JP2011510306A - がん疾患に罹患している患者の生物学的療法に対する感受性を測定するための方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、がん疾患に罹患している患者の、HER受容体ファミリーシグナル伝達経路の阻害に基づく生物学的療法に対する感受性を測定するための方法に関する。
悪性腫瘍の発生率および治療費の増加は、社会全体に対する直接の望ましくない影響を及ぼす深刻な医学的問題である。典型的な例は、乳房の悪性新生物であり、先進国で生活している女性において第2番目に頻度の高い悪性腫瘍である。ここ25年間で、チェコ共和国において新たに報告された乳がんの数は、ほぼ2倍に増加した。2004年に、新しい症例の絶対数が5628人、すなわち、女性100000人あたり107.4人の発生率であり、女性100000人あたり、40.06人の死亡数に達したことは、チェコ国立腫瘍学登録簿(Czech National Oncology Registry(NOR))の最新の完全なデータからわかる(www.svod.cz)。患者のおよそ20〜25%において、乳房の上皮性悪性腫瘍は、HER−2受容体の過度の発現を示し、この発現は、通常、遺伝子の増幅に基づいて起こる(以下に、HER−2陽性上皮性悪性腫瘍として報告した)。これらの上皮性悪性腫瘍は、高度の攻撃性とその結果としての予後不良とを特徴としている。他方では、HER−2受容体を標的とした有力な治療方法が存在する。例えば、モノクローナル抗体トラスツヅマブであり、HER−2陽性の乳房の上皮性悪性腫瘍の患者のためのアジュバント治療および対症療法として現在適応されている。化学療法との組合せにおいて、この抗体は、アジュバント治療の場合は、病気の再発を顕著に低減し、結果として、治癒した患者の数を増加させる。また、播腫性の疾患を有する患者に対して投与された場合は、寿命を顕著に延長させる。
本発明の目的は、がん疾患に罹患している患者の、HER受容体ファミリーシグナル伝達経路の阻害に基づく生物学的療法に対する感受性を測定するための方法であり、この方法は、患者の身体から採取された生物学的材料を用いて行われ、バイオマーカーS6キナーゼもしくはその翻訳後修飾された形態またはS6キナーゼ活性化バイオマーカーもしくはその翻訳後修飾された形態が、腫瘍において測定される。バイオマーカーS6キナーゼもしくはその翻訳後修飾された形態またはS6キナーゼ活性化バイオマーカーもしくはその翻訳後修飾された形態が腫瘍において発現しているときは、その腫瘍は、HER受容体ファミリーシグナル伝達経路の阻害に基づく生物学的療法に対して抵抗性である。反対に、バイオマーカーまたはその翻訳後修飾された形態が腫瘍において発現していないときは、その腫瘍は、上記の生物学的療法に対して感受性があり、患者は、肯定的な全体的予後を有することが見出された。
a)低分子HER−2受容体阻害剤、例えば、ラパチニブ等
b)HERファミリーの他のタンパク質類似体(例えば、HER−1、HER−3、HER−4)の低分子阻害剤、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ等
c)高分子HER−2受容体阻害剤、例えば、トラスツヅマブ等
d)HERファミリーの他のタンパク質類似体(例えば、HER−1、HER−3、HER−4)の高分子阻害剤、例えば、セツキシマブまたはパニツムマブ等。
図は、実施例1による、腫瘍における個々のバイオマーカーの発現を、光学顕微鏡を用いて免疫組織化学的に検出したそれぞれのバイオマーカーの例を示し、バイオマーカーの発現を有する乳房の腫瘍(陽性腫瘍)のマイクロ写真およびバイオマーカーの発現を有さない腫瘍(陰性腫瘍)のマイクロ写真を示す。無増悪生存期間時間、PFSによって評価されたトラスツヅマブの治療学的な有効性の長さとの関連において、関係しているバイオマーカーの(全てのまたは細胞区分:核、細胞質またはこれらの組合せにおける)発現の有意性についての生物静力学的評価の結果(y軸における累積生存率およびx軸における数ヶ月にわたる期間);および全生存、OS(y軸における累積生存率およびx軸における数年にわたる期間);MST=平均生存期間(月/年);実施例2による、ロング−ランク検定(long-rank test)によって評価された統計上の有意性のレベルが、図においてさらに示される。
図2:バイオマーカー:pSer473 Actキナーゼ;抗体:(587F11)マウスmAb(セルシグナリング、USA)
図3:バイオマーカー:pSer/Thr Actキナーゼ;抗体:基質、ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図4:バイオマーカー:pThr308 Actキナーゼ;抗体:(244F9H2)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図5:バイオマーカー:全てのERK1/2キナーゼ;抗体:p44/42 MAPウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図6:バイオマーカー:pERK1/2キナーゼ;抗体:p44/42 MAPK(Thr202/Tyr204)(20G11)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図7:バイオマーカー:全てのGSK3βキナーゼ;抗体:(27C10)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図8:バイオマーカー:pSer9 GSK3βキナーゼ;抗体:ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図9:バイオマーカー:全てのmTORキナーゼ;抗体:(7C10)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図10:バイオマーカー:pSer2448 mTORキナーゼ;抗体:(49F9)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図11:バイオマーカー:全ての抗MUC4タンパク質;抗体:(1G8)マウスmAb(ザイメッド、USA)
図12:バイオマーカー:全てのPTENタンパク質;抗体:(138G6)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図13:バイオマーカー:全てのS6Kタンパク質;抗体:S6リボソームタンパク質(5G10)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)
図14:バイオマーカー:pSer235/236 S6Kタンパク質;抗体:リン酸化−S6リボソームタンパク質(91B2)ウサギmAb(セルシグナリング、USA)。
実施例1
バイオマーカー発現の免疫組織化学的測定
免疫組織化学的検出のために、種々の技術を用いて処理して薄く切断した生検材料、最も高い頻度ではパラフィン中に埋め込まれたホルマリン固定された組織、を用いてもよい。免疫組織化学的反応は、一次抗原と組織抗原との結合の視覚化を示している。使用した特定の方法に従って、場合によっては、二次抗体もしくは三次抗体の特異的な反応、または他のシグナル増幅系も続けて行う。使用される標識のタイプ、高い頻度では酵素標識、に応じて、抗原は、適切な色素原によって特異的な結合が起こる部位おいて可視化される。抗体と抗原との結合は、目に見える反応なしに進む。光学顕微鏡または蛍光顕微鏡の一般的な方法による標本の観察を可能にするために、抗原の局在およびそれに結合する分子の可視化のための、いわゆる色素原または蛍光色素を用いるべきである。FITC(fluorescein-isothiocyanate:フルオレセイン−イソチオシアネート)は、免疫蛍光法において最も高い頻度で用いられる。免疫酵素反応において、抗体は、例えば、セイヨウワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼといった酵素と連結することによって標識される。組織の状況における陽性構造の局在化のために、免疫組織化学法または免疫蛍光法において、例えば、ヘマトキシリンまたはヘキスト型の蛍光染料による切片の対比染色がしばしば用いられる。
個々のバイオマーカーの生物静力学的評価
2004年から2007年の間に、我々は、チェコ共和国の厚生省の内部助成金機関によって支援された研究プロジェクト(NR8335)およびチェコ共和国の産業省の内部助成金機関によって支援された研究プロジェクト(MPO1H−PK/45)に従事した。その目的は、トラスツヅマブに対する耐性をもたらす機構を明らかにし、乳がんのための新しい診断ツールを開発することであった。これらのプロジェクトの枠組み内で、我々は、140人の女性において、初期のHER−2陽性の乳房の上皮性悪性腫瘍におけるおよそ20の異なるタンパク質の出現および活性を測定した。これらの患者の半分は、標的化生物学的治療、トラスツヅマブによって治療されていた。我々の結果は、測定されたタンパク質の内の1つ、すなわちS6キナーゼ1(S6K1)が、トラスツヅマブに対して耐性を有する疾患の強力な予測因子であることをはっきりと示している。さらに、S6キナーゼ1は、HER−2陽性の腫瘍の標本において、十分な頻度の陽性(浸透)を有するバイオマーカーであり、それゆえ、単一遺伝子の予測因子として用いられたとしても、高い精度でHER−2阻害療法に対する反応を予測することができる。
本発明にかかる方法によって、HERシグナル伝達経路の阻害剤による処置の必要を示すがん患者群から、治療がほぼ確実に有益となる患者のみを予想することが可能である。それゆえ、個人にあわせた治療法によって、治療費用の最適化がもたらされ、患者は、望まない毒性および生活の質の低下を示す効果の無い治療によって苦しめられることがない。
Claims (8)
- がん疾患に罹患している患者の、HER受容体ファミリーシグナル伝達経路の阻害に基づく生物学的療法に対する感受性を測定するための方法であり、当該患者の身体から採取された生物学的材料を用いて行われ、バイオマーカーS6キナーゼもしくはその翻訳後修飾された形態またはS6キナーゼ活性化バイオマーカーもしくはその翻訳後修飾された形態の発現が腫瘍において測定されることを特徴とする、方法。
- 上記生物学的材料は、上記腫瘍もしくは他の組織の生検試料または体液である、請求項1に記載の方法。
- 上記S6キナーゼ活性化のバイオマーカーは、リボソームタンパク質S6、タンパク質eIF4BおよびIRS−1を含む群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 上記S6キナーゼは、S6キナーゼ1またはS6キナーゼ2である、請求項1に記載の方法。
- 上記がん疾患は、ヒト起源または動物起源の悪性腫瘍または良性腫瘍であり、好ましくは、造血器腫瘍、上皮系起源、間葉系起源、および神経外胚葉系起源の腫瘍を含む群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 上記がん疾患は、悪性の、乳房、結腸直腸、肺、膵臓、頭頸部、脳、前立腺および皮膚の新生物を含む群から選択される、請求項5に記載の方法。
- 上記生物学的療法は、HER受容体ファミリーシグナル伝達経路に特異的な、低分子阻害剤または高分子阻害剤の投与を包含している、請求項1に記載の方法。
- 上記発現の測定は、免疫分析法、免疫組織化学的方法、免疫細胞化学的方法、免疫蛍光法技術、酵素分析、放射測定分析、シンチグラフィー分析、陽電子放射トモグラフィー、化学発光分析、蛍光分析、免疫沈降技術および質量分析法の原理に基づく方法を含む群から選択される検出方法を用いて行われることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
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