JP2021502456A - 脂肪酸処理融合酵素を含む洗剤組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
本明細書は、コンピュータ可読形態での配列表を含む。このコンピュータ可読形態は、参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、良好な洗浄を含む、特に良好な脂乳化、及び特に脂性汚れの存在下で長持ちする泡を含む、1つ以上の効果を提供する、酵素含有洗剤組成物に関する。
本明細書で使用する場合、「a」及び「an」なる冠詞は、特許請求の範囲において使用される場合、特許請求又は記載されるものの1つ以上を意味するものと理解される。
好ましい洗剤組成物は食器類を手作業で洗うための組成物であり、好ましくは液体形態である。洗剤組成物は通常、組成物の30重量%〜95重量%、好ましくは40重量%〜90重量%、より好ましくは50重量%〜85重量%の液体担体を含有し、この担体には他の必須成分及び任意成分が溶解、分散又は懸濁している。液体担体の好ましい1つの成分は、水である。
本発明の組成物は、界面活性剤系と組み合わせて少なくとも1種の脂肪酸処理融合酵素を含み、当該少なくとも1種の脂肪酸処理融合酵素は、少なくとも2つの触媒ドメイン:1つ以上の脂肪酸を1つ以上のヒドロペルオキシ脂肪酸に変換することができるヒドロペルオキシ脂肪酸産生ドメインと、当該ヒドロペルオキシ脂肪酸を1つ以上のヒドロペルオキシ脂肪酸の誘導体に変換することができるヒドロペルオキシ脂肪酸変換ドメインとを含む。
好ましくは、洗剤組成物は、総組成物の1重量%〜60重量%、好ましくは5重量%〜50重量%、より好ましくは8重量%〜40重量%の界面活性剤系を含む。
式中、x1、x2、...は、混合物の各サルフェートアニオン性界面活性剤のモル数であり、アルコキシル化度は、各サルフェートアニオン性界面活性剤中のアルコキシ基の数である。
式中、x1、x2、...は、本発明の組成物のアニオン性界面活性剤のための出発原料として使用したアルコールの全アルコール混合物中の各アルコールのグラム単位の重量である。重量平均分枝化度の計算には、分枝基を有しないアニオン性界面活性剤成分の重量も含めなければならない。
好ましくは、本発明の組成物は、化学的安定剤及び物理的安定剤からなる群から選択される酵素安定剤を更に含み、好ましくは、当該物理的安定剤は、酵素を封入することを含む。好適な酵素安定剤は、(a)アルカリ土類金属、アルカリ金属、アルミニウム、鉄、銅、及び亜鉛、好ましくはアルカリ金属及びアルカリ土類金属の無機又は有機塩、好ましくはハロゲン化物、硫酸塩、亜硫酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、硝酸塩、亜硝酸、リン酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、及びそれらの混合物を有するアルカリ金属及びアルカリ土類金属塩の群から好ましくは選択される一価、二価、及び/又は三価カチオンからなる群から選択されてもよい。好ましい実施形態では、塩は、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、ギ酸ナトリウム、ギ酸カリウム、乳酸カルシウム、硝酸カルシウム、及びこれらの混合物からなる群から選択される。塩化カルシウム、塩化カリウム、硫酸カリウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、ギ酸ナトリウム、ギ酸カリウム、乳酸カルシウム、硝酸カルシウム、及びそれらの混合物からなる群から選択される塩、特に、塩化カリウム、硫酸カリウム、酢酸カリウム、ギ酸カリウム、プロピオン酸カリウム、乳酸カリウム、及びそれらの混合物の群から選択されるカリウム塩が最も好ましい。酢酸カリウム及び塩化カリウムが最も好ましい。好ましいカルシウム塩は、ギ酸カルシウム、乳酸カルシウム、及び四水和物を含む硝酸カルシウムである。ギ酸カルシウム塩及びギ酸ナトリウム塩が好まれ得る。これらのカチオンは、総組成物の少なくとも0.01重量%、好ましくは少なくとも0.03重量%、より好ましくは少なくとも0.05重量%、最も好ましくは少なくとも0.25重量%〜最大2重量%、更に最大1重量%で存在する。これらの塩は、組成物の総重量に対して0.1重量%〜5重量%、好ましくは0.2重量%〜4重量%、より好ましくは0.3重量%〜3重量%、最も好ましくは0.5重量%〜2重量%で配合される。更に酵素安定剤は、(b)オリゴ糖、多糖、及びそれらの混合物、例えばWO201219844に記載されている単糖グリセラートからなる群から選択される炭水化物と、(c)フェニルボロン酸及びそれらの誘導体、好ましくは4−ホルミルフェニルボロン酸からなる群から選択される重量効率的(mass-efficient)可逆性プロテアーゼ阻害剤と、(d)1,2−プロパンジオール、プロピレングリコール等のアルコール類と、(e)トリペプチドアルデヒド等、例えばCbz−Gly−Ala−Tyr−H、又は二置換アラニンアミドのペプチドアルデヒド安定剤と、(f)カルボン酸、例えばWO2012/19849に記載されているフェニルアルキルジカルボン酸、又は例えばWO2012/19848に記載されているベンジルラジカルの少なくとも2つの炭素原子上でカルボキシル基を含む多重置換ベンジルカルボン酸、フタロイルグルタミン酸、フタロイルアスパラギン酸、アミノフタル酸、及び/又はオリゴアミノ−ビフェニル−オリゴカルボン酸と、(g)それらの混合物と、の群から選択され得る。
本発明の好ましい組成物は、アミラーゼ、リパーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、リポキシゲナーゼ、ジオール合成酵素、及びこれらの混合物からなる群から選択される1種以上の追加の酵素を含む。本発明の更により好ましい組成物は、リパーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、アミラーゼ、及びこれらの任意の組み合わせから選択される1つ以上の酵素を含む。最も好ましくは、本発明の組成物は、リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼ、及びこれらの任意の組み合わせから選択される1つ以上の酵素を含む。
本発明の組成物は、任意に、総組成物の0.01重量%〜3重量%、好ましくは0.05重量%〜2重量%、より好ましくは0.2重量%〜1.5重量%、又は最も好ましくは0.5重量%〜1重量%の塩、好ましくは一価無機塩、二価無機塩、又はそれらの混合物、好ましくは塩化ナトリウムを含んでもよい。最も好ましくは、組成物は、あるいは更に、当該組成物の0.01重量%〜2重量%、好ましくは0.1重量%〜1重量%、より好ましくは0.2重量%〜0.8重量%の量の多価金属カチオンを含み、好ましくは、当該多価金属カチオンは、マグネシウム、アルミニウム、銅、カルシウム、又は鉄、より好ましくはマグネシウムであり、最も好ましくは、当該多価の塩は、塩化マグネシウムである。理論に束縛されることを望むものではないが、多価カチオンの使用が、油水界面及び気液界面でタンパク質/タンパク質、界面活性剤/界面活性剤、又はハイブリッドタンパク質/界面活性剤網状構造の形成を助け、そのことが泡を強化していると考えられる。
好ましくは、本発明の組成物は、O−グリカン、N−グリカン、及びそれらの混合物を含む群から選択される1つ以上の炭水化物を含む。好適な炭水化物は、1,3及び/又は1.4及び/又は1,6結合を有するα又はβグルカンを含む。グルカンは、特にカルボキシルサルフェート、アミノ基のグリコールエーテルで修飾することができる。グルカンは、デキストラン、デンプン、又はセルロースから抽出できる。特に、シゾフィラン、スクレログルカン、又はパラミロン等の天然グルカンに近い構造を有するグルカンが特に好ましい。
本発明の組成物は、任意に、全組成物の1重量%〜10重量%、又は好ましくは0.5重量%〜10重量%、より好ましくは1重量%〜6重量%、又は最も好ましくは0.1重量%〜3重量%、又はそれらの組み合わせのヒドロトロープ、好ましくはクメンスルホン酸ナトリウムを含んでもよい。本明細書に用いるのに好適な他のヒドロトロープとしては、米国特許第3,915,903号に開示されているような、アニオン型のヒドロトロープ、特にキシレンスルホン酸ナトリウム、キシレンスルホン酸カリウム、及びキシレンスルホン酸アンモニウム、トルエンスルホン酸ナトリウム、トルエンスルホン酸カリウム、及びトルエンスルホン酸アンモニウム、クメンスルホン酸ナトリウム、クメンスルホン酸カリウム、及びクメンスルホン酸アンモニウム、並びにこれらの混合物が挙げられる。
本発明の組成物は、有機溶媒を任意に含み得る。好ましくは、有機溶媒としては、アルコール、グリコール、及びグリコールエーテル、あるいはアルコール及びグリコールが挙げられる。本組成物は、全組成物の0重量%〜50重量%未満、好ましくは0.01重量%〜25重量%、より好ましくは0.1重量%〜10重量%、又は最も好ましくは0.5重量%〜5重量%の有機溶媒、好ましくはアルコール、より好ましくはエタノール、ポリアルキレングリコール、より好ましくはポリプロピレングリコール、及びこれらの混合物を含む。
本発明の組成物は、全組成物の約0.01重量%〜約5重量%、好ましくは約0.05重量%〜約2重量%、より好ましくは約0.07重量%〜約1重量%の、両親媒性アルコキシル化ポリアルキレンイミン、及びそれらの混合物、好ましくは両親媒性アルコキシル化ポリアルキレンイミンからなる群から選択される両親媒性ポリマーを更に含み得る。
本明細書における洗剤組成物は、キレート剤を組成物の総量の0.1重量%〜20%重量%、好ましくは0.2重量%〜5重量%、より好ましくは0.2重量%〜3重量%の濃度で含むことができる。
本明細書の洗剤組成物は、ビルダー(例えば、好ましくはシトレート)、洗浄溶媒、洗浄アミン、コンディショニングポリマー、洗浄ポリマー、表面改質ポリマー、汚れ凝集ポリマー、構造化剤、皮膚軟化剤、湿潤剤、皮膚若返り有効成分、酵素、カルボン酸、スクラブ粒子、漂白剤及び漂白活性剤、香料、悪臭抑制剤、顔料、染料、乳白剤、ビーズ、真珠光沢粒子、マイクロカプセル、Ca/Mgイオンなどのアルカリ土類金属などの無機カチオン、抗菌剤、防腐剤、粘度調整剤(例えば、NaCl、並びに他の一価、二価、及び三価の塩)、並びにpH調整剤及び緩衝手段(例えば、クエン酸などのカルボン酸、HCl、NaOH、KOH、アルカノールアミン、リン酸及びスルホン酸、炭酸ナトリウムなどの炭酸塩、重炭酸塩、セスキ炭酸塩、ホウ酸塩、ケイ酸塩、リン酸塩、イミダゾールなど)などの多くの他の補助成分を任意選択的に含むことができる。
本発明は、汚れた物品、好ましくは食器類を手作業で洗う方法であって、請求項のいずれかに記載の組成物を所定の体積の水に入れて洗浄溶液を形成する工程と、当該洗浄溶液中に当該汚れた物品を浸漬する工程と、を含み、当該汚れた物品上の汚れが、少なくとも1種の飽和又は不飽和脂肪酸、好ましくは、モノ不飽和脂肪酸、ジ不飽和脂肪酸、トリ不飽和脂肪酸、テトラ不飽和脂肪酸、ペンタ不飽和脂肪酸、ヘキサ不飽和脂肪酸、及びこれらの混合物からなる群から選択される不飽和脂肪酸、好ましくは、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、サピエン酸、オレイン酸、エライジン酸、バクセン酸、リノール酸、リノエライジン酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、ガドレイン酸、α−エレオステアリン酸、β−エレオステアリン酸、リシノール酸、エイコセン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、エルカ酸、ドコサジエン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコセン酸、及びこれらの混合物、好ましくは、パルミトレイン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、及びこれらの混合物、より好ましくは、オレイン酸を含む方法を含む。
本明細書に記載され、特許請求される発明がより完全に理解され得るためには、以下に記載するアッセイを用いなければならない。
ガラスバイアル泡マイレージ試験法の目的は、脂性汚れ、例えばオリーブ油の存在下で、特定の洗剤組成物の溶液によって生じた経時的な泡体積の変化を測定することである。当該方法の工程は、以下のとおりである。
1.a)指定の洗剤濃度及び水硬度の水性洗剤溶液10g、b)指定の濃度及び水硬度の水性タンパク質(又はタンパク質の混合物)溶液1.0g、及びc)オリーブ油(Bertolli(登録商標)、エキストラバージンオリーブ油)0.11gのアリコートを室温で40mLガラスバイアル(寸法:95mmH×27.5mmD)に続けて添加することによって、試験溶液を調製する。参照サンプルについては、タンパク質溶液を1.0mLの脱塩水で置き換える。
2.磁気撹拌プレート(IKA、型番RTC B S001、VWR磁気撹拌器、カタログ番号58949−012、500RPM)上において室温で2分間撹拌し、続いて、上下運動(毎秒約2回上下サイクル、+/−30cm上及び30cm下)させながら20秒間手動で振盪することによって、試験溶液を密閉試験バイアル内で混合する。
3.振盪後、一定温度を維持するために46℃の水浴内で、密閉バイアル内の試験溶液を磁気撹拌プレート(IKA、型番RTC B S001、VWR磁気撹拌器、カタログ番号58949−012、500RPM)上において60分間更に撹拌する。次いで、サンプルを上記のように更に20秒間手動で振盪し、初期泡高さ(H1)を定規で記録する。
4.サンプルを、撹拌しながら(IKA、型番RTC B S001、VWR磁気撹拌器、カタログ番号58949−012、500RPM)、46℃の水浴内で更に30分間インキュベートし、続いて、上記のように更に20秒間手動で振盪する。最終泡高さ(H2)を記録する。
5.好ましくはH1とH2との間の泡高さの低下がより少ないことと合わせて、より高い泡高さ(H1及びH2)を生じさせるタンパク質溶液がより望ましい。
液体洗剤組成物の溶液によって生じる泡体積の変化は、以下のように汚れ負荷を定期的に加えながら求めることができる。液体洗剤組成物の15dHの硬水(最終濃度0.12重量%、初期温度46℃)溶液の500mLのアリコートを、円筒状容器(寸法:150mmD×150mmH)に添加する。溶液の温度を46℃〜40℃で維持するために、試験中に容器を水浴中でインキュベートする。容器の中央に配置されたパドル(寸法:50mm×25mm)を用いて、135rpmで120秒間機械的に撹拌することによって、容器内で初期泡体積が生じる。
洗剤組成物の溶液によって生成される泡体積の変化は、以下のように汚れ負荷を定期的に加えながら求めることができる。4バールの一定圧力を印加しながら、流し台(円筒寸法:300mmD×288mmH)に4Lになるまで硬水流(15dH)を充填する。同時に、洗剤組成物のアリコート(最終濃度0.12重量%)を、流し台表面の底部から上方37cmの高さで0.67mL/秒の流速でピペットをとおして分注する。水の圧力に起因して、流し台内で初期泡体積が生成される。試験中、溶液の温度を46℃で維持する。
フサリウム・オキシスポラム9S−DOX−AOS(配列番号48)は、N末端DOXドメイン(リノール酸又はオレイン酸リポキシゲナーゼ)及びC末端AOSドメイン(アレンオキシド合成酵素EC4.2.1.92)を含有し、不飽和脂肪酸(例えば、リノール酸)をヒドロペルオキシ脂肪酸(例えば、9S−ヒドロペルオキシリノール酸)に変換し、続いてアレンオキシドに変換する融合酵素である。この酵素は、本発明の一部として含まれる。Hisタグを含有するN末端アミノ酸配列(配列番号65)を含む、フサリウム・オキシスポラム9S−DOX−AOSをコードしているコドン最適化遺伝子(配列番号64)を設計し、合成する。遺伝子合成後、タンパク質を発現させ、Genscript(PISCATAWAY,NJ)によって精製する。簡潔に言えば、完全な合成遺伝子配列を、異種発現のためにpET30aベクターにサブクローニングする。大腸菌BL21(DE3)細胞を組み換えプラスミドで形質転換し、37℃の、カナマイシン含有LB培地に単一コロニーを接種する。OD600が約0.8〜1.0に達したら、イソプロピルβ−D−1−チオガラクトピラノシド(IPTG)(最終濃度0.1mM)及びδ−アミノレブリン酸(最終濃度0.25mM)を添加することによってタンパク質発現を誘導する。培養物を16℃で16時間、200rpmでインキュベートする。細胞を遠心分離によって回収し、ペレットを超音波処理によって溶解させる。遠心分離後、上清を回収し、ニッケル親和性カラム及び当該技術分野において既知の標準的なプロトコルを用いて、一段階精製によってタンパク質を精製する。10%グリセロールを含有する1×PBS緩衝液(pH8.0)中にタンパク質を保存する。最終的なタンパク質濃度は、標準としてBSA(ThermoFisher、カタログ番号23236)を用いてBradfordタンパク質アッセイによって測定したときに0.50mg/mLであり、還元条件下でクマシーブルーで染色されたSDS−PAGEゲルの濃度測定分析によって推定したときの純度は約80%である。
マグナポルテ・オリザエ10R−DOX−EAS(配列番号52)は、N末端DOXドメイン(リノール酸又はオレイン酸リポキシゲナーゼ)及びC末端EASドメイン(エポキシアルコール合成酵素)を含有し、不飽和脂肪酸(例えば、リノール酸)をヒドロペルオキシ脂肪酸(例えば、10R−ヒドロペルオキシリノール酸)に変換し、続いてエポキシアルコールに変換する融合酵素である。この酵素は、本発明の一部として含まれる。Hisタグ、MBPタグ、及びTEVプロテアーゼ切断部位を含有するN末端アミノ酸配列(配列番号67)を含む、マグナポルテ・オリザエ10R−DOX−EASをコードしているコドン最適化遺伝子(配列番号66)を設計し、合成する。遺伝子合成後、タンパク質を発現させ、Genscript(PISCATAWAY,NJ)によって精製する。簡潔に言えば、完全な合成遺伝子配列を、異種発現のためにpET28aベクターにサブクローニングする。大腸菌BL21(DE3)細胞を組み換えプラスミドで形質転換し、37℃のカナマイシンを含有する2xYT培地に単一コロニーを接種する。OD600が約0.8〜1.0に達したら、イソプロピルβ−D−1−チオガラクトピラノシド(IPTG)(最終濃度0.1mM)及びδ−アミノレブリン酸(最終濃度0.25mM)を添加することによってタンパク質発現が誘導される。培養物を16℃で16時間、200rpmでインキュベートする。細胞を遠心分離によって回収し、ペレットを超音波処理によって溶解させる。遠心分離後、上清を回収し、ニッケル親和性カラム、Superdex 200カラム、及び当該技術分野において既知の標準的なプロトコルを用いて、二段階精製によってタンパク質を精製する。10%グリセロールを含有する1×PBS緩衝液(pH7.4)中にタンパク質を保存する。最終的なタンパク質濃度は、標準としてBSA(ThermoFisher、カタログ番号23236)を用いてBradfordタンパク質アッセイによって測定したとき、0.63mg/mLであり、還元条件下でクマシーブルーで染色されたSDS−PAGEゲルの濃度測定分析によって推定したときの純度は約45%である。
特定の条件下(例えば、水硬度、溶液温度、洗剤濃度など)で、汚れ、すなわち、オリーブ油又は脂性汚れの存在下で、特定の洗剤組成物の溶液によって生成される泡体積の発達が生じる。以下の溶液を調製する。
A.硬水(15dH):0.75gのMgCl2.6H2O(Sigma−Aldrich、カタログ番号M9272)、2.10gのCaCl2.6H2O(Sigma−Aldrich、カタログ番号21108)、及び0.689gのNaHCO3(Sigma−Aldrich、カタログ番号31437)を5Lの脱塩水に溶解させる。
B.標的洗剤濃度0.12%で、上記のとおり調製した硬質水(15dH)で希釈された2017年2月に英国で市販されているFairy Dark Greenを使用して、対照参照洗剤組成物の洗剤溶液(「溶液DG−R」)を調製する。
C.タンパク質溶液:泡マイレージ法に進む前に、タンパク質を脱塩水で必要な濃度に希釈する。
D.脂性汚れ:表3に記載の組成に従って脂性汚れを調製する。
本発明の組成物Aは、a)洗剤溶液DG−R(実施例1cに記載のとおり調製)及びb)精製フサリウム・オキシスポラム9S−DOX−AOS(実施例1aに記載のとおり調製)の希釈サンプルを用いて作製された、本発明にかかる液体洗剤組成物の一例である。
本発明にかかるフサリウム・オキシスポラム9S−DOX−AOS(配列番号48)を含む食器類を手作業で洗うための洗剤組成物を表7に示す。酵素は、実施例1aに記載のとおり生成し得る。
本発明にかかるマグナポルテ・オリザエ10R−DOX−EAS(配列番号52)を含む食器類を手作業で洗うための洗剤組成物を表8に示す。酵素は、実施例1bに記載のとおり生成し得る。
Claims (15)
- a)少なくとも2つの触媒ドメイン:
i)1つ以上の脂肪酸を1つ以上のヒドロペルオキシ脂肪酸に変換することができるヒドロペルオキシ脂肪酸産生ドメイン、
ii)前記ヒドロペルオキシ脂肪酸を1つ以上のヒドロペルオキシ脂肪酸の誘導体に変換することができるヒドロペルオキシ脂肪酸変換ドメイン、
を含む少なくとも1種の脂肪酸処理融合酵素と、
b)界面活性剤系と
を含む洗剤組成物。 - 前記融合酵素の前記ヒドロペルオキシ脂肪酸産生触媒ドメインが、オレイン酸リポキシゲナーゼ、リノール酸リポキシゲナーゼ、アラキドン酸リポキシゲナーゼ、及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも1つの活性を示し、好ましくは、前記活性が、オレイン酸10S−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.77)、リノール酸8R−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.60)、リノレン酸9R−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.61)、リノール酸9S−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.58)、リノール酸10R−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.62)、リノール酸10S−リポキシゲナーゼ、リノール酸11−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.45)、リノール酸13S−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.12)、リノール酸9/13−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.B6)、アラキドン酸5−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.34)、アラキドン酸8−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.40)、アラキドン酸12−リポキシゲナーゼ(E.C.1.13.11.31)、アラキドン酸15−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.33)、及びこれらの混合物からなる群から選択され、より好ましくは、前記活性が、オレイン酸10S−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.77)、リノール酸8R−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.60)、リノール酸9R−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.61)、リノール酸9S−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.58)、リノール酸10R−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.62)、リノール酸10S−リポキシゲナーゼ、リノール酸13S−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.12)、及びこれらの混合物からなる群から選択され、最も好ましくは、前記活性が、リノール酸9S−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.58)、リノール酸10R−リポキシゲナーゼ(EC1.13.11.62)、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項1に記載の洗剤組成物。
- 前記融合酵素の前記ヒドロペルオキシ脂肪酸変換触媒ドメインが、シクロオキシゲナーゼ(EC1.14.99.1)、アレンオキシド合成酵素(AOS−EC4.2.1.92)、ヒドロペルオキシド異性化酵素(EC4.2.1.92、EC5.3.99.1、EC5.4.4.5、EC5.4.4.6)、ヒドロペルオキシドリアーゼ(HPL−EC4.2.1.92)、ヒドロペルオキシド脱水酵素(EC4.2.1.92)、ジビニルエーテル合成酵素(DES−EC4.2.1.121、EC4.2.1.B8、EC4.2.1.B9)、9,12−オクタデカジエン酸8−ヒドロペルオキシド8R−異性化酵素(EC5.4.4.5)、9,12−オクタデカジエン酸8−ヒドロペルオキシド8S−異性化酵素(EC5.4.4.6)、7,10−ヒドロペルオキシドジオール合成酵素、エポキシアルコール合成酵素(EAS)、及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも1つの活性を示し、好ましくは、前記活性が、アレンオキシド合成酵素(AOS−EC4.2.1.92)、エポキシアルコール合成酵素(EAS)、ヒドロペルオキシドリアーゼ(HPL−EC4.2.1.92)、9,12−オクタデカジエン酸8−ヒドロペルオキシド8R−異性化酵素(EC5.4.4.5)、9,12−オクタデカジエン酸8−ヒドロペルオキシド8S−異性化酵素(EC5.4.4.6)からなる群から選択され、最も好ましくは、アレンオキシド合成酵素(AOS−EC4.2.1.92)、エポキシアルコール合成酵素(EAS)、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項1又は2に記載の洗剤組成物。
- 前記融合酵素が、プレキサウラ・ホモマラ8R−DOX−AOS(配列番号47)、フサリウム・オキシスポラム9S−DOX−AOS(配列番号48)、コレトトリクム・グラミニコーラ9S−DOX−AOS(配列番号49)、グロメレラ・シングラーテ9S−DOX−AOS(配列番号50)、アスペルギルス・ニガー9R−DOX−AOS(配列番号51)、マグナポルテ・オリザエ10R−DOX−EAS(配列番号52)、グロメレラ・シングラーテ10R−DOX−EAS(配列番号53)、又はフサリウム・オキシスポラム10R−DOX−EAS(配列番号54)、好ましくは、フサリウム・オキシスポラム9S−DOX−AOS(配列番号48)又はマグナポルテ・オリザエ10R−DOX−EAS(配列番号52)からなる群から選択される野生型マルチドメイン酵素から選択される少なくとも1つの参照配列の全長に対して整列された配列の全長にわたって計算したとき、少なくとも60%、好ましくは少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%、好ましくは少なくとも98%、又は好ましくは更に100%の同一性を有する、請求項1〜3のいずれか一項に記載の洗剤組成物。
- 前記少なくとも1種の脂肪酸処理融合酵素が、活性タンパク質に基づいて、前記組成物の0.0001重量%〜1重量%、好ましくは0.001重量%〜0.2重量%の量で存在する、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物。
- 脂肪酸ペルオキシダーゼ(EC1.11.1.3)、非特異的ペルオキシゲナーゼ(EC1.11.2.1)、植物種子ペルオキシゲナーゼ(EC1.11.2.3)、脂肪酸ペルオキシゲナーゼ(EC1.11.2.4)、リノール酸ジオール合成酵素(EC1.13.11.44)、5,8−リノール酸ジオール合成酵素(EC1.13.11.60及びEC5.4.4.5)、7,8−リノール酸ジオール合成酵素(EC1.13.11.60及びEC5.4.4.6)、9,14−リノール酸ジオール合成酵素(EC1.13.11.B1)、8,11−リノール酸ジオール合成酵素、オレイン酸ジオール合成酵素、他のリノール酸ジオール合成酵素、非特異的モノオキシゲナーゼ(EC1.14.14.1)、アルカン−1−モノオキシゲナーゼ(EC1.14.15.3)、オレイン酸12−ヒドロキシラーゼ(EC1.14.18.4)、α−ジオキシゲナーゼ、脂肪酸アミドヒドロラーゼ(EC3.5.1.99)、オレイン酸ヒドラターゼ(EC4.2.1.53)、リノール酸異性化酵素(EC5.2.1.5)、リノール酸(10E,12Z)−異性化酵素(EC5.3.3.B2)、脂肪酸脱炭酸酵素(OleT様)、鉄依存性脱炭酸酵素(UndA様)、アミラーゼ、リパーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、及びこれらの混合物、好ましくは、脂肪酸ペルオキシダーゼ(EC1.11.1.3)、非特異的ペルオキシゲナーゼ(EC1.11.2.1)、植物種子ペルオキシゲナーゼ(EC1.11.2.3)、及び脂肪酸ペルオキシゲナーゼ(EC1.11.2.4)、並びにこれらの混合物からなる群から選択される1種以上の補酵素を更に含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記界面活性剤系が、前記組成物の1重量%〜60重量%、好ましくは5重量%〜50重量%の量で存在する、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記界面活性剤系が、1つ以上のアニオン性界面活性剤及び1つ以上の共界面活性剤を含み、好ましくは、前記共界面活性剤が、両性界面活性剤、双極性界面活性剤、及びこれらの混合物からなる群から選択され、好ましくは、前記両性界面活性剤がアミンオキシド界面活性剤であり、前記双極性界面活性剤がベタイン界面活性剤であり、好ましくは、前記アニオン性界面活性剤の前記共界面活性剤に対する重量比が、9:1未満、より好ましくは5:1〜1:1、より好ましくは4:1〜2:1である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
- 化学的安定剤及び物理的安定剤からなる群から選択される酵素安定剤を更に含み、好ましくは、前記酵素が、前記酵素を封入することによって物理的に安定化される、請求項1〜8のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記組成物がキレート剤を更に含み、好ましくはカルボキシレートキレート剤、アミノカルボキシレートキレート剤、アミノホスホネートキレート剤、及びこれらの混合物からなる群から選択され、好ましくは、前記キレート剤が、MGDA(メチルグリシン−N,N−二酢酸)、GLDA(グルタミン−N,N−二酢酸)、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項1〜9のいずれか一項に記載の組成物。
- 汚れた物品、好ましくは食器類を手作業で洗う方法であって、請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物を所定の体積の水に入れて洗浄溶液を形成する工程と、前記洗浄溶液中に前記汚れた物品を浸漬する工程と、を含み、前記汚れた物品上の汚れが、少なくとも1種の脂肪酸、好ましくは、モノ不飽和脂肪酸、ジ不飽和脂肪酸、トリ不飽和脂肪酸、テトラ不飽和脂肪酸、ペンタ不飽和脂肪酸、ヘキサ不飽和脂肪酸、及びこれらの混合物からなる群から選択される不飽和脂肪酸、好ましくは、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、サピエン酸、オレイン酸、エライジン酸、バクセン酸、リノール酸、リノエライジン酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、ガドレイン酸、α−エレオステアリン酸、β−エレオステアリン酸、リシノール酸、エイコセン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、エルカ酸、ドコサジエン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコセン酸、及びこれらの混合物、好ましくは、パルミトレイン酸、オレイン酸、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、及びこれらの混合物、より好ましくは、オレイン酸を含む方法。
- 少なくとも1種の脂肪酸処理酵素のヒドロペルオキシ脂肪酸産生触媒ドメインから形成されるヒドロペルオキシ脂肪酸が、8R−ヒドロキシペルオキシ脂肪酸、8S−ヒドロキシペルオキシ脂肪酸、9R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、9S−ヒドロペルオキシ脂肪酸、10R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、11R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、11S−ヒドロペルオキシ脂肪酸、12R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、12S−ヒドロペルオキシ脂肪酸、13R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、13S−ヒドロペルオキシ脂肪酸、14R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、14S−ヒドロペルオキシ脂肪酸、15S−ヒドロペルオキシ脂肪酸、これらの誘導体、及びこれらの混合物、好ましくは、不飽和8R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、不飽和8S−ヒドロペルオキシ脂肪酸、不飽和9R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、不飽和10R−ヒドロペルオキシ脂肪酸、これらの誘導体、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項11に記載の方法。
- ヒドロペルオキシ脂肪酸変換触媒ドメインによるヒドロペルオキシ脂肪酸の変換から形成されるヒドロペルオキシ脂肪酸の誘導体が、モノヒドロキシ脂肪酸、ジヒドロキシ脂肪酸、エポキシ脂肪酸、オキソ脂肪酸、ジビニルエーテル脂肪酸、アルケナール、エポキシアルコール、及びこれらの混合物、好ましくは、ジヒドロキシ脂肪酸及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項11又は12に記載の方法。
- 前記少なくとも1種の脂肪酸処理融合酵素が、洗浄工程中の洗浄溶液中に、活性タンパク質に基づいて、0.005ppm〜15ppm、好ましくは0.01ppm〜5ppm、より好ましくは0.02ppm〜0.5ppmの濃度で存在する、請求項11〜13のいずれか一項に記載の方法。
- 脂肪酸を含む汚れを含む水性洗浄液中の泡寿命を延長するための、少なくとも以下の2つの触媒ドメイン:
a)1つ以上の脂肪酸を1つ以上のヒドロペルオキシ脂肪酸に変換することができるヒドロペルオキシ脂肪酸産生触媒ドメイン、及び
b)前記ヒドロペルオキシ脂肪酸を1つ以上のヒドロペルオキシ脂肪酸の誘導体に変換することができるヒドロペルオキシ脂肪酸変換触媒ドメイン、を含む脂肪酸処理融合酵素の使用。
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