JP2014156472A

JP2014156472A - α７ニコチン性アセチルコリン受容体リガンドとしてのキヌクリジン化合物

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Publication number: JP2014156472A
Application number: JP2014092959A
Authority: JP
Inventors: H Cook Ii James; ジェイムズ・エイチ・クック・ザ・セカンド; M Mcdonald Ivar; アイバー・エム・マクドナルド; King Dalton; ダルトン・キング; E Olson Richard; リチャード・イー・オルソン; Wang Nenghui; ネンフイ・ワン; I Iwuagwu Christiana; クリスティアナ・アイ・イウアグ; F Zusi Christopher; エフ・クリストファー・ズシ; John E Macor; ジョン・イー・マコー
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2014-04-28
Filing date: 2014-04-28
Publication date: 2014-08-28
Anticipated expiration: 2029-10-29
Also published as: JP5714745B2

Abstract

【課題】ニコチン性α７受容体に対するリガンドであり、中枢神経系の種々の障害、特に情動障害および神経変性障害の処置。
【解決手段】塩を含む式Ｉ：

の化合物、および、本化合物を使用する組成物および方法の提供。

Description

本発明の背景
本開示は、全般的に、塩を含む式Ｉの化合物および組成物ならびに本化合物を使用する方法に関する。本化合物は、ニコチン性α７受容体に対するリガンド、アゴニストおよび部分アゴニストであり、中枢神経系の種々の障害、特に情動障害および神経変性障害の処置に有用であり得る。

統合失調症は、重篤な精神障害であり、人口の約１％が罹患している。その進行過程は、精神的および社会的機能の重大な機能障害をもたらし、しばしば他の病状の発症を引き起こす。易罹患性は、しばしば家族性であり、遺伝的要因および環境的要因の双方が重要であると考えられている。統合失調症の直接的および間接的費用は、米国のみでも年間数百億ドルと見積もられている。

統合失調症の患者は、自殺リスクが高い(約１０％の生涯リスク)。患者らは、全ての原因の死亡率が２.５倍高く、その結果、平均余命が２０％短い。病気の発症は、種々の状態のリスクを増大させ、その結果死亡リスクを増大させる、不健康な生活習慣要因および行動の連鎖を引き起こし得る。

統合失調症の発症は、青年期後期または成人期早期で最も多く、生涯に亘ってエピソードが再発する。統合失調症は、陽性症状、陰性症状、認知症状の３つの別個の症状ドメインの発現によって特徴付けられる。精神病性症状または陽性症状は、妄想、幻覚、思考障害およびパラノイアを含む。陰性症状は、否定的情動、引きこもりおよび快感消失を含む。認知機能不全は、注意力、作業記憶および実行機能の欠陥を含む。統合失調症の病態生理は十分には理解されていないが、ほとんどの専門家は、生物学的、遺伝的および環境的要因が役割を果たす多因子障害であると考えている。現在のほとんどの治療は、ドーパミン系を標的とし、過剰なドーパミン神経伝達が、統合失調症の少なくとも幾つかの局面の根底にあるという示唆が得られている。この理論は、ドーパミンレベルを上昇させる医薬が統合失調症の陽性症状に類似した精神病を引き起こすという発見により、さらに支持される。また、統合失調症の患者由来の脳の死後分析により、Ｄ２ドーパミン受容体数の増加が示されている。非定型抗精神薬として知られ、幾つかのさらなる神経伝達受容体に活性な新規な抗精神薬が、ここ１０年で導入されているが、これらの医薬はまた、Ｄ２ドーパミン受容体に対する効果も共有している。現在使用されている医薬は全て大きな制限がある。陽性症状は、一般的に、大部分の患者で軽減されるが、これらの医薬は、一般的であってしばしば最も衰弱性である陰性症状および認知欠陥をほとんど軽減しない。さらに、抗精神病薬は、幾つかの望ましくなく、かつ制限的な副作用を有する。

ニコチンは、認知機能に良い影響を有する数少ない薬物の１つである。多くの統合失調症患者が喫煙しており、患者での喫煙率は、一般的集団の２〜４倍であり、施設に入ったことのある患者の９０％までが喫煙している。この喫煙習慣は、自己治療の形態として特徴付けられている。

ニコチン性アセチルコリン受容体(ｎＡＣｈＲ)は、中枢および末梢神経系に亘って広く発現される、五量体のリガンド開口型イオンチャネルである。これらのチャネルは、速く脱感作する(fast-desensitizing)カルシウムチャネルであり、開いたときにＣａ^＋＋イオンの細胞内濃度を上昇させる。１２種の受容体が存在するが、脳中で最も多いニコチン受容体は、α４β２およびα７である。α４β２複合体は、“高親和性”ニコチン部位として同定されている。ホモ五量体α７受容体は、天然生成物α−ブンガロトキシンに選択的に結合して、それによりその相対的に容易な局在化および測定が可能となる。α７受容体は、主に、皮質、海馬および皮質下辺縁領域で発現され、通常、シナプス前性に生じる。学習および記憶に関係する領域へのα７ｎＡＣｈＲの局在化は、ノックアウトマウスおよび薬理学的処置の両方を用いた研究に至っている。それは、感覚ゲーティング、記憶および神経可塑性に関係している。α７アゴニストは、ドーパミン、セロトニン、グルタメートおよびＧＡＢＡを含む、齧歯類の神経伝達物質の放出を増加させることが示されている。α７アゴニストおよび部分アゴニストなどのα７受容体に選択的に結合する化合物は、正常動物および老齢動物において、学習機能および記憶機能を改善し、スコポラミン誘発記憶欠損を回復させ、ＮＭＤＡアンタゴニストによって誘発される認知欠陥を回復させ、アンフェタミン誘発ゲーティング破壊などの薬理的誘発ゲーティング機能欠陥を回復させ、幾らかの抗不安特性を有することが示されている。本発明のα７アゴニストは、統合失調症、および、統合失調症に関連した認知障害の処置に有用であると予測される。

アルツハイマー病は、進行性の神経変性障害であり、認知機能の全般的な喪失を引き起こす。発症率は加齢と共に上昇し、８５歳以上の２５〜５０％がある程度の認知症に罹患していると概算される程である。アルツハイマー病の診断は、正常な成人と比較して、残っている平均余命が半分まで減少することを暗示している。

アルツハイマー病の臨床学的徴候は、進行性の認知衰退、日常生活を行う能力の低下、および、精神神経症状または行動の変化である。疾患の進行期には、筋系の変質および移動性の低下により、自分で食物を摂取できなくなり、最終的には、患者は寝たきりとなる。言語は非常に混乱し、次いで完全に喪失する。患者は、一人で単純作業さえ行えなくなり、常に監視が必要となる。施設介護の費用は、疾患の費用のほぼ７０％を占める。従って、認知機能を向上させ、施設収容を遅らせる治療が、非常に必要とされている。

アルツハイマー病は、皮質および海馬中のニコチン受容体の減少を伴うことが、幾つかの研究で示されている。ニコチン注射またはニコチン皮膚パッチは、アルツハイマー病患者において、注意力、記憶および学習能力を著しく改善することが報告されている。アルツハイマー病の進行中、ニコチン受容体の進行性の喪失が起こるが、より豊富なα４受容体に比べてα７神経細胞が比較的残る。近年、選択的ニコチン性α７アゴニストの投与は、８週間もの長期間投与されたときに、アルツハイマー病患者の認知機能を向上させることが示された。この臨床データは、α７アゴニストおよび部分アゴニストが正常な動物および老齢動物において学習機能および記憶機能を改善し、スコポラミン誘発記憶欠損を回復させたことを示した前臨床データと一致している。従って、本発明の化合物は、アルツハイマー病の処置および予防に有用であり得る。アミロイドペプチドＡβ４２は、α７ニコチン受容体に結合することが示されている(Wang et al., J. Biol. Chem., 2000, 275:5626-5632; J. Neurochem. 2000, 75:1155-1161)。この結合は、Ａβ４２の凝集を促進し、Ａβ４２の毒性作用に重要であると考えられており、また、α７ニコチン受容体を介したシグナル伝達の脱制御を引き起こし得る。α７受容体遺伝子の欠失は、アルツハイマー病のマウスモデルにおいて、認知障害およびシナプス病理を改善する(Dziewczapolski et al., J. Neuroscience, 2009, pp 8805-8815)。本発明の化合物は、Ａβ４２およびα７受容体の相互作用を崩壊させ得る。α７アゴニストおよび部分アゴニストによる処置は、アルツハイマー病において、疾患を修飾するためのアプローチとなり得る。α７受容体はまた、アルツハイマー病などの神経変性状態における炎症プロセスを媒介し得る(Conejero-Goldberg et al., Neurosci. and Biobehav. Rev., 2008, 32, pp 693-706)。本発明のα７アゴニストおよび部分アゴニストは、アルツハイマー病などの神経変性疾患および障害における炎症を軽減するのに有用であり得る。

α７受容体はまた、迷走神経を介した炎症の軽減に関与していることが示されている。さらに、α７受容体は、関節リウマチ(ＲＡ)および変形性関節症(ＯＡ)患者由来の滑膜細胞で発現され、α７アゴニストは、リウマチの関節で起こる炎症誘発カスケードを阻害することが示されている(Waldberger et al., Arthritis and Rheumatism, Vol 58, pp 3439-3449)。従って、本発明の化合物は、関節リウマチおよび変形性関節症などの炎症状態の処置に有用であり得る。

α７サブユニットを含むニコチン受容体は、胃腸の過敏性に関与することが知られている粘膜の肥満細胞に存在する(Kageyama-Yahara et al., Biochem and Biophys. Research Commun., 2008, v. 377, pp321-325)。α７アゴニストGTS-21は、粘膜の肥満細胞の抗原誘発脱顆粒を阻害し、このことは、α７アゴニストが、過敏性腸状態、例えば潰瘍性大腸炎の処置に有用であることを示唆する。

近年の報告において(Marrero et al., JPET Fast Forward, September 28, 2009, DOI: 10.1124/jpet.109.154633)、α７アゴニストは、II型糖尿病のマウスモデル(レプチン受容体欠損ｄｂ／ｄｂマウス)において、体重増加を減らし、食物取り込みを減少させ、トリグリセリド、ブドウ糖、糖化ヘモグロビンおよびＴＮＦａの上昇した血漿レベルを低下させることが示された。本発明のα７アゴニストおよび部分アゴニストは、糖尿病の処置に有用であり得る。

下記の参考文献は、ニコチン受容体系およびα７受容体とリガンドの全般的なレビューを提供する：Picciotto and Zoli, J. Neurobio. (2002) 53:641-655; Brening, et al, Ann. Reports in Med. Chem. (2005) 40:3-16; Dani and Bertrand, Ann. Rev. Pharm. Tox. (2007) 47:699-729; Olincy and Stevens, Biochem. Pharmacol. (2007) 74:1192-1201; Broad, et al, Drugs Future (2007) 32 (2):161-70; de Jonge and Ulloa, Brit. J. Pharmacol. (2007) 151:915-929; Romanelli, et al, ChemMedChem (2007) 2(6):746-767; Lightfoot et al., Progress in Medicinal Chemistry (2008), v 46, pp131-171; Concotta et al., Current Opinion in Investigational Drugs (2008), v 9, pp47-56; Leiser et al., Pharmacol. and Therapeutics (2009), doi:10:1016/j.pharmthera.2009.03.009)。

ニコチン性α７受容体に対するリガンドは、上記参考文献、ならびに米国特許出願第20090270405号公報、米国特許第2007004715号、国際公開第2008/000469号、国際公開第2003/092580号、国際公開第2004/000,469号、欧州特許第337,547号、欧州特許第452,101号およびC.J. Swain, et al., J. Med. Chem., (1992) 35:1019-1031に開示されている。

本発明は、技術的利益を提供し、例えば本化合物は新規であり、ニコチン性α７受容体に対するリガンドであり、種々の中枢神経系の障害、特に情動障害および神経変性障害の処置に有用であり得る。さらに、本化合物は、作用機序、結合、阻害効果、標的選択性、溶解度、安全性プロファイルまたはバイオアベイラビリティーの１種以上に関連した製薬用途に関する利益を提供する。

本発明の説明
本発明は、薬学的に許容される塩を含む式Ｉの化合物、および、これらの化合物を用いた組成物および処置方法を包含する。本化合物は、中枢神経系の種々の障害の処置に有用であり得る。

本発明の一つの局面は、式Ｉ：

[式中、
Ｒ^１は、イソオキサゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、トリアジニル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、インダゾリル、インドリル、２−インドロニル(indolonyl)、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、フロピリジニル、チエノピリジニル、チエノピリミジニル、イソチアゾロピリジニル、チアゾロピリジニル、チアゾロピリジノニル、チアゾロピラジニル、チアゾロピリミジニル、トリアゾロピリジニル、トリアゾロピラジニル、ピロロトリアジニル、５,６−ジヒドロベンゾ[ｈ]キナゾリニル、５Ｈ−クロメノ[４,３−ｄ]ピリミジニル、６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリミジニル、５,６,７,８−テトラヒドロキナゾリニル、７,８−ジヒドロキナゾリン−５(６Ｈ)−オニルおよびテトラヒドロベンゾチアゾリルからなる群から選択され、これらは、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルコキシ、Ｃ_３−７シクロアルコキシ、Ｃ_１−４アルキルチオ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ_１−４アルキルスルホニル、ＮＲ^２Ｒ^３、ピロリジノニル、メチレンジオキシ、フリル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、ナフチル、Ｃ_１−４アルキルアミド、ＣＯＮＲ^２Ｒ^３、ピリジル、フェニルおよびベンジルからなる群から独立して選択される０〜３個の置換基で置換されており、ここで、イミダゾリル、ピリジル、フェニルおよびベンジルは、ハロ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルコキシおよびＮＲ^２Ｒ^３からなる群から独立して選択される０〜２個の置換基で置換されており;
Ｒ^２は、水素、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４ヒドロキシアルキルまたはＣ_１−４アミノアルキルであって、
Ｒ^３は、水素、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４ヒドロキシアルキルまたはＣ_１−４アミノアルキルであるか；
あるいは、Ｒ_２およびＲ_３は、それらが結合している窒素原子と一体となって、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、Ｎ−(Ｃ_１−４アルキル)ピペラジニル、モルホリニルまたはホモピペリジニルである。]
の化合物もしくはその立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、式Ia：

で示される式Ｉの立体異性体である。

本発明の他の局面は、Ｒ^１が、ジメチルイソオキサゾリル、(メチル)(フェニル)イソオキサゾリル、メチルピラゾリル、ジメチルピラゾリル、チエニルピラゾリル、メトキシフェニルピラゾリル、チアゾリル、ブロモチアゾリル、シアノチアゾリル、メチルチアゾリル、ジメチルチアゾリル、(メチル)(フェニル)チアゾリル、イソプロピルチアゾリル、ブチルチアゾリル、ベンジルチアゾリル、メトキシフェニルメチルチアゾリル、フェニルチアゾリル、クロロフェニルチアゾリル、メトキシフェニルチアゾリル、(メトキシフェニル)(メチル)チアゾリル、ピリジニルチアゾリル、(フェニル)(メチル)イミダゾリル、メチルオキサジアゾリル、エチルオキサジアゾリル、メチルチアジアゾリル、フルオロフェニルチアジアゾリル、フリルチアジアゾリル、(ジメチルカルボキサミド)(メチル)チアゾリル、(ピロリジニルＣＯ)チアゾリル、フェニルトリアゾリル、ピリジニル、ブロモピリジニル、クロロピリジニル、(クロロ)(フルオロ)ピリジニル、(クロロ)(メチル)ピリジニル、ジクロロピリジニル、フルオロピリジニル、シアノピリジニル、(シアノ)(メチル)ピリジニル、(シアノ)(ジメチル)ピリジニル、メトキシピリジニル、(メチルピロリジニル)ピリジニル、フェニルピリジニル、メトキシピリジニルピリジニル、ピリダジニル、ブロモピリダジニル、クロロピリダジニル、メチルピリダジニル、メトキシピリダジニル、メチルチオピリダジニル、ピロリジニルピリダジニル、ピロリジノニルピリダジニル、フェニルピリダジニル、ピリジニルピリダジニル、メトキシピリジニルピリダジニル、ピリミジニル、(ブロモ)(イソプロピル)ピリミジニル、(ブロモ)(ジメチル)ピリミジニル、(ブロモ)(シクロプロピル)ピリミジニル、(ブロモ)(メトキシ)ピリミジニル、(ブロモ)(フェニル)ピリミジニル、(ブロモ)(ピリジニル)ピリミジニル、クロロピリミジニル、(クロロ)(ジメチル)ピリミジニル、(メチル)(メトキシ)ピリミジニル、メチルピリミジニル、エチルピリミジニル、(メチル)(フェニル)ピリミジニル、ジメチルピリミジニル、ブチルピリミジニル、イソプロピルピリミジニル、シクロプロピルピリミジニル、メトキシピリミジニル、ジメトキシピリミジニル、イソプロポキシピリミジニル、シクロペントキシピリミジニル、ジフルオロメトキシピリミジニル、トリフルオロエトキシピリミジニル、フェノキシピリミジニル、メチルチオピリミジニル、フェニルピリミジニル、クロロフェニルピリミジニル、メチルフェニルピリミジニル、メトキシフェニルピリミジニル、(フェニル)(トリアゾリル)ピリミジニル、ピリジニルピリミジニル、メトキシピリジニルピリミジニル、メトキシピリミジニルピリミジニル、ナフチルピリミジニル、ピラジニル、ブロモピラジニル、(ブロモ)(メトキシ)ピラジニル、クロロピラジニル、メチルピラジニル、ジメチルピラジニル、ブチルピラジニル、シアノピラジニル、メトキシピラジニル、イソプロポキシピラジニル、トリフルオロメチルピラジニル、フェニルピラジニルおよびジメチルトリアジニルからなる群から選択される、式ＩまたはIaの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、Ｒ^１が、ジメチルピリジノイソオキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、クロロベンゾオキサゾリル、フルオロフェニルベンゾオキサゾリル、エチルフェニルベンゾオキサゾリル、ジメチルアミノフェニルベンゾオキサゾリル、ピリジニルベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、アセトアミドベンゾチアゾリル、ブロモベンゾチアゾリル、クロロベンゾチアゾリル、(クロロ)(メチル)ベンゾチアゾリル、(クロロ)(メトキシ)ベンゾチアゾリル、フルオロベンゾチアゾリル、ジフルオロベンゾチアゾリル、シアノベンゾチアゾリル、メチルベンゾチアゾリル、ジメチルベンゾチアゾリル、(メチル)(メトキシ)ベンゾチアゾリル、エチルベンゾチアゾリル、トリフルオロメチルベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、メトキシベンゾチアゾリル、エトキシベンゾチアゾリル、イソプロポキシベンゾチアゾリル、トリフルオロメトキシベンゾチアゾリル、ジフルオロメトキシベンゾチアゾリル、ジメトキシベンゾチアゾリル、モルホリニルベンゾチアゾリル、(ピロリジニルＣＯ)ベンゾチアゾリル、メチルスルホニルベンゾチアゾリル、クロロチアゾロピリジニル、ジメチルチアゾロピリジニル、ベンジルオキシチアゾロピリジニル、ジフルオロメトキシチアゾロピリジニル、ベンゾトリアゾリル、インドロニル、インダゾリル、ブロモインダゾリル、クロロインダゾリル、フルオロインダゾリル、(メチル)(メトキシ)インダゾリル、メトキシインダゾリル、トリフルオロメチルインダゾリル、トリフルオロメトキシインダゾリル、ジフルオロメトキシインダゾリル、ベンゾイミダゾリル、フルオロベンゾイミダゾリル、メチルベンゾイミダゾリル、(メチル)(メトキシ)ベンゾイミダゾリル、メトキシベンゾイミダゾリル、テトラヒドロベンゾチアゾリル、フロピリジニル、ジメチルフロピリミジニル、チエノピリミジニル、イソプロピルチエノピリミジニル、ジメチルチエノピリミジニル、クロロトリアゾロピリジニル、メチルトリアゾロピリジニル、トリフルオロメチルトリアゾロピリジニル、メトキシトリアゾロピリジニル、トリアゾロピラジニル、ブロモピロロトリアジニル、ジメチルアミノチアゾロピリミジニル、チアゾロピラジニル、ブロモチアゾロピラジニル、メトキシチアゾロピラジニル、メチルチオチアゾロピラジニル、メトキシチアゾロピリミジニル、(メチル)(メトキシ)チアゾロピリミジニル、キノリニル、ブロモキノリニル、フルオロキノリニル、メチルキノリニル、(メチル)(メトキシ)キノリニル、イソキノリニル、ブロモイソキノリニル、ジクロロイソキノリニル、メチルイソキノリニル、ジメチルイソキノリニル、キノキサリニル、クロロキノキサリニル、メチルキノキサリニル、メトキシキノキサリニル、キナゾリニル、ブロモキナゾリニル、ナフチリジニル、５,６−ジヒドロベンゾ[ｈ]キナゾリニル、５Ｈ−クロメノ[４,３−ｄ]ピリミジニル、６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリミジニル、５,６,７,８−テトラヒドロキナゾリニルおよび７,８−ジヒドロキナゾリン−５(６Ｈ)−オニルからなる群から選択される、式ＩまたはIaの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、Ｒ^１が、フェニルチアゾリル、(クロロ)(メチル)ピリジニル、(ブロモ)(フェニル)ピリミジニル、メトキシピリミジニル、ジフルオロメトキシピリミジニル、ジフルオロエトキシピリミジニル、シクロペントキシピリミジニル、(メチルフェニル)ピリミジニル、(メトキシフェニル)ピリミジニル、ブロモピラジニル、クロロピラジニル、メチルチオピラジニル、メトキシベンゾチアゾリル、エトキシベンゾチアゾリル、ジフルオロメトキシベンゾチアゾリル、チアゾロピリジノニル、トリフルオロメチルインダゾリル、ベンゾイミダゾリル、イソキノリニルおよびキナゾリニルからなる群から選択される、式ＩまたはIaの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、Ｒ^１が、ブロモピリジニル、ジクロロピリジニル、メトキシピリジニル、(ピリジニル)ピリジニル、(フェニル)ピリミジニル、(メトキシピリジニル)ピリミジニル、(ピラゾリル)ピリミジニル、クロロピラジニル、(ブロモ)(クロロ)ピラジニルおよびクロロベンゾチアゾリルからなる群から選択される、式ＩまたはIaの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、Ｒ^１が、チアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ベンゾチアゾリル、チアゾロピリジニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、イソキノリニルおよびキナゾリニルからなる群から選択され、これらが、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルコキシ、Ｃ_３−７シクロアルコキシ、Ｃ_１−４アルキルチオ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ_１−４アルキルスルホニル、ＮＲ^２Ｒ^３、ピロリジノニル、メチレンジオキシ、フリル、チエニル、トリアゾリル、ピリミジニル、ナフチル、Ｃ_１−４アルキルアミド、ＣＯＮＲ^２Ｒ^３、ピリジル、フェニルおよびベンジルからなる群から独立して選択される０〜３個の置換基で置換されており、ここで、ピリジル、フェニルおよびベンジルは、ハロ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルコキシおよびＮＲ^２Ｒ^３からなる群から独立して選択される０〜２個の置換基で置換されている、式ＩまたはIaの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、Ｒ^１が、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、チアゾロピリジニルおよびイソキノリニルからなる群から選択され、これらが、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルコキシ、Ｃ_３−７シクロアルコキシ、Ｃ_１−４アルキルチオ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ_１−４アルキルスルホニル、ＮＲ^２Ｒ^３、ピロリジノニル、メチレンジオキシ、フリル、チエニル、トリアゾリル、ピリミジニル、ナフチル、Ｃ_１−４アルキルアミド、ＣＯＮＲ^２Ｒ^３、ピリジル、フェニルおよびベンジルからなる群から独立して選択される０〜３個の置換基で置換されており、ここで、ピリジル、フェニルおよびベンジルが、ハロ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルコキシおよびＮＲ^２Ｒ^３からなる群から独立して選択される０〜２個の置換基で置換されている、式ＩまたはIaの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、Ｒ^１が、ピリジニルおよびイソキノリニルからなる群から選択され、これらが、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルコキシ、Ｃ_３−７シクロアルコキシ、Ｃ_１−４アルキルチオ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ_１−４アルキルスルホニル、ＮＲ^２Ｒ^３、ピロリジノニル、メチレンジオキシ、フリル、チエニル、トリアゾリル、ピリミジニル、ナフチル、Ｃ_１−４アルキルアミド、ＣＯＮＲ^２Ｒ^３、ピリジル、フェニルおよびベンジルからなる群から独立して選択される０〜３個の置換基で置換されており、ここで、ピリジル、フェニルおよびベンジルが、ハロ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４ハロアルキル、Ｃ_１−４ハロアルコキシおよびＮＲ^２Ｒ^３からなる群から独立して選択される０〜２個の置換基で置換されている、式ＩまたはIaの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、

からなる群から選択される化合物またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明の他の局面は、

本発明の他の局面は、Ｒ_１が、チアゾール、チアジアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、ピラゾール、イミダゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジン、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、インダゾール、インドール、２−インドロン(indolone)、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾ(ｄ)イソチアゾール、ベンゾイソオキサゾール、イソチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン、(１,２,４)−トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン、チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジンおよびテトラヒドロベンゾチアゾールからなる群から選択され、ここで、それぞれの基は、所望によりＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、フルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、Ｃ_１−４アルキルスルホニル、フリル、モルホリノ、メチレンジオキシ、ピリジル、Ｃ_１−４アルキルフェニル、ハロフェニル、ジメチルアミノフェニル、Ｃ_１−４アルキルアミド、−ＣＯＮＲ_２Ｒ_３{ここで、Ｒ_２およびＲ_３は、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１−４アルキル、ヒドロキシＣ_１−４アルキル、アミノＣ_１−４アルキルであるか、あるいは、Ｒ_２およびＲ_３は、それらが結合している原子と一体となって、Ｃ_３−６シクロアルキルである。}；フェニル、置換フェニル、フェニルメチル、置換フェニルメチル{ここで、置換フェニルおよび置換フェニルメチルは、ハロゲン、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシからなる群から独立して選択される置換基で置換されている。}からなる群から選択される１個または２個の置換基で置換されている、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩である。

式ＩまたはIaの化合物について、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３を含む可変の置換基の全ての例の範囲は、可変の置換基の他の何れかの例と独立して用いられ得る。そのため、本発明は、異なる局面の組み合わせを含む。

特にことわらない限り、これらの用語は、下記の意味を有する。“アルキル”は、１〜４個の炭素からなる直鎖または分枝鎖のアルキル基を意味する。“アルケニル”は、２〜４個の炭素からなる、少なくとも１個の二重結合を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基を意味する。“アルキニル”は、２〜４個の炭素からなる、少なくとも１個の三重結合を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基を意味する。“シクロアルキル”は、３〜７個の炭素からなる単環式環系を意味する。“ハロアルキル”および“ハロアルコキシ”は、モノハロからパーハロの全てのハロゲン化異性体を含む。炭化水素部分を有する用語(例えばアルコキシ)は、炭化水素部分についての直鎖および分枝鎖の異性体を含む。括弧でくくられた用語および多重括弧でくくられた用語は、結合の関係を当業者に明らかにすることを意図している。例えば、((Ｒ)アルキル)のような用語は、置換基Ｒでさらに置換されたアルキル置換基を意味する。

本発明は、本化合物の全ての薬学的に許容される塩の形態を含む。薬学的に許容される塩は、カウンターイオンが、化合物の生理活性または毒性にほとんど寄与せず、かつ、薬理学的等価物と同程度の機能がある塩である。これらの塩は、通常の有機の技術に従って、市販の反応剤を用いて合成され得る。幾つかのアニオン塩の形態は、酢酸塩、アシストラート(acistrate)、ベシル酸塩、臭化物、塩化物、クエン酸塩、フマル酸塩、グルクロン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヨウ化物、乳酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩およびキシナホ酸塩を含む。幾つかのカチオン塩の形態は、アンモニウム、アルミニウム、ベンザチン、ビスマス、カルシウム、コリン、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、リチウム、マグネシウム、メグルミン、４−フェニルシクロヘキシルアミン、ピペラジン、カリウム、ナトリウム、トロメタミンおよび亜鉛の塩の形態を含む。

幾つかの本発明の化合物は、立体異性体の形態で存在する。本発明は、エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む、本化合物の全ての立体異性体の形態を含む。立体異性体を合成し、分離する方法は、当技術分野で既知である。

本発明は、本化合物の全ての互変異性体の形態を含む。互変異性体のペアの例を下に示す。

本発明は、本発明の化合物中に存在する原子の全ての同位体を含むことを意図している。同位体は、同一の原子番号を有するが、異なる質量数を有する原子を含む。一般的な非限定的例として、水素の同位体は、重水素およびトリチウムを含む。炭素の同位体は、^１３Ｃおよび^１４Ｃを含む。同位体標識された本発明の化合物は、一般的に、他のときに用いられる標識されていない反応剤の代わりに、適切な同位体標識された反応剤を用いて、当業者に既知の慣用の方法によって製造され得るか、または、本明細書で記載された方法と類似の方法によって製造され得る。このような化合物は、生物活性を測定する際の標準および試薬としてなどの、様々な潜在的用途を有し得る。安定な同位体の場合は、このような化合物は、生物学的性質、薬理学的性質または薬物動態の性質を好都合に修飾する可能性を有し得る。

合成方法
本化合物は、下記の方法および当技術分野の技術の範囲内の変形を含む、当技術分野で既知の方法によって合成され得る。幾つかの反応剤および中間体は、当技術分野で既知である。他の反応剤および中間体は、容易に入手可能な物質を用いて、当技術分野で既知の方法によって合成され得る。本化合物の合成を説明するために用いられる可変基(例えば番号付けされた“Ｒ”置換基)は、本化合物を合成する方法を説明することのみを意図しており、特許請求の範囲または本明細書の他の章で用いられる可変基と混同されるべきではない。下記の方法は、例示を目的とし、本発明の範囲を限定することを意図しない。

本化合物の幾つかは、この章で記載された反応および方法を用いて製造され得る。反応は、用いられる反応剤および物質に適切な溶媒中で行われ、行われる変換に適当なものである。分子の種々の位置に存在する官能基は、提案された反応剤および反応と共存できなければならないことが、有機合成の分野の当業者に理解される。このような反応条件と共存できるという置換基の制限は、当業者に容易に明らかとなり、その際には別の方法を用いなければならない。

スキームで用いられる略号は、一般的に、当技術分野で用いられる慣例に従う。本明細書および実施例で用いられる化学的略号は、下記の通り定義される：“ＮａＨＭＤＳ”＝ビス(トリメチルシリル)アミドナトリウム；“ＤＭＦ”＝Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド；“ＭｅＯＨ”＝メタノール；“ＮＢＳ”＝Ｎ−ブロモスクシンイミド；“Ａｒ”＝アリール；“ＴＦＡ”＝トリフルオロ酢酸；“ＬＡＨ”＝水素化リチウムアルミニウム；“ＢＯＣ”、“ＤＭＳＯ”＝ジメチルスルホキシド；“ｈ”＝時間；“ｒｔ”＝室温または保持時間(文脈による)；“ｍｉｎ”＝分；“ＥｔＯＡｃ”＝酢酸エチル；“ＴＨＦ”＝テトラヒドロフラン；“ＥＤＴＡ”＝エチレンジアミン四酢酸；“Ｅｔ_２Ｏ”＝ジエチルエーテル；“ＤＭＡＰ”＝４−ジメチルアミノピリジン；“ＤＣＥ”＝１,２−ジクロロエタン；“ＡＣＮ”＝アセトニトリル；“ＤＭＥ”＝１,２−ジメトキシエタン；“ＨＯＢｔ”＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物；“ＤＩＥＡ”＝ジイソプロピルエチルアミン、“Ｎｆ”＝ＣＦ_３(ＣＦ_２)_３ＳＯ_２−；および“ＴＭＯＦ”＝トリメチルオルトホルメート。

本明細書で用いられる略号は、下記の通り定義される；“１×”＝１回、“２×”＝２回、“３×”＝３回、“℃”＝度(摂氏)、“ｅｑ”＝当量、“ｇ”＝グラム、“mg”＝ミリグラム、“Ｌ”＝リットル、“ml”＝ミリリットル、“μｌ”＝マイクロリットル、“Ｎ”＝規定、“Ｍ”＝モル濃度、“mmol”＝ミリモル、“min”＝分、“h”＝時間、“rt”＝室温、“RT”＝保持時間、“atm”＝気圧、“psi”＝平方インチあたりのポンド(pounds per square inch)、“conc.”＝濃縮、“sat”または“sat'd”＝飽和、“MW”＝分子量、“mp”＝融点、“ee”＝エナンチオマー過剰率、“MS”または“Mass Spec”＝質量分析、“ESI”＝エレクトロスプレーイオン化質量分析、“HR”＝高解像度、“HRMS”＝高解像度質量分析、“LCMS”＝液体クロマトグラフィー質量分析、“ＨＰＬＣ”＝高速液体クロマトグラフィー、“ＲＰＨＰＬＣ”＝逆相ＨＰＬＣ、“ＴＬＣ”または“ｔｌｃ”＝薄層クロマトグラフィー、“ＮＭＲ”＝核磁気共鳴分光分析、“¹H”＝プロトン、“δ”＝デルタ、“s”＝一重項、“d”＝二重項、“t”＝三重項、“q”＝四重項、“m”＝多重項、“br”＝ブロード、“Hz”＝ヘルツ、および、“α”、“β”、“Ｒ”、“Ｓ”、“Ｅ”および“Ｚ”は、当業者によく知られている立体化学の記号である。

スキーム１

式Ｉの化合物を、反応スキーム１で示した通りに製造する。式IIIのケトン(３−キヌクリドン)は既知であるか、市販されているか、または当業者に既知の方法によって製造され得る。シアン化ナトリウムまたはシアン化カリウム＋酸との反応によって、該ケトンを対応する式IVのシアノヒドリンに変換することができる。ボラン／テトラヒドロフラン錯体との反応によって、式IVの化合物を対応する式Ｖのアミノ−メチル化合物(ボラン錯体)に還元することができる。

不活性溶媒中で、式Ｖの化合物をヘテロアリールイソチオシアネートと直接反応させ、式VIのチオウレアを得ることができる。あるいは、ヘテロアリールアミンをチオカルボニル−ジイミダゾールと反応させ、活性化種を得ることができ、これを単離することなく式Ｖの化合物を式VIの化合物に変換するために用いることができる。該ヘテロアリールアミンを当業者に既知の方法によって製造し得る。

例えばジ−イソプロピルカルボジイミドを用いて、式VIのチオウレアを環化させ、式VIIのオキサゾリンを得ることができ、これを酸で処理することによって脱保護し、ラセミの最終生成物の式Ｉの化合物を得る。当技術分野で既知の方法によって、例えば、キラルクロマトグラフィーによって、式Ｉの化合物を、純粋な式Iaおよび式Ibのエナンチオマーに分離し得る。

スキーム２

あるいは、反応スキーム２で示した通りに、式Ｖのキヌクリジンの遊離アミノ基を、例えばカルボベンジルオキシクロリド(“ＣＢＺ−Ｃｌ”)でブロックし、式VIIIの化合物を得ることができる。

式VIIIのラセミ化合物を、例えばキラルクロマトグラフィーによって、そのエナンチオマー、すなわち式IXおよび式Ｘに分割することができる。式IXまたは式Ｘの化合物の何れか、好ましくは式Ｘの化合物について、反応スキーム２で示した通りの反応を行うことができる。

式Ｘの化合物中のボラン基は、例えば希塩酸で処理することによって除去され、カルボベンジルオキシ基は、例えば接触還元によって除去され、キラルな式XIのキヌクリジンアミンを得ることができる。反応スキーム１と同様に、式XIのアミン塩は、イソチオシアネートと反応させて、式VIaのチオウレアを得ることができ、これをジアルキルカルボジイミドまたは混合チオウレア(チオカルボニルジイミダゾールとの反応より)と反応させて、キラルな式Iaのオキサゾリンキヌクリジン化合物およびその互変異性体である式IIaの化合物を得ることができる。

スキーム２ａ

あるいは、式Ｖのボラン基を塩酸で除去し、式XIIの二塩酸塩を得て、これを塩基の存在下でイソチオシアネートと反応させて、中間体である式XIIIのチオウレアを得ることができ、これを反応スキーム１〜２の通りに環化させて、式Ｉの化合物を得ることができる。式XIIの化合物はまた、米国特許第5,137,895号(8/11/1992)に記載された他の方法によって製造され得る。

スキーム３

さらに、(ヘテロ)芳香族性アミンを、二硫化炭素、水酸化ナトリウムおよびヨウ化メチルと反応させ、中間体である式XIVのカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得る。これらを塩基の存在下で式XIIの二塩酸塩と反応させ、２molのメタンチオールを除去し、直接式Iaの望ましい生成物を得る。

生物学的方法
Ｉ) α７ニコチン性アセチルコリン受容体結合
ラットのα７ニコチン性アセチルコリン受容体(ラットα７ｎＡＣｈＲ)を安定に発現するＨＥＫ２９３細胞を用いて、結合のための膜を調製した。４℃で、１０ｍＭＴｒｉｓ(pH 7.4)、５ｍＭＥＤＴＡおよびプロテアーゼ阻害剤からなる低浸透圧性溶解緩衝液中で、細胞をホモジナイズし、３２０００×ｇで２０分間遠心分離した。５０ｍＭＴｒｉｓ(pH 7.4)、１ｍＭＥＤＴＡおよびプロテアーゼ阻害剤からなる膜洗浄緩衝液中で、ペレットを１回洗浄し、３２０００×ｇで２０分間遠心分離した。このペレットを、５０ｍＭＫＨ_２ＰＯ_４(pH 7.4, ２５℃)、１ｍＭＥＤＴＡ、０.００５％ Triton-X 100および０.１％(v/v) Sigma社製プロテアーゼ阻害剤カクテルからなるアッセイ緩衝液に再度懸濁した。アリコートをドライアイス／エタノール中で凍結し、アッセイの日まで−８０℃で保存した。

II) 哺乳動物細胞におけるニコチン性アセチルコリン受容体チャネル機能についてのＣａ ^２＋感受性蛍光ベースアッセイα−７(ＦＬＩＰＲ)
概要：リード化合物を、哺乳動物のＨＥＫ２９３細胞中で発現させたニコチン性ＡＣｈ受容体イオンチャネルのα−７、α３β４、α４αβ２およびα１β１δ１εサブタイプへのアゴニスト活性について評価する。３８４ウェルＦＬＩＰＲ(蛍光画像プレートリーダー)を用いて行った動的蛍光Ｃａ^２＋流入測定から、アゴニスト強度および有効性を測定する。創薬活動における細胞内二価カチオン濃度、特にＣａ^２＋の濃度変化を測定するための蛍光指示薬の有用性が詳細に記載されている(Rudiger, R., et al., Nature Reviews, 2003, 4:579-586; Gonzalez J.E., et al., Receptors and Channels, 2002, 8:283-295)。このアッセイにおいて、３８４ウェルアッセイプレートに播種したチャネル発現ＨＥＫ細胞株に、５１０nmでの緑色の放出シグナルが細胞内Ｃａ^２＋濃度の上昇に応答して増加する、膜透過性蛍光Ｃａ^２＋指示色素を取り込ませる。細胞の基底蛍光をリアルタイムでモニターし、次に試験化合物を急性に添加する。化合物が非選択性カチオンチャネルのいずれかのアゴニストであれば、チャネルは開いて、細胞内Ｃａ^２＋イオンの細胞質への移動が可能となり、それらはＣａ^２＋指示色素に結合して、蛍光アウトプットシグナルの増加を起こし、それが冷却ＣＣＤ撮像カメラによって検出される。

材料および方法：反応剤：Ｃａ^２＋指示色素Ｆｌｕｏ−４のアセトメトキシ(ＡＭ)エステルをInVitrogen (Carlsbad, CA)から得た。アセチルコリンおよび全ての緩衝液の成分は、Sigma Chemical Company, St. Louis, MOから購入した。Ｇ４１８および基礎培地をInVitrogen Life Technologies, Carlsbad, CAから購入した。ウシ胎児血清を(InVitrogen, Carlsbad, CA)から購入した。

細胞培養：ＨＥＫ−２９３細胞を、１０％(v/v) ウシ胎児血清を含む基礎培地中で、３７℃で、５％ＣＯ_２インキュベーター中で増殖させた。イオンチャネルを安定的に発現するＨＥＫ−２９３細胞を、５００μg/ml Ｇ４１８を添加した同じ培地中で増殖させた。

ＨＥＫ−２９３細胞中で発現されたＣａ ^２＋チャネルのＣａ ^２＋流量アッセイ：対象のイオンチャネルを発現するＨＥＫ−２９３を、３８４ウェル黒壁透明底ポリ−Ｄ−リジン被覆プレートに、２０μｌの１０％(v/v) ウシ胎児血清を含む基礎培地中約２０,０００細胞／ウェルの密度で播種し、２９℃で、５％ＣＯ_２インキュベーター中で２日間インキュベートした。アッセイを行う前に、細胞にＦｌｕｏ−４のＡＭエステルを取り込ませた。細胞取り込みは、培養培地を除き、それを２０ｍＭＨＥＰＥＳ、２.５ｍＭプロベネシド、０.５ｍＭＣａＣｌ_２、１ｍＭＭｇＣｌ_２および１０μＭアトロピンを含むハンクス平衡塩溶液(#14175-095)と混合した３０ μｌ／ウェルの色素のＡＭエステル(５μＭ)と置き換えることによって行った。色素取り込みは室温で９０分間行い、その時点で、色素取り込み溶液を除き、４０μｌ／ウェルのハンクス緩衝液と置き換えた。色素を取り込んだ細胞を、ＦＬＩＰＲ３８４(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)に載せた。Ｆｌｕｏ−４色素を４８８nmのアルゴンレーザー線を用いて励起させた。放出を、５４０±３０nmのバンドパスフィルターを用いてフィルターした。Ｃａ^２＋流量アッセイを用いて試験化合物の効果を評価するために、試験された化合物を、アッセイ調製済みプレートに入れた。ニコチン受容体イオンチャネル発現細胞において、２０μｌ／ウェルの試験化合物を含むハンクス緩衝液を添加することによって、アッセイを開始した。全てのアッセイについて、１Hzで１０秒間データを集め(ベースライン)、その時点で化合物含有刺激緩衝液を添加し、０.３３Hzで３分間さらに測定を行った。

データ分析：ニコチン受容体Ｃａ^２＋流量アッセイの統計学的ロバスト性を、ブランクおよび総ウェルから決定する。総ウェルは、各化合物試験プレートについての最大チャネル活性化(アセチルコリンの最大有効投与量)を規定し、対応量のＤＭＳＯのみを含むブランクウェルは、ゼロチャネル活性化を規定する。ＦＬＩＰＲプレートリーダーから得た蛍光単位の生データファイルを、自動的にエクスポートし、社内データ分析ツールによって処理する。各濃度の試験化合物について低下した％活性化データを、MathIQ fitting engine (ID Business Solutions Limited, Surrey, UK)を用いてフィットさせる。試験化合物の示された条件でのＣａ^２＋流量について、最大蛍光強度の変化をフィットさせることによって、データを分析する。３個のアッセイウェルの平均値の２０点の濃度応答曲線(ＣＲＣ)から、化合物の強度(ＥＣ_５０値)を計算する。試験化合物の強度(Ｙmax値)は、総ウェルにおけるアセチルコリンへの最大応答と比較して表される。

III) Ｆｏｓ定量化アッセイ
オスのウィスターラットを、医薬(１〜１０mg/kg)またはビークル(２ml/kg, 皮下)で処置した。処置後２時間で、ラットを素早く断頭し、目的の脳領域を氷上で摘出し、重量を量り、液体窒素で急速冷凍し、−８０℃で保存する。核抽出物における脳組織のさらなる処理およびＦｏｓ定量化は、市販のＥＬＩＳＡベース化学発光検出キット(カタログ番号89860, ＥＺ−検出ｃ−Ｆｏｓトランスキット, Pierce Biotechnology Inc., Rockford, IL)によって規定されたプロトコルに従って行う。

IV) ラットにおけるＭＫ−８０１破壊セットシフトアッセイ
このアッセイは、Stefani et al. (Behavioral Neuroscience, 2003, 117: 728-737)によって記載されたプロトコルの修飾を用いる。このアッセイにおいて、ＭＫ−８０１誘発運動能力欠損(０.０３mg/kg, 腹腔内, １回投与)を逆転させる能力について、試験化合物を評価した。

上記のアッセイ(II)で試験された、本明細書に記載された具体的な化合物の活性を表１に示す。
表１

^a ＥＣ_５０値(ｎＭ)に基づく活性： +++ ＝＜１００ｎＭ； ++ ＝１００〜１０００ｎＭ； + ＝１０００〜１０００００ｎＭ；^b NT ＝試験せず； NA ＝活性なし(＞１００００００ｎＭ)。

表１ｂ

^a ＥＣ_５０値(ｎＭ)に基づく活性： +++ ＝＜１００ｎＭ； ++ ＝１００〜１０００ｎＭ； + = １０００〜１０００００ｎＭ; ^b NT ＝試験せず； NA ＝活性なし (＞１００００００ｎＭ)。

医薬組成物および処置方法
式Ｉの化合物は、α７に結合し、情動障害および神経変性障害を処置するのに有用であり得る。従って、本発明の他の局面は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩、および、薬学的に許容される担体を含む組成物である。

本発明の他の局面は、情動障害または神経変性障害を処置する医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用である。
本発明の他の局面は、統合失調症またはアルツハイマー病を処置する医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用である。

本発明の他の局面は、情動障害または神経変性障害を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。
本発明の他の局面は、統合失調症またはアルツハイマー病を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。

本発明の他の局面は、統合失調症を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。
本発明の他の局面は、アルツハイマー病を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。

本発明の他の局面は、認知障害を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。
本発明の他の局面は、関節リウマチを処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。

本発明の他の局面は、変形性関節症を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。
本発明の他の局面は、潰瘍性大腸炎を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。

本発明の他の局面は、クローン病を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。
本発明の他の局面は、糖尿病を処置する方法であって、患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法である。

“患者”は、情動障害および神経変性障害の分野の従業者によって治療に適すると解されるヒトを意味する。
“処置”、“治療”および関連の用語は、情動障害および神経変性障害の分野の従業者によって理解される通りに用いられる。

本発明の化合物は、一般的に、治療有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩、および、薬学的に許容される担体を含む医薬組成物として与えられ、慣用の賦形剤を含んでもよい。薬学的に許容される担体は、許容される安全性プロファイルを有する慣用の既知の担体である。組成物は、全ての一般の固体および液体の形態を包含し、例えば、カプセル剤、錠剤、ロゼンジおよび散剤、ならびに、懸濁液、シロップ剤、エリキシル剤および溶液を含む。組成物は、一般の製剤方法を用いて製造され、慣用の賦形剤(例えば結合剤および湿潤剤)およびビークル(例えば水およびアルコール)が、組成物に一般的に用いられる。例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 17th edition, 1985を参照のこと。

固体組成物は、通常、単位投与形で製剤化され、１回用量当たり約１〜１０００mgの有効成分を提供する組成物が好ましい。投与量の幾つかの例は、１mg、１０mg、１００mg、２５０mg、５００mgおよび１０００mgである。一般的に、他の医薬が、臨床的に用いられているその群の医薬と同様の単位用量範囲で存在する。典型的には、これは０.２５〜１０００mg/単位である。

液体組成物は、通常、単位投与量範囲である。一般的に、液体組成物は、１〜１００mg/mlの単位投与量範囲である。投与量の幾つかの例は、１mg/ml、１０mg/ml、２５mg/ml、５０mg/mlおよび１００mg/mlである。一般的に、他の医薬は、臨床的に用いられているその群の医薬と同様の単位用量範囲で存在する。典型的には、これは１〜１００mg/mlである。

本発明は、全ての慣用の投与方法を包含し、経口および非経腸方法が好ましい。一般的には、投与レジメは、臨床的に用いられている他の医薬と同様である。典型的には、１日投与量は、１日当たり１〜１００mg/kg体重である。一般的には、多くの化合物が経口で必要とされ、非経腸では少ない。しかし、具体的な投与レジメは、医師によって、堅実な医学的判断を用いて決定される。

具体的な態様の説明
^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、Bruker 500、400または300 MHz装置で測定し、化学シフトを、テトラメチルシラン(δ＝0.0)を参照としてppm(δ)で示した。全ての蒸発を減圧下で行った。特にことわらない限り、Shimadzu社の装置で、Phenomenex-Luna 4.6×50mm S 10 逆相カラムを用いて、流速４ml/分で、メタノール／水中０.１％ＴＦＡの濃度勾配[０〜１００％, ３分, ランタイム４分]を用いて、ＵＶ検出器を２２０nmに設定して、あるいは、Gemini C18 4.6×50mm 5μ 逆相カラムで、流速５ml/分で、１０ｍＭ酢酸アンモニウムアセトニトリル／水の濃度勾配[５〜９５％, ３分, ランタイム４分]を用いて、ＵＶ検出器を２２０nmに設定して、ＬＣ／ＭＳ分析を行った(陰イオンの質量分析)。特にことわらない限り、精製は、分取C-18カラムによって、０.１％トリフルオロ酢酸(ＴＦＡ)を含むメタノール−水の濃度勾配を用いて、Shimadzu社の高速液体分取クロマトグラフィー系を用いて、XTERRA 30×100mm S5 カラムを用いて、流速４０ml/分で、１２分の濃度勾配で行った。

実施例１
Ｎ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３００ml)中のベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(２０ｇ, １３３mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(３０.８ｇ, １７３mmol)を加えた。反応物を５０℃で２４時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を真空オーブン(４０℃)中で２時間乾燥させた。生成物であるＮ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(２８.９ｇ, １１１mmol)を、さらに精製することなく次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (３−((３−ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１００ml)中のＮ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(９.２ｇ, ３５mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(６.０ｇ, ３５mmol)[Swain C.J., et. al., J. Med. Chem., 35:1019-1031 (1992)に従って合成]を加えた。反応物を６５℃で１５時間撹拌した。反応物を冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質を、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、ＴＬＣで検出される最初のスポット／フラクションを生成物として得た。フラクションを合わせて、濃縮し、(３−((３−ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを灰白色の粉末として得た(１０.６ｇ, ２９.１mmol, 収率８３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.88 (s, 1 H), 10.30 (s, 1 H), 7.94 (d, J=7.63 Hz, 1 H), 7.55 - 7.74 (m, 1 H), 7.37 - 7.53 (m, J=7.32, 7.32 Hz, 1 H), 7.16 - 7.37 (m, J=7.63, 7.63 Hz, 1 H), 5.39 (s, 1 H), 3.85 (d, 2 H), 2.65 - 3.08 (m, 6 H), 1.99 - 2.22 (m, 1 H), 1.79 - 1.97 (m, 2 H), 1.66 - 1.79 (m, 1 H), 1.08 - 1.63 (m, 4 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.40; [M+H]⁺ = 363.1。

工程Ｃ： (２−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１００ml)中の(３−((３−ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１０.６ｇ, ２９.１mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１１.４ml, ７２.８mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、粗製の残渣を得た。少量の酢酸エチル(２０ml)を加え、懸濁液を超音波処理した。固体を濾過し、少量の酢酸エチル(２×１０ml)で洗浄した。固体を真空オーブン(８０℃)中で乾燥させ、(２−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(６.８３ｇ, ２０.８mmol, 収率７２％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.09 (br. s., 1 H) 7.81 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.63 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.30 - 7.40 (m, 1 H) 7.15 - 7.24 (m, 1 H) 3.88 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 3.77 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 3.25 - 3.37 (m, 1 H) 3.17 (dd, J=14.95, 1.83 Hz, 1 H) 2.99 - 3.10 (m, 1 H) 2.79 - 2.98 (m, 3 H) 2.27 (br. s., 1 H) 1.98 - 2.11 (m, 1 H) 1.71 - 1.88 (m, 3 H) 1.45 (br. s., 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.44; [M+H-BH₃]⁺ = 315.1。

工程Ｄ：Ｎ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(６.６ｇ, ２０.１mmol)に、３ＭＨＣｌ(５０.３ml, １５１mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。ＴＬＣによって反応の完了が示された(より低いスポット)。酢酸エチルを加え、水層を分離した。水層を１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×１５０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、白色の粉末を得た。少量の酢酸エチル(２０ml)を粉末に加えた。固体を超音波処理し、濾過し、ラセミのＮ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(５.１３ｇ, １６.３mmol, 収率８１％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.02 (br. s., 1 H) 7.79 (d, J=7.02 Hz, 1 H) 7.62 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.29 - 7.38 (m, 1 H) 7.15 - 7.22 (m, 1 H) 3.90 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.65 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.98 - 3.10 (m, 2 H) 2.73 - 2.88 (m, 2 H) 2.67 (t, J=7.78 Hz, 2 H) 2.07 (br. s., 1 H) 1.93 (br. s., 1 H) 1.42 - 1.67 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.15; [M+H]⁺ = 315.3。

Chiralpak AD-H(3×25cm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２／(メタノール／ＡＣＮ／ＤＥＡ＝７０／３０／０.１(v/v/v))＝７７／２３からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を３００nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−Ｎ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(１.４５ｇ, ４.６１mmol, 収率２９.４％)。
(１ａ; Ｓ−異性体): ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.03 (br. s., 1 H) 7.78 (d, J=7.05 Hz, 1 H) 7.61 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.27 - 7.37 (m, 1 H) 7.11 - 7.23 (m, 1 H) 3.89 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.64 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.96 - 3.09 (m, 2 H) 2.71 - 2.88 (m, 2 H) 2.66 (t, J=7.81 Hz, 2 H) 2.02 - 2.11 (m, 1 H) 1.85 - 1.97 (m, 1 H) 1.41 - 1.65 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.15; [M+H]⁺ = 315.3. 旋光度(1.23 mg/mL, DMSO) = +5.20°。

二番目のピークは(Ｒ)−Ｎ−(ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(１.２１ｇ, ３.８５mmol, 収率２４.５％)。
(１ｂ; Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.02 (br. s., 1 H) 7.79 (d, J=7.32 Hz, 1 H) 7.62 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.33 (t, J=7.63 Hz, 1 H) 7.18 (t, J=7.48 Hz, 1 H) 3.90 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.65 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.98 - 3.10 (m, 2 H) 2.73 - 2.87 (m, 2 H) 2.67 (t, J=7.63 Hz, 2 H) 2.08 (br. s., 1 H) 1.93 (br. s., 1 H) 1.42 - 1.67 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.15; [M+H]⁺ = 315.3; 旋光度(3.9 mg/mL, DMSO) = -3.92°。

実施例２
Ｎ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン

メカニカルスターラー、滴下漏斗および温度計を備えた５００mlの３ツ首フラスコに、酢酸(１００ml)を加え、氷浴中で冷却した。チオシアン酸カリウム(４０ｇ, ４１２mmol)および６−メトキシピリジン−３−アミン(６.２ｇ, ４９.９mmol)を反応混合物に加えた。反応物の温度が＜０℃に至るまで、反応物を氷−塩浴中で冷却した。反応温度を＜０℃に維持する速度で、酢酸(３０.０ml)中の臭素(８ml, １５６mmol)の溶液を２時間かけて滴下した。メカニカルスターラーでの撹拌を要した。添加完了後、混合物を撹拌しながら、ゆっくりと一夜かけて室温まで温めた。水(３０ml)を加え、混合物を、油浴中、８５℃まで加熱した。熱いままで、この混合物を濾過した。橙色のフィルターケーキを反応フラスコに戻し、さらに５０mlの酢酸を加えた。混合物を再度８５℃まで加熱し、熱いままで１回以上濾過した。合わせた濾液を氷浴中で冷却し、濃水酸化アンモニウムでｐＨ８まで中和した。紫色の沈殿物が形成した。これを濾過によって集め、５ｇの粗製の物質を得た。この粗製の物質をメタノール(４０ml)から再結晶し、５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミンを紫色の結晶として得た(３ｇ, １６.５５mmol, 収率３３.１％)。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.60 (1 H, d, J=8.42 Hz), 7.41 (2 H, s), 6.67 (1 H, d, J=8.78 Hz), 3.81 (3 H, s)。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン(２.４ｇ, １３.２４mmol)を、５×２０mlのネジ蓋付きバイアルに分けた。各バイアルに、アセトニトリル(１０ml)およびチオカルボニルジイミダゾール(６００mg)を加えた。全てのバイアルを６０℃で一夜加熱した。反応バイアルを合わせて、濃縮し、粗生成物のＮ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを得た。この粗生成物を、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(５０ml)に懸濁し、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(２.７ｇ, １５.８８mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間加熱した。ＬＣ／ＭＳにより、本質的に変換の完了が示された。反応物を室温まで冷却し、水に注いだ。生成物を最初にトルエンで抽出し、次にクロロホルムで抽出した。有機物を合わせて、水で、そして塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、粗製の物質を得た。この粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した(２０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)。生成物のフラクションを集めて、真空で濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを得た(１.３６ｇ, ３.４６mmol, 収率２６.１％)。^１Ｈ−ＮＭＲにより、(３−ヒドロキシ−３−((３−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.３６ｇ, ３.４６mmol, 収率２６.１％)と５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン(.３４ｇ, １.８７６mmol, 収率１４.１７％)のモル比が１：０.５５であることが示された。混合物を、さらに精製することなく次の工程に直接用いた。
MS (LC/MS) R.T. = 3.23; [M+H]⁺ = 392.1。

工程Ｃ： (２−(５−メトキシ−３ａ,７ａ−ジヒドロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)中の(３−ヒドロキシ−３−((３−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.７ｇ, ３.４６mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.８９ml, １２.１０mmol)を加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。混合物を冷却し、水に注いだ。生成物をトルエンおよびクロロホルムで抽出した。有機層を合わせ、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、粗製の物質を得た。この固体の物質をエーテルで磨砕した。固体を濾過して乾燥させ、(２−(５−メトキシ−３ａ,７ａ−ジヒドロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを得た(７００mg, １.９４mmol, 収率５６.０％)。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.98 (1 H, s), 7.86 (1 H, d, J=8.78 Hz), 6.81 (1 H, d, J=8.42 Hz), 3.87 (3 H, s), 3.83 (1 H, s), 3.68 - 3.78 (1 H, m), 3.31 (1 H, s), 3.15 - 3.29 (1 H, m), 2.78 - 3.14 (4 H, m), 2.26 (1 H, br. s.), 2.04 (1 H, br. s.), 1.63 - 1.89 (3 H, m)。

工程Ｄ：Ｎ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(１０ml)中の(２−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(７８０mg, ２.１７mmol)に、３ＭＨＣｌ(１０ml, ３２９mmol)を加えた。反応物を室温で２時間撹拌した。クロロホルムおよび水を加え、水層を分離した。水層を重炭酸ナトリウムで中和した。生成物をクロロホルム(２×)で抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、ラセミのＮ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(５８８mg, １.７０mmol, 収率７８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.90 (1 H, br. s.), 7.82 - 7.86 (1 H, m), 6.80 (1 H, d, J=8.85 Hz), 3.84 - 3.89 (4 H, m), 3.61 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.03 (2 H, d, J=5.19 Hz), 2.73 - 2.86 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.78 Hz), 2.07 (1 H, br. s.), 1.92 (1 H, br. s.), 1.45 - 1.65 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.29; [M+H]⁺ = 346.1。

Chiralpak AD-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３５％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を３００nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮して、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−Ｎ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(２１２mg, ０.６１mmol, 収率３６.１％)。
(２ａ; Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.89 (1 H, br. s.), 7.84 (1 H, d, J=8.85 Hz), 6.77 - 6.82 (1 H, m), 3.84 - 3.89 (4 H, m), 3.61 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.03 (2 H, d, J=5.19 Hz), 2.74 - 2.86 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.63 Hz), 2.06 (1 H, br. s.), 1.92 (1 H, br. s.), 1.44 - 1.65 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.47; [M+H]⁺ = 346.2. 旋光度(3.57 mg/ml, DMSO) = -2.58°。

二番目のピークは、(Ｒ)−Ｎ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(２４２mg, ０.７０mmol, 収率４１.２％)。
(２ｂ; Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.89 (1 H, br. s.), 7.84 (1 H, d, J=8.85 Hz), 6.79 (1 H, d, J=8.55 Hz), 3.82 - 3.90 (4 H, m), 3.61 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.03 (2 H, d, J=5.49 Hz), 2.74 - 2.86 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.78 Hz), 2.06 (1 H, br. s.), 1.92 (1 H, br. s.), 1.42 - 1.67 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.30; [M+H]⁺ = 346.2. 旋光度(3.29 mg/ml, DMSO) = +2.43°。

実施例３
(２−(５Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−４,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミン)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)ピロリジン−１−イル)メタノン

工程Ａ：６−(ピロリジン−１−カルボニル)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

２５０mlのフラスコに、テトラヒドロフラン(５０ml)中の２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−アミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−カルボン酸(１.０ｇ, ３.４mmol)およびピロリジン(０.５５９ml, ６.８mmol)を加えた。この溶液に、ＥＤＣ(１.３ｇ, ６.８mmol)、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール(triaxole)(１.０４１ｇ, ６.８mmol)およびヒューニッヒ塩基(２.３７ml, １３.５９mmol)を加えた。反応物を２５℃で１時間撹拌した。反応物を水およびジクロロメタンに注いだ。その水をジクロロメタンで３回抽出し、有機層を合わせ、濃縮した。残渣を少量のジクロロメタンに溶かし、ジエチルエーテル／ヘキサンで沈殿させた。フラスコを冷蔵庫中に１時間置いて、濾過した。白色の沈殿物を集め、６−(ピロリジン−１−カルボニル)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た(１.０９ｇ, ３.１４mmol, 収率９２％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.95 (s, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 7.61 - 7.77 (m, J=8.39, 1.98 Hz, 1 H), 7.46 - 7.63 (m, 1 H), 3.39 - 3.63 (m, 4 H), 1.74 - 2.00 (m, 4 H), 1.45 - 1.62 (m, 9 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.40; [M+H]⁺ = 363.1。

工程Ｂ： (２−アミノベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)(ピロリジン−１−イル)メタノン

６−(ピロリジン−１−カルボニル)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１.０９ｇ, ３.１４mmol)を、ジクロロメタン(１０ml)およびＴＦＡ(３ml, ３８.９mmol)に溶解し、反応物を２５℃で一夜撹拌した。反応物を分液漏斗に注ぎ、重炭酸ナトリウムで注意深く中和した。液体をクロロホルム／メタノール(４：１)で３回抽出した。有機層を濃縮し、白色の残渣を得て、ジエチルエーテルで磨砕した。沈殿物を集め、(２−アミノベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)(ピロリジン−１−イル)メタノンを得た(０.４９７ｇ, ２.０mmol, ６４％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.86 (d, J=1.51 Hz, 1 H), 7.65 (s, 2 H), 7.35 - 7.46 (m, 1 H), 7.26 - 7.35 (m, 1 H), 3.41 - 3.57 (m, 4 H), 1.64 - 1.97 (m, 4 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.39; [M+H]⁺ = 248.1。

工程Ｃ： (２−(５Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−４,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミン)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)ピロリジン−１−イル)メタノン

(２−(５Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−４,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミン)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)ピロリジン−１−イル)メタノンを、実施例１の工程Ａ〜Ｄの一般的な手順に従って、(２−アミノベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)(ピロリジン−１−イル)メタノン(実施例３の工程Ｂ)を出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.05 (br. s., 1 H) 7.99 (d, J=1.76 Hz, 1 H) 7.60 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.48 (dd, J=8.31, 1.76 Hz, 1 H) 3.90 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.65 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.42 - 3.52 (m, 4 H) 3.04 (s, 2 H) 2.75 - 2.87 (m, 2 H) 2.67 (t, J=7.81 Hz, 2 H) 2.08 (br. s., 1 H) 1.76 - 1.98 (m, 5 H) 1.41 - 1.65 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.33; [M+H]⁺ = 412.2。

実施例４
Ｎ−(５−フェニルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(５−フェニルチアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

アセトニトリル(６ml)中の５−フェニルチアゾール−２−アミン(０.５２ｇ, ２.９mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(０.６８ｇ, ３.８mmol)を加えた。反応混合物を６５℃で２時間撹拌した。沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×２０ml)で洗浄し、中間体Ｎ−(５−フェニルチアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを得た。中間体をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(３０ml)に溶かし、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.５ｇ, ２.９mmol)で処理した。反応混合物を６５℃で５時間撹拌した。反応物を真空で濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製によって精製した(３０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを合わせて、真空で濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(５−フェニルチアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(.８５ｇ, ２.１９mmol, 収率７４.４％)。ＬＣ／ＭＳにより、本ＬＣ／ＭＳ条件でＢＨ_３が無い生成物を確認した：保持時間 3.26 (M+1-BH₃= 375.33)。

工程Ｂ： (２−(５−フェニルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ−[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(３−ヒドロキシ−３−((３−(５−フェニルチアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.８ｇ, ２.１mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.１２ml, ７.２mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を真空で濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。合わせた生成物のフラクションを真空で濃縮し、(２−(５−フェニルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.５１ｇ, １.４４mmol, 収率７０％)。ＬＣＭＳ−マスは、ＬＣ／ＭＳ条件でＢＨ_３が無いものに対応する：保持時間 2.46 (M+1-BH₃ = 341.36)。

工程Ｃ：Ｎ−(５−フェニルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(５−フェニルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.５６ｇ, １.５８mmol)に、３ＭＨＣｌ(３.９５ml, １１.８６mmol)を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌し、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×２０ml)で、次にクロロホルム(２×２０ml)で抽出した。有機層を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、白色の粉末を得た。粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製し(Phenomenex Luna 30×100mm；波長２２０nm；濃度勾配１０分；流速４０ml/分；溶媒Ａ＝１０％メタノール−９０％水−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％メタノール−１０％水−０.１％ＴＦＡ)。フラクションを合わせて、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和し、酢酸エチル(２×３０ml)およびクロロホルム(２×３０ml)で抽出した。有機物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(５−フェニルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.４ｇ, １.１７５mmol, 収率７４.３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.63 (1 H, br. s.), 7.71 (1 H, s), 7.52 (2 H, d, J=7.32 Hz), 7.37 (2 H, t, J=7.78 Hz), 7.25 (1 H, t, J=7.32 Hz), 3.82 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.57 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.02 (2 H, d, J=4.27 Hz), 2.79 (2 H, t, J=7.63 Hz), 2.66 (2 H, t, J=7.63 Hz), 2.04 (1 H, br. s.), 1.92 - 1.97 (1 H, m), 1.44 - 1.65 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.52; [M+H]⁺ = 341.3。

Chiralpak AS-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、ＵＶを３００nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、０.４ｇ, １.１５mmol, ３２.７％を得た。
(４ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.69 (s, 1 H), 7.69 - 7.87 (m, 1 H), 7.52 - 7.66 (m, J=10.99 Hz, 2 H), 7.37 - 7.51 (m, 2 H), 7.21 - 7.38 (m, 2 H), 3.52 - 4.00 (m, 2 H), 2.98 - 3.23 (m, 2 H), 2.78 - 2.94 (m, 2 H), 2.64 - 2.78 (m, 2 H), 1.88 - 2.19 (m, J=60.43 Hz, 2 H), 1.40 - 1.77 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.77; [M+H]⁺ = 341.1。

二番目のピークから、０.４ｇ, １.１５mmol, ３２.７％を得た。
(４ｂ, Ｒ−異性体):L 融点 187〜9℃. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.64 (s, 1 H), 7.62 - 7.84 (m, 1 H), 7.44 - 7.61 (m, 2 H), 7.33 - 7.46 (m, 2 H), 7.18 - 7.31 (m, 1 H), 3.50 - 3.99 (m, 2 H), 2.94 - 3.14 (m, 2 H), 2.74 - 2.91 (m, 2 H), 2.61 - 2.72 (m, 2 H), 2.05 (s, 1 H), 1.82 - 2.00 (m, 1 H), 1.34 - 1.72 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.78; [M+H]⁺ = 341.1。

実施例５
Ｎ−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン
工程Ａ：Ｎ−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(２０ml)中の６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(０.５３ｇ, ２.９４mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(０.６８１ｇ, ３.８２mmol)を加えた。反応混合物を６５℃で２４時間撹拌した。沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×２０ml)で洗浄し、生成物を得た。生成物を、さらに精製せず、または特性決定せずに、次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中のＮ−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(.８２ｇ, ２.８２mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.４８ｇ, ２.８２mmol)を加えた。反応混合物を６５℃で６時間撹拌した。反応物を真空で濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(３０％〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。純粋なフラクションを合わせて、濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.７ｇ, １.７８mmol, 収率６３.２％)。ＬＣ／ＭＳにより、本ＬＣ／ＭＳ条件でＢＨ_３が無い生成物を確認した：保持時間 3.11 (M+1-BH₃ = 379.4)。

工程Ｃ： (２−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(３−ヒドロキシ−３−((３−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.６８ｇ, １.７３mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.９５ml, ６.１mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを合わせて、真空で濃縮し、(２−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.３５ｇ, ０.９８mmol, 収率５６.４％)。
LC/MS MH⁺ - BH₃ = 345.2。

工程Ｄ：Ｎ−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.３３ｇ, ０.９２１mmol)に、３ＭＨＣｌ(２.３０ml, ６.９１mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌し、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を、酢酸エチル(２×２０ml)で、次にクロロホルム(２×２０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、白色の粉末を得た。粗生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製した(Phenomenex Luna 30×100mm；波長２２０nm；濃度勾配１０分；流速４０ml/分；溶媒Ａ＝１０％メタノール−９０％水−０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝９０％メタノール−１０％水−０.１％ＴＦＡ)。フラクションを合わせて、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和し、酢酸エチル(２×３０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(６−メトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.２５ｇ, ０.７３mmol, 収率７９％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.88 (1 H, d, J=1.22 Hz), 7.48 - 7.52 (1 H, m), 7.40 (1 H, d, J=2.75 Hz), 6.92 (1 H, dd, J=8.70, 2.59 Hz), 3.87 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.77 (3 H, s), 3.61 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.03 (2 H, s), 2.75 - 2.86 (2 H, m), 2.67 (2 H, t, J=7.78 Hz), 2.06 (1 H, br. s.), 1.91 (1 H, br. s.), 1.41 - 1.65 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.44; [M+H]⁺ = 345.3。

Chiralpak AD-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中２３％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、ＵＶを２２０nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、２０５.５mg, ０.６０mmol, ３４.１％を得た。
(５ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.88 (1 H, br. s.), 7.50 (1 H, d, J=8.81 Hz), 7.40 (1 H, d, J=2.52 Hz), 6.92 (1 H, dd, J=8.81, 2.77 Hz), 3.87 (1 H, d, J=9.82 Hz), 3.77 (3 H, s), 3.58 - 3.65 (1 H, m), 3.02 (2 H, s), 2.74 - 2.86 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.03 - 2.08 (1 H, m), 1.91 (1 H, br. s.), 1.39 - 1.65 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.40; [M+H]⁺ = 345.2。

二番目のピークから、２０６.９mg, ０.６mmol, ３４％を得た。
(５ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.88 (1 H, br. s.), 7.50 (1 H, d, J=8.56 Hz), 7.40 (1 H, d, J=2.52 Hz), 6.93 (1 H, dd, J=8.81, 2.52 Hz), 3.87 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.77 (3 H, s), 3.62 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.02 (2 H, s), 2.75 - 2.86 (2 H, m), 2.67 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.04 - 2.09 (1 H, m), 1.92 (1 H, br. s.), 1.42 - 1.66 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.70; [M+H]⁺ = 345.1。

実施例６
Ｎ−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(１.１ｇ, ６.７mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(１.５５２ｇ, ８.７１mmol)を加えた。反応混合物を５０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を真空オーブン(５０℃)中で１時間乾燥させ、Ｎ−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(９００mg, ３.２８mmol, 収率４９％)を得た。これをさらに精製せず、または特性決定せずに、次の工程に用いた。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中のＮ−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(０.７１ｇ, ２.５９mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.４４ｇ, ２.５９mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.６５ｇ, １.７３mmol, 収率６６.７％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.93 (1 H, s), 7.74 (1 H, d, J=7.63 Hz), 7.22 - 7.26 (1 H, m), 7.19 (1 H, t, J=7.63 Hz), 3.75 - 3.93 (2 H, m), 2.72 - 2.95 (6 H, m), 2.56 (3 H, s), 2.03 - 2.14 (1 H, m), 1.95 (1 H, br. s.), 1.78 - 1.87 (1 H, m), 1.73 (1 H, ddd, J=13.81, 9.23, 5.04 Hz), 1.56 (1 H, td, J=9.99, 7.78 Hz), 1.38 (2 H, br. s.). (LC/MS) R.T. = 3.70; [M+H]⁺ = 375.2。

工程Ｃ： (２−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオ−スピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(３−ヒドロキシ−３−((３−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.６２ｇ, １.６５mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.３３ml, ２.１４mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(２−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.４ｇ, １.１７mmol, 収率７０.９％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.90 (s, 1 H), 7.61 (d, J=7.63 Hz, 1 H), 7.13 - 7.17 (m, 1 H), 7.09 (t, J=7.48 Hz, 1 H), 3.90 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 3.77 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 3.32 (s, 3 H), 3.30 (d, J=1.53 Hz, 1 H), 3.13 - 3.20 (m, 2 H), 3.00 - 3.09 (m, 1 H), 2.85 - 2.94 (m, 4 H), 2.57 (s, 4 H), 2.28 (s, 1 H), 2.06 (s, 1 H), 1.75 - 1.83 (m, 4 H), 1.45 (s, 1 H). (LC/MS) R.T. = 2.73; [M+H]⁺ = 343.2。

工程Ｄ：Ｎ−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.３８ｇ, １.１１mmol)を３ＭＨＣｌ(２.７８ml, ８.３３mmol)を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。酢酸エチルを加え、水層を集め、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(４−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.１９５ｇ, ０.５９４mmol, 収率５３.５％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.84 (s, 1 H), 7.60 (d, J=7.32 Hz, 1 H), 7.13 - 7.17 (m, 1 H), 7.08 (t, J=7.63 Hz, 1 H), 3.92 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.66 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.04 (s, 2 H), 2.76 - 2.85 (m, 2 H), 2.68 (t, J=7.48 Hz, 2 H), 2.56 (s, 3 H), 2.09 (s, 1 H), 1.93 (s, 1 H), 1.61 (d, J=3.05 Hz, 1 H), 1.60 (s, 1 H), 1.50 (dd, J=7.17, 2.59 Hz, 1 H). (LC/MS) R.T. = 1.76; [M+H]⁺ = 329.2。

Chiralcel OJ-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、ＵＶを３００nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、０.０７ｇ, ０.２１mmol, ３８.９％を得た。
(６ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.83 (br. s., 1 H) 7.59 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.11 - 7.18 (m, 1 H) 7.08 (t, J=7.63 Hz, 1 H) 3.92 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 3.66 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 3.04 (s, 2 H) 2.73 - 2.89 (m, 2 H) 2.61 - 2.72 (m, 2 H) 2.56 (s, 3 H) 2.09 (br. s., 1 H) 1.93 (br. s., 1 H) 1.43 - 1.71 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.75; [M+H]⁺ = 329.1。

二番目のピークから、０.０７ｇ, ０.２１mmol, ３８.１％を得た。
(６ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.84 (br. s., 1 H) 7.59 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.15 (d, J=7.20 Hz, 1 H) 7.08 (t, J=7.48 Hz, 1 H) 3.92 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 3.66 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.00 - 3.09 (m, 2 H) 2.73 - 2.87 (m, 2 H) 2.62 - 2.72 (m, 2 H) 2.56 (s, 3 H) 2.05 - 2.12 (m, 1 H) 1.93 (br. s., 1 H) 1.56 - 1.67 (m, 2 H) 1.45 - 1.55 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.75; [M+H]⁺ = 329.1。

実施例７
Ｎ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(１.１２ｇ, ６.０７mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(１.４０５ｇ, ７.８９mmol)を加えた。反応混合物を５０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を、真空オーブン(４０℃)中で１時間乾燥させ、Ｎ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを得た(０.３３ｇ, １.１２mmol, 収率１８.５％)。これをさらに精製せず、または特性決定せずに、次の工程に用いた。

工程Ｂ： (３−((３−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中のＮ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(０.３ｇ, １.０１８mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.１７３ｇ, １.０１８mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(６０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(３−((３−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.２５ｇ, ０.６３mmol, 収率６１.９％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 12.19 (s, 1 H) 9.72 (br. s., 1 H) 7.93 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.26 - 7.32 (m, 1 H) 5.32 (s, 1 H) 3.88 (dd, J=13.73, 4.88 Hz, 1 H) 3.75 (dd, J=13.73, 4.88 Hz, 1 H) 2.73 - 2.95 (m, 6 H) 2.08 (br. s., 1 H) 1.96 (br. s., 1 H) 1.79 - 1.89 (m, 1 H) 1.68 - 1.78 (m, 1 H) 1.52 - 1.61 (m, 1 H) 1.39 (br. s., 3 H)。

工程Ｃ： (２−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(３−((３−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.２３ｇ, ０.５８mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.１１７ml, ０.７５mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(２−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.１ｇ, ０.２７mmol, 収率４７.６％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.95 (s, 1 H) 7.79 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.42 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.18 (t, J=7.93 Hz, 1 H) 3.92 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 3.77 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 3.26 - 3.38 (m, 1 H) 3.19 (dd, J=15.26, 1.53 Hz, 1 H) 3.01 - 3.11 (m, 1 H) 2.81 - 3.00 (m, 3 H) 2.31 (br. s., 1 H) 2.03 - 2.15 (m, 1 H) 1.70 - 1.89 (m, 3 H) 1.45 (br. s., 3 H)。

工程Ｄ：Ｎ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.０８ｇ, ０.２２１mmol)に、３ＭＨＣｌ(０.５５１ml, １.６５４mmol)を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。酢酸エチルを加え、水層を集め、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.０５ｇ, ０.１４mmol, 収率６５.０％)。
¹H NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.90 (br. s., 1 H) 7.77 (dd, J=7.78, 1.07 Hz, 1 H) 7.41 (dd, J=7.78, 1.07 Hz, 1 H) 7.17 (t, J=7.78 Hz, 1 H) 3.94 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.67 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.00 - 3.11 (m, 2 H) 2.76 - 2.88 (m, 2 H) 2.68 (t, J=7.63 Hz, 2 H) 2.11 (br. s., 1 H) 1.91 - 2.00 (m, 1 H) 1.47 - 1.67 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.11; [M+H]⁺ = 349.1。

Chiralcel OJ-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を２２０nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−Ｎ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.１１ｇ, ０.３０mmol, 収率３４.８％)。
(７ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.90 (br. s., 1 H) 7.77 (d, J=7.32 Hz, 1 H) 7.41 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.17 (t, J=7.93 Hz, 1 H) 3.94 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.67 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.00 - 3.11 (m, 2 H) 2.76 - 2.90 (m, 2 H) 2.68 (t, J=7.78 Hz, 2 H) 2.11 (br. s., 1 H) 1.91 - 2.01 (m, 1 H) 1.47 - 1.68 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.06; [M+H]⁺ = 349.1。

二番目のピークは(Ｒ)−Ｎ−(４−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.１１ｇ, ０.３０mmol, 収率３５.２％)。
(７ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.89 (br. s., 1 H) 7.77 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.40 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.16 (t, J=7.93 Hz, 1 H) 3.94 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.67 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.99 - 3.11 (m, 2 H) 2.74 - 2.88 (m, 2 H) 2.68 (t, J=7.78 Hz, 2 H) 2.11 (br. s., 1 H) 1.90 - 2.01 (m, 1 H) 1.44 - 1.68 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.07; [M+H]⁺ = 349.1。

実施例８
Ｎ−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−アミン(１.２８ｇ, ９.６１mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(２.２２７ｇ, １２.５mmol)を加えた。反応混合物を５０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を真空オーブン(４０℃)中で１時間乾燥させ、Ｎ−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを得た(１.８ｇ, ７.４mmol, 収率７７％)。これをさらに精製せず、または特性決定せずに、次の工程に用いた。

工程Ｂ： (３−((３−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、Ｎ−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(１.０７ｇ, ４.４mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.７４８ｇ, ４.４mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(６０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(３−((３−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(１.２８ｇ, ３.７１mmol, 収率８４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.41 (s, 1 H), 11.16 (s, 1 H), 7.43 (d, J=3.05 Hz, 3 H), 7.13 (ddd, J=9.46, 3.81, 3.51 Hz, 3 H), 5.36 (s, 1 H), 4.01-4.07 (m, 3 H), 3.79 (dd, J=13.28, 4.12 Hz, 1 H), 2.83-2.92 (m, 6 H), 2.71 (d, J=14.04 Hz, 2 H), 2.04-2.13 (m, 2 H), 1.89-1.94 (m, 3 H), 1.74 (td, J=9.46, 5.49 Hz, 2 H), 1.51-1.59 (m, 2 H), 1.38 (s, 2 H), 1.31 (s, 1 H)。
ＬＣ／ＭＳにより、本ＬＣ／ＭＳ条件でＢＨ_３が無い生成物を確認した：保持時間 2.75 (M+1-BH₃ = 332.2)。

工程Ｃ： (２−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ−[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(３−((３−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.０ｇ, ２.９mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.５８７ml, ３.７７mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(２−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.８１ｇ, ２.６mmol, 収率９０％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.29 (s, 1 H), 6.99 - 7.05 (m, 2 H), 3.90 (t, J=9.77 Hz, 1 H), 3.75 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 3.26 - 3.35 (m, 1 H), 3.13 (dd, J=14.95, 1.53 Hz, 1 H), 2.98 - 3.06 (m, 1 H), 2.84 - 2.92 (m, 3 H), 2.22 (s, 1 H), 1.98 - 2.05 (m, 1 H), 1.72 - 1.82 (m, 3 H), 1.45 (s, 1 H)。
ＬＣ／ＭＳにより、本ＬＣ／ＭＳ条件でＢＨ_３が無い生成物を確認した：保持時間 2.29 (M+1-BH₃ = 298.2)。

工程Ｄ：Ｎ−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ−[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.７７ｇ, ２.５mmol)に、３ＭＨＣｌ(６.２ml, １８.６mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。酢酸エチルを加え、水層を集めて、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.５ｇ, １.６８mmol, 収率６８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.45 (s, 1 H), 9.20 (s, 1 H), 7.32 (s, 1 H), 7.00 (dd, J=5.65, 2.90 Hz, 4 H), 3.91 (d, J=10.07 Hz, 2 H), 3.64 (d, J=10.07 Hz, 2 H), 2.98 - 3.05 (m, 4 H), 2.73 - 2.82 (m, 4 H), 2.67 (t, J=7.63 Hz, 4 H), 2.03 (d, J=2.75 Hz, 2 H), 1.85 - 1.92 (m, 2 H), 1.54 - 1.63 (m, 4 H), 1.44 - 1.51 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.30; [M+H]⁺ = 298.2。

Chiralpak AS-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、ＵＶを３３０nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、０.１１ｇ, ０.３６mmol, ３３.０％を得た。
(８ａ; Ｒ−異性体): 融点 255℃(分解). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.43 (br. s., 1 H) 9.16 (br. s., 1 H) 7.14 - 7.53 (m, 2 H) 6.82 - 7.09 (m, 2 H) 3.91 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 3.64 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.96 - 3.09 (m, 2 H) 2.71 - 2.87 (m, 2 H) 2.62 - 2.73 (m, 2 H) 2.01 - 2.08 (m, 1 H) 1.81 - 1.97 (m, 1 H) 1.54 - 1.66 (m, 2 H) 1.40 - 1.53 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.26; [M+H]⁺ = 298.2。

二番目のピークから、０.１１ｇ, ０.３６mmol, ３３.０％を得た。
(８ｂ; Ｓ−異性体): ¹H NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.43 (br. s., 1 H) 9.20 (br. s., 1 H) 7.10 - 7.60 (m, 2 H) 6.83 - 7.11 (m, 2 H) 3.91 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 3.64 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 2.94 - 3.16 (m, 2 H) 2.71 - 2.86 (m, 2 H) 2.59 - 2.72 (m, 2 H) 1.97 - 2.09 (m, 1 H) 1.81 - 1.95 (m, 1 H) 1.53 - 1.71 (m, 2 H) 1.41 - 1.53 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.28; [M+H]⁺ = 298.2。

実施例９
Ｎ−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(１.１４ｇ, ６.１７mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(１.４３ｇ, ８mmol)を加えた。反応物を５０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を真空オーブン(４０℃)中で１時間乾燥させ、Ｎ−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(１.１６ｇ, ３.９mmol, 収率６４％)。これをさらに精製せず、または特性決定せずに、次の工程に用いた。

工程Ｂ： (３−((３−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中のＮ−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(０.８６ｇ, ２.９mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.５ｇ, ２.９mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(６０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(３−((３−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.４ｇ, １.０１mmol, 収率３４.６％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.92 (br. s., 1 H) 9.89 (br. s., 1 H) 8.08 (br. s., 1 H) 7.62 (br. s., 1 H) 7.40 - 7.50 (m, 1 H) 5.40 (br. s., 1 H) 3.88 (d, J=10.20 Hz, 1 H) 3.76 (d, J=10.20 Hz, 1 H) 2.67 - 3.02 (m, 6 H) 2.08 (br. s., 1 H) 1.80 - 1.95 (m, 2 H) 1.73 (br. s., 1 H) 1.01 - 1.63 (m, 4 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.87; [M+H]⁺ = 395.1。

工程Ｃ： (２−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(３−((３−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.３７ｇ, ０.９３mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.１９ml, １.２mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(２−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.１２ｇ, ０.３３mmol, 収率３５.５％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.10 (br. s., 1 H) 7.95 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.60 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 7.36 (dd, J=8.55, 2.14 Hz, 1 H) 3.88 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 3.76 (d, J=10.38 Hz, 1 H) 3.26 - 3.37 (m, 1 H) 3.17 (dd, J=14.95, 1.83 Hz, 1 H) 3.00 - 3.11 (m, 1 H) 2.80 - 2.97 (m, 3 H) 2.28 (br. s., 1 H) 2.00 - 2.11 (m, 1 H) 1.69 - 1.88 (m, 3 H) 1.46 (br. s., 3 H). LC/MS: 保持時間 2.94 (M+1-BH₃ = 349.1)。

工程Ｄ：Ｎ−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の、(２−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.１ｇ, ０.２８mmol)に、３ＭＨＣｌ(０.６９ml, ２.０７mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。酢酸エチルを加え、水層を集めて、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機層を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(６−クロロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.０６ｇ, ０.１７mmol, 収率６２.４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.03 (br. s., 1 H) 7.93 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.58 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 7.35 (dd, J=8.55, 2.14 Hz, 1 H) 3.90 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.65 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.99 - 3.11 (m, 2 H) 2.73 - 2.89 (m, 2 H) 2.67 (t, J=7.63 Hz, 2 H) 2.08 (br. s., 1 H) 1.82 - 1.99 (m, 1 H) 1.43 - 1.67 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.07; [M+H]⁺ = 349.1。

Chiralpak AS-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、ＵＶを２２０nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、０.０３４ｇ, ０.１０mmol, ３６.２％を得た。
(９ａ; Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.02 (br. s., 1 H) 7.93 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.58 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 7.35 (dd, J=8.55, 2.14 Hz, 1 H) 3.90 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.65 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.97 - 3.11 (m, 2 H) 2.73 - 2.89 (m, 2 H) 2.67 (t, J=7.48 Hz, 2 H) 2.08 (br. s., 1 H) 1.93 (br. s., 1 H) 1.43 - 1.69 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.05; [M+H]⁺ = 349.1. 旋光度 = + 4.00°。

二番目のピークから、０.０３７ｇ, ０.１０mmol, ３９.４％を得た。
(９ｂ; Ｒ−異性体): ¹H NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.02 (br. s., 1 H) 7.93 (d, J=2.14 Hz, 1 H) 7.58 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 7.35 (dd, J=8.55, 2.44 Hz, 1 H) 3.90 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.65 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 2.93 - 3.13 (m, 2 H) 2.72 - 2.91 (m, 2 H) 2.62 - 2.73 (m, 2 H) 2.08 (br. s., 1 H) 1.93 (d, J=1.22 Hz, 1 H) 1.44 - 1.68 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.04; [M+H]⁺ = 349.1. 旋光度 = -3.74°。

実施例１０
Ｎ−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の、１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−アミン(１.２８ｇ, ８.７mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(２.０１５ｇ, １１.３１mmol)を加えた。反応物を５０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を真空オーブン(４０℃)中で１時間乾燥させ、Ｎ−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを得た(１.６ｇ, ６.２２mmol, 収率７１.５％)。これをさらに精製せず、または特性決定せずに、次の工程に用いた。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、Ｎ−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(１.０４ｇ, ４.０４mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.６８７ｇ, ４.０４mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(６０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(１.２８ｇ, ３.５６mmol, 収率８８％)。ＬＣ／ＭＳにより、本ＬＣ／ＭＳ条件でＢＨ_３が無い生成物を確認した：保持時間 3.01 (M+1-BH₃ = 346.2)。

工程Ｃ： (２−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(３−ヒドロキシ−３−((３−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.１９ｇ, ３.３１mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.５５ml, ９.９mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(２−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.９４ｇ, ２.９mmol, 収率８７％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.36 (br. s., 1 H) 7.34 - 7.44 (m, 1 H) 7.26 - 7.34 (m, 1 H) 7.00 - 7.12 (m, 2 H) 3.90 (d, J=10.32 Hz, 1 H) 3.77 (d, J=10.32 Hz, 1 H) 3.57 (s, 3 H) 3.28 (dd, J=14.86, 2.27 Hz, 1 H) 3.13 (dd, J=14.86, 1.51 Hz, 1 H) 2.95 - 3.08 (m, 1 H) 2.75 - 2.95 (m, 3 H) 2.22 (br. s., 1 H) 1.96 - 2.11 (m, 1 H) 1.67 - 1.89 (m, 3 H) 1.43 (br. s., 3 H). LC/MS : 保持時間 2.37 (M+1-BH₃ = 312.2)。

工程Ｄ：Ｎ−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の、(２−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.９２ｇ, ２.８mmol)に、３ＭＨＣｌ(７.１ml, ２１.２mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。酢酸エチルを加え、水層を集めて、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(１−メチル−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.８４ｇ, ２.７mmol, 収率９５％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.24 - 9.39 (m, 1 H) 7.33 - 7.42 (m, 1 H) 7.25 - 7.33 (m, 1 H) 6.99 - 7.10 (m, 2 H) 3.92 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.66 (d, J=10.07 Hz, 1 H) 3.57 (s, 3 H) 2.97 - 3.08 (m, 2 H) 2.78 (t, J=7.81 Hz, 2 H) 2.67 (t, J=7.81 Hz, 2 H) 2.01 - 2.09 (m, 1 H) 1.80 - 1.96 (m, 1 H) 1.40 - 1.66 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.49; [M+H]⁺ = 312.2。

Chiralcel OJ-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中２２％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、ＵＶを３００nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、０.０６５ｇ, ０.２０５mmol, ３９.８％を得た。
(１０ａ, Ｒ−異性体): ¹H NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.31 (br. s., 1 H) 7.35 - 7.45 (m, 1 H) 7.26 - 7.34 (m, 1 H) 7.00 - 7.15 (m, 2 H) 3.93 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 3.67 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 3.59 (s, 3 H) 2.93 - 3.13 (m, 2 H) 2.74 - 2.89 (m, 2 H) 2.61 - 2.74 (m, 2 H) 2.05 (br. s., 1 H) 1.91 (br. s., 1 H) 1.38 - 1.68 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.37; [M+H]⁺ = 312.2. 旋光度 = - 16.02°。

二番目のピークから、０.０６ｇ, ０.１９mmol, ３６.８％を得た。
(１０ｂ; Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.31 (br. s., 1 H) 7.33 - 7.43 (m, 1 H) 7.25 - 7.33 (m, 1 H) 6.93 - 7.11 (m, 2 H) 3.93 (dd, J=9.92, 3.20 Hz, 1 H) 3.67 (dd, J=9.92, 3.20 Hz, 1 H) 3.58 (s, 3 H) 2.94 - 3.13 (m, 2 H) 2.74 - 2.85 (m, 2 H) 2.59 - 2.72 (m, 2 H) 2.04 (br. s., 1 H) 1.90 (br. s., 1 H) 1.37 - 1.70 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.37; [M+H]⁺ = 312.2. 旋光度 = + 35.99°。

実施例１１
Ｎ−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

バイアルに、アセトニトリル(１５ml)中の６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(１.５ｇ, ７.７２mmol)およびジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンチオン(１.７８９ｇ, １０.０４mmol)を入れた。反応物を８０℃で一夜加熱した。反応混合物を濾過し、沈殿物を集めて、２.４ｇ(７.８８mmol, １０２％)の赤錆色の固体を得た。

工程Ｂ： (３−((３−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

バイアルに、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(８ml)中の、Ｎ−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(２.４ｇ, ７.８８mmol)および(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.３４１ｇ, ７.８８mmol)を入れた。反応物を８０℃まで加熱した。２時間後、反応物を水およびクロロホルムに注ぎ、有機物を抽出し、濃縮し、赤色の油状物を得た。この物質を、さらに精製せず、または特性決定せずに、次の反応に用いた。

工程Ｃ： (２−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ−[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

フラスコに、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)中の、(３−((３−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)−メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(３.２ｇ, ７.９mmol)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(４.３ml, ２７.６mmol)に入れた。反応物を７０℃で２時間加熱し、水およびクロロホルムに注いだ。有機物を集め、濃縮して残渣を得た。残渣をエーテル中で磨砕し、吸引濾過して沈殿物を集め、１.１１ｇ(２.９８mmol, ３７.８％)の灰色の粉末を得た。

工程Ｄ：Ｎ−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

バイアルに、アセトン(１０ml)中の、(２−(６−エトキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(５００mg, １.３４mmol)およびＨＣｌ(８.０６ml, ２４.１７mmol)を入れた。反応をＨＰＬＣによってモニターした。２時間後、ＬＣ／ＭＳによって反応が完了したことが示された。反応物を水およびクロロホルムに注ぎ、有機層を除去した。水層を中和し、クロロホルム(２×)で抽出した。二番目のクロロホルムフラクションを濃縮して白色の残渣を得た。固体をエーテル中で磨砕し、沈殿物を集め、３１４.４mg(０.８７７mmol, ６５.３％)の望ましい物質を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.89 (1 H, br. s.), 7.50 (1 H, d, J=8.81 Hz), 7.38 (1 H, d, J=2.52 Hz), 6.91 (1 H, dd, J=8.81, 2.52 Hz), 4.03 (2 H, q, J=7.05 Hz), 3.87 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.62 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.02 (2 H, s), 2.78 (2 H, t, J=7.81 Hz), 2.66 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.05 (1 H, br. s.), 1.91 (1 H, br. s.), 1.42 - 1.67 (3 H, m), 1.33 (3 H, t, J=7.05 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 1.60; [M+H]⁺ = 359.0。

Chiralpak AS-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、ＵＶを３００nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、６２.４mg, ０.１７mmol, ３１.２％を得た。
(１１ａ; Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.87 (1 H, br. s.), 7.49 (1 H, d, J=8.55 Hz), 7.38 (1 H, d, J=2.44 Hz), 6.91 (1 H, dd, J=8.85, 2.44 Hz), 4.03 (2 H, q, J=7.02 Hz), 3.87 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.61 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.02 (2 H, s), 2.72 - 2.85 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.63 Hz), 2.05 (1 H, br. s.), 1.91 (1 H, br. s.), 1.43 - 1.64 (3 H, m), 1.33 (3 H, t, J=7.02 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 1.81; [M+H]⁺ = 359.1。

二番目のピークから、５８.９mg, ０.１６４mmol, ２９.５％を得た。
(１１ｂ; Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.86 (1 H, br. s.), 7.48 (1 H, d, J=8.85 Hz), 7.37 (1 H, d, J=2.44 Hz), 6.91 (1 H, d, J=2.75 Hz), 4.02 (2 H, q, J=7.02 Hz), 3.86 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.61 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.01 (2 H, s), 2.72 - 2.85 (2 H, m), 2.62 - 2.69 (2 H, m), 2.04 (1 H, d, J=2.44 Hz), 1.90 (1 H, d, J=4.27 Hz), 1.42 - 1.63 (3 H, m), 1.29 - 1.35 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.52; [M+H]⁺ = 359.1。

実施例１２
Ｎ−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(１.ｇ, ６.２mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(１.４４ｇ, ８.１mmol)を加えた。反応物を５０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を真空オーブン(４０℃)中で１時間乾燥させ、Ｎ−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを得た(１.０６ｇ, ３.８６mmol, 収率６２％)。これをさらに精製せず、または特性決定せずに、次の工程に用いた。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、Ｎ−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(０.９６ｇ, ３.５mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.５９５ｇ, ３.５mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)。生成物のフラクションを真空で濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.８８ｇ, ２.３３８mmol, 収率６６.８％)。
MS (LC/MS) R.T. = 3.71; [M+H]⁺ = 375.2。

工程Ｃ： (２−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(３−ヒドロキシ−３−((３−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.８６ｇ, ２.２８５mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２８８ｇ, ２.２８５mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、酢酸エチルを加えた。沈殿物を濾過し、さらに酢酸エチルで洗浄した。粉末を真空オーブン(７０℃)中で乾燥させ、(２−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.６５ｇ, １.８９９mmol, 収率８３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.03 (1 H, br. s.), 7.59 (1 H, s), 7.51 (1 H, d, J=8.24 Hz), 7.15 (1 H, d, J=8.24 Hz), 3.86 (1 H, d, J=10.38 Hz), 3.74 (1 H, d, J=10.38 Hz), 3.29 (1 H, dd, J=15.26, 1.83 Hz), 3.14 (1 H, d, J=15.26 Hz), 2.99 - 3.09 (1 H, m), 2.80 - 2.95 (3 H, m), 2.36 (3 H, s), 2.25 (1 H, br. s.), 2.03 (1 H, t, J=10.22 Hz), 1.70 - 1.85 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 2.78; [M+H]⁺ = 343.2。

工程Ｄ：Ｎ−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.２４ｇ, ０.７０mmol)に、３ＭＨＣｌ(１.７５３ml, ５.２６mmol)を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。酢酸エチルを加え、水層を集めて、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、Ｎ−(６−メチルベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.１９ｇ, ０.５８mmol, 収率８３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.96 (1 H, br. s.), 7.57 (1 H, s), 7.49 (1 H, d, J=8.24 Hz), 7.13 (1 H, d, J=8.24 Hz), 3.88 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.63 (1 H, d, J=9.77 Hz), 2.98 - 3.04 (2 H, m), 2.72 - 2.85 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.63 Hz), 2.36 (3 H, s), 2.05 (1 H, d, J=2.14 Hz), 1.91 (1 H, br. s.), 1.53 - 1.64 (2 H, m), 1.42 - 1.53 (1 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.79; [M+H]⁺ = 329.2。

Chiralcel OJ-H (4.6×25cm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)で、ＵＶを３００nmでモニターしながら、エナンチオマーを分離した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークから、０.１１ｇ, ０.３４mmol, ５５％を得た。
(１２ａ; Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.95 (s, 1 H), 7.57 (s, 2 H), 7.48 (d, J=8.24 Hz, 2 H), 7.13 (d, J=8.24 Hz, 2 H), 3.89 (d, J=10.38 Hz, 2 H), 3.63 (d, J=10.38 Hz, 2 H), 2.99 - 3.06 (m, 4 H), 2.75 - 2.84 (m, 4 H), 2.67 (t, J=7.63 Hz, 4 H), 2.37 (s, 7 H), 2.06 (s, 2 H), 1.92 (s, 2 H), 1.55 - 1.64 (m, 4 H), 1.49 (dd, J=9.77, 2.44 Hz, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.80; [M+H]⁺ = 329.2. 旋光度 = -4.52。

二番目のピークから、０.１１ｇ, ０.３４mmol, ５５％を得た。
(１２ｂ; Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.96 (s, 1 H), 7.58 (s, 1 H), 7.49 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 7.14 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 3.89 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.63 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.03 (d, J=2.44 Hz, 2 H), 2.75 - 2.84 (m, 2 H), 2.67 (t, J=7.78 Hz, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.06 (s, 1 H), 1.92 (s, 1 H), 1.55 - 1.64 (m, 2 H), 1.49 (dd, J=9.77, 2.75 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.80; [M+H]⁺ = 329.2. 旋光度 = + 10.08。

実施例１３
２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−オール

工程Ａ：Ｎ−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の、６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(国際公開第2007/086800号102頁に記載された通りに製造)(３.１ｇ, １１.０５mmol)に、チオカルボニルジイミダゾール(２.５６ｇ, １４.３７mmol)を加えた。反応物を７０℃まで一夜加熱した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリルで洗浄し、黄色の固体を得た。生成物であるＮ−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(３.８５ｇ, ９.８６mmol, 収率８９％)をさらに精製することなく次の工程に用いた。
MS (LC/MS) R.T. = 2.56; [M+H]⁺ = 388.9。

工程Ｂ： (３−((３−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(４０ml)中のＮ−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(３.８５ｇ, ９.８６mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.６８ｇ, ９.８６mmol)を加えた。反応物を８０℃で２時間加熱した。反応物を冷却し、クロロホルムおよび水の混合物に注いだ。有機層を集め、真空で濃縮し、(３−((３−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを黄色の油状物として得た(６.２ｇ)。

工程Ｃ： (２−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)中の、(３−((３−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(４.９ｇ, ９.９mmol)に、１,３−ジイソプロピルカルボジイミド(５.４ml, ３４.５mmol)を加えた。反応物を８０℃に加熱し、ＬＣ／ＭＳによってモニターした。反応物を冷却し、クロロホルムおよび水の混合物に注いだ。有機層を集めて、真空で濃縮した。残った残渣をエーテル中で磨砕した。沈殿物を集めて、(２−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを得た(３.２８ｇ, ７.１５mmol, 収率７２.６％)。
MS (LC/MS) R.T. = 3.60; [M+H-BH₃]⁺ = 445.2。

工程Ｄ：２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−オール

アセトン(１０ml)中の、(２−(６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(３.２ｇ, ６.９８mmol)に、ＨＣｌ(８.１４ml, ２４.４３mmol)を加えた。反応物を室温で３時間撹拌した。混合物を水に注ぎ、飽和重炭酸ナトリウムで中和した。水層をクロロホルムで抽出した。有機層を集め、真空で濃縮した。残った残渣をエーテル中で磨砕し、ラセミの２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−オールを白色の粉末として得た(９５８mg, ２.９０mmol, 収率４１.５％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.36 (1 H, br. s.), 8.85 (1 H, br. s.), 7.41 (1 H, d, J=8.85 Hz), 7.12 (1 H, d, J=2.44 Hz), 6.78 (1 H, dd, J=8.85, 2.44 Hz), 3.86 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.61 (1 H, d, J=10.07 Hz), 2.96 - 3.06 (2 H, m), 2.71 - 2.85 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.78 Hz), 2.04 (1 H, br. s.), 1.90 (1 H, br. s.), 1.43 - 1.64 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.03; [M+H]⁺ = 331.29。

Chiralpak AD-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を３００nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮して、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−オールであった(３９５.２mg, １.１９mmol, 収率４１.４％)。
(１３ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.36 (1 H, br. s.), 8.84 (1 H, br. s.), 7.41 (1 H, d, J=8.55 Hz), 7.12 (1 H, d, J=2.44 Hz), 6.78 (1 H, dd, J=8.55, 2.44 Hz), 3.86 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.61 (1 H, d, J=10.07 Hz), 2.96 - 3.05 (2 H, m), 2.72 - 2.84 (2 H, m), 2.65 (2 H, t, J=7.63 Hz), 2.04 (1 H, br. s.), 1.90 (1 H, br. s.), 1.52 - 1.64 (2 H, m), 1.43 - 1.52 (1 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.30; [M+H]⁺ = 331.4。

二番目のピークは、(Ｒ)−２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−オールであった(３７５mg, １.１４mmol, 収率３９.３％)。
(１３ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.40 (1 H, d, J=8.55 Hz), 7.11 (1 H, d, J=2.44 Hz), 6.77 (1 H, dd, J=8.55, 2.44 Hz), 3.86 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.60 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.01 (2 H, s), 2.73 - 2.84 (2 H, m), 2.65 (2 H, t, J=7.78 Hz), 2.04 (1 H, br. s.), 1.90 (1 H, br. s.), 1.54 - 1.62 (2 H, m), 1.43 - 1.52 (1 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.43; [M+H]⁺ = 331.4。

実施例１４
Ｎ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(２０ml)中の４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(０.５ｇ, ３.２４mmol)に、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンチオン(０.５８ｇ, ３.２４mmol)を加えた。反応物を５０℃で４時間撹拌した。反応物を冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、Ｎ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを白色の粉末として得た(０.６０ｇ, ２.２７mmol, 収率７０.０％)。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中のＮ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(０.５４ｇ, ２mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.３５ｇ, ２mmol)を加えた。反応物を５０℃で３時間撹拌した。反応物を冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、最初のスポット／フラクション(ＴＬＣ)を生成物として得た。フラクションを合わせて、濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.５１ｇ, １.３９mmol, 収率６８.２％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 11.46 (s, 1 H), 5.26 (s, 1 H), 3.89 (dd, J=13.58, 5.34 Hz, 1 H), 3.68 (dd, J=13.73, 4.88 Hz, 1 H), 2.55 - 2.94 (m, 8 H), 2.06 (dd, J=9.31, 3.20 Hz, 1 H), 1.66 - 1.90 (m, 6 H), 1.21 - 1.59 (m, 4 H); [M+H]⁺ = 365.1。

工程Ｃ： (２−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(３−ヒドロキシ−３−((３−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.５ｇ, １.３７mmol)に、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド(０.７４ml, ４.７８mmol)を加えた。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応物を濃縮し、粗製の残渣を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、二番目のスポット／フラクション(ＴＬＣ)を生成物として得た。フラクションを合わせて濃縮し、(２−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.３８ｇ, １.１４mmol, 収率８４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.26 - 8.86 (m, 1 H), 3.78 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.66 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.19 - 3.30 (m, J=14.95, 2.14 Hz, 1 H), 2.96 - 3.12 (m, 2 H), 2.78 - 2.94 (m, 3 H), 2.54 - 2.65 (m, 4 H), 2.19 (s, 1 H), 2.00 (s, 1 H), 1.66 - 1.85 (m, 7 H), 1.43 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.50; [M+H-BH₃]⁺ = 319.1。

工程Ｄ：Ｎ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.３６ｇ, １.０８mmol)に、３ＭＨＣｌ(０.３６ml, １.０８mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。ＴＬＣによって反応の完了が示された(より低いスポット)。酢酸エチルを加え、水層を分離した。水層を１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、ラセミのＮ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.２８ｇ, ０.８４mmol, 収率７８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.30 - 8.75 (br.s, 1 H), 3.79 (d, J=9.44 Hz , 1 H), 3.55 (d, J=9.76 Hz , 1 H), 2.90 - 3.03 (m, 2 H), 2.54 - 2.84 (m, 8 H), 2.00 (s, 1 H), 1.81 - 1.93 (m, 1 H), 1.75 (d, J=2.44 Hz, 4 H), 1.36 - 1.67 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.39; [M+H]⁺ = 319.1。

Chiralpak AD-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中２３％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を３００nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−Ｎ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.１ｇ, ０.２９mmol, 収率３６.８％)。
(１４ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.29 - 8.89 (br.s, 1 H), 3.80 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.54 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 2.94 - 3.04 (m, 2 H), 2.55 - 2.85 (m, 8 H), 2.00 (s, 1 H), 1.85 - 1.94 (m, 1 H), 1.70 - 1.81 (m, J=2.43 Hz , 4 H), 1.39 - 1.65 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.54; [M+H]⁺ = 319.1。

二番目のピークは、(Ｒ)−Ｎ−(４,５,６,７−テトラヒドロベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.１１ｇ, ０.３０mmol, 収率３８.２％)。
(１４ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.24 - 8.96 (br.s, 1 H), 3.79 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.52 (d, J=9.76 Hz, 1 H), 2.95 - 3.08 (m, 2 H), 2.55 - 2.80 (m, 8 H), 2.00 (s, 1 H), 1.85 - 1.90 (m, 1 H), 1.70 - 1.79 (m, J=2.42 Hz , 4 H), 1.39 - 1.63 (m, 3 H); [M+H]⁺ = 319.1。

実施例１５
Ｎ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)中の４−イソプロピルチアゾール−２−アミン(１.０４ｇ, ７.３１mmol)に、１,１−チオカルボニルジイミダゾール(１.７ｇ, ９.５mmol)を加えた。反応物を５０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、アセトニトリル(２×５０ml)で洗浄した。黄色の粉末を真空オーブン(４０℃)中で２時間乾燥させた。生成物であるＮ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(１.０２ｇ, ４.０４mmol, 収率５５.３％)を、さらに精製することなく次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、Ｎ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(０.５７ｇ, ２.２６mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.３８ｇ, ２.２６mmol)を加えた。反応物を７０℃で２４時間撹拌した。反応物を冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、(３−ヒドロキシ−３−((３−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.５６ｇ, １.５８mmol, 収率７０.０％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.62 (s, 1 H), 6.70 (s, 1 H), 5.31 (s, 1 H), 3.58 - 3.96 (m, 2 H), 2.63 - 3.11 (m, 7 H), 2.00 - 2.22 (m, 1 H), 1.65 - 1.97 (m, 3 H), 1.16 - 1.61 (m, 10 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.43; [M+H]⁺ = 353.2。

工程Ｃ： (２−(５−イソプロピルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(３−ヒドロキシ−３−((３−(５−イソプロピルチアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.５４ｇ, １.５２mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.８３ml, ５.３３mmol)を加えた。反応物を５０℃で２４時間撹拌した。反応物を濃縮し、粗製の残渣を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、二番目のスポット／フラクション(ＴＬＣ)を生成物として得た。フラクションを合わせて、濃縮し、(２−(５−イソプロピルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.３９ｇ, １.２２mmol, 収率８０％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 6.55 (s, 1 H), 3.75 (m, 2 H), 3.20 - 3.31 (m, 1 H), 2.96 - 3.15 (m, 2 H), 2.77 - 2.97 (m, 4 H), 2.22 (s, 1 H), 2.01 (s, 1 H), 1.68 - 1.90 (m, 3 H), 1.43 (s, 3 H), 1.21 (d, J=7.02 Hz, 6 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.36; [M+H-BH₃]⁺ = 307.2。

工程Ｄ：Ｎ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(４−イソプロピルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.４２ｇ, １.３１mmol)に、３ＭＨＣｌ(０.４４ml, １.３１mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。ＴＬＣにより、反応の完了が示された(より低いスポット)。酢酸エチルを加え、水層を分離した。水層を１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、ラセミのＮ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.３４ｇ, １.０５mmol, 収率８０％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.20 - 8.91 (m, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 3.83 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.57 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 2.99 (s, 2 H), 2.58 - 2.92 (m, 5 H), 2.02 (s, 1 H), 1.82 - 1.96 (m, 1 H), 1.38 - 1.66 (m, 3 H), 1.20 (d, J=7.02 Hz, 6 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.27; [M+H]⁺ = 307.1。

Chiralcel OJ-H (30×250mm, 5μｍ)のカラムを用いて、ＣＯ_２中２３％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を３００nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−Ｎ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.０１ｇ, ０.０３mmol, 収率２.９５％)。
(１５ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.35 - 8.95 (m, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 3.82 (d, J=9.41 Hz , 1 H), 3.57 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 2.99 (s, 2 H), 2.60 - 2.88 (m, 5 H), 2.02 (s, 2 H), 1.82 - 1.96 (m, 1 H), 1.38 - 1.65 (m, 3 H), 1.20 (d, J=6.71 Hz, 6 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.38; [M+H]⁺ = 307.1。

二番目のピークは、(Ｒ)−Ｎ−(４−イソプロピルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.０２ｇ, ０.０５mmol, 収率４.８３％)。
(１５ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.35 - 8.91 (m, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 3.82 (d, J=9.44 Hz , 1 H), 3.57 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 2.99 (s, 2 H), 2.60 - 2.90 (m, 5 H), 2.02 (s, 2 H), 1.82 - 1.96 (m, 1 H), 1.38 - 1.62 (m, 3 H), 1.20 (d, J=6.78 Hz, 6 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.49; [M+H]⁺ = 307.3。

実施例１６
Ｎ−(チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)およびテトラヒドロフラン(５ml)中の、チアゾール−２−アミン(２.１２ｇ, ２１.１７mmol)に、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンチオン(４.９０ｇ, ２７.５mmol)を加えた。反応物を６０℃で５時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、冷アセトニトリル(２×１５ml)で洗浄し、橙色〜褐色の粉末を得た。生成物であるＮ−(チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド (３.７０ｇ, １７.６０mmol, 収率８３％)を、さらに特性決定することなく次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−チアゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(３０ml)中の、Ｎ−(チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(１.７ｇ, ８mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.３７ｇ, ８mmol)を加えた。反応物を５０℃で４時間撹拌した。反応物を冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、最初のスポット／フラクション(ＴＬＣ)を生成物として得た。フラクションを合わせて、濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−チアゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(１.５ｇ, ４.８０mmol, 収率５９.８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.64 (s, 1 H), 7.42 (d, J=3.36 Hz, 1 H), 7.14 (m, 1 H), 5.32 (s, 1 H), 3.78 (dd, 2 H), 2.59 - 3.02 (m, 6 H), 1.99 - 2.18 (m, 1 H), 1.79 - 1.92 (m, 2 H), 1.64 - 1.80 (m, 1 H), 1.19 - 1.65 (m, 4 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.73; [M+H]⁺ = 311.1。

工程Ｃ： (２−(チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(３−ヒドロキシ−３−((３−チアゾール−２−イルチオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１.２ｇ, ３.８４mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(２.０９ml, １３.４５mmol)を加えた。反応物を５０℃で２４時間撹拌した。反応物を濃縮し、粗製の残渣を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、最初のスポット／フラクション(ＴＬＣ)を生成物として得た。フラクションを合わせて、濃縮し、(２−(チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.８４ｇ, ３.０２mmol, 収率７９％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.37 - 9.14 (m, 1 H), 7.32 (d, J=3.66 Hz, 1 H), 7.04 (d, J=3.66 Hz, 2 H), 3.79 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.67 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.20 - 3.29 (m, J=14.95, 2.14 Hz, 1 H), 2.97 - 3.15 (m, 2 H), 2.78 - 2.94 (m, 3 H), 2.22 (s, 1 H), 1.95 - 2.08 (m, 1 H), 1.66 - 1.85 (m, 3 H), 1.43 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.57; [M+H-BH₃]⁺ = 265.1。

工程Ｄ：Ｎ−(チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.５７ｇ, ２.０５mmol)に、３ＭＨＣｌ(０.６８ml, ２.０５mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。ＴＬＣにより、反応物の完了が示された(より低いスポット)。酢酸エチルを加え、水層を分離した。水層を１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、ラセミのＮ−(チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.４ｇ, １.４４mmol, 収率７０.２％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.64 (s, 1 H), 7.24 (d, J=3.74 Hz, 2 H), 7.01 (d, J=3.75 Hz, 2 H), 3.78 (d, J=9.80 Hz, 2 H), 3.53 (d, J=9.80 Hz, 2 H), 2.97 - 3.05 (m, 4 H), 2.74 - 2.86 (m, 4 H), 2.65 (t, J=7.84 Hz, 4 H), 2.01 (s, 2 H), 1.88 (s, 2 H), 1.53 - 1.64 (m, 4 H), 1.45 - 1.56 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.28; [M+H]⁺ = 265.1。

Chiralcel OJ-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中２３％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を３００nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−Ｎ−(チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.１２ｇ, ０.４３mmol, 収率１８.８０％)。
(１６ａ, Ｓ−異性体): ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.64 (s, 1 H), 7.26 (d, J=3.75 Hz, 2 H), 7.00 (d, J=3.77 Hz, 2 H), 3.78 (d, J=9.81 Hz, 2 H), 3.54 (d, J=9.82 Hz, 2 H), 2.95 - 3.10 (m, 4 H), 2.75 - 2.82 (m, 4 H), 2.65 (t, J=7.80 Hz, 4 H), 2.01 (s, 2 H), 1.88 (s, 2 H), 1.53 - 1.60 (m, 4 H), 1.42 - 1.51 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.32; [M+H]⁺ = 265.1。

二番目のピークは、(Ｒ)−Ｎ−(チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.１５ｇ, ０.５２mmol, 収率２２.９６％)。
(１６ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.64 (s, 1 H), 7.25 (d, J=3.74 Hz, 2 H), 7.00 (d, J=3.76 Hz, 2 H), 3.78 (d, J=9.80 Hz, 2 H), 3.53 (d, J=9.80 Hz, 2 H), 2.95 - 3.08 (m, 4 H), 2.75 - 2.84 (m, 4 H), 2.65 (t, J=7.80 Hz, 4 H), 2.01 (s, 2 H), 1.88 (s, 2 H), 1.54 - 1.62 (m, 4 H), 1.43 - 1.53 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.28; [M+H]⁺ = 265.3。

実施例１７
Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(２５ml)中の４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−アミン(０.９８ｇ, ４.４５mmol)に、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンチオン(１.０３ｇ, ５.７８mmol)を加えた。反応物を５０℃で３時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過した。粉末をアセトニトリル(２×１０ml)で洗浄し、乾燥させ、ラセミのＮ−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを黄色の粉末として得た(１.２８ｇ, ３.８７mmol, 収率８７％)。生成物を次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (２−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２５ml)中の、Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキサミド(０.４４ｇ, １.３９mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.２４ｇ, １.３９mmol)を加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.６５ml, ４.１６mmol)を加え、反応物を７５℃で２時間加熱した。反応物を冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質をカラムクロマトグラフィーによって精製し(６０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、(２−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを黄色の粉末として得た(０.４１ｇ, １.０２９mmol, 収率７４.２％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 7.59 (d, J=7.63 Hz, 2 H), 6.98 (d, J=8.55 Hz, 2 H), 3.80 (s, 4 H), 3.67 (s, 1 H), 3.24 - 3.31 (m, 1 H), 3.13 (s, 1 H), 3.03 (s, 1 H), 2.83 - 2.92 (m, 3 H), 2.39 (s, 3 H), 2.23 (s, 1 H), 2.07 (s, 1 H), 1.73 - 1.82 (m, 2 H), 1.44 (s, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.88; [M+H]⁺ = 399.34。

工程Ｃ：Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(３−ヒドロキシ−３−((３−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.０８ｇ, ０.１９mmol)に、２ＭＨＣｌ(０.０９ml, ０.１９mmol)を加えた。反応物を室温で１時間撹拌した。ＴＬＣにより、反応の完了が示された(より低いスポット)。酢酸エチルを加え、水層を集めて、１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、ラセミのＮ−(４−(４−メトキシフェニル)−５−メチルチアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.０５ｇ, ０.１２mmol, 収率６６.８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 7.58 (d, J=8.24 Hz, 2 H), 6.98 (d, J=8.55 Hz, 2 H), 3.83 (d, J=9.16 Hz, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.56 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.00 (s, 2 H), 2.74 - 2.83 (m, 2 H), 2.66 (t, J=7.63 Hz, 2 H), 2.38 (s, 3 H), 2.03 (s, 1 H), 1.91 (s, 1 H), 1.54 - 1.62 (m, 2 H), 1.48 (d, J=7.02 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.04; [M+H]⁺ = 385.28。

実施例１８
(Ｅ)−Ｎ−(１'−アザスピロ[オキサゾリジン−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イリデン)ピリジン−３−アミン

工程Ａ： (３−ヒドロキシ−３−((３−ピリジン−３−イルチオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

テトラヒドロフラン(３ml)中の(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(２４７mg, １.４５mmol)の懸濁液に、撹拌しながら、テトラヒドロフラン(１.５ml)中の３−イソチオシアナトピリジン(２９８mg, ２.１９mmol)の溶液を加え、反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物を真空で蒸発させ、残渣(白色の蝋状固体)をカラムクロマトグラフィーによって精製し(３％メタノール／酢酸エチル)、(３−ヒドロキシ−３−((３−ピリジン−３−イルチオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の泡状物質として得た(２９４.６mg, ０.９６mmol, 収率６６.２％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.56 - 8.70 (m, 1 H), 8.24 - 8.36 (m, 1 H), 8.08 - 8.16 (m, 1 H), 7.32 - 7.48 (m, 1 H), 4.02 - 4.18 (m, 1 H), 3.67 - 3.77 (m, 1 H), 3.53 - 3.62 (m, 1 H), 2.88 - 3.11 (m, 3 H), 2.70 - 2.88 (m, 1 H), 2.15 - 2.29 (m, 1 H), 1.92 - 2.12 (m, 2 H), 1.73 - 1.89 (m, 1 H), 1.54 - 1.69 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.00; [MH⁺-BH₃] = 293.10。

工程Ｂ： (Ｅ)−(２−(ピリジン−３−イルイミノ)−１'−アンモニオスピロ[オキサゾリジン−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(５ml)中の(３−ヒドロキシ−３−((３−ピリジン−３−イルチオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(２９４.６mg, ０.９６mmol)の溶液に、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１ml)中のＮ,Ｎ'−メタンジイリデンジプロパン−２−アミン(１２１mg, ０.９６mmol)の溶液を加え、反応混合物を室温で７日間静置した。さらに、０.５mlのＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の１３３mgのＮ,Ｎ'−メタンジイリデンジプロパン−２−アミンを加え、さらに７日間反応を続けた。反応物をカラムクロマトグラフィーによって精製し(５〜１０％メタノール／酢酸エチル)、(Ｅ)−(２−(ピリジン−３−イルイミノ)−１'−アンモニオスピロ[オキサゾリジン−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを得た(１３４.３mg, ０.４９mmol, 収率５１.３％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.34 - 8.60 (m, 1 H), 8.16 (d, J=4.27 Hz, 1 H), 7.59 - 7.96 (m, 1 H), 7.35 (dd, J=8.24, 4.88 Hz, 1 H), 3.89 (br. s., 1 H), 3.65 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.16 - 3.23 (m, 1 H), 3.04 - 3.16 (m, 1 H), 2.85 - 3.04 (m, 2 H), 2.23 (br. s., 1 H), 1.74 - 1.97 (m, 4 H), 1.36 - 1.70 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.65; [M+H-BH₃]⁺ = 259.21。

工程Ｃ： (Ｅ)−Ｎ−(１'−アザスピロ[オキサゾリジン−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イリデン)ピリジン−３−アミン

アセトン(５ml)中の(Ｅ)−(２−(ピリジン−３−イルイミノ)−１'−アンモニオスピロ[オキサゾリジン−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(１２７mg, ０.４７mmol)の懸濁液に、３Ｍ塩酸(２ml, ６.００mmol)を加え、混合物を室温で２時間静置した。水およびクロロホルムを含む分液漏斗に、それを加えた。層を分離し、炭酸ナトリウム溶液で水層を塩基性にして、混合物をクロロホルムで再度抽出した。最後に、水相を酢酸エチルで洗浄した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(１％水酸化アンモニウム／９％メタノール／９０％ジクロロメタン)、ラセミの(Ｅ)−Ｎ−(１'−アザスピロ[オキサゾリジン−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イリデン)ピリジン−３−アミンを白色の固体として得た(１９mg, ０.０７４mmol, 収率１５.８％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.39 (br. s., 1 H), 8.14 (d, J=4.27 Hz, 1 H), 7.72 (br. s., 1 H), 7.34 (dd, J=8.24, 4.88 Hz, 1 H), 3.89 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.57 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 3.14 - 3.27 (m, 1 H), 3.00 - 3.13 (m, 1 H), 2.70 - 3.00 (m, 4 H), 1.97 - 2.22 (m, 2 H), 1.54 - 1.84 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.26; [M+H]⁺ = 259.16。

実施例１９
Ｎ−(ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：２−ブロモ−６−イソチオシアナトピリジン

６−ブロモピリジン−２−アミン(２５３mg, １.４６mmol)、クロロホルム(２ml)、重炭酸ナトリウム(８５０mg, １０.１２mmol)および水(３ml)の混合物を集め、これに、クロロホルム(１ml)中のチオホスゲン(１９０mg, １.６５mmol)の溶液を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物を分液漏斗に移し、酢酸エチルおよび水の層間に分配させた。有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させ、黄色の固体を得た。固体をカラムクロマトグラフィーによって精製し(５％酢酸エチル／ヘキサン)、２−ブロモ−６−イソチオシアナトピリジンを白色の固体として得た(２８１mg, １.３１mmol, 収率８９％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.50 - 7.62 (m, 1 H), 7.34 - 7.43 (m, 1 H), 6.91 - 7.11 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.92; [M+H]⁺ = 216.86。

工程Ｂ：Ｎ−(６−ブロモピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(８ml)およびヒューニッヒ塩基(０.６ml, ３.４４mmol)中の、２−ブロモ−６−イソチオシアナトピリジン(２８１mg, １.３１mmol)の溶液に、(＋／−)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(３００mg, １.３１mmol)を加え、得られた混合物を７５℃で２.５時間加熱した。
MS (LC/MS) R.T. = 1.04; [M+H]⁺ = 373.01。

この反応混合物に、ジ−イソプロピル−カルボジイミド(５２３mg, ４.１４mmol)を加え、７５℃での加熱を２.２５時間続けた。混合物を室温まで週末に亘って冷却した。反応混合物を真空で濃縮した。該物質をカラムクロマトグラフィーによって、次いで分取ＨＰＬＣによって精製し、Ｎ−(６−ブロモピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(２９１.５mg, ０.８６mmol, 収率６６.２％)(不純物として２−アミノ−６−ブロモピリジンを含有)。
MS (LC/MS) R.T. = 0.65; [M+H]⁺ = 337.0。

工程Ｃ：Ｎ−(ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

メタノール(２０ml)中のＮ−(６−ブロモピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(２９１mg, ０.８６mmol)を、１０％パラジウム／炭素(２３mg)で、Parr社製装置中で２時間水素化した。触媒を濾過によって除去し、濾液を真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(０.７％水酸化アンモニウム／６.３％メタノール／９３％クロロホルム)、ラセミのＮ−(ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(４１.３mg, ０.１６mmol, 収率１８.６％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.13 - 8.33 (m, 1 H), 7.57 - 7.72 (m, 1 H), 6.83 - 7.04 (m, 2 H), 3.97 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.66 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.18 - 3.27 (m, 1 H), 3.03 - 3.14 (m, 1 H), 2.94 (t, J=7.63 Hz, 2 H), 2.70 - 2.90 (m, 2 H), 2.06 - 2.24 (m, 2 H), 1.57 - 1.87 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.76; [M+H]⁺ = 259.25。

実施例２０
Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(５−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(３０ml)およびテトラヒドロフラン(５ml)中の、５−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−アミン(１.０７ｇ, ５.１９mmol)に、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンチオン(１.２０ｇ, ６.７４mmol)を加えた。反応物を６０℃で１８時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過した。粉末を冷アセトニトリル(２×１５ml)で洗浄し、乾燥させ、Ｎ−(５−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを橙色〜褐色の粉末として得た(０.５９ｇ, １.８６mmol, 収率３５.９％)。生成物をさらに特性決定することなく次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (３−ヒドロキシ−３−((３−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中のＮ−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(０.５７ｇ, １.８２mmol)に、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.３１ｇ, １.８２mmol)を加えた。反応物を６０℃で４時間撹拌した。反応物を冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(６０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、最初のスポット／フラクション(ＴＬＣ)を生成物として得た。フラクションを合わせて、真空で濃縮し、(３−ヒドロキシ−３−((３−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.６ｇ, １.４３mmol, 収率７９％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.74 (s, 1 H), 7.91 (d, J=8.55 Hz, 2 H), 7.43 (s, 1 H), 6.97 (d, J=8.85 Hz, 2 H), 5.50 (s, 1 H), 3.62 - 3.98 (m, 5 H), 2.70 - 3.10 (m, 6 H), 2.13 (s, 1 H), 1.94 (s, 1 H), 1.66 - 1.91 (m, 2 H), 1.11 - 1.62 (m, 4 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.54; [M+H]⁺ = 417.1。

工程Ｃ： (２−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(３−ヒドロキシ−３−((３−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)チオウレイド)メチル)−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(０.５９ｇ, １.４１mmol)に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.６６ml, ４.２３mmol)を加えた。反応物を７０℃で２４時間撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(５０〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)、最初の成分を生成物として集め、(２−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレートを白色の粉末として得た(０.４５ｇ, １.１７mmol, 収率８３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.65 (s, 1 H), 7.89 (d, J=7.32 Hz, 2 H), 7.15 - 7.43 (m, 1 H), 6.95 (d, J=8.85 Hz, 2 H), 3.64 - 3.93 (m, 5 H), 3.23 - 3.31 (m, J=1.53 Hz, 1 H), 3.09 - 3.21 (m, 1 H), 2.99 - 3.09 (m, 1 H), 2.79 - 2.97 (m, 3 H), 2.25 (s, 1 H), 1.96 - 2.16 (m, 1 H), 1.68 - 1.91 (m, 3 H), 1.45 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.80; [M+H-BH₃]⁺ = 371.1。

工程Ｄ：Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトン(９ml)中の(２−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イルアミノ)−４Ｈ−１'−アンモニオスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−１'−イル)トリヒドロボレート(０.４１ｇ, １.０７mmol)に、３ＭＨＣｌ(０.３６ml, １.０７mmol)を加えた。反応物を室温で４時間撹拌した。ＴＬＣにより、反応の完了が示された(より低いスポット)。酢酸エチルを加え、水層を分離した。水層を１Ｎ水酸化ナトリウムで中和した。生成物を酢酸エチル(２×４０ml)で抽出した。有機物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、ラセミのＮ−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.３ｇ, ０.７７mmol, 収率７２.１％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.56 (s, 1 H), 7.77 - 8.00 (m, J=8.55 Hz, 2 H), 7.27 (s, 1 H), 6.80 - 7.08 (m, 2 H), 3.87 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.79 (s, 3 H), 3.61 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.02 (s, 3 H), 2.60 - 2.92 (m, 4 H), 2.06 (s, 2 H), 1.82 - 2.00 (m, 1 H), 1.39 - 1.70 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.95; [M+H]⁺ = 371.2。

Chiralpak AD-H (30×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中３０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を２２０nmに設定した。分離したピークを真空で濃縮し、白色の粉末を得た。カラムの最初のピークは、(Ｓ)−Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.０３５ｇ, ０.０９mmol, 収率２２.８７％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.56 (1 H, br. s.), 7.86 (2 H, d, J=8.55 Hz), 7.25 (1 H, s), 6.93 - 6.96 (2 H, m), 3.86 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.78 (3 H, s), 3.60 (1 H, d, J=9.46 Hz), 3.01 (2 H, s), 2.72 - 2.84 (2 H, m), 2.62 - 2.71 (2 H, m), 2.05 (1 H, br. s.), 1.91 (1 H, br. s.), 1.55 - 1.64 (2 H, m), 1.44 - 1.52 (1 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 2.03; [M+H]⁺ = 371.3。

二番目のピークは、(Ｒ)−Ｎ−(４−(４−メトキシフェニル)チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンであった(０.０５５ｇ, ０.１５mmol, 収率３５.９％)。
(２１ｂ, Ｒ−異性体): ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.58 (1 H, br. s.), 7.87 (2 H, d, J=8.55 Hz), 7.26 (1 H, s), 6.92 - 6.97 (2 H, m), 3.86 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.78 (3 H, s), 3.60 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.01 (2 H, s), 2.73 - 2.85 (2 H, m), 2.63 - 2.71 (2 H, m), 2.05 (1 H, br. s.), 1.91 (1 H, br. s.), 1.54 - 1.64 (2 H, m), 1.43 - 1.53 (1 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 2.03; [M+H]⁺ = 371.3。

実施例２１
(Ｒ)−Ｎ−(２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)アセトアミド

工程Ａ： (３−((ベンジルオキシカルボニルアミノ)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート

ジクロロメタン(１５０ml)中の、(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(１０ｇ, ４７.０mmol)に、炭酸ナトリウム(２００ml, ２００mmol)およびクロロ蟻酸ベンジル(９.５ml, ６６.５mmol)を加えた。反応混合物を室温で４０分間撹拌した。ジクロロメタンおよび水を加え、水層を分離し、ジクロロメタン(２×)で再度抽出した。有機層を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した(１２〜１００％酢酸エチル−ヘキサン)。生成物のフラクションを合わせて、濃縮し、ラセミの(３−((ベンジルオキシカルボニルアミノ)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートを透明な油状物として得た(３ｇ, ９.８６mmol, 収率２０.９６％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.30 - 7.43 (5 H, m), 5.27 (1 H, br. s.), 5.12 (2 H, s), 3.36 (2 H, d, J=6.04 Hz), 2.76 - 3.21 (6 H, m), 2.21 (1 H, br. s.), 1.97 (1 H, br. s.), 1.71 - 1.86 (2 H, m)。

Chiralpak OJ-H (５×２５)カラムを用いて、ＣＯ_２中２０％アセトニトリル／メタノール(１：１)からなる移動相で、エナンチオマーを分離した。波長を２１０nmに設定した。カラムの最初のピークは、無色の油状物として、(Ｒ)−(３−(アミノメチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(３７.６７ｇ, １２３mmol)であった。
旋光度: +28.2, c = クロロホルム中2.9。
カラムの二番目のピークは、明るい琥珀色の油状物として、(Ｓ)−(３−((ベンジルオキシカルボニルアミノ)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレートであった(４６.８２ｇ, １５３mmol)。
旋光度: 27.4, c = クロロホルム中2.5。

工程Ｂ： (Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩

アセトン(１２０ml)中の(Ｓ)−(３−((ベンジルオキシカルボニルアミノ)メチル)−３−ヒドロキシ−１−アンモニオビシクロ[２.２.２]オクタン−１−イル)トリヒドロボレート(２０.５ｇ, ６７mmol)の溶液を、氷浴で冷却した。３Ｍ水性ＨＣｌ(１２０ml, ３６０mmol)を、２分かけて加えた。激しい発泡が観察された。１０分後、氷浴を除き、混合物を室温まで温めた。２０分後、それをメタノール(８００ml)で希釈し、窒素を吹き付けた。パラジウム／炭素(２ｇ, １.８８mmol)を加え、反応物に窒素を吹きつけ、水素のバルーンを取り付けた。反応混合物を室温で一夜撹拌した。それに窒素を吹きつけ、メタノールを用いて、セライトのパッドで濾過した。溶媒を蒸発させ、粗製の黄色の固体を得た。固体を水(２５ml)に溶解し、エタノール(４００ml)を加えた。すぐに白色の結晶が形成した。これを濾過によって集め、エタノールで、次にエーテルで洗浄した。白色の結晶性固体である(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩を得た(１０.７ｇ, ４６.７mmol, 収率６９.３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 10.93 (1 H, br. s.), 8.24 (3 H, br. s.), 6.02 (1 H, s), 3.26 (1 H, d, J=13.43 Hz), 2.99 - 3.22 (5 H, m), 2.10 - 2.19 (2 H, m), 1.81 - 1.90 (1 H, m), 1.72 - 1.81 (1 H, m), 1.60 - 1.72 (1 H, m). 旋光度: [α]²⁰ _D = -50.9°(c = 6.4, 水)。

工程Ｃ：Ｎ−(２−(１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)アセトアミド

アセトニトリル(１００ml)中のＮ−(２−アミノベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)アセトアミド(４ｇ, １９.３mmol)に、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンチオン(３.４４ｇ, １９.３０mmol)を加えた。反応物を８０℃で一夜撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過した。生成物であるＮ−(２−(１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)アセトアミド(３.６ｇ, １１.３４mmol, 収率５８.８％)を、さらに精製することなく次の工程に直接用いた。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)アセトアミド

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)中のＮ−(２−(１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)アセトアミド(３００mg, ０.９５mmol)に、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２３８mg, １mmol)およびトリエチルアミン(０.３９ml, ２.８４mmol)を加えた。反応物を８０℃で３時間加熱した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.５９ml, ３.７８mmol)を反応混合物に加えた。混合物を８０℃でさらに２時間加熱した。反応物を冷却し、クロロホルムおよび水を混合物に加えた。有機層を真空で濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質を、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した(２〜２０％ [１０％水酸化アンモニウム／メタノール]−クロロホルム)。生成物のフラクションをエーテルで磨砕し、(Ｒ)−Ｎ−(２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル)アセトアミドを白色の固体として得た(１４４.５mg, ０.３９mmol, 収率４１.２％)。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.98 (1 H, s), 8.93 (1 H, br. s.), 8.12 (1 H, d, J=1.83 Hz), 7.52 (1 H, d, J=8.42 Hz), 7.38 (1 H, dd, J=8.60, 2.01 Hz), 3.88 (1 H, d, J=9.88 Hz), 3.62 (1 H, d, J=9.88 Hz), 3.02 (2 H, s), 2.74 - 2.85 (2 H, m), 2.66 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.05 (4 H, s), 1.91 (1 H, br. s.), 1.41 - 1.64 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.55; [M+H]⁺ = 372.2。

実施例２２
(Ｒ)−Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン

酢酸(９０ml)中の４−(ジフルオロメトキシ)アニリン(９.５５ｇ, ６０mmol)に、チオシアン酸カリウム(ＫＳＣＮ)(１２.４１ml, ２４０mmol)を加えた。混合物を２０分間撹拌した(ＫＳＣＮが溶液に溶解した)。この混合物に、酢酸(４０ml)中の臭素(３.０８ml, ６０.０mmol)を２０分かけて滴下した。反応物を室温で一夜撹拌した。それを８００mlの氷水および２００mlの飽和水酸化アンモニウムの混合物に注いだ。生成物を酢酸エチル(５×)で抽出した。有機物を合わせて、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミンを黄色の固体として得た(１２.６ｇ, ５２.４mmol, 収率８７％)。

工程Ｂ：Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

アセトニトリル(１５ml)中の６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン(０.５ｇ, ２.３mmol)に、１,１'−チオカルボニルジイミダゾール(０.４９ｇ, ２.８mmol)を加えた。反応物を７０℃で一夜撹拌した。反応物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを黄色の固体として得た(５００mg, １.５３mmol, 収率６６.３％)。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(５ml)中のＮ−(６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(２８５mg, ０.８７mmol)の溶液に、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２００mg, ０.８７mmol)およびトリエチルアミン(０.４ml, ２.８７mmol)を加えた。反応物を７０℃で２時間加熱した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.４ml, ２.５７mmol)を、反応混合物に加えた。混合物を７０℃でさらに３時間加熱した。それを冷却し、トルエン／０.３Ｍ水酸化ナトリウムに注いだ。生成物をトルエン(４×)およびクロロホルム(３×)で抽出した。有機物を合わせて、水(３×)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、粗生成物を得た。粗製の物質を、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(２〜２０％ [１０％水酸化アンモニウム／メタノール]−クロロホルム)、(Ｒ)−Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(１８６.２mg, ０.４９mmol, 収率５５.５％)。
融点 223〜5℃. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.99 (1 H, br. s.), 7.69 (1 H, d, J=2.75 Hz), 7.61 (1 H, d, J=8.55 Hz), 7.02 - 7.34 (2 H, m), 3.89 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.64 (1 H, d, J=9.77 Hz), 3.03 (2 H, d, J=2.44 Hz), 2.73 - 2.86 (2 H, m), 2.62 - 2.70 (2 H, m), 2.07 (1 H, br. s.), 1.92 (1 H, br. s.), 1.54 - 1.65 (2 H, m), 1.44 - 1.53 (1 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.43; [M+H]⁺ = 381.1。

実施例２３
(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−イソチオシアナト−６−メトキシピリミジン

ジクロロメタン中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１.８６ｇ, ７.９９mmol)の明橙色の溶液に、室温で、６−メトキシピリミジン−４−アミン(１ｇ, ８mmol)を加えた。橙色の溶液を室温で１８時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、望ましい生成物が主要なピークの１つとして示された。深橙色の溶液を濃縮し、残った残渣を濾過した。濾液をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(１０〜５０％酢酸エチル／ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−メトキシピリミジンを黄色の油状物として得た(０.７２ｇ, ４.３mmol, 収率５４％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.49 (1 H, d, J=5.79 Hz), 6.95 (1 H, d, J=5.79 Hz), 3.92 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 3.15; [M+H]⁺ = 168.1。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１５ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(実施例２１の工程Ｂより)(０.３４ｇ, １.４９mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(１.２２ｇ, ３.７４mmol)および４−イソチオシアナト−６−メトキシピリミジン(０.２５ｇ, １.５mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.７ml, ４.５mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜１５％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]／クロロホルム)、(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の固体として得た(０.２１ｇ, ０.７２mmol, 収率４８.２％)。
融点 186〜8℃. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.40 (1 H, s), 6.17 (1 H, br. s.), 3.92 - 4.04 (1 H, m), 3.89 (3 H, s), 3.68 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.12 - 3.23 (1 H, m), 2.98 - 3.12 (1 H, m), 2.67 - 2.97 (4 H, m), 2.11 (2 H, br. s.), 1.48 - 1.82 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.82; [M+H]⁺ = 290.3。

実施例２４
(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−メトキシピリジン−２−アミンエトキシカルボニルチオウレア

ジオキサン(４０ml)中の５−メトキシピリジン−２−アミン(５ｇ, ４０mmol)に、エトキシカルボニルイソチオシアネート(５.２３ml, ４４.３mmol)を加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌した。混合物を真空で濃縮し、５−メトキシピリジン−２−アミンエトキシカルボニルチオウレアを得た(１０.２８ｇ, ４０.３mmol, 収率１００％)。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 12.03 (1 H, br. s.), 11.37 (1 H, br. s.), 8.53 (1 H, br. s.), 8.11 (1 H, d, J=2.93 Hz), 7.50 (1 H, dd, J=8.97, 3.11 Hz), 4.22 (2 H, q, J=7.07 Hz), 3.84 (3 H, s), 1.26 (3 H, t, J=7.14 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 2.40; [M+H]⁺ = 256.1。

工程Ｂ：６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−アミン

エタノール(５７ml)およびメタノール(５７ml)中の、５−メトキシピリジン−２−アミンエトキシカルボニルチオウレア(１０.２１ｇ, ４０mmol)に、ヒドロキシルアミン塩酸塩(１４ｇ, ２００mmol)およびヒューニッヒ塩基(２１ml, １２０mmol)を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、６０℃で４時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、濾過し、固体を除去した。それを真空で濃縮し、クロロホルムに懸濁した。固体を濾過して取り、６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−アミンを得た(６.０５ｇ, ３３.２mmol, 収率８３％)。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.30 (1 H, d, J=1.83 Hz), 7.24 - 7.32 (1 H, m), 7.16 - 7.23 (1 H, m), 5.82 (2 H, br. s.), 3.78 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 0.53; [M+H]⁺ = 165.2。

２ｇの６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−アミンを、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(２〜２０％ [１０％水酸化アンモニウム／メタノール]／クロロホルム)、６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−アミンを得た(１.３５ｇ, ８.２２mmol, 収率６７.５％)。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.29 (1 H, d, J=2.20 Hz), 7.24 - 7.30 (1 H, m), 7.15 - 7.22 (1 H, m), 5.79 (2 H, s), 3.78 (3 H, s)。

工程Ｃ：２−イソチオシアナト−６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン

ジクロロメタン(１５ml)中の６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−アミン(０.３ｇ, １.８mmol)に、１,１'−チオカルボニル−ジ−２(１Ｈ)−ピリドン(０.５１ｇ, ２.２mmol)を加えた。反応物を室温で一夜撹拌し、真空で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、２−イソチオシアナト−６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジンを白色の固体として得た(１６６mg, ０.８mmol, 収率４４％)。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.03 (1 H, d, J=2.20 Hz), 7.54 (1 H, d, J=9.88 Hz), 7.34 (1 H, dd, J=9.51, 2.56 Hz), 3.88 (3 H, s)。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(５ml)中の２−イソチオシアナト−６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン(１６０mg, ０.７８mmol)に、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１７８mg, ０.７８mmol)およびトリエチルアミン(０.３２ml, ２.３３mmol)を加えた。反応物を７０℃で１時間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.３６ml, ２.３３mmol)を反応混合物に加えた。混合物を７０℃で４時間加熱し、冷却し、水性重炭酸ナトリウム／クロロホルムに注いだ。生成物をクロロホルムで抽出した(３×)。合わせた有機物を水(３×)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し(２〜２０％ [１０％水酸化アンモニウム：メタノール]／クロロホルム)、(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシ−[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ−[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(１１４.５mg, ０.３３mmol, 収率４２％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.51 (1 H, br. s.), 8.08 (1 H, d, J=2.44 Hz), 7.35 (1 H, d, J=9.77 Hz), 7.18 (1 H, dd, J=9.46, 2.44 Hz), 3.92 (1 H, d, J=8.85 Hz), 3.84 (3 H, s), 3.58 (1 H, d, J=8.85 Hz), 3.36 - 3.41 (1 H, m), 2.72 - 3.05 (4 H, m), 2.18 - 2.26 (1 H, m, J=13.26, 9.98, 3.66, 3.49, 3.49 Hz), 2.13 (1 H, br. s.), 1.79 (1 H, br. s.), 1.67 - 1.76 (1 H, m, J=13.96, 9.84, 4.27, 4.27 Hz), 1.45 - 1.63 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.86; [M+H]⁺ = 329.2。

実施例２５
(Ｒ)−Ｎ−(５−(トリフルオロメチル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−(トリフルオロメチル)ピラジン−２−アミン

３Ｍ水酸化ナトリウム(１８０ml, ５４０mmol)中の、５,６−ジアミノピリミジン−４−オール(１８ｇ, １４３mmol)の氷浴で冷却した溶液に、３,３−ジブロモ−１,１,１−トリフルオロプロパン−２−オン(２５.２ｇ, ９３mmol)を加えた。反応物を環境温度で３日間撹拌した。固体を濾過し、６０％硫酸(１４０ml)に溶解し、１３５℃で８時間撹拌した。反応物を冷却し、氷に注ぎ、１６時間置いた。濃水酸化アンモニウムで溶液をｐＨ８まで中和し、酢酸エチル(５×１００ml)で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。固体残渣をベンゼン／ヘキサンから再結晶し、５−(トリフルオロメチル)ピラジン−２−アミンを得た(２.２８ｇ, １４mmol, 収率１５％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.32 (1 H, s), 7.99 (1 H, d, J=1.26 Hz), 5.02 (2 H, br. s.). MS (LC/MS) R.T. = 1.56; [M+H]⁺ = 164.03。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(トリフルオロメチル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−(トリフルオロメチル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、５−(トリフルオロメチル)ピラジン−２−アミン(上記の工程Ａより)を出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.08 (1 H, br. s.), 8.35 (1 H, s), 8.32 (1 H, s), 3.95 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.61 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.30 (1 H, dd, J=14.86, 1.76 Hz), 2.65 - 2.99 (5 H, m), 2.05 - 2.16 (2 H, m), 1.64 - 1.74 (1 H, m), 1.42 - 1.57 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.06; [M+H]⁺ = 328.30。

実施例２６
(Ｒ)−Ｎ−(６−フルオロ−１Ｈ−インダゾール−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−フルオロ−１Ｈ−インダゾール−３−アミン

２,４−ジフルオロベンゾニトリル(１.２１ｇ, ８.７０mmol)に、ヒドラジン一水和物(８.４６ml, １７４mmol)を加えた。混合物を５時間還流し、氷に注いだ。溶液を酢酸エチルで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(２５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、６−フルオロ−１Ｈ−インダゾール−３−アミンを明黄色の粉末として得た(０.５ｇ, ３.３mmol, 収率３８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 11.42 (s, 1 H), 7.70 (dd, J=8.55, 5.49 Hz, 1 H), 6.97 (dd, J=10.07, 1.83 Hz, 1 H), 6.72 - 6.79 (m, 1 H), 5.40 (s, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.61; [M+H]⁺ = 152.11。

工程Ｂ：６−フルオロ−３−イソチオシアナト−１Ｈ−インダゾール

ジクロロメタン(１５ml)中の６−フルオロ−１Ｈ−インダゾール−３−アミン(０.３２ｇ, ２.１mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.５３ｇ, ２.３０mmol)を加えた。反応物を５０℃で３時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し(２５％酢酸エチル／ヘキサン)、６−フルオロ−３−イソチオシアナト−１Ｈ−インダゾールを明黄色の粉末として得た(０.３０ｇ, １.５３mmol, 収率７３.０％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 13.39 (s, 1 H), 7.78 (dd, J=8.85, 4.88 Hz, 1 H), 7.41 (dd, J=9.31, 1.68 Hz, 1 H), 7.14 (td, J=9.16, 1.83 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.69; [M+H]⁺ = 194.07。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−フルオロ−１Ｈ−インダゾール−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１５ml)中の６−フルオロ−３−イソチオシアナト−１Ｈ−インダゾール(０.２０ｇ, １.０４mmol)に、トリエチルアミン(０.４３ml, ３.１１mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.２６ｇ, １.１４mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.４８ml, ３.１１mmol)で処理した。反応物を７０℃で２時間加熱した。反応物を環境温度まで冷却し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し(８５％クロロホルム, １４％メタノール, １％水酸化アンモニウム)、(Ｒ)−Ｎ−(６−フルオロ−１Ｈ−インダゾール−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.２２ｇ, ０.６６mmol, 収率６４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 12.16 (s, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.59 - 7.67 (m, 1 H), 7.09 (dd, J=9.77, 2.14 Hz, 1 H), 6.81 - 6.88 (m, 1 H), 3.81 (d, J=9.16 Hz, 1 H), 3.56 (d, J=8.85 Hz, 1 H), 3.00 (s, 2 H), 2.78 (s, 2 H), 2.67 (t, J=7.32 Hz, 2 H), 2.01 (d, J=2.44 Hz, 1 H), 1.92 (s, 1 H), 1.59 (d, J=5.80 Hz, 2 H), 1.46 (s, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.44; [M+H]⁺ = 316.16。

実施例２７
(Ｒ)−Ｎ−(フロ[３,２−ｃ]ピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：フロ[３,２−ｃ]ピリジン−４−アミン

トルエン中の４−クロロフロ[３,２−ｃ]ピリジン(１ｇ, ６.５mmol)に、窒素下で、ラセミのＢＩＮＡＰ(０.２４３ｇ, ０.４mmol)、Ｐｄ_２(ｄｂａ)_３(０.１２ｇ, ０.１３mmol)およびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド(０.８８ｇ, ９.１mmol)を加えた。ベンゾフェノンイミン(１.３ml, ７.８１mmol)を加え、混合物を８０℃で３時間加熱し、室温まで冷却した。反応混合物をエーテルで希釈し、セライトで濾過し、エーテルで洗浄した。濾液を濃縮し、深橙色の残渣をメタノール(９０ml)に溶かし、ヒドロキシルアミン(１.２ml, １９.５mmol)で処理した。混合物を環境温度で１８時間撹拌し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(９５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、フロ[３,２−ｃ]ピリジン−４−アミンを深橙色の固体として得た(７７６mg, ５.７９mmol, 収率８９％)。
MS (LC/MS) R.T. = 0.51; [M+H]⁺ = 135.02。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(フロ[３,２−ｃ]ピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(フロ[３,２−ｃ]ピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、フロ[３,２−ｃ]ピリジン−４−アミン(上記の工程Ａ)を出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.08 (1 H, d, J=5.79 Hz), 7.69 (1 H, d, J=2.01 Hz), 6.99 - 7.13 (2 H, m), 4.00 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.69 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.19 - 3.26 (1 H, m), 3.05 - 3.13 (1 H, m), 2.93 (2 H, t, J=7.43 Hz), 2.73 - 2.87 (2 H, m), 2.08 - 2.24 (2 H, m), 1.52 - 1.82 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.68; [M+H]⁺ = 299.19。

実施例２８
(Ｒ)−Ｎ−(５−フェニルピリジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−フェニルピリジン−３−アミン

エタノール(３ml)に溶解した、５−ブロモピリジン−３−アミン(２４８mg, １.４３mmol)、Ｐｄ(ＰＰｈ_３)_４(５０.４mg, ０.０４mmol)、トルエン(３ml)、炭酸ナトリウム(２Ｍ, ３ml, ６mmol)およびフェニルボロン酸(１９５mg, １.６０mmol)の混合物を、油浴中、９０℃で４時間加熱し、室温まで１６時間冷却した。反応混合物を分液漏斗に移し、酢酸エチルと水の層間に分配した。水相を酢酸エチルで１回以上洗浄し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(８０％酢酸エチル／ヘキサン)、５−フェニルピリジン−３−アミンを白色の固体として得た(３１.９mg, ０.１９mmol, 収率１３％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.17 - 8.42 (m, 1 H), 8.02 - 8.20 (m, 1 H), 7.32 - 7.62 (m, 4 H), 7.25 (s, 1 H), 7.06 - 7.20 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.91; [M+H]⁺ = 171.09。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−フェニルピリジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−フェニルピリジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、５−フェニルピリジン−３−アミン(上記の工程Ａより)を出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.40 (br. s., 2 H), 7.66 (d, J=7.32 Hz, 2 H), 7.46 - 7.56 (m, 3 H), 7.43 (d, J=7.32 Hz, 1 H), 3.79 - 4.02 (m, 1 H), 3.51 - 3.68 (m, 1 H), 3.22 (d, J=14.95 Hz, 1 H), 3.02 - 3.15 (m, 1 H), 2.72 - 2.99 (m, 3 H), 2.14 (br. s., 2 H), 1.76 (dd, J=9.31, 4.12 Hz, 3 H), 1.12 - 1.35 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.90; [M+H]⁺ = 335.17。

実施例２９
(Ｒ)−Ｎ−(２−フェニルピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(２−フェニルピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、２−ブロモピリジン−４−アミンから、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.38 (d, J=5.49 Hz, 1 H), 7.88 (d, J=7.93 Hz, 2 H), 7.71 - 7.84 (m, 1 H), 7.48 (d, J=7.63 Hz, 3 H), 7.19 - 7.36 (m, 1 H), 3.94 - 4.09 (m, 1 H), 3.61 - 3.79 (m, 1 H), 3.17 - 3.27 (m, 1 H), 3.00 - 3.14 (m, 1 H), 2.74 - 3.00 (m, 4 H), 2.05 - 2.23 (m, 2 H), 1.55 - 1.86 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.86; [M+H]⁺ = 335.23。

実施例３０
(Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−ブロモピリジン−２−アミンから、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 7.91 (d, J=7.63 Hz, 2 H), 7.71 (t, J=7.78 Hz, 1 H), 7.32 - 7.55 (m, 5 H), 4.04 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.72 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.23 (d, J=1.22 Hz, 1 H), 3.12 (s, 1 H), 2.95 (s, 2 H), 2.84 (s, 2 H), 2.16 (br. s., 2 H), 1.58 - 1.85 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.75; [M+H]⁺ = 335.23。

実施例３１
(Ｒ)−Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(ジフルオロメトキシ)−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−アミン

４−(ジフルオロメトキシ)−２−フルオロベンゾニトリル(１ｇ, ５.３mmol)に、メチルヒドラジン(４.９２ｇ, １０７mmol)を加えた。混合物を５０℃で５時間加熱し、室温まで冷却した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し(４０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、６−(ジフルオロメトキシ)−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−アミンを白色の粉末として得た(０.５ｇ, ２.３５mmol, 収率４４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.70 (d, J=8.55 Hz, 1 H), 7.14 (s, 1 H), 6.73 (d, J=8.55 Hz, 1 H), 5.49 (s, 1 H), 3.70 (s, 3 H)。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(ジフルオロメトキシ)−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、６−(ジフルオロメトキシ)−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−アミン(工程Ａ)を出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.64 (d, J=8.55 Hz, 1 H), 7.28 (d, J=5.19 Hz, 1 H), 6.83 (dd, J=8.55, 1.83 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3 H), 3.77 - 3.84 (m, 1 H), 3.51 - 3.64 (m, 1 H), 3.00 (s, 2 H), 2.72 - 2.84 (m, 2 H), 2.67 (t, J=7.48 Hz, 2 H), 2.02 (br. s., 1 H), 1.85 - 1.98 (m, 1 H), 1.59 (d, J=5.80 Hz, 2 H), 1.36 - 1.53 (m, 1 H), 1.09 (d, J=6.41 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.04; [M+H]⁺ = 378.19。

実施例３２
(Ｒ)−Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：２−(ジフルオロメトキシ)−５−ニトロピリジン

アセトニトリル(５００ml)中の２−ヒドロキシ−５−ニトロピリジン(７ｇ, ５０mmol)に、硫酸ナトリウム(１.５ｇ, １０.６mmol)および２,２−ジフルオロ−２−(フルオロスルホニル)酢酸(６.２ml, ６０mmol)を加え、反応物を室温で１６時間撹拌した。飽和水性重炭酸ナトリウムで反応を停止させ、アセトニトリルを真空で除去した。残った水性成分を酢酸エチルで抽出し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。薄褐色の油状固体をエーテル／ヘキサンで磨砕し、濾過し、濾液を濃縮し、２−(ジフルオロメトキシ)−５−ニトロピリジンを黄色の油状物として得た(４.７ｇ, ２４.７mmol, 収率４９％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.14 (d, J=2.76 Hz, 1 H), 8.68 (dd, J=9.03, 2.76 Hz, 1 H), 7.98 (s, 0.5 H), 7.62 (s, 0.5 H), 7.34 (d, J=9.03 Hz, 1 H)。

工程Ｂ：６−(ジフルオロメトキシ)ピリジン−３−アミン

脱気したメタノール(１００ml)中の２−(ジフルオロメトキシ)−５−ニトロピリジン(４.７ｇ, ２４.７mmol)に、１０％パラジウム／炭素(５００mg, ０.４７mmol)を加え、反応物を、大気圧で、１時間水素化した。これに酢酸(２.８３ml, ４９.４mmol)を加え、反応物をセライトで濾過し、真空で濃縮し、６−(ジフルオロメトキシ)ピリジン−３−アミンをオリーブグリーン色の液体として得た(６.３３ｇ, ２５.９mmol, 収率１０５％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 7.60 (d, J=2.76 Hz, 1 H), 7.37 (s, 0.5 H), 7.15 (dd, J=8.66, 2.89 Hz, 1 H), 7.00 (s, 0.5 H), 6.71 (d, J=8.78 Hz, 1 H)。

工程Ｃ：５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン

氷浴中で冷却した酢酸(１０ml)に、チオシアン酸カリウム(３.１８ｇ, ３２.８mmol)および６−(ジフルオロメトキシ)ピリジン−３−アミン(１ｇ, ４.１mmol)を加えた。反応物の温度が＜０℃に至るまで、反応物を氷−塩浴中で冷却した。反応物の温度が＜０℃に維持される速度で、酢酸(３ml)中の臭素(０.６５ml, １２.７mmol)の溶液を２時間かけて滴下した。これにより非常に濃厚な混合物を得た。添加完了後、混合物を撹拌し、一夜かけてゆっくりと室温まで温めた。一夜撹拌した後、水(５ml)を加え、混合物を油浴中で８５℃に加熱した。この混合物を熱いままで濾過した。黄色のフィルターケーキを反応フラスコに戻し、さらに５mlの酢酸を加えた。混合物を再度８５℃に加熱し、熱いままで濾過した。合わせた濾液を氷浴中で冷却し、濃水酸化アンモニウムでｐＨ８まで中和した。黄色の沈殿物が形成し、これを濾過によって集めた。この粗製の物質を、カラムクロマトグラフィーによって精製し(１２〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミンを黄色の固体として得た(３２１mg, １.４８mmol, 収率３６.１％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.64 - 7.81 (m, 2 H), 6.92 (d, J=8.53 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.66; [M+H]⁺ = 218.10。

工程Ｄ：Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド

５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン(３１０mg, １.４３mmol)およびジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンチオン(３１１mg, １.７５mmol)を、アセトニトリル(５ml)に溶解し、密封したバイアル中で、７０℃で１０時間加熱した。バイアルを冷凍庫中で１６時間保管した。固体を濾過によって集め、アセトニトリルで洗浄し、Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミドを得た(２９６mg, ０.７２mmol, 収率５１％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.77 (d, J=4.77 Hz, 1 H), 8.06 (d, J=8.53 Hz, 1 H), 8.01 (s, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 7.54 (s, 1 H), 6.94 - 7.13 (m, 1 H)。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(４ml)中の、Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−１Ｈ−イミダゾール−１−カルボチオアミド(２９６mg, ０.７２mmol)に、密封バイアル中で、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１７５mg, ０.７６mmol)およびトリエチルアミン(０.３ml, ２.２mmol)を加え、混合物を７０℃で一夜加熱した。これに、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(３５０μｌ, ２.２５mmol)を加え、反応物を７０℃で６時間加熱した。それを環境温度まで冷却し、水／クロロホルムに注ぎ、さらにクロロホルムで抽出し、真空で濃縮した。残渣をトルエンに溶かし、水で洗浄して、残ったＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミドを除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(２％〜２０％ (１０％水酸化アンモニウム／メタノール)／クロロホルム)、(Ｒ)−Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを薄いクリーム色の固体として得た(１０４mg, ０.２７mmol, 収率３７％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.99 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.03 (d, J=8.53 Hz, 1 H), 3.87 (d, J=10.04 Hz, 1 H), 3.62 (d, J=10.04 Hz, 1 H), 3.03 (d, J=5.02 Hz, 2 H), 2.80 (d, J=9.03 Hz, 2 H), 2.65 (t, J=7.65 Hz, 2 H), 2.08 (br. s., 1 H), 1.83 - 1.99 (m, 1 H), 1.43 - 1.68 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.73; [M+H]⁺ = 382.20。

実施例３３
(Ｒ)−Ｎ−(６−イソプロポキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−イソプロポキシベンゾ[ｄ]チアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−イソプロポキシアニリンから、実施例３２の工程Ｃ〜Ｅの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.49 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 7.38 (d, J=2.51 Hz, 1 H), 6.90 (dd, J=8.78, 2.51 Hz, 1 H), 4.50 - 4.68 (m, 1 H), 3.87 (d, J=10.04 Hz, 1 H), 3.62 (d, J=9.79 Hz, 1 H), 2.79 (d, J=9.03 Hz, 2 H), 2.66 (t, J=7.78 Hz, 2 H), 2.06 (br. s., 1 H), 1.85 - 1.96 (m, 1 H), 1.42 - 1.67 (m, 3 H), 1.17 - 1.34 (m, 6 H), 0.96 - 1.19 (m, 2 H)。

実施例３４
(Ｒ)−Ｎ−(５−(ピロリジン−１−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−(ピロリジン−１−イル)ピラジン−２−アミン

５−ブロモピラジン−２−アミン(１.２ｇ, ６.９mmol)およびピロリジン(４ml, ４８mmol)の混合物を、１８０℃で２００Ｗで２時間マイクロ波照射した。反応物を１２５mlの酢酸エチルで希釈し、水(３×５０ml)および塩水(５０ml)で抽出した。それを硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し(０〜３％メタノール／塩化メチレン)、５−(ピロリジン−１−イル)ピラジン−２−アミンを得た(４９５mg, ３.mmol, 収率４３.７％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.52 (1 H, d, J=1.51 Hz), 7.36 (1 H, d, J=1.76 Hz), 5.21 (2 H, s), 3.24 - 3.29 (4 H, m), 1.90 (4 H, ddd, J=6.48, 3.53, 3.34 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 0.52; [M+H]⁺ = 165.29。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(ピロリジン−１−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−(ピロリジン−１−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、５−(ピロリジン−１−イル)ピラジン−２−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.51 (1 H, br. s.), 8.02 (1 H, s), 7.44 (1 H, d, J=0.92 Hz), 3.84 (1 H, d, J=9.16 Hz), 3.51 (1 H, d, J=8.85 Hz), 3.39 - 3.45 (4 H, m), 3.31 (1 H, dd, J=14.80, 1.07 Hz), 2.69 - 3.04 (5 H, m), 2.15 - 2.25 (1 H, m), 2.09 (1 H, br. s.), 1.98 - 2.02 (4 H + HOD, m), 1.64 - 1.74 (1 H, m), 1.42 - 1.61 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.76; [M+H]⁺ = 329.40。

実施例３５
(Ｒ)−１−(５−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ピラジン−２−イル)ピロリジン−２−オン

工程Ａ：１−(５−アミノピラジン−２−イル)ピロリジン−２−オン

５−ブロモピラジン−２−アミン(５ｇ, ２９mmol)、ピロリジン−２−オン(１１ml, １４４mmol)、ヨウ化銅(I)(１.１ｇ, ５.７５mmol)、炭酸カリウム(７.９４ｇ, ５７.５mmol)および(１Ｒ,２Ｒ)−シクロヘキサン−１,２−ジアミン(１.３８ml, １１.４９mmol)の混合物を、窒素下、ジオキサン(１００ml)中で１８時間還流した。冷却後、２００mlの酢酸エチルおよび２０mlのメタノールを反応物に加えた。これをセライトで濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーによって精製(０〜５％メタノール／塩化メチレン)するために、硫酸ナトリウムに吸着させた。精製した生成物をエーテル／酢酸エチルから再結晶し、１−(５−アミノピラジン−２−イル)ピロリジン−２−オンを得た(１.５７ｇ, ８.８１mmol, 収率３０.７％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.74 (1 H, d, J=1.51 Hz), 7.69 (1 H, d, J=1.51 Hz), 6.20 (2 H, s), 3.84 (2 H, t, J=7.05 Hz), 2.49 (2 H, t, J=7.93 Hz), 2.04 (2 H, dq, J=7.68, 7.51 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 0.48; [M+H]⁺ = 179.27。

工程Ｂ： (Ｒ)−１−(５−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ピラジン−２−イル)ピロリジン−２−オン

(Ｒ)−１−(５−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)ピラジン−２−イル)ピロリジン−２−オンを、１−(５−アミノピラジン−２−イル)ピロリジン−２−オンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.20 (1 H, d, J=1.22 Hz), 8.91 (1 H, br. s.), 8.13 (1 H, s), 4.02 (2 H, t, J=7.02 Hz), 3.92 (1 H, d, J=9.46 Hz), 3.58 (1 H, d, J=9.16 Hz), 3.33 (1 H, dd, J=14.95, 1.53 Hz), 2.71 - 3.01 (5 H, m), 2.63 (2 H, t, J=8.09 Hz), 2.08 - 2.23 (4 H, m), 1.66 - 1.76 (1 H, m), 1.42 - 1.61 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.67; [M+H]⁺ = 343.30。

実施例３６
(Ｒ)−Ｎ−(５−(ピリジン−３−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−(ピリジン−３−イル)ピラジン−２−アミン

ピリジン−３−イルボロン酸(３０７mg, ２.５０mmol)、５−ブロモピラジン−２−アミン(３９１mg, ２.２５mmol)およびジクロロビス(トリフェニルホスフィン)−パラジウム(II)(８８mg, ０.１３mmol)を、脱気したジオキサン(１２ml)に加え、混合物を３０分間撹拌した。炭酸ナトリウム(７９５mg, ７.５０mmol)および脱気した水(８ml)を加え、反応物を、密封した反応バイアル中で、１００℃で８時間加熱した。反応物を環境温度で週末の間静置した。それを酢酸エチル(１００ml)で希釈し、塩水(３×２５ml)で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し(０〜５％メタノール／酢酸エチル)、５−(ピリジン−３−イル)ピラジン−２−アミンを得た(２３５mg, １.３７mmol, 収率５４.６％)。
¹H NMR (400 MHz, アセトン) δ ppm 9.13 (1 H, d, J=1.51 Hz), 8.54 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.50 (1 H, dd, J=4.78, 1.51 Hz), 8.22 - 8.28 (1 H, m), 8.07 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.39 (1 H, ddd, J=7.87, 4.72, 0.76 Hz), 6.05 (2 H, br. s.). MS (LC/MS) R.T. = 0.58; [M+H]⁺ = 173.20。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(ピリジン−３−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−(ピリジン−３−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、５−(ピリジン−３−イル)ピラジン−２−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.12 (1 H, dd, J=2.27, 0.76 Hz), 9.08 (1 H, br. s.), 8.59 (1 H, dd, J=4.78, 1.76 Hz), 8.55 (1 H, d, J=1.51 Hz), 8.45 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.25 (1 H, dt, J=7.99, 1.92 Hz), 7.38 (1 H, ddd, J=8.06, 4.78, 0.76 Hz), 3.97 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.63 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.36 (1 H, dd, J=14.86, 1.76 Hz), 2.69 - 3.06 (5 H, m), 2.14 - 2.24 (1 H, m), 2.12 (1 H, br. s.), 1.66 - 1.77 (1 H, m, J=13.94, 9.66, 4.31, 4.31 Hz), 1.44 - 1.62 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.65; [M+H]⁺ = 337.30。

実施例３７
(Ｒ)−Ｎ−(５−(６−メトキシピリジン−３−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−(６−メトキシピリジン−３−イル)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、５−ブロモピラジン−２−アミンから、実施例３６の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.04 (1 H, br. s.), 8.66 (1 H, d, J=2.01 Hz), 8.46 (1 H, d, J=1.51 Hz), 8.41 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.15 (1 H, dd, J=8.81, 2.52 Hz), 6.82 (1 H, d, J=8.31 Hz), 3.97 (3 H, s), 3.95 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.61 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.35 (1 H, dd, J=14.86, 1.51 Hz), 2.68 - 3.07 (5 H, m), 2.14 - 2.24 (1 H, m, J=13.27, 9.93, 3.53, 3.38, 3.38 Hz), 2.11 (1 H, br. s.), 1.67 - 1.77 (1 H, m), 1.45 - 1.61 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.81; [M+H]⁺ = 367.40。

実施例３８
(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：７−メトキシキノキサリン−２(１Ｈ)−オンおよび６−メトキシキノキサリン−２(１Ｈ)−オン

トルエン中５０％溶液の２−オキソ酢酸エチル(１８.４７ml, ９３mmol)を、エタノール(１００ml)中の４−メトキシベンゼン−１,２−ジアミン(１０.７３ｇ, ７８mmol)の溶液に環境温度で加え、反応物を２時間還流した。反応物を真空で濃縮し、エタノールから結晶化し、６−メトキシキノキサリン−２(１Ｈ)−オンおよび７−メトキシキノキサリン−２(１Ｈ)−オンの混合物を得た(５.７３ｇ, ３２.５０mmol, 収率４２％)。
MS (LC/MS) R.T. = 0.68; [M+H]⁺ = 177.10。

工程Ｂ：２−クロロ−６−メトキシキノキサリン

６−メトキシキノキサリン−２(１Ｈ)−オンおよび７−メトキシキノキサリン−２(１Ｈ)−オン(５.６７ｇ, ３２.２０mmol)の混合物を、オキシ塩化リン(１２０ml)中で、１時間還流した。反応物を濃縮し、氷を添加することによって反応停止させ、炭酸ナトリウムで塩基性にして、酢酸エチル(３×２００ml)で抽出した。有機層を合わせて、真空で濃縮した。粗生成物を硫酸ナトリウムに吸着させ、カラムクロマトグラフィーによって精製し(０〜５％酢酸エチル／ヘキサン)、２−クロロ−６−メトキシキノキサリンを得た(２.２１ｇ, １１.３６mmol, 収率３５％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.69 (s, 1 H), 7.88 (d, J=9.32 Hz, 1 H), 7.43 (dd, J=9.32, 2.77 Hz, 1 H), 7.37 (d, J=2.77 Hz, 1 H), 3.95 (s, 3 H)。

工程Ｃ：Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−６−メトキシキノキサリン−２−アミン

２−クロロ−６−メトキシキノキサリン(０.９３ｇ, ４.７７mmol)および(２,４−ジメトキシフェニル)メタンアミン(２.２ml, １４.６４mmol)を、ジメチルスルホキシド(５ml)中で、１５０℃で３０分間マイクロ波照射した。反応物を酢酸エチル(２５０ml)で希釈し、塩水(３×１００ml)で抽出した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し(２０〜８０％酢酸エチル／ヘキサン)、Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−６−メトキシキノキサリン−２−アミンを得た(１.４６ｇ, 収率８７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.13 (1 H, s), 7.59 - 7.63 (1 H, m), 7.30 (1 H, d, J=8.31 Hz), 7.21 - 7.24 (2 H, m), 6.47 (1 H, d, J=2.27 Hz), 6.42 (1 H, dd, J=8.31, 2.27 Hz), 5.10 (1 H, t, J=5.92 Hz), 4.61 (2 H, d, J=5.79 Hz), 3.88 (3 H, s), 3.84 (3 H, s), 3.78 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 1.95; [M+H]⁺ = 326.23。

工程Ｄ：６−メトキシキノキサリン−２−アミン

Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−６−メトキシキノキサリン−２−アミン(２.８ｇ, ８.６１mmol)を、ＴＦＡ(１０ml, １３０mmol)およびジクロロメタン(１０ml)中で、環境温度で３０分間撹拌した。溶媒を真空で除去した。飽和水性炭酸水素ナトリウム(２００ml)を赤色の残渣に加えると、黄色の固体が沈殿した。混合物を大量のジクロロメタンで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、６−メトキシキノキサリン−２−アミンを得た(１.５０ｇ, ８.５６mmol, 収率９９％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.27 (1 H, s), 7.54 - 7.58 (1 H, m), 7.25 - 7.29 (2 H, m), 4.71 (2 H, br. s.), 3.90 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 0.86; [M+H]⁺ = 176.23。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−メトキシキノキサリン−２−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.61 (1 H, br. s.), 8.57 (1 H, s), 7.62 (1 H, d, J=9.06 Hz), 7.23 - 7.32 (2 H, m), 4.01 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.90 (3 H, s), 3.66 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.37 (1 H, dd, J=14.86, 1.51 Hz), 2.68 - 3.08 (5 H, m), 2.15 - 2.25 (1 H, m), 2.10 - 2.14 (1 H, m), 1.67 - 1.77 (1 H, m), 1.42 - 1.63 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.81; [M+H]⁺ = 340.30。

実施例３９
(Ｒ)−Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：２−クロロ−５−(ジフルオロメトキシ)ピリミジン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)および水(０.２ml)中の、２−クロロピリミジン−５−オール(１ｇ, ７.６６mmol)および２−クロロ−２,２−ジフルオロ酢酸ナトリウム(３.５０ｇ, ２２.９８mmol)を、９０℃で２４時間加熱し、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(５〜３０％酢酸エチル／ヘキサン)、２−クロロ−５−(ジフルオロメトキシ)ピリミジンを薄黄色の油状物として得た(５４９mg, ３.０４mmol, 収率３９.７％)。
MS (LC/MS) R.T. = 1.32; [M+H]⁺ = 181.14。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−(ジフルオロメトキシ)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、２−クロロ−５−(ジフルオロメトキシ)ピリミジンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeO-d₄) δ ppm 8.46 (2 H, s), 6.85 (1 H, t), 4.02 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.73 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.28 (1 H, d, J=1.01 Hz), 3.16 (1 H, d), 2.81 - 3.05 (4 H, m), 2.08 - 2.25 (2 H, m), 1.46 - 1.89 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.53; [M+H]⁺ = 326.30。

実施例４０
(Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジメチルピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４,５−ジメチルピリミジン−２−アミン

メタノール中２Ｍアンモニア(１００ml)中の、４−クロロ−５,６−ジメチルピリミジン−２−アミン(０.３５ｇ, ２.２２mmol)の溶液に、窒素を吹きつけ、パラジウム／炭素(０.０３５ｇ, ０.３３mmol)を加え、窒素を吹きつけ、反応物を、１atmで、環境温度で１８時間水素化した。反応混合物に窒素を吹きつけ、セライトで濾過し、セライトのパッドをメタノールで洗浄した。濾液を真空で乾固するまで蒸発させ、４,５−ジメチルピリミジン−２−アミンを得た(０.３５ｇ, ２.５６mmol, 収率９０％)。これをさらに精製することなく用いた。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.89 (1 H, s), 6.19 (2 H, s), 2.18 (3 H, s), 1.99 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 0.56; [M+H]⁺ = 124.20。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジメチルピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジメチルピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４,５−ジメチルピリミジン−２−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.22 (1 H, s), 4.01 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.73 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.40 (1 H, d), 3.25 (1 H, d), 2.91 - 3.12 (4 H, m), 2.41 (3 H, s), 2.09 - 2.28 (5 H, m), 1.62 - 1.97 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.47; [M+H]⁺ = 288.31。

実施例４１
(Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−フェニルピリミジン−４−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(０.３２ｇ, ２.５mmol)、フェニルボロン酸(０.３８ｇ, ３.１３mmol)、飽和水性炭酸ナトリウム(０.８０ｇ, ７.５０mmol)および塩化ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(０.０３５ｇ, ０.０５mmol)の混合物を、ジメトキシエタン(１５ml)／エタノール(２ml)／水(２ml)の混合物に懸濁した。混合物を１２５℃で２０分間マイクロ波で加熱し、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(１０〜６０％酢酸エチル／ヘキサン)、６−フェニルピリミジン−４−アミンを灰白色の固体として得た(１６７mg, ０.９８mmol, 収率３９％)。
MS (LC/MS) R.T. = 0.99; [M+H]⁺ = 172.23。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−フェニルピリミジン−４−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 9.54 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.75 - 8.86 (2 H, m), 8.18 - 8.28 (3 H, m), 8.00 (1 H, br. s.), 4.70 (1 H, d, J=10.32 Hz), 4.43 (1 H, d, J=10.58 Hz), 3.72 - 3.88 (2 H, m), 3.41 - 3.63 (4 H, m), 2.63 - 2.87 (2 H, m), 2.18 - 2.48 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.36; [M+H]⁺ = 336.24。

実施例４２
(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−メトキシフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−メトキシフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−クロロピリミジン−４−アミンから、実施例４１の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.72 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.90 - 8.00 (2 H, m), 7.16 (1 H, br. s.), 6.96 - 7.05 (2 H, m), 4.04 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.84 (3 H, s), 3.73 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.22 (1 H, d), 3.09 (1 H, d), 2.73 - 2.98 (4 H, m), 2.02 - 2.21 (2 H, m), 1.51 - 1.85 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.44; [M+H]⁺ = 366.28。

実施例４３
(Ｒ)−Ｎ−(６−(６−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(６−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−クロロピリミジン−４−アミンから、実施例４１の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.79 (2 H, dd, J=19.01, 1.89 Hz), 8.27 (1 H, dd, J=8.56, 2.52 Hz), 7.18 (1 H, br. s.), 6.89 (1 H, d, J=8.81 Hz), 4.05 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.96 (3 H, s), 3.74 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.23 (1 H, d), 3.10 (1 H, d), 2.73 - 2.99 (4 H, m), 2.02 - 2.21 (2 H, m), 1.53 - 1.84 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.34; [M+H]⁺ = 367.25。

実施例４４
(Ｒ)−Ｎ−(６−(ナフタレン−２−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(ナフタレン−２−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−クロロピリミジン−４−アミンから、実施例４１の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.83 (1 H, s), 8.56 (1 H, s), 7.83 - 8.13 (4 H, m), 7.49 - 7.58 (2 H, m), 7.37 (1 H, br. s.), 4.06 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.76 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.23 (1 H, s), 3.12 (1 H, d), 2.75 - 3.00 (4 H, m), 2.02 - 2.24 (2 H, m), 1.56 - 1.84 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.93; [M+H]⁺ = 386.31。

表２の化合物を、実施例１の方法に従って、適切な市販のイソチオシアネートまたはアミンを用いて合成した。アミド含有中間体を、実施例３に記載された手順によって得た。

表２

表３の化合物を、実施例２１の工程Ｃ〜Ｄの方法に従って、適切なイソチオシアネートまたはアミンおよびラセミの３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩を用いて合成した。

表３

表３の化合物を、実施例２１の工程Ｃ〜Ｄの方法に従って、適切なイソチオシアネートまたはアミンおよび(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩を用いて合成した。

表３

実施例２１８
(Ｒ)−Ｎ−(６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−オール

メタノール(３０ml)中の４−メトキシ−３−オキソブタン酸メチル(３.５４ml, ２６.５mmol)の溶液に、ホルムアミジンアセテート(３.０７ｇ, ２９.２mmol)およびナトリウムメトキシド(１３ml, ５８.４mmol)を加えた。混合物を１８時間還流し、環境温度まで冷却し、濃縮した。残渣を水に溶かし、１ＮＨＣｌでｐＨを７に調節した。水性混合物をクロロホルムで抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−オールを得た(１.３８ｇ, ９.８５mmol, 収率３７.１％)。
MS (LC/MS) R.T. = 0.19; [M+H]⁺ = 141.20。

工程Ｂ：４−クロロ−６−(メトキシメチル)ピリミジン

６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−オール(１.３８ｇ, ９.８５mmol)をジクロロメタン(１４ml)に溶かし、オキシ塩化リン(９ml, ９７mmol)を環境温度で加えた。混合物を環境温度で１８時間撹拌し、濃縮した。残渣を氷水に溶かし、１Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨを７に調節した。混合物をクロロホルムで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(５〜１０％酢酸エチル／クロロホルム)、４−クロロ−６−(メトキシメチル)ピリミジンを薄黄色の油状物として得た(１.２ｇ, ７.５７mmol, 収率７７％)。これを静置すると固化した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.88 (1 H, d, J=1.01 Hz), 7.52 (1 H, d, J=1.01 Hz), 4.53 (2 H, s), 3.50 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 0.98; [M+H]⁺ = 159.10。

工程Ｃ：６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−アミン

４−クロロ−６−(メトキシメチル)ピリミジン(１.２ｇ, ７.５７mmol)および水酸化アンモニウム(２０ml)の混合物を、密封管中、３時間加熱した。混合物を、環境温度まで冷却し、濃縮した。残渣をエーテルで磨砕し、６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−アミンを薄黄色の固体として得た(０.５０ｇ, ３.５９mmol, 収率４８％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.47 (1 H, s), 6.55 (1 H, s), 5.12 (2 H, br. s.), 4.38 (2 H, s), 3.45 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 0.42; [M+H]⁺ = 140.20。

工程Ｄ：４−イソチオシアナト−６−(メトキシメチル)ピリミジン

１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.８４ｇ, ３.５９mmol)の明橙色の溶液に、ジクロロメタン中、環境温度で、６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−アミン(０.５ｇ, ３.５９mmol)を加えた。橙色の溶液を環境温度で１８時間撹拌した。溶液をカラムクロマトグラフィーによって精製し(０〜４０％酢酸エチル／ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−(メトキシメチル)ピリミジンを黄色の固体として得た(０.３２ｇ, １.７７mmol, 収率４９％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.91 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.19 (1 H, d, J=1.01 Hz), 4.52 (2 H, s), 3.49 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 1.39; [M+H]⁺ = 182.10。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ジメチルホルムアミド中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.３９ｇ, １.７１mmol)に、炭酸セシウム(１.３９ｇ, ４.２８mmol)および４−イソチオシアナト−６−(メトキシメチル)ピリミジン(０.３１ｇ, １.７１mmol)を加えた。懸濁液を環境温度で１５分間撹拌した。反応混合物に、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.８０ml, ５.１３mmol)を加え、混合物を一夜撹拌し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(酢酸エチル中５〜２５％９：１メタノール／水酸化アンモニウム)、(Ｒ)−Ｎ−(６−(メトキシメチル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(０.１８ｇ, ０.５８mmol, 収率３４％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.65 (1 H, d, J=1.01 Hz), 6.92 (1 H, br. s.), 4.40 (3 H, s), 4.03 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.72 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.44 (2 H, s), 3.18 - 3.26 (1 H, m), 3.06 - 3.13 (1 H, m), 2.69 - 2.96 (4 H, m), 1.94 - 2.19 (2 H, m), 1.45 - 1.86 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.76; [M+H]⁺ = 304.30。

実施例２１９
(Ｒ)−Ｎ−(５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：２−クロロ−５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の、２−クロロピリミジン−５−オール(１ｇ, ７.６６mmol)、クロロシクロペンタン(２.３９ml, ２２.９８mmol)および炭酸カリウム(３.１８ｇ, ２２.９８mmol)の混合物を、６５℃で１６時間環境温度で加熱した。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を、水で、そして塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(０〜２５％酢酸エチル／ヘキサン)、２−クロロ−５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジンを白色の固体として得た(８３１mg, ４.１８mmol, 収率５４.６％)。
MS (LC/MS) R.T. = 2.32; [M+H]⁺ = 199.23。

工程Ｂ：５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−２−アミン

５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−２−アミンを、２−クロロ−５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジンから、実施例２１８の工程Ｃの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.99 (2 H, s), 6.18 (2 H, s), 4.54 - 4.75 (1 H, m), 1.30 - 1.91 (8 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.47; [M+H]⁺ = 180.24。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、５−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−２−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.24 (2 H, s), 4.76 - 4.86 (1 H, m), 3.98 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.69 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.33 (1 H, d), 3.20 (1 H, d), 2.77 - 3.08 (4 H, m), 2.04 - 2.26 (2 H, m), 1.49 - 2.03 (11 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.56; [M+H]⁺ = 344.32。

表５の化合物を、実施例２１８の方法に従って、実施例２１８の工程Ｃのような適切な市販の塩化物を用いて合成した。

表４

実施例２２８
(Ｒ)−Ｎ−(６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロ−６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジン

テトラヒドロフラン(１２ml)中の２,２,２−トリフルオロエタノール(２.６１ｇ, ２６.１０mmol)の溶液を、テトラヒドロフラン(４８ml)中の水素化ナトリウム(１.３１ｇ, ３２.６０mmol)の懸濁液に、０℃で滴下した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、テトラヒドロフラン(１２ml)中の４,６−ジクロロピリミジン(３.６ｇ, ２４.１６mmol)の溶液を、０℃で加えた。反応混合物を環境温度で３時間撹拌し、飽和水性塩化アンモニウムに注ぎ、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空で濃縮した。橙色の残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(１０〜４０％酢酸エチル／ヘキサン)、４−クロロ−６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジンを薄黄色の油状物として得た(２.０ｇ, ２.４１mmol, 収率３８.９％)。
MS (LC/MS) R.T. = 2.78; [M+H]⁺ = 213.12。

工程Ｂ：６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジン−４−アミン

６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジン−４−アミンを、４−クロロ−６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジンから、実施例２１８の工程Ｃの一般的な手順に従って製造した。
MS (LC/MS) R.T. = 1.16; [M+H]⁺ = 194.07。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)ピリミジン−４−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.30 (1 H, br. s.), 8.39 (1 H, s), 6.38 (1 H, br. s.), 4.59 - 4.84 (2 H, m), 3.94 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.59 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.33 (1 H, d, J=16.62 Hz), 2.61 - 3.01 (5 H, m), 1.97 - 2.25 (2 H, m), 1.37 - 1.81 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.42; [M+H]⁺ = 358.33。

実施例２２９
(Ｒ)−Ｎ−(５−ブロモ−４−イソプロピルピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−イソプロピルピリミジン−２−アミン

４−イソプロピルピリミジン−２−アミンを、２−クロロ−４−イソプロピルピリミジンから、実施例２１８の工程Ｃの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) d ppm 8.10 (1 H, d, J=5.04 Hz), 6.45 (3 H, d, J=5.04 Hz), 2.59 - 2.80 (1 H, m), 1.15 (6 H, d, J=7.05 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 0.76; [M+H]⁺ = 138.12。

工程Ｂ：５−ブロモ−４−イソプロピルピリミジン−２−アミン

Ｎ−ブロモスクシンイミド(０.５ｇ, ２.８mmol)を、クロロホルム中の４−イソプロピルピリミジン−２−アミン(０.３９ｇ, ２.８１mmol)の溶液に加えた。得られた黄色の溶液を環境温度で１時間撹拌し、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(クロロホルム中３〜１０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム)、５−ブロモ−４−イソプロピルピリミジン−２−アミンを薄黄色の固体として得た(０.６９ｇ, ３.１８mmol, １１３％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.21 (1 H, s), 6.75 (2 H, s), 3.10 - 3.23 (1 H, m), 1.14 (6 H, d, J=6.80 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 2.58; [M]⁺ = 216.09。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(５−ブロモ−４−イソプロピルピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−ブロモ−４−イソプロピルピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、５−ブロモ−４−イソプロピルピリミジン−２−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.49 (1 H, s), 4.02 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.72 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.34 - 3.44 (1 H, m), 3.23 (1 H, s), 3.06 - 3.15 (1 H, m), 2.95 (2 H, t, J=7.55 Hz), 2.75 - 2.89 (2 H, m), 2.00 - 2.21 (2 H, m), 1.52 - 1.83 (3 H, m), 1.24 (6 H, d, J=6.80 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 1.84; [M+H]⁺ = 382.24。

実施例２３０
(Ｒ)−Ｎ−(５−ブロモ−４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−ブロモ−４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−アミンから、実施例２２９の工程Ｂ〜Ｃの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.92 (1 H, d, J=1.51 Hz), 8.73 (1 H, s), 8.64 (1 H, dd, J=4.91, 1.64 Hz), 8.23 (1 H, dt, J=8.06, 1.89 Hz), 7.56 (1 H, dd, J=7.93, 4.91 Hz), 4.00 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.69 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.22 (1 H, d), 3.07 (1 H, d), 2.60 - 2.99 (4 H, m), 2.00 - 2.21 (2 H, m), 1.50 - 1.83 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.76; [M+H]⁺ = 416.30。

実施例２３１
(Ｒ)−Ｎ−(６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロ−６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン

テトラヒドロフラン(１２ml)中のシクロペンタノール(２.２５ｇ, ２６.１mmol)の溶液を、テトラヒドロフラン(４８ml)中の水素化ナトリウム(１.３１ｇ, ３２.６mmol)の懸濁液に、０℃で滴下した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、テトラヒドロフラン(１２ml)中の４,６−ジクロロピリミジン(３.６ｇ, ２４.１６mmol)の溶液を、０℃で加えた。反応混合物を環境温度で３時間撹拌し、飽和水性塩化アンモニウムに注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空で濃縮した。有機残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製し(１０〜４０％酢酸エチル／ヘキサン)、４−クロロ−６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジンを薄黄色の油状物として得た。この物質を次の反応に直接用いた。

工程Ｂ：６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−４−アミン

６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−４−アミンを、４−クロロ−６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジンから、実施例２１８の工程Ｃの一般的な手順に従って製造した。
MS (LC/MS) R.T. = 1.64; [M+H]⁺ = 180.22。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、６−(シクロペンチルオキシ)ピリミジン−４−アミンから、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.37 (1 H, s), 6.16 (1 H, br. s.), 5.27 (1 H, br. s.), 3.98 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.67 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.15 - 3.24 (1 H, m), 3.02 - 3.12 (1 H, m), 2.71 - 2.97 (4 H, m), 2.01 - 2.14 (2 H, m), 1.87 - 2.00 (3 H, m), 1.49 - 1.84 (8 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.96; [M+H]⁺ = 344.34。

実施例２３２
(Ｒ)−Ｎ−(６−イソプロポキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−イソプロポキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４,６−ジクロロピリミジンから、実施例２３１の工程Ａ〜Ｃの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.37 (1 H, s), 6.13 (1 H, br. s.), 5.09 - 5.30 (1 H, m), 3.98 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.67 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.13 - 3.24 (1 H, m), 3.01 - 3.09 (1 H, m), 2.68 - 2.98 (4 H, m), 1.98 - 2.17 (2 H, m), 1.49 - 1.83 (3 H, m), 1.30 (6 H, d, J=6.04 Hz). MS (LC/MS) R.T. = 1.36; [M+H]⁺ = 318.24。

実施例２３３
(Ｒ)−Ｎ−(６−(２,２−ジフルオロエトキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(２,２−ジフルオロエトキシ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４,６−ジクロロピリミジンから、実施例２３１の工程Ａ〜Ｃの一般的な手順に従って製造した。
融点 83〜8℃. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.42 (1 H, s), 5.93 - 6.37 (2 H, m), 4.52 (2 H, td, J=13.98, 3.78 Hz), 3.99 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.68 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.19 (1 H, d), 3.07 (1 H, d), 2.67 - 2.97 (4 H, m), 1.99 - 2.19 (2 H, m), 1.51 - 1.82 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.99; [M+H]⁺ = 340.26。

実施例２３４
(Ｒ)−Ｎ−(ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(実施例１５５より)から、実施例１９の工程Ｃの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.26 (d, J=4.88 Hz, 1 H), 7.58 - 7.74 (m, 1 H), 6.85 - 7.02 (m, 2 H), 4.00 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.70 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.26 - 3.35 (m, 1 H), 3.14 - 3.21 (m, 1 H), 3.02 (d, J=8.24 Hz, 2 H), 2.84 - 2.97 (m, 2 H), 2.11 - 2.25 (m, 2 H), 1.58 - 1.92 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.30; [M+H]⁺ = 259.16。

実施例２３５
(Ｒ)−Ｎ−(ピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(ピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、(Ｒ)−Ｎ−(２−ブロモピリジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(実施例１５４より)から、実施例１９の工程Ｃの手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ ppm 8.31 (d, J=6.41 Hz, 2 H), 7.39 (d, J=3.97 Hz, 2 H), 4.01 (d, J=12.21 Hz, 1 H), 3.70 (d, J=11.90 Hz, 1 H), 3.37 (s, 1 H), 3.29 (s, 1 H), 3.18 (d, J=1.83 Hz, 1 H), 3.15 (d, J=2.14 Hz, 1 H), 2.86 - 3.09 (m, 3 H), 2.02 - 2.20 (m, 1 H), 1.59 - 1.88 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.22; [M+H]⁺ = 259.16。

実施例２３６
(Ｒ)−Ｎ−(５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン

チオシアン酸カリウム(１２.４２ｇ, １２８mmol)を酢酸(４５.０ml)に懸濁し、０℃に冷却した。国際公開公報第2006/044707号に従って製造した６−(ベンジルオキシ)ピリジン−３−アミン(３.２ｇ, １５.９８mmol)を加えた。酢酸(１５ml)中の臭素(２.５５ml, ４９.５mmol)を３０分かけて滴下し、その間に反応混合物は非常に濃厚になった。それをゆっくりと室温まで温め、一夜撹拌した。水(２０ml)を加え、反応混合物を９０℃に加熱し、熱濾過した。濾液を残して、フィルターケーキを反応フラスコに戻し、これにさらに４０mlのＨＯＡｃを加えた。混合物を再度９０℃に加熱し、熱濾過した。合わせた濾液を氷浴で冷却し、ｐＨ＞８になるまでＮＨ_４ＯＨを滴下した。黄色の沈殿物が形成し、これを濾過によって集めた。固体を真空で１時間乾燥させ、５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミンを得た(１.９５ｇ, ７.５８mmol, 収率４７.４％)。これをさらに精製することなく用いた。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.70 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.48 (d, J=7.28 Hz, 2 H) 7.39 (t, J=7.28 Hz, 2 H) 7.30 - 7.36 (m, 1 H) 6.78 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 5.39 (s, 2 H) 5.14 (br. s., 2 H)。

工程Ｂ：５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(３.１ml)中の５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン(８００mg, ３.１１mmol)の懸濁液に、２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(０.３ml, ６.２２mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で、二硫化炭素(０.４７ml, ７.７７mmol)を加え、混合物を１０分間撹拌した。さらに２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(０.３ml, ６.２２mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最終的にヨードメタン(０.４７ml, ７.４６mmol)を滴下した。混合物を１時間撹拌し、この時点で、それを水に注ぎ、ＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製の混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(２〜２０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３)、５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを黄色の結晶性固体として得た(１.０２ｇ, 収率９１％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.02 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=7.28 Hz, 2 H) 7.38 - 7.45 (m, 2 H) 7.32 - 7.38 (m, 1 H) 6.89 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 5.46 (s, 2 H) 2.65 (s, 6 H)。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(７ml)中の、５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(５００mg, １.３８mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(３１７mg, １.３８mmol)および炭酸セシウム(１.０ｇ, ３.０７mmol)の混合物を、１００℃で２時間加熱した。反応混合物を環境温度まで冷却し、水に注ぎ、クロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(２〜２０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−クロロホルム)、(Ｒ)−Ｎ−(５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(３９０mg, 収率６７％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.18 (br. s., 1 H) 7.76 (d, J=8.85 Hz, 1 H) 7.50 (d, J=7.32 Hz, 2 H) 7.41 (t, J=7.32 Hz, 2 H) 7.32 - 7.37 (m, 1 H) 5.42 (s, 2 H) 4.02 (d, J=9.46 Hz, 1 H) 3.68 (d, J=9.46 Hz, 1 H) 3.37 - 3.44 (m, 1 H) 2.75 - 3.06 (m, 5 H) 2.13 - 2.25 (m, 2 H) 1.73 - 1.82 (m, 1 H) 1.49 - 1.70 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.69; [M+H]⁺ = 421.98。

実施例２３７
(Ｒ)−２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−５(４Ｈ)−オン

(Ｒ)−Ｎ−(５−(ベンジルオキシ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(３９０mg, ０.９２５mmol)をＴＦＡに溶解し、環境温度で４時間反応させた。この時点で、ＬＣＭＳおよびＴＬＣにより、出発物質がほとんど消費されたことが示された。ＴＦＡを真空で除去し、粗製の混合物を分取ＨＰＬＣによって精製した。合わせた生成物のフラクションを真空で濃縮し、エーテルで磨砕し、(Ｒ)−２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−５(４Ｈ)−オンのＴＦＡ塩を得た(１６４mg, ０.３６８mmol, 収率３９.８％)。
融点 245℃(分解). ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.99 (br. s., 1 H) 9.05 (br. s., 1 H) 7.81 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 6.65 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 3.96 (d, J=10.29 Hz, 1 H) 3.82 (d, J=10.54 Hz, 1 H) 3.63 - 3.78 (m, 2 H) 3.36 - 3.47 (m, 1 H) 3.16 - 3.34 (m, 3 H) 2.43 (br. s., 1 H) 2.16 (br. s., 1 H) 1.76 - 2.07 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.50; [M+H]⁺ = 332.15。

実施例２３８
(Ｒ)−Ｎ−(６−(３−メトキシフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(３−メトキシフェニル)ピリミジン−４−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(０.３２４ｇ, ２.５mmol)、３−メトキシフェニルボロン酸(０.４７５ｇ, ３.１３mmol)、Ｎａ_２ＣＯ_３(０.７９５ｇ, ７.５０mmol)および塩化ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(０.０３５ｇ, ０.０５０mmol)の混合物を、ＤＭＥ／ＥｔＯＨ／水(１５：２：３ml)に懸濁し、マイクロ波合成装置中で、１２５℃で２０分間加熱し、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(１０〜６０％酢酸エチル−ヘキサン)、６−(３−メトキシフェニル)ピリミジン−４−アミンを灰白色の固体として得た(０.３５ｇ, １.７４mmol, 収率７０％)。
LCMS R.T. = 1.28; [M+H]⁺ = 201.98。

工程Ｂ：４−イソチオシアナト−６−(３−メトキシフェニル)ピリミジン

ジクロロメタン中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.９７０ｇ, ４.１７mmol)の溶液に、室温で、６−(３−メトキシフェニル)ピリミジン−４−アミン(０.７ｇ, ３.４８mmol)を加えた。反応物を室温で１８時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、主要なピークとして望ましい生成物のピークが示された。深橙色の溶液を濃縮し、残った残渣を濾過した。濾液をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜１０％酢酸エチル−ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−(３−メトキシフェニル)ピリミジンを黄色の油状物として得た(０.３９ｇ, ４.３１mmol, 収率４６％)。
LCMS R.T. = 2.91; [M+H]⁺ = 244.03。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(３−メトキシフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.３６３ｇ, １.５８３mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(１.２８９ｇ, ３.９６mmol)および４−イソチオシアナト−６−(３−メトキシフェニル)ピリミジンを加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.７４０ml, ４.７５mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌し続けた。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを薄黄色の溶液として得た(０.２９４ｇ, ０.７８８mmol, 収率５０％)。
融点 80〜5℃. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.77 (1 H, s), 7.47 - 7.58 (2 H, m), 7.39 (1 H, t), 7.20 (1 H, br. s.), 7.04 (1 H, dd), 4.05 (1 H, d), 3.85 (3 H, s), 3.74 (1 H, d), 3.23 (1 H, d), 3.10 (1 H, d), 2.71 - 3.00 (4 H, m), 2.03 - 2.22 (2 H, m), 1.53 - 1.85 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.58; [M+H]⁺ = 366.15。

実施例２３９
(Ｒ)−Ｎ−(イソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３−イソチオシアナトイソキノリン

ジクロロメタン中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.８０５ｇ, ３.４７mmol)の溶液に、室温で、イソキノリン−３−アミン(０.５ｇ, ３.４７mmol)を加えた。反応物を室温で１８時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、主要なピークとして望ましい生成物のピークが示された。深橙色の溶液を濃縮し、濾過した。濾液をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜４０％酢酸エチル−ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−(３−メトキシフェニル)ピリミジンを白色の固体として得た(０.５５ｇ, ２.９６mmol, 収率８５％)。
LCMS R.T. = 2.47; [M+H]⁺ = 187.23。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(イソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.２ｇ, ０.８７３mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.７１１ｇ, ２.１８２mmol)および３−イソチオシアナトイソキノリン(０.１６３ｇ, ０.８７３mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.４０８ml, ２.６２mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(イソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを灰白色の固体として得た(０.１６ｇ, ０.５０８mmol, 収率５８％)。
融点 196〜200℃. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.00 (1 H, s), 7.92 (1 H, d), 7.71 (1 H, d), 7.59 (1 H, t), 7.20 - 7.45 (2 H, m), 3.96 (1 H, d), 3.65 (1 H, d), 3.22 (1 H, d), 3.08 (1 H, d), 2.66 - 3.00 (4 H, m), 2.05 - 2.23 (2 H, m), 1.50 - 1.86 (3 H, m). R.T. = 1.37; [M+H]⁺ = 309.31。

実施例２４０
(Ｒ)−Ｎ−(６−フェノキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−フェノキシピリミジン−４−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(３.００ｇ, ２３.１４mmol)を、フェノール(１１.２９ｇ, １２０mmol)中のナトリウム(０.１９７ｇ, ８.５７mmol)の溶液に、５５℃で加えた。混合物を１４０℃で２時間加熱し、室温で２０時間維持した。反応混合物を、氷／水上で、混合物の温度を２０℃未満に保ちながら、３２％水性ＮａＯＨに注いだ。混合物をクロロホルムで抽出し、有機抽出物を塩化カルシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中２〜２０％酢酸エチル)、６−フェノキシピリミジン−４−アミンを白色の固体として得た(０.６ｇ, ３.２１mmol, 収率７５％)。
LCMS R.T. = 1.37; [M+H]⁺ = 197.95。

工程Ｂ：４−イソチオシアナト−６−フェノキシピリミジン

ＤＣＭ中の６−フェノキシピリミジン−４−アミン(０.２８８ｇ, １.５３８mmol)および１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.３５７ｇ, １.５３８mmol)の混合物を、室温で１８時間撹拌した。薄橙色の混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜３５％酢酸エチル−ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−フェノキシピリミジンを黄色の油状物として得た(０.５５ｇ, ２.９６mmol, 収率８５％)。
LCMS R.T. = 2.78; [M+H]⁺ = 229.94。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−フェノキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１７０ｇ, ０.７４２mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.６０４ｇ, １.８５４mmol)および４−イソチオシアナト−６−フェノキシピリミジン(０.１７ｇ, ０.７４２mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.３４７ml, ２.２２５mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌し続けた。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(６−フェノキシピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを薄黄色の固体として得た(０.２１ｇ, ０.７２mmol, 収率４８.２％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.43 (1 H, s), 7.47 (2 H, t), 7.30 (1 H, t), 7.16 (2 H, d), 6.21 (1 H, br. s.), 4.03 (1 H, d), 3.72 (1 H, d), 3.22 (1 H, d), 3.11 (1 H, d), 2.73 - 2.99 (4 H, m), 2.00 - 2.18 (2 H, m), 1.54 - 1.88 (3 H, m). LCMS R.T. = 1.46; [M+H]⁺ = 352.19。

実施例２４１
(Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−７−メトキシキノキサリン−２−アミン

J. Chem. Soc. Perk Trans. 1, 2001, 978-984に従って製造した２−クロロ−７−メトキシキノキサリン(０.５１ｇ, ２.６２mmol)、および、(２,４−ジメトキシフェニル)メタンアミン(１.１８１ml, ７.８６mmol)を、ＤＭＳＯ(２.５ml)中で、１５０℃で３０分間マイクロ波照射した。これを１５０mlのＥｔＯＡｃで希釈し、１００mlの塩水で３回抽出した。粗生成物を、９０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中２０〜８０％ＥｔＯＡｃ、５０分、４０ml/分でフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−７−メトキシキノキサリン−２−アミンを得た(７９５mg, ２.４４３mmol, 収率９３％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.00 (1 H, s), 7.70 (1 H, d, J=8.81 Hz), 7.29 (1 H, d, J=8.31 Hz), 7.05 (1 H, d, J=2.77 Hz), 6.97 (1 H, dd, J=9.06, 2.77 Hz), 6.47 (1 H, d, J=2.27 Hz), 6.43 (1 H, dd, J=8.18, 2.39 Hz), 5.22 (1 H, t, J=5.29 Hz), 4.63 (2 H, d, J=5.54 Hz), 3.91 (3 H, s), 3.83 (3 H, s), 3.78 (3 H, s). LCMS: RT = 1.91分, MH⁺ = 326.15。

工程Ｂ：７−メトキシキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテート

Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−７−メトキシキノキサリン−２−アミン(０.７９ｇ, ２.４２８mmol)を、ＴＦＡ(１０ml, １３０mmol)／ＣＨ_２Ｃｌ_２(１０ml)中で、室温で３０分間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。飽和水性ＮａＨＣＯ_３(２００ml)を赤色の残渣に加えると、黄色の固体が沈殿した。混合物を大量のＤＣＭで抽出した。有機層を濃縮し、真空で乾燥させ、７−メトキシキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテートを得た(０.７０ｇ, ２.４mmol, 収率９９％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.10 (1 H, s), 7.63 (1 H, d, J=9.07 Hz), 6.95 (1 H, dd, J=9.06, 2.77 Hz), 6.89 (1 H, d, J=2.77 Hz), 6.85 (2 H, br. s.), 3.84 (3 H, s). LCMS: RT = 1.04 分, MH⁺ = 176.14。

工程Ｃ：２−イソチオシアナト−７−メトキシキノキサリン

７−メトキシキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテート(５７８mg, ２mmol)、トリエチルアミン(３３５μｌ, ２.４００mmol)および１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(５５７mg, ２.４００mmol)の混合物を、５mlのＤＣＭ中で２４時間撹拌した。反応物を、１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ、２５分、３５ml/分で直接溶出し、２−イソチオシアナト−７−メトキシキノキサリンを得た(８４mg, ０.３８７mmol, 収率１９％)。
LCMS: RT = 2.49分, MH⁺ = 218.06。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ｂの方法によって合成した。フラッシュクロマトグラフィーを、１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＣＨＣｌ_３中１〜４％ [９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]、５０分で行い、２４mgを得た(収率１７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.73 (1 H, br. s.), 8.45 (1 H, s), 7.80 (1 H, d, J=9.07 Hz), 7.12 (1 H, dd, J=9.06, 2.77 Hz), 7.03 (1 H, d, J=2.52 Hz), 4.02 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.90 (3 H, s), 3.67 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.36 (1 H, dd, J=14.86, 1.51 Hz), 2.69 - 3.06 (5 H, m), 2.10 - 2.26 (2 H, m), 1.66 - 1.80 (1 H, m), 1.43 - 1.63 (2 H, m). LCMS: RT = 0.835分, MH^- = 338.2, MH⁺ = 340.1。

実施例２４２
(Ｒ)−Ｎ−(６−メチルキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−６−メチルキノキサリン−２−アミン

J. Chem. Soc. 1948 ,1310-1313に従って製造した２−クロロ−６−メチルキノキサリン(０.５１ｇ, ２.８６mmol)、および、(２,４−ジメトキシフェニル)メタンアミン(１.２９ml, ８.５７mmol)を、ＤＭＳＯ(２.５ml)中、１５０℃で３０分間マイクロ波照射した。これを１５０mlのＥｔＯＡｃで希釈し、１００mlの塩水で３回抽出した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーによって、９０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中２０〜６０％ＥｔＯＡｃ、５０分、４０ml/分で精製し、Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−６−メチルキノキサリン−２−アミンを得た(８４８mg, ２.７４mmol, 収率９６％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.12 (1 H, s), 7.60 (1 H, s), 7.59 (1 H, d, J=5.79 Hz), 7.38 (1 H, dd, J=8.56, 1.76 Hz), 7.30 (1 H, d, J=8.31 Hz), 6.46 (1 H, d, J=2.27 Hz), 6.42 (1 H, dd, J=8.18, 2.39 Hz), 5.20 (1 H, t, J=5.41 Hz), 4.62 (2 H, d, J=5.54 Hz), 3.83 (3 H, s), 3.77 (3 H, s), 2.46 (3 H, s). LCMS: RT = 1.93分, MH⁺ = 310.20。

工程Ｂ：６−メチルキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテート

Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−６−メチルキノキサリン−２−アミン (０.８４ｇ, ２.７２mmol)を、ＴＦＡ(１０ml, １３０mmol)／ＣＨ_２Ｃｌ_２(１０ml)中で、室温で３０分間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。飽和水性Ｎａ_２ＣＯ_３(２００ml)を赤色の残渣に加えると、黄褐色の固体が沈殿した。混合物を大量のＤＣＭで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、真空で乾燥させ、６−メチルキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテートを得た(６４０mg, ２.３４３mmol, 収率８６％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.24 (1 H, s), 7.55 (1 H, s), 7.34 - 7.45 (2 H, m), 6.82 (2 H, s), 2.41 (3 H, s). LCMS: RT = 1.07 分, MH⁺ = 160.12。

工程Ｃ：２−イソチオシアナト−６−メチルキノキサリン

６−メチルキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテート(５４６mg, ２mmol)、トリエチルアミン(２４３mg, ２.４００mmol)および１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(５５７mg, ２.４０mmol)の混合物を、５mlのＤＣＭ中で４時間撹拌した。反応物を、直接、１２０ｇのシリカゲルのカートリッジから、ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ、２５分、３５ml/分で溶出し、２−イソチオシアナト−６−メチルキノキサリンを得た(１５３mg, ０.７６０mmol, 収率３８％)。
LCMS: RT = 2.59分, MH⁺ = 202.04。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−メチルキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−メチルキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ｂの方法によって合成した。１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＣＨＣｌ_３中１〜４％ [９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]、５０分でフラッシュクロマトグラフィーを行い、４６mgを得た(収率１９％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.75 (1 H, br. s.), 8.57 (1 H, s), 7.71 (1 H, s), 7.60 (1 H, d, J=8.56 Hz), 7.42 (1 H, dd, J=8.44, 1.89 Hz), 4.01 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.68 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.38 (1 H, dd, J=14.86, 1.01 Hz), 2.73 - 3.08 (5 H, m), 2.50 (3 H, s), 2.16 - 2.26 (1 H, m), 2.14 (1 H, br. s.), 1.67 - 1.79 (1 H, m), 1.45 - 1.65 (2 H, m). LCMS: RT = 0.838分, MH^- = 322.2, MH⁺ = 324.2。

実施例２４３
(Ｒ)−Ｎ−(７−メチルキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−７−メチルキノキサリン−２−アミン

J. Chem. Soc. 1948, 1310-1313に従って製造した２−クロロ−７−メチルキノキサリン(０.５１ｇ, ２.８６mmol)、および、(２,４−ジメトキシフェニル)メタンアミン(１.２９ml, ８.５７mmol)に、ＤＭＳＯ(２.５ml)中、１５０℃で３０分間マイクロ波照射した。これを１５０mlのＥｔＯＡｃで希釈し、１００mlの塩水で３回抽出した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーによって、９０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中２０〜８０％ＥｔＯＡｃ、５０分、４０ml/分で精製し、Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−７−メチルキノキサリン−２−アミンを得た(８６０mg, ２.７８mmol, 収率９７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.08 (1 H, s), 7.70 (1 H, d, J=8.31 Hz), 7.49 (1 H, s), 7.30 (1 H, d, J=8.06 Hz), 7.17 (1 H, dd, J=8.31, 2.01 Hz), 6.47 (1 H, d, J=2.52 Hz), 6.42 (1 H, dd, J=8.31, 2.52 Hz), 5.23 (1 H, t, J=5.16 Hz), 4.63 (2 H, d, J=5.79 Hz), 3.83 (3 H, s), 3.78 (3 H, s), 2.48 (3 H, s). LCMS: RT = 1.93分, MH⁺ = 310.20。

工程Ｂ：７−メチルキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテート

Ｎ−(２,４−ジメトキシベンジル)−７−メチルキノキサリン−２−アミン(０.８５ｇ, ２.７５mmol)を、ＴＦＡ(１０ml, １３０mmol)／ＣＨ_２Ｃｌ_２(１０ml)中で、室温で３０分間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。飽和水性ＮａＨＣＯ_３(２００ml)を赤色の残渣に加えると、桃色の固体が沈殿した。混合物を大量のＤＣＭで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、真空下で乾燥させ、７−メチルキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテートを得た(６４０mg, ２.３４mmol, 収率８５％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.20 (1 H, s), 7.64 (1 H, d, J=8.31 Hz), 7.28 (1 H, s), 7.15 (1 H, dd, J=8.31, 1.76 Hz), 6.89 (2 H, s), 2.42 (3 H, s). LCMS: RT = 1.07分, MH⁺ = 160.12。

工程Ｃ：２−イソチオシアナト−６−メチルキノキサリン

７−メチルキノキサリン−２−アミン２,２,２−トリフルオロアセテート(５４６mg, ２mmol)(78263-058-01)、トリエチルアミン(２４３mg, ２.４０mmol)および１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(５５７mg, ２.４０mmol)の混合物を、５mlのＤＣＭ中で２時間撹拌した。反応物を、直接、１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ、２５分、３５ml/分で溶出し、２−イソチオシアナト−７−メチルキノキサリンを得た(１８５mg, ０.９１９mmol, 収率４６％)。
LCMS: RT = 2.58分, MH⁺ = 202.04。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(７−メチルキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(７−メチルキノキサリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ｂの方法によって合成した。１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＣＨＣｌ_３中１〜３％ [９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]、５０分でフラッシュクロマトグラフィーを行い、２２mgを得た(収率７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.80 (1 H, br. s.), 8.53 (1 H, s), 7.81 (1 H, d, J=8.31 Hz), 7.50 (1 H, s), 7.31 (1 H, dd, J=8.56, 1.76 Hz), 4.01 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.66 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.36 (1 H, d, J=14.86 Hz), 2.70 - 3.04 (5 H, m), 2.50 (3 H, s), 2.15 - 2.24 (1 H, m), 2.13 (1 H, br. s.), 1.66 - 1.79 (1 H, m), 1.44 - 1.63 (2 H, m). LCMS: RT = 8.67分, MH^- = 322.6, MH⁺ = 324.1。

実施例２４４
(Ｒ)−Ｎ−(６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(０.３２４ｇ, ２.５mmol)、ピリジン−３−イルボロン酸(０.３８４ｇ, ３.１３mmol)、Ｎａ_２ＣＯ_３(０.７９５ｇ, ７.５０mmol)および塩化ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(０.０３５ｇ, ０.０５０mmol)の混合物を、ＤＭＥ／ＥｔＯＨ／水の混合物に懸濁した。混合物を、マイクロ波合成機中で、１２５℃で２０分間加熱し、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中１０〜６０％酢酸エチル、次に５〜２５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミンを灰白色の固体として得た(０.１７ｇ, ０.９８７mmol, 収率４０％)。
LCMS R.T. = 0.31; [M+H]⁺ = 173.11。

工程Ｂ：４−イソチオシアナト−６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン

ジクロロメタン／Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.６８２ｇ, ２.９４mmol)の溶液に、室温で、６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミン(０.３３７ｇ, １.９５７mmol)を加えた。混合物を６０℃で１８時間加熱した。ＬＣ／ＭＳにより、望ましい生成物のピークが主要なピークとして示された。深橙色の混合物を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(１〜４０％酢酸エチル−ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−メトキシピリミジンを橙色の油状物として得た(０.１２ｇ, ０.５６mmol, 収率２８.６％)。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１３ｇ, ０.５６０mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.４６ｇ, １.４mmol)および４−イソチオシアナト−６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン(０.１２ｇ, ０.５６mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２６ml, １.７mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜１０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−酢酸エチル)、(Ｓ)−Ｎ−(５−クロロピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを灰白色の固体として得た(０.１８２ｇ, ０.６１３mmol, 収率３５％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.13 - 9.21 (1 H, m), 8.82 (1 H, d), 8.63 (1 H, dd), 8.44 (1 H, dt), 7.56 (1 H, dd), 7.31 (1 H, s), 4.06 (1 H, d), 3.76 (1 H, d), 3.20 - 3.28 (1 H, m), 3.08 - 3.16 (1 H, m), 2.72 - 3.01 (4 H, m), 2.00 - 2.24 (2 H, m), 1.52 - 1.83 (3 H, m). LCMS R.T. = 0.72; [M+H]⁺ = 337.2。

実施例２４５
(Ｒ)−Ｎ−(２'−メトキシ−４,５'−ビピリミジン−６−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：２'−メトキシ−４,５'−ビピリミジン−６−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(０.３５ｇ, ２.７０mmol)、２−メトキシピリミジン−５−イルボロン酸(０.５２０ｇ, ３.３８mmol)、Ｎａ_２ＣＯ_３(０.８５９ｇ, ８.１１mmol)および塩化ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(０.０３８ｇ, ０.０５４mmol)を、ＤＭＥ／ＥｔＯＨ／水の混合物(１５：２：３ml)に懸濁した。混合物を、マイクロ波合成機中で、１２５℃で２０分間加熱し、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミンを灰白色の固体として得た(０.２８ｇ, １.３７８mmol, 収率５１％)。
LCMS R.T. = 0.53; [M+H]⁺ = 204.11。

工程Ｂ：６−イソチオシアナト−２'−メトキシ−４,５'−ビピリミジン

ジクロロメタン／Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.８３２ｇ, ３.５８mmol)の溶液に、室温で、２'−メトキシ−４,５'−ビピリミジン−６−アミン(０.５６ｇ, ２.７６mmol)を加えた。橙色の混合物を６０℃で１８時間加熱した。ＬＣ／ＭＳにより、望ましい生成物のピークが主要なピークとして示された。深橙色の混合物を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜４０％酢酸エチル−ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−メトキシピリミジンを橙色の固体として得た(０.１ｇ, ０.４０８mmol, 収率１５％)。
LCMS R.T. = 2.29; [M+H]⁺ = 246.03。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(２'−メトキシ−４,５'−ビピリミジン−６−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.０９３ｇ, ０.４１mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.３３ｇ, １mmol)および６−イソチオシアナト−２'−メトキシ−４,５'−ビピリミジン(０.１ｇ, ０.４１mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.１９ml, １.２mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(２'−メトキシ−４,５'−ビピリミジン−６−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを灰白色の固体として得た(０.０７２ｇ, ０.１８８mmol, 収率４６％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.19 (2 H, s), 8.80 (1 H, d), 7.24 (1 H, br. s.), 4.00 - 4.09 (4 H, m), 3.76 (1 H, d), 3.23 (1 H, s), 3.08 - 3.15 (1 H, m), 2.72 - 3.04 (4 H, m), 1.97 - 2.22 (2 H, m), 1.38 - 1.85 (3 H, m). R.T. = 1.22; [M+H]⁺ = 368.22。

実施例２４６
(Ｒ)−Ｎ−(６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン−４−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(０.３２４ｇ, ２.５mmol)、ピリジン−４−イルボロン酸(０.３８４ｇ, ３.１３mmol)、Ｎａ_２ＣＯ_３(０.７９５ｇ, ７.５０mmol)および塩化ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(０.０３５ｇ, ０.０５０mmol)を、ＤＭＥ／ＥｔＯＨ／水(１５：２：３ml)の混合物に懸濁した。混合物を、マイクロ波合成機中で、１２５℃で２０分間加熱し、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−酢酸エチル)、６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミンを灰白色の固体として得た(０.１５ｇ, ０.８７１mmol, 収率３５％)。
LCMS R.T. = 0.30; [M+H]⁺ = 173.11。

工程Ｂ：４−イソチオシアナト−６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン

ジクロロメタン／Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.６０１ｇ, ２.５９mmol)の溶液に、室温で、６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン−４−アミン(０.２９７ｇ, １.７２５mmol)を加えた。橙色の混合物を６０℃で１８時間加熱した。ＬＣ／ＭＳにより、望ましい生成物のピークが主要なピークとして示された。深橙色の混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜４０％酢酸エチル−ヘキサン)、４−イソチオシアナト−６−(ピリジン−４−イル)ピリミジンを橙色の固体として得た(０.０５５ｇ, ０.２５７mmol, 収率１５％)。
LCMS R.T. = 1.46; [M+H]⁺ = 215.09。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１５ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.０５９ｇ, ０.２５７mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.２０９ｇ, ０.６４２mmol)および４−イソチオシアナト−６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン(０.０５５ｇ, ０.２５７mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.１２ml, ０.７７mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌し続けた。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜１０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色のフィルム状物質として得た(０.０１４ｇ, ０.０４mmol, 収率１６％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.85 (1 H, d), 8.67 (2 H, dd), 8.04 (2 H, dd), 7.34 (1 H, br. s.), 4.06 (1 H, d), 3.76 (1 H, d), 3.23 (1 H, d), 3.10 (1 H, d), 2.70 - 2.99 (4 H, m), 2.01 - 2.22 (2 H, m), 1.53 - 1.86 (3 H, m). LCMS R.T. = 0.42; [M+H]⁺ = 337.14。

実施例２４７
(Ｒ)−６−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)−２−メチルニコチノニトリル

工程Ａ：６−イソチオシアナト−２−メチルニコチノニトリル

ジクロロメタン(２０ml)中の６−アミノ−２−メチルニコチノニトリル(０.４１ｇ, ３.０８mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.７５ｇ, ３.２３mmol)を加えた。反応物を４０℃で３時間撹拌した。反応物を室温まで冷却した。粗製の物質をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ２５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、６−イソチオシアナト−２−メチルニコチノニトリルを得た(０.５２ｇ, ２.９７mmol, 収率９６％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.36 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 7.39 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 2.65 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.09; [M+H]⁺ = 176.0。

工程Ｂ： (Ｒ)−６−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)−２−メチルニコチノニトリル

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の６−イソチオシアナト−２−メチルニコチノニトリル(０.２５ｇ, １.４３mmol)に、トリエチルアミン(０.５ml, ３.６６６mmol)および３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.３３ｇ, １.４６mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製の尿素をクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.６７ml, ４.２８mmol)で処理した。反応物を７０℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−６−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)−２−メチルニコチノニトリルを白色の粉末として得た(０.０９ｇ, ０.３mmol, 収率２１％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 9.11 (s, 1 H), 7.87 (d, J=7.93 Hz, 2 H), 6.69 (s, 1 H), 3.89 (d, J=10.38 Hz, 2 H), 3.63 (d, J=10.38 Hz, 3 H), 3.00 (s, 5 H), 2.72 - 2.80 (m, 4 H), 2.64 - 2.69 (m, 5 H), 2.60 (s, 7 H), 2.00 (d, J=2.14 Hz, 3 H), 1.91 (s, 1 H), 1.87 (s, 2 H), 1.58 (s, 5 H), 1.42 - 1.50 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.48; [M+H]⁺ = 298.13。

実施例２４８
(Ｒ)−６−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)−２,４−ジメチルニコチノニトリル

工程Ａ：６−イソチオシアナト−２,４−ジメチルニコチノニトリル

ジクロロメタン(２０ml)中の６−アミノ−２,４−ジメチルニコチノニトリル(０.１４ｇ, ０.９５mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.２３ｇ, ０.１mmol)を加えた。反応物を４０℃で３時間撹拌した。反応物を室温まで冷却した。粗製の物質をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ２５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、６−イソチオシアナト−２,４−ジメチルニコチノニトリルを得た(０.１５ｇ, ０.７９mmol, 収率８３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 7.37 (s, 1 H), 2.63 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.40; [M+H]⁺ = 190。

工程Ｂ： (Ｒ)−６−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)−２,４−ジメチルニコチノニトリル

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の６−イソチオシアナト−２,４−ジメチルニコチノニトリル(０.０９ｇ, ０.４８mmol)に、トリエチルアミン(０.１７ml, １.１９mmol)および３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１１ｇ, ０.４９mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２２ml, １.４３mmol)で処理した。反応物を７０℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−６−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)−２,４−ジメチルニコチノニトリルを白色の粉末として得た(０.１０ｇ, ０.３２mmol, 収率６６％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 9.08 (s, 1 H), 6.60 (s, 1 H), 3.88 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 3.61 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 2.98 (s, 2 H), 2.70 - 2.79 (m, 2 H), 2.63 - 2.69 (m, 2 H), 2.55 - 2.60 (m, 4 H), 2.31 - 2.39 (m, 4 H), 1.99 (s, 1 H), 1.89 (s, 1 H), 1.54 - 1.62 (m, 2 H), 1.41 - 1.49 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.78; [M+H]⁺ = 312.1。

実施例２４９
(Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３−イソチオシアナト−６−フェニルピリダジン

３−イソチオシアナト−６−フェニルピリダジンを、実施例２３の工程Ｂの方法によって合成した。１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ、２５分、３５ml/分でフラッシュクロマトグラフィーを行い、４２０mgを得た(収率４９％)。
LCMS: RT = 2.17分, MH⁺ = 214.06。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ｂの方法によって合成した。１６０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＣＨＣｌ_３中１〜４％ [９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]、５０分、４０ml/分で、フラッシュクロマトグラフィーを行い、６７mgの(Ｒ)−Ｎ−(６−フェニルピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(収率１７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.61 (1 H, br. s.), 7.95 - 7.99 (2 H, m), 7.74 (1 H, d, J=9.32 Hz), 7.39 - 7.52 (3 H, m), 7.22 (1 H, partial d), 3.97 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.64 (1 H, d, J=9.32 Hz), 3.37 (1 H, dd, J=14.73, 1.38 Hz), 2.69 - 3.06 (5 H, m), 2.16 - 2.26 (1 H, m), 2.14 (1 H, br. s.), 1.66 - 1.79 (1 H, m), 1.45 - 1.60 (2 H, m)
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 7.87 - 8.02 (3 H, m), 7.44 - 7.55 (3 H, m), 7.13 - 7.29 (1 H, m), 4.05 (1 H, d, J=9.82 Hz), 3.74 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.17 (2 H, dd, J=49.35, 14.60 Hz), 2.73 - 3.04 (4 H, m), 2.16 (2 H, br. s.), 1.55 - 1.85 (3 H, m)
LCMS: RT = 0.82分, MH^- = 334.2, MH⁺ = 336.2。

実施例２５０
(Ｒ)−Ｎ−(５−(メチルチオ)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−(メチルチオ)ピラジン−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の５−ブロモピラジン−２−アミン(２ｇ, １１.４９mmol)の溶液に、ナトリウムチオメトキシド(１.６１１ｇ, ２２.９９mmol)を加えた。混合物を、窒素下、１００℃で１８時間加熱し、濃縮した。残渣を水で処理し、混合物をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜１０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミンを黄色の固体として得た(０.１５ｇ, ０.８７１mmol, 収率３５％)。
LCMS R.T. = 0.91; [M+H]⁺ = 141.89。

工程Ｂ：２−イソチオシアナト−５−(メチルチオ)ピラジン

ジクロロメタン中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１.０６９ｇ, ４.６０mmol)の溶液に、室温で、５−(メチルチオ)ピラジン−２−アミン(０.５０ｇ, ３.５４mmol)を加えた。反応物を室温で１８時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、望ましい生成物のピークが主要なピークとして示された。深橙色の混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜４０％酢酸エチル−ヘキサン)、２−イソチオシアナト−５−(メチルチオ)ピラジンを橙色の油状物として得た(０.５４５ｇ, ０.２５７mmol, 収率８４％)。
LCMS R.T. = 2.65; [M+H]⁺ = 184.02。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(５−(メチルチオ)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１５ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.３７５ｇ, １.６３７mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(１.３３３ｇ, ４.０９mmol)および２−イソチオシアナト−５−(メチルチオ)ピラジン(０.３ｇ, １.６３７mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.７６５ml, ４.９mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌し続けた。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(５−(メチルチオ)ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(０.０１４ｇ, ０.０４mmol, 収率１６％)。
融点 155〜60℃. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.13 (1 H, d), 8.06 (1 H, s), 3.96 (1 H, d), 3.66 (1 H, d), 3.20 (1 H, d), 3.08 (1 H, d), 2.87 - 2.96 (2 H, m), 2.72 - 2.82 (2 H, m), 2.52 (3 H, s), 2.00 - 2.19 (2 H, m), 1.51 - 1.81 (3 H, m). LCMS R.T. = 1.01; [M+H]⁺ = 306.12。

実施例２５１
(Ｒ)−Ｎ−(５,６−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(５,６−ジクロロピリジン−２−イル)ピバル酸アミド

クロロホルム(２５ml)中の、J. Org. Chem 2005, 70, 1771の通りに合成したＮ−(６−クロロピリジン−２−イル)ピバル酸アミド(１.０２ｇ, ４.８０mmol)の溶液に、１−クロロピロリジン−２,５−ジオン(０.６２ｇ, ４.６７mmol)を加え、混合物を油浴中で３時間還流した。それを一夜かけて室温まで冷却した。反応混合物を真空で蒸発させ、ＤＭＦ(１５ml)に再度溶解した。さらに４８０mgの１−クロロピロリジン−２,５−ジオンを加え、得られた溶液を油浴中で９５〜１００℃で一夜加熱し、再度室温まで冷却した。溶媒を真空で除去し、残渣を水と酢酸エチルの層間に分配した。水相を酢酸エチルで２回以上洗浄し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空で蒸発させた。ＴＬＣ(１０％酢酸エチル／ヘキサン)により、Ｒｆ＝０.６の濃いスポットと、Ｒｆ＝０.４および０.２のより小さいスポットが示された。この物質を５〜１０％酢酸エチル／ヘキサンでBiotageに流し、Ｒｆ＝０.６のフラクションを集めて、７９０mg(６６％)の白色の固体であるＮ−(５,６−ジクロロピリジン−２−イル)ピバル酸アミドを得た。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.17 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 1.31 (s, 10 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.85; [M+H]⁺ = 248.8。

工程Ｂ：５,６−ジクロロピリジン−２−アミン

Ｎ−(５,６−ジクロロピリジン−２−イル)ピバル酸アミド(７９０mg, ３.２０mmol)、塩酸３７％(１.２５ml)、水(１.２５ml)およびＥｔＯＨ(３ml)の混合物を、油浴中で８５〜９０℃で４時間加熱した。ＬＣＭＳにより、生成物への変換がほとんど完了したことが示された。反応物を室温まで冷却し、反応混合物を少量になるまで蒸発させ、分液漏斗に移し、それを水性炭酸ナトリウムと酢酸エチルの層間に分配した。層を分離し、水相を酢酸エチルで再度洗浄し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、白色の固体を得た。該物質を２０％酢酸エチル／ヘキサンでBiotage カラムに流し、主要な成分を集めて、５,６−ジクロロピリジン−２−アミンを白色の固体として得た(０.４９ｇ, ２.９８mmol, ９３％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.44 (d, J=8.55 Hz, 1 H), 6.36 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 4.58 (s, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.28; [M+H]⁺ = 164.8。

工程Ｃ：５,６−ジクロロ−２−イソチオシアナトピリジン

ジクロロメタン(２５ml)中の５,６−ジクロロピリジン−２−アミン(０.４７ｇ, ２.８８mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.６８ｇ, ２.９４mmol)を加えた。反応物を４０℃で３時間撹拌し、室温まで冷却した。粗製の物質をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ２５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、２,３−ジクロロ−６−イソチオシアナトピリジンを白色の粉末として得た(０.４８ｇ, ２.３４mmol, 収率８１％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.26 (d, J=8.55 Hz, 1 H), 7.47 (d, J=8.24 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.83; [M+H]⁺ = 204.8。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(５,６−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の２,３−ジクロロ−６−イソチオシアナトピリジン(０.４７ｇ, ２.２９mmol)に、トリエチルアミン(０.８ml, ５.７mmol)および３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.５４ｇ, ２.３４mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌し、室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(１.０７ml, ６.８８mmol)で処理した。反応物を７０℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−Ｎ−(５,６−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.３６ｇ, １.０８mmol, 収率４７％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.31 (d, J=1.22 Hz, 1 H), 7.84 (s, 1 H), 6.80 (s, 1 H), 3.85 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.57 (d, J=10.38 Hz, 2 H), 2.98 (s, 3 H), 2.69 - 2.78 (m, 3 H), 2.65 (t, J=7.78 Hz, 3 H), 2.00 (s, 2 H), 1.86 (s, 2 H), 1.58 (dd, J=7.48, 2.90 Hz, 2 H), 1.56 (s, 1 H), 1.41 - 1.49 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.81; [M+H]⁺ = 327.1。

実施例２５２
(Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４,５−ジクロロ−２−イソチオシアナトピリジン

ジクロロメタン(２５ml)中の４,５−ジクロロピリジン−２−アミン(０.２５ｇ, １.５３mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.３６ｇ, １.５６mmol)を加えた。反応物を４０℃で３時間撹拌し、室温まで冷却した。粗製の物質をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ２５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、４,５−ジクロロ−２−イソチオシアナトピリジンを黄色の粉末として得た(０.２６ｇ, １.２７mmol, 収率８３％)。生成物を、次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の４,５−ジクロロ−２−イソチオシアナトピリジン(０.２５ｇ, １.２２mmol)に、トリエチルアミン(０.４３ml, ３.０５mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.２９ｇ, １.２４mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.５７ml, ３.６６mmol)で処理した。反応物を７０℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.０９ｇ, ０.２７mmol, 収率２２％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.81 (s, 1 H), 8.32 (d, J=6.10 Hz, 1 H), 7.03 (s, 1 H), 3.83 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.57 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 2.98 (s, 2 H), 2.71 - 2.79 (m, 2 H), 2.65 (t, J=7.78 Hz, 2 H), 1.99 (s, 1 H), 1.86 (s, 1 H), 1.53 - 1.61 (m, 2 H), 1.41 - 1.49 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.78; [M+H]⁺ = 327.0。

実施例２５３
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−４−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−クロロ−２−イソチオシアナト−４−メチルピリジン

ジクロロメタン(２５ml)中の５−クロロ−４−メチルピリジン−２−アミン(０.４１ｇ, ２.８８mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.７０ｇ, ３.０mmol)を加えた。反応物を４０℃で３時間撹拌した。反応物を室温まで冷却した。粗製の混合物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ２５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、５−クロロ−２−イソチオシアナト−４−メチルピリジンを得た(０.４５ｇ, ２.４４mmol, 収率８５％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.45 (s, 1 H), 7.47 (s, 1 H), 2.37 (s, 3 H). LC/MS RT=2.79; [M+H]⁺ = 184.9。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−４−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の５−クロロ−２−イソチオシアナト−４−メチルピリジン(０.３７ｇ, ２.０mmol)に、トリエチルアミン(０.７ml, ５.０mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(実施例１７の工程Ｂより)(０.４７ｇ, ２.０mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.９４ml, ６.０mmol)で処理した。反応物を７０℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−４−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.１９ｇ, ０.６１mmol, 収率３０.３％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.79 (s, 1 H), 8.08 - 8.15 (m, 2 H), 6.78 (s, 1 H), 3.82 (d, J=8.55 Hz, 2 H), 3.55 (d, J=10.38 Hz, 2 H), 2.93 - 3.02 (m, 5 H), 2.71 - 2.80 (m, 5 H), 2.66 (t, J=7.63 Hz, 4 H), 2.23 - 2.29 (m, 7 H), 1.94 - 2.02 (m, 2 H), 1.92 (s, 1 H), 1.86 (s, 2 H), 1.53 - 1.62 (m, 5 H), 1.41 - 1.49 (m, J=12.55, 9.88, 7.02, 2.29 Hz, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.72; [M+H]⁺ = 307.1。

実施例２５４
(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３−クロロ−６−イソチオシアナトピリダジン

３−クロロ−６−イソチオシアナトピリダジンを、実施例２１８の工程Ｄの方法によって合成した。１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ、２５分、３５ml/分でフラッシュクロマトグラフィーを行い、２１３mgを得た(収率３１％)。
LCMS: RT = 1.25分, MH⁺ = 172.00。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−クロロピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２１８の工程Ｅの方法によって合成した。１６０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＣＨＣｌ_３中１〜３％ [９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]、５０分、４０ml/分でフラッシュクロマトグラフィーを行い、２９mgを得た(収率８％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.27 (1 H, br. s.), 7.28 (1 H, d, J=9.07 Hz), 7.10 (1 H, d, J=9.07 Hz), 3.95 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.62 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.34 (1 H, dd, J=14.98, 1.64 Hz), 2.67 - 3.04 (5 H, m), 2.14 - 2.21 (1 H, m), 2.12 (1 H, br. s.), 1.65 - 1.79 (1 H, m), 1.45 - 1.61 (2 H, m). LCMS: RT = 0.62分, MH^- = 292.1, MH⁺ = 294.1。

実施例２５５
(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３−ブロモ−６−イソチオシアナトピリダジン

３−ブロモ−６−イソチオシアナトピリダジンを、実施例２１８の工程Ｄの方法によって合成した。１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ、２５分、３５ml/分でフラッシュクロマトグラフィーを行い、３６４mgを得た(収率４２％)。
LCMS: RT = 1.34分, MH⁺ = 215.92。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモピリダジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２１８の工程Ｅの方法によって合成した。１６０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＣＨＣｌ_３中１〜３％ [９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]、５０分、４０ml/分でフラッシュクロマトグラフィーを行い、２１１mgを得た(収率３７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.23 (1 H, br. s.), 7.37 (1 H, d, J=9.07 Hz), 6.97 (1 H, d, J=9.07 Hz), 3.92 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.59 (1 H, d, J=9.82 Hz), 3.29 (1 H, dd, J=14.98, 1.64 Hz), 2.63 - 2.99 (5 H, m), 2.04 - 2.19 (2 H, m), 1.59 - 1.74 (1 H, m), 1.39 - 1.58 (2 H, m). LCMS: RT= 0.64分, MH^- 336.1, MH⁺ 338.0。

実施例２５６
(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−クロロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(０.３２４ｇ, ２.５mmol)、４−クロロフェニルボロン酸(０.４８９ｇ, ３.１３mmol)、Ｎａ_２ＣＯ_３(０.７９５ｇ, ７.５０mmol)および塩化ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(０.０３５ｇ, ０.０５０mmol)の混合物を、ＤＭＥ／ＥｔＯＨ／水(１５：２：３ml)の混合物に懸濁した。混合物を、マイクロ波合成機中で、１２５℃で２０分間加熱し、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(２〜１５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、６−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミンを灰白色の固体として得た(０.３ｇ, ０.８７１mmol, 収率５８.４％)。
LCMS R.T. = 1.42; [M+2H]⁺ = 207.91。

工程Ｂ：４−(４−クロロフェニル)−６−イソチオシアナトピリミジン

ジクロロメタン／Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.６６６ｇ, ２.８７mmol)の明橙色の溶液に、室温で、６−(４−クロロフェニル)ピリミジン−４−アミン(０.５９ｇ, ２.８７mmol)を加えた。橙色の混合物を６０℃で１８時間加熱した。ＬＣ／ＭＳにより、望ましい生成物のピークが主要なピークとして示された。深橙色の混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜４０％酢酸エチル−ヘキサン)、４−(４−クロロフェニル)−６−イソチオシアナトピリミジンを橙色の油状物として得た(０.３２２ｇ, １.３００mmol, 収率４５％)。
LCMS R.T. = 2.82; [M]⁺ = 248.03。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(４−クロロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１５ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.２９８ｇ, １.３００mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(１.０５９ｇ, ３.２５mmol)および４−(４−クロロフェニル)−６−イソチオシアナトピリミジン(０.３２２ｇ, １.３００mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.６０８ml, ３.９０mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(６−(ピリジン−４−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(０.１０４ｇ, ０.２７６mmol, 収率２１％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.54 (1 H, br. s.), 8.83 (1 H, d), 7.89 - 8.04 (2 H, m), 7.41 - 7.54 (2 H, m), 7.33 (1 H, br. s.), 4.02 (1 H, d), 3.71 (1 H, d), 3.42 (1 H, d), 2.73 - 3.15 (5 H, m), 2.10 - 2.31 (2 H, m), 1.46 - 1.89 (3 H, m). LCMS R.T. = 1.92; [M]⁺ = 370.35。

実施例２５７
(Ｒ)−Ｎ−(６−(３−クロロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(３−クロロフェニル)ピリミジン−４−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(０.３２４ｇ, ２.５mmol)、３−クロロフェニルボロン酸(０.４８９ｇ, ３.１３mmol)、Ｎａ_２ＣＯ_３(０.７９５ｇ, ７.５０mmol)および塩化ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)(０.０３５ｇ, ０.０５０mmol)の混合物を、ＤＭＥ／ＥｔＯＨ／水(１５：２：３ml)の混合物に懸濁した。混合物を、マイクロ波合成機中で、１２５℃で２０分間加熱し、濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中３０〜７０％酢酸エチル)、６−(３−クロロフェニル)ピリミジン−４−アミンを黄色の固体として得た(０.４７ｇ, ２.２８６mmol, 収率９１％)。
LCMS R.T. = 1.45; [M+2H]⁺ = 208.05。

工程Ｂ：４−(３−クロロフェニル)−６−イソチオシアナトピリミジン

ジクロロメタン／Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.４８６ｇ, ２.０９１mmol)の明橙色の溶液に、室温で、６−(３−クロロフェニル)ピリミジン−４−アミン(０.４３ｇ, ２.０９１mmol)を加えた。橙色の混合物を６０℃で１８時間加熱した。ＬＣ／ＭＳにより、望ましい生成物のピークが主要なピークとして示された。深橙色の混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜４０％酢酸エチル−ヘキサン)、４−(３−クロロフェニル)−６−イソチオシアナトピリミジンを橙色の油状物として得た(０.１２ｇ, ０.４８４mmol, 収率２３％)。
LCMS R.T. = 2.15; [M]⁺ = 248.31。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(３−クロロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１５ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１１１ｇ, ０.４８４mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.３９５ｇ, １.２１１mmol)および４−(３−クロロフェニル)−６−イソチオシアナトピリミジン(０.１２ｇ, ０.４８４mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２２６ml, １.４５３mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌し続けた。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％、次に２〜１０％の９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(６−(３−クロロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(０.０８６ｇ, ０.２２１mmol, 収率４６％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.82 (1 H, d), 8.05 (1 H, d), 7.93 (1 H, ddd), 7.43 - 7.52 (2 H, m), 7.35 (1 H, br. s.), 4.13 (1 H, d), 3.93 (1 H, d), 3.63 - 3.81 (2 H, m), 3.42 - 3.53 (1 H, m), 3.30 - 3.40 (3 H, m), 2.46 (1 H, d), 2.26 - 2.40 (1 H, m), 1.88 - 2.16 (3 H, m). LCMS R.T. = 1.90; [M]⁺ = 370.28。

実施例２５８
(Ｒ)−Ｎ−(５−メチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−メチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１０ml)中の５−メチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−アミン(１.９２ｇ, ２０mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ２ml)、ＣＳ_２(３ml)、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ２ml)およびヨードメタン(３ml)を、ゆっくりと１０分かけて加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、２０mlの水に注いだ。沈殿した固体を濾過し、水で洗浄し、望ましい生成物を乾燥させ、５−メチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを白色の固体として得た(１.４５ｇ, ３５.７％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.63 (s, 6H), 2.50 (s, 3H). LCMS R.T. 1.66分; [M+H] = 203.91。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−メチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の、５−メチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(２６０mg, １.２８mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２００mg, １.２８mmol)および炭酸セシウム(８７６mg, ２.６９mmol)の混合物を、室温で一夜撹拌した。混合物を濃縮し、Biotageシリカゲルカラムで精製し(１００％酢酸エチル、次に１０〜３５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、望ましい生成物である(Ｒ)−Ｎ−(５−メチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(１９２mg, ５４.１％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 4.05 (d, 1H), 3.74 (d, 1H), 3.25 (d, 1H), 3.15 (d, 1H), 2.94 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.19(m, 1H), 2.10 (m, 1H), 1.6-1.8 (m, 3H). MS (LCMS) [M+H] = 264.05. R.T. 0.16分。

実施例２５９
(Ｒ)−Ｎ−(３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１０ml)中の、３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−アミン(２.３ｇ, ２０mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ２ml)、ＣＳ_２(３ml)、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ２ml)およびヨードメタン(３ml)を１０分かけてゆっくりと加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、２０mlの水に注いだ。沈殿した固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、純粋でない３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを黄色の固体として得た(２.３ｇ, ５２.５％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 2.67 (s), 2.62 (s). MS [M+H] = 219.85。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の、３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(２８１mg, １.２８mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２００mg, １.２８mmol)および炭酸セシウム(８７６mg, ２.６９mmol)の混合物を、室温で一夜撹拌した。混合物を濃縮し、Biotageシリカゲルカラムで精製し(１００％酢酸エチル、次に１０〜３５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、望ましい生成物である(Ｒ)−Ｎ−(３−メチル−１,２,４−チアジアゾール−５−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(１４７.８mg, ４０.５％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 4.01-3.99 (d, 1H), 3.72-3.70 (d, 1H), 3.27 (d, 1H), 3.16 (d, 1H), 3.01-2.9 (m, 2H), 2.86-2.83 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.21-2.0(m, 2H), 1.81-1.75(m, 1H), 1.75-1.70 (m, 2H). MS (LCMS) [M+H] = 279.99; R.T. = 0.2分。

実施例２６０
(Ｒ)−Ｎ−(３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(５ml)中の３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５−アミン(４９０mg, ４.９４mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ０.５ml)、ＣＳ_２(１ml)、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ０.５ml)およびヨードメタン(１ml)を、１０分かけてゆっくりと加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。混合物は非常に濃厚となった。２０mlの水を加えた。固体を濾過して取り、水で洗浄し、乾燥させ、純粋でない３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルである黄色の固体を得た(７７０mg, ７７％)。
MS (LCMS) [M+H] = 203.91; R.T. = 1.84分。
生成物を次の工程に直接用いた。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(２８０mg, １.３７mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２１５mg, １.３７mmol)および炭酸セシウム(９４２mg, ２.８９mmol)の混合物を、室温で一夜撹拌した。混合物を濃縮し、Biotageシリカゲルカラムで精製し(１００％酢酸エチル、次に１０〜３５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、望ましい生成物である(Ｒ)−Ｎ−(３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(１９８mg, ５１.９％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 4.1-4.0 (d, 1H), 3.8-3.7 (d, 1H), 3.4-3.2 (d, 1H), 3.2-3.1 (d, 1H), 3.0-2.9 (m, 2H), 2.9-2.8 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.2 (m, 1H), 2.2-2.0 (m, 1H), 1.9-1.6 (m, 3H). MS (LCMS) [M+H] = 264.05; R.T. = 0.26分。

実施例２６１
(Ｒ)−Ｎ−(６−(メチルチオ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−クロロピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１２ml)中の６−クロロピリミジン−４−アミン(１.２９５ｇ, １０mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(１ml, ２０.００mmol, ２０Ｍ)、ＣＳ_２(１.５ml, ２４.８８mmol)、ＮａＯＨ(１ml, ２０.００mmol, ２０Ｍ)およびヨードメタン(１.５ml, ２３.９９mmol)を、１５分間で滴下した。撹拌を１.５時間続けて、混合物を水に注いだ。橙色の固体を分離し、水で洗浄し、乾燥させ、メタノールから再結晶し、６−クロロピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを黄色の固体として得た(０.９６６ｇ, ４.１３mmol, 収率４１.３％)。
LCMS R.T. = 2.39; [M+H]⁺ = 234.08。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(メチルチオ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.９ｇ, ３.９３mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(２.６９ｇ, ８.２５mmol)および６−クロロピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(０.９６４ｇ, ４.１２mmol)を加えた。懸濁液を室温で１８時間撹拌し、１００℃で３時間加熱した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜１５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(６−(メチルチオ)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを薄黄色の固体として得た(０.２１ｇ, ０.７２mmol, 収率４８.２％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.43 (1 H, br. s.), 8.55 (1 H, d), 6.78 (1 H, br. s.), 3.98 (1 H, d), 3.64 (1 H, d), 3.37 (1 H, dd), 2.72 - 3.06 (5 H, m), 2.51 (3 H, s), 2.08 - 2.24 (2 H, m), 1.69 - 1.81 (1 H, m), 1.41 - 1.64 (2 H, m). LCMS R.T. = 0.93; [M+H]⁺ = 306.29。

実施例２６２
(Ｒ)−Ｎ−([１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンイミン

ジクロロメタン(１Ｌ)中の１Ｈ−イミダゾール(４２ｇ, ６１７mmol)の溶液に、臭化シアン(２２.５, ２１２mmol)を加え、混合物を３０分間還流し、室温まで冷却し、白色の固体を濾過して取った。濾液を１００mlまで濃縮し、冷蔵庫で３日間保存した。沈殿した固体を濾過して取り、８ｇのジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンイミンを得た(４９.６mmol, ８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO) δ ppm 8.09 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.13 (s, 1H)。

工程Ｂ： [１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−アミン

ＴＨＦ(７０ml)中の２−ヒドラジニルピリジン(５.２ｇ, ４７.６mmol)の溶液に、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンイミン(７.８ｇ, ４８.４mmol)を加えた。混合物を一夜還流した。粗製の混合物を蒸発させ、Biotageシリカゲルカラムで精製し(０〜２５％, メタノール−塩化メチレン)、紫色のスポットを集め、[１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−アミンを得た(４.７ｇ, ３５mmol, ７３.５％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO) δ ppm 8.05-8.0 (m, 1H), 7.44-7.40 (m, 1H), 7.08-7.0 (m, 1H), 6.74-6.70 (m, 1H), 6.35 (s, 2H). MS (LCMS) [M+H] = 134.98; R.T. = 0.1分。

工程Ｃ： [１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(５ml)中の[１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−アミン(３００mg, ２.２４mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ０.２５ml)、ＣＳ_２(０.５ml)、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ０.２５ml)およびヨードメタン(０.５ml)を１０分かけてゆっくりと加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、１０mlの水を反応混合物に加えた。沈殿した固体を濾過して取り、水(１００ml)で洗浄し、乾燥させ、２３０mgの[１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを白色の固体として得た(０.９６mmol, ４３.１％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.17 (d, 1H), 7.7 (d, 1H), 7.24-7.22 (t, 1H), 6.84-6.80 (t, 1H), 2.71-2.68 (d, 6H). MS (LCMS) [M+H] = 238.94; R.T. = 1.26分。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−([１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の、[１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１２０mg, ０.５０mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１２０mg, ０.７６mmol)および炭酸セシウム(４９２mg, １.５mmol)の混合物を、７０℃で６時間加熱した。混合物を濃縮し、Biotageシリカゲルカラムで精製し(１００％酢酸エチル、次に１０〜３５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、望ましい生成物である(Ｒ)−Ｎ−([１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(９７.２mg, ６１.５％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.2-8.1 (d, 1H), 7.6-7.5 (d, 1H), 7.2-7.1 (t, 1H), 6.7-6.6 (t, 1H), 4.1-4.0 (d, 1H), 3.7-3.6 (d, 1H), 3.5-3.4 (m, 1H), 3.1-2.7 (m, 5H), 2.4-2.2 (m, 2H), 1.8-1.7 (m, 1H), 1.7-1.5(m, 2H). MS (LCMS) [M+H] = 299.3; R.T. = 1.22分。

実施例２６３
(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(３ml)中の６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−アミン(７００mg, ３.０３mmol)の懸濁液に、１６.０Ｍ水酸化ナトリウム(４００μｌ, ６.４０mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で二硫化炭素(４５０μｌ, ７.５７mmol)を加え、得られた帯赤褐色の混合物を１０分間撹拌した。さらに１６.０Ｍ水酸化ナトリウム(４００μｌ, ６.４０mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後に、ヨードメタン(４５０μｌ, ７.２７mmol)を滴下した。混合物を５分間撹拌し、この時点で多量の黄色の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、さらに精製することなく用いるのに十分な純度の黄色の固体として６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(６８０mg, 収率６７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.63 (s, 1 H) 2.68 (s, 6 H)。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

アセトニトリル(２５ml)中の、６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(３００mg, ０.８９５mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２１０mg, ０.８９５mmol)および炭酸セシウム(６００mg, １.７９mmol)の混合物を、開放フラスコ中で、メタンチオールの除去を助けるために全反応時間窒素を溶液に通気しながら、１００℃の油浴で２時間加熱した。２時間後、ＴＬＣにより反応が完了したことが示され、混合物を環境温度まで冷却し、水で希釈し、真空で濃縮した。混合物をクロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、粗製の残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(２〜４０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)。生成物のフラクションを合わせ、真空で濃縮し、(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(２００mg, 収率５７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.39 (br. s., 1 H) 8.48 (s, 1 H) 4.05 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 3.72 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 3.42 (dd, J=15.06, 1.76 Hz, 1 H) 2.73 - 3.08 (m, 5 H) 2.10 - 2.22 (m, 2 H) 1.73 - 1.84 (m, J=14.09, 9.94, 4.17, 4.17 Hz, 1 H) 1.52 - 1.65 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.29; [M+H]⁺ = 394.99。

実施例２６４
(Ｒ)−Ｎ−(６−(メチルチオ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１.５ml)中の、６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(実施例２６３の工程Ａより)(１００mg, ０.２９８mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(６８mg, ０.２９８mmol)および炭酸セシウム(１００mg, ０.６０mmol)の混合物を、１ドラムのバイアルに入れ、１００℃の油浴で１時間加熱し、この時点で、ナトリウムチオメトキシド(１００mg, １.４３mmol)を加え、混合物を一夜加熱した。混合物を環境温度まで冷却し、水(２０ml)に注ぎ、得られた固体を濾過によって集め、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(２〜４０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)。生成物のフラクションを合わせて真空で濃縮し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(メチルチオ)チアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(５２mg, 収率４６％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.39 (br. s., 1 H) 8.31 (s, 1 H) 4.03 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 3.70 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 3.41 (dd, J=14.95, 1.83 Hz, 1 H) 2.73 - 3.10 (m, 5 H) 2.63 (s, 3 H) 2.10 - 2.25 (m, 2 H) 1.47 - 1.86 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.04; [M+H]⁺ = 363.04。

実施例２６５
(Ｒ)−Ｎ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−アミン

５−クロロチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチル(２５０mg, ０.９６６mmol)をＭｅＯＨ(１０ml)に懸濁し、メタノール中２５％(w/w) ナトリウムメトキシドの溶液(１０ml, ４６.３mmol)を加えた。得られた溶液を一夜還流し、環境温度まで冷却し、等量の水に注ぎ、クロロホルム(４×)で抽出した。水相に大量の化合物が残っており、そのためこれを濃縮して残渣を得て、少量の１ＮＨＣｌ(得られた溶液を酸性にする程ではない)に溶解し、ＥｔＯＡｃ(５×)で再度抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−アミンを白色の固体として得た(１４４mg, ０.７９０mmol, 収率８２％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.43 (s, 1 H) 7.81 (s, 2 H) 3.90 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.73; [M+H]⁺ = 183.03。

工程Ｂ：５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(５ml)中の５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−アミン(９１１mg, ５.００mmol)の懸濁液に、２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(５００μｌ, １０.００mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で、二硫化炭素(７５０μｌ, １２.５０mmol)を加え、得られた帯赤褐色の混合物を１０分間撹拌した。さらに２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(５００μｌ, １０.００mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後に、ヨードメタン(７５０μｌ, １２.００mmol)を滴下した。混合物を５分間撹拌し、この時点で、多量の黄色の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、黄色の固体を得た。これをさらにシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(２〜２０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３)、５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(３８０mg, 収率２７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.90 (s, 1 H) 4.09 (s, 3 H) 2.66 (s, 6 H)。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１.７ml)中の、５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１００mg, ０.３４９mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(８０mg, ０.３４９mmol)および炭酸セシウム(２２８mg, ０.６９８mmol)の混合物を、１００℃で２時間加熱した。反応混合物を環境温度まで冷却し、水に注ぎ、固体を濾過によって集め、(Ｒ)−Ｎ−(５−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(７８mg, 収率６４％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.12 (br. s., 1 H) 8.63 (s, 1 H) 3.95 - 4.18 (m, 4 H) 3.71 (d, J=9.77 Hz, 1 H) 3.41 (d, J=15.26 Hz, 1 H) 2.74 - 3.10 (m, 5 H) 2.11 - 2.27 (m, 2 H) 1.71 - 1.86 (m, 1 H) 1.50 - 1.70 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.66; [M+H]⁺ = 347.0。

実施例２６６
(Ｒ)−Ｎ−(５−エチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−エチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１０ml)中の５−エチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−アミン(２.２６ｇ, ２０mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ２ml)、ＣＳ_２(３ml)、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ２ml)およびヨードメタン(３ml)を１０分かけてゆっくりと加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、３０mlの水に注いだ。沈殿した黄色の固体を濾過して取り、水で洗浄し、乾燥させ、望ましい生成物である５−エチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを白色の固体として得た(２.６ｇ, ５９.８％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.86-2.83 (q, 2H), 2.63 (s, 6H), 1.39-1.35 (t, 3H). MS (LCMS) [M+H] = 217.95; R.T. = 1.93分。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−エチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１０ml)中の、５−エチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(３２７mg, １.５mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２３５mg, １.５mmol)および炭酸セシウム(１０００mg, ３.１６mmol)の混合物を、室温で一夜撹拌した。混合物を濃縮し、Biotageシリカゲルのカラムで精製し(１００％酢酸エチル、次に１０〜３５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、望ましい生成物である(Ｒ)−Ｎ−(５−エチル−１,３,４−オキサジアゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(２９０mg, ６６％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 4.05 (d, 1H), 3.74 (d, 1H), 3.3-3.2 (d, 1H), 3.2-3.1(d, 1H), 3.0-2.9(m, 2H), 2.9-2.8 (m, 5H), 2.2 (s, 1H), 2.15-2.0 (m, 1H), 1.9-1.6 (m, 3H), 1.4-1.3 ( t, 3H). (m, 2H). MS (LCMS) [M+H] = 278.09; R.T. = 0.48分。

実施例２６７
(Ｒ)−Ｎ−(３,５−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３,５−ジクロロ−２−イソチオシアナトピリジン

ジクロロメタン(２５ml)中の３,５−ジクロロピリジン−２−アミン(０.３６ｇ, ２.２０９mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.５２３ｇ, ２.２５３mmol)を加えた。反応物を４０℃で３時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、粗製の物質をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ２５〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、３,５−ジクロロ−２−イソチオシアナトピリジンを得た(０.４ｇ, １.９５１mmol, 収率８８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.50 (t, J=2.59 Hz, 1 H), 8.45 (t, J=2.59 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.07; [M+H]⁺ = 204.8。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(３,５−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)中の３,５−ジクロロ−２−イソチオシアナトピリジン(０.１１ｇ, ０.５５mmol)に、Ｅｔ_３Ｎ(０.１７ml, １.２１mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１３ｇ, ０.５６mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物をＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２６ml, １.６５mmol)で処理した。反応物を７０℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−Ｎ−(３,５−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.０８ｇ, ０.２４mmol, 収率４４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.91 (s, 1 H), 8.11 - 8.17 (m, 1 H), 7.97 (d, J=2.44 Hz, 1 H), 3.84 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.59 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 2.95 - 3.04 (m, 2 H), 2.72 - 2.81 (m, 2 H), 2.66 (t, J=7.63 Hz, 2 H), 2.01 (s, 1 H), 1.89 (s, 1 H), 1.54 - 1.62 (m, 2 H), 1.42 - 1.50 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.78; [M+]⁺ = 326.1。

実施例２６８
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−クロロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(５ml)中の５−クロロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン(９３０mg, ５.００mmol)の懸濁液に、２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(５００μｌ, １０.００mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で、二硫化炭素(７５０μｌ, １２.５０mmol)を加え、混合物を１０分間撹拌した。さらに２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(５００μｌ, １０.０mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後に、ヨードメタン(７５０μｌ, １２.００mmol)を滴下した。添加中は発熱に注意した。混合物を１５分間撹拌し、この時点で、多量の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集めた。集めた固体の大部分が薄黄色であり、結晶性であった。少量の塊の僅かに暗い橙色のゴム状固体が存在し、これらを手で除いて廃棄した。残ったものが表題化合物５−クロロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルであった(１.００ｇ, 収率６９％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.04 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.38 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 2.66 (s, 6 H)。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−クロロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１.７ml)中の、５−クロロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１００mg, ０.３５mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(７９mg, ０.３５mmol)および炭酸セシウム(２２５mg, ０.６９mmol)の混合物を、１００℃で２時間加熱した。反応混合物を環境温度まで冷却し、水に注ぎ、固体を濾過によって集めた。粗製の固体をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(２〜４０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(６２mg, 収率５１％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.13 (br. s., 1 H) 7.93 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.45 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 3.92 (d, J=10.29 Hz, 1 H) 3.67 (d, J=10.29 Hz, 1 H) 3.00 - 3.14 (m, 2 H) 2.77 - 2.93 (m, 2 H) 2.69 (t, J=7.65 Hz, 2 H) 2.12 (br. s., 1 H) 1.95 (br. s., 1 H) 1.43 - 1.72 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.10; [M+H]⁺ = 350.10。

実施例２６９
(Ｒ)−Ｎ ^５ ,Ｎ ^５ −ジメチル−Ｎ ^２ −(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イル)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２,５−ジアミン

工程Ａ：５−クロロチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチル

エトキシカルボニルイソチオシアネート(４.３２ml, ３６.６mmol)および２,４−ジクロロ−ピリミジン−５−イルアミン(３.００ｇ, １８.２９mmol)をそのまま混合し、溶解を助けるために５分間超音波処理した。混合物を環境温度で１０分間撹拌し、この時点で全混合物が固化した。メタノール(１００ml)を加え、混合物を３０分間還流し、環境温度まで冷却し、固体を濾過によって集め、５−クロロチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチルを得た(３.８ｇ, 収率８０％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 12.64 (s, 1 H) 9.05 (s, 1 H) 4.31 (q, J=7.19 Hz, 2 H) 1.32 (t, J=7.15 Hz, 3 H)。

工程Ｂ：５−(ジメチルアミノ)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチル

５−クロロチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチル(３００mg, １.１６mmol)を、メタノール中２.０Ｍジメチルアミンの溶液(５.０ml, １０.００mmol)に、圧力容器中で懸濁し、この容器を密封し、７５℃の油浴で加熱した。混合物を環境温度まで冷却し、溶媒を蒸発させ、残渣を、水性重炭酸塩とクロロホルムの層間に分配し、３回抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、５−(ジメチルアミノ)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチルを得た(２３６mg, 収率９９％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11.97 (s, 1 H) 8.67 (s, 1 H) 4.26 (q, J=7.03 Hz, 2 H) 3.17 (s, 6 H) 1.16 - 1.40 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.88; [M+H]⁺ = 268.09。

工程Ｃ：エチルＮ^５,Ｎ^５−ジメチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２,５−ジアミン

５−(ジメチルアミノ)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチル(２３６mg, ０.８８mmol)を、メタノール中２５％(w/w) ナトリウムメトキシドの溶液(５ml, ２３.０mmol)に懸濁し、混合物を一夜還流した。反応混合物を乾固するまで蒸発させ、残渣を水とクロロホルムの層間に分配し、３回抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、エチルＮ^５,Ｎ^５−ジメチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２,５−ジアミンを白色の固体として得た(１７０mg, 収率９９％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.27 (s, 1 H) 7.44 (s, 2 H) 3.10 (s, 6 H)。

工程Ｄ：５−(ジメチルアミノ)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１ml)中のエチルＮ^５,Ｎ^５−ジメチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２,５−ジアミン(１６０mg, ０.８１９mmol)の懸濁液に、２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(１００μｌ, ２.００mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で二硫化炭素(１２０μｌ, ２mmol)を加え、得られた帯赤褐色の混合物を１０分間撹拌した。さらに２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(１００μｌ, ２.０mmol)を加え、混合物を１０分間再度撹拌した。最後に、ヨードメタン(１２０μｌ, １.９mmol)を滴下した。混合物を５分間撹拌し、この時点で多量の黄色の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、５−(ジメチルアミノ)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(１９４mg, 収率７９％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.75 (s, 1 H) 3.26 (s, 6 H) 2.64 (s, 6 H)。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ^５,Ｎ^５−ジメチル−Ｎ^２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イル)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２,５−ジアミン

ＤＭＦ(１.０ml)中の、５−(ジメチルアミノ)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(９０mg, ０.３０１mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(８３mg, ０.３６１mmol)および炭酸セシウム(１９６mg, ０.６０mmol)の混合物を、１００℃で１.５時間加熱した。反応混合物を環境温度まで冷却し、水に注ぎ、クロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、粗製の残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(２〜４０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、(Ｒ)−Ｎ^５,Ｎ^５−ジメチル−Ｎ^２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イル)チアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２,５−ジアミンを黄褐色の固体として得た(８１mg, 収率７１％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.07 (br. s., 1 H) 8.50 (s, 1 H) 4.01 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.67 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.39 (dd, J=14.93, 1.63 Hz, 1 H) 3.23 (s, 6 H) 2.71 - 3.10 (m, 5 H) 2.10 - 2.24 (m, 2 H) 1.68 - 1.84 (m, 1 H) 1.46 - 1.68 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.87; [M+H]⁺ = 360.23。

実施例２７０
(Ｒ)−Ｎ−([１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ： [１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−アミン

ジオキサン(３００ml)中のピラジン−２−アミン(２５ｇ, ２６０mmol)の溶液に、室温で、エトキシカルボニル−イソチオシアネート(３７.９ｇ, ２８９mmol)をゆっくりと加えた。混合物を１８時間撹拌し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣固体をメタノール(１５０ml)およびエタノール(１５０ml)の混合物に溶解した。この溶液に、ＴＥＡ(１０９ml, ７８０mmol)およびヒドロキシルアミン塩酸塩(７２.５ｇ, １０４０mmol)を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、４時間還流した。粗製の混合物を室温まで冷却し、溶媒を蒸発させた。残渣固体をカラムクロマトグラフィーによって精製し(０〜２０％メタノール／ＣＨ_２Ｃｌ_２)、白色の固体を得た(６０ｇ)。固体をＥｔＯＡｃおよび水に溶かした。水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−アミンを白色の固体として得た(１２ｇ, ８８mmol, ３３％)。
MS (LCMS) [M+H] = 135.96; R.T. = 0.21分。

工程Ｂ： [１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１０ml)中の[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−アミン(６７６mg, ５mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ０.５ml)、ＣＳ_２(１ml)、ＮａＯＨ(２０Ｍ, ０.５ml)およびヨードメタン(１ml)を１０分かけてゆっくりと加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、１０mlの水を反応混合物に加えると濁った。混合物をＥｔＯＡｃ(１００ml×３)で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をBiotageシリカゲルカラムで精製し(酢酸エチル−ヘキサン１０〜３０％)、[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを黄色の固体としてを得た(７２０mg, ３mmol, ６０％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 9.2 (2, 1H), 8.5 (d, 1H), 8.2 (d, 1H), 2.67 (s, 6H). MS (LCMS) [M+H] = 239.92. [M+Na] = 261.89; R.T. = 1.55分。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−([１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の、[１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１２０mg, ０.５０mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１２０mg, ０.７６mmol)および炭酸セシウム(４９２mg, １.５mmol)の混合物を、７０℃で６時間加熱した。混合物を濃縮し、Biotageシリカゲルカラムで精製し(１００％酢酸エチル、次に１０〜３５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、望ましい生成物である(Ｒ)−Ｎ−([１,２,４]トリアゾロ[１,５−ａ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の固体として得た(８５mg, ２６.７％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 9.0 (m, 1H), 8.71-8.70 (m, 1H), 8.15-8.10 (m, 1H), 4.15-4.0 (d, 1H), 3.85-3.8 (d, 1H), 3.6-3.5 (d, 1H), 3.4-3.3 (d, 1H), 3.3-3.0 (m, 4H), 2.4-2.2 (m, 2H), 2.0-1.8 (m, 3H). MS (LCMS) [M+H] = 300.06; R.T. = 0.2分。

実施例２７１
(Ｒ)−Ｎ−(チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(２ml)中のチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン(３００mg, １.９８mmol)の懸濁液に、２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(２００μｌ, ４.０mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で二硫化炭素(３００μｌ, ４.９６mmol)を加え、得られた帯赤褐色の混合物を１０分間撹拌した。さらに２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(２００μｌ, ４.０mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後に、ヨードメタン(３００μｌ, ４.７６mmol)を滴下した。混合物を５分間撹拌し、この時点で、多量の黄色の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、さらに精製することなく用いるのに十分な純度の黄色の固体として、チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(１９０mg, 収率３８％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.47 (d, J=4.58 Hz, 1 H) 8.11 (dd, J=8.24, 1.53 Hz, 1 H) 7.37 (dd, J=8.24, 4.88 Hz, 1 H) 2.66 (s, 6 H)。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１ml)中の、チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(９０mg, ０.３５mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(９７mg, ０.４２mmol)および炭酸セシウム(２３０mg, ０.７１mmol)の混合物を、１００℃で２時間加熱した。反応混合物を環境温度まで冷却し、水に注ぎ、クロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(２〜４０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)。生成物のフラクションを合わせ、真空で濃縮し、(Ｒ)−Ｎ−(チアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(８４mg, 収率７６％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.30 (br. s., 1 H) 8.37 (dd, J=4.77, 1.51 Hz, 1 H) 7.82 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H) 7.28 (dd, J=8.03, 4.77 Hz, 1 H) 4.05 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.70 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.42 (dd, J=15.06, 1.76 Hz, 1 H) 2.75 - 3.07 (m, 5 H) 2.14 - 2.26 (m, 2 H) 1.71 - 1.84 (m, J=13.99, 9.79, 4.17, 4.17 Hz, 1 H) 1.48 - 1.68 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.64; [M+H]⁺ = 316.15。

実施例２７２
(Ｒ)−Ｎ−(チアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(４４mg, ０.１１１mmol)を、ＭｅＯＨ(５０ml)に懸濁し、全ての固体が溶解するまで３ＮＨＣｌを加えた(約１０ml)。反応フラスコに窒素を吹きつけ、１０％パラジウム／炭素(３５mg)を加え、フラスコに水素バルーンを取り付けた。混合物を一夜反応させ、この時点でＴＬＣにより出発物質が消費されたことが示された。フラスコに窒素を吹きつけ、セライトで濾過し、メタノールで洗浄した。合わせた濾液を約９０％まで濃縮して、大部分のメタノールを除去し、重炭酸ナトリウムの飽和溶液を添加することによって、溶液を塩基性にした。塩基性の水相をクロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(２〜４０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−クロロホルム)。生成物のフラクションを合わせ、真空で濃縮し、(Ｒ)−Ｎ−(チアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(２４mg, ０.０７５mmol, 収率６７.５％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.50 (br. s., 1 H) 8.41 (d, J=2.76 Hz, 1 H) 8.27 (d, J=2.76 Hz, 1 H) 4.06 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 3.72 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 3.43 (dd, J=15.06, 1.76 Hz, 1 H) 2.74 - 3.09 (m, 5 H) 2.12 - 2.25 (m, 2 H) 1.71 - 1.86 (m, 1 H) 1.49 - 1.67 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.75; [M+H]⁺ = 317.13。

実施例２７３
(Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：７−クロロ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチル

４,６−ジクロロ−２−メチルピリミジン−５−アミン(１ｇ, ５.６２mmol)およびＯ−エチルカルボンイソチオシアナチデート(O-ethyl carbonisothiocyanatidate)(０.６６ml, ５.６２mmol)の混合物に、トルエン(２ml)を加え、固体を完全に湿らせた。混合物を１００℃の油浴上に１.５時間置き、この時点で混合物が固着し(seized)、固体を得た。固体を環境温度まで冷却し、エーテルで磨砕し、得られた固体を濾過によって集め、７−クロロ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチルを得た(１.０８ｇ, ３.９６mmol, 収率７０.５％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 12.70 (br. s., 1 H) 4.30 (q, J=7.19 Hz, 2 H) 2.69 (s, 3 H) 1.30 (t, J=7.15 Hz, 3 H)。

工程Ｂ：７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−アミン

７−クロロ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルバミン酸エチル(３００mg, １.１００mmol)を、メタノール中２５％(w/w)のナトリウムメトキシドの溶液(５ml, ２３.１４mmol)に懸濁し、混合物を一夜還流した。混合物を環境温度まで冷却し、水で希釈し、クロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−アミンを得た(１２０mg, ０.６１２mmol, 収率５５.６％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.71 (s, 2 H) 3.98 (s, 3 H) 2.52 (s, 3 H)。

工程Ｃ：７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(０.５ml)中の７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−アミン(１００mg, ０.５１mmol)の懸濁液に、１６.０Ｍ水酸化ナトリウム(７５μｌ, １.２mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で、二硫化炭素(８０μｌ, １.２７mmol)を加え、得られた帯赤褐色の混合物を１０分間撹拌した。さらに１６.０Ｍ水酸化ナトリウム(７５μｌ, １.２mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後にヨードメタン(８０μｌ, １.２９mmol)を滴下した。混合物を５分間撹拌し、この時点で、多量の黄色の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、粗製の黄色の固体を得た。これをさらにシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(２〜２０％酢酸エチル−クロロホルム)。生成物のフラクションを合わせて、真空で濃縮し、７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを黄色の固体として得た。(９０mg, 収率５９％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.17 (s, 3 H) 2.71 (s, 3 H) 2.64 (s, 6 H)。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(０.５ml)中の７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(５６mg, ０.１９mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(５１mg, ０.２２mmol)および炭酸セシウム(１７５mg, ０.５４mmol)の混合物を、１００℃で２時間加熱した。反応混合物を環境温度まで冷却し、水に注ぎ、クロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(２〜４０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−クロロホルム)。生成物のフラクションを合わせ、真空で濃縮し、(Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(３４mg, 収率５０％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.10 (br. s., 1 H) 4.14 (s, 3 H) 4.03 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.68 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.39 (dd, J=14.93, 1.63 Hz, 1 H) 2.74 - 3.07 (m, 5 H) 2.68 (s, 3 H) 2.04 - 2.28 (m, 2 H) 1.70 - 1.86 (m, 1 H) 1.44 - 1.67 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.10; [M+H]⁺ = 361.32。

実施例２７４
(Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１.５ml)中の７−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−アミン(３００mg, １.６７mmol)の懸濁液に、１６.０Ｍ水酸化ナトリウム(２１０μｌ, ３.４mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この時点で二硫化炭素(２５０μｌ, ４.１５mmol)を加え、得られた帯赤褐色の混合物を１０分間撹拌した。さらに１６.０Ｍ水酸化ナトリウム(２１０μｌ, ３.４mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後にヨードメタン(２５０μｌ, ４.００mmol)を滴下した。混合物を１０分間撹拌し、この時点で多量の黄色の沈殿物が形成した。物質を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、７−メトキシ−５−メチルチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチ酸ジメチルを黄色の固体として得た(３２４mg, 収率６９％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.60 (s, 1 H) 4.20 (s, 3 H) 2.65 (s, 6 H)。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(３ml)中の、７−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１５０mg, ０.５２mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１３２mg, ０.５８mmol)および炭酸セシウム(４２７mg, １.３１mmol)の混合物を、１００℃で２時間加熱した。反応混合物を環境温度まで冷却し、水に注ぎ、クロロホルム(４×)で抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(２〜４０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]−クロロホルム)。生成物のフラクションを合わせ、真空で濃縮し、(Ｒ)−Ｎ−(７−メトキシチアゾロ[５,４−ｄ]ピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(９５mg, 収率５１％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.12 (br. s., 1 H) 8.52 (s, 1 H) 4.16 (s, 3 H) 4.05 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.70 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.40 (dd, J=14.93, 1.88 Hz, 1 H) 2.70 - 3.07 (m, 5 H) 2.08 - 2.27 (m, 2 H) 1.68 - 1.85 (m, 1 H) 1.48 - 1.66 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.90; [M+H]⁺ = 347.34。

実施例２７５
(Ｒ)−２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)チアゾール−５−カルボニトリル

(Ｒ)−２−(４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−イルアミノ)チアゾール−５−カルボニトリルを、実施例２７４の方法によって、２−アミノ−５−シアノチアゾールから出発して合成した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 9.05 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 3.86 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 3.61 (d, J=10.38 Hz, 1 H), 3.01 - 3.10 (m, 2 H), 2.83 (t, J=7.63 Hz, 2 H), 2.62 - 2.71 (m, 2 H), 2.09 (s, 1 H), 1.90 - 1.97 (m, 2 H), 1.54 - 1.62 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.52; [M+H]⁺ = 290.0。

実施例２７６
(Ｒ)−Ｎ−(７−ブロモピロロ[１,２−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(７−ブロモピロロ[１,２−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７４の方法によって、７−ブロモピロロ[１,２−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミンから出発して合成した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.13 (1 H, s), 7.04 (1 H, d, J=4.53 Hz), 6.77 (1 H, d, J=4.53 Hz), 4.09 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.79 (1 H, d, J=10.58 Hz), 3.24 (1 H, d), 3.12 (1 H, d), 2.70 - 3.00 (4 H, m), 2.06 - 2.25 (2 H, m), 1.52 - 1.86 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.62; [M+H]⁺ = 377.2。

実施例２７７
(Ｒ)−Ｎ−(１,６−ナフチリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(１,６−ナフチリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７４の方法によって、１,６−ナフチリジン−２−アミンから出発して合成した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.99 (1 H, s), 8.48 (1 H, d, J=6.04 Hz), 8.20 (1 H, d, J=8.56 Hz), 7.77 (1 H, d, J=6.04 Hz), 7.12 (1 H, d, J=8.81 Hz), 4.12 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.82 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.36 (1 H, d), 3.21 (1 H, d), 2.79 - 3.09 (4 H, m), 2.08 - 2.30 (2 H, m), 1.56 - 1.95 (3 H, m). (LC/MS) R.T. = 0.38; [M+H]⁺ = 310.3。

実施例２７８
(Ｒ)−Ｎ−(キナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(キナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７４の方法によって、２−アミノキナゾリンから出発して合成した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.27 (1 H, s), 7.72 - 7.99 (3 H, m), 7.47 (1 H, dd, J=7.55, 3.78 Hz), 4.07 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.76 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.26 (1 H, br. s.), 3.13 (1 H, d), 2.70 - 3.03 (4 H, m), 2.17 (2 H, br. s.), 1.50 - 1.88 (3 H, m). (LC/MS) R.T. = 1.11; [M+H]⁺ = 310.3。

実施例２７９
(Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(２,４−ジクロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

(２,４−ジクロロフェニル)メタンアミン(２ｇ, １１.４mmol)を、メタノール(１０ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(２.０４ｇ, １２.６mmol)の溶液に加えた。混合物を７０℃で１時間加熱した。混合物をクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, １００％酢酸エチル)。望ましいフラクションを濃縮し、Ｎ−(２,４−ジクロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミドを無色の粘性の油状物として得た(２.８ｇ, ９.２mmol, 収率７２.７％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 7.27 - 7.70 (m, 3 H), 4.77 (s, 1 H), 4.14 - 4.35 (m, 2 H), 3.45 - 3.68 (m, 4 H), 1.09 - 1.29 (m, 6 H). LC/MS RT=2.03; [M+H]⁺ = 304.9。

工程Ｂ：６,８−ジクロロイソキノリン−３−アミン

硫酸(４ml, ７５mmol)に、Ｎ−(２,４−ジクロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(２ｇ, ６.６mmol)を室温で加えた。反応物を４０℃で１８時間加熱した。ＴＬＣおよびＬＣ／ＭＳにより、生成物の存在が示された。反応物を室温まで冷却し、反応混合物がｐＨ約７になるまで、水性ＮａＯＨ(約１５Ｍ)で反応停止させた。粗生成物を酢酸エチル(２×５０ml)で抽出し、有機物をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, １０〜８０％酢酸エチル／ヘキサン)、５,７−ジクロロイソキノリン−１−アミンを暗黄色の粉末として得た(０.３２ｇ, １.５０mmol, 収率２２.９％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 8.99 (s, 1 H), 7.64 - 7.73 (m, 1 H), 7.30 (d, J=2.01 Hz, 1 H), 6.61 (s, 1 H), 6.43 (s, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.40; [M+H]⁺ = 213.1。

工程Ｃ：６,８−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン

ジクロロメタン(２０ml)中の６,８−ジクロロイソキノリン−３−アミン(０.２７ｇ, １.２８mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.３０ｇ, １.２９mmol)を加え、反応混合物を４０℃で４時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、クロマトグラフィーを行い(Biotage, １０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、６,８−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリンを粉末として得た(０.２ｇ, ０.７８mmol, 収率６１.９％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 9.42 (s, 1 H), 8.16 (d, J=1.83 Hz, 1 H), 8.02 (d, J=2.14 Hz, 1 H), 7.92 (s, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.63; [M+H]⁺ = 255.0。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１０ml)中の６,８−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.１７ｇ, ０.６７mmol)に、炭酸セシウム(０.５４３ｇ, １.６７mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１５ｇ, ０.６７mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。生成物をＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.３１ml, ２.０mmol)で処理した。反応物を９０℃で４時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物を少量の酢酸エチルに溶かすと、沈殿物が形成した。それを濾過して取り、少量の酢酸エチルで洗浄し、真空オーブン中で乾燥させ、(Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.０９４ｇ, ０.２４mmol, 収率３６.６％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 9.23 (s, 1 H), 8.71 - 8.83 (m, 1 H), 7.90 - 8.00 (m, 1 H), 7.57 - 7.67 (m, 1 H), 7.13 - 7.24 (m, 1 H), 3.79 - 3.90 (m, 1 H), 3.53 - 3.64 (m, 1 H), 2.93 - 3.04 (m, 2 H), 2.72 - 2.82 (m, 2 H), 2.61 - 2.70 (m, 2 H), 1.99 (s, 1 H), 1.90 (s, 1 H), 1.59 (d, J=4.78 Hz, 2 H), 1.40 - 1.50 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.68; [M+H]⁺ = 377.1。

実施例２８０

(Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(３,４−ジクロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

(３,４−ジクロロフェニル)メタンアミン(２ｇ, １１.４mmol)を、メタノール(１０ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(２.０４ｇ, １２.６mmol)の溶液に加えた。混合物を７０℃で１時間加熱した。混合物をクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, １００％酢酸エチル)。望ましいフラクションを濃縮し、Ｎ−(３,４−ジクロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミドを無色の粘性の油状物として得た(２.８ｇ, ９.２mmol, 収率７２.７％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.45 (m, 1 H), 7.40 (m, 1 H), 7.19 (dd, J=8.09, 1.98 Hz, 1 H), 4.94 (s, 1 H), 4.43 (s, 2 H), 3.47 - 3.77 (m, 4 H), 1.41 - 1.79 (m, 6 H). LC/MS RT=2.15; [M+H]⁺ = 305.1。

工程Ｂ：６,７−ジクロロイソキノリン−３−アミンおよび５,６−ジクロロイソキノリン−３−アミン

硫酸(４ml, ７５mmol)に、Ｎ−(３,４−ジクロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(２ｇ, ６.６mmol)を室温で加えた。反応物を４０℃で４９時間加熱した。ＴＬＣおよびＬＣ／ＭＳにより、生成物の存在が示された。反応物を室温まで冷却し、反応混合物がｐＨ約７になるまで水性ＮａＯＨ(約１５Ｍ)で反応停止させた。粗生成物を酢酸エチル(２×５０ml)で抽出し、有機物をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, １００％酢酸エチルから[９０／１０％酢酸エチル／ＭｅＯＨ])、位置異性体６,７−ジクロロイソキノリン−１−アミンおよび５,６−ジクロロイソキノリン−３−アミンの約１：１混合物を、暗黄色の粉末として得た(１.２ｇ, ５.６４mmol, 収率８６.０％)。位置異性体を分離せずに用いた。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 8.90 (s, 1 H), 8.83 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 7.84 (d, J=8.54 Hz, 1 H), 7.28 (d, J=8.85 Hz, 1 H), 6.83 (s, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 6.48 (s, 2 H), 6.25 (s, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.59; [M+H]⁺ = 213.0。

工程Ｃ：６,７−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリンおよび５,６−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン

ジクロロメタン(２０ml)中の６,７−ジクロロイソキノリン−３−アミンおよび５,６−ジクロロイソキノリン−３−アミン(０.４１０ｇ, １.９２４mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.４６９ｇ, ２.０２１mmol)を加え、反応混合物を４０℃で４時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、クロマトグラフィーを行い(Biotage, １０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、分離した位置異性体６,７−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.２ｇ, ０.７８４mmol, 収率４０.７％)および５,６−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリンを黄色の固体として得た(０.２３ｇ, ０.９０２mmol, 収率４６.８％)。
５,６−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.10 (s, 1 H), 7.87 (d, J=8.85 Hz, 1 H), 7.82 (s, 1 H), 7.66 (d, J=8.55 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.63; [M+H]⁺ = 255.0。
６,７−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.04 (s, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 7.94 (s, 1 H), 7.37 (s, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 3.42; [M+H]⁺ = 255.0。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１０ml)中の６,７−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.１３ｇ, ０.５１０mmol)に、炭酸セシウム(０.４２ｇ, １.２７mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１１８ｇ, ０.５１５mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物を、ＤＭＦ(１０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２３８ml, １.５２９mmol)で処理した。反応物を９０℃で１８時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。これをクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(０.１２ｇ, ０.３１２mmol, 収率６１.２％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.03 (s, 1 H), 8.87 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 7.24 (s, 1 H), 3.88 - 4.06 (m, 1 H), 3.60 - 3.74 (m, 1 H), 3.42 (d, J=14.65 Hz, 1 H), 2.82 - 3.15 (m, 5 H), 2.23 - 2.34 (m, 1 H), 2.18 (s, 1 H), 1.72 - 1.87 (m, 1 H), 1.48 - 1.70 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.63; [M+H]⁺ = 377.1。

実施例２８１
(Ｒ)−Ｎ−(５,６−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１０ml)中の５,６−ジクロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.１１ｇ, ０.４３１mmol)に、炭酸セシウム(０.３５１ｇ, １.０７８mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１００ｇ, ０.４３５mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製した(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)。生成物をＤＭＦ(１０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２０２ml, １.２９３mmol)で処理した。反応物を９０℃で１８時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、(Ｒ)−Ｎ−(５,６−ジクロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の粉末として得た(０.０８４ｇ, ０.２１８mmol, 収率５０.６％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.09 (s, 1 H), 8.93 (s, 1 H), 7.63 - 7.82 (m, 2 H), 7.40 (d, J=8.55 Hz, 1 H), 3.99 (d, J=9.16 Hz, 1 H), 3.78 (d, J=8.85 Hz, 1 H), 3.51 (d, J=14.65 Hz, 1 H), 3.30 (d, J=14.65 Hz, 1 H), 2.90 - 3.23 (m, 4 H), 2.33 - 2.48 (m, 1 H), 2.29 (s, 1 H), 1.83 - 1.94 (m, 1 H), 1.62 - 1.83 (m, J=42.12 Hz, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.57; [M+H]⁺ = 377.1。

実施例２８２
(Ｒ)−Ｎ−(３,４−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(３,４−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６７の方法によって、２−アミノ−３,４−ジクロロピリジンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 9.10 (s, 1 H), 8.08 (d, J=5.49 Hz, 1 H), 7.13 (d, J=5.49 Hz, 1 H), 3.86 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.60 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 2.96 - 3.05 (m, 2 H), 2.77 (t, J=7.63 Hz, 2 H), 2.66 (t, J=7.78 Hz, 2 H), 1.97 - 2.05 (m, 1 H), 1.86 - 1.94 (m, 1 H), 1.54 - 1.63 (m, 2 H), 1.43 - 1.51 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.78; [M+H]⁺ = 327.0。

実施例２８３
(Ｒ)−Ｎ−(３−クロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(３−クロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６７の方法によって、２−アミノ−３−クロロピリジンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 9.06 (s, 1 H), 8.14 - 8.19 (m, 1 H), 7.74 - 7.79 (m, J=7.78, 1.83, 1.83, 1.68 Hz, 1 H), 6.86 - 6.91 (m, 1 H), 3.81 - 3.89 (m, 1 H), 3.55 - 3.63 (m, 1 H), 2.96 - 3.04 (m, 2 H), 2.78 (t, J=7.63 Hz, 2 H), 2.67 (t, J=7.63 Hz, 2 H), 1.96 - 2.02 (m, 1 H), 1.86 - 1.92 (m, J=5.65, 3.20 Hz, 1 H), 1.54 - 1.63 (m, J=6.87, 3.66, 3.51 Hz, 2 H), 1.42 - 1.49 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.26; [M+H]⁺ = 293.0。

実施例２８４
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−３−フルオロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−３−フルオロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６７の方法によって、２−アミノ−３−フルオロ−５−クロロピリジンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 8.81 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.79 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 3.83 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.58 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 2.99 (s, 2 H), 2.71 - 2.80 (m, 2 H), 2.61 - 2.70 (m, 2 H), 2.00 (s, 1 H), 1.83 - 1.92 (m, 1 H), 1.53 - 1.62 (m, 2 H), 1.41 - 1.50 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.52; [M+]⁺ = 311.0。

実施例２８５
(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６７の方法によって、２−アミノ−６−クロロピリジンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D₆) δ ppm 8.33 - 8.42 (m, 1 H), 7.60 - 7.68 (m, 1 H), 6.94 (d, J=7.02 Hz, 1 H), 6.72 - 6.81 (m, 1 H), 3.86 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 3.57 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 2.97 (s, 2 H), 2.69 - 2.78 (m, 2 H), 2.63 - 2.68 (m, J=7.63, 7.63 Hz, 2 H), 1.95 - 2.03 (m, 1 H), 1.83 - 1.92 (m, 1 H), 1.53 - 1.62 (m, 2 H), 1.41 - 1.49 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.43; [M+H]⁺ = 293.0。

実施例２８６
(Ｒ)−Ｎ−(４,６−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４,６−ジクロロピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６７の方法によって、２−アミノ−４,６−ジクロロピリジンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.43 (s, 1 H), 7.13 (s, 1 H), 6.84 (s, 1 H), 3.86 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 3.59 (d, J=10.07 Hz, 1 H), 2.98 (s, 2 H), 2.58 - 2.86 (m, 4 H), 1.94 - 2.13 (m, 1 H), 1.78 - 1.95 (m, 1 H), 1.36 - 1.65 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.87; [M+H]⁺ = 327.0。

実施例２８７
(Ｒ)−Ｎ−(２−メトキシ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(２５ml)中の、４−ブロモピリジン−２−アミン(０.５ｇ, ２.８mmol)、２−メトキシピリジン−３−イルボロン酸(０.５２ｇ, ３.４mmol)に、１Ｎ炭酸ナトリウム(１０ml, ２.３mmol)を、次に塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体(０.２１ｇ, ０.２６mmol)を加えた。反応混合物を８５℃で３時間撹拌し、室温まで冷却した。生成物を酢酸エチル(２×５０ml)で抽出し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, １００から９０／１０％酢酸エチル−酢酸エチル／メタノール)、２−メトキシ−３,４'−ビピリジン−２'−アミンを褐色の粉末として得た(０.５３ｇ, ２.６３mmol, 収率９３％)。生成物を次の工程に直接用いた。

工程Ｂ：２'−イソチオシアナト−２−メトキシ−３,４'−ビピリジン

ジクロロメタン(２０ml)中の２−メトキシ−３,４'−ビピリジン−２'−アミン(０.５３ｇ, ２.６３mmol)に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.６２ｇ, ２.７mmol)を加え、反応混合物を４０℃で４時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、クロマトグラフィーを行い(Biotage, １０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、２'−イソチオシアナト−２−メトキシ−３,４'−ビピリジンを得た(０.４６ｇ, １.９mmol, 収率７１.８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.67 (d, J=2.44 Hz, 1 H), 8.26 (dd, J=4.88, 1.53 Hz, 1 H), 8.15 (dd, J=8.24, 2.44 Hz, 1 H), 7.89 (dd, J=7.32, 1.53 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 7.15 (dd, J=7.32, 4.88 Hz, 1 H), 3.91 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.87; [M+H]⁺ = 244.9。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(２−メトキシ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(２０ml)中の２'−イソチオシアナト−２−メトキシ−３,４'−ビピリジン(０.０９ｇ, ０.３７mmol)に、Ｅｔ_３Ｎ(０.１１ml, ０.８１mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.０９ｇ, ０.３７mmol)を室温で加えた。反応物を７０℃で２時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮した。粗製のウレアをクロマトグラフィーによって精製し(biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、純粋なウレア中間体を得た。生成物をＤＭＦ(２０ml)およびＮ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.１７ml, １.１mmol)で処理した。反応物を９０℃で１８時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, ８５％ＣＨＣｌ_３, １４％ＭｅＯＨ, １％ＮＨ_４ＯＨ)、生成物を含むフラクションを合わせた。ＬＣ／ＭＳおよび^１Ｈ−ＮＭＲにより、幾らかの不純物が存在するかもしれないことが示された。純粋でない生成物について逆相ＨＰＬＣを行い、(Ｒ)−Ｎ−(２−メトキシ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(０.０２ｇ, ０.０５mmol, 収率１４.０５％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ ppm 9.07 (s, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 8.17 (dd, J=4.73, 1.68 Hz, 1 H), 7.79 (d, J=7.32 Hz, 2 H), 7.10 (dd, J=7.32, 4.88 Hz, 1 H), 6.79 - 6.92 (m, 1 H), 3.76 - 3.97 (m, 4 H), 3.51 - 3.66 (m, 1 H), 2.92 - 3.09 (m, 2 H), 2.59 - 2.82 (m, 4 H), 1.85 - 2.03 (m, 2 H), 1.53 - 1.71 (m, 2 H), 1.35 - 1.49 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.05; [M+H]⁺ = 366.1。

実施例２８８
(Ｒ)−Ｎ−(ベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：ベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン

オーブン乾燥した丸底フラスコに、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンイミン (５００mg, ３.１０mmol)、２−アミノフェノール(１８８mg, １.７２４mmol)および無水ＴＨＦ(２０ml)を室温で入れた。得られた懸濁液をＮ_２下で２時間還流し、ＬＣ／ＭＳに基づいて変換の完了を見た。溶媒を真空で除去し、残渣を、Biotage Flash Collectorで精製し、３０〜８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン(１２００ml)で溶出し、予測された生成物であるベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミンを白色の固体として得た(２００mg, １.５mmol, 収率８７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 6.20 (br. s., 2 H) 7.02 - 7.11 (m, 1 H) 7.17 - 7.22 (m, 1 H) 7.29 (d, J=7.53 Hz, 1 H) 7.36 (d, J=7.03 Hz, 1 H ). MS (LC/MS) R.T. = 1.05; [M+H]⁺ = 134.96。

工程Ｂ：ベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１０ml)中のベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン(２００mg, １.４９１mmol)の無色の溶液に、水酸化ナトリウム(２０Ｎ, １４９μｌ, ２.９８mmol)を加え、緑色の懸濁液を得た。混合物を室温で１５分間撹拌した。二硫化炭素(２２５μｌ, ３.７３mmol)を加え、暗褐色の溶液を得た。反応物を室温で１５分間撹拌し、水酸化ナトリウム(２０Ｎ, １４９μｌ, ２.９８mmol)を添加し、さらに１０分間撹拌した。ヨードメタン(２２４μｌ, ３.５８mmol)を滴下した。１２分後に緑色の固体が沈殿した。反応物をさらに２時間撹拌した。固体を濾過によって集め、ＤＭＦ(２×１ml)で、そしてＨ_２Ｏ(２×１ml)で洗浄し、ハウスバキューム(house vacuum)下で３０分間乾燥させ、さらに、オーブン中で、真空で一夜乾燥させ、予測された生成物であるベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを白色の固体として得た(２５８.５mg, １.０８５mmol, 収率７２.７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.70 (s, 6 H) 7.24 - 7.34 (m, 2 H) 7.45 - 7.50 (m, 1 H) 7.66 - 7.74 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.76, [M+H]⁺ = 238.96。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(ベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン
１０mlのバイアルに、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(６９.５mg, ０.３６１mmol)、ＤＭＦ(２ml)、ＤＩＥＡ(０.０６３ml, ０.３６１mmol)およびＣｓ_２ＣＯ_３(２３５mg, ０.７２２mmol)を室温で入れ、次にベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(８６mg, ０.３６１mmol)を入れた。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、出発物質が消費されたことが示された。混合物をＭｅＯＨで希釈し、分取ＨＰＬＣによって精製し、予測された生成物である(Ｒ)−Ｎ−(ベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄褐色のゴム状物質として得た(１０１.５mg, ０.３２３mmol, 収率９０％)。
¹H NMR (400 MHz, アセトン-d₆) δ ppm 2.07 - 2.14 (m, 2 H) 2.20 (ddd, J=8.78, 5.27, 3.26 Hz, 2 H) 2.33 - 2.45 (m, 1 H) 2.62 (d, J=2.26 Hz, 1 H) 3.34 - 3.47 (m, 3 H) 3.48 - 3.58 (m, 1 H) 3.75 - 3.88 (m, 2 H) 4.15 (d, J=10.54 Hz, 1 H) 4.32 (d, J=10.54 Hz, 1 H) 7.13 - 7.26 (m, 2 H) 7.41 (td, J=3.70, 1.63 Hz, 1 H) 9.24 (br, s, 1H). MS (LC/MS) R.T. = 0.792, [M+H]⁺ = 299.17。

実施例２８９
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(５ml)中の５−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン(７００mg, ４.１５mmol)の褐色の溶液に、水酸化ナトリウム(２０Ｎ, ４１５μｌ, ８.３０mmol)を加え、灰色の懸濁液を得た。混合物を室温で１５分間撹拌した。二硫化炭素(６２６μｌ, １０.３８mmol)を室温で加え、褐色の溶液を得た。混合物を室温で１５分間撹拌し、水酸化ナトリウム(２０Ｎ, ２０８μｌ, ４.１６mmol)を加えた。１０分後、ヨードメタン(６２３μｌ, ９.９７mmol)を滴下した。溶液から灰色の固体が生じた。反応物をさらに室温で２時間撹拌した。固体を濾過によって集め、ＤＭＦ／Ｈ_２Ｏ(５０：５０, ２×２ml)で洗浄し、ハウスバキューム下で３０分間乾燥させ、さらに、オーブン中、真空下で６５℃で１.５時間乾燥させ、予測された生成物である５−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを、次の工程に用いるのに十分な程純粋な灰白色の固体として得た(７８０mg, ２.８６mmol, 収率６８.９％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.69 (s, 6 H) 7.37 (dd, J=8.53, 2.26 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=9.03 Hz, 1 H) 7.75 (d, J=1.76 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.44; [M+H]⁺ = 272.9。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(５−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

１０mlのバイアルに、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１０６mg, ０.５５０mmol)、ＤＭＦ(２ml)、ＤＩＥＡ(０.０９６ml, ０.５５０mmol)およびＣｓ_２ＣＯ_３(３５８mg, １.１００mmol)を室温で入れ、次に５−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１５０mg, ０.５５０mmol)を入れた。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、出発物質が消費されたことが示された。反応混合物をＭｅＯＨで希釈し、分取ＨＰＬＣによって精製し、予測された生成物である(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の固体として得た(１０６.５mg, ０.３mmol, 収率５３.０％)。
¹H NMR (400 MHz, アセトン-d₆) δ ppm 2.08 - 2.30 (m, 3 H) 2.35 - 2.48 (m, 1 H) 2.60 - 2.73 (m, 1 H) 3.48 (qd, J=7.53, 7.28 Hz, 3 H) 3.54 - 3.68 (m, 1 H) 3.79 - 4.00 (m, 2 H) 4.18 (d, J=10.54 Hz, 1 H) 4.35 (d, J=10.54 Hz, 1 H) 7.19 (dd, J=8.53, 2.01 Hz, 1 H) 7.30 - 7.47 (m, 2 H) 9.10 (br. s., 1 H). MS(LC/MS) R.T. = 1.56; [M+H]⁺ = 333.13。

実施例２９０
(Ｒ)−Ｎ−(オキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：オキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−アミン

オーブン乾燥した丸底フラスコに、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンイミン(５００mg, ３.１０mmol)、２−アミノピリジン−３−オール(１７１mg, １.５５１mmol)および無水ＴＨＦ(２０ml)を室温で入れた。得られた懸濁液を、Ｎ_２下、１時間還流した。ＬＣ／ＭＳにより、出発物質が消費されたことが示された。溶媒を真空で除去し、残渣をさらに精製することなく次の工程に用いた。
MS(LC/MS) R.T. = 0.235; [M+H]⁺ = 136.09。

工程Ｂ：オキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１２ml)中の粗製のオキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−アミン(８１１mg, ６mmol)(工程Ａより)に、ＮａＯＨ(２０Ｎ, ６００μｌ, １２.００mmol)を加え、黄褐色の溶液を得た。これを室温で１５分間撹拌した。二硫化炭素(９０４μｌ, １５.００mmol)を加え、橙色の溶液を得た。混合物を室温で１５分間撹拌し、ＮａＯＨ(２０Ｎ, ６００μｌ, １２.００mmol)を加え、１０分間撹拌を続け、暗赤色の溶液を得た。ヨードメタン(９００μｌ, １４.４０mmol)を滴下し、１時間後に黄色の固体の沈殿が起こり、約８０％が変換された。混合物をＭｅＯＨで希釈し、分取ＨＰＬＣによって精製し、予測された生成物であるオキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを白色の固体として得た(３５mg, ０.１４６mmol, 収率２.４％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.71 (s, 6 H) 7.22 (dd, J=8.03, 5.02 Hz, 1 H) 7.72 (dd, J=8.03, 1.25 Hz, 1 H) 8.49 (dd, J=5.02, 1.51 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.358; [M+H] = 240.04。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(オキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

１０mlのバイアルに、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(８.５３mg, ０.０４４mmol)、ＤＭＦ(２ml)、ＤＩＥＡ(７.７４μｌ, ０.０４mmol)およびＣｓ_２ＣＯ_３(２８.９mg, ０.０８９mmol)を室温で入れ、次にオキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１０.６mg, ０.０４４mmol)を入れた。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。反応混合物をＭｅＯＨで希釈し、分取ＨＰＬＣによって精製し、予測された生成物である(Ｒ)−Ｎ−(オキサゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の固体として得た(１３mg, ０.０３８mmol, 収率８６％)。
¹H NMR (400 MHz, アセトン-d₆) δ ppm 1.54 - 1.60 (m, 1 H) 1.71 - 1.77 (m, 2 H) 2.16 - 2.24 (m, 1 H) 2.77 - 2.82 (m, 2 H) 2.89 (t, J=7.91 Hz, 4 H) 3.13 - 3.25 (m, 2 H) 3.90 (d, J=10.29 Hz, 1 H) 4.22 (d, J=10.29 Hz, 1 H) 7.13 (dd, J=8.03, 5.02 Hz, 1 H) 7.70 (dd, J=7.91, 1.13 Hz, 1 H) 8.27 (dd, J=5.14, 1.13 Hz, 1 H) 9.11 (br. s., 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.443; [M+H]⁺ = 300.16。

実施例２９１
(２Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

工程Ａ：６−メチルイソキノリン−３−アミン

メタノール(８ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(１.１ｇ, ６.８２mmol)の溶液に、ｐ−トリルメタンアミン(０.７８８ｇ, ６.５０mmol)を環境温度で滴下した。反応フラスコを、予め加熱した油浴に入れ、７０℃で１６時間撹拌し、取り外して冷却した。揮発性成分を減圧下で除去し、粗製の物質を硫酸(５ml)に環境温度で滴下した。反応混合物を７２時間撹拌し、フラスコを氷−水浴に入れ、水(５０ml)で希釈し、水酸化ナトリウム(１０Ｎ)でｐＨ＝１０までゆっくりと中和した。反応混合物が塩基性になったとき、灰色の沈殿物が形成した。この沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、６−メチルイソキノリン−３−アミンを灰色の粉末として得た(０.６５ｇ, ６３％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.73 (s, 1 H), 7.69 (d, J=8.28 Hz, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 7.00 (d, J=8.28 Hz, 1 H), 5.81 (s, 1 H), 2.40 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.37; [M+H]⁺ = 159.10。

工程Ｂ：３−イソチオシアナト−６−メチルイソキノリン

ジクロロメタン(１０ml)中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(２２０mg, ０.９４８mmol)の溶液に、環境温度で、６−メチルイソキノリン−３−アミン(１２５mg, ０.７９０mmol)を加えた。反応混合物を予め加熱した油浴中に置き、４０℃で１８時間撹拌し、油浴から取り出し、環境温度まで冷却した。混合物を濃縮し、粗製の物質をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中５〜３０％酢酸エチル)、３−イソチオシアナト−６−メチルイソキノリンを灰白色の固体として得た(７５mg, ０.３７５mmol, 収率４７.４％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.03 (s, 1 H), 7.88 (d, J=8.24 Hz, 1 H), 7.56 (s, 1 H), 7.46 (dd, J=8.24, 1.53 Hz, 1 H) , 7.39 (s, 1 H) 2.57 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.92; [M+H]⁺ = 201.13。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(６−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(６ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(６５.８mg, ０.２８５mmol)に、トリエチルアミン(０.０９０ml, ０.６３mmol)および３−イソチオシアナト−６−メチルイソキノリン(５７mg, ０.２８５mmol)を加えた。懸濁液を、予め加熱した油浴中に置き、７０℃で２時間３０分撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.１７７ml, １.１４mmol)を加え、混合物を８５℃で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(クロロホルム中０〜４０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム])、次に逆相分取ＨＰＬＣによって精製した(０〜４０％ＴＦＡ−メタノール−水)。生成物の溶液を、UCT Clean-up CHQAX15M25カートリッジでＭｅＯＨ(３×１０ml)を用いて濾過し、濃縮し、予測された生成物である(Ｓ)−１−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)−３−(６−メチルイソキノリン−３−イル)チオウレアを黄褐色のゴム状物質として得た。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.11 (s, 1 H), 8.02 (d, J=8.53 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.47 (d, J=8.53 Hz, 1 H), 4.47 (d, J=10.54 Hz, 1 H), 4.31 (d, J=10.54 Hz, 1 H), 4.10 (d, J=14.81 Hz, 1 H), 3.92 (d, J=14.81 Hz, 1 H), 3.53 - 3.71 (m, 2 H), 3.27 - 3.51 (m, 3 H), 2.84 (br.s, 1 H), 2.55 (s, 3H), 2.48 (m, 1 H), ) 2.10 - 2.30 (m, 3H). MS (LC/MS) R.T. = 1.24; [M+H]⁺ = 323.2。

実施例２９２
(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(４−ブロモベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

(４−ブロモフェニル)メタンアミン塩酸塩(２.３５９ｇ, １０.３９mmol)およびナトリウムメトキシド(２.３７６ml, １０.３９mmol)を、メタノール(１０ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(３.３５ｇ, ２０.７８mmol)の溶液に加えた。濁った混合物を７０℃で１.５時間加熱し、得られた黄色の混合物を濃縮した。残渣をシリカゲルによって精製し、１００％酢酸エチル、黄色の粘性の油状物を得た(２.０４ｇ, ６２％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.47 (2 H, d, J=8.56 Hz), 7.23 (2 H, d, J=8.06 Hz), 6.76 (1 H, br. s.), 5.31 (1 H, br. s.), 4.94 (1 H, br. s.), 4.45 (2 H, br. s.), 3.47 - 3.77 (4 H, m), 1.26 (6 H, t, J=7.05 Hz). LCMS:R.T. = 2.12; [M+2]⁺ = 317.2。

工程Ｂ：６−ブロモイソキノリン−３−アミン

硫酸(４ml, ９５〜９８％)中のＮ−(４−ブロモベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(１.５３ｇ, ４.８５mmol)を、４０℃で１４時間加熱した。混合物を１ＭＮａＯＨでｐＨ７まで中和し、得られた懸濁液を濾過した。残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、ヘキサン中２０〜５５％酢酸エチルで精製した。望ましいフラクションを濃縮し、帯黄褐色の固体を得た(０.４３４ｇ, ４０％)。
LCMS:R.T. = 1.62; [M+2]⁺ = 225.1。

工程Ｃ：６−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリン

ジクロロメタン中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.２５１ｇ, １.０８０mmol)の溶液に、室温で、６−ブロモイソキノリン−３−アミン(０.２４１ｇ, １.０８０mmol)を加えた。溶液を室温で３時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳにより望ましい生成物の形成が示された。深橙色の溶液をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜１０％酢酸エチル−ヘキサン)、６−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリンを黄色の油状物として得た(０.１ｇ, ０.３７７mmol, 収率３５％)。
R.T. = 2.54; [M+H]⁺ = 267.04。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１５ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.０８６ｇ, ０.３７７mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.３０７ｇ, ０.９４３mmol)および６−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.１ｇ, ０.３７７mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.１７６ml, １.１３２mmol)を加え、混合物をさらに１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(５〜２５％ [９.５：０.５メタノール：水酸化アンモニウム]−酢酸エチル)、(Ｒ)−Ｎ−(６−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(０.０５４ｇ, ０.１３５mmol, 収率３６％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.04 (1 H, s), 7.80 - 8.05 (2 H, m), 7.55 (1 H, dd, J=8.81, 1.76 Hz), 7.37 (1 H, br. s.), 4.10 (1 H, d, J=10.58 Hz), 3.87 (1 H, d, J=10.83 Hz), 3.68 - 3.77 (1 H, m), 3.56 - 3.67 (1 H, m), 3.29 - 3.49 (4 H, m), 2.45 (1 H, br. s.), 2.28 - 2.41 (1 H, m), 1.86 - 2.15 (3 H, m). LCMS:R.T. = 1.76; [M+]⁺ = 387.21。

実施例２９３
(Ｒ)−Ｎ−(７−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(３−ブロモベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

(３−ブロモフェニル)メタンアミン塩酸塩(３.６２ｇ, １５.６４mmol)およびナトリウムメトキシド(３.５８ml, １５.６４mmol)を、メタノール(１５ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(５.０４２ｇ, ３１.３mmol)の溶液に加えた。濁った混合物を７０℃で１.５時間加熱し、得られた黄色の混合物を濃縮した。残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、１００％酢酸エチルで精製した。望ましいフラクションを濃縮し、黄色の粘性の油状物を得た(２.５ｇ, ５１％)。
LCMS: R.T. = 2.11; [M+2]⁺ = 317.06。

工程Ｂ：７−ブロモイソキノリン−３−アミンおよび５−ブロモイソキノリン−３−アミン

硫酸(５ml, ９５〜９８％)中のＮ−(３−ブロモベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(２.５ｇ, ７.９３mmol)を、４０℃で５４時間加熱した。混合物を１０Ｍ水性ＮａＯＨで、ｐＨ７まで中和し、得られた懸濁液を濾過した。残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、ヘキサン中２０〜５５％酢酸エチルで、次に１００％酢酸エチルで精製した。フラクションを濃縮し、生成物の混合物を含む褐色の固体を得た(１.０ｇ, ５７％)。
LCMS:R.T. = 1.56; [M+2]⁺ = 225.1。
混合物をそのまま次の工程に用いた。

工程Ｃ：７−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリンおよび５−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリン

ジクロロメタン中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１.１４５ｇ, ４.９３mmol)の溶液に、室温で、７−ブロモイソキノリン−３−アミンおよび５−ブロモイソキノリン−３−アミンの混合物(工程Ｂより)(１.０ｇ, ４.５mmol)を加えた。橙色の溶液を室温で１８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、生成物の形成が示された。深橙色の溶液をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(０〜５％酢酸エチル−ヘキサン)。最初の生成物のフラクションを合わせて、真空で濃縮し、７−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリンを黄色の固体として得た(０.２７ｇ, ０.３７７mmol, 収率２２％)。
¹H NMR (400 MHz, アセトン) δ ppm 9.19 (1 H, s), 8.41 (1 H, s), 7.86 - 8.02 (2 H, m), 7.76 (1 H, s). R.T. = 4.28; [M+H]⁺ = 267.04。

第２の生成物のフラクションを合わせて真空で濃縮し、５−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリンを黄色の固体として得た(０.２５ｇ, ０.３７７mmol, 収率２１％)。
¹H NMR (400 MHz, アセトン) δ ppm 9.24 (1 H, s), 8.23 (1 H, d), 8.15 (1 H, d), 7.81 (1 H, s), 7.64 (1 H, t). LCMS:R.T. = 4.61; [M+H]⁺ = 267.04。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(７−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.２０７ｇ, ０.９０５mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.７３７ｇ, ２.２６３mmol)および７−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.２４ｇ, ０.９０５mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.４２３ml, ２.７２mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、酢酸エチル中５〜１５％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム]を用いて精製した。望ましいフラクションを濃縮し、さらに酢酸エチル中５〜１５％ [９.５：０.５メタノール：水酸化アンモニウム]を用いて精製し、((Ｒ)−Ｎ−(７−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(０.０６１ｇ, ０.１５６mmol, 収率１７％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.96 (1 H, s), 8.12 (1 H, s), 7.66 (2 H, s), 7.32 (1 H, s), 4.01 (1 H, d), 3.73 (1 H, d), 3.35 - 3.42 (1 H, m), 3.22 - 3.29 (1 H, m), 2.84 - 3.17 (4 H, m), 2.13 - 2.35 (2 H, m), 1.62 - 1.96 (3 H, m). LCMS:R.T. = 1.76; [M+]⁺ = 387.21。

実施例２９４
((Ｒ)−Ｎ−(５−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.２０７ｇ, ０.９０５mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.７３７ｇ, ２.２６３mmol)および５−ブロモ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.２４ｇ, ０.９０５mmol)を加えた。懸濁液を室温で３０分間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.４２３ml, ２.７２mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した(５〜１５％ [９.５：０.５メタノール：水酸化アンモニウム]−酢酸エチル)。望ましいフラクションを濃縮し、さらに酢酸エチル中５〜１５％ [９.５：０.５メタノール：水酸化アンモニウム]を用いて精製し、(Ｒ)−Ｎ−(５−ブロモイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄色の固体として得た(０.２４８ｇ, ０.６３４mmol, 収率７０％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.99 (1 H, s), 7.91 (2 H, dd), 7.55 (1 H, br. s.), 7.28 (1 H, t), 3.96 (1 H, d), 3.65 (1 H, d), 3.17 - 3.26 (1 H, m), 3.03 - 3.13 (1 H, m), 2.70 - 2.99 (4 H, m), 2.03 - 2.30 (2 H, m), 1.47 - 1.87 (3 H, m). LCMS:R.T. = 1.69; [M+2]⁺ = 389.21。

実施例２９５
(２Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

工程Ａ：６,８−ジメチルイソキノリン−３−アミン

メタノール(４.９ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(１.５ｇ, ９.３mmol)の溶液に、(２,４−ジメチルフェニル)メタンアミン(１.２ｇ, ８.９mmol)を環境温度で滴下した。反応フラスコを予め加熱した油浴に入れ、７０℃で１６時間撹拌し、冷却し、揮発性成分を減圧下で除去した。粗製の物質を硫酸(１９.７ml)に環境温度で滴下し、７２時間撹拌した。フラスコを氷−水浴に入れ、水(５０ml)で希釈し、水酸化ナトリウム(１０Ｎ)でｐＨ＝１０までゆっくりと中和した。反応混合物を塩基性にしたとき、橙色の沈殿物が形成した。この沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、６,８−ジメチルイソキノリン−３−アミンを得た(１.３７ｇ, ７.９５mmol, ９０％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.82 (s, 1 H), 7.17 (s, 1 H), 6.90 (s, 1 H), 6.72 (s, 1 H), 2.61 (s, 3 H), 2.37 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.77; [M+H]⁺ = 173.15。

工程Ｂ：３−イソチオシアナト−６,８−ジメチルイソキノリン

ジクロロメタン(１９ml)中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１.３５ｇ, ５.８mmol)の溶液に、環境温度で、６,８−ジメチルイソキノリン−３−アミン(１ｇ, ５.８mmol)を加えた。反応混合物を予め加熱した油浴中に置き、４０℃で１８時間撹拌し、冷却し、濃縮し、粗製の物質をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中１０〜３５％酢酸エチル)、３−イソチオシアナト−６,８−ジメチルイソキノリンを黄色の固体として得た(９３.７mg, ０.４３７mmol, ８％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.20 (s, 1 H), 7.36 - 7.44 (m, 2 H), 7.23 (s, 1 H), 2.75 (s, 3 H), 2.51 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.03; [M+H]⁺ = 215.1。

工程Ｃ： (２Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１.４ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(９９mg, ０.４３mmol)に、トリエチルアミン(０.１８ml, １.３mmol)および３−イソチオシアナト−６,８−ジメチルイソキノリン(９３mg, ０.４３mmol)を加えた。懸濁液を、予め加熱した油浴中に置き、７０℃で２時間３０分撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２７ml, １.７mmol)を加え、混合物を８５℃で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(クロロホルム中０〜４０％ [９：１メタノール：水酸化アンモニウム])、次に逆相分取ＨＰＬＣによって精製し(０〜４０％ [０.１％ＴＦＡ]−メタノール−水)、トリフルオロ酢酸塩として(２Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミンを白色の固体として得た(２４mg, ０.０５３mmol, 収率１２％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.29 (s, 1 H), 7.54 (s, 1 H), 7.43 (s, 1 H), 7.34 (s, 1 H), 4.38 (d, J=11.04 Hz, 1 H), 4.17 (d, J=11.04 Hz, 1 H), 3.94- 4.10 (m, 1 H), 3.86 (dd, J=15.06, 2.26 Hz, 1 H), 3.51 - 3.67 (m, 1 H), 3.37 - 3.51 (m, 3 H), 2.77 (s, 3 H), 2.73 (d, J=3.51 Hz, 1 H), 2.48 - 2.57 (m, 3 H), 2.30 - 2.46 (m, 1 H), 1.94 - 2.28 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.90; [M+H]⁺ = 337.38。

実施例２９６
(Ｒ)−Ｎ−(３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、ピリジン−３−イルボロン酸および塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.95 (br. s., 2 H), 8.66 (d, J=4.6 Hz, 1 H), 8.31 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 8.14 (br. s., 1 H), 7.54 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.26 (br. s., 2 H), 3.85 (br. s., 1 H), 3.58 (s, 1 H), 3.00 (br. s., 2 H), 2.67 (br. s., 4 H), 1.90 (br. s., 2 H), 1.59 (br. s., 2 H), 1.45 (br. s., 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.12; [M+H]⁺ = 336.18。

実施例２９７
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、５−クロロピリジン−３−イルボロン酸および塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.92 (s, 2 H), 8.71 (d, J=2.1 Hz, 1 H), 8.19 - 8.39 (m, 2 H), 7.30 (d, J=4.3 Hz, 2 H), 3.77 - 3.95 (m, 1 H), 3.59 (d, J=10.1 Hz, 1 H), 3.01 (d, J=4.9 Hz, 2 H), 2.61 - 2.86 (m, 4 H), 2.00 (s, 1 H), 1.83 - 1.96 (m, 1 H), 1.55 - 1.68 (m, 2 H), 1.40 - 1.54 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.91; [M+H]⁺ = 370.09。

実施例２９８
(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、６−メトキシピリジン−３−イルボロン酸および塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.79 - 9.21 (m, 1 H), 8.46 - 8.66 (m, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 7.97 - 8.14 (m, 1 H), 6.99 - 7.27 (m, 2 H), 6.83 - 6.99 (m, 1 H), 3.92 (s, 4 H), 3.49 - 3.62 (m, 1 H), 2.99 (d, J=4.3 Hz, 2 H), 2.66 (d, J=7.6 Hz, 4 H), 1.79 - 2.05 (m, 2 H), 1.33 - 1.63 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.98; [M+H]⁺ = 366.17。

実施例２９９
(Ｒ)−Ｎ−(６−フルオロ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−フルオロ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、２−フルオロ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジンおよび塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.90 - 9.17 (m, 1 H), 8.57 - 8.71 (m, 1 H), 8.31 (d, J=5.5 Hz, 2 H), 7.31 - 7.40 (m, 1 H), 7.01 - 7.29 (m, 2 H), 3.76 - 3.95 (m, 1 H), 3.59 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 3.01 (br. s., 2 H), 2.68 (br. s., 4 H), 1.95 - 2.05 (m, 1 H), 1.81 - 1.95 (m, 1 H), 1.59 (br. s., 2 H), 1.37 - 1.53 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.68; [M+H]⁺ = 354.09。

実施例３００
(Ｒ)−Ｎ−(４−(３−クロロ−４−フルオロ−フェニル)ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４−(３−クロロ−４−フルオロ−フェニル)ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、３−クロロ−４−フルオロフェニルボロン酸および塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.92 - 9.16 (m, 1 H), 8.28 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.88 - 8.09 (m, 1 H), 7.66 - 7.81 (m, 1 H), 7.43 - 7.63 (m, 1 H), 7.19 - 7.30 (m, 1 H), 6.99 - 7.17 (m, 1 H), 3.77 - 3.94 (m, 1 H), 3.53 - 3.66 (m, 1 H), 2.99 (br. s., 2 H), 2.67 (br. s., 4 H), 1.82 - 2.03 (m, 2 H), 1.52 - 1.66 (m, 2 H), 1.37 - 1.53 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.65; [M+H]⁺ = 387.10。

実施例３０１
(Ｒ)−Ｎ−(４−ｍ−トリルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４−ｍ−トリルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、ｍ−トリルボロン酸および塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.86 - 9.25 (m, 1 H), 8.26 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 7.45 - 7.57 (m, 2 H), 7.39 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 7.27 (d, J=7.3 Hz, 1 H), 7.18 (d, J=4.3 Hz, 2 H), 3.76 - 3.98 (m, 1 H), 3.58 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 2.99 (d, J=5.8 Hz, 2 H), 2.72 - 2.85 (m, 2 H), 2.67 (t, J=7.6 Hz, 2 H), 2.39 (s, 3 H), 1.83 - 2.05 (m, 2 H), 1.52 - 1.64 (m, 2 H), 1.36 - 1.51 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.54; [M+H]⁺ = 349.19。

実施例３０２
(Ｒ)−Ｎ−(４−フェニルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４−フェニルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミンから、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.91 - 9.29 (m, 1 H), 8.27 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 7.73 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 7.38 - 7.58 (m, 3 H), 6.92 - 7.27 (m, 2 H), 3.78 - 3.94 (m, 1 H), 3.59 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 2.91 - 3.08 (m, 2 H), 2.59 - 2.87 (m, 4 H), 1.82 - 2.05 (m, 2 H), 1.59 (br. s., 2 H), 1.36 - 1.53 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.24; [M+H]⁺ = 335.15。

実施例３０３
(Ｒ)−Ｎ−(４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル)ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル)ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、１−メチル−４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−１Ｈ−ピラゾールおよび塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.80 - 9.17 (m, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 8.14 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.94 (br. s., 1 H), 7.06 (d, J=4.3 Hz, 2 H), 3.88 (s, 4 H), 3.56 (d, J=9.8 Hz, 1 H), 2.98 (br. s., 2 H), 2.60 - 2.86 (m, 4 H), 1.79 - 2.07 (m, 2 H), 1.58 (br. s., 2 H), 1.46 (dd, J=9.6, 2.6 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.7; [M+H]⁺ = 339.18。

実施例３０４
(Ｒ)−Ｎ−(４−チアゾール−４−イル)ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４−(チアゾール−４−イル)ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、４−(トリブチルスタンニル)チアゾールおよび塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.25 (d, J=1.8 Hz, 2 H), 8.40 (s, 1 H), 8.27 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 7.23 - 7.53 (m, 2 H), 3.85 (br. s., 1 H), 3.58 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 3.00 (d, J=6.7 Hz, 2 H), 2.73 - 2.85 (m, 2 H), 2.68 (t, J=7.8 Hz, 2 H), 1.84 - 2.04 (m, 2 H), 1.53 - 1.68 (m, 2 H), 1.47 (d, J=7.0 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.78; [M+H]⁺ = 342.17。

実施例３０５
(Ｒ)−Ｎ−(６−ニトロ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−ニトロ−３,４'−ビピリジン−２'−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、４−ブロモピリジン−２−アミン、２−ニトロ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジンおよび塩化１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロロメタン錯体から、実施例２８の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.06 (br. s., 2 H), 8.52 - 8.67 (m, 1 H), 8.31 - 8.46 (m, 2 H), 7.13 - 7.44 (m, 2 H), 3.78 - 3.94 (m, 1 H), 3.60 (d, J=10.1 Hz, 1 H), 3.00 (br. s., 2 H), 2.59 - 2.84 (m, 4 H), 2.00 (br. s., 2 H), 1.59 (br. s., 2 H), 1.38 - 1.53 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.81; [M+H]⁺ = 381.2。

実施例３０６
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−６−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロ−６−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、５−クロロ−６−メチルピリジン−２−アミンを出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.81 (br. s., 1 H), 7.59 (br. s., 1 H), 6.64 (br. s., 1 H), 3.82 (br. s., 1 H), 3.56 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 2.97 (s, 2 H), 2.58 - 2.82 (m, 4 H), 2.48 (br. s., 3 H), 1.98 (br. s., 1 H), 1.81 - 1.93 (m, 1 H), 1.58 (br. s., 2 H), 1.28 - 1.51 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.89; [M+H]⁺ = 307.08。

実施例３０７
(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロ−４−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロ−４−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、５−フルオロ−４−メチルピリジン−２−アミンを出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.59 - 8.97 (m, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 6.50 - 6.95 (m, 1 H), 3.79 (br. s., 1 H), 3.53 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 2.96 (br. s., 2 H), 2.60 - 2.84 (m, 4 H), 2.21 (s, 3 H), 1.95 (br. s., 2 H), 1.52 - 1.66 (m, 2 H), 1.45 (ddd, J=6.9, 2.9, 2.7 Hz, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.63; [M+H]⁺ = 291.12。

実施例３０８
(Ｒ)−Ｎ−(３,５−ジクロロ−６−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(３,５−ジクロロ−６−メチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、３,５−ジクロロ−６−メチルピリジン−２−アミンを出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.83 (br. s., 1 H), 7.86 (d, J=2.1 Hz, 1 H), 3.85 (d, J=9.8 Hz, 1 H), 3.59 (d, J=10.1 Hz, 1 H), 3.00 (br. s., 1 H), 2.73 - 2.84 (m, 1 H), 2.67 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 2.49 (dd, J=14.5, 2.0 Hz, 6 H), 2.01 (br. s., 1 H), 1.89 (br. s., 1 H), 1.59 (br. s., 2 H), 1.37 - 1.51 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.07; [M+H]⁺ = 341.06。

実施例３０９
(Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジメチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４,５−ジメチルピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、４,５−ジメチルピリジン−２−アミンを出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.71 - 9.29 (m, 1 H), 7.92 (s, 1 H), 6.28 - 7.02 (m, 1 H), 3.80 (br. s., 1 H), 3.53 (d, J=10.1 Hz, 1 H), 2.87 - 3.03 (m, 2 H), 2.59 - 2.85 (m, 4 H), 2.04 - 2.26 (m, 6 H), 1.80 - 1.99 (m, 2 H), 1.33 - 1.64 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.67; [M+H]⁺ = 287.20。

実施例３１０
(Ｒ)−Ｎ−(５−メトキシピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−メトキシピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、５−メトキシピリジン−２−アミンを出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.57 - 9.10 (m, 1 H), 7.91 (d, J=3.1 Hz, 1 H), 7.30 (dd, J=8.9, 3.4 Hz, 1 H), 6.54 - 7.04 (m, 1 H), 3.72 - 3.85 (m, 4 H), 3.52 (d, J=10.1 Hz, 1 H), 2.88 - 3.03 (m, 2 H), 2.76 (d, J=5.8 Hz, 2 H), 2.66 (t, J=7.6 Hz, 2 H), 1.81 - 2.02 (m, 2 H), 1.51 - 1.64 (m, 2 H), 1.38 - 1.49 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.46; [M+H]⁺ = 289.17。

実施例３１１
(Ｒ)−Ｎ−(４−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロイソキノリン−３−アミン

メタノール(６０ml)中のイソキノリン−３−アミン(２.０２ｇ, １４.０mmol)に、Ｎ−クロロスクシンイミド(２.１９ｇ, １６.４mmol)を室温で加えた。反応物を室温で３時間撹拌し、真空で濃縮した。粗製の物質についてクロマトグラフィーを行い(Biotage, 10〜１００％酢酸エチル／ヘキサン)、４−クロロイソキノリン−３−アミンを固体として得た(２.１ｇ, １１.８mmol, 収率８４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.86 (s, 1 H), 7.93 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.79 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 7.68 (td, J=6.7, 1.8 Hz, 1 H), 7.24 - 7.35 (m, 1 H), 6.32 (br. s., 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.50; [M+H]⁺ = 178.96。

工程Ｂ： (Ｒ)−Ｎ−(４−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６７の工程Ａ〜Ｂに従って、４−クロロイソキノリン−３−アミン(上記の工程Ａより)を出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.98 - 9.10 (m, 1 H), 8.57 - 8.95 (m, 1 H), 7.99 - 8.18 (m, 2 H), 7.79 (s, 1 H), 7.51 (s, 1 H), 3.84 (d, J=9.8 Hz, 1 H), 3.35 - 3.51 (m, 1 H), 3.02 (d, J=5.5 Hz, 2 H), 2.78 (s, 2 H), 2.61 - 2.73 (m, 2 H), 2.00 (s, 2 H), 1.55 - 1.65 (m, 2 H), 1.42 - 1.54 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.92; [M+H]⁺ = 343.09。

実施例３１２
(Ｒ)−Ｎ−(７−クロロ−８−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(３−クロロ−２−フルオロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

(３−クロロ−２−フルオロフェニル)メタンアミン(１.０ｇ, ６.２７mmol)を、メタノール(１０ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(１.１２ｇ, ６.９６mmol)の溶液に加えた。混合物を７０℃で１時間加熱した。混合物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, １００％酢酸エチル)、Ｎ−(３−クロロ−２−フルオロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミドを無色の粘性の油状物として得た(１.３ｇ, ４.５mmol, 収率６５％)。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.23 - 7.40 (m, 2 H), 7.07 (t, J=7.9 Hz, 1 H), 4.93 (s, 1 H), 4.54 (s, 2 H), 3.50 - 3.74 (m, 4 H), 1.18 - 1.35 (m, 6 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.78; [M+H]⁺ = 289.17。

工程Ｂ：７−クロロ−８−フルオロイソキノリン−３−アミン

Ｎ−(３−クロロ−２−フルオロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(０.９７ｇ, ３.３６mmol)に、硫酸(４ml, ７５mmol)を加えた。反応物を４０℃で２８時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、反応混合物がｐＨ約７になるまで水性水酸化ナトリウム(約１５Ｍ)で反応停止させた。粗生成物を酢酸エチル(２×５０ml)で抽出し、有機物をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し(Biotage, １００％酢酸エチルから９０／１０％酢酸エチル／ＭｅＯＨ)、７−クロロ−８−フルオロイソキノリン−３−アミンを粉末として得た(０.５８ｇ, ２.９５mmol, 収率８８％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) d ppm 8.97 (s, 1 H), 7.47 - 7.57 (m, 1 H), 7.38 - 7.45 (m, 1 H), 6.67 (s, 1 H), 6.33 (s, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.18; [M+H]⁺ = 196.95。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(７−クロロ−８−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(７−クロロ−８−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６７の工程Ａ〜Ｂの一般的な手順に従って、７−クロロ−８−フルオロイソキノリン−３−アミン(上記の工程Ｂより)を出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.19 (d, J=2.1 Hz, 1 H), 8.30 - 8.85 (m, 1 H), 7.68 (br. s., 2 H), 6.93 - 7.43 (m, 1 H), 3.73 - 4.10 (m, 1 H), 3.48 - 3.70 (m, 1 H), 3.02 (br. s., 2 H), 2.59 - 2.86 (m, 4 H), 1.80 - 2.08 (m, 2 H), 1.60 (br. s., 2 H), 1.37 - 1.53 (m, 1 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.22; [M+H]⁺ = 361.06。

実施例３１３
(Ｒ)−Ｎ−(１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例３１２の工程Ａ〜Ｃの一般的な手順に従って、１−フェニルエタンアミンを出発物質として用いて製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.10 (d, J=8.2 Hz, 1 H), 7.72 (d, J=8.2 Hz, 1 H), 7.60 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 7.44 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.03 - 7.33 (m, 1 H), 4.01 (d, J=10.1 Hz, 1 H), 3.69 (d, J=10.1 Hz, 1 H), 3.19 - 3.31 (m, 2 H), 3.12 (d, J=15.0 Hz, 1 H), 2.90 - 3.01 (m, 5 H), 2.77 - 2.90 (m, 2 H), 2.17 (br. s., 2 H), 1.58 - 1.87 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.09; [M+H]⁺ = 323.16。

実施例３１４
(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−フルオロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−フルオロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２５６の工程Ａ〜Ｃの方法によって、６−クロロピリミジン−４−アミンおよび４−フルオロフェニルボロン酸から出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.75 (1 H, s), 7.93 - 8.11 (2 H, m), 7.06 - 7.30 (3 H, m), 4.03 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.73 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.18 - 3.27 (1 H, m), 3.05 - 3.16 (1 H, m), 2.66 - 3.00 (4 H, m), 2.01 - 2.20 (2 H, m), 1.49 - 1.87 (3 H, m). LC/MS RT=1.53; [M+H]⁺ = 354.24。

実施例３１５
(Ｒ)−Ｎ−(６−(３−フルオロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(３−フルオロフェニル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２５６の工程Ａ〜Ｃの方法によって、６−クロロピリミジン−４−アミンおよび３−フルオロフェニルボロン酸から出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.80 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.71 - 7.85 (2 H, m), 7.50 (1 H, td, J=7.99, 5.92 Hz), 7.11 - 7.36 (2 H, m), 4.08 (1 H, d, J=10.58 Hz), 3.80 (1 H, d, J=10.58 Hz), 3.39 - 3.48 (1 H, m), 3.33 (1 H, s), 2.83 - 3.20 (4 H, m), 2.10 - 2.33 (2 H, m), 1.65 - 1.96 (3 H, m). LC/MS RT=1.59; [M+H]⁺ = 354.24。

実施例３１６
(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３１の工程Ｂ〜Ｃの方法によって、２−クロロ−５−フルオロピリミジンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD)δ ppm 8.50 (2 H, d, J=0.76 Hz), 4.03 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.77 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.47 - 3.57 (1 H, m), 3.36 - 3.43 (1 H, m), 3.01 - 3.24 (4 H, m), 2.15 - 2.40 (2 H, m), 1.68 - 2.03 (3 H, m). LC/MS RT=0.30; [M+H]⁺ = 278.19。

実施例３１７
(Ｒ)−Ｎ−(４−クロロ−５−メトキシピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(４−クロロ−５−メトキシピリミジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３１の工程Ｂ〜Ｃの方法によって、２,４−ジクロロ−５−メトキシピリミジンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 7.99 (1 H, s), 4.13 (1 H, d, J=10.83 Hz), 3.91 (4 H, d, J=10.83 Hz), 3.76 - 3.84 (1 H, m), 3.64 - 3.71 (1 H, m), 3.30 - 3.51 (4 H, m), 2.43 - 2.52 (1 H, m), 2.37 (1 H, d, J=3.27 Hz), 2.09 (1 H, dd, J=9.32, 4.78 Hz), 1.88 - 2.03 (2 H, m). LC/MS RT=0.30; [M+H]⁺ = 278.19。

実施例３１８
(Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジフルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６,８−ジフルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７９の工程Ａ〜Ｄの方法によって、(３,５−ジフルオロフェニル)メタンアミンから出発して製造した。
MS (LC/MS) R.T. = 1.42; [M+H]⁺ = 345.26。

実施例３１９
(Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジフルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジフルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７９の工程Ａ〜Ｄの方法によって、(３,４−ジフルオロフェニル)メタンアミンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.97 (1 H, s), 7.73 - 7.91 (1 H, m), 7.58 (1 H, dd, J=11.14, 7.78 Hz), 7.30 (1 H, s), 4.01 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.71 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.31 (1 H, br. s.), 3.14 - 3.24 (1 H, m), 3.03 (2 H, d, J=7.32 Hz), 2.83 - 2.98 (2 H, m), 2.20 (2 H, br. s.), 1.61 - 1.91 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.45; [M+H]⁺ = 345.26。

実施例３２０
(Ｒ)−Ｎ−(５,８−ジフルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５,８−ジフルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７９の工程Ａ〜Ｄの方法によって、(２,５−ジフルオロフェニル)メタンアミンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 9.25 (1 H, s), 7.43 (1 H, br. s.), 7.20 - 7.34 (1 H, m), 6.91 - 7.12 (1 H, m), 4.04 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.74 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.30 (1 H, br. s.), 3.13 - 3.23 (1 H, m), 3.03 (2 H, d, J=7.63 Hz), 2.82 - 2.96 (2 H, m), 2.21 (2 H, br. s.), 1.58 - 1.92 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.37; [M+H]⁺ = 345.33。

実施例３２１
(Ｒ)−Ｎ−(７−フルオロキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(７−フルオロキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３９の工程Ａ〜Ｂの方法によって、７−フルオロキナゾリン−２−アミンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.22 (1 H, s), 7.95 (1 H, dd, J=8.81, 6.04 Hz), 7.47 (1 H, dd, J=10.45, 2.14 Hz), 7.24 (1 H, td, J=8.75, 2.39 Hz), 4.07 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.77 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.25 (1 H, s), 3.07 - 3.17 (1 H, m), 2.89 - 3.02 (2 H, m), 2.75 - 2.88 (2 H, m), 2.04 - 2.26 (2 H, m), 1.50 - 1.85 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.06; [M+H]⁺= 328.33。

実施例３２２
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３９の工程Ａ〜Ｂの方法によって、５−クロロキナゾリン−２−アミンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.53 (1 H, s), 7.62 - 7.84 (2 H, m), 7.47 (1 H, dd, J=6.80, 1.51 Hz), 4.09 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.80 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.36 (1 H, s), 3.15 - 3.24 (1 H, m), 3.00 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.79 - 2.95 (2 H, m), 2.05 - 2.32 (2 H, m), 1.53 - 1.87 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.36; [M+H]⁺= 344.29。

実施例３２３
(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３９の工程Ａ〜Ｂの方法によって、５−フルオロキナゾリン−２−アミンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.46 (1 H, s), 7.77 (1 H, td, J=8.18, 6.30 Hz), 7.63 (1 H, d, J=8.56 Hz), 7.00 - 7.20 (1 H, m), 4.08 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.77 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.25 (1 H, s), 3.07 - 3.17 (1 H, m), 2.94 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.72 - 2.88 (2 H, m), 2.05 - 2.21 (2 H, m), 1.48 - 1.83 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.10; [M+H]⁺= 328.33。

実施例３２４
(Ｒ)−Ｎ−(７−フルオロ−４−メチルキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(７−フルオロ−４−メチルキナゾリン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３９の工程Ａ〜Ｂの方法によって、７−フルオロ−４−メチルキナゾリン−２−アミンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.13 (1 H, dd, J=9.07, 6.04 Hz), 7.46 (1 H, dd, J=10.45, 2.64 Hz), 7.22 (1 H, td, J=8.81, 2.77 Hz), 4.06 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.75 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.23 (1 H, s), 3.06 - 3.15 (1 H, m), 2.94 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.73 - 2.88 (5 H, m), 2.06 - 2.24 (2 H, m), 1.51 - 1.86 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.25; [M+H]⁺= 342.29。

実施例３２５
(Ｒ)−Ｎ−(６−フルオロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−フルオロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７９の工程Ａ〜Ｄの方法によって、(Ｓ)−１−(４−フルオロフェニル)エタンアミンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.23 (1 H, dd, J=9.16, 5.49 Hz), 7.44 (1 H, dd, J=9.92, 2.59 Hz), 7.22 - 7.38 (2 H, m), 4.17 (1 H, d, J=10.99 Hz), 3.94 (1 H, d, J=10.68 Hz), 3.71 - 3.79 (1 H, m), 3.61 - 3.69 (1 H, m), 3.39 - 3.49 (1 H, m), 3.33 - 3.39 (3 H, m), 2.95 (3 H, s), 2.49 (1 H, br. s.), 2.37 (1 H, tt, J=10.07, 3.36 Hz), 2.05 - 2.16 (1 H, m), 1.93 - 2.05 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.47; [M+H]⁺= 341.25。

実施例３２６
(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７９の工程Ａ〜Ｄの方法によって、１−(４−クロロフェニル)エタンアミンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.23 (1 H, dd, J=9.16, 5.49 Hz), 7.44 (1 H, dd, J=9.92, 2.59 Hz), 7.22 - 7.38 (2 H, m), 4.17 (1 H, d, J=10.99 Hz), 3.94 (1 H, d, J=10.68 Hz), 3.71 - 3.79 (1 H, m), 3.61 - 3.69 (1 H, m), 3.39 - 3.49 (1 H, m), 3.33 - 3.39 (3 H, m), 2.95 (3 H, s), 2.49 (1 H, br. s.), 2.37 (1 H, tt, J=10.07, 3.36 Hz), 2.05 - 2.16 (1 H, m), 1.93 - 2.05 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.79; [M+H]⁺= 357.28。

実施例３２７
(Ｒ)−Ｎ−(７−フルオロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(７−フルオロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７９の工程Ａ〜Ｄの方法によって、１−(３−フルオロフェニル)エタンアミンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 7.55 - 7.81 (2 H, m), 7.38 (1 H, t, J=7.55 Hz), 7.16 (1 H, br. s.), 3.95 (1 H, d, J=9.82 Hz), 3.64 (1 H, d, J=9.82 Hz), 3.20 (1 H, d, J=14.86 Hz), 3.01 - 3.13 (1 H, m), 2.63 - 2.97 (7 H, m), 2.11 (2 H, br. s.), 1.41 - 1.81 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.63; [M+H]⁺= 341.32。

実施例３２８
(Ｒ)−Ｎ−(５,７−ジフルオロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(５,７−ジフルオロ−１−メチルイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２７９の工程Ａ〜Ｄの方法によって、１−(３,５−ジフルオロフェニル)エタンアミンから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 7.78 (1 H, d, J=9.77 Hz), 7.39 - 7.55 (2 H, m), 4.31 (1 H, d, J=10.99 Hz), 4.11 (1 H, d, J=10.99 Hz), 3.88 - 3.97 (1 H, m), 3.79 - 3.86 (1 H, m), 3.55 (1 H, t, J=11.90 Hz), 3.37 - 3.47 (3 H, m), 3.00 (3 H, s), 2.64 (1 H, br. s.), 2.32 - 2.45 (1 H, m), 2.18 (1 H, dddd, J=11.71, 7.13, 6.94, 6.56 Hz), 1.99 - 2.13 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.67; [M+H]⁺= 359.22。

実施例３２９
(Ｒ)−Ｎ−(６−(６−(メチルチオ)ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(６−(メチルチオ)ピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２６１の工程Ａ〜Ｂの方法によって、６−(６−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミンから出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.02 (1 H, d, J=2.52 Hz), 8.78 (1 H, s), 8.20 (1 H, dd, J=8.44, 2.39 Hz), 7.36 (1 H, d, J=8.56 Hz), 7.26 (1 H, br. s.), 4.06 (1 H, d, J=10.58 Hz), 3.77 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.34 (1 H, s), 3.14 - 3.22 (1 H, m), 2.82 - 3.08 (4 H, m), 2.58 (3 H, s), 2.08 - 2.24 (2 H, m), 1.60 - 1.88 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. =3.09; [M+H]⁺= 383.2。

実施例３３０
(Ｒ)−Ｎ−(６−(２−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−(２−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミン

６−クロロピリミジン−４−アミン(１.５ｇ, １１.５８mmol)、２−フルオロピリジン−３−イルボロン酸(２.０３９ｇ, １４.４７mmol)およびＮａ_２ＣＯ_３(３.６８ｇ, ３４.７mmol)の混合物を、ジオキサン(１５ml)／ＥｔＯＨ(２ml)／水(３ml)の混合物に懸濁した。混合物を、マイクロ波合成機中で、１２５℃で２０分間加熱し、濃縮し、シリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中１０〜６０％酢酸エチル、次に酢酸エチル中５〜２５％９：１メタノール：水酸化アンモニウムを用いて精製し、灰白色の固体を得た(１.５ｇ, ７.８９mmol, ６８％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.57 (1 H, ddd, J=9.95, 7.68, 2.01 Hz), 8.48 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.33 (1 H, td, J=3.02, 2.01 Hz), 7.51 (1 H, ddd, J=7.37, 4.97, 2.01 Hz), 7.12 (2 H, br. s.), 6.96 (1 H, d, J=1.26 Hz). MS (LC/MS) R.T. =0.43; [M+H]⁺= 191.15。

工程Ｂ：４−(２−フルオロピリジン−３−イル)−６−イソチオシアナトピリミジン

ＤＭＦ中の６−(２−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−アミン(０.３ｇ, １.５７７mmol)の溶液に、ＮａＨ(０.１２６ｇ, ３.１５mmol)を加えた。１.５時間撹拌を続け、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.３６６ｇ, １.５７７mmol)を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、シリカゲルで、ヘキサン中１０〜１５％酢酸エチルを用いて精製し、橙色の固体を得た(０.１３３ｇ, ０.５７３mmol, ３６％)。
MS (LC/MS) R.T. = 2.48; [M+H]⁺= 233.08。

工程Ｃ： (Ｓ)−１−(６−(２−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−３−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)チオウレア

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の４−(２−フルオロピリジン−３−イル)−６−イソチオシアナトピリミジン(０.１８ｇ, ０.７７５mmol)に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.６３１ｇ, １.９３８mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１７８ｇ, ０.７７５mmol)を加えた。懸濁液を室温で１８時間撹拌し、濃縮した。残渣を、シリカゲルで、酢酸エチル中０〜１０％９.５：０.５メタノール：水酸化アンモニウムを用いて精製し、黄色の固体を得た(０.２ｇ, ０.５１５mmol, ６６％)。
MS (LC/MS) R.T. = 1.82; [M+H]⁺= 389.27。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(２−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン)

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(２０ml)中の(Ｓ)−１−(６−(２−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−３−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)チオウレア(０.２ｇ, ０.５１５mmol)の懸濁液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.１６８ｇ, ０.５１５mmol)およびＤＩＣ(０.２４１ml, １.５４５mmol)を加えた。懸濁液を、室温で１８時間、次に６０℃で３時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を、シリカゲルで、酢酸エチル中２〜７％９.５：０.５メタノール：水酸化アンモニウムを用いて精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(２−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを薄黄色の固体として得た(０.０２９ｇ, ０.０８１mmol, １６％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.83 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.55 (1 H, ddd, J=9.76, 7.62, 2.01 Hz), 8.29 (1 H, dt, J=3.02, 1.51 Hz), 7.46 (1 H, ddd, J=7.37, 5.10, 1.89 Hz), 7.33 (1 H, s), 4.06 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.76 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.25 (1 H, s), 3.09 - 3.19 (1 H, m), 2.95 (2 H, t, J=7.68 Hz), 2.74 - 2.91 (2 H, m), 2.04 - 2.26 (2 H, m), 1.55 - 1.87 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.24; [M+H]⁺= 355.28。

実施例３３１
(Ｒ)−Ｎ−(６−(６−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(６−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例３３０の工程Ａ〜Ｄの方法によって、６−フルオロピリジン−３−イルボロン酸から出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.88 (1 H, d, J=2.52 Hz), 8.82 (1 H, s), 8.51 - 8.60 (1 H, m), 7.25 (1 H, s), 7.19 (1 H, dd, J=8.56, 2.52 Hz), 4.06 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.76 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.22 (1 H, s), 3.07 - 3.14 (1 H, m), 2.86 - 2.98 (2 H, m), 2.70 - 2.87 (2 H, m), 2.03 - 2.20 (2 H, m), 1.54 - 1.87 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.21; [M+H]⁺= 355.28。

実施例３３２
(Ｒ)−Ｎ−(６−(５−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｒ)−Ｎ−(６−(５−フルオロピリジン−３−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例３３０の工程Ａ〜Ｄの方法によって、５−フルオロピリジン−３−イルボロン酸から出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.06 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.81 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.56 (1 H, d, J=2.77 Hz), 8.26 (1 H, dt, J=9.82, 2.27 Hz), 7.30 (1 H, br. s.), 4.06 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.75 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.16 - 3.26 (1 H, m), 3.04 - 3.15 (1 H, m), 2.86 - 3.00 (2 H, m), 2.81 (2 H, t, J=7.30 Hz), 2.01 - 2.22 (2 H, m), 1.52 - 1.84 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.20; [M+H]⁺= 355.28。

実施例３３３
(Ｒ)−Ｎ−(６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

((Ｒ)−Ｎ−(６−(１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例３３０の工程Ａ〜Ｄの方法によって、１−メチル−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−１Ｈ−ピラゾールから出発して製造した。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.89 (1 H, s), 7.54 (1 H, d, J=2.14 Hz), 7.28 (1 H, br. s.), 6.84 (1 H, d, J=2.14 Hz), 4.23 (3 H, s), 4.18 (1 H, d, J=10.99 Hz), 3.98 (1 H, d, J=10.68 Hz), 3.81 - 3.88 (1 H, m), 3.72 - 3.80 (1 H, m), 3.53 (1 H, t, J=11.75 Hz), 3.34 - 3.46 (3 H, m), 2.53 (1 H, br. s.), 2.33 - 2.45 (1 H, m), 2.10 - 2.22 (1 H, m), 1.97 - 2.12 (2 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 1.15; [M+H]⁺= 340.29。

実施例３３４
(Ｒ)−Ｎ−(６−(ピラジン−２−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：６−[ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ]−４−クロロピリミジン

６−クロロピリミジン−４−アミン(４.１ｇ, ３１.６mmol)をアセトニトリルに懸濁し、ＤＭＡＰ(０.９６６ｇ, ７.９１mmol)およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート(１４.７４ｇ, ６７.５mmol)を加え、混合物を室温で３日間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を、シリカゲルによって、ヘキサン中０〜１５％酢酸エチルを用いて精製し、６−[ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ]−４−クロロピリミジンを白色の固体として得た(６.２７ｇ, １９.０１mmol, ６０％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.69 (1 H, d, J=0.76 Hz), 7.88 (1 H, d, J=1.01 Hz), 1.58 (18 H, s)。

工程Ｂ：６−[ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ]−４−(２'−ピラジニル)ピリミジン

６−[ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ]−４−クロロピリミジン(１.６０８ｇ, ４.８８mmol)、２−(トリブチルスタンニル)ピラジン(１.５ｇ, ４.０６mmol)およびＰｄ(Ｐｈ_３Ｐ)_４(０.２２５ｇ, ０.１９５mmol)を、トルエン中で合わせて、窒素を吹きつけ、１７時間還流し、室温まで冷却し、濃縮し、シリカゲルで、ヘキサン中１０％酢酸エチル、次にヘキサン中２０〜５０％酢酸エチルを用いて精製し、黄色の固体を得た(０.９４ｇ, ２.５０７mmol, ６２％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.67 (1 H, d, J=1.01 Hz), 9.05 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.60 - 8.77 (3 H, m), 1.59 (18 H, s)。

工程Ｃ：６−(ピラジン−２−イル)ピリミジン−４−アミン

トリフルオロ酢酸(２.７７ml, ３６.０mmol)を、ジクロロメタン中の６−[ビス(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ]−４−(２'−ピラジニル)ピリミジン(１.３４４ｇ, ３.６０mmol)の溶液に室温で加えた。混合物を室温で１８時間撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶かし、飽和ＮａＨＣＯ_３を注意深く加えた。有機層を単離し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.44 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.63 - 8.86 (2 H, m), 8.51 (1 H, d, J=1.01 Hz), 7.38 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.17 (2 H, br. s.). MS (LC/MS) R.T. = 0.37; [M+H]⁺= 174.23。

工程Ｄ：６−(ピラジン−２−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ中の６−(ピラジン−２−イル)ピリミジン−４−アミン(０.２ｇ, １.１５５mmol)の溶液に、ＮａＯＨ(０.１１５ml, ２.３１０mmol)、ＣＳ_２(０.１７４ml, ２.８９mmol)、ＮａＯＨ(０.１１５ml, ２.３１０mmol)およびＭｅＩ(０.１８１ml, ２.８９mmol)を、１５分間で加えた。１.５時間撹拌を続け、混合物を水に注いだ。橙色の固体を分離し、水で洗浄し、乾燥させ、明黄色の固体を得た(０.１４ｇ, ０.５０５mmol, ４４％)。
MS (LC/MS) R.T. = 3.19; [M+H]⁺= 278.19。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(ピラジン−２−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)中の、６−(ピラジン−２−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(０.１３９ｇ, ０.５０１mmol)、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.４０８ｇ, １.２５３mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１１５ｇ, ０.５０１mmol)の混合物を、８０℃で３時間加熱した。混合物を濃縮し、シリカゲルで、酢酸エチル中０〜１０％９.５：０.５メタノール：水酸化アンモニウムを用いて精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(ピラジン−２−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを灰白色の固体として得た(０.０６６ｇ, ０.１９４mmol, ３９％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.46 (1 H, d, J=1.51 Hz), 8.83 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.67 - 8.72 (1 H, m), 8.66 (1 H, d, J=2.52 Hz), 7.77 (1 H, br. s.), 4.05 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.75 (1 H, d, J=10.32 Hz), 3.18 - 3.26 (1 H, m), 3.04 - 3.15 (1 H, m), 2.87 - 3.00 (2 H, m), 2.70 - 2.85 (2 H, m), 2.04 - 2.19 (2 H, m), 1.54 - 1.83 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.97; [M+H]⁺= 338.29。

実施例３３５
(２Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

工程Ａ：６,７−ジメチルイソキノリン−３−アミン

メタノール(４.９ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(１.５０ｇ, ９.３２mmol)の溶液に、(３,４−ジメチルフェニル)メタンアミン(１.２０ｇ, ８.８８mmol)を環境温度で滴下した。反応フラスコを予め加熱した油浴に入れ、７０℃で１６時間撹拌した。この後、フラスコを油浴から取り出し、環境温度まで冷却した。揮発性成分を減圧下で除去し、粗製の物質を硫酸(１９.７ml)に環境温度で滴下した。反応混合物を７２時間撹拌し、フラスコを氷−水浴に入れ、水(５０ml)で希釈し、水酸化ナトリウム(１０Ｎ)でｐＨ＝１０までゆっくりと中和した。反応混合物が塩基性になったとき、橙色の沈殿物が形成した。この沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、６,７−ジメチルイソキノリン−３−アミンおよび５,６−ジメチルイソキノリン−３−アミンの混合物(２：１)を得た(１.６８ｇ, ９.７５mmol, ＞１００％)。
MS (LC/MS) R.T. = 0.32; [M+H]⁺ = 173.13。

工程Ｂ：３−イソチオシアナト−６,７−ジメチルイソキノリン

ジクロロメタン(１９ml)中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１.３５ｇ, ５.８１mmol)の溶液に、環境温度で、６,７−ジメチルイソキノリン−３−アミンおよび５,６−ジメチルイソキノリン−３−アミンの混合物(２：１)(１.００ｇ, ５.８１mmol)を加えた。反応混合物を予め加熱した油浴中に置き、４０℃で１８時間撹拌し、冷却し、濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中１０〜３５％酢酸エチル)、３−イソチオシアナト−６,７−ジメチルイソキノリンおよび３−イソチオシアナト−５,６−ジメチルイソキノリンの混合物(２：１)を黄色の固体として得た(１８６mg, ０.８６９mmol, １５％)。
MS (LC/MS) R.T. = 2.06; [M+H]⁺ = 215.1。

工程Ｃ： (２Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１.４ml)中の(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(９９mg, ０.４３mmol)に、トリエチルアミン(０.１８１ml, １.３０mmol)と、３−イソチオシアナト−６,７−ジメチルイソキノリンおよび３−イソチオシアナト−５,６−ジメチルイソキノリンの混合物(２：１)(９３mg, ０.４３mmol)を加えた。懸濁液を、予め加熱した油浴中に置き、８０℃で２時間３０分撹拌した。Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.２７０ml, １.７４mmol)を加え、混合物を８０℃で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(クロロホルム中０〜４０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム)、次に逆相分取ＨＰＬＣによって精製した(０〜４０％ＴＦＡ−メタノール−水)。生成物のフラクションを合わせ、真空で濃縮し、(２Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミンおよび(２Ｒ)−Ｎ−(５,６−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミンの混合物(２：１)をトリフルオロ酢酸塩として得た。Chiralpak AD-H (4.6×250mm, 5μｍ)カラムを用いて、ＣＯ_２中４０％メタノール(０.１％ＤＥＡ)からなる移動相で、２１５nmで検出しながら２種の位置異性体を分離し、(２Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジメチル−３−イソキノリニル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミンを白色の固体として得た(５.０mg, ０.０１５mmol, 収率３％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.87 (1 H, s), 7.90 (1 H, s), 7.67 (1 H, s), 7.50 (1 H, s), 3.97 (1 H, d, J=10.0 Hz), 3.65 (1 H, d, J=10.0 Hz), 3.19 - 3.27 (1 H, m), 3.04 - 3.17 (1 H, m), 2.94 (2 H, d, J=7.5 Hz), 2.76 - 2.90 (2 H, m), 2.38 - 2.50 (6 H, m), 2.11 - 2.21 (2 H, m), 1.57 - 1.85 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. = 0.92; [M+H]⁺ = 337.22。

実施例３３６
(２Ｒ)−Ｎ−(６−メチル−１,３−ベンゾオキサゾール−２−イル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

工程Ａ：６−メチルベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン

オーブン乾燥した丸底フラスコに、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンイミン(１.４０ｇ, ８.６９mmol)、２−アミノ−５−メチルフェノール(７１３mg, ５.７９mmol)および無水ＴＨＦ(２０ml)を環境温度で入れた。得られた懸濁液をＮ_２(ｇ)下で２時間還流した。溶媒を真空で除去し、残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜３０％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルム)、ベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミンを灰色の固体として得た(７９２mg, ５.３５mmol, 収率９２％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.19 - 7.34 (1 H, m), 7.11 (1 H, s), 7.01 (1 H, d, J=7.8 Hz), 5.60 (2 H, br. s.), 2.43 (3 H, s). MS (LC/MS) R.T. = 0.89; [M+H]⁺ = 149.09。

工程Ｂ：６−メチルベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１.４ml)中の６−メチルベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン(２００mg, １.３５mmol)の懸濁液に、２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(１３５μｌ, ２.７０mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌した後、二硫化炭素(２０３μｌ, ３.３７mmol)を加え、混合物を１０分間撹拌した。さらに２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(１３５μｌ, ２.７０mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後に、ヨードメタン(２０３μｌ, ３.２４mmol)を滴下した。添加完了後、混合物を１５分間撹拌し、この時点で多量の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、水で洗浄し、乾燥させ、６−メチルベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを褐色の固体として得た(２８９mg, １.１４mmol, 収率８５％)。
MS (LC/MS) R.T. = 1.88; [M+H]⁺ = 252.95。

工程Ｃ： (２Ｒ)−Ｎ−(６−メチル−１,３−ベンゾオキサゾール−２−イル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

１０mlのバイアルに、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール塩酸塩(３８.２mg, ０.１９８mmol)、ＤＭＦ(２ml)、Ｃｓ_２ＣＯ_３(１２９mg, ０.３９６mmol)および６−メチルベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(５０mg, ０.１９８mmol)を環境温度で入れた。得られた懸濁液を１時間撹拌した後、それをメタノールで希釈し、逆相分取ＨＰＬＣによって精製し(０〜１００％ＴＦＡ−メタノール−水)、トリフルオロ酢酸塩として(２Ｒ)−Ｎ−(６−メチル−１,３−ベンゾオキサゾール−２−イル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミンを黄褐色のゴム状物質として得た(５５.３mg, ０.１２３mmol, 収率６２％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.89 (br. s., 1 H), 9.15 (br. s., 1 H), 7.33 (d, J=8.03 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 7.06 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 4.00 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 3.88 (d, J=10.29 Hz, 1 H), 3.64 - 3.80 (m, 2 H), 3.34 - 3.44 (m, 1 H), 3.20 - 3.34 (m, 3 H), 2.44 (br. s., 1 H), 2.40 (s, 3 H), 2.08 - 2.20 (m, 1 H), 1.80 - 2.03 (m, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.367, [M+H]⁺ = 313.2。

実施例３３７
(２Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシ−１,３−ベンゾオキサゾール−２−イル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

工程Ａ：６−メトキシベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン

オーブン乾燥した丸底フラスコに、ジ(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)メタンイミン(５００mg, ３.１０mmol)、２−アミノ−５−メトキシフェノール−ＨＣｌ(３６５mg, ２.０７mmol)、トリエチルアミン(２８８μｌ, ２.０７mmol)および無水ＴＨＦ(２０ml)を環境温度で入れた。得られた懸濁液をＮ_２(ｇ)下で２０時間還流し、ＬＣ／ＭＳに基づいて変換の完了を見た。溶媒を真空で除去し、残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(ヘキサン中３０〜８０％酢酸エチル)、６−メトキシベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミンを褐色の固体として得た(３０７mg, １.８７mmol, 収率９０％)。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.28 (1 H, d, J=9.5 Hz), 6.92 (1 H, d, J=2.4 Hz), 6.80 (1 H, dd, J=8.5, 2.1 Hz), 5.28 (2 H, br. s.). MS (LC/MS) R.T. = 1.51; [M+H]⁺ = 165.00。

工程Ｂ：６−メトキシベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(２.０ml)中の、６−メトキシベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン(２３８mg, １.４５mmol)の懸濁液に、２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(１４５μｌ, ２.９０mmol)を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌した後、二硫化炭素(２１９μｌ, ３.６２mmol)を加え、混合物を１０分間撹拌した。さらに２０.０Ｍ水酸化ナトリウム(１４５μｌ, ２.９０mmol)を加え、混合物を再度１０分間撹拌した。最後にヨードメタン(２１８μｌ, ３.４８mmol)を滴下した。混合物をさらに１５分間撹拌し、この時点で多量の沈殿物が形成した。混合物を水に注ぎ、固体を濾過によって集め、水で洗浄し、乾燥させ、６−メトキシベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た。この物質を特性決定せずに用いた。

工程Ｃ： (２Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシ−１,３−ベンゾオキサゾール−２−イル)−４'Ｈ−スピロ[４−アザビシクロ[２.２.２]オクタン−２,５'−[１,３]オキサゾール]−２'−アミン

１０mlのバイアルに、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール塩酸塩(２４.５mg, ０.１２７mmol)、ＤＭＦ(２ml)、Ｃｓ_２ＣＯ_３(８３mg, ０.２５mmol)および６−メトキシベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(３４mg, ０.１３mmol)を環境温度で入れた。得られた懸濁液を環境温度で１時間撹拌し、メタノールで希釈し、逆相分取ＨＰＬＣによって精製し(０〜１００％ＴＦＡ−メタノール−水)、トリフルオロ酢酸塩として(Ｒ)−Ｎ−(６−メトキシベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを黄褐色のゴム状物質として得た(７.２mg, ０.０１４mmol, 収率１１％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.95 (br. s., 1 H), 9.10 (br. s., 1 H), 7.34 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 7.17 (d, J=2.51 Hz, 1 H), 6.84 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1 H), 3.99 (d, J=10.54 Hz, 1 H), 3.87 (d, J=10.54 Hz, 1 H), 3.79 (s, 3 H), 3.63 - 3.78 (m, 2 H), 3.34 - 3.44 (m, 1 H), 3.20 - 3.32 (m, 3 H), 2.43 (m, 1 H), 2.09 - 2.19 (m, 1 H), 1.91 - 2.02 (m, 1 H), 1.80 - 1.91 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.867, [M+H]⁺ = 329.28。

実施例３３８Ａおよび３３８Ｂ
(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(Ａ)および(Ｒ)−Ｎ−(７−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(Ｂ)

工程Ａ：Ｎ−(３−クロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

窒素を吹き付けた密封した試験管に、メタノール(６ml)および(３−クロロフェニル)メタンアミン(１.４４４ml, １１.８２mmol)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(２ｇ, １２.４１mmol)を入れた。試験管に蓋をして、７０℃で加熱した。１８時間後、反応物を室温まで冷却し、反応物を濃縮し、Ｎ−(３−クロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミドを黄色の油状物として得た(２.３ｇ, ８.５mmol, ７１％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.14 - 7.50 (m, 4 H) 4.80 (br. s., 1 H) 4.29 (br. s., 2 H) 4.05 (q, J=7.11 Hz, 1 H) 3.40 - 3.73 (m, 4 H) 2.01 (s, 1 H) 1.05 - 1.29 (m, 6 H). LC/MS RT = 1.12分, [M+H] = 271.09。

工程Ｂ：５−および７−クロロ−イソキノリン−３−アミン

フラスコに、Ｎ−(３−クロロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(１.９ｇ, ７.０２mmol)および硫酸(１４ml, ２６３mmol)を入れた。これを室温で２４時間撹拌した。１０ＮＮａＯＨを用いてｐＨ９まで反応物を中和した。得られた沈殿物をジクロロメタンに溶解し、水層をジクロロメタンで洗浄した。有機層を合わせ、濃縮し、２：１比の７−クロロイソキノリン−３−アミン：５−クロロイソキノリン−３−アミンで、上記の位置異性体(１.１ｇ, ６.１mmol, ８８％)を得た。この位置異性体混合物をさらに分離することなく用いた。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.89 (s, 1 H) 8.81 (s, 2 H) 7.90 (d, J=2.26 Hz, 2 H) 7.82 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.65 (dd, J=7.28, 1.00 Hz, 1 H) 7.58 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.44 (dd, J=9.03, 2.26 Hz, 2 H) 7.07 - 7.19 (m, 1 H) 6.83 (s, 1 H) 6.64 (s, 2 H) 6.28 (s, 2 H) 6.05 (s, 4 H). LC/MS R.T. = 0.955分, [M+H] = 181.03。

工程Ｃ：５−および７−クロロ−３−イソチオシアナト−イソキノリン

バイアルに、ジクロロメタン(１０ml)中の７−クロロイソキノリン−３−アミン／５−クロロイソキノリン−３−アミン(５５０mg, ３.０８mmol)および１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(８５８mg, ３.７０mmol)を入れた。反応物を室温で撹拌した。１８時間後、反応物をシリカゲルのカートリッジで精製し、ヘキサン中５０％酢酸エチルで溶出し、７−クロロ−３−イソチオシアナトイソキノリンおよび５−クロロ−３−イソチオシアナトイソキノリンの混合物を得た(４００mg, １.８mmol, ５８％)。これをすぐに次の反応に用いた。
LC/MS RT = 3.808分, [M+H] = 221.0。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(５−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンおよび(Ｒ)−Ｎ−(７−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

バイアルに、ＤＭＦ(８ml)中の７−クロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン／５−クロロ−３−イソチオシアナトイソキノリン(４００mg, １.８１３mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール(３４０mg, ２.１７５mmol)を入れた。これに炭酸セシウム(１４１７mg, ４.３５mmol)を加えた。反応物を５０℃で１時間撹拌し、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド(０.８４７ml, ５.４４mmol)を反応物に加え、反応物を一夜撹拌した。１８時間後、反応物を水およびクロロホルムに注いだ。有機物を集めて濃縮し、Biotageで精製し、クロロホルム中５〜４０％ (１０％ＮＨ_４ＯＨ／メタノール)で溶出した。生成物の位置異性体を集め、分取ＳＦＣによって分離し、(Ｒ)−Ｎ−(５−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(１２.５mg)を明黄色の固体として単離した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.14 (s, 1 H) 8.67 (br. s., 1 H) 8.03 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 7.82 (d, J=7.28 Hz, 1 H) 7.41 (t, J=8.03 Hz, 1 H) 3.90 (br. s., 1 H) 3.63 (br. s., 1 H) 2.91 - 3.16 (m, 2 H) 2.65 - 2.92 (m, 4 H) 1.85 - 2.19 (m, 2 H) 1.16 - 1.81 (m, 4 H). LC/MS RT=1.578分, [M+H]=343.08。

そして、(Ｒ)−Ｎ−(７−クロロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン(５４.９mg)を明黄色の固体として単離した。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.06 (s, 1 H) 8.43 - 8.93 (m, 1 H) 8.13 (br. s., 1 H) 7.82 (br. s., 1 H) 7.61 (d, J=8.28 Hz, 1 H) 3.89 (br. s., 1 H) 3.61 (br. s., 1 H) 3.31 (br. s., 1 H) 2.90 - 3.18 (m, 2 H) 2.62 - 2.95 (m, 4 H) 1.82 - 2.13 (m, 2 H) 1.34 - 1.80 (m, 3 H). LC/MS R.T=0.898分, [M+H]=343.32。

実施例３３９
(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(３,５−ジクロロピリジン−２−イルカルバモチオイル)ベンズアミド

アセトン(２０ml)中の３,５−ジクロロピリジン−２−アミン(３.８７ｇ, ２３.７３mmol)に、ベンゾイルイソチオシアネート(３.２ml, ２３.７３mmol)を加えた。混合物を環境温度で１時間撹拌し、得られた沈殿物を濾過によって集めた(３.８９ｇ)。濾液を反応フラスコに戻し、１時間還流し、この時点で、反応物が乾固した。固体をアセトンに懸濁し、濾過によって集め、２.２４ｇのＮ−(３,５−ジクロロピリジン−２−イルカルバモチオイル)ベンズアミドを得た(５.９３ｇ, １８.１８mmol, 収率７７％)。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 12.78 (br. s., 1 H) 9.25 (br. s., 1 H) 8.46 (br. s., 1 H) 7.94 (d, J=7.63 Hz, 2 H) 7.88 (d, J=2.44 Hz, 1 H) 7.69 (t, J=7.48 Hz, 1 H) 7.58 (t, J=7.78 Hz, 2 H)。

工程Ｂ：Ｎ−(６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)ベンズアミド

ＮＭＰ(４０ml)中のＮ−(３,５−ジクロロピリジン−２−イルカルバモチオイル)ベンズアミド(５.２ｇ, １６mmol)に、ナトリウムメトキシド(１.７３ｇ, ３２.０mmol)を加えた。混合物を１２０℃の油浴中で４時間加熱し、環境温度まで冷却し、水に注いだ。固体を濾過によって集め、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(０〜５％ (９：１ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ)／クロロホルム)、Ｎ−(６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)ベンズアミドを得た(３６４mg, １.２５６mmol, 収率７.８５％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 13.16 (br. s., 1 H) 8.48 - 8.58 (m, 2 H) 8.13 - 8.23 (m, 2 H) 7.61 - 7.69 (m, 1 H) 7.56 (t, J=7.53 Hz, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.8; [M+H]⁺ = 290.1。

工程Ｃ：６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−アミン

Ｈ_２ＳＯ_４(４ml, ７５mmol)中のＮ−(６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)ベンズアミド(３６４mg, １.２５６mmol)を、１２０℃で３０分間加熱し、環境温度まで冷却し、１０ＮＮａＯＨで塩基性にし、得られた固体を濾過によって集め、６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−アミンを得た(１４８mg, ０.７９７mmol, 収率６３.５％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.19 - 8.24 (m, 2 H) 8.09 (br. s., 2 H)。

工程Ｄ：６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−アミン(１４８mg, ０.７９７mmol)をＤＭＦ(１ml)に懸濁し、１６ＮＮａＯＨ(０.１００ml, １.５９５mmol)を加えた。混合物を環境温度で１０分間撹拌し、この時点で、ＣＳ_２(０.１２０ml, １.９９３mmol)を加えた。混合物を環境温度でさらに１０分間撹拌し、１６ＮＮａＯＨ(０.１００ml, １.５９５mmol)を加えた。混合物を環境温度で１０分間撹拌し、この時点で、ヨードメタン(０.１２０ml, １.９１３mmol)を加えた。１５分間後、混合物を水で希釈し、得られた固体を濾過によって集めた。濾液をクロロホルムで３回抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。粗製の混合物をシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(２〜５０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３)、６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(５０mg, ０.１７３mmol, 収率２１.６４％)。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.57 (s, 1 H) 8.09 (s, 1 H) 2.66 (s, 6 H)。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ−(６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(５０mg, ０.１７mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(４０mg, ０.１７mmol)および炭酸セシウム(１１２mg, ０.３５mmol)をＤＭＦ(１ml)に懸濁し、開放フラスコ中、１００℃の油浴で加熱した。２.５時間後、混合物を環境温度まで冷却し、水に注いだ。混合物をクロロホルム(４×)で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して残渣を得た。粗製の残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、５〜４０％ (９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ)／ＣＨＣｌ_３で精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロチアゾロ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(２０mg, ０.０５６mmol, 収率３２.５％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.31 (d, J=2.51 Hz, 1 H) 7.93 (d, J=2.26 Hz, 1 H) 3.99 (d, J=10.04 Hz, 1 H) 3.67 (d, J=10.04 Hz, 1 H) 3.20 - 3.39 (m, 2 H) 2.86 - 3.05 (m, 3 H) 2.67 - 2.87 (m, 2 H) 2.03 - 2.19 (m, 2 H) 1.74 (ddd, J=13.87, 9.35, 4.64 Hz, 1 H) 1.44 - 1.65 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.49; [M+H]⁺ = 350.2。

実施例３４０
(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン

機械的に撹拌しながら、酢酸(８９ml)中のロダン酸カリウム(２７.７ｇ, ２８５mmol)の懸濁液を含む３ツ首フラスコに、６−フルオロピリジン−３−アミン(４ｇ, ３５.７mmol)を０℃で加えた。酢酸(２９.７ml)中の臭素(５.７０ml, １１１mmol)を入れた滴下漏斗をフラスコに取り付けた。臭素溶液を３０分かけて加えると、溶液は粘性の黄色の混合物となった。臭素の添加が完了した後、反応混合物を環境温度まで温め、１６時間撹拌した。水(３０ml)を加え、混合物を８５℃で２０分間加熱した後、固体を濾過し、水で、そしてメタノールで洗浄し、５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミンを黄色の固体として得た(４.１８ｇ, ２４.７１mmol, 収率６９.２％)。

工程Ｂ：５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−アミン(２.０ｇ, １１.８mmol)を、実施例３３９の工程Ｄの方法に従って反応させ、５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを黄色の固体として得た(２.１７ｇ, 収率６７％)。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.14 (dd, J=8.55, 7.02 Hz, 1 H) 6.98 (dd, J=8.70, 1.98 Hz, 1 H) 2.63 (s, 6 H)。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１００mg, ０.３７mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(８４mg, ０.３７mmol)および炭酸セシウム(２３８mg, ０.７３mmol)を、ＤＭＦ(２ml)に懸濁し、開放フラスコ中で、１００℃の油浴で加熱した。２.５時間後、混合物を環境温度まで冷却し、水に注いだ。混合物をクロロホルム(４×)で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、５〜４０％ (９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ)／ＣＨＣｌ_３で精製し、((Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロチアゾロ[５,４−ｂ]ピリジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(８５mg, 収率６６％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.17 (br. s., 1 H) 7.89 (dd, J=8.66, 6.90 Hz, 1 H) 6.91 (dd, J=8.53, 2.01 Hz, 1 H) 4.04 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.73 (d, J=9.54 Hz, 1 H) 3.43 (dd, J=14.93, 1.63 Hz, 1 H) 3.08 (dd, J=15.06, 1.76 Hz, 1 H) 2.84 - 3.05 (m, 4 H) 2.16 - 2.28 (m, 2 H) 1.75 - 1.87 (m, 1 H) 1.53 - 1.70 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.37; [M+H]⁺ = 334.2。

実施例３４１
(Ｒ)−Ｎ−(６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：３−ブロモ−５−メチルピラジン−２−アミン

クロロホルム(１００ml)中の５−メチルピラジン−２−アミン(１.０９ｇ, １０mmol)の懸濁液に、ピリジン(０.８５ml, １０.５mmol)を加えた。滴下漏斗を取り付けたホイルで包んだフラスコ中で混合物を撹拌し、クロロホルム(１０ml)中の臭素(０.５４ml, １０.５mmol)の溶液を１０分かけて滴下した。添加が完了した後、混合物をさらに２０分間反応させ、１０mlの水を含む分液漏斗に注いだ。相を分離し、有機物を再度水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。得られた赤色の油状物を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、１２〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで精製した。主要なＵＶ活性ピークを集め、３−ブロモ−５−メチルピラジン−２−アミンをクリーム色の固体として得た(１.０６ｇ, ５.６４mmol, 収率５６.４％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.85 (s, 1 H) 6.42 (br. s., 2 H) 2.25 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.93; [M+H]⁺ = 189.9。

工程Ｂ：６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルバミン酸エチル

３−ブロモ−５−メチルピラジン−２−アミン(８５０mg, ４.５２mmol)に、エトキシカルボニルイソチオシアネート(０.５１ml, ４.５２mmol)を、次にトルエン(１ml)を加えた。混合物を、予め加熱した１００℃の油浴中に１分以内で置き、全ての固体を溶解させた。１５分後、全量を整粒された固体の塊とした。さらに１５分間後、メタノール(約５ml)を加え、混合物を還流して固体を破壊した。５分後に混合物を室温まで冷却し、固体を濾過によって集め、メタノールで洗浄し、６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルバミン酸エチルを得た(６８０mg, ２.８５mmol, 収率６３.１％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.48 (br. s., 1 H) 8.48 (s, 1 H) 4.30 (q, J=7.03 Hz, 2 H) 2.56 - 2.65 (m, 3 H) 1.31 (t, J=7.15 Hz, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 2.10 ; [M+H]⁺ = 239.17。

工程Ｃ：６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−アミン

６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルバミン酸エチル(６６０mg, ２.７７mmol)を、１ＮＮａＯＨ(１５ml, １５.００mmol)に懸濁し、１００℃の油浴中で４時間加熱し、環境温度まで冷却した。１ＮＨＣｌで混合物を酸性にして、得られた沈殿物を濾過して取り、エーテルで洗浄し、６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−アミンを黄色の粉末として得た(２３３mg, １.４０２mmol, 収率５０.６％)。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (s, 2 H) 8.12 (s, 1 H) 2.43 (s, 3 H). MS (LC/MS) R.T. = 0.66; [M+H]⁺ = 167.0。

工程Ｄ：６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−アミン(０.２２ｇ, １.３２mmol)を、実施例３３９の工程Ｄの方法に従って反応させ、６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを黄色の固体として得た(２６５mg, 収率５９％)。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.45 (s, 1 H) 2.66 - 2.68 (m, 9 H)。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ−(６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１５０mg, ０.５６mmol)、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１４０mg, ０.６１mmol)および炭酸セシウム(４５０mg, １.３９mmol)をＤＭＦ(３ml)に懸濁し、開放フラスコ中、１００℃の油浴で加熱した。２.５時間後、混合物を環境温度まで冷却し、水に注いだ。混合物をクロロホルム(４×)で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して残渣を得た。粗製の残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィーによって、５〜４０％ (９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ)／ＣＨＣｌ_３で精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−メチルチアゾロ[５,４−ｂ]ピラジン−２−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを白色の粉末として得た(５１mg, 収率２７％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.45 (br. s., 1 H) 8.26 (s, 1 H) 4.02 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 3.69 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 3.39 (dd, J=14.93, 1.63 Hz, 1 H) 2.72 - 3.06 (m, 5 H) 2.60 (s, 3 H) 2.11 - 2.22 (m, 2 H) 1.70 - 1.82 (m, 1 H) 1.49 - 1.64 (m, 2 H). MS (LC/MS) R.T. = 1.15; [M+H]⁺ = 331.2。

実施例３４２
(Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジメトキシイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(３,４−ジメトキシベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(２９４mg, １.８２４mmol)、(３,４−ジメトキシフェニル)メタンアミン(３１２mg, １.８６６mmol)およびＭｅＯＨ(１.５ml)の混合物を、撹拌しながら、油浴中、７０℃で２時間加熱し、室温まで冷却した。揮発性成分を真空で除去した。残渣をさらに精製することなく用いた。
LCMS RT 0.96分, MH⁺= 297.2, ¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 6.79 - 6.93 (3 H, m), 4.94 (1 H, s), 4.41 (2 H, s), 3.84 - 3.90 (6 H, m), 3.52 - 3.70 (4 H, m), 1.19 - 1.28 (6 H, m)。

工程Ｂ：６,７−ジメトキシイソキノリン−３−アミン

Ｎ−(３,４−ジメトキシベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(５４１mg, １.８２５mmol)に、硫酸(０.９５ml, １.８２５mmol)を加えた。冷却後、反応物を環境温度で一夜静置した。それを氷に滴下し、得られた溶液を濃ＮａＯＨで中和し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた酢酸エチルフラクションを硫酸マグネシウムで乾燥させた。乾燥剤を濾過して除き、溶媒を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィーによって５％メタノール／酢酸エチルで精製し、主な成分を集めた。１０５.７mgの褐色の固体を得た(２８％)。
LCMS RT 0.72分, MH⁺ = 205.1; 1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.59 (1 H, s), 7.03 (1 H, s), 6.80 (1 H, s), 6.70 (1 H, s), 4.00 (3 H, s), 3.98 (3 H, s)。

工程Ｃ：３−イソチオシアナト−６,７−ジメトキシイソキノリン

ジクロロメタン(３ml)中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１２４.６mg, ０.５３６mmol)の溶液に、撹拌しながら、ジクロロメタン(５ml)中の６,７−ジメトキシイソキノリン−３−アミン(１０５mg, ０.５１４mmol)の懸濁液を加えた。反応混合物を直接Biotageカラムにアプライし、１５〜２５％酢酸エチル／ヘキサンで、次に１００％酢酸エチルで精製し、３−イソチオシアナト−６,７−ジメトキシイソキノリンを白色の固体として得た。収量６９.４mg(５５％)。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.81 (1 H, s), 7.31 (1 H, s), 7.16 (1 H, s), 6.98 (1 H, s), 3.99 (6 H, s)。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジメトキシイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の塩化 (Ｓ)−３−(アンモニオメチル)−３−ヒドロキシ−１−アゾニアビシクロ[２.２.２]オクタン(７３mg, ０.３１９mmol)および炭酸セシウム(２２１mg, ０.６７８mmol)の懸濁液に、撹拌しながら、ＤＭＦ(１.５ml)中の３−イソチオシアナト−６,７−ジメトキシイソキノリン(６９mg, ０.２８０mmol)の溶液を加え、反応混合物を室温で３日間撹拌した。この溶液に、ＤＭＦ(０.４ml)中のＮ,Ｎ'−メタンジイリデンジプロパン−２−アミン(６９mg, ０.５４７mmol)の溶液を加え、反応物を室温で１４日間静置した。さらに約０.４mlのアセトニトリル中の６９mgのジ−イソプロピルカルボジイミドを加え、反応物を１日以上静置し、それを真空で蒸発させ、残渣について分取ＨＰＬＣを行い、(Ｒ)−Ｎ−(６,７−ジメトキシイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを２０.９mg(８％)得た。
LCMS RT 0.98分, MH⁺ = 403.2. ¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.73 (1 H, s), 7.28 (1 H, s), 7.09 (1 H, s), 6.96 (1 H, s), 4.01 (3 H, s), 4.00 (3 H, s), 3.96 (1 H, d, J=8.5 Hz), 3.63 (1 H, d, J=9.2 Hz), 3.39 (1 H, d, J=15.0 Hz), 2.79 - 3.10 (5 H, m), 2.24 (1 H, br. s.), 2.15 (1 H, br. s.), 1.75 (1 H, dddd, J=13.9, 9.3, 4.7, 4.4 Hz), 1.59 - 1.68 (1 H, m), 1.48 - 1.59 (1 H, m)。

実施例３４３
(Ｒ)−Ｎ−(５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−アミン

イソキノリン−３−アミン(２３９mg, １.６６mmol)、酸化白金(IV)(２８mg, ０.１２３mmol)およびＴＦＡ(６ml)の混合物を、Parr社製装置中で３時間水素化した。反応混合物を酢酸エチルを用いて濾過した。濾液を真空で蒸発させ、残渣を１０％水性炭酸ナトリウムと酢酸エチルの層間に分配した。層を分離し、再度水相を酢酸エチルで洗浄し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。乾燥剤を濾過して除き、溶媒を蒸発させた。この物質をカラムクロマトグラフィーによって酢酸エチルで精製し、１３９.８mg(５７％)の５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−アミンを黄白色の固体として得た。
LCMS RT 0.75分, MH⁺ = 149.1. ¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.78 (1 H, s), 6.26 (1 H, s), 4.29 (2 H, br. s.), 2.64 (4 H, ddd, J=10.6, 5.8, 5.5 Hz), 1.64 - 1.87 (4 H, m)。

工程Ｂ：３−イソチオシアナト−５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン

ジクロロメタン(５ml)中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(２２２mg, ０.９５６mmol)の溶液に、撹拌しながら、ジクロロメタン(１.５ml)中の５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−アミン(１３９mg, ０.９３８mmol)の溶液を加え、得られた溶液を室温で一夜撹拌した。反応混合物を直接Biotageカラムにアプライし、２０〜２５％酢酸エチル／ヘキサンで精製し、主要なピークを集めた。１４１.８mg(７９％)の３−イソチオシアナト−５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリンを得た。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.10 (1 H, s), 6.84 (1 H, s), 2.74 (4 H, t, J=6.3 Hz), 1.81 (4 H, dd, J=4.0, 2.7 Hz)。

工程Ｃ： (Ｓ)−１−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)−３−(５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−イル)チオウレア

ＤＭＦ(１０ml)中の、塩化 (Ｓ)−３−(アンモニオメチル)−３−ヒドロキシ−１−アゾニアビシクロ[２.２.２]オクタン(１８３mg, ０.７９９mmol)および炭酸セシウム(５５０mg, １.６８８mmol)の懸濁液に、撹拌しながら、ＤＭＦ(２ml)中の３−イソチオシアナト−５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン(１４１mg, ０.７４１mmol)の溶液を加え、反応混合物を室温で１０日間撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をメタノールに溶かし、シリカゲルのカラムで１％ＮＨ_４ＯＨ／９％ＭｅＯＨ／９０％ＣＨＣｌ_３で、次に分取ＨＰＬＣで精製した。単離した生成物を水性炭酸ナトリウムと酢酸エチルの層間に分配した。水相を酢酸エチルで再度洗浄し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣を、シリカゲルのカラムで、１％ＮＨ_４ＯＨ／９％ＭｅＯＨ／９０％ＣＨＣｌ_３で再度精製し、(Ｓ)−１−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)−３−(５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−イル)チオウレアを９８mg(３５％)得た。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 12.02 (1 H, br s), 8.23 (1 H, br s), 7.88 (1 H, s), 6.41 (1 H, s), 4.08 (1 H, dd), 3.89 (1 H, dd), 3.46 (2 H, s), 3.05-2.80 (5 H, m), 2.69 (4 H, dt), 2.10 (1 H, br s), 1.93 (1 H, br s), 1.85 (1 H, m), 1.77 (4 H, m), 1.66 (1 H, m), 1.45 (1 H, m); LCMS RT 1.11分, MH⁺ = 447.1。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(２ml)中の(Ｓ)−１−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)−３−(５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−イル)チオウレア(９８mg, ０.２８３mmol)の溶液に、ＤＭＦ(０.４ml)中のＮ,Ｎ'−メタンジイリデンジプロパン−２−アミン(４１mg, ０.３２５mmol)の溶液を加え、得られた溶液を室温で７日間静置した。さらに約０.４mlのアセトニトリル中の５３mgのジ−イソプロピルカルボジイミドを加え、反応物を１日以上静置した。反応混合物を真空で蒸発させ、分取ＨＰＬＣを行い、次に１％ＮＨ_４ＯＨ／９％ＭｅＯＨ／９０％ＣＨＣｌ_３でシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、(Ｒ)−Ｎ−(５,６,７,８−テトラヒドロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを６.４mg(７％)得た。
LCMS RT 0.80分, MH⁺ =313.2; ¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.91 (1 H, s), 6.75 - 6.95 (1 H, m), 3.91 (1 H, d, J=9.5 Hz), 3.60 (1 H, d, J=9.5 Hz), 3.38 (1 H, s), 2.93 - 3.13 (4 H, m), 2.86 - 2.93 (2 H, m), 2.69 (4 H, td, J=11.4, 6.1 Hz), 2.21 - 2.32 (1 H, m), 2.16 (1 H, br. s.), 1.72 - 1.85 (5 H, m), 1.64 (1 H, dd, J=7.2, 4.4 Hz), 1.56 (1 H, dt, J=7.0, 2.6 Hz)。

実施例３４４
(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：Ｎ−(４−クロロ−３−メトキシベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

(４−クロロ−３−メトキシフェニル)メタンアミン(３９２mg, ２.２８４mmol)(塩酸塩として)、ヒューニッヒ塩基(０.５ml, ２.８６mmol)およびＭｅＯＨ(２ml)の混合物に、ＭｅＯＨ(１ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(２９５mg, １.８３mmol)の溶液を加え、得られた混合物を、撹拌しながら、油浴中、７０℃で２時間加熱し、３日かけて室温まで冷却した。溶媒を真空で除去し、残渣をさらに精製することなく用いた。

工程Ｂ：６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−アミン

冷却(０℃)した硫酸(０.０７１ml, １.３３０mmol)に、ジクロロメタン(５ml)中のＮ−(４−クロロ−３−メトキシベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(４００mg, １.３３０mmol)の懸濁液を徐々に加え、得られた混合物を一夜かけて室温まで温めた。反応混合物を砕いた氷にゆっくりと加え、濃ＮａＯＨ溶液を添加することによって混合物を強塩基性にし、有機成分を酢酸エチルで抽出した。有機フラクションを硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣についてシリカゲルのクロマトグラフィーを酢酸エチルで行い、１１０.８mg(４０％)の６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−アミンを得た。
LCMS RT 0.95分, MH⁺ =209.0, 211.0; ¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.66 (1 H, s), 7.78 (1 H, s), 6.83 (1 H, s), 6.63 (1 H, s), 4.36 - 4.58 (2 H, m), 3.99 (3 H, s)。

工程Ｃ：６−クロロ−３−イソチオシアナト−７−メトキシイソキノリン

ジクロロメタン(５ml)中の１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１４２mg, ０.６１１mmol)の溶液に、撹拌しながら、ジクロロメタン(５.００ml)中の６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−アミン(１１０mg, ０.５２７mmol)の懸濁液を加え、反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物を直接シリカゲルカラムにアプライし、１０％酢酸エチル／ヘキサンで精製し、１０６mg(８０％)の６−クロロ−３−イソチオシアナト−７−メトキシイソキノリンを得た。
¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.90 (1 H, s), 7.99 (1 H, s), 7.36 (1 H, s), 7.08 (1 H, s), 4.05 (3 H, s)。

工程Ｄ： (Ｓ)−１−(６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−イル)−３−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)チオウレア

ＤＭＦ(３ml)中の塩化 (Ｓ)−３−(アンモニオメチル)−３−ヒドロキシ−１−アゾニアビシクロ[２.２.２]オクタン(１１１mg, ０.４８４mmol)の懸濁液に、撹拌しながら、ヒューニッヒ塩基(０.５ml, ２.８６mmol)を加え、得られた混合物を室温で３５分間撹拌した。ＤＭＦ(３ml)中の６−クロロ−３−イソチオシアナト−７−メトキシイソキノリン(１０６mg, ０.４２３mmol)の懸濁液を加え、反応混合物を室温で一夜撹拌した。溶媒を真空で蒸発させ、残渣を、シリカゲルのカラムで、１％ＮＨ_４ＯＨ／９％ＭｅＯＨ／９０％ＣＨＣｌ_３で精製し、白色の固体として、１４０.３mg(８２％)の(Ｓ)−１−(６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−イル)−３−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)チオウレアを得た。
LCMS RT 1.28分, MH⁺ = 407.1, 409.0, ¹H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 11.85 (1 H, t, J=5.2 Hz), 9.15 (1 H, br. s.), 8.63 (1 H, s), 7.76 (1 H, s), 6.92 (1 H, s), 6.89 (1 H, s), 4.14 (1 H, dd, J=13.9, 5.6 Hz), 3.99 (2 H, s), 3.90 (1 H, dd, J=14.0, 5.2 Hz), 3.46 (3 H, s), 2.89 - 3.01 (2 H, m), 2.75 - 2.88 (3 H, m), 2.03 - 2.15 (1 H, m), 1.89 - 1.96 (1 H, m), 1.77 - 1.88 (1 H, m), 1.63 (1 H, ddd, J=13.4, 6.1, 3.4 Hz), 1.32 - 1.45 (1 H, m)。

工程Ｅ： (Ｒ)−Ｎ−(６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(２.５ml)中の(Ｓ)−１−(６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−イル)−３−((３−ヒドロキシキヌクリジン−３−イル)メチル)チオウレア(１４０mg, ０.３４４mmol)の溶液に、ＤＭＦ(０.５ml)中のＮ,Ｎ'−メタンジイリデンジプロパン−２−アミン(１０１mg, ０.８００mmol)の溶液を加え、得られた混合物を室温で１０日間静置した。溶媒を真空で蒸発させた。残渣を約５mlのＭｅＯＨに溶解し(幾らかの白色の固体を濾過して除いた, ０９)、分取ＨＰＬＣ精製を行い、次に１％ＮＨ_４ＯＨ／９％ＭｅＯＨ／９０％ＣＨＣｌ_３でシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、３１mg(２４％)の(Ｒ)−Ｎ−(６−クロロ−７−メトキシイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た。
LCMS RT 1.04分, MH⁺ = 373.2, 375.2, ¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 8.78 - 8.89 (1 H, m), 7.90 - 8.01 (1 H, m), 7.14 - 7.23 (1 H, m), 4.01 (3 H, s), 3.95 - 3.99 (1 H, m), 3.62 - 3.71 (1 H, m), 3.19 - 3.25 (1 H, m), 3.06 - 3.13 (1 H, m), 2.90 - 3.00 (2 H, m), 2.76 - 2.89 (2 H, m), 2.10 - 2.21 (2 H, m), 1.69 - 1.83 (2 H, m), 1.56 - 1.68 (1 H, m)。

実施例３４５
(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：７−フルオロイソキノリン−３−アミンおよび５−フルオロイソキノリン−３−アミン

メタノール(１０ml)中の２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(１.５ｇ, １０.２mmol)および(３−フルオロフェニル)メタンアミン(１.２７５ｇ, １０.２mmol)の混合物を、７０度で２時間撹拌した。溶媒を蒸発させて油状物である２,２−ジエトキシ−Ｎ−(３−フルオロベンジル)アセトイミドアミドを得た(２.５ｇ.１００％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.3-6.9 (m, 4H), 4.9 (s, 1H), 4.4 (s, 2H), 3.8-3.5 (m, 4H), 1.27-1.20 (q, 6H). MS (LCMS, 酢酸アンモニウム系中) [M +H] = 254.7。

ＣＨ_２Ｃｌ_２(３ml)中の上で製造した油状物(２.１ｇ)に、室温で、２mlの濃硫酸を非常にゆっくりと加え、それを室温で一夜撹拌した。混合物を氷水に注ぎ、ＮａＯＨ(１０Ｎ)でｐＨ＝８まで中和した。混合物をＥｔＯＡｃ(１００ml×３)で抽出した。有機層を合わせ、水で、そして塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、粗製の固体１.０５ｇを得た。これをさらに精製することなく直接用いた。

工程Ｂ：５−フルオロ−３−イソチオシアナトイソキノリン

塩化メチレン(３０ml)中の上記の粗製の混合物(１０５０mg, ６.４７mmol)の溶液に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(１５００mg, ６.５mmol)を加えた。桃色の溶液を室温で２時間撹拌し、溶媒を蒸発させ、粗製の赤色の固体を得た。これをBiotageで精製し(０〜２５％酢酸エチル−ヘキサン)、７−フルオロ−３−イソチオシアナトイソキノリンと同定された最初のピークを単離した(６３５mg, ３.１１mmol, ４８％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.08 (s, 1H), 7.9-7.8 (m, 1H), 7.7-7.6 (m, 1H), 7.6-7.5 (m, 2H)。

そして、２番目の異性体である５−フルオロ−３−イソチオシアナトイソキノリンを単離した(２７.５mg, ０.１３５mmol, ２.１％)。
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.15 (s, 1H), 7.9-7.8 (m, 1H), 7.7 (s, 1H), 7.6-7.5 (m, 1H), 7.5-7.4 (m, 1H)。

工程Ｃ： (Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の５−フルオロ−３−イソチオシアナトイソキノリン(２７.５mg, ０.１３５mmol)の溶液に、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(２５mg, ０.１６０mmol)および炭酸セシウム(１１０mg, ０.３３７mmol)を加えた。混合物を４０度で一夜撹拌した。反応物にＮ,Ｎ'−メタンジイリデンジプロパン−２−アミン(０.１２ｇ, ０.９５mmol)を加え、混合物を４０度で一夜撹拌した。溶媒を蒸発させ、粗製の固体をBiotageで精製し、最初に１００％酢酸エチルで、２番目のランで０〜２５％９：１メタノール：水酸化アンモニウム−クロロホルムで、(Ｒ)−Ｎ−(５−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(２９.４mg, ０.０８６mmol, ６４.１％)。
¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 9.09 (s, 1H), 7.80-7.75 (d, 1H), 7.50-7.30 (m, 3H), 4.02-4.00 (d, 1H), 3.70-3.60 (d, 1H), 3.4-3.2 (m, 1H), 3.2-3.1 (m, 1H), 3.1-2.9 (m, 2H), 2.9-2.8 (m, 2H), 2.2-2.1 (m, 2H), 1.8-1.6 (m, 3H). MS (LCMS) [M+H] = 327.08。

実施例３４６
(Ｒ)−Ｎ−(８−ブロモ−５−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル

ＭｅＯＨ(３００ml)中のナトリウムメトキシド(１３.３８ｇ, ２４８mmol)の溶液に、２,２−ジエトキシアセトニトリル(１７.２２ml, １２４mmol)を滴下した。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。反応物を３００mlの水で希釈し、生成物を３×２５０mlのＥｔ_２Ｏで抽出した。合わせたＥｔ_２Ｏ層を１００mlの塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させ、望ましい生成物を無色の液体として得た(１５.３ｇ, ９５mmol, 収率７７％)。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.86 (1 H, br. s.), 4.77 (1 H, s), 3.78 (3 H, s), 3.55 (4 H, qd, J=6.97, 4.28 Hz), 1.21 (7 H, t, J=7.05 Hz)。

工程Ｂ： (２−ブロモ−５−フルオロフェニル)メタンアミン

ＴＨＦ(３０ml)中の２−ブロモ−５−フルオロベンゾニトリル(３.０ｇ, １５.００mmol)およびＮａＢＨ_４(１.４１９ｇ, ３７.５mmol)の溶液に、ＴＦＡ(３.４７ml, ４５.０mmol)を２０分かけてゆっくりと加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、ＭｅＯＨ(１０ml)を加え、混合物をさらに３０分間撹拌した。それをＥｔＯＡｃ(２００ml)で希釈し、水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、蒸発させた。残渣を８０ｇのThompsonシリカカートリッジで精製した(ヘキサン中３％〜１００％Ｂ, １２００ml, Ｂ＝ＥｔＯＡｃ中１０％ＭｅＯＨ)。望ましい生成物が、無色の油状物として得られた(１.７０ｇ, ８.３３mmol, 収率５５.５％)。
LC/MS (0.647分, MH⁺ = 205.92). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 7.59 (1 H, dd, J=8.85, 5.49 Hz), 7.43 (1 H, dd, J=10.07, 3.05 Hz), 7.05 (1 H, td, J=8.47, 3.20 Hz), 3.72 (3 H, s), 2.00 (2 H, br. s.)。

工程Ｃ：Ｎ−(２−ブロモ−５−フルオロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド

ＭｅＯＨ(２０ml)中の、２,２−ジエトキシアセトイミド酸メチル(１.２６４ｇ, ７.８４mmol)および(２−ブロモ−５−フルオロフェニル)メタンアミン(１.６ｇ, ７.８４mmol)の混合物を、７５℃で２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、薄黄色の固体として粗生成物を得た。このＮ−(２−ブロモ−５−フルオロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(２.６１ｇ, ７.８３mmol, 収率１００％)を、次の工程に直接用いた。
LC/MS (1.188分, MH⁺: 334.92). ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.44 (1 H, dd, J=8.69, 5.16 Hz), 7.15 (1 H, dd, J=9.44, 2.90 Hz), 6.81 (1 H, td, J=8.25, 3.15 Hz), 5.48 (1 H, br. s.), 4.90 (1 H, s), 4.42 (2 H, s), 3.49 - 3.67 (4 H, m), 1.17 - 1.25 (6 H, m)。

工程Ｄ：８−ブロモ−５−フルオロイソキノリン−３−アミン

Ｎ−(２−ブロモ−５−フルオロベンジル)−２,２−ジエトキシアセトイミドアミド(１.６ｇ, ４.８０mmol)およびジクロロメタン(２ml)の混合物に、Ｈ_２ＳＯ_４(１.２８０ml, ２４.０１mmol)を加えた。反応混合物を８０℃で１６時間撹拌し、室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ(１００ml)で希釈し、氷水で反応停止させ、ＮａＨＣＯ_３溶液で中和した。有機相を水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、蒸発させた。残渣を直接８０ｇのThompsonシリカのカートリッジで精製した(ヘキサン中３％〜１００％ＥｔＯＡｃ, １２００ml)。望ましい生成物を薄黄色の固体として得た(０.４７ｇ, １.９５０mmol, 収率４０.６％)。
LC/MS (1.052分, MH⁺: 242.99). ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8.95 (1 H, s), 7.36 (1 H, dd, J=8.06, 4.53 Hz), 7.23 (1 H, dd, J=10.58, 8.06 Hz), 6.68 (1 H, s), 6.52 (2 H, s), ¹⁹F NMR (376 MHz, DMSO-d₆) δ ppm -126.83 (1 F, s)。

工程Ｅ：８−ブロモ−５−フルオロ−３−イソチオシアナトイソキノリン

８−ブロモ−５−フルオロイソキノリン−３−アミン(０.３０ｇ, １.２４５mmol)およびジクロロメタン(５ml)の混合物に、１,１'−チオカルボニルジピリジン−２(１Ｈ)−オン(０.３１８ｇ, １.３６９mmol)を加えた。得られた混合物を室温で３時間撹拌した。生成物を直接４０ｇのThompsonシリカのカートリッジで精製した(ヘキサン中３％〜１００％ＥｔＯＡｃ, １２００ml)。望ましい生成物を灰白色の固体として得た(０.２３ｇ, ０.８１２mmol, 収率６５.３％)。
LC/MS (2.098分, MH⁺: 284.93). ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 9.38 (1 H, s), 8.04 (1 H, dd, J=8.31, 4.78 Hz), 7.96 (1 H, s), 7.67 (1 H, dd, J=9.82, 8.31 Hz). ¹⁹F NMR (376 MHz, DMSO-d₆) δ ppm -122.13 (1 F, s)。

工程Ｆ： (Ｒ)−Ｎ−(８−ブロモ−５−フルオロイソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(５ml)中の、８−ブロモ−５−フルオロ−３−イソチオシアナトイソキノリン(０.２２ｇ, ０.７７７mmol)および(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(０.１９６ｇ, ０.８５５mmol)の混合物に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(０.６３３ｇ, １.９４３mmol)を加えた。得られた混合物を４０℃で１６時間撹拌した。Ｎ,Ｎ'−メタンジイリデンジプロパン−２−アミン(０.２９４ｇ, ２.３２８mmol)を加え、４０℃でさらに１６時間撹拌を続けた。溶媒を蒸発させた。生成物を直接４０ｇのThompsonシリカのカートリッジで精製し(ヘキサン中３％〜１００％Ｂ, １５００ml, Ｂ＝ＥｔＯＡｃ中２０％ＭｅＯＨ)。生成物をさらにＥｔＯＡｃから再結晶した。望ましい生成物を灰白色の固体として得た(０.１１ｇ, ０.２６１mmol, 収率３３.６％)。
LC/MS (0.997分, MH⁺: 406.98). ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.30 (1 H, s), 7.60 (1 H, dd, J=8.18, 4.66 Hz), 7.22 (1 H, dd, J=10.07, 8.06 Hz), 4.00 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.69 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.23 (1 H, d, J=15.36 Hz), 3.07 - 3.13 (1 H, m), 2.90 - 2.96 (2 H, m), 2.76 - 2.85 (2 H, m), 2.15 (2 H, br. s.), 1.69 - 1.81 (2 H, m), 1.58 - 1.67 (1 H, m). ¹⁹F NMR (376 MHz, MeOD) δ ppm -126.72 (1 F, s)。

実施例３４７
(Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロ−６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン

４,６−ジクロロピリミジン(５.９６ｇ, ４０mmol)、イミダゾール(２.７２ｇ, ４０.０mmol)および炭酸カリウム(５.５３ｇ, ４０.０mmol)の混合物を、ＤＭＦ(５０ml)中で、室温で１８時間撹拌した。反応物を５００mlの水で希釈し、１５０mlのＥｔＯＡｃで５回抽出した。合わせた有機層を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、２４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、酢酸エチル中０〜１０％メタノールで精製し、４−クロロ−６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジンを得た(４.５６ｇ, 収率６３％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.85 (1 H, d, J=0.76 Hz), 8.45 (1 H, s), 7.62 (1 H, t, J=1.51 Hz), 7.34 (1 H, d, J=0.76 Hz), 7.23 (1 H, dd, J=1.38, 0.88 Hz). LCMS: RT = 0.47分, MH⁺ = 181.1。

工程Ｂ：６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン

４−クロロ−６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン(４.０ｇ, ２２.１mmol)を、２つの等量の部分に分けて、メタノール中７Ｎアンモニアの溶液(４０ml)と共に、２個の密封試験管に別々に入れた。試験管を密封し、６５℃で２０時間加熱し、室温で３日間静置した。反応物を合わせて、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、２４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中４０〜１００％ＥｔＯＡｃで、次にＥｔＯＡｃ中０〜５０％ＭｅＯＨで精製し、６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミンを得た(１.４３ｇ, ４０％)。
LCMS: RT = 0.39分, MH⁺ = 162.1。

工程Ｃ：６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１８ml)中の６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン(１.０ｇ, ６.２mmol)の溶液に、１０ＭＮａＯＨ(１.２４ml, １２.４mmol)、二硫化炭素(０.９３ml, １６mmol)、ＮａＯＨ(１.２４ml, １２.４mmol)およびヨードメタン(０.９７ml, １６mmol)を１５分間で滴下した。２時間撹拌を続け、混合物を水に注いだ。濁った溶液をＥｔＯＡｃに分配し、水で洗浄し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、１１０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中１０〜５０％ＥｔＯＡｃで精製し、６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(４１１mg, 収率２５％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.79 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.65 (1 H, d, J=1.01 Hz), 7.96 (1 H, t, J=1.51 Hz), 7.33 (1 H, d, J=1.01 Hz), 7.12 - 7.19 (1 H, m), 2.58 (6 H, s). LCMS: RT = 0.63分, MH⁺ = 266.1。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(３.８ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(４１９mg, １.８mmol)、６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(４０４mg, １.５mmol)および炭酸セシウム(１.２４ｇ, ３.８mmol)の懸濁液を、７５℃で２時間撹拌した。反応物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＣＨＣｌ_３中０〜３％ [９：１ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]で精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(４１７mg, 収率８３％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.40 (1 H, br. s.), 8.60 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.37 (1 H, t, J=1.01 Hz), 7.55 (1 H, t, J=1.39 Hz), 7.16 (1 H, dd, J=1.39, 0.88 Hz), 6.84 (1 H, br. s.), 3.98 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.64 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.34 (1 H, dd, J=14.98, 1.64 Hz), 2.69 - 3.04 (5 H, m), 2.08 - 2.21 (2 H, m), 1.67 - 1.78 (1 H, m), 1.43 - 1.62 (2 H, m). LCMS: RT = 0.26分, MH⁺ =326.2。

実施例３４８
(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロ−６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン

４,６−ジクロロピリミジン(１１.９２ｇ, ８０mmol)、４−メチル−１Ｈ−イミダゾール(６.５７ｇ, ８０mmol)および炭酸セシウム(２６.１ｇ, ８０mmol)の混合物を、ＤＭＦ(５０ml)中で室温で１８時間撹拌した。反応物を２００mlの水に希釈し、２００mlのＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機層を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、３００ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中２５〜７５％酢酸エチルで精製し、２種の位置異性体生成物の混合物を得た。プールしたフラクションを、約２００mlの体積まで濃縮し、冷却し、４−クロロ−６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジンを得た(５.７０ｇ, 収率３７％)。そのＮＭＲＮＯＥの特性によって、４−メチルイミダゾール位置異性体の明確な同定を行った。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.80 (1 H, d, J=0.50 Hz), 8.36 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.29 - 7.31 (1 H, m), 7.25 (1 H, d, J=1.01 Hz), 2.27 (3 H, d, J=1.01 Hz). LCMS: RT = 0.50分, MH⁺ = 195.1。

工程Ｂ：６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン

２Ｍアンモニア(２０ml, ４０.０mmol)／イソプロパノール中の、４−クロロ−６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン(１.１８ｇ, ６.１mmol)の溶液を、密封バイアル中、８０℃で１８時間加熱した。冷却後、固体沈殿物を濾過し、乾燥させ、６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミンを得た(７３３mg, 収率６９.０％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.31 (1 H, d, J=1.26 Hz), 8.28 (1 H, d, J=0.76 Hz), 7.49 (1 H, t, J=1.13 Hz), 7.16 (2 H, s), 6.50 (1 H, d, J=0.76 Hz), 2.15 (3 H, d, J=0.76 Hz). LCMS: RT = 0.39分, MH⁺ = 176.1。

工程Ｃ：６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１２ml)中の６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン(７００mg, ４.００mmol)の溶液に、１０ＭＮａＯＨ(０.８ml, ８mmol)、二硫化炭素(０.６０ml, １０mmol)、ＮａＯＨ(０.８ml, ８mmol)およびヨードメタン(０.６２ml, １０mmol)を１５分間で滴下した。２時間撹拌を続け、混合物を水に注いだ。濁った溶液をＥｔＯＡｃで分配し、水で洗浄し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、１１０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中５０〜１００％ＥｔＯＡｃで精製し、６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(４３８mg, 収率３９％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.76 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.55 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.62 - 7.66 (1 H, m), 7.24 (1 H, d, J=1.01 Hz), 2.57 (6 H, s), 2.24 (3 H, d, J=1.01 Hz). LCMS: RT = 0.66分, MH⁺ = 280.1。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(３.８ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(４１２mg, １.８０mmol)、６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(４１９mg, １.５mmol)および炭酸セシウム(１.２２ｇ, ３.７５mmol)の懸濁液を、７５℃で２時間撹拌した。反応物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＥｔＯＡｃ中１％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]のプレラン、次にＣＨＣｌ_３中１〜２％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]で精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(４７２mg, 収率９２％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.40 (1 H, br. s.), 8.56 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.28 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.21 (1 H, s), 6.76 (1 H, br. s.), 3.97 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.63 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.33 (1 H, dd, J=14.86, 1.76 Hz), 2.62 - 3.05 (5 H, m), 2.24 (3 H, d, J=1.01 Hz), 2.03 - 2.19 (2 H, m), 1.65 - 1.81 (1 H, m), 1.39 - 1.62 (2 H, m). LCMS: RT = 0.25, 0.46分, MH⁺ = 340.3。

実施例３４９
(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロ−６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン

４,６−ジクロロピリミジン(１.８ｇ, １２mmol)、４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール(１.２３ｇ, １２.００mmol)および炭酸セシウム(３.９１ｇ, １２.００mmol)の混合物を、ＤＭＦ(８ml)中で、室温で１８時間撹拌した。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、１２０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中０〜４０％酢酸エチルで精製し、４−クロロ−６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジンを得た(１.４１ｇ, 収率５４.６％)。そのＮＭＲＮＯＥの特性によって、４−クロロイミダゾール位置異性体の明確な同定を行った。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.86 (1 H, d, J=0.76 Hz), 8.33 (1 H, d, J=1.51 Hz), 7.54 (1 H, d, J=1.76 Hz), 7.30 (1 H, d, J=0.76 Hz). LCMS: RT = 0.81分, MH⁺ = 215.1。

工程Ｂ：６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン

２Ｍアンモニア(２０ml, ４０.０mmol)／イソプロパノール中の、４−クロロ−６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン(０.９９ｇ, ４.６０mmol)の溶液を、密封バイアル中、８０℃で１８時間加熱した。冷却後、固体沈殿物を濾過し、乾燥させ、６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミンを得た(８８４mg, 収率９８％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.44 (1 H, d, J=1.51 Hz), 8.32 (1 H, d, J=0.76 Hz), 7.96 (1 H, d, J=1.51 Hz), 7.30 (2 H, br. s.), 6.58 (1 H, d, J=1.01 Hz). LCMS: RT = 0.57分, MH⁺ = 196.1。

工程Ｃ：６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１２ml)中の６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン(８５０mg, ４.３５mmol)の溶液に、１０ＭＮａＯＨ(０.８７ml, ８.７mmol)、二硫化炭素(０.６５ml, １０.９mmol)、ＮａＯＨ(０.８７ml, ８.７mmol)およびヨードメタン(０.６８ml, １０.９mmol)を１５分間で滴下した。２時間撹拌を続け、混合物を水に注いだ。濁った溶液をＥｔＯＡｃに分配し、水で洗浄し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、１１０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中１０〜４０％ＥｔＯＡｃで精製し、６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(５５８mg, 収率４３％)。
回転異性体の約９：１混合物の¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.80 (0.8 H, d, J=0.76 Hz), 8.79 (0.2 H, d, J=0.50 Hz), 8.59 (1 H, d, J=1.51 Hz), 8.50 (0.1 H, d, J=1.26 Hz), 7.97 (0.9 H, d, J=1.51 Hz), 7.84 (0.1 H, d, J=1.51 Hz), 7.32 (0.9 H, d, J=0.76 Hz), 2.63 (0.6 H, s), 2.58 (5.4 H, s). LCMS: RT = 0.94分, MH⁺ = 300.0。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(３.８ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(４１２mg, １.８００mmol)、６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(４５０mg, １.５mmol)および炭酸セシウム(１.２２ｇ, ３.７５mmol)の懸濁液を、７５℃で２時間撹拌した。反応物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＥｔＯＡｃ中１％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]のプレラン、次にＣＨＣｌ_３中１〜２％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]で精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(２６５mg, 収率４８％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.41 (1 H, br. s.), 8.60 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.25 (1 H, d, J=1.51 Hz), 7.44 (1 H, d, J=1.51 Hz), 6.78 (1 H, s), 4.00 (1 H, d, J=9.82 Hz), 3.67 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.36 (1 H, dd, J=14.86, 1.51 Hz), 2.73 - 3.06 (5 H, m), 2.09 - 2.22 (2 H, m), 1.69 - 1.79 (1 H, m), 1.46 - 1.64 (2 H, m). LCMS: RT = 0.54分, MH⁺ = 360.2。

実施例３５０
(Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロ−６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン

４,６−ジクロロピリミジン(５.９６ｇ, ４０mmol)、１Ｈ−ピラゾール(２.７２ｇ, ４０.０mmol)および炭酸セシウム(１３.０３ｇ, ４０.０mmol)の混合物を、ＤＭＦ(２５ml)中で、室温で１８時間撹拌した。反応物を１００mlの水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、２４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中０〜２０％酢酸エチルで精製し、４−クロロ−６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジンを得た(４.８０ｇ, 収率６６％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.77 (1 H, d, J=0.76 Hz), 8.55 (1 H, d, J=2.77 Hz), 7.96 (1 H, d, J=1.01 Hz), 7.80 (1 H, d, J=1.01 Hz), 6.51 (1 H, dd, J=2.64, 1.64 Hz). LCMS: RT = 0.86分, MH⁺ = 181.1。

工程Ｂ：６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン

２Ｍアンモニア(２０ml, ４０.０mmol)／イソプロパノール中の、４−クロロ−６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン(１.３１ｇ, ７.２５mmol)の溶液を、密封バイアル中、８０℃で２４時間加熱した。反応物を室温で４日間保管した。固体沈殿物を濾過し、乾燥させ、６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミンを得た(１.１５ｇ, 収率９８％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.53 (1 H, dd, J=2.52, 0.50 Hz), 8.30 (1 H, d, J=0.76 Hz), 7.82 (1 H, d, J=1.01 Hz), 7.19 (2 H, br. s.), 6.88 (1 H, d, J=1.01 Hz), 6.55 (1 H, dd, J=2.64, 1.64 Hz). LCMS: RT = 0.52分, MH⁺ = 162.1。

工程Ｃ：６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１８ml)中の６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン(１.０ｇ, ６.２０mmol)の溶液に、１０ＭＮａＯＨ(１.２４ml, １２.４mmol)、二硫化炭素(０.９３３ml, １５.５mmol)、ＮａＯＨ(１.２４ml, １２.４mmol)およびヨードメタン(０.９６６ml, １５.５mmol)を１５分間で滴下した。一夜撹拌を続け、混合物を水に注いだ。黄褐色の沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(１３６mg, 収率８％)。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.74 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.64 (1 H, d, J=2.52 Hz), 7.82 (1 H, d, J=1.26 Hz), 7.40 (1 H, d, J=1.01 Hz), 6.57 (1 H, dd, J=2.64, 1.64 Hz), 2.58 (6 H, s). LCMS: RT = 0.96分, MH⁺ = 266.1。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(１.２ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(１３５mg, ０.５９mmol)、６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(１３０mg, ０.４９mmol)および炭酸セシウム(３９９mg, １.２３mmol)の懸濁液を、７５℃で２時間撹拌した。反応物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＥｔＯＡｃ中１％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]のプレランで、次に定組成のＣＨＣｌ_３中１％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]で精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−ピラゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(１０５mg, 収率６６％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.46 (1 H, br. s.), 8.58 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.50 (1 H, dd, J=2.64, 0.63 Hz), 7.74 (1 H, d, J=1.01 Hz), 7.47 (1 H, br. s.), 6.44 (1 H, dd, J=2.64, 1.64 Hz), 3.98 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.65 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.39 (1 H, dd, J=14.86, 1.51 Hz), 2.71 - 3.09 (5 H, m), 2.10 - 2.26 (2 H, m), 1.69 - 1.80 (1 H, m), 1.48 - 1.64 (2 H, m). LCMS: RT = 0.51分, MH⁺ = 326.2。

実施例３５１
(Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

工程Ａ：４−クロロ−６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン

４,６−ジクロロピリミジン(５.９６ｇ, ４０mmol)、１Ｈ−１,２,４−トリアゾール(１.３８１ｇ, ２０.００mmol)および炭酸セシウム(１３.０３ｇ, ４０.０mmol)の混合物を、ＤＭＦ(２５ml)中で、室温で１６時間撹拌した。反応物を１００mlの水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって、１６０ｇのシリカゲルカートリッジで、ヘキサン中２５〜５０％ＥｔＯＡｃで精製し、４−クロロ−６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジンを得た(２.７８ｇ, 収率３８％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.21 (1 H, s), 8.87 (1 H, s), 8.15 (1 H, s), 7.91 (1 H, s). LCMS: RT = 0.68分, MH⁺ = 182.1。

工程Ｂ：６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン

２Ｍアンモニア(２０ml, ４０.０mmol)／イソプロパノール中の４−クロロ−６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン(１.２４ｇ, ６.８３mmol)の溶液を、８０℃で、密封バイアル中で、１８時間加熱した。冷却後、固体沈殿物を濾過し、乾燥させ、６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミンを得た(１.０６ｇ, 収率９６％)。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.30 (1 H, s), 8.35 (1 H, s), 8.30 (1 H, s), 7.39 (2 H, br. s.), 6.83 (1 H, d, J=0.76 Hz). LCMS: RT = 0.41分, MH⁺ = 163.1。

工程Ｃ：６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル

ＤＭＦ(１８ml)中の、６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−アミン(１.００ｇ, ６.１７mmol)の溶液に、１０ＭＮａＯＨ(１.２３ml, １２.３mmol)、二硫化炭素(０.９２７ml, １５.４mmol)、ＮａＯＨ(１.２３ml, １２.３mmol)およびヨードメタン(０.９６ml, １５mmol)を１５分間で滴下した。２時間撹拌を続け、混合物を水に注いだ。濁った溶液をＥｔＯＡｃで分配し、水で洗浄し、濃縮し、１１０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ヘキサン中１０〜５０％ＥｔＯＡｃで、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチルを得た(５４１mg, 収率３３％)。
回転異性体の４：１混合物の¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.42 (0.74 H, s), 9.40 (0.35 H, s), 9.04 (0.32 H, s), 8.84 (0.76 H, d, J=1.01 Hz), 8.81 (0.33 H, d, J=1.01 Hz), 8.23 (1 H, s), 7.42 (0.75 H, d, J=1.01 Hz), 2.64 (1.2 H, s), 2.59 (4.8 H, s). LCMS: RT = 0.86分, MH⁺ = 267.1。

工程Ｄ： (Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

ＤＭＦ(３.８ml)中の、(Ｓ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩(４１２mg, １.８００mmol)、６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−イルカルボンイミドジチオ酸ジメチル(４００mg, １.５mmol)および炭酸セシウム(１２２２mg, ３.７５mmol)の懸濁液を、７５℃で２時間撹拌した。反応物を濃縮し、４０ｇのシリカゲルのカートリッジで、ＥｔＯＡｃ中１％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]のプレランで、次にＣＨＣｌ_３中１〜３％ [９５：５ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ]で、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、(Ｒ)−Ｎ−(６−(１Ｈ−１,２,４−トリアゾール−１−イル)ピリミジン−４−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを得た(２１０mg, 収率４３％)。
¹H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 9.45 (1 H, br. s.), 9.14 (1 H, s), 8.61 (1 H, d, J=1.01 Hz), 8.08 (1 H, s), 7.39 (1 H, s), 4.00 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.67 (1 H, d, J=9.57 Hz), 3.38 (1 H, dd, J=14.86, 1.76 Hz), 2.71 - 3.08 (5 H, m), 2.08 - 2.23 (2 H, m), 1.68 - 1.80 (1 H, m), 1.45 - 1.64 (2 H, m). LCMS: RT = 0.46分, MH⁺ = 327.2。

実施例３５２
(Ｓ)−Ｎ−(イソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミン

(Ｓ)−Ｎ−(イソキノリン−３−イル)−４Ｈ−１'−アザスピロ[オキサゾール−５,３'−ビシクロ[２.２.２]オクタン]−２−アミンを、実施例２３９(工程Ａ〜Ｂ)の方法によって、(Ｒ)−３−(アミノメチル)キヌクリジン−３−オール二塩酸塩から出発して製造した。
¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.00 (1 H, s), 7.91 (1 H, d, J=8.06 Hz), 7.70 (1 H, d, J=8.31 Hz), 7.58 (1 H, t, J=7.18 Hz), 7.40 (1 H, t, J=7.05 Hz), 7.30 (1 H, br. s.), 3.95 (1 H, d, J=9.82 Hz), 3.64 (1 H, d, J=10.07 Hz), 3.16 - 3.25 (1 H, m), 3.02 - 3.13 (1 H, m), 2.92 (2 H, t, J=7.30 Hz), 2.80 (2 H, t, J=7.05 Hz), 2.05 - 2.23 (2 H, m), 1.52 - 1.84 (3 H, m). MS (LC/MS) R.T. =1.39; [M+H]⁺= 309.21。

本開示は、前述の実施例に限定されないこと、および、その本質的な特性から逸脱せずに、他の具体的な形態に具現化できることは、当業者に明らかである。従って、実施例は、全ての点で例示であって、前述の実施例よりむしろ請求の範囲を参照し、限定的ではないと解釈することが望ましく、請求の範囲と同等の意義および範囲に入る変更は全てそれに包含されることが意図される。

Claims

下記：

からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容される塩。
治療有効量の請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、および、薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
統合失調症、アルツハイマー病、認知障害、関節リウマチ、変形性関節症、潰瘍性大腸炎、クローン病または糖尿病を処置する方法であって、治療有効量の請求項１に記載の化合物を患者に投与することを含む方法。
統合失調症に向けた、請求項３に記載の方法。
アルツハイマー病に向けた、請求項３に記載の方法。