JP2022510014A - Ｃ型肝炎ウイルスの治療のための高活性な合剤 - Google Patents

Abstract

Ｃ型肝炎に感染した宿主を治療するための化合物１又はその薬学的に許容可能な塩（例えば、化合物１－Ａ）及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩（例えば、化合物２－Ａ）の組合せ、並びに医薬組成物及び固体剤形を含む剤形が提供される。【選択図】図５

Description

［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１８年１２月５日付けで出願された米国仮特許出願第６２／７７５，７１１号及び２０１９年１０月２日付けで出願された米国仮特許出願第６２／９０９，４８６号の利益を主張するものである。これらの各出願の全体が引用することにより本明細書の一部をなす。

本発明は、抗Ｃ型肝炎療法のためのＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤及びＮＳ５Ａ阻害剤の高活性な組合せ、並びに固体医薬剤形での使用に有利なＮＳ５Ａ阻害剤の新しい固体塩形である。

Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、ＲＮＡ一本鎖ウイルスであり、またヘパシウイルス属のメンバーである。肝疾患の全ての症例の５５％～８５％がＨＣＶによって引き起こされると推定されている。ＨＣＶ感染は、肝硬変及び肝臓癌に結びつく場合があり、そのまま進行すれば、肝移植を必要とすることもある肝不全をもたらす可能性がある。世界中のおよそ７１００万人が慢性ＨＣＶに感染しており、毎年およそ３５万人～５０万人がＨＣＶの合併症により、主に肝硬変及び肝細胞癌により死亡する。

ＲＮＡポリメラーゼは、ＲＮＡ一本鎖ウイルスに対する薬物の開発における主要なターゲットである。ＨＣＶの非構造タンパク質ＮＳ５Ｂ ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼは、ウイルスＲＮＡ合成の開始及び触媒を担う主要な酵素である。ＮＳ５Ｂ阻害剤には２つの主なサブクラス、すなわちヌクレオシドアナログと、非ヌクレオシド阻害剤（ＮＮＩ）とがある。ヌクレオシドアナログは、ポリメラーゼに対する代替基質として作用する活性なトリホスフェートへと同化される（anabolized）。非ヌクレオシド阻害剤（ＮＮＩ）は、タンパク質上のアロステリックな領域に結合する。ヌクレオシド又はヌクレオチドの阻害剤は天然ポリメラーゼ基質を模倣し、連鎖停止剤として作用する。それらは、ＲＮＡ転写の開始及び新生ＲＮＡ鎖の伸長を阻害する。

ＲＮＡポリメラーゼを標的とするのに加えて、他のＲＮＡウイルスタンパク質を標的とすることもできる。例えば、治療アプローチの更なる標的であるＨＣＶタンパク質には、ＮＳ３／４Ａ（セリンプロテアーゼ）及びＮＳ５Ａ（酵素的能力を有しないＨＣＶレプリカーゼの必須の構成要素であり、細胞経路に対して様々な影響を及ぼし、ＨＣＶ機能性に必要とされる非構造ミトコンドリアタンパク質）が含まれる。

２０１３年１２月に最初のヌクレオシドＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤であるソホスブビル（ソバルディ（商標）、Gilead Sciences）が承認された。ソバルディ（商標）は、肝細胞によって取り入れられるウリジンホスホロアミデートプロドラッグであり、細胞内活性化を経て活性代謝産物である２’－デオキシ－２’－α－フルオロ－β－Ｃ－メチルウリジン－５’－トリホスフェートを供給する。ソバルディ（商標）は、インターフェロンとの同時投与を必要とせずに特定の種類のＨＣＶ感染を治療する安全性及び効力が実証された最初の薬物である。ソバルディ（商標）は、ＦＤＡから画期的治療薬指定の承認を受けた第３の薬物である。

ＨＣＶの治療には、多くの追加の固定用量（fixed dose）合剤が承認されている。２０１４年、米国ＦＤＡは、慢性Ｃ型肝炎ウイルス遺伝子型１の感染を治療するためハーボニー（商標）（レジパスビル、ＮＳ５Ａ阻害剤及びソホスブビル）を承認した。ハーボニー（商標）は、慢性ＨＣＶ遺伝子型１の感染を治療するために承認された最初の合剤（combination pill）である。また、インターフェロン又はリバビリンを伴う投与を必要としない、最初の承認されたレジメンである。さらに、ＦＤＡは、遺伝子型１ ＨＣＶ感染を伴う成人に対して毎日１回、全て経口の、インターフェロン及びリバビリンを含まない治療法として、ソホスブビル（ソバルディ（商標））と組み合わせたシメプレビル（オリシオ（商標））を承認した。

また米国ＦＤＡは、２０１４年、ダサブビル（非ヌクレオシドＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤）と、オムビタスビル（ＮＳ５Ａ阻害剤）と、パリタプレビル（ＮＳ３／４Ａ阻害剤）と、リトナビルとを含む配合剤パックである、AbbVieのヴィキラパック（商標）を承認した。ヴィキラパック（商標）は、代償性肝硬変の患者を含む遺伝子型１ ＨＣＶ感染患者を治療するため、リバビリンと共に、又はリバビリンなしで使用可能である。ヴィキラパック（商標）はインターフェロンとの併用療法を必要としない。

２０１５年７月、米国ＦＤＡは、ＨＣＶ遺伝子型４及びＨＣＶ遺伝子型３の治療に対してテクニヴィ（商標）（オムビタスビル／パリタプレビル／リトナビル）及びダクルインザ（商標）をそれぞれ承認した。テクニヴィ（商標）は、瘢痕化及び肝硬変のない患者におけるＨＣＶ遺伝子型４の治療について、リバビリンとの併用に対して承認され、これはインターフェロンとの同時投与を必要としない、ＨＣＶ－４感染患者に対する第１選択である。ダクルインザ（商標）は、ＨＣＶ遺伝子型３感染を治療するため、ソバルディ（商標）との使用に対して承認された。ダクルインザ（商標）は、ＨＣＶ遺伝子型３の治療において安全性及び効力が実証された、インターフェロン又はリバビリンの同時投与を必要としない最初の薬物である。

２０１５年１０月、米国ＦＤＡは、ＨＣＶ治療のヴィキラパック及びテクニヴィ（商標）が、主として基礎となる進行した肝臓病を伴う患者において重篤な肝傷害を引き起こす場合があると警告し、安全性に関する追加情報をラベルに追加するよう要求した。

現在承認されている他のＨＣＶに対する治療法として、リバビリン（レベトール（商標）と共に投与される場合があるインターフェロンアルファ－２ｂ又はペグ化インターフェロンアルファ－２ｂ（ペグイントロン（商標））、ＮＳ３／４Ａテラプレビル（インシベック（商標）、Vertex及びJohnson & Johnson）、ボセプレビル（ビクトレリス（商標）、Merck）、シメプレビル（オリシオ（商標）、Johnson & Johnson）、パリタプレビル（AbbVie）、オムビタスビル（AbbVie）、ＮＮＩダサブビル（ＡＢＴ－３３３）、Merckのゼパティア（商標）（２つの薬物、グラゾプレビルとエルバスビルとの単錠の組合せ）、Gileadのエプクルーサ（ソホスブビル／ベルパタスビル）、AbbieVieによって製造されたマヴィレット（グレカプレビル及びピブレンタスビル）、及びヴォセヴィ（ソホスブビル、ベルパタスビル及びボクシラプレビル）が挙げられる。

有効で過度に毒性でない抗ＨＣＶ療法の開発が医学的に強く必要とされている。潜在的な薬物耐性によりその必要性は高まっている。ＨＣＶのＲＮＡポリメラーゼは、ゲノム全体を通した潜在的に耐性な単一点突然変異及び二重点突然変異の生成とウイルスの多種性の維持とに寄与する高速度の複製を示す。ほぼ全ての単剤療法での治療に際して、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏの両方で耐性突然変異が確認されている。

したがって、Ｃ型肝炎ウイルスの感染症又はＣ型肝炎ウイルス感染症に関連する障害を治療及び／又は阻止するための化合物、医薬組成物、方法、及び剤形を提供することが本発明の目的である。

本発明は、宿主、典型的にはヒトにおけるＣ型肝炎感染症の有利な治療のための、ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤である化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及びＮＳ５Ａ阻害剤である化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の高活性な組合せを提供する。異なる機序で共に作用する２つの高活性な抗ＨＣＶ剤のこの組合せは、所望の併用医薬製剤、例えば固体剤形で提供され得るか、又は協調的な生物学的様式で、例えば重複する薬物動態、血漿及び／又はＡＵＣを達成する様式で作用する両方の活性剤の利益を宿主が受けるように別々に投与され得る。

実施例６並びに図４Ａ、図４Ｂ及び図４Ｃで確証されるように、化合物１及び化合物２は、Ｃ型肝炎ウイルスに対して相乗活性を示すことが見出された。２つの活性薬物が併用レジメンでヒトに投与された場合にどのように相互作用するかを事前に予測することはできない。２つの薬物は拮抗的、相加的、又は相乗的であり得る。このように、本発明の組合せは、予想外にも相乗的に作用して、最適な抗ＨＣＶ治療効果をもたらす。

非限定的な一実施の形態では、化合物１はヘミ硫酸塩として提供される。非限定的な一実施の形態では、化合物２は二ヘミ硫酸塩として提供される。

化合物１は、イソプロピル（（Ｓ）－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－（メチルアミノ）－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－３－ヒドロキシ－４－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）－Ｌ－アラニネート：

である。

化合物１は以前に、Atea Pharmaceuticalsに譲渡された米国特許第９，８２８，４１０号、同第１０，０００，５２３号、同第１０，００５，８１１号及び同第１０，２３９，９１１号、並びに国際公開第２０１６／２１２７６号及び国際公開第２０１９／２００００５号に記載された。

化合物１のヘミ硫酸塩は、以下で化合物１－Ａ：

として示される。

化合物１－Ａは、Atea Pharmaceuticalsに譲渡された米国特許出願公開第２０１８－０２１５７７６号並びに国際公開第２０１８／１４４６４０号及び国際公開第２０１９／２００００５号に開示されている。

化合物２は、コブロパスビル（すなわちＫＷ－１３６、メチルＮ－［（２Ｓ）－１－［（２Ｓ）－２－［５－［４－［７－［２－［（２Ｓ）－１－［（２Ｓ）－２－（メトキシカルボニルアミノ）－３－メチルブタノイル］ピロリジン－２－イル］－１Ｈ－イミダゾール－５－イル］－１，３－ベンゾジオキソール－４－イル］フェニル］－１Ｈ－イミダゾール－２－イル］ピロリジン－１－イル］－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル］カルバメート）：

である。

化合物２は、InterMune, Inc.に譲渡された国際公開第２０１１／０７５６０７号及び米国特許出願公開第２０１１／０１５２２４６号（第１０４頁）に開示されている。

一実施の形態では、化合物２は二ヘミ硫酸塩、すなわち化合物２－Ａ：

である。

化合物２の二ヘミ硫酸塩は今日まで開示されていない。実際、コブロパスビルは今日まで二塩酸塩として投与されてきた。コブロパスビルの二塩酸塩の晶質形（morphic form）は、Beijing Kawin Technology Share-Holding Co.に譲渡された中国特許出願公開第１０８９０４４９６号及び中国特許出願公開第１０８６７５９９８号に開示された。譲受人により、化合物２の二塩酸塩の結晶形は生産が困難であると記載された。大量の溶媒、種々の溶媒の組合せ、及び多様な異なる結晶化技術を使用しているにもかかわらず、Beijing Kawin Technology Share-Holding Co.によって中国特許出願公開第１０８９０４４９６号及び中国特許出願公開第１０８６７５９９８号において、たった１つの結晶形（形態Ｈ）が得られたにすぎなかった。形態Ｈは、化合物２を大量のＭｅＯＨ（化合物２の重量基準で２倍～４倍の量）中に溶解し、塩酸を加えて還流することによって得られた。

これに対して、目下、驚くべきことに、化合物２－Ａは、働きの良い安定な固体の二ヘミ硫酸塩として提供され得ることが見出された。本発明の実施例３で論じられるように、化合物２の結晶化を１６種の異なる無機酸及び有機酸を用いて研究した。それぞれの酸を、合計４８通りの研究で少なくとも２種の異なる溶媒で試験した。これらの条件から、驚くべきことに、溶媒としてのＭｅＯＨと組み合わせて二ヘミ硫酸（di-hemisulfate acid）を使用した場合に、薬物製剤化に適した安定な結晶性化合物が得られることが見出された。

したがって、本発明は、化合物２－Ａの有利な単離晶質形を初めて提供する。化合物２の二ヘミ硫酸塩の単離晶質形のＸＲＰＤパターンが図１Ａに示されている。一実施の形態では、化合物２－Ａの晶質形は、表２から選択される少なくとも５個、６個、７個、８個、９個、又は１０個の２θ値を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。一実施の形態では、化合物２－Ａの晶質形は、少なくとも７．３±０．２゜２θ、７．９±０．２゜２θ、１２．０±０．２゜２θ、１２．２±０．２゜２θ、１４．７±０．２゜２θ、１５．８±０．２゜２θ、１６．１±０．２゜２θ、１６．５±０．２゜２θ、１８．２±０．２゜２θ、及び２２．７±０．２゜２θを含む又はこれらから選択される２θ値を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。代替的な実施の形態では、標準偏差は、±０．３゜２θ±０．４゜２θである。

両方とも塩形である２つの化合物の安定な固形併用剤形を提供することは稀である。共製剤化された併用薬物は、薬学的に許容可能な塩を含まない傾向にある（エプクルーサ、ヴォセヴィ、ゼパティア、及びハルヴォーニ）又は１つの薬学的に許容可能な塩を含む傾向にある（ダクルインザ）。共製剤化における異なる塩形の使用は、吸湿性、製剤の不安定性のリスクを高めるか、又はそうでなければ投与若しくは効力に影響を与え得る安定な共製剤化のし易さを低下させると考えられ得る。共製剤化で異なる塩形を使用することは、化学分析及び規制要件の遵守の点で問題となる場合もある。化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを一緒に製剤化することができるのは、おそらく一部には、化合物２－Ａの晶質形の安定性及び純度が高いためである。実施例５に記載されるように、化合物２－Ａの純度は２５℃及び６０％ＲＨ又は４０℃及び７５％ＲＨに曝されたときに変化しなかった。したがって、本発明の一態様では、宿主、典型的にはヒトを治療する有効量の化合物１のヘミ硫酸塩及び化合物２の二ヘミ硫酸塩の両方を含む経口送達用の固体併用剤形が提供される。

一実施の形態では、この固定用量の組合せは、１２週間未満、例えば１０週間未満、８週間未満若しくは６週間未満、又はそれ以内で持続的なウイルス応答を達成することが意図される。ウイルスを効果的に治療することに加えて、併用薬物療法は、薬剤耐性の発生を制限するのに有用である。

本明細書に記載される剤形中の活性化合物の重量は、特段の指示がない限り、化合物の遊離形又は塩形のいずれかに関するものである。例えば、６００ｍｇの化合物１－Ａは、５５０ｍｇの化合物１の等価物である。６０ｍｇの化合物２の等価物は６７ｍｇの化合物２－Ａであり、１００ｍｇの化合物２の等価物は１１３ｍｇの化合物２－Ａである。

典型的な実施の形態では、化合物１は、約３００ｍｇから１０００ｍｇの間、より典型的には４００ｍｇ若しくは５００ｍｇから６００ｍｇ若しくは８００ｍｇの間、又は５００ｍｇから７５０ｍｇの間の投薬量で投与される。一例では、５５０ｍｇの化合物１が、約６００ｍｇの化合物１－Ａの投薬量として投与される。典型的な実施の形態では、化合物２は、約２５ｍｇから１５０ｍｇの間、より典型的には５０ｍｇから１００ｍｇの間の投薬量で投与される。非限定的な一例では、６０ｍｇの化合物２が、約６７ｍｇの化合物２－Ａの剤形で投与される。

様々な態様では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａは、単一の剤形で一緒に製剤化されるか、又は幾つかの剤形（例えば、それぞれが両方の活性物質を有する又は１つの剤形が１つの活性物質を有し、他の剤形が他の活性物質を有する２つ以上の剤形）で提供される。代替的な実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩は、別個の剤形であるが、それらが宿主において協調的に、例えば相乗的に作用し得るように提供される。例えば、別個の剤形は、活性物質がウイルスに対して一緒に働いていることを示す重複するＡＵＣ又はその他の薬物動態パラメーターが存在するように投与され得る。

本発明の一態様では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａは別個の丸剤で提供され、１日の間にほぼ同時に投与される。

化合物１（又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ）及び化合物２（又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物２－Ａ）の組合せを使用して、抗ＨＣＶ抗体陽性及び抗原陽性の状態、ウイルスによる慢性の肝臓炎症、進行性のＣ型肝炎に起因する肝臓癌（肝細胞癌（ＨＣＣ））、肝硬変、慢性又は急性Ｃ型肝炎、Ｃ型劇症肝炎、慢性持続性Ｃ型肝炎及び抗ＨＣＶによる倦怠感等の関連病状を治療することもできる。

或る特定の実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａは、最大２４週間、最大１２週間、最大１０週間、最大８週間、最大６週間、又は最大４週間にわたって投与される。代替的な実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａは、少なくとも４週間、少なくとも６週間、少なくとも８週間、少なくとも１０週間、少なくとも１２週間、又は少なくとも２４週間にわたって投与される。或る特定の実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩は、少なくとも１日１回又は１日置きに投与される。

或る特定の実施の形態では、患者は非肝硬変である。或る特定の実施の形態では、患者は肝硬変である。更なる実施の形態では、肝硬変宿主は代償性肝硬変を有する。代替的な実施の形態では、肝硬変宿主は非代償性肝硬変を有する。一実施の形態では、宿主はチャイルド・ピューＡ肝硬変を有する。代替的な実施の形態では、宿主はチャイルド・ピューＢ肝硬変又はチャイルド・ピューＣ肝硬変を有する。

上記の組合せを使用して、ＨＣＶ遺伝子型の範囲を治療することもできる。それぞれが複数のサブタイプを有するＨＣＶの少なくとも６種の異なる遺伝子型が世界的に確認されている。遺伝子型１～遺伝子型３は世界中に広まっており、遺伝子型４、遺伝子型５、及び遺伝子型６はより地理的に限定されている。遺伝子型４は中東及びアフリカに多い。遺伝子型５はほとんど南アフリカで見られる。遺伝子型６は主として東南アジアで認められる。米国で最も多い遺伝子型は遺伝子型１であるが、遺伝子型及びサブタイプを定義することは、治療の種類及び期間の決定の手助けとなり得る。例えば、異なる遺伝子型は、異なる薬物療法に異なる応答を示す。最適な治療時間は遺伝子型の感染に応じて変動する。遺伝子型の範囲内で、遺伝子型１ａ及び遺伝子型１ｂ等のサブタイプも同様に、治療に対して異なる応答を示す場合がある。１種類の遺伝子型による感染は、異なる遺伝子型による後の感染を妨げない。

一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの組合せを使用して、ＨＣＶ遺伝子型１、ＨＣＶ遺伝子型２、ＨＣＶ遺伝子型３、ＨＣＶ遺伝子型４、ＨＣＶ遺伝子型５、又はＨＣＶ遺伝子型６が治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型１ａが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型１ｂが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型２ａが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型２ｂが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型３ａが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型３ｂが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型４ａが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型４ｄが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型５ａが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型６ａが治療される。一実施の形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を使用して、ＨＣＶ遺伝子型６ｂ、６ｃ、６ｄ、６ｅ、６ｆ、６ｇ、６ｈ、６ｉ、６ｊ、６ｋ、６ｌ、６ｍ、６ｎ、６ｏ、６ｐ、６ｑ、６ｒ、６ｓ、６ｔ又は６ｕが治療される。

一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの組合せを使用して、ＨＣＶ遺伝子型１、ＨＣＶ遺伝子型２、ＨＣＶ遺伝子型３、ＨＣＶ遺伝子型４、ＨＣＶ遺伝子型５、又はＨＣＶ遺伝子型６が治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型１ａが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型１ｂが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型２ａが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型２ｂが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型３ａが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型４ａが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型４ｄが治療される。

一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型５ａが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型６ａが治療される。一実施の形態では、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを使用して、ＨＣＶ遺伝子型６ｂ、ＨＣＶ遺伝子型６ｃ、ＨＣＶ遺伝子型６ｄ、ＨＣＶ遺伝子型６ｅ、ＨＣＶ遺伝子型６ｆ、ＨＣＶ遺伝子型６ｇ、ＨＣＶ遺伝子型６ｈ、ＨＣＶ遺伝子型６ｉ、ＨＣＶ遺伝子型６ｊ、ＨＣＶ遺伝子型６ｋ、ＨＣＶ遺伝子型６ｌ、ＨＣＶ遺伝子型６ｍ、ＨＣＶ遺伝子型６ｎ、ＨＣＶ遺伝子型６ｏ、ＨＣＶ遺伝子型６ｐ、ＨＣＶ遺伝子型６ｑ、ＨＣＶ遺伝子型６ｒ、ＨＣＶ遺伝子型６ｓ、ＨＣＶ遺伝子型６ｔ、又はＨＣＶ遺伝子型６ｕが治療される。

本発明には、化合物１－Ａが非晶質又は結晶性の塩の形であり得て、独立して、化合物２－Ａが結晶性又は非晶質であり得る、特定の組合せ及び剤形も含まれる。

したがって、本発明は、少なくとも以下の実施の形態を含む：

（ａ）ＨＣＶ感染患者、典型的にはヒトを治療するための化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の有効な組合せ。

（ｂ）ＨＣＶ感染患者、典型的にはヒトを治療するための化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の組合せの有効な固体剤形。

（ｃ）ＨＣＶ感染患者、典型的にはヒトを治療するための化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの有効な組合せ。

（ｄ）ＨＣＶ感染患者、典型的にはヒトを治療するための化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの組合せの固体剤形。

（ｅ）化合物２又はその薬学的に許容可能な塩が化合物２－Ｂである、実施の形態（ａ）又は（ｂ）。

（ｆ）化合物２又はその薬学的に許容可能な塩が化合物２－Ｃである、実施の形態（ａ）又は（ｂ）。

（ｇ）上記組合せが併用医薬組成物形の形で存在する、実施の形態（ａ）～（ｆ）のいずれか。

（ｈ）上記組合せが、協調的な様式で使用されるそれぞれの抗ＨＣＶ活性剤について別個の医薬剤形の形で存在する、実施の形態（ａ）～（ｆ）のいずれか。

（ｉ）経口送達に適している（ｇ）又は（ｈ）の医薬剤形。

（ｊ）丸剤、錠剤、又はゲル剤の形で存在する（ｇ）の剤形。

（ｋ）非経口送達に適している（ｇ）又は（ｈ）の医薬剤形。

（ｌ）静脈内送達に適している（ｇ）又は（ｈ）の医薬剤形。

（ｍ）化合物１、化合物１－Ａ、化合物２、又は化合物２－Ａが晶質形で存在する、実施の形態（ａ）～（ｋ）のいずれか１つ。

（ｎ）式：

の化合物２－Ａ。

（ｏ）図１ＡのＸＲＰＤパターンと実質的に同様であるＸＲＰＤパターンを特徴とする、本明細書に記載される化合物２－Ａの単離晶質形。

（ｐ）少なくとも７．３±０．２°２θ、７．９±０．２°２θ、１２．０±０．２°２θ、１２．２±０．２°２θ、１４．７±０．２°２θ、１５．８±０．２°２θ、１６．１±０．２°２θ、１６．５±０．２°２θ、１８．２±０．２°２θ、及び２２．７±０．２°２θを含む又はこれらから選択される２θ値を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする、本明細書に記載される化合物２－Ａの単離晶質形。

（ｑ）標準偏差が±０．３゜２θである、実施の形態（ｐ）。

（ｒ）標準偏差が±０．４゜２θである、実施の形態（ｐ）。

（ｓ）化合物２－Ａが晶質形で存在する、実施の形態（ｍ）。

（ｔ）化合物２－Ａが、図１Ａと実質的に同様のＸＲＰＤパターンを特徴とする晶質形で存在する、実施の形態（ｍ）。

（ｕ）化合物２－Ａが、少なくとも７．３±０．２°２θ、７．９±０．２°２θ、１２．０±０．２°２θ、１２．２±０．２°２θ、１４．７±０．２°２θ、１５．８±０．２°２θ、１６．１±０．２°２θ、１６．５±０．２°２θ、１８．２±０．２°２θ、及び２２．７±０．２°２θを含む又はこれらから選択される２θ値を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする晶質形で存在する、実施の形態（ｍ）。

（ｖ）標準偏差が±０．３゜２θである、実施の形態（ｕ）。

（ｗ）標準偏差が±０．４゜２θである、実施の形態（ｕ）。

（ｘ）追加の抗ＨＣＶ有効化合物が組み合わせて使用される、上記実施の形態のいずれか１つ。

（ｙ）実施の形態（ａ）～（ｘ）のいずれか１つと、薬学的に許容可能な賦形剤とを含む、医薬組成物。

（ｚ）実施の形態（ａ）～（ｘ）のいずれか１つと、薬学的に許容可能な賦形剤と、第３の抗ＨＣＶ有効作用物質とを含む医薬組成物であって、第３の抗ＨＣＶ有効作用物質が、化合物１、化合物１－Ａ、化合物２、又は化合物２－Ａとは異なる機序により作用する、医薬組成物。

（ａａ）治療を必要とする患者におけるＣ型肝炎ウイルス感染症の治療のための医薬の製造における、実施の形態（ａ）～（ｚ）のいずれか１つの有効な組合せの使用。

（ｂｂ）治療を必要とする患者におけるＣ型肝炎ウイルス感染症を治療する治療的使用を目的とする医薬を製造する方法であって、上記製造において実施の形態（ａ）～（ｚ）のいずれか１つの有効な組合せを使用することを特徴とする、方法。

（ｃｃ）治療を必要とする患者に実施の形態（ａ）～（ｚ）のいずれか１つの有効な組合せを投与することを含む、Ｃ型肝炎ウイルス感染症の治療方法。

（ｄｄ）治癒を必要とする患者に実施の形態（ａ）～（ｚ）のいずれか１つの有効な組合せを投与することを含む、Ｃ型肝炎ウイルス感染症の治癒方法。

（ｅｅ）予防的処置を必要とする患者に実施の形態（ａ）～（ｚ）のいずれか１つの有効な組合せを投与することを含む、Ｃ型肝炎ウイルス感染症のリスクのある患者を予防的処置する方法。

（ｆｆ）治療を必要とする患者に実施の形態（ａ）～（ｚ）のいずれか１つの有効な組合せを投与することを含む、ウイルスによる慢性の肝臓炎症、進行性のＣ型肝炎に起因する肝臓癌（肝細胞癌（ＨＣＣ））、肝硬変、慢性又は急性Ｃ型肝炎、Ｃ型劇症肝炎、慢性持続性Ｃ型肝炎、及び抗ＨＣＶによる倦怠感から選択されるＣ型肝炎ウイルス感染症に関連する病状を治療する方法。

（ｇｇ）患者が肝硬変である、実施の形態（ａａ）～（ｆｆ）のいずれか。

（ｈｈ）患者が非肝硬変である、実施の形態（ａａ）～（ｆｆ）のいずれか。

（ｉｉ）ＨＣＶ感染症が遺伝子型１である、実施の形態（ａａ）～（ｈｈ）のいずれか。

（ｊｊ）ＨＣＶ感染症が遺伝子型２である、実施の形態（ａａ）～（ｈｈ）のいずれか。

（ｋｋ）ＨＣＶ感染症が遺伝子型３である、実施の形態（ａａ）～（ｈｈ）のいずれか。

（ｌｌ）ＨＣＶ感染症が遺伝子型４である、実施の形態（ａａ）～（ｈｈ）のいずれか。

（ｍｍ）ＨＣＶ感染症が遺伝子型５である、実施の形態（ａａ）～（ｈｈ）のいずれか。

（ｎｎ）ＨＣＶ感染症が遺伝子型６である、実施の形態（ａａ）～（ｈｈ）のいずれか。

実施例３に記載される化合物２－ＡについてのＸＲＰＤパターンである。ｘ軸は度数で測定された２θであり、ｙ軸はカウント数で測定された強度である。 実施例３に記載される化合物２－ＡについてのＤＳＣグラフである。上側のｘ軸は摂氏で測定された温度であり、下側のｘ軸は分で測定された時間である。ｙ軸はｍｇで測定された重量である。 実施例３に記載される化合物２－ＢについてのＸＲＰＤパターンである。ｘ軸は度数で測定された２θであり、ｙ軸はカウント数で測定された強度である。 実施例３に記載される化合物２－ＣについてのＸＲＰＤパターンである。ｘ軸は度数で測定された２θであり、ｙ軸はカウント数で測定された強度である。 実施例６に記載される化合物１－Ａ及び化合物２の組合せを使用したＨＣＶ遺伝子型１ａ（ＧＴ１ａ）の９０％阻害についてのアイソボログラムである。ｘ軸は、ＨＣＶ ＧＴ１ａの９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物２のｎＭでの濃度を表し、ｙ軸は、ＨＣＶ ＧＴ１ａの９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物１－ＡのｎＭでの濃度を表す。化合物１－Ａ単独が９０％阻害を達成する用量と、化合物２が９０％阻害を達成する用量の点とを結ぶことによって、相加性の線が形成される。グラフ上の星印（＊）は、９０％阻害を達成する２つの薬物を一緒にした濃度を表す。星印は相加性の線の下にあることから、ＨＣＶ ＧＴ１ａに対して化合物１－Ａ及び化合物２の組合せについて相乗効果が認められることを示している。 実施例６に記載される化合物１－Ａ及び化合物２の組合せを使用したＨＣＶ遺伝子型１ｂ（ＧＴ１ｂ）の９０％阻害についてのアイソボログラムである。ｘ軸は、ＨＣＶ ＧＴ１ｂの９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物２のｎＭでの濃度を表し、ｙ軸は、ＨＣＶ ＧＴ１ｂの９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物１－ＡのｎＭでの濃度を表す。化合物１－Ａ単独が９０％阻害を達成する用量と、化合物２が９０％阻害を達成する用量の点とを結ぶことによって、相加性の線が形成される。グラフ上の星印（＊）は、９０％阻害を達成する２つの薬物を一緒にした濃度を表す。星印は相加性の線の下にあることから、ＨＣＶ ＧＴ１ｂに対して化合物１－Ａ及び化合物２の組合せについて相乗効果が認められることを示している。 実施例６に記載される化合物１－Ａ及び化合物２の組合せを使用したＧＴ３ａ－ＮＳ５Ｂ遺伝子型を含むキメラＨＣＶレプリコン（ＧＴ１ｂ＿３ａ－ＮＳ５ａ）の９０％阻害についてのアイソボログラムである。ｘ軸は、キメラＨＣＶレプリコンの９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物２のｎＭでの濃度を表し、ｙ軸は、キメラＨＣＶレプリコンの９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物１－ＡのｎＭでの濃度を表す。化合物１－Ａ単独が９０％阻害を達成する用量と、化合物２が９０％阻害を達成する用量の点とを結ぶことによって、相加性の線が形成される。グラフ上の星印（＊）は、９０％阻害を達成する２つの薬物を一緒にした濃度を表す。星印は相加性の線の下にあることから、ＧＴ１ｂ＿３ａ－ＮＳ５Ｂを含むキメラＨＣＶレプリコンに対して化合物１－Ａ及び化合物２の組合せについて相乗効果が認められることを示している。 ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤の化合物１－Ａ及びＮＳ５Ａ阻害剤の化合物２－Ａである。

本発明は、宿主、典型的にはヒトにおけるＣ型肝炎感染症の有利な治療のための、特定のＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤及び特定のＮＳ５Ａ阻害剤の高活性な組合せを提供する。

この併用療法で使用される抗ＨＣＶ化合物は、１）ＮＳ５Ｂ阻害剤であるイソプロピル（（Ｓ）－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－（メチルアミノ）－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－３－ヒドロキシ－４－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）－Ｌ－アラニネート（化合物１）又はその薬学的に許容可能な塩、及び２）ＮＳ５Ａ阻害剤であるメチルＮ－［（２Ｓ）－１－［（２Ｓ）－２－［５－［４－［７－［２－［（２Ｓ）－１－［（２Ｓ）－２－（メトキシカルボニルアミノ）－３－メチルブタノイル］ピロリジン－２－イル］－１Ｈ－イミダゾール－５－イル］－１，３－ベンゾジオキソール－４－イル］フェニル］－１Ｈ－イミダゾール－２－イル］ピロリジン－１－イル］－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル］カルバメート（化合物２）又はその薬学的に許容可能な塩である。典型的な実施形態では、化合物１は、ヘミ硫酸塩誘導体（化合物１－Ａ）として投与される。典型的な実施形態では、化合物２は、二ヘミ硫酸塩誘導体（化合物２－Ａ）として投与される。

一実施形態では、薬物の組合せは、固定用量剤形、例えば丸剤又は錠剤で投与される。代替的な実施形態では、２つの化合物は、必要とする宿主が、標準的な薬物動態によって測定されて協調的な様式で両方の化合物の利益を受けるように投与される。

予想外にも、化合物１及び化合物２の組合せが相乗的に作用して、最適な抗ＨＣＶ治療効果をもたらすことが見出された（実施例６、図４Ａ～図４Ｃ）。２つの薬物は併用レジメンで拮抗的、相加的、又は相乗的であり得て、２つの活性薬物がヒトに投与された場合にどのように相互作用するかを事前に予測することはできない。このように、驚くべきことに、化合物１及び化合物２は、Ｃ型肝炎ウイルスに対して相乗活性を示すことが見出された。

ＨＣＶ用の共製剤化された薬物は、塩を含まない又は１つだけの塩を含む傾向にある。剤形の吸湿性の増加又は安定性のリスクがあり得るため、安定な固体併用剤形が２つの塩を含むことは稀である。しかしながら、本発明では、おそらく結晶性の化合物２－Ａの有利な特性のため、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａが一緒に製剤化される。

化合物１（イソプロピル（（Ｓ）－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－（メチルアミノ）－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－３－ヒドロキシ－４－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）－Ｌ－アラニネート）は以前に、Atea Pharmaceuticalsに譲渡された米国特許第９，８２８，４１０号、同第１０，０００，５２３号、同第１０，００５，８１１号及び同第１０，２３９，９１１号、並びに国際公開第２０１６／２１２７６号及び国際公開第２０１９／２００００５号に記載された。化合物１の合成は、以下の実施例１に記載されている。

化合物１－Ａは以前に、Atea Pharmaceuticalsに譲渡された米国特許出願公開第２０１８－０２１５７７６号並びに国際公開第２０１８／１４４６４０号及び国際公開第２０１９／２００００５号に開示された。化合物１－Ａ（イソプロピル（（Ｓ）－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－（メチルアミノ）－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－３－ヒドロキシ－４－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）－Ｌ－アラニネートのヘミ硫酸塩）の合成は、以下の実施例２に記載されている。一実施形態では、化合物１－Ａは、薬学的に許容可能な組成物又はその固体剤形で提供される。別の実施形態では、化合物１－Ａは非晶質固体である。一実施形態では、化合物１－Ａは結晶性固体である。

化合物１－Ａの調製に関する非限定的な例示的なプロセスは、
（ｉ）フラスコ又は容器内で、有機溶媒、例えば、アセトン、酢酸エチル、メタノール、アセトニトリル、又はエーテル等中に化合物１を溶解させる第１の工程と、
（ｉｉ）第２のフラスコ又は容器に、工程（ｉ）の有機溶媒と同じであり得るか、又は異なり得る第２の有機溶媒（該溶媒は例えばメタノールであり得る）を入れ、任意に第２の溶媒を０℃～１０℃に冷却して、Ｈ_２ＳＯ_４を第２の有機溶媒に滴加して、Ｈ_２ＳＯ_４／有機溶媒混合物を作る工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）の０．５／１．０のモル比のＨ_２ＳＯ_４／溶媒混合物を、工程（ｉ）の化合物１の溶液に、外気温又はわずかに高い温度若しくはわずかに低い温度（例えば、２３℃～３５℃）で滴加する工程と、
（ｉｖ）化合物１－Ａの沈殿物が形成されるまで、例えば外気温又はわずかに高い温度若しくはわずかに低い温度で、工程（ｉｉｉ）の反応物を撹拌する工程と、
（ｖ）工程（ｉｖ）から得られた沈殿物を、任意に濾過して、有機溶媒で洗浄する工程と、
（ｖｉ）任意に高温、例えば５５℃、５６℃、５７℃、５８℃、５９℃、又は６０℃で、得られた化合物１－Ａを、真空中で任意に乾燥させる工程と、
を含む。

或る特定の実施形態では、上記工程（ｉ）は、アセトン中で実施される。さらに、工程（ｉｉ）の第２の有機溶媒は、例えばメタノールとすることができ、工程（ｖ）の有機溶媒の混合物は、メタノール／アセトンである。

一実施形態では、化合物１は、工程（ｉ）において酢酸エチル中に溶解される。一実施形態では、化合物１は、工程（ｉ）においてテトラヒドロフラン中に溶解される。一実施形態では、化合物１は、工程（ｉ）においてアセトニトリル中に溶解される。更なる実施形態では、化合物１は、工程（ｉ）においてジメチルホルムアミド中に溶解される。

一実施形態では、工程（ｉｉ）の第２の有機溶媒は、エタノールである。一実施形態では、工程（ｉｉ）の第２の有機溶媒は、イソプロパノールである。一実施形態では、工程（ｉｉ）の第２の有機溶媒は、ｎ－ブタノールである。

一実施形態では、溶媒の混合物、例えばエタノール／アセトンは、工程（ｖ）の洗浄用に使用される。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、イソプロパノール／アセトンである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、ｎ－ブタノール／アセトンである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、エタノール／酢酸エチルである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、イソプロパノール／酢酸エチルである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、ｎ－ブタノール／酢酸エチルである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、エタノール／テトラヒドロフランである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、イソプロパノール／テトラヒドロフランである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、ｎ－ブタノール／テトラヒドロフランである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、エタノール／アセトニトリルである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、イソプロパノール／アセトニトリルである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、ｎ－ブタノール／アセトニトリルである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、エタノール／ジメチルホルムアミドである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、イソプロパノール／ジメチルホルムアミドである。一実施形態では、工程（ｖ）の洗浄用の溶媒の混合物は、ｎ－ブタノール／ジメチルホルムアミドである。

化合物１－Ａは、ＨＣＶに感染した患者のフェーズ１ｂ／２ａ臨床試験を終了している。複数パート試験により、健康な被験体、非肝硬変ＨＣＶ感染患者、及び肝硬変ＨＣＶ感染患者における化合物１－Ａの単回投与及び多回投与の効果が評価された。化合物１－Ａは、試験された全てのＨＣＶ感染コホートに投与した場合に有意な抗ウイルス性減少を誘導した。化合物１－Ａを７日間にわたって１日１回（ＱＤ）投与したところ、強力な抗ウイルス活性が観察された。６００ｍｇの化合物１－Ａ（５５０ｍｇの化合物１に相当）をＱＤで投与した非肝硬変ＨＣＶ感染患者では、平均最大ＨＣＶ ＲＮＡ減少は、ＨＣＶ ＧＴ１感染患者で４．４ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬであり、ＨＣＶ ＧＴ３感染患者で４．６ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬであった。抗ウイルス減少に対する化合物１－Ａの効果は、治療困難な肝硬変患者にも及んだ。ＨＣＶ ＧＴ１又はＨＣＶ ＧＴ３に感染したＣＰＡ肝硬変を伴う患者のコホートでは、ＱＤで７日間投与した場合に平均最大ＨＣＶ ＲＮＡ減少は４．４ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬであった（２０１８年国際肝臓学会議（２０１８年４月１３日、フランス、パリ）で発表されたZhou, X.らの「汎遺伝子型プリンヌクレオチドプロドラッグであるＡＴ－５２７は、慢性Ｃ型肝炎を伴う被験者において強力な抗ウイルス活性を示す（AT-527, a pan-genotypic purine nucleotide prodrug, exhibits potent antiviral activity in subjects with chronic hepatitis C）」）。

特段の指定がない限り、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａは、β－Ｄ立体配置で提供される。代替的な実施形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａは、β－Ｌ立体配置で提供され得る。化合物１又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａのホスホルアミデートは、Ｒ型又はＳ型のキラルリン誘導体、又はラセミ混合物若しくはジアステレオマー混合物を含むそれらの混合物として提供され得る。これらの立体配置の全ての組合せは、本明細書に記載される本発明の代替的な実施形態である。

これらの代替的な立体配置には、限定されるものではないが、

が含まれる。

追加の代替的な立体配置には、

が含まれる。

一実施形態では、上記の立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩のいずれかが、本明細書の本発明の任意の態様において化合物１として使用される。別の実施形態では、上記の立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩のいずれか１つが、本明細書の本発明の任意の態様において化合物１－Ａとして使用される。

代替的な実施形態では、化合物１－Ａは、化合物の図解に記載される特定のホスホルアミデート以外のホスホルアミデートのヘミ硫酸塩として提供される。別の代替的な実施形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩は、化合物の図解に記載される特定のホスホルアミデート以外のホスホルアミデートとして提供される。広範囲のホスホルアミデートが当業者に知られており、これらを望み通りに選択して、本明細書に記載される活性化合物を提供することができる。例えば、化合物１のホスホルアミデート又はその薬学的に許容可能な塩には、式Ａ：

（式中、
Ｒ^７は、水素、Ｃ_１～６アルキル（メチル、エチル、プロピル、及びイソプロピルを含む）、Ｃ_３～７シクロアルキル、又はアリール（フェニル及びナフチルを含む）であり、
Ｒ^８は、水素又はＣ_１～６アルキル（メチル、エチル、プロピル、及びイソプロピルを含む）であり、
Ｒ^９ａ及びＲ^９ｂは、独立して、水素、Ｃ_１～６アルキル（メチル、エチル、プロピル、及びイソプロピルを含む）、又はＣ_３～７シクロアルキルから選択され、
Ｒ^１０は、水素、Ｃ_１～６アルキル（メチル、エチル、プロピル、及びイソプロピルを含む）、Ｃ_１～６ハロアルキル、又はＣ_３～７シクロアルキルである）の化合物又はその薬学的に許容可能な塩が含まれる。

代替的な非限定的な実施形態では、本発明は、シュウ酸塩（化合物１－Ｂ）、塩酸塩（化合物１－Ｃ）、又は硫酸塩（化合物１－Ｄ）としての化合物１を含む。

化合物１及び化合物１－Ａの代謝は、５’－モノホスフェートの生産、続くＮ^６－メチル－２，６－ジアミノプリン塩基（１－３）の同化作用を含み、５’－モノホスフェートとして（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－オキソ－１，６－ジヒドロ－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－３－ヒドロキシ－４－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）メチルリン酸二水素（１－４）を生成する。次に、モノホスフェートは、活性なトリホスフェート種：５’－トリホスフェート（１－６）に更に同化される。５’－トリホスフェートは、更に代謝されて、２－アミノ－９－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－３－フルオロ－４－ヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）－３－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）－１，９－ジヒドロ－６Ｈ－プリン－６－オン（１－７）を生成することができる。或いは、５’－モノホスフェート１－２は、代謝されて、プリン塩基１－８を生成することができる。イソプロピル（（Ｓ）－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－（メチルアミノ）－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－３－ヒドロキシ－４－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）－Ｌ－アラニネートに関する代謝経路をスキーム１に示す。

Atea Pharmaceuticals, Inc.はまた、米国特許第９，８２８，４１０号、同第１０，０００，５２３号、同第１０，００５，８１１号及び同第１０，２３９，９１１号、及び米国特許出願公開第２０１８－０２１５７７６号、並びに国際公開第２０１６／１４４９１８号、国際公開第２０１８／０４８９３７号、国際公開第２０１８／０１３９３７号及び国際公開第２０１８／１４４６４０号において、ＨＣＶの治療用のβ－Ｄ－２’－デオキシ－２’－α－フルオロ－２’－β－Ｃ－置換－２－修飾－Ｎ^６－（モノメチル及びジメチル）プリンヌクレオチドを開示している。Ateaはまた、米国特許第１０，２０２，４１２号及び国際公開第２０１８／００９６２３号において、パラミクソウイルス感染症及びオルトミクソウイルス感染症の治療用のβ－Ｄ－２’－デオキシ－２’－置換－４’－置換－２－Ｎ^６－置換－６－アミノプリンヌクレオチドを開示している。

化合物２及び化合物２－Ａ
化合物２は、InterMune, Inc.に譲渡された国際公開第２０１１／０７５６０７号及び米国特許出願公開第２０１１／０１５２２４６号（第１０４頁）に開示されている。

一実施形態では、化合物２は、その薬学的に許容可能な塩、例えば化合物２－Ａとして投与される。一実施形態では、化合物２又は化合物２－Ａの固体形が使用される。一実施形態では、化合物２又は化合物２－Ａの固体形は結晶性固体である。

化合物２（コブロパスビル、すなわちＫＷ－１３６；メチルＮ－［（２Ｓ）－１－［（２Ｓ）－２－［５－［４－［７－［２－［（２Ｓ）－１－［（２Ｓ）－２－（メトキシカルボニルアミノ）－３－メチルブタノイル］ピロリジン－２－イル］－１Ｈ－イミダゾール－５－イル］－１，３－ベンゾジオキソール－４－イル］フェニル］－１Ｈ－イミダゾール－２－イル］ピロリジン－１－イル］－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル］カルバメート）の合成は当該技術分野で知られている。化合物２を調製するのに使用され得る合成法の非限定的な例には、InterMune, Inc.に譲渡された国際公開第２０１１／０７５６０７号に報告される方法が含まれる。

化合物２の結晶形及び製剤は、Beijing Kawin Technology Share-Holding Co.に譲渡された中国特許出願公開第１０８９０４４９６号及び中国特許出願公開第１０８６７５９９８号に記載されている。今日まで、以前に開示された化合物２の唯一の結晶形は、中国特許出願’４９６号及び中国特許出願’９９８号に記載される二塩酸塩である。

本発明は、化合物２の新たな塩形、二ヘミ硫酸塩の化合物２－Ａ、及び化合物２－Ａの有利な単離晶質形を提供する。

一実施形態では、化合物２－Ａの晶質形は、図１Ａに示されるＸＲＰＤパターンと実質的に同様のＸＲＰＤパターンを特徴とする。一実施形態では、化合物２－Ａの晶質形は、表２からの少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、又は少なくとも１０個の２θ値を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。一実施形態では、化合物２－Ａの晶質形は、
ａ）少なくとも７．３、７．９、１２．０、１２．２、１４．７、１５．８、１６．１、１６．５、１８．２、及び２２．７±０．２゜２θを含む又はこれらから選択される２θ値、
ｂ）７．３、７．９、１２．０、１２．２、１４．７、１５．８、１６．１、１６．５、１８．２、及び２２．７±０．２°２θから選択される少なくとも２個、３個、又は４個の２θ値、
ｃ）７．３、７．９、１２．０、１２．２、１４．７、１５．８、１６．１、１６．５、１８．２、及び２２．７±０．２°２θから選択される少なくとも５個、６個、又は７個の２θ値、
ｄ）７．３、７．９、１２．０、１２．２、１４．７、１５．８、１６．１、１６．５、１８．２、及び２２．７±０．２°２θから選択される少なくとも８個又は９個の２θ値、
ｅ）少なくとも７．３、１２．０、１４．７、１６．５、及び１８．２±０．２°２θを含む又はこれらから選択される２θ値、又は、
ｆ）７．３、１２．０、１４．７、１６．５、及び１８．２±０．２°２θから選択される少なくとも１個の２θ値、
を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。

晶質形を記載するのに使用されるプラスマイナス表記「±０．２°２θ」は、±０．２°２θを特徴とするリスト内の２θ値を指す。例えば、上記（ａ）で、少なくとも７．３、７．９、１２．０、１２．２、１４．７、１５．８、１６．１、１６．５、１８．２、及び２２．７±０．２°２θを含む又はこれらから選択される２θ値には、独立して、以下の２θ値７．３±０．２°２θ、７．９±０．２゜２θ、１２．０±０．２゜２θ、１２．２±０．２゜２θ、１４．７±０．２゜２θ、１５．８±０．２゜２θ、１６．１±０．２゜２θ、１６．５±０．２゜２θ、１８．２±０．２゜２θ、及び２２．７±０．２°２θが含まれる。代替的な実施形態では、標準偏差は、±０．３゜２θである。代替的な実施形態では、標準偏差は、±０．４゜２θである。晶質形を記載するのに使用される±０．２゜２θの標準偏差には、±０．３゜２θ及び±０．４゜２θの標準偏差も含まれる。

実施例３の結晶化調査により、化合物２の２つの追加の固体結晶性塩形、すなわち二硝酸塩（化合物２－Ｂ）及び二臭化水素酸塩（化合物２－Ｃ）も得られた。これらの結晶化形は非常に溶媒に特異的であった。４つの他の溶媒及びＣＨ_３ＣＮ中での研究は医薬品用途には好ましくないにもかかわらず、化合物２－ＢはＣＨ_３ＣＮ中で試験した場合にのみ結晶性固体であった。化合物２－Ｃはｉ－ＰｒＯＨ中でのみ結晶性固体であったが、Ｈ_２Ｏ中ではそうではなかった。化合物２の二硝酸塩の単離晶質形のＸＲＰＤパターンが図２に示されており、化合物２の二臭化水素酸塩の単離晶質形のＸＲＰＤパターンが図３に示されている。

代替的な実施形態では、化合物２は、その薬学的に許容可能な二硝酸塩、すなわち化合物２－Ｂとして投与される。

本発明はまた、化合物２の二硝酸塩、すなわち化合物２－Ｂの晶質形を記載する。一実施形態では、化合物２－Ｂの晶質形は、図２に示されるＸＲＰＤパターンと実質的に同様のＸＲＰＤパターンを特徴とする。一実施形態では、化合物２－Ｂの晶質形は、表３からの少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、又は少なくとも１０個の２θ値を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。一実施形態では、化合物２－Ｂの晶質形は、
ａ）少なくとも８．７、９．３、１４．２、１４．７、１５．２、１５．５、１９．１、２１．４、２１．７、及び２７．２±０．２゜２θを含む又はこれらから選択される２θ値、
ｂ）８．７、９．３、１４．２、１４．７、１５．２、１５．５、１９．１、２１．４、２１．７、及び２７．２±０．２°２θから選択される少なくとも２個、３個、又は４個の２θ値、
ｃ）８．７、９．３、１４．２、１４．７、１５．２、１５．５、１９．１、２１．４、２１．７、及び２７．２±０．２°２θから選択される少なくとも５個、６個、又は７個の２θ値、
ｄ）８．７、９．３、１４．２、１４．７、１５．２、１５．５、１９．１、２１．４、２１．７、及び２７．２±０．２°２θから選択される少なくとも８個又は９個の２θ値、
ｅ）少なくとも８．７、９．３、１５．２、２１．４、及び２１．７±０．２°２θを含む又はこれらから選択される２θ値、又は、
ｆ）８．７、９．３、１５．２、２１．４、及び２１．７±０．２°２θから選択される少なくとも１個の２θ値、
を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。

代替的な実施形態では、標準偏差は、±０．３゜２θである。代替的な実施形態では、標準偏差は、±０．４゜２θである。

更に代替的な実施形態では、化合物２は、その薬学的に許容可能な二臭化水素酸塩、すなわち化合物２－Ｃとして投与される。

本発明はまた、化合物２の二臭化水素酸塩、すなわち化合物２－Ｃの晶質形を記載する。一実施形態では、化合物２－Ｃの晶質形は、図３に示されるＸＲＰＤパターンと実質的に同様のＸＲＰＤパターンを特徴とする。一実施形態では、化合物２－Ｃの晶質形は、表４からの少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、又は少なくとも１０個の２θ値を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。一実施形態では、化合物２－Ｃの晶質形は、
ａ）少なくとも８．５、９．５、１４．８、１５．４、１９．０、２１．５、２２．０、２３．０、２４．２、及び３０．９±０．２゜２θを含む又はこれらから選択される２θ値、
ｂ）８．５、９．５、１４．８、１５．４、１９．０、２１．５、２２．０、２３．０、２４．２、及び３０．９±０．２°２θから選択される少なくとも２個、３個、又は４個の２θ値、
ｃ）８．５、９．５、１４．８、１５．４、１９．０、２１．５、２２．０、２３．０、２４．２、及び３０．９±０．２°２θから選択される少なくとも５個、６個、又は７個の２θ値、
ｄ）８．５、９．５、１４．８、１５．４、１９．０、２１．５、２２．０、２３．０、２４．２、及び３０．９±０．２°２θから選択される少なくとも８個又は９個の２θ値、
ｅ）少なくとも９．５、１５．４、２１．５、２３．０、及び２４．２±０．２°２θを含む又はこれらから選択される２θ値、又は、
ｆ）９．５、１５．４、２１．５、２３．０、及び２４．２±０．２°２θから選択される少なくとも１個の２θ値、
を含むＸＲＰＤパターンを特徴とする。

代替的な実施形態では、標準偏差は、±０．３゜２θである。代替的な実施形態では、標準偏差は、±０．４゜２θである。

定義
本発明の文脈で使用される「Ｄ立体配置」という用語は、非天然起源ヌクレオシドすなわち「Ｌ」立体配置の逆である、糖部分の天然配置を模倣する原理配置を指す。「β」又は「βアノマー」という用語は、ヌクレオシドアナログ中のフラノース部分の平面の上にヌクレオシド塩基が形成される（配置される）ヌクレオシドアナログに関して使用される。

「同時投与する」及び「同時投与」又は併用療法という用語は、本発明による化合物１又はその薬学的に許容可能な塩と化合物２又はその薬学的に許容可能な塩とを組み合わせて投与することを記載するのに使用される。或る特定の実施形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａは、少なくとも１つの他の活性剤、例えば、適宜少なくとも１つの追加の抗ＨＣＶ剤とともに投与される。併用投与のタイミングは、患者を治療する専門医によって最良に決定される。作用物質を同時に投与するか、又は少なくとも治療を受ける患者において２つの薬物の重複する薬理学的効果が可能となるように投与することが好ましいこともある。代替的には、併用療法に対して選択された薬物は、異なる時に患者に投与されてもよい。当然ながら、２以上のウイルス若しくは他の感染、又は他の病状が存在する場合、本発明の化合物を必要に応じて他の感染又は病状を治療するために他の作用物質と組み合わせてもよい。

本明細書で使用される「宿主」という用語は、そこでＨＣＶウイルスを複製することができる、細胞株及び動物、典型的にヒトを含む、単細胞又は多細胞の生物を指す。宿主という用語は、具体的には、本明細書に記載される組合せで治療することができる、感染細胞、ＨＣＶゲノムの全て又は一部でトランスフェクションされた細胞、並びにＨＣＶゲノム又はその一部を有する動物、特に霊長類（チンパンジーを含む）及びヒトを指す。本発明のほとんどの動物用途では、宿主はヒト患者であり、それには、限定されるものではないが、重複する薬物動態を伴う投薬レジメンが含まれる。しかしながら、獣医学的用途は、或る特定の適応症では、本発明によって明確に予想される（チンパンジー等）。宿主は、例えば、ウシ、ウマ、トリ、イヌ、ネコ等の上記ウイルスを保有できるものであってもよい。

「薬学的に許容可能な塩」は、開示された化合物の誘導体であって、親化合物が過度の毒性を有しないその無機及び有機の酸付加塩又は塩基付加塩に変性されている、誘導体である。本発明の化合物の塩は、従来の化学的方法によって、塩基性部分又は酸性部分を有する親化合物から合成され得る。一般にそのような塩は、これらの化合物の遊離酸形を化学量論量の適切な塩基（例えば、Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ又はＫの水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩等）と反応させることによって又はこれらの化合物の遊離塩基形を化学量論量の適切な酸と反応させることによって調製され得る。そのような反応は、典型的には、水中又は有機溶媒中、又はそれら２つの混合物中で行われる。一般に、実施可能であれば、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリルのような非水性媒体が典型的である。本発明の化合物の塩は、任意に溶媒和物の形で提供され得る。

薬学的に許容可能な塩の例として、限定されるものではないが、アミン等の塩基性残基の鉱酸塩又は有機酸塩、カルボン酸等の酸性残基のアルカリ塩又は有機塩等が挙げられる。薬学的に許容可能な塩には、例えば過度に毒性でない無機酸又は有機酸から形成される親化合物の慣用の塩及び第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、慣用の酸塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸等の無機酸から誘導される塩、並びに酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、メシル酸、エシル酸、ベシル酸、スルファニル酸、２－アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、ＨＯＯＣ－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＯＯＨ（ここで、ｎは０～４である）等の有機酸から又は同じ対イオンを生成する異なる酸を使用して調製された塩が含まれる。追加の適切な塩のリストは、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., p. 1418 (1985)に見出すことができる。

化合物は、望ましい結果を与える任意のモル比で送達され得る。例えば、化合物は、モル当量より少ない対イオンと一緒に、例えばヘミ硫酸塩の形で提供され得る。代替的には、化合物は、モル当量より多くの対イオンと一緒に、例えば二硫酸塩の形で提供され得る。化合物と対イオンとのモル比の非限定的な例として、１：０．２５、１：０．５、１：１、及び１：２が挙げられる。

同位体置換
本発明は、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの組合せであって、これらの化合物の一方又は両方が天然存在度を上回る、すなわち濃縮された同位体の量で原子の所望の同位体の置換を伴う、組合せを含む。同位体は、同じ原子番号であるが、異なる質量数を有する、すなわち同数の陽子であるが中性子の数が異なる原子である。一般的な例として、またこれに限定されず、例えば、水素の同位体である重水素（^２Ｈ）及びトリチウム（^３Ｈ）を、記載される構造の任意の場所に使用してもよい。代替的には、又は追加的には、炭素の同位体、例えば^１３Ｃ及び^１４Ｃを使用してもよい。好ましい同位体の置換は、薬物の性能を改善するため、分子上の１以上の位置における水素の重水素への置換である。重水素は、代謝中の結合切断の位置で（α－重水素速度同位体効果）、又は結合切断部位に隣接して若しくはその部位近くに（β－重水素速度同位体効果）結合され得る。Achillion Pharmaceuticals, Inc.（国際公開第２０１４／１６９２７８号、及び国際公開第２０１４／１６９２８０号）は、分子の５位を含む、それらの薬物動態又は薬効を改善するためのヌクレオチドの重水素化を記載している。

重水素等の同位体による置換は、例えばｉｎ ｖｉｖｏ半減期の増加、又は必要な投薬量の減少等のより大きな代謝安定性に起因する或る特定の治療上の利点を与えることができる。代謝性分解の部位における水素の重水素への置換は、その結合における代謝の速度を減少させるか、又はその結合における代謝を排除することができる。水素原子が存在し得る化合物の任意の位置において、水素原子は、プロチウム（^１Ｈ）、重水素（^２Ｈ）及びトリチウム（^３Ｈ）を含む水素の任意の同位体であってもよい。したがって、文脈に明確な別段の指示がない限り、本明細書における化合物に対する参照は、全ての可能性のある同位体の形態を包含する。

「同位体標識化」アナログという用語は、「重水素化アナログ」、「^１３Ｃ標識化アナログ」又は「重水素化／^１３Ｃ標識化アナログ」であるアナログを指す。「重水素化アナログ」という用語は、Ｈ－同位体、すなわち水素／プロチウム（^１Ｈ）が、Ｈ－同位体、すなわち重水素（^２Ｈ）によって置換された本明細書に記載される化合物を意味する。重水素置換は、部分的であってもよく、完全であってもよい。部分的な重水素置換は、少なくとも１つの水素が少なくとも１つの重水素によって置換されることを意味する。或る特定の実施形態では、同位体は任意の目的の位置の同位体中に９０％、９５％又は９９％以上に濃縮される。幾つかの実施形態では、所望の位置で９０％、９５％又は９９％に濃縮されるのは重水素である。これに反する指定がなければ、重水素化は選択された位置において少なくとも８０％である。ヌクレオシドの重水素化が、所望の結果をもたらす任意の置換可能な水素において起こる場合がある。

治療の方法
本明細書で使用される治療は、本発明の組合せを有効量で、ＨＣＶウイルスに感染している又は感染する可能性のある宿主、例えばヒトに投与することを指す。一実施形態では、治療の方法は、有効量の化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を、ＨＣＶウイルスに感染している又は感染する可能性のある宿主、例えばヒトに投与することを含む。別の実施形態では、治療の方法は、化合物１－Ａ及び化合物２を、ＨＣＶウイルスに感染している又は感染する可能性のある宿主、例えばヒトに投与することを含む。別の実施形態では、治療の方法は、化合物１及び化合物２－Ａを、ＨＣＶウイルスに感染している又は感染する可能性のある宿主、例えばヒトに投与することを含む。別の実施形態では、治療の方法は、化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを、ＨＣＶウイルスに感染している又は感染する可能性のある宿主、例えばヒトに投与することを含む。

「予防の（prophylactic）」又は阻止（preventative）という用語は、使用された場合、ウイルス性の障害の発生可能性を予防するか、又は減少させるための本発明の組合せの投与を指す。本発明は代替的な実施形態において、治療法及び予防療法（prophylactic）又は阻止療法（preventative）を含む。一実施形態では、上記の組合せは、Ｃ型肝炎ウイルスに曝露されたため、それによる感染症のリスクにある宿主に投与される。

本発明は、ＨＣＶの薬物耐性及び多剤耐性の形態を含むＣ型肝炎ウイルス、並びに肝硬変及び関連する肝毒性を含む、ＨＣＶ感染の関連する疾患の状態、病状又は合併症、また同様に、特に、虚弱、食欲不振、体重減少、乳房腫大（特に男性において）、発疹（特に手のひらの）、血液凝固困難、皮膚のクモ状血管、錯乱、昏睡（脳症）、腹腔の体液貯留（腹水）、食道静脈瘤、門脈圧亢進、腎不全、脾腫、血球の減少、貧血、血小板減少症、黄疸、及び肝細胞癌等のＨＣＶ感染の二次的な他の病状の治療の方法に関する。上記方法は、有効量の本明細書に記載される組合せを、任意に少なくとも１つの追加の生理活性剤、例えば追加の抗ＨＣＶ剤と組み合わせて、また任意に薬学的に許容可能な担体、添加剤及び／又は賦形剤と更に組み合わせて、それを必要とする宿主、典型的にはヒトに投与することを含む。別の実施形態では、上記方法は、有効量の本発明の組合せをＨＣＶ感染の可能性のある患者に投与することを含む。別の実施形態では、上記の組合せは、薬学的に許容可能な担体、添加剤、又は賦形剤と一緒に、任意に第３の抗ＨＣＶ剤と組み合わせて使用される。別の実施形態では、肝炎関連の肝臓移植後に新しい臓器を保護するために、本発明の組合せを患者に投与することができる。

併用療法及び剤形を使用して、ＨＣＶウイルス曝露に関連する又はその結果として起こる状態を治療することもできる。例えば、活性化合物を使用して、ＨＣＶ抗体陽性及びＨＣＶ抗原陽性の状態、ウイルスによる慢性の肝臓炎症、進行性のＣ型肝炎に起因する肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肝硬変、急性Ｃ型肝炎、Ｃ型劇症肝炎、慢性持続性Ｃ型肝炎、並びに抗ＨＣＶによる倦怠感を治療することができる。

本明細書に記載される組合せ及び医薬組成物を使用して、抗ＨＣＶ抗体陽性及び抗原陽性の状態、ウイルスによる慢性の肝臓炎症、進行性のＣ型肝炎に起因する肝臓癌（肝細胞癌（ＨＣＣ））、肝硬変、慢性又は急性Ｃ型肝炎、Ｃ型劇症肝炎、慢性持続性Ｃ型肝炎及び抗ＨＣＶによる倦怠感等の関連病状を治療することもできる。上記組合せを予防的に使用して、抗ＨＣＶ抗体陽性若しくは抗原陽性である又はＣ型肝炎に曝露された個体において臨床的疾病の進行を阻止又は制限することもできる。

医薬組成物及び剤形
化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の投与は、数ある他の投与経路の中でも、限定されるものではないが、経口投与、局所投与、非経口投与、筋肉内投与、静脈内投与、皮下投与、経皮投与（浸透促進剤を含み得る）、バッカル投与、及び坐剤投与を含む任意の所望な形を使用して実施され得る。一実施形態では、活性化合物又は化合物の組合せは、当該技術分野でよく知られており、以下で更に記載される固体剤形で提供される。腸溶コーティングされた経口錠剤を使用して、経口投与経路のための化合物の生物学的利用能を高めることもできる。最も有効な剤形は、選択された特定の作用物質の生物学的利用能／薬物動態だけでなく、患者における疾患の重症度にも依存することとなる。投与し易くて、有利な患者のコンプライアンスが見込まれるため、経口剤形が特に好ましい。

或る特定の実施形態では、本発明による医薬組成物は、本明細書に記載される化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩のそれぞれ別個の形又は組み合わされた形を抗ＨＣＶウイルス有効量で、任意に薬学的に許容可能な担体、添加剤、又は賦形剤と組み合わせて、更に任意に少なくとも１つの他の活性化合物と組み合わせて又はそれと交互に含む。

一実施形態では、上記組合せには、薬学的に許容可能な担体中での、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物２－Ａの固体剤形が含まれる。この医薬組成物は、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の両方を含有することができ、又は代替的にこれらの化合物は、宿主が標準的な薬物動態によって測定されて協調的な様式で両方の化合物の利益を受けるように投与される別個の剤形で存在し得る。

当業者は、治療的有効量が、治療される感染又は病状、その重症度、採用される治療レジメン、使用される作用物質の薬物動態、また同じく、治療される患者又は被験体（動物又はヒト）に応じて変化し、またかかる治療量が主治医又は専門家によって決定可能であることを認識する。

化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａは、１つ以上の薬学的に許容可能な担体との１つ以上の混合物として製剤化され得る。一般に、１つ以上の経口投与用形態の医薬組成物を、特に丸剤又は錠剤等の１つ以上の固体剤形で投与することが望ましい。或る特定の製剤は、非経口、静脈内、筋肉内、局所、経皮、バッカル、皮下、坐剤、又は鼻腔スプレーを含む他の経路により投与されてもよい。静脈内及び筋肉内の製剤は、しばしば、無菌の生理食塩水中で投与される。当業者は、製剤を水又は別のビヒクルにより可溶性にするため製剤を変更してもよく、例えば、これは、十分に当該技術分野の通常の知識である、わずかな変更（塩製剤、エステル化等）によって、容易に遂行され得る。また、患者における最大の有益な効果に向けて本発明の化合物の薬物動態を管理するために、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの投与経路及び投薬レジメンを変更することも十分に当業者の能力の範囲内である。

或る特定の医薬剤形においては、アシル化（アセチル化又はその他）、及びエーテル（アルキル及び関連する）誘導体、リン酸エステル、チオホスホルアミデート、ホスホルアミデート、及び本発明の化合物の様々な塩の形態を含む、上記化合物のプロドラッグ形態が、所望の効果を達成するために使用され得る。当業者は、宿主生物又は患者の標的部位への活性化合物の送達を容易にするため、如何にして本発明の化合物をプロドラッグ形態へと容易に変更するかを認識する。当業者はまた、本発明の化合物の意図される効果を最大化するための宿主生物又は患者の標的部位への上記化合物の送達において、適用可能である場合は、プロドラッグ形態の有利な薬物動態パラメーターを利用する。

本開示で挙げられる量は、典型的には、遊離形（すなわち、非塩形、水和物形、又は溶媒和物形）を指す。本明細書に記載される典型的な値は、遊離形の同等物、すなわち、遊離形が投与される場合と同様の量を表す。塩が投与される場合に、塩と遊離形との間の分子量比に対して量を計算する必要がある。

本発明による治療上活性な製剤内に含まれる化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの量は、本発明による所望の転帰を達成するのに、例えば、ＨＣＶ感染を治療するために、ＨＣＶ感染の可能性を減少するために、又はＨＣＶ、若しくはＨＣＶに続発して起きる疾患状態、病状、及び／又は合併症を含むその二次的影響の阻害、減少及び／又は消失のために有効な量である。概して、医薬剤形中の本発明の化合物の治療的有効量は、例えば、１日当たり約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。化合物１又は化合物１－Ａは、例えば、患者における作用物質の薬物動態に応じて、患者の１日当たり約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１５ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与され得る。

或る特定の実施形態では、医薬組成物は、単位剤形中に、約１ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａに加えて、約１ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約６００ｍｇ、約３００ｍｇ～約５００ｍｇ、又は約４００ｍｇ～約４５０ｍｇの化合物１又は相当量の化合物１－Ａを含有する剤形で存在する。

或る特定の実施形態では、医薬組成物は、単位剤形中に、最大約１０ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約３００ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３７５ｍｇ、約４００ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４７５ｍｇ、約５００ｍｇ、約５２５ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５７５ｍｇ、約６００ｍｇ、約６２５ｍｇ、約６５０ｍｇ、約６７５ｍｇ、約７００ｍｇ、約７２５ｍｇ、約７５０ｍｇ、約７７５ｍｇ、約８００ｍｇ、約８２５ｍｇ、約８５０ｍｇ、約８７５ｍｇ、約９００ｍｇ、約９２５ｍｇ、約９５０ｍｇ、約９７５ｍｇ、又は約１０００ｍｇ又はそれ以上の化合物１又は相当量の化合物１－Ａを含有する剤形で、例えば固体剤形で存在する。

或る特定の実施形態では、医薬組成物は、単位剤形中に、最大約１０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約３００ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３７５ｍｇ、約４００ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４７５ｍｇ、約５００ｍｇ、約５２５ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５７５ｍｇ、約６００ｍｇ、約６２５ｍｇ、約６５０ｍｇ、約６７５ｍｇ、約７００ｍｇ、約７２５ｍｇ、約７５０ｍｇ、約７７５ｍｇ、約８００ｍｇ、約８２５ｍｇ、約８５０ｍｇ、約８７５ｍｇ、約９００ｍｇ、約９２５ｍｇ、約９５０ｍｇ、約９７５ｍｇ、又は約１０００ｍｇ又はそれ以上の化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する剤形で、例えば固体剤形で存在する。

一実施形態では、最大約８００ｍｇ、最大約７００ｍｇ、最大約６００ｍｇ、最大約５００ｍｇ、最大約４００ｍｇ、最大約３００ｍｇ、最大約２００ｍｇ、又は最大約１００ｍｇの化合物１又は相当量の化合物１－Ａ及び最大約１４５ｍｇ、最大約１３０ｍｇ、最大約１２５ｍｇ、最大約１１０ｍｇ、最大約１００ｍｇ、最大約９０ｍｇ、最大約７５ｍｇ、最大約７０ｍｇ、最大約６５ｍｇ、最大約６０ｍｇ、最大約５５ｍｇ、最大約５０ｍｇ、最大約４５ｍｇ、最大約４０ｍｇ、最大約３５ｍｇ、最大約３０ｍｇ、最大約２５ｍｇ、最大約２０ｍｇ、最大約１５ｍｇ、最大約１０ｍｇ、又は最大約５ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する固体剤形は、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に１日１回で投与される。

一実施形態では、少なくとも約１００ｍｇ、少なくとも約２００ｍｇ、少なくとも約３００ｍｇ、少なくとも約４００ｍｇ、少なくとも約５００ｍｇ、少なくとも約６００ｍｇ、又は少なくとも約７００ｍｇの化合物１又は相当量の化合物１－Ａ及び少なくとも約５ｍｇ、少なくとも約１０ｍｇ、少なくとも約１５ｍｇ、少なくとも約２０ｍｇ、少なくとも約２５ｍｇ、少なくとも約３０ｍｇ、少なくとも約３５ｍｇ、少なくとも約４０ｍｇ、少なくとも約４５ｍｇ、少なくとも約５０ｍｇ、少なくとも約５５ｍｇ、少なくとも約６０ｍｇ、少なくとも約６５ｍｇ、少なくとも約７０ｍｇ、少なくとも約７５ｍｇ、少なくとも約９０ｍｇ、少なくとも約１００ｍｇ、少なくとも約１１０ｍｇ、少なくとも約１２５ｍｇ、少なくとも約１３０ｍｇ、又は少なくとも約１４５ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する固体剤形は、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に１日１回で投与される。

一実施形態では、本明細書に記載される化合物の組合せは、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａ及び最大約３０ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する単一の錠剤として投与される。一実施形態では、最大約３０ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

一実施形態では、本明細書に記載される化合物の組合せは、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａ及び最大約４５ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する単一の錠剤として投与される。一実施形態では、最大約４５ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

一実施形態では、本明細書に記載される化合物の組合せは、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａ及び最大約６０ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する単一の錠剤として投与される。一実施形態では、最大約６７ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

一実施形態では、本明細書に記載される化合物の組合せは、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａ及び最大約１００ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する単一の錠剤として投与される。一実施形態では、最大約１１３ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

代替的には、化合物１－Ａ又は相当量の化合物１の固形剤形を、化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する別個の固体剤形と組み合わせて投与することができる。この組合せは、医療供給者の指示に従って、１日１回、１日２回、１日３回、又は最大１日４回で投与され得る。一実施形態では、化合物１－Ａ又は化合物１は、化合物２又は相当量の化合物２－Ａとは別個のスケジュールで投与される。例えば、化合物１又は相当量の化合物１－Ａは１日２回で投与され得るのに対して、化合物２又は相当量の化合物２－Ａは１日１回だけ投与されるか、又はその逆も同様である。化合物２又は相当量の化合物２－Ａは１日に複数回で投与され得るのに対して、化合物１又は相当量の化合物１－Ａは１日１回だけ投与される。

一実施形態では、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に、最大約８００ｍｇ、最大約７００ｍｇ、最大約６００ｍｇ、最大約５００ｍｇ、最大約４００ｍｇ、最大約３００ｍｇ、最大約２００ｍｇ、又は最大約１００ｍｇの化合物１又は相当量の化合物１－Ａを含有する固体剤形が１日１回で投与され、そして最大約１４５ｍｇ、最大約１３０ｍｇ、最大約１２５ｍｇ、最大約１１０ｍｇ、最大約１００ｍｇ、最大約９０ｍｇ、最大約７５ｍｇ、最大約７０ｍｇ、最大約６５ｍｇ、最大約６０ｍｇ、最大約５５ｍｇ、最大約５０ｍｇ、最大約４５ｍｇ、最大約４０ｍｇ、最大約３５ｍｇ、最大約３０ｍｇ、最大約２５ｍｇ、最大約２０ｍｇ、最大約１５ｍｇ、最大約１０ｍｇ、又は最大約５ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する別個の固体剤形が１日１回で投与される。

一実施形態では、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に、少なくとも約１００ｍｇ、少なくとも約２００ｍｇ、少なくとも約３００ｍｇ、少なくとも約４００ｍｇ、少なくとも約５００ｍｇ、少なくとも約６００ｍｇ、少なくとも約７００ｍｇ、又は少なくとも約８００ｍｇの化合物１又は相当量の化合物１－Ａを含有する固体剤形が１日１回で投与され、そして少なくとも約５ｍｇ、少なくとも約１０ｍｇ、少なくとも約１５ｍｇ、少なくとも約２０ｍｇ、少なくとも約２５ｍｇ、少なくとも約３０ｍｇ、少なくとも約３５ｍｇ、少なくとも約４０ｍｇ、少なくとも約４５ｍｇ、少なくとも約５０ｍｇ、少なくとも約５５ｍｇ、少なくとも約６０ｍｇ、少なくとも約６５ｍｇ、少なくとも約７０ｍｇ、少なくとも約７５ｍｇ、少なくとも約８０ｍｇ、少なくとも約９０ｍｇ、少なくとも約１００ｍｇ、少なくとも約１１０ｍｇ、少なくとも約１２５ｍｇ、少なくとも約１３０ｍｇ、又は少なくとも約１４５ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する別個の固体剤形が１日１回で投与される。

一実施形態では、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａを含有する固形剤形が１日１回で投与され、そして最大約３０ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する別個の固形剤形が１日１回で投与される。一実施形態では、最大約３０ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

一実施形態では、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａを含有する固形剤形が１日１回で投与され、そして最大約４５ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する別個の固形剤形が１日１回で投与される。一実施形態では、最大約４５ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

一実施形態では、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａを含有する固形剤形が１日１回で投与され、そして最大約６０ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する別個の固形剤形が１日１回で投与される。一実施形態では、最大約６７ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

一実施形態では、ＨＣＶの治療のためにそれを必要とする宿主に、最大約６００ｍｇの化合物１－Ａを含有する固形剤形が１日１回で投与され、そして最大約１００ｍｇの化合物２又は相当量の化合物２－Ａを含有する別個の固形剤形が１日１回で投与される。一実施形態では、最大約１１３ｍｇの化合物２－Ａが投与される。

本発明の組合せの化合物は、しばしば経口投与されるが、非経口的に、局所的に、若しくは坐剤の形で、及び鼻内で、鼻腔スプレーとして、又は本明細書に記載される他の様式で投与され得る。より一般的には、これらの化合物は、１つ以上の錠剤、カプセル剤、注射剤、静脈内製剤、懸濁剤、液剤、エマルジョン剤、インプラント、粒子、球体、クリーム剤、軟膏剤、坐剤、吸入形、経皮形、バッカル形、舌下形、局所形、ゲル形、粘液形（mucosal）等で投与され得る。

或る特定の実施形態では、上記組合せは、最大２４週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、最大１２週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、最大１０週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、最大８週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、最大６週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、最大４週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、少なくとも４週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、少なくとも６週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、少なくとも８週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、少なくとも１０週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、少なくとも１２週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、少なくとも２４週間にわたって少なくとも１日１回で投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、最大２４週間、最大１２週間、最大１０週間、最大８週間、最大６週間、又は最大４週間にわたって少なくとも１日置きに投与される。或る特定の実施形態では、上記組合せは、少なくとも４週間、少なくとも６週間、少なくとも８週間、少なくとも１０週間、少なくとも１２週間、又は少なくとも２４週間にわたって少なくとも１日置きに投与される。

本発明の目的について、本発明による組成物の予防的又は阻止的な有効量は、治療的有効量について上に述べられたものと同じ濃度範囲に含まれ、通常、治療的有効量と同じである。

本発明による医薬組成物を調製するため、しばしば、治療的有効量の化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ及び化合物２－Ａを、従来の薬学的配合技術に従って薬学的に許容可能な担体と本質的に混合して服用量を生じることができる。担体は、例えば、経口又は非経口の投与に望ましい調剤形態に応じて多様な形態をとってもよい。経口剤形への医薬組成物の調製において、通常の薬学的媒質のいずれを使用してもよい。したがって、懸濁液、エリキシル剤及び溶液等の液体経口調剤に対し、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤、着色剤等を含む好適な担体及び添加物を使用してもよい。散剤、錠剤、カプセル剤等の固体経口調剤、及び坐剤等の固形調剤に対し、デンプン、デキストロース等の糖担体、マニホールド、ラクトース、及び関連する担体、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等を含む、好適な担体及び添加剤を使用してもよい。所望に応じて、錠剤又はカプセル剤は、標準的な技術によって腸溶性であってもよく、徐放性であってもよい。これらの剤形の使用は、患者における化合物の生物学的利用能を著しく増強し得る。

非経口製剤について、担体は、通常、無菌の水又は塩化ナトリウム水溶液を含むが、分散液を補助するものを含む他の成分を含んでもよい。滅菌水が無菌として使用され維持されることになっている場合、当然に、組成物及び担体も滅菌されなければならない。また、注射用懸濁液を調製してもよく、その場合、適切な液体担体、懸濁化剤等を利用してもよい。

また、薬学的に許容可能な担体を産生するため、リポソーム懸濁液（ウイルス性抗原に標的化されたリポソームを含む）を従来の方法によって作製してもよい。これは、本発明によるヌクレオシド化合物の遊離ヌクレオシド、アシル／アルキルヌクレオシド又はリン酸エステルプロドラッグの形態の送達に適切な場合がある。

本発明による典型的な実施形態では、医薬組成物は、ＨＣＶ感染、又はＨＣＶの二次的な疾患状態、病状又は合併症を治療、予防、又は遅延するために使用される。

固体剤形
本発明の一態様は、任意に併用固定剤形（fixed dosage form）での、活性化合物又はその薬学的に許容可能な塩の固定剤形である。

一実施形態では、固定用量組合せは、化合物、又はその薬学的に許容可能な塩の少なくとも１つの噴霧乾燥固体分散体を含み、該組成物は経口送達に適している。この実施形態の一態様では、固定用量組合せは、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を含み、ここで、少なくとも１つの化合物は噴霧乾燥固体分散体である。

別の実施形態では、固定用量組合せは、化合物又はその薬学的に許容可能な塩の少なくとも１つの顆粒積層（granulo layered）固体分散体であり、該組成物は経口送達に適している。この実施形態の一態様では、固定用量組合せは、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を含む、顆粒積層固体分散体である。或る特定の実施形態では、噴霧乾燥分散体又は顆粒積層固体分散体の成分は、結晶性の化合物１－Ａを使用して調製される。或る特定の実施形態では、噴霧乾燥分散体又は顆粒積層固体分散体の成分は、結晶性の化合物２－Ａを使用して調製される。代替的な実施形態では、化合物１若しくはその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物１－Ａ、又は化合物２若しくはその薬学的に許容可能な塩、例えば化合物２－Ａは、非晶質化合物として送達され得る。

また、他の実施形態では、固体分散体は、コポビドン、ポロキサマー、及びＨＰＭＣ－ＡＳから選択される少なくとも１つの賦形剤を含む。一実施形態では、ポロキサマーはポロキサマー４０７であるか、又はポロキサマー４０７を含み得るポロキサマーの混合物である。一実施形態では、ＨＰＭＣ－ＡＳはＨＰＭＣ－ＡＳ－Ｌである。

また、他の実施形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩から作製された固定用量組成物は、以下の１以上の賦形剤を含む：ホスホグリセリド；ホスファチジルコリン；ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）；ジオレイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）；ジオレイルオキシプロピルトリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）；ジオレオイルホスファチジルコリン；コレステロール；コレステロールエステル；ジアシルグリセロール；ジアシルグリセロールスクシネート；ジホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）；ヘキサンデカノール；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の脂肪アルコール；ポリオキシエチレン－９－ラウリルエーテル；パルミチン酸又はオレイン酸等の界面活性脂肪酸；脂肪酸；脂肪酸モノグリセリド；脂肪酸ジグリセリド；脂肪酸アミド；ソルビタントリオレエート（Ｓｐａｎ（商標）８５）グリココレート；ソルビタンモノラウレート（Ｓｐａｎ（商標）２０）；ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ（商標）２０）；ポリソルベート６０（Ｔｗｅｅｎ（商標）６０）；ポリソルベート６５（Ｔｗｅｅｎ（商標）６５）；ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（商標）８０）；ポリソルベート８５（Ｔｗｅｅｎ（商標）８５）；ポリオキシエチレンモノステアレート；サーファクチン；ポロキサマー；ソルビタントリオレエート等のソルビタン脂肪酸エステル；レシチン；リゾレシチン；ホスファチジルセリン；ホスファチジルイノシトール；スフィンゴミエリン；ホスファチジルエタノールアミン（セファリン）；カルディオリピン；ホスファチジン酸；セレブロシド；ジセチルホスフェート；ジパルミトイルホスファチジルグリセロール；ステアリルアミン；ドデシルアミン；ヘキサデシル－アミン；アセチルパルミテート；グリセロールリシノレエート；ヘキサデシルステアレート；イソプロピルミリステート；チロキサポール；ポリ（エチレングリコール）５０００－ホスファチジルエタノールアミン；ポリ（エチレングリコール）４００－モノステアレート；リン脂質；高い界面活性剤特性を有する合成及び／又は天然の洗浄剤；デオキシコレート；シクロデキストリン；カオトロピック塩（chaotropic salt）；イオンペアリング剤；グルコース、フルクトース、ガラクトース、リボース、ラクトース、スクロース、マルトース、トレハロース、セロビオース、マンノース、キシロース、アラビノース、グルクロン酸、ガラクツロン酸、マンヌロン酸、グルコサミン、ガラクトサミン、及びノイラミン酸；プルラン、セルロース、微結晶性セルロース、ケイ酸化微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシセルロース（ＨＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、デキストラン、シクロデキストラン、グリコーゲン、ヒドロキシエチルデンプン、カラギーナン、グリコン、アミロース、キトサン、Ｎ，Ｏ－カルボキシメチルキトサン、アルギン及びアルギン酸、デンプン、キチン、イヌリン、コンニャク、グルコマンナン、パスツラン（pustulan）、ヘパリン、ヒアルロン酸、カードラン、及びキサンタン、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、エリトリトール、マルチトール、及びラクチトール、プルロニックポリマー、ポリエチレン、ポリカーボネート（例えばポリ（１，３－ジオキサン－２オン））、ポリ無水物（例えばポリ（セバシン酸無水物））、フマル酸ポリプロピル、ポリアミド（例えばポリカプロラクタム）、ポリアセタール、ポリエーテル、ポリエステル（例えばポリラクチド、ポリグリコリド、ポリラクチド－ｃｏ－グリコリド）、ポリカプロラクトン、ポリヒドロキシ酸（例えばポリ（（β－ヒドロキシアルカノエート）））、ポリ（オルトエステル）、ポリシアノアクリレート、ポリビニルアルコール、ポリウレタン、ポリホスファゼン、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリウレア、ポリスチレン、及びポリアミン、ポリリジン、ポリリジン－ＰＥＧ共重合体、及びポリ（エチレンイミン）、ポリ（エチレンイミン）－ＰＥＧ共重合体、グリセロールモノカプリロカプレート、プロピレングリコール、ビタミンＥ ＴＰＧＳ（ｄ－α－トコフェリルポリエチレングリコール１０００スクシネートとしても知られる）、ゼラチン、二酸化チタン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、エチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロック共重合体（ＰＥＯ／ＰＰＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ナトリウムカルボキシメチルセルロース（ＮａＣＭＣ）、又はヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）。

また、他の実施形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩から作製された固定用量組成物は、次の１以上の界面活性剤を含む：ポリオキシエチレングリコール、ポリオキシプロピレングリコール、デシルグルコシド、ラウリルグルコシド、オクチルグルコシド、ポリオキシエチレングリコールオクチルフェノール、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、グリセロールアルキルエステル、グリセリルラウレート、コカミドＭＥＡ、コカミドＤＥＡ、ドデシルジメチルアミンオキシド、及びポロキサマー。ポロキサマーの例として、ポロキサマーの１８８、２３７、３３８及び４０７が挙げられる。これらのポロキサマーは、商品名Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）（ニュージャージー州マウントオリーブのBASFから入手可能）で入手可能であり、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ－６８、Ｆ－８７、Ｆ－１０８及びＦ－１２７にそれぞれ対応する。ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ－６８に対応する）は、約７０００Ｄａ～約１００００Ｄａ、又は約８０００Ｄａ～約９０００Ｄａ、又は約８４００Ｄａの平均分子量を有するブロック共重合体である。ポロキサマー２３７（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ－８７に対応する）は、約６０００Ｄａ～約９０００Ｄａ、又は約６５００Ｄａ～約８０００Ｄａ、又は約７７００Ｄａの平均分子量を有するブロック共重合体である。ポロキサマー３３８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ－１０８に対応する）は、約１２０００Ｄａ～約１８０００Ｄａ、又は約１３０００Ｄａ～約１５０００Ｄａ、又は約１４６００Ｄａの平均分子量を有するブロック共重合体である。ポロキサマー４０７（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ－１２７に対応する）は、約Ｅ１０１ Ｐ５６ Ｅ１０１～約Ｅ１０６ Ｐ７０ Ｅ１０６、又は約Ｅ１０１ Ｐ５６Ｅ１０１、又は約Ｅ１０６ Ｐ７０ Ｅ１０６の比率を有し、約１００００Ｄａ～約１５０００Ｄａ、又は約１２０００Ｄａ～約１４０００Ｄａ、又は約１２０００Ｄａ～約１３０００Ｄａ、又は約１２６００Ｄａの平均分子量を有する、ポリオキシエチレン－ポリオキシプロピレントリブロック共重合体である。

また、更に他の実施形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩から作製される固定用量組成物は、以下の１以上の界面活性剤を含む：ポリ酢酸ビニル、コール酸ナトリウム塩、ジオクチルスルホスクシネートナトリウム、ヘキサデシルトリメチル臭化アンモニウム、サポニン、糖エステル、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘシリーズ、ソルビタントリオレエート、ソルビタンモノオレエート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、オレイルポリオキシエチレン（２）エーテル、ステアリルポリオキシエチレン（２）エーテル、ラウリルポリオキシエチレン（４）エーテル、オキシエチレンとオキシプロピレンのブロック共重合体、ジエチレングリコールジオレエート、テトラヒドロフルフリルオレエート、エチルオレエート、イソプロピルミリステート、グリセリルモノオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルモノリシノレート、セチルアルコール、ステアリルアルコール、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、オリーブオイル、グリセリルモノラウレート、トウモロコシ油、綿実油及びヒマワリ種子油。

代替的な実施形態では、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩から作製される固定用量組成物は、溶媒又は乾式造粒法を含み、その後、任意に、圧縮又は圧密、噴霧乾燥、ナノ懸濁液処理、ホットメルト押し出し、押し出し／球形化（spheronization）、成形、球形化、積層（例えば噴霧積層懸濁液又は溶液）等が続くプロセスによって作製される。かかる技術の例として、適切なパンチ及び金型を使用する直接圧縮（例えば、ここで、パンチ及び金型は好適な打錠機に適合される）；顆粒へと乾燥される湿った粒子を形成する、高剪断造粒機等の好適な造粒設備を使用する湿式造粒法；造粒に続いて適切なパンチ及び金型を使用する圧縮（ここでパンチ及び金型は好適な打錠機に適合される）；所望の長さに切断される、又は重力及び摩滅の下で長さに分断される、円筒状の押出物を形成する湿った塊の押し出し；押出／球形化（ここでは押出物が球状粒子へと丸められ、球形化によって密度が高められる）；コンベンションパン（convention pan）又はウースター（Wurster）カラム等の技術を使用する、不活性コアに対する懸濁液又は溶液の噴霧積層；圧縮単位に適合された好適な型を使用する射出成形又は圧縮成形等が挙げられる。

例示的な崩壊剤として、アルギン酸、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、架橋ナトリウムカルボキシメチルセルロース（ナトリウムクロスカルメロース）、粉末セルロース、キトサン、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、グアーガム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、微結晶性セルロース、アルギン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム（sodium starch glycolate）、部分アルファ化澱粉、アルファ化澱粉、デンプン、カルボキシメチルデンプンナトリウム（sodium carboxymethyl starch）等、又はそれらの組合せが挙げられる。

例示的な滑沢剤として、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ベヘン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリル、硬化ヒマシ油、軽油、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、フマル酸ステアリルナトリウム、ステアリン酸、ステアリン酸亜鉛、二酸化ケイ素、コロイド状二酸化ケイ素、シリカで処理したジメチルジクロロシラン、タルク、又はそれらの組合せが挙げられる。

本明細書に記載される剤形コアは、被覆されて被覆錠剤をもたらしてもよい。剤形コアは、機能性若しくは非機能性のコーティング、又は機能性コーティングと非機能性コーティングとの組合せで被覆されてもよい。「機能性コーティング」として、全組成物の放出特性を変更する錠剤コーティング、例えば徐放性又は遅延放出性のコーティングが挙げられる。「非機能性コーティング」として、機能性コーティングでないコーティング、例えば化粧用コーティングが挙げられる。非機能性コーティングは、初期溶解、水和、コーティングの穿孔等により、活性剤の放出に対して幾つか影響を及ぼす可能性があるが、非被覆組成物からの大きなずれとは見なされない。また、非機能性コーティングは、薬学的有効成分を含む被覆されていない組成物の味をマスキングすることができる。コーティングは、遮光物質、光吸収物質、又は遮光物質と光吸収物質とを含んでもよい。

例示的なポリメタクリレートとして、アクリル酸エステルとメタクリル酸エステルの共重合体、例えば、ａ．ポリ（ブチルメタクリレート、（２－ジメチルアミノエチル）メタクリレート、メチルメタクリレート）１：２：１（例えばＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｅ １００、ＥＵＤＲＡＧＩＴ ＥＰＯ及びＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｅ １２．５；ＣＡＳ番号２４９３８－１６－７）等のアミノメタクリレート共重合体ＵＳＰ／ＮＦ；ｂ．ポリ（メタクリル酸、エチルアクリレート）１：１（例えばＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ３０ Ｄ－５５、ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ１００－５５、ＥＡＳＴＡＣＲＹＬ ３０Ｄ、ＫＯＬＬＩＣＯＡＴ ＭＡＥ ３０Ｄ ＡＮＤ ３０ＤＰ；ＣＡＳ番号２５２１２－８８－８）；ｃ．ポリ（メタクリル酸、メチルメタクリレート）１：１（例えばＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ １００、ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ １２．５及び１２．５Ｐ；メタクリル酸共重合体としても知られる、タイプＡ ＮＦ；ＣＡＳ番号２５８０６－１５－１）；ｄ．ポリ（メタクリル酸、メチルメタクリレート）１：２（例えばＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｓ １００、ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｓ １２．５及び１２．５Ｐ；ＣＡＳ番号２５０８６－１５－１）；ｅ．ポリ（メチルアクリレート、メチルメタクリレート、メタクリル酸）７：３：１（例えばＥｕｄｒａｇｉｔ ＦＳ ３０ Ｄ；ＣＡＳ番号２６９３６－２４－３）；ｆ．ポリ（エチルアクリレート、メチルメタクリレート、トリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリド）１：２：０．２又は１：２：０．１（例えばＥＵＤＲＡＧＩＴＳ ＲＬ １００、ＲＬ ＰＯ、ＲＬ ３０ Ｄ、ＲＬ １２．５、ＲＳ １００、ＲＳ ＰＯ、ＲＳ ３０ Ｄ又はＲＳ １２．５；ＣＡＳ番号３３４３４－２４－１）；ｇ．ポリ（エチルアクリレート、メチルメタクリレート）２：１（例えばＥＵＤＲＡＧＩＴ ＮＥ ３０ Ｄ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ ＮＥ ４０Ｄ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ ＮＭ ３０Ｄ；ＣＡＳ番号９０１０－８８－２）等、又はそれらの組合せが挙げられる。

好適なアルキルセルロースとして、例えば、メチルセルロース、エチルセルロース等、又はそれらの組合せが挙げられる。例示的な水系エチルセルロースコーティング剤として、ペンシルベニア州フィラデルフィアのFMCから入手可能な、ラウリル硫酸ナトリウム及びセチルアルコールを更に含む３０％分散体であるＡＱＵＡＣＯＡＴ；ペンシルベニア州ウェストポイントのColorconから入手可能な、安定化剤又は他の被覆成分（例えばオレイン酸アンモニウム、セバシン酸ジブチル、コロイド状無水シリカ、中鎖トリグリセリド等）を更に含む２５％分散体であるＳＵＲＥＬＥＡＳＥ；ミシガン州ミッドランドのAqualon又はDow Chemical Coから入手可能なエチルセルロース（Ｅｔｈｏｃｅｌ）が挙げられる。当業者は、他のアルキルセルロースポリマーを含む他のセルロースポリマーが、エチルセルロースの一部又は全てを代替し得ることを十分に理解する。

機能性コーティングを作製するのに使用され得る他の好適な材料として、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）；酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）；ポリ酢酸ビニルフタレート；中性又は合成のワックス、脂肪アルコール（ラウリル、ミリスチル、ステアリル、セチル等、又は具体的にはセトステアリルアルコール）、脂肪酸エステル、脂肪酸グリセリド（モノ－、ジ－、及びトリ－グリセリド）を含む脂肪酸、硬化油脂、炭化水素、通常のワックス、ステアリン酸、ステアリルアルコール、炭化水素骨格を有する疎水性及び親水性の材料、又はそれらの組合せが挙げられる。好適なワックスとして、ミツロウ、グリコワックス（glycowax）、キャスターワックス（castor wax）、カルナウバロウ、マイクロクリスタリンワックス、キャンデリア、及びワックス様物質、例えば、室温で通常固体であり約３０℃～約１００℃の融点を有する材料、又はそれらの組合せが挙げられる。

他の実施形態では、機能性コーティングは、消化可能な長鎖（例えばＣ_８～Ｃ_５０、具体的にはＣ_１２～Ｃ_４０）の置換又は非置換の炭化水素、例えば脂肪酸、脂肪アルコール、脂肪酸のグリセリルエステル、鉱物油及び植物油、ワックス、又はそれらの組合せを含んでもよい。約２５℃～約９０℃の融点を有する炭化水素を使用してもよい。具体的には、長鎖炭化水素材料である脂肪（脂肪族）アルコールを使用することができる。

コーティングは、任意に、可塑剤、安定化剤、水溶性成分（例えば孔形成剤）、抗タッキング剤（例えばタルク）、界面活性剤等、又はそれらの組合せ等の追加の薬学的に許容可能な賦形剤を含んでもよい。

機能性コーティングは、機能性コーティングの放出特性に影響する放出改変剤を含む場合がある。放出改変剤は、例えば、孔形成剤又はマトリクス崩壊剤として機能し得る。放出改変剤は、有機又は無機であってもよく、使用される環境においてコーティングから溶解、抽出、又は浸出され得る材料を含む。放出改変剤は、セルロースエーテル、及びヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース又はヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートフタレート等の他のセルロース化合物；ポビドン；ポリビニルアルコール；胃溶性のＥｕｄｒａｇｉｔ ＦＳ ３０Ｄ、ｐＨ感受性のＥｕｄｒａｇｉｔ Ｌ３０Ｄ ５５、Ｌ １００、Ｓ １００、若しくはＬ １００－５５等のアクリルポリマー；又はそれらの組合せを含む、１以上の親水性ポリマーを含んでもよい。他の例示的な放出改変剤として、ポビドン；サッカリド（例えばラクトース等）；ステアリン酸金属；無機塩（例えば第二リン酸カルシウム、塩化ナトリウム等）；ポリエチレングリコール（例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）１４５０等）；糖アルコール（例えばソルビトール、マンニトール等）；アルカリアルキル硫酸塩（例えばラウリル硫酸ナトリウム）；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えばポリソルベート）；又はそれらの組合せが挙げられる。例示的なマトリクス崩壊剤として、不水溶性の有機材料又は無機材料が挙げられる。セルロース、エチルセルロース等のセルロースエーテル、酢酸セルロース、酢酸酪酸セルロース及び酢酸プロピオン酸セルロース等のセルロースエステル、並びにデンプンを含むがこれらに限定されない有機ポリマーは、マトリクス崩壊剤として機能し得る。無機崩壊剤の例として、リン酸一カルシウム、リン酸二カルシウム、及びリン酸三カルシウム等の多くのカルシウム塩、シリカ、及びタルクが挙げられる。

上記コーティング剤は、コーティングの物理的性質を改善するため、任意に可塑剤を含んでもよい。例えば、エチルセルロースは比較的高いガラス転移温度を有し、通常の被覆条件下で可撓性フィルムを形成しないことから、コーティング材料として使用する前にエチルセルロースに可塑剤を添加することが有利な場合がある。一般に、コーティング溶液に含まれる可塑剤の量はポリマーの濃度に基づき、例えば、ポリマーに応じて約１％～約２００％であってもよいが、多くの場合、ポリマーの約１重量％～約１００重量％である。しかしながら、可塑剤の濃度を日常的な実験によって決定することができる。

エチルセルロース及び他のセルロースに対する可塑剤の例として、セバシン酸ジブチル、フタル酸ジエチル、クエン酸トリエチル、クエン酸トリブチル、トリアセチン等の可塑剤、又はそれらの組合せが挙げられるが、他の不水溶性可塑剤（アセチル化モノグリセリド、フタル酸エステル、ヒマシ油等）を使用することができる。

アクリルポリマーに対する可塑剤の例として、クエン酸トリエチルＮＦ、クエン酸トリブチル等のクエン酸エステル、フタル酸ジブチル、１，２－プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、フタル酸ジエチル、ヒマシ油、トリアセチン、又はそれらの組合せが挙げられるが、他の可塑剤（アセチル化モノグリセリド、フタル酸エステル、ヒマシ油等）を使用することができる。

好適な方法を使用して、剤形コアの表面にコーティング材料を塗布することができる。単純コアセルベーション若しくは複合コアセルベーション、界面重合法、液中乾燥法、熱ゲル化法及びイオンゲル化法、噴霧乾燥、噴霧冷却（spray chilling：スプレーチリング）、流動床式コーティング、パンコーティング、又は静電成膜等のプロセスを使用してもよい。

或る特定の実施形態では、任意の中間コーティングを剤形コアと外部コーティングの間に使用する。かかる中間コーティングを使用して、外部コーティングに使用される材料から活性剤若しくはコアサブユニットの他の成分を保護するか、又は他の特性を提供することができる。例示的な中間コーティングとして、典型的には水溶性成膜ポリマーが挙げられる。かかる中間コーティングは、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド等、又はそれらの組合せ等の成膜ポリマーと、可塑剤とを含んでもよい。可塑剤を使用して脆性を減少させ、引張強さ及び弾性を高めることができる。例示的な可塑剤として、ポリエチレングリコールプロピレングリコール及びグリセリンが挙げられる。

併用療法及び交互療法（Alternation Therapy）
薬物耐性は、ウイルス複製で使用される酵素をコードする遺伝子の突然変異によって生じることがある。ＨＣＶ感染に対する併用療法の効力は、併用療法に追加の化合物を追加することにより、延長、増大、又は回復され得る。この更なる併用療法は、異なる突然変異を誘導するか、又は原則の組合せとは異なる経路を通って作用する、別の（おそらくは更に２種又は３種の他の）抗ウイルス化合物と組み合わせて、又は該抗ウイルス剤と交互に施され得る。代替的には、上記組合せの薬物動態、体内分布、半減期、又は他のパラメーターは、そのような併用療法（協調的とみなされる場合は、交互療法を含み得る）によって変更され得る。

本発明は既に、選択されたＮＳ５Ｂ阻害剤をＮＳ５Ａ阻害剤とともに投与することによる、ＨＣＶ又はＨＣＶ感染症に関連する障害の治療のための有利な併用療法を提供している。第３の活性剤、第４の活性剤、又は更に第５の活性剤を共製剤化又は別個の供給のいずれかで追加することによって、追加の治療効果が達成され得る。

化合物１及び化合物１－ＡはＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤であり、かつ化合物２及び化合物２－ＡはＮＳ５Ａ阻害剤であるため、化合物１及び化合物２を、例えば、
（１）プロテアーゼ阻害剤（ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤等）、
（２）別のＮＳ５Ａ阻害剤、
（３）別のＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤、
（４）ＮＳ５Ｂ非基質阻害剤、
（５）ペグ化されてもよく、別の方法で修飾されてもよい、インターフェロンアルファ－２ａ、及び／又はリバビリン、
（６）非基質系阻害剤、
（７）ヘリカーゼ阻害剤、
（８）アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチド（Ｓ－ＯＤＮ）、
（９）アプタマー、
（１０）ヌクレアーゼ耐性リボザイム、
（１１）ｍｉｃｒｏＲＮＡ及びＳｉＲＮＡを含むｉＲＮＡ、
（１２）ウイルスに対する抗体、部分抗体、若しくはドメイン抗体、又は、
（１３）宿主抗体応答を誘導するウイルス性抗原若しくは部分抗原、
と組み合わせて宿主に投与することが有用であり得る。

本発明の組合せと更に組み合わせて又はそれと交互に投与され得る追加の抗ＨＣＶ剤の非限定的な例として、
（ｉ）テラプレビル（インシベック（商標））、ボセプレビル（ビクトレリス（商標））、シメプレビル（オリシオ（商標））、パリタプレビル（ＡＢＴ－４５０）、グレカプレビル（ＡＢＴ－４９３）、リトナビル（ノービア）、ＡＣＨ－２６８４、ＡＺＤ－７２９５、ＢＭＳ－７９１３２５、ダノプレビル、フィリブビル、ＧＳ－９２５６、ＧＳ－９４５１、ＭＫ－５１７２、セトロブビル、ソバプレビル、テゴブビル、ＶＸ－１３５、ＶＸ－２２２、ＡＬＳ－２２０及びボクシラプレビル等のプロテアーゼ阻害剤、
（ｉｉ）ＡＣＨ－２９２８、ＡＣＨ－３１０２、ＩＤＸ－７１９、ダクラタスビル、レジスパスビル、ベルパタスビル（エプクルーサ）、エルバスビル（ＭＫ－８７４２）、グラゾプレビル（ＭＫ－５１７２）、及びオムビタスビル（ＡＢＴ－２６７）等のＮＳ５Ａ阻害剤、
（ｉｉｉ）ＡＺＤ－７２９５、クレミゾール、ダサブビル（Ｅｘｖｉｅｒａ）、ＩＴＸ－５０６１、ＰＰＩ－４６１、ＰＰＩ－６８８、ソホスブビル（ソバルディ（商標））、ＭＫ－３６８２、及びメリシタビン等のＮＳ５Ｂ阻害剤、
（ｉｖ）ＡＢＴ－３３３、及びＭＢＸ－７００等のＮＳ５Ｂ阻害剤、
（ｖ）ＧＳ－６６２４等の抗体、
（ｖｉ）ハーボニー（レジパスビル／ソホスブビル）、ヴィキラパック（オムビタスビル／パリタプレビル／リトナビル／ダサブビル）、ヴィキラックス（オムビタスビル／パリタプレビル／リトナビル）、Ｇ／Ｐ（パリタプレビル及びグレカプレビル）、テクニヴィ（商標）（オムビタスビル／パリタプレビル／リトナビル）、エプクルーサ（ソホスブビル／ベルパタスビル）、ゼパティア（エルバスビル及びグラゾプレビル）、マヴィレット（グレカプレビル及びピブレンタスビル）、及びヴォセヴィ（ソホスブビル、ベルパタスビル及びボクシラプレビル）等の併用薬物、
が挙げられる。

上記組合せが、肝臓癌又は肝硬変に結びつく進行性のＣ型肝炎ウイルスを治療するため投与される場合、一実施形態では、例えば、"New Agents on the Horizon in Hepatocellular Carcinoma" Therapeutic Advances in Medical Oncology, V 5(1), (January 2013), 41-50にてAndrew Zhuによって説明されるように、肝細胞癌（ＨＣＣ）を治療するために典型的に使用される別の薬物と、上記化合物を組み合わせて、又は該化合物と交互に投与することができる。宿主がＨＣＣを有するか、又はそのリスクにある場合の併用療法に適した化合物の例として、抗血管形成剤、スニチニブ、ブリバニブ、リニファニブ、ラムシルマブ、ベバシズマブ、セジラニブ、パゾパニブ、ＴＳＵ－６８、レンバチニブ、ＥＧＦＲに対する抗体、ｍＴｏｒ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、及びヒストンデアセチラーゼ阻害剤、カペシタビン、シスプラチン、カルボプラチン、ドキソルビシン、５－フルオロウラシル、ゲムシタビン、イリノテカン、オキサリプラチン、トポテカン、並びにその他のトポイソメラーゼが挙げられる。

一般的な方法
^１Ｈ、^１９Ｆ及び^３１Ｐ ＮＭＲスペクトルを、４００ＭＨｚ フーリエ変換ブルカー分光計で記録した。別段の規定がない限り、スペクトルは、ＤＭＳＯ－ｄ_６で得られた。スピン多重度は、記号ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｍ（マルチプレット）及びｂｒ（ブロード）で表示される。カップリング定数（Ｊ）は、Ｈｚで報告する。反応は概して、Sigma-Aldrich社の無水溶媒を使用して、乾燥窒素雰囲気下で実施した。一般的な化学物質は全て、商業的供給源から購入した。

以下の略語を実施例で使用する。
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ＧＴ：遺伝子型
ＨＰＬＣ：高圧液体クロマトグラフィー
ＮａＯＨ：水酸化ナトリウム
Ｎａ_２ＳＯ_４：硫酸ナトリウム（無水）
ＭｅＯＨ：メタノール
Ｎａ_２ＳＯ_４：硫酸ナトリウム
ＮＨ_４Ｃｌ：塩化アンモニウム
ＰＥ：石油エーテル
シリカゲル（２３０～４００メッシュ、Ｓｏｒｂｅｎｔ）
ｔ－ＢｕＭｇＣｌ：ｔ－ブチルマグネシウムクロリド
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、無水
ＴＰ：トリホスフェート

実施例１．化合物１の合成

工程１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－（メチルアミノ）－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－２－（ヒドロキシメチル）－４－メチルテトラヒドロフラン－３－オール（１－２）の合成
５０Ｌのフラスコに、メタノール（３０Ｌ）を入れて、１０±５℃で撹拌した。ＮＨ_２ＣＨ_３（３．９５Ｋｇ）を、１０±５℃で反応器へ徐々に通気した。化合物１－１（３．７７ｋｇ）を２０±５℃で数回に分けて添加して、１時間撹拌して、透明な溶液を得た。反応物を更に６時間～８時間撹拌し、その時点で、ＨＰＬＣにより、中間体が溶液の０．１％未満であることが示された。反応器に固体ＮａＯＨ（２５４ｇ）を入れて、３０分間撹拌して、５０±５℃で濃縮した（真空度：－０．０９５）。得られた残渣にＥｔＯＨ（４０Ｌ）を入れて、６０℃で１時間、再度スラリー状にした。次に、混合物をセライトに通して濾過し、フィルターケークを、ＥｔＯＨ（１５Ｌ）を用いて、６０℃で１時間、再度スラリー状にした。濾液をもう一度濾過して、先の濾過からの濾液と組み合わせて、続いて、５０±５℃で濃縮した（真空度：－０．０９５）。大量の固体が沈殿した。ＥｔＯＡｃ（６Ｌ）を固体残渣に添加して、混合物を５０±５℃で濃縮した（真空度：－０．０９５）。続いて、ＤＣＭを残渣に添加して、混合物を還流下で１時間、再度スラリー状にして、室温に冷却して、濾過して、真空炉中で５０±５℃で乾燥させて、化合物１－２をオフホワイト色固体として得た（１．８９Ｋｇ、９５．３％、純度９９．２％）。

工程２：イソプロピル（（Ｓ）－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（２－アミノ－６－（メチルアミノ）－９Ｈ－プリン－９－イル）－４－フルオロ－３－ヒドロキシ－４－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）－Ｌ－アラニネート（化合物１）の合成
化合物１－２及び化合物１－３（イソプロピル（（パーフルオロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）－Ｌ－アラニネート）をＴＨＦ（１Ｌ）中に溶解して、窒素下で撹拌した。次に、懸濁液を－５℃未満の温度に冷却して、温度５℃～１０℃を維持しながら、ｔ－ＢｕＭｇＣｌ溶液の１．７Ｍ溶液（３８４ｍＬ）を１．５時間かけて徐々に添加した。ＮＨ_４Ｃｌ（２Ｌ）及び水（８Ｌ）の溶液を、続いてＤＣＭを、室温で懸濁液に添加した。混合物を５分間撹拌した後、Ｋ_２ＣＯ_３の５％水溶液（１０Ｌ）を添加して、混合物を更に５分間撹拌し、その後、珪藻土（５００ｇ）に通して濾過した。珪藻土をＤＣＭで洗浄して、濾液を分離した。有機相を、５％Ｋ_２ＣＯ_３水溶液（１０Ｌ×２）、ブライン（１０Ｌ×３）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（５００ｇ）でおよそ１時間乾燥させた。その間に、このプロセス全体を並行して７回繰り返し、８個のバッチを組み合わせた。有機相を濾過して、４５±５℃で濃縮した（真空度０．０９ＭＰａ）。ＥｔＯＡｃを添加して、混合物を６０℃で１時間、続いて室温で１８時間撹拌した。次に、混合物を濾過して、ＥｔＯＡｃ（２Ｌ）で洗浄して、粗製化合物１を得た。粗製材料をＤＣＭ（１２Ｌ）中に溶解して、ヘプタン（１８Ｌ）を１０℃～２０℃で添加して、混合物をこの温度で３０分間撹拌させた。混合物を濾過し、ヘプタン（５Ｌ）で洗浄し、５０±５℃で乾燥させて、純粋な化合物１（１６５０ｇ、６０％）を得た。

非晶質化合物１：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.01 - 1.15 (m, 9 H), 1.21 (d, J=7.20 Hz, 3 H), 2.75-3.08 (m, 3 H), 3.71 - 3.87 (m, 1 H), 4.02 - 4.13 (m, 1 H), 4.22 - 4.53 (m, 3 H), 4.81 (s, 1 H), 5.69 - 5.86 (m, 1 H), 6.04 (br d, J=19.33 Hz, 4 H), 7.12 - 7.27 (m, 3 H), 7.27 - 7.44 (m, 3 H), 7.81 (s, 1 H)

結晶性化合物１：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.97 - 1.16 (m, 16 H), 1.21 (d, J=7.07 Hz, 3 H), 2.87 (br s, 3 H), 3.08 (s, 2 H), 3.79 (br d, J=7.07 Hz, 1 H), 4.08 (br d, J=7.58 Hz, 1 H), 4.17 - 4.55 (m, 3 H), 4.81 (quin, J=6.25 Hz, 1 H), 5.78 (br s, 1 H), 5.91 - 6.15 (m, 4 H), 7.10 - 7.26 (m, 3 H), 7.26 - 7.44 (m, 3 H), 7.81 (s, 1 H)

実施例２．化合物１－Ａの合成

２５０ｍＬのフラスコに、ＭｅＯＨ（１５１ｍＬ）を入れて、溶液を０℃～５℃に冷却した。濃Ｈ_２ＳＯ_４溶液を、１０分かけて滴加した。別のフラスコに化合物１（１５１ｇ）及びアセトン（９１０ｍＬ）を入れて、Ｈ_２ＳＯ_４／ＭｅＯＨ溶液を、２５℃～３０℃で２．５時間かけて滴加した。大量の固体が沈殿した。溶液を２５℃～３０℃で１２時間～１５時間撹拌した後、混合物を濾過して、ＭｅＯＨ／アセトン（２５ｍＬ／１５０ｍＬ）で洗浄して、５５℃～６０℃で、真空中で乾燥させて、化合物１－Ａ（１２１ｇ、７４％）を得た。¹HNMR: (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.41 (br, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.36 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 2H ), 7.17 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.73 (s, 2H), 6.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.00 (dd, J = 12.0, 8.0 Hz, 1H), 5.81(br, 1H), 4.84-4.73 (m, 1H), 4.44-4.28 (m, 3H), 4.10 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.85-3.74 (m, 1H), 2.95 (s, 3H), 1.21 (s, J = 4.0 Hz, 3H), 1.15-1.10 (m, 9H).

実施例３．化合物２の塩の調査
表１に示されるように、化合物２の塩の調査に１６種の酸（４種の無機酸及び１２種の有機酸）を使用した。遊離塩基（０．１ｇ～１ｇ）を溶媒（１ｍＬ～１０ｍＬ）に添加し、混合物を４０℃～８０℃に加熱した。酸を添加し、３０分間～１時間撹拌した後に、混合物をゆっくり５±５℃に冷却した。冷却後に、混合物は、透明な液体、粘性の油状物、又は沈殿した固体のいずれかであった。沈殿した固体を濾過し、減圧下で乾燥させ、ＸＰＲＤにより特性評価した。

幾つかのアルコール固体（ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、及びｉ－ＰｒＯＨ）を試したにもかかわらず、全ての有機酸により非晶質固体又は油状物が得られた。結晶性固体が得られた３つの酸は、二ヘミ硫酸（di-hemisulfate）、二ＨＢｒ、及び二ＨＮＯ_３であったが、これらの酸のそれぞれについての結晶性固体は特定の溶媒を使用した場合にしか得られなかった。例えば、二ヘミ硫酸塩の結晶化の調査は、ｉ－ＰｒＯＨ、ＥｔＯＨ、ＣＨ_３ＣＮ、ＭｅＯＨ／ｉ－ＰｒＯＨ、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、及びＭｅＯＨを用いて実施されたが、ＭｅＯＨにおける試験でのみ結晶性固体が得られた。さらに、ｉ－ＰｒＯＨ、ＥｔＯＨ、Ｈ_２Ｏ、及びアセトン中での他の研究にもかかわらず、ＣＨ_３ＣＮにおける試験でのみ二硝酸塩の結晶性固体が得られ、二臭化水素酸塩はｉ－ＰｒＯＨの存在下で結晶化したにすぎず、Ｈ_２Ｏの存在下では結晶化しなかった。

二ヘミ硫酸塩の結晶性固体は、本発明の組合せの薬物開発に好ましい固体である。

化合物２の二ヘミ硫酸塩、二ＨＢｒ、及び二ＨＮＯ_３の結晶性固体についての手順及びＸＲＰＤ特性評価は以下の通りである。

二ヘミ硫酸塩の化合物２－Ａ

遊離塩基（１ｇ）を６ｍＬのメタノール中に溶解し、混合物を４５±５℃に加熱した。Ｈ_２ＳＯ_４（０．１２５ｇ、１当量）を４５±５℃で撹拌しながら１時間かけて添加し、混合物を５±５℃に冷却した。得られた固体を濾過し、減圧下で乾燥させることで、０．９７ｇの結晶性固体の化合物２－Ａが得られた（収率：８６％）。ＸＲＰＤパターンのピークは表２に示されている。ＸＲＰＤパターンは図１Ａに示されており、ＤＳＣは図１Ｂに示されている。

二硝酸塩の化合物２－Ｂ

遊離塩基（１ｇ）を１０ｍＬのアセトニトリル中に溶解し、混合物を７０±５℃に加熱した。６５％のＨＮＯ_３（０．２５ｇ、２当量）を７０±５℃で撹拌しながら０．５時間かけて添加し、混合物を５±５℃に冷却した。得られた固体を濾過し、減圧下で乾燥させることで、０．９５ｇの結晶性固体の化合物２－Ｂが得られた（収率：８２％）。ＸＲＰＤパターンのピークは表３に示されており、ＸＲＰＤパターンは図２に示されている。

二臭化水素酸塩の化合物２－Ｃ

遊離塩基（０．５ｇ）をｉ－ＰｒＯＨ（５ｍＬ）に添加し、混合物を６０℃～７０℃に加熱した。４８％の水性臭化水素酸（０．２４ｇ、２当量）をこの温度で撹拌しながら１時間かけて添加した後に、混合物を５±５℃に冷却した。得られた固体を濾過し、減圧下で乾燥させることで、０．４８ｇの結晶性固体の化合物２－Ｃが得られた（収率：７６％）。ＸＲＰＤパターンのピークは表４に示されており、ＸＲＰＤパターンは図３に示されている。

実施例４．化合物２及び化合物２－Ａの合成

工程１：反応器に化合物２－１（６ｋｇ）及びトルエン（４６．８ｋｇ）を入れ、混合物を７０±５℃に加熱した後に、活性炭（０．６ｋｇ）を添加し、混合物を６０分間撹拌した。次いで、混合物を濾過し、得られたケークをトルエン（５ｋｇ）で洗浄した。濾液を２５±５℃に冷却した。プラスチック製ドラムにＫ_３ＰＯ_４（５．４ｋｇ）及び水道水（１２ｋｇ）（溶液Ａ）を入れ、混合物を撹拌した。次いで、反応器に溶液Ａ、９６％のエタノール（９．６ｋｇ）、化合物２－２（５．４ｋｇ）、及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２ＣＨ_２Ｃｌ_２（０．１８ｋｇ）を入れ、反応混合物を７０±５℃に３０時間加熱した。Ｎ－アセチル－Ｌ－システイン（０．４２ｋｇ）を７０±５℃で添加した後に、溶液を０℃～５℃に冷却し、１時間～２時間撹拌した。次いで、反応物を遠心分離に供し、得られたケークをトルエン（５ｋｇ）で洗浄した。湿潤材料をメタノール（２４ｋｇ）に添加し、混合物を１時間にわたり加熱還流させた。次いで、混合物を２５±５℃に冷却し、３０分間撹拌した。混合物をもう一度遠心分離に供し、得られたケークをメタノール（５ｋｇ～１０ｋｇ）で洗浄した。乾燥減量（ＬＯＤ）が３．０％以下になるまで湿潤材料を６０±５℃で乾燥させることで、７．２ｋｇの化合物２－３が得られた。収率１２０．０％（重量／重量）。

工程２：反応器に水道水（２１ｋｇ）、イソプロパノール（５．６ｋｇ）、及び化合物２－３（７ｋｇ）を入れ、混合物を７０±５℃に加熱した。塩酸（６．３ｋｇ）を７０±５℃でゆっくりと添加し、反応物を１時間～２時間撹拌した。活性炭（０．７ｋｇ）を７０±５℃で添加し、反応物を６０分間撹拌した。次いで、混合物を濾過し、得られたケークを水道水（５ｋｇ）で洗浄した。イソプロパノール（８２．６ｋｇ）を７０±５℃で添加し、反応物を１時間～２時間撹拌した。溶液を０℃～５℃に冷却し、３０分間撹拌した。次いで、反応物を遠心分離に供し、得られたケークをイソプロパノール（５ｋｇ）で洗浄した。乾燥減量（ＬＯＤ）が３．０％以下になるまで湿潤材料を６０±５℃で乾燥させることで、５．３５ｋｇの化合物２－４が得られた。収率７６．４％（重量／重量）。

工程３：反応器にＤＣＭ（８４．２７ｋｇ）、ＨＯＢＴ（２．９２ｋｇ）、Ｍｏｃ－Ｌ－Ｖａｌ－ＯＨ（３．６６ｋｇ）及びＥＤＣＬ（３．９８ｋｇ）を入れ、得られた溶液を撹拌した。化合物２－４（５．３ｋｇ）を添加し、混合物を－２０±１０℃に冷却した。混合物を更に－１０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡ（９．５４ｋｇ）を添加した。反応物を－２０±１０℃で２時間～３時間撹拌した。次いで、混合物を２５±５℃に加熱し、水道水（１５．９ｋｇ）を添加した。反応物を１０分間～２０分間撹拌した。有機層と水層とを分離し、水道水（１５．９ｋｇ）を有機相に添加した。温度を２５±５℃で調節した後に、塩酸（１．５９ｋｇ）を添加して、ｐＨをおよそ５～６に到達させた。有機層を水層から分離した後に、水道水（１５．９ｋｇ）を有機相に添加した。混合物を１０分間～２０分間撹拌した。得られた相を再び分離し、有機相を１０％のＮａ_２ＣＯ_３溶液（３．１８ｋｇ）で２回、そして水道水（４４．５２ｋｇ）で１回洗浄した。有機相を６０℃未満の温度及び－０．０８ＭＰａ未満の真空で濃縮乾固した。次に、メタノール（２５．６ｋｇ）を添加し、得られた溶液を撹拌した後に、Ｈ_２ＳＯ_４（１．６９ｋｇ）を５０±５℃でゆっくりと添加し、反応物を５０±５℃で１時間～２時間撹拌した。この溶液を２５±５℃に冷却し、水道水（１０．６ｋｇ）を添加した後に、Ｎａ_２ＣＯ_３（１．８３ｋｇ）を添加して、ｐＨをおよそ８～９に到達させた。混合物を６０℃未満の温度及び－０．０８ＭＰａ未満の真空で濃縮してメタノールを除去した。反応物に酢酸エチル（６３．６ｋｇ）及び水道水（１５．９ｋｇ）を入れ、３０分間撹拌した。次いで、有機相と水相とを分離し、有機相を水道水（１５．９ｋｇ）で洗浄し、６０℃未満の温度及び－０．０８ＭＰａ未満の真空で濃縮乾固した。酢酸エチル（２８．６２ｋｇ）を添加し、混合物を撹拌することで、化合物２の酢酸エチル溶液が得られた。この溶液をｎ－ヘキサン（６３．０７ｋｇ）中にゆっくりと添加し、得られた混合物を２５±５℃で１時間撹拌し、遠心分離した。得られたケークを酢酸エチル（２ｋｇ）及びｎ－ヘキサン（６ｋｇ）の混合物で洗浄し、乾燥減量（ＬＯＤ）が５．０％以下になるまで湿潤材料を６０±５℃で乾燥させることで、６．１ｋｇの化合物２が得られた。収率１１５．１％（重量／重量）。

工程４：反応器にメタノール（１４ｋｇ）及び化合物２（５．８ｋｇ）を入れ、混合物を３５±５℃に加熱した。活性炭（０．１４５ｋｇ）を３５±５℃で添加し、混合物を３０分間撹拌した後に濾過した。得られたケークをメタノール（５ｋｇ）で洗浄した。濾液の温度を５５±５℃にし、Ｈ_２ＳＯ_４（０．７６５ｋｇ）を添加した。反応物を６５±５℃で２時間撹拌した後に、２５±５℃に冷却し、１０時間撹拌した。酢酸エチル（１５．７ｋｇ）を反応器に添加し、混合物を２時間撹拌した後に遠心分離した。得られたケークをメタノール（５ｋｇ）で洗浄し、乾燥減量（ＬＯＤ）が５．０％以下になるまで湿潤材料を６０±５℃で乾燥させることで、５．６ｋｇの化合物２－Ａが得られた。収率９６．５５％（重量／重量）。

化合物２－Ａを、ＸＲＰＤ（図１Ａ）及び示差走査熱量測定（ＤＳＣ）（図１Ｂ）に加えて、^１ＨＮＭＲ、^１３ＣＮＭＲ、ＦＩ－ＩＲ、及び質量スペクトルによって特性決定した。吸湿性は、２５±１℃／８０±２％ＲＨに設定された気候調節キャビネット（climatic cabinet）内に試料を２４時間置くことにより測定した。水分含有量は３．３％から９．４％に増加した。

実施例５．化合物２－Ａの安定性
化合物２－Ａの安定性は、３つの異なる条件下で測定された：１）開放容器、２）ＰＥバッグ／ＡＬＵバッグ（ＰＥバッグはクリップで閉じられ、ＡＬＵバッグはサーモスシーリング（thermos-sealing）で密封されている）、及び３）乾燥剤入りのＰＥバッグ／ＡＬＵバッグ（ＰＥバッグはプラスチッククリップで閉じられ、ＡＬＵバッグはサーモスシーリングで密封されており、１０ｇのシリカゲルがこれらのバッグの間に入れられている）。開放容器の条件を２つの異なるバッチの化合物２－Ａで実施した。安定性研究の結果は、表５Ａ、表５Ｂ、表６、及び表７に示されている。化合物２－Ａの水分含有量はゆっくりと増加し、２５℃／６０％ＲＨ及び４０℃／７５％ＲＨでは純度は変化しなかった。

実施例６．ＨＣＶレプリコンに対する化合物１－Ａ及び化合物２の組合せのｉｎ ｖｉｔｒｏ阻害効果
それぞれの種類のＨＣＶレプリコン（ＧＴ１ａ、ＧＴ１ｂ、及びＧＴ１ｂ＿３ａ－ＮＳ５Ｂ）についての化合物１－Ａ及び化合物２の個々のＥＣ_５０値を最初に決定した。Ｈｕｈ７細胞を、１０％ＦＢＳ、１％ＮＥＡＡ、１％Ｌ－グルタミン及び１％ペニシリン－ストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ中で維持した。レプリコンＤＮＡコンストラクトからｉｎ ｖｉｔｒｏで転写されたＨＣＶレプリコンＲＮＡ転写物をＨｕｈ７細胞にトランスフェクションすることによって、安定なＨＣＶ ＧＴ１ａ及びＨＣＶ ＧＴ１ｂのレプリコン細胞を作製し、２５０μｇ／ｍｌのＧ４１８で選択した。ＧＴ１ｂレプリコンを骨格として用いて、ＧＴ１ｂ／３ａ ＮＳ５Ｂキメラレプリコンを構築した。レプリコンプラスミドＤＮＡを使用して、ＧＴ１ｂ／３ａ ＮＳ５ＢレプリコンＲＮＡをｉｎ ｖｉｔｒｏで転写し、それを使用してエレクトロポレーションによってＨｕｈ７細胞を一過性にトランスフェクションさせた。

化合物１－Ａ及び化合物２のストック溶液（２０ｍＭ）を１００％のＤＭＳＯ中で調製した。細胞培養培地中のＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であった。安定的にトランスフェクションされたＧＴ１ａレプリコン及びＧＴ１ｂレプリコン並びに一過性にトランスフェクションされたＧＴ１ｂ／３ａ ＮＳ５Ｂキメラレプリコンにおいて、１００００ｎＭから開始して連続した４倍希釈による９つの濃度で、化合物を個々にそれらの阻害活性について２連で試験した。連続希釈された化合物を含む９６ウェルプレートにレプリコン細胞を播種し（ＧＴ１ａ及びＧＴ１ｂでは８０００細胞／ウェル、ＧＴ１ｂ／３ａ ＮＳ５Ｂでは１００００細胞／ウェル）、３７℃及び５％のＣＯ_２で３日間培養した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｆｌｕｏｒを使用して蛍光シグナルを検出し、生データ（ＲＦＵ）を使用して、以下の式：
％生存率＝（ＣＰＤ－ＨＰＥ）（ＺＰＥ－ＨＰＥ）×１００
（式中、ＣＰＤは試験化合物を含むウェルからのシグナルであり、ＺＰＥはＤＭＳＯコントロールウェルからのシグナルの平均であり、ＨＰＥは培地コントロールウェルからのシグナルの平均である）を用いて細胞生存率を計算した。Ｂｒｉｔｅｌｉｔｅ ｐｌｕｓを使用して発光シグナルを検出し、生データ（ＲＬＵ）を使用して、以下の式：
％阻害＝（ＣＰＤ－ＺＰＥ）
を用いて化合物の抗ウイルス活性（％阻害）を計算した。

ＣｏｍｐｕＳｙｎソフトウェア（ComboSyn, Inc.、ニュージャージー州パラマス）を使用してデータを分析し、５０％の細胞毒性（ＣＣ_５０）並びに５０％抗ウイルス効力（ＥＣ_５０）及び９０％抗ウイルス効力（ＥＣ_９０）を達成するのに必要とされる個々の化合物の濃度を得た。これらの値は表８に示されている。

ウイルス複製の阻害の程度に対する化合物１－Ａ及び化合物２の組合せの効果を、上記の方法を使用して０．１２５倍、０．２５倍、１倍、２倍、４倍、及び８倍の各ＨＣＶ遺伝子型についての個々のＥＣ_５０値の比（Lowe相加性モデル）の存在下で決定した。化合物の試験濃度は、ＥＣ_５０値の０．１２５倍、０．２５倍、０．５倍、１倍、２倍、４倍、及び８倍であった。化合物の試験濃度は表９に示されている。細胞培養培地中のＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であった。

また、ＣｏｍｐｕＳｙｎを使用して、２つの化合物の組合せの厳密に相加的な抗ウイルス効果と仮定して各遺伝子型についての予想される９０％阻害レベルのプロット（アイソボログラム）を作成し、各遺伝子型についての個々のＥＣ_５０値の比での併用した場合に９０％の抗ウイルス効果を達成するのに必要とされるそれぞれの個々の化合物の濃度を表す値（９０％阻害時の組合せ指数；ＣＩ_９０）を得てアイソボログラム上にプロットした。Lowe相加性モデルによると、１に等しいＣＩ値（アイソボログラム上にある）、１より大きいＣＩ値（アイソボログラムの上側にある）、及び１未満のＣＩ値（アイソボログラムの下側にある）は、それぞれ、相加的、拮抗的、及び相乗的である２つの化合物の組合せの効果を表す。

ＣＩは全ての試験された遺伝子型について１未満であったことから、相乗的な組合せ効果が示される。３つの遺伝子型（ＧＴ１ａ、ＧＴ１ｂ、及びＧＴ１ｂ＿３ａ－ＮＳ５Ｂ）についてのＣＩは表１０に示されている。

ＧＴ１ａ、ＧＴ１ｂ、及びＧＴ１ｂ＿３ａ－ＮＳ５Ｂについてのアイソボログラムは、それぞれ図４Ａ、図４Ｂ、及び図４Ｃに示されている。ｘ軸は、９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物２の濃度を表し、ｙ軸は、９０％阻害を達成するのに必要とされる化合物１－Ａの濃度を表す。化合物１－Ａ単独が９０％阻害を達成する用量がプロットされており、化合物２単独が９０％阻害を達成する用量がプロットされている。次にこれらの２つの点を結ぶことで、相加性の線が形成される。組み合わせて使用することにより同じ効果（すなわち、９０％阻害）がもたらされる化合物１－Ａ及び化合物２の濃度もプロットし、星印（＊）により表す。これらの各アイソボログラムにおいて、星印は相加性の線より下側にあることから、改めて相乗効果が示される。

実施例６では、エレクトロポレーションによってＨｕｈ７細胞をレプリコンＲＮＡにより一過性にトランスフェクションし、９６ウェルプレートに１００００細胞／ウェルの密度で播種した。ＨＣＶ ＧＴ１ａ及びＧＴ１ｂのレプリコンの安定な細胞を、９６ウェルプレートに８０００細胞／ウェルの密度で播種した。細胞を培養し、３７℃及び５％ＣＯ_２で３日間にわたり化合物で処理した。

ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｆｌｕｏｒを用いて、供給元により提供されたプロトコルに従って細胞生存率を評価した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｆｌｕｏｒ試薬をウェルに加えて、５％ＣＯ_２及び３７℃で１時間インキュベートした。蛍光シグナルをＥｎｖｉｓｉｏｎで測定した。生の蛍光シグナルデータ（ＲＦＵ）を使用して、上記の式を用いて細胞生存率を計算した。

Ｂｒｉｔｅｌｉｔｅ ｐｌｕｓを使用して、供給元により提供されたプロトコルに従って、レプリコンレポーターのホタルルシフェラーゼの活性をモニタリングすることにより、化合物の抗ウイルス活性を決定した。ＭａｃＳｙｎｅｒｇｙ（商標）ＩＩソフトウェア（Prichard and Shipman、1990）を使用して、組合せ指数を計算した。正の組合せ指数値は相乗作用を示し、負の組合せ指数値は拮抗作用を示す。

実施例７．固体投薬製剤（dosage formulations）の非限定的な例
化合物１－Ａ及び化合物２－Ａの錠剤（６０ｍｇ及び１００ｍｇ）についての代表的な非限定的なバッチの配合は表１１及び表１２に示されている。錠剤は、直接圧縮法を使用して共通のブレンドから製造される。医薬品有効成分（ＡＰＩ）は、現状でのアッセイ（as-is assay）に基づいて調整され、微結晶性セルロースのパーセンテージの調整が行われる。化合物１－Ａ及び賦形剤（微結晶性セルロース、乳糖一水和物、及びクロスカルメロースナトリウム）を篩いにかけ、Ｖ型混合機（ＰＫ Ｂｌｅｎｄｍａｓｔｅｒ、０．５Ｌのボウル）に入れ、２５ｒｐｍで５分間混合する。次いで、ステアリン酸マグネシウムを篩いにかけて添加した後に、化合物２－Ａを添加する。共通のブレンドを分割して、６０ｍｇ錠剤及び１００ｍｇ錠剤の製造に使用する。次いで、滑沢剤を加えたブレンドを、シングルパンチの研究用打錠機（KorschのＸＰ１）及び重力式粉末フィーダーを使用して１０個の錠剤／分の速度で圧縮する。６０ｍｇ錠剤は、６ｍｍの丸形の標準的な凹面の工具及び３．５ｋＮの力を使用して製造される。１００ｍｇ錠剤は、８ｍｍの丸形の標準的な凹面の工具及び３．９ｋＮ～４．２ｋＮの力を使用して製造される。

本明細書は本発明の実施形態を参照して記載されている。しかしながら、添付の特許請求の範囲に記載されるような本発明の範囲を逸脱することなく、様々な修正及び変更を行うことができることが当業者には理解される。したがって、本明細書は限定的意味ではなく例示的意味で考えられ、全てのかかる修正が本発明の範囲に含まれることが意図される。

Claims (60)

1. 有効量の化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び有効量の化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬剤形：
   

   
2. 化合物１は、化合物１－Ａ：
   

   

   である、請求項１に記載の医薬剤形。
3. 化合物２は、化合物２－Ａ：
   

   

   である、請求項１又は２に記載の医薬剤形。
4. 前記有効量の化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び前記有効量の化合物２又はその薬学的に許容可能な塩は、単一の固定剤形で投与される、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬剤形。
5. 前記剤形は、経口送達に適している、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬剤形。
6. 前記剤形は、錠剤である、請求項５に記載の医薬剤形。
7. 前記剤形は、カプセル剤である、請求項５に記載の医薬剤形。
8. 組成物は、非経口送達、静脈内送達、筋肉内送達、局所送達、経皮送達、バッカル送達、皮下送達、及び坐剤送達から選択される送達に適した剤形で存在する、請求項１～７のいずれか一項に記載の医薬剤形。
9. 式：
   

   

   の化合物２－Ａ。
10. 固体形である、請求項９に記載の化合物２－Ａ。
11. 実質的に結晶形である、請求項９又は１０に記載の化合物２－Ａ。
12. ７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される少なくとも５個の２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする、化合物２－Ａ：
    

    

    の単離結晶形。
13. ７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される少なくとも６個の２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする、請求項１２に記載の化合物２－Ａの単離結晶形。
14. ７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される少なくとも７個の２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする、請求項１２に記載の化合物２－Ａの単離結晶形。
15. 前記Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される２θ値を含む、請求項１２に記載の化合物２－Ａの単離結晶形。
16. 前記Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、少なくとも７．３±０．２°の２θ値を含む、請求項１２に記載の化合物２－Ａの単離結晶形。
17. 前記Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、少なくとも１８．２±０．２°の２θ値を含む、請求項１２に記載の化合物２－Ａの単離結晶形。
18. 前記Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、少なくとも１４．７±０．２°の２θ値を含む、請求項１２に記載の化合物２－Ａの単離結晶形。
19. 化合物２－Ａは、７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする単離結晶形である、請求項１～８のいずれか一項に記載の医薬剤形。
20. 化合物２－Ａは、７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される少なくとも５個の２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする単離結晶形である、請求項１～８のいずれか一項に記載の医薬剤形。
21. 化合物１又はその薬学的に許容可能な塩を含む剤形と、化合物２又はその薬学的に許容可能な塩を含む剤形とを含むキット。
22. 化合物１は、化合物１－Ａである、請求項２１に記載のキット。
23. 化合物２は、化合物２－Ａである、請求項２１又は２２に記載のキット。
24. 治療を必要とする患者におけるＣ型肝炎感染症を治療する方法であって、有効量の化合物１又はその薬学的に許容可能な塩を、有効量の化合物２又はその薬学的に許容可能な塩と組み合わせて投与することを含む、方法。
25. 化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の重複するＡＵＣ薬物動態をもたらす、請求項２４に記載の方法。
26. 化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩は、相乗効果をもたらす、請求項２４に記載の方法。
27. 化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩は、単一の固定剤形で投与される、請求項２４～２６のいずれか一項に記載の方法。
28. 化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び化合物２又はその薬学的に許容可能な塩は、別個の剤形で投与される、請求項２４～２６のいずれか一項に記載の方法。
29. 化合物１は、化合物１－Ａである、請求項２４～２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 化合物２は、化合物２－Ａである、請求項２４～２９のいずれか一項に記載の方法。
31. 化合物２－Ａは、７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする単離結晶形である、請求項３０に記載の方法。
32. 治療期間は、２４週間以内である、請求項２４～３１のいずれか一項に記載の方法。
33. 治療期間は、１２週間以内である、請求項２４～３１のいずれか一項に記載の方法。
34. 治療期間は、８週間以内である、請求項２４～３１のいずれか一項に記載の方法。
35. 前記患者は、肝硬変である、請求項２４～３４のいずれか一項に記載の方法。
36. 前記患者は、非肝硬変である、請求項２４～３４のいずれか一項に記載の方法。
37. ＨＣＶは、遺伝子型１を含む、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。
38. 前記ＨＣＶは、遺伝子型１ａを含む、請求項３７に記載の方法。
39. 前記ＨＣＶは、遺伝子型１ｂを含む、請求項３７に記載の方法。
40. ＨＣＶは、遺伝子型２を含む、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。
41. ＨＣＶは、遺伝子型３を含む、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。
42. 前記ＨＣＶは、遺伝子型３ａを含む、請求項４１に記載の方法。
43. 前記ＨＣＶは、遺伝子型３ｂを含む、請求項４１に記載の方法。
44. ＨＣＶは、遺伝子型４を含む、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。
45. ＨＣＶは、遺伝子型５を含む、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。
46. ＨＣＶは、遺伝子型６を含む、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。
47. 組成物は、汎遺伝子型の効力を示す、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。
48. 組成物は、投与期間の間に１日１回で投与される、請求項２４～４７のいずれか一項に記載の方法。
49. 化合物１は、１日当たり約５５０ｍｇの量で投与される、請求項２４～４８のいずれか一項に記載の方法。
50. 化合物１－Ａは、１日当たり約６００ｍｇの量で投与される、請求項２４～４８のいずれか一項に記載の方法。
51. 化合物２は、１日当たり約６０ｍｇの量で投与される、請求項２４～５０のいずれか一項に記載の方法。
52. 化合物２－Ａは、１日当たり約６７ｍｇの量で投与される、請求項２４～５０のいずれか一項に記載の方法。
53. ＨＣＶを治療するのに使用される、化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び有効量の化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の単一の固定剤形。
54. 化合物１は、化合物１－Ａである、請求項５３に記載の単一の固定剤形。
55. 化合物２は、化合物２－Ａである、請求項５３又は５４に記載の単一の固定剤形。
56. 化合物２－Ａは、７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする単離結晶形である、請求項５５に記載の単一の固定剤形。
57. Ｃ型肝炎感染症の治療用の医薬の製造における、有効量の化合物１又はその薬学的に許容可能な塩及び有効量の化合物２又はその薬学的に許容可能な塩の固定剤形の使用。
58. 化合物１は、化合物２－１である、請求項５７に記載の使用。
59. 化合物２は、化合物２－Ａである、請求項５７又は５８に記載の使用。
60. 化合物２－Ａは、７．３±０．２°、７．９±０．２°、１２．０±０．２°、１２．２±０．２°、１４．７±０．２°、１５．８±０．２°、１６．１±０．２°、１６．５±０．２°、１８．２±０．２°、及び２２．７±０．２°から選択される２θ値を含むＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする単離結晶形である、請求項５９に記載の使用。

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