JP2018531269A5

JP2018531269A5 -

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Publication number: JP2018531269A5
Application number: JP2018520404A
Authority: JP
Filing date: 2016-10-21
Publication date: 2019-11-28

Claims

少なくとも１．５×１０^７細胞／ｍＬの濃度でプロテインフリークリオ保護剤中に実質的に均質かつ免疫抑制性の成人脂肪組織由来幹細胞（ＡＳＣ）集団の懸濁液を含む、組成物。
ＡＳＣ集団の少なくとも約８０％がＣＤ９０、ＣＤ７３、ＣＤ１３、ＣＤ１０５、ＣＤ２９、ＣＤ１６６、ＣＤ１０、ＣＤ１４０ｂ、ＣＤ１６０、ＣＤ２０４、ＣＤ２７２、ＣＤ４４、ＣＤ４９ａ、ＣＤ５４、ＣＤ９、ガレクチン３、ガレクチン９、ＨＬＡ−ＧおよびＬＴβＲを発現し、ＡＳＣ集団の多くて約１５％がＣＤ４５、ＣＤ１９、ＣＤ１４、ＣＤ１０６、ＣＤ３１およびＣＤ３６を発現する、請求項１に記載の組成物。
ＡＳＣ集団において、
少なくとも９０％がＣＤ９０、ＣＤ７３、ＣＤ１３、ＣＤ２９およびＣＤ１６６を発現し、多くて５％がＣＤ４５、ＣＤ１９、ＣＤ１４およびＣＤ３１を発現し、多くて１０％がＣＤ１０６を発現し、２〜１５％がＣＤ３６を発現し、少なくとも１０％がＣＤ１４６を発現し、少なくとも８０％がＣＤ１０５を発現し、多くて４０％がＣＤ３４を発現する；および／または
少なくとも９０％がＣＤ１０、ＣＤ１４０ｂ、ＣＤ１６０、ＣＤ２０４、ＣＤ２７２、ＣＤ４４、ＣＤ５４、ＣＤ９、ガレクチン３、ガレクチン９、ＨＬＡ−ＧおよびＬＴβＲを発現し、少なくとも８０％がＣＤ４９ａを発現し、少なくとも６０％がＣＤ２５８およびＣＤ２７０を発現し、少なくとも５％がＣＤ２００を発現し、多くて１５％がＣＤ１５、ＣＤ１５２、ＣＤ１６３、ＣＤ１８、ＣＤ２７４、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ８０およびＣＤ８６を発現し、多くて３０％がＣＸＣＲ４を発現する、請求項１または２に記載の組成物。
５０ｎｇ／ｍｌインターフェロン−ガンマ存在下で３日培養を含むインターフェロン−ガンマ刺激により、ＣＤ２７４を発現するＡＳＣ集団のパーセンテージが少なくとも８０％に増加し、ＣＤ５４陽性細胞におけるＣＤ５４の発現レベルがインターフェロン−ガンマの非存在下で３日培養された対照ＡＳＣ集団と比較して少なくとも２５倍増加する、請求項１〜３の何れかに記載の組成物。
解凍直後、幹細胞集団の少なくとも８０％が生存可能細胞であり、幹細胞集団が４８時間培養したとき少なくとも１の集団倍加を有する、請求項１〜４の何れかに記載の組成物。
クリオ保護剤がＴｒｏｌｏｘ（６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−カルボン酸）、Ｎａ^＋、Ｋ^＋、Ｃａ^２＋、Ｍｇ^２＋１Ｃｌ⁻、Ｈ_２ＰＯ_４ ⁻、ＨＥＰＥＳ、ラクトビオン酸、スクロース、マンニトール、グルコース、デキストラン−４０、アデノシンおよびグルタチオンおよび約５％〜約１５％ＤＭＳＯを含む、請求項１〜５の何れかに記載の組成物。
ＡＳＣ濃度が２×１０ ^７細胞〜５×１０ ^７細胞／ｍＬである、請求項１〜６の何れかに記載の組成物。
医薬組成物である、請求項１〜７の何れかに記載の組成物。
凍結される、請求項１〜８の何れかに記載の組成物。
凍結条件下に保存される複数のバイアルを含み、各バイアルが請求項９に記載の組成物を含む、細胞バンク。
各バイアルが約５ｍＬの組成物を含み、ここで、細胞濃度が約２．０×１０^７〜約２．５×１０^７細胞／ｍＬ範囲である、請求項１０に記載の細胞バンク。
（ｉ）ドナーから採取した吸引脂肪組織の間質血管細胞群（ＳＶＦ）を、少なくとも一表面が成人幹細胞の接着が促進されるように前処理されているバイオリアクターに添加し；
（ｉｉ）バイオリアクターにおいて、接着細胞をヒト血小板ライセートを添加した無血清培養培地においてコンフルエントまで培養し；
（ｉｉｉ）接着細胞を剥離し；
（ｉｖ）剥離した細胞を、プロテインフリークリオ保護剤中少なくとも１×１０^６細胞／ｍＬの濃度で凍結させ；
（ｖ）凍結細胞を解凍し、工程（ｉｉ）および（ｉｉｉ）および所望により（ｉｖ）を少なくとも１回繰り返し、
（ｖｉ）剥離した細胞を少なくとも１．５×１０^７細胞／ｍＬの濃度で凍結させ；そして
（ｖｉｉ）所望により、凍結組成物を解凍する
工程を含む、実質的に均質な成人幹細胞集団を含む医薬組成物を製造する方法。
ａ）バイオリアクターの少なくとも一表面を、クリオ沈降物を含むまたはそれからなる組成物で前処理し；
ｂ）培養培地が約２％〜約１５％ヒト血小板ライセートを含み；
ｃ）クリオ保護剤が約５％〜約１５％ＤＭＳＯおよびＴｒｏｌｏｘ（６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−カルボン酸）、Ｎａ^＋、Ｋ^＋、Ｃａ^２＋、Ｍｇ^２＋１Ｃｌ⁻、Ｈ_２ＰＯ_４ ⁻、ＨＥＰＥＳ、ラクトビオン酸、スクロース、マンニトール、グルコース、デキストラン−４０、アデノシンおよびグルタチオンを含み；
ｄ）工程（ｖ）において、凍結細胞を解凍し、工程（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の繰り返しを１回実施するか；または
ｅ）（ａ）〜（ｄ）の任意の２以上の組み合わせである、
請求項１２に記載の方法。
請求項１２または１３に記載の方法により得たまたは得られる、少なくとも１．５ｘ１０^７細胞／ｍＬの濃度でプロテインフリークリオ保護剤中に実質的に均質な成人幹細胞集団の懸濁液を含む、医薬組成物。
医薬として使用するための、請求項１〜９および１４の何れかに記載の組成物。
組織再生、免疫抑制におよび／または抗炎症剤として使用するための、請求項１〜９および１４の何れかに記載の組成物。
対象における虚血性組織障害、組織機能不全または破壊障害、自己免疫性障害、移植片拒絶および炎症性疾患または障害から選択される疾患または障害の処置または予防に使用するための、請求項１〜９および１４の何れかに記載の組成物。
疾患または障害が虚血性心疾患、急性心筋梗塞、虚血性脳卒中、重症虚血肢、虚血性創傷、虚血再灌流障害／原発臓器移植機能不全、椎間板修復、非虚血性拡張型心筋症、関節軟骨障害、クローン病、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、腎疾患、リウマチ性関節炎、移植臓器の拒絶、ＩＩ型糖尿病、肺動脈性高血圧および敗血症からなる群から選択される、請求項１７に記載の使用するための組成物。
疾患または障害が虚血性心疾患であり、多くて約５ｍＬ中約５×１０^７〜約５×１０^８細胞が心筋内注射により対象に投与される、請求項１８に記載の使用するための組成物。
対象が脂肪組織のドナーではない、請求項１７〜１９の何れかに記載の使用するための組成物。
患者への投与を少なくとも１回繰り返すことを含み、所望により脂肪組織が異なるドナーからである、請求項２０に記載の使用するための組成物。