JP2019535003A5 - - Google Patents
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Claims (15)
- 以下の工程を含むマルチプレックスアッセイの実施方法であって、
a)アッセイシステム中でサンプルをビーズと接触させることであって、前記システム中の各ビーズは、
(1)第1の表面及び第2の表面を有する実質的に透明なポリマー層であって、前記第1及び第2の表面は、互いに平行である、前記実質的に透明なポリマー層;
(2)実質的に非透明なポリマー層であって、前記実質的に非透明なポリマー層は、前記実質的に透明なポリマー層の前記第1の表面に固定され、かつ、前記実質的に透明なポリマー層の中央部分を囲み、前記実質的に非透明なポリマー層は、アナログコード識別子を表す二次元形状を含む、前記実質的に非透明なポリマー層;
を含み、
前記システムは、(i)特定のアッセイ、特定の分析物、製造ロット、個人、位置識別子、または較生信号としてイメージングプロセッサーによって認識されるアナログコード識別子を有する少なくとも1つのビーズ、及び(ii)複数のビーズを含み、前記複数のビーズの各ビーズは、分析物に特異的に結合する捕捉剤を含み、前記捕捉剤は、前記実質的に透明なポリマー層の少なくとも前記中央部分において、前記実質的に透明なポリマー層の前記第1の表面及び前記第2の表面の少なくとも1つの上に固定化され、及び前記複数のビーズの各ビーズは、前記捕捉剤に対応するアナログコード識別子を含む、前記接触させること;及び
任意の順序で、同時にまたは順次:
b)前記イメージングプロセッサーによって認識される前記識別子を前記特定のアッセイとして同定すること;及び
c)前記捕捉剤に対応する前記アナログコード識別子の同定に基づいて、前記ビーズの表面上に固定化された前記捕捉剤への前記分析物の結合を分析することによって前記サンプル中の前記分析物の結合を検出すること
を含み、
任意選択的に、ビーズが、実質的に円形のディスクであり;
任意選択的に、前記第1の実質的に透明なポリマー層の中央部分が、前記第1の実質的に透明なポリマー層の表面積の約5%〜約90%を含む、
前記方法。 - 前記システムが:
(iii)少なくとも2つのビーズ、少なくとも3つのビーズ、少なくとも4つのビーズ、少なくとも5つのビーズ、または少なくとも6つのビーズをさらに含み、各々が、特定のアッセイ、特定の分析物、製造ロット、個人、位置識別子、または較生信号としてイメージングプロセッサーによって認識されるアナログコード識別子を有する;かつ/又は
(iv)前記イメージングプロセッサーによって認識される少なくとも1つのビーズを陽性または陰性対照としてさらに含む;かつ/又は
(v)前記イメージングプロセッサーの機能を監視するために予め標識される少なくとも1つのビーズをさらに含む、
請求項1に記載の方法。 - 前記ビーズが、約300μm未満の直径、約200μm未満の直径、又は約50μm未満の直径であり、かつ任意選択的に、前記ビーズの表面が、滑らかで、表面の凹凸がない、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記ビーズの少なくとも1つの表面が、前記捕捉剤の化学的付着のための少なくとも1つの部位を含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- 前記捕捉剤が、DNA分子、DNAアナログ分子、RNA分子、RNAアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、炭水化物部分、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、及び抗体断片からなる群から選択される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記複数のビーズが、磁性または非磁性である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 前記ビーズが、前記実質的に非透明なポリマー層の前記アナログコード識別子を配向するための配向インジケーターをさらに含み、かつ任意選択的に、前記配向インジケーターが、磁性の実質的に非透明な層の非対称性を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記ビーズが、約50μm未満の厚さであり、任意選択的に約10μmの厚さである、請求項1に記載の方法。
- 前記分析物が、DNA分子、DNAアナログ分子、RNA分子、RNAアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、炭水化物部分、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞器官、及び抗体断片からなる群から選択される、請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 前記第1または第2の実質的に透明なポリマー層の実質的に透明なポリマーが、エポキシ系ポリマーを含む、請求項1に記載の方法。
- マルチプレックスアッセイを実施するキットであって、
a)ビーズセットであって、前記セット中の各ビーズは、
(1)第1の表面及び第2の表面を有する実質的に透明なポリマー層であって、前記第1及び第2の表面は、互いに平行である前記実質的に透明なポリマー層;
(2)実質的に非透明なポリマー層であって、前記実質的に非透明なポリマー層は、前記実質的に透明なポリマー層の前記第1の表面に固定され、かつ、前記実質的に透明なポリマー層の中央部分を囲み、前記実質的に非透明なポリマー層は、アナログコード識別子を表す二次元形状を含む、前記実質的に非透明なポリマー層;
を含み、
前記ビーズセットは、(i)特定のアッセイ、特定の分析物、製造ロット、個人、位置識別子、または較生信号としてイメージングプロセッサーによって認識されるアナログコード識別子を有する少なくとも1つのビーズ、及び(ii)複数のさらなるビーズを含み、前記複数のビーズの各ビーズは、分析物に特異的に結合する捕捉剤を含み、前記捕捉剤は、前記実質的に透明なポリマー層の少なくとも前記中央部分において、前記実質的に透明なポリマー層の前記第1の表面及び前記第2の表面の少なくとも1つの上に固定化され、前記複数のビーズの各ビーズは、前記捕捉剤に対応するアナログコード識別子を含む、前記ビーズセット;及び
b)前記分析物または捕捉剤に直接的または間接的に結合することが可能な信号発信エンティティ
を含み、
任意選択的に、ビーズが、実質的に円形のディスクであり;
任意選択的に、前記第1の実質的に透明なポリマー層の中央部分が、前記第1の実質的に透明なポリマー層の表面積の約5%〜約90%を含む、
前記キット。 - 前記信号発信エンティティが、前記信号発信エンティティにコンジュゲートされる二次抗体又はヌクレオチドプローブを介して、前記分析物または捕捉剤に間接的に結合し、任意選択的に、前記信号発信エンティティが、フィコエリトリン、GFP、RFP、CFP、YFP、FITC、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、または放射性標識である、請求項11に記載のキット。
- 前記キットが、少なくとも2つのビーズ、少なくとも3つのビーズ、少なくとも4つのビーズ、少なくとも5つのビーズ、または少なくとも6つのビーズをさらに含み、各々が、特定のアッセイ、特定の分析物、製造ロット、個人、位置識別子、または較生信号としてイメージングプロセッサーによって認識されるアナログコード識別子を有する、請求項11又は12に記載のキット。
- 前記分析物または捕捉剤に直接的または間接的に結合することが可能なエンティティをさらに含み、前記エンティティが、親和性標識を含み、任意選択的に、前記親和性標識が、ビオチン、His 6 、またはマルトースである、請求項11〜13のいずれか1項に記載のキット。
- マルチプレックスアッセイシステムであって、
a)請求項11〜14のいずれか1項に記載のキット中の複数のビーズ;及び
b)イメージングプロセッサーシステム及び反応検出システムを含む装置
を含み、
デコードシステムにおける前記イメージングプロセッサーによる、
(i)特定のアッセイ、
(ii)特定の分析物、
(iii)製造ロット、
(iv)個人、
(v)位置識別子、及び/または
(vi)較生信号
のうちの1つ以上に対応する識別子の同定により、前記特定のアッセイと相関する反応検出システムによって検出されるソフトウェア分析検出信号の使用を活性化させる、前記マルチプレックスアッセイシステム。
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