JP2022520427A - 脳損傷の唾液バイオマーカー - Google Patents
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Abstract
軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）を含む外傷性脳損傷（ＴＢＩ）の経過を診断、監視、治療、及び予測する方法は、対象からの唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカー（例えば、ｍｉＲＮＡ）のレベルを決定することを含む。ＴＢＩの経過を診断、監視、治療及び予測するためのセンサ素子、検出システム、組成物及びキットも記載される。
Description
本発明は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を含むがこれに限定されない脳損傷を診断及び／又は監視するための組成物、キット、システム及び方法に関する。より詳細には、本発明は、ＲＮＡバイオマーカーを使用したＴＢＩの診断及び監視に関する。
外傷性脳損傷（ＴＢＩ）は、西欧諸国における４５歳未満での死亡及び身体障害の主な原因である。その医療費負担及び社会的費用は上昇し続けると予想され、２０２０年までに、世界保健機関は、ＴＢＩが世界中で身体障害の３番目の主因になると予測している。
多くの研究にもかかわらず、ＴＢＩの重症度を評価し、回復を予測するための信頼できるバイオマーカーは見出されていない。これは、軽度ＴＢＩ（ｍＴＢＩ）に特に当てはまり、これは依然として臨床診療で評価することが困難である。ＴＢＩ患者は、グラスゴー昏睡スコア（ＧＣＳ）及び神経イメージング技術によって最初に評価されるが、これには費用のかかる装置が必要であり、現在の診断ツールは、脳損傷の実際の重症度を正確に定義及び定量する能力に欠けており、したがって重度のＴＢＩは容易に検出するが、症例の大部分（７５～９０％）を占めるｍＴＢＩを容易に検出しない。
ｍＴＢＩの正確な診断は、反復性ｍＴＢＩ、及び反復性ＴＢＩの相乗効果が深刻な損傷及び死亡さえももたらす、セカンドインパクト症候群（ＳＩＳ）として知られる壊滅的な脳損傷のリスクの高い、運動選手、軍人及び子供においては特に重要である。したがって、ＴＢＩの重症度の早期診断及び評価は、患者の健康及び最終的には生命を守るために極めて重要になる。
主題技術は、これらの問題を念頭に置いて考案された。
本開示は、頭部外傷を負ったヒト対象における軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）を含む外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を、対象からの生物学的試料中の１つ又は複数のｍｉＲＮＡ分子を検出することによって、診断、監視、及び治療することに関する方法及び検出システムを提供する。以下の開示の文脈において、生物学的試料中の１つ又は複数のｍｉＲＮＡ分子のレベル又は量に関する「レベル」及び「量」という用語は互換的に使用される。
一態様では、本開示は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）の診断及び治療を必要とするヒト対象における外傷性脳損傷の診断及び治療方法に関する。この方法は、対象から唾液試料を得ること、唾液試料を、（ａ）ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させること、唾液試料中の当該少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定すること、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定すること、及び以下の１つ又は複数：対象を言語試験、認知試験、運動試験若しくは光学試験又は前述の任意の組み合わせに供すること、対象をＣＴ若しくはＭＲＩ又はこれらの組み合わせの形態の画像診断に供すること、及び／又は対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと、に従って、ＴＢＩを有すると同定された対象を治療することを含む。
この方法の特定の実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
別の態様では、本開示は、対象の外傷性脳損傷（ＴＢＩ）の診断及び／又は監視方法に関する。この方法は、対象から得られた唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルを決定することを含み、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。
この方法の一実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
別の態様では、本開示は、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムのためのセンサ素子に関し、センサ素子は、（ａ）ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的なプローブで機能化された基板を含む。
センサ素子の一実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
別の態様では、本開示は、本開示によるセンサ素子と、プローブへの標的ＲＮＡバイオマーカーの結合を検出することができる検出装置とを含む、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムに関する。
別の態様では、本開示は、ＴＢＩを有することが疑われる対象に対する一連の処置を決定する方法に関し、対象から得られた唾液試料を本開示による検出システムに適用することと、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、ＴＢＩに対する治療を提供することとを含む。
別の態様では、本開示は、ＴＢＩが疑われる対象を治療する方法に関する。この方法は、（ａ）ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定することと、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、対象にＴＢＩに対する治療を提供することとを含む。
この方法の一実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
別の態様では、本開示は、唾液試料中のＲＮＡバイオマーカーを検出する方法に関する。この方法は、ヒト対象から唾液試料を得ること、唾液試料を、（ａ）ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させること、ポリメラーゼ連鎖反応を使用して少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅すること、及び増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することを含む。
この方法の一実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
別の態様では、本開示は、ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するためのキットに関し、キットは、（ａ）ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む。
このキットの一実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
別の態様では、本開示は、ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するための組成物に関し、組成物は、（ａ）ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む。
この組成物の一実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、（ａ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は（ｂ）ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本発明は、対象の外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断又は監視する方法、並びにＴＢＩに罹患していると同定された対象を治療する方法を提供する。
ＴＢＩバイオマーカーの探求は、メディアにおけるスポーツ脳震盪のプロファイルの増加によって大きな刺激を受けている。ここ数年、多くの研究は、ピッチサイド又はスポーツクリニックでの臨床的意思決定を支援することができるバイオマーカーに焦点を当ててきた。しかし、文献に報告されているタンパク質バイオマーカーは、特異性又は感度を欠いているか、又は損傷後しばらくの間は検出できない。これは、ＴＢＩの一形態である脳震盪の後、脳由来化合物が非常に少量しか放出されず、血液脳関門がほとんど閉じたままであるという事実に起因し得る。
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）は、標的遺伝子の３’ＵＴＲの部分的相補部位との対形成を介してｍＲＮＡ分解、翻訳抑制又はその両方を誘導する、約２２ヌクレオチド長の高度に保存された非コードＲＮＡ分子の豊富なクラスである。ヒトゲノムは、２，０００を超えるｍｉＲＮＡをコードし、これは、全ての遺伝子の約６０％を標的とすることができる。しかし、ｍｉＲＮＡの豊富さにもかかわらず、それらの生体分子機能及び病理学における関与は、完全には解明されていない。ｍｉＲＮＡは、細胞周期、細胞代謝、アポトーシス及び免疫応答を含む多くの生物学的プロセスにおいて中心的な役割を果たし、癌及び神経変性疾患を含む他の疾患状態の検出、同定及び分類のための潜在的なバイオマーカーとして臨床研究においてますます関心を集めている。
誤解を避けるために、本明細書で使用される場合、「少なくとも１つのｍｉＲＮＡがｍｉＲＮＡの群から選択される」とは、問題となっている方法が、診断目的、予後診断目的又は治療目的のために実施されるかどうかにかかわらず、列挙されたｍｉＲＮＡのいずれか１つ又は列挙されたｍｉＲＮＡのいずれか複数（例えば、２つ、３つ、４つ又はそれを超える列挙されたｍｉＲＮＡ）を用いて実施され得ることを意味することが理解される。そのため、列挙されたｍｉＲＮＡのいずれか１つ又は複数を明示的に除外することができる。
外傷性脳損傷は、外力が脳を外傷的に損傷するときに生じる。ＴＢＩを、例えば、重症度、損傷のタイプ及び予後に基づいて分類するための様々なシステムが存在する。ＴＢＩを分類するために最も一般的に使用されるシステムは、グラスゴー昏睡尺度（ＧＣＳ）であり、これは、刺激に対する言語反応、運動反応、及び開眼反応に基づいて、人の意識レベルを３～１５の尺度で評価する。一般に、ＧＣＳスコアが１３以上のＴＢＩは軽度、９～１２は中等度、８以下は重度と定義される。別のシステム、Ｍａｙｏ分類システムは、明確な中等度～重度ＴＢＩ、可能性のある軽度ＴＢＩ及び可能性のあるＴＢＩを含む３つの主な分類を有する。意識消失、外傷後健忘症、頭蓋骨骨折、並びに硬膜下血腫、脳挫傷、及び出血性挫傷を含む神経放射線学的異常の証拠を含む複数の基準が各診断に使用される。ＧＣＳシステム又はＭａｙｏシステムを用いたＴＢＩの分類は、当業者に公知であろう。
本明細書で使用される場合、「軽度」、「中等度」及び「重度」のＴＢＩへの言及は、ＧＣＳに従って行われる。本明細書における「中等度～重度」ＴＢＩへの言及は、ＧＣＳによる中等度及び重度のＴＢＩの両方を包含する。
本明細書で使用される場合、軽度ＴＢＩ（ｍＴＢＩ）への言及はまた、脳震盪への言及である。
本発明のバイオマーカーを使用するＴＢＩの診断及び／又は監視は、医療補助者による初期評価の一部として、患者を脳神経外科の専門知識を有する施設、大規模な外傷センター又は地域の外傷ユニットに搬送すべきかどうかを決定すること、病院の救急科において、ＣＴ脳スキャンの必要性を含む適切な治療を決定すること、ピッチサイドでは、プレーヤーをプレーから外すことに関する意思決定と、プレーヤーを病院に搬送する必要性の評価を支援すること、スポーツクリニックでは、脳震盪の事象を確認し、プレーへの復帰に関する意思決定を可能にすること、戦闘時では、救助隊の出動や被災者の避難の必要性を判断すること、を含む様々な状況で臨床的意思決定及び治療レジメンを支援することが期待される。したがって、本発明が特定の利益を提供する対象は、事故被害者、スポーツ選手、及び軍人を含むことができるが、これらに限定されない。
いずれの場合においても、しかし、おそらくは、特に、対象がＴＢＩのリスクが高い場合（例えば、対象がプロの運動選手であるか、又は軍隊に入隊している場合）、既知又は最近の外傷に先立って（例えば、スポーツ選手としてのキャリアの始まりに近い時期や軍隊への派遣に先立って）対象から試料を採取し、その時点で、又はその後、対象がＴＢＩを経験した可能性があるときに、目的のｍｉＲＮＡを評価することができる。それにより、そのようなサンプルは、内部参照標準を提供することができる。
いくつかの実施形態では、対象はヒトである。
ＴＢＩは、軽度ＴＢＩ（ｍＴＢＩ）、中等度ＴＢＩ又は重度ＴＢＩ（ｓＴＢＩ）であり得る。いくつかの実施形態では、ＴＢＩは中等度～重度のＴＢＩ（ｍ－ｓＴＢＩ）である。
試料中のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルは、定量的又は半定量的に決定することができる。「定量的に」によって、試料中のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡの絶対量又は絶対濃度が決定されることが理解される。次いで、試料中のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡの絶対量を、所定の閾値（例えば、予想される正常レベルについての公表された文献値）、健常対象から採取した対照試料中の同じｍｉＲＮＡ若しくは参照ｍｉＲＮＡの既知のレベル、又は対象から採取した試料中の参照ｍｉＲＮＡの量と比較することができる。いくつかの態様では、対象は、ｍｉＲＮＡのレベルが所定の閾値を下回るとき、又は参照試料若しくは対照試料と比較して低下しているとき、ＴＢＩを有すると診断される。他の実施形態では、対象は、ｍｉＲＮＡのレベルが所定の閾値と比較して増加しているとき、ＴＢＩを有すると診断される。
「半定量的に」によって、目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルが参照と比較して測定されることが理解される。
参照は、インバリアントｍｉＲＮＡ、すなわち、健常対象とＴＢＩを有する対象との間で実質的に不変のままである発現レベルを有するｍｉＲＮＡであってもよい。目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルがインバリアントｍｉＲＮＡのレベルと比較して増加又は減少している場合、対象はＴＢＩに罹患していると診断することができる。
いくつかの実施形態では、対象から得られる試料におけるｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルは、対照試料、参照レベル又は公表値におけるレベルよりも約０．０１倍～約１００倍、約０．０５倍～約５０倍、約０．１倍～約１０倍、約０．５倍～約５倍、約１．０倍～約３倍、又は約１．５倍～約２．０倍低くてもよく、又は高くてもよい。
値を生成するために装置又は方法が使用される場合、記載された値及び使用される装置又は方法に固有のその値の任意の変動を捕捉するために、その値を「約」という用語で修飾することができる。値又は値の範囲が具体的に開示されている場合、「約」は、記載された値又は範囲のプラスマイナス１０％を意味し得る。例えば、約１０分は、９～１１分を意味し得る。
目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルは、当業者に公知の方法を使用して決定することができる。いくつかの実施形態では、目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルを決定することは、ｍｉＲＮＡを増幅することを含む。いくつかの実施形態では、総ｍｉＲＮＡを、最初に、標準的な技術を使用して、例えば、ｍｉＲＮｅａｓｙミニキット（Ｑｉａｇｅｎ社）を使用して、試料から単離することができる。次いで、目的のｍｉＲＮＡの量を決定することができる。いくつかの実施形態では、試料中の目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルは、ＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）を使用して決定される。例えば、定量的ＰＣＲを、目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルの定量的決定のために使用することができる。ＰＣＲはまた、試料中の目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルを参照（例えば、インバリアントｍｉＲＮＡ）のレベルと比較することによって、半定量的決定のために使用することができる。
当業者に公知である、ｍｉＲＮＡの検出及び／又は定量のための好適な技術には、ｑＰＣＲ、ｍｉＲＮＡアッセイ、次世代シーケンシング（ＮＧＳ）及びマルチプレックスｍｉＲＮＡプロファイリングアッセイが含まれる。
いくつかの実施形態では、目的のｍｉＲＮＡ又は各ｍｉＲＮＡのレベルは、インサイチュハイブリダイゼーションを使用して、例えば、ｍｉＲＮＡに特異的なプローブ（例えば、標識プローブ）を使用して決定される。
ｍｉＲＮＡのレベルは、損傷の直後（すなわち、損傷後１時間未満）に対象から得られた試料において、及び／又は、損傷の数時間後若しくは数日後の１つ又は複数の時点において得られた試料において決定することができる。したがって、ｍｉＲＮＡレベルの変化を経時的に検出して、ＴＢＩの監視を可能にすることができる。ｍｉＲＮＡレベルが経時的に変化する場合、ＴＢＩを監視するための本明細書に記載される方法を、それに応じて対象の治療レジメンを維持すること又は調整することを含むように拡大することができる。
特異的ｍｉＲＮＡ及びＴＢＩのタイプに依存して、対象におけるｍｉＲＮＡのレベルが経時的に有意に変化し得る。いくつかの実施形態では、したがって、正確な診断を可能にするために、損傷後比較的早くｍｉＲＮＡを測定することが有利であり得る。いくつかの実施形態では、ｍｉＲＮＡのレベルが、損傷後の７２時間以内、４８時間以内、３６時間以内、２４時間以内、１２時間以内、６時間以内、４時間以内、２時間以内又は１時間以内に対象から得られる試料において決定される。
いくつかのｍｉＲＮＡのレベルは、経時的に実質的に安定であり、したがって、診断を、損傷の数時間後、数日後又は数週間後に行うことを可能にする。いくつかの態様では、ｍｉＲＮＡのレベルは、損傷から２０、１８、１５、１２、１０、８、５又は２日目までに対象から得られる試料において決定される。
いくつかの態様では、ｍｉＲＮＡのレベルは、損傷直後（例えば、Ｔ＝０時間）、損傷の４時間後～１２時間後、損傷の４８時間後～７２時間後、又は損傷の１５日後に対象から得られる試料において決定される。
いくつかの態様では、ｍｉＲＮＡのレベルは、損傷の少なくとも２４時間後に対象から得られる試料において決定される。いくつかの態様では、ｍｉＲＮＡのレベルは、損傷後１５日以内に対象から得られる試料において決定される。いくつかの態様では、ｍｉＲＮＡのレベルは、損傷の２４時間後～１５日後、損傷の２４時間後～１０日後、損傷の２４時間後～７日後、又は損傷の４８時間後～５日後に対象から得られる試料において決定される。
いくつかの実施形態では、ＴＢＩは、軽度ＴＢＩ（ｍＴＢＩ）又は中等度～重度ＴＢＩ（ｍ－ｓＴＢＩ）である。
いくつかの実施形態では、ＴＢＩは軽度ＴＢＩ（ｍＴＢＩ）である。
好都合には、試料は、対象から得られた任意の適切な流体又は組織試料であってもよい。例えば、生物学的試料は、尿、唾液、全血、血漿、血清、痰、精液、糞便、鼻スワブ、涙、膣スワブ、直腸スワブ、子宮頸部スメア、組織生検、及び尿道スワブからなる群のうちの少なくとも１つを含むことができる。いくつかの実施形態では、試料は流体試料である。適切には、試料は、尿、唾液、血液及び痰など、個体から容易に得ることができるものである。いくつかの実施形態では、試料は、唾液、血液、血漿又は血清を含む。いくつかの実施形態では、試料を得るプロセスは、本明細書に記載の本発明の一部を形成しないことが理解される。
いくつかの実施形態では、試料は血清を含むか、又は血清によって構成される。血清は実用的な利点を有するだけでなく、ＰＣＲ反応の潜在的阻害剤であるヘパリンなどの抗凝固剤も含まない。血清はまた、血漿と比較して溶血の影響を受けにくい場合がある。
いくつかの実施形態では、試料は唾液である。唾液は、専門家の訓練又は医療機器なしで、患者（例えばピッチサイド、又は現場で）から容易に得ることができる。
対象がＴＢＩに罹患していると診断されると、特に軽度ＴＢＩ又は中等度～重度ＴＢＩＩと診断されると、適切な治療法の決定を容易にし得る。したがって、本発明は、医師、臨床医、医療補助者などの医療従事者、更には非医療従事者（例えば、教師、スポーツ指導者、軍人）が、ＴＢＩを有する疑いのある対象に対する適切な措置を決定することを可能にする試験を提供する。したがって、ＴＢＩを有すると判定された対象は、診断が行われた結果として最も適切な治療を受けることができる。したがって、本発明の方法は、ＴＢＩと診断された対象に適切な治療を指示することを更に含むことができる。
ＴＢＩと診断された対象は、例えばＣＴスキャンによって更に評価することができる。いくつかの実施形態では、対象は病院に入院する。いくつかの実施形態では、中等度～重度のＴＢＩが除外され得る場合、対象は、評価のために病院に入院する必要がない場合がある。中等度～重度のＴＢＩと診断された対象は、病院、又は神経外傷の専門知識を有する専門センターに入院することができる。
例えばスポーツイベントにおいて、戦闘中又はプレー中に、病院環境外でＴＢＩ（特にｍＴＢＩ）と診断された対象は、直ちにプレー又は戦闘から外され得る。対象は、その後、プレー又は戦闘への段階的な復帰を開始することができる。
更なる態様では、ＴＢＩを緩和するための治療を対象に施すことが適切であるかどうかを決定するための方法が提供され、方法は、対象からの試料中の少なくとも１つのｍｉＲＮＡのレベルを決定すること、及び少なくとも１つのｍｉＲＮＡのレベルに基づいて、ＴＢＩを緩和するための治療を施すことが適切であるか否かを判定することを含む。
治療を対象に施すステップは、特に明記しない限り、特許請求される方法の一部を形成しないことが理解される。
いくつかの実施形態では、方法は、対象に適切な治療を施すことを更に含むことができる。いくつかの態様では、治療は、ＴＢＩを緩和するための治療を含むことができる。したがって、本発明は、対象におけるＴＢＩを診断及び治療する方法を特徴とし、方法は、（ａ）試料（例えば、血液、血漿、尿又は唾液の試料）を対象から得ること、（ｂ）１つ又は複数のｍｉＲＮＡ（本明細書に記載されるｍｉＲＮＡから選択される）を検出すること、ｍｉＲＮＡのレベルが参照標準（本明細書に記載される）と異なる場合、患者がＴＢＩを有すると診断すること、及びＴＢＩに対する治療を施すことを含む。
更なる態様では、本発明は、ＴＢＩに罹患している疑いがある対象に対する適切な治療を決定する方法を提供し、方法は、対象からの試料中の少なくとも１つのｍｉＲＮＡのレベルを決定することによって対象がＴＢＩを有するか否かを同定することを含む。
対象がＴＢＩを有すると同定された場合、適切な治療としては、例えば更なる検査（例えば、言語、認知、運動及び／又は光学試験）、ＣＴ及び／又はミル走査によって対象を更に評価すること、対象を活動（例えば、ＴＢＩが発生した時の活動）から除外すること、対象を病院又は専門クリニックに入院させること、手術、及びＴＢＩを緩和するための治療を対象に施すことのうち、１つ又は複数を挙げることができる。
ＴＢＩを緩和するための治療は、神経保護薬、例えばマンニトール及び高張性生理食塩水などの脳腫脹を治療するための薬物、及び／又は高血圧性蘇生の回避及び鎮静剤の使用などの他の神経保護措置を含むことができる。
いくつかの実施形態では、対象は、例えば病院又はクリニックで、回復を追跡するためにその後監視され得る。
本発明の更なる態様によれば、対象における標的ｍｉＲＮＡのレベルを検出する及び／又は決定する方法が提供され、方法は、（ａ）対象からサンプルを得るステップ、（ｂ）標的ｍｉＲＮＡに特異的なプローブと試料を接触させることによって、試料中の標的ｍｉＲＮＡのレベルを検出する及び／又は決定するステップを含む。
試料は、上で定義したように、対象から得られた任意の適切な流体又は組織試料であってもよい。いくつかの実施形態では、試料は、血液、血清、血漿、尿又は唾液である。
いくつかの態様では、方法は、試料中の２つ以上の標的ｍｉＲＮＡのレベルを決定することを含むことができる。
本発明の更なる態様によれば、それを必要とする対象を治療する方法において使用されるためのＴＢＩを緩和するための治療が提供され、当該対象は、対象からの試料中の少なくとも１つのｍｉＲＮＡのレベルを決定することによって、ＴＢＩを有すると同定される。
標的ｍｉＲＮＡのレベルを決定するステップは、プローブで機能化された基板、例えば、プローブを含むチップと試料を接触させることを含むことができる。基板又はチップは、好都合には、各々が異なる標的ｍｉＲＮＡに特異的な複数のプローブを含むことができる。
対象は、損傷、特に頭部損傷を受けている可能性がある。対象は、ＴＢＩを有すると疑われ得る。対象は、ｍＴＢＩ又は脳震盪を有すると疑われ得る。いくつかの実施形態では、試料は、損傷後７２時間以内、４８時間以内、３６時間以内、２４時間以内、１２時間以内、６時間以内、４時間以内、２時間以内又は１時間以内に得られる。いくつかの実施形態では、試料は、損傷後２４時間以上後に得られる。更なる実施形態では、試料は、損傷後１５日以内に対象から得られる。いくつかの態様では、試料は、損傷の２４時間後～１５日後、損傷の２４時間後～１０日後、損傷の２４時間後～７日後、又は損傷の４８時間後～５日後に対象から得られる。
いくつかの実施形態では、方法は、対象を治療することを更に含む。治療は、例えば更なる検査（例えば、言語、認知、運動及び／又は光学試験）、ＣＴ及び／又はＭＲＩ走査によって対象を更に評価すること、対象を活動（例えば、ＴＢＩが発生した時の活動）から除外すること、対象を病院又は専門クリニックに入院させること、及びＴＢＩを緩和するための治療を対象に施すことのうち、１つ又は複数を挙げることができる。いくつかの実施形態では、治療は、有効量の神経保護薬を投与することを含む。
したがって、なお更なる態様では、本発明は、ＴＢＩを治療する方法を提供し、方法は、対象からの試料における少なくとも１つのｍｉＲＮＡのレベルを決定すること、及び少なくとも１つのｍｉＲＮＡのレベルがｍＴＢＩを示す場合、ｍＴＢＩに適切な治療を施すこと、又は少なくとも１つのｍｉＲＮＡのレベルがｍ－ｓＴＢＩを示す場合、ｍ－ｓＴＢＩに適切な治療を施すことを含む。
異なる治療経路がｍＴＢＩ及びｍ－ｓＴＢＩに使用することができることが当業者によって理解される。
ｍＴＢＩを有する対象は、以下のように治療することができる。
ｍＴＢＩと診断された運動選手は、典型的には、段階的な競技復帰プロトコル（脳震盪に関するベルリンコンセンサス会議及び個々のスポーツ当局、例えばＲＦＵ、ＩＲＢ、ＮＦＬ、ＮＨＬ、ＮＢＡ、ＩＭＭＡＦによって定義される）で開始される。これには、一定の休息期間の後、徐々に運動量を増やし、接触する機会を増やすことが含まれる。ｍＴＢＩを有する運動選手は、典型的には、医学的監督のレベル及び年齢に応じて、６～２３日間の間で変化する期間、競技することができない。逆に、ｍＴＢＩが除外された場合、運動選手はいかなる制限も受けず、翌日から通常通りにトレーニングすることができる。病院到着前の状況でｍＴＢＩと診断された場合、患者は医師の診察（例えば、病院又はプライマリーケアで）を受けする必要があるが、ｍＴＢＩが除外された場合、医療的な確認は指示されない。
ｍＴＢＩ患者は、２４～４８時間監視下に置かれる必要があり、回復するまでは、運転したり、フォークリフトや建設機械を操作してはならない。
ｍＴＢＩと診断された軍人は作戦地域から離脱して、休養することになるが、ｍＴＢＩが除外された場合、その者は現役で任務を継続する。
ＮＨＳでは、ＮＩＣＥが発行したガイダンスに従って、ｍＴＢＩ患者は、観察のために入院する、又は、ＣＴスキャンを受けることができるが、ｍＴＢＩが除外された場合、その患者は直ちに退院することになり得る。
ｍＴＢＩと診断された人は、典型的には、一定期間、仕事又は研究に戻らないように求められる。
ｍＴＢＩと診断された人は、軽度ＴＢＩクリニック又は神経科クリニック又は神経外科クリニックに紹介されることがある。ｍＴＢＩのための典型的な介入は、教育、仕事、研究及び運転に関するアドバイス、必要であれば投薬及び／又は心理学的介入を伴う、例えば、頭痛又は不安又は気分障害又は心的外傷後ストレス障害などの典型的な続発症の医学的管理、並びに例えば、神経心理学、神経前庭又は眼科学などの示されるような他のサービスへの紹介からなる。
ｍＴＢＩを有する患者は、英国神経外科学会によって発行されたガイダンスに従って、遅延性外傷後下垂体機能障害について監視される必要がある。
法医学的な状況では、ｍＴＢＩの診断は、放射線検査では典型的には正常であり、症状が非特異的であるので、しばしば不明確であり、推測的である。ｍＴＢＩの客観的な確定は、損害賠償及び介護の必要性の裁定につながる可能性がある。ｍＴＢＩの適切な治療法には、対象を活動から除くこと、現場又は地域での治療、一晩入院することなく対象を病院で更に評価すること（通常、ｍＴＢＩ患者は頭部損傷のアドバイスを受けて速やかに退院する）、又は入院して一定期間（通常１～２日）観察するなどを含むことができる。対象は、試験（例えば、言語、認知、運動及び／又は光学試験）を用いて更に評価することができる。ＣＴスキャンは、一般に、ＮＩＣＥガイドラインに従って、頭蓋骨骨折の疑い、外傷後痙攣、局所的神経障害、反復嘔吐、初期評価時のＧＣＳスコアが１３未満（小児の場合は１４未満、１歳未満の乳児の場合は１５未満）を含む特定の徴候が存在する場合にのみ必要である。
ｍ－ｓＴＢＩの適切な治療としては、ＭＲＩ又はＣＴスキャン（特に損傷の１時間以内）、入院（集中治療室への入院及び／又は脳神経外科施設を有する専門クリニック又は大規模外傷センターへの転院を含み得る）、神経モニタリング、手術、神経保護薬、例えばマンニトール及び高張性生理食塩水などの脳腫脹を治療するための薬物の投与、及び／又は高血圧性蘇生の回避及び鎮静剤の使用などの他の神経保護措置などの、ＴＢＩを緩和するための治療を施すことを含むことができる。
したがって、本発明は、ＴＢＩを有する対象が最も適切な治療を受けることができるように、ｍＴＢＩ又はｍ－ｓＴＢＩに臨床的かつ迅速に層別化されることを可能にする。
本発明の更なる態様によれば、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムが提供され、検出システムは、標的ｍｉＲＮＡに特異的なプローブで機能化される基板を含むセンサ素子を含む。検出システムは更に、標的ｍｉＲＮＡのプローブへの結合を検出することができる検出装置を含むことができる。
本発明のなお更なる態様によれば、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムで使用するためのセンサ素子が提供され、センサ素子は、標的ｍｉＲＮＡに特異的なプローブで機能化された基板を含む。
センサ素子は、その上に試料（例えば、流体試料）を受け取るための試料添加ゾーンを更に含むことができる。
プローブは、目的のｍｉＲＮＡに選択的に結合することができる。基板は、複数のプローブで機能化することができる。プローブは全て同じであってもよいし、異なる２種類以上のプローブが提供されてもよい。例えば、いくつかの実施形態では、基板は、第１のｍｉＲＮＡに特異的な第１のプローブ及び第２のｍｉＲＮＡに特異的な第２のプローブで機能化することができる。第１及び第２のプローブは、例えばセンサ素子の異なる部分に一緒にグループ化されてもよい。
本発明の更なる態様では、対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法において使用するための組成物が提供され、組成物は、標的ｍｉＲＮＡに特異的なプローブを含む。組成物は、列挙されたｍｉＲＮＡのいずれか１つ、又は、列挙されたｍｉＲＮＡのいずれか複数（例えば、２つ、３つ、４つ又はそれを超える列挙されたｍｉＲＮＡ）と共に含んでよい。
プローブは、タンパク質（例えば、抗体）又は核酸などの生物学的分子を含むことができる。いくつかの実施形態では、プローブは核酸を含む。核酸は、標的ｍｉＲＮＡの全長配列の相補体である配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％又は少なくとも９５％同一である配列を含むことができる。いくつかの実施形態では、核酸は、標的ｍｉＲＮＡの配列の相補体である配列と１００％同一である配列を含む（すなわち、受容体は、標的ｍｉＲＮＡ配列の正確な相補体である核酸配列を含む）。
プローブは、当業者に公知のカップリング化学などの任意の適切な手段によって基板の表面に結合することができる。いくつかの実施形態では、各プローブはリンカーを介して基板の表面に結合される。いくつかの実施形態では、プローブは、基板上にプローブを固定化するための、又は基板上に固定化されたリンカーにプローブを結合させるための部分を含む。
代替的に、又は加えて、プローブは、検出可能な標識を含むことができる。検出可能な標識は、例えば、放射性、蛍光性、発光性、又は抗体ベース（例えば、従来の四量体抗体又はその検出可能なフラグメントを構成することができる）であってもよい。
センサ素子の基板は、任意の適切な材料から形成されてもよい。いくつかの実施形態では、基板は、金属、プラスチック、ガラス、シリカ、ケイ素、グラファイト、グラフェン、又はそれらの任意の組み合わせを含むか、又はそれらから形成される。いくつかの実施形態では、基板は複数の層を含む。例えば、基板は、炭化ケイ素又はシリカの層上にグラフェンの表面又は層を形成することによって調製することができる。グラフェン表面は、例えば、グラフェン－酸化物（ＧＯ）又はグラフェン－アミン（ＧＡ）に化学的に修飾することができる。エピタキシャル成長及び昇華成長などのグラフェン層を形成する方法は、当業者に公知である。
好都合には、核酸を含むプローブ又は核酸によって構成されるプローブを、アミドカップリング試薬（例えば、Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＡＴＵ））を使用して、リンカーを介してＧＯ表面に付着させることができる。次いで、核酸プローブで機能化された表面を含むセンサ素子を使用して、その相補的ｍｉＲＮＡを選択的に検出することができる。
適切なリンカーは、アニリン部分（又はその誘導体）、安息香酸部分（又はその誘導体）又はエテンジアミン部分（又はその誘導体）を含むことができる。アニリンリンカーは、ニトロベンゼン分子（又は誘導体）をグラフェン表面（例えば、ジアゾニウム塩を使用して）に結合させ、ニトロベンゼンをアニリンに還元することによって形成することができる。次いで、アニリンのアミン基を使用してプローブに結合させることができる。同様に、ジアゾニウム塩（例えば、４－安息香酸ジアゾニウムテトラフルオロボラート）を使用して、安息香酸又は安息香酸誘導体をグラフェン表面に付着させることができる。エタンジアミン部分は、カルボキシル化グラフェン又は酸化グラフェンに結合することができる。
センサ素子は、試験ストリップ内に含まれてもよい。試験ストリップは使い捨てであってもよい。
検出装置は、当業者に公知の任意の適切な手段によって、例えば電気インピーダンス、水素イオン濃度の変化、又はハイブリダイゼーションに起因する立体配座変化を検出することによって、標的ｍｉＲＮＡの受容体への結合を検出するように構成することができる。
検出装置は、ユーザにデータを出力するためのユーザインターフェースを更に含むことができる。
いくつかの実施形態では、検出装置は、治療情報のデータベースを含む。装置は、目的のｍｉＲＮＡのレベルに応じて、データベースから適切な治療オプションを特定することができる。治療情報は、ユーザインターフェースを介してユーザに提供することができる。
好都合には、検出装置は、携帯型、例えばハンドヘルド型であってもよい。検出装置は、ｍｉＲＮＡレベル及び対象に関する他の情報を保存するためのデータ保存ユニットを含むことができる。いくつかの実施形態では、装置は、他の装置にデータを通信するためのデータ通信手段を含む。例えば、装置は、ＷｉＦｉ、３Ｇ、４Ｇ、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈを介して、又はモバイルアプリを介して無線でデータを通信することができる。これにより、必要に応じて医療従事者が容易にデータにアクセスできるようになり、利便性が向上する。
したがって、本発明の検出装置は、ＴＢＩを非侵襲的に診断及び監視するための手頃な価格の携帯型ポイントオブケア手段を提供することが想定される。装置は、救急車の乗員、軍、学校、スポーツクラブ及び医療専門家によって使用することができ、ＴＢＩを有すると疑われる患者の正確な評価及びトリアージを可能にする。
本発明の更なる態様は、対象におけるｍＴＢＩを検出及び／又は監視するためのシステムである。
検出システムのタイプは、標的ｍｉＲＮＡと核酸プローブ、一般にはオリゴヌクレオチドプローブとの間の相補性に基づく。相補的領域又は塩基対合領域は、７又は８以上のヌクレオチド長であってもよい。実施形態では、相補的領域又は塩基対合領域は、９、１０、１２、１５若しくはそれを超えるヌクレオチド長であってもよく、又は相補的領域又は塩基対合領域は、ｍｉＲＮＡの全長であってもよい。オリゴヌクレオチドで機能化された基板は、ビーズ又はナノ粒子であってもよい。検出システムは、結合した核酸プローブ－ｍｉＲＮＡを検出可能なシグナルに変換することができる更なる構成要素を有することができる。
別の種類の検出システムは、ＲＴ－ＰＣＴに基づく。したがって、本発明は、本明細書に記載される少なくとも１つのｍｉＲＮＡのｃＤＮＡ相補体の増幅のために設計されるプライマー対を含む、ｍＴＢＩを対象において検出及び／又は監視するための検出システムを包含する。
更なる態様では、本方法で使用するためのキットが提供される。キットは、目的のｍｉＲＮＡに選択的に結合することができるプローブ（例えば、抗体などのタンパク質、又は核酸）を少なくとも含むことができる。いくつかの実施形態では、キットは、複数のプローブを含むアレイを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのプローブは、ＰＣＲを行うためのプライマーである。キットは、使用説明書、例えば、ＴＢＩの診断及び／又は監視に使用するための説明書を更に含むことができる。キットは、増幅プライマー及び酵素（例えば、ＤＮＡポリメラーゼ、ｍｉＲＮＡをｃＤＮＡに変換するための逆転写酵素）などの適切な緩衝液及び試薬を更に含むことができる。
更なる態様及び実施形態
更なる態様では、本開示は、とりわけ、ヒト対象における軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）を含む外傷性脳損傷（ＴＢ）の診断、監視、及び治療に使用するのに適した様々な示差的に発現されたＲＮＡバイオマーカーを含む方法、センサ素子、検出システム、キット、及び組成物を提供する。
更なる態様では、本開示は、とりわけ、ヒト対象における軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）を含む外傷性脳損傷（ＴＢ）の診断、監視、及び治療に使用するのに適した様々な示差的に発現されたＲＮＡバイオマーカーを含む方法、センサ素子、検出システム、キット、及び組成物を提供する。
これらのＲＮＡバイオマーカーの配列及びアクセッション番号を以下の表１に示す。
本開示の一態様によれば、それを必要とするヒト対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び治療する方法が提供され、方法は、対象から唾液試料を得ること、唾液試料を、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７５０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０９８、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、及びｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させること、唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定すること、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定すること、及び以下の１つ又は複数：対象を言語試験、認知試験、運動試験若しくは光学試験又は前述の任意の組み合わせに供すること、対象をＣＴ若しくはＭＲＩ又はこれらの組み合わせの形態の画像診断に供すること、及び／又は対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと、に従って、ＴＢＩを有すると同定された対象を治療することを含む。
ＴＢＩを治療するために臨床医によって選択され得る神経保護療法の例としては、スタチン、プロゲステロン、コルチコステロイド、細胞周期阻害剤（フラボピリドール、半合成フラボノイド、及びプリン類似体ロスコビチン及びオロモウシンなど）、カスパーゼ阻害剤（テトラペプチドカスパーゼ－３阻害剤（ｚ－ＤＥＶＤ－ｆｍｋ）、汎カスパーゼペプチド阻害剤Ｂｏｃ－アスパルチルフルオロメチルケトン及びＢｏｃ－アスパルチルフルオロメチルケトン）を含むオートファジー阻害剤、ポリ（ＡＤＰ－リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の阻害剤、抗炎症剤（ミノサイクリン及び抗炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１０）又はインターロイキン－１受容体アンタゴニスト（ＩＬ－１ｒａ）など）、スルホニル尿素受容体１（ＳＵＲ１）調節カルシウムチャネル阻害剤（グリベンクラミドなど）、サブスタンスＰ（ＳＰ）アンタゴニスト、ジケトピペラジン、及びシクロスポリンＡを挙げることができるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、唾液試料は、損傷直後から損傷後の任意の期間から選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、唾液試料は、損傷直後から、ＲＮＡバイオマーカーの少なくとも１つの発現レベルが所定の閾値又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に戻るまでから選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、唾液試料は、損傷直後から損傷後１年まで、１０ヶ月まで、８ヶ月まで、６ヶ月まで、５ヶ月まで、４ヶ月まで、３ヶ月まで、２ヶ月まで、１ヶ月まで、２５日まで、２０日まで、１５日まで、７日まで、５日まで、３日まで、２日まで、及び／又は２４時間までから選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、唾液試料は、損傷直後から１５日間、１時間から１５日間、２４時間から１５日間、２４時間から７日間、及び２から５日間から選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、本方法は、損傷後の１回又は複数の更なる時間に対象から１つ又は複数の更なる唾液試料を得ること、及び各更なる試料について検出及び増幅ステップを繰り返すことを更に含む。
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の更なる唾液試料は、損傷直後から損傷後の任意の期間から選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の更なる唾液試料は、損傷直後から、ＲＮＡバイオマーカーの少なくとも１つの発現レベルが所定の閾値又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に戻るまでから選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の更なる唾液試料は、損傷直後から損傷後１年まで、１０ヶ月まで、８ヶ月まで、６ヶ月まで、５ヶ月まで、４ヶ月まで、３ヶ月まで、２ヶ月まで、１ヶ月まで、２５日まで、２０日まで、１５日まで、７日まで、５日まで、３日まで、２日まで、及び／又は２４時間までから選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の更なる唾液試料は、損傷直後から１５日間、１時間から１５日間、２４時間から１５日間、２４時間から７日間、及び２から５日間から選択される損傷後の期間中に得られる。
いくつかの実施形態では、１つ又は複数の更なる唾液試料は、損傷後１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５日目に得られる。
いくつかの態様では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を検出することは、ＰＣＲベースのアッセイ、ライトアレイアッセイ、層流チップアッセイ、又は少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを検出するのに適した任意のアッセイを使用して行われる。
いくつかの実施形態では、ＰＣＲベースのアッセイを使用する場合、所定の閾値は、２デルタデルタＣＴ（２－ΔΔＣＴ）法を使用して１．５以上の倍数変化に相当する。
いくつかの実施形態では、所定の閾値は、２デルタデルタＣＴ（２－ΔΔＣＴ）法を使用して２以上の倍数変化に相当する。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
いくつかの実施形態では、方法は、ＴＢＩの治療に成功した後の正常な活動に適しているとしてヒト対象を特定することを更に含む。
本開示の別の態様では、対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法が提供され、方法は、対象から得られた唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルを決定することを含み、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７５０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０９８、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、及びｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルのいずれかは、ＴＢＩを示す。
いくつかの態様では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルが所定の閾値を上回る若しくは下回る、又は対照と比較して増加若しくは減少している場合、対象はＴＢＩを有すると診断される。
いくつかの実施形態では、方法は、ＴＢＩの治療に成功した後の正常な活動に適しているとしてヒト対象を特定することを更に含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システム用のセンサ素子が提供され、センサ素子は、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７５０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０９８、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、及びｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的なプローブで機能化された基板を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、配列番号７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、及び１０５の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、本開示によるセンサ素子と、プローブへの標的ＲＮＡバイオマーカーの結合を検出することができる検出装置とを含む、ＴＢＩを診断及び／又はモニタリングするための検出システムが提供される。
いくつかの態様では、検出システムは、標的ＲＮＡバイオマーカーがアップレギュレーションされているか又はダウンレギュレーションされているかを判定する手段を更に含む。
本開示の別の態様では、ＴＢＩを有する疑いがある対象に対する一連の処置を決定する方法が提供され、対象から得られた唾液試料を本開示による検出システムに適用すること、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、ＴＢＩの治療を提供することを含む。
本開示の別の態様では、ＴＢＩが疑われる対象を治療する方法が提供され、方法は、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７５０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０９８、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、及びｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定すること、及び少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、対象にＴＢＩに対する治療を提供することを含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、唾液試料中のＲＮＡバイオマーカーを検出する方法が提供され、方法は、ヒト対象から唾液試料を得ること、唾液試料を、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７５０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０９８、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、及びｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させること、ポリメラーゼ連鎖反応を使用して少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅すること、及び増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することを含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、ヒト対象の唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法に使用するためのキットが提供され、キットは、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７５０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０９８、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、及びｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、配列番号７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、及び１０５の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、ヒト対象の唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法に使用するための組成物が提供され、組成物は、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７５０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０９８、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、及びｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐからなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、配列番号７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、及び１０５の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本発明の任意の態様に関連して本明細書で行われる記述は、必要に応じて、本発明の任意の他の態様にも等しく適用され得ることが理解される。更に、本開示の様々な態様及び実施形態は、国際公開第２０１７／１５３７１０号及び国際公開第２０１８／１３８４６８号に記載されているような様々な技術、方法、システム、組成物、装置及び／又は開示と組み合わせて使用することもでき、その開示全体は参照により本明細書に組み込まれる。
更なる追加の態様及び実施形態
更なる態様では、本開示は、とりわけ、ヒト対象における軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）を含む外傷性脳損傷（ＴＢ）の診断、監視、及び治療に使用するのに適した様々な示差的に発現されたＲＮＡバイオマーカーを含む方法、センサ素子、検出システム、キット、及び組成物を提供する。
更なる態様では、本開示は、とりわけ、ヒト対象における軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）を含む外傷性脳損傷（ＴＢ）の診断、監視、及び治療に使用するのに適した様々な示差的に発現されたＲＮＡバイオマーカーを含む方法、センサ素子、検出システム、キット、及び組成物を提供する。
例１（以下）に示すように、特定の実施形態では、１７６の唾液ベースライン試料（Ｂ）、損傷後の脳震盪プレーヤーからの４２の試料（Ｃａ群）、試合後の脳震盪プレーヤーからの５２の試料（Ｃｂ群）及び３６～４８時間後の脳震盪プレーヤーからの５４の試料（Ｃｃ群）、試合後の６１人の損傷していないプレーヤー（Ｕｂ群）、３６～４８時間後の４５人の損傷していないプレーヤー（Ｕｃ群）、試合後の３０人の筋骨格損傷プレーヤー（Ｍｂ群）、３６～４８時間後の２４人の筋骨格損傷プレーヤー（Ｍｃ群）で行われたＭｉＲＮＡ ｑＰＣＲ検証試験に従って適切なＲＮＡバイオマーカーを同定した。
これらのＲＮＡバイオマーカーの配列及びアクセッション番号を以下の表２に示す。
例１（以下）でより詳細に論じるように、これらのバイオマーカーは、異なる群比較と異なる時点（Ｃａ対Ｕｂ、Ｃｂ対Ｕｂ、Ｃｃ対Ｕｃ、Ｃａ対Ｍｂ、Ｃｂ対Ｍｂ、Ｃｃ対Ｍｃ、Ｃａ対Ｕ＋Ｍｂ、Ｃｂ対Ｕ＋Ｍｂ、Ｃｃ対Ｕ＋Ｍｃ、Ｃａ対Ｂ、Ｃｂ対Ｂ、Ｃｃ対Ｂ）との間で示差的に発現され、統計学的に有意であることが見出された。
本開示の一態様によれば、それを必要とするヒト対象において外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び治療する方法が提供され、方法は、対象から唾液試料を得ること、唾液試料を、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ４－６ｐ、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．１６８、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、ＹＲＮＡ－２５５、及びＹＲＮＡ－６８４からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させること、唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定すること、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定すること、及び以下の１つ又は複数：対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと、に従って、ＴＢＩを有すると同定された対象を治療することを含む。
ＴＢＩを治療するために臨床医によって選択され得る神経保護療法の例としては、スタチン、プロゲステロン、コルチコステロイド、細胞周期阻害剤（フラボピリドール、半合成フラボノイド、及びプリン類似体ロスコビチン及びオロモウシンなど）、カスパーゼ阻害剤（テトラペプチドカスパーゼ－３阻害剤（ｚ－ＤＥＶＤ－ｆｍｋ）、汎カスパーゼペプチド阻害剤Ｂｏｃ－アスパルチルフルオロメチルケトン及びＢｏｃ－アスパルチルフルオロメチルケトン）を含むオートファジー阻害剤、ポリ（ＡＤＰ－リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の阻害剤、抗炎症剤（ミノサイクリン及び抗炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１０）又はインターロイキン－１受容体アンタゴニスト（ＩＬ－１ｒａ）など）、スルホニル尿素受容体１（ＳＵＲ１）調節カルシウムチャネル阻害剤（グリベンクラミドなど）、サブスタンスＰ（ＳＰ）アンタゴニスト、ジケトピペラジン、及びシクロスポリンＡを挙げることができるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、方法は、ＴＢＩの治療に成功した後の正常な活動に適しているとしてヒト対象を特定することを更に含む。
本開示の別の態様では、対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法が提供され、方法は、対象から得られた唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルを決定することを含み、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ４－６ｐ、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．１６８、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、ＹＲＮＡ－２５５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルのいずれかは、ＴＢＩを示す。
いくつかの態様では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルが所定の閾値を上回る若しくは下回る、又は対照と比較して増加若しくは減少している場合、対象はＴＢＩを有すると診断される。
いくつかの実施形態では、方法は、ＴＢＩの治療に成功した後の正常な活動に適しているとしてヒト対象を特定することを更に含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システム用のセンサ素子が提供され、センサ素子は、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ４－６ｐ、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．１６８、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、ＹＲＮＡ－２５５、及びＹＲＮＡ－６８４からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的なプローブで機能化された基板を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、本開示によるセンサ素子と、プローブへの標的ＲＮＡバイオマーカーの結合を検出することができる検出装置とを含む、ＴＢＩを診断及び／又はモニタリングするための検出システムが提供される。
いくつかの態様では、検出システムは、標的ＲＮＡバイオマーカーがアップレギュレーションされているか又はダウンレギュレーションされているかを判定する手段を更に含む。
本開示の別の態様では、ＴＢＩを有する疑いがある対象に対する一連の処置を決定する方法が提供され、対象から得られた唾液試料を本開示による検出システムに適用すること、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、ＴＢＩの治療を提供することを含む。
本開示の別の態様では、ＴＢＩが疑われる対象を治療する方法が提供され、方法は、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ４－６ｐ、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．１６８、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、ＹＲＮＡ－２５５、及びＹＲＮＡ－６８４からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定すること、及び少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、対象にＴＢＩに対する治療を提供することを含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、唾液試料中のＲＮＡバイオマーカーを検出する方法が提供され、方法は、ヒト対象から唾液試料を得ること、唾液試料を、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ４－６ｐ、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．１６８、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、ＹＲＮＡ－２５５、及びＹＲＮＡ－６８４からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させること、ポリメラーゼ連鎖反応を使用して少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅すること、及び増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することを含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するためのキットが提供され、キットは、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ４－６ｐ、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．１６８、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、ＹＲＮＡ－２５５、及びＹＲＮＡ－６８４からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本開示の別の態様では、ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するための組成物が提供され、組成物は、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ４－６ｐ、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．１６８、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、ＹＲＮＡ－２５５、及びＹＲＮＡ－６８４からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、プローブは、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む。
本発明の任意の態様に関連して本明細書で行われる記述は、必要に応じて、本発明の任意の他の態様にも等しく適用され得ることが理解される。
例
次いで、本発明の実施形態を例として説明する。
次いで、本発明の実施形態を例として説明する。
例１
唾液非コードＲＮＡ：
脳震盪を受けたラグビーのユニオンプレーヤーにおける次世代バイオマーカー
研究デザイン
ラグビーユニオンにおける脳震盪のマイクロＲＮＡによる研究（ＳＣＲＵＭ研究）は、イングランドにおけるシニアプロ国内ラグビー競技の上位二層、すなわち、プレミアシップとチャンピオン層におけるプレーヤー（１１００名まで）の前向き観察研究である。この研究は、進行中の２０１７～２０１８シーズンのＲＦＵ損傷監視プログラムに組み込まれている。
唾液非コードＲＮＡ：
脳震盪を受けたラグビーのユニオンプレーヤーにおける次世代バイオマーカー
研究デザイン
ラグビーユニオンにおける脳震盪のマイクロＲＮＡによる研究（ＳＣＲＵＭ研究）は、イングランドにおけるシニアプロ国内ラグビー競技の上位二層、すなわち、プレミアシップとチャンピオン層におけるプレーヤー（１１００名まで）の前向き観察研究である。この研究は、進行中の２０１７～２０１８シーズンのＲＦＵ損傷監視プログラムに組み込まれている。
全てのプレーヤーは、事前の書面による同意を得て、シーズン前の準備の間（Ｂ群）に、可能であればトレーニングセッションの前に、所属するクラブで約２ｍＬの唾液の単一のベースライン試料を提供するように求められ、並びに、試料の処理及び取扱い、データの匿名化、及び自発的な同意をいつでも取り消す権利を詳述した同意書を記入するように求められた。研究者らは、これらのベースライン抽出のタイミングを、シーズン前のトレーニングセッション、他の損傷、又はサプリメント／医薬品の使用に関連して記録した。
シーズン中、プレーヤーが頭部損傷評価（ＨＩＡ）プロセス（Ｃ群）に入るたびに、唾液試料を提供するように求められた。ピッチサイド評価のために試合中に退出したプレーヤーは、ＨＩＡ１と呼ばれるこの医療評価中に試料を提供し、グループＣａを構成した。プレーヤーが、カテゴリ１の徴候としても知られる脳震盪の明確な徴候を示した場合、ワールドラグビーのガイダンスに従って、ピッチサイド評価は必要ではなく、プレーヤーは試合から直ちに完全に外された。これらのプレーヤーは、「直ちに完全な退場」群（ＩＰＲ）を形成した。脳震盪のためにピッチサイドで評価された全てのプレーヤー、又は脳震盪のために直ちに完全に退場させられた全てのプレーヤーは、試合直後（ＨＩＡ２）及び試合後３６～４８時間（ＨＩＡ３）に評価された。これらの評価のそれぞれで試料を収集した。したがって、本発明者らは、試合直後のＣ群及びＩＰＲ群（それぞれ、Ｃｂ群及びＩＰＲｂ群）及び３６時間～４８時間のＨＩＡ群（それぞれ、Ｃｃ群及びＩＰＲｃ群）の唾液試料を得た。
各時点でのＨＩＡは、スポーツ関連脳震盪の状況で診断ツールとしてよく研究されている改変スポーツ脳震盪評価ツール第５版（ＳＣＡＴ５）の形態をとり、これは、シーズン前の準備中にクラブによって収集されたこれらの評価におけるベースライン性能データによって補完される。このようにして、本発明者らは、脳震盪診断用ｍｉＲＮＡの存在を複数の時点で非侵襲的に調査し、これらのｍｉＲＮＡを、ラグビーの頭部損傷の経験を有する臨床医によって行われる脳震盪についての標準化された臨床評価及び診断閾値と一致させた。全てのＩＰＲプレーヤーは脳震盪を起こしたとみなされた。Ｃ群のプレーヤーは、いずれかの時点（ＨＩＡ１、ＨＩＡ２又はＨＩＡ３）でＨＩＡに不合格であった場合は脳震盪と判断し、それ以外の場合は脳震盪ではないと判断した。脳震盪の疑いでＨＩＡプロセスに参加したが、クリアされたプレーヤーは別々に分析した。
脳震盪と診断されたプレーヤーには、ベルリンコンセンサス段階的復帰（ＧＲＴＰ）プロトコルに従って、チームの医師によって競争競技（ステージＶＩ）（Ｃｄ群及びＩＰＲｄ）に復帰することが許可された時点で、更に唾液の試料を求めた。
プレーヤーがＨＩＡのために外されるときはいつでも、クラブの医療チームはまた、「負傷していない対照」（Ｕ群）のプレーヤーにも声を掛け、試合後（Ｕｂ群）及び３６～４８時間後（Ｕｃ群）に唾液試料を採取した。「負傷していない対照」とは、可能な限り、脳震盪を起こしたプレーヤーと同じ試合、同じプレーポジションで、ほぼ同じ期間（分）、プレーした、脳震盪を起こしていないプレーヤーのことである。これにより、運動による活動の物理的ストレス及び衝突スポーツに参加した際に生じる可能性のある脳震盪下の打撃への曝露に応答したｍｉＲＮＡプロファイルの説明が可能になる。
非神経学的損傷及び筋骨格外傷による混入を排除するために、クラブの衛生担当者は、「負傷していない対照」群（Ｍｂ群及びＭｃ群）と同じ時点で筋骨格損傷（整形外科対照）によりプレーフィールドから退出したプレーヤー（Ｍ群）から試料を採取した。
倫理及び普及
ＳＣＲＵＭ研究は、スポーツにおける反復性脳震盪（ＲＥＣＯＳ）研究の一部として、バーミンガム大学（ＵｏＢ）の倫理観（ＥＲＮ＿１１－０４２９ＡＰ２８）の下で実施されている。本研究は、２０１７年９月２２日にＥａｓｔ ｏｆ Ｅｎｇｌａｎｄ－Ｅｓｓｅｘ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＲＥＣ）によって、ＲＥＣ １７／ＥＥ／０２７５；ＩＲＡＳ ２１６７０３と承認された。
ＳＣＲＵＭ研究は、スポーツにおける反復性脳震盪（ＲＥＣＯＳ）研究の一部として、バーミンガム大学（ＵｏＢ）の倫理観（ＥＲＮ＿１１－０４２９ＡＰ２８）の下で実施されている。本研究は、２０１７年９月２２日にＥａｓｔ ｏｆ Ｅｎｇｌａｎｄ－Ｅｓｓｅｘ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＲＥＣ）によって、ＲＥＣ １７／ＥＥ／０２７５；ＩＲＡＳ ２１６７０３と承認された。
唾液採取
試料を、ＲＮＡ安定化溶液を含有するＯｒａｇｅｎｅ（登録商標）－ＲＮＡ ＲＥ－１００唾液自己収集キット（ＤＮＡ Ｇｅｎｏｔｅｋ社）で合計８週間採取した。水道水で口をすすいだ後、登録時に各参加者から唾液を採取した。次いで、試料をバーミンガム大学に輸送し、そこで試料ポット製造業者のガイダンスに従って試料を処理して冷凍及び貯蔵した。
試料を、ＲＮＡ安定化溶液を含有するＯｒａｇｅｎｅ（登録商標）－ＲＮＡ ＲＥ－１００唾液自己収集キット（ＤＮＡ Ｇｅｎｏｔｅｋ社）で合計８週間採取した。水道水で口をすすいだ後、登録時に各参加者から唾液を採取した。次いで、試料をバーミンガム大学に輸送し、そこで試料ポット製造業者のガイダンスに従って試料を処理して冷凍及び貯蔵した。
材料及び方法
次世代シーケンシング－発見段階
全ての実験は独国ＱＩＡＧＥＮ Ｇｅｎｏｍｉｃ Ｓｅｒｖｉｃｅｓで行った。
次世代シーケンシング－発見段階
全ての実験は独国ＱＩＡＧＥＮ Ｇｅｎｏｍｉｃ Ｓｅｒｖｉｃｅｓで行った。
ＲＮＡ調製
ＲＮＡ調製は、ＲＮｅａｓｙキットの代わりにｍｉＲＮｅａｓｙキット（Ｑｉａｇｅｎ社、独国）を使用したことを除いて、Ｏｒａｇｅｎｅの推奨に従って実施した。
ＲＮＡ調製は、ＲＮｅａｓｙキットの代わりにｍｉＲＮｅａｓｙキット（Ｑｉａｇｅｎ社、独国）を使用したことを除いて、Ｏｒａｇｅｎｅの推奨に従って実施した。
次世代シーケンシング
ライブラリーの調製及びシーケンシング
ライブラリーの調製は、ＱＩＡｓｅｑ ｍｉＲＮＡライブラリーキット（ＱＩＡＧＥＮ社）を使用して行った。合計５ｕｌの総ＲＮＡをマイクロＲＮＡ ＮＧＳライブラリーに変換した。ＵＭＩを含有するアダプタをＲＮＡにライゲートした。次いで、ＲＮＡをｃＤＮＡに変換した。ＰＣＲを使用してｃＤＮＡを増幅し（２２サイクル）、ＰＣＲ中にインデックスを追加した。ＰＣＲ後、試料を精製した。ライブラリー調製ＱＣを、Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ２１００（Ａｇｉｌｅｎｔ社）又はＴａｐｅＳｔａｔｉｏｎ４２００（Ａｇｉｌｅｎｔ社）のいずれかを使用して行った。インサートの品質及び濃度測定値に基づいて、ライブラリーを等モル比でプールした。ライブラリープールを、ｑＰＣＲ ＥｘｉＳＥＱ ＬＮＡ（商標）Ｑｕａｎｔキット（Ｅｘｉｑｏｎ社）を使用して定量した。次いで、ライブラリープールを製造者の説明書（Ｉｌｌｕｍｉｎａ用ＮＥＢＮｅｘｔ Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ Ｓｍａｌｌ ＲＮＡ Ｌｉｂｒａｒｙ Ｐｒｅｐ Ｓｅｔ）に従ってＮｅｘｔＳｅｑ５００シーケンシング装置で配列決定して、約１６３～１７５塩基対サイズのライブラリーを作成した。ｂｃｌ２ｆａｓｔｑソフトウェア（Ｉｌｌｕｍｉｎａ社）を使用して、各試料の逆多重化ファイル及びＦＡＳＴＱファイルとしての生データを生成した。ＦａｓｔＱＣツール（ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂａｂｒａｈａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｐｒｏｅｅｃｔｓ／ｆａｓｔｑｃ／）を使用してＦＡＳＴＱデータを確認した。
ライブラリーの調製及びシーケンシング
ライブラリーの調製は、ＱＩＡｓｅｑ ｍｉＲＮＡライブラリーキット（ＱＩＡＧＥＮ社）を使用して行った。合計５ｕｌの総ＲＮＡをマイクロＲＮＡ ＮＧＳライブラリーに変換した。ＵＭＩを含有するアダプタをＲＮＡにライゲートした。次いで、ＲＮＡをｃＤＮＡに変換した。ＰＣＲを使用してｃＤＮＡを増幅し（２２サイクル）、ＰＣＲ中にインデックスを追加した。ＰＣＲ後、試料を精製した。ライブラリー調製ＱＣを、Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ２１００（Ａｇｉｌｅｎｔ社）又はＴａｐｅＳｔａｔｉｏｎ４２００（Ａｇｉｌｅｎｔ社）のいずれかを使用して行った。インサートの品質及び濃度測定値に基づいて、ライブラリーを等モル比でプールした。ライブラリープールを、ｑＰＣＲ ＥｘｉＳＥＱ ＬＮＡ（商標）Ｑｕａｎｔキット（Ｅｘｉｑｏｎ社）を使用して定量した。次いで、ライブラリープールを製造者の説明書（Ｉｌｌｕｍｉｎａ用ＮＥＢＮｅｘｔ Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ Ｓｍａｌｌ ＲＮＡ Ｌｉｂｒａｒｙ Ｐｒｅｐ Ｓｅｔ）に従ってＮｅｘｔＳｅｑ５００シーケンシング装置で配列決定して、約１６３～１７５塩基対サイズのライブラリーを作成した。ｂｃｌ２ｆａｓｔｑソフトウェア（Ｉｌｌｕｍｉｎａ社）を使用して、各試料の逆多重化ファイル及びＦＡＳＴＱファイルとしての生データを生成した。ＦａｓｔＱＣツール（ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂａｂｒａｈａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｐｒｏｅｅｃｔｓ／ｆａｓｔｑｃ／）を使用してＦＡＳＴＱデータを確認した。
トリミング
ｃｕｔａｄａｐｔを使用して、生のリードにおけるアダプタ及びＵＭＩの情報を抽出し、ｃｕｔａｄａｐｔからの出力を使用して、アダプタ配列を除去し、内部スクリプトを有するＵＭＩによってリードを折り畳んだ。
ｃｕｔａｄａｐｔを使用して、生のリードにおけるアダプタ及びＵＭＩの情報を抽出し、ｃｕｔａｄａｐｔからの出力を使用して、アダプタ配列を除去し、内部スクリプトを有するＵＭＩによってリードを折り畳んだ。
ＵＭＩ補正
実験プロトコルによれば、生のリードはそれぞれ、５’末端から開始して、挿入配列、アダプタ配列、１２ｎｔ長のＵＭＩ配列、及び他のライゲーションされた配列を含むと予想された。リード長及びインサート長に応じて、全ての部分が全てのリードに存在したわけではなかった。ＵＭＩ情報を用いてＰＣＲバイアスを補正するために、生のリードを以下に記載されるように処理した。
実験プロトコルによれば、生のリードはそれぞれ、５’末端から開始して、挿入配列、アダプタ配列、１２ｎｔ長のＵＭＩ配列、及び他のライゲーションされた配列を含むと予想された。リード長及びインサート長に応じて、全ての部分が全てのリードに存在したわけではなかった。ＵＭＩ情報を用いてＰＣＲバイアスを補正するために、生のリードを以下に記載されるように処理した。
１．提供されたアダプタ配列を有する生のリードに対してｃｕｔａｄａｐｔを使用し、各リードのアダプタの存在に関する情報を有する出力を取得する。
２．ｃｕｔａｄａｐｔの出力を解析し、以下の要件の全てを満たすリードのみを保持する。
－リードにアダプタが含まれている。
－インサート配列は、最小インサート長（デフォルト１６ｎｔ）以上でなければならない。
－ＵＭＩ配列は、最小ＵＭＩ長（デフォルト１０ｎｔ）以上でなければならない。
－リードにアダプタが含まれている。
－インサート配列は、最小インサート長（デフォルト１６ｎｔ）以上でなければならない。
－ＵＭＩ配列は、最小ＵＭＩ長（デフォルト１０ｎｔ）以上でなければならない。
３．ステップ２からの完全長ＵＭＩ配列を含まないリードからインサート配列を抽出し、部分ＵＭＩリードとして出力する。
４．ステップ２で出力された全長ＵＭＩのリードを調べ、全ての固有のインサート＋ＵＭＩの組み合わせを同定する。固有のインサート＋ＵＭＩの組み合わせからインサート配列を完全なＵＭＩリードとして抽出する。
５．部分ＵＭＩリードと完全ＵＭＩリードとをＵＭＩ補正の出力として組み合わせる。
マッピング
Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍからダウンロードした全ヒトゲノム配列ＧＲＣｈ３７及びアノテーション参照としてｍｉｒｂａｓｅ＿２０を使用して、各試料のシーケンシングデータの参照プロファイルを得た。リードを、Ｂｏｗｔｉｅ２を使用してｍｉＲｂａｓｅにアラインメントした。リードをスパイクイン、豊富な配列及びｍｉＲＢａｓｅにアラインメントするためのマッピング基準は、リードが参照配列と完全に一致しなければならないというものであった。ゲノムへのマッピングのために、リードの最初の３２塩基において１つのミスマッチの制限を許容した。インデルはマッピングにおいて許容されなかった。非アライメントリードを宿主の参照ゲノムに対してマッピングし、ｍｉｒＰａｒａ及びｍｉＲｂａｓｅの入力として使用して、推定ｍｉＲＮＡを予測した。
Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍからダウンロードした全ヒトゲノム配列ＧＲＣｈ３７及びアノテーション参照としてｍｉｒｂａｓｅ＿２０を使用して、各試料のシーケンシングデータの参照プロファイルを得た。リードを、Ｂｏｗｔｉｅ２を使用してｍｉＲｂａｓｅにアラインメントした。リードをスパイクイン、豊富な配列及びｍｉＲＢａｓｅにアラインメントするためのマッピング基準は、リードが参照配列と完全に一致しなければならないというものであった。ゲノムへのマッピングのために、リードの最初の３２塩基において１つのミスマッチの制限を許容した。インデルはマッピングにおいて許容されなかった。非アライメントリードを宿主の参照ゲノムに対してマッピングし、ｍｉｒＰａｒａ及びｍｉＲｂａｓｅの入力として使用して、推定ｍｉＲＮＡを予測した。
示差的発現
アラインメントされたリードをカウントし、示差的発現分析、有意に示差的に発現されたマイクロＲＮＡのｐ値及びＢｅｎｊａｍｉｎｉ－Ｈｏｃｈｂｅｒｇによる偽発見率を、ＥｄｇｅＲを用いて行った。正規化のために、試料間の発現レベルのｌｏｇ倍及び絶対遺伝子変化に基づくＭ値のトリム平均（ＴＭＭ）法を使用した。
アラインメントされたリードをカウントし、示差的発現分析、有意に示差的に発現されたマイクロＲＮＡのｐ値及びＢｅｎｊａｍｉｎｉ－Ｈｏｃｈｂｅｒｇによる偽発見率を、ＥｄｇｅＲを用いて行った。正規化のために、試料間の発現レベルのｌｏｇ倍及び絶対遺伝子変化に基づくＭ値のトリム平均（ＴＭＭ）法を使用した。
目的変数なしの分析
主成分分析は、試料の定義されたコレクションからのＴＭＭで正規化された定量化を入力として使用して、Ｒで実行される。
主成分分析は、試料の定義されたコレクションからのＴＭＭで正規化された定量化を入力として使用して、Ｒで実行される。
ｍｉＲＮＡ ｑＰＣＲデータ分析－検証研究
全ての実験は独国ＱＩＡＧＥＮ Ｇｅｎｏｍｉｃ Ｓｅｒｖｉｃｅｓで行った。
全ての実験は独国ＱＩＡＧＥＮ Ｇｅｎｏｍｉｃ Ｓｅｒｖｉｃｅｓで行った。
ＭｉＲＮＡ ｑＰＣＲ検証を、１７６の唾液ベースライン試料（Ｂ）、損傷後の脳震盪プレーヤーからの４２の試料（Ｃａ群）、試合後の脳震盪プレーヤーからの５２の試料（Ｃｂ群）及び３６～４８時間後の脳震盪プレーヤーからの５４の試料（Ｃｃ群）、試合後の６１人の損傷していないプレーヤー（Ｕｂ群）、３６～４８時間後の４５人の損傷していないプレーヤー（Ｕｃ群）、試合後の３０人の筋骨格損傷プレーヤー（Ｍｂ群）、３６～４８時間後の２４人の筋骨格損傷プレーヤー（Ｍｃ群）で行った。
ＲＮＡ抽出及びｑＰＣＲ
ｍｉＲＮｅａｓｙ血清／血漿キット（ＱＩＡＧＥＮ社）を製造者の説明書に従って使用して、試料から総ＲＮＡを抽出した。精製した総ＲＮＡを３２μｌの最終容量で溶出した。１４μｌのＲＮＡを、ｍｉＲＣＵＲＹ ＬＮＡ ＲＴ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）を使用して７０μｌの反応物において逆転写した。ｃＤＮＡを５０倍希釈し、ｍｉＲＣＵＲＹ ＬＮＡ ｍｉＲＮＡ ＰＣＲのためのプロトコルに従って１０μｌのＰＣＲ反応物においてアッセイし、各ｍｉＲＮＡを、ｍｉＲＣＵＲＹ ＬＮＡ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎマスターミックスを使用して、ｍｉＲＮＡ Ｒｅａｄｙ－ｔｏ－Ｕｓｅ ＰＣＲ、カスタムパネルでｑＰＣＲにより１回アッセイした。テンプレートを逆転写反応から除外した陰性対照を行い、試料と同様にプロファイリングした。増幅は、３８４ウェルプレート中のＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒｐ ４８０ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｏｃｈｅ社）で行った。Ｃｑの決定（二次導関数法による）及び融解曲線分析の両方のために、Ｒｏｃｈｅ ＬＣソフトウェアを使用して増幅曲線を分析した。増幅効率は、ＬｉｎＲｅｇソフトウェアと同様のアルゴリズムを使用して計算した。全てのアッセイを別個の融解曲線について検査し、Ｔｍがアッセイの既知の仕様内にあることを確認した。更に、アッセイは、データ分析に含めるために、陰性対照よりも低い０Ｃｑ及び３７未満のＣｑで検出されなければならない。これらの基準を満たさなかったデータは、更なる分析から除外した。Ｃｑを二次導関数として計算した。正規化を、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ及びｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐの平均（カスタムノーマライザアッセイ）に基づいて行い、２つのより安定なｍｉＲが、Ｎｏｒｍｏｆｉｎｄｅｒソフトウェアによって全ての試料にわたって同定された（３３）。正規化Ｃｑ値を計算するために使用される式は、カスタムノーマライザアッセイ平均ＣｑとアッセイＣｑ（目的のｍｉＲＮＡ）との差である。より高い値は、ｍｉＲＮＡがその試料においてより豊富であることを示す。
ｍｉＲＮｅａｓｙ血清／血漿キット（ＱＩＡＧＥＮ社）を製造者の説明書に従って使用して、試料から総ＲＮＡを抽出した。精製した総ＲＮＡを３２μｌの最終容量で溶出した。１４μｌのＲＮＡを、ｍｉＲＣＵＲＹ ＬＮＡ ＲＴ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）を使用して７０μｌの反応物において逆転写した。ｃＤＮＡを５０倍希釈し、ｍｉＲＣＵＲＹ ＬＮＡ ｍｉＲＮＡ ＰＣＲのためのプロトコルに従って１０μｌのＰＣＲ反応物においてアッセイし、各ｍｉＲＮＡを、ｍｉＲＣＵＲＹ ＬＮＡ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎマスターミックスを使用して、ｍｉＲＮＡ Ｒｅａｄｙ－ｔｏ－Ｕｓｅ ＰＣＲ、カスタムパネルでｑＰＣＲにより１回アッセイした。テンプレートを逆転写反応から除外した陰性対照を行い、試料と同様にプロファイリングした。増幅は、３８４ウェルプレート中のＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒｐ ４８０ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｏｃｈｅ社）で行った。Ｃｑの決定（二次導関数法による）及び融解曲線分析の両方のために、Ｒｏｃｈｅ ＬＣソフトウェアを使用して増幅曲線を分析した。増幅効率は、ＬｉｎＲｅｇソフトウェアと同様のアルゴリズムを使用して計算した。全てのアッセイを別個の融解曲線について検査し、Ｔｍがアッセイの既知の仕様内にあることを確認した。更に、アッセイは、データ分析に含めるために、陰性対照よりも低い０Ｃｑ及び３７未満のＣｑで検出されなければならない。これらの基準を満たさなかったデータは、更なる分析から除外した。Ｃｑを二次導関数として計算した。正規化を、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ及びｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐの平均（カスタムノーマライザアッセイ）に基づいて行い、２つのより安定なｍｉＲが、Ｎｏｒｍｏｆｉｎｄｅｒソフトウェアによって全ての試料にわたって同定された（３３）。正規化Ｃｑ値を計算するために使用される式は、カスタムノーマライザアッセイ平均ＣｑとアッセイＣｑ（目的のｍｉＲＮＡ）との差である。より高い値は、ｍｉＲＮＡがその試料においてより豊富であることを示す。
統計分析
全ての分析は、ＳＰＳＳ ２０．０（米国イリノイ州シカゴのＳＰＳＳ社）を使用して行った。
全ての分析は、ＳＰＳＳ ２０．０（米国イリノイ州シカゴのＳＰＳＳ社）を使用して行った。
群比較
本発明者らは、両側独立標本ｔ検定手順を使用して、２つの症例群の平均を比較した。両側対応ありｔ検定手順は、単一の群について２つの変数の平均を比較する。手順は、各症例について２つの変数の値の差を計算し、平均が０と異なるかどうかを試験する。ブートストラップは、推定値の標準誤差及び信頼区間のロバストな推定値を導出するための方法である。ブートストラップは、パラメトリック推論が不可能な場合のパラメトリック推定の代替として最も有用である。
本発明者らは、両側独立標本ｔ検定手順を使用して、２つの症例群の平均を比較した。両側対応ありｔ検定手順は、単一の群について２つの変数の平均を比較する。手順は、各症例について２つの変数の値の差を計算し、平均が０と異なるかどうかを試験する。ブートストラップは、推定値の標準誤差及び信頼区間のロバストな推定値を導出するための方法である。ブートストラップは、パラメトリック推論が不可能な場合のパラメトリック推定の代替として最も有用である。
一元配置ＡＮＯＶＡ手順は、単一因子（独立）変数による定量的従属変数の一元配置分散分析を生成する。分散分析は、いくつかの平均が等しいという仮説を検証するために使用される。この技術は、２標本ｔ検定の拡張である。平均に差があると判断することに加えて、どの平均に差があるかを知りたい場合がある。平均を比較するための２つのタイプの試験、すなわち先験的コントラスト試験及び事後試験がある。コントラストは、実験を行う前に設定された試験であり、事後試験は、実験が行われた後に行われる。
一般線形モデル反復測定は、同じ属性の異なる測定値を表す関連従属変数の群を分析する。ＧＬＭ反復測定で使用するための１つ又は複数の対象内因子を定義することが可能である。
判別分析
判別分析（ＤＡ）をＱｉａｇｅｎ社によって提供されたＣｑ値に適用した。
判別分析（ＤＡ）をＱｉａｇｅｎ社によって提供されたＣｑ値に適用した。
ＤＡの主な目的は、群がそれに沿って異なる次元を見つけること、及び変数（予測子）の組み合わせから群メンバーシップを予測するための分類関数を見つけることであった。この場合、２つの群は脳震盪を受けた対象（Ｃ＋ＩＰＲ群）及び損傷していない対象（Ｕ群）であり、予測子はＮＧＳ研究から選択されたバイオマーカーのセットであった。
ＤＡは、既に群に分類されているデータを用いて、観察された変数値に基づいて新たな（及び未分類の）個人を分類するための規則を導き出す。
単変量項（ｔ検定、一元配置Ａｎｏｖａ）では、群間の有意差は、スコアが与えられると、それがどの群に由来するかを予測できることを意味する。ＤＡでは、群が確実に異なる次元を理解しようとして、予測子間の差のパターンを全体として解釈する努力がなされることが多い。
２つの群のみでは、それらを最もよく分離する予測子の線形結合は１つしかない。２つの群重心の分離（平均の多変量バージョン）は、群１及び群２を分離する予測子の最良の線形結合を表す。２つの重心を結ぶ平行線は、線形結合又は判別関数、２つの群を識別するスコアのパターンを表す。
ＤＡには２つのファセットがあり、いずれの所与の研究用途でも一方又は両方が強調され得る。研究者は、次元の数及びそれらの意味が無関係である場合を分類するための決定規則に関心があるかもしれない。あるいは、様々な群を互いに分離する予測子の組み合わせ（判別関数）に関してＤＡの結果を解釈することに重点を置くことができる。
分類関数は、新しい症例の群メンバーシップを予測し、交差検証によって同じ試料の症例の分類の妥当性をチェックするために使用される。
正準相関は、これらの群間の判別関数のスコアによって説明される分散のパーセントを説明する。正準相関は、回帰方程式の両辺に複数の変数があり、各判別関数について、二乗されると、その関数上の群と予測子との間で共有される分散の割合を示すため、多重相関である。
標準的な（直接）ＤＡでは、標準的な重回帰と同様に、全ての予測子が一度に方程式に入り、各予測子には、群との固有の関連付けのみが割り当てられる。予測子間で共有される分散は、全関係に寄与するが、いずれか１つの予測子には寄与しない。
段階的ＤＡでは、統計的基準を使用して、予測子の減少したセットを生成することができる。
全ての分析は、ＳＰＳＳ ２０．０（米国イリノイ州シカゴのＳＰＳＳ社）を使用して行った。
ＲＯＣ曲線分析
試験の診断性能、又は実験症例を正常症例と識別するための試験の精度は、受信者操作特性（ＲＯＣ）曲線分析を使用して評価される。ＲＯＣ曲線を使用して、２つの診断試験の診断性能を比較することもできる。
試験の診断性能、又は実験症例を正常症例と識別するための試験の精度は、受信者操作特性（ＲＯＣ）曲線分析を使用して評価される。ＲＯＣ曲線を使用して、２つの診断試験の診断性能を比較することもできる。
一方の集団が特徴を有し、他方の集団が特徴を有しない２つの集団における特定の試験の結果を考慮すると、２つの群間の完全な分離はほとんど観察されない。実際、試験結果の分布は重複する。
ＲＯＣ曲線では、真陽性率（感度）は、パラメータの異なるカットオフポイントに対する偽陽性率（１００－特異度）の関数としてプロットされる。ＲＯＣ曲線上の各ポイント（カットオフ）は、特定の判定閾値に対応する感度／特異度のペアを表す。ＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ）は、パラメータが２つの診断群（実験／正常）をどれだけ区別できるかの尺度である。完全に区別できる（２つの分布に重複がない）試験は、左上隅を通過するＲＯＣ曲線を有する（感度１００％、特異度１００％）。したがって、ＲＯＣ曲線が左上隅に近いほど、試験の全体的な精度は高くなる。
ＲＯＣ統計
感度：特性が存在する場合に検査結果が陽性となる確率（パーセンテージとして表される真陽性率）。
感度：特性が存在する場合に検査結果が陽性となる確率（パーセンテージとして表される真陽性率）。
特異度：特性が存在しない場合に検査結果が陰性になる確率（パーセンテージとして表される真陰性率）。
陽性尤度比：特性が存在する場合の陽性検査結果の確率と特性が存在しない場合の陽性検査結果の確率との比、すなわち、＝真陽性率／偽陽性率＝感度／（１－特異度）
陰性尤度比：特性が存在する場合の陰性検査結果の確率と特性が存在しない場合の陰性検査結果の確率との比、すなわち、＝偽陰性率／真陰性率＝（１－感度）／特異度
結果
試料サイズ
２０１７年７月から２０１８年４月の間に、合計９０６人のプレーヤーがこの研究に採用された。これには、プレミアシップでプレーしている１１クラブ、及びＩＰＡチャンピオンシップでプレーしている１１クラブのプレーヤーが含まれていた。プレミアシップのあるクラブは、別の組織によって運営されている異なる目的のための唾液採取を含む脳震盪研究プロジェクトに既に参加していたので、ＲＦＵとの協議の後に参加しないことを選択した。ＩＰＡチャンピオンシップのあるクラブは、医療スタッフの人数が限られているために研究の要件を満たすのが困難であると感じて参加しないことを選択したが、ＩＰＡチャンピオンシップの別のクラブは、同様の理由で研究から撤退することを決定したが、プレーヤーがベースライン試料を提供した後であった。これにより、プレミアシップの合計１１のクラブと、ＩＰＡチャンピオンシップの１０のクラブが、シーズン中の頭部損傷イベントの試料収集に参加した。
試料サイズ
２０１７年７月から２０１８年４月の間に、合計９０６人のプレーヤーがこの研究に採用された。これには、プレミアシップでプレーしている１１クラブ、及びＩＰＡチャンピオンシップでプレーしている１１クラブのプレーヤーが含まれていた。プレミアシップのあるクラブは、別の組織によって運営されている異なる目的のための唾液採取を含む脳震盪研究プロジェクトに既に参加していたので、ＲＦＵとの協議の後に参加しないことを選択した。ＩＰＡチャンピオンシップのあるクラブは、医療スタッフの人数が限られているために研究の要件を満たすのが困難であると感じて参加しないことを選択したが、ＩＰＡチャンピオンシップの別のクラブは、同様の理由で研究から撤退することを決定したが、プレーヤーがベースライン試料を提供した後であった。これにより、プレミアシップの合計１１のクラブと、ＩＰＡチャンピオンシップの１０のクラブが、シーズン中の頭部損傷イベントの試料収集に参加した。
全体で、両方の競技にわたって合計２２９件の頭部損傷が発生した。この数は、「カテゴリ１」の徴候及び症状を示したためにプレーヤーが直ちに完全にプレーから外された事例、並びにプレーヤーがフィールド外のＨＩＡ１評価のために一時的にプレーから外された全ての事例を統合したものである。これらの事例の合計１２９件から試料を受け取り、全体のコンプライアンスは５６％となった。
フィールド上での診断又はその後の診断が脳震盪であった可能性のある１２０件の事例のうち７３件（６１％）から試料を受け取った。この群内では、２６件（３６％）が、「カテゴリ１」の徴候及び症状を示したためにプレーヤーがプレーから直ちに完全に外された事例であった。フィールド上での診断又はその後の診断で脳震盪が除外された可能性のある１０９件のうち４２件（３９％）から試料を受け取った。
相当の、負傷していない対照試料を７１例（５５％）受け取った。相当の、筋骨格損傷対照試料を３９例（３０％）受け取った。
次世代シーケンシング－発見段階
ＭｉｃｒｏＲＮＡ／ｓｍａｌｌ ＲＮＡ次世代シーケンシング（ＮＧＳ）を、最初の発見段階において、１５の唾液ベースライン試料（Ｂ）、脳震盪プレーヤーからの１５の試料（１０の脳震盪（Ｃ）及び５のＩＰＲからなる）及び２０の対照（１０の筋骨格損傷（Ｍ）及び１０の損傷していないプレーヤー（Ｕ）からなる）を使用して行った。この段階で分析された全ての試料を、試合後に収集した（時点ｂ）。
ＭｉｃｒｏＲＮＡ／ｓｍａｌｌ ＲＮＡ次世代シーケンシング（ＮＧＳ）を、最初の発見段階において、１５の唾液ベースライン試料（Ｂ）、脳震盪プレーヤーからの１５の試料（１０の脳震盪（Ｃ）及び５のＩＰＲからなる）及び２０の対照（１０の筋骨格損傷（Ｍ）及び１０の損傷していないプレーヤー（Ｕ）からなる）を使用して行った。この段階で分析された全ての試料を、試合後に収集した（時点ｂ）。
平均して、試料あたり１６３０万個のリードが得られた。詳細なｍｉｃｒｏＲＮＡ／ｓｍａｌｌ ＲＮＡ ＮＧＳデータ分析報告が得られた。示差的発現分析ステップは、ｍｉｃｒｏＲＮＡごとに異なることを想定し、生物学的変動と実験内の技術的変動を区別することを試みる。
有意に示差的に発現されるｍｉｃｒｏＲＮＡのＰ値を、負の二項分布に対する正確な試験によって推定する。所与の実験条件間で示差的に発現すると予測されるｍｉｃｒｏＲＮＡのリストを作成した。このリストには、様々なＲＮＡ断片が含まれており、その中には、Ｃ＋ＩＰ群とＭ＋Ｕ群、Ｂ群とＣ＋ＩＰＲ群、Ｂ群とＭ＋Ｕ群の間で示差的に発現される既知のｍｉｃｒｏＲＮＡ、その他の低分子非コードＲＮＡ、予測されるｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｐｕｔ－ｍｉＲと記載）が含まれる。
検証のための選択
Ｃ＋ＩＰＲ群とＭ＋Ｕ群において、ＮＧＳ分析で示差的な発現を示したｍｉｃｒｏＲＮＡ／ｓｍａｌｌ ＲＮＡ／ｐｕｔ ｍｉｃｒｏＲＮＡのパネルを、以下のパラメータＦＤＲ＜０．５又はｐ値＜０．０５に従って選択した。１６８個のｓｍａｌｌ ＲＮＡ、３８個の既知のｍｉｃｒｏＲＮＡ及び２３３個のｐｕｔ－ｍｉＲからなるパネルをｑＰＣＲによる検証研究のために使用した。この試験の後、最も有意に変化したバイオマーカーは、３０個の既知のｍｉｃｒｏＲＮＡ、３４個の推定ｍｉＲ、２８個の低分子非コードＲＮＡに減少し、これらを更に４０５個の試料で分析した。２つのｑＰＣＲ検証セットから得られたＣｑ値を最終的にマージし、合計５９８個の試料を収集した。
Ｃ＋ＩＰＲ群とＭ＋Ｕ群において、ＮＧＳ分析で示差的な発現を示したｍｉｃｒｏＲＮＡ／ｓｍａｌｌ ＲＮＡ／ｐｕｔ ｍｉｃｒｏＲＮＡのパネルを、以下のパラメータＦＤＲ＜０．５又はｐ値＜０．０５に従って選択した。１６８個のｓｍａｌｌ ＲＮＡ、３８個の既知のｍｉｃｒｏＲＮＡ及び２３３個のｐｕｔ－ｍｉＲからなるパネルをｑＰＣＲによる検証研究のために使用した。この試験の後、最も有意に変化したバイオマーカーは、３０個の既知のｍｉｃｒｏＲＮＡ、３４個の推定ｍｉＲ、２８個の低分子非コードＲＮＡに減少し、これらを更に４０５個の試料で分析した。２つのｑＰＣＲ検証セットから得られたＣｑ値を最終的にマージし、合計５９８個の試料を収集した。
統計分析－検証研究
Ｃ群対Ｕ＋Ｍ群で示差的に発現されるＳｎｃＲＮＡ
脳震盪試料を、異なる時点での非損傷及び筋骨格損傷と比較した。表５は、Ｃａ対Ｕ＋Ｍｂ（カテゴリＵ及びＭの時点ａでは試料を採取しなかったため、Ｃａ群を最も近い時点であるＵ＋Ｍｂと比較した）、Ｃｂ対Ｕ＋Ｍｂ、Ｃｃ対Ｕ＋Ｍｃの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。
Ｃ群対Ｕ＋Ｍ群で示差的に発現されるＳｎｃＲＮＡ
脳震盪試料を、異なる時点での非損傷及び筋骨格損傷と比較した。表５は、Ｃａ対Ｕ＋Ｍｂ（カテゴリＵ及びＭの時点ａでは試料を採取しなかったため、Ｃａ群を最も近い時点であるＵ＋Ｍｂと比較した）、Ｃｂ対Ｕ＋Ｍｂ、Ｃｃ対Ｕ＋Ｍｃの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。
ＳＴＥＰＷＩＳＥ分析から選択されたバイオマーカーを表５の灰色のセルに示し、Ｃａ対Ｕ＋Ｍｂ、Ｃｂ対Ｕ＋Ｍｂ、Ｃｃ対Ｕ＋Ｍｃの比較において、それぞれ０．８６、０．８６、０．９７のＡＵＣを示す。
Ｃ群対Ｕ群で示差的に発現れるＳｎｃＲＮＡ
脳震盪試料を、負傷していない対照群と異なる時点でのみ比較した。表６は、Ｃａ対Ｕｂ、Ｃｂ対Ｕｂ、Ｃｃ対Ｕｃの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。ＳＴＥＰＷＩＳＥ分析から選択されたバイオマーカーを表６の灰色のセルに示し、以下の比較Ｃａ対Ｕｂ、Ｃｂ対Ｕｂ、Ｃｃ対Ｕｃにおいて、それぞれ０．８３、０．９１及び０．９７のＡＵＣを示す。
脳震盪試料を、負傷していない対照群と異なる時点でのみ比較した。表６は、Ｃａ対Ｕｂ、Ｃｂ対Ｕｂ、Ｃｃ対Ｕｃの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。ＳＴＥＰＷＩＳＥ分析から選択されたバイオマーカーを表６の灰色のセルに示し、以下の比較Ｃａ対Ｕｂ、Ｃｂ対Ｕｂ、Ｃｃ対Ｕｃにおいて、それぞれ０．８３、０．９１及び０．９７のＡＵＣを示す。
Ｃ群対Ｂ群で示差的に発現されるＳｎｃＲＮＡ
脳震盪試料を、同じ対照のベースラインデータと比較した。表７は、Ｃａ対Ｂ、Ｃｂ対Ｂ、Ｃｃ対Ｂの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのカウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。
脳震盪試料を、同じ対照のベースラインデータと比較した。表７は、Ｃａ対Ｂ、Ｃｂ対Ｂ、Ｃｃ対Ｂの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのカウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。
Ｃ群とＭ群とで示差的に発現されるＳｎｃＲＮＡ
脳震盪試料を、筋骨格損傷対照群と異なる時点でのみ比較した。表８は、Ｃａ対Ｍｂ、Ｃｂ対Ｍｂ、Ｃｃ対Ｍｃの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。ＳＴＥＰＷＩＳＥ分析から選択されたバイオマーカーを表８の灰色のセルに示し、以下の比較Ｃａ対Ｍｂ、Ｃｂ対Ｍｂ、Ｃｃ対Ｍｃにおいて、それぞれ０．９６、０．８３及び０．９４のＡＵＣを示す。
脳震盪試料を、筋骨格損傷対照群と異なる時点でのみ比較した。表８は、Ｃａ対Ｍｂ、Ｃｂ対Ｍｂ、Ｃｃ対Ｍｃの異なる比較の中でｐ値＜０．０５まで生存したｓｎｃＲＮＡを示している。表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。ＳＴＥＰＷＩＳＥ分析から選択されたバイオマーカーを表８の灰色のセルに示し、以下の比較Ｃａ対Ｍｂ、Ｃｂ対Ｍｂ、Ｃｃ対Ｍｃにおいて、それぞれ０．９６、０．８３及び０．９４のＡＵＣを示す。
ＮＧＳ分析によって選択され、第１のｑＰＣＲ検証ステップのために使用される、Ｃｂ群とＵ＋Ｍｂ群との間で示差的に発現されるｍｉｃｒｏＲＮＡ（ＦＤＲ＜０．５又はｐ値＜０．０５）を以下の表３Ａに示す。
ＮＧＳ分析によって選択され、第１のｑＰＣＲ検証ステップのために使用される、Ｃｂ群とＵ＋Ｍｂ群との間で示差的に発現される他のｓｎｃＲＮＡ（ＦＤＲ＜０．５又はｐ値＜０．０５）を以下の表３Ｂに示す。
ＮＧＳ分析によって選択され、最初のｑＰＣＲ検証工程のために使用される、Ｃｂ群とＵ＋Ｍｂ群との間で示差的に発現される推定ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ＦＤＲ＜０．５又はｐ値＜０．０５）を以下の表３Ｃに示す。
第２のｑＰＣＲ検証ステップのために選択されたｍｉｃｒｏＲＮＡ ＩＤを以下の表４Ａに示す。
第２のｑＰＣＲ検証ステップのために選択された推定ｍｉｃｒｏＲＮＡのゲノム位置及び配列を以下の表４Ｂに示す。
第２のｑＰＣＲ検証ステップのために選択された他のｓｎｃＲＮＡのゲノム位置及び配列を以下の表４Ｃに示す。
３つの時点でＣ群対Ｕ＋Ｍ群で示差的に発現されたＳｎｃＲＮＡを以下の表５に示す。この表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析、並びにＳＴＥＰＷＩＳＥ分析も含まれる。
３つの時点でＣ群対Ｕ群で示差的に発現されたＳｎｃＲＮＡを以下の表６に示す。この表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析、並びにＳＴＥＰＷＩＳＥ分析も含まれる。
３つの時点でＣ群対Ｂ群で示差的に発現されたＳｎｃＲＮＡを以下の表７に示す。この表はまた、個々のバイオマーカーごとのカウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析も含まれる。
３つの時点でＣ群対Ｍ群で示差的に発現されたＳｎｃＲＮＡを以下の表８に示す。この表には、個々のバイオマーカーごとのＡＵＣ、ＣＩ、カウント、ＣＴ平均、ＳＤ、ｄｄｃｑ、倍数変化及びパワー分析、並びにＳＴＥＰＷＩＳＥ分析も含まれる。
本開示の実施形態の例の第１のセット
Ａ１．それを必要とするヒト対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び治療する方法であって、方法は、
対象から唾液試料を得ること、
唾液試料を、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させること、
唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定すること、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定すること、及び
以下の１つ又は複数：
対象を言語試験、認知試験、運動試験若しくは光学試験又は前述の任意の組み合わせに供すること、
対象をＣＴ若しくはＭＲＩ又はこれらの組み合わせの形態の画像診断に供すること、及び／又は
対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと
に従って、ＴＢＩを有すると同定された対象を治療すること、
を含む、方法。
Ａ１．それを必要とするヒト対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び治療する方法であって、方法は、
対象から唾液試料を得ること、
唾液試料を、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させること、
唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定すること、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定すること、及び
以下の１つ又は複数：
対象を言語試験、認知試験、運動試験若しくは光学試験又は前述の任意の組み合わせに供すること、
対象をＣＴ若しくはＭＲＩ又はこれらの組み合わせの形態の画像診断に供すること、及び／又は
対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと
に従って、ＴＢＩを有すると同定された対象を治療すること、
を含む、方法。
Ａ２．ヒト対象を、ＴＢＩの治療が成功した後の正常な活動に適しているとして特定することを更に含む、請求項Ａ１に記載の方法。
Ｂ１．対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法であって、方法は、対象から得られた唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルを決定することを含み、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーは、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
Ｂ２．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルのいずれかが、ＴＢＩを示す、請求項Ｂ１に記載の方法。
Ｂ３．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルが、所定の閾値を上回る若しくは下回る、又は対照と比較して増加若しくは減少する場合、対象がＴＢＩを有すると診断される、請求項Ｂ１に記載の方法。
Ｂ４．ヒト対象を、ＴＢＩの治療が成功した後の正常な活動に適しているとして特定することを更に含む、請求項Ｂ１に記載の方法。
Ｂ５．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｂ１からＢ４のいずれか一項に記載の方法。
Ｃ１．ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムのためのセンサ素子であって、センサ素子は、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的なプローブで機能化された基板を含む、センサ素子。
Ｃ２．プローブが、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項Ｃ１に記載のセンサ素子。
Ｃ３．プローブが、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｃ１又はＣ２に記載のセンサ素子。
Ｃ４．プローブが、配列番号７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、及び９９の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｃ１又はＣ２に記載のセンサ素子。
Ｃ５．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、Ｃ１からＣ４のいずれか一項に記載のセンサ素子。
Ｄ１．本開示によるセンサ素子と、プローブへの標的ＲＮＡバイオマーカーの結合を検出可能な検出装置とを含む、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システム。
Ｄ２．標的ＲＮＡバイオマーカーがアップレギュレーションされているか又はダウンレギュレーションされているかを判定する手段を更に含む、請求項Ｄ１に記載の検出システム。
Ｅ１．ＴＢＩを有することが疑われる対象に対する一連の処置を決定するための方法であって、対象から得られた唾液試料を本開示による検出システムに適用すること、及び少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、ＴＢＩのための治療を提供することを含む方法。
Ｆ１．ＴＢＩが疑われる対象を治療する方法であって、方法は、
Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定すること、及び
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、対象にＴＢＩに対する治療を提供すること
を含む、方法。
Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定すること、及び
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、対象にＴＢＩに対する治療を提供すること
を含む、方法。
Ｆ２．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｆ１に記載の方法。
Ｇ１．唾液試料中のＲＮＡバイオマーカーを検出する方法であって、方法は、
対象から唾液試料を取得すること、
唾液試料を、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させること
ポリメラーゼ連鎖反応を使用して少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅すること、及び
増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することを含む、方法。
対象から唾液試料を取得すること、
唾液試料を、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させること
ポリメラーゼ連鎖反応を使用して少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅すること、及び
増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することを含む、方法。
Ｇ２．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｇ１に記載の方法。
Ｈ１．ヒト対象の唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法において使用するためのキットであって、キットは、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、キット。
Ｈ２．プローブが、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項Ｈ１に記載のキット。
Ｈ３．プローブが、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｈ１又はＨ２に記載のキット。
Ｈ４．プローブが、配列番号７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、及び９９の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｈ１又はＨ２に記載のキット。
Ｈ５．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｈ１からＨ４のいずれか一項に記載のキット。
Ｉ１．ヒト対象の唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法において使用するための組成物であって、組成物は、Ｙ＿ＲＮＡ．２５５、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７３、ＲＮＵ６－４５、Ｕ６．３７５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、Ｕ６．４２８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４１０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２９３、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、Ｕ６．１２４９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、及びｐｕｔ－ｍｉＲ－１３５２からなる群から選択される少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、組成物。
Ｉ２．プローブが、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項Ｉ１に記載の組成物。
Ｉ３．プローブが、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｉ１又はＩ２に記載の組成物。
Ｉ４．プローブが、配列番号７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、及び９９の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｉ１又はＩ２に記載の組成物。
Ｉ５．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐからなる群から選択される１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｉ１からＩ４のいずれか一項に記載の組成物。
本開示の実施形態の例の第２のセット
Ａ１．それを必要とするヒト対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び治療する方法であって、方法は、
対象から唾液試料を得ること、
唾液試料を、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させること、
唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定すること、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定すること、及び
以下の１つ又は複数：
対象を言語試験、認知試験、運動試験若しくは光学試験又は前述の任意の組み合わせに供すること、
対象をＣＴ若しくはＭＲＩ又はこれらの組み合わせの形態の画像診断に供すること、及び／又は
対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと
に従って、ＴＢＩを有すると同定された対象を治療することを含む、方法。
Ａ１．それを必要とするヒト対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び治療する方法であって、方法は、
対象から唾液試料を得ること、
唾液試料を、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させること、
唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定すること、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定すること、及び
以下の１つ又は複数：
対象を言語試験、認知試験、運動試験若しくは光学試験又は前述の任意の組み合わせに供すること、
対象をＣＴ若しくはＭＲＩ又はこれらの組み合わせの形態の画像診断に供すること、及び／又は
対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと
に従って、ＴＢＩを有すると同定された対象を治療することを含む、方法。
Ａ２．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ａ１に記載の方法。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ａ１に記載の方法。
Ａ３．ヒト対象を、ＴＢＩの治療が成功した後の正常な活動に適しているとして特定することを更に含む、請求項Ａ１に記載の方法。
Ｂ１．対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法であって、方法が、対象から得られた唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルを決定することを含み、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。
Ｂ２．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルのいずれかが、ＴＢＩを示す、請求項Ｂ１に記載の方法。
Ｂ３．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルが、所定の閾値を上回る若しくは下回る、又は対照と比較して増加若しくは減少する場合、対象がＴＢＩを有すると診断される、請求項Ｂ１に記載の方法。
Ｂ４．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｂ１からＢ３のいずれか一項に記載の方法。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｂ１からＢ３のいずれか一項に記載の方法。
Ｂ５．ヒト対象を、ＴＢＩの治療が成功した後の正常な活動に適しているとして特定することを更に含む、請求項Ｂ１に記載の方法。
Ｂ６．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｂ１からＢ７のいずれか一項に記載の方法。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｂ１からＢ７のいずれか一項に記載の方法。
Ｃ１．ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムのためのセンサ素子であって、センサ素子が、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的なプローブで機能化された基板を含む、センサ素子。
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的なプローブで機能化された基板を含む、センサ素子。
Ｃ２．プローブが、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項Ｃ１に記載のセンサ素子。
Ｃ３．プローブが、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｃ１又はＣ２に記載のセンサ素子。
Ｃ４．プローブが、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｃ１又はＣ２に記載のセンサ素子。
Ｃ５．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｃ１からＣ４のいずれか一項に記載のセンサ素子。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｃ１からＣ４のいずれか一項に記載のセンサ素子。
Ｄ１．本開示によるセンサ素子と、プローブへの標的ＲＮＡバイオマーカーの結合を検出可能な検出装置とを含む、ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システム。
Ｄ２．標的ＲＮＡバイオマーカーがアップレギュレーションされているか又はダウンレギュレーションされているかを判定する手段を更に含む、請求項Ｄ１に記載の検出システム。
Ｅ１．ＴＢＩを有することが疑われる対象に対する一連の処置を決定するための方法であって、対象から得られた唾液試料を本開示による検出システムに適用すること、及び少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、ＴＢＩのための治療を提供することを含む方法。
Ｆ１．ＴＢＩが疑われる対象を治療する方法であって、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定すること、及び
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、対象にＴＢＩに対する治療を提供することを含む、方法。
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定すること、及び
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、対象にＴＢＩに対する治療を提供することを含む、方法。
Ｆ２．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｆ１に記載の方法。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｆ１に記載の方法。
Ｇ１．唾液試料中のＲＮＡバイオマーカーを検出する方法であって、方法が、
ヒト対象から唾液試料を得ることと、
唾液試料を、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させること、
ポリメラーゼ連鎖反応を使用して少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅すること、及び
増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することを含む、方法。
ヒト対象から唾液試料を得ることと、
唾液試料を、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させること、
ポリメラーゼ連鎖反応を使用して少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅すること、及び
増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することを含む、方法。
Ｇ２．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｇ１に記載の方法。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｇ１に記載の方法。
Ｈ１．ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するためのキットであって、キットが、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、キット。
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、キット。
Ｈ２．プローブが、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項Ｈ１に記載のキット。
Ｈ３．プローブが、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｈ１又はＨ２に記載のキット。
Ｈ４．プローブが、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｈ１又はＨ２に記載のキット。
Ｈ５．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｈ１からＨ４のいずれか一項に記載のキット。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｈ１からＨ４のいずれか一項に記載のキット。
Ｉ１．ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するための組成物であって、組成物が、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、組成物。
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、組成物。
Ｉ２．プローブが、少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項Ｉ１に記載の組成物。
Ｉ３．プローブが、標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｉ１又はＩ２に記載の組成物。
Ｉ４．当該プローブが、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項Ｉ１又はＩ２に記載の組成物。
Ｉ５．少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｉ１からＩ４のいずれか一項に記載の組成物。
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項Ｉ１からＩ４のいずれか一項に記載の組成物。
本開示に自明及び／又は固有の他の利点は、当業者には明らかであろう。特定の特徴及び部分的組み合わせは有用であり、他の特徴及び部分的組み合わせを参照せずに採用され得ることが理解されよう。これは、特許請求の範囲によって企図され、特許請求の範囲内である。本開示の範囲から逸脱することなく、多くの可能な実施形態が本開示から作成され得るので、添付の図面に記載又は図示された全ての事項は、例示として解釈されるべきであり、限定的な意味で解釈されるべきではないことを理解されたい。
配列表１５３ ＜２２３＞／ｎｏｔｅ＝“不明点の説明：
‘ＤＥＶＤ’カスパーゼ－３阻害剤配列”
‘ＤＥＶＤ’カスパーゼ－３阻害剤配列”
Claims (57)
- 対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法であって、前記方法が、前記対象から得られた唾液試料中の少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルを決定することを含み、前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、方法。 - 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルのいずれかが、ＴＢＩを示す、請求項１に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのレベルが所定の閾値を上回る若しくは下回る、又は対照と比較して増加若しくは減少する場合、前記対象がＴＢＩを有すると診断される、請求項１に記載の方法。
- 前記唾液試料が、損傷直後から損傷後の任意の期間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項１に記載の方法。
- 前記唾液試料が、損傷直後から、前記ＲＮＡバイオマーカーの少なくとも１つの発現レベルが前記所定の閾値又は前記対照試料中の前記ＲＮＡバイオマーカーの量に戻るまでから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４に記載の方法。
- 前記唾液試料が、損傷直後から損傷後１年まで、１０ヶ月まで、８ヶ月まで、６ヶ月まで、５ヶ月まで、４ヶ月まで、３ヶ月まで、２ヶ月まで、１ヶ月まで、２５日まで、２０日まで、１５日まで、７日まで、５日まで、３日まで、２日まで、及び／又は２４時間までから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４に記載の方法。
- 前記唾液試料が、損傷直後から１５日間、１時間から１５日間、２４時間から１５日間、２４時間から７日間及び２から５日間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項６に記載の方法。
- 前記損傷後の１回又は複数回の更なる時間に前記対象から１つ又は複数の更なる唾液試料を得ることと、各更なる試料について検出及び増幅ステップを繰り返すこととを更に含む、請求項１に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から損傷後の任意の期間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項８に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から、前記ＲＮＡバイオマーカーの少なくとも１つの発現レベルが前記所定の閾値又は前記対照試料中の前記ＲＮＡバイオマーカーの量に戻るまでから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項８に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から損傷後１年まで、１０ヶ月まで、８ヶ月まで、６ヶ月まで、５ヶ月まで、４ヶ月まで、３ヶ月まで、２ヶ月まで、１ヶ月まで、２５日まで、２０日まで、１５日まで、７日まで、５日まで、３日まで、２日まで、及び／又は２４時間までから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項８に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から１５日間、１時間から１５日間、２４時間から１５日間、２４時間から７日間、及び２から５日間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項１１に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、前記損傷後の１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５日目に得られる、請求項８に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を検出することが、ＰＣＲベースのアッセイ、ライトアレイアッセイ、層流チップアッセイ、又は少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを検出するのに適した任意のアッセイを使用して行われる、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＰＣＲベースのアッセイを使用する場合、所定の閾値が、２デルタデルタＣＴ（２－ΔΔＣＴ）法を使用して１．５以上の倍数変化に相当する、請求項１４に記載の方法。
- 所定の閾値が、２デルタデルタＣＴ（２－ΔΔＣＴ）法を使用して２以上の倍数変化に相当する、請求項１４に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の方法。 - 前記ヒト対象を、ＴＢＩの治療が成功した後の正常な活動に適しているとして特定することを更に含む、請求項３３に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。 - ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムのためのセンサ素子であって、前記センサ素子が、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的なプローブで機能化された基板を含む、センサ素子。 - 前記プローブが、前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項２０に記載のセンサ素子。
- 前記プローブが、前記標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項２０又は２１に記載のセンサ素子。
- 前記プローブが、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項２０又は２１に記載のセンサ素子。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項２１から２３のいずれか一項に記載のセンサ素子。 - ＴＢＩを診断及び／又は監視するための検出システムであって、
請求項２０から２４のいずれか一項に記載のセンサ素子と、
前記プローブへの標的ＲＮＡバイオマーカーの結合を検出可能な検出装置と、を含む、検出システム。 - 前記標的ＲＮＡバイオマーカーがアップレギュレーションされているか又はダウンレギュレーションされているかを判定する手段を更に含む、請求項２５に記載の検出システム。
- ＴＢＩを有することが疑われる対象に対する一連の処置を決定するための方法であって、前記対象から得られた唾液試料を請求項２５又は２６に記載の検出システムに適用することと、前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、ＴＢＩに対する治療を提供することと、を含む方法。
- ＴＢＩが疑われる対象を治療する方法であって、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが、前記対象から得られた唾液試料で検出可能であるかどうかを決定することと、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーのアップレギュレーションされたレベル又はダウンレギュレーションされたレベルが検出された場合、前記対象にＴＢＩに対する治療を提供することと、を含む、方法。 - 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項２８に記載の方法。 - 唾液試料中のＲＮＡバイオマーカーを検出する方法であって、前記方法が、
ヒト対象から唾液試料を得ることと、
前記唾液試料を、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドプライマーと接触させることと、
ポリメラーゼ連鎖反応を使用して前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを増幅することと、
前記増幅されたＲＮＡバイオマーカーを検出することと、を含む、方法。 - 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈａｓ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｈａｓｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｈａｓｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｈａｓ１４３）、ｈｓａ－ｍｈａｓ１４８ａ－３ｐｈａｓｓａ－ｍｉＲ－２０６ｈａｓｓａ－ｍｉＲ－２９ｃｈａｓ、ｈｓａ－ｍｉＲ－ｈａｓ－３ｐ、ｈｓａｈａｓＲ－４２５－５ｐ、ｈａｓ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｈａｓ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－ｈａｓ ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｈａｓｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項３０に記載の方法。 - ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するためのキットであって、前記キットが、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、キット。 - 前記プローブが、前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項３２に記載のキット。
- 前記プローブが、前記標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項３２又は３３に記載のキット。
- 前記プローブが、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項３２又は３３に記載のキット。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項３２から３５のいずれか一項に記載のキット。 - ヒト対象からの唾液における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び／又は監視する方法で使用するための組成物であって、前記組成物が、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに特異的な少なくとも１つのプローブを含む、組成物。 - 前記プローブが、前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含む、請求項３７に記載の組成物。
- 前記プローブが、前記標的ＲＮＡバイオマーカーの配列の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項３７又は３８に記載の組成物。
- 前記プローブが、配列番号１、２、１４、１６、２３、２６、２７、２９、３９、４０、４８、７１、７２、７３、７４、７５、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８９、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０の相補体である配列と少なくとも７０％の同一性を有する核酸を含む、請求項３７又は３８に記載の組成物。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項３７から４０のいずれか一項に記載の組成物。 - それを必要とするヒト対象における外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を診断及び治療する方法であって、前記方法が、
前記対象から唾液試料を得ることと、
前記唾液試料を、
ａ．ｈｓａ－ｍｉＲ－１２４６、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ（ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－３ｐ（ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ（＝ｍｉＲ－１４４＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４９７－５ｐ、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－３２５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４４４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６５、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－５９４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８５６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８９３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９５８、ＲＮＵ４－６ｐ、ＳＮＯＲＡ５７、ＳＮＯＲＤ３Ｂ－２、ｔＲＮＡ１２０－ＡｌａＡＧＣ、ｔＲＮＡ１８－ＡｒｇＣＣＴ、ｔＲＮＡ２７－ＭｅｔＣＡＴ、ｔＲＮＡ２－ＬｅｕＴＡＡ、ｔＲＮＡ７３－ＡｒｇＣＣＧ、ｔＲＮＡ８－ＴｈｒＡＧＴ、ｔＲＮＡ９－ＴｙｒＧＴＡ、Ｕ２．３、Ｕ４．６４、Ｕ６．１６８、Ｕ６．６０１、ＵＣ０２２ＣＪＧ１、ＹＲＮＡ－２４５、及びＹＲＮＡ－６８４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｐｕｔ－ｍｉＲ－１００３、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８０、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１０８４、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１１４６（２）、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１２０７、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１３０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－１８８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－２０９、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４６８、ｐｕｔ－ｍｉＲ－４７６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７１、ｐｕｔ－ｍｉＲ－７４２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－８０６、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９２、ｐｕｔ－ｍｉＲ－９６１、ＲＮＵ６－４、ＲＮＵ６－４５、ＲＮＵ６－６、ＲＮＵ６－７、ＲＮＵ６－７３、Ｕ６．１２４９、Ｕ６．３７５、Ｕ６．４２８、及びＹＲＮＡ－２５５、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーに結合することができる核酸を含むプローブと接触させることと、
前記唾液試料中の前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を決定することと、
前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量が、所定の閾値に対して、又は対照試料中のＲＮＡバイオマーカーの量に対して増加又は減少する対象をＴＢＩを有するものとして同定することと、
以下の１つ又は複数：
前記対象に１つ又は複数の神経保護療法を施すこと、
に従って、前記ＴＢＩを有すると同定された対象を治療することと、を含む、方法。 - 前記唾液試料が、損傷直後から損傷後の任意の期間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４２に記載の方法。
- 前記唾液試料が、損傷直後から、前記ＲＮＡバイオマーカーの少なくとも１つの発現レベルが前記所定の閾値又は前記対照試料中の前記ＲＮＡバイオマーカーの量に戻るまでから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４３に記載の方法。
- 前記唾液試料が、損傷直後から損傷後１年まで、１０ヶ月まで、８ヶ月まで、６ヶ月まで、５ヶ月まで、４ヶ月まで、３ヶ月まで、２ヶ月まで、１ヶ月まで、２５日まで、２０日まで、１５日まで、７日まで、５日まで、３日まで、２日まで、及び／又は２４時間までから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４３に記載の方法。
- 前記唾液試料が、損傷直後から１５日間、１時間から１５日間、２４時間から１５日間、２４時間から７日間及び２から５日間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４５に記載の方法。
- 前記損傷後の１回又は複数回の更なる時間に前記対象から１つ又は複数の更なる唾液試料を得ることと、各更なる試料について検出及び増幅ステップを繰り返すこととを更に含む、請求項４２に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から損傷後の任意の期間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４７に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から、前記ＲＮＡバイオマーカーの少なくとも１つの発現レベルが前記所定の閾値又は前記対照試料中の前記ＲＮＡバイオマーカーの量に戻るまでから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４７に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から損傷後１年まで、１０ヶ月まで、８ヶ月まで、６ヶ月まで、５ヶ月まで、４ヶ月まで、３ヶ月まで、２ヶ月まで、１ヶ月まで、２５日まで、２０日まで、１５日まで、７日まで、５日まで、３日まで、２日まで、及び／又は２４時間までから選択される損傷後の期間中に得られる、請求項４７に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、損傷直後から１５日間、１時間から１５日間、２４時間から１５日間、２４時間から７日間、及び２から５日間から選択される損傷後の期間中に得られる、請求項５０に記載の方法。
- 前記１つ又は複数の更なる唾液試料が、前記損傷後の１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５日目に得られる、請求項４７に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーの量を検出することが、ＰＣＲベースのアッセイ、ライトアレイアッセイ、層流チップアッセイ、又は少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーを検出するのに適した任意のアッセイを使用して行われる、請求項４２から５２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＰＣＲベースのアッセイを使用する場合、所定の閾値が、２デルタデルタＣＴ（２－ΔΔＣＴ）法を使用して１．５以上の倍数変化に相当する、請求項５３に記載の方法。
- 所定の閾値が、２デルタデルタＣＴ（２－ΔΔＣＴ）法を使用して２以上の倍数変化に相当する、請求項５３に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのＲＮＡバイオマーカーが、
ａ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｉ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０７、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－５ｐ（＝ｍｉＲ－１２６＊）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３５ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４３－３ｐ（＝ｍｉＲ－１４３）、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２０６、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３４ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２５－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４４９ａ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７１－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４８－３ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９３４、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、及び／又は
ｂ．ｈｓａ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｂ－５ｐ、ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｆ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、及びｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、
１つ又は複数のｍｉＲＮＡを更に含む、請求項４２から５５のいずれか一項に記載の方法。 - 前記ヒト対象を、ＴＢＩの治療が成功した後の正常な活動に適しているとして特定することを更に含む、請求項４２に記載の方法。
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