胞を洗浄し、９６ウェルプレートの各ウェルに１００，０００個の細胞を加え、３７℃で３０分間インキュベートした。そして、ＧＭ－ＣＳＦ １００ｐｇ／ｍＬを使用して細胞を処理し、１：１０勾配で段階希釈されたＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（１０μｇ／ｍＬ～０．０００１μｇ／ｍＬ）を加え、３７℃で３時間インキュベートし、細胞に対してＦＡＣＳ測定し、Ｆｏｒｗａｒｄ Ｓｃａｔｔｅｒ ＧＥＯ平均値に基づいて、顆粒球の変形を評価した。図８に示すように、Ｅ３５、Ｅ１０８及びＥ８７ｂ（ヒトＩｇＧ４の形で再構築）は、全て顆粒球の変形を防ぐことができ、抗体のＩＣ５０値は以下の表７に示した。
Figure 2023011887000018
カニクイザルの顆粒球変形試験によって、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体Ｅ３５（ヒトＩｇＧ４の形で再構築）をさらに評価する。カニクイザルの全血から顆粒球を精製して得て、１００ｐｇ／ｍＬ ＧＭ－ＣＳＦで細胞を処理し、１：１０勾配で段階希釈されたＥ３５－ＩｇＧ４抗体（１０μｇ／ｍＬ～０．０００１μｇ／ｍＬ）を加えた。細胞に対してＦＡＣＳ分析を行い、Ｆｏｒｗａｒｄ Ｓｃａｔｔｅｒ ＧＥＯ平均値に基づいて、顆粒球の変形を評価する。結果からわかるように、Ｅ３５－ＩｇＧ４抗体のＩＣ５０値は、０．００２５２７μｇ／ｍＬであり、カニクイザル顆粒球の変形を防ぐことができた（図９）。
ヒト顆粒球生存実験
ＧＭ－ＣＳＦの存在下では、顆粒球はより長く生存することができた。ヒト顆粒球生存実験では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がこの効果を阻害する能力を評価する。要するに、ヒト末梢血から顆粒球を単離して得て、１００ｐｇ／ｍＬのＧＭ－ＣＳＦで細胞を処理した。１：１０勾配で抗体を段階希釈（１０μｇ／ｍＬ～０．０００１μｇ／ｍＬ）して、細胞に加えた。４８時間のインキュベーションした後、Ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ－ｇｌｏ検出キット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して細胞生存率を分析した。図１０に示すように、Ｅ３５，Ｅ１０８及びＥ８７ｂは、顆粒球の生存を効果的に阻害した。表８は、顆粒球の生存を阻害するさまざまな抗体のＩＣ５０値を示した。
Figure 2023011887000019
 サイトカイン放出に対する阻害効果
ＣＤ１１ｂ発現に対する阻害効果：ヒト末梢血細胞におけるＣＤ１１ｂ発現に対する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体Ｅ３５－ＩｇＧ４、Ｅ８７ｂ－ＩｇＧ４及び対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ４の阻害効果を評価した。要するに、９６ウェルプレートの各ウェルに５０μＬのヒト末梢血を加え、そして、１：１０の比率勾配で段階希釈された抗体（１０μｇ／ｍＬ～０．０００１μｇ／ｍＬ）を加えて一緒にインキュベートした。３７℃で１時間インキュベートし、ＧＭ－ＣＳＦ １０ｎｇ／ｍＬを加えて１時間インキュベートし続け、そして、ＣＤ１１ｂを標識するように、ＦＩＴＣコンジュゲート抗ＣＤ１１ｂ抗体（ＢＤ５３３１０）を使用して４℃で３０分間インキュベートした。赤血球溶解バッファー（ＢＤ３４９２０２）１ｍＬで赤血球を溶解し、ＰＢＳ溶液で２回洗浄し、ＦＡＣＳでＣＤ１１ｂの発現を分析した。図１１及び表９に示すように、対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ４と比較して、Ｅ３５－ＩｇＧ４及びＥ８７ｂ－ＩｇＧ４は、ＣＤ１１ｂの発現に対してより強い阻害能力を持った。抗体のＩＣ５０値を表９に示した。
Figure 2023011887000020
サイトカインの産生に対する阻害効果：抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がサイトカインの産生に対する阻害効果を評価するために、ヒト末梢血１０ｍＬを採取し、Ｆｉｃｏｌｌ密度勾配遠心分離法で単核細胞を単離し、ＰＢＳ溶液で２回洗浄し、細胞培養培地で再懸濁させた。９６ウェルプレートの各ウェルに１，０００，０００細胞（１００μＬ）を加え、３７℃で１：１０勾配で段階希釈したＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（１００μｇ／ｍＬ～０．００１μｇ／ｍＬ）５０μＬを加えて、１時間インキュベートした。次に、それぞれの最終濃度が１００ｎｇ／ｍＬ及び５０ｎｇ／ｍＬになるように、ＬＰＳ及びＧＭ－ＣＳＦを添加した。３７℃で４８時間インキュベートし、上清を回収し、Ｈｕｍａｎ Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ／Ｍｉｃｒｏｇｌｉａ Ｐａｎｅｌ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，７４０５０３）を使用してＴＮＦα及びＩＬ－１βのレベルを分析した。図１２Ａ及び表１０に示すように、対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ４と比較して、Ｅ３５－ＩｇＧ４及びＥ８７ｂ－ＩｇＧ４はより強いＴＮＦα阻害活性を示した。図１３及び表１１に示すように、対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ４と比較して、Ｅ３５－ＩｇＧ４及びＥ８７ｂ－ＩｇＧ４はより強いＩＬ－１β分泌阻害活性を示した。
Figure 2023011887000021
Figure 2023011887000022
同時に、ＥＬＳＩＡ法を使用して、上清中のＴＮＦαのレベルをさらに分析した。ＥＬＩＳＡの結果から、次のことを確認した：対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ４と比較して、Ｅ３５－ＩｇＧ４及びＥ８７ｂ－ＩｇＧ４は、ＴＮＦα分泌に対してより強い阻害活性を持つ（図１２Ｂ及び表１２）。
Figure 2023011887000023
 抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の薬物動態学
ラット体内のＰＫ値：１０匹の健康な成体ラット（体重は約０．２ｋｇ／匹）を体重に応じて２つのグループに分け、各グループに５匹ずつ入れた。第１グループのラットに、２０ｍｇ／ｋｇのＭａｂ－ＩｇＧ４又はＥ３５－ＩｇＧ４を静脈内注射し、第２グループのラットに、２ｍｇ／ｋｇのＭａｂ－ＩｇＧ４又はＥ３５－ＩｇＧ４を静脈内注射した。まず、注射から１時間後に採血し、そして注射から２日、３日、５日、９日、及び１５日後に採血した。血液を遠心分離した後、血漿を採取してＥＬＩＳＡ法により抗体濃度を分析した。要するに、合成されたＧＭ－ＣＳＦＲαを９６ウェルプレートでコーティングして、２日目にＰＢＳＴ溶液で洗浄した後、２００μＬのＰＢＳーミルクで１時間ブロックして、ＰＢＳＴで洗浄し、血漿を加えて３７℃に１時間インキュベートした。プレートを０．１％ＴＢＳＴ溶液で６回洗浄した後、Ｇｏａｔ－ａｎｔｉ－ｈｕｍａｎ Ｆｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ＡＰ １００μＬ（ＰＢＳで１：３０００の希釈）を加え、１時間インキュベートした。０．１％ＴＢＳＴ溶液で６回洗浄し、各ウェルにｐＮＰＰ溶液５０μＬを加え、３７℃で１０～２０分間発色させた。マイクロプレートリーダー４１０ ｎｍにおいて結果を読み取り、その結果として、Ｅ３５－ＩｇＧ４の半減期がＭａｂ－ＩｇＧ４の半減期より長いことを示した（図１４Ａ－１４Ｂ及び表１３）。
Figure 2023011887000024
カニクイザル体内のＰＫ及びＰＤに関する研究：４匹の健康な成体カニクイザル（体重約３ｋｇ／匹）に、Ｅ３５－ＩｇＧ４又は対照抗体Ｍａｂ－ＩｇＧ４を１０ｍｇ／ｋｇの濃度で注射した。ここで、＃１と＃２の動物にＭａｂ－ＩｇＧ４を注射し、＃３と＃４の動物にＥ３５－ＩｇＧ４を注射した。それぞれ、注射の１日前（Ｄ－１）、注射後の１時間（Ｄ１）、そして順に２日（Ｄ２）、４日（Ｄ４）、８日（Ｄ８）、１５日（Ｄ１５）、２２日（Ｄ２２））及び３６日（Ｄ３６）に、各動物から６ｍＬの血液サンプルを採取した。抗体の薬物動態学を評価するために、各サンプリングポイントから１ｍＬの血液サンプルを採取し、５，０００ｇで１５分間遠心分離して血漿を得、５０μＬに等分し、－８０℃で保存した。ラットの薬物動態学研究に用いる上述されたＥＬＩＳＡ法により、血漿中のＥ３５－ＩｇＧ４及びＭａｂ－ＩｇＧ４の濃度を分析した。結果を図１５と表１４に示し、Ｅ３５－ＩｇＧ４の半減期はＭａｂ－ＩｇＧ４の半減期より長かった。抗体の薬力学を評価するために、各サンプリングポイントで残った５ｍＬの血液サンプルから顆粒球を分離し、顆粒球変形実験を行った。要するに、９６ウェルプレートの各ウェルに顆粒球（２ｘ１０６／ｍＬ）１００μＬを加え、３７℃で３０分間インキュベートした後、１００ ｐｇ／ｍＬのＧＭ－ＣＳＦとさらに３時間インキュベートした。そして、前記の顆粒球変形実験のＦＡＣＳ法によって、顆粒球変形の程度を分析した。結果から分かるように、Ｅ３５－ＩｇＧ４とＭａｂ－ＩｇＧ４の両方が顆粒球の変形を防ぐことができ、驚くべきことにＭａｂ－ＩｇＧ４の阻害効果は注射後わずか１４日持続したが、Ｅ３５－ＩｇＧ４の阻害効果は２１日間持続した（図１６Ａ－１６Ｄ）。
Figure 2023011887000025
 ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された炎症細胞の増殖に対する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の阻害効果
ＧＭ－ＣＳＦによって誘発された炎症細胞の増殖に対する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の阻害効果を測定するために、ＧＭ－ＣＳＦを、予めＥ３５－ＩｇＧ４又は対照としてのＮａＣｌ溶液が注射されたカニクイザルに投与した。ＧＭ－ＣＳＦ投与後、白血球、好中球、リンパ球、好塩基球、好酸球、単球、赤血球のレベルを評価した。要するに、４匹のカニクイザルを２つのグループに分けて、各グループは２匹ずつ入れた。１グループのカニクイザルは、１日目と３日目にＥ３５－ＩｇＧ４を腹腔内注射し、もう１グループは、対照としてのＮａＣｌ溶液を注射した。３日目、４日目、５日目では、二グループのカニクイザルに剤量が５．０μｇ／ｋｇのＧＭ－ＣＳＦ（１日２回、各注射間隔は約８時間である）を注射した。ＧＭ－ＣＳＦの初回注射の前、及びＧＭ－ＣＳＦの初回注射後の０．５ｈ、４．０ｈ、２８．０ｈ、５２．０ｈ、７６．０ｈ、２４．０ｈ及び１７６．０ｈに間後に血液サンプルを採集し、異なる時点で異なるタイプの細胞のレベルを分析した。
結果から分かるように、対照群と比較して、Ｅ３５－ＩｇＧ４は、ＧＭ－ＣＳＦによって誘導される白血球、好中球、リンパ球、好塩基球、好酸球及び単球の増殖を完全に阻害した。逆に、２つのグループにおいて、赤血球のレベルはＧＭ－ＣＳＦ治療の前後で一定に保持した（図１７Ａ－１７Ｇ）。
実施例３：生物活性を保持するＥ３５変異体の同定
ｈｉｓで標識されたＥ３５－ｓｃＦｖ配列を原核生物の発現ベクターにクローニングした。ＣＤＲ領域で選択される残基は、飽和突然変異誘発およびスクリーニングに供された。変異体を原核生物の発現ベクターに挿入し、ＢＬ２１細胞のトランスフェクションに用いた。プレーティング後、６０個のクローンをランダムに選択してシーケンシングを行い、各位置で１４～１９個の異なる変異が得られた。これらの変異を含むｓｃＦｖを生成及び精製し、ＴＦ－１細胞増殖実験を使用してその生物活性を評価した。ＴＦ－１細胞の増殖を弱める変異体とそれに対応するＩＣ５０値を以下の表１５に示した（番号付け方法はＥＵ ｋａｂａｔ番号付けシステムである）。
Figure 2023011887000026
Figure 2023011887000027
前記の結果から、ＴＦ－１細胞増殖実験の評価により、Ｅ３５ ｓｃＦｖに由来する以下のアミノ酸配列を有するｓｃＦｖ抗体は、依然として生物学的活性を保持し：
（ｉ）ＶＨの３１位が、Ｅ、Ｈ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣであり、及び／又は、
（ｉｉ）ＶＬの２６位が、Ｓ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣであり、及び／又は、
（ｉｉｉ）ＶＬの２７位が、Ｑ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣであり、及び／又は、
（ｉｖ）ＶＬの２８位が、Ｓ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱであり、及び／又は、
（ｖ）ＶＬの３０位が、Ｓ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣであり、及び／又は、
（ｖｉ）ＶＬの３１位が、Ｓ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧであり、及び／又は、
（ｖｉｉ）ＶＬの３２位が、Ｙ、Ｌ又はＦであり、及び／又は、
（ｖｉｉｉ）ＶＬの５０位が、Ｇ又はＴであり、及び／又は、
（ｉｘ）ＶＬの５１位が、Ａ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｆ、Ｎ又はＶであり、及び／又は、
（ｘ）ＶＬの５２位が、Ｓ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮであり、及び／又は、
（ｘｉ）ＶＬの９２位が、Ｄ、Ａ、Ｑ又はＷであり、及び／又は、
（ｘｉｉ）ＶＬの９３位が、Ｎ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、及び／又は、
（ｘｉｉｉ）ＶＨの２８位がＴ、Ｈ、Ｖ、Ｅ、Ｐ、Ｌ、Ｍ、Ｓ、Ｗ、Ｃ、Ａ、Ｇ、Ｎ又はＫのアミノ酸残基から選択され、及び／又は、
（ｘｉｖ）ＶＨの３０位がＴ、Ｐ、Ｄ、Ｅ、Ｙ、Ｗ、Ｖ、Ｍ、Ｎ、Ｌ、Ｑ、Ｇ、Ｓ、Ａ、Ｋ又はＲのアミノ酸残基から選択される。
同時に、組合せ突然変異を含むＥ３５変異体も調製された。組合せ突然変異を含む全長ＩｇＧ４形式のＥ３５変異体が、ＴＦ－１細胞の増殖を弱める実験におけるＩＣ５０値を分析し、その数値は、以下の表１６に示す。結果から分かるように、組合せ突然変異を含むＥ３５変異体は、ＴＦ－１細胞の増殖を弱めることに対してより強い効果を示した。
Figure 2023011887000028
例示的なＥ３５変異体の軽鎖、重鎖可変領域は、以下の表１７に示す。
Figure 2023011887000029
Figure 2023011887000030
Figure 2023011887000031
 実施例４：抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のエピトープ解析
ＧＭ－ＣＳＦ及びＧＭ－ＣＳＦＲαの結晶構造から、両者の結合部位の近くのアミノ酸残基を同定し、ここで、ＧＭ－ＣＳＦＲαは、その結晶構造（ＰＤＢ ｉｄ： ４ＲＳ１）によって番号を付けて、図２０に示した。Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｔｕｄｉｏソフトウェアを使用して、Ｅ３５の結合部位を予測し、結合部位内および結合部位に近接するアミノ酸残基を選択して、アラニンスキャンを行った。選択される変異を有するＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質が発現された。ＥＬＩＳＡ実験によって、Ｅ３５－ＩｇＧ４、Ｅ８７ｂ－ＩｇＧ４及びＴ１１９－ＩｇＧ４と各ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質変異体との結合親和性を分析した。図１８Ａ－１８Ｃは、抗体とＧＭ－ＣＳＦＲα変異体とのＥＬＩＳＡ結合曲線を示した。本明細書に記載されたように、ＧＭＲαｈは、Ｈｉｓタグを有する野生型ヒトＧＭ－ＣＳＦＲα（ＧＭ－ＣＳＦＲα－６Ｈｉｓ）を示す。野生型ＧＭ－ＣＳＦＲαのアミノ酸配列上の各位置の変異は、前記のようなアラニンスキャン技術で得られた。図１８Ａ－１８Ｃに示すように、位置Ｃ６０での変異は、Ｅ３５、Ｅ８７ｂ及びＴ１１９との結合親和性に明らかな影響を与え、そして、ＧＭ－ＣＳＦＲαタンパク質の構造に影響を与える変異と認定された。これらの結果に基づいて、抗体Ｅ３５、Ｅ８７ｂ及びＴ１１９の例示的なエピトープは、表１８に示すアミノ酸残基を含むもの、と同定された。ＧＭ－ＣＳＦＲα（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２）におけるアミノ酸残基の番号は、図２０に示す。
Figure 2023011887000032

Claims (27)

  1. ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのエピトープに特異的に結合し、前記エピトープが、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαのアミノ酸残基Ｖａｌ５０、Ｇｌｕ５９、Ｌｙｓ１９４、Ｌｙｓ１９５、Ａｒｇ２８３及びＩｌｅ２８４を含む、単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  2. 前記エピトープは、さらに、アミノ酸残基：
    （ｉ）Ｖａｌ５１、Ｔｈｒ６３及びＩｌｅ１９６；又は、
    （ｉｉ）Ｌｅｕ１９１及びＩｌｅ１９６；又は、
    （ｉｉｉ）Ａｒｇ４９、Ｖａｌ５１、Ａｓｎ５７及びＳｅｒ６１；を含む、請求項１に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  3. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体のＴｍ値は、少なくとも約６９℃である、請求項１または２に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  4. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに結合するＫｄ値は０．１ｐＭ～１ｎＭである、請求項１～３のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  5. 抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
    前記重鎖可変領域は、
    配列Ｘ１ＬＸ２Ｘ３Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６）を含む一つの重鎖相補性決定領域ＨＣ－ＣＤＲ１と、
    配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、
    配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、
    前記配列Ｘ１ＬＸ２Ｘ３Ｈにおいて、Ｘ１がＥ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣであり、Ｘ２がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ３がＩ又はＭであり、
    前記配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧにおいて、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦであり、
    前記配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹにおいて、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡであり；
    前記軽鎖可変領域は、
    配列ＲＡＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＸ４Ｘ５Ｘ６ＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３）を含む一つの軽鎖相補性決定領域ＬＣ－ＣＤＲ１と、
    配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、
    配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、
    前記配列ＲＡＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＸ４Ｘ５Ｘ６ＬＡにおいて、Ｘ１がＳ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣであり、Ｘ２がＱ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣであり、Ｘ３がＳ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱであり、Ｘ４がＳ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣであり、Ｘ５がＳ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧであり、Ｘ６がＹ、Ｌ又はＦであり、
    前記配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３ＳＲＡＴにおいて、Ｘ１がＧ又はＴであり、Ｘ２がＡ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ又はＦであり、Ｘ３がＳ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮであり、
    前記配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔにおいて、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ、又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである、
    単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  6. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、
    配列ＥＬＸ１Ｘ２Ｈ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、
    配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、
    配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、
    前記配列ＥＬＸ１Ｘ２Ｈにおいて、Ｘ１がＳ、Ｃ又はＰであり、Ｘ２がＩ又はＭであリ、
    前記配列ＧＦＤＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＥＸ５Ｘ６ＹＡＱＫＸ７ＱＧにおいて、Ｘ１がＰ、Ｇ、Ｔ、Ｓ又はＶであり、Ｘ２がＥ、Ｄ、Ｇ又はＡであり、Ｘ３がＤ、Ｇ、Ｉ、Ｗ、Ｓ又はＶであり、Ｘ４がＧ、Ｅ、Ｄ又はＨであり、Ｘ５がＴ又はＡであり、Ｘ６がＮ又はＩであり、Ｘ７がＳ又はＦであり、
    前記配列ＧＲＹＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＹＧＦＤＹにおいて、Ｘ１がＣ、Ｔ、Ｓ、Ｉ、Ａ又はＶであり、Ｘ２がＳ、Ｇ、Ｅ、Ｆ、Ｗ、Ｈ、Ｉ、Ｖ、Ｎ、Ｙ、Ｔ又はＲであり、Ｘ３がＴ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｐ、Ｉ、Ｓ、Ｙ、Ｋ、Ａ、Ｄ、Ｖ、Ｎ又はＧであり、Ｘ４がＤ、Ａ、Ｍ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、Ｔ、Ｇ又はＷであり、Ｘ５がＴ、Ｓ、Ｆ、Ｑ、Ａ、Ｎ、Ｌ、Ｅ、Ｉ、Ｇ又はＭであり、Ｘ６がＣ、Ｔ、Ｎ、Ｓ又はＡであり；
    前記ＶＬは、
    配列ＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、
    配列ＧＡＳＳＲＡＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、
    配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３と、を含有し、
    前記配列ＱＱＹＸ１Ｘ２Ｘ３ＰＸ４Ｔにおいて、Ｘ１がＮ、Ｄ、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｔ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｗ又はＧであり、Ｘ２がＮ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、Ｘ３がＷ、Ｓ、Ｐ、Ｖ、Ｇ又はＲであり、Ｘ４がＰ、Ｙ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｎ、Ｄ、Ｖ又はＧである、
    請求項５に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  7. ＶＨ及びＶＬを含む単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であって、
    前記ＶＨは、
    ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列、又は多くとも約３つのアミノ酸置換を含むＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１～４のいずれか１つのアミノ酸配列の変異体、を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、
    ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列、又は多くとも約３つのアミノ酸置換を含むＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５～１６のいずれか１つのアミノ酸配列の変異体、を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、
    ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列、又は多くとも約３つのアミノ酸置換を含むＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列の変異体、を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、
    前記ＶＬは、
    アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１、又は多くとも約３つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１の変異体、を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、
    アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５２、又は多くとも約３つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５２の変異体、を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、
    ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列、又は多くとも約３つのアミノ酸置換を含むＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：５３～７５のいずれか１つのアミノ酸配列の変異体、を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有する、
    単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  8. ＶＨ及びＶＬを含む単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であって、
    前記ＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１のいずれか１つのアミノ酸配列を有するＶＨにおけるＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含有し、
    前記ＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４のいずれか１つのアミノ酸配列を有するＶＬにおけるＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含有する、
    単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  9. 以下の（ｉ）～（ｉｘ）のいずれかを含む単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であって、
    （ｉ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又は、ＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｉｉ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｉｉｉ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｉｖ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｖ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｖｉ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｖｉｉ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｖｉｉｉ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに合計多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＬＣ－ＣＤＲｓに合計多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    （ｉｘ）前記単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＶＨ及びＶＬを含み、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又はＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３、又はＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する、
    請求項１～８のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  10. ＶＨ及びＶＬを含む単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であって、
    前記ＶＨは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７を含む一つのＨＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又は、ＨＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有し、
    前記ＶＬは、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７を含む一つのＬＣ－ＣＤＲ３とを含有し、又は、ＬＣ－ＣＤＲｓに多くとも約５つのアミノ酸置換を含む変異体を含有する、
    請求項１～９のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  11. アミノ酸残基を含む単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であって、
    （ｉ）ＶＨの３１位のアミノ酸残基が、Ｅ、Ｈ、Ｎ、Ｇ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｐ、Ｆ、Ｙ、Ａ、Ｖ、Ｋ、Ｗ、Ｒ又はＣであり、及び／又は、
    （ｉｉ）ＶＬの２６位のアミノ酸残基が、Ｓ、Ｌ、Ｎ、Ａ、Ｋ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｍ又はＣであり、及び／又は、
    （ｉｉｉ）ＶＬの２７位のアミノ酸残基Ｑ、Ｙ、Ｐ、Ａ、Ｉ、Ｆ、Ｔ、Ｒ、Ｖ、Ｌ、Ｅ、Ｓ又はＣであり、及び／又は、
    （ｉｖ）ＶＬの２８位のアミノ酸残基Ｓ、Ｈ、Ｗ、Ｌ、Ｒ、Ｋ、Ｔ、Ｐ、Ｉ、Ｆ、Ｖ、Ｅ、Ａ又はＱであり、及び／又は、
    （ｖ）ＶＬの３０位のアミノ酸残基Ｓ、Ｌ、Ｗ、Ｍ、Ａ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、Ｅ、Ｖ、Ｎ、Ｆ又はＣであり、、及び／又は、
    （ｖｉ）ＶＬの３１位のアミノ酸残基Ｓ、Ｔ、Ｒ、Ａ、Ｈ、Ｑ、Ｐ、Ｍ、Ｌ又はＧであり、及び／又は、
    （ｖｉｉ）ＶＬの３２位のアミノ酸残基Ｙ、Ｌ又はＦであり、及び／又は、
    （ｖｉｉｉ）ＶＬの５０位のアミノ酸残基Ｇ又はＴであり、及び／又は、
    （ｉｘ）ＶＬの５１位のアミノ酸残基Ａ、Ｇ、Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｍ、Ｆ、Ｎ又はＶであり、及び／又は、
    （ｘ）ＶＬの５２位のアミノ酸残基Ｓ、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｑ、Ｆ、Ｙ、Ｈ又はＮであり、及び／又は、
    （ｘｉ）ＶＬの９２位のアミノ酸残基Ｄ、Ａ、Ｑ又はＷであり、及び／又は、
    （ｘｉｉ）ＶＬの９３位のアミノ酸残基Ｎ、Ｄ、Ｅ、Ｔ、Ｙ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｆ、Ｓ、Ｉ又はＬであり、及び／又は、
    （ｘｉｉｉ）ＶＨの２８位のアミノ酸残基Ｔ、Ｈ、Ｖ、Ｅ、Ｐ、Ｌ、Ｍ、Ｓ、Ｗ、Ｃ、Ａ、Ｇ、Ｎ又はＫであり、及び／又は、
    （ｘｉｖ）ＶＨの３０位のアミノ酸残基Ｔ、Ｐ、Ｄ、Ｅ、Ｙ、Ｗ、Ｖ、Ｍ、Ｎ、Ｌ、Ｑ、Ｇ、Ｓ、Ａ、Ｋ又はＲであり、
    ここで、番号はＥＵ Ｋａｂａｔにより定義される、
    請求項５～１０のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  12. ＶＨ及びＶＬを含む単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であって、
    前記ＶＨは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：８０～１２１及び２４６～２８７のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有する変異体を含有し、
    前記ＶＬは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列を含有し、或いはＳＥＱ ＩＤ ＮＯｓ：１２２～１４４、１５０～２４５及び２８８～２８９のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約９０％の配列同一性を有する変異体を含有する、
    請求項１～１１のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  13. 以下の（ｉ）～（ｘｖｉｉ）のいずれかを含む単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体であって、
    （ｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｉｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｉｉｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｉｖ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｖ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｖｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有し；
    （ｖｉｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｖｉｉｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｉｘ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４１を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘｉｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘｉｉｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４８を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９３を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘｉｖ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘｖ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘｖｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５０を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３６を含むＶＬを含有し；或いは、
    （ｘｖｉｉ）アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１を含むＶＨ及びアミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８を含むＶＬを含有する、請求項１２に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  14. 請求項１～１３のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と、ＧＭ－ＣＳＦＲαに競合的に結合し、又は
    請求項１～１３のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体と、同じエピトープに特異的に結合する、ＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的に結合する単離された抗体。
  15. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、Ｆｃフラグメントを含む、請求項１～１４のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  16. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、全長のＩｇＧ抗体である、請求項１５に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  17. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、全長のＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体である、請求項１６に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  18. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体、又はヒト化抗体である、請求項１～１７のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  19. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’２、Ｆａｂ’－ＳＨ、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆｖフラグメント、ｄＡｂ、Ｆｄ、ナノボディ、ダイアボディ及び線状抗体からなる群から選択される抗原結合フラグメントである、請求項１～１４のいずれか１項に記載の単離された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体。
  20. 単離された核酸分子であって、
    請求項１～１９のいずれか１項に記載の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体をコードする、核酸分子。
  21. 請求項２０に記載の核酸分子を含むベクター。
  22. 請求項１～１８のいずれか１項に記載の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、請求項２０に記載の核酸分子、又は請求項２１に記載のベクターを含む、単離された宿主細胞。
  23. ａ）抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を効果的に発現できる条件で、請求項２２に記載の宿主細胞を培養すること、及び、
    ｂ）宿主細胞から、発現された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を得ること、を含む、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の調製方法。
  24. 請求項１～１９のいずれか１項に記載の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体、請求項２０に記載の核酸分子、請求項２１に記載のベクター、又は請求項２２に記載の単離された宿主細胞と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
  25. 必要とする個体の疾患又は病症を治療する方法であって、
    有効量の請求項２４に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
  26. 前記疾患又は病症は、炎症性、呼吸又は自己免疫疾患又は病症である、請求項２５に記載の方法。
  27. 前記疾患又は病症は、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー反応、多発性硬化症、骨髄性白血病及びアテローム性動脈硬化症からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
JP2022178427A 2018-11-27 2022-11-07 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用 Pending JP2023011887A (ja)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2018117581 2018-11-27
CNPCT/CN2018/117581 2018-11-27
PCT/CN2019/120545 WO2020108423A1 (en) 2018-11-27 2019-11-25 Antibodies specifically recognizing granulocyte-macrophage colony stimulating factor receptor alpha and uses thereof
JP2021529718A JP7290725B2 (ja) 2018-11-27 2019-11-25 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021529718A Division JP7290725B2 (ja) 2018-11-27 2019-11-25 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2023011887A true JP2023011887A (ja) 2023-01-24

Family

ID=70853745

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021529718A Active JP7290725B2 (ja) 2018-11-27 2019-11-25 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用
JP2022178427A Pending JP2023011887A (ja) 2018-11-27 2022-11-07 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021529718A Active JP7290725B2 (ja) 2018-11-27 2019-11-25 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20230002496A1 (ja)
EP (1) EP3902835A4 (ja)
JP (2) JP7290725B2 (ja)
KR (1) KR102655193B1 (ja)
CN (2) CN113348179A (ja)
AU (1) AU2019388584B2 (ja)
BR (1) BR112021009709A2 (ja)
CA (2) CA3120729A1 (ja)
EA (1) EA202191470A1 (ja)
PH (1) PH12021551195A1 (ja)
SG (1) SG11202105403XA (ja)
WO (1) WO2020108423A1 (ja)
ZA (1) ZA202103596B (ja)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2023007028A (es) * 2020-12-18 2023-09-21 Kiniksa Pharmaceuticals Ltd Composiciones de proteínas y métodos para producir y usar las mismas.
CN116887856A (zh) * 2022-01-20 2023-10-13 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 一种特异性地识别粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体的抗体制剂及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009533020A (ja) * 2006-03-27 2009-09-17 メドイミューン・リミテッド Ｇｍ−ｃｓｆ受容体に対する結合構造要素
CN103193882A (zh) * 2013-03-29 2013-07-10 浙江大学 胚胎干细胞特异性标志物GM-CSFRα及其应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009533020A (ja) * 2006-03-27 2009-09-17 メドイミューン・リミテッド Ｇｍ−ｃｓｆ受容体に対する結合構造要素
CN103193882A (zh) * 2013-03-29 2013-07-10 浙江大学 胚胎干细胞特异性标志物GM-CSFRα及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
BR112021009709A2 (pt) 2021-10-19
US20230002496A1 (en) 2023-01-05
KR102655193B1 (ko) 2024-04-04
JP2022510171A (ja) 2022-01-26
EA202191470A1 (ru) 2021-09-07
AU2019388584B2 (en) 2024-02-15
EP3902835A4 (en) 2022-08-17
CA3120729A1 (en) 2020-06-04
CA3183309A1 (en) 2020-06-04
KR20210129631A (ko) 2021-10-28
AU2019388584A1 (en) 2021-06-10
CN113348179A (zh) 2021-09-03
JP7290725B2 (ja) 2023-06-13
WO2020108423A1 (en) 2020-06-04
PH12021551195A1 (en) 2021-10-25
CN116003597A (zh) 2023-04-25
EP3902835A1 (en) 2021-11-03
ZA202103596B (en) 2022-04-28
SG11202105403XA (en) 2021-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2022052974A1 (en) Antibodies specifically recognizing interleukin-4 receptor alpha and uses thereof
JP2023011887A (ja) 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用
WO2023138521A1 (zh) 特异性识别FasL的抗体及其应用
WO2023138522A1 (zh) 特异性识别FasL的抗体及其应用
WO2022166739A1 (en) Antibodies specifically recognizing thymic stromal lymphopoietin and uses thereof
CN114364695B (zh) 特异性识别c5a的抗体及其应用
WO2023217068A1 (zh) 特异性识别gdf15的抗体及其应用
WO2024056010A1 (zh) 特异性识别nkg2a的抗体及其应用
WO2024041450A1 (zh) 特异性识别Nogo-A的抗体及其应用
WO2023066171A1 (zh) 特异性结合乙型肝炎病毒表面抗原pre-S1的抗体及其应用
WO2023186054A1 (zh) 特异性识别c5a的抗体及其应用
WO2023030501A1 (zh) 特异性识别FcRn的抗体及其应用
WO2024067344A1 (zh) 特异性识别light的抗体及其应用
US20240343817A1 (en) Antibody that specifically recognizes cd40 and application thereof
CN117693523A (zh) 特异性识别fcrn的抗体及其用途
CN118829654A (zh) 特异性识别C5aR1的抗体及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20221110

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20221110

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20231114

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20240611