JP2015166317A - Blood sugar level elevation inhibitor, agent for suppressing blood pressure elevation, and extraction method of persimmon calyx - Google Patents

Blood sugar level elevation inhibitor, agent for suppressing blood pressure elevation, and extraction method of persimmon calyx Download PDF

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千賀 折居
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千賀 折居
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a drug containing an active ingredient having a novel functionality except to stop hiccups or antibacterial activity, in a calyx part of persimmon which is usually destroyed, in order to aim at effective utilization of persimmon, and to provide an extraction method of the active ingredient.SOLUTION: The invention provide a blood sugar level elevation inhibitor and an agent for suppressing blood pressure elevation which contain alcohol extract from persimmon calyx as an active ingredient, and an extraction method of persimmon calyx comprising an extraction step of contacting persimmon calyx with alcohol to extract an active ingredient.

Description

本発明は、柿蔕の抽出物を有効成分とする血糖値上昇抑制剤、血圧上昇抑制剤および柿蔕の抽出方法に関する。   The present invention relates to a blood sugar level increase inhibitor, a blood pressure increase inhibitor, and a method for extracting sputum, which contain a sputum extract as an active ingredient.

柿は、通常、柿果実や柿果実を用いた加工食品を食用とするため、広く栽培されている。柿の果実を食用とする際には、果実以外の蔕(ヘタ)などを分離して果実部分を使用していた。柿の利用については、例えば以下のことが公知である。   In general, persimmons are widely cultivated because edible fruits and processed foods using persimmon fruits are edible. When edible berries are used, the fruit portion is used after separating the berries other than fruits. Regarding the use of soot, for example, the following is known.

特許文献1には、柿果肉、剥いた柿皮、柿蔕を任意の配合比率で配合して加工することが記載してある。特許文献2には、未成熟柿の果実と蔕とを分離して当該蔕を除去することが記載してある。
柿の蔕部分は柿蒂(シテイ)と呼ばれ、柿蒂湯といわれる漢方薬として広く流通している。柿蒂湯の主な効能はシャックリ(吃逆)止めである。柿蒂湯に関しては、非特許文献1に、強直性間代性てんかんに対する柿蒂湯の効果について記載されている。
また、非特許文献2には、柿蔕に含まれるとされるウルソール酸、オレアノール酸に関して、虫歯菌に対する抗菌活性を有することが記載してある。
Patent Document 1 describes that cocoon pulp, peeled husk, and cocoon are mixed and processed at an arbitrary mixing ratio. Patent Document 2 describes that the fruit and cocoon of an immature cocoon are separated and the cocoon is removed.
The cocoon part of the cocoon is called cyte and is widely distributed as a traditional Chinese medicine called Sakaiyu. The main effect of Tsukuyu is to prevent shacking. Concerning Saito, Non-Patent Document 1 describes the effect of Saito on tonic clonic epilepsy.
Non-Patent Document 2 describes that ursolic acid and oleanolic acid, which are supposed to be contained in sputum, have antibacterial activity against caries.

特開2006−288373号公報JP 2006-288373 A 特開2008−63332号公報JP 2008-63332 A

Minami E, Shibata H, Nomoto M, Fukuda T., “Effect of shitei-to, a traditional Chinese medicine formulation, on pentylenetetrazol-induced kindling in mice.” Phytomedicine. 2000 Mar;7(1):69-72.Minami E, Shibata H, Nomoto M, Fukuda T., “Effect of shitei-to, a traditional Chinese medicine formulation, on pentylenetetrazol-induced kindling in mice.” Phytomedicine. 2000 Mar; 7 (1): 69-72. 小西ら、「齲蝕原因菌に対する柿蔕抽出成分の抗菌効果」、日本歯科保存学雑誌 51(3), 299-307, 2008-06-30Konishi et al., “Antimicrobial effect of sputum extract against caries-causing bacteria”, Japanese Dental Conservation Journal 51 (3), 299-307, 2008-06-30

上述したように、柿は、果実だけにとどまらず、果皮や蔕部分にも用途がある。しかし、殆どの場合が柿の果実を対象とした食用に利用されるため、特に蔕部分については、除去された後に殆どが破棄されている。   As described above, strawberries are used not only for fruits but also for skins and strawberries. However, since most cases are used for edible fruits, the most part of the cocoon part is discarded after the removal.

従って、本発明の目的は、柿の有効利用を図るため、通常は破棄されている蔕部分において、シャックリ止めや抗菌活性以外の新たな機能性を有する有効成分を含有する薬剤および当該有効成分を抽出する抽出方法を提供することにある。   Accordingly, an object of the present invention is to provide a drug containing an active ingredient having a new functionality other than shack prevention and antibacterial activity, and the active ingredient in a portion of the heel that is usually discarded in order to effectively use the heel. It is to provide an extraction method for extraction.

本発明者らは柿の蒂部分の更なる有効利用について検討した結果、柿の蔕をアルコールで処理して得られた抽出物を有効成分とする組成物が、血糖値上昇抑制作用および血圧上昇抑制作用を有することを見出した。   As a result of studying further effective utilization of the cocoon part of the cocoon, the present inventors have found that a composition comprising an extract obtained by treating cocoon cocoon with alcohol as an active ingredient has an effect of suppressing an increase in blood glucose level and an increase in blood pressure. It was found to have an inhibitory action.

即ち、上記目的を達成するため、以下の[1]〜[3]に示す発明を提供する。
[1]柿蔕のアルコール抽出物を有効成分とする血糖値上昇抑制剤。
[2]柿蔕のアルコール抽出物を有効成分とする血圧上昇抑制剤。
[3]柿蔕をアルコールに接触させて有効成分を抽出する抽出工程を有する柿蔕の抽出方法。
That is, in order to achieve the above object, the following inventions [1] to [3] are provided.
[1] A blood sugar level increase inhibitor comprising an alcoholic extract of salmon as an active ingredient.
[2] An antihypertensive agent comprising an alcoholic extract of salmon as an active ingredient.
[3] A method for extracting cocoons having an extraction step of extracting active ingredients by bringing the cocoons into contact with alcohol.

本発明の血糖値上昇抑制剤および血圧上昇抑制剤は、柿蔕をアルコールで抽出して得られた抽出物に含まれる成分を有効成分とする。   The blood sugar level increase inhibitor and blood pressure increase inhibitor of the present invention have, as an active ingredient, a component contained in an extract obtained by extracting salmon with alcohol.

血糖値上昇抑制剤は、例えば腸内でα-グルコシダーゼ阻害活性の働きを阻害し、糖の分解・吸収を阻害するα-グルコシダーゼ阻害活性を有するものであり、有効量の血糖値上昇抑制剤を摂取することで、血糖値の上昇を抑制することが期待される。   A blood sugar level increase inhibitor, for example, has an α-glucosidase inhibitory activity that inhibits the action of α-glucosidase inhibitory activity in the intestine and inhibits the decomposition and absorption of sugar. Ingestion is expected to suppress an increase in blood glucose level.

血圧上昇抑制剤は、例えば血圧の上昇に関与するアンジオテンシン変換酵素(ACE)を阻害するアンジオテンシン変換酵素阻害活性を有するものであり、有効量の血圧上昇抑制剤を摂取することで、血圧の上昇を抑制することが期待される。   An antihypertensive agent, for example, has an angiotensin converting enzyme inhibitory activity that inhibits angiotensin converting enzyme (ACE) involved in an increase in blood pressure. By taking an effective amount of an antihypertensive agent, an increase in blood pressure can be achieved. It is expected to be suppressed.

本発明で使用する柿は、食用の果実として広く栽培されているものであり、入手は容易である。また、本発明は、通常は破棄されている柿の蔕部位を有効利用しているため、材料費を抑制することができる。また、アルコール抽出に際してそのまま利用可能であり、必要に応じて切断・粉砕処理を行えばよいため、取り扱いも容易である。   The koji used in the present invention is widely cultivated as an edible fruit and is easily available. Moreover, since the present invention effectively uses the wrinkle part of the wrinkle that is normally discarded, the material cost can be reduced. In addition, it can be used as it is for alcohol extraction, and can be easily handled because it can be cut and pulverized as necessary.

本発明で使用するアルコールは、抽出物を医薬品や食品として利用することを鑑みると、入手が容易、かつ人体に対する安全性を備えたエタノール等を用いるのがよい。   In view of using the extract as a pharmaceutical or food, the alcohol used in the present invention is preferably ethanol or the like that is easy to obtain and has safety to the human body.

即ち、本発明により、破棄されていた蔕を有効利用できるとともに、簡易なアルコール抽出を行うことのみで、血糖値上昇抑制作用および血圧上昇抑制作用という新たな機能性を有する有効成分を含有する薬剤を容易に得ることができる。   That is, according to the present invention, a drug containing an active ingredient having new functionalities such as a blood glucose level increase suppressing action and a blood pressure increase suppressing action can be used effectively by simply discarding sputum that has been discarded. Can be easily obtained.

薄層クロマトグラフィー(TLC)分析を行った結果を示す写真図である。It is a photograph figure which shows the result of having performed the thin layer chromatography (TLC) analysis. 薄層クロマトグラフィー(TLC)分析を行った結果を示す写真図である。It is a photograph figure which shows the result of having performed the thin layer chromatography (TLC) analysis. GC−MS分析を行った結果を示す図である。It is a figure which shows the result of having performed GC-MS analysis.

以下、本発明の実施形態を図面に基づいて説明する。
本発明は、柿の蒂部分の更なる有効利用を図るため、柿蔕をアルコールで処理して得られた抽出物を有効成分とする組成物を、血糖値上昇抑制剤或いは血圧上昇抑制剤として利用するものである。
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings.
The present invention uses a composition containing an extract obtained by treating cocoon with alcohol as an active ingredient for further effective utilization of the cocoon part of the cocoon as an inhibitor of blood sugar level increase or blood pressure increase. It is what you use.

本発明で使用する柿の部位は、果実以外の蔕部分である。蔕は、花弁が枯れ果実が熟したあとにも枯れずについている萼(宿存萼)のことをいう。用いられる柿の品種に特に制限はなく、分類学上でDiospyros kakiに属するものであれば何れも用いることができるが、入手が容易である等の理由から、例えば富有柿や次郎柿等とするのがよい。柿は、通常の収穫時期よりも早い時期に収穫された幼果(着果後30〜60日程度)、或いは、通常の収穫時期に収穫された成熟果実(着果後150〜180日程度)を利用するのがよい。収穫した柿から果実を取り除いて蔕を採取し、当該蔕を乾燥或いは非乾燥状態として利用する。蔕を乾燥する場合は、公知の手法及び装置により乾燥処理を行えばよい。また、採取された蔕は、そのままの形態で、或いは適宜切断・粉砕する等して利用する。蔕を切断・粉砕する場合は、公知の手法及び装置により切断・粉砕処理を行えばよい。   The part of the cocoon used in the present invention is a cocoon part other than the fruit. Persimmon refers to a persimmon that is not withered even after the petals have dried up and the fruit has ripened. There are no particular restrictions on the variety of koji used, and any taxonically belonging to Diospyros kaki can be used, but for reasons such as easy availability, it is named, for example, Fuyucho or Jiro It is good. Persimmons are young fruits harvested earlier than the normal harvest time (about 30 to 60 days after fruit set) or mature fruits harvested at the normal harvest time (about 150 to 180 days after fruit set) It is good to use. Fruits are removed from the harvested cocoons to collect cocoons, and the cocoons are used in a dry or non-dried state. What is necessary is just to perform a drying process with a well-known method and apparatus, when drying a straw. The collected cocoons are used in the form as they are or after being appropriately cut and crushed. In the case of cutting and pulverizing the scissors, the cutting and pulverizing process may be performed by a known method and apparatus.

得られた柿蔕はアルコールによって処理される。本発明で利用できるアルコールは、例えばメタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ブタノール、イソブタノール等の低級アルコール等がよい。また、これらアルコールおよび水の混合溶液、上述した複数のアルコールおよび水を混合した溶液、或いは、上述したアルコールの複数を混合した溶液を利用してもよい。アルコールおよび水の混合比率は特に限定されるものではない。本明細書では、アルコールとして100%エタノールを使用した場合について説明する。   The obtained soot is treated with alcohol. The alcohol that can be used in the present invention is preferably a lower alcohol such as methanol, ethanol, propyl alcohol, isopropyl alcohol, butanol, and isobutanol. Moreover, you may utilize the mixed solution of these alcohol and water, the solution which mixed several alcohol mentioned above, and water, or the solution which mixed multiple said alcohol. The mixing ratio of alcohol and water is not particularly limited. In this specification, the case where 100% ethanol is used as the alcohol will be described.

本発明の柿蔕の抽出方法は、柿蔕をエタノールに接触させて有効成分を抽出する抽出工程を有する。当該抽出工程では、採取後に上述した処理を適宜行った柿蔕に対してエタノールを接触させ、浸漬、攪拌又は還流することにより、抽出物(抽出液)を得る。   The method for extracting sputum according to the present invention includes an extraction step in which the active ingredient is extracted by bringing the sputum into contact with ethanol. In the extraction step, an extract (extract) is obtained by bringing ethanol into contact with the soot that has been appropriately subjected to the above-described treatment after collection and immersing, stirring, or refluxing.

抽出条件として、抽出温度に関しては、抽出に用いる溶媒の凝固点以上から沸点以下であれば任意に設定が可能であり、好ましくは柿蒂中に含まれる成分の変性や反応による消失等が生じ難く、かつ抽出効率が比較的良好な常温〜溶媒の沸点の温度範囲とするのがよい。抽出圧力に関しては、具体的には1.0〜2.5kg/cmの範囲内で適宜設定するのがよい。柿蒂に対する溶媒の重量比率は、例えば柿蒂:溶媒を2:1〜1:50の範囲内で任意に設定することができるが、これに限定されるものではない。抽出時間に関しては特に制限はなく、好ましくは数時間から数日とするのがよい。 As the extraction conditions, the extraction temperature can be arbitrarily set as long as it is not lower than the boiling point and lower than the freezing point of the solvent used for extraction, and preferably, the components contained in the soot are not easily denatured or lost due to the reaction. And it is good to set it as the temperature range from the normal temperature to the boiling point of a solvent with comparatively favorable extraction efficiency. Specifically, the extraction pressure is suitably set within a range of 1.0 to 2.5 kg / cm 2 . The weight ratio of the solvent to the soot can be arbitrarily set, for example, soot: solvent in the range of 2: 1 to 1:50, but is not limited thereto. There is no particular limitation on the extraction time, and preferably several hours to several days.

柿蒂の抽出物は上述した溶媒及び抽出条件によって得られた抽出物(抽出液)をそのまま利用してもよいが、当該抽出液を更に精製して用いることも可能である。精製方法としては、具体的には濾紙やメンブランフィルター等を用いた濾過法、分液操作法、蒸留法、昇華法、沈殿法、再結晶化法、遠心分離法、減圧濃縮法、pH調製、塩析等の方法が挙げられ、これらの方法の1種もしくは2種以上が選択されるが、これらの手法に限定されるものではない。   The extract of koji may use the extract (extract) obtained by the above-described solvent and extraction conditions as it is, but the extract can be further purified and used. As a purification method, specifically, a filtration method using a filter paper or a membrane filter, a liquid separation operation method, a distillation method, a sublimation method, a precipitation method, a recrystallization method, a centrifugal separation method, a vacuum concentration method, a pH adjustment, Although methods, such as salting out, are mentioned and 1 type or 2 types or more of these methods are selected, It is not limited to these methods.

また、得られた抽出物(抽出液)は、適当な溶媒で希釈したり、濃縮して用いてもよく、さらに減圧乾固する等して乾燥粉末としたり、ペースト状に調製してもよい。   Further, the obtained extract (extract) may be diluted with an appropriate solvent, concentrated and used, or further dried under reduced pressure to obtain a dry powder or may be prepared in a paste form. .

このようにして調製された柿蔕の抽出物に、水、アルコール類、多価アルコール類、界面活性剤、酸、アルカリ、増粘剤、賦形剤、防腐剤等を添加した組成物とすることも可能である。当該組成物の形状として、液状である他、固形状、粉末状、顆粒状、ペレット状、ゲル状、粘液状等とすることができる。   A composition obtained by adding water, alcohols, polyhydric alcohols, surfactants, acids, alkalis, thickeners, excipients, preservatives, etc. to the koji extract prepared in this way. It is also possible. The shape of the composition may be liquid, solid, powder, granule, pellet, gel, mucous, or the like.

当該組成物は、医薬品として経口、経腸、経粘膜、注射等により投与できる。その投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与又は静脈内注射、筋肉注射剤、坐剤、吸入薬、経皮吸収剤、点眼剤、点鼻剤等による非経口投与が挙げられる。また、このような種々の剤型の医薬製剤を調製するには、上述した組成物に、さらに薬学的に許容される賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等を適宜組み合わせて添加することができる。投与形態のうち、好ましい形態は経口投与であり、経口投与用製剤として用いる場合の該製剤中の柿蔕の抽出物の含有量は、例えば0.1〜70質量%程度とすることが好ましい。   The composition can be administered as a pharmaceutical by oral, enteral, transmucosal, injection or the like. Examples of the administration form include oral administration or intravenous injection such as tablets, capsules, granules, powders, syrups, etc., intramuscular injections, suppositories, inhalants, percutaneous absorption agents, eye drops, nasal drops, etc. Parenteral administration. In order to prepare pharmaceutical preparations of such various dosage forms, the above-described composition is further added to a pharmaceutically acceptable excipient, binder, extender, disintegrant, lubricant, and dispersant. , Buffering agents, preservatives, flavoring agents, fragrances, coating agents, carriers, diluents, and the like can be added in appropriate combinations. Among the administration forms, the preferred form is oral administration, and the content of the extract of sputum in the preparation when used as a preparation for oral administration is preferably about 0.1 to 70% by mass, for example.

医薬として使用する場合、成人1人当たりの1日の投与量は、年齢、体重、性別、投与方法などの種々の要因によって異なるが、経口投与の場合は上記植物体又はその抽出物(固形分換算)として、例えば0.1〜5000mgを1日1回〜数回に分けて投与することが好ましい。   When used as a medicine, the daily dose per adult varies depending on various factors such as age, weight, sex, and administration method, but in the case of oral administration, the above plant or extract thereof (in terms of solid content) ), For example, 0.1 to 5000 mg is preferably administered once a day to several times a day.

当該組成物は、食品として用いる場合の形態としては、上述した経口投与製剤と同様の形態(錠剤、カプセル剤、シロップ等)が挙げられる。また、前記組成物は、種々の飲料、スナック類、乳製品、調味料、でんぷん加工製品、加工肉製品等に適宜配合してもよい。   In the case of using the composition as a food, the same form (tablet, capsule, syrup, etc.) as the above-mentioned oral administration preparation can be mentioned. The composition may be appropriately blended in various beverages, snacks, dairy products, seasonings, processed starch products, processed meat products, and the like.

種々の形態の食料品を調製するには、上述した抽出物あるいは組成物に、さらに他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて添加することができる。柿蔕中の有効成分を効率よく利用するため、工業的にも用いることが容易で、食品の風味を損なわない形態として、抽出物に前記添加物を添加するのが好ましい。当該食料品中の柿蔕の抽出物の含有量は、一般的に例えば0.002〜5質量%程度とすることが好ましい。   In order to prepare various forms of food products, the above-mentioned extract or composition is further added to other food materials, solvents, softeners, oils, emulsifiers, preservatives, fragrances, stabilizers, colorants, ultraviolet rays. Absorbers, antioxidants, humectants, thickeners, and the like can be added in appropriate combinations. In order to efficiently use the active ingredient in the koji, it is easy to use industrially and it is preferable to add the additive to the extract as a form that does not impair the flavor of the food. In general, the content of the koji extract in the food product is preferably about 0.002 to 5% by mass, for example.

本発明において、柿蔕をエタノール等のアルコールで処理して得られた抽出物を有効成分とする組成物は、血糖値上昇抑制作用および血圧上昇抑制作用を有する。即ち、当該組成物は、柿蔕のアルコール抽出物を有効成分とする血糖値上昇抑制剤或いは血圧上昇抑制剤として利用することができる。   In the present invention, a composition comprising an extract obtained by treating salmon with an alcohol such as ethanol as an active ingredient has an effect of suppressing an increase in blood glucose level and an effect of suppressing an increase in blood pressure. That is, the composition can be used as a blood glucose level increase inhibitor or a blood pressure increase suppressant, which contains a salmon alcohol extract as an active ingredient.

血糖値上昇抑制作用は、例えば腸内でα-グルコシダーゼ阻害活性の働きを阻害し、糖の分解・吸収を阻害するα-グルコシダーゼ阻害活性を有することにより達成される。α-グルコシダーゼ(AGH)はデンプンが分解されて生じるマルトースなどの二糖類を分解してグルコースにする。このグルコースが血液中に入ると血糖値が上昇する。そのためAGHを阻害することは、生じるグルコース量を減らし血糖値の上昇を抑制することができると考えられている。α-グルコシダーゼ阻害活性は、例えばラット小腸由来酵素を用いて評価することができる。   The inhibitory action on the increase in blood glucose level is achieved, for example, by having an α-glucosidase inhibitory activity that inhibits the action of α-glucosidase inhibitory activity in the intestine and inhibits the decomposition and absorption of sugar. α-Glucosidase (AGH) breaks down disaccharides such as maltose produced by breaking down starch into glucose. When this glucose enters the blood, the blood sugar level rises. Therefore, it is considered that inhibiting AGH can reduce the amount of glucose produced and suppress an increase in blood glucose level. The α-glucosidase inhibitory activity can be evaluated using, for example, a rat small intestine-derived enzyme.

血圧上昇抑制作用は、例えば血圧の上昇に関与するアンジオテンシン変換酵素(ACE)を阻害するアンジオテンシン変換酵素阻害活性を有することにより達成される。血圧上昇には昇圧機構(レニン・アンジオテンシン系)と降圧機構(キニン・カリクレイン系)が関与しており、アンジオテンシン変換酵素は両方の系に作用する酵素である。アンジオテンシン変換酵素により、アンジオテンシンIは血管収縮作用を有するアンジオテンシンIIに変換される。さらに、同酵素は血圧を下げるブラジキニンを不活性化させる作用も有しており、これら2つの系の作用が血圧上昇に関与する。そのためアンジオテンシン変換酵素を阻害することで、血圧の上昇を抑制することができると考えられている。アンジオテンシン変換酵素阻害活性は、3-Hydroxybutyryl-Gly-Gly-Gly (3HB-GGG) から切り出されてくる 3-Hydroxybutyric acid (3HB) を酵素法により検出することができる。   The blood pressure increase inhibitory effect is achieved, for example, by having an angiotensin converting enzyme inhibitory activity that inhibits angiotensin converting enzyme (ACE) involved in increasing blood pressure. An increase in blood pressure involves a pressor mechanism (renin / angiotensin system) and an antihypertensive mechanism (kinin / kallikrein system), and angiotensin converting enzyme is an enzyme that acts on both systems. Angiotensin I is converted to angiotensin II having a vasoconstrictive action by an angiotensin converting enzyme. Furthermore, the enzyme also has an action of inactivating bradykinin that lowers blood pressure, and the action of these two systems is involved in the increase of blood pressure. Therefore, it is considered that an increase in blood pressure can be suppressed by inhibiting angiotensin converting enzyme. The angiotensin converting enzyme inhibitory activity can be detected by enzymatic method of 3-Hydroxybutyric acid (3HB) excised from 3-Hydroxybutyryl-Gly-Gly-Gly (3HB-GGG).

また、上述した組成物は、抗肥満作用、抗酸化活性を有する。
抗肥満効果は、腸内でβ-リパーゼの働きを阻害し、脂肪の分解・吸収を阻害するβ-リパーゼ阻害活性を有することにより達成される。抗酸化活性は、酸素が関与する有害な反応を減弱もしくは除去する活性を有する。
Moreover, the composition mentioned above has anti-obesity action and antioxidant activity.
The anti-obesity effect is achieved by having β-lipase inhibitory activity that inhibits the action of β-lipase in the intestine and inhibits the decomposition and absorption of fat. Antioxidant activity has the activity of diminishing or eliminating harmful reactions involving oxygen.

〔実施例1〕
富有柿および次郎柿の幼果および成熟果をそれぞれ別の時期に採取し、採取後、ただちに果皮、果実、種子、蔕部位に分けて−80℃にて保存した。比較例として、漢方薬である「柿蔕(シテイ、中国産)」(以下、漢方薬柿蔕と称する)は市販のものを購入した((株)中屋彦十郎薬局より入手可能)。
[Example 1]
The fruit and mature fruits of Fuyu and Jiro are collected at different times, and immediately after collection, they are divided into pericarp, fruits, seeds, and cocoon parts and stored at -80 ° C. As a comparative example, a Chinese herbal medicine “柿蔕 (City, Made in China)” (hereinafter referred to as “Chinese herbal medicine”) was purchased commercially (available from Nakaya Hikojuro Pharmacy).

富有柿および次郎柿の幼果および成熟果において、それぞれ3.0gの柿蔕を30mLの100%エタノールに接触させ、4℃にて3日間抽出した(抽出工程)。抽出液を45〜50℃、180分の条件で減圧乾固したのち、得られた抽出物を10重量%となるように100%エタノールに再溶解し(エタノール画分)、試料溶液とした。このとき、エタノールに不溶かつ水に可溶である成分の析出が見られた。そこでエタノール可溶成分(エタノール画分)を回収したのち、残留したエタノール不溶成分を10重量%となるように水に再溶解した(水画分)。果皮、果実、種子についても同様の処理を行って試料溶液を作製した。   In the fruit and mature fruit of Tomiyu and Jiro, 3.0 g of each was brought into contact with 30 mL of 100% ethanol and extracted at 4 ° C. for 3 days (extraction process). The extract was dried under reduced pressure at 45 to 50 ° C. for 180 minutes, and then the obtained extract was redissolved in 100% ethanol so as to be 10% by weight (ethanol fraction) to obtain a sample solution. At this time, precipitation of components insoluble in ethanol and soluble in water was observed. Therefore, after recovering the ethanol-soluble component (ethanol fraction), the remaining ethanol-insoluble component was redissolved in water so as to be 10% by weight (water fraction). The same treatment was performed on the skin, fruit, and seed to prepare a sample solution.

漢方薬柿蔕は、100%エタノール、熱水、水、酢酸エチルを用いた抽出を行った。100%エタノールおよび酢酸エチルを用いた抽出は、上述した富有柿および次郎柿のエタノールに準じた手法で行った。
熱水抽出については、処方に従って熱水抽出を行った。即ち、1.0gの柿蔕に対して100mLの割合となるように水を加え、100℃の熱水に接触させて熱水抽出を行った。抽出後は上述の条件で減圧乾固処理を行い、10重量%となるように水に再溶解した。
水抽出については、この熱水抽出に準じた手法で行った。
Chinese herbal medicine was extracted with 100% ethanol, hot water, water, and ethyl acetate. Extraction with 100% ethanol and ethyl acetate was performed by the method according to the above-mentioned ethanol of Tomiyu and Jiro.
About hot water extraction, hot water extraction was performed according to prescription. That is, water was added so that it might become a ratio of 100 mL with respect to 1.0 g of soot, and it was made to contact hot water of 100 degreeC, and hot water extraction was performed. After extraction, it was dried under reduced pressure under the above-mentioned conditions, and redissolved in water to 10% by weight.
About water extraction, it performed by the method according to this hot water extraction.

富有柿幼果および次郎柿幼果の蔕、果皮、種子、果実(エタノール抽出原液)について、薄層クロマトグラフィー(TLC)分析を行った。
試料溶液をTLCプレート(20cm×20cm、Kieselgel 60 F254、メルク社)にチャージしたのち、2時間の展開を行った(展開溶媒:クロロホルム-酢酸エチル-ギ酸=5:4:1)。展開終了後、検出試薬を噴霧し、110℃にてプレートを加熱した。検出試薬は、有機化合物全般を対象とするp-アニスアルデヒドおよび抗酸化活性を検出するDPPH(1,1−ジフェニル−2−ピクリルヒドラジル)を用いた。発色後、呈色したスポットの観察を行った。結果を図1に示した。
Thin layer chromatography (TLC) analysis was performed on the persimmons, pericarps, seeds, and fruits (ethanol extraction stock solution) of Fuyu persimmon fruit and Jiro persimmon fruit.
The sample solution was charged on a TLC plate (20 cm × 20 cm, Kieselgel 60 F254, Merck) and then developed for 2 hours (developing solvent: chloroform-ethyl acetate-formic acid = 5: 4: 1). After completion of the development, the detection reagent was sprayed and the plate was heated at 110 ° C. As the detection reagent, p-anisaldehyde targeting all organic compounds and DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) for detecting antioxidant activity were used. After the color development, the colored spots were observed. The results are shown in FIG.

検出試薬としてp-アニスアルデヒドを使用した場合(図1左側)、富有柿幼果および次郎柿幼果において、蔕、果皮、果実、種子のそれぞれに出現するスポットの数と色が異なっていた。これにより、蔕、果皮、果実、種子のそれぞれによって含有する成分が異なるものと認められた。   When p-anisaldehyde was used as a detection reagent (left side of FIG. 1), the number and color of spots appearing on the persimmon, pericarp, fruit, and seed differed in the Fuyu persimmon fruit and the Jiro persimmon fruit. As a result, it was recognized that the components contained were different for each of cocoons, pericarps, fruits and seeds.

漢方薬柿蔕においては、エタノール、水、熱水抽出、酢酸エチル抽出で抽出された試料において、それぞれに出現するスポットの数と色が異なっていた。これにより、漢方薬柿蔕においては、抽出方法によって回収される成分は異なるものと認められた。   In Chinese herbal medicine, the number and color of spots appearing in the samples extracted by ethanol, water, hot water extraction, and ethyl acetate extraction were different. As a result, it was recognized that the components recovered by the extraction method were different in traditional Chinese medicine.

検出試薬としてDPPHを用いた場合(図1右側)、富有柿幼果、次郎柿幼果および漢方薬柿蔕において、抗酸化活性を示すスポットや強度の差異が確認された。また、富有柿幼果および次郎柿幼果においては、蔕、果皮、果実、種子のそれぞれにおいても抗酸化活性を示すスポットや強度の差異が確認された。
漢方薬柿蔕においては、DPPHを用いた抗酸化活性の検出では、酢酸エチル抽出液に抗酸化活性を有する化合物は検出されなかったことから、抗酸化活性に関与する化合物は主に親水性化合物であることが判った。
When DPPH was used as a detection reagent (right side of FIG. 1), spots and intensity differences showing antioxidant activity were confirmed in Fuyu persimmon fruit, Jiro persimmon fruit and Chinese herbal medicine. In addition, in the Fuyu persimmon fruit and the Jiro persimmon fruit, the spots and strength differences showing antioxidant activity were also confirmed in each of the persimmon, pericarp, fruit and seed.
In the case of Kampo medicine, the detection of antioxidant activity using DPPH did not detect compounds with antioxidant activity in the ethyl acetate extract, so the compounds involved in antioxidant activity are mainly hydrophilic compounds. It turns out that there is.

〔実施例2〕
実施例1で調製した富有柿,次郎柿の柿蔕(幼果,成熟果)の試料溶液を用いて以下の実験を行った。漢方薬柿蔕は、熱水抽出を行った試料溶液を使用した。
[Example 2]
The following experiment was conducted using the sample solution of the buds of Tominari and Jiroro prepared in Example 1 (young fruit, mature fruit). The Chinese herbal medicine used the sample solution which extracted hot water.

それぞれの試料(エタノール抽出原液)について、薄層クロマトグラフィー(TLC)分析を行った。結果を図2に示した。   Each sample (ethanol extraction stock solution) was subjected to thin layer chromatography (TLC) analysis. The results are shown in FIG.

検出試薬としてp-アニスアルデヒドを使用した場合(図2左側)、富有柿(成熟果実:実験例1−1、幼果:実験例2−1)、次郎柿(成熟果実:実験例3−1、幼果:実験例4−1)、漢方薬柿蔕(比較例1−1)において、それぞれに出現するスポットの数と色が異なっていた。これにより、蔕においてはそれぞれの品種によって含有する成分が異なるものと認められた。
また、富有柿、次郎柿の成熟果、幼果の比較においてもスポットの数と色に相違が見られた。これより、柿の熟度によっても蔕が含有する成分が異なるものと認められた。
When p-anisaldehyde is used as a detection reagent (left side of FIG. 2), Tomi Yu (mature fruit: experimental example 1-1, young fruit: experimental example 2-1), Jiro (mature fruit: experimental example 3-1) , Young Fruit: In Experimental Example 4-1) and Traditional Chinese Medicine (Comparative Example 1-1), the number and color of spots appearing in each were different. As a result, it was recognized that the components contained in varieties differ depending on the variety.
In addition, there was a difference in the number and color of spots in the comparison of mature fruits and young fruits of Togashi and Jiro. From this, it was recognized that the components contained in the koji differ depending on the maturity of the koji.

検出試薬としてDPPHを用いた場合(図2右側)、富有柿(成熟果実:実験例1−2、幼果:実験例2−2)は、次郎柿(成熟果実:実験例3−2、幼果:実験例4−2)、漢方薬柿蔕(比較例1−2)よりも抗酸化活性を示すスポットが多く確認された。また、富有柿においても成熟果実(実験例1−2)および幼果(実験例2−2)において発色強度の差異が確認された。これにより、抗酸化活性は、品種および熟度によって異なるものと認められた。   When DPPH was used as a detection reagent (right side of FIG. 2), Togashi Yu (mature fruit: Experimental Example 1-2, young fruit: Experimental Example 2-2) Results: Many spots showing antioxidant activity were confirmed as compared with Experimental Example 4-2) and Chinese herbal medicine (Comparative Example 1-2). In addition, a difference in color intensity was confirmed between mature fruits (Experimental Example 1-2) and young fruits (Experimental Example 2-2) in Fuyu persimmon. Thereby, it was recognized that antioxidant activity changes with varieties and maturity.

〔実施例3〕
実施例1で調製した富有柿(幼果,成熟果)、次郎柿(幼果)および漢方薬柿蔕のエタノール画分および水画分について、α-グルコシダーゼ阻害活性(血糖値上昇抑制作用)を調べた。
Example 3
The α-glucosidase inhibitory activity (inhibition of blood sugar level increase) was investigated for the ethanol fraction and water fraction of Fuyu persimmon (young fruit, mature fruit), Jiro persimmon (young fruit), and Chinese herbal medicine prepared in Example 1. It was.

酵素液は以下のようにして調製した。即ち、1.0gラット腸管アセトンパウダーを0.1Mリン酸ナトリウム緩衝液(pH7.0)10mLに懸濁し、氷冷下にて30分間攪拌処理を行った。その後遠心分離を行い(12000rpm×10分、4℃)、上清を粗酵素液とした。調製した酵素液は−80℃にて保存した。   The enzyme solution was prepared as follows. That is, 1.0 g rat intestinal acetone powder was suspended in 10 mL of 0.1 M sodium phosphate buffer (pH 7.0) and stirred for 30 minutes under ice cooling. Thereafter, centrifugation was performed (12000 rpm × 10 minutes, 4 ° C.), and the supernatant was used as a crude enzyme solution. The prepared enzyme solution was stored at -80 ° C.

蒸留水0.48mLに250mMマルトース水溶液0.4mLを基質として加えた。この反応液に各抽出液(エタノール画分および水画分、終濃度:1〜20mg/mL)0.1mLを阻害剤として添加し、攪拌後37℃で5分間プレインキュベートを行った。その後、0.02mLのα−グルコシダーゼ粗酵素液を添加し、37℃で40分反応を行った。反応終了後、1.0mLの0.2M炭酸ナトリウム水溶液を添加し、反応を停止させた。同反応にて生成したグルコースはグルコースCII−テストワコーを用いて測定した。残存活性を求めたのち50%阻害濃度(IC50、mg/ml)を算出した。結果を表1に示した(値が小さいほど高い活性であることを示す)。 0.4 mL of 250 mM maltose aqueous solution was added as a substrate to 0.48 mL of distilled water. To this reaction solution, 0.1 mL of each extract (ethanol fraction and water fraction, final concentration: 1 to 20 mg / mL) was added as an inhibitor, followed by preincubation at 37 ° C. for 5 minutes after stirring. Thereafter, 0.02 mL of α-glucosidase crude enzyme solution was added, and the reaction was performed at 37 ° C. for 40 minutes. After completion of the reaction, 1.0 mL of 0.2 M sodium carbonate aqueous solution was added to stop the reaction. Glucose produced in the same reaction was measured using Glucose CII-Test Wako. After determining the residual activity, the 50% inhibitory concentration (IC 50 , mg / ml) was calculated. The results are shown in Table 1 (the smaller the value, the higher the activity).

漢方薬柿蔕については、水画分にのみ活性(IC50=16.7mg/ml)が確認された。
富有柿(成熟果)の蔕については、エタノール画分(IC50=5.8mg/mL)、水画分(IC50=15.7mg/mL)に活性が確認され、エタノール画分のほうが高い活性を有していた。
富有柿(幼果)の蔕については、エタノール画分のみに活性(IC50=2.5mg/mL)が確認され、これは成熟果よりも高い活性であった。
次郎柿(幼果)の蔕については、エタノール画分のみに活性(IC50=6.6mg/mL)が確認され、これは富有柿幼果に次いで高い活性であった。
With regard to Chinese herbal medicine, the activity (IC 50 = 16.7 mg / ml) was confirmed only in the water fraction.
As for the persimmon of Fuyu persimmon (mature fruit), the activity was confirmed in the ethanol fraction (IC 50 = 5.8 mg / mL) and the water fraction (IC 50 = 15.7 mg / mL), and the ethanol fraction was higher. Had activity.
As for the persimmon of Fuyu persimmon (young fruit), the activity (IC 50 = 2.5 mg / mL) was confirmed only in the ethanol fraction, which was higher than the mature fruit.
As for Jiro koji (young fruit) cocoons, activity (IC 50 = 6.6 mg / mL) was confirmed only in the ethanol fraction, which was the second highest activity after Furuyu koji berries.

以上より、富有柿(幼果)、次郎柿(幼果)の蔕については、果実、種子、果皮よりもα-グルコシダーゼ阻害活性が高いものと認められた。また、富有柿(成熟果)の蔕については、果実、果皮よりもα-グルコシダーゼ阻害活性が高いものと認められた。   Based on the above, it was recognized that the buds of Fuyu persimmon (young fruit) and Jiro persimmon (young fruit) have higher α-glucosidase inhibitory activity than fruits, seeds and pericarp. In addition, it was recognized that the Fuyu persimmon (mature fruit) persimmon has higher α-glucosidase inhibitory activity than the fruit and pericarp.

〔実施例4〕
実施例1で調製した富有柿,次郎柿の柿蔕(幼果,成熟果)および漢方薬柿蔕の水画分について、アンジオテンシン変換酵素阻害活性(血圧上昇抑制作用)を調べた。
本試験は、血圧上昇に関与するアンジオテンシン変換酵素に対する阻害活性をエースキット−ダブルエスティー(アンジオテンシン変換酵素阻害活性測定キット)((株)同仁化学研究所)を用いて測定し、阻害率(IC50)を求めた。同キットは活性測定上、試料を溶解に用いる有機溶媒とその濃度に対する制限があるため、水画分のみ阻害活性を調べた。
Example 4
The angiotensin-converting enzyme inhibitory activity (blood pressure increase inhibitory activity) was investigated for the water fractions of the fragrance of Fuyu and Jiroro prepared in Example 1 and the water fractions of Chinese medicine pods.
In this test, the inhibitory activity against angiotensin converting enzyme involved in blood pressure increase was measured using Acekit-Double Estee (Angiotensin converting enzyme inhibitory activity measuring kit) (Dojindo Laboratories Co., Ltd.). 50 ). Since the kit has restrictions on the organic solvent used for dissolving the sample and its concentration in measuring the activity, only the water fraction was examined for inhibitory activity.

試験はキットの使用方法に沿って行った。つまり、超純水で調製したアンジオテンシン変換酵素とアミノアシラーゼ混合液20μL、基質溶液(3-Hydroxybutyryl-Gly-Gly-Gly (3HB-GGG))20μL、試料溶液20μLを混合し、37℃で1時間反応させた。これに、3−ヒドロキシブチル酸デヒドロゲナーゼと補酵素の混合液200μLを添加して10分間室温で反応させた。反応後450nmの吸光度測定を行い、得られたデータをもとに阻害率を算出した。結果を表2に示した(値が小さいほど高い活性であることを示す)。   The test was conducted according to the method of using the kit. That is, 20 μL of an angiotensin converting enzyme and aminoacylase mixed solution prepared in ultrapure water, 20 μL of a substrate solution (3-Hydroxybutyryl-Gly-Gly-Gly (3HB-GGG)), and 20 μL of a sample solution are mixed and incubated at 37 ° C. for 1 hour. Reacted. To this, 200 μL of a mixture of 3-hydroxybutyrate dehydrogenase and coenzyme was added and allowed to react at room temperature for 10 minutes. After the reaction, absorbance at 450 nm was measured, and the inhibition rate was calculated based on the obtained data. The results are shown in Table 2 (smaller values indicate higher activity).

この結果、品種による活性の差はあるが、何れの柿蔕においてもアンジオテンシン変換酵素に対する阻害活性が見られた。富有柿(成熟果)にて最も高い活性が見られた。   As a result, although there was a difference in activity depending on the cultivar, inhibitory activity against angiotensin converting enzyme was observed in any pod. The highest activity was seen in Fuyu-an (mature fruit).

〔実施例5〕
実施例1で調製した富有柿、次郎柿および漢方薬柿蔕のエタノール画分および水画分について、β-リパーゼ阻害活性(抗肥満作用)を調べた。
Example 5
Β-lipase inhibitory activity (anti-obesity action) was examined for the ethanol fraction and water fraction of Togashi Yuji, Jiro, and Kampo medicines prepared in Example 1.

50μLの蛍光性のメチルウンベリフェロンオレイン酸エステル溶液に25μLの試料溶液(終濃度:2.5〜2500mg/mL)を添加し、37℃で5分間プレインキュベートした。その後、25μLのβ−リパーゼを添加し、37℃で30分間酵素反応を行った。反応終了後、50μLの100mMクエン酸緩衝液(pH4.2)を添加して反応を停止させ、励起波長355nm、蛍光波長460nmにて、遊離した4−メチルウンベリフェロンの蛍光を測定した。残存活性を求めたのち50%阻害濃度(IC50、μg/mL)を算出した。結果を表3に示した(値が小さいほど高い活性であることを示す)。 To 50 μL of the fluorescent methylumbelliferone oleate solution, 25 μL of the sample solution (final concentration: 2.5 to 2500 mg / mL) was added and preincubated at 37 ° C. for 5 minutes. Thereafter, 25 μL of β-lipase was added, and an enzyme reaction was performed at 37 ° C. for 30 minutes. After completion of the reaction, 50 μL of 100 mM citrate buffer (pH 4.2) was added to stop the reaction, and the fluorescence of released 4-methylumbelliferone was measured at an excitation wavelength of 355 nm and a fluorescence wavelength of 460 nm. After determining the residual activity, the 50% inhibitory concentration (IC 50 , μg / mL) was calculated. The results are shown in Table 3 (smaller values indicate higher activity).

漢方薬柿蔕については、両画分に活性が確認され、水画分(IC50=7.2μg/mL)のほうが高い阻害活性を有していた。
富有柿(成熟果)の蔕については、両画分に活性がみられたが、水画分(IC50=5.7μg/mL)のほうが高い阻害活性を有していた。
富有柿(幼果)の蔕については、両画分に活性がみられたが、水画分(IC50=23.1μg/mL)のほうが高い阻害活性を有していた。
次郎柿(成熟果)の蔕については、両画分に活性がみられたが、水画分(IC50=1.7μg/mL)に高い阻害活性があり、試験したもののなかでは最も高い活性であった。
次郎柿(幼果)の蔕については、両画分に活性がみられ、水画分(IC50=6.9μg/mL)のほうが高い阻害活性を有していた。
With regard to Chinese herbal medicine, the activity was confirmed in both fractions, and the water fraction (IC 50 = 7.2 μg / mL) had higher inhibitory activity.
In the case of Fuyu persimmon (mature fruit), activity was observed in both fractions, but the water fraction (IC 50 = 5.7 μg / mL) had higher inhibitory activity.
As for the persimmon of Fuyu persimmon, the activity was observed in both fractions, but the water fraction (IC 50 = 23.1 μg / mL) had higher inhibitory activity.
As for Jiro koji (mature fruit) koji, activity was observed in both fractions, but the water fraction (IC 50 = 1.7 μg / mL) had high inhibitory activity, and the highest activity among those tested. Met.
As for Jiro koji (young fruit) koji, activity was observed in both fractions, and the water fraction (IC 50 = 6.9 μg / mL) had higher inhibitory activity.

以上より、富有柿および次郎柿の蔕には、果皮、果実、種子の何れの部位よりも高いβ-リパーゼ阻害活性を有するものと認められた。   Based on the above, it was recognized that the buds of Fuyu and Jiro have higher β-lipase inhibitory activity than any part of the fruit skin, fruit or seed.

〔実施例6〕
実施例1で調製した富有柿、次郎柿および漢方薬柿蔕のエタノール抽出原液について、ポリフェノール量の定量および抗酸化活性の定量を行った。
Example 6
With respect to the ethanol extraction stock solutions of Togashi Rin, Jiro, and Chinese herb prepared in Example 1, the amount of polyphenol and the amount of antioxidant activity were quantified.

ポリフェノール量の定量は、フォーリン・チオカルト法を用いて測定した。各抽出液0.09mLに0.45mLの50%フォーリン・チオカルト試薬を添加し、攪拌した。3分後、0.45mLの0.4M炭酸ナトリウム水溶液を加えて攪拌後、55℃で5分間インキュベートした。反応液を1時間放冷して気泡を除き、765nmにおける吸光度を測定した。このとき、ポリフェノール量は没食子酸を用いて検量線を作成し、試料新鮮重1.0gあたりの没食子酸相当量(mg−没食子酸相当量/1.0g)にて算出した。   The amount of polyphenol was measured using the foreign thiocult method. 0.45 mL of 50% foreign thiocult reagent was added to 0.09 mL of each extract and stirred. After 3 minutes, 0.45 mL of 0.4 M sodium carbonate aqueous solution was added, stirred, and incubated at 55 ° C. for 5 minutes. The reaction solution was allowed to cool for 1 hour to remove bubbles, and the absorbance at 765 nm was measured. At this time, the amount of polyphenol was calculated from a gallic acid equivalent (mg-gallic acid equivalent / 1.0 g) per 1.0 g of sample fresh weight by preparing a calibration curve using gallic acid.

抗酸化活性は、褐色試験管を用いた遮光条件下で測定した。1.0mLの100mM Tris−HCl緩衝液(pH7.4)に0.5M DPPHエタノール溶液2.0mLを添加後攪拌し、試料溶液1.0mLを添加した。24℃で20分インキュベートした後、525nmにおける吸光度を測定した。このとき、抗酸化活性はtroloxを用いて検量線を作成し、試料新鮮重1.0gあたりのtrolox相当量(μmol−trolox相当量/1.0g)にて算出した。   Antioxidant activity was measured under light-shielding conditions using a brown test tube. To 1.0 mL of 100 mM Tris-HCl buffer (pH 7.4), 2.0 mL of 0.5 M DPPH ethanol solution was added and stirred, and 1.0 mL of the sample solution was added. After incubation at 24 ° C. for 20 minutes, the absorbance at 525 nm was measured. At this time, the antioxidant activity was calculated using a Trolox calibration curve and the equivalent of Trolox per μg of fresh sample weight (μmol-trolox equivalent / 1.0 g).

それぞれの結果を表4に示した。   The results are shown in Table 4.

蔕部位ではポリフェノール量(7.25mg−没食子酸相当量/1.0mg)、抗酸化活性(10.09μmol−トロロックス相当量/1.0mg)共に、富有柿(幼果)が最も高い値を示した。また、種子、果実、果皮では富有柿(幼果)種子(ポリフェノール量:20.47mg、抗酸化活性:12.42μmol)および次郎柿(幼果)種子(ポリフェノール量:13.91mg、抗酸化活性:6.17μmol)で高いポリフェノール量と抗酸化活性値を示した。漢方薬柿蔕は富有柿,次郎柿と比較してポリフェノール量および抗酸化活性は低かった。   In the cocoon region, both the amount of polyphenol (7.25 mg-gallic acid equivalent / 1.0 mg) and antioxidant activity (10.09 μmol-trolox equivalent / 1.0 mg) have the highest value for Fuyu (fruit). Indicated. In addition, for seeds, fruits and pericarp, Fuyu persimmon (young fruit) seeds (polyphenol content: 20.47 mg, antioxidant activity: 12.42 μmol) and Jiro persimmon (young fruit) seeds (polyphenol content: 13.91 mg, antioxidant activity) : 6.17 μmol) showed a high polyphenol content and an antioxidant activity value. Chinese herbal medicines had lower polyphenol content and antioxidant activity than Fuyu and Jiro.

〔実施例7〕
実施例1で調製した富有柿,次郎柿の柿蔕(幼果,成熟果)および漢方薬柿蔕のエタノール抽出液を減圧乾固して、GC−MS分析を行った。
Example 7
The ethanol extract of Fuyu candy, Jiro candy (young fruit, mature fruit) and Chinese medicine candy prepared in Example 1 was dried under reduced pressure and subjected to GC-MS analysis.

GC−MS分析に際し、各試料はトリメチルシリル誘導体化(TMS誘導体化)を行った。GC−MS分析には、GC装置としてAgilent 6890N(アジレントテクノロジー製)を使用し、カラムとしてJ&W DB−5(アジレントテクノロジー製、30m×0.25mm−i.d.、膜厚0.25μm)を使用し、MS検出器としてAgilent 5972(アジレントテクノロジー製)を使用した。
また、ウルソール酸、オレアノール酸、ベツリン酸、β-シトステロールを同様にTMS誘導体化し、保持時間およびフラグメントイオンピークの比較を行った。結果を図3に示した。
In the GC-MS analysis, each sample was subjected to trimethylsilyl derivatization (TMS derivatization). For GC-MS analysis, Agilent 6890N (manufactured by Agilent Technologies) is used as the GC apparatus, and J & W DB-5 (manufactured by Agilent Technologies, 30 m × 0.25 mm-id, film thickness of 0.25 μm) is used as the column. And an Agilent 5972 (manufactured by Agilent Technologies) was used as the MS detector.
In addition, ursolic acid, oleanolic acid, betulinic acid, and β-sitosterol were similarly derivatized with TMS, and the retention time and fragment ion peak were compared. The results are shown in FIG.

GC−MS分析では富有柿および次郎柿における顕著な成分の差(ピークの相違)は見られなかった。
富有柿,次郎柿および漢方薬柿蔕を比較すると、保持時間20.000〜25.000分にて、富有柿,次郎柿の蔕にはあるが、漢方薬柿蔕にはない成分が確認された。また、漢方薬柿蔕にて8.598分に富有柿,次郎柿の蔕には見られないピークが確認された。このように、GC−MSにて、富有柿および次郎柿と、漢方薬柿蔕とにおける含有成分の違いが示された。
尚、いずれの蔕においても、トリテルペノイド類(保持時間、ウルソール酸:29.683分、オレアノール酸:29.206分、ベツリン酸:29.326分)とβ−シトステロール(27.256分)が検出された。
In GC-MS analysis, no significant component difference (difference in peak) was found between Tomiyu and Jiro.
Comparing Fuyu-an, Jiro-an and Chinese herbal medicines, it was confirmed that in the retention time of 20.000 to 25.000 minutes, the ingredients in Fuyu-an, Jiro-an, but not in Kampo medicines were found. In addition, a peak that was not found in the buds of Fuyu and Jiro at 8.598 minutes was confirmed in the Kampo medicine basket. Thus, in GC-MS, the difference of the contained component in Fuyu and Jiro was and Chinese herbal medicine was shown.
In any sputum, triterpenoids (retention time, ursolic acid: 29.683 minutes, oleanolic acid: 29.206 minutes, betulinic acid: 29.326 minutes) and β-sitosterol (27.256 minutes) were detected. It was done.

本発明は柿蔕の抽出方法に利用でき、抽出された組成物は、血糖値上昇抑制作用および血圧上昇抑制作用を有する医薬品および食品として利用できる。   The present invention can be used for a method for extracting sputum, and the extracted composition can be used as a pharmaceutical and a food having a blood glucose level increase suppressing action and a blood pressure increase suppressing action.

Claims (3)

柿蔕のアルコール抽出物を有効成分とする血糖値上昇抑制剤。   A blood glucose level increase inhibitor comprising an alcoholic extract of persimmon as an active ingredient. 柿蔕のアルコール抽出物を有効成分とする血圧上昇抑制剤。   An antihypertensive agent comprising an alcoholic extract of salmon as an active ingredient. 柿蔕をアルコールに接触させて有効成分を抽出する抽出工程を有する柿蔕の抽出方法。   A method for extracting koji, which comprises an extraction step of bringing koji into contact with alcohol to extract active ingredients.
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