JP2013139441A - マイクロスフェア - Google Patents

Abstract

【課題】本発明は、７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン（化合物（Ｉ））又はその塩の長時間作用を有する投与形態及びその製造方法の提供を課題とする。
【解決手段】化合物（Ｉ）又はその塩を有効成分として含有するマイクロスフェア。該マイクロスフェアを懸濁状態で含有する水性懸濁注射剤。有機溶媒中に化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーを溶解又は懸濁させ、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化させた後に、有機溶媒を除去する工程を含む該マイクロスフェアの製造方法。
【選択図】なし

Description

本発明は、７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩を含有するマイクロスフェア、その製造方法及び該マイクロスフェアを含有する水性懸濁注射剤に関する。

７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン（以下、化合物（Ｉ）という）又はその塩は、ドパミンＤ_２受容体パーシャルアゴニスト作用、セロトニン５−ＨＴ_２Ａ受容体アンタゴニスト作用及びアドレナリンα_１受容体アンタゴニスト作用を有し、さらにそれらの作用に加えてセロトニン取り込み阻害作用（あるいはセロトニン再取り込み阻害作用）を併有することが知られており（特許文献１）、中枢神経疾患（特に統合失調症）に対して広い治療スペクトラムを有している。

特開２００６−３１６０５２号公報

統合失調症等の中枢神経疾患において、長時間（少なくとも１週間、より好ましくは２、３又は４週間、さらに好ましくは６週間以上の期間）作用を有する薬物投与形態は、患者のコンプライアンスを増大させ、そしてそれによって治療における再発率を低下させることができる点で有用である。
しかし、化合物（Ｉ）又はその塩について、長時間作用を有する投与形態は知られていない。
本発明は、化合物（Ｉ）又はその塩の長時間作用を有する投与形態及びその製造方法を提供することを課題とする。

本発明者は上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、化合物（Ｉ）又はその塩を含有するマイクロスフェア、特に、有機溶媒中に化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーを溶解又は懸濁させ、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化させた後に、有機溶媒を除去する工程を含むことによって得られるマイクロスフェア、さらには該マイクロスフェアを懸濁状態で含有する水性懸濁注射剤が、化合物（Ｉ）又はその塩を長時間にわたって治療量で放出することができることを見出した。
本発明は上記知見に基づきさらに検討を重ねた結果完成されたものであり、下記に掲げるものである。

［１］化合物（Ｉ）又はその塩を有効成分として含有するマイクロスフェア。
［２］化合物（Ｉ）又はその塩をアモルファス状態で含有する上記［１］記載のマイクロスフェア。
［３］化合物（Ｉ）又はその塩を結晶状態で含有する上記［１］記載のマイクロスフェア。
［４］有機溶媒中に化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーを溶解又は懸濁させ、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化させた後に、有機溶媒を除去する工程を含むことによって得られる上記［１］〜［３］のいずれかに記載のマイクロスフェア。
［５］マイクロスフェアの平均粒子径が５〜１５０μｍである上記［１］〜［４］のいずれかに記載のマイクロスフェア。
［６］化合物（Ｉ）又はその塩の含有量が５〜５０重量％である上記［１］〜［５］のいずれかに記載のマイクロスフェア。
［７］生体分解性ポリマーがポリ乳酸及び乳酸−グリコール共重合体からなる群から選ばれる少なくとも１種である上記［４］〜［６］のいずれかに記載のマイクロスフェア。
［８］ポリ乳酸及び乳酸−グリコール共重合体の平均分子量が２０００〜２０００００である上記［７］記載のマイクロスフェア。
［９］上記［１］〜［８］のいずれかに記載のマイクロスフェアを懸濁状態で含有する水性懸濁注射剤。
［１０］注射されると少なくとも１ヶ月間化合物（Ｉ）又はその塩を放出する上記［９］記載の水性懸濁注射剤。
［１１］筋肉内投与用又は皮下投与用である上記［９］又は［１０］に記載の水性懸濁注射剤。
［１２］有機溶媒中に、化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーが溶解した溶液を得る工程；得られた溶液を、水と混合し、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化してエマルションを得る工程；及び得られたエマルションから有機溶媒を除去する工程を含む上記［１］〜［８］のいずれかに記載のマイクロスフェアの製造方法。
［１３］有機溶媒中に、化合物（Ｉ）又はその塩が懸濁し、生体分解性ポリマーが溶解した懸濁液を得る工程；得られた懸濁液を、水と混合し、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化してエマルションを得る工程；及び得られたエマルションから有機溶媒を除去する工程を含む上記［１］〜［８］のいずれかに記載のマイクロスフェアの製造方法。
［１４］前記エマルションを得る工程で混合される水のｐＨが８以上である上記［１２］又は［１３］に記載のマイクロスフェアの製造方法。

本発明のマイクロスフェアは、化合物（Ｉ）又はその塩を長時間にわたって治療量で放出することができ、持続性製剤として有用である。本発明の水性懸濁注射剤は、化合物（Ｉ）又はその塩を長時間にわたって治療量で放出することができ、持続性注射剤として有用である。

図１は実施例１のマイクロスフェアのＸ線回折パターンを示す。 図２は実施例１のマイクロスフェアのＳＥＭ（Scanning Electron Microscope）写真である。 図３は実施例２のマイクロスフェアのｐＨ４及び５での溶出試験の結果を示す。 図４は筋肉内投与（左図）及び皮下投与（右図）された実施例２のマイクロスフェアがシストを形成した様子を示す写真である。図中、シストが形成した場所を矢印で示す。 図５は投与後の実施例２のマイクロスフェアを示す写真である。左上図：筋肉内投与後９日目、右上図：筋肉内投与後２８日目、左下図：皮下投与後９日目、右下図：皮下投与後２８日目。 図６は実施例２のマイクロスフェアを雌性ラットに筋肉内もしくは皮下投与後の血中濃度の推移を示す。ＭＳ−ＩＭ：筋肉内、ＭＳ−ＳＣ：皮下。 図７は実施例４のマイクロスフェア調製途中で得られたエマルションの顕微鏡写真である。図７は本来カラー写真であり、粒子中に色のついた化合物（Ｉ）の結晶が観察される。 図８は実施例４のマイクロスフェアのＳＥＭ（Scanning Electron Microscope）写真である。 図９は実施例４のマイクロスフェアのＸ線回折パターンを示す。 図１０は比較例１にて得られた懸濁液における、マイクロスフェア内に封入されていない化合物（Ｉ）とPLGA粒子の顕微鏡写真である。

本発明のマイクロスフェアは、化合物（Ｉ）又はその塩を有効成分として含む。
化合物（Ｉ）は、下記の式（Ｉ）で表される化合物である。化合物（Ｉ）又はその塩は、特開２００６−３１６０５２号公報に記載の方法、又はそれに準じた方法により製造することができる。

ここで、マイクロスフェアとは一般に粒子径が数μｍ〜数十μｍ程度の球状の製剤を言い、表面に凹凸がある場合もある。本発明のマイクロスフェアは、通常、基材ポリマー等の担体を含む。

本発明のマイクロスフェアの平均粒子径は、化合物（Ｉ）又はその塩の所望の放出制御特性を得るためには、好ましくは５〜１５０μｍ、より好ましくは５〜５０μｍ、最も好ましくは１０〜３０μｍである。

本発明において、化合物（Ｉ）又はその塩は、結晶又はアモルファスの状態でマイクロスフェア中に分散されていることが好ましい。この場合の化合物（Ｉ）又はその塩の結晶又はアモルファスの粒子を、本明細書において、一次粒子という。
本発明において、マイクロスフェアの平均粒子径を前述した範囲に収めるためには、化合物（Ｉ）又はその塩の平均一次粒子径は、いずれの粒子径でもよいが、マイクロスフェア中に結晶状態で含有するには通常マイクロスフェアよりも小さい粒子径であればよく、好ましくは０．０５〜１００μｍ、より好ましくは０．１〜５０μｍ、さらに好ましくは０．２〜１０μｍである。最も好ましくは１〜５μｍである。
化合物（Ｉ）又はその塩の平均一次粒子径は、原料として上記範囲であればよく、製剤過程等で粒子径は変化してもよい。
上記範囲の平均一次粒子径を有する化合物（Ｉ）又はその塩は、公知の方法で製造することができ、例えば、化合物（Ｉ）又はその塩の原末をジェットミル等で粉砕することで製造することができる。

ここで、本明細書において、「平均粒子径」とは、レーザー光散乱（laser-light scattering; LLS）法によって測定される場合の体積平均直径（volume mean diameter）をいう。粒度分布は、レーザー光散乱法によって測定され、そして平均粒子径は、粒度分布から計算される。また、一次粒子径とは、凝集せず、一つ一つの粒子がばらばらになった状態での粒子の粒子径を意味する。尚、平均一次粒子径とは一次粒子の平均粒子径を意味する。

本発明のマイクロスフェアにおいて、化合物（Ｉ）又はその塩の所望の放出制御特性を得るためには、化合物（Ｉ）又はその塩の含有量は、好ましくは５〜５０％重量、より好ましくは１０〜４０重量％である。

本発明のマイクロスフェアは、基材ポリマーとして生体分解性ポリマーを含有することが好ましい。
本発明で用いられる生体分解性ポリマーとしては、生体内で徐々に分解されて所望の徐放性能が得られるものであればよく、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸−グリコール酸共重合体（poly（lactic-co-glycolic acid）：PLGA）、ポリクエン酸、ポリリンゴ酸、乳酸−アスパラギン酸共重合体、乳酸−ヒドロキシカプロン酸共重合体、グリコール酸−ヒドロキシカプロン酸共重合体、ポリプロピオラクトン、ポリブチロラクトン、ポリバレロラクトン、ポリカプロラクトン、ポリトリメチレンカーボネート、ポリｐ−ジオキサノン、ポリα−シアノアクリル酸エステル、ポリβ−ヒドロキシ酪酸、ポリトリメチレンオキサレート、ポリオルソエステル、ポリオルソカーボネート、ポリエチレンカーボネート、ポリγ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸、ポリＬ−アラニン及びポリアルギン酸、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリアミノ酸、ポリアルキレンアルキレート、ポリエチレングリコール、ポリウレタン等の単独重合体及びこれらの共重合体が挙げられる。これらの中でもポリ乳酸及び乳酸−グリコール酸共重合体が好ましい。これらの生体分解性ポリマーは、１種単独で用いてもよいし、２種以上を混合して用いてもよい。

ポリ乳酸又は乳酸−グリコール酸共重合体を使用する場合、その分子量は、広い範囲から適宜選択すればよいが、通常２０００〜２０００００程度、好ましくは４０００〜１０００００程度、より好ましくは５０００〜２００００程度である。
ここで、上記分子量は、ポリスチレンを基準物質とするゲル浸透クロマトグラフィー（GPC）で測定したポリスチレン重量換算の重量平均分子量をいう。

また、上記乳酸−グリコール酸共重合体における乳酸：グリコール酸(lactide:glycolide)の比率は、特に限定されず広い範囲から適宜選択すればよいが、通常９９：１〜５０：５０分子数比程度、好ましくは９９：１〜７５：２５分子数比程度である。

ポリ乳酸は、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−ＤＬ−乳酸のいずれでもよく、好ましくはポリ−ＤＬ−乳酸である。また、乳酸−グリコール酸共重合体は、Ｄ−乳酸−グリコール酸共重合体、Ｌ−乳酸−グリコール酸共重合体、ＤＬ−乳酸−グリコール酸共重合体のいずれでもよく、好ましくはＤＬ−乳酸−グリコール酸共重合体である。

ポリ乳酸又は乳酸−グリコール酸共重合体は公知の方法により製造することができ、また市販品（例えば、ＰＬＧＡ−７５２０（和光純薬工業製））を使用することもできる。

本発明のマイクロスフェアにおいて、生体分解性ポリマーの含有量は、通常５０〜９５重量％、好ましくは６０〜９０重量％である。

本発明のマイクロスフェアは、上記生体分解性ポリマーに加えて、非分解性の生体適合性ポリマーを含有してもよい。また、本発明のマイクロスフェアは、乳化剤等の任意の添加剤を含有してもよい。

本発明のマイクロスフェアは、上記した成分を用いて製剤分野で公知の方法により製造することができる。
本発明のマイクロスフェアは、徐放性能、充填時の流動性及び投与時のシリンジの透過性に優れたマイクロスフェアを得るためには、有機溶媒中に化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーを溶解又は懸濁させ、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化させた後に、有機溶媒を除去する工程を含んで製造することが好ましい。さらに製剤分野で公知の工程（例えば、濾過工程、整粒工程）を含んでいてもよい。

以下に、本発明のマイクロスフェアの製造方法について詳細に説明する。
本発明の方法は、有機溶媒中に、化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーを含有する溶液又は懸濁液を得る工程；得られた溶液又は懸濁液を、水と混合し、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化してエマルションを得る工程；及び得られたエマルションから有機溶媒を除去する工程を含む。

まず、有機溶媒中に、化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーを溶解又は懸濁させ、均一な溶液又は懸濁液を得る。化合物（Ｉ）又はその塩は、有機溶媒中に溶解していてもよく、懸濁していてもよい。生体分解性ポリマーは、有機溶媒中に溶解していることが好ましい。
本発明で用いられる有機溶媒は、生体分解性ポリマーを溶解し得るものであれば特に限定されないが、例えば、クロロホルム、ジクロロエタン、トリクロロエタン、ジクロロメタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素；エチルエーテル、イソプロピルエーテル等のエーテル類；酢酸エチル、酢酸ブチル等の脂肪酸エステル；ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素；エタノール、メタノール、イソプロパノール、ベンジルアルコール等のアルコール類；アセトニトリル等のニトリル；ジメチルホルムアミド等のアミド類、アセトンなどの水混和性又は水非混和性の有機溶媒が挙げられる。これらの有機溶媒は、単独で用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。
これらの中でも、水非混和性の有機溶媒、特にジクロロメタンが好ましい。

化合物（Ｉ）又はその塩と有機溶媒の割合は、該有機溶媒１００重量部に対して、化合物（Ｉ）又はその塩が、通常０．０１〜３０重量部程度、好ましくは０．１〜２０重量部程度、より好ましくは１〜１０重量部程度である。
生体分解性ポリマーと有機溶媒の割合は、該有機溶媒１００重量部に対して、生体分解性ポリマーが、通常０．１〜３０重量部程度、好ましくは０．５〜２０重量部程度、より好ましくは１〜１０重量部程度である。

次に、得られた有機溶媒溶液又は懸濁液（化合物（Ｉ）又はその塩、生体分解性ポリマー及び有機溶媒を含む）を乳化する。すなわち、得られた有機溶媒溶液を水（いわゆる外相）と混合し、水中に該有機溶媒溶液が均一に分散したO／W型エマルションを得るか、又は、得られた懸濁液を水（いわゆる外相）と混合し、水中に該懸濁液が均一に分散したS（固体)／O／W型エマルションを得る。
使用される水は特に限定されないが、医薬製剤分野で許容されるものが好ましく、例えば精製水、注射用水等が挙げられる。

有機溶媒溶液又は懸濁液と水の割合は、所望の粒子サイズのO／W型又はS／O／W型エマルションが得られる割合であれば、特に限定されないが、水１容量部に対して、有機溶媒溶液又は懸濁液が、通常０．００１〜０．２容量部程度、好ましくは０．００５〜０．１容量部程度、より好ましくは０．０１〜０．０５容量部程度である。

マイクロスフェアを得るためには水（いわゆる外相）のｐＨはアルカリ性とすることが好ましく、そのｐＨは８以上が好ましく、９以上がより好ましく、１０以上がさらに好ましく、１１以上が最も好ましい。
ｐＨ調整の方法は特に限定されないが、例えば、塩基（例えば、水酸化ナトリウム）の添加が挙げられる。

本発明において、水混和性又は水非混和性のいずれの有機溶媒を使用する場合も、乳化剤を使用してもよい。水混和性の有機溶媒を使用した場合は、乳化剤を使用することが好ましい。本発明で用いられる乳化剤は、O／W型又はS／O／W型エマルション、好ましくは安定なO／W型又はS／O／W型エマルションを形成できるものであればいずれでもよく、例えば、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム等のアニオン性界面活性剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体等の非イオン性界面活性剤；ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセルロース、レシチン、ゼラチン、ヒアルロン酸等が挙げられる。これらの乳化剤は、単独で用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。

乳化剤は、乳化前に水相に添加すればよい。
乳化剤の使用量は、特に限定されず、幅広い範囲から選択されるが、乳化剤水溶液中の濃度が、例えば、０．０００１〜２０重量％程度、好ましくは０.００１〜１０重量％程度、より好ましくは０．００１〜５重量％程度である。

O／W型又はS／O／W型エマルションの調製方法は、特に限定されず、上記有機溶媒溶液又は懸濁液（化合物（Ｉ）又はその塩、生体分解性ポリマー及び有機溶媒を含む）が水中に適当なサイズの液滴ないしミセルとして分散する方法を用いればよい。該調製方法としては、例えば、ホモジナイザー等で上記溶液又は懸濁液と水の混合物を適当な回転速度で攪拌し、水中で上記溶液又は懸濁液を微細化してO／W型又はS／O／W型エマルションとする方法、セラミックフィルター等の微細な貫通孔を有するフィルターに上記溶液又は懸濁液と水の混合物を一定速度で通過させることにより上記溶液又は懸濁液を微細化してO／W型又はS／O／W型エマルションとする方法、セラミックフィルター等の微細な貫通孔を有するフィルターに上記溶液又は懸濁液を一定速度で通過させて上記溶液又は懸濁液を微細化した後、水と混合する方法等を用いればよい。
必要であれば、エマルション形成は、多段階で行ってもよい。
なお、エマルション形成時に撹拌の力を調整することで、所望の粒子径を得ることができる。すなわち、エマルション形成時に撹拌の力を強くすれば粒子径を小さくすることができる。

得られたO／W型又はS／O／W型エマルションから有機溶媒を除去することにより、マイクロスフェアの水性懸濁液が得られる。
有機溶媒の除去は、通常用いられる方法が採用される。該方法としては、プロペラ型撹拌機、あるいはマグネチックスターラーなどで撹拌しながら徐々に減圧して行うか、ロータリーエバポレーターなどを用いて、真空度を調節しながら脱離する。
このようにして得られたマイクロスフェア懸濁液からマイクロスフェアを遠心分離あるいは濾過して分取した後、マイクロスフェアの表面に付着している遊離の化合物（Ｉ）、乳化剤などを、蒸留水で数回繰り返し洗浄し、必要であれば適切な溶媒で洗浄する。必要に応じ、分取後加温し、減圧下でマイクロスフェア中の水分の脱離およびマイクロスフェア中の溶媒の脱離をより完全に行う。また水中に糖や糖アルコール、その他添加剤の存在下または非存在下で、洗浄後のマイクロスフェアを再懸濁後、凍結乾燥しマイクロスフェア粉末を得ることもできる。凍結乾燥の条件はマイクロスフェアが乾燥しうる範囲であれば特に制限はない。
また、乾燥後のマイクロスフェアを必要に応じて篩で篩過し、目的とする平均粒子径を有するマイクロスフェアを得てもよい。

本発明の方法には、具体的には下記方法（１）及び方法（２）が含まれる。
方法（１）：有機溶媒中に、化合物（Ｉ）又はその塩及び生体分解性ポリマーが溶解した溶液を得る工程；得られた溶液を、水と混合し、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化してエマルションを得る工程；及び得られたエマルションから有機溶媒を除去する工程を含む方法。
方法（２）：有機溶媒中に、化合物（Ｉ）又はその塩が懸濁し、生体分解性ポリマーが溶解した懸濁液を得る工程；得られた懸濁液を、水と混合し、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化してエマルションを得る工程；及び得られたエマルションから有機溶媒を除去する工程を含む方法。
方法１により、化合物（Ｉ）又はその塩をアモルファス状態で含有するマイクロスフェアを製造することができる。
方法２により、化合物（Ｉ）又はその塩を結晶状態で含有するマイクロスフェアを製造することができる。

上記マイクロスフェアの各製造工程において、本発明の効果に影響を与えない限り、医薬製剤分野で公知の添加剤（例えば、マンニトールなどの糖アルコールや塩化ナトリウムなどの無機物など）を添加してもよい。

本発明のマイクロスフェア、特に上記製造方法により得られるマイクロスフェアは優れた徐放性能を有する。本発明のマイクロスフェアは、少なくとも１週間、より好ましくは２、３又は４週間、さらに好ましくは６週間以上の期間、治療量で化合物（Ｉ）又はその塩を放出することができる。本発明のマイクロスフェアは、注射用水に懸濁させた水性懸濁注射剤とした場合に、特に上記効果を発揮することができる。

上記製造方法により得られる本発明のマイクロスフェアは、通常、球状の形状を有する。本発明のマイクロスフェアは、球状の形状を有することで、製造における充填時の流動性や投与時のシリンジ通過性（通針性）が良好であり、また筋肉注射剤として投与した場合に筋肉内の刺激が少ない。

本発明はまた、本発明のマイクロスフェアを懸濁状態で含有することを特徴とする水性懸濁注射剤に関する。
本発明の水性懸濁注射剤は、通常、化合物（Ｉ）又はその塩を含有するマイクロスフェア、そのためのビヒクル、および注射用水を含む。

本発明の水性懸濁注射剤のマイクロスフェアの含有量は、注射剤中でマイクロスフェアが分散されれば特に限定されないが、通常５〜５０重量％程度、好ましくは１０〜４０重量％程度、より好ましくは１０〜３０重量％程度である。

本発明に用いられるビヒクルとしては、例えば、懸濁化剤、バルキング剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤等が挙げられる。
懸濁化剤の使用量は、注射用水を含む水性懸濁注射剤の総重量に基づいて、通常約０．００１〜約１０重量％、好ましくは約０．０１〜約５重量％、より好ましくは約０．１〜約３重量％の範囲内の量である。好適な懸濁化剤の例としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣＮａ）、ヒドロキシプロピルセルロース（例えば、ＨＰＣ、ＨＰＣ−ＳＬ、及びＨＰＣ−Ｌ）、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば、市販のＴｗｅｅｎｓ（登録商標）、例えば、Ｔｗｅｅｎ２０（登録商標）及びＴｗｅｅｎ８０（登録商標）（ＩＣＩ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ））、ポリエチレングリコール類（例えば、Ｃａｒｂｏｗａｘｓ ３３５０（登録商標）及び１４５０（登録商標）、並びにＣａｒｂｏｐｏｌ ９３４（登録商標）（Ｕｎｉｏｎ Ｃａｒｂｉｄｅ））及びポリビニルピロリドンが挙げられ、これらは１種又は２種以上を使用してもよい。これらの懸濁化剤は特に限定されないが、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール類及びポリビニルピロリドンが好ましい。好適な他の懸濁化剤としては、種々のポリマー、低分子量オリゴマー、天然プロダクト（natural products）、及び界面活性剤（非イオン性及びイオン性界面活性剤を含む）が挙げられる。例えば、塩化セチルピリジニウム、ゼラチン、カゼイン、レシチン（ホスファチド）、デキストラン、グリセロール、アカシアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセロール、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば、セトマクロゴール１０００のようなマクロゴールエーテル）、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、ポリオキシエチレンステアレート、コロイダル二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非結晶性セルロース、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、エチレンオキサイド及びホルムアルデヒドとの４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェノールポリマー（チロキサポール、スペリオン、及びトリトンとしても公知）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ Ｆ６８（登録商標）及びＦ１０８（登録商標）、これらは、エチレンオキサイド及びプロピレンオキサイドのブロックコポリマーである）、ポロキサミン（例えば、Ｔｅｔｒｏｎｉｃ ９０８（登録商標）、Ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅ ９０８（登録商標）としても公知、これは、エチレンジアミンへのプロピレンオキサイド及びエチレンオキサイドの連続付加から誘導される四官能性ブロックコポリマーである（ＢＡＳＦ Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．））、荷電リン脂質（charged phospholipid）（例えば、ジミリストイルホスファチジルグリセロール）、ジオクチルスルホサクシネート（ＤＯＳＳ）、Ｔｅｔｒｏｎｉｃ １５０８（登録商標）（Ｔ−１５０８）（ＢＡＳＦ Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル（例えば、Ａｅｒｏｓｏｌ ＯＴ（登録商標）、これはスルホコハク酸ナトリウムのジオクチルエステルである（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ））、Ｄｕｐｏｎｏｌ Ｐ（登録商標）（これはラウリル硫酸ナトリウムである（ＤｕＰｏｎｔ））、Ｔｒｉｔｏｎｓ Ｘ−２００（登録商標）（これはアルキルアリールポリエーテルスルホネートである（Ｒｏｈｍ ａｎｄ Ｈａａｓ））、Ｃｒｏｄｅｓｔａｓ Ｆ−１１０（登録商標）（これはスクロースステアレート及びスクロースジステアレートの混合物である（Ｃｒｏｄａ Ｉｎｃ．））、ｐ−イソノニルフェノキシポリ−（グリシドール）（Ｏｌｉｎ−１０Ｇ（登録商標）又はＳｕｒｆａｃｔａｎｔ １０−Ｇ（登録商標）としても公知（Ｏｌｉｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，Ｃｏｎｎ．））、Ｃｒｏｄｅｓｔａｓ ＳＬ−４０（登録商標）（Ｃｒｏｄａ，Ｉｎｃ．）、ＳＡ９ＯＨＣＯ（これはＣ_１８Ｈ_３７ＣＨ_２（ＣＯＮ（ＣＨ_３））−ＣＨ_２（ＣＨＯＨ）_４（ＣＨ_２ＯＨ）_２である（Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ Ｃｏ．））、デカノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−デシル β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−デシル β−Ｄ−マルトピラノシド、ｎ−ドデシル β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−ドデシル β−Ｄ−マルトシド、ヘプタノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ヘプチル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−ヘプチル β−Ｄ−チオグルコシド、ｎ−ヘキシル β−Ｄ−グルコピラノシド、ノナノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ノニル β−Ｄ−グルコピラノシド、オクタノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド、オクチル β−Ｄ−チオグルコピラノシド等が挙げられる。

これらの懸濁化剤の大部分は、公知の薬学的賦形剤であり、そしてthe American Pharmaceutical Association及びThe Pharmaceutical Society of Great Britainによって共同発行されたthe Handbook of Pharmaceutical Excipientsに詳細に記載されている（The Pharmaceutical Press, 1986）。懸濁化剤は、市販されておりそして／又は当該分野において公知の技術によって製造することができる。

ここで、マイクロスフェアの一次粒子の平均粒子径が約１μｍ以上である場合は、懸濁化剤としては、カルボキシメチルセルロース又はそのナトリウム塩が特に好ましい。

バルキング剤の使用量は、注射用水を含む水性懸濁注射剤の総重量に基づいて、通常約１〜約１０重量％、好ましくは約３〜約８重量％、より好ましくは約４〜約５重量％の範囲内の量である。本発明における使用に好適なバルキング剤の例としては、マンニトール、スクロース、マルトース、キシリトール、グルコース、スターチ、ソルビトール等が挙げられ、これらは１種又は２種以上を使用してもよい。これらのバルキング剤は特に限定されず、マンニトールが好ましい。

緩衝剤は、化合物（Ｉ）又はその塩を含むマイクロスフェアの水性懸濁液のｐＨを、約６〜約８、好ましくは約７に調整する量で使用される。このようなｐＨを達成するために、通常、緩衝剤は、タイプに依存して、注射用水を含む水性懸濁注射剤の総重量に基づいて、通常約０．０２〜約２重量％、好ましくは約０．０３〜約１重量％の範囲内、より好ましくは約０．０８〜約０．２重量％の量で使用される。本発明における使用のために好適な緩衝剤の例としては、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、又はＴＲＩＳ緩衝剤が挙げられ、これらは１種又は２種以上を使用してもよい。これらの緩衝剤は特に限定されないが、リン酸ナトリウムが好ましい。

ｐＨ調整剤は、化合物（Ｉ）又はその塩を含むマイクロスフェアの水性懸濁液のｐＨを、通常約６〜約８の範囲、好ましくは約７に調整する量で使用され、そして、化合物（Ｉ）又はその塩を含むマイクロスフェアの水性懸濁液のｐＨが、所望の約７の中性ｐＨに達するために上昇される必要があるのか、あるいは低下される必要があるのかに依存して、酸又は塩基が適宜選択される。従って、ｐＨが低下される必要がある場合、酸性ｐＨ調整剤、例えば、塩酸又は酢酸、好ましくは塩酸が使用される。ｐＨが上昇される必要がある場合、塩基性ｐＨ調整剤、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カルシウム、酸化マグネシウム又は水酸化マグネシウム、好ましくは水酸化ナトリウムが使用される。

上記化合物（Ｉ）又はその塩を含有するマイクロスフェア、及びビヒクルを注射用水に懸濁させることによって、均質な懸濁液が得られる。

本発明の水性懸濁注射剤は、ヒト患者における、統合失調症、鬱などのＣＮＳ（Central Nervous System）関連障害を治療するために使用される。本発明の水性懸濁注射剤は基本的に１回の投与により、一ヶ月以上の再投与を必要としない単回注射又は複数注射である。本発明の水性懸濁注射剤は１回あたり０．１〜５ｍｌ程度、好ましくは０．５〜３ｍｌ程度を投与すればよい。

本発明の水性懸濁注射剤は、該製剤の単位体積当たりの高い薬物ローディング（drug loadings）を可能にし、従って、少ない注射体積で比較的高い用量の化合物（Ｉ）又はその塩の送達を可能にする。

本発明の水性懸濁注射剤は、例えば筋肉内注射又は皮下注射により投与された場合、実質的に一定の化合物（Ｉ）又はその塩の薬物血漿濃度を維持することができる。その際、コンスタントな化合物（Ｉ）又はその塩の薬物血漿濃度を少なくとも１週間、より好ましくは２、３又は４週間、さらに好ましくは６週間以上の期間、維持させることができる。
経口投与される化合物（Ｉ）又はその塩を含む製剤のための一日開始用量（daily starting dose）は、数ｍｇである。１週間以上の経口投与薬物量と等価の薬物用量を投与するためには、単回用量として、非常に大量の薬物量の投与を必要とする。本発明の化合物（Ｉ）又はその塩を含むマイクロスフェアの水性懸濁注射剤によれば、患者にコンプライアンス問題を生じさせることなく、大量の薬物を送達するために、投与することが可能となる。

本発明の水性懸濁注射剤は、用時懸濁注射剤として投与させることができる。

以下に本発明の実施例及び試験例を示し本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例及び試験例に限定されない。
実施例において、化合物（Ｉ）は７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オンを示す。
実施例において、マイクロスフェアの平均粒子径及び粒度分布は、レーザー光散乱法（島津製作所、SALD-3000J）にて、測定用媒体として水を用い、屈折率2.00-0.20iにて測定した。

［実施例１］
ジクロロメタン5ｍｌに化合物（Ｉ）約100ｍｇ及びPLGA（PLGA-7520、和光純薬工業製）約400ｍｇを溶解させ、得られた溶液を100ｍｌあたり2ｍｌの1N水酸化ナトリウム溶液を添加した1％PVA（SPECTRUM (登録商標) Chemicals & laboratory products（以下SPECTRUMと記載）製）水溶液（20ｍｌ、ｐH約12）と混合し、ホモジナイザー（ポリトロンホモジナイザー、POLYTRON (登録商標) PT3000、KINEMATICA AG製）にてエマルションを形成した。得られたエマルションに、100ｍｌあたり2ｍｌの1N水酸化ナトリウム溶液を添加した1％PVA水溶液を添加して計100ｍｌとし、撹拌羽にて一晩撹拌してジクロロメタンを留去しマイクロスフェア懸濁液を得た。
ここで得られたマイクロスフェア懸濁液中のマイクロスフェアの粒子径はシャープな分布を示し26G針での通針が可能であった(表１)。得られたマイクロスフェア懸濁液を、遠心洗浄濾過、凍結乾燥して、実施例1のマイクロスフェアを得た。
乾燥後のマイクロスフェアの結晶性をX線回折で評価したところ、非晶質であり、マイクロスフェア内で分散体を形成していると考えられた（図１）。
実施例１の乾燥後のマイクロスフェア粒子を光学顕微鏡及びSEMにて観察したところ球状であった（図２）。

［実施例２］
ジクロロメタン10ｍｌに化合物（Ｉ）約200ｍｇ及びPLGA（PLGA-7520、和光純薬工業製）約600ｍｇを溶解させ、得られた溶液を100ｍｌあたり2ｍｌの1N水酸化ナトリウム溶液を添加した1％PVA（SPECTRUM製）水溶液（30ｍｌ、ｐH約12）と混合し、ホモジナイザー（IKA ULTRA-TURRAX T8、IKA Works, Inc.製）で微細なエマルションを形成した。得られたエマルションに、100ｍｌあたり2ｍｌの1N水酸化ナトリウム溶液を添加した1％PVA水溶液（ｐH約12）を添加して計100ｍｌとし、撹拌羽にて一晩撹拌してジクロロメタンを留去し、マイクロスフェア懸濁液を得た。
その後、遠心洗浄濾過、凍結乾燥して、実施例２のマイクロスフェアを得た。
得られたマイクロスフェアは平均粒子径約25μmであり、化合物（Ｉ）の含有量は約29%であった（表２）。

［試験例１］
実施例２で得られたマイクロスフェアについて、第十五改正日本薬局方に記載のパドル法にて、下記のとおり溶出試験を行った。
化合物（Ｉ）が25 mg相当となるようにマイクロスフェアを秤取し、0.05mol/L酢酸緩衝液（pH4.0又はpH5.0）900mL中に加え、37℃、50 rpmの条件で、パドル法にて溶出試験を行った（吸光度測定波長：289 nm及び380 nm）。
結果を図３に示す。pH4では初期に50%程度の溶出が見られたが、その後は溶出が抑えられていることが確認された。試験液をpH5にしたところ、初期バーストは見られず、溶出が抑えられていた。生体内ではより中性に近く、pＨ5での溶出試験以上に溶出が抑えられることが予想された。

［実施例３］
実施例２で得られたマイクロスフェアを化合物（Ｉ）が5％となるようにマンニトール/CMCNa水溶液に再分散し、水性懸濁注射剤を得た（pH: 7.00、浸透圧比: 1.10）。成分及び組成を表３に示す。

［試験例２］
実施例３で得られた水性懸濁注射剤を、非絶食雌性ラットに0.5mL/kgで24G針を使用して筋肉内投与（左大腿部に約4mmの深さで投与）又は頚部後皮下投与した。
投与後に投与部位を取り出してみると、筋肉内投与及び皮下投与どちらにおいても投与されたところでシストを形成していた（図４）。投与されたマイクロスフェアを投与後9日目及び28日目に観察したところ、どちらの投与においても経時的に崩れている様子が観察された（図５）。このことからPLGAが分解されることにより溶出していると考えられた。
得られた血中濃度は筋肉内投与と皮下投与で違いは見られなかった（図６）。これはマイクロスフェアからの溶出が律速であるためと推察された。血中濃度は28日目でも持続しており、このマイクロスフェアは28日以上の徐放を示すことがわかった。このマイクロスフェアは、筋肉内投与でも皮下投与でも同じ血中プロファイルを示す特徴を有し、患者が投与部位を選択できる利点を有する。

［実施例４］
化合物（Ｉ）原末をジェットミル（A-Oジェットミル、セイシン企業）にてInlet圧0.5MPa、Grinding圧0.35MPaにて粉砕した。粉砕後の粒子を１％HPC-L溶液に分散し超音波を照射しながら粒子径をレーザー光散乱法（SALD-3000J）にて測定した。得られた粉砕後の化合物（Ｉ）の平均粒子径は2.3μmであった。
ジクロロメタン5ｍｌに粉砕した化合物（Ｉ）約500ｍｇ及びPLGA（PLGA-7520、和光純薬工業製）約500ｍｇを懸濁及び溶解させ、得られた懸濁液を撹拌羽で600rpmで撹拌中の100ｍｌあたり2ｍｌの1N水酸化ナトリウム溶液を添加した1%PVA(SPECTRUM製)水溶液(100ｍｌ、ｐH約12）中に滴下した。滴下後、微細なエマルションを形成した。得られたエマルションを偏光顕微鏡にて観察した写真を図７に示した。PLGAはポリマーであり、偏光を示さないため、粒子中の色のついた結晶は化合物（Ｉ）である。エマルション中に化合物（Ｉ）の結晶が取り込まれていることが観察された。このエマルションのジクロロメタンが揮発するとエマルション中に溶解しているPLGAとの複合粒子が得られる。
エマルションを得た後、撹拌を300rpmに落とし、一晩撹拌してジクロロメタンを留去し、マイクロスフェア懸濁液を得た。
その後、10μmのフィルターで濾取し、精製水で数回洗浄後、風乾してマイクロスフェア粉末を得た。この乾燥後のマイクロスフェアを電子顕微鏡で観察すると化合物（Ｉ）が単独では存在せず、マイクロスフェアに取り込まれPLGAと複合粒子を形成していた（図８）。顕微鏡で観察する限り、得られた粒子のほとんど（約95％以上）が50〜100μmの直径を有する粒子であった。
乾燥後のマイクロスフェアをX線回折にて測定すると化合物（Ｉ）の結晶ピークが見られた（図９）。このことからマイクロスフェア中の化合物（Ｉ）は結晶で存在していることが確認された。

［比較例１］
ジクロロメタン5ｍｌに化合物（Ｉ）約100ｍｇ及びPLGA（PLGA-7520、和光純薬工業製）約400ｍｇを溶解させ、得られた溶液を1％PVA（SPECTRUM）水溶液（20ｍｌ、ｐH約7）と混合し、ホモジナイザー（ポリトロンホモジナイザー、POLYTRON (登録商標) PT3000、KINEMATICA AG製）にてエマルションを形成した。得られたエマルションに、1％PVA水溶液を添加して計100ｍｌとし、撹拌羽にて一晩撹拌してジクロロメタンを留去した。得られた懸濁液は、化合物（Ｉ）の結晶がマイクロスフェアの外に見られた（図１０）。写真上で偏光を示す粒子が化合物（Ｉ）であり、小さな丸い粒子がPLGAである。化合物（Ｉ）がマイクロスフェアに封入されていないことが分かる。

［比較例２］
化合物（Ｉ）原末をジェットミル（A-Oジェットミル、セイシン企業）にてInlet圧0.5MPa、Grinding圧0.35MPaにて粉砕した。粉砕後の粒子を１％HPC-L溶液に分散し超音波を照射しながら粒子径をレーザー光散乱法（SALD-3000J）にて測定した。得られた粉砕後の化合物（Ｉ）の平均粒子径は2.3μmであった。
ジクロロメタン5ｍｌに粉砕した化合物（Ｉ）約500ｍｇ及びPLGA（PLGA-7520、和光純薬工業製）約500ｍｇを懸濁及び溶解させ、得られた懸濁液を撹拌羽で600rpmで撹拌中の1%PVA(SPECTRUM製)水溶液(100ｍｌ、ｐH約7）中に滴下した。滴下後、しばらくするとガム状の物体が形成され、マイクロスフェアを得ることができなかった。実施例４と比較すると、外相であるPVA溶液をアルカリ性にする必要があることが分かる。

本発明は、化合物（Ｉ）又はその塩の長時間作用を有する投与形態及びその製造方法を提供する。

Claims (14)

1. ７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩を有効成分として含有するマイクロスフェア。
2. ７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩をアモルファス状態で含有する請求項１記載のマイクロスフェア。
3. ７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩を結晶状態で含有する請求項１記載のマイクロスフェア。
4. 有機溶媒中に７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩及び生体分解性ポリマーを溶解又は懸濁させ、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化させた後に、有機溶媒を除去する工程を含むことによって得られる請求項１〜３のいずれかに記載のマイクロスフェア。
5. マイクロスフェアの平均粒子径が５〜１５０μｍである請求項１〜４のいずれかに記載のマイクロスフェア。
6. ７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩の含有量が５〜５０重量％である請求項１〜５のいずれかに記載のマイクロスフェア。
7. 生体分解性ポリマーがポリ乳酸及び乳酸−グリコール共重合体からなる群から選ばれる少なくとも１種である請求項４〜６のいずれかに記載のマイクロスフェア。
8. ポリ乳酸及び乳酸−グリコール共重合体の平均分子量が２０００〜２０００００である請求項７記載のマイクロスフェア。
9. 請求項１〜８のいずれかに記載のマイクロスフェアを懸濁状態で含有する水性懸濁注射剤。
10. 注射されると少なくとも１ヶ月間７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩を放出する請求項９記載の水性懸濁注射剤。
11. 筋肉内投与用又は皮下投与用である請求項９又は１０に記載の水性懸濁注射剤。
12. 有機溶媒中に、７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩及び生体分解性ポリマーが溶解した溶液を得る工程；得られた溶液を、水と混合し、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化してエマルションを得る工程；及び得られたエマルションから有機溶媒を除去する工程を含む請求項１記載のマイクロスフェアの製造方法。
13. 有機溶媒中に、７−［４−（４−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−イル−ピペラジン−１−イル）ブトキシ］−１Ｈ−キノリン−２−オン又はその塩が懸濁し、生体分解性ポリマーが溶解した懸濁液を得る工程；得られた懸濁液を、水と混合し、乳化剤の存在下、又は不在下で乳化してエマルションを得る工程；及び得られたエマルションから有機溶媒を除去する工程を含む請求項１記載のマイクロスフェアの製造方法。
14. 前記エマルションを得る工程で混合される水のｐＨが８以上である請求項１２又は１３に記載のマイクロスフェアの製造方法。