JP2017029024A - Enzyme-treated isoquercitrin containing container-packed beverage - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、酵素処理イソクエルシトリンを配合した容器詰飲料に関する。 The present invention relates to a packaged beverage containing enzyme-treated isoquercitrin.
ケルセチン（Quercetin：3,3',4',5,7-pentahydroxyflavone、クエルセチンとも呼ばれる）は、野菜や果物に豊富に含まれるポリフェノール成分であり、そのままで、又は配糖体の形で、柑橘類、タマネギ、ソバ、エンジュ等の種々の植物に含まれている。ケルセチンは、強力な抗酸化活性（非特許文献１）の他、血小板の凝集抑制および接着抑制作用、血管拡張作用、抗ガン作用等、多彩な生理機能をもつことが知られている（非特許文献２）。 Quercetin (3,3 ', 4', 5,7-pentahydroxyflavone, also called quercetin) is a polyphenol component that is abundant in vegetables and fruits, as it is or in the form of glycosides, citrus fruits, It is contained in various plants such as onion, buckwheat and enju. Quercetin is known to have various physiological functions such as platelet aggregation inhibition and adhesion inhibition action, vasodilatory action, and anticancer action in addition to strong antioxidant activity (Non-patent Document 1) (Non-patent Document 1). Reference 2).
ケルセチンの配糖体の一つであるイソクエルシトリンは、ケルセチンの３位にグルコース１つがβ結合したフラボノール配糖体であり、強力な抗酸化活性を有し、色素の退色を防止することが知られており（特許文献１）、抗動脈硬化、血流改善等の生体への作用も期待されている素材である。最近では、イソクエルシトリンに肥満者の体脂肪を低減させる作用があることが見出され、飲料の形態で摂取させて効果があることが報告されている（非特許文献３）。 Isoquercitrin, one of the quercetin glycosides, is a flavonol glycoside in which one glucose is β-bonded at the 3-position of quercetin, and has a strong antioxidant activity and can prevent dye fading. It is a known material (Patent Document 1), and is also expected to have an action on a living body such as anti-arteriosclerosis and blood flow improvement. Recently, it has been found that isoquercitrin has an effect of reducing body fat of obese people, and it has been reported that it is effective when ingested in the form of a beverage (Non-patent Document 3).
しかし、イソクエルシトリンは水に難溶であるため、飲料等の水系の組成物としての利用が制限されるという問題あった。そこで、糖転移酵素を用いて、イソクエルシトリンのグルコース残基部位にグルコースを転移させてα−グルコシルイソクエルシトリン（本明細書では「酵素処理イソクエルシトリン」という）を調製する方法が提案されている（特許文献２）。「酵素処理イソクエルシトリン」は、イソクエルシトリンの作用はそのままに、水への溶解性が改善された水易溶性物質であることが知られている。 However, since isoquercitrin is hardly soluble in water, there is a problem that its use as an aqueous composition such as a beverage is limited. Therefore, a method for preparing α-glucosylisoquercitrin (referred to as “enzyme-treated isoquercitrin” in this specification) by transferring glucose to the glucose residue site of isoquercitrin using glycosyltransferase has been proposed. (Patent Document 2). “Enzyme-treated isoquercitrin” is known to be a readily water-soluble substance with improved solubility in water while maintaining the action of isoquercitrin.
このように酵素処理イソクエルシトリンは、イソクエルシトリンより溶解性に優れているため、酵素処理イソクエルシトリンを高濃度含有する容器詰飲料を製造することが可能であるが、長期間保存した場合、飲料の外観が変化しやすく、長期にわたって飲料の色合いを安定に保持することが困難である。特に、飲料の色の明度（Ｌ＊）が低下し、飲料がやや黒みがかるという問題があった。本発明は、長期保存を行っても明度（Ｌ＊）の低下の少ない酵素処理イソクエルシトリン含有容器詰飲料を提供することを目的とする。 In this way, enzyme-treated isoquercitrin is superior in solubility to isoquercitrin, so it is possible to produce a packaged beverage containing a high concentration of enzyme-treated isoquercitrin. The appearance of the beverage is likely to change, and it is difficult to stably maintain the color of the beverage over a long period of time. In particular, there was a problem that the lightness (L * ) of the color of the beverage was lowered and the beverage was slightly blackish. An object of the present invention is to provide an enzyme-treated isoquercitrin-containing container-packed beverage with little decrease in lightness (L * ) even after long-term storage.
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討した結果、酵素処理イソクエルシトリンを含有した飲料に対し、特定の比率となるようにグルコースとスクロースとを含有させることにより、長期保存時の明度（Ｌ＊）の低下を抑制できることを見出し、本発明を完成するに至った。本発明は、これに限定されるものではないが、以下に関する。
（１） 酵素処理イソクエルシトリンを１００〜１０００ｍｇ／ｋｇ含み、グルコースとスクロースとをグルコース／スクロース（重量比）が０．２より大きく２．０未満となるように含む、容器詰飲料。
As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors have made glucose and sucrose into a specific ratio with respect to a beverage containing enzyme-treated isoquercitrin, thereby allowing long-term storage. It was found that the decrease in the lightness (L * ) can be suppressed, and the present invention has been completed. The present invention is not limited to this, but relates to the following.
(1) A packaged beverage containing 100 to 1000 mg / kg of enzyme-treated isoquercitrin and containing glucose and sucrose so that the glucose / sucrose (weight ratio) is greater than 0.2 and less than 2.0.
(２） 酵素処理イソクエルシトリンを２００〜６００ｍｇ／ｋｇ含む、（１）に記載の容器詰飲料。
（３） グルコース／スクロース（重量比）が、０．５以上１．０以下である、（１）又は（２）に記載の容器詰飲料。
（４） 前記飲料が茶飲料である、（１）〜（３）のいずれか１項に記載の飲料。
（５） 酵素処理イソクエルシトリンを１００〜１０００ｍｇ／ｋｇ以上含有する容器詰飲料の経時的な明度の低下を抑制する方法であって、飲料中のグルコース／スクロース（重量比）を０．２より大きく２．０未満に調整することを含む、上記方法。
(2) The container-packed beverage according to (1), comprising 200 to 600 mg / kg of enzyme-treated isoquercitrin.
(3) The container-packed drink as described in (1) or (2) whose glucose / sucrose (weight ratio) is 0.5 or more and 1.0 or less.
(4) The beverage according to any one of (1) to (3), wherein the beverage is a tea beverage.
(5) A method for suppressing a decrease in lightness over time of a packaged beverage containing 100 to 1000 mg / kg or more of enzyme-treated isoquercitrin, wherein the glucose / sucrose (weight ratio) in the beverage is from 0.2 Adjusting the value to less than 2.0.
本発明によると、高濃度で酵素処理イソクエルシトリンを含有し、長期間保存して明度（Ｌ＊）の低下の少ない容器詰飲料が得られる。 According to the present invention, a packaged beverage containing enzyme-treated isoquercitrin at a high concentration and stored for a long period of time with little decrease in lightness (L * ) can be obtained.
（酵素処理イソクエルシトリン）
本発明でいう酵素処理イソクエルシトリンとは、下記式１において、グルコース残基数（ｎ）が０であるイソクエルシトリンと、グルコース残基数（ｎ）が１以上の整数（好ましくは１〜１５の整数、より好ましくは１〜７の整数）であるイソクエルシトリン糖付加物の混合物をいう。本明細書中、ケルセチンにグルコースが１つ配合されたもの（式１においてｎ＝０）をＱＧ１、２つ配合されたもの（式１においてｎ＝１）をＱＧ２、３つ配合されたもの（式１においてｎ＝２）をＱＧ３（以下、グルコースが一つ増すごとに、ＱＧ４、ＱＧ５、ＱＧ６・・・）と表記することがある。
(Enzyme-treated isoquercitrin)
The enzyme-treated isoquercitrin referred to in the present invention is an isoquercitrin in which the number of glucose residues (n) is 0 in the following formula 1, and an integer having a glucose residue number (n) of 1 or more (preferably 1 to 1). 15 is an integer of 15 and more preferably an integer of 1 to 7). In the present specification, QG1 containing 1 glucose in quercetin (n = 0 in the formula 1) and 1 QG2 (n = 1 in the formula 1) (Q = 1) In Formula 1, n = 2) may be expressed as QG3 (hereinafter, every time glucose increases, QG4, QG5, QG6,...).
酵素処理イソクエルシトリンは、市販されているものを用いてもよいし、イソクエルシトリン又はルチンの酵素処理により調製したものを用いてもよい。イソクエルシトリンは、例えばＷＯ２００５／０３０９７５に記載されている方法、すなわち、ルチンを特定の可食性成分の存在下でナリンギナーゼ処理する方法によって製造することができる。さらに、ＷＯ２００５／０３０９７５に記載されているように、イソクエルシトリンを糖転移酵素で処理することにより、α−グリコシルイソクエルシトリンを得ることができる。 As the enzyme-treated isoquercitrin, a commercially available one may be used, or one prepared by enzyme treatment of isoquercitrin or rutin may be used. Isoquercitrin can be produced, for example, by the method described in WO2005 / 030975, that is, a method in which rutin is treated with naringinase in the presence of a specific edible component. Furthermore, as described in WO2005 / 030975, α-glycosylisoquercitrin can be obtained by treating isoquercitrin with a glycosyltransferase.
本発明の容器詰飲料は、生理作用を奏するのに十分な量の酵素処理イソクエルシトリンを含有する。具体的には、肥満者の体脂肪を低減させるのに十分な量である１００〜１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１５０〜８００ｍｇ／ｋｇである。１回あたりの摂取量と得られる効果及び嗜好性の観点からは、２００〜６００ｍｇ／ｋｇがより好ましい。ここで、本発明で飲料中の酵素処理イソクエルシトリンをいうときは、特に記載した場合を除き、酵素処理イソクエルシトリンの配合量を合計したものをＱＧ１として換算し、ＱＧ１が加水分解されて生じるケルセチンの量を指すものとする。ＱＧ１が加水分解されて生じるケルセチン量は、ケルセチンの分子量３０２、ＱＧ１の分子量４６４を用いて、（酵素処理イソクエルシトリン÷４６４）×３０２で求めることができる。また、本発明で飲料の成分の濃度又は量をいうときは、特に記載した場合を除き、最終製品における濃度又は量を指す。 The packaged beverage of the present invention contains an enzyme-treated isoquercitrin in an amount sufficient to exert a physiological effect. Specifically, the amount is 100 to 1000 mg / kg, preferably 150 to 800 mg / kg, which is an amount sufficient to reduce the body fat of obese people. From the viewpoint of the intake amount per time and the obtained effect and palatability, 200 to 600 mg / kg is more preferable. Here, when referring to the enzyme-treated isoquercitrin in the beverage according to the present invention, the total amount of the enzyme-treated isoquercitrin is converted to QG1 except when specifically described, and QG1 is hydrolyzed. It shall refer to the amount of quercetin produced. The amount of quercetin produced by hydrolysis of QG1 can be determined by (enzyme-treated isoquercitrin / 464) × 302 using quercetin molecular weight 302 and QG1 molecular weight 464. In addition, when referring to the concentration or amount of a beverage component in the present invention, it refers to the concentration or amount in the final product, unless otherwise specified.
酵素処理イソクエルシトリン含量の測定は、当業者によく知られた定法により行うことができる。酵素処理イソクエルシトリン含量は、特に記載した場合を除き、ＱＧ１〜ＱＧ７を関与成分として、下記の方法により求めてもよい：すなわち、標準物質としてQuercetin 3-0-glucoside (QG1)を用い、ＨＰＬＣを用いて、紫外部吸光度３５０ｎｍにおける面積と標準物質濃度により検量線を作成する。酵素処理イソクエルシトリンは、小腸でケルセチンに加水分解されることから、ＱＧ１からＱＧ７は生理活性的に同等であると考えられ、またケルセチンの３位配糖体は糖鎖の長さに関わらず、すべて３５０ｎｍに極大吸収を持ち、その吸光度はアグリコン部分であるケルセチンに依拠する。したがって、分子量は異なるが、モル吸光度ではＱＧ１〜ＱＧ７は等しくなると考えられ、ＱＧ１換算で関与成分を定量する。具体的には、分析試料を、標準物質と同一条件でＨＰＬＣに供し、得られたチャートにおいて、標準物質の溶出保持時間と一致するピークを特定する。そして、ＱＧ１のピークより前に検出される酵素処理イソクエルシトリンＱＧ２〜ＱＧ７のピークを特定し（もしあれば）、各々のピーク面積の総計から、標準物質を用いて作成した検量線を用いて、分析試料中の酵素処理イソクエルシトリン含量を算出する。 The enzyme-treated isoquercitrin content can be measured by a conventional method well known to those skilled in the art. The enzyme-treated isoquercitrin content may be obtained by the following method using QG1 to QG7 as the components involved unless otherwise specified: That is, HPLC using Quercetin 3-0-glucoside (QG1) as a standard substance Is used to create a calibration curve based on the area at an ultraviolet absorbance of 350 nm and the standard substance concentration. Since enzyme-treated isoquercitrin is hydrolyzed to quercetin in the small intestine, QG1 to QG7 are considered to be physiologically equivalent, and the 3-position glycoside of quercetin is independent of the sugar chain length. , All have a maximum absorption at 350 nm, and its absorbance depends on quercetin, which is an aglycon moiety. Therefore, although molecular weights are different, QG1 to QG7 are considered to be equal in terms of molar absorbance, and the components involved are quantified in terms of QG1. Specifically, the analysis sample is subjected to HPLC under the same conditions as the standard substance, and the peak that matches the elution retention time of the standard substance is specified in the obtained chart. Then, the peak of enzyme-treated isoquercitrin QG2 to QG7 detected before the peak of QG1 is specified (if any), and a calibration curve created using a standard substance is used from the total of each peak area. The content of enzyme-treated isoquercitrin in the analysis sample is calculated.
（グルコース／スクロース）
本発明の飲料は、グルコースとスクロースとを、その重量比（グルコース／スクロース）が０．２より大きく２．０未満となるように含有する。明度の低下抑制効果の観点から、好ましくは０．５以上１．５以下である。高濃度の酵素処理イソクエルシトリンを含有する飲料におけるグルコースとスクロースとの比が、上記の特定の範囲内にあれば長期保存時などの酵素処理イソクエルシトリンの経時的な明度（Ｌ＊）の低下が抑制される。
(Glucose / sucrose)
The beverage of the present invention contains glucose and sucrose so that the weight ratio (glucose / sucrose) is greater than 0.2 and less than 2.0. From the viewpoint of the effect of suppressing the decrease in brightness, it is preferably 0.5 or more and 1.5 or less. If the ratio of glucose to sucrose in a beverage containing a high concentration of enzyme-treated isoquercitrin is within the above specified range, the lightness over time (L * ) of the enzyme-treated isoquercitrin during long-term storage, etc. Reduction is suppressed.
本発明は、別の観点からは、高濃度の酵素処理イソクエルシトリンを含有する飲料において、飲料中のグルコースとスクロースとの重量比（グルコース／スクロース）を０．２より大きく２．０未満となるように調整することにより、飲料の経時的な明度の低下を抑制する方法に関する。 From another viewpoint, in a beverage containing a high concentration of enzyme-treated isoquercitrin, the weight ratio of glucose to sucrose in the beverage (glucose / sucrose) is greater than 0.2 and less than 2.0. It is related with the method of suppressing the fall of the brightness of a drink with time by adjusting so that it may become.
飲料中のグルコース及びスクロースの含有量は、グルコースとスクロースとの比が上記の範囲内であればよく、特に制限されない。飲料の種類によって、所望される甘味などを考慮して決定すればよい。例えば、茶飲料であれば、ほとんど甘味を感じない（ほとんど茶葉由来のスクロースである）２０〜３０００ｍｇ／ｋｇ程度のスクロースであってもよいし、例えば有糖茶のように甘味を付与した飲料では、３０００〜１０００００ｍｇ／ｋｇ程度のスクロースであってもよい。したがって、飲料におけるスクロースの含有量は、これに限定されないが、飲料の甘味の設計によって、２０ｍｇ／ｋｇ以上、例えば、２０〜１０００００ｍｇ／ｋｇ程度となりうる。グルコースの含有量は、スクロースの含有量と上記比から決定すればよい。 The content of glucose and sucrose in the beverage is not particularly limited as long as the ratio of glucose to sucrose is within the above range. What is necessary is just to determine by considering the sweet taste etc. which are desired by the kind of drink. For example, in the case of a tea beverage, it may be 20 to 3000 mg / kg of sucrose that hardly feels sweet (mostly sucrose derived from tea leaves). Sucrose of about 3000 to 100000 mg / kg may be used. Therefore, the sucrose content in the beverage is not limited to this, but can be 20 mg / kg or more, for example, about 20 to 100,000 mg / kg, depending on the sweetness design of the beverage. The glucose content may be determined from the sucrose content and the above ratio.
飲料中のグルコース及びスクロースの含有量は、以下の実施例に記載の方法により測定することができる。 The contents of glucose and sucrose in beverages can be measured by the methods described in the following examples.
（飲料の明度）
本発明により、高濃度の酵素処理イソクエルシトリンを含有する飲料における、経時的な明度の低下を抑制することができる。飲料の明度は、Ｌ＊ａ＊ｂ＊表色系におけるＬ＊の値として表現することができる。飲料の明度は、例えば、以下の実施例に記載の方法により測定することができる。
(Beverage lightness)
According to the present invention, it is possible to suppress a decrease in brightness over time in a beverage containing a high concentration of enzyme-treated isoquercitrin. The brightness of the beverage can be expressed as a value of L * in the L * a * b * color system. The brightness of a drink can be measured by the method as described in a following example, for example.
（飲料）
本発明の飲料における、飲料の種類は特に限定されず、炭酸飲料、非炭酸飲料、アルコール飲料、非アルコール飲料、果実飲料、コーヒー飲料、茶飲料、乳性飲料、野菜飲料、スポーツ飲料、ココア飲料、栄養飲料、機能性飲料、ニアウォーター系飲料などいずれであってもよい。特に、飲料の明度の低下が視認されやすい色がやや薄い飲料は本発明に好適である。そのような飲料としては、例えば、緑茶、ほうじ茶、ブレンド茶、麦茶、マテ茶、ジャスミン茶、紅茶、ウーロン茶、杜仲茶などの茶飲料や、スポーツ飲料、ニアウォーター系飲料などが含まれる。
(Beverage)
The type of beverage in the beverage of the present invention is not particularly limited, and carbonated beverages, non-carbonated beverages, alcoholic beverages, non-alcoholic beverages, fruit beverages, coffee beverages, tea beverages, dairy beverages, vegetable beverages, sports beverages, and cocoa beverages. It may be any of a nutrient drink, a functional drink, a near water drink, and the like. In particular, a beverage having a slightly light color in which a decrease in the brightness of the beverage is easily visible is suitable for the present invention. Such beverages include, for example, tea beverages such as green tea, roasted tea, blended tea, barley tea, mate tea, jasmine tea, black tea, oolong tea and Tochu tea, sports beverages, and near water beverages.
本発明の飲料は、グルコース及びスクロースのほか、飲料の種類に応じて、各種添加剤等が配合されていてもよい。各種添加剤としては、例えば、上記以外の糖類等の甘味料、酸味料、香料、ビタミン、色素類、酸化防止剤、乳化剤、保存料、エキス類、食物繊維、ｐＨ調整剤、品質安定剤等が挙げられる。 In addition to glucose and sucrose, the beverage of the present invention may contain various additives depending on the type of beverage. Examples of various additives include sweeteners such as saccharides other than those described above, acidulants, fragrances, vitamins, pigments, antioxidants, emulsifiers, preservatives, extracts, dietary fiber, pH adjusters, quality stabilizers, etc. Is mentioned.
本発明の飲料は、必要に応じて殺菌等の工程を経て、容器詰め飲料とされる。例えば、飲料を容器に充填した後に加熱殺菌等を行う方法や、飲料を殺菌してから無菌環境下で容器に充填する方法により、殺菌された容器詰め飲料を製造することができる。 The beverage of the present invention is made into a container-packed beverage through steps such as sterilization as necessary. For example, a sterilized container-packed beverage can be produced by a method of performing heat sterilization after the beverage is filled in the container, or a method of sterilizing the beverage and then filling the container in an aseptic environment.
容器の種類は特に限定されず、ＰＥＴボトル、缶、瓶、紙パックなどを挙げることができる。特に、無色透明のＰＥＴボトルや瓶は、容器中の飲料の色味が外部から視認しやすいため、本発明を用いて飲料の経時的な明度の低下を抑制するのに適しているといえる。 The kind of container is not particularly limited, and examples thereof include PET bottles, cans, bottles, paper packs, and the like. In particular, colorless and transparent PET bottles and bottles are suitable for suppressing a decrease in lightness of a beverage over time using the present invention because the color of the beverage in the container is easily visible from the outside.
以下、実験例及び実施例を示して本発明の詳細を具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。また、本明細書において、特に記載しない限り、数値範囲はその端点を含むものとして記載される。 Hereinafter, although an experiment example and an Example are shown and the detail of this invention is demonstrated concretely, this invention is not limited to this. In this specification, unless otherwise specified, numerical ranges are described as including the end points.
（酵素処理イソクエルシトリンの測定法）
１．試薬
・アセトニトリル：高速液体クロマトグラフ用 純度99.8％（ナカライテスク株式会社製）
・水：高速液体クロマトグラフ用 不純物0.001％以下（ナカライテスク株式会社製）
・トリフルオロ酢酸：純度99％（ナカライテスク株式会社製）
・イソクエルシトリン（Quercetin 3-O- glucoside： 以下QG1とする）： SSX1327S、純度93.8％ （フナコシ株式会社製）
・エタノール：高速液体クロマトグラフ用 純度99.8％（ナカライテスク株式会社製）
・ジメチルスルホキシド（dimethyl sulfoxide： 以下DMSOとする）：純度99.0％（ナカライテスク株式会社製）。
２．分析機器
高速液体クロマトグラフ（以下HPLCとする）
ポンプ：LC-10ADvp
検出器： SPD-M10Avp検出器
解析ソフト：Class LC solution （以上、株式会社島津製作所）
３．分析試料の調製
・当該食品の原液を20％エタノール／水で5倍希釈し、0.45 μmフィルター（マイレクスLH-4：ミリポア社製）でろ過したものを分析試料としてHPLCに供する。
４．検量線の作成
標準物質であるイソクエルシトリン（純度93.8％）を1.0 mg正確に秤量し、5 mlメスフラスコ中で0.5 mlのジメチルスルホキシド（純度99.0％）に溶解し、20％エタノール（純度99.8％）／水により5 mlにフィルアップする。この200 μg／mlの溶液を20％エタノール／水で順次希釈し、10、25、50、100 μg／mlの溶液を作成する。各濃度の溶液を10 μl、 HPLCに供する。このときに検出されるピークの溶出保持時間は約14.5分である。このときの紫外部吸光度350 nmにおける面積と濃度により検量線を作成する。
(Measurement method of enzyme-treated isoquercitrin)
1. Reagent / Acetonitrile: High-performance liquid chromatograph purity 99.8% (manufactured by Nacalai Tesque)
・ Water: Impurity for high performance liquid chromatograph 0.001% or less (manufactured by Nacalai Tesque)
・ Trifluoroacetic acid: 99% purity (manufactured by Nacalai Tesque)
・ Isoquercitrin (Quercetin 3-O-glucoside: QG1): SSX1327S, purity 93.8% (Funakoshi Co., Ltd.)
・ Ethanol: 99.8% purity for high performance liquid chromatography (manufactured by Nacalai Tesque)
Dimethyl sulfoxide (hereinafter referred to as DMSO): purity 99.0% (manufactured by Nacalai Tesque).
2. Analytical instrument high performance liquid chromatograph (hereinafter referred to as HPLC)
Pump: LC-10ADvp
Detector: SPD-M10Avp detector analysis software: Class LC solution (Shimadzu Corporation)
3. Preparation of analysis sample ・ The stock solution of the food is diluted 5-fold with 20% ethanol / water and filtered through a 0.45 μm filter (Mirex LH-4: manufactured by Millipore) for HPLC.
4). Preparation of calibration curve 1.0 mg of isoquercitrin (purity 93.8%), the standard substance, was accurately weighed and dissolved in 0.5 ml dimethyl sulfoxide (purity 99.0%) in a 5 ml volumetric flask, and 20% ethanol (purity 99.8%). %) / Water to 5 ml. This 200 μg / ml solution is diluted sequentially with 20% ethanol / water to make 10, 25, 50, and 100 μg / ml solutions. 10 μl of each concentration solution is subjected to HPLC. The elution retention time of the peak detected at this time is about 14.5 minutes. At this time, a calibration curve is prepared based on the area and concentration at an ultraviolet absorbance of 350 nm.
原点を通る近似直線を計算し、これを用いてQG1からQG7までの濃度を算出し、合算した値に標準物質の純度（93.8％）をかけることで、ケルセチン配糖体量を算出する。
５．試験操作
・定性試験：分析試料を標準品と同一条件下でHPLC分析を行い、QG1標準品の溶出保持時
間と一致するピークをQG1とする。QG1はケルセチンにグルコースが1個結合したケルセチン配糖体である。
・定量試験： QG1のピークより前に検出される6つのピークは、QG1にさらにグルコース結合したケルセチンの配糖体である。HPLC分析では、QG1およびQG1にさらにグルコースが1〜6個結合した化合物が検出可能であり、これら（QG1からQG7）を関与成分と設定した。また、ケルセチン配糖体は、小腸でケルセチンに加水分解されることから、QG1からQG7は生理活性的に同等であると考え、ケルセチン配糖体の主要な構成成分であり、標準品が入手可能なQG1を指標成分と設定し、QG1換算での量を算出する。ケルセチン配糖体の7つの溶出ピークについてのピーク面積を測定し、QG1標準品のピーク面積に基づいて作成した検量線から分析試料中のケルセチン配糖体含量を算出する。
Calculate an approximate straight line passing through the origin, calculate the concentration from QG1 to QG7 using this, and calculate the amount of quercetin glycoside by multiplying the sum by the purity of the standard substance (93.8%).
5). Test procedure and qualitative test: Analyze the analysis sample under the same conditions as the standard, and set the peak that matches the elution retention time of the QG1 standard to QG1. QG1 is a quercetin glycoside in which one glucose is bound to quercetin.
Quantitative test: The six peaks detected before the QG1 peak are glycosides of quercetin further glucose-bound to QG1. In HPLC analysis, QG1 and a compound in which 1 to 6 glucoses were further bound to QG1 were detectable, and these (QG1 to QG7) were set as the components involved. In addition, since quercetin glycoside is hydrolyzed to quercetin in the small intestine, QG1 to QG7 are considered to be physiologically equivalent and are the main constituents of quercetin glycoside, and standard products are available QG1 is set as the index component, and the amount in terms of QG1 is calculated. The peak areas of the seven elution peaks of quercetin glycoside are measured, and the quercetin glycoside content in the analysis sample is calculated from a calibration curve created based on the peak area of the QG1 standard product.
イソクエルシトリン（QG1）は、ケルセチンの3位に1分子のグルコースがβ結合した化合物である。QG2〜QG7は、QG1にさらに0〜6個のグルコースがα-1,4結合した化合物群で、QG1およびQG2〜QG7の7成分を、関与成分とする。 Isoquercitrin (QG1) is a compound in which one molecule of glucose is β-bonded to the 3-position of quercetin. QG2 to QG7 are a group of compounds in which 0 to 6 glucoses are further α-1,4 linked to QG1, and 7 components QG1 and QG2 to QG7 are involved components.
ケルセチンの3位配糖体は糖鎖の長さに関らず、すべて350nmに極大吸収を持ち、その吸光度はアグリコン部分であるケルセチンが寄与する。従って、分子量は異なるが、モル吸光度ではQG1からQG7は等しくなると考え、QG1換算で関与成分を定量することとした。得られたQG1換算のケルセチン配糖体量は、さらに、ケルセチンの量に換算した。 Regardless of the length of the sugar chain, quercetin 3-position glycosides all have a maximum absorption at 350 nm, and the absorbance is contributed by quercetin, which is an aglycon moiety. Therefore, although the molecular weight is different, QG1 to QG7 are considered to be equal in terms of molar absorbance, and the components involved are determined in terms of QG1. The QG1-converted quercetin glycoside amount obtained was further converted into the amount of quercetin.
（グルコース及びスクロースの測定方法）
グルコース及びスクロースは定法に従って測定することができる。例えば、食品衛生学雑誌Vol. 23 (1982) No. 4 P 331-338に記載の方法で測定することができる。
(Measurement method of glucose and sucrose)
Glucose and sucrose can be measured according to a conventional method. For example, it can be measured by the method described in the Journal of Food Hygiene Vol. 23 (1982) No. 4 P 331-338.
（飲料の明度Ｌ＊の測定方法）
測色色差計ＺＥ−２０００（日本電子工業株式会社製）を用い反射測定を行う。まず、測色色差計の試料台に黒色のキャップをかぶせ、試料台を完全に遮光した状態でゼロ合わせを行う。次いで、試料台に標準白板をおいて標準合わせを行う。その後、専用の丸形セルに試料を７ｍｌ正確に秤り入れ、そのセルを黒色キャップで遮光して反射測定を行う。
(Measurement method of lightness L * of beverage)
Reflection measurement is performed using a colorimetric color difference meter ZE-2000 (manufactured by JEOL Ltd.). First, a black cap is put on the sample table of the colorimetric color difference meter, and zero adjustment is performed with the sample table completely shielded from light. Next, standard alignment is performed by placing a standard white plate on the sample stage. Thereafter, 7 ml of the sample is accurately weighed into a special round cell, and the cell is shielded from light with a black cap to perform reflection measurement.
（実施例１）
酵素処理イソクエルシトリン(QG)として、サンエミックＰ１５（三栄源エフ・エフ・アイ社）を用いた。酵素処理イソクエルシトリン、グルコース、及びスクロースを、以下の表１に記載の量となるように水に溶解して各飲料を調製した。各飲料の調製直後の明度（Ｌ＊）を上記の方法により測定した。その後、各飲料を無色透明のＰＥＴボトルに充填し、加熱殺菌を行った後、５５℃で４日間保管した。５５℃で４日間保管後の各飲料の明度（Ｌ＊）を測定した。調整直後の明度（Ｌ＊）と、５５℃で４日間保管後の明度（Ｌ＊）との差をΔＬとした。結果を表１に示す。
Example 1
As the enzyme-treated isoquercitrin (QG), Sanemik P15 (San-Eigen FFI Co., Ltd.) was used. Each beverage was prepared by dissolving enzyme-treated isoquercitrin, glucose, and sucrose in water to the amounts shown in Table 1 below. The lightness (L * ) immediately after preparation of each beverage was measured by the above method. Thereafter, each beverage was filled in a colorless and transparent PET bottle, sterilized by heating, and stored at 55 ° C. for 4 days. The lightness (L * ) of each beverage after storage at 55 ° C. for 4 days was measured. And immediately after adjusting the lightness (L *), the difference between the lightness (L *) after storage for 4 days at 55 ° C. was [Delta] L. The results are shown in Table 1.
表１の結果より、グルコースとスクロースとの比が０．２より大きく２．０未満となる場合に、飲料の明度の低下（ΔＬ）が少なくなることがわかる。 From the results in Table 1, it can be seen that when the ratio of glucose to sucrose is greater than 0.2 and less than 2.0, the decrease in lightness (ΔL) of the beverage is reduced.
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Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000336354A (en) * | 1999-03-19 | 2000-12-05 | Sanei Gen Ffi Inc | Anti-fading agent |
| WO2005108503A1 (en) * | 2004-05-07 | 2005-11-17 | San-Ei Gen F.F.I., Inc. | Method of preventing fading of tar colorant and tar colorant-containing composition with prevented fading |
| JP2006315985A (en) * | 2005-05-11 | 2006-11-24 | Sanei Gen Ffi Inc | Method for suppressing deterioration of vitamin |
| WO2006132223A1 (en) * | 2005-06-08 | 2006-12-14 | San-Ei Gen F.F.I., Inc. | Anti-hypertensive composition |
| JP2012183063A (en) * | 2011-02-14 | 2012-09-27 | Suntory Holdings Ltd | Quercetin glycoside-containing bottled beverage |
| WO2013047612A1 (en) * | 2011-09-27 | 2013-04-04 | 花王株式会社 | Packaged beverage |
| WO2013047611A1 (en) * | 2011-09-27 | 2013-04-04 | 花王株式会社 | Packaged beverage |
| JP2013106590A (en) * | 2011-11-24 | 2013-06-06 | Sanei Gen Ffi Inc | Method for improving storage stability of enzym-treated isoquercitrin |
| JP2013110989A (en) * | 2011-11-28 | 2013-06-10 | Sanei Gen Ffi Inc | Catechin-rich beverage |
| JP2015065957A (en) * | 2013-09-30 | 2015-04-13 | サントリー食品インターナショナル株式会社 | Container-packed green tea drink blended with quercetin glucoside |
| JP2015065943A (en) * | 2013-09-30 | 2015-04-13 | サントリー食品インターナショナル株式会社 | Quercetin glycoside beverage having color stability |
-
2015
- 2015-07-30 JP JP2015150450A patent/JP2017029024A/en active Pending
Patent Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000336354A (en) * | 1999-03-19 | 2000-12-05 | Sanei Gen Ffi Inc | Anti-fading agent |
| WO2005108503A1 (en) * | 2004-05-07 | 2005-11-17 | San-Ei Gen F.F.I., Inc. | Method of preventing fading of tar colorant and tar colorant-containing composition with prevented fading |
| JP2006315985A (en) * | 2005-05-11 | 2006-11-24 | Sanei Gen Ffi Inc | Method for suppressing deterioration of vitamin |
| WO2006132223A1 (en) * | 2005-06-08 | 2006-12-14 | San-Ei Gen F.F.I., Inc. | Anti-hypertensive composition |
| JP2012183063A (en) * | 2011-02-14 | 2012-09-27 | Suntory Holdings Ltd | Quercetin glycoside-containing bottled beverage |
| WO2013047612A1 (en) * | 2011-09-27 | 2013-04-04 | 花王株式会社 | Packaged beverage |
| WO2013047611A1 (en) * | 2011-09-27 | 2013-04-04 | 花王株式会社 | Packaged beverage |
| JP2013106590A (en) * | 2011-11-24 | 2013-06-06 | Sanei Gen Ffi Inc | Method for improving storage stability of enzym-treated isoquercitrin |
| JP2013110989A (en) * | 2011-11-28 | 2013-06-10 | Sanei Gen Ffi Inc | Catechin-rich beverage |
| JP2015065957A (en) * | 2013-09-30 | 2015-04-13 | サントリー食品インターナショナル株式会社 | Container-packed green tea drink blended with quercetin glucoside |
| JP2015065943A (en) * | 2013-09-30 | 2015-04-13 | サントリー食品インターナショナル株式会社 | Quercetin glycoside beverage having color stability |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 丸善食品総合辞典, JPN6018038793, 25 March 1998 (1998-03-25), pages 76, ISSN: 0003891726 * |
| 日本栄養士会雑誌, vol. 52 (4), JPN6018038792, 2009, pages 314 - 317, ISSN: 0003891727 * |
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