JP2021502091A - 幹細胞からの成長ホルモン産生細胞の誘導およびその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、その内容がその全体として参照により組み込まれ、それに対して優先権が主張される、2017年11月10日に出願された米国仮出願第62/584,299号の優先権を主張する。
特許付与情報
1.導入
成長ホルモン(GH)は、脳下垂体前葉において産生され、特に、小児において重大な作用を有する。成長および代謝に対するGHの作用は、直接的なGH作用とインスリン様成長因子1および2(IGF−1およびIGF−2)産生の刺激を介する間接的な作用とによって媒介される。主な標的組織は、骨、脂肪および筋肉である。GHレベルが低いと、骨塩密度、筋肉強度の低下、およびコレステロールの増加がもたらされる。小児では、小人症をもたらす。
本開示の主題は、例えば、in vitroでの分化によって、幹細胞(例えば、ヒト幹細胞)から生じる成長ホルモン産生細胞(例えば、GH産生成長ホルモン産生細胞)に関する。
4.図面の簡単な説明
本開示の主題は、幹細胞(例えば、ヒト幹細胞)の、1つまたは複数の成長ホルモン産生細胞マーカーを発現する細胞へのまたはGH産生成長ホルモン産生細胞への分化を誘導するためのin vitro方法、および下垂体前駆細胞(または下垂体前駆体)の、1つまたは複数の成長ホルモン産生細胞マーカーを発現する細胞へのまたはGH産生成長ホルモン産生細胞への分化を誘導するためのin vitro方法、およびこのような方法によって生成される細胞、ならびにこのような細胞を含む組成物に関する。成長ホルモンの発現および/分泌を増加させる、成長ホルモンの動的放出を回復させる、ならびに/または成長ホルモン欠損症を処置するためのこのような細胞の使用も提供される。
5.1.定義;
5.2.幹細胞を分化させる方法;
5.3.分化細胞集団を含む組成物;
5.4.成長ホルモンを増加させる方法;
5.5.キット;
5.6.治療用化合物をスクリーニングする方法
5.1 定義
5.2 幹細胞を分化させる方法
5.2.1.幹細胞を下垂体前駆体へと分化させる方法
5.2.2.下垂体前駆体をPit1+細胞へと分化させる方法
5.2.3.Pit1+細胞をGH産生成長ホルモン産生細胞へと分化させる方法
5.3 分化細胞集団を含む組成物
5.4 成長ホルモンを増加させる方法
(a)本明細書に記載の幹細胞由来成長ホルモン産生細胞の集団;
(b)このような幹細胞由来成長ホルモン産生細胞を含む組成物;および
(c)このような組成物を含むデバイス
のうちの1つまたは複数を投与するステップを含む方法を提供する。
5.5 キット
5.6 治療用化合物をスクリーニングする方法
本開示の主題は、本開示の主題の例示として提供され、限定のために提供されるのではない、以下の実施例および付属書類を参照してよりよく理解されよう。
(実施例1)
幹細胞からのヒト成長ホルモン産生細胞の選択的誘導
概要
方法および材料
結果
(実施例2)
GH欠損症を処置するための分化細胞の使用
(実施例3)
幹細胞からのヒト成長ホルモン産生細胞の選択的誘導
概要
方法および材料
Claims (143)
- 下垂体前駆体の分化を誘導するためのin vitro方法であって、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する細胞を、1つまたは複数の背方化剤および1つまたは複数の腹方化剤と接触させるステップと;前記細胞を、Wingless(Wnt)シグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤(Wnt活性化剤)および成長ホルモンの発現を誘導することが可能である1つまたは複数の分子(GH誘導剤)と接触させて、分化細胞の細胞集団を得るステップであって、分化細胞のうちの少なくとも約50%が、成長ホルモンを産生することが可能である成長ホルモン産生細胞(GH産生成長ホルモン産生細胞)であるステップとを含む、方法。
- 前記GH産生成長ホルモン産生細胞が、低レベルのGHRHR免疫反応性を発現する細胞(GHRHRlow細胞)、高レベルのGHRHR免疫反応性を発現する細胞(GHRHRhigh細胞)、およびその組合せを含む、請求項1に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から少なくとも約10日で、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項2に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約2週間または3週間で、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項2または3に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約15日で、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項2または3に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から少なくとも約10日で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項2に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約3週間で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項2から6のいずれか一項に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約25日で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項2から7のいずれか一項に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約35日で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む請求項2から7のいずれか一項に記載の方法。
- 幹細胞の分化を誘導するためのin vitro方法であって、幹細胞を、1つまたは複数のBMP分子およびTGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の1つまたは複数の阻害剤と接触させるステップと;前記細胞を、SHHシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤、FGFシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤、1つまたは複数の背方化剤、1つまたは複数の腹方化剤、Wingless(Wnt)シグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤(Wnt活性化剤)および1つまたは複数の成長ホルモン(GH)誘導剤と接触させて、分化細胞の細胞集団を得るステップであって、分化細胞の少なくとも約50%が、成長ホルモンを産生することが可能である成長ホルモン産生細胞(GH産生成長ホルモン産生細胞)であるステップとを含む、方法。
- 前記GH産生成長ホルモン産生細胞が、低レベルのGHRHR免疫反応性を発現する細胞(GHRHRlow細胞)、高レベルのGHRHR免疫反応性を発現する細胞(GHRHRhigh細胞)、およびその組合せを含む、請求項10に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から少なくとも約3週間で、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項11に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から約24日で、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項11または12に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から約4週間で、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項11または12に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から少なくとも約4週間で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項11から14のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から約6週間で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項12から15のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から約30日で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項12から15のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から33日で、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項12から15のいずれか一項に記載の方法。
- 下垂体前駆体の分化を誘導するためのin vitro方法であって、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する細胞を、1つまたは複数の背方化剤および1つまたは複数の腹方化剤と接触させるステップと;前記細胞を、Wingless(Wnt)シグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤と接触させて、分化細胞の細胞集団を得るステップであって、分化細胞の少なくとも約50%が、Pit1を発現するステップとを含む、方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から少なくとも約5日で、前記細胞集団を得るステップを含む、請求項19に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約7日または約11日で、前記細胞集団を得るステップを含む、請求項19または20に記載の方法。
- 幹細胞の分化を誘導するためのin vitro方法であって、幹細胞を、1つまたは複数のBMP分子およびTGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の1つまたは複数の阻害剤と接触させるステップと;前記細胞を、SHHシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤、FGFシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤、1つまたは複数の背方化剤、1つまたは複数の腹方化剤、およびWingless(Wnt)シグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤(Wnt活性化剤)と接触させて、分化細胞の細胞集団を得るステップであって、分化細胞の少なくとも約50%が、Pit1を発現するステップとを含む、方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から少なくとも約10日で、前記細胞集団を得るステップを含む、請求項22に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から少なくとも約15日で、前記細胞集団を得るステップを含む、請求項22または23に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から約15日で、前記細胞集団を得るステップを含む、請求項22から24のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞の、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤との最初の接触から約20日で、前記細胞集団を得るステップを含む、請求項22から24のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞の、前記1つまたは複数のWnt活性化剤との最初の接触が、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から5日以内である、請求項1から26のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞の、前記1つまたは複数のWnt活性化剤との最初の接触が、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触と同じ日に起こる、請求項1から27のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞の、前記1つまたは複数のWnt活性化剤との最初の接触が、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約4日である、請求項1から28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約5日間および/または最長約15日間、前記1つまたは複数のWnt活性化剤と接触させるステップを含む、請求項1から29のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約7日間、前記1つまたは複数のWnt活性化剤と接触させるステップを含む、請求項1から30のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約3日間および/または最長約10日間、前記1つまたは複数の背方化剤と接触させるステップを含む、請求項1から31のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約4日間または約7日間、前記1つまたは複数の背方化剤と接触させるステップを含む、請求項1から32のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約5日間および/または最長約15日間、前記1つまたは複数の腹方化剤と接触させるステップを含む、請求項1から33のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約7日間または約11日間、前記1つまたは複数の腹方化剤と接触させるステップを含む、請求項1から34のいずれか一項に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞を、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の1つまたは複数の阻害剤と接触させるステップをさらに含む、請求項1から35のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約3日間および/または最長約10日間、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させるステップを含む、請求項36に記載の方法。
- 前記細胞を、約4日間または約7日間、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させるステップを含む、請求項36または37に記載の方法。
- 前記細胞を、前記1つまたは複数の背方化剤およびTGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と、同時に接触させるステップを含む、請求項36から38のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、1つまたは複数のエストロゲン受容体(ER)アゴニストと接触させるステップをさらに含む、請求項1から39のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、1つまたは複数のERアゴニストおよび前記1つまたは複数のWnt活性化剤と、同時に接触させるステップを含む、請求項40に記載の方法。
- 前記細胞の、前記1つまたは複数のERアゴニストとの最初の接触が、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から10日以内である、請求項40または41に記載の方法。
- 前記細胞の、前記1つまたは複数のERアゴニストとの最初の接触が、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触と同じ日に起こる、請求項40から42のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞の、前記1つまたは複数のERアゴニストとの最初の接触が、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞の、前記1つまたは複数の背方化剤との最初の接触から約4日である、請求項40から42のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約5日間および/または最長約15日間、前記1つまたは複数のERアゴニストと接触させるステップを含む、請求項40から44のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、少なくとも約7日間または約8日間、前記1つまたは複数のERアゴニストと接触させるステップを含む、請求項40から45のいずれか一項に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞が、幹細胞のin vitroでの分化によって得られる、請求項1から9、19から21、および27から45のいずれか一項に記載の方法。
- 幹細胞の前記in vitroでの分化が、幹細胞を、1つまたは複数のBMP分子およびTGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の1つまたは複数の阻害剤と接触させるステップ、前記細胞を、SHHシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤およびFGFシグナル伝達の1つ、2つ、またはそれより多い活性化剤と接触させるステップを含む、請求項47に記載の方法。
- 前記幹細胞を、少なくとも約2日間および/または約4日以内、前記1つまたは複数のBMP分子と接触させる、請求項10から18、22から26、47、および48のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞を、少なくとも約5日間、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させる、請求項10から18、22から26、および47から49のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞を、約8日間、TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させる、請求項10から18、22から26、および47から50のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞を、少なくとも約2日間、SHHシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤、およびFGFシグナル伝達の1つ、2つ、またはそれより多い活性化剤と接触させる、請求項10から18、22から26、および47から51のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞を、約5日間、SHHシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤、およびFGFシグナル伝達の1つ、2つ、またはそれより多い活性化剤と接触させる、請求項10から18、22から26、および47から52のいずれか一項に記載の方法。
- 幹細胞の前記in vitroでの分化が、前記細胞を、SMADシグナル伝達の1つまたは複数の阻害剤と接触させるステップをさらに含む、請求項10から18、22から26、および47から53のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞を、少なくとも約2日間、SMADシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させる、請求項54に記載の方法。
- 前記幹細胞を、約5日間、SMADシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させる、請求項54または55に記載の方法。
- 1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞を、Pit1を発現する細胞へと分化させるステップと、Pit1を発現する前記細胞を、GHRHRlow細胞へと分化させるステップと、前記GHRHRlow細胞を、GHRHRhigh細胞へと分化させるステップとを含む、請求項1から9および27から56のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞を、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する細胞へと分化させるステップと、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞を、Pit1を発現する細胞へと分化させるステップと、Pit1を発現する前記細胞を、GHRHRlow細胞へと分化させるステップと、前記GHRHRlow細胞を、GHRHRhigh細胞へと分化させるステップとを含む、請求項10から18および27から56のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞を、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する細胞へと分化させるステップと、1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する前記細胞を、Pit1を発現する細胞へと分化させるステップとを含む、請求項22から56のいずれか一項に記載の方法。
- Pit1を発現する前記細胞の、GHRHRlow細胞への分化が、Pit1を発現する細胞を、GH誘導剤の第1の組合せと接触させることを含む、請求項57または58に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第1の組合せが、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、GHRHシグナル伝達のアゴニスト、ERアゴニスト、およびGhrelinシグナル伝達経路のアゴニストからなる群から選択される、請求項60に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第1の組合せが、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、およびGHRHシグナル伝達のアゴニストを含む、請求項60または61に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第1の組合せが、RA、デキサメタゾン、T3、およびGHRHを含む、請求項62に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第1の組合せが、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、2種のGHRHシグナル伝達のアゴニスト、およびERアゴニストを含む、請求項60または61に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第1の組合せが、RA、デキサメタゾン、T3、GHRH、cAMP、およびDPNを含む、請求項64に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第1の組合せが、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、GHRHシグナル伝達のアゴニスト、ERアゴニスト、およびGhrelinシグナル伝達経路のアゴニストを含む、請求項60または61に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第1の組合せが、RA、デキサメタゾン、T3、GHRH、DPN、およびGhrelinを含む、請求項66に記載の方法。
- Pit1を発現する前記細胞を、少なくとも約3日間、GH誘導剤の前記第1の組合せと接触させて、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項60から67のいずれか一項に記載の方法。
- Pit1を発現する前記細胞を、約5日間、GH誘導剤の前記第1の組合せと接触させて、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項60から68のいずれか一項に記載の方法。
- Pit1を発現する前記細胞を、約2週間、GH誘導剤の前記第1の組合せと接触させて、少なくとも約50%のGHRHRlow細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項60から69のいずれか一項に記載の方法。
- 前記GHRHRlow細胞のGHRHRhigh細胞への分化が、前記GHRHlow細胞を、GH誘導剤の第2の組合せと接触させることを含む、請求項57または58に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第2の組合せが、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、GHRHシグナル伝達のアゴニスト、ERアゴニスト、インターロイキン、およびGhrelinシグナル伝達経路のアゴニストからなる群から選択される、請求項71に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第2の組合せが、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、およびGHRHシグナル伝達のアゴニストを含む、請求項71または72に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第2の組合せが、RA、デキサメタゾン、T3、およびGHRHを含む、請求項73に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第2の組合せが、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、2種のGHRHシグナル伝達のアゴニスト、およびERアゴニストを含む、請求項71または72に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第2の組合せが、RA、デキサメタゾン、T3、GHRH、cAMP、およびDPNを含む、請求項75に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第2の組合せが、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、GHRHシグナル伝達のアゴニスト、ERアゴニスト、インターロイキン、およびGhrelinシグナル伝達経路のアゴニストを含む、請求項71または72に記載の方法。
- GH誘導剤の前記第2の組合せが、デキサメタゾン、T3、GHRH、IL−6、Ghrelin、およびDPNを含む、請求項77に記載の方法。
- 前記GHRHRlow細胞を、少なくとも約5日間、GH誘導剤の前記第2の組合せと接触させて、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項71から78のいずれか一項に記載の方法。
- 前記GHRHRlow細胞を、約10日間、GH誘導剤の前記第2の組合せと接触させて、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項71から79のいずれか一項に記載の方法。
- 前記GHRHRlow細胞を、約4週間、GH誘導剤の前記第2の組合せと接触させて、少なくとも約50%のGHRHRhigh細胞を含む細胞集団を得るステップを含む、請求項71から80のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーが、SIX1、LHX3、LHX4、PITX1、PITX2、HESX1、PROP1、SIX6、TBX19、PAX6、GATA2、SF1、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項1から9、19から21、および27から81のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数の背方化剤が、FGFシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤を含み、請求項1から82のいずれか一項に記載の方法。
- FGFシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤が、FGF1、FGF2、FGF3、FGF4、FGF7、FGF8、FGF10、FGF18、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項10から18および22から83のいずれか一項に記載の方法。
- FGFシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤が、FGF8を含む、請求項10から18および22から84のいずれか一項に記載の方法。
- FGFシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤が、FGF8およびFGF10を含む、請求項10から18、22から82、84、および85のいずれか一項に記載の方法。
- FGFシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤が、FGF8、FGF10、およびFGF18を含む、請求項10から18、22から82、84から86のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数の腹方化剤が、1つまたは複数のBMP分子を含む、請求項1から87のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のBMP分子が、BMP1、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8a、BMP8b、BMP10、BMP11、BMP15、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項10から18および22から88のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のBMP分子が、BMP2を含む、請求項10から18および22から89のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のBMP分子が、BM4を含む、請求項10から18、22から87、89、および90のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のWnt活性化剤が、CHIR99021、Wnt−1、WNT3A、Wnt4、Wnt5a、WAY−316606、IQ1、QS11、SB−216763、BIO(6−ブロモインジルビン−3’−オキシム)、LY2090314、DCA、2−アミノ−4−[3,4−(メチレンジオキシ)ベンジル−アミノ]−6−(3−メトキシフェニル)ピリミジン、(ヘテロ)アリールピリミジン、その誘導体、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項1から91のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のWnt活性化剤が、CHIR99021である、請求項1から92のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のGH誘導剤が、レチノイン酸(RA)、コルチコステロイド、甲状腺ホルモン、ERアゴニスト、GHRHシグナル伝達経路のアゴニスト、Ghrelinシグナル伝達経路のアゴニスト、インターロイキン、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項1から18および60から93のいずれか一項に記載の方法。
- 前記コルチコステロイドが、デキサメタゾン、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項61から94のいずれか一項に記載の方法。
- 前記コルチコステロイドが、デキサメタゾンである、請求項61から95のいずれか一項に記載の方法。
- 前記甲状腺ホルモンが、T3、T4、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項61から96のいずれか一項に記載の方法。
- 前記甲状腺ホルモンが、T3である、請求項61から97のいずれか一項に記載の方法。
- 前記GHRHシグナル伝達経路のアゴニストが、GHRH、c−AMP(例えば、ジブチリル−cAMP)、PKA、CREB、MAPK活性化剤、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項61から98のいずれか一項に記載の方法。
- 前記GHRHシグナル伝達経路のアゴニストが、GHRH、c−AMP、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項61から99のいずれか一項に記載の方法。
- 前記Ghrelinシグナル伝達経路のアゴニストが、Ghrelin、GHSRアゴニスト、その誘導体およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項61から100のいずれか一項に記載の方法。
- 前記インターロイキンが、IL−1、IL−2、IL−3、IL−4、IL−5、IL−6、IL−7、IL−8、IL−9、IL−10、IL−11、IL−12、IL−13、IL−15、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項61から101のいずれか一項に記載の方法。
- 前記インターロイキンが、IL−1、IL−6、IL−10、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項61から102のいずれか一項に記載の方法。
- 前記インターロイキンが、IL−6である、請求項61から103のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のERアゴニストが、ジアリールプロピオニトリル(DPN)、エストラジオール(E2)、プロピルピラゾール−トリオール(PPT)、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項40から104に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のERアゴニストが、DPNを含む、請求項40から105のいずれか一項に記載の方法。
- TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤が、SB431542、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項10から18および22から106のいずれか一項に記載の方法。
- SHHシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤が、SHH、C25IIおよびパルモルファミンなどのスムーズンド(SMO)受容体小分子アゴニスト、SAG(例えば、Stanton et al, Mol Biosyst. 2010 Jan;6(1):44−54に開示されているような)、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項10から18および22から107のいずれか一項に記載の方法。
- SHHシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤が、SHHを含む、請求項10から18および22から108のいずれか一項に記載の方法。
- SHHシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤が、SAGを含む、請求項10から18および22から109のいずれか一項に記載の方法。
- SMADシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤が、LDN193189、Noggin、Dorsomorphin、K02288、DMH1、ML347、LDN212854、その誘導体、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項54から110のいずれか一項に記載の方法。
- SMADシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤が、LDN193189を含む、請求項54から111のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約10ng/mLから200ng/mLの間の濃度の前記1つまたは複数の背方化剤と接触させる、請求項1から112のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約1ng/mLから30ng/mLの間の濃度の前記1つまたは複数の腹方化剤と接触させる、請求項1から113のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約10ng/mlから200ng/mLの間の濃度のFGFシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤と接触させる、請求項10から18および22から114のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約0.1ng/mlから10ng/mlの間の濃度のBMP分子の前記1つまたは複数の活性化剤と接触させる、請求項10から18および22から115のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約1μMから20μMの間の濃度のTGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させる、請求項1から116のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約50ng/mlから200ng/mlの間、または約50nMから200nMの間の濃度のSHHシグナル伝達の前記1つまたは複数の活性化剤と接触させる、請求項10から18および22から117のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約1μMから10μMの濃度の前記1つまたは複数のWnt活性化剤と接触させる、請求項1から118のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約0.1nMから20nMの間の濃度の前記1つまたは複数のERアゴニストと接触させる、請求項40から119のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約0.1μMから1μMの濃度のRAと接触させる、請求項61から120のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約1nMから20nMの間の濃度の1つまたは複数の甲状腺ホルモンと接触させる、請求項61から121のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約0.1μMから10μMの濃度の1つまたは複数のコルチコステロイドと接触させる、請求項61から122のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約0.1μMから10μMまたは約0.1μM未満、または10nMの濃度の1つまたは複数のGHRHシグナル伝達経路のアゴニストと接触させる、請求項61から123のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約1nMから50nMの間の濃度の1つまたは複数のGhrelinシグナル伝達経路のアゴニストと接触させる、請求項61から124のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約1ng/mlから50ng/mlの間の濃度の1つまたは複数のインターロイキンと接触させる、請求項61から125のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞を、約100nMから300nMの間の濃度のSMADシグナル伝達の前記1つまたは複数の阻害剤と接触させる、請求項61から126のいずれか一項に記載の方法。
- 成長ホルモンを産生することが可能であるin vitro分化細胞(GH産生成長ホルモン産生細胞)の細胞集団であって、前記in vitro分化細胞が、請求項10から18および22から127のいずれか一項に記載の方法に従って、幹細胞から生じる、細胞集団。
- 成長ホルモンを産生することが可能であるin vitro分化細胞(GH産生成長ホルモン産生細胞)の細胞集団であって、前記in vitro分化細胞が、請求項1から9、19から21、および27から128のいずれか一項に記載の方法に従って、下垂体前駆体から生じる、細胞集団。
- 請求項128または129に記載の細胞集団を含む組成物。
- in vitro分化細胞の集団を含む組成物であって、前記分化細胞の少なくとも約50%が、成長ホルモンを産生することが可能(GH産生成長ホルモン産生細胞)であり、前記分化細胞の約25%未満が、プロラクチン産生細胞マーカー、甲状腺刺激ホルモン産生細胞マーカー、下垂体前駆体マーカー、Pit1、幹細胞マーカー、NNEマーカー、神経堤(NC)系統マーカー、および非下垂体プラコードマーカーからなる群から選択される1つまたは複数のマーカーを発現する、組成物。
- 前記非下垂体プラコードマーカーが、頭蓋プラコードマーカー、上鰓プラコードマーカー、三叉神経プラコードマーカー、および耳プラコードマーカーからなる群から選択される、請求項131に記載の組成物。
- (a)1つまたは複数の背方化剤;
(b)1つまたは複数の腹方化剤;
(c)Wingless(Wnt)シグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤(Wnt活性化剤);および
(d)1つまたは複数の成長ホルモン(GH)誘導剤
を含む、下垂体前駆体のGH産生成長ホルモン産生細胞への分化を誘導するためのキット。 - (a)1つまたは複数のBMP分子;
(b)TGFβ/Activin−Nodalシグナル伝達の1つまたは複数の阻害剤;
(c)FGFシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤;
(d)SHHシグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤
(e)1つまたは複数の背方化剤;
(f)1つまたは複数の腹方化剤;
(g)Wingless(Wnt)シグナル伝達の1つまたは複数の活性化剤(Wnt活性化剤);および
(h)1つまたは複数の成長ホルモン(GH)誘導剤
を含む、幹細胞のGH産生成長ホルモン産生細胞への分化を誘導するためのキット。 - 1つまたは複数のERアゴニストをさらに含む、請求項133または134に記載のキット。
- 対象におけるGHの発現および/もしくは分泌を増加させる、GH、インスリン様成長因子1(IGF−1)、およびIGF−2のうちの1つもしくは複数の動的放出を回復させる、ならびに/またはGH欠損症を処置する方法であって、前記対象に、以下の:
(a)請求項128または129に記載の細胞集団;および
(b)請求項130から132のいずれか一項に記載の組成物
のうちの1つを投与するステップを含む方法。 - 対象におけるGHの発現および/もしくは分泌を増加させる、GH、インスリン様成長因子1(IGF−1)、およびIGF−2のうちの1つもしくは複数の動的放出を回復させる、ならびに/またはGH欠損症を処置するための医薬の製造における、請求項128または129に記載の細胞集団の使用。
- 対象におけるGHの発現および/もしくは分泌を増加させる、GH、インスリン様成長因子1(IGF−1)、およびIGF−2のうちの1つもしくは複数の動的放出を回復させる、ならびに/またはGH欠損症を処置するための医薬の製造における、請求項130から132のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 療法における使用のための、請求項128または129に記載の細胞集団。
- 療法における使用のための、請求項130から132のいずれか一項に記載の組成物。
- 対象におけるGHの発現および/もしくは分泌を増加させる、GH、インスリン様成長因子1(IGF−1)、およびIGF−2のうちの1つもしくは複数の動的放出を回復させる、ならびに/またはGH欠損症を処置することにおける使用のための、請求項128または129に記載の細胞集団。
- 対象におけるGHの発現および/もしくは分泌を増加させる、GH、インスリン様成長因子1(IGF−1)、およびIGF−2のうちの1つもしくは複数の動的放出を回復させる、ならびに/またはGH欠損症を処置することにおける使用のための、請求項130から132のいずれか一項に記載の組成物。
- GH欠損症に関連する1つまたは複数の細胞表現型を克服することが可能である治療用化合物をスクリーニングするための方法であって、
(a)請求項128または129に記載のin vitroで分化したGH産生成長ホルモン産生細胞の細胞集団を、試験化合物と接触させるステップと;(b)前記GH産生成長ホルモン産生細胞の機能的活性および/または遺伝子発現を測定するステップであって、前記GH産生成長ホルモン産生細胞が、GH欠損症を有する対象の幹細胞またはGH欠損症を有する対象の1つまたは複数の下垂体前駆体マーカーを発現する細胞から得られるステップとを含む方法。
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Citations (2)
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Non-Patent Citations (2)
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JOURNAL OF ENDOCRINOLOGY, vol. 184, JPN6022046993, 2005, pages 41 - 50, ISSN: 0004913721 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2022176958A1 (ja) * | 2021-02-17 | 2022-08-25 | 学校法人藤田学園 | リンパ球性下垂体前葉炎及びその類縁疾患のマーカー並びにその利用 |
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