JP2021510804A - 汗の悪臭の抑制 - Google Patents

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Abstract

本開示は、体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物をスクリーニングするための方法に関する。特に、この方法は、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および／または悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物により引き起こされる汗の悪臭の発生を防止する能力を有する化合物をスクリーニングする。本開示は、汗の中に存在する悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および／または悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物の前駆体が存在することを決定するための感度分析法に基づいており、これらの前駆体は、例えばコルネバクテリアまたはスタフィロコッカスのような細菌により代謝されて、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物になる。

Description

関連出願の相互参照
本願は、２０１８年１月１０日に出願された国際特許出願ＰＣＴ／ＣＮ２０１８／０７２１００号の優先権を主張し、ここでは、その全体を参照することにより、その内容について取り入れるものとする。
本開示は、体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物をスクリーニングする方法に関する。特に、この方法は、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および／または悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物により引き起こされる汗の悪臭の発生を防止する能力を有する化合物をスクリーニングする。本開示は、汗の中に存在する悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および／または悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物の前駆体が存在することを決定するための感度分析法に基づいており、これらの前駆体は、コルネバクテリア（Ｃｏｒｎｅｂａｃｔｅｒｉａ）またはスタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）のような細菌により代謝されて、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物になる。
背景技術
腋窩の悪臭防止は、科学上の努力において常に課題となっている。アポクリン汗腺から分泌される汗は無臭である。しかし、腋窩の悪臭は、腋窩に生息するよう進化し、かつアポクリン汗に見られる無臭の前駆体の特有のカクテルによって成長することに十分に適した細菌の特定の菌株による代謝活動の結果として発生する。
汗の中に悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および／または悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物が存在することを決定するための分析方法を使用すれば、例えば、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物および／または悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物の形成を抑制する化合物の効果的なスクリーニング法を実現することにより、被験者における腋窩の悪臭発生と、より効果的に闘うことができるだろう。
発明の概要
体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物を同定する方法であって、
ａ． 被験者と試験化合物とを接触させるステップ、
ｂ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を含むサンプルを被験者の腋窩のヘッドスペースから採取するステップ、
ｃ． 採取サンプルを吸着材に吸着させるステップ、および
ｄ． 吸着させた採取サンプル中で、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）からなる群より選択される少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物の量を決定するステップ
を含み、
決定ステップが熱脱着ＧＣ／ＭＳにより実施され、
少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物の量が、未治療の被験者から採取したサンプルにおける少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物の量に比べて少ない場合、試験化合物が体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減している、
前記方法。
体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物を同定する方法であって、
ａ． 被験者と試験化合物とを接触させるステップ、
ｂ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を含むサンプルを、被験者から得られる衣類のサンプルから採取するステップ、
ｃ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、被験者の衣類の採取サンプルから溶媒により抽出するステップ、
ｄ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルを形成するステップ、
ｅ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルを抽出し、それにより、抽出サンプルを形成するステップ、および
ｆ． 抽出サンプル中にて、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）および３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）からなる群より選択される悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の少なくとも１種のエステルの量を決定するステップ、
を含み、
決定ステップがＧＣ−ＭＳ／ＭＳにより実施され、
少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の抽出されたエステルの量が、未治療の被験者から採取したサンプルにおける少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の抽出されたエステルの量に比べて少ない場合、試験化合物が体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減している、
前記方法。
本明細書に示される幾つかの態様にあるように、悪臭を引き起こす揮発性化合物である３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）が、それらの各前駆体から、コリネバクテリア（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉａ）由来の亜鉛依存性アミノアシラーゼまたはスタフィロコッカス由来のβ−リアーゼの作用により形成されることを図示したものを示す。 従来の方法を使用して得られる３Ｍ２Ｈサンプルの３つの反復ＧＣ−ＭＳ／ＭＳクロマトグラフを示す。 本明細書に示される幾つかの態様による検出装置を示す。幾つかの実施形態では、図中の描写とは異なり、サンプリングセルが、シャツなしで皮膚と直接接触する。 本明細書に示される方法により得られる代表的なクロマトグラムを示す。 本明細書に示される幾つかの態様による検出装置および方法を示す。 本明細書に示される方法により得られる代表的なクロマトグラムを示す。 本明細書に示される方法により得られる代表的な反復クロマトグラムを示す。 本明細書に示される方法により得られる代表的なクロマトグラムを示す。
詳細な説明
以下の説明では、例示的に示される実施可能な特定の実施形態を参照する。これらの実施形態は、当業者が本明細書に記載の発明を実施することができるように詳細に説明されている。また、その他の実施形態を用いてもよく、本明細書に示される態様の範囲から逸脱することなく論理的変更を加えてもよいと理解されるべきである。よって、例示的な実施形態の以下の説明は、限定的な意味合いで解釈されるべきではなく、本明細書に示される様々な態様の範囲は、添付のクレームにより定められる。
要約書は、読み手がこの技術的開示の性質および要旨をすぐに確認することができるように、３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．７２（ｂ）に準拠して作成される。要約書は、クレームの範囲または意味を解釈または制限するために使用されるわけではないという理解のもとで提出される。
本明細書に示される幾つかの態様による検出方法
図１を参照すると、汗は、グルタミンのコンジュゲートを含むか、または３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オールの場合、３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オールのシステイニルグリシン−Ｓコンジュゲートを含む、特定の無臭前駆体化合物を含有する。被験者の皮膚の表面に存在する細菌、例えばコリネバクテリアまたはスタフィロコッカスは、無臭前駆体化合物を代謝して、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）に変え、悪臭をもたらす。代謝は、コリネバクテリア由来の亜鉛依存性アミノアシラーゼまたはスタフィロコッカス由来のβ−リアーゼにより触媒される。
特定の理論に限定されることを意図するものではないが、３Ｍ２ＨおよびＨＭＨＡの臭気検出閾値は低い（３Ｍ２Ｈ：揮発度−４０μｇ／Ｌ、ＯＤＴ−１．４４〜２．５９×１０−４μｇ／Ｌ；ＨＭＨＡ：揮発度−０．２９μｇ／Ｌ、ＯＤＴ−１．４９〜２．００×１０−４μｇ／Ｌ）。その結果、被験者は、３Ｍ２ＨまたはＨＭＨＡが少量存在しているだけでも、強い悪臭を感じることがある。
特定の理論に限定されることを意図するものではないが、汗の中に存在する悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の前駆体が存在することを決定する分析方法を使用すれば、例えば、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の形成を抑制する化合物の効果的なスクリーニング法を実現することにより、被験者における腋窩の悪臭発生とより効果的に闘うことができるだろう。図２を参照すると、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）を検出するための既存の方法の再現性および／または感度は低い。再現性および／または感度が低下する一因となる要因としては、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物が検出装置に吸着すること、汗中に少量が存在していることなどが挙げられるが、これらに限定されることはない。図２は、従来の方法の再現性が低いこと、あるいは機器の金属表面へのサンプルの吸着の結果を示す。
本開示では、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）を検出するための方法の感度を、悪臭を引き起こす揮発性化合物の検出装置への吸着を低減することにより増加させる分析方法が提供される。本開示では、悪臭を引き起こす揮発性化合物を直接的に検出および定量化する２つの方法が提供される。本明細書で使用されているように、「悪臭を引き起こす揮発性化合物」という用語は、酸である３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）（本明細書では「悪臭を引き起こす揮発性酸化合物」と称される）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）（本明細書では「悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物」と称される）を含む。
一態様において、本開示では、揮発性の悪臭を引き起こす揮発性化合物を、被験者の腋窩のヘッドスペースから選択イオンモニタリング（ＳＩＭ）モードの熱脱着ＧＣ−ＭＳにより直接的に検出および定量化する方法が提供される。代替的な態様において、本開示では、揮発性の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、被験者から汗のサンプルを採取するために用いられる被験者の衣料品または綿棒またはその他の吸収材から直接的に検出および定量化する方法であって、揮発性悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、濃縮、誘導体化、およびＧＣ−ＭＳ／ＭＳにより定量化する方法が提供される。
幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜１００ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜９０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜８０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜７０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜６０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜５０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜４０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜３０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜２０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜１０ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜９ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜８ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜７ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜６ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜５ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜４ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜３ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜２ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を０．５〜１ｎｇの範囲の濃度で検出することが可能である。
幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜５μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜４μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜３μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜２μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜１μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．９μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．８μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．７μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．６μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．５μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．４μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．３μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．２μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．１μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０９μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０８μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０７μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０６μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０５μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０４μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０３μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。幾つかの態様において、本明細書に示される方法は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を０．０１〜０．０２μｇ／ｍｌの範囲の濃度で検出することが可能である。
幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物は、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）からなる群より選択される。
本明細書に示される方法による検出に適したその他の悪臭を引き起こす揮発性化合物としては、Ｃ６〜Ｃ１１脂肪酸、（Ｚ）−３−メチル−２−ヘキセン酸（Ｚ３Ｍ２Ｈ）、米国特許第９，１０１，７８３号明細書に開示されている悪臭を引き起こす揮発性酸化合物、および国際特許出願第２００６／０７９９３４号に開示されている悪臭を引き起こす揮発性酸化合物が挙げられる。
幾つかの態様において、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は３Ｍ２Ｈである。
幾つかの態様において、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物はＨＭＨＡである。
幾つかの態様において、悪臭を引き起こす揮発性硫黄化合物はＭＳＨである。
検出方法：例１、ならびに図３および４を参照すると、幾つかの態様において、本開示では、
被験者から得られるサンプル中の少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を検出する方法であって、
ａ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を含むサンプルを被験者の腋窩のヘッドスペースから採取するステップ、
ｂ． 採取サンプルを吸着材に吸着させるステップ、および
ｃ． 吸着させた採取サンプル中にて、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）からなる群より選択される少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物の量を決定するステップ、
を含み、
決定ステップが熱脱着ＧＣ／ＭＳにより実施される、
方法が提供される。
図３を参照すると、幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を含むサンプルは、開口端を有するサンプリングセルと、サンプリングセルおよび開口端の末端部に流体連通した吸着樹脂を含むサンプリングチューブと、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して空気を引き込むように構成されたポンプとを含むサンプリング装置を使用して採取される。採取の間、被験者は、サンプリングセルをその腋窩の下に配置し、サンプリングセルの開口端は、被験者の皮膚表面にしっかりと接触させられる。
幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して６０分まで引き込まれる。
幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して１５〜６０分にわたり引き込まれる。
幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して６０分にわたり引き込まれる。幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して５０分にわたり引き込まれる。幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して４０分にわたり引き込まれる。幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して３０分にわたり引き込まれる。幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して２０分にわたり引き込まれる。幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して１０分にわたり引き込まれる。
幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して１００〜２００ｍＬ／分の速度で引き込まれる。幾つかの態様において、空気は、サンプリングセルおよびサンプリングチューブを通して１５０ｍＬ／分の速度で引き込まれる。
幾つかの態様において、採取ステップは繰り返される。このステップは、同じ腋窩で繰り返されても、あるいは被験者のもう一方の腋窩で繰り返されてもよい。
幾つかの態様において、サンプリングセルおよび／またはサンプリングチューブの表面は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物がサンプリングセルおよび／またはサンプリングチューブの表面に吸着することを防止、低減または抑制する薬剤により処理される。幾つかの態様において、この処理は、表面と、トルエンに入れたジクロロジメチルシラン（ＤＭＤＣＳ）の５％ｖ／ｖ溶液とを１５分にわたり接触させ、続いてトルエンで少なくとも１回すすぐことを含む。
幾つかの態様において、吸着材は、揮発性化合物を捕捉するように構成された物質、例えば、吸着樹脂、ガラスウール、ガラスビーズなどを含む。
幾つかの態様において、吸着材は、商標名ＴＥＮＡＸ ＴＡで販売されている吸着樹脂、商標名ＴＥＮＡＸ ＧＲで販売されている吸着樹脂、商標名ＣＡＲＢＯＴＲＡＰで販売されている吸着樹脂、商標名ＣＡＲＢＯＴＲＡＰ Ｃで販売されている吸着樹脂、商標名ＣＡＲＢＯＳＩＥＶＥ ＳＩＩＩで販売されている吸着樹脂、および商標名ＣＡＲＢＯＸＥＮ５６９で販売されている吸着樹脂からなる群より選択される吸着樹脂を含む。
幾つかの態様において、吸着材は、商標名ＴＥＮＡＸ ＴＡで販売されている吸着樹脂である。
幾つかの態様において、吸着材は前処理されている。前処理により、この検出方法の感度を増加させることができる。幾つかの態様において、前処理により、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物が、サンプリングセルおよび／またはサンプリングチューブの表面に吸着することを低減するか、防止するか、または減少させることができる。
幾つかの態様において、前処理は、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物がサンプリングセルおよび／またはサンプリングチューブの表面に吸着することを防止、低減または抑制する薬剤による第一の処理、続いて第二の処理を含む。幾つかの態様において、第一の処理は、吸着材と、トルエンに入れたジクロロジメチルシラン（ＤＭＤＣＳ）の５％ｖ／ｖ溶液とを１５分にわたり接触させ、続いてトルエンで少なくとも１回すすぐことを含む。
幾つかの態様において、吸着材は、第一の処理の後に、不活性ガス、例えばＮ２を使用して乾燥させられる。幾つかの態様において、第二の処理は、乾燥させられた吸着材をアセトンで処理すること、続いて不活性ガスを使用した乾燥ステップを含む。
幾つかの態様において、吸着材はアセトンで前処理され、不活性ガス、例えばＮ２を使用した乾燥ステップが続く。
サンプリングセルは、当業者により容易に選択可能な材料、例えば、ガラス、ステンレス鋼などから作製され得る。
幾つかの態様において、決定ステップは熱脱着ＧＣ／ＭＳにより実施され、ここで、採取サンプルは分析カラムを通り、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、選択イオンモニタリング（ＳＩＭ）モードで定量化される。幾つかの態様において、採取サンプルはＤＢ−ｗａｘカラムを通る。あるいは、採取サンプルは、ＤＢ−１、ＤＢ−５、ＤＢ−１７、ＤＢ−２３またはＤＢ−ＦＦＡＰカラムを通る。代表的なクロマトグラフは図４に示される。
例２および図５を参照すると、幾つかの態様において、本開示では、
被験者から得られるサンプル中の少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を検出する方法であって、
ａ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を含むサンプルを、被験者から得られる衣類のサンプルから採取するステップ、
ｂ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、被験者の衣類の採取サンプルから溶媒により抽出するステップ、
ｃ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルを形成するステップ、
ｄ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルを抽出し、それにより、抽出サンプルを形成するステップ、
ｅ． 抽出サンプル中で、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）および３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）からなる群より選択される悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の少なくとも１種のエステルの量を決定するステップ、
を含み、
決定ステップがＧＣ−ＭＳ／ＭＳにより実施される、
方法が提供される。
図５を参照すると、幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、
ａ． 被験者が着用している衣料品の脇下部分を採取するステップ、および
ｂ． 採取した衣類の一部を溶媒中で超音波処理し、それにより、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を得るステップ、
を含む方法により、被験者の衣類から抽出される。
幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、吸着パッド、例えば綿棒などから、
ａ． 被験者の汗のサンプルを採取するのに十分な時間にわたり被験者の皮膚の領域に吸着パッドをあてるステップ、および
ｂ． 被験者の汗のサンプルを含む吸着パッドを溶媒中で超音波処理し、それにより、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を得るステップ、
を含む方法により抽出される。
幾つかの態様において、溶媒は５％ｖ／ｖのエタノール水溶液である。
幾つかの態様において、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のｐＨは、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物がアニオンであることを確実にするように調整される。幾つかの態様において、ｐＨは、ｐＨ５．６〜ｐＨ９の範囲にある。
幾つかの態様において、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のｐＨがｐＨ７に調整されるように、緩衝液でさらに処理される。幾つかの態様において、緩衝液は、５０ｍＭの酢酸ナトリウムである。
幾つかの態様において、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、アニオン交換樹脂に適用される。幾つかの態様において、アニオン交換樹脂は、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の適用前に、事前調整される。
幾つかの態様において、事前調整は、メタノール、続いてエタノールによる処理を含む。
幾つかの態様において、アニオン交換樹脂は、商標名ＳＰＥで販売されているアニオン交換樹脂、商標名ＳＡＭＰＬＩＱ ＳＡＸで販売されているアニオン交換樹脂、商標名ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ ＳＴＲＡＴＡ−Ｘ−Ａで販売されているアニオン交換樹脂、商標名Ａｇｉｌｅｎｔ ＳＡＭＰＬＩＱ ＳＡＸで販売されているアニオン交換樹脂、および商標名ＨＹＰＥＲＳＥＰ ＳＡＸで販売されているアニオン交換樹脂からなる群より選択される。
幾つかの態様において、アニオン交換樹脂は、商標名ＳＰＥで販売されているアニオン交換樹脂と類似したアニオン交換基を有するアニオン交換樹脂であってもよい。
幾つかの態様において、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、メチル、エチル、プロピルまたはブチルエステルに変換され得る。これらの態様において、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、ＢＦ３、ならびにメタノール、エタノール、プロパノールおよびブタノールからなる群より選択されるアルコールと反応し得る。
幾つかの態様において、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物とＢＦ３／アルコールとの反応は、
ａ． 抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物がＳＰＥカートリッジに適用された後に、カートリッジを５０ｍＭの酢酸ナトリウム２ｍＬで洗浄するステップ、
ｂ． 適用された抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、６ｍＬのアルコールで溶出させ、続いて、２％のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を有する６ｍＬのアルコールで溶出させるステップ、
ｃ． 溶出液を採取するステップ、
ｄ． 採取した溶出液を２ｍＬの三フッ化ホウ素（１４％ｗ／ｗ）で処理するステップ、
ｅ． 連続的に撹拌しながら、処理された溶出液を６０℃で３時間にわたりインキュベートするステップ、
ｆ． インキュベートした溶出液を室温に冷却し、冷却した溶出液に１ｍｌの水を添加することにより反応を停止させるステップ、
ｇ． ＴＦＡを中和し、インキュベートした溶出液のｐＨを、０．５ＭのＮａＨＣＯ３を添加することにより、ｐＨ６〜ｐＨ７の範囲のｐＨに調整するステップ、
を含む方法により達成される。
幾つかの態様において、抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物とＢＦ３／メタノールとの反応は、
ａ． 抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物がＳＰＥカートリッジに適用された後に、カートリッジを５０ｍＭの酢酸ナトリウム２ｍＬで洗浄するステップ、
ｂ． 適用された抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、６ｍＬのＭｅＯＨで溶出させ、続いて、２％のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を有する６ｍＬのＭｅＯＨで溶出させるステップ、
ｃ． 溶出液を採取するステップ、
ｄ． 採取した溶出液を２ｍＬの三フッ化ホウ素（１４％ｗ／ｗ）で処理するステップ、
ｅ． 連続的に撹拌しながら、処理された溶出液を６０℃で３時間にわたりインキュベートするステップ、
ｆ． インキュベートした溶出液を室温に冷却し、冷却した溶出液に１ｍｌの水を添加することにより反応を停止させるステップ、
ｇ． ＴＦＡを中和し、インキュベートした溶出液のｐＨを、０．５ＭのＮａＨＣＯ３を添加することにより、ｐＨ６〜ｐＨ７の範囲のｐＨに調整するステップ、
を含む方法により達成される。
幾つかの態様において、適用された抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の溶出は、エタノールまたはアセトニトリルによるものであり得る。
幾つかの態様において、適用された抽出された少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物は、３〜９ｍＬの範囲の体積で溶出される。
幾つかの態様において、ＴＦＡの濃度は、１〜５％ｖ／ｖの範囲にある。
幾つかの態様において、採取した溶出液は、ギ酸または酢酸で処理されてもよい。
幾つかの態様において、採取した溶出液は、１〜５ｍＬの三フッ化ホウ素（１４％ｗ／ｗ）で処理される。
幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルは、１０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２を２回添加することにより抽出される。
幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルは、ペンタン、ヘプタンおよびシクロヘキサンからなる群より選択される溶媒を添加することにより抽出される。
幾つかの態様において、インキュベーション時間は、０．５時間〜５時間である。
幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の抽出されたエステルは、ＧＣ−ＭＳ／ＭＳを使用した分析の前に、５ｍＬの最終体積に濃縮される。幾つかの態様において、ＧＣ−ＭＳ／ＭＳは、最適化されたＭＲＭトランジション下にある。
幾つかの態様において、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の抽出されたエステルは、不活性ガス、例えばＮ２下で濃縮される。
幾つかの態様において、決定ステップはＧＣ−ＭＳ／ＭＳにより実施され、ここで、採取サンプルは分析カラムを通り、少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルは、最適化されたＭＲＭトランジションにより定量化される。幾つかの態様において、採取サンプルはＤＢ−ｗａｘカラムを通る。あるいは、採取サンプルは、ＤＢ−１、ＤＢ−５、ＤＢ−１７、ＤＢ−２３またはＤＢ−ＦＦＡＰカラムを通る。合成した体臭を使用して得られる代表的なクロマトグラフは、図６に示されている。反復クロマトグラフは、図７に示されている。
本明細書に示される幾つかの態様によるスクリーニング法
幾つかの態様において、本開示では、
体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物を同定する方法であって、
ａ． 被験者と試験化合物とを接触させるステップ、
ｂ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物を含むサンプルを被験者の腋窩のヘッドスペースから採取するステップ、
ｃ． 採取サンプルを吸着材に吸着させるステップ、および
ｄ． 吸着させた採取サンプル中にて、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）からなる群より選択される少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物の量を決定するステップ、
を含み、
決定ステップが熱脱着ＧＣ／ＭＳにより実施され、
少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物の量が、未治療の被験者から採取したサンプルにおける少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性化合物の量に比べて少ない場合、試験化合物が体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減している、
方法が提供される。
幾つかの態様において、本開示では、
体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物を同定する方法であって、
ａ． 被験者と試験化合物とを接触させるステップ、
ｂ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を含むサンプルを、被験者から得られる衣類のサンプルから採取するステップ、
ｃ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、被験者の衣類の採取サンプルから溶媒により抽出するステップ、
ｄ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルを形成するステップ、
ｅ． 少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のエステルを抽出し、それにより、抽出サンプルを形成するステップ、および
ｆ． 抽出サンプル中にて、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）および３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）からなる群より選択される悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の少なくとも１種のエステルの量を決定するステップ、
を含み、
決定ステップがＧＣ−ＭＳ／ＭＳにより実施され、
少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の抽出エステルの量が、未治療の被験者から採取したサンプルにおける少なくとも１種の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の抽出エステルの量に比べて少ない場合、試験化合物が体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減している、
方法が提供される。
幾つかの態様において、試験化合物は、米国特許第９，１０１，７８３号明細書に開示されている試験化合物であってもよい。
幾つかの態様において、試験化合物は、国際特許出願第２００６／０７９９３４号に開示されている試験化合物であってもよい。
本発明を最も良好に説明するが、以下の実施例に限定されることはない。
実施例
例１：個別の被験者からの悪臭を引き起こす揮発性化合物の定量化
サンプリングチューブおよびサンプリングセルの不活性処理：サンプリングチューブおよびガラスウールを、トルエン溶液に入れた５％（ｖ／ｖ）のジクロロジメチルシラン（ＤＭＤＣＳ）中で１５分にわたり浸漬し、その後、トルエンで２回すすいだ。その後、すすいだ物品をメタノール中で１５分にわたり浸漬し、メタノールで２回すすぎ、その後Ｎ２で乾燥させた。その後、吸着材、例えばＴＥＮＡＸをアセトンですすぎ、高純度のＮ２で乾燥させた。
ヘッドスペースサンプリングセルを使用して、悪臭を引き起こす揮発性化合物を採取した（図３）。図３を参照すると、ヘッドスペースサンプリングセルの片側がＴｅｎａｘ捕捉部と接続されており、このＴｅｎａｘ捕捉部へと真空ポンプにより圧送を行った。被験者はサンプリングセルをしっかりと腋窩の下に保持し、１５０ｍＬ／分の空気流速で２０分にわたり片側から圧送を行い、その後、２０分にわたり再度もう一方の腋窩からも圧送を行った。
熱脱着ＧＣ／ＭＳを、ＯＰＴＩＣ４熱脱着モジュールを備えた７８９０Ａ／５９７５Ｃ（Ａｇｉｌｅｎｔ）で実施した。脱着した化合物を、−５０℃でＯＰＴＩＣ４にてクライオフォーカス（ｃｒｙｏｆｏｃｕｓｅｄ）した。脱着後、ＯＰＴＩＣ４を、−５０℃〜２５０℃（４００秒にわたり保持）にて、６０℃／秒で、捕捉した化合物をＤＢ−ＷＡＸカラムで注入するようにプログラムした（３０ｍ×０．２５ｍｍ内径×０．２５μｍフィルム厚、Ｊ＆Ｗ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ）。ＤＢ−ＷＡＸカラムでは、以下の温度プログラムを使用した：５０℃（７分にわたり保持）、５０℃〜２５０℃（１０℃／分、２分にわたり保持）。質量分析計のイオン源温度は２３０℃であり、トランスファーライン温度は２５０℃に設定した。ヘリウムを１ｍＬ／分の一定の流速でキャリアガスとして使用し、分流を１０ｍＬ／分に設定した。
較正曲線、ＬＯＤ、ＬＯＱおよび再現性：吸着させたサンプル中の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、Ｅ３Ｍ２Ｈについて選択したフラグメントイオン１００、１１３および１２８を用いて熱脱着ＧＣ／ＭＳにより分析した。一連の０．５、１、２、５、１０、２０、３０および５０ｎｇのサンプルからなる外部標準曲線を用い、選択したイオン１００の面積を使用して、Ｅ３Ｍ２Ｈを定量化した。標準曲線は、以下の通りである：ｙ＝１２６９０３ｘ−１４０３１８、ただしＲ２＝０．９９６３。この分析方法は高感度を有し、ＬＯＤおよびＬＯＱはそれぞれ０．２ｎｇおよび０．５ｎｇであった（表１）。この方法の再現性を、その標準溶液から放出されたＥ３Ｍ２Ｈを定量化することにより評価した。その標準溶液および１：１希釈Ｅ３Ｍ２Ｈ標準溶液のサンプルから放たれたＥ３Ｍ２Ｈを、２６．５±３．７ｎｇ（ｎ＝６）および１１．２±３．６ｎｇ（ｎ＝６）として個別に定量化した（表１）。
Figure 2021510804
９人の白人被験者から放出されたＥ３Ｍ２Ｈをヘッドスペースサンプリングにより捕捉し、ＳＩＭモードの熱脱着ＧＣ−ＭＳにより分析した。被験者により放出された、腋窩の悪臭を引き起こす揮発性酸化合物のクロマトグラムを図４に示す。Ｅ３Ｍ２Ｈの放出は、被験者６および被験者８を除く、６人の被験者において検出された（表２）。６人の被験者において放出されたＥ３Ｍ２Ｈは、０．７２ｎｇ〜３０．５２ｎｇの範囲にあった。
Figure 2021510804
例２：個別の被験者の衣類からの悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の定量化
被験者は、洗濯された白色の綿Ｔシャツを２４時間にわたり着用し、また被験者に、Ｔシャツを着用する日の前に、特定のシャワージェルおよび非抗菌性ロールオン式製品を使用するように指示した。着用したＴシャツからおよそ長さ１０ｃｍ×幅１０ｃｍの脇下領域を１個切り取り、その後、２０ｍＬの５％ＥｔＯＨ中で３０分にわたり超音波処理した。
５０ｍＭの酢酸ナトリウムを用いて抽出をｐＨ７に調整し、それからＳＰＥカートリッジへの充填を行った（６ｃｃ／５００ｍｇ、Ｏａｓｉｓ ＭＡＸカートリッジ、水、ＭＡ）。１０ｍＬのＭｅＯＨおよび１５ｍＬの５％ＥｔＯＨ（ｖ／ｖ）を水に入れたもの（ｐＨ７に調整）を用いて、カートリッジを使用前に調整した。
カートリッジを５０ｍＭの酢酸ナトリウム２ｍＬで洗浄し、その後、悪臭を引き起こす揮発性酸化合物を、６ｍＬのＭｅＯＨで溶出させ、続いて、２％（ｖ／ｖ）のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を有する６ｍＬのＭｅＯＨで溶出させた。その後、２％のＴＦＡを有する６ｍＬのＭｅＯＨからの溶出液を、２ｍＬの三フッ化ホウ素（１４％ｗ／ｗ）で誘導体化させ、連続的に撹拌しながら、６０℃で３時間にわたり加熱した。その後、反応を室温に冷却し、１ｍＬの水を添加して反応を停止させた。
０．５ＭのＮａＨＣＯ３を１０ｍＬ添加してＴＦＡを中和した（ｐＨ６〜７）。Ｅ３Ｍ２ＨおよびＨＭＨＡメチルエステルを１０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、最適化されたＭＲＭトランジションでのＧＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のためにＮ２下で５ｍＬに濃縮した。
ダイナミックレンジ、ＬＯＤ、ＬＯＱ、再現性および回収率：目標化合物Ｅ３Ｍ２ＨメチルエステルおよびＨＭＨＡメチルエステルを、一連の０．０１、０．１、０．５、１および５μｇ／ｍＬからなる外部標準曲線を用いて定量化した。Ｅ３Ｍ２ＨメチルエステルおよびＨＭＨＡメチルエステルについての較正曲線は、個別に、ｙ＝２８０８０ｘ−１０８．８８、Ｒ２＝０．９９９９、およびｙ＝２００２０３ｘ−２２６２、Ｒ２＝０．９９９９であり、それらの測定範囲は、どちらも０．０１〜５μｇ／ｍＬであった（表３）。Ｅ３Ｍ２ＨメチルエステルおよびＨＭＨＡメチルエステルについて、ＬＯＤおよびＬＯＱは、どちらも０．００５μｇ／ｍＬおよび０．０１μｇ／ｍＬであった（表３）。Ｅ３Ｍ２ＨおよびＨＭＨＡについて高感度が達成された。
回収率を調べるために、０．５μｇ、１μｇおよび５μｇのＥ３Ｍ２ＨおよびＨＭＨＡをＴシャツに加えた。各実験を３回にわたり繰り返し、標準偏差ありの回収率を表４に示す。Ｅ３Ｍ２Ｈの回収率は、９３±７％〜１０３±４％の範囲にあり、ＨＭＨＡの回収率は、８５±２％〜８８±４％であった（表４）。
１０ｍｇのＥ３Ｍ２Ｈメチルエステルおよび１０ｍｇのＨＭＨＡメチルエステルサンプルを正確に計量し、５０ｍＬのメスフラスコに移した。これらのサンプルを３０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、体積を５０ｍＬまでにした（２００μｇ／ｍＬのストック溶液Ａ）。１０ｍＬの２００μｇ／ｍＬストック溶液Ａを希釈して、２０ｍＬの１００μｇ／ｍＬストック溶液Ｂにした。５ｍＬの１００μｇ／ｍＬストック溶液Ｂを希釈して、５０ｍＬの１０μｇ／ｍＬストック溶液Ｃにした。１０ｍＬおよび５ｍＬの１０μｇ／ｍＬストック溶液Ｃを個別に２０ｍＬおよび５０ｍＬに希釈して、５μｇ／ｍＬおよび１μｇ／ｍＬ標準溶液を得た。１０ｍＬおよび５ｍＬの１μｇ／ｍＬ標準溶液を個別に２０ｍＬおよび５０ｍＬに希釈して、０．５μｇ／ｍＬおよび０．１μｇ／ｍＬ標準溶液を得た。１０ｍＬおよび５ｍＬの０．１μｇ／ｍＬ標準溶液を個別に２０ｍＬおよび５０ｍＬに希釈して、０．０５μｇ／ｍＬおよび０．０１μｇ／ｍＬ標準溶液を得た。１０ｍＬの０．０１μｇ／ｍＬ標準溶液を希釈して、２０ｍＬの０．００５μｇ／ｍＬ標準溶液にした。
ＧＣ−ＭＳ／ＭＳ分析をＧＣＭＳ ＴＱ８０３０（Ｓｈｉｍａｚｕ）で実施した。ＤＢ−ＷＡＸカラム（３０ｍ×０．２５ｍｍ内径×０．２５μｍフィルム厚、Ｊ＆Ｗ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ）を使用して、分離を達成した。ＤＢ−ＷＡＸカラムでは、以下の温度プログラムを使用する：５０℃（１分にわたり保持）、５０℃〜２５０℃（２５℃／分、１分にわたり保持）。ＧＣの注入器温度は２５０℃であり、注入体積はスプリットレスモードで１μＬである。質量分析計のイオン源の温度は２００℃であり、トランスファーラインは２３０℃に加熱した。ヘリウムを１．０ｍＬ／分の一定の気体流速でキャリアガスとして使用した。ＭＲＭモードでデータを取得した。ＭＲＭパラメーターを以下に示す。
Figure 2021510804
Figure 2021510804
Figure 2021510804
官能評価：被験者が２４時間にわたり着用したＴシャツの臭いをかぎ、腋窩の悪臭の強度を評価した。以下のように強度を表した。１．悪臭なし、２．ほとんど知覚できない悪臭、３．非常に僅かな悪臭、４．僅かな悪臭、５．中程度の悪臭、６．強い悪臭、７．非常に強い悪臭。一般的に、Ｅ３Ｍ２ＨおよびＨＭＨＡの量は、明らかに関係があり、官能評価と一致していた。
９人の白人被験者が着用したＴシャツの片側からのＥ３Ｍ２ＨおよびＨＭＨＡを定量化し、結果を表５に示す。被験者のＴシャツに吸着した腋窩の悪臭のＭＲＭクロマトグラムを図８に示す。Ｅ３Ｍ２ＨおよびＨＭＨＡが、９人の白人被験者全員から検出された。９人の被験者が着用したＴシャツの片側からのＥ３Ｍ２Ｈは０．１μｇ〜３．５μｇの範囲にあり、ＨＭＨＡは０．２μｇ〜９．８μｇの範囲にあった。９人の被験者からのヘッドスペースおよびＴシャツの採取についての結果を比較するために、被験者がＴシャツを着用して２４時間後に、すぐにヘッドスペースにより腋窩の悪臭化合物を採取した。また、ヘッドスペースによる採取で多くのＥ３Ｍ２Ｈを放出した個別の被験者は、被験者７を除いて、Ｔシャツに吸着されるＥ３Ｍ２Ｈの量も多いことを示した（表２および５）。被験者７のＴシャツはゆるく、腋窩の酸の大部分は、Ｔシャツに保持されず、十分にそれらの量を示さなかった。
Figure 2021510804
この明細書で引用した刊行物は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本発明の様々な態様を、実施例および好ましい実施形態を参照することにより先で説明したが、本発明の範囲は、前述の記載によってではなく、特許法の原則の下で適切に解釈される以下のクレームにより定義されると理解されたい。

Claims (2)

  1. 体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物を同定する方法であって、
    ａ． 被験者と試験化合物とを接触させるステップ、
    ｂ． 悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性化合物を含むサンプルを被験者の腋窩のヘッドスペースから採取するステップ、
    ｃ． 採取サンプルを吸着材に吸着させるステップ、および
    ｄ． 吸着させた採取サンプル中で、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）、および３−メチル−３−スルファニルヘキサン−１−オール（ＭＳＨ）からなる群より選択される、悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性化合物の量を決定するステップ
    を含み、
    前記決定するステップが熱脱着ＧＣ／ＭＳにより実施され、
    前記悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性化合物の量が、未治療の被験者から採取したサンプルにおける前記悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性化合物の量に比べて少ない場合、前記試験化合物が体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減している、
    方法。
  2. 体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減する能力を有する化合物を同定する方法であって、
    ａ． 被験者と試験化合物とを接触させるステップ、
    ｂ． 被験者から得られる衣類のサンプルから、悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性酸化合物を含むサンプルを採取するステップ、
    ｃ． 前記悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性酸化合物を、前記被験者の衣類の採取サンプルから溶媒により抽出するステップ、
    ｄ． 前記悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性酸化合物のエステルを形成するステップ、
    ｅ． 前記悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性酸化合物の前記エステルを抽出し、それにより、抽出サンプルを形成するステップ、および
    ｆ． 前記抽出サンプル中にて、３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）および３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸（ＨＭＨＡ）からなる群より選択される前記悪臭を引き起こす揮発性酸化合物の少なくとも１種の前記エステルの量を決定するステップ、
    を含み、
    前記決定するステップがＧＣ−ＭＳ／ＭＳにより実施され、
    前記悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性酸化合物の抽出エステルの量が、未治療の被験者から採取したサンプルにおける前記悪臭を引き起こす少なくとも１種の揮発性酸化合物の前記抽出されたエステルの量に比べて少ない場合、前記試験化合物が体の表面における悪臭の発生を防止、治療または低減している、
    方法。
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