JP2020517952A - 迅速微生物検出及び分析のためのシステム及び方法 - Google Patents

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Abstract

サンプリング装置と、中に分析液を有するスワブ取っ手に接続されたスワブ頭を有するスワブと、収集室と、検出及び分析装置とを含む、迅速微生物検出及び分析のための方法及びシステム。【選択図】 図1

Description

(関連出願の記載)
本願は、米国特許商標庁において2017年4月26日に出願された米国仮特許出願シリアルNo.62/490188、及び2018年4月24日に出願された米国非仮特許出願シリアルNo.15/961455からの優先権を主張する。それらの開示は、本明細書中にその全体を参考として組み入れられる。
(技術の分野)
本発明は、一般に微生物の検出及び分析、特に迅速な微生物の検出及び分析のためのシステム及び方法に関する。
迅速な微生物の検出は、病気の伝播又は相互汚染の危険を減少しようとする多数の産業にとっての要求である。用語「迅速(rapid)」は、一般的に、数時間とは反対に数秒から数分での検出を示す。現在の技術は、二つのグループに分けられることができる。それらは、数分内の結果(即ち、迅速)のため、低コスト、低精度であるか、又は数時間内の結果のため、高コスト、高精度のいずれかである。低コストの選択肢は、表面の上のダスト、土ぼこり、汚れ又は他の非生物の存在とは反対に本当の問題である、生きている微生物の生物付着を正確に同定することができない。生きている微生物の生物付着は、潜在的な健康リスクを正確に理解するか、又は微生物学的実験を行なうために重要である。低コストの選択肢は、ATP発光技術又は蛍光マーカーの使用を含む。これらの選択肢は、数秒から数分以内でユーザーにフィードバックを与える。高コストの選択肢は、一般的に、患者を診察したり、又は食品製造後の分配のためのロットを出荷するために利用される。これらの高コストのシステムは、数時間以内で行なわれ、サンプリング、サンプル運搬、及び試験実行のための熟練者を要求する。
従って、生きている微生物の存在を検出することができるシステムを低コストで高精度に簡単に使用することに対する産業界の要求が増大している。本発明のシステム及び方法は、上述の欠点を克服するように設計されており、この産業界の要求を満たす。
微生物のサンプリングは、一般的に、多数の基体(substrate)及びマトリックス(matrices)から微生物サンプルを除去し、分析する方法を与えるために行なわれる。本発明のシステム及び方法は、微生物汚染及び存在の低コストで正確で素早い同定を可能にする。
微生物検出及び分析のための本発明のシステムは、表面から微生物を除去し、サンプリングされた表面の表面積を測定又は集計し、分析のために適切であるとき、特定の分析溶液中に微生物を迅速に除去することができるサンプリング装置を含む。
システムは、毛管作用を通して、又は液体の迅速なサンプリングを可能にするマイクロ流体収集装置を介して作用する収集室を含む。
システムは、数分内で生存細胞認識をもたらすための室内で発色表示又は磁気浮上(magnetic levitation)又は音波のような代替技術を利用する検出装置、及びホログラフィもしくは顕微鏡によってサンプルを撮像するための撮像装置を含む。
本発明の適用性のさらなる領域は、以下に与えられる詳細な記載から明らかになるだろう。詳細な記述及び特定の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しながら、説明だけの目的のために意図され、本発明の範囲を限定することを意図されないことが理解されるべきである。
本発明は、詳細な記載及び添付図面(それは、必ずしも縮尺通りでない)から十分に理解されるようになるだろう。
図1は、本発明による微生物検出及び分析のためのシステムの図である。
図2は、図1の微生物検出システムのサンプリング装置の図である。
図3は、図1の収集室の入口の図である。
図4A−4Bは、図1に示された収集室の図である。
図5は、図1に示された収集室の一つの収集口内への流体流れを示す。
図6は、多数の流路を有するマイクロ流体装置内への流体流れを示す。
図7は、図1に示された検出及び分析装置の図である。
図8は、本発明による方法の図である。
図9は、サンプリング装置のスワブ取っ手の図である。 図10は、サンプリング装置のスワブ取っ手の図である。
図11は、サンプリング装置のためのリングの形態の物理的バリヤーの図である。 図12は、サンプリング装置のためのリングの形態の物理的バリヤーの図である。
本発明の実施形態の以下の記載は、本質的には例示にすぎず、いかなる方法においても本発明、その適用、又は使用を制限することを意図されない。本発明は、広い潜在的適用及び有用性を有し、それは、広い範囲の産業にわたって適応可能であると考えられる。以下の記載は、本発明の実現可能な開示を与える目的のために例示としてのみ本明細書に与えられるが、本発明の範囲又は実体を制限しない。
本明細書で使用される微生物(「microbe」又は「microbial」)は、微生物学者によって研究されるか又は処理された物品の使用環境で見い出される微生物のいずれかを示すものであると解釈されるべきである。かかる微生物は、バクテリア及び真菌、並びにかび、うどん粉病菌及び藻のような他の単細胞生物を含むが、それらに限定されない。ウイルス粒子及び他の感染性因子もまた、用語「微生物」に含まれる。
用語「基体」又は「マトリックス」は、生命のある表面と生命のない表面の両方を含むことが理解される。かかる生命のある表面は、人間又は動物の起源を持つ皮膚、粘膜層、筋肉組織を含むことができるが、それらに限定されない。生命のない表面は、本質的に生物学上のものでないいずれかの表面を含むが、それらに限定されない。
この開示及び添付の請求項で使用される用語「ギヤ(gear)」は、移動路の連続的な測定のために有用ないずれかの装置を示す。用語「ギヤ」は、伝統的な歯車を含むが、それに限定されない。かかる装置の他の例は、ステッパー、モーター、電気変換器を含むが、それらに限定されない。
さらに、この開示及び添付の請求項に使用される用語「又は」は、排他的な「又は」よりむしろ包括的な「又は」を意味することを意図される。即ち、他に特記しない限り、又は文脈から明らかでない限り、句「Xは、A又はBを使用する」は、以下の例のいずれによっても満足される:Xは、Aを使用する;Xは、Bを使用する;又はXは、AとBの両方を使用する。さらに、本願及び添付の請求項に使用される冠詞(「a」及び「an」)は、他に特記しない限り、又は単数形態に向けられることを意図されるように文脈から明らかでない限り、「一つ以上」を意味することが一般に考えられるべきである。明細書及び請求項の全体を通して、以下の用語は、文脈が他に示さない限り、少なくともここで明白に関連付けられる意味をとる。以下に識別される意味は、用語を必ずしも限定せず、単に用語のための説明例を与えるにすぎない。一つ(「a」、「an」)及びその(「the」)の意味は、複数の参照を含んでもよく、中(「in」)の意味は、中(「in」)及び上(「on」)を含んでもよい。本明細書に使用される句「一実施形態では」は、そうであったとしても同じ実施形態を必ずしも言及しない。
図1は、本発明による微生物分析及び検出のためのシステム100の図である。図1に示されるように、システム100は、一般的に、サンプリング装置10、収集室50、及び検出及び分析装置70を含む。サンプリング装置10は、収集室50と検出及び分析装置70の各々と流体連通している。収集室50中の流体は、検出及び分析装置70において可視化/撮像される。
サンプリング装置
図1及び2を参照すると、サンプリング装置10は、ハウジング12、ハウジング12に取り付けられるか又はそれに接続された(ボタンのような)排出機構14、ハウジング12内に収容されるカウンター(counter)機構16、ハウジング12内に収容されるサンプリング装置ギヤ17、及びハウジング12を包囲しかつサンプリング装置10の垂直方向に移動可能な(リングの形態のような)物理的バリヤー18を含む。スワブ取っ手20及びスワブ頭24を有するスワブ25は、使い捨て可能である。スワブ25は、ハウジング12内に挿入可能であり、図9にも示される排出機構14によってハウジング12から排出可能である。コネクター26は、スワブ取っ手20をスワブ頭に接続する。好ましくは、コネクター26は、スワブ取っ手20の内部にある。スワブ頭24は、菌/微生物を上に有する表面に接触して相互作用するサンプリング装置10の部分である。
スワブ取っ手20は、第一端28及び第二端30を有する。スワブ取っ手20は、少なくとも一つのギヤを持つことが考えられ、それは、本発明の範囲内である。図2に示されるように、スワブ取っ手20は、スワブ取っ手20の第一(上部)端28の近くの第一ギヤ32、及びスワブ取っ手20の第二(下部)端の近くの第二ギヤ34を含む。第二ギヤ34はまた、図10に示される。
スワブ取っ手20は、中空であり、それは、分析液(図示せず)がスワブ取っ手20の内側に捕捉されるか又はそこに含まれることを可能にする。コネクター26は、スワブ取っ手20の内部にあることが好ましい。コネクター26は、例えば一方向弁、ポリマーシール、又はスワブ頭24にスワブ取っ手20を接続する代替的なシール材である。コネクター26は、ユーザーがシステムに関わり合おうとする前にスワブ取っ手20内からの分析液がスワブ頭24に進むことを防止するために使用される。スワブ頭24は、スワブ取っ手20の第二端30の近くに位置される。
サンプリング装置10のハウジング12は、サンプリング装置ギヤ17を含む。サンプリング装置ギヤ17は、サンプリングされるターゲット領域を(例えばcmで)集計するためにスワブ取っ手20の第一ギヤ32と係合されるときに回転する。いったんターゲット領域に到達すると、サンプリング装置10は、サンプリングが完了したことをユーザーに警告又は通知する。
サンプリング装置10中のサンプリング装置ギヤ17は、ターゲット表面領域からカウントダウンする。サンプリング装置ギヤ17は、各回転が進められる既知の領域に対応するように校正される。サンプリング装置ギヤ17は、いったんスワブ頭24がサンプリング装置10と係合したら係合される。サンプリング装置10とスワブ頭24の係合は、ルアーロック接続、ソケットタイプのジョイント中のローラーボールを利用するスナップオン接続、スリーブフィットなどの限定されない種々の機構によって行なわれることができる。
スワブ頭24は、旋回車又はボール機構32(図2に示されるスワブ頭24の内部又はその外部にある)と係合することによって回転する。スワブ頭24が回転すると、スワブ頭24に付けられているか又はスワブ頭24内で構築されたローラーボール又は旋回車又は他の機構32の回転が第二ギヤ34に係合し、第二ギヤ34を回転させる。第二ギヤ34が回転すると、スワブ取っ手20が回転し、第一ギヤ32がサンプリング装置ギヤ17と係合する。校正されたサンプリング装置ギヤ17が回転すると、ターゲット設定サンプル領域に到達するまで内部カウンター16が減少する。いったん設定サンプル領域に到達すると、ユーザーは、光又は音をもたらす電子信号、物理的機構、及びそれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない通知機構によって通知される。光又は音をもたらす電子信号では、カウンター16がいったん終了点に到達すると、これは、サンプリング装置10内の回路を完成させる導体と整列し、それと連動して電子信号が発信される。回路の完成は、LED光、スピーカー、又はそれらの組み合わせと連動する。バリヤー18に関して、いったんカウンター16が終了点に到達すると、カウンター16は、バリヤー18の背後にありかつバリヤー18を適所に保持する突起(accentuator)(図示せず)と連動する。バリヤー18は、弾性体圧縮、圧縮ばね、又はコイル状傾斜面による螺旋エスケープ機構によってサンプリング装置10と係合される。従って、突起の解放は、ばねなどの解放を起こし、従ってバリヤー18を強制落下させる。図11及び12は、サンプリング装置のためのリングの形態の物理的バリヤーの図である。いったんカウンター機構16が終了点に到達すると、バリヤー18が解放されて落下し、スワブ頭24をカバーし、サンプリングを中止する。バリヤー18は、表面からスワブ頭24をわずかに持ち上げ、サンプリングを中止することができる。新しいスワブが挿入されると、バリヤーはカウンター機構とともにリセットされる。バリヤー18は、プラスチック、金属、又はそれらの組み合わせから構成されることが好ましい。
スワブ頭24は、いったんスワブ取っ手20から分析液がスワブ頭24に導入されたら微生物を容易に除去するように設計される。これは、本発明に特有の方法によって達成されることができる。
スワブ頭24からの微生物の除去のための方法は、熱重合繊維のポリマーの熱分解プロファイルに合う温度で分析液中に導入されるときにのみ溶解するスワブ頭24のための熱重合繊維の使用である。
スワブ頭24からの微生物の除去のための方法は、バイオポリマーの酵素消化の活性に対して最適に配合される分析液中に位置されるバイオポリマーベースの繊維の利用である。バイオポリマーベースの繊維の限定されない例は、(a)Dispersin Bを含む分析液と対にされるポリサッカライドベースの繊維としてのポリ−N−アセチルグリコサミン;(b)セルラーゼと対にされるセルロースベースのポリサッカライド繊維;(c)繊維の迅速な溶解を起こすために適切なプロテイナーゼ又はプロテイナーゼの混合物と対にされる蛋白質繊維、但し、蛋白質繊維材料と対になる酵素の限定されない例は、プロテイナーゼK、トリプシン、キモトリプシンなどを含むが、これらに限定されない;(d)リボ核酸又はデオキシリボ核酸のいずれかである繊維の起源に依存してDNase又はRNaseと対にされる核酸ベースの繊維を含むが、これらに限定されない。
スワブ頭24から微生物を除去するための別の方法は、分析液内に配置された磁気ビーズの利用である。いったん分析液がスワブ頭24を通過すると、分析液中の磁気ビーズは、有機物の残骸に結合する。磁気ビーズは、微生物の細胞壁に対して親和性を有する分子で被覆されることができる。磁気ビーズは、商業的に入手可能であり、その供給源は、当業者には公知である。スワブ頭24が分析液で飽和された後、分析液は、収集室内の弱い磁界又は電界中に導入され、(有機材料に結合されていない)磁気ビーズは、スワブ頭24から分析液中に除去される。
さらに別の方法では、スワブ頭24は、スワブ頭24からの微生物の放出を起こすために十分な流体圧力を生成することができる規定された細孔サイズを有する材料から構成される。流体圧力は、いったんスワブ取っ手20とスワブ頭24の間のコネクター26によって形成された封止が破壊されると生成される。分析液は、スワブ取っ手20内の中空空間内にプランジャー又は滅菌空気の押し下げによってスワブ頭24の細孔を通して強制される。細孔の小さいサイズ(好ましくはサブマイクロメーターのオーダー)は、流体内で乱流及び圧力を起こし、それがスワブ頭24の上を通過するときに流体中にいかなる付着細胞も移動させる。スワブ頭24に及ぼされる圧力は、液体をスワブ頭24から外に出して収集室50中に強制する。
さらに別の方法では、スワブ頭24は、図3に示されるように、キャップ54の入口52の中に置かれる。入口52は、スワブ頭24より小さいオリフィス53を有する可撓性ポリマー材料から構成される。スワブ頭24に及ぼされる圧力は、それがオリフィス53を通過するときに液体/分析液がスワブ頭24から外に出て収集室50に入ることを強制する。
収集室
図4A及び4Bを参照すると、スワブ25は、(例えば上述の方法の一つによって)スワブ頭24から搾り出される液体/分析液が収集室50に収集されるためにキャップ54中に導入される。キャップ54は、スワブ頭24を含むスワブ25のためのカバーである。収集室50は、一つ以上の収集領域又は口を有することができる。収集室50は、キャップ54の一部である。図4Aに示されるように、収集室50がキャップ54の底部にあるとき、キャップは、重力及び毛管作用によって満たされる。収集室50はまた、図4Bに示されるようにキャップ54に沿って異なる位置で位置されることができる。もし異なる位置にあるなら、キャップ54は、収集室50の充填を容易にするように回転されることが必要であるだろう。
図5を参照すると、流体をサンプリングするための収集室50内の一つの収集流路又は口56があり、流体は、一つの口56中に流れる。図6では、収集室50は、一回で多数のサンプルを作ることができるマイクロ流体装置60を持つ。流体は、多数の流路又は口62を有するマイクロ流体装置60中に流れ、流体が収集される。収集室50は、スワブ頭24から受けた液体/分析液と流体連通している。収集室50は、金属、ポリマー、又は他の材料から構成され、光学的に透明であり、任意選択的に流体の流れを容易にするためにその上に付与された被覆を持つ。
従って、収集口は、毛管が漏れを防止するために光学的に透明なポリマー鞘で任意選択的にカバーされている簡単なガラス角型毛管の構成を持ってもよく、又は収集口は、光学的に透明なポリマー(例えばポリカーボネートがあるが、それに限定されない)から作られたマイクロ流体装置の構成を持ってもよい。マイクロ流体装置は、5〜10個の毛管を横切って同じ体積の分析溶液をサンプリングする。増大したサンプリング口は、増大した分析解像度及び感度を可能にする。
検出及び分析装置
図を参照すると、システム100は、検出及び分析装置70中への収集室50の挿入のための検出及び分析装置70を含む。検出及び分析装置70は、磁界又は電界72を含む。
本発明の方法によれば、ユーザーは、毛管を含む収集室50の一部を検出及び分析装置70中に挿入する。好ましい実施形態では、検出及び分析装置70は、自動サンプリング口の組み込みに依存して、一つ以上(例えば50個まで)の毛管を保持する。毛管は、いったん挿入されると、全てのサンプルに渡って均一な磁界又は電界72中に入る。代替的に、界72は、圧電電界、DC/AC電界、又はこれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない電界を組み込むことができる。ユーザーは、いったん全てのサンプルが挿入されたら、タイマーを開始させ、要求される分析時間の間、サンプルがそこに位置することを可能にする。要求される分析時間は、例えば数秒から20分までであることができる。いったんこの時間になると、ベルト(図示されず)がサンプルを検出及び分析装置70内の分析口76中に移動させる。もし一つのサンプルだけがある場合には、検出及び分析装置70は、例えば手持ち式のものであることができる。もし一つのサンプルだけがある場合には、検出及び分析装置70は、ベルトを含む必要はなく、サンプルは、磁界又は電界中に位置して、同じ場所で撮像される。サンプルは、ホログラフィ、当業者には公知の従来の顕微鏡技術、又はそれらの組み合わせを使用して撮像される。画像は、分析される。好ましくは、画像は、主に画素を計数して画素を細胞数に対応させるためのアルゴリズムを使用して分析される。かかるアルゴリズムの非限定的な例は、白黒画素に基づいて粒子を計数するアルゴリズム(例えば、http://imagej.net/Particle_Analysis#Automatic_Particle_countingを参照)である。代替的に、写真の代わりに、生きている微生物は、それらがセンサーを通過するときに計数されることができる。センサーは、IR又は光センサーのようなオクルージョンセンサー(occlusion sensor)であることができる。センサーはまた、動的光散乱、又は生きている微生物を計数するためのいずれかの他の形の光検出を利用することもできる。
レポート及び/又はグラフが、検出及び分析装置70内に収容されているか又は検出及び分析装置70と通信するコンピューターから作成される。レポートは、生きている微生物と生きていない微生物を区別する。ユーザーは、いかなる数の可能な方法によって生きている微生物の数を通知される。
一つのかかる方法では、もし生きている微生物の数が、ユーザーが設定した予め決定された閾値よりも高いのなら、ディスプレイスクリーン74は、例えば清浄化されることが必要である領域を示す視覚表示(例えば、赤色又は他の色)を与える。もし生きている微生物の数が、ユーザーが設定した予め決定された閾値よりも低いのなら、ディスプレイスクリーン74は、例えばサンプリングされた領域が関心外であることを示す別の視覚表示(例えば緑色又は他の色)を示す。
別の方法では、ディスプレイスクリーン74は、サンプリングされた表面積当たりの生きている微生物の数をユーザーに示す。
上述の方法の組み合わせも使用されることができる。この場合、ユーザーは、赤色又は緑色の通知を受け取り、一方、微生物の実際の数は、専門家によって評価されることができるデータベースに送信される。
上述のものは、方法の非限定的な例であり、いかなる数の通知方法も、使用されることができ、これらは本発明の範囲内であることが想定される。
図8は、本発明による方法の図である。図8に示されるように、方法は、一般的に、中に分析液を有するスワブ取っ手に接続されたスワブ頭を有するサンプリング装置で表面から微生物をサンプリングすること、但しスワブ頭は、上に微生物を有する表面と接触する(工程1);分析液をサンプリング装置のスワブ取っ手からスワブ頭に導入して、分析液でスワブ頭から微生物を除去して、分析液及び微生物を収集室に収集すること(工程2);分析液及び微生物を有する収集室を検出及び分析装置に挿入すること、但し検出及び分析装置は、磁界、電界、又は電子界、及び生きている微生物のレポートをコンピューターで作成するための読み取り器を有する(工程3)を含む。
それゆえ、本発明が広い有用性及び用途を受け入れる余地があることは、当業者によって容易に理解されるだろう。ここで記載したもの以外の本発明の多くの実施形態及び適応例、並びに多くの変形例、修正例、及び均等構成は、本発明の実体又は範囲から逸脱せずに、本発明及びその前述の記載から明らかであるか、又はそれによって当業者に合理的に示唆されるだろう。従って、本発明は、その好ましい実施形態に関してここで詳細に記載されたが、この開示が本発明の実例及び例示にすぎず、本発明の完全でかつ実現可能な開示を与える目的のためにのみなされていることが理解されるべきである。前述の開示は、本発明を制限したり、又はそうでなければ、かかる他の実施形態、適応例、変形例、修正例、及び均等構成を除外することが意図されていないし、そのように解釈されるべきでない。

Claims (40)

  1. 迅速微生物検出及び分析のためのシステムであって、システムが、
    サンプリング装置と、
    サンプリング装置に挿入するためのスワブであって、中に分析液を有するスワブ取っ手に接続されたスワブ頭を有するスワブと、
    収集室と、
    検出及び分析装置とを含み、
    サンプリング装置が、収集室、及び検出及び分析装置と流体連通しているシステム。
  2. サンプリング装置が、ハウジング、及びハウジングに取り付けられた又は接続された排出機構を含む、請求項1に記載のシステム。
  3. システムが、ハウジング内に収容されたカウンター機構、ハウジング内に収容されたサンプリング装置ギヤ、及びハウジングを包囲しかつサンプリング装置の垂直方向に移動可能な物理的バリヤーをさらに含む、請求項2に記載のシステム。
  4. 物理的バリヤーが、リングの形態である、請求項3に記載のシステム。
  5. スワブが、使い捨て可能である、請求項1に記載のシステム。
  6. スワブが、ハウジング内に挿入可能である、請求項2に記載のシステム。
  7. スワブが、排出機構によってハウジングから排出可能である、請求項2に記載のシステム。
  8. コネクターが、スワブ取っ手をスワブ頭に接続する、請求項1に記載のシステム。
  9. コネクターが、スワブ取っ手の内部にある、請求項8に記載のシステム。
  10. コネクターが、一方向弁、ポリマーシール、又はスワブ頭にスワブ取っ手を接続する代替的なシール材である、請求項8に記載のシステム。
  11. スワブ取っ手が、中空である、請求項1に記載のシステム。
  12. スワブ取っ手が、分析液を含む、請求項1に記載のシステム。
  13. スワブ取っ手が、スワブ取っ手の第一端の近くに第一ギヤを含み、スワブ取っ手の第二端の近くに第二ギヤを含む、請求項3に記載のシステム。
  14. サンプリング装置ギヤが、サンプリングされるターゲット領域を集計するためにスワブ取っ手の第一ギヤと係合されるときに回転する、請求項13に記載のシステム。
  15. サンプリング装置ギヤが、進められる既知の領域に対応する各回転で校正される、請求項3に記載のシステム。
  16. サンプリング装置ギヤが、サンプリング装置がスワブ頭と係合すると係合される、請求項3に記載のシステム。
  17. サンプリング装置とスワブ頭の係合が、ルアーロック接続、スナップオン接続、ソケットタイプのジョイント中のローラーボール、スリーブフィット、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される機構によってなされている、請求項16に記載のシステム。
  18. 光又は音をもたらす電子信号、物理的機構、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される通知機構をさらに含む、請求項1に記載のシステム。
  19. カウンター機構が、物理的バリヤーの背後の突起と係合し、それが、物理的バリヤーを適所に保持する、請求項3に記載のシステム。
  20. 物理的バリヤーが、弾性体圧縮、圧縮ばね、コイル状の傾斜面による螺旋エスケープ機構、及びそれらの組み合わせによってサンプリング装置と係合される、請求項3に記載のシステム。
  21. スワブ頭が、熱重合繊維、バイオポリマーベースの繊維、及びそれらの組み合わせからなる群から選択された繊維を含む、請求項1に記載のシステム。
  22. バイオポリマーベースの繊維が、ポリ−N−アセチルグルコサミン、ポリサッカライドベースの繊維、セルロースベースのポリサッカライド繊維、蛋白質繊維、核酸ベースの繊維、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項21に記載のシステム。
  23. 磁気ビーズが、分析液内に配置されている、請求項1に記載のシステム。
  24. スワブ頭が、サブマイクロメーターのオーダーの細孔サイズを有する材料から構成されている、請求項1に記載のシステム。
  25. 収集室が、少なくとも一つの収集領域又は口を有する、請求項1に記載のシステム。
  26. 収集室が、キャップの一部である、請求項1に記載のシステム。
  27. 収集室が、マイクロ流体デバイスを含む、請求項1に記載のシステム。
  28. 収集室が、光学的に透明である、請求項1に記載のシステム。
  29. 収集室が、その上に付与された被覆を有する、請求項1に記載のシステム。
  30. 収集室が、検出及び分析装置中に挿入可能である、請求項1に記載のシステム。
  31. 検出及び分析装置が、磁界、電界、電子界、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される界を含む、請求項1に記載のシステム。
  32. 検出及び分析装置が、分析口を含む、請求項1に記載のシステム。
  33. 検出及び分析装置が、手で保持されることができる、請求項1に記載のシステム。
  34. 検出及び分析装置が、サンプルを撮像するための機構を含む、請求項1に記載のシステム。
  35. 検出及び分析装置が、画素カウントアルゴリズムを含むか又はそれに対するアクセスを有する、請求項1に記載のシステム。
  36. 検出及び分析装置が、センサーを含む、請求項1に記載のシステム。
  37. 検出及び分析装置が、生きている微生物を測定するための読み取り室を含む、請求項1に記載のシステム。
  38. 検出及び分析装置が、微生物又はその非存在の視覚インディケーターを含む、請求項1に記載のシステム。
  39. 検出及び分析装置が、発色表示、磁気浮上、又はそれらの両方を含む、請求項1に記載のシステム。
  40. 迅速微生物検出及び分析のための方法であって、
    中に分析液を有するスワブ取っ手に接続されたスワブ頭を有するスワブが挿入されたサンプリング装置で表面から微生物をサンプリングすること、但しスワブ頭は、上に微生物を有する表面と接触する;
    分析液をサンプリング装置のスワブ取っ手からスワブ頭に導入すること;
    分析液でスワブ頭から微生物を除去すること;
    分析液及び微生物を収集室に収集すること;及び
    分析液及び微生物を有する収集室を検出及び分析装置に挿入すること、但し検出及び分析装置は、磁界、電界、又は電子界、及び生きている微生物を決定するための読み取り器を有する;
    を含む、方法。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114112919B (zh) * 2020-08-31 2024-04-05 深圳市帝迈生物技术有限公司 光学流动室组件、光学检测装置和样本分析设备
KR102630291B1 (ko) * 2023-07-05 2024-01-29 (주)경동이앤에스 공중부유균 자동 측정 장치 및 그의 측정 방법

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6002789A (en) * 1997-06-24 1999-12-14 Pilot Industries, Inc. Bacteria colony counter and classifier
JP2006502376A (ja) * 2001-12-06 2006-01-19 バイオコントロール システムズ,インコーポレイティド サンプル収集および試験システム
JP2010535346A (ja) * 2007-07-31 2010-11-18 マイクロニクス, インコーポレイテッド 衛生的スワブ採取システム、マイクロ流体アッセイデバイスおよび診断アッセイのための方法
US20110294199A1 (en) * 2010-05-25 2011-12-01 Bearinger Jane P Apparatus for point-of-care detection of nucleic acid in a sample

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5827675A (en) * 1995-07-12 1998-10-27 Charm Sciences, Inc. Test apparatus, system and method for the detection of test samples
US5983733A (en) * 1996-11-15 1999-11-16 Hamilton Company Manual pipette
WO2010039627A2 (en) * 2008-09-30 2010-04-08 3M Innovative Properties Company Biodetection articles
US9381000B2 (en) * 2013-03-15 2016-07-05 Kathleen Morsey Devices and methods for the detection of strep A
GB201315327D0 (en) * 2013-08-28 2013-10-09 Anmat Technology Ltd Apparatus for detecting an analyte using a fluid having magnetic particles with a binding ligand for binding the analyte
US11141951B2 (en) * 2015-02-24 2021-10-12 Porex Corporation Membrane-coated sintered porous media for sample collection

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6002789A (en) * 1997-06-24 1999-12-14 Pilot Industries, Inc. Bacteria colony counter and classifier
JP2006502376A (ja) * 2001-12-06 2006-01-19 バイオコントロール システムズ,インコーポレイティド サンプル収集および試験システム
JP2010535346A (ja) * 2007-07-31 2010-11-18 マイクロニクス, インコーポレイテッド 衛生的スワブ採取システム、マイクロ流体アッセイデバイスおよび診断アッセイのための方法
US20110294199A1 (en) * 2010-05-25 2011-12-01 Bearinger Jane P Apparatus for point-of-care detection of nucleic acid in a sample

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