JP2020532729A - マーカーを抽出するための非破壊サンプリング装置 - Google Patents
マーカーを抽出するための非破壊サンプリング装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020532729A JP2020532729A JP2020512691A JP2020512691A JP2020532729A JP 2020532729 A JP2020532729 A JP 2020532729A JP 2020512691 A JP2020512691 A JP 2020512691A JP 2020512691 A JP2020512691 A JP 2020512691A JP 2020532729 A JP2020532729 A JP 2020532729A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- liquid
- extracting
- extraction chamber
- extraction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000005070 sampling Methods 0.000 title description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 50
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 claims description 27
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 7
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- -1 polypropylene Polymers 0.000 claims description 4
- 239000003351 stiffener Substances 0.000 claims description 4
- 230000006835 compression Effects 0.000 claims description 3
- 238000007906 compression Methods 0.000 claims description 3
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 claims description 3
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 claims description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 claims description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims 1
- 239000012779 reinforcing material Substances 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 46
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 37
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 5
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001746 injection moulding Methods 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003068 pathway analysis Methods 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 101150065984 Comp gene Proteins 0.000 description 1
- 102100034157 DNA mismatch repair protein Msh2 Human genes 0.000 description 1
- 102100021147 DNA mismatch repair protein Msh6 Human genes 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100020903 Ezrin Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001134036 Homo sapiens DNA mismatch repair protein Msh2 Proteins 0.000 description 1
- 101000968658 Homo sapiens DNA mismatch repair protein Msh6 Proteins 0.000 description 1
- 229910015837 MSH2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010027457 Metastases to liver Diseases 0.000 description 1
- 102000008071 Mismatch Repair Endonuclease PMS2 Human genes 0.000 description 1
- 108010074346 Mismatch Repair Endonuclease PMS2 Proteins 0.000 description 1
- 102000013609 MutL Protein Homolog 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010026664 MutL Protein Homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102100037765 Periostin Human genes 0.000 description 1
- 101710199268 Periostin Proteins 0.000 description 1
- 102100022127 Radixin Human genes 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000000112 colonic effect Effects 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 108010055671 ezrin Proteins 0.000 description 1
- 229920005570 flexible polymer Polymers 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- VVIUBCNYACGLLV-UHFFFAOYSA-N hypotaurine Chemical compound [NH3+]CCS([O-])=O VVIUBCNYACGLLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000011528 liquid biopsy Methods 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002861 polymer material Substances 0.000 description 1
- 229920000193 polymethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 1
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 1
- 108010048484 radixin Proteins 0.000 description 1
- 208000013718 rectal benign neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000009666 routine test Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021055 solid food Nutrition 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/40—Concentrating samples
- G01N1/4005—Concentrating samples by transferring a selected component through a membrane
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57488—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds identifable in body fluids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
マーカーの抽出のための方法及び装置であって、可撓性膜を備えた抽出装置の小室のハウジングに置かれた取り外し可能な支持バスケットに試料を導入すること、及び上記ハウジングに予め導入された液体に上記試料を浸すこと、及び上記液体に上記試料を浸した後に、上記抽出小室を密閉すること、及び１〜２Ｈｚの周波数で、１〜５分間、上記可撓性膜に圧力サイクルを加えること、を包含する上記方法。次に、上記圧力サイクルの後、上記試料を浸す上記液体を完全に又は部分的に回収し、且つ上記液体に存在する上記マーカーを検出すること。
Description
本発明は、試料からマーカーを抽出するための非破壊サンプリング方法、装置及び機器に関する。
より具体的には、本発明は、生物学的試料からバイオマーカーを抽出するための方法、装置、及び機器、並びに疾患の初期段階での診断のためのそれらの使用に関する。
試料内の低濃度でのマーカーを抽出することは、その起源に関係なく、試料の完全性を維持しなければならない場合に問題があることが分かっている。
特に、癌などの疾患の初期段階を検出及び評価し、又は治療に対する耐性と反応を予測できるバイオマーカー、即ち生物学的マーカーを探索することは、依然として課題である。
明らかに、バイオマーカーに対する非侵襲的探索は、血液、血清、尿、又は唾液の試料から基本的に出発して行われる。これらの液体において、バイオマーカーは、疾患組織中の濃度と比較して最大１０億倍にまで希釈されるため、これらの培地からバイオマーカーを検出することは事実上不可能である。
第２の制限は、固形生検（主として診断のための分析を目的としている）などの組織試料を入手することが困難なことである。このように、明らかな倫理的理由のために、この貴重な人間の素材は、有用で関連性のある新しいバイオマーカーを探索するためには入手できない。上記バイオマーカーは全体として、臨床試験における完全な組織学的な評価をすることを意図されている。さらに、これらの試料は非常に少量（約１〜１２５ｍｍ３）で採取される。
それにもかかわらず、バイオマーカーの検出は、個別の診断を提供すること、及び選択可能な最良の治療法を実行できるようにするために不可欠である。
本発明の目的は、試料の完全性を尊重しなければならない場合に、マーカーがどのような起源の試料から抽出されるときにも、マーカーの入手可能性の低い問題を克服することである。
より詳細には、本発明の目的は、バイオマーカーの濃度が低すぎる液体生検（例えば、血液、尿、又は唾液）の使用中に遭遇する問題を克服することであるが、また、固形生検の入手可能性の小さいことを克服することでもある。
第１の態様において、本発明は、試料からマーカーを抽出するための簡単で迅速な方法に関しており、以下の工程：
‐可撓性膜を備えた抽出装置の小室のハウジング内に置かれた使い捨ての支持バスケットに試料を導入すること；
‐上記小室の上記ハウジングに予め導入された液体中に上記試料を浸すこと；
‐上記液体中に上記試料を浸した後に、上記抽出小室を密閉し、１〜２Ｈｚ、好ましくは１．５ＨＺの周波数で、１〜５分間、好ましくは３分間、上記可撓性膜に圧力サイクルを加えること；次に
‐上記膜に圧力サイクルを加えた後に、上記試料を完全に又は部分的に回収し、且つ上記液体中に存在する上記マーカーを検出すること；
を包含する。
‐可撓性膜を備えた抽出装置の小室のハウジング内に置かれた使い捨ての支持バスケットに試料を導入すること；
‐上記小室の上記ハウジングに予め導入された液体中に上記試料を浸すこと；
‐上記液体中に上記試料を浸した後に、上記抽出小室を密閉し、１〜２Ｈｚ、好ましくは１．５ＨＺの周波数で、１〜５分間、好ましくは３分間、上記可撓性膜に圧力サイクルを加えること；次に
‐上記膜に圧力サイクルを加えた後に、上記試料を完全に又は部分的に回収し、且つ上記液体中に存在する上記マーカーを検出すること；
を包含する。
上記装置の上記膜に加えられる静水圧は、２〜５バール、好ましくは２バールである。
圧力サイクルとは、最大圧力と最小圧力を交互に繰り返す圧力が、所定の期間、所定の周波数で印加されることを意味する。
「試料」という用語は、食品、植物組織、生物組織、鉱物組成などに由来する固体状態の任意のタイプの試料であって、この試料内に低濃度で１以上のマーカーを含みうるものを意味することを意図されている。より具体的には、生体組織試料又は生体試料は、一般に、例えば針又はメスによって採取された手術標本（生検とも呼ばれる）に由来する。組織サンプリングは、例えば肺、乳房、肝臓、腎臓、子宮、前立腺、骨髄、筋肉、結腸、気管支などのような人間又は動物の体の任意の器官又は要素で行われてもよい。組織試料は、癌性腫瘍から取られてもよい。
「液体」という用語は、低粘度又は水に近い粘度の媒体であって、上記媒体中に浸漬された固体試料中に存在するマーカーを可溶化できるものを意味することを意図されている。「液体」という用語は、例えば、水、アルコール、油などに基づく媒体を意味することを意図されている。生物学的試料に使用される水性媒体の例は、生理的液体である。
「生理的液体」という用語は、血液と等張であるか、又は主要な体液（例えば、血液、尿、唾液）と同じ浸透圧を有する液体を意味することを意図されている。生理的液体は、例えば、蒸留水及びＮａＣｌの重量／体積の０．９％、すなわち９ｇ／ｌに希釈された塩化ナトリウムで構成される。生理的液体はより複雑であり、検討中の組織に応じて、例えば塩化カリウム（ＫＣｌ）、塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）、硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）を含む場合がある。
最後に、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が、また、９ｇ／ｌのＮａＣｌ又は他の塩（例えば、ＫＣｌやＣａＣｌ２）と共に、特に癌性腫瘍由来の試料での生理的液体として用いられる。
上記抽出装置の上記膜に対する上記圧力サイクルは、上記試料から抽出された十分な量のマーカー（特にバイオマーカー）を上記液体（特に生理的液体）から得ることができると同時に、試料（特に組織又は生検試料）の分解を回避できなければならない。上記液体を分離する上記可撓性膜に２〜５バールの低圧をかけると、上記試料中に存在するマーカーを上記試料から押し出すことができる。生体試料の場合、液体を分離する可撓性膜に２〜５バールの低圧をかけると、組織試料から、関心のあるバイオマーカーを含む組織の細胞へ間質液が押し出されうる。それにもかかわらず、圧力サイクルは、引き続く分析のために、組織試料の形態と抗原性を維持することを可能にしなければならない。
１〜５分の短い期間中に周期的圧力をかけられた後、圧力は大気圧に戻され、小室はピストンシリンダーから切り離される。上記液体（特に生理的液体）の一部分又は全部は、マーカー又はバイオマーカーの検出のために上記小室から抽出され、一方、上記試料を保持している上記バスケットは、初期の整合性がそのまま保持されている上記試料について別の後続の分析を可能にするように、上記小室から取り出される。生体組織の試料の場合、生体組織はその後の臨床分析にかけられる。
「マーカー」という用語は、固体試料中に低濃度で存在し且つ上記試料浸漬液中に可溶化できる何らかの物質を意味することが意図されている。マーカーは、例えば、動物又は植物起源の試料又は固形食品中に存在する生物学的化合物（有毒であってもなくてもよい）でありうる。マーカーは、また、バイオマーカーであってもよい。
「バイオマーカー」という用語は、タンパク質だけでなく、検討中の組織の細胞の間質性液体中にある、循環ＤＮＡ、エキソソーム、ｍｉＲＮＡ、代謝産物，及び同等の分子をも意味することを意図されている。
本発明による方法は、上記マーカー又はバイオマーカーの抽出及び検出後に、上記試料がその形態学的及び化学的又は生化学的完全性をもって回収されるという利点を有する。
マーカー又はバイオマーカーを抽出する上記方法は、簡易かつ迅速であるという利点を有する。上記方法は、数分しかかからず、上記試料のその後のテスト（例えば生体組織の試料の場合の臨床テスト）に何らの遅延も生じさせない。上記生理液の一部分が抽出小室内に保持されている場合、それは、凍結保存液（例えば液体窒素）内に低温で保存されうる。
第２の態様において、本発明は、マーカーを抽出するための装置に関しており、それは、本発明を理解するために、図１から図７に示されている。
これらの図面は、本発明の実施形態を例示するためのものであり、本発明をそれらに限定するものではない。
抽出装置（１）は、取り外し可能なバスケット（５）を収容するハウジング（１２）を有する抽出小室（３）を備え、このバスケット（５）は、ハウジング（１２）に予め入れられた液体に試料（６）を浸すように構成されている。
抽出装置に属する各要素は、射出成形によって製造される。
生物学的用途の装置の場合、製造は、医療装置の製造要件を満たすようにクリーンルーム内で行われる。製造後は、抽出装置の要素は、超音波浴中の有機溶媒（例えば、イソプロパノール）によって洗浄される。このようにして製造された要素の滅菌レベルは、医療機器のＤＩＮ ＥＮ ＩＳＯ １７６６５規格に準拠しなければならず、ＤＮＡの痕跡が識別できないようなものでなければならない。
抽出小室は、図７に示されるように透明な高分子材料（例えば、ポリメタクリレート）でできていることが好ましい。
抽出装置（１）は、また、可撓性膜（８）によって抽出小室のハウジング（１２）から分離された空洞（７）も含んでいる。
空洞及び可撓性膜から成るアセンブリは、密閉された抽出小室に存在する液体と組織試料の圧縮又は膨張を可能にする。
空洞の容積は、３〜１０ｍｌ、好ましくは４．５ｍｌである。
上記膜（８）は可撓性の高分子材料でできており、その表面積の５０％〜２００％の変形に耐えられる。この膜は、例えば液体窒素内における抽出小室（３）に貯蔵中の液体の圧縮又は液体の膨張の間、その変形に耐えなければならない。好ましくは、この膜の可撓性は、その表面積の１〜２倍の変形度を許容する。
この膜は、５０〜１０００ミクロンの範囲の厚さ（好ましくは１００ミクロン）を有するシリコーンでできていることが好ましい。
可撓性膜は好ましくはシリコーン製であり、２つのアセンブリ部品の間に取り付けられ、且つ例えばＶ字形の溝によって抽出小室（３）の基部に配置される。これら２つのアセンブリ部品は、必要に応じて互いに分離されていてもよい。
抽出装置（１）は、また、図３に示されているように、ハウジング（１２）内に取り外し可能な支持バスケット（５）を取り付け、且つ圧力サイクルの間、ハウジング（１２）内部に液体を保持するように、抽出小室（３）に配置された漏れ止めキャップを備えている。
好ましい１実施形態によれば、漏れ止めキャップは、２つの部分で構成され、下側部分（４）の上に置かれた上側部分（２）即ちルアーロックキャップは、小室からの液体の抽出を可能にするように、且つ圧力サイクル中に抽出小室の漏れ止めを維持するように構成されている。
このキャップの下側部分は、好ましくは円錐体対円錐体システムによって抽出小室にねじ止めされており、こうして抽出小室が漏れ止めであることを可能にしている。
支持バスケット（５）は、射出成形により製造され、また、プラスチック、好ましくはポリプロピレンでできている。好ましい１実施形態においては、支持バスケットは使い捨てである。
好ましくは、上記バスケットは垂直リブを備え、組織試料を生理的液体に浸すことを可能にする。バスケットの上記リブは、試料がバスケットに留まることを可能にし、同時に生理的液体内に浸漬されるように、試料のサイズに適した幅を持たなければならない。
抽出小室（３）のハウジング（１２）内の支持バスケット（５）の容積は、抽出小室内のハウジングの容積の１０％〜５０％、好ましくは２０％に相当する。支持バスケットの容積は、試料のサイズにも関連している。別の好ましい実施形態によれば、抽出装置は、ピストン（１１）を有するシリンダー（１０）を備え、上記シリンダーは、オリフィス（１３）で空洞（７）に接続されている。空洞‐膜アセンブリは、液体に対する圧力の均一な分布と、より優れたマーカー抽出性能とを得ることを可能にする。
好ましくは、空洞の容積部及びピストンの上方のシリンダーの容積部は、空気で満たされているが、他の不活性ガス（例えば、窒素、アルゴン、又は同等物）も使用できる。空洞と空気で満たされたシリンダーとの総容積は、２０〜１００ｍｌの範囲でありうるが、好ましくは約３０ｍｌである。
本発明による装置の、より好ましい実施形態において、ピストンが設けられたシリンダーは、使い捨て医療用注射器である。
シリンダーは、一般に抽出小室に垂直に接続されているが、他の構成、例えば水平構成なども可能である。
別の好ましい実施形態によれば、空洞は、１つ以上の補強材（９）を含む。補強材が２の倍数である場合、それらは、シリンダー（１０）接続オリフィス（１３）の周りに星形に配置されることが好ましい。補強材の使用は、膜が空洞の壁にくっつくのを有利に防ぐことを可能にする。
生物学的使用のための装置の場合、液体は、好ましくは生理的液体であり、この生理的液体中に浸漬された生物学的組織試料からバイオマーカーを抽出するためのものである。
第３の態様において、本発明は、また、初期段階の疾患の早期診断又は疾患の治療、より具体的には癌の治療のためのバイオマーカーを抽出するための装置に関する。
第４の態様において、本発明は、また、組織の試料又は固形生検から分子代謝及びタンパク質バイオマーカーを検出するための装置の使用に関する。
最後に、第５の態様において、本発明は、抽出装置と圧力ピストンを作動さ小室手段（例えばジャッキ）とを一体化している図６に示されたような機器に関する。この機器は、また、自動パラメータ制御モジュールを備えていてもよい。
図７は、抽出小室及びピストンシリンダーとしての３０ｍｌの外科用シリンジを含む機器の１例を示す。
いくつかの例
上記の方法、装置、及び機器は、原発性の結腸直腸（ＣＲＣ）腫瘍及び肝転移からの結腸直腸（ＣＲＣ‐ＬＭ）腫瘍から得られた生体組織試料の大規模シリーズでテストされた。試料から押し出された液体は、バイオマーカーを検出するためのユニークな材料であり、以下に示されるように、その後の臨床試験のために組織の形態に干渉することはない。
上記の方法、装置、及び機器は、原発性の結腸直腸（ＣＲＣ）腫瘍及び肝転移からの結腸直腸（ＣＲＣ‐ＬＭ）腫瘍から得られた生体組織試料の大規模シリーズでテストされた。試料から押し出された液体は、バイオマーカーを検出するためのユニークな材料であり、以下に示されるように、その後の臨床試験のために組織の形態に干渉することはない。
１．本発明による抽出方法の応用
手術で切り取られた生検は、手術直後に採取され、３ｍｍ３の試料に切り分けられ、４．５ｍｌの小室に入れられた。５００ｍｌ中で４．５ｇのＮａＣｌを含む４ｍｌの高張ＰＢＳバッファー（Weestburg）は、バスケット内の試料として同時に小室に加えられた。次いで独立して、シリンジのピストンが、１５ｍｌのマーキングまで動かされる。次に、シリンジは、抽出小室に接続される。続いて、１５ｍｌマーキングと７．５ｍｌマーキングの間でシリンジ内のピストンを動かすことにより、試料は、１Ｈｚの周波数で交互に圧力を１分間かけられる。接続された圧力計で独立して実行された測定の間、この体積の変化は、２バール（圧縮状態）と１バール（緩和状態）との間の有効な圧力変動に対応し、且つピストンが１５ｍｌマーキングであるときの初期点での１バールに対応する。この手順は各試料について３回繰り返される。その後、抽出液は−２０℃で保存された。手順全体は３分間続き、臨床評価のために試料が復元される。同様の手順が、ヒト乳がん腫瘍、原発性結腸直腸がん、肝臓転移腫瘍及び結腸腫瘍からの試料、及びそれらに隣接する正常な対応物の試料にも適用された。
手術で切り取られた生検は、手術直後に採取され、３ｍｍ３の試料に切り分けられ、４．５ｍｌの小室に入れられた。５００ｍｌ中で４．５ｇのＮａＣｌを含む４ｍｌの高張ＰＢＳバッファー（Weestburg）は、バスケット内の試料として同時に小室に加えられた。次いで独立して、シリンジのピストンが、１５ｍｌのマーキングまで動かされる。次に、シリンジは、抽出小室に接続される。続いて、１５ｍｌマーキングと７．５ｍｌマーキングの間でシリンジ内のピストンを動かすことにより、試料は、１Ｈｚの周波数で交互に圧力を１分間かけられる。接続された圧力計で独立して実行された測定の間、この体積の変化は、２バール（圧縮状態）と１バール（緩和状態）との間の有効な圧力変動に対応し、且つピストンが１５ｍｌマーキングであるときの初期点での１バールに対応する。この手順は各試料について３回繰り返される。その後、抽出液は−２０℃で保存された。手順全体は３分間続き、臨床評価のために試料が復元される。同様の手順が、ヒト乳がん腫瘍、原発性結腸直腸がん、肝臓転移腫瘍及び結腸腫瘍からの試料、及びそれらに隣接する正常な対応物の試料にも適用された。
２．本発明による抽出方法を受けた／受けていない試料の免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）結果の比較
本発明による方法が組織試料の形態及び抗原性を変化させないことを検証するために、様々なヒトとマウスの組織の比較分析がこの方法に施された。各組織試料は２つに分けられた。一方は、慣用病理学的分析のためであり、もう一方は、本発明による抽出方法（図８及び９においてＩＮＶとも記されている）のためである。慣用分析のための試料及び／又は本発明による抽出方法のための試料は、当業者に知られ、且つA. Bellahcene及びV. CastronovoによってAm. J Pathol（1955年1月; 146(1)：95-100）に記載された手順に従って、同じ免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）に供される。
本発明による方法が組織試料の形態及び抗原性を変化させないことを検証するために、様々なヒトとマウスの組織の比較分析がこの方法に施された。各組織試料は２つに分けられた。一方は、慣用病理学的分析のためであり、もう一方は、本発明による抽出方法（図８及び９においてＩＮＶとも記されている）のためである。慣用分析のための試料及び／又は本発明による抽出方法のための試料は、当業者に知られ、且つA. Bellahcene及びV. CastronovoによってAm. J Pathol（1955年1月; 146(1)：95-100）に記載された手順に従って、同じ免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）に供される。
図８において、原発性結腸直腸腫瘍試料（ｎ＝１０、Ａ図）及び転移肝臓試料（ｎ＝１０、Ｂ図）は、慣用の臨床分析と本発明による抽出方法とを施された後、ヘマトキシリン／エオシン（Ｈ＆Ｅ）分析及び識別されたマーカー（ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２）の免疫標識付けが行われた。各マーカーの定量的評価は、当業者に知られ、且つD. Waltregny 他により、J Natl Cancer Inst.（1998年7月1日、90(13):1000-8）に記載された方法により実施された。
各場合において、３人の患者から試料が収集された。各ＩＨＣ画像の強度は、次のスケール（０はトレースなし、１は弱い、２は中程度、３は強い）を用いて評価された。組織は、また、スケール１＝０〜３３％、２＝３３〜６６％、３＝６６〜１００％を用いて、それらの陽性の程度について評価された。２つの評価のそれぞれによって得られた値は、図８に再現されたＨＩＣスコアを得るために乗算される。
図９ａにおいて、乳がん（ｎ＝３）、結腸直腸がん（ＣＲＣ; ｎ＝３）、又はＣＲＣ転移性肝がん（ＣＲＣ−ＬＭ; ｎ＝３）を示すマウス組織の試料に、慣用の検査又は本抽出方法が実施され、その後、ヘマトキシリン／エオシン（Ｈ＆Ｅ）分析が行なわれた。
図８及び図９に示されたように、組織の構造（Ｈ＆Ｅ）及び選択されたマーカーの強度に関して有意な差はなかった。
３．ヒト乳癌における、タンパク質及び代謝マーカーを識別するための装置の使用
乳がんの１０個の標本、及びそれらに隣接する非腫瘍組織は、実施例１に記載の手順に従って扱われ、その後、本発明による装置及び方法に供された。次に、抽出装置の適用後に得られた液体は、可溶性タンパク質の検出のために質量分析機によって、及び代謝産物の検出のために核磁気共鳴機によって分析された。次に、癌性組織から得られた液体から同定されたマーカーは、正常組織のマーカーと比較された。
乳がんの１０個の標本、及びそれらに隣接する非腫瘍組織は、実施例１に記載の手順に従って扱われ、その後、本発明による装置及び方法に供された。次に、抽出装置の適用後に得られた液体は、可溶性タンパク質の検出のために質量分析機によって、及び代謝産物の検出のために核磁気共鳴機によって分析された。次に、癌性組織から得られた液体から同定されたマーカーは、正常組織のマーカーと比較された。
３．１タンパク質マーカーの検出
癌組織中で検出されたタンパク質の中で、例えば、ペリオスチン、コンプ、エズリン、ラディキシン、バーシカン、テネイシンが特定されている。これらのタンパク質は、一般に、パブメド（Pubmed）からの抜粋を再現する以下の表１に示されるように、組織の細胞外空間中に存在する。
癌組織中で検出されたタンパク質の中で、例えば、ペリオスチン、コンプ、エズリン、ラディキシン、バーシカン、テネイシンが特定されている。これらのタンパク質は、一般に、パブメド（Pubmed）からの抜粋を再現する以下の表１に示されるように、組織の細胞外空間中に存在する。
図１０は、本発明による抽出装置及び方法に続いて得られた液体中において特定されたタンパク質マーカーの数を示す。液体（その中に癌組織が漬けられた）中から特定されたマーカーは、正常組織から抽出されたマーカーと比較される。
このようにして、１０３２個のタンパク質が癌組織から同定され、図１０に示差的に表現されている（７２２が増加、１８５が減少）。
３．２代謝マーカーの検出
精密な経路分析（Ingenuity Pathway Analysis）は、収集されたデータの解釈とＩＰＡコア分析（IPA Core Analysis）ソフトウェアによる分析に用いられた。
精密な経路分析（Ingenuity Pathway Analysis）は、収集されたデータの解釈とＩＰＡコア分析（IPA Core Analysis）ソフトウェアによる分析に用いられた。
図１１に示されたのは、本発明による抽出方法及び装置に従って特定された代謝マーカーである。乳癌の場合、代謝産物の変化と増加が観察される。アラニン、タウリン及びヒポタウリン、ベタイン、並びにグルコースアラニンは、Ｐ値に反映されるように、最大の上向き調節（アップレギュレーション）を受けたマーカーである。
Ｐ値は、どの分子が導入された参照分子と有意に関連しているかを示す。これは、特徴付けられたすべての機能分子に関連している。倍率濃縮は、試料中の代謝産物の存在の統計的有意性を示している。
Claims (23)
- マーカーを抽出するための方法であって、
‐可撓性膜を備えた抽出装置の小室のハウジング内に置かれた取り外し可能な支持バスケットに試料を導入すること、
‐前記ハウジングに予め導入された液体中に前記試料を浸すこと、
‐前記液体中に前記試料を浸した後に、前記抽出小室を密閉すること、
‐１〜２Ｈｚの間の周波数で、１〜５分間、前記可撓性膜に圧力サイクルを加えること、
‐前記圧力サイクルの後、前記試料を浸す前記液体を完全に又は部分的に回収し、且つ生理的な前記液体中に存在する前記マーカーを検出すること、
を包含し、
前記膜に加えられる前記圧力は２〜５バールの間であることを特徴とする、
上記方法。 - 前記圧力サイクルの持続時間は、３分間であることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
- 前記試料は生体組織試料であり、前記液体はバイオマーカーの抽出のための生理的液体であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の方法。
- 前記生体組織試料は癌性腫瘍から抽出されることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
- 前記生理的液体は、９ｇ／ｌのＮａＣｌを含むＰＢＳ緩衝液であることを特徴とする、請求項３及び４のいずれか１項に記載の方法。
- マーカーを抽出するための装置（１）であって、
‐取り外し可能な支持バスケット（５）を収容するためのハウジング（１２）を備えた抽出小室（３）であって、前記支持バスケット（５）が、前記ハウジング（１２）に予め導入された液体中に試料（６）を浸すように構成されている抽出小室（３）、
‐前記液体の圧縮又は膨張を可能にする、可撓性の膜（８）によって前記抽出小室（３）の前記ハウジングから分離された空洞（７）、及び
‐前記取り外し可能な支持バスケット（５）を前記ハウジング（１２）内に取り付けるために、前記抽出小室（３）に配置された漏れ止めキャップ（２）、
を備える、
上記装置。 - 前記漏れ止めキャップは、加圧サイクルの間中、前記抽出小室の漏れ止めを維持するように、且つ前記サイクルの最後に前記液体の抽出を可能にするように構成された下側部分（４）と、その上に配置された上側部分、即ちルアーロックキャップ（２）との２つの部分を含むことを特徴とする、請求項６に記載の装置。
- オリフィス（１３）で空洞（７）に接続されたピストン（１１）シリンダー（１０）をまた備えていることを特徴とする、請求項６又は７のいずれかに記載の装置。
- 前記空洞（７）と前記ピストンの上方の前記シリンダ（１０）の容積部とが、空気で満たされていることを特徴とする、請求項８に記載の装置。
- 前記空洞（７）は、また、少なくとも１つの補強材（９）を備えていることを特徴とする、請求項６〜９のいずれか１項に記載の装置。
- 少なくとも２つの補強材は、シリンダ（１０）接続オリフィス（１３）の周りに星形に配置されていることを特徴とする、請求項１０に記載の装置。
- 前記支持バスケット（５）は、前記試料の前記液体中への浸漬を可能にする複数の垂直リブを備えていることを特徴とする、請求項６〜１１のいずれか１項に記載の装置。
- 前記支持バスケット（５）の前記各リブは、前記試料のサイズに適した幅を持たなければならないことを特徴とする、請求項１２に記載の装置。
- 前記支持バスケット（５）は、プラスチック、好ましくはポリプロピレン、で作られていることを特徴とする、請求項６〜１３のいずれか１項に記載の装置。
- 前記膜（８）の可撓性は、その表面積の１〜２倍の変形度を許容することを特徴とする、請求項６〜１４のいずれか一項に記載の装置。
- 前記シリンダ（１０）は、前記抽出小室（３）に垂直に接続されている、請求項８〜１５のいずれか１項に記載の装置。
- 前記ピストン（１１）が設けられた前記シリンダ（１０）は、使い捨て注射器である、請求項８〜１６のいずれか１項に記載の装置。
- 前記試料が生体組織試料であり、前記液体がバイオマーカーの抽出のための生理的液体であることを特徴とする、請求項６〜１７のいずれか１項に記載の抽出装置。
- 初期段階の癌の早期診断のための、請求項１８に記載のバイオマーカーを抽出するための装置。
- 癌治療のための、請求項１８に記載のバイオマーカーを抽出するための装置。
- 固形生検から分子代謝及びタンパク質バイオマーカーを検出するための、請求項１８に記載の装置の使用。
- 請求項８〜１８のいずれか１項に記載のマーカーを抽出する装置と、前記ピストンの移動を作動させるための手段とを含む機器。
- 前記ピストンの移動を作動させるための前記手段が、ジャッキであることを特徴とする、請求項２２に記載の機器。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BE2017/5633A BE1025528B1 (fr) | 2017-09-06 | 2017-09-06 | Dispositif non-destructif d'echantillon pour extraction de marqueurs |
| BEBE2017/5633 | 2017-09-06 | ||
| PCT/EP2018/063244 WO2019048087A1 (fr) | 2017-09-06 | 2018-05-19 | Dispositif non-destructif d'échantillon pour extraction de marqueur |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2020532729A true JP2020532729A (ja) | 2020-11-12 |
Family
ID=59974099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2020512691A Pending JP2020532729A (ja) | 2017-09-06 | 2018-05-19 | マーカーを抽出するための非破壊サンプリング装置 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210072127A1 (ja) |
| EP (1) | EP3679374B1 (ja) |
| JP (1) | JP2020532729A (ja) |
| BE (1) | BE1025528B1 (ja) |
| WO (1) | WO2019048087A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114184441B (zh) * | 2021-10-19 | 2024-04-05 | 威凯检测技术有限公司 | 动物源性医疗器械生物安全性评价实验浸提液的制备装置和方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002522559A (ja) * | 1998-08-11 | 2002-07-23 | ラージ スケール バイオロジー コーポレイション | 植物組織の間質液からタンパク質を回収するための方法 |
| JP2004536292A (ja) * | 2001-04-26 | 2004-12-02 | ボストン・バイオメディカ・インコーポレーテッド | マルチチャンバデバイスおよび生物試料の加工処理のためのその用途 |
| JP2006034719A (ja) * | 2004-07-28 | 2006-02-09 | Terumo Corp | シリンジポンプとシリンジポンプによる輸液方法 |
| JP2015139398A (ja) * | 2014-01-28 | 2015-08-03 | 株式会社ライフテック | 核酸抽出装置および核酸抽出方法 |
| JP2017518497A (ja) * | 2014-05-30 | 2017-07-06 | プレッシャー バイオサイエンシズ インコーポレイテッドＰｒｅｓｓｕｒｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ． | 試料調製デバイスおよび方法 |
-
2017
- 2017-09-06 BE BE2017/5633A patent/BE1025528B1/fr not_active IP Right Cessation
-
2018
- 2018-05-19 WO PCT/EP2018/063244 patent/WO2019048087A1/fr unknown
- 2018-05-19 JP JP2020512691A patent/JP2020532729A/ja active Pending
- 2018-05-19 US US16/644,811 patent/US20210072127A1/en not_active Abandoned
- 2018-05-19 EP EP18726776.0A patent/EP3679374B1/fr active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002522559A (ja) * | 1998-08-11 | 2002-07-23 | ラージ スケール バイオロジー コーポレイション | 植物組織の間質液からタンパク質を回収するための方法 |
| JP2004536292A (ja) * | 2001-04-26 | 2004-12-02 | ボストン・バイオメディカ・インコーポレーテッド | マルチチャンバデバイスおよび生物試料の加工処理のためのその用途 |
| JP2006034719A (ja) * | 2004-07-28 | 2006-02-09 | Terumo Corp | シリンジポンプとシリンジポンプによる輸液方法 |
| JP2015139398A (ja) * | 2014-01-28 | 2015-08-03 | 株式会社ライフテック | 核酸抽出装置および核酸抽出方法 |
| JP2017518497A (ja) * | 2014-05-30 | 2017-07-06 | プレッシャー バイオサイエンシズ インコーポレイテッドＰｒｅｓｓｕｒｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ． | 試料調製デバイスおよび方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20210072127A1 (en) | 2021-03-11 |
| EP3679374A1 (fr) | 2020-07-15 |
| BE1025528A1 (fr) | 2019-03-29 |
| BE1025528B1 (fr) | 2019-04-05 |
| WO2019048087A1 (fr) | 2019-03-14 |
| EP3679374B1 (fr) | 2021-06-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109789420B (zh) | 收集探针及其使用方法 | |
| Almagro et al. | Tissue clearing to examine tumour complexity in three dimensions | |
| JP7084592B2 (ja) | コヒーレントラマンイメージング用生検装置 | |
| JP7092668B2 (ja) | ３ｄ生検組織を染色する装置 | |
| JP5563217B2 (ja) | 血管内の関心位置における一つ以上のバイオマーカのためのデータプロファイルを提供するための方法 | |
| PT3008162T (pt) | Método para separação de células esporádicas de fluidos corporais e aparelho para levar a cabo o referido método | |
| JP2021504703A (ja) | 低侵襲性収集プローブおよびその使用方法 | |
| JPWO2012137832A1 (ja) | 膵臓検査方法および膵臓検査キット | |
| JP6571694B2 (ja) | 生体試料用の試料ホルダ | |
| JP2020532729A (ja) | マーカーを抽出するための非破壊サンプリング装置 | |
| CN107340394A (zh) | 一种骨转移癌的诊断系统及其操作方法 | |
| Khan et al. | Non-invasive photoacoustic screening of blood vasculature during anti-angiogenesis using CAM assay | |
| CN107389776B (zh) | 一种用于检测药物分布的分析方法及其应用 | |
| Yang et al. | Isolation of biofluids from tissues using a vacuum-assisted filtration biomedical device | |
| Hegazy et al. | Diagnostic significance of fine needle biopsy and cell block in skin and subcutaneous nodules | |
| CN111896725A (zh) | 一种肿瘤精准、个性化药物治疗方法及应用 | |
| CN219695028U (zh) | 极性代谢物自动化处理设备 | |
| CN205391132U (zh) | 一种胰腺移植活检器 | |
| Ranamukhaarachchi | Skin mechanics, intradermal delivery and biosensing with hollow metallic microneedles | |
| WO2015110938A1 (en) | Device and method for testing a material response to a compound | |
| JP4486761B2 (ja) | プロトン磁気共鳴スペクトル法を用いる結腸直腸腺腫および結腸直腸癌の診断方法 | |
| Gaddam et al. | A Novel Digital Fingerprinting Tool for Histopathology assessment Leveraging AI on Fresh Biopsy and Resection Tissues: A Feasibility Study using Gastrointestinal Tissues | |
| EP3434102A1 (en) | Method for long-term preservation of anatomical material | |
| CN116746547A (zh) | 一种液氮冻存肿瘤组织pdx模型构建方法及其试剂组合 | |
| Baker et al. | Vibrational biomedical spectroscopy of cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210401 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20220224 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220301 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20221004 |