JP2017193541A - 関節リウマチを治療するための医薬組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】 本発明の目的は、ヒト被験体への投与後に、関節リウマチに治療上有効な改善をもたらす、抗フラクタルカイン抗体を含む医薬組成物を提供することである。
【解決手段】 関節リウマチを治療するための医薬組成物が提供される。当該医薬組成物は、抗フラクタルカイン抗体、および薬学的に許容される賦形剤を含んでおり、ヒトに対して、１回あたり少なくとも１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下反復投与されるように用いられることを特徴とする。
【選択図】なし

Description

本発明は、抗フラクタルカイン抗体を含む、関節リウマチを治療するための医薬組成物に関する。

フラクタルカイン（「ＦＫＮ」とも称する）は、ＬＰＳ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１などの炎症刺激により血管内皮細胞の表面に発現する膜結合型ケモカインである。ＦＫＮ受容体のＣＸ３ＣＲ１を発現する細胞は、セレクチンまたはインテグリンの介在なしに膜結合型ＦＫＮと結合し、強力な細胞接着を引き起こす。また、膜結合型ＦＫＮからシェディングされた分泌型ＦＫＮは、ＣＸ３ＣＲ１を有するＮＫ細胞、Ｔ細胞、単球に対して細胞遊走活性を示す。
ＦＫＮの発現は、炎症誘発性サイトカインによって血管内皮細胞の表面上で誘導される。関節リウマチ（「ＲＡ」とも称する）を有する患者において、ＦＫＮの発現上昇ならびにＣＸ３ＣＲ１＋細胞傷害性エフェクターリンパ球およびマクロファージの蓄積が報告されている。

これまでに、慢性関節リウマチのモデルとして知られるコラーゲン誘導ミューリン関節炎モデル（ＣＩＡ）において、ＦＫＮ阻害による治療効果が報告されている（非特許文献１）。ＣＩＡにおける結果は、抗フラクタルカイン抗体による、関節炎の臨床スコアの有意な低減、関節炎の発生率の有意な減少、さらに、滑膜中の炎症細胞および骨侵食の有意な減少を示している。また、ＦＫＮとＣＸ３ＣＲ１との相互作用を阻害する抗フラクタルカイン抗体が、関節リウマチを含む炎症性疾患を治療し得ることが示唆されている（特許文献１）。このように、関節リウマチの治療において、ＦＫＮに結合し、その阻害できる抗体が、関節リウマチの治療に有効であることが示唆されている。

これまでに、本件出願人により、複数のマウス抗ヒトフラクタルカイン（ｈＦＫＮ）モノクローナル抗体（クローン１Ｆ３−１、３Ａ５−２、１Ｆ３、１Ｇ１、２Ｂ２、３Ｄ５、３
Ｈ７、６Ｄ１、７Ｆ６、および５Ｈ７−６）が開示されており、特にクローン３Ａ５−２は、ｈＦＫＮに対する高い中和活性、結合親和性および種間交差反応性のために、ヒト化され、Ｈ３−２Ｌ４と命名されている（特許文献２、参照によりその全体が組み入れられる）。

Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４；１７３：７０１０−７０１６

ＷＯ２００６／０４６７３９ ＷＯ２０１１／０５２７９９

本発明の目的は、ヒト被験体への投与後に、関節リウマチにおける治療上有効な改善をもたらす、抗フラクタルカイン抗体（本明細書中、「抗ＦＫＮ抗体」とも称する）を含む医薬組成物を提供することである。
本発明の別の目的は、関節リウマチにおける治療上有効な改善をもたらすように使用される、抗ＦＫＮ抗体を含む医薬組成物を提供することである。

本発明は、以下の実施形態を包含するものである。
［１］関節リウマチを治療するための医薬組成物であって、
前記医薬組成物は、抗フラクタルカイン抗体、および薬学的に許容される賦形剤を含んでおり、
前記抗フラクタルカイン抗体は：
その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体であり、
前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり少なくとも１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が、皮下投与されるように用いられることを特徴とする、
前記医薬組成物。

［２］［１］に記載の医薬組成物であって、
前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、
前記医薬組成物。

［３］［１］に記載の医薬組成物であって、
前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇまたは４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、
前記医薬組成物。

［４］［１］に記載の医薬組成物であって、
ヒトに対して１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
平均Ｃ_ｍａｘが１０μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が２．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が３．０×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
をもたらす、
前記医薬組成物。
［５］［１］に記載の医薬組成物であって、
ヒトに対して２００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
平均Ｃ_ｍａｘが２７μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が７．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
をもたらす、
前記医薬組成物。

［６］［１］に記載の医薬組成物であって、
ヒトに対して４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
平均Ｃ_ｍａｘが４３μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が２．７×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
をもたらす、
前記医薬組成物。

［７］［１］に記載の医薬組成物であって、
１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で複数回皮下投与される、
前記医薬組成物。

［８］［１］〜［７］に記載の医薬組成物であって、
前記抗フラクタルカイン抗体の平均トラフ濃度が１０μｇ／ｍＬ以上となるように皮下投与される、
前記医薬組成物。

［９］［１］〜［７］に記載の医薬組成物であって、
前記抗フラクタルカイン抗体の平均トラフ濃度が２０μｇ／ｍＬ以上となるように皮下投与される、
前記医薬組成物。

［１０］抗フラクタルカイン抗体を含有する関節リウマチ治療薬であって、
１００ｍｇ〜４００ｍｇの抗フラクタルカイン抗体が、ヒトに対して１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で皮下投与されるように用いられることを特徴とし、
前記抗フラクタルカイン抗体は：
その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体である、
前記関節リウマチ治療薬。

本発明によれば、ヒト被験体への投与後に、関節リウマチにおける治療上有効な改善をもたらす、抗ＦＫＮ抗体を含む医薬組成物が提供される。本発明の医薬組成物は、関節リウマチに対する治療効果を発揮するのに有用な薬物動態パラメータをもたらすように使用することができる。

図１は、健常人における、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下単回投与（それぞれ５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、および４００ｍｇの用量）後の、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の要約統計量（平均（＋ＳＤ）血清中濃度−時間曲線）をリニアスケールで経時的に示す。 図２は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）時の、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の要約統計量における経時的変化を示す。 図３は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群）時の、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度および血清中総ＦＫＮ濃度における要約統計量の経時的変化を示す。 図４は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（２００ｍｇ群）時の、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度および血清中総ＦＫＮ濃度における要約統計量の経時的変化を示す。 図５は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）における、投与開始後１２週の時点でのＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０（ＬＯＣＦ）を示す。 図６は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）における、投与開始後１２週の時点でのＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０（ＮＲＩ）を示す。 図７は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）における、１２週にわたるＡＣＲ７０の推移を示す。 図８は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）における、１２週にわたるＤＡＳ２８−ＣＲＰの変化の推移を示す。 図９は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）における、投与前および投与開始後１２週の時点での、ＤＡＳ２８−ＣＲＰの疾患活動性分類の割合の推移を示す。 図１０は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）における、投与開始後１２週の時点での、ＤＡＳ２８−ＥＳＲの疾患活動性分類のうち、寛解または低疾患活動性に達した被験者の割合を示す。 図１１は、抗体Ｈ３−２Ｌ４の皮下複数回投与（１００ｍｇ群、２００ｍｇ群および４００ｍｇ群）における、投与開始後１２週の時点での、ＤＡＳ２８−ＥＳＲのＥＵＬＡＲ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｒｉｔｅｒｉａに基づく被験者の割合を示す。

１．発明の概要および定義
本発明は、関節リウマチにおける治療上有効な改善をもたらす医薬組成物に関する。

本発明の一実施形態において、「関節リウマチにおける治療上有効な改善」とは、当該分野で確立された、関節リウマチの評価基準に定められた項目またはパラメータの１つ以上において、治療上有効な改善を示すことを意味し得る。そのような項目またはパラメータとして、これに限定されるものではないが、ＡＣＲ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ）２０反応率、ＡＣＲ５０反応率、ＡＣＲ７０反応率、赤血球沈降速度（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｓｅｄｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｒａｔｅ：ＥＳＲ）、高感度ＣＲＰ（ｈｉｇｈ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ Ｃ−ｒｅａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ：ｈｓ−ＣＲＰ）、ＨＡＱ（Ｈｅａｌｔｈ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ）、ＳＤＡＩ（ｓｉｍｐｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘ）、ＤＡＳ２８（Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｓｃｏｒｅ ２８ Ｊｏｉｎｔｓ；例えば、ＣＲＰを用いたＤＡＳ２８−ＣＲＰ、ＥＳＲを用いたＤＡＳ２８−ＥＳＲなど）、ＣＤＡＩ（ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘ）、およびＢｏｏｌｅａｎ寛解率などを挙げることができる。

本発明の一実施形態において、関節リウマチにおける治療上有効な改善は、ＥＳＲに関して、ベースラインからの、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％の減少を意味し得る。

本発明の一実施形態において、関節リウマチにおける治療上有効な改善は、ｈｓ−ＣＲＰに関して、ベースラインからの、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％の減少を意味し得る。

本発明の一実施形態において、関節リウマチにおける治療上有効な改善は、ＤＡＳ２８のスコア自体またはＤＡＳ２８に基づいて評価される重症度が、改善することを意味し得る。例えば、関節リウマチに治療上有効な改善は、ＤＡＳ２８−ＣＲＰまたはＤＡＳ２８−ＥＳＲに基づく重症度評価において、重症が中等症に改善すること、中等症が軽症の評価に改善すること、軽症が寛解の評価に改善すること等を意味し得る。

本発明は、一態様において、ヒト被験体への単回投与または複数回投与後に、治療上有効な血中抗ＦＫＮ抗体濃度をもたらす、関節リウマチを治療するための医薬組成物に関する。

本発明の一実施形態において、「治療上有効な血清中抗ＦＫＮ抗体濃度」は、抗ＦＫＮ抗体の、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上の血清中濃度である。また、本発明の別の実施形態において、「治療上有効な血清中抗ＦＫＮ抗体濃度」は、抗ＦＫＮ抗体の、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上の平均トラフ濃度である。好ましい実施形態では、「治療上有効な血清中抗ＦＫＮ抗体濃度」は、抗ＦＫＮ抗体の、１０μｇ／ｍＬ以上または２０μｇ／ｍＬ以上の平均トラフ濃度である。

本発明の好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の１０μｇ／ｍＬ以上の血清中濃度をもたらすように製剤化される。本発明の別の好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の２０μｇ／ｍＬ以上の血清中濃度をもたらすように製剤化される。

本発明は、別の態様において、ヒト被験体への単回投与または複数回投与後に、治療上有効な血清中抗ＦＫＮ抗体濃度をもたらすように使用される、抗ＦＫＮ抗体を含む医薬組成物に関する。本発明の医薬組成物は、特に制限されないが、典型的には、皮下投与用に調製された注射用製剤の形態であり得る。一実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の平均トラフ濃度が、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上となるように使用される。好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の平均トラフ濃度が、１０μｇ／ｍＬ以上または２０μｇ／ｍＬ以上となるように使用される。

本発明において、濃度−時間曲線の薬物動態特性、例えば最大実測血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）、Ｃ_ｍａｘに達する時間（Ｔ_ｍａｘ）、および血漿中濃度対時間曲線下の面積（ＡＵＣ）は、薬物動態学分野で十分に確立されている統計学的手法によって調べられる。試験製剤と標準製剤における上記のような評価パラメータの母平均の比が０．８０〜１．２５であるとき、概して、生物学的に同等であるとみなされる。

本発明において、Ｃ_ｍａｘやＡＵＣなどの薬物動態パラメータの平均値は、幾何平均、算術平均、中央値のいずれかの方法で算出することができる。本明細書中、平均Ｃ_ｍａｘ、平均ＡＵＣ、平均ｔＦＫＮ濃度および平均トラフ濃度は算術平均値で示し、t_maxは中央値で示す。対象とする平均値が本明細書と異なる方法で算出された場合であっても、本明細書の方法に従って算出した平均値が、特許請求の範囲に記載された数値範囲内となる場合には、当該平均値は本発明に係る特許請求の範囲に属するものであることが企図される。

本発明において、抗ＦＫＮ抗体の投与量に関して「１回」または「１回あたり」とは、１投与あたりの抗ＦＫＮ抗体の絶対量を指す。したがって、例えば「１回あたり２００ｍｇ」と記載される場合には、２００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体を含む本発明の医薬組成物が１セット投与されてもよいし、１００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体を含む本発明の医薬組成物が同時に２セット投与されてもよい。

本発明において、抗ＦＫＮ抗体の投与間隔に関して、例えば「１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔」とは、ｎ回目（ｎは整数である）の投与からｎ＋１回目の投与までの投与間隔が１週間から２週間であることを指し、ｎ回目とｎ＋１回目の投与間隔とｎ＋１回目とｎ＋２回目の投与間隔は異なっていてもよい。例えば、「１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔」には、１回目の投与から２回目の投与までの投与間隔が１週間であり、２回目の投与から３回目の投与までの投与間隔が２週間ある場合も当然に含まれる。

本明細書中、用語「ヒト」または「ヒト被験体」は、健常な成人男性、および典型的には、関節リウマチを発症している、または関節リウマチを生じさせうる任意の疾患もしくは障害の臨床徴候および症状を示す、任意のヒトを意味するものとする。本発明において、「ヒト」または「ヒト被験体」は、少なくとも１種類の抗リウマチ薬、または抗ＴＮＦ製剤に対して、十分な治療効果が得られなかった、治療効果が持続しなかった、または不耐性であった、リウマチ病患者が好ましい。

用語「関節リウマチ」には、１９８７年ＡＣＲ分類基準または２０１０年ＡＣＲ／ＥＵＬＡＲ分類基準に従って診断され得る疾患状態のことをいう。関節リウマチの生理学的指標としては、関節リウマチにおいて特徴的であるが不変ではない、対称性の関節腫脹、受動運動時の疼痛などが挙げられる。本発明に記載の治療に対する候補は、症状を処置する際にメトトレキサート、または抗ＴＮＦ製剤（アダリムマブ，インフリキシマブ，ゴリムマブ，セルトリズマブペゴルまたはエタネルセプト）が有効ではないか、または完全に有効でないという点において、メトトレキサートまたは抗ＴＮＦ製剤に対して抵抗性であり得る。

２．抗ＦＫＮ抗体
本発明において、抗ＦＫＮ抗体に言及する場合、ヒト化抗ヒトフラクタルカイン抗体Ｈ３−２Ｌ４、またはこれと機能的に同等な抗体を指すものとする。本発明において、「機能的に同等な抗体」とは、抗体Ｈ３−２Ｌ４と、ヒトＦＫＮに対する結合親和性、中和活性、交差反応性、血中における薬物動態の少なくともいずれか、または好ましくは全てが同等である抗体をいう。

本発明において、抗ＦＫＮ抗体に言及する場合、その抗原結合性断片を含んでもよい。そのような抗原結合性断片は、抗ＦＫＮ抗体の機能的、構造的断片であって、当該抗体がＦＫＮに対する結合性を保持し、かつ、完全抗体と血中における薬物動態が有意に異ならないものであれば特に限定されない。抗体の抗原結合断片の例としては、限定はされないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、１本鎖（ＳｃＦｖ）、それらの変異体、抗体部分を含む融合タンパク質、および、抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の他の修飾構造体等が挙げられる。

一実施形態において、本発明の抗ＦＫＮ抗体は、以下のＣＤＲ配列を含む任意の抗体であり得る：
（ａ）配列番号１５（NYYIH）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列番号１６（WIYPGDGSPKFNERFKG）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列番号１７（GPTDGDYFDY）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；
（ｄ）配列番号１８（RASGNIHNFLA）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；
（ｅ）配列番号１９（NEKTLAD）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；および
（ｆ）配列番号２０（QQFWSTPYT）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｌ３

別の実施形態において、抗ＦＫＮ抗体は、抗体が重鎖および軽鎖を含み、前記抗体の重鎖可変領域が、配列番号２１（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSDDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）、配列番号２２（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVRQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTRDKSTNTAYMELSSLRSDDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）、配列番号２３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVRQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTMTADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCARGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）、または配列番号２４（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVRQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCARGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）のアミノ酸配列を含み、かつ、前記抗体の軽鎖可変領域が、配列番号２５（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKFLVYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTQYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）、または配列番号２６（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTQYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）のアミノ酸配列を含むものであり得る。

好ましい実施形態において、抗ＦＫＮ抗体、抗体が重鎖および軽鎖を含み、前記抗体の重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）のアミノ酸配列を含み、かつ、前記抗体の軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）のアミノ酸配列を含むものであり得る。

特定の実施形態において、抗ＦＫＮ抗体は、ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む抗体である。

特定の実施形態において、抗ＦＫＮ抗体は、前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４Ａおよび／またはＧ２３７Ａの変異を含む抗体である。

本発明の特に好ましい実施形態において、抗ＦＫＮ抗体は、配列番号１１に示すアミノ酸配列（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPAAAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK）からなる重鎖、および配列番号１２に示すアミノ酸配列（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC）からなる軽鎖からなる、抗体Ｈ３−２Ｌ４である。

言うまでもなく、上記に例示した抗ＦＫＮ抗体を、当該抗体の機能を保持させたまま、または当該抗体の機能を付加、向上させるために、適宜改変（例えば、抗体の修飾、または、抗体のアミノ酸配列の部分的な置換、付加、欠失）した抗体も、本発明の抗体に含まれる。より具体的には、抗体産生細胞により産生される抗体の不均一性を減少させるため、重鎖のカルボキシ末端（Ｃ末端）に位置するリシン（Ｌｙｓ）を遺伝子改変等の人為的方法によって欠失させた抗体も、本発明の範囲に含まれる。また、本発明の医薬組成物に含まれる抗ＦＫＮ抗体は、必ずしも完全な均一性を有している必要はなく、本発明の医薬組成物が意図する機能を維持する限りにおいて、例えば、重鎖のカルボキシ末端（Ｃ末端）に位置するリシン（Ｌｙｓ）が欠失したものと欠失していないものとが混在していてもよい。

抗ＦＫＮ抗体は、所望により、修飾してもよい。抗ＦＫＮ抗体は、（ａ）例えばシートまたはヘリックスコンホメーション等の、修飾領域におけるアミノ酸配列の三次元的な構造；（ｂ）標的部位での分子の電荷または疎水性の状態；または、（ｃ）側鎖の容積の維持に対する修飾の効果、を変化させる修飾であってもよく、あるいはこれらの変化が明白に観察されないような修飾であってもよい。

抗ＦＫＮ抗体の修飾は、例えば、構成するアミノ酸残基の置換、欠失、付加等によって達成してよい。

本明細書において、アミノ酸とは、その最も広い意味で用いられ、天然のアミノ酸、例えばセリン（Ｓｅｒ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、アラニン（Ａｌａ）、チロシン（Ｔｙｒ）、グリシン（Ｇｌｙ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、プロリン（Ｐｒｏ）のみならず、アミノ酸変異体および誘導体といった、非天然アミノ酸も含まれる。当業者であれば、この広い定義を考慮して、本明細書におけるアミノ酸として、例えばＬ−アミノ酸；Ｄ−アミノ酸；アミノ酸変異体、アミノ酸誘導体等の化学修飾されたアミノ酸；ノルロイシン、β−アラニン、オルニチン等、生体内でタンパク質の構成材料とならないアミノ酸；および当業者に公知のアミノ酸の特性を有する、化学的に合成された化合物等が挙げられることを当然に理解する。非天然アミノ酸の例としては、α−メチルアミノ酸（α−メチルアラニン等）、Ｄ−アミノ酸（Ｄ−アスパラギン酸、Ｄ−グルタミン酸等）、ヒスチジン様アミノ酸（２−アミノ−ヒスチジン、β−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジン、α−メチル−ヒスチジン等）、側鎖に余分なメチレンを有するアミノ酸（「ホモ」アミノ酸）および側鎖中のカルボン酸官能基アミノ酸がスルホン酸基で置換されるアミノ酸（システイン酸等）等が挙げられる。

天然に存在するアミノ酸残基は、例えば、一般的な側鎖特性に基づいて、次のグループに分類され得る：
（１）疎水性：Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；および
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。

抗ＦＫＮ抗体を構成するアミノ酸配列の非保存的置換は、これらのグループの１つに属するアミノ酸を他のグループに属するアミノ酸と交換することにより行ってもよい。より保存的な置換は、これらのグループの１つに属するアミノ酸を同一グループの他のアミノ酸と交換することにより行ってもよい。同様に、アミノ酸配列の欠失または置換を適宜行ってもよい。

３．医薬組成物および製剤
本発明の医薬組成物は、治療上有効量の抗ＦＫＮ抗体を含んでいる。そのような抗ＦＫＮ抗体の量は、本発明の医薬組成物の投与経路、投与間隔に応じて変化し得る。

本発明の一実施形態において、本発明の医薬組成物は、５０ｍｇ〜４００ｍｇの間、例えば１００ｍｇ〜２００ｍｇの量で、抗ＦＫＮ抗体を含むことができる。本発明の特定の実施形態において、本発明の製剤は、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも１５０ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも２５０ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも３５０ｍｇ、または少なくとも４００ｍｇの量で、抗ＦＫＮ抗体を含むことができる。さらに別の実施形態において、本発明の製剤は、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇまたは４００ｍｇの量で抗ＦＫＮ抗体を含むことができる。

本発明の医薬組成物の投与剤形は特に制限されないが、典型的には、皮下投与用に調製された注射用製剤である。本発明の医薬組成物は、例えば、抗ＦＫＮ抗体を、非限定的に注射用水、生理食塩水、またはリン酸緩衝生理食塩水中に、薬学的に許容される賦形剤とともに、注射用製剤として調製することができる。本発明に使用される薬学的に許容される賦形剤には、非限定的に、安定化剤、界面活性剤、保存剤などが挙げられる。

本発明に使用される安定化剤は、例えば薬学的製剤における適切な添加剤または賦形剤として当局によって認められている炭水化物または糖類または糖、例えばスクロースである。安定化剤の濃度は、１５から２５０ｍＭ、または１５０から２５０ｍＭ、または２００ｍＭである。製剤は二次安定剤を含んでもよい。

本発明に使用される薬学的に許容される界面活性剤の適切な例は、これに限定されるものではないが、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）、ポリエチレンポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレンステアレート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、例えばポリオキシエチレンモノラウリルエーテル、アルキルフェニルポリオキシエチレンエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ）、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン共重合体（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ，Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）、およびドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を含む。最も適切なポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０）およびポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）である。界面活性剤の濃度は、０．０１から０．１％（ｗ／ｖ）、または０．０１から０．０８％（ｗ／ｖ）、または０．０２５から０．０７５％（ｗ／ｖ）、例えば０．０５％（ｗ／ｖ）である。

本発明に使用される保存剤には、非限定的に、パラベン、ベンジルアルコール、安息香酸ナトリウム、フェノール、塩化ベンザルコニウム、チメロサール、クロロブタノール、安息香酸、亜硫酸水素ナトリウム、プロピオン酸ナトリウムおよびその任意の組み合わせまたは混合物などを含む。

本発明に使用される緩衝剤の例は、これに限定されるものではないが、ヒスチジン、シトレート、ホスフェート、グリシン、アセテート、およびその任意の組み合わせまたは混合物などを含む。

本発明の製剤は、ｐＨを制御するための緩衝剤またはｐＨ調整剤を含んでもよい。一実施形態では、本発明の製剤は、４．０〜９．０の範囲、５．０〜９．０の範囲、５．０〜８．０の範囲、５．０〜７．５の範囲、５．５〜７．０の範囲、または５．５〜６．５の範囲のｐＨを有する。

本発明の製剤は、ヒト血液と等張でありうること、すなわち本発明の製剤はヒト血液と本質的に同じ浸透圧を有することが当業者に理解される。そのような等張製剤は、一般に、２５０ｍＯＳｍ〜３５０ｍＯＳｍの浸透圧を有する。等張性は例えば蒸気圧または製氷型浸透圧計を使用することによって測定することができる。本発明に使用される等張化剤には、非限定的に、サッカライド、塩およびアミノ酸などを含む。

前述の賦形剤のほか、皮下投与のための注射用製剤の製造のための代表的な賦形剤およびプロセスは当技術分野において公知であり、例えば、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ，１９８５，Ａｎｓｅｌ，Ｈ．Ｃ．，Ｌｅａ ａｎｄ Ｆｅｂｉｇｅｒ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９９５，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．を参照することができる。該文献は参照によりその全体がここに組み入れられる。

本発明の皮下投与用製剤は、例示的に、
ヒトに対して１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
平均Ｃ_ｍａｘが１０μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が２．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が３．０×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
をもたらすように製剤化された皮下投与用製剤；
ヒトに対して２００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
平均Ｃ_ｍａｘが２７μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が７．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
をもたらすように製剤化された皮下投与用製剤；または
ヒトに対して４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
平均Ｃ_ｍａｘが４３μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が２．７×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
をもたらすように製剤化された皮下投与用製剤であり得る。

本発明の好ましい実施形態において、前記抗フラクタルカイン抗体は、配列番号１１に示すアミノ酸配列（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPAAAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK）からなる重鎖、および配列番号１２に示すアミノ酸配列（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC）からなる軽鎖からなる、抗体Ｈ３−２Ｌ４である。

４．投与量、投与間隔および投与回数
本発明の医薬組成物は、関節リウマチに治療上有効な改善をもたらすような投与量でヒト被験体に投与される。したがって、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の血中濃度または平均トラフ濃度が、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上になるように投与される。好ましくは、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の平均トラフ濃度が、１０μｇ／ｍＬ以上、または２０μｇ／ｍＬ以上になるように複数回投与される。

本発明の一実施形態において、本発明の医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり少なくとも１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が、皮下投与されるように用いられることを特徴とする。本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする。本発明の一実施形態において、本発明の医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇまたは４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられる。本発明の好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり２００ｍｇ〜４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられる。

本発明の医薬組成物の投与回数および投与間隔は、１回あたりに投与される抗ＦＫＮ抗体の量、および投与経路等に応じて変化し得る。

本発明の一実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり少なくとも１００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から２ヵ月に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり少なくとも１００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から１ヵ月に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり少なくとも１００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり少なくとも１００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、２回の週１回投与後、隔週の投与間隔で皮下投与されるように用いられる。

本発明の一実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から２ヵ月に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から１ヵ月に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、２回の週１回投与後、隔週の投与間隔で皮下投与されるように用いられる。

本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇ、または４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から２ヵ月に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇ、または４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から１ヵ月に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇ、または４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で、それを必要とするヒト被験体に複数回皮下投与されるように使用される。本発明の特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇ、または４００ｍｇの抗ＦＫＮ抗体が、２回の週１回投与後、隔週の投与間隔で皮下投与されるように用いられる。

本発明の医薬組成物の投与回数は、関節リウマチに治療上有効な改善をもたらす限り特に制限されず、１回あたりに投与される抗ＦＫＮ抗体の量、投与経路、および投与間隔に応じて変化し得る。

本発明の一実施形態において、本発明の医薬組成物は、１週間に１回から２ヵ月に１回までの投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

本発明の別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１週間に１回から１ヵ月に１回までの投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

本発明のさらに別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

本発明の特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、２回の週１回投与後、隔週の投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

本発明の特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の平均トラフ濃度が、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上になるように、１週間に１回から１ヵ月に１回までの投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

本発明のさらに別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の平均トラフ濃度が、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上になるように、１週間に１回から１ヵ月に１回までの投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

本発明のさらに別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の平均トラフ濃度が、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上になるように、１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

本発明のさらに別の実施形態において、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の平均トラフ濃度が、５μｇ／ｍＬ以上、１０μｇ／ｍＬ以上、１５μｇ／ｍＬ以上、２０μｇ／ｍＬ以上、２５μｇ／ｍＬ以上、３０μｇ／ｍＬ以上、３５μｇ／ｍＬ以上、または４０μｇ／ｍＬ以上になるように、２回の週１回投与後、隔週の投与間隔で、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回、少なくとも１０回、少なくとも１１回、少なくとも１２回、少なくとも１３回、少なくとも１４回、少なくとも１５回、少なくとも１６回、少なくとも１７回、少なくとも１８回、少なくとも１９回、少なくとも２０回、少なくとも２１回、少なくとも２２回、少なくとも２３回、少なくとも２４回、少なくとも２５回、少なくとも２６回、少なくとも２７回またはそれ以上の回数で皮下投与され得る。

以下、非限定的に、本発明の特定の態様を例示する。
一態様において、本発明は、関節リウマチを治療するための医薬組成物であって、前記医薬組成物は、抗フラクタルカイン抗体、および薬学的に許容される賦形剤を含んでおり、
前記抗フラクタルカイン抗体は：
その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体であり、
前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり少なくとも１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、医薬組成物である。

別の態様において、本発明は、関節リウマチを治療するための医薬組成物であって、前記医薬組成物は、抗フラクタルカイン抗体、および薬学的に許容される賦形剤を含んでおり、
前記抗フラクタルカイン抗体は：
その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体であり、
前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、医薬組成物である。

さらに別の態様において、本発明は、関節リウマチを治療するための医薬組成物であって、前記医薬組成物は、抗フラクタルカイン抗体、および薬学的に許容される賦形剤を含んでおり、
前記抗フラクタルカイン抗体は：
その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体であり、
前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇ、または４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、医薬組成物である。

本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の１０μｇ／ｍＬ以上の平均トラフ濃度をもたらすように、ヒトに対して、１週間に１回から２週間に１回の投与間隔で皮下反復投与される。好ましい実施形態では、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の１５μｇ／ｍＬ以上の平均トラフ濃度をもたらすように、ヒトに対して、１週間に１回から２週間に１回の投与間隔で皮下反復投与されるように用いられる。さらに好ましい実施形態では、本発明の医薬組成物は、抗ＦＫＮ抗体の２０μｇ／ｍＬ以上の平均トラフ濃度をもたらすように、ヒトに対して、１週間に１回から２週間に１回の投与間隔で皮下反復投与される。

好ましい実施態様では、本発明の医薬組成物は、ヒトに対して１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、以下の薬物動態学的パラメータのいずれか１つ、または２つ、または３つをもたらすように製剤化された、皮下投与用医薬組成物である：
平均Ｃ_ｍａｘが１０μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である；
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が２．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である；および、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が３．０×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である。

別の好ましい実施態様では、本発明の医薬組成物は、ヒトに対して２００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、以下の薬物動態学的パラメータのいずれか１つ、または２つ、または３つをもたらすように製剤化された、皮下投与用医薬組成物である：
平均Ｃ_ｍａｘが２７μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である；
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が７．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である；および、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である。

さらに別の好ましい実施態様では、本発明の医薬組成物は、ヒトに対して４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、以下の薬物動態学的パラメータのいずれか１つ、または２つ、または３つをもたらすように製剤化された、皮下投与用医薬組成物である：
平均Ｃ_ｍａｘが４３μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である；
平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である；および、
平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が２．７×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値である。

好ましい実施態様では、前記医薬組成物は、１００ｍｇ、２００ｍｇまたは４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体を含む、医薬組成物である。

好ましい実施態様では、前記医薬組成物は、１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇまたは４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられる、医薬組成物である。

好ましい実施態様では、前記医薬組成物は、ヒトに対して１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で複数回皮下投与される、医薬組成物である。

好ましい実施態様では、前記医薬組成物は、前記抗フラクタルカイン抗体の平均トラフ濃度が１０μｇ／ｍＬ以上となるように皮下投与される、医薬組成物である。

好ましい実施態様では、前記医薬組成物は、前記抗フラクタルカイン抗体の平均トラフ濃度が２０μｇ／ｍＬ以上となるように皮下投与される、医薬組成物である。

別の態様において、本発明は、抗フラクタルカイン抗体を含有する関節リウマチ治療薬であって、
１００ｍｇ〜４００ｍｇの抗フラクタルカイン抗体が、ヒトに対して１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で皮下投与されるように用いられることを特徴とし、
前記抗フラクタルカイン抗体は：
その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体である、
関節リウマチ治療薬である。

本発明の一実施態様では、抗フラクタルカイン抗体を含有する関節リウマチ治療薬であって、
１００ｍｇ、２００ｍｇ、または４００ｍｇの抗フラクタルカイン抗体が、ヒトに対して１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で皮下投与されるように用いられることを特徴とし、
前記抗フラクタルカイン抗体は：
その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体である、
関節リウマチ治療薬である。

好ましい実施形態では、前記抗フラクタルカイン抗体は、配列番号１１に示すアミノ酸配列（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPAAAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK）からなる重鎖、および配列番号１２に示すアミノ酸配列（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC）からなる軽鎖からなる、抗体Ｈ３−２Ｌ４である。

本発明の一実施形態では、定常状態における平均血清中総ＦＫＮ濃度が、６０μｇ／ｍＬ以上、７０μｇ／ｍＬ以上、８０μｇ／ｍＬ以上、９０μｇ／ｍＬ以上、１００μｇ／ｍＬ以上、１１０μｇ／ｍＬ以上、１２０μｇ／ｍＬ以上、１３０μｇ／ｍＬ以上、１４０μｇ／ｍＬ以上、１５０μｇ／ｍＬ以上、または１６０μｇ／ｍＬ以上となるように皮下投与されることを特徴とする、前記抗フラクタルカイン抗体を含む、医薬組成物である。

本発明の一実施形態では、本発明の医薬組成物は、１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体がヒトに対して複数回投与されたときに、定常状態における平均血清中総ＦＫＮ濃度が７０μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬである、皮下投与用医薬組成物である。

本発明の一実施形態では、本発明の医薬組成物は、１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体がヒトに対して１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で皮下投与されるように用いられたときに、定常状態における平均血清中総ＦＫＮ濃度が７０μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬである、皮下投与用医薬組成物である。

本発明の一実施形態では、本発明の医薬組成物は、２００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体がヒトに対して複数回投与されたときに、定常状態における平均血清中総ＦＫＮ濃度が１６０μｇ／ｍＬ〜１９０μｇ／ｍＬである、皮下投与用医薬組成物である。

本発明の一実施形態では、本発明の医薬組成物は、２００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体がヒトに対して１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で皮下投与されるように用いられたときに、定常状態における平均血清中総ＦＫＮ濃度が１６０μｇ／ｍＬ〜１９０μｇ／ｍＬである、皮下投与用医薬組成物である。

本発明の一実施態様では、ヒトは、少なくとも１種類の抗リウマチ薬、または抗ＴＮＦ製剤に対して十分な効果が得られなかった、効果が持続しなかった、もしくは不耐性であった、リウマチ病患者である。

技術的に矛盾しない限り、本明細書に記載の、あらゆる態様の任意の一または複数を、適宜組み合わせて、本発明を実施してよいことを当業者は理解する。さらに、技術的に矛盾しない限り、本明細書に記載の、好ましいまたは有利なあらゆる態様を、適宜組み合わせて、本発明を実施することが好ましいであろうことを当業者は理解する。

本明細書中に引用される文献は、参照により、それらのすべての開示が、明確に本明細書に援用されているとみなされるべきであって、当業者は、本明細書の文脈に従って、本発明の精神および範囲を逸脱することなく、それらの文献における関連する開示内容を、本明細書の一部として援用して理解できる。

本明細書中に引用される文献は、本出願の出願日前の関連技術の開示のみを目的として提供され、本発明者らが、先行発明または任意の他の理由によって、かかる開示に先行する権利を持たないことを自認するものとして解釈されてはならない。これらの文献のすべての記述は、本出願人が入手可能であった情報に基づいており、これらの記述内容が正確であるという自認を何ら構成しない。

本明細書において用いられる用語は、特定の実施態様を説明するために用いられるのであり、発明を限定する意図ではない。

本明細書において用いられる「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ、ｉｎｃｌｕｄｅ）」という用語は、文脈上明らかに異なる理解をすべき場合を除き、記載された事項（部材、ステップ、要素または数字等）が存在することを意図するものであり、それ以外の事項（部材、ステップ、要素または数字等）が存在することを排除しない。「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｏｆ）」という用語は、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｏｆ）」および／または「実質的に〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語で記載される態様を包含する。

異なる定義が無い限り、ここに用いられるすべての用語（技術用語および科学用語を含む。）は、本発明が属する技術の当業者によって広く理解されるのと同じ意味を有する。ここに用いられる用語は、異なる定義が明示されていない限り、本明細書および関連技術分野における意味と整合的な意味を有するものとして解釈されるべきであり、理想化され、または、過度に形式的な意味において解釈されるべきではない。

第１の、第２の等の用語が種々の要素を表現するために用いられるが、これらの要素はこれらの用語自身によって限定されるべきではないことが理解される。これらの用語は一つの要素を他の要素と区別するためのみに用いられているのであり、例えば、第１の要素を第２の要素と記し、同様に、第２の要素は第１の要素と記すことは、本発明の範囲を逸脱することなく可能である。

本明細書および特許請求の範囲において、成分含有量や数値範囲等を示すのに用いられる数値は、特に明示がない限り、用語「約」で修飾されているものと理解されるべきである。例えば、「１０μｇ」とは、特に明示がない限り、「約１０μｇ」を意味するものと理解され、その程度を、当業者は技術常識と本明細書の文意に従って、合理的に理解できることは当然である。

文脈上明白に他の意味を示す場合を除き、本明細書および請求の範囲で使用される場合、単数形で表される各態様は、技術的に矛盾しない限り、複数形であってもよいことが理解され、逆もまた真である。

以下において、本発明を、実施例を参照してより詳細に説明する。しかしながら、本発明はいろいろな態様により具現化することができ、ここに記載される実施例に限定されるものとして解釈されてはならない。関連技術分野の当業者は、本発明の精神または範囲を変更させることなく、様々な改変、付加、欠失、置換等を伴って本発明を実施できる。

実施例において使用される略語は当業者に周知の慣用的な略語である。いくつかの略語を以下に示す：
ＡＵＣ：area under the serum concentration-time curve
ＡＵＣ_(0-inf)：area under the serum concentration-time curve from zero time extrap-olated to infinite time
ＡＵＣ_(0-ｔ)：area under the concentration-time curve from zero time to time of last quantifiable concentration
ＡＵＣ_(0-336h)：area under the concentration-time curve from zero (predose) to fixed time-point 336 h (2 weeks) after the end of infusion
ＣＤＡＩ：clinical disease activity index
ＣＬ：total clearance
ＣＬ／Ｆ：apparent clearance
ＣＲＰ：C-reactive protein
Ｃ_ｍａｘ：maximum serum concentration
ＤＮＣ_ｍａｘ：dose-normalized C_max
ＤＮＡＵＣ：dose-normalized ＡＵＣ
ＥＬＩＳＡ：enzyme-linked immunosorbent assay
ＦＫＮ：fractalkine
ＩｇＧ：immunoglobulin G
ＮＯＮＭＥＮ：nonlinear mixed effect model
ＳＡＳ：statistical analysis system
ＳＤＡＩ：simple disease activity index
ｔ_１／２：serum elimination half-life
ｔ_ｍａｘ：time to reach peak serum concentration
Ｖ_ｄ：volume of distribution
Ｖ_ｚ／Ｆ：apparent volume of distribution at terminal phase

実施例１：ヒト化抗ヒトフラクタルカイン抗体の調製
以下のヒトへの投与試験では、ヒト化抗ヒトフラクタルカイン抗体Ｈ３−２Ｌ４を用いた。ヒト化を含む、Ｈ３−２Ｌ４の作製は、ＷＯ２０１１／０５２７９９に記載されたように行った。実施例２以降に使用したＨ３−２Ｌ４は、下記１−１．および１−２．に記載の方法で調製した。

１−１．発現ベクター
ヒト化抗ヒトフラクタルカイン抗体（Ｈ３−２Ｌ４）の発現ベクターの作製は以下のように行った。
まず、ヒト化抗ヒトフラクタルカイン抗体（Ｈ３−２Ｌ４）の重鎖可変領域（Ｈ３−２）のアミノ酸配列（配列番号１）のＮ末端にシグナル配列（配列番号３）を付加し、２ヶ所の変異（Ｖ２３４ＡおよびＧ２３７Ａ）を挿入したヒトＩｇＧ２の定常領域のアミノ酸配列（配列番号４）をＣ末端に付加した（配列番号５）。次に、ヒト化抗ヒトフラクタルカイン抗体（Ｈ３−２Ｌ４）の軽鎖可変領域（Ｌ４）のアミノ酸配列（配列番号２）のＮ末端にシグナル配列（配列番号６）を付加し、Ｃ末端に、ヒトＩｇκの定常領域のアミノ酸配列（配列番号７）を付加した（配列番号８）。これらのアミノ酸配列（配列番号５、８）をＣＨＯ細胞で発現させるために最適な遺伝子配列に変換し、遺伝子配列の５’末端に制限酵素ＨｉｎｄＩＩＩの認識配列とコザック配列を、３’末端に停止コドンと制限酵素ＥｃｏＲＩの認識配列をそれぞれ付加した配列を全合成した（配列番号９、１０）。
なお、配列番号１〜１０で特定される配列は、それぞれ以下のとおりであった。

重鎖可変領域（Ｈ３−２）のアミノ酸配列（配列番号１）
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS

軽鎖可変領域（Ｌ４）のアミノ酸配列（配列番号２）
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK

シグナル配列（配列番号３）
MEWSWVFLFFLSVTTGVHS

２ヶ所の変異（Ｖ２３４ＡおよびＧ２３７Ａ）を挿入したヒトＩｇＧ２の定常領域のアミノ酸配列（配列番号４）
ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPAAAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

（配列番号５）
MEWSWVFLFFLSVTTGVHSQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPAAAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

シグナル配列（配列番号６）
MSVPTQVLGLLLLWLTDARC

ヒトＩｇκの定常領域のアミノ酸配列（配列番号７）
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

（配列番号８）
MSVPTQVLGLLLLWLTDARCDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

（配列番号９）
AAGCTTGCCGCCACCATGGAATGGTCCTGGGTGTTCCTGTTCTTCCTGTCCGTGACCACCGGCGTGCACTCCCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCCGGCTACACCTTCACCAACTACTACATCCACTGGGTGAAACAGGCCCCAGGACAGGGCCTGGAATGGATCGGCTGGATCTACCCCGGCGACGGCTCCCCCAAGTTCAACGAGCGGTTCAAGGGCCGGACCACCCTGACCGCCGACAAGTCCACCAACACCGCCTACATGCTGCTGTCCTCCCTGCGGAGCGAGGATACCGCCGTGTACTTCTGCGCCACCGGCCCTACCGACGGCGACTACTTCGACTACTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCCTCCACCAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCTTGCTCCCGGTCCACCTCTGAGTCTACCGCCGCTCTGGGCTGCCTGGTCAAAGACTACTTCCCCGAGCCTGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACCTCTGGAGTGCATACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGTCATCCGGCCTGTACTCCCTGTCCTCCGTGGTGACAGTGCCCTCCTCCAACTTCGGCACCCAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGACAAGACCGTGGAACGGAAGTGCTGCGTGGAATGCCCCCCCTGTCCTGCCCCTCCTGCCGCCGCTCCTTCCGTGTTTCTGTTCCCCCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACCCCCGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCACGAGGACCCCGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAACAGTTCAACTCCACCTTCCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGGTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAGGGCCTGCCTGCCCCCATCGAAAAGACCATCAGCAAGACCAAGGGCCAGCCCCGCGAGCCCCAGGTGTACACACTGCCCCCCAGCCGGGAAGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAAGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGACAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCCATGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTCCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGAGCCTGAGCCCCGGCAAGTGATGAATTC

（配列番号１０）
AAGCTTGCCGCCACCATGTCCGTGCCCACCCAGGTGCTGGGCCTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCCAGATGCGACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCCGCCTCTGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCTCCGGCAACATCCACAACTTTCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACAACGAAAAGACCCTGGCCGACGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGACTACACCCTGACCATCTCCAGCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTTTTGCCAGCAGTTCTGGTCCACCCCCTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGGACCGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCCCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCGGGGCGAGTGCTGATGAATTC

全合成された重鎖をコードする遺伝子配列を、制限酵素ＨｉｎｄＩＩＩとＥｃｏＲＩにて切り出し、ｐＥＥ６．４ベクター（Ｌｏｎｚａ社）のＨｉｎｄＩＩＩとＥｃｏＲＩサイトに挿入した。全合成された軽鎖をコードする遺伝子配列を、制限酵素ＨｉｎｄＩＩＩとＥｃｏＲＩにて切り出し、ｐＥＥ１２．４ベクター（Ｌｏｎｚａ社）のＨｉｎｄＩＩＩとＥｃｏＲＩサイトに挿入した。それぞれのベクターを制限酵素ＮｏｔＩとＰｖｕＩで切断し、重鎖と軽鎖を含むベクター断片同士をライゲーションして、発現ベクターを構築した。

１−２．抗体Ｈ３−２Ｌ４を発現する細胞株の構築および抗体Ｈ３−２Ｌ４の取得
作製した発現ベクターを、ＣＤ−ＣＨＯ／６ｍＭ Ｌ−グルタミンの培地に馴化させたＣＨＯＫ１ＳＶ細胞（Ｌｏｎｚａ社）にエレクトロポレーション法にて導入した。遺伝子導入後、ＣＤ−ＣＨＯ／５０ｕＭ ＭＳＸの培地にて、３７℃／１０％ＣＯ_２環境下でセレクションを行い、目的の抗体を発現する細胞を取得した。その後、細胞のクローニングを実施し、セルバンクを作製した。作製したセルバンクを蘇生・培養し、培養上清をクロマトグラフィーにて精製し、目的の抗体Ｈ３−２Ｌ４を取得した。

上記にしたがって取得された抗体Ｈ３−２Ｌ４は、それぞれ配列番号１１および１２で示すアミノ酸配列を有する重鎖および軽鎖を有するものであった。

Ｈ３−２Ｌ４の重鎖全長（配列番号１１）
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPAAAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

Ｈ３−２Ｌ４の軽鎖全長（配列番号１２）
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

また、抗体Ｈ３−２Ｌ４の重鎖可変領域および軽鎖可変領域のアミノ酸配列は、それぞれ以下のとおりであった。

Ｈ３−２Ｌ４の重鎖可変領域（配列番号１３）
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS

Ｈ３−２Ｌ４の軽鎖可変領域（配列番号１４）
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK

また、抗体Ｈ３−２Ｌ４のＣＤＲ−Ｈ１〜ＣＤＲ−Ｈ３、およびＣＤＲ−Ｌ１〜ＣＤＲ−Ｌ３のアミノ酸配列は、以下のとおりであった：

Ｈ３−２Ｌ４のＣＤＲ−Ｈ１（配列番号１５）
NYYIH

Ｈ３−２Ｌ４のＣＤＲ−Ｈ２（配列番号１６）
WIYPGDGSPKFNERFKG

Ｈ３−２Ｌ４のＣＤＲ−Ｈ３（配列番号１７）
GPTDGDYFDY

Ｈ３−２Ｌ４のＣＤＲ−Ｌ１（配列番号１８）
RASGNIHNFLA

Ｈ３−２Ｌ４のＣＤＲ−Ｌ２（配列番号１９）
NEKTLAD

Ｈ３−２Ｌ４のＣＤＲ−Ｌ３（配列番号２０）
QQFWSTPYT

実施例２：単回投与試験
健康な成人男性を対象に、Ｈ３−２Ｌ４を単回皮下投与した際の安全性および忍容性、ならびに薬物動態を評価するための、臨床第１相試験を行った。

２−１．［治験デザイン］
本治験は、日本人健康成人男性を対象とし、Ｈ３−２Ｌ４を単回皮下投与した際の安全性および忍容性を評価することを主要な目的とした単施設、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、単回投与用量漸増試験であった。本治験では３２例の被験者を、４つのコホート（５０、１００、２００、４００ｍｇ群）に分け、各コホート８例の被験者のうち６例にＨ３−２Ｌ４を、２例にプラセボを単回皮下投与した。

本治験はスクリーニング期、観察入院期、投与入院期、およびフォローアップ期から構成された。

治験薬投与前２８日〜２日以内にスクリーニング検査を、投与前日に観察入院期の検査を実施し、適格性を確認した。適格性が確認された被験者を、割付責任者が作成した割付表に基づき、無作為にＨ３−２Ｌ４またはプラセボ群に割り付けた。なお、各被験者の投与間隔は３０分以上空けることとした。本治験は単回投与試験であり、被験者への投与は１回のみ、食事時間と関係なく行った。

投与後２週間は被験者を入院にて観察・調査し、その後、外来にて投与終了８週後まで観察・調査した。

コホート移行は、治験責任医師の判断にて行い、前コホートの最終被験者の投与終了後７日以上経過した後に、次コホートの投与を開始するものとした。

なお、本試験に使用した治験薬の種類および治験薬の処方は、下記のとおりであった。

２−２．［治験薬の投与］
Ｈ３−２Ｌ４またはプラセボを下記表３の通りに、上腕部または腹部に皮下投与した。第１コホート（５０ｍｇ群）および第２コホート（１００ｍｇ群）では、左右いずれかの上腕にそれぞれ０．５ｍＬ、１．０ｍＬを皮下投与した。第３コホート（２００ｍｇ群）では、左右それぞれの上腕に１．０ｍＬ（合計２．０ｍＬ）を皮下投与した。第４コホート（４００ｍｇ群）では、左右それぞれの上腕および腹部の計４ヵ所に各１．０ｍＬ（合計４．０ｍＬ）を皮下投与した。

２−３．［血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の解析］
血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度は、バリデートされた測定法を用いて測定した。具体的には、マイクロプレートに固相化されたヒトフラクタルカインに血清中Ｈ３−２Ｌ４を結合させ、ルテニウム標識された抗Ｈ３−２Ｌ４ウサギポリクローナル抗体を反応させた後、Ｓｅｃｔｏｒ Ｉｍａｇｅｒ ６０００ （Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ社）にて電気化学発光量を測定することにより定量した。なお、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度測定のための採血は、下記表４に示す採血時期に行った。

２−４．［薬物動態解析］
薬物動態の解析は、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度データに基づき、１つ以上の薬物動態パラメータを算出することが可能なデータを有する被験者の集団（以下、薬物動態解析対象集団と称する）を用いて実施した。投与量別に規定時間ごとに血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の要約統計量を算出した。血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度推移図を作成し、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度を用い、ノンコンパートメント解析により、Ｃ_ｍａｘ、ｔ_ｍａｘ、ＡＵＣ_{（０−ｔ）}、ＡＵＣ_{（０−ｉｎｆ）}、ｔ_１／２、ＣＬ／ＦおよびＶ_ｚ／Ｆを含む薬物動態パラメータを算出した。なお、解析は、ＳＡＳ、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ、Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ Ｋｎｏｗｌｅｄｇｅｂａｓｅ Ｓｅｒｖｅｒ、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ、およびＳ−ＰＬＵＳを用いて実施した。

上記にしたがって算出された結果を下記表５および図１に示す。なお、表中のｔ_ｍａｘ以外の各ＰＫパラメータは、算術平均値で示し、括弧内の数値は標準偏差を示す。ｔ_ｍａｘは中央値で示し、括弧内の数値は最小値および最大値を示す。また、表中のａはｎ＝３を示す。

解析の結果、Ｈ３−２Ｌ４の単回皮下投与した際の薬物動態は、吸収相と２つの消失相（β相およびγ相）の３相性のプロファイルを示すと考えられた。単回皮下投与後、Ｈ３−２Ｌ４は緩除に吸収され、１２０〜１５６時間（中央値）でＣ_ｍａｘに到達した。Ｃ_ｍａｘ到達後、高濃度では緩やかな消失相（β相）、低濃度ではより急峻な最終消失相（γ相）が観察された。γ相とβ相の境界点は１０μｇ／ｍＬ付近と考えられた。５０および１００ｍｇ群では、２相性のプロファイルを示し、Ｃ_ｍａｘに続いてγ相が出現していると考えられた。２００および４００ｍｇ群では最終消失相であるγ相を正確に評価するために必要な採血数が足らなかったため、γ相に依存した薬物動態パラメータを算出できなかった。ｔ_１／２、βはｔ_１／２、γよりも長く、用量の増加に伴い延長した。Ｈ３−２Ｌ４は５０〜４００ｍｇの用量範囲において非線形性の薬物動態を示した。

実施例３：複数回投与試験
関節リウマチ患者を対象に、Ｈ３−２Ｌ４を反復皮下投与した際の安全性および忍容性、薬物動態、関節リウマチに対する有効性を評価するための、臨床第１／２相試験を行った。

３−１．［治験デザイン］
本治験は、日本人関節リウマチ患者を対象とし、Ｈ３−２Ｌ４を１２週間、反復皮下投与した際の安全性および忍容性を評価することを主要な目的とした多施設共同、非盲検、非対照、反復投与用量漸増（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ａｓｃｅｎｄｉｎｇ ｄｏｓｅ、ＭＡＤ）試験であり、無作為化は行わなかった。本治験では、１００ｍｇ投与群として１２名、２００ｍｇ投与群として１５名を対象に、１００ｍｇ投与群の安全性を確認後、２００ｍｇ投与群に移行した。さらに、２００ｍｇ投与群の全ての被験者の投与期の安全性評価が完了し、安全性に問題が無いことを確認後４００ｍｇ投与群として１０名を対象に試験を実施した。

本治験はスクリーニング期、観察期、投与期、継続投与期および追跡調査期から構成された。

治験薬投与開始前４２日〜２日以内にスクリーニング検査を、治験薬初回投与前日または当日投与前に観察期の検査を実施し、適格性が確認された被験者にＨ３−２Ｌ４を投与した。

適格性の選択基準は、以下のとおりであった：
（１）２０歳以上６５歳未満であること；
（２）ＡＣＲ分類基準または２０１０年ＡＣＲ／ＥＵＬＡＲ分類基準を満たす関節リウマチ（ＲＡ）患者であること；
（３）スクリーニング開始時までに下記のいずれかまたは両方の治療を行い、スクリーニング期および観察期の評価で、圧痛関節数４ヵ所以上（６８関節中）かつ腫脹関節数４ヵ所以上（６６関節中）を認めること；
−メトトレキサート（ＭＴＸ）による治療を３ヵ月以上行った患者。ただし、副作用により投与継続ができなかった患者は３ヵ月以上の治療歴は問わない。
−抗ＴＮＦ製剤による治療を３ヵ月以上行った患者。ただし、抗ＴＮＦ製剤による治療はアダリムマブ、インフリキシマブ、ゴリムマブ、セルトリズマブペゴルまたはエタネルセプトのうちいずれか１剤に限る（抗ＴＮＦ製剤はバイオ後続品を含む）。
（４）過去に抗ＴＮＦ製剤以外の生物学的製剤（トシリズマブ、アバタセプト等）または２剤以上の抗ＴＮＦ製剤を投与されたことが無いこと；
（５）スクリーニング期に高感度ＣＲＰ（ｈｓ−ＣＲＰ）０．６ｍｇ／ｄＬ以上あるいは赤血球沈降速度（ＥＳＲ）２８ｍｍ／ｈｒ以上であること；および
（６）スクリーニング時の体重が３０ｋｇ以上１００ｋｇ以下の患者

投与期では、Ｈ３−２Ｌ４を０週、１週、２週、以降２週ごとに１０週まで計７回投与した。７回目の投与終了２週後（１２週時）の評価で、安全性に問題がなく、圧痛関節数および腫脹関節数の両方が観察期から２０％以上改善し、かつ継続投与を希望する被験者は、さらに２週ごとに２０回（４０週間）同一用量にて投与を行った（継続投与期）。なお、４００ｍｇ投与群の継続投与期については、治験責任医師又は治験分担医師の判断で２００ｍｇ投与へ減量することができ、その後、４００ｍｇ投与に戻すこともできることとした。

なお、本試験に使用した治験薬の種類および治療薬の処方は、下記のとおりであった。

３−２．［治験薬の投与］
Ｈ３−２Ｌ４を下記表８のとおりに上腕、腹部または大腿部に皮下投与した。１００ｍｇ投与群では、左右上腕、左右腹部または左右大腿部のいずれか１ヵ所に１．０ｍＬを皮下投与した。２００ｍｇ投与群では、左右上腕、左右腹部または左右大腿部のいずれか２ヵ所に各１．０ｍＬ（合計２．０ｍＬ）を皮下投与した。４００ｍｇ投与群では、左右上腕、左右腹部又は左右大腿部のいずれか４ヵ所に各１．０ｍＬ（合計４．０ｍＬ）を皮下投与した。なお、４００ｍｇ投与群については、治験責任医師又は治験分担医師が適切に皮下投与できると判断した場合に限り、２ヵ所に各２．０ｍＬ（合計４．０ｍＬ）を皮下投与することができることとした。

治験薬投与は、当日予定する全ての調査（投与部位所見は除く）が終了した後に実施した。

７回目の投与終了２週後（１２週時）の評価で、安全性に問題がなく、圧痛関節数および腫脹関節数の両方が観察期から２０％以上改善し、かつ継続投与を希望する被験者はさらに２週ごとに２０回（４０週間）同一用量にて投与を行った。継続投与期に移行した被験者については初回投与後５２週まで観察・調査した。治験薬投与は、当日予定する全ての調査（投与部位所見は除く）が終了した後に実施した。また、治験薬の投与間隔は７日以上（中６日以上）空けることとし、観察・調査日を変更した関係で投与間隔が７日未満となる場合は、治験薬の投与は休薬とし、観察・調査のみ実施した。

３−３．［薬物動態および薬力価］
バリデートされた測定法を用い、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度、血清中総ＦＫＮ濃度を測定した。血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度は、実施例２の２−４に記載の方法により測定した。血清中総ＦＫＮ濃度は、ＷＯ２０１１／０５２７９９に記載された２種類の抗ヒトフラクタルカインモノクローナル抗体１Ｆ３および３Ａ５−２で挟むサンドイッチＥＬＩＳＡ法により測定した。具体的には、血清中の総ＦＫＮをプレートに固相化した１Ｆ３で補足し、ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）で標識した３Ａ５−２でサンドイッチし、さらにＨＲＰの基質である３，３’，５，５’−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｉｄｉｎｅ（ＴＭＢ）を反応させてその発色値をオートリーダー（Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ ｒｅａｄｅｒ Ｅｎｖｉｓｉｏｎ、パーキンエルマージャパン）で測定することにより、血清中総ＦＫＮ濃度を定量した。

薬物動態の解析は、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度データに基づき、治験薬が投与され、評価可能な血清中ＥＨ３−２Ｌ４濃度データが１点以上ある被験者の集団（以下、薬物動態解析対象集団と称する）を用いて実施した。投与量別に規定時間ごとに血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の要約統計量を算出し、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度推移図を作成した。

３−３−１．［血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度］
実施スケジュールに示す時期（投与開始日を起点（１日（０週）として（以下、同様）、投与前（１日）、８日、１５±１日、２９±３日、４３±３日、５７±３日、７１±３日、および８５±３日）に、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度測定のための採血を行った。なお、原則として、２週、４週または６週の投与５日後（±３日）のいずれか１ポイントにて血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度測定のための採血を行った。

投与期（１２週）にわたる、１００ｍｇ投与群、２００ｍｇ投与群および４００ｍｇ投与群における、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の要約統計量（算術平均値で示す。）は、図２に示される。

３−３−２．［血清中総ＦＫＮ濃度］
実施スケジュールに示す採血時期（投与前（１日）、８日、１５±１日、２９±３日、４３±３日、５７±３日、７１±３日、および８５±３日）に、血清中総ＦＫＮ濃度測定のための採血を行った。

投与期（１２週）にわたる１００ｍｇ投与群および２００ｍｇ投与群における、血清中総ＦＫＮ濃度の要約統計量（算術平均値で示す。）は、各投与群における、血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の要約統計量とともにそれぞれ図３および図４に示される。

３−４．［有効性］
有効性の解析は、治験薬が投与され，評価可能な治験薬投与後の有効性データが１点以上ある被験者の集団（最大の解析対象集団（ＦＡＳ：Ｆｕｌｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｅｔ）を用いて実施した。

関節リウマチに対する治験薬の有効性は、投与量別に各評価時期におけるＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０反応率およびその両側９５％信頼区間を算出することにより評価した。ＡＣＲの各評価項目である圧痛・腫脹関節数、ＶＡＳ（患者の疼痛評価、疾患活動性全般評価および医師の疾患活動性全般評価）を用いた評価、患者による身体機能評価（ＨＡＱ）およびｈｓ−ＣＲＰ・ＥＳＲの値、変化量および変化率について評価時期別の要約統計量を算出した。同様に、各評価時期におけるＤＡＳ２８−ＥＳＲ、ＤＡＳ２８−ＣＲＰ、ＳＤＡＩ（ｓｉｍｐｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘ）、ＣＤＡＩ（ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘ）の値および変化量について、投与量ごとに要約統計量を算出した。併せて、各寛解基準（ＤＡＳ２８−ＥＳＲ、ＤＡＳ２８−ＣＲＰ、ＳＤＡＩ、ＣＤＡＩおよびＢｏｏｌｅａｎ）による寛解率およびその両側９５％信頼区間を算出した。

なお、解析はＳＡＳを用いて実施した。

３−４−１．［ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０］
各投与群における、１２週時のＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０の結果を図５（ＬＯＣＦ（Ｌａｓｔ Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ Ｃａｒｒｉｅｄ Ｆｏｒｗａｒｄ）による。）および図６（ＮＲＩ（Ｎｏｎ−Ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ Ｉｍｐｕｔａｔｉｏｎ）による）に示す。１２週時のＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０（ＬＯＣＦ）は、１００ｍｇ投与群でそれぞれ７５．０％、３３．３％、８．３％、２００ｍｇ投与群でそれぞれ８０．０％、２６．７％、２０．０％、４００ｍｇ投与群でそれぞれ７０．０％、３０．０％、２０．０％であった。また、１２週時のＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０、ＡＣＲ７０（ＮＲＩ）は、１００ｍｇ投与群でそれぞれ７５．０％、３３．３％、８．３％、２００ｍｇ投与群でそれぞれ６６．７％、２０．０％、１３．３％、４００ｍｇ投与群でそれぞれ６０．０％、３０．０％、２０．０％であった。
また、各投与群における１２週時までのＡＣＲ７０（ＬＯＣＦによる。）の推移を図７に示す。図７に示されるように、２００ｍｇ投与群および４００ｍｇ投与群は、１００ｍｇ投与群と比べて早期に改善効果が認められた。

３−４−２．［ＤＡＳ２８−ＣＲＰ］
投与期（１２週）にわたる、各投与群における、投与前（０週）からのＤＡＳ２８−ＣＲＰの変化の推移（ＬＯＣＦによる。）を図８に示す。
また、各投与群における、投与前（０週）および１２週時のＤＡＳ２８−ＣＲＰの疾患活動性分類の割合の推移を図９に示す。図９に示されるように、投与後１２週時において、各投与群で改善傾向が認められた。また、各投与群の被験者の２０％以上において寛解を達成した。

３−４−３．［ＤＡＳ２８−ＥＳＲ］
各投与群における１２週時のＤＡＳ２８−ＥＳＲ（ＮＲＩ）の疾患活動性分類のうち寛解または低疾患活動性に達した被験者の割合を図１０に示す。寛解または低疾患活動性に達した被験者の割合は、１００ｍｇ投与群で１６．７％（寛解は８．３％）、２００ｍｇ投与群で２６．７％（寛解は６．７％）、４００ｍｇ投与群で４０％（寛解は２０％）であった。また、各投与群における１２週時のＤＡＳ２８−ＥＳＲ（ＮＲＩ）のＥＵＬＡＲ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｒｉｔｅｒｉａに基づく被験者の割合を図１１に示す。１２週時において、「ｇｏｏｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ」を達成した被験者は、１００ｍｇ投与群、２００ｍｇ投与群および４００ｍｇ投与群において、それぞれ１６．７％、２０％および４０％であった。これらの結果より、投与量の増加に伴って改善効果が高くなることが示された。

３−４−３．［ＳＤＡＩ，Ｂｏｏｌｅａｎ］
１００ｍｇ投与群および２００ｍｇ投与群における、１２週時のＳＤＡＩの寛解率は、それぞれ１６．７％および２０．０％であった。
また、１００ｍｇ投与群および２００ｍｇ投与群における、１２週時のＢｏｏｌｅａｎの寛解率は、それぞれ８．３％および２６．７％であった。

３−４−４．［赤血球沈降速度（ＥＳＲ）、高感度ＣＲＰ（ｈｓ−ＣＲＰ）］
ＥＳＲは、実施スケジュールに示す時期（スクリーニング期、投与前（１日（０週）、１５±１日、２９±３日、５７±３日、および８５±３日）および中止時に測定した。また、継続投与期に移行した被験者はさらに４週ごとに５２週時まで測定した。院内にて１時間値を測定し、測定結果は症例報告書に記載した。

ｈｓ−ＣＲＰは、血液生化学検査の一環として、実施スケジュールに示す時期（スクリーニング期、投与前（１日（０週））、２日、９日、１５±１日、２９±３日、５７±３日、および８５±３日）に測定した。

１００ｍｇ投与群および２００ｍｇ投与群の各被験者における、１２週時の最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度、１２週時までの最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度−時間曲線下面積、並びに各評価時期（投与前（０週）および１２週時）におけるｈｓ−ＣＲＰ、ＥＳＲ、およびこれらの変化率を下記表９および１０に示す（表中の値は、ＳＡＳによる解析は行っていない。）。

表中、ｈｓ−ＣＲＰ変化率およびＥＳＲ変化率が−０．２以下であったものは太字で示されている。また、１２週での最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度が測定限界値以下であったものは、空欄になっている。

表中、ＣＲＰ変化率およびＥＳＲ変化率が−０．２以下であるものは太字で示されている。また、被験者ＥＥ、ＩＩおよびＬＬは、試験を途中で中止した。

上記結果において、投与前（０週）におけるｈｓ−ＣＲＰの値が０．６ｍｇ／ｄＬ以上（本試験における適格性の選択基準値）である被験者に層別すると、１２週での最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度が約１０μｇ／ｍＬ以上の被験者では、最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度が高くなるほど、ｈｓ−ＣＲＰにおける改善傾向が認められた。実際、投与前（０週）におけるｈｓ−ＣＲＰの値が０．６ｍｇ／ｄＬ以上であり、かつ、１２週時における最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度が測定できた、１００ｍｇ投与群において、ｈｓ−ＣＲＰが２０％以上改善しなかった被験者群の１２週での最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の算術平均値が７．２μｇ／ｍＬであった一方、ｈｓ−ＣＲＰの値が２０％以上改善した被験者群の算術平均値は１４．４μｇ／ｍＬであった。同様に、２００ｍｇ投与群において、ｈｓ−ＣＲＰの値が２０％以上改善した被験者群の１２週での最低血清中Ｈ３−２Ｌ４濃度の算術平均値は２４．２μｇ／ｍＬであった。上記結果および２週時以降に定常状態に達していたことを鑑みると、少なくとも１０μｇ／ｍＬの平均トラフ濃度をもたらすように、Ｈ３−２Ｌ４を含む医薬組成物が投与されることが必要であると考えられた。

３−４−５．［圧痛関節数および腫脹関節数の評価］
スクリーニング期、観察期、治験薬投与開始２週時、４週時、８週時、１２週時および中止時に圧痛関節数および腫脹関節数を評価した。また、継続投与期に移行した被験者はさらに４週ごとに５２週時まで評価した。原則として各実施医療機関における同一の治験担当医師が評価を実施した。

圧痛関節数は６８関節を対象に関節を圧迫または可動して評価した。

１２週時における圧痛関節数および腫脹関節数は、投与前（０週）の値に対して減少し、その減少値は、１００ｍｇ投与群でそれぞれ８．８± ７．３０ 、５．３ ± ３．９８、２００ｍｇ投与群でそれぞれ８．７ ± ９．８５ 、６．６ ± ７．０１、４００ｍｇ投与群でそれぞれ１０．４± １１．２７ 、 ８．８ ± ８．３０であった。

３−４−６．［Ｖｉｓｕａｌ Ａｎａｌｏｇ Ｓｃａｌｅ （ＶＡＳ）を用いた評価］
観察期、治験薬投与開始２週時、４週時、８週時、１２週時および中止時にＶＡＳを用いた評価を実施した。また、継続投与期に移行した被験者はさらに４週ごとに５２週時まで評価した。原則として各実施医療機関における同一の治験担当医師が評価を実施した。

３−４−７．［Ｈｅａｌｔｈ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒ （ＨＡＱ）を用いた評価］
観察期，治験薬投与開始２週時、４週時、８週時、１２週時および中止時にＨＡＱを用いた評価を実施した。また、継続投与期に移行した被験者はさらに４週ごとに５２週時まで評価した。

本臨床試験により、ＭＴＸまたはＴＮＦ阻害薬で効果不十分なリウマチ患者において、Ｈ３−２Ｌ４の安全性および忍容性は良好であることが示された。また、Ｈ３−２Ｌ４抗体を含む医薬組成物の臨床的有効性が確認され、特に１回あたり２００ｍｇ以上の前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることで、顕著な改善効果を示した。

Claims (10)

1. 関節リウマチを治療するための医薬組成物であって、
   前記医薬組成物は、抗フラクタルカイン抗体、および薬学的に許容される賦形剤を含んでおり、
   前記抗フラクタルカイン抗体は：
   その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
   その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
   ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
   前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体であり、
   前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり少なくとも１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、
   前記医薬組成物。
2. 請求項１に記載の医薬組成物であって、
   前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ〜４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、
   医薬組成物。
3. 請求項１に記載の医薬組成物であって、
   前記医薬組成物は、ヒトに対して１回あたり１００ｍｇ、２００ｍｇまたは４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が皮下投与されるように用いられることを特徴とする、
   医薬組成物。
4. 請求項１に記載の医薬組成物であって、
   ヒトに対して１００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
   平均Ｃ_ｍａｘが１０μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
   平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が２．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
   平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が３．０×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
   をもたらす、
   前記医薬組成物。
5. 請求項１に記載の医薬組成物であって、
   ヒトに対して２００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
   平均Ｃ_ｍａｘが２７μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
   平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が７．４×１０^３μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
   平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
   をもたらす、
   前記医薬組成物。
6. 請求項１に記載の医薬組成物であって、
   ヒトに対して４００ｍｇの前記抗フラクタルカイン抗体が単回皮下投与されたときに、
   平均Ｃ_ｍａｘが４３μｇ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、
   平均ＡＵＣ_{（０−３３６ｈ）}が１．２×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値、または、
   平均ＡＵＣ_{（０−ｔ）}が２．７×１０^４μｇ・ｈ／ｍＬの８０％〜１２５％の数値範囲内に含まれる値
   をもたらす、
   前記医薬組成物。
7. 請求項１に記載の医薬組成物であって、
   １週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で複数回皮下投与される、
   前記医薬組成物。
8. 請求項１〜７に記載の医薬組成物であって、
   前記抗フラクタルカイン抗体の平均トラフ濃度が１０μｇ／ｍＬ以上となるように皮下投与される、
   医薬組成物。
9. 請求項１〜７に記載の医薬組成物であって、
   前記抗フラクタルカイン抗体の平均トラフ濃度が２０μｇ／ｍＬ以上となるように皮下投与される、
   医薬組成物。
10. 抗フラクタルカイン抗体を含有する関節リウマチ治療薬であって、
    １００ｍｇ〜４００ｍｇの抗フラクタルカイン抗体が、ヒトに対して１週間に１回から２週間に１回までの投与間隔で皮下投与されるように用いられることを特徴とし、
    前記抗フラクタルカイン抗体は：
    その重鎖可変領域が、配列番号１３（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYIHWVKQAPGQGLEWIGWIYPGDGSPKFNERFKGRTTLTADKSTNTAYMLLSSLRSEDTAVYFCATGPTDGDYFDYWGQGTTVTVSS）に示すアミノ酸配列を含む；
    その軽鎖可変領域が、配列番号１４（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNFLAWYQQKPGKAPKLLIYNEKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYFCQQFWSTPYTFGGGTKVEIK）に示すアミノ酸配列を含む；
    ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む；および
    前記ヒトＩｇＧ２アイソタイプの定常領域のＦｃ領域がＶ２３４ＡおよびＧ２３７Ａの変異を含む、抗体である、
    前記関節リウマチ治療薬。