JP2013166702A - キナーゼ阻害剤を組み合わせた抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

【課題】顕著な抗腫瘍効果を示す新規併用療法剤の提供。
【解決手段】テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤と、シスプラチンと、ＴＳＵ−６８又はその塩とを組み合わせてなる抗腫瘍剤。
【選択図】図１

Description

本発明は、複数の癌化学療法剤を組み合わせてなる新規な抗腫瘍剤及びＴＳＵ−６８を有効成分とする抗腫瘍効果増強剤に関する。

従来、進行胃癌に対する化学療法として、５−フルオロウラシル（以下、「５−ＦＵ」ともいう）、シスプラチン、イリノテカン、ドセタキセルなどの抗腫瘍剤が臨床応用されてきた。
５−ＦＵは投与方法によりその効果や副作用が様々であるため、より効果が高くあるいは安全性の高い治療薬として５−ＦＵのプロドラッグが開発され、そのうち５−ＦＵのプロドラッグであるテガフールが配合されたユーエフティー（商品名）（テガフール：ウラシル＝１：４（モル比）で含有する配合剤）、ティーエスワン（商品名）（テガフール：ギメラシル：オテラシルカリウム＝１：０．４：１（モル比）で含有する配合剤、以下、「Ｓ−１」ともいう）が広く臨床で用いられている。

Ｓ−１は、先般、従来日本において標準療法とされていたＳ−１単独療法とＳ−１とシスプラチンの併用療法（以下、「Ｓ−１／シスプラチン併用療法」という）の比較試験により、Ｓ−１／シスプラチン併用療法でより良い生存期間（１１ヶ月 ｖｓ １３ヶ月）が得られたことが公表され、Ｓ−１／シスプラチン併用療法が、進行胃癌に対する標準療法になりうることが示唆された（非特許文献１）。
しかしながら、Ｓ−１／シスプラチン併用療法は進行・再発の胃癌に対し高い治療効果をもたらす有用な治療法であるが、患者のさらなる長期生存に寄与するべく、より強力な抗腫瘍効果を奏し、且つ副作用の少ない胃癌の治療法が望まれている。

（Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸（以下、「ＴＳＵ−６８」という）は、血管内皮増殖因子（以下、「ＶＥＧＦ」という）受容体であるＦｌｋ−１（以下、「ＫＤＲ」ともいう）のチロシンのリン酸化を阻害し、腫瘍組織における血管の新生を抑制することで酸素と栄養の供給を断ち、腫瘍の増殖と転移を抑制する低分子化合物である。また、ＶＥＧＦ受容体の他に細胞内シグナル伝達に関与する血小板由来増殖因子（以下、「ＰＤＧＦ」という）受容体、ＦＧＦ受容体等のチロシンリン酸化も阻害することがｉｎ ｖｉｔｒｏにて確認されている。各種ヒト癌細胞株を皮下に移植したヌードマウスｉｎ ｖｉｖｏモデルにおけるＴＳＵ−６８単独経口投与時の抗腫瘍効果を検討した結果、肺癌、大腸癌、子宮癌などに対して腫瘍増殖抑制効果が認められている（非特許文献２）。ＴＳＵ−６８は、臨床試験において、肝細胞癌などの癌種に治療効果があることが報告されている（非特許文献３）。
また、Ｓ−１にＴＳＵ−６８とを併用させることにより、抗腫瘍効果が増強されることが報告されている（非特許文献４）。

Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ ９（３）：２１５−２２１，２００８． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６０：４１５２，２０００． Ｅｕｒｏ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｕｐｐｌ；６（１２）：１７ ＃４３，２００８． 第６０回日本癌学会総会 ５８０頁、Ｎｏ．２０２４，２００１．

本発明は、顕著な抗腫瘍効果、特に腫瘍増殖遅延効果を示す新規な抗腫瘍剤及び抗腫瘍効果増強剤を提供することを目的とする。

本発明者はこのような現状に鑑み、より患者の生存期間延長に寄与する抗腫瘍剤を開発すべくＳ−１／シスプラチン併用療法と他の抗腫瘍剤を組み合わせた新規な併用療法に関して研究を重ねた結果、更に、血管新生に関与するＶＥＧＦ、ＰＤＧＦなどの受容体チロシンキナーゼの阻害剤であるＴＳＵ−６８を併用することにより、Ｓ−１／シスプラチン併用療法の抗腫瘍効果が顕著に増強される一方で、副作用の発症は増強されないことを見出し、本発明を完成するに至った。また、抗腫瘍剤に他の抗腫瘍剤を新たに併用させた場合、抗腫瘍効果の増強に伴い、副作用も増強されることが一般的であるが、本発明のように顕著に強い抗腫瘍効果、特に腫瘍増殖遅延効果と低い副作用の発症リスクを両立できたことは驚くべきことである。

すなわち本発明は、以下の１）〜８）を提供するものである。
１）テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤と、シスプラチンと、ＴＳＵ−６８又はその塩とを組み合わせてなる抗腫瘍剤。
２）配合剤中のテガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムのモル比（テガフール：ギメラシル：オテラシルカリウム）が、１：０．１〜５：０．１〜５である上記１）記載の抗腫瘍剤。
３）テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤を１日量としてテガフール換算量で５０〜１２０ｍｇ／ｍ²、シスプラチンを１日量として３０〜１５０ｍｇ／ｍ²、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日量として２００〜１５００ｍｇ、それぞれ組み合わせる上記２）記載の抗腫瘍剤。
４）テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤を１日量として６４〜８０ｍｇ／ｍ²、シスプラチンを１日量として５０〜６０ｍｇ／ｍ²、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日量として４００〜８００ｍｇ、それぞれ組み合わせる上記１）記載の抗腫瘍剤。
５）テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤と、シスプラチンを含有する製剤と、ＴＳＵ−６８又はその塩を含有する製剤の組み合わせからなるものである上記１）〜４）のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
６）テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤、シスプラチンを含有する製剤、及びＴＳＵ−６８又はその塩を含有する製剤からなるキット製剤である上記１）〜４）のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
７）ＴＳＵ−６８又はその塩を有効成分とする、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤とシスプラチンとを組み合わせた併用療法の抗腫瘍効果増強剤。
８）ＴＳＵ−６８又はその塩を、１投与単位当たり１００〜２００ｍｇ含有する上記７）記載の抗腫瘍効果増強剤。

本発明のテガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤と、シスプラチンと、ＴＳＵ−６８又はその塩とを組み合わせてなる抗腫瘍剤は、従来の抗腫瘍剤の併用と比較して顕著に高い抗腫瘍効果、例えば腫瘍体積の減少や腫瘍成長の停滞などを奏するが、副作用の発症は増強されない。すなわち、後記実施例に示すように、本発明の抗腫瘍剤は、それぞれ単独で用いた場合や２剤を併用した場合と比較して、副作用の発症を抑えつつ、顕著に高い抗腫瘍効果を実現できる。なお、本発明において抗腫瘍効果とは、腫瘍縮小効果、腫瘍増殖遅延効果及び延命効果などとして評価される。従って、本発明の抗腫瘍剤を用いることにより、より長い生存期間を得ることができる。

ヒト胃癌株ＭＫＮ−４５のヌードマウス腹膜播種モデルにおけるコントロール群、ＴＳＵ−６８単独群、Ｓ−１／シスプラチン併用群及びＳ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群の生存曲線を示した図である。 ヒト胃癌株ＭＫＮ−４５のヌードマウス腹膜播種モデルにおけるコントロール群、ＴＳＵ−６８を３５日間又は７０日間投与するＳ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群の生存曲線を示した図である。

本発明において、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤としては、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを任意の割合で混合し、適宜、後述するような薬学的に許容される担体を添加して調製された製剤が挙げられる。

ここで、「テガフール」は、５−フルオロ−１−（２−テトラヒドロフリル）−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオンで表される公知の化合物であり、生体内で活性化を受けて抗腫瘍活性の本体である５−ＦＵを放出する薬剤である。テガフールは、公知の方法、例えば特公昭４９−１０５１０号に記載されている方法に従って製造することができる。

「ギメラシル」は、２，４−ジヒドロキシ−５−クロロピリジンで表される公知の化合物であり、それ自身全く抗腫瘍活性を有さないものであるが、５−ＦＵが生体内において代謝されて不活性化されることを抑制するものであり、抗腫瘍効果を増強させることができる。

「オテラシルカリウム」は、モノポタシウム １，２，３，４−テトラヒドロ−２，４−ジオキソ−１，３，５−トリアジン−６−カルボキシレートで表される公知の化合物であり、それ自身は抗腫瘍活性を有さないが、主に消化管に分布してその部位での５−ＦＵの活性化を抑制することにより消化管障害を抑制するものである。

テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムの配合割合は、それぞれの配合目的を奏する範囲であれば特に制限されず、例えば、特許第２６１４１６４号公報に記載されている公知の配合剤と同様の範囲で良く、テガフール１モルに対して、ギメラシルを０．１〜５モル程度、好ましくは０．２〜１．５モル程度とすればよく、オテラシルカリウムを０．１〜５モル程度、好ましくは０．２〜２モル程度とすればよい。特に好ましくは、各有効成分の配合割合は、テガフール：ギメラシル：オテラシルカリウム（モル比）＝１：０．４：１であり、一般名「テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム配合剤」（商品名：「ティーエスワン」）として市販されているものが挙げられる。

本発明において「シスプラチン」は、ＣＤＤＰとも称される公知の白金錯体化合物であり、ＤＮＡ合成阻害作用により抗腫瘍効果を奏することが知られて、公知の方法により製造することができる。
本発明の抗腫瘍剤におけるシスプラチンの配合割合は、抗腫瘍効果の増強効果を奏する範囲であれば特に制限されず、例えば、１日量としてテガフール１モルに対して、シスプラチンを０．０２５〜５０モル程度、好ましくは０．１〜１０モル程度、特に好ましくは０．２〜２．０モル程度とすればよい。

本発明の（Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸（ＴＳＵ−６８）は、公知のＶＥＧＦ受容体、ＰＤＧＦ受容体等のチロシンキナーゼ阻阻害剤であり、肺癌、大腸癌、子宮癌などに抗腫瘍効果を奏することが知られている。ＴＳＵ−６８又はその塩は、公知の方法、例えば特表２００２−５１６３１０号公報に記載の方法により製造できる。
ＴＳＵ−６８の塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に制限されず、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、りん酸等の無機酸や、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸等の有機酸との反応により得られる塩が例示できる。
本発明の抗腫瘍剤におけるＴＳＵ−６８又はその塩の配合割合は、抗腫瘍効果の増強効果を奏する範囲であれば特に制限されず、例えば、１日量としてテガフール１モルに対して、ＴＳＵ−６８又はその塩を０．１〜１００モル程度、好ましくは０．５〜５０モル程度、特に好ましくは１〜１０モル程度とすればよい。

本発明の抗腫瘍剤は、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤、シスプラチン及びＴＳＵ−６８又はその塩を上記の配合比となるように配合した配合剤（複数の有効成分を含有する製剤）として一の剤型に製剤化したもの（１剤型形態）でも、同時に又は間隔を空けて別々に使用できるように、上記有効成分をそれぞれの製剤又は配合剤として複数の剤型に製剤化したもの（多剤型形態）であってもよい。このうち、シスプラチンを含有する製剤と、ＴＳＵ−６８又はその塩を含有する製剤と、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤とを組み合わせて、多剤型形態で用いるのが好ましい。

上記製剤の投与形態としては特に制限は無く、治療目的に応じて適宜選択でき、具体的には経口剤（錠剤、被覆錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤など）、注射剤、坐剤、貼付剤、軟膏剤等が例示できる。本発明の抗腫瘍剤を複数の剤型に製剤化する場合は、当該製剤はそれぞれ異なる投与形態であっても同一の投与形態であってよい。例えば、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム配合剤及びＴＳＵ−６８又はその塩を含有する製剤は経口剤、シスプラチンを含有する製剤は注射剤とすることが好ましい。

本発明の抗腫瘍剤又は抗腫瘍効果増強剤は、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム配合剤、シスプラチン及びＴＳＵ−６８又はその塩が併用投与される限り、上記製剤ごとにそれぞれ個別に製造・包装・流通されるものでもよく、また上記製剤のすべて又は一部を併用投与に適した単一のパッケージ（キット製剤）として製造・包装・流通されるものでもよい。

本発明における各有効成分を含有する製剤は、薬理学的に許容される担体を用いて、通常公知の方法により調製することができる。斯かる担体としては、通常の薬剤に汎用される各種のもの、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤、無痛化剤等を例示できる。

賦形剤としては、例えば、乳糖、ショ糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、マルトース、マンニトール、エリスリトール、キシリトール、マルチトール、イノシトール、デキストラン、ソルビトール、アルブミン、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、メチルセルロース、グリセリン、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム及びこれらの混合物等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール及びこれらの混合物等が挙げられる。結合剤としては、例えば、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、エチルセルロース、水、エタノール、リン酸カリウム及びこれらの混合物等が挙げられる。

崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖及びこれらの混合物等が挙げられる。希釈剤としては、例えば、水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類及びこれらの混合物等が挙げられる。安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸、チオ乳酸及びこれらの混合物等が挙げられる。等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ホウ酸、ブドウ糖、グリセリン及びこれらの混合物等が挙げられる。ｐＨ調整剤及び緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム及びこれらの混合物等が挙げられる。無痛化剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカイン及びこれらの混合物等が挙げられる。

本発明の抗腫瘍剤又は抗腫瘍効果増強剤によって治療できる癌としては特に制限されるものではなく、例えば、結腸・直腸癌、肝臓癌、腎臓癌、頭頸部癌、食道癌、胃癌、胆道癌、胆のう・胆管癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頚癌、子宮体癌、膀胱癌、前立腺癌、精巣腫瘍、骨・軟部肉腫、白血病、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、皮膚癌、脳腫瘍、睾丸腫瘍等が挙げられ、好ましくは結腸・直腸癌、胃癌、頭頸部癌、肺癌、乳癌、膵臓癌、胆道癌、肝臓癌であり、特に好ましくは胃癌である。

本発明の抗腫瘍剤における各有効成分の投与量は、それぞれの配合目的を奏する量であれば特に制限されず、患者の年齢、癌種、病期、転移の有無、治療暦、他の抗腫瘍剤の有無などにより適宜設定されるが、テガフールは２０〜５００ｍｇ／ｍ²（体表面積あたり）／ｄａｙ、好ましくは５０〜１２０ｍｇ／ｍ²／ｄａｙ、特に好ましくは６４〜８０ｍｇ／ｍ²／ｄａｙであり、ギメラシルは５．８〜１４５ｍｇ／ｍ²／ｄａｙ、好ましくは１４．５〜３４．８ｍｇ／ｍ²／ｄａｙ、特に好ましくは１８．６〜２３．２ｍｇ／ｍ²／ｄａｙであり、オテラシルカリウムは１９．６〜４９０ｍｇ／ｍ²／ｄａｙ、好ましくは４９〜１１７．６ｍｇ／ｍ²／ｄａｙ、特に好ましくは６２．７〜７８．４ｍｇ／ｍ²／ｄａｙであり、シスプラチンは２０〜２００ｍｇ／ｍ²／ｄａｙ、好ましくは３０〜１５０ｍｇ／ｍ²／ｄａｙ、特に好ましくは５０〜６０ｍｇ／ｍ²／ｄａｙであり、ＴＳＵ−６８又はその塩は５０〜３０００ｍｇ／ｄａｙ、好ましくは２００〜１５００ｍｇ／ｄａｙ、特に好ましくは４００〜８００ｍｇ／ｄａｙである。
従って、本発明の抗腫瘍剤は、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤、シスプラチン及びＴＳＵ−６８又はその塩を、１日量が上記投与量になるように組み合わせてなるのが好ましい。すなわち、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤を、１日量としてテガフール換算量で５０〜１２０ｍｇ／ｍ²、好ましくは６４〜８０ｍｇ／ｍ²、シスプラチンを、１日量として３０〜１５０ｍｇ／ｍ²、好ましくは５０〜６０ｍｇ／ｍ²、ＴＳＵ−６８又はその塩を、１日量として２００〜１５００ｍｇ、好ましくは４００〜８００ｍｇ、それぞれ組み合わせるのが好ましい。

本発明における各有効成分の投与スケジュール（投与順序や投与間隔）は、相乗効果が得られる範囲であれば特に制限されない。例えば、２１〜３５日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から１４〜２１日目にかけて投与し、シスプラチンを１日目又は８日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を第１日目から２１〜３５日目にかけて投与することを１回又は複数回繰り返す投与スケジュールが挙げられ、好ましくは、３５日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から２１日目にかけて投与し、シスプラチンを１日目又は８日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日目から３５日目にかけて投与することを１回又は複数回繰り返す投与スケジュール、又は２８日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から２１日目にかけて投与し、シスプラチンを８日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日目から２８日目にかけて投与することを１回又は複数回繰り返す投与スケジュール、又は、２１日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から１４日目にかけて投与し、シスプラチンを第１日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日目から２１日目にかけて投与することを１回又は複数回繰り返す投与スケジュールが挙げられ、特に好ましくは、３５日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から２１日目にかけて投与し、シスプラチンを８日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日目から３５日目にかけて投与することを１回又は複数回繰り返す投与スケジュールが挙げられる。或いは、２１〜３５日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から２１〜３５日目にかけて投与し、シスプラチンを１日目又は８日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日目から２１〜３５日目にかけて投与するスケジュールが挙げられ、好ましくは、３５日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から３５日目にかけて投与し、シスプラチンを１日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日目から３５日目にかけて投与するスケジュールが挙げられる。或いは、７０日間を１サイクルとして、Ｓ−１を１日目から３５日目にかけて投与し、シスプラチンを１日目に投与し、ＴＳＵ−６８又はその塩を１日目から７０日目まで投与するスケジュールなどが挙げられる。また、本発明の抗腫瘍剤をキットとする場合は、それぞれ単独の製剤を、同時に或いは間隔を空けて投与してもよい。

本発明のＴＳＵ−６８又はその塩は、それ単独でも抗腫瘍効果を奏するが、Ｓ−１／シスプラチン併用療法と併用することにより、さらに顕著にＳ−１／シスプラチン併用療法の抗腫瘍効果を増強する。したがって、ＴＳＵ−６８又はその塩は、Ｓ−１／シスプラチン併用療法の抗腫瘍効果増強剤として有用である。Ｓ−１／シスプラチン併用療法の抗腫瘍効果増強効果と副作用の許容性の面から、ＴＳＵ−６８又はその塩は１日あたり２回に分けて投与することができ、１投与単位当たりの量は１００〜７５０ｍｇ（１日投与量として２００〜１５００ｍｇ）が好ましく、２００〜４００ｍｇ（１日投与量として４００〜８００ｍｇ）がより好ましい。

以下に実施例を示し、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。

[実施例１]
ヒト胃癌株ＳＣ−２のヌードマウス皮下移植モデルにおけるＳ−１／シスプラチン併用療法に対するＴＳＵ−６８の併用効果

試験モデル
ヒト胃癌株ＳＣ−２の約２〜３ｍｍ角のフラグメントを背部皮下に移植した雄性ヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ−ｎｕ、５週齢、日本クレア株式会社）の腫瘍体積（長径ｘ短径²÷２）を算出し、平均腫瘍体積がほぼ１５０ｍｍ³になった時点で群分けした（１群８匹）。この群分け日をｄａｙ０とし、翌日より薬剤投与を開始した。
Ｓ−１は、テガフール換算量で６．９又は８．３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙをｄａｙ１からｄａｙ１４まで１日１回経口投与し、シスプラチンは、７．０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙをｄａｙ１に尾静脈投与した。ＴＳＵ−６８は、２００又は４００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙをｄａｙ１からｄａｙ１４まで１日１回経口投与した。また、Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用は、これらと同様の用量、スケジュール、経路で投与した。薬剤無投与群をコントロール群とした。

抗腫瘍効果
薬剤投与期間中及び投与期間後、３〜４日おきに各マウスの腫瘍体積を測定し、各群の相対腫瘍体積（Ｒｅｌａｔｉｖｅ Ｔｕｍｏｒ Ｖｏｌｕｍｅ；ＲＴＶ）を下記式１により、腫瘍増殖抑制率（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｒａｔｅ；ＩＲ（％））を下記式２により算出した。コントロール群と薬剤投与群との抗腫瘍効果の有意差について、Ｉｎｔｅｒｓｅｃｔｉｏｎ Ｕｎｉｔ Ｔｅｓｔ（閉手順）で統計解析した。すなわち、それぞれ対応する投与量の各群の平均ＲＴＶを、コントロール群とＳ−１／シスプラチン併用群、コントロール群とＴＳＵ−６８単独群、コントロール群とＳ−１／シスプラチン／ＴＳ−Ｕ６８併用群、Ｓ−１／シスプラチン併用群とＳ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群、ＴＳＵ−６８単独群とＳ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群の各比較対でＡｓｐｉｎ−Ｗｅｌｃｈのｔ検定（両側）により解析し、有意水準が０．０５未満であり、且つ薬剤群の平均ＲＴＶが、コントロール群と比較し低値を示している場合に「抗腫瘍効果がある」と判定するものである。また、抗腫瘍効果の上乗せ効果の有意差について、全比較対で得られる有意水準の最大値（Ｏｖｅｒａｌｌ Ｍａｘｉｍａｌ ｐ値）が０．０５未満であり、且つＳ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群の平均ＲＴＶが、Ｓ−１／シスプラチン併用群及びＴＳＵ−６８単独群と比較し、低値を示している場合に「抗腫瘍効果の上乗せ効果がある」と判定するものである。

（式１）相対腫瘍体積（ＲＴＶ）＝ ｄａｙＮの腫瘍体積÷ｄａｙ０の腫瘍体積
（式２）腫瘍増殖抑制率（ＩＲ（％））＝［１−（薬剤投与群の平均ＲＴＶ÷コントロール群の平均ＲＴＶ）］×１００

ｄａｙ１５における平均ＲＴＶ及びＩＲの結果を表１に示す。

ｄａｙ１５におけるＳ−１／シスプラチン併用群、ＴＳＵ−６８単独群は、それぞれコントロール群と比較し、いずれも統計上有意な「抗腫瘍効果がある」ことが認められた。
Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群は、それぞれの用量でＳ−１／シスプラチン併用群及びＴＳＵ−６８単独群と比較し、いずれも統計上有意な「抗腫瘍効果の上乗せ効果がある」ことが認められた。

腫瘍増殖遅延効果
各群の平均ＲＴＶが経時的に指数的に増殖するものとして、各群の平均ＲＴＶが５を超す日前後の測定日の平均ＲＴＶから一次関数式を求め、平均ＲＴＶが５．０になる日（ＲＴＶ５（ｄａｙ））を求めた。また、増殖遅延効果（Ｇｒｏｗｔｈ Ｄｅｌａｙ Ｐｅｒｉｏｄ；ＧＤＰ）として、ＧＤＰ５を薬剤投与群のＲＴＶ５とコントロール群のＲＴＶ５の差より求めた。
各群のＲＴＶ５及びＧＤＰ５を表２に示す。

Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群は、それぞれの用量でＳ−１／シスプラチン併用群及びＴＳＵ−６８単独群と比較し、いずれも腫瘍の増殖が遅延した。

副作用
また、腫瘍体積と併せて、各マウスの体重を測定し、各群の体重変化率（ＢＷＣ（％））を下記数式３により算出した。

（式３）体重変化率（ＢＷＣ（％））＝（（ｄａｙＮの体重−ｄａｙ０の体重）÷ｄａｙ０の体重）×１００

Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群（２００ｍｇ群及び４００ｍｇ群）は、Ｓ−１＋シスプラチン併用群と比較し、体重減少が同等もしくは少なかった。これからＳ−１／シスプラチン療法にＴＳＵ−６８を併用投与することによる副作用（体重減少）の増強が限りなく少ないことが確認された。

[実施例２]
ヒト胃癌株ＮＵＧＣ−３のヌードマウス皮下移植モデルにおけるＳ−１／シスプラチン併用療法に対するＴＳＵ−６８の併用効果

試験モデル
ヒト胃癌株ＮＵＧＣ−３を用い、平均腫瘍体積がほぼ１２５ｍｍ³になった時点で群分けし、Ｓ−１は、テガフール換算量で６．９ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙをｄａｙ１からｄａｙ１４まで１日１回経口投与した以外は実施例１と同様の方法で、Ｓ−１／シスプラチン併用療法に対するＴＳＵ−６８の併用効果を検討した。

抗腫瘍効果
ｄａｙ１５における平均ＲＴＶ及びＩＲの結果を表３に示す。

ｄａｙ１５におけるＳ−１／シスプラチン併用群、ＴＳＵ−６８単独群は、それぞれコントロール群と比較し、いずれも統計上有意な「抗腫瘍効果がある」ことが認められた。
Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群は、それぞれの用量でＳ−１／シスプラチン併用群及びＴＳＵ−６８単独群と比較し、いずれも統計上有意な「抗腫瘍効果の上乗せ効果がある」ことが認められた。

腫瘍増殖遅延効果
実施例１の増殖遅延効果に準じ、ＲＴＶ５の代わりに、各群の平均ＲＴＶが３．０になる日（ＲＴＶ３（ｄａｙ））を求めた。また、同様にＧＤＰ５の代わりに、ＧＤＰ３を薬剤投与群のＲＴＶ３とコントロール群のＲＴＶ３の差より求めた。
各群のＲＴＶ３値及びＧＤＰ３値の結果を表４に示す。

Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群は、それぞれの用量でＳ−１／シスプラチン併用群及びＴＳＵ−６８単独群と比較し、いずれも腫瘍の増殖が遅延した。

副作用
Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群（２００ｍｇ群、４００ｍｇ群）は、Ｓ−１／シスプラチン併用群と比較し、体重減少が同等もしくは少なかった。Ｓ−１／シスプラチン併用療法にＴＳＵ−６８を併用投与することによる副作用（体重減少）の増強が限りなく少ないことが確認された。
[実施例３]
ヒト胃癌株ＭＫＮ−４５のヌードマウス腹膜播種モデルにおけるＳ−１／シスプラチン併用療法に対するＴＳＵ−６８の併用による延命効果（１）
試験モデル
ヒト胃癌株ＭＫＮ−４５細胞を、ヌードマウス１匹に２×１０⁷個ずつ腹腔内に移植して同日に平均体重が均等になるように群分けした（ｄａｙ０）。Ｓ−１は、テガフール換算量で８．３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを，ＴＳＵ−６８は４００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量でいずれもｄａｙ１からｄａｙ３５まで１日１回経口投与し、シスプラチンは７．０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙをｄａｙ１に尾静脈投与した。また、Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用は、これらと同様の用量、スケジュール、経路で投与した。薬剤無投与群をコントロール群とした。各群の生存期間を観察比較し、Ｓ−１／シスプラチン併用療法に対するＴＳＵ−６８の併用による延命効果を検討した。
延命効果
コントロール群、ＴＳＵ−６８単独群、Ｓ−１／シスプラチン併用群及びＳ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群の生存曲線を図１に示す。
Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群は、それぞれの用量でＳ−１／シスプラチン併用群及びＴＳＵ−６８単独群と比較し、いずれも統計上有意な「生存期間の延長効果がある」ことが認められた。
[実施例４]
ヒト胃癌株ＭＫＮ−４５のヌードマウス腹膜播種モデルにおけるＳ−１／シスプラチン併用療法に対するＴＳＵ−６８の併用による延命効果（２）
試験モデル
ヒト胃癌株ＭＫＮ−４５細胞を、ヌードマウス１匹に２×１０⁷個ずつ腹腔内に移植して同日に平均体重が均等になるように群分けした（ｄａｙ０）。Ｓ−１は、テガフール換算量で８．３ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを１日１回経口投与し、シスプラチンは、７．０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙをｄａｙ１に尾静脈投与した。ＴＳＵ−６８はｄａｙ１から３５まで１日１回経口投与する群と、ｄａｙ３５以降もｄａｙ７０までＴＳＵ−６８のみ継続投与する群を設定した。薬剤無投与群をコントロール群とした。ＴＳＵ−６８の継続投与の有無による延命効果を比較した。
延命効果
コントロール群、Ｓ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群（ＴＳＵ−６８：３５日投与）及びＳ−１／シスプラチン／ＴＳＵ−６８併用群（ＴＳＵ−６８：７０日投与）の生存曲線を図２に示す。
ＴＳＵ−６８の投与をｄａｙ３５で打ち切った群は、ｄａｙ８９までに全てのマウスが死亡したのに対して、ｄａｙ７０まで継続した群では７匹中６匹がｄａｙ９１の時点で生存した。即ち、ＴＳＵ−６８の投与継続により明らかに生存期間の延長が得られることが確認された。

Claims (8)

1. テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤と、シスプラチンと、（Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸又はその塩とを組み合わせてなる抗腫瘍剤。
2. 配合剤中のテガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムのモル比（テガフール：ギメラシル：オテラシルカリウム）が、１：０．１〜５：０．１〜５である請求項１記載の抗腫瘍剤。
3. テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤を１日量としてテガフール換算量で５０〜１２０ｍｇ／ｍ²、シスプラチンを１日量として３０〜１５０ｍｇ／ｍ²、（Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸又はその塩を１日量として２００〜１５００ｍｇ、それぞれ組み合わせる請求項２記載の抗腫瘍剤。
4. テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤を１日量としてテガフール換算量で６４〜８０ｍｇ／ｍ²、シスプラチンを１日量として５０〜６０ｍｇ／ｍ²、（Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸又はその塩を１日量として４００〜８００ｍｇ、それぞれ組み合わせる請求項２記載の抗腫瘍剤。
5. テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤と、シスプラチンを含有する製剤と、（Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸又はその塩を含有する製剤の組み合わせからなるものである請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
6. テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤、シスプラチンを含有する製剤、及び（Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸又はその塩を含有する製剤からなるキット製剤である請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
7. （Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸又はその塩を有効成分とする、テガフール、ギメラシル及びオテラシルカリウムを含有する配合剤とシスプラチンとを組み合わせた併用療法の抗腫瘍効果増強剤。
8. （Ｚ）−５−［（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル］２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−プロパン酸又はその塩を、１投与単位当たり１００〜２００ｍｇ含有する請求項７記載の抗腫瘍効果増強剤。

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