JP2021059508A - 腸内環境改善剤 - Google Patents
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Abstract
【課題】腸内環境改善剤の提供。【解決手段】アカシアの樹皮の抽出物を含む、腸内環境改善剤。【選択図】なし
Description
本発明は、腸内環境改善剤に関する。
人の腸内には約３万種類、１００兆個もの腸内細菌が生息しているといわれており、腸内細菌は大きく分けて３つのグループ（善玉菌、悪玉菌、及び日和見菌）から構成されている。これらの菌は互いに密接な関係を持ち、複雑にバランスをとっている。腸内細菌の中で最も数が多い菌は日和見菌であり、次に善玉菌であり、最も数が少ないのが悪玉菌である。一般的に、これらの菌の理想的な割合は、日和見菌７：善玉菌２：悪玉菌１といわれている。腸内に占める善玉菌の割合を増やすことが健康上重要であるといわれている。反対に、悪玉菌が増えると、悪玉菌が作り出す有害物質が増え、様々な悪影響が体に表れる。そのため、最近では、健康に有用な作用をもたらす善玉菌である「プロバイオティクス」や、腸内の善玉菌を増やす作用を有する成分である「プレバイオティクス」等が注目を集めており、様々な健康効果が明らかになりつつある。また、これらに着目した健康食品や嗜好品の販売も増えてきている。
善玉菌としては、乳酸菌、ビフィズス菌等が知られている。悪玉菌としては、ウェルシュ菌、ブドウ球菌、大腸菌（有毒株）等が知られている。日和見菌としては、バクテロイデス、大腸菌（無毒株）等が知られている。
本発明は、腸内環境改善剤を提供することを目的とする。
本発明者等が鋭意検討した結果、アカシアの樹皮の抽出物が腸内環境を改善することを見出した。
本発明によれば、腸内環境改善剤を提供することができる。
本発明の一実施形態は、有効成分としてアカシアの樹皮の抽出物（以下「アカシア樹皮抽出物」という。）を含む、腸内環境改善剤に関する。
本明細書において、「アカシア」とは、アカシア（Ａｃａｃｉａ）属に属する樹木を意味する。アカシアとしては、例えば、Ａｃａｃｉａ ｍｅａｒｎｓｉｉ Ｄｅ Ｗｉｌｄ.、Ａｃａｃｉａ ｍａｎｇｉｕｍ Ｗｉｌｌｄ.、Ａｃａｃｉａ ｄｅａｌｂａｔａ Ｌｉｎｋ、Ａｃａｃｉａ ｄｅｃｕｒｒｅｎｓ Ｗｉｌｌｄ.、Ａｃａｃｉａ ｐｙｃｎａｎｔｈａ Ｂｅｎｔｈ. 等が挙げられる。特に限定するものではないが、アカシアは、好ましくはＡｃａｃｉａ ｍｅａｒｎｓｉｉ Ｄｅ Ｗｉｌｄ.又はＡｃａｃｉａ ｍａｎｇｉｕｍ Ｗｉｌｌｄ.であり、より好ましくはＡｃａｃｉａ ｍｅａｒｎｓｉｉ Ｄｅ Ｗｉｌｄ.である。
アカシアの樹皮の調製方法、及び樹皮からの抽出方法は特に限定されず、公知の方法を使用することができる。例えば、特開２０１１−５１９９２号公報、特開２０１０−１０５９２３号公報、特開２００９−２０３２０９号公報等に記載の方法等を使用することができる。
抽出溶媒としては、特に限定されないが、水、有機溶媒等が挙げられる。水は熱水であることが好ましい。有機溶媒は、好ましくはアルコールであり、より好ましくは炭素数１〜４のアルコールであり、特に好ましくはエタノールである。抽出溶媒は、１種の溶媒を単独で使用してもよいし、２種以上の溶媒を組み合わせて使用してもよい。
特に限定するものではないが、アカシアの樹皮から熱水で抽出を行い、得られた抽出物から更に有機溶媒で抽出を行うことが好ましい。
アカシア樹皮抽出物は、所定の方法で抽出した抽出物を精製したものでもよい。
アカシア樹皮抽出物は、複数の成分を含んでいてもよいし、単一の成分のみを含んでいてもよい。アカシア樹皮抽出物の成分としては、例えば、プロフィセチニジン、プロロビネチニジン、プロシアニジン、プロデルフィニジン、ロビネチニドール、フィセチニドール、シリング酸、タキシフォリン、ブチン、スクロース、ピニトール等が挙げられる。
腸内環境改善剤は、例えば、食品、医薬品、医薬部外品、動物用飼料等として使用することができる。食品としては、例えば、一般食品、保険機能食品（例えば、特定保健用食品、機能性表示食品、及び栄養機能食品）等が挙げられる。
腸内環境改善剤の具体的な用途としては、例えば、腸内の善玉菌を増加させることが挙げられる。善玉菌としては、例えば、乳酸菌、ビフィズス菌等が挙げられ、具体的には、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｂａｃｉｌｌｕｓ）属の菌、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属の菌等が挙げられる。
以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれに限定されるものではない。
＜抽出物の調製＞
アカシア（Acacia mearnsii De Wild.）の樹皮を粉砕し、100℃の熱水で抽出した。得られた溶液をスプレードライヤーで噴霧乾燥し、熱水抽出物を得た。
アカシア（Acacia mearnsii De Wild.）の樹皮を粉砕し、100℃の熱水で抽出した。得られた溶液をスプレードライヤーで噴霧乾燥し、熱水抽出物を得た。
＜腸内環境改善試験＞
（実験動物）
雌性BALB/cマウスを、コントロール群（n=8）、及び投与群（n=8）に分けた。22日間、コントロール群には普通飼料を経口投与し、投与群にはアカシア樹皮抽出物3％含有飼料を経口投与した。22日目に各群のマウスの糞を採取した。
なお、マウスは温度24±1℃、湿度55±5％の施設において飼育し、明暗条件は8:00点灯、20:00消灯とした。
（実験動物）
雌性BALB/cマウスを、コントロール群（n=8）、及び投与群（n=8）に分けた。22日間、コントロール群には普通飼料を経口投与し、投与群にはアカシア樹皮抽出物3％含有飼料を経口投与した。22日目に各群のマウスの糞を採取した。
なお、マウスは温度24±1℃、湿度55±5％の施設において飼育し、明暗条件は8:00点灯、20:00消灯とした。
（腸内細菌解析）
１．DNAの抽出・調整方法
糞からの細菌DNAの抽出はQIAamp DNA stool mini kit (Qiagen, Inc)を用いて行った。抽出方法はQIAamp DNA stool mini kit付属のプロトコールに従った。得られた溶液を、微量分光光度計にて260nm及び280nmの吸光度を測定することで、純度の確認及びDNA濃度（ng/μL）の算出を行った。
１．DNAの抽出・調整方法
糞からの細菌DNAの抽出はQIAamp DNA stool mini kit (Qiagen, Inc)を用いて行った。抽出方法はQIAamp DNA stool mini kit付属のプロトコールに従った。得られた溶液を、微量分光光度計にて260nm及び280nmの吸光度を測定することで、純度の確認及びDNA濃度（ng/μL）の算出を行った。
２．細菌の定量方法
各種プライマーを作成し、リアルタイムPCRにより、ビフィドバクテリウム属の菌、及びラクトバチルス属の菌を検出した。PCRプレートの各ウェルへSsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix 5μL、目的遺伝子のforward primer(5pmol/μL) 0.6μL、reverse primer(5pmol/μL) 0.6μL、DNA溶液 2μL、RNase free water 2.8μLを加えた。PCR条件は、denaturation温度として95℃で30sec、annealing温度として58℃で30sec、elongation温度として72℃で60secとした。増幅過程の蛍光強度をCFX Connect Real-Time System（Bio-Rad Laboratories）によりモニタリングした。発現量は、16SｒRNAを用いてノーマライズした。
各種プライマーを作成し、リアルタイムPCRにより、ビフィドバクテリウム属の菌、及びラクトバチルス属の菌を検出した。PCRプレートの各ウェルへSsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix 5μL、目的遺伝子のforward primer(5pmol/μL) 0.6μL、reverse primer(5pmol/μL) 0.6μL、DNA溶液 2μL、RNase free water 2.8μLを加えた。PCR条件は、denaturation温度として95℃で30sec、annealing温度として58℃で30sec、elongation温度として72℃で60secとした。増幅過程の蛍光強度をCFX Connect Real-Time System（Bio-Rad Laboratories）によりモニタリングした。発現量は、16SｒRNAを用いてノーマライズした。
３．結果
結果を図１に示す。糞中のビフィドバクテリウム属の菌の量が、投与群では、コントロール群と比較して、約3倍に増加していた。また、糞中のラクトバチルス属の菌の量が、投与群では、コントロール群と比較して、約2倍に増加していた。
結果を図１に示す。糞中のビフィドバクテリウム属の菌の量が、投与群では、コントロール群と比較して、約3倍に増加していた。また、糞中のラクトバチルス属の菌の量が、投与群では、コントロール群と比較して、約2倍に増加していた。
Claims (7)
- アカシアの樹皮の抽出物を含む、腸内環境改善剤。
- 前記腸内環境改善が、腸内の善玉菌の増加である、請求項１に記載の腸内環境改善剤。
- 前記善玉菌が、乳酸菌及び／又はビフィズス菌である、請求項２に記載の腸内環境改善剤。
- 前記善玉菌が、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｂａｃｉｌｌｕｓ）属の菌及び／又はビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属の菌である、請求項２に記載の腸内環境改善剤。
- 前記アカシアが、Ａｃａｃｉａ ｍｅａｒｎｓｉｉ Ｄｅ Ｗｉｌｄ．である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の腸内環境改善剤。
- 食品である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の腸内環境改善剤。
- 医薬品又は医薬部外品である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の腸内環境改善剤。
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