JP2019011314A - Regulatory t-cell inducer, adjuvant and food composition - Google Patents
Regulatory t-cell inducer, adjuvant and food composition Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019011314A JP2019011314A JP2018122078A JP2018122078A JP2019011314A JP 2019011314 A JP2019011314 A JP 2019011314A JP 2018122078 A JP2018122078 A JP 2018122078A JP 2018122078 A JP2018122078 A JP 2018122078A JP 2019011314 A JP2019011314 A JP 2019011314A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- regulatory
- food
- food composition
- allergen immunotherapy
- lycopene
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
本発明は、リコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導剤、アレルゲン免疫療法用アジュバント、及び、該制御性Ｔ細胞誘導剤を有効成分として含有する、炎症疾患の治療剤及び／又は予防剤、並びに、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤に関する。また、本発明は、リコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物、アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物、及び、該制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物を含有する、炎症疾患の治療及び／又は予防用食品組成物、並びに、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患治療用食品組成物に関する。 The present invention relates to a regulatory T cell inducer, an allergen immunotherapy adjuvant containing lycopene as an active ingredient, and a therapeutic and / or prophylactic agent for inflammatory diseases comprising the regulatory T cell inducer as an active ingredient. The present invention relates to an agent and a therapeutic agent for allergic diseases caused by allergen immunotherapy. The present invention also includes a food composition for inducing regulatory T cells, a food composition for adjuvants for allergen immunotherapy, and the food composition for inducing regulatory T cells, which contain lycopene as an active ingredient. The present invention relates to a food composition for treating and / or preventing inflammatory diseases, and a food composition for treating allergic diseases by allergen immunotherapy.
制御性Ｔ細胞（以下、Ｔｒｅｇともいう）は、リンパ球の中に存在する炎症抑制性の細胞であり、Ｔｒｅｇの分化誘導を介した炎症抑制が炎症性疾患に対する新たな予防及び治療戦略として注目されている。なかでも食物アレルギーをはじめとするアレルギー疾患のアレルゲン免疫療法において、近年、Ｔｒｅｇ誘導作用を有する成分がアジュバントとして利用され始めている。例えば、ビタミンＤ３、葛根湯、フコキサンチン等が、Ｔｒｅｇ誘導作用を有することが報告されている（非特許文献１、２、特許文献１）。
カロテノイドの一つであるリコピン（Ｌｙｃｏｐｅｎｅ）は、トマト等に含まれている赤い色素であり、天然に存在するカロテノイド化合物の一種であって、様々な疾病に対して予防的又は治療的に働くことが知られている。
カロテノイドは、カロテンとキサントフィルに大別され、特許文献１に、このうちのキサントフィルであるフコキサンチンにＴｒｅｇ誘導作用があることが報告されているが、カロテンである、リコピンにはＴｒｅｇ誘導作用がないと報告されている。これまでにリコピンがＴｒｅｇ誘導作用を有することは報告されていない。
Regulatory T cells (hereinafter also referred to as Tregs) are anti-inflammatory cells present in lymphocytes. Inhibition of inflammation through differentiation induction of Tregs has attracted attention as a new prevention and treatment strategy for inflammatory diseases. Has been. In particular, in allergen immunotherapy for allergic diseases including food allergies, components having a Treg-inducing action have recently begun to be used as adjuvants. For example, vitamin D3, kakkonto, fucoxanthin, and the like have been reported to have a Treg-inducing action (Non-patent
One of the carotenoids, lycopene (Lycopene) is a red pigment contained in tomatoes and the like, and is a naturally occurring carotenoid compound that works preventively or therapeutically on various diseases. It has been known.
Carotenoids are roughly classified into carotenes and xanthophylls, and Patent Document 1 reports that fucoxanthin, which is a xanthophyll, has Treg-inducing action, but caroten, lycopene, has no Treg-inducing action. It is reported. So far, it has not been reported that lycopene has a Treg-inducing action.
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであって、リコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導剤、アレルゲン免疫療法用アジュバント、及び、該制御性Ｔ細胞誘導剤を有効成分として含有する、炎症疾患の治療剤及び／又は予防剤、並びに、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤を提供すること、及び、制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物、アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物、及び、該制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物を含有する炎症疾患の治療及び／又は予防用食品、並びに、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患治療用食品組成物を提供することを課題とする。 The present invention has been made in view of the above circumstances, and contains a regulatory T cell inducer, an adjuvant for allergen immunotherapy, which contains lycopene as an active ingredient, and the regulatory T cell inducer as an active ingredient Providing a therapeutic and / or prophylactic agent for inflammatory diseases, a therapeutic agent for allergic diseases by allergen immunotherapy, and a food composition for inducing regulatory T cells, a food for adjuvants for allergen immunotherapy It is an object of the present invention to provide a composition, a food for treating and / or preventing inflammatory diseases containing the food composition for inducing regulatory T cells, and a food composition for treating allergic diseases by allergen immunotherapy. .
本発明者らは、鋭意研究の結果、リコピンが単独で優れた制御性Ｔ細胞誘導作用を有し、アレルゲン免疫療法用アジュバントや炎症疾患の治療剤及び／又は予防剤、及び、アレルギー疾患の治療及び／又は予防用食品組成物として有効であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、以下の［１］〜［２７］に関する。 As a result of intensive studies, the present inventors have found that lycopene alone has an excellent regulatory T cell inducing action, and is an adjuvant for allergen immunotherapy, a therapeutic and / or preventive agent for inflammatory diseases, and a treatment for allergic diseases. And it discovered that it was effective as a food composition for prevention, and came to complete this invention. That is, the present invention relates to the following [1] to [27].
［１］リコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導剤。
［２］炎症疾患を発症していない対象に対して投与する、［１］の制御性Ｔ細胞誘導剤。
［３］前記対象がヒトである［２］に記載の制御性Ｔ細胞誘導剤。
［４］前記制御性Ｔ細胞がＦｏｘｐ３陽性である［１］〜［３］のいずれか一つの制御性Ｔ細胞誘導剤。
［５］アレルゲン免疫療法用アジュバントとして使用するための、［１］〜［４］のいずれか一つの制御性Ｔ細胞誘導剤。
［６］前記アレルゲン免疫療法が食物アレルギーに対するアレルゲン免疫療法である、［５］の制御性Ｔ細胞誘導剤。
［７］［１］〜［４］のいずれか一つの制御性Ｔ細胞誘導剤を含有する、炎症疾患の治療剤及び／又は予防剤。
［８］前記炎症疾患がアレルギー疾患である、［７］の治療剤及び／又は予防剤。
［９］前記アレルギー疾患が食物アレルギーである、［８］の治療剤及び／又は予防剤。
［１０］前記炎症疾患が大腸炎である、［７］の治療剤及び／又は予防剤。
［１１］リコピンを有効成分として含有する、アレルゲン免疫療法用アジュバント。
［１２］前記アレルゲン免疫療法が、食物アレルギーに対するアレルゲン免疫療法である、［１１］のアジュバント。
［１３］［１１］又は［１２］のアジュバント及び、アレルゲンを有効成分として含有する、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤。
［１４］前記アレルギー疾患が食物アレルギーである、［１３］の治療剤。
［１５］リコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物。
［１６］炎症疾患を発症していない対象に摂取させる、［１５］の食品組成物。
［１７］前記対象がヒトである［１６］の食品組成物。
［１８］前記制御性Ｔ細胞がＦｏｘｐ３陽性である［１５］〜［１７］のいずれか一つの食品組成物。
［１９］［１５］〜［１８］のいずれか一つの食品組成物を含有する、炎症疾患の治療及び／又は予防用食品組成物。
［２０］前記炎症疾患がアレルギー疾患である、［１９］の治療及び／又は予防用食品組成物。
［２１］前記アレルギー疾患が食物アレルギーである、［２０］の治療及び／又は予防用食品組成物。
［２２］前記炎症疾患が大腸炎である、［１９］の治療及び／又は予防用食品組成物。
［２３］リコピンを有効成分として含有する、アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物。
［２４］前記アレルゲン免疫療法が食物アレルギー疾患に対するアレルゲン免疫療法である、［２３］の食品組成物。
［２５］［１１］又は［１２］のアジュバント及び、アレルゲンを含有する、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患治療用食品組成物。
［２６］［２３］又は［２４］のアレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物及び、アレルゲンを含有する、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患治療用食品組成物。
［２７］前記食品組成物が、健康食品、機能性表示食品、特別用途食品、病者用食品、栄養補助食品、サプリメント又は特定保健用食品である、［１５］〜［２６］のいずれか一つの食品組成物。
[1] A regulatory T cell inducer containing lycopene as an active ingredient.
[2] The regulatory T cell inducer of [1], which is administered to a subject who has not developed an inflammatory disease.
[3] The regulatory T cell inducer according to [2], wherein the subject is a human.
[4] The regulatory T cell inducer according to any one of [1] to [3], wherein the regulatory T cells are Foxp3 positive.
[5] The regulatory T cell inducer according to any one of [1] to [4] for use as an adjuvant for allergen immunotherapy.
[6] The regulatory T cell inducer of [5], wherein the allergen immunotherapy is an allergen immunotherapy for food allergy.
[7] A therapeutic and / or prophylactic agent for inflammatory diseases, comprising the regulatory T cell inducer of any one of [1] to [4].
[8] The therapeutic and / or prophylactic agent according to [7], wherein the inflammatory disease is an allergic disease.
[9] The therapeutic and / or prophylactic agent according to [8], wherein the allergic disease is food allergy.
[10] The therapeutic and / or prophylactic agent according to [7], wherein the inflammatory disease is colitis.
[11] An allergen immunotherapy adjuvant comprising lycopene as an active ingredient.
[12] The adjuvant of [11], wherein the allergen immunotherapy is an allergen immunotherapy for food allergy.
[13] A therapeutic agent for allergic diseases by allergen immunotherapy, comprising the adjuvant of [11] or [12] and an allergen as active ingredients.
[14] The therapeutic agent according to [13], wherein the allergic disease is food allergy.
[15] A food composition for inducing regulatory T cells, which contains lycopene as an active ingredient.
[16] The food composition according to [15], which is ingested by a subject who has not developed an inflammatory disease.
[17] The food composition according to [16], wherein the subject is a human.
[18] The food composition according to any one of [15] to [17], wherein the regulatory T cells are Foxp3 positive.
[19] A food composition for treating and / or preventing an inflammatory disease, comprising the food composition according to any one of [15] to [18].
[20] The food composition for treatment and / or prevention according to [19], wherein the inflammatory disease is an allergic disease.
[21] The food composition for treatment and / or prevention according to [20], wherein the allergic disease is food allergy.
[22] The food composition for treatment and / or prevention according to [19], wherein the inflammatory disease is colitis.
[23] A food composition for an adjuvant for allergen immunotherapy, which contains lycopene as an active ingredient.
[24] The food composition according to [23], wherein the allergen immunotherapy is an allergen immunotherapy for food allergic diseases.
[25] A food composition for treating allergic diseases by allergen immunotherapy, comprising the adjuvant of [11] or [12] and an allergen.
[26] A food composition for adjuvants for allergen immunotherapy according to [23] or [24] and a food composition for allergic disease treatment by allergen immunotherapy, comprising allergens.
[27] Any one of [15] to [26], wherein the food composition is a health food, a functional label food, a special-purpose food, a food for a sick person, a dietary supplement, a supplement, or a food for specified health use. Food composition.
本発明に係るリコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導剤、アレルゲン免疫療法用アジュバントは、優れた制御性Ｔ細胞誘導作用を有し、炎症疾患、アレルギー疾患等の治療剤及び／又は予防剤として有用である。また、本発明に係るリコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物、アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物は、優れた制御性Ｔ細胞誘導作用を有し、炎症疾患の治療及び／又は予防用食品組成物として有用である。 The regulatory T cell-inducing agent and allergen immunotherapy adjuvant containing lycopene according to the present invention as an active ingredient has an excellent regulatory T cell-inducing action, and is a therapeutic agent for inflammatory diseases, allergic diseases, and / or the like. Useful as a preventive agent. The food composition for inducing regulatory T cells and the food composition for adjuvants for allergen immunotherapy, which contain lycopene according to the present invention as an active ingredient, have excellent regulatory T cell inducing action and inflammation It is useful as a food composition for treatment and / or prevention of diseases.
≪リコピン≫
以下、本発明について詳しく説明する。
本発明に用いられるリコピンは、下記構造を有する分子量３５６．８７のカロテノイドであり、水には殆ど溶けない脂溶性の赤色色素である。
≪Lycopene≫
The present invention will be described in detail below.
Lycopene used in the present invention is a carotenoid having a molecular weight of 356.87 having the following structure, and is a fat-soluble red pigment that hardly dissolves in water.
本発明のリコピンは、異性体が存在する。該異性体としては、オールトランス異性体と、１１個の共役π結合のうち、少なくとも１個にシス型を含む、シス異性体等が挙げられる。該シス異性体としては、５−シス体、９−シス体、１３−シス体等が挙げられる。本発明において用いられるリコピンは、これらのリコピンのいずれであってもよい。 The lycopene of the present invention has isomers. Examples of the isomer include an all-trans isomer and a cis isomer containing at least one cis form among 11 conjugated π bonds. Examples of the cis isomer include 5-cis isomer, 9-cis isomer, 13-cis isomer and the like. Any of these lycopenes may be used as the lycopene used in the present invention.
リコピンは、天然においては、トマト、柿、スイカ、ピンクグレープフルーツなどの天然物に含まれており、本発明において用いられるリコピンは、これらの天然物から分離及び抽出されたのものであってもよい。 Lycopene is naturally contained in natural products such as tomatoes, strawberries, watermelons, pink grapefruits, etc., and the lycopene used in the present invention may be separated and extracted from these natural products.
また、本発明において用いられるリコピンは、天然物からの抽出物を必要に応じて適宜精製したものでもよいし、合成品であってもよい。 The lycopene used in the present invention may be a product obtained by appropriately purifying an extract from a natural product as necessary, or may be a synthetic product.
また、本発明において用いられるリコピンは、リコピン誘導体であってもよい。該リコピンの誘導体としては、例えば、レチノイン酸のようなカロテノイド、合成アシクロ−レチノイン酸、１−ＨＯ−３’，４’−ジデヒドロリコピン、３，１’−（ＨＯ）２−γ−カロテン、１，１’−（ＨＯ）２−３，４，３’，４’−テトラデヒドロリコピン、１，１’−（ＨＯ）２−３，４−ジデヒドロリコピン等が挙げられ、常法に従い、製造することができる。 The lycopene used in the present invention may be a lycopene derivative. Examples of the lycopene derivative include carotenoids such as retinoic acid, synthetic acyclo-retinoic acid, 1-HO-3 ′, 4′-didehydrolycopene, 3,1 ′-(HO) 2 -γ-carotene, 1,1 ′-(HO) 2 -3,4,3 ′, 4′-tetradehydrolycopene, 1,1 ′-(HO) 2 3,4-didehydrolycopene, etc. Can be manufactured.
本発明において用いられるリコピンの形態の一つとしては、トマト加工品から抽出された脂溶性抽出物が挙げられる。トマト加工品としては、トマトペースト、トマトピューレ、トマトジュース、トマトパルプ等が挙げられる。該トマト加工品から抽出された脂溶性抽出物は、当該脂溶性抽出物を含む組成物中における安定性、品質、生産性の点から特に好ましい。
ここで、トマト加工品から抽出された脂溶性抽出物とは、トマト加工品から、有機溶剤や油を用いて抽出された抽出物や超臨界抽出法によって抽出された抽出物を意味する。 脂溶性抽出物であるリコピンとしては、リコピン含有オイル又はオレオレジンとして広く市販されているトマト抽出物を用いることができ、例えば、サンブライト（株）より販売されているＬｙｃ−Ｏ−Ｍａｔｏ １５％、Ｌｙｃ−Ｏ−Ｍａｔｏ ６％、協和発酵バイオ（株）より販売されているリコピン１８等が挙げられる。
One of the forms of lycopene used in the present invention is a fat-soluble extract extracted from processed tomato products. Examples of processed tomato products include tomato paste, tomato puree, tomato juice, and tomato pulp. The fat-soluble extract extracted from the processed tomato product is particularly preferable in terms of stability, quality, and productivity in the composition containing the fat-soluble extract.
Here, the fat-soluble extract extracted from the processed tomato product means an extract extracted from the processed tomato product using an organic solvent or oil, or an extract extracted by a supercritical extraction method. As the lycopene which is a fat-soluble extract, a tomato extract widely marketed as lycopene-containing oil or oleoresin can be used. For example, Lyc-O-Mato 15% sold by Sunbright Co., Ltd. Lycopene 18 sold by Lyc-O-Mato 6%, Kyowa Hakko Bio Co., Ltd., and the like.
≪制御性Ｔ細胞誘導剤≫
リコピンは、後述の実施例に記載の通り、制御性Ｔ細胞誘導作用を有する。従って、リコピンは、制御性Ｔ細胞誘導剤、制御性Ｔ細胞誘導作用を介するアレルゲン免疫療法用アジュバント、制御性Ｔ細胞誘導による炎症疾患の治療剤及び／又は予防剤の有効成分として用いることができる。
≪Regulatory T cell inducer≫
Lycopene has a regulatory T cell-inducing action, as described in Examples below. Therefore, lycopene can be used as an active ingredient of a regulatory T cell inducer, an adjuvant for allergen immunotherapy via a regulatory T cell inducing action, and a therapeutic and / or prophylactic agent for inflammatory diseases caused by regulatory T cell induction. .
本発明において「制御性Ｔ細胞」とは、免疫反応を抑制する特定のＴ細胞サブポピュレーションを意味する。 In the present invention, “regulatory T cells” means a specific T cell subpopulation that suppresses an immune response.
制御性Ｔ細胞は、ＴＧＦ−β存在下における抗原刺激により末梢血中のナイーブＴ細胞から分化誘導され、免疫寛容の機構に関与している。 Regulatory T cells are induced to differentiate from naive T cells in peripheral blood by antigen stimulation in the presence of TGF-β, and are involved in the mechanism of immune tolerance.
本発明における制御性Ｔ細胞は、Ｆｏｘｐ３陽性細胞であり、好ましくは、Ｆｏｘｐ３及びＣＤ２５陽性細胞であり、これらの表現マーカーを検出することにより、制御性Ｔ細胞の存在を確認することができる。 The regulatory T cells in the present invention are Foxp3 positive cells, preferably Foxp3 and CD25 positive cells, and the presence of regulatory T cells can be confirmed by detecting these expression markers.
本発明において、制御性Ｔ細胞誘導作用の測定は、ナイーブＴ細胞から、制御性Ｔ細胞への誘導を測定できる方法であれば、特に制限はされない。例えば、生体への被検物質の投与下、又は非投与下で、大腸粘膜固有層などの対象組織におけるＦｏｘｐ３陽性ＣＤ２５陽性細胞の割合を、フローサイトメーターを用いて測定することにより、被検物質の制御性Ｔ細胞誘導作用を測定することができる。被検物質投与下における制御性Ｔ細胞の割合が、被検物質非投与下での制御性Ｔ細胞の割合と比較して、高くなれば当該被検物質は制御性Ｔ細胞誘導作用を有すると評価することができる。 In the present invention, the regulatory T cell induction action is not particularly limited as long as it is a method capable of measuring induction from naive T cells to regulatory T cells. For example, by measuring the ratio of Foxp3-positive CD25-positive cells in a target tissue such as the lamina propria of the large intestine with or without administration of the test substance to a living body using a flow cytometer, It is possible to measure the regulatory T cell-inducing action. If the ratio of regulatory T cells under test substance administration is higher than the ratio of regulatory T cells under non-test substance administration, the test substance has regulatory T cell inducing action. Can be evaluated.
また、制御性Ｔ細胞誘導作用は、脾臓より単離されたＣＤ４陽性のナイーブＴ細胞を、制御性Ｔ細胞へ分化誘導することで直接評価することもできる。例えば、脾臓から単離した細胞を、さらにＣＤ４の発現により選別することによって得られたナイーブＴ細胞をＴＧＦ−β等のサイトカインと被検物質とを添加して培養し、制御性Ｔ細胞の割合をフローサイトメーターにより測定することにより、制御性Ｔ細胞誘導作用を測定することができる。 The regulatory T cell inducing effect can also be directly evaluated by inducing differentiation of CD4 positive naive T cells isolated from the spleen into regulatory T cells. For example, naive T cells obtained by further sorting cells isolated from the spleen based on the expression of CD4 are cultured by adding a cytokine such as TGF-β and a test substance, and the ratio of regulatory T cells. Can be measured with a flow cytometer to measure regulatory T cell inducing action.
制御性Ｔ細胞は、免疫寛容機構に関与しており、本発明の制御性Ｔ細胞誘導剤は、制御性Ｔ細胞を誘導することにより、制御性Ｔ細胞が関与する疾患を治療及び／又は予防することができる。本発明において、制御性Ｔ細胞を誘導することにより治療及び／又は予防することができる制御性Ｔ細胞が関与する疾患としては、特に制限はないが、例えば、アレルギー疾患、大腸炎、肺炎等の炎症疾患、心筋梗塞、糖尿病、メタボリックシンドローム等が挙げられる。アレルギー疾患としては、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、毒物アレルギー、及びアレルギー性結膜炎等のＩ型即時型アトピー性アレルギー等を挙げることができる。 Regulatory T cells are involved in the immune tolerance mechanism, and the regulatory T cell inducer of the present invention induces regulatory T cells to treat and / or prevent diseases involving regulatory T cells. can do. In the present invention, the disease involving regulatory T cells that can be treated and / or prevented by inducing regulatory T cells is not particularly limited, and examples thereof include allergic diseases, colitis, pneumonia, etc. Inflammatory diseases, myocardial infarction, diabetes, metabolic syndrome and the like can be mentioned. Examples of allergic diseases include type I immediate atopic allergy such as allergic asthma, allergic rhinitis, food allergy, toxic allergy, and allergic conjunctivitis.
本発明に係る制御性Ｔ細胞誘導剤の投与形態としては、例えば錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、溶液、シロップ剤、乳液等による経口投与を挙げることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主薬であるリコピンに加えて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬等の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤を用いて製剤化することができる。 Examples of the dosage form of the regulatory T cell inducer according to the present invention include oral administration such as tablets, coated tablets, capsules, granules, powders, solutions, syrups, and emulsions. These various preparations include, in addition to lycopene, which is the main agent, in accordance with conventional methods, such as excipients, binders, disintegrants, lubricants, coloring agents, flavoring agents, solubilizing agents, suspension agents, coating agents, etc. It can be formulated using known adjuvants that can be usually used in the pharmaceutical technical field.
本発明の制御性Ｔ細胞誘導剤におけるリコピン又はその誘導体の含有量は、剤型によって異なるため特に限定されない。 The content of lycopene or a derivative thereof in the regulatory T cell inducer of the present invention is not particularly limited because it varies depending on the dosage form.
本発明に係る制御性Ｔ細胞誘導剤の投与量は、個々の薬剤の活性、患者の性別、症状、年齢、投与方法によって異なるが、例えば、リコピン又はその誘導体を、乾燥物換算で、通常、１回１０ｍｇ〜１００ｍｇ、好ましくは、１５ｍｇ〜６０ｍｇ投与することができる量である。 The dose of the regulatory T cell inducer according to the present invention varies depending on the activity of each drug, the sex, symptom, age, and administration method of the patient. For example, lycopene or a derivative thereof is usually converted into a dry matter, The amount is 10 mg to 100 mg, preferably 15 mg to 60 mg at a time.
本発明の制御性Ｔ細胞誘導剤を投与する対象は、動物、中でも哺乳類が挙げられる。哺乳類としては、特に制限はないが、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ等が挙げられ、ヒトであることが好ましい。また、本発明の制御性Ｔ細胞誘導剤は、炎症疾患に対する予防剤として、炎症疾患を発症していない上記対象に投与することもできる。 The subject to which the regulatory T cell inducer of the present invention is administered includes animals, especially mammals. The mammal is not particularly limited, and examples thereof include humans, dogs, cats, cows, horses and the like, and humans are preferable. Moreover, the regulatory T cell inducer of the present invention can also be administered to the above-mentioned subject who has not developed an inflammatory disease as a preventive agent for the inflammatory disease.
≪アレルゲン免疫療法用アジュバント≫
本発明により、リコピンを有効成分として含有する、アレルゲン免疫療法用アジュバントを提供することができる。アレルゲン免疫療法とは、アレルギー疾患の病因であるアレルゲンを投与していくことにより、アレルゲンに暴露された場合に引き起こされる関連症状を緩和する治療法である。
アレルゲン免疫療法の効果発現機序には種々の側面があるが、そのうちの一つとして、自然暴露より多量なアレルゲンを体内に取り込むことで、制御性Ｔ細胞の誘導やＴｈ２細胞の増加抑制等が引き起こされ、これによりアレルギー反応の抑制効果を発現する機序が挙げられる。本発明におけるアレルゲン免疫療法用アジュバントは、該アレルゲン免疫療法において、アレルゲンと共に投与することで、制御性Ｔ細胞の誘導やＴｈ２細胞の増加抑制等のアレルゲンの作用を増強させることができる。
≪Adjuvant for allergen immunotherapy≫
ADVANTAGE OF THE INVENTION By this invention, the adjuvant for allergen immunotherapy which contains a lycopene as an active ingredient can be provided. Allergen immunotherapy is a treatment method that alleviates related symptoms caused by exposure to allergen by administering allergen, which is the etiology of allergic diseases.
There are various aspects of the mechanism of allergen immunotherapy, but one of them is the induction of regulatory T cells and suppression of increase in Th2 cells by incorporating a larger amount of allergen into the body than natural exposure. The mechanism by which it is caused and expresses the inhibitory effect of allergic reaction is mentioned. The adjuvant for allergen immunotherapy in the present invention can enhance the action of allergens such as induction of regulatory T cells and suppression of increase in Th2 cells by administration with allergens in the allergen immunotherapy.
本発明に係るリコピンは、制御性Ｔ細胞誘導作用を有するため、本発明のリコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導剤は、アレルゲン免疫療法用アジュバントとして使用することができる。本発明のアレルゲン免疫療法用アジュバントが有効なアレルゲン免疫療法としては、アレルギー疾患に対するアレルゲン免疫療法であれば特に制限はないが、例えば、食物アレルギーに対するアレルゲン免疫療法等が挙げられる。 Since the lycopene according to the present invention has a regulatory T cell-inducing action, the regulatory T cell-inducing agent containing the lycopene of the present invention as an active ingredient can be used as an adjuvant for allergen immunotherapy. The allergen immunotherapy for which the adjuvant for allergen immunotherapy of the present invention is effective is not particularly limited as long as it is an allergen immunotherapy for allergic diseases, and examples thereof include allergen immunotherapy for food allergy.
本発明のリコピンを有効成分として含有する、アレルゲン免疫療法用アジュバントは、アレルゲンと共に用いることで、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患を治療することができる。
本発明のアレルゲン免疫療法用アジュバントにより治療することができるアレルギー疾患は、特に制限はないが、例えば、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、毒物アレルギー、及びアレルギー性結膜炎等のＩ型即時型アトピー性アレルギー等を挙げることができる。
The allergen immunotherapy adjuvant containing the lycopene of the present invention as an active ingredient can be used together with an allergen to treat allergic diseases caused by allergen immunotherapy.
The allergic disease that can be treated with the allergen immunotherapy adjuvant of the present invention is not particularly limited, but for example, type I immediate type such as allergic asthma, allergic rhinitis, food allergy, toxic allergy, and allergic conjunctivitis Atopic allergies and the like can be mentioned.
本発明のアレルゲン免疫療法用アジュバントにおけるリコピン又はその誘導体の含有量は、剤型によって異なるため特に限定されない。 The content of lycopene or a derivative thereof in the allergen immunotherapy adjuvant of the present invention is not particularly limited because it varies depending on the dosage form.
≪アレルギー疾患治療剤≫
本発明のリコピンを有効成分として含有する、アレルゲン免疫療法用アジュバントは、アレルゲンと共に用いることで、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患を治療することができるため、該アレルゲン免疫療法用アジュバント及び、アレルゲンは、アレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤の有効成分として用いることができる。
本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤により治療することができるアレルギー疾患は、特に制限はないが、例えば、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、毒物アレルギー、及びアレルギー性結膜炎等のＩ型即時型アトピー性アレルギー等を挙げることができる。
≪Allergic disease treatment agent≫
Since the allergen immunotherapy adjuvant containing the lycopene of the present invention as an active ingredient can be used together with the allergen to treat allergic diseases caused by allergen immunotherapy, the allergen immunotherapy adjuvant and the allergen are allergens. It can be used as an active ingredient of a therapeutic agent for allergic diseases by immunotherapy.
The allergic disease that can be treated with the therapeutic agent for allergic disease by the allergen immunotherapy of the present invention is not particularly limited, and examples thereof include allergic asthma, allergic rhinitis, food allergy, toxic allergy, and allergic conjunctivitis. Examples include type I immediate atopic allergy.
本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤の投与形態としては、例えば錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、溶液、シロップ剤、乳液等による経口投与を挙げることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主薬であるリコピン、及びアレルゲンに加えて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬等の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤を用いて製剤化することができる。 Examples of the administration form of the therapeutic agent for allergic diseases by allergen immunotherapy of the present invention include oral administration such as tablets, coated tablets, capsules, granules, powders, solutions, syrups, and emulsions. In addition to lycopene, which is the main drug, and allergens, these various preparations are used in addition to excipients, binders, disintegrants, lubricants, coloring agents, flavoring agents, solubilizers, suspending agents, and coatings. It can be formulated using known adjuvants that can be used normally in the pharmaceutical technical field such as pharmaceuticals.
本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤におけるリコピン又はその誘導体の含有量は、剤型によって異なるが、一般にアレルゲン免疫療法用によるアレルギー疾患の治療剤の全質量に対して、１質量％〜５０質量％であることが好ましく、１〜３０質量％であることがより好ましい。
また、本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤におけるアレルゲンの含有量は、剤型及び使用するアレルゲン、並びに治療期間等により異なるが、一般にアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤の全質量に対して、１質量％〜５０質量％であることが好ましく、１〜２０質量％であることがより好ましい。
The content of lycopene or a derivative thereof in the therapeutic agent for allergic diseases by allergen immunotherapy of the present invention varies depending on the dosage form, but is generally 1% by mass to the total mass of the therapeutic agent for allergic diseases by allergen immunotherapy. It is preferable that it is 50 mass%, and it is more preferable that it is 1-30 mass%.
In addition, the allergen content in the therapeutic agent for allergic diseases by the allergen immunotherapy of the present invention varies depending on the dosage form, the allergen used, the treatment period, etc., but generally the total mass of the therapeutic agent for allergic diseases by the allergen immunotherapy. On the other hand, it is preferable that it is 1 mass%-50 mass%, and it is more preferable that it is 1-20 mass%.
本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤の投与量は、個々の薬剤の活性、患者の性別、症状、年齢、投与方法によって異なるが、例えば、リコピン又はその誘導体を、乾燥物換算で、通常、１回１０ｍｇ〜１００ｍｇ、好ましくは、１５ｍｇ〜６０ｍｇ投与することができる量である。 The dosage of the therapeutic agent for allergic diseases by the allergen immunotherapy of the present invention varies depending on the activity of each drug, the sex, symptom, age, and administration method of the patient, for example, lycopene or a derivative thereof in terms of dry matter, Usually, the dose is 10 mg to 100 mg, preferably 15 mg to 60 mg.
本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤を投与する対象は、動物、中でも哺乳類が挙げられる。哺乳類としては、特に制限はないが、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ等が挙げられ、ヒトであることが好ましい。また、本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤の有効成分の一つであるリコピンは、食経験のあるトマト等の天然物に含まれていることから、本発明のアレルゲン免疫療法によるアレルギー疾患の治療剤は、長期間にわたって行われるアレルゲン免疫療法において、副作用の可能性が低く、非常に安全性が高い。 The subject to which the therapeutic agent for allergic diseases by the allergen immunotherapy of the present invention is administered includes animals, particularly mammals. The mammal is not particularly limited, and examples thereof include humans, dogs, cats, cows, horses and the like, and humans are preferable. In addition, lycopene, which is one of the active ingredients of the therapeutic agent for allergic diseases by the allergen immunotherapy of the present invention, is contained in natural products such as tomatoes with eating experience. The therapeutic agent for a disease has a low possibility of side effects and is very safe in allergen immunotherapy performed over a long period of time.
≪食品組成物≫
本発明により、リコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物を提供することができる。本発明に係るリコピンは、制御性Ｔ細胞誘導作用を有するため、有効成分として食品組成物に含有させることにより、炎症疾患の治療用及び／又は予防用食品の有効成分として、各種食品組成物に含有させることができる。本発明において、食品組成物には、食品だけでなく飲料も含む。
≪Food composition≫
According to the present invention, a food composition for inducing regulatory T cells, which contains lycopene as an active ingredient, can be provided. Since the lycopene according to the present invention has a regulatory T cell inducing action, it can be incorporated into various food compositions as an active ingredient of foods for treating and / or preventing inflammatory diseases by being contained in a food composition as an active ingredient. It can be included. In the present invention, the food composition includes not only food but also beverages.
本発明の食品組成物において、制御性Ｔ細胞は、Ｆｏｘｐ３陽性細胞であり、好ましくは、Ｆｏｘｐ３及びＣＤ２５陽性細胞である。 In the food composition of the present invention, the regulatory T cells are Foxp3 positive cells, preferably Foxp3 and CD25 positive cells.
本発明の制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物により治療及び／又は予防することができる疾患としては、特に制限はないが、例えば、例えば、大腸炎、肺炎等の炎症疾患、心筋梗塞、糖尿病、メタボリックシンドローム、アレルギー疾患等が挙げられる。アレルギー疾患としては、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、毒物アレルギー、及びアレルギー性結膜炎等のＩ型即時型アトピー性アレルギー等を挙げることができる。 The disease that can be treated and / or prevented by the food composition for inducing regulatory T cells of the present invention is not particularly limited. For example, inflammatory diseases such as colitis and pneumonia, myocardial infarction, diabetes, Examples include metabolic syndrome and allergic diseases. Examples of allergic diseases include type I immediate atopic allergy such as allergic asthma, allergic rhinitis, food allergy, toxic allergy, and allergic conjunctivitis.
本発明の制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物を摂取させる対象は、動物、中でも哺乳類が挙げられる。哺乳類としては、特に制限はないが、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ等が挙げられ、ヒトであることが好ましい。また、本発明の制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物の有効成分であるリコピンは、アレルギー疾患に対する予防剤として、炎症疾患を発症していない対象に摂取させることもできる。 Examples of the subject to take the food composition for inducing regulatory T cells of the present invention include animals, especially mammals. The mammal is not particularly limited, and examples thereof include humans, dogs, cats, cows, horses and the like, and humans are preferable. In addition, lycopene, which is an active ingredient of the food composition for inducing regulatory T cells of the present invention, can be taken by a subject who has not developed an inflammatory disease as a preventive agent for allergic diseases.
また、本発明により、リコピンを有効成分として含有する、アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物を提供することができる。本発明に係るリコピンは、制御性Ｔ細胞誘導作用を有するため、アレルゲン免疫療法のためのアジュバントとして食品組成物に含有させることにより、アレルゲン免疫療法においてアレルゲンの作用を増強させることができる。本発明のアレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物が有効なアレルゲン免疫療法としては、アレルギー疾患に対するアレルゲン免疫療法であれば特に制限はないが、例えば、食物アレルギーに対するアレルゲン免疫療法等が挙げられる。 In addition, according to the present invention, a food composition for an adjuvant for allergen immunotherapy, which contains lycopene as an active ingredient, can be provided. Since the lycopene according to the present invention has a regulatory T cell inducing action, the action of the allergen in the allergen immunotherapy can be enhanced by containing it in the food composition as an adjuvant for the allergen immunotherapy. The allergen immunotherapy for which the food composition for adjuvants for the allergen immunotherapy of the present invention is effective is not particularly limited as long as it is an allergen immunotherapy for allergic diseases, and examples thereof include allergen immunotherapy for food allergy. .
前記アレルゲン免疫療法用アジュバント及び、アレルゲンを含有する食品組成物、並びに、前記アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物及び、アレルゲンを含有する食品組成物は、アレルギー疾患治療用食品組成物として、アレルギー疾患を治療することができる。当該アレルギー疾患治療用食品組成物により治療することができるアレルギー疾患としては、特に制限はないが、例えば、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、毒物アレルギー、及びアレルギー性結膜炎等のＩ型即時型アトピー性アレルギー等を挙げることができる。 The adjuvant for allergen immunotherapy and a food composition containing allergen, and the food composition for adjuvant for allergen immunotherapy and the food composition containing allergen are as food compositions for treating allergic diseases, Can treat allergic diseases. Allergic diseases that can be treated with the food composition for treating allergic diseases are not particularly limited, but examples include type I immediates such as allergic asthma, allergic rhinitis, food allergies, toxic allergies, and allergic conjunctivitis. Type atopic allergy.
本発明のアレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物、及びアレルギー疾患治療用食品組成物を摂取させる対象は、動物、中でも哺乳類が挙げられる。哺乳類としては、特に制限はないが、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ等が挙げられ、ヒトであることが好ましい。 The subject to be ingested with the food composition for adjuvant and the food composition for treating allergic disease for allergen immunotherapy of the present invention includes animals, especially mammals. The mammal is not particularly limited, and examples thereof include humans, dogs, cats, cows, horses and the like, and humans are preferable.
本発明の制御性T細胞誘導用食品組成物、アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物、及びアレルギー疾患治療用食品組成物（以下、本発明の食品組成物と総称する）としては、特に限定されないが、例えば、各種飲料、ヨーグルト、チーズ、バター、乳酸菌発酵品等の各種乳製品、流動食、ゼリー、キャンディ、レトルト食品、錠菓、クッキー、カステラ、パン、ビスケット、などが挙げられる。また、健康食品、機能性表示食品、特別用途食品、病者用食品、栄養補助食品、サプリメント又は特定保健用食品等として使用することもできる。 As the food composition for inducing regulatory T cells of the present invention, the food composition for adjuvant for allergen immunotherapy, and the food composition for treating allergic diseases (hereinafter collectively referred to as the food composition of the present invention), Although not limited, For example, various dairy products, such as various drinks, yoghurt, cheese, butter, lactic-acid-bacteria fermented products, a liquid food, jelly, a candy, a retort food, a tablet confectionery, a cookie, castella, bread, biscuits, etc. Moreover, it can also be used as a health food, a functional label food, a special-purpose food, a food for a sick person, a dietary supplement, a supplement, or a food for specified health use.
本発明の食品組成物には、可食性の、炭水化物、蛋白質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、糖質（ブドウ糖、等）、天然又は人工甘味剤、クエン酸、炭酸水、果汁、安定剤、保存剤、結合剤、増粘剤、乳化剤などを適宜配合することができる。 The food composition of the present invention includes edible carbohydrates, proteins, lipids, vitamins, minerals, carbohydrates (glucose, etc.), natural or artificial sweeteners, citric acid, carbonated water, fruit juice, stabilizers, Preservatives, binders, thickeners, emulsifiers and the like can be appropriately blended.
本発明の食品組成物は、その形態によって異なるが、リコピン又はその誘導体を、１ｇ当り、乾燥物換算で、０．１ｍｇ〜２００ｍｇ程度配合することができる。例えば本発明の食品組成物を飲料とする場合、１００ｍＬ当り、乾燥物換算で、好ましくは１０ｍｇ〜２００ｍｇ、より好ましくは１０ｍｇ〜１２０ｍｇ配合することができる。例えば本発明の食品組成物をサプリメントとする場合、１ｇ当り、乾燥物換算で、好ましくは０．１ｍｇ〜２００ｍｇ程度配合することができる。 Although the food composition of this invention changes with forms, about 0.1 mg-200 mg of lycopene or its derivative can be mix | blended per 1g in dry matter conversion. For example, when the food composition of the present invention is used as a beverage, it can be blended preferably in an amount of 10 mg to 200 mg, more preferably 10 mg to 120 mg per 100 mL in terms of dry matter. For example, when the food composition of the present invention is used as a supplement, it can preferably be blended in an amount of about 0.1 mg to 200 mg per gram in terms of dry matter.
また、本発明の食品組成物のうち、アレルギー疾患治療用食品組成物に含まれるアレルゲンの含有量は、食品組成物の形態や使用するアレルゲン、治療期間等により異なるが、一般にアレルギー疾患治療用食品組成物の全質量に対して、１質量％〜５０質量％であることが好ましく、１〜２０質量％であることがより好ましい。 In addition, among the food compositions of the present invention, the allergen content contained in the food composition for treating allergic diseases varies depending on the form of the food composition, the allergen used, the treatment period, etc. It is preferable that it is 1 mass%-50 mass% with respect to the total mass of a composition, and it is more preferable that it is 1-20 mass%.
本発明の食品組成物において、リコピン又はその誘導体は、乾燥物換算で、通常、成人（体重６０ｋｇ程度）１日当り１０ｍｇ〜１００ｍｇ、好ましくは、１５ｍｇ〜６０ｍｇ摂取することができる。摂取回数は、特に限定されないが、好ましくは１日１〜３回であり、必要に応じて摂取回数を増減してもよい。なお、「１日当り」とは、本発明の食品組成物の形態によって異なるが、表示される１日の摂取目安量や、通常１度で消費する飲みきりタイプの飲料であれば１本当りに含まれる量を指すものである。 In the food composition of the present invention, lycopene or a derivative thereof can usually be ingested in an amount of 10 mg to 100 mg, preferably 15 mg to 60 mg per day for adults (about 60 kg body weight) in terms of dry matter. The number of intakes is not particularly limited, but is preferably 1 to 3 times a day, and the number of intakes may be increased or decreased as necessary. Note that “per day” varies depending on the form of the food composition of the present invention. However, the displayed daily intake standard amount or a drink-type beverage that is normally consumed at a time is usually per serving. It refers to the amount contained.
上記の食品組成物は、大腸炎、アレルギー等の各種炎症疾患の治療及び／又は予防作用を有する旨の表示をした食品組成物であってもよい。該アレルギー治療作用を有する旨の表示をした用食品組成物としては、例えば、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、毒物アレルギー、及びアレルギー性結膜炎等のＩ型即時型アトピー性アレルギー治療作用等の作用を有する旨の表示を付した食品組成物等が挙げられる。 The food composition may be a food composition that indicates that it has an effect of treating and / or preventing various inflammatory diseases such as colitis and allergies. Examples of food compositions for which the allergic treatment has been indicated include type I immediate atopic allergic treatment such as allergic asthma, allergic rhinitis, food allergy, toxic allergy, and allergic conjunctivitis And food compositions with a label indicating that they have the above action.
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention more concretely, this invention is not limited to a following example.
［実施例１］
リコピン（和光純薬工業株式会社製）が０．０１％配合されたＣＥ−２飼料（日本クレア株式会社製）を６週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ系マウス（日本エスエルシー株式会社）６匹に４週間自由摂取させた。摂取２８日目にマウスを安楽死させ、開腹下に大腸を摘出した。その後、摘出した大腸からLamina Propria Dissociation Kit mouse（ミルテニーバイオテク社製）を用いて大腸粘膜固有層（ＬＰＬ）から免疫細胞を調製し、抗ＣＤ４抗体、抗Ｆｏｘｐ３抗体及び抗ＣＤ２５抗体で染色した。ＬＰＬにおける制御性Ｔ細胞の割合を、Ｆｏｘｐ３陽性ＣＤ２５陽性を指標として、フローサイトメーター（製品名CantoII；BD Biosciences社製）で観察し、ＣＤ４陽性細胞全体に対する制御性Ｔ細胞の割合を算出した。その結果を図１に示す。
[Example 1]
CE-6 feed (manufactured by Clea Japan Co., Ltd.) containing 0.01% lycopene (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) is added to 6 6-week-old C57BL / 6J mice (Japan SLC Co., Ltd.) Ad libitated weekly. On day 28 after ingestion, the mice were euthanized, and the large intestine was removed under laparotomy. Thereafter, immune cells were prepared from the lamina propria lamina propria (LPL) from the extracted large intestine using Lamina Propria Dissociation Kit mouse (Miltenyi Biotech) and stained with anti-CD4 antibody, anti-Foxp3 antibody and anti-CD25 antibody. The ratio of regulatory T cells in LPL was observed with a flow cytometer (product name CantoII; manufactured by BD Biosciences) using Foxp3 positive CD25 positive as an index, and the ratio of regulatory T cells to the entire CD4 positive cells was calculated. The result is shown in FIG.
［比較例１］
実施例１のリコピンの代わりに、リコピンと同じカロテノイド類である、β−カロテン（和光純薬工業株式会社製）、アスタキサンチン（和光純薬工業株式会社製）、ルテイン（ChromaDex社製）をそれぞれ０．０１％配合した飼料を用いて、実施例１と同様にして制御性Ｔ細胞の割合を観察し、ＣＤ４陽性細胞全体に対する制御性Ｔ細胞の割合を算出した。その結果を図１に示す。なお、「コントロール」は、実施例１において、カロテノイドを含まない飼料を用いた結果を示す。
[Comparative Example 1]
Instead of lycopene of Example 1, β-carotene (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), astaxanthin (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), and lutein (manufactured by ChromaDex), which are the same carotenoids as lycopene, are each 0 Using a feed containing 0.01%, the ratio of regulatory T cells was observed in the same manner as in Example 1, and the ratio of regulatory T cells to the entire CD4 positive cells was calculated. The result is shown in FIG. “Control” indicates the result of using a feed containing no carotenoid in Example 1.
図１に示したように、リコピンには制御性Ｔ細胞誘導作用が認められたが、β−カロテン、アスタキサンチン、ルテインには、制御性Ｔ細胞誘導作用は認められなかった。このことから、リコピンには、制御性Ｔ細胞誘導作用があることが明らかとなった。 As shown in FIG. 1, lycopene was found to have regulatory T cell inducing action, but β-carotene, astaxanthin, and lutein had no regulatory T cell inducing action. This revealed that lycopene has a regulatory T cell inducing action.
［実施例２］
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（６週齢、雌、日本エスエルシー株式会社）より脾臓を摘出後、MACS Buffer（ミルテニーバイオテク社製）中ですり潰し、脾臓細胞を得た。その後、脾臓細胞を、ナイーブＣＤ４単離キット（製品名；Naive CD4+ Tcell Isolation Kit mouse、ミルテニーバイオテク社製）を用いて、細胞へ磁気標識した。脾臓細胞をMACS Bufferで洗浄後、ＭＡＣＳカラム（ミルテニーバイオテク社製）によりナイーブＣＤ４陽性細胞を分離・回収し、ナイーブＣＤ４陽性Ｔ細胞として試験に用いた。ナイーブＣＤ４陽性Ｔ細胞から制御性Ｔ細胞を誘導するために、ナイーブＣＤ４陽性Ｔ細胞を９６ウェルマイクロプレート（Thermo社製）において０．２５μL / well 抗マウスＣＤ３／２８抗体（Gibco社製）、５ｎｇ／ｍＬ ＴＧＦ−β（PEOROTECH社製）及び１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ１６４０培地中で０．５×１０5 ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ（培養液量１００μＬ）の密度で培養した。
[Example 2]
The spleen was extracted from C57BL / 6J mice (6 weeks old, female, Japan SLC) and then ground in MACS Buffer (Miltenyi Biotech) to obtain spleen cells. Thereafter, the spleen cells were magnetically labeled onto the cells using a naive CD4 isolation kit (product name; Naive CD4 + Tcell Isolation Kit mouse, manufactured by Miltenyi Biotech). After washing the spleen cells with MACS Buffer, naive CD4 positive cells were separated and collected by a MACS column (Miltenyi Biotech) and used as naive CD4 positive T cells in the test. In order to induce regulatory T cells from naive CD4 positive T cells, naive CD4 positive T cells were 0.25 μL / well anti-mouse CD3 / 28 antibody (Gibco), 5 ng in a 96-well microplate (Thermo). / ML TGF-β (manufactured by PEOROTECH) and 10% FBS in RPMI1640 medium was cultured at a density of 0.5 × 10 5 cells / well (culture solution volume: 100 μL).
培養開始時に、レチノイン酸（ＡＴＲＡ；ポジティブコントロール、シグマ社製）又はリコピン（和光純薬工業株式会社製）を培地に添加した。レチノイン酸は終濃度１０ｎＭとなるように、リコピンは、終濃度１０ｎＭ、１μＭ又は１０μＭとなるように添加した。培養９６時間後、細胞を回収し、細胞を抗Ｆｏｘｐ３抗体及び抗ＣＤ２５抗体で染色した。制御性Ｔ細胞の割合を、Ｆｏｘｐ３陽性ＣＤ２５陽性を指標として、フローサイトメーター（製品名CantoII；BD Biosciences社製）で観察し、ＣＤ４陽性細胞全体に対する制御性Ｔ細胞の割合を算出した。 At the start of culture, retinoic acid (ATRA; positive control, manufactured by Sigma) or lycopene (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added to the medium. Retinoic acid was added to a final concentration of 10 nM, and lycopene was added to a final concentration of 10 nM, 1 μM, or 10 μM. After 96 hours of culture, the cells were collected, and the cells were stained with anti-Foxp3 antibody and anti-CD25 antibody. The ratio of regulatory T cells was observed with a flow cytometer (product name CantoII; manufactured by BD Biosciences) using Foxp3 positive CD25 positive as an index, and the ratio of regulatory T cells to the entire CD4 positive cells was calculated.
その結果を図２に示す。なお、図２中、「コントロール」は、リコピンを添加せずに同様の培地で培養した結果を示し、「レチノイン酸」は、ポジティブコントロールとしてレチノイン酸を添加して同様の培地で培養した結果を示す。レチノイン酸はナイーブＴ細胞からＦｏｘｐ３陽性の制御性Ｔ細胞を誘導することが知られているが、リコピンにも濃度依存的に、ナイーブＴ細胞から、制御性Ｔ細胞への分化誘導作用があることが示された。また、ＴＧＦ−βと抗ＣＤ３／２８のみの刺激では、炎症性サイトカインによる刺激が存在しないため、炎症が発症していない状態を模しているが、当該条件においても、リコピンにより、制御性Ｔ細胞誘導が促進されたことから、炎症が発症していない対象に対しても、リコピンが制御性Ｔ細胞を誘導できることが示された。このことから、リコピンが、炎症疾患の予防効果があることが明らかとなった。 The result is shown in FIG. In FIG. 2, “control” indicates the result of culturing in the same medium without adding lycopene, and “retinoic acid” indicates the result of culturing in the same medium with retinoic acid added as a positive control. Show. Retinoic acid is known to induce Foxp3-positive regulatory T cells from naive T cells, but lycopene also has a concentration-inducing action from naive T cells to regulatory T cells in a concentration-dependent manner. It has been shown. In addition, stimulation with only TGF-β and anti-CD3 / 28 mimics a state in which inflammation does not develop because there is no stimulation by inflammatory cytokines. Since cell induction was promoted, it was shown that lycopene can induce regulatory T cells even in subjects without inflammation. This revealed that lycopene has a preventive effect on inflammatory diseases.
［実施例３］
６週齢のＢＡＬＢ／Ｃマウス （日本エスエルシー株式会社）９〜１２匹に、２０ｍｇの鶏卵白アルブミン（ＯＶＡ；ｏｖａｌｂｕｍｉｎｅ）及び２ｍｇの水酸化アルミニウムを２週間間隔で２回腹腔内投与した。最後の腹腔内投与の２週間後から、５０ｍｇ ＯＶＡ溶液を３日おきに１回の頻度で６回経口投与し、消化管アレルギーを誘発した。リコピン（和光純薬工業株式会社製）が０．１％配合されたＣＥ−２飼料（日本クレア株式会社製）を、ＯＶＡの腹腔内投与開始時点（長期）、もしくは経口投与開始時点（短期）から試験終了時点まで自由摂取させた。最後のＯＶＡ経口投与後にマウスを個別のケージに移し、３０〜６０分後に観察した便性状の中で最も優位なものを、下記指標に基づき、その個体の便性状としてスコア化した。
０；正常便（Ｎｏｒｍａｌ ｓｔｏｏｌ）
１；やや軟便（Ｓｏｆｔ ｓｔｏｏｌ）
２；軟便（Ｌｏｏｓｅ ｓｔｏｏｌ）
３；軽度の下痢（Ｍｉｌｄ ｄｉａｒｒｈｅａ）
４；重度の下痢（Ｓｅｖｅｒｅ ｄｉａｒｒｈｅａ）
５；水様弁（Ｆｌｕｉｄ ｓｔｏｏｌ）］
その結果を図３に示す。図３中、「リコピン（短期）」は、リコピンを短期摂取させた結果を示し、「リコピン（長期）」は、リコピンを長期摂取させた結果を示す。
[Example 3]
20 mg of chicken ovalbumin (OVA; ovalbumine) and 2 mg of aluminum hydroxide were intraperitoneally administered twice at 2-week intervals to 9 to 12 6-week-old BALB / C mice (Japan SLC Co., Ltd.). Two weeks after the last intraperitoneal administration, 50 mg OVA solution was orally administered at a frequency of once every 3 days to induce gastrointestinal allergy. CE-2 feed (manufactured by Clea Japan Co., Ltd.) containing 0.1% lycopene (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) at the start of intraperitoneal administration of OVA (long term) or at the start of oral administration (short term) Until the end of the study. Mice were transferred to individual cages after the final oral administration of OVA, and the most significant stool properties observed after 30-60 minutes were scored as the stool properties of the individual based on the following indices.
0: Normal stool
1; Soft stool
2; Loose stool
3; Mild diarrhea
4; Severe diarrhea
5; Fluid valve]
The result is shown in FIG. In FIG. 3, “lycopene (short term)” indicates the result of ingesting lycopene for a short time, and “lycopene (long term)” indicates the result of ingesting lycopene for a long time.
［比較例２］
実施例３と同様にＯＶＡを投与し、リコピンを含まないＣＥ−２飼料を自由摂取させ、便性状を実施例３と同様にスコア化した。その結果を図３に示す。図３において、「食物アレルギー」が比較例２の結果を示す。なお、「コントロール」は、実施例３においてＯＶＡを投与せず、リコピンを含まないＣＥ−２飼料を用いた結果を示す。
[Comparative Example 2]
OVA was administered in the same manner as in Example 3, CE-2 feed containing no lycopene was freely ingested, and fecal properties were scored in the same manner as in Example 3. The result is shown in FIG. In FIG. 3, “food allergy” indicates the result of Comparative Example 2. In addition, "control" shows the result using CE-2 feed which does not administer OVA and does not contain lycopene in Example 3.
図３に示したように、食物アレルギーの誘導にとって下痢スコアの有意な上昇が見られたが、リコピンの短期摂取、長期摂取ともに、リコピンの摂取によって下痢スコアの有意な低下が認められた。このことから、リコピンには食物アレルギーの抑制効果があることが明らかとなった。 As shown in FIG. 3, a significant increase in the diarrhea score was observed for the induction of food allergy, but a significant decrease in the diarrhea score was observed with the intake of lycopene for both short-term and long-term intake of lycopene. From this, it was revealed that lycopene has an effect of suppressing food allergy.
本発明の、リコピンを有効成分として含有する、制御性Ｔ細胞誘導剤、アレルゲン免疫療法用アジュバント、制御性Ｔ細胞誘導用食品組成物、及び、アレルゲン免疫療法のためのアジュバント用食品組成物は、優れた制御性Ｔ細胞誘導作用を有し、炎症疾患等の治療及び／又は予防に利用可能である。 The regulatory T cell-inducing agent, adjuvant for allergen immunotherapy, food composition for inducing regulatory T cell, and food composition for adjuvant for allergen immunotherapy, comprising lycopene as an active ingredient of the present invention, It has an excellent regulatory T cell inducing action and can be used for the treatment and / or prevention of inflammatory diseases and the like.
Claims (27)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2017127846 | 2017-06-29 | ||
| JP2017127846 | 2017-06-29 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2019011314A true JP2019011314A (en) | 2019-01-24 |
| JP2019011314A5 JP2019011314A5 (en) | 2019-09-26 |
| JP6892079B2 JP6892079B2 (en) | 2021-06-18 |
Family
ID=65227877
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2018122078A Active JP6892079B2 (en) | 2017-06-29 | 2018-06-27 | Regulatory T cell inducers, adjuvants and food compositions |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP6892079B2 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004161635A (en) * | 2002-11-11 | 2004-06-10 | Kagome Co Ltd | Anti-allergic agent |
| WO2015137501A1 (en) * | 2014-03-14 | 2015-09-17 | 株式会社明治 | Retinoic-acid-producing agent |
| WO2017005647A1 (en) * | 2015-07-03 | 2017-01-12 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods for obtaining regulatory t cells and uses thereof |
| WO2017055235A1 (en) * | 2015-09-30 | 2017-04-06 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Improved modular antigen transportation molecules and uses therof in animals |
| JP2017081891A (en) * | 2015-10-27 | 2017-05-18 | 株式会社ホソダＳｈｃ | Regulatory t cell activity compositions |
-
2018
- 2018-06-27 JP JP2018122078A patent/JP6892079B2/en active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004161635A (en) * | 2002-11-11 | 2004-06-10 | Kagome Co Ltd | Anti-allergic agent |
| WO2015137501A1 (en) * | 2014-03-14 | 2015-09-17 | 株式会社明治 | Retinoic-acid-producing agent |
| WO2017005647A1 (en) * | 2015-07-03 | 2017-01-12 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods for obtaining regulatory t cells and uses thereof |
| WO2017055235A1 (en) * | 2015-09-30 | 2017-04-06 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Improved modular antigen transportation molecules and uses therof in animals |
| JP2017081891A (en) * | 2015-10-27 | 2017-05-18 | 株式会社ホソダＳｈｃ | Regulatory t cell activity compositions |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| CAMPANO, D. G. ALVAREZ ET AL., PROCEEDINGS OF THE NUTRITION SOCIETY, vol. Vol. 76, Issue OCE2, JPN6020021780, 28 March 2017 (2017-03-28), ISSN: 0004388940 * |
| MILLS, LYNSEY M. ET AL., MOLECULAR NUTRITION FOOD RESEARCH, vol. Vol. 56, Issue 7, JPN6020021783, July 2012 (2012-07-01), ISSN: 0004388939 * |
| XIAO, SHENG ET AL., THE JOURNAL OF IMMUNOLOGY, vol. Vol. 181, Issue 4, JPN6020044279, 15 August 2008 (2008-08-15), pages 2277 - 2284, ISSN: 0004388938 * |
| 岩田 誠, 医学のあゆみ, vol. 246, no. 10, JPN6020044278, 7 September 2013 (2013-09-07), pages 857 - 863, ISSN: 0004388937 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP6892079B2 (en) | 2021-06-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Uranga et al. | Food, nutrients and nutraceuticals affecting the course of inflammatory bowel disease | |
| Von Geldern et al. | The influence of nutritional factors on the prognosis of multiple sclerosis | |
| US20160158269A1 (en) | Nutraceutical Composition And Methods For Prevention Or Treating Multiple Sclerosis | |
| US8822543B2 (en) | Method of using punicic acid to enhance immune response and prevent metabolic disorders | |
| KR101778734B1 (en) | Extracellular Solute Binding Protein (ESBP) derived from Bifidobacterium longum KACC 91563 and Anti-allergy Composition using the Same | |
| AU2014233756A1 (en) | Astaxanthin anti-inflammatory synergistic combinations | |
| US20140030807A1 (en) | Method for stimulating foxp3+ regulatory t cell expression of cd39 | |
| JP2019081807A (en) | Marine oil formulations comprising resveratrol or derivatives thereof for use in treating, delaying and/or preventing alzheimer's disease | |
| JP2024500474A (en) | A novel Bifidobacterium animalis lactis HEM20-01 strain, and a composition for treating depression comprising the strain or a culture thereof | |
| WO2019207316A1 (en) | Methods for improving the microbiome and its systemic effect involving administration of carotenoids, specifically lycopene | |
| EP1734946A2 (en) | Method of using punicic acid to enhance immune response and prevent metabolic disorders | |
| Spisni et al. | Natural compounds in the modulation of the intestinal microbiota: implications in human physiology and pathology | |
| Larbi et al. | Nutrition as a Tool to Reverse Immunosenescence? | |
| US8580278B2 (en) | Nutraceutical composition and methods for preventing or treating multiple sclerosis | |
| Hughes et al. | Diet and human immune function | |
| JP6892079B2 (en) | Regulatory T cell inducers, adjuvants and food compositions | |
| JP2009019005A (en) | Lipolysis promoter | |
| JP5711616B2 (en) | IL-17 production inhibitor | |
| JP6093100B2 (en) | Erythrocyte function improver | |
| JP2020531587A (en) | Compositions and nutritional supplements made from them | |
| Magrone et al. | Nutraceuticals in immunosenescence | |
| JP7242219B2 (en) | Blood sugar elevation inhibitor, diabetes inhibitor, and food composition | |
| US20220249591A1 (en) | Composition for the treatment of emotional disorders | |
| JP6842655B2 (en) | Composition for suppressing differentiation into mucosal mast cells | |
| JP6842656B2 (en) | Composition for suppressing differentiation into mucosal mast cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AA64 | Notification of invalidation of claim of internal priority (with term) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A241764 Effective date: 20180717 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180712 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190809 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190809 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200623 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20201117 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201222 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210420 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210518 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6892079 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |