JP2019500876A - モノクローナル抗体組成物中のアフコシル化種の調節 - Google Patents
モノクローナル抗体組成物中のアフコシル化種の調節 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019500876A JP2019500876A JP2018535126A JP2018535126A JP2019500876A JP 2019500876 A JP2019500876 A JP 2019500876A JP 2018535126 A JP2018535126 A JP 2018535126A JP 2018535126 A JP2018535126 A JP 2018535126A JP 2019500876 A JP2019500876 A JP 2019500876A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- monoclonal antibody
- fucose
- glycan
- species
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 5
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 title description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 157
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 122
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 claims abstract description 122
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims abstract description 121
- 239000012526 feed medium Substances 0.000 claims abstract description 76
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 138
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 79
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 44
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 17
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 11
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims description 11
- -1 Man 8 glycan Chemical class 0.000 claims description 10
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 3
- JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5s,6r)-2-[[(2r,3r,4s,5s,6s)-6-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-6-[(2r,3s,4r,5r)-5-acetamido-1,2,4-trihydroxy-6-oxohexan-3-yl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4-[(2r,3s,4s,5s,6r)-3-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-4-h Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@@H]([C@H](O)[C@H](C=O)NC(=O)C)[C@H](O)CO)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)O1 JMUPMJGUKXYCMF-IWDIICGPSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 abstract description 102
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 51
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 51
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 abstract description 29
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract description 21
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 55
- 230000008569 process Effects 0.000 description 51
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 26
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 25
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- 229960000106 biosimilars Drugs 0.000 description 14
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 13
- 239000013628 high molecular weight specie Substances 0.000 description 12
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 11
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 4
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- DINOPBPYOCMGGD-VEDJBHDQSA-N Man(a1-2)Man(a1-2)Man(a1-3)[Man(a1-2)Man(a1-3)[Man(a1-2)Man(a1-6)]Man(a1-6)]Man(b1-4)GlcNAc(b1-4)GlcNAc Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]3[C@H]([C@@H](O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)O3)O)O2)O)[C@@H](CO)O1 DINOPBPYOCMGGD-VEDJBHDQSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- OSKIPPQETUTOMW-YHLOVPAPSA-N N-[(2R,3R,4R,5S,6R)-5-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-5-[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-[(2R,3S,4S,5S,6R)-3-[(2S,3S,4S,5S,6R)-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-[(2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[[(2S,3S,4S,5R,6R)-6-[[(2S,3S,4S,5S,6R)-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-[(2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,5-dihydroxy-4-[(2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-2,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]3[C@H]([C@@H](O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)O3)O)O2)O)[C@@H](CO)O1 OSKIPPQETUTOMW-YHLOVPAPSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical group O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N L-Fucose Natural products C[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000012615 aggregate Substances 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000011143 downstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009144 enzymatic modification Effects 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 230000036252 glycation Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000001365 lymphatic vessel Anatomy 0.000 description 1
- 150000002669 lysines Chemical group 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011165 process development Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012368 scale-down model Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000003989 weak cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
- C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
本願は、2016年1月6日に出願された米国特許出願第62/275,384号明細書の優先権を主張し、その内容は全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は一般に、タンパク質生化学の分野に関する。より具体的には、本発明は、バイオリアクター内での組み換え抗体発現細胞のための栄養供給スキームに関し、そのいずれも実質的に、発現される抗体の望ましくないアイソフォームを減少させ、かつ発現される抗体のアフコシル化種(afucosylated species)のレベルを調節することができる。
特許、公開された出願、受託番号、技術論文及び学術論文を含む様々な刊行物が、本明細書を通して引用される。これら引用された刊行物の各々は、その全体が全ての目的のために本明細書に参照により組み込まれる。
本開示は、バイオリアクター内で組み換え発現されたモノクローナル抗体のアフコシル化種のレベルを増強又は減少させるための方法を特徴とする。さらに、本開示はまた、バイオリアクター内で組み換え発現されたモノクローナル抗体の高分子量種、酸性種、及び断片のレベルを減少させるための方法を特徴とする。
本発明の態様に関連する様々な用語が、本明細書及び特許請求の範囲を通じて使用される。そのような用語は、他に示されない限り当該技術分野における通常の意味を有するものとする。他の具体的に定義された用語は、本明細書に与えられた定義と一致するように解釈されるべきである。
基礎供給戦略
これらの実験は、治療用モノクローナル抗体のバイオリアクター産生中に生じた不均一性を制御する複雑な課題に取り組む精製プロセスを開発するために行われた。基礎/供給培地のための上流プロセス開発は、ベンチトップバイオリアクターのスケールダウンモデルを用いた培地スクリーニング実験から始まった。スクリーニングでは、いくつかの基礎培地タイプといくつかの供給培地タイプとを組み合わせて評価して、適切な組み合わせを決定した。製品の品質及び生産性は、培地選択に用いられた基準の1つである。 基礎/供給培地の選択に続いて、プロセスパラメータの変更及び栄養補助剤の添加によって、製品の品質及び生産性をモニターし、調節した。
供給戦略
モノクローナル抗体調製物のいくつかの特性が、特定の重要品質特性(CQA)を改善するように調節され得ることが決定された。この調節は、栄養素供給を細胞培養物中に導入する方法を変更することによって達成された。上記実施例1では、基礎プロセスは特定の細胞密度を前提としてボーラス供給を利用し、バイオリアクター培養の4日目に開始して隔日で供給を培養物に添加した。ボーラス供給は、隔日で合計約15分の期間にわたって細胞培養物への栄養素添加を含んだ。しかしながら、その後、供給戦略が、高MW種、抗体断片、及び電荷変異体のレベルを含むタンパク質調製の特定の態様のレベルに影響を与えることが決定された。
アフコシル化種の制御
プロセスB又はプロセスCによるバイオリアクター供給について観察された(プロセスAと比較して)有益な結果にも関わらず、プロセス変化の1つの結果はアフコシル化種のレベル、特にG0種の増加であった。
要約
これらのデータは、バイオリアクター内で発現される組み換え抗体の品質制御特性を調節することができる上流プロセスを示す。当該プロセスは、変更されたバイオリアクター供給プロセスとフコースの連続添加とを組み合わせる。延長/連続供給戦略のプロセス及びフコースの補充により、この組み合わせは、生成物関連不純物(例えば、酸性種、G0種)を低下させる。
本発明の1つ又は複数の実施形態の詳細が、添付の上記説明に記載されている。本明細書に記載されたものと類似又は等価の任意の方法及び材料を、本発明の実施又は試験に使用することができるが、好ましい方法及び材料をここで記載する。
Claims (42)
- バイオリアクター内で組み換え発現されたモノクローナル抗体のアフコシル化種(afucosylated species)を減少させるための方法であって、以下、
バイオリアクター内でモノクローナル抗体を発現する組み換え細胞を培養し、そして、
培養の1日目、2日目、3日目、4日目、又は5日目に開始し、かつ培養の終了まで毎日継続して、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体のアフコシル化種が減少するように、培養物に約0.5 g/L〜約5 g/Lのフコースを注入すること、
を含む、方法。 - 前記モノクローナル抗体が、腫瘍壊死因子(TNF)アルファに特異的に結合する、請求項1に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、哺乳動物細胞を含む、請求項1から2のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、チャイニーズハムスター卵巣細胞を含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、HEK293細胞を含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、Sp2/0細胞を含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約5 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約4 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項1から7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約3 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項1から8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約2 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項1から9のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約2 g/L〜約4 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記フコースが、ボーラス(bolus)で注入される、請求項1から11のいずれか一項に記載の方法。
- 前記培養が連続供給培養(continuous-feed culture)であって、培養の2日目、3日目、4日目、又は5日目に開始し、かつ培養の終了まで毎日継続して、24時間の期間にわたって連続して、培養物に供給培地がさらに注入される、請求項1から12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記培養が延長供給培養(extended-feed culture)であって、培養の2日目、3日目、4日目、又は5日目に開始し、かつ培養の終了まで毎日継続して、約18時間〜約20時間の期間にわたって連続して、培養物に供給培地がさらに注入される、請求項1から12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記アフコシル化種が、G0グリカン、G1aグリカン、G1bグリカン、G2グリカン、Man 3グリカン、Man 4グリカン、Man 5グリカン、Man 6グリカン、Man 7グリカン、Man 8グリカン、又はMan 9グリカンを含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
- 前記アフコシル化種が、G0グリカンを含む、請求項1から15のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約10%以下に減少する、請求項1から16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約2%〜約10%に減少する、請求項1から17のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約6%以下に減少する、請求項1から16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約3%〜約7%に減少する、請求項1から19のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、少なくとも12日間バイオリアクター内でモノクローナル抗体を発現する組み換え細胞を培養することを含む、請求項1から20のいずれか一項に記載の方法。
- バイオリアクター内で組み換え発現されたモノクローナル抗体のアフコシル化種を減少させるための方法であって、以下、
バイオリアクター内でモノクローナル抗体を発現する組み換え細胞を培養し、
培養の1日目、2日目、3日目、又は4日目に開始し、かつ培養の終了まで隔日で継続して、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体のアフコシル化種が減少するように、培養物に約0.5 g/L〜約5 g/Lのフコースを注入すること、
を含む、方法。 - 前記モノクローナル抗体が、腫瘍壊死因子(TNF)アルファに特異的に結合する、請求項22に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、哺乳動物細胞を含む、請求項22から23のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、チャイニーズハムスター卵巣細胞を含む、請求項22から24のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、HEK293細胞を含む、請求項22から24のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組み換え細胞が、Sp2/S0細胞を含む、請求項22から24のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約5 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項22から27のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約4 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項22から28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約3 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項22から29のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約1 g/L〜約2 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項22から30のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、培養物に約2 g/L〜約4 g/Lのフコースを注入することを含む、請求項22から27のいずれか一項に記載の方法。
- 前記フコースが、ボーラスで注入される、請求項22から32のいずれか一項に記載の方法。
- 前記培養が連続供給培養であって、培養の2日目、3日目、又は4日目に開始し、かつ培養の終了まで毎日継続して、24時間の期間にわたって連続して、培地に供給培地がさらに注入される、請求項22から33のいずれか一項に記載の方法。
- 前記培養が延長供給培養であって、培養の2日目、3日目、又は4日目に開始し、かつ培養の終了まで毎日継続して、約18時間〜約20時間の期間にわたって連続して、培養物に供給培地がさらに注入される、請求項22から33のいずれか一項に記載の方法。
- 前記アフコシル化種が、G0グリカン、G1aグリカン、G1bグリカン、G2グリカン、Man 3グリカン、Man 4グリカン、Man 5グリカン、Man 6グリカン、Man 7グリカン、Man 8グリカン、又はMan 9グリカンを含む、請求項22から35のいずれか一項に記載の方法。
- 前記アフコシル化種が、G0グリカンを含む、請求項22から36のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約10%以下に減少する、請求項22から37のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約2%〜約10%に減少する、請求項22から38のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約6%以下に減少する、請求項22から37のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノクローナル抗体のアフコシル化種が、前記細胞によって発現されたモノクローナル抗体の総量の約2%〜約6%に減少する、請求項22から40のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、少なくとも12日間バイオリアクター内でモノクローナル抗体を発現する組み換え細胞を培養することを含む、請求項22から41のいずれか一項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662275384P | 2016-01-06 | 2016-01-06 | |
US62/275,384 | 2016-01-06 | ||
PCT/US2017/012349 WO2017120347A1 (en) | 2016-01-06 | 2017-01-05 | Modulation of afucosylated species in a monoclonal antibody composition |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019500876A true JP2019500876A (ja) | 2019-01-17 |
JP2019500876A5 JP2019500876A5 (ja) | 2020-02-13 |
JP6674028B2 JP6674028B2 (ja) | 2020-04-01 |
Family
ID=57944513
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018535126A Active JP6674028B2 (ja) | 2016-01-06 | 2017-01-05 | モノクローナル抗体組成物中のアフコシル化種の調節 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20190161543A1 (ja) |
EP (1) | EP3400241B1 (ja) |
JP (1) | JP6674028B2 (ja) |
CN (1) | CN109153716A (ja) |
AU (1) | AU2017206006B2 (ja) |
CA (1) | CA3010598A1 (ja) |
MX (1) | MX2018008447A (ja) |
WO (1) | WO2017120347A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106170298B (zh) | 2013-10-16 | 2024-01-09 | 前瞻疗法公司 | 用于提高抗体稳定性的缓冲液制剂 |
EP3247718B1 (en) | 2015-01-21 | 2021-09-01 | Outlook Therapeutics, Inc. | Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition |
JP7084308B2 (ja) | 2016-02-03 | 2022-06-14 | アウトルック セラピューティクス,インコーポレイティド | 抗体安定性を増大させるための緩衝液製剤 |
MA52186A (fr) * | 2018-03-26 | 2021-02-17 | Amgen Inc | Glycoformes afucosylées totales d'anticorps produits en culture cellulaire |
HUP1800376A2 (hu) | 2018-11-07 | 2020-05-28 | Richter Gedeon Nyrt | Sejttenyészetben elõállított rekombináns glikoprotein glikozilációs-mintázatának megváltoztatására szolgáló módszer |
AU2019402923A1 (en) * | 2018-12-19 | 2021-07-15 | Seagen Inc. | Controlled fucosylation of antibodies |
WO2021066772A1 (en) * | 2019-10-01 | 2021-04-08 | Arven Ilac Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi | Cell culture medium for reducing fucosylation and basic variants in the production of antibodies |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011519567A (ja) * | 2008-05-02 | 2011-07-14 | シアトル ジェネティクス,インコーポレーテッド | 低いコアフコシル化を有する抗体及び抗体誘導体を調製するための方法並びに組成物 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6090382A (en) | 1996-02-09 | 2000-07-18 | Basf Aktiengesellschaft | Human antibodies that bind human TNFα |
US8227241B2 (en) | 2004-03-12 | 2012-07-24 | Unigene Laboratories, Inc. | Bacterial host cell for the direct expression of peptides |
ATE515566T1 (de) | 2005-05-26 | 2011-07-15 | Cytos Biotechnology Ag | Skalierbares fermentationsverfahren |
US7846724B2 (en) | 2006-04-11 | 2010-12-07 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method for selecting CHO cell for production of glycosylated antibodies |
KR101441437B1 (ko) | 2009-06-02 | 2014-09-25 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 푸코실화-결핍 세포 |
CA2763164A1 (en) | 2009-06-05 | 2010-12-09 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modulating fucosylation of glycoproteins |
US20120258496A1 (en) * | 2010-09-27 | 2012-10-11 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Production of low fucose antibodies in h4-ii-e rat cells |
WO2013114165A1 (en) * | 2012-01-30 | 2013-08-08 | Dr Reddy's Laboratories Limited | Process of obtaining glycoprotein composition with increased afucosylation content |
NO2760138T3 (ja) * | 2012-10-01 | 2018-08-04 | ||
WO2015140700A1 (en) * | 2014-03-19 | 2015-09-24 | Dr. Reddy's Laboratories Limited | Cell culture process |
KR20180068967A (ko) * | 2015-11-02 | 2018-06-22 | 제넨테크, 인크. | 단백질의 푸코실화 및 탈푸코실화 형태를 제조하는 방법 |
-
2017
- 2017-01-05 CN CN201780015362.XA patent/CN109153716A/zh active Pending
- 2017-01-05 US US16/067,193 patent/US20190161543A1/en not_active Abandoned
- 2017-01-05 JP JP2018535126A patent/JP6674028B2/ja active Active
- 2017-01-05 AU AU2017206006A patent/AU2017206006B2/en active Active
- 2017-01-05 EP EP17702444.5A patent/EP3400241B1/en not_active Revoked
- 2017-01-05 WO PCT/US2017/012349 patent/WO2017120347A1/en active Application Filing
- 2017-01-05 MX MX2018008447A patent/MX2018008447A/es unknown
- 2017-01-05 CA CA3010598A patent/CA3010598A1/en active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011519567A (ja) * | 2008-05-02 | 2011-07-14 | シアトル ジェネティクス,インコーポレーテッド | 低いコアフコシル化を有する抗体及び抗体誘導体を調製するための方法並びに組成物 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
CYTOTECHNOLOGY, vol. 64, JPN6020004161, 2012, pages 249 - 265, ISSN: 0004207054 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3400241B1 (en) | 2020-07-22 |
AU2017206006A1 (en) | 2018-07-19 |
EP3400241A1 (en) | 2018-11-14 |
AU2017206006B2 (en) | 2019-08-29 |
MX2018008447A (es) | 2019-05-30 |
JP6674028B2 (ja) | 2020-04-01 |
WO2017120347A1 (en) | 2017-07-13 |
CA3010598A1 (en) | 2017-07-13 |
CN109153716A (zh) | 2019-01-04 |
US20190161543A1 (en) | 2019-05-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6674028B2 (ja) | モノクローナル抗体組成物中のアフコシル化種の調節 | |
JP2019500878A (ja) | モノクローナル抗体組成物中の高分子量種、酸性荷電種、及び断片の低減 | |
CN105567627B (zh) | 使用含高浓度氨基酸的培养基的细胞培养方法 | |
AU2014288811B2 (en) | Improved process for production of monoclonal antibodies | |
AU2017255538B2 (en) | Cell culture medium | |
CN107629124A (zh) | 动物细胞的培养方法 | |
WO2018178063A1 (en) | Perfusion medium | |
AU2018201844B2 (en) | Use Of Monensin To Regulate Glycosylation Of Recombinant Proteins | |
AU2016354052A1 (en) | Methods for modulating production profiles of recombinant proteins | |
KR20240096888A (ko) | 세포 배양 방법 | |
JP2019514411A (ja) | ペルアセチルガラクトースを使った組換えタンパク質のタンパク質ガラクトシル化プロファイルを改変する方法 | |
CN108138147A (zh) | 含Fc蛋白的表达 | |
WO2020229584A1 (en) | Method for reducing methionine oxidation in recombinant proteins | |
CN117242186A (zh) | 细胞培养方法 | |
CN113242907A (zh) | 动物细胞、动物细胞的制造方法及靶蛋白的制造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20191226 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20191226 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20191226 |
|
A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20200116 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200204 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200305 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6674028 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |