JP2022553579A - 抗ｃｄ３７抗体－マイタンシンコンジュゲートおよびその使用方法 - Google Patents

抗ｃｄ３７抗体－マイタンシンコンジュゲートおよびその使用方法 Download PDF

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Abstract

本開示は、抗ＣＤ３７抗体－マイタンシンコンジュゲート構造を提供する。本開示はまた、そのようなコンジュゲートを産生する方法、およびそのコンジュゲートを使用する方法を包含する。【選択図】図１

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年１０月３１日に出願された米国仮出願第６２／９２８，９３９号の優先権の利益を主張し、その開示は参照によって本明細書に組み込まれる。
タンパク質－小分子療法コンジュゲートの分野は、大幅に進歩し、今後数年間でより多くの薬物を提供することを期待して、多くの臨床的に有益な薬物を提供している。タンパク質－コンジュゲート療法薬は、例えば、特異性、機能の多様性、および比較的低いオフターゲット活性に起因して、いくつかの利点を提供することができ、生じる副作用は、より少ない。タンパク質の化学修飾は、これらの利点をより強力に、安定的に、または多様にすることによって、これらの利点を拡張し得る。
いくつかの標準的な化学的転換は、タンパク質に対して翻訳後修飾を作成し、操作するために一般的に使用される。特定のアミノ酸の側鎖を選択的に修飾することができる方法が、いくつか存在する。例えば、カルボン酸側鎖（アスパルテートおよびグルタメート）は、水溶性カルボジイミド試薬による初期活性化およびアミンによるその後の反応によって標的化され得る。同様に、リジンは、活性化したエステルまたはイソチオシアネートの使用を通じて標的化することができ、システインチオールは、マレイミドおよびα－ハロ－カルボニルを用いて標的化することができる。
化学的に変化したタンパク質療法薬または試薬の作製の１つの重大な障害は、生物学的に活性な均質な形態でのタンパク質の産生である。ポリペプチドに対する薬物または検出可能な標識のコンジュゲート化は、制御することが困難な場合があり、接続した薬物分子の数および化学的なコンジュゲート化の位置が異なるコンジュゲートの不均一な混合物を生じる。いくつかの例において、合成有機化学のツールを使用して、コンジュゲート化の部位および／またはポリペプチドに対してコンジュゲート化された薬物もしくは検出可能な標識を制御して、ポリペプチドに対する化学結合の正確かつ選択的な形成を指示することが望ましい場合がある。
ＣＤ３７は、テトラスパニンファミリーとしても知られる、膜貫通４スーパーファミリーのメンバーである。ＣＤ３７は、インテグリンおよび他の膜貫通４スーパーファミリータンパク質と複合体を形成することが知られている、細胞表面糖タンパク質である。ＣＤ３７は、正常な成熟Ｂ細胞上で選択的に発現し、ほとんどのＢ細胞悪性腫瘍によって発現する。ＣＤ３７抗原は、Ｂ細胞中で豊富に発現するが、形質細胞および正常な幹細胞には存在しない。したがって、ＣＤ３７は、再発性Ｂ細胞由来悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、およびＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を含む、Ｂ細胞悪性腫瘍を有する患者における好適な治療標的である。
本開示は、抗ＣＤ３７抗体－マイタンシンコンジュゲート構造を提供する。本開示はまた、そのようなコンジュゲートを産生する方法、およびそのコンジュゲートを使用する方法を包含する。
本開示の態様は、式（Ｉ）の側鎖を有する少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を有する、コンジュゲートであって、
Figure 2022553579000002

式中、
Ｚが、ＣＲ４またはＮであり、
Ｒ１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ２およびＲ３が、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択されるか、またはＲ２およびＲ３が、任意選択により環状に連結されて、５員もしくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃおよびｄが、それぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が、１～４であり、
Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３およびＴ４が、それぞれ独立して、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルから選択され、式中、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールまたは修飾ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数であり、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３およびＶ４が、それぞれ独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択され、
各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｗ１が、マイタンシノイドであり、
Ｗ２が、抗ＣＤ３７抗体である、コンジュゲートを含む。
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、
Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルおよび置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
Ｔ２、Ｔ３およびＴ４が、それぞれ独立して、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、およびエステルから選択され、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３およびＶ４が、それぞれ独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
（ＰＥＧ）ｎが、
Figure 2022553579000003

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡが、以下の構造
Figure 2022553579000004

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０または１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
Figure 2022553579000005

であり、
各Ｒ１２およびＲ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、および置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結してピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択される。
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、およびＴ４、ならびにＶ１、Ｖ２、Ｖ３、およびＶ４が、以下の表から選択される。
Figure 2022553579000006
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、リンカーＬが、以下の構造のうちの１つから選択され、
Figure 2022553579000007

Figure 2022553579000008


Figure 2022553579000009


式中、
各ｆが、独立して、０または１～１２の整数であり、
各ｙが、独立して、０または１～２０の整数であり、
各ｎが、独立して、０または１～３０の整数であり、
各ｐが、独立して、０または１～２０の整数であり、
各ｈが、独立して、０または１～１２の整数であり、
各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルであり、
各Ｒ’が、独立して、Ｈ、アミノ酸の側鎖基、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルである。
いくつかの例において、マイタンシノイドが、以下の式を有するものであり、
Figure 2022553579000010

式中、
Figure 2022553579000011

が、マイタンシノイドとＬとの間の接続点を示す。
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１が、－ＣＯ－であり、Ｔ２が、４ＡＰであり、Ｖ２が、－ＣＯ－であり、Ｔ３が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ３が、－ＣＯ－であり、Ｔ４が存在せず、Ｖ４が存在しない。
いくつかの例において、リンカーＬは、以下の構造を含み、
Figure 2022553579000012

式中、
各ｆが、独立して、１～１２の整数であり、
ｎが、１～３０の整数である。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、ＩｇＧ１抗体である。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、ＩｇＧ１カッパ抗体である。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸である。
いくつかの例において、配列は、Ｌ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲである。
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、修飾アミノ酸残基は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖定常領域のＣ末端に配置されている。
いくつかの例において、重鎖定常領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、アミノ酸配列ＳＬＳＬＳＰＧに対してＣ末端である。
いくつかの例において、重鎖定常領域は、配列ＳＰＧＳＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＳを含む。
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、修飾アミノ酸残基は、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖定常領域中に配置されている。
いくつかの例において、軽鎖定常領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、配列ＫＶＤＮＡＬに対してＣ末端であり、かつ／または配列ＱＳＧＮＳＱに対してＮ末端である。
いくつかの例において、軽鎖定常領域は、配列ＫＶＤＮＡＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱを含む。
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、修飾アミノ酸残基が、抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ１領域中に配置されている。
いくつかの例において、重鎖ＣＨ１領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡに対してＣ末端であり、かつ／またはアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰに対してＮ末端である。
いくつかの例において、重鎖ＣＨ１領域は、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰを含む。
いくつかの例において、コンジュゲートは、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、修飾アミノ酸残基が、抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ２領域中に配置されている。
いくつかの例において、修飾アミノ酸残基が、抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ３領域中に配置されている。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、ＣＤ３７への結合に関して、
アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む抗ＣＤ３７抗体と競合する。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、
アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、
配列番号２に記載されているアミノ酸配列と７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号７に記載されているアミノ酸配列と７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
本開示の態様は、本開示によるコンジュゲートと、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、薬学的組成物を含む。
本開示の態様は、有効量の本開示によるコンジュゲートを対象に投与することを含む、方法を含む。
本開示の態様は、対象のがんを治療する方法を含む。本方法は、対象に、治療有効量の本開示によるコンジュゲートを含む薬学的組成物を投与することを含み、投与が、対象のがんを治療するのに有効である。
いくつかの例において、がんは、血液悪性腫瘍である。
いくつかの例において、血液悪性腫瘍は、悪性Ｂ細胞であることを特徴とする。いくつかの例において、悪性Ｂ細胞であることを特徴とする血液悪性腫瘍は、白血病である。いくつかの例において、白血病は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である。
いくつかの例において、血液悪性腫瘍は、リンパ腫である。いくつかの例において、リンパ腫は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である。
本開示の態様は、対象において標的部位に薬物を送達する方法を含む。本方法は、対象に、本開示によるコンジュゲートを含む薬学的組成物を投与することを含み、投与が、対象において標的部位にコンジュゲートから治療有効量の薬物を放出するのに有効である。
本開示の態様は、ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基を含む、抗ＣＤ３７抗体を含む。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、以下の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
式中、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列が抗体のＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸である。
いくつかの例において、配列は、Ｌ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲである。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、配列は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖定常領域のＣ末端にある。
いくつかの例において、重鎖定常領域は、以下の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
式中、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、アミノ酸配列ＳＬＳＬＳＰＧに対してＣ末端である。
いくつかの例において、重鎖定常領域は、配列ＳＰＧＳＬ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＳを含む。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、ＦＧｌｙ残基は、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖定常領域中に配置されている。
いくつかの例において、軽鎖定常領域は、以下の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、配列ＫＶＤＮＡＬに対してＣ末端であり、かつ／または配列ＱＳＧＮＳＱに対してＮ末端である。
いくつかの例において、軽鎖定常領域は、配列ＫＶＤＮＡＬ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱを含む。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、ＦＧｌｙ残基は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ１領域中に配置されている。
いくつかの例において、重鎖ＣＨ１領域は、以下の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
式中、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡに対してＣ末端であり、かつ／またはアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰに対してＮ末端である。
いくつかの例において、重鎖ＣＨ１領域は、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰを含む。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、以下のものを含み、ここで、
Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される。
いくつかの例において、ＦＧｌｙ残基は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ２領域中に配置されている。
いくつかの例において、ＦＧｌｙ残基は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ３領域中に配置されている。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、ＣＤ３７への結合に関して、
アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む抗ＣＤ３７抗体と競合する。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、
アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
いくつかの例において、抗ＣＤ３７抗体は、
配列番号２に記載されているアミノ酸配列と７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号７に記載されているアミノ酸配列と７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
本開示の態様は、本開示による抗ＣＤ３７抗体を含む、細胞を含む。
本開示の態様は、本開示による抗ＣＤ３７抗体をコードする核酸を含む。本開示の態様はまた、核酸を含む、発現ベクターを含む。本開示の態様はまた、核酸または発現ベクターを含む、宿主細胞を含む。
本開示の態様は、本開示の抗ＣＤ３７抗体を作製する方法を含む。かかる方法は、細胞が抗体を発現するのに好適な条件下で、本開示の発現ベクターを含む細胞を培養することを含み、抗体が産生される。
図１のパネルＡは、標準的な分子生物学的技術を使用して、抗体骨格に沿った所望の位置に挿入されたホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）認識配列を示す。発現時に、真核細胞に対して内因性であるＦＧＥは、コンセンサス配列内のＣｙｓからホルミルグリシン残基（ＦＧｌｙ）への変換を触媒する。図１のパネルＢは、ヒドラジノ－イソ－ピクテ－スペングラー（ＨＩＰＳ）リンカーおよびペイロードと反応し、部位特異的にコンジュゲート化したＡＤＣを生成する、アルデヒド部分（抗体当たり２個）を保有する抗体を示す。図１のパネルＣは、中間体ヒドラゾニウムイオン、続いて求核性インドールによる分子内アルキル化を介して進行し、安定したＣ－Ｃ結合を生成する、ＨＩＰＳ化学を示す。 本開示の実施形態による、ＨＩＰＳ－４ＡＰリンカーに接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端（ＣＴ）でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体の疎水性相互作用カラム（ＨＩＣ）トレースを示す。 本開示の実施形態による、ＨＩＰＳ－４ＡＰリンカーに接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端（ＣＴ）でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体の分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析のグラフを示す。 本開示の実施形態による、Ｄａｕｄｉ細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、ＲＬ細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、Ｒａｍｏｓ－ＲＡ細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、Ｇｒａｎｔａ ５１９細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、ＢＪＡＢ細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、ＤｏＨＨ－２細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、ＳＵ－ＤＨＬ－４細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、Ｒａｊｉ細胞中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビトロ細胞傷害性データを示す示す。 本開示の実施形態による、ＤｏＨＨ－２異種移植モデル中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビボ有効性を示すデータを示す。 本開示の実施形態による、Ｇｒａｎｔａ ５１９異種移植モデル中のＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（ＡＤＣ）に接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体のインビボ有効性を示すデータを示す。 アルデヒドタグ化Ｉｇポリペプチドの生成のための可能性のある修飾部位を示すサイトマップを示す。上側配列は、ＩｇＧ１軽鎖ポリペプチド（配列番号４８）の保存領域のアミノ酸配列であり、Ｉｇ軽鎖中の可能性のある修飾部位を示し、下側配列は、Ｉｇ重鎖ポリペプチド（配列番号４３、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＧ００９０９）の保存領域のアミノ酸配列であり、Ｉｇ重鎖中の可能性のある修飾部位を示す。重鎖および軽鎖の番号付けは、全長重鎖および軽鎖に基づく。 ＩｇＧ１（配列番号４３）、ＩｇＧ２（配列番号４４）、ＩｇＧ３（配列番号４５）、ＩｇＧ４（配列番号４６）、およびＩｇＡ（配列番号４７）の免疫グロブリン重鎖定常領域のアラインメントを示し、アルデヒドタグが免疫グロブリン重鎖中に提供され得る修飾部位を示している。重鎖および軽鎖の番号付けは、全長重鎖および軽鎖に基づく。 免疫グロブリン軽鎖定常領域（上から下まで配列番号４８～５２）のアラインメントを示し、アルデヒドタグが免疫グロブリン軽鎖中に提供され得る修飾部位を示している。
定義
以下の用語は、別段の指示がない限り、以下の意味を有する。任意の定義されていない用語は、その分野で認識された意味を有する。
「アルキル」は、１～１０個の炭素原子、例えば１～６個の炭素原子、または１～５個、または１～４個、または１～３個の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、メチル（ＣＨ３－）、エチル（ＣＨ３ＣＨ２－）、ｎ－プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２－）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ－）、ｎ－ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、イソブチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２－）、ｓｅｃ－ブチル（（ＣＨ３）（ＣＨ３ＣＨ２）ＣＨ－）、ｔ－ブチル（（ＣＨ３）３Ｃ－）、ｎ－ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、およびネオペンチル（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２－）などの直鎖および分枝鎖のヒドロカルビル基を含む。
「置換アルキル」という用語は、本明細書に定義されるアルキル基であって、アルキル鎖（Ｃ１炭素原子を除く）中の１個以上の炭素原子が、任意選択により－Ｏ－、－Ｎ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）ｎ－（式中、ｎは０～２である）、－ＮＲ－（式中、Ｒは、水素またはアルキルである）などのヘテロ原子と置き換わっており、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、および－ＮＲａＲｂからなる群から選択される１～５個の置換基を有し、Ｒ’およびＲ”が、同じであってもよく、または異なっていてもよく、水素、任意選択により置換されたアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロ環式環から選択される、アルキル基を指す。
「アルキレン」は、二価の脂肪族ヒドロカルビル基、好ましくは、直鎖または分枝鎖のいずれかである１～６個、より好ましくは１～３個の炭素原子を有し、任意選択により－Ｏ－、－ＮＲ１０－、－ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０－などから選択される１つ以上の基で中断されている、二価の脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語としては、例として、メチレン（－ＣＨ２－）、エチレン（－ＣＨ２ＣＨ２－）、ｎ－プロピレン（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、イソ－プロピレン（－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）－）、（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２－）、（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）－）、（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－）、（－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２－）などが挙げられる。
「置換アルキレン」は、以下の「置換」の定義において炭素について記載されているように、置換基で置き換えられた１～３個の水素を有するアルキレン基を指す。
「アルカン」という用語は、本明細書で定義されるアルキル基およびアルキレン基を指す。
「アルキルアミノアルキル」、「アルキルアミノアルケニル」、および「アルキルアミノアルキニル」という用語は、Ｒ’ＮＨＲ”－基（式中、Ｒ’が、本明細書で定義されるアルキル基であり、Ｒ”が、本明細書で定義されるアルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン基である）を指す。
「アルカリール」または「アラルキル」という用語は、－アルキレン－アリールおよび－置換アルキレン－アリール基であって、アルキレン、置換アルキレンおよびアリールが本明細書で定義される基を指す。
「アルコキシ」は、－Ｏ－アルキル基であって、アルキルが本明細書で定義されるとおりである基を指す。アルコキシとしては、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｎ－ペントキシなどが挙げられる。「アルコキシ」という用語はまた、アルケニル－Ｏ－、シクロアルキル－Ｏ－、シクロアルケニル－Ｏ－、およびアルキニル－Ｏ－基であって、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、およびアルキニルが本明細書で定義されるとおりである基を指す。
「置換アルコキシ」という用語は、置換アルキル－Ｏ－、置換アルケニル－Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｏ－、置換シクロアルケニル－Ｏ－、および置換アルキニル－Ｏ－の基であって、置換アルキル、置換アルケニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、および置換アルキニルが、本明細書で定義されるとおりである基を指す。
「アルコキシアミノ」という用語は、－ＮＨ－アルコキシ基であって、アルコキシが、本明細書で定義される、基を指す。
「ハロアルコキシ」という用語は、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されているアルキル－Ｏ－基を指し、例として、トリフルオロメトキシなどの基を含む。
「ハロアルキル」という用語は、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されている、上述の置換アルキル基を指す。そのような基の例としては、限定されないが、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロエチルなどのフルオロアルキル基が挙げられる。
「アルキルアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｏ－アルキル、アルキレン－Ｏ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｏ－アルキル、および置換アルキレン－Ｏ－置換アルキルの基であって、アルキル、置換アルキル、アルキレン、および置換アルキレンが、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アルキルチオアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｓ－アルキル、アルキレン－Ｓ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｓ－アルキル、および置換アルキレン－Ｓ－置換アルキルの基であって、アルキル、置換アルキル、アルキレン、および置換アルキレンが、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アルケニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～４個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１～２個の二重結合不飽和部位を有する直鎖または分枝鎖ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、ビビニル、アリル、およびブタ－３－エン－１－イルを含む。この用語には、シスおよびトランス異性体、またはこれらの異性体の混合物が含まれる。
「置換アルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリールおよび－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される、１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有する、本明細書に定義されるアルケニル基を指す。
「アルキニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～３個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１～２個の三重結合不飽和部位を有する直鎖または分枝鎖一価ヒドロカルビル基を指す。そのようなアルキニル基の例としては、アセチレニル（－Ｃ≡ＣＨ）、およびプロパルギル（－ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）が挙げられる。
「置換アルキニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリールおよび－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される、１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有する、本明細書に定義されるアルキニル基を指す。
「アルキニルオキシ」は、－Ｏ－アルキニル基であって、アルキニルが本明細書で定義されるとおりである基を指す。アルキニルオキシは、例として、エチニルオキシ、プロピニルオキシなどを含む。
「アシル」は、Ｈ－Ｃ（Ｏ）－、アルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）－、アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アリール－Ｃ（Ｏ）－、置換アリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、置換ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－、および置換ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。例えば、アシルは、「アセチル」基ＣＨ３Ｃ（Ｏ）－を含む。
「アシルアミノ」は、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキル、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換ヘテロアリール、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）ヘテロ環式環、および－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換ヘテロ環式環の基であって、Ｒ２０が、水素またはアルキルであり、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アミノカルボニル」または「アミノアシル」という用語は、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ２１Ｒ２２基であって、Ｒ２１およびＲ２２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環からなる群から選択され、Ｒ２１およびＲ２２が、任意選択により、それらに結合した窒素と共に結合し、ヘテロ環式環または置換ヘテロ環式環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アミノカルボニルアミノ」は、－ＮＲ２１Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２Ｒ２３基であって、Ｒ２１、Ｒ２２、およびＲ２３が、独立して、水素、アルキル、アリール、またはシクロアルキルから選択されるか、または２つのＲ基が結合して、ヘテロシクリル基を形成する、基を指す。
「アルコキシカルボニルアミノ」という用語は、－ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ基であって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルであり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルが、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アシルオキシ」という用語は、アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、アリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、およびヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－の基であって、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルが、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アミノスルホニル」は、－ＳＯ２ＮＲ２１Ｒ２２基であって、Ｒ２１およびＲ２２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、置換ヘテロ環式環からなる群から選択され、Ｒ２１およびＲ２２が、任意選択により、それらに結合した窒素と共に結合し、ヘテロ環式環または置換ヘテロ環式環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「スルホニルアミノ」は、－ＮＲ２１ＳＯ２Ｒ２２基であって、Ｒ２１およびＲ２２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環からなる群から選択され、Ｒ２１およびＲ２２が、任意選択により、それらに結合した原子と共に結合し、ヘテロ環式環または置換ヘテロ環式環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アリール」または「Ａｒ」は、単環を有する６～１８個の炭素原子の一価の芳香族炭素環基（フェニル基中に存在するものなど）、または複数の縮合環を有する環系（そのような芳香族環系の例としては、ナフチル、アントリル、およびインダニルが挙げられる）であって、縮合環が、芳香族であってもよく、または芳香族でなくてもよいが、但し、接続点が、芳香族環の原子を介するものである、環系を指す。この用語は、例として、フェニルおよびナフチルを含む。アリール置換基の定義によって別段の制約を受けない限り、かかるアリール基は、任意選択により、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、およびトリハロメチルから選択される、１～５個の置換基、または１～３個の置換基で置換され得る。
「アリールオキシ」は、－Ｏ－アリール基であって、アリールが本明細書に定義されるとおりである基を指し、例として、フェノキシ、ナフトキシなどを含み、これも本明細書で定義される任意選択により置換されたアリール基を含む。
「アミノ」は、－ＮＨ２基を指す。
「置換アミノ」という用語は、－ＮＲＲ基であって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルからなる群から選択され、但し、少なくとも１つのＲが水素ではない基を指す。
「アジド」という用語は、－Ｎ３基を指す。
「カルボキシル」、「カルボキシ」または「カルボキシレート」は、－ＣＯ２Ｈまたはその塩を指す。
「カルボキシルエステル」もしくは「カルボキシエステル」、または「カルボキシアルキル」もしくは「カルボキシルアルキル」という用語は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロ環式環、および－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロ環式環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「（カルボキシルエステル）オキシ」または「カルボネート」は、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロ環式環、および－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロ環式環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「シアノ」または「ニトリル」は、－ＣＮ基を指す。
「シクロアルキル」は、縮合環系、架橋環系、およびスピロ環系を含む、単一または複数の環式環を有する３～１０個の炭素原子の環状アルキル基を指す。好適なシクロアルキル基の例としては、例えば、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが挙げられる。かかるシクロアルキル基は、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどの単環構造、またはアダマンタニルなどの複数環構造を含む。
「置換シクロアルキル」という用語は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリールおよび－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される、１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有する、シクロアルキル基を指す。
「シクロアルケニル」は、単一または複数の環を有し、少なくとも１つの二重結合を有し、好ましくは１～２個の二重結合を有する、３～１０個の炭素原子の非芳香族環状アルキル基を指す。
「置換シクロアルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ケト、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリールおよび－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される、１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有する、シクロアルケニル基を指す。
「シクロアルキニル」は、単一または複数の環を有し、少なくとも１つの三重結合を有する、５～１０個の炭素原子の非芳香族シクロアルキル基を指す。
「シクロアルコキシ」は、－Ｏ－シクロアルキルを指す。
「シクロアルケニルオキシ」は、－Ｏ－シクロアルケニルを指す。
「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを指す。
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、－ＯＨ基を指す。
「ヘテロアリール」は、１～１５個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子と、環内の酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される１～１０個のヘテロ原子との芳香族基を指す。かかるヘテロアリール基は、環系中に単環（ピリジニル、イミダゾリル、またはフリルなど）または複数の縮合環（例えば、インドリジニル、キノリニル、ベンゾフラン、ベンズイミダゾリル、またはベンゾチエニルなどの基の中にあるような）を有することができ、環系内の少なくとも１つの環は芳香族である。価数要件を満たすために、かかるヘテロアリール環中の任意のヘテロ原子は、Ｈまたは置換基、例えば、本明細書に記載されるアルキル基または他の置換基に結合されていてもよく、または結合されていなくてもよい。特定の実施形態において、ヘテロアリール基の窒素および／または硫黄環原子は、任意選択により酸化され、Ｎ－オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、またはスルホニル部分を提供する。この用語は、例として、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、およびフラニルを含む。ヘテロアリール置換基の定義によって別段の制約を受けない限り、かかるヘテロアリール基は、任意選択により、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、およびトリハロメチルから選択される、１～５個の置換基、または１～３個の置換基で置換され得る。
「ヘテロアラルキル」という用語は、アルキレンおよびヘテロアリールが本明細書で定義される、－アルキレン－ヘテロアリール基を指す。この用語は、例として、ピリジルメチル、ピリジルエチル、インドリルメチルなどを含む。
「ヘテロアリールオキシ」は、－Ｏ－ヘテロアリールを指す。
「ヘテロ環」、「ヘテロ環式環」、「ヘテロシクロアルキル」、および「ヘテロシクリル」は、単環または複数の縮合環を有し、縮合環系、架橋環系およびスピロ環系を含み、１～１０個のヘテロ原子を含む、３～２０個の環原子を有する、飽和または不飽和基を指す。これらの環原子は、窒素、硫黄、または酸素から選択され、縮合環系において、環のうちの１つ以上が、シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであってもよく、但し、接続点が、非芳香族環を介するものである。特定の実施形態において、ヘテロ環式環基の窒素および／または硫黄原子は、任意選択により酸化され、Ｎ－オキシド、－Ｓ（Ｏ）－、または－ＳＯ２－部分を提供する。価数要件を満たすために、かかるヘテロ環式環中の任意のヘテロ原子は、１個以上のＨまたは１個以上の置換基、例えば、本明細書に記載されるアルキル基または他の置換基に結合されていてもよく、または結合されていなくてもよい。
ヘテロ環およびヘテロアリールの例としては、限定されないが、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソオキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７－テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも称される）、１，１－ジオキソチオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが挙げられる。
ヘテロ環式環置換基の定義によって別段の制約を受けない限り、かかるヘテロ環式環基は、任意選択により、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、および縮合ヘテロ環から選択される、１～５個、または１～３個の置換基で置換され得る。
「ヘテロシクリルオキシ」は、－Ｏ－ヘテロシクリル基を指す。
「ヘテロシクリルチオ」という用語は、ヘテロ環式環－Ｓ－基を指す。
「ヘテロシクレン」という用語は、本明細書で定義されるように、ヘテロ環から形成されるジラジカル基を指す。
「ヒドロキシアミノ」という用語は、－ＮＨＯＨ基を指す。
「ニトロ」は、－ＮＯ２基を指す。
「オキソ」は、原子（＝Ｏ）を指す。
「スルホニル」は、ＳＯ２－アルキル、ＳＯ２－置換アルキル、ＳＯ２－アルケニル、ＳＯ２－置換アルケニル、ＳＯ２－シクロアルキル、ＳＯ２－置換シクロアルキル、ＳＯ２－シクロアルケニル、ＳＯ２－置換シクロアルケニル、ＳＯ２－アリール、ＳＯ２－置換アリール、ＳＯ２－ヘテロアリール、ＳＯ２－置換ヘテロアリール、ＳＯ２－ヘテロ環式環、およびＳＯ２－置換ヘテロ環式環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。スルホニルとしては、例として、メチル－ＳＯ２－、フェニル－ＳＯ２－、および４－メチルフェニル－ＳＯ２－が挙げられる。
「スルホニルオキシ」は、－ＯＳＯ２－アルキル、ＯＳＯ２－置換アルキル、ＯＳＯ２－アルケニル、ＯＳＯ２－置換アルケニル、ＯＳＯ２－シクロアルキル、ＯＳＯ２－置換シクロアルキル、ＯＳＯ２－シクロアルケニル、ＯＳＯ２－置換シクロアルケニル、ＯＳＯ２－アリール、ＯＳＯ２－置換アリール、ＯＳＯ２－ヘテロアリール、ＯＳＯ２－置換ヘテロアリール、ＯＳＯ２－ヘテロ環式環、およびＯＳＯ２－置換ヘテロ環式環の基であって、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環式環、および置換ヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「アミノカルボニルオキシ」という用語は、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ基であって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロ環式環であり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロ環式環が、本明細書で定義されるとおりである、基を指す。
「チオール」は、－ＳＨ基を指す。
「チオキソ」または「チオケト」という用語は、原子（＝Ｓ）を指す。
「アルキルチオ」または「チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－アルキル基であって、アルキルが本明細書で定義されるとおりである基を指す。特定の実施形態において、硫黄は、－Ｓ（Ｏ）－へと酸化され得る。スルホキシドは、１つ以上の立体異性体として存在し得る。
「置換チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－置換アルキル基を指す。
「チオアリールオキシ」という用語は、アリール－Ｓ－基であって、アリール基が本明細書に定義されるとおりである基を指し、これも本明細書で定義される任意選択により置換されたアリール基を含む。
「チオヘテロアリールオキシ」という用語は、ヘテロアリール－Ｓ－基であって、ヘテロアリール基が本明細書に定義されるとおりである基を指し、これも本明細書で定義される任意選択により置換されたアリール基を含む。
「チオヘテロシクロオキシ」という用語は、ヘテロシクリル－Ｓ－基であって、ヘテロシクリル基が本明細書に定義されるとおりである基を指し、これも本明細書で定義される任意選択により置換されたヘテロシクリル基を含む。
本明細書の開示に加えて、「置換された」という用語は、特定の基またはラジカルを修飾するために使用される場合、特定の基またはラジカルの１個以上の水素原子が、それぞれ、互いに独立して、以下に定義される同じまたは異なる置換基で置き換えられることを意味することもできる。
本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、特定の基またはラジカル中の飽和炭素原子上の１個以上の水素を置換するための置換基（単一の炭素上の任意の２個の水素を、＝Ｏ、＝ＮＲ７０、＝Ｎ－ＯＲ７０、＝Ｎ２、または＝Ｓで置き換えることができる）は、別段の指定がない限り、－Ｒ６０、ハロ、＝Ｏ、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、－ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＳＯ２Ｒ７０、－ＳＯ２Ｏ－Ｍ＋、－ＳＯ２ＯＲ７０、－ＯＳＯ２Ｒ７０、－ＯＳＯ２Ｏ－Ｍ＋、－ＯＳＯ２ＯＲ７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）２（Ｍ＋）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｍ＋、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－Ｍ＋、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－ＮＲ７０ＣＯ２ －Ｍ＋、－ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、および－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、Ｒ６０が、任意選択により置換されたアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、各Ｒ７０が、独立して、水素もしくはＲ６０であり、各Ｒ８０が、独立してＲ７０であるか、またはあるいは、２つのＲ８０が、それらが結合する窒素原子と一緒になって、５員、６員、もしくは７員のヘテロシクロアルキルを形成し、これらは任意選択によりＯ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される同じもしくは異なる１～４個の追加のヘテロ原子を含み得、そのうち、Ｎが、－ＨもしくはＣ１～Ｃ３アルキル置換を有していてもよく、各Ｍ＋が、正味の単一正電荷を有する対イオンである。各Ｍ＋は、独立して、例えば、アルカリイオン、例えば、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋、アンモニウムイオン、例えば、＋Ｎ（Ｒ６０）４、またはアルカリ土類イオン、例えば、［Ｃａ２＋］０．５、［Ｍｇ２＋］０．５、または［Ｂａ２＋］０．５（「添え字の０．５は、かかる二価のアルカリ土類イオンの対イオンのうちの１つが、本発明の化合物のイオン化した形態であってもよく、塩化物などの他の典型的な対イオン、または本明細書に開示される２つのイオン化した化合物が、かかる二価アルカリ土類イオンの対イオンとして機能し得るか、本発明の二重イオン化した化合物が、かかる二価アルカリ土類イオンの対イオンとして機能し得ることを意味する）であってもよい。具体例として、－ＮＲ８０Ｒ８０は、－ＮＨ２、－ＮＨ－アルキル、Ｎ－ピロリジニル、Ｎ－ピペラジニル、４Ｎ－メチル－ピペラジン－１－イルおよびＮ－モルホリニルを含むことを意味する。
本明細書の開示に加えて、「置換」アルケン、アルキン、アリールおよびヘテロアリール基中の不飽和炭素原子上の水素の置換基は、別段の指定がない限り、－Ｒ６０、ハロ、－Ｏ－Ｍ＋、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、－Ｓ－Ｍ＋、－ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、－ＣＦ３、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ２、－Ｎ３、－ＳＯ２Ｒ７０、－ＳＯ３ －Ｍ＋、－ＳＯ３Ｒ７０、－ＯＳＯ２Ｒ７０、－ＯＳＯ３ －Ｍ＋、－ＯＳＯ３Ｒ７０、－ＰＯ３ －２（Ｍ＋）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、－ＣＯ２ －Ｍ＋、－ＣＯ２Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、－ＯＣＯ２ －Ｍ＋、－ＯＣＯ２Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－ＮＲ７０ＣＯ２ －Ｍ＋、－ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、ここで、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０、およびＭ＋が、既に定義されているとおりであり、但し、置換アルケンまたはアルキンの場合には、置換基は、－Ｏ－Ｍ＋、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、または－Ｓ－Ｍ＋ではない。
本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、「置換」ヘテロアルキルおよびシクロヘテロアルキル基中の窒素原子上の水素の置換基は、別段の指定がない限り、－Ｒ６０、－Ｏ－Ｍ＋、－ＯＲ７０、－ＳＲ７０、－Ｓ－Ｍ＋、－ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、－ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ２、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－Ｍ＋、－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７０、－ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－Ｍ＋、－ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）２（Ｍ＋）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）（ＯＲ７０）、－Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、－ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および－ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、ここで、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０、およびＭ＋が、既に定義されているとおりである。
本明細書の開示に加えて、特定の実施形態において、置換される基は、１、２、３、もしくは４個の置換基、１、２、もしくは３個の置換基、１もしくは２個の置換基、または１個の置換基を有する。
上で定義されている全ての置換基において、それ自体にさらなる置換基を有する置換基（例えば、置換アリール基を置換基として有し、それ自体が置換アリール基で置換されており、さらに置換アリール基によって置換されている置換アリール基など）を定義することによって到達するポリマーは、本明細書に含まれることを意図していないことが理解される。そのような場合において、そのような置換の最大数は３である。例えば、本明細書で具体的に企図される置換アリール基の連続的な置換は、置換アリール－（置換アリール）－置換アリールに限定される。
別段の指示がない限り、本明細書で明示的に定義されない置換基の命名法は、官能基の末端部分に続いて隣接官能基を接続点に向かって命名することによって到達される。例えば、置換基「アリールアルキルオキシカルボニル」は、（アリール）－（アルキル）－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－基を指す。
１つ以上の置換基を含有する本明細書に開示される基のいずれかに関して、当然のことながら、かかる基は、立体的に実用的ではなく、かつ／または合成的に実行不可能である任意の置換または置換パターンを含有しないことを理解されたい。加えて、主題の化合物は、これらの化合物の置換から生じる全ての立体化学異性体を含む。
「薬学的に許容される塩」という用語は、患者、例えば、哺乳動物への投与に対して許容される塩（所与の投薬量計画に対して許容される哺乳動物安全性を有する対イオンを有する塩）を意味する。かかる塩は、薬学的に許容される無機または有機塩基、および薬学的に許容される無機または有機酸に由来し得る。「薬学的に許容される塩」は、化合物の薬学的に許容される塩を指し、塩は、当該技術分野で周知の様々な有機および無機対イオンに由来し、単なる例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなどを含み、分子が塩基性官能基を含有する場合、塩酸塩、臭化水素塩、ギ酸塩、酒石酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などの有機または無機酸の塩が挙げられる。
「その塩」という用語は、酸のプロトンが、金属カチオンまたは有機カチオンなどのカチオンによって置き換えられたときに形成される化合物を意味する。該当する場合、塩は、薬学的に許容される塩であるが、このことは、患者への投与を意図していない中間化合物の塩には必要ではない。例として、本発明の化合物の塩は、無機または有機酸の共役塩基を塩のアニオン性構成要素として、化合物が無機または有機酸によってプロトン化されてカチオンを形成するものを含む。
「溶媒和物」は、溶媒分子と溶質の分子またはイオンとの組み合わせによって形成される複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、または両者の混合物であり得る。溶媒のいくつかの例としては、限定されないが、メタノール、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、および水が挙げられる。溶媒が水の場合、形成される溶媒和物は、水和物である。
「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒ）」および「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ）」は、同じ原子結合性を有するが、空間中の原子配置が異なる化合物を指す。立体異性体としては、シス－トランス異性体、ＥおよびＺ異性体、エナンチオマー、およびジアステレオマーが挙げられる。
「互変異性体」とは、原子の電子結合および／またはプロトンの位置のみが異なる分子の相互に入れ替わる形態（例えば、エノール－ケトおよびイミン－エナミン互変異性体）、あるいは－Ｎ＝Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－環原子配置を含有するヘテロアリール基の互変異性体形態（例えば、ピラゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、トリアゾール、およびテトラゾール）を指す。当業者は、他の互変異性体環原子配置が可能であることを認識するであろう。
「またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体」という用語は、主題の化合物の立体異性体の薬学的に許容される塩の溶媒和物などの塩、溶媒和物および立体異性体の全ての変形を含むことが意図されることを理解されよう。
「薬学的有効量」および「治療有効量」は、特定の障害または疾患、またはその症状の１つ以上を治療し、かつ／または疾患または障害の発生を予防するのに十分な化合物の量を指す。腫瘍原性増殖性障害に関して、薬学的有効量または治療有効量は、特に、腫瘍を縮小させるか、または腫瘍の成長速度を低下させるのに十分な量を含む。
「患者」は、ヒトおよび非ヒト対象、特に、哺乳動物対象を指す。
本明細書で使用される「治療すること」または「治療」という用語は、哺乳動物（特にヒト）などの患者の疾患または医学的状態を治療すること、または治療を意味し、（ａ）対象の予防的治療など、疾患または医学的状態の発生を防止すること、（ｂ）患者の疾患または医学的状態をなくすか、逆行させるなど、疾患または医学的状態を改善すること、（ｃ）例えば、患者の疾患または医学的状態の発症を遅延させるか、または停止させることなどにより、疾患または医学的状態を抑制すること、あるいは（ｄ）患者の疾患または医学的状態の症状を緩和することを含む。
「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」という用語は、本明細書で交換可能に使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマー形態を指す。特に別段の指示がない限り、「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」は、遺伝的にコードされているアミノ酸およびコードされていないアミノ酸、化学的または生化学的に修飾されているか、もしくは誘導体化されているアミノ酸、ならびに修飾されたペプチド骨格を有するポリペプチドを含んでいてもよい。用語は、これらに限定されないが、異種アミノ酸配列を有する融合タンパク質、異種および相同リーダー配列を有する融合、少なくとも１つのＮ末端メチオニン残基を含むタンパク質（例えば、組換え細菌宿主細胞中で産生を容易にする）を含む融合タンパク質、免疫学的にタグ化されたタンパク質などを含む。
「天然アミノ酸配列」または「親アミノ酸配列」は、本明細書で交換可能に使用され、修飾アミノ酸残基を含むような修飾の前のポリペプチドのアミノ酸配列を指す。
「アミノ酸類似体」、「非天然アミノ酸」などの用語は、交換可能に使用されてもよく、天然に存在するタンパク質（例えば、ＡｌａまたはＡ、ＣｙｓまたはＣ、ＡｓｐまたはＤ、ＧｌｕまたはＥ、ＰｈｅまたはＦ、ＧｌｙまたはＧ、ＨｉｓまたはＨ、ＩｌｅまたはＩ、ＬｙｓまたはＫ、ＬｅｕまたはＬ、ＭｅｔまたはＭ、ＡｓｎまたはＮ、ＰｒｏまたはＰ、ＧｌｎまたはＱ、ＡｒｇまたはＲ、ＳｅｒまたはＳ、ＴｈｒまたはＴ、ＶａｌまたはＶ、ＴｒｐまたはＷ、ＴｙｒまたはＹ）中に一般的に見出される１つ以上のアミノ酸と構造および／または全体的な形状が類似しているアミノ酸様化合物を含む。アミノ酸類似体には、修飾側鎖または骨格を有する天然アミノ酸も含まれる。アミノ酸類似体はまた、天然に存在するＤ形態と同じ立体化学を有するアミノ酸類似体、ならびにアミノ酸類似体のＬ形態を含む。いくつかの例において、アミノ酸類似体は、１つ以上の天然アミノ酸の骨格構造および／または側鎖構造を共有し、その差は、分子中の１つ以上の修飾基である。かかる修飾としては、限定されないが、ある原子（例えばＮ）の関連する原子（例えばＳ）による置換、ある基（例えば、メチル、もしくはヒドロキシルなど）またはある原子（例えば、Ｃｌ、もしくはＢｒなど）の付加、ある基の欠失、共有結合の置換（例えば、単結合を二重結合などへ）、あるいはそれらの組み合わせが挙げられ得る。例えば、アミノ酸類似体は、α－ヒドロキシ酸、およびα－アミノ酸などを含み得る。
「アミノ酸側鎖」または「アミノ酸の側鎖」などの用語は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、およびアミノ酸類似体を含む、アミノ酸残基のα炭素に接続した置換基を指すために使用され得る。アミノ酸側鎖はまた、本明細書に記載の修飾アミノ酸および／またはコンジュゲートの文脈で記載されるアミノ酸側鎖を含み得る。
「炭水化物」などの用語は、単糖類、二糖類、オリゴ糖類、および多糖類のモノマー単位および／またはポリマーを指すために使用され得る。糖という用語は、単糖類、二糖類などのより小さな炭水化物を指すために使用され得る。「炭水化物誘導体」という用語は、目的の炭水化物の１つ以上の官能基が置換され（任意の好都合な置換基によって置き換えられ）、修飾され（任意の好都合な化学物質を使用して別の基に変換され）るか、または存在しない（例えば、除去されるか、またはＨによって置き換えられる）化合物を含む。様々な炭水化物および炭水化物誘導体が入手可能であり、主題の化合物およびコンジュゲートでの使用に適合され得る。
「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、および多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト化抗体、一本鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、キメラ抗体、抗体断片（例えば、Ｆａｂ断片）などを含む。抗体は、標的抗原に結合することができる。（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、抗体の１つ以上の可変領域によって形成される相補性決定領域（ＣＤＲ）によって認識される、エピトープとも呼ばれる１つ以上の結合部位を有し得る。
「自然抗体」という用語は、抗体の重鎖および軽鎖が作製され、多細胞生物の免疫系によって対になっている抗体を指す。脾臓、リンパ節、骨髄、および血清は、自然抗体を産生する組織の一例である。例えば、抗原で免疫付与された第一の動物から単離された細胞を産生する抗体によって産生される抗体は、自然抗体である。
「ヒト化抗体」または「ヒト化免疫グロブリン」という用語は、ヒト抗体から対応して配置されるアミノ酸で置換されている１つ以上のアミノ酸（例えば、フレームワーク領域、定常領域、またはＣＤＲの中）を含有する非ヒト（例えば、マウスまたはウサギ）抗体を指す。概して、ヒト化抗体は、同じ抗体の非ヒト化態様と比較した場合に、ヒト宿主中で低減された免疫応答を生成する。抗体は、例えば、ＣＤＲグラフティング（ＥＰ２３９，４００、ＰＣＴ公開第９１／０９９６７号、米国特許第５，２２５，５３９号、同第５，５３０，１０１号、および同第５，５８５，０８９号）、ベニヤリングもしくはリサーフェイシング（ＥＰ５９２，１０６、ＥＰ５１９，５９６、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９－４９８（１９９１）、Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ７（６）：８０５－８１４（１９９４）、Ｒｏｇｕｓｋａ．ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ９１：９６９－９７３（１９９４））、ならびにチェーンシャッフリング（米国特許第５，５６５，３３２号）を含む、当該技術で公知の様々な技術を使用して、ヒト化され得る。特定の実施形態において、フレームワーク置換は、ＣＤＲおよびフレームワーク残基の相互作用のモデリングによって特定され、抗原結合および配列比較に重要なフレームワーク残基を特定し、特定の位置にある異常なフレームワーク残基を特定する（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３（１９８８）を参照されたい）。本発明での使用が企図される抗体をヒト化するための追加の方法は、米国特許第５，７５０，０７８号、同第５，５０２，１６７号、同第５，７０５，１５４号、同第５，７７０，４０３号、同第５，６９８，４１７号、同第５，６９３，４９３号、同第５，５５８，８６４号、同第４，９３５，４９６号、および同第４，８１６，５６７号、ならびにＰＣＴ公開第９８／４５３３１号および同第９８／４５３３２号に記載されている。特定の実施形態において、主題のウサギ抗体は、ＵＳ２００４／００８６９７９およびＵＳ２００５／００３３０３１に記載される方法に従ってヒト化され得る。したがって、上述の抗体は、当該技術分野で周知の方法を使用してヒト化され得る。
「キメラ抗体」という用語は、抗体の軽鎖および重鎖遺伝子が、典型的には遺伝子操作することによって、異なる種に属している抗体可変領域および定常領域遺伝子から構築されている、抗体を指す。例えば、マウスモノクローナル抗体からの遺伝子の可変セグメントは、ガンマ１およびガンマ３などのヒト定常セグメントに結合され得る。療法用キメラ抗体の一例は、マウス抗体由来の可変ドメインまたは抗原結合ドメインと、ヒト抗体由来の定常ドメインまたはエフェクタードメインとから構成されているハイブリッドタンパク質であるが、他の哺乳動物種由来のドメインも使用され得る。
免疫グロブリンポリペプチドの免疫グロブリン軽鎖または重鎖可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」とも呼ばれる、３つの超可変領域によって中断されているフレームワーク領域（ＦＲ）から構成されている。フレームワーク領域およびＣＤＲの程度は、定義されている（“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，”Ｅ．Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，１９９１を参照されたい）。構成要素である軽鎖および重鎖の組み合されたフレームワーク領域である、抗体のフレームワーク領域は、ＣＤＲを位置決定し、アラインメントするのに役立つ。ＣＤＲは、主に、抗原のエピトープへの結合に寄与する。
本開示全体で、免疫グロブリン重鎖および免疫グロブリン軽鎖中の残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）の番号付けであり、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
「親Ｉｇポリペプチド」は、本明細書に記載されるようなアルデヒドタグ化定常領域を欠くアミノ酸配列を含むポリペプチドである。親ポリペプチドは、天然配列定常領域を含んでいてもよく、または既存のアミノ酸配列修飾（付加、欠失、および／または置換など）を有する定常領域を含んでいてもよい。
Ｉｇポリペプチドの文脈において、「定常領域」という用語は、当該技術分野で十分に理解され、Ｉｇ重鎖またはＩｇ軽鎖のＣ末端領域を指す。Ｉｇ重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン（ならびに、重鎖がμまたはε重鎖である場合、ＣＨ４ドメイン）を含む。天然Ｉｇ重鎖において、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３（および、存在する場合、ＣＨ４）ドメインは、重鎖可変（ＶＨ）領域の直後（これに対するＣ末端）で開始し、それぞれ、約１００アミノ酸長～約１３０アミノ酸長である。天然Ｉｇ軽鎖において、定常領域は、軽鎖可変（ＶＬ）領域の直後（これに対するＣ末端）で開始し、約１００アミノ酸長～約１２０アミノ酸長である。
本明細書で使用される場合、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」という用語は、重鎖および軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非連続な抗原組み合わせ部位を意味することが意図される。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）、およびＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）によって記載されており、その定義は、互いに比較された場合に、アミノ酸残基の重複またはサブセットを含む。それにもかかわらず、抗体または移植抗体またはそのバリアントのＣＤＲを指すためのいずれかの定義の適用は、本明細書で定義され、使用される用語の範囲内であることを意図される。上の引用文献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基を、比較として以下の表１に示す。
Figure 2022553579000013
ポリペプチド、ペプチド、またはタンパク質のアミノ酸配列に関して使用される「遺伝子的にコード可能な」は、アミノ酸配列が、そのアミノ酸配列をコードする核酸の転写および翻訳によって産生することができるアミノ酸残基から構成され、転写および／または翻訳が、細胞中、または無細胞インビトロ転写／翻訳系において生じ得ることを意味する。
「制御配列」という用語は、特定の発現系、例えば、哺乳動物細胞、細菌細胞、無細胞合成などにおいて作動可能に連結されたコード配列の発現を容易にするＤＮＡ配列を指す。原核生物系に好適な制御配列は、例えば、プロモーター、任意選択によりオペレーター配列、およびリボソーム結合部位を含む。真核細胞系は、プロモーター、ポリアデニレーションシグナル、およびエンハンサーを利用し得る。
核酸は、それが別の核酸配列との機能的関係に置かれる場合に、「作動可能に連結される」。例えば、プレ配列または分泌リーダーのためのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現される場合には、ポリペプチドのためのＤＮＡに作動可能に連結され、配列の転写に影響を与える場合には、プロモーターもしくはエンハンサーがコード配列に作動可能に連結されるか、または翻訳の開始を容易にするために配置される場合には、リボソーム結合部位が、コード配列に作動可能に連結される。概して、「作動可能に連結される」は、連結されるＤＮＡ配列が、分泌リーダーの場合には連続的であり、リーディングフレームの場合には連続的であることを意味する。連結は、ライゲーションによって、または増幅反応を介して達成される。合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーは、従来の実施に従って配列を連結するために使用され得る。
本明細書で使用される「発現カセット」という用語は、（例えば、目的の構築物へのライゲーションと適合性のある制限部位の使用によって、または目的の構築物へ、もしくは宿主細胞ゲノムへの相同組換えによって）核酸に挿入することができる、核酸（通常はＤＮＡ）のセグメントを指す。概して、核酸セグメントは、目的のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、カセットおよび制限部位は、転写および翻訳のための適切なリーディングフレームへのカセットの挿入を容易にするように設計される。発現カセットはまた、宿主細胞（例えば、哺乳動物宿主細胞）中で目的のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現を容易にする要素を含み得る。これらの要素としては、限定されないが、プロモーター、最小プロモーター、エンハンサー、応答要素、ターミネーター配列、ポリアデニル化配列などが挙げられ得る。
本明細書で使用される場合、「単離された」という用語は、化合物が天然で存在するものとは異なる環境にある目的の化合物を記載することを意味する。「単離された」は、目的の化合物が実質的に濃縮されており、かつ／または目的の化合物が部分的もしくは実質的に精製されている、試料内にある化合物を含むことを意味する。
本明細書で使用される場合、「実質的に精製された」という用語は、その天然の環境から除去され、天然に関連する他の構成要素を少なくとも６０％含まない、少なくとも７５％含まない、少なくとも８０％含まない、少なくとも８５％含まない、少なくとも９０％含まない、少なくとも９５％含まない、少なくとも９８％含まない、または９８％を超える分を含まない、化合物を指す。
「生理学的条件」という用語は、生細胞と適合性のあるそれらの条件、例えば、生細胞と適合性のある温度、ｐＨ、塩分などの主に水性条件を包含することを意味する。
「反応性パートナー」とは、別の反応性パートナーと特異的に反応し、反応生成物を生成する分子または分子部分を意味する。例示的な反応性パートナーは、スルファターゼモチーフのシステインまたはセリン、およびホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）を含み、これらが反応して、モチーフ中のシステインまたはセリンの代わりに、ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）を含有する変換されたアルデヒドタグの反応生成物を形成する。他の例示的な反応性パートナーは、変換されたアルデヒドタグのｆＧｌｙ残基のアルデヒド（例えば、反応性アルデヒド基）と、アルデヒド反応性基および目的の部分を含む「アルデヒド反応性の反応性パートナー」を含み、これらが反応して、修飾ｆＧｌｙ残基を介して修飾ポリペプチドにコンジュゲート化された目的の部分を有する修飾アルデヒドタグ化ポリペプチドの反応生成物を形成する。
「Ｎ末端」は、遊離アミン基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基を指し、非Ｎ末端アミノ酸残基中のアミン基が、通常、ポリペプチドの共有結合性骨格の一部を形成する。
「Ｃ末端」は、遊離カルボキシル基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基を指し、非Ｃ末端アミノ酸残基中のカルボキシル基が、通常、ポリペプチドの共有結合性骨格の一部を形成する。
ポリペプチドまたはポリペプチドのアミノ酸配列に関して使用される場合の「内部部位」は、Ｎ末端またはＣ末端ではないポリペプチドの領域を意味する。
本発明がさらに記載される前に、本発明は、記載される特定の実施形態に限定されず、当然のことながら、変化する可能性があることを理解されたい。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を記載するためのものであるにすぎず、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲のみによって限定されるため、限定的であることは意図されないこともまた理解されたい。
ある値の範囲が提供される場合、文脈上別途明確に指示されない限り、その範囲の上限と下限との間であり、下限の単位の１０分の１までのそれぞれの間に入る値、およびその記載された範囲内の任意の他の記載された値またはその間に入る値は、本発明に包含されることを理解されたい。これらのより小さい範囲の上限および下限は、独立して、そのより小さな範囲に含まれていてもよく、その記載された範囲内で任意の具体的に除外される境界を仮定して、本発明にも包含される。記載された範囲が、境界の一方または両方を含む場合、それらの含まれる境界の一方または両方を除外した範囲もまた、本発明に含まれる。
明瞭さのために別個の実施形態の文脈で記載された本発明の特定の特徴は、単一の実施形態で組み合わせても提供され得ることが理解される。逆に、簡潔にするために、単一の実施形態の文脈で記載された本発明の様々な特徴は、別個に、または任意の適切なサブコンビネーションでも提供され得る。本発明に関する実施形態の全ての組み合わせは、本発明によって具体的に包含され、まさに、そのような組み合わせが、例えば、安定した化合物（すなわち、作製し、単離し、特性決定し、生物学的活性について試験することができる化合物）である化合物である主題を包含する程度まで、各々および全ての組み合わせが、個々に、かつ明示的に開示されているかのように、本明細書に開示される。加えて、様々な実施形態およびその要素（例えば、かかる変数を記載する実施形態で列挙される化学基の要素）の全てのサブコンビネーションもまた、本発明によって具体的に包含され、まさに各々および全てのサブコンビネーションが、個々に、かつ明示的に開示されているかのように、本明細書に開示される。
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと同様または同等の任意の方法および材料はまた、本発明の実施または試験においても使用することができるが、好ましい方法および材料をここで記載する。本明細書で言及される全ての公開物は、公開物が引用されるものとの関連で方法および／または材料を開示し、記載するために、参照によって本明細書に組み込まれる。
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が別途明確に指示しない限り、複数の参照を含むことに留意すべきである。特許請求の範囲は、いかなる任意の要素も除外するように立案され得ることにさらに留意されたい。したがって、この記述は、特許請求の要素の列挙に関連して「専ら」、「唯一の」などのような排他的な用語の使用または「否定的な」制限の使用のための先行基準としての役割を果たすことを意図している。
明瞭さのために別個の実施形態の文脈で記載された本発明の特定の特徴は、単一の実施形態で組み合わせても提供され得ることが理解される。逆に、簡潔にするために、単一の実施形態の文脈で記載された本発明の様々な特徴は、別個に、または任意の適切なサブコンビネーションでも提供され得る。
本明細書に論じられる公開物は専ら、本出願の出願日前のそれらの開示のためだけに提供される。本明細書内のいずれのものも、本発明が先行の発明という理由によりそのような公開物に先立する権利がないという了解として解釈されるべきではない。さらに、示されている公開日は、実際の公開日とは異なる場合があり、別個に確認する必要がある。
本開示は、抗ＣＤ３７抗体－マイタンシンコンジュゲート構造を提供する。本開示はまた、そのようなコンジュゲートを産生する方法、およびそのコンジュゲートを使用する方法を包含する。各々の実施形態は、以下のセクションにより詳細に記載される。
抗体－薬物コンジュゲート
本開示は、コンジュゲート、例えば、抗体－薬物コンジュゲートを提供する。「コンジュゲート」は、第２の部分（例えば、薬物）と安定して会合する第１の部分（例えば、抗体）を意味する。例えば、マイタンシンコンジュゲートは、別の部分（例えば、抗体）と安定して会合するマイタンシン（例えば、マイタンシン活性化剤部分）を含む。「安定して会合する」は、ある部分が、別の部分または構造に、標準条件下で結合されていることを意味する。特定の実施形態において、第１の部分および第２の部分は、１つ以上の共有結合を介して互いに結合されている。
特定の実施形態において、コンジュゲートは、第２の部分に対してコンジュゲート化されたポリペプチドを含む、ポリペプチドコンジュゲートである。特定の実施形態において、ポリペプチドにコンジュゲート化される部分は、限定されないが、検出可能な標識、薬物、水溶性ポリマー、または膜もしくは表面へのポリペプチドの固定化のための部分など、様々な目的の部分のいずれかであり得る。特定の実施形態において、コンジュゲートは、ポリペプチドが、マイタンシンまたはマイタンシン活性化剤部分にコンジュゲート化されている、マイタンシンコンジュゲートである。「マイタンシン」、「マイタンシン部分」、「マイタンシン活性化剤部分」、および「マイタンシノイド」は、マイタンシンならびにその類似体および誘導体、ならびに薬学的に活性なマイタンシン部分および／またはその部分を指す。ポリペプチドにコンジュゲート化されたマイタンシンは、限定されないが、本明細書に記載されるようなマイタンシンならびにその類似体および誘導体など、様々なマイタンシノイド部分のうちのいずれかであり得る。
目的の部分は、ポリペプチドの任意の所望の部位でポリペプチドにコンジュゲート化され得る。したがって、本開示は、例えば、ポリペプチドのＣ末端またはその付近の部位でコンジュゲート化された部分を有する修飾ポリペプチドを提供する。他の例としては、ポリペプチドのＮ末端またはその付近の位置でコンジュゲート化された部分を有する修飾ポリペプチドを含む。例としては、ポリペプチドのＣ末端とＮ末端との間の位置（例えば、ポリペプチドの内部部位）にコンジュゲート化された部分を有する修飾ポリペプチドも挙げられる。上の組み合わせは、修飾ポリペプチドが２つ以上の部分にコンジュゲート化されている場合にも可能である。
特定の実施形態において、本開示のコンジュゲートは、アミノ酸残基のα炭素でポリペプチドのアミノ酸残基にコンジュゲート化されたマイタンシンを含む。別の言い方をすれば、マイタンシンコンジュゲートは、ポリペプチド中の１つ以上のアミノ酸残基の側鎖が、マイタンシンに接続するように修飾されている（例えば、本明細書に記載されるリンカーを介してマイタンシンに接続する）ポリペプチドを含む。例えば、マイタンシンコンジュゲートは、ポリペプチド中の１つ以上のアミノ酸残基のα炭素が、マイタンシンに接続するように修飾されている（例えば、本明細書に記載されるリンカーを介してマイタンシンに接続する）ポリペプチドを含む。
本開示の実施形態は、ポリペプチドが、１つ以上の部分、例えば、２部分、３部分、４部分、５部分、６部分、７部分、８部分、９部分、または１０部分、またはそれより多い部分にコンジュゲート化される、コンジュゲートを含む。部分は、ポリペプチド中の１つ以上の部位でポリペプチドにコンジュゲート化され得る。例えば、１つ以上の部分は、ポリペプチドの単一アミノ酸残基にコンジュゲート化され得る。いくつかの場合において、１つの部分は、ポリペプチドのアミノ酸残基にコンジュゲート化される。他の実施形態において、２つの部分は、ポリペプチドの同じアミノ酸残基にコンジュゲート化され得る。他の実施形態において、第１の部分は、ポリペプチドの第１のアミノ酸残基にコンジュゲート化され、第２の部分は、ポリペプチドの第２のアミノ酸残基にコンジュゲート化される。例えば、ポリペプチドが第１のアミノ酸残基で第１の部分にコンジュゲート化され、第２のアミノ酸残基で２つの他の部分にコンジュゲート化される場合に、上の組み合わせもまた可能である。これらに限定されないが、第１のアミノ酸残基で第１および第２の部分にコンジュゲート化され、第２のアミノ酸残基で第３および第４の部分にコンジュゲート化されたポリペプチドなどの他の組み合わせも可能である。
１つ以上の部分にコンジュゲート化されるポリペプチドの１つ以上のアミノ酸残基は、天然に存在するアミノ酸、非天然アミノ酸、またはそれらの組み合わせであり得る。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチドの天然に存在するアミノ酸残基にコンジュゲート化された部分を含み得る。他の例において、コンジュゲートは、ポリペプチドの非天然アミノ酸残基にコンジュゲート化された部分を含み得る。１つ以上の部分は、上に記載されるように、単一の天然または非天然アミノ酸残基でポリペプチドにコンジュゲート化され得る。ポリペプチド中の１つ以上の天然または非天然アミノ酸残基は、本明細書に記載されるように、１つまたは複数の部分にコンジュゲート化され得る。例えば、ポリペプチド中の２つ（またはそれ以上）のアミノ酸残基（例えば、天然または非天然アミノ酸残基）は、ポリペプチド中の複数の部位が修飾されるように、それぞれが１つまたは２つの部分にコンジュゲート化され得る。
本明細書に記載されるように、ポリペプチドは、１つ以上の部分にコンジュゲート化され得る。特定の実施形態において、目的の部分は、薬物または検出可能な標識などの化学エンティティである。例えば、薬物（例えば、マイタンシン）は、ポリペプチドにコンジュゲート化されてもよく、または他の実施形態において、検出可能な標識が、ポリペプチドにコンジュゲート化されてもよい。したがって、例えば、本開示の実施形態は、限定されないが、以下のものを含む。ポリペプチドおよび薬物のコンジュゲート、ポリペプチドおよび検出可能な標識のコンジュゲート、２つ以上の薬物およびポリペプチドのコンジュゲート、２つ以上の検出可能な標識およびポリペプチドのコンジュゲートなど。
特定の実施形態において、目的のポリペプチドおよび部分は、カップリング部分を通してコンジュゲート化されている。例えば、ポリペプチドおよび目的の部分は、それぞれ、カップリング部分に結合（例えば、共有結合）してもよく、したがって、目的のポリペプチドおよび部分（例えば、マイタンシンなどの薬物）は、カップリング部分を介して一緒に間接的に結合する。いくつかの場合において、カップリング部分は、ヒドラジニル－インドリルもしくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、またはヒドラジニル－インドリルもしくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物の誘導体を含む。例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介して目的の部分（例えば、マイタンシン）をポリペプチドにカップリングするための一般的なスキームは、以下の一般的な反応スキームに示される。ヒドラジニル－インドリルおよびヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、本明細書において、それぞれ、ヒドラジノ－イソ－ピクテ－スペングラー（ＨＩＰＳ）カップリング部分およびアザ－ヒドラジノ－イソ－ピクテ－スペングラー（ａｚａＨＩＰＳ）カップリング部分とも称される。
Figure 2022553579000014
上の反応スキームにおいて、Ｒは、ポリペプチドにコンジュゲート化される目的の部分（例えば、マイタンシン）である。上の反応スキームに示されるように、２－ホルミルグリシン残基（ｆＧｌｙ）を含むポリペプチドは、カップリング部分（例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）を含むように修飾された薬物（例えば、マイタンシン）と反応し、カップリング部分に接続したポリペプチドコンジュゲートを産生し、したがって、カップリング部分を介して、マイタンシンをポリペプチドに接続する。
本明細書に記載されるように、この部分は、限定されないが、化学エンティティ、例えば、検出可能な標識、または薬物（例えば、マイタンシノイド）などの様々な部分のうちのいずれかであり得る。Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立して、任意の所望の置換基、例えば、限定されないが、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルであってもよい。Ｚは、ＣＲ１１、ＮＲ１２、Ｎ、Ｏ、またはＳであってもよく、式中、Ｒ１１およびＲ１２は、それぞれ独立して、上の「Ｒ’およびＲ”」について記載される置換基のいずれかから選択される。
本明細書に記載されるコンジュゲートおよび化合物に示されるように、他のヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分もまた可能である。例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、リンカーに接続される（例えば、共有結合される）ように修飾され得る。したがって、本開示の実施形態は、リンカーを介して薬物（例えば、マイタンシン）に接続したヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含む。ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物（例えば、マイタンシン）にカップリングし得るリンカーの様々な実施形態を本明細書で詳細に記載する。
特定の実施形態において、ポリペプチドは、目的の部分にコンジュゲート化されてもよく、ポリペプチドは、目的の部分へのコンジュゲート化の前に修飾される。ポリペプチドの修飾は、目的の部分へのコンジュゲート化に好適な１つ以上の反応性基を含有する修飾ポリペプチドを産生し得る。いくつかの場合において、ポリペプチドは、１つ以上のアミノ酸残基で修飾されて、目的の部分（例えば、上述のヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分などのカップリング部分を含む部分）へのコンジュゲート化に好適な１つ以上の反応性基を提供し得る。例えば、ポリペプチドは、反応性アルデヒド基（例えば、反応性アルデヒド）を含むように修飾され得る。反応性アルデヒドは、「アルデヒドタグ」または「ａｌｄタグ」に含まれてもよく、これらは、本明細書で使用される場合、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって、２－ホルミルグリシン残基（本明細書では「ＦＧｌｙ」と称される）を含有するように変換されたスルファターゼモチーフ（例えば、Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲ）に由来するアミノ酸配列を指す。ＦＧＥによって生成されるＦＧｌｙ残基は、「ホルミルグリシン」としても称され得る。言い換えれば、「アルデヒドタグ」という用語は、「変換された」スルファターゼモチーフ（すなわち、システインまたはセリン残基がＦＧＥの作用によってＦＧｌｙに変換されたスルファターゼモチーフ、例えば、Ｌ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲ）を含むアミノ酸配列を指すために本明細書で使用される。変換されたスルファターゼモチーフは、「変換されていない」スルファターゼモチーフ（すなわち、システインまたはセリン残基がＦＧＥによってＦＧｌｙに変換されていないが、変換されることは可能であるスルファターゼモチーフ、例えば、配列Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲを有する、変換されていないスルファターゼモチーフ）を含むアミノ酸配列に由来し得る。スルファターゼモチーフ上のホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用の文脈において使用される場合の「変換」は、スルファターゼモチーフ中のシステインまたはセリン残基のホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基への（例えば、ＣｙｓからＦＧｌｙへ、またはＳｅｒからＦＧｌｙへの）生化学的修飾を指す。部位特異的タンパク質修飾におけるアルデヒドタグおよびその使用のさらなる態様は、米国特許第７，９８５，７８３号および米国特許第８，７２９，２３２号に記載されており、これらの各々の開示は、参照によって本明細書に組み込まれる。
いくつかの場合において、ＦＧｌｙ残基を含有する修飾ポリペプチドは、ＦＧｌｙと、化合物（例えば、上述のヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する化合物）との反応によって、目的の部分にコンジュゲート化され得る。例えば、ＦＧｌｙ含有ポリペプチドは、ポリペプチドへの薬物のコンジュゲート化を提供するために好適な条件下で、反応性パートナー含有薬物と接触され得る。いくつかの例において、反応性パートナー含有薬物は、上述のヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含み得る。例えば、マイタンシンは、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含むように修飾され得る。いくつかの場合において、マイタンシンは、本明細書に詳細に記載されるように、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに接続し、例えば、リンカーによって、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに共有結合される。
特定の実施形態において、本開示のコンジュゲートは、少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を有するポリペプチド（例えば、抗ＣＤ３７抗体などの抗体）を含む。ポリペプチドの修飾アミノ酸残基は、上述のヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物（例えば、マイタンシン）にカップリングされ得る。特定の実施形態において、ポリペプチド（例えば、抗ＣＤ３７抗体）の修飾アミノ酸残基は、上述のようにＦＧｌｙ残基に変換されたシステインまたはセリン残基に由来し得る。特定の実施形態において、ＦＧｌｙ残基は、上述のヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物にコンジュゲート化され、薬物がヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介してポリペプチドにコンジュゲート化される、本開示のコンジュゲートを提供する。本明細書で使用される場合、ＦＧｌｙ’という用語は、目的の部分（例えば、マイタンシンなどの薬物）にカップリングするポリペプチド（例えば、抗ＣＤ３７抗体）の修飾アミノ酸残基を指す。
特定の実施形態において、コンジュゲートは、本明細書に記載の式（Ｉ）の少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を含む。例えば、コンジュゲートは、式（Ｉ）の側鎖を有する少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を含んでいてもよく、
Figure 2022553579000015

式中、
Ｚが、ＣＲ４またはＮであり、
Ｒ１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ２およびＲ３が、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択されるか、またはＲ２およびＲ３が、任意選択により環状に連結されて、５員もしくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃおよびｄが、それぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が、１～４であり、
Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３およびＴ４が、それぞれ独立して、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルから選択され、式中、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールまたは修飾ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数であり、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３およびＶ４が、それぞれ独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択され、
各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｗ１が、マイタンシノイドであり、
Ｗ２が、抗ＣＤ３７抗体である。
特定の実施形態において、Ｚは、ＣＲ４またはＮである。特定の実施形態において、Ｚは、ＣＲ４である。特定の実施形態において、Ｚは、Ｎである。
特定の実施形態において、Ｒ１は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ１は、アルキルもしくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキルもしくはＣ１～６置換アルキル、またはＣ１～４アルキルもしくはＣ１～４置換アルキル、またはＣ１～３アルキルもしくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ１は、アルケニルもしくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニルもしくはＣ２～６置換アルケニル、またはＣ２～４アルケニルもしくはＣ２～４置換アルケニル、またはＣ２～３アルケニルもしくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ１は、アルキニルもしくは置換アルキニル、例えば、Ｃ２～６アルケニルもしくはＣ２～６置換アルケニル、またはＣ２～４アルケニルもしくはＣ２～４置換アルケニル、またはＣ２～３アルケニルもしくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ１は、アリールもしくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリールもしくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリールもしくはＣ５置換アリール、またはＣ６アリールもしくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ１は、ヘテロアリールもしくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリールもしくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリールもしくはＣ５置換ヘテロアリール、またはＣ６ヘテロアリールもしくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ１は、シクロアルキルもしくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキルもしくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキルもしくはＣ３～６置換シクロアルキル、またはＣ３～５シクロアルキルもしくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１は、ヘテロシクリルもしくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリルもしくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリルもしくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、またはＣ３～５ヘテロシクリルもしくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択されるか、またはＲ２およびＲ３が、任意選択により環状に連結されて、５員もしくは６員のヘテロシクリルを形成する。
特定の実施形態において、各Ｒ２は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ２は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ２は、アルキルもしくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキルもしくはＣ１～６置換アルキル、またはＣ１～４アルキルもしくはＣ１～４置換アルキル、またはＣ１～３アルキルもしくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アルケニルもしくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニルもしくはＣ２～６置換アルケニル、またはＣ２～４アルケニルもしくはＣ２～４置換アルケニル、またはＣ２～３アルケニルもしくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アルキニルまたは置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アルコキシまたは置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アミノまたは置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ２は、カルボキシルまたはカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アシルまたはアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アシルアミノまたはアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アルキルアミドまたは置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ２は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、チオアルコキシまたは置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ２は、アリールもしくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリールもしくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリールもしくはＣ５置換アリール、またはＣ６アリールもしくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ２は、ヘテロアリールもしくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリールもしくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリールもしくはＣ５置換ヘテロアリール、またはＣ６ヘテロアリールもしくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ２は、シクロアルキルもしくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキルもしくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキルもしくはＣ３～６置換シクロアルキル、またはＣ３～５シクロアルキルもしくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ２は、ヘテロシクリルもしくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリルもしくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、またはＣ３～５ヘテロシクリルもしくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態において、各Ｒ３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ３は、アルキルもしくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキルもしくはＣ１～６置換アルキル、またはＣ１～４アルキルもしくはＣ１～４置換アルキル、またはＣ１～３アルキルもしくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アルケニルもしくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニルもしくはＣ２～６置換アルケニル、またはＣ２～４アルケニルもしくはＣ２～４置換アルケニル、またはＣ２～３アルケニルもしくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アルキニルまたは置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アルコキシまたは置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アミノまたは置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ３は、カルボキシルまたはカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アシルまたはアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アシルアミノまたはアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アルキルアミドまたは置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、チオアルコキシまたは置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ３は、アリールもしくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリールもしくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリールもしくはＣ５置換アリール、またはＣ６アリールもしくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ３は、ヘテロアリールもしくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリールもしくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリールもしくはＣ５置換ヘテロアリール、またはＣ６ヘテロアリールもしくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ３は、シクロアルキルもしくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキルもしくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキルもしくはＣ３～６置換シクロアルキル、またはＣ３～５シクロアルキルもしくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ３は、ヘテロシクリルもしくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリルもしくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリルもしくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、またはＣ３～５ヘテロシクリルもしくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、任意選択により環状に連結されて、５員または６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、環状に連結されて、５員または６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、環状に連結されて５員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、環状に連結されて６員のヘテロシクリルを形成する。
特定の実施形態において、各Ｒ４は、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。
各Ｒ４の様々な可能性は、以下により詳細に記載される。特定の実施形態において、Ｒ４は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ４は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ４は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩなどのハロゲンである。特定の実施形態において、Ｒ４は、Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ４は、Ｃｌである。特定の実施形態において、Ｒ４は、Ｂｒである。特定の実施形態において、Ｒ４は、Ｉである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アルキルもしくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキルもしくはＣ１～６置換アルキル、またはＣ１～４アルキルもしくはＣ１～４置換アルキル、またはＣ１～３アルキルもしくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アルケニルもしくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニルもしくはＣ２～６置換アルケニル、またはＣ２～４アルケニルもしくはＣ２～４置換アルケニル、またはＣ２～３アルケニルもしくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アルキニルまたは置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アルコキシまたは置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アミノまたは置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ４は、カルボキシルまたはカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アシルまたはアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アシルアミノまたはアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アルキルアミドまたは置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ４は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、チオアルコキシまたは置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ４は、アリールもしくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリールもしくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリールもしくはＣ５置換アリール、またはＣ６アリールもしくはＣ６置換アリール（例えば、フェニルまたは置換フェニル）である。特定の実施形態において、Ｒ４は、ヘテロアリールもしくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリールもしくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリールもしくはＣ５置換ヘテロアリール、またはＣ６ヘテロアリールもしくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ４は、シクロアルキルもしくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキルもしくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキルもしくはＣ３～６置換シクロアルキル、またはＣ３～５シクロアルキルもしくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ４は、ヘテロシクリルもしくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリルもしくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリルもしくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、またはＣ３～５ヘテロシクリルもしくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態において、Ｗ１は、マイタンシノイドである。マイタンシノイドのさらなる記載は、本明細書の開示に見出される。
特定の実施形態において、Ｗ２は、抗ＣＤ３７抗体である。主題のコンジュゲートにおける使用を見出す抗ＣＤ３７抗体のさらなる記載は、本明細書の開示に見出される。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、リンカーＬを含む。リンカーは、目的の１つ以上の部分および／または１つ以上のポリペプチドにカップリング部分を結合させるために利用され得る。いくつかの実施形態において、リンカーは、カップリング部分をポリペプチドまたは化学エンティティのいずれかに結合する。リンカーは、任意の好都合な位置で（例えば、本明細書に記載されるように）カップリング部分に結合され得る（例えば、共有結合され得る）。例えば、リンカーは、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物（例えば、マイタンシン）に接続し得る。ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を使用して、リンカー（したがって、薬物、例えば、マイタンシン）を、抗ＣＤ３７抗体などのポリペプチドにコンジュゲート化し得る。例えば、カップリング部分を使用して、リンカー（したがって、薬物、例えば、マイタンシン）を抗ＣＤ３７抗体のＦＧｌｙ残基などのポリペプチドの修飾アミノ酸残基にコンジュゲート化し得る。
特定の実施形態において、Ｌは、カップリング部分をＷ１に接続し、したがって、カップリング部分は、リンカーＬを介してＷ１に間接的に結合される。上述のように、Ｗ１は、マイタンシノイドであり、したがって、Ｌは、カップリング部分をマイタンシノイドに接続し、例えば、カップリング部分は、リンカーＬを介してマイタンシノイドに間接的に結合される。
任意の好都合なリンカーが、主題のコンジュゲートおよび化合物で利用され得る。特定の実施形態において、Ｌは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシルアミノ、アルキルアミド、置換アルキルアミド、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキルまたは置換アルキル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルケニルまたは置換アルケニル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキニルまたは置換アルキニル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルコキシまたは置換アルコキシ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アミノまたは置換アミノ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、カルボキシルまたはカルボキシルエステル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アシルアミノ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキルアミドまたは置換アルキルアミド基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アリールまたは置換アリール基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリール基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、ヘテロシクリルまたは置換ヘテロシクリル基を含む。
特定の実施形態において、Ｌは、ポリマーを含む。例えば、ポリマーは、ポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールホモポリマー、ポリプロピレングリコールホモポリマー、エチレングリコールとプロピレングリコールとのコポリマー（例えば、ホモポリマーおよびコポリマーが非置換であるか、またはアルキル基で一端で置換されている）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエチルエーテル、ポリビニルピロリドン、それらの組み合わせなどを含む、ポリアルキレングリコールおよびその誘導体を含んでいてもよい。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリアルキレングリコールである。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリエチレングリコールである。他のリンカーも、以下により詳細に記載されるコンジュゲートおよび化合物に示されるように、可能である。
いくつかの実施形態において、Ｌは、式－（Ｌ１）ａ－（Ｌ２）ｂ－（Ｌ３）ｃ－（Ｌ４）ｄ－によって記載されるリンカーであり、式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、およびＬ４は、それぞれ独立して、リンカー単位であり、式中、ａ、ｂ、ｃおよびｄが、それぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が、１～４である。
特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、およびｄの合計は、１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、およびｄの合計は、２である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、およびｄの合計は、３である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、およびｄの合計は、４である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、およびｄは、それぞれ１である。特定の実施形態において、ａ、ｂおよびｃは、それぞれ１であり、ｄは、０である。特定の実施形態において、ａおよびｂは、それぞれ１であり、ｃおよびｄは、それぞれ０である。特定の実施形態において、ａは、１であり、ｂ、ｃおよびｄは、それぞれ０である。
特定の実施形態において、Ｌ１は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続している（例えば、上の式（Ｉ）に示されるとおり）。特定の実施形態において、Ｌ２は、存在する場合、Ｗ１に接続する。特定の実施形態において、Ｌ３は、存在する場合、Ｗ１に接続する。特定の実施形態において、Ｌ４は、存在する場合、Ｗ１に接続する。
任意の好都合なリンカー単位は、主題のリンカーで利用され得る。目的のリンカー単位としては、限定されないが、ポリエチレングリコール、ポリエチレンおよびポリアクリレート、アミノ酸残基、炭水化物系ポリマーまたは炭水化物残基およびそれらの誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、ヘテロ環式環基、それらの組み合わせ、ならびにそれらの置換態様などのポリマーの単位が挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、およびＬ４（存在する場合）のそれぞれは、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、およびジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１つ以上の基を含む。
いくつかの実施形態において、Ｌ１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、またはジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ１は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ１は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ１は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ１は、アルキル基または置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ１は、アリール基または置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ１は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態において、Ｌ２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、またはジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ２は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ２は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ２は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ２は、アルキル基または置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ２は、アリール基または置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ２は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態において、Ｌ３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、またはジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ３は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ３は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ３は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ３は、アルキル基または置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ３は、アリール基または置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ３は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態において、Ｌ４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、またはジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ４は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ４は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ４は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ４は、アルキル基または置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ４は、アリール基または置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ４は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。
いくつかの実施形態において、Ｌは、－（Ｌ１）ａ－（Ｌ２）ｂ－（Ｌ３）ｃ－（Ｌ４）ｄ－を含むリンカーであり、式中、
－（Ｌ１）ａ－は、－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－であり、
－（Ｌ２）ｂ－は、－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－であり、
－（Ｌ３）ｃ－は、－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－であり、
－（Ｌ４）ｄ－は、－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－であり、
式中、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、およびＴ４は、存在する場合、テザー基であり、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、およびＶ４は、存在する場合、共有結合または連結官能基であり、
ａ、ｂ、ｃおよびｄが、それぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が、１～４である。
上述のように、特定の実施形態において、Ｌ１は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続している（例えば、上の式（Ｉ）に示されるとおり）。したがって、特定の実施形態において、Ｔ１は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続している（例えば、上の式（Ｉ）に示されるとおり）。特定の実施形態において、Ｖ１は、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。特定の実施形態において、Ｌ２は、存在する場合、Ｗ１に接続する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ２は、存在する場合、Ｗ１に接続するか、またはＶ２は、存在する場合、Ｗ１に接続する。特定の実施形態において、Ｌ３は、存在する場合、Ｗ１に接続する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ３は、存在する場合、Ｗ１に接続するか、またはＶ３は、存在する場合、Ｗ１に接続する。特定の実施形態において、Ｌ４は、存在する場合、Ｗ１に接続する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ４は、存在する場合、Ｗ１に接続するか、またはＶ４は、存在する場合、Ｗ１に接続する。
テザー基、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、およびＴ４に関して、任意の好都合なテザー基が、主題のリンカーで利用され得る。いくつかの実施形態において、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、およびＴ４は、それぞれ、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、およびエステルから独立して選択される１つ以上の基を含み、式中、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数である。
特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が２であり、Ｔ１－Ｖ１、Ｔ２－Ｖ２、Ｔ３－Ｖ３、またはＴ４－Ｖ４のうちの１つが（ＰＥＧ）ｎ－ＣＯである場合、ｎが、６ではない。例えば、いくつかの例において、リンカーは、以下の構造を有していてもよく、
Figure 2022553579000016

式中、ｎが、６ではない。
特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が２であり、Ｔ１－Ｖ１、Ｔ２－Ｖ２、Ｔ３－Ｖ３、またはＴ４－Ｖ４のうちの１つが（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル－ＮＲ１５である場合、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルが、Ｃ５－アルキルではない。例えば、いくつかの例において、リンカーは、以下の構造を有していてもよく、
Figure 2022553579000017

式中、ｇが、４ではない。
特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、および／またはＴ４）は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルまたは置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルを含む。特定の実施形態において、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、または１～８個の炭素原子、または１～６個の炭素原子、または１～５個の炭素原子、または１～４個の炭素原子、または１～３個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖のアルキル基である。いくつかの例において、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、アルキルもしくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～Ｃ１２アルキル、またはＣ１～Ｃ１０アルキル、またはＣ１～Ｃ６アルキル、またはＣ１～Ｃ３アルキルであってもよい。いくつかの例において、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、Ｃ２－アルキルである。例えば、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、アルキレンもしくは置換アルキレン、例えば、Ｃ１～Ｃ１２アルキレン、またはＣ１～Ｃ１０アルキレン、またはＣ１～Ｃ６アルキレン、またはＣ１～Ｃ３アルキレンであってもよい。いくつかの例において、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、Ｃ２－アルキレンである。
特定の実施形態において、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、または１～８個の炭素原子、または１～６個の炭素原子、または１～５個の炭素原子、または１～４個の炭素原子、または１～３個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖の置換アルキル基である。いくつかの例において、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換アルキル、例えば、置換Ｃ１～Ｃ１２アルキル、または置換Ｃ１～Ｃ１０アルキル、または置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、または置換Ｃ１～Ｃ３アルキルであってもよい。いくつかの例において、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換Ｃ２－アルキルである。例えば、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換アルキレン、例えば、置換Ｃ１～Ｃ１２アルキレン、または置換Ｃ１～Ｃ１０アルキレン、または置換Ｃ１～Ｃ６アルキレン、または置換Ｃ１～Ｃ３アルキレンであってもよい。いくつかの例において、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルは、置換Ｃ２－アルキレンである。
特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、および／またはＴ４）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、ＥＤＡを含有するテザーを含む。特定の実施形態において、（ＥＤＡ）ｗは、１つ以上のＥＤＡ部分を含み、例えば、ｗが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、または１～６、例えば、１、２、３、４、５、または６の整数である）。連結したエチレンジアミン（ＥＤＡ）部分は、任意選択により任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、アリール、または置換アリールで、１つ以上の好都合な位置で置換され得る。特定の実施形態において、ＥＤＡ部分は、構造
Figure 2022553579000018

によって記載され、
式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０または１であり、各Ｒ１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、ｙは、１、２、３、４、５、または６である。特定の実施形態において、ｙは１であり、ｒは０である。特定の実施形態において、ｙは１であり、ｒは１である。特定の実施形態において、ｙは２であり、ｒは０である。特定の実施形態において、ｙは２であり、ｒは１である。特定の実施形態において、各Ｒ１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択される。特定の実施形態において、ＥＤＡの任意の２つの隣接するＲ１２基は、環状に連結して、例えば、ピペラジニル環を形成してもよい。特定の実施形態において、ｙは、１であり、２つの隣接するＲ１２基は、アルキル基であり、環状に連結してピペラジニル環を形成する。特定の実施形態において、ｙは、１であり、隣接するＲ１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）、および置換アルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨ、またはプロピル－ＯＨ）から選択される。
特定の実施形態において、テザー基は、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分（本明細書では、ピペリジン－４－アミノ、Ｐ４Ａとも称される）を含む。４ＡＰ部分は、任意選択により任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アシル、置換アシル、アリール、または置換アリールで、１つ以上の好都合な位置で置換され得る。特定の実施形態において、４ＡＰ部分は、以下の構造によって記載され、
Figure 2022553579000019

Ｒ１２は、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコールまたは修飾ポリエチレングリコール）、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ１２は、ポリエチレングリコール部分である。特定の実施形態において、Ｒ１２は、カルボキシ修飾ポリエチレングリコール部分である。
特定の実施形態において、Ｒ１２は、式（ＰＥＧ）ｋによって記載されるポリエチレングリコール部分を含み、以下の構造によって表されてもよく、
Figure 2022553579000020

式中、ｋが、１～２０、例えば、１～１８、または１～１６、または１～１４、または１～１２、または１～１０、または１～８、または１～６、または１～４、または１もしくは２、例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０などの整数である。いくつかの例において、ｋは、２である。特定の実施形態において、Ｒ１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、またはＣＯＯＲから選択され、式中、Ｒが、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ１７は、ＣＯＯＨである。
特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、および／またはＴ４）は、（ＰＥＧ）ｎを含み、式中、（ＰＥＧ）ｎが、ポリエチレングリコールまたは修飾ポリエチレングリコール連結単位である。特定の実施形態において、（ＰＥＧ）ｎは、以下の構造によって記載され、
Figure 2022553579000021

式中、ｎが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０などの整数である。いくつかの例において、ｎは、２である。いくつかの例において、ｎは、３である。いくつかの例において、ｎは、６である。いくつかの例において、ｎは、１２である。
特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、および／またはＴ４）は、（ＡＡ）ｐを含み、式中、ＡＡが、アミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用され得る。目的のアミノ酸としては、限定されないが、Ｌ－アミノ酸およびＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主なアルファ－アミノ酸およびベータ－アラニンのうちのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸類似体）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸または天然に存在しないベータ－アミノ酸などが挙げられる。特定の実施形態において、ｐは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０などの整数である。特定の実施形態において、ｐは、１である。特定の実施形態において、ｐは、２である。
特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、および／またはＴ４）は、式－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－によって記載される部分を含み、式中、ｈが、０であるか、またはｎが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２などの整数である。特定の実施形態において、ｈは、１である。特定の実施形態において、ｈは、２である。特定の実施形態において、Ｒ１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ１３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アルキルもしくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキルもしくはＣ１～６置換アルキル、またはＣ１～４アルキルもしくはＣ１～４置換アルキル、またはＣ１～３アルキルもしくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アルケニルもしくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニルもしくはＣ２～６置換アルケニル、またはＣ２～４アルケニルもしくはＣ２～４置換アルケニル、またはＣ２～３アルケニルもしくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アルキニルまたは置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アルコキシまたは置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アミノまたは置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、カルボキシルまたはカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アシルまたはアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アシルアミノまたはアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アルキルアミドまたは置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、チオアルコキシまたは置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、アリールもしくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリールもしくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリールもしくはＣ５置換アリール、またはＣ６アリールもしくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、ヘテロアリールもしくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリールもしくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリールもしくはＣ５置換ヘテロアリール、またはＣ６ヘテロアリールもしくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、シクロアルキルもしくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキルもしくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキルもしくはＣ３～６置換シクロアルキル、またはＣ３～５シクロアルキルもしくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１３は、ヘテロシクリルもしくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリルもしくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリルもしくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、またはＣ３～５ヘテロシクリルもしくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態において、Ｒ１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールは、Ｒ１３について上に記載されているとおりである。
連結官能基、Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、およびＶ４に関して、任意の好都合な連結官能基が、主題のリンカーで利用され得る。目的の連結官能基としては、限定されないが、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、チオホスホライデートなどが挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、およびＶ４は、それぞれ独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑが、１～６の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１～６（例えば、１、２、３、４、５、または６）の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１である。特定の実施形態において、ｑは、２である。
いくつかの実施形態において、各Ｒ１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。
各Ｒ１５の様々な可能性は、以下により詳細に記載される。特定の実施形態において、Ｒ１５は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ１５は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アルキルもしくは置換アルキル、例えば、Ｃ１～６アルキルもしくはＣ１～６置換アルキル、またはＣ１～４アルキルもしくはＣ１～４置換アルキル、またはＣ１～３アルキルもしくはＣ１～３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アルケニルもしくは置換アルケニル、例えば、Ｃ２～６アルケニルもしくはＣ２～６置換アルケニル、またはＣ２～４アルケニルもしくはＣ２～４置換アルケニル、またはＣ２～３アルケニルもしくはＣ２～３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アルキニルまたは置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アルコキシまたは置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アミノまたは置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、カルボキシルまたはカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アシルまたはアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アシルアミノまたはアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アルキルアミドまたは置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、チオアルコキシまたは置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、アリールもしくは置換アリール、例えば、Ｃ５～８アリールもしくはＣ５～８置換アリール、例えば、Ｃ５アリールもしくはＣ５置換アリール、またはＣ６アリールもしくはＣ６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、ヘテロアリールもしくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５～８ヘテロアリールもしくはＣ５～８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ５ヘテロアリールもしくはＣ５置換ヘテロアリール、またはＣ６ヘテロアリールもしくはＣ６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、シクロアルキルもしくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～８シクロアルキルもしくはＣ３～８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ３～６シクロアルキルもしくはＣ３～６置換シクロアルキル、またはＣ３～５シクロアルキルもしくはＣ３～５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１５は、ヘテロシクリルもしくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～８ヘテロシクリルもしくはＣ３～８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ３～６ヘテロシクリルもしくはＣ３～６置換ヘテロシクリル、またはＣ３～５ヘテロシクリルもしくはＣ３～５置換ヘテロシクリルである。
特定の実施形態において、各Ｒ１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択される。これらの実施形態において、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリル置換基は、Ｒ１５について上に記載されているとおりである。
特定の実施形態において、テザー基は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、またはエステルを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、アセタール基を含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ジスルフィドを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ヒドラジンを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、エステルを含む。
上述のように、いくつかの実施形態において、Ｌは、－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃおよびｄが、それぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が、１～４である。
いくつかの実施形態において、主題のリンカーにおいて、
Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルおよび置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
Ｔ２、Ｔ３およびＴ４は、それぞれ独立して、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、およびエステルから選択され、
Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３およびＶ４は、それぞれ独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
（ＰＥＧ）ｎが、
Figure 2022553579000022

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡが、以下の構造
Figure 2022553579000023

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０または１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
Figure 2022553579000024

であり、
ＡＡは、アミノ酸残基であり、式中、ｐが、１～２０の整数であり、
各Ｒ１５およびＲ１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結してピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択される。
特定の実施形態において、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、およびＴ４、ならびにＶ１、Ｖ２、Ｖ３、およびＶ４は、以下の表（例えば、以下の表の１つの列）から選択される。
Figure 2022553579000025
特定の実施形態において、Ｌは、－（Ｌ１）ａ－（Ｌ２）ｂ－（Ｌ３）ｃ－（Ｌ４）ｄ－を含むリンカーであり、式中、－（Ｌ１）ａ－は、－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－であり、－（Ｌ２）ｂ－は、－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－であり、－（Ｌ３）ｃ－は、－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－であり、－（Ｌ４）ｄ－は、－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－である。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（ＣＲ１３ＯＨ）ｈであり、Ｖ３は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ４は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ４は、－ＣＯ－である。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、存在せず、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、存在せず、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（ＣＲ１３ＯＨ）ｈであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１１－であり、Ｔ３は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３は、－ＳＯ２－であり、Ｔ４は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（ＣＲ１３ＯＨ）ｈであり、Ｖ３は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ４は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ４は、－ＣＯ－である。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＣＲ１３ＯＨ）ｈであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＳＯ２－であり、Ｔ２は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ２は、存在せず、Ｔ３は、（ＣＲ１３ＯＨ）ｈであり、Ｖ３は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ４は、－ＮＲ１５－である。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ３は、－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－であり、Ｔ４は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、存在せず、Ｔ３は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ３は、存在せず、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（ＣＲ１３ＯＨ）ｈであり、Ｖ３は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ４は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ４は、－ＣＯ（ＡＡ）ｐ－である。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ２は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ２は、－ＮＲ１５－であり、Ｔ３は、存在せず、Ｖ３は、－ＣＯであり、Ｔ４は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ４は、－ＮＲ１５－である。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、（ＥＤＡ）ｗであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（ＣＲ１３ＯＨ）ｈであり、Ｖ３は、－ＣＯＮＲ１５－であり、Ｔ４は、（ＰＥＧ）ｎであり、Ｖ４は、－ＣＯ（ＡＡ）ｐ－である。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、４ＡＰであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、（ＡＡ）ｐであり、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、４ＡＰであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。
特定の実施形態において、リンカーは、以下の構造のうちの１つによって記載される。
Figure 2022553579000026

Figure 2022553579000027


Figure 2022553579000028

上に示すリンカー構造の特定の実施形態において、各ｆは、独立して、０または１～１２の整数であり、各ｙは、独立して、０または１～２０の整数であり、各ｎは、独立して、０または１～３０の整数であり、各ｐは、独立して、０または１～２０の整数であり、各ｈは、独立して、０または１～１２の整数であり、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルであり、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、アミノ酸の側鎖基、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルである。上述のリンカー構造の特定の実施形態において、各ｆは、独立して、０、１、２、３、４、５、または６であり、各ｙは、独立して、０、１、２、３、４、５、または６であり、各ｎは、独立して、０、１、２、３、４、５、または６であり、各ｐは、独立して、０、１、２、３、４、５、または６であり、各ｈは、独立して、０、１、２、３、４、５、または６である。上述のリンカー構造の特定の実施形態において、各Ｒは、独立して、Ｈ、メチル、または－（ＣＨ２）ｍ－ＯＨであり、式中、ｍは、１、２、３、または４（例えば、２）である。
リンカーＬの特定の実施形態において、Ｔ１は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、４ＡＰであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。特定の実施形態において、Ｔ１は、エチレンであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、４ＡＰであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、エチレンであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在しない。特定の実施形態において、Ｔ１は、エチレンであり、Ｖ１は、－ＣＯ－であり、Ｔ２は、４ＡＰであり、Ｖ２は、－ＣＯ－であり、Ｔ３は、エチレンであり、Ｖ３は、－ＣＯ－であり、Ｔ４は、存在せず、Ｖ４は、存在せず、式中、Ｔ２（例えば、４ＡＰ）は、以下の構造を有し、
Figure 2022553579000029

式中、
Ｒ１２は、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコールまたは修飾ポリエチレングリコール）である。
特定の実施形態において、リンカーＬは、以下の構造を含み、
Figure 2022553579000030

式中、
各ｆが、独立して、１～１２の整数であり、
ｎが、１～３０の整数である。
特定の実施形態において、ｆは、１である。特定の実施形態において、ｆは、２である。特定の実施形態において、１つのｆが２であり、１つのｆが１である。
特定の実施形態において、ｎは、１である。
特定の実施形態において、上のリンカー構造の左側は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に接続しており、上のリンカー構造の右側は、マイタンシンに接続する。
上の構造に示される化学エンティティ、リンカー、およびカップリング部分のいずれかは、主題の化合物およびコンジュゲートでの使用に適合され得る。
ヒドラジニル－インドリルおよびヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物およびコンジュゲートを産生するための方法に関連する追加の開示は、２０１３年３月１１日に出願された米国特許出願公開第２０１４／０１４１０２５号および２０１４年１１月２６日に出願された米国特許出願公開第２０１５／０１５７７３６号に見出され、これらのそれぞれの開示は参照により本明細書に組み込まれる。
抗ＣＤ３７抗体
上に示されるように、主題のコンジュゲートは、置換基Ｗ２として抗ＣＤ３７抗体を含んでいてもよく、抗ＣＤ３７抗体は、２－ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。本明細書で使用される場合、アミノ酸は、それらの標準名、それらの標準的な３文字の略称、および／またはそれらの標準的な１文字の略称、例えば、アラニンまたはＡｌａまたはＡ、システインまたはＣｙｓまたはＣ、アスパラギン酸またはＡｓｐまたはＤ、グルタミン酸またはＧｌｕまたはＥ、フェニルアラニンまたはＰｈｅまたはＦ、グリシンまたはＧｌｙまたはＧ、ヒスチジンまたはＨｉｓまたはＨ、イソロイシンまたはＩｌｅまたはＩ、リジンまたはＬｙｓまたはＫ、ロイシンまたはＬｅｕまたはＬ、メチオニンまたはＭｅｔまたはＭ、アスパラギンまたはＡｓｎまたはＮ、プロリンまたはＰｒｏまたはＰ、グルタミンまたはＧｌｎまたはＱ、アルギニンまたはＡｒｇまたはＲ、セリンまたはＳｅｒまたはＳ、トレオニンまたはＴｈｒまたはＴ、バリンまたはＶａｌまたはＶ、トリプトファンまたはＴｒｐまたはＷ、およびチロシンまたはＴｙｒまたはＹと称され得る。
いくつかの場合において、好適な抗ＣＤ３７抗体は、ＣＤ３７ポリペプチドに特異的に結合し、エピトープが、ＣＤ３７抗原内にアミノ酸残基を含む。ヒトＣＤ３７ポリペプチドのアミノ酸配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ－Ｐ１１０４９）を以下の表３に示す。
Figure 2022553579000031
ＣＤ３７エピトープは、表３に示されるヒトＣＤ３７アミノ酸配列の約２００アミノ酸～約２８１アミノ酸の連続伸長部に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するポリペプチドによって形成され得る。
「ＣＤ３７抗原」または「ＣＤ３７ポリペプチド」は、表３に示されるヒトＣＤ３７アミノ酸配列の約２００アミノ酸～約２８１アミノ酸の連続伸長部に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
いくつかの場合において、好適な抗ＣＤ３７抗体は、ＣＤ３７への高親和性結合を示す。例えば、いくつかの場合において、好適な抗ＣＤ３７抗体は、少なくとも約１０－７Ｍ、少なくとも約１０－８Ｍ、少なくとも約１０－９Ｍ、少なくとも約１０－１０Ｍ、少なくとも約１０－１１Ｍ、もしくは少なくとも約１０－１２Ｍ、または１０－１２Ｍより大きな親和性でＣＤ３７に結合する。いくつかの場合において、好適な抗ＣＤ３７抗体は、約１０－７Ｍ～約１０－８Ｍ、約１０－８Ｍ～約１０－９Ｍ、約１０－９Ｍ～約１０－１０Ｍ、約１０－１０Ｍ～約１０－１１Ｍ、もしくは約１０－１１Ｍ～約１０－１２Ｍ、または１０－１２Ｍより大きな親和性で、ＣＤ３７上に存在するエピトープに結合する。
いくつかの場合において、好適な抗ＣＤ３７抗体は、ＣＤ３７内のエピトープへの結合に関して、第２の抗ＣＤ３７抗体（例えば、Ｋ７１５３ＡまたはＡＧＳ６７Ｅ）と競合し、かつ／または第２の抗ＣＤ３７抗体（例えば、Ｋ７１５３ＡまたはＡＧＳ６７Ｅ）として、ＣＤ３７内の同じエピトープに結合する。いくつかの場合において、ＣＤ３７内のエピトープへの結合に関して第２の抗ＣＤ３７抗体と競合する抗ＣＤ３７抗体は、第２の抗ＣＤ３７抗体（例えば、Ｋ７１５３ＡまたはＡＧＳ６７Ｅ）と同じエピトープにも結合する。いくつかの場合において、ＣＤ３７内のエピトープへの結合に関して第２の抗ＣＤ３７抗体と競合する抗ＣＤ３７抗体は、第２の抗ＣＤ３７抗体（例えば、Ｋ７１５３ＡまたはＡＧＳ６７Ｅ）によって結合するエピトープと重複しているエピトープに結合する。いくつかの場合において、抗ＣＤ３７抗体は、ヒト化される。
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、ＣＤ３７に特異的に結合し、ＣＤ３７への結合に関して、
アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む抗ＣＤ３７抗体と競合する、抗ＣＤ３７抗体を含む。
特定の実施形態において、本開示のコンジュゲートは、
アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む、抗ＣＤ３７抗体を含む。
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、
配列番号２に記載されているアミノ酸配列と７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号７に記載されているアミノ酸配列と７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む、抗ＣＤ３７抗体を含む。
第１の抗体が、ＣＤ３７への結合に関して第２の抗体「と競合する」かどうかは、当該技術分野で既知の競合結合アッセイを使用して容易に決定され得る。競合抗体は、例えば、抗体競合アッセイを介して特定され得る。例えば、第１の抗体の試料は、固体支持体に結合することができる。次に、かかる第１の抗体と競合することができることが疑われる第２の抗体の試料を次に添加する。この２つの抗体のうちの１つが標識される。標識された抗体および標識されていない抗体が、ＣＤ３７上の別個の異なる部位に結合する場合、標識された抗体は、疑わしい競合抗体が存在するか否かにかかわらず、同じレベルに結合する。しかしながら、相互作用の部位が同一であるか、または重複している場合、標識されていない抗体が競合し、ＣＤ３７に結合した標識された抗体の量が低下する。標識されていない抗体が過剰に存在する場合、標識された抗体は、もしあるとしても、結合することはほとんどない。
本開示の目的のために、競合抗体は、ＣＤ３７への抗体の結合を約５０％以上、約６０％以上、約７０％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、または約９９％以上減少させる抗体である。かかる競合アッセイを実施するための手順の詳細は、当該技術分野で周知であり、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８８，５６７－５６９，１９８８，ＩＳＢＮ ０－８７９６９－３１４－２に見出すことができる。かかるアッセイは、精製した抗体を使用することによって定量的に作製され得る。標準曲線は、それ自体に対する１つの抗体を滴定することによって確立されてもよく、すなわち、同じ抗体が、標識および競合物の両方に使用される。標識されていない競合抗体がプレートへの標識された抗体の結合を阻害する能力は、滴定され得る。その結果をプロットしてもよく、望ましい結合阻害度を達成するために必要な濃度を比較してもよい。
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４に提供される重鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドを含む抗ＣＤ３７抗体を含む。特定の実施形態において、かかる抗ＣＤ３７抗体は、表４に提供されるＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、およびＶＨ ＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４に提供される軽鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む抗ＣＤ３７抗体を含む。特定の実施形態において、かかる抗ＣＤ３７抗体は、表４に提供されるＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、およびＶＬ ＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４に提供される重鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドと、表４に提供される軽鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドと、を含む、抗ＣＤ３７抗体を含む。特定の実施形態において、かかる抗ＣＤ３７抗体は、表４に提供されるＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、およびＶＬ ＣＤＲ３を含む。
本開示の抗ＣＤ３７の一例の重鎖ポリペプチド、ＶＨポリペプチド、ＶＨ ＣＤＲ、軽鎖ポリペプチド、ＶＬポリペプチド、およびＶＬ ＣＤＲのアミノ酸配列は、以下の表４に提供される（太字でのＫａｂａｔによるＣＤＲ、下線が引かれた可変領域を含む）。
Figure 2022553579000032
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４（配列番号１）に提供される重鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドを含む抗ＣＤ３７抗体を含み、抗体が、Ｌ２３４Ａ置換、Ｌ２３５Ａ置換、または両方（例えば、Ｌ２３４Ａ置換およびＬ２３５Ａ置換）を含み、位置２３４および２３５は、ＥＵ番号付けシステムに従う。Ｅｄｅｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．（１９６９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．６３：７８－８５。ＥＵ番号付けシステムによる残基Ｌ２３４およびＬ２３５は、表４に太字および斜体で示されている。特定の実施形態において、かかる抗ＣＤ３７抗体は、ＣＤ３７への結合に関して、表４に記載されているＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、およびＶＬ ＣＤＲ３を含む抗体と競合する。特定の実施形態において、かかる抗ＣＤ３７抗体は、表４に記載されているＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、およびＶＬ ＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体は、ＩｇＧ１抗体である。例えば、特定の態様において、抗ＣＤ３７抗体は、ＩｇＧ１カッパ抗体である。
特定の態様において、抗ＣＤ３７抗体は、表４に示される抗体に基づくＦＧｌｙ’含有抗体である。例えば、いくつかの実施形態において、抗体は、表４に示される抗体の誘導体であり、抗体と誘導体との間の差は、誘導体中の１つ以上のＦＧｌｙ’残基（および任意選択により、関連するＦＧＥ認識配列アミノ酸）の存在である。表４のアミノ酸配列において、可変領域は、下線が引かれており、ＣＤＲは、太字で示されている。この例において、重鎖のＣ末端の斜体の残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖のＣ末端のリジン残基を置き換える。斜体の残基の中の下線が引かれた残基（ＬＣＴＰＳＲ）は、アルデヒドタグを構成し、Ｃが、重鎖の発現時にＦＧＥによってＦＧｌｙ残基に変換される。斜体の残基の中の下線が引かれていない残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖配列とは異なる追加の残基である。
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体は、抗ＣＤ３７抗体Ｋ７１５３Ａの１個、２個、３個、４個、５個、または６個全ての相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。特定の態様において、抗ＣＤ３７抗体は、抗ＣＤ３７抗体ＡＧＳ６７Ｅの１個、２個、３個、４個、５個、または６個全ての相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
特定の態様において、抗ＣＤ３７抗体は、表４に示される抗体に基づくＦＧｌｙ’含有抗体である。例えば、いくつかの実施形態において、抗体は、表４に示される抗体の誘導体であり、抗体と誘導体との間の差は、誘導体中の１つ以上のＦＧｌｙ’残基（および任意選択により、関連するＦＧＥ認識配列アミノ酸）の存在である。一実施形態による、ダクリズマブベースの抗体の一例の核酸およびアミノ酸配列を表４に提供する。表４のアミノ酸配列において、可変領域は、下線が引かれており、ＣＤＲは、太字で示されている。この例のダクリズマブベースの抗体において、重鎖のＣ末端の斜体の残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖のＣ末端のリジン残基を置き換える。斜体の残基の中の下線が引かれた残基（ＬＣＴＰＳＲ）は、アルデヒドタグを構成し、Ｃが、重鎖の発現時にＦＧＥによってＦＧｌｙ残基に変換される。斜体の残基の中の下線が引かれていない残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖配列とは異なる追加の残基である。
主題のコンジュゲートでの使用に好適な抗ＣＤ３７抗体は、いくつかの場合において、その表面上でＣＤ３７を発現する（例えば、過剰発現する）ヒト腫瘍細胞（例えば、悪性Ｂ細胞）の増殖を阻害し、阻害は、インビトロ、インビボ、またはインビトロおよびインビボの両方で生じる。例えば、いくつかの場合において、主題のコンジュゲートでの使用に好適な抗ＣＤ３７抗体は、その表面上でＣＤ３７を発現する（例えば、過剰発現する）ヒト腫瘍細胞の増殖を、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または８０％より多く、例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％阻害する。
本開示の態様は、本明細書に記載の抗体のうちのいずれかのコンジュゲート化されていない態様をさらに含む。
修飾定常領域配列
上に示されるように、抗ＣＤ３７抗体のアミノ酸配列は、インビボ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳のときに）またはインビトロ（例えば、無細胞系において、アルデヒドタグ含有タンパク質をＦＧＥと接触させることによって）のいずれかで、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって２－ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基に変換（酸化）されることができるセリンまたはシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾される。かかるスルファターゼモチーフは、本明細書では、ＦＧＥ修飾部位とも称され得る。
スルファターゼモチーフ
アルデヒドタグの最小スルファターゼモチーフは、通常、５個または６個のアミノ酸残基の長さであり、通常、６個以下のアミノ酸残基の長さである。Ｉｇポリペプチドにおいて提供されるスルファターゼモチーフは、少なくとも５個または６個のアミノ酸残基であり、例えば、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８または７個未満のアミノ酸残基の長さを有するスルファターゼモチーフを定義するために、５～１６、６～１６、５～１５、６～１５、５～１４、６～１４、５～１３、６～１３、５～１２、６～１２、５～１１、６～１１、５～１０、６～１０、５～９、６～９、５～８、または６～８個のアミノ酸残基の長さであり得る。
特定の実施形態において、目的のポリペプチドは、１つ以上のアミノ酸残基、例えば、２個以上、もしくは３個以上、もしくは４個以上、もしくは５個以上、もしくは６個以上、もしくは７個以上、もしくは８個以上、もしくは９個以上、もしくは１０個以上、もしくは１１個以上、もしくは１２個以上、もしくは１３個以上、もしくは１４個以上、もしくは１５個以上、もしくは１６個以上、もしくは１７個以上、もしくは１８個以上、もしくは１９個以上、もしくは２０個以上、またはそれより多くのアミノ酸残基が、ポリペプチド中のスルファターゼモチーフの配列を提供するために、天然アミノ酸配列に対して挿入、欠失、置換（置き換え）されているものを含む。特定の実施形態において、ポリペプチドは、ポリペプチドの天然アミノ酸配列と比較して、アミノ酸配列の２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２個未満のアミノ酸残基の修飾（挿入、付加、欠失、および／または置換／置き換え）を含む。ポリペプチド（例えば、抗ＣＤ３７抗体）に対する天然のアミノ酸配列が、所望のスルファターゼモチーフの１つ以上の残基を含有する場合、残基の修飾の総数は、例えば、所望のスルファターゼモチーフの配列を提供するために、天然アミノ酸残基に隣接するアミノ酸残基の部位特異的修飾（挿入、付加、欠失、置換／置き換え）によって減少させることができる。特定の実施形態において、挿入され、欠失され、置換され（置き換えられ）、または付加される（例えば、Ｎ末端またはＣ末端に対して）アミノ酸残基の数を最小限に抑えるために、標的抗ＣＤ３７ポリペプチドの天然アミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑える。標的抗ＣＤ３７ポリペプチドのアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、かかる修飾が抗ＣＤ３７の機能および／または構造に及ぼし得る影響を最小限に抑え得る。
特定の目的のアルデヒドタグは、少なくとも１つの最小スルファターゼモチーフ（「コンセンサススルファターゼモチーフ」とも称される）を含むものであるが、より長いアルデヒドタグが、本開示によって企図および包含され、本開示の組成物および方法において使用され得ることが容易に理解されることに留意されたい。したがって、アルデヒドタグは、５個または６個の残基の最小スルファターゼモチーフを含むことができ、またはより長く、追加のアミノ酸残基によってモチーフのＮ末端および／またはＣ末端側に隣接され得る最小スルファターゼモチーフを含むことができる。例えば、５または６個のアミノ酸残基のアルデヒドタグ、ならびに５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個より多く、またはそれより多いアミノ酸残基のより長いアミノ酸配列が企図される。
アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣ末端またはその付近に存在することができ、例えば、アルデヒドタグは、天然の野生型Ｉｇ重鎖のＣ末端の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ１ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ２ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ３ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ軽鎖定常領域、例えば、カッパ軽鎖定常領域またはラムダ軽鎖定常領域中に存在し得る。
特定の実施形態において、使用されるスルファターゼモチーフは、以下の式によって記載されてもよく、
Ｘ１Ｚ１０Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （Ｉ’）
式中、
Ｚ１０が、システインまたはセリンであり（（Ｃ／Ｓ）によって表すこともでき）、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）またはヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよく）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、またはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩであり、
Ｘ１が、存在するか、または存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ、またはＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ、またはＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが、標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、独立して、任意のアミノ酸であってもよいが、通常は、脂肪族アミノ酸、極性非帯電アミノ酸、または硫黄含有アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、またはＧであってもよい。
抗ＣＤ３７重鎖および／または軽鎖のアミノ酸配列は、式Ｘ１Ｚ１０Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０の少なくとも５個のアミノ酸の配列を提供するように修飾することができ、式中、
Ｚ１０が、システインまたはセリンであり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基であり、
Ｚ３０が、脂肪族アミノ酸または塩基性アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在するか、または存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸であり、但し、異種スルファターゼモチーフがポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
この配列が、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域の内部にあるか、またはそれに隣接しており、この配列が、Ｉｇ重鎖のＣ末端にはない。
スルファターゼモチーフは、概して、選択されたＦＧＥ、例えば、アルデヒドタグ化ポリペプチドが発現される宿主細胞中に存在するＦＧＥ、または無細胞インビトロ法においてアルデヒドタグ化ポリペプチドと接触されるＦＧＥによって変換することができるように選択される。
例えば、ＦＧＥが、真核生物ＦＧＥ（例えば、ヒトＦＧＥを含む哺乳動物ＦＧＥ）である場合、スルファターゼモチーフは以下の式を有していてもよく、
Ｘ１ＣＸ２ＰＸ３Ｚ３０ （Ｉ”）
式中、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ、またはＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが、標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、またはＧであってもよく、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）またはヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよく）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、またはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩである。
スルファターゼモチーフの具体例としては、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１２）、ＭＣＴＰＳＲ（配列番号１３）、ＶＣＴＰＳＲ（配列番号１４）、ＬＣＳＰＳＲ（配列番号１５）、ＬＣＡＰＳＲ（配列番号１６）、ＬＣＶＰＳＲ（配列番号１７）、ＬＣＧＰＳＲ（配列番号１８）、ＩＣＴＰＡＲ（配列番号１９）、ＬＣＴＰＳＫ（配列番号２０）、ＭＣＴＰＳＫ（配列番号２１）、ＶＣＴＰＳＫ（配列番号２２）、ＬＣＳＰＳＫ（配列番号２３）、ＬＣＡＰＳＫ（配列番号２４）、ＬＣＶＰＳＫ（配列番号２５）、ＬＣＧＰＳＫ（配列番号２６）、ＬＣＴＰＳＡ（配列番号２７）、ＩＣＴＰＡＡ（配列番号２８）、ＭＣＴＰＳＡ（配列番号２９）、ＶＣＴＰＳＡ（配列番号３０）、ＬＣＳＰＳＡ（配列番号３１）、ＬＣＡＰＳＡ（配列番号３２）、ＬＣＶＰＳＡ（配列番号３３）、およびＬＣＧＰＳＡ（配列番号３４）が挙げられる。
ＦＧｌｙ含有配列
修飾された抗ＣＤ３７重鎖および／または軽鎖にＦＧＥが作用すると、スルファターゼモチーフ中のセリンまたはシステインをＦＧｌｙに修飾する。したがって、ＦＧｌｙ含有スルファターゼモチーフは、以下の式を有していてもよく、
Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （Ｉ’’’）
式中、
ＦＧｌｙが、ホルミルグリシン残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）またはヒスチジン（Ｈ）、通常は、リジンであってもよく）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、またはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩであり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ、またはＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、またはＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが、標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、またはＧであってもよい。
上に記載されるように、ＦＧｌｙ残基を含有する修飾ポリペプチドは、ＦＧｌｙと薬物（例えば、上に記載されるようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物）との反応によって薬物（例えば、マイタンシノイド）にコンジュゲート化され、ＦＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフを産生してもよい。本明細書で使用される場合、ＦＧｌｙ’という用語は、マイタンシノイド（例えば、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基）などの薬物にカップリングするスルファターゼモチーフの修飾アミノ酸残基を指す。したがって、ＦＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフは、以下の式を有していてもよく、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）またはヒスチジン（Ｈ）、通常は、リジンであってもよく）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、またはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩであり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ、またはＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、またはＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが、標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、またはＧであってもよい。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖定常領域のＣ末端に配置されている。いくつかの例において、重鎖定常領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）またはヒスチジン（Ｈ）、通常は、リジンであってもよく）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、またはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩであり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ、またはＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、またはＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが、標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、またはＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫに対してＣ末端であり、この配列が、天然の野生型重鎖Ｉｇ定常領域中に存在しない１、２、３、４、５、または５～１０個のアミノ酸を含んでいてもよい。
特定の実施形態において、重鎖定常領域は、Ｉｇ重鎖のＣ末端に、例えば、天然ＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号３６）配列の代わりに、配列ＳＬＳＬＳＰＧＳＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＳ（配列番号３５）を含む。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基は、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖定常領域に配置されている。特定の実施形態において、軽鎖定常領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）またはヒスチジン（Ｈ）、通常は、リジンであってもよく）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、またはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩであり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ、またはＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、またはＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが、標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、またはＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＫＶＤＮＡＬ（配列番号３７）に対してＣ末端であり、かつ／またはアミノ酸配列ＱＳＧＮＳＱ（配列番号３８）に対してＮ末端である。
特定の実施形態において、軽鎖定常領域は、配列ＫＶＤＮＡＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱ（配列番号３９）を含む。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ１領域に配置されている。特定の実施形態において、重鎖ＣＨ１領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
式中、
ＦＧｌｙ’が、式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）によって表すこともでき）、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）またはヒスチジン（Ｈ）、通常は、リジンであってもよく）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、またはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、またはＩであり、
Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ、またはＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、またはＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが、標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２およびＸ３が、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または帯電アミノ酸以外のもの）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、またはＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡ（配列番号４０）に対してＣ末端であり、かつ／またはアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰ（配列番号４１）に対してＮ末端である。
特定の実施形態において、重鎖ＣＨ１領域は、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰ（配列番号４２）を含む。
修飾部位
上に示されるように、抗ＣＤ３７抗体のアミノ酸配列は、インビボ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳のときに）またはインビトロ（例えば、無細胞系において、アルデヒドタグ含有タンパク質をＦＧＥと接触させることによって）のいずれかで、ＦＧＥの作用によってＦＧｌｙ残基に変換（酸化）されることができるセリンまたはシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾される。本開示のコンジュゲートを生成するために使用される抗ＣＤ３７ポリペプチドには、少なくともＩｇ定常領域、例えば、Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン、少なくともＣＨ１およびＣＨ２ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン、またはＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４ドメイン）、またはＩｇ軽鎖定常領域が含まれる。かかるＩｇポリペプチドは、本明細書で「標的Ｉｇポリペプチド」または「標的抗ＣＤ３７抗体」または「標的抗ＣＤ３７ Ｉｇポリペプチド」と称される。
スルファターゼモチーフが導入される抗ＣＤ３７抗体中の部位は、任意の好都合な部位であり得る。上に示されるように、いくつかの例において、挿入され、欠失され、置換され（置き換えられ）、および／または付加される（例えば、Ｎ末端またはＣ末端に対して）アミノ酸残基の数を最小限に抑えるために、標的抗ＣＤ３７ポリペプチドの天然アミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑える。標的抗ＣＤ３７ポリペプチドのアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、かかる修飾が抗ＣＤ３７の機能および／または構造に及ぼし得る影響を最小限に抑え得る。
抗ＣＤ３７抗体重鎖定常領域は、任意の重鎖アイソタイプ、天然に存在しないＩｇ重鎖定常領域（コンセンサスＩｇ重鎖定常領域を含む）のＩｇ定常領域を含み得る。Ｉｇ定常領域は、アルデヒドタグを含むように修飾されてもよく、アルデヒドタグは、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域中またはそれに隣接して存在する。Ｉｇ定常領域は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、もしくは１６個のアミノ酸、または１６個より多いアミノ酸の挿入および／または置換によって修飾され、上述のようなスルファターゼモチーフのアミノ酸配列を提供することができる。
いくつかの場合において、アルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン、少なくともＣＨ１およびＣＨ２ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン、またはＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４ドメイン）を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプ重鎖またはその任意のアロタイプバリアント、例えば、ヒト重鎖定常領域配列またはマウス重鎖定常領域配列、ハイブリッド重鎖定常領域、合成重鎖定常領域、またはＦＧＥによって修飾され、ＦＧｌｙ修飾Ｉｇポリペプチドを生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むように修飾されたコンセンサス重鎖定常領域配列などの重鎖定常領域配列を含み得る。Ｉｇ重鎖のアロタイプバリアントは、当該技術分野で既知である。例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １：４を参照されたい。
いくつかの場合において、アルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域は、カッパ軽鎖、ラムダ軽鎖、例えば、ヒトカッパまたはラムダ軽鎖定常領域、ハイブリッド軽鎖定常領域、合成軽鎖定常領域、またはＦＧＥによって修飾され、ＦＧｌｙ修飾抗ＣＤ３７抗体ポリペプチドを生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むように修飾されたコンセンサス軽鎖定常領域配列などの軽鎖定常領域配列を含み得る。例示的な定常領域は、ヒトガンマ１およびガンマ３領域を含む。スルファターゼモチーフを除き、修飾定常領域は、野生型アミノ酸配列を有していてもよく、または野生型アミノ酸配列に対して少なくとも７０％同一（例えば、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％同一）であるアミノ酸配列を有し得る。
いくつかの実施形態において、スルファターゼモチーフは、Ｉｇポリペプチド重鎖のＣ末端以外の位置、またはそれに加えた位置にある。上に示されるように、単離されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７ポリペプチドは、上述のスルファターゼモチーフを含むように修飾された重鎖定常領域を含んでいてもよく、スルファターゼモチーフが、抗ＣＤ３７ポリペプチド重鎖定常領域の表面接近可能なループ領域中、またはそれに隣接している。
いくつかの例において、標的抗ＣＤ３７免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ１重鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１２２～１２７、２）アミノ酸１３７～１４３、３）アミノ酸１５５～１５８、４）アミノ酸１６３～１７０、５）アミノ酸１６３～１８３、６）アミノ酸１７９～１８３、７）アミノ酸１９０～１９２、８）アミノ酸２００～２０２、９）アミノ酸１９９～２０２、１０）アミノ酸２０８～２１２、１１）アミノ酸２２０～２４１、１２）アミノ酸２４７～２５１、１３）アミノ酸２５７～２６１、１４）アミノ酸２６９～２７７、１５）アミノ酸２７１～２７７、１６）アミノ酸２８４～２８５、１７）アミノ酸２８４～２９２、１８）アミノ酸２８９～２９１、１９）アミノ酸２９９～３０３、２０）アミノ酸３０９～３１３、２１）アミノ酸３２０～３２２、２２）アミノ酸３２９～３３５、２３）アミノ酸３４１～３４９、２４）アミノ酸３４２～３４８、２５）アミノ酸３５６～３６５、２６）アミノ酸３７７～３８１、２７）アミノ酸３８８～３９４、２８）アミノ酸３９８～４０７、２９）アミノ酸４３３～４５１、および３０）アミノ酸４４６～４５１、ここで、アミノ酸番号付けは、ヒトＩｇＧ１のアミノ酸番号付けに基づく。
いくつかの例において、標的抗ＣＤ３７免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ１重鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１６～２２、３）アミノ酸３４～４７、４）アミノ酸４２～４９、５）アミノ酸４２～６２、６）アミノ酸３４～３７、７）アミノ酸６９～７１、８）アミノ酸７９～８１、９）アミノ酸７８～８１、１０）アミノ酸８７～９１、１１）アミノ酸１００～１２１、１２）アミノ酸１２７～１３１、１３）アミノ酸１３７～１４１、１４）アミノ酸１４９～１５７、１５）アミノ酸１５１～１５７、１６）アミノ酸１６４～１６５、１７）アミノ酸１６４～１７２、１８）アミノ酸１６９～１７１、１９）アミノ酸１７９～１８３、２０）アミノ酸１８９～１９３、２１）アミノ酸２００～２０２、２２）アミノ酸２０９～２１５、２３）アミノ酸２２１～２２９、２４）アミノ酸２２～２２８、２５）アミノ酸２３６～２４５、２６）アミノ酸２１７～２６１、２７）アミノ酸２６８～２７４、２８）アミノ酸２７８～２８７、２９）アミノ酸３１３～３３１、および３０）アミノ酸３２４～３３１、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｂに示されるような配列番号４３（ヒトＩｇＧ１定常領域）に示されるヒトＩｇＧ１のアミノ酸番号付けに基づく。
ＩｇＧ１重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号５３）、２）ＫＳＴＳＧＧＴ（配列番号５４）、３）ＰＥＰＶ（配列番号５５）、４）ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号５６）、５）ＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬ（配列番号５７）、６）ＱＳＳＧＬ（配列番号５８）、７）ＶＴＶ、８）ＱＴＹ、９）ＴＱＴＹ（配列番号５９）、１０）ＨＫＰＳＮ（配列番号６０）、１１）ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧ（配列番号６１）、１２）ＦＰＰＫＰ（配列番号６２）、１３）ＩＳＲＴＰ（配列番号６３）、１４）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号６４）、１５）ＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号６５）、１６）ＤＧ、１７）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号６６）、１８）ＨＮＡ、１９）ＱＹＮＳＴ（配列番号６７）、２０）ＶＬＴＶＬ（配列番号６８）、２１）ＧＫＥ、２２）ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号６９）、２３）ＳＫＡＫＧＱＰＲＥ（配列番号７０）、２４）ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号７１）、２５）ＰＰＳＲＫＥＬＴＫＮ（配列番号７２）、２６）ＹＰＳＤＩ（配列番号７３）、２７）ＮＧＱＰＥＮＮ（配列番号７４）、２８）ＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳ（配列番号７５）、２９）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号７６）、および３０）ＳＬＳＰＧＫ（配列番号７７）が挙げられる。
いくつかの例において、標的免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ２重鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１３～２４、３）アミノ酸３３～３７、４）アミノ酸４３～５４、５）アミノ酸５８～６３、６）アミノ酸６９～７１、７）アミノ酸７８～８０、８）８７～８９、９）アミノ酸９５～９６、１０）１１４～１１８、１１）１２２～１２６、１２）１３４～１３６、１３）１４４～１５２、１４）１５９～１６７、１５）１７５～１７６、１６）１８４～１８８、１７）１９５～１９７、１８）２０４～２１０、１９）２１６～２２４、２０）２３１～２３３、２１）２３７～２４１、２２）２５２～２５６、２３）２６３～２６９、２４）２７３～２８２、２５）アミノ酸２９９～３０２、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｂに示されるような配列番号４４（ヒトＩｇＧ２）に示されるアミノ酸配列の番号付けに基づく。
ＩｇＧ２重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号７８）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡ（配列番号７９）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号８０）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰ（配列番号８１）、５）ＱＳＳＧＬＹ（配列番号８２）、６）ＶＴＶ、７）ＴＱＴ、８）ＨＫＰ、９）ＤＫ、１０）ＶＡＧＰＳ（配列番号８３）、１１）ＦＰＰＫＰ（配列番号８４）、１２）ＲＴＰ、１３）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号８５）、１４）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号８６）、１５）ＦＮ、１６）ＶＬＴＶＶ（配列番号８７）、１７）ＧＫＥ、１８）ＮＫＧＬＰＡＰ（配列番号８８）、１９）ＳＫＴＫＧＱＰＲＥ（配列番号８９）、２０）ＰＰＳ、２１）ＭＴＫＮＱ（配列番号９０）、２２）ＹＰＳＤＩ（配列番号９１）、２３）ＮＧＱＰＥＮＮ（配列番号９２）、２４）ＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳ（配列番号９３）、２５）ＧＮＶＦ（配列番号９４）、および２６）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号９５）が挙げられる。
いくつかの例において、標的免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ３重鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１３～２２、３）アミノ酸３３～３７、４）アミノ酸４３～６１、５）アミノ酸７１、６）アミノ酸７８～８０、７）８７～９１、８）アミノ酸９７～１０６、９）１１１～１１５、１０）１４７～１６７、１１）１７３～１７７、１６）１８５～１８７、１３）１９５～２０３、１４）２１０～２１８、１５）２２６～２２７、１６）２３８～２３９、１７）２４６～２４８、１８）２５５～２６１、１９）２６７～２７５、２０）２８２～２９１、２１）アミノ酸３０３～３０７、２２）アミノ酸３１３～３２０、２３）アミノ酸３２４～３３３、２４）アミノ酸３５０～３５２、２５）アミノ酸３５９～３６５、および２６）アミノ酸３７２～３７７、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｂに示されるような配列番号４５（ヒトＩｇＧ３）に示されるアミノ酸配列の番号付けに基づく。
ＩｇＧ３重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号９６）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＧＧＴ（配列番号９７）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号９８）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧ（配列番号９９）、５）Ｖ、６）ＴＱＴ、７）ＨＫＰＳＮ（配列番号１００）、８）ＲＶＥＬＫＴＰＬＧＤ（配列番号１０１）、９）ＣＰＲＣＰＫＰ（配列番号１０２）、１０）ＰＫＳＣＤＴＰＰＰＣＰＲＣＰＡＰＥＬＬＧＧ（配列番号１０３）、１１）ＦＰＰＫＰ（配列番号１０４）、１２）ＲＴＰ、１３）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号１０５）、１４）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号１０６）、１５）ＹＮ、１６）ＶＬ、１７）ＧＫＥ、１８）ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号１０７）、１９）ＳＫＴＫＧＱＰＲＥ（配列番号１０８）、２０）ＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮ（配列番号１０９）、２１）ＹＰＳＤＩ（配列番号１１０）、２２）ＳＳＧＱＰＥＮＮ（配列番号１１１）、２３）ＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳ（配列番号１１２）、２４）ＧＮＩ、２５）ＨＥＡＬＨＮＲ（配列番号１１３）、および２６）ＳＬＳＰＧＫ（配列番号１１４）が挙げられる。
いくつかの例において、標的免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ４重鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１～５、２）アミノ酸１２～２３、３）アミノ酸３２～３６、４）アミノ酸４２～５３、５）アミノ酸５７～６２、６）アミノ酸６８～７０、７）アミノ酸７７～７９、８）アミノ酸８６～８８、９）アミノ酸９４～９５、１０）アミノ酸１０１～１０２、１１）アミノ酸１０８～１１８、１２）アミノ酸１２２～１２６、１３）アミノ酸１３４～１３６、１４）アミノ酸１４４～１５２、１５）アミノ酸１５９～１６７、１６）アミノ酸１７５～１７６、１７）アミノ酸１８５～１８６、１８）アミノ酸１９６～１９８、１９）アミノ酸２０５～２１１、２０）アミノ酸２１７～２２６、２１）アミノ酸２３２～２４１、２２）アミノ酸２５３～２５７、２３）アミノ酸２６４～２６５、２４）２６９～２７０、２５）アミノ酸２７４～２８３、２６）アミノ酸３００～３０３、２７）アミノ酸３９９～４１７、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｂに示されるような配列番号４６（ヒトＩｇＧ４）に示されるアミノ酸配列の番号付けに基づく。
ＩｇＧ４重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＳＴＫＧＰ（配列番号１１５）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡ（配列番号１１６）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号１１７）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰ（配列番号１１８）、５）ＱＳＳＧＬＹ（配列番号１１９）、６）ＶＴＶ、７）ＴＫＴ、８）ＨＫＰ、９）ＤＫ、１０）ＹＧ、１１）ＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳ（配列番号１２０）、１２）ＦＰＰＫＰ（配列番号１２１）、１３）ＲＴＰ、１４）ＤＶＳＱＥＤＰＥＶ（配列番号１２２）、１５）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号１２３）、１６）ＦＮ、１７）ＶＬ、１８）ＧＫＥ、１９）ＮＫＧＬＰＳＳ（配列番号１２４）、２０）ＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰ（配列番号１２５）、２１）ＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮ（配列番号１２６）、２２）ＹＰＳＤＩ（配列番号１２７）、２３）ＮＧ、２４）ＮＮ、２５）ＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳ（配列番号１２８）、２６）ＧＮＶＦ（配列番号１２９）、および２７）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１３０）が挙げられる。
いくつかの例において、標的免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＡ重鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１～１３、２）アミノ酸１７～２１、３）アミノ酸２８～３２、４）アミノ酸４４～５４、５）アミノ酸６０～６６、６）アミノ酸７３～７６、７）アミノ酸８０～８２、８）アミノ酸９０～９１、９）アミノ酸１２３～１２５、１０）アミノ酸１３０～１３３、１１）アミノ酸１３８～１４２、１２）アミノ酸１５１～１５８、１３）アミノ酸１６５～１７４、１４）アミノ酸１８１～１８４、１５）アミノ酸１９２～１９５、１６）アミノ酸１９９、１７）アミノ酸２０９～２１０、１８）アミノ酸２２２～２４５、１９）アミノ酸２５２～２５６、２０）アミノ酸２６６～２７６、２１）アミノ酸２９３～２９４、２２）アミノ酸３０１～３０４、２３）アミノ酸３１７～３２０、２４）アミノ酸３２９～３５３、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｂに示されるような配列番号４７（ヒトＩｇＡ）に示されるアミノ酸配列の番号付けに基づく。
ＩｇＡ重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＰＴＳＰＫＶＦＰＬＳＬ（配列番号１３１）、２）ＱＰＤＧＮ（配列番号１３２）、３）ＶＱＧＦＦＰＱＥＰＬ（配列番号１３３）、４）ＳＧＱＧＶＴＡＲＮＦＰ（配列番号１３４）、５）ＳＧＤＬＹＴＴ（配列番号１３５）、６）ＰＡＴＱ（配列番号１３６）、７）ＧＫＳ、８）ＹＴ、９）ＣＨＰ、１０）ＨＲＰＡ（配列番号１３７）、１１）ＬＬＧＳＥ（配列番号１３８）、１２）ＧＬＲＤＡＳＧＶ（配列番号１３９）、１３）ＳＳＧＫＳＡＶＱＧＰ（配列番号１４０）、１４）ＧＣＹＳ（配列番号１４１）、１５）ＣＡＥＰ（配列番号１４２）、１６）ＰＥ、１７）ＳＧＮＴＦＲＰＥＶＨＬＬＰＰＰＳＥＥＬＡＬＮＥＬ（配列番号１４３）、１８）ＡＲＧＦＳ（配列番号１４４）、１９）ＱＧＳＱＥＬＰＲＥＫＹ（配列番号１４５）、２０）ＡＶ、２１）ＡＡＥＤ（配列番号１４６）、２２）ＨＥＡＬ（配列番号１４７）、および２３）ＩＤＲＬＡＧＫＰＴＨＶＮＶＳＶＶＭＡＥＶＤＧＴＣＹ（配列番号１４８）が挙げられる。
スルファターゼモチーフは、Ｉｇ重鎖のかかる修飾部位のこれらのアミノ酸配列のうちの１つ以上内、またはそれに隣接して提供され得る。例えば、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む場合）、これらの修飾部位に隣接してＮ末端に、および／または隣接してＣ末端にスルファターゼモチーフを提供することができる。あるいは、またはこれに加えて、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む場合）、Ｉｇ重鎖修飾部位の任意の２つの残基の間にスルファターゼモチーフを提供することができる。いくつかの実施形態において、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、互いに隣接し得るか、または１つ、２つ、３つ、４つ以上（例えば、約１～約２５、約２５～約５０、または約５０～約１００、またはそれ以上のアミノ酸によって分離され得る２つのモチーフを含むように修飾され得る。あるいは、またはこれに加えて、天然アミノ酸配列が、スルファターゼモチーフ配列の１つ以上のアミノ酸残基を提供する場合、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列の修飾部位の選択されたアミノ酸残基は、修飾部位にスルファターゼモチーフを提供するように、修飾され得る（例えば、修飾が１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む場合）。
したがって、表面接近可能なループ領域のアミノ酸配列を修飾してスルファターゼモチーフを提供することができ、修飾が、挿入、欠失、および／または置換を含み得る。例えば、修飾がＣＨ１ドメイン中にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号１４９）を有していてもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＮＳＧＡＬＣＴＰＳＲＧ（配列番号１５０）であってもよく、例えば、ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号１５１）配列の「ＴＳ」残基が、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１５３）を有するように、「ＣＴＰＳＲ」（配列番号１５２）と置き換えられている。別の例として、修飾がＣＨ２ドメイン中にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号１５４）を有していてもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＮＬＣＴＰＳＲＡＰ（配列番号１５５）であってもよく、例えば、ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号１５６）配列の「ＫＡＬ」残基が、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１５８）を有するように、「ＬＣＴＰＳＲ」（配列番号１５７）と置き換えられている。別の例として、修飾がＣＨ２／ＣＨ３ドメイン中にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号１５９）を有していてもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＫＡＫＧＬＣＴＰＳＲ（配列番号１６０）であってもよく、例えば、ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号１６１）配列の「ＧＱＰ」残基が、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１６３）を有するように、「ＬＣＴＰＳ」（配列番号１６２）と置き換えられている。
上に示されるように、単離されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７ Ｉｇポリペプチドは、上述のスルファターゼモチーフを含むように修飾された軽鎖定常領域を含んでいてもよく、スルファターゼモチーフが、Ｉｇポリペプチド軽鎖定常領域の表面接近可能なループ領域中にあるか、またはそれに隣接している。
いくつかの例において、標的免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇ軽鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１３０～１３５、２）アミノ酸１４１～１４３、３）アミノ酸１５０、４）アミノ酸１６２～１６６、５）アミノ酸１６３～１６６、６）アミノ酸１７３～１８０、７）アミノ酸１８６～１９４、８）アミノ酸２１１～２１２、９）アミノ酸２２０～２２５、１０）アミノ酸２３３～２３６、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｃに示されるようなヒトカッパ軽鎖のアミノ酸番号付けに基づく。いくつかの例において、標的免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇ軽鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１２～１４、３）アミノ酸２１、４）アミノ酸３３～３７、５）アミノ酸３４～３７、６）アミノ酸４４～５１、７）アミノ酸５７～６５、８）アミノ酸８３～８３、９）アミノ酸９１～９６、１０）アミノ酸１０４～１０７、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｃに示されるような配列番号４８（ヒトカッパ軽鎖）に基づく。
Ｉｇ軽鎖（例えば、ヒトカッパ軽鎖）の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＲＴＶＡＡＰ（配列番号１６４）、２）ＰＰＳ、３）Ｇｌｙ（例えば、図１５Ｃに示されるヒトカッパ軽鎖配列の位置１５０にあるＧｌｙ）、４）ＹＰＲＥＡ（配列番号１６５）、５）ＰＲＥＡ（配列番号１６６）、６）ＤＮＡＬＱＳＧＮ（配列番号１６７）、７）ＴＥＱＤＳＫＤＳＴ（配列番号１６８）、８）ＨＫ、９）ＨＱＧＬＳＳ（配列番号１６９）、および１０）ＲＧＥＣ（配列番号１７０）が挙げられる。
Ｉｇラムダ軽鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、ＱＰＫＡＡＰ（配列番号１７１）、ＰＰＳ、ＮＫ、ＤＦＹＰＧＡＶ（配列番号１７２）、ＤＳＳＰＶＫＡＧ（配列番号１７３）、ＴＴＰ、ＳＮ、ＨＫＳ、ＥＧ、およびＡＰＴＥＣＳ（配列番号１７４）が挙げられる。
いくつかの例において、標的免疫グロブリンは、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するラットＩｇ軽鎖定常領域の領域内にあるか、またはそれに隣接している。１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１２～１４、３）アミノ酸１２１～２２、４）アミノ酸３１～３７、５）アミノ酸４４～５１、６）アミノ酸５５～５７、７）アミノ酸６１～６２、８）アミノ酸８１～８３、９）アミノ酸９１～９２、１０）アミノ酸１０２～１０５、ここで、アミノ酸番号付けは、図１５Ｃに示されるような配列番号５２に示されるラット軽鎖のアミノ酸番号付けに基づく。
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３７重鎖定常領域のＣＨ１領域に導入される。いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３７重鎖のＣ末端またはその付近（例えば、１～１０アミノ酸以内）に導入される。いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、軽鎖定常領域に導入される。
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３７重鎖定常領域のＣＨ１領域に、例えば、ＩｇＧ１重鎖アミノ酸配列のアミノ酸１２１～２１９内に導入される。例えば、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、以下のアミノ酸配列に導入される。ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥ（配列番号１７５）．例えば、これらの実施形態のいくつかにおいて、アミノ酸配列ＧＡＬＴＳＧＶＨ（配列番号１７６）は、ＧＡＬＣＴＰＳＲＧＶＨ（配列番号１７７）へと修飾され、ここで、スルファターゼモチーフが、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１７８）である。
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３７重鎖のＣ末端またはその付近に導入され、例えば、抗ＣＤ３７重鎖のＣ末端の１アミノ酸、２アミノ酸（ａａ）、３ａａ、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、または１０ａａ内に導入されるスルファターゼモチーフ。１つの非限定的な例として、抗ＣＤ３７重鎖のＣ末端リジン残基を、アミノ酸配列ＳＬＣＴＰＳＲＧＳ（配列番号１７９）と置き換えることができる。
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖の定常領域に導入される。１つの非限定的な例として、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖の定常領域に導入され、スルファターゼモチーフが、ＫＶＤＮＡＬ（配列番号１８０）に対してＣ末端であり、かつ／またはＱＳＧＮＳＱ（配列番号１８１）に対してＮ末端である。例えば、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号８２）であり、抗ＣＤ３７軽鎖は、アミノ酸配列ＫＶＤＮＡＬＬＣＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱ（配列番号１８３）を含む。
ポリペプチドへのコンジュゲート化のための薬物
本開示は、薬物－ポリペプチドコンジュゲートを提供する。薬物の例としては、がん化学療法剤などの小分子薬物が挙げられる。例えば、ポリペプチドが、腫瘍細胞に対する特異性を有する抗体（またはその断片）である場合、抗体は、本明細書に記載されるように、修飾アミノ酸を含むように修飾されてもよく、その後、微小管作用剤などのがん化学療法剤にコンジュゲート化され得る。特定の実施形態において、薬物は、マイタンシノイドなどの抗増殖活性を有する微小管作用剤である。特定の実施形態において、薬物は、以下の構造として、マイタンシノイドであり、
Figure 2022553579000033

式中、
Figure 2022553579000034

が、式（Ｉ）において、マイタンシノイドとリンカーＬとの間の接続点を示す。「接続点」は、
Figure 2022553579000035

記号が式（Ｉ）中のマイタンシノイドのＮとリンカーＬとの間の結合を示すことを意味する。例えば、式（Ｉ）において、Ｗ１は、マイタンシノイド（例えば、上の構造のマイタンシノイド）であり、式中、
Figure 2022553579000036

が、マイタンシノイドとリンカーＬとの間の接続点を示す。いくつかの例において、上に示されるマイタンシノイド構造は、デアシルマイタンシンと称されてもよい。
上述のように、特定の実施形態において、Ｌは、式－（Ｌ１）ａ－（Ｌ２）ｂ－（Ｌ３）ｃ－（Ｌ４）ｄ－によって記載されるリンカーであり、式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、およびＬ４は、それぞれ独立して、リンカー単位である。特定の実施形態において、Ｌ１は、カップリング部分、例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分（例えば、上の式（Ｉ）に示されるとおり）に接続する。特定の実施形態において、Ｌ２は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。特定の実施形態において、Ｌ３は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。特定の実施形態において、Ｌ４は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。
上述のように、特定の実施形態において、リンカー－（Ｌ１）ａ－（Ｌ２）ｂ－（Ｌ３）ｃ－（Ｌ４）ｄ－は、式－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－によって記載され、式中、ａ、ｂ、ｃおよびｄが、それぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が、１～４である。特定の実施形態において、上述のように、Ｌ１は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分（例えば、上の式（Ｉ）に示されるとおり）に接続する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ１は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分（例えば、上の式（Ｉ）に示されるとおり）に接続する。特定の実施形態において、Ｖ１は、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。特定の実施形態において、上述のように、Ｌ２は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ２は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続するか、またはＶ２は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。特定の実施形態において、上述のように、Ｌ３は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ３は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続するか、またはＶ３は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。特定の実施形態において、上述のように、Ｌ４は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ４は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続するか、またはＶ４は、存在する場合、Ｗ１（マイタンシノイド）に接続する。
本開示の実施形態は、ポリペプチド（例えば、抗ＣＤ３７抗体）が、１つ以上の薬物部分（例えば、マイタンシノイド）、例えば、２薬物部分、３薬物部分、４薬物部分、５薬物部分、６薬物部分、７薬物部分、８薬物部分、９薬物部分、または１０薬物部分、またはそれより多い薬物部分にコンジュゲート化される、コンジュゲートを含む。薬物部分は、本明細書に記載されるように、ポリペプチド中の１つ以上の部位でポリペプチドにコンジュゲート化され得る。特定の実施形態において、コンジュゲートは、０．１～１０、または０．５～１０、または１～１０、例えば、１～９、または１～８、または１～７、または１～６、または１～５、または１～４、または１～３、または１～２の範囲の平均薬物対抗体比（ＤＡＲ）（モル比）を有する。特定の実施形態において、コンジュゲートは、１～２、例えば、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、または２などの平均ＤＡＲを有する。特定の実施形態において、コンジュゲートは、１．５～２の平均ＤＡＲを有する。特定の実施形態において、コンジュゲートは、１．７５～１．８５の平均ＤＡＲを有する。特定の実施形態において、コンジュゲートは、１．８の平均ＤＡＲを有する。平均は、算術平均を意味する。
製剤
本開示のコンジュゲートは、様々な異なる方法で製剤化され得る。概して、コンジュゲートが、ポリペプチド－薬物コンジュゲートである場合、コンジュゲートは、ポリペプチドにコンジュゲート化される薬物、治療される条件、および使用される投与経路と適合性のある様式で製剤化される。
いくつかの実施形態において、本開示のコンジュゲートのうちのいずれかと、薬学的に許容される賦形剤とを含む、薬学的組成物が提供される。
コンジュゲート（例えば、ポリペプチド－薬物コンジュゲート）は、任意の好適な形態、例えば、薬学的に許容される塩の形態で提供することができ、任意の好適な投与経路、例えば、経口、局所、または非経口投与のために製剤化することができる。コンジュゲートが、注射可能な液体（それらが静脈内または直接的に組織に投与されるそれらの実施形態におけるものなど）として提供される場合、コンジュゲートは、すぐに使用できる剤形として、または再構成可能な貯蔵安定性粉末もしくは薬学的に許容される担体および賦形剤からなる液体として提供され得る。
コンジュゲートを製剤化する方法は、容易に利用可能なものから適応され得る。例えば、コンジュゲートは、治療有効量のコンジュゲートと薬学的に許容される担体（例えば、生理食塩水）とを含む薬学的組成物で提供され得る。薬学的組成物は、任意選択により、他の添加剤（例えば、緩衝剤、安定剤、防腐剤など）を含み得る。いくつかの実施形態において、製剤は、哺乳動物への投与に適しており、例えば、ヒトへの投与に適したものである。
治療方法
本開示のポリペプチド－薬物コンジュゲートは、親薬物（すなわち、ポリペプチドへのコンジュゲート化の前の薬物）の投与によって治療を受けることが可能な対象の状態または疾患の治療における用途が見出される。
いくつかの実施形態において、有効量の本開示のコンジュゲートのいずれかを対象に投与することを含む、方法が提供される。
特定の態様において、対象の標的部位に薬物を送達する方法であって、この方法が、対象に、本開示のコンジュゲートのうちのいずれかを含む薬学的組成物を投与することを含み、投与が、対象の標的部位で、コンジュゲートから治療有効量の薬物を放出するのに有効である、方法が提供される。
「治療」は、宿主を悩ませる状態に関連する症状の少なくとも改善が達成されることを意味し、改善が、パラメータの大きさ、例えば、治療されている状態と関連する症状の少なくとも低減を指すために、広義で使用される。したがって、治療は、病的状態、またはそれと関連する少なくとも症状が、その状態、またはその状態を特徴付ける少なくとも症状を患わないよう宿主が完全に阻害され、例えば、発生を予防、または停止、例えば、終了する状況も含む。したがって、治療は、（ｉ）予防、すなわち、有害な状態への疾患進行を予防するなど、臨床症状を発症させないようにすることを含め、臨床症状の発症のリスクを減らすこと、（ｉｉ）阻害、すなわち、活動性の疾患を緩和または完全に阻害することなど、臨床症状の発症またはさらなる発症を阻止すること、および／または（ｉｉｉ）軽減、すなわち、臨床症状を逆行させることを含む。
治療される対象は、治療の必要がある対象であり、治療される宿主が、親薬物を使用して治療を受けることが可能である宿主であり得る。したがって、様々な対象は、本明細書に開示されるポリペプチド－薬物コンジュゲートを使用して治療を受けることが可能であり得る。概して、かかる対象は、目的のヒトを含む「哺乳動物」である。他の対象は、家庭動物（例えば、イヌおよびネコ）、家畜（例えば、ウシ、ブタ、ヤギ、ウマなど）、げっ歯類（例えば、マウス、モルモット、およびラット、例えば、疾患の動物モデルなど）、ならびに非ヒト霊長類（例えば、チンパンジー、およびサルを含み得る。
投与されるポリペプチド－薬物コンジュゲートの量は、親薬物の用量および／または投与量レジメンの指導に基づいて最初に決定され得る。概して、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、結合した薬物の標的化送達および／または血清半減期の増強を提供することができ、したがって、投薬量レジメン中の用量の低減または投与の低減のうちの少なくとも１つを提供する。したがって、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、本開示のポリペプチド－薬物コンジュゲートにおいてコンジュゲート化される前の親薬物と比較して、投薬量レジメン中の用量の低減および／または投与の低減を提供することができる。
さらに、上に示されるように、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、制御された化学量論量の薬物送達を提供することができるため、ポリペプチド－薬物コンジュゲートの投薬量は、ポリペプチド－薬物コンジュゲートを基準として提供される薬物分子の数に基づいて計算することができる。
いくつかの実施形態において、複数の用量のポリペプチド－薬物コンジュゲートが投与される。ポリペプチド－薬物コンジュゲートの投与の頻度は、様々な因子、例えば、症状の重症度、対象の状態などのいずれかに依存して変化し得る。例えば、いくつかの実施形態において、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、１ヶ月に１回、１ヶ月に２回、１ヶ月に３回、隔週、週に１回（ｑｗｋ）、週に２回、週に３回、週に４回、週に５回、週に６回、１日おき、毎日（ｑｄ／ｏｄ）、１日に２回（ｂｄｓ／ｂｉｄ）、または１日に３回（ｔｄｓ／ｔｉｄ）などで投与される。
がんを治療する方法
本開示は、がんを有する個体に本開示のコンジュゲートを送達することを含む方法を提供する。本方法は、がん腫、肉腫、白血病、およびリンパ腫を含む多種多様ながんを治療するために有用である。がんの文脈において、「治療すること」という用語は、固形腫瘍の成長を低減すること、がん細胞の複製を阻害すること、全体的な腫瘍負荷を低減すること、およびがんに関連する１つ以上の症状を改善することのうちの１つ以上（例えば、それぞれ）を含む。
主題の方法を使用して治療され得るがん腫としては、限定されないが、食道がん腫、肝細胞がん腫、基底細胞がん腫（皮膚がんの一形態）、扁平上皮細胞がん腫（種々の組織）、移行上皮がん腫（膀胱の悪性新生物）を含む膀胱がん腫、気管支がん腫、結腸がん腫、結腸直腸がん腫、胃がん腫、肺の小細胞がん腫および非小細胞がん腫を含む肺がん腫、副腎皮質がん腫、甲状腺がん腫、膵臓がん腫、乳がん腫、卵巣がん腫、前立腺がん腫、腺がん、汗腺がん腫、脂腺がん腫、乳頭がん腫、乳頭腺がん、嚢胞腺がん、髄様がん腫、腎細胞がん腫、非浸潤性乳管がん腫、または胆管がん腫、絨毛がん腫、セミノーマ、胎児性がん腫、ウィルムス腫瘍、頸部がん腫、子宮がん腫、精巣がん腫、骨原性がん腫、上皮がん腫、および上咽頭がん腫などが挙げられる。
主題の方法を使用して治療され得る肉腫としては、限定されないが、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、コルドーマ、骨原性肉腫、骨肉腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、および他の軟組織肉腫が挙げられる。
主題の方法を使用して治療され得る他の固形腫瘍としては、限定されないが、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、および網膜芽腫が挙げられる。
主題の方法を使用して治療され得る白血病としては、限定されないが、ａ）慢性骨髄増殖性障害（多能性造血幹細胞の新生物性障害）、ｂ）急性骨髄性白血病（多能性造血幹細胞または系統可能性が制御された造血幹細胞の新生物性形質転換）、ｃ）慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ、免疫学的に未成熟であり、機能不全である小さなリンパ球のクローン増殖）、Ｂ細胞ＣＬＬ、Ｔ細胞ＣＬＬ前リンパ球性白血病、および有毛細胞白血病を含む、ならびにｄ）急性リンパ芽球性白血病（リンパ芽球の蓄積を特徴とする）が挙げられる。主題の方法を使用して治療され得るリンパ腫としては、限定されないが、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンＢ細胞リンパ腫などが挙げられる。
特定の態様において、対象のがんを治療する方法であって、かかる方法が、対象に、治療有効量の本開示のコンジュゲートのいずれかを含む薬学的組成物を投与することを含み、投与が、対象のがんを治療するのに有効である、方法が提供される。いくつかの実施形態において、がんは、血液悪性腫瘍である。目的の血液悪性腫瘍としては、限定されないが、悪性Ｂ細胞であることを特徴とする血液悪性腫瘍が挙げられる。悪性Ｂ細胞であることを特徴とする血液悪性腫瘍の非限定的な例としては、白血病（例えば、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ））およびリンパ腫（例えば、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ））が挙げられる。リンパ腫がＮＨＬである場合、特定の態様において、ＮＨＬは、再発性および／または難治性非ホジキンリンパ腫である。
以下の実施例は、当業者に、完全な開示および本発明の製造方法ならびに使用方法の説明を提供するように記載され、本願発明者らがそれらの発明とみなす範囲を限定することは意図されず、以下の実験が全てであるか、または実験のみが行われることを表すことを意図していない。使用された数字（例えば量、温度など）に対する精度を確保する努力がなされたが、ある程度の実験誤差および偏差が考慮されるべきである。別段の指示がない限り、部は、重量部であり、分子量は、重量平均分子量であり、温度は、摂氏であり、圧力は、大気圧または大気圧に近い圧力である。「平均」は、算術平均を意味する。標準的な略語が使用されてもよく、例えば、ｂｐ，塩基対、ｋｂ，キロベース、ｐｌ，ピコリットル、ｓもしくはｓｅｃ，秒、ｍｉｎ，分、ｈもしくはｈｒ，時間、ａａ，アミノ酸、ｋｂ，キロベース、ｂｐ，塩基対、ｎｔ，ヌクレオチド、ｉ．ｍ．，筋肉内（筋肉内に）、ｉ．ｐ．，腹腔内（腹腔内に）、ｓ．ｃ．，皮下（皮下に）などである。
一般的な合成手順
一般的に知られている化学的合成スキームおよび開示されている化合物を合成するのに有用な条件を提供する多くの一般的な参考文献が利用可能である（例えば、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００１、またはＶｏｇｅｌ，Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ，１９７８を参照されたい）。
本明細書に記載される化合物は、ＨＰＬＣ、分取薄層クロマトグラフィー、フラッシュカラムクロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーを含む、当該技術分野で既知の任意の精製プロトコルによって精製され得る。順相および逆相、ならびにイオン性樹脂を含む、任意の好適な静止相を使用することができる。特定の実施形態において、開示された化合物は、シリカゲルおよび／またはアルミナクロマトグラフィーを介して精製される。例えば、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｍｏｄｅｒｎ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，編集Ｌ．Ｒ．Ｓｎｙｄｅｒ ａｎｄ Ｊ．Ｊ．Ｋｉｒｋｌａｎｄ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９７９、およびＴｈｉｎ Ｌａｙｅｒ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，編集Ｅ．Ｓｔａｈｌ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９６９を参照されたい。
主題の化合物を調製するためのいずれかのプロセス中に、関連する分子のいずれかの上にある感受性基または反応性基を保護することが必要であり、かつ／または望ましい場合がある。このことは、例えば、Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９７３、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９９９、“Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”；Ｖｏｌｕｍｅ ３（編集者：Ｅ．Ｇｒｏｓｓ ａｎｄ Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ），Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９８１、“Ｍｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ”，Ｈｏｕｂｅｎ－Ｗｅｙｌ，４ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１５／ｌ，Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４、Ｈ．－Ｄ．Ｊａｋｕｂｋｅ ａｎｄ Ｈ．Ｊｅｓｃｈｅｉｔ，“Ａｍｉｎｏｓａｕｒｅｎ，Ｐｅｐｔｉｄｅ，Ｐｒｏｔｅｉｎｅ”，Ｖｅｒｌａｇ Ｃｈｅｍｉｅ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ Ｂｅａｃｈ，ａｎｄ Ｂａｓｅｌ １９８２，および／またはＪｏｃｈｅｎ Ｌｅｈｍａｎｎ，“Ｃｈｅｍｉｅ ｄｅｒ Ｋｏｈｌｅｎｈｙｄｒａｔｅ：Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ Ｄｅｒｉｖａｔｅ”，Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４などの標準的な研究に記載されるような従来の保護基を使用することによって達成され得る。保護基は、当該技術分野で既知の方法を使用して、好都合なその後の段階で除去され得る。
主題の化合物は、市販されている出発物質および／または従来の合成方法によって調製された出発物質を使用して、様々な異なる合成経路を介して合成することができる。本明細書に開示される化合物を合成するために使用され得る合成経路の様々な例が、以下のスキームに記載される。
実施例１
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）基を含有するリンカーを、以下に示されるスキーム１に従って合成した。
Figure 2022553579000037
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル４－オキソピペリジン－１－カルボキシレート（２００）の合成
磁気撹拌棒が入った１００ｍＬの丸底フラスコに、ピペリジン－４－オン塩酸塩一水和物（１．５３ｇ、１０ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ塩化物（２．５８ｇ、１０ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（３．１８ｇ、３０ｍｍｏｌ）、ジオキサン（２０ｍＬ）、および水（２ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（１×１００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた材料を真空下で乾燥させ、白色固体として化合物２００を得た（３．０５ｇ、収率９５％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．７８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．６），７．５９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．２），７．４３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２），７．３７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２），４．６０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０），４．２８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０），３．７２（ｂｒ，２Ｈ），３．６３（ｂｒ，２Ｈ），２．３９（ｂｒ，２Ｈ），２．２８（ｂｒ，２Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２０Ｈ２０ＮＯ３についての計算値３２２．４、実測値３２２．２。
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル４－（（２－（２－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２０１）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、ピペリジノン２００（６４２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、Ｈ２Ｎ－ＰＥＧ２－ＣＯ２ｔ－Ｂｕ（５６０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、４Åモレキュラーシーブ（活性化粉末、５００ｍｇ）、および１，２－ジクロロエタン（５ｍＬ）を加えた。混合物を１時間、室温で撹拌した。反応混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（８４５ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５日間、室温で撹拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（１×５０ｍＬ）および塩水（１×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、油状物として化合物２０１を得て、これをさらに精製することなく次を実施した。
１３－（１－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）ピペリジン－４－イル）－２，２－ジメチル－４，１４－ジオキソ－３，７，１０－トリオキサ－１３－アザヘプタデカン－１７－オン酸（２０２）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、前のステップからのＮ－Ｆｍｏｃ－ピペリジン－４－アミノ－ＰＥＧ２－ＣＯ２ｔ－Ｂｕ（２０１）、無水コハク酸（２７０ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）、およびジクロロメタン（５ｍＬ）を加えた。混合物を１８時間、室温で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３との間で分配した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。水層を、ｐＨが約３になるまでＨＣｌ（１Ｍ）で酸性化した。水層をＤＣＭで抽出した（３回）。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。反応混合物を、Ｃ１８フラッシュクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／０．１％酢酸を含む水で溶出）によって精製した。生成物含有画分を減圧下で濃縮し、次いでトルエン（３×５０ｍＬ）と共沸させて残留酢酸を除去し、５３４ｍｇ（４２％、２ステップ）の化合物２０２を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １１．９６（ｂｒ，１Ｈ），７．８９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．２），７．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．２），７．４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２），７．３４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２），４．２５－４．５５（ｍ，３Ｈ），３．７０－４．３５（ｍ，３Ｈ），３．５９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０），３．３９（ｍ，５Ｈ），３．３５（ｍ，３Ｈ），３．２１（ｂｒ，１Ｈ），２．７９（ｂｒ，２Ｈ），２．５７（ｍ，２Ｈ），２．４２（ｑ，４Ｈ，Ｊ＝６．０），１．４９（ｂｒ，３Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ３５Ｈ４７Ｎ２Ｏ９についての計算値６３９．３、実測値６３９．２。
（２Ｓ）－１－（（（１４Ｓ，１６Ｓ，３３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－８－（ピペリジン－４－イル）－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－オン酸（２０３）の合成
エステル２０２（２２７ｍｇ、０．３５６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（１７４μＬ、１．０６５ｍｍｏｌ）、Ｎ－デアセチルマイタンシン１２４（２３１ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ２ｍＬ溶液に、ＰｙＡＯＰ（１８５ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を３０分間撹拌した。ピペリジン（０．５ｍＬ）を反応混合物に加え、さらに２０分間撹拌した。粗反応混合物を、０～１００％のアセトニトリル：水の勾配を使用したＣ１８逆相クロマトグラフィーによって精製し、２０３．２ｍｇ（５５％、２ステップ）の化合物２０３を得た。
１７－（ｔｅｒｔ－ブチル）１－（（１４Ｓ，１６Ｓ，３３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）（２Ｓ）－８－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－インドール－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジメチル－４，７－ジオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカンジオエート（２０４）の合成
ピペリジン２０３（２０３．２ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）、エステル１２（１２６．５ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（７７μＬ、０．５８２ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（２６．４ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ１ｍＬ溶液を３０分間撹拌した。粗反応物を、０～１００％のアセトニトリル：０．１％のギ酸を含む水の勾配を使用したＣ１８逆相クロマトグラフィーによって精製し、２８０．５ｍｇ（収率９７％）の化合物２０４を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ８１Ｈ１０６ＣｌＮ８Ｏ１８についての計算値１５１３．７、実測値１５１４．０。
（２Ｓ）－８－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－インドール－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（（（１４Ｓ，１６Ｓ，３３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－オン酸（２０５）の合成
化合物２０４（１０８ｍｇ、０．０７１４ｍｍｏｌ）の５００μＬの無水ＤＣＭ溶液に、ＳｎＣｌ４の１Ｍ ＤＣＭ溶液３５７μＬを加えた。不均一な混合物を１時間撹拌し、次いで、０～１００％のアセトニトリル：０．１％のギ酸を含む水の勾配を使用したＣ１８逆相クロマトグラフィーによって精製し、７８．４ｍｇ（収率７５％）の化合物２０５を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ－Ｈ］－Ｃ７７Ｈ９６ＣｌＮ８Ｏ１８についての計算値１４５５．７、実測値１４５５．９。
実施例２
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）基を含有するリンカーを、以下に示されるスキーム２に従って合成した。
Figure 2022553579000038
ｔｅｒｔ－ブチル４－オキソピペリジン－１－カルボキシレート（２１０）の合成
磁気撹拌棒が入った１００ｍＬの丸底フラスコに、ピペリジン－４－オン塩酸塩一水和物（１．５３ｇ、１０ｍｍｏｌ）、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２．３９ｇ、１１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１．２２ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）、ジオキサン（１０ｍＬ）、および水（１ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた材料を真空下で乾燥させ、１．７４ｇ（８７％）の化合物２１０を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．７３（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．０），２．４６（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．０），１．５１（ｓ，９Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１０Ｈ１８ＮＯ３についての計算値２００．３、実測値２００．２。
ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（２－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２１１）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、ｔｅｒｔ－ブチル４－オキソピペリジン－１－カルボキシレート（３９９ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、Ｈ２Ｎ－ＰＥＧ２－ＣＯＯｔ－Ｂｕ（５５０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、４Åモレキュラーシーブ（活性化粉末、２００ｍｇ）、および１，２－ジクロロエタン（５ｍＬ）を加えた。混合物を１時間、室温で撹拌した。反応混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（８４５ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３日間、室温で撹拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液との間で分配した。有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、８５０ｍｇの化合物２１１を粘性油状物として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２１Ｈ４１Ｎ２Ｏ６についての計算値４１７．３、実測値４１７．２。
１３－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－４－イル）－２，２－ジメチル－４，１４－ジオキソ－３，７，１０－トリオキサ－１３－アザヘプタデカン－１７－オン酸（２１２）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（２－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボキシレート２１１（２２０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、無水コハク酸（５５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、４－（ジメチルアミノ）ピリジン（５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、およびジクロロメタン（３ｍＬ）を加えた。混合物を２４時間、室温で撹拌した。反応混合物をフラッシュクロマトグラフィー（５０～１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）によって部分的に精製して、１１７ｍｇの化合物２１２を透明油状物として得て、これをさらに特性決定することなく次を実施した。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ２５Ｈ４５Ｎ２Ｏ９についての計算値５１７．６、実測値５１７．５。
１７－（ｔｅｒｔ－ブチル）１－（（１４Ｓ，１６Ｓ，３３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）（２Ｓ）－８－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジメチル－４，７－ジオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカンジオエート（２１３）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、１３－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－４－イル）－２，２－ジメチル－４，１４－ジオキソ－３，７，１０－トリオキサ－１３－アザヘプタデカン－１７－オン酸２１２（５５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、Ｎ－デアシルマイタンシン１２４（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（１ｍＬ）、およびジクロロメタン（０．５ｍＬ）を加えた。混合物を８時間、室温で撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（５～１００％ＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製し、１８ｍｇ（１６％）の化合物２１３を白色フィルム物として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ５７Ｈ８７ＣｌＮ５Ｏ１７についての計算値１１４８．６、実測値１１４８．７。
（２Ｓ）－１－（（（１４Ｓ，１６Ｓ，３３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－８－（ピペリジン－４－イル）－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－オン酸（２１４）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、マイタンシノイド２１３（３１ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１ｍＬ）を加えた。溶液を０℃まで冷却し、四塩化スズ（ＩＶ）（１．０Ｍのジクロロメタン溶液、０．３ｍＬ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間、０℃で撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（５～１００％ＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製し、１６ｍｇ（６０％）の化合物２１４を白色固体として得た（１６ｍｇ、収率６０％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ４８Ｈ７１ＣｌＮ５Ｏ１５についての計算値９９２．５、実測値９９２．６。
（２Ｓ）－８－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－インドール－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（（（１４Ｓ，１６Ｓ，３３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－オン酸（２１５）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、マイタンシノイド２１４（１６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル１，２－ジメチル－２－（（１－（３－オキソ－３－（ペルフルオロフェノキシ）プロピル）－１Ｈ－インドール－２－イル）メチル）ヒドラジン－１－カルボキシレート（５）（１３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８μＬ、０．０５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ（１ｍＬ）を加えた。溶液を１８時間、室温で撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（５～１００％ＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製し、１８ｍｇ（７７％）の化合物２１５を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ７７Ｈ９８ＣｌＮ８Ｏ１８についての計算値１４５７．７、実測値１４５７．９。
（２Ｓ）－１－（（（１４Ｓ，１６Ｓ，３３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８６－クロロ－１４－ヒドロキシ－８５，１４－ジメトキシ－３３，２，７，１０－テトラメチル－１２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼンアシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－８－（１－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－インドール－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－オン酸（２１６）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、マイタンシノイド２１５（１８ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）、ピペリジン（２０μＬ、０．０２ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ（１ｍＬ）を加えた。溶液を２０分間、室温で撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（１～６０％ＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製し、１５ｍｇ（９８％）の化合物２１６（本明細書では、ＨＩＰＳ－４ＡＰ－マイタンシンまたはＨＩＰＳ－４－アミノ－ピペリジン－マイタンシンとも称される）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋Ｃ６２Ｈ８８ＣｌＮ８Ｏ１６についての計算値１２３５．６、実測値１２３６．０。
実施例３
実験手順
一般的
部位特異的にコンジュゲート化された抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を作製するための実験を行った。この実施例で使用される抗体は、以下の重鎖および軽鎖を含む。表４に記載されているアミノ酸配列（配列番号１）を有するが、ＥＵ番号付けシステムによるアミノ酸置換Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５Ａを含む重鎖、ならびに表４に記載されているアミノ酸配列（配列番号６）を有する軽鎖。部位特異的ＡＤＣ産生には、非天然アミノ酸であるホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）をタンパク質配列に組み込むことが含まれていた。ＦＧｌｙ（図１）を組み込むために、Ｘがセリン、トレオニン、アラニン、またはグリシンである短いコンセンサス配列ＣＸＰＸＲを、標準的な分子生物学的クローニング技術を使用して、抗体重鎖または軽鎖の保存領域中の所望の位置に挿入した。この「タグ化」された構築物は、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）を共発現する細胞において、組換え的に産生され、このタグ内のシステインをＦＧｌｙ残基に共翻訳的に変換し、アルデヒド官能基（本明細書ではアルデヒドタグとも称される）を生成した。アルデヒド官能基は、生体直交型コンジュゲート化のための化学ハンドルとして機能した。ヒドラジノ－イソ－ピクテ－スペングラー（ＨＩＰＳ）ライゲーションを使用して、ペイロード（例えば、細胞毒素（例えば、マイタンシン）などの薬物）をＦＧｌｙに接続し、細胞毒素ペイロードと抗体との間に安定した共有Ｃ－Ｃ結合を形成した。このＣ－Ｃ結合は、循環およびＦｃＲｎリサイクル中にＡＤＣが直面する生理学的に関連する状態（例えば、プロテアーゼ、低ｐＨ、および還元試薬）に対して安定であると予想された。アルデヒドタグを有する抗体は、様々な位置で産生され得る。重鎖Ｃ末端（ＣＴ）にアルデヒドタグを挿入することの効果を試験するために実験を行った。ＨＩＰＳリンカーを介してマイタンシンペイロードへのコンジュゲート化によって作製して得られたＡＤＣに対して、生物物理学的特性決定および機能特性決定を行った。
タグ化抗体のクローニング、発現、および精製
標準的な分子生物学的技術を使用して、アルデヒドタグ配列を、抗ＣＤ３７抗体の重鎖Ｃ末端（ＣＴ）に挿入した。小規模な産生のために、ＣＨＯ－Ｓ細胞をヒトＦＧＥ発現構築物でトランスフェクトし、ＦＧＥ過剰発現細胞のプールを抗体の一過性産生に使用した。より大規模な産生のために、ＧＰＥｘ技術（Ｃａｔａｌｅｎｔ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｍｅｒｓｅｔ，ＮＪ）を使用して、ヒトＦＧＥ（ＧＰＥｘ）を過剰発現するクローン細胞株を生成した。次いで、ＦＧＥクローンを使用して、抗体発現細胞のバルク安定プールを生成した。Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａクロマトグラフィー（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）を使用して、抗体を馴化培地から精製した。精製した抗体を急速凍結し、さらなる使用まで－８０℃で保存した。
バイオコンジュゲート化、精製、およびＨＰＬＣ分析
Ｃ末端アルデヒドタグ化αＣＤ３７抗体（１５ｍｇ／ｍＬ）を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、０．８５％ＤＭＡを含有する５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５中で３７℃で７２時間、ＨＩＰＳ－４ＡＰリンカー（８モル当量薬物：抗体）に接続したマイタンシンペイロードにコンジュゲート化した。遊離薬物を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５に、タンジェンシャルフローフィルトレーション（２４ダイアボリューム）によって除去した。
最終生成物の薬物対抗体比（ＤＡＲ）を決定するために、ＡＤＣを、分析ＨＩＣ（Ｔｏｓｏｈ＃１４９４７）によって、移動相Ａ：１．５Ｍの硫酸アンモニウム、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０、および移動相Ｂ：２５％のイソプロパノール、１８．７５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０によって試験した。凝集を測定するために、３００ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ６．８の移動相を用い、分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、Ｔｏｓｏｈ＃０８５４１）を使用して試料を分析した。
結果
重鎖Ｃ末端（ＣＴ）にアルデヒドタグを含有するように修飾されたαＣＤ３７抗体を、ＨＩＰＳ－４ＡＰリンカーに接続したマイタンシンペイロードにコンジュゲート化した。完了時に、残りの遊離薬物を、タンジェンシャルフローフィルトレーションによる緩衝液交換中に除去した。これらの反応は高収率であり、ほぼ定量的なコンジュゲート化効率および９５％を超える総収率を有していた。得られたＡＤＣは、１．７９～１．８９の薬物対抗体比（ＤＡＲ）を有しており、主にモノマーであった。図２および３は、ＨＩＣによって決定されるＤＡＲおよびＳＥＣによって決定されるモノマー完全性に関する代表的なＡＤＣを示す。
図２は、ＨＩＰＳ－４ＡＰリンカーに接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端（ＣＴ）でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体の疎水性相互作用カラム（ＨＩＣ）トレースを示す。図２は、ＤＡＲが、ＨＩＣによって決定される場合、１．８４であったことを示す。
図３は、ＨＩＰＳ－４ＡＰリンカーに接続したマイタンシンペイロードに対して重鎖Ｃ末端（ＣＴ）でコンジュゲート化されたアルデヒドタグ化抗ＣＤ３７抗体の分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析のグラフを示す。図３に示されるように、分析ＳＥＣは、最終生成物について９８．２％のモノマーを示した。
インビトロ細胞傷害性
ＣＤ３７陽性Ｂ細胞リンパ腫細胞株であるＤａｕｄｉ、ＲＬ、Ｒａｍｏｓ－ＲＡ、ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２、Ｇｒａｎｔａ ５１９、ＢＪＡＢ、ＤｏＨＨ－２、ＳＵ－ＤＨＬ－４、およびＲａｊｉを、ＡＴＣＣまたはＤＳＭＺ細胞バンクから入手した。供給業者の推奨に従って、細胞を成長培地中で維持した。プレーティングの２４時間前に、細胞を継代させ、対数相成長を確実にした。プレーティング当日に、１００μＬの正常成長培地中で、５０００個の細胞／ウェルを９６ウェルプレートに播種した。細胞を、様々な濃度で２０μＬの希釈分析物で処理し、プレートを５％ＣＯ２の雰囲気下、３７℃でインキュベートした。５日後、１００μＬ／ウェルのＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ－Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ５プレートリーダーを使用して発光を測定した。データ分析にはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用した。
結果
抗ＣＤ３７ ＨＩＰＳ－４ＡＰ－マイタンシンコンジュゲートは、試験した９個の細胞株のうち８個に対して強力な（ナノモル未満の）インビトロ細胞傷害性を示し、遊離マイタンシンに匹敵する活性を有していた。
図４～１２は、それぞれ、Ｄａｕｄｉ、ＲＬ、Ｒａｍｏｓ－ＲＡ、ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２、Ｇｒａｎｔａ ５１９、ＢＪＡＢ、ＤｏＨＨ－２、ＳＵ－ＤＨＬ－４、およびＲａｊｉ細胞株についての結果を示す。
異種移植片試験
ＤｏＨＨ－２異種移植片
方法：雌ＣＢ１７／ＳＣＩＤマウス（８匹／群）に、ＤｏＨＨ－２細胞を皮下接種した。治療は、腫瘍が平均１６６ｍｍ３に達したときに開始し、その時点で、動物に、ビヒクル単独、または１、３、または１０ｍｇ／ｋｇの単回用量の抗ＣＤ３７ ＨＩＰＳ－４ＡＰ－マイタンシンコンジュゲートを静脈内投与した。２つの他の治療群に、抗ＣＤ３７ ＨＩＰＳ－４ＡＰ－マイタンシンコンジュゲートまたはコンジュゲート化されたアイソタイプ対照ＡＤＣのいずれかを合計で４回用量（ｑｗｋ×４）、週に１０ｍｇ／ｋｇ投与した。動物を、体重および腫瘍サイズについて週に２回モニタリングした。腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、動物を安楽死させた。
結果：ビヒクル対照群における動物のエンドポイントまでの時間の中央値は、３３日であった。したがって、腫瘍成長阻害（ＴＧＩ％）を、その日に計算した。ＴＧＩ％は、以下の式によって定義された。
ＴＧＩ（％）＝（ＴＶ対照群－ＴＶ治療群）／ＴＶ対照×１００
抗ＣＤ３７ ＨＩＰＳ－４ＡＰ－マイタンシンコンジュゲートを受けた動物は、それぞれ、１、３、および１０ｍｇ／ｋｇの単回投与で６１％、６８％、および９５％のＴＧＩを示した。後者の投薬群では、８種類の腫瘍のうち６種類が、完全な逆行を示し、４種類の完全な逆行は、試験の終了まで持続した（３６日目）。データを図１３に示す。
Ｇｒａｎｔａ ５１９異種移植片
方法：雌ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウス（６匹／群）に、Ｇｒａｎｔａ ５１９細胞を皮下接種した。治療は、腫瘍が平均１７５ｍｍ３に達したときに開始し、その時点で、動物に、ビヒクル単独、または１０ｍｇ／ｋｇの単回用量の抗ＣＤ３７（マイタンシンペイロードを含まない）、または３もしくは１０ｍｇ／ｋｇの抗ＣＤ３７ ＨＩＰＳ－４ＡＰ－マイタンシンコンジュゲートを静脈内投与した。動物を、体重および腫瘍サイズについて週に２回モニタリングした。腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、動物を安楽死させた。
結果：ビヒクル対照群における動物のエンドポイントまでの時間の中央値は、２４日であった。したがって、腫瘍成長阻害（ＴＧＩ％）を、その日に計算した。ＴＧＩ％は、以下の式によって定義された。
ＴＧＩ（％）＝（ＴＶ対照群－ＴＶ治療群）／ＴＶ対照×１００。
抗ＣＤ３７ ＨＩＰＳ－４ＡＰ－マイタンシンコンジュゲートを受けた動物は、それぞれ、３および１０ｍｇ／ｋｇの単回投与で６９％および１００％のＴＧＩを示した。後者の投薬群では、８種類の腫瘍のうち８種類が、完全な逆行を示し、全ての完全な逆行は、試験の終了まで持続した（３１日目）。データを図１４に示す。
本発明が、その特定の実施形態を参照しつつ記載されているが、様々な変更が行われてもよく、等価物が本開示の真の主旨および範囲から逸脱することなく代用され得ることが当業者によって理解されるべきである。加えて、多くの改変は、特定の状況、材料、物質の組成物、プロセス、１つまたは複数のプロセスステップを、本発明の対象の主旨および範囲に適合するように行われ得る。全てのそのような改変は、本明細書に添付される特許請求の範囲の範囲内であることが意図される。

Claims (65)

  1. 式（Ｉ）の側鎖を有する少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を含む、コンジュゲートであって、
    Figure 2022553579000039

    式中、
    Ｚが、ＣＲ４またはＮであり、
    Ｒ１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
    Ｒ２およびＲ３が、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択されるか、またはＲ２およびＲ３が、任意選択により環状に連結されて、５員もしくは６員のヘテロシクリルを形成し、
    各Ｒ４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
    Ｌが、－（Ｔ１－Ｖ１）ａ－（Ｔ２－Ｖ２）ｂ－（Ｔ３－Ｖ３）ｃ－（Ｔ４－Ｖ４）ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃおよびｄが、それぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの合計が、１～４であり、
    Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３およびＴ４が、それぞれ独立して、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルから選択され、式中、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールまたは修飾ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数であり、
    Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３およびＶ４が、それぞれ独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
    各Ｒ１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択され、
    各Ｒ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルから選択され、
    Ｗ１が、マイタンシノイドであり、
    Ｗ２が、抗ＣＤ３７抗体である、コンジュゲート。
  2. Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルおよび置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルから選択され、
    Ｔ２、Ｔ３およびＴ４が、それぞれ独立して、（ＥＤＡ）ｗ、（ＰＥＧ）ｎ、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、置換（Ｃ１～Ｃ１２）アルキル、（ＡＡ）ｐ、－（ＣＲ１３ＯＨ）ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、およびエステルから選択され、
    Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３およびＶ４が、それぞれ独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ１５－、－ＮＲ１５（ＣＨ２）ｑ－、－ＮＲ１５（Ｃ６Ｈ４）－、－ＣＯＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ２－、－ＳＯ２ＮＲ１５－、－ＮＲ１５ＳＯ２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
    （ＰＥＧ）ｎが、
    Figure 2022553579000040

    であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
    ＥＤＡが、以下の構造
    Figure 2022553579000041

    を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０または１であり、
    ４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、
    Figure 2022553579000042

    であり、
    各Ｒ１２およびＲ１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、および置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ１２基が、環状に連結してピペラジニル環を形成してもよく、
    Ｒ１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、および置換アリールから選択される、請求項１に記載のコンジュゲート。
  3. Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、およびＴ４、ならびにＶ１、Ｖ２、Ｖ３、およびＶ４が、以下の表から選択される、請求項１に記載のコンジュゲート。
    Figure 2022553579000043
  4. 前記リンカーＬが、以下の構造のうちの１つから選択され、
    Figure 2022553579000044

    Figure 2022553579000045


    Figure 2022553579000046


    式中、
    各ｆが、独立して、０または１～１２の整数であり、
    各ｙが、独立して、０または１～２０の整数であり、
    各ｎが、独立して、０または１～３０の整数であり、
    各ｐが、独立して、０または１～２０の整数であり、
    各ｈが、独立して、０または１～１２の整数であり、
    各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルであり、
    各Ｒ’が、独立して、Ｈ、アミノ酸の側鎖基、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換ヘテロシクリルである、請求項１～３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  5. 前記マイタンシノイドが、以下の式を有するものであり、
    Figure 2022553579000047

    式中、
    Figure 2022553579000048

    が、前記マイタンシノイドとＬとの間の接続点を示す、請求項１～４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  6. Ｔ１が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ１が、－ＣＯ－であり、Ｔ２が、４ＡＰであり、Ｖ２が、－ＣＯ－であり、Ｔ３が、（Ｃ１～Ｃ１２）アルキルであり、Ｖ３が、－ＣＯ－であり、Ｔ４が存在せず、Ｖ４が存在しない、請求項１～５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  7. 前記リンカーＬが、以下の構造を含み、
    Figure 2022553579000049

    式中、
    各ｆが、独立して、１～１２の整数であり、
    ｎが、１～３０の整数である、請求項１～６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  8. 前記抗ＣＤ３７抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項１～７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  9. 前記抗ＣＤ３７抗体が、ＩｇＧ１カッパ抗体である、請求項８に記載のコンジュゲート。
  10. 前記抗ＣＤ３７抗体が、式（ＩＩ）の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
    式中、
    ＦＧｌｙ’が、前記式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸である、請求項１～９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  11. 前記配列が、Ｌ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲである、請求項１０に記載のコンジュゲート。
  12. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項１１に記載のコンジュゲート。
  13. 前記修飾アミノ酸残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖定常領域のＣ末端に配置されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  14. 前記重鎖定常領域が、式（ＩＩ）の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
    式中、
    ＦＧｌｙ’が、前記式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
    前記配列が、アミノ酸配列ＳＬＳＬＳＰＧに対してＣ末端である、請求項１３に記載のコンジュゲート。
  15. 前記重鎖定常領域が、配列ＳＰＧＳＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＳを含む、請求項１４に記載のコンジュゲート。
  16. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項１４に記載のコンジュゲート。
  17. 前記修飾アミノ酸残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の軽鎖定常領域中に配置されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  18. 前記軽鎖定常領域が、式（ＩＩ）の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
    式中、
    ＦＧｌｙ’が、前記式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
    前記配列が、配列ＫＶＤＮＡＬに対してＣ末端であり、かつ／または配列ＱＳＧＮＳＱに対してＮ末端である、請求項１７に記載のコンジュゲート。
  19. 前記軽鎖定常領域が、配列ＫＶＤＮＡＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱを含む、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  20. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  21. 前記修飾アミノ酸残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ１領域中に配置されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  22. 前記重鎖ＣＨ１領域が、式（ＩＩ）の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
    式中、
    ＦＧｌｙ’が、前記式（Ｉ）の修飾アミノ酸残基であり、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
    前記配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡに対してＣ末端であり、かつ／またはアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰに対してＮ末端である、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  23. 前記重鎖ＣＨ１領域が、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ＦＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰを含む、請求項２２に記載のコンジュゲート。
  24. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項２２に記載のコンジュゲート。
  25. 前記修飾アミノ酸残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ２領域中に配置されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  26. 前記修飾アミノ酸残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ３領域中に配置されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  27. 前記抗ＣＤ３７抗体が、ＣＤ３７への結合に関して、
    アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
    アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む抗ＣＤ３７抗体と競合する、請求項１～２６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  28. 前記抗ＣＤ３７抗体が、
    アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
    アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む、請求項２７に記載のコンジュゲート。
  29. 前記抗ＣＤ３７抗体が、
    配列番号２に記載されているアミノ酸配列と７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
    配列番号７に記載されているアミノ酸配列と７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む、請求項２７または２８に記載のコンジュゲート。
  30. 請求項１～２９のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、
    薬学的に許容される賦形剤と、を含む、薬学的組成物。
  31. 有効量の請求項１～２９のいずれか一項に記載のコンジュゲートを対象に投与することを含む、方法。
  32. 対象のがんを治療する方法であって、前記方法が、
    前記対象に、治療有効量の請求項１～２９のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む薬学的組成物を投与することを含み、前記投与が、前記対象のがんを治療するのに有効である、方法。
  33. 前記がんが、血液悪性腫瘍である、請求項３２に記載の方法。
  34. 前記血液悪性腫瘍が、悪性Ｂ細胞であることを特徴とする、請求項３３に記載の方法。
  35. 前記血液悪性腫瘍が、白血病である、請求項３４に記載の方法。
  36. 前記白血病が、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である、請求項３５に記載の方法。
  37. 前記血液悪性腫瘍が、リンパ腫である、請求項３４に記載の方法。
  38. 前記リンパ腫が、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である、請求項３７に記載の方法。
  39. 対象において標的部位に薬物を送達する方法であって、前記方法が、
    前記対象に、請求項１～２９のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む薬学的組成物を投与することを含み、前記投与が、前記対象において前記標的部位に前記コンジュゲートから治療有効量の前記薬物を放出するのに有効である、方法。
  40. ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基を含む、抗ＣＤ３７抗体。
  41. 以下の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
    式中、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記抗体のＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸である、請求項４０に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  42. 前記配列が、Ｌ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲである、請求項４１に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  43. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項４１に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  44. 前記配列が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖定常領域のＣ末端にある、請求項４１～４３のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  45. 前記重鎖定常領域が、以下の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
    式中、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
    前記配列が、アミノ酸配列ＳＬＳＬＳＰＧに対してＣ末端である、請求項４４に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  46. 前記重鎖定常領域が、配列ＳＰＧＳＬ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＳを含む、請求項４４に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  47. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項４４に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  48. 前記ＦＧｌｙ残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の軽鎖定常領域中に配置されている、請求項４１～４３のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  49. 前記軽鎖定常領域が、以下の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０ （ＩＩ）
    式中、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
    前記配列が、配列ＫＶＤＮＡＬに対してＣ末端であり、かつ／または配列ＱＳＧＮＳＱに対してＮ末端である、請求項４８に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  50. 前記軽鎖定常領域が、配列ＫＶＤＮＡＬ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱを含む、請求項４９に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  51. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項４９に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  52. 前記ＦＧｌｙ残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ１領域中に配置されている、請求項４１～４３のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  53. 前記重鎖ＣＨ１領域が、以下の配列を含み、
    Ｘ１（ＦＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
    式中、
    Ｚ２０が、プロリンまたはアラニン残基のいずれかであり、
    Ｚ３０が、塩基性アミノ酸または脂肪族アミノ酸であり、
    Ｘ１が、存在してもよく、または存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、任意のアミノ酸であり、
    前記配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡに対してＣ末端であり、かつ／またはアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰに対してＮ末端である、請求項５２に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  54. 前記重鎖ＣＨ１領域が、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰを含む、請求項５３に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  55. Ｚ３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、およびＰから選択され、
    Ｘ１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、およびＶから選択され、
    Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、およびＣから選択される、請求項５３に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  56. 前記ＦＧｌｙ残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ２領域中に配置されている、請求項４１～４３のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  57. 前記ＦＧｌｙ残基が、前記抗ＣＤ３７抗体の重鎖ＣＨ３領域中に配置されている、請求項４１～４３のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  58. 前記抗ＣＤ３７抗体が、ＣＤ３７への結合に関して、
    アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
    アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む抗ＣＤ３７抗体と競合する、請求項４０～５７のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  59. 前記抗ＣＤ３７抗体が、
    アミノ酸配列ＧＹＮＭＮ（配列番号３）を含むＶＨ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＮＩＤＰＹＹＧＧＴＴＹＮＲＫＦＫＧ（配列番号４）を含むＶＨ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＳＶＧＰＦＤＳ（配列番号５）を含むＶＨ ＣＤＲ３を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
    アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＶＹＳＹＬＡ（配列番号８）を含むＶＬ ＣＤＲ１、
    アミノ酸配列ＦＡＫＴＬＡＥ（配列番号９）を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
    アミノ酸配列ＱＨＨＳＤＮＰＷＴ（配列番号１０）を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む、請求項５８に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  60. 前記抗体が、
    配列番号２に記載されているアミノ酸配列と７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
    配列番号７に記載されているアミノ酸配列と７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む、請求項５８または５９に記載の抗ＣＤ３７抗体。
  61. 請求項４０～６０のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体を含む、細胞。
  62. 請求項４０～６０のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３７抗体をコードする核酸。
  63. 請求項６２に記載の核酸を含む、発現ベクター。
  64. 請求項６２に記載の核酸または６３に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
  65. 請求項４０～６０のいずれか一項に記載の抗体を作製する方法であって、細胞が前記抗体を発現するのに好適な条件下で、請求項６３に記載の発現ベクターを含む細胞を培養することを含み、前記抗体が産生される、方法。
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