JP2013516650A - 生物検体を高速フォーカス撮像する方法及び装置 - Google Patents
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Abstract
【選択図】図2
Description
20 分析チャンバー
22 フィールド照明装置
24 解像機構
26 位置決め装置
28 プログラム可能な分析装置
48 対物レンズ
50 フィルター
Claims (22)
- チャンバー内に静止状態で存在する生物学的液体サンプルを撮像する方法であって、
Z軸と平行なレンズ軸を有する対物レンズに対して、チャンバーをZ軸位置に位置させるステップと、
一方又は両方のチャンバー及び対物レンズを互いに対して移動させるステップと、
Z軸に沿ったフォーカス検索範囲内を一方又は両方のチャンバー及び対物レンズが互いに対して移動している時に、生物学的液体サンプルの一以上の画像を生成するステップと、を備えることを特徴とする方法。 - 画像が生成される時に、一方又は両方のチャンバー及び対物レンズを互いに対してZ軸に沿って一定速度で移動させる請求項1記載の方法。
- 画像を生成するステップは、フォーカス検索範囲内でZ軸に関連付けられると共に、定量可能なフォーカス・インデックスを有する画像の周期的な生成を含む請求項2記載の方法。
- 定量可能なフォーカス・インデックスが一定である請求項3記載の方法。
- 一以上の画像の他の画像に対するより鮮明なフォーカス・インデックスを決定するために、画像のフォーカス・インデックスを比較するステップと、
他の画像に対してより鮮明なフォーカス・インデックスを有する少なくとも一つの画像を分析するステップと、をさらに備える請求項3記載の方法。 - 各画像のフォーカス・インデックスの相対量を決定するために、画像のフォーカス・インデックスを比較するステップと、
他の画像よりも大きな相対量のフォーカス・インデックスに関連するZ軸位置で取得された画像を用いてサンプルを分析するステップと、をさらに備える請求項4記載の方法。 - フォーカス検索範囲内で取得された個々の画像のZ軸位置に対するフォーカス・インデックスの相対量をプロットするステップと、
プロットのピークに位置するフォーカス・インデックスを有する画像を識別するステップと、
プロットのピークに位置するフォーカス・インデックスを有する画像を用いてサンプルを分析するステップと、をさらに備える請求項6記載の方法。 - フォーカス検索範囲内で取得された画像のために、個々の画像のZ軸位置に対するフォーカス・インデックスの相対量に多項方程式を適合するステップと、
多項方程式の勾配の変化を識別するステップと、
勾配の変化と関連するZ軸位置で取得された画像を用いてサンプルを分析するステップと、をさらに備える請求項6記載の方法。 - フォーカス検索範囲内にあるサンプルの単一画像を生成するために、サンプルの連続撮像を含む一以上のサンプル画像を生成するステップにおいて、画像がフォーカス検索範囲内のZ軸位置に関連すると共に定量可能なフォーカス・インデックスを有する複数の部分を備える請求項2記載の方法。
- 定量可能なフォーカス・インデックスが一定である請求項9記載の方法。
- 一以上の画像部分の他の画像部分に対するより鮮明なフォーカス・インデックスを決定するために、画像部分のフォーカス・インデックスを比較するステップと、
他の画像に対して鮮明なフォーカス・インデックスを有する少なくとも一つの画像部分を分析するステップと、をさらに備える請求項10記載の方法。 - 各画像のフォーカス・インデックスの相対量を決定するために、画像部分のフォーカス・インデックスを比較するステップと、
他の画像よりも大きな相対量のフォーカス・インデックスに関連するZ軸位置で取得された画像部分を用いてサンプルを分析するステップと、をさらに備える請求項10記載の方法。 - 個々の画像部分のZ軸位置に対するフォーカス・インデックスの相対量をプロットするステップと、
プロットのピークに位置するフォーカス・インデックスを有する画像部分を識別するステップと、
プロットのピークに位置するフォーカス・インデックスを有する画像部分を用いてサンプルを分析するステップと、をさらに備える請求項12記載の方法。 - 個々の画像部分のZ軸位置に対するフォーカス・インデックスの相対量に多項方程式を適合するステップと、
多項方程式の勾配の変化を識別するステップと、
勾配の変化と関連するZ軸位置で取得された画像部分を用いてサンプルを分析するステップと、をさらに備える請求項10記載の方法。 - 一定速度は、画像が生成される近接したZ軸に沿った位置間の距離を一つの画像を生成するのに掛かる時間で除算した値よりも低い請求項2記載の方法。
- 画像を生成するステップは、チャンバーの第一の部分に配置されたフォーカス検索範囲内にあるサンプルを不連続な画像で周期的に生成すると共に、サンプルの単一画像を生成するために、チャンバーの一以上の第二の部分に配置されたフォーカス検索範囲内にあるサンプルを連続的に撮像するステップを含み、
チャンバーの第一の部分に配置されたサンプルの不連続な画像は、Z軸位置と関連付けられると共に、定量可能なフォーカス・インデックスを有し、
チャンバーの第二の部分に配置されたサンプルの連続的な画像は、Z軸位置と関連付けられると共に、小部分と定量可能なフォーカス・インデックスとを有する請求項2記載の方法。 - チャンバー内に静止状態で存在する生物学的液体サンプルを撮像する装置であって、
レンズ軸を有する対物レンズを備えたフィールド照明装置と、
一方又は両方の対物レンズ及びチャンバーを互いに対して位置決めするのに適用される位置決め装置と、
チャンバー内のサンプルの撮像に適用される解像機構と、
一方又は両方の対物レンズ及びチャンバーを互いに対して一定速度でレンズ軸と平行なZ軸に沿って移動させる位置決め装置の制御に適用され、かつ、一方又は両方のチャンバー及び対物レンズがZ軸に沿ったフォーカス検索範囲内を互いに対して一定速度で移動している時に、生物学的液体サンプルの一以上の画像を生成するのに適用されるプログラム可能な分析装置と、を備えることを特徴とする装置。 - 分析装置は、画像が生成される時に一方又は両方のチャンバー及び対物レンズを互いに一定速度でZ軸に沿って移動させる位置決め装置の制御に適用される請求項17記載の装置。
- 分析装置はフォーカス検索範囲内にあるサンプルの画像を周期的に生成する解像機構の制御に適用されると共に、各画像をフォーカス検索範囲内のZ軸位置に関連付けさせ、各画像は定量可能なフォーカス・インデックスを有する請求項18記載の装置。
- 定量可能なフォーカス・インデックスは一定である請求項19記載の装置。
- 分析装置は、一以上の画像の他の画像に対するより鮮明なフォーカス・インデックスを決定するために、画像のフォーカス・インデックスを比較すると共に、他の画像に対してより鮮明なフォーカス・インデックスを有する少なくとも一つの画像を分析するのに適用される請求項19記載の装置。
- 分析装置は、フォーカス検索範囲内のサンプルの単一画像を生成するために連続撮像する解像機構の制御に適用されると共に、固有のZ軸位置を画像の特定部分と結合させ、各画像部分は定量可能なフォーカス・インデックスを有する請求項18記載の装置。
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