JP2019023169A - Composition - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の成分と、消化性オリゴ糖とを含有する組成物に関する。 The present invention relates to a composition containing two or more components selected from processed plant products and sugar alcohols and digestible oligosaccharides.
従来、植物加工物を含む組成物は、健康食品等として知られている(特許文献1)。 Conventionally, compositions containing processed plant products are known as health foods and the like (Patent Document 1).
健康食品等に用いる組成物については、需要者のニーズは近年多様化しており、更なる効果の向上を求める要求、特に健康や美容の観点における更なる効果の向上を求める要求がますます強くなっている。
しかしながら、従来の組成物は、この要求に十分にこたえるものではなかった。
With regard to compositions used for health foods, etc., the needs of consumers have been diversified in recent years, and there is an increasing demand for further improvement of the effect, particularly in terms of health and beauty. ing.
However, conventional compositions have not fully met this requirement.
そこで、本発明者は、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる少なくとも一種を含む組成物について、健康や美容の観点から更なる作用強化が得られる構成について鋭意検討した。その結果、驚くべきことに、消化性オリゴ糖と、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上とを組み合わせることで優れた脂肪細胞における脂肪蓄積抑制効果や筋芽細胞賦活効果を奏し、ダイエットやロコモ症候群の予防や低減において有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。 Then, this inventor earnestly examined about the structure from which a further effect | action reinforcement | strengthening is obtained from a viewpoint of health or beauty about the composition containing at least 1 type chosen from a plant processed material and sugar alcohol. As a result, surprisingly, the combination of digestible oligosaccharides and two or more selected from plant processed products and sugar alcohols has excellent fat accumulation suppressing effect and myoblast activation effect in fat cells, and dieting As a result, the present invention has been completed.
本発明は上記の知見に基づくものであり、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上と、消化性オリゴ糖とを含有する組成物を提供するものである。 This invention is based on said knowledge, and provides the composition containing 2 or more types chosen from plant processed material and sugar alcohol, and digestible oligosaccharide.
本発明によれば、脂肪細胞における脂肪蓄積抑制効果及び筋芽細胞賦活効果に優れた組成物が提供される。また本発明によれば、脂肪細胞における脂肪蓄積抑制や筋芽細胞賦活による、皮下脂肪等の体脂肪の蓄積抑制作用、脂質の分解燃焼等のエネルギー代謝活性の維持又は改善作用、体重低減や上昇抑制作用、容姿のスリム化作用、リバウンドの抑制作用、筋肉増強又は筋肉低減防止作用や筋肉損傷の回復効率の向上作用等が得られるダイエット用組成物及び/又はロコモ症候群の予防用組成物を提供することができる。 ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the composition excellent in the fat accumulation inhibitory effect in a fat cell and a myoblast activation effect is provided. In addition, according to the present invention, by suppressing fat accumulation in fat cells and activating myoblasts, accumulation of body fat such as subcutaneous fat, maintenance or improvement of energy metabolic activity such as lipid decomposition and combustion, weight reduction or increase Providing a composition for diet and / or a composition for preventing locomo syndrome, which has an inhibitory action, slimming action, rebound suppressing action, muscle strengthening or muscle reduction preventing action, and an effect of improving recovery efficiency of muscle damage. can do.
以下、本発明の組成物について、その好ましい実施形態に基づいて説明する。以下、本発明の組成物という場合、「経口用組成物」、「経口剤」、「飲食用組成物」、「飲食用剤」、「飲食品」のいずれにも当てはまり、安全に本発明の効果を得ることができる「ダイエット用組成物」、「筋肉増強用組成物」、「筋肉低減防止用組成物」、「ロコモ症候群の予防及び/又は改善用組成物」、「筋肉増強剤」、「筋肉低減防止剤」、「ロコモ症候群の予防及び/又は改善剤」、「ダイエット用食品」、「筋肉増強用食品」、「筋肉低減防止用食品」、「ロコモ症候群の予防及び/又は改善用食品」のいずれにも当てはまる。 Hereinafter, the composition of this invention is demonstrated based on the preferable embodiment. Hereinafter, when referring to the composition of the present invention, it applies to any of “oral composition”, “oral preparation”, “food composition”, “food composition”, and “food product”, and the present invention is safe. "Composition for diet", "Composition for muscle enhancement", "Composition for preventing muscle reduction", "Composition for prevention and / or improvement of locomo syndrome", "Muscle enhancement agent", “Muscle reduction prevention agent”, “Lomocom syndrome prevention and / or improvement agent”, “Diet food”, “Muscle enhancement food”, “Muscle reduction prevention food”, “Lomocom syndrome prevention and / or improvement It applies to any of “food”.
・消化性オリゴ糖
本発明における消化性オリゴ糖とは、ヒトの消化酵素で分解され、胃や小腸で吸収されてエネルギーになる三糖以上のオリゴ糖である。本発明で使用できる消化性オリゴ糖の構成糖数は三糖以上十糖以下であることが好ましく、三糖以上八糖以下であることがより好ましく、三糖以上六糖以下であることがさらに好ましく、三糖以上四糖以下であることが効果の点から特に好ましい。消化性オリゴ糖としては、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、大豆オリゴ糖等が挙げられ、特に、入手容易性や脂肪細胞における脂肪蓄積抑制や筋芽細胞賦活の効果を高める観点及び製造時のハンドリング性の良さの点から、マルトオリゴ糖が好ましい。マルトオリゴ糖としては、具体的には、マルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース等が挙げられ、特に、マルトトリオースが効果を高める観点から好ましい。
-Digestible oligosaccharide The digestible oligosaccharide in this invention is an oligosaccharide more than the trisaccharide which is decomposed | disassembled by a human digestive enzyme and absorbed in the stomach or small intestine and becomes energy. The number of constituent sugars of the digestible oligosaccharide that can be used in the present invention is preferably from 3 sugars to 10 sugars, more preferably from 3 sugars to 8 sugars, and further preferably from 3 sugars to 6 sugars. It is preferably a trisaccharide or more and a tetrasaccharide or less from the viewpoint of the effect. Examples of digestible oligosaccharides include maltooligosaccharides, isomaltooligosaccharides, soybean oligosaccharides, etc., in particular, the viewpoint of increasing the availability, the effect of suppressing fat accumulation in fat cells and the activation of myoblasts, and handling during production From the viewpoint of goodness, maltooligosaccharides are preferable. Specific examples of maltooligosaccharide include maltotriose, maltotetraose, maltopentaose, maltohexaose, and the like, and maltotriose is particularly preferable from the viewpoint of enhancing the effect.
本発明の組成物の固形分中、消化性オリゴ糖の含有量は、上記の脂肪細胞における脂肪蓄積抑制効果や筋芽細胞賦活を一層高める点から、乾燥質量で、0.0001質量%以上が好ましく、0.001質量%以上がより好ましく、0.01質量%以上が更に好ましく、0.05質量%以上が効果の点から特に好ましい。また本発明の組成物は消化性オリゴ糖、植物加工物及び糖アルコールのみからなるものであってもよいが、他成分との組み合わせで高機能化及び多機能化を図ることを可能する観点から、組成物中の消化性オリゴ糖の含有量の上限としては、30質量%以下が好ましく、20質量%以下がより好ましく、10質量%以下が更に好ましい。 In the solid content of the composition of the present invention, the content of digestible oligosaccharide is 0.0001% by mass or more in terms of dry mass from the viewpoint of further enhancing the effect of inhibiting fat accumulation and activation of myoblasts in the adipocytes. Preferably, 0.001 mass% or more is more preferable, 0.01 mass% or more is further more preferable, and 0.05 mass% or more is particularly preferable from the viewpoint of the effect. In addition, the composition of the present invention may be composed only of digestible oligosaccharides, processed plant products and sugar alcohols, but from the viewpoint of being able to achieve high functionality and multi-function in combination with other components. The upper limit of the digestible oligosaccharide content in the composition is preferably 30% by mass or less, more preferably 20% by mass or less, and still more preferably 10% by mass or less.
・植物加工物又は糖アルコール
本発明の組成物は、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の組み合わせを含有するものである。植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の組み合わせとは、2種以上の植物加工物の組み合わせか、或いは、1種以上の植物加工物と1種以上の糖アルコールとの組み合わせであることが好ましい。2種以上の植物加工物の組み合わせとは、互いに種の異なる2種以上の植物それぞれの加工物の組み合わせであることが好ましい。
-Plant processed material or sugar alcohol The composition of this invention contains 2 or more types of combinations chosen from a plant processed material and sugar alcohol. The combination of two or more selected from plant processed products and sugar alcohols is a combination of two or more plant processed products or a combination of one or more plant processed products and one or more sugar alcohols. Is preferred. The combination of two or more kinds of plant processed products is preferably a combination of two or more types of processed products of different species.
本発明における植物加工物とは、植物を、乾燥、粉砕、抽出、ろ過、搾汁、スラリー化、発酵、加熱等の何れかの1以上の処理をすることにより得られたものである。植物体の部位としては、葉、根、根茎、花、茎、種子等各部位が挙げられる。葉は茎を含んでいてもよい。 The processed plant product in the present invention is obtained by subjecting a plant to one or more treatments such as drying, pulverization, extraction, filtration, squeezing, slurrying, fermentation, and heating. Examples of plant parts include leaves, roots, rhizomes, flowers, stems and seeds. The leaf may contain a stem.
植物加工物としては、具体的には、植物体を乾燥処理及び粉砕処理して得られる乾燥粉末(以下、「乾燥粉砕末」ともいう)、植物体の細片化物及びその乾燥物、植物体の搾汁及びその乾燥粉末、植物体の抽出物及びその乾燥粉末等が挙げられるが、これらに限定されない。本発明においては、加工、貯蔵、運搬等の容易性や使用形態の汎用性といった観点から、最終的に粉末の形態をしていることが好ましい。本明細書で単に粉末という場合、通常、乾燥粉砕末、細片化物の乾燥粉末、搾汁の乾燥粉末、抽出物の乾燥粉末及び発酵物の乾燥粉末のいずれをも含む。粉末は、粒状、顆粒状等を当然に含むものである。 Specifically, the processed plant product includes a dry powder obtained by drying and pulverizing the plant (hereinafter, also referred to as “dry pulverized powder”), a fragmented product of the plant and a dried product thereof, and a plant. Squeezed juice and dried powder thereof, plant extracts and dried powder thereof, and the like, but are not limited thereto. In the present invention, from the viewpoint of ease of processing, storage, transportation, etc. and versatility of usage, it is preferably in the form of powder. In the present specification, the term “powder” usually includes any one of dry pulverized powder, dried powder of pulverized product, dried powder of juice, dried powder of extract, and dried powder of fermented product. Naturally, the powder includes particles, granules and the like.
植物体を乾燥粉砕末化するには従来公知の方法を用いることができる。そのような方法としては、植物体に対して、乾燥処理及び粉砕処理を組み合わせた方法を用いることができる。乾燥処理及び粉砕処理はいずれを先に行ってもよいが、乾燥処理を先に行うことが好ましい。乾燥粉砕末化は、この方法に、さらに必要に応じてブランチング処理、冷却処理、殺菌処理等の処理から選ばれる1種又は2種以上の処理を行ってもよい。また、粉砕処理を行う回数は2回以上であってもよく、粗粉砕処理を行った後に、より細かく粉砕する微粉砕処理を行うことが好ましい。 In order to dry and pulverize a plant body, a conventionally known method can be used. As such a method, a method combining a drying treatment and a pulverization treatment with respect to a plant body can be used. Either the drying process or the pulverization process may be performed first, but the drying process is preferably performed first. In the dry pulverization, this method may be further subjected to one or more treatments selected from treatments such as blanching treatment, cooling treatment, and sterilization treatment as necessary. Further, the number of times of the pulverization treatment may be two or more, and it is preferable to perform the fine pulverization treatment for finer pulverization after the coarse pulverization treatment.
乾燥処理としては、特に限定されないが、例えば、大麦の茎葉の水分含量が10質量%以下、特に5質量%以下となるように乾燥する処理であることが好ましい。この乾燥処理は、例えば、熱風乾燥、高圧蒸気乾燥、電磁波乾燥、凍結乾燥等の当業者に公知の任意の方法により行われ得る。 Although it does not specifically limit as a drying process, For example, it is preferable that it is the process dried so that the moisture content of the barley foliage may be 10 mass% or less, especially 5 mass% or less. This drying treatment can be performed by any method known to those skilled in the art, such as hot air drying, high pressure steam drying, electromagnetic wave drying, freeze drying, and the like.
粉砕処理は特に限定されないが、例えば、クラッシャー、ミル、ブレンダー、石臼等の粉砕用の機器や器具等を用いて、当業者が通常使用する任意の方法により植物体を粉砕する処理が挙げられる。粉砕された植物体は、必要に応じて篩にかけられ、例えば、30〜250メッシュを通過するものを植物体の粉末として用いることが好ましい。粒径が250メッシュ通過のもの以下とすることで、さらなる加工時に植物体の粉末が取り扱いやすくなり、粒径が30メッシュ通過以上のものとすることで、植物体の粉末と他の素材との均一な混合が容易になる。 The pulverization process is not particularly limited, and examples thereof include a process of pulverizing a plant body by an arbitrary method commonly used by those skilled in the art using a crusher, a mill, a blender, a millstone, or the like. The pulverized plant body is sieved as necessary. For example, it is preferable to use a plant body powder that passes through 30 to 250 mesh as the powder of the plant body. By making the particle size below 250 mesh, it becomes easier to handle the plant powder during further processing, and by making the particle size above 30 mesh, the plant powder and other materials Uniform mixing is facilitated.
具体的な乾燥粉砕末化の方法としては、例えば、植物体を切断した後、水分含量が10質量%以下となるように乾燥し、その後粉砕する方法が挙げられる。この他にも、例えば、植物体を切断した後、揉捻し、その後、乾燥し、粉砕する方法;植物体を乾燥し、粗粉砕した後、110℃以上で加熱し、さらに微粉砕する方法等が挙げられる。 As a specific method of dry pulverization, for example, after cutting the plant, it is dried so that the water content is 10% by mass or less, and then pulverized. In addition to this, for example, a method of cutting a plant body and then twisting and then drying and pulverizing; a method of drying and coarsely pulverizing the plant body, heating at 110 ° C. or higher, and further finely pulverizing Is mentioned.
また、植物体を細片化する方法は特に限定されないが、例えば、スライス、破砕、細断等の当業者が植物体を細片化する際に通常使用する方法を用いることができる。細片化の一例として、スラリー化してもよい。スラリー化は、植物体をミキサー、ジューサー、ブレンダー、マスコロイダー等にかけ、どろどろした粥状(液体と固体との懸濁液)にすることにより行う。種子の細片化物を加熱する場合は、この液に水を入れて煮詰めた後、篩別、濾過等の手段によって粗固形分を除去して液分を用いてもよい。 Moreover, although the method of fragmenting a plant body is not specifically limited, For example, the method normally used when those skilled in the art, such as a slice, crushing, shredding, etc. fragment a plant body can be used. As an example of fragmentation, a slurry may be used. Slurry is carried out by applying the plant body to a mushy bowl (suspension of liquid and solid) through a mixer, juicer, blender, mascolloider or the like. When the seed fragment is heated, the liquid may be used after adding water to the liquid and boiling, and then removing the coarse solids by means such as sieving and filtration.
植物体を搾汁する方法は特に限定されないが、例えば、植物体又はその細片化物を圧搾する方法、植物体の細片化物を遠心やろ過する方法等を挙げることができる。具体的な搾汁方法の例としては、ミキサー、ジューサー等の機械的破砕手段によって搾汁し、必要に応じて、篩別、濾過等の手段によって粗固形分を除去することにより搾汁液を得る方法が挙げられる。 Although the method of squeezing a plant body is not specifically limited, For example, the method of squeezing a plant body or its fragmented material, the method of centrifuging or filtering the fragmented plant body, etc. can be mentioned. As a specific example of the squeezing method, the squeezed juice is obtained by squeezing with a mechanical crushing means such as a mixer or a juicer, and if necessary, removing the crude solid content by means such as sieving or filtration. A method is mentioned.
植物体の抽出物を得る方法は特に限定されないが、例えば、植物体又はその細片化物或いは乾燥物等に、エタノール、水、含水エタノール、メタノール、酢酸エチル等の当業者が通常用いる抽出溶媒を加え、必要に応じて攪拌及び/又は加温して抽出する方法等を挙げることができる。抽出溶媒は必要に応じて1種又は2種以上を適宜選択し、使用することができる。加温する場合、その温度は室温〜溶媒の沸点以下であれば特に限定されない。抽出物は、その後の篩別、濾過等の手段によって粗固形分を除去した抽出物を使用することが好ましい。例えば、大豆の細片化物(磨砕物)に水を加えて煮詰めた後、ろ過して得られるろ液(抽出物)は、豆乳として知られている。抽出物は、必要に応じて濃縮してもよく、乾燥して粉末化してもよい。粉末化する際は、必要に応じて賦形剤を使用できる。 A method for obtaining an extract of a plant body is not particularly limited. In addition, a method of extracting by stirring and / or heating as necessary may be mentioned. One or more extraction solvents can be appropriately selected and used as necessary. When heating, the temperature will not be specifically limited if it is room temperature-below the boiling point of a solvent. As the extract, it is preferable to use an extract from which crude solid content has been removed by means such as subsequent sieving and filtration. For example, a filtrate (extract) obtained by filtering water after adding water to a soy shredded product (ground product) and boiled is known as soy milk. The extract may be concentrated as necessary, or dried and powdered. When pulverizing, an excipient can be used if necessary.
植物加工物が粉末である場合、水分量を20質量%以下、特に10質量%以下とすることが、安定性や品質劣化の防止等の観点から好ましい。水分量は例えば、1質量%以上であることが、粉末である植物加工物の製造容易性の点から好ましい。 When the processed plant product is a powder, the water content is preferably 20% by mass or less, particularly 10% by mass or less from the viewpoint of stability and prevention of quality deterioration. For example, the water content is preferably 1% by mass or more from the viewpoint of ease of production of the processed plant product that is a powder.
植物加工物が粉末である場合、30〜250メッシュの何れかのふるいを通過する粉末であることが、他の成分との混合のしやすさや経口しやすさ等の点で好ましい。同様の観点から、粉末である植物加工物は90質量%以上が200メッシュを通過することがより好ましい。 When the processed plant product is a powder, it is preferably a powder that passes through any one of sieves of 30 to 250 mesh in terms of ease of mixing with other components and ease of oral administration. From the same viewpoint, it is more preferable that 90% by mass or more of the processed plant product which is a powder pass through 200 mesh.
また植物体は発酵物であってもよく、例えば植物体又はその粉砕物、搾汁、抽出物若しくは細片化物に対して、乳酸菌、酵母、麹菌、納豆菌、酢酸菌等を添加して発酵して得られたものであってもよい。 The plant body may be a fermented product. For example, lactic acid bacteria, yeast, koji molds, natto bacteria, acetic acid bacteria, etc. are added to the plant body or its pulverized product, juice, extract or fragmented product. May be obtained.
上記の細片化処理で得られた搾汁や抽出処理で得られた液状抽出物、発酵後の液状物やスラリー等はいずれも熱風乾燥、高圧蒸気乾燥、電磁波乾燥、凍結乾燥等の当業者に公知の任意の方法により乾燥粉末化されうる。この際にデキストリン等の賦形剤を添加してもよい。 Those skilled in the art such as hot-air drying, high-pressure steam drying, electromagnetic wave drying, freeze-drying, etc. are all for the juice obtained by the above-mentioned fragmentation treatment, the liquid extract obtained by the extraction treatment, the liquid matter after fermentation and the slurry, etc. Can be made into a dry powder by any known method. At this time, an excipient such as dextrin may be added.
本発明における植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の含有量は特に限定されないが、脂肪細胞における脂肪蓄積抑制効果及び筋芽細胞賦活効果を一層高める点から、本発明の組成物の固形分中、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の含有量は、その総量が乾燥質量で、10質量%以上が好ましく、20質量%以上がより好ましく、30質量%以上が更に好ましく、40質量%以上が効果の点から特に好ましい。また本発明の組成物は消化性オリゴ糖と植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上のみからなるものであってもよいが、他成分との組み合わせで高機能化及び多機能化を図ることを可能する観点から、組成物中の植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の含有量の上限としては、90質量%以下が好ましく、80質量%以下がより好ましく、70質量%以下が更に好ましい。ここで言う組成物中の植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の総量は、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上を2種のみ含有する場合はその合計の量であり、これらを3種以上含有する場合には、その合計の量である。 The content of two or more selected from the processed plant product and sugar alcohol in the present invention is not particularly limited, but from the viewpoint of further enhancing the effect of inhibiting fat accumulation and activation of myoblasts in fat cells, the composition of the present invention is solid. In the minute, the content of two or more selected from processed plant products and sugar alcohols is preferably 10% by mass or more, more preferably 20% by mass or more, and even more preferably 30% by mass or more in terms of the total mass. 40 mass% or more is especially preferable from the point of an effect. The composition of the present invention may be composed of only two or more selected from digestible oligosaccharides, processed plant products, and sugar alcohols, and is intended to be highly functional and multifunctional in combination with other components. From the viewpoint of enabling this, the upper limit of the content of two or more selected from the processed plant product and sugar alcohol in the composition is preferably 90% by mass or less, more preferably 80% by mass or less, and 70% by mass or less. Is more preferable. The total amount of two or more selected from the plant processed product and sugar alcohol in the composition referred to here is the total amount when only two types selected from the plant processed product and sugar alcohol are contained. When three or more of these are contained, the total amount is used.
本発明の組成物が植物加工物を含有する場合、上記の脂肪細胞における脂肪蓄積抑制及び筋芽細胞賦活の効果を一層高める点から、本発明の組成物の固形分中、植物加工物の含有量は、消化性オリゴ糖1質量部に対し、乾燥質量で、0.01質量部以上が好ましく、0.1質量部以上がより好ましく、1質量部以上が更に好ましく、10質量部以上がより一層好ましく、50質量部以上が更に一層好ましく、100質量部以上が特に好ましく、200質量部以上がとりわけ好ましい。また他成分との組み合わせで高機能化及び多機能化を図ることを可能する観点から、組成物中の植物加工物の含有量の上限としては、消化性オリゴ糖1質量部に対し、10000質量部以下が好ましく、1000質量部以下がより好ましく、500質量部以下が更に好ましい。組成物中の植物加工物の量は、植物加工物を1種のみ含有する場合はその単独の量であり、これらを2種以上含有する場合には、その合計量である。 When the composition of the present invention contains a plant processed product, the content of the plant processed product is contained in the solid content of the composition of the present invention from the viewpoint of further enhancing the effects of fat accumulation suppression and myoblast activation in the adipocytes. The amount is preferably 0.01 parts by weight or more, more preferably 0.1 parts by weight or more, still more preferably 1 part by weight or more, and more preferably 10 parts by weight or more based on 1 part by weight of the digestible oligosaccharide. More preferably, 50 parts by mass or more is even more preferable, 100 parts by mass or more is particularly preferable, and 200 parts by mass or more is particularly preferable. In addition, from the viewpoint of achieving high functionality and multi-function in combination with other components, the upper limit of the content of the processed plant product in the composition is 10,000 masses per 1 part by mass of the digestible oligosaccharide. Part or less, preferably 1000 parts by weight or less, more preferably 500 parts by weight or less. The amount of the processed plant product in the composition is a single amount when containing only one kind of processed plant product, and the total amount when containing two or more types of these processed products.
本発明における植物加工物は市販されているものを用いてもよい。市販品としては、例えば、後述する実施例に記載されているものが挙げられる。 The plant processed material in this invention may use what is marketed. As a commercial item, what is described in the Example mentioned later is mentioned, for example.
植物加工物における植物体としては、緑葉の加工物であることが好ましい。本発明において緑葉は、経口摂取可能な緑色植物の葉であり、クロロフィルを有するものである。本発明において使用できる緑葉としては、例えば、イネ科植物、キク科植物、セリ科植物、クワ科植物、ドクダミ科植物、シソ科植物、ユリ科植物、シナノキ科植物、ヒルガオ科植物、ツバキ科植物等の緑葉が脂肪細胞における脂肪蓄積抑制活性や筋芽細胞賦活活性が高い点や植物由来の栄養成分を摂取できる点から好ましい。イネ科植物としては、例えば、小麦、デュラム小麦、ライ麦、ライ小麦、大麦、オーツ麦、はと麦、トウモロコシ、イネ、ヒエ、アワ、キビ、クマザサ等が挙げられる。キク科植物としては、例えば、よもぎ等が挙げられる。セリ科植物としては、例えば、アシタバ、パセリ、セロリ、長命草(ボタンボウフウともいう)等が挙げられる。クワ科植物としては、例えば、クワ等が挙げられる。ドクダミ科植物としては、例えば、ドクダミ等が挙げられる。シソ科植物としては、例えば、シソ等が挙げられる。アブラナ科植物としては、例えば、小松菜、ケール、キャベツ、ブロッコリー等が挙げられる。ユリ科植物としては、例えば、アスパラガス等が挙げられる。シナノキ科植物としては、例えば、モロヘイヤ等が挙げられる。ヒルガオ科植物としては、例えば、甘藷等が挙げられる。ツバキ科植物としては、例えば、茶が挙げられる。これらの中でも、大麦、ケール、長命草、クマザサ、茶、アシタバ、クワ、甘藷、よもぎ、キャベツが効果の点から特に好ましい。 The plant body in the processed plant product is preferably a processed green leaf product. In the present invention, the green leaf is a leaf of a green plant that can be taken orally, and has chlorophyll. The green leaves that can be used in the present invention include, for example, gramineous plants, asteraceae plants, sericaceae plants, moraceae plants, dromedary plants, perilla plants, liliaceae plants, lindenaceae plants, convolvulaceae plants, camellia plants And the like are preferred from the viewpoint of high fat accumulation-inhibiting activity and myoblast activation activity in adipocytes and the ability to ingest plant-derived nutrient components. Examples of gramineous plants include wheat, durum wheat, rye, rye wheat, barley, oats, corn, rice, maize, rice millet, millet, millet, and kumazasa. Examples of asteraceae plants include wormwood and the like. Examples of celery family plants include ashitaba, parsley, celery, long-life grass (also referred to as button-bowl). Examples of the mulberry plant include mulberry. An example of the sphagnum plant is scuttlefish. Examples of the Labiatae plant include perilla and the like. Examples of cruciferous plants include komatsuna, kale, cabbage, broccoli and the like. As a lily family plant, asparagus etc. are mentioned, for example. Examples of the lindenaceae plant include Morohea. Examples of the convolvulaceae plant include sweet potato. An example of the camellia plant is tea. Among these, barley, kale, long-life grass, Kumazasa, tea, Ashitaba, mulberry, sweet potato, wormwood, and cabbage are particularly preferable from the viewpoint of effect.
本発明の組成物が、互いに種の異なる2種以上の植物それぞれの加工物の組み合わせを含有する場合、脂肪細胞における脂肪蓄積抑制活性や筋芽細胞賦活活性を高めるために、緑葉加工物同士の組み合わせであることが好ましい。また2種以上の植物加工物の組み合わせとしては、特に麦類の加工物と、麦類以外の植物の加工物との組み合わせであることが効果の点から好ましい。これらの点から2種以上の植物加工物の組み合わせは、麦類の緑葉の加工物と、麦類以外の植物の緑葉の加工物との組み合わせが好ましい。麦類以外の植物としては、イネ科植物(但し麦類を除く)、キク科植物、セリ科植物、クワ科植物、ドクダミ科植物、シソ科植物、ユリ科植物、シナノキ科植物、ヒルガオ科植物、ツバキ科植物が挙げられる。 In the case where the composition of the present invention contains a combination of processed products of two or more kinds of plants having different species, in order to increase fat accumulation inhibitory activity and myoblast activation activity in adipocytes, A combination is preferred. In addition, the combination of two or more kinds of processed plant products is particularly preferably a combination of a processed wheat product and a processed plant product other than wheat. From these points, the combination of two or more kinds of plant processed products is preferably a combination of a processed product of green leaves of wheat and a processed product of green leaves of plants other than wheat. Plants other than wheat include gramineous plants (excluding wheat), asteraceae plants, antaceae plants, moraceae plants, phyllidaceae plants, perilla plants, liliaceae plants, lindenaceae plants, convolvulaceae plants And camellia plants.
植物として大麦を用いる場合、大麦の若葉を用いることが好ましい。大麦若葉は、成熟期前、すなわち分けつ開始期から出穂開始前期に収穫される葉及び/又は茎である。また、甘藷である場合、甘藷の栽培時に、地面から外に出ている葉又は茎を含む葉を用いることが好ましく、甘藷若葉が好ましい。 When barley is used as a plant, it is preferable to use young barley leaves. Barley young leaves are leaves and / or stems that are harvested before the maturity period, that is, from the beginning of the splitting to the early stage of heading. Moreover, when it is a sweet potato, it is preferable to use the leaf | leaf containing the leaf or stem which has come out from the ground at the time of cultivation of a sweet potato, and a sweet potato young leaf is preferable.
植物体が緑葉である場合、緑葉は乾燥粉砕末であることが好ましい。上記の記載が示すように、乾燥粉砕末とは、搾汁及び抽出処理をしていない植物体に対し、乾燥処理及び粉砕処理をして得られる乾燥粉末である。 When the plant body is a green leaf, the green leaf is preferably a dry pulverized powder. As the above description shows, the dry pulverized powder is a dry powder obtained by drying and pulverizing a plant that has not been squeezed and extracted.
特に本発明の組成物が麦類の加工物を含有する場合、脂肪細胞における脂肪蓄積抑制及び筋芽細胞賦活の効果を一層高める点から、その含有量は、消化性オリゴ糖1質量部に対し、乾燥質量で、1質量部以上5000質量部以下が好ましく、100質量部以上2500質量部以下がより好ましく、1000質量部以上1250質量部以下が更に好ましい。 In particular, when the composition of the present invention contains a processed product of wheat, the content thereof is based on 1 part by mass of digestible oligosaccharides from the viewpoint of further enhancing the effects of inhibiting fat accumulation in fat cells and activating myoblasts. The dry mass is preferably 1 to 5000 parts by mass, more preferably 100 to 2500 parts by mass, and still more preferably 1000 to 1250 parts by mass.
更に、本発明の組成物が麦類の加工物と、麦類以外の植物の加工物とを併用する場合、筋芽細胞賦活活性や脂肪細胞における脂肪蓄積抑制活性の点、特に脂肪蓄積抑制活性の点から、麦類以外の植物の加工物の含有量は、麦類の加工物1質量部に対し、乾燥質量で、0.01質量部以上1000質量部以下が好ましく、0.1質量部以上100質量部以下がより好ましく、1質量部以上10質量部以下が更に好ましく、5質量部以上8質量部以下が効果の点から特に好ましい。 Furthermore, when the composition of the present invention uses a processed product of wheat and a processed product of plants other than wheat, myoblast activation activity and fat accumulation inhibitory activity in fat cells, particularly fat accumulation inhibitory activity From the above point, the content of the processed product of plants other than wheat is preferably 0.01 parts by mass or more and 1000 parts by mass or less, and 0.1 parts by mass with respect to 1 part by mass of the processed product of wheat. It is more preferably 100 parts by mass or less, further preferably 1 part by mass or more and 10 parts by mass or less, and particularly preferably 5 parts by mass or more and 8 parts by mass or less from the viewpoint of the effect.
特に、脂肪蓄積防止効果及び筋芽細胞賦活活性をより高める点から、消化性オリゴ糖と、大麦若葉・ケール・長命草・クマザサ・茶・アシタバ・クワ葉・甘藷若葉及びよもぎ葉の加工物との質量比は、消化性オリゴ糖1質量部に対して各加工物が乾燥質量で0.01質量部以上が好ましく、0.1質量部以上10000質量部以下であることがより好ましく、1質量部以上1000質量部以下であることが更に好ましく、10質量部以上100質量部以下であることが効果の点から特に好ましい。 In particular, from the point of increasing fat accumulation prevention effect and myoblast activation activity, digestible oligosaccharides and processed products of barley young leaves, kale, long-life grass, Kumazasa, tea, Ashitaba, mulberry leaves, sweet potato leaves and wormwood leaves The mass ratio is preferably 0.01 parts by mass or more, more preferably 0.1 parts by mass or more and 10000 parts by mass or less, based on 1 part by mass of the digestible oligosaccharide. The amount is more preferably no less than 1000 parts by mass and no greater than 10 parts by mass, and particularly preferably no less than 10 parts by mass and no greater than 100 parts by mass.
本発明で使用できる糖アルコールとしては、単糖のアルコール、二糖のアルコール、三糖以上のアルコールが挙げられる。単糖のアルコールとしては、例えばエリスリトール、キシリトール等のペンチトール、D−グルシトール(ソルビトール)等のヘキシトール等が挙げられる。また、二糖のアルコールとしては、例えば、還元麦芽糖(マルチトール)、ラクチトール、還元パラチノース(イソマルト)等が挙げられる。また三糖以上のアルコールとしては、マルトトリイトール、イソマルトトリイトール、パニトール等が挙げられる。糖アルコールとしては、消化性オリゴ糖との組み合わせにより、筋芽細胞の賦活活性及び脂肪蓄積抑制の効果を得やすい観点から、四糖以下のアルコールから選ばれる少なくとも1種であることが好ましく、三糖以下のアルコールから選ばれる少なくとも1種であることがさらに好ましく、特に、二糖以下のアルコールから選ばれる少なくとも1種であることが好ましく、二糖以下のアルコールとしては還元麦芽糖であることが効果の点から好ましい。 Examples of sugar alcohols that can be used in the present invention include monosaccharide alcohols, disaccharide alcohols, and trisaccharide alcohols. Examples of monosaccharide alcohols include pentitols such as erythritol and xylitol, and hexitols such as D-glucitol (sorbitol). Examples of the disaccharide alcohol include reduced maltose (maltitol), lactitol, reduced palatinose (isomalt) and the like. Examples of the trisaccharide or higher alcohol include maltotriitol, isomaltotriitol, panitol and the like. The sugar alcohol is preferably at least one selected from alcohols of tetrasaccharides or less, from the viewpoint of easily obtaining myoblast activation activity and fat accumulation suppression effect in combination with digestible oligosaccharides. More preferably, it is at least one selected from alcohols below sugar, particularly preferably at least one selected from alcohols below disaccharide, and the effect of reduced maltose as the alcohol below disaccharides From the point of view, it is preferable.
本発明の組成物が糖アルコールを含有する場合、上記の筋芽細胞賦活効果及び脂肪細胞における脂肪蓄積抑制効果を一層高める点から、本発明の組成物の固形分中、糖アルコールの含有量は、消化性オリゴ糖1質量部に対し、乾燥質量で、1質量部以上が好ましく、10質量部以上がより好ましく、100質量部以上が更に好ましく、1000質量部以上が更に一層好ましく、10000質量部以上が効果の点から特に好ましい。また他成分との組み合わせで高機能化及び多機能化を図ることを可能する観点から、組成物中の糖アルコールの含有量の上限としては、消化性オリゴ糖100質量部に対し、10000000質量部以下が好ましく、1000000質量部以下がより好ましく、100000質量部以下が更に好ましく、10000質量部以下が効果の点から特に好ましい。組成物中の糖アルコールの量は、糖アルコールを1種のみ含有する場合はその単独の量であり、これらを2種以上含有する場合には、その合計量である。 When the composition of the present invention contains a sugar alcohol, the content of the sugar alcohol in the solid content of the composition of the present invention is from the point of further enhancing the myoblast activation effect and the fat accumulation inhibiting effect in fat cells. The dry mass is preferably 1 part by mass or more, more preferably 10 parts by mass or more, still more preferably 100 parts by mass or more, still more preferably 1000 parts by mass or more, and still more preferably 10000 parts by mass with respect to 1 part by mass of the digestible oligosaccharide. The above is particularly preferable from the viewpoint of effects. In addition, from the viewpoint of achieving high functionality and multi-functionality in combination with other components, the upper limit of the sugar alcohol content in the composition is 10000000 parts by mass with respect to 100 parts by mass of digestible oligosaccharides. The following is preferable, 1000000 parts by mass or less is more preferable, 100000 parts by mass or less is further preferable, and 10000 parts by mass or less is particularly preferable from the viewpoint of the effect. The amount of sugar alcohol in the composition is a single amount when only one kind of sugar alcohol is contained, and the total amount when two or more kinds are contained.
本発明の組成物は、消化性オリゴ糖、植物加工物及び糖アルコール以外に、その他の成分を含んでいてもよい。前記のその他の成分としては、例えば、ビタミン類、タンパク質、ミネラル類、乳製品、乳酸菌等の微生物、クエン酸、酸味料、着色料、光沢剤のほか、タルク、セルロース、ステアリン酸カルシウム等の製造用剤等を配合することできる。その他の成分としては、これら以外にも、種々の賦形剤、結合剤、滑沢剤、安定剤、希釈剤、増量剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料等を挙げることができる。その他の成分の含有量は、組成物の形態等に応じて適宜選択することができる。本発明において、組成物に含まれる消化性オリゴ糖、植物加工物及び糖アルコール以外の成分は、固形分中、90質量%以下であることが好ましく、60質量%以下であることがさらに好ましく、30質量%以下であることが効果の点から特に好ましい。 The composition of the present invention may contain other components in addition to the digestible oligosaccharide, the processed plant product, and the sugar alcohol. Examples of the other components include vitamins, proteins, minerals, dairy products, lactic acid bacteria and other microorganisms, citric acid, acidulants, colorants, brighteners, talc, cellulose, calcium stearate, etc. An agent etc. can be mix | blended. Other components include various excipients, binders, lubricants, stabilizers, diluents, extenders, emulsifiers, colorants, flavors, food additives, seasonings, etc. Can do. The content of other components can be appropriately selected according to the form of the composition. In the present invention, the components other than the digestible oligosaccharide, the processed plant product, and the sugar alcohol contained in the composition are preferably 90% by mass or less, more preferably 60% by mass or less in the solid content, It is especially preferable from the point of an effect that it is 30 mass% or less.
本発明の組成物は、固体状、半固体状、流動体状等のいずれの形態であってもよい。例えば固体状としては、錠状、カプセル状、棒状、板状、ブロック状、固形状、丸状、飴状、タブレット状、グミ状、ウエハース状、ビスケット状、クッキー状、ケーキ状、チュアブル状、スティック状等が挙げられる。半固体状としては、ペースト状、ゼリー状等が挙げられる。流動体状としては、シロップ状、液状、ゼリー状等が挙げられる。 The composition of the present invention may be in any form such as solid, semi-solid, and fluid. For example, as solid form, tablets, capsules, sticks, plates, blocks, solids, rounds, bowls, tablets, gummi, wafers, biscuits, cookies, cakes, chewables, Examples include sticks. Examples of the semi-solid form include a paste form and a jelly form. Examples of the fluid form include syrup form, liquid form, and jelly form.
また本発明の組成物は、粉末状又は顆粒状であって、水と混合した混合物を経口摂取する形態であると、腐敗を防ぎ長期保存に適することから好ましい。また本発明の組成物はこれが固体状の形態である場合、上述したように、これを水と混合した液状体となし、該液状体を飲用する等経口摂取することができるが、摂取する者の好み等に応じて、固体のまま経口摂取してもよい。また水だけでなく、牛乳、豆乳、果汁飲料、乳清飲料、清涼飲料、ヨーグルト、ホットケーキミックス等に添加して使用してもよい。また、サプリメント、健康食品、栄養機能食品、機能性表示食品、特定保健用食品、及び医薬品として用いても良い。 In addition, the composition of the present invention is preferably in the form of powder or granules, and is in a form in which a mixture mixed with water is orally ingested, since it prevents spoilage and is suitable for long-term storage. Further, when the composition of the present invention is in a solid form, as described above, the composition is a liquid mixed with water and can be taken orally such as drinking the liquid. Depending on the taste and the like, it may be taken orally as a solid. Further, not only water but also milk, soy milk, fruit juice drink, whey drink, soft drink, yogurt, hot cake mix and the like may be used. Moreover, you may use as a supplement, health food, functional nutrition food, functional indication food, food for specified health, and a pharmaceutical.
本発明の組成物は経口用組成物であるところ、該組成物が植物加工物として緑葉の加工物を含有する場合、本発明の組成物を、青汁用の飲食用組成物として用いることが好ましい。青汁用の飲食用組成物とは、緑葉の加工物を含む飲料である。青汁用の飲食用組成物としては、この飲料、及びこの飲料を得るために液体に分散又は溶解させる固体が挙げられる。青汁用の飲食用組成物には、一般的に知られる青汁製品以外にスムージーやゼリー等が含まれる。 The composition of the present invention is an oral composition. When the composition contains a processed green leaf product as a processed plant product, the composition of the present invention can be used as a food and drink composition for green juice. preferable. The food and drink composition for green juice is a beverage containing a processed product of green leaves. Examples of the composition for eating and drinking for green juice include this beverage and a solid that is dispersed or dissolved in a liquid to obtain this beverage. The food and drink composition for green juice includes smoothies and jellies in addition to the generally known green juice products.
本発明の組成物の形態は青汁用の飲食用組成物の例として挙げた飲料及びこの飲料を得るために液体に分散又は溶解させる固体の形態に限らず、任意の形態を採用できる。 The form of the composition of the present invention is not limited to the drink mentioned as an example of the food and drink composition for green juice and the solid form dispersed or dissolved in the liquid to obtain this drink, and any form can be adopted.
本発明の緑葉粉末は後述する実施例に記載の通り、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上と、消化性オリゴ糖とを含有することにより、優れた脂肪細胞における脂肪の蓄積抑制効果及び筋芽細胞賦活効果を奏する。具体的には、植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上と、消化性オリゴ糖とを含有する組成物を摂取することで、脂肪細胞における脂質の蓄積を防止することができるほか、骨格筋等における筋芽細胞を活性化させることができる。従って、本発明の組成物は、これを摂取することで体脂肪蓄積防止、体脂肪低減、筋肉におけるエネルギー代謝の維持や促進、筋肉増強促進、筋肉減衰や低減の防止、及びロコモ症候群の予防や改善等を図ることができる。
従って、本発明の組成物は、体脂肪蓄積防止用途、体脂肪低減用途、筋芽細胞賦活用途、筋肉細胞増殖促進用途、筋肉増強用途、筋肉低減防止用途、筋肉減衰防止用途、代謝維持及び/又は促進用途、肥満の予防用途、肥満の解消用途、体重低減や上昇抑制用途、容姿のスリム化用途、リバウンドの防止用途、ダイエット用途、ロコモ症候群の予防及び/又は改善用途等において、優れたものとなりうる。ここでいう筋肉増強とは筋肉量の増加を意味し、筋肉低減防止とは筋肉量低減防止を意味する。
The green leaf powder of the present invention contains two or more selected from plant processed products and sugar alcohols and digestible oligosaccharides, as described in the examples described later, and thus has an excellent fat accumulation inhibitory effect on fat cells. And there is a myoblast activation effect. Specifically, by ingesting a composition containing two or more selected from plant processed products and sugar alcohols and digestible oligosaccharides, lipid accumulation in adipocytes can be prevented, and the skeleton Myoblasts in muscles and the like can be activated. Therefore, when ingested, the composition of the present invention prevents body fat accumulation, reduces body fat, maintains and promotes energy metabolism in muscle, promotes muscle strengthening, prevents muscle attenuation and reduction, and prevents locomy syndrome. Improvements can be made.
Therefore, the composition of the present invention is used for body fat accumulation prevention, body fat reduction, myoblast activation, muscle cell proliferation promotion, muscle augmentation, muscle reduction prevention, muscle attenuation prevention, metabolism maintenance and / or Or excellent in use for promoting, obesity prevention, obesity elimination, weight reduction or elevation suppression, slimming, rebound prevention, diet, locomy syndrome prevention and / or improvement It can be. Muscle strengthening here means an increase in muscle mass, and prevention of muscle reduction means prevention of muscle mass reduction.
以下、実施例を示して本発明を更に具体的に説明するが、本発明の範囲は、これらの実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example is shown and this invention is demonstrated further more concretely, the scope of the present invention is not limited to these Examples.
〔実施例1〜19、比較例1〜12〕
被験試料として以下のものを用いた。
・マルトトリオース:粉末状の市販品を用いた。
・大麦若葉:東洋新薬社製の大麦若葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・ケール:東洋新薬社製のケールの葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・長命草:東洋新薬社製の長命草の葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・クマザサ:東洋新薬社製のクマザサの葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・抹茶:東洋新薬社製の碾茶の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・アシタバ:東洋新薬社製のアシタバの葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・クワ:東洋新薬社製のクワの葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・甘藷若葉:東洋新薬社製の甘藷の葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・よもぎ:東洋新薬社製のよもぎの葉の乾燥粉砕末を用いた。乾燥粉砕末は、200メッシュを通過するものが90質量%以上であり、水分量が1質量%以上7質量%以下であった。
・還元麦芽糖:粉末状の市販品を用いた。
・トレハロース:粉末状の市販品を用いた。
上記被験試料を下記(a)〜(L)の手順の脂肪蓄積試験に供した。
[脂肪蓄積試験]
(a)37℃、5容量%CO2インキュベーター内で、75cm2フラスコを用いて、マウス線維芽細胞3T3-L1を10%(v/v)FBS含有DMEM培地で培養した。
(b)線維芽細胞3TL-L1をトリプシン処理により浮遊させ、75cm2フラスコから96well plateの各wellに2x104cells/wellの細胞密度で播種し、37℃、5容量%CO2インキュベーター内で、10%(v/v)FBS含有DMEM培地で2日間前培養した。次いで、培地を、試験試料を含有した分化誘導培地(controlは分化誘導培地のみ)に置換し、3日間培養し分化誘導を行った。分化誘導培地としては、0.5mMイソブチルメチルキサンチン、0.5μMデキサメタゾン及び10μg/mLインスリンを含む10%(v/v)FBS含有DMEM培地を用いた。被験試料はその合計量が所定濃度(300μg/ml濃度)となるように分化誘導培地にて調製した。表1及び表2には、各被験試料の被験試料合計量中の質量割合を示す。
(c)培地を分化誘導培地から試験試料を含有した分化維持培地(controlは分化維持培地のみ)に置換し、4日間培養した。分化維持培地としては、10μg/mLインスリンを含む10%(v/v)FBS含有DMEM培地を用いた。被験試料はその合計量が所定濃度(300μg/ml濃度)となるように分化維持培地にて調製した。表1及び表2には、各被験試料の被験試料合計量中の質量割合を示す。
(d)(c)にて培養後、脂肪細胞から培地上清を除去した。次いで、当該細胞に、10%(v/v)ホルマリン含有PBSを培地と等量で添加し、遮光して10分間室温で静置した。次いで細胞からホルマリン溶液を除去し、PBSにて1回洗浄した。
(e)10%(v/v)ホルマリン含有PBSを100μL/wellで、細胞に添加し、遮光して10分間室温で静置し、細胞を固定した。
(f)ホルマリン溶液を除去し、 PBSで2回洗浄した。
(g)オイルレッドを3mg/mLに溶解した60容量%イソプロパノール(染色液)溶液を50μL/wellの量にて、脂肪細胞とblank wellに添加し、遮光して30分間室温で静置して脂質(脂肪滴)を染色した。次いで染色液を除去し、 60容量%イソプロパノール水溶液を150μL/well添加し、細胞を2回洗浄した。
(h)100容量%イソプロパノールを細胞とblank wellに100μL/well添加し、10分間ほど振とうして染色液を抽出した。染色液が抽出されたイソプロパノール液の520 nm及び650nmにおける吸光度を測定した。
(k)イソプロパノール液を風乾にて完全に除去した後、PierceTM BCA Protein Assay kit(Thermo Fisher Scientific社)を用いて各細胞のタンパク量を算出した。
(L)下記式より、タンパクあたりの脂肪蓄積量を算出し、controlに対する相対値を算出した結果を表1及び表2に示す。相対値が小さいほど、脂肪細胞において脂肪の蓄積が抑制されていることを示す。相対値の結果を下記表1及び表2に示す。
脂肪蓄積量の相対値(%)=[[(Abs520 sample - Abs520 blank) - (Abs650 sample - Abs650 blank) ]/(Protein sample)] / [(Abs520 control - Abs520 blank) - (Abs650 control - Abs650 blank) ]/(Protein control)]]×100(%)
Abs520 sample、Abs650 sample : 520nm、650nmにおける各実施例又は比較例の吸光度
Abs520 control、Abs650 control : 520nm、650nmにおけるcontrolの吸光度
Abs520 blank、Abs650 blank : 520nm、650nmにおけるblankの吸光度
Protein sample: 各実施例又は比較例における細胞中のタンパク量
Protein control: controlにおける細胞中のタンパク量
[Examples 1-19, Comparative Examples 1-12]
The following were used as test samples.
Maltotriose: A powdered commercial product was used.
-Barley young leaf: A dry ground powder of barley young leaf manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
-Kale: A dry pulverized powder of Kale leaf manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
-Long life grass: A dry ground powder of long life grass manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
・ Kumazasa: A dried and ground powder of Kumazasa leaves manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
-Matcha: The dried and ground powder of Tocha Shinyaku Co., Ltd. tea was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
-Ashitaba: A dried powder of Ashitaba leaf manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
-Mulberry: A dry pulverized powder of mulberry leaves manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
-Sweet potato leaf: A dry crushed powder of sweet potato leaf manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
-Wormwood: A dry crushed powder of wormwood leaves manufactured by Toyo Shinyaku Co., Ltd. was used. The dry pulverized powder passed through 200 mesh was 90% by mass or more, and the water content was 1% by mass or more and 7% by mass or less.
Reduced maltose: A powdered commercial product was used.
Trehalose: A powdered commercial product was used.
The test sample was subjected to a fat accumulation test according to the following procedures (a) to (L).
[Fat accumulation test]
(A) Mouse fibroblast 3T3-L1 was cultured in DMEM medium containing 10% (v / v) FBS in a 75 cm 2 flask in a 37 ° C., 5% by volume CO 2 incubator.
(B) The fibroblast 3TL-L1 was suspended by trypsin treatment, seeded at a cell density of 2 × 10 4 cells / well from a 75 cm 2 flask to each well of a 96-well plate, at 37 ° C. in a 5% by volume CO 2 incubator, Pre-cultured in DMEM medium containing 10% (v / v) FBS for 2 days. Subsequently, the culture medium was replaced with a differentiation induction medium containing the test sample (control is only the differentiation induction medium), and differentiation was induced by culturing for 3 days. As a differentiation induction medium, a DMEM medium containing 10% (v / v) FBS containing 0.5 mM isobutylmethylxanthine, 0.5 μM dexamethasone and 10 μg / mL insulin was used. The test sample was prepared in a differentiation induction medium so that the total amount thereof was a predetermined concentration (300 μg / ml concentration). Tables 1 and 2 show mass ratios in the total amount of test samples of each test sample.
(C) The culture medium was replaced with a differentiation maintenance medium containing the test sample from the differentiation induction medium (control is the differentiation maintenance medium only) and cultured for 4 days. As a differentiation maintenance medium, 10% (v / v) FBS-containing DMEM medium containing 10 μg / mL insulin was used. The test sample was prepared in a differentiation maintenance medium so that the total amount was a predetermined concentration (300 μg / ml concentration). Tables 1 and 2 show mass ratios in the total amount of test samples of each test sample.
(D) After culturing in (c), the medium supernatant was removed from the adipocytes. Next, 10% (v / v) formalin-containing PBS was added to the cells in an amount equivalent to that of the medium, and the mixture was allowed to stand for 10 minutes at room temperature, protected from light. The formalin solution was then removed from the cells and washed once with PBS.
(E) 10% (v / v) formalin-containing PBS was added to the cells at 100 μL / well, and the cells were fixed by allowing to stand at room temperature for 10 minutes in the dark.
(F) The formalin solution was removed and washed twice with PBS.
(G) Add 60% isopropanol (staining solution) solution of oil red in 3mg / mL at a volume of 50μL / well to adipocytes and blank well, and leave it at room temperature for 30 minutes protected from light. Lipids (lipid droplets) were stained. Next, the staining solution was removed, and 150 μL / well of a 60% by volume isopropanol aqueous solution was added, and the cells were washed twice.
(H) 100 volume% isopropanol was added to cells and blank wells at 100 μL / well, and the staining solution was extracted by shaking for about 10 minutes. The absorbance at 520 nm and 650 nm of the isopropanol solution from which the staining solution was extracted was measured.
(K) After the isopropanol solution was completely removed by air drying, the protein amount of each cell was calculated using Pierce ™ BCA Protein Assay kit (Thermo Fisher Scientific).
(L) Table 1 and Table 2 show the results of calculating the amount of accumulated fat per protein from the following formula and calculating the relative value to control. A smaller relative value indicates that fat accumulation is suppressed in adipocytes. The relative value results are shown in Tables 1 and 2 below.
Relative value of fat accumulation (%) = [[((Abs520 sample-Abs520 blank)-(Abs650 sample-Abs650 blank)] / (Protein sample)] / [(Abs520 control-Abs520 blank)-(Abs650 control-Abs650 blank )] / (Protein control)]] × 100 (%)
Abs520 sample, Abs650 sample: Absorbance of each example or comparative example at 520 nm and 650 nm
Abs520 control, Abs650 control: Absorbance of control at 520nm and 650nm
Abs520 blank, Abs650 blank: Absorbance of blank at 520nm, 650nm
Protein sample: amount of protein in cells in each example or comparative example
Protein control: amount of protein in cells in control
表1は、植物加工物と糖アルコールと消化性オリゴ糖との3成分を含有する実施例の組成及び評価結果を記載し、表2には消化性オリゴ糖と、2種以上の植物加工物とを含有する実施例の組成及び評価結果を記載している。表3は、消化性オリゴ糖、植物加工物単独又は、トレハロースと1種の植物加工物とを含有する比較例の組成及び評価結果を記載している。
一般に、繊維芽細胞は分化誘導によってPPARγ が発現して脂肪合成が盛んになり、細胞内への脂肪を蓄積させて丸く大きな脂肪細胞になることが知られている。
表1及び表2に記載の各実施例は、表3に示す各比較例に対し、培地中の被験試料濃度が低いにもかかわらず、吸光度の相対値(濁度)が低い。このことから、表1及び表2に記載の各実施例の組成物は、表3に示す各成分を単独で含有する比較例1〜11の組成物に比べて脂肪細胞において脂肪の蓄積が効果的に抑制され、体脂肪の蓄積を抑制でき、また体脂肪を低減できることが判る。一方で、二糖であるトレハロースと植物加工物1種のみを含有する場合(比較例12)は、脂肪細胞中の脂肪の蓄積が効果的に抑制されないことから、三糖以上の消化性オリゴ糖と特定の2種以上の成分との組み合わせにおいて優れた効果が得られることが示された。
Table 1 describes the compositions and evaluation results of Examples containing three components of plant processed products, sugar alcohols and digestible oligosaccharides, and Table 2 lists digestible oligosaccharides and two or more types of plant processed products. The composition and evaluation result of the Example containing these are described. Table 3 describes the composition and evaluation results of comparative examples containing digestible oligosaccharides, plant processed products alone or trehalose and one type of plant processed product.
In general, it is known that fibroblasts express PPARγ by induction of differentiation to increase fat synthesis and accumulate fat in the cells to become round and large fat cells.
Each Example described in Table 1 and Table 2 has a lower relative value of absorbance (turbidity) than each Comparative Example shown in Table 3, although the test sample concentration in the medium is low. From this, the composition of each Example described in Table 1 and Table 2 is more effective in fat accumulation in fat cells than the compositions of Comparative Examples 1 to 11 containing each component shown in Table 3 alone. It is understood that accumulation of body fat can be suppressed and body fat can be reduced. On the other hand, when only trehalose, which is a disaccharide, and one kind of plant processed product are contained (Comparative Example 12), accumulation of fat in fat cells is not effectively suppressed. It has been shown that an excellent effect can be obtained in combination with two or more specific components.
〔実施例20〜32、比較例13〜22〕
上記の各被験試料粉末を、下記(1)〜(7)の手順の筋芽細胞賦活試験に供した。
[筋芽細胞賦活試験]
(1)マウス骨格筋由来筋芽細胞(品名C2C12、理化学研究所バイオリソースセンター製)を37℃、5容量%CO2インキュベーター内で、10 vol%FBS含有DMEM培地を入れた75cm2フラスコを用いて、培養した。
(2)(1)の培養後、トリプシン処理により浮遊させた細胞を75cm2フラスコから回収し、細胞数を計測した。その後、コラーゲンコートした96 well plateにおける各wellに、2000/wellの細胞密度にて培地ごと播種した後、37℃、5容量%CO2インキュベーター内で24時間前培養した。
(3)(1)及び(2)とは別に、表4〜表6に記載の粉末をそれぞれ、10vol%FBS含有DMEM培地に表4〜表6に記載の濃度となるように分散又は溶解させた液を調製し、これを0.2μmフィルター(アドバンテック製)を用いてフィルター滅菌したものを該当する実施例又は比較例のサンプル液とした。なお、表4〜表6の「●」は、実施例又は比較例のサンプル液が、左欄の被験試料を左欄に記載の濃度で含有していたことを示す。コントロールとしては、10 vol%FBS含有DMEM培地そのものをサンプル液として用いた。
(4)各wellより培地を除去後、(3)で調製したサンプル液を各wellにそれぞれ200μLずつ添加し、37℃、5容量%CO2インキュベーター内で24時間培養した。
(5)(4)の培養後、培地を除去した後、各wellをPBS 200μL/wellで1回洗浄した。次いで、無血清DMEMで30倍に希釈したCell Counting Kit−8溶液(同仁化学社) 150μL/wellを添加した。
(6)(5)の溶液添加後のplateを37℃、5容量%CO2インキュベーター内に静置して適度に発色させた後、各wellの450nmにおける吸光度を測定した。得られたデータを元に、コントロールに対する細胞数の割合(% of control)を下記式に基づいて算出した。
% of control=(Data sample - Data blank)/(Data control - Data blank)×100
Data sample:各実施例又は比較例の吸光度
Data control:controlの吸光度
Data blank:細胞がないときの吸光度
[Examples 20 to 32, Comparative Examples 13 to 22]
Each said test sample powder was used for the myoblast activation test of the procedure of following (1)-(7).
[Myoblast activation test]
(1) Mouse skeletal muscle-derived myoblasts (product name: C2C12, manufactured by RIKEN BioResource Center) in a 37 cm, 5 vol% CO 2 incubator using a 75 cm 2 flask containing 10 vol% FBS-containing DMEM medium And cultured.
(2) After culturing in (1), cells suspended by trypsin treatment were collected from a 75 cm 2 flask, and the number of cells was counted. Thereafter, each well in a collagen-coated 96-well plate was seeded with the medium at a cell density of 2000 / well, and then pre-cultured for 24 hours in a 37 ° C., 5% by volume CO 2 incubator.
(3) Separately from (1) and (2), the powders shown in Tables 4 to 6 are dispersed or dissolved in the DMEM medium containing 10 vol% FBS so as to have the concentrations shown in Tables 4 to 6. A solution obtained by sterilizing a filter using a 0.2 μm filter (manufactured by Advantech) was used as a sample solution of the corresponding Example or Comparative Example. In Tables 4 to 6, “●” indicates that the sample solution of the example or the comparative example contained the test sample in the left column at the concentration described in the left column. As a control, 10 vol% FBS-containing DMEM medium itself was used as a sample solution.
(4) After removing the medium from each well, 200 μL each of the sample solution prepared in (3) was added to each well, followed by culturing in a 37 ° C., 5% by volume CO 2 incubator for 24 hours.
(5) After culturing in (4), the medium was removed, and each well was washed once with PBS 200 μL / well. Subsequently, 150 μL / well of Cell Counting Kit-8 solution (Dojin Chemical Co., Ltd.) diluted 30-fold with serum-free DMEM was added.
(6) The plate after the addition of the solution in (5) was allowed to stand in a 37 ° C., 5% by volume CO 2 incubator for appropriate color development, and then the absorbance at 450 nm of each well was measured. Based on the obtained data, the ratio of the number of cells to the control (% of control) was calculated based on the following formula.
% of control = (Data sample-Data blank) / (Data control-Data blank) × 100
Data sample: Absorbance of each example or comparative example
Data control: Absorbance of control
Data blank: Absorbance without cells
(7)評価 (7) Evaluation
消化性オリゴ糖と、植物加工物と、糖アルコールとを組み合わせた実施例20〜24の細胞数の割合(% of control)について、当該実施例における植物加工物及び糖アルコールのいずれかを非含有である対応比較例(下記表6参照)の細胞数の割合を100%として算出した値を表4に示す。 About the ratio (% of control) of the cell number of Examples 20-24 which combined digestible oligosaccharide, plant processed material, and sugar alcohol, it does not contain any of plant processed material and sugar alcohol in the said Example Table 4 shows values calculated by setting the ratio of the number of cells in the corresponding comparative example (see Table 6 below) as 100%.
また、消化性オリゴ糖と2種の植物加工物とを組み合わせた実施例25〜32の細胞数の割合(% of control)について、当該実施例における2種の植物加工物のいずれかを非含有である対応比較例(下記表6参照)の細胞数の割合を100%として算出した値を表5に示す。
表4に示すように、植物加工物と糖アルコールと消化性オリゴ糖との3成分を含有する各実施例では、消化性オリゴ糖と、植物加工物又は糖アルコールとの2成分を含有する対応比較例に対して、大幅に筋芽細胞の賦活活性が大幅に高くなることが判る。
また表5に示すように、消化性オリゴ糖と2種の植物加工物との3成分を含有する各実施例では、消化性オリゴ糖と、1種の植物加工物との2成分を含有する対応比較例に対して、大幅に筋芽細胞の賦活活性が大幅に高くなることが判る。なお比較例17については検出限界以下のため評価できなかった。
以上により、消化性オリゴ糖と植物加工物及び糖アルコールから選ばれる2種以上の成分とを組み合わせることにより、筋芽細胞が効果的に賦活され、筋組織におけるエネルギー代謝を高めることが示された。
As shown in Table 4, in each Example containing three components of a processed plant product, sugar alcohol, and digestible oligosaccharide, the correspondence containing two components of digestible oligosaccharide and processed plant product or sugar alcohol It can be seen that the activation activity of myoblasts is significantly higher than that of the comparative example.
Moreover, as shown in Table 5, each Example containing three components of digestible oligosaccharide and two kinds of plant processed products contains two components of digestible oligosaccharide and one type of plant processed product. It can be seen that the activation activity of myoblasts is significantly higher than the corresponding comparative example. Note that Comparative Example 17 could not be evaluated because it was below the detection limit.
From the above, it was shown that myoblasts were effectively activated and increased energy metabolism in muscle tissue by combining digestible oligosaccharides with two or more components selected from plant processed products and sugar alcohols. .
実施例33(青汁用組成物の製造)
下記処方例に記載の配合比に従って原料を調製し、本発明の効果を奏する青汁用組成物を製造した。
Example 33 (Production of a composition for green juice)
Raw materials were prepared according to the blending ratios described in the following formulation examples, and a green juice composition having the effects of the present invention was produced.
実施例34(青汁用組成物の製造)
下記処方例に記載の配合比に従って原料を調製し、本発明の効果を奏する青汁用組成物を製造した。
Example 34 (Production of a composition for green juice)
Raw materials were prepared according to the blending ratios described in the following formulation examples, and a green juice composition having the effects of the present invention was produced.
実施例35(青汁用組成物の製造)
下記処方例に記載の配合比に従って原料を調製し、本発明の効果を奏する青汁用組成物を製造した。
Example 35 (Production of a composition for green juice)
Raw materials were prepared according to the blending ratios described in the following formulation examples, and a green juice composition having the effects of the present invention was produced.
実施例36(青汁用組成物の製造)
下記処方例に記載の配合比に従って原料を調製し、本発明の効果を奏する青汁用組成物を製造した。
Example 36 (Production of a composition for green juice)
Raw materials were prepared according to the blending ratios described in the following formulation examples, and a green juice composition having the effects of the present invention was produced.
実施例37(錠剤の製造)
下記処方例に記載の配合比に従って原料を調製したのち、打錠機を用いて本発明の効果を奏する錠剤を製造した。
Example 37 (Manufacture of tablets)
After preparing the raw materials according to the blending ratios described in the following prescription examples, tablets having the effects of the present invention were produced using a tableting machine.
実施例38(錠剤の製造)
下記処方例に記載の配合比に従って原料を調製したのち、打錠機を用いて本発明の効果を奏する錠剤を製造した。
Example 38 (Manufacture of tablets)
After preparing the raw materials according to the blending ratios described in the following prescription examples, tablets having the effects of the present invention were produced using a tableting machine.
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