JP2010530362A - 皮内hpvペプチドワクチン接種 - Google Patents
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Abstract
Description
これらをサブユニットとしてワクチンに組み込み、又はこれらのエピトープをインビボのワクチン誘導性免疫のモニタリングに使用する可能性が示される。大部分の上皮細胞は、MHCクラスIを発現するが、クラスIIは発現しないので、今までのところ、殺腫瘍性のHPV特異的CD8+細胞障害性Tリンパ球の誘導に注目が集まっている(Meliefら、2000;Ressingら、1995;Ressingら、2000;Ressingら、1996)。HPV特異的CD8+T細胞の反応性は、子宮頸部上皮内新生物、グレードIII(CIN III)の病変又は子宮頸癌と診断された患者の末梢血(Nimakoら、1997;Ressingら、1996)及び子宮頸癌の患者から単離された腫瘍浸潤T細胞集団(Evansら、1997)において認められた。腫瘍特異的CD4+ヘルパーT(「Th」)免疫もまた、これらの腫瘍の大部分がMHCクラスIIを発現しないという事実にもかかわらず、固形腫瘍の効率的な根絶にとって極めて重要であると現在考えられている(Meliefら、2000;Pardoll及びTopalian、1998;Toesら、1999に総説がある)。最新の証拠により、CD4+腫瘍特異的T細胞が、CD8+腫瘍特異的CTLの最適な誘導のみならず、これらのCTLによる局所エフェクター細胞機能の最適な活動のためにも必要であることが示されている(Ossendorpら、1998、Toesら、1999)。MHCクラスI拘束性腫瘍特異的免疫の誘導に関して、プロフェッショナル抗原提示細胞により捕捉されている抗原の交差提示は、主要な役割を担っていると思われる。交差プライミングによる有効な腫瘍特異的CTLの適切な誘導のためには、腫瘍特異的CD4+T細胞のヘルプが必要とされる(Toesら、1999、Schoenbergerら、1998)。
911)に示されるような)T細胞耐性の不利な誘導が、本明細書に示された長さを有するペプチドの使用によって妨げられる(Zwavelingら、2002、J.Immunol.169:350に示される)。したがって、好ましい実施形態において、本発明の使用が提供され、前記ペプチドはAPCを活性化できる配列を含む。APCを活性化できる配列とは、APC、好ましくはプロフェッショナルAPCを少なくとも部分的に活性化できる配列を意味する。前記活性化により、好ましくは前記APCの表面において、前記ペプチドの少なくとも1つのエピトープの提示がもたらされる。特に好ましい実施形態において、前記ペプチドは、前記抗原に対する少なくとも2つのT細胞エピトープを含む。前記抗原に対する少なくとも2つのT細胞エピトープの存在は、さらにより有効な、前記抗原特異的T細胞応答の誘導及び/又は強化を可能にする。
タンパク質由来の22〜45の連続するアミノ酸残基を含む。
、E6及びE7タンパク質の3種すべてに由来するペプチドを含む。1つの単回ワクチンを使用して、いくつかのHPVタンパク質E2、E6又はE7内に存在する、いくつかの免疫原性エピトープに対するワクチン接種及びその後の保護を得ることができるので、このこともまた有利である。
76〜105、E2 91〜120、E2 106〜135、E2 121〜150、E2 136〜165、E2 151〜180、E2 166〜195、E2 181〜210、E2 196〜225、E2 211〜240、E2 226〜255、E2 241〜270、E2 256〜285、E2 271〜300、E2 286〜315、E2 316〜330、E2 311〜325、E2 331〜365、E2 346〜355、E2 351〜365、E6 1〜22、E6 11〜32、E6 21〜42、E6 31〜52、E6 41〜62、E6 51〜72、E6 61〜82、E6
71〜92、E6 81〜102、E6 91〜112、E6 101〜122、E6
111〜132、E6 121〜142、E6 127〜140、E6 131〜152、E6 137〜158、E7 1〜22、E7 11〜32、E7 21〜42、E7 30〜50、E7 31〜52、E7 35〜50、E7 41〜62、E7 50〜62、E7 51〜72、E7 35〜77、E7 61〜82、E7 71〜92、E7 77〜98、中でも、E2 31〜60又は配列番号7、E2 46〜75又は配列番号8、E2 301〜330又は配列番号9、E2 316〜345又は配列番号10、E6 1〜32又は配列番号11、E6 19〜50又は配列番号12、E6 41〜65又は配列番号13、E6 55〜80又は配列番号14、E6 71〜95又は配列番号15、E6 85〜109又は配列番号16、E6 91〜122又は配列番号17、E6 109〜140又は配列番号18、E6 127〜158又は配列番号19、E7 1〜35又は配列番号20、E7 22〜56又は配列番号21、E7 43〜77又は配列番号22、E7 64〜98又は配列番号23が最も好ましい。これらのペプチドのそれぞれの配列は、配列番号1、2又は3で表わされるHPV16の対応するE2、E6又はE7の完全長配列から推測できる。
の重複が本発明に包含されることを理解するであろう。
プール1:E2 31〜60及び/若しくはE2 46〜75、並びに/又は
プール2:E2 301〜330及び/若しくはE2 316〜345、並びに/又は
プール3:E2 31〜60及び/若しくはE2 46〜75、及び/若しくはE2 301〜330及び/若しくはE2 316〜345、並びに/又は
プール4:E6 1〜32及び/若しくはE6 19〜50、並びに/又は
プール5:E6 41〜65、E6 55〜80及び/若しくはE6 71〜95、並びに/又は
プール6:E6 85〜109、及び/若しくはE6 91〜122、並びに/又は
プール7:E6 109〜140及び/若しくはE6 127〜158、並びに/又は
プール8:E6 1〜32及び/若しくはE6 19〜50、及び/若しくはE6 41〜65、及び/若しくはE6 55〜80及び/若しくはE6 71〜95、及び/若しくはE6 85〜109、及び/若しくはE6 91〜122及び/若しくはE6 109〜140及び/若しくはE6 127〜158、並びに/又は
プール9:E7 1〜35及び/若しくはE7 22〜56、並びに/又は
プール10:E7 43〜77、及び/若しくはE7 64〜98、並びに/又は
プール11:E7 1〜35及び/若しくはE7 22〜56、及び/若しくはE7 43〜77、及び/若しくはE7 64〜98、並びに/又は
プール12:上で定義したようなプール3及びプール8、並びに/又は
プール13:上で定義したようなプール8及びプール11、並びに/又は
プール14:上で定義したようなプール3及びプール11、並びに/又は
プール15:上で定義したようなプール3、プール8及びプール11。
to kill)」シグナルにより(Lanzavecchia、1998、Nature 393:413)、より強固なCD8+エフェクター及びメモリーT細胞応答をもたらすと思われる。
まれて存在することができる。一実施形態において、前記ペプチドは、細胞の内側の前記ペプチドを、前記細胞の表面上のMHC分子に輸送され、及び/又は組み込まれ得るようにプロセッシングできる、プロセッシング部位に隣接している。好ましい実施形態において、本薬剤に使用するペプチドは、プロセッシング後にMHCクラスII分子と複合体を形成できる。MHCクラスII拘束性T細胞性免疫は、現在、例えば、腫瘍細胞の根絶において、前記腫瘍細胞が多くの場合MHCクラスII分子を発現しないにもかかわらず重要であると考えられている。本薬剤に使用するペプチドは、MHCクラスI及びMHCクラスII双方に依存性のT細胞の誘発、誘導及び/又は刺激に特に適している。
ISA−51などの任意のアジュバントを含まないので、この薬剤の処方がより単純で
あり、油−水に基づく乳剤が、好ましくは使用する薬剤中に存在しないことを意味する。したがって、本発明に使用する薬剤は、Montanide ISA−51などのアジュバントを含まない、及び/又は水中油に基づく乳剤を含まない。したがって好ましい実施形態において、本発明に使用する薬剤は、生理的イオン強度及び/又はオスモル濃度の緩衝水溶液、例えば、本明細書において先に定義されたような、1つ又は複数のペプチドを含む或いは1つ又は複数のペプチドからなるPBS(リン酸緩衝生理食塩水)である。当業者は、このような溶液の調製の仕方を知っている。
及びB群連鎖球菌の易熱性可溶性因子(GBS−F)又はブドウ球菌のモジュリンにより活性化できる。TLR7は、イミダゾキノリンにより活性化できる。TLR9は、非メチル化CpG DNA又はクロマチン−IgG複合体により活性化できる。特に、TLR3、TLR7及びTLR9は、ウィルス感染に対する先天的免疫応答を仲介する上で、重要な役割を果たし、これらの受容体を活性化できる化合物は、本発明での使用に特に好ましい。特に好ましいアジュバントは、限定するものではないが、dsRNA、ポリ(I:C)、TLR3及びTLR9受容体を誘発する非メチル化CpG DNA、IC31、TLR9アゴニスト、IMSAVAC、TLR4アゴニストを含む合成化合物を含む。RIG−1は、TLR3のようなds−RNAによって活性化されることが公知である(Immunity(2005)、1:19〜28)。別の好ましい実施形態において、アジュバントは、本明細書において先に定義されたようなペプチドに物理的に連結している。アジュバント及び共刺激性の化合物又は官能基の、ペプチドを含むHLAクラスI及びHLAクラスIIのエピトープへの物理的連結は、抗原を取り込み、代謝し、表示する抗原提示細胞、特に樹状細胞の同時刺激により免疫応答の強化を提供する。別の好ましい免疫調節化合物は、T細胞の接着阻害剤、より好ましくはBQ−788(Buckanovich
RJら、Ishikawa K、PNAS(1994)91:4892)などのエンドセリン受容体の阻害剤である。BQ−788は、N−cis−2,6−ジメチルピペリジノカルボニル−L−γ−メチルロイシル−D−1−メトキシカルボニルトリプトファニル−D−ノルロイシンである。しかし、BQ−788の任意の誘導体又はBQ−788化合物の修飾体もまた、本発明の範囲に包含される。
のいずれに対しても適している。かつての免疫化は、ワクチン接種目的、すなわち、疾患の予防のために使用される。しかし、本発明の方法は、疾患予防だけに適しているわけではない。この方法は、既存の疾患の治療にも使用でき、当然のことながらこの疾患は、抗原特異的T細胞性免疫の誘導及び/又は強化によって治療可能な範囲に限定される。この特徴を、例えば、HPV感染などのウィルス感染に伴う疾患、例えばいくつかの癌の治療に使用できる。好ましい実施形態において、前記ヒト又は動物は、前記免疫応答の誘導及び/又は強化によって少なくとも部分的に治療可能又は予防可能である、HPV感染などの疾患を患っている、又は患う危険性がある。好ましくは、前記疾患は、HPVウィルス性疾患及び/又は癌を含む。
又は複数種のペプチド、アジュバント(双方とも本明細書において先に定義された)並びに本明細書において先に定義されたすべての不活性な薬学的に許容可能な担体及び/又は賦形剤を含む。薬剤の処方及び薬学的に許容可能な賦形剤の使用は、当技術分野において公知であり、慣習であり、例えばRemington;The Science and
Practice of Pharmacy、第21版、2005 University of Sciences in Philadelphiaに記載されている。本発明に使用する第2の薬剤は、皮下投与に適するように処方される。
研究計画
上腕に臨床グレードのHPV16ペプチドのプールを皮内注射することにより測定する、HPV16 E2、E6及びE7特異的T細胞応答を分析する、横断的パイロット研究を、子宮頸部のHPV関連障害を有する患者及び健康な個人において実施した。遅延型過敏反応は、メモリーT細胞応答を表わすので、分析時のHPV16陽性の前提条件はなか
った。
子宮頸癌(n=12)又はCIN(n=5)の病歴のある17例の女性(P)及び19例の健康な個人(HD)のグループが、インフォームドコンセントを受けた後でこの研究に参加した。HPV状態を含む患者の臨床的特徴を、表1に要約する。患者の年齢は28〜72歳(年齢の中央値、46歳)の範囲であった。健康な個人のグループは、年齢の中央値が31歳(範囲、20〜51歳)であり、80%の女性及び20%の男性で構成されていた。末梢血単核細胞(PBMC)を、皮膚検査の投与の直前にすべての対象から得た。健康な個人では陽性の皮膚検査の出現が遅いので、19例の健康なボランティアの11例から第2の血液試料を採取した。研究計画は、Medical Ethical Committee of the Leiden University Medical
Centreの承認を受けた。
遅延型過敏反応(DTH)に基づく皮膚検査を、HPV特異的細胞性免疫応答のインビボ測定のための、高感度且つ単純な方法として使用できる(Hopfl、2000;Hopfl、1991)。皮膚検査用調製物は、HPV16 E6及びE7タンパク質の全体及びHPV16 E2タンパク質の最も免疫原性の高い領域にわたる、臨床グレートの長鎖合成ペプチドの8種のプールで構成されていた(de Jong、2004)。これらの臨床グレードのペプチドは、LUMCの部門間GNP−Facilityで作製された。皮膚検査の各プールは、2又は3種の合成ペプチドからなり、ペプチドでカバーされたタンパク質の領域の最初と最後のアミノ酸で示した。プール1:E231〜60、E246〜75、プール2:E2301〜330、E2316〜345、プール3:E61〜31、E619〜50、プール4:E641〜65、E655〜80、E671〜95、プール5:E685〜109、E691〜122、プール6:E6109〜140、E6127〜158、プール7:E71〜35、E722〜56、プール8:E743〜77、E764〜98。ペプチドプールごとに、20mMの等張リン酸緩衝液中16%のDMSO中に0.2mg/mlのペプチドの0.05ml(10μg/ペプチド)を皮内に注射した。ペプチドプール及び陰性対象(溶剤のみ)を、上腕の個別の皮膚検査部位に、別々に注射した。皮膚検査部位を、少なくとも3回、ペプチドの注射後72時間及び7日(Hopfl)並びに第1の健康な対象の1例において非常に遅い皮膚反応が最初に報告された3週間後に点検した。直径2mmより大きい丘疹が、注射後2日以上たって出現した場合、反応は陽性であると考えた。陽性の皮膚反応部位からパンチ生検(4mm)を得、小片に切断し、10%のヒトAB血清、10%のTCGF並びに5ng/mlのIL7及びIL15を含むIMDM中で培養し、皮膚組織からのリンパ球の遊出を可能にした。培養の2から4週間後、増殖したT細胞を収穫し、それらのHPV特異的反応性に関して検査した。
皮膚検査に使用したペプチドと類似の一連のペプチドを、T細胞刺激アッセイ及びIFNγ−ELISPOTアッセイに使用した。4種のHPV16 E2ペプチドは、15残基が重複した30−merペプチドからなり、HPV16 E6は32−merからなり、HPV16 E7は35−merからなり、双方とも14残基が重複していた。ペプチドは、先に記載したように合成し、溶解した(van der Burg、1999)。特に、IFNγ ELISPOTアッセイにおいて、ペプチドプール4及び5は、皮膚検査に使用したペプチドプールとわずかに異なり、プール4はペプチドE637〜68、E655〜86、E673〜104を含み、プール5はペプチドE673〜104、E691〜122を含んだ。
HPV16特異的Th細胞の存在を、先に記載したように、ELISPOTにより分析した(van der Burg、2001)。簡潔に言うと、新鮮なPBMCを、2×106細胞/ウェルの濃度で、24ウェルプレート(Costar、Cambridge、MA)中の、10%のヒトAB血清を加えた、表示のHPV16 E2、E6及びE7ペプチドプールを含む、又は含まない1mlのIMDM(Bio Whittaker、Verviers、Belgium)に播種した。ペプチドは、5μg/ml/ペプチドの濃度で使用した。37℃で4日間インキュベートした後で、PBMCを収穫し、洗浄し、IFNγ捕捉抗体(Mabtech AB、Nacha、スウェーデン)でコーティングしたMultiscreen 96ウェルプレート(Millipore、Etten−Leur、オランダ)中の10%FCSを加えたl00μlのIMDMに、105細胞/ウェルの濃度で4つの複製ウェルに播種した。さらに抗体をインキュベートし、ELISPOTの発生を、製造業者(Mabtech)の指示書に従って実施した。スポットを全自動コンピューター支援ビデオ画像分析系(Bio Sys)を用いて数えた。特異的スポットを、実験ウェルの平均スポット数から、培地対照の平均スポット数+2×SDを引いて計算した(van der Burg、2001)。
皮膚生検のT細胞培養物を3日間の増殖アッセイにおける特異的ペプチド及びタンパク質の認識に関して検査した(van der Burg、2001)。簡潔に言うと、自己単球を、PBMCから、37℃においてX−vivo15培地(Cambrex)中で、2時間、平底の96ウェルプレートに接着させることによって単離した。この単球を、APCとして使用し、10μg/mlのペプチド及び20μg/mlのタンパク質を一晩取り込ませた。皮膚検査浸潤リンパ球を、2〜5×104細胞/ウェルの濃度で、10%のAB血清を添加したIMDMに播種した。培地単独を陰性対照として採取し、フィトヘムアグルチニン(0.5μg/ml)は陽性対照として機能した。増殖は、[3H]チミジン(5μCi/mmol)の組み込みにより測定した。増殖応答は刺激指数(SI)≧3として具体的に定義した。増殖アッセイの上清を、抗原特異的サイトカイン産生の分析のために、インキュベーションの48時間後に収穫した。
6種のさまざまなTh1及びTh2サイトカイン:IFNγ、腫瘍壊死因子α、インターロイキン2(IL2)、IL4、IL5及びIL10の同時検出を、サイトメトリックビーズアレイ(Becton Dickinson)を使用して、製造業者の指示書に従って実施した。カットオフ値は、さまざまなサイトカインの標準曲線に基づいた(100pg/ml IFNγ及び残存サイトカインに関しては20pg/ml)。抗原特異的サイトカインの産生を、上記のカットオフレベルを超え、及び>2×培地対照濃度のサイトカイン濃度として定義した(de Jong、2004)。
陽性皮膚反応部位に由来するT細胞培養物の特異性及び特徴を、先に報告したように(de Jong、2005)ICSにより検査した。簡潔に言うと、皮膚検査浸潤リンパ球を収穫し、洗浄し、IMDM+10%AB血清に懸濁し、2〜5×104細胞を、50μlのペプチド(10μg/ml)又はタンパク質(20μg/ml)で、X vivo培地中で一晩パルスした自己単球に加えた。培地単独を陰性対照として採取し、フィトヘムアグルチニン(0.5μg/ml)は陽性対照として機能した。試料を、FITC標識マウス−抗ヒトIFNγ(0.5g/ml、BD PharMingen)、PE標識マウス−抗ヒトIL5(0.2mg/ml、BD PharMingen)、APC標識−抗CD4(BD Bioscience)及びPerCP−標識−抗CD8(BD Bioscience)で同時染色した。4℃でインキュベーション後、細胞を洗浄し、1%のパラホルムアルデヒドで固定し、フローサイトメトリー(FACSscan、BD Biosciences)により分析した。
フィッシャーの正確確率検定(両側)を使用して、PBMC中のIFNγ産生HPV特異的T細胞の検出、皮膚検査反応の存在又は皮膚生検中のHPV特異的T細胞の存在の関係、並びに患者と健康な対照との間の、これらのグループ内の皮膚反応の大きさ又は数の違いを分析した。統計分析は、Graphpad Instat Software(バージョン3.0)及びGraphpad Prism4を使用して実施した。
HPV16 E2、E6−及びE7のペプチドの皮内注射に対する皮膚反応
本発明者らは、健康な対象及びHPV誘導性疾患を有する患者の双方における、HPV16 E2、−E6及び−E7のペプチドの皮内注射後の皮膚反応を調査した。陽性皮膚反応は、直径2〜20mmの扁平な赤みがかった丘疹として現れ、注射後2〜25日以内に起こった。陽性皮膚反応を、対照グループ中152例の皮膚検査の46例、及び患者グループ中136例の皮膚検査部位のうち30例において検出した。皮膚反応の大きさは、2つのグループ間で差がなかった。全体的に、皮膚検査の各ペプチドプールは、陽性皮膚反応を引き起こすことができた。E231〜75(19例の対象のうち10例)、E637〜104(9/16)及びE743〜98(7/19)に対する最も頻度の高い反応は、対照グループにおいて観察された。この反応パターンは、本発明者らが、PBMCにおいて先に観察したパターン(de Jong、2002;Welters、2003)及び患者グループにおいて観察したパターン(図1)と似ている。
皮膚検査の結果と循環HPV16特異的1型T細胞の存在とを比較するために、IFNγ ELIspotアッセイを、皮内ペプチドチャレンジが行われる前に収集されたPBMCに実施した。健康なボランティア19例のうち5例において、本発明者らは、HPV16特異的免疫応答をIFNγ−ELlspotにより検出できた。健康な個人のチャレンジ前の血液試料において、循環HPV16特異的T細胞/100.000PBMCの検
出が、≧5であることは、同じペプチド配列に対する早期(≦13日)の陽性皮膚反応と関連があった(p=0.0003、両側、フィッシャー正確確率検定、図2)。後期陽性皮膚反応(14から25日)を誘導したペプチドに対する、健康なドナーのチャレンジ前の血液試料において、HPV16特異的循環T細胞は検出されなかった。このことは、循環抗原特異的細胞の頻度が、皮膚反応が現れる遅延時間を決定することを示唆している。
健康なボランティアの陽性皮膚反応のおよそ25%は、血液中のHPV16特異的IFNγ産生T細胞の検出と関係なく、別の、非IFNγ産生型のT細胞が、HPV16ペプチドの皮内注射後に皮膚に浸潤できることを示唆する。
皮膚検査は、細胞性免疫のインビボ測定のための単純なアッセイとしてよく使用される。本発明者らは、早期抗原のE2、E6及びE7に対するインビボHPV16特異的細胞性免疫応答の測定のための皮膚検査アッセイの使用を、結果を、インビトロアッセイにおけるT細胞の反応性の平行測定の結果と比較することによって正当性を立証した。
血液中の循環HPV特異的CD4+メモリーT細胞の検出と相関しなかった(図2)が、これらの皮膚検査部位の免疫学的構造は、古典的DTH検査のものと同様であり(Platt、1983;Poulter、1982)、HPV16特異的CD4+Th1−及びTh2−細胞並びにHPV16特異的CD8+T細胞を含む(図4及び5)。本発明者らは、これらの反応がT細胞提示の結果であり得るという仮説を立てる。このことは、2ステップのツベルクリン皮膚検査のプロトコルを受けた患者の29%が、第2の検査期間においてのみ陽性であったことは注目されている。(Akcay、2003)。一般的に、ワクチン誘導性T細胞反応は、ワクチン接種後10から14日でピークに達し、3週間でなくなる。しかし、このようなプロトコルでは、より高い抗原用量が多いほど強いアジュバントを注射することになる懸念がある。したがって、皮内チャレンジにより誘導されるT細胞応答が、より緩慢に発生し、遅い時期にピークに達すると推定することは理にかなっている。健康なボランティアにおける皮内ペプチドチャレンジは、HPV16に特異的なCD4+T細胞及びCD8+T細胞の双方を誘導するので、単回の低用量ワクチン接種として考えるべきである。
表1 患者の特徴
a 皮膚検査実施前の治療期間
b FIGOに従った子宮頸癌のステージ
c ループ型電気メスによる切除法(Loop electrosurgical excision procedure)
Claims (12)
- 皮内投与用である、HPV関連疾患の治療又は予防用薬剤の製造のための、HPV−E2、−E6及び/又は−E7タンパク質に由来するペプチドの使用。
- 少なくとも1つのHLAクラスIIエピトープ及び/又は少なくとも1つのHLAクラスIエピトープが、少なくとも1つのHPV−E2、−E6及び/又はE7タンパク質のアミノ酸配列からの連続するアミノ酸配列内に存在する、請求項1に記載の使用。
- 連続するアミノ酸配列の長さが、HPV−E2、E6及び/又はE7タンパク質由来の19〜45の連続するアミノ酸残基、好ましくは22〜45、より好ましくは22〜40、より好ましくは22〜35、さらにより好ましくは22、25、28、32又は35の連続するアミノ酸である、請求項1又は2に記載の使用。
- 薬剤が、HPV−E2、−E6及び/又は−E7タンパク質に由来する少なくとも2種の異なるペプチドを含む、請求項1から3までのいずれか一項に記載の使用。
- 連続するアミノ酸配列が、HPV−E2、−E6及び−E7タンパク質の少なくとも2種、好ましくはHPV−E2、−E6及び−E7タンパク質の3種すべてのアミノ酸配列に由来する、請求項1から4までのいずれか一項に記載の使用。
- 薬剤がアジュバントを含まない、請求項1から5までのいずれか一項に記載の使用。
- 薬剤が、請求項1から6までに記載の1種又は複数種のペプチド及び不活性な薬学的に許容可能な担体からなる、請求項1から6までのいずれか一項に記載の使用。
- 薬剤が、請求項1から5までに記載のペプチド及び少なくとも1種のアジュバントを含み、前記アジュバントは水中油に基づく乳剤に処方されておらず、及び/又は水中油型乳剤ではない、請求項1から5までのいずれか一項に記載の使用。
- 薬剤が、モノホスホリル脂質A及び/又はCpG核酸などのTLR(3、4、7、8、9)リガンド、及び/又はCD40リガンドなどのAPC共刺激性分子、アゴニスト抗体又はそれらの機能的断片及び誘導体、及び/又はGM−CSFを含む、請求項8に記載の使用。
- HPV関連疾患が、HPV感染、HPV関連悪性腫瘍、CIN、VIN、AIN、VAIN、PIN、子宮頸癌、外陰癌、肛門癌、頭部及び頸部の癌又は陰茎癌から選択される、請求項1から9までのいずれか一項に記載の使用。
- 薬剤が、病変部位に直接皮内投与される、請求項1から10までのいずれか一項に記載の使用。
- 更にHPV−E2、−E6及び/又は−E7タンパク質に由来するペプチドが、皮下投与用であるHPV関連疾患の治療又は予防用薬剤の製造のために使用される、請求項1から11までのいずれか一項に記載の使用。
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