JP2022167716A - Antibacterial and antiviral agent - Google Patents

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Abstract

To provide an antibacterial and antiviral agent that has antibacterial and antiviral properties and can suppress the proliferation of bacteria and virus, the agent being safe and applicable to various articles.SOLUTION: An antibacterial and antiviral agent according to the present invention contains a plurality of platinum nanoparticles with a nano particle size as an active ingredient. Alternatively, an antibacterial and antiviral agent according to the present invention contains a platinum nanoparticle solution containing platinum nanoparticles with an average particle size of 1-10 nm.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、粒径がナノサイズの複数の白金ナノ粒子を有効成分とする抗菌及び抗ウイルス剤に関する。 TECHNICAL FIELD The present invention relates to an antibacterial and antiviral agent containing a plurality of nanosized platinum nanoparticles as active ingredients.

従来から、不快な臭いを発生する細菌の増殖を防ぐため、あるいは風邪やウイルス性の疾患を予防するため等に様々な製品に抗菌・抗ウイルス加工がされており、抗菌・抗ウイルス加工を行う抗菌剤・抗ウイルス剤も種々のものが提案されている。 Conventionally, antibacterial and antiviral finishing has been applied to various products to prevent the growth of bacteria that cause unpleasant odors, or to prevent colds and viral diseases. Various antibacterial agents and antiviral agents have also been proposed.

現在、新型コロナウイルス感染症(COVID-19)が流行拡大しており、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)から感染を防ぐために、あるいは、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)を他人に感染させないために、日用生活のあらゆる場面で使用する製品について抗菌性・抗ウイルス性が求められており、抗菌性・抗ウイルス性を付与した製品が種々販売されている。 Currently, the novel coronavirus infectious disease (COVID-19) is spreading, and in order to prevent infection from the new coronavirus (SARS-CoV-2), or to spread the new coronavirus (SARS-CoV-2) to others In order to prevent infection, antibacterial and antiviral properties are required for products used in all aspects of daily life, and various products with antibacterial and antiviral properties are on the market.

一方で、従来から使用している製品や、住宅の床・壁等に抗菌性、抗ウイルス性を付与するために、簡単に抗菌・抗ウイルス効果を付与できて、かつ、安全で安価な抗菌・抗ウイルス剤も求められている。 On the other hand, in order to impart antibacterial and antiviral properties to products that have been used for a long time, floors and walls of houses, etc., it is possible to easily impart antibacterial and antiviral effects, and to use safe and inexpensive antibacterial agents. There is also a need for antiviral agents.

特開2008-056592号公報JP 2008-056592 A

特許文献1においては、平均粒径が1~10nmの白金粒子を含むコロイド溶液からなることを特徴とする抗菌処理液が開示されている。特許文献1においては、白金ナノ粒子が有する抗菌性については記載されているが、抗ウイルス性については記載されておらず、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に対する抗ウイルス性については当然記載されていない。また、新型コロナウイルス感染症(COVID-19)が流行している現状においては、消費者の安全・安心のためにも簡単な方法で抗ウイルス効果を付与できる抗ウイルス剤が求められている。 Patent Document 1 discloses an antibacterial treatment liquid characterized by comprising a colloidal solution containing platinum particles with an average particle size of 1 to 10 nm. Patent Document 1 describes the antibacterial properties of platinum nanoparticles, but does not describe the antiviral properties, and naturally describes the antiviral properties against the new coronavirus (SARS-CoV-2). It has not been. In addition, in the current situation where the novel coronavirus infectious disease (COVID-19) is prevalent, there is a demand for an antiviral agent that can impart an antiviral effect by a simple method for the safety and security of consumers.

そこで本発明は、抗菌性及び抗ウイルス性、特に新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に対する抗ウイルス性も有し、さらに安全で安価な抗菌及び抗ウイルス剤を提供することを目的とする。また、多種多様な物品に対して手軽に抗菌性及び抗ウイルス性を付与することができる抗菌及び抗ウイルス剤を提供することを目的とする。 Accordingly, an object of the present invention is to provide a safe and inexpensive antibacterial and antiviral agent that also has antibacterial and antiviral properties, particularly antiviral properties against the novel coronavirus (SARS-CoV-2). Another object of the present invention is to provide an antibacterial and antiviral agent that can easily impart antibacterial and antiviral properties to a wide variety of articles.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、粒径がナノサイズの複数の白金ナノ粒子を有効成分とするのが好ましい。 The antibacterial and antiviral agent according to the present invention preferably contains a plurality of nano-sized platinum nanoparticles as active ingredients.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、粒径がナノサイズの複数の白金ナノ粒子を含む白金ナノ粒子溶液からなるのが好ましい。 The antibacterial and antiviral agent according to the present invention preferably comprises a platinum nanoparticle solution containing a plurality of nanosized platinum nanoparticles.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に対する抗ウイルス性を有するのがよい。 Antibacterial and antiviral agents according to the present invention should have antiviral properties against the novel coronavirus (SARS-CoV-2).

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、抗ウイルス活性値が3.0以上であるのが好ましい。 The antibacterial and antiviral agent according to the present invention preferably has an antiviral activity value of 3.0 or more.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、抗菌及び抗ウイルス剤をスプレー容器に充填してなる、スプレー製品であってもよい。 The antibacterial and antiviral agent according to the present invention may be a spray product obtained by filling a spray container with the antibacterial and antiviral agent.

本発明の抗菌及び抗ウイルス剤においては、複数の白金ナノ粒子を含むことにより、白金ナノ粒子の「抗菌性」及び「抗ウイルス性」により、抗菌性及び抗ウイルス性を兼ね備えた抗菌及び抗ウイルス剤を提供することができる。 In the antibacterial and antiviral agent of the present invention, by including a plurality of platinum nanoparticles, the "antibacterial" and "antiviral" properties of the platinum nanoparticles provide both antibacterial and antiviral properties. agent can be provided.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、複数の白金ナノ粒子が細菌やウイルスの増殖を抑制することができる。特に、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に対しても増殖抑制効果を有するため、新型コロナウイルス感染症(COVID-19)を予防するために用いる抗ウイルス剤として効果的に使用することができる。 In the antibacterial and antiviral agent according to the present invention, a plurality of platinum nanoparticles can suppress the growth of bacteria and viruses. In particular, it can be effectively used as an antiviral agent to prevent the novel coronavirus infection (COVID-19) because it has a growth-inhibiting effect against the new coronavirus (SARS-CoV-2). can.

また、本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、スプレー容器に充填したスプレー製品とすることで、抗菌及び抗ウイルス効果を付与したい物品にスプレーすることで手軽に抗菌及び抗ウイルス効果を得ることができる。 In addition, the antibacterial and antiviral agent according to the present invention is a spray product filled in a spray container, so that the antibacterial and antiviral effects can be easily obtained by spraying it on the article to which the antibacterial and antiviral effects are desired. can.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、粒径がナノサイズの複数の白金ナノ粒子を有効成分とすること特徴とする。 The antibacterial and antiviral agent according to the present invention is characterized by containing a plurality of nano-sized platinum nanoparticles as active ingredients.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤の有効成分である白金ナノ粒子は、その粒径がナノサイズの白金粒子であればよく、好ましくは平均粒径が1~10nmの白金ナノ粒子であるのがよい。 The platinum nanoparticles, which are the active ingredients of the antibacterial and antiviral agents according to the present invention, may be nanosized platinum particles, preferably platinum nanoparticles with an average particle diameter of 1 to 10 nm. good.

また、本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、粒径がナノサイズの複数の白金ナノ粒子を含む白金ナノ粒子溶液であるのが好ましい。溶液の溶媒は、精製水等の水であるのがよい。多種多様な物品に対して安全に使用することができるからである。 Also, the antibacterial and antiviral agent according to the present invention is preferably a platinum nanoparticle solution containing a plurality of nanosized platinum nanoparticles. The solvent of the solution is preferably water such as purified water. This is because it can be safely used for a wide variety of articles.

上記白金ナノ粒子溶液は、粒径がナノサイズの白金粒子を溶液中に含んでいる。溶液中に含んでいる白金粒子の粒径はナノサイズであればよく、好ましくは平均粒径が1~10nmの白金ナノ粒子であるのがよい。 The platinum nanoparticle solution contains nanosized platinum particles in the solution. The particle size of the platinum particles contained in the solution may be nano-sized, preferably platinum nanoparticles having an average particle size of 1 to 10 nm.

本発明係る抗菌及び抗ウイルス剤に用いることのできる白金ナノ粒子溶液は、白金イオンを還元することで調整されてなることを特徴とし、例えば、平均粒径が1~10nmの白金ナノ粒子を含むコロイド溶液からなるものが挙げられる。このようなコロイド溶液は、例えば、塩化白金酸イオン(PtCl42-)とアスコルビン酸などの白金イオンに対して還元能力を有する還元剤を水中で反応させ、白金イオンを還元することで調製することができる。コロイド溶液を調製するための水中における白金イオン(塩化白金酸イオン)の濃度は0.001~0.1mol/Lとすることが望ましく、還元剤の濃度は白金イオンの濃度の5~20倍とすることが望ましい。なお、水中において白金イオンを安定に存在させるために、クエン酸などのヒドロキシカルボン酸(ナトリウム塩などの塩の形態であってもよい)を安定化剤として添加することが望ましい。水中における安定化剤の濃度は白金イオンの濃度の0.5~2倍とすることが望ましい。 The platinum nanoparticle solution that can be used for the antibacterial and antiviral agent according to the present invention is characterized by being prepared by reducing platinum ions, and contains, for example, platinum nanoparticles with an average particle size of 1 to 10 nm. One consisting of a colloidal solution can be mentioned. Such a colloidal solution can be prepared, for example, by reacting chloroplatinate ions (PtCl4 2− ) with a reducing agent capable of reducing platinum ions such as ascorbic acid in water to reduce the platinum ions. can be done. The concentration of platinum ions (chloroplatinate ions) in water for preparing the colloidal solution is preferably 0.001 to 0.1 mol/L, and the concentration of the reducing agent is 5 to 20 times the concentration of platinum ions. It is desirable to In order to stably exist platinum ions in water, it is desirable to add a hydroxycarboxylic acid such as citric acid (which may be in the form of a salt such as sodium salt) as a stabilizer. The concentration of the stabilizer in water is desirably 0.5 to 2 times the concentration of platinum ions.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、原材料(精製水・アスコルビン酸・クエン酸・白金)はすべて食品添加物であることから安全・安心な抗菌及び抗ウイルス剤として使用することができる。 The antibacterial and antiviral agent according to the present invention can be used as a safe and secure antibacterial and antiviral agent because all raw materials (purified water, ascorbic acid, citric acid, platinum) are food additives.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、抗菌及び抗ウイルス剤をスプレー容器に充填したスプレー製品であってもよい。本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤をスプレー容器に充填したスプレー製品とすることで、手軽に多種多様な製品に抗菌及び抗ウイルス性を付与することができる。スプレー容器は、抗菌及び抗ウイルス剤を収容するスプレー本体と、スプレー本体に取り付けられた噴霧機構を有するスプレーヘッドからなる。噴霧機構は特に制限されず、例えば、プッシュ式スプレータイプでもよく、トリガー式スプレータイプでもよい。 The antibacterial and antiviral agent according to the present invention may be a spray product filled with the antibacterial and antiviral agent in a spray container. By filling a spray container with the antibacterial and antiviral agent according to the present invention to prepare a spray product, it is possible to easily impart antibacterial and antiviral properties to a wide variety of products. The spray container consists of a spray body containing antibacterial and antiviral agents and a spray head having an atomizing mechanism attached to the spray body. The spray mechanism is not particularly limited, and may be, for example, a push-type spray type or a trigger-type spray type.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、マスク、被服、タオル、カーテン等の繊維製品、台所用品、入浴用品、浴槽、洗面台、トイレ、手指の消毒などに用いることができる。例えば、上記白金ナノ粒子溶液からなる抗菌及び抗ウイルス剤をスプレー容器に充填したスプレー製品を住宅の床に噴霧して、自然乾燥させればよい。白金ナノ粒子溶液からなる抗菌及び抗ウイルス剤をスプレー容器に充填したスプレー製品を噴霧することで、床材に白金ナノ粒子を付着させることができるため、住宅の床に抗菌及び抗ウイルス効果を付与することができる。 The antibacterial and antiviral agents according to the present invention can be used in textile products such as masks, clothes, towels, curtains, etc., kitchen utensils, bathing utensils, bathtubs, washstands, toilets, hand disinfection, and the like. For example, a spray product filled with the antibacterial and antiviral agent containing the above platinum nanoparticle solution in a spray container may be sprayed on the floor of a house and allowed to dry naturally. By spraying a spray product filled with an antibacterial and antiviral agent consisting of a platinum nanoparticle solution in a spray container, the platinum nanoparticles can be attached to the floor material, giving antibacterial and antiviral effects to the floor of the house. can do.

また、本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、抗菌効果によって菌の増殖が抑制されるため、不快な臭いを生じさせる菌の増殖を抑制することにより消臭効果が得られることから、マスク等の衛生製品やトイレ等の床への抗菌・消臭剤として好適に用いることができる。 In addition, since the antibacterial and antiviral agent according to the present invention suppresses the growth of bacteria due to its antibacterial effect, it is possible to obtain a deodorant effect by suppressing the growth of bacteria that cause unpleasant odors. It can be suitably used as an antibacterial and deodorant for sanitary products and floors such as toilets.

また、本発明は上記した抗菌及び抗ウイルス剤を塗布した繊維製品、樹脂成型品、セラミック成形品等であってもよい。繊維製品としては、例えばマスク等の衛生製品、被服、タオル、カーテン等が挙げられる。樹脂成型品としては、例えば歯ブラシの柄・毛や食品運搬用トレー、浴槽等が挙げられる。また、セラミック成形品としては、例えばトイレや洗面台等が挙げられる。 In addition, the present invention may be textile products, resin moldings, ceramic moldings, etc. coated with the antibacterial and antiviral agents described above. Textile products include, for example, sanitary products such as masks, clothes, towels, and curtains. Examples of resin molded products include toothbrush handles and bristles, trays for transporting food, and bathtubs. Examples of ceramic moldings include toilets and washbasins.

さらに、本発明は上記した抗菌及び抗ウイルス剤を含む繊維製品、樹脂成型品、セラミック成形品等であってもよい。繊維製品としては、例えばマスク等の衛生製品、被服、タオル、カーテン等が挙げられる。樹脂成型品としては、例えば歯ブラシの柄・毛や食品運搬用トレー、浴槽等が挙げられる。また、セラミック成形品としては、例えばトイレや洗面台等が挙げられる。 Furthermore, the present invention may be textile products, resin moldings, ceramic moldings, etc. containing the antibacterial and antiviral agents described above. Textile products include, for example, sanitary products such as masks, clothes, towels, and curtains. Examples of resin molded products include toothbrush handles and bristles, trays for transporting food, and bathtubs. Examples of ceramic moldings include toilets and washbasins.

[白金ナノ粒子溶液の調製]
0.208gの塩化白金酸カリウム(KPtCl)を50mLの純水に溶解して0.01mol/L(Pt(0)として0.050g/L)の塩化白金酸カリウム水溶液を調製した。また、別途、0.129gのクエン酸ナトリウムを50mLの純水に溶解して0.01mol/L(0.066g/mL)のクエン酸ナトリウム水溶液を、0.881gのアスコルビン酸を50mLの純水に溶解して0.1mol/L(0.452g/L)のアスコルビン酸水溶液をそれぞれ調製した。上記の0.01mol/L塩化白金酸カリウム水溶液50mLを1800mLの純水に加えた後、さらに0.01mol/Lクエン酸ナトリウム水溶液50mLと0.1mol/Lアスコルビン酸水溶液50mLをそれぞれ加え、約5分間強く撹拌することで、平均粒径が4nmの白金のコロイド状粒子(以下「白金ナノ粒子」と言う。)を含む溶液、すなわち白金ナノ粒子溶液を得た。なお、平均粒径の測定は溶液を分散・乾固させて行った電界放出型走査電子顕微鏡測定による。なお、この様な「白金ナノ粒子溶液」は取引市場で販売されており、入手可能である。
[Preparation of platinum nanoparticle solution]
0.208 g of potassium chloroplatinate (K 2 PtCl 4 ) was dissolved in 50 mL of pure water to prepare a 0.01 mol/L (0.050 g/L as Pt(0)) potassium chloroplatinate aqueous solution. Separately, 0.129 g of sodium citrate was dissolved in 50 mL of pure water to prepare a 0.01 mol/L (0.066 g/mL) sodium citrate aqueous solution, and 0.881 g of ascorbic acid was dissolved in 50 mL of pure water. to prepare a 0.1 mol/L (0.452 g/L) ascorbic acid aqueous solution. After adding 50 mL of the above 0.01 mol/L potassium chloroplatinate aqueous solution to 1800 mL of pure water, 50 mL of 0.01 mol/L sodium citrate aqueous solution and 50 mL of 0.1 mol/L ascorbic acid aqueous solution were added, respectively, and about 5 By vigorously stirring for 1 minute, a solution containing platinum colloidal particles having an average particle diameter of 4 nm (hereinafter referred to as “platinum nanoparticles”), ie, a platinum nanoparticle solution, was obtained. The average particle size was measured by a field emission scanning electron microscope in which the solution was dispersed and dried. It should be noted that such "platinum nanoparticle solutions" are sold and available on the trading market.

[抗菌性試験1]
実施例1で調整した「白金ナノ粒子溶液」を400倍の水により希釈化されてなる白金ナノ粒子水溶液のMRSA(メチシリン耐性黄色ブドウ球菌)に対する抗菌性試験を行った。
[Antibacterial test 1]
An antibacterial activity test against MRSA (methicillin-resistant Staphylococcus aureus) was performed on an aqueous platinum nanoparticle solution obtained by diluting the "platinum nanoparticle solution" prepared in Example 1 with 400 times water.

抗菌性試験の方法は、JIS1902:2008定量試験(菌液吸収法)を準用したものであり、生菌数の測定方法は混釈平板培養法に依っている。抗菌性試験は、0.4gの液量の白金ナノ粒子溶液を綿布に浸み込まされた後に、MRSAの菌液0.2mlを接種した。MRSA(メチシリン耐性黄色ブドウ球菌)に対する抗菌性試験の結果を、表1に示す。 The method of the antibacterial test is based on JIS1902:2008 quantitative test (bacterial liquid absorption method), and the method of measuring the number of viable bacteria is based on the pour plate culture method. In the antibacterial test, 0.4 g of platinum nanoparticle solution was impregnated into cotton cloth, and then 0.2 ml of MRSA bacterial solution was inoculated. Table 1 shows the results of the antibacterial test against MRSA (methicillin-resistant Staphylococcus aureus).

Figure 2022167716000001
Figure 2022167716000001

ここで、「増殖値」とは、白金ナノ粒子を含んでいない標準綿布において、植菌後18時間内に生菌が増殖した対数値である。 Here, the "growth value" is the logarithmic value of the growth of viable bacteria within 18 hours after inoculation on a standard cotton cloth containing no platinum nanoparticles.

また、「殺菌活性値」は、植え付けた菌を一定時間後にどの程度減少させたかを示す指標で あり、対数表示で示される。即ち、「殺菌活性値」の評価は、
1)「殺菌活性値」が負の場合・・・「与えた菌が増加している」
2)「殺菌活性値」が0の場合・・・「与えた菌の増減はゼロ」
3)「殺菌活性値」が正の場合・・・「与えた菌が減少している」
4)「殺菌活性値」が1の場合・・・「与えた菌が十分の一に減少している」
5)「殺菌活性値」が3の場合・・・「与えた菌が千分の一に減少している」
となる。
"Bactericidal activity value" is an index showing how much the inoculated bacteria are reduced after a certain period of time, and is expressed in logarithm. That is, the evaluation of the "bactericidal activity value" is
1) If the "Bactericidal activity value" is negative ... "The number of given bacteria is increasing"
2) When the "Bactericidal activity value" is 0 ... "The number of bacteria given is zero"
3) If the "Bactericidal activity value" is positive ... "The number of given bacteria is decreasing."
4) When the "Bactericidal activity value" is 1 ... "The number of given bacteria has decreased to one tenth"
5) When the "Bactericidal activity value" is 3 ... "The number of given bacteria is reduced to 1/1000"
becomes.

また、「静菌活性値」は、抗菌処理をしていない試料と比較して、処理した試料がどの程度菌の増殖を抑制したかを示す数値であり、抗菌防臭効果を判断するための数値である。JIS規格では、「抗菌防臭効果あり。」の評価の基準は、「静菌活性値」が2.0以上の場合である。 In addition, the "bacteriostatic activity value" is a numerical value indicating how much the treated sample inhibited the growth of bacteria compared to the sample without antibacterial treatment, and is a numerical value for judging the antibacterial and deodorant effect. is. According to the JIS standard, the evaluation criteria for "having antibacterial and deodorizing effects" is when the "bacteriostatic activity value" is 2.0 or more.

表1より、白金ナノ粒子溶液はMRSA(メチシリン耐性黄色ブドウ球菌)に対して十分に抗菌性を有していることが示されている。 Table 1 shows that the platinum nanoparticle solution has sufficient antibacterial properties against MRSA (methicillin-resistant Staphylococcus aureus).

[抗菌性試験2]
実施例1で調整した「白金ナノ粒子溶液」を400倍の水により希釈化されてなる白金ナノ粒子水溶液の黄色ブドウ球菌に対する抗菌性試験を行った。
[Antibacterial test 2]
An antibacterial activity test against Staphylococcus aureus was performed on an aqueous platinum nanoparticle solution obtained by diluting the "platinum nanoparticle solution" prepared in Example 1 with 400 times water.

抗菌性試験の方法は、同様にJIS1902:2008定量試験(菌液吸収法)を準用したものであり、生菌数の測定方法は混釈平板培養法に依っている。抗菌性試験は、0.4gの液量の白金ナノ粒子溶液を綿布に浸み込まされた後に、黄色ブドウ球菌の菌液0.2mlを接種した。黄色ブドウ球菌に対する抗菌性試験の結果を、表2に示す。 The method of the antibacterial test similarly applies JIS 1902:2008 quantitative test (bacterial liquid absorption method), and the method of measuring the number of viable bacteria is based on the pour plate culture method. In the antibacterial test, 0.4 g of platinum nanoparticle solution was impregnated into cotton cloth, and then 0.2 ml of Staphylococcus aureus bacterial solution was inoculated. Table 2 shows the results of the antibacterial test against Staphylococcus aureus.

Figure 2022167716000002
Figure 2022167716000002

表2より、白金ナノ粒子溶液は黄色ブドウ球菌に対して十分に抗菌性を有していることが示されている。 Table 2 shows that the platinum nanoparticle solution has sufficient antibacterial properties against Staphylococcus aureus.

[抗ウイルス性試験]
実施例1で調整した「白金ナノ粒子溶液」を50倍の水により希釈化されてなる白金ナノ粒子水溶液の新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に対する抗ウイルス性試験を行った。
[Antiviral test]
An antiviral test against the novel coronavirus (SARS-CoV-2) was performed on an aqueous solution of platinum nanoparticles obtained by diluting the "platinum nanoparticle solution" prepared in Example 1 with 50 times water.

[試験条件]
試験条件は以下の通りとした。
・試験サンプル:白金ナノ粒子溶液 50倍希釈液
・試験ウイルス:Severe acute respiratory syndrome coronavirus2(SARS-CoV-2)
与)
・対照サンプル(Negative control):Phosphate buffered saline(PBS)
[Test conditions]
The test conditions were as follows.
・Test sample: Platinum nanoparticle solution 50-fold dilution ・Test virus: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2)
giving)
- Control sample (Negative control): Phosphate buffered saline (PBS)

[試験方法]
宿主細胞にウイルスを感染させ、EMEMを加え37℃で所定時間培養後、4℃、1,000×gで15分間遠心分離した上清をEMEMを用いて10倍希釈したものを試験ウイルス懸濁液とした。
[Test method]
Host cells were infected with virus, EMEM was added, cultured at 37°C for a predetermined time, centrifuged at 1,000 xg at 4°C for 15 minutes, and the supernatant was diluted 10-fold with EMEM to prepare a test virus suspension. liquid.

[宿主細胞検証試験]
本試験を行う前に、宿主細胞検証試験(細胞毒性確認試験及びウイルス細胞の感受性確認試験)を行った。なお、宿主細胞検証試験は、以下の基準を満たすことを判断基準とする。
・細胞毒性:無し
・ウイルスへの細胞の感受性確認:lg(PBSのウイルス感染価(PFU/mL))-lg(Sampleのウイルス感染価(PUF/mL))≦0.5
[Host cell verification test]
Prior to the main test, host cell verification tests (cytotoxicity confirmation test and virus cell sensitivity confirmation test) were conducted. The host cell verification test shall be judged based on the following criteria.
・Cytotoxicity: None ・Confirmation of cell susceptibility to virus: lg (viral infectious titer of PBS (PFU/mL)) - lg (viral infectious titer of sample (PUF/mL)) ≤ 0.5

[細胞毒性確認試験]
(1)試験サンプル1.9mLにEMEM0.1mLを加え、十分に攪拌する。これを試験液とする。
(2)薬剤不活化剤0.9mlに試験液0.1mlを添加し、十分に攪拌する。
(3)2%FBS含DMEMを用いて、10倍希釈系列を作製する。
(4)プラーク測定法にて各希釈系列の細胞毒性の有無を確認する。
[Cytotoxicity confirmation test]
(1) Add 0.1 mL of EMEM to 1.9 mL of test sample and stir thoroughly. This is used as the test solution.
(2) Add 0.1 ml of the test solution to 0.9 ml of the drug inactivating agent and stir thoroughly.
(3) Prepare a 10-fold dilution series using DMEM containing 2% FBS.
(4) Confirm the presence or absence of cytotoxicity in each dilution series by plaque assay.

[ウイルス細胞の感受性確認試験]
(1)試験サンプル1.9mLにEMEM0.1mLを加え、十分に攪拌する。これを試験液とする。
(2)薬剤不活性化剤(SCDLPを2%FBS含DMEMで10倍希釈した溶液)4.5mlに試験液0.5mlを添加し、十分に攪拌する。
(3)2%FBS含DMEMを用いて、10倍希釈系列を作製する。
(4)EMEMを用いて4~6×10PFU/mLに調製したウイルス懸濁液を(3)の各希釈系列の1/100量添加する。
(5)室温で10分間静置する。
(6)プラーク測定法にて各希釈系列1mL当たりのウイルス感染価を測定し、ウイルスへの細胞の感受性を確認する。
[Virus cell susceptibility confirmation test]
(1) Add 0.1 mL of EMEM to 1.9 mL of test sample and stir thoroughly. This is used as the test solution.
(2) Add 0.5 ml of the test solution to 4.5 ml of a drug deactivator (a solution obtained by diluting SCDLP 10-fold with DMEM containing 2% FBS) and stir thoroughly.
(3) Prepare a 10-fold dilution series using DMEM containing 2% FBS.
(4) Add 1/100 of each dilution series in (3) to a virus suspension adjusted to 4 to 6×10 4 PFU/mL using EMEM.
(5) Allow to stand at room temperature for 10 minutes.
(6) Measure the virus infectivity titer per 1 mL of each dilution series by the plaque assay method to confirm the susceptibility of the cells to the virus.

Figure 2022167716000003
宿主細胞検証試験の結果を表3に示す。試験液を薬剤不活化剤で10倍希釈することにより、検体の影響を受けずにウイルス感染価測定ができることを確認した。なお、ウイルス細胞の感受性確認試験における試験ウイルス懸濁液濃度は、4.7×10PFU/mlであった。
Figure 2022167716000003
The results of host cell validation studies are shown in Table 3. It was confirmed that the virus infectivity titer can be measured without being affected by the sample by diluting the test solution 10-fold with the drug inactivating agent. The test virus suspension concentration in the virus cell sensitivity confirmation test was 4.7×10 4 PFU/ml.

[本試験]
本試験方法は、以下の通り行った。
(1)試験サンプル1.9mLに試験ウイルス懸濁液(懸濁液濃度:1.2×10PFU/ml)0.1mLを加え、十分に攪拌する。
(2)25℃で18時間、静置する。これを試験液とする。
(3)宿主細胞検証試験で不活化が確認された条件で試験液を不活化する。これを反応停止液とする。
(4)上記(3)の反応停止液を10として、2%FBS含DMEMで10倍希釈系列を作製し、反応停止液0.1ml当たりのウイルス感染価をプラーク測定法にて測定し、試験液1ml当たりのウイルス感染価(抗ウイルス活性値)を算出する。抗ウイルス活性値が3.0以上であれば、そのウイルスに対して十分な抗ウイルス効果があると判断できる。新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に対する抗ウイルス性試験の結果を表4に示す。
[Main test]
This test method was performed as follows.
(1) Add 0.1 mL of test virus suspension (suspension concentration: 1.2×10 7 PFU/ml) to 1.9 mL of test sample and stir thoroughly.
(2) Allow to stand at 25° C. for 18 hours. This is used as the test solution.
(3) Inactivate the test solution under conditions where inactivation was confirmed in the host cell verification test. This is used as a reaction stopping solution.
(4) Assuming that the reaction stop solution in (3) above is 100, prepare a 10-fold dilution series with DMEM containing 2 % FBS, and measure the virus infectivity titer per 0.1 ml of the reaction stop solution by a plaque assay method, Calculate the virus infection titer (antiviral activity value) per 1 ml of the test solution. If the antiviral activity value is 3.0 or more, it can be judged that there is a sufficient antiviral effect against the virus. Table 4 shows the results of antiviral tests against the novel coronavirus (SARS-CoV-2).

Figure 2022167716000004
Figure 2022167716000004

表4より、Negative controlは18時間作用後もウイルス感染価の常用対数値はほぼ変化がなかったのに対して、白金ナノ粒子溶液はウイルス感染価の常用対数値の減少が見られた。18時間後のNegative controlとの常用対数値差(抗ウイルス活性値)は3.3であり、白金ナノ粒子溶液は99.9%新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)を減少させており白金ナノ粒子50倍希釈水溶液は高い抗ウイルス効果を有していることが示されている。 From Table 4, the negative control showed almost no change in the common logarithm of the virus infectivity even after 18 hours of action, whereas the platinum nanoparticle solution showed a decrease in the common logarithm of the virus infectivity. The common logarithmic difference (antiviral activity value) from negative control after 18 hours was 3.3, and the platinum nanoparticle solution reduced 99.9% of the new coronavirus (SARS-CoV-2). It has been shown that a 50-fold diluted aqueous solution of nanoparticles has a high antiviral effect.

[消臭性試験]
実施例1で調整した「白金ナノ粒子溶液」を800倍の水により希釈化されてなる白金ナノ粒子水溶液の消臭性について試験を行った。試験方法は、社団法人繊維評価技術協議会の消臭加工繊維製品認証基準を準用したものである。試験条件は、ガス初期濃度をアンモニアが1000ppm(10ml)、酢酸が50ppm(10ml)、イソ吉草酸が約38ppm(10ml)とし、測定時間を試験開始時から2時間経過後とした。消臭効果減少率は75%以上が合格となる。
[Deodorant test]
The deodorant property of an aqueous platinum nanoparticle solution prepared by diluting the "platinum nanoparticle solution" prepared in Example 1 with 800 times water was tested. The test method is based on the certification standards for deodorant processed textile products of the Textile Evaluation Technology Council. The test conditions were as follows: initial gas concentrations were 1000 ppm (10 ml) for ammonia, 50 ppm (10 ml) for acetic acid, and about 38 ppm (10 ml) for isovaleric acid, and the measurement time was 2 hours after the start of the test. A deodorizing effect reduction rate of 75% or more is acceptable.

Figure 2022167716000005
Figure 2022167716000005

表5より、悪臭の源となるアンモニア、酢酸、イソ吉草酸に対して高い消臭性能を有していることが示されている。 Table 5 shows that it has high deodorizing performance against ammonia, acetic acid, and isovaleric acid, which are sources of offensive odors.

その他、本発明は、その主旨を逸脱しない範囲で当業者の知識に基づき種々の改良、修正、変更を加えた態様で実施できるものである。 In addition, the present invention can be implemented with various improvements, modifications, and changes based on the knowledge of those skilled in the art without departing from the spirit of the present invention.

本発明に係る抗菌及び抗ウイルス剤は、ナノサイズの粒径の複数の白金ナノ粒子を有効成分とするため、多種多様な物品に対する安全な抗菌及び抗ウイルス剤として利用することができる。

Since the antibacterial and antiviral agent according to the present invention contains a plurality of nano-sized platinum nanoparticles as active ingredients, it can be used as a safe antibacterial and antiviral agent for a wide variety of articles.

Claims (5)

粒径がナノサイズの複数の白金ナノ粒子を有効成分とする抗菌及び抗ウイルス剤。 An antibacterial and antiviral agent containing, as an active ingredient, a plurality of nanosized platinum nanoparticles. 粒径がナノサイズの複数の白金ナノ粒子を含む白金ナノ粒子溶液からなる抗菌及び抗ウイルス剤。 An antibacterial and antiviral agent comprising a platinum nanoparticle solution containing a plurality of nanosized platinum nanoparticles. 新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に対する抗ウイルス性を有する請求項1又は2に記載の抗菌及び抗ウイルス剤。 3. The antibacterial and antiviral agent according to claim 1 or 2, which has antiviral properties against novel coronavirus (SARS-CoV-2). 抗ウイルス活性値が3.0以上である請求項3に記載の抗菌及び抗ウイルス剤。 4. The antibacterial and antiviral agent according to claim 3, which has an antiviral activity value of 3.0 or more. 請求項1から4のいずれか1項に記載の抗菌及び抗ウイルス剤をスプレー容器に充填してなる、スプレー製品。
A spray product comprising a spray container filled with the antibacterial and antiviral agent according to any one of claims 1 to 4.
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