JP2020508355A - 腫瘍成長を阻害し且つ腫瘍に対する免疫反応を増強するための方法及び組成物 - Google Patents

腫瘍成長を阻害し且つ腫瘍に対する免疫反応を増強するための方法及び組成物 Download PDF

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Abstract

本開示は、特にヒト対象において、抗体薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）を投与して特異的ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞を阻害したり又は死滅させたりすることにより癌の治療を増強するための方法及び組成物を提供する。ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞は、たとえば、スカベンジャーレセプターＣＤ２０４及びＣＤ１６３並びに／又はマンノースレセプター−１（ＣＤ２０６）の１つ以上の発現により同定される。

Description

本開示は、一般的には、腫瘍成長を阻害し且つ抗腫瘍免疫反応を促進するための方法及び組成物に関する。より具体的には、本開示は、宿主抗腫瘍反応に悪影響を及ぼす循環系及び腫瘍微小環境の細胞の活性及び／又は数を低減するための方法及び組成物に関する。
周辺部及び局所腫瘍微小環境で免疫細胞により組織化される複合プロセスにより、腫瘍成長が促進され、且つ腫瘍に対する治療的宿主細胞免疫反応が阻害される。腫瘍成長及びそれに対する抑制された免疫反応の根底にある細胞プロセスは複雑であり、循環単球及び腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）細胞をはじめとする各種の異なる細胞型が関与する。腫瘍の成長支援を妨害したり治療的免疫の抑制を低減又は予防したりすれば、腫瘍成長が阻害され、腫瘍に対する免疫反応を開始する宿主の能力が増強されるであろう。
そのため、より有効な癌療法の開発において、細胞及び機序を同定したりさらにはこうした作用の治療法を開発したりすることに大きな関心が寄せられている。
本開示は、特にヒト対象において、抗体薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）を投与して特異的ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞を阻害したり又は死滅させたりすることにより癌の治療を増強するための方法及び組成物を提供する。ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞は、スカベンジャーレセプターＣＤ２０４及びＣＤ１６３並びに／又はマンノースレセプター−１（ＣＤ２０６）の１つ以上の発現により同定される。ＣＤ２０４、ＣＤ１６３、及び／又はＣＤ２０６を発現する細胞は、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）で個別集団として共存する。たとえば、ＣＤ１６３は、Ｍ２単球／マクロファージ細胞に対するマーカである。
そのため、実施形態では、本開示は、少なくとも１つの細胞傷害剤にコンジュゲートされた少なくとも１つの抗体又はその抗原結合フラグメントを含む組成物を投与することを含む腫瘍成長の阻害方法を提供する。ただし、少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントは、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合する。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントは、リンカーにより少なくとも１つの細胞傷害剤にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ＩＧＦＲ−１に対するアンチセンスヌクレオチドをさらに含む。いくつかの実施形態では、腫瘍は、星状細胞腫や膠芽細胞腫などの神経膠腫である。実施形態では、組成物の投与は、腫瘍に対する免疫反応を増強し、且つ／又は腫瘍成長を阻害する。
実施形態では、本開示は、細胞傷害剤にコンジュゲートされた１つ以上の抗体又はその抗原結合フラグメントを含む組成物を提供する。ただし、抗体又は抗原結合フラグメントの少なくとも１つは、ＣＤ２０４又はＣＤ２０６に結合する。
実施形態では、本開示は、細胞傷害剤にコンジュゲートされた１つ以上の抗体又はその抗原結合フラグメントを含む組成物を提供する。ただし、少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントはＣＤ１６３に結合し、且つ細胞傷害剤はデキサメタゾンではない。
各種モノクローナル抗体ベースの癌療法ストラテジーが描かれている（ウェイナー（Ｗｅｉｎｅｒ）著、ネイチャー・レビューズ・キャンサー（Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ）、２０１５年から採用した）。本特許出願に特に関連するのは、抗体−薬剤コンジュゲート療法及び二重特異的抗体療法の模範的ストラテジーを示すｅ．及びｆである。本明細書に開示されるように、これらの方法のどちらかを用いてＭ２マクロファージを標的としうる。Ｍ２細胞は、多くの細胞表面スカベンジャーレセプターを発現し、且つこれらのスカベンジャーレセプターは、抗体−薬剤コンジュゲートにより標的とするのに理想的な候補である。たとえば、モノクローナル抗体を用いてＭ２細胞上のＣＤ１６３若しくはＣＤ２０４スカベンジャーレセプター又はマンノースレセプター−１（ＣＤ２０６）を標的とすることにより、Ｍ２細胞を選択的に低減及び／又は排除しうる。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞はＭ２細胞である。単球前駆体（Ｍ０）に由来するマクロファージは、古典的分極化（Ｍ１）単球／マクロファージと非古典的活性化（Ｍ２）単球／マクロファージとに特異的分化を受ける。Ｍ０からＭ２への分極化は、同一所有権者の米国特許出願公開第２０１７／００５６４３０号明細書（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に示されるように、さまざまな癌を有する患者の血清及び血清中エキソソームにより駆動可能である。ある特定の態様では、Ｍ２細胞は、限定されるものではないがＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ２３、ＣＤ６４、ＣＤ６８、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、ＣＤ２０６、及び／又は当該技術分野で広く知られる他のＭ２マクロファージマーカをはじめとする１つ以上の細胞表面マーカの発現により同定可能である。
癌は、Ｍ２単球／マクロファージになるようにナイーブミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞をプログラムすることにより、創傷治癒に専念する免疫系の基本的側面を取り込んできた。サイトカイン及びケモカインさらには腫瘍細胞が産生するエキソソームをはじめとする一連の因子を用いて、癌は、単球を循環系内にリクルートし、それをＭ２サブセットに向けて分極化し、次いで、Ｍ２単球を腫瘍微小環境内に引き込んでＴＡＭ化し、免疫攻撃から腫瘍を保護するとともにさらには実際に腫瘍成長を支援するように機能する。腫瘍微小環境内の高レベルのＣＤ１６３＋マクロファージは、多くの癌で独立した予後不良の変数であることが、広範にわたる文献から裏付けられる（以下の表１を参照されたい）。
本明細書には、末梢リンパ器官若しくは循環系に存在する又は腫瘍微小環境に位置する若しくはそれに影響を及ぼすミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞に結合する細胞傷害剤すなわち細胞毒素にコンジュゲートされた抗体及びそのフラグメントが開示される。細胞傷害剤は、ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞の阻害又は死滅、腫瘍患者における免疫系反応の脱抑制、及びこれらの細胞の産物により提供される腫瘍成長支援の除去を行う。ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞を標的とすることは、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、ＣＤ２０６などの細胞表面マーカに結合する抗体又はそのフラグメントを用いて達成される。ＣＤ１６３は、Ｍ２二極化状態になる際の細胞膜上の最も優勢な表面タンパク質であるが、ＣＤ１６３を伴うことなくＣＤ２０４又はＣＤ２０６を発現するいくつかのＴＡＭが存在する。
抗体−薬剤コンジュゲート
抗体療法は、癌、免疫学的障害、及び血管新生障害を有する患者の標的治療で確立されている（カーター，Ｐ．（Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．）著、２００６年、ネイチャー・レビューズ・イムノロジー（Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）、第６巻、ｐ．３４３〜３５７）。細胞傷害剤又は細胞静止剤、すなわち、癌の治療で腫瘍細胞を死滅又は阻害する薬剤を局所送達するための、抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）すなわちイムノコンジュゲートの使用は、腫瘍への薬剤部分の送達及びそこでの細胞内蓄積を目標としているが、これらの非コンジュゲート薬剤の全身投与は、正常細胞に対して許容できないレベルの毒性をもたらしうる（シエ（Ｘｉｅ）ら著、２００６年、エキスパート・オピニオン・オン・バイオロジカル・セラピー（Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．）、第６巻、第３号、ｐ．２８１〜２９１、コフツン（Ｋｏｖｔｕｎ）ら著、２００６年、キャンサー・リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、第６６巻、第６号、ｐ３２１４〜３１２１、ロー（Ｌａｗ）ら著、２００６年、キャンサー・リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、第６６巻、第４号、ｐ．２３２８〜２３３７、ウー（Ｗｕ）ら著、２００５年、ネイチャー・バイオテクノロジー（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．）、第２３巻、第９号、ｐ．１１３７〜１１４５、ランバート Ｊ．（Ｌａｍｂｅｒｔ Ｊ．）著、２００５年、カレント・オピニオン・イン・ファーマコロジー（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ．ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）、第５巻、ｐ．５４３〜５４９、ハーマン Ｐ．（Ｈａｍａｎｎ Ｐ．）著、２００５年、エキスパート・オピニオン・オン・セラピューティック・パテンツ（Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ）、第１５巻、第９号、ｐ．１０８７〜１１０３、ペイン Ｇ．（Ｐａｙｎｅ Ｇ．）、２００３年、キャンサー・セル（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ）、第３巻、ｐ．２０７〜２１２、トレイル（Ｔｒａｉｌ）ら著、２００３年、キャンサー・イムノロジー・イムノセラピー（Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．）、第５２巻、ｐ．３２８〜３３７、シリゴス（Ｓｙｒｉｇｏｓ）及びエペネトス（Ｅｐｅｎｅｔｏｓ）著、１９９９年、アンチキャンサー・リサーチ（Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第１９巻、ｐ．６０５〜６１４）。
本出願では、抗体−薬剤コンジュゲートの新規な使用が開示される。具体的には、ミエロイド／単球／マクロファージ系統の腫瘍促進細胞を標的としてそれらを阻害／死滅するための抗体−薬剤コンジュゲートの使用が記載されている。抗体−薬剤コンジュゲートは、ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞のほか腫瘍細胞を標的としても、しなくてもよい。
抗体−薬剤コンジュゲートは、最小の毒性で最大の有効性を提供する。ＡＤＣを設計及び改善する努力は、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）の選択性、さらには薬剤の作用機序、薬剤結合性、薬剤／抗体比（ロード率）、及び薬剤放出性に重点が置かれてきた（ジュヌツラ（Ｊｕｎｕｔｕｌａ）ら著、２００８ｂ年、ネイチャー・バイオテクノロジー（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．）、第２６巻、第８号、ｐ．９２５〜９３２、ドーナン（Ｄｏｒｎａｎ）ら著、２００９年、ブラッド（Ｂｌｏｏｄ）、第１１４巻、第１３号、ｐ．２７２１〜２７２９、米国特許第７，５２１，５４１号明細書、米国特許第７，７２３，４８５号明細書、国際公開第２００９／０５２２４９号パンフレット、マクドナー（ＭｃＤｏｎａｇｈ）著、２００６年、プロテイン・エンジニアリング・デザイン・アンド・セレクション（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓｉｇｎ ＆ Ｓｅｌ．）、第１９巻、第７号、ｐ．２９９〜３０７、ドロニナ（Ｄｏｒｏｎｉｎａ）ら著、２００６年、バイオコンジュゲート・ケミストリー（Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．）、第１７巻、ｐ．１１４〜１２４、エリクソン（Ｅｒｉｃｋｓｏｎ）ら著、２００６年、キャンサー・リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、第６６巻、第８号、ｐ．１〜８、サンダーソン（Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ）ら著、２００５年、クリニカル・キャンサー・リサーチ（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、第１１巻、ｐ．８４３〜８５２、ジェフリー（Ｊｅｆｆｒｅｙ）ら著、２００５年、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、第４８巻、ｐ．１３４４〜１３５８、ハンブレット（Ｈａｍｂｌｅｔｔ）ら著、２００４年、クリニカル・キャンサー・リサーチ（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、第１０巻、ｐ．７０６３〜７０７０）。薬剤部分は、チューブリン結合、ＤＮＡ結合、プロテアソーム、及び／又はトポイソメラーゼの阻害をはじめとする機序により、その細胞傷害作用及び細胞静止作用を付与しうる。いくつかの細胞傷害薬剤は、大きな抗体又はタンパク質レセプターリガンドにコンジュゲートされたときに不活性又はより低活性になる傾向がある。
本開示の抗体−薬剤コンジュゲートでは、細胞傷害剤と抗体（又は抗原結合フラグメント）との結合は、好ましくは細胞外で安定である。細胞内への輸送又は送達の前、抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）は、好ましくは、安定であり且つインタクトな状態を維持する。すなわち、抗体は、薬剤部分に結合された状態を維持する。リンカーは、標的細胞外では安定であり、細胞内ではある有効な速度で切断されうる。有効なリンカーは、次の通りであろう。すなわち、（ｉ）抗体の特異的結合性を維持し、（ｉｉ）コンジュゲート又は薬剤部分の細胞内送達を可能にし、（ｉｉｉ）安定且つインタクトな状態を維持し、すなわち、コンジュゲートがその標的部位に送達又は輸送されるまで切断されず、しかも（ｉｖ）薬剤部分の細胞傷害作用、細胞死滅作用、又は細胞静止作用を維持する。ＡＤＣの安定性は、質量分析、ＨＰＬＣ、分離／分析技術ＬＣ／ＭＳなどの標準的分析技術により測定しうる。
抗体
本明細書には、抗体薬剤コンジュゲートが開示される。ただし、抗体又はそのフラグメント（たとえば一本鎖可変フラグメントｓｃＦｖ）は、ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞の表面上の１つ以上の抗原、たとえば、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合する。かかる抗体又はフラグメントの組合せは、ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞を攻撃するように同一の組成物に含まれうる。特定の態様では、同一のタンパク質は、ＣＤ１６３、ＣＤ２０６、及びＣＤ２０４のいずれか２つに特異的な結合ドメインを含有しうる。そのため、たとえば、タンパク質は、ＣＤ１６３及びＣＤ２０４の両方に結合する二重特異的抗体でありうる。
ＣＤ１６３抗体又はフラグメントの結合ドメインの供給源としては、ＥＤＨｕ−１（バイオ・ラッド・アンタイボディーズ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ））、ＥＤ２（バイオ・ラッド・アンタイボディーズ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ））、１０Ｄ６（ノボカストラ（Ｎｏｖｏｃａｓｔｒａ））、ＧＨＩ／６１（ファーミンジェン（ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ）、アブカム（ＡｂＣａｍ））、５Ｃ６−ＦＡＴ（ＢＭＡ）、ＭＡＣ２−１５８（トリリウム（Ｔｒｉｌｌｉｕｍ））、ＳＰ９６（シグマ・アルドリッチ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ））、ＥＰＲ１９５１８（アブカム（ＡｂＣａｍ））、ＣＤ１６３ポリクローナルＧ−１７及びＣＤ１６３ポリクローナルＫ−１８（サンタ・クルーズ（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ））が挙げられる。
ＣＤ２０４抗体又はフラグメントの結合ドメインの供給源としては、ＡＢＦ１１４（ＥＭＤミリポア（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ））、ＭＣＡ１３２２（バイオ・ラッド（Ｂｉｏ−Ｒａｄ））、Ｍ２０４ＰＡ（サーモフィッシャー・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））、Ｊ５ＨＴＲ３（ｅバイオサイエンス（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ））、２Ｆ８（サーモフィッシャー・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））、ＣＡＣ−ＫＭＵ−ＭＡ０１（コスモバイオ（Ｃｏｓｍｏｂｉｏ））、及びＳＲＡ−Ｅ５（ＭＰバイオ（ＭＰＢｉｏ））が挙げられる。
ＣＤ２０６抗体又はフラグメントの結合ドメインの供給源としては、クローン１９．２（Ｃｌｏｎｅ １９．２）（サーモフィッシャー・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））、ｏｒｂ４９４１（ビオバイト（Ｂｉｏｒｂｙｔ））、１５−２（サーモフィッシャー・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））、ＭＲ５Ｄ３（サーモフィッシャー・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））、及び７−４５０（サーモフィッシャー・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））が挙げられる。
追加の抗体は、当技術分野で公知の従来法により産生しうる。
いくつかの実施形態では、抗体は、以下に記載のように改変された（又はさらに改変された）抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、本明細書に開示される抗体のヒト化型、脱免疫型、又はリサーフェイス型である。
用語
「抗体」という用語は、最広義に用いられ、具体的には、所望の生物学的活性、たとえば、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６への結合能を呈する限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ダイマー、マルチマー、多重特異的抗体（たとえば二重特異的抗体）、インタクト抗体、及び抗体フラグメントなどを包含する。抗体は、ネズミ、ヒト、ヒト化、キメラ、又は他の種に由来するものでありうる。抗体は、特異的抗原を認識してそれに結合可能な免疫系により生成されるタンパク質である。（ジェインウェイ，Ｃ．（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．）、トラバース，Ｐ．（Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．）、ウォルポート，Ｍ．（Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．）、シュロムチク（Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ）著、２００１年、免疫生物学（Ｉｍｍｕｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、第５版、ガーランド・パブリッシング（Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ）、ニューヨーク）。標的抗原は、一般に、複数の抗体上のＣＤＲにより認識される多くの結合部位（エピトープとも呼ばれる）を有する。異なるエピトープに特異的に結合する各抗体は、異なる構造を有する。そのため、１つの抗原が２つ以上の対応する抗体を有することもある。抗体は、全長イムノグロブリン分子又は全長イムノグロブリン分子の免疫学的活性部分、すなわち、目的標的の抗原又はその一部に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含有する分子を含み、かかる標的は、限定されるものではないが、自己免疫疾患に関連する自己免疫抗体を産生する一種又は複数種の癌細胞を含む。イムノグロブリンは、イムノグロブリン分子のいずれかのタイプ（たとえば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＩｇＡ）、クラス（たとえば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）若しくはサブクラス、又はアロタイプ（たとえば、ヒトＧ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３、非Ｇ１ｍ１［すなわち、Ｇ１ｍ１以外のいずれかのアロタイプ］Ｇ１ｍ１７、Ｇ２ｍ２３、Ｇ３ｍ２１、Ｇ３ｍ２８、Ｇ３ｍ１１、Ｇ３ｍ５、Ｇ３ｍ１３、Ｇ３ｍ１４、Ｇ３ｍ１０、Ｇ３ｍ１５、Ｇ３ｍ１６、Ｇ３ｍ６、Ｇ３ｍ２４、Ｇ３ｍ２６、Ｇ３ｍ２７、Ａ２ｍ１、Ａ２ｍ２、Ｋｍ１、Ｋｍ２、及びＫｍ３）でありうる。イムノグロブリンは、ヒト、ネズミ、又はウサギに由来するものを含めて、いずれかの種に由来しうる。
本明細書で用いられる場合、「ＣＤ１６３に結合する」、「ＣＤ２０４に結合する」、及び「ＣＤ２０６に結合する」ということは、抗体がウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、ジェンバンク（Ｇｅｎｂａｎｋ）アクセッション番号ＣＡＡ７６８４７、バージョン番号ＣＡＡ７６８４７．１ ＧＩ：３３３６８４２）などの非特異的パートナーよりも高い親和性でこれらの抗原に結合することを意味するように用いられる。いくつかの実施形態では、抗体は、生理学的条件で測定したとき、ＢＳＡに対する抗体の解離定数の少なくとも１／２、１／３、１／４、１／５、１／１０、１／２０、１／５０、１／１００、１／２００、１／５００、１／１０００、１／２０００、１／５０００、１／１０４、１／１０５、又は１／１０６以下の解離定数（Ｋｄ）でＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合する。本開示の抗体は、高親和性でＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合可能である。たとえば、いくつかの実施形態では、抗体は、約１０−６Ｍ以下、たとえば、１×１０−６、１０−７、１０−８、１０−９、１０−１０、１０−１１、１０−１２、１０−１３、又は１０−１４のＫｄでＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合可能である。
本明細書で用いられる場合、ＣＤ１６３とは、ＣＤ１６３遺伝子によりコードされる１３０ｋＤａタンパク質を意味する。ジェンバンク（ＧｅｎＢａｎｋ）アクセッション番号ＡＡＹ９９７６２．１を参照されたい。スカベンジャーレセプターシステインリッチ１型タンパク質Ｍ１３０としても知られるＣＤ１６３は、ヘモグロビン−ハプトグロビン複合体に対する及びハプトグロビン（低親和性を有する）の不在下でヘモグロビン単独に対する高親和性スカベンジャーレセプターである。このレセプターは、スカベンジャーレセプターシステインリッチファミリータイプＢに属し、１０４８アミノ酸残基細胞外ドメインと、単一膜貫通セグメントと、いくつかのスプライス変異体を有する細胞質内テールと、からなる。
本明細書で用いられる場合、ＣＤ２０４とは、マクロファージスカベンジャーレセプター１（ＭＳＲ１）又はスカベンジャーレセプターＡ（ＳＲ−Ａ）としても知られるタンパク質を意味する。ジェンバンク（ＧｅｎＢａｎｋ）アクセッション番号ＡＡＨ６３８７８．１を参照されたい。ＣＤ２０４は、脂質代謝、アテローム形成、及びいくつかの代謝プロセスで役割を果たすことが知られる。ＣＤ２０４はまた、炎症、先天性免疫、宿主防御、敗血症、心臓及び脳の虚血傷害、アルツハイマー病、ウイルスの認識及び取込み、骨代謝、並びに肺傷害で重要な役割を果たすことも知られる。
本明細書で用いられる場合、ＣＤ２０６とは、ＭＲＣ１遺伝子によりコードされるマクロファージマンノースレセプター１（ＭＭＲ）タンパク質を意味する。ユニプロット（ＵｎｉＰｒｏｔ）アクセッション番号Ｐ２２８９７を参照されたい。ＣＤ２０６は、マクロファージ及び未成熟樹状細胞の表面に主に存在するＣ型レクチンである。このレセプターは、いくつかの微生物の表面に見いだされるタンパク質に結合されたグリカンの末端のマンノース残基、Ｎ−アセチルグルコサミン残基、及びフコース残基を認識し、先天性免疫系及び適応免疫系の両方で役割を果たす。ＣＤ２０６の追加の機能としては、循環系からの糖タンパク質のクリアランスが挙げられる。ＣＤ２０６は、ヒトＭ２マクロファージの広く使用されるマーカであり、ヒト腫瘍のＴＡＭ上に発現される。ヒトマクロファージと卵巣癌細胞との共培養は、ＣＤ２０６発現の強力なアップレギュレーションを誘発し、乳癌にも関連付けられている。
「抗体フラグメント」は、全長抗体の一部、一般にその抗原結合領域又は可変領域を含む。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びｓｃＦｖフラグメント、ダイアボディー、線状抗体、Ｆａｂ発現ライブラリーにより産生されるフラグメント、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、ＣＤＲ（相補性決定領域）、及び癌細胞抗原、ウイルス抗原、又は微生物抗原に免疫特異的に結合する以上のいずれかのエピトープ結合フラグメント、一本鎖抗体分子、並びに抗体フラグメントから形成される多重特異的抗体が挙げられる。
本明細書で用いられる「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を意味する。すなわち、集団を構成する個別の抗体は、副次量で存在しうる天然に存在する可能性のある突然変異体以外は同一である。モノクローナル抗体は、単一抗原部位に対してきわめて特異的である。さらに、さまざまな決定基（エピトープ）に対してさまざまな抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一決定基に対するものである。特異性のほか、モノクローナル抗体は、他の抗体で汚染されることなく合成しうるという点で有利である。「モノクローナル」という修飾語は、抗体の実質的に均一な集団から得られる抗体の特性を意味し、いかなる特定の方法による抗体の産生も必要とみなすべきではない。たとえば、本開示に従って使用されるモノクローナル抗体は、コーラー（Ｋｏｈｌｅｒ）ら著、１９７５年、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、第２５６巻、ｐ．４９５に最初に記載されたハイブリドーマ法により作製しうるか、又は組換えＤＮＡ法により作製しうる（米国特許第４８１６５６７号明細書を参照されたい）。モノクローナル抗体はまた、クラックソン（Ｃｌａｃｋｓｏｎ）ら著、１９９１年、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、第３５２巻、ｐ．６２４〜６２８、マークス（Ｍａｒｋｓ）ら著、１９９１年、ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、第２２２巻、ｐ．５８１〜５９７に記載の技術を用いてファージ抗体ライブラリーから分離しうる、又は完全ヒトイムノグロブリン系を有するトランスジェニックマウスから分離しうる（ロンバーグ（Ｌｏｎｂｅｒｇ）著、２００８年、カレント・オピニオン（Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ）、第２０巻、第４号、ｐ．４５０〜４５９）。
本明細書のモノクローナル抗体は、具体的には、「キメラ」抗体を含む。この場合、重鎖及び／又は軽鎖の一部は、所望の生物学的活性を呈する限り、特定の種に由来するか又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一又は相同であり、一方、鎖の残りの部分は、他の種に由来するか又は他の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一又は相同である（米国特許第４８１６５６７号明細書、及びモリソン（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ）ら著、１９８４年、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）、第８１巻、ｐ．６８５１〜６８５５）。キメラ抗体は、非ヒト霊長動物（たとえば、キュウセカイザル又は類人猿）に由来する可変ドメイン抗原結合配列と、ヒト定常領域配列と、を含む「霊長動物化」抗体を含む。
本明細書の「インタクト抗体」は、ＶＬ及びＶＨドメインと、さらには軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）及び重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３と、を含むものである。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（たとえばヒト天然配列定常ドメイン）又はそのアミノ酸配列変異体でありうる。インタクト抗体は、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域又はアミノ酸配列変異体Ｆｃ領域）に起因する生物学的活性を意味する１つ以上の「エフェクター機能」を有しうる。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合性、補体依存細胞傷害性、Ｆｃレセプター結合性、抗体依存細胞媒介細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、食作用、及びＢ細胞レセプターやＢＣＲなどの細胞表面レセプターのダウンレギュレーションが挙げられる。
「軽鎖可変領域」（「軽鎖可変ドメイン」又は「ＶＬ」又はＶＬともいう）及び「重鎖可変領域」（「重鎖可変ドメイン」又は「ＶＨ」又はＶＨともいう）という用語は、それぞれ、抗体の軽鎖及び重鎖の可変結合性領域を意味する。可変結合領域は、「相補性決定領域」（ＣＤＲ）として知られる不連続の明確に規定されたサブ領域と、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と、で構成され、一般に、アミノ末端からカルボキシル末端の順にＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４を含む。いくつかの態様では、ＦＲはヒト化である。「ＣＬ」という用語は、「イムノグロブリン軽鎖定常領域」又は「軽鎖定常領域」、すなわち、抗体軽鎖の定常領域を意味する。「ＣＨ」という用語は、「イムノグロブリン重鎖定常領域」又は「重鎖定常領域」を意味する。「Ｆａｂ」（抗原結合フラグメント）は、抗原に結合する抗体の一部であり、鎖間ジスルフィド結合により軽鎖に結合された重鎖の可変領域及びＣＨ１ドメインを含む。
重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に依存して、インタクト抗体は、さまざまな「クラス」に割当て可能である。インタクト抗体には５つの主要クラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、このうちいくつかは、「サブクラス」（アイソタイプ）、たとえば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、及びＩｇＡ２にさらに分割しうる。異なるクラスの抗体に対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。異なるクラスのイムノグロブリンのサブユニット構造及び三次元配置は周知である。
本明細書で用いられる場合、「結合ドメイン」又は「結合領域」という用語は、標的分子（たとえば、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、ＣＤ２０６）を特異的に認識してそれに結合する能力を有する、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチド、若しくはペプチド、又は抗体、若しくは抗体に由来する結合ドメインのドメイン、領域、部分、又は部位を意味する。模範的結合ドメインは、単鎖抗体可変領域（たとえば、ドメイン抗体、ｓＦｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦａｂ、ナノボディー）を含む。ある特定の実施形態では、結合ドメインは、抗原結合部位（たとえば、可変重鎖配列と可変軽鎖配列とを含むか、又は代替フレームワーク領域（ＦＲ）（たとえば、１つ以上のアミノ酸置換を任意選択的に含むヒトＦＲ）内に配置された抗体の３つの軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）と３つの重鎖ＣＤＲとを含む）を含むか又はそれからなる。たとえば、結合ドメインは、抗体に由来しうる。たとえば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）、ナノボディーなど。
抗体の改変
本明細書に開示される抗体は改変しうる。たとえば、ヒト対象に対する免疫原性を低下させるために。これは、当業者の熟知するいくつかの技術のいずれかを用いて達成しうる。これらの技術のいくつかは、以下でより詳細に記載される。
ヒト化
非ヒト抗体又は抗体フラグメントのｉｎ ｖｉｖｏ免疫原性を低減する技術は、「ヒト化」と称されるものを含む。「ヒト化抗体」とは、ヒト抗体の改変可変領域部分を少なくとも含むポリペプチドを意味する。ただし、この可変領域部分、好ましくは、インタクトヒト可変ドメインよりも実質的に小さな部分は、非ヒト種の対応する配列により置換されており、且つこの改変可変領域は、他のタンパク質の少なくとも他の部分、好ましくはヒト抗体の定常領域に結合される。「ヒト化抗体」という表現は、１つ以上の相補性決定領域（「ＣＤＲ」）アミノ酸残基及び／又は１つ以上のフレームワーク領域（「ＦＷ」又は「ＦＲ」）アミノ酸残基が齧歯動物抗体又は他の非ヒト抗体のアナログ部位のアミノ酸残基により置換されたヒト抗体を含む。「ヒト化抗体」という表現はまた、ヒトイムノグロブリンのアミノ酸配列を実質的に有するＦＲと、非ヒトイムノグロブリンのアミノ酸配列を実質的に有するＣＤＲと、を含むイムノグロブリンアミノ酸配列変異体又はそのフラグメントを含む。
非ヒト（たとえばネズミ）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒトイムノグロブリンに由来する最小限の配列を含有するキメラ抗体である。又は、別の見方をすれば、ヒト化抗体は、ヒト配列の代わりに非ヒト（たとえばネズミ）抗体から選択された配列も含有するヒト抗体である。ヒト化抗体は、結合性及び／又は生物学的活性を有意に改変しない同一又は異なる種に由来する保存的アミノ酸置換又は非天然残基を含みうる。かかる抗体は、非ヒトイムノグロブリンに由来する最小限の配列を含有するキメラ抗体である。
「ＣＤＲ移植」、「ガイド選択」、「脱免疫化」、「リサーフェイシング」（「ベニヤリング」としても知られる）、「複合抗体」、「ヒトストリングコンテンツ最適化」、及びフレームワークシャフリングをはじめとする一連のヒト化技術が存在する。
ＣＤＲ移植（ＣＤＲ ｇｒａｆｔｉｎｇ）
この技術では、ヒト化抗体は、レシピエント抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）の残基が所望の性質を有するマウス、ラット、ラクダ、ウシ、ヤギ、ウサギなどの非ヒト種のＣＤＲ（ドナー抗体）の残基により置き換えられたヒトイムノグロブリン（レシピエント抗体）である。実際には、非ヒトＣＤＲは、ヒトフレームワークに「移植」される。いくつかの場合には、ヒトイムノグロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基により置き換えられる。このことは、たとえば、特定のＦＲ残基が抗原結合性に有意な影響を及ぼす場合に起こりうる。
さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも移入ＣＤＲ配列にも移入フレームワーク配列にも見いだされない残基を含みうる。こうした改変は、抗体性能をさらに改善又は最大化するために行われる。そのため、一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、一態様では２つの可変ドメインをすべて含むであろう。その場合、超可変ループはすべて又はすべて、非ヒトイムノグロブリンのものに対応し、且つＦＲ領域はすべて又は実質的にすべて、ヒトイムノグロブリン配列のものである。ヒト化抗体はまた、任意選択的に、イムノグロブリン定常領域（Ｆｃ）又はヒトイムノグロブリン定常領域の少なくとも一部分を含むであろう。
ガイド選択
この方法は、特定のエピトープに特異的な所与の非ヒト抗体のＶＨ又はＶＬドメインと、ヒトＶＨ又はＶＬライブラリーと、を組み合わせることからなり、特異的ヒトＶドメインは、目的抗原に対して選択される。次いで、この選択されたヒトＶＨは、ＶＬライブラリーと組み合わされて完全ヒトＶＨ×ＶＬ組合せを生成する。この方法は、ネイチャー・バイオテクノロジー（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）（Ｎ．Ｙ．）、第１２巻、１９９４年、ｐ．８９９〜９０３に記載されている。
複合抗体
この方法では、最終抗体分子内でヒト抗体のアミノ酸配列の２つ以上のセグメントが組み合わされる。それらは、最終複合抗体Ｖ領域でヒトＴ細胞エピトープを制限又は回避する組合せで複数のヒトＶＨ及びＶＬ配列セグメントを組み合わせることにより構築される。必要な場合には、Ｔ細胞エピトープは、Ｔ細胞エピトープに寄与する又はコードするＶ領域セグメントをＴ細胞エピトープを回避する代替セグメントと交換することにより、制限又は回避される。この方法は、米国特許出願公開第２００８／０２０６２３９Ａ１号明細書に記載されている。
脱免疫化
この方法は、治療用抗体（又は他の分子）のＶ領域からヒト（又は他の第２の種）Ｔ細胞エピトープを除去することを含む。治療用抗体Ｖ領域配列は、たとえば、ＭＨＣ結合モチーフのデータベース（たとえば、ｗｗｗ．ｗｅｈｉ．ｅｄｕ．ａｕでホストされる「モチーフ」データベース）と比較して、ＭＨＣクラスＩＩ結合モチーフの存在に関して解析される。代替的に、ＭＨＣクラスＩＩ結合モチーフは、アルツビア（Ａｌｔｕｖｉａ）らにより考案されたようなコンピュータスレッディング法を用いて同定しうる（ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、第２４９巻、ｐ．２４４〜２５０、１９９５年）。この方法では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質への結合エネルギーに関してＶ領域配列の逐次オーバーラップペプチドが試験される。次いで、このデータは、うまく提示されるペプチドに関連する他の配列特性、たとえば、両親媒性、ロスバードモチーフ、並びにカテプシンＢ及び他のプロセシング酵素の切断部位に関する情報と組み合わされる。
潜在的な第２の種（たとえばヒト）のＴ細胞エピトープが同定されたら、それは１つ以上のアミノ酸の改変により排除される。改変されるアミノ酸は、通常、Ｔ細胞エピトープそれ自体内に存在するが、タンパク質の一次構造又は二次構造に基づいてエピトープに隣接していてもよい（したがって、一次構造では隣接していなくてもよい）。最も典型的には、改変は置換を介するが、いくつかの状況では、アミノ酸の付加又は欠失がより適切であろう。
改変はすべて、部位指向突然変異誘発などの十分に確立された方法を用いて組換え宿主からの発現により最終抗体（又はそのフラグメント）を調製しうるように、組換えＤＮＡ技術により達成可能である。しかしながら、タンパク質化学又は分子改変のいずれかの他の手段の使用もまた可能である。
リサーフェイシング（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）
この方法は、
（ａ）非ヒト抗体可変領域の三次元モデルを構築することにより、非ヒト（たとえば齧歯動物）抗体（又はそのフラグメント）の可変領域のコンフォメーション構造を決定することと、
（ｂ）十分な数の非ヒト抗体の重鎖及び軽鎖の９８％でアライメント位置が同一である重鎖及び軽鎖のフレームワーク位置のセットを与えるように、十分な数の非ヒト抗体及びヒト抗体の可変領域の重鎖及び軽鎖のＸ線結晶構造から相対アクセス性分布を用いて配列アライメントを発生することと、
（ｃ）ヒト化される非ヒト抗体に対して、工程（ｂ）で発生したフレームワーク位置のセットを用いて重鎖及び軽鎖の表面露出アミノ酸残基のセットを規定することと、
（ｄ）ヒト抗体の重鎖及び軽鎖が天然で対になるか又はならない条件で、工程（ｃ）で規定された表面露出アミノ酸残基のセットに同一性が最も近い重鎖及び軽鎖の表面露出アミノ酸残基のセットをヒト抗体アミノ酸配列から同定することと、
（ｅ）ヒト化される非ヒト抗体のアミノ酸配列において、工程（ｃ）で規定された重鎖及び軽鎖の表面露出アミノ酸残基のセットを工程（ｄ）で同定された重鎖及び軽鎖の表面露出アミノ酸残基のセットで置換することと、
（ｆ）工程（ｅ）で特定された置換から得られる非ヒト抗体の可変領域の三次元モデルを構築することと、
（ｇ）工程（ａ）及び（ｆ）で構築された三次元モデルを比較することにより、ヒト化される非ヒト抗体の相補性決定領域のいずれかの残基のいずれかの原子から５オングストローム以内のいずれかのアミノ酸残基を工程（ｃ）又は（ｄ）で同定されたセットから同定することと、
（ｈ）工程（ｇ）で同定されたいずれかの残基をヒトアミノ酸残基から元の非ヒトアミノ酸残基に変化させることにより表面露出アミノ酸残基の非ヒト抗体ヒト化セットを規定することと、
を含む。ただし、工程（ａ）は、最初に行う必要はないが、工程（ｇ）の前に行われなければならない。
スーパーヒト化
この方法は、非ヒト配列と機能的ヒト生殖系遺伝子レパートリーとを比較する。非ヒト配列と同一又は関連性の高いカノニカル構造をコードするヒト遺伝子が選択される。ＣＤＲ内で最も高い相同性を有する選択されたヒト遺伝子は、ＦＲドナーとして選択される。最後に、こうしたヒトＦＲに非ヒトＣＤＲが移植される。この方法は、国際公開第２００５／０７９４７９Ａ２号パンフレットに記載されている。
ヒトストリングコンテンツ最適化
この方法は、非ヒト（たとえばマウス）配列とヒト生殖系遺伝子レパートリーとを比較し、その差は、潜在的ＭＨＣ／Ｔ細胞エピトープのレベルで配列を定量するヒトストリングコンテンツ（ＨＳＣ）としてスコア付けされる。次いで、標的配列は、グローバル同一性尺度を用いて複数のさまざまなヒト化変異体を生成するのではなくそのＨＳＣを最大化することによりヒト化される（モレキュラー・イムノロジー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）、第４４巻、２００７年、ｐ．１９８６〜１９９８に記載されている）。
フレームワークシャフリング
非ヒト抗体のＣＤＲは、すべての既知の重鎖及び軽鎖のヒト生殖系遺伝子フレームワークを包含するｃＤＮＡプールにインフレームで融合される。次いで、ヒト化抗体は、たとえば、ファージディスプレイ抗体ライブラリーのパニングにより選択される。これは、メソッズ（Ｍｅｔｈｏｄｓ）、第３６巻、２００５年、ｐ．４３〜６０に記載されている。
細胞傷害剤
抗体又はその抗原フラグメントにコンジュゲート可能な薬剤は、細胞傷害剤を含む。細胞傷害剤は、たとえば、低分子薬剤、タンパク質、核酸などでありうる。「低分子薬剤」という用語は、本明細書では、たとえば１００〜１８００、より好適には１２０〜１４００の分子量を有しうる有機、無機、又は有機金属の化合物を意味するものとして広義に用いられる。低分子薬剤は、当技術分野で、たとえば、特に国際公開第０５０５８３６７Ａ２号パンフレット及び米国特許第４，９５６，３０３号明細書で、十分に特徴付けられており、それらの全体が参照により組み込まれる。薬剤は、公知の薬剤及び公知の薬剤となりうるものを含む。
いくつかの実施形態では、抗体又はその抗原フラグメントにコンジュゲートされる細胞傷害剤は、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＤＢ）又はそのダイマーを含む。アントノフ（Ａｎｔｏｎｏｗ）ら著、２０１１年、「ＤＮＡ相互作用ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）の合成」（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ＤＮＡ−ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ ｐｙｒｒｏｌｏ［２，１−ｃ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅｓ（ＰＢＤｓ））、ケミカル・レビューズ（Ｃｈｅｍ Ｒｅｖ）、第１１１巻、ｐ．２８１５〜２８６４、チポラ（Ｃｉｐｏｌｌａ）ら著、２００９年、「抗腫瘍薬剤の設計及び合成のためのスキャフォールドとしてのピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン」（Ｐｙｒｒｏｌｏ［２，１−ｃ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ ａｓ ａ ｓｃａｆｆｏｌｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒ ｄｒｕｇｓ）、アンチキャンサー・エイジェンツ・メディカル・ケミストリー（Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｇｅｎｔｓ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ）、第９巻、ｐ．１〜３１、ジェルラターナ（Ｇｅｒｒａｔａｎａ）ら著、「ピロロベンゾジアゼピンの生合成、合成、及び生物学的活性」（Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｙｒｒｏｌｏｂｅｎｏｄｉａｚｅｐｉｎｅｓ）、メディカル・リサーチ・レビューズ（Ｍｅｄ Ｒｅｓ Ｒｅｖ）、第３２巻、ｐ．２５４〜２９３、２０１２年、リー（Ｌｉ）ら著、「強力な抗腫瘍抗生物質シビロマイシンの生合成」（Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｓｉｂｉｒｏｍｙｃｉｎ，ａ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ）、アプライド・アンド・エンバイロンメンタル・マイクロバイオロジー（Ａｐｐｌ Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．）、２００９年５月、第７５巻、第９号、ｐ．２８６９〜７８（それらは各々その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。いくつかのＰＤＢは、ＤＮＡの特異的配列を認識して結合する能力を有する。好ましい配列はＰｕＧＰｕである。ＰＢＤは一般構造：
を有する。それらは、それらの芳香Ａ環及びピロロＣ環の両方の置換基の数、タイプ、及び位置並びにＣ環の飽和度が異なる。Ｂ環には、ＤＮＡのアルキル化に関与する求電子中心のＮ１０−Ｃ１１位にイミン（Ｎ＝Ｃ）、カルビノールアミン（ＮＨ−ＣＨ（ＯＨ））、又はカルビノールアミンメチルエーテル（ＮＨ−ＣＨ（ＯＭｅ））のどれかが存在する。公知の天然産物はすべて、Ｃ環からＡ環を見たときに右回りのツイストを提供する（Ｓ）配置をキラルＣ１１ａ位に有する。このため、それらは、Ｂ型ＤＮＡの副溝と等螺旋性の適切な三次元形状となり、結合部位にスナッグ嵌合をもたらす（コーン（Ｋｏｈｎ）著、「抗生物質ＩＩＩ」（Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ＩＩＩ）、シュプリンガー・フェアラーク（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ）、ニューヨーク、ｐ．３〜１１、１９７５年、ハーレイ（Ｈｕｒｌｅｙ）及びニードハム−バンデバンター（Ｎｅｅｄｈａｍ−ＶａｎＤｅｖａｎｔｅｒ）著、アカウンツ・オブ・ケミカル・リサーチ（Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．）、第１９巻、ｐ．２３０〜２３７、１９８６年）。副溝に付加物を形成するそれらの能力によりＤＮＡプロセシングを妨害しうるので、それらを抗腫瘍剤として使用しうる。
特に有利なピロロベンゾジアゼピン化合物は、化合物１としてグレグソン（Ｇｒｅｇｓｏｎ）ら（ケミカル・コミュニケーションズ（Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．）、１９９９年、ｐ．７９７〜７９８）により及び化合物４ａとしてグレグソン（Ｇｒｅｇｓｏｎ）ら（ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、２００１年、第４４巻、ｐ．１１６１〜１１７４）により記載されている。この化合物は、ＳＧ２０００としても知られ、以下：
で示される。国際公開第２００７／０８５９３０号パンフレットには、抗体などの細胞結合剤に接続するためのリンカー基を有するダイマーＰＢＤ化合物の調製が記載されている。リンカーは、ダイマーのモノマーＰＢＤ単位を結合するブリッジに存在する。
本明細書に記載のコンジュゲートで使用するのに適した他のＰＤＢ化合物としては、以下：
本明細書ではＲｅｌＡという化合物：
本明細書ではＲｅｌＢという化合物：
本明細書ではＲｅｌＣという化合物：
本明細書ではＲｅｌＤという化合物：
本明細書ではＲｅｌＥという化合物：
が挙げられる。
いくつかの実施形態では、抗体又はその抗原結合フラグメントにコンジュゲートされる細胞傷害剤は、メルタンシン（ＤＭ１及びその形態のいくつかはエムタンシンとも呼ばれる）又は他のメイタンシノイド（たとえば、ＤＭ２、ＤＭ３、ＤＭ４、メイタンシノール、マイタンシン、若しくはアンサミトシン）であるか又はそれらを含む。
いくつかの実施形態では、抗体又はその抗原結合フラグメントにコンジュゲートされる細胞傷害剤は、以下の非排他的リストの作用剤の１つ以上であるか又はそれらを含む。
化学療法剤：ａ）．アルキル化剤：たとえば、ナイトロジェンマスタード、クロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドハイドロクロライド、マンノムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、マイトラクトール、ピポブロマン、ノボエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、チオテパ、トロホスファミド、ウラシルマスタード、ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成アナログを含む）、デュオカルマイシン（合成アナログＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）、ベンゾジアゼピンダイマー（たとえば、トマイマイシン、インドリノベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン、イミダゾベンゾチアジアゼピン、又はオキサゾリジノベンゾジアゼピン）、ニトロソウレア：（カルムスチン、ロムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ニムスチン、ラニムスチン）、アルキルスルホネート：（ブスルファン、トレオスルファン、イムプロスルファン、及びピポスルファン）、トリアゼン：（ダカルバジン）、白金含有化合物：（カルボプラチン、シスプラチン、オキサリプラチン）、アジリジン、たとえば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ、エチレンイミン及びメチルメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド（ｔｒｉｅｔｙｌｅｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリエチレンチオホスホルアミド（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈａｏｒａｍｉｄｅ）、及びトリメチロールメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅｌ）を含む）、ｂ）．植物アルカロイド：たとえば、ビンカアルカロイド：（ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ナベルビン）、タキソイド：（パクリタキセル、ドセタキソール）及びそれらのアナログ、クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）、エポチロン、エレウテロビン、ジスコデルモリド、ブリオスタチン、ドロスタチン、アウリスタチン、ツブリシン、セファロスタチン、パンクラチスタチン、サルコジクチイン、スポンギスタチン、ｃ）．ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤：たとえば、［エピポドフィロトキシン：（９−アミノカンプトテシン、カンプトテシン、クリスナトール、ダウノマイシン、エトポシド、リン酸エトポシド、イリノテカン、マイトキサントロン、ノバントロン、レチノイン酸（レチノール）、テニポシド、トポテカン、９−ニトロカンプトテシン（ＲＦＳ２０００））、マイトマイシン：（マイトマイシンＣ）］、ｄ）．抗代謝物：たとえば｛［抗葉酸剤：ＤＨＦＲ阻害剤：（メトトレキセート、トリメトレキセート、デノプテリン、プテロプテリン、アミノプテリン（４−アミノプテロイン酸）、又は他の葉酸アナログ）、ＩＭＰデヒドロゲナーゼ阻害剤：（ミコフェノール酸、チアゾフリン、リバビリン、ＥＩＣＡＲ）、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤：（ヒドロキシウレア、デフェロキサミン）］、［ピリミジンアナログ：ウラシルアナログ：（アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カペシタビン（ゼローダ（Ｘｅｌｏｄａ））、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、５−フルオロウラシル、フロクスウリジン、ラルチトレキセド（ｒａｔｉｔｒｅｘｅｄ）（トムデックス（Ｔｏｍｕｄｅｘ）））、シトシンアナログ：（シタラビン、シトシンアラビノシド、フルダラビン）プリンアナログ：（アザチオプリン、フルダラビン、メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン）］、葉酸リプレニッシャー、たとえば、フロリン酸｝、ｅ）．ホルモン療法剤：たとえば｛レセプターアンタゴニスト：［抗エストロゲン剤：（メゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェン）、ＬＨＲＨアゴニスト：（ゴセレリン（ｇｏｓｃｒｃｌｉｎ）、酢酸ロイプロリド）、抗アンドロゲン剤：（ビカルタミド、フルタミド、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、ゴセレリン、ロイプロリド、メピチオスタン、ニルタミド、テストラクトン、トリロスタン、及び他のアンドロゲン阻害剤）］、レチノイド／デルトイド：［ビタミンＤ３アナログ：（ＣＢ１０９３、ＥＢ１０８９、ＫＨ１０６０、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロール）、フォトダイナミック療法剤：（ベルテポルフィン、フタロシアニン、光増感剤Ｐｃ４、デメトキシ−ヒポクレリンＡ）、サイトカイン：（インターフェロンα、インターフェロンγ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、ＴＮＦドメイン含有ヒトタンパク質）］｝、ｆ）．キナーゼ阻害剤、たとえば、ＢＩＢＷ２９９２（抗ＥＧＦＲ／Ｅｒｂ２剤）、イマチニブ、ゲフィチニブ、ペガプタニブ、ソラフェニブ、ダサチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、ニロチニブ、ラパチニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、バンデタニブ、Ｅ７０８０（抗ＶＥＧＦＲ２剤）、ムブリチニブ、ポナチニブ（ＡＰ２４５３４）、バフェチニブ（ＩＮＮＯ−４０６）、ボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）、カボザンチニブ、ビスモデギブ、イニパリブ、ルキソリチニブ、ＣＹＴ３８７、アキシチニブ、チボザニブ、ソラフェニブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、ラニビズマブ、パニツムマブ、イスピネシブ、ｇ）．抗生物質、たとえば、エンジイン抗生物質（たとえば、カリケアマイシン、とりわけ、カリケアマイシンγ１、δ１、α１、及びβ１（たとえば、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、第３９巻、第１１号、ｐ．２１０３〜２１１７、１９９６年、アンゲバンテ・ヘミー・インターナショナル・エディション・イン・イングリッシュ（Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．）、第３３巻、ｐ．１８３〜１８６、１９９４年を参照されたい）、ダイネマイシン（ダイネマイシンＡ及びデオキシダイネマイシンを含む）、エスペラマイシン、ケダルシジン、Ｃ−１０２７、マデュロペプチン、さらにはネオカルジノスタチンクロモフォア、及び関連クロモタンパク質エンジイン抗生物質クロモフォア（ａｎｔｉｏｂｉｏｔｉｃ ｃｈｒｏｍｏｍｏｐｈｏｒｅｓ））、アクラシノマイシン（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎｓ）、アクチノマイシン、アントラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシノン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン（ｎｉｔｏｍｙｃｉｎｓ）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン、ｆ）．その他：たとえば、ポリケチド（アセトゲニン）、とりわけブラタシン及びブラタシノン、ゲムシタビン、エポキソミシン（たとえばカルフィルゾミブ）、ボルテゾミブ、サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、トセドスタット、ザイブレスタット、ＰＬＸ４０３２、ＳＴＡ−９０９０、スティムバックス（Ｓｔｉｍｕｖａｘ）、アロベクチン−７、Ｘゲバ（Ｘｅｇｅｖａ）、プロベンジ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ）、ヤーボイ（Ｙｅｒｖｏｙ）、イソプレニル化阻害剤（たとえばロバスタチン）、ドーパミン作動性ニューロトキシン（たとえば１−メチル−４−フェニルピリジニウムイオン）、細胞周期阻害剤（たとえばスタウロスポリン）、アクチノマイシン（たとえば、アクチノマイシンＤ、ダクチノマイシン）、ブレオマイシン（たとえば、ブレオマイシンＡ２、ブレオマイシンＢ２、ペプロマイシン）、アントラサイクリン（たとえば、ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、イダルビシン、エピルビシン、ピラルビシン、ゾルビシン、マイトキサントロン（ｍｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、ＭＤＲ阻害剤（たとえばベラパミル）、Ｃａ２＋ＡＴＰアーゼ阻害剤（たとえばタプシガルジン）、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）、ベリノスタット、ＰＣＩ−２４７８１、エンチノスタット、ＳＢ９３９、レスミノスタット、ギビノスタット、ＡＲ−４２、ＣＵＤＣ−１０１、スルフォラファン、トリコスタチンＡ）、タプシガルジン、セレコキシブ、グリタゾン、エピガロカテキンガレート、ジスルフィラム、サリノスポラミドＡ、抗副腎剤、たとえば、アミノグルテチミド、マイトタン、トリロスタン、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、アムサクリン、アラビノシド、ベストラブシル、ビサントレン、エダトラキセート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジクオン、エフロルニチン（ＤＦＭＯ）、エルフォミチン、エリプチニウムアセテート、エトグルシド、硝酸ガリウム、ガシトシン、ヒドロキシウレア、イバンドロネート、レンチナン、ロニダミン、マイトグアゾン、マイトキサントロン、モピダモール、ニトラクリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ポドフィリン酸、２−エチルヒドラジド、プロカルバジン、ＰＳＫ（登録商標）、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン、トリコテセン（とりわけ、Ｔ−２トキシン、ベルカリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）、ウレタン、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス薬剤、及び核酸分解酵素。
抗自己免疫疾患剤：シクロスポリン、シクロスポリンＡ、アミノカプロン酸、アザチオプリン、ブロモクリプチン、クロラムブシル、クロロキン、シクロホスファミド、コルチコステロイド（たとえば、アムシノニド、ベタメタゾン、ブデソニド、ヒドロコルチゾン、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、フルオロコルトロン、ダナゾール、デキサメタゾン、トリアムシノロンアセトニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾン）、ＤＨＥＡ、エタネルセプト（ｅｎａｎｅｒｃｅｐｔ）、ヒドロキシクロロキン、インフリキシマブ、メロキシカム、メトトレキセート、モフェチル、ミコフェノレート（ｍｙｃｏｐｈｅｎｙｌａｔｅ）、プレドニゾン、シロリムス、タクロリムス。
抗感染症剤：ａ）．アミノグリコシド：アミカシン、アストロマイシン、ゲンタマイシン（ネチルマイシン、シソマイシン、イセパマイシン）、ハイグロマイシンＢ及びカナマイシン（アミカシン、アルベカシン、ベカナマイシン、ジベカシン、トブラマイシン）、ネオマイシン（フラマイセチン、パロモマイシン、リボスタマイシン）、ネチルマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ベルダマイシン、ｂ）．アンフェニコール：アジダンフェニコール、クロラムフェニコール、フロルフェニコール、チアンフェニコール、ｃ）．アンサマイシン：ゲルダナマイシン、ハービマイシン、ｄ）．カルバペネム：ビアペネム、ドリペネム、エルタペネム、イミペネム／シラスタチン、メロペネム、パニペネム、ｅ）．セフェム：カルバセフェム（ロラカルベフ）、セファセトリル、セファクロール、セフラジン、セファドロキシル、セファロニウム、セファロリジン、セファロチン（ｃｅｆａｌｏｔｉｎ ｏｒ ｃｅｆａｌｏｔｈｉｎ）、セファレキシン、セファログリシン、セファマンドール、セファピリン、セファトリジン、セファザフルール、セファゼドン、セファゾリン、セフブペラゾン、セフカペン、セフダロキシム、セフェピム、セフミノクス、セフォキシチン、セフプロジル、セフロキサジン、セフテゾール、セフロキシム、セフィキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェピム、セフェタメト、セフメノキシム、セフォジジム、セフォニシド、セフォペラゾン、セフォラニド、セフォゾプラン、セファレキシン、セフピミゾール、セフピラミド、セフピロム、セフポドキシム、セフプロジル、セフキノム、セフスロジン、セフタジジム、セフテラム、セフチブテン、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトビプロール、セフトリアキソン、セフロキシム、セフゾナム、セファマイシン（セフォキシチン、セフォテタン、セフメタゾール）、オキサセフェム（フロモキセフ、ラタモキセフ）、ｆ）．グリコペプチド：ブレオマイシン、バンコマイシン（オリタバンシン、テラバンシン）、テイコプラニン（ダルババンシン）、ラモプラニン、ｇ）．グリシルサイクリン：たとえば、チゲサイクリン、ｇ）．β−ラクタマーゼ阻害剤：ペナム（スルバクタム、タゾバクタム）、クラバム（クラブラン酸）、ｉ）．リンコサミド：クリンダマイシン、リンコマイシン、ｊ）．リポペプチド：ダプトマイシン、Ａ５４１４５、カルシウム依存抗生物質（ＣＤＡ）、ｋ）．マクロライド：アジスロマイシン、セスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、フルリスロマイシン、ジョサマイシン、ケトライド（テリトロマイシン、セスロマイシン）、ミデカマイシン、ミオカマイシン、オレアンドマイシン、リファマイシン（リファンピシン、リファンピン、リファブチン、リファペンチン）、ロキタマイシン、ロキシスロマイシン、スペクチノマイシン、スピラマイシン、タクロリムス（ＦＫ５０６）、トロレアンドマイシン、テリトロマイシン、ｌ）．モノバクタム：アズトレオナム、チゲモナム、ｍ）．オキサゾリジノン：リネゾリド、ｎ）．ペニシリン：アモキシリン、アンピシリン（ピバンピシリン、ヘタシリン、バカンピシリン、メタンピシリン、タランピシリン）、アジドシリン、アズロシリン、ベンジルペニシリン、ベンザチンベンジルペニシリン、ベンザチンフェノキシメチル−ペニシリン、クロメトシリン、プロカインベンジルペニシリン、カルベニシリン（カリンダシリン）、クロキサシリン、ジクロキサシリン、エピシリン、フルクロキサシリン、メシリナム（ピブメシリナム）、メズロシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、ペナメシリン、ペニシリン、フェネチシリン、フェノキシメチルペニシリン、ピペラシリン、プロピシリン、スルベニシリン、テモシリン、チカルシリン、ｏ）．ポリペプチド：バシトラシン、コリスチン、ポリミキシンＢ、ｐ）．キノロン：アラトロフロキサシン、バロフロキサシン、シプロフロキサシン、クリナフロキサシン、ダノフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、エンロフロキサシン、フロキシン、ガレノキサシン、ガチフロキサシン、ゲミフロキサシン、グレパフロキサシン、カノトロバフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、マルボフロキサシン、モキシフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オルビフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、シタフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、トスフロキサシン、トロバフロキサシン、ｑ）．ストレプトグラミン：プリスチナマイシン、キヌプリスチン／ダルホプリスチン、ｒ）．スルホンアミド：マフェニド、プロントシル、スルファセタミド、スルファメチゾール、スルファニルイミド、スルファサラジン、スルフィソキサゾール、トリメトプリム、トリメトプリム−スルファメトキサゾール（コトリモキサゾール）、ｓ）．ステロイド抗細菌剤：たとえば、フシジン酸、ｔ）．テトラサイクリン：ドキシサイクリン、クロルテトラサイクリン、クロモサイクリン、デメクロサイクリン、リメサイクリン、メクロサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、ペニメピサイクリン、ロリテトラサイクリン、テトラサイクリン、グリシルサイクリン（たとえばチゲサイクリン）、ｕ）．他のタイプの抗生物質：アンノナシン、アルスフェナミン、バクトプレノール阻害剤（バシトラシン）、ＤＡＤＡＬ／ＡＲ阻害剤（シクロセリン）、ジクチオスタチン、ジスコデルモリド、エレウテロビン、エポチロン、エタンブトール、エトポシド、ファロペネム、フシジン酸、フラゾリドン、イソニアジド、ラウリマライド、メトロニダゾール、ムピロシン、マイコラクトン、ＮＡＭ合成阻害剤（たとえばホスホマイシン）、ニトロフラントイン、パクリタキセル、プラテンシマイシン、ピラジナミド、キヌプリスチン／ダルホプリスチン、リファンピシン（リファンピン）、タゾバクタム、チニダゾール、ウバリシン。
抗ウイルス薬剤：ａ）．侵入／融合阻害剤：アプラビロク、マラビロク、ビクリビロク、ｇｐ４１（エンフビルチド）、ＰＲＯ１４０、ＣＤ４（イバリズマブ）、ｂ）．インテグラーゼ阻害剤：ラルテグラビル、エルビテグラビル、グロボイドナンＡ、ｃ）．成熟阻害剤：ベビリマト、ビベコン、ｄ）．ノイラミニダーゼ阻害剤：オセルタミビル、ザナミビル、ペラミビル、ｅ）．ヌクレオシド及びヌクレオチド：アバカビル、アシクロビル、アデフォビル、アムドキソビル、アプリシタビン、ブリブジン、シドフォビル、クレブジン、デキセルブシタビン、ジダノシン（ｄｄＩ）、エルブシタビン、エムトリシタビン（ＦＴＣ）、エンテカビル、ファムシクロビル、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、３’−フルオロ置換２’，３’−ジデオキシヌクレオシドアナログ（たとえば、３’−フルオロ−２’，３’−ジデオキシチミジン（ＦＬＴ）及び３’−フルオロ−２’，３’−ジデオキシグアノシン（ＦＬＧ））、ホミビルセン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、ラミブジン（３ＴＣ）、１−ヌクレオシド（たとえば、β−１−チミジン及びβ−１−２’−デオキシシチジン）、ペンシクロビル、ラシビル、リバビリン、スタンピジン、スタブジン（ｄ４Ｔ）、タリバビリン（ビラミジン）、テルビブジン、テノホビル、トリフルリジン、バラシクロビル、バルガンシクロビル、ザルシタビン（ｄｄＣ）、ジドブジン（ＡＺＴ）、ｆ）．非ヌクレオシド：アマンタジン（アテビリジン）、カプラビリン、ジアリールピリミジン（エトラビリン、リルピビリン）、デラビルジン、ドコサノール、エミビリン、エファビレンツ、ホスカルネット（ホスホノギ酸）、イミキモド、インターフェロンα、ロビリド、ロデノシン、メチサゾン、ネビラピン、ＮＯＶ−２０５、ペグインターフェロンα、ポドフィロトキシン、リファンピシン、リマンタジン、レシキモド（Ｒ−８４８）、トロマンタジン、ｇ）．プロテアーゼ阻害剤：アンプレナビル、アタザナビル、ボセプレビル、ダルナビル、フォサムプレナビル、インジナビル、ロピナビル、ネルフィナビル、プレコナリル、リトナビル、サキナビル、テラプレビル（ＶＸ−９５０）、チプラナビル、ｈ）．他のタイプの抗ウイルス薬剤：アブザイム、アルビドール、カラノリドａ、セラゲニン、シアノビリン−ｎ、ジアリールピリミジン、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）、ホスカルネット、グリフィスシン、タリバビリン（ビラミジン）、ヒドロキシウレア、ＫＰ−１４６１、ミルテホシン、プレコナリル、ポートマントー阻害剤、リバビリン、セリシクリブ。
放射性同位体：３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ、３２Ｐ、３５Ｓ、６４Ｃｕ、６８Ｇａ、８６Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１３３Ｘｅ、１７７Ｌｕ、２１１Ａｔ、又は２１３Ｂｉ。放射性同位体標識抗体は、レセプター標的イメージング実験に役立つか、又は本開示の抗体−薬剤コンジュゲートを用いるなどの標的治療用でありうる（ウー（Ｗｕ）ら著、２００５年、ネイチャー・バイオテクノロジー（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、第２３巻、第９号、ｐ．１１３７〜１１４６）。細胞結合分子たとえば抗体は、カレント・プロトコルズ・イン・イムノロジー（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）、第１巻及び第２巻、コリゲン（Ｃｏｌｉｇｅｎ）ら編、ワイリー・インターサイエンス（Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）、ニューヨーク、Ｎ．Ｙ．、１９９１年刊に記載の技術を用いて、放射性同位体金属に結合、キレート化、さもなければ錯体化する本特許のブリッジリンカーを介して配位子試薬で標識可能である。金属イオンに錯体化しうるキレート化配位子としては、ＤＯＴＡ、ＤＯＴＰ、ＤＯＴＭＡ、ＤＴＰＡ、及びＴＥＴＡが挙げられる（マクロサイクリックス（Ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｓ）、米国テキサス州ダラス）。
代替的に、細胞傷害剤は、以上の薬剤のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体でありうる。
追加の許容可能な細胞傷害剤は、国際公開第２０１４／０５７１１７号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１７／００２９５１４号明細書（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示される。
いくつかの実施形態では、細胞傷害剤はデキサメタゾンではない。
コンジュゲート
本明細書には、抗体又はそのフラグメント（たとえばＳｃＦｖ）がＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合する抗体薬剤コンジュゲートが開示される。かかる抗体又はフラグメントの組合せは、ミエロイド／単球／マクロファージ系統細胞を攻撃するように同一の組成物に含まれうる。特定の態様では、同一のタンパク質は、ＣＤ１６３、ＣＤ２０６、及びＣＤ２０４のいずれか２つに特異的な結合ドメインを含有しうる。そのため、たとえば、タンパク質は、ＣＤ１６３及びＣＤ２０４の両方に結合する二重特異的抗体でありうる。
そのため、いくつかの実施形態では、本開示は、リンカーを介して抗体（又は抗原結合フラグメント）に接続された細胞傷害化合物を含むコンジュゲートを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、リンカーを介して抗体又はそのフラグメントに接続されたＰＢＤ化合物を含むコンジュゲートを提供する。
実施形態では、コンジュゲートは、スペーサー接続基に接続された抗体と、トリガーに接続されたスペーサーと、自己犠牲リンカーに接続されたトリガーと、細胞傷害剤（Ｄ）、たとえば、ＰＢＤ化合物のＮ１０位に接続された自己犠牲リンカーと、を含む。かかるコンジュゲートは、以下：
に例示される。式中、Ａｂは以上に定義される抗体であり、且つＰＢＤはピロロベンゾジアゼピン化合物である。例示は、ある特定の実施形態では、ＲＬ’、Ａ、Ｌ１及びＬ２に対応する部分を示す。ＲＬ’は、ＲＬ１’又はＲＬ２’のどちらかでありうる。Ｄは、ＲＬ１’又はＲＬ２’が除去されたＤＬである。
本開示のコンジュゲートは、対象において好ましい部位たとえばＭ２細胞に細胞傷害化合物（たとえばＰＤＢ化合物）を提供する際に使用するのに好適である。好ましい実施形態では、コンジュゲートは、リンカー部分をなんら保持しない活性細胞傷害化合物の放出を可能にする。細胞傷害化合物の反応性に影響を及ぼしうるスタブは存在しない。
リンカーは、共有結合を介して抗体を細胞傷害剤（たとえばＰＢＤ薬剤部分）Ｄに結合する。リンカーは、１つ以上の薬剤部分（Ｄ）（たとえば細胞傷害剤）と抗体（Ａｂ）又はその結合フラグメントとを結合して抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）を形成するために使用可能な二官能性又は多官能性の部分でありうる。リンカー（ＲＬ’）は、細胞の外部すなわち細胞外の環境で安定でありうるか、又は酵素活性、加水分解、若しくは他の代謝条件により切断可能でありうる。抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）は、薬剤部分と抗体とに結合する反応性官能基を有するリンカーを用いて適宜調製しうる。抗体（Ａｂ）のシステインチオール又はアミン、たとえば、Ｎ末端若しくはリシンなどのアミノ酸側鎖は、リンカー若しくはスペーサー試薬、薬剤部分（Ｄ）、又は薬剤−リンカー試薬（ＤＬ、Ｄ−ＲＬ）の官能基との結合を形成可能である。ただし、ＲＬは、ＲＬ１又はＲＬ２でありうる。
実施形態では、リンカーは、共有結合を介して抗体又はその抗原結合フラグメントを細胞傷害剤に結合する。ＡＤＣのリンカーは、好ましくは、ＡＤＣ分子の凝集を防止するとともに、ＡＤＣを水性媒体に自由に溶解可能にしてモノマー状態に維持する。
抗体又はそのフラグメントと細胞傷害剤との結合は、好ましくは、細胞外に安定である。細胞内への輸送又は送達の前、抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）は、好ましくは、安定であり且つインタクトな状態を維持する。すなわち、抗体は、薬剤部分に結合された状態を維持する。リンカーは、標的細胞外では安定であり、細胞内ではある有効な速度で切断されうる。有効なリンカーは、次の通りであろう。すなわち、（ｉ）抗体の特異的結合性を維持し、（ｉｉ）コンジュゲート又は薬剤部分の細胞内送達を可能にし、（ｉｉｉ）安定且つインタクトな状態を維持し、すなわち、コンジュゲートがその標的部位に送達又は輸送されるまで切断されず、且つ（ｉｖ）薬剤部分の細胞傷害作用、細胞死滅作用、又は細胞静止作用を維持する。ＡＤＣの安定性は、質量分析、ＨＰＬＣ、分離／分析技術ＬＣ／ＭＳなどの標準的分析技術により測定しうる。
抗体と薬剤部分との共有結合は、２つの反応性官能基を有するリンカーを必要とする。すなわち、２ヶ所で反応することを意味する。２つ以上の官能性部分又は生物学的活性部分、たとえば、ペプチド、核酸、薬剤、毒素、抗体、ハプテン、及びレポーター基を結合するのに有用な２価リンカー試薬は公知であり、コンジュゲートをもたらす方法が記載されている（ハーマンソン，Ｇ．Ｔ．（Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．）著、１９９６年、バイオコンジュゲート・テクニクス（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）、アカデミック・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）、ニューヨーク、ｐ．２３４〜２４２）。
他の一実施形態では、リンカーは、凝集性、溶解性、又は反応性をモジュレートする基で置換しうる。たとえば、スルホネート置換基は、試薬の水への溶解性を増加させてリンカー試薬と抗体又は薬剤部分とのカップリング反応を促進しうるか、又はＡＤＣの調製に利用される合成経路に依存してＡｂ−ＬとＤＬ若しくはＤＬ−ＬとＡｂとのカップリング反応を促進しうる。
一実施形態では、Ｌ−ＲＬ’は基：
である。式中、アステリスクは、薬剤単位（Ｄ）への結合点を表し、Ａｂは抗体（Ｌ）であり、Ｌ１はリンカーであり、ＡはＬ１を抗体に接続する接続基であり、Ｌ２は共有結合であるか又は−ＯＣ（＝Ｏ）と一緒になって自己犠牲リンカーを形成し、且つＬ１又はＬ２は切断可能リンカーである。
Ｌ１は、好ましくは切断可能リンカーであり、切断のためにリンカーを活性化するトリガーということもある。
Ｌ１及びＬ２の性質は、存在する場合、大きく異なりうる。これらの基は、コンジュゲートが送達される部位の条件により決定しうるそれらの切断特性に基づいて選択される。酵素の作用により切断されるリンカーが好ましいが、ｐＨ（たとえば、酸又は塩基に不安定な場合）、温度、又は照射（たとえば、光に不安定な場合）の変化により切断可能なリンカーもまた使用しうる。還元条件下又は酸化条件下で切断可能なリンカーもまた、本開示のコンジュゲートで使用しうる。
Ｌ１は、アミノ酸の連続配列を含みうる。アミノ酸配列は、酵素的切断の標的基質でありうるので、たとえば、ＰＤＢ化合物のＮ１０位からのＬ−ＲＬ’の放出を可能にする。
一実施形態では、Ｌ１は、酵素の作用により切断可能である。一実施形態では、酵素は、エステラーゼ又はペプチダーゼである。
一実施形態では、Ｌ２は、存在して−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−と一緒になって自己犠牲リンカーを形成する。一実施形態では、Ｌ２は、酵素活性の基質であるので、Ｎ１０位からのＬ−ＲＬ’の放出を可能にする。
一実施形態では、Ｌ１が酵素の作用により切断可能であり且つＬ２が存在する場合、酵素は、Ｌ１とＬ２との結合を切断する。
Ｌ１及びＬ２は、存在する場合、
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、及び
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−
から選択される結合により接続しうる。
Ｌ２に接続するＬ１のアミノ基は、アミノ酸のＮ末端でありうるか、又はアミノ酸の側鎖（たとえば、リシンアミノ酸の側鎖）のアミノ基に由来しうる。
Ｌ２に接続するＬ１のカルボキシル基は、アミノ酸のＣ末端でありうるか、又はアミノ酸の側鎖（たとえば、グルタミン酸アミノ酸の側鎖）のカルボキシル基に由来しうる。
Ｌ２に接続するＬ１のヒドロキシル基は、アミノ酸の側鎖（たとえばセリンアミノ酸の側鎖）のヒドロキシル基に由来しうる。
「アミノ酸の側鎖」という用語は、（ｉ）天然に存在するアミノ酸、たとえば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリン、（ｉｉ）副成分のアミノ酸、たとえば、オルニチン及びシトルリン、（ｉｉｉ）非天然のアミノ酸、β−アミノ酸、天然に存在するアミノ酸の合成アナログ及び誘導体、並びに（ｉｖ）すべてのエナンチオマー、ジアステレオマー、異性体富化形、同位体標識形（たとえば、２Ｈ，３Ｈ、１４Ｃ、１５Ｎ）、保護形、及びそれらのラセミ混合物に見いだされる基を含む。
一実施形態では、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−及びＬ２は、一緒になって、基：
を形成する。式中、アステリスクは、Ｎ１０位への結合点を表し、波線は、リンカーＬ１への結合点を表し、Ｙは、−Ｎ（Ｈ）−、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−、又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−であり、且つｎは、０〜３である。フェニレン環は、本明細書に記載されるように１、２、又は３個の置換基で任意選択的に置換される。一実施形態では、フェニレン基は、ハロ、ＮＯ２、Ｒ、又はで任意選択的に置換される。
一実施形態では、ＹはＮＨである。
一実施形態では、ｎは０又は１である。好ましくは、ｎは０である。
ＹがＮＨであり且つｎが０である場合、自己犠牲リンカーは、ｐ−アミノベンジルカルボニルリンカー（ＰＡＢＣ）といいうる。
自己犠牲リンカーは、遠隔部位が活性化されたとき、以下に示される手順：
に沿って進行する保護された化合物の放出を可能にするであろう（ｎ＝０の場合）。式中、Ｌ＊は、リンカーの残りの部分の活性化形である。これらの基は、保護された化合物から活性化部位を分離するという利点を有する。以上に記載したように、フェニレン基は任意選択的に置換しうる。
本明細書に記載の一実施形態では、基Ｌ＊は、ジペプチド基を含みうる本明細書に記載のリンカーＬ１である。
他の一実施形態では、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−及びＬ２は、一緒になって、以下：
から選択される基を形成する。式中、アステリスク、波線、Ｙ、及びｎは、以上に定義した通りである。各フェニレン環は、本明細書に記載されるように１、２、又は３個の置換基で任意選択的に置換される。一実施形態では、Ｙ置換基を有するフェニレン環は任意選択的に置換され、且つＹ置換基を有していないフェニレン環は非置換である。一実施形態では、Ｙ置換基を有するフェニレン環は非置換であり、且つＹ置換基を有していないフェニレン環は任意選択的に置換される。
他の一実施形態では、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−及びＬ２は、一緒になって、以下：
から選択される基を形成する。式中、アステリスク、波線、Ｙ、及びｎは、以上に定義した通りであり、Ｅは、Ｏ、Ｓ、又はＮＲであり、Ｄは、Ｎ、ＣＨ、又はＣＲであり、且つＦは、Ｎ、ＣＨ、又はＣＲである。
一実施形態では、ＤはＮである。
一実施形態では、ＤはＣＨである。
一実施形態では、ＥはＯ又はＳである。
一実施形態では、ＦはＣＨである。
好ましい実施形態では、リンカーはカテプシンに不安定なリンカーである。
一実施形態では、Ｌ１はジペプチドを含む。ジペプチドは、−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−として表しうる。ただし、−ＮＨ−及び−ＣＯ−は、それぞれ、アミノ酸基Ｘ１及びＸ２のＮ末端及びＣ末端を表す。ジペプチド中のアミノ酸は、天然アミノ酸のいずれかの組合せでありうる。リンカーがカテプシンに不安定なリンカーである場合、ジペプチドは、カテプシン媒介切断の作用部位となりうる。
そのほか、カルボキシル側鎖官能基又はアミノ側鎖官能基を有するアミノ酸基、たとえば、Ｇｌｕ及びＬｙｓでは、それぞれ、ＣＯ及びＮＨはその側鎖官能基を表しうる。
一実施形態では、ジペプチド−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−中の基−Ｘ１−Ｘ２−は、以下：
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−、
−Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−、
−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ−、
−Ｉｌｅ−Ｃｉｔ−、
−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−、
−Ｔｒｐ−Ｃｉｔ−
から選択される。式中、Ｃｉｔはシトルリンである。
好ましくは、ジペプチド−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−中の基−Ｘ１−Ｘ２−は、以下：
Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−
から選択される。
最も好ましくは、ジペプチド−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−中の基−Ｘ１−Ｘ２−は、−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−又は−Ｖａｌ−Ａｌａ−である。
デュボウチク（Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ）ら著、バイオコンジュゲート・ケミストリー（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、２００２年、第１３巻、ｐ．８５５〜８６９（参照により本明細書に組み込まれる）に記載のものを含めて、他のジペプチドの組合せを使用しうる。
一実施形態では、アミノ酸の側鎖は、適宜、誘導体化される。たとえば、アミノ酸の側鎖のアミノ基又はカルボキシ基は、誘導体化しうる。一実施形態では、リシンなどの側鎖アミノ酸のアミノ基ＮＨ２は、ＮＨＲ及びＮＲＲ’からなる群から選択される誘導体化形である。
一実施形態では、アスパラギン酸などの側鎖アミノ酸のカルボキシ基ＣＯＯＨは、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ、及びＣＯＮＲＲ’からなる群から選択される誘導体化形である。
一実施形態では、アミノ酸の側鎖は、適宜、化学的に保護される。側鎖の保護基は、基ＲＬとの関連で以下で考察される基でありうる。本発明者らは、保護されたアミノ酸配列を酵素により切断可能であることを確証した。たとえば、Ｂｏｃで側鎖保護されたＬｙｓ残基を含むジペプチド配列をカテプシンにより切断可能ことを確証した。
アミノ酸の側鎖の保護基は当技術分野で周知であり、ノバビオケム（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）のカタログに記載されている。追加の保護基ストラテジーは、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、グリーン（Ｇｒｅｅｎｅ）及びウッツ（Ｗｕｔｓ）著に示されている。
反応性側鎖官能基を有するそうしたアミノ酸に対して、可能性のある側鎖保護基を以下に示す。
Ａｒｇ：Ｚ、Ｍｔｒ、Ｔｏｓ、
Ａｓｎ：Ｔｒｔ、Ｘａｎ、
Ａｓｐ：Ｂｚｌ、ｔ−Ｂｕ、
Ｃｙｓ：Ａｃｍ、Ｂｚｌ、Ｂｚｌ−ＯＭｅ、Ｂｚｌ−Ｍｅ、Ｔｒｔ、
Ｇｌｕ：Ｂｚｌ、ｔ−Ｂｕ、
Ｇｌｎ：Ｔｒｔ、Ｘａｎ、
Ｈｉｓ：Ｂｏｃ、Ｄｎｐ、Ｔｏｓ、Ｔｒｔ、
Ｌｙｓ：Ｂｏｃ、Ｚ−Ｃｌ、Ｆｍｏｃ、Ｚ、Ａｌｌｏｃ、
Ｓｅｒ：Ｂｚｌ、ＴＢＤＭＳ、ＴＢＤＰＳ、
Ｔｈｒ：Ｂｚ、
Ｔｒｐ：Ｂｏｃ、
Ｔｙｒ：Ｂｚｌ、Ｚ、Ｚ−Ｂｒ。
一実施形態では、側鎖保護は、存在する場合、キャップ基として又はその一部として提供される基に直交するように選択される。そのため、側鎖保護基を除去しても、キャップ基、又はキャップ基の一部であるいずれの保護基官能基は除去されない。
他の実施形態では、選択されるアミノ酸は、反応性側鎖官能基を有していないものである。たとえば、アミノ酸は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、及びＶａｌから選択しうる。
一実施形態では、ジペプチドは、自己犠牲リンカーとの組合せで使用される。自己犠牲リンカーは−Ｘ２−に接続しうる。
自己犠牲リンカーが存在する場合、−Ｘ２−は、自己犠牲リンカーに直接接続される。好ましくは、ＹがＮＨである場合、基−Ｘ２−ＣＯ−はＹに接続されて、基−Ｘ２−ＣＯ−ＮＨ−を形成する。
−ＮＨ−Ｘ１−は、Ａに直接接続される。Ａは、官能基−ＣＯ−を含みうるので、−Ｘ１−とのアミド結合を形成する。
一実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、−ＯＣ（＝Ｏ）−と一緒になって基ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−ＰＡＢＣ−を含む。
好ましくは、自己犠牲リンカー及びジペプチドは、一緒になって基−ＮＨ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＣＯ−ＮＨ−ＰＡＢＣ−を形成する。これは、以下：
で例示される。式中、アステリスクは、結合点を表し、波線は、リンカーＬ１の残りの部分への結合点又はＡへの結合点を表す。好ましくは、波線はＡへの結合点を表す。たとえば、Ｌｙｓアミノ酸の側鎖は、以上に記載されるようにＢｏｃ、Ｆｍｏｃ、又はＡｌｌｏｃで保護しうる。
代替的に、自己犠牲リンカー及びジペプチドは、一緒になって基−ＮＨ−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＣＯ−ＮＨ−ＰＡＢＣ−を形成する。これは、以下：
で例示される。式中、アステリスク及び波線は、以上に定義した通りである。
代替的に、自己犠牲リンカー及びジペプチドは、一緒になって基−ＮＨ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＣＯ−ＮＨ−ＰＡＢＣ−を形成する。これは、以下：
で例示される。式中、アステリスク及び波線は、以上に定義した通りである。
一実施形態では、Ａは共有結合である。そのため、Ｌ１及び抗体は直接接続される。たとえば、Ｌ１が連続アミノ酸配列を含む場合、配列のＮ末端は抗体に直接接続しうる。
そのため、Ａが共有結合である場合、抗体とＬ１との接続は、以下：
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−Ｓ−、
−Ｓ−Ｓ−、
−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−、及び
＝Ｎ−ＮＨ−
から選択しうる。
抗体に接続するＬ１のアミノ基は、アミノ酸のＮ末端でありうるか、又はアミノ酸の側鎖（たとえば、リシンアミノ酸の側鎖）のアミノ基に由来しうる。
抗体に接続するＬ１のカルボキシル基は、アミノ酸のＣ末端でありうるか、又はアミノ酸の側鎖（たとえば、グルタミン酸アミノ酸の側鎖）のカルボキシル基に由来しうる。
抗体に接続するＬ１のヒドロキシル基は、アミノ酸の側鎖（たとえば、セリンアミノ酸の側鎖）のヒドロキシル基に由来しうる。
抗体に接続するＬ１のチオール基は、アミノ酸の側鎖（たとえば、セリンアミノ酸の側鎖）のチオール基に由来しうる。
Ｌ１のアミノ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、及びチオール基に関する以上のコメントは、抗体にも当てはまる。
一実施形態では、Ｌ２は、−ＯＣ（＝Ｏ）−と一緒になって、以下：
を表す。式中、アステリスクは結合点を表し、波線はＬ１への結合点を表し、ｎは０〜３であり、Ｙは共有結合又は官能基であり、且つＥは、たとえば、酵素作用又は光により活性化可能な基であり、それにより、自己犠牲単位を生成する。フェニレン環は、本明細書に記載されるように１、２、又は３個の置換基で任意選択的にさらに置換される。一実施形態では、フェニレン基は、ハロ、ＮＯ２、Ｒ、又はＯＲで任意選択的にさらに置換される。好ましくはｎは０又は１であり、最も好ましくは０である。
Ｅは、たとえば、光により又は酵素の作用により、基が活性化を受けやすくなるように選択される。Ｅは、−ＮＯ２又はグルクロン酸（ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ）でありうる。前者はニトロレダクターゼの作用に、後者はβ−グルクロニダーゼ（β−ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｄａｓｅ）の作用に感受性を有しうる。
この実施形態では、自己犠牲リンカーは、Ｅが活性化されたとき、以下に示される手順：
に沿って進行する保護された化合物の放出を可能にするであろう（ｎ＝０の場合）。式中、アステリスクは結合点を表し、Ｅ＊はＥの活性化形であり、且つＹは以上で記載した通りである。これらの基は、保護された化合物から活性化部位を分離するという利点を有する。以上に記載したように、フェニレン基は任意選択的にさらに置換しうる。
基ＹはＬ１への共有結合でありうる。
基Ｙは、以下：
−Ｃ（＝Ｏ）−
−ＮＨ−
−Ｏ−
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ、
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ（＝Ｏ）−、及び
−Ｓ−
から選択される官能基でありうる。
Ｌ１がジペプチドである場合、Ｙは−ＮＨ−又は−Ｃ（＝Ｏ）−であることが好ましく、それによりＬ１とＹとのアミド結合が形成される。この実施形態では、ジペプチド配列は、酵素活性の基質である必要はない。
他の一実施形態では、Ａはスペーサー基である。そのため、Ｌ１及び抗体は間接的に接続される。
Ｌ１及びＡは、以下：
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、及び
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−
から選択される結合により接続しうる。
一実施形態では、基Ａは、以下：
である。式中、アステリスクはＬ１への結合点を表し、波線は抗体への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａは、以下：
である。式中、アステリスクはＬ１への結合点を表し、波線は抗体への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａは、以下：
である。式中、アステリスクはＬ１への結合点を表し、波線は抗体への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。他の一実施形態では、ｍは１０〜３０、好ましくは２０〜３０である。代替的に、ｍは０〜５０である。この実施形態では、ｍは好ましくは１０〜４０であり、且つｎは１である。
一実施形態では、基Ａは、以下：
である。式中、アステリスクはＬ１への結合点を表し、波線は抗体への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。他の一実施形態では、ｍは１０〜３０、好ましくは２０〜３０である。代替的に、ｍは０〜５０である。この実施形態では、ｍは好ましくは１０〜４０であり、且つｎは１である。
一実施形態では、抗体とＡとの接続は、抗体のチオール残基とＡのマレイミド基とを介する。
一実施形態では、抗体とＡとの接続は、以下：
である。式中、アステリスクはＡの残りの部分への結合点を表し、且つ波線は、抗体の残りの部分への結合点を表す。この実施形態では、Ｓ原子は典型的には抗体に由来する。
以上の実施形態の各々では、以下に示されるマレイミド誘導基：
の代わりに代替官能基を使用しうる。式中、波線は、以上の場合のように抗体への結合点を表し、且つアステリスクは、Ａ基の残りの部分への結合を表す。
一実施形態では、マレイミド誘導基は、基：
で置き換えられる。式中、波線は抗体への結合点を表し、且つアステリスクはＡ基の残りの部分への結合を表す。
一実施形態では、マレイミド誘導基は、任意選択的に抗体と一緒になって以下：
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ、
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−Ｓ−、
−Ｓ−Ｓ−、
−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−、
−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２−、
＝Ｎ−ＮＨ−、及び
−ＮＨ−Ｎ＝
から選択される基で置き換えられる。
一実施形態では、マレイミド誘導基は、任意選択的に抗体と一緒になって以下：
から選択される基で置き換えられる。式中、波線は、抗体への結合点又はＡ基の残りの部分への結合のどちらかを表し、且つアステリスクは、抗体への結合点又はＡ基の残りの部分への結合の他方のものを表す。
Ｌ１を抗体に接続するのに好適な他の基は、国際公開第２００５／０８２０２３号パンフレットに記載されている。
一実施形態では、接続基Ａは存在し、トリガーＬ１は存在し、且つ自己犠牲リンカーＬ２は不在である。そのため、Ｌ１及び薬剤単位は、結合を介して直接接続される。この実施形態では等価的に、Ｌ２は結合である。このことは、ＤＬが式ＩＩの場合、特に関連しうる。
Ｌ１及びＤは、以下：
−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ＜、
−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ＜、及び、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ＜、
から選択される結合により接続しうる。ただし、Ｎ＜又はＯ−はＤの一部である。
一実施形態では、Ｌ１及びＤは、好ましくは、以下：
−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ＜、及び
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−
から選択される結合により接続される。
一実施形態では、Ｌ１はジペプチドを含み、且つジペプチドの一方の末端はＤに結合される。以上に記載したように、ジペプチドのアミノ酸は、天然アミノ酸と非天然アミノ酸とのいずれかの組合せでありうる。いくつかの実施形態では、ジペプチドは天然アミノ酸を含む。リンカーがカテプシンに不安定なリンカーである場合、ジペプチドは、カテプシン媒介切断の作用部位である。その場合、ジペプチドはカテプシンの認識部位である。
一実施形態では、ジペプチド−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−中の基−Ｘ１−Ｘ２−は、以下：
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−、
−Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−、
−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ−、
−Ｉｌｅ−Ｃｉｔ−、
−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−、及び
−Ｔｒｐ−Ｃｉｔ−、
から選択される。式中、Ｃｉｔはシトルリンである。かかるジペプチドでは、−ＮＨ−はＸ１のアミノ基であり、且つＣＯはＸ２のカルボニル基である。
好ましくは、ジペプチド−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−中の基−Ｘ１−Ｘ２−は、以下：
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、及び
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−
から選択される。
最も好ましくは、ジペプチド−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯ−中の基−Ｘ１−Ｘ２−は、−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−又は−Ｖａｌ−Ａｌａ−である。
他の目的ジペプチドの組合せは、以下：
−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−、
−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−、及び
−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−
を含む。
以上に記載のものを含めて、他のジペプチドの組合せを使用しうる。
一実施形態では、Ｌ１−Ｄは、以下：
である。式中、−ＮＨ−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯはジペプチドであり、−Ｎ＜は薬剤単位の一部であり、アステリスクは、薬剤単位の残りの部分への結合点を表し、且つ波線は、Ｌ１の残りの部分への結合点又はＡへの結合点を表す。好ましくは、波線はＡへの結合点を表す。
一実施形態では、ジペプチドはバリン−アラニンであり、且つＬ１−Ｄは以下：
である。式中、アステリスク、−Ｎ＜、及び波線は、以上に定義した通りである。
一実施形態では、ジペプチドはフェニルアラニン（ｐｈｅｎｙｌａｌｎｉｎｅ）−リシンであり、且つＬ１−Ｄは以下：
である。式中、アステリスク、−Ｎ＜、及び波線は、以上に定義した通りである。
一実施形態では、ジペプチドはバリン−シトルリンである。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜７、好ましくは３〜７、最も好ましくは３又は７である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、Ｓはリガンド単位の硫黄基であり、波線はリガンド単位の残りの部分への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、Ｓはリガンド単位の硫黄基であり、波線はリガンド単位の残りの部分への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ１−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、Ｓはリガンド単位の硫黄基であり、波線はリガンド単位の残りの部分への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。
一実施形態では、基Ａ１−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜７、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。
一実施形態では、基Ａ１−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位の残りの部分への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ１−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位の残りの部分への結合点を表し、且つｎは０〜６である。一実施形態では、ｎは５である。
一実施形態では、基Ａ１−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位の残りの部分への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。
一実施形態では、基Ａ１−Ｌ１は、以下：
である。式中、アステリスクはＬ２又はＤへの結合点を表し、波線はリガンド単位の残りの部分への結合点を表し、ｎは０又は１であり、且つｍは０〜３０である。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜８、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。
基ＲＬ’は、基ＲＬから誘導可能である。基ＲＬは、抗体とＲＬの官能基との接続により基ＲＬ’に変換しうる。ＲＬをＲＬ’に変換するために他の工程を採用しうる。こうした工程は、存在する場合は保護基の除去又は適切な官能基の導入を含みうる。
ＲＬ
リンカーは、１つ以上のアミノ酸単位を含むプロテアーゼ切断可能ペプチド部分を含みうる。ペプチドリンカー試薬は、自動シンセサイザー、たとえば、レイニン・シンフォニー・ペプチド・シンセサイザー（Ｒａｉｎｉｎ Ｓｙｍｐｈｏｎｙ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ）（プロテイン・テクノロジーズ・インコーポレーテッド（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、アリゾナ州ツーソン）又はモデル４３３（アプライド・バイオシステムズ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）、カリフォルニア州フォスターシティー）を用いて、ｔ−ＢＯＣ化学（ガイザー（Ｇｅｉｓｅｒ）ら著、「固相ペプチド合成の自動化（Ａｕｔｏｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、マクロ分子のシーケンシング及び合成（Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎｄ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）、アラン・アール・リス・インコーポレイテッド（Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．）、１９８８年、ｐ．１９９〜２１８）、及びｆｍｏｃ／ＨＢＴＵ化学（フィールズ，Ｇ．（Ｆｉｅｌｄｓ，Ｇ．）及びノーブル，Ｒ．（Ｎｏｂｌｅ，Ｒ．）著、「９−フルオロエニルメトキシカルボニルアミノ酸を利用する固相ペプチド合成（Ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ ９−ｆｌｕｏｒｏｅｎｙｌｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ）」、１９９０年、インターナショナル・ジャーナル・オブ・ペプチド・アンド・プレテイン・リサーチ（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．）、第３５巻、ｐ．１６１〜２１４）をはじめとする、ペプチド化学の分野で周知の固相又は液相合成法（Ｅ．シュレーダー（Ｅ．Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ）及びＫ．リュプケ（Ｋ．Ｌｕｅｂｋｅ）著、ペプチド（Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ）、第１巻、ｐ．７６〜１３６、１９６５年、アカデミック・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ））により、調製しうる。
模範的アミノ酸リンカーは、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、又はペンタペプチドを含む。模範的ジペプチドは、バリン−シトルリン（ｖｃ又はｖａｌ−ｃｉｔ）、アラニン−フェニルアラニン（ａｆ又はａｌａ−ｐｈｅ）を含む。模範的トリペプチドは、グリシン−バリン−シトルリン（ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ）及びグリシン−グリシン−グリシン（ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ）を含む。アミノ酸リンカー成分を含むアミノ酸残基は、天然に存在するアミノ酸、さらには副成分のアミノ酸、及び天然に存在しないアミノ酸アナログ、たとえばシトルリンを含む。アミノ酸リンカー成分は、特定の酵素、たとえば、腫瘍関連プロテアーゼ、カテプシンＢ、Ｃ、及びＤ、又はプラスミンプロテアーゼによる酵素的切断の選択性に関して、設計及び最適化が可能である。
アミノ酸の側鎖は、天然に存在するアミノ酸、さらには副成分のアミノ酸、及び天然に存在しないアミノ酸アナログ、たとえばシトルリンを含む。アミノ酸の側鎖は、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ベンジル、ｐ−ヒドロキシベンジル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）４ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＮＨ２、２−ピリジルメチル−、３−ピリジルメチル−、４−ピリジルメチル−、フェニル、シクロヘキシル、さらには以下の構造：
を含む。
アミノ酸の側鎖が水素（グリシン）以外を含む場合、アミノ酸の側鎖が結合された炭素原子はキラルである。アミノ酸の側鎖が結合された各炭素原子は、独立して、（Ｓ）若しくは（Ｒ）配置又はラセミ混合物の状態である。そのため、薬剤−リンカー試薬は、エナンチオマー的純粋形、ラセミ形、又はジアステレオマー形でありうる。
例示的な実施形態では、アミノ酸の側鎖は、アラニン、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、ノルロイシン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、γ−アミノ酪酸、α，α−ジメチルγ−アミノ酪酸、β，β−ジメチルγ−アミノ酪酸、オルニチン及びシトルリン（Ｃｉｔ）をはじめとする天然及び非天然のアミノ酸から選択されるものである。
ｐ−アミノベンジルカルバモイル（ＰＡＢ）自己犠牲スペーサーを有する抗体コンジュゲーション用のリンカー−薬剤部分中間体の構築に有用な模範的バリン−シトルリン（ｖａｌ−ｃｉｔ又はｖｃ）ジペプチドリンカー試薬は、構造：
を有する。式中、Ｑは、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ＮＯ２、又は−ＣＮであり、且つｍは、０〜４の範囲内の整数である。
ｐ−アミノベンジル基を有する模範的ｐｈｅ−ｌｙｓ（Ｍｔｒ）ジペプチドリンカー試薬は、デュボウチク（Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ）ら著、１９９７年、テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ）、第３８巻、ｐ．５２５７〜６０に従って調製可能であり、構造：
を有する。式中、Ｍｔｒはモノ−４−メトキシトリチルであり、Ｑ、は、Ｃ１〜Ｃ８、アルキル−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ＮＯ２、又は−ＣＮであり、且つｍは、０〜４の範囲内の整数である。
「自己犠牲リンカー」ＰＡＢ（ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル）は、薬剤部分を抗体薬剤コンジュゲートの抗体に結合する（カール（Ｃａｒｌ）ら著、１９８１年、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、第２４巻、ｐ．４７９〜４８０、チャクラバルティー（Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｙ）ら著、１９８３年、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、第２６巻、ｐ．６３８〜６４４、米国特許第６２１４３４５号明細書、米国特許出願公開第２００３０１３０１８９号明細書、米国特許出願公開第２００３００９６７４３号明細書、米国特許第６７５９５０９号明細書、米国特許出願公開第２００４００５２７９３号明細書、米国特許第６２１８５１９号明細書、米国特許第６８３５８０７号明細書、米国特許第６２６８４８８号明細書、米国特許出願公開第２００４００１８１９４号明細書、国際公開第９８／１３０５９号パンフレット、米国特許出願公開第２００４００５２７９３号明細書、米国特許第６６７７４３５号明細書、米国特許第５６２１００２号明細書、米国特許出願公開第２００４０１２１９４０号明細書、国際公開第２００４／０３２８２８号パンフレット）。ＰＡＢ以外の自己犠牲スペーサーの他の例としては、限定されるものではないが、次のものが挙げられる。（ｉ）ＰＡＢ基に電子的に類似した芳香族化合物、たとえば、２−アミノイミダゾール−５−メタノール誘導体（ヘイ（Ｈａｙ）ら著、１９９９年、バイオオーガニック・アンド・メディシナル・ケミストリー・レターズ（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．）、第９巻、ｐ．２２３７）、チアゾール（米国特許第７３７５０７８号明細書）、複数の長尺状のＰＡＢ単位（デ・フロート（ｄｅ Ｇｒｏｏｔ）ら著、２００１年、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、第６６巻、ｐ．８８１５〜８８３０）、及びｏ−又はｐ−アミノベンジルアセタール、並びに（ｉｉ）ホモログ化スチリルＰＡＢアナログ（米国特許第７２２３８３７号明細書）。アミド結合の加水分解により環化を受けるスペーサー、たとえば、置換及び非置換の４−アミノ酪酸アミド（ロドリゲス（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ）ら著、１９９５年、ケミストリー・バイオロジー（Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、第２巻、ｐ．２２３）、適切に置換されたビシクロ［２．２．１］及びビシクロ［２．２．２］環系（ストーム（Ｓｔｏｒｍ）ら著、１９７２年、ジャーナル・オブ・ザ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティー（Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．）、第９４巻、ｐ．５８１５）、並びに２−アミノフェニルプロピオン酸アミド（アスベリー（Ａｍｓｂｅｒｒｙ）ら著、１９９０年、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、第５５巻、ｐ．５８６７）を使用可能である。グリシンに置換されたアミン含有薬剤の除去（キングスベリー（Ｋｉｎｇｓｂｕｒｙ）ら著、１９８４年、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、第２７巻、ｐ．１４４７）もまた、ＡＤＣに有用な自己犠牲スペーサーの例である。
一実施形態では、バリン−シトルリンジペプチドＰＡＢアナログ試薬は、２，６−ジメチルフェニル基を有し、構造：
を有する。
本開示の抗体薬剤コンジュゲートに有用なリンカー試薬としては、限定されるものではないが、ＢＭＰＥＯ、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホＳＭＣＣ、及びスルホ−ＳＭＰＢ、並びにＳＶＳＢ（スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）、並びにビスマレイミド試薬：ＤＴＭＥ、ＢＭＢ、ＢＭＤＢ、ＢＭＨ、ＢＭＯＥ、１，８−ビス−マレイミドジエチレングリコール（ＢＭ（ＰＥＯ）２）、及び１，１１−ビス−マレイミドトリエチレングリコール（ＢＭ（ＰＥＯ）３）（ピアス・バイオテクノロジー・インコーポレーテッド（Ｐｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）、サーモ・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、イリノイ州ロックフォード、及び他の試薬供給業者から市販品されている）が挙げられる。ビス−マレイミド試薬は、逐次的又は並行的にチオール含有薬剤部分、標識、又はリンカー中間体への抗体のシステイン残基の遊離チオール基の結合を可能にする。抗体のチオール基、薬剤部分、又はリンカー中間体と反応するマレイミド以外の他の官能基としては、ヨードアセトアミド、ブロモアセトアミド、ビニルピリジン、ジスルフィド、ピリジルジスルフィド、イソシアネート、及びイソチオシアネートが挙げられる。
他のリンカー試薬としては、Ｎ−スクシンイミジル−４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ、カールソン（Ｃａｒｌｓｓｏｎ）ら著、１９７８年、バイオケミカル・ジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．）、第１７３巻、ｐ．７２３〜７３７）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（たとえば、ジメチルアジピミデートＨＣｌ）、活性エステル（たとえば、ジスクシニミジルスベレート）、アルデヒド（たとえば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（たとえば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビス−ジアゾニウム誘導体（たとえば、ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミン）、ジイソシアネート（たとえば、トルエン２，６−ジイソシアネート）、及びビス活性フッ素化合物（たとえば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）が挙げられる。有用なリンカー試薬はまた、モレキュラー・バイオサイエンス・インコーポレーテッド（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ．）（コロラド州ボールダー）などの他の供給業者を介して入手可能であるか、又はトキ（Ｔｏｋｉ）ら著、２００２年、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、第６７巻、ｐ．１８６６〜１８７２、米国特許第６２１４３４５号明細書、国際公開第０２／０８８１７２号パンフレット、米国特許出願公開第２００３１３０１８９号明細書；米国特許出願公開第２００３０９６７４３号明細書、国際公開第０３／０２６５７７号パンフレット、国際公開第０３／０４３５８３号パンフレット、及び国際公開第０４／０３２８２８号パンフレットに記載の手順に従って合成可能である。
リンカーは、分岐状多官能性リンカー部分を介して２つ以上の薬剤部分を抗体に共有結合するためのデンドリマー型リンカーでありうる（米国特許出願公開第２００６／１１６４２２号明細書、米国特許出願公開第２００５／２７１６１５号明細書、デ・フロート（ｄｅ Ｇｒｏｏｔ）ら著、２００３年、アンゲバンテ・ヘミー・インターナショナル・エディション（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．）、第４２巻、ｐ．４４９０〜４４９４、アミール（Ａｍｉｒ）ら著、２００３年、アンゲバンテ・ヘミー・インターナショナル・エディション（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．）、第４２巻、ｐ．４４９４〜４４９９、シャミス（Ｓｈａｍｉｓ）ら著、２００４年、米国化学会誌（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．）、第１２６巻、ｐ．１７２６〜１７３１、サン（Ｓｕｎ）ら著、２００２年、バイオオーガニック・アンド・メディシナル・ケミストリー・レターズ（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ）第１２巻：ｐ．２２１３〜２２１５、サン（Ｓｕｎ）ら著、２００３年、バイオオーガニック・アンド・メディシナル・ケミストリー・レターズ（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、第１１巻、ｐ．１７６１〜１７６８、キング（Ｋｉｎｇ）著、２００２年、テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ）、第４３巻、ｐ．１９８７〜１９９０）。デンドリティックリンカーは、ＡＤＣの効力に関連する薬剤対の抗体のモル比すなわちロード率を増加させることが可能である。そのため、抗体が１つの反応性システインチオール基しか有していない場合、デンドリティックリンカー又は分岐状リンカーを介して多くの薬剤部分を結合しうる。
デンドリマー型リンカーの模範的な一実施形態は、構造：
を有する。式中、アステリスクは薬剤部分への結合点を表す。
追加の許容可能リンカーは、国際公開第２０１４／０５７１１７号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１７／００２９５１４号明細書（参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる）に開示されている。
ＰＢＤ−抗体コンジュゲート
いくつかの実施形態では、本開示は、式Ｌ−（ＤＬ）ｐのコンジュゲートを提供する。式中、ＤＬは、式Ｉ又はＩＩ：
で示され、
Ｌは、抗体（Ａｂ）、たとえば、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合する抗体又は抗体フラグメントであり、
Ｃ２’とＣ３’との間に二重結合が存在する場合、Ｒ１２は、
（ｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ１〜７アルキル、Ｃ３〜７ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ１〜３アルキレンを含む群から選択される１個以上の置換基により任意選択的に置換されたＣ５〜１０アリール基、
（ｉｂ）Ｃ１〜５飽和脂肪族アルキル、
（ｉｃ）Ｃ３〜６飽和シクロアルキル、
（ｉｄ）以下：
（式中、Ｒ２１、Ｒ２２、及びＲ２３の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜３飽和アルキル、Ｃ２〜３アルケニル、Ｃ２〜３アルキニル、及びシクロプロピルから選択され、Ｒ１２基の全炭素原子数は５以下である）、
（ｉｅ）以下：
（式中、Ｒ２５ａ及びＲ２５ｂの一方はＨであり、且つ他方はフェニルから選択され、ただし、このフェニルは、ハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、及びチオフェニルから選択される基により任意選択的に置換される）、並びに
（ｉｆ）以下：
（式中、Ｒ２４は、Ｈ、Ｃ１〜３飽和アルキル、Ｃ２〜３アルケニル、Ｃ２〜３アルキニル、シクロプロピル、フェニルから選択され、ただし、このフェニルは、ハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、及びチオフェニルから選択される基により任意選択的に置換される）、
からなる群から選択され、
Ｃ２’とＣ３’との間に単結合が存在する場合、
Ｒ１２は、以下：
であり、式中、Ｒ２６ａ及びＲ２６ｂは、Ｈ、Ｆ、Ｃ１〜４飽和アルキル、Ｃ２〜３アルケニルから独立して選択され、ただし、このアルキル基及びアルケニル基は、Ｃ１〜４アルキルアミド及びＣ１〜４アルキルエステルから選択される基により任意選択的に置換され、又はＲ２６ａ及びＲ２６ｂの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ１〜４アルキルエステルから選択され、
Ｒ６及びＲ９は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ３Ｓｎ、及びハロから独立して選択され、
Ｒ及びＲ’は、任意選択的に置換されたＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル、及びＣ５〜２０アリール基から独立して選択され、
Ｒ７は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＨＲＲ’、ニトロ、Ｍｅ３Ｓｎ、及びハロから選択され、
Ｒ”は、Ｃ３〜１２アルキレン基（この鎖は、１個以上のヘテロ原子、たとえば、Ｏ、Ｓ、ＮＲＮ２（式中、ＲＮ２は、Ｈ又はＣ１〜４アルキルである）が介在していてもよい）、及び／又は芳香環、たとえば、ベンゼン又はピリジンであり、
Ｙ及びＹ’は、Ｏ、Ｓ、又はＮＨから選択され、
Ｒ６’、Ｒ７’、Ｒ９’は、それぞれ、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ９と同一の基から選択され、
［式Ｉ］
ＲＬ１’は、抗体（Ａｂ）への接続用リンカーであり、
Ｒ１１ａは、ＯＨ、ＯＲＡ（式中、ＲＡはＣ１〜４アルキルである）、及びＳＯｚＭ（式中、ｚは２又は３であり、且つＭは１価の薬学的に許容可能なカチオンである）から選択され、
Ｒ２０及びＲ２１は、一緒になってそれらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に二重結合を形成するか、又は
Ｒ２０は、Ｈ及びＲＣ（式中、ＲＣはキャップ基である）から選択され、
Ｒ２１は、ＯＨ、ＯＲＡ、及びＳＯｚＭでから選択されるか、
のどちらかであり、
Ｃ２とＣ３との間に二重結合が存在する場合、Ｒ２は、
（ｉａ）ハロ、ニトロ、シアノ、エーテル、カルボキシ、エステル、Ｃ１〜７アルキル、Ｃ３〜７ヘテロシクリル、及びビス−オキシ−Ｃ１〜３アルキレンを含む群から選択される１個以上の置換基により任意選択的に置換されたＣ５〜１０アリール基、
（ｉｂ）Ｃ１〜５飽和脂肪族アルキル、
（ｉｃ）Ｃ３〜６飽和シクロアルキル、
（ｉｄ）以下：
（式中、Ｒ１１、Ｒ１２、及びＲ１３の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜３飽和アルキル、Ｃ２〜３アルケニル、Ｃ２〜３アルキニル、及びシクロプロピルから選択され、Ｒ２基は全炭素原子数が５以下である）、
（ｉｅ）以下：
（式中、Ｒ１５ａ及びＲ１５ｂの一方はＨであり、且つ他方はフェニルから選択され、ただし、このフェニルは、ハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、及びチオフェニルから選択される基により任意選択的に置換される）、
（ｉｆ）以下：
（式中、Ｒ１４は、Ｈ、Ｃ１〜３飽和アルキル、Ｃ２〜３アルケニル、Ｃ２〜３アルキニル、シクロプロピル、フェニルから選択され、ただし、このフェニルは、ハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、及びチオフェニルから選択される基により任意選択的に置換される）、
からなる群から選択され、
Ｃ２とＣ３との間に単結合が存在する場合、
Ｒ２は、以下：
であり、式中、Ｒ１６ａ及びＲ１６ｂは、Ｈ、Ｆ、Ｃ１〜４飽和アルキル、Ｃ２〜３アルケニルから独立して選択され、ただし、このアルキル基及びアルケニル基は、Ｃ１〜４アルキルアミド及びＣ１〜４アルキルエステルから選択される基により任意選択的に置換され、又はＲ１６ａ及びＲ１６ｂの一方がＨであるとき、他方はニトリル及びＣ１〜４アルキルエステルから選択され、
［式ＩＩ］
Ｒ２２は、式ＩＩＩａ、式ＩＩＩｂ、又は式ＩＩＩｃ：
（ａ）以下：
（式中、ＡはＣ５〜７アリール基であり、且つ
（ｉ）Ｑ１は単結合であり、且つＱ２は、単結合及び−Ｚ−（ＣＨ２）ｎ−（式中、Ｚは、単結合、Ｏ、Ｓ、及びＮＨから選択され、且つｎは１〜３である）から選択されるか、又は
（ｉｉ）Ｑ１は−ＣＨ＝ＣＨ−であり、且つＱ２は単結合であるか、
のどちらかである）
（ｂ）以下：
（式中、ＲＣ１、ＲＣ２、及びＲＣ３は、Ｈ及び非置換Ｃ１〜２アルキルから独立して選択される）
（ｃ）以下：
（式中、Ｑは、Ｏ−ＲＬ２’、Ｓ−ＲＬ２’、及びＮＲＮ−ＲＬ２’から選択され、且つＲＮは、Ｈ、メチル、及びエチルから選択され、
Ｘは、Ｏ−ＲＬ２’、Ｓ−ＲＬ２’、ＣＯ２−ＲＬ２’、ＣＯ−ＲＬ２’、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＲＬ２’、ＮＨＮＨ−ＲＬ２’、ＣＯＮＨＮＨ−ＲＬ２’、以下：
、ＮＲＮＲＬ２’を含む群から選択され、ＲＮは、Ｈ及びＣ１〜４アルキルを含む群から選択され、
ＲＬ２’は、抗体（Ａｂ）への接続用リンカーであり、
Ｒ１０及びＲ１１は、一緒になって、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に二重結合を形成するか、又は
Ｒ１０はＨであり、且つＲ１１は、ＯＨ、ＯＲＡ、及びＳＯｚＭから選択されるか、
のどちらかであり、
Ｒ３０及びＲ３１は、一緒になって、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に二重結合を形成するか、又は
Ｒ３０はＨであり、且つＲ３１は、ＯＨ、ＯＲＡ、及びＳＯｚＭから選択されるか、
のどちらかである）
で示される。
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは以下のものではない。
他の実施形態では、コンジュゲートは、式ＣｏｎｊＡ、ＣｏｎｊＢ、ＣｏｎｊＣ、ＣｏｎｊＤ、及びＣｏｎｊＥのコンジュゲートから選択することが好ましいであろう。たとえば、いくつかの実施形態では、抗体が以上に定義した通りである場合、本開示のコンジュゲートはＣｏｎｊＡである。いくつかの実施形態では、抗体が以上に定義した通りである場合、本開示のコンジュゲートはＣｏｎｊＢである。いくつかの実施形態では、抗体が以上に定義した通りである場合、本開示のコンジュゲートはＣｏｎｊＣである。いくつかの実施形態では、抗体が以上に定義した通りである場合、本開示のコンジュゲートはＣｏｎｊＤである。いくつかの実施形態では、抗体が以上に定義した通りである場合、本開示のコンジュゲートはＣｏｎｊＥである。
上述したように、いくつかの実施形態では、ＣｏｎｊＡ、ＣｏｎｊＢ、ＣｏｎｊＣ、ＣｏｎｊＤ、及びＣｏｎｊＥは除外される。
いくつかの実施形態では、本開示は、以上に記載のＰＤＢコンジュゲートの製造方法を提供する。この方法は、式ＩＬ又はＩＩＬ：
の化合物を抗体（Ａｂ）にコンジュゲートすることを含む。式中、
ＲＬ１は、抗体（Ａｂ）にコンジュゲートするのに好適なリンカーであり、
Ｒ２２Ｌは、式ＩＩＩａＬ、式ＩＩＩｂＬ、又は式ＩＩＩｃＬ：
（式中、ＱＬは、Ｏ−ＲＬ２、Ｓ−ＲＬ２、及びＮＲＮ−ＲＬ２から選択され、且つＲＮは、Ｈ、メチル、及びエチルから選択され、
ＸＬは、Ｏ−ＲＬ２、Ｓ−ＲＬ２、ＣＯ２−ＲＬ２、ＣＯ−ＲＬ２、Ｎ＝Ｃ＝Ｏ−ＲＬ２、ＮＨＮＨ−ＲＬ２、ＣＯＮＨＮＨ−ＲＬ２、以下：
、ＮＲＮＲＬを含む群から選択され、ＲＮは、Ｈ及びＣ１〜４アルキルを含む群から選択され、
ＲＬ２は、抗体（Ａｂ）にコンジュゲートするのに好適なリンカーである）
で示され、且つ
残りの基はすべて、以上に定義した通りである。
いくつかの好ましい実施形態では、本開示は、以下：
からそれぞれ選択される化合物と、本明細書に定義される抗体と、をコンジュゲートすることを含む、ＣｏｎｊＡ、ＣｏｎｊＢ、ＣｏｎｊＣ、ＣｏｎｊＤ、及びＣｏｎｊＥからなる群から選択されるコンジュゲートの製造方法を提供する。
国際公開第２０１１／１３０６１５号パンフレット（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）には、化合物Ａの親化合物である化合物２６：
が開示されている。化合物Ａは、このＰＢＤと細胞結合剤への結合用リンカーとを含む。細胞結合剤は、コンジュゲートの合成に有用な溶解性を提供するためにいくつかのエチレングリコール部分を提供する。
国際公開第２０１０／０４３３８０号パンフレット及び国際公開第２０１１／１３０６１３号パンフレット（それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）には、化合物３０：
が開示されている。
また、国際公開第２０１１／１３０６１３号パンフレットには、化合物５１：
が開示されている。化合物Ｂは、ＰＢＤ部分間で（ＣＨ２）５テザーの代わりに放出ＰＢＤダイマーの親油性を低減する（ＣＨ２）３テザーを有する点のみが化合物３０と異なる。結合基は、フェニル基のメタ位ではなくパラ位でＣ２に結合される。
国際公開第２０１１／１３０６１３号パンフレットには、化合物９３：
が開示されている。化合物Ｃは、２つの点でこれと異なる。細胞結合剤は、コンジュゲートの合成に有用な溶解性を提供するために増加させたエチレングリコール部分の数を提供し、且つフェニル置換基は、１個ではなく２個の酸素原子を提供し、これもまた溶解性を支援する。化合物Ｃの構造は、より強く副溝に結合することも意味しうる。
化合物Ａ、Ｂ、及びＣは、各Ｃ環に２つのｓｐ２中心を有するので、各Ｃ環に１つのみのｓｐ２中心を有する化合物よりもＤＮＡの副溝へのより強い結合を可能にしうる。
国際公開第２０１１／１３０５９８号パンフレット（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）には、化合物８０：
が開示されている。化合物Ｄは、細胞結合剤への結合のためにヨードアセトアミド基を含む点でこれと異なる。この基は、細胞結合剤への結合時のその安定性に関して化合物８０よりも優れた利点を提供しうる（以下を参照されたい）。化合物８０のマレイミド（ｍａｌｅｍｉｄｅ）基は、レトロマイケル反応を起こして細胞結合剤から脱コンジュゲートされた状態になる可能性があるので、アルブミンやグルタチオンなどの他のチオール含有生物学的分子により捕捉されやすい。かかる脱コンジュゲーションは化合物Ａでは起こりえない。また、ヨードアセトアミド基は、他の望ましくない副反応を回避しうる。
化合物Ｅは、より小さなより親油性の低いＣ２置換基、たとえば、４Ｆ−フェニル、プロピレンを有するという点で、Ｃ２−３エンド二重結合を有する薬剤リンカーを含むすでに開示されたＰＢＤダイマーと異なる。したがって、化合物Ｂのコンジュゲート（以下を参照されたい）は、合成後に凝集する可能性がより低い。コンジュゲートのかかる凝集は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により測定可能である。
化合物Ｄ及びＥは両方とも、各Ｃ環に２つのｓｐ２中心を有するので、各Ｃ環に１つのみのｓｐ２中心を有する化合物よりもＤＮＡの副溝へのより強い結合を可能にしうる。
国際公開第２０１０／０４３８８０号パンフレット、国際公開第２０１１／１３０６１３号パンフレット、国際公開第２０１１／１３０５９８号パンフレット、及び国際公開第２０１１／１３０６１６号パンフレットに開示される薬剤リンカーは、使用しうるとともに参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に記載の薬剤リンカーは、これらの開示に記載されるように合成しうる。
キャップ基Ｒｃ
コンジュゲートは、ＰＤＢ化合物のＮ１０位にキャップ基ＲＣを有しうる。以上に記載の化合物Ｅは、キャップ基ＲＣを有しうる。
コンジュゲートが式（Ａ）の各モノマーのダイマーである一実施形態では、モノマー単位の一方の基Ｒ１０は、キャップ基ＲＣ又は基Ｒ１０である。
コンジュゲートが式（Ａ）の各モノマーのダイマーである一実施形態では、モノマー単位の一方の基Ｒ１０は、キャップ基ＲＣである。
化合物Ｅが式（Ｅ）の各モノマーのダイマーである一実施形態では、モノマー単位の一方の基ＲＬは、キャップ基ＲＣであるか又は抗体への接続用リンカーである。
化合物Ｅが式（Ｅ）の各モノマーのダイマーである一実施形態では、モノマー単位の一方の基ＲＬは、キャップ基ＲＣである。
基ＲＣは、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合、カルビノールアミン、置換カルビノールアミン、ＱＲ１１がＯＳＯ３Ｍのとき重亜硫酸付加物、チオカルビノールアミン、置換チオカルビノールアミン、又は置換カルビナールアミンを残すように、ＰＢＤ部分のＮ１０位から除去可能である。
一実施形態では、ＲＣは、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合、カルビノールアミン、置換カルビノールアミン（ｃａｂｉｎｏｌａｍｉｎｅ）、又はＱＲ１１がＯＳＯ３Ｍのとき重亜硫酸付加物を残すように除去可能な保護基でありうる。一実施形態では、ＲＣは、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合を残すように除去可能な保護基である。
基Ｒｃは、たとえば、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合、カルビノールアミンなどを生成するように、基Ｒ１０の除去に必要とされるものと同一の条件下で除去可能であることが意図される。キャップ基は、意図されたＮ１０位の官能基の保護基として作用する。キャップ基は、抗体に反応しないように意図される。たとえば、ＲＣはＲＬと同一ではない。
キャップ基を有する化合物は、イミンモノマーを有するダイマーの合成の中間体として使用しうる。代替的に、キャップ基を有する化合物は、イミン、カルビノールアミン、置換カルビノールアミン（ｃａｂｉｎｏｌａｍｉｎｅ）などを生成するようにキャップ基が標的位置で除去される場合、コンジュゲートとして使用しうる。そのため、この実施形態では、キャップ基は、本発明者らの先行出願の国際公開第００／１２５０７号パンフレットに定義されるように、治療上除去可能な窒素保護基といいうる。
一実施形態では、基ＲＣは、基Ｒ１０のリンカーＲＬを切断する条件下で除去可能である。そのため、一実施形態では、キャップ基は、酵素の作用により切断可能である。
代替実施形態では、キャップ基は、抗体へのリンカーＲＬの接続前に除去可能である。この実施形態では、キャップ基は、リンカーＲＬを切断しない条件下で除去可能である。
抗体への接続を形成するように化合物が官能基Ｇ１を含む場合、キャップ基は、Ｇ１の付加前又はアンマスク前に除去可能である。
キャップ基は、ダイマーのモノマー単位の１つのみが抗体に確実に接続されるように、保護基ストラテジーの一部として使用しうる。
キャップ基は、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合用のマスクとして使用しうる。キャップ基は、化合物でイミン官能基が必要とされるときに除去しうる。キャップ基はまた、以上に記載したように、カルビノールアミン用、置換カルビノールアミン（ｃａｂｉｎｏｌａｍｉｎｅ）用、及び重亜硫酸付加物用のマスクである。
ＲＣは、本発明者らの先行出願の国際公開第００／１２５０７号パンフレットに記載の基などのＮ１０保護基でありうる。一実施形態では、ＲＣは、本発明者らの先行出願の国際公開第００／１２５０７号パンフレットに定義される治療上除去可能な窒素保護基である。
一実施形態では、ＲＣはカルバメート保護基である。
一実施形態では、カルバメート保護基は、Ａｌｌｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｔｒｏｃ、Ｔｅｏｃ、Ｐｓｅｃ、Ｃｂｚ、及びＰＮＺから選択される。
任意選択的に、カルバメート保護基は、Ｍｏｃからさらに選択される。
一実施形態では、ＲＣは、抗体への接続用官能基が欠如したリンカー基ＲＬである。
本出願は、カルバメートであるＲＣ基に特に関係する。
一実施形態では、ＲＣは基：
である。式中、アステリスクはＮ１０位への結合点を表し、Ｇ２は末端基であり、Ｌ３は共有結合又は切断可能リンカーＬ１であり、Ｌ２は共有結合であるか又はＯＣ（＝Ｏ）と一緒になって自己犠牲リンカーを形成する。
Ｌ３及びＬ２が両方とも共有結合である場合、Ｇ２及びＯＣ（＝Ｏ）は一緒になって、以上に定義したカルバメート保護基を形成する。
Ｌ１は、Ｒ１０との関連で以上に定義した通りである。
Ｌ２は、Ｒ１０との関連で以上に定義した通りである。
周知の保護基に基づくものを含めて、各種末端基を以下に記載する。
一実施形態では、Ｌ３は切断可能リンカーＬ１であり、且つＬ２は、ＯＣ（＝Ｏ）と一緒になって自己犠牲リンカーを形成する。この実施形態では、Ｇ２は、Ａｃ（アセチル）若しくはＭｏｃ、又はＡｌｌｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｔｒｏｃ、Ｔｅｏｃ、Ｐｓｅｃ、Ｃｂｚ、及びＰＮＺから選択されるカルバメート保護基である。任意選択的に、カルバメート保護基は、Ｍｏｃからさらに選択される。
他の一実施形態では、Ｇ２はアシル基−Ｃ（＝Ｏ）Ｇ３である。式中、Ｇ３は、アルキル（シクロアルキル、アルケニル、及びアルキニルを含む）、ヘテロアルキル、ヘテロシクリル、及びアリール（ヘテロアリール及びカルボアリールを含む）から選択される。これらの基は、任意選択的に置換しうる。アシル基は、Ｌ３又はＬ２のアミノ基と一緒になって、適宜、アミド結合を形成しうる。アシル基は、Ｌ３又はＬ２のヒドロキシ基と一緒になって、適宜、エステル結合を形成しうる。
一実施形態では、Ｇ３はヘテロアルキルである。ヘテロアルキル基は、ポリエチレングリコールを含みうる。ヘテロアルキル基は、アシル基に隣接してＯやＮなどのヘテロ原子を有しうるので、適宜、基Ｌ３又はＬ２に存在するヘテロ原子と共に、適宜、カルバメート基又はカーボネート基を形成する。
一実施形態では、Ｇ３は、ＮＨ２、ＮＨＲ、及びＮＲＲ’から選択される。好ましくは、Ｇ３はＮＲＲ’である。
一実施形態では、Ｇ２は基：
である。式中、アステリスクはＬ３への結合点を表し、ｎは０〜６であり、且つＧ４は、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ２、及びハロから選択される。基ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、及びＮＨＲは保護される。一実施形態では、ｎは１〜６であり、好ましくはｎは５である。一実施形態では、Ｇ４は、ＯＲ、ＳＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲＲ’、及びＮＲＲ’である。一実施形態では、Ｇ４は、ＯＲ、ＳＲ、及びＮＲＲ’である。好ましくは、Ｇ４はＯＲ及びＮＲＲ’から選択され、最も好ましくは、Ｇ４はＯＲである。最も好ましくは、Ｇ４はＯＭｅである。
一実施形態では、基Ｇ２は：
である。式中、アステリスクはＬ３への結合点を表し、ｎ及びＧ４は以上に定義した通りである。
一実施形態では、基Ｇ２は：
である。式中、アステリスクはＬ３への結合点を表し、ｎは０又は１であり、ｍは０〜５０であり、且つＧ４は、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ２、及びハロから選択される。好ましい実施形態では、ｎは１であり、且つｍは０〜１０、１〜２、好ましくは４〜８、最も好ましくは４又は８である。他の一実施形態では、ｎは１であり、且つｍは１０〜５０、好ましくは２０〜４０である。基ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、及びＮＨＲは保護される。一実施形態では、Ｇ４は、ＯＲ、ＳＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲＲ’、及びＮＲＲ’である。一実施形態では、Ｇ４は、ＯＲ、ＳＲ、及びＮＲＲ’である。好ましくは、Ｇ４はＯＲ及びＮＲＲ’から選択され、最も好ましくは、Ｇ４はＯＲである。好ましくは、Ｇ４はＯＭｅである。
一実施形態では、基Ｇ２は：
である。式中、アステリスクはＬ３への結合点を表し、且つｎ、ｍ、及びＧ４は以上に定義した通りである。
一実施形態では、基Ｇ２は：
である。式中、ｎは１〜２０であり、ｍは０〜６であり、且つＧ４は、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ２、及びハロから選択される。一実施形態では、ｎは１〜１０である。他の一実施形態では、ｎは１０〜５０、好ましくは２０〜４０である。一実施形態では、ｎは１である。一実施形態では、ｍは１である。基ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、及びＮＨＲは保護される。一実施形態では、Ｇ４は、ＯＲ、ＳＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲＲ’、及びＮＲＲ’である。一実施形態では、Ｇ４は、ＯＲ、ＳＲ、及びＮＲＲ’である。好ましくは、Ｇ４はＯＲ及びＮＲＲ’から選択され、最も好ましくは、Ｇ４はＯＲである。好ましくは、Ｇ４はＯＭｅである。
一実施形態では、基Ｇ２は：
である。式中、アステリスクはＬ３への結合点を表し、且つｎ、ｍ、及びＧ４は以上に定義した通りである。
以上の実施形態の各々では、Ｇ４は、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、及びＮＨＲでありうる。これらの基は好ましくは保護される。
一実施形態では、ＯＨは、Ｂｚｌ、ＴＢＤＭＳ、又はＴＢＤＰＳで保護される。
一実施形態では、ＳＨは、Ａｃｍ、Ｂｚｌ、Ｂｚｌ−ＯＭｅ、Ｂｚｌ−Ｍｅ、又はＴｒｔで保護される。
一実施形態では、ＮＨ２又はＮＨＲは、Ｂｏｃ、Ｍｏｃ、Ｚ−Ｃｌ、Ｆｍｏｃ、Ｚ、又はＡｌｌｏｃで保護される。
一実施形態では、基Ｇ２は、基Ｌ３（この基はジペプチドである）との組合せで存在する。
キャップ基は、抗体への接続が意図されない。そのため、ダイマーに存在する他のモノマーは、リンカーを介して抗体への接続ポイントとして機能する。したがって、キャップ基に存在する官能基は、抗体との反応に利用できないことが好ましい。そのため、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、ＣＯＯＨなどの反応性官能基は、好ましくは回避される。しかしながら、以上に記載したように、保護されるのであれば、かかる官能基は、キャップ基に存在しうる。
薬学的に許容可能なカチオン
薬学的に許容可能な１価及び２価のカチオンの例は、バージ（Ｂｅｒｇｅ）ら著、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシズ（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第６６巻、ｐ．１〜１９、１９７７年（参照により本明細書に組み込まれる）に考察されている。
薬学的に許容可能なカチオンは、無機又は有機でありうる。
薬学的に許容可能な１価無機カチオンの例としては、限定されるものではないが、Ｎａ＋やＫ＋などのアルカリ金属イオンが挙げられる。薬学的に許容可能な２価無機カチオンの例としては、限定されるものではないが、Ｃａ２＋やＭｇ２＋などのアルカリ土類カチオンが挙げられる。薬学的に許容可能な有機カチオンの例としては、限定されるものではないが、アンモニウムイオン（すなわちＮＨ４ ＋）及び置換アンモニウムイオン（たとえば、ＮＨ３Ｒ＋、ＮＨ２Ｒ２ ＋、ＮＨＲ３ ＋、ＮＲ４ ＋）が挙げられる。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、及びトロメタミン、さらにはアミノ酸、たとえば、リシン及びアルギニンに由来するものである。通常の第４級アンモニウムイオンの例は、Ｎ（ＣＨ３）４ ＋である。
置換基
本明細書で用いられる「任意選択的に置換された」という語句は、置換されていなくても置換されていてもよい親基に関する。
特に明記されていない限り、本明細書で用いられる「置換」という用語は、１個以上の置換基を有する親基に関する。「置換基」という用語は、本明細書では、通常の意味で用いられ、親基に共有結合された又は適宜縮合された化学部分を意味する。多種多様な置換基が周知であり、それらの形成方法及びさまざまな親基への導入方法もまた周知である。
置換基の例は、より詳細に以下に記載される。
Ｃ１〜１２アルキル：本明細書で用いられる「Ｃ１〜１２アルキル」という用語は、脂肪族であっても脂環式であってもよい且つ飽和であっても不飽和（たとえば、部分不飽和、完全不飽和）であってもよい１〜１２個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することにより得られる１価部分に関する。本明細書で用いられる「Ｃ１〜４アルキル」という用語は、脂肪族であっても脂環式であってもよい且つ飽和であっても不飽和（たとえば、部分不飽和、完全不飽和）であってもよい１〜４個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することにより得られる１価部分に関する。そのため、「アルキル」という用語は、以下で考察されるサブクラスのアルケニル、アルキニル、シクロアルキルなどを含む。
飽和アルキル基の例としては、限定されるものではないが、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、プロピル（Ｃ３）、ブチル（Ｃ４）、ペンチル（Ｃ５）、ヘキシル（Ｃ６）、及びヘプチル（Ｃ７）が挙げられる。
飽和線状アルキル基の例としては、限定されるものではないが、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｎ−ペンチル（アミル）（Ｃ５）、ｎ−ヘキシル（Ｃ６）、及びｎ−ヘプチル（Ｃ７）が挙げられる。
飽和分岐状アルキル基の例としては、ｉｓｏ−プロピル（Ｃ３）、ｉｓｏ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、ｉｓｏ−ペンチル（Ｃ５）、及びｎｅｏ−ペンチル（Ｃ５）が挙げられる。
Ｃ２〜１２アルケニル：本明細書で用いられる「Ｃ２〜１２アルケニル」という用語は、１個以上の炭素−炭素二重結合を有するアルキル基に関する。
不飽和アルケニル基の例としては、限定されるものではないが、エテニル（ビニル、−ＣＨ＝ＣＨ２）、１−プロペニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ３）、２−プロペニル（アリル、−ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ２）、イソプロペニル（１−メチルビニル、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２）、ブテニル（Ｃ４）、ペンテニル（Ｃ５）、及びヘキセニル（Ｃ６）が挙げられる。
Ｃ２〜１２アルキニル：本明細書で用いられる「Ｃ２〜１２アルキニル」という用語は、１個以上の炭素−炭素三重結合を有するアルキル基に関する。
不飽和アルキニル基の例としては、限定されるものではないが、エチニル（−Ｃ≡ＣＨ）及び２−プロピニル（プロパルギル、−ＣＨ２−Ｃ≡ＣＨ）が挙げられる。
Ｃ３〜１２シクロアルキル：本明細書で用いられる「Ｃ３〜１２シクロアルキル」という用語は、シクリル基でもあるアルキル基、すなわち、環式炭化水素（炭素環式）化合物（この部分は３〜７個の環原子を含めて３〜７個の炭素原子を有する）の脂環式環原子から水素原子を除去することにより得られる１価部分に関する。
シクロアルキル基の例としては、限定されるものではないが、以下：
飽和単環式炭化水素化合物：シクロプロパン（Ｃ３）、シクロブタン（Ｃ４）、シクロペンタン（Ｃ５）、シクロヘキサン（Ｃ６）、シクロヘプタン（Ｃ７）、メチルシクロプロパン（Ｃ４）、ジメチルシクロプロパン（Ｃ５）、メチルシクロブタン（Ｃ５）、ジメチルシクロブタン（Ｃ６）、メチルシクロペンタン（Ｃ６）、ジメチルシクロペンタン（Ｃ７）、及びメチルシクロヘキサン（Ｃ７）、
不飽和単環式炭化水素化合物：シクロプロペン（Ｃ３）、シクロブテン（Ｃ４）、シクロペンテン（Ｃ５）、シクロヘキセン（Ｃ６）、メチルシクロプロペン（Ｃ４）、ジメチルシクロプロペン（Ｃ５）、メチルシクロブテン（Ｃ５）、ジメチルシクロブテン（Ｃ６）、メチルシクロペンテン（Ｃ６）、ジメチルシクロペンテン（Ｃ７）、及びメチルシクロヘキセン（Ｃ７）、並びに
飽和多環式炭化水素化合物：ノルカラン（Ｃ７）、ノルピナン（Ｃ７）、ノルボルナン（Ｃ７）、
に由来するものが挙げられる。
Ｃ３〜２０ヘテロシクリル：本明細書で用いられる「Ｃ３〜２０ヘテロシクリル」という用語は、ヘテロ環式化合物（この部分は３〜２０個の環原子を有し、そのうち１〜１０個が環ヘテロ原子である）の環原子から水素原子を除去することにより得られる１価部分に関する。好ましくは、各環は３〜７個の環原子を有し、そのうち１〜４個が環ヘテロ原子である。
これとの関連では、接頭辞（たとえば、Ｃ３〜２０、Ｃ３〜７、Ｃ５〜６など）は、炭素原子であるかヘテロ原子であるかにかかわらず、環原子の数又は環原子の数の範囲を表す。たとえば、本明細書で用いられる「Ｃ５〜６ヘテロシクリル」という用語は、５個又は６個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。
単環式ヘテロシクリル基の例としては、限定されるものではないが、以下：
Ｎ１：アジリジン（Ｃ３）、アゼチジン（Ｃ４）、ピロリジン（テトラヒドロピロール）（Ｃ５）、ピロリン（たとえば、３−ピロリン、２，５−ジヒドロピロール）（Ｃ５）、２Ｈ−ピロール又は３Ｈ−ピロール（イソピロール、イソアゾール）（Ｃ５）、ピペリジン（Ｃ６）、ジヒドロピリジン（Ｃ６）、テトラヒドロピリジン（Ｃ６）、アゼピン（Ｃ７）、
Ｏ１：オキシラン（Ｃ３）、オキセタン（Ｃ４）、オキソラン（テトラヒドロフラン）（Ｃ５）、オキソール（ジヒドロフラン）（Ｃ５）、オキサン（テトラヒドロピラン）（Ｃ６）、ジヒドロピラン（Ｃ６）、ピラン（Ｃ６）、オキセピン（Ｃ７）、
Ｓ１：チイラン（Ｃ３）、チエタン（Ｃ４）、チオラン（テトラヒドロチオフェン）（Ｃ５）、チアン（テトラヒドロチオピラン）（Ｃ６）、チエパン（Ｃ７）、
Ｏ２：ジオキソラン（Ｃ５）、ジオキサン（Ｃ６））、及びジオキセパン（Ｃ７）、
Ｏ３：トリオキサン（Ｃ６）、
Ｎ２：イミダゾリジン（Ｃ５）、ピラゾリジン（ジアゾリジン）（Ｃ５）、イミダゾリン（Ｃ５）、ピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（Ｃ５）、ピペラジン（Ｃ６）、
Ｎ１Ｏ１：テトラヒドロオキサゾール（Ｃ５）、ジヒドロオキサゾール（Ｃ５）、テトラヒドロイソオキサゾール（Ｃ５）、ジヒドロイソオキサゾール（Ｃ５）、モルホリン（Ｃ６）、テトラヒドロオキサジン（Ｃ６）、ジヒドロオキサジン（Ｃ６）、オキサジン（Ｃ６）、
Ｎ１Ｓ１：チアゾリン（Ｃ５）、チアゾリジン（Ｃ５）、チオモルホリン（Ｃ６）、
Ｎ２Ｏ１：オキサジアジン（Ｃ６）、
Ｏ１Ｓ１：オキサチオール（Ｃ５）及びオキサチアン（チオキサン）（Ｃ６）、並びに
Ｎ１Ｏ１Ｓ１：オキサチアジン（Ｃ６）、
に由来するものが挙げられる。
置換単環式ヘテロシクリル基の例としては、環形の糖、たとえば、フラノース（Ｃ５）、たとえば、アラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノース、及びキシロフラノース（ｘｙｌｏｆｕｒａｎｓｅ）、並びにピラノース（Ｃ６）、たとえば、アロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノース、及びタロピラノースに由来するものが挙げられる。
Ｃ５〜２０アリール：本明細書で用いられる「Ｃ５〜２０アリール」という用語は、芳香族化合物（この部分は３〜２０個の環原子を有する）の芳香環原子から水素原子を除去することにより得られる１価部分に関する。本明細書で用いられる「Ｃ５〜７アリール」という用語は、芳香族化合物（この部分は５〜７個の環原子を有する）の芳香環原子から水素原子を除去することにより得られる１価部分に関し、また本明細書で用いられる「Ｃ５〜１０アリール」という用語は、芳香族化合物（この部分は５〜１０個の環原子を有する）の芳香環原子から水素原子を除去することにより得られる１価部分に関する。好ましくは、各環は５〜７個の環原子を有する。
これとの関連では、接頭辞（たとえば、Ｃ３〜２０、Ｃ５〜７、Ｃ５〜６、Ｃ５〜１０など）は、炭素原子であるかヘテロ原子であるかにかかわらず、環原子の数又は環原子の数の範囲を表す。たとえば、本明細書で用いられる「Ｃ５〜６アリール」という用語は、５個又は６個の環原子を有するアリール基に関する。
環原子は、「カルボアリール基」の場合のようにすべて炭素原子でありうる。カルボアリール基の例としては、限定されるものではないが、ベンゼン（すなわちフェニル）（Ｃ６）、ナフタレン（Ｃ１０）、アズレン（Ｃ１０）、アントラセン（Ｃ１４）、フェナントレン（Ｃ１４）、ナフタセン（Ｃ１８）、及びピレン（Ｃ１６）に由来するものが挙げられる。
縮合環（このうち少なくとも１つは芳香環である）を含むアリール基の例としては、限定されるものではないが、インダン（たとえば、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン）（Ｃ９）、インデン（Ｃ９）、イソインデン（Ｃ９）、テトラリン（１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン（Ｃ１０）、アセナフテン（Ｃ１２）、フルオレン（Ｃ１３）、フェナレン（Ｃ１３）、アセフェナントレン（Ｃ１５）、及びアセアントレン（Ｃ１６）に由来する基が挙げられる。
代替的に、環原子は、「ヘテロアリール基」の場合のように１個以上のヘテロ原子を含みうる。単環式ヘテロアリール基の例としては、限定されるものではないが、以下：
Ｎ１：ピロール（アゾール）（Ｃ５）、ピリジン（アジン）（Ｃ６）、
Ｏ１：フラン（オキソール）（Ｃ５）、
Ｓ１：チオフェン（チオール）（Ｃ５）、
Ｎ１Ｏ１：オキサゾール（Ｃ５）、イソオキサゾール（Ｃ５）、イソオキサジン（Ｃ６）、
Ｎ２Ｏ１：オキサジアゾール（フラザン）（Ｃ５）、
Ｎ３Ｏ１：オキサトリアゾール（Ｃ５）、
Ｎ１Ｓ１：チアゾール（Ｃ５）、イソチアゾール（Ｃ５）、
Ｎ２：イミダゾール（１，３−ジアゾール）（Ｃ５）、ピラゾール（１，２−ジアゾール）（Ｃ５）、ピリダジン（１，２−ジアジン）（Ｃ６）、ピリミジン（１，３−ジアジン）（Ｃ６）（たとえば、シトシン、チミン、ウラシル）、ピラジン（１，４−ジアジン）（Ｃ６）、
Ｎ３：トリアゾール（Ｃ５）、トリアジン（Ｃ６）、並びに
Ｎ４：テトラゾール（Ｃ５）、
に由来するものが挙げられる。
縮合環を含むヘテロアリールの例としては、限定されるものではないが、以下：
ベンゾフラン（Ｏ１）、イソベンゾフラン（Ｏ１）、インドール（Ｎ１）、イソインドール（Ｎ１）、インドリジン（Ｎ１）、インドリン（Ｎ１）、イソインドリン（Ｎ１）、プリン（Ｎ４）（たとえば、アデニン、グアニン）、ベンゾイミダゾール（Ｎ２）、インダゾール（Ｎ２）、ベンゾオキサゾール（Ｎ１Ｏ１）、ベンゾイソオキサゾール（Ｎ１Ｏ１）、ベンゾジオキソール（Ｏ２）、ベンゾフラザン（Ｎ２Ｏ１）、ベンゾトリアゾール（Ｎ３）、ベンゾチオフラン（Ｓ１）、ベンゾチアゾール（Ｎ１Ｓ１）、ベンゾチアジアゾール（Ｎ２Ｓ）に由来するＣ９（２個の縮合された環を有する）、
クロメン（Ｏ１）、イソクロメン（Ｏ１）、クロマン（Ｏ１）、イソクロマン（Ｏ１）、ベンゾジオキサン（Ｏ２）、キノリン（Ｎ１）、イソキノリン（Ｎ１）、キノリジン（Ｎ１）、ベンゾオキサジン（Ｎ１Ｏ１）、ベンゾジアジン（Ｎ２）、ピリドピリジン（Ｎ２）、キノキサリン（Ｎ２）、キナゾリン（Ｎ２）、シンノリン（Ｎ２）、フタラジン（Ｎ２）、ナフチリジン（Ｎ２）、プテリジン（Ｎ４）に由来するＣ１０（２個の縮合された環を有する）、
ベンゾジアゼピン（Ｎ２）に由来するＣ１１（２個の縮合された環を有する）、
カルバゾール（Ｎ１）、ジベンゾフラン（Ｏ１）、ジベンゾチオフェン（Ｓ１）、カルボリン（Ｎ２）、ペリミジン（Ｎ２）、ピリドインドール（Ｎ２）に由来するＣ１３（３個の縮合された環を有する）、及び
アクリジン（Ｎ１）、キサンテン（Ｏ１）、チオキサンテン（Ｓ１）、オキサントレン（Ｏ２）、フェノキサチイン（Ｏ１Ｓ１）、フェナジン（Ｎ２）、フェノキサジン（Ｎ１Ｏ１）、フェノチアジン（Ｎ１Ｓ１）、チアントレン（Ｓ２）、フェナントリジン（Ｎ１）、フェナントロリン（Ｎ２）、フェナジン（Ｎ２）に由来するＣ１４（３個の縮合された環を有する）、
が挙げられる。
以上の基は、単独であるか他の置換基の一部であるかにかかわらず、それ自体及び以下に列挙される追加の置換基から選択される１つ以上の基でそれ自体が任意選択的に置換されていてもよい。
ハロ：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、及び−Ｉ。
ヒドロキシ：−ＯＨ。
エーテル：−ＯＲ、式中、Ｒは、エーテル置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基（Ｃ１〜７アルコキシ基ともいい、以下で考察される）、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基（Ｃ３〜２０ヘテロシクリルオキシ基ともいう）、又はＣ５〜２０アリール基（Ｃ５〜２０アリールオキシ基ともいう）、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。
アルコキシ：−ＯＲ、式中、Ｒはアルキル基（たとえばＣ１〜７アルキル基）である。Ｃ１〜７アルコキシ基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＭｅ（メトキシ）、−ＯＥｔ（エトキシ）、−Ｏ（ｎＰｒ）（ｎ−プロポキシ）、−Ｏ（ｉＰｒ）（イソプロポキシ）、−Ｏ（ｎＢｕ）（ｎ−ブトキシ）、−Ｏ（ｓＢｕ）（ｓｅｃ−ブトキシ）、−Ｏ（ｉＢｕ）（イソブトキシ）、及び−Ｏ（ｔＢｕ）（ｔｅｒｔ−ブトキシ）が挙げられる。
アセタール：−ＣＨ（ＯＲ１）（ＯＲ２）、式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、アセタール置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基であるか、又は「環式」アセタール基の場合、Ｒ１及びＲ２は、それらが結合されている２個の酸素原子及びそれらが結合されている炭素原子と一緒になって、４〜８個の環原子を有するヘテロ環式環を形成する。アセタール基の例としては、限定されるものではないが、−ＣＨ（ＯＭｅ）２、−ＣＨ（ＯＥｔ）２、及び−ＣＨ（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）が挙げられる。
ヘミアセタール：−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＲ１）、式中、Ｒ１は、ヘミアセタール置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。ヘミアセタール基の例としては、限定されるものではないが、−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＭｅ）及び−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＥｔ）が挙げられる。
ケタール：−ＣＲ（ＯＲ１）（ＯＲ２）、式中、Ｒ１及びＲ２は、アセタールで定義した通りであり、且つＲは、水素以外のケタール置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。ケタール基の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）２、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＥｔ）２、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）２、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＥｔ）２、及び−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）が挙げられる。
ヘミケタール：−ＣＲ（ＯＨ）（ＯＲ１）、式中、Ｒ１は、ヘミアセタールで定義した通りであり、且つＲは、水素以外のヘミケタール置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。ヘミアセタール基の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）、及び−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）が挙げられる。
オキソ（ケト、−オン）：＝Ｏ。
チオン（チオケトン）：＝Ｓ。
イミノ（イミン）：＝ＮＲ、式中、Ｒは、イミノ置換基、たとえば、水素、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、Ｃ５〜２０アリール基、好ましくは水素又はＣ１〜７アルキル基である。エステル基の例としては、限定されるものではないが、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ、＝ＮＥｔ、及び＝ＮＰｈが挙げられる。
ホルミル（カルバルデヒド、カルボキサルデヒド）：−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ。
アシル（ケト）：Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒは、アシル置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基（Ｃ１〜７アルキルアシル又はＣ１〜７アルカノイルともいう）、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基（Ｃ３〜２０ヘテロシクリルアシルともいう）、又はＣ５〜２０アリール基（Ｃ５〜２０アリールアシルともいう）、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。アシル基の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３（アセチル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３（プロピオニル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３（ｔ−ブチリル）、及び−Ｃ（＝Ｏ）Ｐｈ（ベンゾイル、フェノン）が挙げられる。
カルボキシ（カルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ。
チオカルボキシ（チオカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＳＨ。
チオロカルボキシ（チオロカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＳＨ。
チオノカルボキシ（チオノカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＯＨ。
イミド酸：−Ｃ（＝ＮＨ）ＯＨ。
ヒドロキサム酸：−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＯＨ。
エステル（カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、式中、Ｒは、エステル置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。エステル基の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ３）３、及び−Ｃ（＝Ｏ）ＯＰｈが挙げられる。
アシルオキシ（逆エステル）：−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒは、アシルオキシ置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。アシルオキシ基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３（アセトキシ）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｐｈ、及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｐｈが挙げられる。
オキシカルボニルオキシ（Ｏｘｙｃａｒｂｏｙｌｏｘｙ）：−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ、式中、Ｒは、エステル置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。エステル基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ３）３、及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＰｈが挙げられる。
アミノ：−ＮＲ１Ｒ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、アミノ置換基、たとえば、水素、Ｃ１〜７アルキル基（Ｃ１〜７アルキルアミノ若しくはジ−Ｃ１〜７アルキルアミノともいう）、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＨ又はＣ１〜７アルキル基であるか、或いは「環式」アミノ基の場合、Ｒ１及びＲ２は、それらが結合されている窒素原子と一緒になって、４〜８個の環原子を有するヘテロ環式環を形成する。アミノ基は、第１級（−ＮＨ２）、第２級（−ＮＨＲ１）、又は第３級（−ＮＨＲ１Ｒ２）でありうるとともに、カチオン形の第４級（−＋ＮＲ１Ｒ２Ｒ３）でありうる。アミノ基の例としては、限定されるものではないが、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−ＮＨＣ（ＣＨ３）２、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２、及び−ＮＨＰｈが挙げられる。環状アミノ基の例としては、限定されるものではないが、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ、及びチオモルホリノが挙げられる。
アミド（カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド）：−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１Ｒ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、アミノ基で定義したアミノ置換基である。アミド基の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２ＣＨ３、及び−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２、さらにはたとえばピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル、及びピペラジノカルボニルの場合のように、Ｒ１及びＲ２がそれらが結合されている窒素原子と一緒になってヘテロ環式構造を形成するアミド基が挙げられる。
チオアミド（チオカルバミル）：−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１Ｒ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、アミノ基で定義したアミノ置換基である。アミド基の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ３、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（ＣＨ３）２、及び−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。
アシルアミド（アシルアミノ）：−ＮＲ１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２、式中、Ｒ１は、アミド置換基、たとえば、水素、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、Ｃ５〜２０アリール基、好ましくは水素又はＣ１〜７アルキル基であり、且つＲ２は、アシル置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、Ｃ５〜２０アリール基、好ましくは水素又はＣ１〜７アルキル基である。アシルアミド基の例としては、限定されるものではないが、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、及び−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｐｈが挙げられる。Ｒ１及びＲ２は、たとえば、スクシンイミジル、マレイミジル、及びフタルイミジル：
の場合のように、一緒になって環状構造を形成してもよい。
アミノカルボニルオキシ：−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ１Ｒ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、アミノ基で定義したアミノ置換基である。アミノカルボニルオキシ基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨＭｅ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＭｅ２、及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＥｔ２が挙げられる。
ウレイド：−Ｎ（Ｒ１）ＣＯＮＲ２Ｒ３、式中、Ｒ２及びＲ３は、独立して、アミノ基で定義したアミノ置換基であり、且つＲ１は、ウレイド置換基、たとえば、水素、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、Ｃ５〜２０アリール基、好ましくは水素又はＣ１〜７アルキル基である。ウレイド基の例としては、限定されるものではないが、−ＮＨＣＯＮＨ２、−ＮＨＣＯＮＨＭｅ、−ＮＨＣＯＮＨＥｔ、−ＮＨＣＯＮＭｅ２、−ＮＨＣＯＮＥｔ２、−ＮＭｅＣＯＮＨ２、−ＮＭｅＣＯＮＨＭｅ、−ＮＭｅＣＯＮＨＥｔ、−ＮＭｅＣＯＮＭｅ２、及び−ＮＭｅＣＯＮＥｔ２が挙げられる。
グアニジノ：−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２。
テトラゾリル：４個の窒素原子と１個の炭素原子とを有する５員芳香環。
イミノ：＝ＮＲ、式中、Ｒは、イミノ置換基、たとえば、水素、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、Ｃ５〜２０アリール基、好ましくはＨ又はＣ１〜７アルキル基である。イミノ基の例としては、限定されるものではないが、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ、及び＝ＮＥｔが挙げられる。
アミジン（アミジノ）：−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ２、式中、各Ｒは、アミジン置換基、たとえば、水素、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、Ｃ５〜２０アリール基、好ましくはＨ又はＣ１〜７アルキル基である。アミジン基の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＭｅ２、及び−Ｃ（＝ＮＭｅ）ＮＭｅ２が挙げられる。
ニトロ：−ＮＯ２。
ニトロソ：−ＮＯ。
アジド：−Ｎ３
シアノ（ニトリル、カルボニトリル）：−ＣＮ。
イソシアノ：−ＮＣ。
シアナト：−ＯＣＮ。
イソシアナト：−ＮＣＯ。
チオシアノ（チオシアナト）：−ＳＣＮ。
イソチオシアノ（イソチオシアナト）：−ＮＣＳ。
スルフヒドリル（チオール、メルカプト）：−ＳＨ。
チオエーテル（スルフィド）：−ＳＲ、式中、Ｒは、チオエーテル置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基（Ｃ１〜７アルキルチオ基ともいう）、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。Ｃ１〜７アルキルチオ基の例としては、限定されるものではないが、−ＳＣＨ３及び−ＳＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。
ジスルフィド：−ＳＳ−Ｒ、式中、Ｒは、ジスルフィド置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基（本明細書ではＣ１〜７アルキルジスルフィドともいう）である。Ｃ１〜７アルキルジスルフィド基の例としては、限定されるものではないが、−ＳＳＣＨ３及び−ＳＳＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。
スルフィン（スルフィニル、スルホキシド）：−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒは、スルフィン置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルフィン基の例としては、限定されるものではないが、−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ３及び−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。
スルホン（スルホニル）：Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ、式中、Ｒは、スルホン置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはたとえばフッ素化又は過フッ素化Ｃ１〜７アルキル基を含めてＣ１〜７アルキル基である。スルホン基の例としては、限定されるものではないが、−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ３（メタンスルホニル、メシル）、−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＦ３（トリフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ３（エシル）、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｃ４Ｆ９（ノナフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＦ３（トレシル）、−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（タウリル）、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｐｈ（フェニルスルホニル、ベシル）、４−メチルフェニルスルホニル（トシル）、４−クロロフェニルスルホニル（クロシル）、４−ブロモフェニルスルホニル（ブロシル）、４−ニトロフェニル（ノシル）、２−ナフタレンスルホネート（ナプシル）、及び５−ジメチルアミノナフタレン−１−イルスルホネート（ダンシル）が挙げられる。
スルフィン酸（スルフィノ）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＨ、−ＳＯ２Ｈ。
スルホン酸（スルホ）：−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、−ＳＯ３Ｈ。
スルフィネート（スルフィン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ、式中、Ｒは、スルフィネート置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルフィネート基の例としては、限定されるものではないが、−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ３（メトキシスルフィニル、メチルスルフィネート）及び−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３（エトキシスルフィニル、エチルスルフィネート）が挙げられる。
スルホネート（スルホン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲ、式中、Ｒは、スルホネート置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルホネート基の例としては、限定されるものではないが、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＣＨ３（メトキシスルホニル、メチルスルホネート）及び−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＣＨ２ＣＨ３（エトキシスルホニル、エチルスルホネート）が挙げられる。
スルフィニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒは、スルフィニルオキシ置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルフィニルオキシ基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ３及び−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。
スルホニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）２Ｒ、式中、Ｒは、スルホニルオキシ置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルホニルオキシ基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＣＨ３（メシレート）及び−ＯＳ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ３（エシレート）が挙げられる。
スルフェート：−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲ、式中、Ｒは、スルフェート置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルフェート基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＣＨ３及び−ＳＯ（＝Ｏ）２ＯＣＨ２ＣＨ３が挙げられる。
スルファミルアミノ（スルファモイル、スルフィン酸アミド、スルフィンアミド）：−Ｓ（＝Ｏ）ＮＲ１Ｒ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、アミノ基で定義したアミノ置換基である。スルファミル基の例としては、限定されるものではないが、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ３）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２、及び−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨＰｈが挙げられる。
スルホンアミド（スルフィナモイル、スルホン酸アミド、スルホンアミド）：−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ１Ｒ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、アミノ基で定義したアミノ置換基である。スルホンアミド基の例としては、限定されるものではないが、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ（ＣＨ３）、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ３）、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２、及び−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨＰｈが挙げられる。
スルファミノ：−ＮＲ１Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、式中、Ｒ１は、アミノ基で定義したアミノ置換基である。スルファミノ基の例としては、限定されるものではないが、−ＮＨＳ（＝Ｏ）２ＯＨ及び−Ｎ（ＣＨ３）Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨが挙げられる。
スルホンアミノ：−ＮＲ１Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ、式中、Ｒ１は、アミノ基で定義したアミノ置換基であり、且つＲは、スルホンアミノ置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルホンアミノ基の例としては、限定されるものではないが、−ＮＨＳ（＝Ｏ）２ＣＨ３及び−Ｎ（ＣＨ３）Ｓ（＝Ｏ）２Ｃ６Ｈ５が挙げられる。
スルフィンアミノ：−ＮＲ１Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒ１は、アミノ基で定義しアミノ置換基であり、且つＲは、スルフィンアミノ置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基である。スルフィンアミノ基の例としては、限定されるものではないが、−ＮＨＳ（＝Ｏ）ＣＨ３及び−Ｎ（ＣＨ３）Ｓ（＝Ｏ）Ｃ６Ｈ５が挙げられる。
ホスフィノ（ホスフィン）：−ＰＲ２、式中、Ｒは、ホスフィノ置換基、たとえば、−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、又はＣ５〜２０アリール基である。ホスフィノ基の例としては、限定されるものではないが、−ＰＨ２、−Ｐ（ＣＨ３）２、−Ｐ（ＣＨ２ＣＨ３）２、−Ｐ（ｔ−Ｂｕ）２、及び−Ｐ（Ｐｈ）２が挙げられる。
ホスホ：−Ｐ（＝Ｏ）２。
ホスフィニル（ホスフィンオキシド）：−Ｐ（＝Ｏ）Ｒ２、式中、Ｒは、ホスフィニル置換基、たとえば、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくはＣ１〜７アルキル基、又はＣ５〜２０アリール基である。ホスフィニル基の例としては、限定されるものではないが、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ３）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ２ＣＨ３）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ｔ−Ｂｕ）２、及び−Ｐ（＝Ｏ）（Ｐｈ）２が挙げられる。
ホスホン酸（ホスホノ）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２。
ホスホネート（ホスホノエステル）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、式中、Ｒは、ホスホネート置換基、たとえば、−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、又はＣ５〜２０アリール基である。ホスホネート基の例としては、限定されるものではないが、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ３）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ３）２、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）２、及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）２が挙げられる。
リン酸（ホスホノオキシ）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２。
ホスフェート（ホスホノオキシエステル）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、式中、Ｒは、ホスフェート置換基、たとえば、−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、又はＣ５〜２０アリール基である。ホスフェート基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ３）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ３）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）２、及び−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）２が挙げられる。
亜リン酸：−ＯＰ（ＯＨ）２。
ホスファイト：−ＯＰ（ＯＲ）２、式中、Ｒは、ホスファイト置換基、たとえば、−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、又はＣ５〜２０アリール基である。ホスファイト基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＰ（ＯＣＨ３）２、−ＯＰ（ＯＣＨ２ＣＨ３）２、−ＯＰ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）２、及び−ＯＰ（ＯＰｈ）２が挙げられる。
ホスホルアミダイト：−ＯＰ（ＯＲ１）−ＮＲ２ ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、ホスホルアミダイト置換基、たとえば、−Ｈ、（任意選択的に置換された）Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、又はＣ５〜２０アリール基である。ホスホルアミダイト基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＰ（ＯＣＨ２ＣＨ３）−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＯＰ（ＯＣＨ２ＣＨ３）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）２、及び−ＯＰ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）２が挙げられる。
ホスホルアミデート：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ１）−ＮＲ２ ２、式中、Ｒ１及びＲ２は、ホスホルアミデート置換基、たとえば、−Ｈ、（任意選択的に置換された）Ｃ１〜７アルキル基、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル基、又はＣ５〜２０アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ１〜７アルキル基、又はＣ５〜２０アリール基である。ホスホルアミデート基の例としては、限定されるものではないが、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ３）−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ３）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）２、及び−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）２が挙げられる。
アルキレン
Ｃ３〜１２アルキレン：本明細書で用いられる「Ｃ３〜１２アルキレン」という用語は、脂肪族であっても脂環式であってもよい且つ飽和であっても部分不飽和であっても完全不飽和であってもよい、３〜１２個の炭素原子（特に明記されていない限り）を有する炭化水素化合物の同一の炭素原子から２個、又は２個の異なる炭素原子の各々から１個ずつのどちらかで、２個の水素原子を除去することにより得られる２座部分に関する。そのため、「アルキレン」という用語は、以下で考察されるサブクラスのアルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレンなどを含む。
線状飽和Ｃ３〜１２アルキレン基の例としては、限定されるものではないが、−（ＣＨ２）ｎ−（式中、ｎは３〜１２の整数である）、たとえば、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−（プロピレン）、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−（ブチレン）、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−（ペンチレン）、及び−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−（ヘプチレン）が挙げられる。
分岐状飽和Ｃ３〜１２アルキレン基の例としては、限定されるものではないが、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）−、−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ２−、及び−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ２−が挙げられる。
線状部分不飽和Ｃ３〜１２アルキレン基（Ｃ３〜１２アルケニレン基及びアルキニレン基）の例としては、限定されるものではないが、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、及び−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−が挙げられる。
分岐状部分不飽和Ｃ３〜１２アルキレン基（Ｃ３〜１２アルケニレン基及びアルキニレン基）の例としては、限定されるものではないが、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ−、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−、及び−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ３）−が挙げられる。
脂環式飽和Ｃ３〜１２アルキレン基（Ｃ３〜１２シクロアルキレン）の例としては、限定されるものではないが、シクロペンチレン（たとえば、シクロペント−１，３−イレン）及びシクロヘキシレン（たとえば、シクロヘキス−１，４−イレン）が挙げられる。
脂環式部分不飽和Ｃ３〜１２アルキレン基（Ｃ３〜１２シクロアルキレン）の例としては、限定されるものではないが、シクロペンテニレン（たとえば、４−シクロペンテン−１，３−イレン）、シクロヘキセニレン（たとえば、２−シクロヘキセン−１，４−イレン、３−シクロヘキセン−１，２−イレン、２，５−シクロヘキサジエン−１，４−イレン）が挙げられる。
カルバメート窒素保護基：「カルバメート窒素保護基」という用語は、イミン結合の窒素をマスクする部分に関し、これは当技術分野で周知である。この基は以下の構造：
を有する。式中、Ｒ’１０は以上に定義したＲである。グリーン，Ｔ．Ｗ．（Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．）及びウッツ，Ｇ．Ｍ．（Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．）著、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第３版、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ・インコーポレーテッド（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．）、１９９９年（参照により本明細書に組み込まれる）の５０３〜５４９頁には、多数の好適な基が記載されている。
ヘミアミナール窒素保護基：「ヘミアミナール窒素保護基」という用語は、以下の構造：
を有する基に関する。式中、Ｒ’１０は以上に定義したＲである。グリーン，Ｔ．Ｗ．（Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．）及びウッツ，Ｇ．Ｍ．（Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．）著、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第３版、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ・インコーポレーテッド（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．）、１９９９年（参照により本明細書に組み込まれる）の６３３〜６４７頁には、アミド保護基として好適な多数の基が記載されている。
カルバメート窒素保護基及びヘミアミナール窒素保護基という基は、まとめて「合成用窒素保護基」と称しうる。
薬剤ロード率
薬剤ロード率とは、抗体又はそのフラグメント１つ当たりの薬剤分子の平均数のことである。本開示の化合物がシステインに結合される場合、薬剤ロード率は、１〜８薬剤（ＤＬ）／抗体の範囲内でありうる。すなわち、１、２、３、４、５、６、７、及び８個の薬剤部分が抗体に共有結合される。コンジュゲートの組成物は、１〜８個の範囲内の薬剤がコンジュゲートされた抗体の集合体を含む。本開示の化合物がリシンに結合される場合、薬剤ロード率は、１〜８０薬剤（ＤＬ）／抗体の範囲内でありうるが、４０、２０、１０、又は８の上限が好ましいであろう。コンジュゲートの組成物は、１〜８０、１〜４０、１〜２０、１〜１０、又は１〜８個の範囲内の薬剤がコンジュゲートされた抗体の集合体を含む。
コンジュゲーション反応からのＡＤＣ調製物の抗体１つ当たりの薬剤の平均数は、ＵＶ、逆相ＨＰＬＣ、ＨＩＣ、質量分析、ＥＬＩＳＡアッセイ、電気泳動などの従来の手段により特徴付けられうる。ｐに関するＡＤＣの定量的分布もまた決定しうる。ＥＬＩＳＡによりＡＤＣの特定の調製物のｐの平均値を決定しうる（ハンブレット（Ｈａｍｂｌｅｔｔ）ら著、２００４年、クリニカル・キャンサー・リサーチ（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、第１０巻、ｐ．７０６３〜７０７０、サンダーソン（Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ）ら著、２００５年、クリニカル・キャンサー・リサーチ（Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）、第１１巻、ｐ．８４３〜８５２）。しかしながら、ＥＬＩＳＡには抗体−抗原結合及び検出に限界があるため、ｐ（薬剤）値の分布は識別できない。また、抗体−薬剤コンジュゲートを検出するためのＥＬＩＳＡアッセイでは、薬剤部分が結合される抗体の位置、たとえば、重鎖若しくは軽鎖フラグメント又は特定のアミノ酸残基が決定されない。いくつかの場合には、逆相ＨＰＬＣや電気泳動などの手段により、ｐがある特定の値である均一なＡＤＣの、他の薬剤ロード率のＡＤＣからの分離、精製、及び特徴付けを達成しうる。かかる技術はまた、他のタイプのコンジュゲートにも適用しうる。
いくつかの抗体−薬剤コンジュゲートでは、ｐは、抗体の結合部位の数により制限されうる。たとえば、抗体は、システインチオール基を１つのみ若しくはいくつか有しうるか、又はリンカーが結合されうる十分な反応性のチオール基を１つのみ若しくはいくつか有しうる。薬剤ロード率が高くなると、たとえば、ｐ＞５では、ある特定の抗体−薬剤コンジュゲートの凝集、不溶性、毒性、又は細胞透過率低下を生じうる。
典型的には、理論最大量未満の薬剤部分がコンジュゲーション反応時に抗体にコンジュゲートされる。抗体は、たとえば、薬剤−リンカー中間体（Ｄ−Ｌ）又はリンカー試薬と反応しない多くのリシン残基を含有しうる。最も反応性の高いリシン基のみがアミン反応性リンカー試薬と反応しうる。また、最も反応性の高いシステインチオール基のみがチオール反応性リンカー試薬と反応しうる。一般に、抗体は、たとえ含有するとしても、薬剤部分に結合されうる多くの遊離の反応性システインチオール基を含有しない。化合物の抗体のシステインチオール残基のほとんどは、ジスルフィドブリッジとして存在するので、部分的又は全体的還元条件下でジチオトレイトール（ＤＴＴ）やＴＣＥＰなどの還元剤で還元しなければならない。ＡＤＣのロード率（薬剤／抗体比）は、（ｉ）抗体と比べてモル過剰の薬剤−リンカー中間体（Ｄ−Ｌ）又はリンカー試薬を制限すること、（ｉｉ）コンジュゲーション反応の時間又は温度を制限すること、及び（ｉｉｉ）システインチオール修飾の部分的又は限定的還元条件を含めて、いくつかの異なる方式で制御しうる。
ある特定の抗体は、還元性鎖間ジスルフィドすなわちシステインブリッジを有する。抗体は、ＤＴＴ（ジチオトレイトール）などの還元剤で処理することにより、リンカー試薬によるコンジュゲーションに対して反応性になるようにしうる。そのため、各システインブリッジは、理論上、２つの反応性チオール求核基を形成するであろう。リシンと２−イミノチオラン（トラウト試薬）とを反応させてアミンをチオールに変換することにより、追加の求核基を抗体に導入可能である。反応性チオール基は、１、２、３、４、又はそれ以上のシステイン残基を工学的に作製することにより（たとえば、１つ以上の非天然システインアミノ酸残基を含む突然変異体抗体を調製することにより）、抗体（又はそのフラグメント）に導入しうる。米国特許第７５２１５４１号明細書には、反応性システインアミノ酸の導入により抗体を工学操作することが教示されている。
実施形態では、鎖内又は分子間のジスルフィド結合を形成しないシステインアミノ酸を抗体の反応性部位に工学的に作製しうる（ジュヌツラ（Ｊｕｎｕｔｕｌａ）ら著、２００８ｂ年、ネイチャー・バイオテクノロジー（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．）、第２６巻、第８号、ｐ．９２５〜９３２、ドーナン（Ｄｏｒｎａｎ）ら著、２００９年、ブラッド（Ｂｌｏｏｄ）、第１１４巻、第１３号、ｐ．２７２１〜２７２９、米国特許第７５２１５４１号明細書、米国特許第７７２３４８５号明細書、国際公開第２００９／０５２２４９号パンフレット）。工学的に作製されたシステインチオールは、マレイミドやα−ハロアミドなどのチオール反応性求電子基を有する本開示のリンカー試薬又は薬剤−リンカー試薬と反応して、システイン工学操作抗体と薬剤部分とを有するＡＤＣを形成しうる。そのため、薬剤部分の位置の設計、制御、及び認知が可能である。工学的に作製されたシステインチオール基は、チオール反応性のリンカー試薬又は薬剤−リンカー試薬と典型的には高収率で反応するので、薬剤ロード率を制御可能である。重鎖又は軽鎖の単一部位の置換によりシステインアミノ酸を導入するようにＩｇＧ抗体を工学操作すると、２つの新しいシステインが対称抗体に与えられる。ほぼ均一なコンジュゲーション産物ＡＤＣを用いて、２に近い薬剤ロード率を達成可能である。
代替的に、アクサップ（Ａｘｕｐ）ら（２０１２年、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ）、第１０９巻、第４０号、ｐ．１６１０１〜１６１１６）により記載されるように、重鎖及び／又は軽鎖に非天然アミノ酸を含有するように抗体を工学操作することにより、部位特異的コンジュゲーションを達成可能である。非天然アミノ酸は、リンカー試薬と薬剤とを結合するように直交化学を設計可能であるという追加の利点を提供する。
抗体の求核基又は求電子基の２個以上が薬剤−リンカー中間体又はリンカー試薬と反応し、続いて薬剤部分の試薬と反応する場合、得られる生成物は、抗体に結合された薬剤部分の分布が、たとえば、１、２、３個などであるＡＤＣ化合物の混合物である。高分子逆相（ＰＬＲＰ）や疎水性相互作用（ＨＩＣ）などの液体クロマトグラフィー法を用いて、薬剤ロード率値により混合物中の化合物を分離しうる。単一薬剤ロード率値（ｐ）を有するＡＤＣの調製物を単離しうるが、薬剤部分が抗体のさまざまな部位でリンカーにより結合されうるので、こうした単一ロード率値のＡＤＣは、依然として、不均一混合物でありうる。
そのため、本開示の抗体−薬剤コンジュゲート組成物は、抗体が１つ以上の薬剤部分を有し且つ薬剤部分が各種アミノ酸残基で抗体に結合されうる抗体−薬剤コンジュゲート化合物の混合物を含む。
一実施形態では、抗体１つ当たりの薬剤分子の平均数は、１〜２０の範囲内である。いくつかの実施形態では、範囲は、１〜８、２〜８、２〜６、２〜４、及び４〜８から選択される。
いくつかの実施形態では、抗体１つ当たり１個の薬剤分子が存在する。
他の形の組込み
特に明記されていない限り、以上のものには、こうした置換基の周知のイオン形、塩形、溶媒和形、及び保護形が組み込まれる。たとえば、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）への参照は、そのアニオン（カルボキシレート）形（−ＣＯＯ−）、塩形、又は溶媒和形、さらには従来の保護形も含む。同様に、アミノ基への参照は、アミノ基のプロトン化形（−Ｎ＋ＨＲ１Ｒ２）、塩形、又は溶媒和形、たとえば塩酸塩形、さらにはアミノ基の従来の保護形も含む。同様に、ヒドロキシル基への参照は、そのアニオン形（−Ｏ−）、塩形、又は溶媒和形、さらには従来の保護形も含む。
塩
活性化合物の対応する塩、たとえば、薬学的に許容可能な塩の調製、精製、及び／又は取扱いを行うことが便利なことも又は望ましいこともある。薬学的に許容可能な塩の例は、バージ（Ｂｅｒｇｅ）ら著、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシズ（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第６６巻、ｐ．１〜１９、１９７７年で考察されている。
たとえば、化合物がアニオン性であるか、又はアニオン性になりうる官能基を有する場合（たとえば、−ＣＯＯＨは−ＣＯＯ−になりうる）、好適なカチオンと共に塩を形成しうる。好適な無機カチオンの例としては、限定されるものではないが、Ｎａ＋やＫ＋などのアルカリ金属イオン、Ｃａ２＋やＭｇ２＋などのアルカリ土類カチオン、及びＡｌ＋３などの他のカチオンが挙げられる。好適な有機カチオンの例としては、限定されるものではないが、アンモニウムイオン（すなわちＮＨ４ ＋）及び置換アンモニウムイオン（たとえば、ＮＨ３Ｒ＋、ＮＨ２Ｒ２ ＋、ＮＨＲ３ ＋、ＮＲ４ ＋）が挙げられる。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、及びトロメタミン、さらにはアミノ酸、たとえば、リシン及びアルギニンに由来するものである。通常の第４級アンモニウムイオンの例は、Ｎ（ＣＨ３）４ ＋である。
化合物がカチオン性であるか、又はカチオン性になりうる官能基を有する場合（たとえば、−ＮＨ２は−ＮＨ３ ＋になりうる）、好適なアニオンと共に塩を形成しうる。好適な無機アニオンの例としては、限定されるものではないが、次の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、及び亜リン酸に由来するものが挙げられる。
好適な有機アニオンの例としては、限定されるものではないが、次の有機酸：２−アセトキシ安息香酸（ａｃｅｔｙｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃ）、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、ケイ皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸（ｇｌｕｃｈｅｐｔｏｎｉｃ）、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、及び吉草酸に由来するものが挙げられる。好適な高分子有機アニオンの例としては、限定されるものではないが、次の高分子酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロースに由来するものが挙げられる。
溶媒和物
活性化合物の対応する溶媒和物の調製、精製、及び／又は取扱いを行うことが便利なことも又は望ましいこともある。「溶媒和物」という用語は、本明細書では、溶質（たとえば、活性化合物、活性化合物の塩）と溶媒との複合体を参照すべく通常の意味で用いられる。溶媒が水である場合、溶媒和物は、適宜、水和物、たとえば、一水和物、二水和物、三水和物などといいうる。
本開示は、溶媒が薬剤部分のイミン結合を横切って付加する化合物を含み、以下：
には溶媒が水又はアルコール（ＲＡＯＨ、式中、ＲＡはＣ１〜４アルキルである）である場合が例示される。この平衡のバランスは、化合物が見いだされる状態さらには部分自体の性質に依存する。
こうした特定の化合物は、たとえば、凍結乾燥により固形で単離しうる。
異性体
本開示のある特定の化合物は、限定されるものではないが、ｃｉｓ形及びｔｒａｎｓ形、Ｅ形及びＺ形、ｃ形、ｔ形、及びｒ−形、エンド形及びエキソ形、Ｒ形、Ｓ形、及びメソ形、Ｄ形及びＬ形、ｄ形及びｌ形、（＋）形及び（−）形、ケト形、エノール形、及びエノラート形、ｓｙｎ形及びａｎｔｉ形、シンクリナル形及びアンチクリナル形、α形及びβ形、アキシアル形及びエクアトリアル形、舟形、椅子形、ツイスト形、エンベロープ形、及び半椅子形、並びにそれらの組合せを含めて、１つ以上の特定の幾何異性形、光学異性形、エナンチオ異性形、ジアステレオ異性形、エピ異性形、アトロプ異性形、立体異性形、互変異性形、配座異性形、又はアノマー異性形で存在しうる。これ以降では、まとめて「異性体」（又は「異性形」）という。
「キラル」という用語は、鏡像パートナーの重ね合わせることができないという性質を有する分子を意味し、一方、「アキラル」という用語は、その鏡像パートナーと重ね合わせることができる分子を意味する。
「立体異性体」という用語は、同一の化学構成を有する化合物を意味するが、原子又は基の空間配置が異なる。
「ジアステレオマー」とは、キラリティー中心を２つ以上有し且つそれらの分子が互いに鏡像でない立体異性体を意味する。ジアステレオマーは、さまざまな物理的性質、たとえば、融点、沸点、分光特性、及び反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動やクロマトグラフィーなどの高分解能分析手順下で分離しうる。
「エナンチオマー」とは、互いに重ね合わせることができない鏡像である化合物の２つの立体異性体を意味する。
本明細書で用いられる立体化学の定義及び規則は、一般に、Ｓ．Ｐ．パーカー（Ｓ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ）編、「化学用語のマグロウヒル辞典（ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｒｍｓ）」、１９８４年、マグロウヒル・ブック・カンパニー（ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｂｏｏｋ Ｃｏｍｐａｎｙ）、ニューヨーク、並びにエリール，Ｅ（Ｅｌｉｅｌ，Ｅ）及びウィレン，Ｓ．（Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．）著、「有機化合物の立体化学（Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）」、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ・インコーポレーテッド（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．）、ニューヨーク、１９９４年に従う。本開示の化合物は、非対称中心又はキラル中心を含有しうるので、さまざまな立体異性形で存在する。本開示の化合物の立体異性形はすべて、限定されるものではないが、ジアステレオマー、エナンチオマー、及びアトロプ異性体、さらにはそれらの混合物たとえばラセミ混合物を含めて、本開示の一部を形成することが意図される。多くの有機化合物は、光学活性形で存在する。すなわち、それらは平面偏光光の平面を回転する能力を有する。光学活性化合物の記述では、接頭辞Ｄ及びＬ又はＲ及びＳは、そのキラル中心の周りの分子の絶対配置を表す。接頭辞ｄ及びｌ又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光光の回転の符号を表すために利用され、（−）又はｌは化合物が左旋性であることを意味する。（＋）又はｄの接頭辞の付いた化合物は右旋性である。所与の化学構造では、これらの立体異性体は、互いに鏡像であること以外は同一である。特定の立体異性体は、エナンチオマーともいいうるので、かかる異性体の混合物は、多くの場合、エナンチオマー混合物と呼ばれる。エナンチオマーの５０：５０混合物は、ラセミ混合物又はラセミ体と呼ばれ、化学反応又は化学プロセスで立体選択性も立体特異性もない場合に生じうる。「ラセミ混合物」及び「ラセミ体」という用語は、光学活性が排除された２つのエナンチオマー種の等モル混合物を意味する。
互変異性形に関する以下の考察を除いて、本明細書で用いられる「異性体」という用語から特に除外されるのは、構造（又は構成）異性体（すなわち、単に原子の空間位置ではなく原子間の結合が異なる異性体）であることに留意されたい。たとえば、メトキシ基（ＯＣＨ３）への参照は、その構造異性体であるヒドロキシメチル基ＣＨ２ＯＨへの参照として解釈すべきではない。同様に、ｏ−クロロフェニルへの参照は、その構造異性体であるｍ−クロロフェニルへの参照として解釈すべきではない。しかしながら、構造クラスへの参照は、そのクラスに含まれる構造異性形を十分に含みうる（たとえば、Ｃ１〜７アルキルはｎ−プロピル及びｉｓｏ−プロピルを含み、ブチルはｎ−、ｉｓｏ−、ｓｅｃ−、及びｔｅｒｔ−ブチルを含み、メトキシフェニルはｏ−、ｍ−、及びｐ−メトキシフェニルを含む）。
以上の除外は、たとえば、次の互変異性対：ケト／エノール（以下に例示される）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エンチオール、Ｎニトロソ／ヒドロキシアゾ（ｈｙｒｏｘｙａｚｏ）、及びニトロ／アシニトロの場合のような互変異性形、たとえば、ケト形、エノール形、及びエノラート形に関するものではない。
「互変異性体」又は「互変異性形」という用語は、低エネルギー障壁を介して相互交換可能な異なるエネルギーの構造異性体を意味する。たとえば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても知られる）は、ケト−エノール異性化やイミン−エナミン異性化などのプロトン移動を介する相互変換を含む。原子価互変異性体は、結合電子のいくつかの再組織化による相互変換を含む。
１つ以上の同位体置換を有する化合物は、「異性体」という用語に特に含まれることに留意されたい。たとえば、Ｈは、１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、及び３Ｈ（Ｔ）を含むいずれの同位体形であってもよく、Ｃは、１２Ｃ、１３Ｃ、及び１４Ｃを含むいずれの同位体形であってもよく、Ｏは、１６Ｏ及び１８Ｏを含むいずれの同位体形であってもよく、他も同様である。
本開示の化合物に組込み可能な同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、及び塩素の同位体、たとえば、限定されるものではないが、２Ｈ（ジュウテリウムＤ）、３Ｈ（トリチウム）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、及び１２５Ｉが挙げられる。本開示の各種同位体標識化合物は、たとえば、３Ｈ、１３Ｃ、及び１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれたものである。かかる同位体標識化合物は、薬剤若しくは基質の組織内分布アッセイを含めて、代謝研究、反応速度論研究、検出若しくはイメージング技術、たとえば、ポジトロンエミッショントモグラフィー（ＰＥＴ）若しくはシングルフォトンエミッションコンピュータトモグラフィー（ＳＰＥＣＴ）、又は患者の放射線治療に有用でありうる。ジュウテリウムで標識又は置換された本開示の治療用化合物は、分布、代謝、及び排泄（ＡＤＭＥ）に関して、改善されたＤＭＰＫ（薬剤代謝及び薬動学）の性質を有しうる。ジュウテリウムなどのより重い同位体による置換は、より大きな代謝安定性から得られるある特定の治療上の利点、たとえば、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期の増加又は投与要件の低減を与えうる。１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴ研究に有用でありうる。本開示の同位体標識化合物及びそのプロドラッグは、非同位体標識試薬の代わりに容易に入手可能な同位体標識試薬を用いて、以下に記載のスキーム又は実施例及び調製に開示される手順を行うことにより、一般に調製可能である。さらに、より重い同位体特にジュウテリウム（すなわち２Ｈ又はＤ）による置換は、より大きな代謝安定性から得られるある特定の治療上の利点、たとえば、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期の増加、投与要件の低減、又は治療指数の改善を与えうる。これとの関連では、ジュウテリウムは置換基と見なされるものと理解される。かかるより重い同位体特にジュウテリウムの濃度は、同位体濃縮係数により規定しうる。本開示の化合物では、特定の同位体として具体的に示されていない原子はいずれも、その原子のいずれかの安定同位体を表すことが意図される。
特に明記されていない限り、特定の化合物への参照は、そのラセミ混合物又は他の混合物を（完全に又は部分的に）含めて、すべてのかかる異性形を含む。かかる異性形の調製方法（たとえば不斉合成）及び分離方法（たとえば、分別結晶化及びクロマトグラフィー手段）は、当技術分野で公知であるか、又は本明細書に教示される方法若しくは公知の方法を慣例に従って適合化することにより、容易に得られるか、のどちらかである。
生物学的活性
ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞増殖アッセイ
一般に、抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）の細胞傷害活性又は細胞静止活性は、細胞培養培地でレセプタータンパク質を有する哺乳動物細胞をＡＤＣの抗体に暴露することと、約６時間の〜約５日間にわたり細胞を培養することと、細胞生存能を測定することと、により測定される。細胞ベースのｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイは、生存能（増殖）、細胞傷害性、及び本開示のＡＤＣのアポトーシス誘導（カスパーゼ活性化）を測定するために使用される。
抗体−薬剤コンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ効力は、細胞増殖アッセイにより測定可能である。セルタイターグロー（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）（登録商標）発光細胞生存能アッセイは、鞘翅目（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ）ルシフェラーゼの組換え発現に基づく市販（プロメガ・コーポレーション（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．）、ウィスコンシン州マディソン）のホモジニアスアッセイ法である（米国特許第５５８３０２４号明細書、同第５６７４７１３号明細書、及び同第５７００６７０号明細書）。この細胞増殖アッセイでは、代謝活性細胞のインジケーターである存在するＡＴＰの定量に基づいて培養下の生存細胞数が決定される（クロウチ（Ｃｒｏｕｃｈ）ら著、１９９３年、ジャーナル・オブ・イムノロジカル・メソッズ（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．）、第１６０巻、ｐ．８１〜８８、米国特許第６６０２６７７号明細書）。セルタイターグロー（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）（登録商標）アッセイは、自動ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）に適合させて９６ウェルフォーマットで行われる（クリー（Ｃｒｅｅ）ら著、１９９５年、アンチキャンサー・ドラッグス（ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇｓ）、第６巻、ｐ．３９８〜４０４）。ホモジニアスアッセイ手順は、血清補足培地で培養された細胞に単一試薬（セルタイターグロー（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）（登録商標）試薬）を直接添加することを含む。細胞洗浄、培地除去、及び複数のピペッティングの工程は必要とされない。システムは、試薬の添加及び混合の後１０分以内に３８４ウェルフォーマットで１５細胞／ウェル程度の少ない量を検出する。細胞は、ＡＤＣで連続処理しうるか、又は処理してからＡＤＣから分離しうる。一般に、短時間すなわち３時間処理された細胞は、連続処理された細胞と同一の効力効果を示した。
ホモジニアス「添加−混合−測定」フォーマットは、細胞の溶解及び存在するＡＴＰの量に比例するルミネセンスシグナルの発生をもたらす。ＡＴＰの量は、培養下に存在する細胞の数に正比例する。セルタイターグロー（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）（登録商標）アッセイは、ルシフェラーゼ反応により生成される「グロータイプ」のルミネセンスシグナルを発生し、これは使用した細胞型及び培地に依存して一般に５時間超の半減期を有する。生存細胞は、相対発光単位（ＲＬＵ）で表される。基質の甲虫ルシフェリンは、ＡＴＰからＡＭＰへの変換及び光子の発生を伴って、組換えホタルルシフェラーゼにより酸化的に脱カルボキシル化される。
抗体−薬剤コンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ効力はまた、細胞傷害性アッセイにより測定可能である。培養された接着細胞は、ＰＢＳで洗浄され、トリプシンで剥離され、１０％ＦＣＳを含有する完全培地に希釈され、遠心分離され、新鮮培地に再懸濁され、そして血球計で計数される。懸濁培養物は直接計数される。計数に好適な単分散細胞懸濁物は、細胞集塊を破壊するように繰返し吸引を行うことによる懸濁液のアジテーションを必要としうる。
細胞懸濁物は、所望の播種密度に希釈されて９６ブラックウェルプレートに分注される（１００μｌ／ウェル）。接着細胞系のプレートは、接着を可能にするように一晩インキュベートされる。懸濁細胞培養物は、播種日に使用可能である。
ＡＤＣ（２０μｇ／ｍｌ）のストック溶液（１ｍｌ）は、適切な細胞培養培地で作製される。ストックＡＤＣの逐次１０倍希釈は、１００μｌ〜９００μｌの細胞培養培地を逐次導入することにより１５ｍｌ遠心分離管で作製される。
各ＡＤＣ希釈（１００μｌ）の４つのレプリケートウェルは、細胞懸濁物（１００μｌ）であらかじめプレーティングされた９６ウェルブラックプレートに２００μｌの最終体積になるように分注される。対照ウェルは、細胞培養培地（１００μｌ）を受け取る。
細胞系の倍加時間が３０時間超である場合、ＡＤＣインキュベーションは５日間であり、それ以外は４日間のインキュベーションが行われる。
インキュベーション時間の終了時、細胞生存能はアラマーブルーアッセイで評価される。アラマーブルー（ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ）（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））は、全プレート（２０μｌ／ウェル）に分注されて４時間インキュベートされる。アラマーブルー蛍光は、バリオスカン（Ｖａｒｉｏｓｋａｎ）フラッシュプレートリーダーを用いて５７０ｎｍ励起、５８５ｎｍ発光で測定される。パーセント細胞生存率は、対照ウェルの平均蛍光と比較してＡＤＣ処理されたウェルの平均蛍光から計算される。
使用
本開示のコンジュゲートは、標的位置／細胞に細胞傷害薬剤化合物を提供するように使用しうる。
標的位置は増殖細胞集団でありうる。抗体は、増殖細胞集団に存在する抗原に対する抗体でありうる。
好ましい実施形態では、標的細胞は、ミエロイド／単球／マクロファージ系統の細胞である。特に好ましい実施形態では、標的細胞はＭ２細胞である。
一実施形態では、抗原は、非標的細胞集団では不在であるか、又は標的たとえばＭ２細胞集団に存在する抗原の量と比較して低減されたレベルで存在する。
標的位置では、リンカーは、薬剤化合物を放出するように切断されうる。そのため、コンジュゲートは、薬剤化合物を標的位置に選択的に提供するように使用しうる。標的位置では、リンカーは、化合物ＲｅｌＡ、ＲｅｌＢ、ＲｅｌＣ、ＲｅｌＤ、又はＲｅｌＥを放出するように切断されうる。そのため、コンジュゲートは、化合物ＲｅｌＡ、ＲｅｌＢ、ＲｅｌＣ、ＲｅｌＤ、又はＲｅｌＥを標的位置に選択的に提供するように使用しうる。
リンカーは、標的位置に存在する酵素により切断されうる。
標的位置は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、又はｅｘ ｖｉｖｏでありうる。
本開示の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物は、抗癌活性に有用なものを含む。特定的には、化合物は、薬剤部分すなわち毒素にコンジュゲートされた、すなわち、リンカーにより共有結合された抗体を含む。薬剤が抗体にコンジュゲートされないとき、薬剤は細胞傷害作用を有する。そのため、薬剤部分の生物学的活性は、抗体へのコンジュゲーションによりモジュレートされる。本開示の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）は、有効用量の細胞傷害剤を標的細胞に選択的に送達することにより、より大きな選択性すなわちより低い有効用量を達成しうる。
そのため、一態様では、本開示は、治療に使用するための本明細書に記載のコンジュゲート化合物を提供する。
さらなる態様では、増殖疾患の治療に使用するための本明細書に記載のコンジュゲート化合物もまた提供される。本開示の第２の態様は、増殖疾患を治療するための医薬の製造におけるコンジュゲート化合物の使用を提供する。
当業者であれば、候補コンジュゲートがいずれかの特定の細胞型の増殖性病態を治療するかしないかを容易に決定可能である。たとえば、特定の化合物により提供される活性を評価するために適宜使用しうるアッセイは、以下の実施例に記載される。
「増殖性疾患」という用語は、ｉｎ ｖｉｔｒｏかｉｎ ｖｉｖｏかにかかわらず、望ましくない過剰又は異常な細胞の不要又は無制御な細胞増殖、たとえば、新生物性又は過形成性の成長に関する。
増殖性病態の例としては、限定されるものではないが、新生物及び腫瘍（たとえば、組織球腫、星状細胞腫及び膠芽細胞腫を含む神経膠腫、星状細胞腫（ａｓｔｒｏｃｙｏｍａ）、骨腫）、癌（たとえば、肺癌、小細胞肺癌、胃腸癌、腸癌、結腸癌、乳癌（ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｉｎｏｍａ）、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、肝癌、腎癌、膀胱癌、膵癌、脳癌、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫、黒色腫）、リンパ腫、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性障害（たとえば、結合組織）、及びアテローム硬化症をはじめとする良性、前悪性、及び悪性の細胞増殖が挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に興味深い癌としては、限定されるものではないが、白血病及び卵巣癌が挙げられる。
限定されるものではないが、肺、胃腸（たとえば、腸、結腸を含む）、胸部（乳房）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳、及び皮膚をはじめとするいずれのタイプの細胞も治療しうる。好ましくは、治療される細胞は、Ｍ２細胞などのミエロイド／単球／マクロファージ系統の細胞である。
本開示の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）は、各種疾患又は障害を治療するために使用しうることが企図される。模範的病態又は過増殖障害としては、良性又は悪性の腫瘍、白血病、血液学的悪性病変、及びリンパ性悪性病変が挙げられる。他のものとしては、自己免疫障害を含めて、ニューロン障害、グリア障害、アストロサイト障害、視床下部障害、腺障害、マクロファージ障害、上皮障害、間質障害、胞胚腔障害、炎症性障害、血管新生障害、及び免疫学的障害が挙げられる。
一般的には、治療される疾患又は障害は、癌などの過増殖疾患である。本明細書で治療される癌の例としては、限定されるものではないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病又はリンパ性悪性病変が挙げられる。かかる癌のより特定の例としては、扁平上皮細胞癌（たとえば、上皮扁平細胞癌）、小細胞肺癌を含む肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌及び肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃癌、膵癌、膠芽細胞腫、星状細胞腫、頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、肝腫、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌又は腎癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、さらには頭頸部癌が挙げられる。特に興味深い癌としては、乳癌、胃癌、又は膀胱癌が挙げられる。
ＡＤＣ化合物を治療に使用しうる自己免疫疾患としては、リウマチ学的障害（たとえば、関節リウマチ、シェーグレン症候群、強皮症、ＳＬＥ腎炎やループス腎炎などの狼瘡、多発性筋炎／皮膚筋炎、クリオグロブリン血症、抗リン脂質抗体症候群、乾癬性関節炎など）、骨関節炎、自己免疫性の胃腸障害及び肝障害（たとえば、炎症性腸疾患（たとえば、潰瘍性結腸炎及びクローン病）、自己免疫性の胃炎及び悪性貧血、自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、セリアック病など）、血管炎（たとえば、チャーグ・ストラウス血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、及び多発性動脈炎（ｐｏｌｙａｒｔｅｒｉｉｔｉｓ）をはじめとするＡＮＣＡ関連血管炎など）、自己免疫性神経障害（たとえば、多発性硬化症、眼球クローヌスミオクローヌス症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎、パーキンソン病、アルツハイマー病、自己免疫性多発性ニューロパチーなど）、腎障害（たとえば、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、ベルジェ病など）、自己免疫性皮膚科学的障害（たとえば、乾癬、蕁麻疹、蕁麻疹、尋常性天疱瘡、水疱性類天疱瘡、皮膚エリテマトーデスなど）、血液障害（たとえば、血小板減少性紫斑病、血栓性血小板減少性紫斑病、輸血後紫斑病、自己免疫性溶血性貧血など）、アテローム硬化症、ブドウ膜炎、自己免疫性聴覚疾患（たとえば、内耳疾患、聴力損失など）、ベーチェット病、レイノー症候群、臓器移植障害、及び自己免疫性内分泌障害（たとえば、糖尿病関連自己免疫疾患、たとえば、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）、アジソン病、自己免疫性甲状腺疾患（たとえば、グレーブス病及び甲状腺炎）など）が挙げられる。より好ましいかかる疾患としては、たとえば、関節リウマチ、潰瘍性結腸炎、ＡＮＣＡ関連血管炎、狼瘡、多発性硬化症、シェーグレン症候群、グレーブス病、ＩＤＤＭ、悪性貧血、甲状腺炎、及び糸球体腎炎が挙げられる。
治療方法
本開示のコンジュゲートは、治療方法に使用可能である。また、治療を必要とする対象に治療有効量の本開示のコンジュゲート化合物を投与することを含む治療方法も提供される。「治療有効量」という用語は、患者に十分に奏功する量である。かかる奏功は、少なくとも１つの症状の少なくとも寛解でありうる。実際の投与量並びに投与の割合及び時間経過は、治療されるものの性質及び重症度に依存するであろう。治療の処方箋、たとえば、投与量に関する決定は、一般医及び他の医師の責任の範囲内にある。
本開示の化合物は、単独で、又は治療される病態に依存して同時又は逐次のどちらかで他の治療との組合せで投与しうる。治療及び療法の例としては、限定されるものではないが、化学療法（たとえば、化学療法剤などの薬剤をはじめとする活性剤の投与）、手術、アンチセンス分子による治療、及び放射線療法が挙げられる。
「化学療法剤」とは、作用機序にかかわらず、癌の治療に有用な化学化合物のことである。化学療法剤のクラスとしては、限定されるものではないが、次のもの：アルキル化剤、抗代謝物、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞傷害／抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光増感剤、及びキナーゼ阻害剤が挙げられる。化学療法剤としては、「標的療法」及び従来の化学療法で使用される化合物が挙げられる。
化学療法剤の例としては、エルロチニブ（ターセバ（ＴＡＲＣＥＶＡ）（登録商標）、ジェネンテック（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）／ＯＳＩファーマシューティカルズ（ＯＳＩ Ｐｈａｒｍ．））、ドセタキセル（タロキソテレ（ＴＡＸＯＴＥＲＥ）（登録商標）、サノフィ・アベンティス（Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ））、５−ＦＵ（フルオロウラシル、５−フルオロウラシル、ＣＡＳ Ｎｏ．５１−２１−８）、ゲムシタビン（ゲムザール（ＧＥＭＺＡＲ）（登録商標）、リリー（Ｌｉｌｌｙ））、ＰＤ−０３２５９０１（ＣＡＳ Ｎｏ．３９１２１０−１０−９、ファイザー（Ｐｆｉｚｅｒ））、シスプラチン（ｃｉｓ−ジアミン、ジクロロ白金（ＩＩ）、ＣＡＳ Ｎｏ．１５６６３−２７−１）、カルボプラチン（ＣＡＳ Ｎｏ．４１５７５−９４−４）、パクリタキセル（タロキソール（ＴＡＸＯＬ）（登録商標）、ブリストル・マイヤーズ・スクイブ・オンコロジー（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）、ニュージャージー州プリンストン）、トラスツズマブ（ハーセプチン（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ）（登録商標）、ジェネンテック（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））、テモゾロミド（４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタアザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミド、ＣＡＳ Ｎｏ．８５６２２−９３−１、テモダール（ＴＥＭＯＤＡＲ）（登録商標）、テモダール（ＴＥＭＯＤＡＬ）（登録商標）、シェリング・プラウ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ））、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニルブト−１−エニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン、ノルバデックス（ＮＯＬＶＡＤＥＸ）（登録商標）、イスブバール（ＩＳＴＵＢＡＬ）（登録商標）、バロデックス（ＶＡＬＯＤＥＸ）（登録商標））、及びドキソルビシン（アドリアマイシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ）（登録商標））、Ａｋｔｉ−１／２、ＨＰＰＤ、及びラパマイシンが挙げられる。
化学療法剤のさらなる例としては、オキサリプラチン（エロキサチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ）（登録商標）、サノフィ（Ｓａｎｏｆｉ））、ボルテゾミブ（ベルカデ（ＶＥＬＣＡＤＥ）（登録商標）、ミレニアム・ファーマシューティカルズ（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍ．））、ステント（サニチニブ（ＳＵＮＩＴＩＮＩＢ）（登録商標）、ＳＵ１１２４８、ファイザー（Ｐｆｉｚｅｒ））、レトロゾール（フェマラ（ＦＥＭＡＲＡ）（登録商標）、ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、イマチニブメシレート（グリーベック（ＧＬＥＥＶＥＣ）（登録商標）、ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、ＸＬ−５１８（Ｍｅｋ阻害剤、エキセリキス（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、国際公開第２００７／０４４５１５号パンフレット）、ＡＲＲＹ−８８６（Ｍｅｋ阻害剤、ＡＺＤ６２４４、アレイ・バイオファーマ（Ａｒｒａｙ ＢｉｏＰｈａｒｍａ）、アストラ・ゼネカ（Ａｓｔｒａ Ｚｅｎｅｃａ））、ＳＦ−１１２６（ＰＩ３Ｋ阻害剤、セマフォー・ファーマシューティカルズ（Ｓｅｍａｆｏｒｅ （Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ））、ＢＥＺ−２３５（ＰＩ３Ｋ阻害剤、ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、ＸＬ−１４７（ＰＩ３Ｋ阻害剤、エキセリキス（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ））、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４（ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、フルベストラント（ファスロデックス（ＦＡＳＬＯＤＥＸ）（登録商標）、アストラゼネカ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ））、ロイコボリン（フォリン酸）、ラパマイシン（シロリムス、ラパミューネ（ＲＡＰＡＭＵＮＥ）（登録商標）、ワイス（Ｗｙｅｔｈ））、ラパチニブ（ティケルブ（ＴＹＫＥＲＢ）（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、グラクソ・スミスクライン（Ｇｌａｘｏ Ｓｍｉｔｈ Ｋｌｉｎｅ））、ロナファルニブ（サラサール（ＳＡＲＡＳＡＲ）（商標）、ＳＣＨ６６３３６、シェリング・プラウ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ））、ソラフェニブ（ネキサバール（ＮＥＸＡＶＡＲ）（登録商標）、ＢＡＹ４３−９００６、バイエル・ラボラトリーズ（Ｂａｙｅｒ Ｌａｂｓ））、ゲフィチニブ（イレッサ（ＩＲＥＳＳＡ）（登録商標）、アストラゼネカ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ））、イリノテカン（カンプトサール（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ）（登録商標）、ＣＰＴ−１１、ファイザー（Ｐｆｉｚｅｒ））、チピファルニブ（ザルネストラ（ＺＡＲＮＥＳＴＲＡ）（商標）、ジョンソン＆ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ））、アブラキサン（ＡＢＲＡＸＡＮＥ）（商標）（クレモフォア（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）フリー）、パクリタキセルのアルブミン工学操作ナノ粒子製剤（アメリカン・ファーマシューティカルズ・パートナー（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ）、イリノイ州シャンバーグ）、バンデタニブ（ｒＩＮＮ、ＺＤ６４７４、ザクチマ（ＺＡＣＴＩＭＡ）（登録商標）、アストラゼネカ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ））、クロラムブシル（ｃｈｌｏｒａｎｍｂｕｃｉｌ）、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ５２７１、スージェン（Ｓｕｇｅｎ））、テムシロリムス（トリセル（ＴＯＲＩＳＥＬ）（登録商標）、ワイス（Ｗｙｅｔｈ））、パゾパニブ（グラクソスミスクライン（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ））、カンホスファミド（テルシタ（ＴＥＬＣＹＴＡ）（登録商標）、テリック（Ｔｅｌｉｋ））、チオテパ及びシクロホスファミド（シトキサン（ＣＹＴＯＸＡＮ）（登録商標）、ネオサール（ＮＥＯＳＡＲ）（登録商標））、アルキルスルホネート、たとえば、ブスルファン、イムプロスルファン、及びピポスルファン、アジリジン、たとえば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ、エチレンイミン及びメチルメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチロールメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含む）、アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）、カンプトテシン（合成アナログトポテカンを含む）、ブリオスタチン、カリスタチン、ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成アナログを含む）、クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）、ドラスタチン、デュオカルマイシン（合成アナログＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）、エレウテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチイン、スポンギスタチン、ナイトロジェンマスタード、たとえば、クロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドハイドロクロライド、メルファラン、ノボエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、ニトロソウレア、たとえば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）、抗生物質、たとえば、エンジイン抗生物質（たとえば、カリケアマイシン、カリケアマイシンγ１Ｉ、カリケアマイシンωＩ１（アンゲバンテ・ヘミー・インターナショナル・エディション・イン・イングリッシュ（ＡＮＧＥＷ ＣＨＥＭ．ＩＮＴＬ．ＥＤ．ＥＮＧＬ．）、１９９４年、第３３巻、ｐ．１８３〜１８６）、ダイネマイシン、ダイネマイシンＡ、ビスホスホネート、たとえば、クロドロネート、エスペラマイシン、さらにはネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連クロモタンパク質エンジイン抗生物質クロモフォア）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン（ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｉｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、たとえば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン、抗代謝物、たとえば、メトトレキセート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、葉酸アナログ、たとえば、デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート、プリンアナログ、たとえば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、ピリミジンアナログ、たとえば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、アンドロゲン、たとえば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、抗副腎剤、たとえば、アミノグルテチミド、マイトタン、トリロスタン、葉酸リプレニッシャー、たとえば、フロリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトラキセート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジクオン、エフロルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、エリプチニウムアセテート、エポチロン、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシウレア、レンチナン、ロニダミン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）、メイタンシノイド、たとえば、マイタンシン及びアンサミトシン、マイトグアゾン、マイトキサントロン、モピダンモール、ニトラエリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、ポドフィリン酸、２−エチルヒドラジド、プロカルバジン、ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳナチュラル・プロダクツ（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、オレゴン州ユージーン）、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン、トリコテセン（特に、Ｔ−２トキシン、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、マイトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）、シクロホスファミド、チオテパ、６−チオグアニン、メルカプトプリン、メトトレキセート、白金アナログ、たとえば、シスプラチン及びカルボプラチン、ビンブラスチン、エトポシド（ＶＰ−１６）、イホスファミド、マイトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン（ナベルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ）（登録商標））、ノバントロン、テニポシド、エダトレキセート、ダウノマイシン、アミノプテリン、カペシタビン（キセローダ（ＸＥＬＯＤＡ）（登録商標）、ロシュ（Ｒｏｃｈｅ））、イバンドロネート、ＣＰＴ−１１、トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００、ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）、レチノイド、たとえば、レチノイン酸、並びに以上のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、及び誘導体が挙げられる。
また、「化学療法剤」の定義には、（ｉ）腫瘍に対するホルモン作用をレギュレート又は阻害するように作用する抗ホルモン剤、たとえば、タモキシフェン（ノルバデックス（ＮＯＬＶＡＤＥＸ）（登録商標）、タモキシフェントシレートを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びファレストン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ）（登録商標）（トレミフェン（ｔｏｒｅｍｉｆｉｎｅ）シトレート）をはじめとする抗エストロゲン剤及び選択的エストロゲンレセプターモジュレーター（ＳＥＲＭ）、（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生をレギュレートする酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、たとえば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、メガセ（ＭＥＧＡＳＥ）（登録商標）（メゲストロールアセテート）、アロマシン（ＡＲＯＭＡＳＩＮ）（登録商標）（エキセメスタン、ファイザー（Ｐｆｉｚｅｒ））、フォルメスタン（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、リビソール（ＲＩＶＩＳＯＲ）（登録商標）（ボロゾール）、フェマラ（ＦＥＭＡＲＡ）（登録商標）（レトロゾール、ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、及びアリミデックス（ＡＲＩＭＩＤＥＸ）（登録商標）（アナストロゾール、アストラゼネカ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ））など、（ｉｉｉ）抗アンドロゲン剤、たとえば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン、さらにはトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）、（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤、たとえば、ＭＥＫ阻害剤（国際公開第２００７／０４４５１５号パンフレット）、（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤、（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に異常細胞増殖に関与するシグナル伝達経路の遺伝子の発現を阻害するもの、たとえば、ＰＫＣα、Ｒａｆ、及びＨ−Ｒａｓ、たとえば、オブリマーセン（ゲナセン（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ）（登録商標）、ゲンタ・インコーポレーテッド（Ｇｅｎｔａ Ｉｎｃ．））、（ｖｉｉ）リボザイム、たとえば、ＶＥＧＦ発現阻害剤（たとえば、アギオザイム（ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ）（登録商標））及びＨＥＲ２発現阻害剤、（ｖｉｉｉ）ワクチン、たとえば、遺伝子療法ワクチン、たとえば、アロベクチン（ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ）（登録商標）、ロイベクチン（ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ）（登録商標）、及びバキシド（ＶＡＸＩＤ）（登録商標）、プロロイキン（ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ）（登録商標）ｒＩＬ−２、トポイソメラーゼ１阻害剤、たとえば、ルトロテカン（ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ）（登録商標）、アバレリックス（ＡＢＡＲＥＬＩＸ）（登録商標）ｒｍＲＨ、（ｉｘ）抗血管新生剤、たとえば、ベバシズマブ（アバスチン（ＡＶＡＳＴＩＮ）（登録商標）、ジェネンテック（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））、並びに以上のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、及び誘導体も含まれる。
また、「化学療法剤」の定義には、治療用抗体、たとえば、アレムツズマブ（カンパス（Ｃａｍｐａｔｈ））、ベバシズマブ（アバスチン（ＡＶＡＳＴＩＮ）（登録商標）、ジェネンテック（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））、セツキシマブ（エルビタックス（ＥＲＢＩＴＵＸ）（登録商標）、イムコローン（Ｉｍｃｌｏｎｅ））、パニツムマブ（ベクチビックス（ＶＥＣＴＩＢＩＸ）（登録商標）、アムジェン（Ａｍｇｅｎ））、リツキシマブ（リツキサン（ＲＩＴＵＸＡＮ）（登録商標）、ジェネンテック（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）／バイオジェン・アイデック（Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ））、オファツムマブ（アルゼラ（ＡＲＺＥＲＲＡ）（登録商標）、ＧＳＫ）、ペルツズマブ（ペルジェタ（ＰＥＲＪＥＴＡ）（商標）、オムニターグ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ）（商標）、２Ｃ４、ジェネンテック（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））、トラスツズマブ（ハーセプチン（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ）（登録商標）、ジェネンテック（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））、トシツモマブ（ベキサール（Ｂｅｘｘａｒ）、コリキシア（Ｃｏｒｉｘｉａ））、及び抗体薬剤コンジュゲートのゲムツズマブオゾガマイシン（マイロターグ（ＭＹＬＯＴＡＲＧ）（登録商標）、ワイス（Ｗｙｅｔｈ））も含まれる。
本開示のコンジュゲートとの組合せで化学療法剤として治療可能性を有するヒト化モノクローナル抗体としては、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリヅマブ、アトリズマブ、バピノイズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モタビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリヅマブ、ペクフシツズマブ、ペルツズマブ、ペルツズマブ、ペキセリズマブ、パリビズマブ、ラニビズマブ、レスリズマブ、レスリズマブ、レスリズマブ、ロベリヅマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ、及びビジリズマブが挙げられる。
いくつかの実施形態では、腫瘍療法をさらに促進するために、本明細書に開示される抗体、フラグメント、及び／又は抗体−薬剤コンジュゲートは、治療レジメンの一部としてアンチセンス分子と逐次的又は同時に組み合わせうる。たとえば、いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、アンチセンス分子の前、後、又はそれと同時に投与しうる。いくつかの実施形態では、抗体−薬剤コンジュゲートとアンチセンス分子とを含む組成物が投与される。
アンチセンス分子とは、ワトソン・クリック塩基対合則によりｍＲＮＡの標的相補的配列に結合することにより分子レベルでは機能する核酸のことである。標的ｍＲＮＡの翻訳は、相補的ヘリックス間でハイブリダイゼーションが行われるとき、活性機序及び／又は受動的機序により阻害される。受動的機序では、ｍＲＮＡと外因性ヌクレオチド配列とのハイブリダイゼーションは、リボソーム複合体によるメッセージの読取りを防止する二本鎖の形成をもたらす。活性機序では、ハイブリダイゼーションは、ＲｎａｓｅＨの結合を促進し、これによりＲＮＡを破壊するが、アンチセンスをインタクトな状態で残して、他方の相補的ｍＲＮＡ標的にハイブリダイズする。一方又は両方の機序は、悪性表現型に寄与する又はそれを持続するタンパク質の翻訳を阻害する。療法剤として、アンチセンス分子は、はるかに選択的であるので、従来の薬剤よりも有効で且つ毒性が低い。
いくつかの実施形態では、アンチセンス分子は１つ以上のＣｐＧモチーフを含む。他の実施形態では、アンチセンス分子はＣｐＧモチーフを含まない。ある特定の態様では、１つ以上のＣｐＧモチーフはメチル化される。他の態様では、１つ以上のＣｐＧモチーフはメチル化されない。ある特定の実施形態では、アンチセンス分子が対象に投与されるとき、１つ以上の非メチル化ＣｐＧモチーフは先天性免疫反応を誘発する。
ある特定の実施形態では、アンチセンス分子は、少なくとも１つの末端修飾又は「キャップ」を含む。キャップは、５’及び／又は３’キャップ構造でありうる。「キャップ」又は「エンドキャップ」という用語は、オリゴヌクレオチドのどちらかの末端の化学修飾を含むとともに（末端リボヌクレオチドに対して）、５’末端の最後の２つのヌクレオチド間及び３’末端の最後の２つヌクレオチドの間の結合の修飾を含む。キャップ構造は、標的配列との分子相互作用又は細胞機構を損なうことなくエキソヌクレアーゼに対するアンチセンス分子の耐性を増加させうる。かかる修飾は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｉｎ ｖｉｖｏにおけるその効力の増加に基づいて選択しうる。キャップは、５’末端（５’キャップ）若しくは３’末端（３’キャップ）に存在しうるか、又は両方の末端に存在しうる。ある特定の実施形態では、５’及び／又は３’キャップは、ホスホロチオエート一リン酸、脱塩基残基（部分）、ホスホロチオエート結合、４’−チオヌクレオチド、炭素環式ヌクレオチド、ホスホロジチオエート結合、反転ヌクレオチド又は反転脱塩基部分（２’−３’又は３’−３’）、ホスホロジチオエート一リン酸、及びメチルホスホネート部分から独立して選択される。ホスホロチオエート結合又はホスホロジチオエート結合は、キャップ構造の一部のとき、一般に５’末端の２つの末端ヌクレオチド間及び３’末端の２つの末端ヌクレオチド間に配置される。
いくつかの実施形態では、アンチセンス分子はまた、米国特許第９，７４４，１８７号明細書（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示されるように、１つ以上のｐ−エトキシ骨格修飾を含みうる。いくつかの実施形態では、アンチセンス分子の核酸骨格は、少なくとも１つのｐ−エトキシ骨格結合を含む。たとえば、アンチセンス分子の約１％まで、約３％まで、約５％まで、約１０％まで、約２０％まで、約３０％まで、約４０％まで、約５０％まで、約６０％まで、約７０％まで、約８０％まで、約９０％まで、約９５％まで、又は約９９％までｐ−エトキシ結合されうる。
いくつかの実施形態では、アンチセンス分子は、インスリン様成長因子１レセプター（ＩＧＦ−１Ｒ）の発現を標的とする。ＩＧＦ−１Ｒは、インスリン受容体と７０％の相同性を共有するチロシンキナーゼ細胞表面レセプターである。そのリガンド（ＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ、及びインスリン）による活性化時、それは増殖、トランスフォーメーション、及び細胞生存をはじめとする広範な細胞機能をレギュレートする。ＩＧＦ−１Ｒは、正常成長の絶対条件ではないが、悪性組織に生じうる足場非依存条件における成長に不可欠である。腫瘍におけるＩＧＦ−ＩＲの役割のレビューは、バサーガ（Ｂａｓｅｒｇａ）ら著、「ビタミンとホルモン（Ｖｉｔａｍｉｎｓ ａｎｄ Ｈｏｒｍｏｎｅｓ）」、第５３巻、ｐ．６５〜９８、１９９７年（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に提供される。
ある特定の実施形態では、アンチセンス分子は、成長因子又は成長因子レセプター、たとえば、ＩＧＦ−ＩＲなどのＤＮＡ又はＲＮＡを指向する。
ある特定の実施形態では、アンチセンスは、ＩＧＦ−１Ｒを指向するデオキシヌクレオチド（ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮ）である。ＩＧＦ−１Ｒの全長コード配列（配列番号１）は、たとえば、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／２６９７０号パンフレット（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に提供される。
ある特定の実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、ＲＮＡ又はＤＮＡのどちらかを含んで、ＩＧＦ−１Ｒシグナル配列に相補的なヌクレオチド配列を含む。ＩＧＦ−１Ｒのシグナル配列は３０アミノ酸配列である。他の実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、ＲＮＡ又はＤＮＡのどちらかを含んで、ＩＧＦ−１Ｒシグナル配列の一部分に相補的なヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、ＲＮＡ又はＤＮＡのどちらかを含んで、ＩＧＦ−１Ｒのコドン１〜３０９に相補的なヌクレオチド配列を含む。他の実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、ＲＮＡ又はＤＮＡのどちらかを含んで、ＩＧＦ−１Ｒのコドン１〜３０９の部分に相補的なヌクレオチド配列を含む。
ある特定の実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、少なくとも約５ヌクレオチド、少なくとも約１０ヌクレオチド、少なくとも約１５ヌクレオチド、少なくとも約２０ヌクレオチド、少なくとも約２５ヌクレオチド、少なくとも約３０ヌクレオチド、少なくとも約３５ヌクレオチド、少なくとも約４０ヌクレオチド、少なくとも約４５ヌクレオチド、又は少なくとも約５０ヌクレオチドの長さである。いくつかの実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、約１５ヌクレオチド〜約２２ヌクレオチドの長さである。ある特定の実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、約１８ヌクレオチドの長さである。
いくつかの態様では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、ヌクレオチド配列５’−ＴＣＣＴＣＣＧＧＡＧＣＣＡＧＡＣＴＴ−３’（配列番号２）又はそのフラグメントを含む。ある特定の実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、配列番号２に対して少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９８％、又は１００％の同一性を有しうる。いくつかの実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、１つ以上のホスホロチオエート結合を含む。ある特定の実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮは、配列番号２のヌクレオチド配列からなる。
ＮＯＢＥＬは、ホスホロチオエート骨格とＩＧＦ−１Ｒ遺伝子のコドン２〜７に相補的な配列とを有する１８マーのオリゴデオキシヌクレオチドである。したがって、ＮＯＢＥＬは、ＩＧＦ−１Ｒを指向するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＧＦ−１Ｒ ＡＳ ＯＤＮ）である。５’末端でＩＧＦ−１Ｒ遺伝子の相補的配列として誘導されるＮＯＢＥＬ配列は、５’−ＴＣＣＴＣＣＧＧＡＧＣＣＡＧＡＣＴＴ−３’（配列番号２）である。ＮＯＢＥＬは安定な貯蔵寿命を有し、ヌクレアーゼ分解に耐えてそのホスホロチオエート骨格による。
好適なアンチセンス核酸はまた、米国特許出願公開第２０１７／００５６４３０号明細書（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
本開示に従って使用される本開示に係る医薬組成物は、活性成分すなわちコンジュゲート化合物に加えて、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、緩衝剤、安定剤、又は当業者に周知の他の物質を含みうる。かかる材料は、非毒性にすべきであり、活性成分の有効性を妨害すべきでない。担体又は他の物質の正確な性質は、経口でありうるか又は注射、たとえば、皮膚、皮下、若しくは静脈内の注射でありうる投与経路に依存するであろう。
経口投与用の医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉末、又は液体の形態でありうる。錠剤は、固形担体又はアジュバントを含みうる。液状医薬組成物は、一般に、水、石油、動物油又は植物油、鉱油又は合成油などの液体担体を含む。生理食塩水溶液、デキストロース若しくは他の糖の溶液、又はグリコール、たとえば、エチレングリコール、プロピレングリコール、若しくはポリエチレングリコールが含まれうる。カプセルは、ゼラチンなどの固形担体を含みうる。
静脈内注射、皮膚若しくは皮下注射、又は罹患部位注射では、活性成分は、発熱原フリーで且つ好適なｐＨ、等張性、及び安定性を有する非経口的に許容可能な水性溶液の形態であろう。当業者であれば、たとえば、食塩注射液、リンゲル注射液、乳酸加リンゲル注射液などの等張媒体を用いて、好適な溶液を十分に調製可能である。保存剤、安定剤、緩衝剤、抗酸化剤、及び／又は他の添加剤は、必要に応じて含まれうる。
製剤
本開示はまた、本明細書に開示されるコンジュゲートの１つ以上を含む又はそれらから本質的になる組成物又は製剤を提供する。
一実施形態では、組成物は、本明細書に記載のコンジュゲート化合物と、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又は賦形剤と、を含む医薬組成物（たとえば、製剤、調製物、医薬品）である。
一実施形態では、組成物は、限定されるものではないが、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、賦形剤、アジュバント、充填剤、緩衝剤、保存剤、抗酸化剤、滑沢剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤（たとえば湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、風味剤、及び甘味剤をはじめとする当業者に周知の１つ以上の他の薬学的に許容可能な成分と一緒に、少なくとも１つの本明細書に記載のコンジュゲート化合物を含む医薬組成物である。
一実施形態では、組成物は、他の活性剤、たとえば、他の治療剤又は予防剤をさらに含む。
好適な担体、希釈剤、賦形剤などは、標準的な医薬品の書籍に見いだしうる。たとえば、「医薬品添加剤便覧（Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ）」、第２版、Ｍ．アッシュ（Ｍ．Ａｓｈ）及びＩ．アッシュ（Ｉ．Ａｓｈ）編、２００１年、シナプス・インフォメーション・リソーシズ・インコーポレーテッド（Ｓｙｎａｐｓｅ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｉｎｃ．）、エンディコット、ニューヨーク州、米国、「レミングトンの医薬品科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）」、第２０版、リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ）刊、２０００年、及び「医薬品賦形剤便覧（Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ）」、第２版、１９９４年を参照されたい。
本開示の他の態様は、当業者に周知の１つ以上の他の薬学的に許容可能な成分、たとえば、担体、希釈剤、賦形剤などと一緒に、本明細書に定義される少なくとも１つの［１１Ｃ］放射性標識コンジュゲート又はコンジュゲート様化合物を混合することを含む、医薬組成物の製造方法に関する。個別ユニット（たとえば、錠剤など）として製剤化される場合、各ユニットは、所定量（投与量）の活性化合物を含有する。
本明細書で用いられる「薬学的に許容可能」という用語は、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、他の問題、合併症を伴うことなく、当該対象（たとえばヒト）の組織との接触に使用するのに好適な、健全な医学的判断の範囲内にある化合物、成分、材料、組成物、剤形などに関する。各担体、希釈剤、賦形剤などはまた、製剤の他の成分に適合可能であるという意味で「許容可能」でなければならない。
製剤は、薬学技術分野で周知のいずれかの方法による調製しうる。かかる方法は、活性化合物と１つ以上の副成分を構成する担体とを会合させる工程を含む。一般的には、製剤は、活性化合物と担体（たとえば、液状担体、微細化固形担体など）とを均一且つ密接に会合させてから所要により生成物を造形することにより調製される。
製剤は、迅速若しくは低速放出、即時、遅延、時限、若しくは持続放出、又はそれらの組合せを提供するように調製しうる。
非経口投与に好適な製剤（たとえば、注射による）は、活性成分が溶解されるか、懸濁されるか、又はそれ以外で（たとえば、リポソーム若しくは他のマイクロ微粒子で）提供される水性若しくは非水性、等張性、発熱原フリー、無菌の液体（たとえば、溶液、懸濁液）を含む。かかる液体は、他の薬学的に許容可能な成分、たとえば、抗酸化剤、緩衝剤、保存剤、安定剤、静細菌剤、懸濁化剤、増粘剤、及び目的レシピエントの血液（又は他の関連する体液）と等張の製剤にする溶質などを追加的に含有しうる。賦形剤の例としては、たとえば、水、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油などが挙げられる。かかる製剤に使用される好適な等張性担体の例としては、食塩注射液、リンゲル液、又は乳酸加リンゲル注射液が挙げられる。典型的には、液体中の活性成分の濃度は、約１ｎｇ／ｍｌ〜約１０μｇ／ｍｌ、たとえば、約１０ｎｇ／ｍｌ〜約１μｇ／ｍｌである。製剤は、単位用量又は複数回用量の密閉容器、たとえば、アンプル及びバイアルに提示しうるとともに、使用直前に無菌液状担体たとえば注射用水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で貯蔵しうる。即時注射用の溶液及び懸濁液は、無菌の粉末剤、顆粒剤、及び錠剤から調製しうる。
投与量
コンジュゲート化合物の適切な投与量が患者ごとに異なりうることは、当業者であれば分かるであろう。最適投与量の決定は、一般に、治療効果のレベルと、いずれかのリスク又は有害な副作用と、のバランスをとることを含むであろう。選択される投与量レベルは、限定されるものではないが、特定の化合物の活性、投与経路、投与時間、化合物排泄速度、治療継続期間、組合せで使用される他の薬剤、化合物、及び／又は材料、病態の重症度、並びに患者の種属、性別、年齢、体重、病態、健康状態、及び既往歴をはじめとするさまざまな因子に依存するであろう。化合物の量及び投与の経路は、最終的には医師、獣医、又は臨床医の自由裁量に委ねられるであるだろうが、一般的には、投与量は、実質的な危険又は有害な副作用を引き起こすことなく所望の効果を達成する作用部位の局所濃度を達成するように選択されるであろう。
投与は、治療の全期間にわたり１回方式、連続方式、又は間欠方式で（たとえば、適切なインターバルの分割用量で）実施可能である。最も効果的な投与手段及び投与量の決定方法は、当業者に周知であり、治療に使用される製剤、治療の目的、治療された標的細胞、及び治療される対象によって異なるであろう。単回又は複数回の投与は、治療医、獣医、又は臨床医により選択される用量レベル及びパターンで行うことが可能である。
いくつかの実施形態では、コンジュゲート化合物又はそれを含有する組成物は、治療有効期間にわたり週１回投与される。いくつかの実施形態では、コンジュゲート化合物又はそれを含有する組成物は、治療有効期間にわたり１日１回投与される。いくつかの実施形態では、コンジュゲート化合物又はそれを含有する組成物は、治療有効期間にわたり月１回投与される。いくつかの実施形態では、コンジュゲート化合物又はそれを含有する組成物は、治療有効期間にわたり年１回投与される。
一般的には、コンジュゲート化合物の好適な用量は、約１００ｎｇ〜約２５ｍｇ（より典型的には約１μｇ〜約１０ｍｇ）／キログラム対象体重／日の範囲内である。いくつかの実施形態では、用量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０７ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、又は５ｍｇ／ｋｇである。コンジュゲート化合物が塩、エステル、アミド、プロドラッグなどを含む場合、投与量は、親化合物を基準にして計算されるので、使用される実際の重量は、それに比例して増加する。
一実施形態では、コンジュゲート化合物は、次の投与レジーム：約１００ｍｇ、１日３回に従って、ヒト患者に投与される。
一実施形態では、コンジュゲート化合物は、次の投与レジーム：約１５０ｍｇ、１日２回に従って、ヒト患者に投与される。
一実施形態では、コンジュゲート化合物は、次の投与レジーム：約２００ｍｇ、１日２回に従って、ヒト患者に投与される。
しかしながら、一実施形態では、コンジュゲート化合物は、次の投与レジーム：約５０又は約７５ｍｇ、１日３又は４回に従って、ヒト患者に投与される。
一実施形態では、コンジュゲート化合物は、次の投与レジーム：約１００又は１２５ｍｇ、１日２回に従って、ヒト患者に投与される。
以上に記載の投与量は、コンジュゲート（薬剤部分と抗体へのリンカーとを含む）、又は提供される薬剤化合物の有効量、たとえば、リンカーの切断後に放出可能な化合物の量に適用しうる。
疾患の予防又は治療では、本開示のＡＤＣの適切投与量は、以上に定義した治療される疾患のタイプ、疾患の重症度及び経過、ＡＤＣが予防目的又は治療目的で投与されるか、以前の治療、患者の臨床歴及び抗体に対する反応、並びに担当医の自由裁量に依存するであろう。分子は、好適には、１回で又は一連の治療にわたり患者に投与される。たとえば、１回以上の個別投与によるか又は連続注入によるかにかかわらず、疾患のタイプ及び重症度に依存して、約１μｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ（たとえば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）の分子は、患者に投与するための初期候補投与量である。典型的な一日投与量は、以上に挙げた因子に依存して、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲内でありうる。患者に投与されるＡＤＣの模範的投与量は、約０．１〜約１０ｍｇ／ｋｇ患者体重の範囲内である。数日間以上にわたる繰返し投与では、病態に依存して、治療は、疾患症状の所望の抑制を生じるまで継続される。模範的投与レジメンは、約４ｍｇ／ｋｇの初期ロード用量及びそれに続く週１回、２週間に１回、又は３週間に１回のＡＤＣの追加用量の投与コースを含む。他の投与レジメンが有用なこともありうる。この治療の進行状況は、従来の技術及びアッセイにより容易にモニターされる。
治療
病態の治療との関連で本明細書で用いられる「治療」という用語は、ヒトであるか動物であるかにかかわらず（たとえば、獣医学的用途で）、一般に、なんらかの所望の治療効果、たとえば、病態の進行の阻害が達成される治療及び療法に関し、進行速度の低下、進行速度に停止、病態の退縮、病態の寛解、及び病態の治癒を含む。予防手段（すなわち、予防、防止）としての治療もまた、含まれる。
本明細書で用いられる「治療有効量」という用語は、所望の治療レジメンに従って投与したときになんらかの所望の治療効果を生じるのに有効な、活性化合物、又はＡＤＣ分子などの材料、活性化合物／ＡＤＣ分子を含む組成物又は製剤の量に関する。
同様に、本明細書で用いられる「予防有効量」という用語は、所望の治療レジメンに従って投与したときになんらかの所望の予防効果を生じるのに有効な、活性化合物、又はＡＤＣ分子などの材料、活性化合物／ＡＤＣ分子を含む組成物又は製剤の量に関する。
いくつかの実施形態では、治療は、対象において腫瘍促進Ｍ２細胞の選択的低減を引き起こす。ある特定の実施形態では、対象のＭ２細胞は、未治療対象と比較して、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％低減される。他の実施形態では、Ｍ２細胞集団は排除される。対象のＭ２細胞は、ＦＡＣＳを用いて測定しうる。ある特定の態様では、治療後、Ｍ２細胞は排除される。すなわち、ＦＡＣＳにより検出不能である。
ある特定の態様では、Ｍ２細胞の低減は、約１０分間、約２０分間、約３０分間、約４０分間、約５０分間、約１時間、約２時間、約３時間、約６時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、又は約７２時間の治療で観測される。
いくつかの実施形態では、治療は、Ｍ２細胞に細胞死を引き起こす。ある特定の実施形態では、細胞死は壊死である。他の実施形態では、細胞死はアポトーシスである。アポトーシスは、本開示の目的では、プログラム細胞死として定義され、限定されるものではないが、原発腫瘍及び転移腫瘍の退縮を含む。アポトーシスは、膨大な数の生理学的及び病理学的プロセスにおいてきわめて重要な役割を果たす広範にわたる現象であるプログラム細胞死である。壊死は、これとは対照的に、さまざまな有害条件及び毒性物質に対する細胞の反応である偶発的細胞死である。さらに他の実施形態では、Ｍ２細胞におけるＩＧＦ−１Ｒの発現を標的としてＭ２細胞に細胞周期停止を引き起こす。
いくつかの実施形態では、治療は、少なくとも６、１２、２４、３６、又は４８ヶ月間にわたり腫瘍成長を低減又は阻害する。いくつかの実施形態では、治療は、腫瘍に対する免疫反応を増強する。
薬剤コンジュゲートの調製
抗体薬剤コンジュゲートは、抗体の求核基と薬剤−リンカー試薬との反応を含めて、当業者に公知の有機化学反応、条件、及び試薬を利用するいくつかの経路により調製しうる。本方法は、本開示の抗体−薬剤コンジュゲートを調製するために利用しうる。
抗体の求核基としては、限定されるものではないが、側鎖チオール基、たとえば、システインが挙げられる。チオール基は、求核性であり、リンカー部分の求電子基、たとえば、本開示のものと共有結合を形成するように反応しうる。ある特定の抗体は、還元性鎖間ジスルフィドすなわちシステインブリッジを有する。抗体は、ＤＴＴ（クリーランド試薬、ジチオトレイトール）やＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンハイドロクロライド、ゲッツ（Ｇｅｔｚ）ら著、１９９９年、アナリティカル・バイオケミストリー（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．）、第２７３巻、ｐ．７３〜８０、ソルテック・ベンチャーズ（Ｓｏｌｔｅｃ Ｖｅｎｔｕｒｅｓ）、マサチューセッツ州ビバリー）などの還元剤による処理によりリンカー試薬とのコンジュゲーションに対して反応性になるようにしうる。そのため、各システインジスルフィドブリッジは、理論上、２つの反応性チオール求核基を形成するであろう。リシンと２−イミノチオラン（トラウト試薬）とを反応させてアミンをチオールに変換することにより、追加の求核基を抗体に導入可能である。
対象／患者
対象／患者は、動物、哺乳動物、有胎盤哺乳動物、有袋動物（たとえば、カンガルー、ウォンバット）、単孔動物（たとえば、カモノハシ）、齧歯動物（たとえば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ科動物（たとえば、マウス）、ウサギ目動物（たとえば、ウサギ）、鳥類（たとえば、トリ）、イヌ科動物（たとえば、イヌ）、ネコ科動物（たとえば、ネコ）、ウマ科動物（たとえば、ウマ）、ブタ科動物（たとえば、ブタ）、ヒツジ科動物（たとえば、ヒツジ）、又はウシ科動物（たとえば、ウシ）でありうる。いくつかの実施形態では、対象／患者は、サル（たとえば、マーモセット、ヒヒ）、類人猿（たとえば、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、ギボン）、及びヒトから選択される霊長動物である。
さらに、対象／患者は、発生のその形態のいずれか（たとえば胎児）でありうる。好ましい一実施形態では、対象／患者はヒトである。
（実施例）
実施例１：抗体−薬剤コンジュゲートの調製
一般的な抗体コンジュゲーション手順
還元緩衝液（例：リン酸緩衝生理食塩水ＰＢＳ、ヒスチジン緩衝液、ホウ酸ナトリウム緩衝液、トリス緩衝液）に１〜５ｍｇ／ｍＬで抗体を希釈する。システインジスルフィドブリッジを選択的に還元するために、ＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンハイドロクロライド）の新たに調製した溶液を添加する。ＴＣＥＰの量は、還元の目標レベルに比例し、１〜４モル当量／抗体の範囲内では２〜８個の反応性チオールを発生する。３７℃で数時間還元した後、混合物を室温に冷却し、過剰の薬剤−リンカー（化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ）を希釈ＤＭＳＯ溶液として添加する（反応混合物の１０％体積／体積までの最終ＤＭＳＯ含有率）。適切な時間、一般的には１〜３時間にわたり、４℃又は室温のどちらかで混合物を穏やかに振盪する。過剰の反応性チオールは、コンジュゲーションの終了時にＮ−エチルマレイミド（ＮＥＭ）のような「チオールキャップ試薬」と反応させることが可能である。１０ｋＤａ以上の分画分子量の遠心分離スピンフィルターを用いて抗体−薬剤コンジュゲートを濃縮し、次いで、タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）又は高速タンパク質液体クロマトグラフィー（ＦＰＬＣ）により精製する。高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）又は超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）による分析により対応する抗体−薬剤コンジュゲートを決定し、ＵＶ−可視分光計、蛍光分光計、又は質量分析計による検出と組み合わせて逆相クロマトグラフィー（ＲＰ）又は疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）を用いて薬剤／抗体比（ＤＡＲ）を評価する。凝集体レベル及びモノマー純度は、ＵＶ−可視分光計、蛍光分光計、又は質量分析計による検出と組み合わせてサイズ排除クロマトグラフィーを用いて、ＨＰＬＣ又はＵＨＰＬＣにより分析可能である。最終コンジュゲート濃度は、分光学的アッセイ（２８０、２１４及び３３０ｎｍの吸光度）と生化学的アッセイ（ビシンコニン酸アッセイＢＣＡ、スミス，Ｐ．Ｋ．（Ｓｍｉｔｈ，Ｐ．Ｋ．）ら著、１９８５年、アナリティカル・バイオケミストリー（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．）、第１５０巻、第１号、ｐ．７６〜８５、参照として既知濃度のＩｇＧ抗体を用いる）とを組み合わせて決定される。抗体−薬剤コンジュゲートは、一般に、０．２μｍフィルターを用いて無菌条件下で無菌濾過され、＋４℃、−２０℃、又は−８０℃で貯蔵される。
ＤＡＲの決定
１０μＬホウ酸緩衝液（１００ｍＭ、ｐＨ８．４）及び５μＬ ＤＴＴ（水中０．５Ｍ）を添加して３７℃で１５分間加熱することにより、抗体又はＡＤＣ（３５μＬ中約３５μｇ）を還元する。アセトニトリル：水：ギ酸（４９％：４９％：２％ｖ／ｖ）の１体積でサンプルを希釈し、ＵＰＬＣシステム（シマズ・ネキセラ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｎｅｘｅｒａ））において８０℃でワイドポア（Ｗｉｄｅｐｏｒｅ）３．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １５０×２．１ｍｍ（Ｐ／Ｎ００Ｆ−４４８２−ＡＮ）カラム（フェノメネックス・エリス（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ａｅｒｉｓ））上に１ｍｌ／分の流量で注入し、７５％緩衝液Ａ（水、トリフルオロ酢酸（０．１％ｖ／ｖ）（ＴＦＡ））、２５％緩衝液Ｂ（アセトニトリル：水：ＴＦＡ ９０％：１０％：０．１％ｖ／ｖ）で平衡化する。結合された材料は、２５％→５５％のグラジエントの緩衝液Ｂを用いて１０分間で溶出させる。２１４ｎｍのＵＶ吸収のピークを積分する。各ＡＤＣ又は抗体に対して次のピークを同定しうる。すなわち、天然抗体軽鎖（Ｌ０）、天然抗体重鎖（Ｈ０）、及び添加された薬剤−リンカーを有するこれらの各鎖（１個の薬剤を有する軽鎖のＬ１及び１、２、又は３結合薬剤−リンカーを有する重鎖のＨ１、Ｈ２、Ｈ３）。薬剤−リンカーを含有するフラグメント（すなわち、Ｌ１、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）を同定するために、３３０ｎｍのＵＶクロマトグラムを使用しうる。
薬剤／タンパク質モル比は、以下のように軽鎖及び重鎖の両方で計算しうる。
最終ＤＡＲは、以下のように計算しうる。
薬剤−リンカーの吸光度の干渉が最小限に抑えられることから、ＤＡＲ測定は２１４ｎｍで行われる。
ＡＤＣの生成
抗ＣＤ２０４抗体、抗ＣＤ１６３抗体、又は抗ＣＤ２０６抗体（「Ａ」）は、ＣｏｎｊＡ−Ａを与えるように化合物Ａにコンジュゲートしうる。
抗ＣＤ２０４抗体、抗ＣＤ１６３抗体、又は抗ＣＤ２０６抗体（「Ａ」）は、ＣｏｎｊＡ−Ｂを与えるように化合物Ｂにコンジュゲートしうる。
抗ＣＤ２０４抗体、抗ＣＤ１６３抗体、又は抗ＣＤ２０６抗体（「Ａ」）は、ＣｏｎｊＡ−Ｃを与えるように化合物Ｄにコンジュゲートしうる。
抗ＣＤ２０４抗体、抗ＣＤ１６３抗体、又は抗ＣＤ２０６抗体（「Ａ」）は、ＣｏｎｊＡ−Ｄを与えるように化合物Ｄにコンジュゲートしうる。
抗ＣＤ２０４抗体、抗ＣＤ１６３抗体、又は抗ＣＤ２０６抗体（「Ａ」）は、ＣｏｎｊＡ−Ｅを与えるように化合物Ｄにコンジュゲートしうる。
製剤
ＣｏｎｊＡ−Ａ、ＣｏｎｊＡ−Ｂ、ＣｏｎｊＡ−Ｃ、ＣｏｎｊＡ−Ｄ、及びＣｏｎｊＡ−Ｅは、ＡＤＣと１つ以上の薬学的に許容可能な担体又は賦形剤とを含む組成物で製剤化される。
製剤は、次のアッセイ、すなわち、微粒子を検出するための目視検査と、遊離の薬剤関連種を測定するためのクロマトグラフィー法と、高分子量及び低分子量のコンジュゲート関連種を検出するためのＨＰＬＣサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）と、を用いて評価される。目視検査に関して、微粒子の存在は、不安定性の指標となるので望ましくないとみなされ、一方、透明溶液は、安定な製剤の指標となる。クロマトグラフィーアッセイは、４℃及び２５℃で遊離の薬剤の量を測定するために使用しうる。
実施例２：抗体−薬剤コンジュゲートを用いた神経膠腫の治療
標準的療法を用いた治療の前、後、又はそれと同時に、治療に関して神経膠腫患者を同定する。各患者は、次の基準、すなわち、年齢＞１８歳、カルノフスキーパフォーマンススコア６０以上、且つ治療を妨害する併存症がないという基準を満たしうる。
０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０７ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、又は５ｍｇ／ｋｇの用量で実施例１に記載のＡＤＣコンジュゲートを１〜６週間にわたり週１〜３回で患者に注射（ｉ．ｖ．）する。任意選択的に、ＩＧＦＲ−１に対するアンチセンスヌクレオチドを並行的に投与する。
放射線学評価を用いて臨床有効性をモニターする。フィリップス（Ｐｈｉｌｉｐｓ）１．５Ｔ及び３Ｔ ＭＲＩスキャナー又はＧＥ １．５Ｔ ＭＲＩスキャナーを用いて、逐次イメージング評価を実施しうる。ルーチン解剖学的ＭＲＩ特徴量を等級付けしうる。動的磁化率強調（ＤＳＣ）ＭＲ灌流及び１５方向拡散テンソルイメージング（ＤＴＩ）の生理学的ＭＲＩ技術を利用することも可能である。ＭＲ灌流及びＤＴＩポスト処理は、ノルディック・アイス（Ｎｏｒｄｉｃ Ｉｃｅ）ワークステーション（バージョン２．３．１４）で実施しうる。ｒＣＢＶは、対側正常白質との関連で計算しうる。平均拡散係数（平均拡散率）は、ＤＴＩデータから計算可能である。
所要により、腫瘍成長を阻害及び／又は排除するために、治療を繰り返しうる。
略語
Ａｃ アセチル
Ａｃｍ アセトアミドメチル
Ａｌｌｏｃ アリルオキシカルボニル
Ｂｏｃ ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート
ｔ−Ｂｕ ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｚｌ ベンジル、ただし、Ｂｚｌ−ＯＭｅはメトキシベンジルであり、且つＢｚｌ−Ｍｅはメチルベンゼンである
Ｃｂｚ又はＺ ベンジルオキシ−カルボニル、ただし、Ｚ−Ｃｌ及びＺ−Ｂｒはそれぞれクロロベンジルオキシカルボニル及びブロモベンジルオキシカルボニルである
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｄｎｐ ジニトロフェニル
ＤＴＴ ジチオトレイトール
Ｆｍｏｃ ９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル
ｉｍｐ Ｎ−１０イミン保護基：３−（２−メトキシエトキシ）プロパノエート−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＰＡＢ
ＭＣ−ＯＳｕ マレイミドカプロイル−Ｏ−Ｎ−スクシンイミド
Ｍｏｃ メトキシカルボニル
ＭＰ マレイミドプロピオンアミド
Ｍｔｒ ４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル（ｔｒｉｍｅｔｈｔｙｌｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｙｌ）
ＰＡＢ ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル
ＰＥＧ エチレンオキシ
ＰＮＺ ｐ−ニトロベンジルカルバメート
Ｐｓｅｃ ２−（フェニルスルホニル）エトキシカルボニル
ＴＢＤＭＳ ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＢＤＰＳ ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル
Ｔｅｏｃ ２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル
Ｔｏｓ トシル
Ｔｒｏｃ ２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルクロライド
Ｔｒｔ トリチル
Ｘａｎ サンチル
参照文献
以下の参照文献はそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
１．ウェイナーＧＪ（Ｗｅｉｎｅｒ ＧＪ）著、「より良好なモノクローナル抗体ベースの治療剤の構築（Ｂｕｉｌｄｉｎｇ ｂｅｔｔｅｒ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｂａｓｅｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）」、ネイチャー・レビューズ・キャンサー（Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ）、第１５巻、ｐ．３６１〜７０、２０１５年
２．バレルムパスＰ（Ｂａｌｅｒｍｐａｓ Ｐ）、ローデルＦ（Ｒｏｄｅｌ Ｆ）、リベルツＲ（Ｌｉｂｅｒｚ Ｒ）ら著、「化学放射線療法後の頭頸部癌再発は原発腫瘍ＣＤ１６３＋マクロファージ及び再発ＣＤ１１ｂ＋ミエロイド細胞に相関する（Ｈｅａｄ ａｎｄ ｎｅｃｋ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｌａｐｓｅ ａｆｔｅｒ ｃｈｅｍｏｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ＣＤ１６３＋ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｔｕｍｏｕｒ ａｎｄ ＣＤ１１ｂ＋ ｍｙｅｌｏｉｄ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅｓ）」、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ）、第１１１巻、ｐ．１５０９〜１８、２０１４年
３．ベーネスＣＬ（Ｂｅｈｎｅｓ ＣＬ）、ブレマーＦ（Ｂｒｅｍｍｅｒ Ｆ）、ヘマーレインＢ（Ｈｅｍｍｅｒｌｅｉｎ Ｂ）ら著、「腫瘍関連マクロファージは乳頭状腎細胞癌の腫瘍進行に関与する（Ｔｕｍｏｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ａｒｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｐａｐｉｌｌａｒｙ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）」、ウィルヒョース・アルヒーフ（Ｖｉｒｃｈｏｗｓ Ａｒｃｈ）、第４６４巻、ｐ．１９１〜６、２０１４年
４．チャングＦＴ（Ｃｈｕｎｇ ＦＴ）、リーＫＹ（Ｌｅｅ ＫＹ）、ワングＣＷ（Ｗａｎｇ ＣＷ）ら著、「腫瘍関連マクロファージは進行非小細胞肺癌において表皮成長因子レセプターチロシンキナーゼ阻害剤に対する反応に相関する（Ｔｕｍｏｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｅ ｗｉｔｈ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｎ ａｄｖａｎｃｅｄ ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ）」、インターナショナル・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ）、第１３１巻、ｐ．Ｅ２２７〜３５、２０１２年
５．ユングＫＹ（Ｊｕｎｇ ＫＹ）、チョーＳＷ（Ｃｈｏ ＳＷ）、キムＹＡ（Ｋｉｍ ＹＡ）ら著、「より高密度の腫瘍関連マクロファージを有する癌は生存率不良に関与した（Ｃａｎｃｅｒｓ ｗｉｔｈ Ｈｉｇｈｅｒ Ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｕｍｏｒ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ Ｗｅｒｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｐｏｏｒ Ｓｕｒｖｉｖａｌ Ｒａｔｅｓ）」、ジャーナル・オブ・パソロジー・アンド・トランスレーショナル・メディスン（Ｊ Ｐａｔｈｏｌ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ）、第４９巻、ｐ．３１８〜２４、２０１５年
６．クラハラＨ（Ｋｕｒａｈａｒａ Ｈ）、シンチＨ（Ｓｈｉｎｃｈｉ Ｈ）、マタキＹ（Ｍａｔａｋｉ Ｙ）ら著、「膵癌におけるＭ２分極化腫瘍関連マクロファージの有意性（Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ Ｍ２−ｐｏｌａｒｉｚｅｄ ｔｕｍｏｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ）」、ジャーナル・オブ・サージカル・リサーチ（Ｊ Ｓｕｒｇ Ｒｅｓ）、第１６７巻、ｐ．ｅ２１１〜９、２０１１年
７．シャボーＩ（Ｓｈａｂｏ Ｉ）、オルソンＨ（Ｏｌｓｓｏｎ Ｈ）、エルカリムＲ（Ｅｌｋａｒｉｍ Ｒ）ら著、「腫瘍間質のマクロファージ浸潤は結腸直腸癌においてＣＤ１６３の腫瘍細胞発現に関連する（Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ Ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ Ｔｕｍｏｒ Ｓｔｒｏｍａ ｉｓ Ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ Ｔｕｍｏｒ Ｃｅｌｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＣＤ１６３ ｉｎ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ）」、キャンサー・マイクロエンバイロンメント（Ｃａｎｃｅｒ Ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎ）、第７巻、ｐ．６１〜９、２０１４年
８．ヘレーラＭ（Ｈｅｒｒｅｒａ Ｍ）、ヘレーラＡ（Ｈｅｒｒｅｒａ Ａ）、ドミンゲズＧ（Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ Ｇ）ら著、「癌関連線維芽細胞及びＭ２マクロファージマーカは一緒になって結腸直腸癌患者においてアウトカムを予測する（Ｃａｎｃｅｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ａｎｄ Ｍ２ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｍａｒｋｅｒｓ ｔｏｇｅｔｈｅｒ ｐｒｅｄｉｃｔ ｏｕｔｃｏｍｅ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ）」、キャンサー・サイエンス（Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉ）、第１０４巻、ｐ．４３７〜４４、２０１３年
９．シャボーＩ（Ｓｈａｂｏ Ｉ）、スタールＯ（Ｓｔａｌ Ｏ）、オルソンＨ（Ｏｌｓｓｏｎ Ｈ）ら著、「ＣＤ１６３マクロファージスカベンジャーレセプターの乳癌発現は早期遠隔再発及び患者生存低減に関連する（Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＣＤ１６３，ａ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｓｃａｖｅｎｇｅｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｅａｒｌｙ ｄｉｓｔａｎｔ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｒｅｄｕｃｅｄ ｐａｔｉｅｎｔ ｓｕｒｖｉｖａｌ）」、インターナショナル・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ）、第１２３巻、ｐ．７８０〜６、２００８年
１０．スーザＳ（Ｓｏｕｓａ Ｓ）、ブリオンＲ（Ｂｒｉｏｎ Ｒ）、リンツネンＭ（Ｌｉｎｔｕｎｅｎ Ｍ）ら著、「ヒト乳癌細胞はマクロファージをＭ２活性化状態に向かわせる（Ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｅｄｕｃａｔｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｔｏｗａｒｄ ｔｈｅ Ｍ２ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｓｔａｔｕｓ）」、ブレスト・キャンサー・リサーチ（Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ）、第１７巻、ｐ．１０１、２０１５年
１１．メドレックＣ（Ｍｅｄｒｅｋ Ｃ）、ポンテンＦ（Ｐｏｎｔｅｎ Ｆ）、ジルストロームＫ（Ｊｉｒｓｔｒｏｍ Ｋ）ら著、「乳癌患者の予後マーカとしての腫瘍間質の腫瘍関連マクロファージの存在（Ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｓｔｒｏｍａ ａｓ ａ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ）」、ＢＭＣキャンサー（ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ）、第１２巻、ｐ．３０６、２０１２年
１２．コーＹＷ（Ｋｏｈ ＹＷ）、パークＣＳ（Ｐａｒｋ ＣＳ）、ヨーンＤＨ（Ｙｏｏｎ ＤＨ）ら著、「ＣＤ１６３発現は血管新生に関連し、一様に治療された古典的ホジキンリンパ腫の患者の生存を短縮した（ＣＤ１６３ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｓｈｏｒｔｅｎｅｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｕｎｉｆｏｒｍｌｙ ｔｒｅａｔｅｄ ｃｌａｓｓｉｃａｌ Ｈｏｄｇｋｉｎ ｌｙｍｐｈｏｍａ）」、プロス・ワン（ＰＬｏＳ Ｏｎｅ）、第９巻、ｐ．ｅ８７０６６、２０１４年
１３．ランＣ（Ｌａｎ Ｃ）、ホァンＸ（Ｈｕａｎｇ Ｘ）、リン（Ｌｉｎ Ｓ）ら著、「Ｍ２分極化マクロファージの発現は進行上皮卵巣癌の予後不良に関連する（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｍ２−ｐｏｌａｒｉｚｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｏｒ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）」、テクノロジー・イン・キャンサー・リサーチ・アンド・トリートメント（Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｔｒｅａｔ）、第１２巻、ｐ．２５９〜６７、２０１３年

Claims (39)

  1. 少なくとも１つの細胞傷害剤にコンジュゲートされた少なくとも１つの抗体又はその抗原結合フラグメントを含む組成物を投与することを含む腫瘍成長の阻害方法であって、前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがＣＤ１６３、ＣＤ２０４、又はＣＤ２０６に結合する、方法。
  2. 前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがＣＤ１６３に結合する、請求項１に記載の方法。
  3. 前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがＣＤ２０４に結合する、請求項１又は２に記載の方法。
  4. 前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがＣＤ２０６に結合する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
  5. 前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがリンカーを介して少なくとも１つの細胞傷害剤にコンジュゲートされる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
  6. 前記リンカーが切断可能である、請求項５に記載の方法。
  7. 前記組成物が薬学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
  8. 前記組成物がＩＧＦＲ−１に対するアンチセンスヌクレオチドをさらに含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
  9. ＩＧＦＲ−１に対する前記アンチセンスヌクレオチドがヌクレオチド配列５’−ＴＣＣＴＣＣＧＧＡＧＣＣＡＧＡＣＴＴ−３’（配列番号２）又はそのフラグメントを含む、請求項８に記載の方法。
  10. 前記少なくとも１つの抗体がモノクローナル抗体である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
  11. 前記少なくとも１つの抗体がキメラ抗体である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
  12. 前記少なくとも１つの抗体がヒト化抗体である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
  13. 前記少なくとも１つの抗原結合フラグメントが一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
  14. 前記少なくとも１つの細胞傷害剤がメルタンシンである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
  15. 前記少なくとも１つの細胞傷害剤がピロロベンゾジアゼピン又はそのダイマーである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
  16. 前記腫瘍が神経膠腫である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
  17. 前記腫瘍が星状細胞腫である、請求項１６に記載の方法。
  18. 前記腫瘍が膠芽細胞腫である、請求項１６に記載の方法。
  19. 前記組成物が１回投与される、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
  20. 前記組成物が２回以上投与される、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
  21. 前記組成物が治療有効期間にわたり週１回投与される、請求項２０に記載の方法。
  22. 前記組成物が治療有効期間にわたり月１回投与される、請求項２０に記載の方法。
  23. 前記組成物が注射により投与される、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
  24. 前記注射が皮下注射又は静脈内注射である、請求項２３に記載の方法。
  25. 腫瘍成長が少なくとも１２ヶ月間にわたり阻害される、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
  26. 腫瘍成長が少なくとも３６ヶ月間にわたり阻害される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
  27. 前記組成物を投与することが前記腫瘍に対する免疫反応を増強する、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
  28. 細胞傷害剤にコンジュゲートされた少なくとも１つの抗体又はその抗原結合フラグメントを含む組成物であって、前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがＣＤ２０４又はＣＤ２０６に結合する、組成物。
  29. 前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがリンカーを介して前記細胞傷害剤にコンジュゲートされる、請求項２８に記載の組成物。
  30. 前記リンカーが切断可能である、請求項２９に記載の組成物。
  31. 前記組成物が薬学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項２８〜３０のいずれか一項に記載の組成物。
  32. 前記組成物がＩＧＦＲ−１に対するアンチセンスヌクレオチドをさらに含む、請求項２８〜３１のいずれか一項に記載の組成物。
  33. ＩＧＦＲ−１に対する前記アンチセンスヌクレオチドがヌクレオチド配列５’−ＴＣＣＴＣＣＧＧＡＧＣＣＡＧＡＣＴＴ−３’（配列番号２）又はそのフラグメントを含む、請求項３２に記載の組成物。
  34. 細胞傷害剤にコンジュゲートされた少なくとも１つの抗体又はその抗原結合フラグメントを含む組成物であって、前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがＣＤ１６３に結合し、且つ前記細胞傷害剤がデキサメタゾンでない、組成物。
  35. 前記少なくとも１つの抗体又は抗原結合フラグメントがリンカーを介して前記細胞傷害剤にコンジュゲートされる、請求項３４に記載の組成物。
  36. 前記リンカーが切断可能である、請求項３５に記載の組成物。
  37. 前記組成物が薬学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の組成物。
  38. 前記組成物がＩＧＦＲ−１に対するアンチセンスヌクレオチドをさらに含む、請求項３４〜３７のいずれか一項に記載の組成物。
  39. ＩＧＦＲ−１に対する前記アンチセンスヌクレオチドがヌクレオチド配列５’−ＴＣＣＴＣＣＧＧＡＧＣＣＡＧＡＣＴＴ−３’（配列番号２）又はそのフラグメントを含む、請求項３８に記載の組成物。
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