JP2015007138A - 痛みおよび炎症の処置のためのヒ素化合物の使用 - Google Patents

Abstract

【課題】炎症および／または慢性、急性および／または痛みを軽減するための新規な方法を提供する。
【解決手段】哺乳動物における組織または器官の拒絶反応の処置または予防のための医薬組成物の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウムの使用。哺乳動物における組織または器官の拒絶反応の処置に使用するための免疫抑制医薬組成物の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウムの使用。治療有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウムを含み、ここにおいて治療有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウムが哺乳動物における組織または器官の拒絶反応を減少または予防するのに十分であるキット。移植された組織のレシピエントである哺乳動物における同種抗原に対する宿主リンパ球の抑制のための経口投与用医薬組成物の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウムの使用。
【選択図】図１

Description

発明の説明
本出願は、２００７年２月２日に出願された米国特許仮出願第６０／８９９，００７号（引用によりその全体が本明細書に組み込まれる）の優先権を主張する。
発明の分野
本発明は、痛みおよび炎症を処置するための方法および組成物、ならびにヒ素化合物を用いて自己免疫障害および免疫学的障害の処置に関する。より詳しくは、本発明の方法および組成物は、痛み、炎症、ならびに自己免疫障害および免疫学的障害を処置するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）および／または六酸化四砒素（ａｒｓｅｎｉｃ ｈｅｘｏｘｉｄｅ）（Ａｓ_４Ｏ_６）またはこれらの塩の使用に関する。

発明の背景
痛みの知覚あるいは侵害受容は、侵害受容器と称される一群の特殊な感覚ニューロンの末梢神経末端によって媒介される。多種多様な物理的および化学的刺激により、哺乳動物においてかかるニューロンの活性化が誘発され、潜在的に有害な刺激の認識がもたらされる。しかしながら、侵害受容器の不適切または過度な活性化は、消耗性で急性または慢性の痛みをもたらすことがあり得る。

一般的に、皮膚ならびにある種の内部組織内の痛み受容体を構成する自由神経終末が、機械的、熱的、化学的または他の有害な刺激に供されると痛みが起こる。痛み受容体によってシグナルは、求心性ニューロンに沿って中枢神経系内に、さらに脳へと伝達され得る。

痛みの原因としては、炎症、身体の外傷、感染性疾患、化学性または無酸素性の損傷、筋痙攣および神経障害性の事象または症候群の発症が挙げられ得る。処置が奏効しない痛みは、痛みが起こっている人にとって、機能の制限、可動性の低下、睡眠障害および生活の質の劇的な妨げのため、破壊的となり得る。

炎症は、痛み、発熱、赤み、腫脹および機能低下の古典的な徴候を特徴とする急性形態の生理学的状態である。炎症による痛みは、組織が損傷された場合に起こり得る。例えば、物理的、化学的および熱的事象、手術、感染ならびに自己免疫疾患によって、組織の損傷および炎症が引き起こされることがあり得る。組織が損傷されると、多くの内因性の痛み誘発物質、例えばブラジキニンおよびヒスタミンが該損傷組織から放出され得る。痛み誘発物質は、感覚神経末端上の受容体に結合し、それにより求心性の痛みシグナル伝達が開始され得る。

さらに、痛み誘発物質は、侵害受容性の求心性神経末端から放出されることがあり得、感覚末端から放出される神経ペプチドによって炎症応答が増強され得る。したがって、炎症中、ペプチド作動性末梢神経線維の伸長およびペプチド含有量の増加がみられることがあり得、多くの線維は、サブスタンスＰ（ＳＰ）とカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）の共存を示す。サブスタンスＰによって内皮細胞の収縮が誘発され得、これにより血漿の血管外遊出が引き起こされ、他の物質（ブラジキニン、ＡＩＰ、ヒスタミン）が損傷部位および求心性神経末端に到達することが可能になる。また、感覚神経末端によるサブスタンスＰの放出によって肥満細胞が脱顆粒されることがあり得る。このプロセスは、炎症メディエータ（ヒスタミンおよびセロトニンなど）の放出、ならびにブラジキニン
の生成を触媒するタンパク質分解酵素の放出による神経原性炎症の重要な要因であると考えられる。ＣＧＲＰは見かけ上、血漿の血管外遊出をもたらさないが、強力な血管拡張因子であり、また、ＳＰおよび他の炎症メディエータと相乗的に作用して血漿の血管外遊出を促進させる。上記の炎症メディエータはすべて、侵害受容器を感作するもの、または痛みをもたらすもののいずれかであり得る。したがって、炎症メディエータの放出および／または活性の阻害は、一般的な炎症性疾患、例えば、喘息、関節炎、皮膚炎、鼻炎、膀胱炎、歯肉炎、血栓性静脈炎、緑内障、胃腸管の疾患または片頭痛などの処置に有用であり得る。

炎症による痛みは、一般的に可逆性であり、損傷組織が修復されると、または痛み誘発刺激が取り除かれると消退するが、慢性の炎症による痛みを処置するための現行の方法は、多くの欠点および欠陥を有する。したがって、痛みの症状を処置するための鎮痛薬（例えば、炎症による痛みの原因因子を処置するための抗生物質）の典型的な経口、非経口または経表面投与では、薬物が広く全身に分布し、好ましくない副作用がもたらされることがあり得る。さらに、炎症による痛みに対する現行の治療法には、薬物有効性の持続期間が短いという欠点があり、頻繁な薬物再投与が必要とされ、薬物耐容性および耐性の増大、抗体発生および／または薬物への依存性や中毒（これらはすべて、問題である）が生じる可能性を伴う。さらに、頻繁な薬物投与は、患者に対するレジメンの費用を増大させ、患者には、忘れずに投与スケジュールを守ることが必要とされ得る。

炎症および筋肉痛のための処置剤の例としては、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）（例えば、アスピリンおよびイブプロフェン）；ならびにオピオイド（モルヒネなど）が挙げられる。

ＮＳＡＩＤは、損傷組織によって放出されるプロスタグランジンの生成を阻害することにより痛みを緩和する。プロスタグランジンは、関節疾患の場合と同様、痛みおよび炎症の末梢側メディエータであることが示されており、その濃度の低下によって患者に軽減がもたらされる。プロスタグランジンは、脊髄および脳内における痛みの媒介に関与していることが示唆されており、これによって、炎症または末梢組織損傷を伴わない一部の痛みの状態におけるＮＳＡＩＤの鎮痛効果が説明され得る。しかしながら、プロスタグランジンは、いくつかの痛みのメディエータのうちの１つにすぎない。したがって、ＮＳＡＩＤは、用量を増やしてもそれ以上痛みは軽減されないという活性の上限を有する。

さらに、ＮＳＡＩＤは、自身の有用性を制限するという副作用を有する。例えば、胃腸管への刺激の原因となり得、長期使用によって腸管に広範な潰瘍化の発生がもたらされることがあり得る。これは、関節炎の病状に対してＮＳＡＩＤを高頻度に使用している高齢患者に特に当てはまる。

オピオイドの治療作用は、脳および脊髄を含む中枢神経系に対するものである。オピオイドは、一次求心性感覚神経（主にＣ線維）と突出ニューロン間の神経伝達効率を阻害する。この阻害は、オピオイドがこれらのシナプスの両方の要素の長期過分極を引き起こすことによりなされる。オピオイドの使用は、悪性腫瘍によって引き起こされるほとんどの型の急性の痛みおよび慢性痛みの緩和に有効である。しかしながら、オピオイド痛覚脱失に対して一部または完全に抗療性である慢性の悪性の痛みの状態（特に、例えば腫瘍の形成および成長による神経圧迫を伴うもの）がいくつかある。残念ながら、オピオイドは、望ましくない副作用、例えば、呼吸器系の機能低下、便秘、ならびに精神活性効果（例えば、鎮静、上機嫌および薬物依存性）も有する。このような副作用は、痛覚脱失をもたらす用量と同様の用量で生じ、したがって、患者に与えることができる用量は制限される。さらに、モルヒネおよびヘロインなどのオピオイドは、多くの場合、薬物耐容性および身体的依存性の急速な増大がもたらされるよく知られた中毒薬物である。耐容性の発現によ
り、同じ鎮痛効果を得るのに必要とされる薬物の用量および頻度は経時的に増加する。このことにより、慢性の絶え間ない痛みを緩和するのに必要とされる用量が、前述の副作用のため命にかかわり得る量に至ることがあり得る。本明細書で用いる場合、用語「慢性」は、１ヶ月以上の期間持続する痛みを意味する。「急性の痛み」は、慢性の痛みよりも持続期間が短く、強さが大きい痛みと定義する。

炎症および筋痙攣から生じる痛みは、一次感覚ニューロンの自由末端の機械的または化学的刺激によって起始され得るが、神経障害性疼痛は、末梢の自由神経末端に対する最初の刺激が必要とされない。神経障害性疼痛は、神経系、末梢神経、脊髄神経節、後根、または中枢神経系に対する損傷に起因するものであり得る持続性または慢性の疼痛症候群である。

神経障害性疼痛は、刺激の非存在下での痛みのシグナル伝達を伴い、典型的には神経系に対する損傷に起因する。ほとんどの場合、かかる痛みは、末梢系に対する最初の損傷（例えば、直接負傷または全身性疾患による）後の末梢および中枢神経系における感作のため起こると考えられている。神経障害性疼痛は、典型的には、その強さが灼熱性でうずくようなしつこいものであり、場合によっては、最初の負傷または該負傷を誘発した疾患過程よりも消耗性であることもあり得る。

神経障害性疼痛の既存の処置剤は、たいてい有効でない。モルヒネなどのアヘン剤は強力な鎮痛剤であるが、その有用性は、前述の有害な副作用（薬物耐容性、身体的依存性および禁断性の急速な発現、ならびに呼吸器系の機能低下、精神状態の変化、ならびに腸運動の低下（便秘、吐き気、嘔吐が付随）ならびに内分泌系および自律神経系の変化など）のため限定的である。また、神経障害性疼痛は、多くの場合、慣用的なオピオイド鎮痛レジメンに対して非応答性であるか、または一部応答性であるにすぎない。Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸拮抗薬ケタミンまたはα（２）−アドレナリン作用性作動薬クロニジンを用いた処置により、急性または慢性の痛みは軽減され得、オピオイド消費量の削減が可能となり得るが、これらの薬剤は、多くの場合、相当な副作用のため耐容性が不充分である。

神経障害性疼痛症候群としては、異痛症、種々の神経痛（ヘルペス後神経痛および三叉神経痛など）、幻想痛、ならびに複合性局所疼痛症候群（反射性交感神経性ジストロフィおよびカウザルギーなど）が挙げられる。カウザルギーは、多くの場合、痛覚過敏および異痛症と複合性の自然発生的な灼熱性の痛みを特徴とする。

残念ながら、既存の方法で、確立された神経障害性疼痛が充分に予想どおりに特異的に処置されるものはない（Ｗｏｏｌｆ Ｃ．ら，Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ Ｐａｉｎ：Ａ ｅｔｉｏｌｏｇｙ，Ｓｙｍｐｔｏｍｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ，Ｌａｎｃｅｔ １９９９；３５３：１９５９−６４）、というのは、神経障害性疼痛の現行の処置方法は、起こっている痛みを軽減または解消させることによるものではなく、心理療法または作業療法によって患者の対処を補助することを単に試みることからなるものであるためである。

したがって、絶え間ない慢性および急性の痛み（例えば、炎症による痛み）の処置のための改善された方法または化合物の必要性が依然として存在する。また、免疫性および自己免疫性の疾患および病状の処置のための改善された方法および薬剤の必要性が存在する。これは、本開示によるヒ素化合物の投与によって達成される。

発明の概要
本発明は、上記の背景技術に記載した制限に対処するものであり、炎症および／または慢性、急性および／または痛みを軽減するための新規な方法を提供する。本発明は一部において、ヒ素化合物、例えば、メタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）および／または六酸化四砒素（Ａｓ_４Ｏ_６）またはこれらの塩などが炎症および痛みを軽減するために使用され得るという知見および実証に基づいている。

本開示は、本発明の一態様によれば、慢性および／または急性に苦しむ哺乳動物（例えば、ヒト）を処置するための方法を提供する。本発明のこの態様の特定のある実施形態によれば、本開示は、痛み、例えば、内臓痛（膵炎など）、癌性疼痛（転移性の癌など）、中枢性疼痛症候群（脳卒中によって引き起こされる痛みなど）、術後疼痛症候群（例えば、乳房切除術後症候群）、骨や関節の痛み（変形性関節症）、脊椎痛（例えば、急性および慢性の腰痛）、顔面筋疼痛（筋肉の負傷）、術後、周術期の痛みおよび先制鎮痛、慢性疼痛、月経困難症、ならびに狭心症に伴う痛み、および種々の起源（例えば、喘息、変形性関節症、慢性関節リウマチ）の炎症による痛みなどを処置または予防するための、ヒ素化合物、好ましくはメタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（ＡＳ_２Ｏ_３）および／または六酸化四砒素（Ａｓ_４Ｏ_６）またはこれらの塩の使用のための方法を提供する。

例示的な一実施形態において、本発明は、急性および慢性の痛覚過敏を処置するための経表面、経口または非経口用組成物の調製における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）および／または六酸化四砒素（Ａｓ_４Ｏ_６）またはこれらの塩の使用を提供する。

本発明の一態様では、治療上充分な量の無機系ヒ素化合物、例えば、メタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）；および／または六酸化四砒素（Ａｓ_４Ｏ_６）を哺乳動物に投与することを含み、該化合物の投与により該哺乳動物の炎症性状態において臨床的に有意な改善がもたらされる、炎症を処置するための方法が提供される。本発明の一実施形態において、炎症性状態における臨床的に有意な改善としては、以下：ａ）痛みの減少または抑制；ｂ）腫脹の減少または抑制；ｃ）赤みの減少または抑制；ｄ）罹患組織の温度の低下または抑制；およびｅ）機能低下の減少または抑制の１つ以上が挙げられる。

本発明の目的のため、ヒスタミン、サイトカインおよび他のポリペプチドの放出は、炎症性状態（喘息患者の肺など）において起こり易いと理論上推定するが、これに依存しない。したがって、一実施形態において、本発明の方法は、例えば、喘息性気道および癌関連壊死で見られる炎症および／または組織の損傷を処置するためのメタ亜ヒ酸ナトリウムの局所または全身性投与を伴うものである。

別の実施形態において、本発明の方法は、個体の損傷組織部位の炎症を処置するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム、三酸化ヒ素および／または六酸化四砒素の局所投与を提供する。

他の実施形態において、本発明は、炎症と関連する痛みおよび／または組織の損傷、例えば、癌関連疾患または自己免疫誘発型疾患における組織線維症を処置するための方法を提供する。本発明の方法によって処置され得る免疫疾患および自己免疫疾患の例としては、内分泌系、筋神経系、結合組織系、心肺系、骨格系および胃腸系の免疫疾患および自己免疫疾患が挙げられる。特に、本発明のヒ素化合物は、自己免疫障害および免疫媒介性障害（多発性硬化症など、および他の免疫に関連する病状）を処置するために使用され得る。

別の実施形態では、感染性疾患、例えば、細菌、ウイルス、寄生虫感染によって引き起こされる炎症および痛みが、本発明の方法によって処置される。

本発明の方法は、治療有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム、三酸化ヒ素および／または六酸化四砒素を適宜投与することを含む。好ましい実施形態において、治療有効量は約１０μｇ〜約２００ｍｇの範囲であり、好ましくは用量分割され、非経口、髄腔内、経口、吸入または経表面で投与される。好ましい総日用量は約０．５ｍｇ〜約７０ｍｇ；最も好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇである。

さらに、本発明の目的のため、メタ亜ヒ酸ナトリウム、三酸化ヒ素および／または六酸化四砒素は、自己免疫抗体の生成および組織損傷に関与している白血球およびリンパ球を阻害および／または枯渇させると理論上推定するが、これに依存しない。したがって、例示的な実施形態において、本発明の方法は、自己免疫誘発型の炎症および／または組織の損傷を処置するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム、三酸化ヒ素および／または六酸化四砒素の局所または全身性投与を提供する。

用語「痛覚過敏」または「痛覚過敏性知覚」は、本明細書で用いる場合、痛みに対する極度の感受性をいい、これは、一形態において、身体の軟組織内の侵害受容器に対する損傷によって引き起こされる。痛覚過敏は、限局的孤立的領域で起こることもあり、より広汎な全身形態として起こることもあり得る。条件付け試験により、後者の広汎性形態の学習性痛覚過敏を起こすことが可能なことが確立されている。限局性形態は、典型的には負傷に関連するものであり、２つの亜型に分けられる。一次痛覚過敏は、損傷組織に直接生じた痛み感受性を示す。二次痛覚過敏は、周囲の非損傷組織に生じた痛み感受性を示す。

前述の一般説明および以下の詳細説明は、ともに例示的および説明的なものにすぎず、特許請求の範囲に記載の発明を制限するものでないことは理解されよう。

図１は、メタ亜ヒ酸ナトリウムで処置したラットにおける、腫瘍負荷によって引き起こされた骨壊死および炎症の組織病理学的評価により得られたデータの棒グラフである。

発明の詳細な説明
本発明は、痛みおよび／または炎症性の疾患もしくは病状に苦しむ哺乳動物（例えば、ヒト）を処置するための方法を提供する。特別な実施形態において、かかる方法は、炎症ならびに急性および／または慢性の痛みを処置するためのヒ素化合物、好ましくはメタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）および／または六酸化四砒素（Ａｓ_４Ｏ_６）またはこれらの塩の局所または全身性投与を含む。

特定のある実施形態において、メタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）および／または六酸化四砒素（Ａｓ_４Ｏ_６）またはこれらの塩は、痛み、例えば、内臓痛（膵炎、間質性膀胱炎、腎仙痛、前立腺炎、慢性骨盤痛など）、癌性疼痛、「ジニア（ｄｙｎｉａ）」、例えば、外陰部痛、幻肢痛、神経根引き抜き損傷、神経根障害、有痛性外傷性単神経障害、有痛性絞扼性神経障害、手根管症候群、尺骨神経障害、足根管症候群、有痛性糖尿病性神経障害、有痛性多発性神経障害、三叉神経痛）、中枢性疼痛症候群（事実上、神経系の任意のレベルの任意の病変（例えば、限定されないが、脳卒
中、多発性硬化症、脊髄損傷）によって引き起こされる可能性がある）、および術後疼痛症候群（例えば、乳房切除術後症候群、開胸術後症候群、断端痛）、骨や関節の痛み（変形性関節症）、脊椎痛（例えば、急性および慢性の腰痛、首の痛み、脊柱管狭窄）、肩の痛み、反復動作による痛み、急性の痛み、例えば、歯痛、咽喉痛、癌の痛み、顔面筋疼痛（筋肉の負傷、線維筋痛症）、術後、周術期の痛みおよび先制鎮痛（例えば、限定されないが、一般的な手術、整形外科的および婦人科系）、慢性疼痛、月経困難症（一次性および二次性）、ならびに狭心症に伴う痛み、ならびに種々の起源、例えば、免疫学的反応および自己免疫疾患の炎症による痛み（例えば、変形性関節症、慢性関節リウマチ、リウマチ病、腱滑膜炎および痛風、強直性脊椎炎、滑液包炎、狼瘡）などを処置または予防するために使用される。

また、本発明のヒ素化合物は、頭痛（例えば、群発性頭痛、片頭痛（予防的および急性の使用を含む））、脳卒中、閉鎖性頭部外傷、癌、敗血症、歯肉炎、骨粗鬆症、良性前立腺増殖症ならびに活動亢進の膀胱の処置に使用され得る。

当業者には、痛みが不均一系障害であることは認識されよう。本発明による方法および組成物、用語「痛み」は、急性および持続性の痛みなどのあらゆる型の痛みをいうものとする。好ましくは、該用語は、持続性の痛み、例えば、限定されないが、糖尿病性神経障害、線維筋痛症、身体表現性障害に関連する痛み、関節炎の痛み、癌の痛み、首の痛み、肩の痛み、背中の痛み、群発性頭痛、緊張型頭痛、片頭痛、ヘルペス神経痛、幻肢痛、中枢性疼痛、歯痛、ＮＳＡＩＤ耐性の痛み、内臓痛、手術による痛み、術後の痛み、骨負傷の痛み、陣痛および分娩中の痛み、火傷に起因する痛み（例えば、日焼け）、産後の痛み、狭心症の痛み、ならびに尿生殖路関連の痛み（例えば、膀胱炎）などをいうものとする。また、持続性の痛みという用語は、好ましくは、侵害受容性の痛みまたは侵害受容をいうものとする。

本発明の別の態様において、治療上充分な量の無機系ヒ素化合物、例えばメタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）を哺乳動物に投与することを含み、該化合物の投与により該哺乳動物の炎症性状態において臨床的に有意な改善がもたらされる、炎症を処置するための方法が提供される。本発明の一実施形態において、炎症性状態における臨床的に有意な改善としては、以下：ａ）痛みの減少または抑制；ｂ）腫脹の減少または抑制；ｃ）赤みの減少または抑制；ｄ）発熱の減少または抑制；およびｅ）機能低下の減少または抑制の１つ以上が挙げられる。

喘息は、炎症と気管支収縮の両方の要因を含む気道の疾患である。喘息に対する処置レジメンは病状の重症度に基づく。軽度の場合は処置しないか、または気管支収縮要因に作用する吸入ベータ（Ｂ）作動薬で処置するだけのいずれかであるが、より重度の喘息を有する患者は、典型的には、多くは抗炎症性の性質である吸入コルチコステロイド類で定期的に処置される。

本発明の他の特定のある実施形態では、メタ亜ヒ酸ナトリウムを使用し、過反応性気道の処置または予防、および気道疾患に関連する炎症性事象、例えば、喘息（例えば、アレルギー性喘息（アトピー性または非アトピー性））、ならびに運動誘発性気管支収縮、職業性喘息、ウイルスまたは細菌による喘息の憎悪、他の非アレルギー性喘息および「喘鳴乳児（ｗｈｅｅｚｙ−ｉｎｆａｎｔ）症候群」の処置または予防が行なわれる。

慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、炎症性および気管支収縮性要素を有する別の一般的な疾患である。この疾患は潜在的に致死性であり、この病状の罹病率および死亡率は相当である。現在、この疾患過程を変化させ得る既知の薬理学的処置はない。

また、本発明のヒ素化合物、例えば、本発明の例示的な実施形態によるメタ亜ヒ酸ナトリウムは、慢性閉塞性肺疾患、例えば、気腫、成人呼吸促進症候群、気管支炎、肺炎、アレルギー性鼻炎（季節性および通年性）、ならびに血管運動神経性鼻炎を処置するために使用され得る。また、該化合物は、塵肺症、例えば、アルミニウム肺症、炭粉症、石綿症、石粉症、チローシス（ｐｔｉｌｏｓｉｓ）、鉄症、珪肺症、タバコ症（ｔａｂａｃｏｓｉｓ）、および綿肺症に対しても有効であり得る。

さらに、メタ亜ヒ酸ナトリウムなどの本発明のヒ素化合物は、本発明の他の実施形態によれば、炎症性腸疾患（例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎）、過敏性腸症候群、膵炎、腎炎、膀胱炎（間質性膀胱炎）、ブドウ膜炎、炎症性皮膚障害（乾癬および湿疹など）、慢性関節リウマチならびに火傷、捻挫または骨折に関連する外傷に起因する水腫、脳水腫および血管浮腫の処置に使用され得る。該化合物は、糖尿病性血管症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、インスリン炎と関連する後毛細管耐性または糖尿病性の症状（例えば、高血糖、利尿、蛋白尿ならびに亜硝酸塩およびカリクレイン尿中排泄の上昇）を処置するために使用され得る。本発明のヒ素化合物、好ましくは、メタ亜ヒ酸ナトリウムは、胃腸管または子宮の痙攣の処置のための平滑筋弛緩薬として使用され得る。さらに、該化合物は、例えば、抗循環血液量減少剤および／または抗降圧剤として、肝臓疾患、多発性硬化症、心臓血管の疾患、例えば、アテローム性動脈硬化、鬱血性心不全、心筋梗塞；神経変性疾患（各々、パーキンソン病およびアルツハイマー病）、癲癇、敗血症性ショックに対して有効であり得る。

別の実施形態において、本発明のヒ素化合物は、炎症性肝臓疾患または多発性硬化症を予防および／または処置するために使用される。

別の実施形態は、本発明によれば、局所炎症を処置、軽減または予防するための経表面組成物におけるヒ素化合物、特にメタ亜ヒ酸ナトリウムの使用を提供する。一実施形態において、ヒ素化合物、例えばメタ亜ヒ酸ナトリウムは、ヒスタミン放出を低減または予防するために哺乳動物に投与される。

他の実施形態において、本発明によれば、本発明のメタ亜ヒ酸ナトリウムまたは他のヒ素化合物（１種類または複数種）は哺乳動物に（例えば、ヒト）に、免疫媒介性疾患および／または自己免疫疾患、例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、自己免疫慢性関節リウマチ（ＲＡ）、全身性脈管炎；インスリン依存性真性糖尿病（ＩＤＤＭ；Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、対宿主性移植片病（ＧＶＨＤ）、セリアック病、自己免疫性甲状腺疾患、シェーグレン症候群、自己免疫性胃炎、潰瘍性大腸炎；クローン病；自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変；原発性硬化性胆管炎；皮膚の自己免疫疾患、自己免疫性拡張型心筋症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症（ＭＧ）、脈管炎（例えば、高安動脈炎およびヴェーゲナー肉芽腫症）、筋肉の自己免疫疾患、自己免疫性筋神経系障害（強直性脊椎炎、多発性硬化症、および急性播種性脳炎など）；免疫媒介性神経障害；精巣の自己免疫疾患、自己免疫性卵巣疾患、自己免疫性ブドウ膜炎、グレーヴズ病、乾癬、強直性脊椎炎、アジソン病、橋本甲状腺炎、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫性肺疾患（ウェゲナー病およびチャーグ‐ストラウス症候群など）；免疫性肺疾患（喘息、浸潤性肺疾患、過敏性肺疾患およびサルコイドーシスなど）；皮膚筋炎（例えば、強皮症および多発性筋炎（ｐｏｌｙｍｙｏｓｉｓ）；ならびに白斑などと関連する炎症症状を処置または軽減するために投与される。

本発明の方法により、炎症の進行が遅滞または停止されること、少なくとも一部の症状、機能が改善されること、および／または生存期間および回復が増大することが期待される。

本発明の他の特定のある態様によれば、メタ亜ヒ酸ナトリウム（ＮａＡｓＯ_２）、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）および／または六酸化四砒素（Ａｓ_４Ｏ_６）またはこれらの塩は、ヒトにおける自己免疫障害の発病に関連する白血球またはリンパ球およびその分泌物を抑制およびまたは枯渇させるために使用され得る。本発明のこの態様の一実施形態によれば、メタ亜ヒ酸ナトリウムの投与により、自己抗体、Ｂ細胞産生自己抗体および／または自己反応性Ｔ細胞のレベルの低下がもたらされ得る。これらの細胞型またはその分泌物のいずれかにおける低減は、例えば、処置前のレベルと比べて少なくとも１０％、２０％、３０％、５０％、７０％またはそれ以上であり得る。

本発明によれば、本発明のヒ素化合物は単独で、または例えばＮＳＡＩＤなどの他の既知の痛みおよび／または抗炎症性投薬物と組み合わせて使用され得る。ヒ素化合物の組合せもまた想定される。

上記の疾患および病状の動物モデルは、当該技術分野で一般的に知られたものであり、本発明の化合物を有用可能性について評価するのに適したものであるのがよい。最後に、本発明の化合物はまた、研究ツール（インビボおよびインビトロ）としても有用である。

本発明の方法は、痛みおよび／または炎症、例えば、慢性関節リウマチに伴う痛みまたは喘息関連炎症を有する哺乳動物を処置するために使用され得る。哺乳動物の例としては、ヒトまたは他の霊長類（例えば、チンパンジー）、齧歯類（例えば、マウス、ラットまたはモルモット）、ウサギ、ネコ、イヌ、ウマ、ウシおよびブタが挙げられる。一部の罹患被検体では、該処置により痛みおよび／または炎症症状の進行抑制および改善がもたらされることが期待される。
投与方法
任意の適当な投与様式が本発明に従って使用され得、限定されないが、非経口投与、例えば、静脈内、皮下、筋肉内および髄腔内投与などが挙げられ；経口、鼻腔内、経直腸または経膣投与もまた使用され得；腫瘍内への直接投与；経皮パッチ；埋入デバイス（特に、低速放出用）；吸入器、長期作用性デポー投与、ならびに最後に経表面投与を使用してもよい。投与様式は、使用されるヒ素化合物の型および処置対象の疾患によって異なる。

使用される医薬組成物は、滅菌された生理学的に許容され得る（水性または有機系）の液剤、コロイド状懸濁剤、クリーム剤、軟膏、ペースト剤、カプセル剤、カプレット剤、錠剤およびカシェ剤の形態であり得る。本発明のヒ素化合物を含む医薬組成物は、密封された滅菌ガラス容器および／またはアンプル内に内包され得る。さらに、活性成分は、リポソーム、ノイソーム（ｎｏｉｓｏｍｅ）またはリポフォーム（ｌｉｐｏｆｏａｍ）内に単独で、または標的化抗体とともにマイクロカプセル封入、カプセル封入され得る。遅延型の低速放出または徐放形態の投与もまた包含されることを認識されたい。
製剤
本発明のヒ素化合物は、痛みおよび炎症の処置のために哺乳動物に投与するための医薬調製物に製剤化され得る。

経口投与のために、医薬調製物は、液状形態、例えば、液剤、シロップ剤または懸濁剤であり得るか、または使用前に水または他の適当なビヒクルで再構成される薬物製剤として提示され得る。かかる液状調製物は、薬学的に許容され得る添加剤、例えば、懸濁化剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体または水添食用脂肪）；乳化剤（例えば、レシチンまたはアカシア）；非水性ビヒクル（例えば、アーモンド油、油性エステル、または分別植物油）；および保存料（例えば、メチルまたはプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾーエートまたはソルビン酸）などを用いて、慣用的な手段によって調製され得る。医薬組成物には、例えば、錠剤またはカプセル剤の形態が採用され得、これは、薬学的に許容され得る賦形剤、例えば、結合剤（例えば、アルファー化トウモロコシデンプン、
ポリビニルピロリドンもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えば、ラクトース、微晶質セルロースもしくはリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクもしくはシリカ）；崩壊剤（例えば、イモデンプンもしくはデンプングリコール酸ナトリウム）；または湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）などを用いて慣用的な手段によって作製される。錠剤は、当該技術分野でよく知られた方法によってコーティングしてもよい。

経口投与のための調製物は、活性化合物の制御放出がもたらされるのに適するように製剤化され得る。

口腔内投与では、該組成物には、慣用的な様式で製剤化される錠剤またはロゼンジ剤の形態が採用され得る。

吸入による投与では、本発明による使用のための化合物は、適当な噴霧推進剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適当なガスの使用を伴い、加圧パックまたはネブライザからのエーロゾルスプレー剤の提示の形態で簡便に送達される。加圧エーロゾル剤の場合、単位投薬量は、定量が送達されるように弁を設けることによって決定され得る。例えば、該化合物と適当な粉末基剤（ラクトースまたはデンプンなど）の粉末ミックスを含むゼラチン製のカプセル剤およびカートリッジが、吸入器または注入器における使用のために製剤化され得る。

該化合物は、注射（例えば、ボーラス注射）または連続注入による非経口投与のために製剤化され得る。かかる製剤は滅菌されたものである。注射用製剤は、単位投薬形態、例えば、アンプルまたは反復用量容器にて保存料を添加して提示され得る。該組成物には、懸濁剤、液剤または乳剤（油性または水性ビヒクル中）などの形態が採用され得、製剤化剤、例えば、懸濁化剤、可溶化剤および／または分散剤などを含めてもよい。あるいはまた、活性成分は、使用前に適当なビヒクル、例えば、滅菌パイロジェンフリー水で再構成される粉末形態であり得る。

また、該化合物は、例えば、慣用的な坐剤用基剤（ココアバターまたは他のグリセリドなど）を含有する経直腸組成物（坐剤または貯留注腸剤など）に製剤化され得る。

前述の製剤に加えて、該化合物はまた、デポー調製物として製剤化され得る。かかる長期作用性製剤は、埋入（例えば、皮下もしくは筋肉内）または筋肉内注射によって投与され得る。したがって、例えば、該化合物は、適当なポリマー材料もしくは疎水性材料（例えば、許容され得る油中の乳剤として）またはイオン交換樹脂を用いて製剤化され得るか、あるいは、やや溶けにくい誘導体として（例えば、やや溶けにくい塩として）製剤化され得る。リポソームおよび乳剤は、親水性薬物の送達用ビヒクルまたは担体のよく知られた例である。

該組成物は、所望により、パックまたはディスペンサーデバイスにて提示され得、これらには、活性成分を含有する１つ以上の単位投薬形態が内包され得る。パックは、例えば、金属またはプラスチックのホイルで構成されたもの（ブリスターパックなど）であり得る。パックまたはディスペンサーデバイスには、投与のための使用説明書が添付されていてもよい。

また、本発明は、本発明の治療レジメンを実施するためのキットを提供する。かかるキットは、１つ以上の容器内に、治療有効量の薬学的に許容され得る形態のヒ素化合物を含む。本発明のキットのバイアル内のヒ素化合物は、例えば、滅菌生理食塩水、デキストロ
ース液もしくは緩衝液、または他の薬学的に許容され得る滅菌液と合わされた薬学的に許容され得る液剤の形態であり得る。あるいはまた、その複合体を凍結乾燥または乾燥させてもよい；この場合、キットは、任意選択でさらに容器内に、該複合体を再構成させて注射目的の液剤を形成するための、好ましくは滅菌された薬学的に許容され得る溶液（例えば、生理食塩水、デキストロース液など）を含む。また、キットは、痛みの処置および／または炎症のための別の治療用薬剤（１種または複数種）を適切な量で含むものであってもよい。かかる他の治療用薬剤は、キットに含めるヒ素化合物との併用薬として製剤化されたものであってもよく、別々に製剤化されたものであってもよい。

別の実施形態において、本発明のキットは、さらに、複合体を注射するための針またはシリンジ（好ましくは滅菌形態でパッケージングされている）および／またはパッケージングされたアルコールパッドを含む。任意選択で、医師または患者がヒ素化合物を投与するための使用説明書が含まれている。

急性もしくは慢性の痛みおよび／または炎症の管理におけるヒ素化合物の治療用量の大きさは、処置対象の病状の重症度および投与経路により異なる。用量、および場合によっては投与頻度もまた、個々の患者の年齢、体重、状態および応答によって異なる。一般に、本明細書に記載の病状に対する総日用量範囲は、おおむね約１０μｇ〜約２００ｍｇであり、分割用量で投与され、非経口または経口または経表面投与される。好ましい総日用量は、活性成分が約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約７０ｍｇ／ｋｇ；最も好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇである。

一例の動物で得られた有効投薬量を、当該技術分野で知られた換算係数を用いて別の動物（例えば、ヒト）における使用のために換算してもよい。例えば、Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈら，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐｏｒｔｓ ５０（４）：２１９−２４４（１９６６）および対応する表面積投薬量係数に関する表１を参照のこと。

所望の血中レベルを、血漿レベルによって確認しながらヒ素化合物の連続注入によって維持してもよい。担当医師には、毒性または骨髄、肝臓もしくは腎臓の機能不全が理由で、どのようにして、およびいつ治療を終了、中断または低投薬量に調整するかがわかるであろうことに注意されたい。また逆に担当医師には、臨床応答が充分でない場合、どのようにして、およびいつ処置を高レベルに調整する（毒性副作用は防ぐ）かがわかるであろう。

この場合も、患者に有効投薬量のヒ素化合物が提供されるのに適当な任意の投与経路が使用され得る。例えば、経口、経直腸、経膣、経皮、非経口（皮下、筋肉内、髄腔内など）が使用され得る。投薬形態としては、錠剤、トローチ剤、カシェ剤、分散剤、懸濁剤、液剤、カプセル剤、パッチなどが挙げられる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ参照）。

本発明の医薬組成物は、活性成分としてヒ素化合物またはその薬学的に許容され得る塩を含み、また、薬学的に許容され得る担体および任意選択で他の治療用成分（例えば、痛み治療のための慣用的な投薬物）を含んでいてもよい。用語「薬学的に許容され得る塩」は、薬学的に許容され得る無毒性の酸および塩基（例えば、無機系および有機系の酸および塩基）から調製される塩をいう。

医薬組成物としては、経口、経直腸、粘膜経路、経皮、非経口（例えば、皮下、筋肉内、髄腔内および静脈内）に適した組成物が挙げられるが、任意の所与の場合で最も適当な経路は、処置対象の病状の性質および重症度に依存する。

静脈内注射または注入用の組成物が使用される場合、使用される適当な投薬量範囲は、例えば、総日用量で約０．５ｍｇ〜約１５０ｍｇである。

また、該ヒ素担持体は、薬物送達デバイスとして使用される負荷および非負荷マトリックス（酢酸セルロース膜など）によって送達され得、また、標的化送達系（抗体または特異的抗原に結合させた融合誘導性（ｆｕｓｏｇｅｎｉｃ）リポソームなど）によっても送達され得る。

実際の使用では、ヒ素化合物は、慣用的な医薬配合手法に従って医薬用担体と充分に混合された活性成分として合わされたものであり得る。担体には、投与、例えば、経口または非経口に所望される調製物の形態（例えば、錠剤、カプセル剤、粉末剤、静脈内注射剤または注入剤）に応じて多種多様な形態が採用され得る。経口投薬形態のための組成物の調製において、経口液状調製物、例えば、懸濁剤、液剤、エリキシル剤、リポソーム剤およびエーロゾル剤の場合は、任意の通常の医薬用媒体、例えば、水、グリコール、油類、アルコール、フレーバー剤、保存料、着色剤などが使用され得；経口固形調製物、例えば、粉末剤、カプセル剤および錠剤の場合は、デンプン、糖類、微晶質セルロース、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などが使用され得る。非経口投薬形態、例えば静脈内注射または注入のための組成物の調製では、当業者に知られた同様の医薬用媒体、例えば、水、グリコール、油類、バッファー、糖、保存料などが使用され得る。かかる非経口組成物の例としては、限定されないが、デキストロース５％ｗ／ｖ、通常の生理食塩水または他の溶液が挙げられる。ヒ素化合物の総用量は、静脈内投与液のバイアルにて投与され得、例えば約２ｍｌ〜約２０００ｍｌの範囲である。希釈液の容量は、投与する総用量によって異なる。

本発明の他の実施形態は、本明細書を検討し、本明細書に開示した発明を実施することで当業者に自明となろう。

実施例１ 鎮痛活性を試験するための動物モデルの使用
化学物質誘発性の痛みの動物モデルを使用し、種々の濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムおよび三酸化ヒ素の鎮痛活性を調べた。

マウスホルマリン試験 メタ亜ヒ酸ナトリウムまたは三酸化ヒ素を、１０匹のＣＤ−１（Ｃｒｌ．）由来雄マウス（体重２４＋／−２ｇ）の群に、それぞれ経口（ＰＯ）または
腹腔内（ＩＰ）投与した。メタ亜ヒ酸ナトリウムおよびビヒクル（蒸留水）または三酸化ヒ素およびビヒクルを、各々、ホルマリン０．０２ｍｌ、２％溶液の足蹠底注射の１時間前に投与した。ホルマリン注射後の０〜３５分間の５分毎の時間区間に記録されたホルマリン誘導性後足舐め時間の５０％以上（≧５０％）の減少を、有意な鎮痛活性を示すとした。一元配置ＡＮＯＶＡを用いて統計学的解析を行なった後、ダネット検定によって、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたは三酸化ヒ素で得られた結果をビヒクル（対照）単独で得られた結果と比較した。Ｐ＜０．０５を有意とみなした。結果を以下にまとめる。

結果は、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムの経口投与により、ホルマリン刺激負荷後の１５〜２０分において有意な鎮痛活性がもたらされたことを示す。標準品のモルヒネでは予測どおり、ホルマリン注射後、初期（０〜５分）および後期（１５〜２５分）において有意な鎮痛効果が引き起こされた。

１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素の腹腔内注射により、ホルマリン刺激負荷後０〜５分、５〜１０分、１０〜１５分、１５〜２０分、２０〜２５分および２５〜３０分の時間区間において、ホルマリン刺激負荷に対する舐め応答の有意な抑制がもたらされたが、低用量の三酸化ヒ素（１ｍｇ／ｋｇ）に対する応答は、刺激負荷後５〜１０分および１０〜１５分の時間区間に限定的であった。同時に行なった標準的なモルヒネＨＣｌは、ホルマリン刺激負荷後０〜２５分間において鎮痛効果を伴った。

酢酸誘発性痛み応答アッセイ マウス酢酸誘発性痛み応答アッセイにおいて、メタ亜ヒ酸ナトリウムを鎮痛活性の可能性について評価した。マウスにおいて、メタ亜ヒ酸ナトリウムを１０、１および０．１ｍｇ／ｋｇの用量で経口投与し、痛覚脱失の可能性を調べた。蒸留水をビヒクルとして使用した。酢酸注射（０．５％、２０ｍｌ／ｋｇ ＩＰ）の１時間前、メタ亜ヒ酸ナトリウムを１０匹のＣＤ−１由来雄マウス（体重２４±２ｇ）の群に経口投与した。酢酸投与５〜１０分後における対照群と比べて５０％以上（≧５０％）の身悶え応答回数の減少を、有意な鎮痛活性と定義した。

１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムの投与は、有意な鎮痛活性を伴った（平均７回の身悶え事象に対して対照では１６回）。低用量では、メタ亜ヒ酸ナトリウムは鎮痛効果を有しなかった。
実施例２ メタ亜ヒ酸ナトリウムおよび三酸化ヒ素の抗炎症活性を試験するための動物モ
デルの使用
メタ亜ヒ酸ナトリウムおよび三酸化ヒ素を、リポ多糖誘発性敗血症性ショックに対する保護効果の可能性についてマウスにおいて試験した。

ＬＰＳ誘発性炎症促進性サイトカインの産生 メタ亜ヒ酸ナトリウムを０．１、１および１０ｍｇ／ｋｇの用量で、リポ多糖（ＬＰＳ；３０ｍｇ／ｋｇのＩＰ；大腸菌０５５：Ｂ５）での刺激負荷１時間前に経口投与した。ＬＰＳ刺激負荷の２時間後、０．１ｍｌの血液試料をマウスの眼窩後から採取し、遠心分離して血漿を得、Ｌｕｍｉｎｅｘによってサイトカイン測定を行なった。血液採取後、死亡率を１２時間毎に３日間にわたってモニターし、記録した。５０パーセント以上（≧５０％）の死亡率の低下は有意な保護を示す。結果を以下の表に示す。

結果は、メタ亜ヒ酸ナトリウムが０．１、１．０および１０ｍｇ／ｋｇの用量でＰＯで、マウスにおいて、ＬＰＳ誘発性敗血症性ショックに対する中等度の保護をもたらしたことを示す。また、１および１０ｍｇ／ｋｇのＰＯメタ亜ヒ酸ナトリウムでＩＬ−１β分泌の有意な抑制、ならびに１０ｍｇ／ｋｇでＩＬ−６の阻害（デキサメタゾンでは３ｍｇ／ｋｇに対して）も観察された。メタ亜ヒ酸ナトリウムは、ＴＮＦ−α、ＫＣまたはＭＣＰ−１の分泌に対して効果がなかった。

肺組織におけるＬＰＳ誘発性好中球増加症 メタ亜ヒ酸ナトリウムを、ＬＰＳ誘発性好中球増加症のマウスモデル肺組織において保護活性の可能性について評価した。メタ亜ヒ酸ナトリウムを０．１、１および１０ｍｇ／ｋｇの用量で、ＬＰＳでの刺激負荷の２時間前に経口（ＰＯ）投与した。ＬＰＳ刺激負荷の２４時間後、気管支肺胞洗浄液を個々の動物から回収し、総細胞計数および示差的計数を行なった。

１０ｍｇ／ｋｇのＰＯメタ亜ヒ酸ナトリウムは細胞計数において、なんら有意な変化を伴わなかった。しかしながら、１ｍｇ／ｋｇでは、ＬＰＳで処置したビヒクル対照と比べて、白血球（総数）および好中球（示差的）ならびに単球の計数に有意な減少が観察された。

１ｍｇ／ｋｇのＰＯデキサメタゾンでは、対照と比べ、総白血球、ならびに示差的好中球および単球計数の抑制の点で、有意な保護がもたらされた。

１０ｍｇ／ｋｇでは、メタ亜ヒ酸ナトリウムの投与は、標準であるデキサメタゾンと同
様、ＴＮＦ−αの有意な抑制と相関していたが、１または０．１ｍｇ／ｋｇでは相関していなかった。１ｍｇ／ｋｇでは、メタ亜ヒ酸ナトリウムの投与は、デキサメタゾンと同様、ＫＣの有意な低下と相関していたが、０．１ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇでは相関していなかった。ＫＣ効果は、用量と関連しないようであった。いずれの濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムでも、気管支肺胞洗浄液中にＩＬ−１β、ＩＩ−６またはＭＣＰ−１の分泌は観察されなかった。
実施例３ 免疫抑制試験
膝窩リンパ節（ＰＬＮ）の増殖症は、対移植片性宿主試験において、リンパ系反応の信頼できるインジケータとして使用されている。ラットの異所性心臓移植モデルは、免疫抑制剤の評価に好成績で使用されている。ＰＬＮ増殖症アッセイと心臓移植モデルの組合せを使用し、同種反応性増殖と同種拒絶反応の両方における宿主リンパ球の有効性に関する情報を得た。その結果は、メタ亜ヒ酸ナトリウムが免疫抑制効果を有することを示す。

心臓移植 ドナー心臓をレシピエントマウスに既報のとおりに移植した（Ｃｈｅｎら，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，５６：６６１−６６６，１９９３；Ｃｈｅｎら，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１５２：３１０７−３３１８，１９９４）。移植したドナー心臓を毎日チェックし、メタ亜ヒ酸ナトリウムを、２週間、または移植片拒絶の発生のいずれか早い方まで投与した。

心臓移植モデルにおいて、高用量（１０ｍｇ／ｋｇ）のメタ亜ヒ酸ナトリウムでは、同種抗原で処置した動物においてわずかな免疫抑制効果が示され、移植片に対して全般的に正の効果が示された。メタ亜ヒ酸ナトリウムは高用量で、同種抗原に対する宿主リンパ球の反応を障害し得るようである。したがって、本発明のヒ素化合物は免疫抑制剤でもある。
実施例４ ＩＩ型コラーゲン誘発性関節炎
ラットコラーゲン関節炎は多発性関節炎の実験モデルであり、前臨床検査もしくは臨床検査中であるか、またはこの疾患の治療薬として現在使用されているかのいずれかである数多くの関節炎治療剤の前臨床試験で広く使用されている。このモデルの顕著な特徴は、頑健で容易に測定可能な多関節での炎症の確実な発症と進行、パンヌス形成および軽度から中等度の骨吸収を伴う顕著な軟骨破壊、ならびに骨膜骨増殖である。ＩＩ−１の産生または活性を阻害する治療用薬剤は、この試験系において特に活性であるが、他の型の抗炎症剤も良好ないし優れた活性を有する。

この試験は、ラットのＩＩ型コラーゲン関節炎の発症の際に起こる炎症（足の腫脹）、軟骨破壊および骨吸収の抑制のために、それぞれ毎日投与したメタ亜ヒ酸ナトリウムの用量応答性の経口（ＰＯ）有効性、および三酸化ヒ素の腹腔内（ＩＰ）有効性を調べるために行なった。

動物（８匹／群、正常は４匹／群）をイソフルランで麻酔し、２ｍｇ／ｍＬのウシＩＩ型コラーゲン（Ｅｌａｓｔｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，オーエンズビル，ミズーリ州）を含有する３００μｌのフロイント不完全アジュバント（Ｄｉｆｃｏ，デトロイト，ＭＩ）を、第０日および第６日に、尾の付け根と背中の２つの部位とに注射した。ＩＰまたは経口経路による投与（２４時間間隔で毎日（ＱＤ））を試験の第０日に開始し、第１６日まで継続した。実験群は以下のとおりとした。

ラットの体重を試験の第０日、３日、６日、９〜１７日目に測定し、カリパスで踝の寸法を、第９日（または関節炎の第０日）から始めて毎日測定した。第１７日目に最後の体重測定後、動物を麻酔して血清を採取し、次いで安楽死させて組織を採取した。後足を内果と外果の水平面で離断し、重量を測定し、顕微鏡検査用に膝とともにホルマリン中に入れた。各動物から肝臓、脾臓および胸腺を取り出し、重量を測定し、廃棄した。

ＰＫ用試料採取を、第１６日目に６動物／群（関節炎）を用いて行ない、以下のとおり：動物１、２、３は、投与前、２時間および８時間の試料のための採血、動物６、７および８は、投与後１、４および１２時間の試料のための採血とした。

メタ亜ヒ酸ナトリウム処置ラットの形態学的病理学検査を行なったが、三酸化ヒ素処置動物に対しては何も行なわなかった。この試験では、保存および脱灰した踝および膝の関節を縦方向（踝）または前面（膝）で半分に切断し、等級付けされたアルコールおよび清浄剤によって処理し、パラフィン中で浸潤および包埋し、切片化し、トルイジンブルーで染色した。すべての組織は、有資格獣医学的病理検査医が顕微鏡で検査した。

コラーゲン関節炎の踝および膝に、炎症、パンヌス形成および骨吸収について０〜５（０＝正常；５＝重度）のスコアを付けた。体重／足重量、足のＡＵＣ（曲線下面積）パラメータおよび組織病理学検査パラメータの統計学的解析を、スチューデントのｔ検定を用いて評価し、有意性を有意性レベル５％に設定した。

足重量およびＡＵＣの抑制割合は、下記式：
抑制％＝Ａ−Ｂ／Ａ×１００
Ａ＝疾患対照平均−正常平均
Ｂ＝処置平均−正常平均
を用いて計算した。

結果：メタ亜ヒ酸ナトリウム：体重減少（関節炎によるもの）は、ビヒクル処置疾患対照ラットと比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（１００％抑制）またはＭＴＸ（９６％）での処置によって有意に抑制された。ＥＤ_５０計算値＝１．９２９ｍｇ／ｋｇ。

踝径の有意な抑制が、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（第９、１１〜１７日目）またはＭＴＸ（第１０〜１７日目）で処置したラットに見られた。

踝径（ＡＵＣ）の抑制は、疾患対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（７３％抑制）またはＭＴＸ（９７％）で処置したラットで有意であった。ＥＤ_５Ｏ計算値＝８．４９９ｍｇ／ｋｇ。

最終足重量の抑制は、疾患対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８３％）またはＭＴＸ（９５％）で処置したラットで有意であった。ＥＤ_５Ｏ計算値＝７．１１６ｍｇ／ｋｇ
相対肝臓重量は、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（疾患対照より１７％増加）で処置したラットで、正常対照および関節炎対照より上に増加した。

相対脾臓重量は、疾患対照ラットと比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（１０％）またはＭＴＸ（１０％）での処置によって減少した。相対胸腺重量は、疾患対照と比較すると、１ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（２０％）で処置したラットにおいて有意に減少した。

ビヒクル処置疾患対照ラットはすべて、少なくとも一方、通常は両方の踝関節に顕著ないし重度の滑膜炎および関節周囲炎を有し、微小ないし中等度のパンヌスおよび骨吸収、ならびに微小ないし顕著な軟骨損傷を伴っていた。対照的に、踝の組織病理学検査パラメータはすべて、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８５％抑制）またはＭＴＸ（９７％）で処置したラットにおいて、正常まで有意に抑制された。ＥＤ_５０計算値＝７．０８０ｍｇ／ｋｇ。

１０匹のビヒクル処置疾患対照ラットはすべて、少なくとも一方の膝関節に中等度ないし重度の滑膜炎および関節周囲炎を有し、微小ないし中等度のパンヌスおよび骨吸収、ならびに軟骨損傷を伴っていた。対照的に、膝の組織病理学検査パラメータは、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８７％抑制）またはＭＴＸ（１００％）で処置したラットにおいて、正常まで有意に抑制された。ＥＤ_５０計算値＝７．９２４ｍｇ／ｋｇ。

この試験で得られた結果は、ラットを１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムで毎日経口処置すると、ＩＩ型コラーゲン関節炎の発症に関連する臨床的変化および組織病理学的変化が有効に抑制されることを示す。

結果：三酸化ヒ素およびメタ亜ヒ酸ナトリウム：体重減少は、ビヒクル処置疾患対照ラットと比較すると、１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素（５５％抑制）でのＩＰ、ＱＤ処置、または１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８５％）でのＰＯ、ＱＤ処置によって有意に抑制された。

踝径の減少の有意な抑制は、１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素（第１０〜１７日目）、または１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（第１１〜１７日目）で処置したラットに見られた。踝径ＡＵＣの抑制は、疾患対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素（８０％抑制）でＩＰ、ＱＤ処置したラット；および１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（６６％）でＰＯ、ＱＤ処置したラットで有意であった。

最終足重量の抑制は、疾患対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素（７１％抑制）でＩＰ、ＱＤ処置したラット、または１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（６９％）でＰＯ、ＱＤ処置したラットで有意であった。

相対肝臓重量は、１もしくは１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素（それぞれ６％および１０％）、または１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（１４％）で処置したラットで、関節炎対照より上に増加した。

相対脾臓重量は、疾患対照ラットと比較すると、１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素（２１％）または１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（１０％）での処置によって、正常対照および関節炎対照より下に減少した。相対胸腺重量は、１０ｍｇ／．ｋｇの三酸化ヒ素で処置したラットにおいて、関節炎対照より下に減少した。

この試験の結果は、ラットを、１０ｍｇ／ｋｇの三酸化ヒ素で毎日腹腔内処置するか、または１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムで毎日経口処置すると、ＩＩ型コラーゲン関節炎の発症に関連する臨床的変化が効果的に抑制されることを示す。
実施例５ アジュバント誘発性関節炎
この試験は、確立されたアジュバント関節炎の関節周囲炎および骨吸収の抑制におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（ＰＯ、ＱＤ、第０〜１３日）の有効性を評価するために行なった。ラットアジュバント関節炎は、数多くの関節炎治療剤の前臨床試験で広く使用されている多発性関節炎の実験モデルである。このモデルの顕著な特徴は、頑健で容易に測定可能な多関節での炎症の確実な発症と進行、顕著な骨吸収および骨膜骨増殖である。軟骨破壊が起こるが、存在している炎症および骨破壊と比較すると、不釣合いに軽度である。アジュバントモデルの使用により、関節以外のさまざまな組織において病理学的変化を試験する機会が提供される。

動物を無作為に群分けし（アジュバントは８匹／群、正常対照は４匹／群）、イソフルランで麻酔し、リポイドアミン（６０ｍｇ／ｍｌ）を含有する１００μｌフロイント完全アジュバント（Ｓｉｇｍａ，セントルイス，ＭＯ）を、第０日に、尾の付け根に注射した。ビヒクル（水）、メタ亜ヒ酸ナトリウム（３、１０、もしくは３０ｍｇ／ｋｇ）またはメトトレキサート（ＭＴＸ）（０．１ｍｇ／ｋｇ）のＰＯ経路による投与を第０日（予防的処置）に開始した。処置は第１３日まで継続した。実験群は以下のとおりとした。

ラットの体重を第０、４および８〜１３日に測定し、そのときに投与容量を調整した。第７日目（腫脹が始まる前だが、全身性疾患の確立後）、カリパスで踝関節の寸法を測定した。第８〜１４日に再度、踝を測定した。最終体重を第１４日目に測定した。第１４日目、動物を安楽死させ、後足、肝臓および脾臓を取り出し、重量測定した。足および脾臓をホルマリン中に入れ、Ｈ＆Ｅおよび顕微鏡検査用に処理した。

アジュバント関節炎の踝（右側のみ）に、炎症および骨吸収について０〜５（０＝正常；５＝重度）のスコアを付けた。踝関節径の統計学的解析を、用量曲線下面積（ＡＵＣ）を求めることにより解析した。ＡＵＣの計算のため、各ラットの踝関節の毎日の測定値（カリパスを使用）をマイクロソフト社のＥｘｃｅｌに入力し、発病してから終了日までの処置期間の面積をコンピュータ処理した。各群の平均を求め、関節炎対照に対する抑制％
を、処置動物と正常動物の値を比較することにより計算した。各群の足重量、脾臓および肝臓の重量ならびに組織学的検査パラメータ（平均±ＳＥ）の差について、スチューデントのｔ検定または他の適切な解析（データ検討後に決定）を用いて解析した。どちらの場合も、有意性をｐ≦０．０５に設定した。

足重量およびＡＵＣの抑制割合は、下記式：
抑制％＝Ａ−Ｂ／Ａ×１００
Ａ＝疾患対照平均−正常平均
Ｂ＝処置平均−正常平均
を用いて計算した。

ＥＤ_５０の計算は、抑制％を用量濃度の自然対数に対してプロットし、Ｓ字状用量応答曲線（可変勾配）を作成することにより行なった。与えた最低用量より２ｌｏｇ単位少ない用量値を割り当てることにより、グラフにゼロ濃度用量（ビヒクル群）を組み込んだ。曲線の範囲を０〜１００％に設定した。ソフトウェアを用いてこの曲線に対する等式を得、動物がパラメータの５０％抑制を示し得る濃度（ＥＤ_５０）を計算した。

結果 経時的な平均体重減少（関節炎によるもの）は、ビヒクル処置対照ラットと比較すると、０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（第１０〜１４日で有意）でＰＯ処置したラットにおいて抑制された。経時的な平均体重減少は、ビヒクル対照と比較すると、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（第４、８、９日）で処置したラットにおいて有意に大きかった。

第０日からの体重減少の抑制は、０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（９１％抑制）で処置したラットで有意であった。第０日からの体重減少の抑制は、ビヒクル対照と比較すると、メタ亜ヒ酸ナトリウム（３、１０および３０ｍｇ／ｋｇ）での処置では有意ではなかった（２〜１４％）。

ビヒクル対照と比べた踝径の増大の有意な抑制は、３ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（第９日で有意）、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（第８〜１４日で有意）、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（第８〜１４日で有意）、および０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（第８〜１４日で有意）でＰＯ処置したラットにおいて観察された。

ビヒクル対照と比べた踝径ＡＵＣ増大の有意で用量応答性の抑制は、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（４６％抑制）、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８３％抑制）および０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（９６％抑制）でＰＯ処置したラットにおいて観察された。メタ亜ヒ酸ナトリウムのＥＤ５０計算値＝１０．６２ｍｇ／ｋｇ。

関節炎による最終足重量の増加は、ビヒクル対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（２８％抑制）、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８３％抑制）、および０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（９９％抑制）でＰＯ処置した動物において有意にかつ用量応答的に抑制された。メタ亜ヒ酸ナトリウムのＥＤ_５０計算値＝１４．２１ｍｇ／ｋｇ。

相対脾臓重量（炎症および髄外造血の促進により増加）は、ビヒクル対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（５０％減少）、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（９１％減少）、および０．０１ ＭＴ（７７％減少）でＰＯ処置したラットにおいて、正常まで有意にかつ用量応答的に減少した。

相対肝臓重量は、ＭＴＸ（１００％減少）で処置したラットにおいて正常まで有意に減
少した。相対肝臓重量の減少は、メタ亜ヒ酸ナトリウム（３、１０および３０ｍｇ／ｋｇ）での処置では有意ではなかった（７〜２９％）。

組織病理学的骨吸収は、ビヒクル対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（５９％抑制）、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８１％抑制）、および０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（１００％抑制）でＰＯ処置したラットにおいて、有意にかつ用量応答的に抑制された。メタ亜ヒ酸ナトリウムのＥＤ_５０計算値＝９．２４３ｍｇ／ｋｇ。

ビヒクル対照と比べて有意で用量応答的な組織病理学的炎症の抑制は、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（２４％抑制）、３０ｇｍ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（７６％抑制）および０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（９９％抑制）でＰＯ処置したラットにおいて観察された。メタ亜ヒ酸ナトリウムのＥＤ_５０計算値＝１７．２５ｍｇ／ｋｇ。

踝の測定値（背側から腹側）は、ビヒクル対照と比較すると、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（３６％抑制）、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（８１％抑制）および０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（９７％抑制）での処置によって有意にかつ用量応答的に抑制された。メタ亜ヒ酸ナトリウムのＥＤ_５０計算値＝１３．６５ｍｇ／ｋｇ。

脾臓の炎症およびリンパ組織萎縮は、ビヒクル対照と比較すると、１０ ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（それぞれ３２％および２９％抑制）、３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（それぞれ８９％および３９％抑制）ならびに０．１ｍｇ／ｋｇのＭＴＸ（それぞれ１００％および５０％抑制）を受けたラットにおいて、有意にかつ用量応答的に抑制された。

この試験の結果は、１０ｍｇ／ｋｇの（ＱＤ）または３０ｍｇ／ｋｇの（ＱＤ２）メタ亜ヒ酸ナトリウムでの経口（ＰＯ）処置によって、アジュバント関節炎の発症に関連する臨床的変化および組織病理学的変化が効果的かつ用量応答的に抑制されることを示す。日用量３０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムは毒性であった（体重の変化に基づく）が、疾患の活動期中の隔日投与は、充分耐容性であり、次いで、第１０日から試験終了まで疾患対照に関して体重を追跡した。
実施例６ メタ亜ヒ酸ナトリウムでの腫瘍誘発性骨溶解の処置
この試験では、腫瘍誘発性の骨の骨溶解の処置のための候補治療薬であるメタ亜ヒ酸ナトリウムを、骨の癌の同系ラットモデルを用いて評価した。簡単には、ラット乳腺癌細胞株ＭＲＭＴ−１を、第１日に近位脛骨の髄腔内に注射し、動物に、第１日から１４日目まで１日１回ビヒクルメタ亜ヒ酸ナトリウムを強制経口投与した。モルヒネを参照品として使用し、挙動試験の直前に投与した。実験期間終了時、左脛骨を切除し、腫瘍性骨溶解をＸ線撮影によって確認した。Ｘ線写真を使用し、マイクロＣＴスキャンのため各群から２つの代表的な骨選択した。骨試料はすべて、ＴＲＡＰ染色および破骨活性（再吸収表面）の評価のため、ならびに骨構造および腫瘍負荷の組織病理学的評価のために脱灰した。メタ亜ヒ酸ナトリウムの有効性は、腫瘍接種ビヒクル処置群との比較を基にした。

組織病理学検査の結果により、用量レベル１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムは、癌誘発性骨損傷の種々の態様の改善に対してプラスの傾向を示すことが示された。このデータは、１０ｍｇ／ｋｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムが、腫瘍誘発性破骨細胞および骨溶解の改善に対して強いプラスの傾向を有したことを示す。データを図１に示す。
実施例７ 経口およびＩ．Ｖ投与後のメタ亜ヒ酸ナトリウムの薬物動態プロフィール
雄ＣＤ−１マウスにおいて、メタ亜ヒ酸ナトリウムの経口（ＰＯ）および静脈内（ＩＶ）投与後の血漿中および脳内薬物動態プロフィールを調べた。７３匹の雄ＣＤ−１（ＩＣＲ）アルビノマウス（ほぼ４週齢、試験開始時１８〜２７ｇ）を無作為に処置群に割り当
てた。試験薬物の投与前、動物を２時間絶食させた。動物を１０ｍｇ／ｋｇの（ＰＯ）または５ｍｇ／ｋｇの（ＩＶ）で処置し、標的投与容量を１０ｍＬ／ｋｇとした。投与後、血液試料（０．２〜０．３ｍＬ）を大静脈から、イソフルラン麻酔下、投与後５、１５、３０、６０、１２０、２４０、４８０、１４４９０、１９２０、２８８０、３３６０、および４３２０分の時点で採取した。各血液採取の直後、動物を致死させ、投与後５、３０、６０、１２０、２４０、４８０、１４４０、２８８０および４３２０分の時点で脳を回収した。

血漿試料および全脳試料を、１０５℃でテフロン（登録商標）製ボンベ内にて濃硝酸で消化させた。ＩＣＰ−ＭＳによる解析のため、消化物を４０ｍＬまで希釈した。消化物を誘導結合プラズマ内に吸引し、生じたイオンを真空界面によって四重極質量解析装置内に抽出した。試料中のヒ素の量を、質量７５の標準溶液での応答との比較によって測定した。ＮＲＣＣ−ＤＯＬＴ−３およびＤＯＲＭ−２を標準参照物質として解析した。

データに対する試験試料濃度を解析し、ノンコンパートメント解析（ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ、バージョン２．１）によって以下のＰＫパラメータを得た。

結果を以下の表に示す。：

Claims (8)

1. 哺乳動物における組織または器官の拒絶反応の処置または予防のための医薬組成物の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウムの使用。
2. 哺乳動物における組織または器官の拒絶反応の処置に使用するための免疫抑制医薬組成物の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウムの使用。
3. 治療有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウムを含み、ここにおいて治療有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウムが哺乳動物における組織または器官の拒絶反応を減少または予防するのに十分である、キット。
4. 哺乳動物が対宿主性移植片病を患っている、請求項１に記載の使用。
5. 移植された組織のレシピエントである哺乳動物における同種抗原に対する宿主リンパ球の抑制のための経口投与用医薬組成物の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウムの使用。
6. 哺乳動物における組織の同種拒絶反応の治療のための経口投与用医薬組成物の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウムの使用。
7. 組成物が、分割された用量で投与される、請求項５または６に記載の使用。
8. 治療有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウムを含み、ここにおいて治療有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウムが移植された組織のレシピエントである哺乳動物における同種抗原に対する宿主リンパ球の抑制を引き起こすのに十分である、キット。