JP2022500358A - 動物用飼料組成物及びその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、コンピュータ可読形態の配列表を含有し、これは、本明細書において援用される。
[発明の分野]
本発明は、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドを含む組成物及び/又は動物用飼料並びにその使用に関する。
ムラミダーゼは、リゾチームとしても知られており、多くの生物によって細菌に対する防御メカニズムとして産生されるO−グリコシルヒドロラーゼである。酵素は、細菌の重要な構造分子であるペプチドグリカンのグリコシド結合を切断することによって細菌細胞壁の加水分解を引き起こす。細菌の細胞壁がムラミダーゼの作用によって弱められた後、細菌の細胞は、浸透圧不均衡の結果として溶解する。
したがって、本発明は、ムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチド及び1つ以上の抗生物質を含む組成物又は動物用飼料に関する。
配列番号1は、国際公開第2013/076253号パンフレットにおいて記載されるアクレモニウム・アルカロフィラム(Acremonium alcalophilum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号4)。
配列番号2は、国際公開第2013/076253号パンフレットにおいて記載されるアクレモニウム・アルカロフィラム(Acremonium alcalophilum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号8)。
配列番号3は、国際公開第2011/104339号パンフレットにおいて記載されるアスペルギルス・フミガーツス(Aspergillus fumigatus)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号3)。
配列番号4は、国際公開第2009/102755号パンフレットにおいて記載されるトリコデルマ・リーゼイ(Trichoderma reesei)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号4)。
配列番号5は、国際公開第2005/080559号パンフレットにおいて記載されるシュタケ(Trametes cinnabarina)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号2)。
配列番号6は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるスポロルミア・フィメタリア(Sporormia fimetaria)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号3)。
配列番号7は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるポロニア・プンクタタ(Poronia punctata)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号6)。
配列番号8は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるポロニア・プンクタタ(Poronia punctata)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号9)。
配列番号9は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるレカニシルリウム(Lecanicillium)種WMM742由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号12)。
配列番号10は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるレカニシルリウム(Lecanicillium)種WMM742由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号15)。
配列番号11は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるオニゲナ・エクイナ(Onygena equina)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号18)。
配列番号12は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるプルプレオシルリウム・リラシナム(Purpureocillium lilacinum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号21)。
配列番号13は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるトリコボルス・ツカリイ(Trichobolus zukalii)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号24)。
配列番号14は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるペニシリウム・シトリナム(Penicillium citrinum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号27)。
配列番号15は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるクラドルリナム・ブルビルロサム(Cladorrhinum bulbillosum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号30)。
配列番号16は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるウンベロプシス・ウエステアエ(Umbelopsis westeae)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号33)。
配列番号17は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載される接合菌(Zygomycetes)種XZ2655由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号36)。
配列番号18は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるカエトミウム・クプレウム(Chaetomium cupreum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号39)。
配列番号19は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるコルディセプス・カルディナリス(Cordyceps cardinalis)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号42)。
配列番号20は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるペニシリウム(Penicillium)種「キイ(qii)」由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号45)。
配列番号21は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるアスペルギルス(Aspergillus)種nov XZ2609由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号48)。
配列番号22は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるペシロマイセス(Paecilomyces)種XZ2658由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号51)。
配列番号23は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるペシロマイセス(Paecilomyces)種XZ2658由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号54)。
配列番号24は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるピクニジオフォラ(Pycnidiophora)cfジスペラ(dispera)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号60)。
配列番号25は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるテルモムコル・インジカエ−セウダチカエ(Thermomucor indicae−seudaticae)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号63)。
配列番号26は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるコナサナギタケ(Isaria farinosa)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号66)。
配列番号27は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるレカニシルリウム(Lecanicillium)種WMM742由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号69)。
配列番号28は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるゾフィエラ(Zopfiella)種t180−6由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号72)。
配列番号29は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるマルブランケア・フラバ(Malbranchea flava)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号75)。
配列番号30は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるヒフォロマ・ポリトリチ(Hypholoma polytrichi)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号80)。
配列番号31は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるアスペルギルス・デフレクタス(Aspergillus deflectus)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号83)。
配列番号32は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるアスコボラス・スチクトイデウス(Ascobolus stictoideus)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号86)。
配列番号33は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるコニオカエタ(Coniochaeta)種由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号89)。
配列番号34は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるツボミタケ(Daldinia fissa)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号92)。
配列番号35は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるロセルリニア(Rosellinia)種由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号95)。
配列番号36は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるアスコボラス(Ascobolus)種ZY179由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号98)。
配列番号37は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるクレヤ(Curreya)種XZ2623由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号101)。
配列番号38は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるコニオチリウム(Coniothyrium)種由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号104)。
配列番号39は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるヒポキシロン(Hypoxylon)種由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号107)。
配列番号40は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるキシラリアセアエ(Xylariaceae)種1653h由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号110)。
配列番号41は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるヒポキシロン(Hypoxylon)種由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号113)。
配列番号42は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるユンナニア・ペニシラタ(Yunnania penicillata)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号116)。
配列番号43は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるエンギオドンティウム・アルブム(Engyodontium album)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号119)。
配列番号44は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるメタポコニア・ブルビローサ(Metapochonia bulbillosa)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号122)。
配列番号45は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるハミゲラ・パラベラネア(Hamigera paravellanea)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号125)。
配列番号46は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるメタリジウム・イアジニ(Metarhizium iadini)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号128)。
配列番号47は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるサーモアスカス・アウランティアクス(Thermoascus aurantiacus)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号131)。
配列番号48は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるクロノスタキス・ロスマニアエ(Clonostachys rossmaniae)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号134)。
配列番号49は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるシンプリシルリウム・オブクラバタム(Simplicillium obclavatum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号137)。
配列番号50は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるアスペルギルス・インフラタス(Aspergillus inflatus)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号140)。
配列番号51は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるパラクレモニウム・インフラツム(Paracremonium inflatum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号143)。
配列番号52は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるウエステルディケラ(Westerdykella)種由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号146)。
配列番号53は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるキバフンタケ(Stropharia semiglobata)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号155)。
配列番号54は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるゲラシノスポラ・クラトフォラ(Gelasinospora cratophora)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号158)。
配列番号55は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるエノキタケ(Flammulina velutipes)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号221)。
配列番号56は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるトフンタケ(Deconica coprophila)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号224)。
配列番号57は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるリゾムコール・パシラス(Rhizomucor pusillus)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号227)。
配列番号58は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるキバフンタケ(Stropharia semiglobata)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号230)。
配列番号59は、PCT/中国特許出願公開第2017/075978号明細書において記載されるキバフンタケ(Stropharia semiglobata)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号233)。
配列番号60は、PCT/中国特許出願公開第2017/075960号明細書において記載されるミセリオフトラ・フェルグシイ(Myceliophthora fergusii)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号3)。
配列番号61は、PCT/中国特許出願公開第2017/075960号明細書において記載されるモルティエレラ・アルピナ(Mortierella alpina)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号15)。
配列番号62は、PCT/中国特許出願公開第2017/075960号明細書において記載されるペニシリウム・アトロベネツム(Penicillium atrovenetum)由来のGH25ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号27)。
配列番号63は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるトリコファエア・サッカタ(Trichophaea saccata)由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号257)。
配列番号64は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるケトミウム・サーモフィラム(Chaetomium thermophilum)由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号264)。
配列番号65は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるトリコデルマ・ハルジアナム(Trichoderma harzianum)由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号267)。
配列番号66は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるトリコファエア・ミヌタ(Trichophaea minuta)由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号291)。
配列番号67は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるケトミウム(Chaetomium)種ZY287由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号294)。
配列番号68は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるモルティエレラ(Mortierella)種ZY002由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号297)。
配列番号69は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるメタリジウム(Metarhizium)種XZ2431由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号300)。
配列番号70は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるゲオミセス・アウラタス(Geomyces auratus)由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号303)。
配列番号71は、国際公開第2017/000922号パンフレットにおいて記載されるイリオネクトリア・ルファ(Ilyonectria rufa)由来のGH24ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である(配列番号306)。
動物:「動物」という用語は、ヒトを除く任意の動物を指す。動物の例は、豚又はブタ(子ブタ、育成ブタ及び雌ブタを含むが、これらに限定されない);シチメンチョウ、カモ、ウズラ、ホロホロチョウ、ガチョウ、ハト(ひなバトを含む)及び鶏(ブロイラー鶏(本明細書においてブロイルと呼ばれる)、ヒヨコ、産卵雌鶏(本明細書において産卵鶏と呼ばれる)を含むが、これらに限定されない)などの家禽;ネコ及びイヌなどの愛玩動物;ウマ(サラブレッド種、冷血種及び温血種を含むが、これらに限定されない)、甲殻類の動物(小エビ及び中エビを含むが、これらに限定されない)並びに魚(アンバージャック、ピラルク、バーブ、バス、アミキリ、ボカチコ、ブリーム、カジカ、コロソマ、コイ、ナマズ、カトラ、サバヒー(chanos)、チャー、カワスズメ、スギ、タラ、クラッピー、へダイ、ニベ科の魚、ウナギ、ハゼ、キンギョ、グラミー、ハタ、グァポテ、ハリバット、ジャワ、ラベオ(labeo)、ライ(lai)、ドジョウ、サバ、ミルクフィッシュ、サギ、ボウフィン、ボラ、パコ(paco)、パールスポット(pearlspot)、ペヘレイ、パーチ、カワカマス、コバンアジ、ローチ、サケ、サンパ(sampa)、ソーガー、ハタ科の魚、タイ、シャイナー、カワアナゴ科の魚、タイワンドジョウ、フエダイ、アカメ、シタビラメ、スパインフット(spinefoot)、チョウザメ、マンボウ、アユ、テンチ、テラー(terror)、テラピア、マス、マグロ、ターボット、シロマス、ウォールアイ及びホワイトフィッシュを含むが、これらに限定されない)を含むが、これらに限定されない単胃動物である。
(同一残基×100)/(アライメントの長さ−アライメント中のギャップの総数)
[組成物]
驚くべきことに、ムラミダーゼ(好ましくは菌類のムラミダーゼ)及び抗生物質を含む組成物が動物において追加の能力上の利益を与えることがわかった。
(a)配列番号1に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(b)配列番号2に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(c)配列番号3に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(d)配列番号4に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(e)配列番号5に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(f)配列番号6に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(g)配列番号7に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(h)配列番号8に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(i)配列番号9に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(j)配列番号10に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(k)配列番号11に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(l)配列番号12に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(m)配列番号13に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(n)配列番号14に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(o)配列番号15に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(p)配列番号16に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(q)配列番号17に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(r)配列番号18に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(s)配列番号19に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(t)配列番号20に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(u)配列番号21に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(v)配列番号22に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(w)配列番号23に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(x)配列番号24に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(y)配列番号25に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(z)配列番号26に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aa)配列番号27に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ab)配列番号28に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ac)配列番号29に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ad)配列番号30に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ae)配列番号31に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(af)配列番号32に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ag)配列番号33に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ah)配列番号34に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ai)配列番号35に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aj)配列番号36に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ak)配列番号37に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(al)配列番号38に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(am)配列番号39に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(an)配列番号40に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ao)配列番号41に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ap)配列番号42に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aq)配列番号43に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ar)配列番号44に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(as)配列番号45に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(at)配列番号46に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(au)配列番号47に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(av)配列番号48に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aw)配列番号49に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ax)配列番号50に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ay)配列番号51に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(az)配列番号52に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ba)配列番号53に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bb)配列番号54に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bc)配列番号55に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bd)配列番号56に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(be)配列番号57に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bf)配列番号58に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bg)配列番号59に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bh)配列番号60に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bi)配列番号61に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bj)配列番号62に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bk)配列番号63に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bl)配列番号64に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bm)配列番号65に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bn)配列番号66に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bo)配列番号67に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bp)配列番号68に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bq)配列番号69に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(br)配列番号70に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bs)配列番号71に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bt)1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10の位置に1つ以上のアミノ酸置換(好ましくは保存的置換)、及び/若しくは1つ以上のアミノ酸欠失、及び/若しくは1つ以上のアミノ酸挿入又はその任意の組み合わせを含む、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号25、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、配列番号55、配列番号56、配列番号57、配列番号58、配列番号59、配列番号60、配列番号61、配列番号62、配列番号63、配列番号64、配列番号65、配列番号66、配列番号67、配列番号68、配列番号69、配列番号70又は配列番号71の変異体;
(bu)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)又は(bt)のポリペプチド並びに1〜10アミノ酸のN末端及び/又はC末端伸張を含むポリペプチド;及び
(bv)ムラミダーゼ活性を有し、且つ成熟ポリペプチドの長さの少なくとも90%を有する、(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)又は(bt)のポリペプチドの断片
からなる群から選択される。
第2の態様において、本発明は、動物用飼料添加剤、1つ以上のタンパク質源及び1つ以上のエネルギー源を含む動物用飼料において、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチド及び1つ以上の抗生物質をさらに含むことを特徴とする動物用飼料に関する。
本発明において、本明細書において記載される組成物及び/又は動物用飼料は、1つ以上の酵素を任意選択で含み得る。酵素は、ハンドブックEnzyme Nomenclature from NC−IUBMB,1992)に基づいて分類することができ、インターネットのENZYMEのサイト:http://www.expasy.ch/enzyme/も参照されたい。
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、ユーバイオティクスを追加で含み得る。ユーバイオティクスは、胃腸管におけるミクロフローラの健康的なバランスをもたらすように設計されている化合物である。ユーバイオティクスは、より詳細に下記に記載されるプロバイオティクス、プレバイオティクス、フィトジェニクス(精油)及び有機酸などの多くの異なる飼料添加剤を包含する。
本発明において、組成物、動物用飼料又は動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、1つ以上の追加のプロバイオティクスをさらに含み得る。特に、動物用飼料組成物又は動物用飼料は、1つ以上の以下の属由来の細菌をさらに含み得る:乳酸桿菌(Lactobacillus)、ラクトコッカス(Lactococcus)、連鎖球菌(Streptococcus)、桿菌(Bacillus)、ペジオコックス(Pediococcus)、腸球菌(Enterococcus)、ロイコノストック(Leuconostoc)、カルノバクテリウム(Carnobacterium)、プロピオン酸菌(Propionibacterium)、ビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)、クロストリジウム(Clostridium)及びメガスファエラ(Megasphaera)又はその任意の組み合わせ。
プレバイオティクスは、宿主の健康に寄与する微生物(たとえば、細菌及び菌類)の成長又は活性を誘発する物質である。プレバイオティクスは、通常、胃腸管の上部を消化されずに通過し、大腸に定着する好都合な細菌の成長又は活性を、細菌のためのベースとして作用することによって刺激する非消化性の繊維化合物である。一般に、プレバイオティクスは、GI管においてビフィズス菌及び乳酸菌の数又は活性を増加させる。
フィトジェニクスは、飼料添加剤として使用され、ハーブ、スパイス又は他の植物に由来する天然の成長促進物質又は非抗生物質の成長促進物質の群である。フィトジェニクスは、精油/抽出物から調製される単一の物質、精油/抽出物、単一の植物及び植物の混合物(ハーブ製品)又は精油/抽出物/植物の混合物(特殊製品)とすることができる。
有機酸(C1〜C7)は、植物又は動物組織の通常の構成成分として自然界に広く分布する。有機酸は、主に大腸において、炭水化物の微生物発酵を通しても形成される。有機酸が鶏における壊疽性腸炎及び若い豚における大腸菌(Escherichia coli)感染症のような腸の問題に対して予防効果を有するため、有機酸は、多くの場合、抗生物質成長促進物質の代わりとしてブタ及び家禽の生産に使用される。有機酸は、1つの構成要素又は通常2つ若しくは3つの異なる有機酸の混合物として販売され得る。有機酸の例は、短鎖脂肪酸(たとえば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸)、中鎖脂肪酸(たとえば、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸)、ジ/トリカルボン酸(たとえば、フマル酸)、ヒドロキシ酸(たとえば、乳酸)、芳香族酸(たとえば、安息香酸)、クエン酸、ソルビン酸、リンゴ酸及び酒石酸又はそれらの塩(通常、二ギ酸カリウム若しくは酪酸ナトリウムなどのナトリウム塩若しくはカリウム塩)である。
本発明の組成物又は動物用飼料は、1つ以上のアミノ酸をさらに含み得る。使用されるアミノ酸の例は、リシン、アラニン、ベータ−アラニン、スレオニン、メチオニン及びトリプトファンである。本発明において、アミノ酸の量は、組成物又は動物用飼料の0.001重量%〜10重量%であり得る。
本発明において、組成物又は動物用飼料は、1つ以上のビタミン、たとえば1つ以上の脂溶性ビタミン及び/又は1つ以上の水溶性ビタミンなどを含み得る。加えて、組成物又は動物用飼料は、任意選択で、1つ以上のミネラル、たとえば1つ以上の微量ミネラル及び/又は1つ以上のマクロミネラルなどを含み得る。
本発明の組成物又は動物用飼料は、着色剤、安定剤、成長を改善する添加剤及び芳香化合物/香味料、多価不飽和脂肪酸(PUFA);活性酸素生成種、酸化防止剤、殺菌性ペプチド、抗菌性ポリペプチド及びマイコトキシン管理化合物をさらに含み得る。
第3の態様において、本発明は、動物における成長能力を改善する方法であって、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチド及び1つ以上の抗生物質を含む組成物又は動物用飼料を動物に投与することを含む方法にさらに関する。
第5の態様において、本発明は、動物における成長能力を改善し、且つ/又は抗生物質の使用量を低下させることにおける組成物又は動物用飼料の使用であって、組成物及び動物用飼料は、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチド及び1つ以上の抗生物質を含む、使用にさらに関する。
[実施例1:ムラミダーゼ活性の決定]
ムラミダーゼの活性は、450nmでマイクロプレートリーダー(Tecan Infinite M200)において測定される、懸濁したミクロコッカス・リゾデイクティカス(Micrococcus lysodeikticus)ATTC No.4698(Sigma−Aldrich M3770)の溶液の吸光度/光学濃度の減少(降下)を測定することによって決定した。
使用前に細胞を10mg細胞/mLの濃度まで脱イオン水中で懸濁し、450nmでの吸光度/光学濃度(OD)を測定した。細胞懸濁液は、次いで、濁り度アッセイにおける細胞濃度(180μLバッファー+20μLサンプル+20μLベース)がOD450=1.0に等しくなるように調整した。調整した細胞懸濁液は、次いで、使用前に周囲温度で保存した。懸濁した細胞は、3時間以内に使用した。
61.45mL 0.1Mクエン酸を38.55mL 0.2Mリン酸水素二ナトリウムと混合し、pHを塩酸又は水酸化ナトリウムによりpH4に調整した。
測定するムラミダーゼサンプルを脱イオン水中50mg酵素タンパク質/Lの濃度まで希釈し、使用まで氷上で保った。96ウェルマイクロタイタープレート(Nunc)において、180μLクエン酸−リン酸バッファーpH4及び20μLの希釈したムラミダーゼサンプルを追加し、低温で保った(5℃)。活性測定を開始するために、20μLのベース(ミクロコッカス・リゾデイクティカス(Micrococcus lysodeikticus))を各ウェルに追加し、450nmでの吸光度の反応速度測定を始め、マイクロプレートリーダーにおいて37℃で1時間行った。450nmで測定した吸光度を各ウェルについてモニターし、ムラミダーゼがムラミダーゼ活性を有する場合、次第に吸光度の降下が見られた。
[場所及び動物]
試験は、2017年8月15日から2017年10月3日まで、Poultrz section、INTA−EEA Pergamino、ブエノスアイレス(Buenos Aires)、アルゼンチン(Argentina)で実行した。生まれて1日の雄ブロイラー鶏(「Cobb−500」)は、民間ふ化場(Granja Tres Arroyos、Tres Arroyos 378、ブエノスアイレス、アルゼンチン)によって提供された。
鳥は、一般的な納屋(カーテンありの網の片開)において、敷料としてチップを有する平飼い飼育室内に収容した。ガス暖房器、ファン及び噴霧器を、納屋の温度をコントロールするために使用した。
無作為化完備型ブロック計画を使用し(因子の配列、2エンラマイシンレベル×2ムラミダーゼレベル)、それぞれ14回反復する4つの処置を合わせて行った(1処置当たり252匹の鳥、表3)。
実験用の餌(スターター、育成、仕上げ及び最後の週)は、主な成分として、トウモロコシ、ダイズ粉を主成分とした(表3)。フィターゼ(RONOZYME(登録商標)HiPhos GT、用量1000FYT/飼料kg、100g/飼料tn)をすべての処置において使用した。DSMのRovimix(登録商標)ブロイラーをビタミン−ミネラルプレミックスとして使用し、マズラマイシンを抗コクシジウム剤として使用した。飼料の組成を表4として掲載した。
ブロイラーの能力に影響を与え、抗生物質又は代替物の有益な効果を実証することができる負荷を生じさせる管理手段:
− 21日齢まで500mLの水の追加(一日置き)を通して高水分を維持する再生敷料(2回の繁殖)
− 高密度、12匹の鳥/m2
− 28及び42日齢時にのみ敷料の上層を除去。
個々の体重及び飼育室の飼料摂取量を毎週決定した。
[体重]
エンラマイシン含有では、体重における増加が観察され(表5)、この差は、21日目から有意であった(p≦0.05)。ムラミダーゼの含有でも、21日齢から体重における増加が観察された(21日目、p≦0.05及び42日目、p≦0.10)。ムラミダーゼのみと比較して、ムラミダーゼ及びエンラマイシンの組み合わせは、重量増加をさらに増加させた。
エンラマイシン含有では、飼料効率が改善され(表6)、差は、35日目から有意であった(p≦0.05)。ムラミダーゼの含有では、飼料効率における改善は、すべての実験に沿って観察され、差は、7日目及び21日目以降、有意であった(p≦0.05)。エンラマイシンのみと比較して、追加のムラミダーゼの含有は、期間全体でエンラマイシンのみをさらに上回って飼料効率をさらに減少させた。
エンラマイシン含有では、体重/飼料要求率が改善され(表7)、差は、35日目以降、有意であり(p≦0.05)、傾向は、21日目に観察された(p≦0.10)。ムラミダーゼ含有では、このパラメーターにおける改善は、エンラマイシンのみをさらに上回って観察された。この差は、21、42及び48日時点(p≦0.05)並びに7及び28日時点(p≦0.10)で有意であった。
エンラマイシンの含有では、屠殺体重(2800g)に達するのに1.1日に相当する低下が観察された(p≦0.05、表8)。ムラミダーゼでは、2800gの体重に達するのに0.3日の低下が48日齢時に観察され、処置間の均一性の差は、観察されなかった(p>0.05)。
本研究において得られた結果は、微生物ムラミダーゼのみの又は抗生物質(エンラマイシン)と一緒の含有がブロイラー鶏の成長能力を改善するのに有効であったことを示した。したがって、ブロイラー鶏のための抗生物質の使用量を低下させることが可能になる。
[研究の概要]
給餌試験を2400匹のCobb 400Yヒヨコの雄の群れで35日間行った。ヒヨコは、民間ふ化場から調達し、飼育室において敷料の上で研究期間の最初から最後まで育てた。6つの処置群への及び群内での飼育室(6.5×4フィート)へのヒヨコの配分を無作為化完備型ブロック計画に従って行った。それぞれの処置群は、16の反復実験飼育室からなり、各飼育室のヒヨコは、25匹とした(1処置当たりn=400、ヒヨコの総数は、2400になる)。
飼料は、すべてマッシュ形態で与えた。3フェーズの給餌を実施した:プレスターター(1〜14日/500g/鳥)、スターター(15〜28日/1500g/鳥)及び仕上げ(29〜35日/処分まで給餌)。同じロットの原料を餌の調製に使用し、すべてのステージの餌は、それぞれの給餌ステージの開始の直前に改めて調製した。すべての餌は、鳥の規格化された回腸消化性アミノ酸必要量を使用し、理想的なタンパク質比に従って配合した(表10)。
ニューカッスル病(5日及び12日)並びに伝染性ファブリキウス嚢病(20日)の予防のために、眼内ルートを通して、標準的なワクチン接種手順に従って鳥にワクチン接種した。
1.能力特性(体重、平均1日体重増加量、平均1日飼料摂取量及び飼料要求率)を飼育室ごとに算出する。
2.反復実験によって算出するヨーロッパ生産効率指数(EPEF)。
EPEF=ADG(g)/FCR*10)×(100−死亡率%)
すべてのデータは、主要因として補足的BMD(0及び50ppm)のレベル並びにムラミダーゼ(0、450及び810ppm)のレベルを使用して、2×3要因配置実験に従って統計的に解析した。主効果及び交互作用を決定した。2つの別々の小屋への実験用の群れの配分が鳥の能力に対して何らかの効果を及ぼすかどうかを見るために、別の構成要素、すなわち小屋の効果も統計モデルに追加した。結果を平均及びプールした平均値の標準誤差として表わし、何らかの有意な変動(P<0.05)がある場合には必ず、平均分離をTukeyのB検定に従って行った。
体重増加量(BWG)、飼料摂取量(FI)及び飼料要求率(FCR)の観点からの能力を1日目から35日目まで週一回の間隔で記録した。表11に示すように、NCにおいてムラミダーゼを補足すると、低い方の濃度(450ppm)でさえ、補足しなかった群と比較してBWGが有意に増加した。450mg/kgから810mg/kgにムラミダーゼの用量を増加させ、産物をPCに補足した場合、BWGは、それに伴って増加した。一定量の生体重増加をもたらすのに必要とされる飼料も450mg/餌kgのムラミダーゼを含有させ、PC又はNCに産物を補足した場合に低下した。しかしながら、飼料効率は、ムラミダーゼをPCに補足した場合、NCを給餌したものと比較して良好であった。
能力についてのデータに基づいて、ムラミダーゼのみの又は抗生物質と組み合わせた補足により、体重増加、飼料効率及びヨーロッパ能力効率指数(EPEF)が、負荷のかかる飼育条件下(餌中の骨肉粉及び堆積した敷料)で育てた市販ブロイラーにおいて、補足なしの群と比較して有意に改善したと結論付けることができた。
Claims (16)
- ムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチド及び1つ以上の抗生物質を含む組成物。
- ムラミダーゼ活性を有する前記ポリペプチドは、菌類のGH24ムラミダーゼ又はGH25ムラミダーゼである、請求項1に記載の組成物。
- 前記抗生物質は、バシトラシン、バンベリマイシン、カルバドックス、エンラマイシン、エンデュラシジン、ライドロマイシン、ラサロシド、リンコマイシン、モネンシン、ネオマイシン、ペニシリン、ロキサルソン、ロキサルソン、サリノマイシン、タイロシン及びバージニアマイシンのいずれか1つである、請求項1又は2に記載の組成物。
- ムラミダーゼ活性を有する前記ポリペプチドは、
(a)配列番号1に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(b)配列番号2に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(c)配列番号3に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(d)配列番号4に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(e)配列番号5に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(f)配列番号6に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(g)配列番号7に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(h)配列番号8に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(i)配列番号9に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(j)配列番号10に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(k)配列番号11に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(l)配列番号12に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(m)配列番号13に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(n)配列番号14に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(o)配列番号15に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(p)配列番号16に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(q)配列番号17に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(r)配列番号18に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(s)配列番号19に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(t)配列番号20に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(u)配列番号21に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(v)配列番号22に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(w)配列番号23に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(x)配列番号24に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(y)配列番号25に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(z)配列番号26に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aa)配列番号27に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ab)配列番号28に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ac)配列番号29に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ad)配列番号30に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ae)配列番号31に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(af)配列番号32に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ag)配列番号33に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ah)配列番号34に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ai)配列番号35に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aj)配列番号36に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ak)配列番号37に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(al)配列番号38に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(am)配列番号39に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(an)配列番号40に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ao)配列番号41に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ap)配列番号42に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aq)配列番号43に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ar)配列番号44に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(as)配列番号45に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(at)配列番号46に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(au)配列番号47に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(av)配列番号48に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(aw)配列番号49に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ax)配列番号50に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ay)配列番号51に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(az)配列番号52に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(ba)配列番号53に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bb)配列番号54に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bc)配列番号55に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bd)配列番号56に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(be)配列番号57に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bf)配列番号58に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bg)配列番号59に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bh)配列番号60に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bi)配列番号61に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bj)配列番号62に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bk)配列番号63に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bl)配列番号64に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bm)配列番号65に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bn)配列番号66に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bo)配列番号67に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bp)配列番号68に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bq)配列番号69に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(br)配列番号70に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bs)配列番号71に対して少なくとも80%、たとえば少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%又は100%の配列同一性を有するポリペプチド;
(bt)1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10の位置に1つ以上のアミノ酸置換(好ましくは保存的置換)、及び/若しくは1つ以上のアミノ酸欠失、及び/若しくは1つ以上のアミノ酸挿入又はその任意の組み合わせを含む、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号25、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、配列番号55、配列番号56、配列番号57、配列番号58、配列番号59、配列番号60、配列番号61、配列番号62、配列番号63、配列番号64、配列番号65、配列番号66、配列番号67、配列番号68、配列番号69、配列番号70又は配列番号71の変異体;
(bu)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)又は(bt)の前記ポリペプチド並びに1〜10アミノ酸のN末端及び/又はC末端伸張を含むポリペプチド;及び
(bv)ムラミダーゼ活性を有し、且つ成熟ポリペプチドの長さの少なくとも90%を有する、(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)、(ah)、(ai)、(aj)、(ak)、(al)、(am)、(an)、(ao)、(ap)、(aq)、(ar)、(as)、(at)、(au)、(av)、(aw)、(ax)、(ay)、(az)、(ba)、(bb)、(bc)、(bd)、(be)、(bf)、(bg)、(bh)、(bi)、(bj)、(bk)、(bl)、(bm)、(bn)、(bo)、(bp)、(bq)、(br)、(bs)又は(bt)のポリペプチドの断片
からなる群から選択される、請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物。 - 前記抗生物質は、エンラマイシン又はバシトラシンである、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物。
- 配列番号1のムラミダーゼ及びエンラマイシン又はバシトラシンを含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物。
- 動物用飼料添加剤、1つ以上のタンパク質源及び1つ以上のエネルギー源を含む動物用飼料において、ムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチド及び1つ以上の抗生物質をさらに含むことを特徴とする動物用飼料。
- 前記タンパク質源は、ダイズ、ツルマメ、インゲン、ハウチワマメ、テパリービーン、ベニバナインゲン、スリムジムビーン、アオイマメ、サヤインゲン、空豆(ソラマメ)、ヒヨコマメ、レンズマメ、ピーナッツ、スペインピーナッツ、キャノーラ、ヒマワリ種、綿実、菜種(アブラナ)若しくはエンドウマメからなる群から選択されるか、又はダイズ粉、全脂肪ダイズ粕、ダイズタンパク濃縮物(SPC)、発酵ダイズ粉(FSBM)、ヒマワリ粕、綿実粕、菜種粕、魚粉、骨粉、羽毛粉、ホエー若しくはその任意の組み合わせなどの加工形態である、請求項7に記載の動物用飼料。
- 前記エネルギー源は、メイズ、トウモロコシ、ソルガム、オオムギ、コムギ、カラスムギ、イネ、ライコムギ、ライムギ、ビート、テンサイ、ホウレンソウ、ジャガイモ、カッサバ、キノア、キャベツ、スイッチグラス、キビ、トウジンヒエ、アワからなる群から選択されるか、又は製粉されたトウモロコシ、製粉されたメイズ、ジャガイモデンプン、カッサバデンプン、製粉されたソルガム、製粉されたスイッチグラス、製粉されたキビ、製粉されたアワ、製粉されたトウジンヒエ若しくはその任意の組み合わせなどの加工形態である、請求項7又は8に記載の動物用飼料。
- 動物における成長能力を改善する方法であって、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物又は請求項7〜9のいずれか一項に記載の動物用飼料を前記動物に投与することを含む方法。
- 前記組成物又は前記動物用飼料は、前記抗生物質が、動物用飼料1kg当たり0.5mg〜90mg、1mg〜80mg、5mg〜70mg、10mg〜60mg、15mg〜50mg若しくは20mg〜40mg又は前記区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料1kg当たり0.1mg〜100mgのレベルであるように添加される、請求項10に記載の方法。
- 前記組成物又は前記動物用飼料は、ムラミダーゼ活性を有する前記ポリペプチドが、動物用飼料1kg当たり50mg〜900mg、100mg〜800mg、200mg〜700mg、300mg〜600mg若しくは400mg〜500m又は前記区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料1kg当たり10mg〜1000mgの酵素タンパク質のレベルであるように添加される、請求項10又は11に記載の方法。
- 前記動物は、単胃動物、たとえば豚又はブタ(子ブタ、育成ブタ及び雌ブタを含むが、これらに限定されない);家禽(家禽、シチメンチョウ、カモ、ウズラ、ホロホロチョウ、ガチョウ、ハト、ひなバト、鶏、ブロイラー、産卵鶏、若雌鶏及びヒヨコを含むが、これらに限定されない);ネコ及びイヌなどの愛玩動物、魚(アンバージャック、ピラルク、バーブ、バス、アミキリ、ボカチコ、ブリーム、カジカ、コロソマ、コイ、ナマズ、カトラ、サバヒー、チャー、カワスズメ、スギ、タラ、クラッピー、へダイ、ニベ科の魚、ウナギ、ハゼ、キンギョ、グラミー、ハタ、グァポテ、ハリバット、ジャワ、ラベオ、ライ、ドジョウ、サバ、ミルクフィッシュ、サギ、ボウフィン、ボラ、パコ、パールスポット、ペヘレイ、パーチ、カワカマス、コバンアジ、ローチ、サケ、サンパ、ソーガー、ハタ科の魚、タイ、シャイナー、カワアナゴ科の魚、タイワンドジョウ、フエダイ、アカメ、シタビラメ、スパインフット、チョウザメ、マンボウ、アユ、テンチ、テラー、テラピア、マス、マグロ、ターボット、シロマス、ウォールアイ及びホワイトフィッシュ);並びに甲殻類の動物(小エビ及び中エビを含むが、これらに限定されない)である、請求項10〜12のいずれか一項に記載の方法。
- 動物における成長能力を改善することにおける、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物又は請求項7〜9のいずれか一項に記載の動物用飼料の使用。
- 動物において抗生物質の使用量を低下させる方法であって、ムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチドを前記動物に投与すること含む方法。
- 動物において抗生物質の使用量を低下させることにおける、ムラミダーゼ活性を有する1つ以上のポリペプチドの使用。
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