JP2017505798A - 住血吸虫症を予防かつ/または治療するための組成物および方法 - Google Patents
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Abstract
Description
[0001]本出願は、その開示内容が参照により本明細書に組み込まれる、2014年2月14日出願の米国仮特許出願第61/940,041号明細書の出願日の利益を主張する。
[発明の分野]
[発明の背景]
[発明の概要]
[発明の詳細な説明]
[実施例]
[被験者]
[0044]エジプトのカイロ(Cairo,Egypt)から約100km北に位置するMenoufiya行政単位における3地区の村の学齢児童約2000名をスクリーニングした。Kato−Katz法によって3日連続して、便試料の顕微鏡スライド2枚を児童それぞれについて調べ、虫卵数/グラム(epg)を記録した。epg24〜384の、体重範囲25〜52kg(平均±SD=37.8±8.6)を有する、6〜15歳(平均±SD=11.7±1.6)の児童66名(男子44名および女子22名)を被験者として選択した。性別、年齢、および社会的条件が一致する、寄生虫を持たない児童を対照として用いた。
[0045]児童66名をランダムに3つの群に分け、処置の1日目に、児童20名の第1群にプラジカンテル(PZQ)(40mg/kg体重)を単回経口投与し、次の3週間プラシーボを投与した(5回投与/週)(「PZQ−プラシーボ処置」)。PZQはDistocide(Epico,El−Asher−Men−Ramadan City,エジプト)であった。プラシーボは、トウモロコシ−ダイズを含有するVegCap(DSM Nutritional Products,メリーランド州コロンビア(Maryland,Columbia))1gであった。児童23名の第2群は、3週間にわたる15日間にARA(10mg/kg体重/日)を投与された(5回投与/週)(「ARA処置」)。ARAは、ARA約395mg/カプセルを含有するVegCap(DSM)1gであった。児童23名の第3群は、処置の1日目にプラジカンテル(40mg/kg体重)が投与され、ARAの投与を15回受けた(10mg/kg/日;5回投与/週)(「PZQ+ARA処置」)。
[0046]処置を開始する2〜3日前、およびPZQ単独での処置から18日後に相当する、ARA(またはARA+PZQ)の処置の最後から3日後に、血液約10mlを各児童から採取した。ARA処置が終了して1週間後(PZQ単独での処置から4週間後に相当する)およびARA処置の最後から6週間後(PZQ単独での処置から9週間後に相当する)、連続して3日間、各児童から便試料を採取した。各便試料のEpgを評価した。
[0047]生化学分析の試料を平たいチューブに入れ、少なくとも60分間凝固させ、遠心分離し、血清を回収した。EDTAを含むチューブに血液試料2mlを分配し、自動血液分析器(XT 1800i,Sysmex Corporation)によって分析した。
[0048]400gで20分間遠心した後、ヘパリン添加血から血漿を回収し、製造元のプロトコルに従ってIL−10およびIFN−γのレベルについて捕捉(capture)酵素免疫測定法(ELISA)(ELISA MAX(商標)Set,BioLegend,カリフォルニア州サンディエゴ(San Diego,California))によって評価するまで−76℃にて保管した。
[0049]ペニシリン200U/ml、ストレプトマイシン200μg/mL、アンホテリシン50ng/mL、および任意の抗原の残留リポ多糖汚染物の阻害剤としてのポリミキシンB(Sigma)20μg/mLで補われた、Roswell Park Memorial Institute(RPMI)−1640培地中にヘパリン添加全血細胞を1:4で希釈した。組換えマンソン住血吸虫(S.mansoni)グリセルアルデヒド3−リン酸デヒドロゲナーゼ(rSG3PDH)0または40μg/mLを含有する培地50μlを有する滅菌丸底ウェルマイクロタイタープレートの2つ組のウェル中で、希釈血液200μlをインキュベートした。全血培養物を37℃/CO23%にて72時間インキュベートし、400gで10分間遠心分離した。細胞不含上清を滅菌プレートのウェルに移し、製造元のプロトコルに従って、放出されたIL−4、IL−17およびIFN−γのレベルについて捕捉ELISA(ELISA MAX(商標)Set,BioLegend,カリフォルニア州サンディエゴ)によって評価するまで−76℃にて保管した。
[0050]初期のベースラインepg<100を有する被験者を、低い感染を有するとして分類した。初期ベースラインepg>100を有するが<400を有する被験者を中程度の感染を有するとして分類した。初期ベースラインepg>400を有する被験者を、高い感染を有するとして分類した。
[被験者]
[0061]El Kafr Sheikhからの学齢児童を、上記の実施例1の学齢児童と同様にスクリーニングした。
[0062]児童をランダムに3つの群に分け、処置の1日目に、児童の第1群にプラジカンテル(PZQ)(40mg/kg体重)を単回経口投与し、次の3週間プラシーボを投与した(5回投与/週)(「PZQ−プラシーボ処置」)。PZQはDistocide(Epico,El−Asher−Men−Ramadan City,エジプト)であった。プラシーボは、トウモロコシ−ダイズを含有するVegCap(DSM Nutritional Products,メリーランド州コロンビア)1gであった。児童の第2群は、3週間にわたる15日間にARA(10mg/kg体重/日)を投与された(5日/週)(「ARA処置」)。ARAは、ARA約395mg/カプセルを含有するVegCap(DSM)1gであった。児童の第3群は、処置の1日目にプラジカンテル(40mg/kg体重)が投与され、次いでARAの投与を15回受けた(10mg/kg/日;5回投与/週)(「PZQ+ARA処置」)。
[0063]処置を開始する2〜3日前、およびPZQ単独での処置から18日後に相当する、ARA(またはARA+PZQ)処置の最後から3日後に、血液約10mlを各児童から採取した。ARA処置が終了して1週間後(PZQ単独での処置から4週間後に相当する)およびARA処置の最後から6週間後(PZQ単独での処置から9週間後に相当する)、連続して3日間、各児童から便試料を採取した。各便試料のepgを評価した。
[0064]生化学分析の試料を平たいチューブに入れ、少なくとも60分間凝固させ、遠心分離し、血清を回収した。EDTAを含むチューブに血液試料2mlを分配し、自動血液分析器(XT 1800i,Sysmex Corporation)によって分析した。
[0065]400gで20分間遠心した後、ヘパリン添加血から血漿を回収し、製造元のプロトコルに従ってIL−10およびIFN−γのレベルについて捕獲酵素免疫測定法(ELISA)(ELISA MAX(商標)Set,BioLegend,カリフォルニア州サンディエゴ)によって評価するまで−76℃にて保管した。
[0066]ペニシリン200U/ml、ストレプトマイシン200μg/mL、アンホテリシン50ng/mL、および任意の抗原の残留リポ多糖汚染物の阻害剤としてのポリミキシンB(Sigma)20μg/mLで補われた、Roswell Park Memorial Institute(RPMI)−1640培地中にヘパリン添加全血細胞を1:4で希釈した。組換えマンソン住血吸虫(S.mansoni)グリセルアルデヒド3−リン酸デヒドロゲナーゼ(rSG3PDH)0または40μg/mLを含有する培地50μlを有する滅菌丸底ウェルマイクロタイタープレートの2つ組のウェル中で、希釈血液200μlをインキュベートした。全血培養物を37℃/CO23%にて72時間インキュベートし、400gで10分間遠心分離した。細胞不含上清を滅菌プレートのウェルに移し、製造元のプロトコルに従って、放出されたIL−4、IL−17およびIFN−γのレベルについて捕獲ELISA(ELISA MAX(商標)Set,BioLegend,カリフォルニア州サンディエゴ)によって評価するまで−76℃にて保管した。
[0067]初期のベースラインepg<100を有する被験者を、低い感染を有するとして分類した。初期ベースラインepg>100を有するが<400を有する被験者を中程度の感染を有するとして分類した。初期ベースラインepg>400を有する被験者を、高い感染を有するとして分類した。
Claims (74)
- 少なくとも1種類の多価不飽和脂肪酸(PUFA)と、少なくとも1種類の治療化合物と、を含む、住血吸虫症を治療かつ/または予防するための組成物。
- 前記PUFAが第1投与量で投与され、かつ前記治療化合物が第2投与量で投与される、請求項1に記載の組成物。
- 前記PUFAが、5〜15mg/kg体重の量で投与される、請求項1または2に記載の組成物。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項1から3のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記PUFAおよび前記治療化合物が、同一投与量で投与される、請求項1に記載の組成物。
- 前記PUFAが、10〜600mg/kg体重/日の量で投与される、請求項5に記載の組成物。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項5または6に記載の組成物。
- 前記PUFAがオメガ−6脂肪酸である、請求項1から7のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記PUFAがアラキドン酸である、請求項8に記載の組成物。
- 前記治療化合物が吸虫駆除剤である、請求項1から9のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記吸虫駆除剤が、2−(シクロヘキシルカルボニル)−1,2,3,6,7,11b−ヘキサヒドロ−4H−ピラジノ[2,1−a]イソキノリン−4−オンまたはその誘導体である、請求項10に記載の組成物。
- 前記住血吸虫症がマンソン住血吸虫症である、請求項1から11のいずれか一項に記載の組成物。
- 請求項1から12のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む、住血吸虫症を治療または予防する方法。
- 少なくとも1種類の多価不飽和脂肪酸(PUFA)および少なくとも1種類の治療化合物を治療有効量で投与することを含む、住血吸虫症を治療かつ/または予防する方法。
- 前記PUFAが第1投与量で投与され、かつ前記治療化合物が第2投与量で投与される、請求項14に記載の方法。
- 前記PUFAが、5〜15mg/kg体重の量で投与される、請求項14または15に記載の方法。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項14から16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記PUFAおよび前記治療化合物が、同一投与量で投与される、請求項14に記載の方法。
- 前記PUFAが、10〜600mg/kg体重/日の量で投与される、請求項18に記載の方法。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項18または19に記載の方法。
- 前記PUFAがオメガ−6脂肪酸である、請求項14から20のいずれか一項に記載の方法。
- 前記PUFAがアラキドン酸である、請求項21に記載の方法。
- 前記治療化合物が吸虫駆除剤である、請求項14から23のいずれか一項に記載の方法。
- 前記吸虫駆除剤が、2−(シクロヘキシルカルボニル)−1,2,3,6,7,11b−ヘキサヒドロ−4H−ピラジノ[2,1−a]イソキノリン−4−オンまたはその誘導体である、請求項23に記載の方法。
- 前記住血吸虫症がマンソン住血吸虫症である、請求項14から24のいずれか一項に記載の方法。
- 住血吸虫症を治療かつ/または予防するために、少なくとも1種類の多価不飽和脂肪酸(PUFA)および少なくとも1種類の治療化合物を投与することを含む、住血吸虫症に対する抵抗性を付与する方法。
- 前記PUFAが第1投与量で投与され、かつ前記治療化合物が第2投与量で投与される、請求項26に記載の方法。
- 前記PUFAが、5〜15mg/kg体重/日の量で投与される、請求項26または27に記載の方法。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項26から28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記PUFAおよび前記治療化合物が同一投与量で投与される、請求項26に記載の方法。
- 前記PUFAが、10〜600mg/kg体重/日の量で投与される、請求項30に記載の方法。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項30または31に記載の方法。
- 前記PUFAがオメガ−6脂肪酸である、請求項26から32のいずれか一項に記載の方法。
- 前記PUFAがアラキドン酸である、請求項33に記載の方法。
- 前記治療化合物が吸虫駆除剤である、請求項26から34のいずれか一項に記載の方法。
- 前記吸虫駆除剤が、2−(シクロヘキシルカルボニル)−1,2,3,6,7,11b−ヘキサヒドロ−4H−ピラジノ[2,1−a]イソキノリン−4−オンまたはその誘導体である、請求項35に記載の方法。
- 前記住血吸虫症がマンソン住血吸虫症である、請求項26から36のいずれか一項に記載の方法。
- 個体におけるIL−10およびIFN−γの前記レベルが、前記PUFAおよび前記治療化合物を投与した後に低減される、請求項26から37のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも1種類の多価不飽和脂肪酸(PUFA)および少なくとも1種類の治療化合物を投与することを含む、住血吸虫症の再発を予防する方法。
- 前記PUFAが第1投与量で投与され、かつ前記治療化合物が第2投与量で投与される、請求項39に記載の方法。
- 前記PUFAが、5〜15mg/kg体重/日の量で投与される、請求項39または40に記載の方法。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項39から41のいずれか一項に記載の方法。
- 前記PUFAおよび前記治療化合物が、同一投与量で投与される、請求項39に記載の方法。
- 前記PUFAが、10〜600mg/kg体重/日の量で投与される、請求項43に記載の方法。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項43または44に記載の方法。
- 前記PUFAがオメガ−6脂肪酸である、請求項39から45のいずれか一項に記載の方法。
- 前記PUFAがアラキドン酸である、請求項39から46のいずれか一項に記載の方法。
- 前記治療化合物が吸虫駆除剤である、請求項39から47のいずれか一項に記載の方法。
- 前記吸虫駆除剤が、2−(シクロヘキシルカルボニル)−1,2,3,6,7,11b−ヘキサヒドロ−4H−ピラジノ[2,1−a]イソキノリン−4−オンまたはその誘導体である、請求項48に記載の方法。
- 前記住血吸虫症がマンソン住血吸虫症である、請求項30から49のいずれか一項に記載の方法。
- 個体におけるIL−10およびIFN−γの前記レベルが、前記PUFAおよび前記治療化合物を投与した後に低減される、請求項39から50のいずれか一項に記載の方法。
- 住血吸虫症の治療および/予防のための、PUFAまたは治療化合物を含む組成物の使用。
- 前記PUFAが第1投与量で投与され、かつ前記治療化合物が第2投与量で投与される、請求項52に記載の使用。
- 前記PUFAが、5〜15mg/kg体重の量で投与される、請求項52または53に記載の使用。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項52から54のいずれか一項に記載の使用。
- 前記PUFAおよび前記治療化合物が、同一投与量で投与される、請求項52から55のいずれか一項に記載の使用。
- 前記PUFAが、10〜600mg/kg体重/日の量で投与される、請求項56に記載の使用。
- 前記治療化合物が、20〜60mg/kg体重/日の量で投与される、請求項56または57に記載の使用。
- 前記PUFAがオメガ−6脂肪酸である、請求項52から58のいずれか一項に記載の使用。
- 前記PUFAがアラキドン酸である、請求項52から59のいずれか一項に記載の使用。
- 前記治療化合物が吸虫駆除剤である、請求項52から61のいずれか一項に記載の使用。
- 前記吸虫駆除剤が、2−(シクロヘキシルカルボニル)−1,2,3,6,7,11b−ヘキサヒドロ−4H−ピラジノ[2,1−a]イソキノリン−4−オンまたはその誘導体である、請求項61に記載の使用。
- 前記住血吸虫症がマンソン住血吸虫症である、請求項52から62のいずれか一項に記載の使用。
- 住血吸虫症の治療および/または予防のための、薬物の製造における請求項52から63のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 多価不飽和脂肪酸(PUFA)10mg/kg体重/日および吸虫駆除剤40mg/kg体重/日を含む、住血吸虫症の予防または治療のための組成物。
- 前記PUFAがアラキドン酸である、請求項65に記載の組成物。
- 前記吸虫駆除剤が、2−(シクロヘキシルカルボニル)−1,2,3,6,7,11b−ヘキサヒドロ−4H−ピラジノ[2,1−a]イソキノリン−4−オンまたはその誘導体である、請求項65または66に記載の組成物。
- 前記PUFAが第1投与量で投与され、かつ前記吸虫駆除剤が第2投与量で投与される、請求項64から67のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記PUFAおよび前記吸虫駆除剤が、同一投与量で投与される、請求項64から68のいずれか一項に記載の組成物。
- 多価不飽和脂肪酸(PUFA)150mg/kg体重/日および吸虫駆除剤40mg/kg体重/日を含む、住血吸虫症の予防または治療のための組成物。
- 前記PUFAがアラキドン酸である、請求項70に記載の組成物。
- 前記吸虫駆除剤が、2−(シクロヘキシルカルボニル)−1,2,3,6,7,11b−ヘキサヒドロ−4H−ピラジノ[2,1−a]イソキノリン−4−オンまたはその誘導体である、請求項70または71に記載の組成物。
- 前記PUFAが第1投与量で投与され、かつ前記吸虫駆除剤が第2投与量で投与される、請求項70から72のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記PUFAおよび前記吸虫駆除剤が、同一投与量で投与される、請求項70から72のいずれか一項に記載の組成物。
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