JP2016140299A - Culture bag fixing block, and method for using culture bag fixing block - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、細胞等の培養技術に関し、特に軟包材からなる培養バッグを用いて細胞等の培養を行う場合に使用する培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法に関する。 The present invention relates to a culture technique for cells and the like, and more particularly to a culture bag fixing base used when cells and the like are cultured using a culture bag made of a soft wrapping material, and a method for using the culture bag fixing base.
近年、医薬品の生産や、遺伝子治療、再生医療、免疫療法等の分野において、細胞や組織、微生物、ウィルス等(以下、細胞等と言う)を人工的な環境下で効率良く大量に培養することが求められている。
このような細胞等の培養では、軟包材からなる培養バッグを好適に用いることができる。軟包材からなる培養バッグを用いることで、培養バッグに優れたガス透過性を付与することができ、閉鎖系の培養システムを構築し易くすることが可能となる。また、培養バッグの容量や培養面積を容易に制御できると共に、細胞等及び培地を含む培養液(以下、細胞等と培地を含むものを培養液と言う)の送液を自動化し易いなどの様々なメリットを得ることが可能である。
In recent years, in the fields of pharmaceutical production, gene therapy, regenerative medicine, immunotherapy, etc., cells, tissues, microorganisms, viruses, etc. (hereinafter referred to as cells) are efficiently cultured in large quantities in an artificial environment. Is required.
In culturing such cells and the like, a culture bag made of a soft wrapping material can be suitably used. By using a culture bag made of a soft wrapping material, it is possible to impart excellent gas permeability to the culture bag, making it easy to construct a closed culture system. In addition, the capacity and area of the culture bag can be easily controlled, and it is easy to automate the feeding of a culture solution containing cells and culture medium (hereinafter referred to as culture solution). Benefits can be obtained.
一方、培養バッグを架台に載せて培養を行う場合、単に載せるだけでは培養バッグの底面にシワや弛みが生じ、平坦な培養面を得ることができない。このように培養面にシワや弛みが生じると、その部分に細胞等が溜って過度な密度を生じ、また細胞等の移動が制限されるため、細胞等の増殖効率が低下するという問題があった。
また、このような細胞等の溜まった場所は、培養細胞等の回収にあたって、培養バッグ内に細胞等が残存する原因になるという問題もあった。
そこで、このような問題を解消するために、特許文献1に記載の細胞培養装置では、培養バッグの四隅に孔を設けると共に、架台の四隅に固定具を立設し、培養バッグの孔に架台の固定具を通して培養バッグを引っ張ることによって、培養面を平坦にする方法が採られている。
On the other hand, when culturing with a culture bag placed on a gantry, wrinkles and slack are generated on the bottom surface of the culture bag simply by placing it, and a flat culture surface cannot be obtained. When wrinkles or slack are formed on the culture surface in this way, cells and the like are accumulated in the portion, resulting in excessive density and movement of the cells and the like are restricted, so that the proliferation efficiency of the cells and the like is lowered. It was.
In addition, such a place where cells or the like are accumulated has a problem that the cells or the like remain in the culture bag when the cultured cells or the like are collected.
Therefore, in order to solve such a problem, in the cell culture device described in Patent Document 1, holes are provided at the four corners of the culture bag, and fixtures are erected at the four corners of the gantry, and the gantry is provided at the hole of the culture bag. The culture surface is flattened by pulling the culture bag through the fixture.
しかしながら、この方法によっても、培養バッグに培養液が入った状態では、培養バッグの培養面にシワや弛みが生じ、その部分に細胞等の溜まった場所が生じることによって、細胞等の増殖効率が低下するというという問題があった。
具体的には、例えば図5では、培養液を充填した培養バッグ300が架台200に載置され、培養バッグ300に設けられた孔301に固定具100を挿入して、培養バッグ300を引っ張るようにしている。しかしながら、このようにしてもなお、培養バッグ300の底面にはシワや弛みが生じるという問題があった。
However, even with this method, when the culture solution is in the culture bag, wrinkles and slack occur on the culture surface of the culture bag, and a place where cells and the like are accumulated in that portion. There was a problem that it decreased.
Specifically, in FIG. 5, for example, the
そこで、本発明者らは、培養バッグを載置する架台に立設した固定具に凹部を設けて、この凹部に培養バッグに設けた孔を係合させ、凹部の高さで培養バッグの端部を保持することによって、培養バッグの培養面を平坦にすることに成功し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、軟包材からなる培養バッグを用いて細胞等の培養を行う場合において、培養バッグの底面を平坦な状態にして培養することの可能な培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法の提供を目的とする。
Therefore, the present inventors provide a recess in a fixture standing on a gantry on which the culture bag is placed, engage a hole provided in the culture bag with the recess, and set the end of the culture bag at the height of the recess. By holding the part, the culture surface of the culture bag was successfully flattened, and the present invention was completed.
That is, the present invention provides a culture bag fixing base capable of culturing with a flat bottom surface of a culture bag and a culture bag fixing when culturing cells or the like using a culture bag made of a soft wrapping material. The purpose is to provide usage of the table.
本発明に係る培養バッグ固定台は、培養液が充填された軟包材からなる培養バッグを載置して培養対象物の培養を行うための培養バッグ固定台であって、培養バッグを載置する架台を備え、前記架台の周縁部に二個以上の固定具が対向して立設され、前記固定具に凹部が形成された構成としてある。 A culture bag fixing base according to the present invention is a culture bag fixing base for mounting a culture bag made of a soft wrapping material filled with a culture medium and culturing a culture object, and mounting the culture bag And two or more fixtures are erected on the periphery of the platform, and a recess is formed in the fixture.
また、本発明に係る培養バッグ固定台の使用方法は、培養バッグの端部に二個以上の孔が設けられ、上記の培養バッグ固定台の架台上に前記培養バッグを載置し、前記培養バッグ固定台の固定具を前記孔に挿入して前記孔の周縁部を前記固定具の凹部に係合し、前記培養バッグの底面を平坦な状態にして前記培養バッグを前記架台に固定する方法としてある。 In addition, the method for using the culture bag fixing table according to the present invention includes two or more holes provided at an end of the culture bag, placing the culture bag on the frame of the culture bag fixing table, and A method of inserting a fixture of a bag fixing base into the hole, engaging a peripheral edge of the hole with a concave portion of the fixing tool, and fixing the culture bag to the gantry with a flat bottom surface of the culture bag It is as.
本発明によれば、軟包材からなる培養バッグを用いて細胞等の培養を行う場合において、培養バッグの底面を平坦な状態にして培養することが可能となる。 According to the present invention, in the case of culturing cells or the like using a culture bag made of a soft wrapping material, the culture bag can be cultured with the bottom surface of the culture bag being flat.
以下、本発明の培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法の好ましい実施形態について、図面を参照しつつ説明する。 Hereinafter, preferred embodiments of the culture bag fixing base and the method for using the culture bag fixing base of the present invention will be described with reference to the drawings.
(第一実施形態)
まず、本発明の第一実施形態に係る培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法について、図1〜3を参照して説明する。図1は、本実施形態に係る培養バッグ固定台の概略を示す斜視図である。図2は、本実施形態に係る培養バッグ固定台に培養バッグを載置した状態の概略を示す斜視図であり、図3は、同状態の概略を示す部分拡大側面図である。
(First embodiment)
First, the culture bag fixing base according to the first embodiment of the present invention and a method for using the culture bag fixing base will be described with reference to FIGS. FIG. 1 is a perspective view showing an outline of a culture bag fixing base according to the present embodiment. FIG. 2 is a perspective view showing an outline of a state where the culture bag is placed on the culture bag fixing base according to the present embodiment, and FIG. 3 is a partially enlarged side view showing the outline of the state.
図1〜3に示されるように、本実施形態の培養バッグ固定台1は、固定具10と、固定具10が四隅に立設された架台20を備えている。
本実施形態の培養バッグ固定台1において、固定具10の配置及び個数は、これに限定されず、架台20の周縁部に2個以上の固定具10が対向して配置されていれば良い。一般的な培養バッグ30を用いる場合、固定具10は架台20の四隅に立設することが好ましく、比較的サイズの大きな培養バッグを用いる場合には、より多くの固定具10を立設することも好ましい。また、固定具10を培養バッグ固定台1の短辺における端部中央にそれぞれ1個ずつ配置することもでき、一方の短辺における端部中央に1個配置し、対向する端部に2個以上配置することもできる。
As shown in FIGS. 1 to 3, the culture bag fixing base 1 of the present embodiment includes a
In the culture bag fixing base 1 of the present embodiment, the arrangement and the number of the
固定具10の形状は、特に限定されないが、例えば略円柱状とすることができる。また、凹部11の上方をドーム状にし、同下方を円柱状や角柱状にすることもできる。
The shape of the
固定具10には、培養バッグ30に設けられた孔31を係合するための凹部11が形成されている。凹部11は、固定具10に水平面に対して円周状に形成することが好ましいが、これに限定されず、培養バッグ固定台1の外側方向に、水平面に対して半円周状や弧状等に形成してもよい。また、凹部11の水平断面は円形に限定されず、多角形や星形などであってもよい。
The
また、固定具10において、凹部11は、培養液が充填された培養バッグ30を培養バッグ固定台1に載置したときに、架台20の表面の位置から上方に、培養バッグ30の厚みの1/2(ほぼ液深dの1/2)の位置に、培養バッグ30の孔31の周縁部を係合可能に設けられている。この培養バッグ30の厚みとは、培養液をいっぱいに充填した時の厚みである。
Further, in the
培養バッグ30は、軟包材からなり、その四隅に孔31が設けられている。この孔31は、軟包材がヒートシールされた端部領域などに設けられ、培養バッグ30内の密封性が孔31により損なわれないことは言うまでもない。
また、孔31の配置及び個数は、これに限定されず、培養バッグ固定台1の固定具10を挿入可能なように、固定具10に対応して設けることが好ましい。
The
Further, the arrangement and the number of the
培養バッグ30は、内容物を視認できるように、一部又は全部が透明性を有することが好ましい。また、培養バッグ30は、細胞等の培養に必要なガス透過性(酸素及び二酸化炭素透過性)を有していることが必要であり、37℃、5%二酸化炭素濃度の培養環境下で使用することが好ましい。さらに、培養バッグ30は、高い細胞等の増殖効率を実現するために、低細胞毒性、低溶出性、及び放射線滅菌適性を有することが好ましい。
なお、培養バッグ30を用いて培養を行う培養対象物は、細胞に限定されず、微生物(カビ、酵母なども含む)やウィルスなど、培養が行われる全ての物を対象とすることができる。
It is preferable that a part or all of the
Note that the culture object to be cultured using the
このような条件を満たす培養バッグ30の材料としては、ポリエチレン系樹脂が好ましい。このポリエチレン系樹脂としては、ポリエチレン、エチレンとα−オレフィンの共重合体、エチレンと酢酸ビニルの共重合体、エチレンとアクリル酸やメタクリル酸共重合体と金属イオンを用いたアイオノマー等が挙げられる。また、ポリオレフィン、スチレン系エラストマー、ポリエステル系熱可塑性エラストマー、シリコーン系熱可塑性エラストマー、シリコーン樹脂等を用いることもできる。
As a material of the
培養バッグ30には、外部と内容物の移送を行うためのポートが備えられ、ポートにはチューブが接続される。ポートの数は特に限定されず、1個又は2個以上設けることもできる。
The
培養バッグ30の四辺はヒートシールにより密封されたものとすることができる。また、培養バッグ30をブロー成形による一体成型バッグとしてもよい。
培養バッグ30の形状及びその収容部の形状は、特に限定されないが、例えば長方形状とすることができる。また、培養バッグ30の収容部の形状を、ポートに向かって次第に狭くなるように構成すれば、培養液の移送の際の細胞等の残留を低減できるため好ましい。
The four sides of the
Although the shape of the
培養バッグ30を、培養バッグ固定台1の架台20上に載置し、固定具10を孔31に挿入して、孔31の周縁部を固定具10の凹部11に係合させる。これにより、培養バッグ30の端部は、凹部11の高さに保持されて、培養バッグ30の底面を平坦な状態にして培養バッグ30を架台20に固定することができる。
そして、このような培養バッグ30に細胞等及び培地を含む培養液が充填されて細胞等の培養が行われる。培養バッグ30への培養液の充填は、培養バッグ30を架台20に固定する前であっても後であってもよい。
The
Then, such a
なお、図3には、培養バッグ30の一方の端部が固定具10の凹部11の高さに保持されているようすが示されているが、当該端部に対向する端部も同様に固定具10の凹部11の高さに保持される。後述する図4についても同様である。
FIG. 3 shows that one end of the
このような本実施形態の培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法によれば、培養バッグ30の底面を平坦な状態に維持することができ、培養面をシワや弛みのない状態にすることができる。このため、培養バッグ30の培養面積を最大にすることが可能になる。
また、培養バッグ30の底面を平坦な状態にすることにより、培養バッグ30内において細胞等を均一に分布(分散)させることができる。このため、細胞等の培養における培養条件の最適化を図ることができ、細胞等の増殖効率を一層向上させることが可能となっている。
According to the culture bag fixing table and the method of using the culture bag fixing table of this embodiment, the bottom surface of the
Moreover, by making the bottom surface of the
(第二実施形態)
次に、本発明の第二実施形態に係る培養バッグ固定台、及び培養バッグ固定台の使用方法について、図4を参照して説明する。図4は、本実施形態に係る培養バッグ固定台に培養バッグを載置した状態の概略を示す部分拡大側面図である。
(Second embodiment)
Next, the culture bag fixing base according to the second embodiment of the present invention and a method for using the culture bag fixing base will be described with reference to FIG. FIG. 4 is a partially enlarged side view showing an outline of a state in which the culture bag is placed on the culture bag fixing base according to the present embodiment.
図4に示されるように、本実施形態の培養バッグ固定台1aは、固定具10aと、固定具10aが四隅に立設された架台20aを備えている。
固定具10aにおいて、凹部11aは、培養液が充填された培養バッグ30を培養バッグ固定台1aに載置したときに、架台20aの表面の位置から上方に、培養バッグ30の厚みの3/4(ほぼ液深dの3/4)の位置に、培養バッグ30の孔31の周縁部を係合可能に設けられている。
As shown in FIG. 4, the culture
In the
本実施形態によれば、培養バッグ30を、培養バッグ固定台1aの架台20a上に載置し、固定具10aを孔31に挿入して、孔31の周縁部を固定具10aの凹部11aに係合させることができる。これにより、培養バッグ30の端部は、凹部11aの高さに引っ張り上げられて保持され、培養バッグ30の底面を平坦な状態にして培養バッグ30を架台20aに固定することができる。
このため、本実施形態によれば、培養バッグ30の底面を平坦な状態に維持して、培養面をシワや弛みのない状態にすることができ、培養面積を最大にすることができるなど、第一実施形態と同様の効果を得ることが可能である。
According to this embodiment, the
Therefore, according to this embodiment, the bottom surface of the
このように、本実施形態によれば、培養バッグ30における対向する端部を、凹部11aの高さに引っ張り上げることで、培養バッグ30の底面を平坦な状態にすることができる。このような効果は、凹部11aの位置が、架台20aの表面の位置から上方に、培養バッグ30の厚みよりもやや上方の位置にあっても同様に得ることができる。
このような観点から、固定具に凹部を形成する位置を、架台の表面の位置から上方に、培養液が充填された培養バッグの厚みの1/2〜3/2の範囲とすることが好ましく、1/2〜1の範囲とすることがより好ましく、1/2〜3/4の範囲とすることがさらに好ましい。
Thus, according to the present embodiment, the bottom surface of the
From such a viewpoint, it is preferable that the position where the concave portion is formed in the fixture is in the range of 1/2 to 3/2 of the thickness of the culture bag filled with the culture solution from the position of the surface of the gantry. The range of 1/2 to 1 is more preferable, and the range of 1/2 to 3/4 is more preferable.
本実施形態における固定具10aの配置、個数、及び形状、凹部11aの形状、培養バッグ30の特徴などその他の点については、第一実施形態と同様のものとすることができる。
Other points such as the arrangement, number, and shape of the
以上、本発明について、好ましい実施形態を示して説明したが、本発明は、前述した実施形態に限定されるものではなく、本発明の範囲で種々の変更実施が可能であることは言うまでもない。
例えば、固定具の形状は実施形態に限定されず、凹部を備えることにより実施形態と同様の効果が得られる限り、例えば略直方体などその他の形状にしても良い。また、架台を振動させることによって、培養バッグ内の培養液を攪拌可能にするなど適宜変更することが可能である。
While the present invention has been described with reference to the preferred embodiment, it is needless to say that the present invention is not limited to the above-described embodiment, and various modifications can be made within the scope of the present invention.
For example, the shape of the fixture is not limited to the embodiment, and other shapes such as a substantially rectangular parallelepiped may be used as long as the same effects as the embodiment can be obtained by providing the recesses. In addition, it is possible to make appropriate changes such as allowing the culture solution in the culture bag to be stirred by vibrating the gantry.
本発明は、培養容器を用いて、閉鎖系で細胞を大量に培養する遺伝子治療、免疫療法、再生医療や抗体医薬生産などにおいて好適に利用することが可能である。 The present invention can be suitably used in gene therapy, immunotherapy, regenerative medicine, antibody drug production, etc., in which cells are cultured in large quantities in a closed system using a culture container.
1,1a 培養バッグ固定台
10,10a 固定具
11,11a 凹部
20,20a 架台
30 培養バッグ
31 孔
DESCRIPTION OF
Claims (6)
培養バッグを載置する架台を備え、前記架台の周縁部に二個以上の固定具が対向して立設され、前記固定具に凹部が形成された
ことを特徴とする培養バッグ固定台。 A culture bag fixing stand for culturing a culture object by placing a culture bag made of a soft wrapping material filled with a culture solution,
A culture bag fixing base comprising a base for placing a culture bag, wherein two or more fixtures are erected on the periphery of the base, and a recess is formed in the fixture.
ことを特徴とする培養バッグ固定台の使用方法。 Two or more holes are provided in an end portion of the culture bag, the culture bag is placed on the culture bag fixing base according to any one of claims 1 to 5, and the culture bag fixing base fixture A culture bag, wherein the culture bag is fixed to the pedestal with the periphery of the hole being engaged with the recess of the fixture, the bottom surface of the culture bag being flat, How to use the fixed base.
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