JP2011132186A - ホルモン不応性前立腺癌治療法及び治療効果予測方法 - Google Patents

Abstract

【課題】ホルモン不応性前立腺癌に対する新規な治療法を開発する。
【解決手段】
ホルモン不応性前立腺癌患者、特に７０歳以上の高齢のホルモン不応性前立腺癌患者に対して、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤とを併用することにより従来にない優れた治療方法を提供する。さらに、ＴＳ遺伝子発現量を指標として当該前立腺癌患者を選択することにより、より十分な治療効果を提供する。
【選択図】なし

Description

本発明は、ホルモン不応性前立腺癌治療のために使用される交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法、その治療効果を予測する方法および当該薬物療法に十分な治療効果を示す可能性が高いと予測された患者に投与するための抗腫瘍剤に関する。

現在、前立腺癌に対して広く施行されている治療法は１）外科療法、２）放射線療法、３）薬物療法（内分泌療法を含む）、の３つであり、歴史的には１９４１年にＨｕｇｇｉｎｓらが進行性前立腺癌患者に対し去勢術を施行し、自他覚所見の改善を確認して以来、内分泌療法は前立腺癌に対するｇｏｌｄ ｓｔａｎｄａｒｄとして広く施行されてきており、今日も内分泌療法は治療の基本となっている。最も一般的な内分泌療法としては、ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ−ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＬＨ−ＲＨ）アゴニストおよび抗アンドロゲン剤各々の単独あるいはこれらの併用療法がある。前立腺細胞内のアンドロゲンのうち４０％は副腎由来であることから、去勢（精巣摘出）或いはＬＨ−ＲＨアゴニスト投与と抗アンドロゲン剤を併用するＭＡＢ（ｍａｘｉｍｕｍ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｂｌｏｃｋａｄｅ）療法が有用とされている（非特許文献１〜４）。しかしながら１〜２年で再燃し、ホルモン不応性前立腺癌の状態になる場合が多い。このホルモン不応性前立腺癌に対して、従来は、エストラムスチンリン酸エステルナトリウムやシクロホスファミド或いはシスプラチンなどの化学療法剤が姑息療法として臨床応用されて来ているが、延命効果に関わるエビデンスはこれまで特にない。最近、欧米で実施された大規模のＰ−ＩＩＩ比較試験でドセタキセルがミトキサントロンに比較して有意な延命効果を示したとの研究報告（生存期間（ＯＳ）の中央値が各々１８．９ヶ月と１６．５ヶ月）があったが、ドセタキセルは日本を含んだ世界の各国で製造販売承認されているものの、副作用が強いことから、ドセタキセルを含む治療法はホルモン不応性前立癌患者、特に高齢のホルモン不応性前立腺癌患者にとっては大変耐え難く、当該患者のＱＯＬの著しい低下を招いているのが現状である（非特許文献５〜６）。従って現在に至るまでホルモン不応性前立腺癌患者、特に７０歳以上の高齢のホルモン不応性前立腺癌患者に相応しい治療法は全くなく、新しい治療法の開発が強く求められている状況である。

Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９８５；２３：８３３−８４１ Ｕｒｏｌｏｇｙ．２００１；５７：７２７−７３２ Ｃａｎｃｅｒ．２００２；９５：３６１−３７６ ＢＪＵ Ｉｎｔ．２００１；８７（９）：８０６−８１３ Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２００４；３５１：１５０２−１５１２ Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２００４；３５１：１５１３−１５２０

本発明は、ホルモン不応性前立腺癌の治療に際して、交替ＭＡＢ療法と併用して用いられる抗腫瘍剤を提供することを目的とする。

また、本発明は、ホルモン不応性前立腺癌の治療に際して、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法による治療効果を予測する方法を提供することを目的とする。

さらに、本発明は前記治療効果が高いと予測された患者に対して、交替ＭＡＢ療法と併用して用いられる抗腫瘍剤を提供することを目的とする。

本発明者らは、ホルモン不応性前立腺癌患者、特に高齢者のホルモン不応性前立腺癌に対する薬物療法について研究を重ねた結果、交替ＭＡＢ療法にテガフール・ウラシル配合剤を併用することにより、十分な治療効果が示されることを見出し、本発明を完成するに至った。

さらに、チミジル酸合成酵素遺伝子（以下、「ＴＳ遺伝子」ともいう）の発現量を指標とすることにより、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法に十分な治療効果を示す可能性が高い患者を予測する方法を見出し、本発明を完成するに至った。なお、チミジル酸合成酵素（以下、「ＴＳ」ともいう）は、従来から他の癌種においてテガフール・ウラシル配合剤の治療効果規定因子として知られているが（例えば、Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ：９２（７）、１２３１−１２３９（２００５））、ホルモン不応性前立腺癌の治療において、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法の患者層の選択にＴＳ遺伝子の発現産物を指標にできることは全く知られていない。
また、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者の治療に対して、重篤な副作用を伴わずに優れた治療効果を示す治療法もこれまでに知られていない。

すなわち本発明は、ホルモン不応性前立腺癌における交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法に関する治療効果を予測する方法及び当該交替ＭＡＢ療法に併用する抗腫瘍剤を提供するものである。
項１．
ホルモン不応性前立腺癌患者の治療のために、交替ＭＡＢ療法に併用するテガフール・ウラシル配合剤からなる抗腫瘍剤。
項２．
交替ＭＡＢ療法が、抗アンドロゲン剤を追加又は変更した交替ＭＡＢ療法である項１記載の抗腫瘍剤。
項３．
テガフール・ウラシル配合剤における各有効成分のモル比が、テガフール：ウラシル＝１：４である項１又は項２に記載の抗腫瘍剤。
項４．
ホルモン不応性前立腺癌患者が７０歳以上である項１乃至３のいずれか１項に記載の抗腫瘍剤。
項５．
下記工程（１）〜（２）を含む、ホルモン不応性前立腺癌患者における交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用に関する薬物療法における治療効果を予測する方法：
（１）患者から採取された癌細胞を含み得る生体試料に含まれるＴＳ遺伝子の発現量を測定する工程、
（２）上記工程（１）で測定した発現量が、予め設定した対応するカットオフポイント（ベータアクチンに対する比）と比較して低い場合、ホルモン不応性前立腺癌患者が当該薬物療法を選択するのに十分な治療効果を示す可能性が高いと予測する工程。
項６．
テガフール・ウラシル配合剤における各有効成分のモル比が、テガフール：ウラシル＝１：４である項５記載の方法。
項７．
ホルモン不応性前立腺癌患者が７０歳以上である項５記載の方法。
項８．
項５乃至７のいずれか１項に記載の方法により、当該薬物療法を選択するのに十分な治療効果を示す可能性が高いと予測されたホルモン不応性前立腺癌患者に当該薬物療法を実施することを特徴とする、テガフール・ウラシル配合剤からなる抗腫瘍剤。

本発明は、ホルモン不応性前立腺癌患者、特に７０歳以上の高齢のホルモン不応性前立腺癌患者に対して、優れた治療効果を示す治療法を提供するものであり、従来のホルモン不応性前立腺癌の治療に比較して、重篤な副作用を伴わないことから患者のＱＯＬを大幅に向上するものである。

さらに、本発明は、ホルモン不応性前立腺癌患者のＴＳ遺伝子の発現量を測定し、予め設定したカットオフポイントを基準として、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤の併用効果が高いと予測される患者層を選定することにより、ホルモン不応性前立腺癌に対して患者層を選定しない場合に比較して、より優れた治療効果を示す薬物療法を提供するものである。

本発明において、ホルモン不応性前立腺癌とはＬＨ−ＲＨアゴニストまたはＭＡＢ（ｍａｘｉｍｕｍ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｂｌｏｃｋａｄｅ）療法後に再燃を来した前立腺癌を意味する。

本発明において、交替ＭＡＢ療法とは、初回治療においてＬＨ−ＲＨアゴニストのみを投与した後に再燃を来したホルモン不応性前立腺癌を治療するに際しては、前記ＬＨ−ＲＨアゴニストに加えて新たに抗アンドロゲン剤を追加する療法、又は初回治療においてＬＨ−ＲＨアゴニストと抗アンドロゲン剤とを併用した後に再燃を来したホルモン不応性前立腺癌を治療するに際しては、初回治療で用いた抗アンドロゲン剤とは異なる種類の抗アンドロゲン剤とを併用した療法を意味する。

本明細書において用いられる抗アンドロゲン剤としては、具体的には、例えば、酢酸クロルマジノン、フルタミド、ビカルタミド等が挙げられ、また、ＬＨ−ＲＨアゴニストとしては、具体的には、例えば、酢酸ゴセレリン、酢酸リュープロレリン等が挙げられる。

本発明における治療効果は、前立腺癌取り扱い規約〔第３版〕にある腫瘍マーカー：ＰＳＡの評価法に準じて判定され，各効果はＰＳＡ奏効率、無増悪生存期間、１年無増悪生存率、ハザード比、ＰＳＡ低下期間の延長程度などにより判定することができる。

本発明における有効成分であるテガフール（一般名、化学名：５−フルオロ−１−（２−テトラヒドロフリル）−２、４−（１Ｈ、３Ｈ）−ピリミジンジオン）は、公知の化合物であり、生体内で活性化を受けて５−フルオロウラシルを放出する薬剤である。テガフールは、公知の方法、例えば特公昭４９−１０５１０号に記載されている方法に従って製造できる。

本発明における有効成分であるウラシル（一般名、化学名：ウラシル）も公知の化合物であり、それ自身全く抗腫瘍活性を有さないものであるが、５−フルオロウラシルが生体内において代謝されて不活性化されることを抑制するものであり、抗腫瘍効果を増強させることができる。

本発明の抗腫瘍剤として用いるテガフールとウラシルの両成分の配合割合は、通常の公知の配合剤の場合と同様で良く、一般にはテガフール１モルに対してウラシルを０．０２〜１０モル、好ましくは０．１〜１０モルとするのがよい。特に好ましくは、テガフール：ウラシル（モル比）＝１：４である。

本発明の抗腫瘍剤として用いるテガフールとウラシルの両成分の配合割合は、通常の公知の配合剤の場合と同様で良く、一般にはテガフール１モルに対してウラシルを０．０２〜１０モル、好ましくは０．１〜１０モルとするのがよい。特に好ましくは、テガフール：ウラシル（モル比）＝１：４である
本発明における各有効成分の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件により適宜選択できる。通常経口投与の場合、テガフールの量が０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日程度、好ましくは１〜３０ｍｇ／ｋｇ／日程度、ウラシルが０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日程度、好ましくは１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日程度の範囲となる量を目安とするのが良い。

本発明に用いられるテガフール・ウラシル配合剤としては、モル比が１：４である医薬組成物として、商品名ユーエフティ（以下、「ＵＦＴ」ともいう）が知られており、頭頸部癌、胃癌、結腸・直腸癌、肝臓癌、胆嚢・胆管癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、膀胱癌、前立腺癌、子宮頸癌に対する治療薬として用いられている。当該ＵＦＴがホルモン不応性前立腺癌患者に対して交替ＭＡＢ療法との併用療法で有用であるという報告は特にない。

本発明における製剤の投与形態としては特に制限は無く、テガフールとウラシルを含有する経口投与用組成物であれば、その形態は特に制限されない。具体的には、錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉末剤、カプセル剤、丸剤、乳剤、懸濁剤、液剤等が挙げられる。本発明の各有効成分を複数の剤型に製剤化する場合は、当該製剤はそれぞれ異なる投与形態であっても同一の投与形態であってよい。例えば、テガフール・ウラシル配合剤は経口剤とすることが好ましい。

本発明の製剤は、薬理学的に許容される担体を用いて、それぞれの投与形態において通常公知の製剤化方法により製造される。かかる担体としては、通常の薬剤に汎用される各種のもの、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、崩壊抑制剤、吸収促進剤、保湿剤、吸着剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を例示できる。

賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤、ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸、チオ乳酸及びこれらの混合物等の安定化剤、塩化ナトリウム、ホウ酸、ブドウ糖、グリセリン及びこれらの混合物等の等張化剤、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム及びこれらの混合物等のｐＨ調整剤及び緩衝剤、酸化チタン、酸化鉄等の着色剤、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等の矯味・矯臭剤、ポリエチレングリコール、Ｄ−マンニトール等の溶解補助剤、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム等の懸濁化剤等を使用できる。

さらに錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。丸剤の形態に成形するに際しては、例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン末、カンテン末等の崩壊剤等を使用できる。

本発明における投与スケジュールは、患者の年齢、性別、病期、転移の有無、治療暦などの条件により適宜選択されるが、再燃が認められない限り投与を継続することが好ましい。

本発明の予測方法の対象となる患者は、ホルモン不応性前立腺癌を有する患者であるが、原発巣が前立腺癌であり、前立腺以外の臓器、組織に転移した前立腺癌を有する患者であっても良い。

本発明のＴＳ遺伝子の発現量測定において用いることができる生体試料としては、癌細胞を含む可能性がある試料であれば特に限定されず、体液（血液、尿等）、組織、その抽出物及び採取した組織の培養物などが例示できる。また、生体試料の採取方法は、生体試料の種類や癌種に応じた方法により適宜選択することができる。生体試料からのＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質の調製は、通常公知の方法により行うことができる。組織としては、特に前立腺が挙げられるが、前立腺から他の臓器や膀胱などに転移した場合には、転移した部位が対象の組織となる。

ＴＳは、ｄＵＭＰから葉酸を補酵素としてｄＴＭＰを合成する活性を有する酵素であり、ＤＮＡ合成時に必要な酵素として知られている。また、５−フルオロウラシルの標的酵素としても知られている。なお、ヒトのＴＳの遺伝子の塩基配列やアミノ酸配列は公知である（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：２０３５−２０４３（１９８５））。

本発明の予測方法は、ＴＳ遺伝子の発現量を指標とするが、その発現量としてはｍＲＮＡの発現量であっても、タンパク質の発現量であってもよい。ここでｍＲＮＡの発現量は、ＴＳ遺伝子と特異的にハイブリダイズするプローブ又はプライマーを用いて、ノーザンブロット法、定量的又は半定量的ＰＣＲ法（例えばＲＴ−ＰＣＲ法、リアルタイムＰＣＲ法）、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダーゼーション法など公知の遺伝子発現量の測定法に従い測定することができる。当該発現量は、常に一定範囲の量を発現しているタンパク質／遺伝子（例えばβアクチンなどのハウスキーピング遺伝子又はその発現タンパク質）を基準として、比により評価することができる。

また、タンパク質発現量は、ＴＳを特異的に認識する抗体を用いて、酵素免疫測定法、放射性免疫測定法、蛍光免疫測定法、ＥＬＩＳＡ法、ウェスタン・ブロッティング法、免疫組織化学染色法など公知の免疫学的測定法を行うことにより測定することができる。

ノーザンブロット法、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダーゼーション法などの遺伝子発現量の測定法に用いられるプローブは、ＴＳ遺伝子の塩基配列内の少なくとも１５塩基長〜全塩基長、好ましくは２０塩基長〜全塩基長、より好ましくは３０塩基長〜全塩基長の連続した塩基配列と特異的にハイブリダイズするように、通常公知のプローブ設計方法に従い上記各塩基長を有するポリヌクレオチドとして設計される。

ＲＴ−ＰＣＲ法、リアルタイムＰＣＲ法などの定量的又は半定量的ＰＣＲ法に用いられるプライマー、プローブの設計は、例えば以下のようにして行うことができる。

本発明のプライマー及びプローブは、ＴＳ遺伝子の塩基配列内の少なくとも１０塩基長〜全塩基長、好ましくは１０〜１００塩基長、より好ましくは１０〜５０塩基長、さらに好ましくは１０〜３５塩基長の連続した塩基配列と特異的にハイブリダイズするように、通常公知のプライマー及びプローブ設計方法に従い上記各塩基長を有するポリヌクレオチドとして設計される。例えば、ＴＳ遺伝子の発現産物検出用のプライマー、すなわちＰＣＲのフォワードプライマー及びリバースプライマーは、ＴＳ遺伝子のうちエキソン領域から設計及び合成することができる。フォワードプライマー及びリバースプライマーは、ＴＳ遺伝子の各エキソン領域のうち、一方を上流側のエキソン領域の塩基配列に基づき設計し（フォワードプライマー）、他方をその下流側のエキソン領域の塩基配列に基づき設計する（リバースプライマー）。例えば、ＴＳ遺伝子のプライマーをエキソン１〜３に基づき設計する際において、フォワードプライマーをエキソン１領域の配列に基づいて設計する場合は、リバースプライマーは、その下流側のエキソン２又はエキソン３領域の配列に基づいて設計する。リバースプライマーは、ＴＳ遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的となるように設計する。また、このプライマーとしては、各エキソン領域を含むＴＳ遺伝子のｍＲＮＡの塩基配列の全て及びその一部の配列を用いることができるが、それぞれのエキソン領域からＰＣＲによる増幅効率を考慮してプライマーを設計するのが望ましい。

ＴＳ遺伝子の発現産物検出用プローブとしては、上記プライマーを使用してＰＣＲ反応により、増幅されるＴＳ遺伝子の各一本鎖ＤＮＡとハイブリダイズ可能なものであれば特に制限されない。ＴＳ遺伝子の全エキソンの塩基配列あるいはその一部と相補的な配列を有するかあるいはストリンジェントな条件でハイブリダイズ可能なものであればよい。

なお、当該プローブは、ＴＳ遺伝子と特異的にハイブリダイズするものであれば、完全に相補的である必要はない。かかるポリヌクレオチドとして、好ましくはＴＳ遺伝子の塩基配列において連続する少なくとも１５塩基以上の塩基配列からなるポリヌクレオチド又はその相補ポリヌクレオチドと比較して、塩基配列において７０％以上、好ましくは８０％以上、より好ましくは９０％以上、さらに好ましくは９５％以上、特に好ましくは９８％以上の同一性を有するポリヌクレオチドである。

なお、本発明において「特異的にハイブリダイズする」とは、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下において、特異的なハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッドが形成されないことをいう。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件は、通常公知の方法に従ってハイブリッドを形成する核酸の融解温度（Ｔｍ）などに基づいて決定することができる。具体的なハイブリダイズ状態を維持できる洗浄条件として通常「１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、３７℃」程度の条件、より厳格には「０．５×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、４２℃」程度の条件、さらに厳格には「０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃」程度の条件が挙げられる。

また、ヒトにおけるＴＳ遺伝子の塩基配列が公知であるため、当該プローブ又はプライマーは、その塩基配列に基づいて、通常公知の合成方法、例えば市販のヌクレオチド合成機によって作製することができる。また、その塩基配列を鋳型としてＰＣＲ法によって調製することもできる。

また、当該プローブ又はプライマーは、ＴＳ遺伝子を容易に検出できるように、通常慣用されている放射性物質、蛍光物質、化学発光物質、または酵素で標識されていてもよい。

本発明の抗体は、ＴＳを特異的に認識するものであれば特に制限されず、モノクローナル抗体及びポリクローナル抗体のいずれであってもよく、Ｆａｂ断片やＦ（ａｂ’）２断片などの抗体断片であってもよい。また、当該抗体は、通常公知の方法に従って製造することができる（例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｅｄｉｔ． Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．（１９８７）、 Ｐｕｂｌｉｓｈ． Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ． Ｓｅｃｔｉｏｎ １１．１２−１１．１３）。

ＴＳ遺伝子の発現量が、予め設定した各カットオフポイントと比較して低い場合、ホルモン不応性前立腺癌患者が交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法を選択するのに、より高い十分な治療効果を示す可能性が高いと予測する。

本発明におけるカットオフポイントは、測定対象や測定方法の種類などの諸条件により変動するものであるため、条件に合わせて予め設定する必要がある。カットオフポイントは、測定対象（患者の数、年齢、性別、体重、健康状態、疾患の状態）や測定方法（遺伝子とタンパク質のいずれの発現産物を測定対象とするか）、測定条件（例えば遺伝子発現産物（ｍＲＮＡ）の測定におけるプライマー、プローブの配列、標識の種類、発現産物がタンパク質の場合の抗体の種類及び感度など）、統計的手法などにより変動するため、本発明は、これらの諸条件により変動し得る任意のカットオフポイントを用いた発明を広く包含し、特定の値に限定されない。ここでカットオフポイントは、予め測定しておいたＴＳ遺伝子の発現量から種々の統計解析手法により求めることができる。例えば、交替ＭＡＢ療法或いは交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法を受けた患者におけるＴＳ遺伝子発現量の平均値や中央値；交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法を受けた患者のＴＳ遺伝子発現量の低値群におけるＰＳＡ奏効率が最大となる値又はある水準以上になる値（例えば、８０％以上になる値）；交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法を受けた患者のＴＳ遺伝子発現量の低値群と高値群におけるＰＳＡ奏効率のｐ値が最小になる値が例示できる。

その結果、本薬物療法におけるＴＳ遺伝子のカットオフポイント（ベータアクチンに対する比）は、例えばリアルタイムＰＣＲ法では０．４６〜１．２４×１０^−２が好ましく、０．７７〜１．２４×１０^−２が特に好ましい。

以下、本発明を実施例に基づき、より詳細に説明するが、本発明がこれら実施例に限定されないことはいうまでもない。

ホルモン不応性前立腺癌症例における交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法における治療効果
初回治療として内分泌療法（ＬＨ−ＲＨアゴニストまたはＭＡＢ療法）が選択され、その後に再燃を来したホルモン不応性前立腺癌患者を対象に交替ＭＡＢ療法又は交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法による治療を施行した。

テガフール・ウラシル配合剤としてＵＦＴを使用し、経口投与した。当該治療に併せて付随研究として遺伝薬理学的研究を実施した。

ＵＦＴの１回投与量は、２６０ｍｇ／ｍ^２／日（テガフールとして1日３００〜４００ｍｇ）を１日２〜３回に分けて食後に経口投与し、再燃が認められない限り投与を継続した。

当該試験の中止基準として、以下の場合には、当該試験担当医師の判断で試験を中止することとした。

１．ＰＳＡが３回連続して上昇、測定可能な軟部組織病変または臓器内病変の増大、あるいは新病変が出現した場合
２．Ｇｒａｄｅ４の有害事象が発現した場合
３．下記のようなコントロール困難な重篤な有害事象・有害反応が発現した場合
重症感染症、出血・脱水・電解質異常を伴う下痢、高度な神経障害、重症腸管麻痺、肺臓炎
４．その他の重篤な有害事象・有害反応の発現により、継続投与が困難となった場合
５．合併症の悪化などにより病態が急激に不良となった場合
６．減量後にも、再び減量を要する毒性が認められた場合
７．患者又は家族から試験中止の申し出があった場合
８．その他、研究担当医師が本治療の継続を不可能と判断した場合
治療効果（ＰＳＡ効果）の判定は、前立腺癌取扱い規約〔第３版〕にある、腫瘍マーカー（ＰＳＡ）の評価法に準じて判定し、以下の通りとした。

著効（ＣＲ）：異常前値が基準値に復した場合
有効（ＰＲ）：異常前値が５０％以上の改善を呈するが、基準値にまでは復さなかった場合
不変（ＮＣ）：異常前値が５０％未満の改善か、２５％未満の増悪を呈した場合
進行（ＰＤ）：異常前値が２５％以上増加するか、基準前値が異常値になった場合
以上より、ＰＳＡ効果は最良効果判定を採用し、ＰＳＡ奏効率はＣＲ＋ＰＲを有効、ＮＣ＋ＰＤを無効として算出した。再燃はＰＳＡが３回連続して上昇した場合とした。

無増悪生存期間（ＰＦＳ）は患者登録日から病態進行に達した日（ＰＤ評価日）までの期間と定義した。病態進行に達する前に死亡した被験者では、死亡を病態進行と取り扱った。病態進行に達していない場合は、最終評価日を解析に用いた。

なお、遺伝子発現解析に用いるＲＮＡサンプルの電気泳動により、ＲＮＡ分解程度の指標であるＲＩＮ（ＲＮＡ Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ Ｎｕｍｂｅｒ）が２．０未満と高度な分解を呈した症例については予め全ての解析より除外した。

当該試験における交替ＭＡＢ療法群（以下、「ＭＡＢ群」）、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法群（以下、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」）の治療成績を表１〜３に示す。

その結果、ホルモン不応性前立腺癌患者に対する「ＭＡＢ群」あるいは「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＰＳＡ奏効率はそれぞれ３３．３％、７３．３％であった（表１）。また、無増悪生存期間について、「ＭＡＢ群」に比較して、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」で明らかな延長をみとめ、無増悪生存期間の中央値は６．４ヶ月、１６．６ヶ月と有意に「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」で高い治療効果をみとめた（表２）。さらに、ＰＳＡ低下期間においても「ＭＡＢ群」に比較して、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」で明らかな延長をみとめた。

また、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者に対する「ＭＡＢ群」及び「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＰＳＡ奏効率は、それぞれ２９％、７５％であった。さらに、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者に対する「ＭＡＢ群」及び「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」の１年無増悪生存率は、それぞれ１１％、７３％であった（表３）。

なお、「ＭＡＢ群」及び「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のいずれの群においてもグレード３以上の血液毒性、非血液毒性は殆ど認められなかった。

以上のことから、ホルモン不応性前立腺癌患者に対する交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法は優れた治療効果をもたらすことが明らかとなった。また、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者に対しては特に優れた効果をもたらした。

ＴＳ遺伝子の発現量測定
ＴＳ遺伝子の発現量は、初回治療開始前に実施した前立腺のニードルバイオプシー組織よりホルマリン固定パラフィン包埋切片を作製し、Ｌａｓｅｒ ｃａｐｔｕｒｅｄ ｍｉｃｒｏｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎにて採取した腫瘍細胞からトータルＲＮＡを抽出し、逆転写後、得られたｃＤＮＡを増幅し、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）リアルタイムＰＣＲ法によりベータアクチンに対する比として定量した。なお、ＴＳ遺伝子の発現量測定用のプライマー及びプローブとして、以下の配列番号１〜３で示すプライマー及びプローブを用いた。さらに、ベータアクチン遺伝子発現量の測定には、以下の配列番号４〜６で示すプライマー及びプローブを用いた。

上記表４記載のプライマー及びプローブ以外に、公知のＴＳ遺伝子配列のオープンリーディングフレームをもとにして種々のフォワードプライマー、リバースプライマー、プローブを設計できる。

カットオフポイントの算出
カットオフポイントは、次のような統計解析手法により求めた。

（１）交替ＭＡＢ療法あるいは交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法を受けた患者におけるＴＳ遺伝子発現量の中央値は１．０２×１０^−２であった。

（２）交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法を受けた患者のＴＳ遺伝子発現量の低値群におけるＰＳＡ奏効率が８０％以上となるカットオフポイントを算出したところ、０．４６〜１．２４×１０^−２であった。

（３）交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法を受けた患者のＴＳ遺伝子発現量の低値群と高値群におけるＰＳＡ奏効率のｐ値が最小となるカットオフポイントを算出したところ、０．７７×１０^−２であった。

ＴＳ遺伝子発現量を指標にして選択された患者、及び７０歳以上の患者での交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法における治療効果
実施例３で算出したカットオフポイント値を用いてＴＳ遺伝子発現量の低値群と高値群の２群における交替ＭＡＢ療法、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法のＰＳＡ奏効率の算出と生存期間解析を実施した。結果を表５〜８に示す。

上記表５のとおり、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者を対象として、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」でＴＳ低値群のＰＳＡ奏効率が８０％以上となるカットオフポイントのうち、下限値である０．４６×１０^−２をカットオフポイントとして採用した場合、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ低値群は、「ＭＡＢ群」や「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ高値群よりも高い治療効果を示した。

上記表６−１のとおり、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」でＴＳ低値群とＴＳ高値群のＰＳＡ奏効率のｐ値が最小となるカットオフポイントを採用した場合、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ低値群は、「ＭＡＢ群」や「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ高値群よりも高い治療効果を示した。

上記表６−２のとおり、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者を対象として、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」でＴＳ低値群とＴＳ高値群のＰＳＡ奏効率のｐ値が最小値となるカットオフポイントを採用した場合、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ低値群は、「ＭＡＢ群」や「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ高値群よりも高い治療効果を示した。

上記表７−１のとおり、交替ＭＡＢ療法、あるいは交替ＭＡＢ療法とＵＦＴとの併用療法を受けた患者におけるＴＳ遺伝子発現量の中央値である１．０２×１０^−２カットオフポイントを採用した場合、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ低値群は、「ＭＡＢ群」や「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ高値群よりも高い治療効果を示した。

上記表７−２のとおり、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者を対象として、ＭＡＢ療法、あるいは交替ＭＡＢ療法とＵＦＴとの併用療法を受けた患者のＴＳ遺伝子発現量の中央値である１．０２×１０^−２カットオフポイントを採用した場合、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」の低値群は、「ＭＡＢ群」や「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ高値群よりも高い治療効果を示した。

上記表８−１のとおり、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」でＴＳ低値群のＰＳＡ奏効率が８０％以上となるカットオフポイントのうち上限値である１．２４×１０^−２をカットオフポイントとして採用した場合、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ低値群は、「ＭＡＢ群」や「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ高値群よりも高い治療効果を示した。

上記表８−２のとおり、７０歳以上のホルモン不応性前立腺癌患者を対象として、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」でＴＳ低値群のＰＳＡ奏効率が８０％以上となるカットオフポイントのうち上限値である１．２４×１０^−２をカットオフポイントとして採用した場合、「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ低値群は、「ＭＡＢ群」や「ＭＡＢ＋ＵＦＴ群」のＴＳ高値群よりも高い治療効果を示した。

以上のとおり、ホルモン不応性前立腺癌患者における交替ＭＡＢ療法とＵＦＴとの併用療法では、交替ＭＡＢ療法に比較し有意なＰＳＡ奏効率の増加、無増悪生存期間の延長がみられ、ＵＦＴを併用することの有効性がみとめられた。さらに、交替ＭＡＢ療法とＵＦＴとの併用療法において，腫瘍組織中ＴＳ遺伝子発現量を指標として発現量の低い患者を選択すると、交替ＭＡＢ療法に比較しＰＳＡ奏効率が３０〜４７％の増加、１年無増悪生存率が６７〜８０％の増加を示し、さらに、ハザード比が０．０９〜０．２２という顕著に高い治療効果を示した。特に、７０歳以上の患者においては、ＰＳＡ奏効率が４８〜５７％の増加、１年無増悪生存率が１００％の増加を示し、さらに、ハザード比が＜０．０１という顕著に高い治療効果を示した。

以上のように、腫瘍組織中ＴＳ遺伝子の発現量を指標としてホルモン不応性前立腺癌患者を選択することにより、交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法は高い治療効果を有することが明らかになった。さらに、腫瘍組織中ＴＳ遺伝子の発現量を指標として、７０歳以上の高齢のホルモン不応性前立腺癌患者に対する交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用療法は特に高い治療効果を有することが明らかとなった。

Claims (8)

1. ホルモン不応性前立腺癌患者の治療のために、交替ＭＡＢ（ｍａｘｉｍｕｍ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｂｌｏｃｋａｄｅ）療法に併用するテガフール・ウラシル配合剤からなる抗腫瘍剤。
2. 交替ＭＡＢ療法が、抗アンドロゲン剤を追加又は変更した交替ＭＡＢ療法である請求項１記載の抗腫瘍剤。
3. テガフール・ウラシル配合剤における各有効成分のモル比が、テガフール：ウラシル＝１：４である、請求項１又は２に記載の抗腫瘍剤。
4. ホルモン不応性前立腺癌患者が７０歳以上である請求項１乃至３のいずれか１項に記載の抗腫瘍剤。
5. 下記工程（１）〜（２）を含む、ホルモン不応性前立腺癌患者における交替ＭＡＢ療法とテガフール・ウラシル配合剤との併用に関する薬物療法における治療効果を予測する方法：
   （１）患者から採取された癌細胞を含み得る生体試料に含まれるチミジル酸合成酵素遺伝子(ＴＳ遺伝子)の発現量を測定する工程、
   （２）上記工程（１）で測定した発現量が、予め設定した対応するカットオフポイント（ベータアクチンに対する比）と比較して低い場合、ホルモン不応性前立腺癌患者が当該薬物療法を選択するのに十分な治療効果を示す可能性が高いと予測する工程。
6. テガフール・ウラシル配合剤における各有効成分のモル比が、テガフール：ウラシル＝１：４である請求項５記載の方法。
7. ホルモン不応性前立腺癌患者が７０歳以上である請求項５記載の方法。
8. 請求項５乃至７のいずれか１項に記載の方法により当該薬物療法を選択するのに十分な治療効果を示す可能性が高いと予測されたホルモン不応性前立腺癌患者に当該薬物療法を実施することを特徴とする、テガフール・ウラシル配合剤からなる抗腫瘍剤。