JP2014518875A - 特定のキトサン系ナノ複合体を用いてsiRNAを効果的かつ安全に送達するための組成物及び方法 - Google Patents
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Abstract
【選択図】図4A
Description
本出願は、2011年5月24日に出願された米国仮特許出願第61/489,306号、及び2011年5月24日に出願された米国仮特許出願第61/489,302号の優先権を主張し、それらの全内容を本明細書において援用する。
本発明の記載は、特定のキトサン系ナノ複合体を用いて治療用RNAi誘導性核酸を効率的に送達するための組成物及び方法に関する。
siRNA(低分子(short)干渉RNA)による遺伝子サイレンシングは、生物学における発展分野であり、かつ治療可能性を有する新規な転写後遺伝子サイレンシング戦略として進化してきた。ヒトゲノムの配列決定及び疾患の分子原因の理解に基づき、意のままに病原性遺伝子をオフにできる可能性は、糖尿病、アテローム性動脈硬化症、及び癌などの多種多様な臨床的病状を治療するための魅力的な手法である。siRNAにより、疾患に関与するヒトゲノム中のほぼ全ての遺伝子は制御の影響を受けやすいため、創薬に対する機会が開かれている。局所投与されるsiRNAについては既に最初の臨床試験に入っている一方で、siRNAの全身送達を成功させるための戦略は、まだ開発の前臨床段階にある。
II型糖尿病(T2DM)は、多様な病的症状を伴う進行性代謝障害であり、多くの場合、脂質代謝及び糖代謝における障害と関連している(Bell et al.,2001,Nature,414:788‐791)。II型糖尿病は、筋肉、脂肪組織、及び肝臓などの末梢組織におけるインスリン作用に対する抵抗性を特徴とする。また、膵β細胞のインスリンを分泌する能力における進行性障害も特徴とする。糖尿病の長期的な影響は、その血管合併症:微小血管合併症、網膜症、神経障害、及び腎症から生じる。大血管合併症も同様にII型糖尿病と関連し、かつ心血管及び脳血管の合併症を含む。
アテローム性動脈硬化症
癌
(0090)このベクターの主な欠点は、限られた効率及びヌクレアーゼ分解から核酸を保護することができないことである。核酸を保護するこのベクターの能力の改善にもかかわらず、そのトランスフェクション効率は低いままであるため、インビボでのその有効な使用が妨げられている。
(0091)カチオン性脂質は、静電相互作用を介して核酸と複合体を形成し、最終的に多層状の脂質‐核酸複合体(リポプレックス)を形成する。リポソーム製剤は、通常、カチオン性脂質及びDOPE(ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン)などの中性脂質を含む。中性脂質は、リポソーム製剤の安定性に寄与し、膜融合を促進するだけでなく、エンドソームを不安定化することでリソソーム脱出に寄与している。リポプレックスは、核酸を培養細胞に送達する最も効率的な方法の1つである。それらのトランスフェクション効率にもかかわらず、リポプレックスは培養細胞で観察され、かつインビボでのいくつかの調査で確認されたように、有毒である。毒性は複合体中のカチオン性脂質と核酸との電荷比、及び投与量に密接に関連している。リポプレックスに関連する毒性を低減するために、さらなる生体適合性製剤が試験されて開発されている。毒性の減少は、主に、他のポリマーとのグラフト化、又はカチオン性ポリマーの全電荷を減少させることによって達成される。
(0092)カチオン性ポリマーは、逆帯電したポリカチオンとポリアニオン種(すなわち核酸)との間の相互作用を介してナノメートルサイズのナノ粒子を形成する。これらのナノ粒子は核酸をカプセル化し、結果的に、ヌクレアーゼによる積荷の劣化を防ぐ(Romoren et al.,2003,Int J Pharm,261:115‐127)。多数の天然及び合成のカチオン性ポリマーは、遺伝子の送達又はサイレンシングのためのビヒクルとして使用されてきた。カチオン性ポリマーを用いたこれらのナノ粒子の多くは、リポプレックスと比較して優れたトランスフェクション効率及び低い血清感受性を有する。天然に存在するポリカチオンの中には、ヒストン、カチオン化ヒト血清アルブミンなどのタンパク質、及びキトサン、アミノ多糖類がある。
(00149)超高純度キトサン試料は、タンパク質、細菌内毒素、有害金属、無機及び有機不純物を含む汚染物質を除去する品質管理製造工程により製造した。全てのキトサンは、50EU/g未満の細菌内毒素を有した。キトサンは、92%及び80%の脱アセチル化度を有するよう選択した(表1)。これらのキトサンを、不均一脱アセチル化により製造し、アセチル基はランダム分布ではなくブロック分布で得られた。キトサンは、以前に記載されているように(Lavertu et al.,2006,Biomaterials,27:4815‐4824;Lavertu et al.,2003,J Pharmaceutical and Biomedical Analysis,32:1149‐1158)亜硝酸を使用して化学的に分解し、10kDa、40kDa、及び80kDaの特定の分子量を得て、10kDa、40kDaのキトサンは両方とも92%及び80%のDDAであり、80kDaのキトサンは80%のDDAであった(表1)。
(00155)インビトロでのトランスフェクションについて、高グルコースのダルベッコ変性イーグル培地(DMEM‐HG)を、0.976g/LのMES及び0.84g/Lの重炭酸ナトリウム(NaHCO3)を用いてpH6.5で調製した。ウシ胎仔血清(FBS)を含まないトランスフェクション培地を、5%CO2のインキュベータ中で37℃にて一晩平衡化し、トランスフェクションの直前に無菌HCl(1N)を用いて37℃でpH値を6.5に調節した。96ウェルプレートで行うsiRNAのトランスフェクションについて、キトサン/siRNAナノ粒子は使用する30分前に上記のように調製した。0.05μg/μl(3,704nM)の濃度の100μlのsiRNA溶液は、1:1の比率(v/v)でキトサンとのsiRNA複合体を形成するために使用した。複合体形成後、siRNA濃度は0.025μg/μl(1,852nM)となり、ナノ粒子を、ウェル当たり(10pモル/ウェル)100nMのsiRNAに等しい0.00135μg/μlの最終濃度で、DMEM‐HG培地を含むゴーストプレート中でインキュベートした。24ウェルプレートで行うdsODNのトランスフェクションについて、キトサン/dsODNナノ粒子は使用する30分前に上記のように調製した。0.05μg/μl(3,717nM)の濃度の100μlのdsODN溶液をは、1:1の比率(v/v)でキトサンとのdsODN複合体を形成するために使用した。複合体形成後、siRNA濃度は0.025μg/μl(1,858nM)となり、ナノ粒子を、ウェル当たり(60pモル/ウェル)600nMのdsODNに等しい0.00135μg/μlの最終濃度で、DMEM‐HG培地を含むゴーストプレート中でインキュベートした。FACSに使用するdsODNとsiRNAとの間の分子量における僅かな差異は、dsODNの6FMA標識に起因している。ナノ粒子を含むプレートを、5%のCO2で37℃にて10分間平衡化した。細胞上の培地を吸引し、dsODN又はsiRNA系のナノ粒子を含むpH6.5の平衡化トランスフェクション培地を、ウェル当たり500μl(24ウェルプレート)又は100μl(96ウェルプレート)補充し、最終濃度を100nM/ウェルとした。FBSをトランスフェクションから4時間後に添加し、ウェル当たり最終濃度を10%とした。細胞は、トランスフェクションから24時間後の分析まで、キトサン/siRNAナノ粒子と共にインキュベートした。DharmaFECT(登録商標)を陽性対照として使用し、未処理細胞及び非複合体化siRNA処理細胞の両方を陰性対照として使用した。
(00158)全RNA抽出は、Machery‐Nagel社からのNucleoSpin(登録商標)RNA XSキットを用いて行った。細胞溶解は、各ウェルに、2μlのTCEP及びストレプトマイセス・グリセウス・キトサナーゼで補充された100μlのRA1溶解緩衝液を添加することで行った(Alameh et al.,2010,Int J Nanomedecine,5:473−481)。溶離する前に試料をRA3緩衝液でインキュベートするときに、試料のDNAse処理を行った。RNAの定量及び品質(完全性)の評価は、Agilent Bioanalyzer 2100を用いて実施した。7.5に等しいRNA完全性番号(RIN)をqPCR分析のための受容閾値と見なした。
(00160)キトサン/dsODN及びキトサン/siRNAの複合体のサイズは、Malvern Zetasizer Nano ZS(登録商標)を用いて、25℃で137°の角度にて動的光散乱により決定した。試料は、計算において純水の屈折率及び粘度を用いて3回測定した。ゼータ電位は、計算のために同じ機器及び水の誘電率を用いて、25℃にてレーザードップラー速度計測により同様に3回測定した。強度平均径として報告されるサイズ決定について、50μlのキトサンを50μlのdsODN又はsiRNAと混合し、その後、10mMのNaClを用いて500μlで完成した。ゼータ測定について、ナノ粒子を500μlの10mMNaClを用いて1:2に希釈した。キトサン/dsODNのナノ粒子の全ての製剤は、DLSで測定したところ、45‐156nmの範囲にあった。キトサン/siRNAナノ粒子は、siRNA配列1(SEQ ID NO:5)及び2(SEQ ID NO:6及びSEQ ID NO:7)と複合体化すると、DLSでの測定から55‐105nmの範囲の平均直径を有していた(表2)。siRNA配列3(SEQ ID NO:8及びSEQ ID NO:9)について、完全に修飾されたキトサン‐siRNAのナノ粒子は、104‐130nmの範囲の平均直径を有していた(表2)。キトサンと複合体化したdsODNと、未修飾siRNA‐ApoB(配列1;SEQ ID NO:5)と、適度に修飾されたsiRNA‐ApoB(配列2;SEQ ID NO:6及びSEQ ID NO:7)との間に、ナノ粒子サイズにおける統計的な差異は認められなかった。しかしながら、完全に修飾されたsiRNA配列は、種々のキトサンと複合体を形成すると、より大きなナノ粒子が生じた。キトサン/dsODN及びキトサン/siRNAのナノ粒子は、Mnが増加するとより大きなサイズ値を示した。これらの特定の製剤においてDDAを比較した場合、統計的に有意な差異は認められなかった。予想されたように、全ての製剤における過剰のキトサンは、表2のゼータ電位によって示されるように、正に帯電したナノ粒子をもたらした。DLSによりサイズ及びゼータ電位の決定が可能であり、一方でESEMではサイズのみを測定した。
(00170)キトサンの特定の製剤(92‐10‐5、80‐40‐5、80‐10‐10、及び80‐80‐5)を、種々の細胞株におけるsiRNA送達、及びその後の遺伝子発現(RecQL1 mRNA、DPP‐IV、又はApoB mRNA)の阻害について評価した。結果は、RecQL1、DPP‐IV、及びApoBをコードするmRNAは、定量的リアルタイムPCRで測定すると2倍を超えて下方制御されたことを示している(図11A及び11B)。これらの結果は、アラマーブルーアッセイで観察すると、本明細書に記載の製剤は明らかな細胞毒性を有さずに、市販のリポソームであるDhamaFECT(登録商標)に匹敵する遺伝子サイレンシングのレベルを達成できることを実証している。
(00173)siNRA‐ApoBナノ粒子のインビボでの効率を、C57BL/6マウスモデルにおいて評価した。各治療法について、4匹の動物(n=2のDα及びn=3のC1群を除いてn=4)に、ApoB遺伝子を標的とする1mgkg-1のsiRNAを注射した。ApoB遺伝子を標的とする1mgkg-1のsiRNAを低分子量のキトサン(LMW‐CS)と複合体化させて、最終量を0.2mlとした(例えば、1:1の比率でのキトサン92‐10‐5と0.5μg/μlの78μlのsiRNA量(37,037nM)との複合体形成後に、1mgkg-1の投与量として計算される、39gのマウスに対して39μgのsiRNAの注射量を投与した)。その後、156μlの全量を投与した。複合体形成後のsiRNA濃度は、0.25μg/μl(18,518nM)となる。具体的には、ApoB遺伝子を標的とするsiRNAを、N:P比が5(N:P5)でキトサン製剤92‐10(DDA、Mn)と複合体化した。合計で、5つの群(C1〜C5;n=4/群)を表3のスケジュールに従って異なる時にTNC処理した。様々なC57BL/6マウス群(群当たりn=4動物)における、1mgkg-1の抗ApoB siRNAの用量でのキトサン/siRNA‐ApoBナノ粒子の静脈注射スケジュールに関するデータを表3に開示する。それぞれの日は、1週間の内で唯一注射が行われた日か又は安楽死が行われた日を表している。治療反応の速度を調査するために、TNC92‐10‐5を1回のみ注射して2日後に安楽死させたDα群からの2匹のマウスを除き、全てのマウスにTNC92‐10‐5(Mn‐DDA‐N:P)を3週間の間、週に1回注射した。これらの2匹のマウスを除いて、他の全てのマウスは2011年1月の最後の週内に安楽死させた。Dα群は未処理のアテローム硬化性の陽性対照としての役割を果たし、Dμは通常の低脂肪食を与えられた陰性対照群であった。Dβ群は、キトサンを含まないsiRNA送達のための陰性対照群であり、複合体化されていない裸のsiRNAを注射した。この調査に用いた動物の総数は32匹であった。
Claims (96)
- インビボでの遺伝子の発現を阻害するための組成物であって、キトサン及び前記遺伝子に対するRNAi誘導性核酸配列を含み、前記キトサンは5kDa〜200kDaの分子量(Mn)、80%〜95%の脱アセチル化度(DDA)を有し、前記キトサンのアミンと前記核酸のリン酸との比率(N:P)は20未満である、組成物。
- 請求項1に記載の組成物であって、前記キトサンの分子量は5〜15kDa、DDAは90〜95%、及びN:P比は2〜10である、組成物。
- 請求項1又は2に記載の組成物であって、前記キトサンの分子量は10kDa、DDAは92%、及びN:P比は5である、組成物。
- 請求項1に記載の組成物であって、前記キトサンの分子量は10kDa、40kDa、80kDa、150kDa、又は200kDaである、組成物。
- 請求項1〜4のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記キトサンはアセチル基のブロック分布又は化学修飾を含む、組成物。
- 請求項1〜5のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記キトサンは1.0〜7.0の間の多分散性を有する、組成物。
- 請求項1〜6のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、ヌクレオチドが10〜50個の間の二本鎖線状デオキシリボ核酸又はリボ核酸の配列である、組成物。
- 請求項1〜7のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、デオキシリボ核酸又はリボ核酸の配列のヘアピン構造である、組成物。
- 請求項1〜8のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、糖骨格、リン酸骨格、及び/又はヌクレオチド塩基環のいずれかにおいて化学的に修飾されている、組成物。
- 請求項1〜9のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、低分子干渉RNA、低分子ヘアピンRNA、又はRNAi誘導ベクターである、組成物。
- 請求項1〜10のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、II型糖尿病、アテローム性動脈硬化症、又は癌の病因に関与する遺伝子を標的とする、組成物。
- 請求項1〜10のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、腫瘍の発生、転移、又は化学療法抵抗性の誘導に関与する遺伝子を標的とする、組成物。
- 請求項1〜11のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は糖調節タンパク質を標的とする、組成物。
- 請求項13に記載の組成物であって、前記糖調節タンパク質はインクレチン分解酵素である、組成物。
- 請求項13に記載の組成物であって、前記インクレチン分解酵素はジペプチジルペプチダーゼ‐IV(DPP‐IV)である、組成物。
- 請求項1〜11のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列はアテローム生成タンパク質を標的とする、組成物。
- 請求項16に記載の組成物であって、前記アテローム生成タンパク質は、アポリポタンパク質B(ApoB)、アポリポタンパク質E(ApoE)、アポリポタンパク質B100(ApoB100)、アポリポタンパク質B48(ApoB48)、好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン(NGAL)、マトリックスメタロプロテアーゼ‐9(MMP‐9)、又はコレステロールエステル転送タンパク質(CETP)である、組成物。
- 請求項1〜12のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、ヘリカーゼタンパク質、RNAヘリカーゼ、P68、DDX5、DDX32、DDX1、Akt、PKB、ABC輸送体のメンバー、MDR1、MRP、RASタンパク質ファミリーのメンバー、SRC、HER2、EGFR、Abl、又はRafを標的とする、組成物。
- 請求項18に記載の組成物であって、前記ヘリカーゼタンパク質はRecQヘリカーゼファミリーのメンバーである、組成物。
- 請求項18又は19に記載の組成物であって、前記ヘリカーゼタンパク質はRecQL1DNAヘリカーゼである、組成物。
- 請求項18に記載の組成物であって、前記RNAi誘導性核酸配列はMDR1を標的とする、組成物。
- 患者における糖尿病及びその関連状態、アテローム性動脈硬化症及びその関連状態、又は癌及びその関連状態を治療するための、請求項1〜21のうちいずれか一項に記載の組成物。
- 請求項22に記載の組成物であって、前記糖尿病関連状態は、インスリン依存性糖尿病(I型糖尿病)、インスリン非依存性糖尿病(II型糖尿病)、インスリン抵抗性、高インスリン血症、糖尿病誘発性高血圧、肥満、血管の損傷、目の損傷、腎臓の損傷、神経の損傷、自律神経系の損傷、皮膚の損傷、結合組織の損傷、及び免疫系の損傷である、組成物。
- 請求項22に記載の組成物であって、前記アテローム性動脈硬化症関連状態は心血管疾患である、組成物。
- 請求項24に記載の組成物であって、前記心血管疾患は、冠動脈心疾患、急性冠症候群、又は狭心症である、組成物。
- 請求項22〜25のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は前記ApoBの血漿濃度を低下させる、組成物。
- 請求項22〜25のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物はGLP‐1の生物学的利用能を増加させる、組成物。
- 請求項22〜27のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は更に前記患者のグルコース代謝の制御を向上させる、組成物。
- 請求項22〜28のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は更に前記患者の血糖値を低下させる、組成物。
- 請求項22〜29のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は更に患者のコレステロール値を低下させる、組成物。
- 請求項22〜30のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は更に前記患者の低密度リポタンパク質濃度を低下させる、組成物。
- 請求項22〜31のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は更に前記患者の体重増加を減少させる、組成物。
- 請求項22〜32のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は、前記ApoBの血漿濃度を少なくとも35%低下させ、かつLDL/VLDLコレステロール値を少なくとも20%低下させる、組成物。
- 請求項22〜32のうちいずれか一項に記載の組成物であって、更にインスリン、グルコシダーゼ阻害剤、スルホニル尿素、DPP‐IV阻害剤、又は血糖降下化合物を含む、組成物。
- 請求項22〜34のうちいずれか一項に記載の組成物であって、好適な送達剤、インスリン、又は血糖降下化合物との同時投与のために製剤化される、組成物。
- 請求項35に記載の組成物であって、前記好適な送達剤は、Mirus Transit TKO(登録商標)親油性試薬、lipofectin(登録商標)、lipofectamine(登録商標)、cellfectin(登録商標)、ポリカチオン、又はリポソームである、組成物。
- 請求項35に記載の組成物であって、前記血糖降下化合物は、メトホルミン、アカルボース、アセトヘキサミド、グリメピリド、トラザミド、グリピジド、グリブリド、トルブタミド、クロルプロパミド、チアゾリジンジオン、アルファ‐グルコシダーゼ阻害剤、ビグアニジン誘導体、トログリタゾン、又はこれらの混合物である、組成物。
- 請求項34に記載の組成物であって、前記スルホニル尿素は、トルブタニド、トラザミド、グリソキセピド、グリミペイド、又はグリボムリドである、組成物。
- 請求項34に記載の組成物であって、前記DPP‐IV阻害剤は、シタグリプチン、ビルダグリプチン、又はサクサグリプチンである、組成物。
- 請求項22に記載の組成物であって、前記癌は、乳癌、神経膠腫、大腸癌、肺癌、小細胞肺癌、胃癌、肝臓癌、血液癌、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭部若しくは頸部の癌、皮膚又は眼内の黒色腫、子宮肉腫、卵巣癌、直腸若しくは結腸直腸の癌、肛門癌、結腸癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、外陰癌、扁平上皮癌、膣癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織腫瘍、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、慢性又は急性の白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓癌、尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中枢神経系腫瘍、神経膠腫、星状細胞腫、多形性膠芽腫、中枢神経系原発リンパ腫、骨髄腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、ブドウ膜黒色腫、精巣癌、口腔癌、咽頭癌、小児腫瘍、白血病、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、神経膠腫、横紋筋芽細胞腫、又は肉腫である、組成物。
- 請求項22又は40に記載の組成物であって、好適な送達剤のうちの少なくとも1つ及び抗癌化合物との同時投与のために製剤化される、組成物。
- 請求項41に記載の組成物であって、前記好適な送達剤は、Mirus Transit TKO(登録商標)親油性試薬、Lipofectin(登録商標)、Lipofectamine(登録商標)、Cellfectin(登録商標)、ポリカチオン、又はリポソームである、組成物。
- 請求項22及び41‐42のうちいずれか一項に記載の組成物であって、好適な抗癌療法の間の同時投与のために製剤化される、組成物。
- 請求項43に記載の組成物であって、前記抗癌療法は、外科手術、化学療法、ホルモン療法、及び定位放射線のうちの少なくとも1つである、組成物。
- 請求項1〜44のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は1mg/kgの用量での注射用に製剤化される、組成物。
- 請求項1〜45のうちいずれか一項に記載の組成物であって、前記組成物は投与したときに肝臓毒性を誘発しない、組成物。
- 核酸配列を細胞内に送達する方法であって、請求項1〜46のうちいずれか一項に記載の組成物を前記細胞と接触させる段階を含む、方法。
- 請求項47に記載の方法であって、前記細胞は、一次細胞、形質転換細胞、又は不死化細胞である、方法。
- キトサンとRNAi誘導性核酸配列とを酸性媒体中で混合することを含む、糖尿病、アテローム性動脈硬化症、又は癌を治療するための組成物を製造する方法であって、前記キトサンは、5kDa〜200kDaの分子量(Mn)、80%〜95%の脱アセチル化度(DDA)を有し、前記キトサンのアミンと核酸のリン酸との比率(N:P)は20未満である、方法。
- 請求項49に記載の方法であって、前記キトサンは前記RNAi誘導性核酸配列と混合する前に、塩酸に溶解させる、方法。
- 請求項50に記載の方法であって、前記キトサンは1:1の比率のグルコサミン:HClに溶解させる、方法。
- 請求項49〜51のうちいずれか一項に記載の方法であって、前記キトサンのMnは10kDa、DDAは80%又は92%であり、前記キトサンのアミンと核酸のリン酸との比率(N:P)は5又は10である、方法。
- 請求項49〜52のうちいずれか一項に記載の方法であって、前記キトサンと前記RNAi誘導性核酸配列との混合により、200nm未満のサイズの球状ナノ粒子が生成される、方法。
- 請求項53に記載の方法であって、前記ナノ粒子のサイズは45〜156nmである、方法。
- キトサン及びRNA誘導性核酸配列を含む組成物の有効量を患者に投与することを含む、前記患者における糖尿病、アテローム性動脈硬化症、又は癌、を治療する方法であって、前記キトサンは、5kDa〜200kDaの分子量(Mn)、80%〜95%の脱アセチル化度(DDA)を有し、前記キトサンのアミンと核酸のリン酸との比率(N:P)は20未満である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記キトサンの分子量は5〜15kDa、DDAは90〜95%、及びN:P比は2〜10である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記キトサンの分子量は10kDa、DDAは92%、及びN:P比は5である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記キトサンの分子量は10kDa、40kDa、80kDa、150kDa、又は200kDaである、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記キトサンはアセチル基のブロック分布又は化学修飾を含む、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記キトサンは1.0〜7.0の間の多分散性を有する、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、ヌクレオチドが10〜50個の間の二本鎖線状デオキシリボ核酸又は二本鎖線状リボ核酸の配列である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、デオキシリボ核酸又はリボ核酸の配列のヘアピン構造である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、糖骨格、リン酸骨格、及び/又はヌクレオチド塩基環のいずれかにおいて化学的に修飾されている、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、低分子干渉RNA、低分子ヘアピンRNA、またRNAi誘導ベクターである、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、II型糖尿病、アテローム性動脈硬化症、又は癌の病因に関与する遺伝子を標的とする、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、腫瘍の発生、転移、又は化学療法抵抗性の誘導に関与する遺伝子を標的とする、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は糖調節タンパク質を標的とする、方法。
- 請求項67に記載の方法であって、前記糖調節タンパク質はインクレチン分解酵素である、方法。
- 請求項68に記載の方法であって、前記インクレチン分解酵素はジペプチジルペプチダーゼ‐IV(DPP‐IV)である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列はアテローム生成タンパク質を標的とする、方法。
- 請求項70に記載の方法であって、前記アテローム生成タンパク質は、アポリポタンパク質B(ApoB)、アポリポタンパク質E(ApoE)、アポリポタンパク質B100(ApoB100)、アポリポタンパク質B48(ApoB48)、好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン(NGAL)、マトリックスメタロプロテアーゼ‐9(MMP‐9)、又はコレステロールエステル転送タンパク質(CETP)である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列は、ヘリカーゼタンパク質、RNAヘリカーゼ、P68、DDX5、DDX32、DDX1、Akt、PKB、ABC輸送体のメンバー、MDR1、MRP、RASタンパク質のファミリーのメンバー、SRC、HER2、EGFR、Abl、又はRafを標的とする、方法。
- 請求項72に記載の方法であって、前記ヘリカーゼタンパク質はヘリカーゼのRecQファミリーのメンバーである、方法。
- 請求項72に記載の組成物であって、前記ヘリカーゼタンパク質はRecQL1DNAヘリカーゼである、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記RNAi誘導性核酸配列はMDR1を標的とする、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は前記ApoBの血漿濃度を低下させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物はGLP‐1の生物学的利用能を増加させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は更に前記患者のグルコース代謝の制御を向上させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は更に前記患者の血糖値を低下させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は更に患者のコレステロール値を低下させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は更に前記患者の低密度リポタンパク質濃度を低下させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は更に前記患者の体重増加を減少させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は、前記ApoBの血漿濃度を少なくとも35%低下させ、かつLDL/VLDLコレステロール値を少なくとも20%低下させる、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は更に、インスリン、グルコシダーゼ阻害剤、スルホニル尿素、DPP‐IV阻害剤、又は血糖降下化合物を含む、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は、好適な送達剤、インスリン、又は血糖降下化合物との同時投与のために製剤化される、方法。
- 請求項85に記載の方法であって、前記好適な送達剤は、Mirus Transit TKO(登録商標)親油性試薬、lipofectin(登録商標)、lipofectamine(登録商標)、cellfectin(登録商標)、ポリカチオン、又はリポソームである、方法。
- 請求項85に記載の方法であって、前記血糖降下化合物は、メトホルミン、アカルボース、アセトヘキサミド、グリメピリド、トラザミド、グリピジド、グリブリド、トルブタミド、クロルプロパミド、チアゾリジンジオン、アルファ‐グルコシダーゼ阻害剤、ビグアニジン誘導体、トログリタゾン、又はこれらの混合物である、方法。
- 請求項84に記載の方法であって、前記スルホニル尿素は、トルブタニド、トラザミド、グリソキセピド、グリミペイド、又はグリボムリドである、方法。
- 請求項84に記載の方法であって、前記DPP‐IV阻害剤は、シタグリプチン、ビルダグリプチン、又はサクサグリプチンである、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記癌は、乳癌、神経膠腫、大腸癌、肺癌、小細胞肺癌、胃癌、肝臓癌、血液癌、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭部又は頸部の癌、皮膚又は眼内の黒色腫、子宮肉腫、卵巣癌、直腸又は結腸直腸の癌、肛門癌、結腸癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、外陰癌、扁平上皮癌、膣癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織腫瘍、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、慢性又は急性の白血病、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓癌、尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中枢神経系腫瘍、神経膠腫、星状細胞腫、多形性膠芽腫、中枢神経系原発リンパ腫、骨髄腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、ブドウ膜黒色腫、精巣癌、口腔癌、咽頭癌、小児腫瘍、白血病、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、神経膠腫、横紋筋芽細胞腫、又は肉腫である、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は、好適な送達剤のうちの少なくとも1つ及び抗癌化合物と共に投与される、方法。
- 請求項91に記載の方法であって、前記好適な送達剤は、Mirus Transit TKO(登録商標)親油性試薬、Lipofectin(登録商標)、Lipofectamine(登録商標)、Cellfectin(登録商標)、ポリカチオン、又はリポソームである、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は好適な抗癌療法の間に同時投与される、方法。
- 請求項93に記載の方法であって、前記抗癌療法は、外科手術、化学療法、ホルモン療法、及び定位放射線のうちの少なくとも1つである、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は1mg/kgの用量で注射される、方法。
- 請求項55に記載の方法であって、前記組成物は投与したときに肝臓毒性を誘発しない、方法。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017078054A1 (ja) * | 2015-11-04 | 2017-05-11 | 株式会社ステリック再生医科学研究所 | RNAi分子とN-アセチル化キトサンとを含む複合体 |
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---|---|---|---|---|
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WO2013130882A1 (en) * | 2012-02-28 | 2013-09-06 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Compositions and methods for treating cancer |
KR101601035B1 (ko) * | 2013-02-28 | 2016-03-08 | 주식회사 종근당 | 키토산 및 액상결정 형성 물질을 포함하는 유전자 전달용 조성물 |
WO2014148620A1 (ja) * | 2013-03-21 | 2014-09-25 | 国立大学法人東京医科歯科大学 | 二重鎖核酸結合剤、当該結合剤-二重鎖核酸複合体、当該複合体を含有する医薬品組成物、及び、当該複合体の製造方法 |
AU2014280796A1 (en) * | 2013-06-10 | 2016-01-28 | Polyvalor, Societe En Commandite | Freeze-dried polyelectrolyte complexes that maintain size and biological activity |
WO2016138132A1 (en) * | 2015-02-25 | 2016-09-01 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Dipeptidyl peptidase-iv(dpp4) inhibitors, methods and compositions for suppressing adipose tissue inflammation |
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CN108117585B (zh) * | 2018-01-16 | 2021-06-01 | 合肥诺为尔基因科技服务有限公司 | 一种靶向导入siRNA促进乳腺癌细胞凋亡的多肽 |
US11911481B2 (en) | 2018-05-21 | 2024-02-27 | United States Government As Represented By The Department Of Veterans Affairs | Compositions and methods for treating RSV-infections |
EP3586851A1 (en) * | 2018-06-27 | 2020-01-01 | Nextraresearch S.r.l. | Compositions for oral administration of pentosan polysulfate and chitosan in form of nanoparticles with improved intestinal absorption |
CN110396524B (zh) * | 2019-05-31 | 2023-05-02 | 海南大学 | 一种用于蚊虫的RNAi纳米颗粒和制备方法及用途 |
WO2022185326A1 (en) * | 2021-03-03 | 2022-09-09 | Amitava Mazumder | Antiviral, anti sars-cov-2, anti h1n3, antibacterial and antimicrobial compositions and methods of preparation thereof |
CN115748011A (zh) * | 2022-11-16 | 2023-03-07 | 中国科学技术大学 | 检测miRNA-21的荧光壳聚糖纤维的制备方法及检测miRNA-21的方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007059605A1 (en) * | 2005-11-04 | 2007-05-31 | Bio Syntech Canada Inc. | Composition and method for efficient delivery of nucleic acids to cells using chitosan |
WO2008020318A2 (en) * | 2006-03-30 | 2008-02-21 | Engene, Inc. | Non-viral compositions and methods for transfecting gut cells in vivo |
JPWO2006054625A1 (ja) * | 2004-11-19 | 2008-05-29 | 株式会社ジーンケア研究所 | 癌細胞特異的細胞増殖抑制剤 |
JP2009530319A (ja) * | 2006-03-23 | 2009-08-27 | サンタリス ファーマ アー/エス | 低分子内部セグメント化干渉rna |
US20100015232A1 (en) * | 2006-07-07 | 2010-01-21 | Aarhus Universitet | Nanoparticles for nucleic acid delivery |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE60134251D1 (de) * | 2000-09-18 | 2008-07-10 | Sanos Bioscience As | Verwendung von glp-2-peptiden |
US20030171310A1 (en) * | 2001-02-23 | 2003-09-11 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of RECQL expression |
US20050153914A1 (en) * | 2001-05-18 | 2005-07-14 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of MDR P-glycoprotein gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
CA2518475C (en) * | 2003-03-07 | 2014-12-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Irna agents comprising asymmetrical modifications |
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Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPWO2006054625A1 (ja) * | 2004-11-19 | 2008-05-29 | 株式会社ジーンケア研究所 | 癌細胞特異的細胞増殖抑制剤 |
WO2007059605A1 (en) * | 2005-11-04 | 2007-05-31 | Bio Syntech Canada Inc. | Composition and method for efficient delivery of nucleic acids to cells using chitosan |
JP2009530319A (ja) * | 2006-03-23 | 2009-08-27 | サンタリス ファーマ アー/エス | 低分子内部セグメント化干渉rna |
WO2008020318A2 (en) * | 2006-03-30 | 2008-02-21 | Engene, Inc. | Non-viral compositions and methods for transfecting gut cells in vivo |
US20100015232A1 (en) * | 2006-07-07 | 2010-01-21 | Aarhus Universitet | Nanoparticles for nucleic acid delivery |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6016006710; Oligonucleotides vol.20, no.4, 2010, p.183-190 * |
JPN6016006711; International Journal of Nanomedicine vol.5, no.1, 20100703, p.473-481 * |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017078054A1 (ja) * | 2015-11-04 | 2017-05-11 | 株式会社ステリック再生医科学研究所 | RNAi分子とN-アセチル化キトサンとを含む複合体 |
JPWO2017078054A1 (ja) * | 2015-11-04 | 2018-08-30 | 株式会社ステリック再生医科学研究所 | RNAi分子とN−アセチル化キトサンとを含む複合体 |
US10646579B2 (en) | 2015-11-04 | 2020-05-12 | Tme Therapeutics Inc. | Complex comprising RNAi molecule and N-acetylated chitosan |
JP2020079270A (ja) * | 2015-11-04 | 2020-05-28 | 株式会社ステリック再生医科学研究所 | RNAi分子とN−アセチル化キトサンとを含む複合体 |
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