JP2012180514A - 液体洗剤組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】プロテアーゼ(A)、下記プロテアーゼ活性阻害剤(B)、界面活性剤(C)及び溶剤(D)を含有する液体洗剤組成物。
プロテアーゼ活性阻害剤(B):配列番号1〜11のいずれか1つのアミノ酸配列である、又はこのアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び付加からなる群より選ばれる少なくとも1種により変質したアミノ酸配列であるプロテアーゼ活性阻害剤。
【選択図】なし
Description
周知の通り、プロテアーゼ等の酵素は、分解力の高さから今や洗剤に欠かすことのできないものとなっている。一方、洗剤は使い勝手の点で従来の固形洗剤から液体洗剤へ形態が変わりつつある。しかしながら、プロテアーゼは、液体洗剤中でプロテアーゼ自身や他の酵素を加水分解してしまう。このため、プロテアーゼ自身や他の酵素の活性が経時的に著しく低下し、液体洗剤の洗浄性が著しく低下するという問題が発生している。
そこで、プロテアーゼや他の酵素の加水分解を抑えるために、プロテアーゼ活性を阻害するプロテアーゼ活性阻害剤の研究が行われている。例えば、ボロニックアシッドがセリンプロテアーゼやズブチリシンの活性を阻害することが知られている(非特許文献1)。また、4−置換フェニルボロン酸がプロテアーゼの活性を阻害することが知られている(特許文献1)。
しかしながら、これらのプロテアーゼ活性阻害剤を含む液体洗剤では、一定の効果はあるものの、貯蔵時のプロテアーゼ活性を十分阻害できるとは言えず、洗浄性の低下が抑制できない問題がある。
すなわち本発明の液体洗剤組成物は、プロテアーゼ(A)、下記プロテアーゼ活性阻害剤(B)、界面活性剤(C)及び溶剤(D)を含有する液体洗剤組成物である。
プロテアーゼ活性阻害剤(B):配列番号1〜11のいずれか1つのアミノ酸配列である、又はこのアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び付加からなる群より選ばれる少なくとも1種により変質したアミノ酸配列であるプロテアーゼ活性阻害剤。
市販のセリンプロテアーゼ(A−1)としては、ノボザイムス社製のアルカラーゼ、サビナーゼ、エバラーゼ、PTN及びジェネンコア社のピュラフェクト、ピュラフェクト OXP等が挙げられる。
プロテアーゼ(A)の濃度が0.00000001重量%以上であることで、洗浄性が良好となる。また、0.1重量%以下であることで、添加量に見合った洗浄性を得られる。
本発明において、(B)はプロテアーゼ活性阻害の機能を保持するものであり、配列番号1〜11のいずれか1つのアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び付加からなる群より選ばれる少なくとも1種により変質したアミノ酸配列であるプロテアーゼ活性阻害剤とは、プロテアーゼ活性の点において配列番号1〜11のアミノ酸配列と等価であるアミノ酸配列を意味する。
欠失、置換及び付加からなる群より選ばれる少なくとも1種により変質されたアミノ酸の個数は、プロテアーゼ活性阻害剤の機能を保持する観点から、1〜10個が好ましく、さらに好ましくは1〜5個である。
プロテアーゼ活性阻害剤(B)の機能とは、プロテアーゼ(A)と可逆的に結合し、プロテアーゼ(A)の活性を阻害することである。
動物細胞としては、特に限定されないが、昆虫細胞、サル細胞COS−7、Vero、マウスL細胞、ラットGH3、ヒトFL細胞及びCHO細胞等が挙げられる。
昆虫細胞としては、特に限定されないが、具体的には、Sf9細胞及びSf21細胞等が挙げられる。
微生物としては、特に限定されないが、細菌及び酵母等が挙げられる。
細菌としては、真正細菌及び古細菌が含まれる。
真正細菌には、グラム陰性菌及びグラム陽性菌が含まれる。グラム陰性細菌としては、エシェリチア属菌(Escherichia)、サーマス属菌(Thermus)、リゾビウム属菌(Rhizobium)、シュードモナス属菌(Pseudomonas)、シュワネラ属菌(Shewanella)、ビブリオ属菌(Vibrio)、サルモネラ属菌(Salmonella)、アセトバクター属(Acetobacter属)、シネコシスティス属(Synechocystis属)等が挙げられる。グラム陽性菌としては、バチルス属(Bacillus属)、ストレプトマイセス属(Streptmyces属)、コリネバクテリウム属(Corynebacterium属)、ブレビバチルス属(Brevibacillus属)、ビフィドバクテリウム属 (Bifidobacterium属)、ラクトコッカス属 (Lactococcus属)、エンテロコッカス属 (Enterococcus属)、ペディオコッカス属(Pediococcus属)、リューコノストック属 (Leuconostoc属)、ストレプトマイセス属(Streptomyces属)等が挙げられる。
植物細胞としては、特に限定されないが、BY−2細胞等が挙げられる。
(B)と(A)との含有量の比が0.01以上であることで、プロテアーゼ活性を十分抑制でき、長期間保存後も洗浄性を保つことができる。また、500以下であることで、洗浄時にプロテアーゼ活性が効率よくもどり、洗浄性が良好である。
プロテアーゼ(A)とプロテアーゼ活性阻害剤(B)のモル比が0.01以上であることで、プロテアーゼ活性を十分抑制でき、長期間保存後も洗浄性を保つことができる。200以下であることで、洗浄時にプロテアーゼ活性が効率よくもどり、洗浄性が良好である。
ノニオン性界面活性剤としては、洗浄性の観点から、脂肪族アルコール(炭素数8〜24)エチレンオキサイド付加物(重合度=1〜100)が好ましく、さらに好ましくは脂肪族アルコール(炭素数12〜18)エチレンオキサイド付加物(重合度4〜20)、次にさらに好ましくは脂肪族アルコール(炭素数12〜15)エチレンオキサイド付加物(重合度=8〜12)、特に好ましくはオレイルアルコールエチレンオキサイド11モル付加物である。
アニオン性界面活性剤としては、洗浄性の観点から、炭素数8〜24のアルキルフェニルスルホン酸塩、脂肪酸塩、炭素数8〜24のアルキル硫酸エステル塩及び炭素数8〜24のアルキル(ポリ)オキシエチレン硫酸エステル塩が好ましく、さらに好ましくは、炭素数12〜16のアルキルフェニルスルホン酸塩及び炭素数8〜16の脂肪酸塩、次にさらに好ましくは、ドデシルベンゼンスルホン酸モノエタノールアミン塩及びラウリン酸ナトリウムであり、特に好ましくはドデシルベンゼンスルホン酸モノエタノールアミン塩である。
市販のセルラーゼとしては、フミコーラ・インソレンス(Humicola insolens)の株により生産されたノボザイムス社のCelluzymeTM、ノボザイムス社製EndolaseTM、CarezymeTM及び花王社のKAC−500(B)TM等が挙げられる。
市販のアミラーゼとしては、ノボザイムス社の DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM及びBANTM並びにGist−Brocades社のRapidaseTM及びMaxamyl PTM等が挙げられる。
ペルオキシダーゼとしては、植物、細菌又は真菌起源のものが含まれる。ペルオキシダーゼには、化学的に、又は遺伝子的に修飾された変異体も含まれる。ペルオキシダーゼとしては、洗浄性の観点から、コプリナス(Coprinus)(例えばC.シネレウス(Coprinus cinereus)又はC.マクロリザス(C.macrorhizus)の菌株由来のもの)、バシラス(Bacillus)(B.ピュミラス(B.pumilus)の菌株由来のもの)及び国際公開第91/05858号に記載されたペルオキシダーゼが好ましく、特に好ましくは国際公開第91/05858号に記載されたペルオキシダーゼである。
ラッカーゼとしては、細菌又は真菌起源のものが含まれる。ラッカーゼとしては、トラメテス(Trametes)(例えばT.ビロサ(T.villosa)又はT.ベルシコロール(T.versicolor)の菌株由来のもの]、コプリナス(Coprinus)[例えばC.シネレウス(C.cinereus)の菌株由来のもの]及びミセリオフトラ(Myceliophthora)[例えばM.サーモフィラ(M.thermophlla)の菌株由来のもの]等が挙げられる。
本発明の液体洗剤組成物に含まれる糖(F)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜50%が好ましく、さらに好ましくは0〜30%、特に好ましくは0〜20%である。
本発明の液体洗剤組成物に含まれるアミノ酸(G)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜50%が好ましく、さらに好ましくは0〜30%、特に好ましくは0〜20%である。
本発明の液体洗剤組成物に含まれる低分子有機化合物(H)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜50%が好ましく、さらに好ましくは0〜30%、特に好ましくは0〜20%である。
本発明の液体洗剤組成物に含まれる脂肪酸(I)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜50%が好ましく、さらに好ましくは0〜30%、特に好ましくは0〜20%である。
本発明の液体洗剤組成物に含まれる油脂(J)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜50%が好ましく、さらに好ましくは0〜30%、特に好ましくは0〜20%である。
本発明の液体洗剤組成物に含まれるプロテアーゼ以外の酵素(K)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜50%が好ましく、さらに好ましくは0〜30%、特に好ましくは0〜20%である。
本発明の液体洗剤組成物に含まれるpH調整剤(L)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し1〜25%が好ましく、さらに好ましくは1〜15%、特に好ましくは1〜10%である。
本発明の液体洗剤組成物中に含まれるビルダー(M)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜5が好ましく、さらに好ましくは0〜3、次にさらに好ましくは0〜1である。
本発明の液体洗剤組成物に含まれるアルカリ剤(N)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜5が好ましく、さらに好ましくは0.1〜4、次にさらに好ましくは0.5〜3である。
本発明の液体洗剤組成物中に含まれるキレート剤(O)の含有量(重量%)は、洗浄性の観点から液体洗剤組成物の重量に対し0〜5が好ましく、さらに好ましくは0〜3、次にさらに好ましくは0〜2である。
液体洗剤組成物中のpHは、pH調整剤(L)によって適宜調整できる。
(1)溶剤(D)に界面活性剤(C)を加え、25℃で均一になるまで撹拌する。
(2)プロテアーゼ(A)、プロテアーゼ活性阻害剤(B)及びプロテアーゼ以外の酵素(K)以外の成分を所定量添加し均一に溶解させる。
(3)プロテアーゼ活性阻害剤(B)を加え、25℃で均一になるまで攪拌する。
(4)最後にプロテアーゼ(A)及び必要によりプロテアーゼ以外の酵素(K)を添加し溶解させ、液体洗剤組成物を製造する。
(1)洗濯物が入った洗濯機に水道水を張り、液体洗剤組成物を25℃で添加し、軽く撹拌して溶解させる。
(2)洗濯機で洗濯物を洗浄する。
(3)洗濯機から液を抜き、水道水で1〜2回すすぐ。
(4)適宜脱水をかける。
配列番号1〜11のアミノ酸配列をコードする遺伝子(配列番号12〜22)(北海道システム・サイエンス社に人工合成を依頼したもの)をそれぞれ制限酵素NcoIとBamHIで処理後、pET−22bプラスミド(Novagen社)のNcoI制限酵素サイトとBamHI制限酵素サイトに結合した。そのBL21(DE3)大腸菌株にこのプラスミドを形質転換してプロテアーゼ阻害剤遺伝子発現株を11種類作成した。
表1〜4の割合で25℃で配合し、本発明の液体洗剤組成物を得た。
<比較例1〜9>
表5の割合で25℃で配合し、比較用の液体洗剤組成物を得た。
・プロテアーゼ(A)
アルカラーゼ水溶液(SDS−PAGEよりアルカラーゼ含量は1g/Lと推定、37μM):ノボザイムス社製、商品名「アルカラーゼ2.5L」
・界面活性剤(C)
オレイルアルコールエチレンオキサイド(表中、EOと記載)11モル付加物:三洋化成工業(株)製
ドデシルベンゼンスルホン酸モノエタノールアミン塩:三洋化成工業(株)製
・その他の酵素(K)
エンドラーゼ水溶液(SDS−PAGEよりセルラーゼ含量は1g/Lと推定):ノボザイムス社製、商品名「エンドラーゼ」
<配合直後の洗浄除去率>
実施例及び比較例で得た液体洗剤組成物それぞれについて、液体洗剤組成物の作成後直ちに液体洗剤組成物0.8gを水999.2gに溶解させ溶液を得た。この溶液に、湿式人工汚染布(4cm×4cm)5枚を投入し、ターゴトメーター(大栄化学製)を用いて以下の条件にて洗浄及びすすぎをした後、布を取り出し、ギヤーオーブン(TABAI製、GPS−222)を用いて70℃で60分間乾燥し、試験布を得た。ついで、多光源分光測色計(スガ試験機製)を使用して、この試験布の540nmの反射率を、試験布1枚ごとに表裏2個所ずつ計4個所(試験布5枚で合計20個所)測定し、この平均値を求め、以下の式にて洗浄除去率(%)を算出した。
(洗浄条件)
時間:10分、温度:25℃、回転速度:120rpm
(すすぎ条件)
時間:1分、温度:25℃、回転速度:120rpm
(洗浄除去率)
洗浄除去率(%)={(RW−RS)/(RI−RS)}×100
なお、RIは清浄布の反射率、RWは洗浄布の反射率、RSは汚染布の反射率を示す。
また、使用した湿式人工汚染布は、表2の汚垢組成を有する財団法人洗濯科学協会製の湿式人工汚染布(540nmにおける反射率が40±5%)である。
実施例及び比較例で得た液体洗剤組成物それぞれについて、上記<配合直後の洗浄除去率>において、作成直後の液体洗剤組成物の代わりに、液体洗剤組成物の作成後25℃で3ヶ月保管した後の液体洗剤組成物を用いる以外は同様に洗浄性試験をおこない、洗浄除去率を算出した。
配合直後の洗浄除去率と25℃で3ヶ月保管後の洗浄除去率との比を洗浄性の性として、以下の式にて算出した。
洗浄性の持続性(%)=(25℃で3ヶ月保管後の洗浄除去率)/(調製直後の洗浄除去率)×100
Claims (4)
- プロテアーゼ(A)、下記プロテアーゼ活性阻害剤(B)、界面活性剤(C)及び溶剤(D)を含有する液体洗剤組成物。
プロテアーゼ活性阻害剤(B):配列番号1〜11のいずれか1つのアミノ酸配列である、又はこのアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び付加からなる群より選ばれる少なくとも1種により変質したアミノ酸配列であるプロテアーゼ活性阻害剤。 - プロテアーゼ(A)、プロテアーゼ活性阻害剤(B)、界面活性剤(C)及び溶剤(D)の含有量が、(A)、(B)、(C)及び(D)の合計重量を基準として、(A)が0.00000001〜0.1重量%、(B)が0.0000000001〜5重量%、(C)が1〜90重量%及び(D)が4.9〜98.9999999899重量%である請求項1に記載の液体洗剤組成物。
- プロテアーゼ活性阻害剤(B)とプロテアーゼ(A)とのモル比{(B)のモル数/(A)のモル数}が0.01〜200である請求項1又は2に記載の液体洗剤組成物。
- さらにプロテアーゼ以外の酵素(K)を含有する請求項1〜3のいずれかに記載の液体洗剤組成物。
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