JP2017057175A - Muscle increasing agent - Google Patents

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康浩 竹内
Yasuhiro Takeuchi
康浩 竹内
登三 宮地
Takazo Miyaji
登三 宮地
眞治 佐藤
Shinji Sato
眞治 佐藤
▲祐▼理 能見
Yuri Nomi
▲祐▼理 能見
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an animal-derived muscle increasing agent which can effectively increase muscle while preventing increase in visceral fat.SOLUTION: The muscle increasing agent is produced by drying ostrich meat, and is orally taken with another food material.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、内臓脂肪の増加を抑制しつつ筋肉を増加させる筋肉増加剤に関し、好ましくは、健康食品として提供される。   The present invention relates to a muscle increasing agent that increases muscle while suppressing an increase in visceral fat, and is preferably provided as a health food.

特許文献1〜特許文献5など、従来から、各種の筋肉増加剤が提案されている。また、筋肉増強サプリメントとして、クレアチンパウダーなども市販されている。   Conventionally, various muscle increasing agents, such as patent documents 1-patent documents 5, are proposed. Moreover, creatine powder etc. are also marketed as a muscle reinforcement supplement.

特開2013−227228号公報JP2013-227228A 特開2009−062346号公報JP 2009-062346 A 特開2004−292325号公報JP 2004-292325 A 特開2004−256513号公報JP 2004-256513 A 特開2004−075637号公報JP 2004-075637 A

”アミノ酸プロスペック クレアチンパウダー”、[online]、[平成27年7月31日検索]、インターネット<URL:http://www.glico.co.jp/info/pwr_pro/crtn.html >"Amino Acid Prospec Creatine Powder", [online], [searched July 31, 2015], Internet <URL: http://www.glico.co.jp/info/pwr_pro/crtn.html>

しかし、動物由来の筋肉増加剤は、脂肪成分が内臓脂肪として蓄積される可能性や、筋肉の筋組織の間に溜まる可能性があり、この点が懸念されるところである。一方、特許文献2などの植物由来の筋肉増加剤は、脂肪成分の蓄積の問題はない反面、筋肉増加効果が十分ではない。   However, animal-derived muscle increasing agents may accumulate fat components as visceral fat and may accumulate between muscle muscle tissues, which is a concern. On the other hand, plant-derived muscle increasing agents such as Patent Document 2 do not have a problem of accumulation of fat components, but have an insufficient muscle increasing effect.

また、パウダー状のサプリメントのように、食後または運動後に、薬のように服用するのでは、いかにも味気なく、継続して服用するのが容易ではない。また、人間に限らず、競走馬などの瞬発力を増加させる食餌を実現できると好ましい。   Moreover, if it is taken like a medicine after eating or exercising like a powdered supplement, it is not very tasty and it is not easy to take continuously. Moreover, it is preferable if not only a human being but the food which increases instantaneous power, such as a racehorse, can be implement | achieved.

本発明は、上記の問題に鑑みてなされたものであって、内臓脂肪の増加を抑制しつつ筋肉を効果的に増加させることができる動物由来の筋肉増加剤を提供することを目的とする。   This invention is made | formed in view of said problem, Comprising: It aims at providing the muscle increase agent derived from the animal which can increase a muscle effectively, suppressing the increase in visceral fat.

上記の目的を達成するため、本発明は、食材として嗜好しつつ、筋肉増加が果たせ、且つ、内臓脂肪の増加を抑制できる材料について種々検討した。その結果、鶏肉、豚肉、牛肉などの食肉と比較して大幅に脂肪分が少なく、且つ、一般の食肉動物と比較して格段に走行能力に優れたダチョウに着目して、各種の実験を繰り返して本発明に至った。   In order to achieve the above object, the present invention has been variously studied on materials that can increase muscle and can suppress increase in visceral fat while being preferred as a food. As a result, repeated various experiments, focusing on ostriches that have significantly less fat compared to meat such as chicken, pork, and beef and that have much better running ability than ordinary meat animals. To the present invention.

すなわち、本発明は、ダチョウ、エミュー、レア、などの平胸類の食肉を乾燥して製造され、他の食材と共に経口摂取される筋肉増加剤である。また、本発明は、ダチョウ、エミュー、レアなどの平胸類の食肉から水抽出した液体を含有して構成され、経口摂取される筋肉増加剤である。   That is, the present invention is a muscle increasing agent produced by drying flat breast meat such as ostrich, emu, rare, etc., and orally ingested together with other ingredients. In addition, the present invention is a muscle increasing agent that is composed of a liquid extracted from meat of flat breasts such as ostrich, emu, and rare, and is taken orally.

本発明の筋肉増加剤は、アンセリンとクレアチンの含有量(W)が、同程度である一方、カルノシンの含有量(W)が、前記各成分の1/60以上、1/25以下であるのが好ましい。ここで、Wは重量を意味し、アンセリンとクレアチンの含有比(W)は、1.0:1.2〜1.2:1.0の範囲内(より好ましくは、1:1.1〜1:1.3の範囲内)であると更に好ましい。   The muscle increasing agent of the present invention has the same content (W) of anserine and creatine, while the content (W) of carnosine is 1/60 or more and 1/25 or less of the above components. Is preferred. Here, W means weight, and the content ratio (W) of anserine and creatine is in the range of 1.0: 1.2 to 1.2: 1.0 (more preferably, 1: 1.1 to More preferably within the range of 1: 1.3.

また、平胸類の食肉から水抽出された液体から製造された筋肉増加剤においては、カルノシンの含有量(W)が、アンセリンやクレアチンに対して、1/60以上、1/40以下であるのが好ましい。   Moreover, in the muscle increasing agent manufactured from the liquid extracted from the water of flat breast meat, the content (W) of carnosine is 1/60 or more and 1/40 or less with respect to anserine and creatine. Is preferred.

本発明によれば、以下の実施例に示す通り、内臓脂肪の増加を抑制しつつ、効果的に筋肉を増加させることができる。また、パウダー状のサプリメントのように、無味乾燥なものではなく、毎回の食事に混入させて摂取することができるので、飽きることなく長期間にわたって摂取しつづけることができる。   According to the present invention, as shown in the following examples, muscles can be effectively increased while suppressing an increase in visceral fat. Moreover, since it is not tasteless dry like a powder-like supplement and can be ingested by being mixed in each meal, it can be ingested over a long period of time without getting tired.

ヒトの摂取態様としては、(1)高齢者のQOL(quality of life )改善や、一般健常者の筋力向上や健康維持増進のために、少量を永続的に摂取する態様と、(2)スポーツ選手などが、自ら掲げた筋力目標量に達するための十分量を、短期間に摂取する態様とが考えられる。   As a human intake mode, (1) a mode in which a small amount is permanently consumed in order to improve QOL (quality of life) of an elderly person, muscular strength of a normal healthy person, and health maintenance, and (2) sports. It can be considered that a player or the like takes a sufficient amount for reaching the target muscle strength he / she has raised in a short period of time.

本発明の筋肉増加剤は、内臓その他の脂肪の増加を抑制しつつ筋肉を増加させることができるので、上記何れの摂取態様でも、各人に相応しい運動を伴う適当量の摂取によって、体重増を防止した状態で筋肉を増加させることできる。   The muscle-increasing agent of the present invention can increase muscles while suppressing the increase in visceral and other fats. Therefore, in any of the above-described ingestion modes, the body weight gain can be increased by taking an appropriate amount accompanied by exercise suitable for each person. It is possible to increase muscles in a prevented state.

本発明の筋肉増加剤は、例えば、フレーク状の食材として提供される。そして、使用者自らが用意した食材と混合して経口摂取しても良いが、本発明の筋肉増加剤を適当な他の食材と混合させることで、うま味のある食品を完成することもできる。   The muscle increasing agent of the present invention is provided as, for example, a flaky food material. And it may mix with the foodstuff which the user himself prepared, and may be ingested orally, but the foodstuff with umami can also be completed by mixing the muscle increasing agent of this invention with a suitable other foodstuff.

なお、このような食品の使用は、必ずしも、ヒトに限定されず、競馬などの競走馬や、闘犬や闘牛などの闘争用動物の食餌とするのも好適である。この場合も、少量を永続的に摂取させる摂取態様と、(2)所定の目標量に達するための十分量を、短期間に摂取させる摂取態様とが考えられる。   The use of such foods is not necessarily limited to humans, and it is also preferable to use them as diets for racehorses such as horse races and fighting animals such as dogs and bullfights. In this case as well, an intake mode in which a small amount is ingested permanently and (2) an intake mode in which a sufficient amount to reach a predetermined target amount is ingested in a short time are considered.

上記した本発明によれば、内臓脂肪の増加を抑制しつつ筋肉を効果的に増加させることができる。   According to the present invention described above, muscles can be effectively increased while suppressing an increase in visceral fat.

実施例1における飼育中の体重の変化を図示したものである。The change of the body weight during breeding in Example 1 is illustrated. 実施例1の飼育終了時の内臓脂肪重量と筋肉重量を図示したものである。The visceral fat weight and muscle weight at the end of breeding in Example 1 are illustrated. 実施例1の実験後の血液生化学検査と、肝臓中の総脂質量及び中性脂肪量を図示したものである。The blood biochemical test after the experiment of Example 1, and the total lipid amount and neutral fat amount in the liver are illustrated. 実施例1におけるグルコース負荷試験の結果を示す図面である。1 is a drawing showing the results of a glucose tolerance test in Example 1. 実施例2の実験終了時における体重比較と、一匹あたりの総摂取量を比較した図面である。It is the figure which compared the body weight comparison at the time of completion | finish of experiment of Example 2, and the total intake per animal. 実施例2の実験終了時における筋肉重量を比較した図面である。It is drawing which compared the muscle weight at the time of completion | finish of experiment of Example 2. FIG. 実施例2の実験終了時における筋肉中のアンセリン、カルノシン、クレアチンの含有量を図示したものである。The content of anserine, carnosine, and creatine in muscle at the end of the experiment of Example 2 is illustrated. 実施例3の実験終了時における体重の比較結果と、1匹あたりの総摂餌量の比較結果とを図示したものである。The comparison result of the body weight at the time of completion | finish of experiment of Example 3 and the comparison result of the total food consumption per animal are illustrated. 実施例3の実験終了時における内臓脂肪重量について図示したものである。The visceral fat weight at the end of the experiment of Example 3 is illustrated. 実施例3の実験終了時における筋肉重量を図示したものである。The muscle weight at the end of the experiment of Example 3 is illustrated. 実施例3の実験終了時における筋肉中のカルノシン、アンセリン、クレアチンの含有量を図示したものである。The contents of carnosine, anserine, and creatine in muscle at the end of the experiment of Example 3 are illustrated.

以下、実施例について説明するが、具体的な記載内容は何ら本発明を限定しない。   Hereinafter, although an Example is described, the concrete description content does not limit this invention at all.

<実施例1> 健常ラット(Wistar、雄、5週齢)に乾燥ダチョウ肉を5%または15%含む高脂肪高ショ糖餌(HFHS)を与え120日間飼育した。比較対象として標準餌(AIN−93M)コントロール群、高脂肪高ショ糖餌コントロール群をおき、ダチョウ肉5%群と15%群については、HFHS群にカロリーと糖質、タンパク質、脂質の比率を合わせた。   <Example 1> Healthy rats (Wistar, male, 5 weeks old) were fed with a high fat high sucrose diet (HFHS) containing 5% or 15% of dry ostrich meat and bred for 120 days. The standard diet (AIN-93M) control group and the high-fat high-sucrose diet control group are set as the comparison target. For the ostrich meat 5% group and 15% group, the ratio of calories, carbohydrates, protein, and lipid is set in the HFHS group. Combined.

ダチョウ肉は、ミンチにして平らに伸ばして凍結後、凍結乾燥機(棚式凍結乾燥機FD−550P、東京理化器械株式会社)を用いて乾燥させ、ミル(ニューパワーミルPM−2005、大阪ケミカル株式会社)で微粉砕したものを使用した。   Ostrich meat is minced and stretched flat and frozen, then dried using a freeze dryer (shelf-type freeze dryer FD-550P, Tokyo Rika Kikai Co., Ltd.), and mill (New Power Mill PM-2005, Osaka Chemical). ) Was used.

なお、このダチョウ肉は、生肉100gあたり、カルノシン:22.0±1.1mg(SD:標準偏差)、アンセリン:708.8±25.7mg、クレアチン:804.9±17.9mgであった。アンセリンとクレアチンの重量比は1:1.14、カルノシンは、クレアチンの1/36.6、アンセリンの1/32.2であった。計測方法は以下の通りである。   The ostrich meat was carnosine: 22.0 ± 1.1 mg (SD: standard deviation), anserine: 708.8 ± 25.7 mg, and creatine: 804.9 ± 17.9 mg per 100 g of raw meat. The weight ratio of anserine and creatine was 1: 1.14, and carnosine was 1 / 36.6 of creatine and 1 / 32.2 of anserine. The measurement method is as follows.

各種食肉試料約1gを秤量し3倍量の蒸留水(肉1g対し3mL)と内部標準として1.6mg/mLノルロイシン溶液1mLを加えて乳鉢ですり潰しながら混合した。4℃,10,000rpmで20分間遠心分離して上清を回収し、ろ液250μLを取り、3倍量のアセトニトリルを加えて混合後、4℃で20分間除タンパク処理した。4℃,10,000rpmで10分間遠心分離して上清を回収し、0.20μmフィルターで濾過した。   About 1 g of various meat samples were weighed, and 3 times the amount of distilled water (3 mL for 1 g of meat) and 1.6 mL / mL norleucine solution 1 mL as an internal standard were added and mixed while grinding in a mortar. The supernatant was collected by centrifugation at 4 ° C. and 10,000 rpm for 20 minutes, 250 μL of the filtrate was taken, mixed with 3 volumes of acetonitrile, and then protein-removed at 4 ° C. for 20 minutes. The supernatant was collected by centrifugation at 4 ° C. and 10,000 rpm for 10 minutes, and filtered through a 0.20 μm filter.

LC−MS/MSによりカルノシン、アンセリン、クレアチンを測定した。HPLCは、カラム:Intrada Amino Acid 2.0 mm i.d.×100 mm, 3 μm (Imtakt, Kyoto) 、カラム温度:40℃、溶離液A:100mMギ酸アンモニウム in H2O 、溶離液B:0.3%ギ酸 in CAN 、溶出条件::B 90-0 % in 0-10 min、0% in 10-12 min 、90% in 12-20 min 、流速:0.3mL/minの条件で、フィルターろ過した資料を5μL注入した。MS条件はイオン化法:ESI、 Positive mode、検出:MRMモード、カルノシンm/z 227.20 → 109.85 (Rt 9.9 min)、アンセリンm/z 241.20 → 108.90 (Rt 9.6 min)、クレアチンm/z 132.10 → 89.80 (Rt 4.2 min) 、ノルロイシンm/z 132.10 → 86.05 (Rt 3.3 min) とし、各標品の10、50、100、500、1,000ng/mL溶液(内部標準100ng/mLを含む)を用いて検量線を作成後、各試料を1,000倍に希釈して測定した。   Carnosine, anserine, and creatine were measured by LC-MS / MS. HPLC: column: Intrada Amino Acid 2.0 mm id × 100 mm, 3 μm (Imtakt, Kyoto), column temperature: 40 ° C., eluent A: 100 mM ammonium formate in H 2 O, eluent B: 0.3% formic acid in CAN Elution conditions: B 90-0% in 0-10 min, 0% in 10-12 min, 90% in 12-20 min, flow rate: 0.3 mL / min did. MS conditions are ionization method: ESI, Positive mode, detection: MRM mode, carnosine m / z 227.20 → 109.85 (Rt 9.9 min), anserine m / z 241.20 → 108.90 (Rt 9.6 min), creatine m / z 132.10 → 89.80 ( Rt 4.2 min), norleucine m / z 132.10 → 86.05 (Rt 3.3 min), and calibration using 10, 50, 100, 500, 1,000 ng / mL solutions (including 100 ng / mL internal standard) of each standard After creating the line, each sample was diluted 1,000 times and measured.

飼育終了後、無麻酔・非拘束下で採血できるように頸静脈にカニューレを施し、空腹時採血とグルコース負荷試験を行い血糖値の変化を測定した。空腹時採血については生化学検査も行った。   After the breeding, the jugular vein was cannulated so that blood could be collected without anesthesia and non-restraint, and fasting blood collection and glucose tolerance test were performed to measure changes in blood glucose level. Biochemical tests were also performed on fasting blood collection.

負荷試験終了後、同一の餌を与えて回復を待って(約1週間)解剖を行い、内臓脂肪と筋肉の重量を測定した。また、肝臓については総脂質と中性脂肪の測定を行った。   After the end of the stress test, the same food was given, and after waiting for recovery (about 1 week), dissection was performed, and the visceral fat and muscle weights were measured. For the liver, total lipid and neutral fat were measured.

餌の組成は、表1に示す通りである。   The composition of the bait is as shown in Table 1.

<実験結果> 図1は、飼育中の体重の変化を図示したものである。図示の通り、ダチョウ肉5%群の体重は、高脂肪高ショ糖餌コントロール群よりも低く推移した。ダチョウ肉15%群では高脂肪高ショ糖餌コントロール群と同程度の体重変化だったが、一時的(飼育6週前後)に重くなった。なお、飼育6週は、図1では、11週齢を意味する。   <Experimental Results> FIG. 1 illustrates changes in body weight during breeding. As shown in the figure, the weight of the ostrich meat 5% group was lower than that of the high fat high sucrose diet control group. The ostrich meat 15% group had the same weight change as the high fat high sucrose diet control group, but became heavier temporarily (around 6 weeks of breeding). In addition, the breeding 6 weeks means 11 weeks old in FIG.

ダチョウ肉の摂取量と平均体重を纏めると、以下の通りである。先ず、実験開始時に体重170〜180gだった健常ラットの実験終了時の体重は、
標準餌コントロールは、平均476.4g
高脂肪高ショ糖餌コントロールは、平均536.6g
高脂肪高ショ糖餌+5%ダチョウ肉は、平均515.0g
高脂肪高ショ糖餌+15%ダチョウ肉は、平均536.8g
であった。
The ostrich meat intake and average body weight are summarized as follows. First, the weight at the end of the experiment of healthy rats, which weighed 170-180 g at the start of the experiment,
The standard bait control averages 476.4g
High fat high sucrose diet control averages 536.6g
High fat high sucrose diet + 5% ostrich meat averages 515.0g
High fat high sucrose diet + 15% ostrich meat average 536.8g
Met.

また、実験終了の直前の1匹あたりの1日平均の餌の量は、
標準餌コントロールは、平均18.4g(重量当たりのカロリーが少ない)
高脂肪高ショ糖餌コントロールは、平均15.2g
高脂肪高ショ糖餌+5%ダチョウ肉は、平均13.5g
高脂肪高ショ糖餌+15%ダチョウ肉は、平均12.9g
であった。
In addition, the daily average amount of food per animal immediately before the end of the experiment is
Standard bait control averages 18.4g (low calories per weight)
High fat high sucrose diet control averages 15.2 g
High fat high sucrose diet + 5% ostrich meat averages 13.5g
High fat high sucrose diet + 15% ostrich meat averages 12.9g
Met.

したがって、515.0gのラットが摂取した5%乾燥ダチョウ肉(1日分)は、13.5g*0.05=0.675gとなり、これを60kgのヒトに換算すると、78.6gとなる。   Therefore, the 5% dry ostrich meat (for 1 day) ingested by 515.0 g of rat is 13.5 g * 0.05 = 0.675 g, which is 78.6 g when converted to 60 kg human.

図2は、飼育終了時の内臓脂肪重量と筋肉重量を示す図面である。エラーバーは、以下の図面も含めSE(標準誤差)を示している。   FIG. 2 is a drawing showing the visceral fat weight and muscle weight at the end of breeding. Error bars indicate SE (standard error) including the following drawings.

図示の通り、内臓脂肪については、ダチョウ肉を与えることにより腸間膜脂肪と精巣脂肪の増加が有意に抑えられた。筋肉については、ダチョウ肉を与えることにより増加する傾向があり、腓腹筋は有意に増加した。なお、*がp<0.05を意味し、**がp<0.01を示すことは他の図面についても同様である。   As shown in the figure, for visceral fat, the increase in mesenteric fat and testicular fat was significantly suppressed by giving ostrich meat. As for muscle, there was a tendency to increase by giving ostrich meat, and gastrocnemius muscle increased significantly. Note that * means p <0.05, and ** shows p <0.01, as is the case with other drawings.

図3は、血液生化学検査と肝臓中の総脂質量・中性脂肪量を示している。図3に示す通り、血液生化学検査において肝機能の指標であるASTとALTの値が、高脂肪高ショ糖餌コントロール群で上昇したが、ダチョウ肉群ではその上昇を有意に抑えており、その効果はダチョウ肉の摂取量に依存していた。血中の総コレステロールと中性脂肪は、ダチョウ肉群で低く抑えられた。   FIG. 3 shows a blood biochemical test and the total lipid amount and neutral fat amount in the liver. As shown in FIG. 3, the values of AST and ALT, which are indicators of liver function in blood biochemical tests, increased in the high fat and high sucrose diet control group, but the increase in the ostrich meat group significantly suppressed, The effect was dependent on ostrich meat intake. Total cholesterol and triglycerides in the blood were kept low in the ostrich meat group.

また、肝臓中の総脂質と中性脂肪についても、高脂肪高ショ糖餌コントロール群で増加したが、ダチョウ肉群ではその増加を有意に抑えており、その効果はダチョウ肉の摂取量に依存していた。   In addition, total lipid and neutral fat in the liver also increased in the high fat and high sucrose diet control group, but the increase was significantly suppressed in the ostrich meat group, and the effect depends on the ostrich meat intake. Was.

図4は、グルコース負荷試験の結果を示す図面である。図示の通り、グルコースの静脈内投与により血糖値が急激に上昇した後、高脂肪高ショ糖餌コントロール群と比べダチョウ肉群では血糖値の下がり方が早い傾向があることから、ダチョウ肉に高脂肪高ショ糖餌によるインスリン抵抗性の惹起を抑制する可能性があることが示唆された。   FIG. 4 is a drawing showing the results of a glucose tolerance test. As shown in the figure, the blood glucose level tends to decrease more quickly in the ostrich meat group than in the high fat high sucrose diet control group after the blood glucose level suddenly increases due to intravenous administration of glucose. It was suggested that the induction of insulin resistance by a high-fat sucrose diet may be suppressed.

以上の実施例1の結果から、高脂肪高ショ糖給餌ラットにおいてダチョウ肉を長期に摂取させることにより筋肉が増加し、内臓脂肪の増加を抑えることが確認される。また、ダチョウ肉の摂取により肝臓への脂肪の蓄積を抑える効果や、肝機能を改善する作用が見られた。そして、筋肉の増加は高齢者のQOL改善につながることが期待される。   From the results of Example 1 described above, it is confirmed that ingestion of ostrich meat for a long time in rats fed with high fat and high sucrose increases muscles and suppresses increase in visceral fat. In addition, the effects of suppressing the accumulation of fat in the liver by ingesting ostrich meat and the effect of improving liver function were observed. And the increase in muscle is expected to lead to QOL improvement of the elderly.

なお、ダチョウ肉15%群で高脂肪高ショ糖餌コントロール群と比較して体重が同程度あるいは一時的に重くなったのは、筋肉の増加と脂肪の増加抑制が同程度あるいは筋肉の増加が上回ったためであると考えられる。また、ダチョウ肉5%群で高脂肪高ショ糖餌コントロール群よりも体重が低く推移したのは、筋肉の増加に比べ内臓脂肪の増加抑制が上回ったためと推測される。   In the ostrich meat 15% group, compared to the high-fat and high-sucrose diet control group, the body weight was the same or temporarily increased because the increase in muscle and the suppression of increase in fat were similar or increased. This is thought to be due to the increase. In addition, the reason why the body weight was lower in the ostrich meat 5% group than in the high-fat and high-sucrose diet control group is presumed to be because the suppression of increase in visceral fat exceeded the increase in muscle.

<実施例2> Wistar系雄性ラット(10週齢)に標準餌(AIN−93M)のタンパク質と脂質の一部を15%の乾燥ダチョウ肉に置き換えた飼料を与え2週間飼育した。飼育期間中はトレッドミル(マルヤス機械株式会社、ミニミニエックス2)を使用して、毎日15m/分の速度で30分間の運動を負荷した。   <Example 2> Wistar male rats (10 weeks old) were fed with a diet in which some of the protein and lipids in the standard diet (AIN-93M) were replaced with 15% dry ostrich meat and reared for 2 weeks. During the breeding period, a treadmill (Maruyasu Kikai Co., Ltd., Mini Mini X 2) was used, and exercise for 30 minutes was applied at a speed of 15 m / min every day.

比較対象として標準餌・非運動群、標準餌・運動群をおき、ダチョウ肉・運動群に与えた餌はAIN−93Mとカロリーと糖質、タンパク質、脂質の比率を合わせた。   A standard diet / non-exercise group and a standard diet / exercise group were set as comparison subjects, and the diet given to the ostrich meat / exercise group was combined with AIN-93M and the ratios of calories, carbohydrates, proteins and lipids.

飼育終了後、内臓脂肪と筋肉の重量を測定した。筋肉についてはアンセリン、カルノシン、クレアチンの測定を行った。   After the breeding, the visceral fat and muscle weight were measured. For muscle, anserine, carnosine and creatine were measured.

筋肉試料約1gを秤量し3倍量の蒸留水(肉1g対し3mL)と内部標準として1.6mg/mLノルロイシン溶液1mLを加えて乳鉢ですり潰しながら混合した。4℃、10,000rpmで20分間遠心分離して上清を回収し、ろ液250μLを取り、3倍量のアセトニトリルを加えて混合後、4℃で20分間除タンパク処理した。   About 1 g of a muscle sample was weighed, and 3 times the amount of distilled water (3 mL for 1 g of meat) and 1.6 mL / mL norleucine solution 1 mL as an internal standard were added and mixed while grinding in a mortar. The supernatant was collected by centrifugation at 10,000 rpm for 20 minutes at 4 ° C., 250 μL of the filtrate was taken, 3 volumes of acetonitrile was added and mixed, and then protein removal treatment was carried out at 4 ° C. for 20 minutes.

次に、4℃、10,000rpmで10分間遠心分離して上清を回収し、0.20μmフィルターで濾過した。その後、LC−MS/MSによりカルノシン、アンセリン、クレアチンを測定した。HPLCは、
カラム:Intrada Amino Acid 2.0 mm i.d.×100 mm, 3 μm (Imtakt, Kyoto) 、
カラム温度:40℃、
溶離液A:100mMギ酸アンモニウム in H2O 、
溶離液B:0.3%ギ酸in ACN 、
溶出条件:B 90-0 % in 0-10 min、0% in 10-12 min 、90% in 12-20 min、
流速:0.3 mL/minの条件で、フィルターろ過した資料を5μL注入した。
MS条件はイオン化法:ESI、 Positive mode、
検出:MRMモード、カルノシンm/z 227.20→ 109.85 (Rt 9.9 min)、アンセリンm/z 241.20→ 108.90 (Rt 9.6 min)、クレアチンm/z 132.10→ 89.80 (Rt 4.2 min) 、ノルロイシンm/z 132.10→ 86.05 (Rt 3.3 min) とし、各標品の10、50、100、500、1,000ng/mL溶液(内部標準100ng/mLを含む)を用いて検量線を作成後、各試料を1,000倍に希釈して測定した。
Next, the supernatant was collected by centrifugation at 10,000 rpm for 10 minutes at 4 ° C., and filtered through a 0.20 μm filter. Thereafter, carnosine, anserine, and creatine were measured by LC-MS / MS. HPLC
Column: Intrada Amino Acid 2.0 mm id x 100 mm, 3 μm (Imtakt, Kyoto),
Column temperature: 40 ° C
Eluent A: 100 mM ammonium formate in H2O,
Eluent B: 0.3% formic acid in ACN
Elution conditions: B 90-0% in 0-10 min, 0% in 10-12 min, 90% in 12-20 min,
Flow rate: 0.3 μL / min, 5 μL of the filtered material was injected.
MS conditions are ionization methods: ESI, Positive mode,
Detection: MRM mode, carnosine m / z 227.20 → 109.85 (Rt 9.9 min), anserine m / z 241.20 → 108.90 (Rt 9.6 min), creatine m / z 132.10 → 89.80 (Rt 4.2 min), norleucine m / z 132.10 → 86.05 (Rt 3.3 min), and after preparing a calibration curve using 10, 50, 100, 500, 1,000 ng / mL solutions of each standard (including 100 ng / mL internal standard), each sample is 1,000 Measurements were made after doubling.

<実験結果> 図5(a)は、体重の比較図、図5(b)は、飼育期間中の一匹あたりの摂取量の比較図である。また、図6の左右には、筋肉重量について、1匹あたりの筋肉重量と、体重1kgあたりの筋肉重量と記載した。また、図7は、筋肉中のアンセリン、カルノシン、クレアチンの含有量(筋肉1gあたり)を図示したものである。   <Experimental Result> FIG. 5A is a comparative diagram of body weight, and FIG. 5B is a comparative diagram of intake per animal during the breeding period. In addition, the muscle weight per animal and the muscle weight per kg body weight are shown on the left and right of FIG. FIG. 7 shows the contents of anserine, carnosine, and creatine in the muscle (per 1 g of muscle).

以上の実施例2の結果から、筋肉重量は3群間に有意な差は見られないものの、体重あたりの筋肉重量では運動負荷群で増加傾向にあり、ダチョウ肉の給餌により速筋が多い腓腹筋で増加傾向が大きかった。運動負荷により体重の増加が抑制されるが、ダチョウ肉給餌により体重増の抑制が抑えられる傾向になる(図5(a)参照)。この傾向を、実施例1と合わせて検討すると、ダチョウ肉給餌による筋肉の増加が関与したためと推察される。   From the results of Example 2 above, although there is no significant difference in the muscle weight among the three groups, the muscle weight per body weight tends to increase in the exercise load group, and the gastrocnemius muscle has more fast muscles due to feeding ostrich meat. The increase trend was large. Although an increase in body weight is suppressed by exercise load, suppression of weight increase tends to be suppressed by feeding ostrich meat (see FIG. 5A). When this tendency is examined together with Example 1, it is presumed that the increase in muscle due to the feeding of ostrich meat was involved.

また、ダチョウ肉を摂取させた群では、摂取させない群と比較して、筋肉中のアンセリンとクレアチンの蓄積量が増加する傾向が見られた。特に、大腿四頭筋では有意にクレアチンの蓄積量が増加していた。   In addition, in the group fed with ostrich meat, the accumulation amount of anserine and creatine in the muscle tended to increase compared to the group not fed. In particular, the amount of accumulated creatine increased significantly in the quadriceps.

なお、この実施例2では、全ての判定項目において、実施例1ほどの有意差が生じないのは、実施例1に比べ、かなりの短期飼育(2週間)であるためであり、更に長期間の実験では、顕著な有意さが生じると予想される。   In Example 2, all the determination items do not produce a significant difference as in Example 1 because it is considerably short-term breeding (2 weeks) compared to Example 1, and for a longer period of time. In this experiment, significant significance is expected to occur.

<実施例3> Wistar系雄性ラット(10週齢)にトレッドミルを使用して毎日15m/分の速度で30分間の運動を負荷し、高脂肪高ショ糖餌(運動+HFHSコントロール群)、高脂肪高ショ糖餌のタンパク質と脂質の一部を15%の乾燥ダチョウ肉に置き換えHFHSにカロリーと糖質・タンパク質・脂質の比率を合わせた餌(運動+HFHS+ダチョウ肉群)、高脂肪高ショ糖餌に加えてタンパク質を取り除いたダチョウ肉水溶性分画を経口投与(運動+HFHS+ダチョウ肉エキス群)の3群に分け2週間飼育した。   <Example 3> Wistar male rats (10 weeks old) were subjected to daily exercise for 30 minutes at a speed of 15 m / min using a treadmill, high fat high sucrose diet (exercise + HFHS control group), high Replacing part of protein and lipid in fat high sucrose diet with 15% dry ostrich meat, HFHS combined with calorie, carbohydrate, protein and lipid ratio (exercise + HFHS + ostrich meat group), high fat high sucrose The ostrich meat water-soluble fraction from which protein was removed in addition to food was divided into three groups of oral administration (exercise + HFHS + ostrich meat extract group) and bred for 2 weeks.

なお、ダチョウ肉エキスについては1日の摂食量から15%ダチョウ肉に相当する量を計算して運動負荷の30分前に経口投与し、他の群も同じ容量の生理食塩水を運動負荷の30分前に経口投与した。   For ostrich meat extract, the amount equivalent to 15% ostrich meat is calculated from the daily intake and administered orally 30 minutes before exercise load, and the other groups receive the same volume of physiological saline for exercise load. Orally administered 30 minutes before.

ダチョウ肉エキスは次のように調製した。ダチョウ生肉2,900gに3倍量の蒸留水を加えてフードプロセッサーで2分間混合し3,000rpm、で10分間遠心分離した。上清を回収しエバポレーターで減圧濃縮後、濃縮液に3倍量のメタノールを混合し、4℃で20分間の除タンパク処理を行い3,000rpm、で10分間遠心分離した。上清を回収しエバポレーターで減圧濃縮後に凍結乾燥した。   The ostrich meat extract was prepared as follows. Three times the amount of distilled water was added to 2,900 g of ostrich raw meat, mixed for 2 minutes with a food processor, and centrifuged at 3,000 rpm for 10 minutes. The supernatant was collected and concentrated under reduced pressure using an evaporator. The concentrated solution was mixed with 3 times the amount of methanol, subjected to protein removal treatment at 4 ° C. for 20 minutes, and centrifuged at 3,000 rpm for 10 minutes. The supernatant was collected, concentrated under reduced pressure with an evaporator, and then lyophilized.

経口投与した水抽出物について成分分析したところ、ダチョウ肉水抽出物の凍結乾燥品100gあたり、カルノシン:0.3g、アンセリン:13.6g、クレアチン:16.9gであった。   As a result of component analysis of the orally administered water extract, it was found to be carnosine: 0.3 g, anserine: 13.6 g, and creatine: 16.9 g per 100 g of freeze-dried ostrich meat water extract.

すなわち、アンセリンとクレアチンと含有量は、ほぼ同じであり、重量比は1:1.24であった。なお、カルノシンは、クレアチンの1/56.3倍、アンセリンの1/45.3倍である。   That is, the contents of anserine and creatine were almost the same, and the weight ratio was 1: 1.24. Carnosine is 1 / 56.3 times that of creatine and 1/43 times that of anserine.

飼育終了後、内臓脂肪と筋肉の重量を測定した。筋肉についてはアンセリン、カルノシン、クレアチンの測定も行った。筋肉試料約1gを秤量し3倍量の蒸留水(肉1g対し3mL)と内部標準として1.6mg/mLノルロイシン溶液1mLを加えて乳鉢ですり潰しながら混合した。4℃、10,000rpmで20分間遠心分離して上清を回収し、ろ液250μLを取り、3倍量のアセトニトリルを加えて混合後、4℃で20分間除タンパク処理した。次に、4℃、10,000rpmで10分間遠心分離して上清を回収し、0.20μmフィルターで濾過した。   After the breeding, the visceral fat and muscle weight were measured. For muscle, anserine, carnosine and creatine were also measured. About 1 g of a muscle sample was weighed, and 3 times the amount of distilled water (3 mL for 1 g of meat) and 1.6 mL / mL norleucine solution 1 mL as an internal standard were added and mixed while grinding in a mortar. The supernatant was collected by centrifugation at 10,000 rpm for 20 minutes at 4 ° C., 250 μL of the filtrate was taken, 3 volumes of acetonitrile was added and mixed, and then protein removal treatment was carried out at 4 ° C. for 20 minutes. Next, the supernatant was collected by centrifugation at 10,000 rpm for 10 minutes at 4 ° C., and filtered through a 0.20 μm filter.

その後、LC−MS/MSによりカルノシン、アンセリン、クレアチンを測定した。HPLCは、
カラム:Intrada Amino Acid 2.0 mm i.d.×100 mm, 3 μm (Imtakt, Kyoto) 、
カラム温度:40℃、
溶離液A:100mMギ酸アンモニウム in H2O 、
溶離液B:0.3% ギ酸 in ACN 、
溶出条件:B 90-0 % in 0-10 min 、0% in 10-12 min 、90% in 12-20 min、
流速:0.3mL/minの条件で、フィルターろ過した資料を5μL注入した。
MS条件はイオン化法:ESI、 Positive mode、
検出:MRMモード、
カルノシンm/z 227.20→ 109.85 (Rt 9.9 min)、
アンセリンm/z 241.20→ 108.90 (Rt 9.6 min)、
クレアチンm/z 132.10→ 89.80 (Rt 4.2 min) 、
ノルロイシンm/z 132.10→ 86.05 (Rt 3.3 min) とし、各標品の10、50、100、500、1,000ng/mL溶液(内部標準100ng/mLを含む)を用いて検量線を作成後、各試料を1,000倍に希釈して測定した。
Thereafter, carnosine, anserine, and creatine were measured by LC-MS / MS. HPLC
Column: Intrada Amino Acid 2.0 mm id x 100 mm, 3 μm (Imtakt, Kyoto),
Column temperature: 40 ° C
Eluent A: 100 mM ammonium formate in H2O,
Eluent B: 0.3% formic acid in ACN,
Elution conditions: B 90-0% in 0-10 min, 0% in 10-12 min, 90% in 12-20 min,
Flow rate: 0.3 μL / min was injected 5 μL of the filtered material.
MS conditions are ionization methods: ESI, Positive mode,
Detection: MRM mode,
Carnosine m / z 227.20 → 109.85 (Rt 9.9 min),
Anserine m / z 241.20 → 108.90 (Rt 9.6 min),
Creatine m / z 132.10 → 89.80 (Rt 4.2 min),
Norleucine m / z 132.10 → 86.05 (Rt 3.3 min), and after preparing a calibration curve using 10, 50, 100, 500, 1,000 ng / mL solutions (including internal standard 100 ng / mL) of each sample, Each sample was diluted 1,000 times and measured.

<実験結果> 図8は、体重と飼育期間中の1匹あたりの摂餌量を示している。また、図9は、内臓脂肪重量(腎臓周囲、精巣、腸管膜の合計)について、1匹あたりの内臓脂肪重量と、体重1kgあたりの内臓脂肪重量とを示している。   <Experimental Results> FIG. 8 shows the body weight and the amount of food consumed per animal during the breeding period. FIG. 9 shows the visceral fat weight per animal and the visceral fat weight per kg body weight with respect to the visceral fat weight (total of perirenal, testis, and intestinal membrane).

図10は、筋肉重量について、1匹あたりの筋肉重量と、体重1kgあたりの筋肉重量とを示している。また、図11は、筋肉中のカルノシン、アンセリン、クレアチンの含有量を示している。なお、図11では、各成分について、運動+高脂肪高ショ糖餌コントロールが左側位置、運動+高脂肪高ショ糖餌+ダチョウ肉が中央位置、運動+高脂肪高ショ糖餌+ダチョウ肉エキスが右側位置に示されている。   FIG. 10 shows the muscle weight per animal and the muscle weight per kg body weight. FIG. 11 shows the contents of carnosine, anserine, and creatine in the muscle. In FIG. 11, for each component, exercise + high fat high sucrose diet control is on the left side, exercise + high fat high sucrose diet + ostrich meat is in the central position, exercise + high fat high sucrose diet + ostrich meat extract Is shown in the right position.

以上の図8〜図11に示す通り、摂餌量と体重に有意差はなかったが、ダチョウ肉あるいはダチョウ肉エキスを与えることにより摂食量が若干増加し体重も増加する傾向が見られた。内臓脂肪重量と筋肉重量に有意差はなかったが、ダチョウ肉給餌により内臓脂肪の増加が抑えられる傾向と筋肉が増加する傾向が見られ、ダチョウ肉エキスにも同様の傾向が見られた。また、筋肉中のカルノシン、アンセリン、クレアチンの含有量に有意差はなかったが、ダチョウ肉あるいはダチョウ肉エキスを与えることによりアンセリンが増加する傾向が見られた。   As shown in FIGS. 8 to 11 above, there was no significant difference in the amount of food intake and body weight, but there was a tendency that the amount of food intake increased slightly and the body weight increased by giving ostrich meat or ostrich meat extract. Although there was no significant difference between the visceral fat weight and the muscle weight, there was a tendency for the increase in visceral fat and the tendency for the muscle to increase by feeding the ostrich meat, and the same tendency was observed for the ostrich meat extract. In addition, there was no significant difference in the contents of carnosine, anserine and creatine in the muscle, but there was a tendency for anserine to increase by giving ostrich meat or ostrich meat extract.

この実施例3も、実施例1に比べかなりの短期飼育(2週間)であることを考慮する必要があり、もっぱら実施例2と対比されるべきである。その点を考慮して検討すると、ダチョウ肉から水抽出した液体成分も、実施例2で使用したダチョウ肉の乾燥粉末と同等の効果があることが確認される。   It is necessary to consider that Example 3 is considerably short-term breeding (2 weeks) as compared with Example 1, and should be compared with Example 2 exclusively. Considering this point, it is confirmed that the liquid component extracted from ostrich meat has the same effect as the dry powder of ostrich meat used in Example 2.

この結果と、ダチョウ肉エキスの成分分析とを合わせて検討すると、(カルノシンを殆ど含まない状態)、アンセリンとクレアチンの併用摂取が、内臓脂肪の増加を抑制しつつ筋肉を増加させる上で、効果を発揮したと思われる。また、実施例3のダチョウ肉エキスは、除タンパク処理によってタンパク質が排除されており、この除タンパク状態でも同等の筋肉増が可能であることが確認される。   When this result is combined with the component analysis of ostrich meat extract (contains almost no carnosine), the combined use of anserine and creatine is effective in increasing muscles while suppressing the increase in visceral fat. It seems to have demonstrated. In the ostrich meat extract of Example 3, protein was eliminated by deproteinization treatment, and it was confirmed that the same muscle gain was possible even in this deproteinized state.

すなわち、本発明は、ダチョウ、エミュー、レア、などの平胸類の食肉から水抽出した液体を含有して構成され、アンセリンとクレアチンとを含有する経口摂取用の筋肉増加剤であって、アンセリンの含有量(W)が、クレアチンの含有量(W)の1.2倍以下であるThat is, the present invention is, ostrich, emu, rhea, is configured to contain a liquid and water extraction from the meat flat chest such as, a muscle increasing agent for oral ingestion containing a anserine and creatine, the anserine Content (W) is 1.2 times or less of content (W) of creatine .

ここで、Wは重量を意味し、アンセリンとクレアチンの含有比(W)は、アンセリン>クレアチンの場合でも、1.2:1.0までの範囲内(より好ましくは、アンセリン<クレアチンで、1:1.1〜1:1.3の範囲内)である。 Here, W means weight, and the content ratio (W) of anserine and creatine is in the range of up to 1.2: 1.0 even if anserine> creatine (more preferably, anserine <creatine, : Within a range of 1.1 to 1: 1.3).

また、カルノシンの含有量(W)が、アンセリンやクレアチンに対して、1/60以上、1/40以下であるのが好ましい。   Moreover, it is preferable that content (W) of carnosine is 1/60 or more and 1/40 or less with respect to anserine and creatine.

Claims (8)

平胸類の食肉を乾燥して製造され、他の食材と共に経口摂取される筋肉増加剤。   A muscle-building agent that is manufactured by drying flat breast meat and taken orally with other ingredients. 平胸類の食肉から水抽出した液体を含有して構成され、経口摂取される筋肉増加剤。   A muscle increasing agent that is composed of a liquid extracted from flat breast meat and is taken orally. アンセリンとクレアチンの含有量(W)が、同程度である一方、カルノシンの含有量(W)が、前記各成分の1/25以下である請求項1又は2に記載の筋肉増加剤。   The muscle increasing agent according to claim 1 or 2, wherein the content (W) of anserine and creatine is substantially the same, while the content (W) of carnosine is 1/25 or less of each of the components. 前記平胸類は、ダチョウ、エミュー、又は、レアである請求項1〜3の何れかに記載の筋肉増加剤。   The muscle increasing agent according to any one of claims 1 to 3, wherein the flat breast is an ostrich, an emu, or a rare. 哺乳類の筋肉増加のために使用され、体重60kgのヒトに換算して、1日当たりの摂取量が10g〜500gである請求項1〜4の何れかに記載の筋肉増加剤。   The muscle increasing agent according to any one of claims 1 to 4, wherein the muscle increasing agent is used for increasing muscle of a mammal, and the daily intake is 10 g to 500 g in terms of a human weighing 60 kg. 請求項1〜5の何れかに記載の筋肉増加剤を含んで構成され、哺乳類が、所定期間又は定常的に経口摂取するための食品。   A food comprising the muscle increasing agent according to any one of claims 1 to 5, and for a mammal to ingest orally for a predetermined period of time. 前記食品は、競走馬を含む闘争用動物の食餌である請求項6に記載の食品。   The food according to claim 6, wherein the food is a food for a fighting animal including a racehorse. 前記食品は、ヒトの食事として提供される請求項6に記載の食品。   The food according to claim 6, wherein the food is provided as a human meal.
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