JP2019147848A - Make-up compositions, cosmetic compositions, compositions for joint protection, compositions - Google Patents

Make-up compositions, cosmetic compositions, compositions for joint protection, compositions Download PDF

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Abstract

To provide highly safe compositions useful for anti-aging of the skin, joint protection, and the like by effectively inhibiting the expression of MMP-13.SOLUTION: The composition of the invention contains amino sugar, and a plant containing flavonoids. Preferably, the plant containing flavonoids is one or more kinds selected from a Pinus, Kaempferia parviflora, and Fallopia sachalinensis. Also preferably, the amino sugar is glucosamine. The composition of the invention is useful as make-up compositions, cosmetic compositions, compositions for joint protection, and the like by effectively inhibiting the silencing action of MMP-13 percutaneously or orally.SELECTED DRAWING: Figure 1

Description

本発明は、アミノ糖と、フラボノイド類含有植物とを含有する化粧用組成物、美容組成物、関節保護組成物、組成物に関する。   The present invention relates to a cosmetic composition, a cosmetic composition, a joint protection composition, and a composition containing an amino sugar and a flavonoid-containing plant.

皮膚は紫外線の影響に加え、油分やコラーゲンの喪失など、様々な要因により、しわ、たるみなどのいわゆる皮膚の老化につながることが知られている。皮膚の構造は、最上層から「表皮」「真皮」「皮下組織」の3層に分かれている。表皮の最上層にある「角質層」は、皮膚の最も外側にあって、外気や紫外線など様々な外的な刺激にさらされている。加齢による免疫力の低下・気温等の外部環境の変化・紫外線・外界の刺激・異物の過剰摂取等様々な要因によりシワ・シミ・クスミ・タルミ・肌荒れなどの肌トラブルや老化現象が表れる。   It is known that the skin leads to so-called skin aging such as wrinkles and sagging due to various factors such as loss of oil and collagen in addition to the influence of ultraviolet rays. The structure of the skin is divided into three layers of “epidermis”, “dermis” and “subcutaneous tissue” from the top layer. The “stratum corneum” at the top of the epidermis is on the outermost side of the skin and is exposed to various external stimuli such as outside air and ultraviolet rays. Skin troubles such as wrinkles, stains, kusumi, tarmi, rough skin, and aging phenomena appear due to various factors such as immunity decline due to aging, changes in the external environment such as temperature, ultraviolet rays, external stimulation, and excessive intake of foreign substances.

近年研究が進み、シワ形成の原因としては、コラーゲン、エラスチン等の真皮マトリックスの線維減少、変性によるものであることが明らかになってきた。これを誘導する因子として、特にマトリックスメタロプロテアーゼ(和名:マトリックス金属タンパク分解酵素、以下「MMPs」と記す。)の関与が指摘されている。   In recent years, research has progressed and it has become clear that the cause of wrinkle formation is due to fiber reduction and degeneration of the dermal matrix such as collagen and elastin. As a factor for inducing this, the involvement of matrix metalloprotease (Japanese name: matrix metalloproteinase, hereinafter referred to as “MMPs”) has been pointed out.

MMPsは、活性部位に亜鉛(II)イオンを保有する細胞外マトリックス分解酵素の総称である。また、MMPsはその構造と基質特異性の違いから、コラゲナーゼ(MMP−1及び13)、ゼラチナーゼ(MMP−2及び9)、ストロメライシン(MMP−3及び10)などのサブファミリーが知られている。このうちMMP−13の主要な基質は、線維状コラーゲン類(I型、II型、III型)およびゼラチン類、プロテオグリカン類、サイトカイン類および細胞外マトリックスの他の構成要素である。   MMPs is a general term for extracellular matrix degrading enzymes having zinc (II) ions in the active site. In addition, MMPs are known to have subfamilies such as collagenase (MMP-1 and 13), gelatinase (MMP-2 and 9), stromelysin (MMP-3 and 10) due to differences in structure and substrate specificity. Yes. Of these, the main substrates of MMP-13 are fibrillar collagens (type I, type II, type III) and gelatins, proteoglycans, cytokines and other components of the extracellular matrix.

紫外線などの外部刺激によってMMP−13等のMMPsの発現が亢進し、これにより皮膚の細胞外マトリックスの構成成分を分解してしまうことが知られている(特許文献1、非特許文献1)。このためMMP−13の産生を抑制することは、皮膚のシワの防止や弾力性の向上に有効である。   It is known that the expression of MMPs such as MMP-13 is enhanced by external stimuli such as ultraviolet rays, thereby decomposing components of the extracellular matrix of the skin (Patent Document 1, Non-Patent Document 1). For this reason, suppressing the production of MMP-13 is effective for preventing skin wrinkles and improving elasticity.

またMMPsによる軟骨の分解は、変形性関節症(退行性骨関節症、肥大性骨関節症などとよばれることもある)に深く関係していることが知られており、特にMMP−13はII型コラーゲン に対して高い分解活性を有し、変形性関節症の軟骨変性に重要な基質分解酵素と考えられている(非特許文献2)。関節等における軟骨細胞では、インターロイキン1ベータ(以下「IL1b」とも記載する)等の各種の炎症性サイトカイニンにより、MMP−13の発現が亢進することが知られている(非特許文献3)。またMMP−13は、関節リウマチ、骨関節炎においても過剰発現されることが知られている。従ってMMP−13の発現を抑制することは、関節の軟骨におけるコラーゲンの減少の防止等の関節保護に有用であり、変形性関節症をはじめとした軟骨コラーゲン分解に関連する疾患の予防及び改善等に有効である。   The degradation of cartilage by MMPs is known to be deeply related to osteoarthritis (sometimes called degenerative osteoarthritis, hypertrophic osteoarthropathy, etc.). It has high degrading activity against type II collagen and is considered to be an important substrate degrading enzyme for cartilage degeneration in osteoarthritis (Non-patent Document 2). In chondrocytes in joints and the like, it is known that expression of MMP-13 is enhanced by various inflammatory cytokinins such as interleukin 1 beta (hereinafter also referred to as “IL1b”) (Non-patent Document 3). MMP-13 is also known to be overexpressed in rheumatoid arthritis and osteoarthritis. Therefore, suppressing the expression of MMP-13 is useful for joint protection such as prevention of decrease in collagen in the cartilage of joints, prevention and improvement of diseases related to cartilage collagen degradation such as osteoarthritis, etc. It is effective for.

MMP−13の発現を抑制する物質としては、経口摂取又は経皮摂取する際の安全性を考慮して、天然由来の素材を用いることが近年提案されている。そのような素材としては、例えば非特許文献1に、オリーブ葉エキスが記載されている。また、特許文献3には、寒天、アガロース及び/又はアガロオリゴ糖が記載されている。   In recent years, as a substance that suppresses the expression of MMP-13, it has been proposed to use a naturally-derived material in consideration of safety when taken orally or percutaneously. As such a material, for example, Non-Patent Document 1 describes an olive leaf extract. Patent Document 3 describes agar, agarose and / or agarooligosaccharide.

特開2008−156349号公報JP 2008-156349 A 特表2011−528013号公報Special table 2011-528013 gazette 特開2011−213707号公報JP 2011-213707 A

木村 善之、“天然薬物のUVB照射による発癌抑制作用とその作用機構”、[online]、[2014年11月21日検索]、インターネット<URL:http://kaken.nii.ac.jp/pdf/2010/seika/jsps/16301/20590700seika.pdf>Yoshiyuki Kimura, “Carcinogenesis suppression by UVB irradiation of natural drugs and its mechanism” [online], [November 21, 2014 search], Internet <URL: http://kaken.nii.ac.jp/pdf /2010/seika/jsps/16301/20590700seika.pdf> 岡崎賢ら、“関節リウマチ・変形性関節症の軟骨変性における遺伝子発現の制御” 福岡医誌103(9):175―181,2012Ken Okazaki et al., “Control of gene expression in cartilage degeneration in rheumatoid arthritis and osteoarthritis” Fukuoka Medical Journal 103 (9): 175-181, 2012 松下 雄彦、“軟骨細胞におけるSIRT1の役割”、[online]、[2014年11月21日検索]、インターネット<URL: http://kaken.nii.ac.jp/pdf/2010/seika/mext/14501/21791393seika.pdf>Takehiko Matsushita, “Role of SIRT1 in chondrocytes”, [online], [searched on November 21, 2014], Internet <URL: http://kaken.nii.ac.jp/pdf/2010/seika/mext/ 14501 / 21791393seika.pdf>

以上の通り、様々な素材のMMP−13の発現抑制作用が知られている。
しかしながら、これらの素材による作用は十分に高いものではなく、より一層高いMMP−13の発現抑制作用を奏する技術が求められている。
したがって、本発明の課題は、安全性が高く、効果的にMMP−13の発現を抑制することにより、皮膚の老化防止、関節保護等に有効な組成物を提供することにある。
As described above, the expression suppressing action of MMP-13 of various materials is known.
However, the action of these materials is not sufficiently high, and a technique that exhibits a much higher MMP-13 expression suppressing action is required.
Therefore, an object of the present invention is to provide a composition that is highly safe and effective in preventing skin aging, protecting joints, and the like by effectively suppressing the expression of MMP-13.

本発明はアミノ糖と、フラボノイド類含有植物とを含有する化粧用組成物を提供するものである。
本発明はアミノ糖と、フラボノイド類含有植物とを含有する美容組成物を提供するものである。
本発明はアミノ糖と、フラボノイド類含有植物とを含有する関節保護組成物を提供するものである。
本発明はアミノ糖と、フラボノイド類含有植物とを含有する組成物を提供するものである。
The present invention provides a cosmetic composition containing an amino sugar and a flavonoid-containing plant.
The present invention provides a cosmetic composition containing an amino sugar and a flavonoid-containing plant.
The present invention provides a joint protective composition containing an amino sugar and a flavonoid-containing plant.
The present invention provides a composition containing an amino sugar and a flavonoid-containing plant.

本発明によれば、安全性が高く、効果的にMMP−13の発現を抑制することにより、皮膚の老化防止作用や関節保護作用から選ばれる少なくとも1の作用に有効な組成物が得られる。また本発明の組成物は、関節痛や関節の可動域の制限を防止することにより、身体のバランス能力、体力や移動能力の低下といったロコモティブシンドローム(運動器機能症候群)の予防及び防止に寄与し得る。   According to the present invention, a composition that is highly safe and effective for at least one action selected from an anti-aging action and a joint protecting action of skin can be obtained by effectively suppressing the expression of MMP-13. In addition, the composition of the present invention contributes to the prevention and prevention of locomotive syndrome (musculoskeletal function syndrome) such as a decrease in body balance ability, physical strength and mobility ability by preventing joint pain and limitation of range of motion of the joint. obtain.

図1は、実施例1及び比較例1及び2のサンプルによるMMP−13遺伝子発現抑制作用を評価した結果を示すグラフである。FIG. 1 is a graph showing the results of evaluating the MMP-13 gene expression inhibitory effect of the samples of Example 1 and Comparative Examples 1 and 2. 図2は、実施例2及び比較例3及び4のサンプルによるMMP−13遺伝子発現抑制作用を評価した結果を示すグラフである。FIG. 2 is a graph showing the results of evaluating the MMP-13 gene expression inhibitory effect of the samples of Example 2 and Comparative Examples 3 and 4. 図3は、実施例3及び比較例5及び6のサンプルによるMMP−13遺伝子発現抑制作用を評価した結果を示すグラフである。FIG. 3 is a graph showing the results of evaluating the MMP-13 gene expression inhibitory effect of the samples of Example 3 and Comparative Examples 5 and 6.

以下、本発明をその好ましい実施形態に基づき説明する。本発明の「化粧用組成物」、「美容組成物」、「関節保護組成物」、及び「組成物」はいずれもアミノ糖と、フラボノイド類含有植物とを含有するものである。以下の説明は特に断らない限り、「化粧用組成物」、「美容組成物」、「関節保護組成物」、「組成物」のいずれにも当てはまる。
以下では、これらの組成物を、総称して「本発明の組成物」という。
Hereinafter, the present invention will be described based on preferred embodiments thereof. Each of the “cosmetic composition”, “beauty composition”, “joint protection composition”, and “composition” of the present invention contains an amino sugar and a flavonoid-containing plant. The following description applies to any of “cosmetic composition”, “beauty composition”, “joint protection composition”, and “composition” unless otherwise specified.
Hereinafter, these compositions are collectively referred to as “the composition of the present invention”.

(アミノ糖)
本発明でいうアミノ糖とは、糖のヒドロキシル基がアミノ基で置換された構造を有する化合物及びその誘導体ならびにこれらの塩を意味する。本発明で用いるアミノ糖は、フラボノイド類含有植物(後述)と組み合わせてなる組成物としての状態で、ヒトを含む哺乳類に適用したときに本発明の課題を解決する効果を発揮する限り、化学構造、純度、性状や調製方法は特定のものに限定されない。本発明を実施する上で比較的望ましいアミノ糖は、天然に遊離の状態で又は多糖、糖蛋白質、糖脂質などの構成単位として存在するものであって、具体的には、例えば、グルコサミン、マンノサミン、ノイラミン酸、ガラクトサミンならびにこれらのアミノ糖の誘導体が挙げられる。天然での存在が確認されている斯かる誘導体の例としては、N−アセチル化誘導体などのアシル化誘導体、N−硫酸化誘導体やO−硫酸化誘導体などの硫酸化誘導体、N−グリコリル化誘導体などのグリコリル化誘導体などが挙げられる。これらは1種又は2種以上を用いることができる。これらのアミノ糖のうち、グルコサミン類は、本発明の効果が高いため、特に有用である。ここでいうグルコサミン類とは、グルコサミン(Glucosamine、C6H13NO5)又はその誘導体ならびにこれらの塩が挙げられる。特に本発明の効果を高めるために、グルコサミン類の中でも、グルコサミンのアシル化誘導体が好ましく、N−アセチルグルコサミン(C8H15NO6)がとりわけ好ましい。本発明で用いるアミノ糖は、以上のようなアミノ糖を構成単位として含む多糖や糖蛋白質などを、例えば、哺乳類、魚類、軟体動物、節足動物、菌類などから常法により採取し、酸性条件下で又は適宜の酵素の作用によって加水分解した後に、クロマトグラフィーなどの糖類の分離精製のための慣用の方法に供して調製することができる。例えば、N−アセチルグルコサミンは、例えば、カニやエビなどの甲殻類の殻から調製された多糖類キチンを原料として、これを、酸で部分加水分解し、さらにこれにキチナーゼのような酵素を作用させて分解することで調製することができる。また、市販されている調製品(例えば、市販のグルコサミン)を利用することもできる。
(Amino sugar)
The term “amino sugar” as used in the present invention means a compound having a structure in which the hydroxyl group of the sugar is substituted with an amino group, derivatives thereof, and salts thereof. The amino sugar used in the present invention has a chemical structure as long as it exerts the effect of solving the problems of the present invention when applied to mammals including humans in the state of a composition combined with a flavonoid-containing plant (described later). The purity, properties and preparation method are not limited to specific ones. A relatively desirable amino sugar in practicing the present invention exists in a naturally free state or as a structural unit such as a polysaccharide, glycoprotein, glycolipid, and the like. Specifically, for example, glucosamine, mannosamine , Neuraminic acid, galactosamine and derivatives of these amino sugars. Examples of such derivatives that have been confirmed to exist in nature include acylated derivatives such as N-acetylated derivatives, sulfated derivatives such as N-sulfated derivatives and O-sulfated derivatives, and N-glycolylated derivatives. And the like. These can use 1 type (s) or 2 or more types. Of these amino sugars, glucosamines are particularly useful because the effects of the present invention are high. As used herein, glucosamines include glucosamine (Glucosamine, C 6 H 13 NO 5 ) or derivatives thereof and salts thereof. In particular, in order to enhance the effect of the present invention, among glucosamines, acylated derivatives of glucosamine are preferable, and N-acetylglucosamine (C 8 H 15 NO 6 ) is particularly preferable. The amino sugar used in the present invention is a polysaccharide or glycoprotein containing the above amino sugar as a structural unit, for example, collected from mammals, fish, molluscs, arthropods, fungi, etc. by a conventional method, and subjected to acidic conditions. It can be prepared by subjecting it to conventional methods for separation and purification of saccharides such as chromatography after hydrolysis under the action of an appropriate enzyme. For example, N-acetylglucosamine is produced by, for example, partially hydrolyzing a polysaccharide chitin prepared from crustacean shells such as crabs and shrimps with an acid and further acting on an enzyme such as chitinase. And can be prepared by decomposing. Commercially available preparations (for example, commercially available glucosamine) can also be used.

(フラボノイド類含有植物)
フラボノイド類含有植物におけるフラボノイド類としては、クマル酸コエンザイムAとマロニルコエンザイムAとが重合してできるカルコンから派生する植物二次代謝物が挙げられる。フラボノイド類の例としては、フラボン類やフラボノール類、フラバノール類、プロアントシアニジン類等が挙げられる。
(Flavonoid-containing plants)
Examples of flavonoids in flavonoid-containing plants include plant secondary metabolites derived from chalcone formed by polymerization of coenzyme A coumarate A and malonyl coenzyme A. Examples of flavonoids include flavones, flavonols, flavanols, proanthocyanidins and the like.

フラボン類としては、2,3−ジデヒドロフラバン−4−オン(2−フェニルクロモンともいう)及びその誘導体が挙げられ、2,3−ジデヒドロフラバン−4−オン骨格の3’、4’、5、7位の何れか1又は2以上にヒドロキシ基又はメトキシ基が結合したもの等が好ましく挙げられる。
フラボノール類としては3-ヒドロキシフラボン(3-ヒドロキシ-2-フェニルクロメン-4-オンともいう)及びその誘導体が挙げられ、3-ヒドロキシフラボン骨格の3’、4’、5、7位の何れか1又は2以上にヒドロキシ基又はメトキシ基が結合したものが好ましく挙げられる。これらは当該骨格の3位のヒドロキシ基に糖が結合した配糖体であってもよい。
フラバノール類としては、フラバン―3−オール及びフラバン‐3,4‐ジオール並びにこれらの誘導体が挙げられる。これらの誘導体としては、フラバン―3−オール又はフラバン‐3,4‐ジオール骨格の3’、4’、5、7位の何れか1又は2以上にヒドロキシ基又はメトキシ基が結合したものが好ましく挙げられる。
プロアントシアニジン類としては、フラバン―3−オール若しくはフラバン‐3,4‐ジオール又はこれらの誘導体が4−8結合により縮合した重合度が2以上の縮重合体からなる化合物が挙げられる。構成するフラバン―3−オール又はフラバン‐3,4‐ジオール単位の3’、4’、5、7位の何れか1又は2以上にヒドロキシ基又はメトキシ基が結合したものが好ましく挙げられる。
Examples of flavones include 2,3-didehydroflavan-4-one (also referred to as 2-phenylchromone) and derivatives thereof, and 3 ′, 4 ′ of 2,3-didehydroflavan-4-one skeleton, Preferred are those in which a hydroxy group or a methoxy group is bonded to any one or more of the 5th and 7th positions.
Flavonols include 3-hydroxyflavone (also called 3-hydroxy-2-phenylchromen-4-one) and derivatives thereof, and any of 3 ′, 4 ′, 5 and 7 positions of the 3-hydroxyflavone skeleton. Preferred are those having a hydroxy group or a methoxy group bonded to one or more. These may be glycosides in which a sugar is bound to the hydroxy group at the 3-position of the skeleton.
Flavanols include flavan-3-ol and flavan-3,4-diol and derivatives thereof. As these derivatives, those in which a hydroxy group or a methoxy group is bonded to one or more of the 3 ′, 4 ′, 5, and 7 positions of the flavan-3-ol or flavan-3,4-diol skeleton are preferable. Can be mentioned.
Examples of the proanthocyanidins include compounds composed of a condensation polymer having a polymerization degree of 2 or more obtained by condensing flavan-3-ol or flavan-3,4-diol or a derivative thereof by a 4-8 bond. Preferred are those in which a hydroxy group or a methoxy group is bonded to any one or more of the 3 ′, 4 ′, 5, and 7 positions of the constituting flavan-3-ol or flavan-3,4-diol unit.

本発明で用いるフラボノイド類のうち、特に好ましいものとしては、フラバン類として、5-hydroxy-7-methoxyflavone、5,7-dimethoxyflavone、5-hydroxy-3,7-dimethoxyflavone、4',5,7-trimethoxyflavone、5-hydroxy-3,7,4'-trimethoxyflavone、3',4',5,7-tetramethoxyflavone、5-hydroxy-3,7,3',4' -tetramethoxyflavone、3,5,7,3',4' -pentamethoxyflavone、3,5,7-trimethoxyflavone、3,5,7,4’-tetramethoxyflavone等が挙げられ
、フラボノール類としては、ケルセチン、ケルセチン-3-ルチノシド等が挙げられ、フラバノール類として、カテキン、エピカテキン等が挙げられ、プロアントシアニジン類として、カテキン又はエピカテキン等が重合したものが挙げられ、アントシアニジン類として、ペラルゴニジン、 、シアニジン、デルフィニジン、オーランチニジン、ルテオリニジン、ペオニジン、マルビジン、ペチュニジン、ヨーロピニジン、ロシニジン、が挙げられる。また、これらに挙げた化合物の配糖体、エステル、重合体などの誘導体も用いることができる。
Among the flavonoids used in the present invention, particularly preferred as flavans are 5-hydroxy-7-methoxyflavone, 5,7-dimethoxyflavone, 5-hydroxy-3,7-dimethoxyflavone, 4 ', 5,7- trimethoxyflavone, 5-hydroxy-3,7,4'-trimethoxyflavone, 3 ', 4', 5,7-tetramethoxyflavone, 5-hydroxy-3,7,3 ', 4'-tetramethoxyflavone, 3,5,7,3 ', 4' -pentamethoxyflavone, 3,5,7-trimethoxyflavone, 3,5,7,4'-tetramethoxyflavone and the like, and flavonols include quercetin, quercetin-3-rutinoside and the like, and flavanols Catechin, epicatechin and the like, and as proanthocyanidins, those obtained by polymerizing catechin or epicatechin and the like, and as anthocyanidins, pelargonidin,, cyanidin, delphinidin, aurantidine, luteolinidine, peonidin, malvidin, petunidin , Europe Blurred, Roshinijin, and the like. In addition, derivatives such as glycosides, esters and polymers of the compounds mentioned above can also be used.

本発明で用いるフラボノイド類含有植物としては、例えば、フラバン類を含有するものとして黒生姜、ウンシュウミカンなどの柑橘類等が挙げられ、フラボノール類を含有するものとして、オオイタドリ、イチョウ等が挙げられ、フラバノール類を含有するものとして、茶等が挙げられ、プロアントシアニジン類を含有するものとして、松、ブドウ、リンゴ、クランベリー等が挙げられる。本発明の組成物は、これらのフラボノイド類含有植物のうち1種のみを含有していてもよく、2種以上を混合して含有していてもよい。本発明では、フラボノイド類含有植物として、とりわけ、松、黒生姜及びオオイタドリから選ばれる1種以上を用いることが好ましい。以下これら好ましい素材について説明する。   Examples of the flavonoid-containing plant used in the present invention include citrus fruits such as black ginger and Satsuma mandarin as those containing flavans, and examples of those containing flavonols include giant redbirds and ginkgo biloba, and flavanols. Teas and the like are included as the ones containing potatoes, and pine, grapes, apples, cranberries and the like are included as the ones containing the proanthocyanidins. The composition of the present invention may contain only one of these flavonoid-containing plants, or may contain a mixture of two or more. In the present invention, as the flavonoid-containing plant, it is particularly preferable to use one or more selected from pine, black ginger, and giant redbird. Hereinafter, these preferable materials will be described.

(松)
松としては、マツ科マツ属の植物が挙げられ、具体的には、フランス海岸松(Pinus Martima)、ニュージーランドマツ、フィンランドマツ、エキナタマツ、カラマツ、クロマツ、アカマツ、ヒメコマツ、ゴヨウマツ、チョウセンマツ、ハイマツ、ストローブマツ、サトウマツ、リュウキュウマツ、スラッシュマツ、カリビアマツ、リギダマツ、テ−ダマツ、ダイオウショウ、タイワンアカマツ、バンクスマツ、ウツクシマツ、ダイオウマツ、シロマツ、カナダのケベック地方のアネダ等が挙げられる。中でも、フランス海岸松、ニュージーランドマツ、フィンランドマツが好ましく、特に、フランス海岸松が好ましい。フランス海岸松は、南仏の大西洋沿岸の一部に生育している海洋性松をいう。
(Pine)
Examples of the pine include plants belonging to the genus Pinaceae, such as Pinus Martina, New Zealand pine, Finnish pine, Epine pine, larch, black pine, Japanese red pine, Japanese pine, Japanese pine, Chinese pine, Japanese pine, Strobe pine, sugar pine, Ryukyu pine, slash pine, caribbean pine, rigid pine, pine pine, daishou, taiwan red pine, banks pine, tsukushima pine, pine pine, white pine, Canadian quebec aneda. Among them, French coastal pine, New Zealand pine, and Finnish pine are preferable, and French coastal pine is particularly preferable. French coastal pine is a marine pine that grows on the Atlantic coast of southern France.

松の使用部位としては、樹皮、葉、松毬などが挙げられ、特に樹皮が好ましい。松としては、とりわけフランス海岸松の樹皮が好ましい。フランス海岸松の樹皮は、フラボノイド類であるプロアントシアニジン(proanthocyanidin)を主要成分として含有する他に、有機酸ならびにその他の生理活性成分等を含有している。この主要成分であるプロアントシアニジンには、活性酸素を除去する強い抗酸化作用があることが知られている。   Examples of pine use sites include bark, leaves, and pine mushrooms, with bark being particularly preferred. As the pine, the bark of French coastal pine is particularly preferable. The bark of French coastal pine contains proanthocyanidins, which are flavonoids, as main components, and also contains organic acids and other physiologically active components. This main component, proanthocyanidins, is known to have a strong antioxidant action to remove active oxygen.

松としては、松の植物体に粉砕、抽出、乾燥から選ばれる1又は2以上の加工を施した加工物が好ましい。好ましい加工物としては、植物体を粉砕して得られる植物体の粉砕物、或いは、植物体をそのまま又は加工後に、水及び/又は有機溶媒で抽出して得られる抽出物を挙げることができる。ここでいう加工とは、加熱、乾燥、粉砕、圧搾から選ばれる少なくとも1つの処理が挙げられる。これらの加工物は単独、混合のいずれでも使用できる。中でも、上述するプロアントシアニジンやその他生理活性成分による使用時の効果の顕著性や品質の安定性の観点から抽出物、特に松の樹皮の抽出物(以下「松樹皮抽出物」という)を用いることが好ましい。松の植物体の抽出物を得る場合の溶媒としては、水又は有機溶媒が選ばれる。水を用いる場合には温水、または熱水が用いられる。抽出に用いる有機溶媒としては、通常使用される有機溶媒であればよく、メタノール、エタノール、1−プロパノール、2−プロパノール、1−ブタノール、2−ブタノール、ブタン、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、1,1,1,2−テトラフルオロエタン、1,1,2−トリクロロエテン等が好ましく用いられる。これらの水及び有機溶媒は単独で用いてもよいし、2種以上を組合わせて用いてもよい。特に、熱水、含水エタノール又は含水プロピレングリコール等が好ましく用いられる。   As the pine, a processed product obtained by subjecting a pine plant body to one or more processes selected from pulverization, extraction, and drying is preferable. Preferable processed products include a pulverized plant obtained by pulverizing a plant, or an extract obtained by extraction with water and / or an organic solvent as it is or after processing the plant. The processing referred to here includes at least one treatment selected from heating, drying, pulverization, and pressing. These workpieces can be used either alone or in combination. Among them, an extract, particularly a pine bark extract (hereinafter referred to as “pine bark extract”) is used from the viewpoint of the remarkable effect of the use of the above-mentioned proanthocyanidins and other physiologically active ingredients and the stability of the quality. Is preferred. As a solvent for obtaining an extract of a pine plant body, water or an organic solvent is selected. When water is used, warm water or hot water is used. The organic solvent used for extraction may be any organic solvent that is usually used, such as methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, butane, acetone, hexane, cyclohexane, propylene glycol, Hydrous ethanol, hydrous propylene glycol, ethyl methyl ketone, glycerin, methyl acetate, ethyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, 1,1,1,2-tetrafluoroethane, 1,1,2-trichloroethene and the like are preferably used. These water and organic solvent may be used independently and may be used in combination of 2 or more type. In particular, hot water, hydrous ethanol, hydrous propylene glycol or the like is preferably used.

上記抽出工程に用いる松樹皮は、松樹皮1質量部に対して、50〜80容量%のエタノール水溶液10容量部を加えて80〜85℃にて1時間抽出したときに、乾燥質量換算で7質量%以上、好ましくは13質量%以上、より好ましくは13質量%〜30質量%の固形物(以下、含水エタノール可溶成分という)が得られるものである。含水エタノール可溶成分を7質量%以上含有する松樹皮を用いることによって、本発明の効果の高い松樹皮抽出物を効率的に得ることが可能となる。   The pine bark used in the extraction step is 7 in terms of dry mass when 10 parts by volume of 50-80% ethanol aqueous solution is added to 1 part by weight of pine bark and extracted at 80-85 ° C. for 1 hour. A solid substance (hereinafter referred to as a water-containing ethanol-soluble component) of not less than 10% by mass, preferably not less than 13% by mass, more preferably 13% by mass to 30% by mass is obtained. By using a pine bark containing 7% by mass or more of a water-containing ethanol-soluble component, it is possible to efficiently obtain a pine bark extract having a high effect of the present invention.

上記松樹皮中の含水エタノール可溶成分の含有量は、例えば、以下のようにして測定することができる。まず、乾燥質量100gの松樹皮を、例えば、カッター、スライサー、ミルなど、あるいはミキサー、ジューサー、ブレンダー、マスコロイダーなどの破砕機を用いて粉末化し、この粉末100gに、50〜80容量%の含水エタノール1Lを加えて、80〜85℃にて1時間加熱還流抽出する。抽出後、遠心分離、ろ過などの分離操作を行い、不溶成分を除去して、抽出液を得る。抽出残渣に対して、さらに上記抽出操作および分離操作を1回以上繰り返す再抽出工程を行うことが、松樹皮中の含水エタノール可溶成分を正確に測定する観点から好ましい。得られた抽出液を凍結乾燥又は減圧濃縮乾固して、乾燥物とし、乾燥物の質量を測定する。そして、抽出前の松樹皮の乾燥質量に対する上記乾燥物の質量の割合を算出して、含水エタノール可溶成分の含有量が求められる。   The content of the water-containing ethanol-soluble component in the pine bark can be measured, for example, as follows. First, pine bark having a dry mass of 100 g is pulverized using, for example, a cutter, a slicer, a mill, or a crusher such as a mixer, a juicer, a blender, a mass collider, and the 100 g of the powder contains 50 to 80% by volume of water. 1 L of ethanol is added, and the mixture is refluxed for 1 hour at 80 to 85 ° C. After extraction, separation operations such as centrifugation and filtration are performed to remove insoluble components, and an extract is obtained. From the viewpoint of accurately measuring the water-soluble ethanol-soluble component in the pine bark, it is preferable to perform a re-extraction step in which the extraction operation and the separation operation are repeated once or more for the extraction residue. The obtained extract is freeze-dried or concentrated to dryness under reduced pressure to obtain a dried product, and the mass of the dried product is measured. And the ratio of the mass of the said dried material with respect to the dry mass of the pine bark before extraction is calculated, and content of a hydrous ethanol soluble component is calculated | required.

上記抽出は、必要に応じて所定温度で保持することによって行われる。抽出効率の点から、松樹皮の体積当たりの表面積を大きくすることが好ましく、特に破砕物が好適に用いられる。松樹皮の破砕処理は、特に制限されず、例えば、上述の松樹皮中の含水エタノール可溶成分の含有量を測定する際に採用した破砕機を用いることができる。破砕効率を上げるために、松樹皮に、水、あるいはエタノール、メタノール、酢酸エチルなどの有機溶媒を加えて破砕してもよい。破砕物の大きさは、好ましくは0.1〜10mm、より好ましくは0.1〜5mmの細片である。   The extraction is performed by holding at a predetermined temperature as necessary. From the viewpoint of extraction efficiency, it is preferable to increase the surface area per volume of the pine bark, and crushed materials are particularly preferably used. The crushing treatment of pine bark is not particularly limited, and for example, a crusher employed when measuring the content of the water-soluble ethanol-soluble component in the pine bark described above can be used. In order to increase the crushing efficiency, the pine bark may be crushed by adding water or an organic solvent such as ethanol, methanol, or ethyl acetate. The size of the crushed material is preferably 0.1 to 10 mm, more preferably 0.1 to 5 mm.

抽出においては、上述のように、水および有機溶媒のうちの少なくとも1種、すなわち水、有機溶媒、または水と有機溶媒との混合溶媒(以下、これらをまとめて抽出溶媒という)が用いられる。抽出効率を高める点から、抽出温度は高い方が好ましい。例えば、水を用いる場合、50〜120℃、好ましくは70〜100℃で熱水抽出することが好ましい。松樹皮に熱水を加えてもよく、松樹皮に水を加えた後、加熱してもよい。抽出時間は、抽出温度により適宜決定され得る。一般的には10分〜24時間である。   In the extraction, as described above, at least one of water and an organic solvent, that is, water, an organic solvent, or a mixed solvent of water and an organic solvent (hereinafter collectively referred to as an extraction solvent) is used. From the viewpoint of increasing the extraction efficiency, a higher extraction temperature is preferable. For example, when water is used, hot water extraction is preferably performed at 50 to 120 ° C, preferably 70 to 100 ° C. Hot water may be added to the pine bark, and water may be added to the pine bark and then heated. The extraction time can be appropriately determined depending on the extraction temperature. Generally, it is 10 minutes to 24 hours.

抽出溶媒の量は、抽出効率を考慮して設定し得る。例えば、水、エタノール、または含水エタノールを抽出溶媒として使用する場合、松樹皮の乾燥質量1質量部に対して、抽出溶媒が好ましくは3〜100質量部、より好ましくは10〜50質量部、あるいは好ましくは3〜100容量部、より好ましくは10〜100容量部となるように設定される。なお、水および/または有機溶媒を添加して破砕した場合は、破砕に使用した溶媒量を考慮し、添加する抽出溶媒の量を調整すればよい。   The amount of the extraction solvent can be set in consideration of the extraction efficiency. For example, when water, ethanol, or hydrous ethanol is used as an extraction solvent, the extraction solvent is preferably 3 to 100 parts by mass, more preferably 10 to 50 parts by mass, or more preferably 10 to 50 parts by mass with respect to 1 part by mass of pine bark dry mass. It is preferably set to 3 to 100 parts by volume, more preferably 10 to 100 parts by volume. In addition, when adding water and / or an organic solvent and crushing, the amount of the extraction solvent to be added may be adjusted in consideration of the amount of solvent used for crushing.

松の植物体の抽出物を得るための抽出方法は特に制限はないが、例えば、加温抽出法、超臨界流体抽出法等が用いられる。例えば、松樹皮の破砕物に対して、抽出溶媒として、水とエタノールとの比が、質量比で1:1〜1:9である水−エタノール混合溶媒(含水エタノール)を、松樹皮の1倍〜20倍量使用して、70〜85℃で還流させながら、0.5時間〜6時間攪拌する方法が挙げられる。還流しない場合は、例えば、一度上記混合溶媒を用いて、加温抽出し、濾過などにより上清を回収し、残渣について、再度上記混合溶媒を加えて加温することによっても、抽出効率を上げることが可能である。   An extraction method for obtaining an extract of a pine plant body is not particularly limited, and for example, a warm extraction method, a supercritical fluid extraction method, or the like is used. For example, a water-ethanol mixed solvent (hydrous ethanol) having a mass ratio of water to ethanol of 1: 1 to 1: 9 is used as an extraction solvent for crushed pine bark. A method of stirring for 0.5 to 6 hours while refluxing at 70 to 85 ° C. using double to 20 times amount is mentioned. In the case of not refluxing, for example, extraction with warming is performed once using the above mixed solvent, and the supernatant is recovered by filtration or the like, and the residue is heated again by adding the above mixed solvent to increase the extraction efficiency. It is possible.

超臨界流体抽出法とは、物質の気液の臨界点(臨界温度、臨界圧力)を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素(笑気ガス)等が用いられるが、二酸化炭素が好ましく用いられる。   The supercritical fluid extraction method is a method of performing extraction using a supercritical fluid that is a fluid that exceeds the critical point (critical temperature, critical pressure) of a gas-liquid substance. As the supercritical fluid, carbon dioxide, ethylene, propane, nitrous oxide (laughing gas) or the like is used, and carbon dioxide is preferably used.

超臨界流体抽出法では、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程と、目的成分と超臨界流体を分離する分離工程とを行う。分離工程では、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、吸着剤・吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。   In the supercritical fluid extraction method, an extraction process for extracting a target component with a supercritical fluid and a separation process for separating the target component and the supercritical fluid are performed. In the separation step, any one of extraction separation by pressure change, extraction separation by temperature change, and extraction separation using an adsorbent / absorbent may be performed.

また、エントレーナー添加法による超臨界流体抽出を行ってもよい。この方法は、抽出流体に、例えば、エタノール、プロパノール、n−ヘキサン、アセトン、トルエン、その他の脂肪族低級アルコール類、脂肪族炭化水素類、芳香族炭化水素類、ケトン類を2〜20W/V%程度添加し、この流体を用いて超臨界流体抽出を行うことによって、目的とする抽出物の抽出溶媒に対する溶解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増強させる方法であり、効率的な松樹皮抽出物を得る方法である。   Moreover, you may perform supercritical fluid extraction by the entrainer addition method. In this method, for example, ethanol, propanol, n-hexane, acetone, toluene, other aliphatic lower alcohols, aliphatic hydrocarbons, aromatic hydrocarbons, and ketones are added to the extraction fluid in an amount of 2 to 20 W / V. It is a method that drastically increases the solubility of the target extract in the extraction solvent or enhances the separation selectivity by performing supercritical fluid extraction using this fluid. It is a method of obtaining a pine bark extract.

超臨界流体抽出法は、比較的低い温度で操作できるため、高温で変質・分解する物質にも適用できるという利点、抽出流体が残留しないという利点、溶媒の循環利用が可能であるため、脱溶媒工程等が省略でき、工程がシンプルになるという利点がある。   Since the supercritical fluid extraction method can be operated at a relatively low temperature, it can be applied to substances that are altered or decomposed at high temperatures, the advantage that the extraction fluid does not remain, and the recycling of the solvent is possible. There is an advantage that the process and the like can be omitted, and the process becomes simple.

また、松の植物体の抽出物を得るための植物体からの抽出方法は、上述の抽出法以外に、液体二酸化炭素回分法、液体二酸化炭素還流法、超臨界二酸化炭素還流法等の方法によって行ってもよい。   Moreover, the extraction method from the plant body for obtaining the extract of the pine plant body is not limited to the above-described extraction method, but by a method such as a liquid carbon dioxide batch method, a liquid carbon dioxide reflux method, or a supercritical carbon dioxide reflux method. You may go.

松の植物体の抽出物を得るための抽出方法は、複数の抽出方法を組み合わせてもよい。複数の抽出方法を組み合わせることにより、種々の組成の抽出物を得ることが可能となる。   The extraction method for obtaining the extract of the pine plant body may be a combination of a plurality of extraction methods. By combining a plurality of extraction methods, it is possible to obtain extracts having various compositions.

抽出には、例えば、回分式、半連続式、または連続式などのいずれの抽出装置を用いてもよい。   For the extraction, for example, any extraction device such as a batch type, a semi-continuous type, or a continuous type may be used.

松の植物体、特に樹皮からの抽出物は、限外濾過、あるいは吸着性担体(ダイヤイオンHP−20、Sephadex−LH20、キチン等)を用いたカラム法またはバッチ法などにより、精製を行うことが安全性の面から好ましい。また、必要に応じて、減圧濃縮、凍結乾燥などの方法により濃縮または乾燥して、液状、ペースト状、または粉末状(抽出物粉末)、細粒状、顆粒状としてもよい。松樹皮の抽出物等の松の加工物は、粉末状、細粒状、顆粒状であることが好ましい。また、上記松樹皮抽出物に対しては、殺菌処理を行ってもよいし、殺菌後、さらに濃縮、乾燥、および粉末化を行ってもよい。殺菌、濃縮、乾燥及び粉末化は、当該技術分野において通常使用される方法によって行われるが、中でも、乾燥としては、凍結乾燥、真空乾燥、噴霧乾燥、ドラム式乾燥、棚式乾燥、およびマイクロウェーブによる乾燥が好ましい。濾過については、濾過の処理を短時間で行うために、ろ過助剤、例えば珪藻土を抽出物に添加してから濾過することが好ましく、この場合、添加するろ過助剤の量は、特に制限はなく、例えば、抽出物中の珪藻土の量として、0.001g/mL〜0.1g/mL程度となるようにして添加される。   Extracts from pine plants, especially bark, should be purified by ultrafiltration or column method or batch method using adsorptive carriers (Diaion HP-20, Sephadex-LH20, chitin, etc.) Is preferable from the viewpoint of safety. Further, if necessary, it may be concentrated or dried by a method such as vacuum concentration or freeze-drying to obtain a liquid, paste, powder (extract powder), fine granule, or granule. The processed pine, such as an extract of pine bark, is preferably in the form of powder, fine particles, or granules. In addition, the pine bark extract may be sterilized or may be further concentrated, dried, and powdered after sterilization. Sterilization, concentration, drying and pulverization are carried out by methods commonly used in the art, and among these, freeze drying, vacuum drying, spray drying, drum drying, shelf drying, and microwave Drying by is preferred. Regarding filtration, in order to perform the filtration process in a short time, it is preferable to filter after adding a filter aid, for example, diatomaceous earth, in this case, the amount of the filter aid to be added is not particularly limited. For example, the amount of diatomaceous earth in the extract is added so as to be about 0.001 g / mL to 0.1 g / mL.

本発明では松を用いる場合、松は、フラボノイド類としてプロアントシアニジンを主な成分の一つとして含有することが好ましい。上述した通り、プロアントシアニジンは、フラバン−3−オール、フラバン−3,4−ジオール及びこれらの誘導体から選ばれる少なくとも1種を構成単位とする重合度が2以上の縮重合体からなる化合物群をいう。プロアントシアニジンは、植物が作り出す強力な抗酸化物質であり、植物の葉、樹皮、果実の皮および種に集中的に含まれている。なお、このプロアントシアニジンは、ヒトの体内では生成することができない物質である。松の加工物はプロアントシアニジンを10質量%以上、20質量%以上、30質量%以上、40質量%以上含有することがより好ましい。   When pine is used in the present invention, the pine preferably contains proanthocyanidins as one of main components as flavonoids. As described above, proanthocyanidin is a compound group consisting of a condensation polymer having a degree of polymerization of 2 or more having at least one selected from flavan-3-ol, flavan-3,4-diol and derivatives thereof as a structural unit. Say. Proanthocyanidins are powerful antioxidants produced by plants and are intensively contained in plant leaves, bark, fruit peels and seeds. This proanthocyanidin is a substance that cannot be produced in the human body. More preferably, the processed pine product contains 10% by mass or more, 20% by mass or more, 30% by mass or more, and 40% by mass or more of proanthocyanidins.

松の加工物に含有するプロアントシアニジンとしては、特に、重合度が低い縮重合体が多く含まれるプロアントシアニジンが好ましい。重合度の低い縮重合体としては、重合度が2〜30の縮重合体(2〜30量体)が好ましく、重合度が2〜10の縮重合体(2〜10量体)がより好ましく、重合度が2〜4の縮重合体(2〜4量体)がさらに好ましい。重合度が2〜4の縮重合体(2〜4量体)のプロアントシアニジンは、特に体内に吸収されやすい。本明細書では、重合度が2〜4の重合体を、オリゴメリック・プロアントシアニジン(oligomeric proanthocyanidin、以下「OPC」と称する)という。   The proanthocyanidins contained in the processed pine are particularly preferably proanthocyanidins containing a large amount of a condensation polymer having a low degree of polymerization. The condensation polymer having a low polymerization degree is preferably a condensation polymer having a polymerization degree of 2 to 30 (2 to 30 mer), more preferably a condensation polymer having a polymerization degree of 2 to 10 (2 to 10 mer). Further, a condensation polymer (2 to 4 mer) having a polymerization degree of 2 to 4 is more preferable. Proanthocyanidins that are condensation polymers having a degree of polymerization of 2 to 4 (2 to 4 mer) are particularly easily absorbed into the body. In the present specification, a polymer having a degree of polymerization of 2 to 4 is referred to as an oligomeric proanthocyanidin (hereinafter referred to as “OPC”).

本発明に用いられる松の加工物は、OPCを10質量%以上、好ましくは20質量%以上、より好ましくは30質量%以上の割合で含有することが望ましい。   The processed pine used in the present invention desirably contains OPC in an amount of 10% by mass or more, preferably 20% by mass or more, more preferably 30% by mass or more.

松の植物体、特に松の樹皮には、プロアントシアニジンの中でもOPCに富むため、プロアントシアニジンの原料として好ましく用いられる。しかし、松の植物体、特に松の樹皮には、プロアントシアニジンだけでなく、プロアントシアニジン以外の成分も含まれている。例えば、松の加工物が抽出物である場合、プロアントシアニジンを植物体より抽出する工程により、様々な有機酸やフラボノイドも抽出される。そのような有機酸やフラボノイドは、プロアントシアニジン以外の成分である。そのような有機酸やフラボノイドとしては、例えば、カフェー酸、フマル酸、キナ酸、没食子酸、バニリン酸、フェルラ酸、並びにカテキン類などが挙げられる。   A pine plant body, particularly a pine bark, is rich in OPC among proanthocyanidins, and is therefore preferably used as a raw material for proanthocyanidins. However, pine plants, particularly pine bark, contain not only proanthocyanidins but also components other than proanthocyanidins. For example, when the processed product of pine is an extract, various organic acids and flavonoids are also extracted by the process of extracting proanthocyanidins from the plant body. Such organic acids and flavonoids are components other than proanthocyanidins. Examples of such organic acids and flavonoids include caffeic acid, fumaric acid, quinic acid, gallic acid, vanillic acid, ferulic acid, and catechins.

(黒生姜)
本発明で用いられる黒生姜(Kaempferia Parviflora)とは東南アジアに自生するショウガ科、バンウコン属の植物であり、精力増進、滋養強壮、血糖値の低下、体力回復、消化器系の改善、膣帯下、痔核、痔疾、むかつき、口内炎、関節痛、胃痛の改善等の報告がある。このように、黒生姜は、長期にわたり人間に摂取されてきた実績のある天然植物であって安全性が高い。
(Black ginger)
Kaempferia Parviflora used in the present invention is a plant belonging to the genus Gingidae or Banturmeric that grows naturally in Southeast Asia. It increases energy, enhances nutrition, lowers blood sugar, restores physical strength, improves digestive system, subvaginal zone There are reports of improvement in hemorrhoids, hemorrhoids, nausea, stomatitis, joint pain, and stomach pain. Thus, black ginger is a natural plant that has been ingested by humans for a long time and is highly safe.

本発明で用いられる黒生姜の使用部位としては、根、葉、茎、花又は枝等が挙げられる。なかでも、好ましいのは、根茎である。本発明で用いられる黒生姜としては、黒生姜に、加熱、乾燥、粉砕、圧搾、抽出から選ばれる少なくとも1種の処理を施した加工物が挙げられる。この黒生姜の加工物の具体例としては、黒生姜に乾燥処理を施してなる乾燥物、黒生姜に乾燥処理及び粉砕処理を施してなる乾燥粉末、黒生姜を裁断処理して成る裁断物又はそれを乾燥処理してなる粉末、搾汁並びに抽出物を挙げることができる。ここで、抽出物とは、上記黒生姜又はその加工物を溶媒で抽出して得られる抽出液、その希釈液又は濃縮液、あるいはそれらの乾燥物及びその粉末を意味する。本発明において、加工物品とは、これらのすべてを包含する。   Examples of the use site of the black ginger used in the present invention include roots, leaves, stems, flowers, branches and the like. Among them, preferred is a rhizome. Examples of the black ginger used in the present invention include a processed product obtained by subjecting black ginger to at least one treatment selected from heating, drying, crushing, pressing, and extraction. Specific examples of the processed product of black ginger include a dried product obtained by subjecting black ginger to a drying treatment, a dried powder obtained by subjecting black ginger to drying treatment and pulverization treatment, a cut product obtained by cutting black ginger, or The powder obtained by drying it, juice, and an extract can be mentioned. Here, the extract means an extract obtained by extracting the black ginger or a processed product thereof with a solvent, a diluted solution or a concentrated solution thereof, or a dried product thereof and a powder thereof. In the present invention, the processed article includes all of them.

黒生姜に乾燥処理及び粉砕処理を施してなる乾燥粉末は、例えば、黒生姜を洗浄後、スライスした黒生姜を天日、あるいは乾燥機を用いて乾燥後、そのままあるいは適当な形状大きさに裁断して得た加工物を、粉砕装置を用いて粉砕することで得ることができる。粉砕装置としては通常使用されるものが広く使用できるが、例えば、原料ホッパー、粉砕機、分級機及び製品ホルダー等から構成される粉砕機を用いることができる。   The dried powder obtained by subjecting black ginger to drying and crushing is, for example, washed black ginger, sliced black ginger dried in the sun or using a dryer, and then cut as it is or into an appropriate shape and size. The processed product obtained in this manner can be obtained by pulverization using a pulverizer. As the pulverizer, those usually used can be widely used. For example, a pulverizer constituted by a raw material hopper, a pulverizer, a classifier and a product holder can be used.

黒生姜の抽出物は、黒生姜又はその加工物を溶媒で抽出することによって得られる。抽出物は、黒生姜に乾燥処理を施した加工物に抽出処理を施して得られたものことが好ましく、スライス後に乾燥処理を施した加工物に抽出処理を施して得られたものであることが好ましい。抽出に使用される溶媒としては、エタノール、メタノール、イソプロパノール、ブタノール等の低級アルコール、酢酸エチル、酢酸メチル等の低級エステル、アセトン、及びこれらと水との混合溶媒が挙げられる。水のみで行うことも有効である。中でも、水単独又はエタノール単独、若しくは水とエタノールとの混合溶媒(いわゆる含水エタノール)を使用するのが好ましい。含水エタノールを用いる場合、含水エタノール中のエタノール濃度は20質量%以上80質量%以下の濃度であることが好ましく、40質量%以上60質量%以下の濃度であることがより好ましい。   An extract of black ginger is obtained by extracting black ginger or a processed product thereof with a solvent. The extract is preferably obtained by subjecting a black ginger to a processed product subjected to a drying treatment, and obtained by subjecting the processed product subjected to a drying treatment after slicing to an extraction treatment. Is preferred. Examples of the solvent used for extraction include lower alcohols such as ethanol, methanol, isopropanol, and butanol, lower esters such as ethyl acetate and methyl acetate, acetone, and a mixed solvent of these with water. It is also effective to use water alone. Among these, it is preferable to use water alone or ethanol alone or a mixed solvent of water and ethanol (so-called water-containing ethanol). When hydrous ethanol is used, the ethanol concentration in the hydrous ethanol is preferably 20% by mass or more and 80% by mass or less, and more preferably 40% by mass or more and 60% by mass or less.

溶媒として混合溶媒を使用する場合は、例えば、アセトン/水(2/8〜8/2、体積比)混合物、エタノール/水(2/8〜8/2、体積比)混合物等を用いることもできる。エタノール/水の場合、黒生姜の根茎に対して、その質量の2〜20倍質量の溶媒を加え、室温又は加熱下で10分〜48時間程度抽出するのが好ましい。   When a mixed solvent is used as the solvent, for example, an acetone / water (2/8 to 8/2, volume ratio) mixture, an ethanol / water (2/8 to 8/2, volume ratio) mixture, or the like may be used. it can. In the case of ethanol / water, it is preferable to add a solvent having a mass of 2 to 20 times the mass of black ginger rhizome and extract it at room temperature or under heating for about 10 minutes to 48 hours.

用いる抽出方法に特に制限はないが、安全性及び利便性の観点から、できるだけ緩やかな条件で行うことが好ましい。例えば、原料植物部位又はその乾燥物を粉砕、破砕又は細断し、これに2〜20倍質量の溶媒を加え、0℃〜溶媒の還流温度の範囲で10分〜48時間、静置、振盪、攪拌あるいは還流等の任意の条件下にて抽出を行う。抽出作業後、濾過、遠心分離等の分離操作を行い、不溶物を除去する。これに、必要に応じて希釈、濃縮操作を行うことにより、抽出液を得る。さらに、不溶物についても同じ操作を繰り返して抽出し、その抽出液を先の抽出液と合わせて用いてもよい。これらの抽出物は、当業者が通常用いる精製方法により、さらに精製して使用してもよい。   There is no particular limitation on the extraction method to be used, but from the viewpoint of safety and convenience, the extraction method is preferably performed under as mild a condition as possible. For example, pulverize, crush or shred the raw material plant part or its dried product, add 2 to 20 times the mass of the solvent, and leave it at 0 ° C. to the reflux temperature of the solvent for 10 minutes to 48 hours. The extraction is performed under any conditions such as stirring or refluxing. After the extraction operation, separation operations such as filtration and centrifugation are performed to remove insoluble matters. An extract is obtained by diluting and concentrating as necessary. Further, the same operation may be repeated for insoluble matter, and the extract may be used in combination with the previous extract. These extracts may be used after further purification by a purification method commonly used by those skilled in the art.

得られた抽出液は、そのままあるいは濃縮して、液状物、濃縮物、ペースト状で、あるいは、さらにこれらを乾燥した乾燥物の形状で用いることができる。乾燥は、噴霧乾燥、凍結乾燥、減圧乾燥、流動乾燥等の当業者が通常用いる方法により行われる。さらに、以上の方法で得られた乾燥物品を、周知の方法を用いて粉末化して使用することも可能である。黒生姜の抽出物等の加工物は、粉末状、細粒状、顆粒状であることが好ましい。   The obtained extract can be used as it is or after being concentrated to form a liquid, a concentrate, a paste, or a dried product obtained by further drying these. Drying is performed by a method commonly used by those skilled in the art, such as spray drying, freeze drying, reduced pressure drying, and fluidized drying. Furthermore, it is also possible to use the dried article obtained by the above method by pulverizing it using a known method. Processed products such as black ginger extract are preferably in the form of powder, fine granules, or granules.

本発明で用いる黒生姜は、フラボノイドとして、5-hydroxy-7-methoxyflavone、5,7-dimethoxyflavone、5-hydroxy-3,7-dimethoxyflavone、4',5,7-trimethoxyflavone、5-hydroxy-3,7,4'-trimethoxyflavone、3',4',5,7-tetramethoxyflavone、5-hydroxy-3,7,3',4'-tetramethoxyflavone、3,5,7,3',4' -pentamethoxyflavone、3,5,7-trimethoxyflavone、3,5,7,4’-tetramethoxyflavone等から選ばれる1種又は2種以上を含有することが好ましい。特に、本発明で用いる黒生姜は、5,7-dimethoxyflavoneを、0.01〜50質量%含むことが好ましく、0.1〜30質量%含むあることがより好ましく、0.5〜20質量%含むことが更に好ましい。   Black ginger used in the present invention is, as a flavonoid, 5-hydroxy-7-methoxyflavone, 5,7-dimethoxyflavone, 5-hydroxy-3,7-dimethoxyflavone, 4 ', 5,7-trimethoxyflavone, 5-hydroxy-3, 7,4'-trimethoxyflavone, 3 ', 4', 5,7-tetramethoxyflavone, 5-hydroxy-3,7,3 ', 4'-tetramethoxyflavone, 3,5,7,3', 4'-pentamethoxyflavone, 3 , 5,7-trimethoxyflavone, 3,5,7,4′-tetramethoxyflavone and the like are preferably contained. In particular, the black ginger used in the present invention preferably contains 0.01 to 50% by mass of 5,7-dimethoxyflavone, more preferably 0.1 to 30% by mass, and more preferably 0.5 to 20% by mass. It is more preferable to include.

(オオイタドリ)
オオイタドリは、タデ科オンダテ属の多年草であり、学名をPolygonum sachalinenseという。
(Great Bluebird)
The giant redbird is a perennial plant belonging to the genus Ondate, and its scientific name is Polygonum sachalinense.

オオイタドリの使用部位としては、葉、茎、芽、根、根茎などが挙げられ、特に芽が好ましい。芽は、若芽、新芽とも呼ばれる。   Examples of the site where the giant redbird is used include leaves, stems, buds, roots, rhizomes and the like, and buds are particularly preferred. Buds are also called young shoots and new shoots.

オオイタドリとしては、オオイタドリの植物体に粉砕、抽出、乾燥から選ばれる1又は2以上の加工を施した加工物が好ましい。好ましい加工物としては、植物体を粉砕して得られる植物体の粉砕物、或いは、植物体をそのまま又は加工後に、水及び/又は有機溶媒で抽出して得られる抽出物を挙げることができる。ここでいう加工とは、加熱、乾燥、粉砕、圧搾から選ばれる少なくとも1つの処理が挙げられる。これらの加工物は単独、混合のいずれでも使用できる。中でも、使用時の効果の顕著性や品質の安定性の観点から抽出物、特にオオイタドリの芽の抽出物を用いることが好ましい。オオイタドリの植物体の抽出物を得る場合の溶媒としては、水又は有機溶媒が選ばれる。水を用いる場合には温水、または熱水が用いられる。抽出に用いる有機溶媒としては、通常使用される有機溶媒であればよく、メタノール、エタノール、1−プロパノール、2−プロパノール、1−ブタノール、2−ブタノール、ブタン、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、1,1,1,2−テトラフルオロエタン、1,1,2−トリクロロエテン等が好ましく用いられる。これらの水及び有機溶媒は単独で用いてもよいし、2種以上を組合わせて用いてもよい。特に、水、含水エタノール又は含水プロピレングリコール等が好ましく用いられる。   As the giant redbird, a processed product obtained by subjecting a giant redbird plant to one or more processes selected from pulverization, extraction and drying is preferable. Preferable processed products include a pulverized plant obtained by pulverizing a plant, or an extract obtained by extraction with water and / or an organic solvent as it is or after processing the plant. The processing referred to here includes at least one treatment selected from heating, drying, pulverization, and pressing. These workpieces can be used either alone or in combination. Among them, it is preferable to use an extract, in particular, an extract of the bud of the giant redbird, from the viewpoint of the remarkable effect during use and the stability of the quality. Water or an organic solvent is selected as the solvent for obtaining the extract of the plant of the giant redbird. When water is used, warm water or hot water is used. The organic solvent used for extraction may be any organic solvent that is usually used, such as methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, butane, acetone, hexane, cyclohexane, propylene glycol, Hydrous ethanol, hydrous propylene glycol, ethyl methyl ketone, glycerin, methyl acetate, ethyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, 1,1,1,2-tetrafluoroethane, 1,1,2-trichloroethene and the like are preferably used. These water and organic solvent may be used independently and may be used in combination of 2 or more type. In particular, water, hydrous ethanol, hydrous propylene glycol or the like is preferably used.

抽出においては、上述のように、水および有機溶媒のうちの少なくとも1種、すなわち水、有機溶媒、または水と有機溶媒との混合溶媒(以下、これらをまとめて抽出溶媒という)が用いられる。抽出効率を高める点から、抽出温度は高い方が好ましい。例えば、水を用いる場合、50〜120℃、好ましくは70〜100℃で熱水抽出することが好ましい。、オオイタドリに熱水を加えてもよく、オオイタドリに水を加えた後、加熱してもよい。抽出時間は、抽出温度により適宜決定され得る。一般的には10分〜24時間である。   In the extraction, as described above, at least one of water and an organic solvent, that is, water, an organic solvent, or a mixed solvent of water and an organic solvent (hereinafter collectively referred to as an extraction solvent) is used. From the viewpoint of increasing the extraction efficiency, a higher extraction temperature is preferable. For example, when water is used, hot water extraction is preferably performed at 50 to 120 ° C, preferably 70 to 100 ° C. In addition, hot water may be added to the bluebird, and water may be added to the bluebird and then heated. The extraction time can be appropriately determined depending on the extraction temperature. Generally, it is 10 minutes to 24 hours.

オオイタドリの植物体からの抽出物は、限外濾過、あるいは吸着性担体(ダイヤイオンHP−20、Sephadex−LH20、キチン等)を用いたカラム法またはバッチ法などにより、精製を行うことが安全性の面から好ましい。また、必要に応じて、減圧濃縮、凍結乾燥などの方法により濃縮または乾燥して、液状、ペースト状、または粉末状(抽出物粉末)、細粒状、顆粒状としてもよい。オオイタドリの抽出物等のオオイタドリの加工物は、粉末状、細粒状、顆粒状であることが好ましい。また、上記オオイタドリの抽出物に対しては、殺菌処理を行ってもよいし、殺菌後、さらに濃縮、乾燥、および粉末化を行ってもよい。殺菌、濃縮、乾燥及び粉末化は、当該技術分野において通常使用される方法によって行われるが、中でも、乾燥としては、凍結乾燥、真空乾燥、噴霧乾燥、ドラム式乾燥、棚式乾燥、およびマイクロウェーブによる乾燥が好ましい。   It is safe to purify the extract from the plant of the giant redbird by ultrafiltration or the column method or batch method using an adsorptive carrier (Diaion HP-20, Sephadex-LH20, chitin, etc.) From the viewpoint of Further, if necessary, it may be concentrated or dried by a method such as vacuum concentration or freeze-drying to obtain a liquid, paste, powder (extract powder), fine granule, or granule. It is preferable that the processed product of the bluebird, such as the extract of the bluebird, is in the form of powder, fine particles, or granules. In addition, the extract of the giant redbird may be sterilized, or may be further concentrated, dried, and powdered after sterilization. Sterilization, concentration, drying and pulverization are carried out by methods commonly used in the art, and among these, freeze drying, vacuum drying, spray drying, drum drying, shelf drying, and microwave Drying by is preferred.

本発明でオオイタドリを用いる場合、その加工物は、フラボノイド類としてケルセチン-3-ルチノシドを含有することが好ましい。特に、本発明で用いるオオイタドリは、ケルセチン-3-ルチノシドを好ましくは、0.1質量%以上含有することが好ましく、1質量%以上含有することがより好ましく、10質量%以上含有することがより好ましいい。   When the giant redbird is used in the present invention, the processed product preferably contains quercetin-3-rutinoside as a flavonoid. In particular, the giant redbird used in the present invention preferably contains quercetin-3-rutinoside, preferably 0.1% by mass or more, more preferably 1% by mass or more, and more preferably 10% by mass or more. I like it.

本発明の組成物は好ましくは動物を対象とするものであり、特に哺乳類を対象とすることが好ましく、とりわけヒトを対象にすることが好ましい。   The composition of the present invention is preferably intended for animals, particularly preferably for mammals, and particularly preferably for humans.

本発明の組成物は、実質的にアミノ糖及びフラボノイド類含有植物のみからなるものであってもよい。実質的にアミノ糖及びフラボノイド類含有植物のみからなるとは、アミノ糖、フラボノイド類含有植物の加工工程で不可避に混入する成分以外の成分を含有しない場合が挙げられ、具体的には、本発明の組成物におけるアミノ糖、フラボノイド類含有植物の合計質量が95質量%以上の場合を意味する。しかしながら本発明の組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、アミノ糖、フラボノイド類含有植物以外に、後述する各種の他の成分を含有することが可能である。   The composition of the present invention may consist essentially of an amino sugar and a flavonoid-containing plant. The term “consisting essentially of an amino sugar and a flavonoid-containing plant” includes a case in which no component other than the component inevitably mixed in the processing step of an amino sugar and a flavonoid-containing plant is included. It means a case where the total mass of amino sugar and flavonoid-containing plants in the composition is 95% by mass or more. However, the composition of the present invention can contain various other components to be described later in addition to the amino sugar and flavonoid-containing plants, as long as the effects of the present invention are not impaired.

(含有量)
本発明の効果を更に高める観点から、本発明の組成物を経口摂取する場合において、本発明の組成物における、アミノ糖の含有量は、10〜2000mgが好ましく、100〜1000mgがより好ましく、200〜800mgが更に好ましい。また本発明の組成物を経口摂取する場合、本発明の組成物における、アミノ糖の含有量は、1〜80質量%が好ましく、5〜50質量%がより好ましく、10〜30質量%が更に好ましい。
(Content)
From the viewpoint of further enhancing the effect of the present invention, when the composition of the present invention is orally ingested, the content of amino sugar in the composition of the present invention is preferably 10 to 2000 mg, more preferably 100 to 1000 mg, 200 ˜800 mg is more preferred. When the composition of the present invention is orally ingested, the content of amino sugar in the composition of the present invention is preferably 1 to 80% by mass, more preferably 5 to 50% by mass, and further 10 to 30% by mass. preferable.

本発明の効果を更に高める観点から、本発明の組成物を経口摂取する場合において、本発明の組成物における、フラボノイド類含有植物の含有量は、乾燥質量で1〜500mgが好ましく、5〜200mgがより好ましく、10〜100mgが更に好ましく、20〜80mgが特に好ましい。また本発明の組成物を経口摂取する場合、本発明の組成物における、フラボノイド類含有植物の含有量は、乾燥質量で0.001〜50質量%が好ましく、0.01〜40質量%がより好ましく、0.1〜30質量%が更に好ましい。   From the viewpoint of further enhancing the effect of the present invention, when the composition of the present invention is orally ingested, the content of the flavonoid-containing plant in the composition of the present invention is preferably 1 to 500 mg, preferably 5 to 200 mg in terms of dry mass. Is more preferable, 10-100 mg is still more preferable, and 20-80 mg is especially preferable. When the composition of the present invention is orally ingested, the content of the flavonoid-containing plant in the composition of the present invention is preferably 0.001 to 50% by mass, more preferably 0.01 to 40% by mass in terms of dry mass. Preferably, 0.1-30 mass% is still more preferable.

本発明の効果を更に高める観点から、本発明の組成物を非経口摂取する場合において、本発明の組成物における、アミノ糖の含有量は、0.000001〜100mgが好ましく、0.00001〜10mgがより好ましく、0.00001〜1mgが更に好ましく、0.0001〜0.1mgが特に好ましい。また本発明の組成物を非経口摂取する場合、本発明の組成物における、アミノ糖の含有量は、0.000001〜20質量%が好ましく、0.00001〜1質量%がより好ましく、0.0001〜0.1質量%が更に好ましい。   From the viewpoint of further enhancing the effect of the present invention, when the composition of the present invention is ingested parenterally, the content of amino sugar in the composition of the present invention is preferably 0.000001 to 100 mg, preferably 0.00001 to 10 mg. Is more preferable, 0.00001 to 1 mg is more preferable, and 0.0001 to 0.1 mg is particularly preferable. When the composition of the present invention is ingested parenterally, the content of amino sugar in the composition of the present invention is preferably 0.000001 to 20% by mass, more preferably 0.00001 to 1% by mass, and 0001-0.1 mass% is still more preferable.

本発明の効果を更に高める観点から、本発明の組成物を非経口摂取する場合において、本発明の組成物における、フラボノイド類含有植物の含有量は、乾燥質量で0.000001〜100mgが好ましく、0.00001〜10mgがより好ましく、0.00001〜1mgが更に好ましく、0.0001〜0.1mgが特に好ましい。本発明の組成物を非経口摂取する場合、本発明の組成物における、フラボノイド類含有植物の含有量は、乾燥質量で0.000001〜20質量%が好ましく、0.00001〜1質量%がより好ましく、0.0001〜0.1質量%が更に好ましい。   From the viewpoint of further enhancing the effects of the present invention, when the composition of the present invention is ingested parenterally, the content of the flavonoid-containing plant in the composition of the present invention is preferably 0.000001 to 100 mg by dry mass, 0.00001-10 mg is more preferable, 0.00001-1 mg is still more preferable, and 0.0001-0.1 mg is especially preferable. When parenterally ingesting the composition of the present invention, the content of the flavonoid-containing plant in the composition of the present invention is preferably 0.000001 to 20% by mass, more preferably 0.00001 to 1% by mass in terms of dry mass. Preferably, 0.0001 to 0.1% by mass is more preferable.

本発明の効果を更に高める観点から、本発明の組成物を経口摂取する場合であっても非経口摂取する場合であっても、アミノ糖の質量:フラボノイド類含有植物の乾燥質量の質量比率(前者:後者)は1:0.0001〜1000であることが好ましく、1:0.001〜100であることがより好ましく、1:0.01〜10であることが更に好ましく、1:0.01〜1であることが特に好ましい。   From the standpoint of further enhancing the effects of the present invention, whether the composition of the present invention is taken orally or parenterally, the mass ratio of amino sugar: dry mass of the flavonoid-containing plant ( The former: latter) is preferably 1: 0.0001 to 1000, more preferably 1: 0.001 to 100, still more preferably 1: 0.01 to 10, and 1: 0. It is especially preferable that it is 01-1.

本発明の組成物は化粧用に用いることができ、この場合、化粧料組成物となる。本発明の化粧用組成物は経皮投与等の非経口投与されるものである。   The composition of the present invention can be used for cosmetic purposes, and in this case, it is a cosmetic composition. The cosmetic composition of the present invention is administered parenterally such as transdermal administration.

本発明の化粧用組成物には、上記アミノ糖、フラボノイド類含有植物以外に、医薬部外品又は化粧料などに通常使用される他の成分を、該化粧料の効果を損なわない範囲で含有してもよい。このような成分としては、例えば水、他の薬効成分、他の油剤、基剤、保湿剤、粉体、ゲル化剤、増粘剤、界面活性剤、乳化剤、抗炎症剤、抗酸化剤、pH調整剤、キレート剤、増粘剤、色素、香料、保存剤や、コラーゲン等の皮膚老化防止・改善剤、発毛抑制剤、防腐剤、防黴剤、紫外線吸収剤、吸収促進剤、紫外線分散剤等が挙げられる。ここで他の薬効成分としては、活性酸素除去剤、抗酸化剤、消炎鎮痛剤、抗ヒスタミン剤、止痒剤、殺菌剤、ビタミン剤、ホルモン剤、ビタミンAなどのカロテノイド類、ビタミンB類、アスコルビン酸、ビタミンE、及びこれらの誘導体又はこれらの塩などが挙げられる。   The cosmetic composition of the present invention contains, in addition to the above-mentioned amino sugar and flavonoid-containing plants, other ingredients usually used in quasi-drugs or cosmetics as long as the effects of the cosmetics are not impaired. May be. Examples of such components include water, other medicinal ingredients, other oils, bases, moisturizers, powders, gelling agents, thickeners, surfactants, emulsifiers, anti-inflammatory agents, antioxidants, pH adjusters, chelating agents, thickeners, pigments, fragrances, preservatives, skin aging prevention / improving agents such as collagen, hair growth inhibitors, antiseptics, antifungal agents, UV absorbers, absorption promoters, UV rays A dispersing agent etc. are mentioned. Other medicinal ingredients here include active oxygen scavengers, antioxidants, anti-inflammatory analgesics, antihistamines, antipruritics, bactericides, vitamins, hormones, carotenoids such as vitamin A, vitamin Bs, ascorbic acid , Vitamin E, and derivatives or salts thereof.

本発明の化粧用組成物は、通常用いられる方法により、アミノ糖、フラボノイド類含有植物以外の他の成分とを混合して調製することができ、医薬品、医薬部外品、化粧品、トイレタリー用品として使用できる。化粧料の具体的な形態は、特に限定されないが、クリーム、化粧クリーム、乳液、化粧水、美容液、ローション、洗顔料、クレンジング、ボディソープ、ボディシャンプー、パック、石鹸、ファンデーション、口紅、リップグロス、頬紅、水性軟膏、油性軟膏、シップ、ゲル(ジェル)、浴用剤等の皮膚用化粧料、シャンプー、リンス、コンディショナー、トリートメント、スタイリング剤、ヘアトニック、ヘアクリーム、整髪料、育毛剤、石鹸、パーマ・カラーの前後処理剤等の髪用化粧料、化粧品と類似した剤型で薬事法の対象外の製品(いわゆる、雑品)であってよい。また、シップやゲルのような担体や架橋剤に保持・吸収させ、局部へ貼付するなどの方法により、局所的な長時間投与を行うこともできる。また、点眼剤、点鼻剤としての投与も可能である。   The cosmetic composition of the present invention can be prepared by mixing other components other than amino sugar and flavonoid-containing plants by a commonly used method, and can be prepared as a pharmaceutical, quasi-drug, cosmetic, toiletry product. Can be used. The specific form of the cosmetic is not particularly limited, but cream, cosmetic cream, milky lotion, lotion, serum, lotion, face wash, cleansing, body soap, body shampoo, pack, soap, foundation, lipstick, lip gloss , Blusher, aqueous ointment, oily ointment, ship, gel (gel), skin cosmetics such as bath preparation, shampoo, rinse, conditioner, treatment, styling agent, hair tonic, hair cream, hair conditioner, hair conditioner, soap, It may be a cosmetic for hair such as a perm / color pre- and post-treatment agent, and a product (so-called miscellaneous goods) that is not covered by the Pharmaceutical Affairs Law in a dosage form similar to cosmetics. In addition, it can be locally administered for a long time by a method such as holding or absorbing in a carrier such as ship or gel or a cross-linking agent and applying it to a local area. In addition, administration as eye drops and nasal drops is also possible.

本発明の組成物は、美容用途又は関節保護用途に用いることができ、その場合、美容組成物、関節保護組成物となる。これらの組成物の投与形態は、非経口投与であってもよく、経口投与であってもよい。本発明の美容組成物、関節保護組成物を非経口投与する場合、これらの組成物のアミノ糖、フラボノイド類含有植物以外の配合成分の例、剤形は、上記の本発明の化粧用組成物と同様とすることができる。また、経口投与の場合の本発明の美容組成物、関節保護組成物のアミノ糖、フラボノイド類含有植物以外の配合成分の例、剤形については、後述する経口用組成物と同様とすることができる。これらの組成物における非経口投与の方法としては、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、経皮投与等が用いられる。皮下投与のひとつである、腹腔内投与としてもよい。また、経腸投与として、注射等を用い内臓へ直接投与してもよい。   The composition of the present invention can be used for cosmetic use or joint protection use, in which case it becomes a cosmetic composition or a joint protection composition. The administration form of these compositions may be parenteral administration or oral administration. When the cosmetic composition and the joint protection composition of the present invention are administered parenterally, examples of the ingredients other than the amino sugar and flavonoid-containing plants and dosage forms of these compositions are the cosmetic compositions of the present invention described above. And can be similar. Further, in the case of oral administration, examples of formulation ingredients and dosage forms other than the amino sugar and flavonoid-containing plants of the cosmetic composition of the present invention and joint protection composition may be the same as the oral composition described later. it can. As a method for parenteral administration in these compositions, intravenous administration, intramuscular administration, subcutaneous administration, transdermal administration and the like are used. It is good also as intraperitoneal administration which is one of subcutaneous administration. Further, as an enteral administration, it may be administered directly to the viscera using injection or the like.

本発明の組成物を、経口で摂取する組成物とする場合、該経口用組成物においては、上記アミノ糖、フラボノイド類含有植物以外に、通常使用される他の成分を、該経口用組成物の効果を損なわない範囲で含有してもよい。このような成分としては、種々の賦形剤、結合剤、光沢剤、滑沢剤、安定剤、希釈剤、増量剤、増粘剤、乳化剤、酸化防止剤、pH調整剤、着色料、香料、添加剤などを挙げることができる。その他の成分の含有量は、本発明の組成物の形態等に応じて適宜選択することができる。   When the composition of the present invention is an orally ingested composition, in the oral composition, in addition to the above-mentioned amino sugar and flavonoid-containing plants, other commonly used components are used as the oral composition. You may contain in the range which does not impair the effect of. Examples of such components include various excipients, binders, brighteners, lubricants, stabilizers, diluents, extenders, thickeners, emulsifiers, antioxidants, pH adjusters, colorants, and fragrances. And additives. The content of other components can be appropriately selected according to the form of the composition of the present invention.

本発明の組成物は、必要に応じて、薬学的に許容される基材や担体を添加して、公知の製剤方法によって、各種の剤形に製剤可能であり、剤形としては、例えば、粉末状、粒状、顆粒状、錠状、棒状、板状、ブロック状、固形状、丸状、液状、ペースト状、ハードカプセルやソフトカプセルのようなカプセル状、カプレット状、タブレット状、ゲル状、チュアブル状、シロップ状、スティック状等の各形態が挙げられる。   The composition of the present invention can be formulated into various dosage forms by a known formulation method by adding a pharmaceutically acceptable base material or carrier, if necessary. Examples of the dosage form include: Powder, granule, granule, tablet, rod, plate, block, solid, round, liquid, paste, capsule like hard capsule or soft capsule, caplet, tablet, gel, chewable , Syrup form, stick form and the like.

本発明の組成物は、天然物由来で安全に非経口摂取及び/又は経口摂取できるのみならず、後述する実施例の記載から明らかな通り、アミノ糖とフラボノイド類含有植物とを含有することにより、MMP−13遺伝子発現の抑制作用を得ることができる。特に本発明の組成物は、これを非経口摂取及び/又は経口摂取することにより、種々の組織や細胞におけるMMP−13の産生を抑制することができる。例えば、皮膚中におけるMMP−13の産生を抑制することで、皮膚中のコラーゲン量の低下を防止して、皮膚のシワの防止や弾力性の向上といった皮膚の老化予防又は改善を図ることができる。また本発明の組成物は、関節等の軟骨細胞におけるMMP−13の産生を抑制することで、関節の軟骨におけるコラーゲンの減少等の関節保護に有用であり、変形性関節症、関節リウマチ、骨関節炎等の軟骨コラーゲン分解に関連する疾患の予防及び改善に有効である。本発明の組成物は、これらの作用のいずれか1種又は2種以上を奏することができる化粧用組成物、経口用組成物として有用であり、またこれらの作用のいずれか1種又は2種以上を奏することができることにより、美容組成物、関節保護組成物等として有用である。   The composition of the present invention is derived from natural products and can be safely ingested parenterally and / or orally, and also contains an amino sugar and a flavonoid-containing plant, as is apparent from the description of Examples below. In addition, an inhibitory action on MMP-13 gene expression can be obtained. In particular, the composition of the present invention can suppress the production of MMP-13 in various tissues and cells by ingesting it parenterally and / or orally. For example, by suppressing the production of MMP-13 in the skin, it is possible to prevent a decrease in the amount of collagen in the skin and prevent or improve skin aging such as prevention of skin wrinkles and improvement of elasticity. . In addition, the composition of the present invention is useful for joint protection such as reduction of collagen in the cartilage of the joint by inhibiting the production of MMP-13 in the chondrocytes of the joint, etc., and it is useful for osteoarthritis, rheumatoid arthritis, bone It is effective in preventing and improving diseases related to cartilage collagen degradation such as arthritis. The composition of the present invention is useful as a cosmetic composition or an oral composition capable of exerting any one or more of these actions, and any one or two of these actions. By being able to exhibit the above, it is useful as a beauty composition, a joint protection composition, and the like.

特に、本発明の組成物はMMP−13の発現の抑制を通じて、軟骨コラーゲンの分解を抑制することにより、関節等における軟骨を保護して健全な状態を保つのに役立つ。軟骨の保護は、関節痛を予防及び改善し、関節可動域の制限を防止して関節をスムーズに動きやすくすることに繋がる。関節の痛みや可動域の制限は、バランス能力、体力、移動能力の低下をきたすとされ、いわゆるロコモティブシンドローム(運動器機能症候群)の原因となる。したがって、本願発明の組成物は、関節痛及び関節可動域の制限に伴うロコモティブシンドローム(運動器機能症候群)を予防及び防止し、バランス能力、体力、移動能力の低下を防止して、姿勢維持(背中が丸まってしまうことの防止)や、筋肉を柔軟で若々しく保つことに寄与し得る。   In particular, the composition of the present invention is useful for protecting the cartilage in a joint or the like and maintaining a healthy state by suppressing the degradation of cartilage collagen through the suppression of the expression of MMP-13. Cartilage protection prevents and ameliorates joint pain, prevents restriction of the range of motion of the joint, and facilitates smooth movement of the joint. Joint pain and limitation of range of motion are said to reduce balance ability, physical strength, and movement ability, and cause so-called locomotive syndrome (motor organ function syndrome). Therefore, the composition of the present invention can prevent and prevent locomotive syndrome (motor organ function syndrome) associated with joint pain and limitation of range of motion, prevent a decrease in balance ability, physical strength, and movement ability, and maintain posture ( (Preventing curling of the back) and keeping the muscles flexible and youthful.

以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。しかし本発明の範囲はかかる実施例に限定されない。以下、特に断らない場合「%」は質量%、「部」は質量部を表す。以下の実施例1〜3のうち、実施例1は、アミノ糖と松とを組み合わせた実施例であり、実施例2は、アミノ糖と黒生姜とを組み合わせた実施例である。実施例3は、アミノ糖とオオイタドリとを組み合わせた実施例である。   Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. However, the scope of the present invention is not limited to such examples. Hereinafter, unless otherwise specified, “%” represents mass%, and “part” represents mass part. Among the following Examples 1 to 3, Example 1 is an example in which an amino sugar and pine are combined, and Example 2 is an example in which an amino sugar and black ginger are combined. Example 3 is an example in which an amino sugar and a bluebird are combined.

〔実施例1、比較例1及び2、並びに参考例1及び2〕
下記の<試験液の調製I>の通りに各種(1)〜(4)の液を調製し、得られた試験液を、下記の<MMP−13発現試験I>に供した。
[Example 1, Comparative Examples 1 and 2, and Reference Examples 1 and 2]
Various liquids (1) to (4) were prepared as shown in <Test liquid preparation I> below, and the obtained test liquids were subjected to the following <MMP-13 expression test I>.

<試験液の調製I>
(1)の液として、10%FBS−DMEM培地を用いた。
(2)アミノ糖含有液
アミノ糖として、N−アセチルグルコサミン(ナカライテスク社製、以下「NAG」とも略記する。)を用いた。これを10mg/mL濃度となるよう10%FBS−DMEM培地に溶解し、1.5時間転倒撹拌した後、フィルタリングしたものを、更に同培地により段階希釈して、NAGを目的とする最終濃度(下記表1参照)の3倍及び6倍の濃度で含有する10%FBS−DMEM培地をそれぞれ作成した。
(3)松含有液
松として、松樹皮抽出物(商品名「フラバンジェノール」(登録商標、株式会社東洋新薬製)、粉末状、OPCを30質量%以上含有)を用いた。これを10mg/mL濃度となるよう10%FBS−DMEM培地に溶解し、1.5時間転倒撹拌した後、フィルタリングしたものを、更に同培地により段階希釈して、松樹皮抽出物を目的とする最終濃度(下記表1参照)の3倍及び6倍の濃度で含有する10%FBS−DMEM培地をそれぞれ作成した。
(4)発現誘導剤含有液
MMP−13の遺伝子発現誘導剤としてインターロイキン1ベータ(以下「IL1b」とも記載する)の水溶液(Pepro Tech社製、IL1bの濃度10μg/mL、以下「IL1b原液」ともいう)を用いた。このIL1b原液3μLを、15mLの10%FBS−DMEM培地へ添加して発現誘導剤含有液を調製した。
<Preparation of test solution I>
As a solution of (1), 10% FBS-DMEM medium was used.
(2) Amino sugar-containing liquid N-acetylglucosamine (manufactured by Nacalai Tesque, hereinafter abbreviated as “NAG”) was used as the amino sugar. This was dissolved in a 10% FBS-DMEM medium to a concentration of 10 mg / mL, and after stirring for 1.5 hours by inversion, the filtered one was further serially diluted with the same medium to obtain the final concentration of NAG ( 10% FBS-DMEM media containing 3 times and 6 times the concentration of the following Table 1) were prepared.
(3) Pine-containing liquid As the pine, a pine bark extract (trade name “Flavandenol” (registered trademark, manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd.), powdered form, containing 30% by mass or more of OPC) was used. This is dissolved in a 10% FBS-DMEM medium so as to have a concentration of 10 mg / mL, and after stirring by inverting for 1.5 hours, the filtered one is further serially diluted with the same medium to obtain a pine bark extract. 10% FBS-DMEM media containing 3 times and 6 times the final concentration (see Table 1 below) were prepared.
(4) Expression inducer-containing solution As a gene expression inducer of MMP-13, an aqueous solution of interleukin 1 beta (hereinafter also referred to as “IL1b”) (Pepro Tech, IL1b concentration 10 μg / mL, hereinafter “IL1b stock solution” Also called). 3 μL of this IL1b stock solution was added to 15 mL of 10% FBS-DMEM medium to prepare an expression inducer-containing solution.

(松樹皮の含水エタノール可溶性分)
なお、フラバンジェノールの調製に用いた松樹皮の含水エタノール可溶性分は、下記の方法に従って測定したところ、13.2質量%であった。まず、2kgの乾燥した松樹皮をミルで1〜5mmの大きさに粉砕して粉砕物とし、この粉砕物から10gを分取してサンプルとした。このサンプルに、100mLの80容量(v/v)%のエタノールを含有する水溶液を加えて、80℃にて1時間還流抽出を行った。次いで、濾過し、濾液1を回収した。濾過残渣については、さらに上記と同様にエタノール水溶液を用いて抽出および濾過を行って濾液を得る操作を2回繰り返した(それぞれ濾液2および3という)。得られた濾液1〜3を合わせて抽出液とし、減圧濃縮乾固して乾燥物を得た(以下、含水エタノール可溶成分という)。この乾燥物の質量を測定したところ、1.32gであった。
(Water-soluble ethanol-soluble content of pine bark)
The water-soluble ethanol-soluble content of pine bark used for the preparation of flavangenol was 13.2% by mass as measured according to the following method. First, 2 kg of dried pine bark was pulverized to a size of 1 to 5 mm with a mill to obtain a pulverized product, and 10 g was separated from this pulverized product to prepare a sample. To this sample, 100 mL of an aqueous solution containing 80 volume (v / v)% ethanol was added, and reflux extraction was performed at 80 ° C. for 1 hour. Subsequently, it filtered and the filtrate 1 was collect | recovered. For the filtration residue, extraction and filtration were further performed using an aqueous ethanol solution in the same manner as described above to obtain a filtrate twice (referred to as filtrates 2 and 3, respectively). The obtained filtrates 1 to 3 were combined to make an extract, and concentrated to dryness under reduced pressure to obtain a dried product (hereinafter referred to as a hydrous ethanol-soluble component). When the mass of this dried product was measured, it was 1.32 g.

(フラバンジェノールの製法)
また、フラバンジェノールは、下記の方法に従って調製されたものである。
まず、松樹皮100gに、水0.5Lを加えて、95℃以上にて1時間還流抽出を行った。次いで、濾過して0.5Lの濾液を回収し(濾液4とする)、さらに、濾過後の不溶物に対して、上記と同様に、水0.5Lを加えて還流抽出を行い、濾過して0.5Lの濾液を得た(濾液5とする)。濾液4と濾液5とを合わせて、1Lの松樹皮抽出液を得た。濾液を濃縮・乾燥し、得られた固体をフラバンジェノールとして使用した。
(Manufacturing method of flavangenol)
Flavangenol is prepared according to the following method.
First, 0.5 L of water was added to 100 g of pine bark, and reflux extraction was performed at 95 ° C. or higher for 1 hour. Next, filtration is performed to collect 0.5 L of filtrate (filtrate 4). Further, 0.5 L of water is added to the insoluble matter after filtration and reflux extraction is performed in the same manner as above, followed by filtration. To obtain 0.5 L of filtrate (referred to as filtrate 5). The filtrate 4 and the filtrate 5 were combined to obtain 1 L of pine bark extract. The filtrate was concentrated and dried, and the resulting solid was used as flavangenol.

<MMP−13発現試験I>
正常ヒト関節軟骨細胞(normal human articular chondrocyte; NHAC, Lonza社)を5.4×104cells/wellとなるよう24well plateへ播種し、一晩前培養を行った。この細胞に、下記の表1の量で上記(1)、(2)、(3)及び(4)の各液をこの記載順で添加した。添加後の細胞を、5%CO2濃度CO2インキュベータで37℃にて18時間培養した。培養後の細胞からセパゾールRNA(ナカライテスク社製)を用いて添付プロトコルに従ってtotal RNAを抽出した。得られたtotal RNAを鋳型とし、cDNA作成用キット(QIAGEN社、製品名:Quantitect Reverse Transcription Kit)を用いてcDNAを合成した。得られたcDNA含有反応液をNuclease free water(QIAGEN社製)を用いて20倍希釈したもの2μLを、RT-PCR用キット(QIAGEN社、製品名:Rotor-Gene Green PCR Kit)に付属の反応液8μLと混合して、下記の条件でPCRを行った。上記反応液8μlは、2x Rotor-Gene SYBR Green PCR Master Mix5μL 、Primer 1μL、Nuclease free water 2μLの混合液である。PCRはQIAGEN社製Rotor-Gene Qを用いて行い、PCR産物量をリアルタイムでモニタリングすることにより測定した。上記のRT-PCRでは、GAPDH (ハウスキーピング遺伝子)を内部標準とした。具体的には、MMP−13のPCR産物量/GAPDHのPCR産物量をMMP−13の遺伝子発現値とした。実験は3連で行って遺伝子発現値の平均値を求めた。実施例1、比較例1及び2、参考例1の遺伝子発現値について、参考例2のMMP−13の遺伝子発現値の平均値を1としたときの割合を、遺伝子発現の相対値として求めた。得られた相対値の平均値を、図1に示す。
<MMP-13 expression test I>
Normal human articular chondrocytes (NHAC, Lonza) were seeded on a 24-well plate at 5.4 × 10 4 cells / well and pre-cultured overnight. To the cells, the above solutions (1), (2), (3) and (4) were added in the order described in the amounts shown in Table 1 below. After the addition, the cells were cultured at 37 ° C. for 18 hours in a 5% CO 2 concentration CO 2 incubator. Total RNA was extracted from the cultured cells using Seppazole RNA (Nacalai Tesque) according to the attached protocol. Using the obtained total RNA as a template, cDNA was synthesized using a cDNA preparation kit (QIAGEN, product name: Quantitect Reverse Transcription Kit). Reaction obtained in the RT-PCR kit (QIAGEN, product name: Rotor-Gene Green PCR Kit) using 2 μL of the resulting cDNA-containing reaction solution diluted 20-fold with Nuclease free water (QIAGEN) PCR was performed under the following conditions by mixing with 8 μL of the solution. 8 μl of the reaction solution is a mixed solution of 2 × Rotor-Gene SYBR Green PCR Master Mix 5 μL, Primer 1 μL, and Nuclease free water 2 μL. PCR was performed by using Rotor-Gene Q manufactured by QIAGEN and monitoring the amount of PCR product in real time. In the above RT-PCR, GAPDH (housekeeping gene) was used as an internal standard. Specifically, the amount of MMP-13 PCR product / the amount of GAPDH PCR product was used as the gene expression value of MMP-13. Experiments were performed in triplicate to determine the average gene expression value. For the gene expression values of Example 1, Comparative Examples 1 and 2, and Reference Example 1, the ratio when the average value of the gene expression value of MMP-13 of Reference Example 2 was set to 1 was determined as the relative value of gene expression. . The average value of the relative values obtained is shown in FIG.

(RT-PCRの条件)
Hold: 95℃・5min
Cycle:95℃・5sec → 60℃・10 sec →72℃・10sec × 45cycle
Melt:72- 99℃
(RT-PCR conditions)
Hold: 95 ℃ ・ 5min
Cycle: 95 ℃ ・ 5sec → 60 ℃ ・ 10 sec → 72 ℃ ・ 10sec × 45cycle
Melt: 72-99 ℃

(Primer)
・GAPDH:Hs_GAPDH_2_SG QuantiTect Primer Assay (QT01192646)
・MMP−13:Hs_MMP13_1_SG QuantiTect Primer Assay (QT00001764)
(Primer)
-GAPDH: Hs_GAPDH_2_SG QuantiTect Primer Assay (QT01192646)
・ MMP-13: Hs_MMP13_1_SG QuantiTect Primer Assay (QT00001764)

図1に示す結果から明らかな通り、アミノ糖と松とを組み合わせた実施例1は、IL1bの添加により誘導されたMMP−13の遺伝子発現を有意に抑制した。これに対して、アミノ糖と松とをそれぞれ単独で配合した比較例1及び2では、有意な抑制作用は見られなかった。この結果から、アミノ糖と松とを組み合わせることにより、本発明の組成物が、優れたMMP−13発現抑制作用を奏することは明らかである。そして、本発明の組成物が、このMMP−13発現抑制を通じて、軟骨や皮膚等各種の結合組織におけるコラーゲンの蓄積量の減少を有効に防止でき、美容や関節保護等に有効であることも明らかである。   As is clear from the results shown in FIG. 1, Example 1 combining amino sugar and pine significantly suppressed MMP-13 gene expression induced by the addition of IL1b. On the other hand, in Comparative Examples 1 and 2 in which amino sugar and pine were blended alone, no significant inhibitory action was observed. From this result, it is clear that the composition of the present invention exhibits an excellent inhibitory action on MMP-13 expression by combining amino sugar and pine. It is also clear that the composition of the present invention can effectively prevent a decrease in the amount of accumulated collagen in various connective tissues such as cartilage and skin through the suppression of MMP-13 expression, and is effective for beauty and joint protection. It is.

〔実施例2、比較例3及び4、並びに参考例5及び6〕
下記の<試験液の調製II>の通りに各種(i)〜(iv)の液を調製し、得られた試験液を、下記の<MMP−13発現試験II>に供した。
[Example 2, Comparative Examples 3 and 4, and Reference Examples 5 and 6]
Various liquids (i) to (iv) were prepared as in <Test liquid preparation II> below, and the obtained test liquids were subjected to <MMP-13 expression test II> below.

<試験液の調製II>
(i)の液として、10%FBS−DMEM培地を用いた。
(ii)アミノ糖含有液
<試験液の調製I>における(2)において、調製したアミノ糖含有液の濃度を、目的とする最終濃度(下記表2参照)の4倍の濃度とした以外は、<試験液の調製I>の(2)と同様にした。
(iii)黒生姜含有液
黒生姜として下記の<黒生姜エキスの製造方法>により製造した粉末状のエキス(以下、「BG」ともいう、)を用いた。得られた粉末状のエキスを10mg/mL濃度となるよう10%FBS−DMEM培地に溶解し、1.5時間転倒撹拌した後、フィルタリングしたものを、更に同培地により段階希釈して、黒生姜エキスを、目的とする最終濃度(下記表2参照)の4倍の濃度で含有する10%FBS−DMEM培地を作成した。
(iv)発現誘導剤含有液
<試験液の調製I>における(4)において、10%FBS−DMEM10mLに対してIL1b原液(10μg/mL)を2.67μL添加して調製した以外は、該(4)と同様とした。
<Preparation of test solution II>
As the solution (i), 10% FBS-DMEM medium was used.
(Ii) Amino sugar-containing liquid In (2) in <Test liquid preparation I>, the concentration of the prepared amino sugar-containing liquid was set to a concentration four times the final concentration of interest (see Table 2 below). In the same manner as in (2) of <Test Solution Preparation I>.
(Iii) Black ginger-containing liquid A powdery extract (hereinafter, also referred to as “BG”) produced by the following <Black ginger extract production method> was used as black ginger. The obtained powdery extract was dissolved in 10% FBS-DMEM medium so as to have a concentration of 10 mg / mL, and after stirring for 1.5 hours, the filtered one was further serially diluted with the same medium, A 10% FBS-DMEM medium containing the extract at a concentration 4 times the final final concentration (see Table 2 below) was prepared.
(Iv) Expression inducer-containing solution In (4) of <Preparation of test solution I>, except that it was prepared by adding 2.67 μL of IL1b stock solution (10 μg / mL) to 10 mL of 10% FBS-DMEM ( Same as 4).

(黒生姜エキスの製造方法)
黒生姜の根茎を細片化した後乾燥してチップ状の根茎を得た。この根茎チップ300gを秤量し、60%含水エタノール3Lとともに3角フラスコに入れる。途中で何回か攪拌しながら室温で24時間静置する。減圧濾過後、残ったチップに60%含水エタノール3Lに再度浸漬して、室温で24時間静置して抽出を行う。これを減圧濾過して、2回目の抽出液を得た。前記1回目、2回目の抽出液を併せ、これを約1/6の体積に減圧濃縮して原液とした。得られた原液を乾燥させて粉末状のエキスを得た。得られたエキス中の5,7-dimethoxyflavoneの含有量は6質量%であった。
(Production method of black ginger extract)
The rhizome of black ginger was fragmented and dried to obtain a chip-like rhizome. 300 g of this rhizome chip is weighed and placed in a triangular flask together with 3 L of 60% water-containing ethanol. Allow to stand at room temperature for 24 hours while stirring several times along the way. After filtration under reduced pressure, the remaining chip is immersed again in 3 L of 60% aqueous ethanol and left to stand at room temperature for 24 hours for extraction. This was filtered under reduced pressure to obtain a second extract. The first and second extracts were combined and concentrated under reduced pressure to about 1/6 volume to obtain a stock solution. The obtained stock solution was dried to obtain a powdery extract. The content of 5,7-dimethoxyflavone in the obtained extract was 6% by mass.

<MMP−13発現試験II>
上記の(1)〜(4)の液を添加する代わりに、正常ヒト関節軟骨細胞に下記の表2の量で上記(i)、(ii)、(iii)及び(iv)の各液をこの記載順で添加したほかは、<MMP−13発現試験I>と同様にして、遺伝子発現値を得た。実施例2、比較例3及び4、参考例3の遺伝子発現値について、参考例4の発現値の平均値を1としたときの割合を、遺伝子発現の相対値として求めた。得られた相対値の平均値を、図2に示す。
<MMP-13 expression test II>
Instead of adding the solutions (1) to (4) above, the above-mentioned solutions (i), (ii), (iii) and (iv) were added to normal human articular chondrocytes in the amounts shown in Table 2 below. A gene expression value was obtained in the same manner as in <MMP-13 expression test I> except that they were added in this order. For the gene expression values of Example 2, Comparative Examples 3 and 4, and Reference Example 3, the ratio when the average expression value of Reference Example 4 was set to 1 was determined as the relative value of gene expression. The average value of the relative values obtained is shown in FIG.

図2に示す結果から明らかな通り、アミノ糖と黒生姜とを組み合わせた実施例2は、IL1bの添加により誘導されたMMP−13の遺伝子発現を有意に抑制した。これに対して、アミノ糖と黒生姜とをそれぞれ単独で配合した比較例3及び4では、有意な抑制作用は見られなかった。この結果から、アミノ糖と黒生姜とを組み合わせることにより、本発明の組成物が、優れたMMP−13発現抑制作用を奏することは明らかである。そして、本発明の組成物が、このMMP−13発現抑制を通じて、軟骨や皮膚等各種の結合組織におけるコラーゲンの蓄積量の減少を有効に防止でき、美容や関節保護等に有効であることも明らかである。   As is clear from the results shown in FIG. 2, Example 2 combining amino sugar and black ginger significantly suppressed the gene expression of MMP-13 induced by the addition of IL1b. On the other hand, in Comparative Examples 3 and 4 in which amino sugar and black ginger were blended alone, no significant inhibitory action was observed. From this result, it is clear that the composition of the present invention exhibits an excellent inhibitory action on MMP-13 expression by combining amino sugar and black ginger. It is also clear that the composition of the present invention can effectively prevent a decrease in the amount of accumulated collagen in various connective tissues such as cartilage and skin through the suppression of MMP-13 expression, and is effective for beauty and joint protection. It is.

〔実施例3、比較例5及び6、並びに参考例7及び8〕
下記の<試験液の調製III>の通りに各種(a)〜(d)の液を調製し、得られた試験液を、下記の<MMP−13発現試験III>に供した。
[Example 3, Comparative Examples 5 and 6, and Reference Examples 7 and 8]
Various liquids (a) to (d) were prepared as in <Test liquid preparation III> below, and the obtained test liquids were subjected to <MMP-13 expression test III> below.

<試験液の調製III>
(a)の液として、10%FBS−DMEM培地を用いた。
(b)アミノ糖含有液
<試験液の調製I>における(2)において、調製したアミノ糖含有液の濃度を、目的とする最終濃度(下記表3参照)の倍の濃度とした以外は、<試験液の調製I>の(2)と同様にした。
(c)
オオイタドリとして下記の(オオイタドリエキスの製造方法)により製造した粉末状のエキスを用いた。これをオオイタドリエキスの濃度が10mg/mLとなるよう10%FBS−DMEM培地に溶解し、1.5時間転倒撹拌した後、フィルタリングしたものを、更に同培地により段階希釈して、オオイタドリエキスを、目的とする最終濃度(下記表3参照)の4倍の濃度で含有する10%FBS−DMEM培地を作成した。
(d)発現誘導剤含有液
10%FBS−DMEM5mLに対してIL1b原液(10μg/mL)を1.335μL添加して調製した。
<Preparation of test solution III>
As the liquid (a), 10% FBS-DMEM medium was used.
(B) Amino sugar-containing solution In (2) of <Test Solution Preparation I>, the concentration of the prepared amino sugar-containing solution was set to a concentration four times the final concentration (see Table 3 below). In the same manner as in (2) of <Test Solution Preparation I>.
(C)
A powdery extract produced by the following (Production method of European redbird extract) was used as the giant redbird. This was dissolved in 10% FBS-DMEM medium so that the concentration of the bluebird extract was 10 mg / mL, and after stirring for 1.5 hours, the filtered one was further serially diluted with the same medium. A 10% FBS-DMEM medium containing 4 times the final concentration of interest (see Table 3 below) was prepared.
(D) Expression inducer-containing solution 1.35 μL of IL1b stock solution (10 μg / mL) was added to 5 mL of 10% FBS-DMEM.

(オオイタドリエキスの製造方法)
オオイタドリの若芽を熱水で抽出、精製してエキスを得た。このエキスを冷凍乾燥して、粉末状とした。得られたエキス中にはケルセチン-3-ルチノシドが含有されていた。
(Manufactured method of giant redbird extract)
An extract was obtained by extracting and purifying young red buds with hot water. This extract was freeze-dried to obtain a powder. The resulting extract contained quercetin-3-rutinoside.

<MMP−13発現試験III>
上記の(1)〜(4)の液を添加する代わりに、正常ヒト関節軟骨細胞に下記の表3の量で上記(a)、(b)、(c)及び(d)の各液をこの記載順で添加したほかは、<MMP−13発現試験I>と同様にして、遺伝子発現値を得た。実施例3、比較例5及び6、参考例5の遺伝子発現値について、参考例6の遺伝子発現値の平均値を1としたときの割合を、遺伝子発現の相対値とした。得られた相対値の平均値を、図3に示す。
<MMP-13 expression test III>
Instead of adding the liquids (1) to (4) above, the liquids (a), (b), (c) and (d) above were added to normal human articular chondrocytes in the amounts shown in Table 3 below. A gene expression value was obtained in the same manner as in <MMP-13 expression test I> except that they were added in this order. For the gene expression values of Example 3, Comparative Examples 5 and 6, and Reference Example 5, the ratio when the average value of the gene expression values of Reference Example 6 was 1 was defined as the relative value of gene expression. The average value of the relative values obtained is shown in FIG.

図3に示す結果から明らかな通り、アミノ糖とオオイタドリとを組み合わせた実施例3は、IL1bの添加により誘導されたMMP−13の遺伝子発現を大きく抑制した。これに対して、アミノ糖とオオイタドリとをそれぞれ単独で配合した比較例5及び6では、MMP−13の遺伝子発現抑制作用は大きく劣るものであった。この結果から、アミノ糖とオオイタドリとを組み合わせることにより、本発明の組成物が、相乗的なMMP−13発現抑制作用を奏することは明らかである。そして、本発明の組成物が、このMMP−13発現抑制を通じて、軟骨や皮膚等各種の結合組織におけるコラーゲンの蓄積量の減少を有効に防止でき、美容や関節保護等に有効であることも明らかである。   As is apparent from the results shown in FIG. 3, Example 3 in which an amino sugar and a bluebird were combined greatly suppressed the gene expression of MMP-13 induced by the addition of IL1b. On the other hand, in Comparative Examples 5 and 6 in which amino sugars and redbirds were blended alone, the gene expression inhibitory action of MMP-13 was greatly inferior. From this result, it is clear that the composition of the present invention exerts a synergistic inhibitory action on MMP-13 expression by combining an amino sugar and a bluebird. It is also clear that the composition of the present invention can effectively prevent a decrease in the amount of accumulated collagen in various connective tissues such as cartilage and skin through the suppression of MMP-13 expression, and is effective for beauty and joint protection. It is.

(配合例1:化粧水)
全体を100質量部として、松樹皮抽出物 0.005質量部、N−アセチルグルコサミン 0.005質量部、グリセリン 10質量部、ジグリセリン 3質量部、1,3−ブチレングリコール 12質量部、ペンチレングリコール 3質量部、ヒアルロン酸ナトリウム 0.1質量部、クエン酸 0.01質量部、クエン酸ナトリウム 0.02質量部、キサンタンガム 0.1質量部、メチルパラベン 0.15質量部、カルボマー 0.2質量部、水酸化ナトリウム 0.03質量部及び水 残部を混合して、化粧水の態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation example 1: lotion)
Based on 100 parts by mass as a whole, pine bark extract 0.005 parts by mass, N-acetylglucosamine 0.005 parts by mass, glycerin 10 parts by mass, diglycerin 3 parts by mass, 1,3-butylene glycol 12 parts by mass, pentylene Glycol 3 parts, sodium hyaluronate 0.1 part, citric acid 0.01 part, sodium citrate 0.02 part, xanthan gum 0.1 part, methylparaben 0.15 part, carbomer 0.2 part Part of the mixture, 0.03 part by mass of sodium hydroxide and the remaining part of water were mixed to prepare the composition of the present invention in the form of lotion.

(配合例2:シャンプー)
全体を100質量部として、松樹皮抽出物 0.001質量部、N−アセチルグルコサミン 0.001質量部、ラウレス硫酸ナトリウム 7.5質量部、コカミドプロピルベタイン 4.2質量部、コカミドDEA 3質量部、1,3−ブチレングリコール 0.1質量部、ポリクオタニウム−10 0.225質量部、クエン酸 0.15質量部、クエン酸ナトリウム 0.05質量部、フェノキシエタノール 0.9質量部及び水 残部を混合して、シャンプーの態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation example 2: shampoo)
Based on 100 parts by weight as a whole, 0.001 part by weight of pine bark extract, 0.001 part by weight of N-acetylglucosamine, 7.5 parts by weight of sodium laureth sulfate, 4.2 parts by weight of cocamidopropyl betaine, 3 parts by weight of cocamide DEA Parts, 1,3-butylene glycol 0.1 parts by weight, polyquaternium-10 0.225 parts by weight, citric acid 0.15 parts by weight, sodium citrate 0.05 parts by weight, phenoxyethanol 0.9 parts by weight and water balance Mixed to prepare the composition of the present invention in the form of a shampoo.

(配合例3:石鹸)
全体を100質量部として、黒生姜粉末 1質量部、N−アセチルグルコサミン 1質量部、グリセリン 2質量部、オリーブ油 1質量部、EDTA−4ナトリウム 0.1質量部、エチドロン酸4ナトリウム 0.2質量部及び石ケン素地 残部を混合及び固化することにより、石鹸の態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation example 3: soap)
100 parts by weight as a whole, 1 part by weight of black ginger powder, 1 part by weight of N-acetylglucosamine, 2 parts by weight of glycerin, 1 part by weight of olive oil, 0.1 part by weight of EDTA-4 sodium, 0.2 part by weight of etidronate 4 sodium The composition of the present invention was prepared in the form of a soap by mixing and solidifying the part and the rest of the soap base.

(配合例4:乳液)
全体を100質量部として、オオイタドリ抽出物 0.05質量部、N−アセチルグルコサミン 0.001質量部、ショ糖脂肪酸エステル 3質量部、グリセリン 12質量部、スクアラン 6質量部、ジメチルシリコーンオイル 24質量部、ポリプロピレングリコール 1質量部、増粘剤 0.06質量部、フェノキシエタノール 0.2質量部、エタノール 5質量部、水酸化ナトリウム 0.01質量部及び精製水 残部を混合して、乳液の態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation example 4: emulsion)
The total weight is 100 parts by weight, with 0.05 parts by weight of extract, 0.001 parts by weight of N-acetylglucosamine, 3 parts by weight of sucrose fatty acid ester, 12 parts by weight of glycerin, 6 parts by weight of squalane, 24 parts by weight of dimethyl silicone oil , 1 part by weight of polypropylene glycol, 0.06 part by weight of thickener, 0.2 part by weight of phenoxyethanol, 5 parts by weight of ethanol, 0.01 part by weight of sodium hydroxide, and the balance of purified water are mixed in the form of an emulsion. Inventive compositions were prepared.

(配合例5:化粧用クリーム)
全体を100質量部として、黒生姜抽出物 0.03質量部、N−アセチルグルコサミン 0.1質量部、スクワラン 15.0質量部、ミリスチン酸オクチルドデシル 4.0質量部、水素添加大豆リン脂質 0.2質量部、ブチルアルコール 2.4質量部、硬化油 1.5質量部、ステアリン酸 1.5質量部、親油型モノステアリン酸グリセリン 1.5質量部、モノステアリン酸ポリグリセリル 0.5質量部、ベヘニルアルコール 0.8質量部、モノミリスチン酸ポリグリセリル 0.7質量部、サラシミツロウ 0.3質量部、d−δ−トコフェロール 0.1質量部、メチルパラベン 0.3質量部、C10〜30アルキル変性カルボキシビニルポリマー 0.2質量部、カルボキシビニルポリマー 0.1質量部、1,3−ブタンジオール 18.0質量部、水酸化ナトリウム 0.1質量部及び精製水 残部を混合して、化粧用クリームの態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation Example 5: Cosmetic cream)
100 parts by weight as a whole, black ginger extract 0.03 parts by weight, N-acetylglucosamine 0.1 part by weight, squalane 15.0 parts by weight, octyldodecyl myristate 4.0 parts by weight, hydrogenated soybean phospholipid 0 0.2 parts by mass, butyl alcohol 2.4 parts by mass, hardened oil 1.5 parts by mass, stearic acid 1.5 parts by mass, lipophilic glyceryl monostearate 1.5 parts by mass, polyglyceryl monostearate 0.5 parts by mass Part, 0.8 parts by weight of behenyl alcohol, 0.7 parts by weight of polyglyceryl monomyristate, 0.3 parts by weight of beeswax wax, 0.1 parts by weight of d-δ-tocopherol, 0.3 parts by weight of methylparaben, C10-30 alkyl modified Carboxyvinyl polymer 0.2 parts by mass, Carboxyvinyl polymer 0.1 parts by mass, 1,3-butanediol 18 0 parts by weight 0.1 parts by weight of sodium hydroxide and a mixture of purified water balance, the composition of the present invention was prepared in the manner of cosmetic creams.

(配合例6:パック剤)
全体を100質量部として、オオイタドリエキス 0.1質量部、N−アセチルグルコサミン 0.01質量部、ポリビニルアルコール 20.0質量部、グリセリン 5.0質量部、エタノール 20.0質量部、カオリン 6.0質量部、防腐剤 0.2質量部、香料 0.1質量部及び精製水 残部を混合して、パック剤の態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation Example 6: Packing agent)
5. 100 parts by weight of the whole, 0.1 parts by weight of the giant redbird extract, 0.01 parts by weight of N-acetylglucosamine, 20.0 parts by weight of polyvinyl alcohol, 5.0 parts by weight of glycerol, 20.0 parts by weight of ethanol, kaolin The composition of the present invention was prepared in the form of a pack agent by mixing 0 part by mass, 0.2 part by mass of a preservative, 0.1 part by mass of a fragrance, and the remainder of purified water.

(配合例7:錠剤)
全体を100質量部として、黒生姜粉末 5質量部、N−アセチルグルコサミン 10質量部、ビタミンB1 5質量部、ビタミンB6 12質量部、ステアリン酸カルシウム 4質量部、麦芽糖 30質量部及びヒドロキシプロピルセルロース 残部を混合及び打錠することにより、錠剤の態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation Example 7: Tablet)
The whole is 100 parts by weight, black ginger powder 5 parts by weight, N-acetylglucosamine 10 parts by weight, vitamin B 1 5 parts by weight, vitamin B 6 12 parts by weight, calcium stearate 4 parts by weight, maltose 30 parts by weight and hydroxypropyl cellulose The composition of the present invention was prepared in the form of a tablet by mixing and tableting the remainder.

(配合例8:顆粒剤)
全体を100質量部として、松樹皮抽出物 5質量部、オオイタドリエキス末 8質量部、N−アセチルグルコサミン 5質量部、黒生姜抽出物5質量部、乳糖 10質量部、ステアリン酸カルシウム 1質量部及び結晶セルロース 残部を混合及び顆粒化することにより、顆粒剤の態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation Example 8: Granules)
Based on 100 parts by weight as a whole, 5 parts by weight of pine bark extract, 8 parts by weight of powdered extract, 5 parts by weight of N-acetylglucosamine, 5 parts by weight of black ginger extract, 10 parts by weight of lactose, 1 part by weight of calcium stearate and crystals The composition of the present invention was prepared in the form of granules by mixing and granulating the cellulose residue.

(配合例9:カプセル剤)
全体を100質量部として、オオイタドリエキス 10質量部、N−アセチルグルコサミン 10質量部、黒生姜抽出物 10質量部、レシチン 8質量部及びオリーブ油 残部を混合して調製したものを内容液として、これをカプセル殻に内包することにより、カプセル剤の態様で本発明の組成物を調製した。
(Formulation example 9: capsule)
100 parts by weight as a whole, 10 parts by weight of a giant redbird extract, 10 parts by weight of N-acetylglucosamine, 10 parts by weight of black ginger extract, 8 parts by weight of lecithin and the rest of olive oil The composition of the present invention was prepared in the form of a capsule by encapsulating in a capsule shell.

(配合例10:液剤)全体を100質量部として、松樹皮抽出物 1質量部、N−アセチルグルコサミン 1質量部、ビタミンB1 1質量部、果糖ブドウ糖液糖 10質量部、クエン酸 1質量部、
安息香酸ナトリウム 0.02質量部、香料製剤 2質量部、スクラロース 0.05質量部、アセスルファムカリウム 0.03質量部、及び精製水 残部を混合して、液剤の態様で本発明の組成物を調製した。
(Composition example 10: Liquid preparation) 100 parts by weight of the whole, 1 part by weight of pine bark extract, 1 part by weight of N-acetylglucosamine, 1 part by weight of vitamin B 1, 10 parts by weight of fructose glucose liquid sugar, 1 part by weight of citric acid ,
Sodium benzoate 0.02 parts by mass, flavor preparation 2 parts by mass, sucralose 0.05 part by mass, acesulfame potassium 0.03 part by mass, and purified water balance are prepared to prepare the composition of the present invention in the form of a liquid agent did.

Claims (2)

グルコサミン類と、プロアントシアニジン含有植物及びジメトキシフラボン含有植物から選ばれる一種又は二種以上の植物とを含有する関節軟骨の保護用又は維持用組成物。   A composition for protecting or maintaining articular cartilage, comprising glucosamines and one or more plants selected from a plant containing proanthocyanidins and a plant containing dimethoxyflavone. グルコサミン類と、プロアントシアニジン含有植物及びジメトキシフラボン含有植物から選ばれる一種又は二種以上の植物とを含有する美容組成物。   A cosmetic composition comprising glucosamines and one or more plants selected from proanthocyanidin-containing plants and dimethoxyflavone-containing plants.
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