JP2014523442A - 改善されたピジウム抽出方法 - Google Patents
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Abstract
Description
ピジウム:ピジウムは、プルヌス・アフリカナ(Prunus africana)の木、またはいわゆる「アフリカンプラム(African plum)の木」の樹皮から抽出される軟質ゴム様の塊である。ピジウムという言葉は、この特許出願で用いられる場合は常に、植物源由来の材料、すなわちプルヌス・アフリカナまたはプルーン(Prunus domestica)(インディアンプラム(Indian Plum))から抽出により得られるハーブ抽出物を指す。抽出物ではなく植物単独の記述において「ピジウム」という言葉が用いられるケースにおいても、同様に記述されたものとする。
ピジウムは、プルヌス・アフリカナの樹皮から得られる抽出物(ゴム様の塊)である。プルヌス・アフリカナの木は、アフリカの森林地帯原産の常緑樹であり、およそ45mの高さまで成長することができる。この植物は、バラ科モモ連サクラ属アフリカナ種に属する。葉は厚く長方形であり、花は、小さく白色である。ピジウムの果実は赤色の液果であり、熟するとサクランボのようになる。樹皮(赤色、茶色、または灰色)が、医薬目的で用いられる植物の部分である。近縁種は、プルーン(Hook) F.Kalkm、またはピジウム・ストリカスラ(Pygeum stricasla)(Hook)であり、さらにオウルヌス・ラティフォリウム(Prunus Latifolium)、プルヌス・パルビフォラム(Prunus parviforum)、プルヌス・クラシフォルニ(Prunus crassifolluni)、プルヌス・ルシタニカ(Prunus lusitanica)、およびプルヌス・ラウロセラスス(Prunus laurocerasus)も挙げられる。
ピジウムは、臨床的な重要性を有する。ピジウムは、数十年にわたり肥大した前立腺(良性前立腺肥大症またはBPH)の治療および予防に用いられてきた。ピジウムに含まれる活性成分は、ベータシトステロールである。粉末化したピジウムの木の樹皮は、アフリカ先住民により泌尿器の問題を治療するのに用いられてきた。現代において、単に「粉末化した樹皮」(これは、規格化が難しいという難題に直面している)を使用するというのではなく、ピジウムの木、すなわちプルヌス・アフリカナ(またはピジウム・アフリカヌムとも称されており、これは、この木が「ピジウム」供給源であることに起因する)からの「分析的に定義された抽出物」の使用に注目が置かれている。オンライン情報(http://www.drugs.com/npc/pygeum.html)のように、ピジウムは、
・良性前立腺肥大症(BPH)の症状を改善するため、および
・性機能を改善するため
に用いられてきた。
・抗炎症剤として、
・前立腺分泌物を増加させるため、および
・腺領域における所定のホルモンを減少させて肥大(膨潤)を縮小するため
の治療剤でもある。
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BPHを治療するために欧州で用いられるピジウムの容認されている形態は、総ステロールを13%(典型的にはベータ-シトステロールとして計算された)に規格化したプルヌス・アフリカナの親油性抽出物である。軽度から中度のBPHを有する男性は、50〜100mgを1日2回摂取することもある。二重盲検試験から、1日1回の100mgは、1日2回の50mgと同程度に有効であることが見出された。有効性を決定するには、ピジウムは、少なくとも6ヶ月間モニターされるべきである。ピジウムを使用するBPHを有する男性は、医師の指示を受けるべきである。ピジウムは、良性前立腺肥大症に関する25から200mgの1日用量での臨床試験で研究されてきた。これは、規格化された調製物のタデナン(Tadenan)およびピジェニル(Pigenil)として入手することができる。これらはいずれもカプセルの形態であり、50mgのプルヌス・アフリカナ抽出物(ピジウム)を含む。推奨される投与量は、1日2回である。
ピジウムの作用機序は、以下のウェブリンクで詳細に説明されている:(http://www.evitamins.com/encyclopedia/assets/nutritional-supplement/pygeuni/how-it-works)。簡単に言えば、化学的解析および薬理学的研究によって、ピジウム樹皮の親油性抽出物は、2種類の活性成分を有することが確認された:
1)ベータ-シトステロールなどの植物ステロール:これらは、良性前立腺肥大症(BPH)を有する男性の前立腺に蓄積しやすいホルモン様物質(プロスタグランジン)の体内での形成を妨害することにより抗炎症性作用を働かせる。
2)フェルラ酸エステル:これらは、前立腺におけるテストステロン活性を間接的にコントロールすることにより、BPHのリスクを減少させる可能性がある。
問題
植物の枯死をもたらす、「再生不能な」供給源、すなわち植物の樹皮からの抽出のための、原材料の供給の制限。これは環境問題につながり、植物「プルヌス・アフリカナ」は絶滅危惧種と宣告された。
原材料の「無制限の供給」をもたらす、「再生可能な供給源」に基づく新規の方法。新規の方法は植物を枯死させることはなく、「再生不能な」供給源、すなわち樹皮を用いるために植物が枯死する従来技術の方法から得られるものと(分析プロファイルおよび生物活性に関して)同じ品質のピジウムを生産する。
「再生不能な」供給源の代わりに「再生可能な供給源」からの新規のピジウム抽出方法の開示
本発明の方法は、ピジウム抽出に、植物の「剪定過程」中に得られた「再生可能な」供給源、すなわち剪定された幹の伐採材/側枝を使用することに基づく。本発明において生薬で用いられる植物の部分は樹皮ではなく「剪定された幹の伐採材」であり植物全体を破壊しないため、同じ植物を繰り返して用いることができる。さらにピジウム源は、「植物廃棄物」、すなわち植物プルーンの規則的な剪定中に得られた剪定された幹の伐採材である。このような植物廃棄物、すなわち植物プルーンの剪定された幹の伐採材/側枝を利用するピジウム抽出方法は、従来技術で報告されていなかった。全ての従来技術の方法は、ピジウム・アフリカヌム(またはいわゆるプルヌス・アフリカナ)の樹皮からのピジウム抽出に基づいており、「プルーンの剪定された幹の伐採材」に基づく方法は開示されていない。
「再生不能な」供給源の代わりに「再生可能な供給源」からの新規のピジウム抽出方法の開発、および新規の方法によって抽出されたピジウムが、「再生不可能な」供給源から得られるピジウムと同等の生物活性を有し、さらに非毒性であるという実証。
本抽出物は、肥大した前立腺の治療のための医薬組成物を作製するのに用いられる。既存のピジウム抽出物の医薬組成物は、50mgおよび100mgの投薬形態(カプセル)で利用可能である。
1.植物材料を繁殖させる工程
2.ピジウムを抽出する再生可能な植物の部分を回収する工程
3.植物材料を洗浄し乾燥させる工程
4.材料を粉砕および砕いて粉末化した形態にする工程
5.有機溶媒で抽出する工程
6.濃縮および乾燥して最終産物を得る工程
7.最終産物を解析して規格化する工程。
1.植物材料の繁殖:特定の数種のプルーンを農地で繁殖させて、どのような形でも現存する天然資源を失わせたり、または現存する植物を絶滅の危機に晒したりすることなく、未加工の植物材料の十分な利用可能性を確保する。植物の成長周期は非常に短く、すなわちわずか18〜24ヶ月であることから、本方法は、原材料の供給源(剪定された幹の伐採材)が十分な量で且つ長期にわたり持続的に入手可能であるという点で商業的な実現可能性を有する。
プルヌス・アフリカナの樹皮からの抽出物およびプルーンの側枝からの抽出物のTLCフィンガープリントのプロファイルから、紫外線下で、さらにはアニスアルデヒド-硫酸で誘導体化した後でも極めて高い類似性を有することが示された。誘導体化されたプルヌス・アフリカナの軌跡は13種の成分を示し、そのうち12種はプルーンの抽出物中に存在しており、これらは92.3パーセントのマッチングを示した。定量的なフィンガープリントによるプルヌス・アフリカナとプルーンとを、200nm(誘導体化前)および660nm(誘導体化後)でなされた比重走査によって比較した。
以下の実施例は、単なる例証として示しただけであり、本発明の革新的な方法を説明するものである。これらは決して限定的なものではなく、当業者によって実行可能な実施形態を含む。
実験室スケールでの抽出
100グラムのプルーンの側枝(葉を除去した)の微粉化した粉末を、200mlのメタノール/水混合物(80:20、v/v)で3回抽出した。抽出物をろ過し、真空中で30℃で蒸発させた。苦扁桃臭を有するペースト状の軟質で暗緑色の塊を得た。抽出溶媒としてメタノール/水混合物の代わりにクロロホルムを使用したところ、優れた品質は得られなかった。抽出溶媒としてMDCを使用したところ、抽出物の最良の品質および収量を得た。抽出物中のステロールの存在は、従来のステロール検出反応によって示された。
産業的な規模での抽出
約800kgの粉末化したプルーンの幹の伐採材(葉を除去した)を、MDC(二塩化メチレン)で、溶媒の体積を3〜4倍で用いて抽出した。
生物活性
本発明の新規の方法により得られたピジウムの生物活性を、実験動物の肥大した前立腺(ウィスターラットにおけるテストステロンにより誘導された良性前立腺肥大症)の縮小に対するその作用により試験した。
新規の方法により得られたピジウムの安全性の特徴を、標準的な毒性試験プロトコール、すなわち急性(経口で2000mg/Kg体重、14日)および亜慢性(25mg/Kg、50mg/Kgおよび100mg/Kgの用量レベル、1ml/100g体重の用量体積、28日間毎日投与)を用いて評価した。マウスおよびラットでそれぞれ独立して毒性研究を行った。結果から、新規の方法により得られたピジウムは非毒性であることが示された。
従来技術の方法は、原材料源、すなわちPrunus africanumの木の樹皮の輸出は禁止されているためにこのような樹皮は極めて限られるという不利な点がある。「Prunus africanum」は、CITES(絶滅のおそれのある野生動物の種の国際取引に関する条約(Convention On International Trade In Endangered Species Of Wild Fauna & Flora))によって絶滅の危機に瀕した植物のリストに加えられている。ピジウムが植物の樹皮から抽出されると、当然ながら植物の「枯死」をもたらすため、植物を絶滅の危機に晒す。
Claims (5)
- プルーン(インディアンプルヌス)からのピジウム抽出のためのバイオ廃棄物を用いた商業的に実現可能な方法であって、
- 「バイオ廃棄物」を、プルーンの定期的な「剪定」または刈り込み過程で得られる葉を取り除いた幹の伐採材/側枝の形態で回収する工程
- バイオ廃棄物を含水量が約10〜15%になるまで乾燥させる工程
- それを粉砕することによって粉末化する工程
- 粉末化した幹の材料を、35〜40℃で塩素化有機溶媒または1:4の比率の水-アルコール混合物で抽出する工程
- 抽出物を、真空中で、30℃でろ過して乾燥させて、典型的にベータ-シトステロールとして計算した総ステロール濃度が15〜18%であり、抗BPH活性を有する「ピジウム」を、苦扁桃臭を有する緑色を帯びた塊として得る工程
を含む方法。 - 抽出方法で用いられる塩素化有機溶媒が、二塩化メチレン(MDC)またはクロロホルムである、請求項1に記載の改善された方法。
- アルコール-水混合物が、メタノール/水(80:20、v/v)である、請求項1に記載の改善された方法。
- 請求項1に記載の方法により得られるプルーンの生物活性抽出物。
- 抗BPH(良性前立腺肥大症)活性を有する請求項1および請求項3に記載の抽出物を含む機能性食品もしくは飲料または医薬組成物。
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