JP2021138629A - 薬物デリバリーキャリアおよびこれを用いる医薬組成物 - Google Patents
薬物デリバリーキャリアおよびこれを用いる医薬組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021138629A JP2021138629A JP2020036022A JP2020036022A JP2021138629A JP 2021138629 A JP2021138629 A JP 2021138629A JP 2020036022 A JP2020036022 A JP 2020036022A JP 2020036022 A JP2020036022 A JP 2020036022A JP 2021138629 A JP2021138629 A JP 2021138629A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- density lipoprotein
- modified high
- apolipoprotein
- eye
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 20
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 117
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 117
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 79
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 48
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 48
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims abstract description 32
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 31
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 208000005590 Choroidal Neovascularization Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 206010060823 Choroidal neovascularisation Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 108010043655 penetratin Proteins 0.000 claims description 54
- MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N penetratin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N 0.000 claims description 54
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 48
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 44
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 35
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 27
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 27
- 108010059886 Apolipoprotein A-I Proteins 0.000 claims description 26
- 102000005666 Apolipoprotein A-I Human genes 0.000 claims description 25
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 21
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 claims description 19
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 16
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 16
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 claims description 15
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 claims description 15
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 claims description 14
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 14
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 13
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 13
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 claims description 12
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 claims description 12
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 claims description 12
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 12
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 10
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 claims description 10
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims description 10
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims description 10
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 208000024519 eye neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 claims description 9
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 claims description 8
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 claims description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 8
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 108010058940 Glutamyl Aminopeptidase Proteins 0.000 claims description 5
- 102000006485 Glutamyl Aminopeptidase Human genes 0.000 claims description 5
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 5
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 claims description 5
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 claims description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 5
- QZDDFQLIQRYMBV-UHFFFAOYSA-N 2-[3-nitro-2-(2-nitrophenyl)-4-oxochromen-8-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(C(C=2[N+]([O-])=O)=O)=C1OC=2C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O QZDDFQLIQRYMBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102000009081 Apolipoprotein A-II Human genes 0.000 claims description 4
- 108010087614 Apolipoprotein A-II Proteins 0.000 claims description 4
- 108010049990 CD13 Antigens Proteins 0.000 claims description 4
- 108010088535 Pep-1 peptide Proteins 0.000 claims description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 102100029470 Apolipoprotein E Human genes 0.000 claims description 3
- 101710095339 Apolipoprotein E Proteins 0.000 claims description 3
- 101000781681 Protobothrops flavoviridis Disintegrin triflavin Proteins 0.000 claims description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 3
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 claims description 3
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 claims description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 3
- 108010062760 transportan Proteins 0.000 claims description 3
- PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N transportan Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 claims description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 3
- 101000763951 Homo sapiens Mitochondrial import inner membrane translocase subunit Tim8 A Proteins 0.000 claims description 2
- 101001123852 Mus musculus Sialidase-2 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 abstract description 9
- 230000003229 cytophilic effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 25
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 17
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 13
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- -1 fluoromethron Chemical compound 0.000 description 11
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- 208000022873 Ocular disease Diseases 0.000 description 8
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 8
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 8
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 8
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 7
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 7
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000003798 L01XE11 - Pazopanib Substances 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 6
- CUIHSIWYWATEQL-UHFFFAOYSA-N pazopanib Chemical compound C1=CC2=C(C)N(C)N=C2C=C1N(C)C(N=1)=CC=NC=1NC1=CC=C(C)C(S(N)(=O)=O)=C1 CUIHSIWYWATEQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960000639 pazopanib Drugs 0.000 description 6
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 5
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 5
- 238000002298 density-gradient ultracentrifugation Methods 0.000 description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 5
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 4
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 4
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 3
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 3
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 3
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 3
- 208000000208 Wet Macular Degeneration Diseases 0.000 description 3
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 3
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 3
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000757160 Homo sapiens Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N Retinol Palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004308 accommodation Effects 0.000 description 2
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 2
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 108091006116 chimeric peptides Proteins 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 2
- VBVAVBCYMYWNOU-UHFFFAOYSA-N coumarin 6 Chemical compound C1=CC=C2SC(C3=CC4=CC=C(C=C4OC3=O)N(CC)CC)=NC2=C1 VBVAVBCYMYWNOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000003885 eye ointment Substances 0.000 description 2
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 210000003583 retinal pigment epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N (+)-Neomenthol Chemical compound CC(C)[C@@H]1CC[C@@H](C)C[C@@H]1O NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N 0.000 description 1
- WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N (-)-D-erythro-Sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCC=CC(O)C(N)CO WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CIVCELMLGDGMKZ-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichloro-6-methylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=CC(Cl)=C(C(O)=O)C(Cl)=N1 CIVCELMLGDGMKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710197241 Accessory gland-specific peptide 70A Proteins 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-M Aminoacetate Chemical compound NCC([O-])=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 102000018619 Apolipoproteins A Human genes 0.000 description 1
- 108010027004 Apolipoproteins A Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBAKFASWICGISY-BTJKTKAUSA-N Chlorpheniramine maleate Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O.C=1C=CC=NC=1C(CCN(C)C)C1=CC=C(Cl)C=C1 DBAKFASWICGISY-BTJKTKAUSA-N 0.000 description 1
- NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N DL-menthol Natural products CC(C)C1CCC(C)CC1O NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004594 DNA Polymerase I Human genes 0.000 description 1
- 108010017826 DNA Polymerase I Proteins 0.000 description 1
- 108091008102 DNA aptamers Proteins 0.000 description 1
- 238000010442 DNA editing Methods 0.000 description 1
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BALXUFOVQVENIU-GNAZCLTHSA-N Ephedrine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 BALXUFOVQVENIU-GNAZCLTHSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 206010015946 Eye irritation Diseases 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 208000012287 Prolapse Diseases 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 description 1
- 108091008103 RNA aptamers Proteins 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BCKXLBQYZLBQEK-KVVVOXFISA-M Sodium oleate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC([O-])=O BCKXLBQYZLBQEK-KVVVOXFISA-M 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- BGDKAVGWHJFAGW-UHFFFAOYSA-N Tropicamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(CO)C(=O)N(CC)CC1=CC=NC=C1 BGDKAVGWHJFAGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 1
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 description 1
- 206010058990 Venous occlusion Diseases 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- 229940124532 absorption promoter Drugs 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- BZKPWHYZMXOIDC-UHFFFAOYSA-N acetazolamide Chemical compound CC(=O)NC1=NN=C(S(N)(=O)=O)S1 BZKPWHYZMXOIDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000571 acetazolamide Drugs 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000008051 alkyl sulfates Chemical class 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002280 amphoteric surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 1
- 229940124623 antihistamine drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229960002537 betamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N betamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- CHDPSNLJFOQTRK-UHFFFAOYSA-N betaxolol hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(OCC(O)C[NH2+]C(C)C)=CC=C1CCOCC1CC1 CHDPSNLJFOQTRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004347 betaxolol hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- HZFGMQJYAFHESD-UHFFFAOYSA-M bromfenac sodium Chemical compound [Na+].NC1=C(CC([O-])=O)C=CC=C1C(=O)C1=CC=C(Br)C=C1 HZFGMQJYAFHESD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960002716 bromfenac sodium Drugs 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical compound BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- AIXAANGOTKPUOY-UHFFFAOYSA-N carbachol Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCOC(N)=O AIXAANGOTKPUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- FYBXRCFPOTXTJF-UHFFFAOYSA-N carteolol hydrochloride Chemical compound [Cl-].N1C(=O)CCC2=C1C=CC=C2OCC(O)C[NH2+]C(C)(C)C FYBXRCFPOTXTJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002165 carteolol hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 229940046978 chlorpheniramine maleate Drugs 0.000 description 1
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 1
- 210000003161 choroid Anatomy 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000850 decongestant Substances 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- KPHWPUGNDIVLNH-UHFFFAOYSA-M diclofenac sodium Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl KPHWPUGNDIVLNH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229960000525 diphenhydramine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 239000003221 ear drop Substances 0.000 description 1
- 229940047652 ear drops Drugs 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 206010014801 endophthalmitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 229960002534 ephedrine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 229960003072 epinephrine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000013 eye irritation Toxicity 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960000443 hydrochloric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001261 isocyanato group Chemical group *N=C=O 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229960001160 latanoprost Drugs 0.000 description 1
- GGXICVAJURFBLW-CEYXHVGTSA-N latanoprost Chemical compound CC(C)OC(=O)CCC\C=C/C[C@H]1[C@@H](O)C[C@@H](O)[C@@H]1CC[C@@H](O)CCC1=CC=CC=C1 GGXICVAJURFBLW-CEYXHVGTSA-N 0.000 description 1
- 230000004576 lipid-binding Effects 0.000 description 1
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000938 luteal effect Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229940041616 menthol Drugs 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000000649 photocoagulation Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 1
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000844 retinal pigment epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940108325 retinyl palmitate Drugs 0.000 description 1
- 235000019172 retinyl palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011769 retinyl palmitate Substances 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 108010038379 sargramostim Proteins 0.000 description 1
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940037001 sodium edetate Drugs 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- WTWSHHITWMVLBX-DKWTVANSSA-M sodium;(2s)-2-aminobutanedioate;hydron Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CC(O)=O WTWSHHITWMVLBX-DKWTVANSSA-M 0.000 description 1
- RUTSRVMUIGMTHJ-UHFFFAOYSA-M sodium;tetradec-1-ene-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCC=CS([O-])(=O)=O RUTSRVMUIGMTHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N sphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003871 sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960004458 tafluprost Drugs 0.000 description 1
- WSNODXPBBALQOF-VEJSHDCNSA-N tafluprost Chemical compound CC(C)OC(=O)CCC\C=C/C[C@H]1[C@@H](O)C[C@@H](O)[C@@H]1\C=C\C(F)(F)COC1=CC=CC=C1 WSNODXPBBALQOF-VEJSHDCNSA-N 0.000 description 1
- 239000012929 tonicity agent Substances 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 1
- 229960004791 tropicamide Drugs 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
【課題】眼部の異常な脈絡膜新生血管に優先的にデリバリーする機能を有する、新たな高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を提供する。【解決手段】血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドが結合したアポリポタンパク質並びにリン脂質を含む、修飾高密度リポタンパク質（ｖｃＨＤＬ）。血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーは、新生血管内皮細胞標的化ペプチド、例えば、ＮＧＲ含有ペプチドである。ｖｃＨＤＬを含む、後眼部新生血管薬物デリバリーキャリア。【選択図】図２
Description
本発明は、薬物デリバリーキャリアおよびこれを用いる医薬組成物に関する。薬物デリバリーキャリアは、標的化ペプチドおよび細胞親和性ペプチドを結合したアポリポタンパク質を用いる、修飾高密度リポタンパク質である。
近年、加齢黄斑変性や糖尿病網膜症などの後眼部疾患に対して薬物の硝子体内注射が行われるようになってきている。このような侵襲的局所投与法は、直接薬物を眼内に注入するため確実な治療効果が期待できる。その反面、注射による眼内炎の危険性や注射を反復して行わないといけないという煩雑性が問題視されている。しかしながら、眼には外界から眼内への物質移行を制御するバリア機能が存在する。そのため、点眼や経静脈投与などによる非侵襲的投与による、眼球内への薬物到達は容易でない。特に、網膜等の後眼部への薬物送達効率は極めて低い。眼内ドラッグデリバリーの様々な投与経路を図１に示す。
これらの問題を打開すべく、薬物キャリアを用いた点眼用ドラッグデリバリーの開発が試みられている。現在眼科領域に応用されている薬物キャリアとしては、後眼部到達用リポソームが知られている。当該後眼部到達用リポソームの粒子径は約１１０ｎｍであり、蛍光色素クマリン−６をリポソームに内包させ、その蛍光強度を測定することで、後眼部へのドラッグデリバリーが確認されている。眼部到達用リポソームでは、そのサイズが小さくなるごとに、後眼部へのリポソームの到達性が高まり、その結果、薬剤の集積性も高まることが期待されると報告されている（特許文献１および２、非特許文献１）。
点眼用ドラッグキャリアのサイズは２０ｎｍ以下が望ましいことを示唆する報告もある（非特許文献２）が、一般に１００ｎｍ未満のサイズのリポソームの作製は容易ではない。
点眼用ドラッグキャリアとしてではなく、悪性腫瘍細胞への抗癌剤細胞内デリバリーを目的として、親和性ペプチドを融合した高密度リポタンパク質（ｃＨＤＬ）が知られている（非特許文献３）。しかし、ＨＤＬを含め粒径１００ｎｍ以下のリポタンパク質について、点眼剤としての薬物デリバリーを目的とするものは知られてはいなかった。
一方で、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）中に、細胞親和性ペプチドのような機能性ペプチドを融合することによって、融合された高密度リポタンパク質自体が新たな動態特性を獲得し、また融合する機能性ペプチド自体が有する生体活性を該ペプチドが含む高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）に付与することも期待し得る。
本発明者は、点眼による後眼部への薬物デリバリーのためのキャリアとして有用である、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）に細胞親和性ペプチド（ＣＰ）を結合した、ＣＰ結合高密度リポタンパク質（ｃＨＤＬ）を提案した。このｃＨＤＬは、細胞毒性を有さず、かつ内包する薬物を後眼部へ到達させることができる（特許文献３）。特許文献３には、このｃＨＤＬを用いる後眼部疾患の診断、予防または治療のための医薬組成物などの記載がある。
Hironaka, K. et al., J Controlled Release 2009; 136: 247-253
Kompella, U. B. et al., Molecular Vision 2006; 12: 1185-1198
Murakami, T. et al., Nanomedicine 2010; 5: 867-879
後眼部疾患の中でも加齢黄斑変性は、長寿命化に従っての失明原因疾患に占める割合が増加することが懸念されている。加齢黄斑変性は、萎縮型と滲出型に大別され、滲出型では、網膜色素上皮細胞の下にある、血管が豊富な脈絡膜から異常な脈絡膜新生血管が生じ、この新生血管が網膜色素上皮の下、もしくは網膜と網膜色素上皮の間に侵入して網膜を傷害することで発症すると考えられている。
滲出型加齢黄斑変性の治療では、異常な脈絡膜新生血管にその生成を抑制する薬物をデリバリーすることが求められる。特許文献３に記載のＣＰ結合高密度リポタンパク質（ｃＨＤＬ）は、内包する薬物を後眼部へ到達させることができるが、後眼部の異常な脈絡膜新生血管に優先的にデリバリーする機能はない。
そこで本発明は、上記ｃＨＤＬがする課題を解決することができる、後眼部の異常な脈絡膜新生血管に優先的にデリバリーする機能を有する、新たな高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を提供することを目的とする。そのようなＨＤＬを提供することができれば、滲出型加齢黄斑変性の効果的な治療に有用であり、さらには、滲出型加齢黄斑変性に類する後眼部新生血管疾患の効果的な治療に有用である。
本発明者らは、細胞親和性ペプチドに加えて標的化ペプチドが結合したアポリポタンパク質を用いた修飾高密度リポタンパク質が、後眼部の異常な脈絡膜新生血管に優先的にデリバリーされることを見出して、本発明を完成させた。
本発明は以下の通りである。
［１］
血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドが結合したアポリポタンパク質並びにリン脂質を含む、修飾高密度リポタンパク質。
［２］
血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーが、新生血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーである、［１］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［３］
新生血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーが、αVβ3インテグリン、アミノペプチダーゼＡ、アミノペプチダーゼＮ、及び血管内皮増殖因子(ＶＥＧＦ)受容体から選択される分子に特異的に結合する、［２］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［４］
新生血管内皮細胞標的化ペプチドが、ＮＧＲ含有ペプチド、ＲＧＤ含有ペプチド、又はＣＰＲＥＣＥＳ含有ペプチドである［２］又は［３］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［５］
細胞親和性ペプチドが、ＴＡＴペプチド、ペネトラチン（ＰＥＮ）、ポリアルギニン（Ｒ８）、ＬＬ−３７、トランスポータン、Ｐｅｐ−１、およびＭＴＳからなる群から選ばれる少なくとも１ 種である、［１］〜［４］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［６］
アポリポタンパク質が、アポリポタンパク質Ａ−Ｉ、アポリポタンパク質Ａ−ＩＩ、アポリポタンパク質Ｃ、アポリポタンパク質Ｅ、およびそれらの部分断片あるいは遺伝子改変型アポリポタンパク質からなる群から選ばれる少なくとも１種である［１］〜［５］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［７］
リン脂質が、ホスファチジルコリンである［１］〜［６］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［８］
ホスファチジルコリンがジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）およびジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）からなる群から選ばれる少なくとも１種である［７］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［９］
密度が１．０〜１．２１ｇ／ｍＬの範囲であり、粒径が直径１０〜２０ｎｍである、［１］〜［８］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［１０］
リポタンパク質１分子あたり、１分子以上の蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の物質をさらに含む、［１］〜［９］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［１１］
［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質、該リポタンパク質中に含まれる後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物、および医薬的に許容され得る添加剤を含む、後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療のための医薬組成物。
［１２］
［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質、該リポタンパク質中に含まれる後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物、および医薬的に許容され得る添加剤を含む、後眼部新生血管の阻害用医薬組成物。
［１３］
後眼部新生血管疾患が、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる少なくとも１種の疾患である、［１１］又は［１２］に記載の医薬組成物。
［１４］
薬物が、眼内の脈絡膜新生血管の抑制のための薬剤、あるいは加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる疾患の診断、予防又は治療剤の少なくとも１種類の化合物である、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる少なくとも１種の後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療のための［１１］又は［１２］に記載の医薬組成物。
［１５］
点眼用である、［１１］〜［１４］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［１６］
［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質を含む、後眼部新生血管ターゲティング用薬物デリバリーキャリア。
［１７］
ｉ）アポリポタンパク質に血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合させて、結合タンパク質を得る；
ｉｉ）上記ｉ）で得られた結合タンパク質と、リン脂質、適宜、蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物とを混合することにより、血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合した修飾高密度リポタンパク質を調製する；
ｉｉｉ）超遠心法により、未反応のリン脂質、アポリポタンパク質を除去することによって、血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合した高密度リポタンパク質を回収する、
ことを含む、［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質の製造方法。
［１］
血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドが結合したアポリポタンパク質並びにリン脂質を含む、修飾高密度リポタンパク質。
［２］
血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーが、新生血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーである、［１］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［３］
新生血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーが、αVβ3インテグリン、アミノペプチダーゼＡ、アミノペプチダーゼＮ、及び血管内皮増殖因子(ＶＥＧＦ)受容体から選択される分子に特異的に結合する、［２］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［４］
新生血管内皮細胞標的化ペプチドが、ＮＧＲ含有ペプチド、ＲＧＤ含有ペプチド、又はＣＰＲＥＣＥＳ含有ペプチドである［２］又は［３］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［５］
細胞親和性ペプチドが、ＴＡＴペプチド、ペネトラチン（ＰＥＮ）、ポリアルギニン（Ｒ８）、ＬＬ−３７、トランスポータン、Ｐｅｐ−１、およびＭＴＳからなる群から選ばれる少なくとも１ 種である、［１］〜［４］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［６］
アポリポタンパク質が、アポリポタンパク質Ａ−Ｉ、アポリポタンパク質Ａ−ＩＩ、アポリポタンパク質Ｃ、アポリポタンパク質Ｅ、およびそれらの部分断片あるいは遺伝子改変型アポリポタンパク質からなる群から選ばれる少なくとも１種である［１］〜［５］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［７］
リン脂質が、ホスファチジルコリンである［１］〜［６］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［８］
ホスファチジルコリンがジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）およびジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）からなる群から選ばれる少なくとも１種である［７］に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［９］
密度が１．０〜１．２１ｇ／ｍＬの範囲であり、粒径が直径１０〜２０ｎｍである、［１］〜［８］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［１０］
リポタンパク質１分子あたり、１分子以上の蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の物質をさらに含む、［１］〜［９］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
［１１］
［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質、該リポタンパク質中に含まれる後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物、および医薬的に許容され得る添加剤を含む、後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療のための医薬組成物。
［１２］
［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質、該リポタンパク質中に含まれる後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物、および医薬的に許容され得る添加剤を含む、後眼部新生血管の阻害用医薬組成物。
［１３］
後眼部新生血管疾患が、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる少なくとも１種の疾患である、［１１］又は［１２］に記載の医薬組成物。
［１４］
薬物が、眼内の脈絡膜新生血管の抑制のための薬剤、あるいは加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる疾患の診断、予防又は治療剤の少なくとも１種類の化合物である、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる少なくとも１種の後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療のための［１１］又は［１２］に記載の医薬組成物。
［１５］
点眼用である、［１１］〜［１４］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［１６］
［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質を含む、後眼部新生血管ターゲティング用薬物デリバリーキャリア。
［１７］
ｉ）アポリポタンパク質に血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合させて、結合タンパク質を得る；
ｉｉ）上記ｉ）で得られた結合タンパク質と、リン脂質、適宜、蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物とを混合することにより、血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合した修飾高密度リポタンパク質を調製する；
ｉｉｉ）超遠心法により、未反応のリン脂質、アポリポタンパク質を除去することによって、血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合した高密度リポタンパク質を回収する、
ことを含む、［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質の製造方法。
本発明によれば、後眼部の異常な脈絡膜新生血管に優先的にデリバリーされる新たな高密度リポタンパク質であるｖｃＨＤＬが提供される。このｖｃＨＤＬを用いることで、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、網膜動静脈閉塞症などの後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療のための医薬組成物および後眼部新生血管の阻害用医薬組成物を提供することができる。
以下に、本発明をさらに詳細に説明する。
（定義）
以下に、本明細書および特許請求の範囲中で使用する用語の定義を示す。
（定義）
以下に、本明細書および特許請求の範囲中で使用する用語の定義を示す。
本発明の構成成分としての「高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）」とは、アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ａｐｏＡ−Ｉ）を含むリポタンパク質を意味し、天然物血漿由来の高密度リポタンパク質、またはアポリポタンパク質またはその遺伝子改変型アポリポタンパク質とリン脂質とを化学合成的な手法もしくは遺伝子工学的な手法により製造される再構成（すなわち、人工）高密度リポタンパク質（ｒＨＤＬ）のいずれであってもよい。高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）は、主な構成成分としてアポリポタンパク質およびリン脂質を含む。人工的に高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を調製する場合には、アポリポタンパク質の１モルに対して、数十倍〜数百倍モルのリン脂質を用いることができる。
ＨＤＬの密度は、天然由来のＨＤＬである場合には約１．０６３〜１．２１０ｇ／ｍＬの範囲（Antonio M. Gotto, Jr.らMethods Enzymol. 1986; 128: 3-41を参照）であり、一方ｒＨＤＬの場合には天然由来のＨＤＬの大きさに準じるが、製造時に所望する大きさの密度に調整することができるため、例えば天然の低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の密度である約１．０１９〜１．０６３ｇ／ｍＬの範囲（Antonio M. Gotto, Jr.らの同文献を参照）をも含み得る。
ＨＤＬの粒子径は、天然由来のＨＤＬである場合には約５〜１２ｎｍの範囲（Antonio M. Gotto, Jr.らの同文献を参照）である。ｒＨＤＬの場合には天然由来のＨＤＬの大きさに準じるが、製造時に所望する大きさの粒径に調整することができるため、例えば天然のＬＤＬの粒径の大きさである約１８〜２５ｎｍの範囲（Antonio M. Gotto, Jr.らの同文献を参照）をも含み得て、また約１０００ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満、または約１００ｎｍ未満の粒径に調整することもできる。ＨＤＬは、そのサイズが小さいほど、後眼部への到達性が高まることが期待され、従って典型的には粒子径は約１００ｎｍ未満、好ましくは約１０〜約５０ｎｍ、より好ましくは約１０〜約２０ｎｍである。
構成成分としての「アポリポタンパク質」とは、リポタンパク質を構成する脂質以外のタンパク質部分を意味する。本発明におけるアポリポタンパク質は、天然のリポタンパク質中に含まれることが一般に知られるアポリポタンパク質およびその遺伝子改変型アポリポタンパク質を含むが、これらに限定されない。高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）中に含まれることが知られるアポリポタンパク質およびその遺伝子改変型アポリポタンパク質が好ましい。例えば、アポリポタンパク質Ａ〜Ｅの群に属するタンパク質を挙げられ、好ましくはアポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ａｐｏＡ−Ｉ）、アポリポタンパク質Ａ−ＩＩ（ａｐｏＡ−ＩＩ）、アポリポタンパク質Ｃ（ａｐｏＣ）、アポリポタンパク質Ｅ（ａｐｏＥ）、およびそれらの遺伝子改変型アポリポタンパク質からなる群から選ばれる、少なくとも１種であるが、これらに限定されるものではない。より好ましくは、アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ａｐｏＡ−Ｉ）およびその遺伝子改変型ａｐｏＡ−Ｉを挙げられる。遺伝子改変型アポリポタンパク質とは、アポリポタンパク質の機能（例えば、脂質結合機能）と同等の機能を有する変異体または類似体等（つまり、機能的同等物）を意味する。例えばアポリポタンパク質の部分断片およびそれらを組み合わせたアポリポタンパク質を挙げられる。アポリポタンパク質Ａ−Ｉの遺伝子改変型アポリポタンパク質の例としては、Ｎ末端４４アミノ酸欠損ａｐｏＡ−Ｉを挙げられる。
構成成分としての「リン脂質」とは、１つまたは複数のリン酸エステル部位を有する脂質を意味する。本発明におけるリン脂質とは、天然のリポタンパク質中に含まれることが一般に知られるリン脂質を含む。高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）中に含まれることが知られるリン脂質が好ましいが、これに限定されない。例えば、スフィンゴシンを骨格とするスフィンゴ脂質が挙げられ、アシル基の炭素数が約１２〜約１８と、好ましくは約１４〜約１８と、長鎖のリン脂質が好ましい。例えば、フォスファチジルグリセロール、フォスファチジルセリン、フォスファチジルコリン、及びフォスファチジルエタノールアミンを挙げられ、フォスファチジルコリンが好ましい。典型的な例としては、ジミリストイルフォスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルフォスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルフォスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、エッグフォスファチジルコリン（ＰＣ）、および１−パルミトイル−２−オレオイルフォスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）を挙げられるが、これらに限定されるものではない。当該リン脂質は、単独でまたは２種以上を組み合わせて使用することができる。本発明におけるリン脂質とは、例えば脂質膜の硬さを調整し、また安定化した複合体が形成する、さらには薬物等の化合物を内包するのに寄与する役割を果たしているものと考えられる。また、リン脂質にコレステロールを添加して用いることもできる。コレステロールを含有させることにより、リン脂質により形成される脂質膜の硬さを調整することができる。リン脂質にコレステロールを添加することで薬剤などの有効成分と相互作用して、脂質膜への内封効率を調整することもできる。リン脂質に対するコレステロールの添加量は、例えば、０．０１〜３０質量％の範囲である。
構成成分としての「血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマー（以下、ＶＴＰと略記する）」は血管内皮細胞に結合して、血管を標的化できるペプチド又はアプタマーを意味し、特に、新生血管内皮細胞に結合して、血管内皮細胞を標的化できるペプチド又はアプタマーである「新生血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマー」であることが好ましい。たとえば、新生血管にはαｖβ３インテグリン、アミノペプチダーゼＡ、アミノペプチダーゼＮ（ＡＰＮ；ＣＤ１３とも呼ばれる）及び血管内皮増殖因子(ＶＥＧＦ)受容体などが発現していることが知られている（Ｊ．Ｌａｈｄｅｎｒａｎｔａら（2007）Ｔｈｅ ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ；２１：３２７２−３２７８）。よって、新生血管内皮細胞標的化ペプチド及びペプチドには、これらの分子に特異的に結合する抗体やその断片及びアプタマーなどが含まれる。
「新生血管内皮細胞標的化ペプチド」としては、例えば、「アスパルギン−グリシン−アルギニン（ＮＧＲ）含有ペプチド」、ＡＣＤＣＲＧＤＣＦＣ（配列番号２）などのＲＧＤ含有ペプチド、及びＣＰＫＶＣＰＲＥＣＥＳＮＣ（配列番号３）などのＣＰＲＥＣＥＳ含有ペプチドを挙げることができる。これらのペプチドは、腫瘍血管内皮細胞上のそれぞれ、ＣＤ１３受容体、αvβ3インテグリン、及びアミノペプチダーゼＡに結合する腫瘍新生血管標的化ペプチドとして見出された分子であり、網膜における新生血管に対しても結合性であることが報告されている（Ｊ．Ｌａｈｄｅｎｒａｎｔａら（2007）上掲）。これらのペプチドは、新生血管への結合能を損なわない限り前後に任意のアミノ酸が付加されていてもよい。例えば、ＮＧＲ含有ペプチドは、ＮＧＲのみであってもＮＧＲの前後の一方又は両方に他のアミノ酸が付随するＸmＮＧＲＹnであることもできる。Ｘは任意のアミノ酸であり、ｍは１〜１０の整数であり、ｍが２以上の場合、Ｘは同一又は異なるアミノ酸の組合せであることができる。Ｙは任意のアミノ酸であり、ｎは１〜１０の整数であり、ｎが２以上の場合、Ｙは同一又は異なるアミノ酸の組合せであることができる。ＸmＮＧＲＹnは、例えば、ＣＮＧＲＣＧＧ（配列番号４）であることができ、ＮＧＲの前後のシステイン（Ｃ）は、酸化によりＳ−Ｓ結合が形成され、ＮＧＲ部分が環状化して、受容体結合活性を増強することができる。
ＶＥＧＦ受容体から選択される分子に特異的に結合する抗体としては、例えば、ベバシズマブ（抗VEGFヒト化モノクローナル抗体）などを挙げることができる。また、抗体としてはVHH（variable domain of heavy chain of heavy chain antibody）抗体を含むことができ、抗体断片としては、例えば、Fab、F(ab')2、Fab'、diabody、一本鎖抗体（例えば、scFv、dsFv）等を挙げることができる。
αVβ3インテグリン、アミノペプチダーゼＡ、アミノペプチダーゼＮ及びＶＥＧＦ受容体から選択される分子に特異的に結合するアプタマーは、例えば、ＤＮＡアプタマー、ＲＮＡアプタマーであることができ、アプタマーとしては、例えば、ＶＥＧＦ受容体に対するアプタマーとしては、例えば、NUCLEIC ACID THERAPEUTICS, Volume 25, Number 5, page 227-234, 2015に記載のＡｐｔ80mer、ＡｐｔM80mer及びＡＰＴDivalentを挙げることができる（表１参照）。Ａｐｔ80merの塩基配列中の５はベンジル含有塩基（ＢｎｄＵ）を示す。ＡｐｔM80merを配列番号5に示す。
「細胞親和性ペプチド（ＣＰ）」とは、細胞膜に結合し、その後細胞内に移行することが可能な細胞親和性を示すペプチドを意味する。本発明における細胞親和性には、細胞膜透過性、細胞接着性、血管内皮細胞集積性、エンドソーム脱出性、細胞核集積性、ミトコンドリア集積性などを含むが、これらに限定されない。
ＣＰは、天然のタンパク質由来の天然ペプチドおよび人工的に製造する合成ペプチド（例えば、キメラペプチド）を含む。ＣＰは、そのアミノ酸配列による化学的特性により、塩基性細胞親和性ペプチド、両親媒性細胞親和性ペプチド、および疎水性細胞親和性ペプチドを含む。塩基性細胞親和性ペプチドが好ましい。例えば、塩基性細胞親和性ペプチド（例えば、ＨＩＶ−１ウイルスのＴＡＴタンパク質（Trans-activator of transcription protein）由来のＴＡＴペプチド、ショウジョウバエ由来のペネトラチン（ＰＥＮ）、ポリアルギニン（Ｒ８）、抗菌性ペプチド由来のＬＬ−３７）、両親媒性細胞親和性ペプチド（例えば、キメラペプチドであるトランスポータンやＰｅｐ−１、ＰＥＮ配列改変あるいはシャッフリング体）、および疎水性細胞親和性ペプチド（例えば、ファージディスプレー法によって得られる合成ペプチドであるＰｅｐ−１、膜タンパク質のシグナルペプチド由来のペプチドであるＭＴＳ）を挙げられるが、これらに限定されるものではない。
ＶＴＰ及びＣＰは、ＨＤＬと結合することで、本発明の修飾高密度リポタンパク質である、ＶＴＰ及びＣＰ結合高密度リポタンパク質（ｖｃＨＤＬ）を形成する。好ましくは、少なくとも１つのＶＴＰ及び少なくとも１つのＣＰが、アポリポタンパク質上で結合している。ＶＴＰ及びＣＰが１つずつ結合する場合は、ＶＴＰは、アポリポタンパク質のＮ末端で結合し、ＣＰは、アポリポタンパク質のＣ末端で結合することができる。あるいは、ＶＴＰは、アポリポタンパク質のＣ末端で結合し、ＣＰは、アポリポタンパク質のＮ末端で結合することもできる。あるいはＶＴＰとＣＰが共に、アポリポタンパク質のＮ末端あるいはＣ末端のいずれかで結合することもできる。ＶＴＰが２つ以上結合する場合、ＶＴＰを連続して２つ以上結合することができ、ＣＰが２つ以上結合する場合、ＣＰを連続して２つ以上結合することができる。あるいは、アポリポタンパク質のＮ末端及びＣ末端のそれぞれにＶＴＰ及びＣＰを結合することもできる。２以上のＶＴＰ及び／又はＣＰを１つのアポリポタンパク質に結合させることで、血管標的化能及び／又は細胞親和性を強化することができる場合がある。ＨＤＬは２分子以上のアポリポタンパク質を含むため、ｖｃＨＤＬにはそれぞれ２分子以上のＶＴＰとＣＰを含ませることができる。
ここで、ＶＴＰ及びＣＰとＨＤＬとの結合の手法は、化学合成的な手法（例えば、カップリング方法）または生物学的手法（例えば、遺伝子工学的方法）であることができる。ＶＴＰ及びＣＰとＨＤＬとが遺伝子工学的方法により、形質転換（融合）遺伝子を作成して人工的に結合させる場合、「融合」と呼ぶ。ＨＤＬ上の融合する官能基および位置は、融合させるＶＴＰ及びＣＰに応じて適宜改変し得る。本発明のｖｃＨＤＬの構造の一例として、ＶＴＰがＮＧＲであり、ＣＰがＰＥＮであり、それぞれ１つ結合した例の模式図を図２（左図）に示す。右図は、特許文献３に記載の従来例の模式図である。
任意の構成成分としての「蛍光標識物質」とは、蛍光標識として作用する物質を意味する。本発明における蛍光標識とは、タンパク質の蛍光標識に使用することができる標識物質であり、本発明のｖｃＨＤＬ中に封入され、内包される。化学合成物質および蛍光タンパク質を含むが、化学合成物質が好ましい。タンパク質へと反応する官能基としては、ＮＨＳエステル（アミン反応性）、イソシアナート（アミン反応性）、マレイミド（ＳＨ反応性）、ヒドラジド（アルデヒド反応性）などが利用でき、それらの官能基を有する蛍光標識物質を使用することができる。該蛍光標識試薬は市販のものを使用することができ、あるいは化学的合成または生物学的合成により調製してもよい。例えば、フルオレセイン、ローダミン、クマリン−６、Ｃｙ色素、Alexa Fluor（登録商標）、HiLyte Fluor（登録商標）等の化学合成物質、およびフィコエリトリン（ＰＥ）、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）等の蛍光タンパク質を含むが、これらに限定されない。
任意の構成成分としての「生体活性物質」とは、生体内の生理的調節機能に対して作用する性質を有する物質、例えば眼（例えば、後眼部）内の生理的調節機能に作用する物質を意味する。例えば、眼科組成物に通常用いられる充血除去成分（例えば、α−アドレナリン作動薬、具体的には塩酸エピネフリン、塩酸エフェドリン等）、眼筋調節薬成分（例えば、コリンエステラーゼ阻害剤、具体的にはトロピカミド等）、抗炎症薬成分または収斂薬成分（例えば、硫酸亜鉛、インドメタシン、ブロムフェナクナトリウム等）、抗ヒスタミン薬成分又は抗アレルギー薬成分（例えば、塩酸ジフェンヒドラミン、マレイン酸クロルフェニラミン等）、ビタミン類（例えば、パルミチン酸レチノール、アスコルビン酸等）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸ナトリウム、グルタミン酸ナトリウム等）、酸性ムコ多糖類（例えば、コンドロイチン硫酸ナトリウム）、局所麻酔薬成分（例えば、クロロブタノール、塩酸プロカイン等）などが例示できる。
任意の構成成分としての「薬物」とは、例えば眼部疾患の診断、予防または治療に有効な薬物が挙げられ、前眼部疾患、後眼部疾患、外眼部疾患の診断、予防または治療に有効な薬物を含む。具体的には、後述する「後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物」を挙げられる。
本発明のｖｃＨＤＬは１粒子当たり、１分子以上の蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物を更に含むことにより、複合体を形成する。
本発明のｖｃＨＤＬ中、構成比率として、アポリポタンパク質を例えば約０．０１〜０．５μｍｏＬ／Ｌ、典型的には約０．０５〜０．１μｍｏＬ／Ｌ、リン脂質を例えば約０．５〜２５０μｍｏＬ／Ｌ、典型的には約２．５〜２０μｍｏＬ／Ｌ、および、例えば、アポリポタンパク質と等量のモル比で融合したＶＴＰ及びＣＰを含む。但し、アポリポタンパク質の１分子に対して、２分子以上のＶＴＰ及びＣＰをそれぞれ結合させることもでき、その場合は、アポリポタンパク質と２倍量以上のモル比で融合したＶＴＰ及び／又はＣＰを含む。
また、適宜、蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物を、例えば、約０．０１〜２５μｍｏＬ／Ｌ、典型的には約０．０５〜２μｍｏＬ／Ｌの割合で含んでいてもよい。
本発明のｖｃＨＤＬの一態様として、例えばアポリポタンパク質の１ｍｇ／ｍＬ当たり、リン脂質を約０．１〜１００ｍｇ／ｍＬ、約１〜５０ｍｇ／ｍＬ、約２〜２０ｍｇ／ｍＬ、典型的には約５ｍｇ／ｍＬ、および適宜、蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物を約０．００１〜１ｍｇ／ｍＬ、約０．０１〜０．５ｍｇ／ｍＬ、約０．０２〜０．１ｍｇ／ｍＬ、典型的には約０．０５ｍｇ／ｍＬ、含む。また、好ましい一態様としては、例えばアポリポタンパク質の１ｍｇ／ｍＬ当たり、リン脂質を約５ｍｇ／ｍＬ、および適宜、蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物を約０．０５ｍｇ（５０μｇ）／ｍＬを含む。
本発明のｖｃＨＤＬは、ＣＰに加えてＶＴＰを含むことで、後眼部薬物デリバリーキャリアであり、かつ新生血管を標的化することができることから、異常な血管新生が原因とされている加齢黄斑変性症の患部である後眼部の新生血管に対する送達能力に優れる。そのため本発明のｖｃＨＤＬに加齢黄斑変性症治療用薬剤を載せることで、加齢黄斑変性症の患部に薬剤を優先的に送達することができる。あるいは、本発明のｖｃＨＤＬに蛍光物質を載せることで、加齢黄斑変性症の患部に蛍光物質を優先的に送達することがで、患部の特定に用いることもできる。
「後眼部新生血管疾患用医薬組成物」とは、後眼部新生血管疾患を診断、予防または治療するための医薬組成物及び後眼部新生血管の阻害用医薬組成物を意味し、構成成分として、上述の本発明の細胞親和性ペプチドを結合（例えば、融合）した高密度リポタンパク質（ｃＨＤＬ）、該高密度リポタンパク質中に含まれる（例えば、封入）後眼部疾患の診断、予防または治療に有効な薬物、および適宜、医薬的に許容され得る添加剤を含む。
「後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物」とは、以下の薬物を挙げられるが、これらに限定されるものではない。例えば、加齢黄斑変性症の診断、予防又は治療剤、糖尿病性網膜症の診断、予防又は治療剤、ぶどう膜炎の診断、予防又は治療剤、眼腫瘍の診断、予防又は治療剤、網膜動静脈閉塞症の診断、予防又は治療剤等が挙げられる。具体的には、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）阻害薬（例えば、ＶＥＧＦ抗体、ＶＥＧＦアプタマー、ｓｉＲＮＡ）、ステロイド製剤（例えば、デキサメタゾン、ベタメタゾン、フルオロメトロン、プレドニゾロン）、非ステロイド製剤（例えば、インドメタシン、ブロムフェナック、ジクロフェナックナトリウム等）、プロスタグランジン製剤（例えば、ラタノプロスト、タフルプロスト）、ピレノキシン、グルタチオン、メマンチン、エピネフリン、塩酸ピロカルピン、カルバコール、塩酸ドルゾラミド、アセタゾラミド、マレイン酸チモロール、塩酸カルテオロール、塩酸ベタキソロール、塩酸ブナゾシン、イソプロピルウノプロストン、プラノプラフェン、アスピリン、ＳＲＰＩＮ８０３（6-(4-Hydroxy-3-methoxybenzylidene)-5-imino-2-(trifluoromethyl)-5H-[1,3,4]thiadiazolo[3,2-a]pyrimidin-7(6H)-one）、パゾパニブ（Ｐａｚｏｐａｎｉｂ）等を含むが、これらに限定されない。
「医薬的に許容され得る添加剤」としては、本発明の効果を妨げない限り、上記の成分に加えて、各種用途に応じて、種々の活性成分または薬効成分（薬理活性成分および生理活性成分を含む）や添加剤（例えば、緩衝化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、防腐剤・保存剤、安定化剤、増粘剤、キレート剤、界面活性剤、吸収促進剤、香料等）を組み合わせて含有してもよい。このような成分は、眼刺激等の問題がない濃度範囲内で適宜配合することができ、成分の種類は特に制限されないが、例えば以下のものを例示する。緩衝化剤（例えば、リン酸ナトリウム）、等張化剤（例えば、塩化ナトリウム）、ｐＨ調整剤（例えば、ホウ酸）、防腐剤・保存剤（例えば、塩化ベンザルコニウム）、安定化剤（例えば、マンニトール）、増粘剤（例えば、アルギン酸ナトリウム）、キレート剤（例えば、エデト酸ナトリウム）、界面活性剤（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート）、吸収促進剤（例えば、オレイン酸ナトリウム）、香料（例えば、メントール）。
本発明の医薬組成物は、点眼剤、眼軟膏剤、点鼻剤、点耳剤、注射剤などの剤型で使用することができ、点眼剤が好ましい。
「点眼用」とは、非侵襲的な投与様式で点眼剤として使用するための形態を意味する。点眼剤は、薬物の水に対する溶解性と水溶液中での安定性に応じて、水性点眼剤、用時溶解点眼剤、懸濁性点眼剤、または油性点眼剤／眼軟膏剤とその剤型を決めることができる。該点眼剤は、点眼用として医薬的に許容され得る添加剤、例えば緩衝化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤、安定化剤、防腐剤等を含み得るが、これらに限定されるものではない。点眼剤のｐＨは、眼科製剤に許容される範囲内である限りにおいて、通常４〜８の範囲内が好ましい。緩衝化剤としては、例えばリン酸塩（例えば、リン酸ナトリウム）、酢酸塩（例えば、酢酸ナトリウム）などが挙げられる。等張化剤としては、例えば塩化ナトリウムなどの無機物塩、濃グリセリンなどのグリセリン、スクロースなどの糖類などを挙げられる。ｐＨ調整剤としては、例えばホウ酸などの有機酸等を挙げられる。界面活性剤としては、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレートなどのポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類）、両性界面活性剤（例えば、アルキルジアミノエチルグリシンなどのグリシン型、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタインなどの酢酸ベタイン型）、陰イオン性界面活性剤（例えば、テトラデセンスルホン酸ナトリウムなどのスルホン酸塩、ラウリル硫酸ナトリウムなどのアルキル硫酸塩）、および陽イオン性界面活性剤（例えば、塩化ベンザルコニウムなどのアルキル４級アンモニウム塩）が挙げられ、非イオン性界面活性剤が好ましい。安定化剤としては、例えば有機酸塩（例えば、クエン酸ナトリウム、マンニトール）などが挙げられる。防腐剤としては、例えば塩化ベンザルコニウム、パラベンなどが挙げられる。
「後眼部新生血管ターゲティング薬物デリバリーシステム」とは、上述の本発明の後眼部新生血管ターゲティング薬物デリバリーキャリアｖｃＨＤＬを、後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物と組み合わせることにより、後眼部新生血管ターゲティング薬物デリバリーシステムを構築することができる。
後眼部新生血管疾患を患っているかまたは患う危険を有する患者に、上述の後眼部新生血管ターゲティング薬物デリバリーシステムを適用することによって、または上述の後眼部新生血管疾患用医薬組成物を投与する方法により、後眼部新生血管疾患を診断、予防または治療することが可能となる。
「後眼部疾患」とは、眼内の硝子体、網膜、脈絡膜、強膜または視神経における疾患を意味する。さらに「後眼部新生血管疾患」とは、例えば、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、網膜動静脈閉塞症等を挙げられるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、加齢黄斑変性が挙げられるが、これに限定されるものではない。
次に、本発明のｖｃＨＤＬの製造方法について、以下記載するが、これらに限定されるものではない。
本発明の目的のＶＴＰ及びＣＰを結合したｖｃＨＤＬの製造方法の１例としては、
ｉ）アポリポタンパク質に、ＶＴＰ及びＣＰを遺伝子工学的手法により、融合させて、融合タンパク質を得る；そして、
ｉｉ）得られた融合タンパク質と、リン脂質、更に必要に応じて蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物を含むリポソームを混合することにより、粗ｖｃＨＤＬを製造する（Spontaneous interaction法）；あるいは、リポソーム形成を経由しない、コール酸ミセルとの混和により、粗ｃＨＤＬを製造する（cholate-dialysis法）；
ｉｉｉ）超遠心法により、未反応のリン脂質、アポリポタンパク質を除去することにより、粗ｖｃＨＤＬを精製する、
ことを含む。
本発明の目的のＶＴＰ及びＣＰを結合したｖｃＨＤＬの製造方法の１例としては、
ｉ）アポリポタンパク質に、ＶＴＰ及びＣＰを遺伝子工学的手法により、融合させて、融合タンパク質を得る；そして、
ｉｉ）得られた融合タンパク質と、リン脂質、更に必要に応じて蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物を含むリポソームを混合することにより、粗ｖｃＨＤＬを製造する（Spontaneous interaction法）；あるいは、リポソーム形成を経由しない、コール酸ミセルとの混和により、粗ｃＨＤＬを製造する（cholate-dialysis法）；
ｉｉｉ）超遠心法により、未反応のリン脂質、アポリポタンパク質を除去することにより、粗ｖｃＨＤＬを精製する、
ことを含む。
遺伝子工学的手法としては、メチラーゼやＤＮＡポリメラーゼＩ／ＤＮＡリガーゼを用いるＤＮＡ編集や、polymerase chain reaction (ＰＣＲ)法を挙げられる。具体的には、大腸菌発現ベクターｐＣＯＬＤ Ｉの制限酵素Ｐｓｔ ＩおよびＸｂａ−Ｉ認識部位に、５’末端にＰｓｔ Ｉ、３'末端にＸｂａ Ｉ認識配列を付加したペネトラチン（ＰＥＮ）ペプチド遺伝子をＤＮＡリガーゼで挿入する。次に、Ｎ末端４４アミノ酸欠損ａｐｏＡ−Ｉ遺伝子の５’末端側に制限酵素Ｋｐｎ Ｉ認識配列を、３’末端側に制限酵素Ｐｓｔ Ｉ認識配列を付加した遺伝子をＰＣＲ法により作製し、上記のｐＣＯＬＤ ＩのＫｐｎ ＩとＰｓｔ Ｉ認識部位間にＤＮＡリガーゼを用いて挿入する。以上の操作により、Ｎ末端４４アミノ酸欠損ａｐｏＡ−ＩのＣ末端側にＰＥＮペプチドが融合されたポリペプチド遺伝子を作製できたことになる。
本発明のｖｃＨＤＬを製造する際の典型的な構成成分の配合比率は以下の通りである。
融合前のＨＤＬに対して等モル比のＶＴＰ及びＣＰを仕込むことにより、融合タンパク質を作製する。
次に、仕込み量として、融合タンパク質の１モルに対して、数倍〜数千倍モル、数十倍〜数百倍モル、例えば約５倍〜約２０００倍モル、約２０倍〜約５００倍モル、約３０倍〜約２００倍モルのリン脂質を仕込むことにより、ｖｃＨＤＬを調製する。
融合前のＨＤＬに対して等モル比のＶＴＰ及びＣＰを仕込むことにより、融合タンパク質を作製する。
次に、仕込み量として、融合タンパク質の１モルに対して、数倍〜数千倍モル、数十倍〜数百倍モル、例えば約５倍〜約２０００倍モル、約２０倍〜約５００倍モル、約３０倍〜約２００倍モルのリン脂質を仕込むことにより、ｖｃＨＤＬを調製する。
上記で製造したＶＴＰ及びＣＰを結合したｖｃＨＤＬの粒子径は、上記の融合タンパク質とリン脂質のモル比を調整し、さらに密度勾配超遠心後の所望の密度画分を得ることで調整することができるが、これらの方法に限定されない。得られた融合タンパク質の粒子径は、特定の方法を用いて測定し、決定することができる。粒子径は、市販の動的光散乱測定器を用いて測定し、決定することができる。
以下、本発明を実施例に基づいて更に詳細に説明する。但し、実施例は本発明の例示であって、本発明は実施例に限定される意図ではない。
実施例１
ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉの構造
ＮＧＲ及びペネトラチン（ＰＥＮ）融合アポリポ蛋白質Ａ−Ｉ (ａｐｏＡ−Ｉ)の構造を以下に説明する。
Ｎ末端４４アミノ酸を欠失したヒトａｐｏＡ−Ｉを鋳型として使用した。
ＮＧＲ(ＣＮＧＲＣＧＧ)部分は、Ｎ末端４４アミノ酸欠損ヒトａｐｏＡ−ＩのＮ末端に融合した。
さらにＮ末端４４アミノ酸欠損ヒトａｐｏＡ−ＩのＣ末端で、ＰＥＮのＣ末端にＫが付加されたＲＱＩＫＩＷＦＱＮＲＲＭＫＷＫＫＫ（配列番号１）が融合した。
このＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉの分子量は約29319Daである。
以下、ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉを含む修飾ＨＤＬをＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮと表記する。
ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉの構造
ＮＧＲ及びペネトラチン（ＰＥＮ）融合アポリポ蛋白質Ａ−Ｉ (ａｐｏＡ−Ｉ)の構造を以下に説明する。
Ｎ末端４４アミノ酸を欠失したヒトａｐｏＡ−Ｉを鋳型として使用した。
ＮＧＲ(ＣＮＧＲＣＧＧ)部分は、Ｎ末端４４アミノ酸欠損ヒトａｐｏＡ−ＩのＮ末端に融合した。
さらにＮ末端４４アミノ酸欠損ヒトａｐｏＡ−ＩのＣ末端で、ＰＥＮのＣ末端にＫが付加されたＲＱＩＫＩＷＦＱＮＲＲＭＫＷＫＫＫ（配列番号１）が融合した。
このＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉの分子量は約29319Daである。
以下、ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉを含む修飾ＨＤＬをＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮと表記する。
ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮの調製
ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮは、改良型コール酸透析法により調製した。
ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮは、ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉと１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(ＤＳＰＣ)を１：２００のモル比で混合することで再構成された。
当初、ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−ＩをＰＢＳ中４Ｍ尿素に１．５ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解し、５５℃に加温した。
一方、ＤＳＰＣはＰＢＳ中のコール酸ナトリウム30mg/mLに１：４のモル比(ＤＳＰＣ:Ｎａコール酸塩)で溶解し、６５℃で強く超音波処理した。
その後、このリン脂質溶液をａｐｏＡ−Ｉ溶液に混合した。
混合物を５５℃で３０分間インキュベートし、ＰＢＳに対して透析し、コール酸ナトリウムを除去し、修飾ＨＤＬを生成させた。
この透析中に、ＰＢＳ温度をＤＳＰＣの融点である55℃に初期設定し、室温まで徐々に冷却したまま放置した。
不溶性不純物は遠心分離で除去した。
ＳＲＰＩＮ８０３をＤＭＳＯに溶解し、使用前に５５℃に予温した。
新たに形成されたＨＤＬを１ｍｇ ａｐｏＡ−Ｉ当たり１０６ｍｇ(モル比８．３：１)のＳＲＰＩＮ８０３とインキュベートし、５５℃で1時間インキュベートした。
次いで、ＫＢｒ密度勾配超遠心法により混合物を直ちに精製した。
精製したＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを濃縮し、続いてＫＢｒを除去するために２時間透析した。
このＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮは、使用するまで４℃に保管した。
完成したＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮの粒子径は１６±６nmである。
本製剤中のＳＲＰＩＮ８０３の最終濃度は６５μMであった。
ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮは、改良型コール酸透析法により調製した。
ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮは、ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉと１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(ＤＳＰＣ)を１：２００のモル比で混合することで再構成された。
当初、ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−ＩをＰＢＳ中４Ｍ尿素に１．５ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解し、５５℃に加温した。
一方、ＤＳＰＣはＰＢＳ中のコール酸ナトリウム30mg/mLに１：４のモル比(ＤＳＰＣ:Ｎａコール酸塩)で溶解し、６５℃で強く超音波処理した。
その後、このリン脂質溶液をａｐｏＡ−Ｉ溶液に混合した。
混合物を５５℃で３０分間インキュベートし、ＰＢＳに対して透析し、コール酸ナトリウムを除去し、修飾ＨＤＬを生成させた。
この透析中に、ＰＢＳ温度をＤＳＰＣの融点である55℃に初期設定し、室温まで徐々に冷却したまま放置した。
不溶性不純物は遠心分離で除去した。
ＳＲＰＩＮ８０３をＤＭＳＯに溶解し、使用前に５５℃に予温した。
新たに形成されたＨＤＬを１ｍｇ ａｐｏＡ−Ｉ当たり１０６ｍｇ(モル比８．３：１)のＳＲＰＩＮ８０３とインキュベートし、５５℃で1時間インキュベートした。
次いで、ＫＢｒ密度勾配超遠心法により混合物を直ちに精製した。
精製したＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを濃縮し、続いてＫＢｒを除去するために２時間透析した。
このＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮは、使用するまで４℃に保管した。
完成したＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮの粒子径は１６±６nmである。
本製剤中のＳＲＰＩＮ８０３の最終濃度は６５μMであった。
比較に用いたＳＲＰＩＮ８０３搭載ＨＤＬ/ＰＥＮについては、ＮＧＲ及びＰＥＮ融合ａｐｏＡ−ＩをＰＥＮ融合ａｐｏＡ−Ｉ(ＮＧＲなし)に置換した。
製造工程は、全ての透析工程が室温であらかじめ形成されたことを除いて同じである。
製造工程は、全ての透析工程が室温であらかじめ形成されたことを除いて同じである。
（条件１）
ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを作製する段階で薬物（ＳＲＰＩＮ８０３）搭載も同時に行った変形例
（１−１）
ＳＲＰＩＮ８０３:ＤＳＰＣ=０．１：２０で脂質膜を作製し、その後ＨＤＬ作製手順に従って、ＮＧＲ融合タンパク質と混合し、その後、透析と密度勾配超遠心で精製した。
薬物回収率：１１％
ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを作製する段階で薬物（ＳＲＰＩＮ８０３）搭載も同時に行った変形例
（１−１）
ＳＲＰＩＮ８０３:ＤＳＰＣ=０．１：２０で脂質膜を作製し、その後ＨＤＬ作製手順に従って、ＮＧＲ融合タンパク質と混合し、その後、透析と密度勾配超遠心で精製した。
薬物回収率：１１％
（１−２）
ＳＲＰＩＮ８０３:ＤＳＰＣ=０．３１：２０
薬物回収率：２．１％
ＳＲＰＩＮ８０３:ＤＳＰＣ=０．３１：２０
薬物回収率：２．１％
（条件２）
（２−１）
透析のみ経た（密度勾配超遠心精製なし）ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮとＳＲＰＩＮ８０３を混合した場合
ＳＲＰＩＮ８０３：ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ=０．８３：１で混合し(１．５ｍｇ／ｍＬ ＳＲＰＩＮ８０３ ＤＭＳＯ 溶液)、５５℃、３０分静置した後、密度勾配超遠心精製し、終夜透析した。
薬物回収率：２０−３０％
（２−１）
透析のみ経た（密度勾配超遠心精製なし）ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮとＳＲＰＩＮ８０３を混合した場合
ＳＲＰＩＮ８０３：ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ=０．８３：１で混合し(１．５ｍｇ／ｍＬ ＳＲＰＩＮ８０３ ＤＭＳＯ 溶液)、５５℃、３０分静置した後、密度勾配超遠心精製し、終夜透析した。
薬物回収率：２０−３０％
（２−２）
２−１における最後の透析工程を２時間に短縮した。
２−１における最後の透析工程を２時間に短縮した。
（２−３）
上記で、２．０ｍｇ／ｍＬ ＳＲＰＩＮ８０３ ＤＭＳＯ溶液を使用し(ＳＲＰＩＮ８０３: ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ=０．８３：１)、両者を５５℃、１０分事前に加温してから混合し、５５℃、３０分静置した後、密度勾配超遠心し、２時間透析した。
薬物回収率：５３−６３％
上記で、２．０ｍｇ／ｍＬ ＳＲＰＩＮ８０３ ＤＭＳＯ溶液を使用し(ＳＲＰＩＮ８０３: ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ=０．８３：１)、両者を５５℃、１０分事前に加温してから混合し、５５℃、３０分静置した後、密度勾配超遠心し、２時間透析した。
薬物回収率：５３−６３％
以下の試験例１〜３では、条件２−３で調製したｖｃＨＤＬを用いた。
試験例１：ＣＮＶマウス試験（その１）
覚醒雄成体マウス(C57BL6/J)を用いた。
全麻酔後、レーザー光凝固法を用いて４個のＣＮＶ (脈絡膜新生血管)を作成した。
ＣＮＶ誘導直後に、以下のいずれか３μＬ（６５μＭ ＳＲＰＩＮ８０３）を患眼に１日２回点眼した。
（ｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ、又は
（ｉｉ） ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮ
７日後、マウスを屠殺し、直ちに眼球を摘出し、４％パラホルムアルデヒド中で固定した。
脈絡膜新生血管を免疫染色法にて染色し、フラットマウント法にてコンフォーカル顕微鏡下で脈絡膜新生血管の面積を測定することで治療効果を判定した。
結果を図３に示す。
覚醒雄成体マウス(C57BL6/J)を用いた。
全麻酔後、レーザー光凝固法を用いて４個のＣＮＶ (脈絡膜新生血管)を作成した。
ＣＮＶ誘導直後に、以下のいずれか３μＬ（６５μＭ ＳＲＰＩＮ８０３）を患眼に１日２回点眼した。
（ｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ、又は
（ｉｉ） ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮ
７日後、マウスを屠殺し、直ちに眼球を摘出し、４％パラホルムアルデヒド中で固定した。
脈絡膜新生血管を免疫染色法にて染色し、フラットマウント法にてコンフォーカル顕微鏡下で脈絡膜新生血管の面積を測定することで治療効果を判定した。
結果を図３に示す。
尚、以下のいずれか３μＬ（６５μＭ ＳＲＰＩＮ８０３）についても患眼に１日２回点眼し、上記と同様の操作で脈絡膜新生血管の面積を測定した。
（ｉｉｉ）遊離ＳＲＰＩＮ８０３、
（ｉｖ）ＰＢＳ (０．１％ ＤＭＳＯ)
（ｉｉｉ）遊離ＳＲＰＩＮ８０３、
（ｉｖ）ＰＢＳ (０．１％ ＤＭＳＯ)
以下の結果は平均値±標準誤差(SE)で示す。
何の治療も行わなかった（ｉｖ）ＰＢＳ(０．１％ ＤＭＳＯ)の場合の平均ＣＮＶサイズは14,000±1,800μm2であったの対して、
（ｉｉｉ）遊離ＳＲＰＩＮ８０３単独の平均ＣＮＶサイズは11,000±1,700μm2に減少し、
（ｉｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮの場合のＣＮＶサイズは約10,000±2,000μm2に減少し、
本発明の（ｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを用いた実験におけるＣＮＶサイズは6,000±750μm2に減少した。
（ｉｉｉ）遊離ＳＲＰＩＮ８０３単独と（ｉｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮの場合のＣＮＶサイズの減少の程度は大きく変わらないのに対して、本発明の（ｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮの場合のＣＮＶサイズは大幅に減少した。
これらの結果は、ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮがＨＤＬ/ＰＥＮに比べてＳＲＰＩＮ８０３の治療効果を増強することを示す。
何の治療も行わなかった（ｉｖ）ＰＢＳ(０．１％ ＤＭＳＯ)の場合の平均ＣＮＶサイズは14,000±1,800μm2であったの対して、
（ｉｉｉ）遊離ＳＲＰＩＮ８０３単独の平均ＣＮＶサイズは11,000±1,700μm2に減少し、
（ｉｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮの場合のＣＮＶサイズは約10,000±2,000μm2に減少し、
本発明の（ｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを用いた実験におけるＣＮＶサイズは6,000±750μm2に減少した。
（ｉｉｉ）遊離ＳＲＰＩＮ８０３単独と（ｉｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮの場合のＣＮＶサイズの減少の程度は大きく変わらないのに対して、本発明の（ｉ）ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮの場合のＣＮＶサイズは大幅に減少した。
これらの結果は、ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮがＨＤＬ/ＰＥＮに比べてＳＲＰＩＮ８０３の治療効果を増強することを示す。
試験例２：ＨＵＶＥＣ細胞試験
(i)ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ、又は(ii)ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮ（いずれもＳＲＰＩＮ８０３濃度は１０μＭ）をＨＵＶＥＣ細胞に４時間作用させた。その後細胞を回収し、０．２ Ｎ ＮａＯＨ，０．５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で溶解した。中和後、この溶解液にアセトニトリルを加えて遠心し、得られる上清に含まれるＳＲＰＩＮ８０３を逆相クロマトグラフィーで定量した。この結果、ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ／ＨＤＬ／ＰＥＮあるいはＳＲＰＩＮ８０３搭載ＨＤＬ／ＰＥＮで処理した場合、ＨＵＶＥＣ細胞内ＳＲＰＩＮ８０３量は、それぞれ２４０±１１、１８０±１７ pg/μg proteinとなった。ＮＧＲ／ＨＤＬ／ＰＥＮは、ＨＤＬ／ＰＥＮに比べて、より多くのＳＲＰＩＮ８０３をＨＵＶＥＣ細胞内に送達できることがわかった。
結果を図４に示す。
(i)ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ、又は(ii)ＳＲＰＩＮ８０３搭載/ＨＤＬ/ＰＥＮ（いずれもＳＲＰＩＮ８０３濃度は１０μＭ）をＨＵＶＥＣ細胞に４時間作用させた。その後細胞を回収し、０．２ Ｎ ＮａＯＨ，０．５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で溶解した。中和後、この溶解液にアセトニトリルを加えて遠心し、得られる上清に含まれるＳＲＰＩＮ８０３を逆相クロマトグラフィーで定量した。この結果、ＳＲＰＩＮ８０３搭載ＮＧＲ／ＨＤＬ／ＰＥＮあるいはＳＲＰＩＮ８０３搭載ＨＤＬ／ＰＥＮで処理した場合、ＨＵＶＥＣ細胞内ＳＲＰＩＮ８０３量は、それぞれ２４０±１１、１８０±１７ pg/μg proteinとなった。ＮＧＲ／ＨＤＬ／ＰＥＮは、ＨＤＬ／ＰＥＮに比べて、より多くのＳＲＰＩＮ８０３をＨＵＶＥＣ細胞内に送達できることがわかった。
結果を図４に示す。
実施例２
Ｐａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮの調製
実施例１の条件２−３におけるＳＲＰＩＮ８０３をＰａｚｏｐａｎｉｂに替えた以外は同様にしてＰａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを調製した（いずれもＰａｚｏｐａｎｉｂ濃度は１３μＭ）。
Ｐａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮの調製
実施例１の条件２−３におけるＳＲＰＩＮ８０３をＰａｚｏｐａｎｉｂに替えた以外は同様にしてＰａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮを調製した（いずれもＰａｚｏｐａｎｉｂ濃度は１３μＭ）。
試験例３：ＣＮＶマウス試験(その２)
試験例１と同様の方法でＰａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ及びＰａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＨＤＬ/ＰＥＮについてのＣＮＶマウス試験を行い（１３μＭ Ｐａｚｏｐａｎｉｂ）、結果を図５に示す。
試験例１と同様の方法でＰａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮ及びＰａｚｏｐａｎｉｂ搭載ＨＤＬ/ＰＥＮについてのＣＮＶマウス試験を行い（１３μＭ Ｐａｚｏｐａｎｉｂ）、結果を図５に示す。
Ｐａｓｏｐａｎｉｂ搭載ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮあるいはＰａｓｏｐａｎｉｂ搭載ＨＤＬ/ＰＥＮを点眼した場合のＣＮＶサイズは、それぞれ９，４００±９９０、１１，０００±１，３００μm2となり、ＳＲＰＩＮ８０３の場合と同様、ＮＧＲ/ＨＤＬ/ＰＥＮはＨＤＬ/ＰＥＮに比べて優れたドラッグキャリアであることを示す。
本発明は、後眼部へのＤＤＳ、特に後眼部の異常な脈絡膜新生血管に優先的に薬剤等をデリバリーする機能を有するＤＤＳに関連する分野に有用である。
配列番号１：ＰＥＮ含有配列のアミノ酸配列
配列番号２：ＡＣＤＣＲＧＤＣＦＣ（ＲＧＤ含有ペプチド）のアミノ酸配列
配列番号３：ＣＰＫＶＣＰＲＥＣＥＳＮＣ（ＣＰＲＥＣＥＳ含有ペプチド）のアミノ酸配列
配列番号４：ＣＮＧＲＣＧＧ（ＮＧＤ含有ペプチド）のアミノ酸配列
配列番号５：ＡｐｔM80merの塩基配列
配列番号２：ＡＣＤＣＲＧＤＣＦＣ（ＲＧＤ含有ペプチド）のアミノ酸配列
配列番号３：ＣＰＫＶＣＰＲＥＣＥＳＮＣ（ＣＰＲＥＣＥＳ含有ペプチド）のアミノ酸配列
配列番号４：ＣＮＧＲＣＧＧ（ＮＧＤ含有ペプチド）のアミノ酸配列
配列番号５：ＡｐｔM80merの塩基配列
Claims (17)
- 血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドが結合したアポリポタンパク質並びにリン脂質を含む、修飾高密度リポタンパク質。
- 血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーが、新生血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーである、請求項１に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- 新生血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーが、αVβ3インテグリン、アミノペプチダーゼＡ、アミノペプチダーゼＮ、及び血管内皮増殖因子(ＶＥＧＦ)受容体から選択される分子に特異的に結合する、請求項２に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- 新生血管内皮細胞標的化ペプチドが、ＮＧＲ含有ペプチド、ＲＧＤ含有ペプチド、又はＣＰＲＥＣＥＳ含有ペプチドである請求項２又は３に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- 細胞親和性ペプチドが、ＴＡＴペプチド、ペネトラチン（ＰＥＮ）、ポリアルギニン（Ｒ８）、ＬＬ−３７、トランスポータン、Ｐｅｐ−１、およびＭＴＳからなる群から選ばれる少なくとも１ 種である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- アポリポタンパク質が、アポリポタンパク質Ａ−Ｉ、アポリポタンパク質Ａ−ＩＩ、アポリポタンパク質Ｃ、アポリポタンパク質Ｅ、およびそれらの部分断片あるいは遺伝子改変型アポリポタンパク質からなる群から選ばれる少なくとも１種である請求項１〜５のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- リン脂質が、ホスファチジルコリンである請求項１〜６のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- ホスファチジルコリンがジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）およびジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）からなる群から選ばれる少なくとも１種である請求項７に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- 密度が１．０〜１．２１ｇ／ｍＬの範囲であり、粒径が直径１０〜２０ｎｍである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- 修飾高密度リポタンパク質１粒子あたり、１分子以上の蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の物質をさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質。
- 請求項１〜１０のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質、該リポタンパク質中に含まれる後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物、および医薬的に許容され得る添加剤を含む、後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療のための医薬組成物。
- 請求項１〜１０のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質、該リポタンパク質中に含まれる後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療に有効な薬物、および医薬的に許容され得る添加剤を含む、後眼部新生血管の阻害用医薬組成物。
- 後眼部新生血管疾患が、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる少なくとも１種の疾患である、請求項１１又は１２に記載の医薬組成物。
- 薬物が、眼内の脈絡膜新生血管の抑制のための薬剤、あるいは加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる疾患の診断、予防又は治療剤の少なくとも１種類の化合物である、加齢黄斑変性症、糖尿病性網膜症、ぶどう膜炎、眼腫瘍、および網膜動静脈閉塞症からなる群から選ばれる少なくとも１種の後眼部新生血管疾患の診断、予防または治療のための請求項１１又は１２に記載の医薬組成物。
- 点眼用である、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
- 請求項１〜１０のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質を含む、後眼部新生血管ターゲティング用薬物デリバリーキャリア。
- ｉ）アポリポタンパク質に血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合させて、結合タンパク質を得る；
ｉｉ）上記ｉ）で得られた結合タンパク質と、リン脂質、適宜、蛍光標識物質、生体活性物質または薬物から選ばれる少なくとも１種類の化合物とを混合することにより、血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合した修飾高密度リポタンパク質を調製する；
ｉｉｉ）超遠心法により、未反応のリン脂質、アポリポタンパク質を除去することによって、血管内皮細胞標的化ペプチド又はアプタマーおよび細胞親和性ペプチドを結合した高密度リポタンパク質を回収する、
ことを含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の修飾高密度リポタンパク質の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2020036022A JP2021138629A (ja) | 2020-03-03 | 2020-03-03 | 薬物デリバリーキャリアおよびこれを用いる医薬組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2020036022A JP2021138629A (ja) | 2020-03-03 | 2020-03-03 | 薬物デリバリーキャリアおよびこれを用いる医薬組成物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2021138629A true JP2021138629A (ja) | 2021-09-16 |
Family
ID=77669411
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2020036022A Pending JP2021138629A (ja) | 2020-03-03 | 2020-03-03 | 薬物デリバリーキャリアおよびこれを用いる医薬組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2021138629A (ja) |
-
2020
- 2020-03-03 JP JP2020036022A patent/JP2021138629A/ja active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6818264B2 (ja) | 高密度リポタンパク質およびその細胞親和性ペプチドを融合した高密度リポタンパク質の点眼による後眼部薬物デリバリー | |
| US11712419B2 (en) | Liposome formulations | |
| RU2572213C2 (ru) | Офтальмологическая система доставки лекарственного препарата, содержащая фосфолипид и холестерин | |
| US20070254832A1 (en) | Methods for the treatment of macular degeneration and related eye conditions | |
| BR112014018393B1 (pt) | Composição farmacêutica adequada para liberação ocular de um esteroide e uso da mesma para a fabricação de um medicamento para tratar uma doença oftálmica | |
| TWI548416B (zh) | 局部眼用含肽調合物 | |
| EP3672641B1 (en) | Composition comprising vegf antagonists and a cationic peptide and uses thereof | |
| KR20200090419A (ko) | 핵산 복합체를 유효성분으로 함유하는 혈관신생관련 질환 치료용 약학 조성물 | |
| JP2021138629A (ja) | 薬物デリバリーキャリアおよびこれを用いる医薬組成物 | |
| WO2022037514A1 (zh) | 药物和野生型穿膜肽衍生物的组合物 | |
| WO2020189773A1 (ja) | 後眼部送達用組成物 | |
| US20240000948A1 (en) | Methods for treating eye diseases using lipid binding protein-based complexes | |
| KR102572074B1 (ko) | 세포 투과성 핵산 복합체를 유효성분으로 함유하는 황반변성의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| WO2017222042A1 (ja) | 眼用医薬組成物 | |
| EP4260871A1 (en) | Optical nerve protecting agent containing anti-lrp1 antibody | |
| JP2017171670A (ja) | 短縮されたテトラネクチン−アポリポプロテインａ−ｉ融合タンパク質、それを含む脂質粒子、及びその使用 | |
| RU2817350C2 (ru) | Липосомальные препараты | |
| JP2023509101A (ja) | 細胞透過性核酸複合体を有効成分として含有する黄斑変性の予防又は治療用組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230302 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20230302 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230315 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20240131 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20240206 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240313 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20240423 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240502 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240514 |