JP2022538733A - 新規抗ｃｄ２５抗体 - Google Patents

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Abstract

本発明は、新規抗ＣＤ２５抗体、およびがんまたは感染症を治療するためのその使用に関する。

Description

本発明は、がんおよび感染症の治療の分野に関するものであり、特に、がんおよび感染症の治療に使用することができる新規抗ＣＤ２５抗体を開示している。
制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、一般に自己免疫から身体を保護する免疫寛容の重要なメディエーターである。しかし、がんでは、Ｔｒｅｇは、論議を呼ぶ役割を果たしているように見える。
実際に、がんの間、腫瘍微小環境は、多くの場合、Ｔｒｅｇの分化および動員に有利に働き、それにより抗腫瘍エフェクターＴ細胞機能を抑制し得る。したがって、Ｔｒｅｇは、免疫療法の主要な障害となり得る。この現象は、多くのヒトのがんおよび腫瘍成長のほとんどのマウスモデルにおいて説明されており、Ｔｒｅｇの頻度およびそれらのサプレッサ機能は、健康な対照について報告されているものと比較して、増加している。特に、Ｔｒｅｇは、腫瘍由来ケモカインの存在下で腫瘍内に蓄積し、一旦配置されると、腫瘍微小環境に浸潤する免疫細胞によって媒介される抗腫瘍応答を防止するかまたは鈍化するように進行することが示されている。したがって、蓄積するＴｒｅｇは、抗腫瘍免疫エフェクター細胞をサイレンシングすることにより、自身の宿主免疫系からの脱出を促進する腫瘍の複数の試みのうちの１つと見なすことができる。
エフェクターＴ細胞の抗腫瘍機能を抑制する能力が増強することを考慮して、Ｔｒｅｇは、抗腫瘍機能を回復するために明確にサイレンシングさせるかまたは消失させる必要がある腫瘍脱出のメディエーターとして認識されている。
制御性Ｔ細胞は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）に結合し、Ｔｒｅｇの発生および恒常性を調節するインターロイキン－２受容体α鎖である、構成的に高レベルのＣＤ２５を発現するマウスＣＤ４＋Ｔ細胞の循環サブセットとして、Ｓａｋａｇｕｃｈｉらによって最初に報告された。
様々な研究において、マウスモデルにおけるＩＬ－２とＣＤ２５との相互作用が分析されている。担癌マウスにおいて、例えばＰＣ６１などの抗ＣＤ２５抗体により、ＩＬ－２のＣＤ２５への結合が遮断されることにより、ＦｏｘＰ３発現およびＴｒｅｇ抑制機能の両方の喪失がもたらされることが示されている。これらの結果は、ＩＬ２の剥奪が、がんの発生を防止するための有望な方法であることを示唆している。近年では、Ｖａｒｇａｓらは、ＰＣ６１抗体のＦｃ最適化形態を開発し、これにより、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）または補体媒介性細胞傷害メカニズム（ＣＤＣ）を介する腫瘍内Ｔｒｅｇの枯渇が可能になり、マウス腫瘍モデルに有意な治療利益をもたらした。したがって、ＴｒｅｇにおけるＩＬ－２経路の生理学的重要性を考えると、この経路の遮断は強力かつ有望な抗腫瘍免疫療法であるように思われた。
有効な抗腫瘍免疫療法が依然として必要とされている。
本発明は、単離された抗ヒトＣＤ２５抗体またはその抗原結合断片に関し、当該抗体は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）のＣＤ２５への結合を阻害するものではなく、好ましくは、当該抗体はモノクローナルである。
一実施形態では、抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体、またはヒト抗体である。
一実施形態では、
重鎖の可変領域（ＨＣＶＲ）は、以下の少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）：
－ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここでＸ４は、ＤまたはＮである：
－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；
もしくは、配列番号１～３と少なくとも約７０％の同一性を共有するアミノ酸配列を有する任意のＣＤＲを含む；および／または
軽鎖の可変領域（ＬＣＶＲ）は、以下の少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つのＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
－ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここで、Ｘ３は、ＳまたはＴである；
もしくは、配列番号４～６と少なくとも約７０％の同一性を共有するアミノ酸配列を有する任意のＣＤＲを含む。
一実施形態では、
（ｉ）ＨＣＶＲは、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの、上記で定義された通りのＣＤＲを含み、
（ｉｉ）ＬＣＶＲは、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの、上記で定義された通りのＣＤＲを含む。
一実施形態では、
（ｉ）ＨＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここで、Ｘ４は、ＤまたはＮである；
－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）を含み；
（ｉｉ）ＬＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
－ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここで、Ｘ３は、ＳまたはＴである；
もしくは、配列番号１～６と少なくとも約７０％の同一性を共有するアミノ酸配列を有する任意のＣＤＲを含む。
一実施形態では、
ＨＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＤＨＡＭＡ（配列番号７）；
－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；を含み
抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号８）；
－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）を含む。
一実施形態では、
（ｉ）抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＮＨＡＭＡ（配列番号１０）；
－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；を含み
（ｉｉ）抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＶＮ（配列番号１１）；
－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）を含む。
一実施形態では、
（ｉ）抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＮＨＡＭＡ（配列番号１０）；
－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；を含み
（ｉｉ）抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲは、以下のＣＤＲ：
－ＣＤＲ１：ＫＧＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号１２）；
－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
－ＣＤＲ３：ＱＱＹＴＳＷＰＷＴ（配列番号１３）を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性抗体である。
本発明はさらに、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含む融合タンパク質に関する。
本発明はさらに、本明細書に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片または融合タンパク質をコードする核酸に関する。
本発明はさらに、本明細書に記載の核酸を含む発現ベクターに関する。
一実施形態では、抗体または抗原結合断片は、抗体依存性細胞傷害、補体依存性細胞傷害、または抗体依存性食作用を媒介する。
本発明は、単離された抗体もしくはその抗原結合断片、または本明細書に記載の融合タンパク質、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物にさらに関する。
本発明は、医薬として使用するための、本明細書に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片、または本明細書に記載の融合タンパク質にさらに関する。
本発明は、がんまたは感染症の治療に使用するための、本明細書に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片にさらに関する。
本発明は、がんまたは感染症の治療に使用するための、本明細書に記載の融合タンパク質にさらに関する。
本発明は、対象におけるがんまたは感染症の治療に使用するための、免疫療法と、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片との組み合わせにさらに関する。
本発明はさらに、対象におけるがんまたは感染症の治療に使用するための、免疫療法と、本明細書に記載の融合タンパク質との組み合わせに関する。
本発明はさらに、Ｔ細胞においてＩＬ－２シグナル伝達を阻害することなく、ＣＤ２５陽性細胞の特異的溶解を誘導する方法に関し、本方法は、本明細書に開示の治療有効量の単離された抗体もしくは抗原結合断片、または本明細書に記載の治療有効量の融合タンパク質、または本明細書に開示の治療有効量の医薬組成物を対象に投与するステップを含む。いくつかの実施形態では、対象は、免疫療法を受けているか、または受けた。
本発明は、対象に免疫療法を施すステップを含む方法にさらに関し、対象は、本明細書に開示の治療有効量の単離された抗体もしくは抗原結合断片、または本明細書に記載の治療有効量の融合タンパク質、または本明細書に開示の治療有効量の医薬組成物を投与されているか、または投与される。いくつかの実施形態では、治療有効量は、Ｔ細胞においてＩＬ－２シグナル伝達を阻害することなく、ＣＤ２５陽性細胞の特異的溶解を誘導するのに有効な量である。
図１は、ＣＤ２５陽性細胞株上での本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）または対照抗体の結合を示すヒストグラムである。 図２は、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）とｍＡｂ ７Ｇ７Ｂ６（ＩＬ－２非競合抗体）との結合競合を示すヒストグラムである。 図３は、ＩｇＧ１対照抗体またはバシリキシマブと比較した、ＩＬ－２により誘導されるエフェクターＴ細胞の増殖に対する本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）の影響を示すヒストグラムである。 図４は、本発明の抗体によって誘導される抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を示すグラフ（Ａ）およびヒストグラム（Ｂ）の組み合わせを示す図である。図４Ａは、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）またはバシリキシマブとのインキュベーションによって誘導されたＣＤ２５陽性細胞の溶解を示す。図４Ｂは、ＩｇＧ１対照抗体と比較した、１μｇ／ｍＬまたは１０μｇ／ｍＬでの本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）とのインキュベーションによって誘導された、ＳＵＤＨＬ－１細胞のアポトーシスに対応するＣＦＳＥ＋７ＡＡＤ＋細胞の割合を表す。データは平均±ＳＥＭとして表す。 図５は、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）、または７Ｇ７Ｂ６またはｍＡｂ ＭＡ－２５１（ＩＬ－２非競合抗体）またはバシリキシマブのＩＬ－２により誘導されるＴ細胞の増殖に対する影響を示すグラフである。「アイソタイプＣｔｌ」：アイソタイプ対照抗体。エラーバーは、ｓｅｍを表す。 図６は、Ｔｒｅｇ細胞の枯渇に対する本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ４）の影響を示す５つのヒストグラム（Ａ～Ｅ）の組み合わせを示す図である。エラーバーは、ｓｅｍを表す。図６Ａは、ＡＬＤ２５Ｈ４、７Ｇ７Ｂ６、またはビヒクルで処置されたヒト化マウスの腫瘍浸潤ＣＤ４＋Ｔ細胞内のＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞の割合を表す。図６Ｂは、抗ＣＤ２５モノクローナル抗体によって得られたＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞枯渇の割合を表す。図６Ｃは、ＡＬＤ２５Ｈ４で処置されたかまたは処置されていないヒト化マウスのＭＤＡ－ＭＢ－２３１またはＨＴ２９によって誘導された腫瘍内のＣＤ４５＋白血球集団内のＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＤ１２７－ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞の割合を表す。図６Ｄは、ＡＬＤ２５Ｈ４で処置されたかまたは処置されていないヒト化マウス内のＭＤＡ－ＭＢ－２３１またはＨＴ２９によって誘導された腫瘍内のＣＤ４５＋白血球集団内のＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３－Ｔエフェクター細胞（ＣＤ４＋Ｔエフェクター細胞）の割合を表す。図６Ｅは、ＡＬＤ２５Ｈ４で処置されたかまたは処置されていないヒト化マウスのＭＤＡ－ＭＢ－２３１またはＨＴ２９によって誘導された腫瘍内のＣＤ４５＋白血球集団内のＣＤ８＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３－Ｔエフェクター細胞（ＣＤ８＋Ｔエフェクター細胞）の割合を表す。 同上。 図７は、ＩｇＧ１対照抗体またはバシリキシマブと比較した、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＩＬ－２の結合に対する１μｇ／ｍＬまたは１０μｇ／ｍＬでの本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ４）の影響を示すヒストグラムである。 図８は、ＩｇＧ１対照抗体と比較した、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ４）によって誘導された抗体依存性食作用（ＡＤＣＰ）の割合を示すヒストグラムである。データは平均±ＳＥＭとして表す。 図９は、ＣＤ４５＋リンパ球集団内のＴｒｅｇ細胞枯渇に対する本発明の抗体の影響を示す３つのヒストグラム（Ａ、ＢおよびＣ）の組み合わせを示す図である。図９Ａは、ＩｇＧ１対照抗体、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）またはバシリキシマブとのインキュベーション後のＣＤ４５＋リンパ球集団内のＴｒｅｇ細胞の割合を表す。図９Ｂは、ＩｇＧ１対照抗体、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）またはバシリキシマブとのインキュベーション後のＣＤ４５＋リンパ球集団内のＣＤ４＋Ｔエフェクター細胞の割合を表す。図９Ｃは、ＩｇＧ１対照抗体、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）またはバシリキシマブとのインキュベーション後のＣＤ４５＋リンパ球集団内のＣＤ８＋Ｔエフェクター細胞の割合を表す。データは平均±ＳＥＭとして表す。
定義
本発明において、以下の用語は、以下の意味を有する。
数字の前にある「約」は、その数字の値のプラスマイナス１０％以下を含む。「約」という用語が指す値は、それ自体も具体的にかつ好ましくは開示されることを理解されたい。
モノボディとしても公知である「アドネクチン」は、当技術分野において周知であり、抗原に対して高い親和性および特異性で結合するように設計されたタンパク質を指す。それらは、まとめて「抗体模倣体」と呼ばれる分子のクラスに属している。
細胞透過性アルファボディとも呼ばれ得る「アルファボディ」は、様々な抗原に結合するように操作された小さい１０ｋＤａタンパク質からなる抗体模倣体の一種を指す。アルファボディは、細胞内タンパク質標的に到達して結合することができる。
「アフィボディ」は、当技術分野において周知であり、ブドウ球菌プロテインＡのＩｇＧ結合ドメインのうちの１つに由来する５８のアミノ酸残基のタンパク質ドメインに基づく親和性タンパク質を指す（Ｆｒｅｊｄ＆Ｋｉｍ，２０１７．Ｅｘｐ Ｍｏｌ Ｍｅｄ．４９（３）：ｅ３０６；米国特許第５，８３１，０１２号明細書）。
「アフィリン」は、当技術分野において周知であり、抗原に選択的に結合するように設計された人工タンパク質を指す。これらは、抗原に対する親和性および特異性において抗体に類似しているが、それらを一種の抗体模倣体にする構造ではない。
「親和性」および「アビディティ」は、当技術分野において周知であり、抗体－抗原複合体の強度を定義するために使用される。親和性は、エピトープと抗体の抗原結合部位との間の相互作用の強度を測定する。それは、親和定数ＫＡまたは解離定数ＫＤによって表され得る。アビディティ（または機能的親和性）は、抗体－抗原複合体の全体的な強度の尺度を提供する。これは、特に抗体またはその抗原結合断片のエピトープに対する親和性、（ｉｉ）抗体および抗原の両方の結合価、ならびに（ｉｉｉ）相互作用する部分の構造的配置など、異なるパラメータに依存し得る。
本明細書で使用される場合、「抗体」および「免疫グロブリン」という用語は同義的に使用され得、関連する任意の特定の免疫反応性を有するか否かにかかわらず、２つの重鎖および２つの軽鎖の組み合わせを有するタンパク質を指す。「抗体」は、目的の抗原（例えば、ヒトＣＤ２５）に対して有意な既知の特異的免疫反応性活性を有する集合体を指す。「抗ｈＣＤ２５抗体」という用語は、本明細書では、ヒトＣＤ２５タンパク質に対して免疫学的特異性を呈する抗体を指すために使用される。本明細書の他の場所で説明しているとおり、ヒトＣＤ２５の「特異性」は、例えば、ｈＣＤ２５の種相同体と（サルＣＤ２５となど）の交差反応を除外するものではない。
抗体および免疫グロブリンは、それらの間の鎖間共有結合の有無にかかわらず、軽鎖および重鎖を含む。脊椎動物系における基本的な免疫グロブリンの構造は、比較的よく理解されている。「免疫グロブリン」という総称は、生化学的に区別できる５つの異なるクラスの抗体で構成されている。以下の議論は一般に免疫グロブリン分子のＩｇＧクラスに向けられるが、５つのクラスの抗体すべてが本発明の範囲内にある。ＩｇＧに関して、免疫グロブリンは、分子量が約２３ｋＤａの２つの同一の軽ポリペプチド鎖、および分子量が約５３～７０ｋＤａの２つの同一の重鎖を含む。４つの鎖は、「Ｙ」構成でジスルフィド結合によって結合されており、軽鎖は、「Ｙ」の口から開始し、可変領域を通って続く重鎖を包み込む。抗体の軽鎖は、カッパ（κ）またはラムダ（λ）のいずれかに分類される。各重鎖クラスは、κまたはλ軽鎖のいずれかと結合され得る。一般に、軽鎖および重鎖は互いに共有結合により結合し、免疫グロブリンがハイブリドーマ、Ｂ細胞または遺伝子操作された宿主細胞のいずれかによって生成される場合、２つの重鎖の「テール」領域は、共有二硫化物結合または非共有結合によって互いに結合する。重鎖では、アミノ酸配列は、Ｙ構成のフォーク型端部のＮ末端から各鎖の下部のＣ末端まで延在している。当業者であれば、重鎖がガンマ（γ）、ミュー（μ）、アルファ（α）、デルタ（δ）またはイプシロン（ε）として分類され、それらの中にいくつかのサブクラス（例えば、γ１～γ４）があることを理解するであろう。抗体の「クラス」をそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ ＩｇＤ、またはＩｇＥと決定するのは、この鎖の性質である。免疫グロブリンのサブクラスまたは「アイソタイプ」（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１など）は特徴が十分に明らかになっており、機能的な特異化をもたらすことが公知である。これらのクラスおよびアイソタイプのそれぞれの修飾型は、本開示の観点から当業者には容易に識別可能であり、したがって、本発明の範囲内である。上述したとおり、抗体の可変領域では、抗体が抗原上のエピトープを選択的に認識し、特異的に結合することが可能になる。すなわち、抗体の軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）と重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）が組み合わさって、三次元抗原結合部位を画定する可変領域を形成する。この四次抗体構造は、「Ｙ」の各アームの端部に存在する抗原結合部位を形成する。より具体的には、抗原結合部位は、ＶＨ鎖およびＶＬ鎖のそれぞれの３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）によって画定される。
「アフィチン」は、もともとスルフォロブス属の２つの７ｋＤａ ＤＮＡ結合ポリペプチドであるＳａｃ７ｄおよびＳｓｏ７ｄに由来する、非常に安定した操作された親和性タンパク質を指す。
「アンチカリン」は、当技術分野において周知であり、結合特異性がリポカリンに由来する抗体模倣技術を指す。アンチカリンは、デュオカリンと呼ばれる二重標的化タンパク質としてフォーマットされ得る。
本明細書で使用される「抗原結合断片」という用語は、抗体全体よりも少ないアミノ酸残基を含む、本発明による抗体の一部または領域を指す。「抗原結合断片」は、抗原に結合し、かつ／またはそれが由来する抗体全体と抗原結合（例えば、ヒトＣＤ２５への特異的結合）について競合する。抗体抗原結合断片としては、これらに限定されないが、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ）’２、Ｆｄ、脱フコシル化抗体、ダイアボディ、トライアボディ、およびテトラボディが挙げられる。
本明細書で使用される「アルマジロリピートタンパク質ベースの足場」は、アルマジロリピートタンパク質に基づく人工ペプチド結合足場に対応する一種の抗体模倣体を指す。アルマジロリピートタンパク質は、ペプチドまたはタンパク質との相互作用を媒介する、約４２アミノ酸のタンデムアルマジロリピートで構成されるアルマジロドメインを特徴とする。
「アトリマー」は、当技術分野において周知であり、それらの生物学的活性の必要条件として三量体化する標的タンパク質の結合分子を指す。それらは他の抗体模倣足場と比較して比較的大きい。
「アビマー」は、当技術分野において周知であり、抗体模倣技術を指す。
本明細書で使用される場合、「ＣＤ２５」という用語は、特に明記しない限り、霊長目（例えば、ヒト）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳動物など、任意の脊椎動物源からの任意の天然ＣＤ２５を指す。インターロイキン－２受容体アルファ鎖（ＣＤ２５とも呼ばれる）タンパク質は、ＩＬ２ＲＡ遺伝子によってコードされる。ＩＬ－２受容体の２つの形態を記載した：第１の形態はアルファサブユニット（ＣＤ２５）、ベータサブユニット（ＣＤ１２２）およびガンマサブユニット（ＣＤ１３２）を含み、第２の形態はベータおよびガンマサブユニットのみを含む（すなわち、ＣＤ１２２およびＣＤ１３２）。この用語は、「全長」または未処置のＣＤ２５、および細胞内での処置から生じる任意の形態のＣＤ２５を含む。この用語はまた、ＣＤ２５の天然に存在するバリアント（例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子バリアント）を包含する。ある実施形態では、ＣＤ２５は、ヒトＣＤ２５である。例えば、ＣＤ２５は、抗原またはマイトジェン刺激に応答する活性化Ｔリンパ球および活性化Ｂリンパ球によって発現する。ＣＤ２５は、制御性Ｔ細胞（ＣＤ２５ｈｉｇｈＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞）によっても発現する。一実施形態では、ＣＤ２５は、ヒトＣＤ２５（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｐ０１５８９）を指す。
本明細書で使用される場合、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」という用語は、重鎖ポリペプチドおよび軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非隣接抗原組み合わせ部位を意味する。所与のＣＤＲの正確なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔら（１９９１年）、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉら、（１９９７年）ＪＭＢ ２７３：９２７－９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）により記載されるスキームを含むいくつかの周知であるスキームのいずれか、またはこれらの組み合わせを使用して決定することができる。より近年では、ユニバーサルナンバリングシステムが開発され、ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（登録商標）が広く採用されている（Ｌｅｆｒａｎｃら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２７：２０９－２１２１９９９）。ＩＭＧＴは、ヒトおよび他の脊椎動物の免疫グロブリン（ＩＧ）、Ｔ細胞受容体（ＴＲ）、ならびに主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）に特化した統合情報システムである。本明細書では、ＣＤＲは、アミノ酸配列および軽鎖または重鎖内の位置の両方に関して言及されている。免疫グロブリン可変ドメインの構造内のＣＤＲの「位置」は種間で保存されており、ループと呼ばれる構造内に存在するため、構造的特徴に従って可変ドメイン配列を整列させる番号付けシステムを使用することにより、ＣＤＲおよびフレームワーク残基が容易に特定され得る。この情報は、ある種の免疫グロブリンからのＣＤＲ残基を、典型的には、ヒト抗体からのアクセプターフレームワークへ移植するおよび置き換える際に使用できる。Ｋａｂａｔ番号付けシステムとＩＭＧＴ固有の番号付けシステムとの間の対応もまた、当業者において周知である（例えば、Ｌｅｆｒａｎｃら、前出）。したがって、一実施形態では、ＣＤＲ領域またはＣＤＲによって、ＩＭＧＴ（登録商標）番号付けシステム（例えば、Ｌｅｆｒａｎｃら、前出）によって定義される免疫グロブリンの重鎖および軽鎖の超可変領域を示すことが意図されている。
ＤＡＲＰｉｎ（設計されたアンキリンリピートタンパク質）は、当技術分野において周知であり、非抗体ポリペプチドの結合能力を利用するために開発された抗体模倣ＤＲＰ（設計されたリピートタンパク質）技術を指す。
本明細書で使用されるとき、「ダイアボディ」は、可変ドメインの鎖間ペアリングが達成されるが、鎖内ペアリングは達成されないように、ＨＣＶＲとＬＣＶＲとの間に短いリンカー（約５～１０残基）を有するｓｃＦｖ断片を構築することによって調製される小さい抗体断片を指し、結果として、二価断片、すなわち、２つの抗原結合部位を有する断片となる。二重特異性ダイアボディは、２つの「クロスオーバー」ｓｃＦｖ断片のヘテロダイマーであり、２つの抗体のＨＣＶＲおよびＬＣＶＲが異なるポリペプチド鎖に存在する。ダイアボディは、欧州特許第０４０４０９７号、国際公開第１９９３０１１１６１号、およびＨｏｌｌｉｇｅｒら、１９９３．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９０（１４）：６４４４－８に、より完全に記載されている。
「ドメイン抗体」は、当技術分野において周知であり、抗体の重鎖または軽鎖のいずれかの可変領域に対応する、抗体の最小の機能的結合単位を指す。
「ドメインクニッツペプチド」は、抗体模倣体の一種を指し、プロテアーゼの機能を阻害するタンパク質の活性ドメインに基づいている。
「エフェクターＴ細胞」という用語は、いくつかのＴ細胞型（例えば、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞）を含む細胞のグループを指す。これには、Ｂ細胞の血漿細胞および記憶Ｂ細胞への成熟などの免疫過程で他の白血球を助けるヘルパーＴ細胞（Ｔｈ細胞）、ならびにウイルス感染細胞および腫瘍細胞を破壊し、移植片拒絶反応にも関与する細胞傷害性Ｔ細胞（Ｔｃ細胞、ＣＴＬ、Ｔキラー細胞、キラーＴ細胞）を含む。
本明細書で使用される場合、「エピトープ」という用語は、抗体またはその抗原結合断片または抗体模倣体が結合するタンパク質（複数可）上に位置するアミノ酸の特定の配置を指す。エピトープは、多くの場合、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面グループで構成され、特定の三次元構造特性および特定の電荷特性を有する。エピトープは、直鎖状（もしくは連続的）または立体配座であってもよく、すなわち、必ずしも隣接していなくてもよい抗原の様々な領域にあるアミノ酸の２つ以上の配列が関与している。
「エバシン」は、当技術分野において周知であり、ケモカイン結合タンパク質のクラスを指す。
本明細書で使用される場合、「フレームワーク領域」または「ＦＲ領域」という用語は、可変領域の一部であるが、ＣＤＲの一部ではない（例えば、ＣＤＲのＩＭＧＴ（登録商標）番号付け定義を使用する）アミノ酸残基を含む。軽鎖のフレームワーク領域は、ＬＣＶＲのＣＤＲの各々によって同様に分離されている。天然に存在する抗体では、各単量体抗体に存在する６つのＣＤＲは、アミノ酸の短い非隣接配列であり、抗体が水性環境でその三次元構成をとるときに、抗原結合部位を形成するように特異的に位置される。重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインの残りの部分は、アミノ酸配列内の分子間変動が少なく、フレームワーク領域と呼ばれる。フレームワーク領域は、主にβシートコンフォメーションを採用し、ＣＤＲはループを形成して接続し、場合によってはβシート構造の一部を形成する。したがって、これらのフレームワーク領域は、非共有結合による鎖間相互作用によって、６つのＣＤＲを正しい配向に位置させるための足場を形成するように作用する。位置されたＣＤＲによって形成される抗原結合部位は、免疫反応性抗原上のエピトープに相補的な表面を画定する。この相補的な表面では、免疫反応性抗原エピトープへの抗体の非共有結合による結合が促進する。ＣＤＲの位置は、当業者によって容易に特定することができる。
「Ｆｃドメイン」、「Ｆｃ部分」、および「Ｆｃ領域」という用語は、抗体重鎖のＣ末端断片、例えば、ヒトガンマ重鎖の約アミノ酸（ａａ）２３０～約ａａ４５０まで、または他のタイプの抗体重鎖におけるその対応する配列（例えば、ヒト抗体の場合はα、δ、εおよびμ）、またはその天然に存在するアロタイプを指す。
「ファイノマー」は、当技術分野において周知であり、これは、抗体模倣体のクラスに属するタンパク質を指す。このタンパク質は、高い熱安定性および免疫原性の低下により、魅力的な結合分子である。
本明細書で使用される「Ｆｖ」は、完全な抗原認識および結合部位を含む最小の抗体断片を指す。この断片は、緊密な非共有結合による会合内の１つのＨＣＶＲおよび１つのＬＣＶＲの二量体からなる。これらの２つのドメインの折り畳みから、抗原結合に寄与し、抗体に抗原結合特異性を付与する６つの超可変ループ（重鎖および軽鎖からそれぞれ３つのループ）が発生する。しかし、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的である３つのＣＤＲのみを含むＦｖの半分）であっても、結合部位全体よりも親和性は低いが、抗原を認識して結合する能力を有する。
本明細書で使用される場合、「重鎖領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖の定常ドメインに由来するアミノ酸配列を含む。重鎖領域を含むタンパク質は、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ（例えば、上部、中間、および／または下部ヒンジ領域）ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、またはそれらのバリアントもしくは断片のうちの少なくとも１つを含む。一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域（例えば、ヒンジ部分、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン）を含み得る。別の実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、少なくとも定常ドメインの領域（例えば、ＣＨ２ドメインの全部または一部）を含まない。ある実施形態では、定常ドメインの少なくとも１つ、好ましくはすべては、ヒト免疫グロブリン重鎖に由来する。例えば、１つの好ましい実施形態では、重鎖領域は、完全ヒトヒンジドメインを含む。他の好ましい実施形態では、重鎖領域は、完全ヒトＦｃ領域（例えば、ヒト免疫グロブリンからのヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３ドメイン配列）を含む。ある実施形態では、重鎖領域の構成定常ドメインは、異なる免疫グロブリン分子に由来する。例えば、タンパク質の重鎖領域は、ＩｇＧ１分子に由来するＣＨ２ドメインと、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４分子に由来するヒンジ領域とを含み得る。他の実施形態では、定常ドメインは、異なる免疫グロブリン分子の領域を含むキメラドメインである。例えば、ヒンジは、ＩｇＧ１分子からの第１の領域と、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４分子からの第２の領域と、を含み得る。上記のとおり、当業者であれば、重鎖領域の定常ドメインは、それらが天然に存在する（野生型）免疫グロブリン分子からアミノ酸配列が異なるように修飾され得ることが理解されるであろう。すなわち、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、１つ以上の重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２またはＣＨ３）および／または軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）への改変または修飾を含み得る。例示的な修飾には、１つ以上のドメインにおける１つ以上のアミノ酸の付加、欠失または置換が含まれる。
本明細書で使用される場合、「ヒンジ領域」という用語は、ＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインに結合する重鎖分子の領域を含む。このヒンジ領域は、約２５残基を含み、柔軟性があるため、２つのＮ末端抗原結合領域を独立して移動させることが可能になる。ヒンジ領域は、上部、中間、下部のヒンジドメインの３つの異なるドメインに細分化させ得る（Ｒｏｕｘら、１９９８．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１（８）：４０８３－９０）。
「超可変ループ」という用語は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と厳密に同義ではない。これは、超可変ループ（ＨＶ）は、構造に基づいて画定される一方で、ＣＤＲは、配列の変動性に基づいて画定されるためであり（Ｋａｂａｔら、１９９１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（第５版）．Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ）、ＨＶとＣＤＲとの境界は、一部のＶＨドメインおよびＶＬドメインにおいて異なり得る。ＶＬおよびＶＨドメインのＣＤＲは、典型的には、上記ですでに説明したように、Ｋａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａの定義によって定義され得る。
本明細書で使用される場合、「同一性」または「同一」という用語は、２つ以上のアミノ酸配列の配列間、または２つ以上の核酸配列の配列間の関係で使用される場合、２つ以上のアミノ酸残基または核酸残基のストリング間の一致数によって決定されるため、アミノ酸配列間または核酸配列間の配列関連性の程度を指す。「同一性」は、特定の数学的モデルまたはコンピュータプログラム（すなわち、「アルゴリズム」）によって指定されたギャップアラインメント（存在する場合）を有する２つ以上の配列のうちの小さい方の間の同一の一致の割合（パーセント）を測定する。関連するアミノ酸配列または核酸配列の同一性は、既知の方法によって容易に計算することができる。このような方法としては、これらに限定されないが、Ｌｅｓｋ Ａ．Ｍ．（１９８８）．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ：Ｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ；Ｓｍｉｔｈ Ｄ．Ｗ．（１９９３）．Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ ｇｅｎｏｍｅ ｐｒｏｊｅｃｔｓ．Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；Ｇｒｉｆｆｉｎ Ａ．Ｍ．＆Ｇｒｉｆｆｉｎ Ｈ．Ｇ．（１９９４）．Ｃｏｍｐｕｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄａｔａ，Ｐａｒｔ １．Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ：Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ Ｇ．（１９８７）．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ：ｔｒｅａｓｕｒｅ ｔｒｏｖｅ ｏｒ ｔｒｉｖｉａｌ ｐｕｒｓｕｉｔ．Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ：Ａｃａｄｅｍｉｃ ｐｒｅｓｓ；Ｇｒｉｂｓｋｏｖ Ｍ．Ｒ．＆Ｄｅｖｅｒｅｕｘ Ｊ．（１９９１）．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｐｒｉｍｅｒ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ；Ｃａｒｉｌｌｏら、１９８８．ＳＩＡＭ Ｊ Ａｐｐｌ Ｍａｔｈ．４８（５）：１０７３－８２に記載されているものが挙げられる。同一性を決定するための好ましい方法は、試験対象の配列間で最大の一致が得られるように設計されている。同一性を決定する方法は、公開されているコンピュータプログラム内に記載されている。２つの配列間の同一性を決定するための好ましいコンピュータプログラム方法には、ＧＡＰ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ；Ｄｅｖｅｒｅｕｘら、１９８４．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１２（１ Ｐｔ １）：３８７－９５），ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮおよびＦＡＳＴＡ（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、１９９０．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２１５（３）：４０３－１０）などのＧＣＧプログラムパッケージが含まれる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）および他の情報源（ＢＬＡＳＴ Ｍａｎｕａｌ，Ａｌｔｓｃｈｕｌら、ＮＣＢ／ＮＬＭ／ＮＩＨ Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．２０８９４）から公開されている。周知のＳｍｉｔｈ Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズムを使用して、同一性を決定することもできる。
本明細書で使用される場合、「インターロイキン－２」または「ＩＬ－２」という用語は、特に明記しない限り、霊長目（例えば、ヒト）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳動物など、任意の脊椎動物源からの任意の天然ＩＬ－２を指す。この用語は、未処置のＩＬ－２のみでなく、細胞内での処置から生じるあらゆる形態のＩＬ－２を含む。この用語はまた、ＩＬ－２の天然に存在するバリアント（例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子バリアント）を包含する。
「ノッチン」（阻害剤シスチンノット（ｃｙｓｔｉｎｅ ｎｏｔ）と呼ばれることもある）は、３つのジスルフィド架橋を含むタンパク質構造モチーフを含む抗体模倣体を指す。
本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、ヒト、家畜、ならびにイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウサギなどの動物園、スポーツ、またはペット動物など、任意の哺乳動物を指す。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均質である抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団に含まれる個々の抗体は、少量で存在し得る天然に存在する突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は非常に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられている。さらに、異なる決定基（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して向けられている。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の抗体によって汚染されずに合成され得るという点で有利である。修飾語「モノクローナル」は、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本発明によるモノクローナル抗体またはそれらの抗原結合断片は、Ｋｏｈｌｅｒら、１９７５．Ｎａｔｕｒｅ．２５６（５５１７）：４９５－７によって最初に記述されたハイブリドーマ方法論によって調製され得るか、または細菌、真核動物もしくは植物細胞において組換えＤＮＡ法を使用して作成されてもよい（米国特許第４，８１６，５６７号明細書）。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎら、１９９１．Ｎａｔｕｒｅ．３５２（６３３６）：６２４－８およびＭａｒｋｓら、１９９１．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２２２（３）：５８１－９７に記載されている技術を使用して、ファージ抗体ライブラリーからも単離され得る。
「ナノボディ」は、当技術分野において周知であり、天然に存在する重鎖抗体の固有の構造的および機能的特性を含む抗体由来の治療用タンパク質を指す（Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ，２０１３．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ．８２：７７５－９７）。これらの重鎖抗体には、単一の可変ドメイン（ＶＨＨ）および２つの定常ドメイン（ＣＨ２およびＣＨ３）が含まれ得る。
本明細書で使用される場合、「防止する（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、「防止すること（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」および「防止（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」という用語は、予防的手段および防止的手段を指し、その目的は、対象が所与の期間にわたって病的状態または障害を発症する可能性を低下させることである。そのような低下は、例えば、対象の病的状態または障害の少なくとも１つの症状の発症の遅延に反映され得る。
本明細書で使用される場合、「制御性Ｔ細胞」または「Ｔｒｅｇ細胞」という用語は、他のＴ細胞の応答を抑制することができる特殊な型のＴ細胞、特にＣＤ４＋Ｔ細胞を指す。Ｔｒｅｇ細胞は一般に、ＣＤ４、ＩＬ－２受容体のα－サブユニット（ＣＤ２５）、および転写因子フォークヘッドボックスＰ３（Ｆｏｘｐ３）の発現を特徴とし（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２２，５３１－６２（２００４））、腫瘍によって発現されるものなど、抗原に対する末梢性自己寛容の誘導および維持において重要な役割を果たす。近年では、ＣＤ８Ｔｒｅｇについても、記載されている。
本明細書で使用される「単鎖抗体」は、これに限定されないが、（１）単鎖Ｆｖ分子（ｓｃＦｖ）；（２）１つの軽鎖可変ドメインのみを含む単鎖タンパク質、または関連する重鎖部分を含まない、軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含むその断片：および（３）１つの重鎖可変領域のみを含む単鎖タンパク質、または関連する軽鎖部分を含まない、重鎖可変領域の３つのＣＤＲを含むその断片など、隣接するアミノ酸残基の１つの途切れない配列を含むかまたはそれからなる一次構造を有するタンパク質である任意の抗体またはその断片を指す。
「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも略される「単鎖Ｆｖ」は、単一のアミノ酸鎖に接続されたＶＨおよびＶＬ抗体ドメインを含む抗体断片を指す。好ましくは、ｓｃＦｖアミノ酸配列は、ｓｃＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成することが可能になる、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間のペプチドリンカーをさらに含む（Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，１９９４．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｒｏｍ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ．Ｉｎ Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ＆Ｍｏｏｒｅ（編），Ｔｈｅ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１１３：２６９－３１５．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ：Ｂｅｒｌｉｎ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）。
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、哺乳動物、好ましくはヒトを指す。一実施形態では、対象は、「患者」、すなわち、温血動物、より好ましくはヒトであり得、医療を受けるのを待機している、もしくは医療を受けているか、または医療処置の対象であった／対象である／対象となるであろうか、または疾患の発症が監視されている。本明細書では、「哺乳動物」という用語は、ヒト、家畜、ならびにイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウサギなどの動物園、スポーツ、またはペット動物など、任意の哺乳動物を指す。好ましくは、哺乳動物は、霊長類、より好ましくはヒトである。
「治療有効量」という用語は、標的に有意な負のまたは有害な副作用を引き起こすことなく、（１）疾患、障害または状態の発症を遅延させるまたは防止する；（２）疾患、障害、または状態の１つ以上の症状の進行、増悪、または悪化を遅らせる、または停止させる；（３）疾患、障害、または状態の症状の改善をもたらす；（４）疾患、障害、もしくは状態の重症度もしくは発生率を低下させる；または（５）疾患、障害、もしくは状態を治癒する；ことを目的とした本明細書に記載の抗体のレベルまたは量を指す。治療有効量は、予防的または防止的作用のために、疾患、障害または状態の発症の前に投与され得る。あるいはまたはさらに、治療有効量は、治療作用のために、疾患、障害または状態の開始後に投与され得る。
本明細書で使用される場合、「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「緩和」という用語は、治療的治療および予防的手段または防止的手段の両方を指す。この目的は、標的となる病的状態または障害を防止するかまたは減速（軽減）することである。治療が必要な場合には、すでに障害を有している場合のみでなく、障害を起こしやすい場合または障害を防止する場合も含む。本発明の方法に従って治療量の抗体を投与された後、患者が、以下のがん細胞（または腫瘍サイズ）もしくは病原性細胞の数の減少；がん性もしくは病原性の全細胞の割合の減少のうちの１つ以上の観察可能および／もしくは測定可能な減少または非存在を示す場合、かつ／または患者が、特定の疾患もしくは状態に関連する症状のうちの１つ以上のある程度の緩和、罹患率および死亡率の低下、ならびに生活の質の問題の改善を示す場合、対象または哺乳動物は、がんまたは感染症に対して首尾よく「治療」されている。治療の奏功および疾患の改善を判定するための上記のパラメータは、医師が精通しているルーチン手順によって容易に測定可能である。
本明細書で使用される場合、「腫瘍浸潤性Ｔｒｅｇ」という用語は、浸潤の増加、局所拡大、生存の利点、および従来のＣＤ４＋またはＣＤ８＋細胞からのｉｎ ｓｉｔｕ発生などのいくつかの異なるメカニズムの結果として、腫瘍性病変内に蓄積するＣＤ２５＋／ｈｉＦｏｘｐ３＋制御性Ｔ細胞に関する。
「ユニボディ」は、当技術分野において周知であり、ＩｇＧ４抗体のヒンジ領域を含まない抗体断片を指す。ヒンジ領域の欠失により、従来のＩｇＧ４抗体の本質的に半分のサイズであり、ＩｇＧ４抗体の二価の結合領域ではなく一価の結合領域を有する分子となる。
本明細書で使用される場合、「可変」という用語は、可変ドメインＶＨおよびＶＬの特定の領域は、配列が抗体間で広範囲にわたって異なり、かつこれらの領域が、その標的抗原に対する各特定の抗体の結合および特異性において使用されることを指す。しかし、変動性は抗体の可変ドメイン全体に均等に分散していない。それは、抗原結合部位の一部を形成するＶＬドメインおよびＶＨドメインのそれぞれ内において「超可変ループ」と呼ばれる３つのセグメント内に集中している。Ｖλ軽鎖ドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＬ１（λ）、Ｌ２（λ）およびＬ３（λ）と呼ばれ、ＶＬドメイン内に、残基２４～３３（Ｌ１（λ）、９、１０または１１アミノ酸残基からなる）、４９～５３（Ｌ２（λ）、３残基からなる）および９０～９６（Ｌ３（λ）、６残基からなる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａら、２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。Ｖκ軽鎖ドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＬ１（κ）、Ｌ２（κ）およびＬ３（κ）と呼ばれ、ＶＬドメイン内に、残基２５～３３（Ｌ１（κ）、６、７、８、１１、１２または１３残基からなる）、４９～５３（Ｌ２（κ）、３残基からなる）および９０～９７（Ｌ３（κ）、６残基からなる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａら、２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。ＶＨドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＨ１、Ｈ２およびＨ３と呼ばれ、ＶＨドメイン内に、残基２５～３３（Ｈ１、７、８または９残基からなる）、５２～５６（Ｈ２、３または４残基からなる）および９１～１０５（Ｈ３、長さは大きく変動可能である）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａら、２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。特に明記しない限り、用語Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３は、それぞれＶＬドメインの第１、第２、および第３の超可変ループを指し、ＶκおよびＶλアイソタイプの両方から得られる超可変ループを含む。用語Ｈ１、Ｈ２、およびＨ３は、それぞれＶＨドメインの第１、第２、および第３の超可変ループを指し、ガンマ（γ）、ミュー（μ）、アルファ（α）、デルタ（δ）またはイプシロン（ε）など、既知の重鎖アイソタイプのいずれかから得られた超可変ループを含む。超可変ループＬ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｈ１、Ｈ２およびＨ３はそれぞれ、上記で定義されるとおり、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」の一部を含み得る。
「バーサボディ」は、当技術分野において周知であり、別の抗体模倣技術を指す。それらは、１５％超のシステインを有する３～５ｋＤａの小さいタンパク質であり、典型的なタンパク質が有する疎水性コアに代わって、高ジスルフィド密度の足場を形成する。疎水性コアを含む多数の疎水性アミノ酸を少数のジスルフィドで置き換えることにより、より小さく、より親水性になり（凝集および非特異的結合が少なく）、プロテアーゼおよび熱に対してより耐性があり、より低密度のＴ細胞エピトープを有するタンパク質となる。これは、ＭＨＣの提示に最も寄与する残基が、疎水性であるためである。これらの４つの特性はすべて免疫原性に影響を与えることがよく知られており、これらが一緒になった免疫原性の大幅な低下を引き起こすことが予想される。
詳細な説明
抗腫瘍免疫療法として、ＩＬ－２経路遮断が明らかに見込まれるとしても、ＩＬ－２経路の操作は、免疫刺激機能および免疫調節機能を双方とも調節するため、慎重に検討する必要がある。実際に、ＩＬ－２経路は、免疫応答の調節および末梢性自己寛容の維持に重要な役割を果たすが、Ｔ細胞の増殖および生存、ならびにエフェクターＴ細胞およびメモリーＴ細胞の生成に不可欠なＴ細胞成長因子としても作用する。さらに、ＩＬ－２受容体は、エフェクターＴ細胞内および骨髄樹状細胞内でも一過性に発現するため、ＩＬ－２経路を操作することにより、例えば、抗腫瘍エフェクターＴ細胞、特にＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の機能の改変など、予測できない結果が生じ、その結果、がんが進行する可能性がある。
エフェクターＣＤ８＋Ｔ細胞は、免疫系の構成要素として、腫瘍の抑制に重要な役割を有する。例えば、エフェクターＣＤ８＋Ｔ細胞は、グランザイムおよびパーフォリンなどの細胞傷害性分子で腫瘍細胞を殺すことができる。ＣＤ８＋Ｔ細胞によって産生されるＩＦＮ－γにより、腫瘍細胞によるＭＨＣクラスＩ抗原の発現が増加し、それによってＣＤ８＋Ｔ細胞のより良い標的となり得る。したがって、がんの間、エフェクターＣＤ８＋Ｔ細胞は、腫瘍性細胞の消失に重要である。
ここで、出願人は、がんの間の効率的なエフェクターＴ細胞応答を維持しながら、Ｔｒｅｇを消失させるかまたはサイレンシングさせることを目的とした。したがって、本発明は、特にＩＬ－２シグナル伝達経路を遮断することなく、Ｔｒｅｇを枯渇させることによって強力な抗癌効果を示し、それによってＩＬ－２がエフェクターＴ細胞を刺激できるようにする新規抗ＣＤ２５抗体に関する。
本発明は、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に結合する単離されたタンパク質に関する。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質は、単離された抗体またはその抗原結合断片であり、抗体またはその抗原結合断片は、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に結合する。
本明細書で使用される「単離されたタンパク質」、特に「単離された抗体」は、タンパク質、特に異なる抗原特異性を有する他のタンパク質または抗体を実質的に含まない抗体（例えば、ｈＣＤ２５に特異的に結合する単離されたタンパク質または抗体は、ｈＣＤ２５以外の抗原に特異的に結合するタンパク質または抗体を実質的に含まない）を指すことを意図する。しかし、ｈＣＤ２５に特異的に結合する単離されたタンパク質、特に単離された抗体は、他の種からのｈＣＤ２５分子など、他の抗原に対して交差反応性を有し得る。さらに、単離されたタンパク質または抗体は、他の細胞物質および／または化学物質、特に、タンパク質または抗体の診断的または治療的使用を妨害するもの、これらに限定されないが、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性成分などを実質的に含まなくてもよい。
一実施形態では、単離されたタンパク質、特に単離された抗体またはその抗原結合断片は精製される。
一実施形態では、単離されたタンパク質または抗体またはその抗原結合断片は、
（１）ローリー法で測定した場合、タンパク質または抗体またはその抗原結合断片の８０重量％、８５重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、９３重量％、９４重量％、９５重量％超、またはそれ以上、最も好ましくは９６重量％、９７重量％、９８重量％または９９重量％超まで；
（２）スピニングカップシーケンターを使用して、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を取得するのに十分な程度まで；または
（３）還元または非還元条件下で、クーマシーブルーまたは好ましくは銀染色を使用したＳＤＳ－ＰＡＧＥによって示される均一性まで精製される。
本発明によれば、単離されたタンパク質、特に単離された抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ２５を介するＩＬ－２のシグナル伝達を阻害するものではない。一実施形態では、単離されたタンパク質は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）のヒトＣＤ２５への結合を阻害するものではない。一実施形態では、単離された抗体またはその抗原結合断片は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）のヒトＣＤ２５への結合を阻害せず、したがって、本明細書では「非遮断抗体」と呼ばれ得る。
一実施形態では、本発明によるタンパク質は、タンパク質の非存在下でのＩＬ－２シグナル伝達と比較して、ＩＬ－２シグナル伝達の５０％未満を阻害する。一実施形態では、本発明によるタンパク質は、タンパク質の非存在下でのＩＬ－２シグナル伝達と比較して、ＩＬ－２シグナル伝達の４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％未満を阻害する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、抗体またはその抗原結合断片の非存在下でのＩＬ－２シグナル伝達と比較して、ＩＬ－２シグナル伝達の５０％未満を阻害する。一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、抗体またはその抗原結合断片の非存在下でのＩＬ－２シグナル伝達と比較して、ＩＬ－２シグナル伝達の４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％未満を阻害する。
ＩＬ－２シグナル伝達を測定するための方法は、当技術分野において周知であり、例えば、ＩＬ－２受容体シグナル伝達の誘導の測定（例えば、リン酸化ＳＴＡＴ５ａの検出による）、増殖の誘導（例えば、ＭＬＲ実験において、ＩＬ－２の存在下でのＴ細胞増殖（例えば、ＩＬ－２の存在下でのＣＤ３およびＣＤ２８を有する細胞の活性化を含む）の直接判定による、特にＣｅｌｌＴｒａｃｅ（商標）細胞増殖キットを使用したＫｉ－６７の検出による）、またはＩＬ－２に依存する細胞株（例えばＣＴＬＬ２細胞株）を使用した増殖、および／または活性化マーカー（例えば、ＣＤ２５、ＣＤ６９、細胞傷害性分子、例えば、グランザイムＢなど）の発現のアップレギュレーションが挙げられる。
一実施形態では、本発明のタンパク質は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖および／または活性化を阻害するものではない。一実施形態では、本発明のタンパク質は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞のＩＬ－２誘導性増殖を阻害するものではない。
一実施形態では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖および／または活性化を阻害するものではない。一実施形態では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞のＩＬ－２誘導性増殖を阻害するものではない（ＩＬ－２誘導性Ｔ細胞の増殖を測定するために使用され得る方法の例は、実施例部分に記載されている）。一実施形態では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、アイソタイプ対照抗体を使用したＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞のＩＬ－２誘導性増殖と比較して、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞のＩＬ－２誘導性増殖を３０％未満、好ましくは２５％未満、またはそれ以下、阻害する。
別の実施形態では、本発明によるタンパク質は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞におけるＳＴＡＴ５ａのリン酸化を阻害するものではない。
別の実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞におけるＳＴＡＴ５ａのリン酸化を阻害するものではない。
一実施形態では、本発明によるタンパク質は、タンパク質の非存在下でのＣＤ２５へのＩＬ－２の結合と比較して、ＣＤ２５へのＩＬ－２の結合の５０％未満を阻害する。一実施形態では、本発明によるタンパク質は、タンパク質の非存在下でのＣＤ２５へのＩＬ－２の結合と比較して、ＣＤ２５へのＩＬ－２の結合の４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％未満を阻害する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、抗体またはその抗原結合断片の非存在下でのＣＤ２５へのＩＬ－２の結合と比較して、ＣＤ２５へのＩＬ－２の結合を５０％未満を阻害する。一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、抗体またはその抗原結合断片の非存在下でのＣＤ２５へのＩＬ－２の結合と比較して、ＣＤ２５へのＩＬ－２の結合を４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％未満を阻害する。
ＣＤ２５へのＩＬ－２の結合を測定するための方法は、当業者において周知であり、これらに限定されないが、例えば、ＣＤ２５上のビオチン化または放射性標識されたＩＬ－２などの、ＣＤ２５上の標識されたＩＬ－２の検出が挙げられる。
一実施形態では、本発明によるタンパク質は、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に特異的である。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に特異的である。
タンパク質、抗体、またはその抗原結合断片は、抗原（例えば、ＣＤ２５）と検出可能なレベルで反応する場合、抗原に「特異的である」、「免疫特異的である」、または「特異的に結合」すると言われ、好ましくは、約１０６Ｍ－１以上、好ましくは、約１０７Ｍ－１、１０８Ｍ－１、５ｘ１０８Ｍ－１、１０９Ｍ－１、５ｘ１０９Ｍ－１以上またはそれ以上の親和定数（ＫＡ）を有する。その同族抗原に対するタンパク質、または抗体もしくはその抗原結合断片の親和性も、一般に、平衡解離定数（ＫＤ）として表される。抗体またはその抗原結合断片は、好ましくは、１０－６Ｍ以下、好ましくは１０－７Ｍ、５．１０－８Ｍ、１０－８Ｍ、５．１０－９Ｍ、１０－９Ｍ以下またはそれ以下のＫＤで、検出可能なレベルで抗原（例えば、ＣＤ２５）と反応する場合、抗原に対して「免疫特異的である」、「特異的である」、または「特異的に結合する」と言われる。
抗体またはその抗原結合断片の親和性は、従来の技術、例えば、Ｓｃａｔｃｈａｒｄ、１９４９．Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．５１：６６０－６７２によって記載されたものを使用して容易に決定することができる。抗体またはその抗原結合断片の抗原、細胞または組織への結合特性は、一般に、免疫検出法、例えば、ＥＬＩＳＡ、免疫蛍光ベースアッセイ、例えば、免疫組織化学（ＩＨＣ）および／または蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、または表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）を使用して）などを使用して決定し、判定することができる。
一実施形態では、本発明によるタンパク質（特に抗体またはその抗原結合断片）は、約５．１０－９Ｍ以下、好ましくは約４．１０－９Ｍまたは約３．１０－９Ｍ以下のヒトＣＤ２５に結合するためのＫＤを提示する。一実施形態では、ヒトＣＤ２５に結合するための本発明のタンパク質のＫＤは、約２，５．１０－９Ｍ～３，５．１０－９Ｍの範囲である。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ポリクローナルである。
別の実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、モノクローナルである。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、全抗体、ヒト化抗体、単鎖抗体、二量体単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ）’２、Ｆｄ、脱フコシル化抗体、二重特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディ、およびテトラボディを含むかまたはそれらからなる群から選択される分子である。
抗体の抗原結合断片は、標準的な方法を使用して得ることができる。例えば、ＦａｂまたはＦ（ａｂ’）２断片は、従来の技術に従って、単離された抗体のプロテアーゼ消化によって産生され得る。
本発明による抗体またはその抗原結合断片は、既知の方法を使用して修飾できることも理解されよう。例えば、ｉｎ ｖｉｖｏでのクリアランスを減速させ、より望ましい薬物動態プロファイルを得るために、抗体またはその抗原結合断片をポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で修飾してもよい。ＰＥＧを抗体またはその抗原結合断片にカップリングし、部位特異的に複合体形成するための方法は、例えば、Ｌｅｏｎｇら、２００１．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ．１６（３）：１０６－１９；Ｄｅｌｇａｄｏら、１９９６．Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．７３（２）：１７５－８２に記載されている。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ユニボディ、ドメイン抗体、およびナノボディを含むかまたはそれらからなる群から選択される分子である。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質は、アフィボディ、アルファボディ、アルマジロリピートタンパク質ベースの足場、ノッチン、クニッツドメインペプチド、アフィリン、アフィチン、アドネクチン、アトリマー、エバシン、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、アビマー、ファイノマー、バーサボディまたはデュオカリンを含むかまたはそれからなる群から選択される抗体模倣体である。
以下では、特に明記されていない限り、ＣＤＲの番号付けおよび定義はＩＭＧＴ（登録商標）番号付けシステムに準拠している。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの以下の相補性決定領域（ＣＤＲ）：
ＶＨ－ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここで、Ｘ４は、ＤまたはＮである：
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および／または
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）
を含む重鎖可変領域（本明細書ではＨＣＶＲまたはＶＨと略される）を含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここで、Ｘ４は、ＤまたはＮである：
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）
を含むＨＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＤＨＡＭＡ（配列番号７）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）
を含むＨＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＨＡＭＡ（配列番号１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）
を含むＨＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの以下の相補性決定領域（ＣＤＲ）：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および／または
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここで、Ｘ３は、ＳまたはＴである；
を含む軽鎖可変領域（本明細書ではＬＣＶＲまたはＶＬと略される）を含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここで、Ｘ３は、ＳまたはＴである；
を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号８）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＶＮ（配列番号１１）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＧＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号１２）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）
を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＧＳＱＮＶＮＫＦＶＮ（配列番号３４）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号８）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＴＳＷＰＷＴ（配列番号１３）
を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＶＮ（配列番号１１）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＴＳＷＰＷＴ（配列番号１３）
を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＧＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号１２）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＴＳＷＰＷＴ（配列番号１３）
を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＧＳＱＮＶＮＫＦＶＮ（配列番号３４）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＴＳＷＰＷＴ（配列番号１３）
を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの以下のＣＤＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここで、Ｘ４は、ＤまたはＮである：
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および／または
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）を含むＨＣＶＲ；および
－少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および／または
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここで、Ｘ３は、ＳまたはＴである、を含むＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－３つの以下のＣＤＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここで、Ｘ４は、ＤまたはＮである：
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）を含むＨＣＶＲ；および
－３つの以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここで、Ｘ３は、ＳまたはＴである；を含むＬＣＶＲ、を含む。
一実施形態では、配列番号１～３、７または１０を有するＨＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３のいずれかは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号４～６、８～９、１１～１３または３４を有するＬＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３のいずれかは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１～３、７、もしくは１０を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号４～６、８～９、１１～１３、もしくは３４を有するＬＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３のいずれかは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１～３、７、または１０を有するＨＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３のいずれかは、対応する配列番号に記載されている特定のＣＤＲまたはＣＤＲのセットと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号４～６、８～９、１１～１３、もしくは３４を有するＬＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３のいずれかは、対応する配列番号に記載されている特定のＣＤＲまたはＣＤＲのセットと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１～３、７または１０を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号４～６、８～９、１１～１３または３４を有するＬＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３のいずれかは、対応する配列番号に記載されている特定のＣＤＲまたはＣＤＲのセットと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－３つの以下のＣＤＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＤＨＡＭＡ（配列番号７）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）を含むＨＣＶＲ；および
－以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号８）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）を含む、抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、配列番号７、２～３を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号５、８～９を有するＬＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３のいずれかは、対応する配列番号に記載されている特定のＣＤＲまたはＣＤＲのセットと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
配列番号７、２および３を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号８、５および９を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体の一例は、Ａｌｄ２５Ｈ１である。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－３つの以下のＣＤＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＨＡＭＡ（配列番号１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）を含むＨＣＶＲ；および
－以下のＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＶＮ（配列番号１１）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）を含む、抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、配列番号１０、２～３を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号５、９、および１１を有するＬＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３のいずれかは、対応する配列番号に記載されている特定のＣＤＲまたはＣＤＲのセットと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
配列番号１０、２および３を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１、５および９を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体の一例は、Ａｌｄ２５Ｈ２である。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－３つの以下のＣＤＲ：
ＣＤＲ１：ＮＨＡＭＡ（配列番号１０）；
ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；を含むＨＣＶＲを含み
－以下のＣＤＲ：
ＣＤＲ１：ＫＧＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号１２）；
ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
ＣＤＲ３：ＱＱＹＴＳＷＰＷＴ（配列番号１３）
を含む抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲを含む。
一実施形態では、配列番号１０、２～３を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号５、１２～１３を有するＬＣＶＲのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３のいずれかは、対応する配列番号に記載されている特定のＣＤＲまたはＣＤＲのセットと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
配列番号１０、２および３を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１２、５および１３を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体の一例は、Ａｌｄ２５Ｈ４である。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３５の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲを含み、ここで、Ｘ１は、ＥまたはＱであり、Ｘ２は、ＬまたはＶであり、Ｘ３は、ＭまたはＬであり、Ｘ４は、ＫまたはＲであり、Ｘ５は、ＡまたはＶであり、Ｘ６は、ＴまたはＰであり、Ｘ７は、ＮまたはＤであり、Ｘ８は、ＫまたはＧであり、Ｘ９は、ＥまたはＱであり、Ｘ１０は、ＡまたはＳであり、Ｘ１１は、Ｋ、ＲまたはＱであり、Ｘ１２は、ＳまたはＮであり、Ｘ１３は、ＹまたはＦであり、Ｘ１４は、ＩまたはＭであり、Ｘ１５は、ＤまたはＮであり、Ｘ１６は、ＳまたはＡであり、Ｘ１７は、ＴまたはＶであり、Ｘ１８は、ＶまたはＴであり、Ｘ１９は、ＭまたはＬである。
配列番号３５
X1VQLVESGGGX2VQPGRSX3X4LSCAX5SGFX6FSX7HAMAWVRQAPX8KGLX9WVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNX10X11X12TLX13LQX14X15SLRX16EDTAX17YYCTTGGNSGYDWGQGX18X19VTVSS
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２０の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲを含み、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＶ、Ｘ２は、ＰまたはＴであり、Ｘ３は、ＤまたはＮ、Ｘ４は、ＱまたはＥ、Ｘ５は、Ｒ、ＫまたはＱ、Ｘ６は、ＦまたはＹであり、Ｘ７は、ＭまたはＩである。
配列番号２０
EVQLVESGGGLVQPGRSMKLSCAX1SGFX2FSX3HAMAWVRQAPKKGLX4WVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAX5STLX6LQX7DSLRSEDTATYYCTTGGNSGYDWGQGVMVTVSS
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３６の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲを含み、ここで、Ｘ１は、ＦまたはＳであり、Ｘ２は、ＮまたはＴであり、Ｘ３は、ＡまたはＧであり、Ｘ４は、ＶまたはＬであり、Ｘ５は、ＬまたはＰであり、Ｘ６は、ＥまたはＫであり、Ｘ７は、ＲまたはＫであり、Ｘ８は、ＲまたはＬであり、Ｘ９は、ＩまたはＶであり、Ｘ１０は、ＹまたはＦであり、Ｘ１１は、ＶまたはＦであり、Ｘ１２は、ＦまたはＹであり、Ｘ１３は、ＳまたはＴであり、Ｘ１４は、ＧまたはＱであり、Ｘ１５は、ＬまたはＩである。
配列番号３６
DIQMTQSPSX1LSASVGDRVTIX2CKX3SQNVNKFX4NWYQQKX5GX6APX7X8LIYGTNSLQTGX9PSRFSGSGSGTDX10TLTISSLQPEDX11ATYX12CQQYX13SWPWTFGX14GTKLEX15K
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２１の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲを含み、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶであり、Ｘ３は、ＳまたはＴである。
配列番号２１
DIQMTQSPSFLSASVGDRVTINCKX1SQNVNKFX2NWYQQKLGEAPRRLIYGTNSLQTGIPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYFCQQYX3SWPWTFGGGTKLELK
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号３５の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲ（ここで、Ｘ１は、ＥまたはＱであり、Ｘ２は、ＬまたはＶであり、Ｘ３は、ＭまたはＬであり、Ｘ４は、ＫまたはＲであり、Ｘ５は、ＡまたはＶであり、Ｘ６は、ＴまたはＰであり、Ｘ７は、ＮまたはＤであり、Ｘ８は、ＫまたはＧであり、Ｘ９は、ＥまたはＱであり、Ｘ１０は、ＡまたはＳであり、Ｘ１１は、Ｋ、ＲまたはＱであり、Ｘ１２は、ＳまたはＮであり、Ｘ１３は、ＹまたはＦであり、Ｘ１４は、ＩまたはＭであり、Ｘ１５は、ＤまたはＮであり、Ｘ１６は、ＳまたはＡであり、Ｘ１７は、ＴまたはＶであり、Ｘ１８は、ＶまたはＴであり、Ｘ１９は、ＭまたはＬである）と、
－配列番号３６の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲ（Ｘ１は、ＦまたはＳであり、Ｘ２は、ＮまたはＴであり、Ｘ３は、ＡまたはＧであり、Ｘ４は、ＶまたはＬであり、Ｘ５は、ＬまたはＰであり、Ｘ６は、ＥまたはＫであり、Ｘ７は、ＲまたはＫであり、Ｘ８は、ＲまたはＬであり、Ｘ９は、ＩまたはＶであり、Ｘ１０は、ＹまたはＦであり、Ｘ１１は、ＶまたはＦであり、Ｘ１２は、ＦまたはＹであり、Ｘ１３は、ＳまたはＴであり、Ｘ１４は、ＧまたはＱであり、Ｘ１５は、ＬまたはＩである）と、を含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号２０の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲ（ここで、Ｘ１は、ＡまたはＶであり、Ｘ２は、ＰまたはＴであり、Ｘ３は、ＤまたはＮであり、Ｘ４は、ＱまたはＥであり、Ｘ５は、Ｒ、ＫまたはＱであり、Ｘ６は、ＦまたはＹであり、Ｘ７はＭまたはＩである）と、
－配列番号２１の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲ（ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶであり、Ｘ３は、ＳまたはＴである）と、を含む。
一実施形態では、配列番号３５を有するＨＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号２０を有するＨＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号３６を有するＬＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号２１を有するＬＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号３５を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号３６を有するＬＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号２０を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号２１を有するＬＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号３５を有するＨＣＶＲは、配列番号３５と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号２０を有するＨＣＶＲは、配列番号２０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号３６を有するＬＣＶＲは、配列番号３６と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号２１を有するＬＣＶＲは、配列番号２１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号３５を有するＨＣＶＲならびに／または配列番号３６を有するＬＣＶＲは、それぞれ、配列番号３５および／または配列番号３６と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号２０を有するＨＣＶＲならびに／または配列番号２１を有するＬＣＶＲは、それぞれ、配列番号２０および／または配列番号２１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、それぞれ配列番号３５および配列番号３６のアミノ酸配列に相同であるアミノ酸配列を含むＨＣＶＲおよびＬＣＶＲを含み、抗体またはその抗原結合断片は、所望の機能的特性を保持している。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、それぞれ配列番号２０および配列番号２１のアミノ酸配列に相同であるアミノ酸配列を含むＨＣＶＲおよびＬＣＶＲを含み、抗体またはその抗原結合断片は、所望の機能的特性を保持している。
本明細書で使用される場合、所与の配列に関して「異なるアミノ酸で置換されている［…］のアミノ酸を有することを特徴とする」という句は、前述の配列内で保存的アミノ酸修飾が生じていることを指す。
本明細書で使用される場合、「保存的アミノ酸修飾」という表現は、アミノ酸配列を含む抗体またはその抗原結合断片の結合特性に有意に影響を与えることのないまたは改変することのない修飾を指す。そのような保存的修飾には、アミノ酸の置換、付加、および欠失が含まれる。修飾は、部位特異的変異誘発およびＰＣＲ媒介変異誘発など、当技術分野において公知である標準的な技術によって、抗体またはその抗原結合断片に導入することができる。
保存的アミノ酸置換は、典型的には、アミノ酸残基が、同様の物理化学的特性を有する側鎖を有するアミノ酸残基により置き換えられているものである。特定の可変領域およびＣＤＲ配列は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸の挿入、欠失、および／または置換を含み得る。置換が行われる場合、好ましい置換は、保存的修飾であろう。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該分野で定義されている。これらのファミリーとしては、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β分岐側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸が挙げられる。したがって、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＣＤＲおよび／または可変領域内の１つ以上のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリーからの他のアミノ酸残基で置き換えることができ、改変された抗体は、本明細書に記載のアッセイを使用して、保持された機能（すなわち、例えば、ｈＣＤ２５への結合など、本明細書に記載の特性）について試験を行うことができる。別の実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＣＤＲおよび／または可変領域内のアミノ酸のストリングは、側鎖ファミリーメンバーの順序および／または構成が異なる構造的に類似したストリングに置き換えることができる。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１４、配列番号１５もしくは配列番号１６の配列を含むかまたはそれらからなるＨＣＶＲを含む。別の実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６もしくは配列番号４７の配列を含むかまたはそれらからなるＨＣＶＲを含む。
配列番号１４
EVQLVESGGGLVQPGRSMKLSCAASGFPFSDHAMAWVRQAPKKGLQWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNARSTLFLQMDSLRSEDTATYYCTTGGNSGYDWGQGVMVTVSS
配列番号１５
EVQLVESGGGLVQPGRSMKLSCAASGFTFSNHAMAWVRQAPKKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQIDSLRSEDTATYYCTTGGNSGYDWGQGVMVTVSS
配列番号１６
EVQLVESGGGLVQPGRSMKLSCAVSGFTFSNHAMAWVRQAPKKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAQSTLYLQMDSLRSEDTATYYCTTGGNSGYDWGQGVMVTVSS
配列番号３７
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSNHAMAWVRQAPKKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAQSTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
配列番号３８
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDHAMAWVRQAPKKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAQSTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
配列番号３９
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSNHAMAWVRQAPGKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
配列番号４０
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDHAMAWVRQAPGKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
配列番号４１
EVQLVESGGGLVQPGRSMKLSCAASGFPFSNHAMAWVRQAPKKGLQWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNARSTLFLQMDSLRSEDTATYYCTTGGNSGYDWGQGVMVTVSS
配列番号４２
EVQLVESGGGLVQPGRSMKLSCAASGFTFSDHAMAWVRQAPKKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQIDSLRSEDTATYYCTTGGNSGYDWGQGVMVTVSS
配列番号４３
EVQLVESGGGLVQPGRSMKLSCAVSGFTFSDHAMAWVRQAPKKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNAQSTLYLQMDSLRSEDTATYYCTTGGNSGYDWGQGVMVTVSS
配列番号４４
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDHAMAWVRQAPGKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNSKSTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
配列番号４５
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSNHAMAWVRQAPGKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNSKSTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
配列番号４６
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSDHAMAWVRQAPGKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
配列番号４７
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSNHAMAWVRQAPGKGLEWVAYISYDGDNTYYRDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGGNSGYDWGQGTLVTVSS
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７、配列番号１８もしくは配列番号１９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲを含む。別の実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲを含む。
配列番号１７
DIQMTQSPSFLSASVGDRVTINCKASQNVNKFLNWYQQKLGEAPRRLIYGTNSLQTGIPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYFCQQYSSWPWTFGGGTKLELK
配列番号１８
DIQMTQSPSFLSASVGDRVTINCKASQNVNKFVNWYQQKLGEAPRRLIYGTNSLQTGIPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYFCQQYSSWPWTFGGGTKLELK
配列番号１９
DIQMTQSPSFLSASVGDRVTINCKGSQNVNKFLNWYQQKLGEAPRRLIYGTNSLQTGIPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYFCQQYTSWPWTFGGGTKLELK
配列番号４８
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKGSQNVNKFLNWYQQKLGEAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYTSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号４９
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFLNWYQQKLGEAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５０
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFVNWYQQKLGEAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５１
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFLNWYQQKPGKAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５２
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFVNWYQQKPGKAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５３
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKGSQNVNKFLNWYQQKPGKAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQYTSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５４
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFLNWYQQKPGKAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５５
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFVNWYQQKPGKAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５６
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKGSQNVNKFLNWYQQKPGKAPRRLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYTSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５７
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFLNWYQQKPGKAPKLLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５８
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVNKFVNWYQQKPGKAPKLLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYSSWPWTFGQGTKLEIK
配列番号５９
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKGSQNVNKFLNWYQQKPGKAPKLLIYGTNSLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYTSWPWTFGQGTKLEIK
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１４、配列番号１５または配列番号１６の配列を含むかまたはそれらからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８もしくは配列番号１９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６もしくは配列番号４７の配列を含むかまたはそれらからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体はＡｌｄ２５Ｈ１抗体であり、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１４の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１４の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１８の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１４の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１４の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８または配列番号５９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１５の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体はＡｌｄ２５Ｈ２抗体であり、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１５の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１８の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１５の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１５の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８または配列番号５９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１６の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１６の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１８の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体はＡｌｄ２５Ｈ４抗体であり、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１６の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１６の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８または配列番号５９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号３７の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号３８の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号３９の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４０の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４１の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４２の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４３の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４４の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４５の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４６の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号４７の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲと；
－配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８もしくは配列番号５９の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲと、を含む。
一実施形態では、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号２０、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６または配列番号４７を有するＨＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号３６、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８または配列番号５９を有するＬＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６もしくは配列番号２０を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９もしくは配列番号２１を有するＬＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号２０、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６もしくは配列番号４７を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号３６、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８または配列番号５９を有するＬＣＶＲは、異なるアミノ酸で置換されている１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５またはそれ以上のアミノ酸を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号２０、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６または配列番号４７を有するＨＣＶＲは、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号２０、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６または配列番号４７と、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号３６、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８または配列番号５９を有するＬＣＶＲは、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号３６、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８または配列番号５９と、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６または配列番号２０を有するＨＣＶＲおよび／または配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９または配列番号２１を有するＬＣＶＲは、それぞれ、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６または配列番号２０および／または配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９または配列番号２１と、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号２０、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、もしくは配列番号４７を有するＨＣＶＲ、および／または配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号３６、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、もしくは配列番号５９を有するＬＣＶＲは、それぞれ、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６もしくは配列番号２０、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６もしくは配列番号４７、および／または配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号３６、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、もしくは配列番号５９と、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有するアミノ酸配列を有することを特徴とし得る。
一実施形態では、ＬＣＶＲおよび／またはＨＣＶＲは、好ましくは、それぞれＬＣＶＲアミノ酸配列からＮ末端に、またはＨＣＶＲアミノ酸配列からＮ末端に位置するリーダー配列をさらに含む。リーダー配列の例としては、これらに限定されないが、配列番号２２および２３が挙げられる。
配列番号２２
MDIRLSLAFLVLFIKGVQC
配列番号２３
MAAVQLLGLLLLWLPAMRC
一実施形態では、ＬＣＶＲは、ＨＣＶＲアミノ酸配列からＮ末端に位置する配列番号２２のアミノ酸配列リーダー配列（例えば、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号２０、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、または配列番号４７など）を含む。
一実施形態では、ＬＣＶＲは、ＬＣＶＲアミノ酸配列からＮ末端に位置する配列番号２３のアミノ酸リーダー配列（例えば、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号３６、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、または配列番号５９など）を含む。
一実施形態では、配列番号１４および配列番号１７の配列を含む本発明の抗体は、本明細書ではＡｌｄ２５Ｈ１抗体と呼ばれる。
本発明はさらに、Ａｌｄ２５Ｈ１様抗体、すなわち、Ａｌｄ２５Ｈ１と同じエピトープ、またはＡｌｄ２５Ｈ１と実質的に同じエピトープに結合する抗体に関する。したがって、本発明は、ＣＤ２５への結合についてＡｌｄ２５Ｈ１と競合する抗体にさらに関する。
一実施形態では、配列番号１５および配列番号１８の配列を含む本発明の抗体は、本明細書ではＡｌｄ２５Ｈ２抗体と呼ばれる。
本発明はさらに、Ａｌｄ２５Ｈ２様抗体、すなわち、Ａｌｄ２５Ｈ２と同じエピトープ、またはＡｌｄ２５Ｈ２と実質的に同じエピトープに結合する抗体に関する。したがって、本発明は、ＣＤ２５への結合についてＡｌｄ２５Ｈ２と競合する抗体にさらに関する。
一実施形態では、配列番号１６および配列番号１９の配列を含む本発明の抗体は、本明細書ではＡｌｄ２５Ｈ４抗体と呼ばれる。
本発明はさらに、Ａｌｄ２５Ｈ４様抗体、すなわち、Ａｌｄ２５Ｈ４と同じエピトープ、またはＡｌｄ２５Ｈ４と実質的に同じエピトープに結合する抗体に関する。したがって、本発明は、ＣＤ２５への結合についてＡｌｄ２５Ｈ４と競合する抗体にさらに関する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、完全にまたは実質的に完全なヒト重鎖定常領域（本明細書ではＨＣＣＲまたはＣＨと略される）および／または軽鎖定常領域（本明細書ではＬＣＣＲまたはＣＬと略される）を含む。
一実施形態では、定常領域はヒト起源のものである。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、完全なまたは実質的に完全なマウスのＨＣＣＲおよび／またはＬＣＣＲを含む。
一実施形態では、定常領域はマウス起源のものである。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、マウス抗体またはその断片である。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、キメラ抗体またはその断片である。
本明細書で使用される「キメラ抗体」は、それが本来は自然に連結されていない第２のアミノ酸配列に連結された第１のアミノ酸配列を含む抗体またはその抗原結合断片を指す。アミノ酸配列は、通常、融合タンパク質内にまとめられる別々のタンパク質内に存在し得るか、または、通常は同じタンパク質内に存在するが、融合タンパク質に新しい配置で配置され得る。キメラタンパク質は、例えば、化学合成によって、またはペプチド領域が所望の関係でコードされているポリヌクレオチドを作製し、翻訳することによって作製されてもよい。「キメラ抗体」という用語は、本明細書において、
（ａ）定常領域またはその一部が、改変されるか、置き換えられるか、または交換されて、これにより、可変領域が、クラス、エフェクター機能および／もしくは種が異なるかまたは変化した定常領域に連結されるか、またはキメラ抗体に新しい特性を付与する全く異なる分子、例えば、酵素、毒素、ホルモン、成長因子、薬物などに連結されるか、または、
（ｂ）可変領域またはその一部が、異なるかもしくは改変された抗原特異性を有する可変領域もしくはその一部、または別の種もしくは別の抗体クラスもしくはサブクラスからの対応する配列と改変されるか、置き換えられるか、または交換される、抗体およびその抗原結合断片を包含する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ヒト化抗体またはその断片である。
本明細書で使用されるとき、「ヒト化抗体」は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含むキメラ抗体またはその抗原結合断片を指す。これには、可変領域および定常領域を有する非ヒト細胞によって作製された抗体が含まれ、これは、例えば、非ヒト抗体のアミノ酸配列を改変して、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列内に見出されたアミノ酸を組み込むことにより、ヒト細胞によって作製されるであろう、より類似している抗体に改変されている。本発明によるヒト化抗体またはその抗原結合断片は、例えば、ＣＤＲ内に、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのランダムまたは部位特異的突然変異誘発によって、またはｉｎ ｖｉｖｏでの体細胞突然変異によって導入される突然変異）を含み得る。「ヒト化抗体」という用語はまた、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク配列に移植されている抗体およびその抗原結合断片を含む。換言すれば、「ヒト化抗体」という用語は、レシピエントヒト抗体のＣＤＲがドナー非ヒト抗体のＣＤＲに置き換えられている抗体またはその抗原結合断片を指す。ヒト化抗体またはその抗原結合断片はまた、フレームワーク配列内にドナー起源の残基を含み得る。ヒト化抗体またはその抗原結合断片は、ヒト免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部も含み得る。ヒト化抗体および／またはその抗原結合断片はまた、レシピエント抗体にも、インポートされたＣＤＲ内またはフレームワーク配列内のいずれにも見られない残基を含み得る。ヒト化は、当技術分野において公知である方法（例えば、Ｊｏｎｅｓら、１９８６．Ｎａｔｕｒｅ．３２１（６０６９）：５２２－５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、１９８８．Ｎａｔｕｒｅ．３３２（６１６２）：３２３－７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、１９８８．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２３９（４８４７）：１５３４－６；Ｐｒｅｓｔａ，１９９２．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３（４）：３９４－８；米国特許第４，８１６，５６７号明細書）、例えば、「超ヒト化」抗体（例えば、Ｔａｎら、２００２．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９（２）：１１１９－２５）および「表面再構成（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）」（例えば、Ｓｔａｅｌｅｎｓら、２００６．Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．４３（８）：１２４３－５７；Ｒｏｇｕｓｋａら、１９９４．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９１（３）：９６９－７３）などの技術を用いて実施できる。
「ヒト化抗体」は、元の抗体と類似の抗原特異性を保持している。しかし、ヒト化の特定の方法を使用して、抗体の結合の親和性および／または特異性を増加させ得る。
本発明による抗体またはその抗原結合断片をヒト化するための方法は、当技術分野において周知である。ヒト化抗体またはその抗原結合断片を作製する際に使用される、軽鎖または重鎖の両方のヒト可変ドメインの選択は、抗原性を低下させるために非常に重要である。いわゆる「ベストフィット」法によれば、本発明による抗体またはその抗原結合断片の可変ドメインの配列は、既知のヒト可変ドメイン配列のライブラリー全体に対してスクリーニングされる。次に、マウス配列に最も近いヒト配列が、ヒト化抗体のヒトフレームワーク（ＦＲ）として受け入れられる（Ｓｉｍｓら、１９９３．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１（４）：２２９６－３０８；Ｃｈｏｔｈｉａ＆Ｌｅｓｋ，１９８７．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．１９６（４）：９０１－１７）。
本発明による抗体またはその抗原結合断片をヒト化するための別の方法は、軽鎖または重鎖の特定のサブグループのすべてのヒト抗体のコンセンサス配列からの特定のフレームワークを使用する。同じフレームワークをいくつかの異なるヒト化抗体に使用できる（Ｃａｒｔｅｒｅｔら、１９９２．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．８９（１０）：４２８５－９；Ｐｒｅｓｔａら、１９９３．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１（５）：２６２３－３２）。抗体が、ｈＣＤ２５および他の好ましい生物学的特性に対する高い親和性を保持してヒト化されることがさらに重要である。この目標を達成するために、好ましい方法によれば、ヒト化抗体およびその抗原結合断片は、親配列およびヒト化配列の三次元モデルを使用する親配列および様々な概念的なヒト化産物の分析プロセスによって調製される。三次元免疫グロブリンモデルは一般的に利用可能であり、当業者は精通している。選択された候補免疫グロブリン配列の可能性のある三次元構造を例示し、表示するコンピュータプログラムが利用可能である。これらの表示を検査することにより、候補免疫グロブリン配列を機能させることにおける残基の可能性の高い役割の分析、すなわち、候補免疫グロブリンがそのエピトープに結合する能力に影響を与える残基の分析が可能になる。このようにして、ＣＤＲ残基は、コンセンサスおよびインポート配列から選択し、組み合わせることができるため、所望の抗体特性、例えば、ｈＣＤ２５に対する親和性の増加などが達成される。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合に影響を与えることに直接的にかつ最も実質的に関与する。
本発明による抗体またはその抗原結合断片をヒト化するための別の方法は、免疫化のためにヒト免疫系の一部を保有するトランスジェニックまたはトランスクロモソーム動物を使用することである。宿主として、これらの動物は、機能的なヒト免疫グロブリン遺伝子によって置き換えられた免疫グロブリン遺伝子を有する。したがって、これらの動物によって、またはこれらの動物のＢ細胞から作られたハイブリドーマで産生された抗体は、すでにヒト化されている。そのようなトランスジェニックまたはトランスクロモソーム動物の例としては、これらに限定されないが、以下が挙げられる：
－ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ）、米国特許第５，９３９，５９８号明細書、同第６，０７５，１８１号明細書、同第６，１１４，５９８号明細書、同第６，１５０，５８４号明細書、および同第６，１６２，９６３号明細書に記載；
－ＨｕＭＡｂ Ｍｏｕｓｅ（登録商標）（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．）、Ｌｏｎｂｅｒｇら、１９９４．Ｎａｔｕｒｅ．３６８（６４７４）：８５６－８５９；Ｌｏｎｂｅｒｇ＆Ｈｕｓｚａｒ，１９９５．Ｉｎｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３（１）：６５－９３；Ｈａｒｄｉｎｇ＆Ｌｏｎｂｅｒｇ，１９９５．Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．７６４：５３６－４６；Ｔａｙｌｏｒら、１９９２．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０（２３）：６２８７－９５；Ｃｈｅｎら、１９９３．Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．５（６）：６４７－５６；Ｔｕａｉｌｌｏｎら、１９９３．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９０（８）：３７２０－４；Ｃｈｏｉら、１９９３．Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．４（２）：１１７－２３；Ｃｈｅｎら、１９９３．ＥＭＢＯ Ｊ．１２（３）：８２１－３０；Ｔｕａｉｌｌｏｎら、１９９４．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２（６）：２９１２－２０；Ｔａｙｌｏｒら、１９９４．Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．６（４）：５７９－９１；Ｆｉｓｈｗｉｌｄら、１９９６．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４（７）：８４５－５１に記載；
－ＫＭ Ｍｏｕｓｅ（登録商標）、国際特許公開第２００２０４３４７８号に記載；
－ＴＣ ｍｉｃｅ、Ｔｏｍｉｚｕｋａら、２０００．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９７（２）：７２２－７に記載；および
－ＯｍｎｉＲａｔ（商標）（ＯＭＴ，Ｉｎｃ．）、国際公開第２００８１５１０８１号；Ｇｅｕｒｔｓら、２００９．Ｓｃｉｅｎｃｅ．３２５（５９３９）：４３３；Ｍｅｎｏｒｅｔら、２０１０．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．４０（１０）：２９３２－４１に記載。
ヒト化抗体およびその抗原結合断片はまた、免疫化のために、ヒト抗体レパートリーを発現するように操作された他のトランスジェニック動物を使用することによる（Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｚら、１９９３．Ｎａｔｕｒｅ．３６２（６４１７）：２５５－８）、またはファージディスプレイ法を使用して抗体レパートリーを選択することによる、など、様々な他の技術に従って産生され得る。そのような技術は当業者に知られており、本出願に開示されるとおり、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片から出発して実施することができる。
いくつかの実施形態では、ＨＣＶＲおよびＬＣＶＲ（またはそのＣＤＲ）を含む本発明による抗体またはその抗原結合断片は、そのアミノ酸配列が完全にヒトであるかまたは実質的にヒトである第１の定常ドメイン（ＣＨ１および／またはＣＬ）を含み得る。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、完全にヒト抗体であるか、または実質的にヒト抗体であるか、またはその断片である。
いくつかの実施形態では、特に本発明による抗体またはその抗原結合断片がヒトの治療用途を意図する場合、定常領域全体またはその少なくとも一部が完全にまたは実質的にヒトアミノ酸配列を有することが典型的である。したがって、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメインおよびＣＬドメイン（および存在する場合は、ＣＨ４ドメイン）のうちの１つ以上、またはそれらの任意の組み合わせは、そのアミノ酸配列に関して完全にヒトであり得るか、または実質的にヒトであり得る。有利には、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメインおよびＣＬドメイン（および存在する場合は、ＣＨ４ドメイン）はすべて、完全にヒトアミノ酸配列を有し得るか、または実質的にヒトアミノ酸配列を有し得る。
「実質的にヒト」という用語は、ヒト化抗体またはキメラ抗体またはその抗原結合断片の定常領域の文脈において、ヒト定常領域と少なくとも７０％、好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上のアミノ酸配列同一性を指す。
この文脈における「ヒトアミノ酸配列」という用語は、生殖細胞系列、再配列された、および体細胞変異した遺伝子を含む、ヒト免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列を指す。本発明はまた、「完全ヒトヒンジ領域」の存在が明示的に必要とされる実施形態を除いて、ヒト配列に対して、１つ以上のアミノ酸の付加、欠失または置換によって改変された「ヒト」配列の定常ドメインを含むタンパク質を企図する。
本発明による抗体またはその抗原結合断片における「完全ヒトヒンジ領域」の存在は、免疫原性を最小化することおよび抗体の安定性を最適化することの両方に有益であり得る。１つ以上のアミノ酸の置換、挿入または欠失は、重鎖および／または軽鎖の定常領域内、特にＦｃ領域内で行われ得ると考えられる。アミノ酸置換は、置換されるアミノ酸を異なる天然に存在するアミノ酸、または非天然もしくは修飾アミノ酸で置き換える結果となり得る。例えば、グリコシル化パターンの変化（例えば、Ｎ－またはＯ－連結型グリコシル化部位の付加または欠失による）などの他の構造的修飾も可能である。抗体またはその抗原結合断片の使用目的に応じて、例えばエフェクター機能を調節するために、Ｆｃ受容体へのその結合特性に関して、本発明による抗体またはその抗原結合断片を修飾することが望ましい場合がある。例えば、システイン残基（複数可）は、Ｆｃ領域に導入され得、それにより、この領域における鎖間ジスルフィド結合形成が可能になる。このように生成されたホモ二量体抗体は、改善されたエフェクター機能を有し得る（Ｃａｒｏｎら、１９９２．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１７６（４）：１１９１－５；Ｓｈｏｐｅｓ，１９９２．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（９）：２９１８－２２）。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧクラスに由来する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ１サブクラスに由来する。別の実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ２サブクラスに由来する。
ＩｇＧ抗体のＦｃ領域は、細胞のＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）と相互作用して、下流のエフェクターメカニズムを刺激し、調節する。５つの活性化受容体、すなわちＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩａ（ＣＤ３２ａ）、ＦｃγＲＩＩｃ（ＣＤ３２ｃ）、ＦｃγＲＩＩＩａ（ＣＤ１６ａ）、およびＦｃγＲＩＩＩｂ（ＣＤ１６ｂ）、ならびに１つの阻害性受容体ＦｃγＲＩＩｂ（ＣＤ３２ｂ）が存在する。ＩｇＧ抗体と免疫系との通信は、ＦｃγＲによって制御され、媒介される。ＦｃγＲは、抗体によって感知され、収集された情報を免疫系に中継し、特に生物療法の文脈において、先天性免疫系と適応免疫系との間の連結をもたらす（ＨａｙｅｓＪら、２０１６．Ｊ Ｉｎｆｌａｍｍ Ｒｅｓ ９：２０９－２１９）。
ＩｇＧサブクラスは、ＦｃγＲに結合する能力が異なり、この結合の差異によって、様々な機能的応答を誘発する能力が決定する。例えば、ヒトでは、ＦｃγＲＩＩＩａは、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）の活性化に関与する主要な受容体であり、ＩｇＧ３はこの受容体に対して最も高い親和性を示す（僅差でＩｇＧ１が続く）。これは、ＡＤＣＣを強力に誘導する能力を反映するものである。ＩｇＧ２は、この受容体に対して弱い結合を有することが示されている。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＦｃγＲに高い親和性で結合し、好ましくは、活性化受容体に高い親和性で結合する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＦｃγＲＩおよび／またはＦｃγＲＩＩａおよび／またはＦｃγＲＩＩｃおよび／またはＦｃγＲＩＩＩａおよび／またはＦｃγＲＩＩＩｂに高い親和性で結合する。
一実施形態では、ＩｇＧ１抗体は、少なくとも１つのＦｃ活性化受容体に結合する。例えば、抗体は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｃ、ＦｃγＲＩＩＩａおよびＦｃγＲＩＩＩｂから選択される１つ以上の受容体に結合し得る。一実施形態では、抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａに結合することができる。一実施形態では、抗体は、ＦｃγＲＩＩａに結合することができる。一実施形態では、抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｃ、および任意によりＦｃγＲＩに結合することができる。一実施形態では、抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、および任意によりＦｃγＲＩに結合することができる。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、約１０－６Μ、１０－７Ｍ、１０－８Μ、１０－９Ｍ、または１０－１０Ｍ未満の解離定数で少なくとも１つの活性化Ｆｃγ受容体に結合する。
一実施形態では、ＩｇＧ１抗体は、低い親和性でＦｃｙＲＩＩｂに結合するよりも、高い親和性でＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｃ、ＦｃγＲＩＩＩａ、および／またはＦｃγＲＩＩＩｂに結合する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ１抗体、好ましくはヒトＩｇＧ１抗体である。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ヒト重鎖定常領域配列を含み得、それらが結合しているＣＤ２５発現細胞を標的化、遮断、および／または枯渇させることができる。
一実施形態では、本発明によるタンパク質は、それらが結合しているＣＤ２５発現細胞を枯渇させる。一実施形態では、本発明によるタンパク質は、それらが結合しているＴｒｅｇを枯渇させる。一実施形態では、本発明によるタンパク質はまた、それらが結合している腫瘍浸潤制御性Ｔ細胞を枯渇させるかまたは減少させる。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、結合しているＣＤ２５発現細胞を枯渇させる。一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、それが結合しているＴｒｅｇを枯渇させる。一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片はまた、それが結合している腫瘍浸潤制御性Ｔ細胞を枯渇させるかまたは減少させる。
ＣＤ２５発現細胞またはＴｒｅｇに関する「枯渇する（ｄｅｐｌｅｔｅ）」または「枯渇すること（ｄｅｐｌｅｔｉｎｇ）」という用語は、サンプルまたは対象内に存在するＣＤ２５発現細胞の数に悪影響を与えるような、死滅、消失、溶解、またはこうした死滅、消失、もしくは溶解の誘導を指す。一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片により、ＣＤ２５発現細胞またはＴｒｅｇ細胞を標的化すること、これらの増殖を遮断すること、および／またはこれらを枯渇させることが可能になる。一実施形態では、枯渇は、ＡＤＣＣを介する。一実施形態では、枯渇は、ＡＤＣＰを介する。一実施形態では、枯渇は、ＣＤＣを介する。
したがって、一実施形態では、本発明の抗体は、直接的または間接的に、ＣＤ２５発現細胞の枯渇をもたらす（例えば、ＣＤ２５発現細胞の数の１０％、２０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、またはそれ以上の消失または減少をもたらす）。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）のＣＤ２５への結合を阻害することなく、それらが結合しているＴｒｅｇを枯渇させる。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導する。
「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害」または「ＡＤＣＣ」という用語は、その抗原に結合した抗体のＦｃ領域が、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、好中球、好酸球および単核細胞（例えば、末梢血単核細胞）のようなエフェクター細胞上のＦｃ受容体に結合するときに、抗体依存的に誘導される細胞媒介性細胞傷害を指し、それにより標的細胞の溶解がもたらされる。ＡＤＣＣは、当技術分野において公知であり、利用可能なアッセイを使用して測定することができる（例えば、Ｃｌｙｎｅｓら、（１９９８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９５，６５２－６）。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ１サブクラスに由来し、ＡＤＣＣ活性を有する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）を誘導する。
「抗体依存性細胞貪食」（ＡＤＣＰ）または「オプソニン化」という用語は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を発現する非特異的細胞傷害性細胞（例えば、食細胞、マクロファージ）が標的細胞に結合した抗体を認識し、標的細胞の食作用を誘導する細胞媒介反応を指す。ＡＤＣＰは、当技術分野において公知であり、利用可能なアッセイを使用して測定することができる（例えば、Ｃｌｙｎｅｓら、（１９９８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９５，６５２－６）。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ１サブクラスに由来し、ＡＤＣＰ活性を有する。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導する。
「補体依存性細胞傷害」（ＣＤＣ）という用語は、補体の存在下で本発明の抗体またはその抗原結合断片によって認識される抗原発現細胞の溶解が誘導されることを指す。補体活性化経路は、補体系の最初の成分（Ｃ１ｑ）が同族の抗原と複合体を形成した分子（例えば、抗体）に結合することによって開始される。ＣＤＣは、当技術分野において公知であり、利用可能なアッセイを使用して測定することができる（例えば、Ｃｌｙｎｅｓら、（１９９８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９５，６５２－６；Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔａｒｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０２：１６３（１９９６））。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ１サブクラスに由来し、ＣＤＣ活性を有する。
抗体の定常領域は、抗体が補体を固定し、細胞依存性細胞傷害および食作用を媒介する能力において重要である。したがって、本明細書において論じられるとおり、抗体のアイソタイプは、抗体が細胞傷害／食作用を媒介することが望ましいか否かに基づいて選択され得る。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、毒性部分に連結されている。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、例えば、毒性部分などに複合体形成されていない。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、毒性部分に連結されていない。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、Ｆｃドメインを含まない（例えば、ＣＨ２および／もしくはＣＨ３ドメインを含まない）か、またはＩｇＧ２もしくはＩｇＧ４アイソタイプのＦｃドメインを含む。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰおよび／またはＣＤＣを媒介するＦｃ領域を含まない。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰおよび／またはＣＤＣを誘導しない。
したがって、一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、直接的または間接的に、ＣＤ２５発現細胞の枯渇をもたらさない（例えば、ＣＤ２５細胞数の１０％、２０％、５０％、６０％、またはそれ以上の消失または減少をもたらさない）。例えば、本発明の抗体は、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６）ポリペプチドに実質的に結合することができるＦｃドメインを含まない。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、操作された抗体またはその断片である。
本発明の操作された抗体には、例えば、抗体の特性を改善するために、ＶＨおよび／またはＶＬ内のフレームワーク残基に修飾が行われたものが含まれる。典型的には、このようなフレームワークの修飾は、抗体の免疫原性を低下させるために行われる。例えば、１つのアプローチは、１つ以上のフレームワーク残基を対応する生殖細胞系列配列に「逆変異」させることである。より具体的には、体細胞変異を受けた抗体は、抗体が由来する生殖細胞系列配列とは異なるフレームワーク残基を含み得る。そのような残基は、抗体フレームワーク配列を、抗体が由来する生殖細胞系列配列と比較することによって同定することができる。フレームワーク領域配列を生殖細胞系列構成に戻すために、体細胞変異は、例えば、部位特異的変異誘発またはＰＣＲ媒介変異誘発によって生殖細胞系列配列に「逆変異」させることができる。そのような「逆変異」抗体もまた、本発明に含まれることを意図している。別のタイプのフレームワーク修飾は、フレームワーク領域内、または１つ以上のＣＤＲ領域内でさえ１つ以上の残基を変異させてＴ細胞エピトープを除去し、それによって抗体の潜在的な免疫原性を低下させることを含む。このアプローチは「脱免疫化」とも呼ばれ、Ｃａｒｒらによる米国特許公開第２００３０１５３０４３号明細書にさらに詳細に記載されている。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、増強された、増加された、または改善されたＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、および／またはＣＤＣ応答を誘発するように操作される。
本明細書で使用される場合、「増強された、増加された、または改善されたＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、および／またはＣＤＣ応答」という用語は、インターロイキン２のＣＤ２５への結合を阻害しないもの、例えば、未修飾の抗ＣＤ２５モノクローナル抗体など、他の抗ＣＤ２５抗体で誘発されたＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、および／またはＣＤＣ応答と比較した、本発明による抗体またはその断片によって誘導されるＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、および／またはＣＤＣ応答に関連する。
ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰおよび／またはＣＤＣを増加させる方法は、当技術分野において周知である。例えば、ＡＤＣＣは、ＹＢ２／０細胞株での抗体の産生などにより、抗体グリカンからフコシル部分を消失させる方法によって、またはヒトｌｇＧ１のＦｃ部分（例えば、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａ、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌ、Ｇ２３６Ａ／Ｓ２３９Ｄ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ）に特定の変異を導入することによって増加され得る（Ｌａｚａｒら、（２００６）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０３，２００５－２０１０；Ｓｍｉｔｈら、（２０１２）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ ２５ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０９，６１８１－６）。ＡＤＣＰは、ヒトｌｇＧ１のＦｃ部分に特定の変異を導入することによっても増加され得る（Ｒｉｃｈａｒｄｓら、（２００８）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ ７，２５１７－２７）。ＣＤＣ応答は、Ｃ１ｑ結合の親和性を高める抗体中での変異によって増加し得る（Ｉｄｕｓｏｇｉｅら、（２００１）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６６，２５７１－５）。
注目すべきことに、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰおよび／またはＣＤＣを減少させるかまたは廃止する方法もまた、当技術分野において周知である。例えば、ＡＤＣＣは、免疫グロブリンのＦｃドメインのグリコシル化プロファイルを修飾する方法によって減少され得るかまたは廃止され得る。ＣＤＣは、抗体がＣ２ｑ結合を変化させるように、１つ以上のアミノ酸を他のアミノ酸で置き換えることによって減少させ得るかまたは廃止し得る（米国特許第６，１９４，５５１号明細書、ｌｄｕｓｏｇｉｅらによる）。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、そのグリコシル化を修飾するように操作される。例えば、本発明による抗体は、グリコシル化されていない（すなわち、抗体は、グリコシル化を欠いている）。グリコシル化を改変して、例えば、抗原に対する抗体の親和性を増加させること、または抗体のＡＤＣＣ活性を変化させることが可能である。そのような炭水化物修飾は、例えば、抗体配列内の１つ以上のグリコシル化部位を改変することによって達成することができる。例えば、１つ以上の可変領域フレームワークのグリコシル化部位を消失させる結果となる１つ以上のアミノ酸置換を行うことができ、それにより、その部位でのグリコシル化を消失させる。このような非グリコシル化により、抗原に対する抗体の親和性が増大し得る。こうしたアプローチについては、Ｃｏらによる米国特許第５，７１４，３５０号明細書および同第６，３５０，８６１号明細書（参照により本明細書に組み入れられる）にさらに詳細に記載されている。追加的または代替的に、フコシル残基の量が減少したもしくはフコシル残基がない低フコシル化抗体もしくは非フコシル化抗体、またはバイセクティングＧｌｃＮａｃ構造が増加している抗体など、改変型のグリコシル化を有する抗体を作製することができる。こうした改変フコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を高めることが実証されている。こうした炭水化物修飾は、例えば、改変グリコシル化機構を有する宿主細胞において抗体を発現させることによって達成することができる。改変グリコシル化機構を有する細胞は、当技術分野において記載されており、本発明の組換え抗体を発現して、それによって改変グリコシル化を有する抗体を産生する宿主細胞として使用することができる。例えば、欧州特許第１１７６１９５号明細書、Ｈａｎｇら（参照により本明細書に組み込まれる）には、フコシルトランスフェラーゼをコードする機能的に破壊されたＦＵＴ８遺伝子を有する細胞株について記載されており、そのような細胞株内で発現する抗体は、低フコシル化を呈するか、またはフコシル残基を欠いている。したがって、いくつかの実施形態では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、低フコシル化または非フコシル化パターンを呈する細胞株、例えば、フコシルトランスフェラーゼをコードするＦＵＴ８遺伝子の発現が不十分である哺乳動物細胞株における組換え発現によって産生され得る。ＰｒｅｓｔａによるＰＣＴ公開第０３／０３５８３５号（参照によって本明細書に組み込まれる）には、Ａｓｎ（２９７）連結炭水化物にフコースを付着させる能力が低下し、その宿主細胞内で発現する抗体の低フコシル化をもたらす、バリアントＣＨＯ細胞株であるＬｅｃｌ３細胞について記載されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ら、２００２ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３－２６７４０も参照のこと）。ＵｍａｎａらのＰＣＴ公開第９９／５４３４２号（参照によって本明細書に組み込まれる）には、操作された細胞株内で発現した抗体が、結果として、抗体のＡＤＣＣ活性の増加となるバイセクティングＧｌｃＮａｃ構造の増加を呈するように、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ（例えば、ベータ（１，４）－ＮアセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作された細胞株について記載している（Ｕｍａｎａら、１９９９ Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６－１８０も参照のこと）。Ｅｕｒｅｋａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓではさらに、フコシル残基を欠く哺乳動物の改変グリコシル化パターンを有する抗体を産生できる遺伝子操作されたＣＨＯ哺乳動物細胞について記載されている（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｕｒｅｋａｉｎｃ．ｃｏｍ／ａ＆ｂｏｕｔｕｓ／ｃｏｍｐａｎｙｏｖｅｒｖｉｅｗ．ｈｔｍｌ）。あるいは、本発明のヒト抗体（好ましくは、モノクローナル抗体）は、哺乳動物様のグリコシル化パターンのために操作され、グリコシル化パターンとしてフコースを欠く抗体を産生することができる酵母または糸状菌内で産生され得る（例えば、欧州特許第ＥＰ１２９７１７２（Ｂ１）号明細書参照のこと）。
一実施形態では、本発明による抗体またはその抗原結合断片は、ｐｅｇ化抗体またはその断片である。
抗体をｐｅｇ化して、例えば、抗体の生物学的（例えば、血清）半減期を増長させることができる。抗体をｐｅｇ化するために、抗体またはその断片は、典型的には、１つ以上のＰＥＧ基が抗体または抗体断片に付着する条件下で、ＰＥＧの反応性エステルまたはアルデヒド誘導体などのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させる。Ｐｅｇ化は、反応性ＰＥＧ分子（または類似の反応性水溶性ポリマー）を用いたアシル化反応またはアルキル化反応によって実施することができる。本明細書で使用される場合、「ポリエチレングリコール」という用語は、モノ（ＤＹ１２～ＤＹ１２０）アルコキシ－またはアリールオキシ－ポリエチレングリコールまたはポリエチレングリコール－マレイミドなどの他のタンパク質を誘導体化するために使用されているＰＥＧの形態のいずれかを包含することを意図する。ある実施形態では、ｐｅｇ化される抗体は、非グリコシル化抗体である。タンパク質をｐｅｇ化するための方法は、当技術分野において公知であり、例えば、欧州特許第０１５４３１６号明細書（Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら）および欧州特許第０４０１３８４号明細書（Ｉｓｈｉｋａｗａら）に記載のものなど、本発明の抗体に適用することができる。
本発明は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含む融合タンパク質にさらに関する。
一実施形態では、融合タンパク質は、第２の抗原結合部分を含む。一実施形態では、融合タンパク質は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、さらに別の分子に結合することができる。
一実施形態では、他の分子は、免疫受容体である。本発明の二重特異性抗体によって結合され得る免疫受容体の例としては、これらに限定されないが、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４、Ｂ７Ｈ６、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＧＩＴＲ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ２７－ＣＤ７０、ＣＤ４０、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＣＤ１６０およびＣＥＡＣＡＭ－１が挙げられる。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、さらに共刺激分子に結合することができる。共刺激分子の例としては、これらに限定されないが、４－１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７－ＣＤ７０、ＣＤ４０およびＯＸ４０が挙げられる。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、ＯＸ４０に結合することができる。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、ＧＩＴＲに結合することができる。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、ＩＣＯＳに結合することができる。
別の実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、さらに共阻害分子に結合することができる。共阻害分子の例としては、これらに限定されないが、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、ＴＩＧＩＴ、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＣＤ１６０およびＣＥＡＣＡＭ－１が挙げられる。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、ＣＴＬＡ４に結合することができる。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、ＰＤ－１に結合することができる。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、ＴＩＧＩＴに結合することができる。
一実施形態では、融合タンパク質は、免疫チェックポイントタンパク質に結合する第２の抗原結合部分を含む。免疫チェックポイントタンパク質（チェックポイント阻害剤およびチェックポイントアゴニストなど）の例を本明細書に列挙する。
一実施形態では、融合タンパク質は、例えば、ＣＤ３またはＣＤ２８などのＴ細胞マーカーに結合する第２の抗原結合部分を含む。
一実施形態では、融合タンパク質は、例えば、活性化ＮＫ受容体などのＮＫ細胞マーカーに結合する第２の抗原結合部分を含む。活性化ＮＫ受容体の例としては、これらに限定されないが、ＫＩＲタンパク質（例えば、ＫＩＲ２ＤＳタンパク質）、ＣＤ１６０－ＴＭ、ＮＫＧ２Ｄ、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－１２Ｒ、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－１８ＲおよびＩＬ－２１Ｒの活性化形態が挙げられる。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、治療部分、すなわち薬物と複合体形成している。治療部分は、例えば、化学療法剤、免疫抑制剤、溶解性ペプチド、放射性核種または毒素であり得る。
別の実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、放射性核種（すなわち、抗体またはその抗原結合断片は放射性標識されていない）および／または毒素とコンジュゲートされていない。
放射性核種の例としては、これらに限定されないが、９０Ｙ、１３１Ｉ、または６７Ｃｕが挙げられる。
毒素の例としては、これらに限定されないが、ドキソルビシンおよびカリケアマイシンが挙げられる。
別の実施形態では、抗体または抗原結合断片は、細胞傷害性部分と複合体形成される。細胞傷害性部分は、例えば、タキソール；サイトカラシンＢ；グラミシジンＤ；臭化エチジウム；エメチン；マイトマイシン；エトポシド；テノポシド（ｔｅｎｏｐｏｓｉｄｅ）；ビンクリスチン；ビンブラスチン；コルヒチン（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎ）；ドキソルビシン；ダウノルビシン；ジヒドロキシアントラシンジオン；チューブリン阻害剤、例えば、メイタンシンまたはその類似体または誘導体；モノメチルアウリスタチンＥまたはＦなどの有糸分裂阻害剤またはその類似体もしくは誘導体；ドラスタチン１０もしくは１５またはその類似体；イリノテカンまたはその類似体；ミトキサントロン；ミトラマイシン；アクチノマイシンＤ；１－デヒドロテストステロン（１－ｄｅｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）；糖質コルチコイド；プロカイン；テトラカイン；リドカイン；プロプラノロール；ピューロマイシン；カリケアマイシンまたはその類似体または誘導体；メトトレキサート、６メルカプトプリン、６チオグアニン、シタラビン、フルダラビン、５フルオロウラシル、デカルバジン（ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）、ヒドロキシ尿素、アスパラギナーゼ、ゲムシタビン、またはクラドリビンなどの代謝拮抗剤；メクロレタミン、チオエパ（ｔｈｉｏｅｐａ）、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、プロカルバジン、マイトマイシンＣなどのアルキル化剤；シスプラチンまたはカルボプラチンなどの白金誘導体；デュオカルマイシンＡ、デュオカルマイシンＳＡ、ラケルマイシン（ＣＣ－１０６５）、またはその類似体または誘導体；ダクチノマイシン、ブレオマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、ミトラマイシン、マイトマイシン、ミトキサントロン、プリカマイシン、アントラマイシン（ＡＭＣ）などの抗生物質；ピロロ［２，ｌ－ｃ］［１，４］－ベンゾジアゼピン（ＰＤＢ）；ジフテリア毒素およびジフテリアＡ鎖およびその活性断片およびハイブリッド分子などの関連分子、リシンＡまたは脱グリコシル化リシンＡ鎖毒素などのリシン毒素、コレラ毒素、志賀様毒素、例えば、ＳＬＴ Ｉ、ＳＬＴ ＩＩ、ＳＬＴ ＩＩＶ、ＬＴ毒素、Ｃ３毒素、志賀毒素、百日咳毒素、破傷風毒素、大豆ボーマン－バークプロテアーゼ阻害剤、シュードモナス外毒素、アロリン、サポリン、モデシン、ゲラニン（ｇｅｌａｎｉｎ）、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファサルシン、シナアブラギリ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質、ジアンチンタンパク質、ヨウシュヤマゴボウ（Ｐｈｙｔｏｌａｃｃａ ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質、例えば、ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ－Ｓ、ツルレイシ阻害剤、クルシン、クロチン、サポンソウ（ｓａｐａｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤、ジェロニン、ミトゲリン（ｍｉｔｏｇｅｌｌｉｎ）、レストリクトシン（ｒｅｓｔｒｉｃｔｏｃｉｎ）、フェノマイシン（ｐｈｅｎｏｍｙｃｉｎ）、およびエノマイシン毒素；リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）；ＤＮａｓｅ Ｉ、ブドウ球菌エンテロトキシンＡ；ヨウシュヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質；ジフテリン毒素；およびシュードモナスエンドトキシンからなる群から選択され得る。
抗体に対して、分子の複合体形成を行うための技術は、当技術分野において周知である（例えば、Ａｒｎｏｎら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｏｆ Ｄｒｕｇｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ（Ｒｅｉｓｆｅｌｄら、編、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、編、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｉｋｅｒ，Ｉｎｃ．，第２版、１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃａｒｒｉｅｒｓ Ｏｆ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｇｅｎｔｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ’８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｐｉｎｃｈｅｒａら、編、１９８５）；「Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｕｓｅ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ（Ｂａｌｄｗｉｎら、編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８５）；およびＴｈｏｒｐｅら、１９８２，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．６２：１１９－５８を参照のこと。また、例えば、ＰＣＴ公開第８９／１２６２４号明細書を参照のこと）。典型的には、核酸分子は、それぞれＮ－ヒドロキシスクシンイミドエステルまたはマレイミド官能基を介して、抗体上のリジンまたはシステインに共有結合により付着している。操作されたシステインを使用した複合体形成または非天然アミノ酸の取り込みの方法により、複合体の均一性が改善されることが報告されている（Ａｘｕｐ，Ｊ．Ｙ．，Ｂａｊｊｕｒｉ，Ｋ．Ｍ．，Ｒｉｔｌａｎｄ，Ｍ．，Ｈｕｔｃｈｉｎｓ，Ｂ．Ｍ．，Ｋｉｍ，Ｃ．Ｈ．，Ｋａｚａｎｅ，Ｓ．Ａ．，Ｈａｌｄｅｒ，Ｒ．，Ｆｏｒｓｙｔｈ，Ｊ．Ｓ．，Ｓａｎｔｉｄｒｉａｎ，Ａ．Ｆ．，Ｓｔａｆｉｎ，Ｋ．，ら、（２０１２）．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｓｉｔｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｕｓｉｎｇ ｕｎｎａｔｕｒａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０９，１６１０１－１６１０６．；Ｊｕｎｕｔｕｌａ，Ｊ．Ｒ．，Ｆｌａｇｅｌｌａ，Ｋ．Ｍ．，Ｇｒａｈａｍ，Ｒ．Ａ．，Ｐａｒｓｏｎｓ，Ｋ．Ｌ．，Ｈａ，Ｅ．，Ｒａａｂ，Ｈ．，Ｂｈａｋｔａ，Ｓ．，Ｎｇｕｙｅｎ，Ｔ．，Ｄｕｇｇｅｒ，Ｄ．Ｌ．，Ｌｉ，Ｇ．，ら、（２０１０）．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｔｈｉｏ－ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ－ＤＭ１ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ ｗｉｔｈ ａｎ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎｄｅｘ ｔｏ ｔａｒｇｅｔ ｈｕｍａｎｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１６，４７６９－４７７８．）。Ｊｕｎｕｔｕｌａら（２００８）は、「ＴＨＩＯＭＡＢ」（ＴＤＣ）と呼ばれるシステインベースの部位特異的複合体形成を開発した。これは、従来の複合体形成法と比較して改善された治療指数を示すことが主張されている。抗体に組み込まれている非天然アミノ酸への複合体形成もＡＤＣについて検討されているが、このアプローチの一般性は依然として確立されていない（Ａｘｕｐら、２０１２）。特に、当業者はまた、ポリペプチド操作（例えば、ポリペプチドのアミノ酸の欠失、挿入、置換、または突然変異を介して）によって反応性になるアシル供与体グルタミン含有タグ（例えば、Ｇｉｎ含有ペプチドタグまたはＱ－タグ）または内因性グルタミンで操作されたＦｃ含有ポリペプチドを想定することができる。次に、トランスグルタミナーゼは、アミン供与剤（例えば、反応性アミンを含むか、または反応性アミンに付着した小分子）と共有結合により架橋して、アミン供与剤との操作されたＦｃ含有ポリペプチド複合体の安定で均質な集団を形成することができる。この複合体は、アシルドナーグルタミン含有タグまたはアクセス可能／曝露／反応性内因性グルタミンを介して、Ｆｃ含有ポリペプチドに対して部位特異的に複合体形成している（国際公開第２０１２０５９８８２号）。
本発明の別の目的は、本発明によるヒトＣＤ２５に結合する抗体またはその抗原結合断片をコードする単離された核酸である。本発明の別の目的は、本発明による融合タンパク質をコードする単離された核酸である。
本明細書で使用されるとき、「単離された核酸」は、他のゲノムＤＮＡ配列、ならびに天然配列に自然に付随するリボソームおよびポリメラーゼなどのタンパク質または複合体から実質的に分離されている核酸を指すことを意図する。この用語は、自然に発生する環境から取り出された核酸配列を包含し、組換えまたはクローン化されたＤＮＡ単離物、および化学合成された類似体または異種系によって生物学的に合成された類似体を含む。実質的に純粋な核酸には、単離された形態の核酸が含まれる。当然のことながら、これは最初に単離された核酸を指し、後にヒトの手によって単離された核酸に付加された遺伝子または配列を除外するものではない。
一実施形態では、単離された核酸は、精製される。
一実施形態では、単離された核酸は、
（１）吸光度法または蛍光法（例えば、２６０と２８０ｎｍとの吸光度の比（Ａ２６０／２８０）による測定など）によって決定したときに、８０重量％、８５重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、９３重量％、９４重量％、９５重量％超またはそれ以上、最も好ましくは９６重量％、９７重量％、９８重量％、または９９重量％超の核酸まで、または
（２）アガロースゲル電気泳動によって、および臭化エチジウム、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ、ＧｅｌＧｒｅｅｎなどの挿入剤を使用して示された均一性まで、
精製される。
一実施形態では、核酸は、本発明による抗体の少なくとも重鎖可変領域または軽鎖可変領域をコードする。一実施形態では、核酸は、本発明による抗体の可変領域および定常領域をコードし得る。一実施形態では、核酸は、別個の核酸上または同じ核酸分子上で抗体の重鎖および軽鎖をコードし得る。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲをコードする配列を含むかまたはそれからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、配列番号２４の配列、または配列番号２４と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含むかまたはそれらからなる。
配列番号２４
GAGGTGCAGCTGGTGGAX1TCTGGGGGCGGCTTAGTGCAGCCTGGAAGGTCCATGAAACTCTCCTGTGCAGX2CTCAGGATTCX3CTTTCAGTX4ACCATGCCATGGCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAAAGAAGGGTCTGX5AGTGGGTCGCATACATTAGTTATGATGGGATAACACTTACTATCGAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACTATCTCCAGAGATAATGCAX6X7AAGX8ACCCTATX9CCTGCAAATX10GACAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCACTTATTAX11TGTACAACAGGGGGTAATTCGGGGTACGACTGGGGCCAAGGAGTCATGGTCACAGTCTCCTCA
ここで、Ｘ１は、ＧまたはＡであり、Ｘ２は、ＣまたはＴであり、Ｘ３は、ＣまたはＡであり、Ｘ４は、ＧまたはＡであり、Ｘ５は、ＣまたはＧであり、Ｘ６は、ＡまたはＣであり、Ｘ７は、ＧまたはＡであり、Ｘ８は、ＴまたはＣであり、Ｘ９は、ＴまたはＡであり、Ｘ１０は、ＧまたはＴであり、Ｘ１１はＣまたはＴである。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲをコードする配列を含むかまたはそれからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、配列番号２５の配列、または配列番号２５と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含むかまたはそれらからなる。
配列番号２５
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCATTCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAGTCACX1ATCAACTGCAAAGX2AAGTCAGAATGTTAACAAGTTCX3TAAACTGGTATCAGCAAAAGCTTGGAGAAGCTCCCAGACGCCTGATCTATGGTACAAACAGTTTGCAAACCGGCATCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGX4ACAGATTACACACTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTTGCCACGTATTTCTGCCAGCAGTATAX5CAGTTGGCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAATTGAAA
ここで、Ｘ１は、ＣまたはＴであり、Ｘ２は、ＣまたはＧであり、Ｘ３は、ＴまたはＧであり、Ｘ４は、ＴまたはＡであり、Ｘ５は、ＧまたはＣである。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲをコードする配列と；
－本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲをコードする配列と、を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－配列番号２４の配列、または配列番号２４と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の同一性を共有する任意の配列と；
－配列番号２５の配列、または配列番号２５と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の同一性を共有する任意の配列と；を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲをコードする配列を含むかまたはそれからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８の配列、または配列番号２６、配列番号２７、もしくは配列番号２８と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含むかまたはそれらからなる。
配列番号２６
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGCGGCTTAGTGCAGCCTGGAAGGTCCATGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCAGGATTCCCTTTCAGTGACCATGCCATGGCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAAAGAAGGGTCTGCAGTGGGTCGCATACATTAGTTATGATGGGGATAACACTTACTATCGAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACTATCTCCAGAGATAATGCAAGAAGTACCCTATTCCTGCAAATGGACAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCACTTATTATTGTACAACAGGGGGTAATTCGGGGTACGACTGGGGCCAAGGAGTCATGGTCACAGTCTCCTCA

配列番号２７
GAGGTGCAGCTGGTGGAATCTGGGGGCGGCTTAGTGCAGCCTGGAAGGTCCATGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCAGGATTCACTTTCAGTAACCATGCCATGGCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAAAGAAGGGTCTGGAGTGGGTCGCATACATTAGTTATGATGGGGATAACACTTACTATCGAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACTATCTCCAGAGATAATGCAAAAAGCACCCTATACCTGCAAATTGACAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCACTTATTACTGTACAACAGGGGGTAATTCGGGGTACGACTGGGGCCAAGGAGTCATGGTCACAGTCTCCTCA

配列番号２８
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGCGGCTTAGTGCAGCCTGGAAGGTCCATGAAACTCTCCTGTGCAGTCTCAGGATTCACTTTCAGTAACCATGCCATGGCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAAAGAAGGGTCTGGAGTGGGTCGCATACATTAGTTATGATGGGGATAACACTTACTATCGAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACTATCTCCAGAGATAATGCACAAAGCACCCTATACCTGCAAATGGACAGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCACTTATTACTGTACAACAGGGGGTAATTCGGGGTACGACTGGGGCCAAGGAGTCATGGTCACAGTCTCCTCA
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲをコードする配列を含むかまたはそれからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１の配列、または配列番号２９、配列番号３０、もしくは配列番号３１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含むかまたはそれらからなる。
配列番号２９
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCATTCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAGTCACCATCAACTGCAAAGCAAGTCAGAATGTTAACAAGTTCTTAAACTGGTATCAGCAAAAGCTTGGAGAAGCTCCCAGACGCCTGATCTATGGTACAAACAGTTTGCAAACCGGCATCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGTACAGATTACACACTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTTGCCACGTATTTCTGCCAGCAGTATAGCAGTTGGCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAATTGAAA

配列番号３０
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCATTCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAGTCACTATCAACTGCAAAGCAAGTCAGAATGTTAACAAGTTCGTAAACTGGTATCAGCAAAAGCTTGGAGAAGCTCCCAGACGCCTGATCTATGGTACAAACAGTTTGCAAACCGGCATCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGAACAGATTACACACTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTTGCCACGTATTTCTGCCAGCAGTATAGCAGTTGGCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAATTGAAA

配列番号３１
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCATTCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAGTCACTATCAACTGCAAAGGAAGTCAGAATGTTAACAAGTTCTTAAACTGGTATCAGCAAAAGCTTGGAGAAGCTCCCAGACGCCTGATCTATGGTACAAACAGTTTGCAAACCGGCATCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGTACAGATTACACACTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTTGCCACGTATTTCTGCCAGCAGTATACCAGTTGGCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAATTGAAA
一実施形態では、本発明による核酸は、
－本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲをコードする配列と；
－本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲをコードする配列と、を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８の配列、または配列番号２６、配列番号２７、もしくは配列番号２８と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有する任意の配列と；
－配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１の配列、または配列番号２９、配列番号３０、もしくは配列番号３１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有する任意の配列と；を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－配列番号２６の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲをコードする配列と；
－配列番号２９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲをコードする配列と；を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－配列番号２７の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲをコードする配列と；
－配列番号３０の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲをコードする配列と；を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－配列番号２８の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲをコードする配列と；
－配列番号３１の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲをコードする配列と；を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、ＨＣＶＲおよび／またはＬＣＶＲは、好ましくは、それぞれ、ＨＣＶＲ核酸配列から５’に、またはＬＣＶＲ核酸配列から５’に位置するリーダー配列をさらに含む。リーダー配列の例としては、これらに限定されないが、配列番号３２および配列番号３３によってそれぞれコードされた配列番号２２および２３が挙げられる。
配列番号３２
ATGGACATCAGGCTCAGCTTGGCTTTCCTTGTCCTTTTCATAAAAGGTGTCCAGTGT

配列番号３３
ATGGCTGCAGTTCAACTCTTAGGGCTGCTGCTGCTTTGGCTCCCAGCCATGAGATGT
一実施形態では、ＨＣＶＲは、ＨＣＶＲ核酸配列から５’に位置する配列番号３２の核酸リーダー配列（配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７または配列番号２８）を含む。
一実施形態では、ＬＣＶＲは、ＨＣＶＲ核酸配列から５’に位置する配列番号３３の核酸配列リーダー配列（配列番号２５、配列番号２９、配列番号３０または配列番号３１）を含む。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明による抗体またはその抗原結合断片の完全にまたは実質的に完全にヒトのＨＣＣＲおよび／またはＬＣＣＲをコードする配列を含むかまたはそれからなる。
そのような実施形態では、定常領域は、任意のヒト抗体定常領域に由来し得る。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明による抗体またはその抗原結合断片の完全にまたは実質的に完全にマウスのＨＣＣＲおよび／またはＬＣＣＲをコードする配列を含むかまたはそれからなる。
そのような実施形態では、定常領域は、任意のマウス抗体定常領域に由来し得る。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明によるキメラ抗体またはその抗原結合断片の重鎖をコードする配列を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明によるキメラ抗体またはその抗原結合断片の軽鎖をコードする配列を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明によるヒト化抗体またはその抗原結合断片の重鎖をコードする配列を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、本発明によるヒト化抗体またはその抗原結合断片の軽鎖をコードする配列を含むかまたはそれらからなる。
典型的には、核酸は、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子であり、例えば、プラスミド、コシムド（ｃｏｓｉｍｄ）、エピソーム、人工染色体、ファージまたはウイルスベクターなど、任意の好適なベクター内に含まれ得る。
したがって、本発明の別の目的は、本発明によるヒトＣＤ２５に結合する抗体またはその抗原結合断片をコードする核酸を含む発現ベクターである。本発明の別の目的は、本発明による融合タンパク質をコードする核酸を含む発現ベクターである。
「ベクター」、「クローニングベクター」および「発現ベクター」という用語は、宿主を形質転換し、導入された配列の発現（例えば、転写および翻訳）を促進するために、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列（例えば、外来遺伝子）を宿主細胞に導入することができるビヒクルを意味する。そのようなベクターは、対象への投与時に抗体の発現を引き起こすかまたは指示するための、プロモーター、エンハンサー、ターミネーターなどの調節エレメントを含み得る。動物細胞の発現ベクターで使用されるプロモーターおよびエンハンサーの例には、ＳＶ４０の初期プロモーターおよびエンハンサー、モロニーマウス白血病ウイルスのＬＴＲプロモーターおよびエンハンサー、免疫グロブリンＨ鎖のプロモーターおよびエンハンサーなどが含まれる。ヒト抗体Ｃ領域をコードする遺伝子を挿入して発現させることができる限り、動物細胞用の任意の発現ベクターを使用することができる。好適なベクターの例としては、ｐＡＧＥ１０７、ｐＡＧＥ１０３、ｐＨＳＧ２７４、ｐＫＣＲ、ｐＳＧ１ベータｄ２－４などが挙げられる。プラスミドの他の例には、複製起点を含む複製プラスミド、または統合プラスミド（例えばｐＵＣ、ｐｃＤＮＡ、ｐＢＲなど）が含まれる。ウイルスベクターの他の例には、アデノウイルス、レトロウイルス、ヘルペスウイルスおよびＡＡＶベクターが含まれる。そのような組換えウイルスは、パッケージング細胞をトランスフェクトすることによって、またはヘルパープラスミドもしくはウイルスによる一過性トランスフェクションによってなど、当技術分野において公知である技術によって産生され得る。ウイルスパッケージング細胞の典型的な例には、ＰＡ３１７細胞、ＰｓｉＣＲＩＰ細胞、ＧＰｅｎｖ＋細胞、２９３細胞などが含まれる。このような複製欠損組換えウイルスを産生するための詳細なプロトコルは、例えば、国際公開第９５／１４７８５号、国際公開第９６／２２３７８号、米国特許第５，８８２，８７７号明細書、米国特許第６，０１３，５１６号明細書、米国特許第４，８６１，７１９号明細書、米国特許第５，２７８，０５６号明細書、および国際公開第９４／１９４７８号に見出すことができる。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲをコードする配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８の配列、または配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、もしくは配列番号２８と、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲをコードする配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、配列番号２５、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１の配列、または配列番号２５、配列番号２９、配列番号３０もしくは配列番号３１と、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、
－調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＶＲをコードする配列と；
－調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲをコードする配列と；を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、
－配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８の配列、または配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７もしくは配列番号２８と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含むかまたはそれらからなるＨＣＶＲをコードする配列と、
－配列番号２５、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１の配列、または配列番号２９、配列番号３０もしくは配列番号３１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を共有する任意の配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＶＲをコードする配列と、を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、
－配列番号２４の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲをコードする配列と；
－配列番号２５の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲをコードする配列と；を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、
－配列番号２６の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲをコードする配列と；
－配列番号２９の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲをコードする配列と；を含む。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－配列番号２７の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲをコードする配列と；
－配列番号３０の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲをコードする配列と；を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による核酸は、
－配列番号２８の配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲをコードする配列と；
－配列番号３１の配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲをコードする配列と；を含むかまたはそれらからなる。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＣＲをコードする配列を含み、ＨＣＣＲは、任意のヒト抗体ＨＣＣＲに由来し得る。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＣＲをコードする配列を含み、ＬＣＣＲは、任意のヒト抗体ＬＣＣＲに由来し得る。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＨＣＣＲをコードする配列を含み、ＨＣＣＲは、任意のマウス抗体ＨＣＣＲに由来し得る。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明による抗体またはその抗原結合断片のＬＣＣＲをコードする配列を含み、ＬＣＣＲは、任意のマウス抗体ＬＣＣＲに由来し得る。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明によるキメラ抗体またはその抗原結合断片の重鎖をコードする配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明によるキメラ抗体またはその抗原結合断片の軽鎖をコードする配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明によるヒト化抗体またはその抗原結合断片の重鎖をコードする配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、調節エレメントに操作可能に連結された、本発明によるヒト化抗体またはその抗原結合断片の軽鎖をコードする配列を含む。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、モノシストロン性である。
「モノシストロン性」とは、単一の核酸が単一の発現ベクター内で発現されることを意味する。
一実施形態では、本発明による発現ベクターは、ポリシストロン性である。
「ポリシストロン性」とは、少なくとも２つ以上の核酸が単一の発現ベクター内で発現されることを意味する。
本発明の別の目的は、ベクターを含む単離された宿主細胞である。この宿主細胞は、本発明の抗体の組換え生産のために使用され得る。
一実施形態では、宿主細胞は、原核生物、酵母、または真核生物細胞、好ましくは哺乳動物細胞、例えば、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ－７、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １６５１）；ヒト胎児腎臓株（浮遊培養での成長のためにサブクローン化された２９３または２９３細胞、Ｇｒａｈａｍら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７））；乳児ハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ，ＡＴＣＣ ＣＣＬ １０）；チャイニーズハムスター卵巣細胞／－ＤＨＦＲ（ＣＨＯ，Ｕｒｌａｕｂら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６（１９８０））；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４，Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３－２５１（１９８０））；マウス骨髄腫細胞ＳＰ２／０－ＡＧ１４（ＡＴＣＣ ＣＲＬ １５８１；ＡＴＣＣ ＣＲＬ ８２８７）またはＮＳＯ（ＨＰＡ培養コレクション番号８５１１０５０３）；サル腎臓細胞（ＣＶｌ ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７０）；アフリカングリーンサル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６，ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ，ＡＴＣＣ ＣＣＬ ２）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ，ＡＴＣＣ ＣＣＬ ３４）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ ３Ａ，ＡＴＣＣ ＣＲＬ １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８，ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７５）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ Ｇ２，ＨＢ ８０６５）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２，ＡＴＣＣ ＣＣＬ５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒら、Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４－６８（１９８２））；ＭＲＣ ５細胞；ＦＳ４細胞；およびヒト肝癌株（Ｈｅｐ Ｇ２）、ならびにＤＳＭ ＰＥＲＣ－６細胞株であり得る。これらの宿主細胞のそれぞれでの使用に好適である発現ベクターもまた、当技術分野において一般的に公知である。「宿主細胞」という用語は、一般に、培養細胞株を指すことに留意されたい。本発明による抗原結合タンパク質をコードする発現ベクターが導入された全ヒトは、「宿主細胞」の定義から明示的に除外される。
本発明の別の目的は、本発明による、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に結合する、単離された抗体またはその抗原結合断片を産生し、精製する方法である。
一実施形態では、この方法は、
－上記の組換え核酸またはベクターをｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏでコンピテント宿主細胞に導入することと；
－抗体またはその抗原結合断片の発現に好適な条件下で、本発明による核酸または発現ベクターで形質転換されたｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏ宿主細胞を培養することと；
－任意により、抗体を発現および／または分泌する細胞を選択することと；
－発現した抗体またはその抗原結合断片を回収することと、を含む。
この組換えプロセスは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏおよび／またはｉｎ ｖｉｖｏの治療的使用および／または診断的使用を目的としたモノクローナル抗体など、抗体またはその抗原結合断片の大規模産生に使用することができる。
これらのプロセスは、当技術分野において周知である（Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ（編），２００４．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（第１版、第１巻：Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ ＵＳ）。
一実施形態では、発現された抗体またはその抗原結合断片はさらに精製される。
本発明による抗体またはその抗原結合断片を精製するための方法は、当技術分野において周知であり（Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ（編），２００４．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（第１版、第１巻：Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ ＵＳ）、これらに限定されないが、プロテインＡ－セファロース、ゲル電気泳動、クロマトグラフィー、好ましくはアフィニティークロマトグラフィー、より好ましくはプロテインＬアガロースでのアフィニティークロマトグラフィーが挙げられる。
本発明の別の目的は、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に結合する本発明による少なくとも１つのタンパク質を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる組成物である。
本発明の別の目的は、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に結合する本発明による少なくとも１つの抗体またはその少なくとも１つの抗原結合断片を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる組成物である。
本発明の別の目的は、本発明による少なくとも１つの融合タンパク質を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる組成物である。
本発明のさらなる目的は、ｈＣＤ２５に結合する本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、または本発明による融合タンパク質をコードする少なくとも１つの核酸を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる組成物である。
本発明のさらなる目的は、ｈＣＤ２５に結合する本発明による少なくとも１つのタンパク質、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる医薬組成物である。
本発明の別の目的は、ヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に結合する本発明による少なくとも１つの抗体またはその少なくとも１つの抗原結合断片、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる医薬組成物である。
本発明の別の目的は、本発明による少なくとも１つの融合タンパク質、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる医薬組成物である。
本発明のさらなる目的は、ｈＣＤ２５に結合する本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、または本発明による融合タンパク質をコードする少なくとも１つの核酸、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる医薬組成物である。
本発明のさらなる目的は、本発明によるｈＣＤ２５に結合する抗体またはその抗原結合断片をコードする少なくとも１つの核酸を含む少なくとも１つの発現ベクター、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる医薬組成物である。
本明細書で使用される場合、組成物に関して「本質的にからなる」とは、少なくとも１つのタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸または発現ベクターが、前述の組成物内で生物学的活性を有する唯一の治療剤または剤であることを意味する。
「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、あらゆる任意の溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。賦形剤は、動物、好ましくはヒトに投与された場合、有害な、アレルギー性の、または他の不都合な反応を引き起こさない。ヒト投与の場合、調製物は、例えば、ＦＤＡ ＯｆｆｉｃｅまたはＥＭＡなどの規制当局が要求する滅菌性、発熱性、ならびに一般的な安全性および純度の基準を満たす必要がある。
これらの組成物に使用され得る薬学的に許容される賦形剤としては、これらに限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（ヒト血清アルブミンなど）、リン酸塩などの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、ポリエチレングリコール、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が挙げられる。
一実施形態では、本発明による医薬組成物は、対象に注射することができる製剤に対して薬学的に許容されるビヒクルを含む。これらは、特に等張性、滅菌、生理食塩水（リン酸一ナトリウムまたは二ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムまたは塩化マグネシウムなど、またはそのような塩の混合物）、または乾燥、特に凍結乾燥された組成物であり得、場合によっては、滅菌水または生理食塩水を添加したときに、注射用溶液の構成が可能になる。
本発明のさらなる目的は、本発明によるｈＣＤ２５に結合する少なくとも１つのタンパク質を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる薬剤である。
本発明のさらなる目的は、本発明によるｈＣＤ２５に結合する少なくとも１つの抗体またはその少なくとも１つの抗原結合断片を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる薬剤である。
本発明のさらなる目的は、本発明による少なくとも１つの融合タンパク質を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる薬剤である。
本発明のさらなる目的は、本発明によるｈＣＤ２５に結合する抗体もしくはその抗原結合断片、または本発明による融合タンパク質をコードする少なくとも１つの核酸を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる薬剤である。
本発明のさらなる目的は、本発明によるヒトＣＤ２５（ｈＣＤ２５）に結合する抗体またはその抗原結合断片をコードする少なくとも１つの核酸を含む少なくとも１つの発現ベクターを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる薬剤である。
対象への投与に使用するために、組成物、医薬組成物または薬剤は、対象への投与用に製剤化される。本発明による組成物、医薬組成物または薬剤は、非経口的に、吸入スプレーによって、直腸的に、経鼻的に、または埋め込まれたリザーバーを介して投与され得る。本明細書で使用される投与という用語には、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内、髄腔内、肝内、病巣内および頭蓋内注射技術または注入技術を含む。
注射に適合した形態の例としては、これらに限定されないが、溶液（例えば、滅菌水溶液）、ゲル、分散液、エマルジョン、懸濁液、固体形態（例えば、粉末、リポソーム形態など、使用前に液体を添加して溶液または懸濁液を調製するために使用するのに好適であるもの）が挙げられる。
本発明の組成物の滅菌注射用形態は、水性または油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、当技術分野において公知である技術に従って製剤化され得る。滅菌注射調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒に含まれる滅菌注射用溶液または懸濁液であり得る。使用され得る許容可能なビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌固定油は、従来、溶媒または懸濁媒体として使用されている。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドなど、任意の低刺激性固定油が使用され得る。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体などの脂肪酸は、特にポリオキシエチル化型のオリーブ油またはヒマシ油などの天然の薬学的に許容される油と同様に、注射剤の調製に有用である。これらの油性溶液または懸濁液はまた、エマルジョンおよび懸濁液などの薬学的に許容される剤形の製剤中に一般的に使用されるカルボキシメチルセルロースまたは同様の分散剤などの長鎖アルコール希釈剤または分散剤を含み得る。薬学的に許容される固体、液体、または他の剤形の製造に一般的に使用される、Ｔｗｅｅｎ、Ｓｐａｎおよび他の乳化剤または生物学的利用能増強剤などの他の一般的に使用される界面活性剤もまた、製剤の目的に使用され得る。
一実施形態では、治療有効量の本発明による単離されたタンパク質、単離された抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤が、それを必要とする対象に投与される。
しかし、本発明による単離されたタンパク質、単離された抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤の毎日の総投与量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定されることは理解されるだろう。任意の特定の患者に対する特定の治療有効用量レベルは、治療している疾患および疾患の重症度；使用される単離されたタンパク質、単離された抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤の活性；対象の年齢、体重、全身健康、性別および食事；使用される特定の単離されたタンパク質、単離された抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤の投与時間、投与経路、および排泄率；治療期間；使用される特定の単離されたタンパク質、単離された抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤と組み合わせてまたは同時に使用される薬物、ならびに医学において周知である同様の要因など、様々な要因に依存する。例えば、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルで化合物の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることは、当業者の技術の範囲内である。各治療に必要な総用量は、複数回投与または単回投与で投与してもよい。
タンパク質、抗体または融合タンパク質の投与に使用されるレジメンまたは投与量は、様々なパラメータに対応させて、特に、使用される投与様式、関連する病状、または所望の治療期間に対応させて、適合させることができる。例えば、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルでタンパク質、抗体、または融合タンパク質の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることは、当業者の技術の範囲内である。タンパク質、抗体、または融合タンパク質の１日の投与量は、成人１名あたり１日０．０１～１０００ｍｇの広い範囲で変動し得る。組成物は、治療される対象への投与量の症候性調整のために、０．０１、０．０５、０．１、０．５、１．０、２．５、５．０、１０．０、１５．０、２５．０、５０．０、１００、２５０、および５００ｍｇの有効成分を含み得る。医薬組成物または薬剤は、典型的には、約０．０１ｍｇ～約５００ｍｇの有効成分を含む。治療有効量の薬剤は、通常、１日あたり０．０００２ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ体重の投与量レベルで供給される。例えば、本発明の組成物、医薬組成物または薬剤中に存在するタンパク質、抗体、融合タンパク質は、１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度、例えば、１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、または１００ｍｇ／ｍＬの濃度で供給され得る。一実施形態では、タンパク質、抗体または融合タンパク質は、１００ｍｇ（１０ｍＬ）または５００ｍｇ（５０ｍＬ）の単回使用バイアルのいずれかで約１０ｍｇ／ｍＬの濃度で供給される。これらの投与量は例示的なものであり、臨床試験で決定されなければならない医薬組成物中の特定の抗体の親和性および耐容性を考慮して最適な投与量を適合させることができることが理解されよう。
本発明は、それを必要とする対象の疾患、障害または症状を治療するための（または治療において使用するための）、本明細書に記載の少なくとも１つの単離されたタンパク質に関する。
本発明は、それを必要とする対象の疾患、障害または症状を治療するための（または治療において使用するための）、本明細書に記載の少なくとも１つの単離された抗体もしくはその抗原結合断片、組成物もしくは医薬組成物、または薬剤に関する。
本発明は、それを必要とする対象の疾患、障害または症状を治療するための（または治療において使用するための）、本明細書に記載の少なくとも１つの融合タンパク質に関する。
したがって、本発明は、それを必要とする対象における疾患、障害または症状を治療するための方法にさらに関し、本方法は、本明細書に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、組成物もしくは医薬組成物、または薬剤を対象に投与することを含む。
したがって、本発明は、それを必要とする対象の疾患、障害または症状を治療するための方法にさらに関し、本方法は、本明細書に記載の単離されたタンパク質または融合タンパク質を対象に投与することを含む。
上記の単離されたタンパク質、抗体もしくはその断片、または融合タンパク質により治療され得る疾患の例としては、これらに限定されないが、がんおよび感染症が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質は、それを必要とする対象のがんの治療において使用することができる。
したがって、本発明は、がんの治療またはがんの治療において使用するための、（好ましくは、上記の組成物、医薬組成物または薬剤中の）上記の単離されたタンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質に関する。
一実施形態では、治療有効量のタンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質が、対象に投与されるか、または投与されることになっている。
本明細書で使用される場合、「がん」という用語は、当技術分野におけるその一般的な意味を有し、これらに限定されないが、固形腫瘍および血液系腫瘍が挙げられる。がんという用語には、皮膚、組織、臓器、骨、軟骨、血液、および血管の疾患が含まれる。「がん」という用語は、原発性がんおよび転移性がんの両方をさらに包含する。本発明の方法および組成物によって治療され得るがんの例としては、これらに限定されないが、膀胱、血液、骨、骨髄、脳、胸、結腸、食道、胃腸、歯肉、頭、肝臓、肝臓、肺、鼻咽頭、首、卵巣、前立腺、皮膚、腹部、睾丸、舌、または子宮のがん細胞が挙げられる。さらに、がんは、これらに限定されないが、特に以下の組織型であり得る：新生物、悪性；癌腫；癌腫、未分化；巨大および紡錘細胞癌；小細胞癌；乳頭癌；扁平上皮癌；リンパ上皮癌；基底細胞癌；毛母癌；移行上皮癌；乳頭状移行上皮癌；腺癌；ガストリノーマ、悪性；胆管癌；肝細胞癌；肝細胞癌と胆管癌の混合型；索状腺癌；腺様嚢胞癌；腺腫性ポリープ内腺癌腺；腺癌、家族性大腸腺腫症；固形癌；カルチノイド腫瘍、悪性；細気管支肺胞腺癌（ｂｒａｎｃｈｉｏｌｏ－ａｌｖｅｏｌａｒ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）；乳頭型腺癌；嫌色素性癌；好酸性癌；好酸性腺癌；好塩基球癌；明細胞腺癌；顆粒細胞癌；濾胞腺癌；乳頭状・ろ胞腺癌；非被包性硬化癌；副腎皮質癌；類内膜癌（ｅｎｄｏｍｅｔｒｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）；皮膚付属器癌；アポクリン腺癌；脂腺癌；耳垢腺癌；粘表皮癌；嚢胞腺癌；乳頭状嚢胞腺癌；乳頭状漿液性嚢胞腺癌；粘液性嚢胞腺癌；粘液腺癌；印環細胞癌；浸潤性導管癌；髄様癌；小葉癌；炎症性癌；ｐａｇｅｔ病、乳房；腺房細胞癌；腺扁平上皮癌；扁平上皮化生を伴う腺癌；胸腺腫、悪性；卵巣間質腫瘍、悪性；莢膜細胞腫、悪性；顆粒膜細胞腫瘍、悪性；アンドロブラストーマ、悪性；セルトリ細胞癌；ライディッヒ細胞腫瘍、悪性；脂質細胞腫瘍、悪性；傍神経節腫、悪性；乳房外傍神経節腫、悪性；褐色細胞腫；グロムス血管肉腫；悪性黒色腫；無色素性黒色腫；表層拡大性黒色腫；巨大色素性母斑内悪性黒色腫；類上皮細胞黒色腫；青色母斑、悪性；肉腫；線維肉腫；線維性組織球腫、悪性；粘液肉腫；脂肪肉腫；平滑筋肉腫；横紋筋肉腫；胎芽性横紋筋肉腫；胞巣状横紋筋肉腫；間質肉腫；混合腫瘍、悪性；ミュラー管混合腫瘍；腎芽腫；肝芽腫；癌肉腫；間葉腫、悪性；ブレンナー腫瘍、悪性；葉状腫瘍、悪性；滑膜肉腫；中皮腫、悪性；未分化胚腫；胎芽性癌；奇形腫、悪性；卵巣甲状腺腫、悪性；絨毛癌；中腎腫、悪性；血管肉腫；血管内皮腫、悪性；カポジ肉腫；血管外皮腫、悪性；リンパ管肉腫；骨肉腫；傍皮質骨肉腫；軟骨肉腫；軟骨芽腫、悪性；間葉性軟骨肉腫；骨巨細胞腫瘍；Ｅｗｉｎｇ肉腫；歯原性腫瘍、悪性；エナメル上皮歯牙肉腫；エナメル上皮腫、悪性；エナメル上皮線維肉腫；松果体腫、悪性；脊索腫；グリオーマ、悪性；上衣腫；アストロサイトーマ；原形質性アストロサイトーマ；細線維性アストロサイトーマ；星芽腫；膠芽腫；希突起膠腫；希突起芽腫；原始神経外胚葉；小脳肉腫；神経節神経芽腫；神経芽腫；網膜芽腫；嗅神経原腫瘍；髄膜腫、悪性；神経線維肉腫；神経鞘腫、悪性；顆粒細胞腫瘍、悪性；悪性リンパ腫；ホジキン病；ホジキンリンパ腫；傍肉芽腫；悪性リンパ腫、小リンパ球；悪性リンパ腫、大細胞、びまん性；悪性リンパ腫、ろ胞性；菌状息肉症；他の特定の非ホジキンリンパ腫；悪性組織球症；多発性骨髄腫；肥満細胞肉腫；免疫増殖性小腸疾患；白血病；リンパ性白血病；形質細胞白血病；赤白血病；リンパ肉腫細胞白血病；骨髄性白血病；好塩基性白血病；好酸球性白血病；単球性白血病；肥満細胞白血病；巨核芽球性白血病；骨髄性肉腫；および有毛細胞白血病。
別の実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質は、それを必要とする対象における感染症、障害または症状の治療において使用され得る。
一実施形態では、治療有効量の本発明のタンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質が、対象に投与されるか、または投与されることになっている。
したがって、本発明は、感染症、障害、もしくは症状の治療または感染症、障害、もしくは症状の治療に使用するための、（好ましくは、上記の組成物、医薬組成物または薬剤中の）上記の単離されたタンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質に関する。
本明細書で使用される「感染症」という用語は、ウイルス、細菌、原虫、カビまたは真菌によって引き起こされるあらゆる感染症を含む。いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、アレナウイルス科、アストロウイルス科、ビルナウイルス科、ブロモウイルス科、ブニヤウイルス科、カリシウイルス科、クロステロウイルス科、コモウイルス科、シストウイルス科、フラビウイルス科、フレキシウイルス科、ヘペウイルス属、レビウイルス科、ルテオウイルス科、モノネガウイルス目、モザイクウイルス属、ニドウイルス目、ノダウイルス科、オルトミクソウイルス科、ピコビルナウイルス属、ピコルナウイルス科、ポティウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、セキウイルス科、テヌイウイルス属、トガウイルス科、トンブスウイルス科、トティウイルス科、ティモウイルス科、ヘパドナウイルス科、ヘルペスウイルス科、パラミクソウイルス科またはパピローマウイルス科のウイルスからなる群から選択される１つ以上のウイルスによる感染を含む。ＲＮＡウイルスの関連する分類学的ファミリーとしては、これらに限定されないが、アストロウイルス科、ビルナウイルス科、ブロモウイルス科、カリシウイルス科、クロステロウイルス科、コモウイルス科、シストウイルス科、フラビウイルス科、フレキシウイルス科、ヘペウイルス属、レビウイルス科、ルテオウイルス科、モノネガウイルス目、モザイクウイルス属、ニドウイルス目、ノダウイルス科、オルトミクソウイルス科、ピコビルナウイルス属、ピコルナウイルス科、ポティウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、セキウイルス科、テヌイウイルス属、トガウイルス科、トンブスウイルス科、トティウイルス科、およびティモウイルス科のウイルスが挙げられる。いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、アデノウイルス、ライノウイルス、肝炎、免疫不全ウイルス、ポリオ、麻疹、エボラ、コクサッキー、ライノ、ウエストナイル、天然痘、脳炎、黄熱病、デング熱、インフルエンザ（ヒト、トリ、およびブタなど）、ラッサ熱、リンパ球性脈絡髄膜炎、フニン、マチュポ（ｍａｃｈｕｐｐｏ）、グアナリト、ハンタウイルス、リフトバレー熱、ラクロス、カリフォルニア脳炎、クリミア・コンゴ、マールブルグ、日本脳炎、キャサヌール森林病、ベネズエラウマ脳炎、東部ウマ脳炎、西部ウマ脳炎、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、パラインフルエンザ、呼吸器多核体、プンタトロ（Ｐｕｎｔａ Ｔｏｒｏ）、タカリベ（Ｔａｃａｒｉｂｅ）、パチンデウイルス（ｐａｃｈｉｎｄａｅ ｖｉｒｕｓｅｓ）、アデノウイルス、デング熱、インフルエンザＡおよびインフルエンザＢ（ヒト、トリ、およびブタなど）、フニン、麻疹、パラインフルエンザ、ピチンデ、プンタトロ、呼吸器多核体、ライノウイルス、リフトバレー熱、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、タカリベ、ベネズエラ馬脳炎、ウエストナイルウイルスと黄熱病ウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレーバレーウイルス、ポワサンウイルス、ロシオウイルス、跳躍病ウイルス、バンジウイルス、イルヘウスウイルス、ココベラウイルス、クンジンウイルス、アルフイ（Ａｌｆｕｙ）ウイルス、ウシ下痢症ウイルス、およびキャサヌール森林病からなる群から選択される１つ以上のウイルスによる感染を含む。本発明に従って治療することができる細菌感染症としては、これらに限定されないが、以下によって引き起こされる感染症が挙げられる：ブドウ球菌；レンサ球菌、例えば、化膿レンサ球菌；腸球菌；バチルス、例えば、炭疽菌、および乳酸菌；リステリア；コリネバクテリウムジフセリエ；ガードネレラ、例えば、Ｇ．バギナリス；ノカルジア；ストレプトマイセス；サーモアクチノマイセス・ブルガリス；トレポネーマ；カンピロバクター（Ｃａｍｐｌｙｏｂａｃｔｅｒ）、シュードモナス、例えば、緑膿菌；レジオネラ；ナイセリア、例えば、淋菌および髄膜炎菌；フラボバクテリウム、例えば、Ｆ．メニンゴセプチカムおよびＦ．オドラターン；ブルセラ；ボルデテラ、例えば、百日咳菌およびＢ．ブロンキセプチカ；エシェリキア属、例えば、大腸菌；クレブシエラ；エンテロバクター、セラチア、例えばＳ．マルセッセンスおよびＳ．リクファシエンス；エドワジエラ；プロテウス、例えばＰ．ミラビリスおよびＰ．ブルガリス；レンサ桿菌；リケッチア科、例えば、Ｒ．フィッケツフィ（ｆｉｃｋｅｔｔｓｆｉ）；クラミジア、例えば、Ｃ．シッタシおよびＣ．トラコマチス（ｔｒａｃｈｏｒｎａｔｉｓ）；マイコバクテリウム、例えば、結核菌、Ｍ．イントラセルラーレ、Ｍ．フォルイターン（ｆｏｌｌｕｉｔｕｒｎ）、Ｍ．レプラエ（ｌａｐｒａｅ）、Ｍ．アビウム、ウシ型結核菌、Ｍ．アフリカヌム、Ｍ．カンサシ、Ｍ．イントラセルラーレ、およびネズミらい菌；およびノカルジア。本発明に従って治療され得る原虫感染症としては、これらに限定されないが、リーシュマニア、コクジジオア、およびトリパノソーマによって引き起こされる感染症が挙げられる。完全な感染症リストは、Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ（ＣＤＣ）のＮａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ（ＮＣＩＤ）のＷｅｂサイト（ワールドワイドウェブ（ｗｗｗ）ｃｄｃ．ｇｏｖ／ｎｃｉｄｏｄ／ｄｉｓｅａｓｅｓ／）で確認できる。本リストは、参照により本明細書に組み込まれる。疾患のすべては、本発明による組成物を使用する治療の候補である。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、単独で使用される。
別の実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、１つのさらなる治療剤、例えば、化学療法剤、標的がん療法、放射線療法または免疫療法剤、または感染症を治療するために使用され得る剤と組み合わせて使用される。
このような投与は、同時、別個、または連続的であってよい。同時投与の場合、剤は、必要に応じて、１つの組成物または別個の組成物として投与し得る。さらなる治療剤は、典型的には、治療される障害に関連している。例示的治療剤としては、例えば、抗がん抗体、細胞毒性剤、化学療法剤、抗血管新生剤、抗がん免疫原、細胞周期制御／アポトーシス調節剤、ホルモン調節剤、ならびにコルチコイド、例えば糖質コルチコイドから選択された他の免疫抑制薬および／または抗炎症薬が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、化学療法剤と組み合わせて使用される。
「化学療法剤」という用語は、腫瘍の成長を阻害する際に有効な化合物を指す。化学療法剤の例としては、アルキル化剤、例えば、チオテパおよびシクロスホスファミド；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、およびウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）；エチレンイミンおよびメチルアメラミン、例えば、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホラミド（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈａｏｒａｒｎｉｄｅ）およびトリメチルオロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）；アセトゲニン（特にブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（ｃａｒｎｐｔｏｔｈｅｃｉｎ）（合成類似体トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）など）；ブリオスタチン；カリスタチン（ｃａｌｌｙｓｔａｔｉｎ）；ＣＣ－１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体など）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ－２１８９およびＣＢＩ－ＴＭＩなど）；エリュテロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）；パンクラチスタチン；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、コロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラルヌスチン（ｅｓｔｒａｒｎｕｓｔｉｎｅ）、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン（ｐｒｅｄｎｉｍｕｓ ｔｉｎｅ）、トロホスファミド、ウラシルマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチンなどのニトロスウレア（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａ）；エンジイン抗生物質などの抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシン（１１およびカリケアマイシン２１１、例えば、Ａｇｎｅｗ Ｃｈｅｍ Ｉｎｔｌ．編Ｅｎｇｌ．３３：１８３－１８６（１９９４）を参照のこと）；ダイネミシン、例えば、ダイネミシンＡ；エスペラミシン；ネオカルジノスタチン発色団および関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カニノマイシン（ｃａｎｎｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシンなど）、エピルビシン、エソルビシン、イダンルビシン（ｉｄａｎｒｂｉｃｉｎ）、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラルナイシン（ｎｏｇａｌａｒｎｙｃｉｎ）、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトムグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｇｒｉｎ）、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；抗代謝産物、例えば、メトトレキサートおよび５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類縁体、例えば、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５－ＦＵなど；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなど；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎；フロリン酸などの葉酸補充剤；アセグラトン；アルドホスファルニド（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｒｎｉｄｅ）グリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルフォルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；マイタンシンおよびアンサマイトシンなどのマイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲンンナニウム（ｓｐｉｒｏｇｅｎｎａｎｉｕｍ）；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’－トリクロロトリエチラルニン（２，２’，２”－ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｔｒｉｅｔｈｙｌａｒｎｉｎｅ）；トリコテセン（特にＴ－２毒素、ベラキュリンＡ、ロリジンＡおよびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロムトール（ｍｉｔｏｂｒｏｍｔｏｌ）；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（タキソール（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）およびドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）（タキソテール（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ－Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ、Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロン酸塩；ＣＰＴ－１ １；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；および上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が挙げられる。この定義にはまた、抗エストロゲンなどの腫瘍に対するホルモン作用を調節するかまたは阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害４（５）－イミダゾール、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびトレミフェン（フェアストン）；ならびに抗アンドロゲン、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリド、およびゴセレリン；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体も含まれる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、標的がん療法と組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、「標的がん療法」という用語は、がんの成長、進行、および拡大に関与する特定の分子（「分子標的」）を妨害することによってがんの成長および拡大を遮断する薬物または他の物質である。標的がん療法は、「分子標的薬」、「分子標的療法」、「精密医療」、または類似の名前で呼ばれることもある。いくつかの実施形態では、標的療法は、対象にチロシンキナーゼ阻害剤を投与することにより構成される。「チロシンキナーゼ阻害剤」という用語は、受容体および／または非受容体チロシンキナーゼの選択的または非選択的阻害剤として作用する様々な治療剤または治療薬のいずれかを指す。チロシンキナーゼ阻害剤および関連化合物は、当技術分野において周知であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許公開第２００７／０２５４２９５号明細書に記載されている。チロシンキナーゼ阻害剤に関連する化合物が、チロシンキナーゼ阻害剤の効果を再現すること、例えば、関連する化合物が、チロシンキナーゼシグナル伝達経路の異なるメンバーに作用して、そのチロシンキナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤と同じ効果を生み出すことは、当業者であれば認識するであろう。本発明の実施形態の方法での使用に好適であるチロシンキナーゼ阻害剤および関連化合物の例としては、これらに限定されないが、ダサチニブ（ＢＭＳ－３５４８２５）、ＰＰ２、ＢＥＺ２３５、サラカチニブ、ゲフィチニブ（イレッサ）、スニチニブ（スーテント；ＳＵ１１２４８）、エルロチニブ（タルセバ；ＯＳＩ－１７７４）、ラパチニブ（ＧＷ５７２０１６；ＧＷ２０１６）、カネルチニブ（ＣＩ １０３３）、セマキシニブ（ＳＵ５４１６）、ヴァタラニブ（ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４）、ソラフェニブ（ＢＡＹ ４３－９００６）、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ；グリベック；ＳＴＩ５７１）、レフルノミド（ＳＵ１０１）、バンデタニブ（ザクティマ；ＺＤ６４７４）、ＭＫ－２２０６（８－［４－アミノシクロブチル）フェニル］－９－フェニル－１，２，４－トリアゾロ［３，４－ｆ］［１，６］ナフチリジン－３（２Ｈ）－オン塩酸塩）それらの誘導体、それらの類似体、およびそれらの組み合わせが挙げられる。本発明での使用に好適である追加のチロシンキナーゼ阻害剤および関連化合物は、例えば、米国特許公開第２００７／０２５４２９５号明細書、同第５，６１８，８２９号明細書、同第５，６３９，７５７号明細書、同第５，７２８，８６８号明細書、同第５，８０４，３９６号明細書、同第６，１００，２５４号明細書、同第６，１２７，３７４号明細書、同第６，２４５，７５９号明細書、同第６，３０６，８７４号明細書、同第６，３１３，１３８号明細書、同第６，３１６，４４４号明細書、同第６，３２９，３８０号明細書、同第６，３４４，４５９号明細書、同第６，４２０，３８２号明細書、同第６，４７９，５１２号明細書、同第６，４９８，１６５号明細書、同第６，５４４，９８８号明細書、同第６，５６２，８１８号明細書、同第６，５８６，４２３号明細書、同第６，５８６，４２４号明細書、同第６，７４０，６６５号明細書、同第６，７９４，３９３号明細書、同第６，８７５，７６７号明細書、同第６，９２７，２９３号明細書、および６，９５８，３４０号明細書に記載されており、これらはすべて、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、経口投与され、少なくとも１つの第Ｉ相臨床試験、より好ましくは少なくとも１つの第ＩＩ相臨床試験、さらにより好ましくは少なくとも１つの第ＩＩＩ相臨床試験、最も好ましくは、少なくとも１つの血液学的または腫瘍学的適応症についてＦＤＡによって承認されているものの対象となった小分子キナーゼ阻害剤である。そのような阻害剤の例としては、これらに限定されないが、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、カネルチニブ、ＢＭＳ－５９９６２６（ＡＣ－４８０）、ネラチニブ、ＫＲＮ－６３３、ＣＥＰ－１１９８１、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ＡＺＭ－４７５２７１、ＣＰ－７２４７１４、ＴＡＫ－１６５、スニチニブ、ヴァタラニブ、ＣＰ－５４７６３２、バンデタニブ、ボスチニブ、レスタウルチニブ、タンドゥチニブ、ミドスタウリン、エンザスタウリン、ＡＥＥ－７８８、パゾパニブ、アキシチニブ、モタセニブ（ｍｏｔａｓｅｎｉｂ）、ＯＳＩ－９３０、セジラニブ、ＫＲＮ－９５１、ドビチニブ、セリシクリブ、ＳＮＳ－０３２、ＰＤ－０３３２９９１、ＭＫＣ－Ｉ（Ｒｏ－３１７４５３；Ｒ－４４０）、ソラフェニブ、ＡＢＴ－８６９、ブリバニブ（ＢＭＳ－５８２６６４）、ＳＵ－１４８１３、テラチニブ、ＳＵ－６６６８、（ＴＳＵ－６８）、Ｌ－２１６４９、ＭＬＮ－８０５４、ＡＥＷ－５４１、およびＰＤ－０３２５９０１が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、放射線療法と組み合わせて使用される。
「放射線療法」という用語は、患者への放射線または関連する放射性医薬品を投与することを含み得る。放射線源は、治療される患者の外部または内部のいずれかであり得る（放射線治療は、例えば、外照射放射線療法（ＥＢＲＴ）または小線源治療（ＢＴ）の形態であり得る）。そのような方法の実施に使用され得る放射性元素としては、例えば、ラジウム、セシウム－１３７、イリジウム－１９２、アメリシウム－２４１、金－１９８、コバルト－５７、銅－６７、テクネチウム－９９、ヨウ素－１２３、ヨウ素－１３１、およびインジウム－１１１が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、免疫療法剤または免疫療法と組み合わせて使用される。
本明細書で使用される「免疫療法剤」または「免疫療法」という用語は、がん細胞に対する身体の免疫応答を間接的または直接的に増強、刺激または増加させる、および／または他の抗がん療法の副作用を減少させる化合物、組成物または治療を指す。したがって、免疫療法は、がん細胞に対する免疫系の応答を直接的または間接的に刺激するかまたは増強する、および／または他の抗がん剤によって引き起こされた可能性のある副作用を軽減する療法である。免疫療法はまた、当技術分野では、免疫療法、生物学的療法、生物学的応答修飾剤療法、および生物療法とも呼ばれる。当技術分野において公知である一般的な免疫療法剤または免疫療法の例としては、これらに限定されないが、サイトカイン、チェックポイント阻害剤、チェックポイントアゴニスト（Ｔ細胞アゴニストとも呼ばれる）、モノクローナル抗体、抗体ドメイン、抗体断片、二重特異性抗体などの抗体、防止用および治療用ワクチン、腫瘍溶解性ウイルス、免疫細胞（Ｔ細胞、ＮＫ、細胞、樹状細胞、Ｂ細胞…）の養子移入が挙げられる。
がん免疫療法の基礎となる中心的な前提の１つは、がん細胞内で選択的または豊富に発現するかまたは変異する抗原が存在することであり、したがって、がん細胞の特定の認識およびその後の破壊が可能になる。このような抗原は、一般に腫瘍特異的抗原と呼ばれる。がん免疫療法の基礎となるもう１つの中心的な前提は、腫瘍内にリンパ球、すなわち腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、特に上記の腫瘍特異的抗原を認識することを介して、腫瘍細胞を標的にして死滅させることができるエフェクターＴＩＬが存在することである。
免疫療法剤または治療法は受動的であってもよい。受動免疫療法剤は、モノクローナル抗体などの免疫細胞因子の投与により即時作用をもたらす剤である。受動免疫療法の結果は、一時的に剤の投与に関連しているため、長期の応答には継続的な投与が必要になり得る）。別の実施形態では、免疫療法剤または治療法は活性である。活性免疫療法剤は、免疫記憶を誘導することによって持続的で耐久性のある応答を生み出す剤である。これは、通常の免疫応答に最もよく類似している。しかし、健康な集団において免疫系機能が変化するのと同じように、能動免疫療法剤に対する応答のレベルは、個々の要因に依存する）。
活性免疫療法剤としては、非特異的活性剤（すなわち、一般的に、ヒトの身体ががん細胞の成長および／または拡散と戦う際により有効になるように免疫系をブーストする剤）および特異的活性剤（すなわち、がん細胞によって発現される特定の抗原に焦点を合わせた細胞性および抗体免疫応答の生成を誘導する剤）の両方が含まれる。非特異的免疫療法剤は、がん治療の主な治療法として単独で、また主な治療法に加えて、使用されている。後者の場合、非特異的免疫療法剤は、他の療法（例えば、がんワクチン）の有効性を高めるためのアジュバントとして機能する。また、この後者の状況において、非特異的免疫療法剤は、他の療法の副作用、例えば、特定の化学療法剤によって誘導される骨髄抑制を低減させるように機能し得る。非特異的免疫療法剤は、主要な免疫系細胞に作用し、二次応答、例えば、サイトカインおよび免疫グロブリンの産生増加などを引き起こし得る。あるいは、剤自体がサイトカインを含むことができる。非特異的免疫療法剤は、一般にサイトカインまたは非サイトカインアジュバントとして分類される。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、サイトカイン療法と組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、「サイトカイン療法」は、対象への少なくとも１つのサイトカインを投与することとして定義される。
複数のサイトカインは、免疫系を強化するように設計された一般的な非特異的免疫療法、または他の療法と共に提供されるアジュバントのいずれかとして、がんの治療における適用が見出されている。好適なサイトカインとしては、これらに限定されないが、インターフェロン、インターロイキン、およびコロニー刺激因子が挙げられる。本発明によって企図されるインターフェロン（ＩＦＮ）としては、一般的なタイプのＩＦＮ、ＩＦＮ－アルファ（ＩＦＮ－α）、ＩＦＮ－ベータ（ＩＦＮ－β）およびＩＦＮ－ガンマ（ＩＦＮ－γ）が挙げられる。ＩＦＮは、例えば、がん細胞の成長を遅らせること、より正常な挙動を有する細胞への発達を促進すること、かつ／または抗原の産生を増加させることにより、がん細胞に直接作用することができ、したがって、免疫系ががん細胞をより容易に認識し、破壊するようになる。ＩＦＮはまた、例えば、血管新生を遅れさせること、免疫系を強化すること、かつ／またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔ細胞、およびマクロファージを刺激することにより、がん細胞に間接的に作用し得る。組換えＩＦＮ－αは、Ｒｏｆｅｒｏｎ（Ｒｏｃｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）およびＩｎｔｒｏｎ Ａ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）として市販されている。本発明によって企図されるインターロイキンとしては、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－１１およびＩＬ－１２が挙げられる。市販の組換えインターロイキンの例としては、プロロイキン（Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ）（登録商標）（ＩＬ－２；Ｃｈｉｒｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）およびノイメガ（Ｎｅｕｍｅｇａ）（登録商標）（ＩＬ－１２；Ｗｙｅｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）が挙げられる。Ｚｙｍｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．（Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈ．）は現在、ＩＬ－２１の組換え型を試験しており、これも本発明の組み合わせでの使用が企図されている。本発明によって企図されるコロニー刺激因子（ＣＳＦ）としては、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦまたはフィルグラスチム）、顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦまたはサルグラモスティム）およびエリスロポエチン（エポエチンアルファ、ダルベポエチン）が挙げられる。１つ以上の成長因子による治療は、従来の化学療法を受けている対象において、新しい血球の生成を刺激する補助となり得る。したがって、ＣＳＦによる治療は、化学療法に関連する副作用を軽減するのに有用であり得、より高用量の化学療法剤の使用が可能になり得る。様々な組換えコロニー刺激因子、例えば、ニューポゲン（Ｎｅｕｐｏｇｅｎ）（登録商標）（Ｇ－ＣＳＦ；Ａｍｇｅｎ）、ニューラスタ（Ｎｅｕｌａｓｔａ）（ペルフィルグラスチム；Ａｍｇｅｎ）、ロイキン（Ｌｅｕｋｉｎｅ）（ＧＭ－ＣＳＦ；Ｂｅｒｌｅｘ）、プロクリット（Ｐｒｏｃｒｉｔ）（エリスロポエチン；Ｏｒｔｈｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、エポゲン（Ｅｐｏｇｅｎ）（エリスロポエチン；Ａｍｇｅｎ）、アラネスプ（Ａｒｎｅｓｐ）（エリスロポエチン）が市販されている。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、サイトカイン模倣体、例えば、ＩＬ－２模倣体と組み合わせて使用される。一実施形態では、ＩＬ－２模倣体は、ＣＤ２５に結合できない。一実施形態では、ＩＬ－２模倣体は、α、βおよびγサブユニットを含むＩＬ－２Ｒと比較して、βおよびγサブユニットを含むＩＬ－２Ｒに優先的に結合する。使用され得るＩＬ－２模倣体の非限定的な例は、ＮＫＴＲ－２１４（Ｎｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、チェックポイント阻害剤療法と組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、「チェックポイント阻害剤療法」は、対象への少なくとも１つのチェックポイント阻害剤の投与として定義される。
チェックポイント阻害剤（ＣＰＩ、免疫チェックポイント阻害剤またはＩＣＩとも呼ばれ得る）分子、多くの場合抗体は、Ｔ細胞に発現する阻害性受容体（ＩＲ）とそのリガンドと間の相互作用を遮断する。がん治療として、チェックポイント阻害剤療法は、腫瘍細胞によって発現されるリガンドによるＴ細胞上に発現する阻害性受容体の活性化を防止することを目的としている。このように、チェックポイント阻害剤療法は、腫瘍内に存在するＴ細胞、すなわち腫瘍浸潤Ｔ細胞の阻害を防止することを目的とし、したがって、腫瘍細胞に対する対象の免疫応答を増強することを目的としている。
チェックポイント阻害剤の例としては、これらに限定されないが、細胞表面受容体ＰＤ－１（プログラム細胞死タンパク質１）の阻害剤（ＣＤ２７９（クラスター分化２７９）としても公知である）；リガンドＰＤ－Ｌ１（プログラムデスリガンド１）の阻害剤（ＣＤ２７４（分化のクラスター２７４）またはＢ７－Ｈ１（Ｂ７ホモログ１）としても公知である）；細胞表面受容体ＣＴＬＡ４またはＣＴＬＡ－４（細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４）の阻害剤（ＣＤ１５２（分化のクラスター１５２）としても公知である）；ＬＡＧ－３（リンパ球活性化遺伝子３）の阻害剤（ＣＤ２２３（クラスター分化２２３）としても公知である）；ＴＩＭ－３（Ｔ細胞免疫グロブリンおよびムチンドメイン含有－３）の阻害剤（ＨＡＶＣＲ２（Ａ型肝炎ウイルス細胞受容体２）またはＣＤ３６６（クラスター分化３６６）としても公知である）；ＴＩＧＩＴ（ＩｇおよびＩＴＩＭドメインを有するＴ細胞免疫受容体）の阻害剤（ＶＳＩＧ９（Ｖセットおよび免疫グロブリンドメイン含有タンパク質９）またはＶＳＴＭ３（Ｖセットおよび膜貫通ドメイン含有タンパク質３）としても公知である）；ＢＴＬＡ（ＢおよびＴリンパ球アテニュエータ）の阻害剤（ＣＤ２７２（クラスター分化２７２）としても公知である）；ＣＥＡＣＡＭ－１（がん胎児性抗原関連細胞接着分子１）（ＣＤ６６ａ（クラスター分化６６ａ）としても公知である）の阻害剤が挙げられる。
一実施形態では、少なくとも１つのチェックポイント阻害剤は、ＰＤ－１の阻害剤、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤、ＣＴＬＡ－４の阻害剤、およびそれらの任意の混合物を含むかまたはそれらからなる群から選択される。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、チェックポイントアゴニスト療法と組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、「チェックポイントアゴニスト療法」は、対象への少なくとも１つのＴチェックポイントアゴニストの投与として定義される。
チェックポイントアゴニストは、Ｔ細胞などの免疫細胞に発現する刺激性受容体（共刺激性受容体）を活性化することによって作用する。本明細書で使用される場合、「刺激性受容体」という用語は、活性化時に刺激性シグナルを誘導し、したがって免疫応答の増強をもたらす受容体を指す。がん治療として、チェックポイントアゴニスト療法は、腫瘍内に存在する免疫細胞に発現する刺激性受容体を活性化することを目的としている。特に、Ｔ細胞アゴニスト療法は、腫瘍内に存在するＴ細胞、すなわち腫瘍浸潤Ｔ細胞の活性化を増強することを目的とし、したがって、腫瘍細胞に対する対象の免疫応答を増強することを目的としている。現在、チェックポイントアゴニスト療法の潜在的な複数の標的が特定されている。
チェックポイントアゴニストの例としては、これらに限定されないが、ＣＤ１３７（クラスター分化１３７）のアゴニスト（４－１ＢＢまたはＴＮＦＲＳ９（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー、メンバー９）としても公知である）；ＯＸ４０受容体のアゴニスト（ＣＤ１３４（クラスター分化１３４）またはＴＮＦＲＳＦ４（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー、メンバー４）としても公知である）；ＧＩＴＲ（糖質コルチコイド誘導性ＴＮＦ受容体ファミリー関連タンパク質）のアゴニスト；ＩＣＯＳ（誘導性共刺激剤）のアゴニスト；ＣＤ２７－ＣＤ７０（クラスター分化２７－クラスター分化７０）のアゴニスト；およびＣＤ４０（クラスター分化４０）のアゴニストが挙げられる。
一実施形態では、少なくとも１つのチェックポイントアゴニストは、ＣＤ１３７のアゴニスト、ＯＸ４０のアゴニスト、ＧＩＴＲのアゴニスト、ＩＣＯＳのアゴニスト、ＣＤ２７～ＣＤ７０のアゴニスト、ＣＤ４０のアゴニストおよびそれらの任意の混合物を含むかまたはそれらからなる群から選択される。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、免疫受容体または共刺激分子に特異的な二次抗体と組み合わせて使用される。
免疫受容体に特異的な抗体の例としては、これらに限定されないが、抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば、イピリムマブ）、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤＬ１抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体、抗Ｂ７Ｈ４抗体、抗Ｂ７Ｈ６抗体、抗４－１ＢＢ抗体および抗ＯＸ４０抗体が挙げられる。免疫受容体に特異的な抗体の他の例は、抗ＴＩＧＩＴ抗体である。
別の実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性であり、免疫受容体または共刺激分子にさらに結合することができる。
免疫受容体の例としては、これらに限定されないが、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４、Ｂ７Ｈ６、４－１ＢＢ、ＴＩＧＩＴおよびＯＸ４０が挙げられる。
共刺激分子の例としては、これらに限定されないが、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４、Ｂ７Ｈ６、４－１ＢＢおよびＯＸ４０が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、二次抗体が結合する抗原を発現する細胞の死を、ＡＤＣＣを介して誘導する二次抗体と組み合わせて使用される。一実施形態では、（例えば、ＩｇＧ１またはＩｇＧ３アイソタイプの）二次抗体は、抗体が結合する細胞に対してＡＤＣＣを誘導する。ＮＫ細胞は、ＡＤＣＣの誘導において重要な役割を有しており、ＮＫ細胞の反応性の増加は、このような二次抗体の使用により、標的細胞に向けることができる。一実施形態では、二次抗体は、細胞表面抗原、例えば、膜抗原に特異的である。いくつかの実施形態では、二次抗体は、ＣＤ２０、ＣＤ５２、ＥｒｂＢ２（またはＨＥＲ２／Ｎｅｕ）、ＣＤ３３、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＭＵＣ－１、ＣＥＡ、ＫＤＲ、αＶβ３など、特にリンパ腫抗原（例えば、ＣＤ２０）などの上記の腫瘍抗原（例えば、腫瘍細胞によって特異的に発現する分子）に特異的である。したがって、本発明はまた、腫瘍抗原（複数可）に対して向けられるモノクローナル抗体の抗腫瘍効果を増強するための方法を提供する。
本発明の方法において、１つ以上の腫瘍抗原に対して向けられる抗体、および本発明の抗体の順次投与によって、ＡＤＣＣ機能は、特異的に増強され、次いで、標的細胞の死滅を増強する。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、ＮＫ細胞活性化受容体の天然リガンドまたはＮＫ細胞活性化受容体に結合して活性化する抗体と組み合わせて使用される。
一実施形態では、剤は、標的細胞（例えば、感染細胞または腫瘍細胞）の表面上のＮＫ細胞活性化受容体の天然リガンドの存在を増加させる剤である。本明細書で使用される場合、「活性化ＮＫ受容体」という用語は、ＮＫ細胞の表面上の任意の分子を指し、これは、刺激されたときに、サイトカイン（例えば、ＩＦＮ－γおよびＴＮＦ－α）産生などＮＫ活性に関連するものとして当技術分野において公知である任意の特性または活性の測定可能な増加、細胞内遊離カルシウムレベル、再配向された死滅アッセイで細胞を標的化する能力、またはＮＫ細胞の増殖を刺激する能力の増加を引き起こす。「活性化ＮＫ受容体」の例としては、これらに限定されないが、ＫＩＲタンパク質（例えば、ＫＩＲ２ＤＳタンパク質）、ＣＤ１６０－ＴＭ、ＮＫＧ２Ｄ、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－１２Ｒ、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－１８ＲおよびＩＬ－２１Ｒの活性化形態が挙げられる。受容体を活性化する際にアゴニストとして作用するリガンドの例としては、例えば、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１ポリペプチドが挙げられる。いくつかの実施形態では、二次抗体は、ＣＤ１３７に特異的である。本明細書で使用される場合、「ＣＤ１３７」という用語は、当技術分野においてその一般的な意味を有し、Ｌｙ６３、ＩＬＡまたは４－１ＢＢとも呼ばれ得る。ＣＤ１３７は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体ファミリーのメンバーである。この受容体ファミリーのメンバーおよびそれらの構造的に関連するリガンドは、多種多様な生理学的プロセスの重要な調節因子であり、免疫応答の調節において重要な役割を果たしている。ＣＤ１３７は、活性化されたＮＫ細胞、ＴおよびＢリンパ球、ならびに単球／マクロファージによって発現する。この遺伝子は、細胞外ドメイン（この受容体ファミリーの特徴）に３つのシステインリッチモチーフ、膜貫通領域、および潜在的なリン酸化部位を含む短いＮ末端細胞質部分を有する２５５アミノ酸のタンパク質をコードする。一次細胞での発現は、厳密に活性化依存性である。受容体のリガンドはＴＮＦＳＦ９である。ヒトＣＤ１３７は、そのリガンドにのみ結合することが報告されている。アゴニストとしては、ネイティブリガンド（ＴＮＦＳＦ９）、アプタマー（ＭｃＮａｍａｒａら、（２００８）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１ １８：３７６－３８６を参照のこと）、および抗体が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、治療用ワクチンまたは治療ワクチンと組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、治療用ワクチンは、少なくとも１つの腫瘍特異的抗原（例えば、合成長ペプチドまたはＳＬＰ）もしくは腫瘍特異的抗原をコードする核酸の投与；腫瘍細胞に選択的に侵入するかつ／もしくは複製する組換えウイルスベクターの投与；腫瘍細胞の投与；ならびに／または腫瘍特異的抗原を提示し、これらの抗原に対する免疫応答を誘発するように操作された免疫細胞（例えば、樹状細胞）の投与として定義される。
がん治療として、治療用ワクチンは、腫瘍細胞に対する対象の免疫応答を増強することを目的としている。
腫瘍細胞に対する対象の免疫応答を増強することを目的とした治療用ワクチンの例としては、これらに限定されるものではないが、アデノウイルス（例えば、腫瘍溶解性アデノウイルス）、ワクシニアウイルス（例えば、修飾ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ））、アルファウイルス（例えば、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ））、麻疹ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、およびコクサッキーウイルスなどのウイルスベクターベースの治療用ワクチン；合成長鎖ペプチド（ＳＬＰ）ワクチン；ＲＮＡベースワクチン、および樹状細胞ワクチンが挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、腫瘍溶解性ウイルス療法と組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、腫瘍溶解性ウイルス療法は、対象への少なくとも１つの腫瘍溶解性ウイルスの投与として定義される。
腫瘍溶解性ウイルスは、正常な非がん細胞よりもがん細胞に優先的に感染して死滅させるウイルスとして定義されている。がん治療として、腫瘍溶解性ウイルス療法は、がん細胞を死滅させる、および／またはがん細胞に対する免疫応答を誘発するかまたは増強することを目的としている。
腫瘍溶解性ウイルスの例としては、これらに限定されないが、タリモジェンラヘルパレプベック（またはＴ－ＶＥＣ）またはＨＳＶ－１７１６などの修飾型単純ヘルペス１型ウイルス；Ａｄ５－ＤＮＸ－２４０１などの修飾型アデノウイルス；ＭＶ－ＮＩＳなどの修飾型麻疹ウイルス；ワクシニアウイルスＴＧ６００２などの修飾型ワクシニアウイルス（ＶＶ）；およびＰＶＳ－ＲＩＰＯなどの修飾型ポリオウイルスが挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、養子細胞療法とも呼ばれる細胞の養子移入（両方ともＡＣＴとも呼ばれる）、例えば、それぞれＴ細胞またはＮＫ細胞の養子移入（養子Ｔ細胞療法または養子ＮＫ細胞療法とも呼ばれる）などと組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、「細胞の養子移入」または「養子細胞療法」は、対象への免疫細胞の移入、例えば、注入または再注入として定義される。がん治療として、対象への免疫細胞の養子移入は、がん細胞に対する対象の免疫応答を増強することを目的としている。
細胞療法のために使用され得る免疫細胞の例としては、これに限定されないが、細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞Ｔ細胞）、エフェクターＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞）、アルファベータ（αβ）Ｔ細胞、およびガンマデルタ（γδ）Ｔ細胞、抗体発現Ｂ細胞または他の抗体産生または提示細胞および樹状細胞が挙げられる。
一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、抗原特異的細胞である。一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、抗原特異的免疫細胞であり、抗原は、がん細胞によって特異的および／または豊富に発現される。一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、腫瘍特異的免疫細胞であり、換言すると、上記のとおり移入された免疫細胞は、がん細胞または腫瘍細胞によって特異的および／または豊富に発現する抗原を介して、がん細胞または腫瘍細胞を特異的に認識する。一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、腫瘍特異的エフェクターＴ細胞である。一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、腫瘍特異的ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞、特に腫瘍特異的細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞である。一実施形態では、移入された細胞は、腫瘍浸潤細胞（ＴＩＬ）である。一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、腫瘍特異的細胞傷害性細胞である。一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、腫瘍特異的ＮＫ細胞である。
腫瘍特異的抗原、すなわち、がん細胞によって特異的および／または豊富に発現する抗原の例としては、これらに限定されないが、ネオアンチゲン（新しい抗原または変異抗原とも呼ばれる）、９Ｄ７、ＡＲＴ４、β－カテニン、ＢＩＮＧ－４、Ｂｃｒ－ａｂｌ、ＢＲＣＡ１／２、カルシウム活性化クロライドチャネル２、ＣＤＫ４、ＣＥＡ（癌胎児性抗原）、ＣＭＬ６６、サイクリンＢ１、ＣｙｐＢ、ＥＢＶ（エプスタインバーウイルス）関連抗原（ＬＭＰ－１、ＬＭＰ－２、ＥＢＮＡ１およびＢＡＲＦ１など）、Ｅｐ－ＣＡＭ、ＥｐｈＡ３、フィブロネクチン、Ｇｐ１００／ｐｍｅｌ１７、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）Ｅ６、ＨＰＶ Ｅ７、ｈＴＥＲＴ、ＩＤＨ１、ＩＤＨ２、未成熟ラミニン受容体、ＭＣ１Ｒ、メラン－Ａ／ＭＡＲＴ－１、ＭＡＲＴ－２、メソテリン、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＭ－１、ＭＵＭ－２、ＭＵＭ－３、ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＬＡＧＥ－２、ｐ５３、ＰＲＡＭＥ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ＰＳＭＡ（前立腺特異的膜抗原）、Ｒａｓ、ＳＡＰ－１、ＳＡＲＴ－１、ＳＡＲＴ－２、ＳＡＲＴ－３、ＳＳＸ－２、サバイビン、ＴＡＧ－７２、テロメラーゼ、ＴＧＦ－βＲＩＩ、ＴＲＰ－１／－２、チロシナーゼ、ＷＴ１、ＢＡＧＥファミリーの抗原、ＣＡＧＥファミリーの抗原、ＧＡＧＥファミリーの抗原、ＭＡＧＥファミリーの抗原、ＳＡＧＥファミリーの抗原、およびＸＡＧＥファミリーの抗原が挙げられる。
本明細書で使用される場合、ネオアンチゲン（新しい抗原または変異抗原とも呼ばれる）は、腫瘍によって獲得された体細胞変異または遺伝子再配列によって影響を受けるタンパク質に由来する抗原に対応する。ネオアンチゲンは、各々の個々の対象に特異的であり得、したがって、個別化された免疫療法を開発するための標的を提供する可能性がある。ネオアンチゲンの例としては、これらに限定されないが、例えば、ＣＤＫ４のＲ２４Ｃ変異体、ＣＤＫ４のＲ２４Ｌ変異体、コドン１２で変異したＫＲＡＳ、変異したｐ５３、ＢＲＡＦのＶ５９９Ｅ変異体、およびＩＤＨ１のＲ１３２Ｈ変異体が挙げられる。
一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、ＣＴＡのクラス（がん／精巣抗原、ＭＡＧＥ型抗原としても知られる）、ネオアンチゲンのクラス、およびウイルス抗原のクラスを含むかまたはこれらからなる群から選択される腫瘍抗原に対して特異的である。
本明細書で使用される場合、ＣＴＡのクラスは、腫瘍細胞で発現されるが、雄生殖細胞系列細胞を除いて正常組織では発現されない遺伝子によってコードされる抗原に相当する。ＣＴＡの例としては、これらに限定されないが、ＭＡＧＥ－Ａ１、ＭＡＧＥ－Ａ３、ＭＡＧＥ－Ａ４、ＭＡＧＥ－Ｃ２、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥおよびＳＳＸ－２が挙げられる。
本明細書で使用される場合、ウイルス抗原のクラスは、ウイルス発がん性タンパク質に由来する抗原に対応する。ウイルス抗原の例としては、これらに限定されないが、Ｅ６およびＥ７などのＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）関連抗原、ならびにＬＭＰ－１、ＬＭＰ－２、ＥＢＮＡ１およびＢＡＲＦ１などのＥＢＶ（エプスタインバーウイルス）関連抗原が挙げられる。
一実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、自己免疫細胞、特に自己Ｔ細胞である。別の実施形態では、上記のとおり移入された免疫細胞は、同種（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ）（または同種（ａｌｌｏｇｅｎｏｕｓ））の免疫細胞、特に同種ＮＫ細胞である。
例えば、自己Ｔ細胞は、対象から単離された抗原特異的Ｔ細胞の拡大によって、または遺伝子操作による対象のＴ細胞の再配向によって、ｅｘ ｖｉｖｏで生成することができる。
一実施形態では、注入される免疫細胞は、対象に注入される前にｅｘ ｖｉｖｏで修飾される。
対象からＴ細胞、特に抗原特異的Ｔ細胞、例えば腫瘍特異的Ｔ細胞を単離する方法は、当技術分野において周知である（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ＆Ｒｅｓｔｉｆｏ，２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４８，６２－６８；Ｐｒｉｃｋｅｔｔら、２０１６，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ ４，６６９－６７８；またはＨｉｎｒｉｃｈｓ＆Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，２０１４，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ ２５７，５６－７１を参照のこと）。Ｅｘ ｖｉｖｏでＴ細胞を拡大させる方法は、当技術分野において周知である（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ＆Ｒｅｓｔｉｆｏ，２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４８，６２－６８；Ｐｒｉｃｋｅｔｔら、２０１６，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ ４，６６９－６７８；またはＨｉｎｒｉｃｈｓ＆Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，２０１４，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ ２５７，５６－７１を参照のこと）。注入前のコンディショニングレジメンを含む、対象におけるＴ細胞の注入のためのプロトコルは、当技術分野において周知である（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ＆Ｒｅｓｔｉｆｏ，２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４８，６２－６８；Ｐｒｉｃｋｅｔｔら、２０１６，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ ４，６６９－６７８；またはＨｉｎｒｉｃｈｓ＆Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，２０１４，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ ２５７，５６－７１を参照のこと）。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、ＣＡＲ免疫細胞療法、特にＣＡＲ Ｔ細胞療法またはＣＡＲ ＮＫ細胞療法と組み合わせて使用される。
本明細書で使用される場合、ＣＡＲ免疫細胞療法は、移入された細胞が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するように遺伝子操作されたＴ細胞またはＮＫ細胞などの上記の免疫細胞である養子細胞療法である。がん治療として、対象へのＣＡＲ免疫細胞の養子移入は、がん細胞に対する対象の免疫応答を増強することを目的としている。
ＣＡＲは、単一の融合分子または複数の分子の１つ以上のシグナル伝達ドメインと結合している標的化部分からなる合成受容体である。一般に、ＣＡＲの結合部分は、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）の抗原結合ドメインからなり、柔軟なリンカーによって結合されたモノクローナル抗体の軽鎖可変断片を含む。受容体またはリガンドドメインに基づく結合部分もまた首尾よく使用されている。第１世代のＣＡＲのシグナル伝達ドメインは、通常、ＣＤ３ゼータの細胞質領域またはＦｃ受容体ガンマ鎖に由来する。第１世代のＣＡＲは、Ｔ細胞の細胞傷害性を首尾よく再配向することが示されているが、ｉｎ ｖｉｖｏでの長期的な拡大および抗腫瘍活性をもたらすことはできなかった。そのため、ＣＤ２８、ＯＸ－４０（ＣＤ１３４）、および４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）などの共刺激分子からのシグナル伝達ドメインが単独（第２世代）または組み合わせ（第３世代）で添加され、ＣＡＲ修飾Ｔ細胞の生存率が増長し、増殖が増加している。
したがって、一実施形態では、上記のとおり移入されたＴ細胞は、ＣＡＲ Ｔ細胞である。ＣＡＲの発現により、Ｔ細胞は、選択された抗原、例えば、がん細胞の表面で発現する抗原などに対して再配向される。一実施形態では、移入されたＣＡＲ Ｔ細胞は、腫瘍特異的抗原を認識する。
別の実施形態では、上記のとおり移入されたＮＫ細胞は、ＣＡＲ ＮＫ細胞である。ＣＡＲの発現により、ＮＫ細胞は、選択された抗原、例えば、がん細胞の表面で発現する抗原などに対して再配向される。一実施形態では、移入されたＣＡＲ ＮＫ細胞は、腫瘍特異的抗原を認識する。
腫瘍特異的抗原の例は、上記に記載している。
一実施形態では、移入されたＣＡＲ Ｔ細胞またはＣＡＲ ＮＫ細胞は、ＥＧＦＲ、特にＥＧＦＲｖＩＩＩ、メソテリン、ＰＳＭＡ、ＰＳＡ、ＣＤ４７、ＣＤ７０、ＣＤ１３３、ＣＤ１７１、ＣＥＡ、ＦＡＰ、ＧＤ２、ＨＥＲ２、ＩＬ－１３Ｒα、αｖβ６インテグリン、ＲＯＲ１、ＭＵＣ１、ＧＰＣ３、ＥｐｈＡ２、ＣＤ１９、ＣＤ２１、およびＣＤ２０を含むかまたはそれらからなる群から選択される腫瘍特異的抗原を認識する。
一実施形態では、上記のＣＡＲ免疫細胞は、自己ＣＡＲ免疫細胞、特に自己ＣＡＲ Ｔ細胞である。別の実施形態では、上記のＣＡＲ免疫細胞は、同種（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ）（または同種（ａｌｌｏｇｅｎｏｕｓ））ＣＡＲ免疫細胞、特に同種ＣＡＲ ＮＫ細胞である。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、抗生物質と組み合わせて使用される。抗生物質の例としては、これらに限定されないが、ペニシリン（例えば、ペニシリン、アモキシシリン）、テトラサイクリン（例えば、ドキシサイクリエント（ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｅｎｔ）、テトラサイクリン、ミノサイクリン）、セファロスポリン（例えば、セフロキシム、セフトリアキソン、セフジニル）、キノロン（例えば、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、モキシフロキサシン）、リンコマイシン（例えば、クリンダマイシン、リンコマイシン）、マクロライド（例えば、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン）、スルホンアミド（例えば、スルファメトキサゾール・トリメトプリム、スルファサラジン、スルフィソキサゾール）、糖ペプチド（例えば、ダルババンシン、オリタバンシン、テラバンシン、バンコマイシン）、アミノグリコシド（例えば、ゲンタマイシン、トブラマイシン、アミカシン）およびカルバペネム（例えば、イミペネム、メロペネム、ドリペネム、エルタペネム）が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、抗ウイルス薬と組み合わせて使用される。抗ウイルス薬の例としては、これらに限定されないが、アバカビル、アシクロビル、アデホビル、アマンタジン、アンプレナビル、アンプリジェン、アルビドール、アタザナビル、アトリプラ、バラビル（ｂａｌａｖｉｒ）、シドフォビル、コンビビル、ドルテグラビル、ダルナビル、デラビルジン、ジダノシン、ドコサノール、エドクスジン、エファビレンツ、エムトリシタビン、エンフビルタイド、エンテカビル、エコリーバー（ｅｃｏｌｉｅｖｅｒ）、ファムシクロビル、ホミビルセン、ホスアンプレナビル、ホスカルネット、ホスホネット、イバシタビン、イムノビル、イドクスウリジン、イミキモド、インジナビル、イノシン、インテグラーゼ阻害剤、インターフェロンＩＩＩ型、インターフェロンＩＩ型、インターフェロンＩ型、インターフェロン、ラミブジン、ロピナビル、ロビリド、マラビロク、モロキシジン、メチサゾン、ネルフィナビル、ネビラピン、ネキサビル（ｎｅｘａｖｉｒ）、ニタゾキサニド、ヌクレオシド類似体、ノルビル、オセルタミビル、ペグインターフェロンアルファ－２ａ、ペンシクロビル、ペラミビル、プレコナリル、ポドフィロトキシン、プロテアーゼ阻害剤、ラルテグラビル、逆転写酵素阻害剤、リバビリン、リマンタジン、リトナビル、ピラミジン（ｐｙｒａｍｉｄｉｎｅ）、サキナビル、ソホスブビル、スタブジン、テラプレビル、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、ティプラナビル、トリフルリジン、トリジビル、トロマンタジン、ツルバダ、バラシクロビル、バルガンシクロビル、ビクリビロク、ビダラビン、ビラミジン、ザルシタビン、ザナミビル、およびジドブジンが挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、抗真菌剤と組み合わせて使用される。抗真菌剤の例としては、これらに限定されないが、ポリエン系抗真菌剤（例えば、アムホテリシンＢ、カンジシジン、フィリピン、ハマイシン、ナタマイシン、ナイスタチン、リモシジン）、イミダゾール系抗真菌剤（例えば、ビホナゾール、ブトコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、フェンチコナゾール、イソコナゾール、ケトコナゾール、ルリコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、チオコナゾール）、トリアゾール系抗真菌剤（例えば、アルバコナゾール、エフィナコナゾール、エポキシコナゾール、フルコナゾール、イサブコナゾール、イトラコナゾール、ポサコナゾール、プロピコナゾール、ラブコナゾール、テルコナゾール、ボリコナゾール）、チアゾール系抗真菌剤（例えば、アバファンギン）、アリルアミン、エキノカンジン（例えば、アニデュラファンギン、カスポファンギン、ミカファンギン）が挙げられる。
一実施形態では、本発明による単離されたタンパク質、抗体またはその抗原結合断片、融合タンパク質、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または薬剤は、駆虫剤と組み合わせて使用される。駆虫剤の例としては、これらに限定されないが、広範囲の駆虫剤（例えば、ニタゾキサニド）、抗原虫薬（例えば、メラルソプロール、エフロルニチン、メトロニダゾール、チニダゾール、ミルテフォシン）、駆虫薬（これらに限定されないが、抗線虫薬（イヌ鉤虫、メベンダゾール、ピランテルパモエート、チアベンダゾール、ジエチルカルバマジン、イベルメクチン）、抗条虫薬（例えば、ニクロサミド、プラジカンテル、アルベンダゾール）、抗吸虫薬（例えば、プラジカンテル）が含まれる）、抗アメーバ薬（例えば、リファンピン、アムホテリシンＢ）が挙げられる。
本発明の別の目的は、それを必要とする対象の疾患の治療における、抗体またはその抗原結合断片と、上記の別の治療剤との使用に関し、抗体またはその抗原結合断片は、治療剤のアジュバントとして使用される。
本発明の別の目的は、それを必要とする対象の疾患の治療における、本明細書に記載の融合タンパク質と上記の別の治療剤との使用に関し、融合タンパク質は、治療剤のアジュバントとして使用される。
したがって、本発明は、がん療法においてアジュバントとして使用するための、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片、または本明細書に記載の融合タンパク質（好ましくは、組成物、医薬組成物または薬剤に含まれる）に関する。したがって、本発明は、感染症の治療法におけるアジュバントとして使用するための、本明細書に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質（好ましくは、組成物、医薬組成物または薬剤に含まれる）に関する。
一実施形態では、本発明は、それを必要とする患者においてがん療法によって誘導される免疫応答を増強するための、本明細書に記載の抗体またはその断片または本明細書に記載の融合タンパク質の使用に関する。
一実施形態では、本発明による抗体もしくはその断片、または本発明による融合タンパク質は、免疫療法剤として、特に多種多様ながん（例えば、免疫抑制および／または免疫疲弊に関連するがん）を治療するために使用することができる。
一実施形態では、本発明による抗体またはその断片または融合タンパク質は、患者においてがん療法によって誘導される免疫応答を増強し得、本治療は、患者においてがん療法によって誘導される免疫応答を増強するのに有効な量で、対象に抗体またはその断片または融合タンパク質を投与することを含む。
本明細書で使用される場合、「アジュバント」という用語は、例えば、がん療法などの療法において増強する化合物または化合物の組み合わせを指す。アジュバントは、低免疫原性腫瘍細胞または非免疫原性腫瘍細胞に対する有効な免疫応答を高める可能性がある。一実施形態では、アジュバントは、がん治療において周知であるがん治療剤と共に使用され、したがってがん細胞に対する免疫応答を増強する。例えば、アジュバントは、がん療法中の免疫応答を増強し得、（Ｔ細胞の活性化を低下させることなく）Ｔ細胞の疲弊を減少させ得、Ｔ細胞の生存を増長させ得、ＮＫ細胞の細胞傷害性を高め得、腫瘍の成長および／または腫瘍のサイズを減少させ得、かつ／または生存率を高め得、がんの転移を治療するかまたは防止し得る。一実施形態では、アジュバントの存在下でのがん療法の増強は、単独で投与されるがん療法との比較によって定義される。
別の実施形態では、本明細書に記載の抗体もしくはその断片または融合タンパク質は、対象の免疫応答を増加させるかまたは改善することができる。
本明細書で使用される場合、「免疫応答」は、刺激に対する免疫系の細胞、例えば、Ｂ細胞、Ｔ細胞（ＣＤ４またはＣＤ８）、制御性Ｔ細胞、抗原提示細胞、樹状細胞、単球、マクロファージ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞、好塩基球、好酸球、または好中球などによる応答を指す。いずれかの態様のいくつかの実施形態では、応答は、特定の抗原に特異的であり（「抗原特異的応答」）、それらの抗原特異的受容体を介したＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞、またはＢ細胞による応答を指す。いずれかの態様のいくつかの実施形態では、免疫応答は、ＣＤ４＋応答またはＣＤ８＋応答などのＴ細胞応答である。これらの細胞によるそのような応答は、例えば、細胞傷害性、増殖、サイトカインまたはケモカインの産生、輸送、または食作用を含み得、応答を受ける免疫細胞の性質に依存し得る。
他の既知の免疫療法剤と同様に、本発明による抗体もしくはその断片または融合タンパク質の、患者において免疫応答を増強する能力は、がん分野外でより広い治療的意味を有し得る。例えば、免疫増強剤は、多種多様な感染症、特に、免疫抑制および／または免疫疲弊を促進する病原体の治療に有用であり得ることが提唱されている。また、そのような免疫増強剤は、ワクチン（例えば、感染症およびがんワクチン）の免疫化効果をブーストするのに有用であり得る。
本発明の別の目的は、それを必要とする対象において、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるための、本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、または本発明による融合タンパク質の使用に関し、治療有効量の抗体もしくはその断片、または本発明の融合タンパク質が対象に投与される。
したがって、本発明は、それを必要とする対象におけるＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるための方法にさらに関し、本方法は、本明細書に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、融合タンパク質、組成物、医薬組成物、または薬剤を対象に投与することを含む。
一実施形態では、上記の抗体もしくはその抗原結合断片、または融合タンパク質（好ましくは、上記の組成物、医薬組成物または薬剤に含まれる）は、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるために使用されるものである。
一実施形態では、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞は、腫瘍浸潤性Ｔｒｅｇである。
一実施形態では、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるために使用するための上記の抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ、好ましくはＩｇＧ１である。
一実施形態では、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるために使用するための上記の抗体またはその抗原結合断片は、高い親和性で、好ましくは、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩから選択される少なくとも１つの活性化Ｆｃγ受容体に結合する。
一実施形態では、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるために使用するための上記の抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰおよび／またはＣＤＣ応答の増強、好ましくはＡＤＣＣおよび／またはＡＤＣＰ応答の増加、より好ましくはＡＤＣＣ応答の増加を誘発する。
一実施形態では、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるために使用するための記載された抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ２５を介するＩＬ－２シグナル伝達を阻害するものではない。したがって、一実施形態では、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるために使用するための記載された抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞（またはエフェクターＴ細胞）の増殖および／または活性化を阻害するものではない。別の実施形態では、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させるために使用するための記載されている抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞（またはエフェクターＴ細胞）におけるＳＴＡＴ５ａのリン酸化を阻害するものではない。
従来技術の抗ＣＤ２５抗体と比較して、本発明の抗体は、以下の利点を提示し得る：
－いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、先行技術のＣＤ２５抗体と比較して、ＣＤ２５に対する増加した親和性を提示する；
－いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、先行技術のＣＤ２５抗体と比較して、ＣＤ２５に対する増加したアビディティを提示する；
－いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、培養中のＴ細胞のＩＬ－２依存性活性化の増加、および好ましくは培養中のＴ細胞の増殖の増加を誘導する；
－いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、先行技術のＣＤ２５抗体と比較して、培養中のＩＬ－２により誘導されるＴ細胞の増殖を阻害誘導する割合が低い；
－いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、先行技術のＣＤ２５抗体と比較して、ＣＤ２５＋発現細胞、好ましくはＣＤ２５＋発現Ｔ細胞、より好ましくはＣＤ２５＋発現Ｔｒｅｇ細胞に対してＡＤＣＣ活性の増加を提示する；
－いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、先行技術のＣＤ２５抗体と比較して、ＣＤ２５＋発現細胞、好ましくはＣＤ２５＋発現Ｔ細胞、より好ましくはＣＤ２５＋発現Ｔｒｅｇ細胞に対してＡＤＣＰ活性の増加を提示する；
－いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、先行技術のＣＤ２５抗体と比較してより高い有効性で、ＣＤ２５＋発現細胞、好ましくはＣＤ２５＋発現Ｔ細胞、より好ましくはＣＤ２５＋発現Ｔｒｅｇ細胞の枯渇（好ましくはｉｎ ｖｉｖｏ枯渇）を誘導する。
材料および方法
ＣＤ２５特異的ｍＡｂの結合：
ＣＤ２５陽性ＳＵ－ＤＨＬ１細胞株を、ＦＩＴＣ標識ｍＩｇＧ対照またはＡＬＤ２５－Ｈ１、Ｈ２、およびＨ４抗ＣＤ２５抗体のいずれかと１０μｇ／ｍｌで４℃で３０分間インキュベートした。フローサイトメトリー分析（ＬＳＲ ｆｏｒｔｅｓｓａ）の前に、細胞をＰＢＳで洗浄した。
ＩＬ２結合アッセイ
ＳＵ－ＤＨＬ１細胞は、ヒトＩｇＧ１対照アイソタイプ、ＡＬＤ２５Ｈ４またはバシリキシマブ（１μｇ／ｍＬまたは１０μｇ／ｍｌ）と室温で１時間プレインキュベートした。次に、細胞をビオチン化複合体形成ＩＬ２（１２５ｎｇ／ｍｌ）およびＡＰＣ結合ストレプトアビジンと共に室温で３０分間連続してインキュベートした。手順の各ステップの間にＰＢＳ洗浄を行った。Ｃｙｔｏｆｌｅｘ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）でのフローサイトメトリーによって細胞を分析し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアによりデータを分析した。データは、ゲーティングした生ＳＵ－ＤＨＬ１細胞でのＡＰＣの平均蛍光強度の平均±ＳＤとして表す（ｎ＝３）。
「ＩＬ２非競合」ｍＡｂ７Ｇ７Ｂ６との結合競合：
ＣＤ２５陽性ＳＵ－ＤＨＬ１細胞株は、市販の対照ｈｕＩｇＧまたは組換え型精製ｈｕＡＬＤ２５－Ｈ１、Ｈ２、またはＨ４抗体のいずれかと１０μｇ／ｍｌで４℃で３０分間プレインキュベートした。細胞をＰＢＳで洗浄し、７Ｇ７Ｂ６－ＡＰＣ抗体（１０μｇ／ｍｌ）またはＡＰＣ－ＩｇＧ対照（対照ｍＡｂヒストグラム）で４℃で３０分間染色した。次に、分析前に細胞をＰＢＳで洗浄した。
ＩＬ－２により誘導されるＴ細胞の増殖への影響：
新たに単離した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、５μｇ／ｍｌのＰＨＡを含む完全ＲＰＭＩ培地（１０％ＦＣＳ、２％グルタミン、１％抗生物質）で７２時間培養した。ＰＢＭＣをＣＦＳＥで染色し、２４時間飢餓状態にし、次に磁気セルソーティングによって活性化Ｔ細胞を単離させた。Ｔ細胞を５０ＵＩ／ｍｌのＩＬ－２および１μｇ／ｍｌの抗体と共に７２時間培養した。細胞分裂後にフローサイトメトリーを行った。
「抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）によるＣＤ２５陽性細胞特異的溶解：
抗ＣＤ２５誘導抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）は、ＩＬ－２事前活性化ＰＢＭＣ（エフェクター細胞として）とＣＦＳＥ染色ＳＵ－ＤＨＬ１（標的細胞）を異なる比率で、１μｇ／ｍｌまたは１０μｇ／ｍＬのｈＩｇＧ対照または抗ＣＤ２５抗体のいずれかと１６時間共培養することによって得た。細胞特異的溶解は、培地中のＬＤＨ放出を定量化する比色法によって得た。あるいは、細胞死は、生存率染料染色（７ＡＡＤ）を用いたフローサイトメトリーによって評価した。ＣＦＳＥ＋７ＡＡＤ＋細胞の割合は、標的細胞のアポトーシスに対応する。
抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）によるＣＤ２５陽性細胞特異的溶解：
抗ＣＤ２５誘導ＡＤＣＰは、ＴＨＰ－１細胞（エフェクター細胞として）およびＣＦＳＥ染色ＳＵＤＨＬ－１細胞（標的細胞）を異なる比率で、ｈＩｇＧ対照または抗ＣＤ２５抗体のいずれかを１μｇ／ｍｌで４時間共培養することによって得た。この時点で、抗ＣＤ３３ ＡＰＣ抗体を共培養に添加する。フローサイトメトリー分析の前に細胞を洗浄する。ＣＤ３３＋ＣＦＳＥ＋細胞の割合は、誘導された食作用のレベルに対応する。
ＩＬ－２により誘導されるＴ細胞の増殖：
新たに単離した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、５μｇ／ｍｌのＰＨＡを含む完全ＲＰＭＩ培地（１０％ＦＣＳ、２％グルタミン、１％抗生物質）で７２時間培養した。ＰＢＭＣは、ＣＦＳＥで染色され、２４時間飢餓状態になった。次に、活性化されたＴ細胞を磁気セルソーティングによって単離した。ソーティングされたＴ細胞は、５０ＵＩ／ｍｌのＩＬ－２および１μｇ／ｍｌのアイソタイプ対照またはＣＤ２５特異的抗体と共に７２時間培養した。細胞分裂後に、ＣＦＳＥ希釈を調べることによるフローサイトメトリーを実施した。
Ｔｒｅｇ細胞枯渇への影響
ＣＤ３４＋再構成ヒト化マウスに腫瘍細胞を注射した。腫瘍が１００ｍｍ３に達したとき、マウスには、ビヒクル、ＡＬＤ２５Ｈ４または７Ｇ７Ｂ６ ＣＤ２５特異的モノクローナル抗体を１０ｍｇ／ｍＬで週１回腹腔内投与した。腫瘍生着後２９日目にマウスを屠殺し、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞の量をフローサイトメトリーにより評価した。
Ｔｒｅｇの枯渇
ＰＢＭＣ（２ｘ１０６／ｍｌ）を、ヒトＩｇＧ１対照アイソタイプ、ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２、ＡＬＤ２５Ｈ４、またはバシリキシマブ（１０μｇ／ｍｌ）と抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８結合ビーズ（Ｄａｋｏ）と共にインキュベートした。６日間のインキュベーション後、抗ＣＤ８－ＦＩＴＣ、抗ＣＤ４－ＰＥ、抗ＣＤ３９－ＰｅｒＣＰ－Ｃｙ５．５、抗ＣＤ１２７－ＰＥ－Ｃｙ７、抗ＣＤ３－ＡＰＣ、および抗ＣＤ４５－Ｐａｃｉｆｉｃ Ｂｌｕｅ抗体の混合物を使用して標識を行った。Ｃｙｔｏｆｌｅｘ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）でのフローサイトメトリーによって細胞を分析し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアによりデータを分析した。Ｔｒｅｇは、ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＣＤ３９＋ＣＤ１２７ｌｏｗ／－細胞集団として同定した。結果は、ＣＤ４５＋リンパ球集団内のＴｒｅｇの平均％±ＳＤとして表す（ｎ＝３ドナー）。
結果
図１は、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）がＣＤ２５に結合することができることを示している。さらに、本発明の抗体は、ＣＤ２５を発現しない細胞への無視できるまたは低レベルのバックグラウンド結合を示し（データは示さず）、これは、ＣＤ２５に対する本発明の抗体の高い特異性を実証している。
図２は、競合アッセイの結果であり、本発明の抗体がモノクローナル抗体７Ｇ７Ｂ６と競合することを実証している。７Ｇ７Ｂ６が、ＩＬ－２非競合抗体であることは、当技術分野において周知である。
さらに、図７は、本発明の抗体ＡＬＤ２５Ｈ４が１０μｇ／ｍＬでＳＵＤＨＬ－１細胞へのＩＬ－２の結合を有意に遮断しないのに対し、ＩＬ－２遮断ＣＤ２５特異的ｍＡｂであるバシリキシマブは、同じ濃度で、ＩＬ－２の結合を完全に遮断することを示している。
さらに、図３は、抗体ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２、およびＡＬＤ２５Ｈ４が、ＩＬ－２により誘導されるエフェクターＴ細胞の増殖にまったく影響を及ぼさないか、または非常に限定的な影響のみ及ぼすことを示している。
次に、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４）がＩＬ－２により誘導されるＴ細胞の増殖に影響を与える能力を測定し、７Ｇ７Ｂ６およびＭＡ－２５１の能力と比較した。この目的のために、強力な増殖を誘導するために、ＰＨＡ活性化Ｔ細胞を単離し、５０ＵＩ／ｍｌのＩＬ－２と共に培養した。細胞は、アイソタイプ対照またはＣＤ２５特異的抗体のいずれかの存在下で成長させた。予想どおり、図５および表１に示すとおり、バシリキシマブは、Ｔ細胞の増殖を９０％阻害した。対照的に、ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２、およびＡＬＤ２５Ｈ４は、ＩＬ－２によって誘導されるＴ細胞の増殖に２０％～３０％の影響のみ与えた。７Ｇ７Ｂ６およびＭＡ－２５１は、ＩＬ－２誘導Ｔ細胞成長に対して有意に高い影響を示し、それぞれ一定の４５％および５２％の阻害であった。
Figure 2022538733000001
次に、ＣＤ４５＋リンパ球集団からのＴｒｅｇ細胞のｉｎ ｖｉｔｒｏ枯渇を誘導する本発明の抗体の能力を測定し、バシキシリマブの能力と比較した（図９）。図９Ａに示すとおり、本発明の抗体は、Ｔｒｅｇ細胞の枯渇を誘導する。ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞およびＣＤ８＋エフェクターＴ細胞ではいずれでも細胞枯渇が観察されなかったため、この効果はＴｒｅｇ細胞に特異的である（図９Ｂおよび９Ｃ）。
さらに、動物に腫瘍細胞を注射するマウスモデルにおいて、本発明の抗体（ＡＬＤ２５Ｈ４）がＴｒｅｇ細胞の枯渇を誘導する能力を測定し、７Ｇ７Ｂ６の能力と比較した。図６Ａおよび図６Ｂに示すとおり、ＡＬＤ２５Ｈ４を投与することにより、腫瘍内のＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞の大規模な枯渇が誘導され、８８％の枯渇に到達した。対照的に、７Ｇ７Ｂ６の投与後にＴｒｅｇ細胞の５９％のみが枯渇したため、７Ｇ７Ｂ６はＴｒｅｇ細胞の枯渇の誘導には、有効性が低かった。さらに、図６Ｃ、６Ｄ、および６Ｅに示すとおり、ＴＩＬ ＣＤ４＋Ｔ細胞またはＴＩＬ ＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれのＴエフェクター細胞の枯渇も観察されないため、このＴ細胞の枯渇はＴｒｅｇ細胞に特異的である。
まとめると、これらの結果は、本発明の抗体が非遮断抗体であること、すなわち、それらがＴ細胞においてＩＬ－２シグナル伝達を阻害しないことを実証している。
これらの結果は、ＣＤ２５に結合するＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２、およびＡＬＤ２５Ｈ４が、７Ｇ７Ｂ６およびＭＡ－２５１とは異なる挙動をし、ＩＬ－２活性への影響が有意に少ないことをさらに実証している。ＩＬ－２は、がんにおけるＴ細胞の増殖および生存に重要であり、ＡＬＤ２５Ｈ１、ＡＬＤ２５Ｈ２およびＡＬＤ２５Ｈ４は、７Ｇ７Ｂ６およびＭＡ－２５１よりもＩＬ－２機能に対する中性が高いため、がん特異的Ｔ細胞ベースの免疫応答の誘導に決定的な利点を有する。
図４Ａおよび図４Ｂは、本発明の抗体が、ＡＤＣＣによるＣＤ２５陽性細胞の効率的な特異的溶解を誘導し、特異的溶解率がバシリキシマブについて測定されたものと同等であることを示している。さらに、本発明の抗体はまた、図８に示されるとおり、ＡＤＣＰによる細胞溶解を誘導する。
要するに、これらの結果は、がんを治療するための本発明の抗体の治療可能性を実証している。

Claims (19)

  1. 単離された抗ヒトＣＤ２５抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）のＣＤ２５への結合を阻害せず、好ましくは、前記抗体はモノクローナルである、抗ヒトＣＤ２５抗体またはその抗原結合断片。
  2. キメラ抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体である、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  3. 重鎖の可変領域（ＨＣＶＲ）が、以下の少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）：
    －ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここでＸ４は、ＤまたはＮである：
    －ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
    －ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；
    もしくは、配列番号１～３と少なくとも約７０％の同一性を共有するアミノ酸配列を有する任意のＣＤＲを含む；および／または
    軽鎖の可変領域（ＬＣＶＲ）が、以下の少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つのＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
    －ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
    －ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここでＸ３は、ＳまたはＴである；
    もしくは、配列番号４～６と少なくとも約７０％の同一性を共有するアミノ酸配列を有する任意のＣＤＲを含む、
    請求項１または２に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  4. （ｉ）前記ＨＣＶＲが、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの、請求項３で定義される通りのＣＤＲを含み、
    （ｉｉ）前記ＬＣＶＲが、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つの、請求項３で定義される通りのＣＤＲを含む、
    請求項１～３のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  5. 前記ＨＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：Ｘ４ＨＡＭＡ（配列番号１）、ここでＸ４は、ＤまたはＮである；
    －ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
    －ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；
    を含み、
    前記ＬＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＫＸ１ＳＱＮＶＮＫＦＸ２Ｎ（配列番号４）、ここで、Ｘ１は、ＡまたはＧであり、Ｘ２は、ＬまたはＶである；
    －ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
    －ＣＤＲ３：ＱＱＹＸ３ＳＷＰＷＴ（配列番号６）、ここでＸ３はＳまたはＴである；
    もしくは、配列番号１～６と少なくとも約７０％の同一性を共有するアミノ酸配列を有する任意のＣＤＲを含む、
    請求項１～４のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  6. 前記ＨＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＤＨＡＭＡ（配列番号７）；
    －ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
    －ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；
    を含み、
    前記抗体またはその抗原結合断片のＬＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号８）；
    －ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
    －ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）；
    を含む、
    請求項１～５のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  7. 前記抗体またはその抗原結合断片の前記ＨＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＮＨＡＭＡ（配列番号１０）；
    －ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
    －ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；
    を含み、
    前記抗体またはその抗原結合断片の前記ＬＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＫＡＳＱＮＶＮＫＦＶＮ（配列番号１１）；
    －ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
    －ＣＤＲ３：ＱＱＹＳＳＷＰＷＴ（配列番号９）；
    を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  8. 前記抗体またはその抗原結合断片の前記ＨＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＮＨＡＭＡ（配列番号１０）；
    －ＣＤＲ２：ＹＩＳＹＤＧＤＮＴＹＹＲＤＳＶＫＧ（配列番号２）；および
    －ＣＤＲ３：ＧＧＮＳＧＹＤ（配列番号３）；
    を含み、
    前記抗体またはその抗原結合断片の前記ＬＣＶＲが、以下のＣＤＲ：
    －ＣＤＲ１：ＫＧＳＱＮＶＮＫＦＬＮ（配列番号１２）；
    －ＣＤＲ２：ＧＴＮＳＬＱＴ（配列番号５）；および
    －ＣＤＲ３：ＱＱＹＴＳＷＰＷＴ（配列番号１３）；
    を含む、
    請求項１～５のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  9. 二重特異性抗体である、請求項１～８のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  10. 前記単離された抗体またはその抗原結合断片を含む、融合タンパク質。
  11. 請求項１～９のいずれか一項に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片または請求項１０に記載の融合タンパク質をコードする、核酸。
  12. 請求項１１に記載の核酸を含む、発現ベクター。
  13. 前記抗体または抗原結合断片が、抗体依存性細胞傷害、補体依存性細胞傷害または抗体依存性食作用を媒介する、請求項１～９のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合断片。
  14. 請求項１～９のいずれか一項に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片または請求項１０に記載の融合タンパク質と、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤と、を含む医薬組成物。
  15. 医薬として使用するための、請求項１～９のいずれか一項に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片または請求項１０に記載の融合タンパク質。
  16. がんまたは感染症の治療に使用するための、請求項１～９のいずれか一項に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片または請求項１０に記載の融合タンパク質。
  17. 対象におけるがんまたは感染症の治療に使用するための、免疫療法と、請求項１～９もしくは１３のいずれか一項に記載の抗体もしくはその抗原結合断片または請求項１０に記載の融合タンパク質との組み合わせ。
  18. Ｔ細胞においてＩＬ－２シグナル伝達を阻害することなくＣＤ２５陽性細胞の特異的溶解を誘導する方法であって、前記方法は、
    治療有効量の請求項１～９もしくは１３のいずれか一項に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片もしくは請求項１０に記載の融合タンパク質、または
    治療有効量の請求項１４に記載の医薬組成物、を対象に投与するステップを含み、
    好ましくは、前記対象は、免疫療法を受けているか、または受けた対象である、方法。
  19. 対象に免疫療法を施すステップを含む方法であって、前記対象が、
    治療有効量の請求項１～９もしくは１３のいずれか一項に記載の単離された抗体もしくはその抗原結合断片もしくは請求項１０に記載の融合タンパク質、または
    治療有効量の請求項１４に記載の医薬組成物を投与された対象であるか、または投与されており、
    好ましくは、前記治療有効量は、Ｔ細胞内におけるＩＬ－２シグナル伝達を阻害することなくＣＤ２５陽性細胞の特異的溶解を誘導するのに有効な量である、方法。
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