JP2019115337A - Extraction method of nucleic acid and extraction cassette thereof - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2017年12月26日に出願された米国特許仮出願番号第62/610444号からの優先権を主張するものであり、これらの全ては引用によって本願に援用される。 This application claims priority from US Provisional Patent Application No. 62/610444, filed December 26, 2017, all of which are incorporated herein by reference.
本出願は、一部継続出願であり、2016年2月8日に出願された継続中の米国特許出願番号第15/018067号「Nucleic acid extracting device」からの優先権を主張するものである。 This application is a continuation-in-part and claims priority from copending US patent application Ser. No. 15/018067, filed on Feb. 8, 2016, "Nucleic acid extracting device".
本出願は、2018年12月14日に出願された中国特許出願番号第201811532891X号についての優先権を主張するものであり、これらの全ては引用によって本願に援用される。 This application claims priority to Chinese Patent Application No. 201811322891X, filed December 14, 2018, all of which are incorporated herein by reference.
本発明は、抽出カセットに関するものであり、特に、液体受容モジュールを有する抽出カセットに関するものである。 The present invention relates to an extraction cassette, in particular to an extraction cassette having a liquid receiving module.
従来の液体受容モジュールでは、サンプル室(compartment)は通常、圧力源に連結された圧力供給口を有する。サンプル室内の液体の移動は、圧力供給口を介して供給された圧力によって制御されることができる。しかしながら、サンプルはしばしばウイルス、バクテリアまたは他の汚染物質を含み、その汚染物質は、圧力供給口を介して分析装置または外部環境に移動することがある。このような汚染物質は不正確なテスト結果を招くだけでなく、オペレータの健康に危険をもたらすことがある。 In conventional liquid receiving modules, the sample compartment usually has a pressure supply port connected to a pressure source. The movement of liquid in the sample chamber can be controlled by the pressure supplied via the pressure supply port. However, the sample often contains viruses, bacteria or other contaminants, which may be transferred to the analyzer or the external environment via a pressure supply. Such contaminants not only lead to inaccurate test results, but may also pose a health hazard to the operator.
一実施形態では、抽出カセットが提供される。抽出カセットは、抽出モジュールおよび液体受容モジュールを含む。液体受容モジュールは、抽出モジュールと連通する。液体受容モジュールは、受容モジュール本体、サンプル室、封止部材、アルコール室、および第1の経路を含む。受容モジュール本体は、第1の側部、第2の側部、およびサンプル供給口を含み、第1の側部は第2の側部の反対側にあり、サンプル供給口は、第1の側部に形成される。サンプル室は、受容モジュール本体に形成され、サンプル室はサンプル供給口と連通し、サンプル室は、第1のサンプル室連結口および第2のサンプル室連結口を含み、第1のサンプル室連結口は、第2の側部に対して第1の側部に近い。封止部材は、サンプル供給口を封止するように構成される。アルコール室は、受容モジュール本体に形成される。アルコール室は、第1の経路を介して第1のサンプル室の第1のサンプル室連結口と連通し、第1の経路の少なくとも一部はアルコール室と第2の側部との間に配置される。 In one embodiment, an extraction cassette is provided. The extraction cassette comprises an extraction module and a liquid receiving module. A liquid receiving module is in communication with the extraction module. The liquid receiving module includes a receiving module body, a sample chamber, a sealing member, an alcohol chamber, and a first path. The receiving module body includes a first side, a second side, and a sample supply port, the first side is opposite the second side, and the sample supply port is on the first side. It is formed in the part. The sample chamber is formed in the receiving module body, the sample chamber communicates with the sample supply port, and the sample chamber includes a first sample chamber connection port and a second sample chamber connection port, and the first sample chamber connection port Are closer to the first side with respect to the second side. The sealing member is configured to seal the sample supply port. An alcohol chamber is formed in the receiving module body. The alcohol chamber is in communication with the first sample chamber connection port of the first sample chamber via the first passage, and at least a portion of the first passage is disposed between the alcohol chamber and the second side. Be done.
一実施形態では、アルコール室は、アルコール室連結口を含み、アルコール室連結口は、第1の側部に対して第2の側部に近く、第1の経路は、アルコール室連結口と第1のサンプル室連結口を連結する。 In one embodiment, the alcohol chamber includes an alcohol chamber connection, the alcohol chamber connection is closer to the second side with respect to the first side, and the first path is the alcohol chamber connection and the first passage. Connect the 1 sample chamber connection port.
一実施形態では、液体受容モジュールは、第1の混合室および第2の経路を更に含み、第1の混合室は、受容モジュール本体に形成され、第2のサンプル室連結口は、第1の側部に対して第2の側部に近く、第2の経路は、第2のサンプル室連結口と第1の混合室を連結する。 In one embodiment, the liquid receiving module further comprises a first mixing chamber and a second passage, wherein the first mixing chamber is formed in the receiving module body and the second sample chamber connection is a first Close to the second side with respect to the side, a second path connects the second sample chamber connection and the first mixing chamber.
一実施形態では、液体受容モジュールは、第2の混合室、第3の経路、および第4の経路を更に含み、第2の混合室は、受容モジュール本体に形成され、第3の経路は、第1の混合室と第2の混合室を連結し、第4の経路は、第2の混合室と抽出モジュールを連結し、第4の経路は、第4の経路出口を含み、第4の経路出口は、第1の混合室および第2の混合室に対して第2の側部に近い。 In one embodiment, the liquid receiving module further comprises a second mixing chamber, a third path, and a fourth path, wherein the second mixing chamber is formed in the receiving module body, and the third path is A first mixing chamber and a second mixing chamber are connected, a fourth path connects the second mixing chamber and the extraction module, and a fourth path includes a fourth path outlet, and a fourth path includes a fourth path outlet. The path outlet is close to the second side with respect to the first mixing chamber and the second mixing chamber.
一実施形態では、液体受容モジュールは、第1の洗剤室、第2の洗剤室、第5の経路、および第6の経路を更に含み、第1の洗剤室および第2の洗剤室は、受容モジュール本体に形成され、第5の経路は、第1の洗剤室と第1の混合室を連結し、第6の経路は、第2の洗剤室と第1の混合室を連結する。 In one embodiment, the liquid receiving module further comprises a first detergent chamber, a second detergent chamber, a fifth passage, and a sixth passage, and the first and second detergent chambers receive A fifth channel connects the first detergent chamber and the first mixing chamber, and a sixth channel connects the second detergent chamber and the first mixing chamber.
一実施形態では、液体受容モジュールは、溶離液室および第7の経路を更に含み、溶離液室は受容モジュール本体に形成され、第7の経路は溶離液室と抽出モジュールを連結する。 In one embodiment, the liquid receiving module further comprises an eluent chamber and a seventh channel, wherein the eluent chamber is formed in the receiving module body, and the seventh channel connects the eluent chamber and the extraction module.
一実施形態では、核酸の抽出方法が提供される。核酸の抽出方法は、以下のステップを含む。まず、抽出カセットが提供され、抽出カセットは、抽出モジュールおよび液体受容モジュールを含み、抽出モジュールは、液体受容モジュールと連通し、液体受容モジュールは、サンプル室、アルコール室、第1の混合室、第2の混合室、第1の洗剤室、第2の洗剤室、および溶離液室を含む。次いで、アルコールがアルコール室内に充填され、第1の洗剤が第1の洗剤室内に充填され、第2の洗剤が第2の洗剤室内に充填され、且つ溶離液が溶離液室内に充填される。次に、サンプルがサンプル室内に充填される。次いで、サンプル室内のサンプルが加熱される。 In one embodiment, a method of extracting nucleic acid is provided. The nucleic acid extraction method comprises the following steps. First, an extraction cassette is provided, the extraction cassette comprising an extraction module and a liquid receiving module, the extraction module in communication with the liquid receiving module, the liquid receiving module comprising a sample chamber, an alcohol chamber, a first mixing chamber, a first 2 mixing chamber, first detergent chamber, second detergent chamber, and eluent chamber. The alcohol is then filled into the alcohol chamber, the first detergent into the first detergent chamber, the second detergent into the second detergent chamber, and the eluent into the eluent chamber. The sample is then loaded into the sample chamber. The sample in the sample chamber is then heated.
一実施形態では、前記方法は、アルコールをアルコール室からサンプル室に移動させ、サンプルとアルコールを混ぜて混合液とする。 In one embodiment, the method moves the alcohol from the alcohol chamber to the sample chamber and mixes the sample with the alcohol to form a mixture.
一実施形態では、前記方法は、以下のステップを更に含む。まず、混合液が第1の混合室内に移動される。次いで、混合液が第1の混合室と第2の混合室との間で繰り返し移動され、サンプルとアルコールを混合させる。 In one embodiment, the method further comprises the following steps. First, the mixture is moved into the first mixing chamber. The mixture is then repeatedly moved between the first and second mixing chambers to mix the sample and the alcohol.
一実施形態では、前記方法は、以下のステップを更に含む。まず、混合液が抽出モジュール内に移動され、核酸が抽出モジュールによって混合液から取得される。次いで、混合液が抽出モジュールの第1の廃液室内に移動される。 In one embodiment, the method further comprises the following steps. First, the mixture is moved into the extraction module and nucleic acids are obtained from the mixture by the extraction module. The mixture is then moved into the first waste chamber of the extraction module.
一実施形態では、前記方法は以下のステップを更に含む。まず、第1の洗剤が第1の洗剤室から第1の混合室および第2の混合室に順に移動され、第1の混合室および第2の混合室を洗浄する。次いで、第1の洗剤は、抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する。次に、第1の洗剤は、抽出モジュールの第1の廃液室に移動される。 In one embodiment, the method further comprises the following steps. First, the first detergent is sequentially moved from the first detergent chamber to the first mixing chamber and the second mixing chamber to wash the first mixing chamber and the second mixing chamber. The first detergent is then transferred to the extraction module to wash the extraction module. The first detergent is then transferred to the first waste chamber of the extraction module.
一実施形態では、前記方法は以下のステップを更に含む。まず、第2の洗剤が第2の洗剤室から第1の混合室および第2の混合室に順に移動され、第1の混合室および第2の混合室を洗浄する。次いで、第2の洗剤は、抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する。次に、第2の洗剤の少なくとも一部が抽出モジュールの第2の廃液室に移動される。 In one embodiment, the method further comprises the following steps. First, the second detergent is sequentially moved from the second detergent chamber to the first mixing chamber and the second mixing chamber to wash the first mixing chamber and the second mixing chamber. The second detergent is then transferred to the extraction module to wash the extraction module. Next, at least a portion of the second detergent is transferred to the second drainage chamber of the extraction module.
一実施形態では、前記方法は、溶離液を溶離液室から抽出モジュールに移動させ、抽出モジュールから核酸を取り出すステップを更に含む。 In one embodiment, the method further comprises moving the eluent from the eluent chamber to the extraction module and removing the nucleic acid from the extraction module.
本発明の実施形態の抽出カセットを用いて、サンプル室のサンプル供給口は封止部材によって封止される。サンプル室内の混合液は、アルコール室に加えられた圧力によって第1の混合室に移動される。従って、サンプル室内のサンプルのウイルス、細菌、その他の汚染物質が液体受容モジュールから漏れるのを防止することができる。サンプルの汚染物質が第1のサンプル室連結口(サンプル室の上方)および第1の経路を介してアルコール室に入ったとしても、汚染物質はアルコール室によって消毒され、汚染が起こることはない。本発明の実施形態の抽出カセットは、サンプルによって汚染される領域を分析装置の内部または周囲の環境に制限し、分析結果の精度を向上させ、オペレータの健康を保護することができる。 Using the extraction cassette of the embodiment of the present invention, the sample supply port of the sample chamber is sealed by the sealing member. The mixture in the sample chamber is transferred to the first mixing chamber by the pressure applied to the alcohol chamber. Thus, virus, bacteria and other contaminants of the sample in the sample chamber can be prevented from leaking out of the liquid receiving module. Even if the sample contaminants enter the alcohol chamber via the first sample chamber connection (above the sample chamber) and the first path, the contaminants are disinfected by the alcohol chamber and no contamination occurs. The extraction cassette of embodiments of the present invention can limit the area contaminated by the sample to the environment inside or around the analyzer, improve the accuracy of the analysis results, and protect the health of the operator.
詳細な説明は、添付の図面と併せて以下の実施形態で説明する。 The detailed description is described in the following embodiments in conjunction with the accompanying drawings.
添付の図面とともに以下の本発明の様々な実施形態の詳細な説明を検討することで、本発明はより完全に理解できる。 The invention may be more completely understood in consideration of the following detailed description of various embodiments of the invention in connection with the accompanying drawings, in which: FIG.
以下の説明では、本発明を実施するベストモードを開示している。この説明は、本発明の一般原理を例示する目的のものであり、本発明を限定するものではない(本発明の範囲は、添付の請求の範囲を参考にして決定される)。 The following description discloses the best mode of carrying out the present invention. This description is for the purpose of illustrating the general principles of the present invention, and is not intended to limit the present invention (the scope of the present invention is determined with reference to the appended claims).
図1Aは、本発明の一実施形態の抽出カセットCの組立図である。図1Bは、本発明の実施形態の抽出カセットCの分解図である。図1Aおよび図1Bに示すように、抽出カセットCは、抽出モジュール1、液体受容モジュール2、サンプリングモジュール3、および連結モジュール4を含む。抽出カセットCは分析装置内に配置されるように構成されている。分析装置は、第1の圧力供給モジュール、分析モジュール、および第2の圧力供給モジュールを含む。第1の圧力供給モジュールおよび第2の圧力供給モジュールは、抽出カセットCに向かって圧力を加え、抽出カセットC内の液体の移動を制御する。分析モジュールは抽出カセットCを加熱および冷却し、抽出カセットC内のサンプルを分析する。
FIG. 1A is an assembled view of the extraction cassette C of one embodiment of the present invention. FIG. 1B is an exploded view of the extraction cassette C according to an embodiment of the present invention. As shown in FIGS. 1A and 1B, the extraction cassette C includes an
図1Bに示すように、液体受容モジュール2は、連結モジュール4を介して抽出モジュール1と連通する。液体受容モジュール2の室は、連結モジュール4を介して互いに連通する。図2Aは液体受容モジュール2の詳細図である。図2Aに示すように、液体受容モジュール2は、受容モジュール本体29、サンプル室21、封止部材211、アルコール室22、および第1の経路221を含む。受容モジュール本体29は、第1の側部291、第2の側部292、およびサンプル供給口212を含む。第1の側部291は第2の側部292の反対側にある。サンプル供給口212は、第1の側部291に形成される。サンプル室21は、受容モジュール本体29に形成される。サンプル室21はサンプル供給口212と連通する。サンプル室21は、第1のサンプル室連結口213および第2のサンプル室連結口214を含む。第1のサンプル室連結口213は、第2の側部292に対して第1の側部291に近い。封止部材211は、サンプル供給口212を封止するように構成される。アルコール室22は、受容モジュール本体29に形成される。アルコール室22は、第1の経路221を介して第1のサンプル室21の第1のサンプル室連結口213と連通する。一実施形態では、第1の経路221の少なくとも一部はアルコール室22と第2の側部292との間に配置される。
As shown in FIG. 1B, the
図2Aに示すように、一実施形態では、アルコール室22は、アルコール室連結口222を含む。アルコール室連結口222は、第1の側部291に対して第2の側部292に近い。第1の経路221は、アルコール室連結口222と第1のサンプル室連結口213を連結する。
As shown in FIG. 2A, in one embodiment, the
図2Aに示すように、一実施形態では、液体受容モジュール2は、第1の混合室23および第2の経路231を更に含む。第1の混合室23は、受容モジュール本体29に形成される。第2のサンプル室連結口214は、第1の側部291に対して第2の側部292に近い。第2の経路231は、第2のサンプル室連結口214と第1の混合室23を連結する。
As shown in FIG. 2A, in one embodiment, the
図2Aおよび図2Bに示すように、一実施形態では、液体受容モジュール2は、第2の混合室24、第3の経路241、および第4の経路242を更に含む。第2の混合室24は、受容モジュール本体29に形成される。第3の経路241は、第1の混合室23と第2の混合室24を連結する。第4の経路242は、第2の混合室24と抽出モジュール1を連結する。一実施形態では、第3の経路241は、第1の混合室23と第2の混合室24の底部を連結する。
As shown in FIGS. 2A and 2B, in one embodiment, the
図2Aに示すように、一実施形態では、液体受容モジュール2は、第1の洗剤室25、第2の洗剤室26、第5の経路251、および第6の経路261を更に含む。第1の洗剤室25および第2の洗剤室26は、受容モジュール本体29に形成される。第5の経路251は、第1の洗剤室25と第1の混合室23を連結する。第6の経路261は、第2の洗剤室26と第1の混合室23を連結する。
As shown in FIG. 2A, in one embodiment, the
図2Aに示すように、一実施形態では、液体受容モジュールは、溶離液室27および第7の経路271を更に含む。溶離液室27は受容モジュール本体29に形成され、第7の経路271は溶離液室27と抽出モジュール1を連結する。
As shown in FIG. 2A, in one embodiment, the liquid receiving module further includes an
図3A〜図3Iは、本発明の実施形態の液体受容モジュール2の動作を示している。図3Aに示すように、まず、液体受容モジュール2は、アルコール281(アルコール室22内)、第1の洗剤282(第1の洗剤室25内)、第2の洗剤283(第2の洗剤室26内)、および溶離液284(溶離液室27内)の4つの液体を受容する。次いで、図3Bに示すように、サンプル285がサンプル室21内に充填される。抽出カセットCが分析装置の分析モジュール内に配置された後、サンプル室21内のサンプル285の温度は60度(60℃)に上げられる。次に、図3Cに示すように、サンプル室21内のサンプル285の温度が60度(60℃)に上げられた後、アルコール室22からのアルコール281は、サンプル室21へ注入され、サンプル285とアルコール281をサンプル区画21内で混ぜて混合液286とする。次いで、図3Dおよび図3Eに示すように、サンプル285およびアルコール281を含む混合液286は、サンプル室21から第1の混合室23に移動される(図3D)。次いで、混合液286は、第1の混合室23と第2の混合室24間で繰り返し移動されて、サンプル285とアルコール281を混合させる(図3E)。
Figures 3A-3I illustrate the operation of the
一実施形態では、サンプル285およびアルコール281を含む混合液286は、抽出モジュール1内に移動され、核酸が抽出モジュール1によって混合液286から取得される。次いで、混合液286は、抽出モジュール1の第1の廃液室に移動される。
In one embodiment, a
次いで、図3Fおよび図3Gに示すように、第1の洗剤282は、第1の洗剤室25から第1の混合室23と第2の混合室24に徐々に移動され、第1の混合室23および第2の混合室24を洗浄する。次いで、第1の洗剤282は、抽出モジュール1に移動されて抽出モジュール1を洗浄する。次いで、第1の洗剤282は、抽出モジュール1の第1の廃液室に移動される。
Then, as shown in FIGS. 3F and 3G, the
次いで、図3Hおよび図3Iに示すように、第2の洗剤283は、第2の洗剤室26から第1の混合室23と第2の混合室24に徐々に移動され、第1の混合室23および第2の混合室24を洗浄する。次いで、第2の洗剤283は、抽出モジュール1に移動されて抽出モジュール1を洗浄する。次いで、第2の洗剤283の少なくとも一部は、抽出モジュール1の第2の廃液室に移動される。
Then, as shown in FIG. 3H and FIG. 3I, the
最後に、溶離液284は、溶離液室27から抽出モジュール1に移動され、抽出モジュール1から核酸を取り出す。次いで、核酸を含む溶離液284は、サンプリングモジュール3に移動され、定量的にサンプリングされる。
Finally, the
図2Aおよび図3Bに示すように、本発明の実施形態の抽出カセットを用いて、サンプル室21のサンプル供給口212は封止部材211によって封止される。サンプル室21内の混合液286は、アルコール室22に加えられた圧力によって第1の混合室23に移動される。従って、サンプル室21内のサンプル285のウイルス、細菌、その他の汚染物質が液体受容モジュールから漏れるのを防止することができる。サンプル285の汚染物質が第1のサンプル室連結口(サンプル室21の上方)および第1の経路221を介してアルコール室22に入ったとしても、汚染物質はアルコール室22によって消毒され、汚染が起こることはない。本発明の実施形態の抽出カセットは、サンプル285によって汚染される領域を分析装置の内部または周囲の環境に制限し、分析結果の精度を向上させ、オペレータの健康を保護することができる。
As shown in FIGS. 2A and 3B, the
図2A、図3D、および図3Eに示すように、本発明の実施形態の抽出カセットを用いており、混合液286は、第3の経路241を介して第1の混合室23と第2の混合室24との間を前後に移動することができる。混合液286は十分に混合されることで、混合液286を十分に混合する効果を最小限のスペースで達成することができる。一実施形態では、第4の経路242は、第1の混合室23および第2の混合室24の上端よりも高い第4の経路出口242Aを有する。第4の経路出口242Aは、混合液286の液面よりも高い。従って、混合液286が意図せずに第4の経路出口242Aを通って抽出モジュール1に入るのを防止することができる。
As shown in FIGS. 2A, 3D, and 3E, using the extraction cassette of the embodiment of the present invention, the
図2Aに示されるように、液体受容モジュール2は、封止部材211を除いて一体的に形成され得る。
As shown in FIG. 2A, the
図4A〜図4Cは、本発明の実施形態の核酸の抽出方法を示している。図4Aに示されるように、本発明の核酸の抽出方法は、以下のステップを含む。まず、抽出カセットが提供され、抽出カセットは液体受容モジュールおよび抽出モジュールを含み、抽出モジュールは液体受容モジュールと連通し、液体受容モジュールは、サンプル室、アルコール室、第1の混合室、第2の混合室、第1の洗剤室、第2の洗剤室、および溶離液室を含む(S11)。次いで、アルコールがアルコール室内に充填され、第1の洗剤が第1の洗剤室内に充填され、第2の洗剤が第2の洗剤室内に充填され、且つ溶離液が溶離液室内に充填される(S12)。次に、サンプルがサンプル室内に充填される(S13)。次いで、サンプル室内のサンプルが加熱される(S14)。 4A-4C illustrate a method of extracting nucleic acid according to an embodiment of the present invention. As shown in FIG. 4A, the nucleic acid extraction method of the present invention comprises the following steps. First, an extraction cassette is provided, the extraction cassette comprising a liquid receiving module and an extraction module, the extraction module in communication with the liquid receiving module, the liquid receiving module comprising a sample chamber, an alcohol chamber, a first mixing chamber, a second The mixing chamber, the first detergent chamber, the second detergent chamber, and the eluent chamber (S11). Then, the alcohol is filled into the alcohol chamber, the first detergent into the first detergent chamber, the second detergent into the second detergent chamber, and the eluent into the eluent chamber ( S12). Next, the sample is filled into the sample chamber (S13). Next, the sample in the sample chamber is heated (S14).
図4Bに示されるように、一実施形態では、この方法は以下のステップを更に含む。アルコールがアルコール室からサンプル室に移動され、サンプルとアルコールを混ぜて混合液とする(S15)。次に、混合液が第1の混合室内に移動され、次いで混合液が第1の混合室と第2の混合室との間で繰り返し移動され、サンプルとアルコールを混合させる(S16)。次に、混合液が抽出モジュール内に移動され、核酸が抽出モジュールによって混合液から取得される(S17)。次いで、混合液が抽出モジュールの第1の廃液室内に移動される(S18)。 As shown in FIG. 4B, in one embodiment, the method further comprises the following steps. Alcohol is transferred from the alcohol chamber to the sample chamber, and the sample and alcohol are mixed to form a mixture (S15). Next, the mixed solution is moved into the first mixing chamber, and then the mixed solution is repeatedly moved between the first mixing chamber and the second mixing chamber to mix the sample and the alcohol (S16). Next, the mixed solution is moved into the extraction module, and the nucleic acid is obtained from the mixed solution by the extraction module (S17). The mixture is then moved into the first waste chamber of the extraction module (S18).
図4Cに示されるように、一実施形態では、この方法は以下のステップを更に含む。第1の洗剤が第1の洗剤室から第1の混合室および第2の混合室に順に移動され、第1の混合室および第2の混合室を洗浄する(S21)。次いで、第1の洗剤が抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する(S22)。次に、第1の洗剤が抽出モジュールの第1の廃液室に移動される(S23)。次に、第2の洗剤が第2の洗剤室から第1の混合室および第2の混合室に順に移動され、第1の混合室および第2の混合室を洗浄する(S24)。次に、第2の洗剤が抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する(S25)。次に、第2の洗剤の少なくとも一部が抽出モジュールの第2の廃液室に移動される(S26)。次いで、溶離液が溶離液室から抽出モジュールに移動され、抽出モジュールから核酸を取り出す(S27)。 As shown in FIG. 4C, in one embodiment, the method further comprises the following steps. The first detergent is sequentially moved from the first detergent chamber to the first mixing chamber and the second mixing chamber to wash the first mixing chamber and the second mixing chamber (S21). Next, the first detergent is transferred to the extraction module to wash the extraction module (S22). Next, the first detergent is moved to the first waste chamber of the extraction module (S23). Next, the second detergent is sequentially moved from the second detergent chamber to the first mixing chamber and the second mixing chamber to wash the first mixing chamber and the second mixing chamber (S24). Next, the second detergent is transferred to the extraction module to wash the extraction module (S25). Next, at least a portion of the second detergent is moved to the second waste chamber of the extraction module (S26). Next, the eluent is moved from the eluent chamber to the extraction module, and the nucleic acid is removed from the extraction module (S27).
1つの実験において、出願人は、高濃度の核酸(Mhプラスミド:106コピー/mL、CytBプラスミド)を含有する口腔細胞保存液を被試験の陽性サンプルとして用い、核酸を含有しない口腔細胞保存液を被試験の陰性サンプルとして用い、陽性サンプルと陰性サンプルの交互テストを行う。陽性サンプルのテスト結果の後の陰性サンプルのテスト結果は、核酸が検出されないことを確認することが望ましい。本発明の実施形態の抽出カセットが交差汚染を効果的に防止できることが実験的に検証された。 In one experiment, the applicant uses an oral cell preservation solution containing high concentration of nucleic acid (Mh plasmid: 106 copies / mL, CytB plasmid) as a positive sample for the test, and no oral cell preservation solution containing no nucleic acid. Perform alternate testing of positive and negative samples, used as negative samples for testing. Test results for negative samples after test results for positive samples are desirable to confirm that no nucleic acid is detected. It has been experimentally verified that the extraction cassette of the embodiments of the present invention can effectively prevent cross contamination.
テスト1: 高濃度の陽性サンプルと陰性サンプルを交互に4回試験する(試験順序:陽性→陰性→陽性→陰性)
結果:陰性サンプル内に核酸は検出されなかった。
Test 1: High concentration positive and negative samples are alternately tested 4 times (test order: positive → negative → positive → negative)
Result: No nucleic acid was detected in the negative sample.
テスト2: 5回の高濃度の陽性サンプルテスト後の陰性サンプルテスト(試験順序:陽性→陽性→陽性→陽性→陰性)
結果:陰性サンプル内に核酸は検出されなかった。
Test 2: Negative sample test after five high concentration positive sample tests (test order: positive → positive → positive → positive → negative)
Result: No nucleic acid was detected in the negative sample.
クレーム要素を変えるための、請求項における「第1の」、「第2の」、「第3の」等の序数詞の使用は、それ自体が、1つのクレーム要素を他のクレーム要素と比較して優先度、序列、又は順序、もしくは方法を実施する行為の時間的順序を示唆するものではなく、特定の名前を有する1つのクレーム要素を同じ名前を有する他の要素から区別するためのラベルとして(だけ、序数詞を)使用している。 The use of ordinals such as "first", "second", "third" etc. in a claim to change the claim element itself compares one claim element with another claim element Does not imply a priority, an order, or an order, or a temporal order of acts of implementing the method, but as a label to distinguish one claim element having a particular name from other elements having the same name. (Only use the ordinal).
本発明は、例として及び望ましい実施の形態によって記述されているが、本発明は開示された実施形態に限定されるものではない。逆に、当業者には自明の種々の変更及び同様の配置をカバーするものである。よって、添付の特許請求の範囲は、最も広義な解釈が与えられ、全てのこのような変更及び同様の配置を含むべきである。 While the invention has been described by way of example and in terms of the preferred embodiments, the invention is not limited to the disclosed embodiments. To the contrary, it is intended to cover various modifications and similar arrangements obvious to those skilled in the art. Thus, the appended claims should be accorded the broadest interpretation and should encompass all such modifications and similar arrangements.
Claims (13)
前記抽出モジュールと連通する液体受容モジュールとを含む抽出カセットであって、前記液体受容モジュールは、
第1の側部、第2の側部、およびサンプル供給口を含み、前記第1の側部は前記第2の側部の反対側にあり、前記サンプル供給口は、前記第1の側部に形成される受容モジュール本体、
前記受容モジュール本体に形成されたサンプル室であって、前記サンプル室は前記サンプル供給口と連通し、前記サンプル室は、第1のサンプル室連結口および第2のサンプル室連結口を含み、前記第1のサンプル室連結口は、前記第2の側部に対して前記第1の側部に近いサンプル室、
前記サンプル供給口を封止するように構成された封止部材、
前記受容モジュール本体に形成されたアルコール室、および
前記アルコール室と前記第1のサンプル室の前記第1のサンプル室連結口を連通する第1の経路であって、前記第1の経路の少なくとも一部は前記アルコール室と前記第2の側部との間に配置される第1の経路
を含む抽出カセット。 An extraction module,
An extraction cassette including a liquid receiving module in communication with the extraction module, the liquid receiving module comprising:
A first side, a second side, and a sample supply port, wherein the first side is opposite the second side, and the sample supply port is the first side. Receiving module body formed in
A sample chamber formed in the receiving module body, wherein the sample chamber is in communication with the sample supply port, and the sample chamber includes a first sample chamber connection port and a second sample chamber connection port. The first sample chamber connection port is a sample chamber closer to the first side with respect to the second side,
A sealing member configured to seal the sample supply port;
An alcohol chamber formed in the receiving module body, and a first path communicating the alcohol chamber and the first sample chamber connection port of the first sample chamber, the at least one of the first paths being connected An extraction cassette comprising: a first path disposed between the alcohol chamber and the second side.
前記第1の混合室は、前記受容モジュール本体に形成され、前記第2のサンプル室連結口は、前記第1の側部に対して前記第2の側部に近く、前記第2の経路は、前記第2のサンプル室連結口と前記第1の混合室を連結する請求項2に記載の抽出カセット。 The liquid receiving module further comprises a first mixing chamber and a second passage,
The first mixing chamber is formed in the receiving module body, the second sample chamber connection port is closer to the second side with respect to the first side, and the second path is The extraction cassette according to claim 2, wherein the second sample chamber connection port and the first mixing chamber are connected.
液体受容モジュールおよび抽出モジュールを含む抽出カセットであって、前記抽出モジュールは、前記液体受容モジュールと連通し、前記液体受容モジュールは、サンプル室、アルコール室、第1の混合室、第2の混合室、第1の洗剤室、第2の洗剤室、および溶離液室を含む抽出カセットを提供するステップ、
アルコールを前記アルコール室内に充填し、第1の洗剤を前記第1の洗剤室内に充填し、第2の洗剤を前記第2の洗剤室内に充填し、且つ溶離液を前記溶離液室内に充填するステップ、
サンプルを前記サンプル室内に充填するステップ、および
前記サンプル室内の前記サンプルを加熱するステップ
を含む方法。 A method of extracting nucleic acid, wherein
An extraction cassette comprising a liquid receiving module and an extraction module, the extraction module in communication with the liquid receiving module, the liquid receiving module comprising a sample chamber, an alcohol chamber, a first mixing chamber, a second mixing chamber Providing an extraction cassette comprising a first detergent compartment, a second detergent compartment and an eluent compartment,
Alcohol is filled into the alcohol chamber, a first detergent is filled into the first detergent chamber, a second detergent is filled into the second detergent chamber, and an eluent is filled into the eluent chamber. Step,
Filling the sample into the sample chamber, and heating the sample in the sample chamber.
前記混合液を前記第1の混合室と前記第2の混合室との間で繰り返し移動させ、前記サンプルと前記アルコールを混合させるステップを更に含む請求項8に記載の方法。 Moving the mixture into the first mixing chamber, and repeatedly moving the mixture between the first mixing chamber and the second mixing chamber to mix the sample and the alcohol. The method of claim 8, further comprising
前記混合液を前記抽出モジュールの第1の廃液室内に移動させるステップを更に含む請求項9に記載の方法。 Moving the mixed solution into the extraction module, wherein the nucleic acid is obtained from the mixed solution by the extraction module, and moving the mixed solution into a first waste chamber of the extraction module. 10. A method according to item 9.
前記第1の洗剤を前記抽出モジュールに移動させ、前記抽出モジュールを洗浄するステップ、および
前記第1の洗剤を前記抽出モジュールの前記第1の廃液室に移動させるステップを更に含む請求項10に記載の方法。 Moving the first detergent sequentially from the first detergent chamber to the first mixing chamber and the second mixing chamber to wash the first mixing chamber and the second mixing chamber;
The method according to claim 10, further comprising moving the first detergent to the extraction module, washing the extraction module, and transferring the first detergent to the first waste chamber of the extraction module. the method of.
前記第2の洗剤を前記抽出モジュールに移動させ、前記抽出モジュールを洗浄するステップ、および
前記第2の洗剤の少なくとも一部を前記抽出モジュールの第2の廃液室に移動させるステップを更に含む請求項11に記載の方法。 Moving the second detergent from the second detergent chamber sequentially to the first mixing chamber and the second mixing chamber to wash the first mixing chamber and the second mixing chamber;
Moving the second detergent to the extraction module, washing the extraction module, and transferring at least a portion of the second detergent to a second waste chamber of the extraction module. 11. The method according to 11.
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