JP2022525585A - 抗hla-dq2.5抗体 - Google Patents
抗hla-dq2.5抗体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2022525585A JP2022525585A JP2021545386A JP2021545386A JP2022525585A JP 2022525585 A JP2022525585 A JP 2022525585A JP 2021545386 A JP2021545386 A JP 2021545386A JP 2021545386 A JP2021545386 A JP 2021545386A JP 2022525585 A JP2022525585 A JP 2022525585A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hla
- peptide
- complex formed
- gliadin
- antigen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 1666
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 827
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 claims abstract description 370
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 claims abstract description 188
- 108010061711 Gliadin Proteins 0.000 claims description 640
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 559
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 557
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 557
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 107
- 108010016832 omega(2)-gliadin Proteins 0.000 claims description 98
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 97
- 108010025412 omega(1)-gliadin Proteins 0.000 claims description 93
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 78
- 108060006613 prolamin Proteins 0.000 claims description 76
- XXRYFVCIMARHRS-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n-dimethoxyphosphorylcarbamate Chemical compound COP(=O)(OC)NC(=O)OC(C)C XXRYFVCIMARHRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 75
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 73
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 claims description 53
- 108010028930 invariant chain Proteins 0.000 claims description 53
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 claims description 50
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 44
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 43
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 43
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 41
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 36
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 claims description 34
- 101710204608 Avenin-3 Proteins 0.000 claims description 32
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 26
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 claims description 23
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 claims description 18
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 claims description 18
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 14
- 108010010378 HLA-DP Antigens Proteins 0.000 claims description 11
- 102000015789 HLA-DP Antigens Human genes 0.000 claims description 11
- 108010047762 HLA-DQ8 antigen Proteins 0.000 claims description 10
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 241000186366 Mycobacterium bovis Species 0.000 claims description 2
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 claims 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 19
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 abstract description 15
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 69
- 238000000034 method Methods 0.000 description 69
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 42
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 40
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 37
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 32
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 32
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 27
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 26
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 22
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 18
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 17
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 17
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 17
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 16
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 15
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 15
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 13
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 13
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 13
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 12
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 12
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 12
- 108010062347 HLA-DQ Antigens Proteins 0.000 description 11
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 11
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 11
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 10
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 9
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 9
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 9
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 9
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 8
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 8
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 8
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 7
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 7
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 6
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010021468 Fc gamma receptor IIA Proteins 0.000 description 6
- 108010021472 Fc gamma receptor IIB Proteins 0.000 description 6
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 6
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 6
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 6
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 6
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 6
- 102100029205 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Human genes 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 6
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 6
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 235000006171 gluten free diet Nutrition 0.000 description 6
- 235000020884 gluten-free diet Nutrition 0.000 description 6
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 6
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 6
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 6
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000012552 review Methods 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 5
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 5
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 5
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 5
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 5
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 4
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 4
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 description 4
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 4
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 description 4
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 4
- 208000028622 Immune thrombocytopenia Diseases 0.000 description 4
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 4
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 4
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 4
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- -1 for example Chemical class 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 108010068617 neonatal Fc receptor Proteins 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 4
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 4
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012492 Biacore method Methods 0.000 description 3
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 3
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 3
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 3
- 108700039882 Protein Glutamine gamma Glutamyltransferase 2 Proteins 0.000 description 3
- 102100038095 Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase 2 Human genes 0.000 description 3
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 3
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 238000003016 alphascreen Methods 0.000 description 3
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 3
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- 229930195712 glutamate Chemical group 0.000 description 3
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 3
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 3
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 3
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical class O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BKKWZCSSYWYNDS-JEDNCBNOSA-N 2-aminoacetic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound NCC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BKKWZCSSYWYNDS-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)propan-1-one Chemical compound OC1=C2C=CC(C)(C)OC2=CC=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100033392 ATP-dependent RNA helicase DDX3Y Human genes 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N Propionic aldehyde Chemical compound CCC=O NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 2
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 2
- 238000012440 amplified luminescent proximity homogeneous assay Methods 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N monopropylene glycol Natural products CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCC(C=C1)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WCMOHMXWOOBVMZ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoylamino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O WCMOHMXWOOBVMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHVODYOQUSEYJJ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]amino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)C(CC1)CCC1CN1C(=O)C=CC1=O IHVODYOQUSEYJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 1
- WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxolane Chemical compound C1COCO1 WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(F)C=C1F VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 1
- YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 2,2-diamino-1,4-bis(4-azidophenyl)-3-butylbutane-1,4-dione Chemical compound C=1C=C(N=[N+]=[N-])C=CC=1C(=O)C(N)(N)C(CCCC)C(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZYPDJSJJXZWZJJ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-3-piperidin-4-yloxypyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C(=NN(C=1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2)OC1CCNCC1 ZYPDJSJJXZWZJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-(4-isothiocyanatophenyl)propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C(C)CN(CC(O)=O)CC(N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-methyl-7h-purine-6-thione Chemical compound S=C1N(C)C(N)=NC2=C1NC=N2 FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- ZMRMMAOBSFSXLN-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanehydrazide Chemical compound C1=CC(CCCC(=O)NN)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O ZMRMMAOBSFSXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 206010027654 Allergic conditions Diseases 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N Ammonia-15N Chemical compound [15NH3] QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000669426 Aspergillus restrictus Ribonuclease mitogillin Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 208000000412 Avitaminosis Diseases 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N Carbon-13 Chemical compound [13C] OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N Carbon-14 Chemical compound [14C] OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000011413 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108010023736 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Proteins 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 108700032819 Croton tiglium crotin II Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 1
- 108010021470 Fc gamma receptor IIC Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 108010026515 HLA-DQ5 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010080451 HLA-DQ6 antigen Proteins 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 101000819490 Homo sapiens Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101000935587 Homo sapiens Flavin reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 1
- 101001041117 Homo sapiens Hyaluronidase PH-20 Proteins 0.000 description 1
- 101000878602 Homo sapiens Immunoglobulin alpha Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 1
- 206010021135 Hypovitaminosis Diseases 0.000 description 1
- 208000010159 IgA glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 206010021263 IgA nephropathy Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical class C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102100038005 Immunoglobulin alpha Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 201000010743 Lambert-Eaton myasthenic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100029206 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-c Human genes 0.000 description 1
- 229910052765 Lutetium Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010025327 Lymphopenia Diseases 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010087870 Mannose-Binding Lectin Proteins 0.000 description 1
- 102000009112 Mannose-Binding Lectin Human genes 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 206010061291 Mineral deficiency Diseases 0.000 description 1
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 description 1
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010028424 Myasthenic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 241000609499 Palicourea Species 0.000 description 1
- 241000237988 Patellidae Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 240000007643 Phytolacca americana Species 0.000 description 1
- 235000009074 Phytolacca americana Nutrition 0.000 description 1
- 101100413173 Phytolacca americana PAP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 208000026378 Polyglandular endocrine disease Diseases 0.000 description 1
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N Purine Natural products N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 240000003946 Saponaria officinalis Species 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 208000020221 Short stature Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- 206010072148 Stiff-Person syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101150117115 V gene Proteins 0.000 description 1
- 244000000188 Vaccinium ovalifolium Species 0.000 description 1
- 240000001866 Vernicia fordii Species 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 1
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001818 alpha-sarcin Proteins 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000001558 benzoic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N butyric aldehyde Natural products CCCC=O ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N carbendazim Chemical compound C1=CC=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=C1 TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002041 carbon nanotube Substances 0.000 description 1
- 229910021393 carbon nanotube Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 201000003278 cryoglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N cyclohexanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCC1 NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 229930191339 dianthin Natural products 0.000 description 1
- 239000012954 diazonium Substances 0.000 description 1
- 125000005442 diisocyanate group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000012893 effector ligand Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 108010028531 enomycin Proteins 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 150000002222 fluorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 208000021302 gastroesophageal reflux disease Diseases 0.000 description 1
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 229940044700 hylenex Drugs 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 102000027596 immune receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008915 immune receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000006749 inflammatory damage Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052745 lead Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000023404 leukocyte cell-cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100001023 lymphopenia Toxicity 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 230000009149 molecular binding Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000036473 myasthenia Effects 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 235000018343 nutrient deficiency Nutrition 0.000 description 1
- 230000031787 nutrient reservoir activity Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-OUBTZVSYSA-N oxygen-17 atom Chemical compound [17O] QVGXLLKOCUKJST-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 108010076042 phenomycin Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 1
- 229920000191 poly(N-vinyl pyrrolidone) Polymers 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920001583 poly(oxyethylated polyols) Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 230000007824 polyneuropathy Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N purine Chemical compound N1=C[N]C2=NC=NC2=C1 IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 229920005604 random copolymer Polymers 0.000 description 1
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- RUELTTOHQODFPA-UHFFFAOYSA-N toluene 2,6-diisocyanate Chemical compound CC1=C(N=C=O)C=CC=C1N=C=O RUELTTOHQODFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000701 toxic element Toxicity 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 208000030401 vitamin deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2833—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against MHC-molecules, e.g. HLA-molecules
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/16—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/32—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency specific for a neo-epitope on a complex, e.g. antibody-antigen or ligand-receptor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Botany (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
主要組織適合性複合体(MHC)クラスIIに属するヒト白血球抗原(HLA)は、HLA-DR、HLA-DPおよびHLA-DQ分子、例えばHLA-DQ2.5アイソフォーム(本明細書において、以降「HLA-DQ2.5」と呼ぶ)を含み、これらは細胞表面上でα鎖とβ鎖から構成されるヘテロ二量体を形成している。セリアック病患者の大多数(>90%)はHLA-DQ2.5ハプロタイプの対立遺伝子を有している(非特許文献6)。このアイソフォームは、グルテンペプチドに対して、より強いアフィニティを有すると考えられる。他のアイソフォームと同様に、HLA-DQ2.5は、外因性源に由来するプロセシングされた抗原を、T細胞上のT細胞受容体(TCR)に提示する。セリアック病患者では、パンなどの高グルテン食品の消化の結果として、免疫原性のグルテンペプチド、例えばグリアジンペプチドが形成される(非特許文献2)。該ペプチドは小腸上皮を通って粘膜固有層に輸送され、トランスグルタミナーゼ2(TG2)のような組織トランスグルタミナーゼによって脱アミド化される。脱アミド化されたグリアジンペプチドは抗原提示細胞(APC)によってプロセシングされ、APCがそれらをHLA-DQ2.5にロードする。ロードされたペプチドはHLA-DQ2.5拘束性T細胞に提示され、自然免疫反応と適応免疫反応を活性化する。これは、小腸粘膜の炎症性損傷ならびに様々なタイプの胃腸障害、栄養欠乏症、および全身症状を含む症状を引き起こす。抗HLA DQ中和抗体はセリアック病患者に由来するT細胞の活性化を阻害することが報告されている(非特許文献7)。
現在実施可能なセリアック病治療法は、生涯にわたるグルテンフリー食(GFD)の順守である。しかし、現実的には、GFDを用いたとしてもグルテン曝露を完全に排除することは困難である。これらの患者に対する許容グルテン量はわずか約10~50mg/日である(非特許文献11)。GFD製造では二次汚染が広範囲に生じる可能性があり、GFDを十分に順守している患者においてさえも、微量のグルテンがセリアック病の症状を引き起こすことがある。このような意図しないグルテン曝露のリスクの存在下で、GFDに対する補助療法が必要とされている。
補助療法を必要とする上記の状況下において、本発明は抗HLA-DQ2.5抗体を提供する。
本発明の抗原結合分子、特に単一特異性および多重特異性(例えば、二重特異性)抗体は、HLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された1つまたは複数の複合体に結合することができる。
[1] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、抗原結合分子。
[1-2] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、[1]の抗原結合分子。
[2] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、[1]の抗原結合分子。
[2-2] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、[2]の抗原結合分子。
[3] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、[1]の抗原結合分子。
[3-2] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも3、4、5、6、7、8つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、[3]の抗原結合分子。
[4] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビス(Mycobacterium bovis)ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞;およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、抗原結合分子。
[4-2] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞;およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、[4]の抗原結合分子。
[5] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と26merグリアジンとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞;およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、[4]の抗原結合分子。
[6] HLA-DQ2.5とセリアック病に関連する免疫優性ペプチドとによって形成された複合体に対して結合活性を有する、[5]の抗原結合分子。
[7] HLA-DQ2.5とセリアック病に関連する免疫優性ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[5]の抗原結合分子。
[8] HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[5]の抗原結合分子。
[5-2] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と26merグリアジンとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞;およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、[5]の抗原結合分子。
[9] HLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体とHLA-DQ2.5/グルテンペプチド拘束性CD4+ T細胞との間の相互作用をブロックする、[1]~[8]の抗原結合分子。
[10] HLA-DQ8、HLA-DQ2.2、HLA-DQ7.5、HLA-DQ5.1、HLA-DQ6.3、HLADQ7.3、HLA-DRまたはHLA-DPに対する結合活性を実質的に有しない、[1]~[9]の抗原結合分子。
[11] HLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体に対して増強された結合活性を有する、[1]~[10]の抗原結合分子。
[12] HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てと比較して、
HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して、より強い結合活性を有する、[1]~[11]の抗原結合分子。
[12-2] 本発明の抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てと比較して、
HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8つ、または全てに対して、より強い結合活性を有する、[12]の抗原結合分子。
[13] HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLADQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
HLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体とHLA-DQ2.5/グルテンペプチド拘束性CD4+ T細胞との間の相互作用をブロックする、抗原結合分子。
[13-2] 本発明の抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLADQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
HLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体とHLA-DQ2.5/グルテンペプチド拘束性CD4+ T細胞との間の相互作用をブロックする、[13]の抗原結合分子。この文脈において、グルテンペプチドは、上記の抗原結合分子のいずれかが結合する複合体中のペプチドである。
[14] 以下の(1)~(5)のいずれか1つである、[1]~[13-2]の抗原結合分子:
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。
[15] 二重特異性抗原結合分子である、[1]~[14]の抗原結合分子。
[16] 二重特異性抗原結合分子が二重特異性抗体である、[15]の抗原結合分子。
[17] 少なくとも2つの抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
該抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とセリアック病に関連する免疫優性ペプチドとの間に形成された1つまたは複数の複合体への結合活性を有し、
該抗原結合ドメインのいずれも、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。
[18] 少なくとも2つの抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
該抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
該抗原結合ドメインのいずれも、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。
[19] 前記抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[18]の抗原結合分子。
[20] 前記抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[19]の抗原結合分子。
[21] 少なくとも2つの抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
該抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
該抗原結合ドメインのいずれも、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。
[22] 前記抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[21]の抗原結合分子。
[23] 第1の抗原結合ドメインと第2の抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、第1の抗原結合ドメインがHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された1つまたは複数の複合体への結合活性を有し、第2の抗原結合ドメインがHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された1つまたは複数の複合体への結合活性を有し、第1の抗原結合ドメインが結合する複合体中の少なくとも1つのグルテンペプチドが、第2の抗原結合ドメインが結合する複合体中の少なくとも1つのグルテンペプチドとは異なる、抗原結合分子。
[24] HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[23]の抗原結合分子。
[25] HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[23]の抗原結合分子。
[26] HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、
[23]の抗原結合分子。
[27] HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、[26]の抗原結合分子。
[28] HLA-DQ2.5と第1のグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合活性を有する第1の抗原結合ドメイン、およびHLA-DQ2.5と第2のグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合活性を有する第2の抗原結合ドメインを含む、抗原結合分子であって、
該抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2つまたはそれ以上に対して結合活性を有し、
該抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。
[29] HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2つまたはそれ以上に対して結合活性を有する、[28]の抗原結合分子。
[30] 第1の抗原結合ドメインと第2の抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
第1の抗原結合ドメインが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1つまたは複数に対して結合活性を有し、
第2の抗原結合ドメインが、HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1つまたは複数に対して結合活性を有し、
該抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。
[31] 第2の抗原結合ドメインが、HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1つまたは複数に対して結合活性を有する、[30]の抗原結合分子。
[32] HLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体とHLA-DQ2.5/グルテンペプチド拘束性CD4+ T細胞との間の相互作用をブロックする、[17]~[31]の抗原結合分子。
[33] HLA-DQ2.2、HLA-DQ7.5、HLA-DQ5.1、HLA-DQ6.3、HLADQ7.3、HLA-DRまたはHLA-DPに対する結合活性を実質的に有しない、[17]~[32]の抗原結合分子。
[34] HLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体に対して増強された結合活性を有する、[17]~[33]の抗原結合分子。
[35] HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てと比較して、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18個、または全てに対して、より強い結合活性を有する、[17]~[34]の抗原結合分子。
[36] HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てと比較して、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17個、または全てに対して、より強い結合活性を有する、[17]~[35]の抗原結合分子。
[37] 以下の(1)~(5)のいずれか1つである、[17]~[36]の抗原結合分子:
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。
[38] 二重特異性抗原結合分子である、[17]~[37]の抗原結合分子。
[39] 二重特異性抗原結合分子が二重特異性抗体である、[38]の抗原結合分子。
[40] 以下の(a)~(d)のいずれか1つである、[37]~[39]の抗原結合分子:
(a) 以下の(i)および(iii)を含む抗原結合分子;
(b) 以下の(ii)および(iii)を含む抗原結合分子;
(c) (a)または(b)の抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(d) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(a)または(b)の抗原結合分子と競合する抗原結合分子;
(i) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列;
(ii) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列;
(iii) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列。
[40-1] グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、γ2グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチドのうちの1、2、3、4、5、6、7、8つ、または全てである、[9]、[13]、および[32]の抗原結合分子。
[40-2] グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、およびα1bグリアジンペプチドである、[40-1]の抗原結合分子。
[40-3] グルテンペプチドが、α2グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、γ2グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチドである、[40-1]の抗原結合分子。
[40-4] グルテンペプチドが、α2グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、およびBCホルデインペプチドである、[40-1]の抗原結合分子。
[40-5] グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、γ4aグリアジンペプチド、およびγ2グリアジンペプチドである、[40-1]の抗原結合分子。
[40-5a] グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチドである、[40-1]の抗原結合分子。
[40-6] グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、およびα1bグリアジンペプチドである、[40-1]の抗原結合分子。
[41] [1]~[40-6]の抗原結合分子をコードする核酸。
[42] [41]の核酸が導入されているベクター。
[43] [41]の核酸または[42]のベクターを含む細胞。
[44] [43]の細胞を培養することによって抗原結合分子を産生する方法。
[45] 以下の(1)~(5)のいずれか1つである、抗原結合分子:
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。
[46] 以下の(a)~(d)のいずれか1つである、[45]の抗原結合分子:
(a) 以下の(i)および(iii)を含む抗原結合分子;
(b) 以下の(ii)および(iii)を含む抗原結合分子;
(c) (a)または(b)の抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(d) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(a)または(b)の抗原結合分子と競合する抗原結合分子;
(i) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列;
(ii) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列;
(iii) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列。
本明細書に記載または言及される技術および手順は、一般的によく理解されており、例えば以下に記載の広く利用される方法論などの従来の方法論を用いて当業者により常用されている:Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3d edition (2001) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.;Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel, et al. eds., (2003));the series Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.): PCR 2: A Practical Approach (M.J. MacPherson, B.D. Hames and G.R. Taylor eds. (1995)), Harlow and Lane, eds. (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, and Animal Cell Culture (R.I. Freshney, ed. (1987));Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984);Methods in Molecular Biology, Humana Press;Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press;Animal Cell Culture (R.I. Freshney), ed., 1987);Introduction to Cell and Tissue Culture (J. P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press;Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, eds., 1993-8) J. Wiley and Sons;Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds.);Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, eds., 1987);PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994);Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., eds., 1991);Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999);Immunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997);Antibodies (P. Finch, 1997);Antibodies: A Practical Approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989);Monoclonal Antibodies: A Practical Approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000);Using Antibodies: A Laboratory Manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999);The Antibodies (M. Zanetti and J. D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995);およびCancer: Principles and Practice of Oncology (V.T. DeVita et al., eds., J.B. Lippincott Company, 1993)。
本明細書の趣旨での「アクセプターヒトフレームワーク」は、下で定義するヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来する、軽鎖可変ドメイン (VL) フレームワークまたは重鎖可変ドメイン (VH) フレームワークのアミノ酸配列を含む、フレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに「由来する」アクセプターヒトフレームワークは、それらの同じアミノ酸配列を含んでもよいし、またはアミノ酸配列の変更を含んでいてもよい。いくつかの態様において、アミノ酸の変更の数は、10以下、9以下、8以下、7以下、6以下、5以下、4以下、3以下、または2以下である。いくつかの態様において、VLアクセプターヒトフレームワークは、VLヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と、配列が同一である。
(a) アミノ酸残基26-32 (L1)、50-52 (L2)、91-96 (L3)、26-32 (H1)、53-55 (H2)、および96-101 (H3)のところで生じる超可変ループ (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987));
(b) アミノ酸残基24-34 (L1)、50-56 (L2)、89-97 (L3)、31-35b (H1)、50-65 (H2)、 および95-102 (H3)のところで生じるCDR (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991));
(c) アミノ酸残基27c-36 (L1)、46-55 (L2)、89-96 (L3)、30-35b (H1)、47-58 (H2)、および93-101 (H3) のところで生じる抗原接触 (MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996));ならびに、
(d) HVRアミノ酸残基46-56 (L2)、47-56 (L2)、48-56 (L2)、49-56 (L2)、26-35 (H1)、26-35b (H1)、49-65 (H2)、93-102 (H3)、および94-102 (H3)を含む、(a)、(b)、および/または(c)の組合せ。
一態様において、HVR残基は本明細書において示されたものを含む。
別段示さない限り、HVR残基および可変ドメイン中の他の残基(例えば、FR残基)は、本明細書では上記のKabatらにしたがって番号付けされる。
分率X/Yの100倍。
ここで、Xは配列アラインメントプログラムALIGN-2によって、当該プログラムのAおよびBのアラインメントにおいて同一である一致としてスコアされたアミノ酸残基の数であり、YはB中のアミノ酸残基の全数である。アミノ酸配列Aの長さがアミノ酸配列Bの長さと等しくない場合、AのBへの%アミノ酸配列同一性は、BのAへの%アミノ酸配列同一性と等しくないことが、理解されるであろう。別段特に明示しない限り、本明細書で用いられるすべての%アミノ酸配列同一性値は、直前の段落で述べたとおりALIGN-2コンピュータプログラムを用いて得られるものである。
一局面において、本発明は、T細胞にグルテンペプチドを提示するHLA-DQ2.5への抗HLA-DQ2.5抗体の結合に一部基づくものである。特定の態様において、HLA-DQ2.5に結合する抗体が提供される。
一局面において、本発明は、HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された1つまたは複数の複合体への結合活性を有する、単離された抗原結合分子または抗体を提供する。特定の態様において、抗HLA-DQ2.5抗体(「本抗体」)は、以下の機能/特徴を有する。
*「結合活性を実質的に有しない」という特性は、例えば、本明細書に記載のFACS結果において説明されるように定義することができる。特定の抗原への「結合活性を実質的に有しない」抗体は、本明細書に記載の測定条件下で、陰性対照(例えば、本明細書では、表4の「IC17」、および表5の「IC17二価」)のMFI(平均蛍光強度)値の250%以下、好ましくは200%以下、より好ましくは150%以下であるMFI値を有する。
二重特異性抗体の場合、ある局面において、特定の抗原に対する「結合活性を実質的に有しない」抗体は、本明細書に記載の測定条件下で、IC17二価抗体のMFI値を0%とし、DQN0139bb//IC17のMFI値を100%としたとき、2%以下、より好ましくは1%以下であるMFI値を有する。
グルテンペプチドは、好ましくはグリアジンペプチドである。グリアジンペプチドは、好ましくは33merグリアジンペプチド、26merグリアジンペプチド、14mer 1ペプチド、α1グリアジンペプチド、α1bグリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、α3グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、γ2グリアジンペプチド、γ4bグリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、またはω2グリアジンペプチドである。
他の局面において、グルテンペプチドは、好ましくは以下からなる群より選択される:BCホルデインペプチド、アベニン1ペプチド、アベニン2ペプチド、アベニン3ペプチド、ホルデイン1ペプチド、ホルデイン2ペプチド、セカリン1ペプチド、セカリン2ペプチド。
一方、本明細書において、「無関係な」ペプチドには、HLA-DQ2.5上に提示され得ることが報告されているが本発明とは無関係なもの、すなわち、上記の目的のグルテンペプチドではないものが含まれる。例えば、無関係なペプチドには、CLIPペプチド、B型肝炎ウイルス(HBV)ペプチド、サルモネラペプチド、チロペルオキシダーゼ(TPO)ペプチド、マイコバクテリウム・ボビスペプチドなどが含まれるが、これらに限定されない。
これらの非標的MHCクラスII分子および無関係なペプチドとの複合体の形態にあるHLA-DQ2.5に対するあらゆる実質的な阻害効果を防止するため、かつセリアック病患者の抗体PKを改善するために、これらの特徴は好ましい。
*「結合活性」という特性は、例えば、本明細書に記載のFACS結果において説明されるように定義することができる。特定の抗原への「結合活性」を有する抗体は、本明細書に記載の測定条件下で、陰性対照(例えば、本明細書では、表4の「IC17」、および表5の「IC17二価」)のMFI(平均蛍光強度)値の300%以上、好ましくは500%以上、より好ましくは1000%以上であるMFI値を有する。
*本発明の抗HLA-DQ2.5抗体は、HLA-DQ2.5と本明細書に記載のグルテンペプチドとによって形成された1つまたは複数の複合体への結合について、5×10-7M以下、好ましくは4×10-7M以下、好ましくは3×10-7M以下、好ましくは2×10-7M以下、好ましくは1×10-7M以下、好ましくは9×10-8M以下、好ましくは8×10-8M以下、好ましくは7×10-8M以下、好ましくは6×10-8M以下、好ましくは5×10-8M以下、好ましくは4×10-8M以下、好ましくは3×10-8M以下、好ましくは2×10-8M以下、好ましくは1×10-8M以下、好ましくは9×10-9M以下、好ましくは8×10-9M以下、好ましくは7×10-9M以下、好ましくは6×10-9M以下、好ましくは5×10-9M以下、好ましくは4×10-9M以下、好ましくは3×10-9M以下、好ましくは2×10-9M以下の解離定数(Kd)を有する。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(5) HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(9) HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(11) HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(12) HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;
(13) HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;
(14) HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;
(15) HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;
(16) HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(5) HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(5) HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(9) HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(12) HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;
(13) HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;
(14) HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;
(15) HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;および
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(5) HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(9) HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(11) HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(12) HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;
(13) HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;
(15) HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;
(16) HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(9) HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(11) HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(12) HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;
(13) HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;
(15) HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;
(16) HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(11) HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(16) HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(9) HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(11) HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(12) HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;
(13) HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;
(14) HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;
(15) HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;
(16) HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(9) HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(11) HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(16) HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(1) HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(2) HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(3) HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(4) HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(5) HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(6) HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(7) HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(8) HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;
(9) HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(10) HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(11) HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;
(12) HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;
(13) HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;
(14) HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;
(15) HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;
(16) HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;
(17) HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;
(18) HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;
(19) HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;および
(20) HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体。
(a) HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;
(b) HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルス(HBV)ペプチドとによって形成された複合体;
(c) HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;
(d) HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼ(TPO)ペプチドとによって形成された複合体;
(e) HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;
(f) HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞;および
(g) HLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞。
*「中和活性」という特性は、例えば、本明細書に記載されるように定義することができる。「中和活性」を有する抗体は、本明細書に記載の測定条件で、1マイクログラム(μg)/mLの抗体濃度によって、HLA-DQ2.5(またはHLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体)とTCRとの結合を95%以上、好ましくは97%以上、より好ましくは99%以上中和することができる。
いくつかの態様において、グルテンペプチドは、以下である:
[1] α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、γ2グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチドのうちの1、2、3、4、5、6、7、8つ、または全て;
[2] α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、およびα1bグリアジンペプチド;
[3] α2グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、γ2グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチド;
[4] α2グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、およびBCホルデインペプチド;
[5] α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、γ4aグリアジンペプチド、およびγ2グリアジンペプチド;
[5a] α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチド;
[6] α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、およびα1bグリアジンペプチド。
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。
いくつかの態様において、本発明の二重特異性抗原結合分子は、二重特異性抗体である。
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は、≦1μM、≦100nM、≦10nM、≦1nM、≦0.1nM、≦0.01nMまたは≦0.001nM(例えば、10-8M以下、例えば10-8M~10-13M、例えば10-9M~10-13M)の解離定数 (Kd) を有する。
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は、抗体断片である。抗体断片は、これらに限定されるものではないが、Fab、Fab’、Fab’-SH、F(ab’)2、Fv、および scFv断片、ならびに、後述する他の断片を含む。特定の抗体断片についての総説として、Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003) を参照のこと。scFv断片の総説として、例えば、Pluckthun, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., (Springer-Verlag, New York), pp.269-315 (1994);加えて、WO93/16185;ならびに米国特許第5,571,894号および第5,587,458号を参照のこと。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含みインビボ (in vivo) における半減期の長くなったFabおよびF(ab')2断片についての論説として、米国特許第5,869,046号を参照のこと。
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体である。特定のキメラ抗体が、例えば、米国特許第4,816,567号;および、Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984) に記載されている。一例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域(例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサルなどの非ヒト霊長類に由来する可変領域)およびヒト定常領域を含む。さらなる例において、キメラ抗体は、親抗体のものからクラスまたはサブクラスが変更された「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片も含む。
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において知られる種々の手法によって製造され得る。ヒト抗体は、van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74 (2001) および Lonberg, Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008) に、概説されている。
本発明の抗体は、所望の1つまたは複数の活性を伴う抗体についてコンビナトリアルライブラリをスクリーニングすることによって単離してもよい。例えば、ファージディスプレイライブラリの生成や、所望の結合特徴を備える抗体についてそのようなライブラリをスクリーニングするための、様々な方法が当該技術分野において知られている。そのような方法は、Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001) において総説されており、さらに例えば、McCafferty et al., Nature 348:552-554;Clackson et al., Nature 352: 624-628 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992); Marks and Bradbury, in Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003); Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004); Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004); Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34):12467-12472 (2004);およびLee et al., J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004) に記載されている。
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加させるまたは減少させるように改変されている。抗体へのグリコシル化部位の追加または削除は、1つまたは複数のグリコシル化部位を作り出すまたは取り除くようにアミノ酸配列を改変することにより、簡便に達成可能である。
特定の態様において、本明細書で提供される抗体のFc領域に1つまたは複数のアミノ酸修飾を導入して、それによりFc領域変異体を生成してもよい。Fc領域変異体は、1つまたは複数のアミノ酸ポジションのところでアミノ酸修飾(例えば、置換)を含む、ヒトFc領域配列(例えば、ヒトIgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4のFc領域)を含んでもよい。
本明細書では、用語「Fc領域」または「Fcドメイン」は、定常領域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖のC末端領域を定義するために使用される。この用語には、天然配列のFc領域および変異体Fc領域が含まれる。一態様において、ヒトIgG重鎖のFc領域は、Cys226から、またはPro230から、重鎖のカルボキシル末端まで延びている。ただし、Fc領域のC末端リジン(Lys447)またはグリシン-リジン(残基446~447)は、存在していてもしていなくてもよい。本明細書で特に指定しない限り、Fc領域または定常領域のアミノ酸残基の番号付けは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991に記載の、EUインデックスとも呼ばれるEUナンバリングシステムにしたがう。
用語「Fc受容体」または「FcR」は、抗体のFc領域に結合する受容体のことをいう。ある態様において、FcRは天然のヒトFcRである。ある態様において、FcRは、IgG抗体に結合するもの(γ受容体)であり、FcγRI、FcγRII、およびFcγRIIIサブクラスの受容体を含み、これには、これらの受容体の対立遺伝子変異体および選択的スプライス形態も含まれる。FcγRII受容体には、FcγRIIA(「活性化受容体」)およびFcγRIIB(「阻害受容体」)が含まれ、これらは、主にその細胞質ドメインにおいて異なっている類似のアミノ酸配列を有する。活性化受容体FcγRIIAは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベース活性化モチーフ(ITAM)を含む。阻害受容体FcγRIIBは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ(ITIM)を含む(例えば、Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)を参照されたい)。FcRは、例えば、Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods 4:25-34 (1994); およびde Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995)でレビューされている。今後同定されるものを含めて、他のFcRは、本明細書における用語「FcR」に包含される。
Fcγ受容体は、モノクローナルIgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4抗体のFcドメインに結合することができる受容体のことをいい、Fcγ受容体遺伝子によって実質的にコードされるタンパク質のファミリーに属する全てのメンバーを含む。ヒトでは、このファミリーは、FcγRI(CD64)、例えば、アイソフォームFcγRIa、FcγRIb、およびFcγRIc;FcγRII(CD32)、例えば、アイソフォームFcγRIIa(アロタイプH131およびR131を含む)、FcγRIIb(FcγRIIb-1およびFcγRIIb-2を含む)、およびFcγRIIc;ならびにFcγRIII(CD16)、例えば、アイソフォームFcγRIIIa(アロタイプV158およびF158を含む)、およびFcγRIIIb(アロタイプFcγRIIIb-NA1およびFcγRIIIb-NA2を含む);ならびに全ての未同定のヒトFcγ受容体、Fcγ受容体アイソフォーム、およびそれらのアロタイプを含む。しかし、Fcγ受容体はこれらの例に限定されない。これらに限定されることなく、Fcγ受容体には、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、およびサル由来のものが含まれる。Fcγ受容体は、いかなる生物に由来してもよい。マウスFcγ受容体には、FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)、FcγRIII(CD16)、およびFcγRIII-2(CD16-2)、ならびに、全ての未同定のマウスFcγ受容体、Fcγ受容体アイソフォーム、およびそれらのアロタイプが含まれるが、これらに限定されない。そのような好ましいFcγ受容体には、例えば、ヒトFcγRI(CD64)、FcγRIIA(CD32)、FcγRIIB(CD32)、FcγRIIIA(CD16)、および/またはFcγRIIIB(CD16)が含まれる。FcγRIのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれ配列番号:80(NM_000566.3)および74(NP_000557.1)に示され;FcγRIIAのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれ配列番号:81(BC020823.1)および75(AAH20823.1)に示され;FcγRIIBのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれ配列番号:82(BC146678.1)および76(AAI46679.1)に示され;FcγRIIIAのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれ配列番号:83(BC033678.1)および77(AAH33678.1)に示され;FcγRIIIBのポリヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、それぞれ配列番号:84(BC128562.1)および78(AAI28563.1)に示される(各カッコ内にRefSeqアクセッション番号を示す)。Fcγ受容体がモノクローナルIgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4抗体のFcドメインへの結合活性を有するか否かは、上述したFACSおよびELISAフォーマットに加えて、ALPHA screen(Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay:増幅型ルミネッセンスプロキシミティホモジニアスアッセイ)、表面プラズモン共鳴(SPR)に基づくBIACORE法など(Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2006) 103(11), 4005-4010)により、評価することができる。
Fcγ受容体FcγRI、FcγRIIA、FcγRIIB、FcγRIIIA、および/またはFcγRIIIBのいずれかへのFcドメインの結合活性の低下は、上述したFACSおよびELISAフォーマット、ならびにALPHA screen(増幅型ルミネッセンスプロキシミティホモジニアスアッセイ)および表面プラズモン共鳴(SPR)に基づくBIACORE法(Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2006) 103(11), 4005-4010)を用いることによって評価することができる。
本明細書において、「低下したFcγ受容体結合活性」とは、例えば、上記の解析方法に基づいて、試験抗原結合分子または抗体の競合活性が、対照抗原結合分子または抗体の競合活性に比べて、50%以下、好ましくは45%以下、40%以下、35%以下、30%以下、20%以下、または15%以下、特に好ましくは10%以下、9%以下、8%以下、7%以下、6%以下、5%以下、4%以下、3%以下、2%以下、または1%以下であることを意味する。
(a) L234F、L235E、P331S;
(b) C226S、C229S、P238S;
(c) C226S、C229S;または
(d) C226S、C229S、E233P、L234V、L235A
のいずれか1つを有するFcドメインを含むもの、ならびに231位から238位のアミノ酸配列が欠失されているFcドメインを有するものが含まれ、これらの置換の位置は、IgG1抗体のFcドメインを形成するアミノ酸におけるEUナンバリング(各数字はEUナンバリングでのアミノ酸残基の位置を表し、数字の前の1文字アミノ酸記号は置換前のアミノ酸残基を表す一方、数字の後の1文字アミノ酸記号は置換後のアミノ酸残基を表す)に従って特定されている。
(e) H268Q、V309L、A330S、およびP331S;
(f) V234A;
(g) G237A;
(h) V234AおよびG237A;
(i) A235EおよびG237A;または
(j) V234A、A235E、およびG237A
のいずれか1つを有するFcドメインを含むものも含まれ、これらの置換の位置は、IgG2抗体のFcドメインを形成するアミノ酸におけるEUナンバリングに従って特定されている。各数字はEUナンバリングでのアミノ酸残基の位置を表し、数字の前の1文字アミノ酸記号は置換前のアミノ酸残基を表し、数字の後の1文字アミノ酸記号は置換後のアミノ酸残基を表す。
(k) F241A;
(l) D265A;または
(m) V264A
のいずれか1つを有するFcドメインを含むものも含まれ、これらの置換の位置は、IgG3抗体のFcドメインを形成するアミノ酸におけるEUナンバリングに従って特定されている。各数字はEUナンバリングでのアミノ酸残基の位置を表し、数字の前の1文字アミノ酸記号は置換前のアミノ酸残基を表し、数字の後の1文字アミノ酸記号は置換後のアミノ酸残基を表す。
(n) L235A、G237A、およびE318A;
(o) L235E;または
(p) F234AおよびL235A
のいずれか1つを有するFcドメインを含むものも含まれ、これらの置換の位置は、IgG4抗体のFcドメインを形成するアミノ酸におけるEUナンバリングに従って特定されている。各数字はEUナンバリングでのアミノ酸残基の位置を表し、数字の前の1文字アミノ酸記号は置換前のアミノ酸残基を表し、数字の後の1文字アミノ酸記号は置換後のアミノ酸残基を表す。
特定の態様において、抗体の1つまたは複数の残基がシステイン残基で置換された、システイン改変抗体(例えば、「thioMAbs」)を作り出すことが望ましいだろう。特定の態様において、置換を受ける残基は、抗体の、アクセス可能な部位に生じる。それらの残基をシステインで置換することによって、反応性のチオール基が抗体のアクセス可能な部位に配置され、当該反応性のチオール基は、当該抗体を他の部分(薬剤部分またはリンカー‐薬剤部分など)にコンジュゲートして本明細書でさらに詳述するようにイムノコンジュゲートを作り出すのに使用されてもよい。特定の態様において、以下の残基の任意の1つまたは複数が、システインに置換されてよい:軽鎖のV205(Kabatナンバリング);重鎖のA118(EUナンバリング);および重鎖Fc領域のS400(EUナンバリング)。システイン改変抗体は、例えば、米国特許第7,521,541号に記載されるようにして生成されてもよい。
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は、当該技術分野において知られておりかつ容易に入手可能な追加の非タンパク質部分を含むように、さらに修飾されてもよい。抗体の誘導体化に好適な部分は、これに限定されるものではないが、水溶性ポリマーを含む。水溶性ポリマーの非限定的な例は、これらに限定されるものではないが、ポリエチレングリコール (PEG)、エチレングリコール/プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ-1,3-ジオキソラン、ポリ-1,3,6-トリオキサン、エチレン/無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸(ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれでも)、および、デキストランまたはポリ(n-ビニルピロリドン)ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド/エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール類(例えばグリセロール)、ポリビニルアルコール、および、これらの混合物を含む。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、その水に対する安定性のために、製造において有利であるだろう。ポリマーは、いかなる分子量でもよく、枝分かれしていてもしていなくてもよい。抗体に付加されるポリマーの数には幅があってよく、2つ以上のポリマーが付加されるならそれらは同じ分子であってもよいし、異なる分子であってもよい。一般的に、誘導体化に使用されるポリマーの数および/またはタイプは、これらに限定されるものではないが、改善されるべき抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が規定の条件下での療法に使用されるか否か、などへの考慮に基づいて、決定することができる。
例えば、米国特許第4,816,567号に記載されるとおり、抗体は組換えの方法や構成を用いて製造することができる。一態様において、本明細書に記載の抗HLA-DQ2.5抗体をコードする、単離された核酸が提供される。そのような核酸は、抗体のVLを含むアミノ酸配列および/またはVHを含むアミノ酸配列(例えば、抗体の軽鎖および/または重鎖)をコードしてもよい。さらなる態様において、このような核酸を含む1つまたは複数のベクター(例えば、発現ベクター)が提供される。さらなる態様において、このような核酸を含む宿主細胞が提供される。このような態様の1つでは、宿主細胞は、(1)抗体のVLを含むアミノ酸配列および抗体のVHを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、または、(2)抗体のVLを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第一のベクターと抗体のVHを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第二のベクターを含む(例えば、形質転換されている)。一態様において、宿主細胞は、真核性である(例えば、チャイニーズハムスター卵巣 (CHO) 細胞)またはリンパ系の細胞(例えば、Y0、NS0、Sp2/0細胞))。一態様において、抗HLA-DQ2.5抗体の発現に好適な条件下で、上述のとおり当該抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養すること、および任意で、当該抗体を宿主細胞(または宿主細胞培養培地)から回収することを含む、抗HLA-DQ2.5抗体を作製する方法が提供される。
本明細書で提供される抗HLA-DQ2.5抗体は、当該技術分野において知られている種々の測定法によって、同定され、スクリーニングされ、または物理的/化学的特性および/または生物学的活性について特徴決定されてもよい。
一局面において、本発明の抗体は、例えばELISA、ウエスタンブロット等の公知の方法によって、その抗原結合活性に関して試験される。
本発明の文脈において、用語「多重特異性抗体(抗原結合分子)」は、異なるタイプのエピトープに特異的に結合し得る抗体のことをいう。より具体的には、多重特異性抗体は、少なくとも2つの異なるタイプのエピトープに対して特異性を有する抗体であり、異なる抗原を認識する抗体に加えて、同じ抗原上の異なるエピトープを認識する抗体も含まれる。例えば、抗原が異種の受容体である場合、多重特異性抗体は、該異種の受容体を構成する異なるドメインを認識し得;あるいは、抗原が単量体である場合、多重特異性抗体は、該単量体抗原上の複数の部位を認識する。通常、そのような分子は、2種の抗原またはエピトープに結合する(「二重特異性抗体」;本明細書では「デュアル特異性抗体」と同じ意味で使用される)が、より多くの抗原またはエピトープ(例えば、3種以上の抗原)に対する特異性を有していてもよい。本明細書において、「二重特異性」および「多重特異性」などの用語は、ある抗原結合ドメイン/領域の特異性が別の抗原結合ドメイン/領域の特異性とは異なることを意味する。すなわち、これらの用語は、1つの抗原結合分子に2つ以上の特異性があることを意味する。例えば、「二重特異性」抗体の場合、第1の抗原結合ドメインは、HLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体の第1のグループに結合し得、第2の抗原結合ドメインは、HLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体の第2のグループに結合し得る。2つのグループのメンバー(つまり、複合体)は重複していてもよいが、同一でなくてもよい。すなわち、一部の複合体はこれらのグループの両方に含まれていてよい。「二重特異性」および「多重特異性」などの用語は、この状況を包含し得る。同じことが、第1/第2の抗原結合ドメインが結合しない複合体の第1および第2のグループにも適用される。
ここで、該抗原結合分子は、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2つまたはそれ以上に対して結合活性を有し;ここで、該抗原結合分子は、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない。
いくつかの態様において、本発明の抗原結合分子は、HLA-DQ8に対する結合活性を実質的に有しない。
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。
(a) 以下の(i)および(iii)を含む抗原結合分子;
(b) 以下の(ii)および(iii)を含む抗原結合分子;
(c) (a)または(b)の抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(d) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(a)または(b)の抗原結合分子と競合する抗原結合分子;
(i) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列;
(ii) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列;
(iii) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列。
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。
(a) 以下の(i)および(iii)を含む抗原結合分子;
(b) 以下の(ii)および(iii)を含む抗原結合分子;
(c) (a)または(b)の抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(d) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(a)または(b)の抗原結合分子と競合する抗原結合分子;
(i) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列;
(ii) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列;
(iii) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列。
1) イムノコンジュゲート
本発明はまた、1つまたは複数の細胞傷害剤(例えば化学療法剤または化学療法薬、増殖阻害剤、毒素(例えば細菌、真菌、植物もしくは動物起源のタンパク質毒素、酵素的に活性な毒素、もしくはそれらの断片)または放射性同位体)にコンジュゲートされた本明細書の抗HLA-DQ2.5抗体を含むイムノコンジュゲートを提供する。
本明細書に記載の抗HLA-DQ2.5抗体の薬学的製剤は、所望の純度を有する抗体を、1つまたは複数の任意の薬学的に許容される担体 (Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)) と混合することによって、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で、調製される。薬学的に許容される担体は、概して、用いられる際の用量および濃度ではレシピエントに対して非毒性であり、これらに限定されるものではないが、以下のものを含む:リン酸塩、クエン酸塩、および他の有機酸などの緩衝液;アスコルビン酸およびメチオニンを含む、抗酸化剤;保存料(オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム;塩化ヘキサメトニウム;塩化ベンザルコニウム;塩化ベンゼトニウム;フェノール、ブチル、またはベンジルアルコール;メチルまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン;カテコール;レソルシノール;シクロヘキサノール;3-ペンタノール;およびm-クレゾールなど);低分子(約10残基未満)ポリペプチド;血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリンなどのタンパク質;ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー;グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジンなどのアミノ酸;グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む、単糖、二糖、および他の炭水化物;EDTAなどのキレート剤;スクロース、マンニトール、トレハロース、ソルビトールなどの、砂糖類;ナトリウムなどの塩形成対イオン類;金属錯体(例えば、Zn-タンパク質錯体);および/またはポリエチレングリコール (PEG) などの非イオン系表面活性剤。本明細書の例示的な薬学的に許容される担体は、さらに、可溶性中性活性型ヒアルロニダーゼ糖タンパク質 (sHASEGP)(例えば、rHuPH20 (HYLENEX(登録商標)、Baxter International, Inc.) などのヒト可溶性PH-20ヒアルロニダーゼ糖タンパク質)などの間質性薬剤分散剤を含む。特定の例示的sHASEGPおよびその使用方法は(rHuPH20を含む)、米国特許出願公開第2005/0260186号および第2006/0104968号に記載されている。一局面において、sHASEGPは、コンドロイチナーゼなどの1つまたは複数の追加的なグリコサミノグリカナーゼと組み合わせられる。
本明細書で提供される抗HLA-DQ2.5抗体のいずれも、治療的な方法において使用されてよい。一局面において、医薬品としての使用のための、抗HLA-DQ2.5抗体が提供される。さらなる局面において、セリアック病の治療における使用のための、抗HLA-DQ2.5抗体が提供される。特定の態様において、治療方法における使用のための、抗HLA-DQ2.5抗体が提供される。特定の態様において、本発明は、セリアック病を有する個体を治療する方法であって、当該個体に抗HLA-DQ2.5抗体の有効量を投与する工程を含む方法における使用のための、抗HLA-DQ2.5抗体を提供する。このような態様の1つにおいて、方法は、当該個体に少なくとも1つの(例えば後述するような)追加治療剤の有効量を投与する工程を、さらに含む。
本発明の別の局面において、上述の障害の治療、予防、および/または診断に有用な器材を含んだ製品が、提供される。製品は、容器、および当該容器上のラベルまたは当該容器に付属する添付文書を含む。好ましい容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、IV溶液バッグなどが含まれる。容器類は、ガラスやプラスチックなどの、様々な材料から形成されていてよい。容器は組成物を単体で保持してもよいし、症状の治療、予防、および/または診断のために有効な別の組成物と組み合わせて保持してもよく、また、無菌的なアクセスポートを有していてもよい(例えば、容器は、皮下注射針によって突き通すことのできるストッパーを有する静脈内投与用溶液バッグまたはバイアルであってよい)。組成物中の少なくとも1つの有効成分は、本発明の抗体である。ラベルまたは添付文書は、組成物が選ばれた症状を治療するために使用されるものであることを示す。さらに製品は、(a)第一の容器であって、その中に収められた本発明の抗体を含む組成物を伴う、第一の容器;および、(b)第二の容器であって、その中に収められたさらなる細胞傷害剤またはそれ以外で治療的な剤を含む組成物を伴う、第二の容器を含んでもよい。本発明のこの態様における製品は、さらに、組成物が特定の症状を治療するために使用され得ることを示す、添付文書を含んでもよい。あるいはまたは加えて、製品はさらに、注射用制菌水 (BWFI)、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液、およびデキストロース溶液などの、薬学的に許容される緩衝液を含む、第二の(または第三の)容器を含んでもよい。他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、およびシリンジなどの、他の商業的観点またはユーザの立場から望ましい器材をさらに含んでもよい。
本開示の抗原結合分子は、さまざまな既存の医学的使用の技術と組み合わせることができる。本開示の抗原結合分子と組み合わせることができる技術の非限定的な例には、抗原結合分子をコードする核酸を、ウイルスベクターなどを用いて生体内に組み込んで該抗原結合分子を直接発現させる方法が含まれる。そのようなウイルスベクターの例としては、アデノウイルスが挙げられるが、これに限定されない。あるいは、抗原結合分子をコードする核酸を、例えばエレクトロポレーション法または核酸を直接投与する方法などにより、ウイルスベクターを用いずに直接生体内に組み込むことも可能である。あるいは、抗原結合分子を分泌/発現するように遺伝子改変された細胞を生体に投与して、該抗原結合分子を該生体内で連続的に分泌させることも可能である。
組換えタンパク質の発現および精製
1.1. 組換えHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体、HLA-DQ8/グリアジンペプチド複合体、HLA-DQ5.1/DBYペプチド複合体、HLA-DQ2.2/CLIPペプチド複合体、HLA-DQ7.5/CLIPペプチド複合体、HLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体、およびHLA-DQ2.5/BCホルデインペプチド複合体の発現および精製
組換えHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体の発現および精製
発現および精製に使用した配列は、HLA-DQA1*0501(Protein Data Bankアクセッションコード4OZG)およびHLA-DQB1*0201(Protein Data Bankアクセッションコード4OZG)であり、これらは両方ともCAMPATH-1Hシグナル配列:MGWSCIILFLVATATGVHS(配列番号:37)を有する。HLA-DQA1*0501は、C47S変異、GGGGリンカー(配列番号:38)およびc-fosロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、ならびにFlagタグをHLA-DQA1*0501のC末端に有する。HLA-DQB1*0201は、33merグリアジンペプチド配列: LQLQPFPQPELPYPQPELPYPQPELPYPQPQPF(配列番号:39)、および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025)をHLA-DQB1*0201のN末端に、GGGGGリンカー(配列番号:40)およびc-junロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、GGGGGリンカー(配列番号:40)、ならびにBAP配列(BMC Biotechnol. 2008; 8: 41)、8×HisタグをHLA-DQB1*0201のC末端に有する。FreeStyle293-F細胞株(Thermo Fisher)を用いて、組換えHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体を一過性に発現させた。HLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体を発現している馴化培地を、固定化金属アフィニティクロマトグラフィー(IMAC)樹脂と共にインキュベートし、続いてイミダゾールで溶出した。HLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体を含む画分を回収した後、1×PBSで平衡化したSuperdex 200ゲル濾過カラム(GE healthcare)に供した。その後、HLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体を含む画分をプールして、-80℃で保存した。精製したHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体は、BirA(Avidity)を用いてビオチン化した。
発現および精製に使用した配列は、HLA-DQA1*0301(Protein Data Bankアクセッションコード4GG6)およびHLA-DQB1*0302(Protein Data Bankアクセッションコード4GG6)であり、これらは両方ともCAMPATH-1Hシグナル配列:MGWSCIILFLVATATGVHS(配列番号:37)を有する。HLA-DQA1*0301は、SSADLVPRGGGGリンカー(配列番号:41)およびc-fosロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、ならびにFlagタグをHLA-DQA1*0301のC末端に有する。HLA-DQB1*0302は、グリアジンペプチド配列: QQYPSGEGSFQPSQENPQ(配列番号:42)、および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025)をHLA-DQB1*0302のN末端に、SSADLVPRGGGGGリンカー(配列番号:43)およびc-junロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、GGGGGリンカー(配列番号:40)、ならびにBAP配列(BMC Biotechnol. 2008; 8: 41)、8×HisタグをHLA-DQB1*0302のC末端に有する。FreeStyle293-F細胞株を用いて、組換えHLA-DQ8/グリアジンペプチドを一過性に発現させた。HLA-DQ8/グリアジンペプチド複合体を発現している馴化培地を、IMAC樹脂と共にインキュベートし、続いてイミダゾールで溶出した。HLA-DQ8/グリアジンペプチド複合体を含む画分を回収した後、1×PBSで平衡化したSuperdex 200ゲル濾過カラムに供した。その後、HLA-DQ8/グリアジンペプチド複合体を含む画分をプールして、-80℃で保存した。
発現および精製に使用した配列は、HLA-DQA1*0101(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00601)およびHLA-DQB1*0501(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00638)であり、これらは両方ともCAMPATH-1Hシグナル配列:MGWSCIILFLVATATGVHS(配列番号:37)を有する。HLA-DQA1*0101は、C30Y変異を有する。HLA-DQA1*0101は、SSADLVPRGGGG リンカー(配列番号:41)およびc-fosロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、ならびにFlagタグをHLA-DQA1*0101のC末端に有する。HLA-DQB1*0501は、DBYペプチド配列: ATGSNCPPHIENFSDIDMGE(配列番号:44)、および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025)をHLA-DQB1*0501のN末端に、SSADLVPRGGGGGリンカー(配列番号:43)およびc-junロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、GGGGGリンカー(配列番号:40)、ならびにBAP配列(BMC Biotechnol. 2008; 8: 41)、8×HisタグをHLA-DQB1*0501のC末端に有する。FreeStyle293-F細胞株を用いて、組換えHLA-DQ5.1/DBYペプチド複合体を一過性に発現させた。HLA-DQ5.1/DBYペプチド複合体を発現している馴化培地を、IMAC樹脂と共にインキュベートし、続いてイミダゾールで溶出した。HLA-DQ5.1/DBYペプチド複合体を含む画分を回収した後、1×PBSで平衡化したSuperdex 200ゲル濾過カラムに供した。その後、HLA-DQ5.1/DBYペプチド複合体を含む画分をプールして、-80℃で保存した。精製したHLA-DQ5.1/DBYペプチドは、BirAを用いてビオチン化した。
発現および精製に使用した配列は、HLA-DQA1*0201(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00607)およびHLA-DQB1*0202(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00623)であり、これらは両方ともCAMPATH-1Hシグナル配列:MGWSCIILFLVATATGVHS(配列番号:37)を有する。HLA-DQA1*0201は、SSADLVPRGGGGリンカー(配列番号:41)およびc-fosロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、ならびにFlagタグをHLA-DQA1*0201のC末端に有する。HLA-DQB1*0202は、CLIPペプチド配列: KLPKPPKPVSKMRMATPLLMQALPMGALP(配列番号:45)、および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025)をHLA-DQB1*0202のN末端に、SSADLVPRGGGGGリンカー(配列番号:43)およびc-junロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、GGGGGリンカー(配列番号:40)、ならびにBAP配列(BMC Biotechnol. 2008; 8: 41)、8×HisタグをHLA-DQB1*0202のC末端に有する。FreeStyle293-F細胞株を用いて、組換えHLA-DQ2.2/CLIPペプチド複合体を一過性に発現させた。HLA-DQ2.2/CLIPペプチド複合体を発現している馴化培地を、IMAC樹脂と共にインキュベートし、続いてイミダゾールで溶出した。HLA-DQ2.2/CLIPペプチド複合体を含む画分を回収した後、1×PBSで平衡化したSuperdex 200ゲル濾過カラムに供した。その後、HLA-DQ2.2/CLIPペプチド複合体を含む画分をプールして、-80℃で保存した。
発現および精製に使用した配列は、HLA-DQA1*0505(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00619)およびHLA-DQB1*0301(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00625)であり、これらは両方ともCAMPATH-1Hシグナル配列:MGWSCIILFLVATATGVHS(配列番号:37)を有する。HLA-DQA1*0505は、C66S変異を有する。HLA-DQA1*0505は、SSADLVPRGGGGリンカー(配列番号:41)およびc-fosロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、ならびにFlagタグをHLA-DQA1*0505のC末端に有する。HLA-DQB1*0301は、CLIPペプチド配列: KLPKPPKPVSKMRMATPLLMQALPMGALP(配列番号:45)、および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025)をHLA-DQB1*0301のN末端に、SSADLVPRGGGGGリンカー(配列番号:43)およびc-junロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、GGGGGリンカー(配列番号:40)、ならびにBAP配列(BMC Biotechnol. 2008; 8: 41)、8×HisタグをHLA-DQB1*0301のC末端に有する。FreeStyle293-F細胞株を用いて、組換えHLA-DQ7.5/CLIPペプチド複合体を一過性に発現させた。HLA-DQ7.5/CLIPペプチド複合体を発現している馴化培地を、IMAC樹脂と共にインキュベートし、続いてイミダゾールで溶出した。HLA-DQ7.5/CLIPペプチド複合体を含む画分を回収した後、1×PBSで平衡化したSuperdex 200ゲル濾過カラムに供した。その後、HLA-DQ7.5/CLIPペプチド複合体を含む画分をプールして、-80℃で保存した。
発現と精製のために使用した配列は、HLA-DQA1*0501(Protein Data Bankアクセッションコード4OZG)およびHLA-DQB1*0201(Protein Data Bankアクセッションコード4OZG)であり、これらは両方ともCAMPATH-1Hシグナル配列:MGWSCIILFLVATATGVHS(配列番号:37)を有する。HLA-DQA1*0501は、C47S変異、3Cプロテアーゼ切断リンカー:LEVLFQGP(配列番号:46)およびGGGGリンカー(配列番号:38)、ならびにc-fosロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)およびFlagタグをHLA-DQA1*0501のC末端に有する。HLA-DQB1*0201は、γ2グリアジンペプチド配列:IIQPEQPAQLP(配列番号:47)、および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025)をHLA-DQB1*0201のN末端に、3Cプロテアーゼ切断リンカー:LEVLFQGP(配列番号:46)およびc-junロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、GGGGGリンカー(配列番号:40)、およびBAP配列(BMC Biotechnol. 2008; 8: 41)、8×HisタグをHLA-DQB1*0201のC末端に有する。組換えHLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体は、FreeStyle293-F細胞株を用いて一過性に発現させた。HLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体を発現している馴化培地をIMAC樹脂と共にインキュベートし、続いてイミダゾールで溶出した。HLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体を含む画分を回収した後、1×PBSで平衡化したSuperdex 200ゲル濾過カラムに供した。その後、HLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体を含む画分をプールして、-80℃で保存した。
発現と精製のために使用した配列は、HLA-DQA1*0501(Protein Data Bankアクセッションコード4OZG)およびHLA-DQB1*0201(Protein Data Bankアクセッションコード4OZG)であり、これらは両方ともCAMPATH-1Hシグナル配列:MGWSCIILFLVATATGVHS(配列番号:37)を有する。HLA-DQA1*0501は、C47S変異、3Cプロテアーゼ切断リンカー:LEVLFQGP(配列番号:46)およびGGGGリンカー(配列番号:38)、ならびにc-fosロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)およびFlagタグをHLA-DQA1*0501のC末端に有する。HLA-DQB1*0201は、BCホルデインペプチド配列:EPEQPIPEQPQPYPQQP(配列番号:48)、および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025)をHLA-DQB1*0201のN末端に、3Cプロテアーゼ切断リンカー:LEVLFQGP(配列番号:46)およびc-junロイシンジッパー配列(PNAS, 1998 Sep 29;95(20): 11828-33)、GGGGGリンカー(配列番号:40)、ならびにBAP配列(BMC Biotechnol. 2008; 8: 41)、8×HisタグをHLA-DQB1*0201のC末端に有する。組換えHLA-DQ2.5/BCホルデインペプチド複合体は、FreeStyle293-F細胞株を用いて一過性に発現させた。HLA-DQ2.5/BCホルデインペプチド複合体を発現している馴化培地をIMAC樹脂と共にインキュベートし、続いてイミダゾールで溶出した。HLA-DQ2.5/BCホルデインペプチド複合体を含む画分を回収した後、1×PBSで平衡化したSuperdex 200ゲルろ過カラムに供した。その後、HLA-DQ2.5/BCホルデインペプチド複合体を含む画分をプールして、-80℃で保存した。
2.1 D2 TCRを発現するJ.RT3-T3.5細胞株の樹立
D2 TCRα鎖cDNA(配列番号:97)を発現ベクターpCXND3(WO2008/156083)に挿入した。D2 TCRβ鎖cDNA(配列番号:49)を発現ベクターpCXZD1(US2009/0324589)に挿入した。線状化したD2 TCRα鎖-pCXND3およびD2 TCRβ鎖-pCXZD1(各1500ng)をエレクトロポレーション(LONZA、4D-Nucleofector X)によりJ.RT3-T3.5細胞株に同時に導入した。次に、トランスフェクトされた細胞をジェネティシンとゼオシンを含む培地中で培養し、その後、AriaIII(Becton Dickinson)を用いてソーティングを行って高発現細胞集団を得た。次いで、シングルセルクローニングを行い、目的のD2 TCR分子を高発現する細胞を得た。
HLA-DQA1*0501 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00613)、HLADQA1*0201 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00607)、HLA-DQA1*0505 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00619)、HLA-DQA1*0301 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00608)、HLA-DQA1*0101 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00601)、HLA-DQA1*0103 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00604)、HLA-DQA1*0303 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00611)、HLA-DRA1*0101 cDNA(GenBankアクセッション番号NM_019111.4)、またはHLADPA1*0103 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00499)を発現ベクターpCXND3(WO2008/156083)に挿入した。HLA-DQB1*0201 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00622)、HLADQB1*0202 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00623)、HLA-DQB1*0301 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00625)、HLA-DQB1*0302 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00627)、HLA-DQB1*0501 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00638)、HLA-DQB1*0603 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00647)、HLA-DRB1*0301 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00671)、またはHLA-DPB1*0401 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00521)を発現ベクターpCXZD1(US/20090324589)に挿入した。
線状化したHLA-DQA1*0501-pCXND3とHLADQB1*0201-pCXZD1のそれぞれ、および線状化したHLA-DQA1*0201-pCXND3とHLA-DQB1*0202-pCXZD1、
HLA-DQA1*0505-pCXND3とHLADQB1*0301-pCXZD1、
HLA-DQA1*0301-pCXND3とHLADQB1*0302-pCXZD1、
HLA-DQA1*0101-pCXND3とHLADQB1*0501-pCXZD1、
HLA-DQA1*0103-pCXND3とHLADQB1*0603-pCXZD1、
HLA-DQA1*0303-pCXND3とHLADQB1*0301-pCXZD1、
HLA-DRA1*0101-pCXND3とHLADRB1*0301-pCXZD1、
HLA-DPA1*0103-pCXND3とHLA-DPB1*0401-pCXZD1のそれぞれを、エレクトロポレーション(LONZA、4D-Nucleofector X)によりマウスIL-3依存性プロB細胞由来細胞株Ba/F3に同時に導入した。次に、トランスフェクトされた細胞をジェネティシンとゼオシンを含む培地中で培養した。その後、培養して増殖させた細胞をHLA分子の発現についてチェックし、HLAの高発現を確認した。これを実施して、目的のHLA分子を高発現する細胞を得た。樹立された各細胞株を以下のように命名した:Ba/F3-HLA-DQ2.5(HLA-DQA1*0501、HLADQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.2(HLA-DQA1*0201、HLA-DQB1*0202)、Ba/F3-HLA-DQ7.5(HLA-DQA1*0505、HLA-DQB1*0301)、Ba/F3-HLA-DQ8(HLA-DQA1*0301、HLADQB1*0302)、Ba/F3-HLA-DQ5.1(HLA-DQA1*0101、HLA-DQB1*0501)、Ba/F3-HLA-DQ6.3(HLA-DQA1*0103、HLA-DQB1*0603)、Ba/F3-HLA-DQ7.3(HLA-DQA1*0303、HLADQB1*0301)、Ba/F3-HLA-DR(HLA-DRA1*0101、HLA-DRB1*0301)、およびBa/F3-HLA-DP(HLA-DPA1*0103、HLA-DPB1*0401)。
HLA-DQA1*0501 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00613)を発現ベクターpCXND3(WO2008/156083)に挿入した。HLA-DQB1*0201 cDNA(IMGT/HLAアクセッション番号HLA00622)を発現ベクターpCXZD1(US/20090324589)に挿入した。HLA-DQ2.5/各ペプチド複合体のためのHLA-DQB1*0201は、各ペプチド配列および第X因子切断リンカー(Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2007 Dec 1; 63(Pt 12): 1021-1025.)をHLA-DQB1*0201のN末端に有する。具体的には、各ペプチド配列は以下の通りであった:CLIPペプチド配列のためにKLPKPPKPVSKMRMATPLLMQALPMGALP(配列番号:45)を使用し;B型肝炎ウイルスペプチド配列のためにPDRVHFASPLHVAWR(配列番号:50)を使用し;サルモネラペプチド配列のためにMMAWRMMRY(配列番号:51)を使用し;チロペルオキシダーゼペプチド配列のためにYIDVWLGGLAENFLPY(配列番号:52)を使用し;マイコバクテリウム・ボビスペプチド配列のためにKPLLIIAEDVEGEY(配列番号:53)を使用し;α1グリアジンペプチド配列のためにQPFPQPELPYP(配列番号:54)を使用し;α2グリアジンペプチド配列のためにFPQPELPYPQP(配列番号:55)を使用し;γ1グリアジンペプチド配列のためにQPQQSFPEQQQ(配列番号:56)を使用し;γ2グリアジンペプチド配列のためにGIIQPEQPAQLP(配列番号:57)を使用し;ω1グリアジンペプチド配列のためにQPFPQPEQPFP(配列番号:58)を使用し;ω2グリアジンペプチド配列のためにFPQPEQPFPWQ(配列番号:59)を使用し;BCホルデインペプチド配列のためにPQQPIPEQPQPYPQQP(配列番号:60)を使用し;α3グリアジンペプチド配列のためにPFRPEQPYPQP(配列番号:61)を使用し;α1bグリアジンペプチド配列のためにLPYPQPELPYP(配列番号:62)を使用し;γ4bグリアジンペプチド配列のためにFPQPEQEFPQP(配列番号:63)を使用し;アベニン1ペプチド配列のためにQPYPEQEEPFV(配列番号:64)を使用し;アベニン2ペプチド配列のためにQPYPEQEQPFV(配列番号:65)を使用し;アベニン3ペプチド配列のためにQPYPEQEQPIL(配列番号:66)を使用し;ホルデイン1ペプチド配列のためにPQQPFPQPEQPFRQ(配列番号:67)を使用し;ホルデイン2ペプチド配列のためにQEFPQPEQPFPQQP(配列番号:68)を使用し;セカリン1ペプチド配列のためにPEQPFPQPEQPFPQ(配列番号:69)を使用し;セカリン2ペプチド配列のためにQPFPQPEQPFPQSQ(配列番号:70)を使用し;14mer 1ペプチド配列のためにPQQQTLQPEQPAQLP(配列番号:71)を使用し;33merグリアジンペプチド配列のためにLQLQPFPQPELPYPQPELPYPQPELPYPQPQPF(配列番号:39)を使用し;26merグリアジンペプチド配列のためにFLQPEQPFPEQPEQPYPEQPEQPFPQ(配列番号:72)を使用した。線状化したHLA-DQA1*0501-pCXND3とHLA-DQB1*0201/各ペプチド-pCXZD1のそれぞれを、エレクトロポレーション(LONZA、4D-Nucleofector X)によりマウスIL-3依存性プロB細胞由来細胞株Ba/F3に同時に導入した。次に、トランスフェクトされた細胞をジェネティシンとゼオシンを含む培地中で培養した。その後、培養して増殖させた細胞をHLA-DQ2.5分子の発現についてチェックし、HLA-DQ2.5の高発現を確認した。樹立された各細胞株を以下のように命名した:Ba/F3-HLA-DQ2.5/CLIP(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/CLIPペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/HBV(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/B型肝炎ウイルスペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/サルモネラ(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/サルモネラペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/TPO(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/チロペルオキシダーゼペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/M.ボビス(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/マイコバクテリウム・ボビスペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α1グリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/α1グリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α2グリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/α2グリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/γ1グリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/γ1グリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/γ2グリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/γ2グリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ω1グリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/ω1グリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ω2グリアジン(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/ω2グリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/BCホルデイン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/BCホルデインペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α3グリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/α3グリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α1bグリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/α1bグリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/γ4bグリアジン(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/γ4bグリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/アベニン1(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/アベニン1ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/アベニン2(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/アベニン2ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/アベニン3(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/アベニン3ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ホルデイン1(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/ホルデイン1ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ホルデイン2(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/ホルデイン2ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/セカリン1(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/セカリン1ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/セカリン2(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/セカリン2ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/14mer 1(HLA-DQA1*0501、HLADQ2.5/14mer 1ペプチドのHLA-DQB1*0201)、Ba/F3-HLA-DQ2.5/33merグリアジン(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)、およびBa/F3-HLA-DQ2.5/26merグリアジン(HLA-DQA1*0501、HLA-DQ2.5/26merグリアジンペプチドのHLA-DQB1*0201)。
抗DQ2.5抗体の作製
抗DQ2.5抗体を次のように調製し、選択し、アッセイした:
NZWウサギをHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体で皮内免疫した。2ヶ月間に4回の反復投与を行った後、血液と脾臓を採取した。B細胞の選択のために、ビオチン化HLA-DQ5.1/DBYペプチド複合体、ビオチン化HLA-DQ8/グリアジンペプチド複合体、およびAlexa Fluor 488標識HLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体を調製した。HLA-DQ2.5に結合できるがHLA-DQ5.1およびHLA-DQ8には結合しないB細胞を、上記の標識タンパク質で染色し、セルソーターを用いて選別し、その後WO2016098356A1に記載の手順に従ってプレーティングし、培養した。培養後、B細胞培養上清をさらなる解析のために回収し、B細胞ペレットを凍結保存した。
B細胞培養上清を用いたELISAにより、HLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体への特異的結合を評価し、HLA-DQ5.1/DBYペプチド複合体およびHLA-DQ8/グリアジンペプチド複合体への非交差反応性を確認した。336株のB細胞株がHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体への特異的結合を示すことが、結果により示された。
HLA-DQ2.2/CLIPペプチド複合体およびHLA-DQ7.5/CLIPペプチド複合体への交差反応性を評価するために、上記の選択された336株のB細胞の上清を用いてELISAを実施した。さらに、選択された336株のB細胞の上清を用いた中和アッセイにより中和活性をチェックした。
中和アッセイの手順は、以下に説明するAlphaLISA中和アッセイ(HLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド-D2 TCR)に従った。高い中和活性をもつB細胞が好ましく、クローニングのために選択された。
所望の結合特異性を示す180株のB細胞株のRNAを、ZR-96 Quick-RNAキット(ZYMO RESEARCH、カタログ番号R1053)を用いて、凍結保存した細胞ペレットから精製した。これらをDQN0377-0464と名付けた。選択された細胞株において抗体重鎖可変領域をコードするDNAを逆転写PCRにより増幅し、F1332m重鎖定常領域をコードするDNA(配列番号:73)と組換えた(WO2018/155692)。抗体軽鎖可変領域をコードするDNAも逆転写PCRにより増幅し、hk0MC軽鎖定常領域をコードするDNA(配列番号:74)と組換えた(WO2018/155692)。クローニングされた抗体をFreestyle(商標)293-F細胞(Invitrogen)において発現させ、培養上清から精製した。以下で説明するさらなる評価により、2個のクローン(DQN0385ee、DQN0429cc)を結合能力、特異性および機能性に基づいて選択した。DQN0344xx(WO2019/069993)も利用した。DQN0139bb(WO2018/155692)をアッセイ対照として使用した。これらの抗体のVH、VL、HCDRおよびLCDRの配列ID番号を上記表1に示す。これらの抗体の重鎖および軽鎖のFR1~FR4およびCDR1~CDR3の配列を表2に示す。
二重特異性抗体の作製:
複数のHLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体への交差反応結合を示す二重特異性抗体を作製した。二重特異性抗体を作製するために、6つの多重グルテンペプチド選択的HLA-DQ2.5二価抗体(DQN0344Hx-SG181.S3n、DQN0385He-SG181.S3n、DQN0429Hc-SG181.S3n、DQN0139Hb-SG181.S3n, p、DQN0385He-SG181.S3p、およびDQN0429Hc-SG181.S3p)と1つの陰性対照抗体(IC17HdK-SG181.S3p)を使用した。SG181は、Fcγ受容体に対するFc結合を弱めるFcγ受容体サイレンシングFcである。可変領域およびヒトIgG1定常領域を含む抗体をコードするcDNAを合成して、標準的な哺乳動物発現ベクターにクローニングした。二価抗体のそれぞれは、一過性にトランスフェクトして、Expi293発現システム(Thermo Fisher Scientific)を用いて発現させた。培養上清を回収し、MabSelect SuRe pccアフィニティクロマトグラフィー(GE Healthcare)および続いてSuperdex200(GE Healthcare)を使用するゲル浸透クロマトグラフィーを用いて、抗体を該上清から精製した。二重特異性抗体を作製するために、精製された7つの二価抗体を(WO2015/046467に記載される)Fabアーム交換技術に供した。その後、6つの二重特異性抗体を作製して、それぞれ、DQN0344xx//IC17、DQN0385ee//IC17、DQN0429cc//IC17、DQN0344xx//DQN0385ee、DQN0344xx//DQN0429cc、およびDQN0139bb//IC17と命名した。二重特異性抗体の概要と配列を表3に示す。SG181.S3n(配列番号:33)およびSG181.S3p(配列番号:34)は、重鎖定常領域の配列である。k0MC(配列番号:35)およびSK1(配列番号:36)は、軽鎖定常領域の配列である。
二重特異性抗体の概要と配列を以下の表3に示す。
HLAに対する抗体の結合解析:
図1~12は、FACSによって測定された、数種のペプチドとHLA-DQの複合体を発現するBa/F3細胞株のパネルへの各抗HLA-DQ抗体の結合を示す。以下に対する抗HLA-DQ抗体の結合を試験した:Ba/F3-HLA-DQ2.5、Ba/F3-HLA-DQ2.2、Ba/F3-HLA-DQ7.5、Ba/F3-HLA-DQ8、Ba/F3-HLA-DQ5.1、Ba/F3-HLA-DQ6.3、Ba/F3-HLA-DQ7.3、Ba/F3-HLA-DR、Ba/F3-HLA-DP、Ba/F3-HLA-DQ2.5/CLIP、Ba/F3-HLA-DQ2.5/HBV、Ba/F3-HLA-DQ2.5/サルモネラ、Ba/F3-HLA-DQ2.5/TPO、Ba/F3-HLA-DQ2.5/M.ボビス、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α1グリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α2グリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/γ1グリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/γ2グリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ω1グリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ω2グリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/BCホルデイン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α3グリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/α1bグリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/γ4bグリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/アベニン1、Ba/F3-HLA-DQ2.5/アベニン2、Ba/F3-HLA-DQ2.5/アベニン3、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ホルデイン1、Ba/F3-HLA-DQ2.5/ホルデイン2、Ba/F3-HLA-DQ2.5/セカリン1、Ba/F3-HLA-DQ2.5/セカリン2、Ba/F3-HLA-DQ2.5/14mer 1、Ba/F3-HLA-DQ2.5/33merグリアジン、Ba/F3-HLA-DQ2.5/26merグリアジン。5μg/mLの各抗HLA-DQ抗体を各細胞株と共に室温で30分間インキュベートし、FACSバッファー(PBS中の2%FBS、2mM EDTA)で洗浄した。次に、ヤギF(ab')2抗ヒトIgG, マウスads-PE(Southern Biotech、カタログ番号2043-09)を加えて4℃で20分間インキュベートし、これをFACSバッファーで洗浄した。データ収集をLSRFortessa X-20(Becton Dickinson)で行い、続いてFlowJoソフトウェア(Tree Star)とMicrosoft Office Excel2013を用いて解析した。IC17のMFI値を0%とし、DQN0139bb/IC17のMFI値を100%としたときの、二重特異性抗体の%MFIを決定した。IC17のMFI値を0%とし、DQN0139bbのMFI値を100%としたときの、二価抗体の%MFIを決定した。
HLA-DQ2.5+ PBMC B細胞に対する抗体の結合解析:
図13および図14は、FACSによって測定された、HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞への抗HLA-DQ抗体の結合を示す。20μg/mLの各抗HLA-DQ抗体を、ヒトFcRブロッキング試薬(Miltenyi Biotech、カタログ番号130-059-901)の存在下でPBMCと共に室温で30分間インキュベートし、FACSバッファー(PBS中の2%FBS、2mM EDTA)で洗浄した。次に、Pacific Blue(商標)抗ヒトCD19抗体マウスIgG1k(Biolegend、カタログ番号2043-09)およびAlexa Fluor 555標識抗ヒトIgG Fc抗体(参考例1~3)を加えて4℃で30分間インキュベートし、これをFACSバッファーで洗浄した。データ収集をLSRFortessa X-20(Becton Dickinson)で行い、続いてFlowJoソフトウェア(Tree Star)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析した。IC17のMFI値を0%とし、DQN0139bb/IC17のMFI値を100%としたときの、二価抗体の%MFIを決定した。IC17のMFI値を0%とし、DQN0139bbのMFI値を100%としたときの、二価抗体の%MFIを決定した。
細胞ベースの中和アッセイ:
細胞ベースの中和活性を確認した。HLA-DQ2.5を含むエプスタイン・バーウイルス(EBV)形質転換リンパ芽球様細胞株(ECACC、IHW9088)を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、化学的に合成した33merグリアジンペプチド(Genscript、LQLQPFPQPELPYPQPELPYPQPELPYPQPQPF(配列番号:39))および段階希釈した抗HLA-DQ抗体およびD2 TCR発現J.RT3-T3.5細胞を添加して、37℃、5%CO2で一晩培養した。33merグリアジンペプチドの最終濃度は200μg/mLであり、IHW9088は3.0×104細胞/ウェルであり、D2 TCR発現J.RT3-T3.5細胞は1.0×105細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、細胞を回収し、FACSバッファー(PBS中の2%FBS、2mM EDTA)で洗浄した。次に、40倍希釈したAPC抗ヒトCD20抗体(Biolegend、302310)および40倍希釈したBrilliant Violet 421抗ヒトCD69抗体(Biolegend、310930)を加えて4℃で30分間インキュベートし、FACSバッファーを用いて洗浄し、再懸濁した。データ収集をLSR Fortessa (Becton Dickinson)で行い、続いてFlowJoソフトウェア(Tree Star)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、D2 TCR発現J.RT3-T3.5細胞の活性化に対する抗HLA-DQ抗体の中和活性を決定した。J.RT3-T3.5細胞上のCD69発現を活性化マーカーとして使用した。図17および18に示すように、試験した全ての抗HLA DQ2.5抗体は、33merグリアジンペプチドによって誘導されるD2 TCR発現T細胞の活性化を阻害した。
pH7.4でヒトHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体、HLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体、およびHLA-DQ2.5/BCホルデイングリアジンペプチド複合体に結合する抗HLA-DQ2.5抗体のアフィニティを、Biacore T200機器(GE Healthcare)を用いて37℃で測定した。アミンカップリングキット(GE Healthcare)を用いて、CM4センサーチップの全てのフローセルに抗ヒトFc(GE Healthcare)を固定化した。全ての抗体および分析物を、20mM ACES、150mM NaCl、0.05%Tween 20、0.005%NaN3を含有するACES(pH7.4)中で調製した。各抗体を、抗ヒトFcによりセンサー表面で捕捉した。抗体捕捉レベルは200共鳴単位(RU)を目指した。組換えヒトHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体およびHLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体を、2倍段階希釈によって調製した50~800nMで注入し、続いて解離させた。組換えヒトHLA-DQ2.5/BCホルデイングリアジンペプチド複合体を、2倍段階希釈によって調製した25~400nMで注入し、続いて解離させた。各サイクルごとにセンサー表面を3M MgCl2で再生させた。結合アフィニティは、Biacore T200評価ソフトウェア(GE Healthcare)を用いてデータを処理し、1:1結合モデルにフィッティングすることによって決定した。
ヒトHLA-DQ2.5/33merグリアジンペプチド複合体、HLA-DQ2.5/γ2グリアジンペプチド複合体およびHLA-DQ2.5/BCホルデイングリアジンペプチド複合体に結合する抗HLA-DQ2.5抗体のアフィニティを表6に示す。
9.1 TCR KO Jurkat NFAT-Luc細胞株の樹立
Cas9とTCR定常領域を標的とするシングルガイドRNAで構成されたリボヌクレオタンパク質(RNP)複合体(Blood. 2018;131:311-22.)を、エレクトロポレーション(LONZA、Nucleofector 2b)によってNFAT-RE-luc2 Jurkat細胞株(Promega Corporation、CS176401)に導入した。TCRα鎖とTCRβ鎖に対する全てのシングルガイドRNAを混合して、同時に導入した。RNPを導入した細胞をハイグロマイシンB含有培地中で培養し、続いてFACS Aria III(Becton, Dickinson and Company)を用いてシングルセルクローニングを行った。その後、TCRα鎖およびTCRβ鎖の配列をチェックし、TCRα鎖とTCRβ鎖がノックアウトされたJurkat NFAT-Luc由来のクローンを同定した。樹立されたクローンをTCR KO Jurkat NFAT-Lucと命名した。
DQ2.5/α1グリアジン拘束性TCR(TCC ID: 387.9)、DQ2.5/α1bグリアジン拘束性TCR(TCC ID: 370.2.25)、DQ2.5/ω1グリアジン拘束性TCR(TCC ID: 442P.C.21)、DQ2.5/ω2グリアジン拘束性TCR(TCC ID: 578.42)、DQ2.5/γ1グリアジン拘束性TCR(TCC ID: 820.27)、DQ2.5/γ2グリアジン拘束性TCR(TCC ID: 430.1.41)、DQ2.5/γ4aグリアジン拘束性TCR(TCC ID: 430.1.36)のアミノ酸配列情報は、物質移動合意書に基づいてOslo Universityから入手した。DQ2.5/α2グリアジン拘束性TCR(D2 TCR)のアミノ酸配列情報は、Nat Struct Mol Biol. 2014;21:480-8から入手し、DQ2.5/BCホルデイン拘束性TCR(TCC ID: 1468.2)のアミノ酸配列情報は、Eur J Immunol. 2020; 50: 256-269から入手した。
各TCRβ鎖配列を、2A自己切断ペプチド配列(P2A、アミノ酸配列: GSGATNFSLLKQAGDVEENPGP、配列番号:93)によって対応するTCRα鎖配列と連結させた。DQ2.5/γ2グリアジン拘束性TCRおよびDQ2.5/α2グリアジン拘束性TCRを除いて、全てのTCRα鎖とTCRβ鎖は、これら自体の天然シグナルペプチド配列を有する。DQ2.5/γ2グリアジン拘束性TCRの天然シグナル配列は、Campathシグナル配列(MGWSCIILFLVATATGVHS、配列番号:37)で置き換えた。Campathシグナル配列(MGWSCIILFLVATATGVHS、配列番号:37)を、DQ2.5/α2グリアジン拘束性TCRα鎖β鎖のN末端にも結合させた。コドン最適化された各TCRβ鎖-P2A-TCRα鎖cDNAを発現ベクターpCXZD1(US/20090324589)に挿入した。DQ2.5/α1グリアジン拘束性TCR、DQ2.5/α2グリアジン拘束性TCR(D2 TCR)、DQ2.5/ω1グリアジン拘束性TCR、DQ2.5/ω2グリアジン拘束性TCR、DQ2.5/γ1グリアジン拘束性TCR、DQ2.5/γ2グリアジン拘束性TCR、DQ2.5/BCホルデイン拘束性TCRについては、各TCRβ鎖-P2A-TCRα鎖-pCXZD1をエレクトロポレーション(LONZA、4D-Nucleofector)によってTCR KO Jurkat NFAT-Lucに導入した。その後、トランスフェクトされた細胞を、ゼオシンとハイグロマイシンBを含む培地中で培養し、次いでFACS Aria III(Becton, Dickinson and Company)を用いて、TCR陽性画分(抗TCRalphabeta抗体(Miltenyi Biotech)で染色することによって決定される)のシングルセルクローニングを行った。樹立されたクローンを、以下のように命名した:DQ2.5/α1グリアジン拘束性TCRが導入された場合にはα1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Luc、DQ2.5/ω1グリアジン拘束性TCRが導入された場合にはω1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Luc、DQ2.5/ω2グリアジン拘束性TCRが導入された場合にはω2グリアジンTCR Jurkat NFAT-Luc、DQ2.5/γ1グリアジン拘束性TCRが導入された場合にはγ1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Luc、DQ2.5/γ2グリアジン拘束性TCRが導入された場合にはγ2グリアジンTCR Jurkat NFAT-Luc、DQ2.5/α2グリアジン拘束性TCR(D2)が導入された場合にはD2 TCR Jurkat NFAT-Luc、およびDQ2.5/BCホルデイン拘束性TCRが導入された場合にはBCホルデインTCR Jurkat NFAT-Luc。DQ2.5/α1bグリアジン拘束性TCR、DQ2.5/γ4aグリアジン拘束性TCRについては、各TCRβ鎖-P2A-TCRα鎖-pCXZD1をエレクトロポレーション(LONZA、4D-Nucleofector)によってTCR KO Jurkat NFAT-Lucに導入した。次いで、トランスフェクトされた細胞を、ゼオシンとハイグロマイシンBを含む培地中で培養し、一過性にTCRを発現する細胞株として直接使用した。これらの一過性TCR発現細胞株を、DQ2.5/α1bグリアジン拘束性TCRが導入された場合にはα1bグリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucと命名し、DQ2.5/γ4aグリアジン拘束性TCRが導入された場合にはγ4aグリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucと命名した。
組織トランスグルタミナーゼで処理したペプシントリプシン消化グリアジン(tTG-PTグリアジン)の調製
10gのグリアジン(Sigma、G3375)を100mLの0.2N HClに懸濁した後、2M NaOHでpHをpH7.4に調整した。次に、201mgのペプシン(Sigma、P7012)を加え、37℃に設定した水浴中で2時間撹拌した。次に、ペプシン処理したグリアジンを201mgのトリプシン(Sigma、T0303)で処理し、37℃に設定した水浴中で4時間撹拌した。ペプシンとトリプシンを不活性化するために、ペプシントリプシン消化グリアジンを98℃で30分間インキュベートし、その後-75℃で凍結乾燥させた。
ペプシントリプシン消化グリアジンをPBSで1mg/mLに再構成させた。組織トランスグルタミナーゼ(Sigma、T5398)を1mM CaCl2-PBSで1mg/mLに再構成させた。1mg/mLのペプシントリプシン消化グリアジンを1mg/mLの組織トランスグルタミナーゼと9対1の比で混合した後、37℃で2時間インキュベートして、0.9mg/mLのtTG-PTグリアジンを作製した。
11.1
DQ2.5/α1グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。HLA-DQ2.5を発現するエプスタイン・バーウイルス(EBV)形質転換リンパ芽球様細胞株(ECACC、IHW9023)を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞とtTG-PTグリアジンの混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とα1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。tTG2-PTグリアジンの最終濃度は100μg/mLであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、α1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/α1グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/α2グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞とtTG-PTグリアジンの混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とD2 TCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。tTG2-PTグリアジンの最終濃度は50μg/mLであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、D2 TCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いてOutlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/α2グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/ω1グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞と化学的に合成したωグリアジンW03E7ペプチド(Genscript、EQPFPQPEQPFPWQP、配列番号:94)との混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とω1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。ωグリアジンW03E7ペプチドの最終濃度は10μMであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、ω1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/ω1グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/ω2グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞と化学的に合成したωグリアジンW03E7ペプチド(Genscript、EQPFPQPEQPFPWQP、配列番号:94)との混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とω2グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。ωグリアジンW03E7ペプチドの最終濃度は0.3μMであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、ω2グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/ω2グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/γ1グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞とtTG2-PTグリアジンとの混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とγ1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。tTG2-PTグリアジンの最終濃度は50μg/mLであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、γ1グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/γ1グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/γ2グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞とtTG2-PTグリアジンとの混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とγ2グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。tTG2-PTグリアジンの最終濃度は30μg/mLであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、γ2グリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/γ2グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/BCホルデインペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞と化学的に合成したBCホルデインB08E2E7ペプチド(Genscript、EPEQPIPEQPQPYPQQ、配列番号:95)との混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とBCホルデインTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。B08E2E7ペプチドの最終濃度は0.2μMであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、BCホルデインTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/BCホルデインペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/α1bペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞と化学的に合成した33merグリアジンペプチド(Genscript、LQLQPFPQPELPYPQPELPYPQPELPYPQPQPF(配列番号:39))との混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とα1bグリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。33merグリアジンペプチドの最終濃度は0.4μMであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、α1bグリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/α1bグリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
DQ2.5/γ4aペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を確認した。IHW9023細胞を抗原提示細胞として使用した。
IHW9023細胞と化学的に合成したγ4aグリアジンペプチド(Genscript、FSQPEQEFPQPQ(配列番号:96))との混合物を96ウェルプレート(Corning、3799)に分配した。次に、段階希釈した抗HLA-DQ抗体とγ4aグリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucを添加し、37℃、5%CO2で一晩培養した。γ4aグリアジンペプチドの最終濃度は6μMであり、IHW9023は8.0×104細胞/ウェルであり、γ4aグリアジンTCR Jurkat NFAT-Lucは2.0×104細胞/ウェルであり、最終アッセイ容量は100μL/ウェルであった。一晩培養した後、50μLの培養細胞を回収して、OptiPlate-96(PerkinElmer、6005299)に再分配した。その後、50μLのBio-Glo(Promega、G7491)を加えて室温で10分間インキュベートし、Envision(PerkinElmer)を用いて発光を測定し、続いて、Outlook Excel 2013(Microsoft)とGraphPad Prismソフトウェア(GraphPad)を用いて解析して、DQ2.5/γ4aグリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化に対する抗HLA DQ抗体の阻害効果を決定した。抗体を伴わない抗原の非存在下でのウェルの秒あたりカウント数(CPS)を100%とし、抗体を伴わない抗原の存在下でのウェルのCPSを0%としたときの、抗HLA DQ抗体の阻害%を決定した。IC50値は、XLfit Excelアドインソフトウェア(IDBS)を用いて決定した。
図32および表7に示すように、DQN0385eeは、DQ2.5/α2グリアジン、ω2グリアジン、γ1グリアジン、γ2グリアジン、BCホルデイン、α1bグリアジン、およびγ4aグリアジンペプチド依存性のJurkat T細胞活性化を用量依存的な様式で阻害した。
図33および表7に示すように、DQN0429ccは、DQ2.5/α2グリアジン、ω2グリアジン、γ1グリアジン、およびBCホルデインペプチド依存性のJurkat T細胞活性化を用量依存的な様式で阻害した。
図34および表7に示すように、DQN0344xx//DQN0385eeは、DQ2.5/α1グリアジン、α2グリアジン、ω1グリアジン、ω2グリアジン、γ1グリアジン、BCホルデイン、α1bグリアジン、およびγ4aグリアジンペプチド依存性のJurkat T細胞活性化を用量依存的な様式で阻害した。DQN0344xx//DQN0385eeは、DQ2.5/γ2グリアジンペプチド依存性Jurkat T細胞活性化を、用量依存的な様式で、中程度に阻害したが、IC50値は決定されなかった。
図35および表7に示すように、DQN0344xx//DQN0429ccは、DQ2.5/α1グリアジン、α2グリアジン、ω1グリアジン、ω2グリアジン、γ1グリアジン、BCホルデイン、およびα1bグリアジンペプチド依存性のJurkat T細胞活性化を用量依存的な様式で阻害した。
デルタGK Fcの調製
ヒトIgG4由来デルタGK Fc断片は、FreeStyle(商標)293発現システム(Invitrogen)を用いて発現させた。発現させたFc断片を、回収した細胞培養培地からアフィニティクロマトグラフィー(MabSelect SuRe, GE)により精製した。最後の工程では、バッファーをD-PBS(-)に交換した。
抗デルタGK抗体の作製
抗デルタGK抗体は、下記のように調製し、選択し、アッセイした。
NZWウサギを、参考例1で発現させたヒトIgG4由来デルタGK Fc断片(100~200μg/用量/頭部)で皮内免疫した。この用量を3ヶ月間にわたり6回反復投与し、その後、血液と脾臓を採取した。B細胞の選択のために、IgG4デルタGK抗体(IgG4 C末端GKを遺伝子欠失させたIgG4抗体)および野生型IgG4抗体を調製した。デルタGK特異的B細胞をセルソーターを用いて選別し、その後WO2016098356A1に記載の手順に従ってプレーティングし、培養した。培養後、さらなる解析のためにB細胞培養上清を回収し、対応するB細胞ペレットを凍結保存した。
抗デルタGKモノクローナル抗体YG55の特徴決定
遺伝子クローニングと抗体発現の後、二次スクリーニングで上記のELISAアッセイによりYG55の特異性を評価した。抗体遺伝子のクローニングは成功し、それによりヒット(陽性)B細胞クローンにより示されたのと同じ特異性を保持するYG55が得られた(図21)。この高度に特異的な結合は表面プラズモン共鳴アッセイでも確認された。特異的結合モチーフとそのエピトープを結晶構造解析により同定した。
Claims (50)
- HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、請求項1に記載の抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のいずれかまたは両方に対して結合活性を実質的に有しない、請求項1に記載の抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビス(Mycobacterium bovis)ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞;およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と26merグリアジンとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞;およびHLA-DQ2.5を発現するBa/F3細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、請求項4に記載の抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とセリアック病に関連する免疫優性ペプチドとによって形成された複合体に対して結合活性を有する、請求項5に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とセリアック病に関連する免疫優性ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項5に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項5に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体とHLA-DQ2.5/グルテンペプチド拘束性CD4+ T細胞との間の相互作用をブロックする、請求項1~8のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ8、HLA-DQ2.2、HLA-DQ7.5、HLA-DQ5.1、HLA-DQ6.3、HLADQ7.3、HLA-DRまたはHLA-DPに対する結合活性を実質的に有しない、請求項1~9のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体に対して増強された結合活性を有する、請求項1~10のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てと比較して、
HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して、より強い結合活性を有する、請求項1~11のいずれか一項に記載の抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9つ、または全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLADQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
HLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体とHLA-DQ2.5/グルテンペプチド拘束性CD4+ T細胞との間の相互作用をブロックする、抗原結合分子。 - 以下の(1)~(5)のいずれか1つである、請求項1~13のいずれか一項に記載の抗原結合分子:
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。 - 二重特異性抗原結合分子である、請求項1~14のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- 二重特異性抗原結合分子が二重特異性抗体である、請求項15に記載の抗原結合分子。
- 少なくとも2つの抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
該抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とセリアック病に関連する免疫優性ペプチドとの間に形成された1つまたは複数の複合体への結合活性を有し、
該抗原結合ドメインのいずれも、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。 - 少なくとも2つの抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
該抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
該抗原結合ドメインのいずれも、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。 - 前記抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項18に記載の抗原結合分子。
- 前記抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項19に記載の抗原結合分子。
- 少なくとも2つの抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
該抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
該抗原結合ドメインのいずれも、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。 - 前記抗原結合ドメインのいずれかが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項21に記載の抗原結合分子。
- 第1の抗原結合ドメインと第2の抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、第1の抗原結合ドメインがHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された1つまたは複数の複合体への結合活性を有し、第2の抗原結合ドメインがHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された1つまたは複数の複合体への結合活性を有し、第1の抗原結合ドメインが結合する複合体中の少なくとも1つのグルテンペプチドが、第2の抗原結合ドメインが結合する複合体中の少なくとも1つのグルテンペプチドとは異なる、抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項23に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項23に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有し、
HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有しない、
請求項23に記載の抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体の全てに対して結合活性を有する、請求項26に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5と第1のグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合活性を有する第1の抗原結合ドメイン、およびHLA-DQ2.5と第2のグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合活性を有する第2の抗原結合ドメインを含む、抗原結合分子であって、
該抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2つまたはそれ以上に対して結合活性を有し、
該抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。 - HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2つまたはそれ以上に対して結合活性を有する、請求項28に記載の抗原結合分子。
- 第1の抗原結合ドメインと第2の抗原結合ドメインを含む抗原結合分子であって、
第1の抗原結合ドメインが、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1つまたは複数に対して結合活性を有し、
第2の抗原結合ドメインが、HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1つまたは複数に対して結合活性を有し、
該抗原結合分子が、HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てに対して結合活性を実質的に有せず、
該抗原結合分子が、二重特異性抗原結合分子または多重特異性抗原結合分子である、抗原結合分子。 - 第2の抗原結合ドメインが、HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と33merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも1つまたは複数に対して結合活性を有する、請求項30に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5/グルテンペプチド複合体とHLA-DQ2.5/グルテンペプチド拘束性CD4+ T細胞との間の相互作用をブロックする、請求項17~31のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.2、HLA-DQ7.5、HLA-DQ5.1、HLA-DQ6.3、HLADQ7.3、HLA-DRまたはHLA-DPに対する結合活性を実質的に有しない、請求項17~32のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体に対して増強された結合活性を有する、請求項17~33のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てと比較して、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18個、または全てに対して、より強い結合活性を有する、請求項17~34のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- HLA-DQ2.5とCLIPペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とサルモネラペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とマイコバクテリウム・ボビスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とB型肝炎ウイルスペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とチロペルオキシダーゼペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5陽性PBMC B細胞のうちの少なくとも1、2、3、4、5つ、または全てと比較して、HLA-DQ2.5とα1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα1bグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とω2グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とセカリン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とBCホルデインペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とγ1グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と26merグリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5と14mer 1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とα3グリアジンペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン2ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とアベニン3ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン1ペプチドとによって形成された複合体;HLA-DQ2.5とホルデイン2ペプチドとによって形成された複合体;およびHLA-DQ2.5とγ4bグリアジンペプチドとによって形成された複合体のうちの少なくとも2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17個、または全てに対して、より強い結合活性を有する、請求項17~35のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- 以下の(1)~(5)のいずれか1つである、請求項17~36のいずれか一項に記載の抗原結合分子:
(1) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(2) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(3) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列を含む抗原結合分子;
(4) (1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(5) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(1)~(3)のいずれか1つの抗原結合分子と競合する抗原結合分子。 - 二重特異性抗原結合分子である、請求項17~37のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- 二重特異性抗原結合分子が二重特異性抗体である、請求項38に記載の抗原結合分子。
- 以下の(a)~(d)のいずれか1つである、請求項37~39のいずれか一項に記載の抗原結合分子:
(a) 以下の(i)および(iii)を含む抗原結合分子;
(b) 以下の(ii)および(iii)を含む抗原結合分子;
(c) (a)または(b)の抗原結合分子が結合するのと同じエピトープに結合する抗原結合分子;
(d) HLA-DQ2.5またはHLA-DQ2.5とグルテンペプチドとによって形成された複合体への結合について、(a)または(b)の抗原結合分子と競合する抗原結合分子;
(i) 配列番号:2のHCDR1配列、配列番号:3のHCDR2配列、配列番号:4のHCDR3配列、配列番号:18のLCDR1配列、配列番号:19のLCDR2配列、および配列番号:20のLCDR3配列;
(ii) 配列番号:6のHCDR1配列、配列番号:7のHCDR2配列、配列番号:8のHCDR3配列、配列番号:22のLCDR1配列、配列番号:23のLCDR2配列、および配列番号:24のLCDR3配列;
(iii) 配列番号:10のHCDR1配列、配列番号:11のHCDR2配列、配列番号:12のHCDR3配列、配列番号:26のLCDR1配列、配列番号:27のLCDR2配列、および配列番号:28のLCDR3配列。 - グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、γ2グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチドのうちの1、2、3、4、5、6、7、8つ、または全てである、請求項9、13、および32のいずれか一項に記載の抗原結合分子。
- グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、およびα1bグリアジンペプチドである、請求項41に記載の抗原結合分子。
- グルテンペプチドが、α2グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、γ2グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、およびγ4aグリアジンペプチドである、請求項41に記載の抗原結合分子。
- グルテンペプチドが、α2グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、およびBCホルデインペプチドである、請求項41に記載の抗原結合分子。
- グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、α1bグリアジンペプチド、γ4aグリアジンペプチド、およびγ2グリアジンペプチドである、請求項41に記載の抗原結合分子。
- グルテンペプチドが、α1グリアジンペプチド、α2グリアジンペプチド、ω1グリアジンペプチド、ω2グリアジンペプチド、γ1グリアジンペプチド、BCホルデインペプチド、およびα1bグリアジンペプチドである、請求項41に記載の抗原結合分子。
- 請求項1~46のいずれか一項に記載の抗原結合分子をコードする核酸。
- 請求項47に記載の核酸が導入されているベクター。
- 請求項47に記載の核酸または請求項48に記載のベクターを含む細胞。
- 請求項49に記載の細胞を培養することによって抗原結合分子を産生する方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019070242 | 2019-04-01 | ||
JP2019070242 | 2019-04-01 | ||
PCT/JP2020/014978 WO2020204054A1 (en) | 2019-04-01 | 2020-04-01 | Anti-hla-dq2.5 antibody |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2022525585A true JP2022525585A (ja) | 2022-05-18 |
Family
ID=72668218
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021545386A Pending JP2022525585A (ja) | 2019-04-01 | 2020-04-01 | 抗hla-dq2.5抗体 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20220153847A1 (ja) |
EP (1) | EP3947466A4 (ja) |
JP (1) | JP2022525585A (ja) |
CN (1) | CN113950483A (ja) |
WO (1) | WO2020204054A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP7147030B2 (ja) | 2020-09-18 | 2022-10-04 | 中外製薬株式会社 | 抗hla-dq2.5抗体およびセリアック病の治療のためのその使用 |
WO2023058705A1 (ja) * | 2021-10-08 | 2023-04-13 | 中外製薬株式会社 | 抗hla-dq2.5抗体の製剤 |
JP7220335B1 (ja) * | 2021-10-08 | 2023-02-09 | 中外製薬株式会社 | 抗hla-dq2.5抗体の製剤 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8354507B2 (en) * | 2003-12-15 | 2013-01-15 | Dendreon Corporation | HLA-DR specific antibodies, compositions and methods |
EP3390453A2 (en) * | 2015-12-17 | 2018-10-24 | Janssen Biotech, Inc. | Antibodies specifically binding hla-dr and their uses |
US20200040085A1 (en) * | 2017-02-27 | 2020-02-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-hla-dq2.5/8 antibody and its use for the treatment of celiac disease |
CN117777294A (zh) * | 2017-10-03 | 2024-03-29 | 中外制药株式会社 | 抗hla-dq2.5抗体 |
GB201802338D0 (en) * | 2018-02-13 | 2018-03-28 | Univ Oslo | Antigen binding proteins |
-
2020
- 2020-04-01 EP EP20784213.9A patent/EP3947466A4/en active Pending
- 2020-04-01 CN CN202080039883.0A patent/CN113950483A/zh active Pending
- 2020-04-01 JP JP2021545386A patent/JP2022525585A/ja active Pending
- 2020-04-01 US US17/438,496 patent/US20220153847A1/en active Pending
- 2020-04-01 WO PCT/JP2020/014978 patent/WO2020204054A1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3947466A4 (en) | 2022-12-28 |
CN113950483A (zh) | 2022-01-18 |
US20220153847A1 (en) | 2022-05-19 |
WO2020204054A1 (en) | 2020-10-08 |
EP3947466A1 (en) | 2022-02-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP3215532B1 (en) | Anti-tim3 antibodies and methods of use | |
JP7108612B2 (ja) | 抗hla-g抗体とその使用 | |
JP7186239B2 (ja) | 抗hla-g抗体及びその使用 | |
US11780908B2 (en) | Anti-dengue virus antibodies, polypeptides containing variant FC regions, and methods of use | |
US20160090422A1 (en) | Anti-crth2 antibodies and methods of use | |
JP2019507584A (ja) | 抗ミオスタチン抗体および使用方法 | |
KR102559128B1 (ko) | 항hla-dq2.5 항체 및 셀리악병의 치료를 위한 그의 사용 | |
JP2020536047A (ja) | 抗hla−dq2.5抗体 | |
WO2020204054A1 (en) | Anti-hla-dq2.5 antibody | |
KR102614250B1 (ko) | 항hla-dq2.5 항체의 제제 | |
WO2023058705A1 (ja) | 抗hla-dq2.5抗体の製剤 | |
TW202241942A (zh) | Sars-cov-2結合分子及其用途 | |
CN118369115A (zh) | 抗hla-dq2.5抗体的药物制剂 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230320 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20240205 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20240404 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20240418 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240604 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20240917 |