JP2018128604A - 顕微鏡装置 - Google Patents

Abstract

【課題】複数の生体標本を効率的に撮像する技術を提供する。
【解決手段】顕微鏡装置１００は、サンプルS及び第１液浸媒質を収容する、光を透過する透明部を有するサンプル容器９を複数収容可能な、着脱可能に支持されるサンプル容器ホルダー７と、透明部を介してサンプルSへ照明光を射出する照明光学系１と、透明部を介してサンプルSからの光を検出する検出光学系２と、照明光学系１の光軸と直交し、且つ、検出光学系２の光軸と直交する方向であり、重力方向である第１の方向に、サンプル容器ホルダー７と、検出光学系２及び照明光学系１と、を相対的に移動させる移動機構と、を備え、サンプル容器ホルダー７は、サンプル容器Sを第１の方向に積載し、収容する。
【選択図】図１

Description

複数の生体標本を観察する顕微鏡装置に関する。

従来、照明光軸と検出光軸とが直交する構成を有する顕微鏡装置による観察手法である、選択的平面照明顕微鏡法（SPIM）が知られている。SPIMは、観察面以外への照明光の照射が少なく光毒性が抑えられるため、生体標本を観察するのに適した手法であるといえる。SPIMを用いた技術を開示する文献としては、特許文献１、２が挙げられる。

近年では、生体標本の立体像を得るSPIMの技術を、スフェロイドやオルガノイド（人工臓器またはその一部）のような３次元培養細胞の立体像を得て、その立体像の画像解析により薬効の評価を行う創薬スクリーニングに用いることも検討されている。

特表2006-509246号公報 特表2010-541023号公報

創薬スクリーニングでは複数の生体標本の撮像を連続して行うため、SPIM技術を創薬スクリーニングに適用する場合には、複数の生体標本を効率的に撮像できることが求められる。

従来では、SPIMにより複数の生体標本を撮像する場合、例えば、生体標本をマルチウェルプレートに収容してウェル毎に撮像を実行する方法が考えられた。一方で、プレート内に収容された生体標本を全て撮像するには、マルチウェルプレートの４倍にあたる移動スペースを確保することが要され、特に占有スペースが制限され得るスクリーニングを目的とした装置構成ではこのような手法は適しているとは言い難い。

また、特許文献２では、生体標本をアガロースゲル内に封入する、または、ロッドに生体標本を接着することで、複数の生体標本を撮像する方法について開示されている。一方で、生体標本をゲル内に封入する作業や、ロッドに接着する作業は、液体媒質を用いていないため既存の分注器や搬送ロボット等を用いて行うことができず、作業の効率化を図りづらい。

以上の実情を鑑みて、本発明では、複数の生体標本を効率的に撮像する技術を提供することを目的とする。

本発明の一態様における顕微鏡装置は、顕微鏡装置であって、サンプル及び第１液浸媒質を収容する、光を透過する透明部を有するサンプル容器を複数収容可能な、着脱可能に支持されるサンプル容器ホルダーと、前記透明部を介して前記サンプルへ照明光を射出する照明光学系と、前記透明部を介して前記サンプルからの光を検出する検出光学系と、前記照明光学系の光軸と直交し、且つ、前記検出光学系の光軸と直交する方向であり、前記顕微鏡装置が水平な設置面におかれたときに重力方向である第１の方向に、前記サンプル容器ホルダーと、前記検出光学系及び前記照明光学系と、を相対的に移動させる移動機構と、を備え、前記サンプル容器ホルダーは、前記サンプル容器を前記第１の方向に積載し、収容することを特徴とする。

本発明によれば、複数の生体標本を効率的に撮像する技術を提供することができる。

第１の実施形態の顕微鏡装置の構成を示す図。 第１の実施形態の顕微鏡装置の一部の構成を示す図。 制御装置の機能構成を示す図。 変形例である顕微鏡装置の一部の構成を示す図。 第２の実施形態の顕微鏡装置の構成を示す図。 第２の実施形態の顕微鏡装置の一部の構成を示す図。 第３の実施形態の顕微鏡装置の構成を示す図。

本発明の第１の実施形態における顕微鏡装置について図面を用いて説明する。図１は、第１の実施形態の顕微鏡装置１００の構成を示す図である。顕微鏡装置１００は、シート状に形成した光束（以下、光シートと記載）によって生体標本であるサンプルSを照明するシート照明顕微鏡である。

顕微鏡装置１００は、照明光学系１と、検出光学系２と、サンプル容器ホルダー７と、媒質容器８と、サンプル容器ホルダー７を着脱可能な移動機構１６（図１では不図示）と、制御装置１５と、を備えている。サンプル容器ホルダー７は、詳しくは後述するが、異なるサンプルSを収容したサンプル容器９を複数収容可能なホルダーである。顕微鏡装置１００は、照明光学系１によってサンプル容器ホルダー７内のサンプルSを照明し、サンプルSからの光を検出光学系２によって検出することでサンプルSを観察するものである。また、図１に示すように、照明光学系１の光軸方向をＸ方向、Ｘ方向に直交する検出光学系２の光軸方向をＹ方向、Ｘ方向、Ｙ方向に直交する方向をＺ方向として定めている。以下の図面においても、図１で示す方向に対応する方向が記載される。

照明光学系１は、光源３と、光ファイバー４と、レンズ群５と、絞り６と、を有している。光源３は、サンプルSを照明するための励起光を射出する光源であり、その励起光は光ファイバー４を介してレンズ群５へ導光される。レンズ群５は、サンプル容器ホルダー７内に収容されたサンプル容器９内のサンプルSへ向けて励起光が照射されるように光シートを形成する。

図２は、顕微鏡装置１００を図１とは異なる方向から見た顕微鏡装置１００の一部の構成を示す図である。以下、図２を用いてサンプル容器ホルダー７、媒質容器８、移動機構１６について説明する。

サンプル容器ホルダー７は、サンプルSを収容する複数のサンプル容器９を収容可能なホルダーである。サンプル容器ホルダー７は、サンプル容器９を外側から支持する支持構造を有しており、支持構造内でサンプル容器９を重力方向に積載することで収容する。本実施形態では、サンプル容器ホルダー７は支持構造として４本のロッドを有している。サンプル容器ホルダー７は、ロッド間でサンプル容器９を狭持しながら、ロッド先端のＬ字構造により積層されたサンプル容器９の底面を支持することでサンプル容器９を収容する。尚、サンプル容器ホルダー７は、積載されるサンプル容器９の位置がずれないように外側から支持する構造を有していればよく、上記構成に限られない。支持構造である４本のロッドとサンプル容器９の間に隙間があってもよく、必ずしも狭持しなくてもよい。

また、重力方向とは、顕微鏡装置１００を使用するために机等の水平な平面上に配置したときに、重力のかかる方向である。即ち、重力方向とは、顕微鏡装置１００の一般的な使用を想定した際に上下に相当する方向に該当する。図１、図２のZ方向で示される方向は、重力方向に該当する。サンプル容器ホルダー７は、顕微鏡装置１００内で着脱可能に支持され、本実施形態では、移動機構１６に着脱される。

サンプル容器ホルダー７に収容されるサンプル容器９は、例えば、キュベットのような容器であり、側面が光を透過する透明部として機能するものである。つまり照明光学系１からの励起光とサンプルSから発生する蛍光は、サンプル容器９の透明部を介して導光される。サンプル容器９は、サンプルSと共に第１液浸媒質を収容する。第１液浸媒質としては、生体標本における光の吸収や蛍光を損なうことなく、光の散乱を防止する役割を有する透明化溶液等が用いられる。また、サンプル容器９は、蓋９ａによって収容物を気密状態で収容する。

移動機構１６は、図１で示される照明光学系１、検出光学系２のそれぞれの光軸に直交する重力方向（Ｚ方向）に、サンプル容器ホルダー７と検出光学系２とを相対的に移動させる。本実施形態では、移動機構１６は、サンプル容器ホルダー７を着脱可能に支持するとともにサンプル容器ホルダー７をＺ方向に移動させる可動ステージである。即ち、移動機構１６は、サンプル容器ホルダー７をＺ方向に移動させることで、照明光学系１及び検出光学系２を介して観察を行うサンプルSを、サンプル容器ホルダー７に積載された複数のサンプルの中から切り替える手段として機能する。また、移動機構１６は、Ｘ方向やＹ方向へ移動する機能を有していてもよい。

このような構成により、サンプル容器ホルダー７に収容された複数の種類のサンプルを移動機構１６によって観察することができる。特に、顕微鏡装置１００内で重力方向に積載することでサンプル容器９を収容する構成では、従来のようなマルチウェルプレートを使用して複数のサンプルを観察する場合と比較してスペースをとらない。

また、サンプル容器ホルダー７が移動機構１６と着脱可能に構成されている。そのため、例えば、複数のサンプル容器ホルダー７を用意しておき、一つのサンプル容器ホルダー７が収容する全てのサンプルを観察し終えた後にそのサンプル容器ホルダー７を取り外し、次のサンプル容器ホルダー７を装着する、といった工程を繰り返すことで複数のサンプルSを効率的に観察することが可能である。特にそのような工程は、ロボット等を用いて自動化することも容易であり、顕微鏡装置１００によれば複数のサンプルSの効率的な観察を実現できる。

媒質容器８は、サンプル容器９内に収容される第１液浸媒質と略同一の屈折率を有する第２液浸媒質を貯留し、サンプル容器ホルダー７を第２液浸媒質内に浸漬する。また、媒質容器８は、図１に示されるような光を透過する透明部８ａを有している。即ち、照明光学系１からの励起光を透明部８ａ、第２液浸媒質、そしてサンプル容器９の透明部及び第１液浸媒質を介してサンプルSへ導く。また、サンプルSからの蛍光は、サンプル容器９の第１液浸媒質及び透明部、第２液浸媒質、透明部８ａを介して対物レンズ１０へ導かれる。このとき、第２液浸媒質が第１液浸媒質と略同一の屈折率を有しているため、移動機構１６を対物レンズ１０の光軸方向（Ｙ方向）に移動させたとしても検出光学系２の焦点ずれや収差の発生が防止される。同様に移動機構１６を照明光学系１の光軸方向（Ｘ方向）に移動させたとしても照明光学系１の焦点ずれや収差の発生が防止される。

検出光学系２は、対物レンズ１０と、ミラー１１と、エミッションフィルタ１２と、レンズ１３と、カメラ１４とを有している。対物レンズ１０へ入射したサンプルSからの蛍光は、ミラー１１、エミッションフィルタ１２、レンズ１３を介してカメラ１４へ集光される。対物レンズ１０は、レボルバに複数設置されるものから光路上に配置されるものが切り替わるように構成されていてもよい。

図３は、制御装置１５の機能構成を示す図である。制御装置１５は、例えばコンピュータであり、顕微鏡装置１００の構成要素を制御する。制御装置１５は、光源制御部２１、絞り制御部２２、移動制御部２３、画像処理部２４を有している。

光源制御部２１は、光源３のＯＮ、ＯＦＦや波長制御等を行なう。絞り制御部２２は、絞り６を制御し、照射する励起光の射出ＮＡを調節する。移動制御部２３は、移動機構１６の重力方向（Ｚ方向）の移動や、回転移動、ＸＹ平面での移動、を制御する。画像処理部２４は、カメラ１４で取得した画像に対する任意の画像処理や、画像の表示媒体への出力や制御装置１５内への保存等を行う。

以下、顕微鏡装置１００のより望ましい構成を記載する。移動機構１６は、Ｚ方向への移動だけでなく、Ｚ方向を軸としてサンプル容器ホルダー７を回転移動させる回転機構としての役割を有していてもよい。このような回転移動を行うことで、観察面を変更することなく、照明光学系１に対するサンプルの向きを変えることができる。そのため、サンプルSの全体にわたり良好な蛍光観察を行うことができる。

従来、複数のサンプルを観察する手段としてＸＹ平面上に複数のサンプルを配置するマルチウェルプレート等が用いられるが、そのような構成では検出光学系が上下いずれかに配置されるため、仮に回転機構を設ける場合、ＸＹ平面上に回転軸を有することになる。そうなると、回転に伴いサンプルが容器内で転がってしまい、観察に支障がでてしまう。一方で、本構成のように、サンプルSを重力方向に積載する構成とすることで、回転機構を追加することができ、観察に支障もなく且つサンプルSの全体にわたり良好な蛍光観察を行うことができる。

また、サンプル容器ホルダー７は、図２に示されるように、積層されるサンプル容器９を上から押圧する押さえ部１７を有していてもよい。押さえ部１７は、例えばバネのような弾性体であり、Ｚ方向に弾性力を有してサンプル容器９を押圧する。例えば、サンプル容器９内の第１液浸媒質の液量が少なく、媒質容器８内の第２液浸媒質にサンプル容器ホルダー７を浸漬した際にサンプル容器９に大きな浮力がかかる場合、サンプル容器９がサンプル容器ホルダー７内で浮いて移動してしまう可能性がある。一方で、サンプル容器ホルダー７が押さえ部１７を備えていることでサンプル容器９が固定されるため、サンプル容器９が浮力により移動してしまうことを防ぐことができる。

また、移動機構１６によってサンプル容器ホルダー７がＺ方向に移動する際に、サンプル容器ホルダー７が浸漬される媒質容器８の第２液浸媒質の液面位置が変更されることによって、装置内で振動や揺れが生じる可能性がある。そのような液面位置の変更を防ぐために、サンプル容器ホルダー７と媒質容器８は、Ｚ方向に相対的に移動しないような構成であることが望ましい。例えば、可動ステージである移動機構１６のＺ方向の駆動機構に対して、サンプル容器ホルダー７だけでなく、媒質容器８も接続されるような構成とすれば、サンプル容器ホルダー７と媒質容器８がＺ方向に相対的に移動しない構成とすることができる。

以上に示したように顕微鏡装置１００によれば、複数のサンプルの観察を連続的に行うことができ、効率化を図ることができる。

以下、第１の実施形態の変形例について説明する。図４は、変形例である顕微鏡装置１００ｂの一部の構成を示す図である。顕微鏡装置１００ｂは、サンプル容器ホルダー７の代わりにサンプル容器ホルダー１８を有している点が顕微鏡装置１００と異なるがそれ以外の構成は同様である。

サンプル容器ホルダー１８は、ロッドではなく、断面が矩形の箱型の支持構造と蓋１８ｂを有しており、該支持構造内に複数のサンプル容器９を積載し収容する。また、サンプル容器ホルダー１８は、透明部１８ａを有している。即ち、顕微鏡装置１００ｂでは、透明部１８ａ、サンプル容器９の透明部を介して照明光学系１からの励起光をサンプルSへ導光し、透明部１８ａ、サンプル容器９の透明部を介してサンプルSからの蛍光を検出光学系２へ導光し検出を行う。

また、サンプル容器ホルダー１８の箱型の支持構造は、４本のロッドとは異なり壁面及び底面とにより隙間無く内部を覆うものであるため、サンプル容器９を気密状態で収容する。このような構成とすることで、第２液浸媒質がサンプル容器ホルダー１８内に入ることがない。そのため、蓋を有さないサンプル容器９であっても観察を行うことができる。

また、本変形例のサンプル容器ホルダー１８では、押さえ部１７を支持構造の底面に設置されている。このように押さえ部１７の位置はサンプル容器ホルダー内の上下どちらに設置されていても構わない。

以下、本発明の第２の実施形態おける顕微鏡装置について図面を用いて説明する。図５は、第２の実施形態の顕微鏡装置２００の構成を示す図である。顕微鏡装置２００は、ライトフィールド顕微鏡であり、顕微鏡装置１００と比較しＺ方向に厚さのある光束が励起光としてサンプルSに照射される。

顕微鏡装置２００は、照明光学系１と、検出光学系３０と、複数のサンプル容器ホルダー７と、媒質容器２５と、複数のサンプル容器ホルダー７のそれぞれを着脱可能な移動機構２８と、制御装置１５と、を備えている。照明光学系１は、顕微鏡装置１００で説明したものと同様の構成である。検出光学系３０は、対物レンズ１０の瞳面と共役な面、即ち、レンズ１３の結像位置にマイクロレンズアレイ２７を有しており、マイクロレンズアレイ２７後方にカメラ１４を有している点が検出光学系２と異なっている。

顕微鏡装置２００では、さらに液浸媒質補給器２６が設置されており、本実施形態では液浸対物レンズである対物レンズ１０と媒質容器２５の間に第３液浸媒質を供給する。このとき、液浸媒質補給器２６によって、余剰に供給された第３液浸媒質を受け止めるドレインタンクが備えられていてもよい。

制御装置１５の機能構成についても顕微鏡装置１００と同様である。本実施形態では、画像処理部２４は、カメラ１４で取得した画像情報から３次元画像を構築する。

図６は、顕微鏡装置２００を図５とは異なる方向から見たときの顕微鏡装置２００の一部の構成を示す図である。以下、図５、図６を用いてサンプル容器ホルダー７、媒質容器２５、移動機構２８について説明する。

複数のサンプル容器ホルダー７は、それぞれが第１の実施形態で説明したものと同様である。本実施形態では、図５のように複数のサンプル容器ホルダー７が移動機構２８の周囲に接続される。より詳しくは、複数のサンプル容器ホルダー７は、Ｚ方向を中心とする円周上に設置される。そして移動機構２８は、Ｚ方向への移動及びＺ方向の軸を中心に回転移動を行う。このとき、移動機構２８の回転移動に伴い、照明光学系１と検出光学系３０の光路上に配置されるサンプル容器ホルダー７が、切り替わるようにサンプル容器ホルダー７が設置されている。

移動機構２８がＺ方向に移動することで、一つのサンプル容器ホルダー７に収容されたサンプルの中から観察するサンプルSを切り替える。また、移動機構２８が回転移動を行うことで、移動機構２８の周囲に接続されたサンプル容器ホルダー７の配置が変わり、即ち照明光学系１及び検出光学系３０による観察対象のサンプルを収容するサンプル容器ホルダー７を切り替える。また、移動機構２８は、Ｚ方向への移動と回転移動に限らず、Ｘ方向及びＹ方向への移動を行ってもよい。

また、サンプル容器ホルダー７はいずれも、媒質容器２５に収容される第２液浸媒質内に浸漬され、第２液浸媒質はサンプル容器９内に収容される第１液浸媒質と略同一の屈折率を有している。そのため、移動機構２８を対物レンズ１０の光軸方向（Ｙ方向）に移動させたとしても検出光学系３０の焦点ずれや収差の発生を防止できる。同様に移動機構２８を照明光学系１の光軸方向（Ｘ方向）に移動させたとしても照明光学系１の焦点ずれや収差の発生が防止される。

媒質容器２５は、図５に示されるような光を透過する透明部２５ａを有している。透明部２５ａは、媒質容器８の透明部８ａと同様の機能を有するものである。

以上のような顕微鏡装置２００によっても、複数のサンプルの観察を連続的に行うことができ、効率化を図ることができる。また、サンプル容器ホルダー７を複数設置するような構成とすれば、サンプル容器ホルダー７を着脱する工程を、サンプル容器ホルダー７の設置分一度に行うことができ、より効率的に観察を行うことが可能となる。

以下、本発明の第３の実施形態おける顕微鏡装置について図面を用いて説明する。図７は、第３の実施形態の顕微鏡装置３００の構成を示す図である。顕微鏡装置３００は、
多光子励起顕微鏡である。顕微鏡装置３００は、顕微鏡装置１００、２００と異なり、落射光路を有している。

顕微鏡装置３００は、光源３１と、スキャナ３２と、レンズ３３と、ミラー３４と、レンズ３５と、ダイクロイックミラー３６と、対物レンズ１０と、エミッションフィルタ３７と、集光レンズ３８と、光検出器３９と、サンプル容器ホルダー７と、媒質容器８と、液浸媒質補給器２６と、移動機構１６（図７では、不図示）と、制御装置１５とを備えている。

媒質容器８及びサンプル容器ホルダー７及び移動機構１６については、第１の実施形態で説明した顕微鏡装置１００と同様の構成を有する。

光源３１は、超短パルスレーザ（以下、レーザ光と記載）を出力する。スキャナ３２は、光源３１からのレーザ光を走査する。スキャナ３２は、対物レンズ１０を通じてサンプルSにレーザ光を照射する位置がＸ、Ｙ方向に変更されるように、レーザ光の走査を行う。その後、レーザ光は、レンズ３３、ミラー３４、レンズ３５、ダイクロイックミラー３６を介して対物レンズ１０へ導光される。ダイクロイックミラー３６は、レーザ光を透過し、サンプルSからの蛍光を反射するように設計される。

対物レンズ１０は、第２の実施形態で説明したような液浸対物レンズであり、液浸媒質補給器２６から随時第３液浸媒質が供給される。また、液浸媒質補給器２６によって、余剰に供給された第３液浸媒質を受け止めるドレインタンクが備えられていてもよい。対物レンズ１０は、媒質容器８の透明部８ａ（図７では不図示）と、第２液浸媒質、サンプル容器９の透明部、第１液浸媒質を介してレーザ光を照射し、また同径路により蛍光を検出する。対物レンズ１０により検出された蛍光は、ダイクロイックミラー３６を反射し、エミッションフィルタ３７、集光レンズ３８を介して光検出器３９に集光される。制御装置１５は、第１の実施形態において説明したものと同様である。

以上のような構成を有する顕微鏡装置３００によっても複数のサンプルの観察を連続的に行うことができ、効率化を図ることができる。特に、第１の実施形態で説明したように、移動機構１６によってＺ方向を軸とした回転移動を行う構成とすれば、サンプルSの全体にわたり良好な蛍光観察を行うことができ、解像度の高い３次元画像を構築することができる。

上述した実施形態は、発明の理解を容易にするために具体例を示したものであり、本発明はこれらの実施形態に限定されるものではない。上述した顕微鏡装置は、特許請求の範囲に記載した本発明を逸脱しない範囲において、さまざまな変形、変更が可能である。

１００、１００ｂ、２００、３００ 顕微鏡装置
１ 照明光学系
２、３０ 検出光学系
３、３１ 光源
４ 光ファイバー
５ レンズ群
６ 絞り
７、１８ サンプル容器ホルダー
８、２５ 媒質容器
８ａ、１８ａ、２５ａ 透明部
９ サンプル容器
９ａ、１８ｂ 蓋
１０ 対物レンズ
１１、３４ ミラー
１２、３７ エミッションフィルタ
１３、３３、３５、３８ レンズ
１４ カメラ
３９ 光検出器
１５ 制御装置
１６、２８ 移動機構
２１ 光源
２２ 絞り制御部
２３ 移動制御部
２４ 画像処理部
２６ 液浸媒質補給器
２７ マイクロレンズアレイ
３２ スキャナ
３６ ダイクロイックミラー
Ｓ サンプル

Claims (10)

1. 顕微鏡装置であって、
   サンプル及び第１液浸媒質を収容する、光を透過する透明部を有するサンプル容器を複数収容可能な、着脱可能に支持されるサンプル容器ホルダーと、
   前記透明部を介して前記サンプルへ照明光を射出する照明光学系と、
   前記透明部を介して前記サンプルからの光を検出する検出光学系と、
   前記照明光学系の光軸と直交し、且つ、前記検出光学系の光軸と直交する方向であり、前記顕微鏡装置が水平な設置面におかれたときに重力方向である第１の方向に、前記サンプル容器ホルダーと、前記検出光学系及び前記照明光学系と、を相対的に移動させる移動機構と、を備え、
   前記サンプル容器ホルダーは、前記サンプル容器を前記第１の方向に積載し、収容する
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
2. 請求項１に記載の顕微鏡装置であって、
   さらに、前記第１液浸媒質と略同一の屈折率を有する第２液浸媒質を貯留し、前記サンプルホルダーを前記第２液浸媒質で浸漬可能な媒質容器を備え、
   前記媒質容器は、光を透過する第２の透明部を有し、
   前記照明光学系は、前記第２の透明部と前記透明部と、を介して前記サンプルへ前記照明光を射出し、
   前記検出光学系は、前記第２の透明部と前記透明部と、を介して前記サンプルからの前記光を検出する
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
3. 請求項２に記載の顕微鏡装置であって、
   前記サンプル容器ホルダーと前記媒質容器は、前記第１の方向に相対的に移動しないように構成される
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
4. 請求項３に記載の顕微鏡装置であって、
   前記移動機構は、前記サンプル容器ホルダー及び前記媒質容器と接続されている
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
5. 請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の顕微鏡装置であって、
   さらに、前記サンプル容器ホルダーを前記第１の方向を軸として回転移動させる第２の移動機構を備える
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
6. 請求項１乃至請求項５のいずれか１項に記載の顕微鏡装置であって、
   さらに、前記第１の方向に積載されて前記サンプル容器ホルダーに収容された前記サンプル容器を、前記第１の方向に押圧する押さえ部を備える
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
7. 請求項６に記載の顕微鏡装置であって、
   前記押さえ部には、弾性体を備え、
   前記弾性体の弾性力で前記第１の方向に前記サンプル容器を押圧する
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
8. 請求項１乃至請求項７のいずれか１項に記載の顕微鏡装置であって、
   前記サンプル容器ホルダーは、第３の透明部を有し、前記サンプル容器を気密状態で収容し、
   前記照明光学系は、前記第３の透明部と前記透明部と、を介して前記サンプルへ照明光を射出し、
   前記検出光学系は、前記第３の透明部と前記透明部と、を介して前記サンプルからの光を検出する
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
9. 請求項１乃至請求項８のいずれか１項に記載の顕微鏡装置であって、
   さらに、前記第１の方向の軸を中心に回転移動する第３の移動機構と、
   複数の前記サンプル容器ホルダーと、を備え、
   前記照明光学系及び前記検出光学系の光路上に配置されるサンプル容器ホルダーが、前記第３の移動機構の移動に伴い、複数の前記サンプル容器ホルダーの中から切り替えられる
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
10. 請求項１乃至請求項９のいずれか１項に記載の顕微鏡装置であって、
    前記照明光学系は、前記第１の方向と、前記検出光学系の光軸方向と、にそれぞれ直交する第２の方向から前記サンプルへ照明光を射出する
    ことを特徴とする顕微鏡装置。