JP2016104708A - アスコルビン酸誘導体を含有する非水性注射剤及びデポ形成方法 - Google Patents

Abstract

【課題】アスコルビン酸誘導体を用い、生体内等への投与後にデポを形成することができる注射剤を提供すること。【解決手段】有効成分と下記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体とを含有する非水性注射剤。（下記式中、ｎは６〜２２の整数を表す。）【選択図】なし

Description

本発明は、非水性注射剤及びデポ形成方法に関する。

従来より知られているデポ形成用注射剤は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）等の高分子化合物が利用されている。
しかし、高分子化合物は、生体内で分解されるのに長期間を要し、また、部分的に分解したオリゴマーは炎症を引き起こす可能性がある。

一方、後述の一般式で表されるアスコルビン酸誘導体は、高分子化合物よりも安全性が高く、生分解性にも優れている。
非特許文献１及び２には、アスコルビン酸誘導体をコアゲル化して徐放性製剤として利用することが提案されている。

タルタラ（Ｌｕｉｓ Ｉ． Ｔａｒｔａｒａ）、外４名、「アスコルビン酸ラウリルのナノ構造をドラッグ・デリバリー・システムに用いるアセタゾールアミドの眼内浸透の向上」（Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ Ｏｃｕｌａｒ Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ａｓｃｏｒｂｙｌ Ｌａｕｒａｔｅ Ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｓ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ）、Ｊ Ｏｃｕｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ、メリー・アン・リーバート，Ｉｎｃ．（Ｍａｒｙ Ａｎｎ Ｌｉｅｂｅｒｔ， Ｉｎｃ．）、２０１２年１１月２日、第２８巻、ｐ．１０２−１０９ サイノ、外６名、「アルキルビタミンＣ誘導体に基づくナノ構造（コアゲル）を用いるイブプロフェンの皮膚透過及び分配の最適化」（Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｋｉｎ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ （ｃｏａｇｅｌｓ） ｂａｓｅｄ ｏｎ ａｌｋｙｌ ｖｉｔａｍｉｎ Ｃ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ）、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ファーマシューティクス・アンド・バイオファーマシューティクス（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕtics）、エルセヴィア Ｂ．Ｖ．（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｂ．Ｖ．）、２０１０年、第７６巻、ｐ．４４３−４４９

しかしながら、非特許文献１及び２に記載されたアスコルビン酸誘導体と薬物とを含む組成物は、生体内に投与する前に既にゲル状となっているので、注射剤に適用することはできない。

本発明は、アスコルビン酸誘導体を用い、生体内等に投与した後にデポを形成することができる注射剤を提供することを目的とする。

本発明者らは、アスコルビン酸誘導体を含有する液体組成物は、注射剤として好適な流動性を有し、また、それを生体内等に投与すればデポを形成することを見出し、本発明を完成するに至った。具体的には、本発明は以下のものを提供する。

（１）有効成分と下記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体とを含有する非水性注射剤。
（上記式中、ｎは６〜２２の整数を表す。）
（２）上記非水性注射剤の全体積に対し、上記有効成分の含有量は０．０００１〜５０％（ｗ／ｖ）、上記アスコルビン酸誘導体の含有量は０．１〜８０％（ｗ／ｗ）である（１）記載の非水性注射剤。
（３）上記非水性注射剤は、体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触してデポを形成するものである（１）又は（２）記載の非水性注射剤。
（４）上記非水性注射剤の全量に対し、２０％（ｗ／ｗ）以上の極性有機溶媒を更に含有する（１）から（３）いずれか１項記載の非水性注射剤。
（５）上記非水性注射剤は、関節内投与用、硝子体内投与用、皮下投与用、筋肉内投与用、脊椎内投与用又は脳室内投与用である（１）から（４）いずれか１項記載の非水性注射剤。
（６）上記非水性注射剤は、関節、網脈絡膜又は網膜への上記有効成分の供給に用いられる（１）から（５）いずれか１項記載の非水性注射剤。

（７）有効成分、上記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体、及び、液状組成物の全量に対し３０％（ｗ／ｗ）超の極性有機溶媒を含有する液状組成物を体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポ形成方法。

（８）有効成分及び上記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体を含有する液状組成物を上記アスコルビン酸誘導体の臨界ミセル温度以下の温度において体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポ形成方法。

本発明によれば、高分子化合物ではなく、生分解性であり、安全性も高いアスコルビン酸誘導体を基剤として用い、流動性のある液体として調製することができるので、注射剤に好適な組成物を提供することができる。また、本発明の非水性注射剤は、薬物等の有効成分の濃度を低濃度から高濃度まで自由に設定することができる。本発明の非水性注射剤は、生体内等に投与した後にデポを形成することができるので、長期に亘って有効成分を徐放することができる。

本発明の製剤例１及び２で得た各製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を示すグラフである。 本発明の製剤例３〜６で得た各製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を示すグラフである。 本発明の製剤例７〜９で得た各製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を示すグラフである。 本発明の製剤例１０で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を示すグラフである。 本発明の製剤例１１で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を示すグラフである。 本発明の製剤例１２で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を示すグラフである。 本発明の製剤例１３で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を示すグラフである。 本発明の製剤例１で得た製剤を用いて生じたデポの写真である。 本発明の製剤例２で得た製剤を用いて生じたデポの写真である。 本発明の製剤例７で得た製剤を用いて生じたデポの写真である。

以下、本発明の実施形態について詳細に説明する。

本発明の非水性注射剤は、有効成分と、下記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体（以下、「アスコルビン酸誘導体」と略称することがある。）とを含有する。

上記式中、ｎは６〜２２の整数を表し、１０〜２０の整数が好ましく、１０〜１８の整数がより好ましい。目的とする有効成分の徐放性に応じて、ｎの値を調整することができる。

本発明において、アスコルビン酸誘導体は、公知の方法により製造することができ、通常、アスコルビン酸と、パルミチン酸、ラウリン酸等の高級脂肪酸とを用いてエステル化することにより得ることができる。

本発明の非水性注射剤の全量に対するアスコルビン酸誘導体の含有量は、上限値として、８０％（ｗ／ｗ）が好ましく、６０％（ｗ／ｗ）がより好ましく、４０％（ｗ／ｗ）が更に好ましく、３０％（ｗ／ｗ）が更により好ましく、下限値として、０．１％（ｗ／ｗ）が好ましく、１０％（ｗ／ｗ）がより好ましい。より好ましいアスコルビン酸誘導体の濃度は０．１〜４０％（ｗ／ｗ）、更に好ましくは１０〜３０％（ｗ／ｗ）の範囲である。本発明において、アスコルビン酸誘導体は、後述の溶媒、特に極性有機溶媒を選択することにより、このように幅広い濃度で調製することができ、また、目的とする有効成分の徐放性に応じて適切な濃度に調整することができる。

有効成分は、本発明の非水性注射剤において主目的とする薬効等の効果を奏する成分であり、医薬品有効成分、動物薬等の薬物が好ましいが、薬物に限られず、検査薬、色素等の薬効以外の効果を奏する成分であってもよい。

薬物は、非水性注射剤に求められる薬効に応じて適宜選択されてよく、具体的には、水に溶解する薬物であっても水に溶解しにくい薬物であってもよく、好ましい薬物としては、例えば、Ｔａｆｅｔｉｎｉｂ、ＳＩＭ−８１７３７８、ＡＣＴＢ−１００３、Ｃｈｉａｕｒａｎｉｂ 、ＣＴ−５３６０８ 、Ｃｉｎｎａｍｏｎ、ｃｈｉｍ４Ｇ８−ＳＤＩＥ、ＣＥＰ−５２１４、ＩＭＣ−１Ｃ１１、ＣＥＰ−７０５５、３−［５−［２−［Ｎ−（２−Ｍｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ）−Ｎ−ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ］ｅｔｈｏｘｙ］−１Ｈ−ｉｎｄｏｌ−２−ｙｌ］ｑｕｉｎｏｌｉｎ−２（１Ｈ）−ｏｎｅ、ｈＦ４−３Ｃ５ 、ＺＫ−ＣＤＫ、ＩＭＣ−ＥＢ１０、ＬＳ−１０４ 、ＣＹＣ−１１６ 、ＯＳＩ−９３０ 、ＰＦ−３３７２１０、ＪＮＪ−２６４８３３２７、ＳＳＲ−１０６４６２、Ｒ−１５３０、ＰＲＳ−０５０、ＴＧ−０２、ＳＣ−７１７１０、ＳＢ−１５７８、ＡＭＧ−１９１、ＡＭＧ−８２０、Ｓｕｌｆａｔｉｎｉｂ、Ｌｕｃｉｔａｎｉｂ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＪＮＪ−２８３１２１４１、Ｉｌｏｒａｓｅｒｔｉｂ、ＰＬＸ−５６２２、ＡＲＲＹ−３８２、ＴＡＳ−１１５、Ｔａｎｉｂｉｒｕｍａｂ、Ｈｅｎａｔｉｎｉｂ ｍａｌｅａｔｅ、ＬＹ−２４５７５４６ 、ＰＬＸ−７４８６、ＦＰＡ−００８、ＮＶＰ−ＡＥＥ−７８８、ｃｇｉ−１８４２、ＲＡＦ−２６５、ＭＫ−２４６１、ＳＧ−００５２９、Ｒｅｂａｓｔｉｎｉｂ ｔｏｓｙｌａｔｅ、Ｇｏｌｖａｔｉｎｉｂ ｔａｒｔｒａｔｅ、Ｒｏｎｉｃｉｃｌｉｂ、ＢＶＴ−ＩＩ、Ｘ−８２、ＸＶ−６１５、ＫＤ−０２０、Ｌｅｓｔａｕｒｔｉｎｉｂ、Ｄｅｌｐｈｉｎｉｄｉｎ、Ｓｅｍａｘａｎｉｂ、Ｖａｔａｌａｎｉｂ ｓｕｃｃｉｎａｔｅ、ＯＳＩ−６３２、Ｔｅｌａｔｉｎｉｂ、Ａｌａｃｉｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ、ＡＴＮ−２２４、Ｔｉｖｏｚａｎｉｂ、ＸＬ−９９９、Ｉｃｒｕｃｕｍａｂ、Ｆｏｒｅｔｉｎｉｂ、Ｃｒｅｎｏｌａｎｉｂ ｂｅｓｙｌａｔｅ、Ｒ−４０６、Ｂｒｉｖａｎｉｂ、Ｐｅｇｄｉｎｅｔａｎｉｂ、ＴＧ−１００５７２、Ｏｌａｒａｔｕｍａｂ、Ｆｏｓｔａｍａｔｉｎｉｂ ｄｉｓｏｄｉｕｍ、ＢＭＳ−６９０５１４、ＡＴ−９２８３、ＭＧＣＤ−２６５、Ｑｕｉｚａｒｔｉｎｉｂ、ＥＮＭＤ−９８１６９３、Ｆａｍｉｔｉｎｉｂ ｍａｌａｔｅ、Ａｎｌｏｔｉｎｉｂ、Ｔｏｖｅｔｕｍａｂ、ＰＬＸ−３３９７、Ｆｒｕｑｕｉｎｔｉｎｉｂ、（−）−Ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ ｇａｌｌａｔｅ、Ｍｉｄｏｓｔａｕｒｉｎ、ＮＳＣ−７０６４５６、Ｏｒａｎｔｉｎｉｂ、Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ、Ｄｏｖｉｔｉｎｉｂ ｌａｃｔａｔｅ、ＸＬ−６４７、Ｍｏｔｅｓａｎｉｂ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ、Ｂｒｉｖａｎｉｂ ａｌａｎｉｎａｔｅ、Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ ｍａｌｅａｔｅ、Ａｐａｔｉｎｉｂ、Ｆｅｄｒａｔｉｎｉｂ、Ｐａｃｒｉｔｉｎｉｂ、Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ、Ｉｎｔｅｄａｎｉｂ、Ｍａｓｉｔｉｎｉｂ ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｅｌｅｍｅｎｅ、Ｄｉｈｙｄｒｏａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ、ＷＳ−１４４２、Ｉｔｒａｃｏｎａｚｏｌｅ、Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ、Ｄｉｈｙｄｒｏａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ、Ｉｍａｔｉｎｉｂ ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ ｍａｌａｔｅ、Ｄａｓａｔｉｎｉｂ、Ｐａｚｏｐａｎｉｂ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ、Ａｘｉｔｉｎｉｂ、Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ、Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ Ｓ−ｍａｌａｔｅ、Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ、２−［［［２−［（ヒドロキシアセチル）アミノ］−４−ピリジニル］メチル］チオ］−Ｎ−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−３−ピリジンカルボキサミド等のチロシンキナーゼ阻害剤、ハイドロコルチゾン、トリアムシノロン、フルオシノロン、デキサメタゾン等のステロイド、イソプロピルウノプロストン等のプロスタグランジン、シクロスポリン、タクロリムス等の免疫抑制剤、インドメタシン、ブルムフェナク等の非ステロイド性抗炎症剤、パゾパニブ、ＳＵ５４１６、バラチニブ、ラニビズマブ、ベバシズマブ等の血管新生阻害薬、ニカルジピン、ニトレンジピン等の循環改善薬、ビタミンＥ等の抗酸化剤、アセタゾラミド、ブリンゾラミド等の炭酸脱水酵素阻害剤、チモロール、プロスタグランジン誘導体等の眼圧下降薬、各種ビタミンＡ誘導体等のビジュアルサイクルモジュレーター、毛様体栄養因子（ＣＮＴＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）等の栄養因子や神経成長因子（ＮＧＦ）、幹細胞増殖因子（ＨＧＦ）のような各種成長因子、ペガプタニブのようなアプタマー、各種アンチセンス核酸、ｓｉＲＮＡのような核酸医薬、ルセンティス等の抗体・ペプチド製剤、特開２００６−９６７３９、特開２０１１−３７８４４、特開２００５−２３２１４９、特開２００６−２７３８５１、特開２００６−３０６８６１、特開２００８−２６６２９４等に記載のＶＥＧＦ阻害剤、特開２００７−２３０９９３、特開２００８−０７４８２９、特開２００８−１４３８８９、特開２００８−１４３８９０、特開２００８−１４３８９１、特開２００９−００７３４４、特開２００９−０８４２７４等に記載のグルココルチコイド受容体結合活性を有する化合物、ＲＵ２４８５８等の選択的グルココルチコイド受容体アゴニスト、フルオロウラシル等の抗癌剤、トファシチニブ等のヤヌスキナーゼ阻害剤、ルボキシスタウリンメシレート等のプロテインキナーゼ阻害剤、リマチル、サラゾスルファサラジン、メトトレキサート、レフルノミド、シオゾール、コルベット、ハイドロキシクロロキン等の抗リウマチ薬、（＋）−３−アセチル−６−クロロ−２−［２−（３−（Ｎ−（２−エトキシエチル）−Ｎ−イソプロピルアミノ）プロポキシ）−５−メトキシフェニル］ベンゾチアゾリン−Ｏ，Ｏ’−ジアセチル−Ｌ−酒石酸塩、トラマドール等の鎮痛薬、ＩＬ−１ｒａ（及びＩＬ−１シグナル阻害剤）、グルコサミン、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤等その他軟骨保護作用を示す薬剤等が挙げられる。

本発明の非水性注射剤は、後述の非水性液状組成物を用いることができ、また、溶解型としてのみならず、懸濁液、乳化液等として調製することができるので、水に溶解しにくい薬物であっても好適に使用することができる。
薬物その他の有効成分は、単独又は２種以上組み合わせて用いることができる。

本発明の非水性注射剤の全体積に対する有効成分の含有量は、下限値として、０．０００１％（ｗ／ｖ）が好ましく、０．０５％（ｗ／ｖ）がより好ましい。また、本発明の非水性注射剤は薬物の徐放性に優れるため、比較的少量の薬物でも優れた治療／予防効果を奏することができるため、上記薬物の含有量は、上限値として、５０％（ｗ／ｖ）が好ましく、４０％（ｗ／ｖ）がより好ましく、３０％（ｗ／ｖ）が更に好ましく、２０％（ｗ／ｖ）が更により好ましい。本発明は、アスコルビン酸誘導体を基剤とするので、有効成分の濃度を低濃度から高濃度まで自由に設定することができる。

本発明の非水性注射剤としては、有効成分及びアスコルビン酸誘導体に加え、溶媒を含有するものが好ましい。溶媒としては、生体内に投与するものである場合、生理的に許容される溶媒が好ましい。溶媒としては、極性有機溶媒が好ましい。

極性有機溶媒としては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジメチルアセトアミド、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、ポリエチレングリコール（ポリエチレングリコール４００［ＰＥＧ４００］等）、エタノールが挙げられ、また、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、トリアセチン、トリプロピオニン等であってもよく、アセトン、アニソール、１−ブタノール、２−ブタノール、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、３−メチル−１−ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２−メチル−１−プロパノール、１−ペンタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、酢酸プロピル等であってもよい。

これらの溶媒は、単独又は２種以上組み合わせて用いることができ、例えば、ジメチルスルホキシドを単独で用いてもよく、ジメチルスルホキシドとベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、ポリエチレングリコール、エタノール等の他の溶媒とを組み合わせて用いてもよい。溶媒を２種以上用いる場合、各溶媒の混合比を選択することにより、有効成分の放出量、徐放特性を制御することができる。

本発明の非水性注射剤の全量に対する極性有機溶媒の含有量は、有効成分及びアスコルビン酸誘導体以外の全成分を極性有機溶媒とするものであってもよく、下限値としては、２０％（ｗ／ｗ）が好ましく、生体内等への投与の前にデポを形成しない観点で、３０％（ｗ／ｗ）がより好ましく、４０％（ｗ／ｗ）が更に好ましく、５０％（ｗ／ｗ）が更により好ましい。

本発明の非水性注射剤において、アスコルビン酸誘導体１００質量部に対する溶媒の含有量は、特に限定されないが、アスコルビン酸誘導体の溶解性の観点で、下限値として、１００質量部が好ましく、２００質量部がより好ましく、４００質量部が更に好ましく、上限値として、１０００質量部が好ましく、８００質量部がより好ましく、６００質量部が更に好ましい。

本発明の非水性注射剤は、生体内等への投与によりデポを形成することができる点で、含有する溶媒の実質的に全てが上述の極性有機溶媒であることが好ましく、水を含有しないことがより好ましい。本発明の非水性注射剤は、非水性液状組成物として調製することが好ましい。本明細書において、「非水性液状組成物」とは、実質的に水を含有しない液状組成物を意味し、不純物程度の痕跡量の水を含有する液状組成物であってもよいが、水を全く含有しない液状組成物であることが好ましい。
本発明の非水性注射剤は、非水性液状組成物として調製することにより、アスコルビン酸誘導体の分子がラメラ構造をとることなくばらばらの状態で極性有機溶媒に溶解しており、これを生体内等に投与すると、極性有機溶媒が体液等に含有される水に抜ける際にアスコルビン酸誘導体が水を含みつつ安定な分子配列であるコアゲルを形成するものと思われる。

本発明の非水性注射剤は、上記成分に加え、浸透圧調整剤、緩衝剤等を含んでもよい。

本発明の非水性注射剤は、澄明な製剤として調製することができる。非水性注射剤としては溶液であってもよいが、溶解型に限定されず、懸濁液、乳化液等であってもよい。

本発明の非水性注射剤は、適宜方法により製造することができ、特に限定されないが、例えば、アスコルビン酸誘導体に溶媒を加え、必要に応じて加温しながらアスコルビン酸誘導体を溶解、懸濁又は乳化し、有効成分を加え、均一に分散、懸濁又は溶解させて非水性注射剤を調製することができる。有効成分の懸濁は、固体の有効成分を十分粉砕したうえでアスコルビン酸誘導体及び溶媒に均一に分散させることにより、また、液状の有効成分を乳化することにより、行うことができる。乳化方法としては、界面化学的乳化方法、機械的乳化方法、膜乳化方法等が挙げられる。

本発明の非水性注射剤は、特に限定されないが、デポを形成することができる。デポを形成し、有効成分の徐放性を発揮することができる。本発明でデポが形成される条件は、体液（涙液、硝子体液等）、疑似体液又はリン酸緩衝液等への接触であってよく、各種条件に応じた処方及び投与方法を採用すればよい。本明細書において、体液、疑似体液又はリン酸緩衝液等に接触することとなる非水性注射剤の投与を「生体内等への投与」、「生体内等に投与した」等と総称することがある。例えば体液（涙液、硝子体液等）への接触でデポを形成する非水性注射剤は、体内へ注射投与すればよい。また、細胞株、人工皮膚等の各種試験片のほか、疑似体液又はリン酸緩衝液等の各種試験液等の試験対象に投与することもできる。これらの生体内等への投与により、各投与箇所においてデポが形成され、薬物が徐放されることになる。本発明の非水性注射剤は、局所投与に好適である。

本発明の非水性注射剤は、特に限定されないが、例えば、関節内投与用、硝子体内投与用、皮下投与用、筋肉内投与用、脊椎内投与用、脳室内投与用等に用いることができる。

本発明の非水性注射剤は、投与部位近傍でデポを形成することができるので、例えば硝子体内に投与すれば眼内の患部（例えば網脈絡膜、網膜）へ、また、関節内に投与すれば関節へと、薬物を効果的かつ持続的に供給することができる。

本発明の非水性注射剤は、例えば硝子体内に投与する場合、後眼部疾患の治療／予防に好適に使用することができる。後眼部疾患としては、種々の原因による炎症、ウイルスや細菌の感染症、網膜脈絡膜の血管新生、血管透過性亢進に起因する疾患、網膜脈絡膜の腫瘍性疾患、網膜膜脈絡膜の遺伝性疾患、緑内障に起因する視神経障害が挙げられる。更に具体的には、眼内炎、ぶどう膜炎、サイトメガロウイルス網膜炎、加齢性黄斑変性症、糖尿病性網膜症、増殖性硝子体網膜症、網膜静脈閉塞症、網膜動脈閉塞症、網膜剥離、中心性漿液性網脈絡膜症、網膜芽細胞腫、網膜色素変性症、黄斑ジストロフィー、コロイデレミア、色盲、先天網膜分離症、緑内障に伴う視野狭窄、視野欠損等が挙げられる。ただし、本発明の非水性注射剤は、薬物や投与方法に応じ、種々の疾患の治療／予防に使用されてよい。

有効成分、アスコルビン酸誘導体及び溶媒を含有する液状組成物を体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポを形成する方法もまた、本発明の一つである。溶媒としては、液状組成物の全量に対し３０％（ｗ／ｗ）超の極性有機溶媒であることが好ましく、上述した極性有機溶媒の好ましい含有量及び例示を適用することができる。液状組成物としては、非水性液状組成物が好ましく、上述の非水性注射剤として用いることができる。

有効成分及びアスコルビン酸誘導体を含有する液状組成物を、アスコルビン酸誘導体の臨界ミセル温度以下の温度において体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポを形成する方法もまた、本発明の一つである。液状組成物は、上述の溶媒を更に含有するものが好ましく、非水性液状組成物であることが好ましい。本発明において、液状組成物は、デポを形成するためにアスコルビン酸誘導体の臨界ミセル温度を超える温度にまで加温する必要がなく、体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させるだけでもデポを形成することができるので、非水性注射剤として好適であり、特に、生体内に投与後に上記加温が必要ない点でも非水性注射剤として望ましい。

（１）製剤例１〜２
製剤例１
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇに、ジメチルスルホキシド（以下、「ＤＭＳＯ」とする。）１０００ｍｇを加え、加温しながら溶解した。メスフラスコにトリアムシノロンアセトニド１０ｍｇを入れ、この６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸溶液を加え１ｍＬにメスアップし、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例２
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇに代えて６−Ｏ−ステアロイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−ステアロイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性試験
製剤例１及び２で得た各製剤１００μＬを１０ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ；シグマ アルドリッチ社製）に投入し、３７℃でインキュベートした。いずれの製剤も、リン酸緩衝液に投入後、デポを形成した。経時的にリン酸緩衝液を回収し、高速液体クロマトグラフィーを用いてリン酸緩衝液中の薬物濃度を測定した。
製剤例１及び２で得た各製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を図１に示す。

図１から、一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体のｎが大きくなれば、製剤の徐放性が向上する傾向があることが示唆される。

（２）製剤例３〜６
製剤例３
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇに、ＤＭＳＯ ７５０ｍｇとベンジルアルコール２５０ｍｇを加え、加温しながら溶解した。メスフラスコにトリアムシノロンアセトニド１０ｍｇを入れ、この６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸溶液を加え１ｍＬにメスアップし、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例４
ＤＭＳＯ ７５０ｍｇに代えてＤＭＳＯ ５００ｍｇを用い、また、ベンジルアルコール２５０ｍｇに代えてベンジルアルコール５００ｍｇを用いること以外は製剤例３と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例５
ベンジルアルコール２５０ｍｇに代えて安息香酸ベンジル２５０ｍｇを用いること以外は製剤例３と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例６
ベンジルアルコール５００ｍｇに代えて安息香酸ベンジル５００ｍｇを用いること以外は製剤例４と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性試験
製剤例３〜６で得た各製剤１００μＬを１０ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入し、３７℃でインキュベートした。どの製剤も、リン酸緩衝液に投入後、デポを形成した。経時的にリン酸緩衝液を回収し、高速液体クロマトグラフィーを用いてリン酸緩衝液中の薬物濃度を測定した。
製剤例３〜６で得た各製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を図２に示す。

図２から、製剤に用いる溶媒を混合溶媒とすることで任意の薬物放出量に調整することが可能となることがわかった。

（４）製剤例７〜９
製剤例７
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇに、ＤＭＳＯ ７５０ｍｇとポリエチレングリコール４００（以下、「ＰＥＧ４００」とする。）２５０ｍｇを加え、加温しながら溶解した。メスフラスコにトリアムシノロンアセトニド１０ｍｇを入れ、この６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸溶液を加え１ｍＬにメスアップし、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例８
ＤＭＳＯ ７５０ｍｇに代えてＤＭＳＯ ５００ｍｇを用い、また、ＰＥＧ４００ ２５０ｍｇに代えてＰＥＧ４００ ５００ｍｇを用いること以外は製剤例７と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例９
ＤＭＳＯ ７５０ｍｇに代えてＤＭＳＯ ２５０ｍｇを用い、ＰＥＧ４００ ２５０ｍｇに代えてＰＥＧ４００ ７５０ｍｇを用いること以外は製剤例７と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性試験
製剤例７〜９で得た各製剤１００μＬを１０ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入し、３７℃でインキュベートした。どの製剤も、リン酸緩衝液に投入後、デポを形成した。経時的にリン酸緩衝液を回収し、高速液体クロマトグラフィーを用いてリン酸緩衝液中の薬物濃度を測定した。
製剤例７〜９で得た各製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を図３に示す。

図３から、製剤に用いる混合溶媒は、各溶媒の混合比を変化させることで薬物放出量を制御できることがわかった。

（５）製剤例１０
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸 ２００ｍｇに、ＤＭＳＯ １０００ｍｇを加え、加温しながら溶解した。メスフラスコに （＋）−３−アセチル−６−クロロ−２−［２−（３−（Ｎ−（２−エトキシエチル）−Ｎ−イソプロピルアミノ）プロポキシ）−５−メトキシフェニル］ベンゾチアゾリン−Ｏ，Ｏ’−ジアセチル−Ｌ−酒石酸塩（以下、「化合物Ａ」とする。）１０ｍｇを入れ、この６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸溶液を加え１ｍＬにメスアップし、１％化合物Ａ含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性試験
製剤例１０で得た製剤１００μＬを１０ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入し、３７℃でインキュベートした。この製剤は、リン酸緩衝液に投入後、デポを形成した。経時的にリン酸緩衝液を回収し、高速液体クロマトグラフィーを用いてリン酸緩衝液中の薬物濃度を測定した。
製剤例１０で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を図４に示す。

（６）製剤例１１
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇに、ＤＭＳＯ １０００ｍｇを加え、加温しながら溶解した。メスフラスコにメチレンブルー１ｍｇを入れ、この６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸溶液を加え１ｍＬにメスアップし、０．１％メチレンブルー含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける色素放出特性試験
製剤例１１で得た製剤１００μＬを５ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入し、３７℃でインキュベートした。この製剤は、リン酸緩衝液に投入後、デポを形成した。経時的にリン酸緩衝液を回収し、マイクロプレートリーダーを用いてリン酸緩衝液中の色素濃度を測定した。
製剤例１１で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を図５に示す。

（７）製剤例１２
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇに、ＤＭＳＯ １０００ｍｇを加え、加温しながら溶解した。メスフラスコにプレニルアミン乳酸塩１０ｍｇを入れ、この６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸溶液を加え１ｍＬにメスアップし、１％プレニルアミン乳酸塩含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性試験
製剤例１２で得た製剤１００μＬを１０ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入し、３７℃でインキュベートした。この製剤は、リン酸緩衝液に投入後、デポを形成した。経時的にリン酸緩衝液を回収し、高速液体クロマトグラフィーを用いてリン酸緩衝液中の薬物濃度を測定した。
製剤例１２で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を図６に示す。

（８）製剤例１３
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇに、ＤＭＳＯ １０００ｍｇを加え、加温しながら溶解した。メスフラスコに２−［［［２−［（ヒドロキシアセチル）アミノ］−４−ピリジニル］メチル］チオ］−Ｎ−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−３−ピリジンカルボキサミド（以下、「化合物Ｂ」とする。）５０ｍｇを入れ、この６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸溶液を加え１ｍＬにメスアップし、５％化合物Ｂ含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性試験
製剤例１３で得た製剤２０μＬを５０ｍＬの１％モノステアリン酸ポリエチレングリコール（ＭＹＳ４０）含有１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入し、３７℃でインキュベートした。この製剤は、リン酸緩衝液に投入後、デポを形成した。経時的にリン酸緩衝液を回収し、高速液体クロマトグラフィーを用いてリン酸緩衝液中の薬物濃度を測定した。
製剤例１３で得た製剤のｉｎ ｖｉｔｒｏにおける薬物放出特性を図７に示す。

（９）製剤例１４〜２２
製剤例１４
トリアムシノロンアセトニド１０ｍｇに代えてフルオレセイン１ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、０．１％フルオレセイン含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例１５
トリアムシノロンアセトニド１０ｍｇに代えてアトロピン硫酸塩１０ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、１％アトロピン硫酸塩含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例１６
トリアムシノロンアセトニド１０ｍｇに代えてインドメタシン１０ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、１％インドメタシン含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例１７
トリアムシノロンアセトニド１０ｍｇに代えてジフェンヒドラミン塩酸塩１０ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして１％ジフェンヒドラミン塩酸塩含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例１８
トリアムシノロンアセトニド１０ｍｇに代えてチモロールマレイン酸塩１０ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、１％チモロールマレイン酸塩含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例１９
トリアムシノロンアセトニド１０ｍｇに代えてプロプラノロール塩酸塩１０ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、１％プロプラノロール塩酸塩含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例２０
トリアムシノロンアセトニド１０ｍｇに代えてトリアムシノロンアセトニド２００ｍｇ用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、２０％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例２１
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン２００ｍｇに代えて６−Ｏ−ラウロイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−ラウロイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

製剤例２２
６−Ｏ−パルミトイル−Ｌ−アスコルビン２００ｍｇに代えて６−Ｏ−イコサノイル−Ｌ−アスコルビン酸２００ｍｇを用いること以外は製剤例１と同様の操作をして、１％トリアムシノロンアセトニド含有６−Ｏ−イコサノイル−Ｌ−アスコルビン酸製剤を調製した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおけるデポ形成試験
製剤例１４〜２２で得た各製剤１００μＬを５ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入したところ、どの製剤もデポを形成した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏにおけるデポ形成試験
製剤例１、２及び７で得た各製剤１００μＬを５ｍＬの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）（ダルベッコＰＢＳ）に投入したところ、どの製剤もデポを形成した。製剤例１、２及び７で得た各製剤を用いて生じたデポの写真をそれぞれ図８、図９及び図１０に示す。

Claims (8)

1. 有効成分と下記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体とを含有する非水性注射剤。
   （上記式中、ｎは６〜２２の整数を表す。）
2. 前記非水性注射剤の全体積に対し、前記有効成分の含有量は０．０００１〜５０％（ｗ／ｖ）、前記アスコルビン酸誘導体の含有量は０．１〜８０％（ｗ／ｗ）である請求項１記載の非水性注射剤。
3. 前記非水性注射剤は、体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触してデポを形成するものである請求項１又は２記載の非水性注射剤。
4. 前記非水性注射剤の全量に対し、２０％（ｗ／ｗ）以上の極性有機溶媒を更に含有する請求項１から３いずれか１項記載の非水性注射剤。
5. 前記非水性注射剤は、関節内投与用、硝子体内投与用、皮下投与用、筋肉内投与用、脊椎内投与用又は脳室内投与用である請求項１から４いずれか１項記載の非水性注射剤。
6. 前記非水性注射剤は、関節、網脈絡膜又は網膜への前記有効成分の供給に用いられる請求項１から５いずれか１項記載の非水性注射剤。
7. 有効成分、下記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体、及び、液状組成物の全量に対し３０％（ｗ／ｗ）超の極性有機溶媒を含有する液状組成物を体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポ形成方法。
   （上記式中、ｎは６〜２２の整数を表す。）
8. 有効成分及び下記一般式で表わされるアスコルビン酸誘導体を含有する液状組成物を前記アスコルビン酸誘導体の臨界ミセル温度以下の温度において体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポ形成方法。
   （上記式中、ｎは６〜２２の整数を表す。）